BRPI0207961B1

BRPI0207961B1 - uso de análogos de epotilona e capecitabina para fabricar medicamento para tratar tumores cancerosos sólidos e kit compreendendo os referidos compostos.

Info

Publication number: BRPI0207961B1
Application number: BRPI0207961-5A
Authority: BR
Inventors: Francis Y. F. Lee
Original assignee: R-Pharm Us Operating, Llc
Priority date: 2001-03-14
Filing date: 2002-03-05
Publication date: 2019-11-19
Also published as: CA2440555A1; SK11082003A3; BG108137A; IL157443A; US7312237B2; IS2882B; ATE554756T1; AU2002248542B2; EP1383490A4; BG66289B1; US20050159461A1; BR0207961A; EE200300440A; HUP0400203A3; US20100015149A1; RU2003130377A; CZ20032376A3; JP2004529904A; EP1383490A1; RU2321400C2

Abstract

"combinação de análogos da epotilona e agentes quimioterápicos para o tratamento de doenças proliferativas". composições e métodos são descritos que são úteis no tratamento e prevenção de doenças proliferativas.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para USO DE ANÁLOGOS DE EPOTILONA E CAPECITABINA PARA FABRICAR MEDICAMENTO PARA TRATAR TUMORES CANCEROSOS SÓLIDOS E KIT COMPREENDENDO OS REFERIDOS COMPOSTOS”.

REFERÊNCIA CRUZADA COM PEDIDOS RELACIONADOS

Este pedido reivindica prioridade do pedido provisório números de série 60/275.801 depositado em 14 de março de 2001 e 60/316.395 depositado em 31 de agosto de 2001, cada um incorporado na presente invenção como referência em sua totalidade.

CAMPO DA INVENÇÃO

Esta invenção está relacionada aos campos da oncologia e regimes melhorados de quimioterapia.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

A descrição de cada periódico e documento de patente publicada mencionados na presente invenção estão incorporados como referência em sua totalidade.

O Instituto Nacional do Câncer avaliou que somente nos Estados Unidos, uma em cada três pessoas será atingida pelo câncer durante sua vida. Além disso, aproximadamente 50% a 60% das pessoas que contraem câncer provavelmente morrem da doença. A ampla ocorrência desta doença ressalta a necessidade de regimes melhorados anti-cancerígenos para o tratamento da doença.

Devido a grande variedade de câncer observada atualmente, numerosos agentes anti-cancerígenos têm sido desenvolvidos para eliminar o câncer no organismo. Estes compostos são administrados para pacientes com câncer com o objetivo de eliminar ou de outra forma inibir o crescimento das células malignas enquanto mantêm as células normais e

Petição 870190080272, de 19/08/2019, pág. 8/47 sadias intactas. Os agentes anti-cancerígenos foram classificados baseados em seus mecanismos de ação.

Um tipo de quimioterápico é denominado como um complexo de coordenação metálica. Acredita-se que este tipo de quimioterápico forma predominantemente ligações cruzadas no DNA intra-fita no núcleo das células, dessa forma prevenindo a replicação celular. Como resultado, o crescimento do tumor é inicialmente reprimido e então revertido. Outro tipo de quimioterápico é denominado como um agente de alquilação. Estes compostos atuam inserindo composições ou moléculas estranhas no DNA das células cancerígenas de divisão. Como resultado dessas frações estranhas, as funções normais das células cancerígenas são interrompidas e a proliferação é evitada. Outro tipo de quimioterápico é um agente antineoplásico. Este tipo de agente previne, mata ou bloqueia o crescimento e difusão das células cancerígenas. Ainda outros tipos de agentes anticancerígenos incluem inibidores da aromastase nãoesteróidal, agente de alquilação bifuncionais, etc.

O paclitaxel representa uma das maiores classes de agentes anti-microtúbulos que promovem a polimerização da tubulina e, provavelmente, interrupção da mitose durante a divisão celular. O Taxol7 (paclitaxel) demonstrou apresentar uma atividade antitumoral excelente in vivo e foi empregado no tratamento de uma variedade de tipos de câncer, incluindo de mama, de ovário e de pulmão. Infelizmente, muitos tumores desenvolvem resistência ao paclitaxel.

Os inventores atuais descobriram análogos da epotilona que atuam sinergisticamente quando utilizados combinados com certos agentes quimioterápicos convencionais. É objeto da invenção fornecer regimes eficazes de tratamento quimioterápico combinados onde os análogos da epotilona são 5 combinados com outros agentes antineoplásicos para o tratamento de doenças proliferativas.

RESUMO DA INVENÇÃO

A presente invenção fornece um método sinergístico para o tratamento de doenças proliferativas, incluindo câncer, que compreende administrar a uma espécie de mamífero que necessite do tratamento uma quantidade sinergisticamente terapeuticamente eficaz de: (1) no mínimo um agente antiproliferative e (2) um composto de fórmula I onde:

onde:

Q é selecionado do grupo que consiste em

e

G é selecionado do grupo que consiste em alquila, alquila substituída, arila, arila substituída, heterociclo

R

W é O ou N Ri₅;

X é 0 ou Η, H;

Y é selecionado do grupo que consiste em O; H, 0R₁₆; OR₁₇, ORi₇; N0Ri₈; H, NHOR₁₉; H, NR₂₀R₂i; Η, H; e CHR₂₂; onde 0Ri₇, 0R_í7 pode ser um cetal cíclico;

Zi e Z₂ são selecionados independentemente do grupo que consiste em CH₂, O, NR₂₃, S, e SO₂ onde somente um de Z_xe Z₂ pode se um heteroátomo;

Bi e B₂ são selecionados independentemente do grupo que consiste em OR₂₄, OCOR₂₅ e 0-C (=0) -NR26R27, e quando B_x é H e Y é OH, H, podem formar um cetal ou acetal de anel com seis membros;

D é selecionado do grupo que consiste em NR₂₈R₂₉, NR30COR31 e heterociclo saturado;

R1, R2 / R3 i R4 i R5i Rs, R7, R13 i R14 , R18 i R19, R20 , R21, R22, R26 θ R₂₇ são selecionados independentemente do grupo que consiste em H, alquila, alquila substituída e arila e quando R_x e R₂ são alquila podem ser juntados para formar uma cicloalquila e quando R₃ e R₄ são alquila podem ser juntados para formar uma cicloalquila;

R₉, R_xo, Ris, Ri7, R24, R25 e R31 são selecionados independentemente do grupo que consiste em H, alquila, e alquila substituída;

Rs, R_xx, R12, Ras, R30 e R32 são selecionados independentemente do grupo que consiste em H, alquila, e alquila substituída, arila, arila substituída, cicloalquila e heterociclo;

Ris, R23/ R29 são selecionados independentemente do grupo que consiste em H, alquila, alquila substituída, arila, arila substituída, cicloalquila, heterociclo, R₃₂C=O, R33SO2, hidroxila, 0-alquila ou alquila O-substituida; e sais farmaceuticamente aceitáveis destes e quaisquer hidratos, solvatos ou seus esteroisômeros geométricos e óticos;

com a condição que os compostos onde

W e X são ambos 0; e

Ri, R-2 θ R? sao H; e

R3, R₄ e Rg são metila; e

Re é H ou metila; e

Zi e Z₂ são CH₂; e

G é l-metil-2-(4-tiazolil-substituído)etenila;

e

Q é conforme definido acima são excluídos.

A fórmula II fornece outro exemplo de uma epotilona adequada para uso nos métodos e composições da presente invenção:

onde :

P-Q é um C, um C de ligação dupla ou um epóxido;

R é selecionado do grupo de H, alquila e alquila substituída;

R¹ é selecionado do grupo que consiste em

G¹ é selecionado do grupo de H, halogênio, CN, alquila e alquila substituída;

G² é selecionado do grupo de

H, halogênio, CN, alquila e alquila substituída;

G³ é selecionado do grupo de

O,

NZ¹

G⁴ é selecionado do grupo de H, alquila, alquila substituída, OZ², NZ²Z³, Z²C=O, Z⁴SO₂ e opcionalmente glicosila substituída;

G^s é selecionado do grupo de halogênio, N3, NCS, SH, CN, NC, N(Z^x)3⁺ e heteroarila;

G^s é selecionado do grupo de H, alquila, alquila substituída, CF3, OZ⁵, SZ⁵ e NZ⁵Z6;

G⁷ é CZ⁷ ou N;

G⁸ é selecionado do grupo de H, halogênio, alquila, alquila substituída, OZ¹⁰, SZ¹⁰, NZ¹⁰Z^1:l;

G⁹ é selecionado do grupo de 0, S,-NH-NH- e -N=N-;

G¹⁰ é N ou CZ¹²;

G¹¹ é selecionado do grupo de H₂N, H2N substituído, alquila, alquila substituída, arila, arila substituída;

Z¹, Z⁶, Z⁹ e Z¹¹ são independentemente selecionados do grupo de H, alquila, alquila substituída, acila e acila substituída;

Z² é selecionado do grupo de H, alquila, alquila substituída, acila e acila substituída e heterocíclo;

Z³, Z⁵, Z⁸ e Z¹⁰ são independentemente selecionados do grupo de H, alquila, alquila substituída, acila e acila substituída, arila e arila substituída;

Z⁴ é selecionado do grupo de alquila, alquila substituída, arila e arila substituída e heterocíclo;

Z⁷ é	selecionado	do	grupo	de H,	halogênio,
alquila, alquila	substituída,	arila, arila substituída, OZ⁸,
SZ⁸ e NZ⁸Z⁹;
Z¹² é	selecionado	do	grupo	de H,	halogênio,

alquila, alquila substituída, arila e arila substituída;

com a condição que quando R¹ é

G¹, G², G³ e G⁴ não podem apresentar simultancarncnts os seguintes significados:

G¹ e G² = H, G³ = O e G⁴ = H ou Z²C=O onde z²= grupo 5 alquila.

Um composto de preferência de fórmula II da invenção é

Fórmula lia

onde os símbolos apresentam os seguintes significados:

P-Q é um C, um C de ligação dupla ou um epóxido,

R é um átomo de H ou um grupo metila;

G¹ é um átomo de H, um grupo alquila, um grupo alquila substituída ou um atomo de halogênio,

G² é um átomo de H, um grupo alquila ou um grupo alquila substituída;

G³ é um átomo de O, um átomo de S ou um grupo NZ¹ com Z¹ sendo um átomo de H, um grupo alquila, um grupo alquila substituído, um grupo acila ou um grupo acila substituída e

G⁴ é um átomo de H, um grupo alquila, um grupo alquila substituído, um grupo OZ², um grupo NZ²Z³, um grupo Z2C=O, um grupo Z⁴SO₂ ou opcionalmente um grupo glicosila substituído com Z² sendo um átomo de H, um grupo alquila, um grupo alquila substituxdo;

Z³ é um átomo de H, um grupo alquila, um grupo alquila substituído, um grupo acila ou um grupo acila substituído e

Z⁴ é grupo alquila, alquila substituído, arila, arila substituído ou um grupo heterocíclico, com a condição que G¹, G², G³ e G⁴ não apresentem simultaneamente os seguintes significados: G¹ e G² = átomo de H, G³ = átomo de O e G⁴ = átomo de H ou Z²C=O com Z²= grupo alquila.

Um composto particularmente de preferência da fórmula II é [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*,

16S*]]-3-[2-[2-(aminometil)-4-tiazolil]-1-metiletenil]-7,11diidróxi-8,8,10,12,16-pentametil-4-17-dioxabiciclo [14.1.0] heptadecano-5,9-diona (composto 4) e seus sais aceitáveis farmaceuticamente.

Agentes antiproliferatives adequados para uso nos métodos da invenção, incluem, sem limitação, agente de alquilação (incluindo, sem limitação, mostardas nitrogenadas, derivados de etilenimina, sulfonatos de alquila, nitrosouréias e triazenos): mostarda de uracila, clormetina, ciclofosfamida (citoxano), ifosfamida, melfalano, clorarnbucil, pipobroman, trietileno-melamina, trietilenotiofosforamina, bussulfano, carmustina, lomustina, estreptozocina, dacarbazina e temozolomida; Antimetabólitos (incluindo, sem limitação, antagonistas de ácido fólico, análogos da pirimidina, análogos da purina e inibidores da adenosina desaminase), metotrexato, 5-fluorouracila, floxuridina, citarabina, 6-mercaptopurina, 6-tioguanina, fosfato de fludarabina, pentostatina e gemcitabina; produtos naturais e seus derivados (por exemplo, alcalóides da vinca, antibióticos anti-tumorais, enzimas, linfocinas e epipodofilotoxinas): vimblastina, vincristina, vindesina, bleomicina, dactinomicina, daunorrubicina, doxorrubicina, epirrubicina, idarrubicina, ara-C, paclitaxel (paclitaxel está disponível comercialmente como Taxol®) , mitramicina, desoxico-formicina, mitomicina-C, L-asparginase, interferons (especialmente IFN-a), etoposida e teniposida; navelbeno, CPT-11, anastrazol, letrazol, capecitabina, reloxafina, ciclofosfamida, ifosamida e droloxafina e radiação.

A presente invenção também fornece uma composição farmacêutica para o tratamento sinergístico de câncer que compreende no mínimo um agente antiproliferative e um composto de fórmulas I e/ou II e um veículo aceitável farmaceuticamente.

Em uma modalidade de preferência da invenção, o agente antiproliferative é administrado simultaneamente com ou antes ou após a administração de um composto de fórmulas I e/ou II.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

A Figura 1 descreve o espectro de citotoxicidade do composto 1 em comparação com um painel de linhagens de células tumorígenas em um ensaio de oncologia de células diversas. Gráfico de barras, do lado direito, descreve os valores de IC_S0 das linhagens de células listadas na coluna do lado esquerdo (de cima para baixo).

A Figura 2 descreve um período de tempo do bloqueio mitótico induzido pela incubação das células HCT116 na presença do Composto 1 7,5 nm.

As figuras 3A e 3B são um par de gráficos demonstrando o sinergismo combinado com quimioterapia utilizando o composto 2 e o composto 1. O sinergismo foi obtido com uma faixa de concentrações do composto 1 e do composto 2 e parecia não ser dependente de uma concentração em particular de cada agente utilizado na combinação. No caso do composto 2, as concentrações de 0,33 μΜ (fig. 3A) e 0,11 μΜ (Fig,. 3B) todas produziram interação sinergística com várias concentrações do composto 1. Nestes experimentos, o composto 1 foi fornecido inicialmente por 20 horas seguido pelo composto 2 por um segundo período de 2 0 horas de tratamento.

A figura 4 é um gráfico que apresenta a atividade antitumoral do composto 1 e paclitaxel contra um modelo de carcinoma de ovário humano scPat-7.

A figura 5 é um gráfico que apresenta a atividade antitumoral da administração oral do composto 1 e administração intravenosa do paclitaxel no modelo de carcinoma de ovário humano scPat-7.

A figura 6 é um gráfico que apresenta a dependência da atividade antitumoral do composto 1 na forma de tratamento no modelo de carcinoma de ovário humano A2780.

