UA126325C2 - Злитий білок, рекомбінантна бактерія і спосіб її застосування - Google Patents

Злитий білок, рекомбінантна бактерія і спосіб її застосування Download PDF

Info

Publication number
UA126325C2
UA126325C2 UAA201703662A UAA201703662A UA126325C2 UA 126325 C2 UA126325 C2 UA 126325C2 UA A201703662 A UAA201703662 A UA A201703662A UA A201703662 A UAA201703662 A UA A201703662A UA 126325 C2 UA126325 C2 UA 126325C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
amino acids
targeting sequence
protein
recombinant
contains amino
Prior art date
Application number
UAA201703662A
Other languages
English (en)
Inventor
Брайан ТОМПСОН
Ешлі Зиґель
Эшли ЗИГЕЛЬ
Original Assignee
Споуджен Байотек Інк.
Споуджен Байотэк Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Споуджен Байотек Інк., Споуджен Байотэк Инк. filed Critical Споуджен Байотек Інк.
Publication of UA126325C2 publication Critical patent/UA126325C2/uk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/32—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Bacillus (G)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H3/00—Processes for modifying phenotypes, e.g. symbiosis with bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N37/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids
    • A01N37/44—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids containing at least one carboxylic group or a thio analogue, or a derivative thereof, and a nitrogen atom attached to the same carbon skeleton by a single or double bond, this nitrogen atom not being a member of a derivative or of a thio analogue of a carboxylic group, e.g. amino-carboxylic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/10—Animals; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/50—Isolated enzymes; Isolated proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A23K10/18—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A23K20/142—Amino acids; Derivatives thereof
    • A23K20/147—Polymeric derivatives, e.g. peptides or proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2/00—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
    • A61L2/16—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor using chemical substances
    • A61L2/18—Liquid substances or solutions comprising solids or dissolved gases
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
    • C02F3/342—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used characterised by the enzymes used
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
    • C02F3/348—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used characterised by the way or the form in which the microorganisms are added or dosed
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K8/00—Compositions for drilling of boreholes or wells; Compositions for treating boreholes or wells, e.g. for completion or for remedial operations
    • C09K8/60—Compositions for stimulating production by acting on the underground formation
    • C09K8/62—Compositions for forming crevices or fractures
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/74—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora
    • C12N15/75—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora for Bacillus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N3/00—Spore forming or isolating processes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
    • E—FIXED CONSTRUCTIONS
    • E21—EARTH OR ROCK DRILLING; MINING
    • E21B—EARTH OR ROCK DRILLING; OBTAINING OIL, GAS, WATER, SOLUBLE OR MELTABLE MATERIALS OR A SLURRY OF MINERALS FROM WELLS
    • E21B43/00—Methods or apparatus for obtaining oil, gas, water, soluble or meltable materials or a slurry of minerals from wells
    • E21B43/16—Enhanced recovery methods for obtaining hydrocarbons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2101/00—Nature of the contaminant
    • C02F2101/10—Inorganic compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2101/00—Nature of the contaminant
    • C02F2101/30—Organic compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2103/00—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated
    • C02F2103/002—Grey water, e.g. from clothes washers, showers or dishwashers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2103/00—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated
    • C02F2103/003—Wastewater from hospitals, laboratories and the like, heavily contaminated by pathogenic microorganisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2103/00—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated
    • C02F2103/007—Contaminated open waterways, rivers, lakes or ponds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2103/00—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated
    • C02F2103/06—Contaminated groundwater or leachate
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2103/00—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated
    • C02F2103/10—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated from quarries or from mining activities
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2103/00—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated
    • C02F2103/14—Paint wastes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2103/00—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated
    • C02F2103/16—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated from metallurgical processes, i.e. from the production, refining or treatment of metals, e.g. galvanic wastes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2103/00—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated
    • C02F2103/26—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated from the processing of plants or parts thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2103/00—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated
    • C02F2103/26—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated from the processing of plants or parts thereof
    • C02F2103/28—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated from the processing of plants or parts thereof from the paper or cellulose industry
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/035—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a signal for targeting to the external surface of a cell, e.g. to the outer membrane of Gram negative bacteria, GPI- anchored eukaryote proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/40—Fusion polypeptide containing a tag for immunodetection, or an epitope for immunisation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2208/00—Aspects relating to compositions of drilling or well treatment fluids
    • C09K2208/24—Bacteria or enzyme containing gel breakers

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Hydrology & Water Resources (AREA)
  • Water Supply & Treatment (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Geology (AREA)
  • Mining & Mineral Resources (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)

Abstract

Винахід стосується злитого білка, що містить націлювальну послідовність, білок екзоспорія або фрагмент білка екзоспорія, які націлюють злитий білок у екзоспорій представника сімейства Bacillus cereus. Винахід також стосується рекомбінантного представника сімейства Bacillus cereus, який експресує такий злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорія або фрагмент білка екзоспорія, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Bacillus cereus, який містить мутацію генах які мають екзоспорій, який легше видалити зі спори порівняно з екзоспорієм спори дикого типу. Також стосується способу стимулювання росту рослин, захисту рослини від патогена або підвищення стійкості рослини до стресів, іммобілізації фрагментів екзоспорія на рослині та стимулювання проростання насіння рослини із застосуванням рекомбінантного члена родини Bacillus cereus або складу для рослин.

Description

представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорія або фрагмент білка екзоспорія, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства
Васійи5 сегеив, який містить мутацію генах які мають екзоспорій, який легше видалити зі спори порівняно з екзоспорієм спори дикого типу. Також стосується способу стимулювання росту рослин, захисту рослини від патогена або підвищення стійкості рослини до стресів, іммобілізації фрагментів екзоспорія на рослині та стимулювання проростання насіння рослини (із застосуванням рекомбінантного члена родини Вас//и5 сегеиз або складу для рослин.
ПЕРЕХРЕСНЕ ПОСИЛАННЯ НА СПОРІДНЕНІ ЗАЯВКИ
І0О001) За даною заявкою вимагається пріоритет по тимчасовій заявці США Мо 62/051885, поданій 17 вересня 2014 року, зміст якої включений в даний опис як посилання в повному обсязі.
ПОСИЛАННЯ НА СПИСОК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ, НАДАНИЙ В ЕЛЕКТРОННІЙ ФОРМІ (00021) Офіційна копія списку послідовностей надана в електронній формі через ЕЕ5-УМер як список послідовностей у форматі АЗСІЇ у файлі за назвою "3005.У/О Сепе Зедиепсе І ізііпд їх", який створений 10 вересня 2015 року і має розмір 488 кілобайт, і вона подана одночасно з описом. Список послідовностей, що міститься в цьому документі у форматі АЗСІЇ, є частиною опису і включений у даний опис як посилання в повному обсязі.
ГАЛУЗЬ ВИНАХОДУ
0003) Даний винахід стосується, головним чином, злитих білків, що містять націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій представника сімейства Васіїйи5 сегеи5. Також винахід стосується рекомбінантних представників сімейства ВасійШ5 сегеи5, які експресують такі злиті білки, сполук, що містять рекомбінантні представники сімейства ВасіШиє5 сегеи5, насіння, покритого рекомбінантними представниками сімейства Васійи5 сегеи5, і способів застосування рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеи5 (наприклад, для стимуляції росту рослини, захисту рослини від патогенів, підвищення стійкості рослин до стресових впливів, іммобілізації спори рекомбінантного представника сімейства Васіїйш5 сегеи5 на рослині, стимуляції проростання насіння рослини і доставки нуклеїнових кислот у рослини). Крім того, винахід стосується рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеи5, які надекспресують протеазу або нуклеазу, де надекспресія протеази або нуклеази частково або повністю інактивує спори представника сімейства Васійи5 сегеи5 або підвищує чутливість спори до фізичної або хімічної інактивації. Крім того, даний винахід стосується рекомбінантних представників сімейства
Васійиє сегеи5, які надекспресують білки екзоспорію, насіння, покритого такими рекомбінантними представниками сімейства Васіїйй5 сегеи5, і способів застосування таких рекомбінантних представників сімейства ВасіШи5 сегеи5 (наприклад, для стимуляції росту рослини, підвищення стійкості рослини до стресових впливів і захисту рослин від патогенів).
Зо Ї0004| Крім того, винахід стосується різних модифікацій рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеи5, які експресують злиті білки, які включають: (ї) надекспресію білків- модуляторів, які модулюють експресію злитого білка в рекомбінантних представниках Васійй5 сегеи5; (ії) генетичну інактивацію рекомбінантних представників сімейства Васіїйй5 сегеиб5; і (ії) мутації або інші генетичні зміни рекомбінантних представників сімейства Васійй5 сегеи5, що дозволяють збір фрагментів екзоспорію, що містять злитий білок. Також винахід стосується різних способів застосування фрагментів екзоспорію. 00051 Крім того, винахід стосується злитих білків, які містять білок оболонки спори й білок або пептид, що представляє інтерес, рекомбінантних бактерій, які експресують такі злиті білки, насіння, покритого такими рекомбінантними бактеріями, і способів застосування таких рекомбінантних бактерій (наприклад, для стимуляції росту рослин, захисту рослин від патогенів, підвищення стійкості рослин до стресових впливів, іммобілізації рекомбінантної бактеріальної спори на рослині, стимуляції проростання насіння рослин і доставки нуклеїнових кислот у рослини). 0006) Крім того, даний винахід стосується біологічно чистих бактеріальних культур нових штамів бактерій.
ІЇ0007| Крім того, даний винахід стосується насіння рослин, покритого ферментом, що каталізує утворення оксиду азоту, або супероксиддисмутазою, або рекомбінантною спороутворювальною бактерією, що надекспресує фермент, який каталізує утворення оксиду азоту, або супероксиддисмутазу.
ІЇ0008| Також винахід стосується способів доставки корисних бактерій і ферментів або вакцин тваринам і інших способів застосування.
РІВЕНЬ ТЕХНІКИ, ДО ЯКОГО НАЛЕЖИТЬ ВИНАХІД 00091 У зоні, що оточує корені рослини, знаходиться область, яка називається ризосферою.
У ризосфері бактерії, гриби й інші організми конкурують за поживні речовини і за зв'язування з кореневими структурами рослини. Ризосферу можуть окупувати як шкідливі, так ії корисні бактерії і гриби. На бактерії, гриби і кореневу систему рослини може впливати дія пептидів, ферментів і інших білків у ризосфері. Доповнення грунту або обробка рослин деякими з цих пептидів, ферментів або інших білків, може чинити сприятливі ефекти на загальну популяцію корисних грунтових бактерій і грибів, створювати в цілому більш здорове грунтове середовище бо для росту рослин, поліпшувати ріст рослин і забезпечувати захист рослин від певних бактеріальних і грибних патогенів. Однак попереднім спробам внести пептиди, ферменти й інші білки в грунт для індукції таких корисних ефектів на рослини перешкоджав низький термін існування ферментів, білків і пептидів у грунті. Крім того, поширеність протеаз, природним чином присутніх у грунті, приводить до деградації білків у грунті. Середовище навколо коренів рослини (ризосфера) є унікальною сумішшю бактерій, грибів, поживних речовин і коренів, що має якості, відмінні від нативного грунту. Симбіотичний взаємозв'язок між цими організмами є унікальним і може бути змінений до кращого шляхом включення екзогенних білків. Висока концентрація грибів і бактерій у ризосфері викликає ще велику деградацію білків внаслідок аномально високих рівнів протеаз і інших елементів, шкідливих для білків у грунті. Крім того, ферменти й інші білки, внесені в грунт, можуть швидко вимиватися з коренів рослин. 0010) Таким чином, у даній галузі існує потреба в способі ефективної доставки пептидів, ферментів і інших білків у рослини (наприклад, у кореневі системи рослин) і в продовженні періоду часу, протягом якого такі молекули залишаються активними. Більше того, у даній галузі існує потреба в способі селективного націлювання таких пептидів, ферментів і білків у ризосферу і, зокрема, у листя рослин і в корені рослин.
СУТЬ ВИНАХОДУ
0011) Ознаки даного винаходу визначені в прикладеній формулі винаходу й у переліку варіантів здійснення, наданому нижче в розділі за назвою "ВАРІАНТИ ЗДІЙСНЕННЯ". Інші задачі й ознаки стануть почасти очевидними і почасти описані нижче.
КОРОТКИЙ ОПИС КРЕСЛЕНЬ
І0012| На фіг. 1А ї 18 представлене вирівнювання амінокислотної послідовності М-кінцевої частини ВСІА Васіїйи5 апіпгасіє штаму 5іегпе з відповідною областю з різних білків екзоспорію представників сімейства Васіїйи5 сегеив5. 0013) На фіг. 2 представлені ілюстративні результати флуоресцентної мікроскопії для експресії злитих білків, що містять різні білки екзоспорію, зв'язані з репортером тСпПеггу, на екзоспорії рекомбінантного представника сімейства Васіїйїн5 сегецв5. 0014 На фіг. З представлені дані, які демонструють спори рекомбінантних Васійв5
ІШигіпдіепзі5 ВТО1ЗА, які експресують злитий білок, який містить ДНК-зв'язувальний білок.
ІО015| На фіг. 4 представлена фотографія, отримана за допомогою трансмісійної
Зо електронної мікроскопії, яка демонструє фрагменти екзоспорію і спори представника сімейства
Васійиє сегени5, що втратили екзоспорій, отримані з використанням рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5, що має нокаут його гена СОїЕ.
І0016Ї На фіг. 5 представлена фотографія гелю 505-РАСЕ, яка демонструє стандартний білковий маркер (доріжка 1) і білки фрагментів екзоспорію, отримані з використанням рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5, що має мутацію з нокаутом його гена
СОїЕ (доріжка 2).
І0017| На фіг. б представлені дані, які ілюструють ферментативну активність кислої фосфатази у фрагментах екзоспорію, отриманих із представника сімейства Васійи5 сегеи5, що має мутацію з нокаутом його гена СОїЕ. 0018) На фіг. 7 представлені дані, які ілюструють, що представник сімейства ВасіШив5 сегеив5
ЕЕЗ349 знижує інгібіторні ефекти гербіциду на довжину кореня сочевиці.
І0019| На фіг. 8 представлені дані, які ілюструють збільшену фосфатазну активність представника сімейства Васійй5 сегеи5, модифікованого для надекспресії кислої фосфатази (АсрО).
І0020| На фіг. 9 представлені дані, які демонструють активність ендоклюканази в рекомбінантних спорах Васійїи5 «(пигіпдіепві5, які експресують злитий білок СоїС-ендоклюканаза.
І00211 На фіг. 10 представлені зображення світлопольної і флуоресцентної мікроскопії, які демонструють виявлення РНК на поверхні рекомбінантних спор В. (пигіпдіепві5, які експресують злитий білок, який містить амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1 і 55рсС, зв'язаний або з одноланцюжковою РНК (олРНК), або з дволанцюжковою РНК (длРНК). 00221) На фіг. 11 представлена фотографія, яка демонструє ефекти мікроРНК МІКЗ19 на висоту і розвиток коренів сої після її доставки в рослини сої з використанням рекомбінантних спор В. (Пигіпдіепвів, які експресують злитий білок, який містить амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1ї 55рсС, зв'язаний з МІКЗ19.
І0023| На фіг. 12 представлені зображення світлопольної і флуоресцентної мікроскопії, які демонструють виявлення ЗЕР і тСПегу у кишечнику нематод, яких годували нормальним бактеріальним кормом Е. соїї ОР5БО (дві праві панелі), або нематод, яких годували спорами В.
ІШигіпдіепві5, які експресують злитий білок, який містить амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1 і або
СЕР, або тСпПег!гу (три ліві панелі). бо І0024| На фіг. 13 представлені зображення флуоресцентної мікроскопії, які демонструють виявлення ендофітних бактерій, виділених з рослин кукурудзи, оброблених Васійи5 (Пигіпдієпвів
ЕЕ-ВО00184, які експресують злитий білок, який містить амінокислоти 20-35 5ЗЕО ІЮО МО: 1 і СЕР.
Стрілками позначені окремі спори. 00251 На фіг. 14 представлена фотографія, яка демонструє флуоресценцію бактеріальних колоній, що містять рекомбінантні представники сімейства Васійй5 сегеи5, які експресують злитий білок, який містить амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1 і СЕР, виділені з рослин кукурудзи, вирощених з насіння, покритого рекомбінантними бактеріями. (0026) На фіг. 15 представлені фотографії, отримані за допомогою трансмісійної електронної мікроскопії, які демонструють: (А) інтактні спори Васійи5 «Пигіпдіепзіз ВТО1ЗА, оточені прикріпленим до них екзоспорієм; (В) спори штаму Васіїйи5 (игіпдіепзіз ВТО1ЗА з нокаутом СОЇЕ з відкріпленим екзоспорієм; ії (С) очищений препарат фрагментів екзоспорію, які походять зі штаму Васійїи5 (Пигіпдіепзіз ВТО1ЗА з нокаутом СОЇЕ.
ВИЗНАЧЕННЯ
І0027| Коли в даному описі використовують форму однини, "один" і "зазначений", вони означають "цонайменше один" або "один або декілька", якщо немає інших указівок.
Ї0028| Терміни "прийнятний з погляду сільського господарства носій" їі "носій" використовують у даному описі взаємозамінно.
І0029| Термін "тварина" охоплює будь-яку тварину, яка не є людиною, а також людей.
Наприклад, коли в даному описі використовують термін "тварина", тварина може являти собою ссавця (наприклад, людина, вівця, коза, корова, свиня, олень, альпака, бізон, верблюд, осел, кінь, мул, лама, кролик, собака або кішка), птицю (наприклад, курка, індичка, качка, гусак, перепел або фазан), рибу (наприклад, лосось, форель, тиляпія, тунець, сом або короп) або ракоподібне (наприклад, дрібна креветка, велика креветка, лобстер, краб або рак). 00301 "Біологічно чиста бактеріальна культура" стосується культури бактерій, які не містять інших видів бактерій у кількостях, достатніх для перешкоджання реплікації культури або для виявлення звичайними бактеріологічними способами. Іншими словами, вона являє собою культуру, де практично всі присутні бактеріальні клітини стосуються визначеного штаму.
І0О31) Терміни "який містить", "який включає" і "який має" є інклюзивними й означають, що можуть бути присутніми додаткові елементи, відмінні від перерахованих елементів.
Зо 00321 Термін "біологічно активний пептид" стосується будь-якого пептиду, який демонструє біологічну активність. "Біологічно активні пептиди" можна одержувати, наприклад, за допомогою розщеплення білка, пептиду, пробілка або розщеплення препробілка протеазою або пептидазою.
І0033)| Термін "ефективна кількість" стосується кількості, яка є достатньою для статистично значимого збільшення росту, і/або виходу білка, і/або виходу зерна в рослини в порівнянні з ростом, виходом білка і виходом зерна рослини, яка піддана контрольній обробці. (0034) "Фермент, залучений у продукцію або активацію сполуки, що стимулює ріст рослин," включає будь-який фермент, який каталізує будь-яку стадію біологічного шляху синтезу сполуки, що стимулює ріст рослини або змінює структуру рослини, або будь-який фермент, який каталізує конвертування неактивної або менш активної похідної сполуки, що стимулює ріст рослини або змінює структуру рослини, в активну або більш активну форму сполуки. Такі сполуки включають, наприклад, але не обмежуються ними, низькомолекулярні гормони рослин, такі як ауксини і цитокініни, біологічно активні пептиди і низькомолекулярні сполуки, що стимулюють ріст рослин, синтезовані бактеріями або грибами в ризосфері (наприклад, 2,3- бутандіол). 0035) Термін "злитий білок", як використовують у рамках винаходу, стосується білка, що має поліпептидну послідовність, що містить послідовності, які походять з двох або більше окремих білків. Злитий білок можна одержувати шляхом зв'язування молекули нуклеїнової кислоти, що кодує весь перший поліпептид або його частину, з молекулою нуклеїнової кислоти, що кодує весь другий поліпептид або його частину, з одержанням послідовності нуклеїнової кислоти, що при експресії забезпечує один поліпептид, який має функціональні властивості, які походять з кожного з вихідних білків.
І0ОЗ3б6| Термін "рівень проростання", як використовують у рамках винаходу, стосується кількості насіння, яке проростає протягом конкретного періоду часу. Наприклад, рівень проростання 8595 указує на те, що 85 з 100 насінин проросли протягом даного періоду часу.
І0037| Термін "інактивувати" або "інактивація" як використовують у рамках винаходу відносно інактивації спор рекомбінантного представника сімейства Васіййиє сегеи5 або рекомбінантної спороутворювальної бактерії, означає, що спори нездатні проростати, або що спори можуть проростати, але є ушкодженими, так що проростання не приводить до живої бо бактерії. Терміни "частково інактивувати" або "часткова інактивація" означають, що деякий відсоток спор є інактивованим, але деякі спори зберігають здатність до проростання і повернення в живий реплікований стан. Термін "генетична інактивація" стосується інактивації спор рекомбінантного представника сімейства Васійй5 сеген5 або рекомбінантної спороутворювальної бактерії за допомогою мутації ДНК спор, яка приводить до повної або часткової інактивації спори. Терміни "фізична інактивація" і "хімічна інактивація» стосуються інактивації спор з використанням будь-яких фізичних або хімічних засобів, наприклад, за допомогою термічної обробки, опромінення гамма-випромінюванням, опромінення рентгенівським випромінюванням, опромінення УФ-А, опромінення УФ-В або обробки розчинником, таким як глутаральдегід, формальдегід, пероксид водню, оцтова кислота, відбілювач, хлороформ або фенол, або будь-якої їхньої комбінації. 0038) Терміни "іммобілізація спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегейв на рослині" і "іммобілізація спор рекомбінантної спороутворювальної бактерії на рослині" стосується зв'язування спори рекомбінантного представника сімейства Васійц5 сегеи5 або спори рекомбінантної спороутворювальної бактерії з рослиною, наприклад, з коренем рослини або з надземною частиною рослини, такою як листя, стебло, квітка або плід, так щоб спора залишалася в кореневій структурі рослини або надземній частині, а не переходила в середовище для росту рослини або в середовище, яке оточує надземні частини рослини.
І0039| Термін "Інокулят", як описано в даному описі, визначений у декількох нормах федерального або штатного права як (1) "інокуляти грунту або рослин включають будь-який носій або культуру конкретного мікроорганізму або суміш мікроорганізмів, надані для поліпшення грунту або росту, якості або виходу рослин, а також включають будь-яке насіння або добриво, надані для інокуляції з такою культурою" (Мем/ Могк Згаге 10-А Сопзоїїдаїеай І ам); (2) "речовини, відмінні від добрив, які виробляються, продаються або надаються для застосування для поліпшення фізичного стану грунту або для сприяння росту рослин або виходу культури" (Сапада Регпійїлег5 Ас); (3) "склад, що містить чисті або задані суміші живих бактерій, грибів або вірусних частинок, для обробки насіння, проростків або іншого матеріалу розмноження рослин для підвищення здатності до росту або стійкості до захворювань або іншої зміни властивостей кінцевих рослин або культури" (Ай пос Еигореап УогКкіпд Ссгоцмр, 1997) або (4) "будь-яка хімічна або біологічна речовина суміші речовин, або пристрій, розповсюджувані в
Зо даному штаті для нанесення на грунт, рослини або насіння, для цілей корекції грунту; або які призначені для поліпшення проростання, росту, якості, виходу, якості продукту, репродукції, смаку або інших бажаних характеристик рослин, або які призначені для забезпечення якої- небудь хімічної, біохімічної, біологічної або фізичної зміни грунту" (Зесійоп 14513, Саїійогпіа боса апа Адгісийиге Соде). 00401 "Білок-модулятор" включає будь-який білок, який при надекспресії в представнику сімейства Васіїйй5 сегеи5, який експресує будь-який зі злитих білків, описаних у даному описі, модулює експресію злитого білка, так що експресія злитого білка збільшується або знижується в порівнянні з експресією злитого білка в представнику сімейства Васійи5 сегеи5, що не надекспресує білок-модулятор.
ІЇ0041| "Середовище для росту рослин" включає будь-який матеріал, який здатний підтримувати ріст рослин.
І0042| «Білок або пептид, який підсилює імунну систему рослин", як використовують у рамках винаходу, включає будь-який білок або пептид, що має сприятливий ефект на імунну систему рослин. 00431) Термін «білок або пептид, що стимулює ріст рослин", як використовують у рамках винаходу, включає будь-який білок або пептид, що збільшує ріст рослини, підданої впливу білка або пептиду. (0044) Термін "пробіотик", як використовують у рамках винаходу, стосується мікроорганізмів (наприклад, бактерій), що забезпечують користь для здоров'я при вживанні твариною або уведенні тварині. (0045) Терміни "прискорення росту рослини" і "стимуляція росту рослини" використовують у даному описі взаємозамінно, і вони стосуються здатності підсилювати або збільшувати щонайменше одне з висоти, маси, розміру листя, розміру коренів або розміру стебла рослини, підвищувати вихід білка з рослини або підвищувати вихід зерна з рослини. (0046) «Білок або пептид, що захищає рослину від патогена", як використовують у рамках винаходу, включає будь-який білок або пептид, що робить рослину, піддану впливу білка або пептиду, менш чутливою до інфекції патогеном.
І0047| «Білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів", як використовують у рамках винаходу, включає будь-який білок або пептид, що робить рослину, 60 піддану впливу білка або пептиду, більш стійкою до стресових впливів.
(0048) Термін "пептид або білок, що зв'язується з рослиною," стосується будь-якого пептиду або білка, здатного специфічно або неспецифічно зв'язуватися з будь-якою частиною рослини (наприклад, корені або надземні частини рослини, такі як листя, стебла, квітки або плоди) або з матеріалом рослини.
І0049| Термін "піретриназа" стосується будь-якого ферменту, що деградує піретрин або піретроїд.
І0О50| Термін "ризосфера" використовують взаємозамінно з терміном "коренева зона" для позначення сегмента грунту, що оточує корені рослини і підданий їх впливу.
І0051| Термін "націлювальна послідовність", як використовують у рамках винаходу, стосується поліпептидної послідовності, яка, коли вона присутня як частина більш довгого поліпептиду або білка, приводить до локалізації білош довгого поліпептиду або білка в конкретної субклітинній області. Націлювальні послідовності, описані в даному описі, приводять до локалізації білків у екзоспорії представника сімейства Васійи5 сегеи5.
ОПИС ВИНАХОДУ
Ї. Злиті білки для експресії в представниках сімейства Васіїйй5 сегеи5 і рекомбінантні представники сімейства Васіїйи5 сегецв5, які експресують такі злиті білки 0052) Даний винахід стосується злитих білків, що містять націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій представника сімейства Васійи5 сегеи5, і щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес. При експресії в бактеріях представників сімейства Васійи5 сегеи5 ці злиті білки націлюються на шар екзоспорію спор і фізично орієнтуються так, щоб білок або пептид, що представляє інтерес, експонувався зовні спори.
Ї0053| Цю систему дисплея в екзоспорії ВасіШйи5 (ВЕМО) можна використовувати для доставки пептидів, ферментів і інших білків у рослини (наприклад, у листя, плоди, квітки, стебла або корені рослини) або в середовище для росту рослини, таке як грунт. Пептиди, ферменти і білки, що доставляються в грунт або інше середовище для росту рослини таким чином, зберігаються і демонструють активність у грунті протягом тривалих періодів часу. Уведення рекомбінантних бактерій-представників сімейства Васійи5 сегеив5, які експресують злиті білки, описані в даному описі, у грунт або ризосферу рослини, приводить до сприятливого посилення
Зо росту рослини в багатьох різних умовах грунту. Використання ВЕМО для одержання цих ферментів дозволяє їм продовжувати демонструвати їхні сприятливі ефекти на рослину і ризосферу протягом перших місяців життя рослини.
А. Націлювальні послідовності, білки екзоспорію і фрагменти білків екзоспорію для націлювання білків або пептидів, що представляють інтерес, у екзоспорій представника сімейства Васіїйи5 сегеи5 0054) Для простоти посилання, опис амінокислотних послідовностей для націлювальних послідовностей, білків екзоспорію і фрагментів білків екзоспорію, які можна використовувати для націлювання білків або пептидів, що представляють інтерес, у екзоспорій представників сімейства Васіїйн5 сегецй5, представлені в таблиці 1 разом з їхньою 5ЕО ІЮ МО.
Таблиця 1
Пептидні і білкові послідовності, використані для націлювання білків або пептидів, що представляють інтерес, у екзоспорій представників сімейства Васійи5 сегеи5
Повнорозмірний ВА54623(В.апійгасіз Хієте).д /-/://://11Ї11116 С
Повнорозмірний ВсіВ(В.апійгасіє біете)ї 11111118
Ак. 1-30 ВАБІВВ2(В.апійтасів Біте)ї /-/:///711111111111111111Ї11119
Повнорозмірний гіпотетичний білок рсегкраб4 2363 (В. меіпепетерпепвів
Повнорозмірний гіпотетичний білок рсегкрабі4 2131 (В. меіпепетерпепвів
А.к. 1-36 колагену, який містить триспіральний повтор (В. меіпепеїерпепвів мжеіпепвівєрпепзіз КВАВА 10987
Кн іі ііі відів НІНІ
АТСС 10987
Бл ііі ііі іні іній НК З 63
КВАВА мжеіпепвіерпапепвзіз КВАВА
В. Іпигіпдієпвів 5іг. АІ Накат /Повнорозмірний гіпотетичний білок ВАН 2230(В.Іпигіпоіепвів зі. АІНакат) | 66
Вс іній нні йііаійь НТ
Ак. 1-44 триспіральногоповтору колагену (В. сегеих).д /-/:/ 77777116
Повнорозмірний колаген, який містить триспіральний повтор (В. сегеи5 АТС ква нт вен 1 75
КВАВА мжмеїіпеп5іерпапепзі5 КВАВА
Повнорозмірний колаген, який містить триспіральний повтор (В. сетеиз АТОС (Повнорозмірний гіпотетичний білокВС4725(В.сегеиз АТСС 14579).:/ И2:/ЧУН| (807
Апсевіог" "Ате5 Апсевіог" "Повнорозмірний білок ВсіА (В. іпигіпдієпвзіз серовару копкикіап штаму 97-27). | 86
Ак. 1-34 колагену, який містить триспіральний повтор (В. сегеиз АТСС 14579).Й | 89
В ііі ііі НИ "Й 14579 мжеіпепвівєрпапепвів
Меїнак.20-35 ВсіА (В.апійптасів біете)ї -/-:/://///7777111111111111111111111111119611
Меїнак.18-3Зпродуктугена2280(В. меіепзієрпепіз КВАВХ)дГ/:////|77777982Ш
Меїнак.18-3Зпродуктугена 3572 (В. еіепвзієрпепвіз КВАВЯХ).Л/:/ 17779922
Повнорозмірний ВА51141 (Ех5) (В. апіпгасіз іегпе)
Повнорозмірний ВА51144 (ВхрВ/ЕХ5РА) (В. апійгасів біегпе)
Повнорозмірний ВА51145 (Со) (В. апійгасіз біегпе)
штаму 97-27 а.к-хамінокислоти х ВСіА штаму В. апіпгасіх5 5іегпе має 10095 ідентичності послідовності з ВСІА В. (пигіпдіепвів.
Таким чином, 5ЕО ІЮ МО: 1, 2 і 95 також відповідають амінокислотам 1-41 ВСІА В.
ІШигіпдіепзі5, повнорозмірному ВСІА В. (пПигіпдіепві5 і амінокислотам 1-196 ВеїА В.
ІШигіпдіепві5, відповідно. Аналогічно, ХЕО ІЮ МО: 96 також відповідає залишку метіоніну плюс амінокислоти 20-35 ВСІА В. (Пигіпдіепвів. "к Гіпотетичний білок ТІКО3720 В. тусоїде5 має 10095 ідентичності послідовності з гіпотетичним білком М/РО03189234 В. тусоїде5. Таким чином, 5ЕО ІЮ МО: 57 і 58 також відповідають амінокислотам 1-136 гіпотетичного білка М/РО03189234 В. тусоїідез і повнорозмірному гіпотетичному білку МУРО03189234 В. тусоїдев, відповідно. 0055) Васійи5 являє собою рід палочковидних бактерій. Сімейство бактерій Васійи5 сегеи5 включає будь-який вид Васіїш5, який здатний продукувати екзоспорій. Таким чином, сімейство бактерій Васійи5 сеген5 включає вид Васійи5 апіпгасіх, Васій5 сегеи5, Васійи5 ІПигіпдіепвів,
Васійи5 тусоіде5, Васійн5 рзепдотусоіїде5, Васійй5 5атапії, Васійш5 даєтокКепвіб5, ВасшШив мжеїіпепзіерпепвтіз і Васійи5 їоуосіепбіз. У стресових умовах зовнішнього середовища бактерії сімейства Васійи5 сегеи5 зазнають споруляцію і формують овальні ендоспори, які можуть залишатися в спочиваючому стані протягом тривалих періодів часу. Зовнішній шар ендоспор відомий як екзоспорій і містить базальний шар, оточений зовнішнім пушком з волосоподібних виступів. Нитки на волосоподібному пушку в основному утворені колаген-подібним глікопротеїном ВсіІА, у той час як базальний шар складається з ряду різних білків. Також у екзоспорію присутній інший споріднеий колагену білок, ВсІВ, і він експонується на ендоспорах представників сімейства ВасшШи5 сегеи5. Було показано, що ВсіА, основний компонент поверхневого пушка, зв'язаний з екзоспорієм його аміно-кінцем (М-кінцем), що розташовується в базальному шарі, і його карбокси-кінець (С-кінець) виступає зі спори назовні.
І0О56) Раніше було відкрито, що певні послідовності М-кінцевих областей ВсіА і ВсІВ можна використовувати для націлювання пептиду або білка в екзоспорій ендоспори Васіїйи5 сегецй5 (див. публікації патентних заявок США Мо 2010/0233124 ії 2011/0281316, і Тпотрзоп еї аї.,
Тагдеїйпа ої Те Всі апа Всі ргоївіп5 то Ше Васіїїи5 апіпгасі5 5зроге зипасе, Моїіесшаг Містобіооду 79(2):421-34 (2008)). Також було виявлено, що білок ВегА/ВА5З3290 Васійи5 апійгасіб локалізується в екзоспорію.
ІЇ0057| Зокрема, було виявлено, що амінокислоти 20-35 ВсіА зі штаму Васійи5 апіпгасіб зіете є достатніми для націлювання в екзоспорій. Вирівнювання послідовностей амінокислот 1- 41 ВСад (5ЕО І МО: 1) з відповідними М-кінцевими областями декількох інших білків екзоспорію сімейства Васійи5 сегеиз і білків сімейства Васіїйн5 сегецй5, які мають споріднені послідовності, представлено на фіг. 1А і 18. Як можна бачити з фіг. 1А і 18, існує область високої гомології серед усіх білків в області, що відповідає амінокислотам 20-41 ВсіА. Однак у цих послідовностях амінокислоти, що відповідають амінокислотам 36-41 ВсіІА, містять вторинну структуру і не є необхідними для локалізації злитого білка в екзоспорії. Консервативна область націлювальної
Зо послідовності ВСІА (амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1) представлена напівжирним шрифтом на фіг. ТА ії 18 і відповідає мінімальній націлювальній послідовності, необхідній для локалізації в екзоспорії. Більш висококонсервативна область, що охоплює амінокислоти 25-35 ВсСІіІА у націлювальній послідовності, підкреслена в послідовностях на фіг. ТА і 18, і вона являє собою послідовність розпізнавання для ЕхеА/ВхрВ/ЕхХ5ЕВ і гомологів, яка направляє і збирає описані білки на поверхні екзоспорію. Амінокислотні послідовності 5ЕО ІЮ МО. 3, 5 ії 7 на фіг. ТА являють собою амінокислоти 1-33 ВегА/ВА53290 штаму Васіїйн5 апіпгасіє З(егпе, метіонін з наступними амінокислотами 2-43 ВА5З4623 штаму ВасіШив5 апійгасі5 Єегпе, і амінокислоти 1-34
ВсІВ штаму Васіи5 апіпгасі5 (егпе, відповідно (для ВА54623 було виявлено, що заміна валіну, що знаходиться в положенні 1 нативного білка, на метіонін приводить до кращої експресії). Як можна бачити з фіг. ТА, кожна з цих послідовностей містить консервативну область, яка відповідає амінокислотам 20-35 ВсіА (ЗЕО ІЮО МО: 1; показані напівжирним шрифтом), і більш висококонсервативну область, що відповідає амінокислотам 20-35 ВСІА (підкреслені). 0058) Додаткові білки представників сімейства Васійи5 сегеи5 також містять консервативну націлювальну область. Зокрема, на фіг. ТА і 18 ЗЕО ІО МО: 9 являє собою амінокислоти 1-30
ВАБЗ1882 штаму Васійи5 апійгасіє біегпе, ЗЕО ІО МО: 11 являє собою амінокислоти 1-39 продукту гена 2280 Васійи5 меїпепзіерпепзі5 КВАВ4А, ЗЕО ІЮ МО: 13 являє собою амінокислоти 1-39 продукту гена 3572 Васіййи5 меїпепеїерпепзіє КВАВ4, 5ЕБЕО ІО МО: 15 являє собою амінокислоти 1-49 лідерного пептиду екзоспорію Васійи5 сегеиз МО200, 5ЕО ІО МО: 17 являє собою амінокислоти 1-33 лідерного пептиду екзоспорію Васійи5 сеген5 МО166, ЗЕО ІЮО МО: 19 являє собою амінокислоти 1-39 гіпотетичного білка ІКО 04663 ВасіШиє5 сегеи5 МО200, 5ЕО І
МО: 21 являє собою амінокислоти 1-39 ВД-пропелерного білюьа УУТМ ВасіШи5 угеіпепеїерпепвів
КВАВ4, ЗЕО ІЮО МО: 23 являє собою амінокислоти 1-30 гіпотетичного білка рбсегкрар4 2363
Васійи5 меїпепеіерпепзіз КВАВА, ЗЕО ІЮ МО: 25 являє собою амінокислоти 1-30 гіпотетичного білка Бсегкрар4 2131 Васійш5 меїпепзіерпепзії КВАВ4., 5БО І МО: 27 являє собою амінокислоти 1-36 колагену, що містить триспіральні повтори, ВасіШи5 мейпепз5іерпепзіз КВАВА,
ЗЕО ІЮО МО: 29 являє собою амінокислоти 1-39 гіпотетичного білка бтусо0001 21660 ВасшШив тусоїде5 2048, ЗЕО ІО МО: 31 являє собою амінокислоти 1-30 гіпотетичного білка рітус0001 22540 Васійи5 тусоіїде5 2048, 5ЕО ІЮ МО: 33 являє собою амінокислоти 1-21 гіпотетичного білка Бітус0001 21510 ВасшШиє тусоіїде5 2048, 5ЕБО ІЮО МО: 35 являє собою амінокислоти 1-22 білка колагену з триспіральними повторами Васійи5 ІПигіпдіепбзі5 35646, 5ЗЕО
ІО МО: 43 являє собою амінокислоти 1-35 гіпотетичного білка МУР 69652 Васіїйи5 сегеи5, ЗЕО ІЮ
МО: 45 являє собою амінокислоти 1-41 лідерної послідовності екзоспорію М/РО16117717 Васійив5 сегеи5, 5ЕО ІЮО МО: 47 являє собою амінокислоти 1-49 пептиду екзоспорію М/Р002105192
Васійи5 сегеи5, ЗЕО ІЮО МО: 49 являє собою амінокислоти 1-38 гіпотетичного білка М/Р87353
Васійи5 сегени5, ЗЕО ІЮ МО: 51 являє собою амінокислоти 1-39 пептиду екзоспорію 02112369
Васійи5 сегеи5, ЗЕО ІЮ МО: 53 являє собою амінокислоти 1-39 білка екзоспорію М/РО16099770
Васійи5 сегеиз, ЗЕО ІЮО МО: 55 являє собою амінокислоти 1-36 гіпотетичного білка ХУРОО6612525
Васійи5 ІПигіпдіепзії5, ЗЕО ІО МО: 57 являє собою амінокислоти 1-136 гіпотетичного білка
ТІшКО3720 Васійи5 птусоїде5, БЕО ІЮ МО: 59 являє собою амінокислоти 1-36 білка колагену з доменом триспіральних повторів В. сегеи5 АТСС 10987, 5ЕБО І МО: 61 являє собою амінокислоти 1-39 колаген-подібного білка В. сегеи5 ЕЗЗ3ЗІ, 5ЕО ІО МО: 63 являє собою амінокислоти 1-41 колагену, що містить триспіральні повтори, В. мжеіїпепеїерпапепзіз КВАВА,
ЗЕО ІЮ МО: 65 являє собою амінокислоти 1-30 гіпотетичного білка ВАН 2230 В. ІпПигіпдієпвів штаму АІЇ НаКат, ЗЕО ІЮ МО: 67 являє собою амінокислоти 1-33 колагену, що містить триспіральні повтори, В. сегеи5 АТСС 14579, 5ЕО ІЮО МО: 69 являє собою амінокислоти 1-44 триспірального повтору колагену В. сегеи5, ЗЕО ІЮ МО: 71 являє собою амінокислоти 1-38 колагену, що містить триспіральні повтори В. сегеи5 АТОС 14579, 5ЕО ІО МО: 73 являє собою амінокислоти 1-30 гіпотетичного білка ВС2К1835 В. сегеиз ЕЗЗІ, 5ЕО ІЮО МО: 75 являє собою амінокислоти 1-48 колагену, що містить триспіральні повтори, В. меіпеп5іерпапепзіз КВАВА,
ЗЕО ІЮ МО: 77 являє собою амінокислоти 1-30 колагену, що містить триспіральні повтори, В. сегеи5 АТСС 14579, 5ЕО ІЮО МО: 79 являє собою амінокислоти 1-39 гіпотетичного білка ВС4725
В. сегеих АТОС 14579, 5ЕО ІЮ МО: 81 являє собою амінокислоти 1-44 гіпотетичного білка
ВС2Ка476 В. сегеи5 ЕЗЗІ, 5ЕО ІЮ МО: 83 являє собою амінокислоти 1-40 колагену, що містить триспіральні повтори, В. апійгасіз штаму "Ате5 Апсевіог", ЗЕБО ІЮ МО: 85 являє собою амінокислоти 1-34 білка Всі В. Іпигіпдіепзіє серовару Копкикіап штаму 97-27, 5ЕО І МО: 87 являє собою амінокислоти 1-34 консервативного гіпотетичного білка В. сегеиз АТСС 10987,
ЗЕО Ір МО: 89 являє собою амінокислоти 1-34 колагену, що містить триспіральні повтори, В. сегеиз АТОСС 14579, 5ЕО ІЮО МО: 91 являє собою амінокислоти 1-99 неповної послідовності лідерного пептиду екзоспорію В. сегеи5, і ЗЕО ІО МО: 93 являє собою амінокислоти 1-136 гіпотетичного білка ЕК45 27600 В. меїпепзіерпапепвів. Як показано на фіг. ТА і 18, кожна з М- кінцевих областей цих білків містить область, яка є консервативною з амінокислотами 20-35
ВСІА (ЗЕО ІО МО: 1), і більш консервативну область, що відповідає амінокислотам 25-35 ВСІА. (0059) Будь-яку частину ВСІА, що включає амінокислоти 20-35, можна використовувати для націлювання злитого білка в екзоспорій. Крім того, для націлювання злитих білків у екзоспорій можна використовувати повнорозмірні білки екзоспорію або фрагменти білків екзоспорію. Таким чином, для націлювання в екзоспорій можна використовувати повнорозмірний ВсіА або фрагмент ВСІА, що включає амінокислоти 20-35. Наприклад, для націлювання злитих білків у екзоспорій можна використовувати повнорозмірний ВсіІА (ЗЕО ІЮ МО: 2) або фрагмент ВСІіІА середніх розмірів, який позбавлений С-кінця, такої як ЗЕО ІЮО МО: 95 (амінокислоти 1-196 ВСІА). 60 Фрагменти середнього розміру, такі як фрагмент 5ЗЕБЕО ІЮ МО: 95, мають меншу вторинну структуру, ніж повнорозмірний ВСІА, і було виявлено, що вони прийнятні для застосування як націлювальна послідовність. Націлювальна послідовність також може містити значно більш короткі частини ВСІА, що включають амінокислоти 20-35, такі як ХЕО ІО МО: 1 (амінокислоти 1- 41 Всї), амінокислоти 1-35 5ЕО ІЮ МО: 1, амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1 або 5ЕО ІО МО: 96 (залишок метіоніну, зв'язаний з амінокислотами 20-35 ВсіА). Навіть більш короткі фрагменти
ВсІА, які включають тільки деякі з амінокислоти 20-35, також демонструють здатність до націлювання злитих білків у екзоспорій. Наприклад, націлювальна послідовність може містити амінокислоти 22-31 5ЕО ІЮ МО: 1, амінокислоти 22-33 5ЕО ІЮ МО: 1 або амінокислоти 20-31
ЗЕО ІЮО МО: 1.
І0060| Альтернативно будь-яка частина ВегА/ВА5З3290, ВА5З4623, ВсІВ, ВА51882, продукту гена 2280 КВАВА4, продукту гена 3572 КВАВА4, лідерного пептиду екзоспорію В. сегеи5 МО200, лідерного пептиду екзоспорію В. сегеи5 МО166, гіпотетичного білка ІКоО 04663 В. сегеи5 МО200, р-пропелерного білка УУТМ В. меїіпепеіерпепвзіх5 КВАВА, гіпотетичного білка бсегкрарі4 2363 В. мжеїіпепзіерпепзіз КВАВ4, гіпотетичного білка Брсегкрар4 2131 В. меїпепе5їерпепзі5 КВАВА, колагену, що містить триспіральні повтори, В. меїпепеїерпепзі5 КВАВА, гіпотетичного білка ртусо0001 21660 В. тусоїдеб5 2048, гіпотетичного білка Бітус0001 22540 В. тусоїде5 2048, гіпотетичного білка ртус0001 21510 В. тусоїде5 2048, білка колагену з триспіральними повторами В. ІПигіпдіепеіз 35646, гіпотетичного білка М/Р 69652 В. сегецив5, лідерної послідовності екзоспорію У/РО16117717 В. сегеи5, пептиду екзоспорію пептид УУРО02105192 В. сегеи5, гіпотетичного білка М/Р87353 В. сегеи5, пептиду екзоспорію 02112369 В. сегеив, білка екзоспорію УУРО16099770 В. сегеи5, гіпотетичного білка МРООб612525 В. Шигіпдіепвів, гіпотетичного білка ТІЗКО3720 В. тусоїдев, білка колагену з доменом триспіральних повторів В. сегеи5 АТСС 10987, колаген-подібного білка В. сеген5 ЕЗЗІ,, колагену, що містить триспіральні повтори, В. у'еіпепеїерпапепвіх КВАВА, гіпотетичного білка ВАН 2230 В. ІпПигіпдіепзі5 штаму АЇ
Накат, колагену, що містить триспіральні повтори, В. сегеи5 АТСС 14579, триспіральних повторів колагену В. сегец5, колагену, що містить триспіральні повтори, В. сегеи5 АТСС 14579, гіпотетичного білка ВС2К1835 В. сегеи5 ЕЗЗІ, колагену, що містить триспіральні повтори, В. мжеїпепетерпапепзі5 КВАВА., колагену, що містить триспіральні повтори, В. сегенз АТСС 14579, гіпотетичного білка ВС4725 В. сегеи5 АТСС 14579, гіпотетичного білюка ВС2К4476 В. сегеи5
Зо ЕЗЗІ, колагену, що містить триспіральні повтори, В. апіпгасіз штаму "Атев5 Апсевіог", білка Всі
В. Тигіпдіеєпоі5 серовару Копкикіап штаму 97-27, консервативного гіпотетичного білка В. сегеи5
АТОСС 10987, колагену, що містить триспіральні повтори, В. сегеи5 АТСС 14579, неповної послідовності лідерного пептиду екзоспорію В. сегеи5 або гіпотетичного білка ЕК45 27600 В. мжеїпепетерпапепвзі5, що включає амінокислоти, які відповідають амінокислотам 20-35 ВСІА, може служити як націлювальна послідовність.
І0061| Як можна бачити з фіг. ТА, амінокислоти 12-27 ВегА/ВА5З3290, амінокислоти 23-38
ВАБЗ4623, амінокислоти 13-28 ВсіВ, амінокислоти 9-24 ВА51882, амінокислоти 18-33 продукту гена 2280 КВАВА, амінокислоти 18-33 продукту гена 3572 КВАВА4, амінокислоти 28-43 лідерного пептиду екзоспорію В. сегеи5 МО200, амінокислоти 12-27 лідерного пептиду екзоспорію В. сегеи5 МО166, амінокислоти 18-33 гіпотетичного білка ІКоО 04663 В. сеген5 МО200, амінокислоти 18-33 р-пропелерного білка УУТМ В. у"еїпепеїерпепзіз КВАВА, амінокислоти 9-24 гіпотетичного білка рсегкрар4 2363 В. меїпепеїерпепзіє КВАВ4, амінокислоти 9-24 гіпотетичного білка рсегкрар4 2131 В. уеїпепеїерпепзіз КВАВ4, амінокислоти 15-30 колагену, що містить триспіральні повтори, В. меїпепз5іерпепзіє КВАВ4, амінокислоти 18-33 гіпотетичного білка рБітусо0001 21660 В. тусоїде5 2048, амінокислоти 9-24 гіпотетичного білка Ббтус0001 22540 В. тусоїде5 2048, амінокислоти 1-15 гіпотетичного білка бтус0О001 21510 В. тусоїде5 2048, амінокислоти 1-16 білка колагену з триспіральними повторами В. ІПигіпдіепбоіє 35646, амінокислоти 14-29 гіпотетичного білка М/Р 69652 В. сегеи5, амінокислоти 20-35 лідерної послідовності екзоспорію УМ/РО16117717 В. сегеи5, амінокислоти 28-43 пептиду екзоспорію
М/РОО2105192 В. сегеи5, амінокислоти 17-32 гіпотетичного білка М/Р87353 В. сегецв, амінокислоти 18-33 пептиду екзоспорію 02112369 В. сегеи5, амінокислоти 18-33 білка екзоспорію МУРО16099770 В. сегеи5, амінокислоти 15-30 гіпотетичного білка МРОО6612525 В.
Шигіпдіеєпві5 і амінокислоти 115-130 гіпотетичного білка ТІЗКО3720 В. тусоїде5 відповідають амінокислотам 20-35 ВсІА. Як можна бачити з фіг. 18, амінокислоти 15-30 білка колагену з доменом триспіральних повторів В. сегеи5 АТСС 10987, амінокислоти 18-33 колаген-подібного білка В. сегеи5 ЕЗЗІЇ, амінокислоти 20-35 колагену, що містить триспіральні повтори, В. мжеїпепзіерпапепзіз КВАВА, амінокислоти 9-24 гіпотетичного білка ВАН 2230 В. Пигіпдієпвів штаму АЇ НаКкат, амінокислоти 12-27 колагену, що містить триспіральні повтори, В. сегеи5 АТОС 14579, амінокислоти 23-38 триспіральних повторів колагену В. сегеи5, амінокислоти 17-32 бо колагену, що містить триспіральні повтори, В. сегеи5 АТСС 14579, амінокислоти 9-24 гіпотетичного білка ВС2К1835 В. сегеи5 ЕЗЗ3Ї, амінокислоти 27-42 колагену, що містить триспіральні повтори, В. жеїіпеп5іерпапепзіз КВАВ4, амінокислоти 9-24 колагену, що містить триспіральні повтори, В. сегеи5 АТСС 14579, амінокислоти 18-33 гіпотетичного білка ВС4725 В. сегеи5 АТСС 14579, амінокислоти 23-38 гіпотетичного білка ВС2К4476 В. сегеи5 ЕЗЗІ|, амінокислоти 19-34 колагену, що містить триспіральні повтори, В. апіпйгасіз штаму "Атез
Апсевіог", амінокислоти 13-28 білка ВсІА В. Шигіпдіепбіє серовару КопКиКіап штаму 97-27, амінокислоти 13-28 консервативного гіпотетичного білка В. сегеи5 АТС 10987, амінокислоти 13-28 колагену, що містить триспіральні повтори, В. сегеи5 АТСС 14579, амінокислоти 78-93 неповної послідовності лідерного пептиду екзоспорію В. сегеи5, і амінокислоти 115-130 гіпотетичного білка ЕК45 27600 В. меіпепеїерпапепві5 відповідають амінокислотам 20-35 ВеСІА.
Таким чином, будь-яка частина цих білків, яка включає приведені вище відповідні амінокислоти, може служити як націлювальна послідовність. 00621) Більше того, будь-яка амінокислотна послідовність, яка містить амінокислоти 20-35
ВСІА або будь-які з приведених вище відповідних амінокислот можуть служити як націлювальна послідовність. 0063) Таким чином, націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-35 5ЕО ІЮ
МО: 1, амінокислоти 20-35 5ЕО І МО: 1, 5ЕО ІО МО: 1, 5ЕО ІЮ МО: 96, амінокислоти 22-31 5ЕО
ІЮ МО: 1, амінокислоти 22-33 5ЕБЕО ІЮО МО: 1 або амінокислоти 20-31 5ЕО ІЮО МО: 1.
Альтернативно, націлювальна послідовність складається з амінокислоти 1-35 5ЕО ІЮО МО: 1, амінокислот 20-35 5БЕО ІО МО: 1, 5БО ІО МО: 1 або 5ЕО ІЮО МО: 96. Альтернативно, націлювальна послідовність може складатися з амінокислоти 22-31 5ЕО ІЮО МО: 1, амінокислоти 22-33 ЗЕО ІЮ МО: 1 або амінокислоти 20-31 5ЕО ІЮ МО: 1. Альтернативно, білок екзоспорію може містити повнорозмірний ВСІА (ЗЕО ІЮ МО: 2), або фрагмент білка екзоспорію може містити фрагмент ВсіІА середнього розміру, який позбавлений С-кінця, такої як 5ЕБО ІЮО МО: 59 (амінокислоти 1-196 ВсіА). Альтернативно фрагмент білка екзоспорію може складатися з 5ЕО
ІО МО: 59.
І0064| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-35 5ЕО ІО МО: 1; амінокислоти 5-35 5ЕО ІЮ МО: 1; амінокислоти 8-35 5ЕО ІО МО: 1; амінокислоти 10-35 5ЕО ІЮ
МО: 1 або амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮО МО: 1.
Зо 0065) Націлювальна послідовність також може містити амінокислоти 1-27 5ЕО ІЮО МО: 3, амінокислоти 12-27 ЗЕБО ІЮО МО: 3 або 5ЕО ІЮО МО: 3, або білок екзоспорію може містити повнорозмірний ВегА/ВА5З3290 (5ЕО ІЮ МО: 4). Також було виявлено, що залишок метіоніну, зв'язаний з амінокислотами 12-27 ВегА/ВА5ЗЗ3290, можна використовувати як націлювальну послідовність. Таким чином, націлювальна послідовність може містити ЗЕБЕО ІЮ МО: 97.
Націлювальна послідовність також може містити амінокислоти 14-23 5ЕО ІО МО: 3, амінокислоти 14-25 ЗЕО ІЮ МО: З або амінокислоти 12-23 5ЕО ІО МО: 3.
І0066| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-27 5ЕО ІО МО: 3; амінокислоти 5-27 5ЕО ІО МО: 3; амінокислоти 8-27 5ЕО ІЮ МО: З або амінокислоти 10-27 5ЕО
ІО МО: 3.
І0067| Націлювальна послідовність також може містити амінокислоти 1-38 5ЕО ІЮО МО: 5, амінокислоти 23-38 5ЕБЕО ІЮО МО: 5 або 5ЕО ІЮО МО: 5, або білок екзоспорію може містити повнорозмірний ВА54623 (ЗЕО ІЮО МО: 6).
І0068| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-38 5ЕО І МО: 5; амінокислоти 5-38 5ЕО ІЮ МО: 5; амінокислоти 8-38 5ЕО ІО МО: 5; амінокислоти 10-38 5ЕО ІЮ
МО: 5; амінокислоти 15-38 5ЕО ІЮ МО: 5 або амінокислоти 20-38 5ЕО ІО МО: 5.
І0069| Альтернативно, націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-28 5ЕО ІЮ
МО: 7, амінокислоти 13-28 5ЕО ІЮ МО: 7 або 5ЕО ІЮ МО: 7, або білок екзоспорію може містити повнорозмірний ВсІВ (ЗЕО ІЮ МО: 8).
ІЇ0070| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-28 5ЕО ІО МО: 7;
БО амінокислоти 5-28 5ЕО ІО МО: 7; амінокислоти 8-28 5ЕО ІЮ МО: 7 або амінокислоти 10-28 5ЕО
ІО МО: 7. 0071) Націлювальна послідовність також може містити амінокислоти 1-24 5ЕО ІЮО МО: 9, амінокислоти 9-24 5ЕО ІО МО: 9 або 5ЕБЕО ІЮ МО: 9, або білок екзоспорію може містити повнорозмірний ВАБ5ЗІ1882 (5БО ІО МО: 10). Також як націлювальну послідовність можна використовувати залишок метіоніну, зв'язаний з амінокислотами 9-24 ВА5Б1882. Таким чином, націлювальна послідовність може містити 5ЕО ІЮ МО: 105.
І0072| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 9; амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮО МО: 9 або амінокислоти 8-24 5ЕО І МО: 9.
І0073| Націлювальна послідовність також може містити амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 11, 60 амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮО МО: 11 або 5ЕО ІЮО МО: 11, або білок екзоспорію може містити повнорозмірний продукт гена 2280 В. меїпепзіерпепзіз КВАВ4- (ЗЕБО ІЮ МО: 12). Також як націлювальну послідовність можна використовувати залишок метіоніну, зв'язаний з амінокислотами 18-33 продукту гена 2280 В. меїпепе5їерпепзіз КВАВ4. Таким чином, націлювальна послідовність може містити ЗЕО ІЮ МО: 98.
Ї0074| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮ МО: 11; амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 11; амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 11; амінокислоти 10-33 5ЕО І
МО: 11 або амінокислоти 15-33 5БЕО ІЮ МО: 11. 0075) Націлювальна послідовність також може містити амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 13, амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 13 або 5ЕО ІЮО МО: 13, або білок екзоспорію може містити повнорозмірний продукт гена 3572 В. меїпепзіерпепзіз КВАВА4. (5ЕБО ІЮ МО: 14). Також як націлювальну послідовність можна використовувати залишок метіоніну, зв'язаний з амінокислотами 18-33 продукту гена 3572 В. меїпепе5їерпепзіз КВАВ4. Таким чином, націлювальна послідовність може містити ЗЕО ІЮ МО: 99.
І0076| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 13; амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 13; амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 13; амінокислоти 10-33 5ЕО І
МО: 13 або амінокислоти 15-33 5БЕО ІЮ МО: 13.
І0077| Альтернативно, націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-43 5ЕО ІЮ
МО: 15, амінокислоти 28-43 5ЕО ІЮО МО: 15 або 5ЕО ІЮ МО: 15, або білок екзоспорію може містити повнорозмірний лідерний пептид екзоспорію В. сегеи5 МО200 (5ЕО ІЮО МО: 16).
І0078| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-43 5ЕО ІО МО: 15; амінокислоти 5-43 5ЕО ІЮО МО: 15; амінокислоти 8-43 5ЕО ІЮ МО: 15; амінокислоти 10-43 5ЕО І
МО: 15; амінокислоти 15-43 5ЕО ІО МО: 15; амінокислоти 20-43 5ЕО ІО МО: 15 або амінокислоти 25-43 БЕО ІЮ МО: 15.
І0079| Націлювальна послідовність також може містити амінокислоти 1-27 5ЕО ІЮО МО: 17, амінокислоти 12-27 5ЕО ІЮО МО: 17 або 5ЕО ІЮО МО: 17, або білок екзоспорію може містити повнорозмірний лідерний пептид екзоспорію В. сегеи5 МО166 (ЗЕБО ІЮ МО: 18). Також як націлювальну послідовність можна використовувати залишок метіоніну, зв'язаний з амінокислотами 12-27 В. сегеи5 МО166. Таким чином, націлювальна послідовність може містити
ЗЕО ІО МО: 100.
Зо І0080| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-27 5ЕО ІО МО: 17; амінокислоти 5-27 5ЕО ІЮО МО: 17; амінокислоти 8-27 5ЕО ІЮ МО: 17 або амінокислоти 10-27
ЗЕО ІЮО МО: 17. 0081) Націлювальна послідовність також може містити амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 19, амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 19 або 5ЕО ІЮО МО: 19, або білок екзоспорію може містити гіпотетичний гіпотетичний білок ІКО 04663 В. сегеи5 МО200 (ЗЕО І МО: 20).
І0082| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 19; амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 19; амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 19; амінокислоти 10-33 5ЕО І
МО: 19 або амінокислоти 15-33 5БЕО ІЮ МО: 19. (0083) Альтернативно, націлювальна послідовність містить амінокислоти 1-39 5ЕО ІО МО: 21, амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 21 або 5ЕО ІО МО: 21, або білок екзоспорію може містити повнорозмірний р-пропелерний білок УУТМ В. меїпепетерпепзіз КВАВА (ЗЕО ІЮ МО: 22). Також як націлювальну послідовність можна використовувати залишок метіонін, зв'язаний з амінокислотами 18-33 р-пропелерного білюка КВАВ4 УМУТМ В. меїпепетерпепзві5. Таким чином, націлювальна послідовність може містити 5ЕО ІЮ МО: 101.
І0084| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 21; амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 21; амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 21; амінокислоти 10-33 5ЕО І
МО: 21 або амінокислоти 15-33 5БЕО ІЮ МО: 21. (0085) Націлювальна послідовність також може містити амінокислоти 1-24 5ЕО ІЮО МО: 23, амінокислоти 9-24 5ЕО ІО МО: 23 або 5ЕБО ІО МО: 23, або білок екзоспорію може містити гіпотетичний гіпотетичний білок рсегкрабр4 2363 В. меїпепзіерпепзіз КВАВ4А (5ЕО ІЮО МО: 24).
Також як націлювальну послідовність можна використовувати залишок метіоніну, зв'язаний з амінокислотами 9-24 гіпотетичного білка рсегкраб4 2363 В. меїпепо5іерпепзії КВАВ4. Таким чином, націлювальна послідовність може містити ЗЕО ІЮ МО: 102.
І0086| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 23; амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮ МО: 23 або амінокислоти 8-24 5ЕО І МО: 23.
І0087| Націлювальна послідовність містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІЮО МО: 25, амінокислоти 9-24 5ЕБО Ір МО: 25 або 5БО ІЮО МО: 25, або білок екзоспорію може містити гіпотетичний гіпотетичний білок бсежкрабрі4 2131 В. меїпепеїерпепоії КВАВ4- (ЗЕБО ІЮ МО: 26). Також як націлювальну послідовність можна використовувати залишок метіоніну, зв'язаний з бо амінокислотами 9-24 гіпотетичного білка рсегкрабр4 2131 В. меїпепзіерпепзі5 КВАВ4. Таким чином, націлювальна послідовність може містити 5ЕО ІЮ МО: 103.
І0088| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 25; амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮО МО: 25 або амінокислоти 8-24 5ЕО ІО МО: 25.
І0089| Альтернативно, націлювальна послідовність містить амінокислоти 1-30 5ЕО ІО МО: 27, амінокислоти 15-30 5ЕО ІЮ МО: 27 або 5ЕО ІО МО: 27, або білок екзоспорію може містити повнорозмірний колаген, що містить триспіральний повтор, В. меіпепеїерпепзіз КВАВА (ЗЕО І
МО: 28).
І0090| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-30 5ЕО ІО МО: 27; амінокислоти 5-30 5ЕО ІЮО МО: 27; амінокислоти 8-30 5ЕО ІЮ МО: 27 або амінокислоти 10-30
БЕОПІЮО МО: 27.
І0091| Націлювальна послідовність також може містити амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 29, амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 29 або 5ЕО ІО МО: 29, або білок екзоспорію може містити гіпотетичний гіпотетичний білок бтусо0001 21660 В. тусоїде5 2048 (5ЕО ІО МО: 30).
І0092| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 29; амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 29; амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 29; амінокислоти 10-33 5ЕО І
МО: 29 або амінокислоти 15-33 5БЕО ІЮ МО: 29. 0093) Націлювальна послідовність також може містити амінокислоти 1-24 5ЕО ІЮО МО: 31, амінокислоти 9-24 5ЕО ІО МО: 31 або 5ЕБО ІО МО: 31, або білок екзоспорію може містити гіпотетичний гіпотетичний білок бтус0001 22540 В. тусоїде5 2048 (5ЕБО ІО МО: 32). Також як націлювальну послідовність можна використовувати залишок метіоніну, зв'язаний з амінокислотами 9-24 гіпотетичного білка бБтусО001 22540 В. тусоїде5 2048. Таким чином, націлювальна послідовність може містити ЗЕО ІЮ МО: 104.
І0094| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 31; амінокислоти 5-24 ЗЕО ІЮО МО: 31 або амінокислоти 8-24 5ЕО І МО: 31. (0095) Альтернативно, націлювальна послідовність містить амінокислоти 1-15 5ЕО ІО МО: 33, ЗЕБЕО ІЮ МО: 33, або білок екзоспорію містить повнорозмірний гіпотетичний білок рітус0001 21510 В. тусоїдез 2048 (5ЕО ІО МО: 34).
І0096)| Націлювальна послідовність також може містити амінокислоти 1-16 5ЕО ІЮО МО: 35,
ЗЕБЕО ІО МО: 35, або білок екзоспорію може містити повнорозмірний білок колагену з триспіральними повторами В. ІПигіпдіепзі5 35646 (5ЕО ІЮ МО: 36).
І0097| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-29 5ЕО ІО МО: 43, амінокислоти 14-29 5ЕО ІЮО МО: 43 або 5ЕО ІО МО: 43, або білок екзоспорію може містити гіпотетичний гіпотетичний білок МУР. 69652 В. сегеи5 (ЗЕО ІЮО МО: 44).
І0098| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-29 5ЕО ІО МО: 43; амінокислоти 5-29 5ЕО ІЮО МО: 43; амінокислоти 8-29 5ЕО ІОЮО МО: 43 або амінокислоти 10-29
ЗЕО І МО: 43.
І0099| Альтернативно, націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-35 5ЕО ІЮ
МО: 45, амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮО МО: 45 або 5ЕО ІЮ МО: 45, або білок екзоспорію може містити повнорозмірну лідерну послідовність екзоспорію М/РО16117717 В. сегеиз (ЗЕО ІЮО МО: 46). Також як націлювальну послідовність можна використовувати залишок метіоніну, зв'язаний з амінокислотами 20-35 лідерної послідовності екзоспорію УУРО16117717 В. сегеи5. Таким чином, націлювальна послідовність може містити 5ЕО ІЮ МО: 106.
І00100| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-35 5ЕБЕО І МО: 45; амінокислоти 5-35 5ЕО ІЮО МО: 45; амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮ МО: 45; амінокислоти 10-35 5ЕО І
МО: 45 або амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮ МО: 45.
Ї00101| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-43 5ЕО ІЮО МО: 47, амінокислоти 28-43 5ЕО ІЮО МО: 47 або 5ЕО ІЮО МО: 47, або білок екзоспорію може містити повнорозмірний пептид екзоспорію М/РО02105192 В. сегеиз (5ЕО ІЮ МО: 48).
І00102| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-43 5ЕБЕО ІО МО: 47;
БО амінокислоти 5-43 5ЕО ІЮО МО: 47; амінокислоти 8-43 5ЕО ІЮ МО: 47; амінокислоти 10-43 5ЕО І
МО: 47; амінокислоти 15-43 5ЕО ІО МО: 47; амінокислоти 20-43 5ЕО ІО МО: 47 або амінокислоти 25-43 5БЕО ІЮ МО: 47.
І00103| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-32 5ЕО ІО МО: 49, амінокислоти 17-32 5ЕО ІЮ МО: 49 або 5ЕО ІО МО: 49, або білок екзоспорію може містити гіпотетичний гіпотетичний білок УМР87353 В. сегеи5 (5ЕО ІЮ МО: 50).
І00104| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-32 5ЕО І МО: 49; амінокислоти 5-32 5ЕО ІЮО МО: 49; амінокислоти 8-32 5ЕО ІЮ МО: 49; амінокислоти 10-32 5ЕО ІЮ
МО: 49 або амінокислоти 15-32 5ЕО ІЮ МО: 49. 00105) Альтернативно, націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-33 5ЕО І 60 МО: 51, амінокислоти 18-33 5ЕО ІО МО: 51 або 5ЕО ІЮ МО: 51, або білок екзоспорію може містити повнорозмірний пептид екзоспорію 02112369 В. сегеиз5 (ЗЕО ІЮ МО: 52).
ІЇ00106| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 51; амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 51; амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 51; амінокислоти 10-33 5ЕО І
МО: 51 або амінокислоти 15-33 5БЕО ІЮ МО: 51.
І00107| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-33 5ЕО ІО МО: 53, амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮО МО: 53 або 5ЕО ІЮО МО: 53, або білок екзоспорію може містити повнорозмірний білок екзоспорію МУРО16099770 В. сегеи5 (ЗЕО ІЮО МО: 54). 00108) Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-33 5ЕО І МО: 53; амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 53; амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 53; амінокислоти 10-33 5ЕО І
МО: 53 або амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 53. 00109) Альтернативно, націлювальна послідовність може містити кислоти 1-30 5ЕО ІЮО МО: 55, амінокислоти 15-30 5ЕО ІО МО: 55 або 5ЕО ІЮ МО: 55, або білок екзоспорію може містити повнорозмірний гіпотетичний білок УРО06612525 В. Іигіпдіепві5 (ЗЕО ІЮ МО: 56). 00110) Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-30 5ЕО І МО: 55; амінокислоти 5-30 5ЕО ІЮО МО: 55; амінокислоти 8-30 5ЕО ІЮ МО: 55 або амінокислоти 10-30
ЗЕО ІЮ МО: 55. 00111) Націлювальна послідовність також може містити амінокислоти 1-130 5ЕО ІЮО МО: 57, амінокислоти 115-130 5ЕО ІЮ МО: 57 або 5ЕО ІЮО МО: 57, або білок екзоспорію може містити гіпотетичний гіпотетичний білок ТІОРО3720 В. тусоїдез5 (5ЕО ІО МО: 58).
І00112)| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-130 5ЕО ІЮ МО: 57; амінокислоти 5-130 5ЕО ІЮО МО: 57; амінокислоти 10-130 5ЕО ІО МО: 57; амінокислоти 20-130 5ЕО ІО МО: 57; амінокислоти 30-130 5ЕО ІО МО: 57; амінокислоти 40-130 5ЕО ІО МО: 57; амінокислоти 50-130 5ЕО ІЮ МО: 57; амінокислоти 60-130 5ЕО ІЮО МО: 57; амінокислоти 70-130 5ЕО ІО МО: 57; амінокислоти 80-130 5ЕО ІО МО: 57; амінокислоти 90-130 5ЕО ІО МО: 57; амінокислоти 100-130 5ЕО ІО МО: 57 або амінокислоти 110-130 5ЕО ІО МО: 57. 00113) Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-30 5ЕО ІЮ МО: 59 або
ЗЕО ІЮ МО: 59; або білок екзоспорію може містити повнорозмірний білок колагену з доменом триспіральних повторів В. сегени5 АТСС 10987 (5ЕО ІО МО: 60).
Ї00114| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-30 5ЕО ІЮО МО: 59; амінокислоти 4-30 5ЕО ІЮО МО: 59 або амінокислоти 6-30 5ЕО ІЮ МО: 59. 00115) Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-33 5ЕБЕО І МО: 61; амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 61 або 5ЕО ІО МО: 61; або білок екзоспорію може містити повнорозмірний колаген-подібний білок В. сегеи5 ЕЗЗІ (5ЕО ІЮ МО: 62). 00116) Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-33 5ЕО І МО: 61; амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮ МО: 61; амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 61 або амінокислоти 15-33
ЗЕО ІЮО МО: 61.
І00117| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-35 5ЕО ІЮ МО: 63 або
ЗЕБЕО ІО МО: 63; або білок екзоспорію може містити повнорозмірний колаген, що містить триспіральні повтори, В. меіпепвіерпапепвіз КВАВА (5ЕО ІО МО: 64). 00118) Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-35 5ЕБЕО І МО: 63; амінокислоти 5-35 5ЕО ІЮО МО: 63; амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮ МО: 63; амінокислоти 10-35 5ЕО І
МО: 63 або амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮ МО: 63.
Ї00119| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-24 5ЕО ІЮО МО: 65; амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮО МО: 65; 5ЕО ІЮО МО: 65 або 5ЕО ІЮО МО: 107; або білок екзоспорію може містити гіпотетичний гіпотетичний білок ВАН 2230 В. ІПигіпдіепзі5 штаму АЇ НаКкат (ЗЕО
ІО МО: 66).
І00120| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-24 5ЕО ІЮ МО: 65 або амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮ МО: 65.
І00121| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-27 5ЕБЕО І МО: 67;
БО амінокислоти 12-27 5ЕО ІЮО МО: 67 або 5ЕО ІЮО МО: 67; або білок екзоспорію може містити повнорозмірний колаген, що містить триспіральні повтори, В. сегеи5 АТСС 14579 (5ЕО ІЮ МО: 68).
І00122| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-27 5ЕО І МО: 67; амінокислоти 5-27 ЗЕО ІЮО МО: 67 або амінокислоти 10-27 5ЕО І МО: 67.
І00123| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-38 5ЕБЕО І МО: 69; амінокислоти 23-38 5ЕО ІЮ МО: 69 або 5ЕО ІО МО: 69; або білок екзоспорію може містити триспіральний триспіральний повтор колагену В. сегеи5 (ЗЕО ІЮ МО: 70).
І00124| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-38 5ЕБЕО І МО: 69; амінокислоти 5-38 5ЕО ІЮО МО: 69; амінокислоти 10-38 5ЕО ІЮО МО: 69 або амінокислоти 15-38 60 ЗЕОІЮО МО: 69.
00125) Білок екзоспорію може містити повнорозмірний колаген, що містить триспіральні повтори, В. сегеи5 АТСС 14579 (5ЕО ІО МО: 72). 00126) Націлювальна послідовність, може містити ЗЕО ІЮ МО: 73 або білок екзоспорію може містити гіпотетичний гіпотетичний білок ВС2К1835 В. сегеи5 ЕЗЗІ (5ЕО ІО МО: 74).
І00127| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-42 5ЕБЕО І МО: 75; амінокислоти 27-42 5ЕО ІЮО МО: 75 або 5ЕО ІЮО МО: 75; або білок екзоспорію може містити повнорозмірний колаген, що містить триспіральні повтори, В. меіпеп5їерпапепзіз КВАВ4А (5ЕО
ІО МО: 76). 00128) Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-42 5ЕБЕО І МО: 75; амінокислоти 5-42 5ЕО ІЮО МО: 75; амінокислоти 10-42 5ЕО ІЮО МО: 75; амінокислоти 15-42 5ЕО
ІО МО: 75; амінокислоти 20-42 5ЕО ІЮ МО: 75 або амінокислоти 25-42 5ЕО ІЮО МО: 75.
І00129| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-24 5ЕО ІО МО: 77; амінокислоти 9-24 5ЕО ІО МО: 77 або 5ЕБО ІО МО: 77; або білок екзоспорію може містити повнорозмірний колаген, що містить триспіральні повтори, В. сегеи5 АТСС 14579 (5ЕО ІЮ МО: 15.78).
І00130| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-24 5ЕО ІЮО МО: 77 або амінокислоти 5-24 5ЕО ІО МО: 77. 00131) Білок екзоспорію може містити повнорозмірний гіпотетичний білок ВС4725 В. сегецй5
АТСОС 14579 (БЕО ІЮ МО: 80). 20 І00132| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-38 5ЕБЕО І МО: 81; амінокислоти 23-38 5ЕО ІЮО МО: 81 або 5ЕО ІЮО МО: 81; або білок екзоспорію може містити гіпотетичний гіпотетичний білок ВС2К4А476 В. сегеи5 ЕЗЗІ (5ЕО ІО МО: 82).
ІЇ00133| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-38 5ЕО І МО: 81; амінокислоти 5-38 5ЕО ІЮО МО: 81; амінокислоти 10-38 5ЕО ІЮО МО: 81; амінокислоти 15-38 5ЕО 25 ІО МО: 81 або амінокислоти 20-38 5ЕО І МО: 81.
І00134| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-34 5ЕО ІЮ МО: 83 або
ЗБЕО ІО МО: 83; або білок екзоспорію може містити повнорозмірний колаген, що містить триспіральні повтори, В. апійгасі5 штаму "Атез5 Апсевіог" (ЗЕО ІО МО: 84). 00135) Білок екзоспорію може містити повнорозмірний білок ВсСіІА В. ІПигіпдіепзі5 серовару
Коо) КопкиКкіап штаму 97-27 (5ЕО ІО МО: 86).
І00136| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-28 5ЕО І МО: 87; амінокислоти 13-28 5ЕО ІЮ МО: 87 або 5ЕО ІО МО: 87; або білок екзоспорію може містити консервативний консервативний гіпотетичний білок В. сегеи5 АТС 10987 (5ЕО ІЮ МО: 88).
І00137| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-28 5ЕО І МО: 87; 35 амінокислоти 5-28 5ЕО ІЮ МО: 87 або амінокислоти 10-28 5ЕО ІЮ МО: 87. 00138) Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-28 5ЕО ІЮ МО: 89 або
ЗБЕО ІО МО: 89; або білок екзоспорію може містити повнорозмірний колаген, що містить триспіральні повтори, В. сегеи5 АТСС 14579 (5ЕО ІЮ МО: 90).
І00139| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-28 5ЕО І МО: 89; 40 амінокислоти 5-28 5ЕО ІЮ МО: 89 або амінокислоти 10-28 5ЕО ІЮ МО: 89. 00140) Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-93 5ЕО ІЮ МО: 91 або
ЗЕО ІЮО МО: 91; або білок екзоспорію може містити неповну послідовність лідерного пептиду екзоспорію В. сегеи5 (5ЕО 10 МО: 92).
І00141| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-93 5ЕО І МО: 91; 45 амінокислоти 10-93 5ЕО ІЮ МО: 91; амінокислоти 20-93 5ЕО ІЮ МО: 91; амінокислоти 30-93 5ЕО
ІЮО МО: 91; амінокислоти 40-93 5ЕБЕО ІЮ МО: 91; амінокислоти 50-93 5ЕО ІЮО МО: 91 або амінокислоти 60-93 5ЕО І МО: 91. (00142) Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 1-130 5ЕО ІЮ МО: 93 або
ЗЕО ІО МО: 93; або білок екзоспорію може містити неповну послідовність гіпотетичного білка 50 ЕН45 27600 В. меїіпепвіерпапепвів (ЗЕО ІЮО МО: 94).
І00143| Націлювальна послідовність може містити амінокислоти 2-130 5ЕО ІЮ МО: 93; амінокислоти 10-130 5ЕО ІЮО МО: 93; амінокислоти 20-130 5ЕО ІЮО МО: 93 або амінокислоти 30- 130 5ЕО ІО МО: 93. (00144) Більше того, як проілюстровано в прикладах, наданих у даному описі нижче, було 55 виявлено, що більш короткі послідовності, ніж амінокислоти 20-35 ВсіІА, можна використовувати для націлювання злитого білка в екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5. Зокрема, для націлювання злитого білка в екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 можна використовувати амінокислоти 20-33 ВсіА, амінокислоти 20-31
ВСІА, амінокислоти 21-33 ВсіІА або амінокислоти 23-31 ВсІА. Таким чином, націлювальна 60 послідовність може складатися з амінокислоти 20-33 5ЕО ІЮО МО: 1, амінокислот 20-31 5ЕО І
МО: 1, амінокислот 21-33 5ЕО ІО МО: 1 або амінокислот 23-31 5ЕО ІЮО МО: 1. Також для націлювання злитого білка в екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегейв5 можна використовувати відповідні області будь-якої з ЗЕО ІО МО, показаних на фіг. ТА і 18. Під "відповідними областями" мають на увазі, що, коли послідовності вирівнюють з БЕО ІЮ МО: 1, як показано на фіг. ТА і 18, області інших амінокислотних послідовностей, що вирівнюються з амінокислотами ЗЕО ІЮО МО: 1, є "відповідними областями" цих послідовностей. Таким чином, наприклад, амінокислоти 12-25 5ЕО ІО МО: 3, амінокислоти 23-36 5ЕО ІЮ МО: 5, амінокислоти 13-26 5ЕО ІО МО: 7, і т.д. можна використовувати для націлювання злитого білка в екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійш5 сегецй5, оскільки ці області вирівнюються з амінокислотами 20-33 БЕО ІО МО: 1, як показано на фіг. 1А. 00145) Також для націлювання злитого білка в екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 можна використовувати навіть більш короткі області в межах амінокислот 20-35 ВСІА. Зокрема, можна використовувати будь-яку амінокислотну послідовність, яка включає амінокислоти 25-30 5ЕБО ІЮ МО: 1 або відповідні амінокислоти з будь-якої з послідовностей, показаних на фіг. ТА і 18. Кваліфікованому фахівцю буде зрозуміло, що, починаючи з амінокислоти 25-30 5ЕБО ІЮ МО: 1 або відповідної області будь-якої з послідовностей, представлених на фіг. ТА ї 18, додаткові амінокислоти можна додавати на М- кінець, С-кінець, і як на М-кінець, так і на С-кінець, для одержання націлювальної послідовності яка буде ефективною для націлювання злитого білка в екзоспорій рекомбінантного представника сімейства ВасШив сегеи5.
І00146| Крім того, з вирівнювання послідовностей на фіг. ТА і 1В, можна без зусиль побачити, що, хоча амінокислоти 20-35 ВсіА є консервативними й амінокислоти 25-35 є більш консервативними, у цій області може зустрічатися деякий ступінь варіювання без впливу на здатність націлювальної послідовності до націлювання білка в екзоспорій. На фіг. ТА ї 18 приведена процентна ідентичність будь-якої з відповідних амінокислот кожної послідовності з амінокислотами 20-35 ВсІіА ("95 ідентичності 20-35") і з амінокислотами 25-35 ВсіА ("95 ідентичності 25-35"). Таким чином, наприклад, у порівнянні з амінокислотами 20-35 ВсСІА, що відповідають амінокислоти ВегА/ВА53290 є приблизно на 81,395 ідентичними, відповідні амінокислоти ВА5Б4623 є приблизно на 50,095 ідентичними, відповідні амінокислоти ВсіІВ є приблизно на 43,895 ідентичними, відповідні амінокислоти ВА51882 є приблизно на 62,5965 ідентичними, відповідні амінокислоти продукту гена 2280 КВАВ4- є приблизно на 81,395 ідентичними, і відповідні амінокислоти продукту гена 3572 КВАВ4 є приблизно на 81,395 ідентичними. Ідентичність послідовностей протягом цієї області для інших послідовностей приведена на фіг. ТА і 18.
І00147| Що стосується амінокислот 25-35 ВсіА, відповідні амінокислоти Ве(А/ВА5З3290 є приблизно на 90,995 ідентичними, відповідні амінокислоти ВА54623 є приблизно на 72,790 ідентичними, відповідні амінокислоти ВсІВ є приблизно на 54,595 ідентичними, відповідні амінокислоти ВА51882 є приблизно на 72,795 ідентичними, відповідні амінокислоти продукту гена 2280 КВАВА є приблизно на 90,995 ідентичними, і відповідні амінокислоти продукту гена 3572 КВАВ4 є приблизно на 81,895 ідентичними. Ідентичність послідовностей протягом цієї області для інших послідовностей приведена на фіг. ТА і 18.
Ї00148| Таким чином, націлювальна послідовність може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 4395 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО
ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 5495.
Альтернативно, націлювальна послідовність складається з амінокислотної послідовності, яка складається з 16 амінокислот і має щонайменше приблизно 4395 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІО МО: 1, де ідентичність амінокислот 25-35 складає щонайменше приблизно 5495.
І00149| Націлювальна послідовність також може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 5095 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 6395. Альтернативно, націлювальна послідовність складається з амінокислотної послідовності, яка складається з 16 амінокислот і має щонайменше приблизно 5095 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО І
МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 6395. 00150) Націлювальна послідовність також може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 5095 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 7295. Альтернативно, націлювальна послідовність складається з амінокислотної послідовності, яка складається з 16 амінокислот і має щонайменше приблизно 5095 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО І
МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 7295. бо І00151| Націлювальна послідовність також може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 5695 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 6395. Альтернативно, націлювальна послідовність складається з амінокислотної послідовності, яка складається з 16 амінокислот і має щонайменше приблизно 5695 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО І
МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 6395.
І00152| Альтернативно, націлювальна послідовність може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 6295 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО
ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 7295.
Націлювальна послідовність, також може складатися з амінокислотою послідовності, яка складається з 16 амінокислот і має щонайменше приблизно 6295 ідентичності з амінокислотами 20-35 ЗЕО ІО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 5ЕО ІЮ МО: 1 складає щонайменше приблизно 72965. 00153) Націлювальна послідовність може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 6895 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕБО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 8195. Альтернативно, націлювальна послідовність складається з амінокислотної послідовності, яка складається з 16 амінокислот і має щонайменше 6895 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 8195. 00154) Націлювальна послідовність також може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 7595 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 7295. Альтернативно, націлювальна послідовність складається з амінокислотної послідовності, яка складається з 16 амінокислот і має щонайменше приблизно 7595 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО І
МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 5ЕО ІЮ МО: 1 складає щонайменше приблизно 7290. 00155) Націлювальна послідовність також може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 7595 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 8195. Альтернативно, націлювальна послідовність складається з амінокислотної послідовності, яка складається з 16
Зо амінокислот і має щонайменше приблизно 7595 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО І
МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 5ЕО ІЮ МО: 1 складає щонайменше приблизно 819. 00156) Націлювальна послідовність також може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 8195 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 8195. Альтернативно, націлювальна послідовність складається з амінокислотної послідовності, яка складається з 16 амінокислот і має щонайменше приблизно 8195 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО І
МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 8195.
І00157| Націлювальна послідовність може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 8195 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕБО ІЮ МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 9095. Альтернативно, націлювальна послідовність складається з амінокислотної послідовності, яка складається з 16 амінокислот і має щонайменше приблизно 8195 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО І
МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 9095.
ІЇ00158| Кваліфікованому фахівцю буде зрозуміло, що варіанти описаних вище послідовностей також можна використовувати як націлювальні послідовності за умови, що націлювальна послідовність містить амінокислоти 20-35 ВсіА, відповідні амінокислоти
ВегА/ВА53290, ВА54263, ВсІВ, ВА5Б1882, продукту гена 2280 КВАВ4 або продукту гена 3572
КВАВ, або присутня послідовність, яка має описану вище ідентичність послідовності з амінокислотами 20-35 і 25-35 ВесіІА. 00159) Певні білки екзоспорію сімейства Васійц5 сегец5, які позбавлені областей, що мають гомологію з амінокислотами 25-35 ВсіА, також можна використовувати для націлювання пептиду або білка в екзоспорій представника сімейства Васійй5 сегеи5. Зокрема, злиті білки можуть включати білок екзоспорію, який містить ЗЕО ІЮ МО: 108 (ІпрА В. тусоїдев5), білок екзоспорію, який містить ЗЕО ІЮ МО: 109 (ВА5ЗІ1141 В. апійгасіє 5(егпе (Ех5У)), білок екзоспорію, який містить ЗЕО ІЮ МО: 110 (ВА5ЗІ144 В. апінгасіє Зіегпе (ВхрВ/Ех5ЕА)), білок екзоспорію, який містить БЕО ІЮ МО: 111 (ВА5ЗІ1145 В. апінгасіє Зіегпе (СоїУу)), білок екзоспорію, який містить
ЗЕО ІЮ МО: 112 (ВА51140 В. апінгасіб5 5іегпе), білок екзоспорію, який містить ЗЕО ІЮ МО: 113 (ЕХ5ЕВ В. апійгасі5 НУО401), білок екзоспорію, який містить зЕО ІЮ МО: 114 (ІпрА1 В. (Вигіпдіепвів 60 НО?74), білок екзоспорію, який містить ЗЕО ІЮ МО: 115 (Ех5у В. сегеи5 АТСС 10876), білок екзоспорію, який містить ЗЕО ІЮ МО: 116 (Ех5Н В. сегеицв), білок екзоспорію, який містить БХЕО
ІО МО: 117 (МісА В. апійгасі5 Атев), білок екзоспорію, який містить 5ЕО ІЮ МО: 118 (св В. апіпгасів), білок екзоспорію, який містить 5ЕО ОО МО: 119 (ВсіС В. апінгасіє З(егпе), білок екзоспорію, який містить ЗЕО ІЮ МО: 120 (кисла фосфатаза ВасшШив Пигіпдіепзі5 серовару
КопКиКіап штаму 97-27), білок екзоспорію, який містить ЗЕО ІЮ МО: 121 (ІпрА2 В. ІВигіпдіепвів
НО?74), або білок екзоспорію, який містить ЗЕО ІЮО МО: 122 (ІпрАЗ В. тусоїде5). Включення білка екзоспорію, що містить будь-яку з БЕО ІЮ МО: 108-122 у злиті білки, описані в даному описі, приводить до націлювання в екзоспорій представника сімейства В. сегецв5. 00160) Більше того, білки екзоспорію, які мають високий ступінь ідентичності послідовності з будь-яким з повнорозмірних білків екзоспорію або фрагментів білка екзоспорію, описаних вище, також можна використовувати для націлювання пептиду або білка в екзоспорій представника сімейства Васійи5 сеген5. Таким чином, злитий білок може містити білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, що містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з будь-якою з ЗЕО ІЮО МО: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34,
Зб, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 95, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121 ї 122. Альтернативно злитий білок може містити білок екзоспорію, який має щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з будь-якою з 5ЕО ІО МО: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 44, Аб, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 95, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121 і 122. 00161) У ході споруляції рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5, який експресує будь-який зі злитих білків, описаних у даному описі, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію розпізнається апаратом зборки екзоспорію спор і направляється в екзоспорій, що приводить до експонування білка або пептиду, що представляє інтерес, що є частиною злитого білка, зовні спори. 00162) Як проілюстровано далі за допомогою прикладів, наданих у даному описі нижче, застосування різних націлювальних послідовностей дозволяє контролювати рівень експресії злитого білка на поверхні спори представника сімейства Васійй5 сегеи5. Застосування певних націлювальних послідовностей, описаних у даному описі, приведе до більш високого рівня експресії злитого білка, у той час як застосування інших націлювальних послідовностей приведе до більш низьких рівнів експресії злитого білка на поверхні спори. 00163) У будь-якому зі злитих білків, описаних у даному описі, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть містити амінокислотну послідовність
СХТ на їхньому С-кінці, де Х являє собою будь-яку амінокислоту. 00164) У будь-якому зі злитих білків, описаних у даному описі, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть містити залишок в аланіну в положенні націлювальної послідовності, що відповідає амінокислоті 20 5ЕО 10 МО: 1. 00165) У будь-якому зі злитих білків, описаних у даному описі, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, крім того, можуть містити залишок метіоніну, серину або треоніну в положенні амінокислоти, яке безпосередньо передує першій амінокислоті націлювальної послідовності, білка екзоспорію або фрагмента білка екзоспорію, або в положенні націлювальної послідовності, яке відповідає амінокислоті 20 5ЕО ІЮО МО: 1.
В. Злиті білки для експресії в рекомбінантних представниках сімейства Васійи5 сегей5
І00166| Даний винахід стосується злитих білків, які містять щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, або білок екзоспорію. Коли білок або пептид, який представляє інтерес, являє собою будь-який білок або пептид, що представляє інтерес, злитий білок може містити: (1) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-30 5ЕО ІЮО МО: 59; (2) націлювальну послідовність, яка містить БЕО ІЮ МО: 59; (3) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 60; (4) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30
ЗЕО ІЮ МО: 59; (5) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 4-30 5ЕО ІЮ МО: 59; (6) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 6-30 5ЕО ІЮ МО: 59; (7) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІО МО: 61; (8) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 ЗЕО ІЮ МО: 61; (9) націлювальну послідовність, яка містить ФЕО
ІЮ МО: 61; (10) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності послідовності з «ЕО ІЮО МО: 62; (11) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 61; (12) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕБО ІЮ МО: 61; (13) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти бо 10-33 5ЕО ІЮО МО: 61; (14) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ
МО: 61; (15) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-35 5ЕО ІЮО МО: 63; (16) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 63; (17) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 64; (18) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО ІЮО МО: 63; (19) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 ЗЕО ІЮО МО: 63; (20) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІО МО: 63; (21) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІО МО: 63; (22) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮ МО: 63; (23) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІО
МО: 65; (24) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮО МО: 65; (25) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 65; (26) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 66; (27) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 107; (28) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 БЕ ІЮО МО: 65; (29) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІО МО: 65; (30) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1- 27 5ЕО ІЮ МО: 67; (31) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-27 5ЕО І МО: 67; (32) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 67; (33) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 68; (34) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 5ЕО ІЮО МО: 67; (35) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 ЗЕО ІЮО МО: 67; (36) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІЮ МО: 67; (37) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-38 5ЕО ІО МО: 69; (38) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-38 5ЕО ІЮО МО: 69; (39) націлювальну послідовність, яка містить хЕО ІЮ МО: 69; (40) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 70; (41) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38
ЗЕО ІЮ МО: 69; (42) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІЮО МО: 69; (43) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО ІЮО МО: 69; (44) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 ЗЕО ІО МО: 69; (45) білок екзоспорію, який містить ЗЕО ІЮО МО: 72; (46) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ
МО: 73; (47) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 95965 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 74; (48) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1- 42 5ЕО ІЮ МО: 75; (49) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 27-42 5ЕО І МО: 75; (50) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 75; (51) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 76; (52) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-42 5ЕО І МО: 75; (53) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-42 5ЕО ІЮО МО: 75; (54) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-42 5ЕО ІЮ МО: 75; (55) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-42 5ЕБО ІО МО: 75; (56) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-42 5ЕО ІЮО МО: 75; (57) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-42 5ЕО ІЮ МО: 75; (58) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІЮ
МО: 77; (59) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮО МО: 77; (60) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 77; (61) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 78; (62) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІЮО МО: 77; (63) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІО МО: 77; (64) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 80; (65) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-38 5ЕО ІЮ МО: 81; (66) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-38 5ЕО ІЮ МО: 81; (67) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 81; (68) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8590 ідентичності з БЕ ІЮ МО: 82; (69) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38 БЕ ІЮО МО: 81; (70) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІЮ МО: 81; (71) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО ІЮО МО: 81; (72) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО ІЮ
МО: 81; (73) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-38 5ЕО ІЮ МО: 81; (74) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-34 5ЕО ІЮО МО: 83; (75) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 83; (76) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЕО ІЮ МО: 84; (77) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 86; (78) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-28 5ЕО І МО: 87; (79) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13-28 5ЕО ІЮО МО: 87; (80) націлювальну 60 послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 87; (81) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮО МО: 88; (82) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-28 5ЕО ІЮО МО: 87; (83) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО ІО МО: 87; (84) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІЮО МО: 87; (85) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-28 5ЕО ІЮО МО: 89; (86) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮО МО: 89; (87) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 90; (88) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-28 5ЕО ІЮО МО: 89; (89) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕБЕО І МО: 89; (90) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІЮО МО: 89; (91) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-93 5БЕО ІЮО МО: 91; (92) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 91; (93) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8590 ідентичності з ЗЕ ІЮ МО: 92; (94) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-93 5ЕО ІЮО МО: 91; (95) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-93 5ЕО ІЮО МО: 91; (96) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-93 5ЕО ІЮ МО: 91; (97) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-93 5ЕО ІЮ
МО: 91; (98) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-93 5ЕО ІЮ МО: 91; (99) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-93 5ЕО ІЮО МО: 91; (100) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 60-93 5ЕО ІО МО: 91; (101) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-130 5ЕО ІЮО МО: 93; (102) націлювальну послідовність, яка містить
ЗЕБЕО ІЮ МО: 93; (103) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8590 ідентичності з БЕО ІО МО: 94; (104) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-130 5ЕО ІО МО: 93; (105) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-130 5ЕО ІЮ МО: 93; (106) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5ЕО
ІО МО: 93; (107) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5ЕО ІО МО: 93; або (108) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності послідовності з ФЕО ІЮ МО: 122.
І00167| Наприклад, коли білок або пептид, який представляє інтерес, являє собою будь-який білок або пептид, що представляє інтерес, злитий білок може містити: (1) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО ІЮ МО: 59; (2) націлювальну послідовність,
Зо яка містить амінокислоти 4-30 5ЕБЕО ІЮО МО: 59; (3) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 6-30 5ЕО ІО МО: 59; (4) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2- 33 ЗЕО І МО: 61; (5) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 61; (6) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ МО: 61; (7) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 61; (8) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО ІЮО МО: 63; (9) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІО МО: 63; (10) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕБО ІЮ МО: 63; (11) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІЮО МО: 63; (12) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮ
МО: 63; (13) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІЮО МО: 65; (14) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮО МО: 65; (15) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 ЗЕО ІЮО МО: 67; (16) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО ІО МО: 67; (17) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІЮО МО: 67; (18) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38 5ЕО І МО: 69; (19) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО І МО: 69; (20) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО І МО: 69; (21) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5БЕО ІЮО МО: 69; (22) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-42 5ЕО ІЮО МО: 75; (23) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-42 5ЕО ІО МО: 75; (24) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-42 5ЕО ІО МО: 75; (25) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-42 5ЕО І МО: 75; (26) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-42 5ЕО ІЮ
МО: 75; (27) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-42 5ЕО ІЮ МО: 75; (28) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІЮО МО: 77; (29) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 ЗЕО ІЮО МО: 77; (30) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38 5ЕО ІО МО: 81; (31) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІЮ МО: 81; (32) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО ІЮО МО: 81; (33) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО ІЮ
МО: 81; (34) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-38 5ЕО ІЮ МО: 81; (35) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-28 5ЕО ІЮО МО: 87; (36) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО ІЮО МО: 87; (37) націлювальну послідовність, бо яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІЮ МО: 87; (38) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-28 5ЕО ІО МО: 89; (39) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 28 5ЕО ІО МО: 89; (40) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО І МО: 89; (41) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-93 5ЕО ІЮ МО: 91; (42) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-93 5БЕО ІЮО МО: 91; (43) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-93 5ЕО ІЮ МО: 91; (44) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-93 5ЕБО ІО МО: 91; (45) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-93 5ЕО ІЮ МО: 91; (46) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-93 5ЕО ІЮО МО: 91; (47) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 60-93 5ЕО ІЮ
МО: 91; (48) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-130 5ЕО ІЮ МО: 93; (49) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-130 5ЕО ІЮО МО: 93; (50) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5ЕО ІО МО: 93; або (51) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5ЕО ІО МО: 93. (00168) Альтернативно, коли білок або пептид, який представляє інтерес, являє собою будь- який білок або пептид, що представляє інтерес, злитий білок може містити: (1) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 20-33 5ЕО ІЮ МО: 1; (2) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 21-33 5ЕО ІЮ МО: 1; (3) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 23-31 ЗЕО ІЮ МО: 1; (4) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮ МО: 96; (5) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮ МО: 96; (6) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 12-25 ЗЕО ІЮ МО: 3; (7) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 13-25 ЗЕО ІЮ МО: 3; (8) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 15-23 ЗЕО ІЮ МО: 3; (9) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-45 5ЕО ІЮ МО: 97; (10) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮ МО: 98; (11) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 23-36 5БО ІЮ МО: 5; (12) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 23-34 5ЕБЕО ІЮ МО: 5; (13) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 24-36 5БО ІЮ МО: 5; (14) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 26-34 5ЕБО ІЮ МО: 5; (15) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 13-26 5БО ІЮ МО: 7; (16) націлювальну
Ко) послідовність, яка складається з амінокислоти 13-24 5ЕБЕО ІЮ МО: 7; (17) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 14-26 5БО ІЮ МО: 7; (18) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 16-24 5ЕБО ІЮ МО: 7; (19) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 9-22 5ЕО ІЮ МО: 9; (20) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 9-20 5ЕО ІЮ МО: 9; (21) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 10-22 5ЕБЕО ІЮ МО: 9; (22) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 12-20 5ЕБЕО ІЮ МО: 9; (23) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-45 5ЕО ІЮ МО: 105; (24) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮ МО: 105; (25) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-31 5ЕО ІЮ МО: 11; (26) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-29 5БЕО ІЮ МО: 11; (27) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 19-31 5ЕО ІЮ МО: 11; (28) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-45 5ЕО ІЮ МО: 98; (29) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮ МО: 98; (30) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-31 5ЕО ІЮ МО: 13; (31) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-29 5БЕО ІЮ МО: 13; (32) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 19-31 5ЕО ІЮ МО: 13; (33) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 21-29 5БЕО ІЮ МО: 13; (34) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-45 5ЕО ІЮ МО: 99; (35) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮ МО: 99; (36) націлювальну
БО послідовність, яка складається з амінокислоти 28-41 5ЕБЕО ІЮ МО: 15; (37) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 28-39 5ЕБЕО ІЮ МО: 15; (38) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 29-41 5ЕБЕО ІЮ МО: 15; (39) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 31-39 5ЕБЕО ІЮ МО: 15; (40) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 12-25 5БЕО ІЮ МО: 17; (41) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 13-25 5БЕО ІЮ МО: 17; (42) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-45 5ЕО ІЮ МО: 100; (43) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-31 5ЕО ІЮ МО: 19; (44) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-29 5ЕБЕО ІЮ МО: 19; (45) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 19-31 5ЕО ІЮ МО: 19; (46) націлювальну 60 послідовність, яка складається з амінокислоти 21-29 5ЕБЕО ІЮ МО: 19; (47) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-31 5ЕО ІЮ МО: 21; (48) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-29 5ЕБЕО ІЮ МО: 21; (49) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 19-31 5ЕО ІЮ МО: 21; (50) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 21-29 5ЕБЕО ІЮ МО: 21; (51) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮ МО: 101; (52) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮ МО: 101; (53) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 9-22 5ЕО ІЮ МО: 23; (54) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 9-20 5ЕО ІЮ МО: 23; (55) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 10-22 5ЕБЕО ІЮ МО: 23; (56) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 12-20 5ЕО ІЮ МО: 23; (57) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-45 5ЕБЕО ІЮ МО: 102; (58) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮ МО: 102; (59) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 9-22 5ЕО ІЮ МО: 25; (60) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 9-20 5ЕО ІЮ МО: 25; (61) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 10-22 5ЕО ІО МО: 25; (62) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 12-20 5ЕО ІЮ МО: 25; (63) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮ МО: 103; (64) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮ МО: 103; (65) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 15-28 5ЕБЕО ІВ МО: 27; (66) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 15-26 5БО ІЮ МО: 27; (67) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 16-28 5ЕО ІО МО: 27; (68) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-26 5БО ІЮ МО: 27; (69) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-45 5ЕБЕО ІЮ МО: 104; (70) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮ МО: 104; (71) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕБО ІЮО МО: 33; (72) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-41 5ЕО ІЮ МО: 33; (73) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 3-11 5ЕО ІЮ МО: 33; (74) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-14 5ЕО ІЮ МО: 35; (75) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-42 5ЕО ІЮ МО: 35; (76) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 2-14 5ЕО ІЮ МО: 35; (77) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 14-27 5БЕО ІЮ МО: 43; (78) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 14-25 5БЕО ІЮ МО: 43; (79) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 15-27 5ЕО ІЮ МО: 43; (80) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 20-33 5ЕО ІЮ МО: 45; (81) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 20-31 5ЕО ІЮ МО: 45; (82) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 21-33 5ЕО ІО МО: 45; (83) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮ МО: 106; (84) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮ МО: 106; (85) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 28-41 5ЕО ІО МО: 47; (86) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 28-39 5ЕБО ІЮ МО: 47; (87) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-31 5ЕО ІЮ МО: 53; (88) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-29 5ЕО ІО МО: 53; (89) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 19-31 5ЕО ІЮ МО: 53; (90) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-31 5ЕО ІЮ МО: 61; (91) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-29 5ЕО ІО МО: 61; (92) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 19-31 5ЕО ІЮО МО: 61; (93) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-22 ЗЕО ІЮ МО: 65; (94) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-20 5ЕО ІЮ МО: 65; (95) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-22 5ЕО І МО: 65; (96) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5БЕО ІЮО МО: 107; (97) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮ МО: 107; (98) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-25 5ЕО ІО МО: 67; (99) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-23 5ЕО І МО: 67; (100) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13-25 5ЕО ІЮ МО: 67; (101) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-23 5ЕО ІЮ
МО: 67; (102) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-36 5ЕО ІЮ МО: 69; (103) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-34 5ЕО ІЮО МО: 69; (104) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 24-36 5ЕО ІЮ МО: 69; (105) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 26-34 5ЕО ІЮО МО: 69; (106) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 27-40 5ЕО ІО МО: 75; (107) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 27-38 5ЕО І МО: 75; (108) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-22 5ЕО ІЮ 60 МО: 77; (109) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-20 5ЕО І МО: 77; (110)
націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-22 5ЕО ІЮО МО: 77; (111) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-20 5ЕО ІО МО: 77; (112) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-36 5ЕО ІЮО МО: 81; (113) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-34 5ЕО ІЮ МО: 81; (114) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 24-36 5ЕО ІЮ МО: 81; (115) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 26-34 5ЕО ІЮ
МО: 81; (116) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13-26 5ЕО І МО: 87; (117) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13-24 5БО ІО МО: 87; або (118) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-26 5ЕО ІЮО МО: 87. Націлювальна послідовність також може складатися з будь-якої з цих послідовностей.
І00169| Даний винахід стосується злитих білків, які містять щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію. Білок або пептид, що представляє інтерес, може являти собою фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, або білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту. Коли білок або пептид, який представляє інтерес, включає фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, або білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть являти собою будь-яку націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійй5 сегеи5. Наприклад, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть являти собою будь-які з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію або фрагментів білків екзоспорію, приведених вище в абзацах (001661-(00168)| для застосування з будь-яким білком або пептидом, що представляє інтерес, або: (1) націлювальну послідовність, яка містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 4395 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО
ІО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 5495; (2) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (3) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (4) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮО МО: 1; (5) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з зБЕО ІО МО: 2; (6) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО ІО МО: 1; (7) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35
Ко) ЗЕО ІЮ МО: 1; (8) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (9) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (10) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5БЕО ІО МО: 1; (11) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-27 5ЕО ІО МО: 3; (12) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-27 5ЕО ІО МО: 3; (13) націлювальну послідовність, яка містить БЕО ІЮ МО: 3; (14) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 4; (15) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27
ЗЕО ІЮ МО: 3; (16) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО ІЮО МО: 3; (17) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО І МО: 3; (18) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІЮ МО: 3; (19) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-38 5ЕО ІЮО МО: 5; (20) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-38 5ЕО ІО МО: 5; (21) націлювальну послідовність, яка містить БЕО
ІО МО: 5; (22) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 6; (23) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2- 38 5ЕО ІЮО МО: 5; (24) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІЮО МО: 5; (25) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-38 5ЕО І МО: 5; (26) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО ІЮ МО: 5; (27) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО ІЮО МО: 5; (28) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-38 5ЕО ІО МО: 5; (29) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-28 5ЕО ІО МО: 7; (30) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13- 28 5ЕО ІЮО МО: 7; (31) націлювальну послідовність, яка містить 5ЗЕО ІЮ МО: 7; (32) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 8; (33) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-28 5ЕО ІЮО МО: 7; (34) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО І МО: 7; (35) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-28 5ЕО ІЮ МО: 7; (36) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІО МО: 7; (37) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕБО ІЮО МО: 9; (38) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮ МО: 9; (39) націлювальну послідовність, яка містить зЕО ІЮ МО: 9; (40) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 10; (41) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 60 ЗЕО ІЮ МО: 9; (42) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮО МО: 9;
(43) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО І МО: 9; (44) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 11; (45) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 11; (46) націлювальну послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 11; (47) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8590 ідентичності з БЕ ІЮ МО: 12; (48) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 11; (49) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 11; (50) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 33 ЗЕО І МО: 11; (51) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 11; (52) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО І МО: 11; (53) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (54) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 13; (55) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 13; (56) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8590 ідентичності з БЕ ІЮ МО: 14; (57) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 13; (58) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 13; (59) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 33 ЗЕО І МО: 13; (60) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 13; (61) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО І МО: 13; (62) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-43 5ЕО ІО МО: 15; (63) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 28-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (64) націлювальну послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 15; (65) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8590 ідентичності з БЕ ІЮ МО: 16; (66) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕБО ІЮО МО: 15; (67) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО ІО МО: 15; (68) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 43 5ЕО ІЮО МО: 15; (69) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (70) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО І МО: 15; (71) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5БЕО ІЮО МО: 15; (72) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (73) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-27 5ЕО ІО МО: 17; (74) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-27 5ЕО ІО МО: 17; (75) націлювальну послідовність, яка містить зхЕО ІЮ МО: 17;
Зо (76) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІО МО: 18; (77) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27
ЗЕО ІЮ МО: 17; (78) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО ІЮО МО: 17; (79) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО І МО: 17; (80) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІЮО МО: 17; (81) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮ МО: 19; (82) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕБО ІО МО: 19; (83) націлювальну послідовність, яка містить
ЗБЕО ІЮ МО: 19; (84) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 20; (85) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 19; (86) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 33 5ЕО І МО: 19; (87) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО І МО: 19; (88) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО І МО: 19; (89) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5БЕО ІЮ МО: 19; (90) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (91) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕБЕО ІО МО: 21; (92) націлювальну послідовність, яка містить
ЗБЕО ІЮ МО: 21; (93) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 22; (94) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 21; (95) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 33 5ЕО І МО: 21; (96) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО І МО: 21; (97) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО І МО: 21; (98) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5БЕО ІЮО МО: 21; (99) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІЮО МО: 23; (100) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮ МО: 23; (101) націлювальну послідовність, яка містить
ЗБЕО ІЮ МО: 23; (102) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8590 ідентичності з БЕО ІО МО: 24; (103) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 23; (104) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮ МО: 23; (105) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮ
МО: 23; (106) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІЮО МО: 25; (107) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮО МО: 25; (108) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 25; (109) білок екзоспорію, який містить амінокислотну 60 послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 26; (110) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІОЮО МО: 25; (111) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮ МО: 25; (112) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІО МО: 25; (113) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-30 5ЕО ІЮ МО: 27; (114) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-30 5ЕО ІЮ
МО: 27; (115) націлювальну послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 27; (116) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 28; (117) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО І МО: 27; (118) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІЮО МО: 27; (119) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО ІЮО МО: 27; (120) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІЮО МО: 27; (121) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (122) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 29; (123) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІО МО: 29; (124) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з
ЗЕО ІЮО МО: 30; (125) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮ МО: 29; (126) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО І МО: 29; (127) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5БЕО ІЮ МО: 29; (128) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (129) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (130) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІО МО: 31; (131) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮ МО: 31; (132) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 31; (133) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з
ЗЕО ІЮО МО: 32; (134) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО І МО: 31; (135) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО І МО: 31; (136) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮО МО: 31; (137) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮО МО: 33; (138) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮО МО: 33; (139) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з 5ЕО ІЮ МО: 34; (140) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-16 5БЕО ІЮО МО: 35; (141) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ
МО: 35; (142) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 36; (143) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-29 5ЕО ІЮ МО: 43; (144) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-29 5ЕО ІЮ
МО: 43; (145) націлювальну послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 43; (146) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 44; (147) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-29 5ЕО І МО: 43; (148) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (149) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (150) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (151) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-35 5ЕО ІО МО: 45; (152) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (153) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮО МО: 45; (154) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 46; (155) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (156) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (157) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (158) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІО МО: 45; (159) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІО МО: 45; (160) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-43 5ЕО ІО МО: 47; (161) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 28-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (162) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІО МО: 47; (163) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85595 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 48; (164) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (165) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО ІО МО: 47; (166) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 5БЕО ІЮО МО: 47; (167) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІО МО: 47; (168) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО ІЮО МО: 47; (169) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО ІО МО: 47; (170) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО І МО: 47; (171) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-32 5ЕО ІЮ
МО: 49; (172) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 17-32 5ЕО ІЮ МО: 49; (173) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 49; (174) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з 5ЕО ІЮ МО: 50; (175) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-32 5ЕО ІЮО МО: 49; (176) націлювальну 60 послідовність, яка містить амінокислоти 5-32 5ЕО ІЮО МО: 49; (177) націлювальну послідовність,
яка містить амінокислоти 8-32 5ЕО ІЮ МО: 49; (178) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-32 5ЕО І МО: 49; (179) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-32 5ЕО ІЮ МО: 49; (180) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮ
МО: 51; (181) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (182) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 51; (183) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з 5ЕО ІЮ МО: 52; (184) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮ МО: 51; (185) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (186) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 51; (187) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 51; (188) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (189) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮ
МО: 53; (190) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5БЕО ІЮ МО: 53; (191) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 53; (192) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з 5ЕО ІЮ МО: 54; (193) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5БЕО ІЮО МО: 53; (194) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (195) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 53; (196) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 53; (197) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (198) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-30 5ЕО ІЮ
МО: 55; (199) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (200) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 55; (201) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з 5ЕО ІЮ МО: 56; (202) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО ІЮО МО: 55; (203) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІЮО МО: 55; (204) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (205) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІО МО: 55; (206) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-130 5ЕО ІО МО: 57; (207) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 115-130 5ЕО
ІО МО: 57; (208) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 57; (209) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «БО ІО МО:
Ко) 58; (210) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (211) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (212) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130 5ЕО ІО МО: 57; (213) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5БО ІО МО: 57; (214) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5БО ІО МО: 57; (215) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-130 5БО ІО МО: 57; (216) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-130 5БО ІО МО: 57; (217) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 60-130 5БО ІО МО: 57; (218) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 70-130 5БО ІО МО: 57; (219) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 800-130 5БО ІО МО: 57; (220) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 90-130 5БО ІО МО: 57; (221) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 100-130 5ЕБЕО І МО: 57; (222) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130 ЗЕО ІЮ МО: 57; (223) фрагмент білка екзоспорію, що містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з
ЗБО ІЮ МО: 95; (224) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕБО ІО МО: 96; (225) націлювальну послідовність, яка містить БЗЕО ІЮ МО: 97; (226) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 98; (227) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 99; (228) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 100; (229) націлювальну послідовність, що містить ЗЕО ІЮ МО: 101; (230) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 102; (231) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮО МО: 103; (232) націлювальну послідовність, яка
БО містить БЕО ІЮ МО: 104; (233) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 105; (234) націлювальну послідовність, яка містить зЗЕО ІЮ МО: 106; (235) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 108; (236) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО І МО: 109; (237) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 110; (238) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 111; (239) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 112; (240) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з зЗЕО ІЮ МО: 113; (241) білок екзоспорію, 60 який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО:
114; (242) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮО МО: 115; (243) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 116; (244) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 117; (245) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 118; (246) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 119; (247) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 120; (248) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЕО ІЮ МО: 121; (249) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 22-31 ЗЕО ІЮО МО: 1; (250) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 22-33 5ЕО ІЮ
МО: 1; (251) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-31 5ЕО ІЮ МО: 1; (252) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-23 5БЕО ІЮО МО: 3; (253) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-25 ЗЕО ІЮ МО: 3; або (254) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-23 5ЕО ІЮО МО: 3.
І00170| Наприклад, коли білок або пептид, який представляє інтерес, включає фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, або білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть являти собою: (1) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (2) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (3) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (4) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІО МО: 1; (5) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (6) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2- 27 5ЕО ІЮ МО: 3; (7) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО ІО МО: 3; (8) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 ЗЕО ІЮО МО: 3; (9) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІО МО: 3; (10) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38 5ЕБО ІЮО МО: 5; (11) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІО МО: 5; (12) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 38 5ЕО ІО МО: 5; (13) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО І МО:
Ко) 5; (14) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО ІЮО МО: 5; (15) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-38 5ЕО ІЮ МО: 5; (16) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-28 5ЕО ІО МО: 7; (17) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕБО ІЮО МО: 7; (18) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-28 5ЕО ІО МО: 7; (19) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10- 28 5ЕО ІЮ МО: 7; (20) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО І МО: 9; (21) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО І МО: 9; (22) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮ МО: 9; (23) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 11; (24) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 11; (25) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕБО ІЮ МО: 11; (26) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 11; (27) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ
МО: 11; (28) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (29) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (30) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (31) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕБО ІО МО: 13; (32) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (33) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5БЕО І МО: 15; (34) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5БЕО І МО: 15; (35) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 5ЕО ІО МО: 15; (36) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5БЕО ІЮО МО: 15; (37) націлювальну
БО послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (38) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕБО ІО МО: 15; (39) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО ІЮО МО: 15; (40) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 ЗЕО І МО: 17; (41) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО І МО: 17; (42) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО ІО МО: 17; (43) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІЮО МО: 17; (44) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 19; (45) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 19; (46) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 19; (47) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ МО: 19; (48) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ 60 МО: 19; (49) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (50)
націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (51) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5БЕО ІЮО МО: 21; (52) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕБО ІО МО: 21; (53) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (54) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІЮ МО: 23; (55) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО І МО: 23; (56) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІО МО: 23; (57) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІОЮО МО: 25; (58) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 ЗЕО ІЮО МО: 25; (59) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІО МО: 25; (60) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО ІЮ МО: 27; (61) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 30 5ЕО І МО: 27; (62) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО І МО: 27; (63) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО І МО: 27; (64) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (65) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (66) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 29; (67) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (68) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 29; (69) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО І0
МО: 31; (70) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮО МО: 31; (71) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮО МО: 31; (72) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (73) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-29 5ЕО ІО МО: 43; (74) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-29 5ЕО ІЮ МО: 43; (75) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-29 5ЕО ІЮ МО: 43; (76) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО ІЮ
МО: 45; (77) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (78) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (79) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (80) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5БО ІО МО: 45; (81) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕО ІО МО: 47; (82) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 43 5ЕО ІО МО: 47; (83) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 БЕО ІЮ МО:
Ко) 47; (84) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО І МО: 47; (85) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5БЕО ІЮО МО: 47; (86) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (87) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕБО ІО МО: 47; (88) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-32 5ЕО ІО МО: 49; (89) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 32 5ЕО І МО: 49; (90) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-32 5ЕО І МО: 49; (91) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-32 5ЕО І МО: 49; (92) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-32 5ЕО ІЮО МО: 49; (93) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (94) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 51; (95) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕБО ІЮ МО: 51; (96) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (97) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ
МО: 51; (98) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (99) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (100) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (101) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (102) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІО МО: 53; (103) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (104) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІЮ
МО: 55; (105) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО ІЮО МО: 55; (106) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІЮО МО: 55; (107) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-130 5ЕО ІО МО: 57; (108) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-130 5ЕО ІО МО: 57; (109) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 100-130 5ЕБЕО ІЮ МО: 57; (110) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5ЕБЕО ІЮ МО: 57; (111) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 300-130 5ЕБЕО ІЮ МО: 57; (112) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-130 5ЕО ІО МО: 57; (113) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-130 5БЕБЕО ІЮ МО: 57; (114) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 600-130 5БЕБЕО ІЮ МО: 57; (115) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 700-130 5ЕО 10 МО: 57; (116) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 800-130 5БЕБЕО ІЮ МО: 57; (117) націлювальну послідовність, яка містить 60 амінокислоти 90-130 5БЕБЕО ІЮ МО: 57; (118) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 100-130 5ЕО ІЮ МО: 57; або (119) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130 5ЕО ІО МО: 57.
