BR112014022273B1

BR112014022273B1 - método de preparação para um pó de proteína do plasma de ave doméstica de baixo conteúdo de cinza

Info

Publication number: BR112014022273B1
Application number: BR112014022273-8A
Authority: BR
Inventors: Guoxiang Cheng; Guoyong Jiang; Wei Yu; Yong Pan; Jun Zhang; Daming Zhu; Minggang Liu; Kaibao Xiong
Original assignee: Shanghai Genon Biological Product Co., Ltd.
Priority date: 2012-03-09
Filing date: 2013-03-08
Publication date: 2020-06-30
Also published as: EP2823714B1; EP2823714A4; EP2823714A1; CN102599332A; US9578889B2; CN102599332B; JP2015511485A; CA2866741A1; RU2604190C2; US20150056363A1; PL2823714T3; JP5990286B2; MX351742B; MX2014010891A; CA2866741C; RU2014140683A; ES2655213T3; WO2013131494A1

Abstract

A presente invenção refere-se a um método para produzir um pó de proteína de ave doméstica de baixa cinza através da utilização de sangue de aves domésticas. Especificamente, o método da presente invenção compreende as etapas de: misturar o sangue de ave doméstica com um anticoagulante para obter todo o sangue anticoagulado; centrifugar separando todo o sangue anticoagulado para obter o liquido do plasma; descalcificar o liquido de plasma através de uma reação de precipitação, ultrafiltrar o liquido de plasma através de uma membrana de ultra-filtração; emulsificar e nano-filtrar para obter o liquido do plasma concentrado; e secar o liquido de plasma concentrado para obter o pó de proteína de plasma de ave doméstica. O método da presente invenção contornando, efetivamente, as falhas no difícil processamento profundo do sangue de aves domésticas, conseguindo a reciclagem da fonte de sangue de ave doméstica, evitando fontes residuais, e reduzindo a poluição do meio; e o pó de proteína de plasma produzido tendo a vantagem de alto conteúdo de proteína, boa palatabilidade, amino ácido balançado e do gênero.

Description

MÉTODO DE PREPARAÇÃO PARA UM PÓ DE PROTEÍNA DO PLASMA DE AVE DOMÉSTICA DE BAIXO CONTEÚDO DE CINZA

Campo da invenção

[001] A invenção se refere ao campo da biotecnologia e agricultura moderna; e, em particular, a um método para produção de pó de proteína de plasma de ave doméstica com baixa-cinza através da utilização do sangue de ave doméstica.

Antecedentes da invenção

[002] O abate cresceu rapidamente na China. Uma grande quantidade de subprodutos tais como sangue é produzido, enquanto a ave doméstica é abatida para produção de carne para alimentação. De acordo com a estatística, a quantidade total de sangue de ave doméstica na China é mais do que um milhão de toneladas por ano, que pode pelo menos ser utilizada para produzir cerca de 130,000 toneladas de produtos em pó de proteínas animais. Entretanto, devido a alguns problemas, tais como insuficiência de método de abate de sangue de aves, alto conteúdo de cálcio, fácil ajuste rápido, alta viscosidade e baixo conteúdo de matéria seca, etc., sem meio efetivo para processamento do sangue de aves domésticas e utilização está disponível em casa e fora. Devido a algumas razões, tais como perda de tecnologia de processamento intensivo em grande escala, estas fontes de proteínas não são razoavelmente utilizados, resultando em um grande resíduo de quantidade grande de fontes de proteína de alta qualidade.

[003] Atualmente, existe uma perda séria de fontes de proteína na China, 75% de produção de alimento de soja depende da importação, e 70% de produção e pó de peixe depende da importação. A alta dependência na importação e materiais de proteína é restrita aos gargalos no desenvolvimento de cadeias industriais de agropecuário animal na China. O propósito do 12° Plano Quinquenal (12th five- year) da indústria de suprimento na China é para construir a demonstração de bases nas quais a proteína de alta qualidade é produzida através de processamento profundo pelo uso de subprodutos do processamento animal.

[004] Consequentemente, existe uma necessidade urgente para desenvolver métodos de processamento profundo de fontes de sangue de aves domésticas, especialmente, o método para preparo de pó de proteína de plasma de ave doméstica.

Descrição detalhada

[005] O objetivo da presente é prover um método para produzir pó de proteína de plasma de ave doméstica de baixa cinza através da utilização de sangue de ave doméstica.

[006] O outro objetivo da presente invenção é prover um alto conteúdo de proteína, baixo conteúdo de cinza no pó de proteína de plasma de ave doméstica e uso do mesmo.

[007] No primeiro aspecto da presente invenção, um método de preparação para alto conteúdo de proteína, o pó de proteína no plasma de ave doméstica de baixa-cinza é provido, o qual inclui as etapas a seguir:

(a) misturar o sangue de ave doméstica com anticoagulante, de modo a obter todo o sangue anticoagulado;
(b) centrifugar todo o sangue anticoagulado obtido da etapa (a) para coletar o liquido claro, de modo a obter o liquido do plasma;
(c) adicionar o agente descalcificante dentro do liquido de plasma obtido na etapa (b), e conduzir a reação de precipitação, de modo a obter o liquido de reação de plasma precipitado;
(d) remover o precipitado através da centrifugação do liquido de reação do plasma obtido na etapa (c), de modo a obter o liquido de plasma descalcificado;
(e) processar por ultrafiltração o liquido de plasma descalcificado obtido na etapa (d) usando uma membrana de ultra-filtragem, e coletar o filtrado, de modo a obter o liquido de plasma processado por ultrafiltração;
(f) adicionar emulsificante para o liquido de plasma processado por ultrafiltração obtido da etapa (e), de modo a obter o liquido de plasma emulsificado;
(g) submeter o liquido de plasma emulsificado obtido na etapa (f) à nanofiltração para obter um plasma concentrado; e
(h) secar o concentrado de plasma obtido na etapa (g), de modo a obter o pó de proteína de plasma de aves domésticas.