A figura 7 é uma demonstração gráfica do sinergismo terapêutico in vivo em xeno-enxertos de tumores humanos resistentes a multi-drogas in vivo (carcinoma de cólon humano HCTVM46) desenvolvidos em camundongos lisos após quimioterapia combinada utilizando o composto 1 e o composto 2. O composto 1 foi administrado intravenosamente durante 24 horas antes da administraçao do composto 2 intraperitonealmente. Os dados demonstrados foram regimes de tolerância máxima: somente o composto 1 (15 mg/kg, q4dx3), somente o composto 2 (400 mg/kg, q4dx3), combinação (composto 1 com 6 mg/kg seguido pelo composto 2 com 4 00 mg/kg).

A Figura 8 demonstra a dependência da forma de tratamento combinada do composto 1 e composto 2 in vivo contra xeno-enxertos de tumores humanos resistentes a multidrogas (carcinoma de cólon humano HCTVM46) desenvolvidos em camundongos lisos. Ao contrário de outras formas de administração descritas anteriormente, a administração do composto 2 um dia antes do composto 1 não ocasionou sinergismo terapêutico. Os dados apresentados foram regimes de tolerância máxima: somente o composto 1 (10 mg/kg, iv, q4dx3), somente o composto 2 (400 mg/kg, ip, q4dx3), combinação (composto 2 com 300 mg/kg seguido pelo composto 1 com 10 mg/kg).

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

De acordo com a presente invenção, os métodos para a administração programada dos análogos da epotilona em combinação sinergística com no mínimo uma agente antineoplásico adicional para o tratamento e prevenção de doenças proliferativas são fornecidos.

Epotilonas imitam os efeitos biológicos do taxol (Bollag et al. , Cancer Research 55: 2325-2333 (1995) e em estudos de competição atuam como inibidores competitivos da ligação do taxol aos microtúbulos. Entretanto, epotilonas apresentam uma vantagem significativa em relação ao taxol onde epotilonas exibem uma queda muito menor na potência comparada ao taxol contra uma linhagem celular resistente a multi-drogas (Bollag et al. (1995)). Além disso, epotilonas são consideravelmente menos eficientemente eliminadas das células pela glicoproteína do que o taxol (Gerth et al. (1996)) .

Logo, em uma modalidade de preferência, o método quimioterápico da invenção compreende a administração do análogo de epotilona de fórmulas I e/ou II combinado com outros agentes anti-cancerígenos. Os análogos de epotilona descritos na presente invenção, quando utilizados combinados com no mínimo um outro agente anti-cancerígeno demonstram atividade citotóxica superior.

Um analogo de epotilona de preferencia para ser utilizado nos métodos da invenção e um composto de formula I

onde :

Q é selecionado do grupo que consiste em

G é selecionado do grupo que consiste em alquila, alquila substituída, arila, arila substituída, heterociclo,

W é O ou N R₁₅;

X é O ou Η, H;

Y é selecionado do grupo que consiste em 0; H, 0Ri6; 0Ri7, ORi?; NOR13; H, NHOR19; H, NR20R217 Η, H; e CHR22 ΐ onde 0Ri7, OR17 pode ser um cetal cíclico;

Zi e Z₂ são selecionados independentemente do grupo que consiste em CH₂, O, NR23, S, e S0₂ onde somente um de Z_xe Z₂ pode se um heteroátomo;

Bi e B₂ são selecionados independentemente do grupo que consiste em OR₂₄, OCOR₂₅ e 0-C (=0)-NR26R27, e quando B_x é H e Y é OH, H, podem formar um cetal ou acetal de anel com seis membros;

D é selecionado do grupo que consiste em NR₂₈R₂₉, NR₃₀COR₃i e heterociclo saturado;

Rif Rs, R3, R4, R5, Re, R7, R13 , R14 , Ria, R19, Rso,

R21, R22, R26 e R27 são selecionados independentemente do grupo que consiste em H, alquila, alquila substituída e arila e quando Ri e R₂ são alquila podem ser juntados para formar uma cicloalquila e quando R₃ e R₄ são alquila podem ser juntados para formar uma cicloalquila;

R9, Rio, Rie, R17, R₂₄, R25 ® R31 sao selecionados independentemente do grupo que consiste em H, alquila, e alquila substituída;

Rs, R11, R12, R28, R30 θ R32 sao selecionados independentemente do grupo que consiste em H, alquila, e alquila substituída, arila, arila substituída, cicloalquila e heterociclo;

Ris, R23, R29 são selecionados independentemente do grupo que consiste em H, alquila, e alquila substituída, arila, arila substituída, cicloalquila, heterociclo, R₃₂C=O, R33SO2, hidroxila, 0-alquila ou alquila O-substituída; e sais farmaceuticamente aceitáveis destes e quaisquer hidratos, solvatos ou seus esteroisômeros geométricos e óticos;

com a condição de que os compostos onde

W e X são ambos O; e

Ri, R₂ e R₇ são H; e

R₃, R₄ e R₆ são metila; e

R_s é H ou metila; e

Zi e Z2 são CH₂; e

G é l-metil-2-(4-tiazolil-substituído)etenila;

e

Q é conforme definido acima são excluídos.

Outra epotilona de preferência para uso na presente invenção é um composto de fórmula II:

onde:

P-Q é um C, um C de ligação dupla ou um epóxido;

R é selecionado do grupo de H, alquila e alquila substituída;

R¹ é selecionado do grupo que consiste em

R²

O

G² é selecionado do grupo de H, alquila e alquila substituída;

G³ é selecionado do grupo de O, Se NZ¹

G⁴ é selecionado do grupo de H, alquila, alquila substituída, OZ², NZ²Z³, Z2C=O, Z⁴SO₂ e opcionalmente 10 glicosila substxtuxda;

G⁵ é selecionado do grupo de halogênio, N3, NCS, SH, CN, NC, N(Z^x)3⁺ e heteroarila;

G⁶ é selecionado do grupo de H, alquila, alquila substituída, CF3, OZ⁵, SZ⁵ e NZ⁵Z6;

G⁷ é CZ⁷ ou N;

G⁸ é selecionado do grupo de H, halogênio, alquila, alquila substituída, OZ¹⁰, SZ¹⁰, NZ¹⁰Z¹¹;

G⁹ é selecionado do grupo de O, S,-NH-NH- e -N=N-;

G¹⁰ é N ou CZ¹²;

Z² ê selecionado do grupo de H, alquila, alquila substituída, acila e acila substituída e heterociclo;

Z⁴ é selecionado do grupo de alquila, alquila substituída, arila e arila substituída e heterociclo;

	Z⁷ é	selecionado	do	grupo de	H, halogênio,
alquila,	alquila	substituída,	arila, arila substituída, OZ⁸,
SZ⁸ e NZ⁸	Z⁹;
	Z¹² é	selecionado	do	grupo de	H, halogênio,
alquila,	alquila	substituída,	arila e arila	substituída;

com a condição de que quando R¹ é

I

G², G³ e G⁴ não podem apresentar simultaneamente os seguintes significados:

G¹ e G² = H, G³ = 0 e G⁴ = H ou Z²C=O onde Z²= grupo alquila.

Um composto de preferência de fórmula II da invenção é Fórmula lia

onde os símbolos apresentam os seguintes significados:

P-Q é um C, um C de ligação dupla ou um epóxido,

R é um átomo de H ou um grupo metila;

G¹ é um átomo de H, um grupo alquila, um grupo alquila substituída ou um átomo de halogênio,

	G² é um átomo	de	H,	um grupo alquila ou	um grupo
alquila	substituída;
	G³ é um átomo	de	0,	um átomo de S ou um	grupo NZ¹
com Z¹	sendo um átomo	de	H,	um grupo alquila,	um grupo

alquila substituído, um grupo acila ou um grupo acila substituída e

G⁴ é um átomo de H, um grupo alquila, um grupo alquila substituído, um grupo OZ², um grupo NZ²Z³, um grupo Z²C=O, um grupo Z⁴SO₂ ou opcionalmente um grupo glicosila substituído com Z² sendo um átomo de H, um grupo alquila, um grupo alquila substituído, um grupo arila, um grupo arila substituído ou um grupo heterocíclico;

Z⁴ é grupo alquila, alquila substituído, arila, arila substituído ou um grupo heterocíclico, com a condição de que G¹, G², G³ e G⁴ não apresentem simultaneamente os seguintes significados: G¹ e G² = átomo de H, G³ = átomo de O e G⁴ = átomo de H ou Z²C=O com Z²= grupo alquila.

Um composto particularmente de preferência da fórmula II é [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*_Z16S*]]-3-[2-[2-(aminometil)-4-tiazolil]-1-metiletenil]-7,11diidróxi-8,8,10,12,16-pentametil-4 -17-dioxabiciclo [14.1.0] heptadecano-5,9-diona (composto 4) e seus sais aceitáveis farmaceuticamente. Este composto de preferência (composto 4) é o da fórmula:

O OH O

Um composto particularmente de preferência da fórmula I é [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*,

16S*]]-7,ll-diidróxi-8,8,10,12,16-pentametil-3 -[1-metil-2(2-metil-4-tiazolil)etenil]-4-aza-17-oxabiciclo [14.1.0]heptadecano-5,9-diona (composto 1) e seus sais aceitáveis farmaceuticamente. Este composto de preferência (composto 1) é o da fórmula:

Quando descrevendo os compostos da presente invenção, o termo “alquila inferior ou “alq inferior (como parte de outro grupo) se refere a um grupo alquila não substituído de 1 a 6, preferencialmente de 1 a 4, átomos de carbono.

O termo aralquila se refere a um grupo arila ligado diretamente através de um grupo alquila inferior. Um grupo aralquila de preferência é uma benzila.

O termo arila se refere a um grupo hidrocarboneto aromático monocíclico ou bicíclico que

apresenta 6	a 12	átomos de carbono	na	porção cíclica.
Exemplos de	arila na	presente invenção	são	fenila, naftila e
grupos bifenila.
0	termo	“heterocíclo se	refere a um grupo

inteiramente saturado ou insaturado, aromático ou não aromático que é um sistema de anel monocíclico com 4 a 7 membros, um sistema bicíclico com 7 a 11 membros ou um sistema de anel tricíclico com 10 a 15 membros que apresenta no mínimo um heteroátomo em no mínimo um anel contendo um átomo de carbono. Cada anel do grupo heterocíclico contendo um heteroátomo pode apresentar 1, 2, 3 ou 4 heteroátomos

selecionados de nitrogênio, oxigênio e enxofre onde os heteroátomos de nitrogênio e enxofre podem também ser opcionalmente oxidados e os heteroátomos de nitrogênio podem também ser opcionalmente quaternizados. O grupo heterocíclico pode ser ligado a qualquer heteroátomo ou átomo de carbono.

Exemplos de grupos heterocíclico monocíclicos incluem pirroidinila, pirrolila, indolila, pirazolila, oxetanila, pirazolinila, imidazolila, imidazolinila, imidazolidinila, oxazolila, oxazolidinila, isoxazolinila, isoxazolila, tiazolila, tiadiazolila, tiazolidinila, isotiazolila, isotiazolidinila, furila, tetraidrofurila, tienila, oxadiazolila, piperidinila, piperazinila, 2oxopiperazinila, 2-oxopiperidinila, 2-oxopirrolidinila, 2oxazepinila, azepinila, 4-piperidonila, piridila, N-oxopiridila, pirazinila, pirimidinila, piridazinila, tetraidrotiopiranila, tetraidropiranila, morfolinila, tiamorfolinila, sulfóxido de tiamorfolinila, tetraidrotiopiranilsulfona, tiamorfolinil sulfona, 1,3dioxolano, tetraidro-1,1-dioxotienila, dioxanila, isotiazolidinila, tietanila, tiiranila, triazinila, triazolila e semelhantes.

Exemplos de grupos heterocíclicos bicíclicos incluem benzotiazolila, benzoxazolila, benzotienila, quinolinila, quinolinila-N-óxido, tetraidroisoquinolinila, isoquinolinila, benzimidazolila, benzopiranila, indolizinila, benzofurila, cromonila, cumarinila, cinolinila, quinoxalinila, indazolila, pirrolopiridila, furopiridinila (tal como furo [2,3-c] piridinila, furo [3,1b]piridinila ou furo [2,3-b]piridinila), diidroisoindolila, diidroquinazolinila (tai como 3,4-diidro-4-oxoquinazolinila), benzisotiazolila, benzisoxazolila, benzodiazinila, benzofurazanila, benzotiopiranila, benzotriazolila, benzpirazolila, diidrobenzofurila, diidrobenzotienila, diidrobenzotiopiranila, diidrobenzotiopiranila sulfona, diidrobenzopiranila, indolinila, isocromanila, isoindolinila, naftilridinila, ftalazinila, piperonila, purinila, piridopiridila, quinazolinila, tetraidroquinolinila, tienofurila, tienopiridila, tienotienila e semelhantes.

Quando um grupo é denominado como sendo opcionalmente substituído, pode ser substituído com um a cinco, preferencialmente um a três, substituintes, tais como F, Cl, Br, I, trifluormetila, trifluormetoxila, hidroxila, alcoxi inferior, cicloalcóxi, heterociclooxila, oxo, alquanoíla inferior, ariloxila, alcanoilóxi inferior, amina, alquilamina inferior, arilalmina, cicloalquilamina, heterocicloamina, aminas dissubstituídas onde os dois substituintes amino são selecionados de alquila inferior, arila ou aralquila, alcanoilamino inferior, aroilamina, aralcanoilamino, alcanoilamino inferior substituída, arilamino substituído, aralquilanoilamino substituído, tiol, alquiltio inferior, ariltio, aralquiltio, ciloalquiltio, heterociclotio, alquiltiono inferior, ariltiono, aralquiltiono, alquilsulfonila inferior, arilsulfonila, aralquilsulfonila, sulfonamida (por exemplo, SO₂NH₂) ,

sulfonamida substituída, nitro, ciano, carboxila, carbamila (por exemplo, CONH₂) , carbamila substituída (por exemplo, alquila CONH-inferior, CONH-arila, CONH-aralquila ou casos onde existem dois substituintes no nitrogênio selecionado independentemente de alquila inferior, arila ou aralquila), alcoxicarbonila inferior, arila, arila substituída, guanidino e heterociclos (por exemplo, indolila, imidazolila, furila, tienila, tiazolila, pirrolidila, piridila, pirimidila e semelhantes). Quando observado acima 10 que o substituinte também é substituído, pode ser substituído por F, Cl, Br, I, alquila inferior opcionalmente substituída, hidroxila, alcóxi inferior opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída ou aralquila opcionalmente substituída.

Todos os estereoisômeros dos compostos da fórmula

I e II da presente invenção são contemplados, na forma de mistura ou na forma pura ou na forma substancialmente pura.

A definição dos compostos da fórmula I abrange todos os possíveis estereoisômeros suas misturas. As definições da fórmula I e II abrangem muito particularmente as formas racêmicas e os isômeros óticos isolados que apresentam atividade especificada.

