BR122018006081B1

BR122018006081B1 - Método de produção de compostos A-87774 ou sal dos mesmos, agroquímico, herbicida e regulador de crescimento de plantas

Info

Publication number: BR122018006081B1
Application number: BR122018006081-6A
Authority: BR
Inventors: Yoshio Shigematsu; Yoshiko Sugie; Masaaki Kizuka
Original assignee: Mitsui Chemicals Agro, Inc.
Priority date: 2009-08-18
Filing date: 2010-08-13
Publication date: 2019-03-19
Also published as: BR112012003724A2; CA2771400C; EP2468879A1; CN102482695A; CA2771400A1; JP2011078407A; RU2012110247A; RU2545403C2; AU2010285723A1; US8563266B2; BR112012003724B1; US20120149575A1; WO2011021580A1; ES2537416T3; EP2468879A4; EP2468879B1; BR112012003724A8; AU2010285723B2; JP5694708B2; CN102482695B

Abstract

são fornecidos novos compostos a-87774 possuindo uma atividade herbicida ou uma atividade reguladora do crescimento de plantas ou um sal dos mesmos, um microrganismo que produz os mesmos, um método de produção dos mesmos, um agroquímico (em particular, herbicida ou regulador do crescimento de plantas) contendo o mesmo como um ingrediente ativo, um método ara usar o mesmo, e uma cultura do microorganismo.

Description

MÉTODO DE PRODUÇÃO DE COMPOSTOS A-87774 OU SAL DOS MESMOS, AGROQUÍMICO, HERBICIDA E REGULADOR DE CRESCIMENTO DE PLANTAS

Dividido do caso BR 112012003724-2, depositado em 13/08/2010 Área técnica [001] A presente invenção diz respeito a compostos

A-87774 ou um sal dos mesmos, um microorganismo que produz os mesmos, um método de produção dos mesmos, um agroquímico (em particular um herbicida, ou regulador de crescimento da planta) contendo o mesmo como um ingrediente ativo, um método para usar o mesmo, e um produto de cultura do microorganismo. Fundamentos da técnica [002] Microorganismos produzem várias substâncias fisiologicamente ativas, e uma parte deles tem sido utilizada de forma eficaz para a melhoria da produtividade no campo da agricultura. Por exemplo, milbemicinas, as avermectinas, e espinosinas têm sido postas em uso prático como inseticidas, e blastcidina e kasugamicina como fungicidas.

[003] Por outro lado, no campo de herbicidas, bialafos tem sido comercializado.

[004] Metabólitos de microrganismos, quando usados como agroquímicos, tem uma vantagem de serem facilmente degradados no ambiente, e esta vantagem é considerada como sendo uma propriedade desejável que os produtos agroquímicos futuros devem ter, considerando-se a carga ambiental. No entanto, nenhum composto tem sido colocado em uso prático exceto os estabelecidos acima como um composto tendo uma atividade herbicida, e tem havido a necessidade de se produzir uma nova substância ativa.

Sumário da Invenção

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2/35 [005] Problemas a serem resolvidos pela invenção [00 6] Um objetivo da invenção é fornecer novos compostos A-87774 possuindo uma atividade herbicida ou uma atividade de regulação do crescimento da planta ou de um sal dos mesmos, um microrganismo que produz os mesmos, um método de produção dos mesmos, um agroquímico (em particular herbicida ou regulador do crescimento de plantas) contendo os mesmos como um ingrediente ativo, um método para usar os mesmos, e um produto de cultura do microorganismo.

Meios de resolver os problemas [007] Os presentes inventores, à luz dos problemas acima mencionados, têm intensivamente conduzido pesquisas sobre os metabólitos de microorganismos, e, como resultado, descobriram que compostos com atividade herbicida extremamente forte estão presentes em uma solução de cultura de microrganismos pertencentes ao Streptomyces, o que levou à conclusão da presente invenção.

[008] Isto é, a presente invenção proporciona compostos A-87774 representados por A-87774-1, A-87774-2 ou A-87774-3 ou um sal dos mesmos, um microorganismo que produz o composto, um método de produção do composto, um agroquímico (em particular, herbicida ou regulador de crescimento da planta) contendo o composto como um ingrediente ativo, um método para a remoção de ervas daninhas, utilizando o composto e um método para regular o crescimento da planta, um produto de cultura obtida através da cultura de microorganismos, e um agroquímico que contém o produto de cultura.

Propriedades da Invenção [009] Os novos Compostos A-87774 da presente

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3/35 invenção têm uma excelente ação herbicida ou ação reguladora no crescimento da planta, e é útil como um agroquímico (em particular, herbicida ou um regulador do crescimento da planta).

Breve Descrição dos Desenhos

[010]	A	Fig. 1	mostra o espectro	de	ressonância
magnética	nuclear	1H do	composto A-87774-1.
[011]	A	Fig. 2	mostra o espectro	de	ressonância
magnética	nuclear	13C do	composto A-87774-1	•
[012]	A	Fig. 3	mostra o espectro	de	absorção no
infravermelho do	composto A-87774-1.
[013]	A	Fig. 4	mostra o espectro	de	ressonância
magnética	nuclear	1H do	composto A-87774-2.
[014]	A	Fig. 5	mostra o espectro	de	ressonância
magnética	nuclear	13C do	composto A-87774-2	•
[015]	A	Fig. 6	mostra o espectro	de	absorção no
infravermelho do	composto A-87774-2.
[016]	A	Fig. 7	mostra o espectro	de	ressonância
magnética	nuclear	1H do	composto A-87774-3.
[017]	A	Fig. 8	mostra o espectro	de	ressonância
magnética	nuclear	13C do	composto A-87774-3	•
[018]	A	Fig. 9	mostra o espectro	de	absorção no
infravermelho do	composto A-87774-3.
Modo	de realização	da invenção
[019]	0	novo	composto A-87774-	1	da presente

invenção tem as seguintes propriedades:

1) Peso molecular: 668,

2) a fórmula molecular: C18H29N4O17PS2,

3) Espectro de ressonância Magnética nuclear ^-H (ôp_pm) quando medido em água deuterada: 5,86 (1H, d, J=5,9 Hz) ,

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4/35

5,59 (1Η, d, J=ll,0 Hz), 4,56 (1H, q, J6,9Hz), 4.42 (1H, dd,

J=ll.	.2, 2	.9 Hz), 4.38 (1H, dd, J=11.2, 3	.7 Hz),	4 .	30-	-4 .	27
(2H,	m) ,	4.24-4.23 (2H, m), 4.07 (1H, d,	J=10.1	Hz	) ,	3.	97
(1H,	dd,	J=12.7, 2.1 Hz), 3.61 (1H, dd,	J=11.3,	10	.3	Hz	) ,
3.55	(1H,	m) , 3.52 (1H, m), 3.33 (1H, dd,	J=11.4	, 1	.8	Hz	) ,
2.72	(1H,	dd, J=7.0, 6.6 Hz), 1.42 (3H, d,	J=6.9	Hz)	r

4) Espectro de ressonância Magnética nuclear ¹³C (ôp_pm) , quando medido em água deuterada: 178,6 (s), 174,0 (s), 154,8

(s) ,	91,	4	(s) ,	89,2	(d) ,	87,6	(d) ,	80,8	(d) ,	74,8	(d) ,	73,	5
(d) ,	70,	2	(d) ,	70,2	(d) ,	70,0	(t) ,	63,7	(d) ,	60,6	(d) ,	53,	8
(t) ,	36,	5	(t) ,	30,3	( t)	, 18,3	(q)	r

5) Espectro de Absorção de Infravermelhos (V maxCm 1) r quando medido por disco de KBr: 3423, 1703, 1639, 1487, 1450, 1406, 1383, 1339, 1258, 1217, 1184, 1088, 1067, 937, 899,

827, 536,

6) Rotação óptica específica: [OC]d²⁴ +40,0° (c, 0.22, em H₂O) .

[020] O novo composto A-87774-2 da presente invenção tem as seguintes propriedades:

1) Peso molecular: 666,

2) a fórmula molecular: Ci8H₂7N4Oi7PS2,

3) Espectro de ressonância Magnética nuclear ¹H (ôp_pm) , quando medido em água deuterada: 77.73 (1H, d, J=8.1 Hz),

5.91 (1H, d, J=2.4 Hz), 5.90 (1H, d, J=8.1 Hz), 5.60 (1H, d, J=10.8 Hz), 4.57 (1H, q, J=6.9 Hz), 4.55 (1H, d, J=11.4 Hz), 4.46 (1H, dd, J=11.2, 2.2 Hz), 4.34-4.32 (3H, m), 4.22 (1H, d, J=12.6 Hz), 4.07 (1H, d, J=10.1 Hz), 3.96 (1H, dd, J=12.6, 1.7 Hz), 3.61 (1H, dd, J=11.4, 10.1 Hz), 3.32 (1H, d, J=11.4 Hz), 1.42 (3H, d, J=6.9 Hz),

4) Espectro de ressonância Magnética nuclear ¹³C (ôp_pm) ,

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5/35 quando medido em água deuterada: 178.6 (s), 166.3 (s) , 151.8

(s) ,	141.7 (d)	, 102.8 (d), 91.3 (s),	89.3	(d) ,	89.2	(d)
81.5	(d), 74.8	(d), 73.5 (d), 73.4 (d),	69.5	(d) ,	69.4	(t)
63.7	(d), 60.6	(d), 53.8 (t), 18.3 (q),

5) Espectro de Absorção de Infravermelhos (V maxCm 1) y quando medido por disco de KBr: 3399, 1706, 1455, 1405, 1346, 1266, 1185, 1087, 1067, 934, 900, 826, 534, e

6) Rotação óptica especifica: [a] d²⁴ +47,2 ° (c, 1.0, em

H₂O) .

