CN111194693B - 一种海棠新品种的组培快繁方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种海棠新品种‘云想容’的组培快繁方法，属于植物组织培养技术领域。包括以下步骤：1)外植体的选取与消毒处理；2)将处理后的外植体接种到诱导培养基中进行腋芽诱导培养，直至外植体腋芽萌发，长成2～3cm的植株；3)在无菌环境下剪下步骤2)获得的植株并接种到增殖培养基中培养，当长出大量丛生小芽时，将小芽接种到复壮培养基中进行复壮生长；4)剪下2～3cm的丛生芽接种到生根培养基中进行生根培养；5)组织苗的炼苗与移栽。本发明组织培养操作步骤简单，成本低，能够快速增殖产生大量不定芽，高效繁育大量苗木，繁殖后代保留母株优良性状且性状一致，缩短了繁殖周期，有利于观赏海棠新品种在市场上的推广。

Description

一种海棠新品种的组培快繁方法
技术领域
本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种海棠新品种‘云想容’的组培快繁方法。
背景技术
‘云想容’海棠(Malus′Yunxiangrong′)为蔷薇科苹果属落叶小乔木，是唐纳德(Malus‘Donald Wyman’)种子变异产生的新品种。其树形直立，树高不超过5m，树姿优美，枝条红棕色。花蕾较大，花苞粉色，重瓣性强，浅杯花型，伞形花序，花开时花瓣正面白色，背面粉色，具有极佳的观赏效果，在我国的园林绿化中有非常大的应用潜力。
目前，‘云想容’只能通过嫁接方式进行繁殖，不利于观赏海棠新品种在市场上的推广。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明所要解决的技术问题是提供一种海棠新品种‘云想容’的组培快繁方法，以解决目前海棠新品种‘云想容’只能通过嫁接方式进行繁殖的问题。
为了解决上述问题，本发明采用的技术方案为：
一种海棠新品种‘云想容’的组培快繁方法，包括以下步骤：
1)外植体的选取与消毒处理；
2)将步骤1)处理后的外植体接种到诱导培养基中进行腋芽诱导培养，直至外植体腋芽萌发，长成2～3cm的植株；诱导培养基为：以MS培养基为基本培养基，添加1.0mg/L 6-BA、0.1mg/LNAA、30g/L蔗糖、7g/L琼脂，调节 pH值为5.8；
3)在无菌环境下剪下步骤2)获得的植株并接种到增殖培养基中培养，当长出大量丛生小芽时，将小芽接种到复壮培养基中进行复壮生长，增殖培养基为：以MS培养基为基本培养基，添加0.5mg/L 6-BA、0.02mg/L TDZ、0.1mg/L NAA、30g/L蔗糖、7g/L琼脂，调节pH值为5.8；复壮培养基为：以MS培养基为基本培养基，添加1.0mg/L 6-BA、0.05mg/L IBA、30g/L蔗糖、7g/L琼脂，调节pH值为5.8；
4)剪下步骤3)获得的2～3cm的丛生芽接种到含有0.7mg/L IBA的1/2MS 培养基上培养7天后再接种到不添加生长调节剂的1/2MS培养基上进行生根培养；1/2MS培养基中添加20g/L蔗糖、7g/L琼脂，调节pH值为5.8；
5)当根长到2～3cm时，将培养瓶开瓶锻炼，炼苗5～7d得到试管苗，移栽到基质中，管理至成品苗。
进一步的，步骤1)中外植体的选取与消毒为选取一年生海棠新品种‘云想容’幼嫩的单芽茎段作为外植体，先剪至2～3cm长后用饱和的洗衣粉溶液浸泡 30min，并用软毛刷刷掉表面脏污，然后流水冲洗1h后晾干置于超净工作台中，用75％的酒精消毒30s后用无菌水清洗1～2次，之后用胶头滴管添加了2滴吐温-20的0.1％的HgCl2溶液消毒8min，再用无菌水反复冲洗6～8次，每次1分钟，在无菌滤纸上晾干后切除茎段与消毒剂接触的部分，切成1～2cm的茎段。