Um análogo de epotilona particularmente de preferência para uso nos métodos da invenção é o composto 1:

é [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-7,11diidróxi-8,8,10,12,16- pentametil -3-[l-metil-2-(2-metil-4tiazolil)etenil]-4-aza-17-oxabiciclo [14.1.0]-heptadecano5,9-diona. Outra epotilona de preferência é o composto 4:

[1S-[1R*, 3R* (E) , 7R* , IOS*, HR*, 12R*, 16S*]]3-[2-[2-(aminometil)-4-tiazolil] -1- metiletenil]-7,11diidróxi- 8,8,10,12,16-pentametil-4-17-dioxabiciclo [14.1.0] heptadecano-5,9-diona.

O composto 1, um exemplo de análogo a epotilona da invenção, é um análogo da epotilona semi-sintético e apresenta uma forma de ação similar a do paclitaxel (isto é, estabilização dos microtúbulos). Entretanto, em estudos préclínicos de farmacologia, o composto 1 demonstrou uma melhora significativa em relação ao paclitaxel em diversos aspectos críticos. 0 composto 1 exibe uma atividade antitumoral de amplo espectro e muito impressiva contra a sensibilidade ao paclitaxel (Ά2780, HCT116 e LS174T) e, com maior importância, assim como em modelos de tumores de cólon humano resistentes ao paclitaxel (HCT116/VM46), carcinoma de ovário (Pat-7 e A2780Tax) e carcinoma de mama (Pat-21). O composto 1 é eficaz oralmente; a atividade antitumoral produzida após administração oral é comparável a produzida pela administração parenteral da droga. Estes dados de eficácia pré-clínicos indicam que o composto 1 demonstra eficacia clxnica melhorada nos tipos de doença sensíveis ou não ao TAXOL®.

Em uma modalidade de preferência da invenção, um composto de fórmulas I e/ou II é administrado em conjunto com no mínimo um agente antineoplásico.

Conforme utilizado na presente invenção, o termo agente antineoplásico é sinônimo de agente quimioterápico e/ou agente antiproliferative e se refere a compostos que previnem o câncer ou células hiperproliferativas de se multiplicarem. Agentes antiproliferatives evitam que as células cancerígenas se multipliquem por: (1) interferindo com a habilidade celular de replicar o DNA e (2) induzindo a morte celular e/ou apoptose das células cancerígenas.

Classes de compostos que podem ser utilizados como agentes citotóxicos antiproliferativos incluem o seguinte:

Agentes de alquilação (incluindo, sem limitação, mostardas nitrogenadas, derivados de etilenimina, sulfonatos de alquila, nitrosouréias e triazenos): mostarda de uracila, clormetina, ciclofosfamida (Cytoxan), ifosfamida, melfalano, clorambucil, pipobromano, trietileno-melamina, trietilenotiofosforamina, bussulfano, carmustina, lomustina, estreptozoeina, dacarbazina e temozolomida.

Antimetabólitos (incluindo, sem limitação, antagonistas do ácido fólico, análogos da pirimidina, analogos da purina e inibidores da adenosina desaminase): metotrexato, 5-fluoruracila, floxuridina, citarabina, 6mercaptopurina, 6-tioguanina, fosfato de fludarabina, pentostatina e gemeitabina.

Produtos naturais e seus derivados (por exemplo, alcalóides da vinca, antibióticos anti-tumorais, enzimas, linfocinas e epipodofilotoxinas): vimblastina, vincristina, vindesina, bleomicina, dactinomicina, daunorrubicina, doxorrubicina, epirrubicina, idarrubicina, ara-C, paclitaxel (paclitaxel está disponível comercialmente como Taxol®) , mitramicina, desoxico-formicina, mitomicina-C, L asparaginase, interferons (especialmente IFN-a), etoposida e teniposida.

Outros agentes antiproliferativos citotóxicos são navelbeno, CPT-11, anastrazol, letrazol, capecitabina, reloxafina, ciclofosfamida, ifosamida e droloxafina.

O termo terapia por radiação inclui, mas não é limitado a, raios-X ou raios gama que são fornecidos de uma fonte de aplicação externa, tal como um feixe de luz ou por implantação de uma pequena fonte radioativa.

_ _ Agentes que interferem os microtúbulõs interferem com a mitose celular e são bem conhecidos na área por sua atividade citotóxica anti-proliferativa. Os agentes que afetam os microtúbulos úteis na invenção incluem, mas não estão limitados a, alocolchicina (NSC 406042), Halicondrin B (NSC 609395), colchicina (NSC 757), derivados de colchicina (NSC 33410) , dolastatina 10 (NSC 376128) , maitansina (NSC 153858), rizoxina (NSC 332598), paclitaxel (Taxol®, NSC 125973), derivados do Taxol® (por exemplo, NSC 608832), tiocolchicina NSC 361792) , tritil cisteína (NSC 83265) , sulfato de vimblastina (NSC 49842), sulfato de vincristina (NSC 67574), epotilonas naturais e sintéticas incluindo, mas não limitadas a epotilona A, epotilona B, epotilona C, epotilona D, desoxiepotilona A, desoxiepotilona B, [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-7,11-diidróxi8,8,10,12,16- pentametil -3-[l-metil-2-(2-metil-4tiazolil)etenil]-4-aza-17-oxabiciclo [14.1.0]-heptadecano5,9-diona (descrito na Patente US 6.262.094, elaborada em 17 de julho de 2001), [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, 11R*,

12R*, 16S*]]-3-[2-[2-(aminometil)-4-tiazolil]-1-metileteni]7,ll-diidróxi-8,8,10,12,16-pentametil-4-17-dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona (descrito no pedido de patente USS 09/506.481 depositado em 17 de fevereiro de 2000 e exemplos 7 e 8 da presente invenção) e seus derivados; e outros agentes de ruptura de microtúbulos. Agentes antineoplásicos adicionais incluem, discodermolida (ver Service, (1996) Science, 274:2009) estramustina, nocodazol, MAP4 e semelhantes. Exemplos de tais agentes são também descritos na .literatura científica e de patentes, ver, por exemplo, Bulinski (1997) J. Cell. Sei. 110:3055-3064; Panda (1997) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 94:10560-10564; Muhlradt (1997) Cancer Res. 57:3344-3346; Nicolaou (1997) Nature 387:268-272; Vasguez (1997) Mol. Biol. Cell. 8:973-985; Panda (1996) J. Biol. Chem. 271:29807-29812.

Nos casos onde é desejável paralisar células anormalmente proliferativas juntamente com ou antes do tratamento com os métodos quimioterápicos da invenção, hormônios e esteróides (incluindo análogos sintéticos): 17aetinilestradiol, dietilestilbestrol, testosterona, prednisona, fluoximesterona, propionato de dromostanolona, testolactona, megestrolacetato, metilprednisolona, metiltestosterona, prednisolona, triamcinolona, horotrianiseno, hidroxiprogesterona, aminoglutetimida, estramustina, acetato de medroxiprogesterona, leuprolida, flutamida, toremifeno, Zoladex podem ser administrados ao paciente.

Também adequados para uso nos métodos combinados quimioterápicos da invenção são os antiangiogênicos, tais como inibidores da matriz de metaloproteinase e outros VEGF inibidores, tais como anticorpos anti-VEGF e pequenas moléculas, tais como ZD6474 e SU6668 também são incluídos. Os anticorpos anti-Her2 da Genetech podem também ser utilizados. Um inibidor EGFR adequado é EKB-569 (um inibidor irreversível) . Também incluídos estão o anticorpo Imclone C225 imunoespecífico para o EGFR e inibidores src.

Também incluído para uso como um agente citostático antiproliferative é o Casodex™ que torna carcinomas . dependentes de andrógenos não proliferativos. Ainda outro exemplo de um agente citostático é o antiestrógeno Tamoxifen que inibe a proliferação ou crescimento do câncer de mama dependente do estrogênio. Os inibidores da transdução dos sinais proliferativos celulares são os agentes citostáticos. Exemplos dos inibidores do fator de crescimento epidermal são inibidores Her-2, inibidores MEK-1 quinase, inibidores MAPK quinase, inibidores PI3, inibidores Src quinase e inibidores PDGF.

Conforme mencionado, certos agentes antiproliferativos são agentes antiangiogênicos e antivasculares e, por interrupção do fluxo sangüíneo para os tumores sólidos, paralisa as células cancerígenas privandoas de se nutrirem. A castração, que também torna os carcinomas dependentes de andrógenos não proliferativos, podem também ser utilizados. A falta de nutrição através de outro meio que não a interrupção cirúrgica do fluxo sangüíneo é outro exemplo de um agente citostático. Uma classe de agentes citostáticos anti-vasculares de maior preferência é a das combretastatinas. Outros exemplos de agentes citostáticos incluem inibidores da MET quinase, inibidores da MAP quinase, inibidores do receptor e de não receptor das tirosinaquinases, inibidores da sinalização da integrina e inibidores dos receptores do fator de crescimento semelhantes a insulina.

Logo, a presente invenção fornece métodos para o tratamento sinergístico de uma variedade de tipos de câncer, incluindo, mas não limitado a, os seguintes:

carcinoma incluindo os de bexiga (incluindo câncer de bexiga metastático e acelerado), de mama, de cólon (incluindo câncer colorretal), de rim, fígado, pulmão (incluindo câncer de pulmão de células pequenas e não pequenas e adenocarcinoma de pulmão), de ovário, de próstata, de testículo, trato urinário, sistema linfático, reto, laringe, pâncreas (incluindo carcinoma pancreático exócrino), esôfago, estômago, vesícula biliar, cérvix, tireóide e pele (incluindo carcinoma de células escamosas);

tumores hematopoiéticos de linhagem linfóide incluindo leucemia, leucemia linfocítica aguda, leucemia linfoblástica aguda, linfoma de células B, linfoma de células T, linfoma de Hodgkins, linfoma não Hodgkins, linfoma de células capilares, linfoma histiocítico e linfoma de Burketts;

tumores hematopoiéticos de linhagem mielóide incluindo leucemias mielogênicas agudas ou crônicas, síndrome mielodisplásticas, leucemia mielóide e leucemia promielocítia;

tumores do sistema nervoso central e periférico incluindo astrocitoma, neuroblastoma, glioma e schwannomas;

tumores de origem mesenquimal incluindo fibrossarcoma, rabdomiosarcoma e osteossarcoma; e outros tumores incluindo melanoma, xenoderma pigmentoso, ceratoacantoma, seminoma, câncer folicular de tireóide e teratocarcinoma.

Mais preferencialmente, a invenção é utilizada para tratar tipos de câncer acelerados ou metastáticos da bexiga, do. pâncreas, -da próstata, de pulmão de células não pequenas, colorretal e de mama.

Em uma modalidade de preferência da invenção, um método é fornecido para o tratamento sinergístico de tumores cancerígenos. Vantajosamente, o método sinergístico desta invenção reduz o desenvolvimento de tumores, reduz o volume do tumor ou produz a regressão do tumor em um hospedeiro mamifero.

Métodos para a administração segura e eficaz da maior parte destes agentes quimioterápicos são conhecidos pelos especialistas na área. Além disso, sua administração é descrita na literatura padrão.

Por exemplo, a administração de muitos destes agentes quimioterápicos é descrita em Physicians Desk Reference(PDR), por exemplo, a edição de 1996 (Medicai Economics Company, Montvale, NJ 07645-1742, USA); cuja descrição é incorporada na presente invenção como referência.

Os compostos de preferência de fórmula I para uso

Tib nos métodos da presente invenção incluem: [1S-[1R*, 3R* (E), 7R* , 10S*, HR*, 12R*, 16S*] ]-7 , ll-diidróxi-8,8,10,12,16pentametil-3 -[1-metil-2 -(2-metil-4-tiazolil)etenil]-4,13,17trioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R* , 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-7,11-diidróxi-8,8,10,12tetrametil-3-[1-metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-4,13,17trioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; [4S-[4R*, 7S*, 8R* , 9R* , 15R* (E)]] -4,8-diidroxi-5,5,7,9,13-pentameti1-16[l-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil] -1,10- dioxa -13cicloexadeceno-2,6-diona; [4S-[4R*, 7S*, 8R*, 9R*, 15R* (E)]]-4,8-diidróxi-5,5,7,9-tetrametil -16- [1-metil -2- (2metil-4-tiazolil)etenil]-1,10-dioxa-13- cicloexadeceno -2,6diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*] ] -

7,11-diidróxi-8,8,10,12,16-pentametil-3 -[l-metil-2-(2-metil4-tiazolil)etenil] -4,14,17- trioxabiciclo [14.1.0]heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, 11R*, 12R*, 16S*]]-7,ll-diidróxi-8,8,10,12 -tetrametil-3 -[1-metil-

2- (2-meti1-4-tiazolil)eteni1]-4,14,17 — trioxabiciclo[14.1.0]heptadecano-5,9-diona; [4S-[4R*, 7S*, 8R*, 9R*, 15R* (E)] ]-

4,8-diidróxi-5,5,7,9,13-pentametil-16-[l-metil-2-(2-metil-4 tiazolil)etenil]-1,10-dioxa-13-cicloexadeceno-2,6-diona;

[4S-[4R*, 7S* , 8R* , 9R* , 15R* (E)]]-4,8-diidróxi-5,5,7,9tetrametil-16 -[1-metil -2- (2-metil-4-tiazolil)etenil]-1,10dioxa-13-cicloexadeceno-2,6-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-7,ll-diidróxi-8,8,10,12,16pentamet i1-3 -[1-met i1-2 -(2-metil-4-tiazolil) etenil] -4,17dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-9-ona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R* , 10S*, HR*, 12R*, 16S* ] ] - 7,11-diidróxi - 8,8,10 , 12 33 tetrametil-3-[1-metil-2-{2-metil-4-tiazolil)etenil] -4,17dioxabiciclo[14.1.0]-heptadecano-9-ona; [1S-[1R*, 3R* (E) ,

7R* , 10S*, HR*, 12R*, 16S*] ]-7,11 -diidróxi-3,8,8,10,12,16hexametil-3-[l-metil-2- (2-metil-4-tiazolil) etenil] -4,175 dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R* , 10S*, HR*, 12R*, 16S*] ]-7,11-diidróxi-3,8,8 ,

10,12-pentametil-3 -[l-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil]-

4,17-dioxabiciclo[14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; [4S-[4R*,

7S*, 8R* , 9R* , 15R* (E)]]-4,8-diidróxi-5,5,7,9,13,1610 hexametil-16-[l-metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil] -1- oxa

-13-cicloexadeceno-2,6-diona; [4S-[4R*, 7S*, 8R*, 9R*, 15R* (E)]]-4,8-diidróxi-5,5,7,9,16-pentametil-16 -[1-metil -2- (2metil-4-tiazolil)etenil]-1-oxa-13-cicloexadeceno-2,6-diona;

[1S-Í1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-7,1115 diidróxi-8,8,10,12,16-pentametil-3-[l-metil-2-(2-metil -4tiazolil)etenil]-4,17-dioxabiciclo[14.1.0]-heptadecano -5,9diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*] ] -