І00171| Передбачається злитий білок, який містить антиген або фермент рекультивації і націлювальну послідовність або білок екзоспорію. Націлювальна послідовність або білок екзоспорію можуть містити будь-які з націлювальних послідовностей або білків екзоспорію, приведених вище в абзацах (001661-(00168|)|, для застосування з будь-яким білком або пептидом, що представляє інтерес, або: (1) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО ІО МО: 1; (2) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35
ЗЕО ІЮ МО: 1; (3) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (4) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (5) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (6) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 22-31 БО ІЮО МО: 1; (7) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 22-33 5ЕО ІЮ МО: 1; (8) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20- 31 5ЕО ІО МО: 1; (9) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 5ЕО ІО МО: 3; (10) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО І МО: 3; (11) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 ЗЕО ІЮ МО: 3; (12) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІО МО: 3; (13) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-23 5ЕО ІО МО: 3; (14) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-25 5ЕО ІЮО МО: 3; (15) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-23 5БЕО ІЮ МО: 3; (16) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38 5ЕО І МО: 5; (17) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІЮО МО: 5; (18) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-38 5ЕО ІЮ МО: 5; (19) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО ІО МО: 5; (20) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО ІЮО МО: 5; (21) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-38 5ЕО ІЮ МО: 5; (22) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2- 28 5ЕО ІЮ МО: 7; (23) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО І МО: 7; (24) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-28 5ЕО І МО: 7; (25) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІЮ МО: 7; (26) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІО МО: 9; (27) націлювальну послідовність,
Зо яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІО МО: 9; (28) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО
ІО МО: 9; (29) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ФЕО ІО МО: 10; (30) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2- 24 ЗЕО ІЮ МО: 9; (31) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО І МО: 9; (32) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО І МО: 9; (33) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 11; (34) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 11; (35) націлювальну послідовність, що містить ЗЕО ІЮ МО: 11; (36) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8590 ідентичності з БЕ ІЮ МО: 12; (37) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 11; (38) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 11; (39) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 33 ЗЕО І МО: 11; (40) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 11; (41) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІО МО: 11; (42) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (43) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 13; (44) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 13; (45) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, що має щонайменше 8590 ідентичності з БЕ ІЮ МО: 14; (46) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 ЗЕ ІО МО: 13; (47) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (48) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 33 ЗЕО І МО: 13; (49) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО:
БО 13; (50) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІО МО: 13; (51) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-43 5ЕО ІЮО МО: 15; (52) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 28-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (53) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 15; (54) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8590 ідентичності з БЕ ІЮ МО: 16; (55) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕБО ІЮО МО: 15; (56) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО ІО МО: 15; (57) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 43 5ЕО ІЮО МО: 15; (58) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (59) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО ІО МО: 15; (60) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5БЕО ІЮО МО: 15; (61) націлювальну 60 послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (62) націлювальну послідовність,
яка містить амінокислоти 1-27 5ЕО ІО МО: 17; (63) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-27 5ЕО ІО МО: 17; (64) націлювальну послідовність, яка містить зхЕО ІЮ МО: 17; (65) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІО МО: 18; (66) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27
ЗЕО ІЮ МО: 17; (67) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО ІЮО МО: 17; (68) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО І МО: 17; (69) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІЮО МО: 17; (70) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 19; (71) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕБО ІО МО: 19; (72) націлювальну послідовність, яка містить
ЗЕБЕО І МО: 19; (73) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 20; (74) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 19; (75) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 33 5ЕО І МО: 19; (76) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО І МО: 19; (77) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО І МО: 19; (78) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 19; (79) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (80) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕБО ІО МО: 21; (81) націлювальну послідовність, яка містить
ЗБЕО ІЮ МО: 21; (82) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 22; (83) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 21; (84) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 33 5ЕО І МО: 21; (85) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО І МО: 21; (86) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО І МО: 21; (87) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5БЕО ІЮО МО: 21; (88) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІЮО МО: 23; (89) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮ МО: 23; (90) націлювальну послідовність, яка містить зЕО
ІЮ МО: 23; (91) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 24; (92) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 23; (93) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 24 5ЗЕО ІЮО МО: 23; (94) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮ МО:
Ко) 23; (95) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІО МО: 25; (96) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮО МО: 25; (97) націлювальну послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 25; (98) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮО МО: 26; (99) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІЮО МО: 25; (100) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮ МО: 25; (101) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІО МО: 25; (102) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-30 5ЕО ІЮ МО: 27; (103) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-30 5ЕО ІЮ
МО: 27; (104) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮО МО: 27; (105) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 28; (106) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО І МО: 27; (107) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІЮО МО: 27; (108) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО ІЮО МО: 27; (109) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІО МО: 27; (110) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІО МО: 29; (111) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 29; (112) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІО МО: 29; (113) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з
ЗЕО ІЮО МО: 30; (114) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮ МО: 29; (115) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 29; (116) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 29; (117) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 29; (118) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (119) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІО МО: 31; (120) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5БЕО ІЮ МО: 31; (121) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 31; (122) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з
ЗЕО ІЮО МО: 32; (123) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО І МО: 31; (124) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО І МО: 31; (125) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮО МО: 31; (126) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮО МО: 33; (127) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮО МО: 33; (128) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, 60 яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 34; (129) націлювальну послідовність, яка
Зо містить амінокислоти 1-16 5БЕО ІЮО МО: 35; (130) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ
МО: 35; (131) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 36; (132) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-29 5ЕО ІЮ МО: 43; (133) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-29 5ЕО ІЮ
МО: 43; (134) націлювальну послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 43; (135) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 44; (136) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-29 5ЕО І МО: 43; (137) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (138) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (139) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (140) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (141) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (142) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО І МО: 45; (143) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 46; (144) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (145) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІО МО: 45; (146) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5БЕО ІЮО МО: 45; (147) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІО МО: 45; (148) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (149) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-43 5ЕО ІО МО: 47; (150) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 28-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (151) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 47; (152) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з
ЗЕО ІЮО МО: 48; (153) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (154) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО ІО МО: 47; (155) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 5БЕО ІЮО МО: 47; (156) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІЮО МО: 47; (157) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО ІЮО МО: 47; (158) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО ІО МО: 47; (159) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (160) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-32 5ЕО ІЮ
МО: 49; (161) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 17-32 5ЕО І МО: 49; (162)
Зо націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 49; (163) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕС ІЮ МО: 50; (164) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-32 5ЕО ІЮО МО: 49; (165) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-32 5ЕО ІЮО МО: 49; (166) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-32 5ЕО ІЮ МО: 49; (167) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-32 5ЕО І МО: 49; (168) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-32 5ЕО ІЮ МО: 49; (169) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮ
МО: 51; (170) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5БЕО ІЮО МО: 51; (171) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 51; (172) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 52; (173) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5БЕО ІЮО МО: 51; (174) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (175) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 51; (176) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 51; (177) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (178) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮ
МО: 53; (179) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5БЕО ІЮ МО: 53; (180) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 53; (181) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 54; (182) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5БЕО ІЮО МО: 53; (183) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (184) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 53; (185) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 53; (186) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (187) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-30 5ЕО ІЮ
МО: 55; (188) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (189) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 55; (190) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з 5ЕО ІЮ МО: 56; (191) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО ІЮО МО: 55; (192) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІЮО МО: 55; (193) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (194) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІО МО: 55; (195) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти бо 1-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (196) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 115-130 5ЕО
ІО МО: 57; (197) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 57; (198) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 58; (199) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (200) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (201) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130 5БО ІО МО: 57; (202) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5БО ІО МО: 57; (203) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5БЕО ІО МО: 57; (204) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-130 5БО ІО МО: 57; (205) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-130 5БО ІО МО: 57; (206) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 60-130 5БО ІО МО: 57; (207) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 70-130 5БО ІО МО: 57; (208) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 80-130 5БО ІО МО: 57; (209) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 90-130 5БО ІО МО: 57; (210) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 100-130 5ЕБЕО І МО: 57; (211) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130 5ЕБО 10 МО: 57; (212) націлювальну послідовність, яка містить зХЕО ІЮ МО: 97; (213) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО 10
МО: 98; (214) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕ ІЮ МО: 99; (215) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 100; (216) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО
ІО МО: 101; (217) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮО МО: 102; (218) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 103; (219) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО
ІО МО: 104; (220) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮО МО: 105; (221) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 106; (222) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 108; (223) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 109; (224) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 110; (225) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 111; (226) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 112; (227) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше
Зо 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮО МО: 113; (228) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 114; (229) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 115; (230) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮО МО: 116; (231) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 117; (232) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 118; (233) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮО МО: 119; (234) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з 5ЕО ІЮ МО: 120; або (235) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з
ЗЕО І МО: 121.
І00172| Передбачається злитий білок, який містить фермент, прийнятний для руйнування емульсії або гелю в рідині гідророзриву пласту, або антибактеріальний білок або пептид і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію. Націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть містити будь-які з націлювальних послідовностей, або білків екзоспорію, приведених вище в абзацах (001661- 00168) для застосування з будь-яким білком або пептидом, що представляє інтерес, або: (1) націлювальну послідовність, яка містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 4395 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕБЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 54 905; (2) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-35 5ЕБО ІЮ МО: 1; (3) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-35 5ЕО ІО МО: 1; (4) націлювальну послідовність, яка містить хЕО ІЮО МО: 1; (5) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЗЕО ІЮ МО: 2; (6) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО
І МО: 1; (7) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІЮО МО: 1; (8) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (9) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІО МО: 1; (10) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮО МО: 1; (11) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-27 5ЕО ІО МО: 3; (12) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12- 60 27 5ЕО ІЮО МО: 3; (13) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 3; (14) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 4; (15) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 5ЕО ІЮО МО: 3; (16) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО І МО: 3; (17) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО ІЮ МО: 3; (18) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІО МО: 3; (19) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-38 5ЕБО ІЮО МО: 5; (20) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-38 5ЕО ІЮО МО: 5; (21) націлювальну послідовність, яка містить БЕО ІЮ МО: 5; (22) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 6; (23) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38
ЗЕО ІЮ МО: 5; (24) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІЮО МО: 5; (25) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-38 5ЕО І МО: 5; (26) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО ІЮ МО: 5; (27) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО ІО МО: 5; (28) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-38 5ЕО ІО МО: 5; (29) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-28 5ЕО ІО МО: 7; (30) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13- 28 5ЕО ІЮО МО: 7; (31) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕБЕО ІЮО МО: 7; (32) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 8; (33) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-28 5ЕО ІЮО МО: 7; (34) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО І МО: 7; (35) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-28 5ЕО ІЮ МО: 7; (36) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІО МО: 7; (37) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕБО ІЮО МО: 9; (38) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮ МО: 9; (39) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 9; (40) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 10; (41) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24
ЗЕО ІЮ МО: 9; (42) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮО МО: 9; (43) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО І МО: 9; (44) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 11; (45) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 11; (46) націлювальну послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 11; (47) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8590 ідентичності з БЕ ІЮ МО: 12; (48) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 11; (49) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 11; (50) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 33 ЗЕО І МО: 11; (51) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 11; (52) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО І МО: 11; (53) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (54) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (55) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 13; (56) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8590 ідентичності з БЕ ІЮ МО: 14; (57) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 13; (58) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 13; (59) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 33 ЗЕО І МО: 13; (60) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 13; (61) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО І МО: 13; (62) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-43 5ЕО ІЮО МО: 15; (63) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 28-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (64) націлювальну послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 15; (65) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8590 ідентичності з БЕ ІЮ МО: 16; (66) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕБО ІЮО МО: 15; (67) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО ІО МО: 15; (68) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 43 5ЕО ІЮО МО: 15; (69) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (70) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО І МО: 15; (71) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5БЕО ІЮО МО: 15; (72) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (73) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-27 5ЕО ІЮО МО: 17; (74) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-27 5ЕО ІО МО: 17; (75) націлювальну послідовність, яка містить зхЕО ІЮ МО: 17; (76) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІО МО: 18; (77) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27
ЗЕО ІЮ МО: 17; (78) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО ІЮО МО: 17; (79) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО І МО: 17; (80) бо націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІЮО МО: 17; (81) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 19; (82) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕБО ІО МО: 19; (83) націлювальну послідовність, яка містить
ЗБЕО ІЮ МО: 19; (84) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 20; (85) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 19; (86) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 33 5ЕО І МО: 19; (87) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО І МО: 19; (88) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО І МО: 19; (89) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5БЕО ІЮ МО: 19; (90) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (91) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕБЕО ІО МО: 21; (92) націлювальну послідовність, яка містить
ЗБЕО ІЮ МО: 21; (93) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 22; (94) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 21; (95) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 33 5ЕО ІЮ МО: 21; (96) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 БЕО ІЮ МО: 21; (97) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО І МО: 21; (98) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5БЕО ІЮО МО: 21; (99) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІЮО МО: 23; (100) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮ МО: 23; (101) націлювальну послідовність, яка містить
ЗЕБЕО ІЮ МО: 23; (102) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8590 ідентичності з БЕО ІО МО: 24; (103) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 23; (104) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮ МО: 23; (105) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮ
МО: 23; (106) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІЮО МО: 25; (107) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮО МО: 25; (108) націлювальну послідовність, що містить ЗЕО ІЮ МО: 25; (109) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 26; (110) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІОЮО МО: 25; (111) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮ МО: 25; (112) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІО МО: 25; (113) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти
Зо 1-30 5ЕО ІЮ МО: 27; (114) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-30 5ЕО ІЮ
МО: 27; (115) націлювальну послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 27; (116) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 28; (117) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО І МО: 27; (118) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІЮО МО: 27; (119) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО ІЮО МО: 27; (120) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІЮО МО: 27; (121) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (122) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (123) націлювальну послідовність, що містить ЗЕО ІЮ МО: 29; (124) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85595 ідентичності з
ЗЕО ІЮО МО: 30; (125) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮ МО: 29; (126) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО І МО: 29; (127) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5БЕО ІЮ МО: 29; (128) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 29; (129) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (130) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІО МО: 31; (131) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5БЕО ІЮ МО: 31; (132) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 31; (133) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з
ЗЕО ІЮО МО: 32; (134) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО І МО: 31; (135) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО І МО: 31; (136) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮО МО: 31; (137) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮО МО: 33; (138) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮО МО: 33; (139) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з 5хЕО ІЮ МО: 34; (140) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-16 5БЕО ІЮО МО: 35; (141) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ
МО: 35; (142) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 36; (143) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-29 5ЕО ІЮ МО: 43; (144) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-29 5ЕО ІЮ
МО: 43; (145) націлювальну послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 43; (146) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 60 44; (147) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-29 5ЕО І МО: 43; (148)
націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-29 5ЕО ІЮ МО: 43; (149) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (150) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (151) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-35 5ЕО ІО МО: 45; (152) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти
Б 20-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (153) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 45; (154) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з
ЗЕО ІО МО: 46; (155) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (156) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (157) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (158) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІО МО: 45; (159) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (160) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-43 5ЕО ІО МО: 47; (161) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 28-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (162) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІО МО: 47; (163) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 48; (164) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (165) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО ІО МО: 47; (166) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 5БЕО ІЮО МО: 47; (167) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІО МО: 47; (168) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО ІЮО МО: 47; (169) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО ІО МО: 47; (170) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (171) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-32 5ЕО ІЮ
МО: 49; (172) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 17-32 5ЕО І МО: 49; (173) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 49; (174) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з 5ЕО ІЮ МО: 50; (175) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-32 5ЕО ІЮО МО: 49; (176) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-32 5ЕО ІО МО: 49; (177) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-32 5ЕО ІЮ МО: 49; (178) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-32 5ЕО І МО: 49; (179) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-32 5ЕО ІЮ МО: 49; (180) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮ
Ко) МО: 51; (181) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5БЕО ІЮО МО: 51; (182) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 51; (183) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕС ІЮ МО: 52; (184) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5БЕО ІЮО МО: 51; (185) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (186) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 51; (187) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 51; (188) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (189) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮ
МО: 53; (190) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5БЕО ІЮ МО: 53; (191) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 53; (192) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 54; (193) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5БЕО ІЮО МО: 53; (194) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (195) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 53; (196) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 53; (197) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (198) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-30 5ЕО ІЮ
МО: 55; (199) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (200) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 55; (201) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЕО ІЮО МО: 56; (202) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО ІЮО МО: 55; (203) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІЮО МО: 55; (204) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (205) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІО МО: 55; (206) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (207) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 115-130 5ЕО
ІО МО: 57; (208) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 57; (209) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 58; (210) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (211) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (212) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130 5БО ІО МО: 57; (213) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5БО ІО МО: 57; (214) націлювальну 60 послідовність, яка містить амінокислоти 300-130 5БО ІО МО: 57; (215) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-130 5БО ІО МО: 57; (216) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-130 5БО ІО МО: 57; (217) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 600-130 5БО ІО МО: 57; (218) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 70-130 5БО ІО МО: 57; (219) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 80-130 5БО ІО МО: 57; (220) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 90-130 5БЕО І МО: 57; (221) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 100-130 5ЕБЕО І МО: 57; (222) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130 ЗЕО ІЮ МО: 57; (223) фрагмент білка екзоспорію, що містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з
ЗБО ІЮ МО: 95; (224) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕБО ІО МО: 96; (225) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 97; (226) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 98; (227) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 99; (228) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮО МО: 100; (229) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 101; (230) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 102; (231) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮО МО: 103; (232) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 104; (233) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 105; (234) націлювальну послідовність, яка містить зЗЕО ІЮ МО: 106; (235) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 108; (236) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО І МО: 109; (237) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 110; (238) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 111; (239) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 112; (240) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 113; (241) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 114; (242) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 115; (243) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 116; (244) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 117; (245) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 118; (246) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 119; (247) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 120; (248) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 121; (249) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 22-31 ЗЕО ІЮО МО: 1; (250) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 22-33 5ЕО ІЮ
МО: 1; (251) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-31 5ЕО ІЮ МО: 1; (252) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-23 5ЕО ІЮО МО: 3; (253) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-25 ЗЕО ІЮ МО: 3; або (254) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-23 5ЕО ІЮО МО: 3.
ІЇ00173| Коли білок або пептид, який представляє інтерес, включає антиген, фермент рекультивації, фермент, прийнятний для руйнування емульсії або гелю в рідині гідророзриву пласту, або антибактеріальний білок або пептид, переважно, націлювальна послідовність або білок екзоспорію містять будь-які з націлювальних послідовностей або білків екзоспорію, приведених вище в абзаці (00167|, для застосування з будь-яким білком або пептидом, що представляє інтерес, або: (1) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО І
МО: 1; (2) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІО МО: 1; (3) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (4) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (5) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕБО ІЮО МО: 1; (6) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 5ЕО ІО МО: 3; (7) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27
ЗЕО ІЮ МО: 3; (8) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО ІЮ МО: 3; (9) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІЮ МО: 3; (10) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38 5ЕО ІЮ МО: 5; (11) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕБО ІЮО МО: 5; (12) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-38 5ЕО ІО МО: 5; (13) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10- 38 5ЕО ІО МО: 5; (14) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО ІЮО МО: 5; (15) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-38 5ЕО ІЮО МО: 5; (16) бо націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-28 5ЕО ІЮ МО: 7; (17) націлювальну
Зб послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО ІО МО: 7; (18) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-28 5ЕБО ІЮО МО: 7; (19) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІЮ МО: 7; (20) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2- 24 ЗЕО ІЮ МО: 9; (21) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО І МО: 9; (22) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО І МО: 9; (23) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮ МО: 11; (24) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5БЕО ІЮО МО: 11; (25) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 11; (26) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 11; (27) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 11; (28) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮ
МО: 13; (29) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 З5ЕО ІЮО МО: 13; (30) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (31) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ МО: 13; (32) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕБО ІО МО: 13; (33) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5БЕО ІЮ МО: 15; (34) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 43 5ЕО ІЮО МО: 15; (35) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 БЕО ІЮ МО: 15; (36) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО І МО: 15; (37) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5БЕО ІЮО МО: 15; (38) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (39) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕБО ІО МО: 15; (40) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 5ЕО ІО МО: 17; (41) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 27 ЗЕО ІЮ МО: 17; (42) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО ІЮ МО: 17; (43) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО І МО: 17; (44) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 19; (45) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 19; (46) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 19; (47) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 19; (48) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 19; (49) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮ
МО: 21; (50) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (51)
Зо націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (52) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ МО: 21; (53) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕБО ІО МО: 21; (54) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 23; (55) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 24 5ЗЕО ІО МО: 23; (56) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮ МО: 23; (57) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 25; (58) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮО МО: 25; (59) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮ МО: 25; (60) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО ІО МО: 27; (61) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІО МО: 27; (62) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 30 ЗЕО І МО: 27; (63) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІО МО: 27; (64) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 29; (65) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (66) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (67) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕБО ІО МО: 29; (68) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (69) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІЮ МО: 31; (70) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО І МО: 31; (71) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮ МО: 31; (72) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (73) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (74) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-29 5ЕО ІО МО: 43; (75) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (76) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО І МО: 45; (77) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (78) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІО МО: 45; (79) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (80) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (81) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕО ІО МО: 47; (82) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5БЕО ІЮ МО: 47; (83) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 43 5ЕО ІЮ МО: 47; (84) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (85) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО ІО МО: 47; (86) бо націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5БЕО ІЮО МО: 47; (87) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (88) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-32 5ЕО ІО МО: 49; (89) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-32 5ЕО ІО МО: 49; (90) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 32 ЗЕО І МО: 49; (91) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-32 5ЕО ІО МО: 49; (92) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-32 5ЕО І МО: 49; (93) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (94) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (95) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 51; (96) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (97) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 51; (98) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮ
МО: 53; (99) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (100) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5БЕО ІЮ МО: 53; (101) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 53; (102) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (103) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО ІО МО: 55; (104) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (105) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО ІЮ
МО: 55; (106) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (107) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (108) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (109) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-130 5ЕО ІО МО: 57; (110) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5ЕБЕО ІЮ МО: 57; (111) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5ЕО 10 МО: 57; (112) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 400-130 5ЕБЕО ІЮ МО: 57; (113) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-130 5БЕБЕО ІЮ МО: 57; (114) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 600-130 5БЕБЕО ІЮ МО: 57; (115) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 700-130 5ЕБЕО ІЮ МО: 57; (116) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 800-130 5БЕБЕО ІЮ МО: 57; (117) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 90-130 5БЕБЕО ІЮ МО: 57; (118) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 100-130 БО ІО МО: 57; (119) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130 5ЕО ІО МО: 57.
І00174| Коли білок або пептид, який представляє інтерес, включає антиген, фермент рекультивації, фермент, прийнятний для руйнування емульсії або гелю в рідині гідророзриву пласту, або антибактеріальний білок або пептид, більш переважно, націлювальна послідовність або білок екзоспорію містять будь-які з націлювальних послідовностей, або білків екзоспорію, приведених вище в абзаці (00167), для застосування з будь-яким білком або пептидом, що представляє інтерес, або: (1) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО І
МО: 9; (2) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІО МО: 9; (3) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮ МО: 9; (4) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 11; (5) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕБО ІЮ МО: 11; (6) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 11; (7) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10- 33 5ЕО І МО: 11; (8) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО І МО: 11; (9) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 13; (10) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (11) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5БЕО ІЮО МО: 13; (12) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ МО: 13; (13) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (14) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5БЕО І МО: 15; (15) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5БЕО І МО: 15; (16) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 5ЕО І МО: 15; (17) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5БЕО ІЮО МО: 15; (18) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (19) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕБО ІО МО: 15; (20) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО ІЮО МО: 15; (21) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 ЗЕО І МО: 17; (22) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО І МО: 17; (23) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО І МО: 17; (24) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІЮО МО: 17; (25) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 19; (26) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 19; (27) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 19; (28) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти бо 10-33 5ЕО ІЮО МО: 19; (29) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ
МО: 19; (30) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (31) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (32) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5БЕО ІЮО МО: 21; (33) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕБО ІО МО: 21; (34) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (35) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5БЕО ІЮ МО: 23; (36) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО І МО: 23; (37) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІО МО: 23; (38) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІЮО МО: 25; (39) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮО МО: 25; (40) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІО МО: 25; (41) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО ІО МО: 27; (42) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 30 5ЕО І МО: 27; (43) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО І МО: 27; (44) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО І МО: 27; (45) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (46) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5БЕО ІЮО МО: 29; (47) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 29; (48) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 29; (49) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 29; (50) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО І0
МО: 31; (51) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮО МО: 31; (52) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮО МО: 31; (53) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (54) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-29 5ЕО ІО МО: 43; (55) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-29 5ЕО ІЮ МО: 43; (56) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-29 5ЕО ІЮ МО: 43; (57) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО ІЮ
МО: 45; (58) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (59) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (60) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (61) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕБО ІО МО: 45; (62) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕО ІО МО: 47; (63) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-
Зо 43 5ЕО ІО МО: 47; (64) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 БЕО ІЮ МО: 47; (65) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІЮО МО: 47; (66) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5БЕО ІЮО МО: 47; (67) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО ІЮО МО: 47; (68) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕБО ІО МО: 47; (69) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-32 5ЕО ІО МО: 49; (70) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 32 5ЕО І МО: 49; (71) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-32 5ЕО ІО МО: 49; (72) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-32 5ЕО І МО: 49; (73) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-32 5ЕО ІЮО МО: 49; (74) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (75) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 51; (76) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 БО ІЮ МО: 51; (77) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (78) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ
МО: 51; (79) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (80) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (81) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (82) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕБО ІО МО: 53; (83) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (84) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (85) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО І МО: 55; (86) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО І МО: 55; (87) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІЮО МО: 55; (88) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (89) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-130 5ЕО ІО МО: 57; (90) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-130 5ЕО ІО МО: 57; (91) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5ЕО ІО МО: 57; (92) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5ЕО
ІО МО: 57; (93) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (94) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-130 5БЕО ІО МО: 57; (95) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 60-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (96) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 70-130 5ЕО ІО МО: 57; (97) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 80-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (98) націлювальну послідовність, яка містить бо амінокислоти 90-130 5ЕО ІО МО: 57; (99) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти
100-130 5ЕО ІО МО: 57; (100) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130
ЗЕО І МО: 57.
ІЇ00175| Коли білок або пептид, який представляє інтерес, включає антиген, фермент рекультивації, фермент, прийнятний для руйнування емульсії або гелю в рідині гідророзриву пласту, або антибактеріальний білок або пептид, ще більш переважно націлювальна послідовність або білок екзоспорію містять: (1) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІО МО: 9; (2) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24
ЗЕО ІЮ МО: 9; (3) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 БЕО ІЮ МО: 11; (4) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 11; (5) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5БЕО ІО МО: 11; (6) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 11; (7) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 13; (8) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 33 5ЕО І МО: 13; (9) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО І МО: 13; (10) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО І МО: 13; (11) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО ІЮО МО: 15; (12) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 5ЕО ІЮО МО: 15; (13) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕБО ІО МО: 15; (14) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО ІЮО МО: 15; (15) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (16) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО ІЮ
МО: 15; (17) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5БЕО ІЮО МО: 17; (18) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 ЗЕО ІЮО МО: 17; (19) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІЮ МО: 17; (20) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 19; (21) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 19; (22) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 19; (23) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ
МО: 19; (24) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (25) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (26) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ МО: 21; (27) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕБО ІО МО: 21; (28) націлювальну послідовність, яка містить
Зо амінокислоти 5-24 5ЕО ІО МО: 23; (29) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 24 5ЕО ІЮ МО: 23; (30) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮ МО: 25; (31) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІО МО: 25; (32) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІЮО МО: 27; (33) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 ЗЕО ІЮО МО: 27; (34) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІО МО: 27; (35) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 29; (36) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 33 ЗЕО І МО: 29; (37) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 29; (38) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІО МО: 29; (39) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮО МО: 31; (40) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮО МО: 31; (41) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-29 5ЕО ІО МО: 43; (42) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-29 5ЕО ІО МО: 43; (43) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-29 5ЕО ІЮ МО: 43; (44) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІЮ
МО: 45; (45) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (46) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (47) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (48) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО ІО МО: 47; (49) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 5ЕБО ІЮ МО: 47; (50) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІЮО МО: 47; (51) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО ІЮ
БО МО: 47; (52) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (53) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5БЕО ІЮО МО: 47; (54) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-32 ЗЕО ІЮО МО: 49; (55) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-32 5ЕО ІО МО: 49; (56) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-32 5ЕО ІЮО МО: 49; (57) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-32 5ЕО ІЮ МО: 49; (58) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮ
МО: 51; (59) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (60) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5БЕО ІЮО МО: 51; (61) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 51; (62) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 53; (63) націлювальну послідовність, яка містить бо амінокислоти 8-33 5ЕБО ІЮ МО: 53; (64) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти
10-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (65) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ
МО: 53; (66) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІЮО МО: 55; (67) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО ІЮО МО: 55; (68) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (69) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-130 5ЕО ІО МО: 57; (70) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-130 5ЕО ІО МО: 57; (71) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5ЕО ІО МО: 57; (72) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5ЕО
ІО МО: 57; (73) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (74) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-130 5ЕО ІО МО: 57; (75) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 60-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (76) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 70-130 5ЕО ІО МО: 57; (77) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 80-130 5ЕО ІО МО: 57; (78) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 90-130 5ЕО ІО МО: 57; (79) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 100-130 5ЕО ІО МО: 57; (80) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130 5ЕО
ІО МО: 57; (81) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 4-30 5ЕО ІЮ МО: 59; (82) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 6-30 5ЕО ІЮО МО: 59; (83) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 61; (84) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕБО ІО МО: 61; (85) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 61; (86) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 ЗЕО ІЮ МО: 63; (87) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІО МО: 63; (88) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІО МО: 63; (89) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮО МО: 63; (90) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮО МО: 65; (91) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО ІО МО: 67; (92) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІЮО МО: 67; (93) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІЮ МО: 69; (94) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО ІЮ
МО: 69; (95) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО ІЮ МО: 69; (96) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-42 5ЕО ІЮО МО: 75; (97) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-42 5ЕО ІЮ МО: 75; (98) націлювальну послідовність,
Зо яка містить амінокислоти 15-42 5ЕБО ІО МО: 75; (99) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-42 5ЕО ІО МО: 75; (100) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-42 ЗЕО І МО: 75; (101) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮ
МО: 77; (102) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІЮО МО: 81; (103) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО ІЮО МО: 81; (104) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО ІО МО: 81; (105) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-38 5ЕО ІЮО МО: 81; (106) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО ІО МО: 87; (107) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІО МО: 87; (108) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО ІЮ
МО: 89; (109) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО І МО: 89; (110) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-93 5ЕО ІЮО МО: 91; (111) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-93 5БЕО ІО МО: 91; (112) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-93 5ЕО ІЮО МО: 91; (113) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-93 5ЕО ІО МО: 91; (114) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-93 ЗЕО ІЮ МО: 91; (115) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 60-93 5ЕО ІЮ
МО: 91; (116) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-130 5ЕО ІО МО: 93; (117) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5ЕО ІЮ МО: 93; або (118) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5ЕО І МО: 93. 00176) Білок або пептид злитого білка, що представляє інтерес, описаного вище, може включати антиген.
І00177| Білок або пептид злитого білка, що представляє інтерес, описаного вище, може включати фермент рекультивації. 00178) Білок або пептид злитого білка, що представляє інтерес, описаного вище, може включати фермент, прийнятний для руйнування емульсії або гелю в рідині гідророзриву пласту.
І00179| Білок або пептид злитого білка, що представляє інтерес, описаного вище, може включати антибактеріальний білок або пептид.
С. Рекомбінантні представники сімейства Васіїйи5 сегецв5, які експресують злиті білки 001801 Крім того, даний винахід стосується рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеи5, які експресують злитий білок. Злитий білок може являти собою будь-який зі злитих білків, описаних вище в розділі І.В. бо ІЇ. Модулювання експресії злитого білка в рекомбінантних представниках сімейства Васійи5 сегеиб5, які експресують злитий білок, за допомогою спільної надекспресії з білками- модуляторами 00181) Рекомбінантні представники сімейства Васійи5 сегеи5, які експресують злиті білки, описані в даному описі, експонують білок або пептид, що представляє інтерес, який є частиною злитого білка, зовні їхніх спор. Було виявлено, що надекспресія певних білків екзоспорію (позначаються в даному описі як "білки-модулятори") у рекомбінантному представнику сімейства Васійн5 сегеи5, який також експресує злитий білок, дозволяє модулювання (тобто збільшення або зменшення) рівня експресії злитого білка, тим самим, збільшуючи або зменшуючи кількість білка або пептиду, що представляє інтерес, який експонується зовні спори.
Здатність контролювати кількість білка або пептиду, що представляє інтерес, який експонується зовні спори, є корисною, оскільки в деяких випадках є бажаним збільшення кількості експонованого білка або пептиду, що представляє інтерес. Наприклад, коли білок, який представляє інтерес, являє собою фермент, який деградує джерело поживних речовин рослин, може бути бажаним збільшення кількості ферменту, експонованого на спорі, щоб могла бути досягнута більш висока ферментативна активність і більш висока стимуляція росту рослин при внесенні спор у середовище для росту рослин або нанесенні спор на рослину, або насіння рослини, або область, яка оточує рослину або насіння рослини. В інших випадках є бажаним зменшення кількості білка або пептиду, що представляє інтерес, який експонується. Наприклад, коли білок або пептид, який представляє інтерес, включає посилюючий імунну систему рослин білок або пептид, може бути бажаним зниження кількості білка або пептиду, експонованого на спорі, оскільки надлишкова стимуляція імунної системи рослини може приводити до небажаних ефектів. 00182) Як додатково описано в даному описі нижче, рекомбінантні представники сімейства
Васійи5 сегец5, які експресують білок-модулятор, можна використовувати в будь-яких з різних галузей і способів, описаних у даному описі, і для будь-яких застосувань, описаних у даному описі. Наприклад, рекомбінантні представники сімейства Васійи5 сегец5, які експресують білок- модулятор, можна використовувати в способах стимуляції росту рослин; способах захисту рослин від патогенів; способах підвищення стійкості рослин до стресових впливів; способах іммобілізації спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 на рослинах;
Зо способах стимуляції проростання насіння рослини; способах доставки нуклеїнових кислот у рослину; способах доставки нуклеїнових кислот тваринам, комахам, хробакам (наприклад, нематодам), грибам або найпростішим; способах доставки ферментів у рослину; способах зміни властивостей рослин; способах доставки білків або пептидів тварині; вакцинах і способах досягнення імуногенної відповіді в індивідуума; способах зменшення вмісту забруднюючих домішок у навколишньому середовищі; способах фіторекультивації забрудненого грунту; способах обробки рідини гідророзриву пласту для руйнування емульсії або гелю в рідині; способах дезінфекції поверхні; і для таких застосувань, як обробка або дегумування мастила, масла або жиру; переробка шкур у шкіру; одержання біопалива, біодизелю або біоетанолу; переробка або конверсія цукрів; обробка крохмалю; переробка паперу або льону; обробка побічних продуктів тварин або грибів або виділення амінокислот; спрямоване розщеплення технічних відходів; добавки в їжу і корми; дієтичні добавки; корми для тварин; промислове очищення; переробка зерна; косметичне виробництво; дезодорація; переробка продуктів харчування або напоїв; оптимізація пивоварства або добавки для пивоварства; детергентні добавки або переробка тканин або пряжі. 00183) Для багатьох застосувань білків (наприклад, ферментів), існує крива біологічної відповіді, де оптимальна концентрація білка або ферменту приводить до бажаного ефекту, і надлишок білка або занадто мала кількість білю»а приводить до небажаних або зменшених ефектів. Одним прикладом цієї біологічної кривої є демонстрація того, що біологічний лікарський засіб, такий як білковий лікарський засіб інсулін для лікування діабету, вимагає оптимальної дози для зниження рівнів цукру в крові в пацієнтів з діабетом. Занадто мала кількість інсуліну приведе до недостатньої відповіді і підтримки небажаних підвищених рівнів цукру в крові і потенційної гіперкаліємії. Занадто велика доза інсуліну приводить до низьких рівнів цукру в крові і потенційної гіпокаліємії і пов'язаної з нею захворюваністю.
І00184| Подібні криві біологічної відповіді існують для багатьох білків і пептидів, що представляють інтерес, що містяться в злитих білках, описаних у даному описі. Таким чином, для різних галузей застосування і способів для рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеи5, описаних у даному описі, може бути бажаним модулювання рівня експресії білка або пептиду, що представляє інтерес, на екзоспорії. Шляхом збільшення або зниження рівнів експресії білка або пептиду, що представляє інтерес, на екзоспорії рекомбінантного бо представника сімейства Васйи5 сегецв, рівні експресії можуть бути оптимізовані для підтримки загального рівня експресії білка або пептиду, що представляє інтерес, при найбільш ефективній концентрації. 00185) Наприклад, було б бажаним модулювання рівнів експресії злитого білка у випадках, що коли білок або пептид, який представляє інтерес, включає білок або пептид, залучений у пряму передачу сигналу в рослинах, такий як пептид флагеліну йЯд22, і рекомбінантний представник сімейства Васійн5 сегеи5, який експресує злитий білок, наносять на рослину для забезпечення сприятливого ефекту на рослину. Таке модулювання було б корисним, щоб уникнути сигнальної відповіді, яка є досить високою, щоб приводити до шкідливих відповідей рослини (наприклад, занадто висока відповідь на йд22 може приводити до некрозу), або сигнальної відповіді, яка є досить низькою, щоб забезпечити низьку або недостатняю відповідь на пептид.
І00186| Крива біологічної відповіді також може мати значення для рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегец5, які експресують злитий білок, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає антиген. У таких випадках, було б бажаним модулювання рівня експресії злитого білка, що містить антиген, для досягнення оптимального діапазону для забезпечення належної імунної відповіді у тварини. Занадто висока доза може приводити до набряку області ін'єкції і небажаному запаленні, у той час як занадто низька доза може привести до недостатньої вакцинації або імунної відповіді.
ІЇ00187| Модулювання рівня експресії злитого білка на екзоспорії рекомбінантного представника сімейства Васійн5 сегеи5 також забезпечує користь, наприклад, коли рекомбінантний представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 використовують для руйнування емульсії або гелю в рідині гідророзриву пласту. Полісахаридні гелі часто використовують у гелях гідророзриву пласту. Ці гелі вимагають руйнування. Коли розчин гелю готовий до руйнування, для оператора є бажаним, щоб руйнування, яке являє собою ферментативну реакцію, відбувалося з конкретною оптимізованою швидкістю. Занадто швидке руйнування гелю може привести до небажаних побічних ефектів, таких як нагромадження нерозщеплених фрагментів гелю. З іншого боку, занадто повільне руйнування приводить до тривалого часу очікування і збільшеннюя витрат. З використанням способів, описаних у даному описі нижче, рівні ферментів на екзоспорії рекомбінантного представника сімейства Васійц5 сегеив5, який
Зо експресує злитий білок, який містить фермент, прийнятний для руйнування емульсії або гелю в рідині гідророзриву, можна модулювати для забезпечення наявності оптимізованого рівня ферменту для руйнування гелів, що приводить до кращих результатів при використанні в польових умовах.
І00188| Передбачається рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеив5, який експресує: (ії) злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальуа послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегец5; і (ії) білок-модулятор, де експресія білка-модулятора збільшена в порівнянні з експресією білка- модулятора в представнику сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах. Білок- модулятор, коли він спільно експресується зі злитим білком у рекомбінантному представнику сімейства Васійи5 сегеи5, приводить до збільшеної або зниженої експресії злитого білка в порівнянні з рівнем експресії злитого білка в рекомбінантному представнику сімейства Васійй5 сегеиб5, який не експресує білок-модулятор на збільшеному рівні, у порівнянні з експресією білка-модулятора в представнику сімейства Васійц5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах.
І00189| Білок-модулятор може включати білок Ех5У, білок Ех5ЕА/ВхрВ, білок СоїУу, білок
СОЮ, білок ЕХ5ЕВ, білок ІпПпАТ, білок ІпрАг, білок Ех5у, білок Ех5Н, білок ХісА, білок Х|СВ, білок
ВсІС, білок Асрс, білок ІппАЗ, аланінрацемазу 1, аланінрацемазу 2, білок ВСІА, білок ВСсСІВ, білок
ВхрА, білок ВсіІЕ, білок ВетгА/ВА5З3290, білок СоїЕ, білок Ех5А, білок Ех5К, білок Ех5В, білок
Уаро, білок Та, білок БОВАТ, білок БОБА2, варіант будь-якого з них або комбінацію будь-яких з них.
І00190| Наприклад, білок-модулятор, коли він спільно експресується в рекомбінантному представнику сімейства Васійй5 сегеи5 зі злитим білком, приводить до збільшеної експресії злитого білка відносно рівня експресії злитого білка в рекомбінантному представнику сімейства
Васійиє сегеи5, що не експресує білок-модулятор на збільшеному рівні, у порівнянні з експресією білка-модулятора в представнику сімейства ВасшШи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах. Коли білок-модулятор, коли він спільно експресується в рекомбінантному представнику сімейства Васіїййи5 сегеи5 зі злитим білком, приводить до збільшеної експресії злитого білка, білок-"модулятор може включати білок ВсСІВ, білок СОїЕ, білок ВхрВ, білок Со, білок ВСІА, варіант будь-якого з них або комбінацію будь-яких з них. бо 00191) Альтернативно, білок-модулятор, коли він спільно експресується в рекомбінантному представнику сімейства Васійн5 сегеи5 зі злитим білком, приводить до зниженої експресії злитого білка відносно рівня експресії злитого білка в рекомбінантному представнику сімейства
Васійиє сегеи5, що не експресує білок-модулятор на збільшеному рівні, у порівнянні з експресією білка-модулятора в представнику сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах. Коли білок-модулятор, коли він спільно експресується рекомбінантному представнику сімейства Васійи5 сегеив5 зі злитим білком, приводить до такої зниженої експресії злитого білка, білок-модулятор може включати білок ВсіІС, білок Арсс, білок х|сВ, варіант будь-якого з них або комбінацію будь-яких з них.
І00192| Наприклад, білок-модулятор може включати білок СоїО, білок ВСсІіВ, білок
Ех5ЕА/ВхрВ, білок х|сВ, будь-який їхній варіант або будь-яку їхню комбінацію. 00193) Для простоти посилання опис білків-модуляторів і їх ЗЕО ІЮ МО приведені в таблиці 2 нижче.
Таблиця 2
Амінокислотні послідовності білків-модуляторів
І00194| Багато з модуляторів мають гомологи, паралоги або генетичні перебудови. Таким чином, багато білків, які мають щонайменше 7095 гомологію з будь-якою з модулюючих послідовностей, приведених вище в таблиці 2, зберігають здатність виступати як білки- модулятори при надекспресії в рекомбінантному представнику сімейства Васійн5 сегеи5, що також експресує будь-який зі злитих білків, описаних у даному описі. Крім того, багато з модуляторів (наприклад, ВСІА, ВсіВ і ВсІЕ) мають внутрішні області повторів, що можуть значно відрізнятися між штамами. Додавання або зменшення кількості повторів у внутрішній області повторів можуть впливати на загальну гомологію послідовностей, але очікується, що якщо гомологія М- і С-кінцевих областей білка зберігає щонайменше 7595 ідентичності послідовності з будь-якою з амінокислотних послідовностей білків-модуляторів, приведених у таблиці вище, гомологи будуть зберігати здатність виступати як білки-модулятори.
ЇО0195| Таким чином, наприклад, білок-«модулятор може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 7095 ідентичності послідовності з будь-якої з «ЕО ІЮ МО: 123-156. 00196) Білок-модулятор може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 7595 ідентичності послідовності з будь-якої з БЕО ІЮ МО: 123-156.
І00197| Білок-модулятор може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності послідовності з будь-якої з БЕО ІЮ МО: 123-156. 00198) Білок-модулятор може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності послідовності з будь-якої з БЕО ІЮ МО: 123-156.
І00199| Білок-модулятор може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності послідовності з будь-якої з БЕО ІЮ МО: 123-156. 002001) Білок-модулятор може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9895 ідентичності послідовності з будь-якої з БЕО ІЮ МО: 123-156. 002011) Білок-модулятор може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності послідовності з будь-якої з БЕО ІЮ МО: 123-156.
І00202| Білок-модулятор може містити амінокислотну послідовність, яка має 100905 ідентичності послідовності з будь-якої з зБЕО ІЮ МО: 123-156. (00203) Наприклад, білок-модулятор може включати 5ЕО ІЮ МО: 124, 126, 134, 135, 143 або 144.
І00204| Рекомбінантні представники сімейства Васійи5 сегеи5, які експресують білок- модулятор, можуть містити вектор, який кодує білок-модулятор. Наприклад, вектор може включати багатокопійну плазміду. Багатокопійні плазміди дозволяють високі рівні експресії білка-модулятора.
І. Промотори для експресії злитих білків і/або білків-модуляторів у рекомбінантних представниках сімейства ВасіШи5 сегеи5
ІЇ00205| Коли злитий білок містить націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій представника сімейства
Васійи5 сегеи5, ДНК, яка кодує злитий білок, у прийнятному випадку знаходиться під контролем промотору споруляції, що викликає експресію злитого білка на екзоспорії ендоспори представника сімейства В. сегеи5 (наприклад, нативний промотор БсСІА із представника сімейства В. сегецйв5).
І00206| Таким чином, будь-які зі злитих білків, описаних вище в розділі 1.8, можна експресувати у рекомбінантному представнику сімейства Васійи5 сегеи5 під контролем промотору споруляції, що є нативним для націлювальної послідовності білка екзоспорію або фрагмента білка екзоспорію злитого білка, або частини такого промотору.
І00207| Аналогічно, будь-який з білків-модуляторів, описаних вище в розділі ІЇ, можна експресувати під контролем їх нативного промотору або його частини. (00208) Будь-який зі злитих білків або білків-модуляторів можна експресувати під контролем промотору споруляції з високою експресією.
І00209| Промотор споруляції з високою експресією включає промоторну послідовність полімерази сигма-К, специфічної до споруляції.
І00210| Для простоти посилання, ілюстративні нуклеотидні послідовності промоторів, які можна використовувати для експресії будь-якого зі злитих білків або будь-якого з білків- модуляторів у рекомбінантному представнику сімейства Васіїйи5 сегеи5, представлені в таблиці
З нижче разом з їхньою ЗЕО ІО МО. У таблиці 3 також надані ілюстративні мінімальні промоторні послідовності для багатьох промоторів. У таблиці З промоторні послідовності полімерази сигма-К, специфічної до споруляції, у промоторах зазначені напівжирним шрифтом і підкресленим текстом. Деякі з послідовностей мають множину послідовностей сигма-К, які перекриваються одна з одною. Перекривання зазначені подвійним підкресленням у таблиці.
Промоторні послідовності знаходяться безпосередньо вище ініціюючого кодона для кожного з зазначених генів. Іншими словами, у послідовностях, показаних у таблиці З нижче, останній нуклеотид промоторної послідовності безпосередньо передує першому нуклеотиду ініціюючого кодона для кодуючої області гена, що кодує зазначений білок.
Таблиця З
Промоторні послідовності для експресії злитих білків і білків-модуляторів у рекомбінантних представниках сімейства Васійи5 сегеи5
ТТ СТТААТССТТТАСССТТТАСТТ ТТОТААААСТТОАТАСАСТТ
ССАТССООСТСТОТААТТТСТААТТСАТСААТАААТОСТСТТСО
Промотор ЕхвУ (В. сегеив СААДААДДаССсСтТатТААТТТТАТСАТАААСААТТАААСОвдатаАасс
Е837/76) (ЗЕО 10 МО: 157) ТААААИСАИаСТААСаСОААААТААДААААТААААсаСсСсАХасттат
І АААСАаСАТААТТССАССТТОССТТАТССТСОТТТСОаССТАТТТА
АААДААааТтстТТаАалтатаАССАААТСТОСТСААСТОСААТ
АТСТТАТТААТИТАААТАСААДАСААСААСАТААССА
Мінімальний промотор ЕхзУ (В. 158
АССАССТАССОАСОАТССААТСТаТАСАТТССТАОСТатАССА
ААТОаСААСАТТААТАТСОАСТААСАСТТаТтТСТТАСТатТТтОАТТТ
Промотор ЕХ5ЕА/ВхрВ (В. ААСТТасСтТІсСтТаТатаСаАТТСААТаАСТТасСаТтаАТОТТАСОСАТТТ апіпгасів Зіегте) (ЗЕОІО МО: | ААААСТАААТААТаОДаСТААаСсАТОСАТТОСОЯТОССАСААТТА 159) ТСТаССАСССААТССАТОСТТААСОАСТАТТАТТАТОТАААТТТ
СТТААААТТОСЙСААСТТаТСТАСААСАТАСААССТаТтостттте
АТТААСТОаАААСТАСААДАСАСАТАААСаАСТОАААААС мінлальний промотор. АСАТАСААССТОТОСТТТТСАТТААСТОАААСТАСАДАСАСАТА х5ЕА/ВхрВ (В. апіпгасів ААССАСТСАААААС
Зіегпе) (ЗЕО І МО: 160
ТАСААСААСААСасСссаАСТАСТТТАТИаТСОСААТТАСАСОЯСОС
САДАСААСААСТТТАСАТТТОСТСТОСасСААТТТТТТАСАСОАдА
Промотор Соїу/Сої2 (В. АААДААТТАСАТАТАТСТССОТТПТТТТАТАСАСТатТаСОаААААСАТТ апінгасів бієтпе) (ФЗЕОІО МО: | ТАССТОаААААСАСАТССАСТААДАТАДИаСАТОаТСТТТТТТТАТАТТ 161) СТАТТАТОТАСАТСССТАСТАТАТАААТТОССТОасСТТ ТТАТССОТА
АСААТТААСОТААТАТСААССАТАТССССОТТСАТАТТатТАСТАС тТатАТаТСАСААСТСАСОСАСААССАСТОААСАТА соатьнн промотор ТСААССАТАТССССОТТСАТАТТСТАСТАСТОТАТОТСАСААСТС оїУ/Сої2 (В. апінгасів біегпе) АССАСААССАСІСААСАТА
ЗЕОІО МО: 162
ТААСТСААТСТТААСАСАААТТОДОапАдаСаСасСАССАСТТСИТ
СатТАСААСААСОСААпААСААаТТапОСпАТАСАССАСТАТТСТ
Промотор СОЮ (В. сегеив) ТАТТСАСТОаАТТТАОСАСОаСООаСаТААСАССАСААААСАТТСА (5ЕО 10 МО: 163) І СОТ аАТТ САСОСТАТСАТАТСТТАССАТАДАТАТААТАТТААТ
І ТТТАААССАСААТСТСТАСАТОТТОАСАТТаТСоСТТТТТАТТТИаТ
ТСТТАСАдААСААСОАТТ ТТ ТААСОАААСТТСТТАССАССТТАТО
ААТАТААСТАТААТАСТАСАСОСАТТТАТТСАССТАСИТ
АССТТОАТТСАСОСТАТСАТАТСТТАСОСАТАААТАТААТАТТАА
Мінімальний промтор СОЮ (В. | ПІГТТТАААБОАСААТСТСТАСАТОТТОАСАТТатТОоСТТТТТАТТТО сегеив) (ЗЕО ІО МО: 164) ТТСТТАСАААСААСОАТТТТТААСОАААСИТТСТТАССАССТТАТ
СААТАТААИТАТААТАСТАСАССОСАТТТАТТСАССТАССИТ
САТАДАААТСТАСТТ ТТ СТТаТСААДАСАСТАТОаСТТАТАТОССТ
ССТСТТТ ТАТ ТОСТ ТТ СТТТСАТТТСТАААТААСАТТТТСААС
Промотор ЕХ5ЕВ (В. сегеив ТСТАТТСАТАСТАТТСТТТСААСТТТАСИТТАСАААСТАТТТСТОа
Е837/76) (ЗЕО 10 МО: 165) ТАДАСИаТтТАаТаТтт тот тТатТАСТАТАСОСАСТТАСТТТТАТОС
І АТААСАСТАСАССТСТаСАСТАТТСАСТАТАААТТ ТТ САТАТАТТ
АТАТТатТасСтТТатоСААДААСАТатастТАТТАСТоАСасСаАТСТ
АААТОАААСАААСОАСТаААААТ
Мінімальний промотор ЕХХЕВ (АСТАТТСАСТАТАААТТ ТТ САТАТАТТАТАТТаТОаСТТаТССААА (В. сегєив Е837/76) (5ЕО 10 АСАТаТасСТТАТТАСТСАСОаСОАТСТАААТОАААСАААСсАСТ
МО: 166 СААДАТ
ААТАСАТОАТААТОАААТОСОАТТТТОТОТТТТАТАТАСТОААТТ
АТСАААТАТТОТОТАСАТОАААСАААСАТААААТССССАТТААА
Промотор ІппАЧ (В. СТОССТСТАТОСАААТТАТАААТТОТТОСАТАААААСТТТСААТА
Іигіпдієпвів зегомаг Кигеїтакі ТТТТСАСАДААСАТТаТТаААТТатаАТАТАТТСИатАТасСтТААСТ штаму НО-1) (ЗЕО ІО МО: 167). | АТОАААТТТТТАСАААТАТАТТАААААСАТТАСАТААТАТСАСТА
ААТАТТОДАААААТАТТОААТТТТТААТААААТТТААТТТОТААТА
САТАТТАТТТАТТАСОССАССАДАТААССО
Мінімальний промотор ІПпАї | ААААТТТААТТТОТААТАСАТАТТАТТТАТТАСОССАСОСАААТАА (В. Іпигіпдіепвів зегомаг Китгеїакі | ССС штаму НО-1) (ЗЕО ІЮ МО: 168
ААТТОТОСАТАТТОТСТТТТАААТТТТСТАТСТААСТТАТТТААТА
ТАТААТАААТААСТСТТТТТТОТОАСТТТТТТТаАТАССАССТАА
АТААТСАСТАСАСОСТСТОАССАСАССАСТОСАСОССАТСАТ ват 210298) (КО ІС МО тв) ТСТАТААСССААТАТТТАСТАТТОСАТСАТТАТАСААСТАТСТСТ ' ТТТТТАТТОТАТАТАСААССОСОСАТАССТСТАТАТТАТАСААС
ТТАТАТАТАТТОТОСАТТОСАТАТТАТСААТТАТСТАААТТТТАА
СТСТТаттАСААТТААТААСОСАССАААТАСТА (В. тися птаму 219298). АСТТАТАТАТАТТОТОСАТТССАТАТТАТСААТТАТСТАААТТТТ
ЗЕОО МО. 170 ААСТСТТОТТАСААТТААТАДСССАССАААТАСТА
ААТОАСОТТТТСААСТТТОАТТАТСАТТСАТОТТТОСТАТТТТАА
Промотор Ех») (В. Іпигіпдієпзіз | САСАААСАТАТААСТСААСТАСТТТТТТСААТОССАТСТТТТАТА серовару Кигзіакі) (ЗЕО ІЮ МО: | СТАСТТАСААТАСОААААСАСТСААСТАТААСААААСТААССА 171) ССАДАТАА игіпдієтеі серовару кі м АСТАСТТТТТТСААТОССАТСТТТТАТАСТАСТТАСААТАСОАА
ЗРО МО: 12 ААСАСТСААСТАТААСААААСТААССАССАААТАД
АТАТОСТААТОСТТАСТТТТТАТАСТСААСТТААААТОТОСТТТТ
СОАССТААСАСАТАААССТОСАААДАТААААТАААСТСТТАДО
Промотор ЕХ5Н (В. сегеив ТТТАССОТОТТТААТСТААССАСТСААТТАТТАААААСАТАТААТТ вх, ААТАТОТОАСТСАТОААСАТААТТАААТААТОТТТТСААСТТТА ' АТТАТССТТСАТОТТТОСТАТТТТААССАСААСАААТААСТСААТ
ТАСТТТТТТСОСАТТОСАТСТТТТТТААСТСТТАТААТАССААААС
АСТСААСТАТАААААТАДСТАДОСАСОАААТАД
Мінімальний промотор ЕхеН (В. ААТАТОТСАОТСАТОААСАТААТТАДАТААТОТТ ТТОААСТТТА сегеив Е837/76) (ЗЕО ТО МО: 01 ТАТООТТСАТОТТТОСТАТТТТААОСАСААСАААТААСТСААТ соте ТАСТТТТТТСОСАТТОСАТСТТТТТТААСТСТТАТААТАССААААС
АСТСААСТАТАААААТАДСТАДОСАСОАААТАД
ТАТААААТААААССОСОТОТАТТТОСТАСТОАТОСАСТАТТОТО
ТаСОССтТАДАААТОСААТТТСАСААССАСАТССАСАТСТТОТТ
Промотор хсА (В. (пигіпдієпвзіз | СТАСААСААТСТТОТААТТСАТТОАТОААТТТТАСААССТСААС серовару Кигзіакі штаму НО7З) | ТАСАСААТОАСААСАСССАТОСТОТТТАТТТТООТТАСААСТСА (ЗЕО ІО МО: 175) ТТААТОТСАСТОСТТАТСТТСТТОтТТТОТАТТТАСАТТААТААСА
ТАТТОСАСТТОАССАСАТТТОСТСАСААТСТСААСАССТТТТТТ
ТТААДАТАСОСОДААСАОСАТААСОСААССТОСААТТ
Мінімальний промотор ХСсА (В. | ТСТТОТТТОТАТТТАСАТТААТААСАТАТТОСАСТТОАССАСАТ
ІШигіпдіепзі5з серовару Кигєїакі | ГТС САСААТСТСААСАССТТ ПТ ТТ ТАААТАСИаСа,ААдАсСАсаИ штаму НО7З) (ЗЕО ІЮ МО: 176) | АТААСОСААССТОСААТТ
АТСААСТТТТАСААДАСТАААСОСТАААОСАТТААСАААСТОСА
ТТООСОААТТАТТААССТОТТАТТОСТОТАСАССТОТАТОСОТТ
Промотор х/сВ (В. (пигіпдієпвіз | АСТОСТТТТТТАТТАСТТТТАТАТААТТОСАТТОССАТССТТОСА серовару Кигеїакі штаму НО7З) | сАаСсСаТттТАСТТасАТТАТтТАаСсСтТАТТИаСАсСОсСАаСАаСАаСАА (ЗЕО ІО МО: 177) ТСАТТОАААССАТТАСАССАТАТТТТАТОССАСААТААТАТАТТ
ТТСАТААТАССАСААДААССОСАСТТТААААСААТОАСОСААС
ОСАДАТАААСАСТТОТТСАТАТАСТАДАТАСАСАСАА
Мінімальний промотор х/)сВ (В.
ІШигіпдіепзі5з серовару Кигєїакі |( АСИСААДАТААДАСАсСТ тат САТАТАИТАААТАСАСАСІАА штаму НО7З) (ЗЕО ІЮ МО: 178)
ТОАДАСТАТСТАСАССТААТТТАССОСАААСОААТСТСАСОСАСАА
САСТТТСОСААСАССТАТАТТТТААДАТТТААТАААААААСАСАС
! ТОСОСАСТСАСАДАТТАТАААССТАССТООССТТСАААТСАААА вісте) а ши АТТТСАСТААААССАТАТТАТСААТАСОСАСАДААТОСААААДА ' СОССТТАТСАТААСОСОТТТТТТОСАТТТТТТСТТСАААСАДАС
САТТТТАСТАТСАССАТТТААСТААТТТТТОСАТСТАСТАТСАТО
АСТТТСАТТСАСАТТСТСАТТАСАДАССАСАСАТТТА апілтасе Соте ЗВО АССАТТТААСТААТТТТТОСАТСТАСТАТСАТОАСТТТСАТТСАС тво 7 ТАТТСТСАТТАСАААОСАСАСАТТТА
САСТАТОТТТАТТСАСОАТААААТАТАССАСТАСАСТСТСТСОСТ
СТТАТТАТСТАССАТСТСТСТААТССАТСАТТТОТТТСАТТТАСТ
Промотор Асрс (В. сегеце ТААААТТОТАААТААААТСАСАТСАТТТОТСААТТАТААТТОТСА
ЕВ37/76) (БО 10 МО: 181) ТТТОСАСААТТАДАСТТСТСААААТААТТСТСАТСАТТТТТТСТС ' АТСТТТСТААТАТАССАСАТАСТАСТАТАТАТАСААААСАСААТА
ТОСАДАТСТТСАТАСАДАДААТАТТАТТТТТСОСАТАТАТААТАТ
ААСТОАТТТТСТААСАТСААОСАСССТАСАТ
(В согоце БЕВЗ) (БОЮ. АСАСААТАТОСАААТОТТСАТАСААААААТАТТАТТТТТССАТА
МО тво ТАТААТАТТААСТОАТТТТСТААСАТСААОСАСОСТАСАТ
АТАСТОАСТААТАТОСТААТОСАТАСАТТАААТАСТАТАСАДА
АТАТТТААТТСТТАТТТТТАТТАААААДАССАТОААТСССАСАТТТ
Промотор ІппАЗ (В. АСТОСОТТТТОАТТОТААСТААСААСАТАТААААСТТСАСТСТТ
ІШигіпдіепзі5з серовару Кигєїакі | АТГТАТАйСАСАСаСТОТаТатт тат т ттТАТАТСТТАТИТАТТТСАСС штаму НО7З) (ЗЕО ІЮ МО: 183) | СТОСАТАДАААААТАТТТСТСААСАТТТТАТТТОТТОАААААТАТ
ТОАДАТАТТССТАТТАТААССААТАТТАТОТТСТТАТССОСАДАДА
АССАТААТТТОСАСАСАСТОСОСАСОАААТАСА
Мінімальний промотор ІпПпАЗ | ТСТТАТСТАТТТСАСССТОСАТАААААААТАТТТСТСААСАТТТТ (В. Іпигіпдіепзіз серовару АТТТОТТОАААААТАТТОААТАТТОСТАТТАТААСОААТАТТАТО
Кигеіакі штаму НО7З3) (ЗЕО І. | ТТОТТАТССОСААААААССАТААТТТОСАСАСАСТОСОСАСОА
МО: 184 ААТАСА
СТТОСТСАССААТААСТОСТОАОСОСАСААТТОСТТОАТСТТОО
СТТТАСААТТОСАССАТТОАССАААСАСТСТТТААСОСТОСТСО
Промотор аланінрацемази 1 (В. САТАДАСааАСТАСААТАТАТОСТОИСТаТтСсСТААдАсатттАадас сегеиз Е837/76) (ЗЕОІО МО: | СОААССАССТАТТААТОСТТОСТООТТСАСТТАСАСАСАЛССА 185) АСТОААСТАААСТТСТТАСАСОТОСТОАТАТАТОТОСАССАСО
ТСТТТТСТТАСТТТОААССОТОСАТТТСАТААААСАДОСАТАТА
АААСААТААССТТСОСАТАТСОТОТАТААССААСТОТАТТТ
Мінімальний промотор аланінрацемази 1 (В. сегеи58 / | АТААААСААТААССТТСОСАТАТСОТОТАТААОСААСТОТАТТТ
ЕВ837/76) (ЗЕО ІЮ МО: 186
САТТТСАААТААТОААСОСТТССАТТОААТСОСАССТАТТТТСА
Промотор аланінрацемази? | ААТСААТТТСАСТАТАТТОАТССАССАТТТОААТАСААСТАТСА гототег (В. Пиіпдієпвів АСАССААСТТТААСТТОАТОСААТОСАСАТТОТАСАААСАТТОТ ге овасу когегакі ота ноз) | ААТТСТОСТСТТСТОСОТАТАТААТАСТТ СТ ТОАОССТАТТАТ (го 5 МО. 187) У АТСАТОСТСААААТТОСОААААТТСТАСТАСТТТОАСТАССАТА ' ТТОДАДАСТАТТАТАТТОТАДААССТСАТАТОАААССТОАААТ
АСААТОСААТОСААТТАТТСАСТТАССАСТТАСАССА
Мінімальний промотор аланінрацемази 2 (В. ТТАТАТТОТАДААССТСАТАТОДААССТОААДАТАСААТОСААТ
ІШигіпдіепзі5з серовару Кигєїакі | аСААТТАТТаАаттТАааАаТТАпАССА штаму НО7З) (ЗЕО ІЮ МО: 188)
АТССАТОСААССТОТАТСААССАСТАТААТТТСАТССАСААТТТ
ТТТСААСТОАСТСТААДАСААСОСОСТАТТОТСТТСТОСТСАТСТ
Промотор ВСІА (В. сегеив СОААСААТСАТАСАТАААСТААТТОТААТТОСТТОСТТОТТСАА рук ть САТААТСАСССТСТТОСААДАТСААТСАТАТОТТАТАСАТАТАСТ ї АААСТТТОСАТТТТТТТАААТТОТТСААСТАОТТТААСАТТТСТТ
ТСААТААТТСАААТИТССОТОтТСАТТТТСТТТСОСТТТТОаСАТСТ
АСТАТАТААТОААСОСТТТАТОСАССТОААТТТ
Мінімальний промотор Всів (8. ЛАТ СААТСАТАТОТТАТАСАТАТАСТАДАСТТ ТОСАТТТТТТТАА сегецв Е897/76) (ЗЕО ТО МО | АТТОТТСААСТАОТТТААСАТТТСТІ ТТСААТААТТСАААТеТОС 190) " |атотсАТТТТСТТТСОСТТТТОСАТСТАСТАТАТААТОААСОСТ
ТТАТОСАССТСААТТТ
САССТОТААСТСТОТАСОСААСААТААТТТСААСАСССАСТОА
ТААТАСАТТТТТТТОТТТТТТСАТТСТТАТСТТОААТАТАААТСАС
Промотор Всі (В. Іпигіпдієпвіз./ | СТСАТСТТТТААТТАСААСОТААССААТТТАСТАТТТТОАААТАС серовару копкикіап штаму 97- | АССТАТСАТТТТАТААТАТОААТАСТАСТАСТТАТАСАААСОСОС 27) (ЗВЕО ІО МО: 191) АААААСТТТААТАТАТОТАААААТСАТТТОСАТАТОААААААСТА
СССАТАСАТТТТТТСОАААТОАТАААТСТТТТАТТТТОТТААТТА
ССАДАСААДАДАТОТОСААТОАСССОСАТТТАА
Мінімальний промогор ВсіВ (В. | АТАтТОдАААААСТАОССАТАСАТТТТТТССОАААТОАТАААТСТТ
К 9 ровару ТТАТТТТОТТААТТАСОАААСАААААТОТОСААТОАСОСОСАТТ опкикіап штаму 97-27) (ЗЕО ТАА
І МО: 192
ТТТТСАТСТОСТАСАТОСОТОААСТААТаСТОССАТТТСААТТАТ
ААААССАТТТОСТОСТТСТТОСТСООАТААДАСАААТСОССАСТТ
Промотор ВхрА (В. апінгасіб ТАТаТтТАСАСаСТСААТАТОАТАССААТСАТаСССАСТИассСАТС штаму Зіете) (ЗЕО І МО: ТТТТТСТААААТАТОТТТТАСААААСТААТТОТТТТТТСТАТСТТТ 193) ТСТТаттттОтсАТТТТАТСТТСАСССАСТТАСТТАТТОТААСАС
ССССОСАТТТТТТСАТСАСАТАТТТТСТТОТССОСССАТАСАСТ
АССТОСТАСОСАТСАТСАТОААОСАСОААТАСАТ
Мінімальний промотор ВхрА (В.
СатоАСОАСААСАТАТАСААСАСОСАСТОСТОСТОСТАСТОТ
ААСАССААСАААТАТОСОССАААСТОТАААТАСАТСОССТАТА
! ССАСАДОСТОТСССОААТАСАСАТААТАТОСАТТСААСОССО
АВіото) ЗВО МО), ССАСТОССТТААСААДАТТАСОССАСТСТТТАТТТОСАААДАСА ї ССТТАТОТТАСАТААДАДАСАССАСТААТТОТТТТААААСТАСТА
ТТОСТаАССТТаттАСААААТАСААТТТААСТАСААССТОССТТ
ТТТАТАТСАААТАТАТТТТАТАССТОТАСТТТАССТТТСААС
АСААОСТОТСССОСААТАСАСАТААТАТОСАТТСААСООСООО
Мінімальний промотор ВСЕ (В. | АСТСССТТААСАААТТАССССАСТСТТТАТТТОСАААААСАССТ апійгасів АбТегте) (ЗЕО ІЮ МО: | ТАТОТТАСАТАААААСАССАСТААТТОТТТТААААСТАСТАТТО 196) СТОАСОТТОТТАСААААТАСААТТТААСТАСААССТОССТТТТТ
АТАТОАААТАТАТТТТАТАССТОСТАСТТТАССТТТСААС
АТТТАТТТСАТТСААТТТТТОСТАТТТАСТАССТАССОСАСТСАС
АДААДАССАССТСТСАТТААТТТАТАТТАТАСТСАТТОАААТСТАА
Промотор Веїд (В. апійгасіє 1 ТТААТОАААТСАТСАТАСТАТАТОТТТТАТААСААСТАААССТ віюте) (ЗБОЮ МО. 197 АССАТАСТТААТТААТАСАТАТСТАТАСАСТТСААТАТСАСАСС ' АТОСАСТТСААТТАТАТССААСТТТСАТТТСАААТТАААТААСТО
ССТОСОСТАТТОТОААТОТСАТТТАСТСТОССТАСТАСАТТТАА
ТААТТАТОАСААССААТСАТАССАССТТАСТАС
ТААСААСТАААССТАССАТАСТТААТТААТАСАТАТСТАТАСАС
Мінімальний промотор ВеїА (В. | ТТСААТАТСАСАССАТОСАСТТОААТТАТАТССААСТТТСАТТТС апінгасіє Зіегпє) (ЗЕОІО МО: | АААТТАААТААСТОССТОСОСТАТТОТОААТСОТСАТТТАСТСТС 198) ССТАСТАСАТТТААТААТТАТОСАСААОСААТСАТАССАССТТАС
ТАС
АСТТаТтТАСААДСААТТТАААТСТТСАСААДАСАТАТаТАААТОАСТ
ТАСТАСАаСТАаТТаСААДаИТАССАТТТСТААСААСИаТААСАСАТ
Промотор СОЇЕ (В. сегеив САААТАТТААТТТСААСТААТОааСалдтатАТтаАдапаТаАААс
АНВ2О) (ЗЕО 10 МО: 199) саеабаСсдаСааТАпАААаТААААААасАААтта,ТтааттТатТАА
І АСАСАТатТСОАДАТОАСАТСТСТ ТТ ТТТАСТасАТТАААСаИтА
АаТатсТСстТСсААДАдАААДАаААТаАСАСАТТОоСастТАТТатСАСас
АТАТЯаАТТААСТОаААТАИСТаАТадасАсастТТАСаА 200 давАдаСОсТТАСИаА
ААСОаТТАТТАаСатАСпАСАААСААаТААСаасСАсААасСА,тТТо
ТТаСАТТААДАТССТАТаттТАсСАааСатататААДАаСААСасатАТ
Промотор Ех5А (В. сегеи5 ТеССаттаст ПТТТСсАТАСАТАТААТСАТААСОАСААСОаААдА штаму АТСС 10876) (ЗЕО ІЮ тТаСпОаСАТАСАТТОаТ ТТ тТОДАСАААТСАТТОаТОаСТТСТТТАТОаСТ
МО: 201) ТАТТССАСТТСИААТОаАТАТТОАААДАТСИААСААИаИтаАТААДАДИ
ТААДАДСААДИТТААТИаТТАТТТАСААДАдСАСТТАСТТСАТИаАсАТ
ТТаТтТАСТТАТАСАТААДСТТАТАСАсСаАасассААААТ
Мінімальний промотор Ех5А (В. ТГСАТЗАСАТТТОТТАСТТАТАСАТААСТТАТАСАССАСОСОСА сегеи5 штаму АТСС 10876) АААТ БТ
ЗЕ ІЮО МО: 202
ААдасбасааТСААТастТатАТАТаСАААТААаАТТаСАсаСсСТТТ
АССТаААпААсСАаСатаАТАастТСАТТасСстаАААААСсАаАА
Промотор Ех5К (В. ІПигіпдіепзіє | ХАСТАТААСАДАСАТАТТаАТАТТТАССАТТТАОСАТСАСАСАТ серовару КопКкикіап штаму 97- | т САТТОАТаСТАТТаИТТСАТССАААСААТТТАдаАаАддадаИт 27) (ЗЕО ІЮ МО: 203) ТААДАСИадСаАТТСИаАААТатТАТАТОАСТАААТАТСААИТтАТТТ
АСОСАТСИТААДАСАТССТатТТАТССАСТТТААААасСсСсСтТАТТТ
Адсааст тот ТасСстСАААААаТТАдасАаа,аасспААААСА
Мінімальний промотор Ех5К (В. ТСААСТАТТТАСаСАТСИСТАААСАТССТатТтТАТССАСТТТААА
ІШигіпдіепзі5 серовару ассСстТАТТАСОаСТТоТтТасТтоСАААААдатТААласасАа,аааА
КопКиКіап штаму 97-27) (5ЕО |АААСА
ІО МО: 204 дааАТтттсАаатТасаАСаТсстосСтстсСттсСТТАСАТТАДАТТААТ
САТАСТАТААДАТОААДАСАААТаАААТаАААААТАаСасняцААА
Промотор Ех5В (В. сегеив АТСАСААДАТТТТТтТоТасатАСТАТАСААТАТатТтАСААТАДаИаст
Е837/76) (ЗЕО 10 МО: 205) ТТатСсААТОДААСААООААТТССОИТаСААТаСАСОпСАдсдОаТ
І ТСаСаААСТОССТСТАТАДААДААСТАТаСААДАСААСААТАТСТТ тАасСТАТТатт тат тт ТАТТатаАСАСаТТСААСААСИтТТоТ
ТСТСТТАТТССТАСТАСАДОААдасАСААТадатТтадА
Мінімальний промотор ЕХх5В (В. АСТАТаспСАААСААСААТАТСТТТАССТАТТИТТПТИаТтттттТтТАТ сегеив Е837/76) (ЗЕО І МО: тТатаАСАатТТСААаААСаТт СТ ТТ СТТАТТСИТАаТАаАсА 206 АСОАСААТОАИТОдА
ТТТТаСАСААСасСссСОатТААААСТТТААТОААТААТТТАТСАДАТА
АТТТАДАТОСТТТОССОААДАСАТААдАадаТста т ТаспАТСОСААТТ
Промотор уабс (В. сегеи5 ТТААСАВААдатАасААТТаАТОСААААСсаСААспСАа,аСсАААСас
АНВ2О) (ЗЕО 10 МО: 207) ТАТСТАТСОАДОаАдИаИттТасСссАСАТТААИТААТаСАТТАСТТСТТ
І САТАДОТТАТСАТААСААТАСАДАДасйаАСАсС ТТ СААТТТОаААС
ТатоссСтТтТаТтСсАССТТТСТОСТОСТАДАТТСАТАСТТТАДАДА
САСОТААСАТОСССТААСОАдИа ТТ ТОСАСОаТАаСАСА
Мінімальний промотор таро ваААдАСАпААатТСАТСССАТТТаААААтТасаасСАцватсСатАТТ
АтАаСТОАТтттоаТттАтТаатТттТАТСССЯССАасаАТТССААТСТТ
Промотор Таї (В. Іпигіпдіепзієї | ТАСТОСО,СасаасасАААТТАТТАСАСААДСАСААСТТАСАаТтАТАТТО серовару Копкикіап штаму 97- | «ТААДАДАСТТАСАдасАааст ГІТАССТатАСААДааИтосСстТаААаА 27) (ЗЕО ІЮ МО: 209) ТАТОАСАТТАСААДАСАТТАСОаСаИТтаАТСАААСАаТАСАДИасстА
ТСАСТТОАТАСИасСтТТ ТТ ТсАСССТТТТТОССТТТТСТСАТАСО
АТАТТАТОИТААТОИТААСаИТтАТАСИТасасАТАСТАСТ
Мінімальний промотор Таї (В.
ІШигіпдіепзіз серовару АСССТТПТСОССТТТСТСАТАССАТАТТАТИТААТаТААСаИТтА
КопКиКіап штаму 97-27)(ІЗЕО ч1АсатасасАТАСТАСТ
ІО МО: 210
АТта,атасАссосттАаа,астоАаасСстасттгАпСАаСАспАСаасСТСАТА доса,атоссатсатасатСадатостТАСАасатоСАТАТОССАТ
Промотор супероксид- ТТСАСАТаТТтТАТТАТОТОСОССАсСаАдАасттоСттатАаААса дисмутази (ЗОБА) (В. сегеи5ї | ЗАСТ ТТ ТТАТаАААТАТАТИАаСАТТТТААТТОАААТОаААИТ
Е837/76) (ЗЕО ІЮ МО: 211) сапААТТТасТтТАСТТТААТаАТАаСААСАСААТаталдтТТТАТТ таттасСсАСССТАТааСААТТАаСсСОаТАСААтТаААда,атта,ТатАтат
САСТТААСтТасССААТАСАТАААСТОСОсСАсСОААТАТААСА
Мінімальний промотор супероксид-дисмутази (ЗОБА) (В. сегеив Е837/76) (ЗЕО 1О АСТТАДИТааСААТАСАТАААСТОССОСАССААТАТААСА
МО: 212
ААТАТААСАСААДААТТСТаАТОа ТТ ТСАААТССТАТААТААСИ датТаттоСатАТАТаССТТТАТАТТТТССО,СААСАТААААСАС
Промотор супероксид- ААТАТАТТАТТССАСОССАТТатт тата тСстТАТТТАТСАТОССИТ дисмутази (ЗОБА) (В. сегеиз І йСбОСАТтТастАсС,атаасСаТтАТИИТТСАТТСИаТтатАТСААААСОаАа
АНВ20О) (5ЕО ІЮ МО: 213) ААаСАпСАаСОаАТТАСАПАААаТТаААпААдААастаТаттАастаА
АААдпАААСАаТААСТСАТТТТаТатАТат тоСсСТСстТАТаСТОосСаИ
АСААТСТААаСОсасСАСаСААТатАТТ ГТасАсасААТаАА тоСапААпАтТААдААСАСААТАТАТТАТТССАСССАТТИатттаИат
Мінімальний промотор ат стТАТПТАТСАТСССЯТаСаАттастаСатаасСатАТаТТСАТ супероксид-дисмутази (ЗОБА2) ТССТатАТСААААСаАдаСАдасАпАасСасАТТАСАСАААаТтТадА (В. сетєив АН8В2О) (ЗЕО ІО МО: | ЗААДДИСТаИттАасСтТаААААпАААСАсСТААСТСАТТТТТатАТО 214) ттосстТотТАТаСТоСаСАСААТСТААСаСсасасСАСААТИатАТТТТОа сдасаААТОаАА
ТААТСАСССТСТТССАДАТСААТСАТАТИаТТАТАСАТАТАСТААД
Промотор ВСІА (В. апіпгасіб АСТТТССАТТ ТПТТТАААТТатТСААСТАСаСТТТААСАТТТСТТТТО
Зіегте) (ЗЕО ІЮ МО: 215) ААТААТТСАААТатТоСататсСАТ тот тсасТтттТасСАТСТА
СТАТАТААТаААСастТ ГТАтТасяаааТтаААТТТ
Промотор ВА51882 (В. аанНасаїаасаадаасіасайадддадсаадсацдісіадсдааадсіаасідснійай апінгасіз Сіегтте) (ЗЕОІО МО: /|аааіаастіаєтанааацісаїаіагасааісосідієсашсашодадсісіасссасдсай 216 тасіанадіааіадаашнсададоаюдюдайтай
Промотор гена 3572 (В. Стадашаадаїасасааіадсаааададааасасацацаіаасоагааадааасії меіНепеіерпепвзіз КВАВ 4) (ЗЕО прпупчупкиації
ІЮ МО: 217 ашдіагашдіаддіаасідіайатанасіасааіасадіагасісаіаддадаіадаої даїаддіадацоаааіаюдаїдаадааааддааіаасіааааддацдісдаїаїссдасі
Промотор рД-пропелерного ссішаднагаааіааюіададаанададіаїаашіанаіаадіаланоїанадацаасосі білка УУТМ (В. Наїсстаанодюдайнаащдаюдааншіаададааддддаснасадісєсттаюцдиансії меіНепеіерпепвзіз КВАВ 4) (5ЕОЇ| аїаадсснйаааададдіассассссасасссааааасаддаддааайаїаасіасаї
ІО МО: 218) анддаднідіаасодїасаадааісддіанаанасссюіааагааднашдтюіаагаад даасшШай(аайнсіссіасааіааааіаааддаддіааіааа аасссНааїдсайдонНааасайнодіааадісіааадсаддаїаацддсдадаацдіаа агіпдієтеїв МО-79) (ЕС діадацонНаасасссідддісааааандаїатадаааанадноасастоідсаннії
МО: 219) сагаадаїдадісаі(аєдіЩаааніадіаадааааасадіацаагсаіаагдаанд
Й діаїснааїаааададаюдаддіаасна
Промотор Ех5У (В. Іпигіпдієпвів Таанссасснссснаїссіссодссіашааааааадацісндаданаїдассаааїсіс серовару копкикіап штаму 97- сісаасіссааіаїсЧанаацдіаааіасааасаадаадаїаадда 27) (ЗЕО І МО: 220 її м: йддацдісннищшаїайноіанащшіасаїсссіасіаіаїааансссідсіШаїсодїаадаай
Вт пан дідаасаїаа
Промотор тЇсА (В. Іпигіпдіепвів Паащісасіссна(снсндшаашасанаааадаганодадчндадаачашодіс серовару Кигеїакі штаму НО7З)
ФЕО ІЮ МО: 222 асааїісісаадассішШаааіаддсдааададдаїаададааддаюддаай серовару КШегакі штаму ОЗ) Азаіїашсаїааіасдадааааадсддадшаааадааюадддаасодаааіааад
ФЕО ІЮ МО: 223 аднтнсагавгадіааагадасадаа
Промотор Ех5зЕА/ВхрВ (В. Ааасіаааіааідадсіаадсаддандддаддсадаайнаїсідссасссааїссаїдсі
ТІигіпдієпвіз АІ НаКат) (5ЕО І | (аасдадтананаюдіааашснаааандддаасццісіадаасаіадаассідіссні
МО: 224 саЦаасідааадіадааасадаіаааддадідааааас гіпсі А Накат (ЗЕОІО Айсасіасаасддддчаюадшодагдсоддаїасаагдадаадіассддааадіащшаї
МО: 225 адаасанНасааада!аїанаїсіссаїсаїаааддададаюдсааад
Сасдсассасісдісаіасаасаасдсаадаачааанодадаїасадсадіанснайн . садідашадсасдсдасудіаасаддадаааасансасойдансадодіаїсайаєсйц вромотов Со (В. апінгасів аддаїаааіаіааіанаацааадодасаасісітасаюндадайноаїсснтатонсна
Тегпе) (ЗЕО ІЮ МО: 226) дааадаасданшаасдааацдіїснассасунНаїдааїаіаадіаїгааіадіасасдат ансадсіасаїа їаіаісаїадіаааайаднснансссасайагсайаіадааісдссаанНагасадсад
Промотор сигма-К (В. апіпгасів | аааасіаадіаддіанайснаааноашадсассисіааіанасадаїадаа!ссаїсаїї
Зіегте) (ЗЕО ІЮ МО: 227) Нсаасадідаасаддашснсідаасасаасісністсснашссааааадаааад садсссаїШааааіасоадсідснагааіціасана
ТАТСАСАТААСТОТТТАТТТТТААТАТТ ТССАСАТАААИатТадАдс пПТААТСАСТОСОаЙСсасСТ тат САТССССССАСТОАТТАТТААТ
Промотор ІпрА1 (В. тТаААССААдаапАТАААААаАтТАаАа,аас СТ аАССАСААААСТта
ТІигіпдієпвіз АІ НаКат) (ЗЕО ІС | вадайСИаСАТОАТТСТАТААСАААДААасСТТААТатТтТТАТАСААТТА
МО: 228) тат ТтТАТАТАаСаСаАсаасТАаТАААСАпАпАТТТасАСААДА
ААТаСАСССАТТТАТСТОаААТТТТААСТТТТАТААДДааасАсаАА
АТО
Кластерний оперон 1 глікозил- пеппоієтоїв серверу АшШаспнадсадіаааасідаїаісадішасідснйсаншааайсааїсанаааїсії копкикіап штаму 97-27) (ЗЕО ссннсіасаіадісагаадндіадасанссдіаддадоасаснаїа
ІО МО: 229
Кластерний оперон 2 глікозил- асаіааайсассіссаїааадсунсанаїаіадіада(дсаааассдааадаааадас трансферази ВСІА (В.
ПД - Іасддасашдаанайдаааадаааіснааасіасндаасаашаааааааюддааад штаму НО7З) (ЗЕО ІЮ МО: 230) сатідац
Промотор глікозил- нсіацшіссаасадаасагдсіасданаааддінносаааюдссісноддадаадаада о. анпададсоаніШагадааассаааадісанаасаанааднаащдастнтдтоссії трансферази (В. (пигіпдієпвів ЛІ їаададдаінаюцнасіагаацагацдіаїсаддіасіааіаасаадіаїаадіашсюдда
Накат) (ЗЕО ІО МО: 231) аЗалта д'єєсаво д'ягавотато99989 дагааса 00211) Промоторні послідовності полімерази сигма-К, специфічної до споруляції, серед промоторних послідовностей, представлених у таблиці 3, приводять до високих рівнів експресії злитого білка або білка-модулятора в ході пізньої споруляції. Консенсусна послідовність для промоторної послідовності полімерази сигма-К, специфічної до споруляції, являє собою
САТАМММТМ; однак ця послідовність може містити аж до двох мутацій і усе ще бути функціональною. Промоторна послідовність полімерази сигма-К, специфічної до споруляції, звичайно знаходиться вище ділянки зв'язування рибосом (КВ5). 00212) Також для експресії злитих білків або білків-модуляторів можна використовувати промотори, що мають високий ступінь ідентичності послідовності з будь-якою з послідовностей, представлених вище в таблиці 3. 00213) Наприклад, злитий білок або білок-модулятор можна експресувати під контролем промотору, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 80905 ідентичності з будь-якою з послідовностей нуклеїнової кислоти 5ЕО ІЮ МО: 157-231.
І00214| Злитий білок або білок-модулятор можна експресувати під контролем промотору, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 9095 ідентичності з будь-якою з послідовностей нуклеїнової кислоти БЕО ІЮ МО: 157-231. 00215) Злитий білок або білок-модулятор можна експресувати під контролем промотору, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 9595 ідентичності з будь-якою з послідовностей нуклеїнової кислоти БЕО ІЮ МО: 157-231. 00216) Злитий білок або білок-модулятор можна експресувати під контролем промотору, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 98595 ідентичності з будь-якою з послідовностей нуклеїнової кислоти БЕО ІЮ МО: 157-231.
І00217| Злитий білок або білок-модулятор можна експресувати під контролем промотору, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 9995 ідентичності з будь-якою з послідовностей нуклеїнової кислоти БЕО ІЮ МО: 157-231. 00218) Злитий білок або білок-модулятор можна експресувати під контролем промотору, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має 10095 ідентичності з будь-якою з послідовностей нуклеїнової кислоти БЕО ІЮ МО: 157-231.
І00219| Наприклад, білок-модулятор або злитий білок можна експресувати під контролем промотору ВсіФ (наприклад, 5ЕО ІЮ МО: 189, 190, 215, 229 або 230), промотору Соїу (наприклад, ЗЕО ІО МО: 161, 162 або 221), промотору Ех5У (наприклад, 5ЕО ІЮ МО: 157, 158 або 220) або індукованого рамнозою промотору (наприклад, 5ЕО ІЮО МО: 225). Наприклад, злитий білок можна експресувати під контролем промотору, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, яка має щонайменше 8095 ідентичності з будь-якою з послідовностей нуклеїнової кислоти ЗЕО ІЮ МО: 157, 158, 161, 162, 189, 190, 215, 220, 221, 225, 229 або 230.
ІЇ00220| Злитий білок можна експресувати під контролем промотору, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 8595 ідентичності з будь-якою з послідовностей нуклеїнової кислоти ЗЕО ІЮ МО: 157, 158, 161, 162, 189, 190, 215, 220, 221, 225, 229 або 230.
ІЇ00221| Злитий білок можна експресувати під контролем промотору, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 9095 ідентичності з будь-якою з послідовностей нуклеїнової кислоти ЗЕО ІЮ МО: 157, 158, 161, 162, 189, 190, 215, 220, 221, 225, 229 або 230.
І00222| Злитий білок можна експресувати під контролем промотору, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 9595 ідентичності з будь-якою з послідовностей нуклеїнової кислоти ЗЕО ІЮ МО: 157, 158, 161, 162, 189, 190, 215, 220, 221, 225, 229 або 230.
ІЇ00223| Злитий білок можна експресувати під контролем промотору, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 9895 ідентичності з будь-якою з
Ко) послідовностей нуклеїнової кислоти ЗЕО ІЮ МО: 157, 158, 161, 162, 189, 190, 215, 220, 221, 225, 229 або 230.
ІЇ00224| Злитий білок можна експресувати під контролем промотору, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 9995 ідентичності з будь-якою з послідовностей нуклеїнової кислоти ЗЕО ІЮ МО: 157, 158, 161, 162, 189, 190, 215, 220, 221, 225, 229 або 230.
ІЇ00225| Злитий білок можна експресувати під контролем промотору, що містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має 10095 ідентичності з будь-якою з послідовностей нуклеїнової кислоти ЗЕО ІЮ МО: 157, 158, 161, 162, 189, 190, 215, 220, 221, 225, 229 або 230. (00226) Злитий білок або білок-модулятор можна експресувати під контролем промотору, що містить промоторну послідовність полімерази сигма-К, специфічної до споруляції, де промоторна послідовність або послідовності полімерази сигма-К, специфічної до споруляції, мають 10095 ідентичності з відповідними нуклеотидами будь-якої з ЗЕО ІЮ МО: 157-231.
І00227| Злиті білюим можна експресувати під контролем промотору, який є нативним для націлювальної послідовності, білка екзоспорію або фрагмента білка екзоспорію злитого білка.
Таким чином, наприклад, що коли націлювальна послідовність походить з ВсІА, злитий білок можна експресувати під контролем нативного промотору ВСІА (наприклад, 5ЕО ІО МО: 189, 190, 215, 229 або 230). (00228) Білки-модулятори можна експресувати під контролем їх нативних промоторів. Таким чином, наприклад, коли білок-модулятор містить СОЮ, Со можна експресувати під контролем нативного промотору СоїО (наприклад, ЗЕО ІЮ МО: 163 або 226). Нативні промоторні послідовності для кожного з білків-модуляторів представлені вище в таблиці 3. 00229) У таблиці З також представлені ілюстративні мінімальні промоторні послідовності для кожного білка-модулятора. Білки-модулятори і злиті білки можна експресувати під контролем цих мінімальних промоторних послідовностей. Наприклад, білок-модулятор можна експресувати під контролем мінімального промотору, що містить частину нативнойї промоторної послідовності. Наприклад, коли білок-модулятор містить Со, СоЮю можна експресувати під контролем мінімального промотору Со (ЗЕО ІО МО: 164).
І00230| Альтернативно, білюки-модулятори можна експресувати під контролем будь-якого промотору, що містить промоторну послідовність полімерази сигма-К, специфічної до бо споруляції, незалежно від того, чи є промотор нативним промотором для білка-модулятора. Як можна бачити з таблиці 3, кожний з нативних промоторів і мінімальних промоторів для білків- модуляторів містить щонайменше одну промоторну послідовність полімерази сигма-К, специфічної до споруляції. Таким чином, наприклад, коли білок-модулятор являє собою ВхрВ,
ВхрВ можна експресувати під контролем промотору ВСІА (наприклад, 5ЕО ІЮО МО: 189, 190, 215, 229 або 230) або будь-якого з інших промоторів, приведених у таблиці 3.
І00231| Більше того, білок-модулятор або злитий білок можна експресувати під контролем частини кожнобудь-якого го з промоторів, приведених вище в таблиці 3, за умови, що частина промотору включає промоторну послідовність полімерази сигма-К, специфічної до споруляції.
Наприклад, білок-«модулятор можна експресувати під контролем промоторної області, що містить перші 25, 50, 100, 150, 200, 250 або 300 нуклеотидів вище ініціюючого кодона, за умови, що ця область містить промоторну послідовність полімерази сигма-К, специфічної до споруляції.
ЇМ. Мутації й інші генетичні зміни рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеи5, що дозволяють збір вільного екзоспорію
І00232| Як додатково описано в прикладі нижче, рекомбінантні представники сімейства
Васійи5 сегеи5, які експресують злиті білки, що містять білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегецв, можна використовувати для доставки білків або пептидів, що представляють інтерес, у рослини, насіння, середовище для росту рослин або в область, яка оточує насіння або рослину (наприклад, за допомогою поливу грунту, нанесення на листя або обробки насіння). Крім того, рекомбінантні представники сімейства Васійй5 сегеи5 можна використовувати для доставки молекул нуклеїнових кислот тваринам, комахам, хробакам (наприклад, нематодам), грибам і найпростішим; для доставки білків або пептидів тварині; у вакцинах і для досягнення імуногенної відповіді; для рекультивації; для обробки рідини гідророзриву пласту для руйнування емульсії або гелю в рідині; для дезінфекції і для різних інших застосувань, описаних у даному описі нижче. Однак у деяких випадках присутність живих мікроорганізмів може бути небажаною, і замість цього є бажаним відділення живої спори від злитих білків у екзоспорії на зовнішній поверхні спори. Наприклад, у деяких застосуваннях є бажаним збільшення
Зо ферментативної активності без порушення цілісності спор. У таких ситуаціях фрагменти екзоспорію можуть бути переважними над живими мікроорганізмами, що мають фермент у їхній екзоспорії. (002331 Крім того, для деяких застосувань може бути бажаним зниження щільності продукту.
У таких випадках є бажаним відділення щільних спор від екзоспорію (який містить злиті білки). В ділянці вакцин може бути бажаним відділення спори від екзоспорію (який містить злиті білки, що містять антиген) для видалення потенційних антигенів, які присутні на самій спорі, з вакцинного препарату. Більше того, у деяких випадках наявність живих спор може привести до потенційного росту бактерій у продукті, що може бути небажаним для деяких застосувань (наприклад, доповнення кормів для тварин і переробка шкур у шкіру). (00234) У рекомбінантні представники сімейства Васіїїи5 сегеи5 можна вносити мутації й інші генетичні зміни (наприклад, надекспресію білка), що дозволяють відділення вільного екзоспорію від спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5. Процес відділення забезпечує фрагменти екзоспорію, що містять злиті білки, які по суті вільні від самих спор. Під "по суті вільними від спор" мають на увазі, що після відділення екзоспорію від спор одержують препарат, що містить менше 595 спор по об'єму, переважно менше 395 спор по об'єму, ще більш переважно менше 195 спор по об'єму, і найбільш переважно не містить спор або, якщо спори присутні, вони не піддаються виявленню. Ці фрагменти екзоспорію самі по собі можна використовувати замість рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегецй5, і їх можна використовувати для доставки білків або пептидів, що представляють інтерес, у рослини, насіння, середовище для росту рослин або в область, яка оточує насіння або рослину, і для інших цілей, описаних у даному описі.
І00235| Таким чином, передбачається рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства
Васі сегеи5. Рекомбінантний представник сімейства Васійиє сегеи5 містить мутацію або експресує білок, де експресія білка збільшена в порівнянні з експресією білка в представнику сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах. Мутація і збільшена експресія білка приводить до спор Васійи5 сегеи5, що мають екзоспорій, який простіше видалити зі спори в бо порівнянні з екзоспорієм спор дикого типу.
(002361) Крім того, передбачається рекомбінантний представник сімейства Васіїйи5 сегеи5, Що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеиц5.
Рекомбінантний представник сімейства Васіїйи5 сегеив5: (і) містить мутацію в гені СоїЕ; (ії) експресує білок Ех5У, де експресія білка Ех5У збільшена в порівнянні з експресією білка Ех5"У у представнику сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах, і де білок Ех5У містить С- кінцеву мітку, що містить глобулярний білок; (ії) експресує білок ВсіВ, де експресія білка ВсІВ збільшена в порівнянні з експресією білка ВсІВ у представнику сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах; (ім) експресує білок х|сВ, де експресія білка ХісВ збільшена в порівнянні з експресією білка х|сВ у представнику сімейства Васійй5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах; (м) містить мутацію в гені Ех5У; (мі) містить мутацію в гені СоїУ; (мії) містить мутацію в гені Ех5А або (мії) містить мутацію в гені СОЮ.
І00237| Рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 може містити мутацію в гені
СОГїЕ, таку як нокаут гена СОЇЕ або домінантно-негативна форма гена СОїЇЕ. Мутація в гені СОЇЕ може частково або повністю інгібувати здатність СОЇЕ зв'язувати екзоспорій зі спорою.
І00238| Рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 може експресувати білок
Ех5У. Білок Ех5У містить С-кінцеву мітку, що містить глобулярний білок (наприклад, зелений флуоресцентний білок (СЕР) або його варіант), і експресія білка Ех5У збільшена в порівнянні з експресією білка Ех5У у представнику сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах.
Глобулярний білок може мати молекулярну масу від 25 кДа до 100 кДа. Експресія білка Ех5уУ, що містить С-кінцеву мітку, що містить глобулярний білок, також може інгібувати зв'язування білка Ех5У з його мішенями в екзоспорії.
І00239| Рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 може експресувати білок
ВсІВ, що може приводити до утворення неміцного екзоспорію. Експресія білка ВсІВ може бути збільшена в порівнянні з експресією білка ВсІВ у представнику сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах.
І00240| Рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 може експресувати білок
У|сВ, що може приводити до фрагментарного формування екзоспорію, а не у вигляді повної
Зо структури. Експресія білка МІВ може бути збільшена в порівнянні з експресією білка х|сВ у представнику сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах. (00241) Рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 може містити мутацію в гені
Ех5У, таку як нокаут гена Ех5У. Мутація в гені ЕхеУ може частково або повністю інгібувати здатність Ех5У до завершення утворення екзоспорію або зв'язування екзоспорію зі спорою. (00242) Рекомбінантний представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 може містити мутацію в гені
СоїУ, таку як нокаут гена Соїу. Мутація в гені СОЇ може приводити до утворення неміцного екзоспорію. (00243) Рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 може містити мутацію в гені
ЕХ5А, таку як нокаут гена Ех5А. Мутація в гені Ех5А може приводити до утворення неміцного екзоспорію. (00244) Рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 може містити мутацію в гені
СОЮ, таку як нокаут гена СОЮ або домінантно-негативна форма гена Сою. Мутація в гені СОЮ може приводити до формування екзоспорію смугами.
І00245| Фрагменти екзоспорію можна одержувати з будь-якого з цих рекомбінантних представників сімейства Васійн5 сегеи5 і використовувати для різних цілей, як додатково описано в даному описі нижче. Фрагменти екзоспорію містять злиті білки. При очищенні фрагментів екзоспорію, що містять злиті білки, від спор, одержують безклітинний білковий препарат, у якому злиті білки стабілізовані і підтримуються за допомогою ковалентних зв'язків із фрагментами екзоспорію.
І00246| Унаслідок міцних ковалентних зв'язків між злитими білками і фрагментами екзоспорію, злиті білки стають стійкими до нагрівання. Стійкість до нагрівання злитих білків, зв'язаних із фрагментами екзоспорію, дозволяє їхнє використання для застосувань, що вимагають стійких до нагрівання білків або ферментів (наприклад, у харчових добавках).
М. Інактивація спор бактерій роду Васійн5, включаючи спори рекомбінантних представників сімейства Васіїйи5 сегеи5
І00247| Спори бактерій роду Васійй5 можна генетично інактивувати. Генетична інактивація спор може бути переважною, наприклад, оскільки вона дозволяє доставку спор у рослину або середовище для росту рослин при усуненні яких-небудь шкідливих ефектівів, які живі бактерії можуть чинити на рослину. Крім того, застосування інактивованих спор може забезпечити бо багато з тих же корисних ефектів (наприклад, попередження росту бактерій у продукті), що розглянуті вище в розділі ІМ відносно застосування фрагментів екзоспорію.
А. Генетична інактивація за допомогою надекспресії протеази або нуклеази (00248) Передбачається рекомбінантна бактерія роду Васіїйи5, яка експресує протеазу або нуклеазу. Експресія протеази або нуклеази збільшена в порівнянні з експресією протеази або нуклеази в бактерії дикого типу роду Васіи5 у тих же умовах. Збільшена експресія протеази або нуклеази частково або повністю інактивує спори рекомбінантної бактерії роду Васійи5 або робить спори рекомбінантної бактерії роду Васіїйй5 більш чутливими до фізичної або хімічної інактивації.
І00249| Рекомбінантна бактерія роду Васійи5 переважно являє собою рекомбінантний представник сімейства ВасшШив сегеи5.
І00250| Рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегени5 також може експресувати злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегецв5.
І00251| Рекомбінантна бактерія роду Васійй5 може експресувати як протеазу, так і нуклеазу, де експресія протеази збільшена в порівнянні з експресією протеази в бактерії дикого типу роду
Васійй5 у тих же умовах і експресія нуклеази збільшена в порівнянні з експресією нуклеази в бактерії дикого типу роду Васійи5 у тих же умовах. (00252) Протеаза рекомбінантної бактерії може включати неспецифічну протеазу.
І00253| Протеаза рекомбінантної бактерії може включати серинову протеазу, треонінову протеазу, цистеїнову протеазу, аспартатну протеазу, протеазу глутамінової кислоти, лужну протеазу, субтилізин, гістидинову протеазу або металопротеїназу. (00254) Протеаза рекомбінантної бактерії може містити протеазу проростання спори, таку як протеаза проростання спори Васійи5 5!,иБбійй5, протеаза проростання спори Васійи5 тусоїде5 або протеаза проростання спори Васійи5 (пПигіпдіепвів. (00255) Протеаза проростання спори може включати активну форму протеази проростання спори. Ця протеаза в природі неактивна в спорі. При проростанні ця протеаза активується внаслідок розщеплення протеази до пробілкової активної форми. Таким чином, рекомбінантна бактерія може містити активну протеазу, а не неактивну в природі форму. Активна протеаза
Зо може розщеплювати захисні білки ЗА5Р у спорі перед проростанням.
І00256| Нуклеаза рекомбінантної бактерії може містити ендонуклеазу або екзонуклеазу.
Нуклеаза може містити неспецифічну ендонуклеазу, таку як ендонуклеаза 1 Васійи5 зи!ибБЇ5.
Наприклад, протеаза проростання спори і ендонуклеаза 1 можуть мати амінокислотні послідовності, приведені нижче в таблиці 4.
Таблиця 4
Амінокислотні послідовності протеази проростання спори і ендонуклеази 1
І00257| Також можна використовувати протеазу або нуклеазу, що має високий ступінь ідентичності амінокислот з послідовностями, приведеними вище в таблиці 4. 00258) Таким чином, наприклад, протеаза проростання спори може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85595 ідентичності з 5ЕО ІЮ МО: 233 або 234.
І00259| Протеаза проростання спори може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності з БЗЕО ІЮ МО: 233 або 234.
І00260| Протеаза проростання спори може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з БЗЕО ІО МО: 233 або 234.
І00261| Протеаза проростання спори може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9895 ідентичності з БЗЕО ІЮ МО: 233 або 234.
І00262| Протеаза проростання спори може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з БЗЕО ІЮ МО: 233 або 234.
І00263| Протеаза проростання спори може містити амінокислотну послідовність, яка має
БО 10095 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 233 або 234. (00264) Аналогічно, неспецифічна ендонуклеаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 232.
І00265| Неспецифічна ендонуклеаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 232.
І00266| Неспецифічна ендонуклеаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 232.
І00267| Неспецифічна ендонуклеаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9895 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 232.
І00268| Неспецифічна ендонуклеаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 232.
І00269| Неспецифічна ендонуклеаза може містити амінокислотну послідовність, яка має 10095 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 232. (00270) Протеазу або нуклеазу можна експресувати під контролем промотору, що містить промоторну послідовність сигма б. Наприклад, промотор може мати одну з послідовностей, показаних у таблиці 5 нижче. Консенсусна послідовність для зв'язування фактора транскрипції сигма Сб являє собою САТММТА, де М являє собою будь-який нуклеотид. Промоторні послідовності сигма б у промоторах, представлених у таблиці 5, зазначені напівжирним шрифтом і підкресленим текстом.
Таблиця 5
Промоторні послідовності, що мають послідовності сигма о ,ТААСТАААаСТТСТАСАСТТ ТТААСАдасСстаААСасСсАТатСАСаАСТТИ,АТ
АаААдаСатТАтТатасСсАСсаАСсастотСсастТАалатттАаса7асатТТаАТА
Протеаза ОРЕ, В. вСАСАТТТААТОТТТаССсСАТАСТІТ ТТСАССТОССТОСТОаССАТССА,Та 5иБійв 168 (ЗЕО 10 АСТоСАТАСТТАСАТАСААСААДаИТаАТАТТСТАТСАААСа,ааАСпААпАсА
МО: 235) АТТаСААТАаСОПАСпСАТСААТаАААТТТСАТаТтТАААСОаААДАСпСААТИаАСсСтТ
ТАТАТАТІ ТІ ТаСаспСААТСТААСТАТАТТТАСТАТИААТТаОСОСОСАСИадаА
ТАСС
Мінімальний промотор | «СААТАаССсАСАТСААТОАААТТ ТСАТаТААДАсСОаАААСпААТОаАССТТАТ протеази СРЕ, В. АТАТТ"Т"ІТаСОасСААТСТААСТАТАТТТАСТАТОААТТИаСОСОСАСсСОСАСАТАС 5иБійв 168 (ЗЕО 10 (Є)
МО: 236
Протеаза СРЕ, В ТТТСАССТОСТААСАТАСААССтТатАаСАСА,ТаТтсТТААСпаИТтТАААТСТ зубів 168 (5ЕО І ТСТТСАСААТАСААСААДАТТатАТТСТАТСАААСАСАССТТТАСАТТаСА
МО: 237) АТАТАДАТаТтТАААСТАТ ПТСАТТЯаААССИтТСТСТ ТТ ТАаСАТСОАТТТА
І ТТСАаСАААТааСААСААТАТАСОТАСТТААТатТаАдАсаАдаасССосстат
Мінімальний промотор протеази СРЕ, В. САДаСТ СТО ТТ ТАаСАТОаАТТ ТАТ САССАААТИС,ССААСААТАТАСИ 5иБійв 168 (ЗЕО 10 ТАСТТААТИТаААасСаАдсаа,асоостат
МО: 238 ссттаттаАТТосАдасССатАТАТТСААаАдАдаСаатТАсСАТААСАТТИаА одер. В. ибйіїв 168 САСААТаАСССТТТАТАаСОПААСААпААасСтТААСаАТАААТТСаТстадА (ЕО Іо МО: 239) СТСОТТТТАААТСААТТТТСАастоСтТатАТАСААТТАССАААСИТТ тота
І ААТаААасССАТата т п таАСАСАТТСТАТАСТСАСААДСаСаАсСИа ТАС АС
АС
Мінімальний промотор | ЗдАТСАДАОССАТСТОТТТТОАСАСАТТСТАТАСТСАСААОСАССТСАСА
ЗА5Р о, В. з,ибійів 168 САС й
ЗЕО І МО: 240
АААСИайсСтТААасТ п ТТАТ ТСТСААСАТТТАССАСАСААТТСОТОСИаС
ЗА5РРВ, В. зибій5 168 | АТаАТ ТТ оСаасССАТТТТААСАТААТАСИТАСТААСААаССОаасСАдАС (ЗЕО ІЮ МО: 241) СсАТТаСОТтТАСОаСсСсОаСсСасс,сасСАатаАСАСССаАСААасИа ТТ САСАС
АТТааТасСсААСТОСАСТТААСССААССАТАСТАААТАДАААсССИАСАТТТ
ТАСАС
Мінімальний промотор | УАТТЗСТОСААСТОСАСТТААСССААССАТАСТАДАТАААААССАСАТТ
ЗАБ5БРР, В. з,ибійїв5 168 ТТАСАС нини
ЗЕО ІЮ МО: 242
ТСастІСстТоССАСТТААТСТОаАТТТАСАТТССААСОСААТССААТОАТТТ
ЗАБ5РУ, В. зибійй5 168 | АТАТасАЧАТСТОАААСАТААТСААТТТТСАТТ ТТаТтсТтоСАССТТТСТТА (ЗЕО ІЮ МО: 243) АТОААДАААТТТАТТ СТ ТапйСаИататАТАААТТААААТААТСТСТОСАТАА
ТАТСАТТСАААСААдасСтТтТаТт Пп ТоАТТАСАСТТТАаСАСАТОаААТААдС
ЗЕО ІЮ МО: 244 АТТАСАСТТТАСАСАТОИААТАДа
ТАСАааТтТОСтТСоТоСАТТ ТТОАСАТТССАТАТТСАЧИаСААССОасСАСАТАААДА 5АБРБ, В. зибійв 168 | ТЖАСАаСАСАСАТТСТАТАСТСТОСЯаССАССССвасСтСАаА,ааСсСсос (ЗЕО ІЮ МО: 245) саптТтТАТТТТСТОСАСААСААТТаССАаСАТАААТАААССССатАТАТ
ТТСАААСТАААТАСИаСаИТтТААСААТТТСТТТАТСИАААААдааАСпАТИаААА
АдДС
Мінімальний промотор ССААССасСАСАТААААТаАСАаСАСАСАТТСТАТАСТСТОСаССАСОСС дер, В. вубйє 168 ссастсАааАсасСсасас ТАТ ТТТСТОСАСААСААТТаССАаСАТА (5ЕО Ір М О: 246) ААТАААССССИаТАТАТТТСАААСТАААТАСИаСаИтТААСААТТТСТТТАТС
І САДААдАдасАспАТаААААда (00271) Експресія нуклеази або протеази під контролем промотору сигма-о дозволяє сайт- специфічну експресію нуклеази або протеази в проспорі, де активність ферменту спрямована на проспору й область, де розташована бактеріальна ДНК-мішень. Надмірне розщеплення ДНК проспори є летальним для бактеріальної спори, коли вона починає проростати.
І00272| Наприклад, як проілюстровано далі в прикладах, описаних у даному описі нижче, надекспресія протеази проростання спори (ОРЕ) у її активній формі в проспорі представника сімейства Васіїйи5 сегеи5 у ході споруляції приводить до протеолітичного розщеплення білків у проспорі й інактивації спори і/або робить спору більш чутливою до інактивації за допомогою опромінення ультрафіолетовим випромінюванням або гамма-випромінюванням. Аналогічно, надекспресія неспецифічної ендонуклеази в проспорі в ході споруляції руйнує ДНК у спорі, що приводить до високої кількості інактивованих частинок спори. Ці способи інактивації спор представників сімейства Васійи5 сегени5 можна використовувати окремо або спільно один з одним і/або з іншими способами інактивації спор. (00273) Експресія генів у спорах Васійн5 суворо регулюється експресією специфічних до споруляції сигма-факторів, які направляють РНК-полімеразу до генів, які повинні експресуватися в ході кожної стадії споруляції. Пізня експресія генів у проспорі, де упакована бактеріальна ДНК і необхідні білки, регулюється фактором сигма б. У ході пізньої споруляції бактеріальна ДНК упаковується з захисними білками, які називаються малими розчинними в кислотах білками (ЗАБР). Ці білки БА5Р включають, серед інших, БА5Ра, ЗАЗРРВ і ЗА5РУ. Білки 5А5Р захищають бактеріальну ДНК від опромінення УФ-випромінюванням і інших загрозливих факторів. При проростанні пробілок протеази проростання спори активується і розщеплює ці білки ЗА5Р.
І(00274| За допомогою експресії ЗРК під контролем промотору сигма б у проспорі експресується ОРЕ і захисні білюим БАЗР деградуються після початку споруляції, залишаючи бактеріальну ДНК більш чутливою до деградації. Аналогічно, експресія неспецифічної нуклеази під контролем промотору сигма З приводить до розщеплення ДНК хазяїна. Оскільки спора нездатна репарувати великомасштабне ушкодження її ДНК, це в остаточному підсумку
Зо приводить до загибелі спори. Надекспресію СРК і неспецифічної ендонуклеази можна використовувати разом для деградації як захисних білків ЗА5Р, так і ДНК хазяїна. (00275) Протеазу або нуклеазу можна експресувати під контролем будь-якого промотору, що містить послідовність промотору сигма б. (00276) Таким чином, протеазу або нуклеазу можна експресувати під контролем будь-якого з промоторів, приведених у таблиці 5 вище. Крім того, протеазу або нуклеазу можна експресувати під контролем промотору, що має високий ступінь ідентичності послідовності з будь-якою з промоторних послідовностей, приведених у таблиці 5.
І00277| Наприклад, промотор може містити послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 9595 ідентичності з будь-якою з послідовностей нуклеїнової кислоти 5ЕО ІЮ МО: 235-246.
І00278| Промотор може включати послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 9895 ідентичності з будь-якою з послідовностей нуклеїнової кислоти 5ЕО ІЮ МО: 235-246.
І00279| Промотор може містити послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше
9995 ідентичності з будь-якою з послідовностей нуклеїнової кислоти ЗЕО ІЮ МО: 235-246.
І00280| Промотор може містити послідовність нуклеїнової кислоти, що має 100905 ідентичності з будь-якою з послідовностей нуклеїнової кислоти 5ЕО ІЮ МО: 235-246. 00281) У будь-якій з рекомбінантних бактерій роду Васіййн5, які експресують протеазу або нуклеазу, спори рекомбінантної бактерії роду Васійй5 можуть бути більш чутливими до інактивації наприклад, за допомогою опромінення ультрафіолетовим випромінюванням, опромінення гамма-випромінюванням або за допомогою обробки відбілювачем, пероксидом водню, хлороформом, фенолом або оцтовою кислотою, у порівнянні з тими ж спорами, що не експресують протеазу або нуклеазу на підвищеному рівні в порівнянні з експресією протеази або нуклеази в бактерії дикого типу роду Васійи5, обробленій в тих же умовах.
В. Генетична інактивація за допомогою мутації гена, що кодує рецептор проростання, коровий літичний фермент спори, малий розчинний у кислоті білок спори (ЗАЗР) або білок оболонки спори
І00282| Спори будь-якого рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеийв5, які експресують злитий білок, який містить націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійн5 сегеи5, також можна генетично інактивувати або можна підвищувати їхню чутливість до фізичної або хімічної інактивації за допомогою модифікації представника сімейства Васіїйи5 сегеи5 так, щоб він містив мутацію. 00283) Такі мутації включають нокаут або інші інактивуючі мутації в одному або декількох генах, що кодують рецептор проростання. Гени рецептора проростання включають, наприклад, сегА, СетгВ, сегК, сетгН, сегі, сего, сеї, сего, сег, Сег5, сегМ, се або сегх.
І00284| Такі мутації також включають нокаут або інші інактивуючі мутації в літичних ферментах кори спори. Наприклад, у літичні ферменти кори спори 5іІеВ і См можна вносити мутації для інактивації спор. Такі мутації перешкоджають росту спори при проростанні й ефективно інактивують спори. 00285) Крім того, такі мутації включають нокаут або інші інактивуючі мутації генів ЗА5Р (наприклад, ЗАбРа, ЗАЗРВД або 5А5РУ). Такі мутації усувають захист спор від УФ-опромінення і роблять їх більш чутливими до інактивації за допомогою опромінення ультрафіолетовим
Зо випромінюванням і іншими способами.
І00286| Такі способи також включають нокаут або інші інактивуючі мутації в генах, які кодують білки оболонки або кори спори (наприклад, СоїА, СоїВ або СоїсС). Такі мутації роблять спори більш чутливими до інактивації фізичними або хімічними способами, такими як вплив ультрафіолетового випромінювання, гамма-випромінювання або обробка розчинниками, такими як відбілювач, пероксид водню, хлороформ, фенол або оцтова кислота.
І00287| Таким чином, даний винахід стосується рекомбінантного представника сімейства
Васійи5 сегеи5, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства
ВасшШи5 сегеи5. Рекомбінантний представник сімейства Васійн5 сегеи5 містить мутацію, що частково або повністю інактивує спори рекомбінантного представника сімейства Васіїйн5 сегеи5 або підвищує чутливість спори рекомбінантного представника сімейства Васіййиє сегеи5 до фізичної або хімічної інактивації в порівнянні з такими ж спорами, що не містять мутацію.
Мутація включає мутацію в гені, що кодує рецептор проростання, мутацію в гені, що кодує літичний фермент кори спори, мутацію в гені, що кодує малий розчинний у кислоті білок спори (ЗАБ5Р), або мутацію в гені, що кодує білок оболонки або кори спори.
І00288| Крім того, даний винахід стосується рекомбінантного представника сімейства
Васійиє сегеи5, що експресує злитий білок, як описано в розділі | вище. Рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 містить мутацію, що частково або повністю інактивує спори рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 або підвищує чутливість спори рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 до фізичної або хімічної інактивації в порівнянні з такими ж спорами, що не містять мутацію. (002891) Будь-який з рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеи5, описаних вище в розділі М.А, які експресують протеазу або нуклеазу, також може містити мутацію, яка частково або повністю інактивує спори рекомбінантного представника сімейства Васіїйи5 сегеи5 або робить спори рекомбінантного представника сімейства Васійиє сегеи5 більш чутливими до фізичної або хімічної інактивації в порівнянні з такими ж спорами, що не містять мутацію.
Наприклад, мутація може включати мутацію в гені, що кодує рецептор проростання, мутацію в гені, що кодує літичний фермент кори спори, мутацію в гені, що кодує малий розчинний у 60 кислоті білок спори (ЗА5Р), або мутацію в гені, що кодує білок оболонки або кори спори.
(00290) Наприклад, мутація може включати мутацію в гені, що кодує рецептор проростання, таку як нокаут гена, що кодує рецептор проростання. Рецептор проростання може включати
СегА, СегВ, СетКк, СетН, Сегі, Сего, сег, сего, сег, Сег5, сем, сег або сегх. 00291) Наприклад, мутація може включати мутацію в гені, який кодує літичний фермент кори спори, таку як нокаут гена, який кодує літичний фермент кори спори. Літичний фермент кори спори може включати 51ІеВ або См/.
І00292| Наприклад, мутація може включати мутацію в гені, який кодує 5А5Р, таку як мутація в гені 55рА, мутація в гені 55рВ, мутація в гені 55рс, мутація в гені 55ЮрО, мутація в гені 55рЕ, мутація в гені а 55рЕ, мутація в гені 55ро, мутація в гені 55рН, мутація в гені 55рі, мутація в гені з5ру, мутація в гені 55рК, мутація в гені з55рі, мутація в гені 55рМ, мутація в гені 55рМ, мутація в гені 55РрО, мутація в гені 55рР або їхня комбінація. ЗАБР може включати ЗАЗРо, ЗАБРД або
ЗАБРУ. Спори рекомбінантного представника сімейства Васіййи5 сегеи5 можуть бути більш чутливими до інактивації за допомогою опромінення ультрафіолетовим випромінюванням або гамма-випромінюванням у порівнянні з такими ж спорами, що не містять мутацію в гені, який кодує ЗА5Р. 00293) Наприклад, мутація може включати мутацію в гені, що кодує білок оболонки або кори спори, таку як нокаут гена, що кодує білок оболонки або кори спори. Білок оболонки або кори спори може включати СоїА, СоїВ або СоїС. Спори рекомбінантного представника сімейства
Васійиє сегеи5 можуть бути більш чутливими до інактивації за допомогою опромінення ультрафіолетовим випромінюванням, гамма-випромінюванням або за допомогою обробки відбілювачем, пероксидом водню, хлороформом, фенолом або оцтовою кислотою, у порівнянні з такими ж спорами, що не містять мутацію в білку оболонки або кори спори, обробленими в тих же умовах.
МІ. Рекомбінантні представники сімейства Васійш5 сегеи5, які надекспресують ферменти екзоспорію, що мають сприятливі ефекти на рослини або сповільнюють проростання спор представника сімейства Васійи5 сегеий5
І00294| Також передбачаються рекомбінантні представники сімейства Васійш5 сегеив, які надекспресують різні білки екзоспорію для забезпечення корисних ефектів на рослину або сповільнюють проростання спор.
Зо І00295| Передбачається рекомбінантний представник сімейства ВасшШиє сегеив5, який експресує білок екзоспорію, де експресія білка екзоспорію збільшена в порівнянні з експресією білка екзоспорію в представнику сімейства Васіїйй5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах. Білок екзоспорію може містити фермент екзоспорію, де фермент екзоспорію включає фермент, залучений у солюбілізацію поживних речовин, інозинуридингідролазу, протеазу, фермент, який каталізує деградацію вільних радикалів, аргіназу або аланінрацемазу. Альтернативно білок екзоспорію може включати білок ВСІА, білок ВсІВ, білок СОЇЕ, білок Со, білок Ех5У, білок
ЕхХ5ГА/ВхрВ, білок СоїУ, білок ЕХ5ЕВ, білок Ех5у, білок Ех5Н, білок хМісА, білок Х|СВ, білок ВсІС, білок ВхрА, білок ВсіІЕ, білок Вегх//ВА5З3290, білок Ех5А, білок Ех5К, білок Ех5В, білок Марс або білок Та. (00296) Білок екзоспорію переважно не є частиною злитого білка.
І00297| Ілюстративні амінокислотні послідовності Асрс, ІппАТ, ІпрА2г, ІпрАЗ, БОВБАТ1 і БОБА?2 надані вище в таблицях 1 і 2. Ілюстративні послідовності для аланінрацемази 1, аланінрацемази 2, аргінази, ІПН і ІшпНа2 відповідають 5ЕО ІЮ МО, зазначеним у таблиці нижче.
Таблиця 6
Ілюстративні амінокислотні послідовності ферментів екзоспорію (00298) Надекспресія інозинуридингідролаз і аланінрацемаз перешкоджає здатності спор до проростання і, тим самим, підтримує спори на стадії спокою і підвищує стабільність спор.
І00299| Ферменти ЗОБА і аргіназа деградують вільні радикали. Спори, які надекспресують ці ферменти, мають збільшену стійкість до стресових впливів, викликаних вільними радикалами. 003001 Коли білок екзоспорію включає фермент екзоспорію, і фермент екзоспорію включає бо фермент, залучений у солюбілізацію поживних речовин, фермент, залучений у солюбілізацію поживних речовин, може включати фермент, залучений у солюбілізацію фосфатів, такий як кисла фосфатаза (наприклад, АсрсС). Кисла фосфатаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 137.
І00301| Кисла фосфатаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 137.
І00302| Кисла фосфатаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9895 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 137. 00303) Кисла фосфатаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 137.
Ї00304| Кисла фосфатаза може містити амінокислотну послідовність, яка має 100905 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 137. 00305) Коли білок екзоспорію включає фермент екзоспорію, і фермент екзоспорію включає інозинуридингідролазу, інозинуридингідролаза може включати /- ІшпНІ1 або ІшпН2.
Інозинуридингідролаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8590 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 250 або 251.
І00306| Інозинуридингідролаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 250 або 251.
І00307| Інозинуридингідролаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 250 або 251.
І00308| Інозинуридингідролаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9895 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 250 або 251.
І00309| Інозинуридингідролаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 250 або 251. 00310) Інозинуридингідролаза може містити амінокислотну послідовність, яка має 10090 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 250 або 251. 00311) Коли білок екзоспорію включає фермент екзоспорію, і фермент екзоспорію включає протеазу, протеаза може являти собою металопротеїназу (наприклад, ІппА!т, ІппАг2 або ІппАЗ).
Металопротеїназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595
Коо) ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 114, 121, 122, 129, 130 або 138.
І00312)| Металопротеїназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 114, 121, 122, 129, 130 або 138. 00313) Металопротеїназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 114, 121, 122, 129, 130 або 138.
І00314| Металопротеїназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 114, 121, 122, 129, 130 або 138. (00315) Металопротеїназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9895 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 114, 121, 122, 129, 130 або 138. 00316) Металопротеїназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 114, 121, 122, 129, 130 або 138.
І00317| Металопротеїназа може містити амінокислотну послідовність, яка має 100905 ідентичності з зФЕО ІЮ МО: 114, 121, 122, 129, 130 або 138. 00318) Коли білок екзоспорію включає фермент екзоспорію, і фермент екзоспорію включає фермент, який каталізує деградацію вільних радикалів, фермент, який каталізує деградацію вільних радикалів, може включати супероксиддисмутазу (наприклад, супероксиддисмутазу 1 (ЗОБАТЇ) або супероксиддисмутазу 2 (5ОБА2)) Супероксиддисмутаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 155 або 156.
І00319| Супероксиддисмутаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 155 або 156.
