RU2238970C1 - Штамм mycelia sterilia лх-1-продуцент комплекса биологически активных веществ, обладающих рострегуляторными свойствами - Google Patents
Штамм mycelia sterilia лх-1-продуцент комплекса биологически активных веществ, обладающих рострегуляторными свойствами Download PDFInfo
- Publication number
- RU2238970C1 RU2238970C1 RU2003107088/13A RU2003107088A RU2238970C1 RU 2238970 C1 RU2238970 C1 RU 2238970C1 RU 2003107088/13 A RU2003107088/13 A RU 2003107088/13A RU 2003107088 A RU2003107088 A RU 2003107088A RU 2238970 C1 RU2238970 C1 RU 2238970C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- growth
- complex
- producer
- biologically active
- Prior art date
Links
Landscapes
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к микробиологической промышленности. Штамм гриба Mycelia sterilia ЛХ-1, хранящийся во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов, коллекционный номер ВКПМ F-862, является продуцентом комплекса биологически активных веществ, обладающих рострегуляторными свойствами. Изобретение позволяет получить препарат, используемый в качестве биостимуляторов роста растений. 3 табл.
Description
Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается новой культуры микроорганизмов, продуцирующей биологически активные вещества, обладающие рострегуляторными свойствами, которые могут быть использованы в сельском хозяйстве при обработке таких культур как картофель, огурцы, томаты и др.
Известно сообщество микроорганизмов для получения регуляторов роста растений, состоящее из микромицета Acremonium panaxeorum UHMU F-160, дрожжей Candida muscorum UHMU Y-411, Rhodotorula glutinis UHMU Y-42 и бактерий Azomonas macrocytogenes UHMU B-28 и Xantobacter sp UHMU B-29 /пат. РФ 2100932/.
Недостатком указанного сообщества является сложность и трудоемкость его культивирования.
Известны препараты, стимулирующие развитие и рост растений, полученные из чистых культур грибов-эндофитов, выделенных из корней пшеницы, овса, картофеля, пырея, мать-и-мачихи. Каждый препарат состоит из растворенных в 70% этиловом спирте продуктов метаболизма соответствующего ему эндофита. Обработка одним из указанных препаратов семян пшеницы, огурцов или клубней картофеля перед посевом способствовала повышению урожая /Гельцер Ф.Ю. Новые продуценты стимулирующих веществ для растений. Доклады ВАСХНИЛ, №5, 1975/.
Известен препарат “Симбиот-2”, стимулирующий урожайность растений, полученный из продуктов метаболизма грибов-эндофитов (ав.св. СССР №921488). В качестве сырья для его изготовления используют эндофиты, выделенные из корней облепихи.
Недостатком известных стимуляторов роста является невысокая активность препаратов, полученных из эндофитов растений, обладающих наибольшей лекарственной ценностью.
Известен препарат Симбионт-1, изготавливающийся из эндофитов, выделенных из корней жень-шеня. Препарат эффективен только при хороших условиях роста растений (ав.св. СССР №370932).
Общим недостатком известных препаратов является невозможность идентифицировать получаемую с помощью известных штаммов продукцию, содержание значительных количеств спирта в препарате.
Наиболее близким техническим решением к заявляемому изобретению является известный штамм Cylinddrocarpon magntsianum, являющийся продуцентом регулятора роста растений /патент Украины №17558/. Штамм выделен из корневой системы облепихи. В качестве питательной среды используют, г/л: глюкозу, KH2PO4, K2HPO4, MgSO4, К2SO4, MnSO4, FeSO4, аспарагин.
Основным его недостатком является сложность его получения в промышленном масштабе, штамм оказывает эффективность только в прикорневой зоне определенного растения-хозяина.
Целью изобретения является расширение источников сырья из новых штаммов и повышение активности регулятора роста.
Цель достигается тем, что из корней лоха выделен новый штамм Mycelia sterilia ЛХ-1. Штамм хранится в Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов, коллекционный номер ВКПМ F-862. Штамм предназначен для получения биостимулятора роста растений.
Штамм выделен из корней лоха. Видовое название культуры Mycelia sterilia, наименование штамм ЛХ-1. Родословная штамма: природный изолят.
