CN101658516A - 紫杉醇类药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种紫杉醇类药物与药学上可接受生物学载体的药物组合物及其制备方法。紫杉醇类药物与载体蛋白的药物组合物是用载体蛋白、有机相、稳定剂、冻干保护剂以及紫杉醇类药物制备的纳米粒混悬液。紫杉醇类药物的重量体积百分比浓度为0.075－1.0％。本发明中利用高压匀浆技术制备的紫杉醇类药物纳米粒，不但能够达到降低紫杉醇类药物的不良反应的目的，而且提高了其临床用药的安全性。该纳米混悬液制备工艺简单可行，可适用于大量制备和工业化生产。

Description

紫杉醇类药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于医药制剂技术领域，涉及紫杉醇类的药物组合物及其制备方法。

背景技术

紫杉醇类药物(如紫杉醇、多烯紫杉醇等)是目前临床上所使用的最有效的抗肿瘤药物之一。紫杉醇为七十年代发现的从红豆杉或其种属的树皮或针叶中分离得到的天然产物，多烯紫杉醇为半合成产物，之后发现这是一类具有特殊抗肿瘤作用机制的抗肿瘤剂。

紫杉醇类药物的抗肿瘤作用机制是促进微管聚合，降低微管的解聚速度，从而使微管处于稳定的非功能性状态，从而达到阻止肿瘤细胞有丝分裂和增殖的目的。且临床前研究表明，多烯紫杉醇与紫杉醇相比，对微管的亲和力更强、血浆半衰期更长及细胞内滞留时间更长。

尽管紫杉醇和多烯紫杉醇具有良好的抗肿瘤作用，但是其水溶性均较低(约10μg/ml)，因此临床上所使用的紫杉醇注射液和多烯紫杉醇注射液均需要分别使用表面活性剂聚氧乙烯蓖麻油和聚山梨酯80(吐温-80)以及助溶剂乙醇来达到溶解紫杉醇和多烯紫杉醇药物的目的。紫杉醇注射液和多烯紫杉醇注射液则最早分别是由美国百时美施贵宝公司和法国赛诺菲-安万特公司成功开发上市的产品。

虽然使用表面活性剂聚氧乙烯蓖麻油和聚山梨酯80后可以配制成注射液，但是其在临床应用中的毒副作用较大，容易引起较多的并发症，较为常见的包括过敏反应、骨髓抑制(主要表现为中性粒细胞减少)、液体潴留、神经毒性、脱发等不良反应。

大量的研究显示聚氧乙烯蓖麻油在体内可促使大量组织胺释放，进而产生过敏反应，还可导致神经传导延迟感觉神经病变。此外，聚氧乙烯蓖麻油还可在血液中形成微小颗粒包裹紫杉醇分子，影响了药物分子向组织间的扩散，从而影响了其抗肿瘤效应。还有研究表明聚氧乙烯蓖麻油可溶解PVC输液器中的二乙烯己基邻苯二甲酸盐(Diethylehexyl Phthalate)，而聚山梨酯80(吐温80)具有溶血性，且黏性大，临床用药很不方便，同时由于其毒性用于静脉内注射时会引起过敏反应如休克、呼吸困难、低血压、血管性水肿、风疹等过敏样症状。

上述注射液制剂在毒副作用、给药方便性以及稳定性等方面均存在一定的问题，因此开发新的紫杉醇类药物给药剂型成为必要。

纳米粒由于其粒径小，可以避免网状内皮系统(RES)的吞噬作用而具有一定的靶向性，同时避免了表面活性剂的使用可以达到降低毒性反应，增强疗效的作用，并且其制备工艺简单，适合进行工业化生产。

本技术利用了白蛋白的内在性质来达到药物给药的靶向性。这些性质包括：

1.白蛋白作为营养物质，可以主动在肿瘤部位聚集；

2.白蛋白可以易化脂溶性药物通过细胞膜的跨膜转运；

3.白蛋白在体内可以转运多种小分子物质。

本技术还利用了肿瘤本身的生物学特性，即肿瘤快速生长需要大量的营养物质供给，且在多种肿瘤中富含半胱氨酸的酸性分泌型蛋白(SPARC)的表达活性增强，如头颈部肿瘤、黑色素瘤、卵巢癌等，并且有研究表明SPARC的表达与否与临床疗效和疾病的预后有关。

