UA64784C2 - Improvements in enzymatic synthesis of chiral amines - Google Patents

Improvements in enzymatic synthesis of chiral amines Download PDF

Info

Publication number
UA64784C2
UA64784C2 UA2000105759A UA2000105759A UA64784C2 UA 64784 C2 UA64784 C2 UA 64784C2 UA 2000105759 A UA2000105759 A UA 2000105759A UA 2000105759 A UA2000105759 A UA 2000105759A UA 64784 C2 UA64784 C2 UA 64784C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
aminopropane
amino
amino group
transaminase
acid
Prior art date
Application number
UA2000105759A
Other languages
English (en)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed filed Critical
Publication of UA64784C2 publication Critical patent/UA64784C2/uk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/001—Amines; Imines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/005—Amino acids other than alpha- or beta amino acids, e.g. gamma amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
    • C12P13/06—Alanine; Leucine; Isoleucine; Serine; Homoserine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
    • C12P13/12—Methionine; Cysteine; Cystine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
    • C12P41/006—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by reactions involving C-N bonds, e.g. nitriles, amides, hydantoins, carbamates, lactames, transamination reactions, or keto group formation from racemic mixtures

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

Даний винахід відноситься до удосконалень ферментативного синтезу хіральних сполук, що містять аміногрупу, наприклад, хіральних амінів.
У патентах США МеоМео4950606, 5169780, 5300437 і 5360724, розкриття інформації про яких включене в даний текст для зведення, описане енантіомерне збагачення хіральних амінів за допомогою використання трансамінази амінокислоти. Трансамінази амінокислот є відомими залежними від піридоксальфосфату ферментами, знайденими в різних мікроорганізмах включаючи Рзепдотопа5, Евспегіспіа, Васійшв, засспаготусе5, Напзепшціа, Сапаїда, 5ігеріотусев, АзрегудПи5 і Меигозрога. Дві трансамінази амінокислот
ЕС 2.6.1.18 ії ЕС 2.6.1.19 кристалізовані і охарактеризовані авторами ХУопапйа еї аї!., Адгіс. Віої. Спет., 47(10), 2257-2265 (1983).
У патентах США МоМо 4950606, 5169780 і 5300437 описується, що індивідуальні штами організмів, що містять трансаміназу, можуть бути виділені за допомогою культивування в хемостаті, тобто культивування в постійному, але обмеженому хімічному оточенні, з акцептором аміногрупи і аміном як єдиним джерелом азоту. Типовий штам, виділений таким чином у вищезгаданих патентах, охарактеризований (в
Американській колекції типів культур) як Васійй5, тедасегішт. Звичайно трансамінази омега-амінокислот метаболізують амінокислоти, в яких аміногрупа знаходиться на кінцевому, ахіральному (нехіральному) вуглецевому атомі, і амін, що використовується як джерело азоту в подібній хемостатній культурі, може бути того ж самого типу, а саме ахіральним аміном, таким як н-октиламін, циклогексиламін, 1,4-бутандіамін, 1,6-гександіамін, б-аміногексанова кислота, 4-аміномасляна кислота, тирамін і бензиламін. У тих патентах також повідомляється, однак, що амін, який використовується як джерело азоту в таких хемостатних культурах, може бути хіральним аміном, таким як 2-амінобутан, а-фенетиламін і 2-аміно-4-фенілбутан.
Можуть використовуватися хіральні амінокислоти, такі як І--лізин, І--орнітин, р-аланін і таурин.
