CN1319436C - 补血草工厂化试管快速繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种补血草工厂化试管快速繁殖方法,包括外植体培养、继代培养、生根培养和过渡培养,其特征在于:在继代转接时,选择叶内包裹的腋芽,在腋芽基部水平切芽,将切下的芽转接在生根培养基中,在室温及无光照条件下,培养4-5天,待芽切口周围分化出根原基后,每天光照12-15小时,培养4-5天,待芽基部长满4-5mm的放射状根,芽上部长出4-6片叶后,进行移栽。本发明能使幼芽生根快,生根率高,无丛生苗,生根苗移栽后成活率达100%,大田中植株长势好,整齐,花穗大且饱满,既能给种植户带来可观的经济收益,又能完全满足补血草鲜切花市场的需求,是一项具有推广应用价值的技术。
Description
技术领域
本发明涉及植物花卉——补血草的组培种苗繁殖方法,属于植物种苗的组织培养技术领域。
背景技术
补血草,俗称勿忘我,是蓝雪科(或矶松科)补血草属多年生或两年生草本植物,是著名的观赏花卉。近年来,随着我国经济的发展和人民生活水平的提高,补血草已成为我国花卉市场中的重要切花种类。然而市场上供应的补血草组培种苗仍存在着下列问题:-是生根率低,直接影响移栽成活率,不仅会增大种植成本,而且会错过最佳种植良机,给种植户带来较大经济损失。二是组培种苗大多有丛生苗,在移栽大田种植时,会因丛生苗与主苗争抢营养成分而导致植株生长高矮不齐、花穗不饱满等质量问题。因此,有必要对现有技术加以改进。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术之不足,提供一种生根率高,无丛生苗的优质补血草工厂化试管快速繁殖方法。
本发明所述补血草种苗包括外植体培养、继代培养、生根培养和过渡培养,其中:
外植体培养:选取从基部抽出的8-12cm花芽,去除其顶部的花穗,切成0.8-1.2cm的含腋芽茎段,常规灭菌后,将茎段接种在下列外植体培养基中:
MS基本培养液
6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 0.3~1.5mg/L
萘乙酸(NAA) 0~0.3mg/L
蔗糖 30000mg/L
琼脂粉 7000mg/L
pH值 5.4-5.8
培养4-6周,控制温度15-28℃,光照强度800-1000勒克斯,每天光照12-15小时;
继代培养:筛选经外植体培养出的健壮芽,转接在下列继代培养基中:
MS基本培养液
6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 0.2~0.6mg/L
培养3-4周,使之长成外部叶均包含腋芽的芽;
过渡培养:将生根苗移栽至下列栽培土中:腐殖土∶红土=1∶1,控制遮荫度50-70%,注意通风保湿,3-4周后,即可移栽大田;
其特征在于:
切芽:在继代转接时,选择叶内包裹的腋芽,在腋芽基部水平切芽,切下的芽的切口平整、均匀,不带愈伤组织,且切下的芽只有一对嫩叶包裹着生长点,切下的芽转入生根培养,其余部分转入继代培养;
生根培养:将切下的芽转接在下列生根培养基中:
50%的MS基本培养液
α-萘乙酸(NAA) 0.1~0.3mg/L
蔗糖 20000mg/L
琼脂粉 5000mg/L
水解酪蛋白(CH) 100mg/L
pH值 5.4-5.8
在室温及无光照条件下,培养4-5天,待芽切口周围分化出根原基后,在强度为800-1000勒克斯的光照条件下,每天光照12-15小时,培养4-5天,待芽基部长满4-5mm的放射状根,芽上部长出4-6片叶后,进行移栽。
在研究补血草种苗组培繁殖的过程中,解决了以下技术难题:
1、切芽方法
生根培养前的切芽,是决定组培苗能否生根的关键技术,切芽不准,即切芽过大、过小以及切芽方法不当都无法保证生根以及移栽成活率。发明人经过多年的探索与试验研究,终于得出了生根良好,成活率高,无丛生苗的切芽方法。
2、生根培养
生根的好坏直接影响着种苗的成活及长势,而生根培养又是决定能否生根的关健环节。采用现有技术中的温度、光照等控制条件是很难保障幼芽生根的,尤其是温度的控制相当严格,不适宜规模化、产业化生产。发明人经长期的努力,研究出一种无需特殊的温度要求,只要在室温下即可生根,生根率高达90-100%,且生根苗移栽后能100%成活。
本发明与现有技术相比具有下列优点和效果:通过上述方案中的切芽方法可获得易生根且成活率高的幼芽,再经过无特殊温度要求的上述生根培养,使幼芽生根快,生根率高,无丛生苗,生根苗移栽后成活率达100%,大田中植株长势好,整齐,花穗大且饱满,既能给种植户带来可观的经济收益,又能完全满足补血草鲜切花市场的需求,是一项具有推广应用价值的技术。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明做进一步描述,但本发明的范围不局限于此。
实施例1
1、外植体培养:选取从基部抽出的8cm花芽,去除其顶部的花芽,切成0.8cm的含腋芽茎段,常规灭菌后,将茎段接种在下列外植体培养基中:
MS基本培养液
6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 1.5mg/L
萘乙酸(NAA) 0.3mg/L
蔗糖 30000mg/L
琼脂粉 7000mg/L
pH值 5.8
培养6周,控制温度15℃,光照强度1000勒克斯,每天光照15小时;
2、继代培养:筛选经外植体培养出的健壮芽,转接在下列继代培养基中:
MS基本培养液
