WO2007029677A1 - 組織再生用基材 - Google Patents

組織再生用基材 Download PDF

Info

Publication number
WO2007029677A1
WO2007029677A1 PCT/JP2006/317513 JP2006317513W WO2007029677A1 WO 2007029677 A1 WO2007029677 A1 WO 2007029677A1 JP 2006317513 W JP2006317513 W JP 2006317513W WO 2007029677 A1 WO2007029677 A1 WO 2007029677A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
tissue regeneration
cell growth
growth factor
regeneration substrate
gelatin
Prior art date
Application number
PCT/JP2006/317513
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Yoshito Ikada
Shigehiko Suzuki
Tsuguyoshi Taira
Yoshitake Takahashi
Kenji Tomihata
Original Assignee
Gunze Limited
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Gunze Limited filed Critical Gunze Limited
Priority to US12/065,979 priority Critical patent/US8889171B2/en
Priority to BRPI0615905A priority patent/BRPI0615905B8/pt
Priority to AU2006288336A priority patent/AU2006288336B2/en
Priority to KR1020087007675A priority patent/KR101224927B1/ko
Priority to CA2619785A priority patent/CA2619785C/en
Priority to EP06797419.6A priority patent/EP1923078B1/en
Publication of WO2007029677A1 publication Critical patent/WO2007029677A1/ja

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/54—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/14—Macromolecular materials
    • A61L27/26—Mixtures of macromolecular compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/56—Porous materials, e.g. foams or sponges
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/58—Materials at least partially resorbable by the body
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/60—Materials for use in artificial skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
    • A61L2300/412—Tissue-regenerating or healing or proliferative agents
    • A61L2300/414—Growth factors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/60—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a special physical form
    • A61L2300/602—Type of release, e.g. controlled, sustained, slow