Крім енантіомерного збагачення в патентах США МоМо 4950606, 5169780 і 5300437 описаний стереоселективний синтез однієї хіральної форми аміну за допомогою дії трансамінази амінокислоти на кетон формули В'СОВА, в якій В! і 2 є різними алкільними або арильними групами, в присутності донора аміногрупи. Описані донори аміногрупи подібні амінам, що використовуються як джерело азоту в хемостатних культурах; наприклад, ахіральним амінам, в яких аміногрупа знаходиться на кінцевому вуглецевому атомі, таким як пропіламін і бензиламін, хіральним амінам, в яких аміногрупа знаходиться на кінцевому вуглецевому атомі, таким як (5)-2-амінобутан, і хіральним амінокислотам, таким як І! -аланін і 1- аспарагінова кислота.
Даний винахід заснований на виявленні того, що ахіральний амін 2-амінопропан несподівано є кращим як донор аміну в такому трансаміназному синтезі амінів в порівнянні з ахіральними амінами, в яких аміногрупа знаходиться на кінцевому вуглецевому атомі, або хіральними амінами, в яких аміногрупа знаходиться на некінцевому вуглецевому атомі. Таким чином, винахід являє собою удосконалення відомого стереоселективного синтезу хірального аміну, в процесі якого кетон приводиться в контакт з трансаміназою в присутності донора аміногрупи, з використанням як донора аміногрупи 2-амінопропану.
Термін "хіральний амін" застосовується тут в самому широкому значенні. Як описано у перелічених вище патентах, відомий стереоспецифічний синтез може застосовуватися для отримання широкої різноманітності аліфатичних і аліциклічних сполук різних і змішаних функціональних типів, що характеризуються тільки присутністю первинної аміногрупи, пов'язаних з повторним вуглецевим атомом, який крім атома водню, несе або (ії) двовалентну групу, що утворює хіральную циклічну структуру, або (ії) два заступники (відмінних від водню), відмінних один від одного по структурі або хіральності.
Двовалентні групи, що утворюють хіральну циклічну структуру, включають, наприклад, 2-метилбутан- 1,4-диіл, пентан-1,4-диіл, гексан-1,4-диіл, гексан-1,5-диіл, 2-метилпентан-1,5-диіл. Таким чином, дане удосконалення, що полягає у використанні 2-амінопропану як донора аміну, може використовуватися в стереоспецифічному синтезі 1-аміно---метилциклопентану з 2-метилциклопентанону, 1-аміно-3- метилциклопентану з З-метилциклопентанону, 1-аміно-2-метилциклогексану з 2-метилциклогексанону і т.д.
Два різних заступники у повторного вуглецевого атома (Б'ї В, приведені вище) також можуть варіювати в широких межах і включають алкіл, аралкіл, арил, галоген, гідрокси, нижчий алкіл, нижчий алкокси, нижчий алкілтіо, циклоалкіл, карбокси, карбалкокси, карбамоїл, моно- і ди-(нижчий алкілузаміщений карбамоїл, трифторметил, феніл, нітро, аміно, моно- і ди-(нижчий алкіл)заміщений аміно, алкілсульфоніл, арилсульфоніл, алкілкарбоксамідо, арилкарбоксамідо і т.д., а також алкіл, аралкіл або арил, заміщений вищенаведеними заступниками.
Таким чином, дане удосконалення, що полягає у використанні 2-амінопропану як донора аміну, може застосовуватися в стереоспецифічному синтезі 2-амінобутану з бутанону, 2-аміно-1-бутанолу з 1-гідрокси- бутан-2-ону, аланіну з піровиноградної кислоти, 1-аміно-1-фенілетану з ацетофенону, 1-аміно-1-(2-метокси- 5-фторфеніл)етану з 2-метокси-5-фторацетофенону, у-аміновалеріанової кислоти з левулінової кислоти, 1- аміно-1-фенілпропану з 1-фенілпропан-1-ону, 1-аміно-1-(4-бромфеніл)пропану з 1-(4-бромфеніл)пропан-1- ону, 1-аміно-1-(4-нітрофеніл)упропану з 1-(4-нітрофеніл)упропан-1-ону, 1-феніл-2-амінопропану з 1- фенілпропан-2-ону, валіну з 2-оксо-3-метилмасляної кислоти 1-(3З-трифторметилфеніл)-2-амінопропану з 1- (З-трифторметилфеніл)пропан-1-ону, 2-амінопропанолу з гідроксипропанону, 1-метокси-2-амінопропану з метоксиоксипропанону, 1-аміно-1-фенілбутану з 1-фенілбутан-1-ону, 1-феніл-2-амінобутану з 1-фенілбутан- 2-ону, 1-(2,5-диметокси-4-метил-феніл)-2-амінобутану з 1-(2,5-диметокси-4-метилфеніл)бутан-2-ону, 1-(4- гідроксифеніл)-З-амінобутану з 1-(4-гідрокси-феніл)бутан-З-ону, 1-аміно-1-(2-нафтил)етану з 0ю2- ацетилнафталіну, фенілаланіну з фенілпіровиноградної кислоти, глутамінової кислоти з 2-кетоглутарової кислоти, аспарагінової кислоти з 2-сетобурштинової кислоти і т.д.
