CH646432A5 - Beta-lactam-antibiotika. - Google Patents
Beta-lactam-antibiotika. Download PDFInfo
- Publication number
- CH646432A5 CH646432A5 CH67680A CH67680A CH646432A5 CH 646432 A5 CH646432 A5 CH 646432A5 CH 67680 A CH67680 A CH 67680A CH 67680 A CH67680 A CH 67680A CH 646432 A5 CH646432 A5 CH 646432A5
- Authority
- CH
- Switzerland
- Prior art keywords
- liters
- antibiotics
- column
- eluted
- water
- Prior art date
Links
- 239000003782 beta lactam antibiotic agent Substances 0.000 title 1
- 239000002132 β-lactam antibiotic Substances 0.000 title 1
- 229940124586 β-lactam antibiotics Drugs 0.000 title 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 50
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 37
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 claims description 37
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 17
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 10
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 claims description 9
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- 241000187180 Streptomyces sp. Species 0.000 claims description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910006069 SO3H Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 68
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 51
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 34
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 26
- ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N isobutanol Chemical compound CC(C)CO ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 26
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 23
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 20
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 20
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 17
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 17
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 16
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 15
- GOODEIVATWULQD-CWYJLJPQSA-N (5r,6r)-3-[(r)-[(e)-2-acetamidoethenyl]sulfinyl]-7-oxo-6-(2-sulfooxypropan-2-yl)-1-azabicyclo[3.2.0]hept-2-ene-2-carboxylic acid Chemical compound C1C([S@](=O)/C=C/NC(=O)C)=C(C(O)=O)N2C(=O)[C@@H](C(C)(C)OS(O)(=O)=O)[C@@H]12 GOODEIVATWULQD-CWYJLJPQSA-N 0.000 description 14
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 13
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 13
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 12
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 12
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N ammonia Natural products N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 11
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 10
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 10
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 9
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 9
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 8
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 8
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- FWWJFXYMDLTDNO-BBCPMLLOSA-N (5r,6r)-3-[(r)-[(e)-2-acetamidoethenyl]sulfinyl]-6-(2-hydroxypropan-2-yl)-7-oxo-1-azabicyclo[3.2.0]hept-2-ene-2-carboxylic acid Chemical compound C1C([S@](=O)/C=C/NC(=O)C)=C(C(O)=O)N2C(=O)[C@@H](C(C)(C)O)[C@@H]12 FWWJFXYMDLTDNO-BBCPMLLOSA-N 0.000 description 7
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 7
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 7
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 7
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 7
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 7
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 7
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 6
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 6
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 6
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 6
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 6
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 6
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 6
- 241000894007 species Species 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 241000544912 Melanoides Species 0.000 description 5
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 5
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 5
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 5
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 5
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 5
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 5
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 5
- 239000000645 desinfectant Substances 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 150000003952 β-lactams Chemical class 0.000 description 5
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 4
- QYQDKDWGWDOFFU-IUODEOHRSA-N Cefotiam Chemical compound CN(C)CCN1N=NN=C1SCC1=C(C(O)=O)N2C(=O)[C@@H](NC(=O)CC=3N=C(N)SC=3)[C@H]2SC1 QYQDKDWGWDOFFU-IUODEOHRSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 102000006635 beta-lactamase Human genes 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 4
- 229960001242 cefotiam Drugs 0.000 description 4
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 4
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 4
- IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M potassium bromide Chemical compound [K+].[Br-] IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N tetraphosphorus decaoxide Chemical compound O1P(O2)(=O)OP3(=O)OP1(=O)OP2(=O)O3 DLYUQMMRRRQYAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000272517 Anseriformes Species 0.000 description 3
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 3
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 3
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 description 3
- 241001453268 Comamonas terrigena Species 0.000 description 3
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 3
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical class [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000588747 Klebsiella pneumoniae Species 0.000 description 3
- 239000004166 Lanolin Substances 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 3
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 3
- 241000588767 Proteus vulgaris Species 0.000 description 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 3
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 3
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 3
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 3
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 3
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 3
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 3
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 description 3
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 description 3
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 3
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 239000012499 inoculation medium Substances 0.000 description 3
- 229940039717 lanolin Drugs 0.000 description 3
- 235000019388 lanolin Nutrition 0.000 description 3
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 3
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 3
- 229940007042 proteus vulgaris Drugs 0.000 description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 3
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 3
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 2
- 241000588813 Alcaligenes faecalis Species 0.000 description 2
- 241000193755 Bacillus cereus Species 0.000 description 2
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 2
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 2
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 2
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 241000191938 Micrococcus luteus Species 0.000 description 2
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 2
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000588770 Proteus mirabilis Species 0.000 description 2
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 description 2
- 241000607715 Serratia marcescens Species 0.000 description 2
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 2
- 241000186986 Streptomyces anulatus Species 0.000 description 2
- 241000771986 Streptomyces galtieri Species 0.000 description 2
- 241000187436 Streptomyces globisporus Species 0.000 description 2
- 241000813862 Streptomyces saprophyticus Species 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 229940005347 alcaligenes faecalis Drugs 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 2
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- -1 etc. Substances 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 2
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 2
- 235000019371 penicillin G benzathine Nutrition 0.000 description 2
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 2
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 239000012286 potassium permanganate Substances 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004436 sodium atom Chemical group 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- BBBFYZOJHSYQMW-LGDQNDJISA-N (2s)-2,4-diamino-4-oxobutanoic acid;(2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O BBBFYZOJHSYQMW-LGDQNDJISA-N 0.000 description 1
- UQZSVIGPZAULMV-DKWTVANSSA-N (2s)-2,4-diamino-4-oxobutanoic acid;propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O UQZSVIGPZAULMV-DKWTVANSSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 2-(3-bromo-2-fluorophenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC(Br)=C1F PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150046236 CNR1 gene Proteins 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N D-Fructose Natural products OC[C@H]1OC(O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N L-arabinopyranose Chemical compound O[C@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 1
- 241000576755 Sclerotia Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 1
- 241000936859 Streptomyces albovinaceus Species 0.000 description 1
- 241000520747 Streptomyces canescens Species 0.000 description 1
- 241000958217 Streptomyces fimicarius Species 0.000 description 1
- 241000936692 Streptomyces griseinus Species 0.000 description 1
- 241000187392 Streptomyces griseus Species 0.000 description 1
- 241000933218 Streptomyces parvus Species 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 1
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- ZAIPMKNFIOOWCQ-UEKVPHQBSA-N cephalexin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@@H]3N(C2=O)C(=C(CS3)C)C(O)=O)=CC=CC=C1 ZAIPMKNFIOOWCQ-UEKVPHQBSA-N 0.000 description 1
- 229940106164 cephalexin Drugs 0.000 description 1
- 238000001142 circular dichroism spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L cobalt dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Co+2] GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000012156 elution solvent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000011790 ferrous sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000003891 ferrous sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 229910003002 lithium salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000002 lithium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002960 penicillins Chemical class 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003016 phosphoric acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 229920001521 polyalkylene glycol ether Polymers 0.000 description 1
- 235000021395 porridge Nutrition 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229920003124 powdered cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000019814 powdered cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229940088417 precipitated calcium carbonate Drugs 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000000039 preparative column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 1
- 230000003014 reinforcing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015113 tomato pastes and purées Nutrition 0.000 description 1
- 239000000052 vinegar Substances 0.000 description 1
- 235000021419 vinegar Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D477/00—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring
- C07D477/10—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 4, and with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2
- C07D477/12—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 4, and with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2 with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, attached in position 6
- C07D477/16—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 4, and with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2 with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, attached in position 6 with hetero atoms or carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 3
- C07D477/20—Sulfur atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
- C12P17/182—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system
- C12P17/184—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system containing a beta-lactam ring, e.g. thienamycin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf die Antibiotika C-19393S2 und C-19393H2, welche neue Verbindungen sind, sowie auf deren Salze und auf ein Verfahren zur Herstellung 3s dieser Antibiotika C-19393S2 und/oder C-19393H2.
Es ist gelungen, eine Anzahl von Mikroorganismen aus Bodenproben zu isolieren und die durch diese Mikroorganismen erhältlichen Antibiotika zu untersuchen. Aufgrund dieser Versuche wurde festgestellt, dass ein gewisser Mikroor- 40 ganismus fähig ist, neue Antibiotika zu erzeugen, wobei dieser Mikroorganismus der Gattung Streptomyces angehört. Es wurde auch festgestellt, dass die Züchtung dieses Mikroorganismus in einem geeigneten Züchtungsmedium neue Verbindungen in der Kulturbrühe anzureichern vermag und dass 45 diese Verbindungen gegen gramnegative und grampositive Bakterien eine antimikrobielle Wirkung besitzen. Es wurden somit die oben erwähnten Antibiotika isoliert, welche aufgrund ihrer chemischen und physikalischen Eigenschaften als neu angesehen werden müssen und der folgenden allge- 50 meinen Formel entsprechen:
(I)
,H
,0=c\
H NH-COCH.
55
OOH
worin R den Rest -SO3H oder das Wasserstoffatom bedeutet.
In der obigen Formel I wird die Verbindung, in welcher R den Rest -SO3H darstellt, als Antibiotikum C-19393S2 und 65 die Verbindung, in welcher R das Wasserstoffatom darstellt, als Antibiotikum C-19393H2 bezeichnet.
Die vorliegende Erfindung bezieht sich daher worin R den Rest -SO3H oder das Wasserstoffatom bedeutet, und
(2) auf ein Verfahren zur Herstellung der besagten Antibiotika C-19393S2 und/oder C-19393H2, welches darin besteht, dass man einen zur Gattung Streptomyces gehörenden Mikroorganismus, welcher die Antibiotika C-19393S2 und/ oder C-19393H2 zu erzeugen vermag, in einem Kulturmedium züchtet, um dank dem Mikroorganismus in der Kulturbrühe die Antibiotika C-19393S2 und/oder C-19393H2 anzureichern, worauf man diese Antibiotika C-19393S2 und/oder C-19393H2 aus der besagten Brühe isoliert.
In den vorliegenden Beschreibung wird das Antibiotikum C-19393S2 nachstehend kurz als «C-19393S2» und das Antibiotikum C-19393H2 kurzerhand als «C-19393H2» bezeichnet.