Definitions

  • the present invention relates to a tissue regeneration substrate. Specifically, the present invention relates to an artificial dermis base material for regenerating skin tissue in acute skin defect wounds such as burns and trauma and chronic skin defect wounds such as pressure sores and ulcers.
  • a method for producing an artificial dermis a method of freeze-drying a collagen sponge is generally used, and crosslinking is often performed for the purpose of controlling the rate of degradation and absorption in vivo.
  • a certain growth factor for example, basic fibroblast growth factor (bFGF)
  • bFGF basic fibroblast growth factor
  • Non-patent Document 2 Kawai et al. Have shown that injecting bFGF-impregnated gelatin microspheres into artificial dermis promotes the sustained release effect of bFGF and the in vivo construction of skin tissue (non-) Patent Document 1). It has also been clarified that tissue construction is promoted by adding bF GF-impregnated gelatin microspheres in the production of cell-embedded cultured skin (Non-patent Document 2).
  • bFGF basic fibroblast growth factor
  • bFGF has an isoelectric point of 9.6, and is adsorbed by, for example, electrical interaction with gelatin having an isoelectric point of 5.0.
  • bFGF is adsorbed on microspheres made of acidic gelatin (isoelectric point 5.0), and bFGF is gradually released in vivo by using the microspheres on which bFGF is adsorbed.
  • this method requires a technique such as injecting bFGF to the base material after adsorbing bFGF to the microsphere, which is a fine particle, and is used in clinical settings. It was complicated and difficult to use.
  • bFGF is easy to adsorb, and it is considered that an artificial dermis material is made with acidic gelatin and bFGF is adsorbed there. Because it is inferior due to invasion of cells, it is suitable for tissue regeneration. A substrate capable of adsorbing an appropriate amount of bFGF while allowing easy entry of surrounding cells is desired.
  • Patent Document 2 describes that a medical base material containing gelatin and collagen as essential base material components and cross-linked by irradiation with ultraviolet rays is used for a cell culture carrier, cultured skin, and the like. Has been.
  • Patent Document 1 Japanese Patent Laid-Open No. 2003-325652
  • Patent Document 2 Japanese Patent Laid-Open No. 11-47258
  • Non-patent literature l K. Kawai et al., Biomaterials, Vol. 21, p.489-499 (2000)
  • Non-Patent Document 2 Sao et al., Journal of the Japan Burn Society, Vol. 29, p.24-30
  • Non-Patent Document 3 Y. Tabata et al., J. Controlled Release, Vol. 31, p.189-199 (1994) Disclosure of Invention
  • the present invention has a sustained release ability of cell growth factors such as basic fibroblast growth factor (bFGF).
  • bFGF basic fibroblast growth factor
  • an object of the present invention is to provide a tissue regeneration substrate that is easy for cells to enter and is suitable for tissue regeneration.
  • a base material obtained by adding bFGF to a bioabsorbable porous base material containing collagen and gelatin is bFGF. It has been found that it has good sustained release properties and is suitable as a tissue regeneration substrate for regenerating skin tissue as soon as cells invade. Based on this knowledge, the present invention was completed through further research.
  • the present invention provides the following tissue regeneration base material and method for producing the same.
  • Item 1 A tissue regeneration substrate comprising a bioabsorbable porous substrate containing collagen and gelatin containing a cell growth factor.
  • Item 2 The tissue regeneration substrate according to Item 1, wherein the bioabsorbable porous substrate has a gelatin content of 1 to 70% by weight.
  • Item 3 The tissue regeneration substrate according to Item 1 or 2, wherein the cell growth factor is basic fibroblast growth factor (bFGF).
  • bFGF basic fibroblast growth factor
  • Item 4 Initial stage in which the amount of cell growth factor released into PBS after being immersed in 37 ° C phosphate buffered saline (PBS) for 3 days is impregnated in the tissue regeneration substrate Item 4.
  • the tissue regeneration substrate according to any one of Items 1 to 3, which is 7% by weight or less based on the total amount of cell growth factors.
  • Item 5 Initial stage in which the amount of cell growth factor released into PBS after being immersed in phosphate buffered saline (PBS) at 37 ° C for 7 days was impregnated in the tissue regeneration substrate Item 5.
  • the tissue regeneration substrate according to any one of Items 1 to 4, which is 15% by weight or less based on the total amount of cell growth factors.
  • Item 6 The tissue regeneration substrate according to any one of Items 1 to 5 having continuous pores having an average pore diameter of 10 to 500 / ⁇ ⁇ .
  • Item 7 The tissue regeneration substrate according to any one of Items 1 to 6, which is decomposed and absorbed within 3 weeks in a living body.
  • Item 8 A tissue regeneration substrate comprising a step of freeze-drying an aqueous mixture containing collagen and gelatin, a step of crosslinking the resulting dried product, and a step of incorporating a cell growth factor into the resulting crosslinked product Manufacturing method.
  • the present invention is described in detail below.
  • the tissue regeneration substrate of the present invention comprises a cell growth factor in a bioabsorbable porous substrate containing collagen and gelatin.
  • the tissue regeneration base material of the present invention means a base material widely used in regenerative medicine, for example, a base material used in regenerative medicine such as skin, bone, cartilage, myocardium and fat. In particular, it is suitably used as a tissue regeneration substrate for skin (dermis), that is, an artificial dermis substrate.
  • the bioabsorbable porous substrate used for the tissue regeneration substrate of the present invention contains collagen and gelatin as essential components.
  • the gelatin is not particularly limited.
  • gelatin derived from bones such as cows, pigs, chickens, and rabbits, tendons, and skins can be used.
  • the gelatin is preferably acid-treated or alkali-treated. Acid-treated gelatin is positively charged, and alkali-treated gelatin is negatively charged.
  • Various cell growth factors can be bound without being denatured by electrostatic binding. Therefore, good sustained release of cell growth factor (for example, bFGF) becomes possible.
  • collagen those derived from the skin, tendon, etc. of cows, pigs, etc. are not particularly limited. From the standpoint of improving safety by eliminating antigenicity, fat collagen is preferred in which collagen is treated with an enzyme such as peptase to remove telopeptides as much as possible.
  • an enzyme such as peptase to remove telopeptides as much as possible.
  • the content of gelatin contained in the bioabsorbable porous substrate is about 1 to 70% by weight, preferably about 20 to 60% by weight, more preferably about 30 to 50% by weight. If the gelatin content is too high, it will be difficult for surrounding tissues to enter the bioabsorbable porous substrate. On the other hand, if the gelatin content is too low, electrostatic interaction between gelatin and cell growth factors will occur. Adsorption due to becomes weak and the sustained release performance decreases. Therefore, the content range is as described above. The effect of gelatin and collagen can be effectively demonstrated and high therapeutic effects can be obtained.
  • the bioabsorbable porous substrate preferably has a porous structure because it becomes a substrate that regenerates the tissue three-dimensionally.
  • the average pore diameter of the microscopic pores of the bioabsorbable porous substrate is a force that can select an optimum value depending on the tissue or organ to be regenerated, preferably about 10 to 500 / ⁇ ⁇ . Preferably, it is about 50 to 300 / ⁇ ⁇ . If it is less than 10 m, cells may not enter the bioabsorbable porous substrate, resulting in extremely inferior cell adhesion, or force that the adhered cells cannot extend three-dimensionally. If it exceeds 500 / zm, the cell density may be low, and the tissue or organ may not be regenerated.