基于这些要素，美国生物科学有限公司已经开发了含有紫杉醇和人血清白蛋白的制剂Abraxane。

由于超声波技术等制备方法均不能用于工业化规模的生产，并且其得到的微粒粒径太大，这使其不适合和不能用于病人给药使用。因此美国生物科学有限公司在专利US2007082838以及CN1515244A和CN1515246A中记载了并要求分别保护用高压匀化方法制备可以重制的多烯紫杉醇/紫杉醇和人血清白蛋白的冷冻干燥制剂，且所得重构后混悬液的稳定性超过24小时。

在US2007082838专利中记载并要求保护加入稳定剂柠檬酸钠和/或氯化钠的包含多烯紫杉醇药物的白蛋白纳米粒，其平均粒径＜200nm，并且如专利中所述，这些用高压匀化方法得到的纳米乳剂据称有很高的稳定性，此处术语“稳定性”的意义既表示平均粒径不随时间或冷冻干燥过程而改变，也表示不出现纳米颗粒的药物沉淀(US2007082838，实施例12)。

本发明人多次重复了前述专利的实施例，特别是US2007082838的实施例11，16，和18，不曾得到在此专利实施例和权利要求书中所公开的结果。本发明人制备了所公开的混合物，然后在其推荐的压力范围内用Avestin匀化器对其处理，得到pH＝7.2的纳米乳剂，如专利中所述公开的，在旋转蒸发器中蒸发除去有机溶剂时，产生平均粒径约260nm的纳米颗粒，但是令人意外的是很快出现纳米颗粒的沉淀，同时在进行所述的系列滤膜过滤(1.2μm，0.8μm，0.45μm和0.22μm)时较难，滤膜容易出现堵塞的情况，且其冻干物在可注射的生理溶液中形成的纳米混悬液不稳定(在约8小时内倾向于沉淀)，这些与专利中声称的稳定性大于24小时的结果截然不同。

另外在CN1515244A以及CN1515246A专利中记载并要求保护含有水不溶性药物以及蛋白质包衣颗粒的药物输送系统及该种组合物的制备方法，并且其中所述的颗粒平均直径为10-200nm，如专利中所述的药物是紫杉醇，所述蛋白质为白蛋白，其所述药物组合系统的制备方法为将含所述水不溶性药物并在其中分散的有机相和含蛋白质的水性介质组成的混合物置于3000-30000Psi的高压匀浆器内，使其接受高剪切处理，产生上述颗粒，并且该组合物不含有表面活性剂。

本发明人也多次重复了前述专利的实施例，特别是CN1515246A的实施例1、5和6，不曾得到在此专利的实施例和权利要求书中所说明的结果。本发明人制备了所公开的混合物，然后在其所推荐的压力范围内用Avestin匀化器对混合物进行处理，得到pH＝6.8的纳米乳剂，并且按照专利中所述的用旋转蒸发器蒸发除去溶剂，可产生平均粒径约为200nm的纳米颗粒，在进行冷冻干燥后所得的饼块中加入无菌水或生理盐水后很容易再构成分散液，但是其纳米颗粒大小较冷冻干燥前明显增加，平均粒径由冷冻干燥之前的200nm增大为350nm，且在4h内即出现纳米颗粒的聚集、沉淀，并不如专利中所述的纳米混悬液稳定。

此外，本发明人用专利CN1515246A中所记载的滤膜进行过滤，但是其结果是滤器很容易出现堵塞，且药物的产率很低，总是低于30％，这与专利中所陈述的70-100％的产率结果不同，并且从来没有达到如专利中所述的如此高的药物产率。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种紫杉醇类药物组合物及其制备方法。

本发明的技术方案如下：

一种紫杉醇类药物组合物，包含紫杉醇类药物，药学上可接受的生物学载体、稳定剂和冻干保护剂，pH值为3.0～4.5。

所述紫杉醇类药物可以选自紫杉醇、多烯紫杉醇。

上述药学上可接受的生物学载体为含有半胱氨酸和/或二硫键的蛋白质。优选的，所述含有半胱氨酸和/或二硫键的蛋白质为天然的蛋白质。进一步优选的，所述天然的蛋白质为人血清白蛋白。