Zur Herstellung der Antibiotika C-19393S2 und/oder C-19393H2 verwendet man gemäss vorliegender Erfindung einen zur Gattung Streptomyces gehörenden, die Antibiotika C-19393S2 und/oder C-19393H2 erzeugenden Mikroorganismus. Ein typisches Beispiel eines solchen Mikroorganismus ist Streptomyces sp. Stamm C-19393 (nachstehend hin und wieder als «Stamm C-19393» bezeichnet, welcher dadurch erhalten wurde, dass man eine Suspension einer in Schweden gesammelten Bodenprobe in sterilem Wasser auf einem Kulturmedium, welches sich aus 1% lösliche Stärke, 0,05% Harnstoff, 0,05% Polypepton (Daigo Nutritive Chemicals, Ltd., Japan), 0,05% Hefeextrakt (Difco, USA), 0,02% Dikaliumphosphat, 0,02% Kaliumchlorid, 0,01% Magnesiumsulfat, 5 ng/ml Bleomycin und 2% Agar besteht und einen pH-Wert von 7,0 aufweist, der Plattenkultur unterzieht und den bei Züchtung der Kolonie während 2 Wochen bei 28°C gebildeten Mikroorganismus wiederholt reinigt.
Die mikrobiologischen Eigenschaften des Streptomyces sp. Stamm C-19393 sind die folgenden:
a) Morphologische Eigenschaften
Das Luftmycel hat eine Dicke von ungefähr 1 ji. und erstreckt sich aus dem weit verzweigten, vegetativen Mycel. Dies verzweigt sich monopodial aus der Hauptachse unter Bildung von Nebenketten. Gerade verlaufende oder schwach verborgene Sporenketten, d. h. sogennanter «rectus flexibilis (nachstehend kurzerhand mit «RF» bezeichnet) können am Ende der Seitenkette festgestellt werden. Jede Spore hat eine zylindrische Form (0,35-0,55 u x 0,7-1,4 u) und eine glatte Oberfläche. Es werden weder spezifische Organe, wie z.B. sphärische Sporangien und Sclerotia, noch bewegliche Sporen beobachtet.
b) Züchtungseigenschaften
Die Züchtungseigenschaften des Stammes auf verschiedenen Medien finden sich in der folgenden Tabelle 1. Soweit nichts anderes ausgesagt wird, wurden die Eigenschaften nach Züchtung während 2 Wochen bei 28°C festgestellt.
3
Tabelle 1
646432
Medium Wachstum Luftmycel Rückseite lösliches Pigment
Saccharose Nitrat-Agar mässig weiss farblos kein
Glucose-Asparagin-Agar schwach weiss farblos kein
Glycerin-Asparagin-Agar mässig weiss farblos kein
Stärkeagar mässig kein ocker kein
Nähragar mässig weiss elfenbeinfarben kein
Tyrosinagar mässig kein farblos kein
Hefeextrakt-Malzextrakt-Agar mässig kein gräulichgelb kein
Weizenmehlagar mässig weiss farblos kein
Der Stamm C-19393 zeigt ein ausgiebiges Wachstum auf einem 2% Weizenmehl, 2% Tomatenpaste, 0,2% Bovril (der Firma Bovril, England) und 2% Agar enthaltenden Medium, welches einen pH-Wert von 7,0 aufweist (nachstehend als «T Medium» bezeichnet), wobei gräulich-gelbe Luftmycelien reichlich gebildet werden. Es bildet sich kein lösliches Pigment.
c) Physiologische Eigenschaften
(1) Temperaturbereich für das Wachstum:
unterer Wert: < 15°C oberer Wert: 32 bis 35°C optimale Temperatur 26,5 bis 30°C
(2) Verflüssigung von Gelatine: positiv
(3) Hydrolyse von Stärke: positiv
(4) Peptonisierung von Magermilch: positiv Koagulierung von Magermilch: negativ
(5) Erzeugung von Melanoidpigmenten:
Tyrosin-Agar: negativ Pepton-Hefeextrakt-Eisen-Agar: negativ
(6) Die Assimilierung von Kohlenstoffquellen (auf Pridham-Gottlieb-Agar) erfolgt gemäss nachstehender Tabelle 2.
Tabelle 2
Kohlenstoffquellen
Assimilation
Glycerin i-Inositol
D-Mannitol
D-Xylose
L-Arabinose
D-Glucose
D-Galactose
D-Fructose
Maltose
Saccharose
Rhamnose
Raffinose
Stärke
Cellulose
Blindversuch (ohne Zusatz)
+ ± + + + + + +
+ +
Bemerkung: - kein Wachstum
+ Wachstum zweifelhaft + Wachstum
Aus den oben erwähnten, verschiedenen Eigenschaften geht hervor, dass der Stamm C-19393 offensichtlich der Gattung Streptomyces angehören dürfte. Aufgrund der obigen Beobachtungen wurde die taxonomische Stellung des Stammes C-19393 überprüft und dabei festgehalten, dass dieser Stamm ein weisses bis gelbes Luftmycel entwickelt, die i5 Sporenkette RF ist, die Sporenoberfläche glatt ist, Melanoid-pigmente und lösliche Pigmente auf den Medien nicht erzeugt werden, keine bestimmte Farbe auf der Rückseite festgestellt wird und der Stamm Mannitol nicht verwertet, wobei zu diesem Zwecke die folgenden Literaturstellen her-20 angezogen wurden:
Literaturzitat 1. S.A. Waksman, «The Actinomycetes», Bd. 2, 1961
Literaturzitat 2. Bergey's Manual of Determinative Bacte-25 riology, 8. Ausgabe, 1974
Literaturzitat 3. E.B. Shirling und D. Gottlieb, «International Journal of Systematic Bacteriology», Bd. 18, S. 69-189,1968; ibid, Bd. 18, S. 279-392,1968; ibid. Bd. 19, S. 391-512,1969; und ibid, Bd. 22, S. 265-394,1972.
30
Es konnte indessen in den obigen Literaturstellen 1 bis 3 kein Stamm gefunden werden, welcher sämtliche Eigenschaften des Stammes C-19393 aufgewiesen hätte. Es wurden daher der neue Stamm mit 7 in der Literaturstelle 2 auf Seiten 35 751, Tabelle 17.41b beschriebenen Stämmen verglichen, welche sich auszeichnen durch weisse Luftmycelien, RF, keine Melanoidpigmenterzeugung und glatte Sporenoberfläche. Streptomyces galtieri, welcher Mannitol nicht verwertet, unterscheidet sich aber vom Stamm C-19393 inso-.40 fern, als der erstere auf einem Saccharosenitratmedium
(nachstehend als «Czapek» bezeichnet) nicht wächst. Aus-" serdem sind die Arten der durch den Stamm C-19393und S. galtieri verwerteten Quellen häufig verschieden. Unter den Stämmen, wie sie in der Tabelle 17.41b aufgezählt sind, ist 45 Streptomyces albovinaceus dem Stamm C-19393 bezüglich der Verwertung von anderen Kohlenstoffquellen als Mannitol ähnlich, jedoch vom Stamm C-19393 insofern verschieden, als der erstere Stamm rote bis rosefarbene, lösliche Pigmente erzeugt.
so Von den 41 in Tabelle 17.43b auf den Seiten 795-796 in der Literaturstelle 2 aufgezählten Stämmen, die sich durch ein gelbes Luftmycel, RF, keine Melanoidpigmenterzeugung und glatte Sporenoberfläche auszeichnen, verwertet lediglich Streptomyces canescens kein Mannitol. Dieser Stamm unter-55 scheidet sich aber vom Stamm C-19393 insofern, als der erstere auf Czapek nur schwach wächst und überdies Xylose und Rhamnose nicht verwertet. Dem Stamm C-19393 hinsichtlich der Verwertung von Kohlenstoffquellen ausser Mannitol ähnliche Stämme sind weiter unten beschrieben, 60 doch unterscheidet sich ein jeder dieser Stämme vom Stamm C-19393 durch die in Klammern wiedergegebenen Angaben. Sowohl die Farbe des Luftmycels als auch die Erzeugung löslicher Pigmente wurden mit dem Stamm C-19393 und den typischen Stämmen der entsprechenden Spezies verglichen: 65 Streptomyces chrysomallus (Farbe des Luftmycels und Erzeugung von löslichen Pigmenten), Streptomyces citreo-fluorescens (Farbe des Luftmycels und Erzeugung von löslichen Pigmenten), Streptomyces fimicarius (schwaches
646432
4
Wachstum auf Czapek), Streptomyces globisporus (grosser Sporendurchmesser, schwache Stärkeverwertung), Streptomyces globisporus subsp. vulgaris (schwaches Wachstum auf Czapek), Streptomyces griseinus (schwaches Wachstum auf Czapek und Koagulierung von Magermilch), Streptomyces parvus (Erzeugung löslicher Pigmente und grosser Sporendurchmesser) und Streptomyces setonii (schwaches Wachstum auf Czapek und Erzeugung von löslichen Pigmenten).
Überdies wurden von den in der Literaturstelle 3 beschriebenen Stämmen des «International Streptomyces Project» insgesamt 34 Stämme, die sich auszeichnen durch ein weisses bis gelbes Luftmycel, durch keinerlei Bildung von Melanoid-pigment, durch keine bestimmte Farbe auf der Rückseite, durch keine Bildung eines löslichen Pigmentes und durch die Anwesenheit von RF Sporenketten und einer glatten Sporen-oberfläche, direkt mit Stämmen gemäss Literaturstellen 1,2 und 3 und nötigenfalls sogar mit Originalstämmen davon verglichen, indem man den Stamm auf einem «T»-Medium, auf welchem der Stamm C-19393 relativ charakteristische Züchtungseigenschaften aufweist, züchtete, wobei man feststellte, dass Streptomyces saprophyticus relativ ähnliche Eigenschaften wie jene des Stammes C-19393 aufwies. Der Stamm C-19393 besitzt aber ein bestimmtes charakteristisches Merkmal, insofern als er nicht Mannitol zu assimilieren vermag, wogegen die meisten der Gattung Streptomyces angehörenden Species, welche weisse bis gelbe Luftmycelien aufweisen, dies zu tun vermögen. Der Stamm C-19393 unterscheidet sich somit eindeutig vom obgenannten Streptomyces saprophyticus. Daraus ergibt sich, dass der Stamm C-19393 eine neue Art darstellt, so dass er als Streptomyces sp. C-19393 bezeichnet wird. Dieser Stamm ist beim Fermentation Research Institute, Agency of Industriai Science and Technology, Tsukuba, Japan, unter der Nummer FERM-P Nr. 4.774; am 18. Januar 1979 beim Culture Collection of the Institute for Fermentation, Osaka, 17-85, Juso-honmachi 2-chome, Yodogewa-ku, Osaka 532, Japan, unter der Nummer IFO 13886; am 30. Januar 1979 beim American Type Culture Collection, Rockville, Maryland, USA, unter der Nummer ATCC 31486, hinterlegt worden.