7.11- diidróxi-6,8,8,10,12-pentametil-3-[l-metil-2- (2-metil-

4-tiazolil)etenil]-4,17-dioxabiciclo[14.1.0] -heptadecano20 5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*] ] -

7.11- diidróxi-8,8,10,12-pentametil-3 -[l-metil-2-(2-metil-4tiazolil)etenil]-4-aza-17-oxabiciclo[14.1.0] -heptadecano-

5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*] ] -

7.11- diidróxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[l-metil-2-(2-metil-4- tiazolil)etenil]-4-aza-17-oxabiciclo[14.1.0] -heptadecano-

5,9-diona; [4S-[4R*, 7S*, 8R*, 9R*, 15R* (E)]]-4,8-diidróxi-

5,5,7,9,13 -pentametil- 16- [1-metil-2 -(2-metil-4-tiazolil) etenil]-l-aza-13-cicloexadeceno-2,6-diona; [4S-[4R*, 7S* ,

8R* , 9R*, 15R* (E)]]-4,8-diidróxi-5,5,7,9-tetrametil-16-[1metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil] -l-aza-13-cicloexadeceno2,6-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, IOS*, HR*, 12R*, 16S*] ] -

7.11- diidróxi-4,8,8,10,12-hexametil-3 -[l-metil-2-(2-metil-4- tiazolil)etenil]-4-aza-17-oxabiciclo[14.1.0] -heptadecano-

5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, 11R*, 12R*, 16S*]]-

7.11- diidróxi-4,8,8,10,12-pentametil-3 -[1-metil-2 - (2-metil-

4-tiazolil)etenil]-4-aza-17-oxabiciclo[14.1.0] -heptadecano-

5.9- diona; [4S-[4R* , 7S*, 8R* , 9R* , 15R* (E)]]-4,8-diidróxi- .10. 1,5,5,7,9,13-hexametil -16- 11-metí1-2 -(2-metil-4-1iazolil) etenil]-l-aza-13-cicloexadeceno-2,6-diona; [4S-[4R*, 7S*,

8R* , 9R* , 15R* (E)]]-4,8-diidróxi-1,5,5,7,9-pentametil-16[l-metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil]-l-aza-13- cicloexadeceno-2,6-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*,

16S*]]-7,ll-diidróxi-8,8,10,12-pentametil-3 - [l-metil-2- (2metil-4-tiazolil)etenil]-13-aza-4,17-dioxabiciclo [14.1.0]heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R* , 16S*]]-7,ll-diidróxi-8,8,10,12 -tetrametil-3-[1-metil2-(2-metil-4-tiazolil) etenil] -13- aza -17- dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona;[4S-[4R*, 7S*, 8R*, 9R*, 15R* (E)]]-4,8-diidróxi-5,5,7,9,13-pentametil-16-[l-metil-2- (2metil-4-tiazolil)etenil]-10-aza-l-oxa-13-cicloexadeceno-2,6diona; [4S-[4R*, 7S*, 8R*, 9R*, 15R* (E)]]-4,8-diidróxi-

5.5.7.9- tetrameti1-16-[1-meti1-2- (2-metil-4-tiazolil)etenil]

-10-aza-l-oxa-13-cicloexadeceno-2,6-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R* , 10S*, HR*, 12R* , 16S*]]-7,11-diidróxi-8,8,10,12 pentameti1-3-[l-metil-2—(2-metil-4-tiazolil)etenil]-14- aza·

4,17-dioxabiciclo[14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; [IS-[1R*,

3R* (E) , 7R* , 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-7,11-diidróxi-

8,8,10,12- tetrametil -3- [l-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil]-14-aza-4,17-dioxabiciclo [14.1.0] -heptadecano -5,9diona;[4S-[4R*, 7S*, 8R*, 9R*, 15R* (E)]]-4,8-diidróxi5,5,7,9,13-pentametil -16- [l-metil-2-(2-metil-4-1iazolil) etenil]-ll-aza-l-oxa-13-cicloexadeceno-2,6-diona; [4S-[4R*, 7S*, 8R* , 9R*, 15R* (E)]]-4,8-diidróxi-5,5,7,9-tetrametil16- [l-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil]-ll-aza-l-oxa-13cicloexadeceno-2,6-diona; [1S-[1R*, 3R* (E), 7R*, 10S*, 11R*, . 12R*, - 16S*}]-N-fenil-7,ll-diidróxi-8,8,10,12,16pentametil-5,9-dioxo-4,17-dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-

3-carboxamida; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-N-fenil-7,11-diidróxi-8,8,10,12-tetrametil- 5,9-dioxo-

4,17-dioxabiciclo[14.1.0]-heptadecano-3-carboxamida;

[4S-[4R*, 7S*, 8R*, 9R* , 15R*]] -N-fenil-4,8 diidróxi-5,5,7,9,13-pentametil-2,6-dioxo-l-oxa-13- cicloexadeceno-16-carboxamida; [4S-[4R*, 7S*, 8R* , 9R*, 15R*]]-Nfenil-4,8-diidróxi-5,5,7,9-tetrametil-2,6-dioxo-l- oxa -13cicloexadeceno-16-carboxamida; [IS-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, 11R*, 12R* , 16S*]]-7,11-diidróxi-8,8,10,12,16-pentametil-3[l-metil-2- (2-metil-4-tiazolil) ciclopropil]-4,17-dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R* , 10S*, HR*, 12R*, 16S*] ]-7,11-diidróxi-8,8,10,12-tetrametil3-[l-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) ciclopropil] -4,17dioxabiciclo[14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; e [4S-[4R*, 7S*, 8R*, 9R*, 15R*(E)]]-N-fenil-4,8-diidróxi-5,5,7,9,13pentamet i1-16-[1-metil-2-(2 -hidroximet il-4-tiazolil)etenil]l-aza-13-13(Z)-c icloexadeceno-2,6 — diona; e sens sai s, solvatos e hidratos farmaceuticamente aceitáveis.

Os compostos de preferência de formula II para uso nos métodos da invenção incluem:

[1S-[1R*, 3R* (E) , 7R* , 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]3 -[2 -[2-azidometil)-4 -tiazolil]metiletenil]-7,11- diidróxi-

8.8.10.12.16- pentametil-4,17-dioxabiciclo [14.1.0]- heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*_z 11R*, 12R*, 16S*]]-3-[2-[2-aminometil)-4-tiazolil]metiletenil]-

7.11- diidróxi-8,8,10,12,16-pentametil -4,17- dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona;[IS-[IR*, 3R* (E), 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*] ]-3-[2-[2-[ [ [ (1,1-dimetiletóxi) carbonil] amino] metil]-4-tiazolil]-1-metiletenil]-7,11-diidróxi-8,8,

10.12.16- pentametil-4,17-dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-

5,9-diona; [4S-[4R*, 7S*, 8R*, 9R*, 15R* (E)]]-16-[2- [ [ [(1,1-dimetiletóxi) carbonil] amino]metil]-4-tiazolil]-1metil-etenil]-4,8-diidroxi -5,5,7,9,13- pentametil-l-oxa-13 (Z)-cicloexadeceno-2,6-diona; [4S-[4R*, 7S*, 8R*, 9R*, 15R* (E)]]-16-[2-(aminometil)-4-tiazolil] -1- metiletenil]-4,8diidróxi-5,5,7,9,13-pentametil-l-oxa-13(Z) -cicloexadeceno2,6 -diona;[1S-[1R*, 3R* (E), 7R*, 10S*, 11R*, 12R*, 16S *]]-

7.11- diidróxi-8,8,10,12 - tetrametil -3- [1-metil -2- [2- [(pentanoiloxi)metil]-4-tiazolil]etenil]-4,17- dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*,

10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-7,11-diidróxi-8,8,10,12-tetrametil3- [l-metil-2-[2- [ (naftoiloxi)metil] -4-tiazolil]etenil]-4,17dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona;[IS-[1R*, 3R* (E) , 7R* , 10S*, HR*, 12R*, 16S*] ]-7 , H-diidróxi-3 - [2 - [2 [ [ (2-metoxietóxi)acetilóxi]metil]-1-metil-4-tiazolil]etenil]

-8,8,10,12-tetrametil-4,17-dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano -5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*,

16S*]]-7,11- diidroxi -8,8,10,12-tetrametil-3-[l-metil-2-[2[(N-propionilamino)metil] -4- tiazolil]etenil]-4,17dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona;[IS-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]] -3 - [2 -(3-acetil-2,3 diidro-2-metileno-4-tiazolil)-1-metiletenil]-7,11- diidroxi-

8,8,10,12-tetrametil-4,17-dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-

5,9-diona,ΝΓ-óxido; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]- 7,11--diidroxi-3- [2= [2- (metoximetil) -4-tiazolil] -1metiletenil] -8,8,10,12- tetrametil -4,17- dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; [IR*, 3R* (E) , 7R*, 10S*,

HR*, 12R*, 16S*]]-7,11-diidroxi-8,8,10,12,16-pentametil-3 [l-metil-2-[2-(fenoximetil) -4- tiazolil] etenil] -4,17dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R* , 10S*, HR*, 12R* , 16S*]]-3 - [2 - [(etiltio)metil]-4 tiazolil) -1- metiletenil] -7,11- diidroxi -8,8,10,12,16pentametil-4,17-dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona;

[1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S* ] ]-3 - [2 - [2 etoximetil)-4-tiazolil]-1-metiletenil]- 7,11-diidroxi-8,8,10, 12-tetrametil-4,17-dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9diona; [IS- [IR*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-7,Hdiidróxi-8,8,10,12-tetrametil-3-[1-metil -2- [2-[(2,3,4,6tetraacetil-alfa-glucosilóxi)metil] -4-tiazolil]etenil]-4,17dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona;[IS-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-7,H-diidróxi-8,8,10,12tetrametil-3-[l-metil-2-[2-[(2',3',4',6'-tetraacetil -betaglucosilóxi)metil]-4-tiazolil]etenil] -4,17- dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona;[IS-[1R*, 3R* (E), 7R*, 10S*, HR*, 12R* , 16S*]]-7,ll-diidroxi-8,8,10,12-tetrametil-3 -[1metil -2- [2-[(6'-acetil-alfa-glucosilóxi) metil]-4-1iazolil] etenil]-4,17-dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona;

[1S-[1R*, 3R*(E), 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-7, lldiidroxi -8,8,10,12,16- pentametil -3- [l-metil-2-[2-[ (ptoluenosulfoniloxi)metil] -4- tiazolil] etenil] -4,17dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R* , 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-3 -[2 -[2 -(bromometil)4 10 tiazolil]—1-metiletenil]-7,ll-diidroxi-8',8,10,12-tetrametil-

4,17-dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*,

3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-3-[2-(5-bromo-2metil-4-tiazolil)-1-metiletenil] -7,11- diidróxi-8,8,10,12tetrametil-4,17-dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona;

[1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R* , 16S* ] ]-3 - [2 - [2 -

8,8,10,12,16-pentametil -4,17- dioxabiciclo [14.1.0]heptadecano-5,9-diona; [4S-[4R*, 7S*, 8R*, 9R* , 15R*(E)]]-

16-[2 -[2-(cianomet il)-4-tiazolil] -1- met ileteni1] -4,82 0 di idroxi-5,5,7,9,13-pentametil-1-oxa-13(Z) -cicloexadeceno2,6-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*] ]-

7,11-diidróxi-3-[2-[2-)IH-imidazol-l-ilmetil)-4-tiazolil]-1metiletenil]-8,8,10,12,16-pentametil -4,17- dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona;[IS-[IR*, 3R* (E), 7R*, 10S*,

HR*, 12R* , 16S*] ] -3-[2-(2-formil-4-tiazolil)-1-metiletenil]

-7,11- diidroxi -8,8,10,12- tetrametil-4,17-dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*,

10S*, HR*, 12R*, 16S*] ] -3- [2-(2 - formil-4-tiazolil)-1-

metiletenil]-7,11-diidróxi-8,8,10,12,16- pentametil -4,17dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R* , 10S*, HR*, 12R*, 16S*] ] -3 - [2 - (2-etenil-4 tiazolil)-1-metiletenil]- 7,11-diidróxi-8,8,10,12-tetrametil-

4,17-dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, 11R*, 12R*, 16S*]]-7,11-diidróxi-3 - [2 [2-(metoxiimino)-4-tiazolil] -1- metiletenil] -8,8,10,12tetrametil-4,17-dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona;

[1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-7,11diidróxí-.8., 8,10,12-tetrametil-3- [T-metiT-2- [2- [ Hfenilmetil) imino]metil]-4-tiazolil]etenil]-4,17-dioxabiciclo [14.1.0]heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-3-[2-(2-acetil-4-tiazolil)-1-metiletenil]-7,11diidróxi-8,8,10,12-tetrametil-4,17-dioxabiciclo [14.1.0]heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-7,11-diidróxi-8,8,10,12-tetrametil-3 -[1-metil2 -(2-oxiranil-4-tiazolil)etenil]-4,17-dioxabiciclo [14.1.0]heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*,16S*]]-7,11-diidróxi-3-[2 -[2-)2- iodoetenil)-4-tiazolil] -1-metiletenil] -8,8,10,12- tetrametil -4,17- dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*,

10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-3-[2 -(2-etinil-4-tiazolil)-1metiletenil]-7,11-diidroxi -8,8,10,12- tetrametil -4,17dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-7,11-diidróxi-

8,8,10,12,16-pentametil-3-[1-metil-2 -[2 -[(metilamino)metil]-

4-tiazolil]etenil]-4,17-dioxabiciclo [14.1.0] -heptadecano-

5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*] ] -

3- [2- (2- [ [ [2-(dimetilamino)etil] amino]metil]-4-tiazolil)-1metiletenil]-7,11-diidroxi -8,8,10,12,16- pentametil-4,17dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R* , 10S*, HR*, 12R* , 16S* ]]-3 - [2 - [2 - [-(dimetilamino) metil] -4- tiazolil)-1-metiletenil]-7,ll-diidróxi-8,8,10,12,

16-pentametil-4,17-dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-3[2-[2-[[Bis (2-metoxietil) amino] metil] -4- tiazolil)-1metiletenil]-7,ll-diidróxi-8,8,10,12,16-pentametil -4,17JLO_ dioxabiciclo [14.1:. 0]-heptadecano-5,9-diona; [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-7,H-diidróxi-

8,8,10,12,16-pentametil-3 -[1-metil-2 - [2 - [ (4 - metil -1- piperazinil)metil]-4-tiazolil]etenil] -4,17- dioxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona; ácido [1S-[1R*, 3R* (E),

7R* , 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-4-[2-(7,11-diidróxi-8,8,10,12 tetrametil-5,9-dioxo-4,17-dioxabiciclo(14.1.0] -heptadecano3-il)-1-propenil]-2-tiazolcarboxilico; ester metilico do ácido [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, HR*, 12R*, 16S*]]-4-[2(7,11-diidroxi -8,8,10,12- tetrametil-5,9-dioxo-4,1720 dioxabiciclo (14.1.0]-heptadecano-3-il)-1-propenil]-2tiazolcarboxi1ico e seus sais, solventes ou hidratos farmaceuticamente aceitáveis.