进一步的，步骤2)至步骤4)中，海棠新品种‘云想容’在培养基中的培养条件均为：每天光照14h，光照强度1500～2000lx，温度为25±2℃。
进一步的，步骤5)试管苗在移栽至培养基前需洗去残留在根部的培养基，保证根部的完整性，处理后移栽到基质中。
有益效果：本发明利用组织培养快速繁殖技术，诱导观赏海棠新品种‘云想容’快速增殖产生大量不定芽，高效繁育大量苗木，繁殖后代保留母株优良性状且性状一致，缩短了繁殖周期，而且，组织培养操作步骤简单，成本低，有利于观赏海棠新品种在市场上的推广，为工厂化育苗提供了一条有效的途径。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步说明本发明，但这些实施例并不用来限制本发明。
实施例1
一种海棠新品种‘云想容’的组培快繁方法，包括以下步骤：
(1)外植体的消毒处理：选取一年生海棠新品种‘云想容’幼嫩的单芽茎段作为外植体，先剪至2～3cm长后用饱和的洗衣粉溶液浸泡30min，并用软毛刷刷掉表面脏污，然后流水冲洗1h后晾干置于超净工作台中，用75％的酒精消毒30s后用无菌水清洗1～2次，之后用胶头滴管添加了2滴吐温-20的0.1％的HgCl2溶液消毒8min，再用无菌水反复冲洗6～8次，每次1分钟，在无菌滤纸上晾干后切除茎段与消毒剂接触的部分，切成1～2cm的茎段，成活率达到 83.3％；
(2)初代培养：将步骤(1)处理后的1～2cm茎段接种到添加了6-BA 1.0mg/L、NAA0.1mg/L、蔗糖30g/L、琼脂7g/L的MS培养基(调节pH值为 5.8，121℃下灭菌20min)上进行腋芽诱导，每天光照14h，光照强度1500～ 2000lx，温度为25±2℃，直至外植体腋芽萌发，长成2～3cm的植株，诱导率达到93％；
(3)继代培养：步骤(2)获得的植株长至2cm左右时，在无菌环境下将其剪下接种到添加了6-BA 0.5mg/L、TDZ 0.02mg/L、NAA 0.1mg/L、蔗糖30g/L、琼脂7g/L的MS培养基上进行增殖培养，调节pH值为5.8，每天光照14h，光照强度1500～2000lx，温度为25±2℃；当长出大量丛生小芽时，将这些芽接种到添加了6-BA 1.0mg/L、IBA 0.05mg/L、蔗糖30g/L、琼脂7g/L的MS培养基上进行复壮生长，调节pH值为5.8，每天光照14h，光照强度1500～2000lx，温度为25±2℃；增值系数高达8.17；
(4)生根培养：将步骤(3)过程获得的高度为2～3cm的丛生芽剪下，在含有0.7mg/LIBA的1/2MS培养基上培养7天后接种到不添加生长调节剂的1/2 MS培养基上进行生根培养，1/2MS培养基中添加20g/L蔗糖、7g/L琼脂，调节pH值为5.8，121℃下灭菌20min。每天光照14h，光照强度1500～2000lx，温度为25±2℃；生根率达到80.3％；
(5)炼苗移栽：当根长到2～3cm时，将培养瓶敞口放置培养室内，炼苗5～ 7d得到试管苗，将试管苗从培养瓶中取出，洗去残留在根部的培养基，保证根部的完整性，处理后移栽到基质中，放在温室中，并定期喷雾浇水，保持基质的湿度。
需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。