Wenngleich der Stamm C-19393 gemäss obigen Ausführungen beschrieben worden ist, so ist doch bekannt, dass verschiedene Streptomyces-Stämme nicht fixiert sind und eine spontane oder künstliche Mutation möglich ist. Somit soll der gemäss vorliegender Erfindung verwendbare Stamm jeden beliebigen Stamm umfassen, welcher der Gattung Streptomyces angehört und die Antibiotika C-19393S2 und/ oder C-19393H2 zu erzeugen vermag.
Die Züchtung im Hinblick auf die Herstellung der erfin-dungsgemässen Antibiotika kann durch Wachsenlassen des oben erwähnten Stammes in einem assimilierbare Nährmittel enthaltenden Kulturmedium geschehen. Als Kohlenstoffquellen in diesem Medium können beispielsweise Glucose, Stärke, Glycerin, Dextrin, Saccharose, Hirsebrei, Melassen usw. verwendet werden. Beispiele von Stickstoffquellen sind Fleischextrakte, getrocknete Hefe, Hefeextrakt, Sojabohnenmehl, Maisquellflüssigkeit, Weizenkeime, Baumwollsamenmehl, Ammoniumsulfat, Ammoniumnitrat usw. Nötigenfalls kann man auch dem Medium in geeigneten Mengen anorganische Salze, wie z.B. Calciumcarbonat, Natriumchlorid, Kaliumchlorid, Phosphorsäuresalze usw., sowie das Wachstum des Mikroorganismus günstig beeinflussende und die Herstellung der Antibiotika C-19393S2 und C-19393H2 begünstigende organische und anorganische Substanzen zugeben.
Auch Salze von Schwermetallen, wie z.B. Ferrosulfat, Kupfersulfat usw., und Vitamine, wie z.B. Vitamin Bi, Biotin usw., kann man nötigenfalls dem Medium zugeben. Auch die
Schaumbildung verhindernde Mittel und oberflächenaktive Mittel, wie z.B. Silikonöl, Polyalkylenglykoläther usw., können dem Medium hinzugefügt werden. Andere organische und anorganische Substanzen, welche das Wachstum s des Mikroorganismus günstig beeinflussen und die Erzeugung von C-19393S2 und/oder C-19393H2 begünstigen, können ebenfalls in geeigneten Mengen dem Medium zugesetzt werden.
Die Züchtung kann in an sich bekannter Weise, wie dies im 10 allgemeinen für die Erzeugung von Antibiotika der Fall ist, erfolgen, wobei man entweder ein festes Züchtungsmedium oder ein flüssiges Züchtungsmedium einsetzt. Die Züchtung in flüssigen Medien kann durch stationäre Züchtung, durch Rühren der Kultur, durch Schüttelkultur oder aerobe Kultur is erfolgen. Vorzugsweise wird man die Kultur unter Belüftung schütteln. Die Züchtung erfolgt vorzugsweise bei einer Temperatur im Bereiche von ungefähr 15°C bis ungefähr 32°C bei einem pH-Wert von ungefähr 4 bis ungefähr 8 und dies während einer Zeitdauer von ungefähr 8 Stunden bis ungefähr 20168 Stunden. Vorzugsweise erfolgt die Züchtung während 24 bis 144 Stunden.
In der Fermentierbrühe werden die Antibiotika C-19393S2 und/oder C-19393H2 vorwiegend extrazellulär erzeugt. Daher ist es von Vorteil, die erhaltene Kultur in mikrobielle 25 Zellen und die überstehende Flüssigkeit mittels Zentrifu-gieren oder Filtrieren zu trennen und hierauf das gewünschte Antibiotikum aus der überstehenden Flüssigkeit zu isolieren. Das gewünschte Antibiotikum kann aber auch direkt aus der Fermentierbrühe gewonnen werden.
30 Die Prüfung der Wirkung des erhaltenen Produktes gegenüber Comamonas terrigena IFO 13299 als Testorganismus und unter Verwendung von C-19393S2 bzw. C-19393H2 als Referenzsubstanz lässt sich nach der Zylinderplattenmethode oder der Papierscheibenmethode unter Verwendung eines Bouillon-Agar-Mediums oder TSA (Trypti-case Soy Agar der Baltimore Biological Laboratory, USA) ausführen.
Das Isolieren von C-19393S2 und C-19393H2 kann gemäss 40 der für die Isolierung von Metaboliten, welche durch Mikroorganismen erzeugt worden sind, üblicherweise zur Anwendung gelangenden Methode durchgeführt werden. Da beispielsweise die zur Hauptsache extrazellulär erzeugten C-19393S2 und C-19393H2 wasserlösliche, saure Substanzen 4s sind, wird man sie im allgemeinen isolieren, indem man die mikrobiellen Zellen durch Filtrieren oder Zentrifugieren isoliert und dann trennt, worauf man die Wirksubstanz aus dem Filtrat reinigt und gewinnt. Es ergibt sich daraus, dass man dank des verschiedenartigen Löslichkeitsverhaltens und -aus-50 masses in verschiednenen Lösungsmitteln, dank des Ausfällensverhaltens oder Ausfällungsgeschwindigkeit und dank der Adsorptionsaffinitätsunterschiede zu diesem Zwecke zu verschiedenen Massnahmen greifen kann, wie z.B. Ionenaus-tauschchromatographie, Molekularsiebchromatographie, ss Konzentration unter vermindertem Druck und Gefriertrocknung usw. und dies einzeln oder in einer geeigneten Kombinationsform und zwar in beliebiger Reihenfolge oder sogar wiederholt. Beispiele von verwendbaren Adsorptionsmitteln sind Aktivkohle, Adsorptionsharze, Anionenaustauscher-60 harze, gepulverte Cellulose, Silikagel usw. oder Trägermittel mit Molekularsiebeigenschaften. Beispiele von Eluierungslö-sungsmitteln, welche verwendet werden können, sind wäss-rige Lösungen von wasserlöslichen, organischen Lösungsmitteln, wie z.B. Aceton, Methanol, Äthanol, Propanol, Butanol, «s Isopropanol, Isobutanol usw., oder wässrige Lösungen von Säuren oder Alkali, Puffermitteln, wässrige Lösungen von anorganischen oder organischen Salzen und dies ungeachtet des Umstandes, dass die geeignet erscheinenden Lösungs
5
646432
mittel je nach der Art des Trägermittels verschieden sein können.
Das Antibiotikum C-19393Sz wird nach beendeter Züchtung aus der Fermentierbrühe unter Verwendung eines Filterhilfsmittels zwecks Abtrennung der mikrobiellen Zellen abfiltriert. Das so erhaltene Filtrat wird durch eine Säule von Aktivkohle unter neutralen oder schwach sauren Bedingungen geleitet und das adsorbierte C-19393S: mit einem hydropilen Lösungsmittelsystem eluiert. Im wässrigen Eluat findet sich dann weitgehend das antibakteriell wirksame Material. Da die erfindungsgemässe antibiotische Substanz sauer reagiert, wird man mit Vorteil für die weitere Reinigung Anionenaustauschharze vom Cl- oder CHbCOO Typus, wie Amberlite IRA-400,402 und 410 (Rohm & Haas Co., USA), Dowex-1 (Dow Chemical Co., USA), Diaion SA-21A und C (Mitsubishi Chemical Industries, Japan) verwenden. Die antibiotische Substanz wird dann mit einer wässrigen Natriumchloridlösung oder einer Pufferlösung weiter eluiert. Das Entsalzen des Eluates kann dadurch bewirkt werden, dass man das Eluat schwach sauer stellt und es erneut mit Aktivkohle chromatographiert und hierauf mit wässrigem Alkohol eluiert usw. Das die Wirksubstanz enthaltende Eluat wird dann unter vermindertem Druck bei niedriger Temperatur eingeengt und das Konzentrat mit Methanol oder Äthanol versetzt. Der gebildete Niederschlag wird hierauf durch Filtrieren entfernt und die erhaltene wässrige Alkohollösung erneut unter vermindertem Druck eingengt. Der so erhaltene, eingeengte Rückstand wird mit Aceton oder einer ähnlichen Substanz versetzt und der Niederschlag durch Filtrieren abgetrennt. Das so erhaltene Pulver lässt sich vorteilhafterweise durch Säulenchromatographie unter Verwendung einer Kombination von DEAE oder QAE Sephadex in Cl-Form (Pharmacia Co., Schweden) und einem Adsorptionsharz XAD (Rohm & Haas Co., USA) oder Diaion High Porous Type Resin HP-20 (Mitsubishi Chemical Industries, Japan, nachstehend hin und wieder als «Diaion HP-20» bezeichnet) weiter reinigen. Dies will besagen, dass man eine wässrige Lösung des auf diese Weise erhaltenen Pulvers durch DEAE Sephadex A-25 (Cl-Form) leitet und darauf adsorbieren lässt, worauf man nach dem Waschen mit Wasser die Säule mit 0,4-molarem wässrigem Natriumchlorid eluiert. Das Eluat wird dann auf einen pH-Wert von 5 eingestellt und einer Säulenchromatographie auf Aktivkohle unterworfen. Die Eluierung aus der mit Aktivkohle beschickten Säule erfolgt unter Verwendung von wässrigem Isobutanol. Bessere Resultate kann man allerdings durch Eluieren unter neutralen oder schwach basischen Bedingungen, die man durch Zugabe von verdünntem wässrigem Ammoniak oder dergleichen erzielt, durchführen. Die erhaltene Substanz wird hierauf der Säulenchromatographie unterworfen, wobei man XAD-II oder Diaion HP-20 verwendet. Die adsorbierte Wirksubstanz wird fraktioniert mit Wasser eluiert. Die die Wirksubstanz enthaltenden Fraktionen werden gesammelt und eingeengt und das Konzentrat hierauf der Säulenchromatographie unterworfen, wobei man QAE-Sephadex A-25 (Cl-Form) verwendet. Hierauf wird mit einer 0,2-molaren wässrigen Natriumchloridlösung eluiert. Das Eluat wird mittels Aktivkohle durch Chromatographie in der gleichen Weise, wie oben beschrieben worden ist, entsalzt. Dann wird das Eluat eingeengt und das Konzentrat einer XAD-II Säulenchromatographie unterworfen und hierauf eluiert und mit Wasser fraktioniert. Die Fraktionen enthalten solche mit einem einzelnen Peak auf einem flüssigen Chromatogramm, wie dies aus den nachstehenden Angaben hervorgehen wird. Die aktiven Fraktionen werden gesammelt und unter vermindertem Druck bei niedriger Temperatur zur Trockne eingeengt. Dann versetzt man den Rückstand mit Aceton oder dergleichen, wobei man das C-19393S2 erhält.