І00320| Супероксиддисмутаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 155 або 156.
І00321| Супероксиддисмутаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9895 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 155 або 156.
І00322| Супероксиддисмутаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 155 або 156.
І00323| Супероксиддисмутаза може містити амінокислотну послідовність, яка має 10095 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 155 або 156. 00324) Коли білок екзоспорію включає фермент екзоспорію, і фермент екзоспорію включає аргіназу, аргіназа може включати аргіназу Васійй5 ІВПигіпдіеп5із. Аргіназа може містити 60 амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 249.
І00325| Аргіназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9090 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 249.
І00326| Аргіназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 249.
І00327| Аргіназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 98905 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 249.
І00328| Аргіназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9990 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 249. (00329) Аргіназа може містити амінокислотну послідовність, яка має 10095 ідентичності з
ЗЕО І МО: 249. 003301) Коли білок екзоспорію включає фермент екзоспорію, і фермент екзоспорію включає аланінрацемазу, аланінрацемаза може включати аланінрацемазу 1 (АГ К1) або аланінрацемазу 2 (А. К2). Аланінрацемаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8590 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 247 або 248.
І00331| Аланінрацемаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 247 або 248.
І00332| Аланінрацемаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 247 або 248. 00333) Аланінрацемаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9895 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 247 або 248.
І00334| Аланінрацемаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 247 або 248.
І00335| Аланінрацемаза може містити амінокислотну послідовність, яка має 100905 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 247 або 248. 00336) Білок екзоспорію може включати білок ВСІА, білок ВсіВ, білок СОїЕ, білок СОЮ, білок
Ех5У, білок ЕХ5ГА/ВхрВ, білок СоїУ, білок ЕХ5ЕВ, білок Ех5у), білок Ех5Н, білок Х|СА, білок Х|СВ, білок ВсіІС, білок ВхрА, білок ВсіІЕ, білок ВетАі/ВА5З3290, білок Ех5А, білок Ех5К, білок Ех5В, білок
Уарос або білок Тоді. Білок екзоспорію переважно включає білок ВсіА, білок ВсіВ, білок СОЇЕ або білок СОЮ. Ілюстративні амінокислотні послідовності для цих білків екзоспорію можуть бути
Зо знайдені в таблиці 2 вище.
І00337| Білок екзоспорію може включати білок ВСІА. Білок ВСІА може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85595 ідентичності з зЗЕО ІЮ МО: 141 або 142. 00338) Білок ВсІА може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 90905 ідентичності з зЗЕО ІЮ МО: 141 або 142.
ІЇ00339| Білок ВсІА може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9590 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 141 або 142. 00340) Білок ВсІА може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9890 ідентичності з ЗЕО ІЮО МО: 141 або 142. 00341) Білок ВсІА може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 99905 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 141 або 142.
І00342| Білок ВСІА може містити амінокислотну послідовність, яка має 10095 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 141 або 142. 00343) Білок екзоспорію може включати білок ВсІВ. Білок ВСІВ може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85595 ідентичності з зЗЕО ІЮ МО: 143 або 144.
І00344| Білок ВсІВ може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9090 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 143 або 144. 00345) Білок ВсІВ може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9590 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 143 або 144.
І00346| Білок ВсІВ може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9890
БО ідентичності з ЗЕО ІЮО МО: 143 або 144.
І00347| Білок ВсІВ може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 99905 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 143 або 144. 00348) Білок ВсСІВ може містити амінокислотну послідовність, яка має 10095 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 143 або 144. (00349) Білок екзоспорію може включати білок СОЇЕ. Білок СОЇЕ може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 149. 00350) Білок СОЇТЕ може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9090 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 149. 00351) Білок СОЇТЕ може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9590 60 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 149.
І00352| Білок СОЇТЕ може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9890 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 149. 00353) Білок СОїТЕ може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 99960 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 149.
І00354| Білок СОЇЕ може містити амінокислотну послідовність, яка має 10095 ідентичності з
ЗЕО ІО МО: 149. 00355) Білок екзоспорію може включати білок СОЮ. Білок СОЮ може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЗЕО ІЮ МО: 126. 00356) Білок Со може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9090 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 126.
І00357| Білок Со може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9590 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 126. 00358) Білок Со може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 98905 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 126.
ІЇ00359| Білок СоОТО може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9990 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 126. 00360 Білок СОЮ може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 10090 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 126.
І00361| Білок екзоспорію може включати білок Ех5У. Білок Ехо може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 123. (00362) Білок екзоспорію може включати білок ЕХеЕА/ВхрВ. Білок Ех5РА/ВхрВ може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 95905, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з зЗЕО ІЮ МО: 124. 00363) Білок екзоспорію може включати білок СоїУу. Білок СоїуУ може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 909565, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 125.
ІЇ00364| Білок екзоспорію може включати білок Ех5ЕВ. Білок Ех5ЕВ може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 95905,
Ко) щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з зЗЕО ІЮ МО: 127 або 128. 00365) Білок екзоспорію може включати білок Ех5у. Білок Ех5) може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 131. (00366) Білок екзоспорію може включати білок Ех5Н. Білок ЕхоН може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 132.
І00367| Білок екзоспорію може включати білок ХісА. Білок ХісСА може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 133. 00368) Білок екзоспорію може включати білок ХісВ. Білок Х|сВ може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 134 або 135. 003691 Білок екзоспорію може включати білок ВсісС. Білок ВсіС може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 136. 003701 Білок екзоспорію може включати білок ВхрА. Білок ВхрА може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 145. 00371) Білок екзоспорію може включати білок ВсіІЕ. Білок ВсІЄ може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 146 або 147.
І00372| Білок екзоспорію може включати білок ВехгА/ВА53290. Білок ВеїА/ВА5З3290 може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 90965, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 148. 00373) Білок екзоспорію може включати білок Ех5А. Білок Ех5А може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 150. (00374) Білок екзоспорію може включати білок Ех5К. Білок Ех5К може містити амінокислотну 60 послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше
9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 151. 00375) Білок екзоспорію може включати білок Ех5В. Білок Ех5В може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 909565, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 152.
І00376| Білок екзоспорію може включати білок Марс. Білок Марб може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 95905, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з зЗЕО ІЮ МО: 153.
І00377| Білок екзоспорію може включати білок ТаЇ. Білок Ті білок може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з зЗЕО ІЮ МО: 156.
І00378| Рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегени5 також може експресувати злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегецв5.
МІ. Експресія злитих білків у ендофітних представниках сімейства Васійи5 сегецй5, у представниках сімейства Васійи5 сегецй5, здатних деградувати гербіциди або пестициди, або в пробіотичних представниках сімейства Васіїн5 сегеи5 003791 Будь-який зі злитих білків, що містять білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5, може експресуватися в ендофітному представнику сімейства Васіїйи5 сегеи5, штамі бактерій, який здатний деградувати гербіцид або пестицид, або в пробіотичному штамі бактерій.
ІЇ00380| Експресія злитих білків у ендофітному штамі бактерій забезпечує здатність доставляти білок або пептид, що представляє інтерес, безпосередньо в рослину. Ендофітні штами можна доставляти в рослини з використанням різних способів, наприклад, ендофітні штами можна доставляти за допомогою обробки насіння, обробки середовища для росту рослин (наприклад, грунту), поливу, нанесення на саму рослину (наприклад, позакореневе нанесення на надземні частини рослини). Після потрапляння усередину рослини бактерії збільшуються в кількості і колонізують внутрішні тканини рослини.
ІЇ00381| Як додатково пояснено в даному описі нижче, пробіотичні штами бактерій, які експресують злиті білки, і, зокрема, штами, які є як пробіотичними, так і ендофітними, які експресують злиті білки, є прийнятними в способах доставки білків або пептидів, що представляють інтерес (наприклад, ферментів), тваринам. (003821 Хоча будь-які зі злитих білків, що містять білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васій5 сегеи5, можуть експресуватися в штамі представника сімейства Васійй5 сегеи5, що здатний деградувати гербіцид або пестицид, як додатково пояснено в даному описі нижче, ці штами є особливо прийнятними в способах деконтамінації середовища, забрудненого гербіцидом і/або пестицидом. 00383) Таким чином, даний винахід стосується рекомбінантного представника сімейства
Васійи5 сегеи5, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства
Васійй5 сегеи5, де рекомбінантний представник сімейства Васійн5 сегеи5 включає ендофітний штам бактерій, штам бактерій, що здатний деградувати гербіцид або пестицид, або пробіотичний штам бактерій.
І00384| Ендофітний штам бактерій може включати представник сімейства Васійй5 сегеи5
ЕЕЗ349, представник сімейства Васійи5 сеген5 ЕЕ439, Васійи5 (Пигіпдіепзі5 ЕЕ417, Васійи5 сегеи5
ЕЕ444 або Васійи5 «пигіпдіепзіз ЕЕ319, Васійив ІПигіпдіепзі5 ЕЕ-800184, представник сімейства
Васійни5 сегеив ЕЕ-В800377, Васіїи5 рзеендотусоїде5 ЕЕ-800366 або Васіїи5 тусоіїде5 ЕЕ-800363.
І00385| Наприклад, ендофітний штам бактерій може включати представник сімейства
Васійй5 сегеив ЕЕ439, Васійй5 Шигіпдіеєпвів ЕЕ417, Васійи5 сегеи5 ЕЕ444 або Васійи5
Ішгіпдіепзіз ЕЕЗ19, Васійи5 (Шигіпдіепзії ЕЕ-800184, представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ-
ВвО0377, Васійи5 рсендотусоїде5 ЕЕ-800366 або Васійи5 тусоїде5 ЕЕ-800363.
І00386| Штам бактерій, який здатний деградувати гербіцид або пестицид, може включати представник сімейства Васійй5 сегениз ЕЕЗ349, представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ-800377,
Васійи5 рзендотусоїде5 ЕЕ-800366 або Васійи5 тусоїде5 ЕЕ-800363.
І00387| Пробіотичний штам бактерій може включати представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 60 ЕЕ349, представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ439, Васійи5 (пигіпдіепзіз ЕЕ417 або Васійи5 сегеив ЕЕ44АА.
ІЇ00388| Крім того, даний винахід стосується рекомбінантного представника сімейства
Васійи5 сегеи5, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства
Васійй5 сегеи5, де рекомбінантний представник сімейства Васійй5 сегеи5 включає ендофітний штам бактерій, і злитий білок включає будь-який зі злитих білків, описаних у розділі І вище.
МІ. Націлювальні послідовності, білки екзоспорію і фрагменти білків екзоспорію для застосування в: (а) рекомбінантних представниках сімейства Васійи5 сегецй5, які експресують злитий білок і разом з ним надекспресують білок-модулятор; (5) рекомбінантних представниках сімейства Васіїйи5 сегеи5, що включають мутацію або іншу генетичну зміну, що дозволяє збір вільного екзоспорію; (с) рекомбінантних представниках сімейства Васійи5 сегеи5, що надекспресують протеазу або нуклеазу; (4) рекомбінантних представниках сімейства Васійи5 сегеи5, які експресують злитий білок і надекспресують білок екзоспорію, що має сприятливі ефекти на рослини; або (е) або ендофітних рекомбінантних представниках сімейства Васіййи5 сегеив5, які експресують злиті білки 00389) Будь-які з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію, або білків екзоспорію, описаних у даному розділі, можуть знаходитися в будь-якому зі злитих білків у: (а) будь-якому з рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегец5, які експресують злитий білок і надекспресують білок-модулятор, описаний у розділі ІЇ вище; (Б) будь-якому з рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеив5, які експресують злитий білок і містять або мутацію іншу генетичну зміну, що дозволяє збір вільного екзоспорію, описані в розділі ЇМ вище; (с) будь-якому з рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегец5, які експресують злитий білок і надекспресують протеазу або нуклеазу, описані в розділі М.А; (4) будь-якому з рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегец5, які експресують злитий білок і надекспресують білок екзоспорію, що має сприятливі ефекти на рослини, описані в розділі МІ вище; і (є) будь-якому з ендофітних рекомбінантних представників сімейства Васіїйи5 сегеив5, які
Зо експресують злитий білок, описаний у розділі МІ вище. 00391) Наприклад, націлювальна послідовність може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 5095 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 6395.
І00392| Наприклад, націлювальна послідовність може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 5695 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 6395. 00393) Наприклад, націлювальна послідовність може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 5095 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 7295.
І00394| Наприклад, націлювальна послідовність може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 6295 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 7295. 00395) Наприклад, націлювальна послідовність може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 7595 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 7295.
І00396)| Наприклад, націлювальна послідовність може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 6895 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 8195.
І00397| Наприклад, націлювальна послідовність може містити амінокислотну послідовність,
БО яка має щонайменше приблизно 7595 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 8195. 00398) Наприклад, націлювальна послідовність може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 8195 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 8195.
І00399| Наприклад, націлювальна послідовність може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 8195 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 9095.
І00400| Наприклад, націлювальна послідовність може складатися з: (а) амінокислотної послідовності, яка складається з 16 амінокислот і має щонайменше приблизно 4395 ідентичності 60 з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 5495; (5) амінокислот 1-35 ЗЕО ІО МО: 1; (с) амінокислот 20-35 5ЕО ІЮ
МО: 1; (4) ЗЕО ІО МО: 1; (є) БЕО ІО МО: 96 або () 5ЕО ІЮ МО: 120. 00401) Націлювальна послідовність, може складатися з амінокислотної послідовності, як описано в цих прикладах.
ІЇ00402| Злитий білок може містити білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, що містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності з зБЕО ІЮ МО: 2, 4, б, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 95, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121 їі 122.
Ї00403| Злитий білок може містити білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, що містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з зБЕО ІЮ МО: 2, 4, б, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 95, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121 їі 122.
ІЇ00404| Злитий білок може містити білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, що містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9895 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 2, 4, б, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 95, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121 їі 122. 00405) Злитий білок може містити білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, що містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з зБЕО ІЮ МО: 2, 4, б, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 95, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121 їі 122. 00406) Злитий білок може містити білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, що містить амінокислотну послідовність, яка має 10095 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 95, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121 ії 122.
Зо Ї00407| Злитий білок може містити білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 60, 62, 64, 66, 68, 70, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94 або 122.
Ї00408| Злитий білок може містити білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 60, 62, 64, 66, 68, 70, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94 або 122.
Ї00409| Злитий білок може містити білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 98595 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 60, 62, 64, 66, 68, 70, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94 або 122.
Ї00410| Злитий білок може містити білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 60, 62, 64, 66, 68, 70, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94 або 122.
Ї00411| Злитий білок може містити білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має 10095 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 60, 62, 64, 66, 68, 70, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94 або 122.
І00412| Націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію злитого білка можуть містити амінокислотну послідовність СХТ на С-кінці, де Х являє собою будь-яку амінокислоту.
І00413| Націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть містити залишок аланіну в положенні націлювальної послідовності, що відповідає амінокислоті 20 5ЕО ІЮО МО: 1. (00414) Націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, крім того, можуть містити залишок метіоніну, серину або треоніну в амінокислотному положенні, що безпосередньо передує першій амінокислоті націлювальної послідовності білка екзоспорію або фрагмента білка екзоспорію або в положенні націлювальної послідовності, що відповідає амінокислоті 20 5ЕО ІЮО МО: 1.
ЇХ. Злиті білки, які містять білок або пептид, що представляє інтерес, і білок оболонки спори, рекомбінантні бактерії що формують оболонку спори, і насіння, покрите рекомбінантними бактеріями, які формують оболонку спори
А. Білки оболонки спори, які можна використовувати для націлювання злитого білка, що 60 містить білок оболонки спори, на поверхню спори рекомбінантної спороутворювальної бактерії
00415) Для експонування білків або пептидів, що представляють інтерес, на поверхні спори рекомбінантної спороутворювальної бактерії можна використовувати ряд білків оболонки спори.
Такі бактерії включають будь-які спороутворювальні бактерії і, зокрема, включають бактерії родів Васіййи5, І увзіпірасійи5, Мігдіпірасійи5, Сіовігідіа і Раепірбасійн5. Спороутворювальні бактерії роду Васійй5 включають представників сімейства Васіїйй5 сегецйв5, а також інші види Васі|н5, які не є представниками сімейства Васіїйи5 сегеи5 (наприклад, бактерії виду Васіййш5, які позбавлені екзоспорію). Ці білки оболонки спори включають СоїВ, СоїС, СдеА, СоїВ/Н, Соїб, білок оболонки спори Х і СоїУ. Для простоти посилання, опис амінокислотних послідовностей для ілюстративних білків оболонки спори, які можна використовувати для націлювання білків або пептидів, що представляють інтерес, на поверхню спори рекомбінантної спороутворювальної бактерії, представлені в таблиці 7 нижче разом з їхньою 5ЕО ІЮ МО.
Таблиця 7
Послідовності білків оболонки спори, використовувані для націлювання білків і пептидів, що представляють інтерес, на поверхню спори рекомбінантної спороутворювальної бактерії
В. Злиті білки, які містять білок або пептид, що представляє інтерес, і білок оболонки спори (00416) Даний винахід також стосується злитих білків, що містять щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і білок оболонки спори, де білок оболонки спори включає білок СоїЇВ/Н, білок спори Х або білок СоїУ, де білок СоїУ містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 80595 ідентичності з ЗЕО ІЮО МО: 258 або 259.
І00417| Наприклад, білок оболонки спори може включати білок СоїВ/Н. (00418) Наприклад, білок оболонки спори може включати білок спори Х. (00419) Наприклад, білок оболонки спори може включати білок СоїУ, де білок СоїУ містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8095 ідентичності з зЗЕО ІЮ МО: 258 або 259.
Ї00420| Білок оболонки спори може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 255, 257, 258 або 259.
І00421| Білок оболонки спори може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 90595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 255, 257, 258 або 259.
І00422| Білок оболонки спори може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 255, 257, 258 або 259.
І00423| Білок оболонки спори може містити амінокислотну послідовність, яка має
Ко) щонайменше 9895 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 255, 257, 258 або 259.
І00424| Білок оболонки спори може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 255, 257, 258 або 259.
ІЇ00425| Білок оболонки спори може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 10095 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 255, 257, 258 або 259.
С. Рекомбінантні бактерії, які формують оболонку спори, які експресують злиті білки, і насіння рослин, покрите рекомбінантними бактеріями, що формують оболонку спори (00426) Передбачаються рекомбінантні спороутворювальні бактерії, які експресують будь-які зі злитих білків, описаних у розділі ЇХ.В. Рекомбінантні спороутворювальні бактерії можуть включати ендофітний штам бактерій, штам бактерій, що стимулює ріст рослин, або штам бактерій, який є як ендофітним, так і стимулюючим ріст рослин.
І00427| Крім того, даний винахід стосується рекомбінантної спороутворювальної бактерії, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і білок оболонки спори, який націлює злитий білок на поверхню спори бактерії, де білок оболонки спори включає білок СоїВ, білок СоїС, білок СдеА, білок СоїВ/Н, білок Соїб, білок оболонки Х або білок Соїм; і де рекомбінантна спороутворювальна бактерія включає ендофітний штам бактерій, що стимулює ріст рослин штам бактерій або штам бактерій, який є як ендофітним, так і стимулюючим ріст рослин. (00428) Експресія злитого білка в ендофітному штамі бактерій дозволяє доставку білка або пептиду, що представляє інтерес, усередину рослини. Ендофітні штами можна доставляти в рослини з використанням різних способів, наприклад, ендофітні штами можна доставляти за допомогою обробки насіння, обробки середовища для росту насіння (наприклад, грунту), поливу, нанесення безпосередньо на рослину (наприклад, позакореневе нанесення на надземні частини рослини). Після потрапляння в рослину бактерії збільшуються в кількості і колонізують внутрішні тканини рослини.
ІЇ00429| Даний винахід також стосується насіння рослин, покритого рекомбінантною спороутворювальною бактерією, де рекомбінантна спороутворювальна бактерія експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і білок оболонки спори, який націлює злитий білок на поверхню спори бактерії, де білок оболонки спори включає білок СоїВ, білок СоїС, білок СдеА, білок СоїЇВ/Н, білок Соїб, білок спори Х або білок сої. 00430) Рекомбінантна бактерія, що формує оболонку спори, може включати бактерію роду
ВасйШивх або І узіпірасіїив.
ІЇ00431| Крім того, даний винахід стосується рекомбінантної бактерії роду Васіййи5, де рекомбінантна бактерія включає рекомбінантну спороутворювальну бактерію і де рекомбінантна спороутворювальна бактерія експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і білок оболонки спори, що націлює злитий білок на поверхню спори бактерії, де білок оболонки спори включає білок СоїЇВ, білок СоїС, білок СдеА, білок
СоїВ/Н, білок Соїб, білок оболонки Х або білок СоїуУ. Рекомбінантна спороутворювальна бактерія експресує протеазу або нуклеазу, де експресія протеази або нуклеази збільшена в порівнянні з експресією протеази або нуклеази в бактерії дикого типу роду Васіїйш5 у тих же умовах, і де збільшена експресія протеази або нуклеази частково або повністю інактивує спори рекомбінантної бактерії роду Васіййи5 або підвищує чутливість спори рекомбінантної бактерії роду Васіййн5 до фізичної або хімічної інактивації. Протеаза або нуклеаза може являти собою кожну з протеаз або нуклеаз, описаних вище в розділі М.А, і вона може експресуватися під контролем будь-яких промоторів, описаних вище в розділі М.А. Крім того, винахід стосується
Зо насіння рослин, покритого такими спороутворювальними бактеріями. Рекомбінантна бактерія може містити ендофітний штам бактерій, що стимулює ріст рослин штам бактерій, або штам бактерій, який є як ендофітним, так і стимулюючим ріст рослин.
Ї00432| У будь-яких з насіння рослин, описаних у цьому розділі, рекомбінантна спороутворювальна бактерія може включати ендофітний штам бактерій, що стимулює ріст рослин штам бактерій, або штам бактерій, який є як ендофітним, так і стимулюючим ріст рослин. 004331) У будь-яких з рекомбінантних спороутворювальних бактерій або насіння, ендофітний штам бактерій, що стимулює ріст рослин штам бактерій, або штам бактерій, який є як ендофітним, так і стимулюючим ріст рослин, може включати ВасшШи5 тедаїегічт ЕЕ385, Васійнив5 5р. ЕЕ387, Васійи5 сігсціап5 ЕЕЗ88, Васійн5 5ибБійб ЕЕ405, І убзіпірасійи5 тТи5йоптіє ЕЕ442 або
Гузіпірасіїйш5 5рнпаегсиє ЕЕ443, Васі ритій5 ЕЕ-В00143, Васіїйи5 виб ЕЕ148, Васійи5 5,ИБій5 ЕЕ218 або Васійй5 тедаїегішт ЕЕ281. Наприклад, ендофітний штам бактерій може включати Васійи5 5!,ибійй ЕЕ405 або Васійи5 тедаїегішт ЕЕЗ385.
І00434| Альтернативно, ендофітний штам, штам бактерій, що стимулює ріст рослин, або штам бактерій, який є як ендофітним, так і стимулюючим ріст рослин, може включати представник сімейства Васіййи5 сегени5 ЕЕЗ349, представник сімейства Васійш5 сегеи5 ЕЕ439,
Васійив5 Іпигіпдіепзіє ЕЕ417, Васійи5 сегеи5 ЕЕ444 або Васійи5 (Пигіпдіеп5із ЕЕЗ319, Васійи5
ІШшгіпдіепвіє ЕЕ-800184, представник сімейства Васійн5 сегеиз ЕЕ-В00377, Васіїи5 рзейдотусоїде5 ЕЕ-800366, Васіййи5 тусоїдез ЕЕ-800363, Васійи5 тусоіїдез5 ВТ155, Васійшв5 тусоїде5 ЕЕ118, Васійй5 тусоіїде5 ЕЕ141, Васійш5 тусоїдез5 ВТ46-3, представник сімейства
Васійи5 сегеи5 ЕЕ128, Васійи5 «(пигіпдіепзіз ВТО1ЗА або представник сімейства Васіїйн5 сегей5
ЕЕЗ49.
І00435| У будь-яких з рекомбінантних спороутворювальних бактерій або насіння, білок оболонки спори може містити амінокислотну послідовність яка має щонайменше 8595 ідентичності з будь-якою з 5ЕО ІЮ МО: 252-259.
ІЇ00436| Білок оболонки спори може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності з будь-якою з 5ЕО ІЮ МО: 252-259.
ІЇ00437| Білок оболонки спори може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з будь-якою з 5ЕО ІЮ МО: 252-259. бо ІЇ00438| Білок оболонки спори може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9855 ідентичності з будь-якою з 5ЕО ІЮ МО: 252-259.
Ї00439| Білок оболонки спори може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з будь-якою з 5ЕО ІЮ МО: 252-259.
І00440| Білок оболонки спори може містити амінокислотну послідовність, яка має 10095 ідентичності з будь-якою з 5ЕО ІЮ МО: 252-259.
І00441| Також передбачається рекомбінантна спороутворювальна бактерія, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і білок, який націлює злитий білок на поверхню спори бактерії. Рекомбінантна спороутворювальна бактерія не є рекомбінантним представником сімейства Васійи5 сегеи5. Білок, який націлює злитий білок на поверхню спори бактерії, включає амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1, 5ЕО І
МО: 96 або амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЕО ІЮ МО: 108, 5ЕО ІЮО МО: 111, 5ЕО ІЮ МО: 114, 5ЕО ІЮ МО: 120 або 5ЕО ІО МО: 121.
І00442| Білок, який націлює злитий білок на поверхню спори бактерії, може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 108, 5ЕО ІЮ
МО: 111, БЕО ІЮ МО: 114, 5ЕО ІО МО: 120 або 5ЕО ІО МО: 121.
І00443| Білок, який націлює злитий білок на поверхню спори бактерії, може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 108, 5ЕО ІЮ
МО: 111, БЕО ІЮ МО: 114, 5ЕО ІО МО: 120 або 5ЕО ІО МО: 121.
І00444| Білок, який націлює злитий білок на поверхню спори бактерії, може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9895 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 108, 5ЕО І
МО: 111, БЕО ІЮ МО: 114, 5ЕО ІО МО: 120 або 5ЕО ІО МО: 121.
І00445| Білок, який націлює злитий білок на поверхню спори бактерії, може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з зБЕО ІЮ МО: 108, 5ЕО ІЮ
МО: 111, БЕО ІЮ МО: 114, 5ЕО ІО МО: 120, або ЗЕО ІЮ МО: 121.
І00446| Білок, який націлює злитий білок на поверхню спори бактерії, може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 10095 ідентичності з БЗЕО ІЮ МО: 108, 5ЕО ІЮ
МО: 111, 5ЕО І МО: 114, 5ЕО ІЮО МО: 120 або 5ЕО І МО: 121.
І00447| Наприклад, білок, який націлює злитий білок на поверхню спори бактерії, може містити амінокислоти 20-35 5БЕО ІЮ МО: 1, 5ЕО ІО МО: 96, 5ЕО ІО МО: 108, 5ЕО ІЮО МО: 120 або
Коо) ЗЕО І МО: 121. (00448) Рекомбінантна спороутворювальна бактерія включає ендофітний штам бактерій, що стимулює ріст рослин штам бактерій, або штам бактерій, який є як ендофітним, так і стимулюючим ріст рослин. Наприклад, ендофітний штам бактерій, штам бактерій, що стимулює ріст рослин, або штам бактерій, який є як ендофітним, так і стимулюючим ріст рослин, включає
Васйи5 тедаїегпит ЕЕЗ385, Васійн5 5р. ЕЕЗ87, Васіїйи5 сіксшапе ЕЕЗ88, Васійи5 зИиБшШів5 ЕЕ405,
Гузіпірасіїйиє Ти5Поптів ЕЕ442, Іувзіпірасійи5 5рпаєгісизє ЕЕ443, Васіййє ритіи5 ЕЕ-В00143,
Васійив5 зибБійБ ЕЕ148, Васійи5 з,ирійвБ ЕЕ218 або Васійи5 тедаїегішт ЕЕ281. Ендофітний штам бактерій переважно включає Васійи5 5р. ЕЕ387.
Х. Способи одержання злитих білків
І00449| Будь-який зі злитих білків, описаних у даному описі, можна одержувати з використанням стандартних способів клонування і молекулярної біології, відомих у даній галузі.
Наприклад, ген, що кодує білок або пептид, що представляє інтерес (наприклад, ген, що кодує білок або пептид, що стимулює ріст рослин), можна ампліфікувати за допомогою полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) і лігувати із ДНК, що кодує будь-які з описаних вище націлювальних послідовностей, білків екзоспорію, фрагментів білків екзоспорію або білків оболонки спори, з одержанням молекули ДНК, яка кодує злитий білок. Молекулу ДНК, яка кодує злитий білок, можна клонувати у будь-який прийнятний вектор, наприклад, плазмідний вектор. Вектор у прийнятному випадку включає ділянку множинного клонування, у яку можна без зусиль вбудовувати молекулу ДНК, що кодує злитий білок. У прийнятному випадку вектор також
БО містить селективний маркер, такий як ген стійкості до антибіотика, так щоб бактерії, трансформовані, трансфіковані або схрещені з вектором, можна було без зусиль ідентифікувати і виділяти. Коли вектор являє собою плазміду, плазміда в прийнятному випадку також містить оріджин реплікації. Альтернативно ДНК, що кодує злитий білок, можна вбудовувати в хромосомну ДНК представника сімейства В. сеген5 або спороутворювальної бактерії-хазяїна.
ХІ. Мітки, маркери і лінкери, що можуть бути включені в злиті білки 004501 Будь-які зі злитих білків, описаних у даному описі, також можуть включати додаткові поліпептидні послідовності, які не є частиною націлювальної послідовності білка екзоспорію, фрагмента білка екзоспорію або стимулюючого ріст рослин білка або пептиду, білка або бо пептиду, що захищає рослину від патогена, білка або пептиду, що підвищує стійкість рослини до стресу або білка або пептиду, що зв'язується з рослиною. Наприклад, злитий білок може включати мітки або маркери для полегшення або очищення візуалізації злитого білка (наприклад, полігістидинова мітка або флуоресцентний білок, такий як СЕР або УЕР) або візуалізації спор рекомбінантного представника сімейства Васійй5 сегеи5, які експресують злитий білок. 00451) Експресія злитих білків на екзоспорії представника сімейства Васійи5 сегеи5 або на поверхні спори спороутворювальної бактерії з використанням націлювальних послідовностей, білків екзоспорію, фрагментів білків екзоспорію і білків оболонки спори, описаних у даному описі, підвищується унаслідок відсутності вторинної структури на М-кінцях цих послідовностях, що забезпечує нативне укладання злитих білків і збереження активності. Належне укладання, крім того, може бути поліпшена шляхом включення короткого амінокислотного лінкера між націлювальною послідовністю, білком екзоспорію, фрагментом білка екзоспорію, білком оболонки спори і білком або пептидом, що представляє інтерес. (00452) Таким чином, будь-який зі злитих білків, описаних у даному описі, може включати амінокислотний лінкер між націлювальною послідовністю, білком екзоспорію, фрагментом білка екзоспорію або білком оболонки спори і білком або пептидом, що представляє інтерес.
І00453| Лінкер може включати поліаланіновий лінкер або полігліциновий лінкер. Також можна використовувати лінкер, що містить суміш залишків як аланіну, так і гліцину. (00454) Наприклад, у злитому білку, у якому націлювальна послідовність містить ЗЕО ІЮ МО: 1, злитий білок може мати одну з наступних структур:
Немає лінкера: 5ЕО ІЮО МО: 1-РОЇ
Аланіновий лінкер: ЗЕО ІЮ МО: 1-Ап-РОЇ
Гліциновий лінкер: ЗЕО ІЮ МО: 1-С1и-РОЇ
Змішаний аланіновий і гліциновий лінкер: БЕО ІЮ МО: 1 - (А/С) - РОЇ, де Ап, Сп ії (А/З)ла являють собою будь-яку кількість залишків аланіну, будь-яку кількість залишків гліцину або будь-яку кількість залишків суміші аланіну і гліцину, відповідно. Наприклад, п може складати від 1 до 25, і переважно складає від б до 10. Коли лінкер містить суміш залишків аланіну і гліцину, можна використовувати будь-яку комбінацію залишків гліцину й аланіну. В описаних вище структурах, "РО!" являє собою білок або пептид, що представляє
Зо інтерес.
ІЇ00455| Альтернативно або додатково, лінкер може включати ділянку розпізнавання протеазою. Включення ділянки розпізнавання протеазою дозволяє спрямоване видалення під впливом протеази, що розпізнає ділянку розпізнавання протеазою, білка або пептиду, що представляє інтерес.
ХІІ. Білки і пептиди, які представляють інтерес
І00456| Білок або пептид, що представляє інтерес, може включати будь-який білок або пептид.
І00457| Білок або пептид, що представляє інтерес, у злитих білках, описаних у даному описі, може включати, наприклад: (а) стимулюючий ріст рослин білок або пептид; (Б) білок або пептид, що захищає рослину від патогена; (с) білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів; (4) пептид або білок, що зв'язується з рослиною; (е) фермент, який каталізує продукції оксиду азоту; (Її) білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту; або (д) сигнальну молекулу рослини або білок або пептид, що змінює склад рослини; (п) антиген; (Її) фермент рекультивації; () фермент, прийнятний для руйнування емульсії або гелю в рідині гідророзриву пласту; або (К) антибактеріальний білок або пептид.
А. Стимулюючі ріст рослини білки або пептиди (004581) Білок або пептид, що представляє інтерес, може включати стимулюючий ріст рослин білок або пептид.
І00459| Стимулюючий ріст рослин білок або пептид може включати пептидний гормон, негормональний пептид, фермент, залучений у продукцію або активацію сполуки, що стимулює ріст рослин, або фермент, який деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин. (00460) Наприклад, білок або пептид, що стимулює ріст рослин, може включати пептидний гормон.
І00461| Пептидний гормон може включати фітосульфокін (наприклад, фітосульфокін-о), сіамава З (СІ М3), системін, 2тісЕ або ЗСЕ/5РІ11. (00462) Стимулюючий ріст рослин білок або пептид може включати негормональний пептид.
І00463| Негормональний пептид може включати ККМ 16010, Но-5ум46, пептид еМмоЮа40, меліттин, мастопаран, Ма57, ЕНРР, РОГ АКІЗ5 або інгібітор трипсину Кипіїх (КТІ). бо (00464| Стимулюючий ріст рослин білок або пептид може включати фермент, залучений у продукцію або активацію стимулюючої ріст рослин сполуки. Фермент, залучений у продукцію або активацію стимулюючої ріст рослин сполуки, може являти собою будь-який фермент, який каталізує будь-яку стадію біологічного шляху синтезу сполуки, що стимулює ріст рослини або змінює структуру рослини, або будь-який фермент, який каталізує конвертування неактивної або менш активної похідної сполуки, що стимулює ріст рослини або змінює структуру рослини, в активну або більш активну форму сполуки.
І00465| Сполука, яка стимулює ріст рослин, може включати сполуку, яка продукується бактеріями або грибами в ризосфері, наприклад 2,3-бутандіол.
І00466| Альтернативно, стимулююча ріст рослин сполука може включати гормон росту рослин.
І00467| Гормон росту рослин може включати цитокінін або похідне цитокініну, етилен, ауксин або похідне ауксину, гіберелову кислоту або похідне гіберелової кислоти, абсцизову кислоту або похідне абсцизової кислоти, або жасмонову кислоту або похідне жасмонової кислоти.
І00468| Коли стимулююча ріст рослин сполука включає цитокінін або похідне цитокініну, цитокінін або похідне цитокініну може включати кінетин, цис-зеатин, транс-зеатин, 6- бензиламінопурин, дигідроксизеатин, Мб6-(О2-ізопентеніл)аденін, рибозилзеатин, М6-(02- ізопентеніл)аденозин, 2-метилтіо-цис-рибозилзеатин, цис-рибозилзеатин, транс-рибозилзеатин, 2-метилтіо-транс-рибозилзеатин, рибозилзеатин-о-монофосфат, Мб-метиламінопурин, /Мб- диметиламінопурин, 2'-дезоксизеатинрибозид, 4-гідрокси-3-метил-транс-2-бутеніламінопурин, орто-тополін, мета-тополін, бензиладенін, орто-метилтополін, мета-метилтополін або їхню комбінацію. (00469) Коли стимулююча ріст рослин сполука включає ауксин або похідне ауксину, ауксин або похідне ауксину може включати активний ауксин, неактивний ауксин, кон'югований ауксин, що зустрічається в природі ауксин або синтетичний ауксин, або їхню комбінацію. Наприклад, ауксин або похідне ауксину може включати індол-3-оцтову кислоту, індол-З-піровиноградну кислоту, індол-З-ацетальдоксим, індол-З-ацетамід, індол-3-ацетонітрил, індол-3-етанол, індол-3- піруват, індол-3-ацетальдоксим, індолю-З-масляну кислоту, фенілоцтову кислоту, 4-хлоріндол-
З-оцтову кислоту, кон'югований із глюкозою ауксин або їхню комбінацію.
І00470| Фермент, залучений у продукцію або активацію стимулюючої ріст рослин сполуки,
Зо може включати ацетоїнредуктазу, індол-З-ацетамідгідролазу, триптофанмонооксигеназу, ацетолактатсинтетазу, а-ацетолактатдекарбоксилазу, піруватдекарбоксилазу, діацетилредуктазу, бутандіолдегідрогеназу, амінотрансферазу (наприклад, триптофанамінотрансферазу), триптофандекарбоксилазу, аміноксидазу, індол-3- піруватдекарбоксилазу, індол-З-ацетальдегіддегідрогеназу, оксидазу бічного ланцюга триптофану, нітрилгідролазу, нітрилазу, пептидазу, протеазу, аденозинфосфатізопентенілтрансферазу, фосфатазу, аденозинкіназу, аденінфосфорибозилтрансферазу, СУР7З5А, 5'-рибонуклеотидфосфогідролазу, аденозиннуклеозидазу, зеатин-цис-транс-ізомеразу, зеатин-О-глюкозилтрансферазу, /Д- глюкозидазу, цис-гідроксилазу, цис-гідроксилазу СК, М-глюкозилтрансферазу СК, 2,5- рибонуклеотидфосфогідролазу, аденозиннуклеозидазу, пуриннуклеозидфосфорилазу, зеатинредуктазу, гідроксиламінредуктазу, 2-оксоглутаратдіоксигеназу, о гіберелову 2В/3В гідролазу, гібералін-3-оксидазу, гібералін-20-оксидазу, хітозаназу, хітиназу, В-1,3-глюканазу, Д- 1,4-глюканазу, В-1,6-глюканазу, дезаміназу аміноциклопропан-1-карбонової кислоти або фермент, залучений у продукцію фактора поа (наприклад, подА, поав або поаі).
І00471| Коли фермент містить протеазу або пептидазу, протеаза або пептидаза може являти собою протеазу або пептидазу, що розщеплює білки, пептиди, пробілки або препробілки з утворенням біологічно активного пептиду. Біологічно активний пептид може являти собою будь-який пептид, що демонструє біологічну активність.
І00472| Приклади біологічно активних пептидів включають ККМ 16010 і КЕНРР. 00473) Протеаза або пептидаза, що розщеплює білки, пептиди, пробілки або препробілки з утворенням біологічно активного пептиду, може включати субтилізин, кислу протеазу, лужну протеазу, протеїназу, ендопептидазу, екзопептидазу, термолізин, папаїн, пепсин, трипсин, проназу, карбоксилазу, серинову протеазу, глутамінову протеазу, аспартатну протеазу, цистеїнову протеазу, треонінову протеазу або металопротеїназу.
І00474| Протеаза або пептидаза може розщеплювати білки в багатому білком матеріалі (наприклад, соєвому борошні або дріжджовому екстракті).
І00475| Коли фермент включає хітозаназу, хітозаназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 313. (00476) Хітозаназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 90905 60 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 313.
І00477| Хітозаназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9590 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 313. (00478) Хітозаназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 98905 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 313.
І00479| Хітозаназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 99905 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 313. (00480) Хітозаназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 10090 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 313.
І00481| Наприклад, злитий білок може містити амінокислоти 20-35 ВсіА (амінокислоти 20-35
ЗЕО ІЮО МО: 1) як націлювальну послідовність і амінокислотну послідовність, що містить БЕО ІЮ
МО: 313, як фермент, який є специфічним до клітинного компонента бактерії або гриба. Крім того, злитий білок може містити лінкер (наприклад, поліаланіновий лінкер) між націлювальною послідовністю і ферментом. (00482) Стимулюючий ріст рослин білок або пептид може включати фермент, який деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин. (00483) Фермент, який деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, може включати целюлазу, ліпазу, лігніноксидазу, протеазу, глікозидгідролазу, фосфатазу, нітрогеназу, нуклеазу, амідазу, нітратредуктазу, нітритредуктазу, амілазу, оксидазу аміаку, лігніназу, глюкозидазу, фосфоліпазу, фітазу, пектиназу, глюканазу, сульфатазу, уреазу, ксиланазу або сидерофор. (00484) При додаванні в середовище для росту рослин або нанесенні на рослину, насіння або область, яка оточує рослину або насіння рослини, злиті білки, які містять ферменти, які деградують або модифікують джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, можуть полегшувати переробку поживних речовин поблизу рослини і приводити до посиленого поглинання поживних речовин рослиною або корисними бактеріями або грибами поблизу рослини. (00485) Фермент, який деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, може включати целюлазу.
І00486| Целюлаза може включати ендоцелюлазу (наприклад, ендоглюконаза, така як ендоглюканаза Васійи5 5иЇибБійб5, ендоглюканаза Васійи5 (Пигіпдіепзіз, ендоглюконаза Васійи5 сегеи5 або ендоглюконаза ВасіЇи5 сіацвії), екзоцелюлазу (наприклад, екзоцелюлаза Тгісподегта геезеї) або рД-глюкозидазу (наприклад, р-глюкозидаза Васійи5 5и,ибБій5, В-глюкозидаза ВасшШив
Тигіпдієпвіз, р-глюкозидаза Васійи5 сегеи5 або р-глюкозидаза ВасіШи5 сіашивії). Целюлаза переважно включає ендоглюканазу Васійи5 з,ЇибБіЇ5.
І00487| Ендоглюканаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 311.
І00488| Ендоглюканаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 311.
І00489| Ендоглюканаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 311.
І00490| Ендоглюканаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9895 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 311.
І00491| Ендоглюканаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 311.
І00492| Ендоглюканаза може містити амінокислотну послідовність, яка має 10095 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 311. 00493) Наприклад, злитий білок може містити амінокислоти 20-35 ВсіА (амінокислоти 20-35
ЗЕО ІЮО МО: 1) як націлювальну послідовність і амінокислотну послідовність, що містить БЕО ІЮ
МО: 311, як фермент, який деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин. Крім того, злитий білок може містити лінкер (наприклад, поліаланіновий лінкер) між націлювальною послідовністю і ферментом. (00494) Фермент, який деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, може включати ліпазу (наприклад, ліпаза Васійиє5 5ирійб, ліпаза Васійн5
ІШигіпдіепві5, ліпаза Васійи5 сегеи5 або ліпаза Васійїи5 сіацшвії). 00495) Фермент, який деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, може включати оксидазу лігніну. Наприклад, оксидаза лігніну може включати пероксидазу лігніну, лаказу, гліоксальоксидазу, лігніназу або марганцеву пероксидазу. (00496) Фермент, який деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, може включати протеазу. Наприклад, протеаза може включати субтилізин, кислу 60 протеазу, лужну протеазу, протеїназу, пептидазу, ендопептидазу, екзопептидазу, термолізин,
папаїн, пепсин, трипсин, проназу, карбоксилазу, серинову протеазу, глутамінову протеазу, аспартатну протеазу, цистеїнову протеазу, треонінову протеазу або металопротеїназу.
І00497| Фермент, який деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, може включати фосфатазу. Наприклад, фосфатаза може включати гідролазу складних моноефірів фосфорної кислоти, фосфомоноестеразу (наприклад, РПоАХ4), гідролазу складних діефірів фосфорної кислоти, фосфодиестеразу, гідролазу складних моноефірів трифосфорної кислоти, фосфорилангідридгідролазу, пірофосфатазу, фітазу (наприклад, фітаза
Васійиє виб ЕЕ148 або фітаза ВасшШи5 игіпдіепзіз ВТО1З3А), триметафосфатазу або трифосфатазу. (00498) Фермент, який деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, може включати нітрогеназу. Наприклад, нітрогеназа може включати нітрогеназу сімейства Мії (наприклад, МИВОЕНКМХМУ Раепірасіїи5 таззіїепвів).
І00499| Фермент, який деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, може включати фосфоліпазу. Наприклад, фосфоліпаза може включати фосфоліпазу АТ, фосфоліпазу А2, фосфоліпазу С, фосфоліпазу ОО або лізофосфоліпазу.
Фосфоліпаза переважно включає фосфоліпазу С.
І00500| Фосфоліпаза С може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 312.
І00501| Фосфоліпаза С може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 312.
І00502| Фосфоліпаза С може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 312.
І00503| Фосфоліпаза С може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9895 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 312.
І00504| Фосфоліпаза С може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з ФБЕО ІЮО МО: 312.
Ї0050О5| Фосфоліпаза С може містити амінокислотну послідовність, яка має 100905 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 312. 00506) Наприклад, злитий білок може містити амінокислоти 20-35 ВсіА (амінокислоти 20-35
Зо ЗЕО ІЮО МО: 1) як націлювальну послідовність і амінокислотну послідовність, що містить ЗЕО ІЮ
МО: 312, як фермент, що деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин. Крім того, злитий білок може містити лінкер (наприклад, поліаланіновий лінкер) між націлювальною послідовністю і ферментом.
В. Білки або пептиди, які захищають рослини від патогенів
І00507| Білок або пептид, що представляє інтерес, може включати білок або пептид, що захищає рослину від патогена. 00508) Білок або пептид, що захищає рослину від патогена, може включати білок або пептид, що підсилює імунну систему рослин. 00509) Наприклад, білок або пептид, що підсилює імунну систему рослин, може включати гарпін, гарпін-подібний білок, а-еластин, В-еластин, системін, фенілаланінаміакліазу, еліцитин, дефензин, криптогейн, білок флагелін або пептид флагеліну (наприклад, Пд22). 00510) Білок або пептид, який захищає рослину від патогена, може являти собою білок або пептид, що має антибактеріальну активність, протигрибкову активність, або як антибактеріальну, так і протигрибкову активність. Приклади таких білків і пептидів включають бактеріоцини, лізоцими, пептиди лізоциму (наприклад, ГУ5М), сидерофори, авідини, стрептавідини, нерибосомальні активні пептиди, кональбуміни, альбуміни, лактоферини, пептиди лактоферину (наприклад, І ГсіпВ) і ТазаА. 00511) Білок або пептид, який захищає рослину від патогена, може являти собою білок або пептид, що має інсектицидну активність, гельмінтицидну активність, придушує хижацтво комах
БО або хробаків, або їхню комбінацію. Наприклад, білок або пептид, який захищає рослину від патогена, може включати інсектицидний бактеріальний токсин (наприклад, інсектицидний білок
МІР), ендотоксин, токсин Стгу (наприклад, токсин Сгу з Васійни5 (Пигіпдієепв5ів5), інгібуючий протеазу білок або пептид (наприклад, інгібітор трипсину або інгібітор протеази агоупеавй), цистеїнову протеазу або хітиназу. Коли токсин Стгу містить токсин Сту з Васійи5 (Вигіпдіепві5, токсин Сту може являти собою білок Сту5В або білок Сту21А. Сту5В і Сту21А мають інсектицидну і нематоцидну активність. 00512) Білок, який захищає рослину від патогена, може включати фермент. Наприклад, фермент може включати протеазу або лактоназу. Протеази і лактонази можуть бути специфічними до бактеріальної сигнальної молекули (наприклад, бактеріальна сигнальна 60 молекула гомосерин лактону).
00513) Коли фермент включає лактоназу, лактоназа може включати 1,4-лактоназу, 2-пірон- 4,6-дикарбоксилатлактоназу, З-оксоадипат-енол-лактоназу, актиноміцинлактоназу, дезоксилимонат А-кільцеву лактоназу, глюконолактоназу, І -рамноно-1,4-лактоназу, лимонін-О- кільцеву лактоназу, стероїд-лактоназу, триацетат-лактоназу або ксилоно-1,4-лактоназу.
ІЇ00514| Фермент може включати фермент, який є специфічним до клітинного компонента бактерії або гриба. Наприклад, фермент може включати р-1,3-глюканазу, ВД-1,4-глюканазу, Д-1,6- глюканазу, хітозаназу, хітиназу, хітозаназа-подібний фермент, літиказу, пептидазу, протеазу, протеазу (наприклад, лужну протеазу, кислу протеазу або нейтральну протеазу), мутанолізин, стафолізин або лізоцим.
Ї00515| Коли фермент включає хітозаназу, хітозаназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 313. 00516) Хітозаназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 90905 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 313.
І00517| Хітозаназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9590 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 313. 00518) Хітозаназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 98905 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 313. 00519) Хітозаназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9990 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 313. 00520) Хітозаназа може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 10090 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 313.
І00521| Наприклад, злитий білок може містити амінокислоти 20-35 ВсіА (амінокислоти 20-35
ЗЕО ІЮО МО: 1) як націлювальну послідовність і амінокислотну послідовність, що містить БЕО ІЮ
МО: 313, як фермент, що є специфічним до клітинного компонента бактерії або гриба. Крім того, злитий білок може містити лінкер (наприклад, поліаланіновий лінкер) між націлювальною послідовністю і ферментом.
І00522| Для будь-якого з описаних вище білків або пептидів, які захищають рослину від патогена, патоген може включати білок або пептид, що представляє інтерес, який захищає рослину від бактеріального патогена, патогена хробаків або патогена комах.
Зо ІЇ00523| Наприклад, бактеріальний патоген може включати протеобактерію ос-класу, протеобактерію р-класу, протеобактерію у-класу або їхню комбінацію; або бактеріальний патоген включає Адгорасіегішт Ішптеїасієп5, Рапіоєа в5іеуайії, Епміпіа сагоїомога, Наївіопіа 5оЇапасеагит, Рзейдотопах 5угіпдає, Рзхендотопах аєегидіпоза, Хапіпотопах сатревігі5 або їхню комбінацію.
І00524| Білок або пептид, який захищає рослину від патогена, може включати білок або пептид, який захищає рослину від хижацтва патогена хробаків або комах.
ІЇ00525| Патоген хробаків або комах може включати гусінь, совку-іпсилон, метелика кукурудзяного, совку трав'яну, метелика-совку, хрущика японського, малу кукурудзяну стеблеву вогнівку, довгоносика кукурудзяного, личинку мухи паросткової, гусінь, що випускає павутину, вогнівку кукурудзяну стеблеву, південного кукурудзяного кореневого хробака, південного картопляного дротяника, стеблеву шашіль, жука цукрової тростини, личинку хруща, совку капустяну, довгоносика бавовняного, жовту смугасту гусінь, п'явицю червоногруду, клопа постільного, попелицю, совку малу, мексиканську зернівку бобову, соєву совку, соєву стеблеву шашіль або їхню комбінацію.
С. Білки або пептиди, що підвищують стійкість рослин до стресових впливів 00526) Білок або пептид, що представляє інтерес, може включати білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів.
І00527| Наприклад, білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів, може включати фермент, що деградує сполуку, яка зумовлює стрес. Сполуки, які зумовлюють стрес, включають, але не обмежуються ними, аміноциклопропан-1-карбонову кислоту (АСС), активні форми кисню, оксид азоту, оксиліпіни і феноли. Конкретні активні форми кисню включають гідроксил, пероксид водню, кисень і супероксид.
Ї00528| Фермент, який деградує сполуку, яка зумовлює стрес, може включати супероксиддисмутазу, оксидазу, каталазу, дезаміназу аміноциклопропан-1-карбонової кислоти, пероксидазу, антиоксидантний фермент або антиоксидантний пептид.
Ї00529| Коли фермент, що деградує сполуку, яка зумовлює стрес, включає супероксиддисмутазу, супероксиддисмутаза може включати супероксиддисмутазу 1 (БОБА1) або супероксиддисмутазу 2 (БОБАЗ).
ІЇ00530| Супероксиддисмутаза може містити амінокислотну послідовність, яка має 60 щонайменше 8595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 155 або 156.
Ї00531| Супероксиддисмутаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 155 або 156.
І00532| Супероксиддисмутаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 155 або 156.
Ї00533| Супероксиддисмутаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9895 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 155 або 156.
І00534| Супероксиддисмутаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 155 або 156.
І00535| Супероксиддисмутаза може містити амінокислотну послідовність, яка має 100905 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 155 або 156.
ІЇ00536| Білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів, може включати білок або пептид, який захищає рослину від стресових впливів зовнішнього середовища. Стресові впливи зовнішнього середовища можуть включати, наприклад, посуху, повінь, спеку, заморозки, сіль, важкі метали, низькі значення рн, високі значення рН або їхню комбінацію. Наприклад, білок або пептид, який захищає рослину від стресових впливів зовнішнього середовища, може включати білок, який індукує формування мікрокристалів льоду, проліназу, фенілаланінаміакліазу, ізохоризматсинтазу, ізохоризматпіруватліазу або холіндегідрогеназу. р. Білки або пептиди, що зв'язуються з рослинами
І00537| Білок або пептид, що представляє інтерес, може включати білок або пептид, що зв'язується з рослиною. Білок або пептид, що зв'язується з рослиною, може являти собою будь- який білок або пептид, що здатний специфічно або неспецифічно зв'язуватися з будь-якою частиною рослини (наприклад, корінь рослини або надземна частина рослини, така як листя, стебло, квітка або плід) або з рослинним матеріалом. Таким чином, наприклад, білок або пептид, що зв'язується з рослинами, може являти собою білок або пептид, що зв'язується з коренями, або білок або пептид, що зв'язується з листям.
ІЇ00538| Прийнятні білки і пептиди, що зв'язуються з рослинами, включають адгезини (наприклад, рикадгезин), флагеліни, омптини, лектини, експансини, структурні білки біоплівки (наприклад, ТазА або УпцаВ), білки пілусу, білки завитка, інтиміни, інвазини, аглютиніни й
Зо афімбріальні білки.
Е. Ферменти, які каталізують продукцію оксиду азоту 00539) Багато видів рослин по своїй суті не мають високого рівня проростання. Для таких рослин є бажаним збільшення рівня проростання. Оксид азоту є потужним чинником, який сприяє проростанню, який, коли він знаходиться поблизу насіння рослини, підвищує проростання.
І00540| Даний винахід стосується злитих білків, що містять будь-які з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію, фрагментів білків екзоспорію або білків оболонки спори, описаних у даному описі, і фермент, який каталізує продукцію синтази оксиду азоту. Таким чином, білок або пептид, який представляє інтерес, може включати фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту. Злиті білки, що містять фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, можна експресувати у рекомбінантних представниках сімейства Васійн5 сегеи5 або рекомбінантних спороутворювальних бактеріях для доставки ферменту, що каталізує продукцію оксиду азоту, у насіння рослини, рослину, середовище для росту рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, і, тим самим, для стимуляції проростання.
І00541| Наприклад, фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, може включати синтазу оксиду азоту (наприклад, синтазу оксиду азоту Васійи5 Ійпигіпдіепоі5 або синтазу оксиду азоту
Васіив5 5и,ибійй5, наприклад, синтазу оксиду азоту з Васійй5 (Шигіпдіепзіз ВТО1ЗА або Васійи5 5,иБій5 168) або аргіназу.
І00542| Наприклад, синтаза оксиду азоту може включати одну з амінокислотних послідовностей, описаних нижче в таблиці 8.
Таблиця 8
Ілюстративні послідовності синтази оксиду азоту 00543) Синтаза оксиду азоту також може містити послідовність, що має високий ступінь ідентичності послідовності з послідовностями синтази оксиду азоту, представленими в таблиці 8 вище. Наприклад, синтаза оксиду азоту може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності послідовності з БЕО ІЮ МО: 260 або 261.
Ї00544| Синтаза оксиду азоту може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності послідовності з БЕО ІЮ МО: 260 або 261.
Ї00545| Синтаза оксиду азоту може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності послідовності з «ЗЕО ІЮ МО: 260 або 261.
Ї00546| Синтаза оксиду азоту може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9895 ідентичності послідовності з БЕО ІЮ МО: 260 або 261.
Ї00547| Синтаза оксиду азоту може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9955 ідентичності послідовності з БЕО ІЮ МО: 260 або 261.
Ї00548| Синтаза оксиду азоту може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 10095 ідентичності послідовності з БЗЕО ІО МО: 260 або 261. 00549) Коли білок або пептид, який представляє інтерес, включає синтазу оксиду азоту, злитий білок може містити одну з амінокислотних послідовностей, показаних у таблиці 9 нижче.
У послідовностях, показаних у таблиці 9У нижче, націлювальна послідовність представлена напівжирним шрифтом, лінкер із шести амінокислот зазначений підкресленням і послідовність синтази оксиду азоту представлена звичайним текстом. Таким чином, злитий білок може містити 5ЕО ІЮО МО: 262 або 263.
Таблиця 9
Ілюстративні злиті білки, що містять синтазу оксиду азоту
Меїзамінокислоти 20-35 МАЕОРМІ МаРТІ РРІРРАДДАААМЕЕКЕП М/УМЕАКАРІААСХМОЕ СК
ВСІА, аланіновий лінкер і ЕЕЕМКОВІ АБІКЗЕІОВІ ТАЗУУНТКЕЕГ ЕНСАКМАМ/АМЗМАСІИВІ ЕЕ синтаза оксиду азоту М/М5І ММІОААВСУВТКЕЕМАВОАЇ ЕННІЕТАТММОИКІВ РТІТІЕРРЕЕКСЕ
Васйиз зибійв (ЗЕО І МО: | КОМЕМ/МНОГ ІВМАСМЕЗОСЕВІВОРАБЗСБІ ТААСЕЕ! СМУВСЕНТО 262) ЕОГРІИПЕАМКИарЕОРМУМУМЕЇ РАБІ МІЕМРІТНРОІЕАЕЗОЇІ ЕІ КУ МСА
МРІБОМКГЕМаСсІНУМААРЕМОСУ УМаТЕІСАВМІ АСЕКАМОКІ ККМ
АБМІСІААОУМТОІ МУКООАЇ МЕЇ МКАМІ НЕУККОСМУ5ІМОННТААЗО
ЕКАРЕЕОЕЕЕАСАКІ Таруутгм ІРРІЗРААТНІЕННОМОМБІМКРММЕ
УООКРУЕ
Мей-амінокислоти 20-35 МАЕОРМІ МаРТІ РРІРРАДДАААМ5ОКТКОЇ ІЕЕАЗНЕІТІСУКЕЇ ЗКЕН
ВСІА, аланіновий лінкер і РЕЄЕВМКЕІОАЕІЕКТаТУЕНТЕРЕЕЇ МУНАЗА МАМ АМЗМАСІСВІ ЕМ синтаза оксиду азоту КМНІГОАРЕММОЕЕСМУМУНАЇ ІННІКХМАТМОСКУКРТТІЕКОМОСЕЕМ
Васйизв ІПигіпдієпвів (5ЕО 10 | МІВІУМНО ІЯМАСУКТЕМИаУТар5НОТАЄТОЕСОЕ СМ ОСЕаИтТтМЕ
МО: 263) ОМІ Р МЕБІСЕКАРІУКЕІРКЕЕУКЕУРІЕНРЕУРІББІ САКУУМОаМУРМІ
ЗОМВАГГЕІВИІЗУТААРЕМСОМ УМаТЕІСАВМІ АСНОВУМІ ГРАМАЕМ
МОГ ОТЗАМОИаті мУКоОКАПЕЇ ММАМІ НЗЕККОСУБІМОННТААОСОБО
ОРЕКОЕААСИавВУМТамимуУ РРІ БРАТТНІМНКРУРМЕІКРМЕЕН
Ї0О0550| Як білок або пептид, що представляє інтерес, в злитих білках можна використовувати синтази оксиду азоту з ряду видів, включаючи Васіи5 (пигіпдіепві5, Васійи5 сегеи5, Васійи5 5,ибБій5 і Васійи5 тусоїідев.
Е. Білки і пептиди, що зв'язують нуклеїнові кислоти 00551) Є бажаною доставка нуклеїнових кислот у рослини на полі, однак їй перешкоджає нестабільність нуклеїнових кислот, які швидко деградуються в зовнішньому середовищі (наприклад, у середовищі для росту рослин, такому як грунт).
І00552| Даний винахід стосується злитих білків, що містять будь-які з націлювальних
Зо послідовностей, білків екзоспорію, фрагментів білка екзоспорію або білків оболонки спори, описаних у даному описі, і білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту. Такі злиті білки стабілізують нуклеїнові кислоти, і їх можна використовувати для доставки нуклеїнових кислот у грунт і/або в рослини. 00553) Таким чином, білок або пептид, який представляє інтерес, може включати білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту. Наприклад, білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, може включати РНК-зв'язувальний білок або пептид або ДНК-зв'язувальний білок або пептид.
І(00554| РНК-зв'язувальний білок або пептид може включати неспецифічний РНК-
зв'язувальний білок або пептид або специфічний РНК-зв'язувальний білок або пептид. 00555) Наприклад, РНК-зв'язувальний пептид може включати білок НІід (наприклад, білок
Наї Васійсз ІпПигіпдіепвів). (00556) ДНК-зв'язувальний білок або пептид може включати малий розчинний у кислоті білок спори (БА5БР). Наприклад, БАР може включати 5А5Р, який кодується геном з5рА, геном 55рВ, геном 55РрсС, геном 55рО, геном 55рЕ, геном 55рЕ, геном 55ро, геном 55рнН, геном 55рі, геном
З5ру, геном 55рК, геном 5З5рі, геном 55рМ, геном 55рМ, геном 55ро або геном 55рР.
Наприклад, БАЗР може включати 5БАбРо, ЗАБРІОВ або ЗА5ЗРУуУ. ЗАЗР може включати ЗАЗР
Васійи5 ІпПигіпдівепвів.
ІЇ00557| Білок, який зв'язує нуклеїнову кислоту, може містити одну з амінокислотних послідовностей, описаних нижче в таблиці 10.
Таблиця 10
Ілюстративні послідовності ЗА5Р і НІід 00558) Білок, який зв'язує нуклеїнову кислоту, також може містити послідовність, яка має високий ступінь ідентичності послідовності з будь-якою з послідовностей, представлених вище в таблиці 10. Наприклад, білок, що зв'язує нуклеїнову кислоту, може містити послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 85595 ідентичності з будь-якою з ЗЕО ІЮ МО: 264-266.
ІЇ00559| Білок, який зв'язує нуклеїнову кислоту, може містити послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 9095 ідентичності з будь-якою з БЕО ІЮ МО: 264-266.
ІЇ00560| Білок, який зв'язує нуклеїнову кислоту, може містити послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 9595 ідентичності з будь-якою з БЕО ІЮ МО: 264-266. 00561) Білок, який зв'язує нуклеїнову кислоту, може містити послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 9895 ідентичності з будь-якою з БЕО ІЮ МО: 264-266.
І00562| Білок, який зв'язує нуклеїнову кислоту, може містити послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 9955 ідентичності з будь-якою з БЕО ІЮ МО: 264-266. 00563) Білок, який зв'язує нуклеїнову кислоту, може містити послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 10095 ідентичності з будь-якою з 5ЕО ІЮ МО: 264-266. 00564) Наприклад, коли білок або пептид, який представляє інтерес, включає білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, злитий білок може містити одну з амінокислотних послідовностей, представлених у таблиці 11 нижче. У послідовностях, представлених у таблиці 11 нижче, націлювальна послідовність показана напівжирним шрифтом, амінокислотний лінкер із шести залишків аланіну зазначений підкресленням, і послідовність білка або пептиду, який зв'язує нуклеїнову кислоту (ЗА5Ро, ЗАБРРІ або НІ), показана звичайним текстом. Таким чином, наприклад, злитий білок може містити ЗЕО ІЮО МО: 267, 268 або 269.
Таблиця 11
Ілюстративні злиті білки, що містять білок, який зв'язує нуклеїнову кислоту
Меїнамінокислоти 20-35 ВСІА, МАЕЄЕОРМІ МРТ РРІРРАДДААДААМАООЗАЗНАЗММММО аланіновий лінкер і ЗА5Ро (5ЕО ІЮ ППРОААБЗАЇЕОМКІ ЕІАБЕРИМОЇ САЕТТЗВАМИаЗУССИЕЇТ
МО: 267 КАГУВІ АСООММИаСоОгн
Меїнамінокислоти 20-35 ВСІА, МАЕЄЕОРМІ МЕРТІ РРІРРАДДААДДАМАМММЗСИМОММ МР аланіновий лінкер і ЗАБ5Р»У (ЗЕО ІЮ СААДОАІБОМКІ ЕІАЗЕРСУМІ АОТТЗААМазУССОЄІТКА
МО: 268 ГУ5ЕАОюМмассов
Меїнамінокислоти 20-35 ВСІА, МАЕЄЕОРМІ МРТ РРІРРАДДААДААМКРІМОВОРІ МОТАК аланіновий лінкер і НЯ (ЗЕОІЮ МО: | ЕМТУУТУР І чМагОої ВаОоУкагОМЕТМ ПИ ЕЗЕСКООСИ УК 269 НАІЗТЕРАРОКММОЇ ЕЕ 00565) Також можна використовувати нуклеази як для зв'язування, так і для розщеплення молекул нуклеїнової кислоти. Нуклеази мають високу афінність відносно молекул РНК і ДНК і демонструють їхню ферментативну активність за допомогою розщеплення молекул РНК і/або
ДНК на менші фрагменти РНК і/або ДНК. Нуклеази можуть бути специфічними, такими, що розпізнають і розщеплюють конкретні послідовності ДНК або РНК, або неспецифічними, що розщеплюють будь-яку ДНК і/або РНК, з якою вони контактують. Нуклеази можна підрозділити на екзонуклеази (нуклеази, які відщеплюють нуклеотиди з кінців молекул РНК і/або ДНК) або ендонуклеази (нуклеази, що розщеплюють фосфодіефірний зв'язок у полінуклеотидному ланцюгу). Кожен нуклеазний фермент має активний центр, що містить конкретні амінокислоти, які діють, каталізуючи розщеплення молекули нуклеїнової кислоти. Мутація цих активних центрів може інактивувати активний центр і забезпечити високоафінне зв'язування нуклеази з її субстратом-нуклеїновою кислотою без розщеплення субстрату. Таким чином, такі мутанти можуть зв'язуватися і можуть стабілізувати молекулу нуклеїнової кислоти без розщеплення молекули нуклеїнової кислоти.
Ї00566| Таким чином, білок, що зв'язує нуклеїнову кислоту, може включати нуклеазу (наприклад, нуклеазу, яка має інактивований активний центр).
І00567| Коли білок або пептид, який представляє інтерес, включає білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, з білком або пептидом, який зв'язує нуклеїнову кислоту, може бути зв'язана молекула нуклеїнової кислоти. Нуклеїнова кислота може включати, наприклад, модулюючу молекулу РНК; молекулу РНК-ї; мікроРНК; аптамер або молекулу ДНК, яка кодує модулюючу молекулу РНК, молекулу РНК-ї, мікроРНК або аптамер.
ХІІ. Рекомбінантні представники сімейства Васійи5 сегец5, які є хазяїнами 00568) Як описано вище, представник сімейства Васійи5 сегени5 може служити як хазяїн для експресії злитих білків, які містять націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій представника сімейства Васіййи5 сегеи5; служити як хазяїн для експресії білків-модуляторів, що модулюють експресію злитого білка; служити як хазяїн для надекспресії ферменту екзоспорію; може бути генетично інактивований; або може містити мутацію або іншу генетичну зміну, яка дозволяє збір вільного екзоспорію. 00569) Рекомбінантний представник сімейства Васіїйй5 сегеи5 може спільно експресувати два або більш з будь-яких злитих білків, описаних вище. Наприклад, рекомбінантний
Зо представник сімейства Васійй5 сегеи5 може спільно експресувати щонайменше один злитий білок, який містить білок або пептид, який зв'язується з рослиною, разом зі злитим білком, що містить стимулюючий ріст рослин білок або пептид, злитим білком, що містить білок або пептид, який захищає рослину від патогена, злитим білком, що містить білок або пептид, що підвищує стійкість рослин до стресових впливів, злитим білком, що містить фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, або злитим білком, що містить білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту. 00570) Рекомбінантний представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 може включати будь-який вид
Васійй5, який здатний продукувати екзоспорій. Наприклад, рекомбінантний представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 може включати Васіїи5 апіпгасі5, Васійи5 сегециз5, Васійи5 (Пигіпдієпвів,
Васійи5 тусоіде5, Васіїйи5 рзейдотусоїде5, Васій5 5атапії, Васіїйш5 даєтокКепвів, Васійив5 мжеїіпепзіерпепві5, Васійи5 (оуоіепві5 або їхню комбінацію. Зокрема, рекомбінантний представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 може включати Васійи5 Шигіпдіепзі5 або Васійй5 тусоїдев.
Ї00571| Для одержання рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегецй5, який експресує злитий білок, будь-який представник сімейства Васійн5 сегеи5 можна кон'югувать з, трансдукувати або трансформувати вектором, що кодує злитий білок, з використанням стандартних способів, відомих у даній галузі (наприклад, за допомогою електропорації). Потім бактерії можна піддавати скринінгу для ідентифікації трансформантів будь-яким способом, відомим у даній галузі. Наприклад, коли вектор включає ген стійкості до антибіотика, бактерії можна піддавати скринінгу по стійкості до антибіотика. Альтернативно ДНК, що кодує злитий білок, можна вбудовувати в хромосомну ДНК представника сімейства В. сегеи5, що є хазяїном.
Потім рекомбінантний представник сімейства Васійй5 сегеи5 можна піддавати впливу умов, які індукують споруляцію. Прийнятні умови для індукції споруляції відомі в даній галузі. Наприклад, рекомбінантний представник сімейства Васійш5 сегеи5 можна висівати на чашки з агаром і інкубувати при температурі приблизно 302С протягом декількох діб (наприклад, З доби).
ІЇ00572| Також у прийнятному випадку можна використовувати інактивовані штами, нетоксичні штами або піддані генетичному маніпулюванню штами будь-якого з описаних вище видів. Наприклад, можна використовувати Васійи5 ІПигіпдіепоі5, які позбавлені токсину Сгу.
Альтернативно або додатково, після одержання спор рекомбінантного представника сімейства
В. сегецйв5, які експресують злитий білок, їх можна інактивувати для попередження подальшого бо проростання під час застосування. Можна використовувати будь-який спосіб інактивації бактеріальних спор, що відомий у даній галузі. Прийнятні способи включають, але не обмежуються ними, обробку нагріванням, опромінення гамма-випромінюванням, опромінення рентгенівським випромінюванням, опромінення УФ-А, опромінення УФ-В, хімічну обробку (наприклад, обробка глутаральдегідом, формальдегідом, пероксидом водню, оцтовою кислотою, відбілювачем або будь-якою їх комбінацією), або їхню комбінацію. Альтернативно, можна використовувати спори, які походять з нетоксигенних штамів або генетично або фізично інактивованих штамів.
І00573| Багато штамів представників сімейства Васійи5 сегеи5 мають властиві їм корисні якості. Наприклад, деякі штами мають ефекти прискорення росту рослин. Будь-який з рекомбінантних представників сімейства Васійн5 сегеи5, описаних у даному описі, може включати штам бактерій, який прискорює ріст рослин.
І00574| Штам бактерій, який стимулює ріст рослин, може включати штам бактерій, який продукує інсектицидний токсин (наприклад, токсин Стгу), продукує фунгіцидну сполуку (наприклад, Д-1,3-глюканаза, хітозаназа, літиказа або їхня комбінація), продукує нематоцидну сполуку (наприклад, токсин Сгу), продукує бактерицидну сполуку, є стійким до одного або декількох антибіотиків, містить одну або декілька вільно реплікованих плазмід, зв'язується з коренями рослин, колонізує корені рослин, утворює біоплівки, солюбілізує поживні речовини, секретує органічні кислоти або має будь-яку комбінацію цих ефектів.
І00575| Наприклад, коли рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 включає прискорюючий ріст рослин штам бактерій, прискорюючий ріст рослин штам бактерій може включати (а) Васійн5 тусоїде5 ВТ155 (МКК! Мо В-50921), (Б) Васійи5 тусоїде5 ЕЕ118 (МАК. Мо
В-50918), (с) Васійи5 тусоїде5 ЕЕ141 (МКК. Ме В-50916), (а) Васіїйни5 тусоїде5 ВТ46-3 (МАК Мо
В-50922), (е) представник сімейства Васійн5 сегеи5 ЕЕ128 (МАК Ме В-50917), (1) Васійнв5
ІШигіпдіепзі5 ВТО1ЗА (МКК Мо В-50924), (9) представник сімейства Васійн5 сегенз ЕЕ349 (МКК.
Мо В-50928), (п) представник сімейства Васійи5 сегеиз ЕЕ-800377 (МАНІ. В-671159), (і) Васі рзепдотусоїдез ЕЕ-В00366 (МАВ В-67120) або (Ї) Васійн5 тусоіїдез ЕЕ-В800363 (МАВІ В- 67121). Кожний зі штамів (а)-(у)у був депонований у Опйей Зіаїє5х ЮОерагпітепі ої Адгісийиге (ОБОА) Адгісийига!І Кезеагспй Зегмісе (АК5), за адресою 1815 Мой Опімегейу 5ігеєї, Реогіа,
Шіпоїє 61604 Ш.5.А., 10 березня 2014 року, і ідентифікований за допомогою номера депозиту
МЕ, зазначеного в дужках. Васійи5 (пигіпдіепзіз ВТО1ЗА також відомий як Васіїйи5 (пигіпдіепвів 407. Кожний зі штамів (йп)-() був депонований у ОЗБА АКБ 19 серпня 2015 року, і ідентифікований за допомогою номера депозиту МКК, зазначеного в дужках. (00576) Ці прискорюючі ріст рослин штами були виділені з ризосфер різних сильних рослин і були ідентифіковані по їх послідовностях 165 рРНК (приведених у таблиці 12) і за допомогою біохімічних аналізів. Штами були ідентифіковані щонайменше до їхнього родового позначення за допомогою загальноприйнятих біохімічних і морфологічних індикаторів. Біохімічні аналізи для підтверджених грампозитивних штамів, таких як Васійй5, включали аналіз росту на середовищі
РЕА ї поживному агарі, мікроскопічне дослідження, аналіз росту на середовищі з 595 і 7,590 масі, аналіз росту при рН 5 і рн 9, аналіз росту при 422С ії 502С, визначення здатності продукувати кислоту при ферментації з целобіозою, лактозою, гліцерином, глюкозою, сахарозою, а-манітом і крохмалем; визначення продукції рфлуоресцентного пігменту; визначення гідролізу желатину; аналіз відновлення нітратів; визначення продукції каталази, гідролізу крохмалю; визначення оксидазної реакції, продукції уреази і рухливості. Ідентифікація цих штамів і демонстрація їхніх ефектів прискорення росту рослин описані нижче в прикладах.
Таблиця 12
Часткові послідовності 165 рРНК для прискорюючих рослин ріст представників сімейства Васійи5 сегепв5 там . рибосомальної РНК
І00577| Наприклад, рекомбінантний представник сімейства Васійє5 сегеи5, який містить прискорюючий ріст рослин штам бактерій, може включати Васійн5 тусоїде5 ВТ155, Васійи5 тусоїде5 ЕЕ141 або Васіїи5 (пигіпдіепзі5 ВТО1ЗА. (00578) Рекомбінантний представник сімейства Васіїйн5 сегени5 може включати ендофітний штам бактерій. Наприклад, ендофітний штам бактерій може включати представник сімейства
ВасшШи5 сегеиз ЕЕ349, представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ439, Васійи5 (Пигіпдіепзі5 ЕЕ417,
Васійи5 сегеи5 ЕЕ444 або Васійй5 ІПигіпдіепзіє ЕЕЗ319, Васійи5 игіпдіепзіє ЕЕ-ВО0184, представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ-В800377; Васійй5 рзепдотусоїдез5 ЕЕ-800366 або
Васійи5 тусоїде5 ЕЕ-800363.
І00579| Представник сімейства Васіїйи5 сегеиз ЕЕ349 також являє собою прискорюючий ріст рослин штам бактерій, і він описаний вище. Як додатково описано в прикладах нижче, було виявлено, то представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ349 також є ендофітним. 00580) Представник сімейства Васійй5 сегеи5 ЕЕ439, Васійив5 (Пигіпдіепзіз ЕЕ417, Васі сегеи5 ЕЕ444, Васійи5 ІПигіпдіепвіє ЕЕЗ19, Васйив5 Шигіпдіеєпзіє ЕЕ-800184, представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 ЕЕ-800377; Васіїй5 рзендотусоїде5 ЕЕ-800366 або Васійи5 тусоїде5
ЕЕ-8В800363 описані додатково нижче в розділі ХІМ.
І00581| Ендофітний штам бактерій може включати представник сімейства Васіїйн5 сегеив5
ЕЕ439, Васійи5 Іигіпдієпвів ЕЕ417, Васіїйн5 сегеи5 ЕЕ444, Васіїи5 ІПигіпдіепвзіз ЕЕЗ19, Васйв
ІШшгіпдіепвіє ЕЕ-800184, представник сімейства Васійн5 сегеиз ЕЕ-В00377; Васіїи5 рзенйдотусоїде5 ЕЕ-800366 або Васіїйи5 тусоїде5 ЕЕ-800363.
І00582| Рекомбінантний представник сімейства Васійн5 сегеи5 може включати штам бактерій, який здатний деградувати гербіцид або пестицид. Як додатково розглянуто нижче в прикладах, було виявлено, що представник сімейства Васійй5 сегени5 ЕЕЗ349, представник сімейства Васіїи5 сегеи5 ЕЕ-800377, Васіїи5 рсендотусоїде5 ЕЕ-800366, і Васійи5 тусоїде5 ЕЕ-
ВО0363 здатні деградувати гербіциди і/або пестициди. Таким чином, коли рекомбінантний представник сімейства Васійиє сегеи5 включає штам бактерій, який здатний деградувати гербіцид, штам бактерій, який здатний деградувати гербіцид, може включати представник сімейства Васійш5 сегеи5 ЕЕЗ349, представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ-800377, Васійив рзепдотусоїдез ЕЕ-800366 або Васійи5 тусоїдез5 ЕЕ-800363.
Зо 00583) Штам бактерій, який здатний деградувати гербіцид або пестицид, може деградувати гербіцид на основі сульфонілсечовини (наприклад, сульфентразон), гербіцид на основі арилтриазину, дикамбу, 2,4-О0, фенокси-гербіцид, піретрин, піретроїд або їхню комбінацію.
ІЇ00584| Штам бактерій, який здатний деградувати пестицид, може являти собою штам бактерій, який здатний деградувати піретрин. 00585) Рекомбінантний представник сімейства Васіїйй5 сеген5 може включати пробіотичний штам бактерій. Наприклад, пробіотичний штам бактерій може включати представник сімейства
ВасшШи5 сегеиз ЕЕ349, представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ439, Васійи5 (пигіпдіепзіз ЕЕ417 або Васійи5 сегеи5 ЕЕ444. (00586) Рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеи5 може включати інактивуючу мутацію в його гені ВсіА, його гені СОЇЕ або його гені СОЮ (наприклад, нокаут гена ВсСІА, гена
СоОоїЕ або гена Со). Наприклад, рекомбінантний представник сімейства ВасіШйи5 сегеи5 може включати інактивуючу мутацію в його гені ВсіІА (наприклад, нокаут гена ВсІА). Було виявлено, що експресія злитих білків у рекомбінантному представнику сімейства Васійй5 сегеи5, що має таку мутацію, приводить до збільшених рівнів експресії злитого білка.
ХІМ. Ендофітні бактеріальні штами
І00587| Крім того, даний винахід стосується ендофітних бактеріальних штамів. Хоча багато бактерій ризосфери мають симбіотичну взаємодію з рослиною, тільки невелика підгрупа цих бактерій здатна до інтерналізації в рослину і до ендофітного росту. Як додатково описано в прикладах нижче, кілька штамів представників сімейства Васіїйи5 сегеив і кілька бактеріальних штамів, які не є представниками сімейства Васіїи5 сегец5, було виділено з проростків кукурудзи і було виявлено, що вони мають здатність до ендофітного росту в рослинах.
А. Ендофітні представники сімейства Васійи5 сегеив5
І00588| Даний винахід стосується біологічно чистих бактеріальних культур, що мають здатність до ендофітного росту. Бактеріальний штам у кожній з цих бактеріальних культур може являти собою: (а) представник сімейства Васіййи5 сегени5 ЕЕ439 (МАК! В-50979); (р) Васіїи5
ІШигіпдіепсіє ЕЕ417 (МАНІ В-50974); (с) Васійн5 сегеи5 ЕЕ444 (МАНІ В-50977); (а) Васі
ІШигіпдіепсіє ЕЄЗ319 (МАНІ В-50983), (є) Васіїйи5 (Пийпдіепзіз ЕЕ-800184 (МАНІ В-67122); (1) представник сімейства Васіїйни5 сегеиз ЕЕ-800377 (МАНІ В-67119); (9) Васіїи5 рзендотусоїдев5
ЕЕ-В00366 (МАВІ В-67120) або (п) ВасшШи5 тусоіїдез ЕЕ-800363 (МАВ В-67121). Кожний зі бо штамів (а)-(с) був депонований у Опйей 5(аге5 ЮОерагітепі ої Адгісикиге (ЗОБА) Адгісийигаї
Кезеагсії Зегмісе (АК5), за адресою 1815 Моййп Опімегейу 5ігевї, Реогіа, Шіпоїв 61604 0.5.А., 10 вересня 2014 року, і вони ідентифіковані за допомогою номерів МЕКІ., наданих у дужках після назв кожного штаму. Штам (4) був депонований у ШОБОА АКЗ 17 вересня 2014 року, і він ідентифікований за допомогою номера МКК, наданого в дужках після назви штаму. Кожний зі штамів (е)-(п) був депонований у БОА АКЗ 19 серпня 2015 року й ідентифікований за допомогою номерів МЕК/Г., наданих у дужках, після назв кожного штаму. 005891 Нові штами, описані в даному описі, були ідентифіковані за допомогою секвенування 165 рибосомальної РНК (рРНК). Таким чином, представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ439 має послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 100965 ідентичності послідовності з послідовністю ЗЕО ІО МО: 277. ВасшШив Шигіпдіепзіз ЕЕ417 має послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 100965 ідентичності послідовності з послідовністю ЕС І МО: 278. Васійй5 сегеи5 ЕЕ444 має послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності послідовності з послідовністю ЗЕО ІО МО: 279. ВасШив «(Пигіпдіепзіз ЕЕЗ319 має послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності послідовності з послідовністю ЗЕО ІЮ МО: 280. Васійи5 (игіпдіеп5і5 ЕЕ-В800184 має послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 100965 ідентичності послідовності з послідовністю ЗЕ ІО МО: 301. Представник сімейства Васійи5 сегеиз ЕЕ-В00377 має послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 98595, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності послідовності з послідовністю ЗЕО ІЮ МО: 304. Васійи5 рзепдотусоїдез ЕЕ-800366 має послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності послідовності з послідовністю ЗЕО ІЮ МО: 303.
Васйи5 тусоїдез5 ЕЕ-В00363 (МАВ В-67121) має послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності послідовності з послідовністю
ЗЕО ІЮ МО: 302. Послідовності 165 рРНК приведені нижче в таблиці 13.
Таблиця 13
Часткові послідовності 165 рРНК для ендофітних штамів представників сімейства Васійи5 сегеи5
ЗЕО ІЮ МО для часткової послідовності 005901 Крім того, даний винахід стосується біологічно чистої бактеріальної культури, де бактерії в бактеріальній культурі є мутантами представника сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ439,
Зо Васіи5 ІПиппдіепзіз ЕЕ417, Васіи5 сегеи5 ЕЕ444, ВасіШив5 ІПигіпдіеєпбіє ЕЕЗ19, Васі
ІШшгіпдіепвіє ЕЕ-800184, представника сімейства Васійй5 сегеиз ЕЕ-В00377, Васіїйив5 рзепдотусоїдез ЕЕ-В800366 або Васійи5 птусоїде5 ЕЕ-800363, що містять одну або кілька мутацій, де бактерії є ендофітними.
В. Інші ендофітні бактеріальні штами
І00591| Даний винахід також стосується інших біологічно чистих бактеріальних культур (не представників сімейства Васійн5 сегеи5), що мають здатність рости ендофітно. Ці штами були виділені з проростків кукурудзи, як детально описано в прикладах нижче.
І00592| Бактеріальний штам будь-якої з цих бактеріальних культур може являти собою (а)
Васйи5 тедаїегпит ЕЕЗ85 (МАНІ В-50980), (Б) Васіїїи5 5р. ЕЕЗ387 (МАНІ В-50981), (с) ВасшШив сісшапе ЕЄЗ88 (МАВ 8В-50982), (4) ВасіШив 5иЇибБіййв5 ЕЕ405 (МАНІ В-50978), (є) І увіпібасійи5
Тивітоптів ЕЕ442 (МАВ В-50975), (1) Гувіпірсаїйив врпаєгісиз ЕЕ443 (МАНІ В-50976) або (9)
Васйи5 ритійв ЕЕ-800143 (МАВ В-67123). Кожний зі штамів (а)-() був депонований у Опіней
Зіаїе5 ЮОерайтепі ої Адгісикиге (ШБОА) АдгісинКига! Кезеагсп Зегмісе (АК5) за адресою 1815
Мой Опімегейу 5ігеєеї, Реогіа, Шіпої5 61604 Ш.5.А., 10 вересня 2014 року, і вони ідентифіковані за допомогою номерів МЕКІГ., наданих у дужках після назв кожного штаму. Наступний депозит,
Васійи5 5р. ЕЕ387, був визначений як штам, подібний до Васіййє5 ритій5. Штам (9) був депонований у ОБОА АКБ 19 серпня 2015 року, і він ідентифікований за допомогою номера
МЕНІ, наданого в дужках після назви. 00593) Нові штами, описані в даному описі, були ідентифіковані за допомогою секвенування 165 рибосомальної РНК (рРНК). Таким чином, Васійй5 тедаїегішт ЕЕЗ385 має послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності послідовності з послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 281. ВасйШйиб5 5р. ЕЕЗ387 має послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності послідовності з послідовністю ЗЕ ІЮ МО: 282. ВасіШйи5 сігсшап5 ЕЕ388 має послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності послідовності з послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 283. Васійи5 з,ИбБійвБ ЕЕ405 має послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності послідовності з послідовністю ЗЕО ІЮ МО: 284. І узіпірбасни5 тТи5йогті5 ЕЕ442 має послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності послідовності з послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 285. І узіпірсайни5 5рпаєгісиз ЕЕ443 має послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності послідовності з послідовністю ЗЕО ІЮ МО: 286. ВасшШив ритіїи5 ЕЕ-800143 має послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності послідовності з послідовністю ЗЕО ІЮ МО: 305. Послідовності 165 рРНК приведені нижче в таблиці 14.
Таблиця 14
Часткові послідовності 165 рРНК для ендофітних штамів, які не є представниками сімейства
Васіїи5 сегеив5 00594) Крім того, даний винахід стосується біологічно чистої бактеріальної культури, де бактерії в бактеріальній культурі є мутантами Васійи5 тедаїегішт ЕЕЗ85, Васійи5 5р. ЕЕ387,
Васійи5 сігсціап5 ЕЕ388, Васійни5 5,ибБій ЕЕ405, І узіпірасійи5 тТи5ПїОоптіх ЕЕ442 або І увзіпірсайив 5зрпаєгіси5 ЕЕ443, що містять одну або кілька мутацій, де бактерії є ендофітними. 00595) Даний винахід також стосується біологічно чистої бактеріальної культури, де бактерії в бактеріальній культурі є мутантами Васійй5 тедаїегішт ЕЕЗ385, Васійи5 5р. ЕЕ387, Васйив сігсціапе ЕЕЗ88, Васійн5 5и,ибБійб ЕЕ405, Іувзіпірасійи5 Ти5йогтіє ЕЕ442 або І Уувзіпірсайнив5 5рпаєгіси5 ЕЕ443, що містять одну або кілька мутацій, де бактерії є пробіотичними.
Зо ХМ. Інокуляти 005961) Крім того, винахід стосується інокулятів будь-якого з біологічно чистих бактеріальних штамів, описаних вище в попередньому розділі. Інокуляти призначені для нанесення на рослини, насіння рослин, середовище для росту рослин або область, яка оточує рослину або насіння рослини, де інокулят містить ефективну кількість будь-якої з біологічно чистих бактеріальних культур і прийнятний з погляду сільського господарства носій.
І00597| Інокулят може містити ефективну кількість суміші, що містить щонайменше дві з біологічно чистих бактеріальних культур, описаних вище в попередньому розділі. 00598) Крім того, інокулят може містити ефективна кількість ризобактерій. Ризобактерії можуть являти собою біологічно чисту бактеріальну культуру штаму ризобактерій. Ризобактерії можуть включати бактерії роду Вгадугпігобішт (наприклад, Вгадуті2обішт іаропісит), бактерії роду ЕПі2обішт (наприклад, Кпі2обішт рпазеоїї, ЕпПігобішт Іедитіпозагит або їхньої комбінації), або їхні комбінації.
ХМІ. Насіння рослин, покриті ферментом, який каталізує продукцію оксиду азоту, або рекомбінантними бактеріями, що надекспресують фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту 00599) Також передбачається насіння рослин, яке покрите: (ї) ферментом, який каталізує продукцію оксиду азоту; (ії) супероксиддисмутазою або (ії) рекомбінантним мікроорганізмом, що експресує фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, або супероксиддисмутазу, де експресія ферменту, що каталізує продукцію оксиду азоту, або супероксиддисмутази, збільшена в порівнянні з експресією ферменту, що каталізує продукцію оксиду азоту, або супероксиддисмутази в мікроорганізмі дикого типу в тих же умовах.
І00600| Фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, може включати синтазу оксиду азоту або аргіназу. 00601) Фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, може включати синтазу оксиду азоту, таку як синтаза оксиду азоту з Васійи5 Шигіпдіепзіз ВТО1ЗА або Васійи5 з,ибБій5 168. (00602) Наприклад, синтаза оксиду азоту може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності послідовності з БЕО ІЮ МО: 260 або 261.
Ї0О60О3| Синтаза оксиду азоту може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності послідовності з БЕО ІЮ МО: 260 або 261.
Ї00604| Синтаза оксиду азоту може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності послідовності з ЗЕО ІЮ МО: 260 або 261.
Ї0060О5| Синтаза оксиду азоту може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9895 ідентичності послідовності з БЕО ІЮ МО: 260 або 261.
ІЇ0О60О6б| Синтаза оксиду азоту може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності послідовності з БЕО ІЮ МО: 260 або 261.
І00607| Синтаза оксиду азоту може містити амінокислотну послідовність, яка має 100905 ідентичності послідовності з зЗЕО ІЮО МО: 260 або 261.
І00608| Супероксиддисмутаза може включати супероксиддисмутазу 1 (ЗОБА) або супероксиддисмутазу 2 (ЗОБА).
І00609| Супероксиддисмутаза містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 155 або 156.
І00610| Супероксиддисмутаза містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 155 або 156.
І00611| Супероксиддисмутаза містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 155 або 156.
І00612| Супероксиддисмутаза містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше
Ко) 9895 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 155 або 156.
І00613| Супероксиддисмутаза містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 155 або 156.
І00614| Супероксиддисмутаза містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 10095 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 155 або 156. 00615) Коли насіння рослини покривають рекомбінантним мікроорганізмом, рекомбінантний мікроорганізм може включати вид Васійи5, ЕхсПегеспіа соїї, вид АзрегуйШив5, такий як АзрегойШив5 підег, або вид Засспготусев, такий як Засспготусез сегемівіає. 00616) Наприклад, рекомбінантний мікроорганізм може включати представник сімейства
Васійи5 сегеи5, Васійи5 5,ибійїв, Васінйи5 Іспепіоптів або Васійн5 тедаїегійт.
ІЇ00617| Амінокислотні послідовності ілюстративних ферментів-синтаз оксиду азоту представлені вище в таблиці 8. Амінокислотні послідовності ілюстративних супероксиддисмутаз представлені вище в таблиці 2.
ХМІІ. Сполуки (00618) Передбачаються сполуки, що містять рекомбінантний представник сімейства Васійн5 сегец5, як описано в даному описі, фрагменти екзоспорію, які походять зі спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5, як описано в даному описі, або рекомбінантну спороутворювальну бактерію, як описано в даному описі, і прийнятний з погляду сільського господарства носій. 00619) Прийнятний з погляду сільського господарства носій може включати добавку, таку як олія, камедь, смола, глина, поліоксіетиленгліколь, терпен, в'язку органічну сполуку, складний ефір жирної кислоти, сульфатований спирт, алкілсоульфонат, нафтовий сульфонат, сульфат спирту, алкілбутандіамат натрію, поліефір тіобутандіоату натрію, бензольне похідне ацетонітрилу, білковий матеріал або їхню комбінацію. (00620) Прийнятний з погляду сільського господарства носій може включати загусник, такий як довголанцюжковий алкілсульфонат поліетиленгліколю, поліоксіетилен олеат або їхню комбінацію; поверхнево-активну речовину, таку як важке нафтове масло, важкий нафтовий дистилят, складний ефір поліолу і жирної кислоти, складний ефір поліетоксилованої жирної кислоти, арилалкілполіоксіетиленгліколь, алкіламінацетат, алкіларилсульфонат, багатоатомний спирт, алкілфосфат або їхню комбінацію; або засіб проти злежування, такий як сіль натрію бо (наприклад, натрієва сіль монометилнафталінсульфонату, натрієва сіль диметилнафталінсульфонату, сульфіт натрію, сульфат натрію або їхню комбінацію), карбонат кальцію, діатомітова земля або їхня комбінація.
І00621| Добавка може включати білковий матеріал, такий як молочний продукт, пшеничне борошно, соєве борошно, кров, альбумін, желатин, люцернове борошно, дріжджовий екстракт або їхню комбінацію.
І00622| Прийнятний з погляду сільського господарства носій може включати вермикуліт, вугілля, фільтрпресний бруд для карбонізації на виробництві цукру, рисове лушпиння, карбоксиметилцелюлозу, торф, перліт, дрібний пісок, карбонат кальцію, борошно, галуни, крохмаль, тальк, полівінілпіролідон або їхню комбінацію.
І00623| Склад може включати склад для покриття насіння, рідкий склад для внесення на рослини або в середовище для росту рослин, або твердий склад для внесення на рослини або в середовище для росту рослин. Склад, який покриває насіння, може містити водний розчин або розчин на масляній основі для нанесення на насіння або порошковий або гранульовий склад для нанесення на насіння. Рідкий склад для внесення на рослини або в середовище для росту рослин може включати концентрований склад або готовий для застосування склад. Твердий склад для внесення на рослини або в середовище для росту рослин може включати гранульний склад або порошковий засіб.
І00624| Крім того, склад може містити добриво, матеріал добрива з мікронутрієнтами, інсектицид, гербіцид, засіб для зміни росту рослин, фунгіцид, інсектицид, моллюскоцид, альгіцид, бактеріальний інокулят, грибний інокулят або їхню комбінацію. 00625) Бактеріальний інокулят може включати бактеріальний інокулят роду КПі2оБбішт, бактеріальний інокулят роду Вгадугпігобішт, бактеріальний інокулят роду Мебзогпі2орічцт, бактеріальний інокулят роду Алогпі2орішт, бактеріальний інокулят роду АЇогтігобійт, бактеріальний інокулят роду 5біпогпі2обішт, бактеріальний інокулят роду Кіпумега, бактеріальний інокулят роду Агоїобасієг, бактеріальний інокулят роду Рзхейдотопав, бактеріальний інокулят роду Ало5рігіййшт, бактеріальний інокулят роду Васійй5, бактеріальний інокулят роду
Зігеріотусе5, бактеріальний інокулят роду Раєепірасійй5, бактеріальний інокулят роду
Рагасоссив, бактеріальний інокулят роду Епіегорасієг, бактеріальний інокулят роду АїЇсаїїдепев, бактеріальний інокулят роду Мусобрасіеєгішт, бактеріальний інокулят роду Тгісподегта,
Зо бактеріальний інокулят роду Сііосіадішт, бактеріальний інокулят роду Сіоти5, бактеріальний інокулят роду КіерзіеЇа або їхню комбінацію. (00626) Бактеріальний інокулят може включати прискорюючий ріст рослин штам бактерій.
Прискорюючий ріст рослин штам бактерій може продукувати інсектицидний токсин, продукувати фунгіцидну сполуку, продукувати нематоцидну сполуку, продукувати бактерицидну сполуку, може бути стійким до одного або декількох антибіотиків, може містити одну або декілька вільно реплікованих плазмід, може зв'язуватися з коренями рослин, колонізувати корені рослин, утворювати біоплівки, солюбілізувати поживні речовини, секретувати органічні кислоти, або може здійснювати їхню комбінацію.
І00627| Наприклад, бактеріальний інокулят може містити Васіїйй5 агуарпацаії САР5З (МЕМ.
Мо В-50819), Васіїйн5 агуабпацаії САР5б (МК Мо В-50817), Васійи5 Яехих ВТО54 (МАКІ Ме В- 50816), Рагасоссив Копагайемаеє МСЗ35 (МКК Мо В-50820), ВасіШи5 тусоїде5 ВТ155 (МКК Ме В- 50921), Епіегорасіег сіосасае САР12 (МКК! Мо В-50822), ВасіШи5 пеаІбзопії ВОВА57 (МКК Мо
МАНІ. В-50821), Васійи5 тусоїде5 ЕЕ118 (МАК Мо В-50918), Васійн5 5,ибБій ЕЕ148 (МКК Мо В- 50927), АїІсаїдепе5 Таесай5 ЕЄ107 (МКК Ме В-50920), ВасйШи5 тусоїде5 ЕЕ141 (МКК Ме В- 50916), Васійй5 тусоїде5 ВТ46-3 (МККІ Мо В-50922), представник сімейства Васіїйи5 сегеи5
ЕЕ128 (МАК! Ме В-50917), Васійи5 «пПигіпдіепзіз ВТО13А (МАК Ме В-50924), Раєпівбасйв5 тазвзійепвіз ВТ23 (МКК! Мо В-50923), представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ349 (МКК! Мо В- 50928), Васійи5 зиБійв ЕЕ218 (МЕКІ Мо В-50926), Васійи5 тедаїегішт ЕЕ281 (МЕМ Мо В-50925), представник сімейства Васійи5 сегеиз ЕЕ-800377 (МАНІ В-67119); Васіїїн5 рзепдотусоїіде5 ЕЕ- воо366 (МАНІ В-67120), Васійи5 тусоїде5 ЕЕ-800363 (МАНІ В-67121), Васіїййиє5 риті5 ЕЕ- вО00143 (МАВ В-67123) або Васійи5 «Вигіпдіепбіз ЕЕ-800184 (МАВІ В-67122), або їхню комбінацію. Кожний з цих штамів був депонований у Опіей 5іагех5 ЮОерагптепі ої АдгісиКиге (ОБОА) Адгісийига!І Кезеагспй Зегмісе (АК5), за адресою 1815 Мой Опімегейу 5ігеєї, Реогіа,
Шіпоїє 61604 ЦО.5.А., 11 березня 2013 року (Васійй5 агуарпацаі САР5З, Васіи5 агуабпацаї
САР5Бб, ВасшШи5 Пехи5 ВТО054, Рагасосси5 Копагайемає МОС35, Епіегорасіеєг сіоасае САРІ2 і
Васійи5 пеаіІзопії ВОВА57), 10 березня 2014 року (Васійй5 тусоїде5 ВТ155, Васійи5 птусоїіде5
ЕЕ118, Васійи5 зибБійв5 ЕЕ148, АїІсаідепе5 Таесаїйб ЕЕ107, Васійн5 тусоїде5 ЕЕТ141, Васійи5 тусоїде5 ВТ46-3, представник сімейства Васіїйй5 сегеи5 ЕЕ128, Васійи5 (игіпдіепвіз ВТО1ЗА,
Раєпірасійи5 табвзз5ійепвзі5 ВТ23, Васійи5 сегеи5 Таптйу тетбрег ЕЕ349, Васійи5 5!ИиБрійй5 ЕЕ218 і бо ВасшШив тедаїегішт ЕЕ281), або 19 серпня 2015 року (представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ-
вО00377; Васіїн5 рзендотусоіїдез5 ЕЕ-800366, Васійй5 тусоіїде5 ЕЕ-800363, ВасшШив5 ритіїв5 ЕЕ-
ВО00143 або Васійи5 «(пигіпдіепзі5 ЕЕ-ВО0184), і вони ідентифіковані за допомогою номерів МЕКІГ., наданих у дужках. (00628) Ці прискорюючі ріст рослин штами були виділені з ризосфер різних сильних рослин і були ідентифіковані по їх послідовностях 165 рРНК і за допомогою біохімічних аналізів. Штами були ідентифіковані щонайменше до їхнього родового позначення за допомогою загальноприйнятих біохімічних і морфологічних індикаторів. Біохімічні аналізи для підтверджених грамнегативних штамів, таких як Рагасосси5 Копагайемає, АїІсаїїдепез Таесаї5 і
Епіегорасіег сіоасае, включали аналіз росту на середовищі МасСопКеу і поживному агарі, мікроскопічне дослідження, аналіз росту на середовищі з 595 і 7,595 масі, аналіз росту прирН 5 і рН 9, аналіз росту при 422 і 502С, визначення здатності продукувати кислоту при ферментації з целобіозою, лактозою, гліцерином, глюкозою, сахарозою, а-манітом і крохмалем; визначення продукції флуоресцентного пігменту; визначення гідролізу желатину; аналіз відновлення нітратів; визначення продукції каталази, гідролізу крохмалю; визначення оксидазної реакції, продукції уреази і рухливості. Аналогічно, біохімічні аналізи для підтверджених грампозитивних штамів, таких як Васійи5 ії Раепірасійй5, включали визначення росту на середовищі РЕА і поживному агарі, мікроскопічне дослідження, аналіз росту на середовищі з 595 і 7,595 Масі, аналіз росту при рН 5 ї рН 9, аналіз росту при 422С їі 502С, визначення здатності продукувати кислоту при ферментації з целобіозою, лактозою, гліцерином, глюкозою, сахарозою, а-манітом і крохмалем; визначення продукції флуоресцентного пігменту; визначення гідролізу желатину; аналіз відновлення нітратів; визначення продукції каталази, гідролізу крохмалю; визначення оксидазной реакції, продукції уреази і рухливості.. Ідентифікація цих штамів і демонстрація їхніх ефектів прискорення росту рослин описані нижче в прикладах. Часткові послідовності 165 рРНК для штамів Васійн5 тусоїде5 ВТ155, ВасшШи5 тусоїде5 ЕЕ118, Васійн5 тусоїде5 ЕЕ141, Васійи5 тусоїде5 ВТ46-3, представника сімейства ВасіШи5 сегеи5 ЕЕ128, Васійиз «пигіпдіепзіз ВТО1ЗА і представника сімейства Васійш5 сегениє ЕЕ349 представлені в таблиці 12 вище. Часткові послідовності 165 рРНК для штамів Васійш5 агуарпацаії САР5З, ВасшШив агуабпацаі САР5Бб,
Васійи5 ЯПЯехиз ВТО054, Рагасоссив Копагайємає МСЗ35, Епієгорасієї сіоасае САРІ2, Васійв5 пеаізопії ВОВА5Б7, Васі 5ибБійв ЕЕ148, АїІсаіїдепе5 Гаєсаїз ЕЕ107, Раєпірасійн5 таззіїепвів
Зо ВТ23, Васійив5 зи,ибрійй ЕЕ218 і ВасіШи5 тедаїтегічт ЕЕ281 приведені в таблиці 15 нижче.
Таблиця 15
Часткові послідовності 165 рРНК для додаткових прискорюючих ріст рослин штамів бактерій
Ш ЗЕО ІЮО МО для часткової послідовності рибосомальної 165
І00629| Наприклад, склад може містити прискорюючий ріст рослин штам бактерій, що містить Рагасоссиб5 Копагайемае МС35, Васіййи5 агуабпацаі САР5З або Васійй5 тедаїегійт
ЕЕ281, де склад додатково включає будь-який з рекомбінантних представників сімейства
Васіїйй5 сегеи5, описаних у даному описі, включаючи будь-які рекомбінантні прискорюючі ріст рослин штами представників сімейства Васійй5 сегеи5, описані в даному описі (наприклад, рекомбінантні Васіййи5 птусоїде5 ВТ155, Васійи5 птусоїде5 ЕЕ141 або Васійи5 игіпдіепвів
ВТО1ЗА). 00630) Грибний інокулят може включати грибний інокулят сімейства Сіотегасеає, грибний інокулят сімейства Сіагоідодіотегасеае, грибний інокулят сімейства Сідазрогасеає, грибний інокулят сімейства Асашцозрогасеає, грибний інокулят сімейства Зассціозрогасеаеє, грибний інокулят сімейства Епігорпозрогасеає, грибний інокулят сімейства Расідзрогасеає, грибний інокулят сімейства Оімегзізрогасеає, грибний інокулят сімейства Рагадіотегасеає, грибний інокулят сімейства АгоПпаеозрогасеає, грибний інокулят сімейства Сеозірпопасеає, грибний інокулят сімейства АтрБізрогасеає, грибний інокулят сімейства ЗсщейПозрогасеає, грибний інокулят сімейства ОЮепіїзсиНагасеає, грибний інокулят сімейства Касосеїгасеає, грибний інокулят відділу Вазідіотусоїа, грибний інокулят відділу Азсоптусоїа, грибний інокулят відділу 7удотусоїа або їхню комбінацію. 00631) Крім того, спороутворювальна бактерія, окремо або в комбінації з інсектицидом, може містити ефективну кількість щонайменше одного фунгіциду.
І00632| Типові фунгіцидні інгредієнти також включають каптан (М-трихлорметил)тіо-4- циклогексан-1,2-дикарбоксімід), флудіоксони 1 (4-(2,2-дифтор-1,3-бензодіоксол-4-іл)-1-Н-пірол-
З-карбонітрил; карбендазим іпродіон (комерційно доступний під торговою назвою КомгаІ.ТМ.), тебуконазол, тіабендазол, азоксистробін, прохлораз і оксадиксил (М-(2,6-диметилфеніл)-2- метокси-М-(2-оксо-3-оксазолідиніл)ацетамід).
Ї00633| Якщо склад, насіння рослини або інокулят містить фунгіцид, фунгіцид може включати алдиморф, ампропілфос, ампропілфос калій, андоприм, анілазин, азоконазол, азоксистробін, беналаксил, беноданіл, беноміл, бензамакрил, бензамакрил-ізобутил, біалафос, бінапакрил, біфеніл, бітертанол, бластицидин-5, боскалід, бромуконазол, бупіримат, бутіобат, полісульфід кальцію, капсиміцин, каптафол, каптан, карбендазим, карвон, хінометіонат, хлобентіазон, хлорфеназол, хлоронеб, хлорпікрин, хлороталоніл, хлозолінат, клозилакон, куфранеб, цимоксаніл, ципроконазол, ципродиніл, ципрофурам, дебакарб, дихлорофен, диклобутразол, диклофлуанід, дикломезин, диклоран, діетофенкарб, диметиримол, диметоморф, димоксистробін, диніконазол, диніконазол-М, динокап, дифеніламін, дипіритіон, диталімфос, дитіанон, додеморф, додин, дразоксолон, едифенфос, епоксиконазол, етаконазол, етиримол, етридіазол, фамоксадон, фенапаніл, фенаримол, фенбуконазол, фенфурам, фенітропан, фенпіклоніл, фенпропідин, фенпропіморф, фентин ацетат, фентин гідроксид, фербам, феримзон, флуазинам, флеметовер, фторомід, флухінконазол, флурпримідол, флусилазол, флусульфамід, флутоланіл, флутриафол, фолпет, фосетил-алюміній, фосетил- натрій, фталід, фуберидазол, фуралаксил, фураметпір, фуркарбоніл, фурконазол, фурконазол- цис, фурмециклокс, гуазатин, гексахлорбензол, гексаконазол, гімексазол, імазаліл,
Ко) імібенконазол, іміноктадин, іміноктадин албесилат, іміноктадин триацетат, йодокарб, іпробенфос (ІВР), іпродіон, ірумаміцин, ізопротіолан, ізоваледіон, касугаміцин, крезоксим-метил, препарати міді, такі як: гідроксид міді, нафтенат міді, оксихлорид міді, сульфат міді, оксид міді, оксин-мідь і бордоська рідина, манкупрум, манкозеб, манеб, меферимзон, мепаніпірим, мепроніл, металаксил, метконазол, метасульфокарб, метфуроксам, метирам, метомеклам, метсульфовакс, мілдіоміцин, міклобутаніл, міклозолін, диметилдитіокарбамат нікелю, нітротал- ізопропіл, нуаримол, офурас, оксадиксил, оксамокарб, оксолінову кислоту, оксикарбоксим, оксифентіїн, паклобутразол, пефуразоат, пенконазол, пенцикурон, фосдифен, пімарицин, піпералін, поліоксин, поліоксорим, пробеназол, прохлораз, процимидон, пропамокарб, пропанозин-натрій, пропіконазол, пропінеб, протіоциназол, піразофос, пірифенокс, піриметаніл, піроквілон, піроксифур, хіноконазол, квінтозен (РСМВ), сірку і препарати сірки, тебуконазол, теклофталам, текназен, тетцикласис, тетраконазол, тіабендазол, тициофен, тифлузамід, тіофанат-метил, тіоксимід, толклофос-метил, толілфлуанід, триадимефон, триадименол, триазбутил, триазоксид, трихламід, трициклазол, тридеморф, трифлоксистробін, трифлумізол, трифорин, уніконазол, валідаміцин А, вінкозолін, вініконазол, зариламід, зинеб, зирам, а також
Оаддег с, ОК-8705, ОК-8801, а-(1,1-диметилетил)-(3-(2-феноксіетил)-1 Н-1,2,4-триазол-1- етанол, а-(2,4-дихлорфеніл)-ІЗ-фтор-3-пропіл-1 Н-1,2,4-триазол-1-етанол, а-(2,4-дихлорфеніл)-
ІЗ-метокси-а-метил-1 Н-1,2,4-триазол-1-етанол, а-(5-метил-1,3-діоксан-5-іл)-ІЗ-(4- (трифторметил)феніл|метилен|-1 Н-1,2,4-триазол-1-етанол, (5К5,6К5)-6-гідрокси-2,2,7,7- тетраметил-5-(1 Н-1,2,4-триазол-1-іл)-3-октанон, (Е)-а-(метоксіїміно)-М-метил-2- феноксифенілацетамід, 1-ізопропілі2-метил-1-|(1-(4- метилфеніл)етиліаміно|карбоніл|Іпропіл)укарбамат, 1--2,4-дихлорфеніл)-2-(1Н-1,2,4-триазол-1- іл)у'етанон-О-(фенілметил)оксим, 1-(2-метил-1-нафталеніл)-1 Н-пірол-2,5-діон, 1-(5,5- дихлорфеніл)-3-(2-пропеніл)-2,5-піролідиндіон, 1-Кдийодометил)сульфоніл|-4-метилбензол, 1- (2-(2,4-дихлорфеніл)-1,3-діоксолан-2-іл|метилі/-1 Н-імідазол, 1-(2-(4-хлорфеніл)-3- фенілоксираніл|метил|-1Н-1,2,4-триазол, 1-(1-(2-К(2,4-дихлорфеніл)-метокси|феніл|етеніл|-1 Н- імідазол, 1-метил-5-ноніл-2-(фенілметил)-З-піролідинол, 2",6'-дибром-2-метил-4"- трифторметокси-4-трифторметил-1,3-тіазолкарбоксанілид, 2,2-дихлор-М-(1-(4-хлорфеніл)етил|- 1-етил-3-метилциклопропанкарбоксамід, 2,6б-дихлор-5-(метилтіо)-4-піримідинілтіоціанат, 2,6- дихлор-М-(4-трифторметилбензил)бензамід, 2,6-дихлор-М-(4- бо (трифторметил)феніл|метилібензамід, 2-(2,3,3-трийод-2-пропеніл)-2Н-тетразол, 2-((1-
метилетил)-сульфоніл|-5-«"трихлорметил)-1,3,4-тіадіазол, 2-І((б-дезокси-4-0-(4-0О-метил-(3-0- глікопіранозил)-а-Ю-глюкопіранозил|аміно|-4-метокси-1 Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин-5-карбонітрил, 2-амінобутан, 2-бром-2-(бромметил)пентандинітрил, 2-хлор-М-(2,3-дигідро-1,1,3-триметил-1 Н- інден-4-іл)-З-піридинкарбоксамід, 2-хлор-М-(2,6-диметилфеніл)-М-(ізотіоціанатметил)ацетамід, 2-фенілфенол и (ОРР), 3,4-дихлор-1-(4--дифторметокси)феніл|пірол-2,5-діон, З,5-дихлор-М-
Іціано((1-метил-2-пропініл)окси|метилі|бензамід, 3-(1,1-диметилпропіл-1-оксо-1 Н-інден-2- карбонітрил, 3-(2-(4-хлорфеніл)-5-етокси-3-ізоксазолідиніл|піридин, 4-хлор-2-ціано-М,М-диметил- 5-(4-метилфеніл)-1Н-імідазол-1-сульфонамід, 4-метилтетразоло|1,5-а)хіназолін-5(4Н)-он, 8-(1,1- диметилетил)-М-етил-М-пропіл-1,4-діоксаспіро(4,5|декан-2-метанамін, сульфат 8- гідроксихіноліну, 9УН-ксантен-2-(феніламіно)карбоніл|-9-карбоновий гідразид, біс-(1-метилетил)-
З-метил-4-((З-метилбензоїл)окси)|-2,5-тіофендикарбоксилат, цис-1-(4-хлорфеніл)-2-(1 Н-1,2,4- триазол-1-іл)уциклогептанол, цис-4-І(3-І4-(1,1-диметилпропіл)феніл-2-метилпропіл)|-2,6- диметилморфоліну гідрохлорид, етил-((4-хлорфеніл)-азо|ціаноацетат, бікарбонат калію, метантетратіол-натрієву сіль, метил 1-(2,3-дигідро-2,2-диметилінден-1-іл)-1Н-імідазол-5- карбоксилат, метил М-(2,6-диметилфеніл)-М-(5-ізоксазолілкарбоніл)-ОЇ -аланінат, метил-М- (хлорацетил)-М-(2,6-диметилфеніл)-О0І -аланінат, М-(2,3-дихлор-4-гідроксифеніл)-1- метилциклогексанкарбоксамід, М-(2,6-диметилфеніл)-2-метокси-М-(тетрагідро-2-оксо-3- фураніл)ацетамід, М-(2,6-диметилфеніл)-2-метокси-М-(тетрагідро-2-оксо-3-тієніл)уацетамід, М-(2- хлор-4-нітрофеніл)-4-метил-З-нітробензолсульфонамід, М-(4-циклогексилфеніл)-1,4,5,6- тетрагідро-2-піримідинамін, М-(4-гексилфеніл)-1,4,5,6-тетрагідро-2-піримідинамін, М-(5-хлор-2- метилфеніл)-2-метокси-М-(2-оксо-3-оксазолідиніл)лацетамід, М-(6-метокси)-3- піридиніл)уциклопропанкарбоксамід, М-(2,2,2-трихлор-1-Кхлорацетил)аміно|етил|бензамід, М-(3- хлор-4,5-біс(2-пропінілокси)феніл|-М'-метоксиметанімідамід, М-форміл-М-гідроксі-ОїІ -аланін- натрієву сіль, О,О-дієтил (2-(дипропіламіно)-2-оксоетил|І|стилфосфорамідотіоат, О-метил 5- фенілфенілпропілфосфорамідотіоат, З-метил-1,2,3-бензотіадіазол-7-карботіоат і спіро(2НІ-1- бензопіран-2,1'(З'Н)-ізобензофурані|-3-он, М-трихлорметил)тіо-4-циклогексан-1,2-дикарбоксімід, тетраметилтіопероксидикарбоновий діамід, метил-М-(2,6-диметилфеніл)-М-(метоксіацетил)-ОІ - аланінат, 4-(2,2-дифтор-1,3-бензодіоксол-4-іл)-1-Н-пірол-3-карбонітрил або їхню комбінацію. 00634) Крім того, прийнятні фунгіциди включають наступні: (1) сполуку, здатну інгібувати синтез нуклеїнових кислот, таку як беналаксил, беналаксил-М, бупіримат, хіралаксил, клозилакон, диметиримол, етиримол, фуралаксил, гімексазол, металаксил, металаксил-М, офурас, оксадиксил, оксолінова кислота; (2) сполуку, здатну інгібувати мітоз і ділення клітин, таку як беноміл, карбендазим, діетофенкарб, етабоксам, фуберидазол, пенцикурон, тіабендазол тіофанат-метил, зоксамід; (3) сполуку, здатну інгібувати дихання, наприклад, інгібітор дихання Сі, такий як дифлуметорим; інгібітор дихання СіІ, такий як боскалід, фенфурам, флутоланіл, фураметпір, фурмециклокс, мепроніл, оксикарбоксин, пентіопірад, тифлузамід; інгібітор дихання СІ, такий як амісульбром, азоксистробін, ціазофамід, димоксистробін, енестробін, фамоксадон, фенамідон, флуоксастробін, крезоксим-метил, метоміностробін, орисастробін, пікоксистробін, трифлоксистробін; (4) сполуку, здатну діяти як роз'єднувач, таку як динокап, флуазинам, мептилдинокап; (5) сполуку, здатну інгібувати продукцію АТР, таку як фентин ацетат, фентин хлорид, фентин гідроксид; (б) сполуку, здатну інгібувати біосинтез а.к. і білків, таку як андоприм, бластицидин-5, ципродиніл, касугаміцин, касугаміцин гідрохлорид гідрат, мепанипірим, піриметаніл; (7) сполуку, здатну інгібувати передачу сигналу, таку як фенпіклоніл, хіноксифен; (8) сполуку, здатну інгібувати синтез ліпідів і мембран, таку як біфеніл, клозолінат, едифенфос, етридіазол, йодокарб, іробенфос, іпродіон, ізопротіолан, процимідон, пропамокарб, пропамокарб гідрохлорид, піразофос, толклофос- метил, вінклозолін; (9) сполуку, здатну інгібувати біосинтез ергостерину, таку як алдиморф, азаконазол, бітертанол, бромуконазол, ципроконазол, диклобутразол, диніконазол, диніконазол-М, додеморф, додеморф ацетат, епоксиконазол, етаконазол, фенаримол, фенбуконазол, фенгексамід, фенпропідин, фенпропіморф, флуквінконазол, флурпримідол, флусилазол, флутриафол, фурконазол, фурконазол-цис, гексаконазол, імазаліл, імазаліл сульфат, імібенконазол, метконазол, міклобутаніл, нафтифін, нуаримол, окспоконазол, паклобутразол, пефуразоат, пенконазол, прохлораз, пропіконазол, протіоконазол, пірибутикарб, пірифенокс, симеконазол, спіроксамін, тебуконазол, тербінафін, тетраконазол, триадимефон, триадименол, тридеморф, трифлумізол, трифорин, уніконазол, вінконазол, вориконазол; (10) сполуку, здатну інгібувати синтез клітинної стінки, таку як бентіавалікарб, біалафос, диметоморф, флуморф, іпровалікарб, мандипропамід, поліоксини, поліоксорим, валідаміцин А; (11) сполуку, здатну інгібувати біосинтез меланіну, таку як карпропамід, диклоцимет, феноксаніл, фталід, піроквілон, трициклазол; (12) сполуку, здатну індукувати захист хазяїна, бо таку як ацибензолар-5-метил, пробеназол, тіадиніл; (13) сполуку, здатну мати множинну дію,
таку як бордоська рідина, каптафол, каптан, хлороталоніл, нафтенат міді, оксид міді, оксихлорид міді, препарати міді, такі як гідроксид міді, сульфат міді, дихлофлуанід, дитіанон, додин, вільна основа додину, фербам, фторофолпет, фолпет, гуазатин, гуазатину ацетат, іміноктадин, іміноктадин абесилат, іміноктадин триацетат, манкупрум, манкозеб, манеб, метирам, метирам цинк, оксин-мідь, пропінеб, сірка і препарати сірки, включаючи полісульфід кальцію, толілфлуанід, зинеб, зирам; (14) сполуку, вибрану з наступного переліку: (2Е)-2-(2-16- (З-хлор-2-метилфенокси)-5-фторпіримідин-4-іл|оксиуфеніл)-2-(метоксіїміно)-М-метилацетамід, (2Е)-2-2-1К1 Е)-1-(3-І(Е)-1-фтор-2-фенілвініл|оксиуфеніл)етиліден|іаміноюкси)метилі|феніл)-2- (метоксіїміно)-М-метилацетамід, 1-(4-хлорфеніл)-2-(1Н-1,2,4-триазол-1-іл)уциклогептанол, 1-((4- метоксифенокси)метил|-2,2-диметилпропіл-1 Н-імідазол-1-карбоксилат, 2,3,5,6-тетрахлор-4- (метилсульфоніл)піридин, 2-бутокси-6-йод-З-пропіл-4Н-хромен-4-он, 2-хлор-М-(1,1,3-триметил- 2,3-дигідро-1Н-інден-4-іл)нікотинамід, 2-фенілфенол і солі, 3,4,5-трихлорпіридин-2,6- дикарбонітрил, 3,4-дихлор-М-(2-ціанофеніл)ізотіазол-5-карбоксамід, / 3-(5-(4-хлорфеніл)-2,3- диметилізоксазолідин-З-іл|піридин, 5-хлор-6-(2,4,6-трифторфеніл)-М-К1 Н)-1,2,2- триметилпропіл)і(1,2,4Ігтриазоло|1,5-а|піримідин-7-амін, 5-хлор-7-(4-метилпіперидин-1-іл)-6- (2,4,6-трифторфеніл)|1,2,4)гриазоло|1,5-а|Іпіримідин, 5-хлор-М-(1А)-1,2-диметилпропіл|-6-(2,4,6- трифторфеніл)|1,2,4гриазоло|1,5-а|Іпіримідин-7-амін, 8-гідроксихіноліну сульфат, бентіазол, бетоксазин, капсиміцин, карвон, хинометіонат, куфранеб, цифлуфенамід, цимоксаніл, дазомет, дебакарб, дихлорофен, дикломезин, диклоран, дифензокват, дифензокват метилсульфат, дифеніламін, феримзон, флуметовер, флуопіколід, фторимід, флусульфамід, фосетил- алюміній, фосетил-кальцій, фосетил-натрій, гексахлорбензол, ірумаміцин, ізотіаніл, метасульфокарб, метил-(2Е)-2-2-Ідциклопропіл|(4-метоксифеніл)іміно|метилугіо)метил|феніл)-
З-метоксіакрилат, метил 1-(2,2-диметил-2,3-дигідро-1 Н-інден-1-іл)-1 Н-імідазол-5-карбоксилат, метилізотіоціанат, метрафенон, мілдіоміцин, /- М-(2-(1,3-диметилбутил)феніл|-5-фтор-1,3- диметил-1Н-піразол-4-карбоксамід, М-(3',4и-дихлор-5-фторбіфеніл-2-іл)-3-(дифторметил)- 1- метил-1Н-піразол-4-карбоксамід, М-(З-етил-3,5,5-триметилциклогексил)-3-(форміламіно)-2- гідроксибензамід, М-(4-хлор-2-нітрофеніл)-М-етил-4-метилбензолсульфонамід, М-(4- хлорбензил)-3-ІЗ-метокси-4-(проп-2-ін-1-ілокси)феніл|пропанамід, М-К4- хлорфеніл)(ціано)метилі|-3-ІЗ-метокси-4-(проп-2-ін-1-ілокси)феніл|Іпропанамід, М-К5-бром-3-
Зо хлорпіридин-2-іл)метил)|-2,4-дихлорнікотинамід, М-(1-(5-бром-3-хлорпіридин-2-іл)етил/|-2,4- дихлорнікотинамід, М-(1-(5-бром-3З-хлорпіридин-2-іл)етил|-2-фтор-4-йодонікотинамід, М-(2-(4-13- (4-хлорфеніл)проп-2-ін-1-іл|окси)-З3-метоксифеніл)етил|-Ма-ІС-(метилсульфоніл)валінамід, М- (2-Кциклопропілметокси)іміно||(б-(дифторметокси)-2,3-дифторфеніл|метил)-2-фенілацетамід,
М-12-11,1"-бі(циклопропіл)-2-іл|феніл)-3-(дифторметил)-1-метил-1 Н-піразол-4-карбоксамід, -М-(2-
ІЗ-хлор-5-(трифторметил)піридин-2-іл|єтил)-2-(трифторметил) бензамід, натаміцин, М-етил-М- метил-М'-(2-метил-5-(трифторметил)-4-ІЗ-«-триметилсиліл)упропокси|феніллимидоформамід, - М- етил-М-метил-М'--2-метил-5-(дифторметил)-4-ІЗ-«триметилсиліл)/пропокси|феніл)імідоформамід, нікель диметилдитіокарбамат, нітротал-ізопропіл, О-(11-К4-метоксифенокси)метилі|-2,2- диметилпропіл)и Н-імідазол-1-карботіоат, октилінон, оксамокарб, оксифентіїн, пентахлорфенол і солі, фосфорна кислота і її солі, піпералін, пропамокарб фосетилат, пропанозин-натрій, проквіназид, пірибенкарб, піролнітрин, хінтозин, теклофталам, текназин, триазоксид, трихламід, валіфенал, зариламід. 00635) Фунгіцид може включати заміщений бензол, тіокарбамат, етилен біс-дитіокарбамат, тіофталідамід, сполуку міді, ртутьорганічну сполуку, оловоорганічну сполуку, сполуку кадмію, анілазин, беноміл, циклогексамід, додин, етридіазаол, іпродіон, метлаксил, тіамимефон, трифорин або їхню комбінацію. (00636) Якщо сполука, насіння рослини або інокулят містить фунгіцид, фунгіцид може являти собою некореневий фунгіцид. Некореневий фунгіцид включає мідь, манкозеб, пентіопірад, триазоли, ципроконазол, метконазол, пропікназол, протіоконазол, тебуконазол, азоксистробін, піракластробін, флуоксастробін, пікоксистробін, трифлоксистробін, сірку, боскалід, тіофанат метил, хлоротаноніл, пентіопірад, дифенконазол, флутриафол, ципродиніл, флузинам, іпродіон, пенфлуфен, ціазофамід, флутоланіл, цимоксаніл, диметоморф, піриметаніл, зоксамід, мандипропамід, метринам, пропамокарб, фенамідон, тетраконазол, хлоронаб, гімексазол, толклофос і фенбуконазол.