所述紫杉醇类药物组合物是含有紫杉醇类药物的白蛋白纳米粒，所述紫杉醇类药物白蛋白纳米粒子的平均粒径≤200nm，并且是可无菌过滤的。

所述紫杉醇类药物组合物中的蛋白质与紫杉醇类药物的重量比是20～5∶1；优选的，蛋白质与紫杉醇类药物的重量比为10∶1。

所述的稳定剂包括：i)药学上可接受的盐类，如柠檬酸钠、氯化钠、油酸钠等；或ii)生物相容性酸，如盐酸、柠檬酸、冰醋酸、酒石酸等。优选的稳定剂为氯化钠。

所述的冻干保护剂选自甘露醇、天冬氨酸、蔗糖、山梨醇、乳糖、果糖、海藻糖、麦芽糖、氨基酸盐或右旋糖苷等。优选的冻干保护剂为天冬氨酸。

上述的紫杉醇类药物组合物是紫杉醇类药物的白蛋白纳米粒无菌冷冻干燥制剂。所述组合物的无菌冷冻干燥制剂为可用5％葡萄糖溶液、0.9％氯化钠溶液或注射用水复溶为液体混悬液的无菌冷冻干燥粉末，其中液体混悬液中紫杉醇类药物浓度范围为0.075-1.0％，所述％均为重量体积浓度。

所述紫杉醇类药物组合物，按最终制剂中的重量体积浓度计，含有紫杉醇类药物0.075-1.0％，药学上可接受的生物学载体0.6-20％，稳定剂1-8.0％。

在紫杉醇类药物组合物的制备过程中还需要使用有机溶剂、注射用水。

所使用的有机溶剂选自二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醇、四氢呋喃、乙腈、丙酮、甲基吡咯烷酮、或类似溶剂之一，或两种以上的这些溶剂的混合物，优选为氯仿与乙醇的混合物。

本发明紫杉醇类药物组合物是按以下方法制得的：

有机相配制：将紫杉醇类药物分散于有机相中；

水相配制：将药学上可接受的生物学载体、稳定剂加入注射用水中；

然后将有机相与水相混合搅拌，通过高压匀化作用分散制成紫杉醇类药物白蛋白纳米粒，加入冻干保护剂，冷冻干燥得到的紫杉醇类药物白蛋白纳米粒冻干制剂，具有良好的化学稳定性和物理稳定性。

与现有技术的不同之处在于，本申请在与含药物的有机相混合之后，向含有药物颗粒的水溶液中加入冻干保护剂，使溶液的pH值稳定在3.0-4.5。

本发明提供的紫杉醇类药物组合物可以直接静脉注射。

本发明所述的紫杉醇类药物组合物作为制备用于非经肠胃给药的医药产品的应用。

与现有技术相比，已发现pH值在3.0～4.5之间时，对于重构的冷冻干燥产品，不仅其粒径无明显变化，如本发明实施例1中所述，外加入天冬氨酸的纳米粒在冻干重构前后的平均粒径分别为152nm和149.2nm，室温观察物理稳定性超过24小时；而且将产品进行HPLC检测，发现含有天冬氨酸的制剂在重构放置12h后其多烯紫杉醇药物含量无明显变化，证明了其化学稳定性好，不存在多烯紫杉醇药物降解的情况。

一种所述紫杉醇类药物组合物的制备方法，包括如下步骤：

1)有机相配制：

将紫杉醇类药物溶于有机溶剂中，直至完全溶解，密封保存，为有机相；

2)水相配制：

将生物学载体蛋白质、稳定剂分散于注射用水中，定容，搅拌溶解为水相；

3)在冷却条件下，分别将水相、有机相转移至微射流仪中，在5000-30000Psi条件下匀浆制得含有紫杉醇类药物的白蛋白纳米粒混悬液；

4)将所制得的含有紫杉醇类药物的白蛋白纳米粒混悬液通过0.22μm的滤膜除菌过滤，得无菌紫杉醇类药物白蛋白纳米粒混悬液；

5)向紫杉醇类药物白蛋白纳米粒混悬液加入冻干保护剂天冬氨酸，然后进行冷冻干燥，制得紫杉醇类药物白蛋白纳米粒无菌冷冻干燥制剂。

上述紫杉醇类药物白蛋白纳米粒无菌冷冻干燥制剂是无菌粉状固体药物组合物。

本发明使用生物相容性聚合物-载体蛋白制备紫杉醇类药物组合物，制备具有靶向和缓释效应的新药物，进一步提高制剂的稳定性、有效性和安全性。

本发明的紫杉醇类药物组合物与现有技术的紫杉醇注射液和多烯紫杉醇注射液相比，本发明可以使紫杉醇类药物具有肿瘤靶向性，提高了药物的疗效，降低了药物的不良反应发生率。

本发明中实施例1的多烯紫杉醇药物组合物与US2007082838中所述的纳米乳剂相比，本发明得到的多烯紫杉醇药物组合物稳定的pH值范围为3.0-4.5，提高了多烯紫杉醇药物的化学稳定性，避免了其在碱性条件下的降解。