Культурально-морфологические особенности штамма: Аэроб. Гриб дает медленно растущие волокнистые колонии серо-коричневого цвета, врастающие в агар. Окраска среды под воздействием гриба не изменяется. При микроскопировании было выявлено, что гифы гриба темноокрашенные, с большим содержанием капель масла. На гифах формируется значительное количество интеркалярных, собранных в цепочки шаровидных хламидоспор (от 3 до 5, реже 7 штук).
Продукт, синтезируемый штаммом - комплекс биологически активных веществ.
При культивировании штамма в течение 3-х недель в жидкой среде Гельцер с последующим выделением комплекса вторичных метоболитов полученный препарат увеличивает адсорбирующую поверхность злаковых культур на 30-70%, а также прирост гипокотиля экспериментальной линии горчицы 50-70% к контролю (воде).
Биологическую активность определяли, используя стандартную методику биотестов на семенах растений.
Штамм хранили на агаризованных питательных средах при температуре 4-7°С с пересевами один раз в 3 месяца.
Агаризованная среда Гельцер (ГА), г/л, рН 6,2-6,6:
Глюкоза 8,0
КН2РO4 0,6
К2НРO4 1,8
MgSO4 0,2
К2SO4 0,1
MnSO4 Следы
FeSO4 Следы
L-аспарагин 0,02
Агар-агар 15,0
Вода До 1000 мл
Размножение культуры осуществляли путем пересева на агаризованной среде Гельцер, состав которой представлен выше.
Условия и состав среды для ферментации: на жидкой питательной среде Гельцер продолжительность культивирования 20-30 дней при температуре 26±1°С. Состав среды: жидкая питательная среда Гельцер, г/л, рН 6,0-6,4:
Глюкоза 8,0
КН2РO4 0,6
К2НРO4 1,8
MgSO4 0,2
K2SO4 0,1
MnSO4 Следы
FeSO4 Следы
L-аспарагин 0,02
Вода До 1000 мл
Штамм не является зоопатогенным, не является фитопатогенным, не представляет опасности для окружающей среды.
Препарат на основе штамма ЛХ-1 получили при выращивании культуры в колбах. Культивирование в колбах проводили в два этапа - после первого цикла отбирали культуральную жидкость, добавляли свежую питательную среду в количестве 30% от первоначального объема и осуществляли второй цикл культивирования. При проведении биотестов и химических анализов использовали лиофильно высушенный фильтрат культуральной жидкости.
Содержание фитогормонов в препарате: индолилуксусную кислоту (ИУК), цитокинины (ЦК), гибберелины (ГА) - определяли хроматографическим методом.
Цитокинины представляют собой наиболее активные природные соединения, участвующие в гормональной регуляции онтогенеза растений и характеризующиеся способностью индуцировать деление растительных клеток.
Гибберелловая кислота ГА3 наиболее широко применяется в сельском хозяйстве как регулятор роста растений. Однако ГА7 представляет наибольший интерес, т.к. имеет более широкий спектр действия и физиологическую активность выше.
Индолилуксусная кислота (ИУК) является ростстимулятором, но из-за плохой растворимости в воде и относительно высокой стоимости имеет узкий спектр рекомендованых для обработки культур.
Все эти соединения, относящиеся к известным регуляторам роста растений, подробно описаны в литературе /Регуляторы роста растений. Под редакцией Г.С. Муровцева, М., 1979 г./.
Заявляемый штамм позволил получить одновременно все эти соединения, что значительно повысило биологическую активность препарата и одновременно повысило экономическую эффективность его применения.
Биологическая активность сухого препарата на основе заявляемого штамма на мятлике, сорт Деним, (контроль - вода) и содержание фитогормонов в этом препарате приведены в таблице 1.
В таблице 2 приведен элементный состав лиофилизированного препарата.
Содержание свободных углеводов, мг/г сух. веса: сахароза - 431, глюкоза - 181, фруктоза - 134, маннит - 145.
В препарате содержатся следующие аминокислоты:
лизин - 0,055, гистидин - 0,024, аспарагин - 0,005, серин - 0,096, глутамин - 0,025, глицин - 0,031, аланин - 0,040, валин - 0,061. Аминокислоты определяли методом ионнообменной хроматорграфии.
В препарате содержатся жирные кислоты, в том числе арахидоновая кислота, которая является важньм компонентом комплекса метоболитов, стимулирующая рост и развитие растений. Содержание жирных кислот определяли методом газожидкостной хроматографии.
