JPS5821886B2 - シヨクブツヨウサツキンサツダニザイ - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明者らは、新規抗生物質Ｂ−９８８９１が有用植物
の種々の病害に対し有効で、ダニの増殖を抑制し、しか
も薬害をともなわないという新知見を得、この新知見に
基づき本発明を完成した。

本発明は、抗生物質Ｂ−９８８９１を有効成分として含
有することを特徴とする植物用殺菌殺ダニ剤である。

本発明に使用する抗生物質Ｂ−９８８９１は、新規抗生
物質で、その製法は日本特許出願昭４９−３５２５４号
（昭和４９年３月２８日付出願）に記載され゛ており、
以下のとおりのものである。

抗生物質１３−９８８９１の生産菌はストレプトマイセ
ス属に属するが、たとえばニューギニアの土壌から分離
したストレプトマイセス・リモファシエンス（Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ ｒｉｍｏｆａｃｉｅｎｓ ）ＡＢ
−９８８９１と名付けた菌株等はもつとも有効に用いら
れる菌の一例である。

上記菌株は工業技術院微生物工業技術研究所に微工研菌
寄第２５４９号として寄託されている。

原菌の形態学的特徴と分類培地上の培養所見はたとえば
下記のとおりである。

α〕 形態的特徴 本菌は通常の分類培地上で気菌糸を形成し、車軸分枝を
示す。

輪生枝上の各分枝は直状である。

ある種の合成寒天培地たとえばグルコース・アスパラギ
ン寒天培地上ではまれにループ、フックも認められる。

胞子の形は卵形ないし円筒形であり、その大きさは０．
６〜０．８ Ｘ ０．７〜１．３μである。

胞子は通常３ないし１６個が連鎖しており、その表面は
平滑ないしいぼ状の突起が認められる。

通常の分類培地上で胞子の５、鞭毛胞子、菌核などの形
成が認められない。

（２）分類培地上の生育状態 本菌の分類培地上の所見は第１表に示すとおりである。

なお、とくに記載しないかぎり２８℃で２１日間観察し
た培養所見である。

また、表中（）内ハカラー・ハーモニー・マニュアル（
４版）（コンテイナー・コーポレーション・オブ・アメ
リカ）による色名の記号である。

０〕 生理的性質 （１）生育温度範囲 １５〜３８℃で生育するが２８〜３６℃でより良好な生
育と気菌糸の着生が認められる。

（２）ゼラチンの液化（２４℃、２８日培養）液化認め
られない。

（３）スターチ加水分解：陽性 （４）硝酸塩還元： バクト・ナイトレート・ブロス（ｌ５Ｐ−Ａ８）および
ツアペック液で陰性 （５）脱脂乳の凝固：陽性 ペプトン化：陽性 （６）メラニン様色素の生成 陽性（ペプトン・イースト・鉄寒天培地）陰性（チロシ
ン寒天培地） （７）炭素源利用性（プリトノ・ム・ゴツトリーブ寒天
培地） よ（利用される炭素源 イノシトール、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−グルコース、マ
ルトース、Ｄ−マンノーズ、スターチ、グリセリン、酢
酸ナトリウム、コノ・り酸ナトリウム、クエン酸ナトリ
ウム やや利用される炭素源 Ｄ−フラクトース、トレノ・ローズ 利用されない炭素源 エリスリトール、アドニトール、Ｄ−ソルビトール、Ｄ
−マンニトール、ヅルシトール、Ｄ−キジローズ、Ｌ−
アラビノース、Ｌ−ツルポーズ、ラムノーズ、メリビオ
ーズ、シュークローズ、ラクトース、ラフィノース、プ
リシン、ニスキュリン、イヌリン 上に示したように本菌においては基生菌糸の表面は、無
色ないし淡黄色、裏面は淡黄色ないし黄褐色ないし褐色
、気菌糸は黄白色あるいは綿状で黄橙色ないしやや灰色
を帯びた黄色、合成寒天培地上で淡黄褐色ないし褐色で
ある。

またいわゆる蛋白含有培地上のクロモゲニツク作用は弱
いが、ペプトン・イースト・鉄寒天上著明な黒褐色の可
溶性色素の産生が認められメラニン陽性である。

なおグルコース・ペプトン・ゼラチン上褐色の可溶性色
素とともに青緑色の可溶性色素の産生が認められる。

本菌の培養所見にもとづいてニス・ニー・ワックスマン
著ジ・アクチノミセーテス２巻（ザ・ウィリアム・アン
ド・ウイルキンス社 １９６２年）、コーオパレイテイ
ヴ・デスクリグジョン・オブ・タイプ・カルチュア・オ
ブ・ストレプトマイセス■（インターナショナル・ジャ
ーナル・オブ・システィマチイック・バクテリオロジー
１８巻、６９頁）、同■（１８巻、２７９頁）；同■（
１９巻、３９１頁）；同■（２２巻、２６５頁）ロッジ
ほか著、ザ・ジーナス・ストレプトヴアーテイシリウム
・ア・タフソノミック・スタディ（ジオルナーレ・ディ
・ミクロビオロシア １７巻１頁、１９６９年）その他
の文献に報告されている既知菌種と本菌との比較を行な
った結果、本菌バストレア” ）マイセス・リモファシ
エンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｒｉｍｏｆａｃｉ
ｅｎｓ ）’（特公昭４２−・７５９８）と類似してい
ることが判明した。