  • the tissue regeneration substrate of the present invention reflects the porous structure of the bioabsorbable porous substrate as it is.
  • the tissue regeneration substrate of the present invention comprises a cell growth factor in a bioabsorbable porous substrate containing collagen and gelatin.
  • the cell growth factor is not particularly limited as long as it promotes angiogenesis and enhances cell activity.
  • a cell growth factor having an angiogenesis action specifically, a basic fibroblast growth factor (bFGF) ), Acidic fibroblast growth factor (aFGF), vascular endothelial growth factor (VEGF), hepatocyte growth factor (HGF), plasma-derived growth factor (PDGF), angiopoetin, and transforming growth factor (TGF). It is done.
  • a particularly preferred embodiment of the present invention is bFGF.
  • the content of the cell growth factor in the tissue regeneration base material of the present invention can be appropriately selected according to the target yarn and texture to be regenerated, and is not particularly limited. Preferably, for 1cm 2
  • the tissue regeneration substrate of the present invention can stably and slowly release cell growth factors over a long period of time. It has an excellent sustained release performance.
  • bFGF has an action of promoting angiogenesis and enhancing the activity of cells, but it is an unstable substance in the living body, and even if it is used in an aqueous solution state, there is almost no expected biological effect.
  • bFGF can be released slowly and the action of bFGF can be stably maintained.
  • the tissue regeneration substrate of the present invention has, for example, the amount of cell growth factor released into PBS after being immersed in 37 ° C phosphate buffered saline (PBS) for 3 days. It is characterized in that it is 7% by weight or less (preferably 6% by weight or less) with respect to the total amount of the initial cell growth factor impregnated in the substrate. Also, the amount of cell growth factor released into the PBS after being immersed in 37 ° C phosphate buffered saline (PBS) for 7 days The total amount of initial cell growth factors impregnated in the substrate 15% by weight or less (preferably 13% by weight or less). In particular, when the cell growth factor is bFGF, the above sustained release performance is exhibited with good reproducibility.
  • tissue regeneration substrate of the present invention also serves as a bioabsorbable substrate containing collagen and gelatin, it is decomposed and absorbed within 3 weeks in vivo.
  • the preferable lower limit of the moisture content of the tissue regeneration substrate is 90%, and the preferable upper limit is 99.8%.
  • the water content of the bioabsorbable porous substrate corresponds to the degree of crosslinking of the bioabsorbable porous substrate, and the water content decreases as the degree of crosslinking increases. If the moisture content is less than 90%, the obtained tissue regeneration substrate may not have the flexibility suitable for transplantation. If it exceeds 99.8%, the obtained tissue regeneration substrate becomes a culture solution or buffer. In some cases, strength cannot be maintained. A more preferred lower limit is 95%, and a more preferred upper limit is 98%.
  • the moisture content is based on the following formula.
  • Moisture content (%) [(Ws-Wd) / Ws] X 100 (%)
  • Ws represents the weight (wet weight) when the tissue regeneration substrate is immersed in phosphate buffered saline for 1 hour at 25 ° C
  • Wd represents the adhesion prevention material using a vacuum dryer. It represents the weight when completely dried (dry weight).
  • the tissue regeneration substrate of the present invention comprises a step of freeze-drying an aqueous mixture containing collagen and gelatin, a step of crosslinking the resulting dried body, and cell growth in the resulting crosslinked body. It is manufactured by a manufacturing method including a step of containing a factor.
  • the above gelatin and collagen are mixed to form an aqueous solution, which is cast into a suitable mold and frozen at 40 to 80 ° C for 30 minutes to 2 hours.
  • the frozen material is freeze-dried to produce a sponge-like bioabsorbable porous substrate.
  • the obtained lyophilized product is subjected to a crosslinking treatment to produce a bioabsorbable porous substrate.
  • a crosslinking treatment there are no particular limitations on the method of crosslinking the frozen dried product, and examples thereof include a thermal crosslinking method, a ⁇ -ray irradiation method, an ultraviolet irradiation method, an electron beam irradiation method, an X-ray irradiation method, and a chemical crosslinking method using a crosslinking agent. It is done. Among them, a chemical crosslinking method using a crosslinking agent is preferable because the entire substrate can be crosslinked so as to have a uniform degree of crosslinking.
  • a freeze-dried product can be immersed in an aqueous solution containing a cross-linking agent such as dartalaldehyde to perform chemical cross-linking. Excess dartalaldehyde is removed by washing with water, and freeze-dried again if necessary to obtain a crosslinked bioabsorbable porous substrate.
  • a cross-linking agent such as dartalaldehyde
  • cell growth factor is contained in the obtained cross-linked substrate, and the method is not particularly limited.
  • an aqueous solution containing cell growth factor is dropped onto the cross-linked body.
  • Cell growth factor For example, the cross-linked product is impregnated with an aqueous solution containing. Then, you may provide a drying process further as needed.
  • the tissue regeneration base material of the present invention (particularly, artificial dermal base material) can stably and slowly release cell growth factors and can easily enter cells, so that wound healing is promoted. The healing period can be greatly shortened.
  • FIG. 1 is a graph showing the results of an in vitro bFGF sustained release test in Test Example 1
  • FIG. 2 is a tissue slice image when the gelatin content of the sponge in Test Example 1 is 0% by weight.
  • FIG. 3 is a tissue slice image when the gelatin content of the sponge in Test Example 1 is 10% by weight.
  • FIG. 4 is a tissue section image when the gelatin content of the sponge in Test Example 1 is 30% by weight.
  • FIG. 5 is a tissue slice image when the gelatin content of the sponge in Test Example 1 is 50% by weight.
  • FIG. 6 is a tissue slice image when the gelatin content of the sponge in Test Example 1 is 100% by weight.
  • Pig tendon-derived type I collagen and pig skin-derived gelatin were mixed to form an aqueous solution.
  • An aqueous solution was placed in a mold and frozen at 40 ° C for 1 hour, and then freeze-dried to produce a sponge.
  • Thermal crosslinking was performed by treating the sponge at 110 ° C under vacuum. Further, after thermal cross-linking, it was immersed in 0.2% dartalaldehyde and 0.05N acetic acid aqueous solution to carry out chemical cross-linking. Excess dartalaldehyde was removed by washing with water, and freeze-dried again to obtain a crosslinked collagen gelatin sponge. This crosslinked sponge was used in the subsequent in vitro sustained release test.
  • the sponge used in the experiment had a gelatin content of 0, 10, 30, 50% by weight.
  • the sustained release test was performed by immersing the sponge in PBS at 37 ° C, and quantifying bFGF released in PBS after 1, 3, 5, 7, and 9 days by the ELISA method.
  • Table 1 and Fig. 1 show the ratio of the amount of bFGF released over the number of days elapsed when the weight of bFGF contained in each sponge after impregnation is 100, that is, the bFGF elution ratio (%).
  • the sponge used in the experiment was a sponge having a gelatin content of 0, 10, 30, 50, or 100% by weight. This was made into a sponge having a diameter of 12 mm and a thickness of 3 mm, and bFGF aqueous solution 1001 was dropped on the sponge so as to be impregnated with 0 g of bFGF.
  • Figures 2-6 show tissue slice images after 2 weeks of implantation of this sponge in the skin defect layer on the back of the guinea pig.