[021] O novo composto A-87774-3 da presente invenção tem as seguintes propriedades:

1) Peso molecular: 828,

2) a fórmula molecular: C24H37N4O22PS2,

3) Espectro de ressonância Magnética nuclear ¹H (óp_pm) quando medido em água deuterada: 7.7 4 (1H, d, J=8.1 Hz) ,

5.94 (1H, d, J=5.3 Hz), 5.91 (1H, d, J=8.1 Hz), 5.60 (1H, d, J=11.0 Hz), 5.01 (1H, br.s), 4.57 (1H, q, J=6.9 Hz) , 4.57 (1H, m), 4.50-4.48 (3H, m), 4.41 (1H, m), 4.22 (1H, d, J=12.5

Hz), 4.07 (1H, d, J=10.1 Hz), 4.04 (1H, dd, J=3.3, 1.8 Hz),

3.96 (1H, dd, J=12.5, 1.3 Hz), 3.87 (1H, d, J=12.3 Hz), 3.85 (1H, m) , 3.71 (1H, dd, J=12.3, 4.4 Hz) , 3.63-3.61 (3H, m) ,

3.32 (1H, d, J=11.4 Hz), 1.42 (3H, d, J=6.9 Hz),

4) Espectro de ressonância Magnética nuclear ¹³C (ôp_pm) , quando medido em água deuterada: 178.6 (s), 166.3 (s), 151.8

(s) ,	141.	6 (d)	, 102	:.9 (d	) ,	100.3	(d) ,	91.3	(s) ,	89.2	(d)
89.li	(d),	80.2	(d) ,	74.8	(d)	, 74.1	(d) ,	73.8	(d) ,	73.5	(d)
72.2	(d) ,	70.3	(d) ,	69.9	(d)	, 69.3	(t) ,	66.8	(d) ,	63.7	(d)
61.0	(t) ,	60.6	(d) ,	53.7	(t)	, 18.3	(q),

5) Espectro de Absorção de Infravermelhos (V maxCITL f quando medido por disco de KBr: 3396, 1705, 1402, 1340, 1265,

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1184, 1090, 1063, 937, 899, 825, 538, e

6) Rotação óptica especifica: [CC]d²⁴ +78,7° (c, 1.0, em

H₂0) [022] Compostos A-87774 podem formar qualquer sal, desde que ele não prejudique a ação herbicida ou a ação de regulação de crescimento da planta dos Compostos A87774. Sais de Compostos A-87774, por exemplo, podem ser sais com um metal alcalino ou um metal alcalino-terroso tal como um sal de sódio, um sal de potássio, um sal de magnésio e um sal de cálcio; sais de amônio, ou sais com uma amina orgânica tal como uma isopropilamina e trietilamina, e de preferência um sal de sódio.

[023] Através da cultura de microrganismos,

Compostos A-87774 da presente invenção podem ser isolados a partir do produto da cultura dos mesmos.

[024] Exemplos de cepas pertencentes a gênero

Streptomyces usadas no método de produção de Compostos A87774 da presente invenção podem incluir Streptomyces sp. Cepa SANK 61805. A característica micológica de cepa SANK 61805 é conforme a seguir. Deve notar-se que a análise taxonômica tal como a propriedade morfológica, as propriedades em vários meios de cultura, a propriedade fisiológica, propriedade quimiotaxonômica e do gene 16S de rRNA da cepa SANK 61805 seguiu o método descrito no Manual Identificação de Actinomicetos (Hosenkin no Bunrui to Dotei) (editado por The Society for Actinomycetes Japan, publicado por Business Center for Academic Societies Japan, 2001).

1. Característica morfológica

A cepa SANK 61805 foi cultivada em um médio agar

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7/35 definido por ISP (International Streptomyces Project) a 28°C durante 14 dias, seguido por observação microscópica. 0 micélio do substrato se alonga bem e ramifica, e apresenta uma cor marrom amarelado pálido, marrom-amarelado a marrom amarelado acinzentado. Ruptura de micélio semelhante à cepa do gênero Nocardia ou alongamento em ziguezague não é observado. Ramos de micélios aéreos simples, e exibem cor branca, marrom acinzentado a marrom amarelado acinzentado. 10 a 50 ou mais das cadeias de esporos são formadas na ponta dos micélios aéreos, e as cadeias de esporos apresentam uma forma linear, ou, em casos raros, uma forma em espiral. Observação com microscópio eletrônico de digitalização mostra estrutura de superfície lisa. O esporo é elíptico e tem um tamanho de 0,4 a 0,8 x 0,8 a l,2pm. Além disso, um órgão especial, tal como esclerócio de ramo trocóide, ou esporângio de micélios aéreos não é observado.

2. Propriedades em vários meios de cultura

Em vários meios de cultura, as propriedades após a cultura a 28°C durante 14 dias são apresentados na Tabela 1. Indicações de tom de cor representam os números de chips de cor no Gráfico de cor padrão (Standard Color Chart) emitido pelo Instituto de Pesquisa de cor do Japão (Japan Color Research Institute) de acordo com o sistema de Munsell.

[Tabela 1]

Tipos de meio	Itens¹’ Propriedades da cepa SANK 61805
Agar de Exrato da	G : Muito bom, elevado, laranja
levedura/extrato de	amarelado opaco (10YR7/8) ^2>
malte (ISP2)	AM : Formada abundantemente,
	aveludado, marrom escuro

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	R SP	: acinzentado(5YR4/2) : Laranja amarelado opaco (10YR7/10) Não produzida
agar de aveia(ISP3)	G	: Muito bom, elevado, incolor
	AM	: Formada abundantemente,
		aveludado, marrom
	R	: acinzentado (5YR5/2)
	SP	: Laranja amarelado opaco
		(10YR7/8)
		Não produzida
Agar de sai	G	: Muito bom, elevado, marrom
inorgânico/amido		amarelado (10YR5/4)
(ISP4)	AM	: Muito bom, aveludado,
	R	: marrom acinzentado (5YR5/2)
	SP	: Marrom amarelado (10YR7/6)
		Não produzida
agar de	G	: Muito bom, elevado, marrom
Glicerina/asparagina		amarelado (10YR5/4)
(ISP5)	AM	: Muito bom, marrom
	R	: acinzentado (5YR5/2)
	SP	: Laranja amarelado opaco
		(10YR7/8)
		Não produzida
agar de	G	: Não é muito bom, elevado,
Peptona/levedura/		marrom amarelado
ferro (ISP6)	AM	: acinzentado (10YR5/3)
	R	: Not muito bom, white
	SP	: Marrom amarelado
		acinzentado (10YR5/3)

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	Preto
agar de Tirosina (ISP7)	G		Muito bom, elevado, marrom escuro acinzentado(10YR3/1)
	AM		Muito bom, aveludado, cinza
	R		amarronzado (10YR5/2)
	SP		Marrom escuro acinzentado(10YR2/1) Preto
agar de	G	•	Não é muito bom, elevado,
Sacarose/nitrato	AM	•	incolor Não é muito bom, aveludado,
	R		marrom amarelado
	SP		acinzentado (10YR5/3) Incolor Não produzida
agar de	G		Não é muito bom, elevado,
Glicose/asparagina	AM	í	incolor Não é muito bom, aveludado,
	R		marrom amarelado
	SP		acinzentado (10YR5/3) Incolor Não produzida
agar nutritivo (Difco)	G	í	Não é muito bom, plano, marrom amarelado pálido
	AM		(2.5Y8/4)
	R		não formada
	SP		Pale marrom amarelado (2.5Y8/4) Não produzida
Agar de extrato de	G		não é muito bom, elevado,

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10/35

batata/extrato de	marrom amarelado pálido
cenoura AM	: (10YR7/3) não é muito bom, aveludado,
R	: marrom amarelado
SP	: acinzentado (10YR5/3) Pale marrom amarelado (10YR7/3) Não produzida
Agar aquoso G	: Não é bom, plano, cinza amarelado (7.5Y9/2)
AM	: Não é bom, aveludado,
R	marrom amarelado
SP	: acinzentado (10YR5/3) Cinza amarelado (7.5Y9/2) Não produzida

1) G, AM, R e SP significam crescimento, micélios aéreos, lado reverso e pigmento solúvel, respectivamente.

2) As indicações dentro dos parênteses na coluna de

propriedades são indicações de	tom	de cor	de	acordo	com
sistema de Munsell.
3. Propriedade fisiológica
[025] As propriedades	fisiológicas	da	cepa	SANK
61805 observadas por de 2 a 21	dias	após a	cultura à	28°C

são apresentadas na Tabela 2.

[Tabela 2]

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hidrólise do	amido	positiva
Liquefação da	gelatina	negativa
Redução do nitrato	negativa
Peptonização	de leite	negativa
Coagulação do	leite	negativa
Produtividade	de pigmento semelhante
à melanina	(meio 1)	positiva
	(meio 2) ²⁾	positiva
	(meio 3) ³⁾	positiva

degradabilida.de do substrato

Caseina tirosina xantina negativa positiva negativa faixa de temperatura do crescimento (meio 4)⁴⁾10-48°C

Temperatura adequado de crescimento (meio 4) 24-40°C

Tolerância ao Sal

7%

1) Meio 1 denota triptona/ extrato de levedura/ caldo (ISP1).

2)	Meio 2 denota	ágar	de	peptona /	extrato	de
levedura	/ ferro (ISP6).
3)	Meio 3 denota	agar de	tirosina (ISP7)
4)	Meio 4 denota	agar	de	extrato de	levedura	/

extrato de malte (ISP2).

[026] Adicionalmente, a utilização de fontes de carbono da cepa SANK 61805 observada após a cultura a 28°C durante 14 dias, utilizando meio agar de Pridham-Gottlieb (ISP9) é mostrada na Tabela 3.

[Tabela 3]

D-glicose	+	D-frutose	+
L-arabinose	+	L-rhamnose	+

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12/35

D-xilose	+	Sacarose	-
Inositol	-	Rafinose	+
D-manitol	+	Controle	-

+ significa utilizado, ± significa pouco utilizado e significa não utilizado.

4. Em relação ao componente fúngico [027] A propriedade quimiotaxonômica da cepa SANK

61805 foi investigada de acordo com o Manual de

Identificação de Actinomicetos (Hosenkin no Bunrui to Dotei) [The Society for Actinomycetes Japan (editora), Business Center for Academic Societies Japan, pp 49-82, 2001]. Como resultado, ácido LL-diaminopimélico foi detectado a partir da parede celular, e nenhum padrão característico foi observado como um componente de açúcar em toda a célula. Como espécies moleculares de menaquinona maiores, MK-9 (Ηε) e MK-9 (He) foram detectadas.