Os compostos da formula I podem ser preparados por procedimentos descritos em WO/9902514. Os compostos da 25 fórmula II podem ser preparados pelos procedimentos descritos na Patente US 6.262.094.

Os compostos de fórmulas I e II são úteis em várias formas de sais farmaceuticamente aceitáveis. O termo as farmaceuticamente aceitável se refere às formas dos sais que poderíam ser óbvias para os químicos farmacêuticos, isto é, aqueles que são substancialmente atóxicos e que fornecem as propriedades farmacocinéticas desejadas, paladar, absorção, distribuição, metabolismo ou excreção. Outros fatores, mais práticos na natureza, que também são importantes na seleção, são o custo da matéria bruta, a facilidade de cristalização, rendimento, estabilidade, higroscopicidade e fluidez da massa da droga resultante. Convenientemente, composições farmacêuticas podem ser preparadas a partir de componentes ativos de seus sais farmaceuticamente aceitáveis combinados com veículos farmaceuticamente aceitáveis.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da fórmula I e II que são adequados para uso nos métodos e composições da presente invenção incluem, mas não estão limitados a, sais formados com uma variedade de sais orgânicos e inorgânicos, tais como cloreto de hidrogênio, ácido hidroximetano sulfônico, brometo de hidrogênio, ácido metanosulfônico, ácido sulfúrico, ácido acético, ácido trifluoracético, ácido maléico, ácido benzenossulfônico, ácido toluenossulfônico, ácido sulfâmico, ácido glicólico, ácido esteárico, ácido láctico, ácido málico, ácido pamóico, ácido sulfanílico, ácido 2-acetoxibenzóico, ácido fumárico, ácido toluenossulfônico, ácido metanosulfônico, ácido etanodissulfônico, ácido oxálico, ácido isotônico e incluem vários outros sais farmaceuticamente aceitáveis, tais como, por exemplo, nitratos, fosfatos, boratos, tartaratos, citratos, succinatos, benzoatos, ascorbatos, salicilatos e semelhantes. Os cations, tais como ions de amônio quaternário são contemplados como contra-íons farmaceuticamente aceitáveis para frações aniônicas.

Sais de preferência dos compostos de fórmula I e

II incluem sais cloridrato, sais do ácido metanosulfônico e sais do ácido trifluoracético. Além disso, sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da fórmula I e/ou II podem ser formados com metais alcalinos, tais como sódio, 10 potássio e lítio; metais álcálinoterrosos, tais como cálcio e magnésio; bases orgânicas, tais como dicicloexilamina, tributilamina e piridina; e aminoácidos, tais como arginina, lisina e semelhantes.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente 15 invenção podem ser sintetizados por métodos químicos convencionais. Geralmente, os sais são preparados reagindo a base ou ácido livre com quantidades estoiquiométricas ou com um excesso da base ou ácido orgânico ou inorgânico desejado formador de sal em um solvente adequado ou combinação de 20 solvente.

A presente invenção também abrange uma composição farmacêutica útil no tratamento do câncer, compreendendo a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz das combinações desta invenção, com ou sem veículos ou diluentes 25 farmaceuticamente aceitáveis. As composições sinergísticas farmacêuticas desta invenção compreendem um agente ou agentes antiproliferatives, um composto de fórmula I e um veículo farmaceuticamente aceitável. Os métodos estão vinculados ao uso de um agente neoplásico combinado com um composto de fórmula I e/ou fórmula II. As composições da presente invenção podem compreender também um ou mais componentes adicionais farmaceuticamente aceitáveis, tais como alume, estabilizantes, agentes anti-microbianos, tampões, corantes, aromatizantes, auxiliares e semelhantes. Os agentes antineoplásicos, os compostos e composições de fórmula I e II da presente invenção podem ser administrados oralmente ou parenteralmente incluindo as formas de administração intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, subcutanea, retal e tópica.

Para uso oral, os agentes antineoplásicos, os compostos e composições de fórmula I e II desta invenção, podem ser administrados, por exemplo, na forma de comprimidos e cápsulas, pós, grânulos dispersíveis ou selos ou como soluções aquosas ou suspensões. No caso de comprimidos para uso oral, os veículos que são mais comumente utilizados que incluem lactose, amido de milho, carbonato de magnésio, talco e açúcar e agentes lubrificantes, tais como estearato de magnésio, são comumente utilizados. Para administração oral na forma de cápsula, os veículos úteis incluem lactose, amido de milho, carbonato de magnésio, talco e açúcar. Quando são utilizadas suspensões aquosas para administração oral, agentes emulsificantes e/ou de suspensão são comumente adicionados.

Além disso, aromatizantes e edulcorantes podem ser adicionados às composições orais. Para uso intramuscular, intraperitoneal, subcutâneo ou intravenoso, soluções

Ζ2ή estéreis dos componentes ativos são geralmente empregadas, e o pH das soluções deve ser adequadamente ajustado e tamponado. Para uso intravenoso, a concentração total do

soluto deve	ser controlada para tornar	a, pxapazraçao
isotônica.
Para	preparar supositórios	de	acordo com	a
invenção, uma	cera de baixa fusão, tal	como	uma mistura	de

glicerídeos de ácidos graxos ou manteiga de cacau é derretida inicialmente e o princípio ativo é difundido homogeneamente na cera, por exemplo, por agitação. A mistura derretida homogênea é então colocada em moldes com tamanhos convenientemente elaborados e deixados esfriar e desta forma solidificar.

As preparações líquidas incluem soluções, suspensões e emulsões. Tais preparações são exemplificadas por soluções de água ou propilenoglicol/água para injeção parenteral. As preparações líquidas podem também incluir soluções para administração intranasal.

As preparações em aerosol adequadas para inalação podem incluir soluções e sólidos na forma de pó, que podem estar combinadas com um veículo farmaceuticamente aceitável, tal como um gás inerte comprimido.

As preparações sólidas que também estão incluídas, são destinadas para conversão, imediatamente antes de ser utilizadas, para preparações líquidas tanto para administração oral como para parenteral. Tais formas líquidas incluem soluções, suspensões e emulsões.

Os compostos de fórmula I e II, assim como os agentes antineoplásicos descritos na presente invenção, podem também ser fornecidos transdermicamente. As composições transdérmicas podem apresentar a forma de cremes, loções, aerosóis e/ou emulsões e podem ser incluídas em um adesivo transdérmico do tipo matriz ou reservatório como são convencionais na área para este objetivo.

As combinações da presente invenção podem também ser utilizadas juntamente com outras terapias bem conhecidas que são selecionadas de acordo com sua utilidade particular contra a condição que está sendo tratada.

Se formulados como uma dose fixa, os princípios ativos das composições combinadas desta invenção são empregados dentro das faixas de dosagem descritas abaixo. Alternativamente, os agentes antineoplásicos e os compostos de fórmula I e II podem ser administrados separadamente nas faixas de dosagem descritas abaixo. Em uma modalidade de preferência da presente invenção, o agente antineoplásico é administrado na faixa de dosagem descrita abaixo após ou simultaneamente com o composto de fórmula I na faixa de dosagem descrita abaixo.

A tabela I descreve as combinações quimioterapêuticas de preferência e exemplos de dosagens para uso nos métodos da presente invenção. Onde aparece Composto de fórmula I qualquer uma das variações da fórmula I ou fórmula II descritas na presente invenção são contempladas para uso nas combinações quimioterapêuticas. Preferencialmente, o composto 1 ou o composto 4 é empregado.

	TABELA 1
Combinação Quimioterápica	Dosagem mg/m² (por dose)
Composto da Formula I	0,1-100 mg/m²
+ Cisplatina	5-150 mg/m²
Composto da Foismula I	0,1-100 mg/m²
+ Carboplatina	5-1000 mg/m²
Composto da Formula I	0,1-100 mg/m²
+ Radiação	200-8000 mg/m²
Composto da Formula I	0,1-100 mg/m²
+ CPT-11	5-400 cgY
Composto da Formula I	0,1-100 mg/m²
+ Paclitaxel	40-250 mg/m²
Composto da Formula I	0,1-100 mg/m²
+ Paclitaxel	40-250 mg/m²
+ Carboplatina	5-1000 mg/m²
Composto da Formula I	0,1-100 mg/m²
+ 5FU e opcionalmente	5-5000 mg/m²
+ Leucovorina	5-1000 mg/m²
Composto da Formula I	0,1-100 mg/m²
+ Epotilona	1-500 mg/m²

Composto da Formula I + Gemcitabina

Composto da Formula I + UFT e opcionalmente + leucovorina

Composto da Formula I + Gemcitabina + Cisplatina

Composto da Formula I + UFT + Leucovorina

Composto da Formula I + Cisplatina + paclitaxel

Composto da Formula I + Cisplatina + 5FU

Composto da Formula I + Oxaliplatina + CPT~11

0,1-100 mg/m²

100-3000 mg/m²

0,1-100 mg/m²

50-800 mg/m²

5-1000 mg/m²

0,1-100 mg/m²

100-3000 mg/m²_ ₅_₁₅₀-_mg/_m2 ””

0,1-100 mg/m²

50-800 mg/m²

5-1000 mg/m²

0,1-100 mg/m²

5-150 mg/m²

40-250 mg/m²

0,1-100 mg/m²

5-150 mg/m²

5-5000 mg/m²

0,1-100 mg/m²

5-200 mg/m²

4-400 mg/m²

Composto da Formula I + 5FU + CPT-11 e opcionalmente + leucovorina

Composto da Formula I + 5FU + radiação

Composto da Formula I + radiação + 5FU + Cisplatina

Composto da Formula I + Oxaliplatina + 5FU e opcionalmente + Leucovorina

Composto da Formula I + paclitaxel + CPT-11

Composto da Formula I + paclitaxel + 5-FU

0,1-100 mg/m²

5-5000 mg/m²

4- 400 mg/m²

5- 1000 mg/m²

0,1-100 mg/m²

5-5000 mg/m²

200-8000 cGy

0,1-100 mg/m²

200-8000 cGy

5-5000 mg/m²

5-150 mg/m²

0,1-100 mg/m²

5-200 mg/m²

5-5000 mg/m²

5-1000 mg/m²

0,1-100 mg/m²

40-250 mg/m²

4- 400 mg/m²

0,1-100 mg/m²

40-250 mg/m²

5- 5000 mg/m²

Composto da Formula I + UFT + CPT-11 e opcionalmente + leucovorina

0,1-100 mg/m²

50-800 mg/m²

4- 400 mg/m²

5- 1000 mg/m²

Na tabela I acima, 5FU' significa 5-fluoruracila, leucovorina pode ser empregada como leucovorina cálcica, UFT é uma proporção molar de tegafur:uracila e epotilona é um composto preferencialmente descrito em WO 99/0254 ou WO 00/50423, ambos os documentos incorporados como referência na presente invenção em sua totalidade.

Enquanto a tabela I fornece exemplos de faixas de dosagem dos compostos de fórmula I e II e certos agentes anti-cancerígenos da invenção quando formulando as composiçoes farmacêuticas da invenção, o clinico pode utilizar dosagens de preferencia conforme garantido pela condição do paciente que está sendo tratado. Por exemplo, o composto 1 pode preferencialmente ser administrado com 25-60 mg/m² a cada três semanas. O composto 2 pode preferencialmente ser administrado com uma dosagem variando de 25-500 mg/m² a cada três semanas a medida que o tratamento é necessário. As dosagens de preferência para cisplatina são de 75-120 mg/m² administradas a cada três semanas. As dosagens de preferência para a carboplatina estão dentro da faixa de 200-600 mg/m² ou uma AUC de 0,5-8 mg/mL x min; a de maior preferência apresenta uma AUC de 4-6 mg/mL x min. Quando o método empregado utiliza radiação, as dosagens de preferência estão dentro da faixa de 200-6000 cGY. As dosagens de preferência para CPT-11 estão dentro da faixa de 100-125 mg/m2, uma vez por semana. As dosagens de preferência para o paclitaxel estão dentro da faixa de 130225 mg/m² a cada 21 dias. As dosagens de preferência para a gemcitabina estão dentro da faixa de 80-1500 mg/m²administradas semanalmente. A UFT é utilizada preferencialmente dentro de uma faixa de 300-400 mg/m2/dia quando combinada com a administração da leucovirina. As dosagens de preferência para a leucovirina estão dentro da faixa de 10-600 mg/m² administradas semanalmente.

A dosagem real empregada pode ser variada dependendo das exigências do paciente e da gravidade da condição que está sendo tratada. A determinação da dosagem adequada para uma situação particular é determinada por especialistas na área. Geralmente, o tratamento é iniciado com dosagens pequenas que são menores do que a dose ótima do composto. Portanto, a dosagem é aumentada em quantidades pequenas até que o efeito ótimo sobre as circunstâncias é obtido. Por conveniência, a dosagem total diária pode ser dividida e administrada em porções durante o dia se desejado. Terapia intermitente (por exemplo, uma semana em três semanas ou três em quatro semanas) pode também ser utilizada.

Certos tipos de câncer podem ser tratados efetivamente com os compostos de fórmula I e/ou fórmula II e uma pluralidade de agentes anti-cancerígenos. Tais combinações triplas e quádruplas podem fornecer uma melhor eficácia. Quando tais combinações triplas e quádruplas são utilizadas, as dosagens descritas acima podem ser utilizadas. Outras combinações na tabela I acima podem portanto, incluir o composto 1 combinado com (1) mitoxantrona + prednisona; (2) doxorrubicina + carboplatina; ou (3 herceptina + tamoxifeno. 5-FU pode ser substituído por UFT em quaisquer das combinações acima.

Quando empregando os métodos ou composições da presente invenção, outros agentes utilizados na modulação do crescimento do tumor ou metástase em um padrão clínico, tal como anti-eméticos, podem se administrados conforme desej ado.

A presente invenção abrange um método para o tratamento sinergístico do câncer onde um agente neoplásico e um composto da fórmula I e/ou II são administrados simultaneamente ou seqüencialmente. Logo, enquanto uma formulação farmacêutica compreende um agente (s) antineoplásico e um composto da fórmula I e/ou da fórmula II, pode ser vantajoso administrar a combinação para um tratamento em particular, a administração anterior do agente antineoplásico pode ser vantajosa em outro tratamento. Compreende-se também que a combinação imediata do agente antineoplásico e o composto de fórmula I e/ou II pode ser utilizada juntamente com outros métodos de tratamento do câncer (preferencialmente tumores cancerígenos) incluindo, mas não limitados a, terapia por radiação e cirurgia. Também é compreendido que um agente citostático ou latente, caso exista, pode ser administrado seqüencialmente ou simultaneamente com uma ou todas as outras terapias sinergisticas .

As combinações da presente invenção podem também ser co-administradas com outros agentes terapêuticos bem conhecidos que são selecionados por sua utilidade particular contra a condição que está sendo tratada. Combinações da presente invenção podem alternativamente ser utilizadas seqüencialmente com agentes farmaceuticamente aceitáveis conhecidos quando uma fórmula de combinação múltipla é inadequada.