Abstract

　本発明は、塩基性繊維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）等の細胞成長因子の徐放能を有し、かつ、細胞が侵入しやすく組織の再生に適した組織再生用基材を提供する。具体的には、コラーゲン及びゼラチンを含む生体吸収性多孔質基材に細胞成長因子を含有してなる組織再生用基材、並びにその製造方法に関する。

Description

明 細 書
組織再生用基材
技術分野
[0001] 本発明は、組織再生用基材に関する。具体的には、熱傷、外傷などの急性皮膚欠 損創ならびに褥瘡、潰瘍などの慢性皮膚欠損創に皮膚組織を再生させる為の人工 真皮基材等に関する。
背景技術
[0002] 皮膚の欠損が広範囲にわたる場合、早期に皮膚欠損部を閉鎖する必要がある。欠 損した皮膚の再生方法としては、細胞を使わずに铸型としてのコラーゲンスポンジを 生体に移植して生体内で疑似真皮組織を再生させる方法 (人工真皮）がある。人工 真皮の場合には、真皮様組織が再生した後に薄い分層植皮を行うか培養表皮を移 植する必要があるが、できるだけ早く真皮成分を再生させることが必要である。
[0003] 人工真皮の製造方法としては、コラーゲンスポンジを凍結乾燥する方法が一般的 であり、生体内での分解吸収速度を制御する目的で架橋を行うことが多い。
[0004] 皮膚組織の再生を促進させる方法としては、ある種の成長因子、例えば塩基性繊 維芽細胞成長因子 (bFGF)を、皮膚表面に塗布することがあげられる。皮膚から吸 収されることにより効果はあるが、その効果を維持するためには毎日塗布する必要が ある。そこで、成長因子を徐放させることにより、一度の投与で効果を持続させる方法 が試みられている。
[0005] 例えば河合らは、 bFGF含浸ゼラチンマイクロスフェアーを人工真皮に注入すること により、 bFGFの徐放効果と皮膚組織の生体内での構築が促進されることを明らかに している（非特許文献 1)。また、細胞組込型の培養皮膚を作製するにあたっても、 bF GF含浸ゼラチンマイクロスフェアーを添加することにより組織の構築が促進されるこ とが明らかになつている (非特許文献 2)。
[0006] し力し、この方法だと一度マイクロスフェアーに bFGFを含浸させる必要があり、さら にその bFGF含浸ゼラチンマイクロスフェアーを臨床の現場で人工真皮に注入する 作業が必要となり繁雑である。 [0007] そこで、人工真皮自体に成長因子徐放能をもたせることができれば、臨床現場で成 長因子を人工真皮に塗布するだけで使用することが可能になり、簡便な方法となりう る。
[0008] 現在、臨床で最も多く使用されている細胞成長因子は塩基性繊維芽細胞成長因 子 (bFGF)である。 bFGFは等電点が 9. 6であり、例えば等電点が 5. 0のゼラチンと 電気的相互作用により吸着する。この特性を利用して、酸性ゼラチン (等電点 5. 0) でできたマイクロスフェアーに bFGFを吸着させ、 bFGFの吸着したマイクロスフェア 一を用いることによって生体内で bFGFを経時的に徐放させることが可能である（特 許文献 1、非特許文献 3)。
[0009] しかしながら、この方法では微粒子であるマイクロスフェアーにー且 bFGFを吸着さ せた後に、 bFGFを吸着させたマイクロスフェアーを基材に注入させるなどの手技が 必要となり、臨床現場で利用するには煩雑で使いにくい一面があった。
[0010] 一方、 bFGFが吸着しやす 、酸性ゼラチンで人工真皮材料を作製し、そこに bFGF を吸着させれば徐放能をもつ基材になると考えられる力 生体内においてゼラチンは コラーゲンと比較すると細胞の侵入などで劣るために、組織の再生には適して 、な ヽ 。 bFGFを適量吸着させることが可能であり、一方で周囲の細胞が侵入しやすい基材 が望まれる。
[0011] なお、特許文献 2には、ゼラチンとコラーゲンとを必須基材構成成分とし、紫外線が 照射されて架橋されている医用基材が、細胞培養担体、培養皮膚などに用いられる ことが記載されている。
特許文献 1：特開 2003 - 325652号公報
特許文献 2：特開平 11—47258号公報
非特許文献 l : K.Kawaiら、 Biomaterials, Vol.21, p.489- 499 (2000)
非特許文献 2 :佐生ら、日本熱傷学会誌、第 29卷、 p.24-30
非特許文献 3 :Y.Tabataら、 J. Controlled Release, Vol.31, p.189- 199 (1994) 発明の開示
発明が解決しょうとする課題
[0012] 本発明は、塩基性繊維芽細胞成長因子 (bFGF)等の細胞成長因子の徐放能を有 し、かつ、細胞が侵入しやすく組織の再生に適した組織再生用基材を提供することを 目的とする。
課題を解決するための手段
[0013] 本発明者は、上記の課題を解決するため鋭意研究を行った結果、コラーゲンとゼラ チンとを含む生体吸収性多孔質基材に bFGFを含有させて得られる基材が、 bFGF の良好な徐放性を有しかつ細胞が侵入しやすぐ皮膚組織を再生させるための組織 再生用基材として好適であることを見出した。この知見に基づき、さらに研究を重ね て本発明を完成するに至った。
[0014] 即ち、本発明は、以下の組織再生用基材及びその製造方法を提供する。
[0015] 項 1.コラーゲン及びゼラチンを含む生体吸収性多孔質基材に細胞成長因子を含 有してなる組織再生用基材。
[0016] 項 2.生体吸収性多孔質基材のゼラチンの含有量が 1〜70重量％である項 1に記 載の組織再生用基材。
[0017] 項 3.細胞成長因子が塩基性繊維芽細胞成長因子 (bFGF)である項 1又は 2に記 載の組織再生用基材。
[0018] 項 4. 37°Cのリン酸緩衝食塩水（PBS)に 3日間浸漬させた後の該 PBS中への細胞 成長因子の放出量が組織再生用基材中に含侵させた初期の細胞成長因子の総量 に対し 7重量％以下である項1〜3のいずれかに記載の組織再生用基材。
[0019] 項 5. 37°Cのリン酸緩衝食塩水（PBS)に 7日間浸漬させた後の該 PBS中への細胞 成長因子の放出量が組織再生用基材中に含侵させた初期の細胞成長因子の総量 に対し 15重量％以下である項 1〜4のいずれかに記載の組織再生用基材。