本菌とストレフトマイセス・リモファシエンスとの相違
点は第２表に示すとおりであるが、他の形、態上の特徴
、培養性質および生理的性質に関しては両者一致すると
ころが多い。

第２表にあげた相違点は本菌をストレフトマイセス・リ
モファシエンスと種を異にすると決定するには不充分と
考えられる。

しかじ本菌がデストマイシンＡ、Ｂを産生ぜず新規抗生
物質Ｂ−９８８９１を産生ずることにかんがみ本菌はス
トレプトマイセス・リモファシエンスとはストレインを
異にするものとみなし、ストレプトマイセス・リモファ
シエンスＡ；、 Ｂ −９８８９１と呼称することにし
た。

ストレプトマイセス属菌の一般的性状として蘭学上の性
質はきわめて変異しやすくストレプトマイセス・リモフ
ァシエンスＡＢ−９８８９１モ’ｃの培地上の所見、炭
素源の利用性などが変化しやすい。

したがって本菌の性質も上述のとおりに一定のものでな
く種々の変異株が容易に得られる。

もちろんそれらの変異が自然の原因に由来するものであ
っても各種変異誘起剤を用いて人工的に行なわれたもの
であってもさしつかえない。

培養に際しては、一般に微生物が同化しうる炭素源、消
化しうる窒素源および無機塩などを含有させた培地が使
用される。

また培地には必要に応じて微量栄養素、発育促進物質、
前駆物質などの微量有効物質を添加してもよい。

一般に微生物が同化しうる炭素源としてはぶどう糖、し
よ糖、糖蜜、でんぷん、デキストリン、グリセリンなど
があり、消化しうる窒素源としては肉エキス、大豆粉、
コーンステイープリカー、ペプトン、カゼイン、綿実粕
など、および硝酸塩類、アンモニウム化合物などの無機
窒素化合物などがあり、それらはいずれも有効に利用さ
れる。

培養は表面培養法によってもよいが、深部通気培養法に
よるのが通常である。

深部通気培養法による場合、培地の液性は中性附近にす
るのがよく、培養時の温度は２０〜３７℃附近に保つの
がよい。

しかしこれらの培養組成物、培地の液性、培養温度、攪
拌数などの培養条件は使用する菌株の種類や外部の条件
などに応じて好ましい結果が得られるように適宜調節、
選択されることはいうまでもない。

このようにして得られた培養物は抗生物質Ｂ−９８８９
１を多量に含有するが、培養液から目的とする本抗生物
質を採取するには、微生物の生産する代謝産物をその微
生物の培養液から採取するのに通常使用される分離手段
が適宜使用される。

たとえば抗生物質Ｂ−９８８９１は水溶性塩基性物質で
、主として培養沢液中に含まれるので、先ず、培養液に
沢過補助剤を加えて沢過し、菌体な除去する。

得られた培養涙液を適宜の吸着剤に接触させて有効成分
を吸着させ、次いで適宜の溶媒で有効物質を脱着させ、
分別採取する手段が有利に利用される。

吸着剤としては活性炭、吸着性樹脂、陽イオン交換樹脂
、活性アルミナ、シリカゲルなどが用いられ、あるいは
分子ふるいの如き分子量の差を利用した分離精製法が用
いられる。

溶出溶媒は吸着剤の種類、性質によって異なるが、たと
えば水溶性有機溶媒の含水溶液たとえば含水アセトン、
含水メタノール、含水エタノール、含水プロパツール、
含水ブタノールなどあるいは酸、アルカリ、緩衝液もし
くは無機塩もしくは有機塩の水溶液などが適宜用いられ
る。

さらに詳しく述べるならば、吸着剤として活性炭あるい
は吸着性樹脂を用いると培養沢液中の活性物質は中性お
よび弱塩基性で吸着され、アセトン、メタノール、プロ
パツールなどを適宜含有させた水または塩類あるいは酸
含有の水もしくは緩衝液などで溶出される。

また、本抗生物質は塩基性物質なので、陽イオン交換樹
脂に吸着され、これを適当な酸、アルカリもしくは緩衝
液により溶出する事が出来る。

陽イオン交換樹脂としては、たとえばＩＲＣ−５０（ロ
ーム アンド バース社製）、ＣＧ−５０（同）などの
樹脂が用いられ、樹脂塔に抗生物質３３−９８８９１を
吸着させ、希アンモニア水、緩衝液などを用いて溶出す
る事が出来る。

以上の他に抗生物質Ｂ−９８８９１はシリカゲル（メル
ク社製）を用いる吸着クロマトグラフィーによって精製
してもよ（、適当な溶剤たとえばメタノール、メチルア
ミン、水の混液で展開すると活性区分が溶出される。