В препарате также содержится аскорбиновая кислота и цитрин (витамин Р). Определялись методом цветных реакций.
Данные по химическому составу препарата, мг/г сух. веса:
Фитогормоны 28,450
Аминокислоты 0,166
Углеводы 834,000
Зольные элементы 14,500
Полученный биостимулятор осаждают этанолом, ацетоном, термоустойчив до 150°С, характеризуется биологической стабильностью, устойчив к воздействию микроорганизмов.
Изобретение характеризуется следующими примерами.
Пример 1.
Штамм Mycelia sterilia ЛХ-1 растет на богатой органической среде (жидком сусле) в условиях аэрации при 20-30°С, в течение 48 ч продуцирует 25 г вторметоболитов, проявляющих биостимулирующую активность. Культивирование штамма осуществляют на жидкой питательной среде Гельцер, продолжительность культивирования 20-30 дней при температуре 26±1°C. Состав среды: жидкая питательная среда Гельцер, г/л, рН 6,0-6,4:
Глюкоза 8,0
КН2РO4 0,6
К2НРO4 1,8
MgSO4 0,2
K2SO4 0,1
MnSO4 Следы
FeSO4 Следы
L-аспарагин 0,02
Вода До 1000 мл
В качестве источника углеродного питания использовали глюкозу в концентрации 1,5%. При культивировании на жидкой питательной среде заявляемый штамм требует дополнительный фактор роста - ферментализат БВК в количестве 0,2%. Выращивание осуществляют при 28-30°С, в условиях аэрации и перемешивании в колбах объемом 750 мм3 со 100 мл среды указанного состава в течение 48 ч на качалках (220 об/мин). При этом происходит подкисление среды до рН 4,7 за счет выделения органических кислот и СО в культуральную жидкость. Было установлено оптимальное значение рН для роста культуры Mycelia sterilia 6,8-7,0 и для синтеза метоболитов - 6,8-7,2.
Исследовали процесс синтеза метоболитов заявляемым штаммом в интервале температур 25-35°С. Для достижения необходимого значения рН приводили подтитровку 10%-ным раствором NaOH.
Условия проведения процесса: температура 28-30 град., рН 6,8-7,2, подача воздуха 0,5 л/л среды в 1 мин, скорость перемешивания 300 об/мин, время культивирования 18-20 ч.
Процесс идет стабильно, ассоциация устойчиво сохраняет свойство синтезировать метоболиты в пяти последовательных ферментациях.
Метоболиты, состав которых указан в таблице 1, синтезируемые заявляемым штаммом использовали при обработке посевов картофеля, огурцов, томатов, при обработке саженцев красной смородины и крыжовника.
Полученный жидкий препарат на основе заявляемого штамма осторожно перемешивали и применяли для обработки (внесение в почву) посадок сеянцев ели (внекорневая подкормка), картофеля (полив всходов), капусты поздней (подкормка рассады накануне высадки в грунт), томаты (внекорневая подкормка), огурцы (полив всходов). Вели морфофизиологические и фенологические наблюдения, учитывали урожай продукции, определяли некоторые параметры, характеризующие качество продукции. Результаты приведены в таблице 3. Контроль (100%) - показатели продукции с участка, не обрабатываемой заявляемым штаммом.
Заявляемый штамм осуществляет положительное влияние на растения посредством прямой и непосредственной стимуляции роста растений за счет синтеза различных метоболитов, полезных для растений. Препарат, изготовленный на основе заявляемого штамма, найдет широкое применение в современной агробиотехнологии.
Заявляемый штамм при проведении патентного и информационного поиска на уровне техники не обнаружен, в связи с чем можно сделать вывод о соответствии заявляемого изобретения условиям патентоспособности, предусмотренной Патентным законом РФ.