具体实施方式

以下实施例仅用于进一步说明本发明，但不限制本发明。除有特别说明的外，所有％均是重量体积浓度。

实施例1

该实施例证实了含有氯化钠(4.0％)和冻干保护剂天冬氨酸的多烯紫杉醇药物组合物的稳定性。

有机相配制：多烯紫杉醇(10％)溶于包含氯仿和乙醇的混合溶剂(3％，v/v)中；

水相配制：人血清白蛋白(5％，m/v)，稳定剂氯化钠(4.0％)加入注射用水中搅拌直至溶解；批次量为30ml。

将水相加入微射流仪中，将有机相缓慢加入水相中，在5000Psi条件下匀化制备纳米乳剂。该液体混悬液可以直接过0.22μm滤膜除菌过滤，并且分别制备了外加入0.5％天冬氨酸和不加天冬氨酸的制剂，上述制剂的pH值分别为3.7和6.7，冷冻干燥除去纳米乳中的有机溶剂，得到多烯紫杉醇白蛋白纳米粒的无菌冻干固体粉末。

使用马尔文粒度测定仪进行粒度分析，冷冻干燥前的纳米粒子平均粒径为152nm，而含有天冬氨酸和不含天冬氨酸的冻干制剂重构后的平均粒径分别为149.2nm和278nm，且室温放置后，其稳定性分别为＞24h和＜4h，充分证明了含有冻干保护剂天冬氨酸对冷冻干燥制剂的稳定性作用。

实施例2

该实施例证实了含有氯化钠(7.7％)的多烯紫杉醇药物组合物的稳定性。

有机相配制：多烯紫杉醇(8％)溶于包含二氯甲烷和乙酸乙酯的混合溶剂(3％，v/v)中；

水相配制：人血清白蛋白(5％，m/v)，稳定剂氯化钠(7.7％)加入注射用水中搅拌直至溶解；批次量为30ml。

将水相加入微射流仪中，有机相缓慢加入水相中，在5000Psi压力条件下匀化制备纳米乳剂。该液体混悬液可以直接过0.22μm滤膜除菌过滤，并且外加入冻干保护剂0.6％天冬氨酸后分装冻干，制剂的pH值为3.6，在冷冻干燥过程中除去纳米乳中的有机溶剂。

使用马尔文粒度测定仪进行粒度分析。纳米粒子重构前后的平均粒径分别为172nm和171.6nm，并且绝大部分的粒子粒径＜0.4μm，室温放置纳米粒混悬液的稳定性＞24h。

实施例3

该实施例作为证实了含有柠檬酸钠(4.2％)的多烯紫杉醇药物组合物的物理稳定性和多烯紫杉醇药物的化学不稳定性。

有机相配制：多烯紫杉醇(10％)溶解于含有氯仿和乙醇的混合溶剂(3％，v/v)中；

水相配制：人血清白蛋白(重量体积比5％)、稳定剂柠檬酸钠(4.2％)加入注射用水中搅拌直至溶解；批次量为30ml。

将水相加入微射流仪中，有机相缓慢加入水相中，在5000Psi压力条件下匀化制备纳米乳剂。该液体混悬液可以通过0.22μm滤膜除菌过滤，并且外加入冻干保护剂2％甘露醇后分装冻干，通过冷冻干燥过程除去纳米乳中的有机溶剂。

使用马尔文粒度测定仪进行粒度测定。冻干制剂重构前后纳米粒子的平均粒径分别为152nm和153.4nm，并且室温放置纳米粒混悬液的稳定性＞24h，但是该制剂的pH值为7.2，多烯紫杉醇药物在其中存在化学降解的情况，HPLC检测证明在冻干制剂重构放置8h后，多烯紫杉醇药物含量降解达到20％。