5. Análise genética de 16S de rRNA [028] A sequência de base (1325bp) de genes de 16S de rRNA da cepa SANK 61805 foi descodificada, e a pesquisa de banco de dados foi realizada, resultando na cepa SANK 61805 sendo incluída num agrupamento do gênero Streptomyces.

[029] A identificação foi realizada de acordo com os critérios de ISP (Internacional Streptomyces Project), S. A. Waksman, The Actinomycetes (os actinomicetos), vol. 2, R. E. Buchanan e N. E. Gibbons, Bergey's Manual of Determinative Bacteriology (manual de Bergey de bacteriologia determinativa), 8^a edição, 1974, Bergey's Manual of Systematic Bacteriology (Manual de Bergey de Bacteriologia Sistemática), vol. 4, de 1989, e documentos recentes sobre actinomicetos do gênero Streptomyces para determinar que a

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13/35 cepa presente pertence ao gênero Streptomyces entre actinomicetos. Em seguida, a cepa presente foi nomeada como Streptomyces sp. cepa SANK 61805.

[030] A partir dos resultados acima, a cepa presente foi identificada como Streptomyces sp. cepa SANK 61805 (a seguir, na presente especificação, referida como cepa SANK 61805) . Deve notar-se que a cepa presente foi internacionalmente depositada no National Institute of Advanced Industrial Science and Technology International Patent Organism Depositary (Instituto Nacional de Ciência Industrial Avançada e Centro Depositário de Organismo de Patente Internacional) (Endereço: AIST Tsukuba Central No. 6, 1-1-1 Higashi, Tsukuba, Ibaraki, Japão) de 19 de junho de 2007, e o número de depósito do mesmo é FERM BP-10840.

[031] Como bem conhecido na arte, actinomicetos são suscetíveis à mutação na natureza ou por operação artificial (por exemplo, radiação ultravioleta, radiação radioativa, tratamento químico, etc), e cepa SANK 61805 da presente invenção é também suscetível à mutação. A cepa SANK 61805 conforme referida na presente invenção inclui todas as cepas mutantes da mesma. Além disso, estas cepas mutantes também incluem aquelas obtidos por um método genético, por exemplo, recombinação, transdução, transformação, ou semelhante. Isto é, a cepa SANK 61805, que produz o composto A-87774-1, A87774-2 ou A-87774-3 e da cepa mutante da mesma, e as cepas que não podem ser claramente distinguidas a partir da mesma estão todas incluídas na cepa SANK 61805.

[032] Quando da cultura de uma cepa (cepa de produção), que produz Compostos A-87774 da presente invenção, um meio a ser utilizado pode ser um meio que contém

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14/35 adequadamente aqueles selecionados a partir de uma fonte de carbono, uma fonte de nitrogênio, um íon inorgânico e uma fonte orgânica nutritiva, e qualquer um de meio sintético ou natural, pode também ser incluído.

[033] As fontes nutritivas podem ser aquelas que são conhecidas e convencionalmente utilizadas para as cepas de cultura de micetos e actinomicetos, e incluem fontes de carbono, fontes de nitrogênio e sais inorgânicos que podem ser utilizados por microorganismos.

[034] Especificamente, a fonte de carbono pode ser, por exemplo, glicose, frutose, maltose, sacarose, manitol, glicerol, dextrina, aveia, centeio, amido de milho, batata, óleo de farinha de milho, farinha de soja, óleo de semente de algodão, xarope de amido, melaços, óleo de soja, ácido citrico ou ácido tartárico, e pode ser usado sozinho ou em combinação. A fonte de carbono é, em geral, utilizada dentro da, mas não se limita a, faixa de 1 a 10% em peso da quantidade de meio.

[035] Além disso, a fonte de nitrogênio pode ser, em geral, um material contendo proteína ou um hidrolisado do mesmo. A fonte preferível de nitrogênio pode ser, por exemplo, farinha de soja, farelo de trigo, farinha de amendoim, farinha de algodão, leite desnatado, hidrolisado de caseína, farmamina, farinha de peixe, milhocina, peptona, extrato de carne, levedura viva, levedura seca, extrato de levedura, extrato de malte, batata, sulfato de amônio, nitrato de amônio ou nitrato de sódio, e podem ser usados sozinhos ou em combinação. A fonte de nitrogênio é de preferência utilizada dentro do intervalo de 0,2 a 6% em peso da quantidade de meio.

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15/35 [036] Além disso, o sal inorgânico nutritivo pode ser um sal comum capaz de proporcionar íons de sódio, amônio, cálcio, fosfato, sulfato, cloreto ou carbonato. Além disso, o sal inorgânico nutritivo pode também estar em uma quantidade mínima de um metal tal como potássio, cálcio, cobalto, manganês, ferro, zinco, níquel, ou magnésio.

[037] Deve notar-se que, após cultura líquida, um anti-espumante tal como um óleo de silicone, óleo vegetal ou agente tensoativo pode ser usado.

[038] O pH de um meio para cultura das cepas que produzem Compostos A-87774 (cepa de produção, em particular, a cepa SANK 61805) para produzir o composto A-87774-1, A87774-2 ou A-87774-3 é, de preferência de 5,0 a 8,0.

[039] A temperatura de um meio para a produção de Compostos A-87774 pode ser adequadamente modificada dentro de um intervalo no qual uma cepa de produção (cepa de produção, em particular, a cepa SANK 61805) produz uma substância desejada, mas é, de preferência de 22 a 36°C.

[040] Compostos A-87774 podem ser obtidos por cultura aeróbia de uma cepa de produção (em particular, a cepa SANK 61805) , e sua obtenção a partir do produto da cultura. Tal método de cultura pode ser um método de cultura aeróbia que é normalmente utilizado, por exemplo, um método de cultura sólido, um método de cultura de agitação ou um método de cultura de agitação por aeração.

[041] Compostos A-87774 podem ser extraídos, por separação de uma solução de cultura de uma cepa de produção (em particular, a cepa SANK 61805) em um líquido e um componente fúngico, ou sem separação, do filtrado ou solução de cultura, utilizando a propriedade físico-química do mesmo,

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16/35 e é, de preferência extraída após separação em um líquido e um componente fúngico. A separação pode ser realizada, por exemplo, por um método de separação centrífuga ou um método de filtração utilizando terra de diatomáceas como auxiliar de filtração.

[042] Ao extrair Compostos A-87774 a partir de um componente fúngico, uma solução aquosa ou um solvente orgânico solúvel em água é adicionado a um componente fúngico, seguido por agitação e, subsequentemente, a mistura é submetida a, por exemplo, um método de separação centrífuga ou um método de filtração utilizando terra de diatomáceas como auxiliar de filtração para separar uma fase líquida. A partir da fase resultante líquida, um solvente orgânico solúvel em água é destilado (de preferência, separado por destilação sob pressão reduzida) e, subsequentemente, o procedimento semelhante ao do filtrado da solução de cultura abaixo mencionado pode ser realizado para se obter os compostos A-87774-1, A-87774-2 ou A-87774-3. O solvente orgânico solúvel em água para utilização na extração pode ser metanol, etanol, acetona, acetonitrila ou tetrahidrofurano, ou um seu solvente misto, e a razão do solvente orgânico solúvel em água a ser adicionada é de 0 a 95% em volume.

[043] Compostos A-87774 são uma substância solúvel em água, e utilização da propriedade físico-química da mesma permite que ela seja extraída e purificada a partir do filtrado. Como um adsorvente, por exemplo, um carvão ativado, ou um adsorvente sintético é usado. Tal adsorvente sintético, pode ser, por exemplo, séries de HP, tais como Diaion HP-20 (fabricado por Mitsubishi Chemical Corporation) ou séries de

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XAD, tais como Amberlite XAD-2 (fabricado por Organo

Corporation). 0 liquido contendo Compostos A-87774 pode ser passado através da camada de adsorvente como mencionado acima, para remover as impurezas nele contidas por adsorção, ou os

Compostos

A-87774 também podem ser adsorvidos no mesmo de uma vez subsequentemente eluidos com um solvente orgânico.

solvente orgânico de eluição pode ser, por exemplo, um solvente orgânico solúvel em água tal como metanol, etanol, acetona, acetonitrila ou tetra-hidrofurano, e um solvente misto de água e tal solvente orgânico solúvel em água, e, além disso um solvente tendo o pH ajustado pela adição de ácido acético, ácido fórmico ou amônia aquosa pode também ser usado. Além disso, é também possível extrair ou remover impurezas contidas em uma solução aquosa contendo Compostos A-87774, utilizando um solvente orgânico imiscível com água, por exemplo, acetato de etilo, tolueno, clorofórmio, cloreto de metileno, butanol, ou semelhantes, sozinhos ou em combinação, sem o uso de um adsorvente.

[044] A fração de extração de Compostos A-87774 assim obtida pode ser sujeito a um método comum utilizado para a purificação de um composto orgânico para posterior purificação. Tal método de purificação pode ser, por exemplo, adsorção, partição, troca catiônica, troca aniônica, cromatografia em gel de coluna de filtração, cromatografia em camada fina ou cromatografia líquida de alta performance. O carreador para utilização nestas cromatografias pode ser, por exemplo, gel de sílica, alumina, Florisil, celulose, carvão ativado, Dowex 50W, Amberlite CG400, Sephadex LH-20, Sephadex G-25 ou gel de sílica C18, e estes podem ser usados sozinhos ou em combinação em qualquer

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18/35 ordem, para isolar e purificar Compostos A-87774 de forma eficaz.

[045] Compostos A-87774 da presente invenção obtidos a partir de um produto de cultura que pode ser obtido através da cultura de uma cepa de produção (em particular, a cepa SANK 61805) como mencionado acima têm uma excelente atividade herbicida, e assim podem ser usados, como um agroquímico, em particular, como um herbicida, para a remoção de ervas daninhas no campo da agricultura e da horticultura, ervas daninhas em especial na agricultura ou ervas daninhas na plantação de arroz, ao tratar as ervas daninhas ou solo.