[008] Em uma outra concretização preferida, o sangue da ave vem de galinhas ou de pássaros.

[009] Em uma outra concretização preferida, as aves são selecionadas de galinhas, patos, ou gansos; os pássaros são selecionados de pombo ou pardal.

[010] Em uma outra concretização preferida, na etapa (a), o anticoagulante é citrato de sódio, e a quantidade de anticoagulante adicionado é de 0,1 ~5% (p/p) do sangue total.

[011] Em uma outra concretização preferida, a quantidade de anticoagulante adicionado é de 0,4 ~2% (p/p) do sangue total; preferivelmente, de 0,5 ~1% (peso/peso), mais preferivelmente, 1% (peso/peso).

[012] Em uma outra concretização preferida, na etapa (a), o anticoagulante é preparado como solução de anticoagulante aquoso com a concentração e 8 ~15% em peso, e então a solução de anticoagulante aquoso é misturada com o sangue da ave doméstica, de modo a obter todo o sangue anticoagulado.

[013] Em uma outra concretização preferida, a água para preparo do anticoagulante é água pura, ou a água filtrada através de membrana de nanofiltração com um peso molecular de 200 (água permeando a membrana).

[014] Em uma outra concretização, existe uma etapa entre a etapa (a) e a etapa (b): o sangue total anticoagulado é tratado por pré-filtragem para remover as impurezas tais como cabelo, pedras e assim por diante, de modo a obter o sangue total anticoagulado pré-filtrado.

[015] Em uma outra concretização preferida, o processo de centrifugação na etapa (b) utiliza centrifuga de tubo; e/ou o processo de centrifugação na etapa d) utiliza centrifuga de disco.

[016] Em uma outra concretização preferida, a velocidade da centrifuga do processo de centrifugação na etapa (b) é de 6000-16000 r/minuto, preferivelmente, de 11,000 r/minutos.

[017] Em uma outra concretização preferida, a velocidade da centrifuga do processo de centrifugação na etapa (d) é de 8000-15000 r/minutos, preferivelmente de 11,000 r/minutos.

[018] Em uma outra concretização preferida, a etapa (b) compreende adicionalmente a etapa a seguir: o plasma separado é crio-preservado e a temperatura para a crio-preservação é de 2~10°C; preferivelmente 4°C.

[019] Em uma outra concretização preferida, o agente de descalcificação na etapa (c) compreende um carbonato solúvel em água (por exemplo, carbonato de sódio, carbonato de potássio, carbonato de amônia, ou uma combinação dos mesmos/ e/ou

[020] Na etapa (c), a quantidade de agente descalcificante é de 0,02 ~0,5% (peso/peso) do líquido do plasma obtido na etapa (c) (preferivelmente 0,05~0,3% (peso/peso), mais preferivelmente, 0,01% (peso/peso); e/ou

[021] Na etapa (f), a quantidade do emulsificante adicionado é de 0,01 ~0,5% (peso/peso) do líquido do plasma obtido na etapa (e); e o emulsificante é selecionado de: monoglicerídeos de ácido graxo, éster de sorbitol, fosfolipídio de soja, ou uma combinação destes; e/ou

[022] Na etapa (h), quando a secagem, secagem por pulverização é utilizada, e a temperatura do ar de entrada é de 220°C~230°C, enquanto a temperatura do ar de saída é de 80°C ~ 85°C.

[023] Em uma outra concretização preferida, na etapa (c), o tempo de reação de precipitação é de 0,5 - 4 horas.

[024] Em uma outra concretização preferida, na etapa (c), o carbonato de sódio é preparado como a solução aquosa com a concentração e 20% em peso, e então é lentamente adicionado dentro do líquido do plasma.

[025] Em uma outra concretização preferida, a quantidade de emulsificante adicionado é de 0,01 ~0,1% (peso/peso) do líquido do plasma obtido na etapa (e): e o emulsificante é éster de sorbitol.

[026] Em uma outra concretização preferida, na etapa (e), a membrana de ultra-filtração é uma membrana de ultra-filtragem com peso molecular de 300,000 - 500,00; e/ou

[027] Na etapa (g), a nanofiltração é pré-formada usando uma membrana de nano=filtração com um peso molecular de 200- 1000, a proporção de volume do concentrado e plasma para filtrado é de 1:2 ~4, e o concentrado de plasma é colhido.

[028] Em uma outra concretização preferida, na etapa (e), a membrana de ultra-filtração é uma membrana de ultra-filtragem com um peso molecular maior que 300,000.

[029] Em uma outra concretização preferida, na etapa (e), a membrana de ultra-filtragem é uma membrana de ultrafiltração com um peso molecular de 350,000-500,000.

[030] Em uma outra concretização preferida, a membrana de ultra-filtração é uma membrana de ultra-filtragem com peso molecular de 400,000.

[031] Em uma outra concretização preferida, a membrana de nanofiltragem é uma membrana de nanofiltração com peso molecular de 200-500, preferivelmente, com um peso molecular de 200.

[032] Em uma outra concretização preferida, o método inclui ainda a etapa a seguir: misturar o pó de proteína do plasma seco e o componente selecionado a partir de: cereais, milho, soja e trigo, para obter um suprimento granular.

[033] No segundo aspecto da presente invenção, um pó de proteína de plasma de ave doméstica é provido. No pó de proteína, o conteúdo de proteína é ≥ 70%, o conteúdo de imunoglobulina é ≥ 14% e o conteúdo de cinza é ≤ 15%.

[034] Em uma outra concretização preferida, o conteúdo de proteína é 70 ~78%; o conteúdo de imunoglobulina é de 14 ~30%; e o conteúdo de cinza é de 8 ~15%.