І00637| Якщо сполука, насіння рослини або інокулят включає бактеріальний інокулят роду
Васіш5, бактеріальний інокулят може включати ВасіШих агогі, Васійи5 аїгамаї, Васійи5 аїІроїасіїв,
Васійи5 атуїоїїдиеїтасієпо5, Васійи5 сегеи5, Васійн5 соадшапз5, Васійй5 епадорагавзіїйсив5, Васішив5 епдогпуїнтоз, Васійи5 Кигвіакі, Васійй5 Іасіїсоїа, ВасйШи5 Іасітогбив5, Васіїйи5 Іасії5, ВасіПи5
Іатегозрогив, Васі Іепіїтогби5, Васійн5 ІсПпепіїогтіх, Васійй5 тедаїегпит, Васійи5 тейдивза, (510) Васіи5 теїйеп5, Васійи5 пайо, Вас підгїісап5, Васійшє5 роріїйає, Васіїйй5 ритійшв5, ВасіПи5 віатепвів, Васіїйй5 5рпеагсив5, Васійи5 взрр., Васійив5 взибійв, Васійй5 ІПигіпдієпві5, Васйив ипітадеПан або їх комбінацію, плюс інокуляти, приведені в категорії Васійи5 Сепи5 у Вегдеу5
Мапиаї ої Зуєтетаїйіс ВасіегіоІоду, Ріг5ї Ед. (1986), включеному в даний опис як посилання в повному обсязі. 00638) Якщо сполука, насіння рослини або інокулят містить інсектицид, інсектицид може являти собою нематицид. Прийнятні нематициди включають антибіотичні нематициди, такі як абамектин; карбаматні нематициди, такі як ацетопрол, Васійн5 спйопо5роги5, хлорпікрин, бенклотіаз, беноміл, ВигпоЇдегіа серасіа, карбофуран, карбосульфан і клеотокард; дазомет,
ОВСР, ОСІР, аланікарб, алдикарб, алдоксикарб, оксаміл, діамідафос, фенаміфос, фостіетан, фосфмідон, кадусафос, хлорпірифос, диклофентіон, диметоат, етопрофос, фенсуольфотіон, фостіазат, гарпіни, гетерофос, іміціафос, ізамідофос, ісазофос, метоміл, мекарфон, Мугоїпесійт меггисагіа, Раесйотусез ІШасіпих5, форат, фосфокарб, тербуфос, тіоназин, тіазофос, дазомет, 1,2-диклоропропан, 1,3-дихлорпропен, фурфарал, йодометан, метам, метилбромід, метилізотіоціанат і ксиленоли. 00639) Наприклад, але не обмежуючись цим, нематицид і інсектицид може бути наданий у формі комерційного продукту Амісїа Юцо, що являє собою суміш абамектину і тіаметоксаму, комерційно доступну від Зупдепіа. (00640) Якщо сполука, насіння рослини або інокулят містить бактеріоцид, він може включати стрептоміцин, пеніциліни, тетрацикліни, ампіцилін і оксолінову кислоту.
І00641| Добриво може включати рідке добриво. Матеріал мікродобрива може містити борну кислоту, борат, борну фриту, сульфат міді, мідну фриту, хелат міді, натрію тетраборат декагідрат, сульфат заліза, оксид заліза, сульфат заліза амонію, залізну фриту, хелат заліза, сульфат марганцю, оксид марганцю, хелат марганцю, хлорид марганцю, марганцеву фриту, молібдат натрію, молібденову кислоту, сульфат цинку, оксид цинку, карбонат цинку, цинкову фриту, фосфат цинку, хелат цинку або їхню комбінацію.
І00642| Добриво може містити сульфат амонію, нітрат амонію, сульфат нітрат амонію, хлорид амонію, бісульфат амонію, полісульфід амонію, тіосульфат амонію, водяний аміак, безводний аміак, поліфосфат амонію, сульфат алюмінію, нітрат кальцію, нітрат кальцію амонію, сульфат кальцію, кальцинований магнезит, кальцинований вапняк, оксид кальцію, нітрат кальцію, доломітовий вапняк, гашене вапно, карбонат кальцію, фосфат діамонію, фосфат моноамонію, нітрат магнію, сульфат магнію, нітрат калію, хлорид калію, сульфат калію магнію, сульфат калію, нітрати натрію, магнезіальний вапняк, магнезію, сечовину, сечовини- формальдегіди, сечовини амонію нітрат, покриту сіркою сечовину, покриту полімером сечовину, ізобутиліден дисечовину, Кг2504-2мМ9505, каїніт, сильвініт, кізерит, англійську сіль, елементарну сірку, вапняну глину, подрібнені устричні черепашки, риб'яче борошно, макухи, риб'яче добриво, кров'яне борошно, фосфатну руду, суперфосфати, шлак, кісткове борошно, деревний попіл, гній, гуано кажанів, торф'яний мох, компост, глауконітовий пісок, борошно з насіння бавовнику, борошно з пір'я, крабове кормове борошно, риб'ячу емульсію, гумінову кислоту або їхню комбінацію. 00643) Склад, насіння рослини або інокулят також може включати щонайменше один засіб біологічного контролю, вибраний з (1) бактерій, зокрема, спороутворювальних бактерій, (2) грибів або дріжджів, і (3) ізофлавонів. Переважними є комбінації, що містять як засіб біологічного контролю, зокрема, спороутворювальну бактерію, що колонізує корені, або бактерію, прийнятну як біофунгіцид, вибрану з групи, яка складається з Ігрупа (1)): (1.1) Васійи5 ації, (1.2) Васійи5 аїігамаї, (1.3) Васійи5 аїроїасіїв, (1.4) Васіїн5 атупоїїдпегасівепв, (1.5) Васійи5 сегецйв, (1.6) Васійи5 соадшапв, (1.7) Васіїн5 епдорагавзійсив, (1.8) Васіїн5 епдогпуйтозв, (1.9), (1.10) Васійи5 Кикеїакі, (1.11) Васшив Іасіїсоїа, (1.12) Васійнв5 Іасітогрив, (1.13) Васшив5 Іасів, (1.14) ВасШиз Іагегозрогив, (1.15) Васійи5 Іепітогрив, (1.16) Васив5 Іспепітоптів, (1.17) Васі тедивза, (1.18) Васіїїиє тедаїегішт, (1.19) Васійи5 теїйепв, (1.20) Васійи5 панцо, (1.21) ВасішШи5 піднтісапв, (1.22) Васі: роріїає, (1.23) Васіи5 ритіїшв, (1.24) ВасіПи5 зіатепвів, (1.25) Васйив5 5рпаєгіси5 (продукти, відомі як МесіоїЇ ех.5ир.5), (1.26) Васійи5 5ибБійй або В. 5!ЇибБіййб варіант атуїоїїднетасіеєп5, (1.27) Васійи5 «Пигіпдіепві5, зокрема, В. «(игіпдіеп5і5 варіант ізгаєїепвів (продукти, відомі як МесіоВас.кТМ.) або В. Іпигіпдіепоіє підвид аїламжаі штам АВТ5-1857 (продукти, відомі як Хептагі) або В. Іпигіпдіепзі5 підвид Кигеїакі штам НО-1 (продукти, відомі як
ОбіреІ Е5), (1.28) Васіййи5 ципшШадейПастшв5, (1.29) ЮОеШіа асідомогап5, зокрема, штам КАХУ209 (продукти, відомі як ВіоВоо5!), (1.30) ІГузобрасіег апіїріоїси5, зокрема, штам 13-1 (Віоіодіса бСопіто! 2008, 45, 288-296), (1.31) І узобасієг еплутодепе5, зокрема, штам 3.18, (1.32)
Рзепдотопа5 сПІогогарпіх, зокрема, штам МА 342 (продукти, відомі як Седотоп), (1.33)
Рзепдотопаєх ргогадіх (продукти, відомі як Ргогадіх.,КТМ.), (1.34) Зігеріотусез5 дари, зокрема, 60 штам Кб1 (продукти, відомі як Мусозіор.КТМ., див. Стор Ргоїесіп 2006, 25, 468-475), (1.35)
зігеріотусез дгізеомігіді5 (продукти, відомі як Мусозіор.КТМ.). 00644) Крім того, переважними є комбінації, які містять як засіб біологічного контролю гриб або дріжджі, вибрані з групи, яка складається з Ігрупа (2)Ї: (2.1) АтреІотусе5 адпиіздчаїїв5, зокрема, штам АОС) 10 (продукт, відомий як АС 10.КТМ.), (2.2) Аигеобазідіит риїшіапв, зокрема, бластоспори штаму О5М14940 або бластоспори штаму О5М 14941 або їхньої суміші (продукт, відомий як Віоз5от Ргоїесі.КкТМ.), (2.3) Веаймегіа Браззіапа, зокрема, штам АТСС 74040 (продукти, відомі як Маїйшгаїї5.КТМ.), (2.4) Сапаїда оіІеорпіа, зокрема, штам О (продукти, відомі як Меху), (2.5) Сіадозрогішт сіадозрогіоїде5 НЗО (див. Еиг. У). Ріапі Рашої. 2009, 123, 401-414), (2.6), (2.7) Ойорпозрпога аїІоресигі (продукти, відомі як Тм/і5їЇ Еипдив5), (2.8) СІпосіадійт сагепшиіашт, зокрема, штам 41446 (продукти, відомі як Ргезіор), (2.9) І есапісіПит Іесапії (раніше відомі як МегісШіит Іесапії), зокрема, конідії штаму КМО1 (продукти, відомі як МусоїаІ.кТМ.,
МепаїІес.КтТМ.), (2.10) Мегагпігішт апізоріїєа (продукти, відомі як ВІО 1020), (2.11) Меї5сппікоміа їгисісоїа, зокрема, штам МАК м-30752 (продукти, відомі як ЗПпетег.ТМ.), (2.12)
Місгозрпаеєегорзі5 оспгасеа (продукти, відомі як Місгох), (2.13), (2.14) Мотигавєа гііеуї, (2.15), (2.16)
Репісіййшт бБііаійї, зокрема, штам АТСС22348 (продукти, відомі як Уитроеїатнп. ВТМ., РВ-50, Ргоміде), (2.17) Ріспіа апотаїа, зокрема, штам М/КС-076, (2.18) Рзхецдо7ута Поссшоза, зокрема, штам РЕ-
А22 ЦІ. (продукти, відомі як Зрогодех І), (2.19) РушШішт оїїдапагит 0М74 (продукти, відомі як
Роїумегвит), (2.20) Тісподегпта азрегеПшт, зокрема, штам ІСС 012 (продукти, відомі як Віоїеп), (2.21) Тгісподегта Пагліапит, зокрема, Т. Пагліаапит 739 (продукти, відомі, наприклад, як
Тиісподех). 00645) Крім того, переважними є комбінації, які включають як засіб біологічного контролю ізофлавон, вибраний із групи, яка складається з (група (3)|: (3.1) геністеїну, (3.2) біоханіну АТО, (3.3) формононетину, (3.4) даїдзеїну, (3.5) гліцитеїну, (3.6) гесперетину, (3.7) нарингеніну, (3.8) халькону, (3.9) кумарину, (3.10) амбіол-(2-метил-4-диметиламінометил-5- гідроксибензімідазолдигідрохлориду), (3.11) аскорбату і (3.12) пратенсеїну і їхніх солей і складних ефірів.
І00646| Якщо склад, насіння рослини або інокулят містить інсектицид, інсектицид може включати піретроїди, фосфороорганічні сполуки, карамоїлоксими, піразоли, амідини, галогеновані вуглеводні, неонікотиноїди і карбамати і їхні похідні. Зокрема, прийнятні класи
Зо інсектицидів включають фосфорорганічні сполуки, фенілпіразоли і піретроїди. Переважними інсектицидами є інсектициди, відомі як тербуфос, хлорпірифос, хлортоксифос, тефлутрин, карбофуран і тебупіримфос. Комерційно доступні інсектициди включають тіометоксам (комерційно доступний від Зупдепіа під торговою назвою Стгиізег).
І00647| Інсектицид може включати фосфороорганічну сполуку, карбамат, піретроїд, акарицид, алкілфталат, борну кислоту, борат, фторид, сірку, галогенароматичну заміщену сечовину, складний ефір вуглеводню, інсектицид на біологічній основі, або їхню комбінацію.
І00648| Прийнятні інсектициди для застосування в рамках даного винаходу включають наступні: Оп) агоністи/антагоністи ацетилхолінових рецепторів, такі як хлорнікотинили/неонікотиноїди, нікотин, бенсултап або картап. Прийнятні приклади хлорнікотинілів/неонікотиноїдів включають ацетаміприд, динотефуран, нітенпірам, нітіазин, тіаклоприд, тіаметоксам, імідаклотиз і (2Е)-1-(2-хлор-1,3-тіазол-5-ілуметил|-3,5-диметил-М- нітро-1,3,5-триазинан-2-імін; (2) інгібітори ацетилхолінестерази (АСМЕ), такі як карбамати і фосфороорганічні сполуки. Прийнятні приклади карбаматів включають аланікарб, алдикарб, алдоксикарб, аліксикарб, амінокарб, бендіокарб, бенфуракарб, буфенкарб, бутакарб, бутокарбоксим, бутоксикарбоксим, карбарил, карбофуран, карбосульфан, хлоретокарб, диметилан, етіофенкарб, фенобукарб, фенотіокарб, форметанат, фуртіокарб, ізопрокарб, мета- натрій, метоміл, метолкарб, оксаміл, фосфокарб, піримікарб, промекарб, пропоксур, тіофанокс, триазамат, триметакарб, ХМС і ксилікарб. Прийнятні приклади фосфороорганічних сполук включають ацефат, азаметифос, азинфос (-метил, -етил), бромофос-етил, бромфенвінфос (- метил), бутатіофос, кадусафос, карбофенотіон, хлоретоксифос, хлорфенвінфос, хлормефос, хлорпірифос (-метил/-етил), кумафос, ціанофенфос, ціанофос, деметон-5-метил, деметон-5- метилсульфон, діаліфос, діазинон, дихлофентіон, дихлорфос/О0МР, дикротофос, диметоат, диметилвінфос, діоксабензофос, дисульфотон, ЕРМ, етіон, етопрофос, етримфос, фамфур, фенаміфос, фенітротіон, фенсульфотіон, фентіон, флупіразофос, фонофос, формотіон, фосметилан, фостіазат, гептенофос, фодофенфос, іпробенфос, ісзофос, ізофенфос, ізопропіл-
О-саліцилат, ізоксатіон, малатіон, мекарбам, метакрифос, метамідофос, метидатіон, мевінфос, монокротофос, налед, ометоат, оксидеметон-метил, паратіон (-метил/-етил), фентоат, форат, фозалон, фосмет, фосфамідон, фосфокарб, фоксим, піримфос (-метил/-етил), профенофос, пропафос, пропетамфос, протіофос, протоат, піраклофос, піридафентіон, піридатіон, 60 квіналфос, себуфос, сульфотеп, сульпрофос, тебупіримфос, темефос, тербуфос,
тетрахлорвінфос, тіометон, триазофос, триклорфон і вамідотіон; (3) модулятори натрієвих каналів/блокатори потенціалзалежних натрієвих каналів, такі як піретроїди й оксадіазини.
Прийнятні приклади піретроїдів включають акринатрин, алетрин (а-цис-транс, а-транс), бета- цифлутрин, бифентрин, біоалетрин, біоалетрин-5-циклопентил-ізомер, біоетанометрин, біоперметрин, біоресметрин, хловапортрин, цис-резметрин, цис-перметрин, клоцитрин, циклопротрин, цифлутрин, цигалотрин, цифенотрин, СОТ, дельтаметрин, емпентрин (1К- ізомер), есфенвалерат, етофенпрокс, фенфлутрин, фенпропатрин, фенпіритрин, фенвалерат, флуброцитринат, флуцитринат, флуфенпрокс, флуметрин, флувалінат, фубфенпрокс, гамма- цигалотрин, іміпротрин, кадетрин, лямбда-цигалотрин, метофлутрин, перметрин (цис-, транс-), фенотрин (1Е-транс-ізомер), пралетрин, профлутрин, протрифенбут, піресметрин, ресметрин,
КИ 15525, силафлуофен, тау-флувалінат, тефлутрин, тералетрин, тетраметрин (1К-ізомер), тралоцитрин, тралометрин, трансфлутрин, 2ХІ 8901 і піретрини (піретрум). Прийнятний приклад оксадіазинів включає індоксакарб; (4) модулятори ацетилхолінових рецепторів, такі як спінозини. Прийнятний приклад спінозинів включають спіносад; (5) антагоністи ЗАВА-залежних хлоридних каналів, такі як циклодієнові хлорорганічні сполуки і фіпроли. Прийнятні приклади циклодієнових хлорорганічних сполук включають камфехлор, хлордан, ендосульфан, гамма-
НСН, НН, гептахлор, ліндан і метоксихлор. Прийнятні приклади фіпролів включають ацетопрол і ваніліпрол; (б) активатори хлоридних каналів, такі як мектини. Прийнятні приклади мектинів включають абамектин, авермектин, емамектин, емамектин-бензоат, івермектин, лепімектин, мілбемектин і мілбеміцин; (7) міметики ювенільних гормонів, такі як діофенолан, епофенонан, феноксикарб, гідропрен, кінопрен, метопрен, пірипроксифен, трипрен; (8) агоністи/деструктори екдизону, такі як діацилгідразини. Прийнятні приклади діацилгідразинів включають хромафенозид, галофенозид, метоксифенозид і тебуфенозид; (9) (інгібітори біосинтезу хітину, такі як сполуки бензоїлсечовини, бупрофезин і циромазин. Прийнятні приклади сполук бензоїлсечовини включають бістрифлуорон, хлофлуазурон, дифлубензурон, флуазурон, флуциклоксурон, флуфеноксурон, гексафлумурон, луфенурон, новалурон, новіфлумурон, пенфлурон, тефлубензурон і трифлумурон; (10) інгібітори окиснювального фосфорилування, деструктори АТР, такі як оловоорганічні сполуки і діафентіурон. Прийнятні приклади оловоорганічних сполук включають азоциклотин, цигексатин і фенбутатину оксид; (11)
Зо засобуи що роз'єднують окиснювальне фосфорилування шляхом порушення градієнта протонів
Н, такі як піроли і динітрофеноли. Прийнятний приклад піролів включає хлорфенапір. Прийнятні приклади динітрофенолів включають бінапакрил, динобутон, динокап і ОМОС; (12) інгібітори транспорту електронів ділянки І, такі як МЕТІ, гідраметилнон і дикофол. Прийнятні приклади
МЕТІ включають феназаквін, фенпіроксимат, піримідифен, піридабен, тебуфенпірад, толфенпірад; (13) інгібітори транспорту електронів ділянки ІІ, такі як ротенон; (14) інгібітори транспорту електронів ділянки І, такі як ацеквіноцил і флуакрипірим; (15) мікробні деструктори кишкової оболонки комах, такі як штами ВасйШив5 (игіпдіепвів; (16) інгібітори синтезу ліпідів, такі як тетронові кислоти і тетрамові кислоти. Прийнятні приклади тетронових кислот включають спіродиклофен, спіромезифен і спіротетрамат. Прийнятний приклад тетрамінових кислот включає /цис-3-(2,5-диметилфеніл)-8-метокси-2-оксо-1-азаспіро|4.5|)дец-3-ен-4-ілетилкарбонат (він же: /3-(2,5-диметилфеніл)-8-метокси-2-оксо-1-азаспіро(4.5|дец-З-ен-4-ілетиловий ефір вугільної кислоти (реєстраційний Ме СА 382608-10-8); (17) карбоксаміди, такі як флонікамід; (18) октопамінергічні агоністи, такі як амітраз; (19) інгібітори магній-стимульованої АТР-ази, такі як пропаргіт; (20) агоністи ріанодинових рецепторів, такі як фталаміди і ринаксапір. Прийнятний приклад фталамідів включає М2-П1,1-диметил-2-(метилсульфоніл)етил|-3-йодо-М'-(2-метил-4-
П1,2,2,2-тетрафтор-1-(трифторметил)етил|феніл|-1,2-бензолдикарбоксамід (тобто флубендіамід, реєстраційний Ме САБ5 272451-65-7); (21) аналоги нереїстоксину, такі як тіоциклам водень оксалат і тіосультап-натрій; (22) біологічні засоби, гормони або феромони, такі як азадирактин,
ВасіШиз 5рес., Веаиймегіа 5рес., кодлемон, Меїагтігішт 5рес., Раесітусез 5рес., ІпПигіпдіепвів і
МепісіЦит 5рес.; (23) активні сполуки, що мають невідомі або неуточнені механізми дії, такі як фуміганти, селективні інгібітори харчування, інгібітори росту кліщів, амідофлумет; бенклотіаз, бензоксимат, біфеназат, бромпропілат, бупрофезин, хінометіоат, хлордимеформ, хлорбензилат, хлорпікрин, клотіазобен, циклопрен, цифлуметофен, дицикланіл, феноксакрим, фентрифаніл, флубензимін, флуфенерим, флутензин, госсиплур, гідраметилонон, японілур, метоксадіазон, нафтопродукти, піперонілбутоксид, олеат калію, пірафлупрол, піридаліл, пірипрол, сульфурамід, тетрадифон, тетрасул, триаратен, вербутин, більше того, сполука 3- метилфенілпропілкарбамат (Тзитасіде г), сполука 3-(5-хлор-З-піридиніл)-8-(2,2,2- трифторетил)-8-азабіцикло|3.2.1|октан-З-карбонітрил (реєстраційний Мо САБ 185982-80-3) і відповідний ізомер 3-ендо (реєстраційний номер Ме СА5 185984-60-5) (див. МО 96/37494, УМО бо 98/25923), а також препарати, що містять ефективні екстракти рослин, нематоди, гриби або віруси. Прийнятні приклади фумігантів включають фосфід алюмінію, метилбромід і сульфурилфторид. Прийнятні приклади селективних інгібіторів харчування включають кріоліт, флонікамід і піметрозин. Прийнятні приклади інгібіторів росту кліщів включають клофентезин, етоксазол і гекситіазокс.
І00649| Комерційно доступні нематицидні інгредієнти включають абамектин (комерційно доступний від Зупдепіа під торговою назвою Амісіа). 00650) Якщо склад, насіння рослини або інокулят містить гербіцид, гербіцид може включати 2,4-0, 2,4-08, ацетохлор, ацифлуорфен, алахлор, аметрин, атразин, амінопіралід, бенефин, бенсульфурон, бенсулід, бентазон, бромацил, бромксиніл, бутилат, карфентразон, хлоримурон, хлорсульфурон, клетодим, кломазон, клопіралід, клорансулам, циклоат, ОСРА, десмедифам, дикамбу, дихлобеніл, диклофоп, диклосулам, дифлуфензопір, диметенамід, дикват, діурон,
О5МА, ендотал, ЕРТС, еталфлуралін, етгофумесат, феноксапроп, флуазифоп-Р, флукарбазон, флуфанецет, флуметсулам, флуміклорак, флуміоксазин, флуометурон, флуроксипір, фомесафен, форамсульфурон, глюфосинат, гліфосат, галосульфурон, гексазинон, імазаметабенц, імазамокс, імазапік, імазаквін, імазетапір, ізоксабен, ізоксафлутол, лактофен, лінурон, МСРА, МОСРВ, мезотрион, метолахлор-с, метрибузин, метсульфурон, молінат, М5МА, напропамід, напталам, нікосульфурон, норфлуразон, оризалін, оксидіазон, оксифлуорфен, паракват, пеларгонову кислоту, пендиметалін, фенмедифам, піклорам, примісульфурон, продіамін, прометрин, пронамід, пропаніл, просульфурон, піразон, піритіобак, квінклорак, квізалофоп, римсульфурон, сетоксидим, сидурон, симазин, сульфентразон, сульфометурон, сульфосульфурон, тебутіурон, тебацил, тіазопір, тифенсульфурон, тіобенкарб, тралкоксидим, триалат, триасульфурон, трибенурон, триклопір, трифлуралін, трифлусульфурон або їхню комбінацію.
Ї00651| Гербіцид може включати хлорфеноксисполуку, нітрофенольну сполуку, нітрокрезольну сполуку, дипіридильну сполуку, ацетамід, аліфатичну кислоту, анілід, бензамід, бензойну кислоту, похідне бензойної кислоти, ганусову кислоту, похідне ганусової кислоти, бензонітрил, бензотіадіазинону діоксид, тіокарбамат, карбамат, карбанілат, хлорпіридиніл, похідне циклогексенону, похідне динітроамінобензолу, сполуку Ффтординітротолуїдину, ізоксазолідинон, нікотинову кислоту, ізопропіламін, похідне ізопропіламіну, оксадіазолінону,
Зо фосфат, фталат, сполуку піколінової кислоти, триазин, триазол, урацил, похідне сечовини, ендоталл, хлорат натрію, сульфонілсечовину, арилтриазин або їхню комбінацію. 00652) Сполука може містити гербіцид і штам бактерій, який здатний деградувати гербіцид.
І00653| Штам бактерій, який здатний деградувати гербіцид, може включати представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ349 (МАК! Мо В-50928), представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ- вО00377 (МАВІ В-67119), Васі рзепдотусоїдез ЕЕ-800366 (МАВІ В-67120) або ВасшШив5 тусоїдез ЕЕ-В00363 (МАНІ. В-67121) або їхню комбінацію.
І00654| Гербіцид, який підлягає деградації, може включати сульфонілсечовину, таку як сульфентразон, арилтриазин, дикамбу, феноксигербіцид, 2,4-О, піретрин, піретроїд або їхню комбінацію.
ЇОО655| У склади можуть бути включені зв'язувальні речовини, такі як карбоксиметилцелюлоза, і природні і синтетичні полімери у формі порошків, гранул або латексів, такі як гуміарабік, хітин, полівініловий спирт і полівінілацетат, а також природні фосфоліпіди, такі як цефаліни і лецитини, і синтетичні фосфоліпіди. Зв'язувальні речовини включають зв'язувальні речовини, що складаються переважно з адгезивного полімеру, який може бути природним або синтетичним, без фітотоксичного ефекту на насіння, що підлягає покриванню. Додаткові зв'язувальні речовини, які можуть бути включені, або окремо, або в комбінації, включають, наприклад, прості поліефіри, складні ефіри простих поліефірів, поліангідриди, поліефіруретани, поліефіраміди; полівінілацетати; співполімери полівінілацетату; полівінілові спирти і тилозу; співполімери полівінілових спиртів; полівінілпіролідони; полісахариди, включаючи крохмалі, модифіковані крохмалі і похідні крохмалів, декстрини, мальтодекстрини, альгінати, хітозани і целюлози, складні ефіри целюлози, прості ефіри целюлози і складні ефіри простих ефірів целюлози, включаючи етилцелюлози, метилцелюлози, гідроксиметилцелюлози, гідроксипропілцелюлози і карбоксиметилцелюлозу; жири; олії; білки, включаючи казеїн, желатин і зеїни; гуміарабіки; шелаки; вінілиденхлорид і співполімери вінілиденхлориду; лігносульфонати, зокрема, лігносульфонати кальцію; поліакрилати, поліметакрилати й акрилові співполімери; полівінілакрилати; поліетиленоксид; полібутени, поліїзобутени, полістирол, полібутадієн, поліетиленаміни, поліетиленаміди; акриламідні полімери і співполімери; полігідроксіетилакрилат, мономери метилакриламіду і поліхлорпрен.
Ї00656| Можна використовувати різні барвники, включаючи органічні хромофори, що 60 пьіДроздьіляються на нітрозо, нітро, азо, у тому числі моноазо, біазо і поліазо, дифенілметан,
триарилметан, ксантен, метан, акридин, тіазол, тіазин, індамін, індофенол, азин, оксазин, антрахінон і фталоціанін.
І00657| Інші добавки, які можна додавати, включають мікронутрієнти, такі як солі заліза, марганцю, бору, міді, кобальту, молібдену і цинку.
Ї00658| Також можна включати один або кілька консервантів (наприклад, протимікробні засобу або інші біоцидні засоби) для збереження і стабілізації складу. Приклади прийнятних бактерицидних засобів включають бактерицидні засоби на основі дихлорофену і напівформалю бензилового спирту (РгохекФ від ІСІ або Асіїсіде?»? КЗ від Тпог Спетіе і КаїййопФ МК від Юом/
Спетісаї) і похідні ізотіазолінону, такі як алкілізотіазолінони і бензізотіазолінони (Асіісіде? МВ5 від Тпог Спетіє). Як наступні приклади, прийнятні консерванти включають МІТ (2-метил-4- ізотіазолін-З-он), ВІТ (І2-бензізотіазолін-З3-он, який може бути придбаний від Амесіа, Іпс. у вигляді Ргохе! СХІ. як розчин у гідроксиді натрію і дипропіленгліколі), 5-хлор-2-(4-хлорбензил)-
З(2Н)-ізотіазолон, 5-хлор-2-метил-2Н-ізотіазол-3-он, 5-хлор-2-метил-2Н-ізотіазол-3-он, 5-хлор-2- метил-2Н-ізотіазол-3-она гідрохлорид, 4,5-дихлор-2-циклогексил-4-ізотіазолін-3-он, 4,5-дихлор- 2-октил-2Н-ізотіазол-З-он, 2-метил-2Н-ізотіазол-3-он, комплекс 2-метил-2Н-ізотіазол-3-он- хлорид кальцію, 2-октил-2Н-ізотіазол-3-он і геміформаль бензилового спирту.
І00659| Приклади прийнятних загусників для сполук включають полісахариди, органічні глини або розчинний у воді полімер, який демонструє псевдопластичні властивості у водному середовищі, наприклад, такий як гуміарабік, камедь карайї, трагакантова камедь, гуарова камедь, камедь бобів ріжкового дерева, ксантанова смола, карагенан, альгінатна сіль, казеїн, декстран, пектин, агар, 2-гідроксіетилкрахмал, 2-аміноетилкрахмал, 2-гідроксіетилцелюлоза, метилцелюлоза, сіль карбоксиметилцелюлози, сульфатна сіль целюлози, поліакриламід, солі лужних металів співполімерів малеїнового ангідриду, солі лужних металів полі(мет)акрилату. 00660) Прийнятні протиобмерзальні інгредієнти для сполуки включають, наприклад, але не обмежуючись ними, етиленгліколь, 1,2-пропіленгліколь, 1,3-пропіленгліколь, 1,2-бутандіол, 1,3- бутандіол, 1,4-бутандіол, 1,4-пентандіол, З-метил-і,-пентандіол, 2,3-диметил-2,3-бутандіол, триметилолпропан, маніт, сорбіт, гліцерин, пентаеритрит, 1,4-циклогександиметанол, ксиленол, бісфеноли, такі як бісфенол А або подібні до них. Крім того, передбачаються ефірні спирти, такі як діетиленгліколь, триетиленгліколь, тетраєетиленгліколь, поліоксіетилен або
Зо поліоксипропіленгліколи з молекулярною масою аж до 4000, монометиловий ефір діетиленгліколю, моноетиловий ефір діетиленгліколю, монометиловий ефір триетиленгліколю, бутоксіетанол, бутиленгліколь монобутиловий ефір, дипентаеритрит, трипентаеритрит, тетрапентаєритрит, дигліцерин, тригліцерин, тетрагліцерин, пентагліцерин, гексагліцерин, гептагліцерин, октагліцерин і їхні комбінації.
ХМ. Насіння рослин
Ї00661| Крім того, даний винахід стосується насіння рослин, покритого будь-яким з рекомбінантних представників сімейства Васіїйи5 сегеци5, описаних у даному описі, будь-якими з рекомбінантних спороутворювальних бактерій, описаних у даному описі, будь-якими з біологічно чистих бактеріальних культур, описаних у даному описі, будь-якими з інокулятів, описаних у даному описі, будь-яким ферментом, що каталізує продукцію оксиду азоту, будь- яким рекомбінантним мікроорганізмом, що експресує фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, або будь-якими зі складів, відмінних від вакцин, як описано в даному описі.
ХІХ. Способи, які стосуються рослин і насіння рослин, способи уповільнення проростання спор рекомбінантного представника сімейства Васійй5 сегени5 і способи одержання і застосування фрагментів екзоспорію 00662 Крім того, даний винахід стосується способів стимуляції росту рослин, способів захисту рослини від патогена або підвищення стійкості рослини до стресових впливів, способів іммобілізації спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 або рекомбінантних спороутворювальних бактерій на рослині, способів стимуляції проростання насіння рослини, способів доставки нуклеїнових кислот у рослини, способів уповільнення проростання спор рекомбінантного представника сімейства Васіїййє5 сегеи5, способів одержання і застосування фрагментів екзоспорію і способів доставки корисних бактерій тваринам.
А. Способи стимуляції росту рослин 00663) Даний винахід стосується способів стимуляції росту рослин.
І00664| Один спосіб стимуляції росту рослин за даним винаходом включає внесення в середовище для росту рослин будь-якого з рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеи5, описаних вище, або будь-якого зі складів, що містять рекомбінантний представник сімейства Васій5 сеген5, описаний вище. Альтернативно будь-який з рекомбінантних представників сімейства Васійц5 сегеи5, описаних вище, або будь-який зі складів, що містять 60 рекомбінантний представник сімейства Васійш5 сегеи5, описаний вище, можна наносити на рослину, насіння рослини або на область, яка оточує рослину насіння або рослини. У таких способах рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 експресує злитий білок, який містить стимулюючий ріст рослин білок або пептид. Стимулюючий ріст рослин білок або пептид може бути фізично зв'язаний з екзоспорієм рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегепв. 00665) Інший спосіб стимуляції росту рослин включає внесення в середовище для росту рослин будь-якої з рекомбінантних спороутворювальних бактерій, описаних вище, або будь- якого зі складів, що містять рекомбінантну спороутворювальну бактерію, описану вище.
Альтернативно будь-яка з рекомбінантних спороутворювальних бактерій, описаних вище, або будь-який зі складів, що містять рекомбінантну спороутворювальну бактерію, описану вище, можна наносити на рослину, насіння рослини або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. У таких способах рекомбінантна спороутворювальна бактерія експресує злитий білок, який містить стимулюючий ріст рослин білок або пептид. Стимулюючий ріст рослин білок або пептид може бути фізично зв'язаний з оболонкою спори рекомбінантної спороутворювальної бактерії. (00666) Інший спосіб стимуляції росту рослин включає внесення в середовище для росту рослин рекомбінантного представника сімейства Васіййиє сегеи5 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васійй5 сегеи5. Альтернативно рекомбінантний представник сімейства Васійни5 сегеи5 або склад можна наносити на рослину, насіння рослини або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. Рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 експресує фермент, залучений у солюбілізацію поживних речовин, протеазу, білок ВСІА, білок ВсіІВ, білок СОїЕ, білок СОЮ, білок Ех5У, білок ЕХеЕА/ВхрВ, білок
Со, білок ЕХ5ЕВ, білок Ех5у, білок Ех5Н, білок М|сА, білок хісВ, білок ВсіС, білок ВхрА, білок
ВСЕ, білок ВетхА/ВА5З3290, білок Ех5А, білок Ех5К, білок Ех5В, білок Марс або білок ТОЇ, де експресія ферменту, залученого в солюбілізацію поживних речовин, протеази, білка ВсіА, білка
ВсСІВ, білка СОїЕ, білка СОЮ, білка Ех5У, білка ЕХ5ЕА/ВхрВ, білка СоїУ, білка ЕХ5ЕВ, білка Ех5у, білка ЕХ5Н, білка Х|сСА, білка Х|сВ, білка ВсіІС, білка ВхрА, білка ВсіЕ, білка ВетгА/ВА5З3290, білка
ЕХ5А, білка Ех5К, білка Ех5В, білка Марс або білка Тоді збільшена в порівнянні з експресією ферменту, залученого в солюбілізацію поживних речовин, протеази, білка ВСІА, білка ВСІВ, білка
Ко) СОЄЕ, білка СОЮ, білка Ех5У, білка Ех5ГА/ВхрВ, білка СоїУ, білка ЕХ5ЕВ, білка Ех5у, білка ЕХ5Н, білка місА, білка хісВ, білка ВсіІС, білка ВхрА, білка ВесІЕ, білка ВетхА/ВА53290, білка ЕхХ5А, білка
ЕХ5К, білка Ех5В, білка Марс або білка То! у представнику сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах.
І00667| Додаткові способи стимуляції росту рослин, які залучають застосування фрагментів екзоспорію, які походять з рекомбінантного представника сімейства Васійш5 сегеи5, описані нижче.
В. Способи захисту рослини від патогена або підвищення стійкості рослини до стресових впливів
ІЇ0066б8| Даний винахід також стосується способів захисту рослини від патогена або підвищення стійкості рослини до стресових впливів. 006691 Один зі способів захисту рослини від патогенів або підвищення стійкості рослини до стресових впливів включає внесення в середовище росту рослини будь-якого з рекомбінантних представників сімейства Васійц5 сегейи5, описаних вище, або будь-якого зі складів, що містять рекомбінантний представник сімейства Васі сегейи5, описаний вище. Альтернативно будь- який з рекомбінантних представників сімейства Васіїйн5 сегеи5, описаних вище, і будь-який зі складів, що містять рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, описаний вище, можна наносити на рослину, насіння рослини або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. У таких способах рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 експресує злитий білок, який містить білок або пептид, що захищає рослину від патогена, або білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів. Білок або пептид, який захищає рослину від патогена, або білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів, може бути фізично зв'язаний з екзоспорієм рекомбінантного представника сімейства
Васійи5 сегейв. 00670) Інший спосіб захисту рослини від патогена або підвищення стійкості рослини до стресових впливів включає внесення в середовище для росту рослини будь-яких з рекомбінантних спороутворювальних бактерій, описаних вище, або будь-якого зі складів, що містять рекомбінантні спороутворювальні бактерії, описані вище. Альтернативно будь-які з рекомбінантних спороутворювальних бактерій, описаних вище, або будь-який зі складів, що містять рекомбінантні спороутворювальні бактерії, описані вище, можна наносити на рослину, 60 насіння рослини або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. У таких способах рекомбінантна спороутворювальна бактерія експресує злитий білок, який містить білок або пептид, що захищає рослину від патогена, або білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів. Білок або пептид, який захищає рослину від патогена, або білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів, може бути фізично зв'язаний з оболонкою спори рекомбінантної спороутворювальної бактерії.
ІЇ00671| У будь-якому зі способів захисту рослини від патогена рослини, вирощені в середовищі для росту рослин, що містить рекомбінантний представник сімейства Васіййи5 сегеи5, або рекомбінантні спороутворювальні бактерії, переважно є менш чутливими до інфекції патогеном у порівнянні з рослинами, вирощеними в тих же умовах в ідентичному середовищі для росту рослин, що не містить рекомбінантного представника сімейства Васіїйи5 сегеи5 або рекомбінантну спороутворювальну бактерію. 006721 У будь-якому зі способів підвищення стійкості рослин до стресових впливів рослини, вирощені в середовищі для росту рослин, що містить рекомбінантний представник сімейства
Васійй5 сегеи5 або рекомбінантну спороутворювальну бактерію, є менш чутливими до стресових впливів у порівнянні з рослинами, вирощеними в тих же умовах в ідентичному середовищі для росту рослин, що не містить рекомбінантного представника сімейства Васіййи5 сегеи5 або рекомбінантну спороутворювальну бактерію. (00673) Інший спосіб підвищення стійкості рослини до стресових впливів включає внесення в середовище для росту рослин рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства ВасіШи5 сегеи5. Альтернативно рекомбінантні Васійи5 сегеи5 або склад можна наносити на рослину, насіння рослини або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. Рекомбінантний представник сімейства
Васійй5 сегеи5 експресує супероксиддисмутазу або аргіназу, де експресія супероксиддисмутази або аргінази збільшена в порівнянні з експресією супероксиддисмутази або аргінази в представнику сімейства Васійи5 сегеиз дикого типу в тих же умовах.
І00674| Інший спосіб захисту рослини від патогена включає внесення в середовище для росту рослин рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васійц5 сегеи5. Альтернативно рекомбінантний Васійи5 сегеи5 або склад можна наносити на рослину, насіння рослини або в область, яка оточує
Зо рослину або насіння рослини. Рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 експресує протеазу, де експресія протеази збільшена в порівнянні з експресією протеази в представнику сімейства Васіїїи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах. 00675) Додаткові способи захисту рослини від патогена або підвищення стійкості рослини до стресових впливів, які залучають застосування фрагментів екзоспорію, які походять з рекомбінантного представника сімейства Васійц5 сегецй5, описані нижче.
С. Способи іммобілізації спор рекомбінантного представника сімейства Васіїййи5 сегеи5 або рекомбінантних спороутворювальних бактерій на рослині 00676) Крім того, даний винахід стосується способів іммобілізації спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 або рекомбінантних спороутворювальних бактерій на рослині.
І00677| Один зі способів іммобілізації спор рекомбінантного представника сімейства Васіййи5 сегени5 на рослині включає внесення в середовище для росту рослин будь-якого з рекомбінантних представників сімейства Васійй5 сегеи5, описаних вище, або будь-якого зі складів, що містять рекомбінантний представник сімейства Васійш5 сегеи5, описаний вище.
Альтернативно будь-який з рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеи5, описаних вище, або будь-який зі складів, що містять рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, описаний вище, можна наносити на рослину, насіння рослини або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. У таких способах рекомбінантний представник сімейства
Васійиє сегеи5 експресує злитий білок, який містить білок або пептид, що зв'язується з рослиною. Білок або пептид, що зв'язується з рослиною, може бути фізично зв'язаний з екзоспорієм рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегецв5.
І00678| Інший спосіб іммобілізації спор рекомбінантної спороутворювальної бактерії на рослині включає внесення в середовище для росту рослин будь-якої з рекомбінантних спороутворювальний бактерій, описаних вище, або будь-якого зі складів, що містять рекомбінантну спороутворювальну бактерію, описану вище. Альтернативно будь-яку з рекомбінантних спороутворювальних бактерій, описаних вище, або будь-який зі складів, що містять рекомбінантну спороутворювальну бактерію, описану вище, можна наносити на рослину, насіння рослини або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. У таких способах рекомбінантна спороутворювальна бактерія експресує злитий білок, який містить 60 пептид, що зв'язується з рослиною, і білок або пептид, що зв'язується з рослиною, може бути фізично зв'язаний з оболонкою спори рекомбінантної спороутворювальної бактерії.
І00679| Білок або пептид, що зв'язується з рослиною, переважно селективно націлює й утримує рекомбінантний представник сімейства Васійй5 сегеи5 або рекомбінантну спороутворювальну бактерію на рослині. Наприклад, білок або пептид, що зв'язується з рослиною, може селективно націлювати й утримувати рекомбінантний представник сімейства
Васійи5 сегениє на коренях рослин, субструктурах коренів, надземній частині рослини або підструктурі надземної частини рослини. р. Способи стимуляції проростання насіння рослини 1. Способи стимуляції проростання, які залучають застосування рекомбінантного представника сімейства Васіїїш5 сегеи5 або рекомбінантної спороутворювальної бактерії 00680) Даний винахід також стосується способів стимуляції проростання насіння рослини.
І00681| Один зі способів стимуляції проростання насіння рослини включає внесення в середовище для росту рослин будь-якого з рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеи5, описаних вище, або будь-якого зі складів, що містять рекомбінантний представник сімейства Васіййи5 сегеи5, описаний вище. Альтернативно будь-який з рекомбінантних представників сімейства Васійц5 сегеи5, описаних вище, або будь-який зі складів, що містять рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, описаний вище, можна наносити на рослину, насіння рослини або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. У таких способах рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 експресує злитий білок, який містить фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту. Фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, може бути фізично зв'язаний з екзоспорієм рекомбінантного представника сімейства Васіїн5 сегецйв.
ІЇ00682| Інший спосіб стимуляції проростання насіння рослини включає внесення в середовище для росту рослин будь-яких з рекомбінантних спороутворювальних бактерій, описаних вище, або будь-яких зі складів, що містять рекомбінантну спороутворювальну бактерію, описану вище. Альтернативно будь-які з рекомбінантних спороутворювальних бактерій, описаних вище, або будь-які зі складів, що містять рекомбінантну спороутворювальну бактерію, описану вище, можна наносити на рослину, насіння рослини або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. У таких способах рекомбінантна спороутворювальна
Зо бактерія експресує злитий білок, який містить фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, і фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, може бути фізично зв'язаний з оболонкою спори рекомбінантної спороутворювальної бактерії.
Ї00683| Описані вище способи стимуляції проростання насіння рослини переважно включають нанесення рекомбінантного представника сімейства Васіїйи5 сегеи5, рекомбінантної спороутворювальної бактерії і складу на насіння рослини. 00684) Крім того, будь-який зі способів стимуляції проростання насіння рослини може включати включення субстрату для ферменту, що каталізує продукцію оксиду азоту, у середовище для росту рослин, на насіння рослини, рослину або область, яка оточує рослину або насіння рослини. Наприклад, у прийнятному випадку спосіб додатково включає додавання
І -аргініну в середовище для росту рослини, на насіння рослини, рослину або область, яка оточує рослину або насіння рослини. Наприклад, І -аргінін можна наносити на надземну частину рослини. Переважно І -аргінін наносять на насіння рослини. 00685) Присутність І-аргініну підсилює реакцію і приводить до більшої продукції МО синтазою оксиду азоту. Більше того, І-аргінін на насінні рослини, у середовищі для росту рослин або в області, що оточує рослину, може служити як субстрат для продукції оксиду азоту нативними бактеріальними ферментами.
І00686| У будь-якому з описаних вище способів стимуляції проростання насіння рослини насіння в середовищі для росту рослин, що містить рекомбінантний представник сімейства
Васійй5 сегеи5 або рекомбінантну спороутворювальну бактерію, або насіння, на яке нанесений рекомбінантний представник сімейства Васіййи5 сегеи5 або рекомбінантна спороутворювальна бактерія, переважно має збільшений рівень проростання в порівнянні з насінням, що пророщується в тих же умовах в ідентичному середовищі для росту рослин, що не містить рекомбінантного представника сімейства Васіїйш5 сегеи5 або рекомбінантну спороутворювальну бактерію, або насінням, на яке на нанесений рекомбінантний представник сімейства Васіййи5 сегец5 або рекомбінантна спороутворювальна бактерія, що пророщуються в тих же умовах.
І00687| У будь-якому з описаних вище способів стимуляції проростання насіння рослин, насіння в середовищі для росту рослин, що містить рекомбінантний представник сімейства
Васійй5 сегеи5 або рекомбінантну спороутворювальну бактерію, або насіння, на яке нанесений рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 або рекомбінантна спороутворювальна бо бактерія, переважно має більш довгий головний корінь після проростання в порівнянні з насінням, що пророщується в тих же умовах в ідентичному середовищі для росту рослин, що не містить рекомбінантного представника сімейства Васійй5 сегеи5 або рекомбінантну спороутворювальну бактерію, або насінням, на яке не нанесений рекомбінантний представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 або рекомбінантна спороутворювальна бактерія, у тих же умовах.
ІЇ00688| Додаткові способи стимуляції проростання насіння рослин, які залучають застосування фрагментів екзоспорію, які походять з рекомбінантного представника сімейства
Васійи5 сегеи5, описані нижче. 2. Способи стимуляції проростання за допомогою доставки в рослини ферментів, які каталізують продукцію оксиду азоту, або рекомбінантних мікроорганізмів, що надекспресують такі ферменти
Ї00689| Інший спосіб стимуляції проростання насіння рослин включає внесення в середовище для росту рослин або нанесення на рослину, насіння рослини або в область, яка оточує рослину або насіння рослини: (ї) ферментуу, що каталізує продукції оксиду азоту; (ії) супероксиддисмутази; або (іїї) рекомбінантного мікроорганізму, що експресує фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту або супероксиддисмутазу, де експресія ферменту, що каталізує продукцію оксиду азоту або супероксиддисмутази, збільшена в порівнянні з експресією ферменту, що каталізує продукцію оксиду азоту або супероксиддисмутази, у мікроорганізмі дикого типу в тих же умовах.
ІЇ00690| Переважно спосіб включає нанесення ферменту або мікроорганізму на насіння рослини.
Ї00691| Крім того, спосіб може включати внесення субстрату ферменту, що каталізує продукцію оксиду азоту, у середовище для росту рослини, на насіння рослини, рослину або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. Наприклад, у прийнятному випадку спосіб, крім того, включає додавання І -аргініну в середовище для росту рослини, до насіння рослини, рослини або області, що оточує рослину або насіння рослини. Наприклад, І -аргінін можна наносити на надземну частину рослини. Переважно І -аргінін наносять на насіння рослини.
І00692| Насіння в середовищі для росту рослин, що містить фермент або мікроорганізм, або насіння, на яке нанесений фермент або мікроорганізм, переважно має збільшений рівень проростання в порівнянні з насінням, що пророщується в тих же умовах в ідентичному
Зо середовищі для росту рослин, що не містить фермент або мікроорганізм, або насінням, на яке не нанесений фермент або мікроорганізм, що пророщується в тих же умовах. (00693) Насіння в середовищі для росту рослин, що містить фермент або мікроорганізм, або насіння, на яке нанесений фермент або мікроорганізм, переважно має більш довгий головний корінь після проростання в порівнянні з насінням, що пророщується в тих же умовах в ідентичному середовищі для росту рослин, що не містить фермент або мікроорганізм, або насінням, на яке не нанесений фермент або мікроорганізм, у тих же умовах.
І00694| Фермент, який каталізує продукцію синтази оксиду азоту, може включати синтазу оксиду або азоту аргіназу. Коли фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, включає синтазу оксиду азоту, синтаза оксиду азоту може включати, наприклад, синтазу оксиду азоту з
Вас ІПигіпдіепхіє ВТО1ТЗА або Васіїйи5 5,иБій5 168. Наприклад, синтаза оксиду азоту може мати щонайменше 8595 ідентичності послідовності з ЗЕО ІЮ МО: 260 або 261.
І00695| Синтаза оксиду азоту може мати щонайменше 9095 ідентичності послідовності з
ЗЕО І МО: 260 або 261.
І00696| Синтаза оксиду азоту може мати щонайменше 9595 ідентичності послідовності з
ЗЕО ІЮ МО: 260 або 261.
І00697| Синтаза оксиду азоту може мати щонайменше 9895 ідентичності послідовності з
ЗЕО ІЮ МО: 260 або 261.
І00698| Синтаза оксиду азоту може мати щонайменше 9995 ідентичності послідовності з
ЗЕО ІЮ МО: 260 або 261.
І00699| Синтаза оксиду азоту може мати 10095 ідентичності послідовності з БЕО ІЮ МО: 260 або 261.
ІЇ00700| Супероксиддисмутаза може включати супероксиддисмутазу 1 (ЗОБА) або супероксиддисмутазу 2 (5ОМБА2). Супероксиддисмутаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85595 ідентичності з зЗЕО ІЮ МО: 155 або 156.
І00701| Супероксиддисмутаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 155 або 156.
І00702| Супероксиддисмутаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 155 або 156.
ІЇ00703| Супероксиддисмутаза може містити амінокислотну послідовність, яка має 60 щонайменше 9895 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 155 або 156.
І00704| Супероксиддисмутаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 155 або 156.
І00705| Супероксиддисмутаза може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 10095 ідентичності з зФЕО ІЮ МО: 155 або 156.
І00706| Рекомбінантний мікроорганізм, що експресує фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, може включати вид Васіїйш5 (наприклад, представник сімейства Васійи5 сегеийв,
Васійив5 зибійв, Васіїйи5 ІПспепітогтіх або Васійй5 тедаїегішт), Езспегеспіа соїї, вид Азрегойи5 (наприклад, АзрегоіЙи5 підег) або вид Засспготусез (наприклад, Засспготусез сегемівіає).
І00707| У будь-якому з описаних вище способів фермент або рекомбінантний мікроорганізм можна вносити в середовище для росту рослин або можна наносити на рослину, насіння рослини або на область, яка оточує рослину, у складі, що містить фермент або рекомбінантний мікроорганізм і прийнятний з погляду сільського господарства носій. Склад може містити будь- який з прийнятних з погляду сільського господарства носіїв і інших компонентів, описаних в даному описі. 00708) Фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, можна доставляти очищеним або неочищеним і можна доставляти окремо або в комбінації з іншими корисними білками, інокулятами або хімічними реагентами на насіння рослини, середовище для росту рослин або в область, яка оточує рослину або насіння рослини.
Е. Способи доставки нуклеїнових кислот у рослини 00709) Також даний винахід передбачає способи доставки нуклеїнових кислот у рослини.
ІЇ00710| Один зі способів доставки нуклеїнових кислот у рослину включає внесення в середовище для росту рослини будь-якого з рекомбінантних представників сімейства Васі сегеи5, описаних вище, або будь-якого зі складів, що містять рекомбінантний представник сімейства Васій5 сеген5, описаний вище. Альтернативно будь-який з рекомбінантних представників сімейства Васійц5 сегеи5, описаних вище, або будь-який зі складів, що містять рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, описаний вище, можна наносити на рослину, насіння рослини або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. У таких способах рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 експресує злитий білок, який містить білок, який зв'язує нуклеїнову кислоту. Білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову
Зо кислоту, зв'язаний з молекулою нуклеїнової кислоти. Білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, може бути фізично зв'язаний з екзоспорієм рекомбінантного представника сімейства
Васійи5 сегейв.
ІЇ00711| У таких способах рекомбінантний представник сімейства Васійн5 сегеи5 може включати ендофітний штам бактерій. Ендофітний штам бактерій може включати представник сімейства Васійни5 сегеи5 ЕЕЗ349, представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ439, ВасшШив
Іигіпдіеєпвіз ЕЕ417, Васіїїи5 сегеи5 ЕЕ444, Васійн5 І(Пигіпдіензі5 ЕЕЗ19, Васіив5 ІПигіпдіепвів ЕЕ-
ВО00184, представник сімейства Васіїйни5 сегеи5 ЕЕ-800377, Васіїйн5 рзендотусоїде5 ЕЕ-800366 або Васійиє тусоіїде5 ЕЕ-800363. Наприклад, ендофітний штам бактерій може включати представник сімейства Васіїйи5 сегеиз ЕЕ439, Васійи5 (пигіпдіепзіз ЕЕ417, ВасшШив сегеи5 ЕЕ444,
Васійи5 ІпПигіпдіепзіє ЕЄЕЗ19, Васійн5 ІпПигіпдіепзіз ЕЕ-800184, представник сімейства Васіїн5 сегеиз ЕЕ-800377, Васіїи5 реендотусоїдез ЕЕ-800366 або Васіїйи5 тусоїде5 ЕЕ-800363.
ІЇ00712| Інший спосіб доставки нуклеїнових кислот у рослину включає внесення в середовище для росту рослин будь-яких з рекомбінантних спороутворювальних бактерій, описаних вище, або будь-яких зі сполук, що містять рекомбінантну спороутворювальну бактерію, описану вище. Альтернативно будь-які з рекомбінантних спороутворювальних бактерій, описаних вище, або будь-які зі сполук, що містять рекомбінантні спороутворювальні бактерії, описані вище, можна наносити на рослину, насіння рослини або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. У таких способах рекомбінантна спороутворювальна бактерія експресує злитий білок, який містить білок, який зв'язує нуклеїнову кислоту. Білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, зв'язаний з молекулою нуклеїнової кислоти. Білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, може бути фізично зв'язаний з оболонкою спори рекомбінантної спороутворювальної бактерії.
ІЇ00713| Рекомбінантна спороутворювальна бактерія може включати ендофітний штам бактерій. Наприклад, ендофітний штам бактерій може включати Васійи5 тедаїегічшт ЕЕЗ385,
Васійи5 5р. ЕЕЗ87, Васійив5 сігсшапе ЕЕЗ88, Васійив5 зибійв5 ЕЕ405, І узіпірасіїи5 Тибіоптів ЕЕ442,
І узіпірасійи5 5рпегіси5 ЕЕ443 або Васійи5 ритійй5 ЕЕ-800143.
І00714| У будь-якому з описаних вище способів доставки нуклеїнових кислот у рослину молекула нуклеїнової кислоти може включати модулюючу молекулу РНК; молекулу РНК-ї; мікроРНК; аптамер; або молекулу ДНК, яка кодує модулюючу молекулу РНК, молекулу РНК-Ї, 60 мікроРНК або аптамер.
00715) Молекули нуклеїнових кислот, що підлягають доставці в рослину, можна одержувати будь-якими способами, відомими в даній галузі (наприклад, хімічний синтез, рекомбінантна продукція мікроорганізмом і т. д.). З білюом або пептидом, що зв'язує нуклеїнову кислоту, що є частиною злитих білків, описаних у даному описі, можуть бути зв'язані молекули нуклеїнових кислот у препараті для доставки таких нуклеїнових кислот у рослину або рослини. Білки і пептиди, які зв'язують нуклеїнову кислоту, іммобілізують і стабілізують нуклеїнові кислоти і дозволяють їхню доставку в рослину інтактними. Молекули нуклеїнових кислот, що підлягають доставці в рослину, можуть бути в активній формі або в неактивній формі, яка може бути процесована в активну форму рослиною. 00716) Для здійснення зв'язування молекул нуклеїнових кислот з білюом або пептидом, який зв'язує нуклеїнову кислоту, молекули нуклеїнових кислот можна інкубувати з будь-якими з рекомбінантних представників Васійшє5 сегеи5 або рекомбінантних спороутворювальних бактерій, описаних у даному описі, які експресують злитий білок, який містить білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту.
І00717| Додаткові способи доставки нуклеїнових кислот у рослину, які залучають застосування фрагментів екзоспорію, які походять з рекомбінантного представника сімейства
Васійи5 сегеи5, описані нижче.
Е. Способи уповільнення проростання спор рекомбінантного представника сімейства
Васійи5 сегеийив5
ІЇ00718| Крім того, даний винахід стосується способу уповільнення проростання спор представника сімейства Васіїйй5 сегеи5. Спосіб включає модифікацію представника сімейства
Васійи5 осегеи5 для експресії інозинуридингідролази або аланінрацемази, де експресія інозинуридингідролази або аланінрацемази збільшена в порівнянні з експресією інозинуридингідролази або аланінрацемази в представнику сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах.
Сб. Інактивація представника сімейства ВасіШи5 осеген5є або рекомбінантної спороутворювальної бактерії перед застосуванням 00719) У будь-якому з описаних вище способів, у яких використовується рекомбінантний представник сімейства Васійй5 сегеи5 або рекомбінантна спороутворювальна бактерія, спосіб,
Зо крім того, може включати інактивацію рекомбінантного представника сімейства ВасіШи5 сегеий5 або рекомбінантною спороутворювальною бактерією перед внесенням у середовище для росту рослин або нанесенням на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини.
І00720| Наприклад, інактивація може включати вплив на рекомбінантний представник сімейства ВасіШи5 сегеи5 або рекомбінантної спороутворювальної бактерії термообробки; опромінення гамма-випромінюванням; опромінення рентгенівським випромінюванням; опромінення УФ-А випромінюванням; опромінення ШМ-В випромінюванням; обробки глутаральдегідом, формальдегідом, пероксидом водню, оцтовою кислотою, відбілювачем, хлороформом або фенолом, або їхньої комбінації.
І00721| Альтернативно або додатково, інактивація може включати модифікацію рекомбінантного представника сімейства ВасйШив сегеи5 або рекомбінантної спороутворювальної бактерії для експресії протеази проростання спори або неспецифічної ендонуклеази, де експресія протеази проростання спори або неспецифічної ендонуклеази збільшена в порівнянні з експресією протеази проростання спори або неспецифічної ендонуклеази в представнику сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах, і де рекомбінантна спороутворювальна бактерія включає рекомбінантну бактерію роду Васійи5.
Н. Способи одержання і застосування фрагментів екзоспорію (007221 Крім того, даний винахід стосується способів одержання і застосування фрагментів екзоспорію. Ці способи стосуються рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегецв, описаних у розділі ІМ даного опису вище, тобто рекомбінантних представників сімейства Васі сегеи5, що містять мутацію або іншу генетичну зміну, що дозволяє збір вільного екзоспорію.
І00723| Таким чином, даний винахід стосується способу видалення екзоспорію зі спор рекомбінантного представника сімейства Васіїй5 сегеи5. Спосіб включає вплив на суспензію, що містить будь-який з рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеи5, описаних у розділі ІМ даного опису вище, центрифугування або фільтрації з одержанням фрагментів екзоспорію, що відділені від спор. Фрагменти екзоспорію містять злитий білок.
І00724| Спосіб видалення екзоспорію зі спор рекомбінантного представника сімейства
Васі сегеи5 може включати вплив на суспензію, що містить спори, центрифугування і збір супернатанта, де супернатант містить фрагменти екзоспорію і по суті вільний від спор. бо 00725) Альтернативно спосіб видалення екзоспорію зі спор рекомбінантного представника сімейства Васіїйй5 сегеи5 може включати проведення фільтрації суспензії, що містить спори, і збір фільтрату, де фільтрат містить фрагменти екзоспорію і по суті вільний від спор. (00726) Перед центрифугуванням або фільтрацією суспензію спор можна струшувати або механічно руйнувати.
І00727| Фрагменти екзоспорію також можна відділяти від спор за допомогою градієнтного центрифугування, афінного очищення, або дозволяючи спорам випасти в осад із суспензії. (007281 Крім того, даний винахід стосується способів застосування фрагментів екзоспорію.
І00729| Передбачається спосіб стимуляції росту рослин. Спосіб включає внесення фрагментів екзоспорію або складу, що містить фрагменти екзоспорію і прийнятний з погляду сільського господарства носій, у середовище для росту рослин. Альтернативно фрагменти екзоспорію або склад можна наносити на рослину, насіння рослини або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. Фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5, описаних у розділі ІМ даного опису вище, і містять злитий білок. Злитий білок містить стимулюючий ріст рослин білок або пептид. 00730) Також передбачається спосіб захисту рослини від патогенів або підвищення стійкості рослини до стресових впливів. Спосіб включає внесення фрагментів екзоспорію або складу, що містить фрагменти екзоспорію і прийнятного з погляду сільського господарства носія в середовище для росту рослин. Альтернативно фрагменти екзоспорію або склад можна наносити на рослину, насіння рослини або на область, яка оточує рослину або насіння рослини.
Фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства Васіїйи5 сегецв, описаного вище в розділі ІМ, і містять злитий білок. Злитий білок містить білок або пептид, який захищає рослину від патогена, або білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів. 00731) Коли спосіб являє собою спосіб захисту рослини від патогена, злитий білок містить білок або пептид, який захищає рослину від патогена. 00732) У способах захисту рослини від патогена рослини, вирощені в середовищі для росту рослин, що містить фрагменти екзоспорію, переважно є менш чутливими до інфекції патогеном у порівнянні з рослинами, вирощеними в тих же умовах в ідентичному середовищі для росту рослин, що не містить фрагменти екзоспорію.
Зо 007331) Коли спосіб являє собою спосіб підвищення стійкості рослини до стресових впливів, злитий білок містить білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів. 00734) У способах підвищення стійкості рослини до стресових впливів, рослини, вирощені в середовищі для росту рослин, що містить фрагменти екзоспорію, переважно є менш чутливими до стресових впливів у порівнянні з рослинами, вирощеними в тих же умовах в ідентичному середовищі для росту рослин, що не містить фрагменти екзоспорію. 00735) Також передбачається спосіб іммобілізації фрагментів екзоспорію на рослині. Спосіб включає внесення фрагментів екзоспорію або складу, що містить фрагменти екзоспорію і прийнятний з погляду сільського господарства носій, у середовище для росту рослин.
Альтернативно фрагменти екзоспорію або склад можна наносити на рослину, насіння рослини або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. Фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства Васійиє5 сегеи5, описаних у розділі ЇМ даного опису вище, і містять злитий білок. Злитий білок містить білок або пептид, що зв'язується з рослиною. 00736) Білок або пептид, що зв'язується з рослиною, переважно селективно націлює й утримує фрагменти екзоспорію на рослині. Наприклад, білок або пептид, що зв'язується з рослинами, може селективно націлювати й утримувати фрагменти екзоспорію на коренях рослин, субструктурах коренів, на надземній частині рослини або в субструктурі надземної частини рослини.
І00737| Також передбачається спосіб стимуляції проростання насіння рослини. Спосіб включає внесення фрагментів екзоспорію або складу, що містить фрагменти екзоспорію і прийнятний з погляду сільського господарства носій, у середовище для росту рослин.
Альтернативно фрагменти екзоспорію або склад можна наносити на рослину, насіння рослини або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. Фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства Васійй5 сегеи5, описаного в розділі ЇМ даного опису вище і містять злитий білок. Злитий білок містить супероксиддисмутазу або фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту.
Ї00738| У способах стимуляції проростання спосіб переважно включає нанесення фрагментів екзоспорію на насіння рослини. 007391 Крім того, способи стимуляції проростання можуть включати внесення субстрату для бо ферменту, що каталізує продукцію оксиду азоту, у середовище для росту рослини, на насіння рослини, рослину або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. Наприклад, у прийнятному випадку спосіб, крім того, включає додавання І! -аргініну в середовище для росту рослин, на насіння рослини, рослину або область, яка оточує рослину або насіння рослини.
Наприклад, І-аргінн можна наносити на надземну частину рослини. Переважно І -аргінін наносять на насіння рослини.
І00740| Присутність І-аргініну підсилює реакцію і приводить до більшої продукції МО синтазою оксиду азоту. Більше того, І -аргінін на насінні рослини, середовищі для росту рослини або області, що оточує рослину, може служити як субстрат для продукції оксиду азоту нативними бактеріальними ферментами. 007411) У способах стимуляції проростання насіння рослини, насіння в середовищі для росту рослин, що містить фрагменти екзоспорію, або насіння, на яке нанесені фрагменти екзоспорію, переважно мають збільшений рівень проростання в порівнянні з тим же насінням, що пророщується в тих же умовах в ідентичному середовищі для росту рослин, що не містить фрагменти екзоспорію, або тим же насінням, що пророщується в тих же умовах, на яких фрагменти екзоспорію не наносили. (00742) У способах стимуляції проростання насіння рослини, насіння в середовищі для росту рослин, що містить фрагменти екзоспорію або насіння, на яке нанесені фрагменти екзоспорію, переважно має більш довгий головний корінь після проростання в порівнянні з тим же насінням, що пророщується в тих же умовах в ідентичному середовищі для росту рослин, що не містить фрагменти екзоспорію, або з тим же насінням, що пророщується в тих же умовах, на яких фрагменти екзоспорію не були нанесені.
І00743| Також передбачається спосіб доставки нуклеїнових кислот у рослину. Спосіб включає внесення фрагментів екзоспорію або складу, що містить фрагменти екзоспорію, у середовище для росту рослин. Альтернативно фрагменти екзоспорію або склад можна наносити на рослину, насіння рослини або на область, яка оточує рослину або насіння рослини.
Фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегецв, описаного в розділі ІМ даного опису, і містять злитий білок. Злитий білок містить білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту. Білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, зв'язаний з молекулою нуклеїнової кислоти.
Зо І00744| У способі доставки нуклеїнових кислот у рослину молекула нуклеїнової кислоти може містити модулюючу молекулу РНК; молекулу РНК-ї; мікроРНК; аптамер або молекулу
ДНК, яка кодує модулюючу молекулу РНК, молекулу РНК-і, мікроРНК або аптамер. 00745) Молекули нуклеїнових кислот, що підлягають доставці в рослину, можна одержувати будь-якими способами, відомими в даній галузі (наприклад, хімічний синтез, рекомбінантна продукція мікроорганізмом і т.д.). Потім молекули нуклеїнових кислот можуть зв'язуватися з білком або пептидом, який зв'язує нуклеїнову кислоту, що є частиною злитих білків, описаних у даному описі, у препараті для доставки таких нуклеїнових кислот у рослину або рослини. Білки і пептиди, які зв'язують нуклеїнову кислоту, іммобілізують і стабілізують нуклеїнові кислоти і дозволяють їхню доставку в рослину інтактними. Молекула нуклеїнової кислоти, що підлягає доставці в рослину, може бути в активній формі або в неактивній формі, що може процесуватися рослиною в активну форму.
І00746| Для проведення зв'язування молекул нуклеїнової кислоти з білюом або пептидом, який зв'язує нуклеїнову кислоту, молекули нуклеїнових кислот можна інкубувати із фрагментами екзоспорію, що містять злитий білок, який містить білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту.
І. Середовище для росту рослин
І00747| У будь-якому зі способів, описаних у даному описі, які залучають застосування середовища для росту рослин, середовище для росту рослин може містити грунт, воду, водний розчин, пісок, гравій, полісахарид, мульчу, компост, торф'яний мох, солому, колоди, глину, соєве борошно, дріжджовий екстракт або їхню комбінацію.
І00748| Більше того, середовище для росту рослин можна доповнювати субстратом або кофактором ферменту. Наприклад, субстрат або кофактор може включати триптофан, аденозинмонофосфат, аденозиндифосфат, аденозинтрифосфат (наприклад, аденозин-3- трифосфат), індол, триметафосфат, феродоксин, ацетоїн, діацетил, піруват, ацетолактат, пектин, целюлозу, метилцелюлозу, крохмаль, хітин, пектин, борошно, похідне целюлози, фосфат, ацетоїн, хітозан, неактивне похідне індол-3З-оцтової кислоти, неактивне похідне гіберелової кислоти, ксилан, арабіноксилан, жир, віск, масло, фітинову кислоту, лігнін, гумінову кислоту, холін, похідне холіну, пролін, поліпролін, пролін-багатий білок, пролін-багате борошно, фенілаланін, хоризмат, І -аргінін, МАОН, МАОРН, АТР, СТР, цитохром С, цитохром р450 або 60 їхню комбінацію.
У. Способи застосування 007491) Способи, описані в даному описі, можуть включати покриття насіння рекомбінантним представником сімейства Васійй5 сегеи5, рекомбінантною спороутворювальною бактерією або фрагментами екзоспорію, або складом, що містить рекомбінантний представник сімейства
ВасшШив5 сегец5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або фрагменти екзоспорію, перед посівом.
Ї00750| Способи, описані в даному описі, можуть включати нанесення рекомбінантного представника сімейства Васіи5 сегеи5, рекомбінантної спороутворювальної бактерії або фрагментів екзоспорію, або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегец5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або фрагменти екзоспорію, на надземну частину рослини.
ІЇ00751| У способах, описаних у даному описі, внесення рекомбінантного представника сімейства Васійн5 сегеи5, рекомбінантної спороутворювальної бактерії або фрагментів екзоспорію, у середовище для росту рослин, може включати внесення рідкого або твердого складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васіїйй5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або фрагменти екзоспорію, у середовище. Середовище для росту рослин може включати грунт (наприклад, горшкова суміш), компост, торф'яний мох, пісок, початкову суміш для насіння або їхню комбінацію. Спосіб може включати внесення складу в середовище для росту рослин до, одночасно з або після посіву насіння, проростків, пагонів, цибулин або рослин у середовище для росту рослин.
К. Агрохімікати 00752) У способах, описаних у даному описі, спосіб, крім того, може включати внесення щонайменше одного агрохімікату в середовище для росту рослин або нанесення щонайменше одного агрохімікату на рослини або насіння рослин.
І00753| Агрохімікат може включати добриво (наприклад, рідке добриво), матеріал мікродобрива (наприклад, борну кислоту, борат, борну фриту, сульфат міді, мідну фриту, хелат міді, натрію тетраборат декагідрат, сульфат заліза, оксид заліза, сульфат заліза амонію, залізну фриту, хелат заліза, сульфат марганцю, оксид марганцю, хелат марганцю, хлорид марганцю, марганцеву фриту, молібдат натрію, молібденову кислоту, сульфат цинку, оксид цинку,
Зо карбонат цинку, цинкову фриту, фосфат цинку, хелат цинку або їхню комбінацію), інсектицид (наприклад, фосфороорганічну сполуку, карбамат, піретроїд, акарицид, алкілфталат, борну кислоту, борат, фторид, сірку, галогенароматичну заміщену сечовину, складний ефір вуглеводню, інсектицид на біологічній основі, або їхню комбінацію), гербіцид (наприклад, хлорфеноксисполуку, нітрофенольну сполуку, нітрокрезольну сполуку, дипіридильну сполуку, ацетамід, аліфатичну кислоту, анілід, бензамід, бензойну кислоту, похідне бензойної кислоти, ганусову кислоту, похідне ганусової кислоти, бензонітрил, бензотіадіазинону діоксид, тіокарбамат, карбамат, карбанілат, хлорпіридиніл, похідне циклогексенону, похідне динітроамінобензолу, сполуку фтординітротолуїдину, ізоксазолідинон, нікотинову кислоту, ізопропіламін, похідне ізопропіламіну, оксадіазолінону, фосфат, фталат, сполуку піколінової кислоти, триазин, триазол, урацил, похідне сечовини, ендоталл, хлорат натрію або їхню комбінацію), фунгіцид (наприклад, заміщений бензол, тіокарбамат, етилен біс-дитіокарбамат, тіофталідамід, сполуку міді, ртутьорганічну сполуку, оловоорганічну сполуку, сполуку кадмію, анілазин, беноміл, циклогексамід, додин, етридіазол, іпродіон, метлаксил, тіамимефон, трифорин або їхню комбінацію), моллюскоцид, альгіцид, модифікатор росту рослин, бактеріальний інокулят (наприклад, бактеріальний інокулят роду КПі2оБбішт, бактеріальний інокулят роду Вгайдугпігобішт, бактеріальний інокулят роду Мезогпігорійт, бактеріальний інокулят роду А2огПпі2гобішт, бактеріальний інокулят роду АПопі2орішт, бактеріальний інокулят роду Зіпогпі2обрішт, бактеріальний інокулят роду Кішйумега, бактеріальний інокулят роду
А?оіорасієг, бактеріальний інокулят роду Рвзтеидотопах, бактеріальний інокулят роду
А?озріпійшт, бактеріальний інокулят роду Васійй5, бактеріальний інокулят роду Зігеріотусев, бактеріальний інокулят роду Раеєепірасійи5, бактеріальний інокулят роду Рагасоссив, бактеріальний інокулят роду Епіегорасієг, бактеріальний інокулят роду АїЇсаїдепев, бактеріальний інокулят роду Мусобасіегішт, бактеріальний інокулят роду Тгісподегта, бактеріальний інокулят роду Сііосіадійт, бактеріальний інокулят роду Сіоти5, бактеріальний інокулят роду КіебзівеНа або їхню комбінацію), грибний інокулят (наприклад, грибний інокулят сімейства Сіотегасеає, грибний інокулят сімейства Сіагоідодіотегасеаеє, грибний інокулят сімейства Сідазрогасеає, грибний інокулят сімейства Асаціозрогасеає, грибний інокулят сімейства Зассцозрогасеає, грибний інокулят сімейства Епігорпозрогасеає, грибний інокулят сімейства Расіазрогасеає, грибний інокулят сімейства Оімегхізрогасеає, грибний інокулят бо сімейства Рагадіотегасеае, грибний інокулят сімейства Агопаеозрогасеае, грибний інокулят сімейства Сеозірпопасеає, грибний інокулят сімейства Атрізрогасеає, грибний інокулят сімейства 5сщіеїЙозрогасеає, грибний інокулят сімейства ОепіїзсиКагасеає, грибний інокулят сімейства Касосеїгасеає, грибний інокулят відділу Вабвідіотусоїа, грибний інокулят відділу
Азсоптусоїа, грибний інокулят відділу 7удотусоїа або їхню комбінацію), або їхню комбінацію.
І00754| Добриво може включати сульфат амонію, нітрат амонію, сульфат нітрат амонію, хлорид амонію, бісульфат амонію, полісульфід амонію, тіосульфат амонію, водяний аміак, безводний аміак, поліфосфат амонію, сульфат алюмінію, нітрат кальцію, нітрат кальцію амонію, сульфат кальцію, кальцинований магнезит, кальцинований вапняк, оксид кальцію, нітрат кальцію, доломітовий вапняк, гашене вапно, карбонат кальцію, фосфат диамонію, фосфат моноамонію, нітрат магнію, сульфат магнію, нітрат калію, хлорид калію, сульфат калію магнію, сульфат калію, нітрати натрію, магнезіальний вапняк, магнезію, сечовину, сечовини- формальдегіди, сечовини амонію нітрат, покриту сіркою сечовину, покриту полімером сечовину, ізобутиліден дисечовину, Кг2504-2мМ9505, каїніт, сильвініт, кізерит, англійську сіль, елементарну сірку, вапняну глину, подрібнені устричні черепашки, риб'яче борошно, макухи, риб'яче добриво, кров'яне борошно, фосфатну руду, суперфосфати, шлак, кісткове борошно, деревний попіл, гній, гуано кажанів, торф'яний мох, компост, глауконітовий пісок, борошно з насіння бавовнику, борошно з пір'я, крабове кормове борошно, риб'ячу емульсію, гумінову кислоту або їхню комбінацію. 00755) Агрохімікат може містити будь-який з фунгіцидів, бактеріальних інокулятів або гербіцидів, описаних вище в розділі ХМІЇ.
М. Рослини і насіння
І00756| У будь-якому з описаних вище способів, що стосуються рослин, рослина може являти собою дводольну рослину, однодольну рослину або голонасінну рослину.
І00757| Наприклад, коли рослина являє собою дводольну рослину, дводольна рослина може бути вибрана з групи, яка складається з бобу, гороху, томата, перцю, гарбуза великоплідного, люцерни, мигдалю, анісу, яблука, абрикоса, аракачі, артишоку, авокадо, земляних бобів, буряка, бергамоту, чорного перцю, чорної акації, ожини, лохини, гіркого апельсина, бок-чоя, бразильського горіха, хлібного дерева, броколі, кормових бобів, брюсельскої капусти, гречки, капусти, рижію, китайської капусти, какао, канталупи, кмину,
Зо артишоку іспанського, ріжкового дерева, моркви, горіха кешью, маніоки, рицини звичайної, цвітноїкапусти, селери запашної, селери салатної, вишні, каштана, нуту, цикорію, чилійського перцю, хризантеми, коричного дерева, цитрона, климентина, гвоздики, конюшини, кави, горіха коли, кользи, кукурудзи, бавовнику, насіння бавовнику, вигни китайської, крамбе, журавлини, хрінниці, огірка, смородини, кремової яблуні, касії пучкуватої, чини бульбочкової, баклажана, ендивію, фенхеля, гуньби, інжиру, ліщини, льону, герані, агрусу, горлянки, винограду, грейпфрута, гуави, конопель, конопельного насіння, хни, хмелю, кінського бобу, хрону, індигоноски, жасмину, артишоку ієрусалимського, джуту, капусти кормової, капока, кенафу, кольрабі, кумквата, лаванди, лимона, сочевиці, леспедеци, салату-латуку, лайма, лакриці, лічі, локви, люпину, горіха макадамія, мускатного горіха, мандарина, буряка кормового, манго, мушмули, дині, м'яти, шовковиці, гірчиці, нектарина, олійного нуга, торреї, окри, оливи, опію, апельсина, папайї, пастернаку, гороху, персика, арахісу, груші, горіха пекан, хурми, гороху голубиного, фісташки, подорожника, сливи, граната, памело, маку, картоплі, солодкої картоплі, сливи домашньої, гарбуза, квебрахо, айви, дерев роду Сіпспопа, квіноа, редиска, рами, ріпаку, малини, китайської кропиви, ревеню, троянди, каучукового дерева, ріпи, сафлору, еспарцету, козельцю, саподили, мандарина уншіу, козельцю іспанського, кунжуту, масляного дерева, сої, шпинату, гарбуза великоплідного, полуниці, цукрового буряка, цукрової тростини, соняшника, брукви, солодкого перцю, танжерина, чаю, метлюга абісинського, тютюну, томата, трилисника, тунгового дерева, турнепсу, урени, віки, волоського горіха, кавуна, парагвайського чайного дерева, суріпиці, грициків, крес-салата, хрінниці, жерухи, талабану, бадьяна, лавра, лавра шляхетного, касії, джамана, кропу, тамаринду, мати перцевої, орегано, розмарину, шавлії, саусепа, щитолистника, калофілла, момордики харантської, лакового дерева, таїтянського каштана, васильків, чорниці, гібіскуса, маракуйї, кайміта, сассафраса, кактуса, зверобою, плакуна, глоду, коріандру, безсмертника піщаного, ківі, чебрецю, цукіни, уллюки, хіками, гідрофіллуму, стрихноса колючого, жовтого момбіна, карамболю, амаранту, васабі, японського перцю, жовтої сливи, мадуки, китайського червоного дерева, новозеландського шпинату, ломиносу, темеди, пижми, піщанки, момбіна, малайського яблука, бразильської хрінниці, осоту, діоскореї бататової, кінської петрушки, сухоребрика лікарського, смілки, агата, сіамця олександрійського, будяка, стягникрову, антильського агрусу, кураю, солероса, щавлю, птериса мечоподібного, капусти листової, примули, первоцвіту, портулаку, буркуна, терпентинного 60 дерева, пізонії білої, дикого бетелю, африканського перцю, ериодиктіона клейкого, естрагону,
петрушки, кервелю, суріпиці весняної, бедринця ломикаменевого, ліпії солодкої, білокопитника, перилли, перцевої трави, перилли, гіркого бобу, квасениці бульбової, кампонга, китайської селери, лимонного василька, тайського василька, водяної мімози, кокориша, капустяного дерева, моринги, мірабіліса широкого, оноклеї, лімнофіли ароматної, лимнохариса жовтого, любистка, перцевої трави, маки, горлянки звичайної, бобу гіацинтового, батата водяного, пазовика, хауттюйнії, шпинату Окінави, глінусу лядвенецевидного, галинсоги дрібноквіткової, миколайчиків максиканських, рукколи, артишоку іспанського, циклантери їстівної, мицуби, чипілину, критмума, мампата, еболо, кокцинії індійської, осоту польового, червоної водорості, кнідосколуса аконитолистого, хуазонтла, ефіопської гірчиці, лободи гігантської, лободи цільнолистої, мексиканського чаю, лободи білої, центелли, целозії сріблистої, каперсового куща, капусти польової, пекінської капусти, мізуни, китайської ріпи, кай-лана, листової гірчиці, малабарського шпинату, мангольда, алтея, ампельної акації, китайського джуту, паприки, насіння аннатто, м'яти перцевої, савойської капусти, майорану, кмину, ромашки, меліси лимонної, перцю гвоздикового, чорниці, черимойї, морошки, терносливи, пітайї, дуріана, бузини, фейхоа, хлібного дерева, джамбула, ююби, фізаліса, пурпурного мангустана, рамбутана, червоної смородини, чорної смородини, ягід салал, мандарина, агли, адзукі, чорного бобу, спаржевої квасолі, квасолі кранберрі, квасолі звичайної, зеленої квасолі, квасолі багатобарвної, лімської квасолі, квасолі золотавої, турецьких бобів, квасолі пінто, квасолі вогненно-червоної, стручкового гороху, гороху мангетот, зеленої цвітної капусти, спаржевої капусти, кропиви, болгарського перцю, червоного ендивію, дайкона, редьки, веху цукрового, тат-соя, броколіни, чорної редьки, кореня лопуха, садового бобу, італійської броколі, лобії, люпину, стеркулії, бобів оксамитних, квадратного гороху, пахіризуса, малги, вернонії, акації язичкової, акації Мюррея, акації колючої, чагарнику витчетті, акації коріацея, чіа, букового горіха, свічкового дерева, колоквінта, мелікокки, горіха Майя, монгонго, горіха огбоно, райського горіха і чемпедака.
І00758| Коли рослина являє собою однодольну рослину, однодольна рослина може бути вибране з групи, яка складається з кукурудзи, пшениці, жита, рису, ячменя, проса, банана, цибулі, часнику, спаржі, пажитниці, проса, фоніо, райшана, трави Палмера, куркуми, шафрану, калгану, шніт-цибулі, кардамону, фінікової пальми, ананаса, цибулі-шалота, цибулі-порея, цибулі-перо, водяного горіха, черемші, бусенника звичайного, бамбука, дагуссі, вольфії
Зо безкореневої, маланги, таїтянського шпинату, абаки, ареки, африканського проса, горіха катеху, проса волотевого, сорго волотевого, цитронелли, кокоса, колоказії їстівної, маїсу, колоказії, дурри, твердої пшениці, едо, фуркреа, форміо, імбиру, грястиця збірна, ковили, що тягнеться, суданської трави, сорго гвінейського, банана текстильного, генекена, гібридної кукурудзи, іовара, сорго лимонного, агави мексиканської, проса очеретяного, проса пальчастого, проса італійського, проса японського, проса звичайного, новозеландського льону, жита, олійної пальми, пальмірової пальми, сагової пальми, метлюга білого, сизалю, сорго, спельти, солодкої кукурудзи, солодкого сорго, таро, метлюга абіссинської, тимофіївки лугової, тритикале, ванілі, пшениці і ямса. 00759) Коли рослина являє собою голонасінну рослину, голонасінна рослина може бути із сімейства, вибраного з групи, яка складається з Агайсагіасеає, Воу"епіасеае, Серпаоїахасеає,
Сиргеззасеає, Сусадасеає, Ерпедгасеає, Сіпкдоасеає, Спеїасєає, Ріпасеає, Родосаграсеєавє,
Тахасеає, Таходіасеаєе, МеМм/йї5спіасеає і 7атіасеає. 00760) Рослини і насіння рослин, описані в даному описі, можуть включати трансгенні рослини або насіння рослин, такі як трансгенні злаки (пшениця, рис), маїс, соя, картопля, бавовник, тютюн, олійний ріпак і плодові рослини (плоди яблунь, груш, цитрусові плоди і виноград) Переважні трансгенні рослини включають кукурудзу, сою, картоплю, бавовну, тютюн і олійний ріпак.
І00761| Прийнятні трансгенні рослини і насіння можуть бути характеризуватися утворенням у рослині токсинів, особливо з генетичного матеріалу Васійи5 (игіпдіеєпзі5 (наприклад, унаслідок гена СІуЇА (а), СтгуА (Б), СтуІА (с), СтуПпПА, СтуША, СтуПІВ2, Студс, Стуг2АБ, СтуЗзВЬ, СтуІЕ або їхньої комбінації). Утворення токсинів у рослинах підвищує стійкість рослин до комах, паукоподібних, нематод, і личинок і равликів (які далі називаються "рослинами ВІ"). Рослини Ві, наприклад, сорту кукурудзи, сорту бавовнику, сорту сої і сорту картоплі, є комерційно доступними під торговою назвою МЕ ОО ЗАКОФ (наприклад, кукурудза, бавовник, соя), поскоці
Ф (наприклад, маїс), Загі іпкФ (наприклад, маїс), ВоїЇдагаФ (бавовник), МисоїпФ (бавовник) і
Мем еакю (картопля). Толерантні до гербіцидів рослини включають рослини під торговими назвами Коипдир Кеадуф (толерантність до гліфосату, наприклад, кукурудза, бавовник, соя),
СІвате!дте (наприклад, кукурудза), Гірбегу СіпкФ (толерантність до глюфосинату, наприклад, олійний ріпак), ІМІФ (з толерантністю до імідазолінонів) і 5ТЗФ (толерантність до бо сульфонілсечовини, наприклад, кукурудза).
(007621) Насіння рослин, як описано в даному описі, можуть бути генетично модифікованим (наприклад, будь-яке насіння, яке приводить до генетично модифікованої рослини або частини рослини, що демонструють толерантність до гербіциду, толерантність до факторів зовнішнього середовища, таких як нестача води, посуха, віруси і продукція азоту, або резистентність до токсинів бактерій, грибів або комах). Прийнятне генетично модифіковане насіння включає насіння капустяних культур, овочів, фруктів, дерев, волокнистих культур, олійних культур, бульбоплідних культур, кави, квітів, бобових рослин, злаків, а також інших однодольних і дводольних видів рослин. Переважно, генетично модифіковане насіння включають арахіс, тютюн, трави, пшеницю, ячмінь, жито, сорго, рис, ріпак, цукровий буряк, соняшник, томат, перець, боби, салат-латук, картоплю і моркву. Найбільш переважно, генетично модифіковане насіння включають насіння бавовнику, сої і кукурудзи (солодкої, польової, посівної або яка лопається).
ІЇ00763| Особливо прийнятні трансгенні рослини, який можна обробляти відповідно до винаходу, являють собою рослини, які включають події трансформації або комбінацію подій трансформації, що приведені, наприклад, у базах даних різних національних або регіональних контролюючих органів (див., наприклад, пер://дптоїпо.|го.й/дтр Бгомжузе.азрх і пЕруЛлимли.адбіоз.сот/абазе.рпр).
ХХ. Способи доставки корисних бактерій і білків або пептидів тваринам (00764) Крім того, даний винахід стосується способів доставки корисних бактерій і/або білків або пептидів тваринам.
І00765| Уведення бактеріальних штамів, які є як пробіотичними, так і ендофітними, у рослину, дозволяє входження бактерій у рослину, де вони діляться і збільшуються в кількості.
Ендофітні і пробіотичні штами можна доставляти в рослини з використанням різних способів, наприклад, ендофітні і пробіотичні штами можна доставляти за допомогою обробки насіння, обробки середовища для росту рослин (наприклад, грунту), поливу, нанесення безпосередньо на рослину (наприклад, позакореневе нанесення на надземні частини рослини). Після потрапляння в рослину бактерії збільшуються в кількості і колонізують внутрішні тканини рослини. Потім рослиною можна годувати тварину, що дозволяє доставку пробіотичних бактерій тварині. Знижується вартість у порівнянні з традиційними способами доставки пробіотичних
Зо бактерій тваринам, оскільки ендофітний характер бактерій дозволяє їм ділитися і збільшуватися в кількості в рослині. За допомогою первинної доставки невеликої кількості пробіотичного і ендофітного штаму бактерій у рослину і дозволи бактеріям збільшитися в кількості в рослині, доза зростає. Крім того, пробіотичний і ендофітний штам може поширюватися в цільовій культурі перед збором і вживанням.
ІЇ00766| Також для цих цілей можна використовувати бактеріальні штами, що здатні колонізувати філоплану рослини і також є пробіотичними. Штами, що здатні клонізувати філоплану рослини, спочатку можна доставляти в рослини невеликими дозами, а потім вони діляться і колонізують зовнішні поверхні рослин.
І00767| Прийнятні штами бактерій, які є як ендофітними або які колонізують філоплану, так і пробіотичними, включають штами, що можуть як реплікуватися в польових умовах у або на рослині, так і забезпечують користь для тварин при вживанні. Користь пробіотичних бактерій у тварин включає, але не обмежуються цим, регуляцію мікробіома травного тракту тварини, секрецію ферментів, що сприяють перетравлюванню рослинного матеріалу, і стимуляцію імунної системи тварин. Приклади посилюючих травлення ферментів, що можуть забезпечити користь, включають, але не обмежуються ними, целюлази, ендоглюканази, екзоглюканази, р- глюкозидази, амілази, протеази, пектинази, ксиланази, ксилозидази, ліпази, фосфоліпази і лігнази. 00768) Роди ВасшшШиз і Гузіпірасіййи5 є унікальними тим, що вони містять велику кількість видів, які є як ендофітними і, так чином, колонізують рослини, так діють як пробіотики в хребетних. Таким чином, види Васіїйи5 і І узіпібасШи5 є у високому ступені прийнятними для доставки пробіотиків тваринам шляхом пасирування і вирощування в рослинах. Поширені види
Васійи5, що можуть бути як ендофітними, так і пробіотичними, включають Васійн5 5и,ирїв5,
Васи5 їптив, Васійи5 атупоїїдиеїтасіеп5, Васійи5 сегецйв, Васіїив5 (оуосегіп, Васіїйи5 тедаїенпит,
ВасшШи5 ритіиз і ВасШив Іспепіїгтів. Також можна використовувати види ГузіпірасншШив5, що є як ендофітними, так і пробіотичними.
І00769| Також передбачається спосіб доставки корисних бактерій тварині. Спосіб включає годівлю тварини рослиною, модифікованою так, щоб вона містила рівень ендофітного і пробіотичного штаму бактерій, що перевищує рівень ендофітного і пробіотичного штаму бактерій у тій же рослині, яка не була модифікованою, вирощеній в тих же умовах. бо І00770| Рослина, якою годують тварину, може включати рослину, вирощену в середовищі для росту рослин, що містить ендофітний і пробіотичний штам бактерій або склад, який містить ендофітний і пробіотичний штам бактерій, рослину, на яку нанесений ендофітний і пробіотичний штам бактерій, рослину, яка виросла з насіння рослини, на яку був нанесений ендофітний і пробіотичний штам бактерій, рослину, що виросла в області, на яку був нанесений ендофітний і пробіотичний штам бактерій, або насіння, яке виросло в області, на яку був нанесений ендофітний і пробіотичний штам бактерій.
І00771| Ендофітний і пробіотичний штам бактерій може включати види Васійн5 або
Гузіпірасійй5. Наприклад, вид Васійй5 може включати Васійи5 зибіййб5, Васійй5 йптив5, Васійн5 атупюо!їїдиеїасієп5, Васіїи5 сегеи5, Васійи5 їоуосегіп, Васіїйй5 тедаїегішт, Васії5 ритіїшв5, Васі
Іспепітогіті5, або їхню комбінацію.
І00772| Ендофітний і пробіотичний штам бактерій може включати представник сімейства
Васіїйн5 сегеиз ЕЕЗ349, представник сімейства Васіи5 сегеи5 ЕЕ439, ВасШив ІПигіпдіепвіз ЕЕ4А17,
Васійи5 сегеиз5 ЕЕ444, Васі тедаїегпит ЕЕЗ85, Васійй5 5р. ЕЕЗ87, Васіи5 сігсшапе ЕЕЗ88,
Васіив зибійв5 ЕЕ405, І увіпібасШи5 Ти5йоптів ЕЕ442, І увіпібасіи5 5рпегісиз ЕЕ443, ВасШи5 ритйи5 ЕЕ-В00143 або їхню комбінацію. 007731 Крім того, білки або пептиди (наприклад, ферменти) можна доставляти тваринам шляхом годування тварин рекомбінантними представниками сімейства Васійн5 сегеив5, які експресують злитий білок, який містить білок або пептид, фрагментами екзоспорію, що містять такі злиті білки, або рекомбінантними спороутворювальними бактеріями, які експресують такі злиті білки. Рекомбінантний представник сімейства Васіййє5 сегеи5 або рекомбінантні спороутворювальні бактерії можуть являти собою ендофітний штам бактерій або штам бактерій, який здатний колонізувати філоплану рослини, що дозволяє доставку білка або пептиду тварині за допомогою проковтування рослини, яка колонізована бактеріями. Також можна використовувати пробіотичні рекомбінантні штами представників сімейства Васійи5 сегеи5 або штами рекомбінантних спорооутворювальних бактерій, так що тварина, яка проковтує рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 або рекомбінантні спороутворювальні бактерії, одержує користь як від пробіотичних бактерій, так і користь від білка або пептиду.
Також для доставки білків або пептидів тваринам можна використовувати рекомбінантні штами представників сімейства Васіїйи5 сегецз і рекомбінантні штами спороутворювальних бактерій, які
Зо є як ендофітними, так і колонізуючими філоплану.
І00774| Таким чином, також передбачається спосіб доставки білків або пептидів тварині.
Спосіб включає годівлю тварини рекомбінантним представником сімейства Васійи5 сегеи5, що експресує злитий білок, який містить білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васіїйш5 сегеи5. Альтернативно спосіб включає годівлю тварини фрагментами екзоспорію, які походять з рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5, який експресує злитий білок, який містить білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію, або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васіїн5 сегецйв. 00775) Рекомбінантний представник сімейства Васійй5 сеген5 може включати будь-який з рекомбінантних представників сімейства Васійй5 сегеи5, описаних у даному описі, які експресують злитий білок. (00776) Фрагменти екзоспорію можуть включати фрагменти екзоспорію, які походять з будь- якого з представників сімейства Васійн5 сегеий5, описаних вище в розділі ІМ.
І00777| Рекомбінантний представник сімейства Васіїйн5 сегени5 може включати ендофітний штам бактерій. Ендофітний штам бактерій може включати представник сімейства Васійи5 сегей5
ЕЕЗ349, представник сімейства Васійи5 сеген5 ЕЕ439, Васійи5 (Пигіпдіепзі5 ЕЕ417, Васійи5 сегеи5
ЕЕ444, Васійив5 ІШПигіпдіепбіз ЕЕЗ19, Васййив5 Шигіпдіепзіз ЕЕ-800184, представник сімейства
Васійй5 сегеиз ЕЕ-В00377, Васіїй5 рзейдотусоіїдезє ЕЕ-800366, або Васійй5 тусоіїде5 ЕБЕ-
ВО00363. Наприклад, ендофітний штам бактерій включає представник сімейства Васійй5 сегейв5
ЕЕ439, Васійив5 Іигіпдієпвів ЕЕ417, Васіїйн5 сегеиб5 ЕЕ444, Васійив5 Шигіпдіепзіз ЕЕЗ319, ВасШив
ІШшгіпдіепвіє ЕЕ-800184, представник сімейства Васійн5 сегеиз ЕЕ-В00377, Васіїи5 рзенйдотусоїде5 ЕЕ-800366 або Васіїйи5 тусоїде5 ЕЕ-800363. 00778) Рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сеген5 може включати пробіотичний штам бактерій. Пробіотичний штам бактерій може включати представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ349 (МКК Мо В-50928), представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ439 (МКК В-50979),
Васйив5 ІПигіпдіеєпзі ЕЕ417 (МАНІ В-50979), ВасіШи5 сегеиз ЕЕ444 (МАНІ В-50977), ВасПив5
ІШигіпдіепзіз ВТО1ЗА (МАК. Мо В-50924), або їхню комбінацію. бо І00779| Рекомбінантний представник сімейства Васіїйй5 сегеи5 може знаходитися в рослині,
якою годують тварини.
ІЇ00780| Альтернативно рекомбінантний представник сімейства Васійиє сегеи5 може включати штам бактерій, який здатний колонізувати філоплану рослини. Наприклад, штам бактерій, який здатний колонізувати філоплану рослини, може включати Васійй5 тусоїде5
ВТ155, Васійи5 тусоїде5 ЕЕ118, Васіїййи5 тусоїдез5 ЕЕ141, Васійн5 тусоїде5 ВТ46-3, представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ218, Васійи5 Шигіпдіепзіз ВТО1ТЗА, представник сімейства Васійив5 сегеиз ЕЕ-800377, Васіїи5 реендотусоїдез ЕЕ-800366 або Васіїйи5 тусоїде5 ЕЕ-800363.
І00781| Рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегени5 може бути присутнім на філоплані рослини, якою годують тварину.
І00783| Наприклад, націлювальна послідовність може містити або складатися з амінокислотної послідовності що має щонайменше приблизно 5095 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 6395.
І00784| Націлювальна послідовність може містити або складатися з амінокислотної послідовності, що має щонайменше приблизно 5095 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО
ІО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 72905.
І00785| Націлювальна послідовність може містити або складатися з амінокислотної послідовності, що має щонайменше приблизно 5695 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО
ІО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 6395.
І00786| Націлювальна послідовність може містити або складатися з амінокислотної послідовності, що має щонайменше приблизно 6295 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО
ІО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 72905.
І00787| Націлювальна послідовність може містити або складатися з амінокислотної послідовності, що має щонайменше приблизно 6895 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО
ІО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 8195.
І00788| Націлювальна послідовність може містити або складатися з амінокислотної послідовності, що має щонайменше приблизно 7595 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО
ІО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 72905.
І00789| Націлювальна послідовність може містити або складатися з амінокислотної
Ко) послідовності, що має щонайменше приблизно 7595 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО
ІО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 8195.
І00790| Націлювальна послідовність може містити або складатися з амінокислотної послідовності, що має щонайменше приблизно 8195 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО
ІО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 8195.
ІЇ00791| Націлювальна послідовність може містити або складатися з амінокислотної послідовності, що має щонайменше приблизно 8195 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО
ІО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 9095.
І00792| Націлювальна послідовність, може складатися з: (а) амінокислотної послідовності, яка складається з 16 амінокислот і має щонайменше приблизно 4395 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 5495; (5) амінокислот 1-35 ЗЕО ІО МО: 1; (с) амінокислот 20-35 5ЕО ІЮ
МО: 1; (4) ЗЕО ІЮО МО: 1; (є) БЕО ІЮ МО: 96 або (Ї) БЕО ІЮ МО: 120.
І00793| Білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 44, Аб, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 95, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121 і 122.
І00794| Білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з БЗЕО ІЮ МО: 2, 4,6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 44, Аб, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 76, 78, 80, 82,
БО 84, 86, 88, 90, 92, 94, 95, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121 і 122.
І00795| Білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9895 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 44, Аб, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 95, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121 їі 122.
І00796| Білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з ЗЕО ІЮО МО: 2, 4,6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 44, Аб, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 95, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121 і 122.
І00797| Білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію може містити амінокислотну 60 послідовність, яка має щонайменше 10095 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18,
20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 95, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121 і 122.
І00798| Націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть містити амінокислотну послідовність СХТ на їхньому С-кінці, де Х являє собою будь-яку амінокислоту.
І00799| Націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть містити залишок аланіну в положенні націлювальної послідовності, що відповідає амінокислоті 20 ЗЕО ІЮ МО: 1. (00800) Націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, крім того, можуть містити залишок метіоніну, серину або треоніну в амінокислотному положенні, що безпосередньо передує першій амінокислоті націлювальної послідовності білка екзоспорію або фрагмента білка екзоспорію, або в положенні націлювальної послідовності, що відповідає амінокислоті 20 ЗЕО ІЮ МО: 1. 008011 Крім того, злитий білок може містити амінокислотний лінкер між націлювальною послідовністю, білком екзоспорію або фрагментом білка екзоспорію і білюом або пептидом, що представляє інтерес. Лінкер може являти собою будь-який з лінкерів, описаних вище в розділі
ХІ.
І00802| Злитий білок може експресуватися під контролем промотору споруляції, нативного для націлювальної послідовності білка екзоспорію або фрагмента білка екзоспорію злитого або білка його частини, і/або під контролем промотору споруляції з високою експресією. Промотор може являти собою будь-який з промоторів, описаних вище в розділі ПП. (00803) Також передбачається спосіб доставки білків або пептидів тварині. Спосіб включає годівлю тварини рекомбінантною спороутворювальною бактерією. Рекомбінантна спороутворювальна бактерія може являти собою будь-яку з рекомбінантних спороутворювальних бактерій, описаних вище в розділі ІХ.
І00804| Рекомбінантна спороутворювальна бактерія може знаходитися в рослині, якою годують тварину.
І00805| Рекомбінантна спороутворювальна бактерія може включати ендофітний і пробіотичний штам бактерій. Наприклад, ендофітний і пробіотичний штам бактерій може
Зо включати Васійи5 тедаїегішт ЕЕЗ85 (МКК 8-50980), Васійи5 5р. ЕЕЗ87 (МАНІ В-50981),
Васійи5 сігсшапз ЕЄЗ88 (МАВ В-50982), Васійи5 5иЇиБійв ЕЕ405 (МАВ В-50978), І увіпібрасійи5
Тивітоптів ЕЕ442 (МАВ В-50975) або І узіпірасійи5 5рпаегісиз ЕЕ443 (МКАІ В-50976), Васійи5 ритіїнв ЕЕ-800143 (МАВІ. В-67123), або їхню комбінацію. 00806) У будь-якому зі способів рослину можна обробляти перед годівлею тварини.
І00807| У будь-якому з описаних вище способів, які залучають годівлю рослиною тварину, спосіб, крім того, може включати внесення ендофітного штаму бактерій або складу, що містить ендофітний штам бактерій, у середовище для росту рослин. Альтернативно спосіб може включати нанесення ендофітного штаму бактерій або складу, що містить ендофітний штам бактерій, на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини.
Рослина, якою годують тварину, включає рослину, вирощену в середовищі для росту рослин, що містить ендофітний і пробіотичний штам бактерій або склад, що містить ендофітний і пробіотичний штам бактерій, рослину, на яку нанесений ендофітний і пробіотичний штам бактерій, рослину, вирощену з насіння рослини, на яку був нанесений ендофітний і пробіотичний штам бактерій, рослину, вирощену в області, на яку був нанесений ендофітний і пробіотичний штам бактерій, або насіння, вирощене в області, на яку був нанесений ендофітний і пробіотичний штам бактерій. (00808) У будь-якому з описаних вище способів доставки білків або пептидів тварині білок або пептид, що представляє інтерес, включає фермент. Наприклад, фермент може включати ксиланазу, ксилозидазу, фітазу, фосфатазу, протеазу, целюлазу, ендоглюканазу, екзоглюконазу, глюканазу, амілазу (наприклад, с-амілаза або р-амілаза), ліпазу, фосфоліпазу, глікозилазу, галактаназу, а-галактозидазу, ДВ-глюкозидазу, амілазу, пектиназу, біотиназу, полігалактуроназу, лігніназу або їхню комбінацію. Ліпаза може включати фосфоліпазу А1, фосфоліпазу А2, фосфоліпазу С, фосфоліпазу ОО, лизофосфоліпазу або їхню комбінацію.
Переважно фермент включає ксиланазу або фітазу. 00809) У будь-якому зі способів, що включають годівлю тварини рослиною, рослину можна обробляти перед годівлею тварини. 00810) У будь-якому з описаних вище способів, що включають доставку бактерій, білків або пептидів тварині, тварина може являти собою ссавця (наприклад, вівця, коза, корова, свиня, олень, альпака, бізон, верблюд, осел, кінь, мул, лама, кролик, собака або кішка), птицю бо (наприклад, курка, індичка, качка, гусак, перепел або фазан), рибу (наприклад, лосось, форель,
тиляпія, тунець, сом або короп) або ракоподібне (наприклад, дрібна креветка, велика креветка, лобстер, краб або рак).
ХХІ. Способи доставки корисних нуклеїнових кислот тваринам, комахам, хробакам, грибам і найпростішим 00811) Крім того, винахід стосується способів доставки молекули нуклеїнової кислоти тварині, комасі, хробаку, грибу або найпростішому.
І00812| Спосіб може включати годівлю тварини, комахи або хробака рослиною, модифікованою там, щоб вона містила рівень молекули нуклеїнової кислоти, що перевищує рівень молекули нуклеїнової кислоти в тій же рослині, що не була модифікована, вирощеною в тих же умовах. 00813) Крім того, передбачається спосіб доставки молекули нуклеїнової кислоти тварині, комасі або хробаку. Спосіб може включати годівлю тварини, комахи або хробака рекомбінантним представником сімейства Васійи5 сегеи5, який експресує злитий білок, який містить білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійц5 сегеи5. Альтернативно спосіб може включати годівлю тварини, комахи або хробака рекомбінантною спороутворювальною бактерією, яка експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і білок оболонки спори, що націлює злитий білок на поверхню спори бактерії. Білок або пептид, що представляє інтерес, включає білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, і з білком або пептидом, що зв'язує ДНК або РНК, зв'язана молекула нуклеїнової кислоти. Білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, може бути фізично зв'язаний з екзоспорієм рекомбінантного представника сімейства Васіїйи5 сегеи5 або з оболонкою спори рекомбінантної спороутворювальної бактерії. 00814) Передбачається інший спосіб доставки молекули нуклеїнової кислоти тварині, комасі або хробаку. Спосіб включає годівлю тварини, комахи або хробака фрагментами екзоспорію, які походять з рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5. Фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеци5, описаного в розділі ЇМ даного опису вище, і містять злитий білок. Злитий білок містить білок або пептид, який зв'язує
Зо нуклеїнову кислоту, і де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, зв'язаний з молекулою нуклеїнової кислоти. (00815) Переважно хробак являє собою нематоду.
І00816| Передбачається спосіб доставки молекули нуклеїнової кислоти в гриб або найпростіше. Спосіб включає приведення в контакт гриба або найпростішого з рекомбінантним представником сімейства Васіїйи5 сегеи5, який експресує злитий білок, який містить білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійй5 сегеи5. Альтернативно спосіб включає приведення в контакт гриба або найпростішого з рекомбінантною спороутворювальною бактерією, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і білок оболонки спори, що націлює злитий білок на поверхню спори бактерії. Білок або пептид, що представляє інтерес, включає білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, і молекула нуклеїнової кислоти зв'язана з білком або пептидом, який зв'язує нуклеїнову кислоту. (008171 Крім того, передбачається спосіб доставки молекули нуклеїнової кислоти в гриб або найпростіше. Спосіб включає приведення в контакт гриба або найпростішого з фрагментами екзоспорію. Фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства
Васіїйй5 сегеи5, описаного в розділі ЇМ даного опису вище і містять злитий білок. Злитий білок містить білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, і білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, зв'язаний з молекулою нуклеїнової кислоти.
І00818| Молекула нуклеїнової кислоти може включати модулюючу молекулу РНК; молекулу
РНК-ї; мікроРНК; аптамер; або молекулу ДНК, що кодує модулюючу молекулу РНК, молекулу
РНК-Ї, мікроРНК або аптамер.
І00819| Рекомбінантний представник сімейства Васійй5 сеген5 може включати будь-який з рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеи5, що експресує злитий білок. 00820) Злитий білок може містити будь-який зі злитих білків, описаних у даному описі, що включає білок, який зв'язує нуклеїнову кислоту.,. (00821) Білок оболонки спори включає білок СОїВ, білок СоїС, білок СдеА, білок СоїВ/Н, білок Соїс, білок оболонки спори Х або білок СоОГУ.
І00822| Білок оболонки спори може містити амінокислотну послідовність, яка має 60 щонайменше 8595 ідентичності з будь-якою з 5ЕО ІЮ МО: 252-259.
І00823| Білок оболонки спори може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095 ідентичності з будь-якою з 5ЕО ІЮ МО: 252-259.
І00824| Білок оболонки спори може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9595 ідентичності з будь-якою з 5ЕО ІЮ МО: 252-259.
І00825| Білок оболонки спори може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9895 ідентичності з будь-якою з 5ЕО ІЮ МО: 252-259.
І00826| Білок оболонки спори може містити амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9995 ідентичності з будь-якою з 5ЕО ІЮ МО: 252-259. (00827| Білок оболонки спори може містити амінокислотну послідовність, яка має 100965 ідентичності з будь-якою з 5ЕО ІЮ МО: 252-259. (00828) Описані вище способи можна використовувати для численних цілей. Наприклад, ці способи можна використовувати для доставки РНК або ДНК тваринам для зниження схильності тварини до захворювання або лікування захворювання у тварини (наприклад, органічне захворювання, таке як інсульт, діабет, хвороба серця і дегенеративні захворювання). Також було продемонстровано, що РНК і ДНК є ефективними для усунення або лікування захворювання, викликаного патогенами тварин, такими як бактерії, віруси, черви (наприклад, нематоди) і гриби. РНК і ДНК можуть діяти безпосередньо на патоген або можуть діяти з імунною системою тварини, активуючи або підвищуючи імунну відповідь. (008291 Крім того, описані вище способи можна використовувати для усунення паразитів, у тому числі комах, червів (наприклад, нематод), грибів і найпростіших. Доставка конкретних РНК або ДНК паразиту може приводити до зниження здатності паразита інфікувати хазяїна (наприклад, рослини-хазяїна), зниження годування на цільових хазяях або рослинах, прямого знищення за допомогою блокування ключових генів або різних інших ефектів.
ХХІЇ. Вакцини і спосіб забезпечення імуногенної відповіді
І00830| Передбачається вакцина, яка містить фармацевтично прийнятний носій і спори рекомбінантного представника сімейства Васійиє5 сегеи5, які експресують злитий білок як описаний вище в абзацах 1001711, (001731--(00176| розділу І. де білок або пептид, який представляє інтерес, являє собою антиген або імуноген. 00831) Крім того, передбачається вакцина, що містить фармацевтично прийнятний носій і
Зо фрагменти екзоспорію. Фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства Васіїи5 сегецй5, описаних у розділі ІМ даного опису вище і містять злитий білок. Злитий білок містить антиген.
І00832| Передбачається інша вакцина, що містить фармацевтично прийнятний носій і рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеи5. Рекомбінантний представник сімейства
Васійй5 сегеи5 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеци5, як описано вище в розділі ЇЇ.
І00833| У вакцинах, що містять фрагменти екзоспорію або рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, як описано вище в розділі ІЇ, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть містити будь-які з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію або фрагментів білків екзоспорію, описаних у даному описі.
Зокрема, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть містити будь-які з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію або фрагментів білків екзоспорію, описаних вище в абзацах (007821-(008011.
І00834| Злитий білок може експресуватися під контролем промотору споруляції, нативного для націлювальної послідовності білка екзоспорію або фрагмента білка екзоспорію злитого білка або його частини, і/або під контролем промотору споруляції з високою експресією.
Промотор може являти собою будь-який з промоторів, описаних вище в розділі ПІ.
ІЇ00835| Коли білок або пептид, який представляє інтерес, являє собою антиген, експонування антигену на зовнішній стороні спори або на фрагменті екзоспорію забезпечує відповідь імунної системи для забезпечення вакцинації проти різних патогенів або захворювань.
Прийнятними антигенами або низькомолекулярними сполуками є ті, про які відомо або очікується, що вони будуть індукувати бажану імунну відповідь, яка є достатньою для забезпечення терапевтичного або захисного ефекту при експресії зовні спори Васіїйн5 або експонуванні на фрагменті екзоспорію. Прийнятність в більшості визначається укладанням тривимірної структури після включення рекомбінантного антигену в екзоспорій, тобто антигенна частина(и) рекомбінантної молекули повинна бути доступною для виявлення імунною системою.