[046] Tais ervas daninhas na agricultura podem ser, por exemplo, solanáceas infestantes, como Erva-moura (biack nightshade) e maçã espinho (thorn apple), plantas daninhas malváceas como malva real (velvetleaf) e guanxuma (prickly sida), as ervas daninhas convolvuláceas como glória da manhã alta e corriola do campo (field bindweed), as ervas daninhas amarantáceas como caruru do brejo (livid amaranth) e Carurúgigante (redroot pigweed), ervas daninhas asteráceas como carrapicho comum, ambrosia comum, senécio comum e pulicária (annual fleabane), as ervas daninhas crucíferas, como mostarda indiana e bolsa-de-pastor, ervas daninhas quenopodiáceas como ançarinha branca (common lambsquarters) e figleaved goosefoot (Chenopodium ficifolium), ervas daninhas violáceas como Amor-perfeito-(field pansy), as Saponárias (caryophyllaceous) como morugem (chickweed common), ervas daninhas leguminosas, como trevo branco, jointvetch indiana (Aeschynomene indica) e fedegoso (sicklepod), ervas daninhas Portulacaceaes como beldroega

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19/35 comum, as ervas daninhas Scrophulariaceaes como verônica (Persian speedwell), ervas daninhas Lamiaceae como henbit (Lamium amplexicaul), ervas daninhas euforbiáceas como prostate spurge (Euphorbia supina), ervas daninhas gramineas como capim capivara, Capim do prado (johnsongrass), capim colchão , Pé-de-galinha (goosegrass), Pastinho-de-inverno (bluegrass), water foxtail (Alopecurus geniculatus), aveia selvagem, azevém-anual, azevém, capim-verde e capim-de-burro, ervas daninhas Cyperaceae como tiririca de arroz (rice flatsedge) e tiririca amarela, as ervas daninhas Commelinaceae como trapoeraba asiática (asiatic dayflower), trapoeraba tropical (tropical spiderwort), ou ervas daninhas Equisetaceae como Cavalinha-dos-campos (field horsetail). Além disso, ervas daninhas danosas na plantação de arroz podem ser ervas daninhas gramineas, tais como Jervão (early watergrass), ervas daninhas ciperáceas como Japanese bulrush (Schoenoplectus erectus), tidalmarsh flatsedge (Cyperus serotinus), needle spikerush (Eleocharis acicularis), Kuroguwai (Eleocharis kuroguwai) e Shizui, ervas daninhas Alismataceae como Sagitária (arrowhead) e Sagitária anã (dwarf arrowhead), ou ervas daninhas de folha larga como false pimpernel (Lindernia dúbia), plantaginea, Indian toothcup (Rotala indica) e three-stamen waterwort (Elatine triandra).

[047] A atividade herbicida de Compostos A-87774 sobre estas ervas daninhas pode ser avaliada por tratamento de porções de caule e folhas com uma solução da droga após a germinação das ervas daninhas alvo, ou por tratamento do solo no qual as sementes ou tubérculos das ervas daninhas alvo estão presentes com uma solução da droqa antes da

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20/35 germinação de ervas daninhas alvo, e comparando o crescimento subsequente das ervas daninhas com a do grupo controle não tratado.

[048] Compostos A-87774 podem ser usados não apenas para terras agrícolas e arrozais, mas também para os pomares, campos de amoreiras, terras não-agrícolas e florestas de montanhosas.

[049] Além disso, Compostos A-87774 da presente invenção também têm uma ação de regulação ou supressão do crescimento do mesmo, sem permitir que as plantas sejam secas até à morte, e, assim, é usado como um regulador de crescimento da planta. Um corpo da planta pode ser tratado com Compostos A-87774 num momento e concentração adequados para regular o crescimento das plantas e, assim, eficácias variadas podem ser esperadas, tal como, por exemplo, a prevenção de alojamento devido ao caule reduzido de arroz de arrozal, e número reduzido de cortes, devido à supressão do crescimento da grama.

[050] Compostos A-87774 podem ser aplicados em uma forma de preparação comumente usada como uma preparação agroquímica. Tal preparação pode ser, por exemplo, emulsões, pós molháveis, pós molháveis granulados, produtos químicos solúveis em água, soluções, pós, grânulos, suspensões, e dispersões, dispersões secos, ou cápsulas de materiais poliméricos.

[051] Estas preparações podem conter um aditivo adequado e carreador, e tais aditivo e carreador para estarem contidos em uma preparação sólida podem ser, por exemplo, pós de vegetais tais como farinha de soja, farinha de trigo, amido e celulose cristalina; pós minerais tais como terra de

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21/35 diatomáceas, fosforito, gesso, talco, bentonita, zeólito e argila, ou compostos orgânicos ou inorgânicos, tais como benzoato de sódio, carbonato de cálcio, uréia e sulfato de sódio. Além disso, o aditivo e carreador que devem estar contidos em uma preparação liquida podem ser, por exemplo, óleos vegetais tais como óleo de semente de soja, óleo de colza e óleo de semente de algodão, óleos minerais; hidrocarbonetos aromáticos tais como querosene, xileno e tolueno; amidas, tais como formamida e dimetilformamida; ésteres tais como acetato de etileno glicol e succinato de dietila; cetonas tais como metil-isobutil-cetona e acetona; éteres, tais como etileno glicol etil éter; alcoóis, tais como etileno glicol e isopropanol; sulfóxido de dimetila; tricloroetileno, ou água. Um agente tensoativo pode ser adicionado a fim de tornar a preparação liquida homogênea e estável.

[052] O tensoativo não-iônico adequado pode ser, por exemplo, um aduto de polimero de óxido de etileno de alcoóis alifáticos superiores, tais como éster de ácido graxo de sacarose, laurilo, álcool estearilico e álcool álcool oleilico; um aduto de polimero de óxido de etileno de alquil fenóis tais como o isooctil fenol e nonil fenol; um aduto de óxido de polimero de etileno de alquil naftóis tais como butil naftol e octil naftol; um aduto de óxido de polimero de etileno de ácidos graxos superiores tais como o ácido palmitico, ácido esteárico e ácido oléico; um aduto de polimero de óxido de etileno de mono- ou di-alquil fosfatos, tais como estearil fosfato e dilauril fosfato; um aduto de polimero de óxido de etileno de aminas alifáticas superiores, tais como dodecilamina e estearato de amida; um éster de

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22/35 ácido graxo superior de alcoóis polivalentes, tais como sorbitano, e um aduto de polímero de óxido de etileno dos mesmos, bem como um copolímero de óxido de etileno e óxido de propileno.

[053] O agente tensoativo aniônico apropriado pode ser, por exemplo, sais de éster de ácido alquila sulfúrico, tais como lauril sulfato de sódio e sal de éster amina de ácido oleíl álcool sulfúrico, sais de ácidos graxos, tais como ácido sulfossuccínico de dioctil éster de sódio, oleato de sódio e estearato de sódio; ou sulfonatos de alquilarila tais como isopropilnaftaleno sulfonato de sódio, metileno bisnaftaleno sulfonato de sódio, lignosulfonato de sódio e dodecilbenzenosulfonato de sódio. Além disso, o tensoativo catiônico adequado pode ser, por exemplo, uma amina alifática superior, sais de amônio quaternário, ou sais de alquil piridinio.

[054] O conteúdo de Compostos A-87774 em uma preparação agroquímica depende das formas de dosagem, ou similares, mas tem, por exemplo, 100%, em peso, como o limite superior, e 0,01%, em peso, como o limite inferior, de preferência, de 0,1 a 50 % em peso. A quantidade de Compostos A-87774 a ser aplicada como um agroquímico depende das ervas daninhas alvo, órgãos de plantas alvo a serem regulados no quanto ao seu crescimento, as formas de dosagem, ou o teor em preparações, mas pode ser de 1000 g a 0,1 g por 10 ares (1000 m2), de preferência, dentro da faixa de 100 g a 1 g.

[055] A seguir, a presente invenção será explicada em mais detalhadamente com referência a Exemplos e Exemplos de Teste, mas a presente invenção não é limitada aos mesmos.

[Exemplos]

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Exemplo 1

Separação do composto A-87774-1 e A-87774-2 (1) Cultura da cepa SANK 61805 [056] 80 mL de um meio como mostrado na composição de meio a seguir foram colocados num frasco de Erlenmeyer de 500 mL de volume, e aquecido e esterilizado a 121°C durante 30 minutos. Para cada meio, uma alça de platina de Streptomyces sp. cepa SANK 61805 foi inoculado a partir de uma inclinação, e cultivadas a 2 8°C e a 210 rpm durante 3 dias sob agitação rotativa para gerar uma solução de cultura de semeadura. 80 mL de um meio que tem a mesma composição foram colocados em cada um dos 100 frascos de Erlenmeyer de 500 ml de volume, e aquecido e esterilizado a 121°C por 30 minutos, o qual foi resfriado à temperatura ambiente. Para isso, 0,5 mL da solução de cultura de semeadura acima referida foi inoculada, e cultivada a 28 °C e a 210 rpm, durante 8 dias sob agitação rotativa.

Composição do meio

Amido solúvel40 g

Glicose10 g

Farinha de soja10 g

Extrato de levedura4,5g

Milhocina2,5g

Dihidrogênio fosfato de potássio0,5g fosfato de magnésio Octahidratado0,05g sulfato de zinco Heptahidratado 0,01 g sulfato de níquel Hexahidratado 0,001 g

Cloreto de cobalto hexahidratado 0,001 g

CB-442 (anti-espumante)0,05g

Água da torneira 1000 mL

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24/35 pH antes da esterilização 7,5 (2) separação dos compostos A-87774-1 e A-87774-2 [057] Separação de substâncias ativas foi realizada de acordo com o seguinte método. Após a separação, a mostarda indiana cultivada durante 7 dias em solo de campo de arroz colocada num pote cúbico de 4 cm foi aspergida com uma solução de 0,5 mL de cada fração, e os ingredientes ativos foram seguidos de acordo com os efeitos herbicidas dos mesmos.