У протилежність донорам аміну, що повідомляються в попередньому рівні техніки, і дійсно більшості аміноалканових донорів аміногруп, які є теоретично доступними, 2-амінопропан володіє відносно унікальним поєднанням, а саме (ії) є ахіральним і (ії) має аміногрупу на некінцевому аліфатичному вуглецевому атомі. Таким чином, незважаючи на використання трансамінази омега-амінокислоти, яка за природою діє на аміногруппу в кінцевому або о-положенні амінокислоти, було знайдено, що використання як донора аміногрупи сполуки, що має аміногрупу на некінцевому аліфатичному вуглецевому атомі, дає термодинамічну перевагу. Не бажаючи прив'язуватися до якої-небудь теорії вважаємо, що це удосконалення є наслідком побічного продукту ферментативної реакції, який є в цьому випадку кетоном, в протилежність використанню донора аміну, що має аміногрупу на кінцевому вуглецевому атомі, такого як етил-амін, н-пропіламін, н-октиламін, 1,4-бутандіамін, 1,6-гександіамін, б-аміногексанова кислота, 4- аміномасляна кислота, тирамін або бензиламін, який утворить альдегід при реакції в присутності трансамінази амінокислоти. У реакціях, в яких утворюються амінокислоти з кетокислот, термодинамічна перевага використання ізопропіламіну як донора аміногрупи приводить в результаті до константи рівноваги, рівної приблизно 1000. Оскільки дана термодинамічна перевага є слідством хімічного навколишнього середовища реагуючої карбонільної групи, це в рівній мірі застосовно і до синтезу всіх хіральних с- амінокислот з їх кетокислот, природних або неприродних.
Незважаючи на дану термодинамічну перевагу, присутність аміногрупи на кінцевому аліфатичному вуглецевому атомі приводить, в основному, до хіральності, в порівнянні із заміщенням на кінцевому вуглецевому атомі, який, обов'язково маючи два водневих атоми, запобігає хіральності. Оскільки трансаміназа є стереоселективною, використання хірального донора аміну означає, що тільки половина такого аміну є доступною як донор. З промислової точки зору, це є неприйнятним для донора аміногрупи.
На жаль, величезна більшість аміно(нижчих)алканів, що задовольняють першій вимозі наявності аміногрупи на некінцевому вуглецевому атомі, є самі по собі хіральними. Таким чином, обмежуючи увагу аміноалканами, що мають не більше за 8 вуглецевих атомів, визначили, що теоретично існує, принаймні, 130 можливих гомологічних і ізомерних амінів, в яких аміногрупа не знаходиться на три заміщеному вуглецевому атомі (щоб бути донором аміногрупи, сполука повинна також нести, принаймні, один доступний атом водню на вуглецевому атомі, до якого приєднується аміногрупа). З цих 130 можливих донорів аміногрупи менше за половину (54) мають аміногрупу на некінцевому вуглецевому атомі і з них 9390 (50) є хіральними. Тільки 4 з алкіламінів, що мають аміногрупу на некінцевому вуглецевому атомі, є ахіральними і з них З є непридатними з точки зору вартості і доступності і, крім того, невідповідними як донори аміногрупи: З-амінопентан, 2,2-диметил-З-амінопентан і 4-аміногептан. Таким чином, з всіх аміно(нижчих)алканів, теоретично відповідних як донори аміногрупи, тільки 2-аміно-пропан (ї) має аміногрупу на кінцевому вуглецевому атомі і таким чином є термодинамічно більш сприятливим серед аміноалканів, в яких аміногрупа знаходиться на кінцевому вуглецевому атомі, (ії) є ахіральним так, щоб бути повністю доступним для реакції і (ії) є прийнятним з точки зору вартості і доступності. Як подальша перевага, 2-амінопропан також дає побічний продукт, ацетон, який може легко виділятися і сам по собі є статтею торгівлі.
