CN111956789A

CN111956789A - 一种适用于血液净化患者的营养物的制备方法及营养物

Info

Publication number: CN111956789A
Application number: CN202010698121.3A
Authority: CN
Inventors: 刘自军; 李建中
Original assignee: Beijing Xifeng Technology Co ltd
Current assignee: Beijing Xifeng Technology Co ltd
Priority date: 2020-07-20
Filing date: 2020-07-20
Publication date: 2020-11-20

Abstract

本发明属于分子生物学技术领域，具体公开了一种适用于血液净化患者的营养物的制备方法及获得的营养物。本发明的营养物的制备方法包括将正常人血液、血浆、血清中的任意一种进行膜分离，采用的分离膜的孔径为2～20nm。采用该孔径的分离膜分离得到的超滤液所含成分与血液净化患者在血液净化过程中所丢失物质成分类似，经实验证明，将该超滤液作为营养物输入到患者体内，不仅能有效地改善血液净化患者营养不良状况，特别是能维持体内低分子蛋白浓度，有效解决目前血液净化患者的健康问题。

Description

一种适用于血液净化患者的营养物的制备方法及营养物

技术领域

本发明涉及分子生物学技术领域，特别是涉及一种生物制品，尤其是一种适用于血液净化患者的营养物的制备方法及获得的营养物。

背景技术

血液净化是通过清除体内的毒素和废物，移除体内过量的体液，来控制电解质和酸碱度平衡的一种临床治疗手段。血液净化能替代部分肾功能，是终末期肾脏病患者的主要替代治疗方式。对于终末期肾脏病患者，通过定时地进行维持性血液净化治疗，可以延长患者的生存期，改善生活质量，降低并发症。

但是，由于微炎症状态、毒素的蓄积和治疗并发症的药物(如铁剂、磷结合剂)等导致的食欲减退、消化不良以及胃肠功能紊乱在维持性血液净化患者中比较常见，影响了患者蛋白质－能量的摄入。虽然血液净化能清除人体内代谢产生的废物，但血液净化过程中也伴随着大量氨基酸、多肽、蛋白质、水溶性维生素、激素以及葡萄糖等营养物质的流失。例如在一次普通血液净化过程中，约丢失氨基酸10±2g。短期内，这些物质的丢失对患者健康的影响不明显，随着治疗时间的延长，维持性血液净化患者大多会出现蛋白质能量代谢异常，骨骼肌和脂肪明显消耗，表现在血液生化上为低胆固醇血症、低蛋白血症以及低前白蛋白。在维持性血液净化患者中，营养不良的患者可达到23％～76％。

血液净化过程中蛋白质的丢失以及能量摄入不足是维持性血液净化患者营养不良最重要的原因。长期透析形成的消耗状态或营养不良，会直接影响血液净化患者的死亡率和各种并发症的发病率。且营养不良还导致透析耐受性下降，出现感染以及心脑血管并发症的风险进一步增加。营养不良已成为维持性血液净化患者独立的死亡危险因素，也是预测维持性血液净化患者发病率和死亡率的重要预测因素。此外，在血液净化过程中，还存在一些功能性多肽和蛋白的流失，受患者体质状况的影响，可能这部分功能性蛋白无法自身补给，导致患者体内某些功能性蛋白缺失，从而影响患者的健康状况。

因此，提供一种适用于血液净化患者的营养物，以改善患者的营养不良状况，是一个需要亟待解决的问题。

发明内容

本发明主要解决的技术问题是提供一种适用于血液净化患者的营养物的制备方法，以及制备获得的营养物。

具体地，第一方面，本发明提供了一种适用于血液净化患者的营养物的制备方法，包括步骤：将正常血液、血浆、血清中的任意一种进行膜分离，采用的分离膜的孔径为2～20nm。采用该孔径的分离膜分离得到的超滤液所含成分与血液净化患者在血液净化过程中所丢失物质成分类似，将该超滤液作为营养物输入到患者体内，不仅能有效地改善血液净化患者营养不良状况，特别是能维持体内低分子蛋白浓度，有效解决目前血液净化患者的健康问题。

其中，所述正常血液、血浆或血清为人的正常血液、血浆或血清。

作为本发明一种优选的实施方案，所述正常血液、血浆或血清膜分离时还包括对所述正常血液、血浆或血清稀释步骤，采用的稀释液为纯水或水溶液，优选所述水溶液为生理盐水、血液透析用透析液、含葡萄糖的等渗溶液、pH值为6～8的Tris-盐酸缓冲液中的任意一种或几种的组合。