实施例4

该实施例证明了含有油酸钠(1％)的多烯紫杉醇药物组合物的稳定性。

有机相配制：多烯紫杉醇(12％)溶解于含有氯仿和乙醇的混合溶剂(3％，v/v)中；

水相配制：人血清白蛋白(3％，m/v)、稳定剂油酸钠(0.06％，m/v)加入注射用水中，搅拌溶解定容至30ml。

将水相加入微射流仪中，有机相缓慢加入水相中，在5000Psi压力条件下匀化制备纳米乳剂，该液体混悬液可以通过0.22μm滤膜除菌过滤，并且外加入冻干保护剂天冬氨酸0.5％后分装冻干，上述制剂的pH值为3.8。

该纳米混悬液用马尔文粒度测定仪进行测定，其冻干制剂重构前后纳米粒子的平均粒径分别为182nm和184nm，并且纳米混悬液冻干复溶后的室温放置稳定性＞24h。

实施例5

有机相配制：将60.6mg紫杉醇溶解于氯仿和乙醇的混合溶剂中(3％，v/v)；

水相配制：4.5ml人血清白蛋白(3％，m/v)和稳定剂氯化钠(2.0％)溶解于注射用水中，搅拌均匀，定容至批次量30ml。

将水相加入微射流仪中，有机相缓慢加入水相中，在5000Psi压力条件下匀化制备纳米乳剂。该液体混悬液可以通过0.22μm滤膜除菌过滤。除菌过滤液外加入冻干保护剂柠檬酸0.4％后分装冻干，上述制剂的pH值为3.7。

该纳米混悬液用马尔文粒度测定仪进行测定，其冻干制剂重构前后纳米粒子的平均粒径分别为176nm和174nm，并且纳米混悬液冻干复溶后的室温放置稳定性＞24h。

实施例6

该实施例证实了用微射流仪制备纳米粒时加入稳定剂的必要性。

有机相配制：将59.6mg多烯紫杉醇溶解于氯仿和乙醇的混合溶剂中(5％，v/v)；

水相配制：6.1ml人血清白蛋白(4％，m/v)和稳定剂氯化钠2.0％溶解于注射用水中，搅拌均匀，定容至批次量30ml。

将水相加入微射流仪中，有机相缓慢加入水相中，在6000Psi压力条件下匀化制备纳米乳剂。该液体混悬液可以通过0.22μm滤膜除菌过滤。

除菌过滤液外加入冻干保护剂天冬氨酸0.6％后分装冻干。

该纳米混悬液的平均粒径为192nm(马尔文粒度测定仪)，其冻干复溶前后粒径明显变化：复溶粒径为470nm，复溶后纳米粒室温放置稳定性＜8h。

实施例7：药物浓度对纳米粒子大小的影响

该实施例中证实了有机相中药物浓度的重要作用。

进行三个试验，其中多烯紫杉醇在有机相中的药物浓度分别为50mg/ml、100mg/ml和180mg/ml，而其他参数如有机相比例、人血清白蛋白浓度、稳定剂用量和高压匀浆压力与实施例1中的参数相同，制得多烯紫杉醇白蛋白纳米粒冷冻干燥制剂。

结果发现，较低的药物浓度可得到平均粒径大约为220nm的粒子，而较高的药物浓度则可得到较小平均粒径的纳米粒子，即140-145nm。具体实验参数及结果如表1中所示：

表1：不同药物浓度对多烯紫杉醇白蛋白纳米粒粒径大小的影响

试验	多烯紫杉醇药物浓度	有机相比例	人血清白蛋白浓度	氯化钠	匀浆压力	粒径
							1	5％	3％	5％	4.0％	5000Psi	220nm
2	10％	3％	5％	4.0％	5000Psi	170-180nm
							3	18％	3％	5％	4.0％	5000Psi	140-145nm

注：以批次量30ml计算

实施例8：有机相的相比例对颗粒大小的影响

该实施例证实了在系统中有机溶剂较低的相比例的重要作用。

进行了三个试验，在试验中，除了改变有机溶剂的相比例外，其他与实施例3中所述的相同，水溶性有机溶剂无水乙醇在有机相中的含量维持在20％(v/v)。

结果发现，随着相比例的增加纳米粒子的大小随之增加：在6％(v/v)相比例下得到的颗粒平均粒径大约为270nm；在3％(v/v)相比例下，颗粒平均粒径为180nm；在2％(v/v)相比例时，颗粒平均粒径则为140nm，具体实验参数与结果如表2中所示。