[0020] 項 6.平均孔径 10〜500 /ζ πιの連続孔を有する項 1〜5のいずれかに記載の組織 再生用基材。
[0021] 項 7.生体内で 3週間以内に分解吸収される項 1〜6のいずれかに記載の組織再生 用基材。
[0022] 項 8.コラーゲン及びゼラチンを含む水性混合物を凍結乾燥する工程、得られる乾 燥体を架橋処理する工程、及び得られる架橋体に細胞成長因子を含有させる工程 を含む組織再生用基材の製造方法。 [0023] 以下、本発明を詳述する。
I.組織再牛.用某材
本発明の組織再生用基材は、コラーゲン及びゼラチンを含む生体吸収性の多孔質 基材に細胞成長因子を含有してなる。本発明の組織再生用基材とは、広く再生医療 に用いられる基材を意味し、例えば、皮膚、骨、軟骨、心筋、脂肪などの再生医療に 用いられる基材である。特に、皮膚 (真皮)の組織再生用基材、つまり人工真皮基材 として好適に用いられる。
[0024] 本発明の組織再生用基材に使用される生体吸収性多孔質基材は、コラーゲン及 びゼラチンを必須成分として含有する。
[0025] 上記ゼラチンとしては特に限定はなぐ例えば、牛、豚、鶏、鮭等の骨、腱、皮等に 由来するものを用いることができる。上記ゼラチンは、酸処理又はアルカリ処理されて いることが好ましい。酸処理されたゼラチンは正電荷に、アルカリ処理されたゼラチン は負電荷に帯電することから、この電荷を利用すれば、正あるいは負の電荷を有する ゼラチンを含む生体吸収性多孔質基材に、静電結合により各種の細胞成長因子を 変性させることなく結合させることが可能となる。そのため、細胞成長因子 (例えば、 b FGF)の良好な徐放が可能になる。
[0026] 上記コラーゲンとしては特に限定はなぐ牛、豚等の皮膚や腱等に由来するものを 用いることができる。抗原性を排除してより安全性を高める観点から、コラーゲンをプ 口テアーゼゃペプシン等の酵素で処理して、テロペプチドをできる限り除去したァテ 口コラーゲンが好ましい。ァテロコラーゲンには、 ι〜ιν型があるが、基材の用途に応 じて選択することができる。培養皮膚や創傷被覆材として用いる場合、真皮の構成成 分に近い、 I又は III型を用いることが好ましい。生体吸収性多孔質基材にコラーゲン を含有させることにより、該基材への細胞の侵入が容易となる。
[0027] 生体吸収性多孔質基材に含まれるゼラチンの含有量は、 1〜70重量％程度、好ま しくは 20〜60重量％程度、より好ましくは 30〜50重量％程度である。ゼラチンの含 有量が多くなりすぎると、生体吸収性多孔質基材に周囲の組織が入りにくくなり、一 方、ゼラチンの含有量が少なすぎると、ゼラチンと細胞成長因子が静電的相互作用 による吸着が弱くなり徐放性能が低下する。従って、上記した含有量の範囲であると 、ゼラチン及びコラーゲンの効果が有効に発揮され高い治療効果を得ることができる
[0028] 生体吸収性多孔質基材は、三次元的に組織を再生する基材となるため、多孔質構 造を有していることが好ましい。特に、多数の連続孔 (連続した微細小孔）を有してい ることが好ましい。力かる構造であることにより、本発明の組織再生用基材に細胞を播 種したときには、細胞が微細小孔内に浸入して接着し三次元的に伸展することが可 能となり、また、細胞を播種することなく移植した場合にも、周辺の細胞が容易に侵入 することができる。更に、接着した細胞へ充分な栄養を供給することが可能となり、細 胞を正常に増殖及び分化させることができる。
[0029] 生体吸収性多孔質基材の微細小孔の平均孔径としては、再生しょうとする組織又 は器官により最適な値を選択することができる力 好ましくは 10〜500 /ζ πι程度、より 好ましくは 50〜300 /ζ πι程度である。 10 m未満であると、生体吸収性多孔質基材 の内部に細胞が侵入できず細胞接着性が極端に劣ったり、接着した細胞が三次元 的に伸展できな力つたりすることがあり、 500 /z mを超えると、細胞の密度が低くなり 組織又は器官を再生できな 、ことがある。
[0030] 本発明の組織再生用基材は、上記の生体吸収性多孔質基材の多孔質構造がそ のまま反映される。
[0031] 本発明の組織再生用基材は、コラーゲン及びゼラチンを含む生体吸収性多孔質 基材に、細胞成長因子を含有してなる。細胞成長因子としては血管新生を促進し、 細胞の活性を高めるものであれば特に限定されず、例えば血管新生作用をもつよう な細胞成長因子、具体的には塩基性線維芽細胞増殖因子 (bFGF)、酸性線維芽細 胞増殖因子 (aFGF)、血管内皮細胞増殖因子 (VEGF)、肝細胞増殖因子 (HGF) 、血漿版由来増殖因子 (PDGF)、アンジォポェチン、トランスフォーミング増殖因子（ TGF)が挙げられる。本発明の特に好ましい実施形態としては、 bFGFである。
[0032] 本発明の組織再生用基材における細胞成長因子の含有量は、その再生する対象 糸且織等に応じて適宜選択することができ特に限定はない。好ましくは、 1cm2に対して
0.1 g〜100 g程度、好ましくは 1 μ g〜50 μ g程度含有して!/ヽればよ!/ヽ。
[0033] 本発明の組織再生用基材は、長時間に渡り細胞成長因子を安定して徐放できると いう優れた徐放性能を有している。例えば、 bFGFは血管新生を促進し細胞の活性 を高める作用を有するが、生体内で不安定な物質でありかつ水溶液状態で使用して も期待される生物効果はほとんど認められない。しかし、上記の生体吸収性多孔質 基材に所定量の bFGFを含浸させることにより、 bFGFを徐放させて bFGFの作用を 安定的に持続させることができる。
[0034] 本発明の組織再生用基材は、例えば、 37°Cのリン酸緩衝食塩水（PBS)に 3日間 浸漬させた後の該 PBS中への細胞成長因子の放出量が、組織再生用基材中に含 侵させた初期の細胞成長因子の総量に対し 7重量％以下 (好ましくは 6重量％以下） という特徴がある。また、 37°Cのリン酸緩衝食塩水（PBS)に 7日間浸漬させた後の該 PBS中への細胞成長因子の放出量力 該基材中に含侵させた初期の細胞成長因 子の総量に対し 15重量％以下 (好ましくは 13重量％以下）という特徴がある。特に、 細胞成長因子が bFGFの場合に上記の徐放性能が再現性よく発揮される。
[0035] さらに、本発明の組織再生用基材は、コラーゲン及びゼラチンを含む生体吸収性 基材カもなるため、生体内で 3週間以内に分解吸収される。