Ферментативне перетворення може проводитися за допомогою звичайних прийомів культивування з ізольованими, але незростаючими клітинами, або з препаратом розчинної трансамінази амінокислоти.
Трансаміназа амінокислоти може бути у вільній формі або у вигляді вільного від клітин екстракту або препарату цілих клітин або може бути імобілізованою на відповідній підкладці або відповідній матриці, такій як поперечно-зшитий декстран або агароза, кремнезем, поліамід або целюлоза. Вона також може бути інкапсульованою в поліакриламіді, альгінатах, волокнах або аналогічних. Способи такої імобілізації описані в літературі (див., наприклад, Меїподз ої Епгутої оду, 44, 1976).
Хоч це і не є необхідним, звичайно доцільно додавати джерело пірідоксаміну, таке як піридоксальфосфат.
ПРИКЛАД 1.
Винахід може бути проілюстрований прикладом отримання (5)-1-метокси-2-амінопропану, проміжної сполуки для синтезу сільськогосподарських хімічних речовин, в якому метоксиацетон вводиться в контакт з трансаміназою в присутності 2-амінопропану як донора аміну, дають можливість реакції продовжуватися доти, поки істотна кількість метоксиацетону не перетвориться в (5)-1-метокси-2-амінопропан (і 2- амінопропан одночасно перетворюється в ацетон), і що утворився таким чином (5)-1-метокси-2- амінопропан виділяють. Загальне перетворення за допомогою ферменту може бути представлене таким чином і їй
Сну С-стО--сСН, ж СНИ СНеЗСН, ув ? спр сно ев, се с-сН,
П'ять мілімолей первинного кислого фосфату натрію і 250мл концентрованої соляної кислоти додавалося до 1000мл води. Суміш охолоджувалася до 5-10"С в бані з льодом і додавалося 258мл 2- амінопропану з подальшим доданням 20бмл метоксиацетону (98905). Дану суміш перемішували і рн доводили до 7,5 або за допомогою гідроокису натрію, або соляної кислоти, з потреби. Суміш переносили в
З-літровий круглодонний реактор з регульованою температурою і апаратом для перемішування. Після того, як температура суміші ставала стабільною 30ж-17С, додавали 0,2мМ піридоксаль-5'і-фосфату. При необхідності РН доводили знов до 7,5 і додавали невелику кількість води, щоб довести об'єм суміші до 1800мл.
Окремо готували розчин ферменту. До 200мл 5мММ розчину фосфату натрію (рН 7,5), 0,2мММ піридоксаль-5'-фосфату і додавали 2г (суха вага) клітин Васіи5, що містять (5)-трансаміназу. Коли клітини повністю суспендувалися, ферментний розчин додавали до реакційної суміші, описаної вище.
Кінцева реакційна середа містила 1,5М 2-амінопропану і 1,0М метоксиацетону. Реакція протікала протягом 8 годин при 30:-17С і рн 7,5, після чого (5)-2-метокси-2-аміно-пропан був присутнім в реакційній суміші, мав концентрацію 0,6М і чистоту вище за 99905.
Реакцію припиняли доданням 5мл концентрованої соляної кислоти з подальшою флеш-перегонкою для видалення метоксиацетону, який не прореагував, і побічного продукту, ацетону, в єдиній фракції. Згодом може бути проведена розділова колонкова перегонка цього дистиляту для розділення метоксиацетону і ацетону. До реакційної суміші додавали 27Омл 5095-ого водного розчину гідроокису натрію для депротонування амінів. Потім аміни видаляли з суміші шляхом перегонки у вигляді єдиної фракції і (5)-1- метокси-2-амінопропан відділяли від залишкового 2-амінопропану шляхом розділової перегонки, отримуючи 125г (5)-1-метокси-2-амінопропану, що містить 5095 води. Аналіз за допомогою газової хроматографії показав, що продукт був більш ніж на 9995 хімічно і енантіомерно чистим.