Claims (4)

1.一种海棠新品种‘云想容’的组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)外植体的选取与消毒处理；
2)将步骤1)处理后的外植体接种到诱导培养基中进行腋芽诱导培养，直至外植体腋芽萌发，长成2～3cm的植株；诱导培养基为：以MS培养基为基本培养基，添加1.0mg/L 6-BA、0.1mg/L NAA、30g/L蔗糖、7g/L琼脂，调节pH值为5.8；
3)在无菌环境下剪下步骤2)获得的植株并接种到增殖培养基中培养，当长出大量丛生小芽时，将小芽接种到复壮培养基中进行复壮生长，增殖培养基为：以MS培养基为基本培养基，添加0.5mg/L 6-BA、0.02mg/L TDZ、0.1mg/L NAA、30g/L蔗糖、7g/L琼脂，调节pH值为5.8；复壮培养基为：以MS培养基为基本培养基，添加1.0mg/L 6-BA、0.05mg/L IBA、30g/L蔗糖、7g/L琼脂，调节pH值为5.8；
4)剪下步骤3)获得的2～3cm的丛生芽接种到含有0.7mg/L IBA的1/2MS培养基上培养7天后再接种到不添加生长调节剂的1/2MS培养基上进行生根培养；1/2MS培养基中添加20g/L蔗糖、7g/L琼脂，调节pH值为5.8；
5)当根长到2～3cm时，将培养瓶开瓶锻炼，炼苗5～7d得到试管苗，移栽到基质中，管理至成品苗。
2.根据权利要求1所述的海棠新品种‘云想容’的组培快繁方法，其特征在于，步骤1)中外植体的选取与消毒为选取一年生海棠新品种‘云想容’幼嫩的单芽茎段作为外植体，先剪至2～3cm长后用饱和的洗衣粉溶液浸泡30min，并用软毛刷刷掉表面脏污，然后流水冲洗1h后晾干置于超净工作台中，用75％的酒精消毒30s后用无菌水清洗1～2次，之后用胶头滴管添加了2滴吐温-20的0.1％的HgCl2溶液消毒8min，再用无菌水反复冲洗6～8次，每次1分钟，在无菌滤纸上晾干后切除茎段与消毒剂接触的部分，切成1～2cm的茎段。
3.根据权利要求1所述的海棠新品种‘云想容’的组培快繁方法，其特征在于，步骤2)至步骤4)中，海棠新品种‘云想容’在培养基中的培养条件均为：每天光照14h，光照强度1500～20001x，温度为25±2℃。
4.根据权利要求1所述的海棠新品种‘云想容’的组培快繁方法，其特征在于，步骤5)试管苗在移栽至培养基前需洗去残留在根部的培养基，保证根部的完整性，处理后移栽到基质中。
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Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117121819B (zh) * 2023-10-12 2024-05-24 南京林业大学 一种‘白云’海棠茎段高效快繁体系的建立方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103155866A (zh) * 2011-12-10 2013-06-19 天水市果树研究所 珠美海棠组培快繁育苗方法
CN104585036A (zh) * 2015-01-29 2015-05-06 南京林业大学 一种北美海棠高原之火腋芽的组培快繁方法
CN104686331A (zh) * 2015-02-21 2015-06-10 杨业云 一种垂丝海棠组培快繁殖方法
CN107637520A (zh) * 2017-09-27 2018-01-30 南京林业大学 一种湖北海棠的组织培养方法
CN109601380A (zh) * 2018-12-26 2019-04-12 武汉市农业科学院 一种火之舞海棠的组培快繁方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX368807B (es) * 2014-09-22 2019-10-17 Pioneer Hi Bred Int Metodos para reproducir plantas asexualmente y composiciones de las mismas.

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103155866A (zh) * 2011-12-10 2013-06-19 天水市果树研究所 珠美海棠组培快繁育苗方法
CN104585036A (zh) * 2015-01-29 2015-05-06 南京林业大学 一种北美海棠高原之火腋芽的组培快繁方法
CN104686331A (zh) * 2015-02-21 2015-06-10 杨业云 一种垂丝海棠组培快繁殖方法
CN107637520A (zh) * 2017-09-27 2018-01-30 南京林业大学 一种湖北海棠的组织培养方法
CN109601380A (zh) * 2018-12-26 2019-04-12 武汉市农业科学院 一种火之舞海棠的组培快繁方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
‘云想容’海棠茎段组织培养技术;李利娟等;《北方园艺》;20210413(第7期);第66-72页 *
‘雪球’海棠组织培养体系的建立与优化;王冰洁等;《西北农林科技大学学报（自然科学版）》;20150119;第43卷(第3期);第77页摘要、第78页第1.4节 *
Discrimination of Malus Taxa with Different Scent Intensities Using Electronic Nose and Gas Chromatography⁻Mass Spectrometry;Fan Junjun等;《Sensors》;20181012;第18卷(第10期);第3429页 *
The effect of in vitro pretreatments on subsequent shoot organogenesis from excised Rubus and Malus leaves;Harry Jan Swartz等;《Plant Cell, Tissue and Organ Culture》;19900515;第21卷(第2期);第179-184页 *
贴梗海棠组培快繁育苗技术;赖淑丽;《现代农业科技》;20190225(第4期);第131页第4.3节 *

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