[058] 8 L de solução de cultura obtida no exemplo (1) acima foram separados em um componente fúngico e uma porção liquida por uma centrifuga (7500 x g). A porção de componente fúngico foi agitada em conjunto com metanol, e, subsequentemente, filtrada sobre terra de diatomáceas. Após o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, foi combinado com a porção liquida da solução de cultura e concentrado para 5 L, que foi passado através de coluna de Diaion HP-20 (diâmetro interno de 6 cm, comprimento de 31 cm), e o líquido passado e 2,8 L de água usados para lavar a coluna foram combinados. Esta solução foi passada da coluna de Dowex 50W x 8 (tipo H⁺: diâmetro interno de 6 cm, comprimento de 33 cm) , e a solução passada e 2 L de água usados para lavar a coluna foram combinados. Depois, esta solução foi passada através de Em seguida, esta solução foi passada através da coluna de carvão ativado (diâmetro interno de 6 cm, comprimento de 2 0 cm) para adsorver o ingrediente ativo. A coluna foi lavada com 1 L de água, e 2 L de metanol/água (3/1) e, subsequentemente, o ingrediente ativo foi eluído com 2,5 L metanol/ amônia aquosa a 2.8% (4/1). O produto sólido obtido a partir do eluato por destilação do solvente sob pressão reduzida foi

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25/35 dissolvido em 80 mL de água, e passada através da coluna de Amberlite CG-400 do tipo I (tipo Cl: diâmetro interno de 4 cm, comprimento de 22 cm) . A coluna foi lavada sequencialmente com 1 L de HC1 0,02 N, e 1 L de HC1 0,02 N contendo NaCl 0,01 M e, subsequentemente, o ingrediente ativo foi eluido com 1,3 L de HC1 0,02 N contendo NaCl 0,6 Μ. A fim de remover NaCl, este foi passado através da coluna de carvão ativado (diâmetro interno de 3 cm, comprimento de 20 cm) de novo, e a coluna foi lavada com 1 L de água e, subsequentemente, o ingrediente ativo foi eluido com 1,5 L metanol/amônia aquosa a 2.8% (4/1), e destilouse o solvente sob pressão reduzida para dar 383 mg do produto sólido.

[059] Este produto sólido foi purificado por cromatografia em coluna de Sephadex G-25. Isto é, em coluna de Sephadex G-25 (diâmetro interior de 2,5 cm, comprimento de 41 cm) equilibrada com um solvente misto de acetonitrila, água e ácido acético (relação de mistura de volume: 73/27/0.1), o produto sólido foi colocado posteriormente à dissolução em 1 mL de água, e eluido com o mesmo solvente misto, e o eluato foi particionado em porções de 12mL cada. O ingrediente ativo, possuindo uma atividade herbicida foi eluido a 49a-89a na ordem sequencial, e assim o solvente desta fração foi removido por destilação sob pressão reduzida para dar 130 mg do produto sólido.

[060] Este produto sólido foi purificado por cromatografia liquida de alta eficiência (HPLC). Como a coluna de HPLC, Shiseido CAPCELL PAK-CL8 UG120Â (diâmetro interno de 2 cm, comprimento de 25 cm) foi utilizada, e como o eluente, uma mistura de solventes de acetonitrila, água,

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26/35 e ácido acético (relação de volume de mistura: 4/96/0.1) foi utilizada, para realizar-se a eluição em um forno para coluna a temperatura de 40°C, e a uma taxa de fluxo de 15ml/min, dando 11,3 mg do composto A-87774-2 como um pó branco eluida a um tempo de retenção de 5,6 a 9,6 minutos e 81.3mg de uma fração contendo o composto A-87774-1 eluídos antes de 5,6 minutos. O último foi purificado mais uma vez com Shiseido CAPCELL PAK C18 UG120Â (diâmetro interno de 1 cm, comprimento de 25 cm) e com HPLC (forno de coluna com temperatura de 40°C, taxa de fluxo de 5ml/min) usando um solvente misto de acetonitrila, água, e ácido acético (relação de volume da mistura: 3/97/0.1) para dar 2,4 mg do composto A-87774-1 como um pó branco eluído em de 13,4 a 16,6 minutos.

[061]

Estes compostos A-87774-1 e A-87774-2 possuíam um peso molecular, uma fórmula molecular, um espectro de ressonância magnética nuclear de 1H, quando medido em água deuterada, um espectro magnética nuclear de 13C, quando medido em de ressonância água deuterada, um espectro de absorção no infravermelho, quando medido por disco de KBr e uma rotação óptica específica, que são mencionados acima. O espectro de ressonância magnética nuclear de 1H, o espectro de ressonância magnética nuclear 13C e o espectro de absorção no infravermelho do composto A87774-1 são mostrados, respectivamente, na fig. 1, fig. 2 e fig. 3, e o espectro de ressonância magnética nuclear de 1H, o espectro de ressonância magnética nuclear de 13C e o espectro de absorção no infravermelho do composto A-87774-2 são mostrados, respectivamente, na fig. 4, fig. 5 e fig. 6. Deve-se notar que, como material padrão interno, o metanol foi adicionado para o espectro de ressonância

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27/35 magnética nuclear de 1H e o espectro de ressonância magnética nuclear de 13C de A-87774-1 e A-87774-2.

[062] O dispositivo de medição é como se segue:

Espectro de ressonância nuclear magnética: JEOL ECA500

Espectro de absorção no infravermelho: SHIMADZU FTIR8400

Rotação óptica específica: JASCO DIP-360.

[063] Além disso, as condições para a medição da

RMN são como se segue:

Frequência ^TH: 500,16 MHz, ¹³C: 125,77 MHz

Temperatura de medição, número de integrações:

A-87.774-1	!Η:	23,9°C,	8 vezes,
	¹³C:	24,6°C,	21600 vezes,
A-87774-2	!Η:	23.1°C,	8 vezes,
	¹³C:	24.6°C,	46000 vezes.

Exemplo 2

Separação do composto A-87774-3 (1) Cultura da cepa SANK 61805 [064] 80 mL de um meio que tem a mesma composição que o exemplo 1 acima (1) foi colocado em cada um dos 4 frascos dos frascos de Erlenmeyer 500 ml de volume, e aquecido e esterilizado a 121° por 30 minutos. Para cada meio, uma alça de platina de Streptomyces sp. cepa SANK 61805 foi inoculado a partir de uma inclinação, e cultivadas a 28°C e, a 210 rpm sob agitação rotativa. O giicerol foi adicionado até 2% em 7 dias e 14 dias, seguido por cultura durante 22 dias.

(2) Separação do composto A-87774-3 [065] 320 mL da solução de cultura obtida no exemplo acima (1) foram separados em um componente fúngico

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28/35 e uma porção liquida por uma centrífuga (7500 x g) . A porção de componente fúngica foi agitada em conjunto com metanol, e, subsequentemente, filtrada sobre terra de diatomáceas. Posteriormente o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, foi combinado com a porção líquida da solução de cultura e concentrada. Este foi passado através da coluna de carvão ativado (diâmetro interno de 1,6 cm, comprimento de 16 cm) para adsorver o ingrediente ativo. A coluna foi lavada sequencialmente com 120 mL de água, metanol/água (1/1), e metanol, e, subsequentemente, o ingrediente ativo foi eluído com 120 mL de metanol/ amônia aquosa a 2.8% (4/1). Este foi concentrado, posteriormente dissolvido em 3ml de água, e passado através da coluna de Dowex 50W x 8 (tipo H⁺: diâmetro interno de 1,2 cm, comprimento de 9,5 cm), e a eluição e 50ml de água usados para lavar a coluna foram combinados. Em seguida, este foi passado através da coluna Amberlite CG-400 de tipo I coluna (tipo Cl^-: diâmetro interno de 1,8 cm, comprimento de 12 cm) . Dentro da coluna, 60 mL de HC10,02 N, 80 mL de HC1 0,02 N contendo NaCl 0,01 M, e 200 mL de HC1 0,02 N contendo NaC10,6 M foram sequencialmente lavados, e cada porção de 20 mL foi aliquotada, após o que os ingredientes ativos foram eluídos nas frações da 5^a a 14^a. A fim de remover NaCl, esta fração foi passada através da coluna de carvão ativado (diâmetro interno de 1,2 cm, comprimento de 10 cm) de novo, e a coluna foi lavada com 50 mL de água. Subsequentemente, o ingrediente ativo foi eluído com 50 mL de metanol/ amônia aquosa a 2.8% (4/1), e o solvente foi removido por destilação sob pressão reduzida para dar 237 mg do produto sólido.

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29/35 [066] Este produto sólido foi purificado por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). À medida que a coluna de HPLC, Shiseido CAPCELL PAK-CL8 UG120Â (diâmetro interno de 2 cm, comprimento de 25 cm) foi utilizada, e como o eluente, uma mistura de solventes de acetonitrila, água, e ácido acético (relação de volume de mistura: 3/97/0.4) foi utilizada, para realizar a eluição em um forno de coluna à temperatura de 4 0°C a uma taxa de fluxo de 10 mL/min, dando 7,3 mg do composto A-87774-3 como um pó branco eluído a um tempo de retenção de 12,5 a 16,8 minutos.

[067] Este composto A-87774-3 tinha um peso molecular, uma fórmula molecular, um espectro de ressonância magnética nuclear de 1H, quando medido em água deuterada, um espectro de ressonância magnética nuclear de 13C, quando medido em água deuterada, um espectro de absorção no infravermelho, quando medido por disco de KBr e uma rotação óptica específica, que são mencionados acima. O espectro de ressonância magnética nuclear de 1H, o espectro de ressonância magnética nuclear de 13C e o espectro de absorção no infravermelho do composto A-87774-3 são mostrados, respectivamente, na fig. 7, fig. 8 e Fig. 9. Deve-se notar que, como o material padrão interno, acetona foi adicionada para o espectro de ressonância magnética nuclear de 1H de A87774-3, e ácido acético foi adicionado para o espectro de ressonância magnética nuclear de 13C de -A-87.774-3.

