CN102119660B - 一种高山杜鹃组培苗温室内生根培养以及炼苗移栽的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种高山杜鹃温室内生根培养以及炼苗移栽的方法，该方法包括瓶苗出苗、水培生根、生根苗移栽以及移栽后管理等步骤。本发明的方法不仅缩短了育苗时间，更重要的是此法可使移栽成活率提高到92％以上，大大降低了生产成本，提高生产效益。另外，采用本发明的方法可促进新根的早发并形成强壮的须根根系，同时在移栽时培养基容易清洗干净，克服了清洗固体培养基时须根容易断而影响成活率的缺点。

Description

一种高山杜鹃组培苗温室内生根培养以及炼苗移栽的方法

【技术领域】

本发明属于植物栽培技术领域。更具体地，本发明涉及一种高山杜鹃组培苗温室内生根培养以及炼苗移栽的方法。

【背景技术】

高山杜鹃是杜鹃资源中的一大类，属常绿杜鹃。其树形优美、花形独特、色彩艳丽，观赏价值非常高，是公认的高档盆花。

高山杜鹃通过种子有性繁殖出苗率低，主要靠扦插，而扦插繁殖受母株材料和繁殖季节的影响，往往无法满足市场的需要。因此，高山杜鹃种苗的繁育除了少部分是嫁接和扦插外，绝大多数种苗的生产都来自于组培生产。应用组织培养技术进行繁殖，具有繁殖速度快，不受季节影响等特点。

按照组培苗生产的流程，即外植体的采取、初代培养、继代培养、壮苗培养、生根培养、移栽培养，高山杜鹃组培苗从开始生产到要进行移栽，一般至少需要6个月的时间。而组织培养技术的应用成败很大程度上取决于组培苗生根和移栽成活率及成活质量。

按照目前行业的状况，高山杜鹃组培苗的移栽方法如下：在试管内完成高山杜鹃初代培养、增殖培养、壮苗培养和生根培养全部过程，然后将生根的组培苗直接移栽到温室基质内。传统的移栽方法由于生根的试管苗原来的环境是无菌的，移出来直接栽在基质里以后菌类容易大量滋生，造成成活率低下。再就是在移苗时易伤苗，伤口过多，根损伤过多。因此按照常规方法移栽，高山杜鹃组培苗移栽成活率一般在70％左右。更重要的是，由于这种移栽方法要求的温室条件更高，养护要求更加精细，培养时间也更长，导致成本更高。即便种苗成活，生长时间也很长。这些直接影响了植物组培工厂化育苗生产的应用效果，是制约其进入商业化规模生产应用的重要因素。

近年来，国内也就提高高山杜鹃移栽成活率做了一系列的研究。汤桂钧和覃娟在《高山杜鹃组培快繁技术体系研究》(北方园艺2009(3)：114-116)中描述了珍珠岩、泥炭和自制生根粉的高生根率高配方的生根培养基。陈幼妹在《高山杜鹃组培苗生根移栽技术研究》中通过对比不同的培养基和培养基硬度对芽苗生根的影响，提出相对较优的壮苗生根培养基为1/2Anderson+IBA 0.5mg/L+活性炭5g/L+蔗糖25g/L。这些方法一定程度上提高了高山杜鹃组培苗的移栽成活率和种苗质量，但没从根本上克服这些缺陷。

因此，为了克服现有技术存在的这些缺陷，有必要研制高山杜鹃组培苗温室内生根培养以及炼苗移栽的方法，本发明人经过大量试验研究，终于完成了本发明。

【发明内容】

[要解决的技术问题]

本发明的目的是提供一种高山杜鹃组培苗温室内生根培养以及炼苗移栽的方法。

[技术方案]