[035] Em uma outra concretização preferida, o pó de proteína de plasma é preparado através do método de acordo com o primeiro aspecto da presente invenção.

[036] No terceiro aspecto da presente invenção, o uso do pó de proteína de acordo com o segundo aspecto da presente invenção é provido, o qual pode ser utilizado para preparar a composição de suprimento ou a composição de alimento.

[037] Deve ser entendido que na presente invenção, as características técnicas especificamente acima e abaixo (tal como os Exemplos) podem ser combinado uma com a outra, constituindo, desse modo, uma solução nova ou uma solução técnica preferida que não necessite ser individualmente descrita.

Descrição das figuras

[038] A figura 1 ilustra um diagrama de fluxo para preparação do pó da proteína do plasma usando o sangue de aves domésticas.

Descrição detalhada da invenção

[039] Através de uma pesquisa compreensiva e intensiva, os inventores descobriram inesperadamente um método para preparar o pó de proteína de plasma do sangue de aves domésticas de baixa-cinza. Com base nos tratamentos tais como anticoagulação, centrifugação, etc., a dificuldade de nanofiltração para o sangue de ave doméstica é efetivamente resolvido pelo método através da precipitação da descalcificação, e remoção de fibrinogênio e muito do óleo e óleo residual a partir da emulsificação por ultrafiltração, facilitando, desse modo, as operações subsequentes, e melhorando significativamente a eficiência de todo o processo de preparação. O pó de proteína do plasma preparado através do método têm muitas vantagens, tais como alto conteúdo de proteína (especialmente o conteúdo de imunoglobulina), baixo conteúdo de cinza, palatabilidade, e aminoácido balanceado, etc., e ele é idealmente apropriado para suprimento e alimentos. Com base nas descobertas acima, a presente invenção é acompanhada.

Definição:

[040] Atualmente, "aves domésticas" também conhecidas como espécies de pássaros, incluem pássaros e aves domésticas, tais como, mas não limitados a, galinhas, patos, gansos, pombos, pardal e assim por diante. Preferivelmente, a ave doméstica é galinha.

Método de preparação:

[041] O pó de proteína de plasma de ave doméstica com alto conteúdo de proteína e baixo conteúdo de zinca pode ser obtido através do método de preparação (ou processamento) do ó de proteína de plasma do sangue de ave doméstica de acordo com a presente invenção através do uso dos subprodutos do processamento do sangue de aves domésticas como matéria prima, e tecnologias de anti-coagulação, ultrafiltração, emulsão, nanofiltração e secagem por pulverização.

[042] Em particular, isto inclui as etapas a seguir:

(a) misturar o sangue de ave doméstica com anticoagulante, de modo a obter todo o sangue anticoagulado;
(b) centrifugar todo o sangue anticoagulado obtido da etapa (a) para coletar o liquido claro, de modo a obter o a solução do plasma;
(c) adicionar o agente descalcificante dentro do liquido de plasma obtido na etapa (b), e conduzir a reação de precipitação, de modo a obter o liquido de reação de plasma precipitado;
(d) remover o precipitado através da centrifugação do liquido de reação do plasma obtido na etapa (c), de modo a obter o liquido de plasma descalcificado;
(e) processar por ultrafiltração o liquido de plasma descalcificado obtido na etapa (d) usando uma membrana de ultra-filtragem, e coletar o filtrado, de modo a obter o liquido de plasma processado por ultrafiltração;
(f) adicionar emulsificante para o liquido de plasma processado por ultrafiltração obtido da etapa (e), de modo a obter o liquido de plasma emulsificado;
(g) submeter o liquido de plasma emulsificado obtido na etapa (f) à nanofiltração para obter um plasma concentrado; e
(h) secar o concentrado de plasma obtido na etapa (g), de modo a obter o pó de proteína de plasma de aves domésticas.

Matéria prima:

[043] O sangue na presente invenção é obtido de aves domésticas, incluindo aves domésticas e pássaros. Deve ser apreciado por um técnico no assunto, que o componente no sangue das aves domésticas é muito similar, portanto, qualquer ave doméstica está incluída na invenção. O sangue de várias aves domésticas pode ser utilizado como matéria prima no método de preparação para produzir o pó de proteína do sangue de ave doméstica na presente invenção. A ave doméstica inclui, mas não está limitada a: galinhas, patos, gansos, pombos, pardais e assim por diante. Preferivelmente, a ave doméstica é utilizada. Preferivelmente, o sangue fresco de aves saudáveis é utilizado como matéria prima para produção de pó de proteína do plasma de baixo conteúdo de cinza.

Anticoagulação do sangue de ave doméstica:

[044] O tratamento com anticoagulação na presente invenção pode ser realizado através da tecnologia bem conhecida pelos técnicos no assunto. Por exemplo, o anticoagulante pode ser preparado como 8~15% em peso da solução de anticoagulante aquosa, e o sangue de ave doméstica é misturado com a solução anticoagulante aquosa, obtendo, desse modo todo o sangue anticoagulado; assim, a água utilizada pra preparação da solução aquosa do anticoagulante pode ser água pura, ou água filtrada através de uma membrana de nanofiltração com um peso molecular de 200 (na permeação da água, a membrana é utilizada).

[045] A quantidade de anticoagulante adicionado pode ser determinada de acordo com as propriedades da matéria prima do sangue de ave doméstica (por exemplo, o grau de dificuldade na anticoagulação). Preferivelmente, a quantidade de anticoagulante adicionado é de 0,1~5% do sangue total (peso/peso); mais preferivelmente, 0,4 ~2% (peso/peso), mais preferivelmente, 1% (peso/peso).