[068] O dispositivo de medição é como se segue:

Espectro de ressonância nuclear magnética: JEOL ECA500

Espectro de absorção no infravermelho: SHIMADZU FTIR8400

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Rotação óptica especifica: JASCO DIP-360.

Além disso, as condições para a medição da RMN são como se segue:

Frequência ¹H: 500,16 MHz, ¹³C: 125, 77 MHz

Temperatura para medição, número de integrações: A-87774-3 ^-H: 23.1°C, 64 vezes, ¹³C: 23.9°C, 48000 vezes.

Exemplo de Teste 1

Teste de aspersão para caules e folhas [069] Os compostos A-87774-1, A-87774-2 e A-87774- foram dissolvidos em uma solução aquosa contendo 0,1% (p/v) de Newcol 1200 para preparar soluções de 100 e 50 mg/L. Solo granular de campo de arroz foi colocado em um pote cúbico de cm, no qual sementes de mostarda indiana, malva real, caruru e capim capivara foram inoculadas e cultivadas em estufa durante 7 dias para obter um corpo da planta, que foi aspergido com 0,5 mL desta solução de teste, e 14 dias após a eficácia herbicida foi investigada. A eficácia herbicida foi avaliada de acordo com 6 graus de 5 (seco até a morte) a 0 (sem atividade). Estes resultados são mostrados na Tabela [Tabela 4]

	A-87774-1	A-87774-2	A-87774-3
Concentração do composto (mg/l)	Mostarda indiana	Malva real	Caruru	Capim capivara	Mostarda indiana	Malva real	Caruru	Capim capivara	Mostarda indiana	Malva real	Caruru	Capim capivara
100	5	5	5	1	5	5	5	5	5	5	5	3
50	5	5	5	1	5	5	5	3	5	5	5	1

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31/35 [070] A partir destes resultados, verificou-se que qualquer um dos Compostos A-87774 exibe excelentes efeitos herbicidas.

Exemplo de teste 2

Teste de aspersão para caules e folhas [071] Em um pote plástico [lOcm x 15 cm x 3 cm (altura) ] , no qual solo de campo de arroz foi colocado, uma planta teste como mostrado na Tabela 2 foi inoculada, e 14 dias após a inoculação, a planta foi aspergida com A87774-2. À medida que a solução da droga, uma solução de 100 mg/L dissolvido em uma solução aquosa contendo 0,01% (v/v) graminea S foi preparada, e aspergida em uma quantidade equivalente líquida a 2000 L/ha (dosagem de 200 g/ha). A eficácia herbicida foi investigada após 14 dias, e avaliada de acordo com 6 graus de 5 (seco até a morte) a 0 (sem atividade). Estes resultados são mostrados na Tabela 5 .

[Tabela 5]

[072] A partir destes resultados, verificou-se que o composto A-87774-2 exibe excelentes efeitos herbicidas sobre uma vasta gama de ervas daninhas.

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Exemplo de teste 3 [073] Em um pote plástico [10 cm x 15 cm x 3 cm (altura) ] no qual solo de campo de arroz foi colocado, 9 tipos de espécies de plantas foram inoculados, e 14 dias após a inoculação, as plantas foram Aspergidas com a solução de 62,5mg/l de A-87774-2, ou 250 mg ou 62,5 mg / L de A87774-3 dissolvido em uma solução aquosa contendo 0,1% (p / v) de Newcol 1200 em uma quantidade equivalente líquida para 2000 L / ha. A dose foi de, respectivamente, 125 g / ha, 500 g / ha, e 125 g / ha. A eficácia herbicida foi investigada 15 dias depois, e avaliada de acordo com 6 graus de 5 (seco até a morte) a 0 (sem atividade) . Estes resultados são mostrados na Tabela 6.

[Tabela 6]

[074] A partir destes resultados, verificou-se que o composto A-87774-3 também exibe excelentes efeitos herbicidas sobre uma vasta gama de ervas daninhas.

Exemplo de teste 4

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Teste de tratamento do solo [075] Em um pote plástico [10 cm x 15 cm x 3 cm (altura) ] , no qual solo de campo de arroz foi colocado, 7 tipos de amostras de plantas foram inoculados, e um dia depois, uma solução de droga de 50 mg / L ou 12,5 mg /1 de A-87774-2 ou A-87774-3 foi pingada para o tratamento, e do grau de supressão do crescimento foi investigado 14 dias depois. A dosagem da solução da droga foi deixada, respectivamente, 500 g / ha, e 125 g / ha. A eficácia herbicida foi avaliada de acordo com 6 graus de 5 (não germinadas) até 0 (nenhuma atividade). Estes resultados são mostrados na Tabela 7.

os compostos A-87774 exibem excelentes efeitos herbicidas também no tratamento do solo.

Exemplo de teste 5

Teste de tratamento campo de arroz [077] Um recipiente com um diâmetro de 6 cm em que solo de campo de arroz foi colocado foi preenchido com água,

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34/35 seguido por pudlagem com solo, e subsequentemente as sementes ou tubérculos de 6 tipos de ervas daninhas de campo de arroz foram plantadas. 2 dias depois, uma solução de droga de 50 mg / L de A-87774-2 ou A-87774-3 foi deixada gotejada para o tratamento, e do grau de supressão do crescimento foi investigado 26 dias depois. A dosagem da solução da droga foi deixada a 500 g/ha. A eficácia herbicida foi avaliada de acordo com 6 graus de 5 (não germinadas) até 0 (nenhuma atividade). Estes resultados são mostrados na Tabela 8.

[078] A partir destes resultados, verificou-se que os compostos A-87774 exibem excelentes efeitos herbicidas também sobre ervas daninhas de campo de arroz.

[Aplicabilidade industrial] [079] Os novos compostos A-87774-1, A-87774-2 e A87774-3 do presente invento têm uma excelente ação herbicida e atividade de regulação do crescimento da planta, e são úteis como um agroquímico (em particular, um herbicida para a agricultura e horticultura e um regulador de crescimento da planta).

[Número de depósito]

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Claims

REIVINDICAÇÕES

1.8 Hz), 3.96 (1H, dd, J=12.5, 1.3 Hz), 3.87 (1H, d, J=12.3

Hz), 3.85 (1H, m) , 3.71 (1H, dd, J=12.3, 4.4 Hz) , 3.633.61(3H, m) , 3.32 (1H, d, J=11.4 Hz) , 1.42 (3H, d, J=6.9

Hz) ,

1) peso molecular: 828,

1) peso molecular: 668,

1.8 Hz), 3.96 (1H, dd, J=12.5, 1.3 Hz), 3.87 (1H, d, J=12.3

Hz) ,

1) peso molecular: 828,

1) peso molecular: 666,

1) peso molecular: 668,

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7/12

1.8 Hz), 3.96 (1H, dd, J=12.5, 1.3 Hz), 3.87 (1H, d, J=12.3 Hz), 3.85 (1H, m) , 3.71 (1H, dd, J=12.3, 4.4 Hz) , 3.633.61(3H, m) , 3.32 (1H, d, J=11.4 Hz) , 1.42 (3H, d, J=6.9 Hz) ,

1) peso molecular: 828,

1.7 Hz), 3.61 (1H, dd, J=11.4, 10.1 (3H,

Hz) ,

1) peso molecular: 668,

1.8 Hz), 3.96 (1H, dd, J=12.5, 1.3

Hz) d,

Hz)

J=8.1 , 5.60

J=6.9 Hz), (1H, m), 4.22

1) peso molecular: 828,

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1) peso molecular: 666,

1.8 Hz), 2.72 (1H, dd, J=7.0, 6.6 Hz), 1.42 (3H, d, J=6.9

Hz) ,

1) peso molecular: 668,

1. Método para produzir um composto A-87774, caracterizado pelo fato de que compreende o cultivo de um micro-organismo pertencente ao gênero Streptomyces, e a obtenção do composto a partir da cultura, em que o composto A-87774 é extraído de Streptomyces sp. cepa SANK 61805, e em que o composto A-87774 é selecionado do grupo que consiste em:

(I) um composto A-87774-1 tendo as seguintes propriedades:

2) fórmula molecular: C24H37N4O22PS2,

2.2 Hz), 4.34-4.32 (3H,

m) , 4.22 (1H, d,

J=12.6 Hz), 4.07 (1H, d, J=10.1 Hz),

2) fórmula molecular: C18H27N4O17PS2, (Sppm)

Hz) , (1H,

2) fórmula molecular: C18H29N4O17PS2,

2) fórmula molecular: C24H37N4O22PS2,

2) fórmula molecular: C18H27N4O17PS2,

2)

2) fórmula molecular: C24H37N4O22PS2,

2.2 Hz), 4.34-4.32 (1H, d, J=10.1 Hz),

2) fórmula molecular: C18H27N4O17PS2, (Ôppm)

Hz) , (1H,

2) fórmula molecular: C18H29N4O17PS2,

2.