ПРИКЛАД 2.
Далі винахід можна проілюструвати прикладом синтезу І-аланіну, корисної амінокислоти, в якому піровиноградну кислоту вводять в контакт з трансаміназою в присутності 2-амінопропану як донора аміногрупи, даючи реакції продовжуватися доти, поки істотна кількість піровиноградної кислоти не перетворитися в І -аланін, і одночасно 2-амінопропан не перетвориться в ацетон. Загальне перетворення за допомогою ферменту може бути зображене таким чином о ут спрі-сооН жк свурсн-сВ, к ї» і с ст-СсООН сне С-сВ, 58)
Пируват натрію (50мММ, 165г) і хлоргідрат ізопропіламіну (50мММ, 0,2Змл 6,5 молярного розчину) розчиняли в 29,О0мл 50мММ первинного кислого фосфату натрію і рН доводили до 7,5. Додавали піридоксальфосфат (1,0мМ, 8,0мг) з подальшим доданням д8мг клітин Е.соїї, що містять (5)-трансаміназу, і таким чином кінцевий об'єм досягав ЗОомл і кінцевий показник рН був 7,5. Після інкубації при 30"С протягом 24 годин вимірювали концентрації ізопропиламіну, ацетону і І-аланіну за допомогою ВЕРХ і газової хроматографії, і за даними визначення концентрація І-аланіну була 45,6МмМ, що еквівалентне Кед для вищенаведеної реакції понад 100.
Коли аналогічну реакцію виконували, використовуючи клітини Е.соїї (0,3г), що містять (К)-трансаміназу, перетворення відбувалося до О-аланіну з концентрацією 46мМ.
ПРИКЛАД 3. Синтез І -аланіну
В окремому прикладі синтезу І-аланіну, пируват натрію (1М, 110,Ог) і хлоргідрат ізопропіламіну (ІМ, 15З3мл 6,5 молярного розчину) розчиняли в 800мл 50мМ буферу на основі первинного кислого фосфату натрію, і рН доводили до 7,5. Потім додавали піридоксальфосфат (1мМ, 265мг) з подальшим доданням 5г клітин Е.соїї, що містять (5)-трансаміназу, так, щоб кінцевий об'єм був 1л і кінцеве значення рнН було 7,5.
Після інкубації при 30"С протягом 24 годин визначали концентрації ізопропіламіну і І-аланіну за допомогою
ВЕРХ і концентрацію ацетону визначали за допомогою газової хроматографії. Концентрація отриманого І - аланіну становила 970мМ, що еквівалентно константі рівноваги для реакції приблизне 1000.
ПРИКЛАД 4. Синтез І -2-аміномасляної кислоти
Натрієву сіль кетомасляної кислоти (50ММ, 186мг) і ізопропіламін (50ММ, 0,2Змл 6,5 молярного розчину) розчиняли в 29мл 50мММ буферу на основі первинного кислого фосфату натрію, і рН доводили до 7,5.
Додавали піридоксальфосфат (1мМ, 8,0мг) з подальшим доданням 100мг клітин Е.соїї, що містять (5)- трансаміназу, так, щоб кінцевий об'єм досягав ЗОомл і кінцеве значення рн було 7,5. Після інкубації при 30"С протягом 24 годин визначали концентрації ізопропіламіну і Г-2-аміномасляної кислоти за допомогою ВЕРХ і концентрацію ацетону - за допомогою газової хроматографії. Було визначено, що концентрація отриманої
Ї -аміномасляної кислоти була 48мММ, що еквівалентно константі рівноваги для реакції понад 500.
ПРИКЛАД 5. Синтез додаткових амінокислот
Слідуючи, в основному, описаним в прикладі 4 процедурам, здійснювали синтез І-глутамату, І1- метіоніну і Г-норваліну з натрієвих солей відповідних кетокислот: 2-кетоглутарової кислоти (50ММ, 252мМГг), 4-метилтіо-2-оксомасляної кислоти (50ММ, 255мг) і 2-ксетовалеріанової кислоти (50мМ, 207мгГг), відповідно. У всіх випадках (5)-трансаміназа давала виключно І -ізомер амінокислоти при концентраціях 45, 47 і 4А6мМ, відповідно.