[0036] 組織再生用基材の含水率の好ましい下限は 90%、好ましい上限は 99. 8%である 。生体吸収性多孔質基材の含水率は、該生体吸収性多孔質基材の架橋度に対応し ており、架橋度が高いほど含水率は低くなる。含水率が 90%未満であると、得られる 組織再生用基材が移植に適する柔軟性を有しないことがあり、 99. 8%を超えると、 得られる組織再生用基材が培養液やバッファ一中で強度を保つことができないこと がある。より好ましい下限は 95%、より好ましい上限は 98%である。なお、含水率は 以下の計算式による。
[0037] 含水率（％) = [ (Ws-Wd) /Ws] X 100 (%)
式中、 Wsは、組織再生用基材を 25°Cにおいてリン酸緩衝生理食塩水中に 1時間 浸漬したときの重量 (湿潤重量)を表し、 Wdは、癒着防止材を真空乾燥機を用いて 完全に乾燥したときの重量 (乾燥重量)を表す。
II.組織再牛.用某材の製法
本発明の組織再生用基材は、コラーゲン及びゼラチンを含む水性混合物を凍結乾 燥する工程、得られる乾燥体を架橋処理する工程、及び得られる架橋体に細胞成長 因子を含有させる工程を含む製造方法により製造される。
[0038] まず、上記のゼラチン及びコラーゲンを混合して水溶液とし、これを適当な型枠の 中に流延し、 40〜一 80°Cで 30分〜 2時間程度凍結する。この凍結物を凍結乾燥 することによりスポンジ状の生体吸収性多孔質基材を作製する。
[0039] 次に、得られた凍結乾燥物を架橋処理して生体吸収性多孔質基材を作製する。凍 結乾燥物の架橋の方法としては特に限定されず、例えば、熱架橋法、 γ線照射法、 紫外線照射法、電子線照射法、 X線照射法、架橋剤を用いる化学架橋法等が挙げ られる。そのうち、基材の全体が均一の架橋度となるように架橋できることから架橋剤 を用いる化学架橋法が好適である。
[0040] 化学架橋法として、例えば、ダルタルアルデヒド等の架橋剤を含む水溶液に、凍結 乾燥物を浸漬しィ匕学架橋を行うことができる。水洗にて余剰のダルタルアルデヒドを 除去し、必要に応じ再度凍結乾燥することにより架橋された生体吸収性多孔質基材 を得る。
[0041] 次に、得られる架橋された基材に細胞成長因子を含有させるが、その方法としては 特に限定はなぐ例えば、細胞成長因子を含有する水溶液を該架橋体に滴下する、 細胞成長因子を含有する水溶液を該架橋体に含浸させるなどが例示される。その後 、さらに、必要に応じて乾燥工程を設けてもよい。
発明の効果
[0042] 本発明の組織再生用基材 (特に、人工真皮基材）は、細胞成長因子を安定的に徐 放することができ、かつ、細胞が侵入しやすいため、創傷治癒が促進され、治癒期間 の大幅な短縮を図ることができる。
図面の簡単な説明
[0043] [図 1]試験例 1における in vitroにおける bFGFの徐放試験の結果を示すグラフである
[図 2]試験例 1におけるスポンジのゼラチン含量を 0重量％とした場合の組織切片像 である。
[図 3]試験例 1におけるスポンジのゼラチン含量を 10重量％とした場合の組織切片像 である。 [図 4]試験例 1におけるスポンジのゼラチン含量を 30重量％とした場合の組織切片像 である。
[図 5]試験例 1におけるスポンジのゼラチン含量を 50重量％とした場合の組織切片像 である。
[図 6]試験例 1におけるスポンジのゼラチン含量を 100重量％とした場合の組織切片 像である。
発明を実施するための最良の形態
[0044] 以下に実施例を示して本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限られる ものではない。
[試験例 1]
(1)コラーゲンとゼラチンの混合スポンジの作製
豚腱由来タイプ Iコラーゲンと豚皮膚由来ゼラチンとを混合して水溶液とした。水溶 液を型枠に入れて 40°Cで 1時間凍結し、その後凍結乾燥することによりスポンジを 作製した。
[0045] このスポンジを真空下 110°Cで処理することにより熱架橋を行った。さらに、熱架橋 後、 0. 2%ダルタルアルデヒド、 0. 05N酢酸水溶液に浸漬しィ匕学架橋を行った。水 洗にて余剰のダルタルアルデヒドを除去し、再度凍結乾燥することにより架橋コラー ゲン ゼラチンスポンジを得た。この架橋スポンジを次の in vitro徐放試験に用いた。
(2) in vitro徐放試験
実験に使用したスポンジは、ゼラチン含量が 0、 10、 30、 50重量％のものを用いた
。これを 12mm Φ厚さ 3mmのスポンジとし、 bFGF力 0 g含浸するよう bFGF水溶 液 100 μ 1をスポンジに滴下した。
[0046] 徐放試験は 37°Cの PBS中にスポンジを浸漬させ、 1, 3, 5, 7, 9日後に PBS中に 放出された bFGFを、 ELIS A法により定量して行った。
[0047] 含浸後の各スポンジ中に含まれる bFGFの重量を 100とした時の経過日数におけ る bFGF放出量の割合、即ち bFGF溶出割合（％)を表 1及び図 1示す。
[0048] [表 1] ゼラチ^ fi (SS%)
曰
0 10 30 50
1 7.2 3.0 2.9 3.2
3 11.9 5.5 5.7 4.2
5 16.2 9.2 8.7 6.0
7 20.3 12.0 12.1 6.8
9 22.6 13.9 14.2 7.3
[0049] (3)埋植試験
実験に使用したスポンジは、ゼラチン含量が 0、 10、 30、 50、 100重量％のスポン ジを用いた。これを 12mm Φ厚さ 3mmのスポンジとし、 bFGF力 0 g含浸するよう b FGF水溶液 100 1をスポンジに滴下した。このスポンジを、モルモット背部全層皮膚 欠損層に埋植して 2週間経過後の組織切片像を図 2〜6に示す。
[0050] ゼラチン 100重量％のスポンジでは、周囲組織の細胞の侵入が少なぐまたスポン ジの下に細胞が潜り込むダウングロースの像が観察された。一方で、コラーゲン含量 が高くなるにつれて、細胞の侵入が多ぐ組織の再生も良好であつたが、コラーゲン 1 00重量％の場合、細胞成長因子の徐放性能が低下した。そのため、周囲組織の侵 入を妨げることなぐかつ細胞成長因子の徐放機能を発揮させるためには、ゼラチン を最適な混合割合で混合させることが必要となる。