本发明是通过下述技术方案实现的。

本发明涉及一种高山杜鹃的组培苗温室内生根培养以及炼苗移栽的方法，该方法的步骤如下：

(1)瓶苗出苗

经继代、增殖培养和壮苗培养但未进行生根培养的高山杜鹃组织瓶苗搬放到大棚温室中自然摆放3-7天，进行温度适应性炼苗；

(2)水培生根

自瓶中取出组培苗用与室温接近的纯净水洗净培养基后放入水液中浸泡5分钟左右，然后轻轻捞出小苗一株靠一株地摆放在装有1厘米深的洁净清水的浅盘或盆中，摆满小苗的盘在大棚温室内摆放进行水培生根；

(3)生根苗移栽

高山杜鹃新根长到1-2厘米时即可移栽到基质中，移栽完毕后，将穴盘放置在铺有地布的苗床上，并用密闭的拱棚加以保护；

(4)移栽后管理

移栽后，要严格控制温室的温度和光照强度。

根据本发明的一种优选实施方式，在所述步骤(1)中，大棚温室的温度控制在白天18-22℃，晚上15-18℃，光照强度1000-2500勒克斯。

根据本发明的另一种优选实施方式，在步骤(2)中，水液为1500倍的50％多菌灵可湿性粉剂或50％甲基托布津可湿性粉剂溶液。

根据本发明的另一种优选实施方式，在所述步骤(2)中，浸有小苗的洁净清水无病菌，具有可溶性盐分含量即EC值≤0.15ms/cm即10.5mg/L，pH值4.5-6.5，悬浮物≤10mg/L，氯化钠含量≤100mg/L。

根据本发明的另一种优选实施方式，在所述步骤(2)中，浸有小苗的洁净清水具有可溶性盐分含量即EC值为0。

根据本发明的另一种优选实施方式，在所述步骤(2)水培生根期间，大棚温室的温度控制在白天18-25℃，晚上14-18℃，空气湿度控制在75％-85％，光照强度2000-5000勒克斯。

根据本发明的另一种优选实施方式，在所述步骤(3)中，移栽用基质选用75％泥炭+25％珍珠岩配方组合，基质pH值4.5-5.5，EC值≤0.35ms/cm。

根据本发明的另一种优选实施方式，在所述步骤(3)中，移栽完毕后，当天用1500倍的50％多菌灵可湿性粉剂或50％甲基托布津可湿性粉剂水溶液浇定根水。

根据本发明的另一种优选实施方式，在所述步骤(4)中，大棚温室的温度控制在白天18-25℃，晚上14-18℃，光照强度5000-15000勒克斯。

下面将更详细地描述本发明。

本发明涉及一种高山杜鹃的组培苗温室内生根培养以及炼苗移栽的方法，该方法的步骤如下：

(1)瓶苗出苗

组培苗的生产流程包括外植体的采取、初代培养、继代培养、壮苗培养、生根培养、移栽培养。

外值体取尚未木质化的枝条上的嫩芽茎段，包括茎段、茎尖。

初代培养是观赏植物组织培养快速繁殖过程的基础，也是决定培养成功与否的关键，其目的是建立无菌材料，并使外植体发育起来。

在初代培养基础上获得的芽、苗数量有限，不能充分发挥组织培养快速繁殖的优势，需经继代繁殖以获取大量增殖材料。继代培养外植体为初代培养所得的茎段。继代增殖培养主要是愈伤组织途径的增殖培养。经初代培养获得的无菌且带腋芽的茎段和芽转接到分化培养基上，进行增殖培养。

当增殖达到一定数量后，进行壮苗培养，经培养的种苗长度达到4cm、叶片4叶以上、叶色深绿、健壮的幼苗准备移入大棚温室。

这之后，经壮苗培养的高山杜鹃组织瓶苗搬放到大棚温室中自然摆放3-7天，进行温度适应性炼苗。

利用在温室外添加外遮荫降温、湿帘风机降温或水暖加温等方法控制大棚温室的温度。所述温度控制在白天18-22℃，晚上15-18℃。温度过高会导致组培苗失水萎蔫死亡，温度过低会使组培苗生长缓慢，生根时间延长。