また、たとえばセファデックス（５ｅｐｈａｄｅｘ ）
Ｇ−１５（７フルマシャ社製）のような分子ふるいの
性質を有している担体に本抗生物質を吸着させ、水また
は緩衝液などで溶出することにより精製することも出来
る。

精製方法としてこれら吸着剤あるいは分子ふるいの担体
を適宜組合せて行なってもよい。

かくして精製された抗生物質Ｂ−９８８９１はメタノー
ルまたはアセトンなどから無色粉末として得られる。

後記参考例２で得られた遊離の抗生物質Ｂ−９８８９１
の粉末の諸性質を次に示す。

物理化学的性状 （１）融点；２２０℃付近から徐々に着色し明瞭な融点
を示さない。

（２）比旋光度；＠ｌ賃−＋９１．８°±１Ｏ０（Ｃ−
〇、５、水）、＝＋６８．５°±１０°（Ｃ＝０．５、
Ｎ／１０ＨＣＩ ） （３）ＰＫ値；４．２±０．２．７，０±０．２（滴定
法）（４）分子量；５２９±１００（滴定法）（５）含
有元素および元素分析値 炭素、水素、窒素および酸素から成り、ハロゲン、リン
、硫黄などを含有しない。

Ｃ；４２．７３±１．５ Ｈ；６．０１±０．５ Ｎ；２０．４８±ｉ、。

Ｏ；３０．０５±２．０ （６）紫外線吸収スペクトル 紫外線吸収スペクトルは第１図に示す通りで、図中、実
線はｐＨ７、点線はＮ／１ＯＮａＯＨおよび破線はＮ／
ｌ０ＭＣｌ の水溶液中でそれぞれ測定したスペクトル
を示す。

その極大値は７ λｐ ２７１±２ｎｍ（Ｅ’％−１５７）ｍａＸＩＣ
ＩＩＬ ２Ｎ／１ＯＮａＯＨ２□１±２ｎｍ（Ｅ１％＝ｍａｘ
１ｃｍ１５
４） ２Ｎ／１０ＨＣ１２８ｏ±２ｎｍ（８１％−ｍａｘ
１ｃＩｒＬ２２８
） である。

（７）赤外線吸収スペクトル 臭化カリウムの錠剤として測定した赤外線吸収スペクト
ルは第２図に示す通りで、主な吸収（波数）は次の通り
である。

３３３０．３１６０（肩）、２９００．２８５０゜１６
６０．１６００．１５０５．１４８５．１４００．１３
７５．１２９５．１２３０１１１８０．１１３０．１０
６５．９１０．７８０．７００．５８０ａ二１゜ （８）薄層クロマトグラフィー〔シリカゲル（メルク社
製キーゼルゲルＨ２５４） 〕 溶 媒 系 Ｒｆ値 ジクロロホルムメタ／ −／Ｌ／ ： １７％ ０．
３４アンモニア水 （２：２：１−上層） プロパノールニピリジン：酢酸：水 ０．１５（１５
：１０：３：１０） 酢酸エチル：アセトン：酢酸：水 ０．３７（４５
： ５ ： ５ ： ４５−下層）（９）ヘーハークロ
マトグラフイ（ワットマンＡ１１紙を使用） 溶 媒 系 Ｒｆ値 ブタノール：酢酸：水 ０．１３（２：
２：１） グロパノール：水 ０．２７（７：
３） イソプロパツール：５％アンモニア水 ０．２６（６
：４） （１０） Ｐ紙電気泳動 （ワットマンＡ１１紙を使用、５００ｖ、２時間で全て
陰極側に移動した） 緩 衝 液 儂 Ｍ／１０グリシン十食塩−カセイソ ○０．７−ダ（
ｐＨ９，３２） 緩 衝 液 儂 Ｍ／１５リン酸（ｐＨ７，０５） ０１．Ｉ
Ｍ／１０クエン酸（ｐＨ３，６２） ０３．３水
に易溶であるが、その他の有機溶媒に難溶である。

（１２） 呈色反応 グレイクーリーバッハ、板目、過マンガン酸カリウム試
薬反応は陽性、フタール酸アニリン、ニンヒドリン試薬
反応は擬陽性、ポーリイ、エールリッヒ、ドラーゲンド
ルフ、バートン、過ヨード酸ベンチヂン、塩化第二鉄−
サルファサルチル酸試薬反応は陰性である。