作为本发明一种优选的实施方案，稀释步骤采用的稀释方法包括两种，一种是在膜分离之前将所述稀释液与正常血液、血浆或血清混合，另一种是在膜分离过程中将所述稀释液与正常血液、血浆或血清混合。

作为本发明一种优选的实施方案，若在膜分离之前将所述稀释液与正常血液、血浆或血清混合，正常血液、血浆或血清与稀释液的混合体积比为(0.1～5)：1；若在膜分离过程中将所述稀释液与正常血液、血浆或血清混合，正常血液、血浆或血清与稀释液的混合体积比为1：(0.1～10)。

作为本发明一种优选的实施方案，在进行膜分离时，进行膜分离的处理液中如含有血细胞，例如处理液是正常血液或者正常血液与稀释液的混合液时，膜分离后超滤液的收集速度为处理液流速的5～30％。如果进行膜分离的处理液中不含血细胞，例如处理液是正常血浆、正常血清、正常血浆与稀释液的混合液或者正常血清与稀释液的混合液，膜分离后超滤液的收集速度为处理液流速的5～50％。

进一步优选地，所述分离膜的孔径为3～8nm。选择该孔径的分离膜，有利于获得的营养物成分更接近于透析患者体内流失的物质成分，达到更佳的补充效果。

作为本发明一种优选的实施方案，在所述膜分离之后还包括浓缩步骤；所述浓缩步骤为冻干处理和/或除去小分子的处理。

优选地，所述除去小分子的处理是采用1kDa半透膜透析或者采用孔径为1kDa的离心管离心。

作为本发明一种优选的实施方案，所述制备方法还包括对营养物中成分进行调整步骤，优选地，所述成分调整包括对营养物中氨基酸、糖、矿物质、微量元素、维生素、激素及蛋白质中的一种或多种成分的含量进行调整。更优选地，调整后每100mL所述营养物中含有：

作为本发明一种优选的实施方案，在所述膜分离之后还包括病毒灭活步骤。由于本发明采用的分离膜的膜孔径小于20nm，因此原料中的大部分病毒不能透过膜，超滤过程中可以完成病毒的清除，因此一般获得的超滤液经病毒检测是合格的，无须进一步灭活。但在需要灭活时，可以增加该病毒灭活步骤。

第二方面，本发明提供了一种适用于血液净化患者的营养物，所述营养物由上述的制备方法获得。

其中，所述营养物成分的分子量在70kDa以内。

本发明提供的一种适用于血液净化患者的营养物，所述营养物中含有以下成分：以每100mL所述营养物计算，含有：

优选地，所述营养物中还包括以下成分：以每100mL所述营养物计算，含有：

本发明提供的营养物适用于血液净化患者，可以用于制备改善血液净化患者健康状况的药物。

本发明是采用正常血液或含有正常血液成分的液体如血浆或血清作为原料，正常血液或含有正常血液成分的液体中各种营养物质及小分子蛋白处于平衡状况，通过膜分离超滤处理后，得到的超滤液所含成分与血液净化患者在血液净化过程中所丢失物质类似，将该超滤液作为营养物输入到患者体内，不仅能有效地改善血液净化患者营养不良状况，特别是能维持低分子蛋白浓度，有效解决目前血液净化患者面临的健康问题。

本发明提供的营养物，其中含有血清蛋白，其中血清蛋白成分分子量在70kDa以内。本发明的营养物可有效改善血液净化患者的营养状况，维持血液中小分子蛋白浓度的平衡。研究发现，只单纯提高维持性血液净化患者的能量、蛋白等营养素的摄入并不能完全纠正患者的营养不良状况。本发明试验发现，采用本发明的营养物可以在治疗过程中维持血液净化患者正常的营养状况，改善患者的小分子蛋白平衡，达到维持患者健康稳定的效果。

本发明提供的营养物，可以在制备得到的超滤液的基础上，再对其成分进行调整，例如对其中患者体内需要的氨基酸、糖、矿物质、微量元素、水溶性纤维素、激素或多肽等成分的含量进行调整，可以进行增加或降低，以更好的改善维持性血液净化患者的营养状况。