Agroquímico caracterizado pelo fato de conter um composto A-87774, como um ingrediente ativo;

em que o agroquímico compreende um ou mais aditivos selecionados a partir do grupo consistindo em pós de vegetais, pós minerais, compostos orgânicos ou inorgânicos, óleos vegetais, óleos minerais, hidrocarbonetos aromáticos, amidas, ésteres, cetonas, éteres, alcoóis, sulfóxido de

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2) fórmula molecular: C24H37N4O22PS2, (Ôppm) (1H,

2) fórmula molecular: C18H27N4O17PS2,

2/12

899, 827, 536, e

6) rotação óptica especifica: [a] d²⁴+40.0^o (c, 0.22, em H₂0) , ou um sal do mesmo;

(II) um composto A-87774-2 tendo as seguintes propriedades:

2) fórmula molecular: C18H29N4O17PS2,

3) espectro de ressonância magnética nuclear de ¹H

(ôppm) , quando medido em água deuterada: 7.74 (1H, d, J=8.1 Hz) , 5.94 (1H, d, J=5.3 Hz) , 5.91 (1H, d, J=8.1 Hz), 5.60 (1H, d, J=11.0 Hz), 5.01 (1H, br.s), 4.57 (1H, q, J=6.9 Hz),

3.32 (1H, d, J=11.4 Hz), 1.42 (3H, d, J=6.9 Hz),

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11/12

3.96 (1H, dd,

J=12.6,

Hz) ,

3) espectro de ressonância magnética quando medido em água deuterada:

3.33 (1H, dd,

J=10.1

J=11.3,

J=11.4,

6 Hz) , 1.42 (3H, d,

J=6.9 espectro de ressonância magnética nuclear de ¹³C

174.0 quando (s) , (ôppm) , medido em água deuterada: 178.6

(s) , 154.8 (s), 91.4 (s), 89.2 (d), 87.6 (d) , 80.8 (d), 74.8 (d), 73.5 (d), 70.2 (d), 70.2 (d), 70.0 (t) , 63.7 (d), 60.6 (d), 53.8 (t), 36.5 (t) , 30.3 (t) , 18.3 (q), 5) espectro de absorção no infravermelho (VmaxCm^-1) , quando medido por disco de KBr: 3423, 1703, 1639, 1487,

1450, 1406, 1383,

1339, 1258, 1217, 1184, 1088, 1067, 937,

899, 827, 536, e

6) rotação óptica específica: [a] d²⁴+40.0^o (c, 0.22, em

H₂O) , ou um sal do mesmo;

(II) um composto A-87774-2 tendo as seguintes propriedades:

peso molecular: 666,

3.61 (1H, dd,

3) espectro de ressonância magnética nuclear de ¹H (ôppm), quando medido em água deuterada: 5.86 (1H, d, J=5.9

Hz), 5.59 (1H, d, J=11.0 Hz), 4.56 (1H, q, J=6.9 Hz) , 4.42

Petição 870180073930, de 22/08/2018, pág. 51/55

10/12

(1H, dd, J=ll. 2, 2 .9 Hz), 4.38 4.30 -4.27 (2H, m) , 4.24-4.23 (2Hj Hz) , 3.97 (1H, dd, J=12.7, 2.1 H 10.3 Hz), 3.55 (1H, m) , 3.52 (1H, 1.8 Hz), 2.72 (1H, dd, J=7.0, 6. Hz) ,

3) espectro de ressonância magnética nuclear de ¹H

3.32 (1H, d, J=11.4 Hz), 1.42 (3H, d, J=6.9 Hz),

3) espectro de ressonância magnética nuclear de ¹H (óppm) , quando medido em água deuterada: 7.73 (1H, d, J=8.1

Hz), 5.91 (1H, d, J=2.4 Hz), 5.90 (1H, d, J=8.1 Hz) , 5.60 (1H, d, J=10.8 Hz), 4.57 (1H, q, J=6.9 Hz) , 4.55 (1H, d,

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8/12

J=11.4 Hz), 4.46 (1H, dd, J=11.2, 2.2 Hz) , 4.34-4.32 (3H,

m) , 4.22 (1H, d, J=12.6 Hz) , 4.07 (1H, d, J=10.1 Hz) , 3.96 (1H, dd, J=12.6, 1.7 Hz) , 3.61 (1H, dd, J=11.4, 10.1 Hz) ,

3.33 (1H, dd,

J=11.3,

J=11.4, dd, J=7.0, 6.6 Hz), 1.42 (3H, d,

J=6.9 de ¹³C

3.61 (1H, dd,

3.7 Hz), d,

J=10.1

3) fórmula molecular: C18H29N4O17PS2, espectro de ressonância magnética nuclear de ¹H quando medido em água deuterada: 5.86 (1H, d, J=5.9 (ôppm) ,

Hz) , 5.59 (1H, d, J= (1H, dd, J=ll. 2, 2. 4.30 -4.27 (2H, m) , Hz) , 3.97 (1H, dd, 10.3 Hz) , 3.55 (1H, 1.8 Hz) , 2.72 (1H,

Hz) ,

J=12.7, 2.1 Hz),

3. Herbicida caracterizado pelo fato de conter um composto A-87774, como um ingrediente ativo, em que o herbicida compreende um ou mais aditivos selecionados a partir do grupo consistindo em pós de vegetais, pós minerais, compostos orgânicos ou inorgânicos, óleos vegetais, óleos minerais, hidrocarbonetos aromáticos, amidas, ésteres, cetonas, éteres, alcoóis, sulfóxido de dimetila; tricloroetileno, água e tensoativo, e em que o composto A-87774 é selecionado do grupo que consiste em:

(I) um composto A-87774-1 tendo as seguintes propriedades:

3) espectro de ressonância magnética nuclear de ¹H (8ppm) , quando medido em água deuterada: 7.74 (1H, d, J=8.1

Hz), 5.94 (1H, d, J=5.3 Hz) , 5.91 (1H, d, J=8.1 Hz) , 5.60 (1H, d, J=11.0 Hz), 5.01 (1H, br.s), 4.57 (1H, q, J=6.9 Hz),

3.32 (1H, d, J=11.4 Hz), 1.42 (3H, d, J=6.9 Hz),

3) espectro de ressonância magnética nuclear quando medido em água deuterada:

3.33 (1H, dd,

J=10.1

J=11.3,

J=11.4, dd, J=7.0, 6.6 Hz), 1.42 (3H, d,

J=6.9 de ¹³C

3.61 (1H, dd,

3.7 Hz), d,

Hz) , 5.59 (1H, d, J= (1H, dd, J=ll. 2, 2. 4.30 -4.27 (2H, m) , Hz) , 3.97 (1H, dd, 10.3 Hz) , 3.55 (1H, 1.8 Hz), 2.72 (1H,

Hz) ,

J=12.7, 2.1 Hz),

3.633.61(3H, m) , 3.32 (1H, d, J=11.4

Hz), 1.42 (3H, d,

J=6.9

Hz) ,

3) espectro de ressonância magnética nuclear quando medido em

3/12

3.32 (1H, d, J=11.4 Hz), 1.42 (3H, d, J=6.9 Hz),

3) espectro de ressonância magnética nuclear de (ôppm) , quando medido em água deuterada: 7.73 (1H, d, J=8.1

Hz), 5.91 (1H, d, J=2.4 Hz) , 5.90 (1H, d, J=8.1 Hz) , 5.60 (1H, d, J=10.8 Hz), 4.57 (1H, q, J=6.9 Hz) , 4.55 (1H, d, J=11.4 Hz), 4.46 (1H, dd, J=11.2, 2.2 Hz) , 4.34-4.32 (3H,

m), 4.22 (1H, d, J=12.6 Hz), 4.07 (1H, d, J=10.1 Hz), 3.96 (1H, dd, J=12.6, 1.7 Hz) , 3.61 (1H, dd, J=11.4, 10.1 Hz) ,

3) espectro de ressonância magnética nuclear de ¹H (ôppm), quando medido em água deuterada: 5.86 (1H, d, J=5.9 Hz), 5.59 (1H, d, J=11.0 Hz) , 4.56 (1H, q, J=6.9 Hz), 4.42 (1H, dd, J=11.2, 2.9 Hz) , 4.38 (1H, dd, J=11.2, 3.7 Hz) ,

4) espectro de ressonância magnética nuclear de ¹³C

(8ppm) quando medido em água deuterada: 178.6 (s) , 166.3 (s) 151.8 (s), 141.6 (d) ! 102.9 (d), 100.3 (d), 91.3 (s), 89.2 (d) , 89.1(d), 80.2 (d) , 74.8 (d), 74.1(d), 73.8 (d), 73.5 (d) , 72.2 (d), 70.3 (d) , 69.9 (d), 69.3 (t), 66.8 (d), 63.7

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12/12 (d), 61.0 (t), 60.6 (d), 53.7 (t), 18.3 (q),

4.57 (1H, m), 4.50-4.48 (3H, m), 4.41 (1H, m), 4.22 (1H, d,

J=12.5 Hz), 4.07 (1H, d, J=10.1 Hz) , 4.04 (1H, dd, J=3.3,

4) espectro de ressonância magnética nuclear de ¹³C (ôppm) quando medido em água deuterada: 178.6 (s) , 166.3 (s) ,

151.8 (s), 141.7 (d), 102.8 (d), 91.3 (s) , 89.3 (d), 89.2

(d), 81.5 (d), 74.8 (d), 73.5 (d), 73.4 (d), 69.5 (d), 69.4 (t), 63.7 (d), 60.6 (d) , 53.8 (t), 18.3 (q), 5) espectro de absorção no infravermelho

(Vmaxcrn^-1) quando medido por disco de KBr: 3399, 1706, 1455,

1405, 1346, 1266, 1185, 1087, 1067, 934, 900, 826, 534, e

6) rotação óptica específica: [ol]d²⁴+47.2° (c, 1.0, em

H₂O) , ou um sal do mesmo; e (III) um composto A-87774-3 tendo as seguintes propriedades:

4)

z) ,

m) , (1H, , m) dd, J=11.2, 3.7 Hz), , 4.07 (1H, d,

4. Regulador de crescimento de plantas caracterizado pelo fato de conter um composto A-87774, como um ingrediente ativo, em que o regulador de crescimento de plantas compreende um ou mais aditivos selecionados a partir do grupo consistindo em pós de vegetais, pós minerais, compostos orgânicos ou inorgânicos, óleos vegetais, óleos minerais, hidrocarbonetos aromáticos, amidas, ésteres, cetonas, éteres, alcoóis, sulfóxido de dimetila;

tricloroetileno, água e tensoativo, e em que o composto A-87774 é selecionado do grupo que consiste em:

(I) um composto A-87774-1 tendo as seguintes propriedades:

4) espectro de ressonância magnética nuclear de ¹³C

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9/12

(Sppm) quando medido em água deuterada: 178.6 (s) , 166.3 (s) 151.8 (s), 141 .6 (d) , 102.9 (d), 100.3 (d), 91.3 (s), 89.2 (d) , 89.1(d) , 80.2 (d), 74.8 (d), 74.1(d), 73.8 (d), 73.5 (d) , 72.2 (d), 70.3 (d), 69.9 (d), 69.3 (t), 66.8 (d), 63.7 (d) , 61.0 (t), 60.6 (d), 53.7 (t), 18.3 (q),

r infravermelho

4.57 (1H, m), 4.50-4.48 (3H, m), 4.41 (1H, m), 4.22 (1H, d,

J=12.5 Hz), 4.07 (1H, d, J=10.1 Hz), 4.04 (1H, dd, J=3.3,

4) espectro de ressonância magnética nuclear de ¹³C (ôppm) quando medido em água deuterada: 178.6 (s), 166.3 (s),