（１３）安定性 酸性でや〜不安定であるが、中性ないし塩基性では安定
である。

生物学的性状 （１）抗菌スペクトル（ｉｎ ｖｉｔｒｏ ）寒天希釈
法および拡散法による抗生物質Ｂ−９８８９１の抗菌ス
ペクトルは第３表に示す通りである。

なお木表の「阻止円直径」は本抗生物質の５０００μｆ
１ｍｌ液に浸漬した沢紙円板（直径７ＷｔｒＩＬ）のま
わりに生ずる阻止円の直径を示す。

０．００１％、粉末寒天１．５％（ｐＨ７）使用前に下
記のビタミンをそれぞれ記載した最終製産となるように
培地に添加する。

サイアミン１μ？／ｒｕｌ、リボフラビン１μｆ７／ｒ
ｕｌ、パントテン酸カルシウム１μ９／ｒｕｌ！、ニア
シン１μ？／ｍｌ、ビオチア０．００５ ｔｔ ’ｆ！
／ｒｎｌ、葉酸０．５ μ？ ／７７１１、ピリドキシ
ン塩酸塩２μ？／ｍｌ、パラアミノ安息香酸０．５μｆ
／ｍｌ、ジアノコバラミン０．０００２μ？／ｍｌＢ：
エールリツヒ肉エキス０．５％、ポリペプトン０５％、
ＮａＣ１Ｏ，５％、粉末寒天１．５％（ｐＨ７） Ｃ：グリセリン３０％、エールリッヒ肉エキス０．５％
、ポリペプトン０５％、ＮａＣ１Ｏ，５％、粉末寒天１
５％（ｐＨ７，０） Ｄニゲルコース１．０％、（ＮＨ４）２ＨＰＯ４０，４
％、ＭｇＳＯ４・７Ｈ，２００，０７％、ＫＨ２Ｐ０４
ｏ、ｉ％、ＮａＣ１０，１％、ＦｅＳＯ４０，００３％
、粉末寒天１．５％（ｐＨ７，０）第３表から抗生物質
１３−９８８９１はある種のダラム陽性菌、ダラム陰性
菌、植物病原性真菌、一部の酵母などに対して抗菌力を
示すことがわかる。

なお抗生物質Ｂ−９８８９１の微生物定量には検定培地
としてシ甲糖３％を加えたバレイショ煎汁寒天培地（ｐ
Ｈ５）を、試験菌としてロドトルラ・ルブラＩＦＯ−０
９０７を用いる拡散法を採用した。

（２）毒性 マウスとラットを用いた急性毒性は次の通りである。

家兎の眼粘膜および皮膚に対してはいずれも１０００
ｐｐｍの濃度で１０日間の観察中何らの異常も認められ
なかった。

ヒメダカを用いた魚毒試験では２０ｐｐｍの濃度で７日
間飼育し、観察したが、その間何らの異常も認められな
かった。

既知抗生物質との比較 以上述べた諸性質から抗生物質Ｂ−９８９９１は核酸系
抗生物質と思われるが、これらに属する既知抗生物質の
うち紫外線スペクトルが比較的類似しているものとして
、グウゲロチン、アンセルマイシン、プラストサイジン
Ｓ１アスピキユラマイシン、ヒキ：シマイシン、モロヤ
マイシンＡ、 Ｂ（グウゲロチン類似物質）、Ｃ、サイ
トピリンなどが挙げられる。

しかし、これらの抗生物質の紫外線スペクトルの極大値
はすべて２６８ｎｍ（アルカリ性水溶液中）および２７
６ ｎ ｍ （酸性水溶液中）に認められ、抗生物質１
３−９８８９１のそれと異なる。

また、これらの抗生物質のうち化学構造の明らかな化合
物は全て発色団としてサイトシンを有している。

しかし抗生物質Ｂ−９８８９１の発色団は５−ハイドロ
キシメチルサイトシンであった。

このような結果から抗生物質Ｂ−９８８９１は明らかに
新規抗生物質と判断される。

新抗生物質１３−９８８９１はその生物学的性質に示さ
れるようにグラム陽性細菌、ダラム陰性細菌に弱い抗菌
性を示し、また抗酸性菌や白癖菌にも有効である。

マウスに対する急性毒性も弱く、眼粘膜や皮膚に対する
刺戟作用もほとんど認められない低毒性の抗生物質と考
えられる。

つぎに、抗生物質１３−９８８９１の具体的製法を参考
例により示す。

参考例 １ ３ ｌ 容量ノ坂ロｍｌルベンニクルコース１，０％、
酵母エキス０．３％、バクトドリプトン０．５％（ｐＨ
７）からなる培地５００ｍ１を注入し、次いで滅菌し、
これにストレプトマイセス・リモファシエンスＡ、Ｂ−
９８８９１株（ＩＦＯ： １３５９２、工業技術院微生
物工業技術研究所に微工研菌寄第２５４９号として寄託
）の斜面培養から１白金耳を接種したのち１２０往復／
分の往復振盪機上２８℃で４８時間培養した。

５０１容量のステンレスタンクにグルコース３０％、生
大豆粉２．２％、ポリペプトン０．３％、沈降性炭酸カ
ルシウム０．４％、アンチフロスＦ１０２（第一工業製
薬社製）０．０５％（ｐＨ７）の組成からなる培地３０
１を調製、滅菌し、先に培養した坂ロコルベンの全培養
液５００ｍ１をこれに接種して通気量３０１／分、攪拌
数１０ Ｏｒｐｍで２８℃４８時間深部培養を行ない、
種培養とした。