Claims

請求の範囲
[1] コラーゲン及びゼラチンを含む生体吸収性多孔質基材に細胞成長因子を含有して なる組織再生用基材。
[2] 生体吸収性多孔質基材のゼラチンの含有量力^〜 70重量％である請求項 1に記 載の組織再生用基材。
[3] 細胞成長因子が塩基性繊維芽細胞成長因子 (bFGF)である請求項 1に記載の組 織再生用基材。
[4] 37°Cのリン酸緩衝食塩水（PBS)に 3日間浸漬させた後の該 PBS中への細胞成長 因子の放出量が組織再生用基材中に含侵させた初期の細胞成長因子の総量に対 し 7重量％以下である請求項 1に記載の組織再生用基材。
[5] 37°Cのリン酸緩衝食塩水（PBS)に 7日間浸漬させた後の該 PBS中への細胞成長 因子の放出量が組織再生用基材中に含侵させた初期の細胞成長因子の総量に対 し 15重量％以下である請求項 1に記載の組織再生用基材。
[6] 平均孔径 10〜500 μ mの連続孔を有する請求項 1に記載の組織再生用基材。
[7] 生体内で 3週間以内に分解吸収される請求項 1に記載の組織再生用基材。
[8] コラーゲン及びゼラチンを含む水性混合物を凍結乾燥する工程、得られる乾燥体 を架橋処理する工程、及び得られる架橋体に細胞成長因子を含有させる工程を含 む組織再生用基材の製造方法。
PCT/JP2006/317513 2005-09-09 2006-09-05 組織再生用基材 WO2007029677A1 (ja)

Priority Applications (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US12/065,979 US8889171B2 (en) 2005-09-09 2006-09-05 Tissue regeneration substrate
BRPI0615905A BRPI0615905B8 (pt) 2005-09-09 2006-09-05 substrato para regeneração de tecido e método para produção do referido substrato
AU2006288336A AU2006288336B2 (en) 2005-09-09 2006-09-05 Tissue regeneration substrate
KR1020087007675A KR101224927B1 (ko) 2005-09-09 2006-09-05 조직 재생용 기재
CA2619785A CA2619785C (en) 2005-09-09 2006-09-05 Sustained release of a cell growth factor from a tissue regeneration substrate comprising collagen and gelatin
EP06797419.6A EP1923078B1 (en) 2005-09-09 2006-09-05 Tissue regeneration substrate

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2005-261840 2005-09-09
JP2005261840A JP5008284B2 (ja) 2005-09-09 2005-09-09 組織再生用基材

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2007029677A1 true WO2007029677A1 (ja) 2007-03-15

Family

ID=37835797

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2006/317513 WO2007029677A1 (ja) 2005-09-09 2006-09-05 組織再生用基材

Country Status (9)

Country Link
US (1) US8889171B2 (ja)
EP (1) EP1923078B1 (ja)
JP (1) JP5008284B2 (ja)
KR (1) KR101224927B1 (ja)
CN (1) CN101257933A (ja)
AU (1) AU2006288336B2 (ja)
BR (1) BRPI0615905B8 (ja)
CA (1) CA2619785C (ja)
WO (1) WO2007029677A1 (ja)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9283302B2 (en) * 2011-12-16 2016-03-15 Cormatrix Cardiovascular, Inc. Extracellular matrix encasement structures and methods
EP2353547B1 (en) * 2008-06-26 2018-01-17 Nobelpharma Co., Ltd. Agent for regenerating tympanic membrane or external auditory canal
JP5396803B2 (ja) * 2008-10-06 2014-01-22 コニカミノルタ株式会社 細胞培養基材及び細胞培養方法
JP2010130913A (ja) * 2008-12-02 2010-06-17 Gunze Ltd グルコース消費量測定による細胞成長因子の活性評価方法
JP2014030663A (ja) * 2012-08-06 2014-02-20 Gunze Ltd 徐放性組織再生材料
JPWO2014115732A1 (ja) * 2013-01-25 2017-01-26 富士フイルム株式会社 移植用人工真皮およびその製造方法
JP6429490B2 (ja) * 2014-05-12 2018-11-28 多木化学株式会社 コラーゲン線維架橋多孔体
JP6432967B2 (ja) * 2014-05-12 2018-12-05 多木化学株式会社 溶解性コラーゲン線維多孔体
CN107849539A (zh) * 2015-08-13 2018-03-27 富士胶片株式会社 多能干细胞的培养方法、培养容器的制造方法、培养容器以及细胞培养用支架材料
CN109311224B (zh) * 2016-06-08 2020-12-29 富士胶片株式会社 明胶成型体的制造方法及明胶成型体
CN107126579A (zh) * 2017-05-15 2017-09-05 中国科学院西北高原生物研究所 一种具有快速止血作用的牦牛皮胶原蛋白海绵及其制备方法和应用
US11744922B2 (en) * 2017-10-27 2023-09-05 Saint Louis University Biomimetic sponges for tissue regeneration
CN108525021B (zh) * 2018-04-17 2021-05-18 山西医科大学 基于3d打印的含血管及毛囊结构组织工程皮肤及其制备方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH1147258A (ja) * 1997-07-30 1999-02-23 Menicon Co Ltd ゼラチンとコラーゲンとを含有する医用基材
JPH11319068A (ja) * 1998-05-12 1999-11-24 Menicon Co Ltd 人工皮膚用基材およびその製法
WO2002091955A1 (fr) * 2001-05-17 2002-11-21 Kaneka Corporation Rein artificiel presentant la fonction de metabolisme de proteine et son procede de fabrication
WO2003092759A1 (fr) * 2002-05-01 2003-11-13 Japan Science And Technology Agency Procede de preparation d'un materiau composite poreux
JP2003325652A (ja) * 2002-05-16 2003-11-18 Gunze Ltd 細胞組込型培養皮膚