151.8 (s), 141.7 (d), 102.8 (d), 91.3 (s) , 89.3 (d), 89.2

(Vmaxcrn^-1) quando medido por disco de KBr: 3399, 1706, 1455,

1405, 1346, 1266, 1185, 1087, 1067, 934, 900, 826, 534, e

6) rotação óptica específica: [a]ü²⁴+47.2° (c, 1.0, em

4) espectro de ressonância magnética nuclear

(ôppm) , quando medido em água deuterada: 178.6 (s) , 174.0 (s) , 154.8 (s) , 91.4 (s), 89.2 (d), 87.6 (d) , 80.8 (d) , 74.8 (d), 73.5 (d), 70 .2 (d), 70.2 (d), 70.0 (t) , 63.7 (d) , 60.6 (d), 53.8 (t), 36 .5 (t), 30.3 (t), 18.3 (q), 5) espectro de absorção no infravermelho (VmaxCm-¹) ,

quando medido por disco de KBr:

3423, 1703, 1639, 1487,

1450, 1406, 1383,

1339, 1258, 1217, 1184, 1088, 1067, 937,

899, 827, 536, e

6) rotação óptica específica: [a]_D ²⁴+40.0° (c, 0.22, em

H₂0) , ou um sal do mesmo;

(II) um composto A-87774-2 tendo as seguintes propriedades:

4.24-4.23 (2H, m)

m), 3.52 (1H, m),

9 Hz), 4.38 (1H,

11.0 Hz), 4.56 (1H, q, J=6.9 dd, J=11.2, , 4.07 (1H,

Hz), 4.42

4) espectro de ressonância magnética nuclear de ¹³C

(ôppm) quando medido em água deuterada: 178.6 (s) , 166.3 (s) 151.8 (s), 141.6 (d) , 102.9 (d), 100.3 (d), 91.3 (s), 89.2 (d), 89.1(d), 80.2 (d), 74.8 (d), 74.1(d), 73.8 (d), 73.5 (d), 72.2 (d), 70.3 (d), 69.9 (d), 69.3 (t), 66.8 (d), 63.7 (d), 61.0 (t), 60.6 (d), 53.7 (t), 18.3 (q), 5) espectro de absorção no infravermelho

(Vmaxcrn^-1) quando medido por disco de KBr: 3396, 1705, 1402, 1340, 1265, 1184, 1090, 1063, 937, 899, 825, 538, e

6) rotação óptica especifica: [ol]d²⁴+78.7° (c, 1.0, em

H₂O) , ou um sal do mesmo.

4.57 (1H, m), 4.50-4.48 (3H, m), 4.41 (1H, m), 4.22 (1H, d,

Petição 870180073930, de 22/08/2018, pág. 47/55

6/12

J=12.5 Hz), 4.07 (1H, d, J=10.1 Hz) , 4.04 (1H, dd, J=3.3,

4) espectro de ressonância magnética nuclear de ¹³C (óppm) quando medido em água deuterada: 178.6

151.8 (s) , (t) , (d) ,

166.3 (s),

(s) , 141.7 (d), 102.8 (d), 91.3 (s) , 89.3 (d), 89.2 81.5 (d), 74.8 (d) , 73. 5 (d), 73.4 (d) , 69.5 (d), 69.4 63.7 (d), 60.6 (d) , 53. 8 (t), 18.3 (q) r 5) espectro de absorção no infravermelho

quando medido por disco de

KBr: 3399, 1706, 1455, (VmaxCm^-1)

1405, 1346, 1266, 1185,

1087, 1067,

934, 900, 826, 534, e

6) rotação óptica especifica:

[a]_D ²⁴+47.2° (c, 1.0, em

H2O) , ou um sal do mesmo; e (III) um composto A-87774-3 tendo as seguintes propriedades:

4) espectro de ressonância magnética nuclear

(ôppm) , quando medido em água deuterada: 178.6 (s), 174.0 (s) , 154.8 (s) , 91.4 (s), 89.2 (d), 87.6 (d) , 80.8 (d) , 74.8 (d), 73.5 (d), 70 .2 (d), 70.2 (d), 70.0 (t) , 63.7 (d) , 60.6 (d), 53.8 (t), 36 .5 (t), 30.3 (t), 18.3 (q), 5) espectro de absorção no infravermelho (VmaxCm 1) ,

quando medido por disco de KBr:

3423, 1703, 1639, 1487,

1450, 1406, 1383,

1339, 1258, 1217, 1184, 1088, 1067, 937,

899, 827, 536, e

6) rotação óptica específica: [a] d²⁴+40.0^o (c, 0.22, em

H2O) , ou um sal do mesmo;

(II) um composto A-87774-2 tendo as seguintes propriedades:

Petição 870180073930, de 22/08/2018, pág. 46/55

4.24-4.23 (2H, m)

m), 3.52 (1H, m),

9 Hz), 4.38 (1H,

11.0 Hz), 4.56 (1H, q, J=6.9 dd, J=11.2, , 4.07 (1H,

Hz), 4.42

4/12 dimetila; tricloroetileno, água e tensoativo; e em que o composto A-87774 é selecionado do grupo que consiste em:

(I) um composto A-87774-1 tendo as seguintes propriedades:

166.3 (s),

91.3

89.2

100.3 (d),

151.8 (s), 141.6 (d), 102.9 (d),

(d) , 89.1(d), 80.2 (d), 74.8 (d) , 74.1 (d) , (d) , 72.2 (d), 70.3 (d), 69.9 (d) , 69.3 (t) (d) , 61.0 (t), 60.6 (d), 53.7 (t) , 18.3 (q)

73.8 r

66.8 f

f

4.04 (1H, dd, , 3.87 (1H, d, (1H, d,

J=3.3,

J=12.3 , 3.71 (1H, dd,

J=12.3, 4.4 Hz),

4.57

151.8 (s), 141.7 (d) , 102.8 (d), 91.3 (s) , 89.3 (d), 89.2 (d), 81.5 (d), 74.8 (d) , 73.5 (d), 73.4 (d) , 69.5 (d), 69.4 (t), 63.7 (d), 60.6 (d) , 53.8 (t), 18.3 (q), 5) espectro de absorção no infravermelho

(Vmaxcrn^-1) quando medido por disco de KBr: 3399, 1706, 1455,

1405, 1346, 1266, 1185, 1087, 1067, 934, 900, 826, 534, e

6) rotação óptica específica: [α]ϋ²⁴+47.2° (c, 1.0, em

4) espectro de ressonância magnética nuclear de ¹³C (ôppm), quando medido em água deuterada: 178.6 (s), 174.0

(S) , 154.8 (s), 91.4 (s) , 89.2 (d), 87.6 (d) , 80.8 (d) 74.8 (d), 73.5 (d), 70.2 (d), 70.2 (d), 70.0 (t) , 63.7 (d) 60.6 (d), 53.8 (t), 36.5 (t) , 30.3 (t) , 18.3 (q), 5) espectro de absorção no infravermelho (VmaxCm 1) quando medido por disco de KBr: 3423, 1703, 1639, 1487

1450, 1406, 1383, 1339, 1258, 1217, 1184, 1088, 1067, 937,

Petição 870180073930, de 22/08/2018, pág. 43/55

4.30-4.27 (2H, m) , 4.24-4.23 (2H, m) , 4.07 (1H, d, J=10.1

Hz), 3.97 (1H, dd, J=12.7, 2.1 Hz) , 3.61 (1H, dd, J=11.3,

10.3 Hz), 3.55 (1H, m), 3.52 (1H, m), 3.33 (1H, dd, J=11.4,

5) espectro de absorção no infravermelho (Vmaxcrn^-1) quando medido por disco de KBr: 3396, 1705, 1402, 1340, 1265, 1184, 1090, 1063, 937, 899, 825, 538, e

5.91 (1H, d, J=2.4 Hz), 5.90 d, J=10.8 Hz), 4.57 (1H, q,

J=11.4 Hz), 4.46 (1H, dd, J=11.2, (1H,

J=6.9

7.73 nuclear (1H, d, d, J=8.1 Hz) de ¹H

J=8.1 , 5.60

Hz), 4.55 (1H, d,

5) espectro no de absorção (Vmaxcrn^-1) quando medido por disco de KBr: 3396, 1705, 1402,

1340, 1265, 1184, 1090, 1063, 937, 899, 825, 538, e

6) rotação óptica especifica: [ol]d²⁴+78.7⁰ (c, 1.0, em

H₂O) , ou um sal do mesmo.

5.91 (1H, d, J=2.4 Hz), 5.90 d, J=10.8 Hz), 4.57 (1H, q,

J=11.4 Hz), 4.46 (1H, dd, J=11.2, (1H,

J=6.9 de ¹H

m) , 4.22 (1H, d,

J=12.6 Hz), 4.07 (1H, dd,

J=12.6,

7.73 (1H, d, d, J=8.1 Hz) , 5.60

Hz) , 4.55 (1H, d,

5/12 peso molecular: 666,

5) de absorção espectro no

73.5

63.7 infravermelho (VmaxCm^-1) quando medido por disco de KBr: 3396, 1705, 1402,

1340, 1265, 1184, 1090,

1063, 937, 899, 825, 538, e

6) rotação óptica específica: [a] d²⁴+78.7^o (c, 1.0, em

H2O) , ou um sal do mesmo.

5.91 (1H, d, J=8.1 br.s), 4.57 (1H, q, (3H, m), 4.41

J=12.5 Hz), 4.07 (1H, d, J=10.1 Hz),

5.94 (1H, d, J=5.3 d, J=11.0 Hz), 5.01 (1H, m), 4.50-4.48 água (1H, de ¹H deuterada: 7.74 (1H,

6) rotação óptica específica: [a]ü²⁴+78.7° (c, 1.0, em

H₂O) , ou um sal do mesmo.