[046] Preferivelmente, o tratamento de anticoagulante é conduzido de acordo com as etapas a seguir:

[047] O anticoagulante é dissolvido dentro da água de acordo com 8 ~15% em peso (peso/peso) para obter a solução de anticoagulante aquosa, a solução anticoagulante aquosa é carregada dentro de um recipiente de pulverização; a solução do anticoagulante aquosa é misturada com o sangue de ave doméstica, onde a quantidade da solução anticoagulante aquosa adicionada é 1 ~30% do sangue de ave doméstica (volume/volume) (preferivelmente 5~15% (volume/volume)), ou a quantidade da solução anticoagulante aquosa adicionada é 0,1 ~5% da quantidade total de todo o sangue (peso/peso); e a mistura resultante é agitada de modo que a solução anticoagulante aquosa é misturada igualmente com o sangue de ave doméstica.

Separação por centrifugação:

[048] Após a coleta, todo o sangue anticoagulado obtido a partir da concentração do sangue obtido na etapa acima, todo o sangue anticoagulado é preferivelmente tratado por pré- filtragem (por exemplo, através de bolsa de filtro) para remover as impurezas, tais como cabelo, pedras e assim por diante, e então é centrifugado pelo uso do sangue em centrifuga de tubos (por exemplo, na velocidade de rotação é 8000 - 15000 rpm/minuto, preferivelmente, 11000 rpm/minutos), de modo a obter o liquido claro, ou seja, o liquido do plasma da ave doméstica. Preferivelmente, o sangue de ave doméstica anticoagulado é centrifugado imediatamente durante o tratamento da pré-filtragem.

[049] Durante a separação por anticoagulação e centrifugação, o sangue de ave doméstica não pode ser imediatamente submetido a separação e purificação subsequente, e é necessário para ser criopreservado. Preferivelmente, o liquido do plasma separado e o liquido hemócito são criopreservado, respectivamente, na temperatura de armazenamento de 1-10°C (preferivelmente, 4°C).

Descalcificação do plasma:

[050] O agente de descalcificação é adicionado dentro do liquido do plasma obtido na etapa acima, dito agente de descalcificação inclui carbonato de cálcio solúvel em água (tal como carbonato de sódio, carbonato de potássio, carbonato de amônio, ou uma combinação dos mesmos), a quantidade de agente de descalcificação adicionado é 0,02 ~0,5% (peso/peso) do liquido do plasma obtido na etapa acima para neutralização de ions de cálcio livre no plasma e produção de carbonato de cálcio precipitado, e este precipitado é removido pela centrifugação.

Ultra-filtraçãodo plasma:

[051] O liquido do plasma de ave doméstica obtido na etapa acima é submetido à ultra-filtração, e a ultrafiltração pode ser realizada de acordo com a rotina de operação conhecida da técnica, por exemplo, ultrafiltração é conduzida pelo uso de uma membrana de filtro com peso molecular de 300,000 ~500,000 (preferivelmente, uma membrana de filtro com peso molecular de 400,000) para remoção de fibrinogênio e mais óleo, e o filtrado é colhido, obtendo, desse modo, o plasma ultra- filtrado.

[052] Na presente invenção, a tecnologia do biofilme moderno é adotada, e a membrana de ultrafiltração com peso molecular de 300,000 ~500,000 é utilizado para ultrafiltração, conseguindo, desse modo, a remoção do fibrinogênio do sangue de ave doméstica e algum óleo, e contornar os problemas, tais como alta viscosidade do sangue de ave doméstica e a dificuldade de nanofiltração para o sangue de ave doméstica.

Emulsificação:

[053] As etapas de emulsificação são etapas de operação de rotina, o emulsificante é adicionado dentro do plasma obtido na etapa acima para emulsificar o óleo residual, e um emulsificante são selecionados a partir do grupo consistindo de: monoglicerídeos de ácido graxo, éster de sorbitol, fosfolipídios de soja, preferivelmente, éster de soja.

[054] A quantidade de emulsificante adicionado pode ser determinada pelo conteúdo de óleo do liquido de plasma. Preferivelmente, a quantidade do emulsificante adicionado é de 0,01~0,5% (ou 0,05% ~0,1%) (peso/peso) do liquido do plasma na etapa acima.

Nanofiltragem do plasma:

[055] O liquido do plasma emulsificado obtido na etapa acima é submetido à nanofiltragem, onde a nano-filtração pode ser realizada de acordo com a operação de rotina da técnica, por exemplo, o plasma emulsificado é concentrado pelo uso de uma membrana com peso molecular de 200-1000 (preferivelmente o peso molecular de 200) através da nanofiltração, resultando na proporção do volume de plasma concentrada por filtragem como 1: 1~6 (preferivelmente, de 1:2 ~4 ou 1: 3~4), e mais de água e sais no plasma é removido, obtendo, desse modo o concentrado do plasma.

[056] De acordo com a presente invenção, a concentração na nano-filtração, o conteúdo de matéria seca no liquido do plasma de ave doméstica pode ser aumentado, e o custo para secagem do plasma pode ser grandemente reduzido.

Secagem:

[057] Finalmente, o concentrado do plasma obtido na etapa acima é seco, e a secagem pode ser realizada pela operação comumente utilizada por um técnico no assunto, preferivelmente, secagem por pulverização, onde a temperatura de entrada pode ser 220°C ~230°C, enquanto a temperatura de saída pode ser 80°C ~85°C.