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL105529A0 (en) * 1992-05-01 1993-08-18 Amgen Inc Collagen-containing sponges as drug delivery for proteins
AUPN174495A0 (en) 1995-03-15 1995-04-06 Ketharanathan, Vettivetpillai Surgical prostheses
JPH09122227A (ja) * 1995-10-31 1997-05-13 Bio Eng Lab:Kk 医用材料およびその製造方法
CN1183972C (zh) 1999-02-04 2005-01-12 吉林圣元科技有限责任公司 促进伤口组织修复的伤口覆盖材料
CN1141981C (zh) 1999-02-04 2004-03-17 李校坤 促进脊髓组织损伤愈合的海绵材料其制备方法及应用
AUPR217300A0 (en) * 2000-12-20 2001-01-25 Ketharanathan, Vettivetpillai Method of creating biological and biosynthetic material for implantation
US20090312524A1 (en) * 2003-11-28 2009-12-17 Alternative Sourced Collagen, Llc Compositions and methods comprising collagen
CN1252251C (zh) 2004-07-26 2006-04-19 戴育成 皮肤干细胞胶原海绵膜人工活性皮肤的制备方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH1147258A (ja) * 1997-07-30 1999-02-23 Menicon Co Ltd ゼラチンとコラーゲンとを含有する医用基材
JPH11319068A (ja) * 1998-05-12 1999-11-24 Menicon Co Ltd 人工皮膚用基材およびその製法
WO2002091955A1 (fr) * 2001-05-17 2002-11-21 Kaneka Corporation Rein artificiel presentant la fonction de metabolisme de proteine et son procede de fabrication
WO2003092759A1 (fr) * 2002-05-01 2003-11-13 Japan Science And Technology Agency Procede de preparation d'un materiau composite poreux
JP2003325652A (ja) * 2002-05-16 2003-11-18 Gunze Ltd 細胞組込型培養皮膚

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KIMURA Y. ET AL.: "Adipose tissue engineering based on human preadipocytes combined with gelatin microspheres containing basic fibroblast growth factor", BIOMATERIALS, vol. 24, 2003, pages 2513 - 2521, XP004419996 *
SASO Y. ET AL.: "Cell-preconfluent Baiyo Hifu eno Johosei bFGF Tenka Koka", JAPANESE JOURNAL OF BURN INJURIES, vol. 29, no. 1, 2003, pages 24 - 30, XP003009775 *
See also references of EP1923078A4 *

Also Published As

Publication number Publication date
EP1923078A4 (en) 2011-12-14
CA2619785A1 (en) 2007-03-15
JP2007068884A (ja) 2007-03-22
AU2006288336B2 (en) 2011-08-18
EP1923078B1 (en) 2016-01-20
KR20080042151A (ko) 2008-05-14
JP5008284B2 (ja) 2012-08-22
AU2006288336A1 (en) 2007-03-15
KR101224927B1 (ko) 2013-01-22
US8889171B2 (en) 2014-11-18
BRPI0615905A2 (pt) 2011-05-31
CA2619785C (en) 2013-12-03
CN101257933A (zh) 2008-09-03
BRPI0615905B8 (pt) 2021-12-07
EP1923078A1 (en) 2008-05-21
BRPI0615905B1 (pt) 2018-05-15
US20090143287A1 (en) 2009-06-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5008284B2 (ja) 組織再生用基材
Ulubayram et al. EGF containing gelatin-based wound dressings
Suzuki et al. Experimental study of a newly developed bilayer artificial skin
Ruszczak Effect of collagen matrices on dermal wound healing
Zheng et al. Polydopamine-modified collagen sponge scaffold as a novel dermal regeneration template with sustained release of platelet-rich plasma to accelerate skin repair: a one-step strategy
De Vries et al. Dermal regeneration in native non‐cross‐linked collagen sponges with different extracellular matrix molecules
US20020161440A1 (en) Dermal scaffold using alkaline pre-treated chitosan matrix or alkaline pre-treated chitosan and alkaline pre-treated collagen mixed matrix
US9421229B2 (en) Neural scaffolds
JP2020510701A (ja) 創傷治癒薬
JP3377354B2 (ja) 人工皮膚
WO2004052418A1 (ja) 骨−軟骨組織の再生用移植体
CN110025830B (zh) 一种缓释抑菌型人工真皮模型及其构建方法
JP2005211477A (ja) 再生医療用支持体
JP2022516123A (ja) バイオロジカルスキャホールド及びその製造方法
JP2003325652A (ja) 細胞組込型培養皮膚
CN102671243A (zh) 一种负载季铵化壳聚糖/siRNA复合粒子的皮肤再生材料及其制备方法
JP2014030663A (ja) 徐放性組織再生材料
RU2430743C2 (ru) Биологически активное раневое покрытие
Jiang et al. Improved wound healing in pressure-induced decubitus ulcer with controlled release of basic fibroblast growth factor
JPH08196618A (ja) 細胞侵入性コラーゲン製剤、および人工皮膚、およびそれらの製造方法
JP2000245450A (ja) 生着率を改善する培養表皮用シート
JPH03242142A (ja) 人工皮膚及びその製造方法
JP4464056B2 (ja) 発毛促進用複合材料
JP2000262610A (ja) 表皮再生を目的とした自家抜去毛包移植用の人工真皮
Huang et al. Wound dressings containing bFGF‐impregnated microspheres: Preparation, characterization, in vitro and in vivo studies

Legal Events

Date Code Title Description
WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 200680032611.8

Country of ref document: CN

121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2006797419

Country of ref document: EP

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2619785

Country of ref document: CA

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2006288336

Country of ref document: AU

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 12065979

Country of ref document: US

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: MX/a/2008/003254

Country of ref document: MX

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2028/DELNP/2008

Country of ref document: IN

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2006288336

Country of ref document: AU

Date of ref document: 20060905

Kind code of ref document: A

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 1020087007675

Country of ref document: KR

ENP Entry into the national phase

Ref document number: PI0615905

Country of ref document: BR

Kind code of ref document: A2

Effective date: 20080310