具体地，本发明提供的营养物在制备时，还包括对正常血液、血浆或血清进行稀释的步骤，稀释液为纯水或水溶液。其中，所述水溶液为生理盐水、血液透析用透析液、含葡萄糖的等渗溶液、pH值为6～8的Tris-盐酸缓冲液中的一种。稀释处理有利于血液或含有血液成分的液体通过膜分离器，实现理想的超滤分离效果。

在对正常血液、血浆或血清进行稀释时，可以采用以下两种方法进行稀释。第一种方法，先将稀释液与正常血液、血浆或血清混合，制成膜分离原液，之后进行膜分离处理；第二种方法，将稀释液与正常血液、血浆或血清在膜分离器内混合进行膜分离处理。

对于第一种稀释方法，稀释液与正常血液、血浆或血清混合时，正常血液、血浆或血清与稀释液的体积比为(0.1～5)：1。

对于第二种稀释方法，稀释液与正常血液、血浆或血清在膜分离器内混合时，正常血液、血浆或血清与稀释液的体积比为1：(0.1～10)。

本发明提供的营养物在制备时，膜分离采用的膜分离器可以是透析仪。

在膜分离时，将原液，或者正常血液、血浆或血清，从膜分离器一端进入，另一端流出。利用蠕动泵或真空系统或加压装置，从膜分离器中(另一侧)收集超滤液作为营养物，即通过动力装置利用压强差将超滤液分离出来。

在膜分离时，所述原液，或者正常血液、血浆或血清，可以循环通过所述膜分离器。所述超滤液也可以循环通过所述膜分离器，在血端各物质含量达到平衡后停止循环并收集，以提高分离效率。

当然，所述原液，或者正常血液、血浆或血清，也可单次通过所述膜分离器。

优选的，所述超滤液的收集速度为原液，或者，正常血液、血浆或血清流速的5～50％，可以避免膜堵塞，有利于超滤的进行。

对于含有血细胞的原液或正常血液，超滤液的收集速度优选为原液或正常血液流速的5～30％，可以避免对细胞的损坏，发生凝血。

在本发明中，将原液，或者正常血液、血浆或血清，从膜分离器一端进入，另一端流出。利用蠕动泵或真空系统或加压装置，从膜分离器另一侧收集得到超滤液。

本发明收集超滤液的量可控制与稀释液等量或大于稀释液。优选收集的超滤液的体积为稀释液体积的1～1.2倍。

在本发明中，获得的超滤液还可以进一步采用透析、低温离心超滤、分子量截留中的一种或几种方法进行处理，处理获得含有不同截留分子量的超滤液，优选所述超滤液包含分子量≥0.1kDa、≥0.3kDa、≥0.5kDa、≥1kDa、≥2kDa、≥5kDa、≥10kDa、≥15kDa和≥20kDa的成分。

本发明的制备方法还包括将制备得到的所述超滤液进行浓缩的步骤，所述浓缩方式包括透析、低温离心超滤、高压压滤、减压浓缩及冻干中的一种或多种。例如所述浓缩指将超滤液进行脱水及除去部分小分子的处理，可获得高浓度的浓缩物，还可以再冻干得到冻干粉。使用时，所述浓缩物或冻干粉经溶解复配后，直接通过静脉输入或在透析治疗结束时从回血端输入患者体内。

所得浓缩物可以根据血型不同分开，也可以将不同血型浓缩物按照任意比例混合使用。

本发明中可根据具体需要进一步调整超滤液的组成，也可进一步调整超滤液浓缩后得到的例如冻干粉的组成，使其包含不同分子量成份的浓缩物。

本发明提供的营养物可以用于制备改善血液净化患者健康状况的药物。

本发明的制备方法简便，制备得到的营养物可改善血液净化患者营养状况，维持血液中小分子蛋白浓度平衡，提高患者生存期。

附图说明

图1是本发明提供的第一种营养物制备装置的示意图；

图2是本发明提供的第二种营养物制备装置的示意图；

图3是本发明提供的第三种营养物制备装置的示意图；

图4是本发明提供的第四种营养物制备装置的示意图。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明。需要理解的是以下实施例的给出仅是为了起到说明的目的，并不是用于对本发明的范围进行限制。本领域的技术人员在不背离本发明的宗旨和精神的情况下，可以对本发明进行各种修改和替换。