0(s) agente(s) quimioterápico(s) e/ou terapia de radiação podem ser administrados de acordo com os protocolos terapêuticos bem conhecidos na área. Será compreendido pelos especialistas na area que a administraçao do(s) agente(s) quimioterápico(s) e/ou terapia por radiação podem ser alternados dependendo da doença que esta sendo tratada e os efeitos conhecxdos do(s) agente(s) quimioterápico(s) e/ou terapia por radiação naquela doença. Também, de acordo com o conhecimento do clínico especializado, os protocolos terapêuticos (por exemplo, quantidades de dosagem e períodos de administração) podem ser variados de acordo com os efeitos observados dos agentes terapêuticos administrados (isto é, agente(s) antineoplásico(s) ou radiação) no paciente, e através das respostas observadas da doença em relação aos agentes terapêuticos administrados.

Nos métodos desta invenção, um composto de fórmula I ou II é administrado simultaneamente ou seqüencialmente com um agente antiproliferative e/ou radiação. Logo, não é necessário que o(s) agente(s) quimioterápico(s) e o composto de formula I e/ou II, ou a radiação e o composto de formula

I e/ou fórmula II sejam administrados simultaneamente ou essencialmente simultaneamente. A vantagem de uma administração simultânea ou essencialmente simultânea é correta dentro da determinação do clínico especializado.

Também, geralmente, o composto de fórmula E e/ou

II e o(s) agente(s) quimioterápico(s) não precisam ser administrados na mesma composição farmacêutica e podem, em virtude das diferentes características físicas e químicas, precisar ser administrados por diferentes vias. Por exemplo, o composto de fórmula I ou II pode ser administrado oralmente para produzir e manter bons níveis sangüíneos destes, enquanto o(s) agente(s) quimioterápico(s) pode(m) ser administrado(s) intravenosamente. A determinação da forma de administração e a conveniência da administração, quando possível, na mesma composição farmacêutica, é apropriada dentro do conhecimento do clínico especialista. A administração inicial pode ser feita de acordo com os protocolos estabelecidos conhecidos na área, e então, baseados nos efeitos observados, a dosagem, a forma de administração e a posologia podem ser modificados pelo clinico especialista.

A escolha particular do composto de fórmula I e/ou II e agente(s) citotóxico(s) antiproliferative(s) ou radiação depende do diagnóstico dos clínicos em atendimento e seu julgamento da condição do paciente e o protocolo do tratamento adequado.

Se o composto de fórmula I e/ou II e o(s) agente(s) antineoplásico(s) e/ou radiação não são administrados simultaneamente ou essencialmente simultaneamente, então a ordem inicial de administração do composto de fórmula I e/ou II e o(s) agente (s) quimioterápico(s) e/ou radiação pode ser variada. Logo, por exemplo, o composto de fórmula I e/ou II pode ser administrado inicialmente seguido pela administração do(s) agente(s) antiproliferative(s) e/ou radiação; ou o(s) agente(s) antiproliferativo(s) e/ou radiação podem ser administrados inicialmente seguido pela administração do composto da fórmula I e/ou II. Esta administração alternativa pode ser repetida durante um protocolo de tratamento simples. A determinação da ordem de administração e o número de repetições da administração de cada agente terapêutico durante o protocolo do tratamento, é apropriado dentro do conhecimento do clínico especializado após avaliação da doença que está sendo tratado e a condição do paciente. Por exemplo, o(s) agente(s) antineoplásico(s) e/ou radiação podem ser administrados inicialmente, especialmente se um agente citotóxico é empregado. O tratamento é então continuado com a administração do composto da fórmula I e/ou II e opcionalmente seguido pela administração de um agente citostático, se desejado, até que o protocolo do tratamento esteja completo.

Portanto, de acordo com a experiência e conhecimento, o clínico pode modificar cada protocolo para a administração de um componente (agente terapêutico, isto é, composto da fórmula I e/ou II, agente(s) antineoplásico(s) ou radiação) do tratamento de acordo com as necessidades individuais do paciente, a medida que o tratamento continua.

O clínico responsável, julgando se o tratamento é eficaz com a dosagem administrada, irá considerar o bem estar do paciente assim como sinais mais definidos, tais como alívio os sintomas relacionados com a doença, inibição do crescimento do tumor, redução real do tumor ou inibição da metástase. O tamanho do tumor pode ser medido por métodos padronizados, tais como estudos radiológicos, por exemplo, pesquisa CAT ou MRI e medições sucessivas podem ser utilizadas para julgar se o crescimento do tumor foi ou nao interrompido ou mesmo revertido. O alívio dos sintomas associados a doença, tais como dor e melhora nas condições gerais podem também ser utilizados para ajudar na avaliaçao da eficácia do tratamento.

Para facilitar uma compreensão adicional da invenção, os seguintes exemplos são apresentados principalmente com o objetivo de ilustrar seus detalhes mais especificamente. O escopo da invenção não deve ser limitado pelos exemplos, mas abranger o aspecto individual total definido pelas reivindicações.

PROTOCOLO EXPERIMENTAL

Compostos;

As seguintes definições são utilizadas para identificar os compostos teste através dos exemplos:

Composto 1: [1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, 10S*, 11R*,

12R* , 16S*]]-7,11-diidróxi-8,8,10,12,16-pentametil-3 - [1metil-2-(2-metil-4-tiazolil)etenil] -4- aza -17- oxabiciclo [14.1.0]-heptadecano-5,9-diona

Composto 2: sal de cloridrato de (R)-2,3,4,5tetraidro-1-(lH-imidazol-4-ilmetil)-3-(fenilmetil)-4-(2tienilsufon.il) -1H-1,4 -benzodiazepina-7-carbonitrila

Composto 3: Um inibidor CDK é apresentado abaixo

Composto 4 : 1S-[1R*, 3R* (E) , 7R*, IOS*, 11R*,

12R*, 16S*]]-3-[2-[2-aminometil)-4-tiazolil]-1-metiletenil]7,11-diidróxi-8,8,10,12,16- pentametil -4,17-dioxabiciclo [14.1.0] heptadecano-5,9-diona

Composto______5: N-[5-[[[5-(1,1-dimetiletil)-2oxazolil)metil]tio]-2-tiazolil] -4-piperidinacarboxamida.

Soluções e Produtos Químicos:

A menos que especificado, as soluções e produtos químicos utilizados para a manutenção da cultura de células foram obtidos da GIBCO/BRL. 0 produto de culturas de tecido estéreis foi obtido da Corning, NY. Todos os outros reagentes foram da Sigma ou Fisher no maior grau disponível.

Administração da Droga:

Para administração do composto 1 (uma epotilona) a roedores, dois tipos diferentes de excipientes foram utilizados: (1) etanol/água (1:9, v/v) e (2)

Cremophor®/etanol/água (1:1:8, v/v). O composto 1 foi inicialmente dissolvido em etanol ou uma mistura de Cremophor®/etanol (50:50). A diluição final para a concentração da dosagem necessária e feita menos de 1 hora antes da administração da droga. Para administração parenteral (IV) , a diluição foi feita com água para que as soluções de dosagem contenham a composição de excipiente especificada descrita acima. Para administração oral (PO), a diluição foi feita com tampão fosfato de sódio 0,25M (pH=8,0) com uma proporção de 30/70, v/v. O paclitaxel foi dissolvido em uma mistura 50/50 de etanol e Cremophor® e armazenado à temperatura de 4°C; a diluição final do paclitaxel foi obtida imediatamente antes da administração da droga com NaCl a 0,9%. O volume de todos os compostos injetados foi de 0,01 mL/g para camundongos e 0,005 mL/g para ratos.

Linhagens de Células de Tumor:

Linhagens de células de carcinoma humano HCT116, células HCT16/V46 e uma variante MDR [1] foram mantidas em meio McCoy 5A (GIBCO) e em soro fetal bovino inativado pelo calor 10% (GIBCO). Células de carcinoma de ovário humano A2780 e células A2780Taz obtidas com o Dr Antonio Fojo (NCI, Bethesda, MD) foram mantidas em IMEM (GIBCO) e soro fetal bovino a 10% (GIBCO). Esta linhagem de células resistente ao paclitaxel não super-expressam a p-glicoproteína, mas apresenta mutações de ponto no isotipo M40 da beta-tubulina [2]. A tubulina purificada isolada destas células resistentes é refratária a polimerização pelo paclitaxel e é considerada responsável pela sensibilidade colateral aos agentes de despolimerização de microtúbulos, tal como a vimblastina.

Ensaio de Citotoxicidade:

A citotoxicidade in vitro foi avaliada em células tumorais por um ensaio colorimétrico baseado no tetrazólio que leva vantagem na conversão metabólica do MTS (3-(4,5dimetiltiazol-2-il)-5-(3-carboximetoxifenil)-2-(4-sulfenil)2H-tetrazólio, sal interno) para uma forma reduzida que absorve luz a 492 nm [3]. As células foram semeadas 24 horas antes da adição da droga. Após uma incubação de 72 horas à temperatura de 37°C com o composto diluído serialmente, MTS combinado com o agente de ligação de elétrons, metossulfato de fenazina, foi adicionado às células. A incubação foi continuada por 3 horas e então a absorbância do meio a 4 92 nm foi medida com um espectrofotômetro para obter o número de células sobreviventes em relação às populações controle. Os resultados são expressados como concentrações citotóxicas médias (valores IC50).

Ensaio de Formação de Colônias de Células Clonogênicas:

A potência com que o composto 1 e o paclitaxel mata as células tumorais clonogênicas (células que são capazes de se dividir indefinidamente para formar uma colônia) in vitro foi avaliada por um ensaio de formação de colônia. A concentração necessária para matar células clonogênicas de carcinoma de cólon humano HCT-116 em torno de 90% (isto é, a IC₉₀) foi determinada. A análise dos efeitos do tratamento de combinação in vitro foi pelos métodos da multiplicidade e isobolograma descritos por Stephens e Steel [4].

Ensaio da Polimerização da Tubulina:

A potência com que o composto 1 e o paclitaxel polimerizam a tubulina isolada de cérebro de bezerro foi avaliada por técnica publicada [5,6].

Animais:

Todos os roedores foram obtidos da Harlan Sprague Dawlwy Co. (Indianópolis, Indiana) e mantidos em um ambiente sem amônia em uma colônia definida e livre de patógenos. O programa de cuidado animal do Briston-Myers Squibb Pharmaceutical Research Institute é totalmente acreditado pela American Association for Accreditation of Laboratory Animal Care (AAALAC).

Teste Antitumoral in vivo:

Os seguintes tumores humanos foram utilizados: ovariano A2780, ovariano A2780Tax (formado a partir de células obtidas do Dr. Antonio Fojo, Medicine Branch, NCI, Bethesda, MD), de cólon HCT116/VM46, ovariano Pat-7 (formado a partir de uma biópsia tumoral fornecida pelo Dr. Thomas Hamilton, Fox Chase Cancer Center, Filadélfia, PA) de um paciente que tinha desenvolvido resistência ao TAXOL®) . O fibrosarcoma murino M5076 também foi empregado.

Os tumores humanos foram mantidos em camundongos lisos Balb/c nu/nu. M5076 foi mantido em camundongos

C57BL/6. Os tumores forem propagados como transplantes subcutâneos na cepa apropriada de camundongo utilizando fragmentos do tumor obtidos dos camundongos doadores.

Os seguintes tumores foram transportados para a cepa hospedeira do camundongo indicada: fibrosarcoma M5076 murino (M5076) em camundongos C57B1/6; carcinomas ovarianos Pat-7 e A2780, carcinomas de cólon HCT116, HCT16/VM46 e LS174T, carcinoma de mama Pat-21 em camundongos lisos. O transporte do tumor ocorreu duas vezes por semana para tumores murinos e aproximadamente a cada duas ou oito semanas para as várias linhagens de tumores humanos. Com relação ao teste de eficácia, os tumores M5076 foram implantados em camundongos híbridos Fl (C57B1/6 x DBA/2) e tumores humanos foram implantados em camundongos lisos. Todos os implantes tumorais para teste de eficácia foram subcutâneos (sc).

O número exigido de animais necessário para detectar uma resposta significativa foi agrupado no início do experimento e cada um recebeu um implante subcutâneo de um fragmento tumoral (· 50 mg) com um trocarte de calibre 13. Para o tratamento de tumores em estágio inicial, os animais foram novamente agrupados antes da distribuição para os vários tratamento e grupos de controle. Para tratamento de animais com doença em estágio avançado, os tumores cresceram até uma janela de tamanho determinada (tumores fora desta faixa foram excluídos) e os animais foram uniformemente distribuídos para vários grupos de tratamento e controle. O tratamento de cada animal foi baseado no peso corporal individual. Animais tratados foram avaliados diariamente para mortalidade/toxicidade relacionada ao tratamento. Cada grupo de animais foi pesado antes do início do tratamento (Wtl) e então novamente após a última dose do tratamento (Wt2). A diferença no peso corporal (Wt2-Wtl) fornece uma medição da toxicidade relacionada ao tratamento.

A resposta do tumor foi determinada pela medição dos tumores com um compasso de calibre duas vezes por semanas, até que os tumores atingem um tamanho alvo prédeterminado de 1 gm. Os pesos dos tumores (mg) foram calculados pela fórmula:

Peso do tumor = (comprimento x largura²) 2

A atividade antitumoral foi avaliada com a dose máxima tolerada (MTD) que é definida como o nível de dose imediatamente abaixo onde a toxicidade excessiva (isto é, mais do que uma morte) ocorre. A MTD foi frequentemente equivalmente a OD. Quando ocorreu morte, o dia da morte foi registrado. Os camundongos tratados que morreram antes do crescimento dos seus tumores atingir o tamanho alvo, tiveram suas mortes associadas com a toxicidade da droga. Nenhum camundongo morreu apresentando tumores menores do que o tamanho alvo. Os grupos de tratamento com mais de uma morte causada por toxicidade da droga foram considerados por apresentar tratamentos excessivamente tóxicos e seus dados não foram incluídos na avaliação da eficácia do composto antitumoral.

O ponto final da resposta do tumor foi expressado em termos de demora no crescimento do tumor (valor T-C) ,

definido como a diferença no tempo (dias) necessária para os tumores tratados (T) atingirem um tamanho alvo predeterminado comparado aos do grupo controle (C).

Para avaliar a morte das células tumorais, o tempo para o volume do tumor dobrar foi inicialmente calculado com a fórmula:

TVDT = tempo médio (dias) para os tumores controle atingirem o tamanho alvo - tempo médio (dias) para os tumores controle atingirem metade do tamanho alvo

E, log da morte celular = T-C (3,32 x TVDT)

Avaliações estatísticas dos dados foram realizadas utilizando o teste de Wilcoxon Gehan generalizado [7].