Beim Antibiotikum C-19393H> wird man die nach vollendeter Züchtung erhaltene Fermentierbrühe unter Verwendung eines Filterhilfsmittels zur Entfernung der mikrobiellen Zellen filtrieren. Das erhaltene Filtrat wird dann durch eine Säule von Aktivkohle unter neutralen oder schwach sauren Bedingungen geleitet und das adsorbierte C-19393 H2 mit einem hydrophilen Lösungsmittelsystem eluiert. Da diese erfindungsgemässe antibiotische Substanz sauer ist, kann man mit Vorteil für die weitere Reinigung Anionenaustauschharze der Cl- oder CHîCOO-Form, wie Amberlite IRA-400, 402,410, Dowex-1, Diaion SA-21A und C einsetzen. Die aktive Substanz wird mittels einer wässrigen Natriumchloridlösung oder einer Pufferlösung weiter eluiert. Das Entsalzen des Eluates kann so durchgeführt werden, dass man das Eluat neutral oder schwach sauer einstellt und es erneut über Aktivkohle chromatographiert und anschliessend mit wässrigem Alkohol eluiert usw.
Das die Wirksubstanz enthaltende Eluat wird unter vermindertem Druck bei einer niedrigen Temperatur eingeengt und das Konzentrat hierauf mit Methanol oder Äthanol versetzt. Der gebildete Niederschlag wird durch Filtrieren entfernt und die entstandene wässrige Alkohollösung erneut unter vermindertem Druck eingeengt. Für die weitere Reinigung des entstandenen Konzentrats bedient man sich mit Vorteil der Säulenchromatographie unter Verwendung einer Kombination von DEAE oder QAE Sephadex in Cl-Form und dem Adsorptionsharz XAD oder Diaion HP-20. Somit wird das zuvor erhaltene Konzentrat durch Diaion HP-20 hindurchgeleitet und mittels Wasser fraktioniert eluiert. Die aktiven Fraktionen werden eingeengt und das Konzentrat durch DEAE Sephadex A-25 (Cl-Form) hindurchgeleitet. Nach dem Waschen mit einer 0,02-molaren wässrigen Natriumchloridlösung erfolgt die Eluierung mittels 0,05-molarem wässrigem Natriumchlorid. Das entstandene Eluat wird hierauf durch Diaion HP-20 geleitet, das man zuvor mit einer wässrigen Natriumchloridlösung behandelt hatte. Die Eluierung erfolgt mit einer Methanol enthaltenden, wässrigen Natriumchloridlösung. Das Entsalzen des Eluates erfolgt über Aktivkohle mittels Chromatographie in der oben beschriebenen Weise. Das entstandene Eluat wird eingeengt und das Konzentrat unter Verwendung von Diaion HP-20 (0,149 bis 0,297 mm) der Säulkenchromatographie unterworfen und anschliessend mit Wasser fraktioniert eluiert. Die wirksamen Fraktionen werden vereinigt und eingeengt und das Konzentrat unter Verwendung von QAE Sephadex A-25 (Cl-Form), welches zuvor mit einer 0,2-molaren wässrigen Natriumchloridlösung behandelt worden war, der Säulenchromatographie unterworfen. Die Fraktionierung erfolgt unter Verwendung von 0,04-molarer wässriger Natriumchloridlösung. Die aktiven Fraktionen werden in der gleichen Weise, wie dies oben beschrieben worden ist, über Aktivkohle chromatographiert und dabei entsalzt. Das Eluat wird eingeengt und das Konzentrat unter Verwendung von Avicel (kristalline Cellulose) (hergestellt durch Asahi Chemical Industry Co., Ltd., Japan) der Säulenchromatographie unterworfen, worauf man die Säule eluiert und mit 90%igem wässrigem Propanol fraktioniert. Das Eluat wird eingeengt und das Konzentrat unter Verwendung von XAD-II (0,074 bis 0,149 mm) der Säulenchromatographie unterworfen und hierauf eluiert und mit Wasser fraktioniert. Die aktiven Fraktionen werden eingeengt und das Konzentrat einer präpara-tiven Säulenchromatographie unterworfen und anschliessend eluiert und mit einer Methanol enthaltenden Phosphatpufferlösung fraktioniert. Die ein einzelnes Peak aufweisenden Fraktionen werden vereinigt und eingeengt und das Konzentrat unter Verwendung von Diaion HP-20 (0,074 bis 0,149 mm) der Säulenchromatographie unterworfen und hierauf mit Wasser eluiert, um das Puffermittel zu entfernen.
s
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
646432
6
Die eluierten aktiven Fraktionen werden unter vermindertem Druck bei einer niedrigen Temperatur eingeengt und das Konzentrat gefriergetrocknet, wobei man das C-19393H2 als weisses Pulver erhält.
Die erfindungsgemässen Verbindungen vermögen Alkalimetallsalze oder Ammoniumsalze zu bilden. Beispiele von Metallsalzen einer jeden Komponente sind die Natrium-, Kalium-, Lithiumsalze usw. Die physikalischen und chemischen Eigenschaften des Dinatriumsalzes von C-19393S2, wie es gemäss Beispiel 1 erhalten wird, sind die folgenden:
(1) Aussehen: weisses Pulver
(2) Spezifische Drehung: [a]o —152° ± 15° (c=0,5 in Wasser)
(3) Elementaranalyse (%): (über Phosphorpentoxyd während 6 Stunden bei 40°C getrocknete Probe)
C = 36,29 ±1,0 H = 3,72 ±0,5 N = 6,07 ±0,5 Na = 9,70 ±1,0 0 = 31,09*
S = 13,13 ±1,0
*(Der Sauerstoffgehalt stellt den Rest dar, berechnet durch Subtrahieren der Werte der anderen Elemente)
(4) Molekulargewicht (berechnet, als wenn zwei Natriumatome pro Molekül vorhanden sind) 528 bis 429
(5) Bruttoformel: geschätzte Bruttoformel: Ci4Hi6N2Na209S2
(6) Ultraviolettabsorptionsspektrum: Das in Wasser gemessene Spektrum ist aus Figur 1 ersichtlich, wobei die Maximalwerte die folgenden sind:
X5S 240 ± 2nm (Ej* = 296 ± 20) und 285 + 2nm (E',1 = 245 + 20)
(7) Infrarotabsorptionsspektrum: Das in Kaliumbromid-tablette gemessene Spektrum befindet sich in Figur 2, wobei die hauptsächlichen Peaks (Wellenzahlen) die folgenden sind:
3450,3220,3000,1770,1700,1630,1515,1395,1240-1260, 1100, 1050, 1010,980,950,915,900,860,815,795,760,715, 670,625,590,530 (cnr1)-
(8) Dünnschichtchromatographie (Cellulose f (Tokyo Kasei Co., Ltd., Japan)
Lösungsmittelsystem
Rf-Wert a) Propanol : Wasser (4:1 )
0,33±0,1
b) Butanol : Essigsäure : Wasser (2:2:1)
0,54±0,1
c) Propanol : Äthanol : Wasser (5:2:3)
0,62±0,1
(9) Hochleistungs-Flüssigkeitchromatographie (Waters Associates Inc., USA)
a) Microbondapak Cis/5% Methanol-0,02-molarer Citrat-Puffer (pH 6,3), 1,5 ml/Min/cm (ca. 169 kg/cm2) Rt = 9,0 (Min) ± 1 (Min)
b) Microbondapak NH2/70% Methanol-0,02-molarer Borat-Puffer (pH 7,5), 1,5 ml/Min/cm (ca. 162 kg/cm2) Rt = 7,0 (Min)+1 (Min)
(10) Löslichkeit: in Chloroform, Äthylacetat und Aceton unlöslich, in Äthanol, Butanol und Pyridin schwach löslich in Methanol, Dimethylsulfoxyd und Essigsäure löslich und in Wasser leicht löslich.
(11) Farbreaktionen:
Positiv: Ehrlich- und Kaliumpermanganatreaktionen Negativ: Ninhydrin-, Greig-Leaback-, Dragendorff-, Fer-richlorid- und Sakaguchi-Reaktionen
Die physikalischen und chemischen Eigenschaften des gemäss Beispiel 2 erhältlichen Natriumsalzes von C-19393H2 sind die folgenden:
(1) Aussehen: weisses Pulver
(2) Elementaranalyse (%) (an einer über Phosphorpentoxyd während 6 Stunden bei 40°C getrockneten Probe):
C = 45,34 ±1,0 H = 4,98 ±0,5 N = 7,48 ±0,5 Na = 6,15± 1,0 S = 8,51 ± 1,0
(3) Molekulargewicht (berechnet für die 1 Natriumatom pro Molekül enthaltende Verbindung) 426 bis 322
(4) Bruttoformel: geschätzte Bruttoformel: CMHnNîNaSOe
(5) Spezifische Drehung: [aß6 -134° (c=0,156 in Wasser)
(6) Ultraviolettabsorptionsspektrum: Das in Wasser gemessene Spektrum findet sich in Figur 3 und die maximale Werte sind die folgenden:
*££ (EU) = 242 ± 2nm (395 ± 20) und 289 + 2nm (314 ± 20)
(7) Infrarotabsorptionsspektrum: Das in Kaliumbromid-tablette gemessene Spektrum findet sich in Figur 4, wobei die hauptsächlichen Peaks (Wellenzahlen) die folgenden sind: 3400,2980,2940,1770, 1700,1630, 1530, 1390,1265, 1215,
1130,1090,1065,1040,1000,920,840, 820,790,770,700, 620, 540,450 (cm"1)
(8) Zirkulardichroismusspektrum (in Wasser): Positiver Cottoneffekt bei 234 nm und negativer Cottoneffekt bei 206, 258 und 292 nm
(9) Dünnschichtchromatographie [unter Verwendung von Cellulose f (Tokyo Kasei Co., Ltd., Japan)]
Lösungsmittelsysteme: Rf-Wert a) Propanol:Wasser (4:1) 0,45 ±0,1
b) Butanol:Essigwasser:Wasser(2:1:1) 0,65±0,1
c) Butanol:Pyridin:Essigsäure:Wasser 0,45±0,1 ( 15:3:2:12), obere Schicht
(10) Hochleistungs-Flüssigchromatographie (Waters Associates Inc., USA)
a) Microbondapak Cis/8% Methanol-0,02-molarer Phos-phat-Puffer (pH = 6,3), 2,0 ml/Min/cm (ca. 134 kg/cm2); Rt = 5,3 + 1,0 (Min)
b) Microbondapak NH2/5% Methanol-0,02-molarer Phosphat-Puffer (pH = 5,7), 1,3 ml/Min/cm (ca. 211 kg/ cm2); Rt = 4,8 ±1,0 (Min)
(11) Farbreaktionen:
Positiv: Ehrlich- und Kaliumpermanganat-Reaktionen Negativ: Ninhydrin-, Greig-Leaback-, Dragendorff-, Fer-richlorid- und Sakaguchi-Reaktionen
(12) Löslichkeit: In Chloroform und Äthylacetat unlöslich, in Aceton, Äthanol und Butanol spärlich löslich und in Methanol und Wasser löslich.