利用安装遮荫网方法控制光照强度。这一阶段的光照强度控制在1000-2500勒克斯，促使组培苗适应温室环境条件。光照过高会加速组培苗光合作用，加快失水，光照过低则起不到驯化的作用。光照时间为早上太阳升起到下午落山之间。

(2)水培生根

自瓶中取出组培苗用与室温接近的纯净水洗净培养基后放入水液中浸泡5分钟左右，然后轻轻捞出小苗一株靠一株的摆放在装有1厘米深洁净清水的浅盘或盆中，摆放时注意根部浸入水中，植株立放，上部叶片不能歪斜而浸入水中。

其中，所述的水液为1500倍的50％多菌灵可湿性粉剂或50％甲基托布津可湿性粉剂溶液。多菌灵为一种高效低毒内吸性杀菌剂，具保护和治疗作用，对子囊菌亚门、半知菌亚门病原真菌有效，对鞭毛菌亚门真菌和细菌无抑制活性，用于防治禾谷类作物、棉花、油菜和其它作物多种病害。甲基托布津，通用名甲基硫菌灵，属苯并咪唑类，是一种广谱性内吸杀菌剂，能防治多种作物病害，具有内吸、预防和治疗作用。它在植物体内转化为多菌灵，干扰菌的有丝分裂中纺锤体的形成，影响细胞分裂。能够有效防治多种作物的病害，如用于麦类、水稻、棉花、油菜、甘薯、甜菜、蔬菜和花卉等。

其中，所述的洁净清水除要求无病菌外，必须要求可溶性盐分含量即EC值≤0.15ms/cm即10.5mg/L，EC值为0时最好。如果EC值过高，可能会形成反渗透压，将根系中的水分置换出来，使根尖变褐或者干枯。

所述洁净清水的pH值为4.5-6.5，可事先用磷酸进行调节；悬浮物≤10mg/L；氯化钠含量≤100mg/L。

摆满小苗的盘在大棚温室内摆放进行水培生根。水培生根期间，要严格控制大棚温室的温度、湿度和光照。

其中，温度控制在白天18-25℃，晚上14-18℃。温度过高会导致组培苗失水萎蔫死亡，温度过低会使组培苗生长缓慢，生根时间延长。

利用人工喷雾或使用加湿器方法控制温室中的空气湿度。所述的湿度控制在75％-85％。如果这一湿度过高，则会起不到驯化的作用或引起各种病害；湿度过低，则会导致种苗失水，影响成活。

利用安装遮荫网方法控制光照强度。这一阶段的光照强度控制在2000-5000勒克斯，促使组培苗适应温室环境条件。光照过高会加速组培苗光合作用，加快失水，光照过低则起不到驯化的作用。

高山杜鹃不同品种水培生根的时间存在差异，快的7-10天即长出新根，慢的需要20-25天。

(3)生根苗移栽

高山杜鹃新根处到1-2厘米时即可进行移栽。移栽用基质选用75％泥炭+25％珍珠岩配方组合，基质事先经过消毒处理。所述基质的pH值为4.5-5.5，可直接选择pH值为4.5-5.5的纯泥炭或事先用硫酸亚铁水溶液调整基质的pH值。

所述基质的EC值≤0.35ms/cm，如果该值过高，则会影响生根。

另外，穴盆中的基质不要压得太实，以便通气，要保持一定湿度。

初期移栽的穴盘选用72穴或128穴穴盘。所述的穴盘是本技术领域里通常使用的穴盘，例如用聚苯泡沫、聚苯乙烯、聚氯乙烯和聚丙烯等吹塑或注塑的。标准穴盘的尺寸为540mm×280mm。所述穴盘使用基质的量比所述穴盘体积大10％以上。所述的穴盘在使用前需要进行常规的清洗消毒。