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实施例1

本实施例提供了一种适用于血液净化患者的营养物的制备方法，具体如下：

取200mL由1.38g透析A粉与0.588g透析B粉(透析A粉和透析B粉均购自北京联合易康医疗器械公司)配置的透析液，加入到800mL正常新鲜的人血液中，再加入50IU肝素钠抗凝剂，搅拌均匀，得到膜分离原液，之后进行膜分离。

膜分离采用图1所示的装置，其中膜分离器为透析仪，透析仪采用德国费森尤斯公司的透析仪，型号为FX80，采用的分离膜的孔径为3.3nm，膜面积为1.8m²。

膜分离具体过程为：膜分离原液利用血泵以100mL/min的流速通过透析仪，在透析仪的另一侧采用蠕动泵以10mL/min速度收集超滤液，共收集超滤液200mL。所得超滤液即营养物。

采用考马斯亮蓝法(稀释200倍后)分别测试原血(正常新鲜血液)、稀释血(加入透析液后的原血)、滤后血(超滤后的血液)及超滤液中蛋白质的含量。测试结果见表1。

表1

由表1结果可以计算得出，超滤液中蛋白质总量为：0.27g/L×0.2L＝0.054g。

所得超滤液经过凝胶电泳测试，主要成份分子量小于70kDa。

当然，得到的超滤液也可以循环通过膜分离器，即采用图2所示的装置，在血端各物质含量达到平衡后停止循环并收集，得到营养物，以提高分离效率。

实施例2

取600mL正常新鲜的人血液，加入50IU肝素钠抗凝剂，搅拌均匀，之后进行膜分离。

膜分离采用图3所示的装置，其中膜分离器为透析仪，透析仪采用德国费森尤斯公司的透析仪，型号为FX80，采用的分离膜的孔径为3.3nm，膜面积为1.8m²。

膜分离具体过程为：添加有抗凝素的正常血液利用血泵以100mL/min的流速通过透析仪，同时在透析仪的另一侧加入1200mL透析液(即稀释液，由8.28g透析A粉与3.528g透析B粉和去离子水配置而成)，采用蠕动泵以200mL/min速度通过透析仪，循环交换30min，收集得到超滤液1300mL。所得超滤液即营养物。

采用考马斯亮蓝法(稀释200倍后)分别测试原血(正常新鲜血液)、滤后血(超滤后的血液)及超滤液中蛋白质的含量。测试结果见表2。

表2

由表2结果可以计算得出，超滤液中蛋白质总量为：0.04g/L×1.3L＝0.052g。血液经膜分离损失的蛋白质总量为2.46g。说明透析过程中血液中存在明显的蛋白流失情况，蛋白流失量大于超滤液中蛋白总量，表明部分蛋白被吸附在透析仪上。

所得超滤液经过凝胶电泳测试，主要成份分子量小于70kDa。

当然，也可以将本实施例的超滤液循环交换改为单次通过透析仪即收集的方式进行制备，即采用图4所示的装置进行制备。

实施例3

本实施例提供了一种对制得的超滤液进行病毒灭活的方法。

取采用实施例1方法制备得到的适用于血液净化患者的营养物，进行病毒灭活，具体如下。

将采用实施例1方法制备得到的适用于血液净化患者的营养物进一步采用S/D灭活方式进行病毒灭活。具体操作为：向超滤液(即营养物)中加入三硝基丁基磷酸酯(TNBP)和Tween 80，使最终质量浓度分别为0.3％和1.0％，在25±1℃下孵育6h，即可完成病毒灭活。向灭活后的超滤液中加入相当于超滤液体积1/5的大豆油，搅拌均匀后，静置分层，重复操作3次，萃出TNBP和Tween 80，得到灭活的超滤液。

实施例4

本实施例提供了一种对制得的超滤液进行浓缩的方法。

取采用实施例1方法制备得到的适用于血液净化患者的营养物200mL，冷却至-30℃凝固后，置于低温冷冻箱中，冷冻干燥，得白色冻干粉，无菌密封后于4℃保存。

实施例5

本实施例提供了另一种对制得的超滤液进行浓缩的方法。

取采用实施例1方法制备得到的适用于血液净化患者的营养物200mL，置于1kDa半透膜中，在无菌水中透析4h，除去小分子成分，真空减压浓缩，浓缩液冷却至-30℃～-50℃凝固后，冻干，得白色粉末，无菌密封后低温保存。