Aus den verschiedenen oben beschriebenen Eigenschaften geht hervor, dass die Antibiotika C-19393S2 und C-19393H2 Antibiotika vom ß-Lactamtypus sein dürften, wobei aufgrund der einzelnen Elementaranalysenwerte und der geschätzten Molekulargewichte die geschätzten Molekularformeln für diese beiden Antibiotika die folgenden sein dürften: Ci4Hi6N2Na20oS2 und CwHn^NaOsS. Ausgehend vom Umstände, dass beide Antibiotika Maximalwerte von s
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
241+3 nm und 287 ± 4 nm beim Ultraviolettabsorptionsspektrum aufweisen, wird angenommen, dass die erfin-dungsgemässen Antibiotika die gleichen Chromophoren wie bei MM-4550 unter den bekannten Antibiotika vom ß-Lac-tamtypus aufweisen.
Die Tabelle 3 zeigt Vergleichswerte von 'H-NMR-Spektren dieser drei Antibiotika, nämlich:
beim Antibiotikum C-19393S2 werden im Bereiche des CFh-Protons im Gegensatz zum MM-4550 zwei CHb-Signale (S 1,66 ppm, 3H, s, 1,73 ppm, 3H, s) beobachtet; beim Antibiotikum C-19393H2 werden ebenfalls zwei CHb-Signale (81,36 ppm, 3H, s; 1,47 ppm, 3H, s) beobachtet; das Hs-Proton (84,97 ppm, 1 H, m), das man beim MM-4550 fest7 646432
stellt, wird weder beim Antibiotikum C-19393S2 noch beim Antibiotikum C-l 9393 Hi festgestellt; die chemischen Verschiebungen der restlichen Protonsignale sind miteinander im wesentlichen gleich; die Kupplungskonstanten von HU bis s Hs und Hs bis Ha, erhalten durch Spinentkopplung mittels H5-Bestrahlung sind wertmässig die gleichen; beim Antibiotikum C-19393S2 wird die Anwesenheit von SO3 durch die starken Absorptionsbanden bei 1260 und 1050 cm-1 des IR-Spektrums bestätigt, während beim Antibiotikum 10 C-19393H2 die oben erwähnte von der SCb-Gruppe herrührende Absorption im IR-Spektrum nicht beobachtet wird.
Aufgrund dieser Überlegungen wurde den Antibiotika C-19393S2 und C-19393H2 die obige Formel I zugeschrieben.
Tabelle 3
'H-NMR-Spektren von C-19393S2und C-19393Ha
H2
S2
MM-4550"
8-CH3
l,36(3H,s)
l,66(3H,s)
l,45*(3H,d,J=6,5)
(100 MHz,
8-CH3
l,47(3H,s)
l,73(3H,s)
D2O, TMS)
N-Ac
2,16(3H,s)
2,16(3H,s)
2,05(3H,s)
(3mg/0,4ml)
H4a
3,08(dd, j4Ha.5H = 9
3,10(dd, j4Ha.5H = 9
2,99(dd, j4Ha,5H = 9
j4Ha,b=18)
J'':Ha.h.— 18)
j4Ha,b— 18,5)
H4b
3,93(dd, j4Hb,5H= 10,5)
3,90(dd, J4Hb.5H= 10,5)
3,46(dd, J4Hb.5H= 10,5)
Hô
3,84(d,J5H,6H=6)
4,00(d,j5H,6H = 6)
3,88(dd,j5H,6H=6)
Hs
4,60(m)
4,52(m)
4,37(m)
N-CH=
6,41(d,J=14)
6,42(d,J=14)
6,24**(d,J=14)
S-CH=
7,59(d)
7,60(d)
7,18**(d)
=CH-NH
10,65**(d,J=ll)
Hs
4,97(m,J6H.8H=9)
* DdO/CHsCN, ** DMSO-ds/CHsCN
11 A.G. Brown, D.F. Corbett, A.J. Englington und T.T. Howarth, J. Chem, Soc., Chem. Comm., 1977, 523-525.
Die biologischen Eigenschaften von C-l9393S2 sind nachstehend beschrieben. Das antibiotische Spektrum von C-19393S2 in Form des Natriumsalzes gegenüber verschiedenen Mikroorganismen findet sich in der folgenden Tabelle 4. Wie aus der Tabelle ersichtlich ist, ist das Antibiotikum C-l9393S2 gegen grampositive und gramnegative Bakterien wirksam.
Tabelle 4
Antimikrobielles Spektrum des Natriumsalzes von C-19393S2
Testorganismus
Minimale
Hemmkonzentration
(Hg/ml)
Escherichia coli NIHJ
12,5-25
Salmonella typhimurium IFO 12529
12,5
Klebsiella pneumoniae IFO 3318
12,5
Proteus vulgaris IFO 3045
100
Proteus mirabilis IFO 3845
50
Serratia marcescens IFO 12648
25
Alcaligenes faecalis IFO 13111
50
Pseudomonas aeruginosa IFO 3080
>100
Comamonas terrigena IFO 13299
6,25
Staphylococcus aureus 209P
12,5
Sarcina lutea IFO 3232
12,5
Bacillus subtilis IFO 3513
12,5
Bacillus cereus IFO 3460
>100
Das Antibiotikum C-19393S2 besitzt auch auf ß-Lactamase eine starke Hemmwirkung und erhöht daher in ausgesprochener Weise die Empfindlichkeit für Penicillin- oder Cepha-4o losporinderivate von verschiedenen Bakterien, welche gegen Penicillinderivate und/oder Cephalosporinderivate resistent sind. Die verstärkende Wirkung auf die antimikrobielle Aktivität von Ampicillin und Cefotiam mittels C-19393S2 findet sich in der folgenden Tabelle 5.
45
Tabelle 5
Verstärkungseffekt auf die antimikrobielle Aktivität von so Ampicillin und Cefotiam durch C-19393S2
Testorganismus*
C-19393S2 Minimale Hemmkonzentration (ug/ml)
Ampicillin
Cefotiam
55
Escherichia coli TN 659
Klebsiella pneumoniae 60 TN 1725
Proteus vulgaris TN 224
65
0
1 p-g/ml 5 ug/ml
0
1 jj-g/ml 5 ug/ml
0
1 ug/ml 5 p.g/ml
>800
3,13 ^ 0,003
800 50 0,78
400 1,56 1,56
0,2 0,1 0,006
200 0,2 0,02
200 0,2 0,2
(Bemerkung) Medium: Bouillon-Agar
* Klinisch isolierte Stämme, welche ß-Lactamase zu erzeugen vermögen Medium: Herzinfusions-Agar (Eiken Chemical Co., Japan)
646432
8
Wie aus dem obigen antimikrobiellen Spektrum augenfällig ist, besitzt das erfindungsgemässe C-19393S2 gegen grampositive und gramnegative Bakterien eine antimikrobielle Wirkung. Somit lässt sich C-19393S2 für die Behandlung von bakteriellen Infektionen bei Menschen und Säugetieren, z.B. bei Mäusen, Ratten, Hunden, und bei Vogelarten, wie z.B. Hausvögel, Geflügel und Enten, verwenden.
Um das C-19393S2 als Mittel für die Behandlung von z.B. E. coli-Infektionen einzusetzen, wird man das C-19393S2 in einer physiologischen Kochsalzlösung lösen, um auf diese Weise eine injizierbare Lösung zu erhalten, welche man parenteral, z.B. subkutan oder intramuskulär, in einer Posologie von 2 bis 200 mg/kg/Tag und vorzugsweise von 5 bis 50 mg/kg/Tag verabreichen kann. Für die orale Verabreichung kann man das Antibiotikum C-19393S2 mit Lactose vermischen und diese Mischung in Kapseln einfüllen. Auf diese Weise erhält man Kapseln, welche man in einer Posologie von 10 bis 500 mg/kg/Tag und vorzugsweise von 20 bis 200 mg/kg/Tag verabreichen kann.
Das erfindungsgemässe C-19393S2 kann auch als Desinfektionsmittel verwendet werden. So kann man beispielsweise ein flüssiges Präparat herstellen, indem man C-l9393S2 in destilliertem Wasser in einer Konzentration von 0,1 bis 1,0% (Gew.-Vol.) löst. Man kann auch eine Salbe herstellen, welche 2 bis 50 mg und vorzugsweise 5 bis 20 mg C-19393S2 pro g Paraffinöl oder Lanolin als Grundmasse enthält. Diese Salbe kann auf Händen, Beinen, Augen, Ohren usw. sowohl beim Menschen als auch bei den oben erwähnten Tieren als Bakterizid oder Desinfektionsmittel verwendet werden.
Wie aus dem in der Tabelle 4 ersichtlichen Resultat einwandfrei hervorgeht, besitzt das Antibiotikum C-19393S2 eine ß-Lactamase hemmende Wirkung und erhöht daher in ausgeprägter Weise die Empfindlichkeit von auf Penicillin oder Cephalosporin resistenten Bakterien in bezug auf Ampicillin oder Cefotiam dank des Umstandes, dass diese Verbindung ß-Lactamase zu erzeugen vermag. Demzufolge kann man C-19393S2 für die Behandlung von Infektionen bei Mensch und Tier, z.B. Mäusen, Ratten oder Hunden, und Vogelarten, wie z.B. Hausvögel, Geflügel und Enten, anwenden, insbesondere aber bei bakteriellen Infektionen, welche ß-Lactam resistenten Bakterien zuzuschreiben sind; dann verwendet man das Antibiotikum in Kombination mit Penicillin- oder Cephalosporinantibiotika.
Wird C-19393S2 in Kombination mit anderen Mitteln vom ß-Lactamtypus für die Behandlung von Infektionen, z.B. durch ß-Lactam resistenten E. coli, verwendet, wird man gleiche Mengen an C-19393S2 und Ampicillin in einer physiologischen Kochsalzlösung lösen, um auf diese Weise Injektionslösungen zu erhalten, die man ohne weiteres parenteral, z.B. subkutan oder intramuskulär, in einer Dosierungsmenge von 0,1 bis 20 mg/kg/Tag und vorzugsweise 0,5 bis 5 mg/kg/Tag, verabreichen kann. C-19393S2 kann auch oral in einer Dosierungsmenge von 1 bis 200 mg/kg/Tag und vorzugsweise 5 bis 100 mg/kg/Tag in Form von Kapseln verabreicht werden, wobei jede Kapsel mengenmässig die gleiche Menge C-19393S2 und Cephalexin enthält.