6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 0.6mg/L
培养4周,使之长成外部叶均包含腋芽的芽;
3、切芽:选择叶内包裹的腋芽,在腋芽基部水平切芽,切下的芽的切口平整、均匀,不带愈伤组织,且切下的芽只有一对嫩叶包裹着生长点,切下的芽转入生根培养,其余部分转入继代培养;
4、生根培养:将切下的芽转接在下列生根培养基中:
50%的MS基本培养液
萘乙酸(NAA) 0.3mg/L
蔗糖 20000mg/L
琼脂粉 5000mg/L
水解酪蛋(CH) 100mg/L
pH值 5.8
在室温及无光照条件下,培养4-5天,待芽切口周围分化出根原基后,在强度为1000勒克斯的光照条件下,每天光照15小时,培养4-5天,待芽基部长满4-5mm的放射状根,芽上部长出4-6片叶后,进行移栽;
5、过渡培养:将生根苗移栽至下列栽培土中:腐殖土∶红土=1∶1,控制遮荫度50-70%,注意通风保湿,3-4周后,即可移栽大田。
实施例2
1、外植体培养:选取从基部抽出的12cm花芽,去除其顶部的花芽,切成1.2cm的含腋芽茎段,常规灭菌后,将茎段接种在下列外植体培养基中:
MS基本培养液
6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 0.3mg/L
蔗糖 30000mg/L
琼脂粉 7000mg/L
pH值 5.4
培养4周,控制温度28℃,光照强度800勒克斯,每天光照12小时;
2、继代培养:筛选经外植体培养出的健壮芽,转接在下列继代培养基中:
MS基本培养液
6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 0.2mg/L
培养3周,使之长成外部叶均包含腋芽的芽;
3、切芽:选择叶内包裹的腋芽,在腋芽基部水平切芽,切下的芽的切口平整、均匀,不带愈伤组织,且切下的芽只有一对嫩叶包裹着生长点,切下的芽转入生根培养,其余部分转入继代培养;
4、生根培养:将切下的芽转接在下列生根培养基中:
50%的MS基本培养液
萘乙酸(NAA) 0.1mg/L
蔗糖 20000mg/L
琼脂粉 5000mg/L
水解酪蛋白(CH) 100mg/L
pH值 5.4
在室温及无光照条件下,培养4-5天,待芽切口周围分化出根原基后,在强度为800勒克斯的光照条件下,每天光照12小时,培养4--5天,待芽基部长满4-5mm的放射状根,芽上部长出4-6片叶后,进行移栽;
5、过渡培养:将生根苗移栽至下列栽培土中:腐殖土∶红土=1∶1,控制遮荫度50-70%,注意通风保湿,3-4周后,即可移栽大田。
Claims (1)
1、一种补血草工厂化试管快速繁殖方法,其特征在于包括:
(1)外植体培养:选取从基部抽出的8-12cm花芽,去除其顶部的花穗,切成0.8-1.2cm的含腋芽茎段,常规灭菌后,将茎段接种在下列外植体培养基中:
MS基本培养液
6-苄基氨基嘌呤 0.3~1.5mg/L
萘乙酸 0~0.3mg/L
蔗糖 30000mg/L
琼脂粉 7000mg/L
pH值 5.4-5.8
培养4-6周,控制温度15-28℃,光照强度800-1000勒克斯,每天光照12-15小时;
(2)继代培养:将经外植体培养出的健壮芽,转接在下列继代培养基中:
MS基本培养液
6-苄基氨基嘌呤 0.2~0.6mg/L
培养3-4周,使之长成外部叶均包含腋芽的芽;
(3)切芽:选择叶内包裹的腋芽,在腋芽基部水平切芽,切下的芽的切口平整、均匀,不带愈伤组织,且切下的芽只有一对嫩叶包裹着生长点,切下的芽转入生根培养,其余部分转入继代培养;
(4)生根培养:将切下的芽转接在下列生根培养基中:
50%的MS基本培养液
α-萘乙酸 0.1~0.3mg/L
蔗糖 20000mg/L
琼脂粉 5000mg/L
水解酪蛋白 100mg/L
pH值 5.4-5.8
在室温及无光照条件下,培养4-5天,待芽切口周围分化出根原基后,在强度为800-1000勒克斯的光照条件下,每天光照12-15小时,培养4-5天,待芽基部长满4-5mm的放射状根,芽上部长出4-6片叶后,进行移栽;
(5)过渡培养:将生根苗移栽至下列栽培土中:腐殖土∶红土=1∶1,控制遮荫度50-70%,注意通风保湿,3-4周后,即移栽大田。
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JPH02177832A (ja) * | 1988-12-28 | 1990-07-10 | Kikkoman Corp | リモニウム属植物の再生方法及びその種苗の増殖方法 |
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二色补血草的组织培养与快速繁殖 那淑芝,李云祥,甄占萱,戴继先,承德民族师专学报,第23卷第2期 2003 * |
二色补血草试管苗生根及移栽基质研究 陈银凤,陈嵩,亚热带植物科学,第30卷第3期 2001 * |
补血草的组织培养和快速繁殖 陈佳瀛,杜秀达,植物生理学通讯,第38卷第6期 2002 * |
补血草的组织培养和快速繁殖 陈佳瀛,杜秀达,植物生理学通讯,第38卷第6期 2002;二色补血草的组织培养与快速繁殖 那淑芝,李云祥,甄占萱,戴继先,承德民族师专学报,第23卷第2期 2003;二色补血草试管苗生根及移栽基质研究 陈银凤,陈嵩,亚热带植物科学,第30卷第3期 2001 * |
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