２００１容量のステンレスタンクに上記のタンクと同様
の組成からなる培地１００１を調製し、滅菌したのちこ
れに上記種培養１０１を加え通気量５０１／分、攪拌数
１０゜ｒｐｍで２８℃１１４時間深部培養を行なった。

かくして得られた８０１培養液中にかイフロスーパーセ
ル（２％Ｗ／Ｖ １ジヨン・マンビル社製）を加え、沢
過すると６０７の涙液が得られた。

この涙液をｐＨ８に調製後、６１のイオン交換樹脂ＩＲ
Ｃ−５０（ローム・アンド・ハース社製）ヲ充填した塔
を通過させ、４０１の水を、次いで４０１の０．５％ア
ンモニア水を通過させて洗浄したのち、４０７の２％ア
ンモニア水で有効成分を溶出させた。

得られた溶出液を３１のクロマト用活性炭（武田薬品社
製）を充填した塔を通過させ、２０７の水を、次いで２
０１の５％アセトンを通過させて洗浄したのち、１５７
０３０％アセトンおよび１５１の５０％アセトンで有効
成分を溶出させた。

有効区分を濃縮し、０．５１のメタノールを加えると、
褐色の３８１の粗粉末が得られた。

得られた粗粉末を水に溶かし、この水溶液を３５１のイ
オン交換樹脂ＣＧ−５０（ローム・アンド・・・−ス社
製）を充填した塔を通過させ、２、５ Ｊ （７）水を
、次いで１．５１の０．５％アンモニア水を通過させて
洗浄したのち１．５１のピリジン：酢酸：水（２：１：
９７）次いで１，５１のピリジン：酢酸：水（４：２：
９４）の緩衝液で有効成分を溶出させた。

得られた溶出液を濃縮し、メタノールを加えると黄褐色
粉末として抗生物質Ｂ−９８８９１の酢酸塩（１，６？
）が得られた。

参考例 ２ ２００１容量のステンレスタンクニゲルコース３．０％
、生大豆粉２２％、ポリペプトン０．３％、沈降性炭酸
カルシウム０．４％、アンチフロスＦ １．０２ （第
一工業製薬社製）０．０５％の組成からなる１００１の
培地（ｐＨ７）を調製、滅菌し、参考例１と同様の方法
で調製した坂ロコルベン培養の全培養液をこれに接種し
、通気量５０１／分、攪拌数１０ Ｏｒｐｍで２８℃４
８時間深部培養を行ない得られた培養液を種培養とした
。

２００Ｍ容量のステンレスタンクにグルコース５．０％
、生大豆粉３．５％、ファーマメディア（トレイダース
・オイル・ミル・カンパニー）１．０％、ＮａＣ１０，
５％、沈降性炭酸カルシウム０．５％（ｐＨ７）の組成
からなる培地１ＯＯＯ１を調製、滅菌し、これに上で得
られた種培養１００１を加え通気量５００１／分、攪拌
数１０ Ｏｒｐｍで２８℃、１１４時間深部培養を行な
った。

このようにして得られた培養液を参考例１と同様の方法
で処理すると７５０１の涙液が得られる。

このＰ液から２２５２の粗粉末が得られた。

得られた粗粉末を水に溶かし、この水溶液を５１のイオ
ン交換樹脂ＣＧ−５０を充填した塔を通過させ、２５１
の水を、次いで２５１の０．５％７ンモニア水で洗浄し
たのち、１７１の１％アンモニア水で有効成分を溶出さ
せた。

得られた溶出液を、あらかじめ１０１の２％アンモニア
水で処理した′１０１のクロマト用活性炭を充填した塔
を通過すせ、５０１の２％アンモニア水を、次いで５０
１の５％アセトン−２％アンモニア水を、更に５０１の
５％アセトンを通過させて洗浄したのち、８０１の２０
％アセトンで有効成分を溶出させた。

溶出液を濃縮し、メタノールを加えると無色の粉末とし
て遊離の抗生物質Ｂ−９８８９１（１５０グ）が得られ
た。

参考例 ３ 参考例２と同様の方法によって培養し、沢過して得られ
た７００１の涙液から粗粉末を得、その得られた粗粉末
を水に溶かし、この水溶液をイオン交換樹脂ＣＧ−５０
にて精製したのち、さらに５１のクロマト用活性炭を充
填した塔を通過させ、２５、ｅの水を、次いで２５１の
５％アセトンを通過させて洗浄したのち３５１の２０％
アセトン＝０．５％蟻酸で有効成分を溶出させた。

得られた溶出液を濃縮し、メタノールを加えると、微黄
色粉末として抗生物質１３−９８８９１の蟻酸塩（ｉｉ
５′？）が得られた。

この蟻酸塩の諸性質は次のとおりである。

ｍｐ ２２８℃（分解点） （ロ）’、￥＋８８．４°±１０°（Ｃ＝ ０．５、水
）＋６６９°±１０° （Ｃ＝ ０．５、Ｎ／１０ＨＣ
Ｉ） ＵＶ Ａｍａｘ ｎｍ（Ｅ”％） ＣＴＬ ｐＨ７，２７１（１４２） Ｎ／１０ＮａＯＨ２７１（１３９） Ｎ／ｌ０ＭＣｌ、 ２８０（２１０） 元素分析値 Ｃ４０，５０±１．５、Ｈ５，７７±０．５、Ｎ１８．
５５±１．０ また、２０％アセトン−０，５％蟻酸のかわりに２０％
アセトン−Ｎ／２０塩酸で溶出することにより塩酸塩が
得られた。