Claims (2)

1. Спосіб одержання хірального аміну, згідно з яким кетон вводять в контакт з трансаміназою в присутності донора аміногрупи, який відрізняється тим, що як донор аміногрупи використовують 2-амінопропан.
2. Синтез за п. 1, в якому хіральним аміном є хіральна амінокислота.
З. Спосіб одержання (5)-1-метоксі-2-амінопропану, який включає введення метоксіацетону в контакт з трансаміназою в присутності 2-амінопропану як донора аміногрупи доти, поки істотна кількість метоксіацетону не перетвориться в (5)-1-метоксі-2-амінопропан і 2-амінопропан не перетвориться в ацетон, і виділення (5)-1- метоксі-2-амінопропану.
UA2000105759A 1998-03-11 1999-10-03 Improvements in enzymatic synthesis of chiral amines UA64784C2 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US7752098P 1998-03-11 1998-03-11
PCT/US1999/005150 WO1999046398A1 (en) 1998-03-11 1999-03-10 Improvements in the enzymatic synthesis of chiral amines

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA64784C2 true UA64784C2 (en) 2004-03-15

Family

ID=22138554

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UA2000105759A UA64784C2 (en) 1998-03-11 1999-10-03 Improvements in enzymatic synthesis of chiral amines

Country Status (24)

Country Link
EP (1) EP1075534B8 (uk)
JP (1) JP2002505884A (uk)
KR (1) KR20010034561A (uk)
CN (1) CN1154746C (uk)
AT (1) ATE295424T1 (uk)
AU (1) AU753904B2 (uk)
BR (1) BR9908797A (uk)
CA (1) CA2322605A1 (uk)
CZ (1) CZ295882B6 (uk)
DE (1) DE69925267T2 (uk)
ES (1) ES2243051T3 (uk)
FI (1) FI20001805A (uk)
HK (1) HK1035000A1 (uk)
HU (1) HUP0101056A3 (uk)
MX (1) MXPA00008573A (uk)
NO (1) NO319671B1 (uk)
NZ (1) NZ506405A (uk)
PL (1) PL342882A1 (uk)
PT (1) PT1075534E (uk)
RU (1) RU2213142C2 (uk)
SK (1) SK284352B6 (uk)
TR (1) TR200002604T2 (uk)
UA (1) UA64784C2 (uk)
WO (1) WO1999046398A1 (uk)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE60013939T2 (de) 1999-03-19 2005-10-06 Sumitomo Chemical Co. Ltd. Stereoselektive Transaminase, deren kodierende Gen und deren Verwendungen
JP2001190298A (ja) * 2000-01-13 2001-07-17 Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd 光学活性ｎ−メチルアミノ酸の製造方法
EP1818411A1 (en) * 2006-02-13 2007-08-15 Lonza AG Process for the preparation of optically active chiral amines
DE102007042600A1 (de) 2007-09-07 2009-03-12 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur Herstellung von enantiomerenangereichten Aminen
CN102341494B (zh) 2009-01-08 2014-10-15 科德克希思公司 转氨酶多肽
JP5707344B2 (ja) 2009-02-26 2015-04-30 コデクシス， インコーポレイテッド トランスアミナーゼ生体触媒
SG177329A1 (en) 2009-06-22 2012-02-28 Codexis Inc Transaminase reactions
MX2012002561A (es) * 2009-09-02 2012-04-10 Lonza Ag Un proceso para la identificacion y preparacion de una omega-transaminasa (r)-especifica.
US8852900B2 (en) 2010-06-17 2014-10-07 Codexis, Inc. Biocatalysts and methods for the synthesis of (S)-3-(1-aminoethyl)-phenol
US8932836B2 (en) 2010-08-16 2015-01-13 Codexis, Inc. Biocatalysts and methods for the synthesis of (1R,2R)-2-(3,4-dimethoxyphenethoxy)cyclohexanamine
WO2013024453A1 (en) * 2011-08-16 2013-02-21 Embio Limited Enzymatic synthesis of optically active chiral amines
CN104630170A (zh) * 2013-11-08 2015-05-20 中国科学院天津工业生物技术研究所 一种来源于里氏木霉的新(r)-转氨酶及其应用
CN114134126B (zh) * 2021-10-28 2023-12-05 浙江大学杭州国际科创中心 转氨酶及其突变体在制备(s)-1-甲氧基-2-丙胺中的应用