Wird C-19393S2 als Desinfektionsmittel verwendet, so kann es als flüssiges Präparat, beispielsweise als wässrige Lösung vorliegen, welche C-19393Sa in einer Konzentration von 0,1 bis 10% (Gew./Vol.) und Benzylpenicillin in einer Konzentration von 0,1 bis 1,0% (Gew./Vol.) enthält. Man kann aber auch eine Salbe herstellen, welche 5 bis 20 mg C-19393S2 und 5 bis 20 mg Benzylpenicillin per g Paraffinöl oder Lanolin als Grundlage enthält. Diese Lösungen bzw. Salben lassen sich zum Abtöten von Bakterien oder zum Desinfizieren von Händen, Beinen, Augen, Ohren usw. beim Menschen und den obigen Tieren anwenden.
Das Antibiotikum C-l9393S2 dürfte auch als Zwischenprodukt für die Synthese von neuen Typen von Pharmazeu-tika interessant sein. Das erfindungsgemässe Antibiotikum ist in wässriger Lösung in einem neutralen pH-Bereich beständig.
Die physiologischen Eigenschaften von C-l 9393H2 werden nachstehend beschrieben.
Das antimikrobielle Spektrum des Natriumsalzes von C-19393H2 gegenüber verschiedenen Mikroorganismen findet sich in der nachstehenden Tabelle 6. Wie aus den Resultaten der Tabelle 6 herevorgeht, besitzt das Antibiotikum C-19393H2 eine antibakterielle Wirkung gegen grampositive und gramnegative Bakterien.
Tabelle 6
Antimikrobielles Spektrum des Natriumsalzes des Antibiotikums C-19393H2
Testorganismus
Minimale
Hemmkonzentration
(Hg/ml)
Escherichia coli NIHJ
0,08
Salmonella typhimurium IFO 12529
0,31
Klebsiella pneumoniae IFO 3318
0,31
Proteus vulgaris IFO 3045
5
Proteus mirabilis IFO 3845
5
Serratia marcescens IFO 12648
0,31
Alcaligenes faecalis IFO 13111
5
Pseudomonas aeruginosa IFO 3080
10
Comamonas terrigena IFO 13299
0,16
Staphylococcus aureus 209P
0,63
Sarcina lutea IFO 3232
0,31
Bacillus subtilis IFO 3513
0,31
Bacillus cereus IFO 3460
10
(Bemerkung) Medium: Bouillon-Agar
Wie aus der obigen Tabelle 6 ersichtlich ist, besitzt das erfindungsgemässe Antibiotikum C-19393H2 eine antimikrobielle Wirkung gegen grampositive und gramnegative Bakterien und kann daher für die Behandlung von bakteriellen Infektionen bei Menschen und Säugetieren, beispielsweise bei Mäusen, Ratten und Hunden und dergl., sowie bei Vogelarten, wie z.B. Hausvögeln, Geflügel, Enten und dergl., eingesetzt werden.
Um das C-19393H2 zur Behandlung von beispielsweise E. coli-Infektionen zu verwenden, wird es in einer physiologischen Kochsalzlösung gelöst, um auf diese Weise eine Injektionslösung zu erhalten, welche man parenteral, z.B. subkutan oder intramuskulär, in einer Dosierungsmenge von 0,1 bis 50 mg/kg/Tag und vorzugsweise von 0,5 bis 20 mg/ kg/Tag verabreichen kann. Für die orale Verabreichung kann das Antibiotikum C-l9393H2 mit Lactose vermischt und diese Mischung in Kapseln eingefüllt werden, welche man in Mengen von 1 bis 100 mg/kg/Tag und vorzugsweise von 5 bis 50 mg/kg/Tag verabreichen kann.
Ferner kann man das erfindungsgemässe C-19393H2 auch als Desinfektionsmittel verwenden. So kann man beispielsweise ein flüssiges Mittel herstellen, indem man C-19393H2 in destilliertem Wasser bei einer Konzentration von 0,01 bis 0,1% (Gew./Vol.) löst. Man kann aber auch eine Salbe herstellen, welche 0,2 bis 20 mg, vorzugsweise 1 bis 10 mg C-l9393H2 pro g Paraffinöl oder Lanolin als Grundlage enthält. Eine solche Salbe bzw. eine solche Lösung lässt sich als bakterizides oder desinfizierendes Mittel für Hände, Beine, Augen, Ohren usw. beim Menschen oder den oben erwähnten Tieren anwenden.
Das Antibiotikum C-19393H> dürfte auch als Zwischens
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
9
646432
produkt für die Synthese neuer Arten von pharmazeutischen Mitteln wertvoll sein. Das Antibiotikum ist in wässriger Lösung in einem neutralen pH-Bereich beständig.
Wie oben beschrieben worden ist, kann man MM-4550 als Beispiel eines relativ ähnlichen Antibiotikums wie die erfin-dungsgemässen Antibiotika C-19393S2 und C-19393H2 ansehen. Das Antibiotikum MM-4550 ist aber strukturell von den Antibiotika C-19393S2 und C-l9393H2 verschieden. MC 696-SY2-A (Maeda et al., The Journal of Antibiotics, Bd. 30, S. 770-772,1977), welches die gleiche Substanz wie MM-4550 ist, ist sehr unbeständig [Umezawa et al., The Journal of Antibiotics, Bd. 26, S. 51-54,1973], wogegen die Antibiotika C-19393S2 und C-19393 H2 beständige Verbindungen darstellen.
Die vorliegende Erfindung sei durch die folgenden Beispiele ausführlicher erläutert. Wo nichts andres ausgesagt wird, entsprechen die Prozente Gewichtsteilen pro 100 Volumenteilen.
Beispiel 1
Eine Kultur von Streptomyces sp. Stamm C-19393 (IFO 13886, ATCC 31486) wurde auf einem 200 ml T-Medium, welches sich in einem 1 -Liter-Erlenmeyerkolben befand, wachsen gelassen, um Sporen zu erhalten. Die so erhaltenen Sporen wurden hierauf in sterilem Wasser bei einer Konzentration von 1,2 x 108 lebenden Zellen/ml suspendiert. Die Sporensuspension wurde mit sterilem Wasser bis auf ein zehnfaches Volumen des ursprünglichen Volumens verdünnt, und dann wurde 1 ml der verdünnten Suspension verwendet, um 40 ml eines Impfmediums in einem 200-ml-Erlen-meyerkolben zu impfen. Das geimpfte Medium wurde hierauf auf einer rotierenden Schüttel vorrichtung während 2 Tagen bei 28°C gezüchtet. Die entstandene Kultur wurde dazu verwendet, um 500 ml eines Impfkulturmediums zu impfen, das sich in einem 2-Liter-Sakaguchi-Schüttelkolben befand. Das geimpfte Medium wurde auf einer sich hin und her bewegenden Schüttelvorrichtung während 2 Tagen bei 28°C gezüchtet. Dann wurde die so erhaltene Impfkultur in einen Fermentierbehälter aus rostfreiem Stahl von 50 Liter Inhalt übergeführt, welcher 30 Liter eines Impfmediums enthielt, das 15 ml Actocol (Takeda Chemical Industries, Ltd., Japan) enthielt, worauf die Züchtung während 3 Tagen bei 28°C unter Belüftung bei 30 Liter/Minute und rühren mit 280 Umdrehungen pro Minute geschah. Die Kulturbrühe wurde dann in einen 2-m3-Fermentierbehälter eingebracht, welcher 1,2 m3 eines Hauptkulturmediums enthielt. Die Züchtung erfolgte dann während 5 Tagen bei 30°C unter Belüftung bei 840 Liter/Minute und rühren bei 180 Umdrehungen pro Minute. Das oben verwendete Impfmedium setzte sich aus 20 g Glucose, 30 g löslicher Stärke, 10 g rohem Sojabohnenmehl, 10 g Maiskornflüssigkeit, 5 g Polypepton (Daigo Nutritive Chemicals, Ltd., Japan), 3 g Natriumchlorid und 5 g ausgefälltem Calciumcarbonat per Liter Medium zusammen, wobei der pH-Wert des Mediums vor dem Sterilisieren auf 7,0 eingestellt worden war. Das oben verwendete Hauptzüchtungsmedium setzte sich aus 30 g Glucose, 30 g löslicher Stärke, 15 g entfettetem Sojabohnenmehl, 15 g Baumwollsa-menmehl, 0,25 g Kaliumdihydrogenphosphat, 0,6 g Kalium-monohydrogenphosphat, 0,002 g Kobaltchlorid und 0,5 g Actocol per Liter des Mediums zusammen, wobei das Medium vor dem Sterilisieren auf einen pH-Wert von 7,0 eingestellt worden war. Sämtliche oben verwendeten Medien wurden während 20 Minuten bei 120°C unter Dampf sterilisiert.
Die so erhaltene Fermentierbrühe wurde über Hyflo-Supercel (Johnes Manville Co., USA) filtriert, um 1230 Liter Filtrat zu erhalten, das hierauf auf einen pH-Wert von 6,3 eingestellt und dann durch eine mit 100 Liter Aktivkohle beschickte Säule geleitet wurde. Hierauf wurden die Antibiotika C-19393S2 und C-19393H2 aus der Säule mittels 300 Liter Wasser bzw. 700 Liter 7%igem wässrigem Isobutanol eluiert. Das das Antibiotikum C-19393S2 enthaltende Eluat wurde durch eine Säule von Dowex 1 x 2 (Cb-Form, 2 Liter) geleitet und die Säule hierauf mit 6 Liter Wasser gewaschen und dann mit 32 Liter 5%igem wässrigen Natriumchlorid eluiert. Das Eluat wurde auf einen pH-Wert von 5 eingestellt und durch eine mit 4 Litern Aktivkohle beschickte Säule geleitet. Nach dem Waschen mit 12 Litern Wasser wurde das gewünschte Antibiotikum mit 7 Litern 8%igem Isobutanol und 12 Litern Isobutanol : wässrigem 0,05 n-Ammoniak (8:92) eluiert und das Eluat unter vermindertem Druck auf ein Volumen von 150 ml eingeengt. Das Konzentrat wurde hierauf mit 1350 ml Methanol versetzt und der so gebildete Niederschlag durch Filtrieren entfernt. Das Filtrat wurde auf ein Volumen von 200 ml eingeengt und durch eine mit 300 ml DEAE-Sephadex A-25 (CNForm) beschickte Säule geleitet. Die Säule wurde nacheinander mit 0,1 molaren und 0,2 molaren wässrigen Natriumchloridlösungen (jeweils 900 ml) gewaschen, worauf die gewünschte antibiotische Substanz mit 1500 ml wässrigem 0,4 molarem Natriumchlorid eluiert wurde. Das Eluat wurde auf einen pH-Wert von 5 eingestellt und durch eine mit 500 ml Aktivkohle beschickte Säule geleitet. Nach dem Waschen mit 1,5 Litern Wasser wurde die Säule mit 2,5 Litern Isobutanol: wässrigem 0,05 n-Ammoniak (8:92) eluiert und das Eluat zur Trockne eingeengt.