この塩酸塩の諸性質は次のとおりである。

ｍｐ ２２４℃（分解点） 師〕”、；＋８１．３°±１０°（Ｃ＝０．５、水）＋
６３３°±１０°（Ｃ＝０．５、Ｎ／１０ＨＣＩ） ＵＶλｍａｘ ｎｍ（Ｅ’％） ｃＩｒＬ ｐＨ７，２７２（１４２） Ｎ／１０ＮａＯＨ１２７２（１４７） Ｎ／ｌ０ＨＣＩ、 ２８０（２１３） 元素分析値 Ｃ３８，８１±１，５、Ｈ５，７５±０．５、Ｎ１８．
２５±１．０ これらの塩も遊離の抗生物質Ｂ−９８８９１とほぼ同程
度の生物活性を示した。

本発明の植物用殺菌殺ダニ剤には、抗生物質Ｂ−９８８
９１を有効成分として含有せしめる。

抗生物質Ｂ−９８８９１は、単独でも、あるいは植物に
適用されうるその他の薬剤と共存させてもよい。

剤型としては、公知の植物用殺菌剤の種々の剤型な適宜
採用しうる。

たとえば、液状担体（たとえば溶剤）に溶解するかある
いはこれに分散させ、または適当な固体担体（たとえば
希釈剤、増量剤）と混合するか、あるいはこれに吸着さ
せ、所要の場合はさらにこれらに乳化剤、分散剤、懸濁
剤、展着剤、浸透剤、湿潤剤、粘漿剤、安定剤などを添
加し、油剤、乳剤、水和剤、粉剤、錠剤、粒剤、噴霧剤
などの剤型として使用する。

主要有効成分の濃度は乳剤、水和剤などとしては１〜７
０％程度が適当であり、油剤、粉剤などとしては０．０
１〜１０％程度が適当であるが使用目的によってはこれ
らの濃度を適宜変更してもよい。

なお、乳剤、水和剤などは使用に際して水などで適宜希
釈、増量（たとえば１００〜１００００倍）して撒布す
るのがよい。

本発明の組成物に使用する溶剤にはたとえば水、アルコ
ール類（たとえばメチルアルコール、エチルアルコール
、エチレンクライコールナト）、エーテル類（たとえば
ジオキサン、テトラハイドロフラン、セロソルブなど）
、脂肪族炭化水素類（たとえばガソリン、ケロセン、灯
油、燃料油、機械油など）、芳香族炭化水素類（たとえ
ばベンゼン、トルエン、キシレン、ソルベントナフサ、
メチルナフタレンなど）やその他有機塩基類（たとえば
ピ１ノジン、アルデヒドコリジンなど）、ハロゲン化炭
化水素類（たとえばクロロホルム、四塩化炭素など）、
酸アミド類（たとえばジメチルホルムアミドなど）、エ
ステル類（たとえば酢酸エチルエステル、酢酸ブチルエ
ステル、ＪＷ７５酸のグリセリンエステルなど）、ニト
リル類（たとえばアセトニトリルなど）などの溶媒が適
当であり、これらの１種または２種以上の混合物を使用
する。

希釈、増量剤としては植物性粉末（たとえば大豆粉、タ
バコ粉、小麦粉、木粉など）、鉱物性粉末（たとえばカ
オリン、ベントナイト、酸性白土などのクレー類、滑石
粉、ロウ石粉などのタルク類、珪藻土、雲母粉などのシ
リカ類など）、さらにアルミナ、硫黄粉末、活性炭など
も用いられ、これらの１種または２種以上の混合物を使
用する。

また、乳化剤、展着剤、浸透剤、分散剤などとして使用
される界面活性剤としては、必要に応じて石けん類、高
級アルコールの硫酸エステル、アルキルスルホン酸、ア
ルキルアリールスルホン酸、第４級アンモニウム塩、オ
キシアルキルアミン、脂肪酸エステル、ポリアルキレン
オキサイド系、アンヒドロソルビトール系等が広く使用
されうる。

また、これらの目的には必要に応じてカゼイン、ゼラチ
ン、でん粉、アルギン酸、寒天、ポリビニルアルコール
、松根油、糠油、ベントナイト、クレゾール石けん等を
用いることもできる。

また、これらの組成物に他種の殺菌剤（たとえば銅系殺
菌剤、水銀系殺菌剤、有機イオウ系殺菌剤、フェノール
系殺菌剤など）、除草剤、殺虫剤（有機塩素系殺虫剤、
有機リン系殺虫剤、天然殺虫剤など）その他殺ダニ剤、
殺線虫剤、植物生長調整剤、共力剤、誘引剤、忌避剤、
香料、植物栄養剤、肥料などを配合し、混合使用するこ
ともできる。