通过上述试验，我们可以得出的结论是：只有在较低相比例的情况下所制备的纳米粒较小，才可以通过无菌过滤。

表2：不同有机相比例对纳米粒粒径大小的影响

试验	多烯紫杉醇药物用量	有机相的相比例	人血清白蛋白浓度	柠檬酸钠	匀浆压力	粒径
							1	90mg	6％	5％	4.2％	5000Psi	270nm
2	90mg	3％	5％	4.2％	5000Psi	180nm
							3	90mg	2％	5％	4.2％	5000Psi	140nm

注：以批次量30ml计算

实施例9：稳定剂用量对纳米混悬液稳定性的影响

该实施例中证实了在纳米混悬液中的稳定剂氯化钠用量对粒子大小及稳定性的重要作用。

进行了三个试验，在试验中，多烯紫杉醇药物(5％)溶解于乙酸乙酯和二氯甲烷(3％)的混合溶剂中，人血清白蛋白(3％)、稳定剂氯化钠用量选择1.5％、4.0％和7.7％，加入注射用水中溶解制成水相，制备工艺如实施例4，且纳米混悬液中的乙酸乙酯和二氯甲烷通过旋转蒸发除去。

结果发现随着稳定剂氯化钠用量的降低，稳定性逐渐降低。在7.7％氯化钠用量时，其室温放置稳定性＞24h；在4％氯化钠用量时，其室温放置稳定性＞24h；在1.5％氯化钠用量时，其室温放置稳定性＜8h，具体试验参数和结果如表3中所示。

通过上述试验，我们可以得出的结论是：只有在稳定剂用量较高比例的情况下所制备的纳米粒混悬液的室温放置稳定性较好，可以达到放置24h稳定的目的。

表3：不同稳定剂用量对多烯紫杉醇白蛋白纳米粒稳定性的影响

试验	多烯紫杉醇药物浓度	有机相的相比例	人血清白蛋白浓度	氯化钠	匀浆压力	稳定性
							1	5％	3％	3％	1.5％	5000Psi	＜8h
2	5％	3％	3％	4.0％	5000Psi	＞24h
							3	5％	3％	3％	7.7％	5000Psi	＞24h

注：以批次量30ml计算

实施例10

在以下的实施例中证实了仅使用水不溶性有机溶剂制备纳米粒的可行性。

有机相配制：89.7mg多烯紫杉醇药物溶解于0.8ml氯仿中；

水相配制：人血清白蛋白(3％，m/v)、氯化钠(4.0％，m/v)加入注射用水中，搅拌溶解定容至30ml。

将水相加入微射流仪中，有机相缓慢加入水相中，在6000Psi压力条件下匀化制备纳米乳剂，该液体混悬液可以通过0.22μm滤膜除菌过滤，并且外加入冻干保护剂天冬氨酸0.6％后分装冻干。

该纳米混悬液用马尔文粒度测定仪进行测定，纳米粒子冻干前的平均粒径为161nm，纳米混悬液冻干复溶后其平均粒径为158nm，并且纳米混悬液冻干复溶后的室温放置稳定性＞12h。

实施例11

有机相配制：多烯紫杉醇药物(5％，m/v)溶解于氯仿和乙醇(6％，v/v)的混合有机溶剂中；

水相配制：人血清白蛋白(3％)和稳定剂氯化钠(3.6％)于注射用水中搅拌溶解定容至30ml。

将水相转移至微射流仪中，有机相缓慢加入水相中，在6000Psi压力条件下制备多烯紫杉醇纳米粒乳液，该液体混悬液可以通过0.22μm滤膜除菌过滤，外加入冻干保护剂天冬氨酸0.4％后分装冻干。

该纳米混悬液用马尔文粒度测定仪进行粒度测定，纳米粒子的冻干前平均粒径为171nm，冻干重构后的平均粒径为172nm，并且室温放置稳定性＞24h。

实施例12

有机相配制：紫杉醇药物(10％，m/v)溶解于氯仿和乙醇(2％，v/v)的混合有机溶剂中；

水相配制：人血清白蛋白(3％，m/v)和稳定剂柠檬酸(1.0％，m/v)于注射用水中搅拌溶解定容至30ml。

将水相转移至微射流仪中，有机相缓慢加入水相中，在6000Psi压力条件下制备紫杉醇纳米粒乳液，该液体混悬液可以通过0.22μm滤膜除菌过滤，外加入冻干保护剂甘露醇2％后分装冻干。