EXEMPLO I

COMPOSTO 1 DEMONSTRA CITOTOXICIDADE CONTRA CÉLULAS CANCERÍGENAS IN VITRO

O composto 1 apresenta um amplo espectro de atividade contra um painel de linhagens de células tumorais in vitro. Das 21 linhagens de células testadas (Figura 1) , 18 apresentam valores IC50 entre 1,4-6 nm. Três linhagens de células apresentam valores de IC50 maiores do que 6 nM: isto e, duas linhagens de tumores de colon altamente multi—drogas resistentes (MDR) HCT116/VM46 (24,5 nM) e MIP (24,8 nM) e a linhagem de fibroblastos normais de pulmão de camundongo MLF (34,5 nM) . Deve ser observado que o composto 1 superou substancialmente a resistência multi-droga inerente nestas linhagens de células. Logo, para o paclitaxel, as razões das concentrações (R/S ou proporção de resistência) necessárias para inibir cerca de 50% do crescimento celular nestas

linhagens resistentes em comparação com as exigidas para a linhagem sensível HCT116 foram de 155 e >>55, respectivamente, para HCT16/VM46 e MIP. Em comparação, as proporções R/S para o composto 1 foram somente 9,4 e 9,5, 5 respectivamente (Tabela 2) .

TABELA 2.	Citotoxicidade in vitro do Composto 1 e do Paclitaxel em linhagens de células tumorais sensíveis e resistentes ao Paclitaxel IC50. nM (taxa de resistência
Composto	HCT-116 HCT-116/VM46 MIP
Paclitaxel	2,1 326 (155) >>112 (>>53)
Composto 1	2,6 24,5 (9,4) 24,8 (9,5)

Mecanismo de citotoxicidade - polimerização da tubulina

As atividades citotóxicas das epotilonas, da mesma forma que as dos taxanos, estão relacionadas a estabilização 10 dos microtúbulos que resulta em interrupção mitótica na transição G2/M. Neste aspecto, a potência do composto 1 é similar a dos seus dois análogos naturais, a epotilona A e B

TABELA 3. Potência de polimerização da tubulina de três epotilonas em comparação com o paclitaxel

Análogo Potência de	Taxa de
polimeri zação,	polimerização
EC_o,oi (μΜ)	Potência do análogo/Paclitaxel
Composto 1 3,5	0,4
(Epotilona A) 2,0	0,4
(Epotilona B) 1,8	0,3
Paclitaxel 8,5, 5,0, 6,0	l,o

EXEMPLO 2

COMPOSTO 1 INIBE A PROGRESSÃO DO CICLO CELULAR

Da mesma forma que o paclitaxel, o composto 1 bloqueia as células na fase mitótica do ciclo de divisão 5 celular. Além disso, a concentração do composto 1 necessária para capturar as células pela mitose corresponde exatamente a concentração necessária para matar as células durante a mesma duração do tratamento. Logo, conforme demonstrado na figura 2, o composto 1 a uma concentração próxima ao valor 10 IC90 (· 7,5 nM) bloqueia quase completamente as células na mitose em 8 horas.

EXEMPLO 3

Quimioterapia combinada in vitro

O sucesso de um agente anti-cancerígeno depende 15 não somente de sua atividade antitumoral como um simples agente mas também de sua habilidade para se combinar com sucesso com outras drogas anti-neoplásicas. Da mesma forma que o paclitaxel, o composto 1 induz confusão no ciclo celular interno pela captura das células pela mitose. Por estas razões, é particularmente pertinente pesquisar o comportamento do composto 1 quando utilizado em quimioterapia de combinação. Os ensaios de formação de colônia foram utilizados para examinar a citotoxicidade do composto 1 combinado com diversos agentes anti-cancerígenos selecionados de vários mecanismos de ação in vitro.

Análises de isobolograma demonstraram que a forma de interaçao entre o composto 1 e outros agentes citotoxicos in vitro são dependentes da droga, sequência e dose e podem variar do sinergismo para antagonismo (Tabela 4) . Para o composto 2, um inibidor da ras farnesil transferase na fase I do estudo clínico, foi observado sinergismo quando o composto 1 foi administrado inicialmente seguido pelo composto 2 (figuras 3A e 3B) . Quando as células foram tratadas com o composto 1 e composto 2 simultaneamente ou na seqüência composto 2 —> composto 1, somente o acúmulo foi observado. Com o composto 3, um inibidor CDK, a sinergia foi novamente observada quando o composto 1 foi administrado inicialmente, mas o antagonismo foi observado para as outras duas seqüências de tratamento.

Para o paclitaxel, todos as três seqüências de tratamentos resultaram em acúmulo. No caso da cisplatina, o acúmulo foi observado quando dois agentes foram utilizados seqüencialmente, mas o sinergismo foi obtido para o tratamento simultâneo.

TABELA 4. Efeito da seqüência de exposição da droga na interação citotóxica entre o composto 1 e cinco outros agentes antineoplásicos na linhagem de células de carcinoma de cólon humano HCT116.

Seqüência de	Combinação	Forma de Interação
+ Composto 2
(inibidor ras	FT)	Sinergia
Composto 1	► Lo 2
Composto 2	—► Composto 1	Aditividade
Simultâneo	Aditividade
+ Composto 3	(inibidor CDK)
Composto 1	—► Composto 3	Sinergia
Composto 3	► Composto 1	Antagonismo
Simultâneo	Antagonismo
+ Paclitaxel	(estabilizador
de microtíbulo)
Composto 1	—► Paclitaxel	Aditividade
Paclitaxel	—► Composto 1	Aditividade
Simultâneo	Aditividade
+ Cisplatina	(dano no DNA)
Composto 1	—► Cisplatina	Adi t ividade
Cisplatina —	—► Composto 1	Aditividade
Simultâneo	Sinergia

EXEMPLO 4

ATIVIDADE ANTITUMORAL POR ADMINISTRAÇÃO PARENTERAL

O composto 1 foi avaliado em um painel de oito modelos de tumores murinos e humanos. Cinco foram escolhidos devido a sua resistência ao paclitaxel (tabela 5) e três modelos sensíveis ao paclitaxel foram incluídos para obter uma avaliação completa do espectro de atividade antitumoral do composto 1.

Modelos de Tumores Refratários ao Paclitaxel

1. Modelo Pat-7 de carcinoma ovariano resistente ao TAXOL® derivado clinicamente

Este modelo de tumor foi desenvolvido a partir de uma biópsia de tumor de um paciente com câncer de ovário(Pat-7) que no começo respondia ao tratamento com TAXOL® mas finalmente desenvolveu resistência ao medicamento após nove cursos de monoterapia com TAXOL®. Antes do tratamento com TAXOL®, Pat-7 também recebeu numerosos outros agentes quimioterápicos incluindo carboplatina, citoxano, VP-16, ifosfamida e altretamina. A biópsia do tumor foi realizada após o desenvolvimento da resistência ao TAXOL®.

O composto 1 foi administrado a camundongos lisos portadores de tumores determinados utilizando um programa de a cada 2 dias x 5. Com a dose máxima, foi altamente ativo produzindo logs de morte celular (LCKs) de 2,1 e 4,5 em dois testes distintos (Tabela 6 e figura 4) . O paclitaxel IV avaliado simultaneamente produziu LCKs de 0,6 e 1,3, respectivamente, em sua dose ótima e programa.

Para avaliar a atividade do composto 1 em uma segunda espécie, Pat-7 foi implantado em ratos lisos imunocomprometidos e o composto 1 foi administrado em um programa IV de a cada 8 dias x 2 (tabela 6) . Com a dose ótima de 3 mg/kg/inj, o composto 1 foi altamente ativo, realizando 4 de 6 curas. Em comparação, o paclitaxel produziu 2,2 LCK com sua dose ótima e nenhuma cura (n=6).

2. Xenoenxerto de carcinoma ovariano humano A2780Tax (tubulina mutante)

A2780 é um modelo de carcinoma de ovário humano resistente ao paclitaxel. Foi derivado da linhagem A2789 original sensível pela co-incubação das células com paclitaxel e verapamil, um agente MDR-reverso. Seu mecanismo de resistência foi demonstrado como sendo não-MDR relacionado e é atribuído a mutação no gene que codifica a proteína beta-tubulina [2].

O composto 1 administrado a camundongos portadores de tumores determinados com um programa a cada 2 dias x 5 produziu 2,5 LCK em sua dose máxima tolerada (MTD) (6,3 mg/kg/inj). Em comparação, o paclitaxel IV produziu 0,8 LCK em sua MTD. O composto 1 foi significativamente melhor do que o paclitaxel neste teste (Tabela 6).

3. Xenoenxerto de carcinoma de cólon humano HCT116/VM46 (multi-droga resistente).

HCT116/M46 é um carcinoma de cólon MDR-resistente desenvolvido a partir da linhagem original sensível HCT116. HT116/VM46 com crescimento em camundongos lisos in vivo, demonstrou consistentemente alta resistência ao paclitaxel (tabela 5). Em 12 estudos consecutivos com paclitaxel, em sua dose máxima tolerada (MTD), produziu LCKs que variaram de 0-0,9 (média = 0,35 LCK).

O tratamento com o composto 1 de tumores determinados HCT116/VM46 em camundongos utilizando um programa de a cada 2 dias x 5 produziu efeitos anti-tumorais significativos. Em sua ótima dose (4,8-6,3 mg/kg/inj) em três estudos separados, o composto 1 produziu 3,1, 1,3 e 1,8 LCKs. Ao contrário, o paclitaxel IV testado simultaneamente produziu 0,4 e 0,7 LCK, respectivamente, em sua MTD nos primeiros dois testes.

4. Modelo Pat-21 de câncer de mama resistente ao paclitaxel derivado clinicamente

Pat-21 é um modelo tumoral resistente ao paclitaxel de primeira passagem desenvolvido a partir de uma biópsia tumoral de um paciente com câncer de mama com doença metastática que recebeu e falhou na resposta, uma terapia experimental consistindo de 5 ciclos de TAXOL® combinados com o agente multi-droga de resistência reversa, dexverapamil. Anterior a terapia com TAXOL®, o paciente também recebeu quimioterapia compreendendo adriamicina, citoxano, metotrexato e 5-FU. As biópsias tumorais foram obtidas após a finalização da terapia com TAXOL®.

Pat-21 cresce com uma taxa relativamente lenta em camundongos lisos, dobrando de volume aproximadamente a cada 3 semanas. Para a avaliação da eficácia antitumoral, dois cursos do composto 1 ou paclitaxel foram administrados a camundongos portadores de tumores Pat-21 determinados para aproximadamente 100 mg. Os um intervalo de 3 semanas.

dois cursos foram separados por

Cada curso consistiu de 3 doses fornecidas a cada 4 dias. O paclitaxel foi completamente inativo contra este modelo produzindo 0,3 de LCK em sua MTD de 36 mg/kg/ing. Ao contrário, o composto 1 foi significativamente ativo, geralmente produzindo valor LCK de >1,5 LCK com sua dose ótima de 10 mg/kg/inj.

5. Modelo de sarcoma murino M5076

M5076 é um fibrosarcoma de camundongo que é inerentemente refratário ao paclitaxel in vivo. O composto 1 testado IV em um programa a cada 2 dias x 5 comparado com tumores sc não determinados, permaneceu inativo em sua MTD de 8,4 mg/kg/inj, produzindo 0,5 e 0,7 LCKs, respectivamente, em dois experimentos distintos (tabela 6). O paclitaxel IV testado simultaneamente fornecido em seu ótimo programa foi também inativo e produziu 0,1 e 0,5 LCK, respectivamente.

Em um estudo separado, o composto 1 foi administrado em um programa de dose de menor freqüência (isto é, a cada 4 dias x 3) e demonstrou uma melhora na atividade antitumoral, produzindo 1,0 LCK com MTD de 24

TABELA	5. Características do modelo do	tumor
Tumor	Histologia	Sensibilidade	Mecanismo(s)
		ao Paclitaxel	de Resistência
Pat-7	Ovário	Resistente¹	MDR, MRP²
A2780Tax	Ovário	Resistente	Mutação
			na tubilina
HCT116/VM46	Cólon	Rô S X S t· θΙΤ t O	MDR
Pat-21	Mama	Resistente¹	Desconhecido
A2780	Ovário	Sensível	-
HCT116	Cólon	Sensível	-
LS174T	Cólon	Sensível	-
Murino
M5076	Fibrosarcoma	Resistente	Desconhecido
			non-MDR

¹ Resistência clínica ao TAXOL ² MRP = Resistência multi-droga relacionada à proteína.

TABELA	6. Atividade pré-clínica antitumoral do compostol e paclitaxel em relação aos tumores resistentes ao paclitaxel
Tumor	Composto 1 ___________________________________ Paclitaxel Experimento Programa OD¹ LCK² LCK²' ³ N° Rt. , (mg/kg) (curas/ total)

Tumores Humanos - em camundongos lisos

Pat-7

R4 03 IV, q2dx5 4,3 2,1 0,6

	8	IV,	q2dx5	6,3	4,5	1,3
	12	IV,	q2dx5	6,3	2,1
A2780Tax	12	IV,	q2dx5	6,3	2,5	0,8
HCTVM46	32	IV,	q2dx5	4,8	3,1	0,4
	33	IV,	q2dx5	4,8	1,3	0,7
	35	IV,	q2dx5	6,3	1,5	ND⁴
	35	iv,	q4dx3	16	2,0	ND⁴

Histórico das respostas(0,4, do Paclitaxel em 120,7, estudos consecutivos0,4,

0,3,

0,0,

0,2,

0,1,

0,9,

0,3,

0,3)

Pat-21 R667 IV, q4dx3; 10 >1,5⁵ 0,3

41,6

Tumores Humanos - em ratos lisos

Pat-7 15 IV, q8dx2 3 >5 2,2 (4/6)(0/6)

Tumores Murinos

M5076 159	IV, q2dx5 8,4 0,5 0,1
162	IV, q2dx5 8,4 0,7 0,5
172	IV, q4dx3 24 1,0 ND

¹ OD, dose ótima ou dose tolerada (MTD) ² LCK, log total da morte celular log. Quando 50% ou mais dos animais tratados são curados, o valor de LCK é calculado com base nas medições

de tumor da última	data anterior a cura é declarada e representa uma
estimativa mínima de	LCK (>). Em tais casos, as taxas de cura são também

descritas.

³ LCK são para dose

ótima (dose variou de 24-36 mg/kg) , ou dose maior

testada se inativa.

⁴ NR, não realizado.

⁵. Estudo ainda em andamento. A análise provisória baseada nos dados de medição do tumor na última data disponível (6/8/99) indica inibição do crescimento do tumor para no mínimo 1,5 LCK.

Modelos de tumores sensíveis ao Paclitaxel

1. Modelo de carcinoma ovariano humano A278 0

A27809 é um modelo de carcinoma ovariano humano de crescimento rápido que é altamente sensível ao paclitaxel (Tabela 6). Camundongos lisos com tumores determinados foram tratados com o composto 1 utilizando o programa otimizado com paclitaxel com administração IV a cada 2 dias por um total de 5 injeções (a cada 2 dias x 5) . Na dose máxima tolerada (6,3 mg/kg/inj. , o composto 1 foi altamente ativo 10 produzindo >4,8 e 3,1 LCKs em três experimentos distintos. O paclitaxel IV testado simultaneamente, incluído nos primeiros dois estudos, produziu 2 e 3,5 LCKs, respectivamente em sua dose ótima.