本発明の農業用殺菌剤の使用量あるいは他種の薬剤との
混合の組み合わせおよびこれらの配合比などは、適用作
物の種類、生育段階、生育状況、栽培方法、疾病の種類
、発病の状態、薬剤の施用の時期およびそれに伴う環境
条件、施用方法、薬剤の経済的使用などの諸条件によっ
て異なるが、普通ｌＯアール当たり１〜３００２程度で
もよい。

使用濃度としては本発明の化合物を含有した終末濃度が
Ｉ ＩＩ ｆｆ ／ｒｕｌ 〜１０ ｍ９／ｍｌの範囲
であるのが適当である。

又、本発明の殺菌剤の使用方法としては、直接作物の表
面に散布あるいは土壌に潅注してもよい。

すなわち、作物に安全かつ有効に使用されるならばそれ
がどのような使用量、使用濃度または使用方法であろう
と本発明になんらの制約を加えるものではない。

本発明の植物用殺菌殺ダニ剤は、種々の植物の疾病に有
効で、さらに殺ダニ効果も併用する有用なものである。

たとえば、食用作物（例、オオムギ）、行用作物（例、
タバコ）、果樹（例、リンゴ）、林木（例、アラカシ）
、野菜（例、キラリ、マクワウリ、ピーマン、トマト）
、花弁（例、バラ）などのうどんこ病、たとえばトマト
、ジャガイモ等の疫病に対し特に有効である。

そして、毒性（例、急性毒性、眼粘膜および皮膚刺激作
用、魚毒等）も何ら問題はなく、極めて安全なものであ
る。

次に本発明の作用を示す試験例および実施例をあげる。

なお以下の表中にある各種薬剤は市販農薬でそシ１の有
効成分を下に列挙する。

また表中の濃度とはその有効成分の濃度である。

カラセン乳剤（ジニトロメチルヘプ ３７ ％チルフ
ェニルクロトネート） 濃厚武田マイシン（ジヒドロストレ １２．５％ブト
マイシン硫酸塩） ベノミル水和剤〔メチル−１−（ブ ５０ ％チルカ
ルバモイル）−２−ベンツイ ミダゾールカーバメート〕 ポリオキシンＡＬ水和剤（ポリオキシ １ｏ ％ン複
合体Ｂとして） モレスタン水和剤（６−メチルキノ ２５ ％キサリ
ン２・３−ジチオカーボネート） ケルセン乳剤〔１・１−ビス（クロ ４０ ％ルフェ
ニル）−２・２・２−トリク ロルエタノール〕 試験例 ｌ・ マクワウリうどんこ病防除試験 鉢植え栽培（葉数６〜７枚）のマクワウリ（品種銀泉）
の展開葉にすでに罹病している葉より重病病原菌をふり
かげて接種する。

一方抗生物質Ｂ−９８８９１を水で所定濃度となるよう
希釈し、最終３０００倍希釈となるよう展着剤ダイン（
武田薬品製）を加える。

また対照薬剤も同様に水で希釈する。

そしてこれらの薬液を接種２日後前記マクワウリに充分
量噴霧し、その後温室内で栽培管理し所定日数後に散布
時の展開葉上に形成される菌叢の面積率を測定した。

１区２反復で試験を行なった。

試験例 ２ ピーマンうどんこ病防除試験 鉢植え栽培（葉数９〜ｉｏ枚）のピーマン（品種カルフ
ォルニア ワンダー）の展開葉の裏面にすでに罹病して
いるピーマンの葉より重病病原菌＊をふりかけて接種し
２目抜試験例１と同様に調合した薬液を充分量噴霧し、
その後温室内で栽培管理し所定日数後に形成される菌叢
の面積率を調査した。

試験は１区２反復で行った。試験例 ３ トマト疫病防除試験 トマト（品種 大型福寿）を１２ＣＩｒＬ鉢で栽培しそ
の３０日苗を供試した。

１区４鉢の２反復の試側険を行った。

試験例１と同様に調合した薬液を充分量噴霧し、２日後
にトマト疫病菌の遊走子懸濁液を噴霧接種した。

４日間温室に保ちその後（第３および４葉）の病斑面積
率を調査した。

試験例 ４ オオムギうどんこ病防除試験 ５〜６葉期の植木鉢栽培のオオムギ（品種 滋賀へ石五
号）を２０℃の照明灯（プラントルックス 東芝製）つ
きの箱内で栽培し罹病オオムギの植木鉢に隣接して置い
て発病させた。