І00836| Патогени або захворювання, з яких може походити антиген, включають, але не обмежуються ними, інфекції акінетобактеріями, які викликаються Асіпеобасіег Баштаппії; бо актиномікоз, який викликається Асііпотусез ізгаєїїй, Асііпотусез дегепсзегіає і Ргоріопірасієегічт ргоріопісих; африканський трипаносомоз, який викликається Тгурапозота бБгисеї; синдром набутого імунодефіциту (СНІД), який викликається вірусом імунодефіциту людини; амебіаз, який викликається Епіатоера Пізіоїуїса; анаплазмоз, який викликається Апаріазєта депи», сибірську виразку, яка викликається Васіїйи5 апіпгасіб5; інфекцію Агсапорасіепцт Наєтоїуїсит, яка викликається Агсапорасієгішт ПпПаептоїуїйсит; аргентинську геморагічну пропасницю, яка викликається вірусом Хунін; аскаріоз, який викликається Абвсагі5 Іштргісоїде5, інфекцію астровірусом, яка викликається сімейством Авігомігадає; бабезіоз, рід Вабрезіа; інфекцію Васі сегеи5, яка викликається Васіїйш5 сегеи5; бактеріальну пневмонію; бактеріальний вагіноз; інфекцію Васіегоїдех5, яка викликається родом Васіегіоде5; балантидіаз, який викликається
Ваіапіаічт соїї; інфекцію Вауїїзазсагі5, яка викликається родом Вакхіїзазсагів; інфекцію вірусом
ВК, яка викликається вірусом ВК; чорну трихомпорію, яка викликається Рієйгаїа погіає; інфекцію
Віаєіосуєіїє ПпПотіпіх5, яка викликається Віавіосувії5 Потіпіє; бластомікоз, який викликається
Віазіотусез дептайніаїі5; болівійську геморагічну пропасницю, яка викликається вірусом Мачупо; інфекцію Воггейа, яка викликається родом Воїгтеїїа; ботулізм (і дитячий ботулізм), який викликається уживанням токсину Сіовігідішт роїцііпит; бразильську геморагічну пропасницю, яка викликається Забіа; бруцельоз, який викликається родом ВгисеїЇІа; інфекцію ВигКкпоїдегіа, яка звичайно викликається ВигКпоїЇдегіа серасіа і іншими видами ВигКпоїдегіа; виразку Вигиїї, яка викликається Мусобасіегішт пцїсегап5; інфекцію каліцивірусом (норовірусом і саповірусом), яка викликається сімейством Саїісімігідаєї кампілобактериоз, який викликається родом
Сатруюбасіег; кандидоз (моніліаз; молочниця), який звичайно викликається Сапаїйда аїбрісапз і іншими видами Сапаїда; хвороба котячих подряпин, яка викликається ВагіопеЇМа Пепзеїає; целюліт, який звичайно викликається Зігеріососси5 і Зарпуіососси5 групи А; хворобу Шагаса (американський трипанозомоз), який викликається Тгурапозота сги7і; шанкроїд, який викликається Наеторпійи5 аисгеуї; вітрянку, яка викликається вірусом Магісейа 2051ег (МАМ); хламідіоз, який викликається Спіатуаїйа ігаспотаїй5; інфекцію Спіатуадорпйа рпеитопіає, яка викликається СПіатудорпйа рпештопіае; холеру, яка викликається Міргіо СПоїегає; хромобластомікоз, який звичайно викликається Ропбзесаєа реайгозої; клонорхоз, який викликається Сіопогспі5 5іпепв5іб5; інфекцію Сіовігідіит аййісіе, яка викликається Сіовігідійт айісіе; кокцидіоїдомікоз, який викликається Соссідіоідев іт і Собссідіоіїдеб5 розадавії;
Зо колорадську кліщову пропасницю (СТЕ), яка викликається вірусом колорадської кліщової пропасниці (СТЕМ); звичайну застуду (гострий вірусний ринофарингіт; вірусну інфекцію верхніх дихальних шляхів), яка звичайно викликається риновірусами і коронавірусами; хворобу
Крейтцфельда-Якоба (СОЮ), яка викликається пріоном СОЮ; конго-кримську геморагічну пропасницю (ССНЕ), яка викликається вірусом конго-кримської геморагічної пропасниці; криптококоз, який викликається Стгуріососси5 пеоїогптап5; криптоспоридіоз, який викликається родом Стуріозрогідішт; синдром ЇІагма тідгап5, шкірна форма (СІМ), який звичайно викликається Апсуїозіота рга7ійепое і множиною інших паразитів; циклоспоріаз, який викликається Сусіозрога сауєїапепвів; цистицеркоз, який викликається Таеєпіа 5оїЇїшт; інфекцію цитомегаловірусом, яка викликається цитомегаловірусом; пропасницю Денге, яка викликається вірусами Денге (0ЕМ-1, СЕМ-2, СЕМ-3 ї ОЕМ-4) - флавівіруси; діентамебіаз, який викликається
Ріепіатоеба ігадіїїє; дифтерію, яка викликається Согупебасієегішт аїірппегіає; дифілоботриоз, який викликається РірпуПоБроїйгішт; дракункульоз, який викликається ЮОгасипсци5 теаіпепві5; геморагічну пропасницю Ебола, яка викликається ЕБоїЇамігих (ЕВОМ); ехінококоз, який викликається родом ЕсПіпососси5; ерліхіоз, який викликається родом ЕнПгіїспіа; ентеробіоз (оксіуроз), який викликається Епіегобріиз мегтісціагів; інфекцію Епіегососси5, яка викликається родом Епіегососси5; інфекцію ентеровірусом, яка викликається родом Епіегоміги5; сипний тиф, який викликається КісКейбіа ргомжа7екії; інфекційну еритему (п'яту хворобу), яка викликається парвовірусом В19; раптову екзантему, яка викликається вірусом герпесу 6 людини (ННУ-6) і вірусом герпесу 7 людини (ННМ-7); фасцилопсидоз, який викликається РавзсіоІорвіб бриФбкКі; фасциольоз, який викликається Разсіоїа Пераїййса і Разсіоїа дідапіїса; фатальне сімейне безсоння (ЕРЇ), яке викликається пріоном ЕРЇ; філяріоз, який викликається надсімейством
Ейагіоїдеа; харчове отруєння, яке викликається Сіобігідішт регігіпдеп5; інфекцію вільно живучими амебами; інфекцію Ризобасіегішт, яка викликається родом ЕРизобасіегішт; газову гангрену (Сіозігідіа! туопесговів5), яка звичайно викликається Сіовігідійт регітіпдеп5 або іншими видами Сіозігідішт; геотрихоз, який викликається Сеоїгіспит сапаійдит; синдром Герстманна-
Штреусслера-Шейнкера (555), який викликається пріоном 55; гіардіоз, який викликається
Сіагаіа іпіезііпаїїє; сап, який викликається ВигКПпоїЇдегіа таїйеї; гнатостомоз, який викликається
Спафйобіота 5ріпідегит і Спафйобіота Пізрічит; гонорею, яка викликається Меїі5зегіа допо йпоеає; пахову гранульому (донованоз), яка викликається Кіерзіейа дтгапшиотайі5; бо стрептококову інфекцію групи А, яка викликається Зігеріососсиз руодепев; стрептококову інфекцію групи В, яка викликається Зігеріососси5 адаїасіає; інфекцію гемофільною паличкою, яка викликається Наеторпіи5 іпїчеп7ає; вірусну пухирчатку порожнини рота і кінцівок (НЕМО), яка викликається ентеровірусами, в основному вірусом Коксакі А і ентеровірусом 71 (ЕМ'71); хантавірусний легеневий синдром (НР5), який викликається вірусом Син Номбре; інфекцію
Неїїсобасіег руїогі, яка викликається Неїїсобасіег руїогі; гемолітичний-уремічний синдром (НОБ), який викликається Езспегіспіа соїї 0157:Н7; геморагічну пропасницю з ренальним синдромом (НЕК5), яка викликається сімейством Випуамігідаеє; гепатит А, який викликається вірусом гепатиту А; гепатит В, який викликається вірусом гепатиту В; гепатит С, який викликається вірусом гепатиту С; гепатит О, який викликається вірусом гепатиту ЮО; гепатит Е, який викликається вірусом гепатиту Е; простий герпес, який викликається вірусом простого герпесу 1 і 2 (НБУМ-1 ії НБ5У-2); гістоплазмоз, який викликається Нізіоріазта сарзшайшт; анкілостомоз, який викликається Апсуїобіота диодепаїе і Месаг атегісапи5; інфекцію бокавірусом людини, яка викликається бокавірусом людини (НВом); ерліхоз людини, який викликається ЕпПгпіспіа ем/іпаії; гранулоцитарний анаплазмоз людини (НОСА), який викликається Апаріахєта рпадосуїорпйит; інфекцію метапневмовірусом людини, яка викликається метапневмовірусом людини (ПМРМ); моноцитарний ерліхоз людини, який викликається ЕПпіспіа спапеепвібв; інфекцію вірусом папіломи людини (НРУ), яка викликається вірусом папіломи людини (НРУ); інфекцію вірусом парагрипу людини, яка викликається вірусами парагрипу людини (НРІМ); гіменолепідоз, який викликається Нутепоїері5 папа і Нутепоїері5 аїтіпшща; інфекційний мононуклеоз Епштейна-
Барр (Мопо), який викликається вірусом Епштейна-Барр (ЕВМ); грип (Пи), який викликається сімейством Огіпотухомігідає; ізоспоріаз, який викликається Ізоз5рога Веїїї; хворобу Кавасакі (причина невідома, однак дані показують, що вона є інфекційною); кератит; інфекцію КіпдеПа
Кіпдає, яка викликається КіпдеїМа Кіпдає; куру, яка викликається пріоном Куру; пропасницю
Ласса, яка викликається вірусом Ласса; легіонельоз (хвороба легіонерів), який викликається
І едіопейа рпешторпіїа; легіонельоз (понтіакська лихоманка), який викликається І едіопейПа рпешторпйа; лейшманіоз, який викликається родом ІГеї5птапіа; лепру, яка викликається
Мусобасіегіншт Іергаеє і Мусобасіегішт Іерготаїйоз5іб5; лептоспіроз, який викликається родом
І еріозріга; лістеріоз, який викликається І ібіегйа топосуїодепе5; хворобу Лайма (бореліоз
Лайма), яка звичайно викликається Воїтеїйа ригдаогегі і іншими видами Воїітеїїа; лімфатичний
Зо філяріатоз (елефантіаз), який викликається Ууиспегегіа рапсгопі і Вгидіа таїауї; лімфоцитарний хоріоменінгіт, який викликається вірусом лімфоцитарного хоріоменінгіту (-СММ); малярію, яка викликається родом Ріазтодішт; марбургську геморагічну пропасницю (МНЕ), яка викликається вірусом марбургської хвороби; кір, який викликається вірусом кору; меліоїдоз (хвороба Уїтмора), який викликається ВигКкпоїЇдегіа рзеидотаїйеї; менінгіт; менінгококове захворювання, яке викликається Меїіззегіа тепіпоуйіаї; метагонімоз, який звичайно викликається Меїадопітив уокадаулаії; мікроспоридіоз, який викликається типом Місгозрогідіа; контагіозний молюск (МС), який викликається вірусом МоПи5сит сопіадіозвит (МСМ); свинку, яка викликається вірусом свинки; щурячий сипний тиф (ендемічний тиф), який викликається КіскКейбвіа їурпі; інфекцію
Мусоріазта рпештопіа, яка викликається Мусоріазта рпешитопіає; міцетому, яка викликається численними видами бактерій (Асііпотусефота) і грибів (Енйтусефота); міаз, який викликається паразитичними личинками двокрилих мух; неонатальний кон'юнктивіт (орпіпа/тіа пеопаїогит), який найбільш часто викликається Спіатуаїйа ігаспотаїйі5 і Меїззегпа допогпоеає; (новий) варіант хвороби Крейтцфельда-Якоба (мСОЮ, пиСур), який викликається пріоном мСОуОЮ; нокардіоз, який звичайно викликається Мосагайїа авз(егоїде5 і іншими видами Мосагаїа; онхоцеркоз (річкову сліпоту), який викликається Опсопосегса моїмиціи5; паракокцидіоїдомікоз (південно-американський бластомікоз), який викликається Рагасоссідіоіїдеє Бгабійепвіє; парагонімоз, який звичайно викликається Рагадопіти5 мевзіегтапі і іншими видами Рагадопіти5; пастерельоз, який викликається родом Рабієигейа; головний педикульоз (головні воші), який викликається
Редісшив питапиз саріїїх; натільний педикульоз (натільні воші), який викликається Реаісшив5 питапих согрогіє; лобковий педикульоз (лобкові воші, площиці), який викликається РІінпіги5 риріє; запальне захворювання тазу (РІЮ); коклюш (судомний кашель), який викликається
Вогаеїейа регив55іб; чуму, яка викликається "Уегзіпіа ребііїє; пневмококову інфекцію, яка викликається зігеріососси5 рпештопіае; пневмоцистну пневмонію (РСР), яка викликається
Рпештосузіїв |ігомесіїї пневмонію; поліомієліт, який викликається поліовірусом; інфекцію
РгемоїеїІа, яка викликається родом РгемоїеїІа; первинний амебний менінгоенцефаліт (РАМ), який звичайно викликається Маедієгіа їоу/егі; прогресуючу багатовогнищеву лейкоенцефалопатію, яка викликається вірусом УС; пситтакоз, який викликається Спіатуадаорпйа р5іНасі; пропасницю
О, яка викликається СохієїІа Бигпеїййї; сказ, який викликається вірусом сказу; пропасницю укусу пацюків, який викликається 5ігеріорасійи5 топіїйоптів ії Зрігйчт тіпи5; інфекцію респіраторно- бо синцитіальним вірусом, яка викликається респіраторно-синцитіальним вірусом (КБМ);
риноспоридіоз, який викликається КПіпо5рогідішт 5еерегі; інфекцію риновірусом, яка викликається риновірусом; рикетсіозну інфекцію, яка викликається родом КісКейбіа; вісповидний рикетсіоз, який викликається КісКейбіа акКагі; пропасницю доліни Рифт (КМЕ), яка викликається вірусом пропасниці долини Рифт; плямисту пропасницю Скелястих гір (КЕМ5БЕ), яка викликається КіскКейвіа гіскейвії; ротавірусну інфекцію, який викликається ротавірусом; краснуху, яка викликається вірусом краснухи; сальмонельоз, який викликається родом заІтопеїйа; БАК5 (тяжкий гострий респіраторний синдром), який викликається коронавірусом
ЗАК5; коросту, яка викликається Загсоріе5 5сабівї; шистозоматоз, який викликається родом
Зеспібіобзота; сепсис; шигельоз (бацилярна дизентерія), який викликається ЗПпідейа депив; оперізувальний лишай (оперізувальний герпес), який викликається вірусом МагісеПа 27051ег (МАМ); натуральну віспу (віспу), яка викликається Магіоїа та|ог або Мапоїа тіпог; споротрихоз, який викликається Зрогоїпгіх 5сПпепескКії; стафілококовое харчове отруєння, яке викликається родом іарпуіососси5; стафілококову інфекцію, яка викликається родом еїарпуіососсив; стронгілоїдоз, який викликається Зігопдуоїдез 5іегсогаїї5; сифіліс, який викликається Тгеропета раїїїаит; теніоз, який викликається родом Таеєпіа; правець (тризм щелепи), який викликається
Сіовігідіцт їТебапі; дерматофітію бороди і вусів (паразитарний сикоз), який звичайно викликається родом Тгіспорпуїоп; мікоз голови (стригучий лишай скальпа), який звичайно викликається Тгіспорпуїп (опзигапе; мікоз гладкої шкіри тулуба (стригучий лишай тулуба), який звичайно викликається родом Тгіспорпуїп; дерматомікоз паховий (пахову епидермофітію), який звичайно викликається Ерідегпторпуюп Поссозит, Тгіспорпуйоп о гибгит ої Тгіспорпуїп тепіадгорпуїез; дерматомікоз рук (стригучий лишай рук), який викликається Тгіспорпуюп гиргит; чорний лишай, який звичайно викликається Ногіаєа уегпескії; дерматомікоз стоп (стопу атлета), який звичайно викликається родом Тгіспорпуйп; мікоз нігтя (оніхомікоз), який звичайно викликається родом Тгіспорпуїоп; різнобарвний лишай (різнобарвний пітиріаз), який викликається родом Маїаззеліа; токсокаріаз (синдром Іагма тідгап5, очна форма (ОГМ)), який викликається Тохосага сапі5 або Тохосага саїї; токсокаріаз (синдром Іагма тідгап5, вісцеральна форма (МІ М)), який викликається Тохосага сапіє або Тохосага саїї; токсоплазмоз, який викликається Тохоріазта допаїї; трихінельоз, який викликається ТгіспіпеПа 5рігаїїє; трихомоноз, який викликається Тгіспотопах мадіпаїїє; трихіуріаз (інфекція волосоголовцем), який
Зо викликається Тгіспигіє ігіспіига; туберкульоз, який звичайно викликається Мусобасіегійт
Імрегсціов5і5; туляремію, яка викликається ЕгапсізеїЇІа Ішагепвів; інфекцію Огеаріазта игеаімісит, яка викликається Огеаріазта игеауїсит; венесуельський енцефаліт коней, який викликається вірусом венесуельського енцефаліту коней; венесуельську геморагічну пропасницю, яка викликається вірусом Гуанарито; вірусну пневмонію; пропасницю західного Нілу, яка викликається вірусом пропасниці західного Нілу; білу п'єдру (білий лишай), який викликається
Тисповзрогоп о Беїдеїїї; інфекцію Уегзіпіа рзеиаоїшрегсціо5і5, яка викликається Уегзіпіа рзепадоїшбегсиіо5і5; ієрсиніоз, який викликається Уегзіпіа епіегосоїЇйіса; жовту пропасницю, яка викликається вірусом жовтої пропасниці; зигомікоз, який викликається загоном МисогаЇев5 (мукормікоз) і рядом Епіоторпїпогаіез (ентомофторамікоз).
І00837| Коли білок або пептид, який представляє інтерес, являє собою антиген, для експресії злитого білка можна використовувати будь-який представник сімейства Васіїйїн5 сегецйв5.
Переважними є Васійи5 (пигіпдіепзі5 або Васійн5 тусоідев.
І00838| Для одержання вакцини антиген, який представляє інтерес, включають у злитий білок відомими способами, такими як ПЛР-сплайсинг за допомогою подовження, що перекривається, розщеплення ендонуклеазою рестрикції і лігування або синтез гена де помо.
Потім злитий білок вводять у рекомбінантний представник сімейства ВасйШиє сегеи5 за допомогою трансфекції, трансформації, кон'югації, електропорації або інших відомих способів.
Потім рекомбінантний представник сімейства Васійш5 сегеи5 вирощують у культуральному середовищі (наприклад, мінімальне рідке середовище), і йому дозволяють спорулювати.
Переважно, споруляція продовжується до завершення, а потім спори збирають і зберігають.
Спори можна збирати або за допомогою центрифугування, або за допомогою зняття спор із планшетів для вирощування і внесення в рідке середовище (наприклад, РВ5 або вода), а потім центрифугування і промивання отриманого осаду зі спорами в рідкому середовищі. Перед застосуванням осад зі спорами можна ресуспендувати у рідкому середовищі до бажаної концентрації для застосування або ін'єкції Коли вакцина містить фрагменти екзоспорію, фрагменти екзоспорію можна одержувати з використанням будь-якого зі способів, описаних у розділі ХІХ.Н вище. (00839) Бажана концентрація спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 або фрагментів екзоспорію у вакцині основана на розмірі індивідуума, кількості активного бо антигену на поверхні спор і присутності і концентрації у вакцинному складі ад'ювантів. Вакцина за винаходом може містити загальноприйняті ад'юванти, включаючи фармацевтично прийнятні носії. (00840) Передбачається спосіб індукції імуногенної відповіді в індивідуума. Спосіб включає уведення вакцини, що містить спори рекомбінантного представника сімейства Васійн5 сегецв, які експресують злиті білки, або фрагменти екзоспорію, що містять злиті білки, як описано в даному описі, індивідууму.
І00841| Вакцина, як описано в даному описі, є прийнятною для внутрішньовенного, внутрішньоартеріального, внутрішньоочеревинного, внутрішньом'язового, підшкірного, внутрішньоплеврального, місцевого, перорального, інтраназального, внутрішньошкірного, трансепітеліального уведення або введення за допомогою інгаляції.
І00842| Вакцину можна вводити індивідууму, яким може є людина, миша, птиця, свиня, жуйна тварина, вівця, кішка, собака, кінь, коза, плазун або примат, який не є людиною.
Переважно індивідуумом є ссавець і найбільш переважно людина.
ХХІ. Рекультивація 00843) Коли білок або пептид, який представляє інтерес, являє собою білок або пептид для рекультивації, токсична речовина каталітично конвертується білком або пептидом для рекультивації в нетоксичну або менш токсичну речовину. (00844) Коли білок або пептид для рекультивації включає фермент, фермент експонується і стабілізується на зовнішній області спори і може бути доставлений у забруднений грунт або забруднену воду у формі, яка є активною проти цільового забруднювача або хімічної сполуки.
І00845| Прийнятні ферменти залежать від забруднювача або хімічної речовини, на які націлена рекультривація.
І00846| Для одержання композиції для рекультивації фермент, що представляє інтерес, включають у злитий білок відомими способами, такими як ПЛР-сплайсинг за допомогою подовження, що перекриває, розщеплення ендонуклеазою рестрикції і лігування, або синтез гена де помо. Потім ген злитого білка вводять у рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 за допомогою трансфекції, трансформації, кон'югації, електропорації або інших відомих способів. Потім рекомбінантний представник сімейства Васійн5 сегенє вирощують у культуральному середовищі (наприклад, мінімальне рідке середовище) і дозволяють йому
Зо спорулювати. Переважно, споруляція продовжується до завершення, а потім спори збирають і зберігають. Спори можна збирати або за допомогою центрифугування, або за допомогою зняття спор із планшетів для вирощування і внесення в рідке середовище (наприклад, РВ5 або вода), а потім центрифугування і промивання отриманого осаду зі спорами в рідкому середовищі.
Перед застосуванням осад зі спорами можна ресуспендувати у рідкому середовищі до бажаної концентрації для застосування. Альтернативно осад складу зі спорами можна складати в гранули в бажаній концентрації для застосування і внесення в забруднене середовище. Коли фрагменти екзоспорію використовують для рекультивації, фрагменти екзоспорію можна одержувати з використанням будь-якого зі способів, описаних у розділі ХІХ.Н вище. (00847| Передбачається спосіб зменшення кількості забруднювачів у навколишньому середовищі. Спосіб включає вплив на забруднене середовище спор рекомбінантного представника сімейства Васіїйш5 сегеи5, які експресують злитий білок, як описано вище в абзацах (1001711, 1001731-(001751 і (001771 розділу І, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає фермент рекультивації. (00848) Передбачається інший спосіб зменшення кількості забруднювачів у навколишньому середовищі. Спосіб включає вплив на забруднене зовнішнє середовище фрагментів екзоспорію.
Фрагменти екзоспорію походять з рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегецв, описаного в розділі ІМ даного опису вище і містять злитий білок. Злитий білок містить фермент рекультивації.
І00849| Передбачається інший спосіб зменшення кількості домішок у навколишньому середовищі. Спосіб включає вплив на забруднене навколишнє середовище спор рекомбінантного представника сімейства Васійшє5 сегени5. Рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васіїйи5 сегецв5, як описано вище в розділі ЇЇ.
І00850| У способах зменшення кількості домішок, що включають вплив на забруднене навколишнє середовище фрагментів екзоспорію або рекомбінантного представника сімейства
Васіїйй5 сегец5, як описано вище в розділі ІЇ, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть являти собою будь-які з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію або фрагментів білків екзоспорію, описаних у даному описі. Зокрема, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть містити 60 будь-які з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію або фрагментів білків екзоспорію,
описаних вище в абзацах (007821-(008011.
І00851| Злитий білок можна експресувати під контролем промотору споруляції, нативного для націлювальної послідовності білка екзоспорію, або фрагмента білка екзоспорію злитого білка або його частини, і/або під контролем промотору споруляції з високою експресією.
Промотор може являти собою будь-який з промоторів, описаних вище в розділі ПІ.
І00852| Коли білок або пептид, який представляє інтерес, являє собою фермент рекультивації, для експресії злитого білка можна використовувати будь-який представник сімейства Васіййи5 сегеи5. Переважними є Васіїйй5 «Пигіпудіепбі5, Васійи5 сегеи5 або Васійи5 тусоідев.
І00853| Спори рекомбінантного представника сімейства ВасіШи5 сегеи5 можуть включати ендофітний штам бактерій для фіторекультивації, такий як представник сімейства Васійн5 сегеи5 ЕЕ349, представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ439, Васійи5 ІПигіпдіепзі5 ЕЕ417, Васійив5 сегеиз ЕЕ444 або Васіїйи5 (Пигіпдіепзіз ЕЕЗ319. (00854| Забруднене навколишнє середовище, що підлягає обробці, може являти собою газ, рідину, напіврідину, гель, плівку, напівтверду речовину або тверду речовину. Тверде навколишнє середовище може являти собою грунт, такий як поверхневий грунт і підорний шар грунту, компост, пожнивні залишки, листя, мульчу, зрубані дерева, біоплівку, шар бруду, гумус, відстій, пісок, шлак, осадові відкладення, стічні води, порожню породу, ядерні відходи, боєприпаси і снаряди, лікарняні відходи, частини автомобілів під прес, металевий обріз, ізоляційні відходи, харчові відходи, азбест, елементи харчування, брухт металообробки, полігонні відходи, відходи деревообробки, відходи текстильного виробництва, скляний бій, шкіряні відходи, гумові відходи, пластмасові відходи, відходи електронних компонентів, сільськогосподарські відходи, фотографічні відходи, керамічні відходи, фармацевтичні відходи, віск, витрачені каталізатори або їхні комбінації. Рідке навколишнє середовище може являти собою питну воду, підземні води, поверхневу воду, сольові розчини, резервуари, відстійники, водяні екосистеми, промислові стічні води, кислі шахтні води, витрачену автомобільну рідину, витрачені електролітичні ванни, розчини для знежирення, розчини для сухого очищення, машинні охолодні рідини, відходи бурових рідин, відходи мастильно-охолодних рідин, відходи рідин гідророзриву пласту, відходи мастильних речовин, фарбу, побутову стічну воду, нафтозабруднені стоки, стоки целюлозних заводів, системи підготовки води, систему очищення стоків, каналізацію, відстійник для осадження, нагромаджувач стічних вод, озеро, або ріку їхню комбінацію. Газоподібне навколишнє середовище може являти собою повітря, вихлопний газ, такий як викиди енергостанцій, сміттєспалювальних заводів, крематоріїв або нафтоперегінних заводів, технологічний вихідний потік, звальний газ, природний газ, пропан або їхню комбінацію.
ІЇ00855| Забруднене навколишнє середовище може бути забруднене різними забруднювачами, включаючи, але не обмежуючись ними, хімічний бойовий засіб, включаючи зарин (В; о-ізопропілметилфосфонофлуоридаті); зоман (0; о- пінаколілметилфосфонофлуоридат); циклозарин (СЕ; о-циклогексилметилфосфонофлуоридат);
УХ (О-етил-5-(2-(дізопропіламіно)детил|Іметилфосфонотіоат); табун (СА; М,М- диметилетилфосфороамідоціанідат), ОБР (діїізопропілфосфорофлуоридат) або іприт; неорганічну сполуку, що містить миш'як, сурму, барій, берилій, кадмій, хром, мідь, залізо, свинець, марганець, ртуть, нікель, селенів, срібло, олово, талій, уран, цинк або їхню комбінацію; органічну сполуку, що містить поліциклічний ароматичний вуглеводень (РАН), хлоровану ароматичну сполуку, хлоровану аліфатичну сполуку, нітроароматичну сполуку (МАС), фенольну сполуку, ціаносполуку, діоксин або їхню комбінацію; неочищену нафту, очищену нафту, паливну нафту, дизельне паливо, бензин, масло для гідросистем і гас або їхній леткий компонент, такий як бензол, толуол, етилбензол, ксилол або нафталін; вибухову речовину, добриво, пестицид, інсектицид або гербіцид. (00856| Концентрація рекомбінантних спор або фрагментів екзоспорію, необхідна для обробки забрудненого навколишнього середовища, основана на факторах, що включають обсяг або площу, що підлягають обробці, поширеність присутньої заданої хімічної речовини, забруднювача або органічного матеріалу, кількість часу, доступного для обробки, і кількість активного ферменту на поверхні спор.
І00857| Спори рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 або фрагменти екзоспорію можна приводити в контакт із забрудненим навколишнім середовищем шляхом включення спор або фрагментів екзоспорію в потік, що містить забруднювач, приведення в контакт потоку, що містить забруднювач, з іммобілізуючим матеріалом, що містить спори або фрагменти екзоспорію (наприклад, фільтр, мембрана, губка або касета), включення спор або фрагментів екзоспорію в гранули, що підлягають змішуванню з забрудненим навколишнім 60 середовищем, розпилення спор або фрагментів екзоспорію на або в забруднене навколишнє середовище, інжектування спор або фрагментів екзоспорію в забруднене навколишнє середовище або зрошення забрудненого навколишнього середовища спорами або фрагментами екзоспорію. (00858| Спори можна комбінувати з бактеріальними інокулятами, хімічними сполуками, розчинниками й іншими продуктами, що можуть прискорювати процес розкладання.
І00859| Фермент рекультивації включає, але не обмежується ними, фосфатзв'язувальний білок, протеазу, гідроліазу вуглеводів, ліпазу, фосфоліпазу, нуклеазу, білок, що зв'язує поживні речовини, целюлазу, оксидоредуктазу, монооксигеназу, діоксигеназу, лаказу, лігнінпероксидазу, марганцеву пероксидазу, пероксидазу, дегалогеназу, каталазу, амілазу, редуктазу, оксидазу, амідазу, лігніназу, ксиланазу, пектиназу, ксилозидазу, ендоглюканазу, екзоглюканазу, глюкозидазу, інгібуючий біоплівку пептид, фермент, що деградує гербіцид, фермент, що деградує пестицид (наприклад, піретриназу), або їхню комбінацію.
І00860| Коли фермент включає фермент, який деградує гербіцид, або фермент, який деградує пестицид, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегени5 у прийнятному випадку включає штам бактерій, що здатний деградувати гербіцид або пестицид. Наприклад, штам бактерій, що здатний деградувати гербіцид або пестицид, може включати представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ349 (МАК! Мо В-50928), представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ- вО00377 (МАВІ В-67119); Васіїйнє рзепдотусоїдез ЕЕ-800366 (МАВІ В-67120) або ВасшШив5 тусоїде5 ЕЕ-В800363 (МАН В-67121).
І00861| Також передбачається спосіб фіторекультивації грунту. Спосіб включає внесення спор рекомбінантного представника сімейства Васійиє сегеи5 у забруднений грунт; або нанесення спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 на рослину, посаджену в забруднений грунт, або насіння рослини для посадки в забруднений грунт, або на область забрудненого грунту, що оточує рослину або насіння рослини; де спори рекомбінантного представника сімейства Васіїйш5 сегеи5 експресують злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій спор рекомбінантного представника сімейства Васіїйй5 сегеи5, де злитий білок являє собою злитий білок, як описано вище, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає фермент рекультивації, і де
Зо рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сеген5 включає ендофітний штам бактерій або штам бактерій, що колонізує корені. Наприклад, рекомбінантна спороутворювальна бактерія може включати ендофітний штам бактерій. (00862) Також передбачається інший спосіб фіторекультивації забрудненого грунту. Спосіб включає експресію ферменту рекультивації в спорі представника сімейства Васіїйн5 сегеи5, де експресія ферменту рекультивації в спорі рекомбінантного представника сімейства Васіййи5 сегени5 збільшена в порівнянні з експресією ферменту рекультивації в спорі представника сімейства Васіїи5 сегеи5 дикого типу. (00863) Також передбачається інший спосіб фіторекультивації забрудненого грунту. Спосіб включає внесення рекомбінантної спороутворювальної бактерії в забруднений грунт, або нанесення рекомбінантної спороутворювальної бактерії на рослину, посаджену в забруднений грунт, або насіння рослини для посадки в забруднений грунт, або на область забрудненого грунту, що оточує рослину або насіння рослини. Рекомбінантна спороутворювальна бактерія експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і білок оболонки спори, що націлює злитий білок на поверхню спори бактерії. Білок оболонки спори включає білок СоїЇВ, білок СоїС, білок СдеА, білок СОїЇВ/Н, білок Соїб, білок оболонки спорьї Х або білок СоїуУ. Рекомбінантна спороутворювальна бактерія включає ендофітний штам бактерій або штам бактерій, що колонізує корені. Білок або пептид, що представляє інтерес, включає фермент рекультивації. (00864) Також передбачається інший спосіб фіторекультивації забрудненого грунту. Спосіб включає внесення фрагментів екзоспорію в забруднений грунт або нанесення фрагментів екзоспорію на рослину, посаджену в забруднений грунт, або насіння рослини для посадки в забруднений грунт, або на область забрудненого грунту, що оточує рослину або насіння рослини. Фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства
Васійй5 сегеи5, описаного в розділі ЇМ даного опису вище і містять злитий білок. Злитий білок містить фермент рекультивації.
І00865| Передбачається інший спосіб фіторекультивації забрудненого грунту. Спосіб включає внесення спор рекомбінантного представника сімейства Васіїйн5 сегеи5 у забруднений грунт. Альтернативно спосіб включає нанесення спор рекомбінантного представника сімейства
Васіїи5 сегеи5 на рослину, посаджену в забруднений грунт, або насіння рослини для посадки в 60 забруднений грунт, або на область забрудненого грунту, що оточує рослину або насіння рослини. Рекомбінантний представник сімейства Васіййи5 сеген5 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійиє5 сегеи5, як описано вище в розділі ІІ, ії злитий білок включає фермент рекультивації.
І00866| У способах фіторекультивації забрудненого грунту, які залучають застосування фрагментів екзоспорію або рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегец5, як описано вище в розділі ІЇ, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть містити будь-які з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію або фрагментів білків екзоспорію, описаних у даному описі. Зокрема, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть включати будь-яку з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію або фрагментів білків екзоспорію, описаних вище в абзацах
І007821-(008011.
І00867| Злитий білок можна експресувати під контролем промотору споруляції, нативного для націлювальної послідовності білка екзоспорію або фрагмента білка екзоспорію злитого білка або його частини і/або під контролем промотору споруляції з високою експресією.
Промотор може являти собою будь-який з промоторів, описаних вище в розділі ПІ. (00868) Фермент рекультивації експонується на зовнішній області спор і в рослині, так що як рослина, так і спори, можуть конвертувати забруднювач-мішень. Рослина може захоплювати забруднювач-мішень, у той час як спори конвертують забруднювач у нетоксичну або менш токсичну форму в рослині або кореневій системі.
І00869| Спори рекомбінантного представника сімейства Васіййи5 сеген5 можуть включати ендофітний штам бактерій, такий як представник сімейства Васіїй5 сегеи5 ЕЕ349, представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ439, Васійи5 Іпигіпдіепзі5 ЕЕ417, Васійи5 сегеи5 ЕЕ444, або Васіййи5
Іигіпдіепвів ЕЕЗ19, Васіїйи5 (пПигіпдіепзіз ЕЕ-800184, представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ- вО0О0377, Васіїйив5 рсендотусоїдез5 ЕЕ-800366 або Васіїи5 тусоіїде5 ЕЕ-800363.
І00870| Спори або фрагменти екзоспорію можна наносити на рослину або насіння рослини, і рослина або рослина, вирощена з насіння рослини, є толерантною до забруднювача-мішені, що підлягає усуненню з забрудненого грунту. (00871) У способі фіторекультивації рекомбінантні представники сімейства Васійи5 сегеив5 зазнають споруляцію в рослині.
Зо І00872| Спори рекомбінантного представника сімейства ВасшШи5 сегени5 можна вносити в середовище для росту рослин різними способами, такими як зрошення грунту під час посіву.
Також спори можна наносити на насіння рослини за допомогою обробки насіння. (00873) Переважно, рослина, яка підлягає обробці ферментом рекультивації, є толерантною до забруднювача-мішені, так що рослина не ушкоджується забруднювачем-мішенню.
І00874| Концентрація рекомбінантних спор, необхідна для способу фіторекультивації, основана на факторах, що включають обсяг або площу, які підлягають обробці, здатність ендофітних штамів колонізувати корені рослин, ступінь, у якому присутній забруднювач-мішень, і кількість активного ферменту на поверхні спор.
І00875| Передбачається інший спосіб зменшення кількості домішок у навколишному середовищі. Спосіб включає вплив на забруднене середовище спор штаму представника сімейства Васійн5 сегеи5, що здатний деградувати гербіцид або пестицид. Забруднювачі у навколишному середовищі включають гербіцид, пестицид або їхню комбінацію. Штам представника сімейства Васійн5 сегеи5, що здатний деградувати гербіцид або пестицид, включає представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕЗ349 (МККІ Мо В-50928), представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 ЕЕ-800377 (МАНІ В-67119); Васійи5 рсендотусоїде5 ЕЕ-800366 (МАВ
В-67120); Васіїйнв5 тусоїдез5 ЕЕ-800363 (МАНІ. В-67121) або їхню комбінацію. (00876) Штам представника сімейства Васійи5 сегеи5, що здатний деградувати гербіцид або пестицид, може включати рекомбінантний представник сімейства Васійц5 сегеи5, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5. Білок або пептид, що представляє інтерес, переважно включає фермент, який деградує гербіцид, фермент, який деградує пестицид, або їхню комбінацію.
І00877| Таким чином, можна досягати подвійної деградуючої пестицид або гербіцид активності, оскільки як штами представників сімейства Васійи5 сегеив, так і деградуючі гербіцид або деградуючі пестицид ферменти в злитому білку демонструють активність деградації пестициду і/або гербіциду. Гербіциди і/або пестициди, які деградуються штамом сімейства
Васі сегени5, що здатний деградувати гербіцид або пестицид, можуть бути такими ж або можуть відрізнятися від гербіцидів і/або пестицидів, які деградуються ферментом, який деградує бо гербіцид, або ферментом, який деградує пестицид. Таким чином, коли навколишнє середовище забруднене одним типом гербіциду або пестициду, можна досягати подвійної деградуючої дії проти цього одного гербіциду або пестициду. Альтернативно, коли навколишнє середовище забруднене більше ніж одним типом гербіциду або пестициду, можна досягати подвійної деградуючої дії проти двох або більше різних гербіцидів або пестицидів.
І00878| У способах зменшення кількості домішок, які залучають застосування одного зі штамів представників сімейства Васійи5 сегецй5, описаних у даному описі, які здатні деградувати гербіцид або пестицид, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть містити будь-які з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію або фрагментів білків екзоспорію, описаних у даному описі. Зокрема, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть включати будь-яку з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію або фрагментів білків екзоспорію, описаних вище в абзацах
І007821-(008011.
ХХІМ. Руйнування емульсій або гелів у рідині гідророзриву пласту
І00879| Передбачається спосіб обробки рідини гідророзриву пласту для руйнування емульсії або гелю в рідині. Спосіб включає додавання спор рекомбінантного представника сімейства
Васій5 сегеи5 у рідину гідророзриву пласту. Рекомбінантний представник сімейства ВасйШиб сегени5 експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію, або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій спор рекомбінантного представника сімейства Васійни5 сегеи5. Такий злитий білок описаний вище, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає фермент, прийнятний для руйнування емульсії або гелю. 00880) Рекомбінантний представник сімейства Васіййи5 сегеи5 може включати будь-який рекомбінантний представник сімейства Васійц5 сегеи5, описаний у даному описі, що експресує злитий білок.
І00881| Передбачається інший спосіб обробки рідини гідророзриву пласту для руйнування емульсії або гелю в рідині. Спосіб включає додавання фрагментів екзоспорію в рідину гідророзриву пласту. Фрагменти екзоспорію походять з рекомбінантного представника сімейства Васіїйн5 сегеи5, описаного в розділі ІМ даного опису вище, і містять злитий білок.
Злитий білок містить фермент, прийнятний для руйнування емульсії або гелю.
Зо 00882) Фермент вибирають, виходячи з цільової емульсії або гелю, що підлягають обробці, і рН рідини гідророзриву пласту. Ферменти включають, але не обмежуються ними, геміцелюлазу, амілазу, пектиназу, гідроліазу вуглеводів, целюлазу, агаразу, полігалактуроназу, ендоглюканазу або їхню комбінацію.
І00883| Емульсія або гель містить полімер або інший компонент, який фермент може розщепити. Емульсія або гель може містити полімер, аравійську камедь, агар, ксантанову смолу, целюлозу, карбоксиметилцелюлозу, карбоксиметилгідроксиетилцелюлозу, гідроксиетилметилцелюлозу, гуар, похідне гуара або їхню комбінацію.
І00884| Коли білок або пептид, який представляє інтерес, являє собою фермент для руйнування емульсії або гелю, для експресії злитого білюьа можна використовувати будь-який представник сімейства Васійи5 сегеи5. Переважними є Васійи5 Іигіпдіепбізє або Васійи5 тусоідев.
І00885| Спори або фрагменти екзоспорію можна інжектувати у свердловину, яка знаходиться в контакті з підземним утримуючим вуглеводні шаром, таким як піщаний продуктивний шар або карбонатний продуктивний шар. (00886) Необхідна концентрація спор або фрагментів екзоспорію основана на факторах, що включають розмір свердловини, що підлягає обробці, тип емульсії або гелю, кількість активного ферменту на поверхні спор або фрагментів екзоспорію, і присутність і концентрацію ад'ювантів, що доставляються ферментами. (00887| Ферменти можуть розщеплювати полімери або інші компоненти в емульсії або гелі або можуть розчиняти такі компоненти, так що рідина гідророзриву пласту може викачуватися зі свердловини. (00888) У способах обробки рідини гідророзриву пласту для руйнування емульсії або гелю в рідині можна використовувати будь-які з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію або фрагментів білків екзоспорію, описаних вище. Зокрема, націлювальна послідовність, білок екзоспорію, або фрагмент білка екзоспорію можуть включати будь-яку з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію або фрагментів білків екзоспорію, описаних вище в абзацах
І007591-(007781І. 00889) Злитий білок можна експресувати під контролем промотору споруляції, нативного для націлювальної послідовності білка екзоспорію або фрагмента білка екзоспорію в злитому 60 білку або його частині, або під контролем промотору споруляції з високою експресією.
Промотор може являти собою будь-який з промоторів, описаних вище в розділі ПІ.
ХХМ. Переробка сировини (00890) Сировину одержують з рослин, які збирають для їхньої біомаси, і обробляють у корм (осушення, силосування, екструзія, пелетування і т.д.). Рослинну біомасу, яка складає сировину, часто важко розщепити унаслідок волокнистої природи матеріалу. Присутність ферментів може значно полегшити деградацію цього волокнистого матеріалу, що приводить до більш піддатливого розщеплення і легше перероблюваного матеріалу. Традиційно ферменти додають після переробки сировини і при доставці в організм, який вживає сировину. Ферменти, що доставляються в сировину, можуть поліпшити здоров'я і набір маси цільових тварин, а також
Знизити вплив на навколишнє середовище продуктів життєдіяльності тварин, яких годують таким доповненим ферментами кормом.
ІЇ00891| Ці ж системи можна використовувати для попередньої обробки сировини, призначеної для продукції біопалива, включаючи переробку в біоетанол, біодизель або інші біопалива.
І00892| Багато видів спор мають здатність персистувати на надземних поверхнях рослин, таких як листя, стебла і плоди, протягом тривалого періоду часу. З використанням технологій дисплея на спорах, як описано в даному описі, для експонування ферментів на цих спорах, у сировину доставляється активний фермент, який буде присутній, коли сировину збирають. Ці цільові ферменти також можна доставляти в сировинну рослину при посіві, або за допомогою доставки рекомбінантних спор на насіння рослин, або за допомогою доставки рекомбінантних спор в середовище для росту рослин або в область навколо рослини.
І00893| Передбачається спосіб доставки ферментів у рослину. Спосіб включає внесення в середовище для росту рослин рекомбінантного представника сімейства Васійй5 сегеи5, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійц5 сегеив5, або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, як описано в даному описі; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину насіння або рослини, рекомбінантного представника сімейства Васіїйи5 сегеи5 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васійнє5 сегеи5. Білок або пептид, що представляє інтерес, включає фермент. Фермент може бути фізично зв'язаний з екзоспорієм рекомбінантного представника сімейства Васіїйи5 сегецв5.
І00894| Передбачається інший спосіб доставки ферментів у рослину. Спосіб включає внесення в середовище для росту рослин рекомбінантної спороутворювальної бактерії або складу, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію; або нанесення на рослину, насіння рослини, область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантної спороутворювальної бактерії або складу, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію. Рекомбінантна спороутворювальна бактерія експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і білок оболонки спори, що націлює злитий білок на поверхню спори бактерії. Білок оболонки спори включає білок СоїВ, білок СоїС, білок СдеА, білок СоїВ/Н, білок Соїб, білок оболонки спори Х або білок СоїУ.
Рекомбінантна спороутворювальна бактерія включає ендофітний штам бактерій. Білок або пептид, що представляє інтерес, включає фермент, і фермент фізично зв'язаний з оболонкою спори рекомбінантної спороутворювальної бактерії.
І00895| Передбачається інший спосіб доставки ферментів у рослину. Спосіб включає внесення фрагментів екзоспорію або складу, що містить фрагменти екзоспорію, у середовище для росту рослин; або нанесення фрагментів екзоспорію або складу, що містить фрагменти екзоспорію, на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини.
Фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегецв, описаного в розділі ІМ даного опису вище, і містять злитий білок. Білок або пептид, що представляє інтерес, включає фермент.
ІЇ00896| Коли спосіб доставки ферментів у рослину включає застосування фрагментів екзоспорію, спосіб, крім того, може включати обробку рослини посилюючою проникнення речовиною, поверхнево-активною речовиною, детергентом, маслом або їх комбінацією.
І00897| Оптимальні штами бактерій для цих способів включають, але не обмежуються ними, представники сімейства Васійи5 сегеи5, включаючи Васійи5 сегеи5, Васійи5 тусоїде5, Васійни5
ІШигіпдіеп5віз і ВасйШи5 рзейдотусоїде5, а також інші спороутворювальні Васійи5, включаючи
Васійи5 тедаїегішт, Васійн5 Яйптив5, Васійи5 Яехи5, представники скарбу Васіїйи5 5и,ибБіййв, ВасішШив ритіїй5, ВасшШив Пспепітоптів і ВасіШйив 5ирійів. бо (00898) Нанесення можна проводити безпосередньо на рослинний матеріал, необов'язково разом з ад'ювантами, такими як неїонні або інші поверхнево-активні речовини. Рекомбінантний представник сімейства Васійй5 сегени5 можна наносити на надземну частину рослини перед збиранням, наприклад, шляхом розпилення на надземну частину рослини.
І00899| Нанесення на насіння рослини звичайно виконують у формі рідини для занурення насіння, завису або покриття для насіння на полімерній основі. Необов'язково, нанесення можна виконувати разом з інокулятами, фунгіцидами, інсектицидами або нематоцидами, які наносяться на насіння.
ІЇ00900| Внесення в середовище для росту рослин або нанесення на область навколо рослини можна виконувати перед посівом, при посіві або після посіву насіння, необов'язково разом з добривами, фунгіцидами, гербіцидами або інсектицидами.
Ї00901| Фермент є прийнятним для деградації біомаси, розщеплення целюлозного матеріалу, полегшення перетравлення в травній системі цільової тварини, яку можна годувати рослиною, або для продукції біопалива (наприклад, для продукції біоетанолу або біодизеля).
ІЇ00902| Фермент включає, але не обмежується ними, неспецифічну протеазу, металопротеїназу, целюлазу, ксиланазу, фосфатазу, ендоглюканазу, екзоглюканазу, |В- глюкозидазу, амілазу, пектиназу, ксилозидазу, ліпазу, фосфоліпазу або їхню комбінацію.
І00903| Вибір ферменту може залежати від сировини і передбачуваного використання сировини. Переважно ферменти являють собою деградуючі ферменти.
І00904| Ферменти сімейства протеаз, які представляють інтерес, включають неспецифічні протеази, такі як серинові протеази, гістидинові протеази, аспартатні протеази, а також металопротеази. 00905) Ферменти сімейства целюлаз, які представляють інтерес, включають екзоглюканази, ендоглюканази, В-1,3-глюкозидази, целюлази, геміцелюлази, а-глюкозидази.
І00906)| Ферменти сімейства ксиланаз, які представляють інтерес, включають ксилозидази, ендоксиланази, екзоксиланази, пектинази, метилпектинази, полігалактуроназу.
І00907| Ферменти-фосфатази, які представляють інтерес, включають кислі фосфатази, лужні фосфатази, поліфосфатази, фітази, монофосфатази і дифосфатази. (00908) Багато з цих ферментів також корисні для росту рослин. (00909) Ці ферменти можуть не тільки "попередньо розщеплювати" частину сировини для збільшення усмоктування ключових поживних речовин цільовою твариною, яку годують сировиною, але також сприяють травленню в травній системі цільової тварини. 00910) "Попереднє розщеплення" целюлозного матеріалу при зборі може вивільняти вільну целюлозу в ході переробки для продукції біоетанолу і біопалива, а також попередньої обробки масел, призначених для продукції біопалива. 00911) Бактерія може являти собою ендофітну бактерію. Вибір ендофітних рекомбінантних бактерій дозволяє бактеріям входити в рослину, а також колонізувати і рости усередині тканин рослини. Це приведе до встановлення зростаючої кількості рекомбінантних спороутворювальних організмів усередині рослини в міру того, як вона росте після нанесення відносно невеликої кількості рекомбінантних спор на насіння або застосування з насіннями при посадці. При зборі матеріалу рослинної біомаси, бактерії будуть зазнавати споруляцію, створюючи нові ферменти в рослинах, які будуть активними на сировині, коли її збирають, транспортують і використовують, наприклад, або як корм для тварин, або для продукції біопалива. Це може значно знизити виробничу вартість деградуючих ферментів у порівнянні з існуючими технологіями. Це є унікальним способом доставки розщеплювальних ферментів у біомасу перед промисловою переробкою. 00912) Хоча оптимальні бактеріальні штами є такими, як описано вище, вибір ендофітних штамів буде збільшувати ефективність. Переважно, ендофітні бактерії включають представник сімейства Васіїи5 сегеи5 ЕЕ349, представник сімейства Васіїйи5 сегеив5 439, Васійи5 (Пигіпдіепвів
ЕЕ417, Васйи5 сегеи5 ЕЕ444, Васійи5 тедаїенпйит ЕЕЗ85, Васійи5 5р. ЕЕЗ387, ВасіПйши5 сігсшапв
ЕЕз388, Васійи5 зибійб5 ЕЕ405, І узіпібасПйи5 тТи5Погтів ЕЕ442, І узіпірасійи5 5рпаєгісих ЕЕ443 або їхню комбінацію.
ІЇ00913| Рослина може являти собою культуру, вибрану з кукурудзи, люцерни, пшениці, пасовищної культури, фуражної культури, сої, проса, хіками, сорго цукрового, цукрової тростини або їхньої комбінації, і іншої сировини біопалива і біоетанолу.
І00914| Для способів доставки ферментів у рослину можна використовувати будь-які з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію або фрагментів білків екзоспорію, описаних у даному описі.
ХХМІ. Застосування спор для зміни властивостей рослин-мішеней
ІЇ00915| Рекомбінантні представники сімейства Васійн5 сегеи5 і рекомбінантні 60 спороутворювальні бактерії, як описано в даному описі, дозволяють взаємодію експонованих на поверхні сигнальних молекул, що впливають на біохімічні каскади, і ряду інших білків, що корисні для здоров'я рослин. Присутність експонованих на спорах білків або пептидів може приводити до зміни метаболізму рослини-мішені, що приводить до зміни складу рослини, її плодів або інших властивостей або характеристик. (00916) Експресію злитих білків можна прямо використовувати для зміни складу рослини- мішені. Вибір різних ферментів приводить до різних ефектів на рослину-мішень.
І00917| Передбачається спосіб зміни властивості рослини. Спосіб включає внесення в середовище для росту рослин рекомбінантного представника сімейства Васійн5 сегеи5, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васіїйив сегеийв, або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, як описано в даному описі; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину насіння або рослини, рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васійнє5 сегеи5. Білок або пептид, що представляє інтерес, включає сигнальну молекулу рослини або фермент, що впливає на склад рослини, і білок або пептид, що представляє інтерес, може бути фізично зв'язаний з екзоспорієм рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегецв5. (00918) Передбачається інший спосіб зміни властивостей рослини. Спосіб включає внесення в середовище для росту рослин рекомбінантної спороутворювальної бактерії або складу, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантної спороутворювальної бактерії або складу, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію. Рекомбінантна спороутворювальна бактерія експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і білок оболонки спори, що націлює злитий білок на поверхню спори бактерії. Білок оболонки спори включає білок СоїВ, білок СоїС, білок СдеА, білок СоїВ/Н, білок Соїб, білок оболонки спори Х або білок СоїУ.
Рекомбінантна спороутворювальна бактерія включає ендофітний штам бактерій. Білок або пептид, що представляє інтерес, включає сигнальну молекулу рослин або фермент, що впливає
Ко) на склад рослин, і білок або пептид, що представляє інтерес, може бути фізично зв'язаний з оболонкою спори рекомбінантної спороутворювальної бактерії. 00919) Передбачається інший спосіб зміни властивостей рослини. Спосіб включає внесення фрагментів екзоспорію або складу, що містить фрагменти екзоспорію, у середовище для росту рослин; або нанесення фрагментів екзоспорію або складу, що містить фрагменти екзоспорію, на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини. Фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеци5, описаного в розділі ІМ даного опису вище, і містять злитий білок. Білок або пептид, що представляє інтерес, включає сигнальну молекулу рослин або фермент, що впливає на склад рослини.
Ї00920| Коли спосіб зміни властивості рослини включає застосування фрагментів екзоспорію, спосіб, крім того, може включати обробку рослини посилюючою проникнення речовиною, поверхнево-активною речовиною, детергентом, маслом або їх комбінацією.
І00921| Бактерія-мішень переважно виживає або активно росте у навколишному середовищі і на коренях рослини-мішені. Оптимальні штами бактерій для цих способів включають, але не обмежуються ними, представник сімейства Васійн5 сегеи5 ЕЕЗ349, представник сімейства
Васіи5 сегеиб5 439, Васійи5 Іигіпдіепві ЕЕ417, Васійи5 сегеи5 ЕЕ444, Васіїйн5 тедаїенит
ЕЕЗ85, Васійи5 5р. ЕЕЗ87, Васійшн5 сієсшап5 ЕЕЗ88, Васіїйив5 зибБбій ЕЕ405, І узіпібасінив5 Тивіогтів
ЕЕ442 або І узіпірасійи5 5рпаєгісиз ЕЕ443. (00922) Сигнальні молекули рослин або ферменти також можна доставляти в рослину при посіві або за допомогою доставки рекомбінантних спор на насіння рослин, або за допомогою доставки рекомбінантних спор в середовище для росту рослин або в область, яка оточує рослину. (00923) Нанесення можна проводити безпосередньо на рослинний матеріал, необов'язково разом з ад'ювантами, такими як неїонні або інші поверхнево-активні речовини. Рекомбінантний представник сімейства Васійш5 сегеи5 або рекомбінантну спороутворювальну бактерію, або фрагменти екзоспорію можна наносити на надземну частину рослини перед збором, наприклад, шляхом розпилення на надземну частину рослини. (00924) Нанесення на насіння рослини звичайно виконують у формі рідини для занурення насіння, зависі або покриття для насіння на полімерній основі. Необов'язково, нанесення можна виконувати разом з інокулятами, фунгіцидами, інсектицидами або нематоцидами, які бо наносяться на насіння.
І00925| Внесення в середовище для росту рослин або нанесення на область навколо рослини можна виконувати перед посівом, при посіві або після посіву насіння, необов'язково разом з добривами, фунгіцидами, гербіцидами або інсектицидами.
Ї00926| Фермент включає, але не обмежується ними, ендоглюканази, протеази, фосфоліпази, амінокарбокси-1-пропандезаміназу, дезамінази аміноциклопропан-1-карбонових кислот, ліпази або їхню комбінацію.
І00927| Сигнальні молекули рослин включають, але не обмежуються ними, 1922 і пептиди флагеліну, криптогеин, гарпіни, гарпін-подібні білки, ферменти, що деградують або модифікують джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, або їхню комбінацію.
ІЇ00928| Ферменти або сигнальні молекули рослин можуть викликати бажані метаболічні зміни в рослині-хазяїні, включаючи збільшення захоплення макронутрієнтів і мікронутрієнтів або зміну складу тканин рослин шляхом збільшення кореневих систем, збільшення вмісту білків у рослинах, таких як зернові, злакові і плодові рослини, шляхом модифікації метаболізму і збільшення захоплення азоту, і модифікації вмісту олії в ріпаку, канолі, сої і соняшнику, вмісту цукру (сахарози) у винограді, цукровій тростині, просі, сорго цукровому і іншій сировині біопалива, вмісту медичних сполук і вмісту канабіноїдів у маріхуані. Ці зміни не тільки підвищують цінність рослин, що представляють інтерес, але також збільшують прийнятність цих рослин у різних галузях промисловості, таких як одержання біопалива, продукція цукру і продукція сировини.
ІЇ00929| Для способів зміни властивості рослини можна використовувати будь-які з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію або фрагментів білків екзоспорію, описаних вище.
ХХМІ. Дезінфекція
І00930| Передбачається спосіб дезінфекції поверхні. Спосіб включає вплив на поверхню рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5, що експресує злитий білок, як описано вище в абзацах 1001701-(001731 ії (00177| розділу І. де білок або пептид, який представляє інтерес, включає антибактеріальний білок або пептид.
І00931| Передбачається інший спосіб дезінфекції поверхні. Спосіб включає вплив на поверхню фрагментів екзоспорію. Фрагменти екзоспорію походять з рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5, описаного в розділі ІМ даного опису вище, і містять злитий білок. Злитий білок містить антибактеріальний білок або пептид.
І00932| Передбачається інший спосіб дезінфекції поверхні. Спосіб включає вплив на поверхню рекомбінантного представника сімейства Васі сегеи5. Рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 являє собою рекомбінантний представник сімейства
ВасШив сегеи5, як описано вище розділі ІЇ.
ІЇ00933| У способах дезінфекції поверхні, що включають вплив на поверхню фрагментів екзоспорію або рекомбінантного представника сімейства Васійн5 сегеи5, як описано вище в розділі ІЇ, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть являти собою будь-яку з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію або фрагментів білків екзоспорію, описаних у даному описі. Зокрема, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть включати будь-яку з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію або фрагментів білків екзоспорію, описаних вище в абзацах
І007591-(007781І.
І00934| Злитий білок можна експресувати під контролем промотору споруляції, нативного для націлювальної послідовності білка екзоспорію або фрагмента білка екзоспорію злитого білка або його частини і/або під контролем промотору споруляції з високою експресією.
Промотор може являти собою будь-який з промоторів, описаних вище в розділі ПІ.
І00935| Антибактеріальний білок або пептид мінімізує або попереджує формування на поверхні або зв'язування з поверхнею вірусних агентів, бактерій, амеб, паразитів або цвілі. (00936) Антибактеріальний білок або пептид включає, але не обмежується ними, протеази, нуклеази, протимікробні пептиди, ГГ У5М, І сіпВ, лізостафін, альбумін, дефензини, бактеріоцини, ліпопептиди, пептиди уродженої імунної системи, лізоцим, літиказу або їхню комбінацію.
Ї00937| Спори рекомбінантного представника сімейства Васіййє сегенє можна використовувати разом з іншими протимікробними засобами, включаючи дезінфікуючі засоби, очищувальні засоби, антибіотики, протигрибкові засоби і противірусні засоби. (00938) Хоча для експресії злитих білків можна використовувати будь-які з представників сімейства Васіїйи5 сегеи5, переважними є або Васійи5 (пигіпдіепзі5, або Васіїйн5 тусоїдев. 00939) Для цих способів можна використовувати будь-які з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію або фрагментів білків екзоспорію, описаних у даному описі. (510) 00940)
ХХМІ. Інші застосування 00941) Злиті білки, де білок або пептид, який представляє інтерес, являє собою фермент, або рекомбінантний представник Васійц5 сегеий5, де білок або пептид, який представляє інтерес, являє собою фермент, можна використовувати для обробки або дегумування мастила, олії або жиру; переробки шкур у шкіру; одержання біопалива, біодизеля або біоетанолу; переробки або конверсії цукрів; обробки крохмалю; переробки паперу або льону; обробки побічних продуктів тварин або грибів або виділення амінокислот; спрямованого розщеплення технічних відходів; добавок у їжу і корми; дієтичних добавок; кормів для тварин; промислового очищення; переробки зерна; косметичного виробництва; дезодорації; переробки продуктів харчування або напоїв; оптимізації пивоварства або добавок для пивоварства; детергентних добавок або переробки тканин або пряжі.
І00942| За допомогою експонування ферменту на зовнішній стороні спори або на фрагментах екзоспорію, фермент може бути стабілізований, іммобілізований або піддадний повторному застосуванню.
І00943| Промислові процеси, як правило, залучають жорсткі умови, що включають високі температури, присутність розчинників і великі кількості органічного матеріалу. Ці умови перешкоджають традиційним ферментам. Експресія ферменту-мішені на поверхні спор або фрагментів екзоспорію забезпечує стійкість до високих температур і жорстких умов і дозволяє повторне виділення і повторне використання ферментів. (00944| Ключові ферменти, що представляють інтерес, для таких застосувань включають: І- лактамази, протеази, ліпази, фосфоліпази, целюлази, ендоглюканази, екзоглюканази, пектинази, лігнінази, амілази (наприклад, с-амілази, ДВ-амілази або глюкоамілази), полігалактуронази, глюкозидази, галактозидази, гідролази вуглеводів, гідролази клітинної стінки, нуклеази, геміцелюлази, ксиланази, манази, лакази, лактази, естерази (наприклад, пектинметилестерази), фітази, фосфатази, інвертази, глюкозаоксидази, каталази, літикази, ацетолактатдекарбоксилази й уреази. (00945) Переважні ферменти для обробки або дегумування мастила, олії або жиру, або для косметичного виробництва включають ліпази, фосфоліпази, естерази і протеази.
І00946| Переважні ферменти для переробки шкур у шкіру включають ліпази, протеази, пептидази, колагенази і фосфоліпази. (00947| Переважні ферменти одержання біопалива, біодизеля або біоетанолу можуть включати, але не обмежуються ними, ліпази і естерази. (00948) Переважні ферменти для переробки або конверсії цукрів, для переробки зерна і для переробки текстилю і пряжі включають гідролази вуглеводів, амілази, манази, глюкоамілази, інвертази, целюлази, геміцелюлази, пектинази, пектинметилестерази, ксиланази, ендоглюканази, екзоглюканази, глюкозидази, галактозидази, лакази, лактази, каталази і глюкозаоксидази. (00949) Переважні ферменти для обробки крохмалю включають амілази і глюкоамілази.
І00950| Переважні ферменти для переробки паперу і льону включають целюлази, геміцелюлази, ксиланази, ендоглюканази, лакази, лігнінази, екзоглюканази, фітази, каталази і глюкозидази.
І00951| Переважні ферменти для обробки побічних продуктів тварин або грибів або виділення амінокислот включають протеази, пептидази, ліпази, літикази, гідролази клітинної стінки, фосфоліпази, ендоглюканази, целюлази, глюканази і гідролази вуглеводів.
І00952| Переважні ферменти для спрямованого розщеплення технічних відходів, промислового очищення, детергентних добавок і дезодорації включають ліпази, фосфоліпази, протеази, пептидази, амілази, літикази, гідролази клітинної стінки, глюкоамілази, целюлази, геміцелюлази, ксиланази, естерази, глюкозидази, галактозидази, лакази, лактази, уреази, фосфатази і гідролази вуглеводів. 00953) Переважні ферменти добавок у їжу і корми, дієтичних добавок, кормів для тварин, добавок для пивоварства, добавок у напої або переробки вина включають манази, лакази, літикази, протеази, пептидази, гідролази вуглеводів, пектинази, пектинметилестерази, естерази, ліпази, целюлази, геміцелюлази, ксиланази, фітази, фосфатази, інвертази, глюкозидази, галактозидази, лактази, каталази, глюканази, ендоглюканази, ацетолактатдекарбоксилазу і глюкозаоксидази. (00954) Хоча для експресії злитих білків для цих застосувань можна використовувати будь- який з представників сімейства Васійи5 сегеи5, переважними є або Васійи5 Вигіпдіепві5, або
Васійи5 тусоїдев.
І00955| Передбачається застосування злитих білків, що містять фермент як білок або 60 пептид, що представляє інтерес, або рекомбінантний представник сімейства Васійни5 сегецв,
який експресує злитий білок, який містить фермент як білок або пептид, що представляє інтерес. Злитий білок може являти собою будь-який зі злитих білків, описаних вище в абзацах
І001691-(001731, 1001751 і (001771) розділу І. Застосування може являти собою застосування для обробки або дегумування мастила, олії або жиру; переробки шкур у шкіру; одержання біопалива, біодизеля або біоетанолу; переробки або конверсії цукрів; обробки крохмалю; переробки паперу або льону; обробки побічних продуктів тварин або грибів або виділення амінокислот; спрямованого розщеплення технічних відходів; добавок у їжу і корми; дієтичних добавок; кормів для тварин; промислового очищення; переробки зерна; косметичного виробництва; дезодорації; переробки продуктів харчування або напоїв; оптимізації пивоварства або добавок для пивоварства; детергентних добавок або переробки тканин або пряжі.
Ї00956| Також передбачається застосування фрагментів екзоспорію. Застосування може являти собою застосування для обробки або дегумування мастила, олії або жиру; переробки шкур у шкіру; одержання біопалива, біодизеля або біоетанолу; переробки або конверсії цукрів; обробки крохмалю; переробки паперу або льону; обробки побічних продуктів тварин або грибів або виділення амінокислот; спрямованого розщеплення технічних відходів; добавок у їжу і корми; дієтичних добавок; кормів для тварин; промислового очищення; переробки зерна; косметичного виробництва; дезодорації; переробки продуктів харчування або напоїв; оптимізації пивоварства або добавок для пивоварства; детергентних добавок або переробки тканин або пряжі. Фрагменти екзоспорію походять з рекомбінантного представника сімейства
Васійй5 сегеи5, описаного в розділі ЇМ даного опису вище, і містять злитий білок. Злитий білок містить фермент.
І00957| Крім того, передбачається застосування рекомбінантного представника сімейства
Васійи5 сегеи5. Рекомбінантний представник сімейства Васійй5 сегени5 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійнє сегеи5, як описано вище в розділі ІІ.
Застосування може являти собою застосування для обробки або дегумування мастила, олії або жиру; переробки шкур у шкіру; одержання біопалива, біодизеля або біоетанолу; переробки або конверсії цукрів; обробки крохмалю; переробки паперу або льону; обробки побічних продуктів тварин або грибів або виділення амінокислот; спрямованого розщеплення технічних відходів; добавок у їжу і корми; дієтичних добавок; кормів для тварин; промислового очищення;
Зо переробки зерна; косметичного виробництва; дезодорації; переробки продуктів харчування або напоїв; оптимізації пивоварства або добавок для пивоварства; детергентних добавок або переробки тканин або пряжі.
І(00958| У застосуваннях фрагментів екзоспорію або рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеи5, як описано вище в розділі ІЇ, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть являти собою будь-які з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію або фрагментів білків екзоспорію, описаних у даному описі.
Зокрема, націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію можуть включати будь-які з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію або фрагментів білків екзоспорію, описаних вище в абзацах (007591-(007781.
ІЇ00959| Злитий білок можна експресувати під контролем промотору споруляції, нативного для націлювальної послідовності білка екзоспорію або фрагмента білка екзоспорію злитого або білка його частини, і/або під контролем промотору споруляції з високою експресією. Промотор може являти собою будь-який з промоторів, описаних вище в розділі ПП.
ІЇ00960| Після детального опису винаходу буде очевидно, що можливі модифікації і варіювання без відхилення від обсягу винаходу, визначеного в прикладеній формулі винаходу.
ПРИКЛАДИ
І00961| Наступні необмежувальні приклади надані для подальшої ілюстрації даного винаходу.
Приклад 1. Застосування рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5, що експонує ліпазу або ендоглюканазу, для стимуляції росту рослин сої
І00962| Гени ліпази і ендоглюканази Васійй5 зибБійб ампліфікували за допомогою полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) з використанням наступних праймерів, показаних у таблиці 16:
Таблиця 16 01771111 лпаза/////////0 | ендоглюканаза.7/////ЗЗ
00963) Для створення злитих конструкцій гени піддавали злиттю з нативним промотором рСіА із ДНК Васійиз Іпигіпдіепві5, що кодує перші 35 амінокислот ВсіА (амінокислоти 1-35 5ЕО І
МО: 1), з використанням способу сплайсингу за допомогою подовження, що перекривається (ЗОЕ). Правильні амплікони клонували в човниковий вектор Е. соїї/Васійй5 рНРІ3, і правильні клони піддавали скринінгу за допомогою секвенування ДНК. Правильні клони вводили за допомогою електропорації в Васійи5 (Пигіпдіепві5 (Стгу-, плазміда-) і піддавали скринінгу відносно резистентності до хлорамфеніколу. Правильні трансформанти вирощували в бульйоні із серцево-мозковою витяжкою протягом ночі при 302С, висівали на чашки з поживним агаром, і інкубували при 302С протягом З діб. Спори, які експресують злиту конструкцію (спори ВЕМО) збирали з чашок за допомогою промивання у фосфатно-сольовому буфері (РВ5) і очищали центрифугуванням і додатковими промиваннями в РВ5. Нетрансформовані контрольні спори
ВасшШиз «Пигіпдіепві5 (ВА) одержували ідентичним чином.
І00964| Сою (лінія ЧаКе 011-28-04) висівали на глибину 2,54 см у горщики глибиною 10 см, заповнені стандартним глинистим грунтом верхнього шару. Спори розбавляли до концентрації 1х10'/мл у 50 мл води і наносили на кожну насінину при посіві. Рослини вирощували при ідеальному освітленні з використанням ламп Т5, 54 ватт, і їх піддавали впливу світла протягом 11 годин на добу в умовах контрольованої температури 15,5-25,52С. Рослини поливали до насичення кожні три доби протягом випробування протягом двох тижнів. Наприкінці двох тижнів вимірювали висоту кожної рослини і результати вимірювань нормалізовували до результатів для контрольних спор Васи5 (Пигіпдіепві5. Виконували два незалежні випробування. 00965) Результати представлені в таблиці 17 разом зі стандартною помилкою середнього значення. В обох випробуваннях рослини сої, вирощені в присутності спор ВЕМО, які експонують або ліпазу, або ендоглюканазу, виростали значно вищими, ніж рослини сої, оброблені контрольними спорами ВІ. (статистичний аналіз виконували з використанням 1- критерію).
Таблиця 17 11111111, Рослинисої// | 7/7 / 01 бана | Сяндявковти Пеня м контролем 11111111. |ЛюазаВЕМО | 1793 | 127895 | 0995
Ендоцелюлаза, о
ПИ сот НИК ТИНИ НЕ З ВСЕ новини 11111111 |ЛюяазаВЕМО | 7 195 | лаядов | 0428
Ендоцелюлаза, о вм |в | оз
Приклад 2. Застосування рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеци5, який експонує ендоглюканазу, для стимуляції росту рослин кукурудзи.
Зо І00966| Спори ВЕМО, які експресують ендоглюканазу, одержували ідентично тому, як описано в прикладі 1. Польову кукурудзу висівали на глибину 3,8 см у горщики глибиною 10 см, заповнені стандартним глинистим грунтом верхнього шару. Контрольні спори і спори ВЕМО, які експресують ендоглюканазу, розбавляли до концентрації 1х107/мл у 50 мл води і наносили на кожну рослину при посіві. Також включали контроль, що містив тільки воду. Рослини вирощували при ідеальному освітленні з використанням ламп Т5, 54 ватт, і їх піддавали впливу світла протягом 11 годин на добу в умовах контрольованої температури 15,5-25,520. Рослини поливали до насичення кожні три доби протягом випробування протягом одного тижня.
Наприкінці одного тижня вимірювали ріст кожної рослини, і результати вимірювань нормалізовували до результатів для контрольних спор ВасіШиз (пигіпдіепвів.
І00967| Результати представлені в таблиці 18 разом зі стандартною помилкою середнього значення. Рослини кукурудзи, що виросли в присутності спор ВЕМО, які експонують ендоглюканазу, виростали значно вищими, ніж як рослини сої, оброблені контрольними спорами В.ї., так і контрольні рослини, оброблені тільки водою (статистичний аналіз виконували з використанням і-критерію).
Таблиця 18 11111111 ВБисотаасм | Порівняння.// | 5ЕМ
Приклад 3. Застосування рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеци5, який експонує ендоглюканазу або протеазу, для стимуляції росту рослин пшениці.
І00968| Спори ВЕМО, які експресують ендоглюканазу, одержували ідентично тому, як описано в прикладі 1. Спори ВЕМО, які експресують протеазу РігВ Е. сої, одержували з використанням способів, подібних до способів, описаних вище в прикладі 1, і наступних праймерів: ддаїссаїдсіассаааадсс (прямий, 5БО ІЮО МО: 41) їі додафссНадіссдсаддсдіадс (зворотний, 5ЕО ІЮ МО: 42).
І00969| Зимову тверду пшеницю висівали на глибину 2,54 см у горщики глибиною 10 см, заповнені стандартним глинистим грунтом верхнього шару. Контрольні спори і спори ВЕМО, які експресують ендоглюканазу або протеазу, розбавляли до концентрації 1х107/мл у 50 мл води і наносили на кожну рослину при посіві. Також включали контроль, що містив тільки воду.
Рослини вирощували при ідеальному освітленні з використанням ламп Т5, 54 ватт, і їх піддавали впливу світла протягом 11 годин на добу в умовах контрольованої температури 15,5- 25,5"С. Рослини поливали до насичення кожні три доби протягом випробування протягом одного тижня. Наприкінці одного тижня вимірювали ріст кожної рослини, і результати вимірювання нормалізовували до результатів для контрольних рослин, оброблених тільки водою. 00970) Результати представлені в таблиці 19 разом зі стандартною помилкою середнього значення. Рослини пшениці, що виросли в присутності спор ВЕМО, які експонують ендоглюканазу або протеазу, виростали значно вищими, ніж рослини сої, оброблені контрольними спорами Ві. або контрольні рослини, оброблені тільки водою (статистичний аналіз виконували з використанням і-критерію).
Таблиця 19 11111110 Висотаасм | Порівняння.їд/ | ЗЕМ
Приклад 4. Застосування рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегецв5, які експонують ендоглюканазу, для стимуляції росту рослин пажитниці
І00971| Спори ВЕМО, які експресують ендоглюканазу, одержували ідентично тому, як описано в прикладі 1. Пажитницю багаторічну висівали на глибину 6,4 мм у горщики глибиною 10 см, заповнені стандартним глинистим грунтом верхнього шару. Контрольні спори і спори
Зо ВЕМО, які експресують ендоглюканазу, розбавляли до концентрації 1х107/мл у 50 мл води і наносили на кожну рослину при посіві. Також включали контроль, що містив тільки воду.
Рослини вирощували при ідеальному освітленні з використанням ламп Т5, 54 ватт, і їх піддавали впливу світла протягом 11 годин на добу в умовах контрольованої температури 15,5- 25,5"С. Рослини поливали до насичення кожні три доби протягом випробування протягом двох тижнів. Наприкінці двох тижнів вимірювали ріст кожної рослини, і результати вимірювання нормалізовували до результатів для контрольних рослин, оброблених тільки водою.
І00972| Результати представлені в таблиці 20 разом зі стандартною помилкою середнього значення. Рослини пажитниці, що виросли в присутності спор ВЕМО, які експонують ендоцелюлазу, виростали значно вищими, ніж рослини пажитниці, оброблені контрольними спорами В.І. або контрольні рослини, оброблені тільки водою (статистичний аналіз виконували з використанням і-критерію).
Таблиця 20 11111110 Висотаасм | Порівняння.// | 5ЕМ
Приклад 5. Застосування рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегецв5, які експонують ферменти, залучені в синтез або активацію гормонів рослин, для стимуляції росту рослин
І00973| Систему ВЕМО також можна використовувати для експонування ферментів, залучених у синтез гормонів рослин. Наприклад, гормон рослин індол-3-оцтова кислота є потужним стимулятором росту рослин. Індол-З-оцтова кислота синтезується іп мімо із триптофану ферментами триптофанмонооксигеназою і індол-3З-ацетамідгідролазою. Індол-3- оцтова кислота й інші ауксинові гормони також можуть синтезуватися іп мімо із триптофану і/або індолу за допомогою ферментів нітрилази, триптофанамінотрансферази, індол-3- ацетальдегіддегідрогенази, індол-З-піруватдекарбоксилази, оксидази амінів, триптофандекарбоксилази й оксидаз бічних ланцюгів триптофану.
І00974| Систему ВЕМО також можна використовувати для експонування ферментів, залучених у модифікацію гормонів росту рослин у біологічно активні або неактивні форми.
Наприклад, нітрилазу можна експресувати на системі ВЕМО для каталізу конверсії індол-3- ацетонітрилу в біологічно активну індол-3-оцтову кислоту. Крім того, у середовище для росту рослин з експресованою ВЕМО нітрилазою можна додавати неактивні форми гормонів рослин, такі як індол-3-ацетонітрил, для забезпечення поступового вивільнення активного гормону в середовище для росту рослин. З використанням відповідних ферментів можна модифікувати багато інших неактивних або менш активних форм гормонів рослин.
І00975| Відповідні гормони росту рослин (ауксини) включають індол-З-піровиноградну кислоту, індол-З-ацетальдоксим, індол-З-ацетамід, індол-3-ацетонітрил, індол-3-етанол, індол-3- піруват, індол-З-масляну кислоту, фенілоцтові кислоти, 4-хлоріндол-3-оцтову кислоту і індол-3- ацетальдоксим. Ці гормони синтезуються з триптофану і/або індолу іп мімо за допомогою ферментів триптофанмонооксигенази, індол-3З-ацетамідгідролази, нітрилази, нітрилгідролази, ацетолактатсинтетази, альфа-ацетолактатдекарбоксилази, триптофанамінотрансферази, індол-3-ацетальдегіддегідрогенази, індол-З-піруватдекарбоксилази, оксидази амінів, триптофандекарбоксилази й оксидаз бічних ланцюгів триптофану.
Зо ІЇ00976| Також за допомогою ферментів, які експресуються у системі ВЕМО, можна синтезувати гормони росту сімейства цитокінів. Приклади цитокінів включають кінетин, зеатин (цис і транс), 6-бензиламінопурин, дигідроксизеатин, Мб-(О2-ізопентеніл)аденін, рибозилзеатин,
Мб-(раг-ізопентеніл)аденозин, 2-метилтіо-цис-рибозилзеатин, цис-рибозилзеатин, рибозилзеатин-5-монофосфат, Мб-метиламінопурин, Мб-диметиламінопурин, 2- дезоксизеатинрибозид, 4-гідрокси-3-метил-транс-2-бутеніламінопурин, орто-тополін, мета- тополін, бензиладенін, опрто-метилтополін і мета-метилтополін. Ці сполуки, що стимулюють ріст рослин, синтезуються іп мімо з мевалонату або аденозинмоно/ди/трифосфату за допомогою ферментів, що включають аденозинфосфатізопентенілтрансферази, фосфатази, аденозинкінази, аденінфосфорибозилтрансферазу, СУР7З5А, 5- рибонуклеотидфосфогідролазу, аденозиннуклеозидази, зеатин-цис-трансізомеразу, зеатин-О- глюкозилтрансферази, р-глюкозидази, цис-гідроксилази, цис-гідроксилази СК, М- глюкозилтрансферази СК, 2,5-рибонуклеотидфосфогідролази, аденозиннуклеозидази, пуринові нуклеозидфосфорилази і зеатинредуктази.
І00977| З використанням способів, подібних до способів, описаних вище в прикладі 1, будь- який з цих ферментів можна включати в систему ВЕМО для експонування спор ВЕМО шляхом створення злитої конструкції, що містить фермент і націлювальну послідовність, яка націлює експресований фермент у екзоспорій, коли злита конструкція експресується в представнику сімейства Васійи5 сегеи5. Потім рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, який експресує таку конструкцію, можна додавати в грунт або інше середовище для росту рослин або наносити безпосередньо на позакореневу частину рослини з використанням способів, подібних до способів, описаних вище в прикладі 1, для стимуляції росту рослин. 00978) Середовище для росту рослин можна доповнювати попередниками або субстратами ферментів. Наприклад, середовище для росту рослин можна доповнювати триптофаном, аденозинмонофосфатами, аденозиндифосфатами, аденозинтрифосфатами або індолом.
Прийнятні концентрації цих субстратів складають від 100 нМ до 100 мкМ.
Приклад 6. Застосування рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегецв5, які експонують протеази або пептидази, що розщеплюють білки, пептиди, пробілки або препробілки на біологічно активні пептиди для стимуляції росту рослин
ІЇ00979| Протеази і пептидази можна експресувати у системі ВЕМО, що може ферментативно розщеплювати доступні білюи в середовищі для росту рослин на біологічно активні пептиди, які можуть діяти на рослину прямо або опосередковано. Приклади включають ферментативне розщеплення соєвого борошна, дріжджового екстракту або іншого багатого білком матеріалу, що додається в середовище для росту рослин, на активні пептиди, які можуть прямо стимулювати ріст рослин. Біологічно активні пептиди, отримані ферментативним розщепленням білкового матеріалу, включають КЕНРР ії ККМ 16010, потужні стимулятори розвитку коренів рослин. Крім того, пробілки або препробілки можна розщеплювати на активні форми за допомогою експресованих ВЕМО протеаз і пептидаз на їх біологічно активні форми.
Неактивні пробілюи або препробілюи можна додавати в середовище для росту рослин для полегшення їхнього поступового розщеплення протеазами ВЕМО і повільного вивільнення біологічно активних білків. 00980) З використанням способів, подібних до способів, описаних вище в прикладі 1, будь- яку з цих протеаз або пептидаз можна включати в систему ВЕМО для експонування на спорах
ВЕМО шляхом створення злитої конструкції, що містить протеазу або пептидазу і націлювальну послідовність, яка націлює експресований фермент у екзоспорій, коли злита конструкція експресується в представнику сімейства Васі сегеи5. Потім рекомбінантний представник сімейства Васіїйн5 сегеи5, який експресує таку конструкцію, можна додавати в грунт або інше середовище для росту рослин, доповнене соєвим борошном, дріжджовим екстрактом або іншим багатим білком матеріалом для стимуляції росту рослин. У прийнятному випадку, соєве борошно, дріжджовий екстракт або інший багатий на білок матеріал додають у середовище для росту рослин у формі рідкої композиції, що містить від приблизно 10 мкг/л до приблизно 100 мг/л білкового борошна, дріжджового екстракту або іншого багатого білком матеріалу.
Приклад 7. Застосування спор ВЕМО, які експресують протеазу РІгВ, для стимуляції росту рослин.
Зо І00981| Спори ВЕМО, які експресують протеазу РІГВ Е. соїї, одержували, як описано вище в прикладі 3. Насіння сої висівали на глибину 2,54 см у горщики глибиною 10 см, заповнені стандартним глинистим грунтом верхнього шару. Контрольні спори і спори ВЕМО, які експресують протеазу, розбавляли до концентрації 1х107/мл у 50 мл води і наносили на кожну рослину при посіві. Також включали контроль, що містив тільки воду. Рослини вирощували при ідеальному освітленні з використанням ламп Т5, 54 ватт, і їх піддавали впливу світла протягом 13 годин на добу в умовах контрольованої температури 15,5-25,5"С. Рослини поливали до насичення кожні три доби протягом випробування протягом одного тижня. Наприкінці одного тижня вимірювали ріст кожної рослини, і результати вимірювання нормалізовували до результатів для контрольних рослин, оброблених тільки водою. 00982) Результати представлені в таблиці 21 разом зі стандартною помилкою середнього значення як відсоток від контролю, обробленого тільки водою. Рослини сої, що виросли в присутності спор ВЕМО, які експонують протеазу, виростали значно вищими, ніж рослини сої, оброблені контрольними спорами В.і., або контрольні рослини, оброблені тільки водою (статистичний аналіз виконували з використанням І-критерію). Додавання соєвого борошна до контрольних рослин, оброблених водою або В. ІПигіпдіепзі5, мало незначний ефект. Навпаки, у присутності соєвого борошна і системи ВЕМО із протеазою, рослини сої відповідали в значній мірі відносно всіх інших обробок.
Таблиця 21 оосюжеосхевючю вютсю ЛОУТХИТМС ПМ,
Обробка Соєве борошно | Висота (см) : від обробки обробки тільки водою : тільки водою
Приклад 8. Застосування рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегецв5, які експресують білки або пептиди, залучені в стимуляцію росту рослин (00983) Систему ВЕМО також можна використовувати для експонування білків або пептидів, які прямо залучені в стимуляцію росту рослин. Наприклад, у системі ВЕМО можна експресувати пептидні гормони рослин і негормональні пептиди, що стимулюють ріст рослин. Наприклад, негормональні пептиди, що прямо зв'язують і активують рецептори рослин, можна експресувати у системі ВЕМО для безпосереднього впливу на рецептори в рослині і коренях рослин-мішеней.
Такі пептидні гормони і негормональні пептиди включають фітосульфокін, саісаіма З (СІ М3З), системін, ККМ 16010, Нд-бум4б, еМмор40, білки сімейства МОЮ, 2тіСЕ, білки і пептиди сімейства 5СК/5РІ1Ї, КНРР, РОГАКІЗ і КТІ. Ці пептиди і споріднені пептиди можна експресувати у системі ВЕМО і доставляти в середовище для росту рослин або безпосередньо наносити на позакореневу частину для стимуляції росту рослин. (00984) З використанням способів, подібних до способів, описаних вище в прикладі 1, будь- який з цих білків або пептидів можна включати в систему ВЕМО для експонування на спорах
ВЕМО шляхом створення злитої конструкції, що містить фермент і націлювальну послідовність, яка націлює експресований фермент у екзоспорій, коли злита конструкція експресується в представнику сімейства Васійи5 сегеи5. Потім рекомбінантний представник сімейства Васі сегеи5, який експресує таку конструкцію, можна додавати в грунт або інше середовище для росту рослин, або наносити безпосередньо на позакореневу частину рослини з використанням способів, подібних до способів, описаних вище в прикладі 1, для стимуляції росту рослин.
Приклад 9. Застосування спор ВЕМО, які експресують РОГАКІЗ або КТІ, для стимуляції росту рослин (00985) Спори ВЕМО, які експресують пептид рослин РОГ АКІЗ і пептид сої КТІ, створювали шляхом синтезу генів, що кодують пептиди РОГАКІ5 або КІТ, зв'язані з націлювальною послідовністю, 5ЕО 1Ю МО: 96. Потім гени вводили в Васійиз ІПигіпдіепвіб5 і одержували спори, як описано в прикладі 1. Насіння сої висівали на глибину 2,54 см у горщики глибиною 10 см, заповнені стандартним глинистим грунтом верхнього шару. Спори ВЕМО, які експресують
РОГАКІЗ або КТІ, розбавляли до концентрації їх1О0б/мл у 50 мл води і наносили на кожну рослину при посадці. Також включали контроль, оброблений тільки водою. Чисті пептиди
РОГАКІЗ ії КТІ також досліджували відносно їхніх ефектів на сою в кількості 0,05 мг/горщик.
Зо Рослини вирощували при ідеальному освітленні з використанням ламп Т5, 54 ватт, і їх піддавали впливу світла протягом 13 годин на добу в умовах контрольованої температури 15,5- 25,5"С. Рослини поливали до насичення кожні три доби протягом випробування протягом двох тижнів. Наприкінці двох тижнів вимірювали висоту кожної рослини, вимірювали корені і результати вимірювання нормалізовували до результатів для контрольних рослин, оброблених тільки водою. (00986) Результати представлені в таблиці 22 разом зі стандартною помилкою середнього значення як відсоток від результату для контролю, обробленого тільки водою. Рослини сої, вирощені в присутності спор ВЕМО, які експонують РОГ АКІ5, виростали більш високими і мали невелике збільшення розвитку коренів, відносно контрольних рослин сої, оброблених водою.
Присутність вільного пептиду КТІ привело до значного уповільнення росту рослин із утратою 6- 895 їхньої висоти, але збільшенню на 1595 довжини коренів. Експресія КТІ на системі ВЕМО привела до користі для росту рослин, але без ефекту уповільнення росту рослин. Важливо, що присутність контрольних спор Васійи5 «пигіпдіепбзіє з вільним пептидом КТІ не перешкоджало ефекту КТІ відносно уповільнення росту, у той час як ВЕМО з КТІ не виявляли такого уповільнення росту.
Таблиця 22
Корені після Висота після нормалізації до нормалізації до
Обробка Пептид результатів обробки ЗЕМ результатів обробки ЗЕМ водою водою мг/горщик мг/горщик
Приклад 10. Застосування рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеив5, які експонують ферменти, що деградують або модифікують джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, для стимуляції росту рослин і/або утилізації поживних речовин
І00987| Систему ВЕМО також можна використовувати для експонування ферментів, які деградують або модифікують позитивним чином джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, що знаходиться в або грунті іншім середовищі для росту рослин. Такі ферменти деградують продукти, які є присутніми у грунті або іншому середовищі для росту рослин, у форми, що можуть легко захоплюватися рослинами, і/або корисними бактеріями, і/або грибами ризосфери. Такі ферменти включають, наприклад, глюкозидгідролази для деградації складних вуглеводів, целюлази для деградації целюлози; ліпази для деградації ліпідів, у тому числі олій, жирів і восків; лігніноксидази для деградації лігніну і гумінових кислот; протеази для деградації поліпептидів; фосфоліпази для деградації мембрани; амідази і нітрогенази для заповнення азоту; амілази для переробки крохмалів; нуклеази для заповнення нуклеотидів, пектинази для руйнування пектину, сульфатази для заповнення сірки і ксиланази для руйнування ксиланів і арабіноксиланів. Отримані продукти, включаючи прості цукри, амінокислоти, жирні кислоти й інші поживні речовини, будуть більш доступними для прямого поглинання рослинами і/або для стимуляції корисних бактерій і/або грибів до росту і розвитку в ризосферах рослин.
І00988| Крім того, ферменти й інші біологічні молекули можна використовувати для вивільнення або депонування фосфату, азоту й інших ключових елементарних поживних речовин для поглинання рослиною з їхньої різної органічної і неорганічної форм у грунті.
Наприклад, фосфатази можна використовувати для деградації фосфатів у навколишньому середовищі на прийнятні неорганічні фосфати для утилізації рослиною. Фосфати можуть являти собою фосфати, що зустрічаються в природі, які присутні у середовищі для росту рослин.
Альтернативно або додатково, середовище для росту рослин можна доповнювати фосфатами, такими як триметафосфат, поширена сільськогосподарська добавка. Приклади прийнятних фосфатаз включають гідролази складних моноефірів фосфорної кислоти, фосфомоноестерази, гідролази складних діефірів фосфорної кислоти, фосфодіестерази, гідролази складних моноефірів трифосфорної кислоти, фосфорилангідридгідролази, пірофосфатази, фітазу, триметафосфатази і трифосфатази. Наприклад, ферменти триметафосфатаза, трифосфатаза і
Зо пірофосфатаза послідовно руйнують триметафосфат до корисного неорганічного фосфату.
І00989| Сімейство ферментів нітрогеназ конвертує атомсферний азот (М2г) в аміак, тим самим, конвертуючи азот, що в іншому випадку був би недоступним для рослин, у корисну форму. Прийнятні ферменти стосуються сімейства нітрогеназ МІії.
І00990| Також у середовище для росту рослин можна додавати хімічну енергію, таку як аденозин-З-трифосфат, феродоксин або додаткові ферменти, які створюють таку енергію в системі ВЕМО. Вони являють собою кофактори для нітрогеназ і обмежені в грунті. Таким чином, такі кофактори можна додавати в грунт для посилення реакцій, описаних вище. 00991) Інші добавки, які можна додавати в середовище для росту рослин, включають крохмалі, целюлозу і похідні целюлози, пектини, ксилани й арабіноксилани, жири, воски, олії, фітинові кислоти, лігніни, гумінові кислоти й інші джерела поживних речовин, відносно яких описані вище ферменти виявляють активність. 00992) З використанням способів, подібних до способів, описаних вище в прикладі 1, будь- який з цих ферментів можна включати в систему ВЕМО для експонування на спорах ВЕМО шляхом створення злитої конструкції, що містить фермент і націлювальну послідовність, для націлювання злитої конструкції в екзоспорій представника сімейства Васіїйн5 сегеи5. Потім злиту конструкцію можна експресувати у представнику сімейства Васійц5 сегецв, і цей рекомбінантний представник сімейства Васійши5 сегениє можна додавати в грунт або в інше середовище для росту рослин з використанням способів, подібних до способів, описаних вище в прикладі 1, для стимуляції росту рослин.
Приклад 11. Застосування спор ВЕМО, які експресують фосфатазу, для стимуляції росту рослин
І00993| Спори ВЕМО, які експресують фосфатазу А4 (РпПоА4) Васійи5 5и,ибій5, одержували шляхом синтезу гена, що кодує РПОА4, зв'язаного з націлювальною послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 96. Потім цей ген вводили в Васійи5 ІПигіпдіепзіз і одержували спори, як описано в прикладі 1.
Кукурудзу висівали на глибину 2,54 см у горщики глибиною 10 см, заповнені стандартним глинистим грунтом верхнього шару. Спори ВЕМО, які експресують РпоА4, розбавляли до концентрації 1х107/мл у 50 мл води і наносили на кожну рослину при посіві. Також включали контроль, оброблений тільки водою. У горщики додавали поліфосфат у рідкій формі в кількості 0,5 мг/горщик. Рослини вирощували при ідеальному освітленні з використанням ламп Т5, 54 60 ватт, і їх піддавали впливу світла протягом 13 годин на добу в умовах контрольованої температури 15,5-25,5"С. Рослини поливали до насичення кожні три доби протягом випробування протягом двох тижнів. Наприкінці двох тижнів висоту кожної рослини вимірювали і результати вимірювань нормалізовували до результатів для контрольних рослин, оброблених тільки водою.
І00994| Результати представлені в таблиці 23. Кукурудза, вирощена в присутності спор
ВЕМО, які експонують РпоА4, демонструє посилений ріст, особливо в присутності доданого поліфосфату. Цей ефект був більш високим, ніж ефект поліфосфату окремо.
Таблиця 23
Приклад 12. Застосування рекомбінантних представників сімейства ВасішШив5 сегеив5, які експонують ферменти, залучені у синтез 2,3-бутандіолу або синтез або активацію гіберелової кислоти, для стимуляції росту рослин
Ї00995| Систему ВЕМО також можна використовувати для експонування ферментів, залучених у синтез стимулюючої ріст рослин сполуки 2,3-бутандіолу. Іп мімо, 2,3-бутандіол синтезується корисними бактеріями і грибами в ризосфері з ацетоїну, діацетилу, ацетолактату або пірувату ферментами ацетолактатсинтетазою, ос-ацетолактаздекарбоксилазою, піруватдекарбоксилазою, діацетилредуктазою, бутандіолдегідрогеназами й ацетоїнредуктазою.
Ї00996| Систему ВЕМО також можна використовувати для експонування ферментів, залучених у синтез або активацію стимулюючої ріст рослин сполуки гіберелової кислоти.
Гіберелова кислота може продукуватися з неактивних або менш активних форм під дією ферментів, включаючи, але не обмежуючись ними, гідроксиламінредуктази, 2- оксоглутаратдіоксигенази, гіберелін-2В/ЗВ-гідролази, гіберелін-З-оксидази і гіберелін-20- оксидази.
І00997| Будь-які з цих ферментів можна включати в систему ВЕМО для експонування на спорах ВЕМО з використанням способів, подібних до способів, описаних вище в прикладі 1.
Можна одержувати злиту конструкцію, що містить фермент і націлювальну послідовність, яка націлює фермент у екзоспорій, коли злита конструкція експресуються в представнику сімейства
ВасіШив5 сегеи5. Потім злиту конструкцію експресують у представнику сімейства Васіїйи5 сегецв, і представник сімейства Васійи5 сегеи5 додають у грунт або інше середовище для росту рослин
Зо для стимуляції росту рослин.
Ї00998| Для посилення ефекту ферментів, експонованих на ВЕМО, грунт можна доповнювати субстратами ферментів. Наприклад, грунт або інше середовище для росту рослин можна доповнювати ацетоїном, який є субстратом для ацетоїнредуктази; піруватом, який є субстратом для піруватдекарбоксилази; діацетилом, який є субстратом діацетилредуктази, і/або ацетолактатом, який є субстратом для ацетолактатдекарбоксилази. Альтернативно або додатково, грунт або інше середовище для росту рослин можна доповнювати менш сильнодіючими або неактивними формами гіберелової кислоти, що конвертується в більш активні форми ферментами, описаними вище, у грунті або іншому середовищі для росту рослин.
Приклад 13. Застосування рекомбінантних представників сімейства ВасішШив5 сегеив5, які експонують протеази, для захисту рослин від патогенів
Ї00999| Систему ВЕМО також можна використовувати для експонування протеаз, що захищають рослини від одного або декількох патогенів. Наприклад, окремі представники визначених бактеріальних патогенів можуть взаємодіяти за допомогою секреції бактеріальних лактонів гомосерину або споріднених сигнальних молекул. Таким чином, протеази, специфічні до бактеріальних сигнальних молекул лактонам гомосерину, можуть захищати рослини від таких бактеріальних патогенів шляхом порушення взаємодії між бактеріями, стадії, необхідної для секреції бактеріями токсинів і активації факторів вірулентності. Прийнятні протеази, специфічні до бактеріальних сигнальних молекул лактонів гомосерину включають ендопептидази і екзопептидази.
ІЇ001000| Протеази, специфічні до бактеріальних молекул передачі сигналу лактонам гомосерину, можна включати в систему ВЕМО з використанням способів, подібних до способів, описаних вище в прикладі 1. Можна одержувати злиту конструкцію, що містить протеазу і націлювальну послідовність, яка націлює протеазу в екзоспорій, коли злита конструкція експресуються в представнику сімейства Васіїйн5 сегеи5. Потім злиту конструкцію експресують у представнику сімейства Васійи5 сегеи5 і представник сімейства Васійи5 сегеи5 додають у грунт або інше середовище для росту рослин. Потім протеаза може деградувати бактеріальні сигнальні молекули лактони гомосерину, блокуючи ключову стадію у вірулентності цих організмів, і, тим самим, допомагаючи захистити рослину від цих патогенів. На систему ВЕМО ефективно діють інші протеази і пептидази з цією здатністю, як продемонстровано вище в прикладі 6 і 7.
Приклад 14. Застосування рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегецв, які експонують протимікробні білки і пептиди, для захисту рослин від патогенів
І001001| Систему ВЕМО також можна використовувати для експонування ферментів, які проявляють антибактеріальну і/або протигрибкову активність, що може допомогти захистити рослини від одного або декількох патогенів. Наприклад, протигрибкові білки і пептиди, такі як бактеріоцини, лізоцими (наприклад, Гу5зМ), сидерофори, авідини, стрептавідини, кональбумін, альбумін, лактоферини (наприклад, І єсіпВ) або ТазА, можна експресувати у системі ВЕМО для досягнення їхнього ефекту на бактеріальні і грибні патогени рослин. Бактеріоцини, альбумін, кональбумін, лізоцими і лактоферин демонструють пряму протимікробну дію на їхні мішені, у той час як сидерофори, авідини і стрептавідини зв'язують необхідні поживні речовини, що вимагаються патогенам для вірулентності. Наприклад, пептид І їсіпВ лактоферину, коли він експресується на поверхні системи ВЕМО, буде лізувати клітини бактерій, які є чутливими до пептидів лактоферину, у середовищі для росту рослин. Ці білки і пептиди мають специфічну дію на окремі мікроорганізми і можуть селективно націлюватися на групу патогенів без знищення всіх мікроорганізмів у середовищі для росту рослин.
І001002| Будь-який з цих білків або пептидів можна включати в систему ВЕМО для експонування на спорах ВЕМО з використанням способів, подібних до способів, описаних вище в прикладі 1. Можна одержувати злиту конструкцію, що містить фермент і націлювальну послідовність, яка націлює фермент у екзоспорій, коли злита конструкція експресується в представнику сімейства Васійи5 сегеи5. Потім злиту конструкцію експресують у представнику сімейства Васіййн5 сегеи5, і представник сімейства Васіййи5 сегеи5 додають у грунт або інше
Зо середовище для росту рослин для захисту рослин від одного або декількох патогенів.
Приклад 15. Застосування спор ВЕМО, які експресують протимікробні пептиди, для захисту рослин від бактерій 0010031) Синтезували гени, які кодують будь-який з двох протимікробних пептидів: І сіпВ (який походить з бичачого лактоферину) і ГУ5М (який походить з лізоциму курки), зв'язані з націлювальною послідовністю, ВСІА (5ЕО ІЮ МО: 96), під контролем промотору ВСІА (ЗЕО ІЮ
МО: 215). Гени вводили в ВасйШив5 ІПигіпдіепбіз ВТО1З3А і спори одержували шляхом вирощування нічної культури трансформованих Васійи5 у бульйон із серцево-мозковою витяжкою, посіву на чашки з поживним агаром при 302 і дозволу рости протягом З доби. Спори змивали з планшетів і споліскували ЗХ РВ5. Культури 5іарпуіососси5 ерідептідіє вирощували протягом ночі в бульйоні Т5В при 372С. Потім нічну культуру осаджували, промивали РВЗ: і ресуспендували в РВ5 при Ар5595-0,2.1х107 ВЕМО, які експресують пептиди Гу5М або І сіпВ, інкубували в РВЗ5 з 5. ерідептідіє протягом З годин при 372С, при струшуванні. Контрольний зразок 5. ерідегтідіє залишали необробленим (без спор ВЕМО). Після інкубації протягом З годин одержували планшети з розведенням 5. ерідегтіаді5 і інкубували при 372С протягом ночі.
Культури 5. ерідептіді5 полічили на наступну добу і кількісно визначали процентне знищення. У таблиці 24 нижче показані дані активності знищення. Пептиди, експресовані ВЕМО, знищували значну кількість клітин 5. ерідегтідіє. У такий же спосіб буде відбуватися знищення бактерій у ризосфері, на насінні або іншому рослинному матеріалі. Вибір пептидів, специфічних до визначених класів бактерій, також може забезпечити зміщення популяції мікроорганізмів поблизу рослини сприятливим чином або селективне націлювання на ключові патогени.
Таблиця 24
Приклад 16. Застосування рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеив5, які експонують ферменти для захисту рослин від патогенів
І001004| Систему ВЕМО також можна використовувати для експонування ферментів, які захищають рослини від одного або декількох патогенів. Наприклад, клітинні стінки дріжджів і цвілі деградуються ферментами, такими як В-1,3-глюканази, В-1,4-глюканази, В-1,6-глюканази, хітозанази, хітинази, подібні до хітозаназ білки і літикази. Клітинні стінки бактерій деградуються ферментами, вибраними з протеїназ, протеаз, мутанолізину, стафолізину і лізоцимів. Кожний з цих ферментів, що деградують клітинну стінку, можна експресувати у системі ВЕМО і додавати в середовище для росту рослин для селективного інгібування патогенних мікроорганізмів у ризосфері. 001005) Систему ВЕМО також можна використовувати для експонування ферментів або білків, які захищають рослини від патогенних комах або хробаків, наприклад, шляхом придушення хижацтва комах і/або хробаків на бажаних рослинах. Приклади таких білків і ферментів, що представляють інтерес, включають ендотоксини, токсини Сгу, інші інсектицидні білкові токсини, інгібітори протеаз, цистеїнові протеази, білок Сту5В, білок Сту 21А, хітиназу, білки-інгібітори протеаз, пептиди-інгібітори протеаз, інгібітори трипсину інгібітори протеаз атомпеавй.
І001006| Будь-які з цих білків або пептидів можна включати в систему ВЕМО для експонування на спорах ВЕМО з використанням способів, подібних до способів, описаних вище в прикладі 1. Можна одержувати злиту конструкцію, що містить фермент і націлювальну послідовність, яка націлює фермент у екзоспорій, коли злита конструкція експресується в представнику сімейства Васійи5 сегеи5. Потім злиту конструкцію експресують у представнику сімейства Васійи5 сегеи5 і представник сімейства Васіййи5 сеген5 додають у грунт або інше середовище для росту рослин для захисту рослин від патогенів.
Приклад 17. Застосування спор ВЕМО, які експресують протигрибковий фермент, для захисту рослин, і демонстрація ефективності проти засспготусев.
ІЇ001007| Синтезували ген, що кодує протигрибковий фермент р-1,3-глюканазу з Васійи5 5МиБій5, зв'язаний з націлювальною послідовністю ВсіА (ЗЕБЕО ІО МО: 96) під контролем промотору ВСІА (5ЕО ІО МО: 215). Ген вводили в Васійи5 Іпигіпдіепзіз ВТО1ЗА і спори в них забезпечували шляхом вирощування нічної культури трансформованих Васійй5 у бульйоні із серцево-мозковою витяжкою, посіву на агар з поживними речовинами при 302С і дозволу рости
Зо протягом З доби. Спори змивали з планшетів і споліскували ЗХ РВ5. Культури Засспаготусе5 сегемізіде вирощували протягом ночі в бульйоні 7 при 372С. Потім нічну культуру осаджували, промивали РВЗ і ресуспендували в РВЗ при АбБ5595-0,2.1х107 ВЕМО, які експресують рД-1,3- глюканазу, інкубували в РВ5 з Засспаготусе5 протягом 1 години при 372С, при струшуванні.
Контрольний зразок Засспаготусе5 залишали необробленим (без спор ВЕМО). Після інкубації протягом З годин одержували планшети з розведенням Засспаготусез і інкубували при 3726 протягом ночі. Культури Засспаготусе5 полічили на наступну добу і кількісно визначали процентне знищення. У таблиці 25 нижче показана активність спор ВЕМО, які експресують ВД- 1,3-глюканазу, відносно знищення. Фермент, експресований ВЕМО, знищував значну кількість клітин Засспаготусев5. У такий же спосіб буде відбуватися знищення грибних мікроорганізмів у ризосфері, на насінні або іншому рослинному матеріалі. Вибір пептидів, специфічних до визначених класів грибів, також може забезпечити зміщенні популяції мікроорганізмів поблизу рослини сприятливим чином або селективне націлювання на ключові грибні патогени.
Таблиця 25
Приклад 18. Застосування рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегец»5, які експонують стимулюючі імунну систему рослин пептиди або білки, для захисту рослин від патогенів 001008) Систему ВЕМО також можна використовувати для експонування пептидів і білків, що підсилюють імунну систему рослин. Ці білюм можна експресувати на зовнішній поверхні спори ВЕМО і доставляти в середовище для росту рослин для стимуляції імунної системи рослин, щоб дозволити рослині захистити себе від патогенів рослин. Ілюстративні білки і пептиди включають гарпін, с-еластини, р-еластини, системини, фенілаланінаміакліазу, еліцитини, дефензини, криптогейн і білки і пептиди флагеліну. Вплив на рослини цих білків або пептидів буде стимулювати стійкість рослин до багатьох патогенів рослин.
ІЇ001009| Будь-який з цих білків або пептидів можна включати в систему ВЕМО для експонування на спорах ВЕМО з використанням способів, подібних до способів, описаних вище в прикладі 1. Можна одержувати злиту конструкцію, що містить фермент і націлювальну послідовність, яка націлює фермент у екзоспорій, коли злита конструкція експресуються в представнику сімейства Васійи5 сегеи5. Потім злиту конструкцію експресують у представнику сімейства Васійи5 сегеи5 і представник сімейства Васіййи5 сеген5 додають у грунт або інше середовище для росту рослин для захисту рослин від патогенів.
Приклад 19. Застосування рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеив5, які експонують білок або пептид, що зв'язується з коренями або листям, для іммобілізації рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 на кореневій системі рослини або на листі рослин. 001010) Білки і пептиди, які зв'язуються з коренями і листям, також можна включати в систему ВЕМО, щоб забезпечити іммобілізацію спор ВЕМО на кореневій системі або на листі рослини. Експонування таких лігандів, які зв'язуються з коренями або листями, на спорах ВЕМО дозволяє націлювання спор на кореневу систему рослини, або на субструктури кореневої системи, або на листя, або на субструктури листя, для підтримки спор ВЕМО в оптимальному положенні, щоб інші експовані біологічні молекули і ферменти були ефективними. 001011) Наприклад, рикадгезин являє собою ліганд, який зв'язується з коренями, що зв'язується з кореневими волосками. Таким чином, експонування рикадгезину на спорах ВЕМО націлює спори на кореневі волоски. Додаткові білки, які можна використовувати для селективного зв'язування з коренями або листям рослин, включають адгезини, флагелін, омптіни, лектини, білки пілусу, білки завитка, інтіміни, інвазини, аглютинін, афімбріальні білки,
ТазА або Уцав. 0010121 Такі білки або пептиди, які зв'язуються з коренями або листям, можна включати в систему ВЕМО з використанням способів, подібних до способів, описаних вище в прикладі 1.
Можна одержувати злиту конструкцію, що містить білок або пептид, який зв'язується з коренями або листям, і націлювальну послідовність, яка націлює білок або пептид у екзоспорій, коли конструкція експресується в представнику сімейства Васійи5 сегеи5. Потім злиту конструкцію, що містить ліганд, який зв'язується з коренями або листям, експресують у представнику сімейства Васійи5 сегеи5. Такі злиті конструкції можна спільно експресувати з однією або
Зо декількома додатковими злитими конструкціями, що містять будь-який з корисних ферментів, описаних у даному описі (наприклад, фермент, залучений у синтез гормонів рослин, фермент, що деградує джерело поживних речовин, або протеази, що захищають рослину від патогена).
Рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 додають у грунт або інше середовище для росту рослин або наносять на листя рослини. Ліганд, який зв'язується з коренями або листям, націлює представника сімейства Васійй5 сегеи5 на кореневу систему рослини або на листя рослини і іммобілізує його на них, таким чином, дозволяючи спільно експресованій злитій конструкції проявляти її ефекти поблизу системи коренів або листя.
Приклад 20. Застосування рекомбинантих представників сімейства Васійи5 сегеив, які експонують білки або ферменти, для підвищення стійкості рослин до стресових впливів 001013) Білки, пептиди і ферменти, що підвищують стійкість рослини до стресових впливів, можна включати в систему ВЕМО і доставляти в рослини-мішені шляхом нанесення на корені, листя або додавання в середовище для росту рослин. У період дії стресових факторів рослини вивільняють пов'язані з впливом стресових факторів сполуки, включаючи аміноциклопропан-1- карбонову кислоту (АСС), активні форми кисню й інші, що приводить до негативного впливу на ріст рослини. Систему ВЕМО можна використовувати для експонування ферментів, що деградують такі зв'язані з впливом стресових факторів сполуки, такі як дезаміназа аміноциклопропан-1-карбонової кислоти, супероксиддисмутази, оксидази, каталази й інші ферменти, що впливають на активні форми кисню. Такі ферменти зменшують кількість цих сполук, пов'язаних із впливом стресових факторів, і дозволяють рослинам продовжувати рости і навіть успішно розвиватися в стресових умовах. 001014) Будь-який з цих білків або пептидів можна включати в систему ВЕМО для експонування на спорах ВЕМО з використанням способів, подібних до способів, описаних вище в прикладі 1. Можна одержувати злиту конструкцію, яка містить фермент і націлювальну послідовність, яка націлює фермент у екзоспорій, коли злита конструкція експресується в представнику сімейства Васійи5 сегеи5. Потім злиту конструкцію експресують у представнику сімейства Васіїййи5 сегеи5 і представник сімейства Васійй5 сегеи5 додають у грунт або в інше середовище для росту рослин або наносять на листя рослини для підвищення стійкості рослини-мішені до впливу стресових факторів.
Приклад 21. Одержання спор ВЕМО, які експресують захисний фермент каталазу бо ІЇ001015)| Синтезували ген, який кодує захисний фермент каталазу з Васійи5 сегенцв,
зв'язаний з націлювальною послідовністю ВеїА (5ЕО ІЮ МО: 97), під контролем промотору ВеїА (ЗЕО ІЮО МО: 197). Цей ген вводили в Васійи5 ІПигіпдіеєпзіз ВТО1ЗА. Спори одержували шляхом вирощування нічної культури трансформованих Васійи5 і штаму дикого типу в бульйоні із серцево-мозковою витяжкою, посіву на агар з поживними речовинами при 302С і дозволу рости протягом З доби. Спори змивали з планшетів і споліскували ЗХ РВ5. До кожного осаду зі спорами додавали З краплі пероксиду водню. Фермент каталаза конвертує пероксид водню у воду і газоподібний Ог2. Контрольні спори не мали пухирців, у той час як спори ВЕМО з каталазою мали пухирці, демонструючи активність ферменту на поверхні спор. Інші захисні ферменти можна експонувати аналогічним чином і доставляти в рослину для дії на вільні радикали, продуковані рослинами при впливі стресових факторів.
Приклад 22. Застосування рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеив5, які експонують білки або ферменти, що захищають насіння або рослини від стресових факторів зовнішнього середовища
ІЇ001016| Білки, пептиди і ферменти, що захищають рослину від стресових факторів зовнішнього середовища, можна включати в систему ВЕМО і доставляти рослинам-мішеням шляхом нанесення на корені, листя, плоди або додавання в середовище для росту рослин. У періоди заморозків рослини можуть ушкоджуватися під дією льоду. Систему ВЕМО можна використовувати для експонування пептидів, білків або ферментів, що захищають рослини від таких ефектів. Наприклад, систему ВЕМО можна використовувати для експонування холіндегідрогеназ, які діють, продукуючи захисні продукти, що захищають рослини або насіння від заморозків. Субстрати цих ферментів (наприклад, холін і/або похідні холіну) також можна додавати в середовище для росту рослин. Додавання таких субстратів може підвищувати кількість захисного агента (бетаїн і споріднені хімічні сполуки), продукованого в оточуючому рослину середовищі ферментами, експресованими ВЕМО. Відомо, що похідні бетаїну захищають насіння від холодового стресу.
ІЇ001017| Будь-який з цих білків або пептидів можна включати в систему ВЕМО для експонування на спорах ВЕМО з використанням способів, подібних до способів, описаних вище в прикладі 1. Можна одержувати злиту конструкцію, що містить фермент і націлювальну послідовність, яка націлює фермент у екзоспорій, коли злита конструкція експресуються в
Зо представнику сімейства Васійи5 сегеи5. Потім злиту конструкцію експресують у представнику сімейства Васіїйи5 сегец5, і представник сімейства Васійи5 сегеи5 додають у грунт або в інше середовище для росту рослин або наносять на листя рослини для захисту рослини від стресових впливів і факторів зовнішнього середовища.
Приклад 23. Підвищена експресія злитих конструкцій на системі ВЕМО з використанням посилених або альтернативних промоторних елементів 001018) Система ВЕМО може експонувати широкий діапазон білків, пептидів і ферментів з використанням однієї або декількох націлювальних послідовностей, описаних у даному описі.
Деякі з цих націлювальних послідовностей, мають високу афінність відносно екзоспорію, який може бути корисним для експресії злитого білка, однак їхній низький рівень експресії злитого білка обмежує їхнє застосування на системі ВЕМО. Для таких злитих білків і послідовностей можна замість нативних промоторів можна використовувати альтернативні промотори споруляції з високою експресією.
ІЇ001019| Наприклад, 5БО ІО МО: 13 (амінокислоти 1-39 продукту гена 3572 В. мжеїпепзіерпепзізї КВАВА) забезпечує високоефективну М-кінцеву послідовність для доставки білків у екзоспорій представників сімейства Васійи5 сегец5, як показано в таблиці 26 нижче. Усі гени синтезували в їхній повній формі (включаючи промоторні області й області, що кодують злиті білки), як описано в даному описі. Коли елементи нативного промотору для гена 3572 В. мжеїпепзіерпепзії КВАВА (5ЕО ІЮ МО: 217) використовували для експресії злитого білка, що містить націлювальну послідовність 5Е2) ІО МО: 13, злиту з ферментом Д-галактозидазою (з Е. сої), експресувався низький рівень злитого білка, що приводило до зниження активності ферменту на поверхні спори. Активність ферменту вимірювали по конвертуванню 0,5 М о- нітрофенілгалактозиду в розчині протягом 10 хвилин. Конвертування ферменту вимірювали за допомогою спектрофотометра при АВз55ао. Заміна нативних промоторних елементів гена 3572 В. мжеїпепзіерпепзіз КВАВА промоторами з високою експресією 5ЕО ІЮ МО: 197 (Веті/ВА5З3290 В. апійгасії) або ЗЕО ІЮ МО: 218 (В-пропелерний білок УУТМ В. меїпепетерпепзіз КВАВ4) приводила до значного збільшення ферментативної активності спор. З іншого боку, заміна нативних промоторих елементів гена 3572 В. мжеїіпепз5іерпепзіз КВАВА промотором, нативним для В. апіпгасіз 5іеєгпе ВАБІ882 (5ЕО ІО МО: 216), приводила до зниження ферментативної активності спор. Рівень експресії націлювальної послідовності ЗЕ ІО МО: 13, злитої з |Д- 60 галактозидазою, був значно більш низьким (0,38Х) під контролем промотору ВА51882 (ЗЕО ІЮ
МО: 216), і значно збільшувався під контролем промотору ВегА (ЗЕО ІЮ МО: 197) або промотору білка УУТМ (5ЕО ІО МО: 218).
Таблиця 26 системі ВЕМО, нормалізована , ЗЕО ІЮ МО: 13 - Д- о ввоюмоги? аюоидаа 010000 , ЗЕО ІЮ МО: 13 - Д- о , ЗЕО ІЮ МО: 13 - Д- о , ЗЕО ІЮ МО: 13 - Д- о
Приклад 24. Виділення й ідентифікація бактеріальних штамів, які стимулюють ріст рослин 0010201 Зразки грунту з ризосфер найбільш здорових і найбільш стійких рослин картоплі (Зоїапит (шбрегозит), патисон (Сисигбйа реро), томата (Зоїапит Іусорегзісит) і кучерявої квасолі (РпазеоЇн5 соссіпеи5) збирали, розбавляли стерильною водою і наносили на чашки з поживним агаром. Бактеріальні ізоляти, що демонстрували найбільш високі швидкості росту і були здатні до пасирування і збільшення в кількості, відбирали для подальшого дослідження.
Вибрані штами вирощували в мінімальному середовищі (КНеРОа З г, МагНРО» 6 г, МНАСІ 1 г, масі 0,50 г, Ма5О» 7НгО 0,15 г, Сасі» 2Н20 0,013 г і глюкоза 1 г, на л сухої маси). Нічні культури (3022) вибраних штамів осаджували центрифугуванням, середовище декантували і їх ресуспендували в однаковій кількості дистильованої води. Виконували посів десяти насінин салату-латуку на обробку на глибину 1 см у глинистий грунт верхнього шару (СоїЇштбіа, МО), який був просіяний для видалення великих залишків. Насінини інокулювали при посіві в 4-см горщики за допомогою 0,5 мкл ресуспендованих бактерій у воді, домішаних до 10 мл НгО.
Десять мл НгО було достатньо для доставки бактерій у З дюймиз (7,62 сму) грунту, а також для насичення грунту для належного проростання насіння. Рослини вирощували при температурі 65-75 ЕЕ (18-24 7С) з 11 годин світла/доба, і поливом 5 мл води кожні З доби. Через один тиждень збирали дані про ріст рослин і діаметр листя, а також про загальний стан здоров'я рослин. Первинний скринінг ізолятів ризосфери привів до одержання більше ніж 200 різних видів бактерій і грибів з ризосфери чотирьох рослин. Деякі з бактеріальних видів описані в таблиці 27. Ідентифіковані штами зазначені за допомогою їхніх належних позначень для бактерій. Інші штами зазначені за допомогою їх невідомого ідентифікаційного номера.
Інокуляти, що дали результати, близькі до контролю (/- 295), у таблицю не включені.
Таблиця 27 11111110 | КачаннийсалатуГ | 777777777777//Ї111111
01111110 | КачаннийсалатуГ | 777777777777//Ї111111 0010211) Бактеріальні штами, які викликали найбільший ефект на загальний стан здоров'я рослини і висоту рослини в первинному випробуванні із салатом-латуком, піддавали подальшій ідентифікації. Бактеріальні штами вирощували протягом ночі в бульйоні Луріа-Бертані при 37 "С, і нічні культури осаджували в центрифузі. Середовище декантували і бактеріальний осад, що залишився, піддавали виділенню хромосомної ДНК із використанням набору для виділення бактеріальної хромосомної ДНК Оіадеп. Хромосомну ДНК піддавали ампліфікації способом ПЛР областей, що кодують 165 рРНК, з використанням праймерів ЕЗЗ8Е 5'-АСТ ССТ АСа паА пас да АСтТ-3 (ЗЕО ІО МО: 298), Е1099К А 5-40 Та бе бе то 0-3 (ЗЕО ІЮ МО: 299) і
ЕлО99К в 5-асИа та бас тбоеа ТА 0-3 (5БО Ір МО: 300). ПЛР-амплікони очищали з використанням набору для очищення продуктів ПЛР Рготеда і отримані амплікони розбавляли і відправляли в Опімегейу ої Міззоигі ОМА Соге для секвенування ДНК. Послідовності ДНК порівнювали з базою даних бактеріальних ізолятів МСВІ ВІ АЗТ, ії рід і вид ідентифікували за допомогою прямого порівняння з відомими штамами. Найпереважні ідентифіковані види представлені в таблиці 27. У багатьох випадках послідовності 165 рРНК були здатні тільки вказати на рід вибраного бактеріального штаму. У випадках, коли пряма ідентифікація не підходила, виконували додаткові біохімічні аналізи з використанням способів, стандартних у даній галузі, для розрізнення штамів на рівні видів і штамів, і вони приведені в таблиці 28.
Таблиця 28
Е. Р. В. В. В. в. В. пеаі
Випробування сіоасає |Копагаїйа-| агуарпаї- | ПЧехив | тусоїдез |агуарпаї- ВО ВА
САР1І2 |має МОЗ5аі САРБ5ЗІ 8ВТО54| ВТ155 Цаї САРБб 57
Ургаза.ї///71/Ї7 1117-11-11 11-11
Оксидаза.//-/-//771/ ЇЇ ї111сюк Їж 1 | 1-1
Нітдато////11 ЇЇ я 11 | 1151 | 1
Висота, 59 Мас! 7 Ї я 17 - ЇЇ я 15 | - | 1 1 (Висота,7,596Масі ЇЇ - 17 - ЇЇ я 15 | | 1
Висота, 506С ЇЇ - | - ЇЇ ях | 5 | - | хх
ВисотарНн5 77 ЇЇ я 17 - Їж 1 я | | 1 (Кислота, целлобіозаї | з | - | ж | ях | я | чх- | - (Кислота,лактоза.ї /-/-:/ | З | - | я | я | я | - | з (Кислота, крохмаль: | - | - | - | 5 | - | х- | -
Приклад 25. Виділення й ідентифікація додаткових бактеріальних штамів, які стимулюють ріст рослин
І001022| Зразки грунту сільськогосподарських полів поблизу (за5, Капза5, збирали, розбавляли стерильною водою і наносили на чашки з поживним агаром. Бактеріальні ізоляти, які демонстрували найбільш високі швидкості росту і були здатні до пасирування і збільшення в кількості, відбирали для подальшого дослідження. Вибрані штами вирощували в мінімальних середовищах (КНегРОх З г, МагНРО» 6 г, МНАСІ 1 г, Масі 0,50 г, Ма5зО»х 7НгО 0,15 г, Сасі» 2Н20 0,013 г ї глюкоза 1 г, на л сухої маси). Нічні культури (30 "С) вибраних штамів осаджували центрифугуванням, середовище декантували і їх ресуспендували в однаковій кількості
Зо дистильованої води. Насіння кукурудзи покривали комерційним полімером для насіння, змішаним тільки з водою (всього 1,6 мкл на насінину), або комерційним полімером, що містить вибрані бактеріальні штами (всього 1,6 мкл на насінину). Покрите насіння висівали в горщики діаметром (З дюйми) 7,62 см на глибину 1 дюйм (2,54 см) у глинистий грунт верхнього шару (Соіштбіа, МО), який був просіяний для видалення великих залишків. Рослини вирощували при температурі 18-24 "С (65-75 "Р) з 11 годин світла/доба, і поливом 50 мл води при посіві і кожні З доби. Через два тижні збирали дані про ріст рослин і діаметр листя, а також про загальний стан здоров'я рослин. Для аналізів проростання і визначення довжини кореня через З доби насіння покривали, як описано вище, і рівномірно розподіляли по 10 насінин на паперовий рушник.
Паперові рушники змочували 10 мл води, загортали, вміщували в невеликий пластиковий мішок і інкубували при 30 "С або вміщували на коврик для пророщення, що підігрівається, при 27- 30 С (80-85 Р). Розміри коренів реєстрували через З доби. Первинний скринінг ізолятів ризосфери привів до одержання більше ніж 100 різних видів бактерій і грибів з ризосфери. Деякі з бактеріальних видів описані в таблиці 29. Ідентифіковані штами зазначені за допомогою їхніх належних позначень для бактерій.