实施例6

本实施例提供了又一种对制得的超滤液进行浓缩的方法。

取采用实施例1方法制备得到的适用于血液净化患者的营养物200mL，置于孔径为1kDa的离心管中，4℃左右离心浓缩，浓缩液冷却至-30℃～-50℃凝固后，真空冻干，无菌密封后低温保存。

效果实验例

本实验例进行了以下实验和研究。

分别收集了4名血液透析(HD法)患者透析废弃液各120L，采用电化学发光全自动免疫分析(罗氏：cobas e411)，测试废弃液中各物质的浓度，进一步计算得到透析治疗过程中各患者血液丢失物质的总量，4名患者的透析废弃液检测结果见表3所示，其中，FX80、F14、R400分别代表透析仪的型号。

表3

注：表中“/”表示未检出。

分别收集了3名CRRT(连续性肾脏替代治疗法)患者的透析液各20L，测试透析液中各物质浓度，计算CRRT治疗过程中血液中丢失物质的量，检测结果如表4所示。

表4

由表3、表4的检测结果可知，血液净化过程中激素和小分子蛋白等具有重要生理功能的物质流失在各透析方式不同时虽存在差异，但流失现象均十分明显。

取实施例1制备得到的营养物，采用孔径为1kDa的膜，将营养物进行超滤浓缩，经胰蛋白酶酶解成多肽。通过UPLC/QTOF-MS方法对肽段进行序列分析，并通过已有蛋白质库进行数据比对，分析出实施例1获得的营养物中已知蛋白的种类，结果如表5所示。

表5

纤维蛋白原α链	载脂蛋白A2
		β微球蛋白	溶菌酶C
血清胱抑素C	补体成分
		视黄醇结合蛋白4	D2前列腺素合成酶
视黄醇结合蛋白前体	白蛋白
		免疫球蛋白卡帕尔	半胱氨酸蛋白酶抑制剂B
半胱氨酸蛋白酶抑制素	丝氨酸肽酶抑制剂
		血清淀粉样蛋白A1	潜在转化生长因子贝塔结合蛋白2
前纤维蛋白1抗体	胶原型VI阿尔法3链
		免疫球蛋白	胸腺素β10
载脂蛋白A1	桥粒糖蛋白1抗体
		补充因子D	嗜铬粒蛋白A
胰岛素	血管紧张肽原前体
		丛生蛋白	胃动蛋白
肌动蛋白	胸腺素4
		血清淀粉样蛋白A2	甲朊酸亚单位阿尔法前体
免疫球蛋白卡帕尔可变3D-20	胶原蛋白I阿尔法2链
		促甲状腺激素	防御素1
白细胞介素6	促肾上腺皮质激素
		基底膜聚糖	分泌和跨膜蛋白1
微球蛋白前体	硫氧还蛋白
		1-抗胰蛋白酶	胰岛素样生长因子结合蛋白

通过数据库比对，确定了营养物中已知蛋白有42种，其中包括部分尿毒症毒素分子，而未知蛋白种类超过100多种。

通过商用专一性ELISA检测试剂盒对实施例1获得的200mL营养物中部分已知蛋白进行了定量分析。在包被一抗的96孔板中加入营养物，检测目标蛋白与固相抗体结合，再加入酶标记的二抗，使之与目标蛋白结合，反应后加入底物显色，颜色的深浅与目标蛋白的量成正比，通过酶标仪测定具体数值，结果如表6所示。

表6

蛋白种类	含量
		醛固酮	1.5μg
白蛋白	5.0mg
		血管紧张素	0.93μg
血管舒缓激肽	1.7μg
		防御素	3.2μg
胰岛素样生长因子结合蛋白	4.5μg
		黏蛋白	0.5μg
维生素D结合蛋白	1.3μg

对以上选择的4名血液透析(HD法)患者和3名CRRT(连续性肾脏替代治疗法)患者进行情况分析，患者基本情况如下表7所示。

表7

患者基本情况：	4男，3女
		年龄(岁)	49(25-60)
透析时间(月)	20(14-40)
		体重(kg)	60(52-75)
BMI(kg/m<sup>2</sup>)	22(19-30)
		白蛋白(g/L)	37(34-42)