该纳米混悬液用马尔文粒度测定仪进行粒度测定，纳米粒子的冻干前平均粒径为164nm，冻干重构后的平均粒径为161nm，并且室温放置稳定性＞24h。

Claims (12)

1.一种紫杉醇类的药物组合物，其特征在于，包含紫杉醇类药物，药学上可接受的生物学载体、稳定剂和冻干保护剂，pH值为3.0-4.5。

2.根据权利要求1所述紫杉醇类的药物组合物，其特征在于，所述药学上可接受的生物学载体为含有半胱氨酸和/或二硫键的蛋白质；优选的，所述含有半胱氨酸和/或二硫键的蛋白质为天然的蛋白质；进一步优选的，所述天然的蛋白质为人血清白蛋白。

3.根据权利要求1所述紫杉醇类的药物组合物，其特征在于，所述组合物为含有紫杉醇类药物的白蛋白纳米粒，所述紫杉醇类药物白蛋白纳米粒子的平均粒径≤200nm，并且是可无菌过滤的。

4.根据权利要求3所述紫杉醇类的药物组合物，其特征在于，所述蛋白质包被的紫杉醇类药物组合物中的蛋白质与紫杉醇类药物的重量比是20～5∶1；优选地，蛋白质与紫杉醇类药物的重量比为10∶1。

5.根据权利要求1所述紫杉醇类的药物组合物，其特征在于，所述的稳定剂包括：i)药学上可接受的盐类，选自柠檬酸钠、氯化钠或油酸钠；或ii)生物相容性酸，选自盐酸、柠檬酸、冰醋酸或酒石酸；其中优选的稳定剂为氯化钠。

6.根据权利要求1所述紫杉醇类的药物组合物，其特征在于，所述的冻干保护剂选自甘露醇、天冬氨酸、蔗糖、山梨醇、乳糖、果糖、海藻糖、麦芽糖、氨基酸盐或右旋糖苷；其中优选的冻干保护剂为天冬氨酸。

7.根据权利要求1所述紫杉醇类的药物组合物，其特征在于，所述的紫杉醇类药物组合物是紫杉醇类药物白蛋白纳米粒无菌冷冻干燥制剂。

8.根据权利要求7所述紫杉醇类的药物组合物，其特征在于，所述的无菌冷冻干燥制剂为可用5％葡萄糖溶液、0.9％氯化钠溶液或注射用水复溶为液体混悬液的无菌冷冻干燥粉末，其中液体混悬液中所含紫杉醇类药物浓度范围为0.075-1.0％，均为重量体积浓度。

9.根据权利要求1-8任一种所述紫杉醇类的药物组合物，其特征在于，所述组合物，中，按最终制剂中的重量体积浓度计，含有紫杉醇类药物0.075-1.0％，药学上可接受的生物学载体0.6-20％，稳定剂1-8.0％。

10.一种权利要求1的紫杉醇类的药物组合物的制备方法，包括步骤：

1)将紫杉醇类药物溶于有机溶剂中，直至完全溶解，密封保存，为有机相；

2)将生物学载体蛋白质、稳定剂分散于注射用水中，定容，搅拌溶解为水相；

3)在冷却条件下，分别将水相、有机相转移至微射流仪中，在5000-30000Psi条件下匀浆制得含有紫杉醇类药物的白蛋白纳米粒混悬液；

4)将所制得的含有紫杉醇类药物的载体白蛋白纳米粒混悬液通过0.22μm的滤膜除菌过滤，得无菌紫杉醇类药物白蛋白纳米粒混悬液；

5)向紫杉醇类药物白蛋白纳米粒混悬液加入冻干保护剂，然后进行冷冻干燥，制得紫杉醇类药物白蛋白纳米粒无菌冷冻干燥制剂。

11.根据权利要求10所述紫杉醇类药物的药物组合物的制备方法，其特征在于，步骤1)所述有机溶剂选自二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醇、四氢呋喃、乙腈、丙酮、甲基吡咯烷酮、或类似溶剂之一或两种以上的这些溶剂的混合物；优选为氯仿与乙醇的混合物。

12.权利要求1-9所述任一种紫杉醇类药物的药物组合物作为制备用于非经肠胃给药的医药产品的应用。