Dann wurde der Rückstand mit Aceton versetzt, wobei man 2,4 g eines blassgelben Pulvers erhielt. Nach dem Lösen des so erhaltenen Pulvers in wenig Wasser wurde die Lösung durch eine mit 1,21 Amberlite XAD-II(0,074-0,149 mm) beschickte Säule geleitet und mit Wasser fraktioniert eluiert. Die Fraktionen, denen eine antibiotische Wirkung zukam, wurden vereinigt und eingeengt, worauf das Extrakt durch eine mit 200 ml QAE-Sephadex A-25 (Cl"-Form) beschickte Säule geleitet wurde. Nach dem Waschen mit 600 ml wässrigem 0,1 molarem Natriumchlorid wurde die Säule mit 1,2 Liter wässrigem 0,2 molarem Natriumchlorid eluiert. Das Eluat wurde dann auf einen pH-Wert von 5 eingestellt und durch eine mit 600 ml Aktivkohle beschickte Säule geleitet. Nach dem Waschen der Säule mit 1,8 Liter Wasser, wurde sie mit 3 Liter Isobutanol : wässrigem 0,05 n-Ammoniak (8:92) eluiert. Das Eluat wurde zur Trockne eingeengt und der Rückstand hierauf mit Aceton versetzt, worauf man 1,07 g eines Pulvers erhielt. 620 mg des so erhaltenen Pulvers wurden in wenig Wasser gelöst und die Lösung durch eine mit 360 ml Amberlite XAD-II (0,074-0,149 mm) beschickte Säule geleitet. Die Säule wurde hierauf eluiert und mit Wasser fraktioniert und jede der Fraktionen, denen eine antibiotische Wirkung zugeschrieben wurde, durch Flüssigchromatographie in der oben beschriebenen Weise analysiert. Die ein einzelnes Peak aufweisenden Fraktionen wurden vereinigt und zur Trockne eingeengt, worauf das Konzentrat mit Aceton versetzt wurde. Auf diese Weise erhielt man 136 mg Antibiotikum C-19393S2 in Form des Dinatriumsalzes als weisses Pulver.
Beispiel 2
Das gemäss Beispiel 1 erhaltene Eluat von C-l9393H2 wurde durch eine Säule von Dowex 1 x 2 (Ch-Form) geleitet, die Säule hierauf mit 6 Litern Wasser gewaschen und hierauf mit 180 Litern einer 5%igen wässrigen Natriumchloridlösung eluiert. Das Eluat wurde durch eine mit 25 Litern Aktivkohle beschickte Säule geleitet. Nach dem Waschen mit 75 Litern Wasser wurde das gewünschte Antibiotikum mit 175 Litern Isobutanol : Wasser (7:93) eluiert und das Eluat unter vermindertem Druck auf ein Volumen von 2 bis 3 Litern eingeengt. 15 Liter Methanol wurden dem Konzentrat dann zugegeben s
10
15
20
25
3«
35
40
45
50
55
60
65
646432
10
und der auf diese Weise gebildete Niederschlag durch Filtrieren entfernt. Das Filtrat wurde auf ein Volumen von 2 Litern eingeengt und durch eine mit 5 Litern Diaion HP-20 (0,149 mm Maschenweite) beschickte Säule geleitet. Hierauf wurde die Säule mit 5 Litern Wasser und 10 Litern Methanol: Wasser (Mischungsverhältnis 1:9) eluiert und fraktioniert. Die aktiven Fraktionen wurden vereinigt und eingeengt und das Konzentrat durch eine mit 3 Litern DEAE-Sephadex A-25 (CNForm) beschickte Säule geleitet. Dann wurde die Säule mit 9 Litern einer wässrigen 0,02 molaren Natriumchloridlösung gewaschen und das gewünschte Antibiotikum mit 12 Litern einer 0,05 molaren wässrigen Natriumchloridlösung eluiert und fraktioniert. Die aktiven Fraktionen wurden durch eine mit 2 Litern Diaion HP-20 (0,149 mm Maschenweite) beschickte Säule geleitet, welche zuvor mit 4 Litern wässrigem Natriumchlorid behandelt worden war. Nach dem Waschen mit 10 Litern 5%iger wässriger Natriumchloridlösung wurde der Wirkstoff mit 10 Litern Me-thanol:5%igem wässrigem Natriumchlorid (5:95) und 10 Litern Methanol : 5%igem wässrigem Natriumchlorid (1:9) eluiert und fraktioniert. Die aktiven Fraktionen wurden durch eine mit 500 ml Aktivkohle beschickte Säule geleitet und nach dem Waschen mit 1,5 Litern Wasser mit 2,5 Litern 7%igem wässrigem Isobutanol eluiert. Das Eluat wurde eingeengt und das Konzentrat durch eine mit 1 Liter Diaion HP-20 (0,149-0,297 mm Maschenweite) beschickte Säule geleitet und mit Wasser eluiert und fraktioniert. Die Fraktionen mit antibiotischer Wirkung wurden vereinigt und eingeengt und das Konzentrat durch eine mit 200 ml Q AE-Sephadex A-25 (Cl-Form) beschickte Säule geleitet, welche zuvor mit 400 ml einer 0,02 molaren wässrigen Natriumchloridlösung behandelt worden war. Dann wurde die Säule nacheinander mit 0,02 molaren, 0,03 molaren und 0,04 molaren wässrigen Natriumchloridlösungen, und zwar jeweils 1 Liter, eluiert. Die aktiven Fraktionen wurden über eine mit 200 ml Aktivkohle beschickte Säule geleitet und nach dem Waschen mit 0,6 Litern Wasser mit 1 Liter 7%igem wässrigem Isobutanol eluiert. Das Eluat wurde eingeengt und das Konzentrat anschliessend mit Propanol versetzt, um eine 90%ige wässrige Propanollösung zu erhalten, welche anschliessend in einer mit Avicel beschickten Säule, welche zuvor mit 90%igem wässrigem Propanol behandelt worden war, chromatographiert wurde. Die Säule wurde mit 90%igem wässrigem Propanol eluiert. Die aktiven Fraktionen wurden eingeengt und das Konzentrat über 350 ml Amberlite XAD-II (0,074 bis 0,149 mm) chromatographiert und die Säule mit Wasser eluiert. Die aktiven Fraktionen wurden eingeengt und das Konzentrat einer präparativen Hochlei-stungs-Flüssigchromatographie unter Verwendung von RP-18 (E. Merck & Co., BRD) als Trägermittel unterworfen und mit 10% Methanol in 0,02 molarem Phosphatpuffer (pH 6,3) eluiert. Die aktiven Fraktionen wurden durch eine mit 40 ml Diaion HP-20 (0,074-0,149 mm) beschickte Säule geleitet und mit Wasser fraktioniert eluiert. Jede der eine antimikrobielle Wirkung aufweisenden Fraktionen wurde in der oben beschriebenen Weise durch Flüssigchromatographie analysiert. Die ein einzelnes Peak aufweisenden Fraktionen wurden vereinigt und gefriergetrocknet, wobei man 12 mg C-19393H2 als weisses Pulver erhielt.
Beispiel 3
1150 Liter eines Kulturbrühenfiltrates, hergestellt in ähnlicher Weise wie in Beispiel 1, wurden auf einen pH-Wert von 5 eingestellt und dann durch eine mit 100 Liter Aktivkohle beschickte Säule geleitet. Nach dem Waschen mit 300 Litern Wasser wurde die Säule mit 350 Litern Isobutanol : 0,02 n-Natriumhydroxyd (8:92) eluiert. Das Eluat wurde durch eine mit 10 Litern Diaion SA-21A (CKForm) beschickte Säule geleitet und nach dem Waschen mit 30 Litern Wasser wurde die Säule mit 100 Litern 5%iger wässriger Natrium-chloridlösung eluiert. Das Eluat wurde hierauf durch eine mit 20 Litern Diaion HP-20 (0,297 mm) beschickte Säule geleitet, welche zuvor mit 40 Litern einer 5%igen wässrigen Natriumchloridlösung behandelt worden war. Dann wurde die Säule mit 20 Litern 5%igem wässrigem Natriumchlorid gewaschen. Hierauf wurden die Antibiotika C-19393S2 und C-19393H2 mit 40 Litern Wasser bzw. 60 Litern Meth-anol:5%igem wässrigem Natriumchlorid (5:95) aus den Säulen eluiert. Das das Antibiotika C-19393S2 enthaltende Eluat wurde auf den pH-Wert von 5 eingestellt und durch eine mit 2 Liter Aktivkohle beschickte Säule geleitet. Nach dem Waschen mit 6 Litern Wasser wurde die Säule mit 10 Litern 8%igem Isobutanol: wässrigem 0,05 n-Ammoniak eluiert und das Eluat eingeengt. Das Konzentrat wurde durch eine mit 200 ml QAE-Sephadex A-25 (CKForm) beschickte Säule geleitet und die Säule nach dem Waschen mit 1 Liter 0,2 molarem wässrigem Natriumchlorid mit 1 Liter 0,4 molarem wässrigem Natriumchlorid eluiert. Nach dem Entsalzen des Eluates durch Chromatographie über Aktivkohle wurde es über Amberlite XAD-II der Säulenchromatographie unterworfen und in ähnlicher Weise wie in Beispiel 1 aufgearbeitet, wobei man 100 mg Antibiotikum C-19393S2 in Form des Dinatriumsalzes als weisses Pulver erhielt.