按照常规血液透析对选取的患者进行透析，分析透析前后血液中物质流失情况。透析完成后，取按照实施例5方法制备得到的营养物冻干粉，并对其成分进行调整，得到浓缩物，每个患者体内输入浓缩物100mL，之后检测患者体内血液成分的变化情况。

其中成分调整的方法为：取按照实施例5方法制备得到的营养物冻干粉0.5g，将其溶于按照表8所示的成分和浓度配置的氨基酸溶液中，之后添加葡萄糖和部分激素以及蛋白成分，制备成100mL的浓缩物。

表8

每100mL的浓缩物中含有氨基酸总量2.87g，总蛋白量1.5g，葡萄糖5g，还含有激素、微量元素、维生素及矿物质等。其中激素的代表性成分含量见表9。

表9

成分	含量
		促肾上腺皮质激素	1.0μg
睾酮	1.0μg
		肾上腺糖皮质激素	2.0mmol
促甲状腺激素	0.85mIU
		甲状腺激素T3	15.1pmol
维生素B12	250ng
		胰岛素	5.2μU
生长激素	1.0μg
		胆固醇	10mmol
甘油三脂	3mmol

选取的7名患者在输入以上浓缩物之后，患者血浆氨基酸浓度的结果对比见表10。患者血浆代表性物质浓度变化的结果对比见表11。

表10

从表10结果可以看出，透析后氨基酸流失非常明显，总流失量大；通过添加营养物后，血液中的氨基酸得到补充，使得透析前后的变化较小，大部分氨基酸浓度保持平稳。当然，针对部分特异性氨基酸可以基于患者进行个体化调整，从而达到更好的效果。

表11如下。

表11

从表11结果中可以看出，通过检测几种代表性物质浓度变化，可以发现，透析前后小分子物质浓度变化较大，如胰岛素和醛固酮。尤其是醛固酮，透析后浓度不到透析前的一半。通过流加营养物后，醛固酮的浓度明显得到提升，几乎恢复到透析前的含量，保证了透析患者的健康水平。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims

1.一种适用于血液净化患者的营养物的制备方法，其特征在于，包括步骤：将正常血液、血浆、血清中的任意一种进行膜分离，采用的分离膜的孔径为2～20nm。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述正常血液、血浆或血清膜分离时还包括对所述正常血液、血浆或血清稀释步骤，采用的稀释液为纯水或水溶液，优选所述水溶液为生理盐水、血液透析用透析液、含葡萄糖的等渗溶液、pH值为6～8的Tris-盐酸缓冲液中的任意一种或几种的组合；进一步优选地，稀释方法为在膜分离之前将所述稀释液与正常血液、血浆或血清混合，或者在膜分离过程中将所述稀释液与正常血液、血浆或血清混合；在膜分离之前将所述稀释液与正常血液、血浆或血清混合时，正常血液、血浆或血清与稀释液的混合体积比为(0.1～5)：1；或，在膜分离过程中将所述稀释液与正常血液、血浆或血清混合时，正常血液、血浆或血清与稀释液的混合体积比为1：(0.1～10)。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，进行膜分离的处理液中含有血细胞时，膜分离后超滤液的收集速度为处理液流速的5～30％；或，膜分离的处理液中不含血细胞时，膜分离后超滤液的收集速度为处理液流速的5～50％；和/或，收集的超滤液的体积为稀释液体积的1～1.2倍。

4.根据权利要求1～3任意一项所述的制备方法，其特征在于，所述分离膜的孔径为3～8nm。

5.根据权利要求1～4任意一项所述的制备方法，其特征在于，所述膜分离之后还包括浓缩步骤；所述浓缩步骤为冻干处理和/或除去小分子的处理。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述除去小分子的处理是采用1kDa半透膜透析或者采用孔径为1kDa的离心管离心。

7.根据权利要求1～6任意一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括对营养物中成分进行调整步骤，优选地，调整后每100mL所述营养物中含有：

8.一种适用于血液净化患者的营养物，其特征在于，所述营养物由权利要求1～7任意一项所述的制备方法获得；优选地，所述营养物成分的分子量在70kDa以内。

9.一种适用于血液净化患者的营养物，其特征在于，所述营养物中含有以下成分：

以每100mL所述营养物计算，含有：

优选地，所述营养物中还包括以下成分：

以每100mL所述营养物计算，含有：

10.权利要求8或9所述的适用于血液净化患者的营养物在制备改善血液净化患者健康状况的药物中的应用。