Таблиця 29 11111111 |Обробканасіннякукурудзи! /-:/ / |/ в
Б й 5. нормалізована до величини (З доби), нормалізована до актеріальний інокулят . для контрольного полімеру величини для до контрольного полімеру (Представниксімейства В. сегеих ЕЕТ28| 1056 /| - (Представниксімейства В. сегеих ЕЕЗЯ49Ї 1052 | -сС1С
В.вибійв ЕЕ2І8 77777771 7овб6/ Її (В.тедаюйитЕв281ї./////777777777111Ї771111111111078 Її 001023) Бактеріальні штами, що викликали найбільший ефект на загальний стан здоров'я рослини, описані в таблиці 29. Бактеріальні штами вирощували протягом ночі в бульйоні Луріа-
Бертані при 37 "С, ії нічні культури осаджували в центрифузі. Середовище декантували і бактеріальний осад, що залишився, піддавали виділенню хромосомної ДНК із використанням набору для виділення бактеріальної хромосомний ДНК Оіадеп. Хромосомну ДНК піддавали ампліфікації способом ПЛР областей, що кодують 165 рРНК, з використанням праймерів ЕЗЗ8Е 5-АСТ ССТ Аба ааА соб Ада АСтТ-3 (5ЗЕБО ІЮ МО: 298), Е1099К А 5-4цсОа та бас та тта сб-3 (5ЕОІЮ МО: 299) і Е1О99К В 5-Сс(с:Оа То баб та ТА С-3' (5ЕО Ір МО: 300). ПЛР- амплікони очищали з використанням набору для очищення продуктів ПЛР Рготеда і отримані амплікони розбавляли відправляли в Опімегейу ої Міхзоигі ОМА Соге для секвенування ДНК.
Послідовності ДНК порівнювали з базою даних бактеріальних ізолятів МСВІ ВГ АЗТ, і рід і вид ідентифікували за допомогою прямого порівняння з відомими штамами. Найпереважні ідентифіковані види представлені в таблиці 16. У багатьох випадках послідовності 165 рРНК були здатні тільки вказати на рід вибраного бактеріального штаму. У випадках, коли пряма ідентифікація не підходила, виконували додаткові біохімічні аналізи з використанням способів, стандартних у даній галузі, для розрізнення штамів на рівні видів і штамів, і встановлені штами приведені в таблиці 30.
Таблиця 30 вони оовиоівшьи 8. васіюе| 8. сабе: В. ник (пусо-
Випробування ТПМТпО сімейства Щі | в /пебае- паввіі-| ЛУСОК пев |тусої- о мейства| іде еп5І5 І в, сегеив ІЕЕТЕЕ21 пит епвзів дез Гаесайв| сез В. сегенз І(ЕЕ14
ВТО1ЗА ЕЕЗ49 48| 8 ЕЕ281 вто втТ46-3| ЕЕ107 ІЕЕ118 ЕЕ128 1
Рухливість | ях | ж ||| 5 | їх | - | я 1 - |! - 1
Колоніяризоїду | - | - /|-Ї|-/ - | їх | | - | - «
Оксидаза.ї///// | 5 | - |-Ї-1 - | - |-ї! 1-1 - 1 -
Нітрат | 5 | я (ЖІ - 1 - | - | 5 | я 11 ж чі
Висота,59е масі | ях | мк |-| 6 ях | - | «| я 1 - | ж (Висота, 7,596 Мас! ж | - |-|Ї»5/ -5|- |-ї- 1-1 - 1 -
Висота,42С | - | «х |«|х1| хх | хх | ях | ях | - | ях | -
Висота, 503 | - | - 171-71-11 - 1 - 1-1 -1-1- 1.
Висотаарн5ї | ж | - || | - | жі! я | - | т
Висотаарн | 5 | т |-| 5 5 | - | жі 5 | т цею || || ж й МКІ ня ня Мк ни Мк целобіоза (Кислота,лактоза | - | ж ||| | - | | я | - | т Ж (Кислота,крохмалбї - | т |-| | 5 | - | «| ж | | я м/К:ріст протягом тижня або низький ріст
Приклад 26. Дослідження стимулюючих ріст рослин бактеріальних штамів на люцерні (0010241) Вибрані штами вирощували в мінімальному середовищі (КНегРоОх З г, МагНРО» 6 г,
МНАСІ 1 г, Масі 0,50 г, Ма95О»х 7НгО 0,15 г, Сасі» 2НгО 0,013 г ї глюкоза 1 г, на л сухої маси).
Нічні культури (302С) вибраних штамів осаджували центрифугуванням, середовище декантували і бактерії ресуспендували в однаковій кількості дистильованої води. Десять покритих 2ебра насінин люцерни висівали на кожну обробку на глибину 0,6 см у глинистий грунт верхнього шару (СоїЇштрбіа, МО), який був просіяний для видалення великих залишків. Насінини інокулювали при посіві за допомогою 0,5 мкл ресуспендованих бактерій у воді, домішаних до 10 мл НгО. Десять мл Н2гО було достатньо для доставки бактерій у З дюймиЗз (7,62 сму) грунту, а також для насичення грунту для належного проростання насіння. Рослини вирощували при температурі 65-75 "ЕЕ (18-24 С) з 11 годин світла/доба і поливом 5 мл води кожні З доби.
Люцерні дозволяли рости протягом 1 тижня для аналізу появи і первинного проростання рослин в описаних умовах. Ідентифіковані штами, зазначені їхніми належними позначеннями для бактерій, і кінцеві дані про висоту приведені в таблиці 31.
Таблиця 31 11111110 люцернлаї7/// | 77777777 11111111
Безінокуляці 77777777771111111111111148211 11171711 -1111111111110б008Ш
Приклад 27. Дослідження штамів, що стимулюють ріст рослин, на огірках 001025) Вибрані штами вирощували в мінімальному середовищі (КНегРОх З г, МагНРО» 6 г,
МНАСІ 1 г, Масі 0,50 г, Ма5О»х 7НгО 0,15 г, Сасі» 2Н2О 0,013 г і глюкоза 1 г, на л сухої маси).
Нічні культури (302С) вибраних штамів осаджували центрифугуванням, середовище декантували і ресуспендували в однаковій кількості дистильованої води. Десять насінин огірка висівали на кожну обробку на глибину 1 см у глинистий грунт верхнього шару (СоіІштбіа, МО), який був просіяний для видалення великих залишків. Насінини інокулювали при посіві за допомогою 0,5 мкл ресуспендованих бактерій у воді, домішаних до 10 мл НгО. Десять мл НгО було достатньо для доставки бактерій у З дюйми? (7,62 см3) грунту, а також для насичення грунту для належного проростання насіння. Рослини вирощували при температурі 65-75 "Е (18- 24 7С) з 11 годин світла/доба, і поливом 5 мл води кожні З доби. Огіркам дозволяли рости протягом 2 тижнів для аналізу появи і первинного проростання рослин в описаних умовах.
Ідентифіковані штами, зазначені їхніми належними позначеннями для бактерій, і кінцеві дані про висоту приведені в таблиці 32.
Таблиця 32 1111111 опри/ Її 11171111
Безінокуляції 77777771 71123 77111711 -1111111 11116067
Приклад 28. Дослідження бактеріальних штамів, які прискорюють ріст рослин, на патисонх (0010261) Вибрані штами вирощували в мінімальному середовищі (КНегРоОх З г, МагНРО» 6 г,
МНАСІ 1 г, Масі 0,50 г, Маоа5О»х 7НгО 0,15 г, Сасі» 2Н2О 0,013 г, і глюкоза 1 г, на л сухої маси).
Нічні культури (302С) вибраних штамів осаджували центрифугуванням, середовище декантували, і їх ресуспендували в однаковій кількості дистильованої води. Насіння патисон висівали на кожну обробку на глибину 1 см у глинистий грунт верхнього шару (СоЇштбіа, МО), який був просіяний для видалення великих залишків. Насінини інокулювали при посіві за допомогою 0,5 мкл ресуспендованих бактерій у воді, домішаних до 10 мл НгО. Десять мл НгО було достатньо для доставки бактерій у З дюймах? (7,62 сму) грунту, а також для насичення грунту для належного проростання насіння. Рослини вирощували при температурі 65-75 "Е (18- 24 С) з 11 годин світла/доба, і поливом 5 мл води кожні З доби. Патисонм дозволяли рости протягом 2 тижнів для аналізу появи і первинного проростання рослин в описаних умовах.
Ідентифіковані штами, зазначені їхніми належними позначеннями для бактерій, дані про кінцеву висоту і дані про кінцевий діаметр листя (по ширині двох листя) приведені в таблиці 33.
Таблиця 33 10111111 патисн7/ | Її 777777 ЇЇ
Безінокулята | 7016 | -(- | 0028 | 508 | -
Приклад 29. Дослідження бактеріальних штамів, що стимулюють ріст рослин, на пажитнтці.
І001027| Вибрані штами вирощували в мінімальному середовищі (КНегРоОх З г, МагНРО» 6 г,
МНАСІ 1 г, Масі 0,50 г, Ма5О»х 7НгО 0,15 г, Сасі» 2Н2гО 0,013 г, і глюкоза 1 г, на л сухої маси).
Нічні культури (302С) вибраних штамів осаджували центрифугуванням, середовище декантували, і їх ресуспендували в однаковій кількості дистильованої води. Тридцять насінин пажитниці висівали на кожну обробку на глибину 0,3 см у глинистий грунт верхнього шару
Зо (Соїштбіа, МО), який був просіяний для видалення великих залишків. Насінини інокулювали при посіві за допомогою 0,5 мкл ресуспендованих бактерій у воді, домішаних до 10 мл НгО. Десять мл НгО було достатньо для доставки бактерій у З дюймах? (7,62 см) грунту, а також для насичення грунту для належного проростання насіння. Рослини вирощували при температурі 65-75 ЕЕ (18-24 С) з 11 годин світла/доба, і поливом 5 мл води кожні З доби. Пажитниці дозволяли рости протягом 1,5 тижня для аналізу появи і первинного проростання рослин в описаних умовах. Ідентифіковані штами, зазначені їхніми належними позначеннями для бактерій, і дані про висоту приведені в таблиці 34.
Таблиця 34 11111111 Пажитницяу/ | 7777 / Її
Безінокулятаї 77777711 11111611 11111111 0023
Приклад 30. Дослідження бактеріальних штамів, які стимулюють ріст рослин, на кукурудзі (0010281) Вибрані штами вирощували в мінімальному середовищі (КНегРоОх З г, МагНРО» 6 г,
МНАСІ 1 г, Масі 0,50 г, Ма5О»х 7НгО 0,15 г, Сасі» 2Н2гО 0,013 г, і глюкоза 1 г, на л сухої маси).
Нічні культури (3020) вибраних штамів осаджували центрифугуванням, середовище декантували, і їх ресуспендували в однаковій кількості дистильованої води. Десять насінин кукурудзи висівали на кожну обробку на глибину 2,5 см у глинистий грунт верхнього шару (Соіштбіа, МО), який був просіяний для видалення великих залишків. Насінини інокулювали при посіві за допомогою 0,5 мкл ресуспендованих бактерій у воді, домішаних до 10 мл НгО. Десять мл Н2О було достатньо для доставки бактерій у З дюйми? (7,62 смУ) грунту, а також для насичення грунту для належного проростання насіння. Рослини вирощували при температурі 65-75 ЕЕ (18-24 72) з 11 годин світла/ддоба, і поливом 5 мл води кожні З доби. Кукурудзі дозволяли рости протягом 2 тижнів для аналізу появи і первинного проростання рослин в описаних умовах. Ідентифіковані штами, зазначені їхніми належними позначеннями для бактерій, і кінцеві дані про висоту приведені в таблиці 35.
Таблиця 35 11111111 Кукурудза | /////////У|/:/П|| СС
Безінокуляці (77777711 11111789 77717171 і 1110039
В.йсехиєВТО54 сс 11117189,96. | лі2ббо6 | 0,095
Васіїмв пусоїдев вітай ВТІ55 7777/1796 | 7107,9096. | бом
Приклад 31. Дослідження бактеріальних штамів, які стимулюють ріст рослин, на сої 0010291) Вибрані штами вирощували в мінімальному середовищі (КНегРоОх З г, МагНРО» 6 г,
МНАСІ 1 г, Масі 0,50 г, Ма5О»х 7НгоО 0,15 г, Сасі» 2Н2О 0,013 г, і глюкоза 1 г, на л сухої маси, або для Вгадугпігорішт або КПігобішт на дріжджовому середовищі з манітом). Нічні культури (3020) вибраних штамів осаджували центрифугуванням, середовище декантували, і їх ресуспендували в однаковій кількості дистильованої води. Десять насінин сої висівали на кожну обробку на глибину 2,5 см у глинистий грунт верхнього шару (Соіштбріа, МО), який був просіяний для видалення великих залишків. Насінини інокулювали при посіві за допомогою 0,5 мкл ресуспендованих бактерій у воді, домішаних до 10 мл НгО. При дослідженні двох бактеріальних штамів 0,5 мкл кожних ресуспендованих бактерій домішували до 10 мл Н2О. Десять мл НгО було достатньо для доставки бактерій у З дюйми? (7,62 см3) грунту, а також для насичення грунту для належного проростання насіння. Рослини вирощували при температурі 65-752Е (18- 242) з 11 годин світла/доба, і поливом 5 мл води кожні З доби. Сої дозволяли рости протягом 2 тижнів для аналізу появи і первинного проростання рослин в описаних умовах. Ідентифіковані штами, зазначені їхніми належними позначеннями для бактерій, і кінцеві дані про висоту приведені в таблиці 36. Спільна інокуляція бактеріальних штамів у рамках даного винаходу з представниками ВгадугпігоБбічт 5р. або ЕПі2обічшт 5р. приводила до збільшення росту рослини в порівнянні в кожним інокулятом окремо.
Таблиця 36 111111сояя | 77777777 Є!
Безінокуляції 77777771 11113,94 | 7777-77 17111б089
Вгайутігоріитер. 77777771 1425 | лог (Впігорімтвр. 77777771 1475 | лоб | 77777721
Приклад 32. Представники сімейства Васійн5 сегец5 з ознаками стимуляції росту рослин (001030) Васійи5 тусоїде5 штаму ВТ155, Васійи5 тусоїде5 штаму ЕЕ118, ВасШив тусоїдев5 штаму ЕЕ141, ВасіШйи5 тусоїде5 штаму ВТ46-3, представник сімейства Васійи5 сегеи5 штаму
ЕЕЗ49, Васйив ІПигіпдіепзіз штаму ВТО1ЗА і Васійи5 тедасегішт штаму ЕЕ281 вирощували в бульйоні Луріа-Бертані при 372С і нічні культури осаджували центрифугуванням, середовище декантували, і їх ресуспендували в однаковій кількості дистильованої води. 20 насіння кукурудзи висівали на кожну обробку на глибину 2,5 см у глинистий грунт верхнього шару (Соіштбіа, МО), який був просіяний для видалення великих залишків. Насінини інокулювали при посіві за допомогою 0,5 мкл ресуспендованих бактерій у воді, домішаних до 50 мл НО.
П'ятдесят мл НгО було достатньо для доставки бактерій у 29 дюймів? (442,5 сму) грунту, а також для насичення грунту для належного проростання насіння. Рослини вирощували при температурі 65-72 "Е з 13 годин світла/доба, і поливом 5 мл води кожні З доби. Проросткам дозволяли рости протягом 2 тижнів для аналізу появи і первинного проростання рослин в описаних умовах. Ідентифіковані штами, зазначені їхніми належними позначеннями для бактерій, і кінцеві дані про висоту приведені в таблиці 37.
Таблиця 37 кукурудза 001031) Усі досліджені бактерії, що стимулюють ріст рослин, мали сприятливий ефект на висоту кукурудзи через два тижні в описаних умовах. Представник сімейства Васійи5 сегеив5 штаму ЕЕ128 мав найкращий ефект у цьому випробуванні, забезпечуючи збільшення висоти кукурудзи більш ніж на 14905.
Приклад 33. Посилена селекція представників сімейства Васійи5 сегеи5 як хазяїв ВЕМО для експресії з метою скринінгу стимулюючої ріст рослин активності й інших корисних видів активності
І001032| Систему ВЕМО можна використовувати для експонування широкого діапазону білків, пептидів і ферментів з використанням будь-яких з націлювальних послідовностей, описаних у даному описі, для забезпечення корисних сільськогосподарських ефектів. Додаткові корисні ефекти можуть бути досягнуті шляхом вибору експресуючого хазяїна (представник
Зо сімейства Васійи5 сегеи5), що має властиві йому корисні властивості. Багато штамів представників сімейства Васійи5 сегеи5 мають користь прискорення росту рослин. Крім того,
багато штамів представників сімейства Васійш5 сегени5 мають захисні ефекти за допомогою прямої фунгіцидної, інсектицидної, нематоцидної або іншої захисної активності. При використанні таких штамів як експресуючих хазяїнів для системи ВЕМО кінцевий продукт у вигляді спор буде мати комбінацію позитивних у сільському господарстві ознак. 001033) У таблиці 38 представлені результати експерименту, де злитий білок експресували в різних штамах представників сімейства Васійц5 сегеи5. Усі штами експресували злитий білок, який містить амінокислоти 1-35 5ЕО ІЮ МО: 1 ї фосфатазу РпоА4 з ВасшШив 5,иБійі5, корисний фермент для посилення поглинання фосфатів у кукурудзі. Ген синтезували, клонували у вектор рмМкКаА і вводили в кожний з Васійй5 5рр., зазначених у таблиці 38. Штами піддавали споруляції шляхом інкубації при 302С на чашках з поживним агаром, що містив 10 мкг/мл хлорамфеніколу, протягом трьох діб. Спори збирали, промивали і наносили на кукурудзу при посіві в кількості 1х105 к.у.о./мл у 50 мл води на горщик діаметром 7,62 см з 5 мг поліфосфату на горщик.
Кукурудзу вирощували в мулисто-глинистому грунті протягом двох тижнів. Рослини вирощували при ідеальному освітленні з використанням ламп Т5, 54 ватт, і піддавали впливу 13 годин світла на добу в умовах контрольованої температури 15,5-25,52С. Рослини поливали до насичення кожні три доби протягом випробування протягом двох тижнів. Наприкінці двох тижнів висоту кожної рослини вимірювали і результати вимірювань нормалізовували до результатів для контрольних спор Васійи5 (Пигіпдіепеіх. Експресія злитого більюьа 5ЕО ІЮ МО: 1-фосфатаза приводила до збільшення висоти кукурудзи через 2 тижні незалежно від вибраного експресуючого штаму-хазяїна. Як показано в таблиці 38, використання стимулюючого ріст рослин представника сімейства Васійи5 сегеи5 далі збільшувало висоту кукурудзи.
Таблиця 38 й шде Висота через 2 тижні, сімейства В. сегеив5
Приклад 34. Застосування різних націлювальних послідовностей для експресії Д- галактозидази на поверхні Васійи5 (пПигіпдіепвів (0010341) Для експонування ферментів, білків і пептидів на поверхні представників сімейства
Васійи5 сеген5 можна використовувати широку множину націлювальних послідовностей, що мають високий ступінь гомології з амінокислотами 20-35 ВСІА (амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1). Виконували порівняння декількох націлювальних послідовностей шляхом одержання злитих білків, що містять націлювальні послідовності, зв'язані з ліпазою Вабсійи5 5ибрій5. Злиті конструкції синтезували з використанням промоторів, нативних для націлювальної послідовності клонували в плазміду РМКА4, яка реплікується, і вводили в Васійи5 (Пигіпдіепвів
ВТО13А. Штами піддавали споруляції за допомогою інкубації при 302С на чашках з поживним агаром, що містив 10 мкг/мл хлорамфеніколу, протягом З доби. Спори збирали, промивали і ресуспендували в РВ5 у кількості 1х108/мл. їх105 кожних спор зі злитою конструкцією суспендували в 400 мкл аНгО. Реакційні суміші нагрівали з реакційними компонентами до бажаної температури реакції (40 "С). Додавали 200 мкл робочого буфера (9:1 розчин А:розчин
В). Розчин А являв собою 50 мМ Тті5 рН 10 ї 13,6 мМ дезоксихолеву кислоту, і розчин В являв собою З мг/мл п-нітрофенілпальмітату в ізопропанолі. Реакційну суміш інкубували при 4020 протягом 10 хвилин і вміщували на лід, центрифугували для видалення спор і реєстрували поглинання при 420 нм. Результати представлені в таблиці 39 нижче. Активність нормалізовували до активності контрольного злитого білка, що містить амінокислоти 1-35 5ЕО
ІО МО: 1, злиті з ліпазою ВасшШив 5,ибБійїв5.
Таблиця 39 001035) Кілька націлювальних послідовностей, зв'язаних з ліпазою, приводять до більш високих рівнів експресії й активності ферменту на поверхні спор. Зокрема, кожна з 5ЕО ІЮО МО: 96, 98 і 100, що містять більш коротку націлювальну послідовність, приводила до посиленої експресії злитої конструкції на поверхні спор ВЕМО. Усі злиті білки, що містять досліджені націлювальні послідовності, приводили до експонування ліпази на поверхні.
Приклад 35. Застосування різних послідовностей екзоспорію для експресії ліпази на поверхні Васійи5 Іпигіпдієпвів і демонстрація локалізації злитого білка на поверхні екзоспорію 001036) Для експонування ферментів, білків і пептидів на поверхні представників сімейства
Васій5 сеген5 можна використовувати широку множину білків екзоспорію. Кілька різних білків екзоспорію порівнювали шляхом одержання злитих білків, що містять білки екзоспорію, зв'язані з ліпазою Васіййє5 зирійбї5, як описано в прикладі 34. Злиті конструкції синтезували з використанням промотору, нативного для білка екзоспорію, зазначеного в таблиці 40 нижче, клонували в плазміду рМКа, яка реплікується, і вводили в Васійиз (пПигіпдіепзіз ВТО1ТЗА. Спори, які експонують різні злиті конструкції білка екзоспорію-ліпази Васійи5 5и,ирій5 168, одержували шляхом вирощування трансформованих бактерій у бульйоні із серцево-мозковою витяжкою з тиском селекції, забезпечуваним 10 мкг/мл хлорамфеніколу, посіву на планшет з поживним агаром і інкубації при 302С протягом З діб. Через З доби спори змивали з планшетів, очищали центрифугуванням і ресуспендували в РВ5 у кількості 1х108 к.у.о./мл.
Ї001037| 1х105 спор для кожної злитої конструкції ресуспендували в 400 мкл анНгО. Реакційні суміші нагрівали з компонентами реакції до бажаної температури реакції (40 "С). Додавали 200 мкл робочого буфера (9:1 розчин А: розчин В). Розчин А являв собою 50 мМ Ттгі5 рН 10 їі 13,6 мМ дезоксихолеву кислоту і розчин В являв собою З мг/мл п-нітрофенілпальмітату в ізопропанолі.
Реакційну суміш інкубували при 40 "С протягом 10 хвилин і вміщували на лід, центрифугували для видалення спор і реєстрували поглинання при 420 нм. Результати представлені в таблиці 40 нижче. Активність нормалізовували до активності зЕО ІЮ МО: 109, зв'язаної з ліпазою.
Таблиця 40
Зо 001038) Використання білків екзоспорію ЗЕО ІО МО: 109 ї 110 приводило до найбільш високої активності ферменту на спорах. Усі злиті білки, що містять білки екзоспорію, приводили до експонування на поверхні активної ліпази Васійн5 5,ибійї5 168, хоча і на різних рівнях. 001039) З використанням флуоресцентного репортера тСпПеггу було продемонстровано, що додаткові білки екзоспорію приводять до націлювання злитих білків у екзоспорій. Одержували злиті конструкції, що містили білки екзоспорію 5ЕО ІЮ МО: 111, 120 ії 110, зв'язані з репортером тету. Спори вирощували протягом 1,5 доби, збирали і ресуспендували, як описано вище. 7 мкл флуоресцентних спор вміщували під мікроскоп Мікоп Е1000 ії візуалізували в ході пізньої споруляції. Кругова локалізація у вигляді кільця вказує на локалізацію на зовнішньому шарі спори, і його ознаки відповідають ознакам білка екзоспорію. Результати флуоресцентної мікроскопії представлені на фіг. 2. На панелях А, В і С фіг. 2 представлені зображення, отримані за допомогою флуоресцентної мікроскопії, для спор, які експресують злиті білки, що містять білки екзоспорію ЗЕО ІЮ МО: 111, 120 їі 110, відповідно, і репортер тСпПеїту. Усі три злиті конструкції продемонстрували високі рівні флуоресценції і локалізації в екзоспорії, демонструючи їхню потенційну застосовність для експресії чужорідних білків на поверхні екзоспорію.
Приклад 36. Застосування різних націлювальних послідовностей і білків екзоспорію для експресії фосфатази в спорах Васійи5 зибійї5 і ефекти експресуючих фосфатазу спор у сої
І001040| Спори ВЕМО, які експресують фосфатазу А4 (РпоА4) ВасшШив зи ЕЕ148, одержували за допомогою синтезу генів, що кодують різні націлювальні напослідовності і білки екзоспорію, під контролем їхніх нативних промоторів, зв'язаних з РпоА4. Синтезовані гени клонували в рМКаА і вводили в Васійи5 (пПигіпдіепзіз ВТО1ЗА. Спори, які експонують різні злиті конструкції білок екзоспорію-РпоА4 Васійи5 5иБійб ЕЕ148, одержували шляхом вирощування трансформованих бактерій у бульйоні із серцево-мозковою витяжкою с селективним тиском, забезпечуваним 10 мкг/мл хлорамфеніколу, посіву на чашках з поживним агаром, і інкубації при
З02С протягом трьох діб. Через три доби спори змивали з планшетів, очищали центрифугуванням і ресуспендували в РВ5 у кількості 1х108 к.у.о./мл. 0010411) Рослини сої висівали на глибину 2,54 см у горщики глибиною 10 см, заповнені стандартним глинистим грунтом верхнього шару. Спори ВЕМО, які експресували РпоА4, розбавляли до концентрації їх10з/мл у 50 мл води і наносили на кожну рослину при посіві.
Також включали контроль у вигляді тільки води. Поліфосфат додавали в горщики в рідині в кількості 0,5 мг/горщик. Рослини вирощували при ідеальному освітленні з використанням ламп
Т5, 54 ватт, і піддавали впливу 13 годин світла на добу в умовах контрольованої температури 15,5-25,5 "С. Рослини поливали до насичення кожні три доби протягом випробування протягом двох тижнів. Наприкінці двох тижнів вимірювали висоту кожної рослини і результати вимірювання нормалізовували до результатів для контрольних рослин, оброблених тільки водою. (0010421 Результати представлені в таблиці 41. Усі рослини сої, вирощені в присутності спор
Зо ВЕМО, які експресують злиті білки, що містять РпоА4, зв'язану з різними націлювальними послідовностями, і білки екзоспорію з різними партнерами по злиттю з РпоА4, демонстрували посилений ріст, однак ступінь цього ефекту варіювалася, залежно від використовуваної націлювальної послідовності або білка екзоспорію.
Таблиця 41
Вид Васійив Націлювальна послідовність або Висота через 2 тижні, білок екзоспорію, зв'язані з РпоА4 нормалізована
НгО (без бактерій) 10095
ВасшШиз (Пигіпдіепвзіз штам . , о
ВТО13А Амінокислоти 1-35 5ЕО ІЮ МО: 1 10095
ВасшШиз (Пигіпдіепвзіз штам . , о
ВТО13А Амінокислоти 1-28 БЕО І МО: З 117495
ВасшШиз (Пигіпдіепвзіз штам . , о
ВТО13А Амінокислоти 1-33 5БЕО ІЮ МО: 21 107390
ВасшШиз (Пигіпдіепвзіз штам , о
ВТО1ЗА ЗЕО ІЮ МО: 96 123,396
ВасшШиз (Пигіпдіепвзіз штам , о
ВТО1ЗА ЗЕО ІЮ МО: 98 124195
ВасшШиз (Пигіпдіепвзіз штам , о
ВТО1ЗА ЗЕОІЮ МО: 109 191,79
ВасшШиз (Пигіпдіепвзіз штам , о
ВТО1ЗА ЗЕОЮ МО: 110 104 895
Приклад 37. Спільне застосування спор ВЕМО і обробки насіння, рідких добрив і інших добавок
І001043| Спори ВЕМО, які експресують злиті білки, досліджували відносно сумісності з різними обробками насіння. Спори ВЕМО експресували злиті білки, що містять націлювальну послідовність з амінокислоти 1-35 5ЕБО ІЮ МО: 1, зв'язану з фосфатазою (РпоА4) з Васіййи5 5,ИБій5 ЕЕ148 або пептидом РОГ АКІБ. Синтезовані гени клонували в рМКА і вводили в Васі
Іигіпдіепзіз ВТО1ЗА. Спори, які експонують різні злиті конструкції білок екзоспорію-Рпод4
Васійиє вирій ЕЕ148 або РОГАКІ5, одержували шляхом вирощування трансформованих бактерій у бульйоні із серцево-мозковою витяжкою із селективнвим тиском, забезпечуваним 10 мкг/мл хлорамфеніколу, посіву на чашки з поживним агаром і інкубації при 302С протягом трьох діб. Через три доби спори змивали з планшетів, очищали центрифугуванням і ресуспендували в
РВЗ у кількості 1х 108 к.у.о./мл. 001044) Рослини вирощували при ідеальному освітленні з використанням ламп Т5, 54 ватт, і піддавали впливу 13 годин світла на добу в умовах контрольованої температури 15,5-25,5 76.
Рослини поливали до насичення кожні три доби протягом випробування протягом двох тижнів.
Наприкінці двох тижнів вимірювали висоту кожної рослини і результати вимірювань нормалізовували до результатів для контрольних рослин, оброблених тільки водою. Результати представлені в таблиці 42 нижче. Полив-внесення в грунт у кількості 50 мл на горщик.
Полімер-тільки полімер для покриття насіння АССЕГЕКОМ. Для застосування під час поливу спор ВЕМО додавали в кількості 1їх107 клітин/50 мл. Для застосування для покриття насіння спор ВЕМО додавали в кількості 1,3х10"/клітин/насінина. 10-34-0 і 6-24-6 являють собою стандартні комерційні композиції стартового добрива. 10-34-0 являє собою рідкий фосфат амонію. 6-24-6 є рідким фосфатним добривом з низьким вмістом солі зі складом орто/полі.
Барвник-червоний барвник для покриття насіння ВесКег Опадегоод. МАСНО, АРКОМ і
СКОЇЗЕК являють собою комерційні фунгіциди, використовувані на насінні. МАСНО містить активний інгредієнт імідаклоприд, АРКОМ містить активний інгредієнт мефеноксам і СКОІ5ЕК містить суміш активних інгредієнтів тіаметоксаму, мефеноксаму і флудіоксонілу. Було виявлено, що спори є сумісними з багатьма обробками насіння, і вони зберігали здатність стимулювати ріст рослин у кукурудзі.
Таблиця 42
Висота кукурудзи
Обробка ВЕМО Хімічна обробка через 2 тижні, нормалізована
ІЇ001045| Було виявлено, що спори ВЕМО є сумісними з усіма дослідженими змінами покриття насіння. Коли спори ВЕМО РПА4 комбінували з барвником і полімером окремо, відбувалося невелике зниження активності, однак спори відновлювали повну активність у випадку барвника в комбінації з іншими фунгіцидами. Спори ВЕМО також добре діяли з рідкими
Зо добривами. Стартове добриво вносило вклад у ріст рослин, імовірно, за допомогою прямого доповнення поживними речовинами. Спори ВЕМО діяли з обома стартовими добривами, що вказує на те, що активність фосфатази усе ще може приводити до збільшеного росту рослин у присутності надлишку поживних речовин. Комбінації спор ВЕМО з фунгіцидами демонстрували більш високе збільшення росту рослини, ніж окремо спори ВЕМО, ймовірно внаслідок захисту, забезпечуваного молодим рослинам кукурудзи в процесі раннього росту.
Приклад 38. Застосування спор ВЕМО як добавки для надземної частини рослин для зниження інгібування стресовими факторами росту кукурудзи 001046 Спори ВЕМО експонують систему, яку можна використовувати для доставки ферментів, що можуть пом'якшувати дію деяких стресових факторів відносно зростаючих рослин у польових умовах або у теплиці. Для цього вибирали ферменти, які селективно діють на активні форми кисню в грунті. Активні форми кисню є ключовими маркерами стресового впливу в рослинах.
І001047| Одержували спори ВЕМО, які експресують злиті білки, що містять націлювальну послідовність з амінокислоти 1-35 5ЕО ІЮО МО: 1, зв'язану з хітозаназою, супероксиддисмутазою, каталазою або ДВ1,3-глюканазою з Васійн5 (пигіпдіепзіз ВТО1ЗА. Синтезовані гени клонували в рМК4 і вводили в Васійи5 ІпПигіпдіепзіє ВТО1ТЗА. Спори, які експонують різні білкові злиті конструкції одержували шляхом вирощування трансформованих бактерій у бульйоні із серцево-мозковою витяжкою із селективним тиском 10 мкг/мл хлорамфеніколу, посіву на чашки з поживним агаром і інкубації при 302С протягом трьох діб. Через три доби спори змивали з чашок, очищали центрифугуванням і ресуспендували в РВ5 у кількості 1х108 к.у.о./мл. 001048) Рослини кукурудзи, вирощувані протягом трьох тижнів, на стадії М5 вирощували при ідеальному освітленні з використанням ламп Т5, 54 ватт, і піддавали впливу 13 годин світла на добу в умовах контрольованої температури 15,5-25,52С. Рослини поливали до насичення кожні три доби в ході випробування. В міру досягнення рослинами М5 спори ВЕМО або позитивні контрольні хімічні речовини розпилювали на листя або в кількості 1х105 спор
ВЕМО/мл, або в рекомендованих кількостях для хімічних реагентів. Всього 1 мл спрею наносили на кожну рослину індивідуально. Висоту рослин вимірювали безпосередньо перед нанесенням позакореневих спреїв. Потім рослини кукурудзи піддавали стресовому впливу шляхом нагрівання до 32,2 "С і зменшення частоти поливу до одного разу на тиждень. Рослини тримали в стресових умовах протягом двох тижнів. Наприкінці двох тижнів висоту рослин знову вимірювали й оцінювали зовнішній вигляд. У цих стресових умовах ріст рослин був мінімальним у випадку контрольної обробки. Здатність продовжувати ріст у стресових умовах визначали по збільшенню висоти рослин протягом двох тижнів у порівнянні з контролем, обробленим тільки водою. Результати представлені в таблиці 43 нижче.
Таблиця 43
Зміна висоти рослини після
Обробка Кількість стресового впливу протягом 2 тижнів
Ї001049| Трохи зменшують стресовий вплив ферментів вносили на кукурудзу з використанням системи ВЕМО, як показано в таблиці 43 вище. Контрольні спори не мали
Зо вираженого ефекту (зниження висоти рослини -1,695). Фермент хітозаназу з ВЕМО мав позитивний ефект, коли його комбінували із субстратом хітозаном. Двома ферментами з найкращою ефективністю були Д-1,3-глюканаза з ВЕМО і супероксиддисмутаза з ВЕМО. Д-1,3- глюканаза з ВЕМО мала в основному протигрибкову активність, але також могла мати прямий ефект на рослини. Саліцилова кислота і ВТН являли собою позитивні контролі для позакореневого аналізу і позитивну відповідь спостерігали для обох з них. Цей спосіб позакореневої доставки можна використовувати для доставки ферментів, що зменшують стресовий вплив, на рослину в різні періоди сезону.
Приклад 39. Рівні експресії злитих білків з використанням різних промоторів, що містять сигма-К
ІЇ001050| Як показано в прикладі 23 вище, заміна нативного промотору націлювальної послідовності білка екзоспорію або фрагмента білка екзоспорію може значно впливати на рівень злитого білка, який експрессується на екзоспорії спор представника сімейства Васійи5 сегеи5. Наприклад, заміна нативного промотору ВСІА промотором ВсСІВ значно знижує рівень злитого білка на поверхні спор представника сімейства Васійн5 сегеи5. Альтернативно заміна нативного промотору ВсІВ промотором ВсіА значно збільшує рівні злитого білка на екзоспорії. 001051) Відносні рівні експресії різних білків екзоспорію під контролем їх нативних промоторів споруляції одержували з даних мікроматриць від Вегдтап еї аї., 2008. Відносні рівні експресії визначали під час пізньої споруляції (300 хвилин після початку експерименту), коли промотори сигма-К є найбільш активними. Промотори сигма-К є ключовими промоторами для експресії генів, локалізованих у екзоспорії, і асоційованих з ними білків. Відносна експресія являє собою збільшення рівня експресії гена в порівнянні із середнім значенням для всіх інших генів хромосоми в усі дані моменти часу. У таблиці 44 нижче показані відносні рівні експресії різних генів, контрольованих сигма К, у представниках сімейства Васійи5 сегеий5.
Таблиця 44
Відносна експресія
Білок (промотор ЗЕО ІЮ МО) (кратність збільшення рівня мРНК)
Приклад 40. Одержання і дослідження спор ВЕМО, які експресують злитий білок, який містить синтазу оксиду азоту, і застосування таких спор для стимуляції проростання насіння рослин 0010521) Одержували спори ВЕМО, які експресують злитий білок, який містить амінокислоти 20-35 ВСІА, лінкер з 6 залишків аланіну і фермент синтазу оксиду азоту з ВасшШив зиб5 168. Ген фермент синтаза оксиду азоту (МО5) з Васійи5 5зибБійй5 168 синтезували в злитій конструкції з промотором ВСІА, ділянкою зв'язування рибосом (РВ5), ініціюючим кодоном і амінокислотами 20-35 ВСІА. Лінкерну область із шести залишків аланіну включали для відділення націлювальної послідовності ВсСІА від фрагментів МОБ. Амінокислотні послідовності цих злитих білків, включаючи метіонін, який кодується ініціюючим кодоном ВсСіА, амінокислоти 20-35 ВСіА, лінкер із шести амінокислот і фермент МОБ, представлені вище в таблиці 9. Ці клони субклонували в човниковий вектор РНР1З за допомогою розщеплення ХпПої і лігування в ділянку Заї! рНР13.
Правильні конструкції, які були відсеквеновані і підтверджені, трансформували в клітини Е. соїї.
Отримані плазміди трансформували в Васіїйи5 (Ппигіпдіепзі5 ВТО1ЗА і Васійи5 тусоїде5 ЕЕ155. 001053) Потім рекомбінантні Васійи5 игіпдіепзіє ВТО1ЗА і Васійш5 тусоїде5 ЕЕ155, трансформовані плазмідами, що кодують злиті білюи МОБ, індукували до споруляції шляхом зняття бактерій на чашки з поживним агаром і інкубації чашок при 302С протягом 72 годин.
Через 72 години бактеріальні спори збирали з чашки шляхом зняття в стерильний фосфатно- сольовий буфер (РВ5) і очищали за допомогою центрифугування в градієнті щільності три рази. 0010541) Потім спори наносили на комерційні гібридні насіння кукурудзи і насіння сої в
Зо кількості 1х105 спор/насінина. Гібридний сорт сої являв собою ВЕСК 335МЕ, що містить ген захисту від цистоутворювальних нематод, ген резистентності до гліфосату КОМОР КЕАОУ і
К-ген для резистентності до Ріуїоріїпога. Гібридний сорт кукурудзи являв собою ВЕСК 5540, що містить ген резистентності до гліфосату КОМОР КЕАБУ. Потім насіння злегка обсипали
І -аргініном. Контрольний набір насіння обсипали І -аргініном, але без спор. Потім насінини вміщували між двома паперовими рушниками, які потім змочували 25 мл НгО. Потім паперові рушники скручували, вміщували в невеликий мішок для сендвічів і щільно закривали. Потім ці мішки вміщували в інкубатор при 302С, і їм дозволяли проростати протягом 24 або 48 годин.
Кількість насінин, які проросли в кожен момент часу, вимірювали і результати порівнювали з необробленими і контрольними насінинами. Результати цих експериментів представлені в таблиці 45 і 46 нижче.
Таблиця 45
Збільшення рівня проростання гібридних насінин сої, оброблених спорами рекомбінантних представників сімейства Васіїйн5 сегец5, які експресують злитий білок, який містить синтазу оксиду азоту
Насінини сої плюс В. (пигіпдіепвів
ВТО13ЗА, які експресують злитий 28,990 97,59 білок МОЗ В. зибі5
Насінини сої з І -аргініном і В. тусоїде5 ЕЕ155, які експресують 30090 97,59
МО5 В. з,ибів
Таблиця 46
Збільшення рівня проростання гібридних насінин кукурудзи, оброблених спорами рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегецв5, які експресують злитий білок, який містить синтазу оксиду азоту
Насінини кукурудзи плюс В.
Шигіпдіепзіз ВТО1ЗА, які о о експресують злитий білок МОБ В. 6,5 82,57 5ИБ5
Насінини кукурудзи з І -аргініном і В. тусоїде5 ЕЕ155, які експресують 4,390 95,095
МО5 В. з,ибів 001055) Як можна бачити з таблиць 45 і 46, обробка насінин І -аргініном і рекомбінантним представником сімейства Васійи5 сегеи5, який експресує злитий білок, який містить фермент синтазу оксиду азоту, приводила до збільшення кількості пророслих насінин як сої, так і кукурудзи.
Приклад 41. Одержання і дослідження спор ВЕМО, які експресують злитий білок, який містить білки, які зв'язують нуклеїнову кислоту 001056) Одержували спори ВЕМО, які експресують злитий білок, який містить амінокислоти 20-35 ВСІА, лінкер з восьми залишків аланіну і неспецифічний ДНК-зв'язувальний білок ЗАЗРа з
ВасшШив зибБій5 168 або неспецифічний ДНК-зв'язувальний білок ЗАБРУу з ВасшШив 5зи,ибБій5 168.
ДНК, що кодує ген 5АЗРа і БА5РУу, синтезували в рамці зчитування з промотором ВСІА, КВ5, ініціюючим кодоном ВеїА їі амінокислотами 20-35 ВСІА. Між націлювальною послідовністю ВСіА і
РНК/ДНК-зв'язувальними білками включали лінкерну область з восьми залишків аланіну. Лінкер забезпечує більш високу рухливість і укладання злитих білків. Амінокислотні послідовності цих злитих білків, включаючи метіонін, який кодується ініціюючим кодоном ВСІА, амінокислоти 20-35
ВСІА, лінкер з восьми амінокислот і білок БЗАб5Ра або 5А5РУ, представлені вище в таблиці 11.
Синтезовані гени розщеплювали ХпПої і лігували в ділянку Заії рНР1З з одержанням плазмід рНРІЗ-ВсіІА20-35-ЗАЗРа ії 0 рНРІЗ-ВсіА20-25-5АБРУ. рНРІЗ являє собою добре охарактеризовану човникову векторну плазміду розміром 5,5 т.п.н., що має касети резистентності до хлорамфеніколу і еритроміцину. Її конструювали шляхом лігування плазмід рЕ194, рС194 і рус.
І001057| Правильні клони піддавали секвенуванню ДНК і трансформували в штам 505110
Е. соїї. Потім плазмідну ДНК очищали і трансформували в Васійиз (Пигіпдіепзіз ВТО1ЗА. Потім ці бактерії індукували до споруляції шляхом зняття на чашки з поживним агаром на 72 годин при 302С. Спори збирали й очищали, як описано вище в безпосередньо попередньому прикладі. 0010581) Потім для оцінки здатності рекомбінантних спор зв'язувати нуклеїнові кислоти,
рекомбінантні представники сімейства Васійи5 сегеи5, трансформовані плазмідами, що кодують злиті білюи БАбРа і ЗАБЗРУ, інкубували в РВ5 з випадковими ДНК-праймерами, що містили флуоресцеїнову мітку на 5'-кінці. Також в експеримент включали контроль з використанням нерекомбінантних спор. Спори інкубували протягом десяти хвилин з 50 мМ міченої ДНК, а потім промивали центрифугуванням протягом однієї хвилини при 10000 об./хв. Супернатант видаляли і спори ресуспендували в 1 мл РВ5. Спори знову осаджували і супернатант видаляли після центрифугування, а потім їх піддавали аналізу. Спори, оброблені міченою флуоресцеїном
ДНК, досліджували під флуоресцентним мікроскопом ЕбОО Мікоп і зв'язування ДНК визначали по зміні загальної флуоресценції в порівнянні з контрольними спорами, що не містили ДНК- зв'язувальні злиті білки. Результати цього аналізу представлені в таблиці 47 нижче.
Таблиця 47
Зв'язування ДНК зі спорами рекомбінантного представника сімейства Васіїйн5 сегецв, які експресують злитий білок, який містить ДНК-зв'язувальний білок злитий білок Всід-БАб5Ра й злитий білок ВсІА-БАЗРУ я 0010591 Крім того, на фіг. З представлене зв'язування ДНК зі спорами при вимірюванні по зв'язуванню міченою флуоресцеїном ДНК. На фіг. 3, "контроль" стосується нерекомбінантних спор В. ІПигіпдіепзіз ВТО1З3А (нерекомбінантні), "ЗАБРа" стосується спор В. ІПигіпдіепвів
ВТО13А, які експресують злитий білок Всід-5БА5Ра, і БАБРСс стосується спор В. ІШПигіпдієпвів
ВТО13ЗА, які експресують злитий білок ВсІА-БАЗРУ. 001060) Як видно з даних, показаних у таблиці 47 і на фіг. 3, спори, які експресують злиті білки БА5Ра або 5АБ5бРУ, зв'язували значно більш високу кількість ДНК, ніж нерекомбінантні спори, демонструючи високу афінність цих спор до ДНК.
Приклад 42. Одержання і дослідження спор ВЕМО, які експресують злитий білок, який містить нуклеазу 0010611) На додаток до неспецифічних ДНК- і РНК-зв'язувальних білків, описаних вище безпосередньо в попередньому прикладі, також для зв'язування і розщеплення молекул нуклеїнових кислот можна використовувати нуклеази. Спори ВЕМО, які експресують злитий білок, який містить амінокислоти 20-35 ВСІА і фермент ендонуклеазу, одержували й аналізували відносно їхньої здатності зв'язувати і розщеплювати ДНК.
І001062| Ендонуклеазу 1 Васійи5 5!йБійй5 піддавали ПЛР-ампліфікації і злиттю в рамці зчитування з промотором ВСІА, КВ, ініціюючим кодоном і амінокислотами 20-35 ВсіІА. Потім цю
Зо конструкцію клонували в плазміду рНРІЗ з одержанням плазміди рнНР1І3-ВсіА20-35- ендонуклеаза. Цю конструкцію секвенували і її трансформували і збільшували в кількості в Е. соїї. Потім з Е. соїї виділяли плазмідну ДНК і вводили в Васійи5 (Пигіпдіепзіз ВТО1ЗА. Спори одержували й очищали, як описано в прикладі 40 вище. 001063) Ендонуклеазну активність аналізували за допомогою інкубації рекомбінантних спор, які експресують злитий білок ендонуклеази, і нерекомбінантних контрольних спор у РВЗ у концентрації 1х108 спор/мл у РВЗ з 300 нг ДНК сперми лосося і 1 мкг/мл барвника для ДНК САРІ (4",6-діамідино-2-феніліндол). Реакції дозволяли протікати протягом 10 хвилин при 37 "С. Через 10 хвилин супернатант аналізували відносно розщепленої ДНК із використанням флуориметра.
В міру розщеплення ДНК барвник ОАРІ вивільняється з індивідуальних вивільнених нуклеотидів, і, таким чином, розщеплення можна визначати по зниженню забарвлення ОАРІ з часом. Результати цього аналізу представлені в таблиці 48 нижче.
Таблиця 48
Нуклеазна активність і зв'язування ДНК спорами ВЕМО, які експресують злитий білок ендонуклеази . Зниження сигналу Зв'язана зі спорами
Обробка Конструкція ДНК (супернатант) ДНК (флуоресценція на спорах
БЕ бійні НИНІ НИЄ ННЯ ННЯ 0010641 Дані, надані вище в таблиці 48, демонструють, що злитий білок ендонуклеази експресувався на екзоспорії спор Васіїйи5 ІпПигіпдіепзі5 ВТО13ЗА і був здатний розщеплювати ДНК сперми лосося, про що свідчить зниження сигналу САРІ у супернатанті. Несподівано частина ендонуклеази міцно зв'язувала ДНК без її розщеплення, зберігаючи флуоресцентний сигнал
БАРІ на спорах, навіть після промивання спор для видалення надлишку ДНК. Це демонструє, що не вся ДНК процесувалась, і що нуклеази, експресовані зовні спори, можуть міцно зв'язувати
ДНК. Для збільшення цього ефекту в злитому білку можна використовувати нуклеазу, яка має інактивований активний центр, що може привести до меншого розщеплення ДНК і ще більшого зв'язування ДНК на спорах.
Приклад 43. Сільськогосподарське застосування спор, які експресують злиті білки, що містять зв'язувальні нуклеїнову кислоту або білки пептиди
І001065| Рекомбінантні представники сімейства ВасіШи5 сегеи5 або рекомбінантні спороутворювальні бактерії, які експресують злиті білки, що містять білки або пептиди, які зв'язують нуклеїнову кислоту, можна використовувати в сільському господарстві для доставки нуклеїнових кислот у середовище для росту рослин (наприклад, грунт) і/або в рослини.
Наприклад, рекомбінантні представники сімейства ВасіШиє сеген5 або рекомбінантні спороутворювальні бактерії можна доставляти в рослини за допомогою обробки насіння, при поливі борозни/грунту або позакореневої обробки. Більше того, злиті білки, що містять білки або пептиди, які зв'язують нуклеїнову кислоту, можна експресувати у будь-якому з ендофітних представників сімейства Васійй5 сегеи5 або будь-якому з інших ендофітних видів Васійсн5, описаних у даному описі, дозволяючи доставку нуклеїнових кислот, зв'язаних з білками, які зв'язують нуклеїнову кислоту, усередину рослини, де вони є більш ефективними відносно досягнення їхніх клітин-мішеней. Наприклад, злиті білки, що містять білки, які зв'язують нуклеїнову кислоту, можна експресувати у ендофітному штамі представника сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕЗ349. Експресія іншого злитого білка (який містить ендоглюканазу як білое, що представляє інтерес) у цьому штамі описана в прикладі 51 даного опису нижче, що демонструє, що злиті білки, які експресуються в цьому ендофітному штамі, доставляються усередину
Зо рослин. Таким чином, експресія злитих білків, що містять ЗАЗРа, ЗА5РУ, НІдД або нуклеазу, що має інактивований активний центр, у ендофітних штамах представників сімейства ВасшШив сегеи5, таких як представник сімейства Васійй5 сегеи5 ЕЕ349, може забезпечити засіб для доставки РНК ї ДНК (наприклад, РНК-ї або рДНК) усередину рослини. Також для цієї мети в злитих білках можна використовувати інші неспецифічні білки, які зв'язують нуклеїнову кислоту.
Приклад 44. Одержання спор ВЕМО, які експресують злитий білок, а також надекспресують білок, що модулює експресію злитих білків 001066) Надекспресія різних білків екзоспорію (які позначаються в даному описі як "білки- модулятори") у рекомбінантному представнику сімейства Васійй5 сегеи5, який експресує будь- який зі злитих білків, описаних у даному описі, може модулювати (підвищувати або знижувати) рівень експресії злитого білка. Ці білюи-модулятори включають Ех5У, Ех5ЕА/ВхрВ, Соїм, СОЮ,
Ех5ЕВ, ІппАтТ, ІппА2, Ех5у, Ех5Н, М|СсСА, м|сВ, ВсІС, АсрсС, ІппАЗ, аланінрацемазу 1, аланінрацемазу 2, ВСІА, ВсіІВ, ВхрВ, ВсІЕ, ВехА/ВА5З3290, СоїЕ, Ех5А, Ех5К, Ех5В, Маро, та), супероксиддисмутазу 1 (ЗОБА) і супероксиддисмутазу 2 (ЗОБАЗ).
І001067| Здатність контролювати рівень експресії злитого білка дозволяє контролювати кількість білка або пептиду, що представляє інтерес, в злитому білку, яка експонується зовні спори рекомбінантного представника сімейства Васіи5 сегеи5. Наприклад, коли білок або пептид, який представляє інтерес, у злитому білку включає стимулюючий ріст рослин білок або пептид (наприклад, фермент, що деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій,
грибів або рослин), рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, який експресує злитий білок, продукує спори, які при нанесенні на насіння, рослину або додаванні в середовище для росту рослин має сприятливий ефект на рослину внаслідок дії ссимулюючого ріст рослин білка або пептиду. Модулювання рівня експресії злитого білка приводить до модулювання рівня білка або пептиду, що представляє інтерес, що експонуються зовні спори рекомбінантного представника сімейства Васійиє5 сегеи5. У деяких випадках є корисним збільшення рівня експресії злитого білка (наприклад, коли є бажаним збільшення експресії ферменту і, тим самим, збільшення кількості ферменту на спору, що може доставлятися рослині). В інших випадках є корисним зниження рівня експресії злитого білка (наприклад, коли
Є бажаним зниження експресії білка і, тим самим, зменшення кількості білка на спору, що доставляється в рослину, наприклад, коли високі рівні білка мають шкідливі ефекти на рослину).
І001068| Для одержання плазмід для експресії злитих білків у представниках сімейства
Васійш5 сегеи5 одержували фрагменти ПЛР, що містили промотор ВсСІА (ЗЕО ІО МО: 85), ініціюючий кодон і амінокислоти 20-35 ВсіА, злиті в рамці зчитування або з геном ендоглюканази
Васійиє вирій 168, або з геном В-галактозидази з ОНбБа ЕЕ. соїї. Ці фрагменти ПЛР розщеплювали ХпПоїЇ і лігували в ділянку ЗаїЇ плазміди Р2ЗОРЕК з одержанням плазмід Р2ОРЕК-
ВСІА 20-35-ендоглюканаза і рР2БОРЕК-ВСІА 20-35-родаї, відповідно. Плазміду Р2ЗОРЕК одержували шляхом злиття плазміди риС57 (яка містить касету резистентності до ампіциліну) із плазмідою рВС16-1 з ВасШив5 (яка містить касету резистентності до тетрацикліну). Ця плазміда розміром 5,5 т.п.н. може реплікуватися як у Е. сої, так і в Васійи5 5рр.
Ї001069| Плазміди реБИРЕК-ВсіА 20-35-ендоглюканаза і рБИРЕК-ВсіА 20-35-Вдаї трансформували і збільшували в кількості в негативних по метилазі дат штамах Е. соїї.
Послідовності плазмід розИРЕК-ВсіІіА 20-35-ендоглюканаза і рзИРЕК-ВсіА 20-35-Вдаї підтверджували секвенуванням ДНК.
ІЇ001070| Плазміди реБИРЕН-ВсіА 20-35-ендоглюканаза і рзБИРЕК-ВсіА 20-35-Вдаї трансформували в штами-хазяїни Васійи5 (пигіпдіепзіз ВТО1ЗА (для реЇОРЕК-ВсіА 20-35-Епао) або Васіїйи5 тусоїде5 ВТ155 (рРЗОРЕК-ВсіА 20-35-Вдаї). Ці трансформовані штами експресували або фермент рД-галактозидазу, фермент або ендоглюканазу зовні спори.
Зо ІЇ001071| Для одержання плазмід для надекспресії білків-модуляторів одержували фрагменти ПЛР, що містили нативні промоторні області і гени, що кодують ЕХ»ЕА/ВхрВ, Сою,
ЕХ5ЕВ, МісВв, ВсіС, АсрсС, ВсіА, ВсіВ, ВхрВ і СОїТЕ, розщеплювали їхній заї! і лігували в плазміду рНРІ13. Нуклеотидні послідовності для нативних промоторних областей представлені вище в таблиці 3. Плазміда рНР13 являє собою багатокопійну плазміду і, таким чином, вона приводить до високих рівнів експресії кодованих білків-модуляторів, коли плазміди трансформують у клітину-хазяїна, що є представником сімейства Васіййи5 сегеи5. Плазміди рНРІ13, що містять промоторі області і гени, які кодують ЕХ»ЕА/ВхрВ, Со, Ех5ЕВ, хі|сВ, ВсіІС, АсрсС, ВСІА, ВсІВ,
Вхрв, ВсіІЕ, ВегА/ВА53290 і СоїЕ, позначають в даному описі як рНР13-Ех5ЕА/ВхрВ, рнНРІ13- бою, рНРІ13-ЕХ5ЕВ, рНРІ13-М|сВ, рНРІ3-ВсСІіС, рНРІЗ3-Асро, рНРІ1З3-ВСІіА, рНРІ3-ВсіВ, рНР13-
ВхрВ и рРНР13-СоїЕ, відповідно.
І001072| Плазміди рНРІ13, які містять промоторні області і гени, що кодують білки- модулятори, трансформували і збільшували в кількості в штамах БЕ. соїї. Послідовності цих плазмід підтверджували секвенуванням ДНК.
І001073| Плазміди рНР1З3, що кодують білки-модулятори, трансформували в Васіїн5
ІШигіпдіепзіє ВТО1ЗА, що містять рРЗОРЕНК-ВсіА 20-35-ендоглюканазу, або Васійи5 тусоіде5
ВТ155, що містять Р23ЗОРЕК-ВсіА 20-35-Вдаї. Отримані рекомбінантні бактерії висівали на чашки з поживним агаром, що містили 10 мкг/мл хлорамфеніколу, для селекції плазміди рНРІ13 ії 10 мкг/мл тетрацикліну для селекції плазмід Р2ШРЕК. Потім бактерії, що містили обидві плазміди, вирощували в бульйоні із серцево-мозковою витяжкою протягом ночі як з тетрацикліном, так і з хлорамфеніколом. Потім нічні культури знімали на поживний агар і бактеріям дозволяли спорулювати при 302С протягом 72 годин. Через 72 години бактеріальні спори збирали з чашки шляхом зняття в стерильний РВЗ5 і їх очищали центрифугуванням у градієнті щільності три рази.
Потім чисті спори розбавляли до 1х108 к.у.о./мл і аналізували відносно ферментативної активності з використанням популяції з 1х108 колонієутворювальних одиниць (к.у.о.).
Приклад 45. Збільшена або зменшена експресія злитих білків на системі ВЕМО за допомогою надекспресії білка, що модулює експресію злитої конструкції
Ї001074| Рекомбінантні спор Васійй5 тусоїдез ЕЕ155, отримані, як описано вище в попередньому прикладі, аналізували відносно активності ВД-галактозидази, і рекомбінантні спор
Васійи5 ІВПигіпдіепзіє ВТО1З3А, отримані, як як описано вище в попередньому прикладі, 60 аналізували відносно активності ендоглюканази.
І001075| Активність В-галактозидази аналізували шляхом вимірювання гідролізу хромогенного субстрату орто-нітрофеніл-В-галактозида (ОМРО). Для одержання стандартів використовували комерційне джерело рВ-галактозидази (0,2 мкг, 0,4 мкг і 0,8 мкг із вихідного розчину 100 мкг/мл). 250 мкл препарату спор осаджували і спори ресуспендували в 50 мкл буфера для розведення ферменту (10 мМ ТРЇІ5, рН 7,6, 0,2 М Масі», 595 гліцерин). До кожного зразка і до стандарту додавали 600 мкл попередньо нагрітої до 372С суміші субстратів (10 мМ
КСІ1 мМ МоБОхх7 Н2гО, 100 мМ МагРО», рН 7,5), що містила 1,14 мг/мл ОМРО. Кожну реакційну суміш інкубували при кімнатній температурі протягом 2 хвилин. Для зупинки реакції додавали 250 мкл 1 М карбонату натрію. Розчин центрифугували протягом 5 хв при 14000хд для видалення спор для зчитування поглинання. Поглинання визначали при 420 нм із використанням наноспектрофотометра ІМРІГЕМ моделі РЗЗ3О. Зразки аналізували в трьох екземплярах з порожнім зразком для кожної реакції. Результати цього аналізу представлені нижче в таблиці 49.
Таблиця 49
Ефекти надекспресії білків екзоспорію на рівні експресії ВсіА 20-35-Вдаї! модулятор (нормалізована) нини зни
РЗОРЕВ-Всід20-35-Вда! ССС 001076) Як можна бачити з результатів, представлених у таблиці 49, надекспресія СОЮ,
СОЕ, ВСІА, ВсСІВ і ВхрВ збільшувала експресію злитого білка, що містить В-галактозидазу, що приводило до збільшеної активності ферменту на спорах. Навпроти, надекспресія Х|сВ або
АсрС знижувала експресію злитого білка, що містить р-галактозидазу, що приводило до зниженої активності ферменту на спорах.
І001077| Аналіз активності ендоглюканази виконували шляхом визначення целюлазної активності з використанням субстрату карбоксиметилцелюлози (СМС) і динітросаліцилової кислоти (реагент ЮМ5). Комерційне джерело ферменту целюлази використовували для одержання стандартів у 50 мМ цитратному буфері, рН 4,8.195 СМС (натрієва сіль карбоксиметилцелюлози) одержували в 50 мМ цитратному буфері, рН 4,8, щоб вона служила як субстрат для реакції. 250 мкл препарату спор осаджували і спори ресуспендували в 150 мл 50
ММ цитратного буфера, рН 4,8. Реакцію проводили за допомогою реагенту, що складався з 195
ОМ5, 195 Маон, 0,0595 Ма»5О», 0,295 фенолу і 18,295 сегнетової солі. 150 мкл зразка змішували 3 250 мкл субстрату 195 СМС і інкубували на водяній бані при 50 "С протягом 15 хвилин.
Зо Додавали 300 мкл реагенту ОМ5 і зразки кип'ятили при 100 "С протягом 10 хвилин, а потім прохолоджували на льоді. Розчин центрифугували протягом 5 хвилин при 14000хд для видалення спор для зчитування поглинання. Поглинання визначали при 540 нм із використанням наноспектрофотометра ІМРІГЕМ моделі РЗЗ30. Зразки аналізували в трьох екземплярах з порожнім зразком для кожної реакції. Результати цього аналізу представлені в таблиці 50 нижче.
Таблиця 50
Ефекти надекспресії білків екзоспорію на рівні експресії ВСсІА 20-35-ендоглюканази
Плазміда, що кодує злитий білок Плазміда, що кодує білок- Ферментативна активність модулятор (нормалізована) нини жинннншшшши зи рРОШРЕВ-ВСІА 20-35- 10092 ендоглюканаза 2
ЗИРЕВ-ВСІА 20-35-
ЗИРЕВ-ВСІА 20-35- о рРОШРЕВ-ВСІА 20-35- Ко о ендоглюканаза рРНР1ІТЗ3-Х|сВ 89,39о рРОШРЕВ-ВСІА 20-35- Й о ендоглюканаза рРНР1ІЗ3-ВсІВ 193,095 рРОШРЕВ-ВСІА 20-35- Й о ендоглюканаза рНРІЗ-Асро 33,79 рРОШРЕВ-ВСІА 20-35- Й о, ендоглюканаза рРНРІЗ3-ВхрВ 202,390 рРОШРЕВ-ВСІА 20-35- Й о, ендоглюканаза рНРІ13-ВсіС 3,29
Ї001078| Як показано в таблиці 50, надекспресія Со, СоОїЕ, ВсІВ і ВхрВ збільшувала експресію злитого білка, що містить ендоглюканазу, що приводило до збільшеної активності ферменту на спорах. Надекспресія УісВ, АсрС або ВсіС, з іншого боку, знижувала експресію злитого білка, що приводило до зниженої активності ферменту на спорах. 0010791 У сукупності, надекспресія Со, СОїЕ, ВсІВ або ВхрВ збільшувала експресію обох злитих білків, що приводило до збільшеної активності як В-галактозидази, так і ендоглюканази, на спорах, які експресують злиті білки ВсіА 20-35-ВдаІ або ВсіА 20-35-ендоглюканаза, відповідно. Надекспресія хісВ або Асрс, з іншого боку, знижувала експресію обох злитих білків, що приводило до зниженої активності ДрВ-галактозидази і ендоглюканази на спорах, які експресують злиті білки ВСІА 20-35-вда! або ВСІА 20-35-ендоглюканаза, відповідно. Надекспресія
ВсІіС ії ВсіА20-35, мічених есЕР, також знижувала експресію злитого білка ВсіА 20-35- ендоглюканаза, у той час як надекспресія ВсІіА підвищувала експресію злитого білка ВсіА 20-35- роа!.
Приклад 46. Ефекти спор ВЕМО, які експресують злитий білок і надекспресують білок- модулятор, на ріст кукурудзи 0010801) Нанесення рекомбінантних спор Васійи5 «ВПигіпдіепоіє ВТТОЗА і Васійи5 тусоїдев5
ВТ155, які експресують злитий білок, який містить ендоглюканазу Васійн5 зибій5 168, на кукурудзу приводить до збільшення потужності проростків і ростової відповіді протягом двох тижнів. Зміна рівня експресії злитого білка, що містить ендоглюканазу, індукована надекспресією білка-модулятора в таких спорах, як описано вище в попередньому прикладі, приводить до відповідних змін ефектів спор ВЕМО на ріст кукурудзи.
ІЇ001081| Для демонстрації цього рЗШОРЕК-ВсіА 20-35-ендоглюканазу і рНР13-СоЮю або рРНРІЗ3-ВсІВ спільно експресували в Васійи5 ІПигіпдіепзіз ВТО13ЗА. Спори одержували на поживному агарі, як описано вище в прикладі 40. Спори розбавляли до концентрації 1х107 спор/50 мл води, і 50 мл води додавали до комерційного гібридного насіння кукурудзи в горшковій суміші при посіві. Гібридний сорт кукурудзи являв собою ВЕСК 5540, що містить ген резистентності до гліфосату КОМОР КЕАБУ. Насіння кукурудзи покривали фунгіцидом і
Зо біологічним інокулятом.
І001082| Рослини вирощували під штучним освітленням протягом 14 годин на добу і визначали ріст рослини протягом періоду, що складав десять діб. У ході експерименту рослини поливали кожні три доби. Через десять діб вимірювали висоту рослин і її нормалізовували до висоти необроблених рослин кукурудзи. Результати цих експериментів представлені в таблиці 51 нижче.
Таблиця 51
Ефекти спор ВЕМО, які експресують злитий білок, який містить ендоглюканазу, і надекспресують білок-модулятор, на ріст гібридної кукурудзи
Ріст кукурудзи
Плазміда, що кодує |Плазміда, що кодує (нормалізований до зпитий біпок біпок-мо пято Експресуючий штам контролю у вигляді дулятор РООРЕВ-ВСІА 20-35 ендоглюканази окремо) рОШРЕВ-ВсСІА 20-35- Вас игіпдієпвів о ендоглюканаза Немає ВТО13А 10096 рОШРЕВ-ВсСІА 20-35- Й Вас игіпдієпвів о ендоглюканаза рРНРІТЗ-Сою ВТО13А 103,85 рОШРЕВ-ВсСІА 20-35- Й Вас игіпдієпвів о ендоглюканаза рНРІ1З-Всів ВТО13А 107,65 001083) Як показано в таблиці 51, надекспресія білків екзоспорію СОЮ і ВсІВ підсилювала ефекти злитого білка ВсіА 20-35-ендоглюканаза на ріст і потужність проростків кукурудзи через діб. Ці ефекти корелюють з рівнями експресії злитого білка в спорах ВЕМО, які експресують
ВсіА 20-35-ендоглюканазу і рРНР1І3-Со або рНРІ13-ВсіІВ, що вказує на те, що зміна рівнів експресії злитих білків білками-модуляторами обумовлює ефекти на ріст і потужність проростків.
Приклад 47. Генетична інактивація представників сімейства Васіїйи5 сегеи5 і застосування 10 таких інактивованих представників сімейства Васійи5 сегеи5 для експресії злитих білків 001084) Як описано вище, надекспресія протеази проростання спори (ОРЕ) у її активній формі в проспорі представника сімейства Васіййи5 сегеи5 у ході споруляції приводить до протеолітичного розщеплення білків у проспорі й інактивації спори. Аналогічно, надекспресія неспецифічної ендонуклеази в проспорі в ході споруляції руйнує ДНК у спорі, що приводить до частки інактивованих частинок спор у популяції спор.
І001085| Одержували плазміду, яка кодує неспецифічну ендонуклеазу під контролем промотору сигма 0. Ген неспецифічної ендонуклеази 1 з Васіїйи5 5,ибБії5 168 і промотор сигма о (ЗЕБЕО ІЮО МО: 235) синтезували і лігували в плазміду рРНР1З з використанням ділянки заїЇ з одержанням плазміди рНР13-5ідс-нуклеаза. Правильні клони секвенували і трансформували і збільшували в кількості в клітинах Е. сої. Плазмідну ДНК виділяли з клітин БЕ. сої і трансформували в Васійи5 (пПигіпдіепзіз ВТО1ЗА. Правильні клони підтверджували за допомогою
ПЛР. Амінокислотна послідовність для ендонуклеази 1 ВасшШив зиБійй5 168 представлена вище в таблиці 4. 001086) Клітини Васійи5 «Пигіпдіепзіз ВТО1З3А, які експресують ендонуклеазу сигма о, одержували й очищали на чашках з поживним агаром, як описано вище в прикладі 40. Спори візуально підраховували з використанням гемоцитометра, розбавляли і висівали розведеними на чашки з поживним агаром. Співвідношення живих спор до убитих спор обчислювали шляхом визначення зміни від візуально підрахованої кількості до кількості на чашці. У кожен аналіз включали контрольні спори (необроблені). Крім того, 1х108 спор обробляли УФф-
Зо випромінюванням протягом 10 хвилин з використанням ручної УФ-лампи, і аналіз повторювали.
Підраховану візуальну кількість і кількість на чашці знову порівнювали для оцінки загибелі спор.
Результати цих аналізів представлені в таблиці 52 нижче.
Таблиця 52
Життєздатність спор представника сімейства Васійи5 сегец5, який експресує неспецифічну нуклеазу під контролем промотору сигма с
Обробка
Васійив5 «Іпигіпдіепзіз ВТО1ЗА 10095 61,395
ВасшШиз (Пигіпдіепзіз ВТО1ЗА, які о о експресують Зідс-ендонуклеазу 70,азе гають (001087) Як можна бачити з таблиці 52, експресія ендонуклеази 1 під контролем промотору сигма б знижувала життєздатність клітин приблизно на 3095 у спорах, які не були піддані опроміненню УФ-випромінюванням, і приблизно на 7595 у спорах, які були піддані опроміненню
УФ-випромінюванням.
І001088| Можна очікувати, що спільна експресія як протеази проростання спор, так і неспецифічної ендонуклеази, під контролем промоторів сигма с, далі знизить життєздатність спор.
Приклад 48. Одержання фрагментів екзоспорію з рекомбінантних представників сімейства
ВасШив5 сегеи5, що мають нокаут гена СОЇЕ
І001089| Конструювали плазміду рОСрЕ, що містила кістяк плазміди рисС19, здатної реплікуватися в Е. сої, а також оріджин реплікації касети стійкості до еритроміцину з рЕ194. Ця конструкція здатна реплікуватися як у Е. сої, так і в Васіїйй5 5рр. Область ДНК розміром 1 т.п.н., що відповідала вищій області гена СоОїЕ, і область розміром 1 т.п.н., що відповідала нижчій області гена СОїЕ, ампліфікували способом ПЛР із Васіїйи5 апіпгасі5 Деїегпе. Потім дві області розміром 1 т.п.н. сплайсували з використанням сплайсингу шляхом подовження, що перекривається, за допомогою гомологічних виступаючих кінців розміром 15 п.н., що відповідали протилежним ПЛР-ампліконам. Цей фрагмент розміром 2 т.п.н. розщеплювали ХпоЇ (у зовнішніх праймерах) і лігували в ділянку заї! рОосСрЕ. Плазмідну конструкцію підтверджували за допомогою розщеплення і секвенування ДНК. Ген омега резистентності грампозитивних бактерій до канаміцину розщеплювали Ватні і вміщували між двома областями розміром 1 т.п.н. Кінцеву конструкцію знову підтверджували способом ПЛР і секвенували, і кінцеву плазміду вводили в Васіїйн5 апійгасі5 Дейгегпе. Правильні клони піддавали скринінгу на резистентність як еритроміцину, так і до канаміцину. 0010901 Клони пасирували при високій температурі (40 "С) у бульйоні із серцево-мозковою витяжкою в присутності канаміцину (25 мкг/мл) і стандартним чином відбирали для виділення на чашки з агаром ЇВ, що містив канаміцин, і вирощували при 30 "С. Індивідуальні колонії відбирали зубочисткою на чашки з агаром ІВ, що містив 5 мкг/мл еритроміцину, і вирощували при 30 "С. Клони, що зберігали резистентність до канаміцину, але втрачали резистентність до еритроміцину (що означало втрату плазміди, але рекомбінацію і видалення гена СоїЕ), вирощували в бульйоні із серцево-мозковою витяжкою плюс канаміцин, і виділяли хромосомну
Зо ДНК із використанням набору для виділення хромосомної ДНК Оіадеп. Належне видалення гена
СоОоїЕ визначали ампліфікацією способом ПЛР області гена СОїЕ і по втраті СОЇЕ і купуванню касети резистентності до канаміцину. 001091) Одержували конструкцію (РНР13-Асро-есЕР), яка кодувала білок екзоспорію АрссС (кисла фосфатаза), злитий у рамці зчитування з флуоресцентним репортерним білком есЕР (посилений зелений флуоресцентний білок). Конструкція РНР13-Арсб-есЕР уключала нативний промотор Арсс, ділянку зв'язування рибосоми і кодуючу послідовність для Арсс (з В. апійгасіб
Деегппе), злиту в рамці зчитування з есЕР (з роОЕРим). Цю конструкцію одержували ампліфікацією способом ПЛР індивідуальних генів Асрс і есЕР з відповідними праймерами, що містили перекривальну область розміром 15 п.н., що відповідає послідовним ампліконам. Потім два ПЛР-амплікони очищали і комбінували в другій реакції ПЛР із використанням зовнішніх праймерів, що містили ділянки ХпоЇ. Два амплікони служили затравками один для одного за допомогою їхніх сумісних кінців і утворювали злиті амплікони ПЛР, які очищали і розщеплювали
ХПОЇ протягом 1 години при 372С. Сплайсований продукт ПЛР клонували в ділянку заї! рНР 13, і для правильних клонів підтверджували послідовності і їх трансформували в 5С5110 Е. соїї.
Потім плазмідну ДНК виділяли з Е. сої і вводили в В. апіпйгасі5 ЛетТегпе СоїЕ: Кап, отримані, як описано вище, що вирощували в бульйоні із серцево-мозковою витяжкою, який містив 10 мкг/мл хлорамфеніколу, протягом ночі при 302С. Один мілілітр цієї культури інокулювали в поживний бульйон (50 мл) у колбі з дефлектором і вирощували при 30 "С протягом З діб. Спори збирали центрифугуванням при 10000х9д протягом 5 хвилин, і супернатант (який містить зруйновані фрагменти екзоспорію) фільтрували через мембранний фільтр із граничним значенням 100000
Да з одержанням очищених фрагментів екзоспорію, які містили злиті білки.
І001092| Фотографія, отримана за допомогою трансмісійної електронної мікроскопії, що демонструє спори з нокаутом СОїЕ, представлена на фіг. 4. Забарвленими стрілками відмічені фрагменти екзоспорію, які відділені від спор, і незабарвленими стрілками відмічені спори, з яких був видалений екзоспорій.
І001093| Очищення фрагментів екзоспорію виконували в такий спосіб: спори СоїЕ:Кап вирощували в бульйоні із серцево-мозковою витяжкою протягом ночі при 30 "С і знімали на чашки з поживним агаром і вирощували при 30 "С протягом З доби. Через З доби спори збирали шляхом зняття з чашок бавовняними валиками, змоченими РВ, і ресуспендували в 1 мл РВ5 у бо мікроцентрифугальній пробірці. Спори відділяли від культури за допомогою центрифугування і супернатант, що містив фрагменти екзоспорію, фільтрували через 0,22-мкм фільтр для видалення яких-небудь залишкових спор. Потім фільтрат фільтрували через фільтр з граничним значенням 100 кДа для збору фрагментів екзоспорію, однак дозволяли вільним білкам проходити через фільтр. Фільтр із граничним значенням 100 кДа промивали і зібрані фрагменти екзоспорію кип'ятили в буфері 505 протягом 5 хвилин і розділяли за допомогою
ЗО5-РАСЕ електрофорезу. На фіг. 5 представлена фотографія гелю 5ЗО5-РАСЕ, яка демонструє очищені фрагменти екзоспорію (доріжка 2) і стандартний білковий маркер (доріжка 1). Фрагменти екзоспорію, показані на доріжці 2, відповідають індивідуальним білкам, що складають фрагменти екзоспорію. Є видимою тільки підгрупа смуг, які звичайно спостерігали в препараті 505-РАСЕ з цілими спорами. (001094) Десять мікролітрів препарату фрагмента екзоспорію, який містив злитий білок
АсрбС-есЕР, досліджували в аналізі фосфатази відносно активності проти рМРР (п- нітрофенілполіфосфат). Активність кислої фосфатази виявляли за допомогою спектрофотометрії на основі вивільнення п-нітрофенолу з фосфату за допомогою фосфатазної активності. У короткому викладі, 1 мл 10 мМ рМРР у фосфатному буфері при рН 6,0 інкубували з фргаментами екзоспорію в 1-мл мікроцентрифугальній пробірці і дозволяли їм інкубуватися при 37 "С протягом 10 хвилин. Через 10 хвилин пробірку центрифугували протягом 1 хвилини для видалення надлишку спор, і виконували зчитування супернатанта на спектрофотометрі при 420 нм відносно вільного п-нітрофенолу. Було виявлено, що очищені фрагменти екзоспорію були здатні ефективно вивільняти фосфатні групи з рМРР, демонструючи, що АрсС була присутня на фрагментах екзоспорію. Результати цього аналізу представлені на фіг. 6. На фіг. 6, "контрольні спори СОЇЕ" стосуються спор з нокаутам СоОоїЕ окремо (які не експресують злитий білок АсрбС-есгЕР), "СоїтЕ Аср-еСЕР" стосується спор з нокаутом СОоїЕ, які експресують злитий білок АсрОС-есЕР, і "фрагменти СоїЕ АсрОС-есЕР" стосуються фрагментів екзоспорію, отриманих, як описано вище, зі спор з нокаутом СОїЕ, які експресують злитий білок АсрС-есЕР. (001095) Ці результати демонструють, що руйнування екзоспорію, таке як мутація з нокатом гена СОЇЕ, можна використовувати для одержання фрагментів екзоспорію, які по суті вільні від спор, і демонструють, що ці фрагменти екзоспорію містять злиті білки, які націлені на екзоспорій.
Зо Приклад 49. Експресія злитих білків у рекомбінантних представниках сімейства Васіййи5 сегеи5, які здатні деградувати гербіциди, і застосування таких рекомбінантних представників сімейства Васіїи5 сегеи5 для стимуляції росту рослин (001096) Рекомбінантні представники сімейства Васіїйи5 сегецй5, які експресують злиті білки, можуть мати виражені ефекти на здоров'я і ріст рослин, як проілюстровано, наприклад, у прикладах 1-4, 7, 9, 11, 33, 36, 37 і 38 вище. Злиті білки, які містять націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, описані в даному описі, можна використовувати в ряді різних видів і штамів сімейства Васійи5 сегеи5, що включає Васійн5 апінгасіх, Васіййб5 сегеийив5, Васійй5 ІПпПигіпдіепві5, Васіїйй5 тусоідев5, Васіїй5 рвзепдотусоїідев,
ВасшШи5 затапії, Васіййи5 даєтокКепбві5, Васійи5 уеіїпепеїерпепзіз і ВасшШив (оуоіепвіб5. Багато представників сімейства Васіїйи5 сегеи5 потужно деградують органічний і неорганічний матеріал у навколишньому середовищі, і деякі представники сімейства Васійи5 сегеи5 мають здатність деградувати гербіциди. Експресія злитих білків у таких штамах є переважною, оскільки це може забезпечити активність деградації гербіциду, тим самим, пом'якшуючи стресовий вплив на рослини, який може бути викликаний застосуванням гербіцидів, на додаток до здатності стимулювати ріст рослин і забезпечувати іншу користь для здоров'я рослин, залежно від білка або пептиду, що представляє інтерес, вибраного для включення в злитий білок.
І001097| Представник сімейства Васййи5 сегеи5 ЕЕЗ349 виділяли, ідентифікували й охарактеризовували, як описано вище в прикладі 25, і було виявлено, що він має здатність стимулювати ріст рослин. Крім того, було виявлено, що цей штам має здатність деградувати множину гербіцидів, включаючи сполуки сульфонілсечовини й арилтриазини.
І001098| Для демонстрації здатності представника сімейства Васійш5 сегеи5 ЕЕЗ349 деградувати гербіциди, 1х105 спор представника сімейства Васійи5 сеген5 ЕЕ349 наносили на сочевицю, посіяну в грунт, що містив різні концентрації сульфентразону. Насінню дозволяли рости при 242С протягом З тижнів з циклом 13 годин день/ніч з поливом кожні З доби. Через З тижні виконували вимірювання рослин відносно росту коренів. Контрольний набір насіння без представника сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ349 висівали в ідентичних умовах. 001099) Результати цього експерименту можна бачити на фіг. 7. На фіг. 7, "захищені" стосується насіння, обробленим представником сімейства Васійн5 сегеи5 ЕЕЗ349, і "незахищені" стосується необробленого насіння. На осі у представлена довжина кореня, нормалізована до 60 довжини кореня контролю, обробленого тільки водою. На фіг. 7 показано, що в міру збільшення концентрації гербіциду інгібування росту коренів також збільшувалося. Однак нанесення представника сімейства Васійн5 сеген5 ЕЕЗ349 на насіння пом'якшувало значну частину цього інгібування, навіть при повній концентрації гербіциду в грунті. Таким чином, як можна бачити з фіг. 7, представник сімейства Васіїйн5 сегени5 ЕЕ349 може діяти як антидот. 001100) Більше того, здатність представника сімейства ВасйШи5 сегеиз ЕЕ349 експресувати злиті білюиим продемонстрований у прикладі 51 нижче. Таким чином, представника сімейства
Васійи5 сегеиз ЕЕ349 можна використовувати як антидот подвійного призначення і хазяїн для експресії злитих білків, які містять націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій.
Приклад 50. Одержання рекомбінантних представників сімейства Васійи5 сегеив, які надекспресують ферменти екзоспорію, і ефекти таких рекомбінантних представників сімейства
ВасшШив сегеи5 на рослини (001101) Екзоспорій представників сімейства Васіїйи5 сегеи5 природним чином містить різні природні ферменти, що можуть мати корисні ефекти на рослини. Наприклад, екзоспорій представників сімейства Васійи5 сегеи5 містить ферменти, залучені в солюбілізацію поживних речовин (наприклад, кислі фосфатази, такі як Асрс), інозинуридингідролази, протеази (наприклад, метталопротеїнази, такі як ІпПпАт, ІппА2 ії ІппАЗ), ферменти, які каталізують деградацію вільних радикалів (наприклад, супероксиддисмутази, такі як БОБАТ і БОБАХ), аргінази й аланінрацемази. Надекспресія таких ферментів у представниках сімейства ВасіПив5 сегеи5 може забезпечити рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, що буде мати корисні ефекти при внесенні на насіння, рослини, у середовище для росту рослин або в область, яка оточує рослину або насіння рослини. (001102) Металопротеїнази ІппАг і ІппАЗ, кислу фосфатазу (Асрс) і супероксиддисмутазу 1 і 2 ампліфікували способом ПЛР із їх нативними промоторами за допомогою праймерів, що містили ділянки Хпої (амінокислотні послідовності для ІппА2г, ІппАЗ, АсрС, БОБА1 ії БОБА 2 представлені вище в таблицях 1 і 2, і нуклеотидні послідовності для нативних промоторів для цих білків представлені в таблиці 3). Продукти ПЛР розщеплювали ХпоЇ і клонували в човниковий вектор ЕЕ. соїй/Васій5 рНРІЗ через їхню ділянку заїЇ. Правильні клони підтверджували способом ПЛР і секвенуванням ДНК. Плазміди вводили в Васіїив5 ІПигіпдіеп5ів
Зо ВТО1ЗА і Васіи5 тусоїдез ЕЕ155. Правильні клони піддавали скринінгу шляхом посіву на чашки з агаром ЇВ, що містив хлорамфенікол. Нічні культури правильних клонів вирощували в бульйоні із серцево-мозковою витяжкою, який містив хлорамфенікол, і 1 мл цієї нічної культури інокулювали в 50 мл поживного бульйону і культивували протягом З доби при 302С. Споруляцію підтверджували за допомогою світлової мікроскопії. Потім спори піддавали ферментативним аналізам. 0011031 Спори Васійи5 тусоїде5 ЕЕ155, які надекспресують Асрс (тобто спор, що містять плазміду РНР13-АсрС (кисла фосфатаза)) аналізували відносно активності фосфатази. Один мілілітр культури для споруляції осаджували й осад ресуспендували в 1 мл РВ5, і досліджували в аналізі фосфатази відносно активності проти рМРР. (п-нітрофенілполіфосфат), як описано вище в прикладі 48. Спори, які надекспресують АсрС, мали значно більш високу активність фосфатази, як проілюстровано на фіг. 8. На фіг. 8, на осі у показані одиниці фосфатазної активності, визначені по вивільненню п-нітрофенолу. 0011041) Збільшена активність кислої фосфатази, що спостерігається для спор Васійи5 тусоїде5 ЕЕ155, модифікованих для надекспресії АсрС, можуть солюбілізувати поживні речовини при додаванні таких спор у середовище для росту рослин або нанесенні таких спор на насіння рослини, рослину або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. Оскільки фосфат є дуже важливою поживною речовиною для росту і розвитку рослин, це може підсилити ріст рослини і забезпечити корисні ефекти на здоров'я рослини. 001105) Аналогічно, супероксиддисмутаза є дуже потужним антиоксидантним білком.
Надекспресія супероксиддисмутази в представнику сімейства Васійи5 сегени5 може забезпечити спори, які мають здатність деградувати вільні радикали, що впливають на рослини. Видалення вільних радикалів може пом'якшити до деякої міри цей стресовий вплив і привести до збільшеної потужності рослин у стресових умовах. Спори Васійи5 Іпигіпдіепзіє ВТО1ЗА, які надекспресують БОБАТ і БОБА2 (тобто спори, трансформовані плазмідами рНР13-5ОБАЇ і рРНРІ3-БОБВА2, відповідно), можна піддавати ферментативному аналізу. Один мілілітр культури для споруляції можна осаджувати й осад можна ресуспендувати у 1 мл ЯаН2гО, що містить ксантин. Потім у реакційну суміш можна додавати ксантиноксидазу, а також цитохром С.
Інгібування деградації цитохрома С у цьому аналізі вказує на активність супероксиддисмутази.
І001106| Спори Васійн5 тусоїде5 ЕЕ155, які надекспресують цинкову металопротеїназу бо (тобто спори, трансформовані плазмідою рНР13-ІппАг), піддавали ферментативному аналізу.
Один мілілітр культури для споруляції осаджували й осад ресуспендували в 1 мл РВ5. Потім спори піддавали реакції з 0,595 азоказеїном, субстратом протеази, протягом 5 хвилин. Ці реакційні суміші осаджували за допомогою ТСА (трихлороцтова кислота) для видалення нерозщепленого казеїну і виконували зчитування поглинання вільного азобарвника, який залишився, при АВ5595. Спори, які надекспресують ІппА?, мали на 21195 більш високу протеазну активність у порівнянні з нерекомбінантними спорами Васіїйи5 тусоїде5 ЕЕ155.
Ї001107| Приклади З і 7, вище, ілюструють, що експресія протеази на екзоспорії представника сімейства Васійи5 сегени5 може забезпечити корисні ефекти на рослини. Спори
Васійив5 ІпПигіпдіепзі5 ВТО1ЗА з ІппАТ, ІппА2 або ІппАЗ можуть мати подібні ефекти при внесенні в середовище для росту рослин або нанесенні на насіння рослин, рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини.
Приклад 51. Експресія злитих білків у ендофітному штамі сімейства Васійи5 сегеив5 (001108) Було виявлено, що представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ349 має здатність до ендофітного росту і здатний служити як штам-хазяїна для системи ВЕМО. Для демонстрації здатності представника сімейства ВасйШи5 сегеи5 ЕЕЗ349 до ендофітного росту і здатності служити як штам-хазяїна для системи ВЕМО, представник сімейства Васійй5 сегеи5 ЕЕЗ349 трансформували плазмідою рР2ЗОРЕК-ВсіА 20-35-ендоглюканази (описаної вище в прикладі 44).
Спори одержували й очищали, як описано вище приклад 40. 001109) Ці спори розбавляли до концентрації 1х105 спор/50 мл води, а потім 50 мл води додавали до комерційного гібридного насіння кукурудзи в горшкову грунт при посіві. Насіння кукурудзи покривали фунгіцидом і біологічним інокулятом. Гібридний сорт кукурудзи являв собою ВЕСК 5475ЕК, що містить ген резистентності до гліфосату КООМОШР КЕАОМУ і ген резистентності до посухи АЛОШШАМАХ. Рослини вирощували при штучному освітленні протягом 14 годин на добу і визначали ріст рослин протягом десяти діб. Рослини поливали кожні три доби в ході експерименту. Через десять діб вимірювали висоту рослин і її нормалізовували до висоти необроблених рослин кукурудзи. Результати цих експериментів представлені в таблиці 53.
Таблиця 53
Ефекти ендофітного представника сімейства Васійи5 сегецй5, який експресує злитий білок ВсіІА 20-35-ендоглюканаза, на ріст проростків кукурудзи . - Ріст кукурудзи
Представник сімейства Васійи5 о ендоглюканаза сегеиз ЕЕЗ349 МО 001110) Як можна бачити з даних, показаних у таблиці 53, експресія конструкції РЖ3ЗОРЕК-
ВСІА 20-35-ендоглюканаза в ендофітному штамі представника сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ349 приводила до збільшеного росту кукурудзи в порівнянні з необробленими рослинами або рослинами, обробленими тільки представником сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ349. 001111) Потім представник сімейства Васійи5 сегеи5 349, який експресує ВсСІА 20-35- ендоглюканазу, виділяли з рослин кукурудзи. Рослини, які росли протягом десяти діб, витягали з грунту і промивали для видалення надлишкового дебрису. Потім рослини перевертали, піддавали впливу відбілювача 595 протягом десяти хвилин, промивали водою, піддавали впливу пероксиду водню (1095) протягом десяти хвилин, знову промивали водою і стебла розрізали стерильним лезом бритви. Розділені половини стебел вміщували лицьовою стороною вниз на чашки з поживним агаром на дві години. Через дві години стебла видаляли і чашки з агаром інкубували при 302С протягом 48 годин. Через 48 годин чашки досліджували відносно морфології колоній, і колонії представників сімейства Васійи5 сегеи5, виявлені усередині рослини, відбирали зубочисткою на чашки з поживним агаром і чашки з поживним агаром плюс тетрациклін (для селекції бактерій, що містять плазміду Р23ЗОРЕК-20-35 ВсіА-ендоглюканаза).
Отримане збільшення кількості колоній представника сімейства Васійй5 сегеи5 349 представлено в таблиці 54. Ці результати демонструють здатність до внесення системи ВЕМО у рослину-мішень у ендофітному штамі представника Васійи5 сегеий5.
Таблиця 54:
Ендофітний аналіз представника сімейства Васіїйи5 сегени5 ЕЕ349 с. Бактерії сімейства ІРезистентні до тетрацикліну актерії «усього) й штами) Васійи5 сегеив5
НеО(контроль).ї/////77777771 77111156 17771111 11111101
Представник сімейства
Васійн5 сегеи5 ЕЕЗ349, трансформований рРЗОРЕК- 221 ба 21 20-35 ВсіА-ендоглюканазою (001112) Резистентні до тетрацикліну клони Васійй5 вирощували протягом ночі при 302С у бульйоні із серцево-мозковою витяжкою плюс тетрациклін і осаджували центрифугуванням при 10000х9 протягом 5 хвилин. Супернатант видаляли й осад заморожували протягом ночі при - 2026. Потім хромосомну ДНК екстрагувавли з кожного клону і визначали присутність плазміди рРОШРЕВ-20-35 ВсіА-ендоглюканаза за допомогою трансформації хромосомної ДНК (яка містить плазміду) у клітини ОНба БЕ. соїї і посіву на чашки з ЇВ плюс ампіцилін. Правильні клони піддавали аналізу послідовності ДНК, який підтверджував, що представник сімейства Васійб5 сегец5 349 знаходиться усередині рослини (був ендофітним) і містив плазміду. 001113) Багато ендофітних бактерій були виявлені в проростках кукурудзи, причому ряд різних штамів і видів сімейства Васійи5 сегеи5 виявлявся усередині як контрольних рослин, так і рослин, оброблених ЕЕЗ349. Резистентні до тетрацикліну представники сімейства Васійи5 сегейв5 (що вказує на присутність плазміди рРЕОРЕК-20-35 ВсІА-ендоглюканаза) виявлялися тільки в оброблених проростках кукурудзи, і усі з них мали ту ж морфологію колоній, що і вихідний ексересуючий хазяїн, представник сімейства Васіййи5 сегеи5 ЕЕЗ349. Присутність плазміди
РООРЕВК 20-35 ВсіА-ендоглюканаза підтверджували ампліфікацією способом ПЛР (із використанням унікальних праймерів.
Приклад 52. Виділення, ідентифікація й охарактеризація ендофітних бактеріальних штамів сімейства Васіїйи5 сегеи5 001114) На додаток до ендофітному штаму представника сімейства Васійи5 сегей5 349, описаного вище в попередньому прикладі, також було ідентифіковано кілька інших представників сімейства Васіїйн5 сегеи5, що мають здатність до ендофітного росту: представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ439, Васійи5 ІПигіпдіепбзіз ЕЕ417, Васійи5 сегени5 ЕЕ444, Васі
І Пигіпдіепсіє ЕЕЗ19, Васі Іигіпдіепбвіє ЕЕ-800184, Васійн5 тусоїдез5 ЕЕ-800363, Васіїїи5 рзепдотусоїде5 ЕЕ-800366 і представник сімейства ВасіШйи5 сегеиз ЕЕ-800377. (001115) Для одержання цих додаткових представників сімейства Васійи5 сегеи5 виконували посів комерційних гібридних насінин кукурудзи в горшкову грунт і дозволяли їм рости. Насінини кукурудзи покривали фунгіцидом і біологічним інокулятом. Рослини вирощували при штучному
Зо освітленні протягом 14 годин на добу і визначали ріст рослин протягом 14 діб. Рослини поливали кожні три доби в ході експерименту. Через 14 діб рослини витягали з грунту і відмивали для видалення надлишкових залишків грунту. Потім рослини перевертали, піддавали впливу 595 відбілювача протягом десяти хвилин, промивали водою, піддавали впливу пероксиду водню (1095) протягом десяти хвилин, знову промивали водою, і стебла розділяли стерильним лезом бритви. Розділені половини стебел вміщували лицьовою стороною вниз на чашки з поживним агаром на дві години. Через дві години стебла видаляли і чашки з агаром інкубували при 302С протягом 48 годин. Через 48 годин чашки досліджували відносно морфології колоній, і колонії представників сімейства Васійи5 сегеи5, виявлені усередині рослини, відбирали зубочисткою на поживний агар. Потім їх вирощували протягом ночі при 30 "С у бульйоні із серцево-мозковою витяжкою й осаджували центрифугуванням при 10000х4 протягом 5 хвилин. Супернатант видаляли й осад заморожували протягом ночі при -2020. Потім хромосомну ДНК кожного клону екстрагували і підтверджували ідентичність кожної колонії способом ПЛР із використанням праймерів для 165 рРНК і амплікони відправляли на секвенування ДНК і ідентифікацію. Послідовності 165 рРНК для цих штамів представлені вище в таблиці 13.
Приклад 53. Виділення, ідентифікація й охарактеризація додаткових ендофітних бактеріальних штамів (не представники сімейства Васіїйц5 сегеийи5) 001116) Із проростків кукурудзи виділяли ендофітні бактеріальні штами Васійи5 тедаїегійт
ЕЕЗ85, Васійи5 5р. ЕЕЗ87, Васійшн5 сієсшап5 ЕЕЗ88, Васіїйив5 зибБбій ЕЕ405, І узіпібасінив5 Тивіогтів
ЕЕ442, І узіпібрасійи5 5рр. ЕЕ443 і Васійй5 ритій5 ЕЕ-800143. Проростки кукурудзи, вирощувані протягом двох тижнів, спочатку стерилізували. Рослини екстрагували з грунту і промивали для видалення надлишків залишків грунту. Потім рослини перевертали, піддавали впливу 590 відбілювача протягом десяти хвилин, промивали водою, піддавали впливу пероксиду водню (1095) протягом десяти хвилин і знову промивали водою. Стебла розрізали стерильним лезом бритви. Розділені половини стебел вміщували лицьовою стороною вниз на чашки з поживним агаром на дві години. Через дві години стебла рослин видаляли з чашок, а потім чашки інкубували при 302С протягом 48 годин. Колонії Васіїї, які були ендофітними, відбирали для подальшого аналізу. Ці штами вирощували в бульйоні із серцево-мозковою витяжкою протягом ночі при 302С, і культури піддавали екстракції ДНК із використанням набору для хромосомної
ДНК Оіадеп. ДНК ампліфікували способом ПЛР для одержання гена 165 рРНК, що відправляли на секвенування ДНК. Для отримані послідовності виконували пошук у ВГА5Т з використанням баз даних МСВІ для встановлення ідентичності виду Васіїйй. Послідовності 165 рРНК представлені вище в таблиці 14.
Приклад 54. Експресія злитих білків, що містять білок оболонки спори, у ендофітних штамах бактерій Васійи5 001117) Ендофітні бактеріальні штами Васійи5 «пигіпдіепзіє ЕЕЗ319, Васійи5 Ягти5 АЗО і
Васійи5 Іспептоптіє А4 трансформували, щоб вони містили плазміди, які кодують різні білки оболонки спори, злиті з ендоглюканазою. Одержували плазміди рРНР13-СоїС-ендоглюканаза і рНРІЗ-СдеА-ендоглюканаза. Кожна з цих плазмід кодувала білок оболонки спори (СоїС або
СдеА), злитий у рамці зчитування з поліаланіновим лінкером, що містить вісім залишків аланіну, і ендоглюканазою. Поліаланіновий лінкер і едоглюканазу піддавали злиттю з С-кінцем білків оболонки спор.
І001118| Для одержання плазмід, що кодують злиті білки, ген ендоглюканази з Васійи5 5,иБій5 168 ампліфікували способом ПЛР. Гени, що кодують білки оболонки спори СоїсС і СдеА, також ампліфікували способом ПЛР із хромосомної ДНК Васійи5 5иБбійї5 168 (СоїС) або Васійи5 атуїоїїдцеїтасієпе (СдеА). Потім правильні амплікони піддавали сплайсингу способом перекривної ПЛР з одержанням фрагмента ДНК злитого білка за допомогою відпалу
Зо гомологічних виступаючих кінців розміром 15 п.н. Кожний із зовнішніх праймерів конструювали так, щоб вони містили ділянки ХпоЇ. Амплікони очищали набором для очищення продуктів ПЛР
Рготеда, і ДНК розщеплювали Хпої! і лігували в ділянку ЗаіїЇ рНР13. Потім плазмідну ДНК секвенували, трансформували в клітини Е. сої і ДНК вводили в різні ендофітні штами ВасійЇїи5.
ІЇ001119)Ї Спори кожного з рекомбінантних видів Васійи5, які експресують злиті білки, одержували шляхом зняття нічних культур на чашки з поживним агаром, які потім інкубували при 302С протягом 72 годин. Через 72 годин бактеріальні спори збирали з рослин шляхом зняття в стерильний РВ5. Спори очищали центрифугуванням у градієнті щільності три рази, розбавляли до 1х109 к.у.о./мл, і аналізували відносно активності ендоглюканази, як описано вище в прикладі 45. Результати цього аналізу представлені в таблиці 55 нижче і на фіг. 9.
Таблиця 55
Активність ендоглюканази в спорах ВасіП5, які експресують злиті білки СоїС-ендоглюканаза або
СаеА-ендоглюканаза ферментів/активність 001120) На фіг. 9, СоїС1, СоїС2 і СоїСб3 являють собою три окремі експериментальні культури для споруляції Васіїйи5 (пигіпдіепзі5 ЕЕ319 з РНР13-СоїС-Епао.
Приклад 55. Ефекти спор Васійи5, які експресують злиті білки СоїС-ендоглюканаза, СоїВ- ендоглюканаза або СдеА-ендоглюканаза, на ріст насіння кукурудзи і сої 0011211) Спори рекомбінантного виду Васіїш5, які експресують злиті білки, що містять білок оболонки спори і ендоглюканазу (наприклад, злиті білки СоїС-ендоглюканаза, СоїВ- ендоглюканаза або СдеА-ендоглюканаза, описані вище в попередньому прикладі) можна досліджувати відносно їхніх ефектів на ріст рослин (наприклад, кукурудза і соя) у такий спосіб.
Спори можна одержувати, як описано вище в попередньому прикладі, промивати, розбавляти до 1х108 к.у.о./мл у воді і наносити на насіння рослин (наприклад, насіння кукурудзи і сої) у кількості їх105-7 спор/насінина. Потім спор можна наносити або як обробку насіння, або як полив грунту. Рослини можна саджати на глибину 1" (2,54 см) у 4" (10,16 см) горщики, і вирощувати 18,32С з циклом 13 годин на світлі/у темряві. Через дві доби можна визначати висоту рослин і довжину коренів.
Приклад 56. Доставка пробіотичних бактерій тваринам шляхом годування тварин рослинами, що містять такі бактерії 001122) Пробіотичні бактерії можна доставляти тваринам (наприклад, домашня худоба, риби або інші тварини) шляхом внесення пробіотичних бактерій на насіння рослини, у середовище для росту рослин (наприклад, за допомогою внесення в борозну грунту), на рослину (наприклад, шляхом позакореневого нанесення) або на область, яка оточує рослину або насіння рослини, а потім годування такими рослинами або рослинами, вирощеними з насіння рослин, тварини. Бактерії можна наносити на листя або стебла рослин поки рослини ростуть, і вони будуть колонізувати філоплану (поверхню листя і стебла). Рослини перед годівлею тварини можна піддавати переробці в корм для тварин. 0011231) Використання ендофітних штамів бактерій у таких способах дозволяє бактеріям вижити і залишатися в тканині рослини, так що вони будуть у значних кількостях проковтуватися твариною при вживанні рослинного матеріалу з рослини. Наприклад, вважають, що штами представника сімейства Васійш5 сегениз ЕЕ349, представника сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ439,
Васі Іигіпдіепвіз ЕЕ417, Васіїїи5 сегеи5 ЕЕ444, Васійи5 тедаїегішт ЕЕЗ85, Васійив5 5р. ЕЕЗ87,
Васі сіксшапе ЕЕЗ88, Васійи5 зиБіШв5 ЕЕ405, І узіпірасіїи5 Ти5Погтів ЕЕ442, І узіпівбасійи5 5рр.
ЕЕ443 і Васійи5 ритіїи5 ЕЕ-800143 є пробіотичними і ендофітними, і їх можна використовувати в цих способах. 001124) Будь-який з цих штамів або інших пробіотичних і ендофітних штамів можна вирощувати й одержувати спор, як описано вище в прикладі 40. Потім спори можна вносити в середовище для росту рослин, наносити на насіння рослини, рослину або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. Рослини, вирощені в середовищі для росту рослини,
Зо рослини, вирощені з насіння рослин, рослини, на які нанесені бактерії, або насіння рослин, вирощені в області, на яку нанесені бактерії, можна вирощувати, а потім ними можна годувати тварину. Ендофітні бактерії можуть колонізувати внутрішню тканину рослини і можуть реплікуватися в значних кількостях усередині рослини. Бактерії будуть спорулювати при використанні традиційних способів збору врожаю, забезпечуючи тривале збереження рослинного матеріалу (наприклад, як сіно або силос), яким пізніше можна годувати цільову тварину. 001125) У цих способах необхідно використовувати тільки невелика кількість бактерій, оскільки ендофітні бактерії природним чином колонізують рослини і проліферують на й у рослинах.
Приклад 57. Доставка корисних ферментів тваринам шляхом годування тварин рослинами, що містять рекомбінантний представник сімейства Васіййи5 сегеи5 або інші рекомбінантні бактерії, які експресують злитий білок, який містить корисний фермент 001126) Рекомбінантні представники сімейства Васійй5 сегеи5, які експресують злитий білок, який містить білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій, що описані в даному описі, також можна використовувати для доставки корисних ферментів тваринам. Рекомбінантними представниками сімейства Васіййє5 сегенє можна годувати безпосередньо тварин (наприклад, шляхом примішування рекомбінантного представника сімейства ВасіШи5 сегеи5 у корм для тварин, яким згодом годують тварину). Альтернативно способи доставки бактерій тваринам, описані вище в попередньому прикладі, можна використовувати разом з рекомбінантним представником сімейства Васій5 сегеиб5, який експресує злитий білок, який містить білок або пептид, що має корисні ефекти у тварини (наприклад, фермент, що сприяє перетравлюванню рослинного матеріалу).
І001127| Ферменти, які присутні у кормі для домашньої худоби, риб і інших тварин, можуть впливати на засвоєння поживних речовин, кількість продукції і здоров'я тварини, яка вживає ферменти. Ферменти, які є корисними для здоров'я тварини, включають, наприклад, ксиланази, фітази, фосфатази, протеази, целюлази, ендоглюканази, глюканази, амілази, ліпази, фосфоліпази, глікозилази, галактанази, а-галактозидази, амілази, пектинази, біотинази і полігалактуронази, серед інших. Систему ВЕМО можна використовувати для експресії таких бо ферментів на поверхні екзоспорію. Рекомбінантні представники сімейства Васійи5 сегец»5, які експресують злитий білок, який містить один з цих ферментів, можна вносити в середовище для росту рослин, на насіння рослин, або рослину на область, яка оточує рослину або насіння рослини. Аналогічно, у цих способах можна використовувати рекомбінантні бактерії, які експресують злитий білок, який містить один з цих ферментів, і білок оболонки спори, що націлює злитий білок на поверхню спори бактерії. Рекомбінантні бактерії можна вносити в середовище для росту рослин, на насіння рослини або рослину, або на область, яка оточує рослину або насіння рослини. Рослини, вирощені в середовищі для росту рослин, рослини, вирощені з насіння рослин, рослини, на які нанесені бактерії, або рослини або насіння рослин, вирощені в області, на яку нанесені бактерії, можна вирощувати, і потім годувати ними тварину, і таким чином, тварині доставляти корисний фермент. Бактерії будуть спорулювати при застосуванні традиційних способів збору, що дозволяють тривале збереження рослинного матеріалу (наприклад, такого як сіно або силос), яким згодом можна годувати цільову тварину. (001128) Ендофітні штами представників сімейства Васіїййи5 сегеи5 можна використовувати як хазяї для експресії злитих білків, що містять білок або пептид, який представляє інтерес (наприклад, фермент, що має корисні ефекти у тварин), і націлювальну послідовність, білок екзоспорію, або фрагмент білка екзоспорію, що націлюють злитий білок у екзоспорій.
Наприклад, як хазяї можна використовувати ендофітні штами представника сімейства Васійй5 сегеи5 ЕЕЗ349, представника сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ439, Васійи5 ІВПигіпдіепвіз ЕЕ417,
ВасшШив сегеи5 ЕЕ444 і Васійи5 (Пигіпдіепзі5 ЕЕЗ19, описані в даному описі. 001129) Додаткові представники сімейства Васійи5 сегеи5 можна вибирати для нанесення на надземну частину рослини, оскільки ці бактерії не повинні бути ендофітними для колонізації філоплани. Наприклад, для цієї мети можна використовувати Васійй5 тусоїде5 ВТ155, Васійив5 тусоїде5 ЕЕ118, Васійй5 тусоіїде5 ЕЕ141, Васійш5 тусоїдез5 ВТ46-3, представник сімейства
Васйи5 сегеи5 ЕЕ218, Васійи5 (Пигіпдієпзіз ВТО1ТЗА, Васійи5 (Пигіпдіеєпзі ЕЕ-800184, Васпив тусоіїдез ЕЕ-В800363, Васійй5 рзейдотусоїдез5 ЕЕ-800366 або представник сімейства ВасшШив сегеиз ЕЕ-В00377. 0011301) Аналогічно, ендофітні штами рекомбінантних бактерій можна використовувати як хазяї для експресії злитих білків, що містять білок або пептид, який представляє інтерес, і білок оболонки спори, що націлює злитий білок на поверхню спори бактерії. Наприклад, як хазяї
Зо можна використовувати ендофітні штами Васійи5 тедаїегішт ЕЕЗ385, Васійи5 зр. ЕЕ387, ВасшШив сіксшапе ЕЕЗ88, Васійив5 5ибійв ЕЕ405, І увіпірбаси5 Тизїогтів ЕЕ442, І увіпібасіи5 5рр. ЕЕ443 або Васійи5 ритійи5 ЕЕ-800143. 0011311) Використання ендофітних штамів бактерій у цих способах дозволяє бактеріям вижити і залишатися в тканині рослини, так що як бактерії, так і злиті білки, які експресуються бактеріями, будуть проковтувати в значних кількостях твариною при вживанні рослинного матеріалу з рослини. Таким чином, за допомогою простого додавання рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 або інших рекомбінантних бактерій при посіві, корисні ферменти можна поширювати в тканині рослини і доставляти тваринам за допомогою вживання ними рослинного матеріалу.
Приклад 58: Застосування різних націлювальних послідовностей для експресії ендоглюканази на поверхні спор представника сімейства Васійн5 сегеи5, і використання таких спор для стимуляції росту рослин
І001132| Плазміду рР3БОРЕК модифікували шляхом клонування отриманого за допомогою
ПЛР фрагмента способом гомологічної рекомбінації, який здійснював злиття промотору ВСІА, ініціюючого кодона й амінокислот 20-35 ВСІА (амінокислоти 20-35 5ЕО ІО МО: 1) у рамці зчитування з ендоглюканазою Васійи5 зирійз 168 (рР2БОРЕК-ВсіА 20-35-Епадо), як описано вище в прикладі 44. Потім цю плазміду піддавали зворотній ПЛР для ампліфікації усього плазмідного кістяка, за винятком послідовності, що відповідає амінокислотам 20-35 ВсІА. Цей продукт зворотної ПЛР комбінували з продуктом ПЛР, який ампліфікував еквівалентну область з будь-
БО якої з 5ЕО ІЮО МО: 5, 15, 25, 81, 85, 87 або амінокислот 20-33 5ЕО ІЮО МО: 1. Таким чином, одержували конструкції, що містили кожну з наступних націлювальних послідовностей, злиту в рамці зчитування з ендоглюканазою Васійи5 5ибійї 168: (1) амінокислоти 20-35 5ЕО ІО МО: 1; (2) амінокислоти 23-38 5ЕО ІЮ МО: 5; (3) амінокислоти 28-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (4) амінокислоти 9- 24 ЗЕО ІЮ МО: 25; (5) амінокислоти 23-38 ЗЕО ІЮ МО: 81; (6) амінокислоти 13-28 5ЕО І МО: 85; (7) амінокислоти 13-28 5БЕО ІО МО: 87; і (8) амінокислоти 20-33 5ЕО ІЮ МО: 1. Кожна конструкція містила промотор ВсСІА дикого типу і метіонін у положенні ініціюючого кодона, за якими йшла націлювальна послідовність, злита в рамці зчитування з геном ендоглюканази Васійнй5 5и,ибБійів5.
Кожну з цих конструкцій трансформували в Е. сої і висівали з одержанням окремих колоній на чашках із середовищем Луріа плюс ампіцилін (100 мкг/мл). Плазміди з кожної окремої колонії бо вирощували в нічних культурах у бульйоні Луріа плюс ампіцилін, і очищали з використанням мініпрепаративного набору УМІФАКО ЗМ, і послідовності підтверджували секвенуванням по методу Сенгера. ДНК також кількісно визначали за допомогою спектрофотометрії, і ДНК вводили в Васійи5 ІПигіпдіепзіз ВТО1ЗА. Крім того, конструкцію реШРЕК-ВсіА-20-35 Епао вводили в Васіїйи5 (пигіпдіепзіз ВТО1ТЗА, з генома яких був видалений нативний білок ВсіІА за допомогою гомологічної рекомбінації (нокаут ВсСІА, "ВсІА КО"). Правильні колонії піддавали скринінгу шляхом посіву на чашки з поживним бульйоном, що містить антибіотик (тетрациклін у кількості 10 мкг/мл). Кожну позитивну колонію вирощували в бульйоні із серцево-мозковою витяжкою при 30 "С протягом ночі при 300 об./хв. з антибіотиком, і геномну ДНК очищали і повторно секвенували для підтвердження генетичної чистоти. Підтверджені колонії вирощували протягом ночі в бульйоні із серцево-мозковою витяжкою з 10 мкг/мл тетрацикліну і індукували до споруляції за допомогою споруляції в середовищі на основі дріжджового екстракту. 001133) Кожну продуковану партію в середовищі на основі дріжджового екстракту збирали через 48 годин після продукції спор і піддавали порівнянню ферментів в отриманих спорах з використанням методології, описаної в прикладі 45. Поглинання визначали при 540 нм із використанням нанофотометра ІМРІ ЕМ РЗ330. Для кожної реакції було три зразки і порожній зразок. Результати визначення ферментів представлені в таблиці 56.
ІЇ001134| Для кукурудзи 1 мкл цільного бульйону в кожному випадку для будь-якої з конструкцій вміщували на кожну насінину. Для патисона 2 мкл цільного бульйона для кожної конструкції наносили на кожну насінину. Для цього 50 насінин вміщували в 50-мл пропіленову пробірку з конічним дном і злегка струшували з використанням вихрового змішувача. У пробірку з цими обертовими насінинами повільно додавали піпеткою 50 мкл (для кукурудзи) або 100 мкл (для патисона) бульйону, що містив рекомбінантні спори, і струшуюча дія покривала насінини рівномірним покриттям бульйону з цільними клітинами для кожної конструкції. Потім ці насінини висівали на глибину 1" (2,54 см) у природний грунт із використанням горщика для посіву розміром 39,6 см3 (15,6 дюймів"), по дві насінини на горщик. Потім горщики поливали до насичення і рослинам дозволяли проростати. Рослини вирощували в приміщенні для контрольованого росту при 709Е протягом дня і 60О?Е увечері зі світловим періодом 14 годин/добу, в умовах штучного освітлення протягом 14 діб. Через 14 діб вимірювали ріст рослин і результати нормалізовували до контрольної групи, у якій виконували обробку тільки водою як
Зо обробку насіння.
Таблиця 56
Рівні ферментів і фенотипи росту рослин
Рівні й . Фенотип Середня
Націлювальна ферменту Ідентичність Ідентичність ост Фенотип зміна
Ц росту послідовність ендоглю- |послідовності з| послідовності з а.к. кукуруд- росту фенотипу канази (ак. 20-35 ВсіА 25-35 ВСІА патисон зи рослини (мО/мл)
А.к. 20-35
ВСІА (5ЕО І 382 10096 10096 11296 94796 103,496
МО: 1
Ак. 23-38 о о о о о
А.к. 28-43
ЗЕО ІЮ МО: 16,7 68,89 81,896 115,79 103,496 109695 15
А.к. 9-24 5ЕО о о о о о
Ак. 23-38
ЗЕО ІЮ МО: 21,5 50,09 тато 106,79 98,396 102596 81
А.к. 13-28
ЗЕО ІЮ МО: 38,3 Аз, 54596 99,79 100,59 100195 85
Рівні й . Фенотип Середня
Націлювальна ферменту Ідентичність Ідентичність ост Фенотип зміна
Ц росту послідовність ендоглю- |послідовності з| послідовності з а.к. кукуруд- росту фенотипу канази (ак. 20-35 ВсіА 25-35 ВСІА патисон зи рослини (мО/мл)
А.к. 13-28
ЗЕО ІЮ МО: 14,4 Аз, 54596 102695 104195 103,496 87
А.к. 20-33 о о о 102,790 томол|р яв | кое полк тет
А.к.20-35 5ЕО
ІО МО: 1 у о о
ВТО1ЗА Всі 100,8 10096 10095 МО МО МО ів) а.к-хамінокислоти
МО:не визначено 001135) Представлені вище дані показують, що кожна з цих конструкцій була здатна стимулювати ріст рослин, і показують, що використання різних націлювальних послідовностей дозволяє контролювати рівень експресії ферменту зовні спори. (001136) Використання амінокислот 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1 або а.к.13-28 5ЕО ІЮО МО: 85 як націлювальної послідовності привело до найбільш високих рівнів продукції ферменту. Це є несподіваним з урахуванням низького ступеня ідентичності між цими націлювальними послідовностями (ідентичність 43,895 протягом усієї довжини націлювальної послідовності).
Використання амінокислот 28-43 5ЕО ІЮ МО: 15 або амінокислот 9-24 5ЕО ІО МО: 25 приводило до найбільш високої відповіді рослин серед двох типів рослин. Експресія злитого білка, що містить амінокислоти 20-25 5БЕО ІО МО: 1, як націлювальної послідовності у хазяїні ВТО1ЗА ВсіА
КО, привела до дуже великого (263,895) збільшення рівня ферментативної активності на поверхні спор у порівнянні з експресією того ж злитого білка в штамі дикого типу.
Приклад 59: Використання різних націлювальних послідовностей і білків екзоспорію для експресії фосфоліпази, ліпази і ендоглюканази на поверхні спор представника сімейства
ВасШиз сегеицз і застосування таких спор для стимуляції росту рослин
І001137| Плазміду Р3ОРЕК модифікували за допомогою клонування отриманого способом
ПЛР фрагмента (розщеплення Хпої і лігування), у якому були злиті промотор ВСІА, ініціюючий кодон і амінокислоти 20-35 ВсіА (амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1), за яким йшла лінкерна послідовність із шести залишків аланіну, у рамці зчитування з геном або фосфатидилхолін- специфічної фосфоліпази С Васійи5 (пигіпдіепві5 (РС-РІ С) (РЗБОРЕВ-ВсІА 20-35-РІ)), або ліпази
ПрА ВасшШив 5!,ибійб5 (реШРЕК-ВсіА-20-35-ліпаза), або ендоглюканази едіз5 Васійи5 5ибБії5 (РЗОРЕВ-ВсіА-20-35-Епдо) як описано вище в прикладі 44. Потім ці плазміди піддавали зворотної ПЛР для ампліфікації всього кістяка плазміди, за винятком послідовності, що відповідає амінокислотам 20-35 ВсіІА. Цей продукт зворотної ПЛР комбінували з продуктом ПЛР, що ампліфікував еквівалентну область з будь-якої з 560 ІЮ МО: 5 (тобто амінокислоти 23-38
ЗЕО ІЮ МО: 5), 15 (тобто амінокислоти 28-43 5ЕО ІЮ МО: 15) і 25 (тобто амінокислоти 9-24 5ЕО
ІО МО: 25); повнорозмірні білки екзоспорію 5ЕО ІЮ МО: 120, 111, 121, 108 і 114 або амінокислоти
Зо 20-33, 20-31, 21-33, 23-33 або 23- 31 5ЕО ІО МО: 1. Кожна з цих конструкцій містила промотор
ВсіІА дикого типу, метіонін у положенні ініцюючого кодона, за яким йшла націлювальна послідовність, або білок екзоспорію, злиті в рамці зчитування з геном фосфатидилхолін- специфічної фосфоліпази С Васіїййи5 сегеи5, ліпази ГірА Васійн5 з,ибБрій5 168 або ендоглюканази едіз Васійиб5 5!Иирійй5 168. Кожну з цих конструкцій піддавали скринінгу відносно правильних трансформантів, як описано в прикладі 58 вище. 001138) Кожну продуковану партію в середовищі на основі дріжджового екстракту збирали через 48 годин після продукції спор і піддавали порівнянню ферментів отриманих спор.
Одержання даних про ферменти для ендоглюканази виконували, як описано вище в прикладі 58. Для аналізу ферменту фосфоліпази С 1 мл рекомбінантних спор осаджували при 10000х43 протягом З хвилин і супернатант видаляли і викидали. Потім осад зі спорами ресуспендували в
Б500-мкл реакційному буфері (0,25 мМ Ттіз-НСІ, 6095 гліцерин, 20 мМ о- нітрофенілфосфорилхолін, рН 7,2). Негативний контроль для аналізів ферментів містив спори
ВТО13А без експресії ферментів. Кожен зразок інкубували при 372С протягом 18 годин, знову центрифугували для видалення спор, розбавляли 1:1 у воді і виконували зчитування Аб5540 з використанням спектрофотометра. Це порівнювали зі стандартною кривою проти комерційно придбаних контролів фосфоліпази і ліпази для встановлення активності в О/мл. Результати дані визначення ферментів представлені в таблиці 57 і в таблиці 58.
Таблиця 57
Рівні ферменту ендоглюканази
Ак. 20-35 БЕО ІО МО: 1
ЗЕО Ю МО: 120
ЗЕО Ю МО: 111
ЗЕО Ю МО: 121
ЗЕО Ю МО: 108
ЗЕОИЮ МО: 114
Ак. 20-33 БЗЕО ІО МО: 1
Націлювальна послідовність, експеримент 22 Рівні ендоглюканази (моО/мл)
А.к. 20-31 5ЕО ІЮО МО: 1 48,22
А.к. 21-33 БЕО І МО: 1 60,86
А.к. 23-33 5ЕО ІО МО: 1 19,93
А.к. 23-31 ЗЕО ІЮО МО: 1 45,31
Ак. 20-35 БЗЕО ІО МО: 1
А.к.-амінокислоти 0011391) Багато з націлювальних послідовностей і білків екзоспорію була здатна експонува велика кількість активних ферментів на поверхні спор, включаючи 5ЕО ІЮО МО: 108, 111, 114, 120 ї 121. Амінокислоти 20-31, 21-33 і 23-31 5ЕО ІЮ МО: 1 забезпечили подібні рівні експресії ферментів з амінокислотами 20-35 5ЕБО ІЮО МО: 1, що вказує на те, що фрагменти менших розмірів є достатніми для експонування ферментів на поверхні спор. Тільки амінокислоти 23-33
ЗЕО ІО МО: 1 демонстрували знижений рівень експонування ферменту на спорах.