A2780 desenvolvido em ratos lisos também foi utilizado. O composto 1 testado em sua MTD (1,2 mg/kg/inj) e administrado a cada 2 dias x 5 foi considerado inativo quando testado (0,3 LCK). O paclitaxel IV testado simultaneamente foi altamente ativo, produzindo 5 das 7 curas neste estudo. Estudos subsequentes em camundongos com os tumores A2780 demonstraram que doses menos frequentes do composto 1 foram melhor toleradas e produziram uma atividade melhorada (ver tabela 6). Conseqüentemente, a falta de atividade em ratos lisos para o composto 1 pode ser causada ao programa de tratamento sub-ótimo empregado. Por exemplo, em estudos subseqüentes utilizando tumores Pat-7 resistentes ao paclitaxel, o composto 1 demonstrou possuir atividade antitumoral significativa quando administrado em um programa de dose menos frequente a cada 8 dias x 2 (tabela 6).

2. Modelo de carcinoma de cólon humano HCT116

O HCT116 é um modelo de carcinoma de cólon humano que demonstrou ser altamente sensível ao paclitaxel in vivo. O composto 1 administrado a camundongos lisos com tumores HCT116 determinados (-100 mg) foi altamente ativo, produzindo >6,3 LCKs e um grande número de curas em três tipos diferentes de programas de tratamento: a cada 2 dias x 5 doses, a cada 4 dias x 3 e a cada 8 dias x 2 (Tabela 7) . Entretanto, estas atividades apesar de impressivas foram comparáveis, mas não superiores aos resultados históricos

1X( obtidos pelo paclitaxel fornecido em sua dose e programa ótimos.

3. LS174T

LS174T é um modelo de carcinoma de cólon humano conhecido como sendo sensível ao paclitaxel. O composto 1 administrado a cada 4 dias x 3 produziu 2,3 LCKs em sua MTD de 16 mg/kg/inj. Em comparação, o paclitaxel iv testado simultaneamente produziu 2,0 LCK em sua dose ótima de 36 mg/kg/inj, administrada a cada 2 dias por 5 doses (tabela

7) .

TABELA 7. Atividade pré-clínica antitumoral do composto 1 e

Paclitaxel em comparaçao com os tumores sensíveis ao paclitaxel

Composto 1 __________________________________ Paclitaxel

Tumor	Experimento N	Programa Rt. ,	OD¹ (mg/kg)	LCK² (curas/ total)	LCK²' ³
Tumores	Humanos - em camundongos lisos
A2780	89	IV, q2dx5	6,3	>4,8	2
				(3/7)
	92	IV, q2dx5	6,3	2	3,5
	111	IV, q2dx5	4,8	3,1	ND⁴
	115	IV, q2dx5	6,3	2,4	ND
	115	IV, q4dx3	16	>5,3	ND

HCT116	52	IV,	q2dx5	6,3	>6,3	ND
					(4/8)
	52	IV,	q4dx3	10	>6,3	ND
					(5/8)
	52	IV,	q8dx2	24	>6,3	ND
					(8/8)
LS174T	R578	IV,	q4dx3	16	2,3	2,0

¹ OD, dose ótima ou dose tolerada (MTD) ² LCK, log total da morte celular log. Quando 50% ou mais dos animais tratados são curados, o valor de LCK é calculado com base nas medições de tumor da última data anterior a cura é declarada e representa uma estimativa mínima de LCK (>). Em tais casos, as taxas de cura são também descritas.

³ LCK são para dose ótima (dose variou de 24-36 mg/kg) , ou dose maior testada se inativa.

⁴ NR, não realizado.

EXEMPLO 5

Atividade antitumoral através da administração por via oral

O fato do composto 1 ser significativamente mais estável em pH neutro do que em pH baixo fornece ímpeto para a avaliação do Composto 1 pela administração oral (PO) em um veículo tampão de pH (fosfato de potássio 0,25 M, pH 8,0) .

Utilizando um programa a cada 2 dias x 5, o Composto 1 foi altamente ativo oralmente contra o modelo de carcinoma ovariano humano Pat-7 (Tabela 8) . Em dois experimentos orais 10 distintos, o Composto 1 produziu 3,1 e 2,5 LCKS na sua MTD (Figura 5 e Tabela 8). Em comparação, paclitaxel IV testado simultaneamente produziu 1,3 e 1,2 LCK, respectivamente na sua dosagem e seu programa ótimo.

No modelo de carcinoma de cólon humano HCT116, o

Composto 1 administrado oralmente curou sete dos oito camundongos quando administrado a uma dose de 90 mg/kg/adm, a cada 2 dias por 5 doses. Notar que esse grau de atividade anti-tumor foi equivalente aquele alcançado pelo regime IV testado concomitantemente (a cada 8 dias x 2, ver Tabela 6).

________________________________________________________________________

TABELA 8. Atividade antitumoral do composto 1 oral e paclitaxel IV

Composto 1 (PO)

Paclitaxel (IV)

Tumor	Experimento N°	Programa Rt. ,	OD^l (mg/kg)	LCK² (curas/ total)	LCK²' ³
Tumores Humanos - em camundongos lisos
Pat-7	8	PO, q2dx5	60	3,1	1,3
	9	PO, q2dx5	80	2,5	1,2
HCT116	52	PO, q2dx5	90	>6,3 (7/8)	ND⁴

¹ OD, dose ótima ou dose tolerada (MTD) ² LCK, log total da morte celular log. Quando 50% ou mais dos animais tratados são curados, o valor de LCK é calculado com base nas medições de tumor da última data anterior a cura é declarada e representa uma estimativa mínima de LCK (>) . Em tais casos, as taxas de cura são também descritas.

⁴ NR, não realizado.

Dependência do Programa

Vários estudos foram conduzidos para avaliar a dependência do programa do Composto 1. No primeiro estudo, empregando os tumores A2780, o Composto 1 foi administrado aos camundongos através de dois diferentes programas: (1) o programa tradicional (otimizado para paclitaxel) a cada 2 dias x 5, e (2) o programa menos freqüente a cada 4 dias x 3. Embora ambos os programas fossem ativos, produzindo 2,4 e > 5,3 LCKs, respectivamente, o programa de dosagem menos freqüente permite um nível de dosagem maior sendo fornecido (MTD = 16 mg/kg/inj) e realizado muito melhor do que o programa mais freqüente (MTD = 6,3 mg/kg/in) (Figura 6 e Tabela 9) .

Em um segundo estudo, no modelo de carcinoma de cólon humano HCT116, três programas diferentes de tratamento foram utilizados: q2dx5, q4dx3, assim como q8dx2. Todos os tratamentos foram IV e os tumores foram estipulados para 100 mg no início do tratamento. Melhores resultados foram obtidos com o programa de tratamento q8dx2. Na dose ótima de 24 mg/kg/inj, o Composto 1 produziu 100% de curas (8 dos 8 camundongos). Os programas q4dx3 e q2dx5 produziram curas em 5 de 8 e 4 de 8 camundongos, respectivamente (Tabela 9).

Em dois outros estudos, empregando os tumores Pat7 e HCT116/VM46, a eficácia dos dois programas de tratamento IV foram comparados: q2dx5 e q4dx3. Em ambos os casos, os dois regimes produziram essencialmente atividades antitumoral equivalentes (Tabela 9).

TABELA 9.	Dependência do programa da atividade antitumoral do composto
Tumor	Experimento N°	Composto 1 (PO)
Programa Rt. ,	OD¹ (mg/kg)	LCK² (curas/total)
A2780	115	IV, q2dx5	6,3	2,4 (0/8)
	115	IV, q4dx3	16	>5,3 (3/7)
HCT116	52	IV, q2dx5	6,3	>6,3 (4/8)
	52	IV, q4dx3	10	>6,3 (5/8)
	52	IV, q8dx2	24	>6,3 (8/8)
Pat-7	12	IV, q2dx5	6,3	2,1
	12	IV, q4dx3	15	1,7
HCT116/VM46	35	IV, q2dx5	6,3	1,8
	35	IV, q4dx3	16	2,0

O Composto 1 possui atividade antitumoral claramente demonstrada superior ao paclitaxel em cinco tumores resistentes ao paclitaxel - quatro xeno-enxertos tumorais humanos e um tumor murino: o carcinoma ovariano Pat-7 resistente ao paclitaxel clinicamente derivado; o carcinoma ovariano A2780Tax que é resistente ao paclitaxel por causa da mutação da tubulina; o carcinoma de cólon HCT115/VM467 MDR, o carcinoma de mama Pat-21 resistente ao paclitaxel clinicamente derivado; e o fibrosarcoma M5076 murino. Contra três xeno-enxertos de tumores humanos sensíveis ao paclitaxel, o Composto 1 produziu atividade antitumoral equivalente ao paclitaxel: carcinoma ovariano humano A2780; carcinoma de cólon humano HCT116 e LS174T. Adicionalmente, o Composto 1 é oralmente ativo, produzindo atividade antitumoral através da via oral que é equivalente a produzida através da administração da droga IV em dois xeno-enxertos de tumor humano diferentes.

EXEMPLO 6

Agentes antiproliferativos em combinação com os compostos da invenção atuam sinergisticamente para exterminar as células tumorais em xeno-enxertos de tumor humano

O sinergismo terapêutico foi também claramente demonstrado com a combinação do Composto 1 e Composto 2 in vivo nos xeno-enxertos HCT/VM46 de carcinoma de cólon humano resistentes a multidroga. Ambos o Composto 1 e o Composto 2 possuem atividade antitumoral modesta nesse modelo como um tratamento com agente simples (Fig. 7) . Ambos os agentes causaram mais do que 1 LCK de resposta tumoral (LCK de 1,6 e 1,1, respectivamente) mas não induziram a cura do tumor. Contudo, quando os dois agentes foram administrados em combinação (Composto 1 seguido do Composto 2 24 horas mais tarde), uma melhora dramática na atividade antitumoral foi observada. Notavelmente, um aumento altamente significativo no retardamento do crescimento do tumor (LCK de 3,7) incluindo efeitos curativos melhorados foram observados em 3 dos 7 camundongos (Fig. 7) .

A dependência da seqüência da combinação foi demonstrada. Quando o tratamento com o Composto 2 foi administrado 24 horas antes do Composto 1, nenhum sinergismo terapêutico foi observado (Fig. 8), somente com a combinação assim como com o Composto 1 fornecido sozinho.

EXEMPLO 7

Estudos Farmacológicos do Composto 1 sozinho e em combinação com outros agentes antineoplásicos em pacientes com câncer avançado

Fornecidos os efeitos citotoxicos do Composto 1 ambos in vivo e in vitro, os ensaios clínicos fase I estão em andamento para determinar a toxicidade em pacientes com câncer avançado. As pacientes possuindo câncer ovariano peritoneal, carcinoma de célula pulmonar grande, melanoma e um cancer primário desconhecido foram determinados para uma resposta objetiva. O Composto 1 foi fornecido em doses gradativas que variaram de 7,4 mg/m² a 65 mg/m². Esses estudos revelaram o MTD. A dose recomendada para a para os ensaios clínicos da Fase II é de 50 mg/m² utilizando um programa semanal q³.

O Composto 1 é também determinado nos ensaios clínicos de Fase I em combinação com outros agentes quimioterápicos. O composto 1 será administrado com uma dose inicial de 30 mg/m² em combinação com carboplatina a 6 AUC utilizando programa semanal q³. Outros estudos são realizados para determinar a eficácia da administração combinada do Composto 1 a 3 0 mg/m² e doxorrubicina a 50 mg/m² utilizando um programa semanal q³. A combinação de regimes quimioterápicos onde o Composto 1 a 30 mg/m² é combinado com CPT-11 a 150 mg/m² estão também em andamento.

O composto 1 é também avaliado nos estudos clínicos de Fase II em pacientes com câncer que não responderam ao regimes de tratamento utilizando taxanos, antraciclinas, platina, e 5 FU em combinação com CPT-11. Nesses estudos, o composto 1 será administrado utilizando um regime de dosagem consistindo de infusão intravenosa de 50 mg/m² por 1 hora a cada três semanas por 18 ciclos (PR e SD) ou 4 ciclos após CR.

REFERÊNCIAS

1. Long BH, et al. , Mechanisms of resistance to etoposide and teniposide in acquired resistant human colon and lung carcinoma cell lines. Cancer Research, 1991. 51:

5275-5284.

2. Giannakakou P, et al.,

Paditaxel-resistant human ovarian cancer cells have mutant beta-tubulins that exhibit impaired paclitaxel-driven polymerization. J. Biol, chem., 1997. 272(27): 17118-25.

3. Riss TL, et al. Comparison of MTT, XTT, and a novel tetrazolium compound MTS for in vitro proliferation and chernoserxsitivity assays. Molecular Biology of the CelJ., 1992. 3 (suppl.): 184a.

4. Stephens TC, Steel GG. The evaluation of combinations of cytotoxic drugs and radiation: Isobolograms and therapeutic synergism. In, Rodent tumor models in experimental cancer therapy, pp. 248. Ed. Robert F. Kaliman. Pergamon Press, NY.

5. Long BH, Fairchild CR. Paclitaxel inhibits progression of mitotic cells to G(l) phase by interference with spindle formation without affecting other microtubule functions during anaphase and telophase. Cancer Research, 1994. 54(16): 4355-4361.

6. Williams, RC, Lee, JC. Preparation of tubulin from brain. Methods in Enzymology, 1982. 85(Part D) : 376385 .

7. Gehan, GA. A generalized Wilcoxon test for comparing arbitrarily singly-censored samples. Biometrika, 1985. 52: 203-233.

A presente invenção não está limitada às modalidades descritas especificamente acima, mas é capaz de variação e modificação sem se afastar do escopo reivindicações em anexo.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Uso de (1) capecitabina e (2) um composto (1) apresentando a fórmula

ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis,

5 CARACTERIZADO pelo fato de ser na fabricação de medicamento para o tratamento de tumores cancerosos sólidos.

2. Uso de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de ser no tratamento de tumores refratários.

10

3. Kit para o tratamento de câncer, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende, em formas separadas, (1) capecitabina e (2) um composto (1) apresentando a fórmula como definida na reivindicação 1, e um veiculo farmaceuticamente aceitável.

15

4. Kit de acordo com a reivindicação 3,

CARACTERIZADO pelo fato de que é para o tratamento de tumores cancerosos sólidos.

5. Kit de acordo com a reivindicação 3, CARACTERIZADO pelo fato de que é para o tratamento de tumores

Petição 870190080272, de 19/08/2019, pág. 9/47 refratários.

6. Kit, de acordo com a reivindicação 3, CARACTERIZADO pelo fato de que o sal farmaceuticamente aceitável é selecionado do grupo que consiste no sal

5 cloridrato, do sal do ácido metanossulfônico e do sal do ácido trifluoracético.