移栽时，必须尽可能深地种植生根苗。移栽完毕后，当天用0.2％多菌灵水液浇定根水，并将穴盘放置在铺有地布的苗床上。立即架设竹弓盖薄膜成拱棚，拱棚的四周要封闭严密。

(4)移栽后管理

移栽后，要严格控制温室的温度和光照强度。

其中，温度控制在白天18-25℃，晚上14-18℃。如果温度过高，则会加速光合作用，加快失水，影响生长和成活；温度过低，则会延缓生长时间。

利用安装遮荫网方法控制光照强度。所述的光照强度控制在5000-15000勒克斯。移栽之后的一周内，用定时器控制遮荫网开启时间。大约一周后，早晚尽量增加光照强度。

一般两周后可将薄膜棚罩两头揭开，再过2-3天后再将薄膜全部揭除。

[有益效果]

本发明的技术方法依据高山杜鹃能在水培状态下能够快速生根的特点，将室内进行的水培生根过程在温室内进行，不仅缩短了育苗时间，更重要的是此法可使移栽成活率提高到92％以上，大大降低了生产成本，提高生产效益。另外，由于高山杜鹃的根系是须根性的，采用本发明的液体培养技术可促进新根的早发并形成了强壮的须根根系，同时在移栽时培养基容易清洗干净，克服了清洗固体培养基时须根容易断而影响成活率的缺点。

【具体实施方式】

实施例1

该方法的步骤如下：

(1)瓶苗出苗

选择高山杜鹃优良品种Nova zember嫩芽茎段为外值体。按照正常程序准备好培养基等，并处理好外值体。通过初代培养诱导出高山杜鹃的芽，之后，将经初代培养获得的无菌且带腋芽的芽转接到分化培养基上，进行增殖培养。

当增殖达到一定数量后，进行壮苗培养，之后将长度达到4cm、叶片4叶以上、叶色深绿、健壮的幼苗准备移入大棚温室。

在移入大棚温室前，调试好温室内温度控制系统和光照控制系统。幼苗移入大棚温室时，控制温度白天18-22℃，晚上15-18℃；光照强度控制在1000-2500勒克斯。前四天组培苗不打开封口，后三天再打开封口。累计自然摆放7天。

(2)水培生根

自瓶中取出组培苗用与室温接近的纯净水洗净培养基后放入1500倍的50％多菌灵可湿性粉剂溶液中浸泡5分钟左右，然后轻轻捞出小苗，一株靠一株地摆放在装有1厘米深洁净清水的浅盘或盆中，摆放时注意根部浸入水中，植株立放，上部叶片不能歪斜而浸入纯净水中。纯净水EC值为0；pH值为4.5-6.5；悬浮物≤10mg/L；氯化钠含量≤100mg/L。

摆满小苗的盘在大棚温室内摆放进行水培生根。水培生根期间，控制大棚温室的温度白天18-25℃，晚上14-18℃、湿度75-85％和光照控制在2000-5000勒克斯。

经过15天的培养，种苗开始长出新根。

(3)生根苗移栽

高山杜鹃新根长到1-2厘米时开始进行移栽。移栽用基质选用75％泥炭+25％珍珠岩配方组合，基质事先经过消毒处理。基质的pH值为4.5-5.5，基质EC值≤0.35ms/cm。移栽穴盘选用聚氯乙烯72穴穴盘。

移栽时，必须尽可能深地种植生根苗。移栽完毕后，当天用1500倍的50％甲基托布津可湿性粉剂水溶液浇定根水。

然后将穴盘放置在铺有地布的苗床上，并立即架设竹弓盖薄膜成拱棚，拱棚的四周要封闭严密。

(4)移栽后管理

移栽后，温度控制在白天18-25℃，晚上14-18℃。光照强度控制在5000-15000勒克斯。10天后可将薄膜棚罩两头揭开，再过2-3天后再将薄膜全部揭除。

经检测分析确定，高山杜鹃种苗的移栽成活率达到92％以上。从壮苗培养完成到种苗移栽后出圃发货一般需要70-100天。

对比实施例：现有技术高山杜鹃生根培养及炼苗移栽方法

(1)瓶苗出苗

选择高山杜鹃优良品种Nova zember嫩芽茎段为外值体。按照正常程序准备好培养基等，并处理好外值体。通过初代培养诱导出高山杜鹃的芽，之后，将经初代培养获得的无菌且带腋芽的芽转接到分化培养基上，进行增殖培养。