[058] O método da presente invenção será ilustrado adicionalmente com base na figura 1 em combinação com as concretizações preferidas:

(1) a solução de anticoagulante aquosa preparada de acordo com uma proporção em peso de anticoagulante para água de 8~15% em peso (peso/peso) é adicionada dentro do sangue de ave doméstica coletado, a quantidade de solução de anticoagulante aquoso adicionado é de 5~20% de sangue de ave doméstica (volume/volume), a mistura resultante é agitada, de modo que a solução de anticoagulante aquoso é misturada igualmente com o sangue de ave doméstica, obtendo, desse modo, todo o sangue anticoagulado.
(2) o sangue de ave doméstica com anticoagulante é colhido, filtrado através de uma bolsa de filtro, separado pela centrifuga de tubo (11000 rpm/minuto), obtendo, desse modo, o liquido claro, que é o liquido de plasma de ave doméstica e armazenada a 4°C.
(3) a solução de carbonato de sódio (tal como 20% em peso da solução de carbonato de sódio aquoso) é adicionada no liquido do plasma armazenado a 4°C, e a mistura resultante é agitada por 0,5 ~4 horas, por condução da reação de precipitação.
(4) durante a precipitação, a reação do liquido do plasma é centrifugada através de uma centrifuga de disco, por remoção do precipitado e obtendo o liquido do plasma descalcificado.
(5) o liquido do plasma descalcificado é submetido a ultra- filtração usando uma membrana do filtro com o peso molecular de 300,000~500,000 para remover o fibrinogênio e muito do óleo, obtendo, desse modo, o filtrado do plasma.
(6) um emulsificante é adicionado dentro do filtrado do plasma para emulsificar o óleo residual, onde a quantidade do emulsificante adicionado é de 0,02~0,1% (peso/peso) do filtrado do plasma da etapa (5), obtendo desse modo o plasma emulsificado.
(7) o plasma emulsificado é concentrado através de nano- filtragem usando uma membrana com peso molecular de 200, de acordo com a proporção do volume de 1:2 ~4 (ou seja, plasma concentrado: água filtrada) (preferivelmente 1: 3~4), para remoção de muito da água e sais, obtendo, desse modo o plasma concentrado.
(8) durante a nano-filtragem, o liquido do plasma de ave doméstica é seco por pulverização, sendo que a temperatura de entrada de ar é controlada a 220 ~230°C, e a temperatura de saída são controladas a 75 ~90°C. Durante a secagem por pulverização, o teste, e a embalagem, do pó de proteína do plasma do sangue de ave doméstica é obtido.

Pó de proteína do plasma:

[059] O pó de proteína de plasma no sangue de aves domésticas provido pela presente invenção possui indicadores excelentes, onde o conteúdo de proteína está acima de 70%, no qual os componentes funcionais, globulina imune (tais como IgY) contado para 14%, palatabilidade é boa, existe um aminoácido balanceado, o conteúdo de cinza é menor que 15%, o conteúdo de umidade não é maior que 9%, e o conteúdo de sal é menor que 2,6%.

USO:

[060] O pó de proteína do plasma do sangue de ave doméstica provido pela presente invenção pode ser utilizado no campo, tal como suprimento e alimento do gênero. Por exemplo, o pó de proteína no plasma seco pode ser misturado com os componentes selecionados a partir do grupo consistindo de: cereais, milho, soja e trigo, para obter uma composição de suprimento e composição de alimentos, para alimentação de filhotes de cães desmamados.

[061] Durante o processo para preparo do pó de proteína do plasma do sangue de aves domésticas provido na presente invenção, o conteúdo de sais é grandemente reduzido, enquanto a atividade de várias imunoglobulinas funcionais no plasma original é mantida. Quando aplicado ao suprimento, ele pode efetivamente prevenir a infecção no intestino dos animais filhotes alimentados, reduzir o estímulo imune, e melhorar o metabolismo de nutrição e níveis de imunidade de filhotes desmamados. Ele pode ser utilizado como composição de suprimento na alimentação gradual ("creep feed") e assistência alimentícia ("nursing feed"); e também utilizado na composição alimentícia.

[062] As vantagens principais da presente invenção:

[063] 1. É provido um método para preparar pó de proteína de plasma de sangue de ave doméstica de baixo conteúdo de cinza. Para o primeiro período, o sangue de ave doméstica é utilizado como uma matéria prima para produzir o pó de proteína de plasma do sangue de aves doméstica. A presente invenção contorna os defeitos do sangue de ave doméstica como inadequação para processamento profundo, produzindo, desse modo, um baixo conteúdo de cinzas, um alto conteúdo de proteína (especialmente imunoglobulina) o pó de proteína do plasma, e assume a liderança no processamento e o preparo do pó de proteína de plasma do sangue de ave doméstica de alto nível de qualidade nutricional a partir do sangue de ave doméstica em casa e fora de casa.

[064] De acordo com o método, o íon de cálcio no plasma é removido a partir do plasma de ave doméstica anticoagulado obtido por reação de precipitação; o fibrinogênio é removido através da ultra-filtração e óleo é emulsificado, prevenir desse modo que o sangue coagule e bloqueie a membrana nano- filtração; dessalinização e concentração são realizados através da nano-filtração, reduzindo, efetivamente desse modo o conteúdo de cinza no plasma, aumentando o índice efetivo, tal como a proteína bruta do plasma; os processos de concentração utilizados reduzem grandemente os custos de secagem; e a tecnologia de secagem por pulverização de alta pressão é utilizada para garantir a uniformidade das partículas do produto do plasma de ave doméstica, e outros bons indicadores.

[065] De acordo com o método da presente invenção, a membrana de ultrafiltração com faixa de peso molecular especifica é utilizado para ultrafiltração. Durante a ultrafiltração, o filtrado é tomado nas etapas subsequentes, melhorando significativamente o rendimento do produto final.

[066] É indicado na técnica anterior que o plasma de galinhas pode ser ultrafiltrado usando a membrana de ultrafiltração com o peso molecular de 0,1~300000 e utilizado para a preparação de pó de proteína do plasma de sangue de galinha, entretanto, não é especificado que se o filtrado ou liquido de retenção é utilizado durante a ultrafiltração, e os inventores proveram que o rendimento do produto final preparado de acordo com a técnica anterior é baixo.

[067] 2. Os indicadores do pó de proteína do plasma do sangue de ave doméstica preparado pelo método da presente invenção são excelentes, onde o conteúdo de proteína está acima de 70%, no qual os componentes funcionais da imunoglobulina (tal como IqY) contado para 14%, palatabilidade é boa, existe o aminoácido balanceado, o conteúdo de zinca é menor que 14,5%. O índice do pó de proteína do plasma de ave doméstica da presente invenção é bom, o qual conduz ao nível doméstico.