Таблиця 58
Рівні ферменту фосфоліпази
Рівні ферменту РО-РІ С Рівні ферменту ліпази
Контроль (НО 00111111 001
А.к. 20-35 5ЕО ІО МО: 1 0,787 0,436
А.к. 23-38 БЕО ІЮ МО: 5 0,688 0,602
А.к. 28-43 БЕО ІЮ МО: 15 0,372 0,228
А.к. 9-24 5БЕО І МО: 25 0,247 0,359
ЗЕО ІЮ МО: 114 0,446 0,798
ЗЕО І МО: 120 3,612 0,753
ЗЕО ІО МО: 111 0,738 0,329
А.к.-амінокислоти 001140) Аналогічно результатам, показаним вище в таблиці 57, найбільш високі рівні фосфоліпази або ліпази на поверхні спор спостерігали, коли використовували амінокислоти 20- 35 5ЕО ІЮ МО: 1, амінокислоти 23-38 5ЕО ІЮО МО: 5 або білкову послідовність екзоспорію ЗЕО ІЮ
МО: 120. (001141) Ефекти цих спор, які експресують трохи з цих конструкцій, на утворення бульбочок у сої, представлені в таблиці 59.
Таблиця 59
Відповіді рослин на фосфоліпазу
Контроль(Неб)ї ////77777111111111111111111Ї111111111111119811с1 білок з а.к. 20-35 ЗЕО ІЮ МО: 1 і фосфоліпазу " 001142) Рослини сої покривали, як описано вище, однак аналіз виконували до періоду З тижнів. Рослини обережно витягали, з коренів обережно змивали бруд і для кожної рослини підраховували бульбочки. Як показано в таблиці 59, нанесення спор, які експонують фосфоліпазу, на насіння сої, забезпечує збільшену кількість бульбочок на рослинах, що є позитивною ознакою як раннього росту, так і кінцевого збільшення врожаю сої.
Приклад 60: Зв'язування РНК МІКЗ19 і випадкової РНК 1 зі спорами Васійи5 сегеицв, які експресують злитий білок, який містить білок, який зв'язує нуклеїнову кислоту, і застосування таких спор для доставки РНК у рослини (001143) ДНК ї РНК можна зв'язувати зі спорами представника сімейства Васійи5 сегеив5, які експресують злиті білки, які містять націлювальну послідовність, і білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, на їх екзоспорії, як описано в прикладах вище й в описі. Спори діють як механізм доставки, доставляючи нуклеїнову кислоту-мішень (наприклад, мікроРНК) у рослину- мішень. Для демонстрації цієї здатності спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 спор звичайну мікроРНК МіІКЗ19 доставляли в сою з використанням спор, які експресують злитий білок, який містить амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, злиті в рамці зчитування з відомим геном ДНК-зв'язувального білка 55рсС. МІКЗ319 має різні ефекти на фенотип рослин у різних рослинах, і навіть у різних частинах тієї самої рослини. Наприклад, у деяких видах обробка листя МІК319 приводить до скручування листя, у той час як в інших видах використання МІКЗ319 приводить до стійкості до стресових впливів. МІКЗ319 є повсюдною серед геномів рослин, є спільним регулятором каскадів, і її доставка в різні рослини приводить до різних фенотипів.
Таблиця 60
РНК, використовувані в цьому дослідженні вАаСОСОСООСАСОССАСИС (5ЕО ІЮ МО:
І ЗЕО ІЮ МО: 308
ЕЕЗІ ЗЕО ІЮ МО: 309 310
І001144| Синтетичну мікроРНК МІКЗ19 з СіІусіпе тах (соя) конструювали, щоб вона відповідала послідовності МІКЗ19, доступній в тікКВахе (тікКВазе.огду, центральний репозитарий послідовностей мікроРНК). Дві частково комплементарні одноланцюжкові послідовності синтезували в Іпієдгатед ОМА Тесппоїодіез (ІТ, Ісула), щоб вони відповідали 3'- і
Зо Б5'-продуктам зрілих генів, про які відомо, що вони існують іп мімо (використовували дві різних версії 5'-послідовності). Аналогічно, синтезували дві одноланцюжкові РНК із випадковими послідовностями, невідповідними геному сої, як контроль. Дволанцюжкові (дл) продукти генів одержували шляхом комбінування двох одноланцюжкових (ол) продуктів при 952С протягом 10 хв, а потім повільного охолодження при кімнатній температурі, щоб забезпечити відпал. Васійи5
ІШигіпдіепві5, які експресують злитий білок, який містить промотор ВсіА, залишок метіоніну в положенні ініціюючого кодона й амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1, злиті в рамці зчитування з відомим геном ДНК-зв'язувального білка 55рс (ЗА5Р а/р типу, малий розчинний у кислоті білок
С спор Васіїйи5 Пигіпдіепзіз ВТО1З3А), конструювали за допомогою стандартних методик клонування, як описано вище в прикладі 58. Цю конструкцію (55рС-ВсіА) створювали в Е. соїїЇ, трансформували в Васіїйи5 «пПигіпдіепзіз ВТО1ЗА і клони підтверджували секвенуванням ДНК.
Спори В. Пигіпдіепоі5, які експресують 55рС-ВсСІА, одержували шляхом вирощування протягом ночі трансформованих бактерій у бульйоні із серцево-мозковою витяжкою (ВНІ) протягом 2 діб в середовищі на основі дріжджового екстракту до досягнення щільності 2х108 спор на мілілітр (мл) з менше ніж 195 вегетативних клітин. ДНК екстрагували з аліквоти батьківської культури ВНІ і відправляли на секвенування для підтвердження вбудовування плазміди 55рсС-ВсІіА. Для одержання спор для обробки насіння 1 мл культури спор в середовищі на основі дріжджового екстракту осаджували центрифугуванням і ресуспендували в 100 мкл води. Цю концентровану суспензію підраховували і спори використовували в кількості бх108 спор/мл. Для кожної насінини спори 1 мкл спор комбінували з 10 мкл РНК у концентрації 10 мкМ і інкубували при 3020 протягом 2 годин (у збільшеному масштабі для множини насінин). Після цієї інкубації спори осаджували (які містять зв'язану РНК) і надлишкову незв'язану РНК у супернатанті видаляли й осад ресуспендували в 10 мкл води. Зразки наносили на насіння в такий спосіб: готували 39,6 см3 (15,6 дюймів) комерційного грунту верхнього шару торгової марки Тітрегіпе у кожному горщику і виконували поглиблення на 1 дюйм (2,54 см), у який вносили 2 мл води, і зверху вміщували одну насінину. Зразок 10 мкл спорезв'язана РНК наносили за допомогою мікропіпетки безпосередньо зверху насіння. Насіння залишали на 30 хв, а потім сусіднім грунтом вільно накривали насіння. Насінню дозволяли проростати протягом 4 діб в приміщенні для вирощування рослин зі штучним освітленням з циклом 13/11 годин на світлі/доба, і при діапазоні температур 21 "С удень/15 "С уночі. На 14 добу рослини викопували, фотографували і вимірювали. Висоту нормалізовували до висоти рослин, оброблених контролем у вигляді води (див. таблицю 61).
ІЇ001145| У прикладі 41 вище описана здатність спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 з З5рОС-ВсІА зв'язувати й утримувати ДНК. Для оцінки здатності зв'язувати РНК у спори, які експресують 55рС-ВсІіА, синтезували мічені біотином випадкові послідовності РНК за допомогою ІОТ, і інкубували зі спорами, у точності як виконували для обробок, описаних вище (1 мкл спор в кількості бх109 спор/мля10 мкл 10 мкМ РНК протягом 2 годин при 302С, осаджені і ресуспендовані в 10 мкл води). До зразка 10 мкл спор-РНК додавали авідин, кон'югований із флуоресцеїном (БІТС) (Ше ТесппоїІодіе5) у кінцевій концентрації 20 мкг/мл, і інкубували протягом 1 години при кімнатній температурі в темряві. Відомо, що авідин зв'язує біотин, і РІТС є флуоресцентною міткою. Спори знову осаджували для видалення
Зо надлишку авідину-РІТС, який не зв'язався, і ресуспенували в 495 параформальдегіді в РВХ, і зберігали при 4 "С протягом ночі в темряві. Спори досліджували відносно флуоресценції і фотографували (див. таблицю 62). Крім того, як показано на фіг. 10, спори, мічені 55рО-ВСіА, були здатні зв'язувати й утримувати як олРНК, так і длРНК, як показано по міченню РІТС- авідином спор в присутності оОлЛРНК або длРНК, зв'язаної з біотином. Для одержання результатів, показаних на фіг. 10, спори інкубували або з дволанцюжкової, або з одноланцюжкової РНК (випадкової послідовності), міченої біотином, і піддавали детекції за допомогою авідину, кон'югованого з флуоресцеїном (РІТС). На спорах, інкубованих тільки з водою, не було виявлено флуоресценції. Зображення світлопольної мікроскопії і відповідні зображення флуоресценції одержували за допомогою об'єктива 40Х і окуляру 10Х. 001146) Як видно в таблиці 61 нижче, основний ефект МІКЗ319 як обробка насіння відносно сої полягає в рості коренів і загальній висоті. Корені, що закручуються, визначали яктакі, що мають щонайменше два повороти на 1807. Висоту вимірювали для основного стебла. Коли рослини сої викопували й аналізували відносно присутності "коренів, які закручуються", специфічного фенотипу сої, що спостерігається групою авторів винаходу, не спостерігали ознак коренів, що закручуються, в обробленому водою контролі, контрольному штамі ВТО1ЗА, контролі, обробленому тільки дволанцюжковою (длРНК) РНК або спорах окремо (контроль у вигляді носія). Єдину ознаку коренів, що закручуються, відзначали, коли спори 55рС-ВСІА (носій) доставляли в насіння разом із длРНК (6095 коренів, що закручуються) (також див. фіг. 10). На фіг. 11 також представлені фенотипічні зміни рослин сої, підданих впливу спор 55рсС-ВсІА у комбінації з РНК а5МІКЗ319. Коли спори використовують для доставки РНК, вплив РНК підсилюється, що приводить до збільшеної затримки росту і фенотипу з коренями, що закручуються, представленому на фіг. 11. Для одержання результатів, представлених на фіг. 11, насіння сої обробляли дволанцюжковою (дл) МІКЗ3З19 з попереднім зв'язуванням спор В.
Іигіпдіепві5, які експресують 55рС-ВсСІА, або без нього. Застосування а5МІК319 приводило в середньому до дещо більш високих рослин; однак застосування азМіІКЗ19, зв'язаної із спорами, приводило до "коренів, що закручуються", що визначаються як наявність щонайменше двох поворотів на 1802, і до меншої висоти в цілому. Представлений серединний зразок з кожних експериментальних умов. Зображення одержували з використанням цифрової камери з рослинами разом на одному зображенні. бо (001147) Як РНК-контроль на сою наносили набір олРНК (одноланцюжкові) і длРНК. У цих експериментах випадкова олРНК не мала ефекту, коли її застосовували окремо, у той час як дДлЛРНК мала ефект затримки росту на висоту рослин при доставці на насіння. В обох випадках, коли спори (носій) використовували спільно з випадковою версією або олРНК, або длРНК, відбувалося значне посилення фенотипу затримки росту (затримка росту 3395 і 27,895, відповідно). Ця затримка росту не є помітною у випадку зразків спор (контроль у вигляді носія) окремо. Ці дані, узяті разом, демонструють здатність спор підсилювати і специфічно доставляти
ОоЛРНК їі длРНК у рослини шляхом нанесення на насіння, і демонструють здатність двох різних
РНК (випадкова Я! і МІКЗ319) впливати на фенотип при доставці через спори Васійи5 сегецв, які експресують злитий білок, який містить ДНК/РНК-зв'язувальний білок.
Таблиця 61:
Ефект МІКЗ19 відносно коренів і висоти на розвиток сої
Вода(контрол)їд 77777771
Водаєспори(контроль)д 7/7 лова
ВипадковаолРНКЯ!безспор.// | (07777771 лобові
ВипадковаолРНКЖІяспор.ї//://Ї 77777771 11111111 бобові а5МІВЗ319безспор.////////7777771СЇ7711717171717110111111111111111111111ле53Об611
ВипадковадлРНКЯ безспор.// | 07777771 824061 (ВипадковадлРНКЖ яспор.////ОЇ 77777771 5абІ111С
Таблиця 62
Флуоресцентне виявлення еспресуючих 55рсС-ВСсСіА спор зі зв'язаною міченою біотином РНК
Флуоресценція, виявлена
Споричвода (контроль фонової флуоресценції спор) зфлуоресценція РІТС) (001148) Як можна бачити в таблиці 62, на спорах без присутності РНК не було виявлено флуоресценції. На спорах виявлялася як одноланцюжкова (ол), так і дволанцюжкова (дл) РНК.
Приклад 61: Доставка нуклеїнових кислот у нематоди Саєпогпарайі5 еїєдап5 шляхом годування їх рекомбінантними спорами Васійїи5 (игіпдіепві5, які експресують злитий білок (001149) Доставка РНК і ДНК у нематоди має множину застосувань у науці рослин, для здоров'я тварин і у фундаментальних дослідженнях. Нематоди викликають значне ушкодження і утрати врожаю при комерційному і некомерційному вирощуванні ключових культур, і паразитичні нематоди викликають високу захворюваність у людини й інших тварин у багатьох бідних регіонах світу. Доставка РНК і ДНК має потенціал до пом'якшення і лікування багатьох нематодних проблем, і було продемонстровано, що доставка конструкцій РНК і ДНК є прийнятною для впливу на цільові нематоди. Цей приклад ілюструє застосовність механізму доставки РНК/ДНК, описаного вище в прикладі 60, для доставки спор у нематоди. 001150) Нематоди С. еІедапо дикого типу купували від Сагоїїпа Віоіодіса! (Могйп Сагоїіпа) і підтримували при 232С на чашках з агаром МОМ-Ї йе, покритих ОРБО Е. соїї для харчування.
Конструювали два різні штами Васіїййи5 (пПигіпдіепзіз ВТО1ТЗА за допомогою стандартних методик клонування для експресії амінокислот 20-35 5ЕО ІО МО: 1, злитих у рамці зчитування з зеленим флуоресцентним білком (СЕР) або тсСпПеггу для відстеження присутності спор в кишечнику. Ці
Зо спори, мічені зеленим або червоним флуоресцентним барвником, одержували шляхом вирощування протягом ночі в середовищі ВНІ (із серцево-мозковою витяжкою), а потім протягом трьох діб в середовищі на основі дріжджового екстракту до досягнення щільності приблизно 2х108 спор на мілілітр (мл) з менше ніж 195 вегетативних клітин. Для одержання спор для годування нематод 1 мл культури спор в середовищі осаджували центрифугуванням і ресуспендували в 100 мкл води для видалення надлишкового середовища. Цю концентровану суспензію підраховували і розбавляли до 1х1089 спор/мл. Для годування хробаків спорами 1 мкл суспензії спор, що містила спори, мічені як червоним, так і зеленим флуоресцентни барвником, додавали в 6б0-мм чашку з агаром МОМ-ІШе з 10 мкл РВ5 (фосфатно-сольовий буфер) для полегшення розподілу. Інші джерела їжі були недоступними. Двадцять нематод дикого типу різного віку відразу переносили в чашки. Живі нематоди перевіряли через 5 годин на вживання спор з використанням стандартної флуоресцентної мікроскопії. 001151) Як можна бачити на фіг. 12 і в таблиці 63, централізований кишечник нематод мав флуоресценцію, коли їх годували рекомбінантними спорами представника сімейства Вас сегеи5, які експресують злитий білок, який містить націлювальну послідовність, і СЕР, у той час як кишечник не мав флуоресценції, коли їх годували ОРБ5БО Е. сої (стандартна їжа). Зображення живих нематод одержували з об'єктивом 4х і окуляром 10х. Це демонструє здатність цих спор як бути проковтнутими, так і доставляти "вантаж" у вигляді білків-мішеней, прикладом яких є зелений флуоресцентний білок. Також можна використовувати інші білки екзоспорію і націлювальні білки взаємозамінно з націлювальною послідовністю для доставки РНК і ДНК у нематоду або інший організм-мішень. Також можна використовувати інші рекомбінантні спор представників сімейства Васійй5 сегеи5 внаслідок у високому ступені консервативної природи екзоспорію і його утворення на поверхні спор.
Таблиця 63:
Флуоресценція С. еієдапо5, виявлена в кишечнику
Приклад 62: Конструювання, очищення і застосування фрагментів екзоспорію (001152) Мутанти з нокаутом (КО): Для одержання мутантних штамів Васійи5 (пигіпдіепвів
ВТО1ТЗА з нокаутом ех5у і соїЕ (КО) конструювали човникову плазміду РКОКІ і вектор, що вбудовується, що містив кістяк рОС57, який здатний реплікуватися в Е. соїї, а також касету резистентості до еритроміцину з оріджином реплікації з рЕ194. Ця конструкція здатна реплікуватися як у Е. сої, так і в Васійи5 5рр. Область ДНК розміром 1 т.п.н., що відповідала вищій області гена соїЕ, і область розміром 1 т.п.н., що відповідала нижчій області гена соїЕ, ампліфікували способом ПЛР із Васійи5 (Пигіпдіепхіє ВТО1ЗА. Одержували другу конструкцію, що містила область ДНК розміром 1 т.п.н., що відповідала вищій області гена ех5У, і область розміром 1 т.п.н., що відповідала нижчій області гена ех5У, обидві з яких ампліфікували
Зо способом ПЛР із Васійи5 (пигіпдіепзі5 ВТО1ТЗА. Потім для кожної конструкції дві області розміром 1 т.п.н. піддавали сплайсингу з використанням гомологічної рекомбінації з областями, що перекриваються, із плазмідою рКОКІ. Плазмідну конструкцію підтверджували за допомогою розщеплення і секвенування ДНК. Клони піддавали скринінгу на резистентність до еритроміцину. 001153) Клони пассрували при високій температурі (402С) у бульйоні із серцево-мозковою витяжкою. Індивідуальні колонії відбирали зубочисткою на чашки з агаром ІВ, що містили 5 мкг/мл еритроміцину, вирощували при 302С і піддавали скринінгу відносно присутності плазміди рКОКІ як вільної плазміди за допомогою ПЛР колоній. Колонії, що мали подію вбудовування, продовжували пасирувати для скринінгу одиничних колоній, які втрачали резистентність до еритроміцину (втрата в значній мірі плазміди, але рекомбінація і видалення генів ех5У або сОїЕ). Делеції підтверджували ампліфікацією ПЛР і секвенуванням заданої області хромосоми.
Плазміду рШРЕМК-ВсіІА 20-35 Епдо (описану в прикладі 58) трансформували в кожний з мутантів ехзУ і СоТЕ КО. Як описано вище в прикладі 48, мутант соТЕ КО також трансформували плазмідою рРЗШРЕК ВеСїІА 20-35 есЕР (отриманою, як описано вище в прикладі 44, але з заміною есЕР ендоглюканазою за допомогою гомологічної рекомбінації). (001154) Домінантно-негативні мутанти: для одержання домінантно-негативного мутанта автори даного винаходу ампліфікували способом ПЛР М-кінцеву половину і С-кінцеву половину
Сою (5ЕБО ІО МО: 126), що містили амінокислоти 1-81 і 81-199, відповідно, і клонували ці фрагменти у вектор рНРІ13 з використанням гомологічної рекомбінації (вектор РНР13 описаний вище в прикладі 1). Правильні клони підтверджували секвенуванням по методу Сенгера.
Кожний із двох домінантно-негативних мутантів СО вводили в Васійи5 ІПигіпдіепзі5 ВТО1ЗА, які містили конструкцію Р2ЕЗШОРЕК-ВсіА 20-35 Епдо, що продукує ендоглюканазу на поверхні спори, як проілюстровано вище в прикладі 58.
001155) Одержання фрагментів екзоспорію: Для кожного з двох мутантів КО і для обох домінантно-негативних мутантів нічну культуру вирощували в середовищі ВНІ при 3020, 300 об./хв., у колбах з дефлекторами із селекцією антибіотиками. Один мілілітр цієї нічної культури інокулювали в середовище на основі дріжджового екстракту (50 мл) у колбі з дефлектором і вирощували при 30 "С протягом З доби. Аліквоту спор видаляли, додавали 195 Туеєп і спори перемішували шляхом струшування протягом однієї хвилини. Спори збирали центрифугуванням при 10000х9 протягом 5 хвилин і супернатант, що містив фрагменти екзоспорію, фільтрували через 0,22-мкм фільтр для видалення яких-небудь залишкових спор.
Супернатант (який містив зруйновані фрагменти екзоспорію) фільтрували через мембранний фільтр із граничним значенням 100000 Да з одержанням очищених фрагментів екзоспорію, що містили злиті білки. Білюи з меншою ММ видаляли шляхом пропускання через фільтр із пороговим значенням 100 кДа. У фільтраті або ретентаті супернатанта спор виявлено не було.
І001156|Ї На фіг. 15 представлені фотографії отримані за допомогою трансмісійної електронної мікроскопії, які демонструють інтактні спори Васійи5 (Пигіпдіепзі5 ВТО1ЗА (панель
А), оточені прикріпленим до них екзоспорієм, і мутантні спори Васіїйи5 ІПигіпдієеєпзіз ВТО1ЗА з нокаутом СОЇЕ (панель В), від яких екзоспорій відділений. Стрілки на панелі А фіг. 15 указують на екзоспорій інтактних спор, у той час як стрілки на панелі В на фіг. 15 указують на екзоспорій, який відділений від спор. На панелі С на фіг. 15 представлена фотографія, отримана за допомогою трансмісійної електронної мікроскопії, очищеного препарату фрагментів екзоспорію, отриманого зі спор Васійи5 (игіпдіепзіз ВТО1ЗА з нокаутом СОїЕ (отриманих, як описано вище за допомогою струшування, центрифугування і фільтрації супернатанта), візуалізованих за допомогою негативного фарбування. Зображення одержували на трансмісійному мікроскопі
УЕОЇ ОЕМ 1400. Видимих фрагментів екзоспорію не спостерігали, коли контрольні спори (Васійи5 «(игіпдіепзіз ВТО1ТЗА без нокауту СОїЕ, які експресують злитий білок ВСІА 20-35 Епао, дані не представлені) піддавали тим же процедурам струшування, центрифугування, фільтрації, які описані вище.
І001157| Присутність ендоглюканази ВсіА 20-35 у колекції фрагментів екзоспорію з мутантів з нокаутом СоїЕ і Ех5МУ і домінантно-негативних мутантів СоїО: Фрагменти екзоспорію одержували й очищали, як описано вище, що містили плазміду Р2ОРЕК ВСІА 20-35-Епао, яка
Зо забезпечує екзоспорій, що містить ферменти-ендоглюканази на поверхні спор. Фрагменти екзоспорію, що містили цю конструкцію, одержували з мутантних спор з нокаутом соїЕ, мутантних спор з нокаутом ех5у, спор з домінантним М-кінцевим мутантом Со або спор з домінантним С-кінцевим мутантом СоїО. У будь-якому з цих експериментів рівень активності ендоглюканази на фрагментах екзоспорію кількісно визначали як відсоток від загальних рівнів ферменту. Ці результати порівнювали проти конструкції дикого типу, що не містила ніяких мутантів, але містила плазміду Р2ОРЕК ВеСІА 20-35-Епао.
І001158| Ефекти фрагментів екзоспорію на ріст рослин: потім ці фрагменти екзоспорію наносили за допомогою обробки насіння на насіння сої (як описано в прикладі 59 вище).
Контроль дикого типу (В. (пПигіпдіепзіз ВТО1ТЗА, які експресують конструкцію ВсіІА 20-35 Епао) також наносили на насіння сої. Для кожного експерименту на кожну насінину наносили 1 мкл фрагментів екзоспорію з кожної конструкції або розведення фрагментів 1:2, 1:4 або 1:8.
Таблиця 64:
Ферментативна активність фрагментів екзоспорію і ростова відповідь рослин
Активність Ростова Ростова Ростова ендоглюканази, | відповідь відповідь відповідь й . . . . .. ІНаявність
Мутація Конструкція фрагменти рослини сої, | рослини сої, | рослини сої, спор екзоспорію розведення | розведення | розведення (мО/мл) 12 14 1:68 дикого типу | Епдо домінантний | Епдо
Активність Ростова Ростова Ростова ендоглюканази, | відповідь відповідь відповідь . . . . . .. ІНаявність
Мутація Конструкція фрагменти рослини сої, | рослини сої, | рослини сої, спор екзоспорію розведення | розведення | розведення (мО/мл) 12 14 1:68 домінантний | Епдо (001159) Ці результати демонструють, що мутації, які руйнують екзоспорій, такі як мутація з нокаутом гена соїЕ або ех5Уу, або домінантно-негативна мутація в білку Со, можна використовувати для одержання фрагментів екзоспорію, які по суті вільні від спор, і демонструють, що ці фрагменти екзоспорію містять злиті білки, які націлені на екзоспорій. Ці фрагменти можна використовувати для стимуляції росту рослин і в інших застосуваннях.
Існував невеликий рівень фонової активності ендоглюканази в препараті фрагментів екзоспорію зі штаму ВТО13, що не має мутацій і експресуючого конструкцію ВСІА 20-25 Епдо (ВТО1ЗА ВсіІА 20-35 Епао) Це було несподіваним і може відповідати низькому рівню нестабільного екзоспорію, що вивільняється зі спор і захоплюється в процесі збору фрагментів екзоспорію.
Штами СоїЕ і Ех5у КО містять найбільш високу кількість ферменту у фракції фрагментів екзоспорію. Домінантно-негативні мутанти Со, які експресують злитий білок, також мають підвищений рівень ферменту у фракції фрагментів екзоспорію. 001160) Фрагменти екзоспорію з мутантів СОЇЕ і Ех5У (які не експресують ВСІА 20-35 Епабо), нанесені безпосередньо на рослини, мали негативний ефект на ріст і були виключені з цього експерименту. Коли фрагменти екзоспорію з ВТО1ЗА ВсіА 20-35 Епдо наносили на сою, це приводило до негативного фенотипу росту. Коли до сої додавали фрагменти екзоспорію з мутантів СОЇТЕ або Ех5уУ, які експресували злитий білок ВсіІА 20-35 Епадо, відбувалося значне збільшення швидкості росту (ї28,395 і ї14,895 для фрагментів ВТОТЗА ВсіІА 20-35 Епао).
Фрагменти екзоспорію з мутацією СоїЕ усе ще були активними в розведенні 1:4, однак фрагменти екзоспорію Ех5У більш не забезпечували користь для росту рослин сої в цьому розведенні. Домінантно-негативні мутанти Со, які експресують злитий білок ВСІА 20-35 Епао, забезпечили невелике збільшення росту сої в порівнянні з фрагментами з ВТО1ЗА ВсІА 20-35
Епадо, забезпечивши ріст 6,595 і 2,795, відповідно.
Приклад 63: Додаткова демонстрація прийнятності ендофітних представників сімейства
Васіїи5 сегеиз і інших рекомбінантних видів Васійй5 для ендофітної доставки пептидів, білків і ферментів у рослину 001161) Було виявлено, що Васійи5 Іпигіпдіепзіз ЕЕ417, Васійи5 «(Пигіпдіепзіз ЕЕ-В00184,
Зо Васіїйи5 сегеиз ЕЕ439 і Васійи5 5р. ЕЕЗ387 мають здатність до ендофітного росту і здатні служити як штам-хазяїн для системи ВЕМО (див. приклади 52 і 53). Для демонстрації здатності цих ВасіїЇї до ендофітного росту і здатності служити як штам-хазяїн для системи ВЕМО, кожний з цих штамів трансформували плазмідою рмкК4-ВсіА 20-35-есЕР (описаною вище в прикладі 62).
Спори одержували й очищали, як описано вище в прикладі 40. 0011621 Ці спор розбавляли до концентрації 1х108/мл, а потім 1 мкл бульйону з цільними клітинами додавали до комерційного гібридного насіння кукурудзи в горшковій грунту при посіві.
Насіння кукурудзи покривали фунгіцидом і біологічним інокулятом. Гібридний сорт кукурудзи являв собою ВЕСК 6175УЕ, що містить ген резистентності до гліфосату КОМОР КЕАбБУ і ген резистентності до посухи АЛОШШАМАХ. Рослини вирощували при штучному освітленні протягом 14 годин на добу і визначали ріст рослин протягом десяти діб. У ході експерименту рослини поливали кожні три доби. 001163) Потім Васійн5 (пигіпдіепзіз ЕЕ417, Васійнв5 ІШПигіпдіепзії ЕЕ-800184, ВасішШшив5 сегеийв5
ЕЕ439 і Васійи5 5р. ЕЕЗ87, які експресують ВсіІА 20-35-еСЕР, виділяли з рослин кукурудзи.
Рослини, вирощувані протягом десяти діб, витягали з грунту і промивали для видалення надлишкових залишків грунту. Рослини перевертали, промивали водою, піддавали впливу 590 відбілювача протягом десяти хвилин, промивали водою, піддавали впливу 7095 етанолу протягом десяти хвилин, знову промивали водою, і стебла розділяли стерильним лезом бритви.
Розділені половини стебел вміщували лицьовою стороною вниз на чашки з поживним агаром на дві години при 302С. Через дві години стебла видаляли і чашки з агаром інкубували при 3020 протягом 48 годин. Через 48 годин чашки досліджували відносно морфології колоній, і колонії
Васійн5, виявлені усередині рослини, відбирали зубочисткою на чашки з поживним агаром і чашки з поживним агаром плюс хлорамфенікол (для селекції бактерій, що містять плазміду рмка-20-35 ВсіА-есЕР). Результати представлені в таблиці 65. Ці результати демонструють можливість уведення системи ВЕМО у рослину-мішень за допомогою експресії в ендофітному штамі представника Васійи5 сегеи5. На фіг. 13 також продемонстрована здатність Васійн5
ІШшгіпдіепвії ЕЕ-800184 експресувати есЕР на спорах, про що свідчить флуоресцентна мікроскопія. На фіг. 13, стрілками зазначені одиничні спори. На фіг. 14 продемонстрована здатність виділених бактеріальних колоній до зеленої флуоресценції, що демонструє, що вони дійсно доставляють білок, який представляє інтерес (у даному випадку есЕР), усередину рослин. На фіг. 14 представлена флуоресценція колоній ендофітних бактерій, виділених з рослин кукурудзи на чашках, опромінених лампою з фільтром для СЕР.
Таблиця 65:
Ендофітна доставка "вантажних" білків ня " п Фо колоній Фо колоній (001164) Щоб далі продемонструвати здатність цих ендофітних штамів експресувати білки на поверхні спор, наступні конструкції вводили в плазміду Васійи5 5р. ЕЕЗ387: рНРІ13, у яких ендоглюканаза була злита з будь-яким з: ВСІА 20-35, СоїВ, Соїс, СоїС, СдеА, ІпНА, ІпнАг, ІппАТ,
Соїу або АсрсС (амінокислоти 20-25 5ЕО ІЮ МО: 1 або 5ЕО ІЮО МО: 252, 256, 253, 254, 108, 121, 114, 111 ї 120, відповідно). Конструкцію Р2ОРЕК ВсіІА-20-35 Епао, описану вище в прикладі 58, також вводили в Васійн5 ІПигіпдіепвіз ЕЕ-В800184, інший ендофітний штам. Скринінг трансформованих клітин виконували способом ПЛР і секвенуванням по методу Сенгера. Спори будь-якої з цих конструкцій одержували шляхом вирощування нічної культури в ВНІ із селекцією (хлорамфенікол), і 500 мкл кожної культури зчищали на чашки з поживним агаром, і дозволяли їм інкубуватися при 302С протягом З діб. Через З доби спори зчищали в РВ5, розбавляли до концентрації їх108/мл, осаджували центрифугуванням для виділення спор і виконували кількісне визначення ферменту на спорах, як описано вище в прикладі 58. Концентрацію ферменту обчислювали як мО/мл для кожної конструкції. На здатність ВасіШи5 5р. ЕЕ387 експресувати злиті білки на поверхні їхніх спор указують рівні ферменту. Васіїйи5 5р. ЕЕ387 були здатні експресувати усі зі злитих білків спор на їхнє поверхні, однак АсрС (5ЕО ІЮ МО: 120) був найкращим злитим білком для цього штаму. Ці дані були несподіваними, оскільки Васійи5 5р.
ЕЕЗ387 не є штамом представника сімейства Васійи5 сегеи5 і не має екзоспорію, але, проте, демонструє поверхневу експресію злитих білків, що включають білки екзоспорію або націлювальні послідовності, які походять з білків екзоспорію (наприклад, СоїУ, Асрс і амінокислоти 20-35 5ЕО ІО МО: 1).
Таблиця 66:
Ендофітні штами Васійи5 5р. ЕЕ387 (ЕЕЗ387) і Васійи5 Іпигіпдіепзіз ЕЕ-800184 (ЕЕ-В00184), які експресують злиті білки
Партнер по злиттю білка А .
І . . о. . ктивність ендоглюканази послідовності праг (ЗЕОІ0МО:121) ЇБЕЗВЯЇГ//-/-/-//777/ Ї7777717171717171717171716017ссСсСс2С
Партнер по злиттю білка А .
І . . о. . ктивність ендоглюканази послідовності
І001165| Ці ендофітні штами також можна вводити в рослину шляхом додавання в середовище для росту рослин, у тому числі грунт, склади для поливу й у гранульні склади.
Ендофітні штами також можуть проникати в рослину-мішень через надземні частини рослини.
Це забезпечує унікальний і ефективний механізм доставки білків і пептидів, що представляють інтерес, у рослину, або, у випадку ДНК- і РНК-зв'язувальних білків, доставку ДНК і ДНК у рослину. (001166) Ці дані для ВасШи5 зр. ЕЕЗ87 також демонструють, що усі з амінокислоти 20-35
ВСІА (ЗЕО ІЮ МО: 1) ії 5ЕО ІЮО МО: 108, 121 ї 120 чітко мають позитивні дані в штамах Васійи5 поза сімейством Васійи5 сегеи5. Васійи5 Пигіпдіепбіз ЕЕ-800184 також є винятково.
Експресуючі. системою-хазяїном. Ці рівні є як помітними, так і позитивними, що вказує на те, що консервативний механізм зв'язування для цих білків може бути присутнім в інших видах Васійи5.
ІЇ001167| Поверхнева експресія на спорах Васійи5 ІПигіпдіепзіз ЕЕ-800184. Васійв5
ІШишгіпдіепвії ЕЕ-800184 трансформували роИОРЕК ВсіІА 20-35 еогЕР, і дозволяли їм спорулювати, як описано вище. Спори осаджували, промивали і піддавали флуоресцентній мікроскопії для демонстрації поверхні спор, навантаженої білками еСЕР, на фіг. 13.
Приклад 64: Експресія злитих білків у деградуючих гербіциди і пестициди штамах представників сімейства Васіїйи5 сегеийв5
І001168| Приклади 49 і 51 вище демонструють здатність деградуючого гербіцид штаму представника сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕЗ349 як деградувати гербіциди, так і служити як штам- хазяїн для експресії злитого білка, зв'язаного з екзоспорієм його спор. Для подальшої демонстрації здатності деградуючих гербіциди штамів продукувати навантажений ферментом екзоспорій на їхніх спорах, автори даного винаходу ввели рРНР1З3 СоїС-Епао (ЗЕО ІЮ МО: 253), рРОШРЕВ АсрО-Епао (5ЕО ІО МО: 120), РОЄШРЕВ ІпнА2-Епао (ЗЕО ІЮ МО: 121) і РІ2ЕОРЕК 23-38
ЗЕО ІЮ МО: 5-Епдо) у представника сімейства Васіййи5 сегеи5 ЕЕ-800377. Опис рНР1З Соїс-
Епдо може бути знайдений в прикладі 54, опис РЗ23МОРЕК АсроС-Епао і рРЗОРЕК ІппА2-Епдо може бути знайдений в прикладі 59, і опис Р23ОРЕРК 23-38 5ЕО ІЮО МО: 5-Епдо може бути знайдений в прикладі 58. Було ідентифіковано, що представник сімейства ВасшШи5 сегеиз ЕЕ-В00377 ефективно деградує піретрин, дикамбу і 2,4-0. Деградацію гербіцидів і пестицидів
Зо підтверджували як по росту на гербіциді або пестициді як джерело поживних речовин, так і по зниженню рівня дикамби і 2,4-Ю у присутності деградуючого гербіцид або пестицид штаму.
Плазміди одержували і клітини трансформували ідентично прикладу 48 вище. Кожну конструкцію підтверджували секвенуванням по методу Сенгера. Спори одержували з використанням середовища для споруляції і умови приведені в прикладі 48. Активність ферменту також визначали, як у прикладі 58 вище.
Таблиця 67:
Рівні експресії фермантів злитих білків у деградуючому пестицид штамі представника сімейства
Васіїйн5 сетеиз ЕЕ-800377 001169) Як можна бачити з таблиці 67, представник сімейства Васійй5 сегени5 ЕЕ-800377 здатний продукувати ендоглюканазу й експонувати ендоглюканазу на його екзоспорії при використанні декількох різних білків екзоспорію або націлювальних послідовностей. З досліджених конструкцій амінокислоти 23-38 5ЕО ІО МО: 5 або 5ЕО ІОЮО МО: 253 забезпечили найбільш високі рівні ферментів у цьому штамі. (001170) Цей приклад демонструє здатність системи експонування на спорі експресуватися в деградуючих гербіциди і пестициди штамах. Цю систему можна використовувати для експресії інших білків-мішеней на поверхні спор, у тому числі білків, які самі діють на гербіциди або пестициди, такі як ферменти деградації гербіцидів, ферменти деградації пестицидів, метаболичні ферменти, редуктази, оксидази й інші корисні ферменти для руйнування пестицидів окремо або в присутності рослин.
Приклад 65: Застосування вільної синтази оксиду азоту (МОБ) і зв'язаної зі спорами МО5 для посилення проростання рослин 001171) У прикладі 40 продемонстрована здатність синтази оксиду азоту (МО5) з ВасшШив 5ЦИБІй5 168 стимулювати проростання, коли вона зв'язана з екзоспорієм представників сімейства Васійи5 сегец5, і доставка цієї злитої конструкції МО5-білок спори в насіння або в область поблизу насіння. У цьому прикладі вільна МОЗ з Васіййи5 (игіпдіепвіз ВТОТ1ЗА (5ЕО І
МО: 261) і вільна еМмо5 (епітеліальна МО5 з бичачих нейтрофілів, бідта-Аїагісй, каталожний номер Мо М1533) також може допомагати індукувати проростання і збільшений ріст насіння, підданого впливу МО5. Плазміди РНР1З ВсіІА-ВТ МОБ, рНРІ1З ВсіА-В5 МО5 і РНРІ1ІЗ ВсіІА-БОБА (супероксиддисмутаза) одержували ідентично РНРІ1ТЗ ВсіІА-В5 МОБ, як описано в прикладі 40, і трансформували в Васіїи5 (пигіпдіепзіз ВТОТЗА. рНРІ1ТЗ ВсеіА- ВТ МО5 містить промотор ВСІА, ініціюючий кодон, амінокислоти 20-35 ВсіА, лінкер з б залишків аланіну і ген МО5 Васі
ІШигіпдіепзі5 ВТО1ЗА (див. таблицю 9, ЗЕО ІО МО: 263). РНР1З ВсіА-В85 МОЗ містить промотор
ВСІА, ініціюючий кодон, амінокислоти 20-35 ВСІА, лінкер з 6 залишків аланіну і ген МОЗ Васійи5 5,иБій5 168 (див. таблицю 9, 5ЕО 10 МО: 264). рНРІЗ ВсіА-ЗОБА містить промотор ВСІА, амінокислоти 20-35 ВСІА, лінкер з 6 залишків аланіну і ген супероксиддисмутази 1 (БОБА1)
Васійи5 сегеив5 (5ЕО ІО МО: 155). 0011721 У таблиці 68 представлені результати аналізу проростання в грунті. У цьому аналізі комерційний сорт ВЕСК'5 294МК (КОМОР КЕАБОУ) покривали або 1 мкл води (контроль), або 1 мкл води з додаванням 34,2 мо еМмо5 бичачих нейтрофілів. Потім 50 насінин з кожної групи сіяли і вирощували, як описано в прикладі 58, але з 4 насінинами на горщик. Через 7 діб вимірювали висоту рослин. Як видно з таблиці 68, присутність еМо5 дозволяла збільшений ріст насіння, що приводило до збільшення на 30,795 висоти пагонів обробленої сої.
Таблиця 68:
Вплив вільної емоз на ріст рослин у сої 001173) На додаток до випробування проростання в грунті, описаному вище, виконували
Зо стандартні аналізи проростання, як описано в прикладі 40. Для сої автори даного винаходу вибирали насіння сої віком 2 роки з низьким рівнем проростання і покривали їх по 1 мкл на кожну з 50 оброблюваних насінин. Обробка являла собою контроль у вигляді НгО (вода), І1- аргінін, Васіїи5 (пигіпдіепзі5 ВТО1ЗА (контрольний штам), Васіййи5 «пигіпдіепзіз ВТО1ТЗА з рНР1З
ВсІА-ВТ МОБ і ВасШив (игіпдіепзіз ВТО1ЗА з рНРІЗ ВсІА В5 МО5. Результати для сої представлені в таблиці 69 нижче.
Таблиця 69:
Вплив експонованої на спорах МО5 на рівень проростання в сої
І001174| Стандартні аналізи проростання також виконували, як описано вище, для комерційних гібридів сорго. Кожну з 50 оброблюваних насінин сорго покривали по 0,5 мкл.
Обробка являла собою контроль у вигляді НО (вода), І -аргінін, Васійи5 пигіпдіепзіє ВТО1ЗА (контрольний штам), Васійи5 (ВПигіпдіепхіз ВТО1ЗА з рНРІЗ ВсІіІА-ВТ МОЗ і Васійи5 «Пигіпдіепвів
ВТО13А з рНРІ1З ВсіА В5 МО5. Через 4 доби вимірювали висоту пагонів і довжину коренів для дослідження збільшеного проростання насіння, і всі дані нормалізовували до даних для контролю у вигляді води. Результати представлені в таблиці 70 нижче. Додавання або ВТ МОБ, або В5 МОБ привело до значно збільшеної довжини кореня і росту втечі, причому відмінність була найбільш помітною випадку обробки В5 МО5.
Таблиця 70:
Зв'язана зі спорами МО5 і збільшене проростання сорго
Ріст коренів Ріст пагонів
І001175| Експеримент, описаний вище для сорго, повторювали, але з дещо іншими обробками. Обробки включали контроль у вигляді НгО (вода), Васійи5 ІПигіпдіепзіз ВТО1ЗА (контрольний штам), Васійи5 ІпПигіпдіепзіз ВТО1ЗА з рНРІ1З ВсІіІА-5ОБА або вільну бичачу емоб5.
Через 4 доби вимірювали висоту пагонів і довжину коренів для вивчення збільшеного проростання насіння, і всі дані нормалізовували до даних для контролю у вигляді води.
Результати представлені в таблиці 71 нижче. Додавання або ВТ 5ОБА, або вільного МО5 (еМмо5), приводить до значно збільшеної довжини коренів і росту пагонів.
Таблиця 71:
Зв'язана зі спорами ЗОБА і вільна МОЗ і збільшений ріст сорго (нормалізований) (нормалізований) штам)
ВасшШиз (Пигіпдіепзіз ВТО1ЗА з рНРІ13З ВсіА- о о (001176) Узяті разом, ці результати демонструють, що надекспресію синтази оксиду азоту з множини джерел можна надавати насінню і можна підвищувати їхній рівень проростання і розростання з насіння як у грунті, так і при традиційних способах проростання. Цей ефект також може бути виявлений при додаванні вільної МО5 до насіння. Додавання супероксиддисмутази до спор також приводить до збільшення проростання насіння. І -аргінін сприяв збільшенню рівня проростання, коли його використовували окремо, або сприяв у меншому ступені, коли його змішували з ферментами МОБ.
І001177| Гени МО5 поширені в різних мікроорганізмах, і ці мікроорганізми можна генетично модифікувати для посилення їхньої здатності експресувати МОЗ на насінні або поблизу насіння рослини в середовищі для росту рослин. Експресія МОЗ на спорах забезпечує кращу систему доставки, оскільки вегетативні мікроорганізми є більш нестабільними і не живуть на насінні протягом тривалих періодів часу. Експресія на спорах з використанням будь-яких з націлювальних послідовностей, білків екзоспорію, фрагментів білків екзоспорію і білків оболонки спори, описаних у даному описі, є ефективним шляхом доставки МО5 у насіння.
Приклад 66: Модулювання експресії ферменту і росту рослин
Зо (001178) Як продемонстровано в прикладах 44, 45 і 46, надекспресія білка-модулятора в рекомбінантному представнику сімейства Васій5 сегеи5, що спільно експресує злитий білок, може приводити до збільшених або знижених рівнів цього злитого білка, що включається в екзоспорій. Злиті білки і конструкції одержували і спори одержували, як описано вище в прикладах 44 і 45. Аналіз росту виконували, як описано вище в прикладі 46. (001179) Як можна бачити в таблиці 72, експресія злитих білків Р2ЕОРЕК ВеСїІА 20-35 Епао на поверхні спор Васіїи5 ІПигіпдіепзі5 ВТО1ЗА з використанням амінокислот 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1 як націлювальної послідовності приводила до збільшеного росту в кукурудзі, сої і патисоні. Цей ефект може підсилюватися, коли надекспресується другий білок екзоспорію. Кожний зі штамів зі надекспресією Со, ВхрВ і МісВ мав виражений ефект на ріст кукурудзи, сої і/або патисону, причому найбільш вираженим було це збільшення росту в кукурудзі.
Таблиця 72:
Зв'язана зі спорами ЗОБА і вільна МОЗ і збільшення росту сорго
НгО, 1,0 мкл/насінина 100,095 100,095 100,095
Васійи5 (пигіпдіепзі5 ВТО1ЗА з о о о оЗОРЕВ ВсіА 20-35 Епоо (основа) 103,86 108,86 105,86
Основа с РрНР1З ВсіА-Сою 109,695 106,495 105,295
Основа с РрНР1З ВсіА-ВхрВ 106,895 117,295 113,995
Основа с рНРІ1З ВсіА-х|сВ 110,495 122,495 106,79 001180) Надекспресія інших білків-модуляторів також може модулювати рівні експресії злитих білків, а також ефекти на ріст рослин, включаючи ефекти, описані в даному прикладі й у прикладах 44 і 45 вище. Кожний з них можна використовувати для зміни або корекції рівнів ферменту до бажаних ефективних рівнів.
Приклад 67: Надекспресія білків екзоспорію й ефекти на рослини 001181) Надекспресія білків спор і екзоспорію, що зустрічаються в природі, може впливати на ефект, який стимулюючі ріст рослин, ендофітні й інші представники сімейства Васійи5 сегеийв5 мають на рослини. Експресія різних білків екзоспорію як частина злитого білка або як вільний фермент може мати сприятливі ефекти на рослини, як проілюстровано вище для фосфатаз (приклади 11 і 36), синтази оксиду азоту (приклад 65) і протеаз, таких як ІпрА (приклади 3, 6, 7, 13). Інші білки екзоспорію і спор, такі як аланінрацемаза й інозитурідин надають перевагу гідролазу, можуть перешкоджати або сповільнювати проростання спор, і їх надекспресія приведе до того, що спори будуть у меншому ступені піддані швидкому проростанню, що є небажаним побічним ефектом при використанні багатьох типів спор. Нарешті, спори, які надекспресують визначені білки екзоспорію, можуть змінювати загальну зборку екзоспорію, що приводить до змін зв'язування спор з рослинами. Приклад цього можна бачити в таблиці 73 нижче.
І001182| Спори одержували, як описано для Васійи5 (пигіпдіеп5іє ВТО1ЗА у прикладі 58.
Аналіз росту виконували шляхом приміщення 1 мкл бульйону з цільними клітинами для кожної конструкції на насіння кукурудзи або 2 мкл на насіння патисона. Обробку насіння, посів і реєстрацію даних виконували, як описано в прикладі 58. (001183) Штам Васійи5 тусоїде5 ЕЕ155, що стимулює ріст рослин штам сімейства Васійи5 сегеи5, трансформували експресуючими плазмідами, як описано в прикладі 44. Надекспресія білків екзоспорію в цьому штамі прямо приводила до збільшення зв'язування спор з рослиною, і
Зо вона приводить до більш високої стимуляції росту рослин. Зокрема, надекспресія ВсіВ, ВеіА,
Сою, СогЕ приводила до посиленої стимуляції росту рослин. Можна надекспресувати інші білки екзоспорію, що можуть приводити до змін структури екзоспорію, включаючи Ех5У, Ех5ЕА/ВхрВ,
Со, СОЮ, ЕХхХ5ЕВ, ІппАт, ІппАг, Ехв5у), ЕхХ5Н, МСА, М|сВ, ВсСІС, Асрс, ІпрАЗ, аланінрацемазу 1, аланінрацемазу 2, ВСІА, ВсІВ, ВхрА, ВСІЕ, ВегА/ВА5З3290, СоїЕ, Ех5А, Ех5К, Ех5В, маро, таї, супероксиддисмутазу 1 (5БОБАТ) і супероксиддисмутазу 2 (ЗОБА). Надекспресія або мутація будь-якого з цих генів приводить до змін структури екзоспорію і приводить до підвищення користі відносно росту рослин, асоційованої з представниками сімейства Васійи5 сегеив5.
Таблиця 73:
Надекспресія білків екзоспорію в Васійи5 тусоїде5 ЕЕ155 м Надекспресія білка на Ріст патисон. Ріст кукурудзи
Бактерії Ми (нормалізований до (нормалізований до плазміді РНР1З контролю) контролю) вав тусоїдеє уд (контроль) 10095 10095
Васйив5 тусоїде5 о о вВ155 пвуь тот м Надекспресія білка на Ріст патисон. Ріст кукурудзи
Бактерії Ми (нормалізований до (нормалізований до плазміді РНР1З контролю) контролю)
Васійн5 тусоїдев5 о о вВ155 тоб, вть тов,вть
Васійн5 тусоїдев5 о о вВ155 ть то6,5ть
Васійн5 тусоїдев5 о о
В155 в ль
Приклад 68: Зв'язування з тканинами рослин з використанням експонованих на екзоспорії зв'язувальних білків 001184) Спори, які є прийнятними для експонування екзогенних і ендогенних білків, можна використовувати як партнери по злиттю для посилення зв'язування спор з поверхнями, у тому числі з тканинами рослин. Для демонстрації цієї ознаки спори Васіїйи5 игіпдіепзіє ВТО1ЗА трансформували плазмідами р2РЕК ВеСїІА 20-35 ТазА, реМОРЕК ВеїА 20-35 експансин, РЗАОРЕК
ВсіА 20-35 Епдо і рРЗ3ЗОРЕК ВсІА 20-35 контроль. Та5зА і експансин являють собою білки, що зв'язуються з рослинами. Контрольна плазміда містила промотор ВСІА, ініціюючий кодон і амінокислоти 20-35 5БЕО ІЮО МО: 1, але не включала партнер по злиттю. Ці конструкції одержували ідентично іншим конструкціям, описаним вище в прикладі 58.
І001185| Для проведення аналізу зв'язування тканин рослини кукурудзи вирощували протягом 2 тижнів і рослини сої вирощували протягом З тижнів, як описано в прикладі 58, але без якої-небудь обробки насіння. Потім первинний листок і перший трилисник рослин протирали 1 мл спор, що містили кожну з описаних вище конструкцій. Листя залишали сохнути, відтинали від рослин і вміщували в 50-мл конічну пробірку з 10 мл води й інтенсивно струшували. Спори, які вивільнялися з листка у воду, підраховували на гемоцитометрі, і кількості порівнювали з кількостями, очікуваними в тому випадку, якби спори не зв'язувалися з листям. Цей експеримент повторювали десять разів і виконували другий експеримент, який залучав посів цієї води на чашки з антибіотиками (тетрациклін плюс поживний агар) протягом ночі при 3020.
Кінцеві кількості представлені в таблиці 74.
Таблиця 74:
Зв'язування тканини рослини збільшувалася при експресії зв'язувального білка на спорах
Зміна ' Зміна
Загальне ' Зв'язування, ' . , зв'язування . зв'язування
Обробка (конструкція) Культура | зв'язування, : до (аналіз на : відносно відносно
Чо чашках) контролю контролю
ВсІА 20-35 ендоглюканаза 75,99 15,695 -15,696
ВСІА 20-35 експансин Кукурудза 38,49 41196 А1196
ВСІА 20-35 ТазА Кукурудза 54,99 100925 10095
ВсіА 20-35 ендоглюканаза 93,79 35,495
ВсіА 20-35 експансин 87,99 т29,695 99,195
ВСІА 20-35 ТазА 75,79 20,89 91,79 26,59 (001186) Як можна бачити з таблиці 74, контрольні спори ВТО1ЗА мають високу афінність до сої зі зв'язуванням 58,395 і 65,2956 контрольних спор. Незважаючи на це, експресія ендоглюканази, експансина або ТазА на поверхні спор привела до підвищення зв'язування спор з листям сої, причому багато препаратів спор досягали 10095 зв'язування з листям. У кукурудзі відбувалося значно менше зв'язування контрольних спор, особливо в аналізі на чашках.
Зо Результати аналізу на чашках є найбільш несподіваними, демонструючи збільшення зв'язування для будь-якої з експресуючих конструкцій, причому Таб5зА забезпечував 10095 зв'язування спор у цьому аналізі. 0011871) Ці зв'язувальні білки також можна використовувати в будь-якому з рекомбінантних спороутворювальних мікроорганізмів з використанням будь-якої з експресуючих систем або партнерів по злиттю, описаних у даному описі. Ця система також є корисною разом зі смугами екзоспорію для одержання системи доставки білків, яка як є безклітинною, так і міцно зв'язується з листям.
Приклад 69: Застосування рекомбінантних спороутворювальних бактерій, які експресують злиті білки, що містять білки Со/Сде і фермент для стимуляції росту рослин 0011881) Білки оболонки спори з білкових шарів виявляються на всіх спорах видів Васіййи5, описаних у даному описі, а також споріднених родів Мігдіпірасійи5, Гузіпірасійи5, Сіовігідіа і
Раєепірасійй5. Злиття білків або пептидів, що представляють інтерес, з білками оболонки дозволяє експресію чужорідних білків на поверхні спори і доставку цих білків або пептидів, що представляють інтерес, у рослини. Для демонстрації здатності білків оболонки доставляти ферменти в рослини була створена серія конструкцій. Плазміду рНР1З з колекції Васійи5
Сепеїіс 5іоскК Сийиге використовували для клонування будь-якої з конструкцій, описаних нижче, у ділянку множинного клонування з використанням гомологічної рекомбінації за допомогою їхніх нативних промоторних елементів. 0011891) СоїВ, Соїс і СоїС з Васійи5 5,иБійх МО1099 або СдеА з Васіїйн5 атуїіоїїдчпетасіеп5 піддавали злиттю в рамці зчитування з геном ендоглюканази еді5 з Васійи5 зи,ибБійй5 168, геном ліпази ІїрА з Васійи5 5и,ирій5 168 або геном ро-ріс з Васійн5 Іпигіпдіепзіє ВТО1ЗА. Ці конструкції клонували в рНР1З за допомогою гомологічної рекомбінації, підтверджували секвенуванням по методу Сенгера і трансформували в ВасшШив 5зи,ирійв5 ЕЕ405, Васійи5 з,иБійй5 АОЗ9, представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 ЕЕ439, Васійи5 5р. ЕЕ398 або Васіїйн5 (пПигіпдіепхіз ЕЕ-800184. Кожен трансформант також піддавали скринінгу відносно правильних клонів за допомогою секвенування по методу Сенгера. Після підтвердження клонів кожен клон вирощували в бульйоні із серцево-мозковою витяжкою (ВНІ) з тетрацикліном (10 мкг/мл) протягом ночі при
З02С, і 100 мкл нічної культури зчищали на чашки з поживним агаром з тетрацикліном. Ці чашки інкубували при 302С протягом З доби і спор збирали, зчищаючи їх за допомогою змоченого водою бавовняного валика, і ресуспендували у воді. 001190) Потім спори для аналізу ендоглюканази розбавляли до 1х109 к.у.о./мл у воді й аналізували відносно ферментативної активності з використанням хромофора 4-хлор-2
Зо нітрофенілцеллотетрози (4С2МС, З мМ у воді). Для цього способу 50 мкл спор вміщували в 96- ямковий планшет і в кожен планшет додавали 50 мкл 300 нМ розчину 4С2МС. Потім планшет інкубували при 302С і зчитували поглинання при 410 нм через 0,5 години. В усіх випадках відповідне поглинання контрольного штаму віднімали з загального поглинання кожного клону для усунення якої-небудь фонової активності. 001191) Спори для аналізу ліпази розбавляли до 1х108 к.у.о./мл у воді й аналізували відносно ферментативної активності в другому способі з використанням хромофора 4- нітрофенілпальмітату (4МР, З мМ у воді). Для цього способу 50 мкл спор вміщували в 96- ямковий планшет і в кожен планшет додавали 50 мкл 300 нМ розчину 4МР. Потім планшет інкубували при 302С і зчитували поглинання при 410 нм через 0,5 години. В усіх випадках відповідне поглинання контрольного штаму віднімали з загального поглинання кожного клону для усунення якої-небудь фонової активності. 0011921 Спори для аналізу фосфоліпази розбавляли до 1х108 к.у.о./мл у воді й аналізували відносно ферментативної активності, як описано вище для фосфоліпази в прикладі 58. В усіх випадках відповідне поглинання контрольного штаму віднімали з загального поглинання кожного клону для усунення якої-небудь фонової активності. 001193) Визначення ростових відповідей рослин і обробку і збір виконували, як описано для патисона в прикладі 58 вище. Усі дані про ріст нормалізовували до даних для контрольного штаму без експонування ферменту на спорах.
Таблиця 75:
Злиті конструкції білків оболонки і їхніх рівнів експресії ферментів
Ростова
Ферментативна | Ферментативна | Ферментативна| відповідь об Партнер по активність активність активність рослини робка . . . (конструкція) злиттю для | ендоглюканази ліпази фосфоліпази, відносно ендоглюканази| (поглинання (поглинання (поглинання |контрольного мінус контроль) | мінус контроль) | мінус контроль) штаму, патисон
Контрольний штам Васійн5 М/А 10095 5,ИБій5 АОЗО дя 7777/1771 Соб | 0.09, | 0069 | 054 | 99495 дя 77/17 боді | 03 | 7/0 | 0218 | мо
Контрольний штам Васійн5 М/А 10095 5,ИБІй5 ЕЕ4О5
Контрольний штамВ. М/А 10095
Іигіпдієпвів
ЕЄЕ184
ЕБЕТ84 177 Сою | 241 | 77777071 |711160330. | лоб
ЕБТ84 177 Сова | 270 | 0520 | 2 щ-(Б0 | п
Контрольний штам Васійи5 М/А МО 10095 5р. ЕЕЗ387
М/А-не застосовно
МО:не визначено (0011941 Дані в таблиці 75 демонструють, що білки оболонки широко діють на ряд корисних для рослин ферментів, як у представниках сімейства Васійй5 сегеи5 (ЕЕ184, ЕЕ439), такі не в представниках сімейства Васійи5 сегеи5 (ЕЕ405, АОЗ9 ії ЕЕ387 з даного приклада і приклада 65).
Додавання експонованих на спорах ферментів, у цьому прикладі ендоглюканази, приводить у більшості випадків до фенотипу збільшення росту рослин.
ВАРІАНТИ ЗДІЙСНЕННЯ
Ї001195)| Для подальшої ілюстрації нижче приведені додаткові необмежувальні варіанти здійснення даного винаходу. 001196) Варіант здійснення 1 являє собою злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і: (1) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-30 5ЕО ІЮО МО: 59; (2) націлювальну послідовність, яка містить БЕО ІЮ МО: 59; (3) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 60; (4) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30
ЗЕО ІЮ МО: 59; (5) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 4-30 5ЕО ІЮ МО: 59; (6) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 6-30 5ЕО ІЮ МО: 59; (7) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІО МО: 61; (8) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІО МО: 61; (9) націлювальну послідовність, яка містить хЕО
ІЮ МО: 61; (10) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності послідовності з 5БО ІЮО МО: 62; (11) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5БЕО ІЮО МО: 61; (12) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 61; (13) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 61; (14) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 61; (15) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-35 5ЕО ІЮ
МО: 63; (16) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 63; (17) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 64; (18) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО ІЮО МО: 63; (19) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІЮ МО: 63; (20) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮО МО: 63; (21) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕБО ІО МО: 63; (22) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮО МО: 63; (23) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО І МО: 65; (24) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО І МО: 65; (25) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 65; (26) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 66; (27) націлювальну послідовність, яка містить хЕО ІЮ МО: 107; (28) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 65; (29) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІО МО: 65; (30) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1- 27 5ЕО ІЮ МО: 67; (31) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-27 5ЕО І МО: 67; (32) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 67; (33) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 68; (34) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 5ЕО І МО: 67; (35) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО ІО МО: 67; (36) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІЮ МО: 67; (37) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-38 5ЕО ІО МО: 69; (38) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-38 5ЕО ІЮО МО: 69; (39) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮО МО: 69; (40) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 70; (41) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38
Ко) ЗЕО ІЮ МО: 69; (42) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІЮО МО: 69; (43) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5БЕО І МО: 69; (44) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 ЗЕО ІО МО: 69; (45) білок екзоспорію, який містить ЗЕО ІЮО МО: 72; (46) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ
МО: 73; (47) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 95 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 74; (48) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-42 5ЕО ІЮО МО: 75; (49) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 27-42 5ЕО І0
МО: 75; (50) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 75; (51) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 76; (52) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-42 5ЕО І МО: 75; (53) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-42 5ЕО ІЮО МО: 75; (54) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-42 5ЕО ІЮО МО: 75; (55) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-42 5ЕБО ІО МО: 75; (56) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-42 5ЕО ІЮО МО: 75; (57) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-42 5ЕО ІЮ МО: 75; (58) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІО
МО: 77; (59) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮО МО: 77; (60) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 77; (61) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з 5ЕО ІЮО МО: 78; (62) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІЮО МО: 77; (63) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІО МО: 77; (64) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з 5ЕО ІЮО МО: 80; (65) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-38 5ЕО ІЮО МО: 81; (66) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-38 5ЕО ІЮ МО: 81; (67) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 81; (68) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з 5ЕО ІЮ МО: 82; (69) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38 БЕ ІЮО МО: 81; (70) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІЮ МО: 81; (71) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО ІЮО МО: 81; (72) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО ІЮ
МО: 81; (73) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-38 5ЕО ІЮ МО: 81; (74) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-34 5ЕО ІЮО МО: 83; (75) націлювальну 60 послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 83; (76) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 84; (77) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 86; (78) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-28 5ЕО І МО: 87; (79) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13-28 5ЕО ІЮО МО: 87; (80) націлювальну послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 87; (81) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з 5ЗЕО ІЮ МО: 88; (82) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-28 5ЕО ІЮО МО: 87; (83) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО ІО МО: 87; (84) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІО МО: 87; (85) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-28 5ЕО ІЮО МО: 89; (86) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮО МО: 89; (87) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 90; (88) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-28 5ЕО ІЮО МО: 89; (89) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО І МО: 89; (90) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІЮО МО: 89; (91) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-93 5БЕО ІЮО МО: 91; (92) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 91; (93) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 92; (94) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-93 5ЕО ІЮО МО: 91; (95) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-93 5ЕО ІЮО МО: 91; (96) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-93 5ЕО ІЮ МО: 91; (97) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-93 5ЕО ІЮ
МО: 91; (98) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-93 5ЕО ІЮ МО: 91; (99) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-93 5ЕО ІЮО МО: 91; (100) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 60-93 5ЕО ІО МО: 91; (101) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-130 5ЕО ІЮО МО: 93; (102) націлювальну послідовність, яка містить
ЗЕБЕО ІЮ МО: 93; (103) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 94; (104) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-130 5ЕО ІО МО: 93; (105) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-130 5ЕО ІЮ МО: 93; (106) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5ЕО
ІО МО: 93; (107) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5ЕО ІО МО: 93;
Зо або (108) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності послідовності з ЗЕО ІЮ МО: 122. 0011971 Варіант здійснення 2 являє собою злитий білок відповідно до варіанта здійснення 1, де злитий білок містить: (1) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО
ІО МО: 59; (2) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 4-30 5ЕО ІЮО МО: 59; (3) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 6-30 5ЕО ІЮ МО: 59; (4) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 61; (5) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕБЕО ІЮ МО: 61; (6) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 61; (7) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 61; (8) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО І МО: 63; (9) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО 10 МО: 63; (10) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮО МО: 63; (11) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІЮ МО: 63; (12) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕБО ІО МО: 63; (13) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 65; (14) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 24 5ЗЕО ІО МО: 65; (15) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 5ЕО ІЮ МО: 67; (16) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО ІО МО: 67; (17) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІЮО МО: 67; (18) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38 5ЕО ІЮО МО: 69; (19) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІО МО: 69; (20) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО ІЮО МО: 69; (21) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО ІЮ МО: 69; (22) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-42 5ЕО ІО
МО: 75; (23) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-42 5ЕО ІЮО МО: 75; (24) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-42 5БЕО ІЮО МО: 75; (25) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-42 5ЕО ІЮ МО: 75; (26) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-42 5ЕБО ІО МО: 75; (27) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-42 5ЕО ІЮО МО: 75; (28) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО І МО: 77; (29) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО І МО: 77; (30) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38 5ЕО І МО: 81; (31) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІЮО МО: 81; (32) націлювальну 60 послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО ІЮ МО: 81; (33) націлювальну послідовність,
яка містить амінокислоти 15-38 5ЕБО ІО МО: 81; (34) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-38 5ЕО ІЮО МО: 81; (35) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-28 5ЕО І МО: 87; (36) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО І МО: 87; (37) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІЮ МО: 87; (38) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-28 5ЕО ІЮО МО: 89; (39) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО ІЮО МО: 89; (40) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІО МО: 89; (41) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-93 5ЕО ІЮ МО: 91; (42) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-93 5ЕО ІЮО МО: 91; (43) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-93 5ЕО ІЮ
МО: 91; (44) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-93 5ЕО ІЮ МО: 91; (45) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-93 5ЕО ІЮО МО: 91; (46) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-93 5ЕО ІЮ МО: 91; (47) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 60-93 5ЕБО ІО МО: 91; (48) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-130 5ЕО ІЮО МО: 93; (49) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-130 5ЕО ІО МО: 93; (50) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5ЕО
ІО МО: 93; або (51) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5ЕО ІЮО МО: 93. 0011981 Варіант здійснення З являє собою злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і: (1) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 20-33 5БО ІО МО: 1; (2) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 21-33 5БЕО ІО МО: 1; (3) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 23-31 5БО ІО МО: 1; (4) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-15 5БО ІО МО: 96; (5) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІО МО: 96; (6) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 12-25 5БО ІО МО: 3; (7) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 13-25 5БО ІО МО: 3; (8) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 15-23 5БО ІО МО: 3; (9) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-15 5БЕО ІЮ МО: 97; (10) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕБЕО ІЮ МО: 98; (11) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 23-36 5ЕО ІО МО: 5; (12) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 23-34 5ЕО ІО МО: 5; (13) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 24-36 5БЕО ІО МО: 5; (14) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 26-34 5ЕО ІО МО: 5; (15) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 13-26 5ЕО ІО МО: 7; (16) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 13-24 5ЕО ІО МО: 7; (17) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 14-26 5ЕО ІО МО: 7; (18) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 16-24 5ЕО ІО МО: 7; (19) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 9-22 5ЕБЕО ІО МО: 9; (20) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 9-20 5ЕО ІО МО: 9; (21) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 10-22 5ЕО ІО МО: 9; (22) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 12-20 5ЕО ІО МО: 9; (23) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮО МО: 105; (24) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮО МО: 105; (25) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-31 5ЕО ІЮ МО: 11; (26) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-29 5ЕО ІЮ МО: 11; (27) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 19-31 5ЕО ІЮ МО: 11; (28) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮ МО: 98; (29) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮ МО: 98; (30) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-31 5ЕО ІЮ МО: 13; (31) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-29 5ЕО ІЮ МО: 13; (32) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 19-31 5ЕО ІЮ МО: 13; (33) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 21-29 5ЕО ІЮ МО: 13; (34) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-15 5ЕБЕО ІЮ МО: 99; (35) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮ МО: 99; (36) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 28-41 5ЕО ІЮ МО: 15; (37) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 28-39 5ЕО ІЮ МО: 15; (38) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 29-41 5ЕО ІЮ МО: 15; (39) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 31-39 5ЕО ІЮ МО: 15; (40) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 12-25 5ЕО ІЮ МО: 17; (41) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 13-25 5ЕО ІЮ МО: 17; (42) націлювальну послідовність, яка складається з 60 амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮО МО: 100; (43) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-31 5ЕО ІЮ МО: 19; (44) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-29 5ЕО ІЮ МО: 19; (45) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 19-31 5ЕО ІЮ МО: 19; (46) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 21-29 5ЕО ІЮ МО: 19; (47) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-31 5ЕО ІЮ МО: 21; (48) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-29 5ЕО ІЮ МО: 21; (49) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 19-31 5ЕО ІЮ МО: 21; (50) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 21-29 5ЕО ІЮ МО: 21; (51) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮО МО: 101; (52) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІО МО: 101; (53) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 9-22 5ЕО ІЮ МО: 23; (54) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 9-20 5ЕО ІЮ МО: 23; (55) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 10-22 5ЕО ІЮ МО: 23; (56) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 12-20 5ЕО ІЮ МО: 23; (57) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮО МО: 102; (58) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮО МО: 102; (59) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 9-22 5ЕО ІЮ МО: 25; (60) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 9-20 5ЕО ІЮ МО: 25; (61) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 10-22 5ЕО ІЮ МО: 25; (62) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 12-20 5ЕО ІЮ МО: 25; (63) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮО МО: 103; (64) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮО МО: 103; (65) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 15-28 5ЕО ІЮ МО: 27; (66) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 15-26 5ЕО ІЮ МО: 27; (67) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 16-28 5ЕО ІЮ МО: 27; (68) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-26 5ЕО ІЮ МО: 27; (69) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮО МО: 104; (70) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮО МО: 104; (71) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮ МО: 33; (72) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-11 5ЕБЕО ІЮ МО: 33; (73) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 3-11 5ЕБЕО ІЮ МО: 33; (74) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-14 5ЕБО ІЮ МО: 35; (75) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-42 5ЕО ІЮ МО: 35; (76) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 2-14 5ЕБО ІЮ МО: 35; (77) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 14-27 5ЕО ІЮ МО: 43; (78) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 14-25 5ЕО ІЮ МО: 43; (79) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 15-27 5ЕО ІЮ МО: 43; (80) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 20-33 5ЕО ІЮ МО: 45; (81) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 20-31 5ЕО ІЮ МО: 45; (82) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 21-33 5ЕО ІЮ МО: 45; (83) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮО МО: 106; (84) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮО МО: 106; (85) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 28-41 5ЕО ІЮ МО: 47; (86) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 28-39 5ЕО ІЮ МО: 47; (87) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-31 5ЕО ІЮ МО: 53; (88) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 18-29 5ЕО ІЮ МО: 53; (89) націлювальну послідовність, яка складається з амінокислоти 19-31 5ЕО ІЮО МО: 53; (90) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-31 5ЕО ІЮО МО: 61; (91) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-29 5ЕО ІЮ
МО: 61; (92) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 19-31 5ЕО ІЮ МО: 61; (93) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-22 5ЕО ІЮО МО: 65; (94) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-20 5ЕО ІЮО МО: 65; (95) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-22 5ЕО ІО МО: 65; (96) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО ІО МО: 107; (97) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮ МО: 107; (98) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-25 5ЕО ІЮ
МО: 67; (99) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-23 БЕО ІЮО МО: 67; (100) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13-25 5ЕО ІЮО МО: 67; (101) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-23 5ЕО ІО МО: 67; (102) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-36 5ЕО ІЮО МО: 69; (103) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-34 5ЕО ІЮ МО: 69; (104) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти бо 24-36 5ЕО ІЮ МО: 69; (105) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 26-34 5ЕО ІЮ
МО: 69; (106) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 27-40 5ЕО І МО: 75; (107) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 27-38 5ЕО ІЮО МО: 75; (108) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-22 5ЕО ІОЮО МО: 77; (109) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-20 5ЕО ІЮ МО: 77; (110) націлювальну послідовність, утримуючі амінокислоти» 10Е6ОІЮОМО:77(111)націлювальна послідовність, яка містить амінокислоти 12-20
ЗЕО ІО МО: 77; (112) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-36 5ЕО ІЮО МО: 81; (113) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-34 5ЕО ІЮ МО: 81; (114) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 24-36 БЕО ІЮО МО: 81; (115) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 26-34 5ЕО ІО МО: 81; (116) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13-26 5ЕО ІО МО: 87; (117) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13-24 5ЕО ІЮ МО: 87; або (118) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-26 5ЕО І МО: 87.
І001199| Варіант здійснення 4 являє собою злитий білок, який містить фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, або білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, і: (1) націлювальну послідовність, яка містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 4395 ідентичності з амінокислотами 20-35 5БЕО ІО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 54 95; (2) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-35 5ЕБО ІЮ МО: 1; (3) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-35 5ЕО ІО МО: 1; (4) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 1; (5) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЗЕО ІЮ МО: 2; (6) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО
І МО: 1; (7) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІЮО МО: 1; (8) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (9) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІО МО: 1; (10) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮО МО: 1; (11) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-27 5ЕО ІО МО: 3; (12) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12- 27 5ЕО ІЮО МО: 3; (13) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕБЕО ІЮО МО: 3; (14) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 4; (15) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 5ЕО ІЮО МО: 3;
Зо (16) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО І МО: 3; (17) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО ІЮ МО: 3; (18) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІО МО: 3; (19) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-38 5ЕБО ІЮ МО: 5; (20) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-38 5ЕО ІЮО МО: 5; (21) націлювальну послідовність, яка містить БЕО ІЮ МО: 5; (22) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 6; (23) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38
ЗЕО ІЮ МО: 5; (24) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІЮО МО: 5; (25) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-38 5ЕО І МО: 5; (26) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО ІЮ МО: 5; (27) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО ІО МО: 5; (28) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-38 5ЕО ІО МО: 5; (29) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-28 5ЕО ІЮ МО: 7; (30) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13- 28 5ЕО ІЮО МО: 7; (31) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕБЕО ІЮО МО: 7; (32) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗЕО ІО МО: 8; (33) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-28 5ЕО ІЮО МО: 7; (34) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО І МО: 7; (35) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-28 5ЕО ІЮ МО: 7; (36) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІО МО: 7; (37) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕБО ІЮО МО: 9; (38) націлювальну послідовність, яка містить
БО амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮО МО: 9; (39) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 9; (40) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 10; (41) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24
ЗЕО ІЮ МО: 9; (42) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮО МО: 9; (43) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5БО ІО МО: 9; (44) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 11; (45) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮО МО: 11; (46) націлювальну послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 11; (47) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 12; (48) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 11; (49) націлювальну послідовність, яка містить бо амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 11; (50) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-
33 ЗЕО І МО: 11; (51) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 11; (52) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО І МО: 11; (53) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (54) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 13; (55) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 13; (56) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 14; (57) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 13; (58) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 13; (59) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 33 ЗЕО І МО: 13; (60) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 13; (61) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО І МО: 13; (62) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-43 5ЕО ІЮО МО: 15; (63) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 28-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (64) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 15; (65) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з 5ЕО ІЮ МО: 16; (66) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕБО ІЮО МО: 15; (67) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 БЕО ІЮ МО: 15; (68) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 43 5ЕО ІЮО МО: 15; (69) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (70) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО І МО: 15; (71) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5БЕО ІЮО МО: 15; (72) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (73) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-27 5ЕО ІО МО: 17; (74) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-27 5ЕО ІО МО: 17; (75) націлювальну послідовність, яка містить зхЕО ІЮ МО: 17; (76) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІО МО: 18; (77) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27
ЗЕО ІЮ МО: 17; (78) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО ІЮО МО: 17; (79) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО І МО: 17; (80) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІЮО МО: 17; (81) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 19; (82) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕБО ІО МО: 19; (83) націлювальну послідовність, яка містить
ЗБЕО ІЮ МО: 19; (84) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з ЕС ІЮ МО: 20; (85) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 19; (86) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 33 5ЕО ІЮ МО: 19; (87) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 БЕО ІЮ МО: 19; (88) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО І МО: 19; (89) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5БЕО ІЮ МО: 19; (90) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (91) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕБЕО ІО МО: 21; (92) націлювальну послідовність, яка містить
ЗБЕО ІЮ МО: 21; (93) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з ЕС ІЮ МО: 22; (94) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 21; (95) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 33 5ЕО І МО: 21; (96) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО І МО: 21; (97) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (98) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5БЕО ІЮО МО: 21; (99) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІЮО МО: 23; (100) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮ МО: 23; (101) націлювальну послідовність, яка містить
ЗБЕО ІЮ МО: 23; (102) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 24; (103) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 23; (104) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮ МО: 23; (105) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮ
БО МО: 23; (106) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІЮО МО: 25; (107) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮО МО: 25; (108) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 25; (109) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 26; (110) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІОЮО МО: 25; (111) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮ МО: 25; (112) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІО МО: 25; (113) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-30 5ЕО ІЮ МО: 27; (114) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-30 5ЕО ІЮ
МО: 27; (115) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮО МО: 27; (116) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 60 28; (117) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО І МО: 27; (118)
націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІЮО МО: 27; (119) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО ІЮО МО: 27; (120) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІЮО МО: 27; (121) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (122) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 29; (123) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІО МО: 29; (124) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗЕО ІЮО МО: 30; (125) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮ МО: 29; (126) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (127) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5БЕО ІЮ МО: 29; (128) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 29; (129) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (130) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІО МО: 31; (131) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5БЕО ІЮ МО: 31; (132) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 31; (133) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗЕО ІО МО: 32; (134) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО І МО: 31; (135) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО І МО: 31; (136) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮО МО: 31; (137) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮО МО: 33; (138) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮО МО: 33; (139) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 34; (140) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-16 5БЕО ІЮО МО: 35; (141) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ
МО: 35; (142) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 36; (143) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-29 5ЕО ІЮ МО: 43; (144) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-29 5ЕО ІЮ
МО: 43; (145) націлювальну послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 43; (146) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 44; (147) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-29 5ЕО І МО: 43; (148) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (149) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (150) націлювальну послідовність,
Зо яка містить амінокислоти 10-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (151) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-35 5ЕО ІО МО: 45; (152) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (153) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІО МО: 45; (154) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 46; (155) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (156) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІО МО: 45; (157) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (158) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІО МО: 45; (159) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (160) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-43 5ЕО ІО МО: 47; (161) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 28-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (162) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮО МО: 47; (163) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 48; (164) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (165) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО ІО МО: 47; (166) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 5БЕО ІЮО МО: 47; (167) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (168) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО ІЮО МО: 47; (169) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО ІО МО: 47; (170) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО І МО: 47; (171) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-32 5ЕО ІЮ
МО: 49; (172) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 17-32 5ЕО І МО: 49; (173) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 49; (174) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 50; (175) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-32 5ЕО ІЮО МО: 49; (176) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-32 5ЕО ІЮО МО: 49; (177) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-32 5ЕО ІЮ МО: 49; (178) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-32 5ЕО І МО: 49; (179) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-32 5ЕО ІЮ МО: 49; (180) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮ
МО: 51; (181) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5БЕО ІЮО МО: 51; (182) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 51; (183) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 52; (184) бо націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5БЕО ІЮО МО: 51; (185) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (186) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 51; (187) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 51; (188) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (189) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮ
МО: 53; (190) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5БЕО ІЮ МО: 53; (191) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 53; (192) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 54; (193) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5БЕО ІЮО МО: 53; (194) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (195) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 53; (196) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 53; (197) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (198) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-30 5ЕО ІЮ
МО: 55; (199) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (200) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 55; (201) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 56; (202) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО ІЮО МО: 55; (203) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІЮО МО: 55; (204) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (205) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІО МО: 55; (206) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (207) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 115-130 5ЕО
ІО МО: 57; (208) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 57; (209) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 58; (210) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (211) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (212) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130 5БО ІО МО: 57; (213) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5БО ІО МО: 57; (214) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5БО ІО МО: 57; (215) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-130 5БО ІО МО: 57; (216) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-130 5БО ІО МО: 57; (217) націлювальну
Зо послідовність, яка містить амінокислоти 600-130 5БЕО ІО МО: 57; (218) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 70-130 5БО ІО МО: 57; (219) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 80-130 5БО ІО МО: 57; (220) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 90-130 5БО ІО МО: 57; (221) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 100-130 5ЕБЕО І МО: 57; (222) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130 ЗЕО ІЮ МО: 57; (223) фрагмент білка екзоспорію, що містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗБО ІЮ МО: 95; (224) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕБО ІО МО: 96; (225) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 97; (226) націлювальну послідовність, яка містить БЕО ІЮ МО: 98; (227) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮО МО: 99; (228) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮО МО: 100; (229) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 101; (230) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 102; (231) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮО МО: 103; (232) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 104; (233) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 105; (234) націлювальну послідовність, яка містить зЗЕО ІЮ МО: 106; (235) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 108; (236) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з ЗЕО І МО: 109; (237) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 110; (238) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 111; (239) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 112; (240) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 113; (241) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з зХЕО ІО МО: 114; (242) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 115; (243) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 116; (244) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 117; (245) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 118; (246) білок екзоспорію, який містить амінокислотну 60 послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 119; (247) білок екзоспорію,
який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 120; (248) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з 5ЕО ІЮ МО: 121; (249) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 22-31 5ЕО ІЮО МО: 1; (250) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 22-33 5ЕО ІО МО: 1; (251) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-31 5ЕО ІЮ
МО: 1; (252) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-23 5ЕО ІЮ МО: 3; (253) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-25 5БО ІЮО МО: 3; або (254) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-23 5ЕО ІЮО МО: 3. 0012001 Варіант здійснення 5 являє собою злитий білок, який містить антиген або фермент рекультивації і: (1) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (2) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (3) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (4) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІО МО: 1; (5) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (6) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 22- 31 5ЕО ІО МО: 1; (7) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 22-33 5ЕО ІЮО МО: 1; (8) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-31 5ЕО ІЮО МО: 1; (9) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 5ЕО ІО МО: 3; (10) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕБЕО ІЮО МО: 3; (11) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО ІО МО: 3; (12) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10- 27 ЗЕО ІЮО МО: 3; (13) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-23 5ЕО ІЮ МО: 3; (14) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-25 5ЕО ІЮО МО: 3; (15) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-23 5ЕО ІЮ МО: 3; (16) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38 5ЕО ІО МО: 5; (17) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕБО ІЮО МО: 5; (18) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-38 5ЕО ІО МО: 5; (19) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10- 38 5ЕО ІО МО: 5; (20) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО І МО: 5; (21) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-38 5ЕО ІЮО МО: 5; (22) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-28 5ЕО ІЮ МО: 7; (23) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО ІО МО: 7; (24) націлювальну послідовність,
Зо яка містить амінокислоти 8-28 5ЕБО ІЮО МО: 7; (25) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІЮ МО: 7; (26) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1- 24 ЗЕО ІЮ МО: 9; (27) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО І МО: 9; (28) націлювальну послідовність, яка містить зЗЕО ІЮО МО: 9; (29) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з 5ЕО ІЮО МО: 10; (30) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІЮ МО: 9; (31) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІО МО: 9; (32) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕБЕО ІЮО МО: 9; (33) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮ МО: 11; (34) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-39 5ЕО І МО: 11; (35) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 11; (36) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 12; (37) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 11; (38) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5БЕО І МО: 11; (39) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 11; (40) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ МО: 11; (41) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕБО ІО МО: 11; (42) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮ МО: 13; (43) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (44) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 13; (45) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 14; (46) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (47) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО 10 МО: 13; (48) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (49) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ МО: 13; (50) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5БО ІЮО МО: 13; (51) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-43 5ЕБО ІЮ МО: 15; (52) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 28-43 5ЕО ІО МО: 15; (53) націлювальну послідовність, яка містить 560 ІЮ МО: 15; (54) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 16; (55) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕО ІЮО МО: 15; (56) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО 10 МО: 15; (57) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 5ЕО ІЮО МО: 15; (58) націлювальну 60 послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (59) націлювальну послідовність,
яка містить амінокислоти 15-43 5ЕБО ІО МО: 15; (60) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО ІЮО МО: 15; (61) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (62) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-27 5ЕО ІЮ
МО: 17; (63) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-27 ЗЕО ІЮ МО: 17; (64) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 17; (65) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з 5ЕО ІЮО МО: 18; (66) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 ЗЕО ІЮО МО: 17; (67) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 ЗЕО ІЮО МО: 17; (68) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО ІО МО: 17; (69) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІЮО МО: 17; (70) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІО МО: 19; (71) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ
МО: 19; (72) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 19; (73) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 20; (74) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО 10 МО: 19; (75) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮ МО: 19; (76) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 19; (77) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕБО ІО МО: 19; (78) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 19; (79) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІО МО: 21; (80) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ
МО: 21; (81) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 21; (82) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 22; (83) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО 10 МО: 21; (84) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (85) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (86) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕБО ІО МО: 21; (87) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (88) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО І МО: 23; (89) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО І МО: 23; (90) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 23; (91) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з зЗЕО ІЮО МО: 24;
Зо (92) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО І МО: 23; (93) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮО МО: 23; (94) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮО МО: 23; (95) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІО МО: 25; (96) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5БЕО ІО МО: 25; (97) націлювальну послідовність, яка містить зЕО ІЮО МО: 25; (98) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 26; (99) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24
ЗЕО ІЮО МО: 25; (100) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮ МО: 25; (101) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО І МО: 25; (102) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-30 5ЕО ІЮО МО: 27; (103) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-30 5ЕО ІО МО: 27; (104) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮО МО: 27; (105) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 28; (106) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО І МО: 27; (107) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІО МО: 27; (108) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО ІЮО МО: 27; (109) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІЮ
МО: 27; (110) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІО МО: 29; (111) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 БЕО ІЮО МО: 29; (112) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 29; (113) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 30; (114) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (115) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮ МО: 29; (116) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 29; (117) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ МО: 29; (118) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ
МО: 29; (119) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІЮ МО: 31; (120) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5БЕО ІЮО МО: 31; (121) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 31; (122) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІО МО: 32; (123) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІЮО МО: 31; (124) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮ МО: 31; (125) націлювальну послідовність, яка містить бо амінокислоти 8-24 5ЕО ІО МО: 31; (126) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти
1-15 5ЕО ІО МО: 33; (127) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 33; (128) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗЕО ІЮО МО: 34; (129) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-16 5ЕО ІЮ МО: 35; (130) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 35; (131) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 36; (132) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-29 5ЕО І МО: 43; (133) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-29 БЕО ІЮО МО: 43; (134) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 43; (135) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІО МО: 44; (136) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (137) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-29 5ЕО ІЮ МО: 43; (138) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-29 5ЕО ІО МО: 43; (139) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (140) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-35 5ЕО ІЮ
МО: 45; (141) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (142) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 45; (143) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 46; (144) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5БЕО ІЮО МО: 45; (145) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (146) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (147) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (148) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО І МО: 45; (149) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-43 5ЕО ІЮ
МО: 47; (150) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 28-43 5ЕО І МО: 47; (151) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 47; (152) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 48; (153) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕО ІЮО МО: 47; (154) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО ІЮО МО: 47; (155) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (156) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (157) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (158) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО ІЮ
Ко) МО: 47; (159) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО ІО МО: 47; (160) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-32 5БЕО ІЮО МО: 49; (161) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 17-32 5ЕО ІО МО: 49; (162) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 49; (163) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 50; (164) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-32 5ЕО І МО: 49; (165) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-32 5ЕО ІЮО МО: 49; (166) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-32 5ЕО ІЮО МО: 49; (167) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-32 5ЕО ІЮ
МО: 49; (168) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-32 5ЕО І МО: 49; (169) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮ МО: 51; (170) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІО МО: 51; (171) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮО МО: 51; (172) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 52; (173) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕБО ІЮО МО: 51; (174) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (175) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 51; (176) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ
МО: 51; (177) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 БЕО ІО МО: 51; (178) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (179) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІО МО: 53; (180) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮО МО: 53; (181) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 54; (182) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (183) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (184) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (185) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ
МО: 53; (186) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 53; (187) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-30 5ЕО ІЮО МО: 55; (188) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-30 5ЕО ІО МО: 55; (189) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮО МО: 55; (190) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 56; (191) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО ІЮО МО: 55; (192) націлювальну послідовність, яка містить бо амінокислоти 5-30 5ЕО ІО МО: 55; (193) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти
8-30 5ЕО ІЮО МО: 55; (194) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІЮ
МО: 55; (195) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-130 5ЕО ІО МО: 57; (196) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 115-130 5БЕО ІО МО: 57; (197) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 57; (198) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 58; (199) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (200) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (201) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-130 5ЕО ІО МО: 57; (202) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5ЕБЕО ІЮ МО: 57; (203) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5ЕО 10 МО: 57; (204) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 400-130 5ЕБЕО ІЮ МО: 57; (205) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-130 5БЕБЕО ІЮ МО: 57; (206) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 600-130 БО ІЮ МО: 57; (207) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 700-130 5ЕБЕО ІЮ МО: 57; (208) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 800-130 5БЕБЕО ІЮ МО: 57; (209) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 90-130 5БЕБЕО ІЮ МО: 57; (210) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 100-130 БО ІО МО: 57; (211) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (212) націлювальну послідовність, яка містить 5Е0 10 МО: 97; (213) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕБО І МО: 98; (214) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 99; (215) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ
МО: 100; (216) націлювальну послідовність, яка містить БЕО ІЮ МО: 101; (217) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 102; (218) націлювальну послідовність, яка містить з-ЕО
ІО МО: 103; (219) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮО МО: 104; (220) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 105; (221) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО
ІЮ МО: 106; (222) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 108; (223) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 109; (224) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з ЗЕО 10 МО: 110; (225) білок екзоспорію, який містить амінокислотну
Ко) послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 111; (226) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 112; (227) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 113; (228) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 114; (229) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 115; (230) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 116; (231) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 117; (232) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 118; (233) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 119; (234) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з 5ЕО ІЮ МО: 120; або (235) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗЕО І МО: 121. 0012011) Варіант здійснення 6 являє собою злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 1-3, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає антиген або фермент рекультивації. (0012021 Варіант здійснення 7 являє собою злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 1-3, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає фермент, прийнятний для руйнування емульсії або гелю в рідині гідророзриву пласту, або антибактеріальний білок або пептид. 001203) Варіант здійснення 8 являє собою злитий білок, який містить фермент, прийнятний для руйнування емульсії або гелю в рідині гідророзриву пласту, або антибактеріальний білок або пептид і: (1) націлювальну послідовність, яка містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 4395 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕБЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 54 95; (2) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (3) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-35 5ЕО ІО МО: 1; (4) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ
МО: 1; (5) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 60 85 95 ідентичності з БЕО ІО МО: 2; (6) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-
35 5ЕО ІО МО: 1; (7) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІО МО: 1; (8) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮО МО: 1; (9) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІО МО: 1; (10) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮО МО: 1; (11) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-27 5ЕО ІО МО: 3; (12) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12- 27 5ЕО ІЮО МО: 3; (13) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕБЕО ІЮО МО: 3; (14) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 4; (15) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 5ЕО ІЮО МО: 3; (16) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО І МО: 3; (17) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО ІЮ МО: 3; (18) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІО МО: 3; (19) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-38 5ЕБО ІЮО МО: 5; (20) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-38 5ЕО ІО МО: 5; (21) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮО МО: 5; (22) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 6; (23) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38
ЗЕО ІО МО: 5; (24) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІЮО МО: 5; (25) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-38 5ЕО І МО: 5; (26) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО ІЮ МО: 5; (27) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО ІО МО: 5; (28) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-38 5ЕО ІО МО: 5; (29) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-28 5ЕО ІО МО: 7; (30) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13- 28 5ЕО ІЮО МО: 7; (31) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕБЕО ІЮО МО: 7; (32) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 8; (33) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-28 5ЕО ІЮО МО: 7; (34) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО І МО: 7; (35) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-28 5ЕО ІЮ МО: 7; (36) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІО МО: 7; (37) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕБО ІЮО МО: 9; (38) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮ МО: 9; (39) націлювальну послідовність, яка містить зЕО ІЮ МО: 9;
Зо (40) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 10; (41) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24
ЗЕО ІЮ МО: 9; (42) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮО МО: 9; (43) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО І МО: 9; (44) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 11; (45) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 11; (46) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 11; (47) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 12; (48) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 11; (49) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 11; (50) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 33 ЗЕО І МО: 11; (51) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 11; (52) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО І МО: 11; (53) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (54) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 13; (55) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 13; (56) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 14; (57) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 13; (58) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5БЕО ІЮ МО: 13; (59) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 33 ЗЕО І МО: 13; (60) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 13; (61) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО І МО: 13; (62) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-43 5ЕО ІЮО МО: 15; (63) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 28-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (64) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 15; (65) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з 5ЕО ІЮ МО: 16; (66) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕБО ІЮО МО: 15; (67) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО ІО МО: 15; (68) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 43 5ЕО ІЮО МО: 15; (69) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (70) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО І МО: 15; (71) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5БЕО ІЮО МО: 15; (72) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (73) націлювальну послідовність, бо яка містить амінокислоти 1-27 5ЕО ІО МО: 17; (74) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-27 5БЕО ІО МО: 17; (75) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 17; (76) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІО МО: 18; (77) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27
ЗЕО ІО МО: 17; (78) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО ІО МО: 17; (79) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО І МО: 17; (80) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІЮО МО: 17; (81) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 19; (82) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕБО ІО МО: 19; (83) націлювальну послідовність, яка містить
ЗБЕО ІЮ МО: 19; (84) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з ЕС ІЮ МО: 20; (85) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 19; (86) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 33 5ЕО І МО: 19; (87) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО І МО: 19; (88) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО І МО: 19; (89) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5БЕО ІЮ МО: 19; (90) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮ МО: 21; (91) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕБЕО ІО МО: 21; (92) націлювальну послідовність, яка містить
ЗБЕО ІЮ МО: 21; (93) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з 5БЕО ІО МО: 22; (94) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 21; (95) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 33 5ЕО І МО: 21; (96) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО І МО: 21; (97) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО І МО: 21; (98) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5БЕО ІЮО МО: 21; (99) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІЮО МО: 23; (100) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮ МО: 23; (101) націлювальну послідовність, яка містить
ЗБЕО ІЮ МО: 23; (102) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 24; (103) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 23; (104) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮ МО: 23; (105) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮ
МО: 23; (106) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІЮО МО: 25; (107)
Зо націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮО МО: 25; (108) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 25; (109) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 26; (110) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІОЮО МО: 25; (111) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮ МО: 25; (112) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІО МО: 25; (113) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-30 5ЕО ІЮ МО: 27; (114) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-30 5ЕО ІЮ
МО: 27; (115) націлювальну послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 27; (116) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 28; (117) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО І МО: 27; (118) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІО МО: 27; (119) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО ІЮО МО: 27; (120) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІЮО МО: 27; (121) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (122) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 29; (123) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІО МО: 29; (124) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 30; (125) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5БЕО ІЮ МО: 29; (126) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО І МО: 29; (127) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5БЕО ІЮ МО: 29; (128) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (129) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (130) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІО МО: 31; (131) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5БЕО ІЮ МО: 31; (132) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 31; (133) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗЕО ІЮО МО: 32; (134) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІЮ МО: 31; (135) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО І МО: 31; (136) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮО МО: 31; (137) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮО МО: 33; (138) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮО МО: 33; (139) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 34; (140) націлювальну послідовність, яка 60 містить амінокислоти 1-16 5БЕО ІЮО МО: 35; (141) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ
МО: 35; (142) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 36; (143) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-29 5ЕО ІЮ МО: 43; (144) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-29 5ЕО ІЮ
МО: 43; (145) націлювальну послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 43; (146) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 44; (147) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-29 5ЕО І МО: 43; (148) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (149) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (150) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (151) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-35 5ЕО ІО МО: 45; (152) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (153) націлювальну послідовність, яка містить зЗЕО ІЮ МО: 45; (154) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 46; (155) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (156) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІО МО: 45; (157) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (158) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІО МО: 45; (159) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (160) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-43 5ЕО ІО МО: 47; (161) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 28-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (162) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 47; (163) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗЕО ІЮ МО: 48; (164) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (165) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО ІО МО: 47; (166) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 5БЕО ІЮО МО: 47; (167) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІО МО: 47; (168) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО ІЮО МО: 47; (169) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО ІО МО: 47; (170) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО І МО: 47; (171) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-32 5ЕО ІЮ
МО: 49; (172) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 17-32 5ЕО І МО: 49; (173) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 49; (174) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 50; (175) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-32 5ЕО ІЮО МО: 49; (176) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-32 5ЕО ІЮО МО: 49; (177) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-32 5ЕО ІЮ МО: 49; (178) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-32 5ЕО І МО: 49; (179) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-32 5ЕО ІЮ МО: 49; (180) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮ
МО: 51; (181) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 БЕО ІЮО МО: 51; (182) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 51; (183) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 52; (184) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5БЕО ІЮО МО: 51; (185) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (186) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕБО ІЮ МО: 51; (187) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 51; (188) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (189) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІЮ
МО: 53; (190) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 БЕО ІЮ МО: 53; (191) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 53; (192) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 54; (193) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5БЕО ІЮО МО: 53; (194) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (195) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 53; (196) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 53; (197) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (198) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-30 5ЕО ІЮ
МО: 55; (199) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (200) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 55; (201) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 56; (202) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (203) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІЮО МО: 55; (204) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (205) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІО МО: 55; (206) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (207) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 115-130 5ЕО 60 ІО МО: 57; (208) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 57; (209) білок екзоспорію,
який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 58; (210) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (211) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (212) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130 5БО ІО МО: 57; (213) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5БО ІО МО: 57; (214) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5БО ІО МО: 57; (215) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-130 5БО ІО МО: 57; (216) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-130 5БО ІО МО: 57; (217) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 60-130 5БО ІО МО: 57; (218) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 700-130 5БО ІО МО: 57; (219) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 80-130 5БО ІО МО: 57; (220) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 90-130 5БО ІО МО: 57; (221) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 100-130 5ЕБЕО І МО: 57; (222) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130 ЗЕО ІЮ МО: 57; (223) фрагмент білка екзоспорію, що містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з
ЗБО ІЮ МО: 95; (224) націлювальну послідовність, яка містить 5ЗЕБЕО ІЮО МО: 96; (225) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 97; (226) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 98; (227) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 99; (228) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 100; (229) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 101; (230) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 102; (231) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮО МО: 103; (232) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 104; (233) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 105; (234) націлювальну послідовність, яка містить зЗЕО ІЮ МО: 106; (235) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з зЗЕО ІЮ МО: 108; (236) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з ЗЕО І МО: 109; (237) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 110; (238) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 111; (239) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше
Зо 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 112; (240) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 113; (241) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 114; (242) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 115; (243) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 116; (244) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 117; (245) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 118; (246) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 119; (247) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 120; (248) білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595 ідентичності з 5ЕО ІЮ МО: 121; (249) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 22-31 5ЕО ІЮО МО: 1; (250) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 22-33 ЗЕО ІЮО МО: 1; (251) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-31 5ЕО ІЮ
МО: 1; (252) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-23 5ЕО ІЮ МО: 3; (253) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-25 5БО ІЮО МО: 3; або (254) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-23 5ЕО ІЮО МО: 3. (0012041 Варіант здійснення 9 являє собою злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 5-8, де націлювальна послідовність містить: (1) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 БО ІО МО: 1; (2) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІО МО: 1; (3) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35
ЗЕО ІЮО МО: 1; (4) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІЮО МО: 1; (5) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (6) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 5ЕО ІЮ МО: 3; (7) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 ЗЕБЕО ІЮО МО: 3; (8) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 ЗЕО ІЮ МО: 3; (9) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10- 27 ЗЕО ІЮ МО: 3; (10) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38 5ЕО ІО МО: 5; (11) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО І МО: 5; (12) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-38 5ЕО ІЮ МО: 5; (13) націлювальну 60 послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО ІО МО: 5; (14) націлювальну послідовність,
яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО ІЮО МО: 5; (15) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-38 5ЕО ІЮ МО: 5; (16) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2- 28 5ЕО ІЮ МО: 7; (17) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО І МО: 7; (18) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-28 5ЕО І МО: 7; (19) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІЮ МО: 7; (20) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 9; (21) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕБО ІЮО МО: 9; (22) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІО МО: 9; (23) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2- 33 5ЕО І МО: 11; (24) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО І МО: 11; (25) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 11; (26) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5БЕО ІЮ МО: 11; (27) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 11; (28) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 13; (29) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 13; (30) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 33 ЗЕО І МО: 13; (31) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 13; (32) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІО МО: 13; (33) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕО ІЮО МО: 15; (34) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО ІЮО МО: 15; (35) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 5ЕО ІО МО: 15; (36) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІЮО МО: 15; (37) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО ІЮО МО: 15; (38) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО ІЮ
МО: 15; (39) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (40) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 ЗЕО ІЮО МО: 17; (41) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО ІЮ МО: 17; (42) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО ІО МО: 17; (43) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІЮО МО: 17; (44) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО І МО: 19; (45) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО І МО: 19; (46) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 19; (47) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5БЕО ІЮО МО: 19; (48) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 19; (49) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 21; (50) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 21; (51) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 33 ЗЕО ІЮО МО: 21; (52) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 21; (53) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІО МО: 21; (54) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 23; (55) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮО МО: 23; (56) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІО МО: 23; (57) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 25; (58) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 24 5ЗЕО ІЮО МО: 25; (59) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮ МО: 25; (60) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО ІО МО: 27; (61) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІЮО МО: 27; (62) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 ЗЕО ІЮО МО: 27; (63) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІО МО: 27; (64) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 29; (65) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 33 5ЕО І МО: 29; (66) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО І МО: 29; (67) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 29; (68) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5БЕО ІЮО МО: 29; (69) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІЮО МО: 31; (70) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІО МО: 31; (71) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІО МО: 31; (72) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2- 29 ЗЕО ІЮО МО: 43; (73) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-29 5ЕО ІЮ МО: 43; (74) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-29 5ЕО ІО МО: 43; (75) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (76) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (77) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІО МО: 45; (78) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕБО ІЮ МО: 45; (79) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (80) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮ
МО: 45; (81) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕО ІЮО МО: 47; (82) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО ІЮО МО: 47; (83) націлювальну 60 послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 5БЕО ІЮО МО: 47; (84) націлювальну послідовність,
яка містить амінокислоти 10-43 5ЕБЕО ІО МО: 47; (85) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО ІЮО МО: 47; (86) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (87) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО ІЮ
МО: 47; (88) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-32 ЗЕО ІЮО МО: 49; (89) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-32 5ЕО ІЮО МО: 49; (90) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-32 5ЕО ІЮ МО: 49; (91) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-32 5ЕО ІО МО: 49; (92) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-32 5ЕО ІЮО МО: 49; (93) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО І МО: 51; (94) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО І МО: 51; (95) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО І МО: 51; (96) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5БЕО ІЮО МО: 51; (97) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 51; (98) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 53; (99) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 53; (100) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (101) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ
МО: 53; (102) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 БЕО ІЮ МО: 53; (103) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (104) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІЮО МО: 55; (105) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (106) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІО МО: 55; (107) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (108) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-130 5ЕО ІЮ
МО: 57; (109) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-130 5ЕО ІО МО: 57; (110) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5ЕО ІО МО: 57; (111) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5ЕО ІО МО: 57; (112) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-130 5ЕО ІО МО: 57; (113) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 500-130 5ЕО ІО МО: 57; (114) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 60-130 5ЕО ІО МО: 57; (115) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 700-130 5ЕО ІО МО: 57; (116) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 80-130 5ЕО ІО МО: 57; (117)
Ко) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 900-130 5ЕО ІО МО: 57; (118) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 100-130 5ЕО ІЮ МО: 57; або (119) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130 5ЕО ІЮО МО: 57. 0012051 Варіант здійснення 10 являє собою злитий білок відповідно до варіанта здійснення 9, у якому націлювальна послідовність включає: (1) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 9; (2) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24
ЗЕО ІЮ МО: 9; (3) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮ МО: 9; (4) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮ МО: 11; (5) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 11; (6) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕБО ІЮ МО: 11; (7) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 11; (8) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 11; (9) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО І МО: 13; (10) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 13; (11) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (12) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ МО: 13; (13) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕБО ІО МО: 13; (14) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕО ІО МО: 15; (15) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 43 5ЕО ІЮО МО: 15; (16) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 БЕО ІЮ МО: 15; (17) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО І МО: 15; (18) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5БЕО ІЮО МО: 15; (19) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (20) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5БО ІО МО: 15; (21) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 5ЕО ІЮ МО: 17; (22) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 27 ЗЕО ІО МО: 17; (23) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО ІЮ МО: 17; (24) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІО МО: 17; (25) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 19; (26) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 19; (27) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 19; (28) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 19; (29) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 19; (30) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮ 60 МО: 21; (31) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 ЗЕО ІЮО МО: 21; (32)
націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 21; (33) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ МО: 21; (34) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 21; (35) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 23; (36) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 24 5ЗЕО ІЮО МО: 23; (37) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮ МО: 23; (38) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 25; (39) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮО МО: 25; (40) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮО МО: 25; (41) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО ІО МО: 27; (42) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІО МО: 27; (43) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 30 ЗЕО І МО: 27; (44) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІО МО: 27; (45) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 29; (46) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (47) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (48) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕБО ІО МО: 29; (49) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (50) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІЮ МО: 31; (51) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО І МО: 31; (52) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮ МО: 31; (53) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (54) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (55) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-29 5ЕО ІО МО: 43; (56) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (57) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 ЗЕО ІЮ МО: 45; (58) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (59) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО І0О МО: 45; (60) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (61) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (62) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕО ІО МО: 47; (63) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО ІО МО: 47; (64) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 43 5ЕО ІЮ МО: 47; (65) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІЮ МО:
Ко) 47; (66) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО І МО: 47; (67) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5БЕО ІЮО МО: 47; (68) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (69) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-32 5ЕО ІО МО: 49; (70) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-32 5ЕО ІЮ МО: 49; (71) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 35 32 ЗЕО І МО: 49; (72) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-32 5ЕО ІО МО: 49; (73) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-32 5ЕО І МО: 49; (74) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (75) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (76) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 51; (77) націлювальну послідовність, яка містить 40 амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (78) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 51; (79) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІЮ
МО: 53; (80) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (81) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (82) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ МО: 53; (83) націлювальну послідовність, 45 яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 53; (84) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО ІО МО: 55; (85) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 5ЕО І МО: 55; (86) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО І МО: 55; (87) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (88) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (89) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (90) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-130 5ЕО ІО МО: 57; (91) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5ЕО ІО МО: 57; (92) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5ЕО ІО МО: 57; (93) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-130 5ЕО
ІО МО: 57; (94) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (95) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 600-130 5ЕО ІО МО: 57; (96) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 70-130 5ЕО ІО МО: 57; (97) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 80-130 5ЕО ІО МО: 57; (98) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 90-130 5ЕО ІО МО: 57; (99) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 100-130 5ЕО ІЮ МО: 57; або (100) націлювальну послідовність, яка містить 60 амінокислоти 110-130 5ЕО ІО МО: 57.
І001206| Варіант здійснення 11 являє собою злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 5-10, у якому націлювальна послідовність включає: (1) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮ МО: 9; (2) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕБЕО ІО МО: 9; (3) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 11; (4) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 33 5ЕО І МО: 11; (5) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО І МО: 11; (6) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 11; (7) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (8) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (9) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕБО ІО МО: 13; (10) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 13; (11) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 ЗЕО ІЮ МО: 15; (12) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 5ЕО ІО МО: 15; (13) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО І МО: 15; (14) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5БЕО ІЮО МО: 15; (15) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (16) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5БО ІО МО: 15; (17) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 ЗЕО ІО МО: 17; (18) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 27 5ЕО ІЮ МО: 17; (19) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІЮ МО: 17; (20) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 19; (21) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 19; (22) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ МО: 19; (23) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕБО ІО МО: 19; (24) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 21; (25) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- 33 ЗЕО І МО: 21; (26) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІО МО: 21; (27) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО І МО: 21; (28) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІОЮО МО: 23; (29) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮО МО: 23; (30) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮ МО: 25; (31) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІО МО: 25; (32) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-
Зо 30 5ЕО І МО: 27; (33) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО І МО: 27; (34) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІЮО МО: 27; (35) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (36) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (37) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕБО ІО МО: 29; (38) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮО МО: 29; (39) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 ЗЕО ІЮ МО: 31; (40) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮ МО: 31; (41) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-29 5ЕО І МО: 43; (42) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-29 5ЕО ІЮО МО: 43; (43) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-29 5ЕО ІО МО: 43; (44) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІО МО: 45; (45) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕБО ІЮ МО: 45; (46) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІЮО МО: 45; (47) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮ
МО: 45; (48) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО ІЮО МО: 47; (49) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 5ЕО ІЮО МО: 47; (50) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (51) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕБО ІО МО: 47; (52) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО ІЮО МО: 47; (53) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (54) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-32 5ЕО ІЮ
МО: 49; (55) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-32 5ЕО ІЮО МО: 49; (56) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-32 5ЕО ІЮ МО: 49; (57) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-32 5ЕО ІЮ МО: 49; (58) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 51; (59) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮ МО: 51; (60) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 51; (61) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ
МО: 51; (62) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (63) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІЮО МО: 53; (64) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ МО: 53; (65) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5БО ІО МО: 53; (66) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІО МО: 55; (67) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8- бо 30 ЗЕО ІЮО МО: 55; (68) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІО МО:
55; (69) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (70) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (71) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5ЕО ІО МО: 57; (72) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5ЕО ІО МО: 57; (73) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-130 5ЕО ІО МО: 57; (74) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (75) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 60-130 5ЕО
ІО МО: 57; (76) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 70-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (77) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 80-130 5БЕО ІО МО: 57; (78) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 90-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (79) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 100-130 5ЕБЕО І МО: 57; (80) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130 5ЕБО І МО: 57; (81) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 4-30 5ЕО ІЮО МО: 59; (82) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 6-30 5ЕО ІЮ МО: 59; (83) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮ МО: 61; (84) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮО МО: 61; (85) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ
МО: 61; (86) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІЮО МО: 63; (87) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮО МО: 63; (88) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІЮ МО: 63; (89) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5БО ІО МО: 63; (90) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІО МО: 65; (91) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5- 27 5ЕО ІЮ МО: 67; (92) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО І МО: 67; (93) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІО МО: 69; (94) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5БЕО ІЮО МО: 69; (95) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО ІЮ МО: 69; (96) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-42 5ЕО ІО МО: 75; (97) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-42 5ЕО ІЮО МО: 75; (98) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-42 5ЕО І МО: 75; (99) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-42 5ЕО ІЮ
МО: 75; (100) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-42 5ЕО І МО: 75; (101) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮО МО: 77; (102) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІЮО МО: 81; (103) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО ІЮО МО: 81; (104) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО ІО МО: 81; (105) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-38 5ЕО І МО: 81; (106) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО ІЮ
МО: 87; (107) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО І МО: 87; (108) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО ІЮО МО: 89; (109) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІО МО: 89; (110) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-93 5ЕО ІЮО МО: 91; (111) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-93 5ЕО ІЮ МО: 91; (112) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-93 5ЕО ІЮ МО: 91; (113) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-93 5ЕО ІЮ
МО: 91; (114) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-93 5ЕО ІЮО МО: 91; (115) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 60-93 5ЕО ІЮО МО: 91; (116) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130 5БО ІО МО: 93; (117) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 ЗЕО ІЮ МО: 93; або (118) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5ЕО ІО МО: 93.
І001207| Варіант здійснення 12 являє собою злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 5 і 9-11, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає антиген.
І001208| Варіант здійснення 13 являє собою злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 5 і 9-11, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає фермент рекультивації.
БО І001209| Варіант здійснення 14 являє собою злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 7-11, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає фермент, прийнятний для руйнування емульсії або гелю в рідині гідророзриву пласту. 001210) Варіант здійснення 15 являє собою злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 7-11, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає антибактеріальний білок або пептид. (001211) Варіант здійснення 16 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, що експресує злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 1-15. (0012121 Варіант здійснення 17 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегец5, який експресує: 60 (ї) злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васіїйи5 сегец5; і (і) білок-модулятор, де експресія білка-модулятора збільшена в порівнянні з експресією білка-модулятора в представнику сімейства Васійци5 сегеи5 у тих же умовах; і де спільна експресія білка-модулятора зі злитим білком у рекомбінантному представнику сімейства Васіїйи5 сегеи5 приводить до збільшеної або зниженої експресії злитого білка відносно рівня експресії злитого білка в рекомбінантному представнику сімейства Васіїйи5 сегеци5, який не експресує білок-модулятор на збільшеному рівні, у тих же умовах у порівнянні з експресією білка-модулятора в представнику сімейства Васійци5 сегеи5 дикого типу. 001213) Варіант здійснення 18 являє собою рекомбінантний представник сімейства ВасіШив5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 17, де білок-модулятор включає білок Ех5У, білок
Ех5ГА/ВхрВ, білок СоїУу, білок СОЮ, білок ЕхХ5ЕВ, білок ІппА!т, білок ІппАг, білок Ехв5у), білок
Ех5Н, білок Мм|сСА, білок МісВ, білок ВсіІС, білок АсрС, білок ІппАЗ, аланінрацемазу 1, аланінрацемазу 2, білок ВсіА, білок ВсіІВ, білок ВхрА, білок ВСсІЕ, білок ВехгА/ВА53290, білок
СоїЕ, білок Ех5А, білок Ех5К, білок Ех5В, білок Маро, білок ТоїЇ, білок БОБАТ, білок БОБА2, варіант будь-якого з них або комбінацію будь-яких з них. (0012141 Варіант здійснення 19 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 17 або 18, де білок-модулятор, коли він спільно експресується в рекомбінантному представнику сімейства Васійи5 сегеиб5 зі злитим білком, приводить до збільшеної експресії злитого білка відносно рівня експресії злитого білка в рекомбінантному представнику сімейства Васіїйци5 сегец5, який не експресує білок-модулятор на збільшеному рівні, у тих же умовах у порівнянні з експресією білка-модулятора в представнику сімейства Васіїи5 сегеи5 дикого типу. 001215) Варіант здійснення 20 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 19, де білок-модулятор включає білок ВсіВ, білок СОЇЕ, а ВхрВ білок, білок СОЮ, білок ВСІА, варіант будь-якого з них або комбінацію будь-яких з них. (001216) Варіант здійснення 21 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 17 або 18, де білок-модулятор, коли він спільно експресується в рекомбінантному представнику сімейства Васійи5 сегеиб5 зі злитим білком,
Зо приводить до зниженої експресії злитого білка відносно рівня експресії злитого білка в рекомбінантному представнику сімейства Васіїйци5 сегец5, який не експресує білок-модулятор на підвищеному рівні, у тих же умовах у порівнянні з експресією білка-модулятора в представнику сімейства Васіїи5 сегеи5 дикого типу. (0012171 Варіант здійснення 22 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васіййи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 21, де білок-модулятор включає білок ВсіІС, білок
Арсс, білок ХхісВ, варіант будь-якого з них або комбінацію будь-яких з них. (0012181 Варіант здійснення 23 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васіййи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 17 або 18, де білок-модулятор включає білок СОЮ, білок ВсСІВ, білок Ех5ЕА/ВхрВ, білок х|сВ, варіант будь-якого з них або комбінацію будь-яких з них. 001219) Варіант здійснення 24 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 17-23, де білок-модулятор містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 7095, щонайменше 7595, щонайменше 85 965, щонайменше 90 95, щонайменше 95 95, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності послідовності з будь-якою з 5ЕО ІЮ МО: 123-156. (0012201 Варіант здійснення 25 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 17-24, де білок-"модулятор включає 5ЕО
ІО МО: 124, 126, 134, 135, 143 або 144. 0012211 Варіант здійснення 26 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 17-25, що містить вектор, який кодує білок-модулятор. (0012221 Варіант здійснення 27 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 26, де вектор включає багатокопійний плазмідний вектор. 001223) Варіант здійснення 28 являє собою рекомбінантний представник сімейства ВасіШив5 сегеи5, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства
Васійй5 сегеи5; де рекомбінантний представник сімейства Васіїйй5 сегеи5 містить мутацію, що бо частково або повністю інактивує спори рекомбінантного представника сімейства Васіїйй5 сегеив або підвищує чутливість спори рекомбінантного представника сімейства ВасшШиє сегеи5 до фізичної або хімічної інактивації в порівнянні з тими ж спорами, що не містять мутацію, їі де мутація включає мутацію в гені, що кодує рецептор проростання, мутацію в гені, що кодує літичний фермент кори спор, мутацію в гені, що кодує малий розчинний у кислоті білок спор (ЗА5Р), або мутацію в гені, що кодує білок оболонки або кори спори. (0012241 Варіант здійснення 29 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, який експресує злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 1-15; де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 містить мутацію, яка частково або повністю інактивує спори рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 або підвищує чутливість спори рекомбінантного представника Васіи5 сегеи5 до фізичної або хімічної інактивації в порівнянні з тими ж спорами, що не містять мутацію. 001225) Варіант здійснення 30 являє собою рекомбінантну бактерію роду Васійй5, що експресує протеазу або нуклеазу, де експресія протеази або нуклеази збільшена в порівнянні з експресією протеази або нуклеази в бактерії дикого типу роду Васійи5 у тих же умовах, і де збільшена експресія протеази або нуклеази частково або повністю інактивує спори рекомбінантної бактерії роду Васіййи5 або підвищує чутливість спори рекомбінантної бактерії роду Васійи5 до фізичної або хімічної інактивації. (0012261 Варіант здійснення 31 являє собою рекомбінантну бактерію відповідно до варіанта здійснення 30, де рекомбінантна бактерія роду Васійй5 включає рекомбінантний представник сімейства Васіїн5 сегецйв. (0012271 Варіант здійснення 32 являє собою рекомбінантну бактерію роду Васійи5 відповідно до варіанта здійснення 30 або 31, де рекомбінантна бактерія роду Васійи5 експресує протеазу і нуклеазу, де експресія протеази збільшена в порівнянні з експресією в бактерії дикого типу роду
Васійй5 у тих же умовах і експресія нуклеази збільшена в порівнянні з експресією нуклеази в бактерії дикого типу роду Васіїїи5 у тих же умовах. (0012281 Варіант здійснення 33 являє собою рекомбінантну бактерію роду Васійи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 30-32, де протеаза включає неспецифічну протеазу. (0012291 Варіант здійснення 34 являє собою рекомбінантну бактерію роду Васіїйи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 30-33, де протеаза включає серинову протеазу, треонінову
Зо протеазу, цистеїнову протеазу, аспартатну протеазу, протеазу глутамінової кислоти, лужну протеазу, субтилізин, гістидинову протеазу або металопротеїназу. 0012301 Варіант здійснення 35 являє собою рекомбінантну бактерію роду Васійи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 30, 32 і 34, де протеаза включає протеазу проростання спори. 001231) Варіант здійснення 36 являє собою рекомбінантну бактерію роду Васійи5 відповідно до варіанта здійснення 35, де протеаза проростання спори включає активну форму протеази проростання спори. (0012321 Варіант здійснення 37 являє собою рекомбінантну бактерію роду Васійи5 відповідно до варіанта здійснення 35 або 36, де протеаза проростання спори включає протеазу проростання спори Васійи5 зиБійб, протеазу проростання спори Васійи5 тусоїде5 або протеазу проростання спори Васійи5 ІПигіпдіепвів. (0012331 Варіант здійснення 38 являє собою рекомбінантну бактерію роду Васійи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 35-37, де протеаза проростання спори містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 95 965, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з БЕО ІО МО: 233 або 234. (0012341 Варіант здійснення 39 являє собою рекомбінантну бактерію роду Васійи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 30-38, де нуклеаза включає ендонуклеазу або екзонуклеазу. (0012351 Варіант здійснення 40 являє собою рекомбінантну бактерію роду Васійи5 відповідно до варіанта здійснення 39, де нуклеаза включає неспецифічну ендонуклеазу. (0012361 Варіант здійснення 41 являє собою рекомбінантну бактерію роду Васійи5 відповідно до варіанта здійснення 40, де неспецифічна ендонуклеаза включає ендонуклеазу 1 Васійи5 5,ИБів.
І001237| Варіант здійснення 42 являє собою рекомбінантну бактерію роду Васійи5 відповідно до варіанта здійснення 40 або 41, де неспецифічна ендонуклеаза містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 95 95, щонайменше 98 965, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з «ЕО ІО МО: 232. (0012381 Варіант здійснення 43 являє собою рекомбінантну бактерію роду Васійи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 30-42, де нуклеаза або протеаза експресується під бо контролем промотору, що містить промоторну послідовність сигма о.
(0012391 Варіант здійснення 44 являє собою рекомбінантну бактерію роду Васійи5 відповідно до варіанта здійснення 43, де промотор містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності з послідовністю нуклеїнової кислоти відповідно до будь-якої з зЗЕО ІЮ МО: 235-246. (001240) Варіант здійснення 45 являє собою рекомбінантну бактерію роду Васіїйи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 30-44, де спори рекомбінантної бактерії роду Васійи5 є більш чутливими до інактивації за допомогою опромінення ультрафіолетовим випромінюванням, опромінення гамма-випромінюванням або обробки відбілювачем, пероксидом водню, хлороформом, фенолом або оцтовою кислотою відносно тих же спор, що не експресують протеазу або нуклеазу на підвищеному рівні в порівнянні з експресією протеази або нуклеази в бактерії дикого типу роду Васіїши5, обробленої в тих же умовах. (0012411) Варіант здійснення 46 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 31-45, де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегецв, крім того, містить мутацію, яка частково або повністю інактивує спори рекомбінантного представника сімейства Васіййи5 сегеи5 або підвищує чутливість спори рекомбінантного представника сімейства Васіїйй5 сегеи5 до фізичної або хімічної інактивації в порівнянні з тими ж спорами, що не містять мутацію. (0012421 Варіант здійснення 47 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 46, де мутація включає мутацію в гені, що кодує рецептор проростання, мутацію в гені, що кодує літичний фермент кори спори, мутацію в гені, що кодує малий розчинний у кислоті білок спор (5БА5Р), або мутацію в гені, що кодує білок оболонки або кори спори. (0012431 Варіант здійснення 48 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеив відповідно до варіанта здійснення 28, 29 або 47, де мутація включає мутацію в гені, що кодує рецептор проростання. (0012441) Варіант здійснення 49 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 48, де мутація в гені, що кодує рецептор проростання, включає нокаут гена, що кодує рецептор проростання. (0012451 Варіант здійснення 50 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 48 або 49, де рецептор проростання включає сегА, сетгВ, СегК, сетгн, сегі, сего, Сегі, сего, сег, Сег5, сегМ, сСеш або сегх.