Beispiel 4
Das gemäss Beispiel 3 erhaltene Eluat von C-l9393H2 wurde auf einen pH-Wert von 5 eingestellt und durch eine mit 2 Litern Aktivkohle beschickte Säule geleitet. Nach dem Waschen mit 6 Litern Wasser wurde die Säule mit einer Mischung von 10 Litern Isobutanol und wässrigem 0,05 n-Ammoniak (Mischungsverhältnis 8:92) eluiert und das Eluat eingeengt. Das Konzentrat wurde durch eine mit 200 ml QAE-Sephadex A-25 (CKForm) beschickte Säule geleitet und nach dem Waschen mit 1 Liter 0,02 molarem wässrigem Natriumchlorid wurde die Säule mit 1 Liter 0,04 molarem wässrigem Natriumchlorid eluiert. Nach dem Entsalzen des Eluates durch Chromatographie über Aktivkohle wurde es über Diaion HP-20 (0,074-0,149 mm) der Säulenchromatographie unterworfen und die Säule mit Wasser eluiert und fraktioniert. Die ein einzelnes Peak bei der Flüssigchromatographie zeigenden Fraktionen wurden vereinigt und eingeengt und das Konzentrat gefriergetrocknet. Auf diese Weise erhielt man 48 mg C-19393H2 in Form des Natriumsalzes als weisses Pulver.
s
10
IS
20
25
30
35
40
45
50
55
B
4 Blatt Zeichnungen
Claims (3)
- 646432PATENTANSPRÜCHE 1. Die Antibiotika C-19393S2 und C-19393H2 der folgenden allgemeinen Formel:(1) auf die Antibiotika C-19393S2und C-19393H2 der folgenden allgemeinen Formel:/H,C = C\H NH-COCHOOH(I),HH NH-COCH.OOHworin R den Rest -SO3H oder das Wasserstoffatom bedeutet, sowie die Salze dieser Verbindungen. 15
- 2. Verfahren zur Herstellung der Antibiotika C-19393S2 und/oder C-19393H2, dadurch gekennzeichnet, dass man einen zur Gattung Streptomyces gehörenden Mikroorganismus, welcher die Antibiotika C-19393S2 und/oder C-19393H2 zu erzeugen vermag, in einem Kulturmedium, 20 welches assimilierbare Kohlenstoffquellen und assimilierbare Stickstoffquellen enthält, solange züchtet, bis im Züchtungsmedium die besagten Antibiotika C-19393S2 und/oder C-19393H2 wesentlich angereichert sind, worauf man diese Antibiotika isoliert. 25
- 3. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet,dass der Mikroorganismus Streptomyces sp. C-19393, IFO 13886 ist.30
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1156079A JPS55104296A (en) | 1979-02-02 | 1979-02-02 | Antibiotic substance c-19393s2 and its preparation |
| JP8114179A JPS565496A (en) | 1979-06-26 | 1979-06-26 | Antibiotic c-19393h2 and its preparation |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CH646432A5 true CH646432A5 (de) | 1984-11-30 |
Family
ID=26347007
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CH67680A CH646432A5 (de) | 1979-02-02 | 1980-01-28 | Beta-lactam-antibiotika. |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4518529A (de) |
| AU (1) | AU534530B2 (de) |
| CH (1) | CH646432A5 (de) |
| DE (1) | DE3003624A1 (de) |
| DK (1) | DK12580A (de) |
| ES (1) | ES488836A0 (de) |
| FR (1) | FR2447922A1 (de) |
| GB (1) | GB2042532B (de) |
| HU (1) | HU181721B (de) |
| IT (1) | IT1130246B (de) |
| NL (1) | NL8000628A (de) |
| PH (1) | PH14316A (de) |
| PT (1) | PT70710A (de) |
| SE (1) | SE8000842L (de) |
| SU (1) | SU1075984A3 (de) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4530791A (en) * | 1979-04-16 | 1985-07-23 | Kowa Co., Ltd. | β-Lactam antibiotics |
| JPS5740485A (en) * | 1980-08-25 | 1982-03-06 | Shionogi & Co Ltd | Novel antibiotic pa-39504-x3 and its preparation |
| JPS5746985A (en) * | 1980-09-05 | 1982-03-17 | Kowa Co | Preparation of antibiotic |
| EP0050961B1 (de) * | 1980-10-24 | 1985-05-22 | Kowa Company, Ltd. | Antibiotika, Verfahren zu ihrer Herstellung, sie enthaltende Arzneipräparate und ein zu Streptomyces-Arten gehörender Stamm, der zu ihrer Herstellung verwendbar ist |
| JPS57109786A (en) * | 1980-12-26 | 1982-07-08 | Takeda Chem Ind Ltd | Antibiotic c-19393e5 and its preparation |
| US4497742A (en) * | 1981-03-04 | 1985-02-05 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Isomerization of β-lactam compounds |
| US5391604A (en) * | 1993-07-30 | 1995-02-21 | Diemat, Inc. | Adhesive paste containing polymeric resin |
| CA2250400A1 (en) * | 1996-04-30 | 1997-11-06 | Metrika, Inc. | Method and device for measuring reflected optical radiation |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4172129A (en) * | 1974-03-28 | 1979-10-23 | Beecham Group Limited | Antibiotics |
| GB1577725A (en) * | 1976-06-30 | 1980-10-29 | Beecham Group Ltd | Azetidinone derivatives |
| EP0002564B1 (de) * | 1977-11-12 | 1984-06-20 | Beecham Group Plc | 7-Oxo-1-azabicyclo-(3.2.0)-hepten-(2)-carbonsäure-(2)-Derivate, ihre Herstellung, sie enthaltende pharmazeutische Zusammensetzungen und Zwischenprodukte |
| US4211707A (en) * | 1978-08-10 | 1980-07-08 | Merck & Co., Inc. | Process for hydrolytically cleaving O-sulfo thienamycins |
| US4232036A (en) * | 1978-10-24 | 1980-11-04 | Merck & Co., Inc. | 6-, 1- and 2-Substituted-1-carbadethiapen-2-em-3-carboxylic acids |
| US4530791A (en) * | 1979-04-16 | 1985-07-23 | Kowa Co., Ltd. | β-Lactam antibiotics |
-
1980
- 1980-01-10 AU AU54518/80A patent/AU534530B2/en not_active Ceased
- 1980-01-11 DK DK12580A patent/DK12580A/da not_active Application Discontinuation
- 1980-01-17 US US06/113,132 patent/US4518529A/en not_active Expired - Lifetime
- 1980-01-18 PT PT70710A patent/PT70710A/pt unknown
- 1980-01-28 HU HU80180A patent/HU181721B/hu unknown
- 1980-01-28 CH CH67680A patent/CH646432A5/de not_active IP Right Cessation
- 1980-01-31 NL NL8000628A patent/NL8000628A/nl not_active Application Discontinuation
- 1980-01-31 FR FR8002162A patent/FR2447922A1/fr active Granted
- 1980-01-31 ES ES488836A patent/ES488836A0/es active Granted
- 1980-02-01 IT IT19645/80A patent/IT1130246B/it active
- 1980-02-01 GB GB8003402A patent/GB2042532B/en not_active Expired
- 1980-02-01 SE SE8000842A patent/SE8000842L/xx not_active Application Discontinuation
- 1980-02-01 DE DE19803003624 patent/DE3003624A1/de not_active Withdrawn
- 1980-02-01 SU SU802878699A patent/SU1075984A3/ru active
- 1980-02-01 PH PH23567A patent/PH14316A/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK12580A (da) | 1980-08-03 |
| GB2042532A (en) | 1980-09-24 |
| AU534530B2 (en) | 1984-02-02 |
| US4518529A (en) | 1985-05-21 |
| IT8019645A0 (it) | 1980-02-01 |
| IT1130246B (it) | 1986-06-11 |
| PT70710A (en) | 1980-02-01 |
| FR2447922A1 (fr) | 1980-08-29 |
| SU1075984A3 (ru) | 1984-02-23 |
| ES8102590A1 (es) | 1981-02-16 |
| FR2447922B1 (de) | 1982-05-28 |
| AU5451880A (en) | 1980-08-07 |
| HU181721B (en) | 1983-11-28 |
| DE3003624A1 (de) | 1980-11-20 |
| PH14316A (en) | 1981-05-20 |
| GB2042532B (en) | 1983-07-20 |
| ES488836A0 (es) | 1981-02-16 |
| NL8000628A (nl) | 1980-08-05 |
| SE8000842L (sv) | 1980-12-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CH622825A5 (de) | ||
| DE3887820T2 (de) | Antibiotika, Benanomicine A und B und Dexylosylbenanomicin B, ihre Herstellung und Verwendung. | |
| DE2754326A1 (de) | Antibiotikum am-2282, verfahren zu seiner herstellung und arzneimittel | |
| DE2718782C2 (de) | ||
| DE2939333C2 (de) | ||
| DE2344020C2 (de) | Verfahren zur Herstellung des Antibiotikums Cephemimycin | |
| CH646432A5 (de) | Beta-lactam-antibiotika. | |
| DE68912355T2 (de) | Antibiotische Antitumor-Verbindung und Methode zu deren Herstellung. | |
| DE3012014C2 (de) | Istamycine, Verfahren zu deren Herstellung sowie Verwendung derselben als antibakterielle Mittel | |
| DE3048421C2 (de) | Antibiotische Substanz, Verfahren zu deren Herstellung und antimykotisches Mittel, welches diese enthält | |
| DE2839668C2 (de) | ||
| DE2652677C2 (de) | Antibiotica 890A&darr;1&darr; und 890A&darr;3&darr;, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Antibiotika enthaltende antibakterielle Mittel | |
| DE2444110A1 (de) | Neues antibiotikum | |
| DE3782199T2 (de) | Biologisch aktive peptide tan-866. | |
| DE1770441C2 (de) | Neue Antibiotika und Verfahren zu ihrer Herstellung | |
| DE69129924T2 (de) | Antibiotikum und Verfahren zu seiner Herstellung | |
| DE2034245C2 (de) | Antibiotikum Juvenimicin A&darr;3&darr; | |
| DE2236599C3 (de) | Fungizides Antibiotikum, sowie Herstellung und Verwendung desselben | |
| AT364455B (de) | Verfahren zur herstellung von neuen phosphonsaeuren | |
| DE3132786C2 (de) | Antibiotikum SF-2103A, Verfahren zu dessen Herstellung und antibiotisches Mittel, welches das Antibiotikum enthält | |
| DE2408121A1 (de) | Platomycin a und b, verfahren zu ihrer herstellung, arzneimittel und ihre verwendung als desinfektionsmittel | |
| DE2039990C2 (de) | Neue Antibiotika B-5050 A bis F (Maridomycin I bis VI), Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre pharmazeutische Zubereitung | |
| DE2039184B2 (de) | 7-(5-Amino-5-carboxyvaleramido)-7methoxycephalosporansäure (Antibiotikum A 16884) und Verfahren zu ihrer Herstellung | |
| JPS5913190B2 (ja) | 抗生物質ｃ−１１９２４ｆ−１ | |
| DE2326943C3 (de) | Xylostatsin Verfahren zu dessen Herstellung und Xylostatsin enthaltende Arzneimittel |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PL | Patent ceased | ||
| PL | Patent ceased |