試験例１と同様にして得られた薬液を１０日間隔で充分
量３回噴霧散布し第３回目の散布後ＩＯ日口重前記条件
下で栽培管理を行った。

発病程度の調査はムギうどんこ病の発病面積率の基準（
農林省農政局）にしたがって発病面積率を求めた。

試験例 ５ タバコうどんこ病防除試験 第４番目の木葉が充分た展開した植木鉢栽培のタバコ（
品種 エムシー）を１区２鉢ずつ温室内に用意して実験
に供した。

発病は罹病株の植木鉢を隣接して置き自然感染によって
発病させた。

薬液は試験例１と同様にして調製しそれをＩＯ日日間子
２回充分量を噴霧した。

散布９日、１５日後に形成が認められた菌叢の面積率を
求めた。

試験例 ６ バラうどんこ病防除試験 鉢植えのバラをビニールノ・ウス内で管理栽培して実験
を行なった。

供試品種はスーパースターおよびアーリンフランシスの
２品種で１処理あたり３鉢を用いた。

試験例１と同様にして調製した薬液を７日間隔で３回、
充分量噴霧し、自然の発病をまった。

３回目の散布７日後に鉢あたり３枝の罹病小葉数を調べ
全調査小葉数に対する比率を算出した。

試験例 ７ リンゴうどんこ病防除試験 葉数５〜８枚のリンゴ（品種、国光）の実生苗を用いた
。

すでにある罹病葉上の重病病原菌を実生苗の上部からふ
りかけて接種し、温室内に放置。

コし２目抜試験例１と同様にして得られた薬液を充分量
噴霧した。

薬液散布後は温室内で栽培管理し１２日後に形成が認め
られた菌叢の面積率を測定した。

１区６反復で試験を行なった。試験例 ８ アラカシうどんこ病防除試験 約１０年生のアラカシ自然木の新抽出枝で試験を行なっ
た。

試験例１と同様にして得た薬液を噴霧散布した。

旧葉は著しく罹病しているため新抽出枝の新葉に自然感
染するのを待った。

処理葉は１区５０葉であった。

散布７日後処理葉の菌叢の面積率を測定した。

試験例 ９ 鉢（直径９ｃＩｒＬ）植えしたインゲンの実生苗（発芽
後５日）の木葉上にナミハダ＝ （Ｔ ｅｔｒａｎｙｃ
ｈｕｓｕｒｔｉｃａｅ ）の雌成虫５０頭前後を接種し
たのち、試験例１と同様にして得た薬液をスプレーガン
な用いて鉢肖り２０ｍ１散布した。

散布後鉢をファイトトロン（２８℃）中に置き、葉上の
生存ダニ数を調査し、散布直前のダニ数に対する減少率
を求めた。

試験例 １０ 薬剤耐性菌防除効果 鉢植え１ケ月のキラリ（品種四葉）の上部から。

うどんこ病罹病のキラリの葉をふりかけて接種し、１目
抜実験例１と同様にして得られた薬液を充分に噴霧して
およそ１４日後に形成される菌叢を新たな接種源として
別の無病キラリに接種する。

接種１日後前述と同様の薬剤を散布して７日後に形成さ
れる菌叢の面積率を測定した。

次に実施例により本発明の内容を具体的に説明するが、
本発明はこれのみに限定されるべきものではないし、こ
れらの濃度は広い範囲内で変動してもさしつかえない。

実施例 １ 抗生物質Ｂ−９８８９１１０部、リグニンスルホン酸ナ
トリウム２部、ポリオキシエチレンアルキルアリールエ
ーテル３部およびクレイ８５部を混合して水和剤を得る
。

本則を水で５００倍〜１０００倍に希釈して１０ａ当り
１００〜２００１の割合で農園芸作物に均一に噴霧する
。

実施例 ２ 抗生物質Ｂ−９８８９１０，５部およびクレイ９９．５
部を混合して粉剤を得る。

本則を１０ａあたり３〜５ｋｇ直接に散布する。

実施例 ３ 抗生物質Ｂ−９８８９１１０部、ポリオキシエチレンア
ルキルアリールエーテル５部および乳糖８５部を混合攪
拌して水溶剤とし水で所望濃度に稀釈して１０ａ当り１
００１！農園芸作物に均一に散布する。

実施例 ４ 抗生物質Ｂ−９８８９１５０部、メタノール５部、アミ
ンステアレート５部および水４０部を混合してなる水溶
液剤で、本則を水で稀釈し実施例１と同様に噴霧する。

実施例 ５ 抗生物質Ｂ−９８８９１０，５部、アラビアゴム５部、
トントナイト３０部およびタルク６４．５部を混合造粒
してなる粒剤を１０ａあたり３〜５ｋｇを直接に施用す
る。

以上の実施例に示した薬剤は前記試験例に示したと同様
、オオムギうどんこ病、バラうどんこ病、トマト疫病、
ベノミル剤耐性のキラリうどんこ病菌など各種作物の諸
病虫害防除剤として極めて卓越した防除効果を示した。

【図面の簡単な説明】

第１図は抗生物質Ｂ−９８８９１の水溶液での紫外部吸
収スペクトルを示す。 第２図は抗生物質Ｂ−９８８９１の臭化カリウムを用い
て測定した光外部吸収スペクトルを示す。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ 抗生物質Ｂ−９８８９１を有効成分として含有する
   ことを特徴とする植物用殺菌殺ダニ剤。