当增殖达到一定数量后，进行壮苗培养，之后选择长度2-3cm半木质化的种苗转接到生根培养基上，经过30天的生根培养，再将长度达到4cm、叶片4叶以上、叶色深绿、健壮的幼苗准备移入大棚温室。

(2)温室内驯化

在移入大棚温室前，调试好温室内温度控制系统和光照控制系统。幼苗移入大棚温室时，控制温度白天18-22℃，晚上15-18℃；光照强度控制在1000-2500勒克斯。前3天组培苗不打开封口，后2天再打开封口。累计过渡摆放5天。

(3)移栽

移栽前配制珍珠岩、蛭石、草炭土比例为1∶1∶0.5的栽培基质，基质的pH值为4.5-5.5，基质EC值≤0.35ms/cm。移栽穴盘选用聚氯乙烯72穴穴盘。

移栽时从试管中取出发根的小苗，用自来水洗掉根部粘着的培养基，要全部除去，以防残留培养基滋生杂菌。移植时用一个筷子粗的竹签在基质中插一小孔，然后将小苗插入。栽前基质要浇透水。栽后轻浇薄水。再将苗移入空气湿度达90％以上的拱棚中养护。

(4)移栽后管理

同实施例1。

经检测分析确定，采用现有技术，高山杜鹃种苗的移栽成活率达到71％。从壮苗培养完成到种苗移栽后出圃发货一般需要135-190天。

Claims (2)

1.一种高山杜鹃的组培苗温室内生根培养以及炼苗移栽的方法，其特征在于该方法的步骤如下：

(1)瓶苗出苗

经继代、增殖培养和壮苗培养但未进行生根培养的高山杜鹃组织瓶苗搬放到大棚，大棚温室的温度控制在白天18-22℃，晚上15-18℃，光照强度1000-2500勒克斯，前三到四天组培苗不打开封口，后二到三天再打开封口，在大棚温室中自然摆放5-7天，进行温度适应性炼苗；

(2)水培生根

自瓶中取出组培苗用与室温接近的纯净水洗净培养基后放入水液，水液为1500倍的50%多菌灵可湿性粉剂或50%甲基托布津可湿性粉剂溶液，水液中浸泡5分钟左右，然后轻轻捞出小苗一株靠一株地摆放在装有1厘米深的洁净清水的浅盘或盆中，摆满小苗的盘在大棚温室内摆放进行水培生根，浸有小苗的洁净清水无病菌，具有可溶性盐分含量即EC值≤0.15ms/cm即10.5mg/L，pH值4.5-6.5，悬浮物≤10mg/L，氯化钠含量≤100mg/L；

(3)生根苗移栽

移栽用基质选用75%泥炭+25%珍珠岩配方组合，基质pH值4.5-5.5，EC值≤0.35ms/cm；

移栽完毕后，当天用1500倍的50%多菌灵可湿性粉剂或50%甲基托布津可湿性粉剂水溶液浇定根水；

高山杜鹃新根长到1-2厘米时即可移栽到基质中，移栽完毕后，将穴盘放置在铺有地布的苗床上，并用密闭的拱棚加以保护；

(4)移栽后管理

移栽后，要严格控制温室的温度和光照强度，大棚温室的温度控制在白天18-25℃，晚上14-18℃，光照强度5000-15000勒克斯。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于在所述步骤(2)水培生根期间，大棚温室的温度控制在白天18-25℃，晚上14-18℃，空气湿度控制在75%-85%，光照强度2000-5000勒克斯。