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5300437A (en) * 1989-06-22 1994-04-05 Celgene Corporation Enantiomeric enrichment and stereoselective synthesis of chiral amines
EP0857790B1 (en) * 1995-10-23 2005-08-17 Kaneka Corporation Process for producing optically active amino compounds

Also Published As

Publication number Publication date
KR20010034561A (ko) 2001-04-25
SK284352B6 (sk) 2005-02-04
EP1075534A4 (en) 2003-07-09
ES2243051T3 (es) 2005-11-16
HUP0101056A2 (hu) 2001-07-30
WO1999046398A1 (en) 1999-09-16
DE69925267T2 (de) 2006-01-26
NZ506405A (en) 2003-08-29
TR200002604T2 (tr) 2000-11-21
CZ20003177A3 (cs) 2000-12-13
EP1075534B8 (en) 2005-07-06
ATE295424T1 (de) 2005-05-15
EP1075534B1 (en) 2005-05-11
NO20004036D0 (no) 2000-08-11
SK13382000A3 (sk) 2001-05-10
HUP0101056A3 (en) 2006-03-28
NO319671B1 (no) 2005-09-05
CN1154746C (zh) 2004-06-23
EP1075534A1 (en) 2001-02-14
NO20004036L (no) 2000-10-27
HK1035000A1 (en) 2001-11-09
FI20001805A (fi) 2000-08-15
CZ295882B6 (cs) 2005-11-16
RU2213142C2 (ru) 2003-09-27
AU2993899A (en) 1999-09-27
JP2002505884A (ja) 2002-02-26
PT1075534E (pt) 2005-09-30
MXPA00008573A (es) 2003-07-14
CN1292828A (zh) 2001-04-25
PL342882A1 (en) 2001-07-16
BR9908797A (pt) 2000-12-12
DE69925267D1 (de) 2005-06-16
AU753904B2 (en) 2002-10-31
CA2322605A1 (en) 1999-09-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2087536C1 (ru) Способ энантиомерного обогащения смеси двух энантиомерных хиральных аминов
EP2064331B1 (en) Process for preparation of optically active N-protected 3-aminopyrrolidine or N-protected 3-aminopiperidine by optical resolution of racemic amine mixtures employing an omega-transaminase
US4826766A (en) Production of amino acids using coupled aminotransferases
UA64784C2 (en) Improvements in enzymatic synthesis of chiral amines
SK286456B6 (sk) Spôsob výroby L-fosfinotricínu enzymatickou transamináciou s aspartátom
US6133018A (en) Enzymatic synthesis of chiral amines using -2-amino propane as amine donor
US4847412A (en) Process for racemizing an optically active N-benzylidene amino-acid amide
Winkler et al. Principles and results of stable isotope labelling of L-α-Aminoacids by combined chemical and enzymatic methods
JPS5991890A (ja) Ｌ−フエニルアラニンの製造方法
JP2674078B2 (ja) Ｄ−α−アミノ酸の製造法
JPS62205781A (ja) シユ−ドモナス属菌株の培養方法
JPS59159789A (ja) Ｌ−α−アミノ酸の製造方法
JPH02124087A (ja) シユードモナス属細菌の培養方法
JPS62257392A (ja) トランスアミノ化によるｌ−アミノ酸の製法
CZ355697A3 (cs) Způsob stereoselektivní syntézy jedné chirální formy aminu