[068] 3. No experimento de alimentação de adição do pó de proteína de plasma de ave doméstica dentro das dietas de porcos desmamados, o pó de proteína do plasma de ave doméstica preparada na presente invenção produz os melhores efeitos de alimentação, melhorando o metabolismo nutricional e nível de imunidade de leitões desmamados.

[069] A presente invenção será ilustrada adicionalmente abaixo com referência aos exemplos específicos. Deve ser entendido que estes exemplos são apenas para ilustrar a presente invenção, mas não limita o escopo de proteção da presente invenção. Para os métodos experimentais sem condições particulares nos exemplos a seguir, eles são geralmente realizados sob as condições convencionais, ou como instruído pelo fabricante.

[070] Os métodos de detecção para os indicadores no presente invenção (tal como o conteúdo da proteína (incluindo IgY), cinza, umidade, ou sal no pó de proteína do plasma do sangue de ave doméstica; ou o conteúdo de imunoglobulina (IgG) das criações de leitões) e o cálculo da proporção de ganho por alimentos de criações de leitões são métodos bem conhecidos pelo técnico no assunto.

Exemplo 1:

[071] Preparação do pó de proteína de plasma do sangue de ave doméstico 1:

[072] (1) 100 kg de anticoagulante (citrato de sódio) e 800 kg de água foram misturados para preparar a solução de anticoagulante aquoso, e a solução anticoagulante aquosa foi adicionada dentro de 10 toneladas de sangue de galinha com agitação, de modo que a solução anticoagulante aquosa foi suficientemente misturada com o sangue de ave doméstica para homogeneizar.

[073] (2) após a coleta do sangue de ave doméstica anticoagulado a partir da concentração do sangue, o sangue de ave doméstica foi filtrado através da bolsa de filtragem para remover as impurezas tais como cabelo, pedras e do gênero, e então foi centrifugado pelo uso do sangue em centrifuga de tubo (11000 rpm/minuto), de modo a obter o liquido claro, ou seja, o liquido do plasma.

[074] (3) 10 kg do carbonato de sódio (agente de descalcificação) foram dissolvidos em 50 kg de água, preparando desse modo a solução aquosa de carbonato de sódio, a solução foi lentamente adicionado dentro do liquido do plasma, onde a quantidade de carbonato de sódio foi de 0,1% (peso/peso) do liquido de plasma obtido na etapa anterior, e a mistura resultante foi agitada por 1 hora para reação de precipitação.

[075] (4) durante a reação e precipitação, o liquido de reação no plasma foi centrifugado por uma centrifuga de disco (11000 rpm/minuto) para remoção do precipitado, obtendo, assim, o liquido do plasma descalcificado.

[076] (5) o liquido de plasma descalcificado foi submetido para ultrafiltração usando uma membrana de filtro com um peso molecular de 400,000 para remover o fibrinogênio e muito do óleo, obtendo, desse modo o filtrado de plasma.

[077] (6) emulsificante (éster de sorbitol) foi adicionado dentro do filtrado do plasma para emulsificar o óleo residual. A quantidade de emulsificante adicionado foi de 0,1% (peso/peso) do plasma obtido na etapa anterior, obtendo, assim, o plasma emulsificado.

[078] (7) o plasma emulsificado foi concentrado através de nanofiltração pelo uso de uma membrana com peso molecular de 200 para obter o plasma concentrado, onde a proporção o volume do plasma concentrado versus a água filtrada foi de 1:3, e muita da água e sais foi removido, obtendo, assim, o liquido de plasma concentrado.

[079] (8) o líquido do plasma concentrado foi seco por pulverização, sendo que a temperatura de entrada de ar foi controlada em 220~230°C, e a temperatura de saída de ar foram controladas a 80 ~85°C, obtendo, desse modo o baixo conteúdo de cinza no pó de proteína do plasma de sangue de ave doméstica, ou seja, o pó de proteína do plasma 1.

[080] O resultado: usando o método acima, cerca de 610 kg do pó de proteína de plasma de ave doméstica 1 foi obtido a partir de 10 toneladas do sangue de ave doméstica, e o índice do produto são mostrados na tabela 1:

Exemplos 2 - 3:

[081] Preparação do pó de proteína de plasma no sangue de ave doméstica 2-3

[082] O método de preparação foi o mesmo que aquele no Exemplo 1, enquanto as condições específicas são descritas na Tabela 2. Quando a quantidade de agente descalcificante adicionado foi determinada pelo peso total (peso/peso) do plasma (líquido) obtido na etapa do Exemplo (2); a quantidade de agente emulsificante adicionado foi determinada pelo peso total (peso/peso) do plasma (líquido) obtido na etapa do exemplo (5).

Exemplo 5:

[083] Preparação do pó de proteína de plasma de sangue de ave doméstico 4:

(1) 5 kg de anticoagulante (citrato de sódio) e 40 kg de água foram misturadas para preparar a solução do anticoagulante aquoso, e a solução anticoagulante aquoso foi adicionado dentro de 1 tonelada de sangue de galinha com agitação, de modo que a solução de anticoagulante aquosa foi suficientemente misturada com o sangue de ave doméstica pra homogeneidade.
(2) após a coleta do sangue de ave doméstica anticoagulado a partir da concentração do sangue, o sangue de ave doméstica foi filtrado através da bolsa de filtragem para remover impurezas, tais como, pelo, pedras, e do gênero, e então foi centrifugado através do uso de sangue em centrífuga de tubo (11000 rpm/minuto), de modo a obter o líquido claro, ou seja, o plasma líquido.
(3) 0,5 kg de carbonato de sódio e 0,7 kg de carbonato de amônio foram utilizados como agente descalcificante, o agente descalcificante foi dissolvido em 5 kg de água fazendo, desse modo a solução de descalcificação, e a solução foi lentamente adicionada dentro do líquido do plasma, onde a quantidade de agente descalcificante adicionado foi de 0,12% (peso/peso) do líquido do plasma obtido na etapa anterior, e a mistura resultante foi agitada durante 1 hora para reação de precipitação.
(4) durante a reação de precipitação, o líquido de reação do plasma foi centrifugado por uma centrífuga de disco (11000 rpm/minuto) durante ar emoção do precipitado, obtendo, assim, o líquido do plasma descalcificado.
(5) o líquido do plasma descalcificado foi submetido a ultrafiltração usando uma membrana de filtro com peso molecular de 500,000 para remover fibrinogênio e muito do óleo, obtendo, desse modo o filtrado do plasma.
(6) o emulsificante (éster de sorbitol: monoglicerídeos de ácido graxo = 1:1) foi adicionado dentro do filtrado do plasma para emulsificar o óleo residual. A quantidade de emulsificante adicionado foi de 0,08% (peso/peso) do plasma obtido na etapa anterior, obtendo, assim, o plasma emulsificado.
(7) o plasma emulsificado foi concentrado através de nanofiltração através do uso de uma membrana com peso molecular de 200 para obter o plasma concentrado, onde a proporção em volume do plasma concentrado versus a água filtrada foi de 1:3,1, e muita da água e sais foram removidos, obtendo assim, o líquido do plasma concentrado.
(8) o líquido do plasma concentrado foi seco por pulverização, onde a temperatura do ar de entrada foi controlada a 220~230° e a temperatura do ar de saída foi controlada a 80~85°C, obtendo, desse modo, o baixo conteúdo de cinza no pó de proteína do plasma do sangue de ave doméstica, ou seja, o pó de proteína do plasma 5.

[084] Como resultado, ao uso do método acima, os índices do pó de proteína do plasma obtido são como mostrado na tabela 4:

Teste de alimentação do Exemplo 6:

[085] Quantidade determinada do pó de proteína do sangue de ave doméstica foi adicionado dentro do alimento, e os efeitos sobre o conteúdo da imunoglobulina (IgG) e o alimento para conseguir a proporção para os leitões de criação foram comparados entre o grupo com o pó de proteína do sangue de ave doméstica e o grupo sem o pó de proteína do sangue de ave doméstica.

Métodos específicos:

[086] O grupo de teste: o pó de proteína do plasma de ave doméstica preparado em qualquer um dos exemplos 1-5; quantidade adicionada: 0,4% (peso/peso, determinado através do peso total do alimento)

[087] Grupo controle: concentrado de proteína de soja; quantidade adicionada: 0,4% (peso/peso, determinado pelo peso total do alimento)

[088] Idade dos porcos: os porcos desmamados com 28 dias

[089] Dias de alimentação: duas semanas

[090] Resultados experimentais forma mostrados na tabela 5:

[091] Em resumo, o pó de proteína do plasma de aves domésticas pode melhorar, significativamente, o conteúdo da imunoglobulina de porcos.

Exemplo Comparativo 1 e Exemplo Comparativo 2:

[092] Índices relevantes do pó de proteína do plasma no sangue de ave doméstica produzido por membranas de ultrafiltração com peso molecular diferente.

[093] Método de preparação foi o mesmo que o do exemplo 1, exceto que: na etapa (5) do exemplo comparativo 1, uma membrana de ultra-filtração com peso molecular de 200,000 foi utilizada para ultra-filtragem.

[094] Na etapa (5) do exemplo comparativo 2, uma membrana de ultra-filtração com peso molecular de 1,000 foi utilizada para ultra-filtragem.

[095] Os resultados da comparação dos indicadores relevantes do pó de proteína do plasma do sangue de ave doméstica, produzido por membranas de ultra-filtração de diferentes pesos moleculares, estão mostrados na Tabela 6.

[096] Os resultados mostraram: o rendimento do pó de proteína de plasma de sangue de ave doméstica produzido no exemplo 1 aumentou, significativamente, e comparação com a "membrana de ultra-filtração com peso molecular de 20 ou 1000", o rendimento do pó de proteína do plasma do sangue de ave doméstica produzido no exemplo 1 aumentou pelo menos 11%.

[097] Exemplo Comparativo 3:

[098] O método de preparação foi o mesmo como o Exemplo 1, exceto que:

[099] Sem agente de descalcificação (etapa (3) e etapa (4) no exemplo 1 não estavam presentes), ou emulsificante foi adicionado no exemplo comparativo 3 (ou seja, etapa (6) no exemplo 1 não estava presente).

[100] Exemplo Comparativo 4:

[101] O método de preparação foi o mesmo como o Exemplo 1, exceto que:

[102] Nenhum agente de descalcificação foi adicionado no exemplo comparativo 4 (ou seja, etapa (3) e etapa (4) no exemplo 1 não estavam presentes).

[103] Comparado com o exemplo comparativo 3, no exemplo comparativo 4, a etapa (6) do exemplo 1 foi adicionada entre a etapa (5) e a etapa (7) do exemplo comparativo 3:

[104] (6) emulsificante (éster de sorbitol) foi adicionado dentro do filtrado do plasma, para emulsificar o óleo residual. A quantidade do emulsificante adicionado foi de 0,1% (peso/peso) do plasma obtido na etapa anterior, obtendo assim, o plasma emulsificado.

[105] Os efeitos do agente descalcificante e do emulsificante sobre os resultados da nanofiltragem e consumo de energia estão demonstrados na tabela 7.