Claims (1)
- Штамм гриба Mycelia sterilia ЛХ-1 - продуцент комплекса биологически активных веществ, обладающих рострегуляторными свойствами, коллекционный номер ВКПМ F-862.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2003107088/13A RU2238970C1 (ru) | 2003-03-18 | 2003-03-18 | Штамм mycelia sterilia лх-1-продуцент комплекса биологически активных веществ, обладающих рострегуляторными свойствами |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2003107088/13A RU2238970C1 (ru) | 2003-03-18 | 2003-03-18 | Штамм mycelia sterilia лх-1-продуцент комплекса биологически активных веществ, обладающих рострегуляторными свойствами |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2238970C1 true RU2238970C1 (ru) | 2004-10-27 |
RU2003107088A RU2003107088A (ru) | 2004-11-10 |
Family
ID=33537725
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2003107088/13A RU2238970C1 (ru) | 2003-03-18 | 2003-03-18 | Штамм mycelia sterilia лх-1-продуцент комплекса биологически активных веществ, обладающих рострегуляторными свойствами |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2238970C1 (ru) |
-
2003
- 2003-03-18 RU RU2003107088/13A patent/RU2238970C1/ru not_active IP Right Cessation
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Sokolova et al. | Effect of phytohormones synthesized by rhizosphere bacteria on plants | |
RU2409658C1 (ru) | Посевной мицелий базидиомицета и способ его приготовления | |
CN111172066A (zh) | 一株巨大芽孢杆菌及其应用 | |
RU2430155C1 (ru) | Посевной мицелий базидиомицета и способ его приготовления | |
Kaewkam et al. | Utilization of Spirulina maxima to enhance yield and cordycepin content in Cordyceps militaris artificial cultivation. | |
RU2238970C1 (ru) | Штамм mycelia sterilia лх-1-продуцент комплекса биологически активных веществ, обладающих рострегуляторными свойствами | |
Elisashvili et al. | Extracellular polysaccharide production by culinary-medicinal Shiitake mushroom Lentinus edodes (Berk.) Singer and Pleurotus (Fr.) P. Karst. species depending on carbon and nitrogen source | |
US6238663B1 (en) | Method for treating hyperkeratotic disease with a Halobacterium halobium lysate | |
RU2237087C1 (ru) | Штамм cylindrocarpon radicicola - продуцент комплекса биологически активных веществ, обладающих рострегуляторными свойствами | |
RU2238971C1 (ru) | Штамм mycelia radicis var. ginseng-продуцент комплекса биологически активных веществ, обладающих рострегуляторными свойствами | |
RU2237088C1 (ru) | Штамм mycelia sterilia-продуцент комплекса биологически активных веществ, обладающих рострегуляторными свойствами | |
KR102371464B1 (ko) | 계란 껍질과 다양한 소재를 이용한 비료의 제조방법 | |
KR20160035860A (ko) | 진딧물 방제용 조성물 및 그 방제 방법 | |
RU2186847C2 (ru) | Штамм микромицета тrichoderma viride, шт.23, обладающий фунгицидными свойствами для получения комплексного биопрепарата со свойствами фунгицида и бактериального удобрения, способ получения комплексного биопрепарата, комплексный биопрепарат со свойствами фунгицида и бактериального удобрения | |
RU2675503C1 (ru) | Способ получения биологического препарата для стимуляции роста и защиты растений от заболеваний | |
RU2286324C1 (ru) | СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНОГО УДОБРЕНИЯ НА ОСНОВЕ БАКТЕРИЙ РОДА Azotobacter | |
RU2102416C1 (ru) | Способ получения ликопина | |
CN110183260A (zh) | 一种利用生物制氢发酵液制备的植物营养液及其应用 | |
RU2545403C2 (ru) | Соединение а-87774 или его соль, способ получения соединения и его соли и агрохимикат, содержащий соединение или его соль в качестве активного ингредиента | |
Sahur et al. | Isolation and characterization of indigenous rhizosphere bacteria producing gibberellic acid and indole acetic acid from local soybeans in South Sulawesi | |
Eshonkulov et al. | TECHNOLOGY OF DEEP CULTIVATION OF MEDICINAL FUNGUS SCHIZOPHYLLUM COMMUNE | |
Malinka | Saprophytic cultivation of Claviceps | |
RU2161884C1 (ru) | Сообщество микроорганизмов для получения регулятора роста растений, способ получения регулятора и регулятор роста растений | |
KR930000525B1 (ko) | 제초제와 식물성장억제제의 제조방법 및 그 조성물 | |
RU2103872C1 (ru) | Штамм дрожжей exophiala nigrum, используемый для обработки семян и выращивания растений |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PC4A | Invention patent assignment |
Effective date: 20050627 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160319 |