Resultados:

[106] (i) de acordo com os resultados na Tabela 7, conduzindo "processamento de uma tonelada de plasma de galinha" como um exemplo:

[107] No exemplo 1, 750 kg do sal e água pode ser removido, para produzir 250 kg de plasma de sangue de galinha concentrado;

[108] No exemplo comparativo 4, cerca de 703 kg do sal e água pode ser removido, para produzir cerca de 2 97 kg do plasma de sangue de galinha concentrado;

[109] No exemplo comparativo 3, 670 kg de sal e água pode ser removido, para produzir 330 kg de plasma de sangue de galinha concentrado.

[110] A partir dos resultados comparativos, é mostrado que: comparado com o exemplo comparativo 3 ou exemplo comparativo 4, o volume do liquido concentrado obtido no exemplo 1 através da nanofiltragem foi significativamente reduzido.

[111] (ii) como mostrado na Tabela 7, quando o concentrado da nanofiltração foi seco adicionalmente:

[112] Comparado com o exemplo comparativo 3, pode assegurar 520 yan/tonelada de pó de proteína do plasma de ave doméstica pode ser salvo no exemplo 1;

[113] Comparado com o exemplo comparativo 4, 120 yuan/tonelada do pó de proteína do plasma de ave doméstica pode ser salvo no exemplo 1;

[114] Comparação dos resultados mostra que: comparado com o exemplo comparativo 3 ou4, o consume de energia para o processo de secagem adicional no exemplo 1 foi grandemente reduzido, cortando significativamente o custo econômico.

[115] 1. Através do uso da precipitação, o processo de ultra-filtração e emulsificação para resolver os problemas, tais como, alta viscosidade no sangue de aves domésticas e a inadequação para tratamento com nanofiltração e assim por diante, o método na presente invenção facilita as operações subsequentes de nanofiltração, e melhora significativamente a preparação do pó de proteína do plasma.

[116] 2. Método da presente invenção pode não apenas preencher os vazios na demanda para o suprimento de proteína, mas também consegue um uso razoável da fonte de residual. A descoberta e a inovação na tecnologia de processamento de sangue de aves domésticas de acordo com a presente invenção proveem um suporte técnico para desenvolvimento em grande escala e utilização do sangue de aves domésticas.

[117] Todas as literaturas mencionadas no pedido são incorporadas aqui por referência, como ensinamento individual para referência. Adicionalmente, deve ser entendido que após a leitura dos ensinamentos acima, muita variações e modificações podem ser feitas pelos técnicos no assunto, e estes equivalentes também estão dentro do escopo de proteção como definido pelas reivindicações anexas.

Claims

Método de preparação para um pó de proteína do plasma de ave doméstica de baixo conteúdo de cinzas, dito método sendo caracterizado pelo fato de incluir as etapas de:
- (a) misturar o sangue de ave doméstica com anticoagulante, de modo a obter todo o sangue anticoagulado;
- (b) centrifugar todo o sangue anticoagulado obtido na etapa (a) para coletar o líquido claro, de modo a obter o líquido do plasma;
- (c) adicionar o agente descalcificante dentro do líquido de plasma obtido na etapa (b), e conduzir a reação de precipitação, de modo a obter o líquido de reação de plasma precipitado, sendo que o agente descalcificante compreende um carbonato solúvel em água, e a quantidade de agente descalcificante adicionado é de 0,02 - 0,5% (p/p) do líquido do plasma obtido na etapa (b);
- (d) remover o precipitado através da centrifugação do líquido de reação do plasma obtido na etapa (c), para obter o líquido de plasma descalcificado;
- (e) processar por ultrafiltração o líquido de plasma descalcificado obtido na etapa (d) usando uma membrana de ultra-filtragem, e coletar o filtrado, para obter o liquido de plasma processado por ultrafiltração, sendo que a membrana de ultra-filtragem é uma membrana de ultra-filtragem com peso molecular de 300.000-500.000 Dalton;
- (f) adicionar emulsificante para o líquido de plasma processado por ultrafiltração obtido da etapa (e), para obter o líquido de plasma emulsificado, sendo a quantidade emulsificante adicionada é de 0,01-0,5% (p/p) do líquido do plasma obtido na etapa (e); e o emulsificante é selecionado a partir de monoglicerídeo de ácido graxo, éster de sorbitol, fosfolipídio de soja, ou uma combinação dos mesmos;
- (g) submeter o liquido de plasma emulsificado obtido na etapa (f) à nanofiltração para obter um plasma concentrado, sendo a nanofiltração realizada usando uma membrana de nano-filtragem com peso molecular de 200-1000 Dalton, a proporção em volume do concentrado de plasma versus filtrado foi de 1:2-4, e o concentrado de plasma é colhido; e
- (h) secar o concentrado de plasma obtido na etapa (g), para obter o pó de proteína de plasma de aves domésticas.
Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de a ave doméstica vir de galinha e pássaros.
Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de na etapa (a), o anticoagulante ser citrato de sódio, e a quantidade de anticoagulante adicionado ser de 0,1 - 5% (peso/peso) do sangue total.
Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de o processo de centrifugação na etapa (b) utilizar centrifugas de tubo; e/ou o processo de centrifugação na etapa (d) utilizar centrifugas de disco.
Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de na etapa (h), quando seca, a secagem por pulverização ser utilizada, e a temperatura de entrada de ar ser de 220°C-230°C, enquanto a temperatura de saída do ar é de 80°C-85°C.
Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de o carbonato solúvel em água ser selecionado a partir do grupo consistindo de: carbonato de sódio, carbonato de potássio, carbonato de amônio, ou uma combinação dos mesmos.
Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de o método incluir, adicionalmente, a etapa a seguir: misturar o pó de proteína de plasma seco e o componente selecionado a partir de: cereais, milho, soja e trigo, para obter o suprimento granular.
Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de na etapa (e), a membrana de ultra-filtragem ser uma membrana de ultrafiltração com o peso molecular de 350.000 - 500.000 Daltons.
Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de na etapa (e), a membrana de ultra-filtragem ser uma membrana de ultrafiltração com o peso molecular de 400.000 Dalton.