І001246| Варіант здійснення 51 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 28, 29 і 47-50, де мутація включає мутацію в гені, що кодує літичний фермент кори спор.
І001247| Варіант здійснення 52 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 51, де мутація в гені, що кодує літичний фермент кори спори, включає нокаут гена, що кодує літичний фермент кори спори. (0012481 Варіант здійснення 53 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 51 або 52, де літичний фермент кори спори включає 5ІіеВ або См. (0012491 Варіант здійснення 54 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 28, 29 і 47-53, де мутація включає мутацію в гені, який кодує ЗА5Р. 0012501 Варіант здійснення 55 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васі сегеиз відповідно до варіанта здійснення 54, де мутація в гені, який кодує БА5Р, включає нокаут гена, що кодує БА5Р. 0012511) Варіант здійснення 56 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегецйз відповідно до варіанта здійснення 54 або 55, де мутація в гені, який кодує 5А5Р, включає мутацію в гені 55рА, мутацію в гені 55рВ, мутацію в гені 55рс, мутацію в гені 55ЮрО, мутацію в гені 55рЕ, мутацію в гені 55рЕ, мутацію в гені 55ро, мутацію в гені 55рН, мутацію в гені 55рі, мутацію в гені 55ру), мутацію в гені 55рК, мутацію в гені 55рі., мутацію в гені 55рМ, мутацію в гені 55ЮрМ, мутацію в гені 55роО, мутацію в гені 55рР або їхню комбінацію. (0012521 Варіант здійснення 57 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійн5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 54-56, де БАБР включає 5АБРа, 5А5РВД або 5БАЗРУ. 0012531 Варіант здійснення 58 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 54-57, де спори рекомбінантного представника сімейства Васійй5 сегеи5 є більш чутливими до інактивації за допомогою опромінення ультрафіолетовим випромінюванням або опромінення гамма-випромінюванням у бо порівнянні з тими ж спорами, що не містять мутацію в гені, який кодує БА5Р.
(0012541 Варіант здійснення 59 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 28, 29 і 47-58, де мутація включає мутацію в гені, що кодує білок оболонки або кори спори. 0012551 Варіант здійснення 60 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 59, де мутація в гені, що кодує білок оболонки або кори спори, включає нокаут гена, що кодує білок оболонки або кори спори.
І001256| Варіант здійснення 61 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 59 або 60, де білок оболонки або кори спори включає
СОА, СоїВ або Соїс.
І001257| Варіант здійснення 62 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 59-61, де спори рекомбінантного представника сімейства Васійй5 сегеи5 є більш чутливими до інактивації за допомогою опромінення ультрафіолетовим випромінюванням, опромінення гамма-випромінюванням або за допомогою обробки відбілювачем, пероксидом водню, хлороформом, фенолом або оцтовою кислотою, у порівнянні з тими ж спорами, що не містять мутацію в білку оболонки або кори спори, обробленими в тих же умовах. (0012581 Варіант здійснення 63 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 31-62, де рекомбінантний представник сімейства Васіїйн5 сегеи5 також експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства ВасШив сегеи5. 0012591 Варіант здійснення 64 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васіййи5 сегеи5, що експресує білок екзоспорію, де експресія білка екзоспорію збільшена в порівнянні з експресією білка екзоспорію в представнику сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах, і де білок екзоспорію включає: фермент екзоспорію, де фермент екзоспорію включає фермент, залучений у солюбілізацію поживних речовин, інозинуридингідролазу, протеазу, фермент, який каталізує деградацію вільного радикала, аргіназу або аланінрацемазу; або
Ко) білок ВсСІА, білок ВсіІВ, білок СОЇЕ білок СОЮ, ап білок Ех5У, білок ЕХеЕА/ВхрВ, білок СоїУ, білок ЕХ5ЕВ, білок Ех5у, білок Ех5Н, білок місА, білок Хі|сВ, білок ВсіІС, білок ВхрА, білок ВСЕ, білок Веїт!/ВА53290, білок Ех5А, білок Ех5К, білок Ех5В, білок Харо або білок Та). 0012601 Варіант здійснення 65 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 64, де білок екзоспорію не є частиною злитого білка. (001261) Варіант здійснення 66 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 64 або 65, де білок екзоспорію включає фермент екзоспорію, де фермент екзоспорію включає фермент, залучений у солюбілізацію поживних речовин, інозинуридингідролазу, протеазу, фермент, який каталізує деградацію вільного радикала, аргіназу або аланінрацемазу. (0012621) Варіант здійснення 67 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 66, де фермент, залучений у солюбілізацію поживних речовин, включає фермент, залучений у солюбілізацію фосфатів. (001263) Варіант здійснення 68 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 67, де фермент, залучений у солюбілізацію фосфатів, включає кислу фосфатазу. (0012641 Варіант здійснення 69 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеиз відповідно до варіанта здійснення 68, де кисла фосфатаза включає Асрос. (001265) Варіант здійснення 70 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 68 або 69, де кисла фосфатаза містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 95 95, щонайменше 98 965, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 137. 001266) Варіант здійснення 71 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 64 або 65, де фермент екзоспорію включає інозинуридингідролазу.
І001267| Варіант здійснення 72 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 71, де інозинуридингідролаза включає ІшпН1 або
ІопНнае. (0012681 Варіант здійснення 73 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 71 або 72, де інозинуридингідролаза містить 60 амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше
95 965, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з БЕО ІО МО: 250 або 251. (0012691 Варіант здійснення 74 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійн5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 64 або 65, де фермент екзоспорію включає протеазу. (0012701 Варіант здійснення 75 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеиз відповідно до варіанта здійснення 74, де протеаза включає металопротеїназу. (0012711) Варіант здійснення 76 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 75, де металопротеїназа включає Іпп1, ІппА2 або
ІппАЗ. (0012721 Варіант здійснення 77 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васіййи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 75 або 76, де металопротеїназа містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 95 95, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95, або щонайменше 100 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 114, 121, 122, 129, 130 або 138. (0012731 Варіант здійснення 78 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 64 або 65, де фермент, який каталізує деградацію вільного радикала, включає супероксиддисмутазу. (0012741 Варіант здійснення 79 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 78, де супероксиддисмутаза включає супероксиддисмутазу 1 (ЗОБА) або супероксиддисмутазу 2 (ЗОБАЗ). (001275) Варіант здійснення 80 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 78 або 79, де супероксиддисмутаза містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 95 965, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з БЕО ІО МО: 155 або 156. (0012761 Варіант здійснення 81 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 64 або 65, де фермент екзоспорію включає аргіназу.
І001277| Варіант здійснення 82 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеиз відповідно до варіанта здійснення 81, де аргіназа включає аргіназу Васійни5 ІПигіпдіепвів. (0012781 Варіант здійснення 83 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васіййи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 81 або 82, де аргіназа містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 95 95, щонайменше 98 965, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з 5ЕО ІЮО МО: 249. (0012791 Варіант здійснення 84 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 64 або 65, де фермент екзоспорію включає аланінрацемазу. 001280) Варіант здійснення 85 являє собою рекомбінантний представник сімейства ВасіШив5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 84, де аланінрацемаза включає аланінрацемазу 1 (АЇ КІТ) або аланінрацемазу 2 (А -К2). (0012811) Варіант здійснення 86 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійн5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 84 або 85, де аланінрацемаза містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 95 95, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 247 або 248. (0012821 Варіант здійснення 87 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 64 або 65, де білок екзоспорію включає білок ВСІА, білок ВсіВ, білок СОЇЕ білок СОЮ, ап білок Ех5У, білок ЕХеЕА/ВхрВ, білок Соїу, білок ЕХ5ЕВ, білок Ех5у, білок Ех5Н, білок М|СА, білок М|СсВ, білок ВсІС, білок ВхрА, білок ВсСІЕ, білок
ВегА/ВА53290, білок ЕхХ5А, білок Ех5К, білок Ех5В, білок Харс або білок ТаЇ. (0012831 Варіант здійснення 88 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійн5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 87, де білок екзоспорію включає білок ВсіА, білок ВсІВ, білок СОЇЕ або білок СОЮ. (001284) Варіант здійснення 89 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 87 або 88, де білок екзоспорію включає білок ВСІіА. (001285) Варіант здійснення 90 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 89, де білок ВсіА містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з зБЕО ІЮ МО: 141 або 142.
І001286| Варіант здійснення 91 являє собою представник сімейства Васійи5 сегеийв5 відповідно до варіанта здійснення 87 або 88, де білок екзоспорію включає білок ВсіІВ.
І001287| Варіант здійснення 92 являє собою представник сімейства Васійи5 сегеийв5 відповідно до варіанта здійснення 91, де білок ВСІВ містить амінокислотну послідовність, яка 60 має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше 98 95,
щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 143 або 144. (0012881 Варіант здійснення 93 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 87 або 88, де екзоспорію включає білок СОЇЕ. (0012891 Варіант здійснення 94 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 93, де білок СОЇЕ містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 149. 0012901 Варіант здійснення 95 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 87 або 88, де білок екзоспорію включає білок СОЮ. 001291) Варіант здійснення 96 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 95, де білок СОЇ містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 126. (0012921 Варіант здійснення 97 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 87, де білок екзоспорію включає білок Ех5У, білок
ЕхХ5ГА/ВхрВ, білок СоїУ, білок ЕХ5ЕВ, білок Ех5у, білок Ех5Н, білок хМісА, білок Х|СВ, білок ВсІС, білок ВхрА, білок ВсіІЕ, білок Ветгх//ВА53290, білок Ех5А, білок Ех5К, білок Ех5В, білок Марс або білок Та. (0012931 Варіант здійснення 98 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійн5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 97, де білок екзоспорію включає: білок Ех5У, де білок Ех5У містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 100 95 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 123; білок Ех5РА/ВхрВ, де білок Ех5РА/ВхрВ містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 9о, щонайменше 90 96, щонайменше 95 956, щонайменше 98905, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 124; білок СоїУ, де білок СоїУ містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 100 95 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 125; білок Ех5ЕВ, де білок ЕХ5ЕВ містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 965, щонайменше 90 95, щонайменше 95 95, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 127 або 128; білок Ех5у, де білок Ех) містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 100 95 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 131; білок Ех5Н, де білок Ех5Н містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 100 95 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 132; білок ХМісА, де білок ХісСА містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 100 95 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 133; білок ХісВ, де білок хХісВ містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 100 95 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 134 або 135; білок ВсіІС, де білок ВсІС містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 95 95, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 м/йп
ЗЕО ІЮ МО: 136; білок ВхрА, де білок ВхрА містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 95 95, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 м/йп
ЗЕО ІЮ МО: 145; білок ВсіІЕ, де білок ВсІЕ містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 100 95 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 146 або 147; білок ВетА/ВА5З3290, де білок ВегА/ВА5З3290 містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 9о, щонайменше 90 96, щонайменше 95 956, щонайменше 98905, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 148; білок Ех5А, де білок Ех5А містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 100 95 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 150; 60 білок ЕхХ5К, де білок Ех5К містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95,
щонайменше 90 95, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 100 95 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 151; білок Ех5В, де білок Ех5В містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 100 95 ідентичності з БЕО ІЮО МО: 152; білок Марс, де білок таро містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 100 95 ідентичності з ФЕО ІЮО МО: 153; або білок ТіЇ, де білок Т)Ї містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 100 95 ідентичності з ФЕО ІО МО: 156. (0012941 Варіант здійснення 99 являє собою рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 64-98, де рекомбінантний представник сімейства Васіїйн5 сегеи5 також експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства ВасШив сегеи5.
І001295| Варіант здійснення 100 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійи5 сегеи5, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства
Васійй5 сегеи5; де рекомбінантний представник сімейства Васіїйй5 сегеи5 містить мутацію або експресує білок, де експресія білка збільшена в порівнянні з експресією білка в представнику сімейства Васійй5 сегеи5 дикого типу у тих же умовах, і де мутація або збільшена експресія білка забезпечує спорр Васіїйй5 сегеи5, що мають екзоспорій, який легше видалити зі спори в порівнянні з екзоспорієм спори дикого типу.
І001296| Варіант здійснення 101 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійи5 сегеи5, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка
Зо екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства
Васійи5 сегеи5; де рекомбінантний представник сімейства Васіїйи5 сегецв: (ї) містить мутацію в гені СОЇЕ; (і) експресує білок Ех5У, де експресія білка Ех5У збільшена в порівнянні з експресією білка
Ех5У у представнику сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах, і де білок Ех5 У містить С-кінцеву мітку, що містить глобулярний білок; (ії) експресує білок ВсіВ, де експресія білка ВсІВ збільшена в порівнянні з експресією білка
ВсІВ у представнику сімейства Васіи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах; (ім) експресує білок хУісВ, де експресія білка У|сВ збільшена в порівнянні з експресією білка "еВ у представнику сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах; (у) містить мутцию в гені Ехв5У; (мі) містить мутацію в гені СоїУ; (мії) містить мутацію в гені Ех5А; або (мії) містить мутацію в гені СОЮ.
І001297| Варіант здійснення 102 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїйй5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 100 або 101, де рекомбінантний представник сімейства Васіїи5 сегеи5 містить мутацію в гені СОЇЕ.
І001298| Варіант здійснення 103 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васі сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 102, де мутація в гені СОЇТЕ частково або повністю інгібує здатність СОЇЕ зв'язувати екзоспорій зі спорою.
І001299| Варіант здійснення 104 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїйй5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 102 або 103, де мутація в гені СОТЕ включає нокаут гена СОїЕ або домінантно-негативну форму гена СОїЕ.
І001300| Варіант здійснення 105 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васі сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-104, де рекомбінантний представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 експресує білок Ех5У, де експресія білка Ех5У збільшена в порівнянні з експресією білка Ех5У у представнику сімейства Васіїйи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах, і де білок Ех5У містить С-кінцеву мітку, що містить глобулярний білок.
І001301| Варіант здійснення 106 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїйй5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 105, де глобулярний білок має молекулярну 60 масу від 25 кДа до 100 кДа.
І001302| Варіант здійснення 107 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїйй5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 105 або 106, де глобулярний білок включає зелений флуоресцентний білок (СЕР) або його варіант.
І001303| Варіант здійснення 108 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 105-107, де експресія білка Ех5У, що містить С-кінцеву мітку, що містить глобулярний білок, інгібує зв'язування білка Ех5У з його мішенями в екзоспорії.
І001304| Варіант здійснення 109 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васі сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-108, де рекомбінантний представник сімейства Васіїи5 сегеи5 експресує білок ВсіВ, де експресія білка ВсІВ збільшена в порівнянні з експресією білка ВсіІВ у представнику сімейства Васіїйи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах.
І001305| Варіант здійснення 110 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїйй5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 109, де експресія білка ВСІВ приводить до утворення неміцного екзоспорію.
І001306| Варіант здійснення 111 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-110, де рекомбінантний представник сімейства Васіїйн5 сегеи5 експресує білок х|сВ, де експресія білка ХісВ збільшена в порівнянні з експресією білка хісВ у представнику сімейства Васіїйй5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах.
І001307| Варіант здійснення 112 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїйй5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 111, де експресія білка ХісВ приводить до фрагментарного формування екзоспорію замість цілої структури.
І001308| Варіант здійснення 113 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васі сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-112, де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 містить мутацію в гені Ех5У.
І001309| Варіант здійснення 114 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васій5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 113, де мутація в гені ЕхеУ частково або повністю інгібує здатність ЕхеУ завершувати формування екзоспорію або зв'язувати екзоспорій
Зо зі спорою.
І001310| Варіант здійснення 115 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїйй5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 113 або 114, де мутація в гені Ех5У включає нокаут гена ЕхзуУ. 001311) Варіант здійснення 116 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васі сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-115, де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 містить мутацію в гені СОГУ.
І001312| Варіант здійснення 117 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 116, де мутація в гені СоїуУ включає нокаут гена СоїУ. 001313) Варіант здійснення 118 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїи5 сегеиз5 відповідно до варіанта здійснення 116 або 117, де мутація в гені СОЇУ приводить до утворення неміцного екзоспорію. 001314) Варіант здійснення 119 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васі сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-118, де рекомбінантний представник сімейства Васійни5 сегеи5 включає мутацію в гені Ех5А. 001315) Варіант здійснення 120 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 119, де мутація в гені ЕХх5хА включає нокаут гена ЕХ5А.
І001316| Варіант здійснення 121 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїи5 сегеци5 відповідно до варіанта здійснення 119 або 120, де мутація в гені Ех5А приводить до утворення неміцного екзоспорію.
І001317| Варіант здійснення 122 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васі сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-121, де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 містить мутацію в гені СОЮ. 001318) Варіант здійснення 123 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 122, де мутація в гені СОЮ включає нокаут гена СОЮ або домінантно-негативну форму гена Со.
І001319| Варіант здійснення 124 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїи5 сегеци5 відповідно до варіанта здійснення 122 або 123, де мутація в гені СОЮ приводить бо до формування екзоспорію смугами.
І001320| Варіант здійснення 125 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійи5 сегеи5, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства
Васійй5 сегеи5, де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 включає ендофітний штам бактерій, штам бактерій, що здатний деградувати гербіцид або пестицид, або пробіотичний штам бактерій.
І001321| Варіант здійснення 126 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійи5 сегеиз відповідно до варіанта здійснення 125, де ендофітний штам включає представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 ЕЕ349 (МЕКІ. Мо В-50928), представник сімейства Васійй5 сегеих ЕЕ439 (МАНІ В-50979), Васійив5 Шигіпдіеєпвіє ЕЕ417 (МАВ В-50979), Васіїйй5 сегеийвб
ЕЕ444 (МАНІ В-50977), Васійнв5 ІШипйпдієпві ЕЄ319 (МАНІ В-50983), Васшив5 (пПиппдіепвів ЕЕ- вО00184 (МАВ В-67122), представник сімейства Васіййи5 сегеи5 ЕЕ-800377 (МАВІ В-67119);
Васійи5 рзепдотусоіїде5 ЕЕ-В800366 (МАВ В-67120) або Васіїйй5 тусоїде5 ЕЕ-800363 (МАНІ В- 67121).
Ї001322| Варіант здійснення 127 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїйй5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 125, де ендофітний штам бактерій включає представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ439 (МЕНІ. В-50979), ВасіПи5 ІПигіпдіепзі5 ЕЕ417 (МАВ
В-50979), Васійи5 сегеиз ЕЕ444 (МАВ В-50977) або Васійи5 (Шигіпдіепзіз ЕЕ319 (МКК В- 50983), Васійив Шитгіпдіепзіз ЕЕ-800184 (МАН 8В-67122), представник сімейства ВасшШив сегеи5
ЕЕ-В00377 (МАВ В-67119); Васіїив рзейдотусоїдез ЕЕ-800366 (МАНІ В-67120); або Васійи5 тусоїде5 ЕЕ-В800363 (МАН В-67121).
І001323| Варіант здійснення 128 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 125, де штам бактерій, що здатний деградувати гербіцид або пестицид, включає представник сімейства Васійн5 сегеи5 ЕЕ349 (МАК. Ме В-50928), представник сімейства Васіїйи5 сегеиз ЕЕ-800377 (МАНІ. В-67119); Васійив рзепдотусоїдез ЕЕ-800366 (МАВ В-67120) або Васійи5 тусоїде5 ЕЕ-800363 (МАВ В-67121).
І001324| Варіант здійснення 129 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїйй5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 125, де пробіотичний штам бактерій включає
Зо представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 ЕЕ349 (МЕКІ. Мо В-50928), представник сімейства Васійй5 сегеиз ЕЕ439 (МАВ В-50979), Васійив Іигіпдіепзіз ЕЕ417 (МАВІ В-50979) або Васійи5 сегеи5
ЕЕ444 (МАВ В-50977). 001326) Варіант здійснення 131 являє собою злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 4, 8 ї 12-15 або рекомбінантний представник сімейства Васіїйй5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 16 або 130, де націлювальна послідовність містить: амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 5095 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 63 95; амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 5095 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 72 95; амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 5695 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 63 95; амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 6295 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 72 95; амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 68595 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 81 95; амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 7595 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 72 95; амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 75595 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 81 95; амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 8195 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 81 95; або 60 амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 8195 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 90 95.
І001327| Варіант здійснення 132 являє собою злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 4, 8 ї 12-15 або рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеийв5 відповідно до варіанта здійснення 16 або 130, де націлювальна послідовність складається з: (а) амінокислотної послідовності, яка складається з 16 амінокислот і має щонайменше приблизно 4395 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 54 95; (Б) амінокислот 1-35 5ЕО І МО: 1; (с) амінокислот 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1; (4) БЕОІЮО МО: 1; (є) ЗЕО ІЮ МО: 96; або (У ЗЕО ІЮ МО: 120. (0013281 Варіант здійснення 133 являє собою злитий білок або рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 131, де націлювальна послідовність складається з амінокислотної послідовності.
І001329| Варіант здійснення 134 являє собою злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 4, 8 ї 12-15 або рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 16 або 130, де злитий білок містить білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, що містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 90 965, щонайменше 95 95, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з «Ф»ЕО
ІП МО: 2, 4,6, 8, 10, 12, 14,16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 44, 46, А8, 50, 52, 54, 56, 58, 95, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120 і 121.
І001330| Варіант здійснення 135 являє собою злитий білок відповідно до варіанта здійснення 1 або рекомбінантний представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 16 або 130, де злитий білок містить білок екзоспорію, який містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 90 95, щонайменше 95 95, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 60, 62, 64, 66, 68, 70, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94 або 122.
Ко) 0013311) Варіант здійснення 136 являє собою злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 1-15 і 131-135 або рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-29, 48-63 і 99-135, де націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію містять амінокислотну послідовність СХТ на їхньому С-кінці, де Х являє собою будь-яку амінокислоту. 0013321 Варіант здійснення 137 являє собою злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 1-15 і 131-136 або рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-29, 48-63 і 99-136, де націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію містять залишок аланіну в положенні націлювальної послідовності, що відповідає амінокислоті 20 5ЕО ІЮО МО: 1.
І001333| Варіант здійснення 138 являє собою злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 1-15 і 131-137 або рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-29, 48-63 і 99-137, де націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію додатково містять залишок метіоніну, серину або треоніну в положенні амінокислоти, що безпосередньо передує першій амінокислоті націлювальної послідовності білка екзоспорію або фрагмента білка екзоспорію, або в положенні націлювальної послідовності, що відповідає амінокислоті 20 5ЕО ІЮ МО: 1. 001334) Варіант здійснення 139 являє собою злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 1-15 і 131-138 або рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеий5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-29, 48-63 і 99-138, де злитий білок, крім того, містить амінокислотний лінкер між націлювальною послідовністю, білком екзоспорію або фрагментом білка екзоспорію і білком або пептидом, що представляє інтерес. 001335) Варіант здійснення 140 являє собою злитий білок або рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 139, де лінкер включає поліаланіновий лінкер, полігліциновий лінкер або лінкер, що містить суміш як залишків аланіну, так і залишків гліцину. (0013361 Варіант здійснення 141 являє собою злитий білок або рекомбінантний представник сімейства Васіййи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 139 або 140, де лінкер містить ділянку розпізнавання протеазою. (0013371 Варіант здійснення 142 являє собою злитий білок, який містить щонайменше один 60 білок або пептид, що представляє інтерес, і білок оболонки спори, де білок оболонки спори включає білок СоїВ/Н, білок спори Х або білок Соїу, де білок Соїу містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 80 95 ідентичності з зЗЕО ІЮ МО: 258 або 259.
І001338| Варіант здійснення 143 являє собою злитий білок відповідно до варіанта здійснення 142, де білок оболонки спори включає білок СОоїЇВ/Н.
І001339| Варіант здійснення 144 являє собою злитий білок відповідно до варіанта здійснення 142, де білок оболонки спори включає білок спори Х.
І001340| Варіант здійснення 145 являє собою злитий білок відповідно до варіанта здійснення 142, де білок оболонки спори включає білок СоїМ, де білок Соїу містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 80 95 ідентичності з БЗЕО ІО МО: 258 або 259. 0013411) Варіант здійснення 146 являє собою злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 142-145, де білок оболонки спори містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 255, 257, 258 або 259. (0013421 Варіант здійснення 147 являє собою рекомбінантну спороутворювальну бактерію, що експресує злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 142-146. (0013431) Варіант здійснення 148 являє собою рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до варіанта здійснення 147, де рекомбінантна спороутворювальна бактерія включає ендофітний штам бактерій, штам бактерій, що стимулює ріст рослин, або штам бактерій, який є як ендофітним, так і стимулюючим ріст рослин. (001344) Варіант здійснення 149 являє собою рекомбінантну спороутворювальну бактерію, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і білок оболонки спори, що націлює злитий білок на поверхню спори бактерії, де білок оболонки спори включає білок СоїВ, білок СоїС, білок СдеА, білок СоїВ/Н, білок Соїб, білок оболонки спори Х або білок Соїу; і де рекомбінантна спороутворювальна бактерія включає ендофітний штам бактерій, штам бактерій, що стимулює ріст рослин, або штам бактерій, який є як ендофітним, так і стимулюючим ріст рослин. (0013451) Варіант здійснення 150 являє собою насіння рослини, покрите рекомбінантною спороутворювальною бактерією, де рекомбінантна спороутворювальна бактерія експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і білок
Зо оболонки спори, що націлює злитий білок на поверхню спори бактерії, де білок оболонки спори включає білок СоїВ, білок СоїС, білок СдеА, білок СоїВ/Н, білок Сої б, білок спори Х або білок
СоїУ. (001346) Варіант здійснення 151 являє собою рекомбінантна спороутворювальна бактерія відповідно до варіанта здійснення 147, 148 або 149 або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 150, де рекомбінантна спороутворювальна бактерія включає бактерію роду Васійи5,
Гузіпірасійи5, Мігоіпірасійи5, Сіовігідіа або Раєпірбасійн5.
Ї001347| Варіант здійснення 152 являє собою рекомбінантну бактерію роду ВасшШив5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 30-45, де рекомбінантна бактерія містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію, і де рекомбінантна спороутворювальна бактерія також експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і білок оболонки спори, що націлює злитий білок на поверхню спори бактерії, де білок оболонки спори включає білок СоїВ, білок СоїС, білок СдеА, білок СоїВ/Н, білок Сої С, білок оболонки спори Х або білок СоїУ.
І001348| Варіант здійснення 153 являє собою рекомбінантну бактерію роду Васіййи5 відповідно до варіанта здійснення 152, де рекомбінантна бактерія включає ендофітний штам бактерій, штам бактерій, що стимулює ріст рослин, або штам бактерій, який є як ендофітним, так і стимулюючим ріст рослин. (0013491) Варіант здійснення 154 являє собою насіння рослини, покрите рекомбінантною спороутворювальною бактерією відповідно до варіанта здійснення 152 або 153. 001350) Варіант здійснення 155 являє собою насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 150, 151 або 154, де рекомбінантна спороутворювальна бактерія включає ендофітний штам бактерій, штам бактерій, що стимулює ріст рослин, або штам бактерій, який є як ендофітним, так і стимулюючим ріст рослин. 0013511) Варіант здійснення 156 являє собою рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до варіанта здійснення 148, 149 або 153, або насіння відповідно до варіанта здійснення 155, де ендофітний штам бактерій, штам бактерій, що стимулює ріст рослин, або штам бактерій, який є як ендофітним, так і стимулюючим ріст рослин, включає Васіййи5 тедаїенйшит ЕЕЗ385 (МАНІ В-50980), Васіїїи5 5р. ЕЕ387 (МАНІ В-50981), Васіїйив5 сієсшап5 ЕЕЗ388 (МАВ В-50982), Васійи5 5!ЇиБійй5 ЕЕ405 (МАВ В-50978), І узіпібасіПи5 Тизіогтів ЕЕ442 (МАНІ. В- 60 50975), І узіпібрасійи5 5рпаєтісиї ЕЕ443 (МАНІ 8-50976), Васій5 ритіїй5 ЕЕ-800143 (МАНІ В-
67123), Васіййив зибБійвБ ЕЕТ148 (МАНІ 8-50927), ВасіШив5 в!ЇибБійв ЕЕ218 (МАВІ В-50926) або
Васіїйн5 тедаїегійт ЕЕ281 (МАНІ. В-50925). 0013521 Варіант здійснення 157 являє собою рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння відповідно до варіанта здійснення 156, де ендофітний штам бактерій включає
Васіиз зибій5 ЕЕ405 (МАВ. В-50978) або ВасШи5 тедаїетгішт ЕЕЗ385 (МАНІ В-50980). 0013531) Варіант здійснення 158 являє собою рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до варіанта здійснення 148, 149 або 153 або насіння відповідно до варіанта здійснення 155, де ендофітний штам бактерій, що стимулює ріст рослин штам бактерій, або штам бактерій, який є як ендофітним, так і стимулюючим ріст рослин, включає представник сімейства Васі сегеи5 ЕЕЗ349 (МККІ Мо В-50928), представник сімейства Васіїйн5 сегеи5
ЕЕ439 (МАНІ В8-50979), Васіїйи5 игіпдіепбвіє ЕЕ417 (МАНІ В-50979), ВасшШи5 сегеи5 ЕЕ444 (МАВ 8В-50977), Васіїи5 (игіпдіепзіз ЕЕ319 (МАНІ В-50983), Васійи5 Шигіпдіеєпвіє ЕЕ-800184 (МАНІ 8В-67122), представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ-800377 (МАНІ В-67119), Васійшв5 рзейдотусоїде5 ЕЕ-В800366 (МАНІ В8-67120), Васійн5 тусоіїде5 ЕЕ-В800363 (МАНІ В-67121),
ВасшШив тусоїде5 ВТ155 (МКК Мо В-50921), Васійи5 тусоїде5 ЕЕ118 (МЕКІ Мо В-50918), ВасПив5 тусоїде5 ЕЕ141 (МКК Мо В-50921), Васійи5 тусоіїде5 ВТ46-3 (МАК Ме В-50922), представник сімейства Васійи5 сегени5 ЕЕ128 (МКК! Мо В-50917), Васійи5 (пигіпдіепзіє ВТО1ТЗА (МАК Ме В- 50924) або представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 ЕЕ349 (МКК Мо В-50928). (0013541 Варіант здійснення 159 являє собою рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 149, 151, 152, 153 і 156-158, або насіння відповідно до варіанта здійснення 150, 151 і 154-158, де білок оболонки спори містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 95 965, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з будь-якою з 5ЕО ІЮ МО: 252-259. 001355) Варіант здійснення 160 являє собою рекомбінантну спороутворювальну бактерію, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і білок, який націлює злитий білок на поверхню спори бактерії, де рекомбінантна спороутворювальна бактерія не є рекомбінантним представником сімейства Васіїйн5 сегецб, і білок, який націлює злитий білок на поверхню спори бактерії, включає амінокислоти 20-35 5ЕО
Ко) ІЮ МО: 1, 5ЕБЕО ІЮ МО: 96 або амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 108, 5ЕО ІЮО МО: 111, 5ЕО ІЮ МО: 114, 5ЕО ІЮ МО: 120 або 5ЕО ІО МО: 121. (0013561 Варіант здійснення 161 являє собою рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до варіанта здійснення 160, де білок, який націлює злитий білок на поверхню спори бактерії, включає амінокислоти 20-35 5ЕО ІО МО: 1, 5ЕО ІЮ МО: 96, 5ЕО ІО МО: 108, 5ЕО І
МО: 120 або 5ЕО ІО МО: 121.
І001357| Варіант здійснення 162 являє собою рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до варіанта здійснення 160 або 161, де рекомбінантна спороутворювальна бактерія включає ендофітний штам бактерій, штам бактерій, що стимулює ріст рослин, або штам бактерій, який є як ендофітним, так і стимулюючим ріст рослин. (0013581 Варіант здійснення 163 являє собою рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до варіанта здійснення 162, де ендофітний штам бактерій, що стимулює ріст рослин штам бактерій, або штам бактерій, який є як ендофітним, так і стимулюючим ріст рослин, включає Васійи5 тедаїегічт ЕЕ385 (МКК. В-50980), Васійи5 зр. ЕЄЗ387 (МАНІ. 8В-50981), Васйив сієсшап5 ЕЕЗ88 (МАНІ В-50982), Васйи5 5!,иБій5 ЕЕ405 (МАВ В-50978), І увіпібасійи5 Ти5Поптів
ЕЕ442 (МАНІ В-50975), І увіпіврасійив 5рпаегісих ЕЕ443 (МАНІ В-50976), Васіїйи5 ритіїшв ЕБ- вО0143 (МАВ В-67123), Васійив зи,иБбій5 ЕЕ148 (МАВ В-50927), Васіїйи5 з,ибійв ЕЕ218 (МАНІ Вв- 50926) або Васійи5 тедаїегішт ЕЕ281 (МАВ В-50925). 0013591 Варіант здійснення 164 являє собою рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до варіанта здійснення 163, де ендофітний штам бактерій включає Васійи5 5р. ЕЕ387 (МАВ. В-50981). 001360) Варіант здійснення 165 являє собою злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 142-146, рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до будь- якого з варіантів здійснення 147-149, 151-153 і 156-164, або насіння відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 150, 151 і 154-159, де злитий білок, крім того, містить амінокислотний лінкер між білком оболонки спори і білком або пептидом, що представляє інтерес.
І001361| Варіант здійснення 166 являє собою злитий білок, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння відповідно до варіанта здійснення 165, де лінкер включає поліаланіновий лінкер, полігліциновий лінкер або лінкер, що містить суміш залишків як бо аланіну, так і гліцину.
І001362| Варіант здійснення 167 являє собою злитий білок, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння відповідно до варіанта здійснення 165 або 166, де лінкер містить ділянку розпізнавання протеазою.
001363) Варіант здійснення 168 являє собою злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 1-3 їі 142-146, рекомбінантний представник сімейства Васійн5 сегеиб5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-29, 48-63 і 99-141, рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 147-149, 151-153 і 156-167, або насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 150, 151 і 154-167, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає стимулюючий ріст рослин білок або пептид, білок або пептид, який захищає рослину від патогена, білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів, білок або пептид, що зв'язується з рослиною, фермент, який каталізує продукції оксиду азоту або білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту.
(0013641) Варіант здійснення 169 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 168, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає стимулюючий ріст рослин білок або пептид.
001365) Варіант здійснення 170 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 169, де стимулюючий ріст рослин білок або пептид включає пептидний гормон, негормональний пептид, фермент, залучений у продукцію або активацію стимулюючої ріст рослин сполуки або фермент, що деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин.
(001366) Варіант здійснення 171 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 170, де стимулюючий ріст рослин білок або пептид включає пептидний гормон.
(0013671) Варіант здійснення 172 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 171, де пептидний гормон включає фітосульфокін, сіамайа З
(СІ М3), системін, 7тіСЕ або ЗСЕ/5РІ11.
001368) Варіант здійснення 173 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння бактерії відповідно до варіанта здійснення 172, де фітосульфокін включає фітосульфокін-а.
001369) Варіант здійснення 174 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 170, де стимулюючий ріст рослин білок або пептид включає негормональний пептид.
0013701 Варіант здійснення 175 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 174, де непептидний гормон включає ККМ 16010, Нао-Зум46, пептид ЕМОЮ40, мелітин, мастопаран, Ма57, КНРР, РОЇ АКІЗ або інгібітор трипсину Кипіїх (КТІ).
0013711 Варіант здійснення 176 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 170, де стимулюючий ріст рослин білок або пептид включає фермент, залучений у продукцію або активацію стимулюючої ріст рослин сполуки.
0013721 Варіант здійснення 177 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 176, де стимулююча ріст рослин сполука включає сполуку, яка продукується бактеріями або грибами в ризосфері.
001373) Варіант здійснення 178 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 177, де сполука, яка продукується бактеріями або грибами в ризосфері, включає 2,3-бутандіол.
(0013741) Варіант здійснення 179 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 176, де сполука, яка стимулює ріст рослин, включає гормон росту рослин.
0013751) Варіант здійснення 180 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини
60 відповідно до варіанта здійснення 179, де гормон росту рослин включає цитокінін або похідне цитокініну, етилен, ауксин або похідне ауксину, гіберелову кислоту або похідне гібералової кислоти, абсцизову кислоту або похідне абсцизової кислоти, жасмонову кислоту або похідне жасмонової кислоти. (0013761) Варіант здійснення 181 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 180, де гормон росту рослин включає цитокінін або похідне цитокініну, і цитокінін або похідне цитокініну включає кінетин, цис-зеатин, транс-зеатин, 6- бензиламінопурин, дигідроксизеатин, Мб-(О2-ізопентеніл)аденін, рибозилзеатин, Мб6-(02- ізопентеніл)аденозин, 2-метилтіо-цис-рибозилзеатин, цис-рибозилзеатин, транс-рибозилзеатин, 2-метилтіо-транс-рибозилзеатин, рибозилзеатин-о-монофосфат, Мб-метиламінопурин, /Мб- диметиламінопурин, 2'-дезоксизеатинрибозид, 4-гідрокси-3-метил-транс-2-бутеніламінопурин, орто-тополін, мета-тополін, бензиладенін, орто-метилтополін, мета-метилтополін або їхню комбінацію; або, коли гормон росту рослини включає ауксин або похідне ауксину, ауксин або похідне ауксину може включати активний ауксин, неактивний ауксин, кон'югований ауксин, ауксин, що зустрічається в природі, синтетичний ауксин, або їхню комбінацію.
І001377| Варіант здійснення 182 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 180 або 181, де гормон росту рослин включає ауксин або похідне ауксину, і ауксин або похідне ауксину включає індол-З-оцтову кислоту, індол-3- піровиноградну кислоту, індол-3-ацетальдоксим, індол-3-ацетамід, індол-З-ацетонітрил, індол-3- етанол, індол-З-піруват, індол-З-ацетальдоксим, індол-З-масляну кислоту, фенілоцтову кислоту, 4-хлоріндол-3-оцтову кислоту, кон'югований із глюкозою ауксин або їхню комбінацію. (0013781) Варіант здійснення 183 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 176-182, де стимулюючий ріст рослин білок або пептид включає фермент, залучений у продукцію або активацію стимулюючої ріст рослин сполуки, і фермент, залучений у продукцію або активацію стимулюючої ріст рослин сполуки, включає ацетоїнредуктазу, індол-3-ацетамідгідролазу, триптофанмонооксигеназу, ацетолактатсинтетазу, а-ацетолактатдекарбоксилазу, піруватдекарбоксилазу,
Зо діацетилредуктазу, бутандіолдегідрогеназу, амінотрансферазу (наприклад, триптофанамінотрансферазу), триптофандекарбоксилазу, аміноксидазу, індол-3- піруватдекарбоксилазу, індол-З-ацетальдегіддегідрогеназу, оксидазу бічного ланцюга триптофану, нітрилгідролазу, нітрилазу, пептидазу, протеазу, аденозинфосфатізопентенілтрансферазу, фосфатазу, аденозинкіназу, аденінфосфорибозилтрансферазу, СУР7З5А, 5'-рибонуклеотидфосфогідролазу, аденозиннуклеозидазу, зеатин-цис-транс-ізомеразу, зеатин-О-глюкозилтрансферазу, ВД- глюкозидазу, цис-гідроксилазу, цис-гідроксилазу СК, М-глюкозилтрансферазу СК, 2,5- рибонуклеотидфосфогідролазу, аденозиннуклеозидазу, пуриннуклеозидфосфорилазу, зеатинредуктазу, гідроксиламінредуктазу, 2-оксоглутаратдіоксигеназу, о гіберелову 2В/3В гідролазу, гібералін-3-оксидазу, гібералін-20-оксидазу, хітозаназу, хітиназу, В-1,3-глюканазу, Д- 1,4-глюканазу, В-1,6-глюканазу, дезаміназу аміноциклопропан-1-карбонової кислоти або фермент, залучений у продукцію фактора под. (0013791) Варіант здійснення 184 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 183, де фермент, залучений у продукцію або активацію стимулюючої ріст рослин сполуки включає фермент, залучений у продукцію фактора под, і фермент, залучений у продукцію фактора под, включає подА, поав або поді; або де фермент, залучений у продукцію або активацію стимулюючої ріст рослин сполуки, включає амінотрансферазу, і амінотрансфераза включає триптофанамінотрансферазу. 001380) Варіант здійснення 185 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 183, де фермент, залучений у продукцію або активацію стимулюючої ріст рослин сполуки, включає протеазу або пептидазу, що розщеплює білки, пептиди, пробілки або препробілки з утворенням біологічно активного пептиду. 001381) Варіант здійснення 186 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 183, де протеаза або пептидаза включає субтилізин, кислу протеазу, лужну протеазу, протеїназу, ендопептидазу, екзопептидазу, термолізин, папаїн, пепсин, трипсин, проназу, карбоксилазу, серинову протеазу, глутамінову протеазу, аспартатну бо протеазу, цистеїнову протеазу, треонінову протеазу або металопротеїназу.
(0013821 Варіант здійснення 187 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 185 або 186, де біологічний активний пептид включає ЕКМ 16010 або ЕНРР. 001383) Варіант здійснення 188 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 185-187, де протеаза або пептидаза розщеплює білки в багатому білком матеріалі. (0013841) Варіант здійснення 189 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 188, де багате білком борошно являє собою соєве борошно або дріжджовий екстракт. (001385) Варіант здійснення 190 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 183, де фермент, залучений у продукцію або активацію стимулюючої ріст рослин сполуки, включає хітозаназу, де хітозаназа містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 95 95, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або а 100 95 ідентичності з ЗЕО ІЮО МО: 313. (0013861) Варіант здійснення 191 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 170, де стимулюючий ріст рослин білок або пептид включає фермент, що деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин.
І001387| Варіант здійснення 192 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 191, де фермент, що деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, включає целюлазу, ліпазу, лігніноксидазу, протеазу, глікозидгідролазу, фосфатазу, нітрогеназу, нуклеазу, амідазу, нітратредуктазу, нітритредуктазу, амілазу, оксидазу аміаку, лігніназу, глюкозидазу, фосфоліпазу, фітазу, пектиназу, глюканазу, сульфатазу, уреазу, ксиланазу або сидерофор.
Зо (001388) Варіант здійснення 193 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 192, де фосфоліпаза включає фосфоліпазу АТ, фосфоліпазу
А2, фосфоліпазу С, фосфоліпазу О або лізофосфоліпазу. (0013891) Варіант здійснення 194 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 193, де фосфоліпаза включає фосфоліпазу С, і фосфоліпаза
С містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 95 95, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з ЗЕО ІЮ МО: 312. 0013901) Варіант здійснення 195 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 192, де фермент, що деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, включає целюлазу і целюлаза включає ендоцелюлазу, екзоцелюлазу або ВД-глюкозидазу. 0013911 Варіант здійснення 196 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 195, де целюлаза включає ендоцелюлазу, і ендоцелюлаза включає ендоглюканазу. 0013921 Варіант здійснення 197 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 195 або 196, де целюлаза включає ендоцелюлазу, і ендоцелюлаза включає ендоглюканазу Васійи5 зибБійб5, ендоглюканазу Васійи5 (ВПигіпдіепвів, ендоглюканазу Васійц5 сегеи5 або ендоглюканазу Васіїйи5 сіашвії. 001393) Варіант здійснення 198 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 197, де целюлаза включає ендоглюканазу Васійи5 зиБЇі5, і ендоглюканаза Васійи5 зибБій5 містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 95 95, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 311. (0013941) Варіант здійснення 199 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник 60 сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 195, де целюлаза включає екзоцелюлазу і екзоцелюлаза включає екзоцелюлазу Тгісподепта геезеї. 001395) Варіант здійснення 200 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 195, де целюлаза включає В-глюкозидазу, і ВД-глюкозидаза включає В-глюкозидазу Васійи5 вий, В-глюкозидазу Васійи5 ІВПигіпдіепві5, ВД-глюкозидазу
Васійи5 сегеи5 або ВД-глюкозидазу Васіїи5 сіашвії. 0013961) Варіант здійснення 201 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 192, де фермент, що деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, включає ліпазу, і ліпаза включає ліпазу Васійи5 5,ибБій5, ліпазу Васійи5 (пигіпдіепві5, ліпазу Васіїйи5 сегеци5 або ліпазу Васіїйи5 сіашвії. 0013971) Варіант здійснення 202 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 192, де фермент, що деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, включає лігніноксидазу, і лигниноксидаза включає пероксидазу лігніну, лаказу, глиоксальоксидазу, лігніназу або пероксидазу марганцю. (001398) Варіант здійснення 203 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 192, де фермент, що деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, включає протеазу, і протеаза включає субтилізин, кислу протеазу, лужну протеазу, протеїназу, пептидазу, ендопептидазу, екзопептидазу, термолізин, папаїн, пепсин, трипсин, проназу, карбоксилазу, серинову протеазу, глутамінову протеазу, аспартатну протеазу, цистеїнову протеазу, треонінову протеазу або металопротеїназу. 0013991) Варіант здійснення 204 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 192, де фермент, що деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, включає фосфатазу, і фосфатаза включає
Зо гідролазу складних моноефірів фосфорної кислоти, фосфомоноестеразу, гідролазу складних диефірів фосфорної кислоти, фосфодіестеразу, гідролазу складних моноефірів трифосфорної кислоти, фосфорилангідридгідролазу, пірофосфатазу, фітазу, триметафосфатазу або трифосфатазу. 0014001) Варіант здійснення 205 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства ВасіШи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 204, де фермент, що деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, включає фосфомоноестеразу, Ф|4 фосфомоноестераза включає РпоА4; або де фермент, що деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, включає фітазу, і фітаза включає фітазу Васійи5 з,иБій ЕЕ148 або фітазу Васійи5 (пигіпдіепзі5 ВТО1ЗА. 0014011 Варіант здійснення 206 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 192, де фермент, що деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, включає нітрогеназу, і нітрогеназа включає нітрогеназу сімейства МІії. 0014021 Варіант здійснення 207 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 206, де нітрогеназа сімейства Мії включає МИВСЕНКМХМ
Раєпібасіїи5 тазвіїепвів. 001403) Варіант здійснення 208 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 168, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає білок або пептид, що захищає рослину від патогена. (0014041) Варіант здійснення 209 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 208, де білок або пептид, що захищає рослину від патогена, включає білок або пептид, що підсилює імунну систему рослини. 0014051 Варіант здійснення 210 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини 60 відповідно до варіанта здійснення 209, де білок, що підсилює імунну систему рослини, включає гарпін, гарпін-подібний білок, а-еластин, ВД-еластин, системин, фенілаланінаміакліазу, еліцитин, дефензин, криптогейн, білок флагеллін або пептид флагеліну. 0014061) Варіант здійснення 211 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 210, де пептид флагеліну включає Пдг2. 0014071) Варіант здійснення 212 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 208, де білок або пептид, що захищає рослину від патогена, має антибактеріальну активність, протигрибкову активністю або як антибактеріальну, так і протигрибкову активність. 0014081) Варіант здійснення 213 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 212, де білок або пептид, що захищає рослину від патогена, включає бактеріоцин, лізоцим, пептиду лізоцим, сидерофор, авідин, стрептавідин, нерибосомальний активний пептид, кональбумін, альбумін, лактоферрин, пептид лактоферину або ТазА. 0014091) Варіант здійснення 214 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 213, де пептид лізоциму включає Гу5М або де пептид лактоферину включає І ГсіпвВ. 0014101) Варіант здійснення 215 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 208, де білок або пептид, що захищає рослину від патогена, має інсектицидну активність, гельмінтицидну активність, придушує хижацтво комах або хробаків, або має комбінацію цих ефектів. (0014111 Варіант здійснення 216 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 215, де білок або пептид, що захищає рослину від патогена, включає інсектицидний бактеріальний токсин, ендотоксин, токсин Сгу, білок або пептид, що є
Зо інгібітором протеази, цистеїнову протеазу або хітиназу. (0014121 Варіант здійснення 217 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 216, де білок або пептид, що захищає рослину від патогена, включає інсектицидний бактеріальний токсин, і інсектицидний бактеріальний токсин включає інсектицидний токсин МІР; де білок або пептид, який захищає рослину від патогена, включає білок або пептид, що є інгібітором протеази, і білок або пептид, що є інгібітором протеази, включає інгібітор трипсину або інгібітор протеази агом/пеай; або де білок або пептид, який захищає рослину від патогена, включає токсин Сгу, і токсин Сту включає токсин Сгу з Васіїйи5
Іигіпдієпвів. 001413) Варіант здійснення 218 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 217, де токсин Сгу включає токсин Стгу з Васійи5 (ВПигіпдіепві5, і токсин Сту з Васійи5 ІПигіпдіепзі5 включає білок Стгу5В або білок Сту21А. (0014141 Варіант здійснення 219 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 208, де білок, що захищає рослину від патогена, включає фермент. (0014151 Варіант здійснення 220 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 219, де фермент включає протеазу або лактоназу. (0014161) Варіант здійснення 221 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 220, де протеаза або лактоназа є специфічною до бактеріальної сигнальної молекули. (001417) Варіант здійснення 222 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 221, де бактеріальна сигнальна молекула включає бактеріальну сигнальну молекулу лактон гомосерину. (0014181 Варіант здійснення 223 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник 60 сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 220-222, де фермент включає лактоназу, і лактоназа включає 1,4-лактоназу, 2-пірон-4,6-дикарбоксилатлактоназу, З-оксоадипат-енол- лактоназу, актиноміцинлактоназу, дезоксилимонат А-кільцеву лактоназу, глюконолактоназу, І - рамноно-1,4-лактоназу, лимонін-О-кольцеву лактоназу, стероїд-лактоназу, триацетат-лактоназу або ксилоно-1,4-лактоназу. (0014191 Варіант здійснення 224 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 219, де фермент є специфічним до клітинного компонента бактерії або гриба. (001420) Варіант здійснення 225 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 224, де фермент включає р-1,3-глюканазу, В-1,4-глюканазу,
В-1,6-глюканазу, хітозаназу, хітиназу, хітозаназа-подібний фермент, літиказу, пептидазу, протеазу, протеазу, мутанолізин, стафолізин або лізоцим. (001421) Варіант здійснення 226 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 225, де фермент включає хітозаназу, де хітозаназа містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9595, щонайменше 98 965, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з «ЕО ІЮО МО: 313. (001422) Варіант здійснення 227 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 225, де протеаза включає лужну протеазу, кислу протеазу або нейтральну протеазу. (0014231 Варіант здійснення 228 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 208-227, де білок або пептид, що захищає рослину від патогена, захищає рослину від бактеріального патогена, грибного патогена, патогена-хробака або патогена-комахи. (0014241) Варіант здійснення 229 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник
Зо сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 228, де бактеріальний патоген включає протеобактерию а- класу, протеобактерію В-класу, протеобактерію у-класу або їхню комбінацію; або де бактеріальний патоген включає Адгобасієгічт (шптегасіеп5, Рапіоєа 5ієеулагійї, Егм/іпіа сагоїомога,
Ваїбвіопіа зоіапасеагшит, Рбепдотопаб5 зугіпдає, Рвепдотопа5 аєгидіпоза, Хапіпотопав сатревігі5 або їхню комбінацію. (0014251 Варіант здійснення 230 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 228, де білок або пептид, що захищає рослину від патогена, захищає рослину від хижацтва патогена-хробака або патогена-комахи. (001426) Варіант здійснення 231 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 228 або 230, де патоген-хробак або патоген-комаха включає гусінь, совку-іпсилон, метелика кукурудзяного, совку трав'яну, метелика-совку, хрущика японського, малу кукурудзяну стеблеву вогнівку, довгоносика кукурудзяного, личинку мухи паросткової, гусінь, що випускає павутину, вогнівку кукурудзяну стеблеву, південного кукурудзяного кореневого хробака, південного картопляного дротяника, стеблеву шашіль, жука цукрової тростини, личинку хруща, совку капустяну, довгоносика бавовняного, жовту смугасту гусінь, п'явицю червоногруду, клопа постільного, попелицю, совку малу, мексиканську зернівку бобову, соєву совку, соєву стеблеву шашіль або їхню комбінацію. (001427) Варіант здійснення 232 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 168, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає щонайменше один білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів. (0014281) Варіант здійснення 233 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 232, де білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів, включає фермент, що деградує сполуку, яка обумовлює стрес. (0014291) Варіант здійснення 234 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васіїйи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння відповідно до бо варіанта здійснення 233, де сполука, яка обумовлює стрес, включає аміноциклопропан-1-
карбонову кислоту (АСС), активні форми кисню, оксид азоту, оксиліпін, фенольну сполуку або їхню комбінацію. (0014301) Варіант здійснення 235 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 233 або 234, де фермент, що деградує сполуку, яка обумовлює стрес, включає супероксиддисмутазу, каталазу, каталазу, дезаміназу аміноциклопропан-1-карбонової кислоти, пероксидазу, антиоксидантний фермент або антиоксидантний пептид. 0014311 Варіант здійснення 236 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 235, де фермент, що деградує сполуку, яка обумовлює стрес, включає супероксиддисмутазу. (0014321 Варіант здійснення 237 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 235 або 236, де супероксиддисмутаза включає супероксиддисмутазу 1 (ЗОБА) або супероксиддисмутазу 2 (БОБАЗ). 0014331) Варіант здійснення 238 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 237, де супероксиддисмутаза містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 95 95, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з «ЕО ІЮ МО: 155 або 156. (0014341) Варіант здійснення 239 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 232, де білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів, включає білок або пептид, що захищає рослину від стресового впливу зовнішнього середовища. 0014351 Варіант здійснення 240 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 239, де стресовий вплив зовнішнього середовища включає посуху, повінь, спеку, заморозки, сіль, важкі метали, низькі значення рн, високі значення рН або їхню комбінацію. (0014361) Варіант здійснення 241 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 239 або 240, де білок або пептид, що захищає рослину від стресового впливу зовнішнього середовища, включає білок, який індукує формування мікрокристалів льоду, проліназу, фенілаланінаміакліазу, ізохоризматсинтазу, ізохоризматпіруватліазу або холіндегідрогеназу. (0014371) Варіант здійснення 242 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 168, де злитий білок включає щонайменше один білок або пептид, що зв'язується з рослинами. (0014381) Варіант здійснення 243 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 242, де білок або пептид, який зв'язується з рослинами, включає адгезин, флагелін, омптин, лектин, експансин, структурний білок біоплівки, білок пілуса, білок завитка, інтимін, інвазин, аглютинін, афімбріальний білок. (0014391) Варіант здійснення 244 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 243, де білок, який зв'язується з рослинами, включає адгезин, і адгезин включає рикадгезин; або де білок, який зв'язується з рослинами, включає структурний білок біоплівки, і структурний білок біоплівки включає ТазА або УцавВ.
І001440| Варіант здійснення 245 являє собою злитий білок відповідно до варіанта здійснення 4, або злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегецв, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 168, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту. (0014411) Варіант здійснення 246 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 245, де фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, 60 включає синтазу оксиду азоту або аргіназу.
(0014421 Варіант здійснення 247 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 245, де фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, включає синтазу оксиду азоту. (001443) Варіант здійснення 248 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 247, де синтаза оксиду азоту включає синтазу оксиду азоту
Васійи5 «пигіпдіепві5 або синтазу оксиду азоту Васійи5 5,иБійів5. (001444) Варіант здійснення 249 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 248, де синтаза оксиду азоту включає синтазу оксиду азоту з
ВасшШив ІпПигіпдіепзіз ВТО1ТЗА або Васійив зибійї5 168. (0014451) Варіант здійснення 250 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 245-249, де синтаза оксиду азоту містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 95 965, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності послідовності з ЗЕО ІЮ МО: 260 або 261. (001446) Варіант здійснення 251 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 245-250, де злитий білок включає 5ЕО ІЮ МО: 262 або 263.
І001447| Варіант здійснення 252 являє собою злитий білок відповідно до варіанта здійснення 4, або злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегецв, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 168, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту. (0014481) Варіант здійснення 253 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 252, де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, включає РНК-зв'язувальний білок або пептид ДНК-зв'язувальний білок або пептид. (0014491) Варіант здійснення 254 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 253, де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, включає РНК-зв'язувальний білок або пептид. 0014501) Варіант здійснення 255 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 254, де РНК-зв'язувальний білок або пептид включає неспецифічний РНК-зв'язувальний білок або пептид. (001451) Варіант здійснення 256 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 254, де РНК-зв'язувальний білок або пептид включає специфічний РНК-зв'язувальний білок або пептид. (0014521 Варіант здійснення 257 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 254, де РНК-зв'язувальний білок або пептид включає білок
Но. 0014531) Варіант здійснення 258 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 257, де білок НІід включає білок Наї Васійи5 (пПигіпдіепвів. (0014541) Варіант здійснення 259 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 253, де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, включає ДНК-зв'язувальний білок або пептид. (001455) Варіант здійснення 260 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійй5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 259, де ДНК-зв'язувальний білок або пептид включає малий розчинний у кислоті білок спор (5БАБ5Р). (001456) Варіант здійснення 261 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник 60 сімейства Васіїйш5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 260, де БАЗР включає ЗА5Р, який кодується геном 55рА, геном 55рВ, геном 55рс, геном 55рбО, геном 55рЕ, геном 55рЕ, геном 55ро, геном 55рнН, геном 55рі, геном 55рУ, геном 55рК, геном 55рі, геном 55рМ, геном 55рМ, геном 556рО або геном з8рР. (001457) Варіант здійснення 262 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 261, де БЗАЗР включає ЗАБЗРа, ЗАБРВД або 5А5РУ. (0014581) Варіант здійснення 263 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 260-262, де 5БАБР включає ЗАБР Васійни5
Іигіпдієпвів. 0014591) Варіант здійснення 264 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 252-263, де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, містить амінокислотну послідовність яка має щонайменше 85 95, щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 100 95 ідентичності з будь-якою з 5ЕО ІЮ МО: 264-266. 0014601) Варіант здійснення 265 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васіїи5 сегеи5, або рекомбінантну спороутворювальну бактерію, або насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 252-264, де злитий білок містить 560 ІЮ МО: 267, 268 або 269. (0014611) Варіант здійснення 266 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 252-254 і 259, де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, включає нуклеазу, що має інактивований активний центр. (0014621 Варіант здійснення 267 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 252-266, що додатково включають молекулу нуклеїнової кислоти, зв'язану з білком або пептидом, який зв'язуває нуклеїнову кислоту.
Зо (001463) Варіант здійснення 268 являє собою злитий білок, рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 267, де молекула нуклеїнової кислоти включає модулюючу молекулу РНК; молекулу РНК-ї; мікроРНК; аптамер або молекулу ДНК, що кодує модулюючу молекулу РНК, молекулу РНК-ї, мікроРНК або аптамер.
І001464| Варіант здійснення 269 являє собою злитий білок відповідно до варіанта здійснення 4 або рекомбінантний представник сімейства Васійн5 сегеи5, або насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-29, 48-63, 99-141 і 168-268, де націлювальна послідовність містить ХЕО ІЮ МО: 96.
І001465| Варіант здійснення 270 являє собою рекомбінантний представник сімейства
ВасшШи5 сеген5, що спільно експресує щонайменше один злитий білок, який містить стимулюючий ріст рослин білок або пептид, білок або пептид, що захищає рослину від патогена, білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів, фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, або білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 168-241 і 245-269 і щонайменше один злитий білок, який містить білок або пептид, що зв'язується з рослиною, відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 242-244 і 269.
І001466| Варіант здійснення 271 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійиє сегени5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 116-141 і 168-270, де рекомбінантний представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 включає Васійи5 апіпгасі5, Васійи5 сегецв,
Васійи5 ІПигіпдієп5і5, Васійш5 тусоіде5, ВасшШи5 рзейдотусоїде5, Васіи5 затагпії, Васіш5 даєтокКепвіз, ВасіШйи5 меїпепзіерпепвзі5, Васійи5 їоуоіепві5 або їхню комбінацію.
І001467| Варіант здійснення 272 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 271, де рекомбінантний представник сімейства
Васіи5 сегеи5 включає ВасШив (Пигіпдіепві5 або Васіїйи5 тусоїідев.
І001468| Варіант здійснення 273 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїйй5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 271 або 272, де рекомбінантний представник сімейства Васіїи5 сегеи5 включає стимулюючий ріст рослин штам бактерій.
І001469| Варіант здійснення 274 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 273, де стимулюючий ріст рослин штам бо бактерій продукує інсектицидний токсин, продукує фунгіцидну сполуку, продукує нематоцидну сполуку, продукує бактерицидну сполуку, є резистентним до одного або декількох антибіотиків, містить одну або декілька плазмід, які вільно реплікуються, зв'язується з коренями рослин, колонізує корені рослин, утворює біоплівки, солюбілізує поживні речовини, секретує органічні кислоти або має комбінацію цих ефектів.
І001470| Варіант здійснення 275 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 274, де інсектицидний токсин включає токсин
Стгу; де фунгіцидна сполука включає Вр-1,3-глюканазу, хітозаназу, літиказу або їхню комбінацію; або де нематоцидна сполука включає токсин Сгу.
І001471| Варіант здійснення 276 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїйй5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 273-275, де стимулюючий ріст рослин штам бактерій включає Васійи5 тусоїде5 ВТ155 (МКК Ме В-50921), ВасйШив5 тусоіде5
ЕЕ118 (МЕКІ. Мо В-50918), Васійи5 тусоїде5 ЕЕ141 (МЕРІ. Мо В-50921), Васіїйнв5 тусоїдез5 ВТ46-3 (МАК. Ме 8В-50922), представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ128 (МАК Мо В-50917), Васійив
ІШигіпдіепзі5 ВТО1ТЗА (МКК. Мо В-50924), представник сімейства ВасіШи5 сегеиз ЕЕ349 (МКК. Мо
В-50928); представник сімейства Васій5 сегеи5 ЕЕ-800377 (МАНІ В-67119); Васйив5 рзепдотусоїдез ЕЕ-800366 (МАВ В-67120) або Васійи5 тусоїде5 ЕЕ-800363 (МАВ В-67121).
І001472| Варіант здійснення 277 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 276, де стимулюючий ріст рослин штам бактерій включає Васіїйн5 тусоїде5 ВТ155 (МАК. Мо В-50921), Васіїйн5 тусоїде5 ЕЕ141 (МАК. Мо
В-50921) або Васійи5 (пигіпдіепзі5 ВТО1ЗА (МАК Мо В-50924).
І001473| Варіант здійснення 278 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійиє сегени5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 116-141 і 168-275, де рекомбінантний представник сімейства Васіїц5 сегени5 включає ендофітний штам бактерій.
І001474| Варіант здійснення 279 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїйй5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 278, де ендофітний штам бактерій включає представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 ЕЕ349 (МЕКІ. Мо В-50928), представник сімейства Васійй5 сегеих ЕЕ439 (МАНІ В-50979), Васійив5 Шигіпдіеєпвіє ЕЕ417 (МАВ В-50979), Васйи5 сегеийв
ЕЕ444 (МАВІ В-50977), або ВасшШив5 (Ппигіпдіепхіє ЕЕ319 (МКК В-50983), Васійив5 ІПигіпдієпвів
ЕЕ-В00184 (МАВ. 8В-67122), представник сімейства Васійи5 сегеиз ЕЕ-800377 (МАНІ В-67119);
Зо Васійи5 рзепдотусоіїде5 ЕЕ-В800366 (МАВ В-67120) або Васіїїйи5 тусоїде5 ЕЕ-800363 (МАНІ В- 67121).
І001475| Варіант здійснення 280 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїйй5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 279, де ендофітний штам бактерій включає представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ439 (МАНІ В-50979), ВасіПив5 Іпигіпдіепзі5 ЕЕ417 (МАВ
В-50979), Васійи5 сегеи5 ЕЕ444 (МАНІ В-50977), Васйив Шигіпдіеєпзіз ЕЕЗ19 (МАНІ В-50983),
Васійн5 ІпПигіпдіепзіє ЕЕ-800184 (МАНІ 8В-67122), представник сімейства Васіїйни5 сегеи5 ЕБ- вО00377 (МАВІ В-67119); Васіїїй5 рзепдотусоїдез ЕЕ-800366 (МАВІ В-67120) або ВасшШив5 тусоїде5 ЕЕ-В800363 (МАН В-67121).
І001476| Варіант здійснення 281 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійиє сегени5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 116-141 і 186-275, де рекомбінантний представник сімейства Васійш5 сегеи5 включає штам бактерій, який здатний деградувати гербіцид або пестицид.
І001477| Варіант здійснення 282 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійш5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 281, де штам бактерій, який здатний деградувати гербіцид або пестицид, включає представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ349 (МАК. Ме В-50928), представник сімейства Васіїйи5 сегеиз ЕЕ-800377 (МАНІ. В-67119); Васійив рзепдотусоїдез ЕЕ-800366 (МАВ В-67120); або Васійй5 тусоїде5 ЕЕ-800363 (МАНІ. В-67121).
І001478| Варіант здійснення 283 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїйй5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 125, 128, 281 і 282, де штам
БО бактерій, який здатний деградувати гербіцид або пестицид, деградує гербіцид на основі сульфонілсечовини, гербіцид на основі арилтриазину, дикамбу, 2,4-О0, фенокси-гербіцид, піретрин, піретроїд або їхню комбінацію.
І001479| Варіант здійснення 284 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 283, де гербіцид на основі сульфонілсечовини включає сульфентразон.
І001480| Варіант здійснення 285 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїйй5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 282 або 283, де штам бактерій, що здатний деградувати пестицид, деградує піретрин.
І001481| Варіант здійснення 286 являє собою рекомбінантний представник сімейства 60 Васійиє сегени5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 116-141 і 186-275, де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 включає пробіотичний штам бактерій.
І001482| Варіант здійснення 287 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїйй5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 286, де пробіотичний штам бактерій включає представник сімейства Васійи5 сеген5 ЕЕ349 МКК. Мо В-50928), представник сімейства Васійи5 сегєиз ЕЕ439 (МАВ В-50979), Васійив Іигіпдіепзіз ЕЕ417 (МАВ В-50979) або Васійи5 сегеи5
ЕЕ444 (МАНІ. В-50977).
І001483| Варіант здійснення 288 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійиє сегеи5 відповідно до варіантів здійснення 16-141 і 168-287, де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегец5 містить інактивуючу мутацію в його гені ВСІА.
І001484| Варіант здійснення 289 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 288, де инактивирующая мутація в гені ВсІА включає нокаут гена ВсІА.
І001485| Варіант здійснення 290 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-29, 48-63, 99-141 і 168-289, де злитий білок експресується під контролем промотору споруляції, нативного для націлювальної послідовності білка екзоспорію або фрагмента білка екзоспорію, у злитому білку або його частині.
І001486| Варіант здійснення 291 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 17-27, де білок-модулятор експресується під контролем його нативного промотору або його частини.
Ї001487| Варіант здійснення 292 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-29, 48-63, 99-141 і 168-291, де злитий білок або білок-модулятор експресується під контролем промотору споруляції з високою експресією.
І001488| Варіант здійснення 293 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васійи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 292, де промотор споруляції з високою експресією включає послідовність промотору специфічної до споруляції полімерази сигма-К.
І001489| Варіант здійснення 294 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїйи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 290-293, де промотор споруляції містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 8095, щонайменше 90 95, щонайменше 95 95, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з будь-якою з послідовностей нуклеїнової кислоти БЕО ІЮ МО: 157-231.
І001490| Варіант здійснення 295 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 290-293, де промотор одержить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 80 956, щонайменше 90 9о, щонайменше 95 965, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності послідовності з ЗЕО ІЮ МО: 157, 158, 161, 162, 189, 190, 215, 220, 221, 225, 229 або 230.
І001491| Варіант здійснення 296 являє собою рекомбінантний представник сімейства
Васіїйй5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 293-295, де послідовність або послідовності промотору специфічної до споруляції полімерази сигма-К має 100 9о ідентичності з відповідними нуклеотидами будь-якої з 5ЕО ІЮ МО: 157-231. (0014921 Варіант здійснення 297 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру, де бактерії в бактеріальній культурі являють собою: (а) представник сімейства ВасіШи5 сегеиз ЕЕ439 (МКК В-50979); (5) Васіїйнв5 ШТигіпдієпзіз ЕЕ417 (МАНІ. В-50979); (с) Васіїи5 сегеи5 ЕЕ444 (МАНІ. В-50977); (94) Васіїйнв5 ШТигіпдіеєпзіз ЕЕ319 (МАНІ. В-50983); (є) Васіїйнв5 ШТигіпдіеєпзіз ЕЕ-800184 (МАВ В-67122); (Ї) представник сімейства ВасіШиз сегеиз ЕЕ-800377 (МАВ В-67119); (9) Васіїйнв реендотусоіїде5 ЕЕ-800366 (МАВ. В-67120); або (п) Васіїн5 тусоїде5 ЕЕ-800363 (МАНІ. В-67121). 001493) Варіант здійснення 298 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру відповідно до варіанта здійснення 297, де бактерії в бактеріальній культурі являють собою представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ439 (МКК. В-50979), і бактерії мають послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності послідовності з послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 277. (001494) Варіант здійснення 299 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру відповідно до варіанта здійснення 297, де бактерії в бактеріальній культурі являють собою
Васійив5 ІПигіпдіепзіз ЕЕ417 (МАНІ. В-50979), і бактерії мають послідовність 165 рибосомальної 60 РНК, що має щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності послідовності з послідовністю 5ЕО ІЮО МО: 278.
І001495| Варіант здійснення 300 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру відповідно до варіанта здійснення 297, де бактерії в бактеріальній культурі являють собою
Васійи5 сегеиз ЕЕ444(МАВІ. В-50977), і бактерії мають послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності послідовності з послідовністю 5ЕО ІЮО МО: 279.
І001496| Варіант здійснення 301 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру відповідно до варіанта здійснення 297, де бактерії в бактеріальній культурі являють собою
Васіив5 ІПигіпдіепзіз ЕЕ319 (МАНІ. В-50983), і бактерії мають послідовність 165 рибосомальної
РНК, що має щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності послідовності з послідовністю 5ЕО ІЮО МО: 280.
І001497| Варіант здійснення 302 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру відповідно до варіанта здійснення 297, де бактерії в бактеріальній культурі являють собою
Васійив5 игіпдіепзіз ЕЕ-В800184 (МАНІ 8-67122), і бактерії мають послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності послідовності з послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 301.
І001498| Варіант здійснення 303 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру відповідно до варіанта здійснення 297, де бактерії в бактеріальній культурі являють собою представник сімейства ВасіШи5 сегеи5 ЕЕ-800377 (МАВ В-67119), і бактерії мають послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності послідовності з послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 304.
І001499| Варіант здійснення 304 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру відповідно до варіанта здійснення 297, де бактерії в бактеріальній культурі являють собою
Васіи5 рзепдотусоїдез ЕЕ-В00366 (МАВ В-67120), і бактерії мають послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності послідовності з послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 303. 001500) Варіант здійснення 305 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру відповідно до варіанта здійснення 297, де бактерії в бактеріальній культурі являють собою
Васійи5 тусоїдез ЕЕ-В00363 (МАНІ. В-67121), і бактерії мають послідовність 165 рибосомальної
РНК, що має щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності послідовності з послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 302. 0015011 Варіант здійснення 306 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру, де бактерії в бактеріальній культурі є мутантами бактерій відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 297-305, що включають одну або кілька мутацій, де бактерії є ендофітними. 001502) Варіант здійснення 307 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру де бактерії в бактеріальній культурі являють собою: (а) Васіїйн5 тедаїегпит ЕЕЗ85 (МАНІ В-50980); (5) Васіїйнв зр. ЕЕ387 (МАВ. В-50981); (с) Васіїїи5 сієсшапе ЕЕЗ388 (МАНІ В-50982); (94) Васіїйнв5 зибійй5 ЕЕ405 (МАНІ В-50978); (є) Гузіпібасійи5 Ти5іогтів ЕЕ442 (МАНІ В-50975); (У Гузіпірасіїив5 зрпаєтісиз ЕЕ443 (МАНІ. В-50976); або (9) Васіїйнв ритійв ЕЕ-800143 (МАВ В-67123). 001503) Варіант здійснення 308 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру відповідно до варіанта здійснення 307, де бактерії в бактеріальній культурі являють собою
Васійи5 тедаїетішт ЕЕЗ85 (МАВ В-50980), і бактерії мають послідовність 165 рибосомальної
РНК, що має щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності послідовності з послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 281. 001504) Варіант здійснення 309 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру
БО відповідно до варіанта здійснення 307, де бактерії в бактеріальній культурі являють собою
Васійи5 5р. ЕЕ387 (МАНІ В-50981), і бактерії мають послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності послідовності з послідовністю 5ЕО ІЮО МО: 282. 001505) Варіант здійснення 310 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру відповідно до варіанта здійснення 307, де бактерії в бактеріальній культурі являють собою
Васійив сігсшапе ЕЕЗ388 (МАВ В-50982), і бактерії мають послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності послідовності з послідовністю ЗЕО ІЮ МО: 283. 001506) Варіант здійснення 311 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру 60 відповідно до варіанта здійснення 307, де бактерії в бактеріальній культурі являють собою
Васіи5 з,ибійв ЕЕ4О5(МАВІ В-50978), і бактерії мають послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 10095 ідентичності послідовності з послідовністю 5ЕО ІЮО МО: 284.
І001507| Варіант здійснення 312 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру відповідно до варіанта здійснення 307, де бактерії в бактеріальній культурі являють собою
І узіпібасійше Тивйогптіє ЕЕ442 (МАНІ 8-50975), і бактерії мають послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності послідовності з послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 285.
І001508| Варіант здійснення 313 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру відповідно до варіанта здійснення 307, де бактерії в бактеріальній культурі являють собою
Гувіпірасійни5 в5рпаєтісиз ЕЕ443 (МАНІ 8-50976), і бактерії мають послідовність 165 рибосомальної РНК, що має щонайменше 9895, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності послідовності з послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 286.
І001509| Варіант здійснення 314 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру відповідно до варіанта здійснення 307, де бактерії в бактеріальній культурі являють собою
Васйи5 ритій5 ЕЕ-800143 (МАВ В-67123), і бактерії мають послідовність 165 рибосомальної
РНК, що має щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності послідовності з послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 305. 001510) Варіант здійснення 315 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру, де бактерії в бактеріальній культурі є мутантами відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 307-314, що містять одну або кілька мутацій, де бактерії є ендофітними. 001511) Варіант здійснення 316 являє собою біологічно чисту бактеріальну культуру, де бактерії в бактеріальній культурі є мутантами відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 307-315, що містять одну або кілька мутацій, де бактерії є пробіотичними. 001512) Варіант здійснення 317 являє собою інокулят для внесення на рослини, насіння рослини, у середовище для росту рослин або в область, яка оточує рослину або насіння рослини, де інокулят містить ефективну кількість біологічно чистої бактеріальної культури відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 297-316 і прийнятний з погляду сільського господарства носій. 001513) Варіант здійснення 318 являє собою інокулят відповідно до варіанта здійснення 317, де інокулят містить ефективну кількість суміші, що містить щонайменше дві біологічно чисті бактеріальні культури відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 297-316. (0015141 Варіант здійснення 319 являє собою інокулят відповідно до варіанта здійснення 317 або 318, де інокулят додатково містить ефективну кількість ризобактерій. 001515) Варіант здійснення 320 являє собою інокулят відповідно до варіанта здійснення 319, де ризобактерії являють собою біологічно чисту бактеріальну культуру штаму ризобактерій.
І001516Ї Варіант здійснення 321 являє собою інокулят відповідно до варіанта здійснення 319 або 320, де ризобактерії включають бактерії роду Вгадугпі2оБбішт, бактерії роду КПігобішт або їхню комбінацію. 0015171) Варіант здійснення 322 являє собою інокулят відповідно до варіанта здійснення 321, де бактерії роду Вгадугпіг2орішт включають Вгадугпі2обішт іаропісит. 0015181 Варіант здійснення 323 являє собою інокулят відповідно до варіанта здійснення 322, де бактерії роду КПпі2обішт включають КПігобрішт рпавзеоїї, Епігобішт Іедитіпозагит або їхню комбінацію. 001519) Варіант здійснення 324 являє собою насіння рослини, покрите: () ферментом, що каталізує продукцію оксиду азоту; (ії) супероксиддисмутазою; або (ії) рекомбінантним мікроорганізмом, що експресує фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, або супероксиддисмутазу, де експресія ферменту, що каталізує продукцію оксиду азоту, або супероксиддисмутази збільшена в порівнянні з експресією ферменту, що каталізує продукцію оксиду азоту, або супероксиддисмутази, у мікроорганізмі дикого типу в тих же умовах. 001520) Варіант здійснення 325 являє собою насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 324, де насіння рослини покрите ферментомом, що каталізує продукції оксиду азоту. 0015211) Варіант здійснення 326 являє собою насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 324 або 325, де насіння рослини покрите рекомбінантним мікроорганізмом, що експресує фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту. (0015221 Варіант здійснення 327 являє собою насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 324-326, де фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту включає синтазу оксиду або азоту аргіназу. 001523) Варіант здійснення 328 являє собою насіння рослини відповідно до варіанта бо здійснення 327, де фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту включає синтазу оксиду азоту. 001524) Варіант здійснення 329 являє собою насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 328, де синтаза оксиду азоту включає синтазу оксиду азоту з Васійи5 ІПигіпдіепвів
ВТО1ЗА або Васійив 5и,ибБійї5 168. 001525) Варіант здійснення 330 являє собою насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 328 або 329, де синтаза оксиду азоту містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 95 95, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності послідовності з ЗЕО ІЮО МО: 260 або 261. (0015261 Варіант здійснення 331 являє собою насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 324-330, де насіння рослини покрите супероксиддисмутазою.
І001527| Варіант здійснення 332 являє собою насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 324-331, де насіння рослини покрите рекомбінантним мікроорганізмом, яке експресує супероксиддисмутазу. (0015281 Варіант здійснення 333 являє собою насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 324-332, де супероксиддисмутаза включає супероксиддисмутазу 1 (ЗОБА) або супероксиддисмутазу 2 (БОБАЗ). 0015291 Варіант здійснення 334 являє собою насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 331-333, де супероксиддисмутаза містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з БЕО ІЮ МО: 155 або 156. 0015301 Варіант здійснення 335 являє собою насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 324-334, де рекомбінантний мікроорганізм включає вид Васіййи5,
Езспегеспіа соїї, вид Азрегоїи5 або вид Засспготусев.
І001531| Варіант здійснення 336 являє собою насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 335, де вид Васійй5 включає представник сімейства Васійи5 сегеи5, ВасшШивз зИибБЇ5,
Васі» Іспепітогтіх5 або Васіїйи5 тедаїегішт.
І001532| Варіант здійснення 337 являє собою насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 335, де вид Азрегоййи5 включає Азрегдйи5 підег або де вид Засспготусе5 включає
Засспготусез сегемівіає.
Зо І001533| Варіант здійснення 338 являє собою склад, який містить рекомбінантний представник сімейства Васійй5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-141 і 168-296 або рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 147-149, 152-154 і 156-268 і прийнятний з погляду сільського господарства носій. (0015341 Варіант здійснення 339 являє собою склад, що містить фрагменти екзоспорію, які походять зі спор рекомбінантного представника сімейства Васіїйи5 сегеи5 відповідно до будь- якого з варіантів здійснення 100-124, 130-141 і 168-296, і прийнятний з погляду сільського господарства носій. 001535) Варіант здійснення 340 являє собою насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 150, 151 і 154-268, де насіння покрите складом, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію і прийнятний з погляду сільського господарства носій. (0015361 Варіант здійснення 341 являє собою насіння рослини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 324-337, де насіння покрите складом, що містить фермент або рекомбінантний мікроорганізм і прийнятний з погляду сільського господарства носій.
І001537| Варіант здійснення 342 являє собою склад відповідно до варіанта здійснення 338 або 339, насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 340 або 341, або інокулят відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 317-323, де прийнятний з погляду сільського господарства носій включає диспергуючий засіб, поверхнево-активну речовину, добавку, воду, загусник, засіб проти злежування, засіб для руйнування осаду, склад для компостування, гранулярний склад, діатомітову землю, олію, барвник, стабілізатор, консервант, полімер, покриття або їхню комбінацію.
Ї001538| Варіант здійснення 343 являє собою склад, насіння рослини або інокулят відповідно до варіанта здійснення 342, де прийнятний з погляду сільського господарства носій включає добавку, і добавка включає олію, камедь, смолу, глину, поліоксіетиленгліколь, терпен, в'язку органічну сполуку, складний ефір жирної кислоти, сульфатований спирт, алкілсульфонат, нафтовий сульфонат, сульфат спирту, натрій алкілбутандіамат, поліефір натрійтіобутандіоату, бензольне похідне ацетонітрилу, білковий матеріал або їхню комбінацію; прийнятний з погляду сільського господарства носій включає загусник, і загусник включає довголанцюжковий алкілсульфонат полієтиленгліколю, поліоксіетилен олеат або їхню комбінацію; прийнятний з погляду сільського господарства носій включає поверхнево-активну речовину, і поверхнево- бо активна речовина включає важку нафтову олію, важкий нафтовий дистилят, складний ефір поліолу і жирної кислоти, складний ефір поліетоксилованої жирної кислоти, арилалкілполіоксіетиленгліколь, алкіламінацетат, алкіларилсульфонат, багатоатомний спирт, алкілфосфат або їхню комбінацію; або прийнятний з погляду сільського господарства носій включає засіб проти злежування, і засіб проти злежування включає натрієву сіль, карбонат кальцію, діатомітову землю або їхню комбінацію.
Ї001539| Варіант здійснення 344 являє собою склад, насіння рослини або інокулят відповідно до варіанта здійснення 343, де добавка включає білковий матеріал, і білковий матеріал включає молочний продукт, пшеничне борошно, соєве борошно, кров, альбумін, желатин, люцернове борошно, дріжджовий екстракт або їхню комбінацію; або засіб проти злежування включає натрієву сіль, і натрієва сіль включає натрієву сіль монометилнафталінсульфонату, натрієву сіль диметилнафталінсульфонату, сульфіт натрію, сульфат натрію або їхній комбінацію. (0015401 Варіант здійснення 345 являє собою склад, насіння рослини, відповідно до будь- якого з варіантів здійснення 338-344 або інокулят відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 317-323 і 342-344, де прийнятний з погляду сільського господарства носій включає вермикуліт, вугілля, фільтрпресний бруд для карбонізації на виробництві цукру, рисове лушпиння, карбоксиметилцелюлозу, торф, перліт, дрібний пісок, карбонат кальцію, борошно, галуни, крохмаль, тальк, полівінілпіролідон або їхню комбінацію. (001541) Варіант здійснення 346 являє собою склад, насіння рослини, відповідно до будь- якого з варіантів здійснення 338-345 або інокулят відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 317-323 і 342-345, де склад або інокулят містить склад для покриття насіння, рідкий склад для внесення на рослини або в середовище для росту рослин, або твердий склад для внесення на рослини або в середовище для росту рослин.
І001542| Варіант здійснення 347 являє собою склад, насіння рослини або інокулят відповідно до варіанта здійснення 346, де склад для покриття насіння містить водний або масляний розчин для нанесення на насіння або порошковий або гранульний склад для нанесення на насіння.
І001543| Варіант здійснення 348 являє собою склад, насіння рослини або інокулят відповідно до варіанта здійснення 346, де рідкий склад для внесення на рослини або в середовище для росту рослин включає концентрований склад або готовий для застосування склад.
І001544| Варіант здійснення 349 являє собою склад, насіння рослини або інокулят відповідно до варіанта здійснення 346, де твердий склад для внесення на рослини або в середовище для росту рослин включає гранульний склад або порошковий засіб. (0015451 Варіант здійснення 350 являє собою склад відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-349, насіння рослини відповідно до варіанта здійснення 340 або 341, або інокулят відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 317-323 і 342-349, де склад або інокулят додатково містять агрохімікат, що включає добриво, матеріал мікродобрива, інсектицид, гербіцид, засіб для зміни росту рослин, фунгіцид, інсектицид, моллюскоцид, альгіцид, бактеріальний інокулят, грибний інокулят або їхню комбінацію.
І001546| Варіант здійснення 351 являє собою склад, насіння рослини або інокулят відповідно до варіанта здійснення 350, де склад або інокулят містить бактеріальний інокулят, і бактеріальний інокулят містить стимулюючий ріст рослин штам бактерій.
І001547| Варіант здійснення 352 являє собою склад, насіння рослини або інокулят відповідно до варіанта здійснення 351, де стимулюючий ріст рослин штам бактерій продукує інсектицидний токсин, продукує фунгіцидну сполуку, продукує нематоцидну сполуку, продукує бактерицидну сполуку, є стійким до одного або декількох антибіотиків, містить одну або декілька плазмід, які вільно реплікуються, зв'язується з коренями рослини, колонізує корені рослин, утворює біоплівки, солюбілізує поживні речовини, секретує органічні кислоти або має комбінацію цих ефектів.
І001548| Варіант здійснення 353 являє собою склад, насіння рослини або інокулят відповідно до варіанта здійснення 352, де інсектицидний токсин включає токсин Стгу; де фунгіцидна сполука включає р-1,3-глюканазу, хітозаназу, літиказу або їхню комбінацію; або де нематоцидна сполука включає токсин Стгу.
І001549| Варіант здійснення 354 являє собою склад, насіння рослини або інокулят відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 351-353, де стимулюючий ріст рослин штам бактерій включає Васійй5 агуарпацаі САРБ5З (МАЕКІ Мо В-50819), Васійй5 агуабнанаії САРБб (МКК! Мо В-50817), Васійй5 ПЯехи5 ВТО054 (МАК! Мо В-50816), Рагасоссив Копагайемає МОЗ35 (МКК! Мо В-50820), Васійи5 тусоїде5 ВТ155 (МАК Мо В-50921), Епіегобасієг сіоасае САР12 (510) (МЕРІ. Мо В-50822), Васійи5 пеаІзопії ВОВА57 (МЕРІ Мо МЕКІГ. В-50821), Васійн5 тусоїде5 ЕЕ118
(МАВ Мо В-50918), Васійи5 зиБійб5 ЕЕ148 (МЕКІ Мо В-50927), АІсаіїїдепез Таєсаї ЕЕ107 (МАВ
Мо В-50920), Васійи5 тусоїдез ЕЕ141 (МАК Ме В-50916), ВасйШи5 тусоїде5 ВТ46-3 (МКК Ме В- 50922), представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ128 (МКК Ме В-50917), Васійи5 ІПигіпдієпвів
ВТО1ЗА (МКК Мо В-50924), Раєпірасійи5 таззійепвіз ВТ23 (МКК Ме В-50923), представник сімейства ВасіШи5 сегениз ЕЕ349 (МККІ Мо В-50928), Васійи5 5,ИиБійБ ЕЕ218 (МАК! Мо В-50926),
ВасшШив тедаїегішт ЕЕ281 (МКК Мо В-50925), представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ-800377 (МАНІ В-67119); Васіїйш5 рзейдотусоїде5 ЕЕ-800366 (МАНІ 8-67120), Васійн5 тусоіїде5 ЕЕ- вооз363 (МАНІ В-67121), Васійи5 ритійв ЕЕ-800143 (МАВІ В-67123) або Васійи5 (игіпдієпвів
ЕЕ-ВО0184 (МАВ. В-67122), або їхню комбінацію.
ІЇ001550| Варіант здійснення 355 являє собою склад, насіння рослини або інокулят відповідно до варіанта здійснення 354, де стимулюючий ріст рослин штам бактерій включає
Рагасосси5 Копагайемає МС35 (МКК Мо В-50820), Васійи5 агуабпанаі САР5З (МЕКІ. Мо В-50819) або Васійй5 тедаїегішт ЕЕ281 (МАК Мо В-50925), і склад додатково включає рекомбінантний представник сімейства Васіййн5 сегеци5 відповідно до варіанта здійснення 276 або 277. 001551) Варіант здійснення 356 являє собою насіння рослини, покрите рекомбінантним представником сімейства Васіїйи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-141 і 168-296, фрагментами екзоспорію, які походять зі спор рекомбінантного представника сімейства
Васі сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-124, 130-141 і 168-296, рекомбінантною спороутворювальною бактерією відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 147-149, 151-153 і 156-268, біологічно чистою бактеріальною культурою відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 297-316, інокулятом відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 317-323 і 342-355, або складів відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338, 339 і 342-355. (0015521 Варіант здійснення 357 являє собою спосіб стимуляції росту рослин, що включає: внесення в середовище для росту рослин рекомбінантного представника сімейства ВасіШив сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-141 і 168-296 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-141 і 168-296 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васіїи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 експресує злитий білок, який містить стимулюючий ріст рослин білок або пептид. 001553) Варіант здійснення 358 являє собою спосіб стимуляції росту рослин, що включає: внесення в середовище для росту рослин рекомбінантної спороутворювальної бактерії відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 147-149, 151-153 і 156-268, або складу, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантної спороутворювальної бактерії відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 147-149, 151-153 і 156-268 або складу, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; де рекомбінантна спороутворювальна бактерія експресує злитий білок, який містить стимулюючий ріст рослин білок або пептид. 001554) Варіант здійснення 359 являє собою спосіб захисту рослини від патогена або підвищення стійкості рослини до стресових впливів, що включає: внесення в середовище для росту рослин рекомбінантного представника сімейства Васі сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-141 і 168-296 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355, або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-141 і 168-296 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васіїи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 експресує злитий білок, який містить білок або пептид, що захищає рослину від патогена, або білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів. 001555) Варіант здійснення 360 являє собою спосіб захисту рослини від патогена або бо підвищення стійкості рослини до стресових впливів, що включає:
внесення в середовище для росту рослин рекомбінантної спороутворювальної бактерії відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 147-149, 151-153 і 156-268 або складу, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантної спороутворювальної бактерії відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 147-149, 151-153 і 156-268 або складу, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; де рекомбінантна спороутворювальна бактерія експресує злитий білок, який містить білок або пептид, що захищає рослину від патогена, або білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів. (001556) Варіант здійснення 361 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 359 або 360, де спосіб являє собою спосіб захисту рослини від патогена, і рослини, вирощені в середовищі для росту рослин, що містить рекомбінантний представник сімейства Васіїйи5 сегей5 або рекомбінантну спороутворювальну бактерію, є менш чутливими до інфекції патогеном у порівнянні з рослинами, вирощеними в тих же умовах в ідентичному середовищі для росту рослин, що не містить рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 або рекомбінантну спороутворювальну бактерію.
І001557| Варіант здійснення 362 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 359 або 360, де спосіб являє собою спосіб підвищення стійкості рослини до стресових впливів, і рослини, вирощені в середовищі для росту рослин, що містить рекомбінантний представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 або рекомбінантну спороутворювальну бактерію, є менш чутливими до стресових впливів у порівнянні з рослинами, вирощеними в тих же умовах в ідентичному середовищі для росту рослин. яка не містить рекомбінантний представник сімейства ВасіЇйи5 сегец5 або рекомбінантну спороутворювальну бактерію. 001558) Варіант здійснення 363 являє собою спосіб іммобілізації спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 на рослині, що включає: внесення в середовище для росту рослин рекомбінантного представника сімейства ВасіПйи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-141 і 168-296 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васійш5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-141 і 168-296 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васіїи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 експресує злитий білок, який містить білок або пептид, що зв'язується з рослиною.
І001559| Варіант здійснення 364 являє собою спосіб іммобілізації спор рекомбінантної спороутворювальної бактерії на рослині, що включає: внесення в середовище для росту рослин рекомбінантної спороутворювальної бактерії відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 147-149, 151-153 і 156-268 або складу, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантної спороутворювальної бактерії відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 147-149, 151-153 і 156-268 або складу, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; де рекомбінантна спороутворювальна бактерія експресує злитий білок, який містить зв'язувальний рослину пептид.
І001560| Варіант здійснення 365 являє собою спосіб стимуляції проростання насіння рослини, що включає: внесення в середовище для росту рослин рекомбінантного представника сімейства ВасіПйи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-141 і 168-296 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-141 і 168-296 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васіїи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; бо де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 експресує злитий білок, який містить супероксиддисмутазу або фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту.
І001561| Варіант здійснення 366 являє собою спосіб стимуляції проростання насіння рослини, що включає: внесення в середовище для росту рослин рекомбінантної спороутворювальної бактерії відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 147-149, 151-153 і 156-268 або складу, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантної спороутворювальної бактерії відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 147-149, 151-153 і 156-268 або складу, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; де рекомбінантна спороутворювальна бактерія експресує злитий білок, який містить супероксиддисмутазу, або фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту. (0015621 Варіант здійснення 367 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 357-360 і 363-366, де стимулюючий ріст рослин білок або пептид, білок або пептид, що захищає рослину від патогена, білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів, що зв'язується з рослинами білок або пептид, або супероксиддисмутаза або фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, фізично зв'язаний 3 екзоспорієм рекомбінантного представника сімейства Васіїйи5 сегеи5 або з оболонкою спори рекомбінантної спороутворювальної бактерії. 001563) Варіант здійснення 368 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 365-367, де спосіб включає нанесення рекомбінантного представника сімейства
Васійи5 сегеи5, рекомбінантної спороутворювальної бактерії або складу на насіння рослини. (0015641 Варіант здійснення 369 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення варіант здійснення 365-371, що додатково включає внесення І -аргініну в середовище для росту рослин, нанесення на насіння рослини, рослину або область, яка оточує рослину або насіння рослини. 001565) Варіант здійснення 370 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 369, де спосіб включає нанесення І -аргініну на надземну частину рослини. (001566 Варіант здійснення 371 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 369, де спосіб включає нанесення І -аргініну на насіння рослини.
І001567| Варіант здійснення 372 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 365-371, де насіння в середовищі для росту рослин, що містить рекомбінантний представник сімейства Васійш5 сегеи5 або рекомбінантну спороутворювальну бактерію, або насіння, на яке нанесений рекомбінантний представник сімейства Васіи5 сегеи5 або рекомбінантна спороутворювальна бактерія, мають збільшений рівень проростання або мають більш довгий головний корінь після проростання в порівнянні з насіннями, що пророщуються в тих же умовах в ідентичному середовищі для росту рослин, яка не містить рекомбінантний представник сімейства Васійш5 сегеи5 або рекомбінантну спороутворювальну бактерію, або насінням, на яке не нанесений рекомбінантний представник сімейства Васі сегеи5 або рекомбінантна спороутворювальна бактерія, вирощеними в тих же умовах. (0015681 Варіант здійснення 373 являє собою спосіб доставки нуклеїнових кислот у рослину, що включає: внесення в середовище для росту рослин рекомбінантного представника сімейства ВасіПйи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-141 і 168-296 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантного представника сімейства Васіййи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 16-141 і 168-296 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства
Васіїи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 експресує злитий білок, який містить білок, який зв'язує нуклеїнову кислоту, і де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, зв'язаний з молекулою нуклеїнової кислоти.
І001569| Варіант здійснення 374 являє собою спосіб згідно з 373, де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 включає ендофітний штам бактерій. 001570) Варіант здійснення 375 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 374, де ендофітний штам бактерій включає представник сімейства Васійн5 сегеи5 ЕЕ349 (МКК. Мо В- 50928), представник сімейства Васійи5 сегеиз ЕЕ439 (МКК В-50979), ВасіШив ІПигіпдіепвів 60 ЕЕ417 (МАНІ В-50979), Васійй5 сегеиз ЕЕ444 (МАВ В-50977) або Васійи5 (пигіпдіепзі5 ЕЕ319
(МАВ 8-50983), ВасіШив5 (Пигіпдіепзіз ЕЕ-800184 (МАНІ В-67122), представник сімейства
Васіїйн5 сегеиз ЕЕ-800377 (МАНІ. В-67119); Васійи5 рхендотусоїдез ЕЕ-800366 (МАНІ. В-67120) або Васійн5 тусоїде5 ЕЕ-800363 (МАВІ. В-67121). (001571) Варіант здійснення 376 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 375, де ендофітний штам бактерій включає представник сімейства Васійи5 сегеиз ЕЕ439 (МКК Вв- 50979), Васійив Іпигіпдіеєпзії ЕЕ417 (МАНІ В-50979), Васіїйнв5 сегеив ЕЕ444 (МАВ В-50977) або
Васійив5 Пигіпдіепзіз ЕЕЗ319 (МАНІ В-50983), Васійи5 Шигіпдіеєпзіє ЕЕ-800184 (МАНІ В-67122), представник сімейства Васійи5 сегеиз ЕЕ-800377 (МАН В-67119); Васіїн5 роеендотусоїде5 ЕЕ- воОоЗ366 (МАВ. В-67120) або Васійи5 тусоіїдез5 ЕЕ-В00363 (МАВ. В-67121). 0015721 Варіант здійснення 377 являє собою спосіб доставки нуклеїнових кислот у рослину, що включає: внесення в середовище для росту рослин рекомбінантної спороутворювальної бактерії відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 147-149, 151-153 і 156-268 або складу, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантної спороутворювальної бактерії відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 147-149, 151-153 і 156-268 або складу, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; де рекомбінантна спороутворювальна бактерія експресує злитий білок, який містить білок, який зв'язує нуклеїнову кислоту, , і де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, зв'язаний з молекулою нуклеїнової кислоти. 0015731) Варіант здійснення 378 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 377, де рекомбінантна спороутворювальна бактерія включає ендофітний штам бактерій. (0015741 Варіант здійснення 379 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 378, де ендофітний штам бактерій включає Васіїйи5 тедаїегішт ЕЕЗ385 (МКК В-50980), Васіив5 вр.
ЕЕзЗ87 (МАНІ. В-50981), Васіїнв5 сіксшапе ЕЕЗ88 (МАНІ. В-50982), Васійив5 зиБій5 ЕЕ405 (МАНІ. в- 50978), ІГузіпірасійив Тивйоптіє ЕЕ442 (МАНІ В-50975), або Іубзіпірасійй5 5рпаегіси5 ЕЕ443 (МАВ. В-50976), або Васійи5 ритйи5 ЕЕ-800143 (МАНІ. В-67123).
Зо 001575) Варіант здійснення 380 являє собою спосіб доставки молекули нуклеїнової кислоти тварині, комасі або хробаку, що включає годівлю тварини, комаху або хробака рослиною, модифікованою так, щоб вона містила рівень молекули нуклеїнової кислоти, що перевищує рівень молекули нуклеїнової кислоти в тій же рослині, яка не було модифікована, вирощеній в тих же умовах. 001576) Варіант здійснення 381 являє собою спосіб доставки молекули нуклеїнової кислоти тварині, комасі або хробаку, що включає годівлб тварини, комахи або хробака: рекомбінантним представником сімейства Васійи5 сегец5, який експресує злитий білок, який містить білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегец5; або рекомбінантною спороутворювальною бактерією, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і білок оболонки спори, що націлює злитий білок на поверхню спори бактерії; де білок або пептид, який представляє інтерес, включає білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, і з білком або пептидом, який зв'язує нуклеїнову кислоту, зв'язана молекула нуклеїнової кислоти.
І001577| Варіант здійснення 382 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 380 або 381, де хробак являє собою нематоду. (0015781 Варіант здійснення 383 являє собою спосіб доставки молекули нуклеїнової кислоти в гриб або найпростіше, що включає приведення гриба або найпростішого в контакт із: рекомбінантним представником сімейства Васійи5 сегец5, який експресує злитий білок, який містить білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегец5; або рекомбінантною спороутворювальною бактерією, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і білок оболонки спори, що націлює злитий білок на поверхню спори бактерії; де білок або пептид, який представляє інтерес, включає білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, і з білком або пептидом, який зв'язує нуклеїнову кислоту, зв'язана молекула бо нуклеїнової кислоти.
0015791 Варіант здійснення 384 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 373-379 і 381-383, де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, фізично зв'язаний з екзоспорієм рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 або з оболонкою спори рекомбінантної спороутворювальної бактерії. (0015801 Варіант здійснення 385 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 373-384, де молекула нуклеїнової кислоти містить модулюючу молекулу РНК; молекулу РНК-ї; мікроРНК; аптамер; або молекулу ДНК, що кодує модулюючу молекулу РНК, молекулу РНК-їі, мікроРНК або аптамер. (0015811 Варіант здійснення 386 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 381-385, де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 включає рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-29, 48-63, 100-141 і 186-296. (0015821 Варіант здійснення 387 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 381-386, де злитий білок включає злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 252-266. (0015831 Варіант здійснення 388 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 381-385, де білок оболонки спори включає білок СоїВ, білок СоїС, білок СдеА, білок
СОїЇВ/Н, білок Соїс, білок оболонки спори Х або білок СогУ. (0015841) Варіант здійснення 389 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 388, де білок оболонки спори містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 95, щонайменше 90 95, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 100 95 ідентичності з будь-якою з 5ЕО ІЮ МО: 252-259. 001585) Варіант здійснення 390 являє собою спосіб стимуляції росту рослини, що включає: внесення в середовище для росту рослин рекомбінантного представника сімейства ВасіПйи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 64-70, 74-77 і 87-99 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васійиє сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантного представника сімейства Васі сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 64-70, 74-77 і 87-99 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васіїи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 експресує фермент, залучений у солюбілізацію поживних речовин, протеазу, білок ВсіІА, білок ВсіІВ, білок СОїЄ білок СОЮ, ап білок Ех5У, білок ЕХхЕА/ВхрВ, білок СоїУу, білок ЕХ5ЕВ, білок Ех5у), білок Ех5Н, білок х|сСА, білок "св, білок ВсіІС, білок ВхрА, білок ВсіІЕ, білок Веті/ВА5З3290, білок Ех5А, білок Ех5К, білок Ех5В, білок Марс, або білок Тоді, де експресія ферменту, залученого в солюбілізацію поживних речовин, протеази, білка Всі, білка ВсіІА, білка ВсСІВ, білка СОїЕ, білка СОЮ, білка Ех5У, білка
ЕхХ5ГА/ВхрВ, білка СоїУу, білка ЕХ5ЕВ, білка Ех5у, білка Ех5Н, білка хХісА, білка Х|СВ, білка ВсіІсС, білка ВхрА, білка ВсіЕ, білка ВехА/ВА53290, білка Ех5А, білка Ех5К, білка Ех5В, білка Харо або білка То! збільшена в порівнянні з експресією ферменту, залученого в солюбілізацію поживних речовин, протеази, білка ВсіА, білка ВсІВ, білка СОїЕ, білка СОЮ, білка Ех5У, білка Ех5ГА/ВхрВ, білка СоїУ, білка ЕХ5ЕВ, білка Ех5у), білка ЕхХ5Н, білка Х|сСА, білка МХ|сВ, білка ВсіІС, білка ВхрА, білка ВсІЕ, білка ВехтА/ВА53290, білка Ех5А, білка ЕхХ5К, білка Ех5В, білка Марс або білка Таї у представнику сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах.
І001586| Варіант здійснення 391 являє собою спосіб підвищення стійкості рослини до стресових впливів, що включає: внесення в середовище для росту рослин рекомбінантного представника сімейства ВасіПйи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 64, 65 і 78-83 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 64, 65 і 78-83 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васіїи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; де рекомбінантний представник сімейства Васійй5 сегеи5 експресує супероксиддисмутазу або аргіназу, де експресія супероксиддисмутази або аргінази збільшена в порівнянні з експресією супероксиддисмутази або аргінази в представнику сімейства Васійн5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах.
І001587| Варіант здійснення 392 являє собою спосіб захисту рослини від патогена, що 60 включає:
внесення в середовище для росту рослин рекомбінантного представника сімейства ВасіПйи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 64, 65 і 74-77 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 64, 65 і 74-77 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васіїи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; де рекомбінантний представник сімейства Васіїйи5 сегеи5 експресує протеазу, де експресія протеази збільшена в порівнянні з експресією протеази в представнику сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах.
І001588| Варіант здійснення 393 являє собою спосіб уповільнення проростання спор представника сімейства Васійи5 сегеи5, що включає модифікацію представника сімейства
Васійи5 осегеи5 для експресії інозинуридингідролази або аланінрацемази, де експресія інозинуридингідролази або аланінрацемази збільшена в порівнянні з експресією інозинуридингідролази або аланінрацемази в представнику сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах. (0015891 Варіант здійснення 394 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 357-379 і 381-393, що додатково включає інактивацію рекомбінантного представника сімейства Васіїйй5 сегеи5 або рекомбінантної спороутворювальної бактерії перед внесенням у середовище для росту рослин або нанесенням на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини. 0015901 Варіант здійснення 395 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 394, де інактивація включає вплив на рекомбінантний представник сімейства Васійй5 сегеи5 або рекомбінантну спороутворювальну бактерію термічної обробки; опромінення гамма- випромінюванням; опромінення рентгенівським випромінюванням, опромінення УФф-А; опромінення ШМ-В; обробки глутаральдегідом, формальдегідом, пероксидом водню, оцтовою кислотою, відбілювачем, хлороформом або фенолом, або їх комбінацією. 001591) Варіант здійснення 396 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 394
Зо або 395, де інактивація включає модифікацію рекомбінантного представника сімейства ВасшШив сегеи5 або рекомбінантної спороутворювальної бактерії для експресії протеази проростання спори або неспецифічної ендонуклеази, де експресія протеази проростання спори або неспецифічної ендонуклеази збільшена в порівнянні з експресією протеази проростання або спори неспецифічної ендонуклеази в представнику сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу в тих же умовах, і де рекомбінантна спороутворювальна бактерія включає рекомбінантну бактерію роду Васійи5.
І001592| Варіант здійснення 397 являє собою спосіб видалення екзоспорію зі спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5, що включає: вплив на суспензію, що містить спори рекомбінантного представника сімейства ВасіПйи5 сегец5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-124, центрифугування або фільтрації з одержанням фрагментів екзоспорію, які відділені від спор; де фрагменти екзоспорію містять злитий білок. 0015931) Варіант здійснення 398 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 397, де спосіб включає вплив на суспензію, що містить спори, центрифугування, і, крім того, включає збір супернатанта, де супернатант містить фрагменти екзоспорію і по суті вільний від спор. (0015941) Варіант здійснення 399 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 397, де спосіб включає вплив на суспензію, що містить спори, фільтрації, і, крім того, включає збір фільтрату, де фільтрат містить фрагменти екзоспорію і по суті вільний від спор. 0015951 Варіант здійснення 400 являє собою спосіб стимуляції росту рослин, що включає: внесення фрагментів екзоспорію або складу відповідно до варіанта здійснення 339 у середовище для росту рослин; або нанесення фрагментів екзоспорію або складу відповідно до варіанта здійснення 339 на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини; де фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-124 і містять злитий білок, і злитий білок містить стимулюючий ріст рослин білок або пептид. 001596) Варіант здійснення 401 являє собою спосіб захисту рослини від патогена або підвищення стійкості рослини до стресових впливів, що включає: внесення фрагментів екзоспорію або складу відповідно до варіанта здійснення 339 у 60 середовище для росту рослин; або нанесення фрагментів екзоспорію або складу відповідно до варіанта здійснення 339 на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини; де фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства Васіййи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-124 і містять злитий білок, і злитий білок містить білок або пептид, який захищає рослину від патогена або білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів.
І001597| Варіант здійснення 402 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 401, де спосіб являє собою спосіб захисту рослини від патогена і де злитий білок містить білок або пептид, що захищає рослину від патогена.
І001598| Варіант здійснення 403 являє собою спосіб захисту рослини від патогена відповідно до варіанта здійснення 402, де рослини, вирощені в середовищі для росту рослин, що містить фрагменти екзоспорію, є менш чутливими до інфекції патогеном у порівнянні з рослинами, вирощеними в тих же умовах в ідентичному середовищі для росту рослин, що не містить фрагменти екзоспорію. (0015991 Варіант здійснення 404 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 401, де спосіб являє собою спосіб підвищення стійкості рослини до стресових впливів, і де злитий білок містить білок або пептид, що підвищує стійкість рослини до стресових впливів. 001600) Варіант здійснення 405 являє собою спосіб підвищення стійкості рослини до стресових впливів відповідно до варіанта здійснення 404, де рослини, вирощені в середовищі для росту рослин, що містить фрагменти екзоспорію, є менш чутливими до стресових впливів у порівнянні з рослинами, вирощеними в тих же умовах в ідентичному середовищі для росту рослин, що не містить фрагменти екзоспорію. 001601) Варіант здійснення 406 являє собою спосіб іммобілізації фрагментів екзоспорію на рослині, що включає: внесення фрагментів екзоспорію або складу відповідно до варіанта здійснення 339 у середовище для росту рослин; або нанесення фрагментів екзоспорію або складу відповідно до варіанта здійснення 339 на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини; де фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-124 і містить злитий білок, і злитий білок містить білок або пептид, що зв'язується з рослиною. (0016021 Варіант здійснення 407 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 363, 364 і 406, де білок або пептид, який зв'язується з рослинами, селективно націлює й утримує рекомбінантний представник сімейства Васійй5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або фрагменти екзоспорію фрагменти в рослині. 001603) Варіант здійснення 408 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 407, де білок або пептид, який зв'язується з рослинами, селективно націлює й утримує рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або фрагменти екзоспорію в коренях рослин, субструктурах коренів, надземній частині рослини або субструктурі надземної частини рослини. 001604) Варіант здійснення 409 являє собою спосіб стимуляції проростання насіння рослини, що включає: внесення фрагментів екзоспорію або складу відповідно до варіанта здійснення 339 у середовище для росту рослин; або нанесення фрагментів екзоспорію або складу відповідно до варіанта здійснення 339 на насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини; де фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства Васіййи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-124 і містять злитий білок, і злитий білок містить супероксиддисмутазу або фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту. 001605) Варіант здійснення 410 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 409, де спосіб включає нанесення фрагментів екзоспорію на насіння рослини. (0016061 Варіант здійснення 411 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 409 або 410, що додатково включає внесення І -аргініну в середовище для росту рослин, нанесення на насіння рослини або область, яка оточує насіння рослини.
І001607| Варіант здійснення 412 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 411, де спосіб включає нанесення І -аргініну на насіння рослини. (0016081 Варіант здійснення 413 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 409-412, де насіння в середовищі для росту рослин, що містить фрагменти екзоспорію, або насіння, на яке нанесені фрагменти екзоспорію, мають збільшений рівень бо проростання або мають більш довгий головний корінь після проростання в порівнянні з тим же насінням, що пророщується в тих же умовах в ідентичному середовищі для росту рослин, що не містить фрагменти екзоспорію, або тими же насінням, що пророщується у тих же умовах, на яких фрагменти екзоспорію не були нанесені. 0016091 Варіант здійснення 414 являє собою спосіб доставки нуклеїнових кислот у рослину, що включає: внесення фрагментів екзоспорію або складу відповідно до варіанта здійснення 339 у середовище для росту рослин; або нанесення фрагментів екзоспорію або складу відповідно до варіанта здійснення 339 на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини; де фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-124 і містять злитий білок, і злитий білок містить білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, і де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, зв'язаний з молекулою нуклеїнової кислоти. 001610) Варіант здійснення 415 являє собою спосіб доставки молекули нуклеїнової кислоти тварині, комасі або хробаку, що включає годівлю тварини, комахи або хробака фрагментами екзоспорію, де фрагменти екзоспорію походять з рекомбінантного представника сімейства
Васіїи5 сегеци5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-124 і містять злитий білок, де злитий білок містить білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, і де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, зв'язаний з молекулою нуклеїнової кислоти. 001611) Варіант здійснення 416 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 415, де хробак являє собою нематоду. 0016121 Варіант здійснення 417 являє собою спосіб доставки молекули нуклеїнової кислоти в гриб або найпростіше, що включає приведення в контакт гриба або найпростішого з фрагментами екзоспорію, де фрагменти екзоспорію походять з рекомбінантного представника сімейства Васіїйш5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-124 і містять злитий білок, де злитий білок містить білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, і де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнову кислоту, зв'язаний з молекулою нуклеїнової кислоти. 001613) Варіант здійснення 418 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 414-417, де молекула нуклеїнової кислоти включає модулюючу молекулу РНК;
Зо молекулу РНК-ї; мікроРНК; аптамер або молекулу ДНК, що кодує модулюючу молекулу РНК, молекулу РНК-їі, мікроРНК або аптамер. 001614) Варіант здійснення 419 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 414-418, де злитий білок містить злитий білок відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 253-266. 001615) Варіант здійснення 420 являє собою спосіб стимуляції проростання насіння рослини, що включає внесення в середовище для росту рослин, або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини: () ферменту, що каталізує продукції оксиду азоту; (її) супероксиддисмутази; або (ії) рекомбінантного мікроорганізму, що експресує фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, або супероксиддисмутазу, де експресія ферменту, що каталізує продукцію оксиду азоту, або супероксиддисмутази збільшена в порівнянні з експресією ферменту, що каталізує продукцію оксиду азоту, або супероксиддисмутази в мікроорганізмі дикого типу в тих же умовах. (001616) Варіант здійснення 421 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 420, де спосіб включає нанесення ферменту або мікроорганізму на насіння рослини. (0016171 Варіант здійснення 422 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 420 або 421, що додатково включає внесення І -аргініну в середовище для росту рослин, на насіння рослини або в область, яка оточує насіння рослини. 001618) Варіант здійснення 423 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 422, де спосіб включає нанесення І -аргініну на насіння рослини.
БО 0016191 Варіант здійснення 424 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 420-423, де насіння в середовищі для росту рослин, що містить фермент або мікроорганізм, або насіння, на яке нанесений фермент або мікроорганізм, мають збільшений рівень проростання або більш довгий головний корінь після проростання в порівнянні з насінням, що пророщується в тих же умовах в ідентичному середовищі для росту рослин, що не містить фермент або мікроорганізм, або насінням, на яке не був нанесений фермент або мікроорганізм, що пророщуються в тих же умовах. 0016201 Варіант здійснення 425 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 420-424, де фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, включає синтазу оксиду азоту або аргіназу. 60 (001621) Варіант здійснення 426 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 425,
де фермент, який каталізує продукцію оксиду азоту, включає синтазу оксиду азоту. (0016221 Варіант здійснення 427 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 426, де синтаза оксиду азоту включає синтазу оксиду азоту з Васійи5 Ійпигіпдіепзіє ВТО1ЗА або
Васиз 5ибійв5 168. (0016231 Варіант здійснення 428 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 426 або 427, де синтаза оксиду азоту містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 965, щонайменше 90 95, щонайменше 95 95, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності послідовності з зЗЕО ІЮО МО: 260 або 261. (0016241 Варіант здійснення 429 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 420-438, де супероксиддисмутаза включає супероксиддисмутазу 1 (ЗОБА) або супероксиддисмутазу 2 (БОРАЗг). (0016251 Варіант здійснення 430 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 429, де супероксиддисмутаза містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 85 965, щонайменше 90 95, щонайменше 9595, щонайменше 9895, щонайменше 9995 або 100 95 ідентичності з ФЕО ІЮ МО: 155 або 156. (0016261 Варіант здійснення 431 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 420-430, де рекомбінантний мікроорганізм включає вид Васійш5, ЕвсПегеспіа сої, вид
АзрегдіПи5 або вид Засспготусев.
І001627| Варіант здійснення 432 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 431, де вид Васійн5 включає представник сімейства Васійи5 сегеи5, Васійиб5 зибБійй5, Васійн5
Іспепітогіті5з або Васійн5 тедаїегішт. (0016281 Варіант здійснення 433 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 431, де вид Азрегодййн5 включає Азрегойи5 підег або де вид Засспготусе5 включає Засспготусев5 сегемівіає. (0016291 Варіант здійснення 434 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 420-433, де або фермент рекомбінантний мікроорганізм вносять у середовище для росту рослин або наносять на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, у складі, що містить фермент або рекомбінантний мікроорганізм і прийнятний з погляду сільського господарства носій.
Зо 001630) Варіант здійснення 435 являє собою спосіб доставки ферментів у рослину, що включає: внесення в середовище для росту рослин рекомбінантного представника сімейства ВасіПйи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 316-141 і 168-296 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантного представника сімейства Васіййи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 16-141 і 168-296 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства
Васіїи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; де білок або пептид, який представляє інтерес, включає фермент. 0016311 Варіант здійснення 436 являє собою спосіб доставки ферментів у рослину, що включає: внесення в середовище для росту рослин рекомбінантної спороутворювальної бактерії відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 147-149, 151-153, і 156-268 або складу, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантної спороутворювальної бактерії відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 147-149, 151-153 і 156-268 або складу, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; де білок або пептид, який представляє інтерес, включає фермент.
І001632| Варіант здійснення 437 являє собою спосіб доставки ферментів у рослину відповідно до варіанта здійснення 435 або 436, де фермент фізично зв'язаний з екзоспорієм рекомбінантного представника сімейства Васіїйй5 сегеи5 або з оболонкою спори рекомбінантної спороутворювальної бактерії. 0016331) Варіант здійснення 438 являє собою спосіб доставки ферментів у рослину, що включає: внесення фрагментів екзоспорію або складу відповідно до варіанта здійснення 339 у середовище для росту рослин; або 60 нанесення фрагментів екзоспорію або складу відповідно до варіанта здійснення 339 на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини; де фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства Васіййи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-124 і містять злитий білок, і білок або пептид, що представляє інтерес, включає фермент. (0016341) Варіант здійснення 439 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 438, де спосіб додатково включає обробку рослини посилюючим проникненням засобом, поверхнево-активною речовиною, детергентом, маслом або їх комбінацією. 001635) Варіант здійснення 440 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 435-441, де фермент є прийнятним для деградації біомаси, розщеплення целюлозного матеріалу, сприяння травленню в травній системі цільової тварини, яку можна годувати рослиною, або для продукції біопалива. (001636) Варіант здійснення 441 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 440, де фермент включає неспецифічну протеазу, металопротеїназу, целюлазу, ксиланазу, фосфатазу, ендоглюканазу, екзоглюканазу, В-глюкозидазу, амілазу, пектиназу, ксилозидазу, ліпазу, фосфоліпазу або їхню комбінацію. (0016371) Варіант здійснення 442 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 434-441, де рослина являє собою культуру, вибрану з кукурудзи, люцерни, пшениці, пасовищної культури, фуражної культури, сої, проса, хіками, солодкого сорго, цукрової тростини або їхньої комбінації. (001638) Варіант здійснення 443 являє собою спосіб зміни властивості рослини, що включає: внесення в середовище для росту рослин рекомбінантного представника сімейства ВасіПйи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 316-141 і 168-296 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантного представника сімейства Васіййи5 сегеи5 відповідно до варіанта здійснення 16-141 і 168-296 або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства
Васіїи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; де білок або пептид, який представляє інтерес, включає сигнальну молекулу рослини або
Зо фермент, що впливає на склад рослини. (0016391 Варіант здійснення 444 являє собою спосіб зміни властивості рослини, що включає: внесення в середовище для росту рослин рекомбінантної спороутворювальної бактерії відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 147-149, 151-153 і 156-268 або складу, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; або нанесення на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини, рекомбінантної спороутворювальної бактерії відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 147-149, 151-153 і 156-268 або складу, що містить рекомбінантну спороутворювальну бактерію відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 338 і 342-355; де білок або пептид, який представляє інтерес, включає сигнальну молекулу рослини або фермент, що впливає на склад рослини. (0016401 Варіант здійснення 445 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 443 або 444, де білок або пептид, який представляє інтерес, фізично зв'язаний з екзоспорієм рекомбінантного представника сімейства Васіїйи5 сегеи5 або з оболонкою спори рекомбінантної спороутворювальної бактерії. 001641) Варіант здійснення 446 являє собою спосіб зміни властивості рослини, що включає: внесення фрагментів екзоспорію або складу відповідно до варіанта здійснення 339 у середовище для росту рослин; або нанесення фрагментів екзоспорію або складу відповідно до варіанта здійснення 339 на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини; де фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-124 і містять злитий білок, і білок або пептид, що представляє інтерес, включає сигнальну молекулу рослини або фермент, що впливає на склад рослини. (0016421 Варіант здійснення 447 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 446, де спосіб додатково включає обробку рослини посилюючим проникнення засобом, поверхнево- активною речовиною, детергентом, маслом або їх комбінацією. (001643) Варіант здійснення 448 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 435-447, де рекомбінантний представник сімейства Васіїйи5 сегеи5, рекомбінантну бо спороутворювальну бактерію або фрагменти екзоспорію наносять на позакореневу частину рослини перед збором врожаю. (0016441 Варіант здійснення 449 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 443-450, де фермент включає ендоглюканазу, протеазу, фосфоліпазу, дезаміназу аміноциклопропан-1-карбонової кислоти, ліпазу або їхню комбінацію. (001645) Варіант здійснення 450 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 443-448, де сигнальна молекула рослини включає пептид флагеліну, криптогеїн, гарпін, гарпін-подібний білок, фермент, що деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин, або їхню комбінацію. (0016461 Варіант здійснення 451 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 443-450, де рослина вибрана з винограду, цукрової тростини, проса, солодкого сорго, зернової культури, злакової культури, ріпаку, каноли, солі, соняшника, маріхуани або їхньої комбінації. (0016471 Варіант здійснення 452 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 443-451, де властивість рослини, яка підлягає зміні, включає метаболічну зміну. (0016481 Варіант здійснення 453 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 452, де метаболічна зміна включає збільшення засвоєння макронутрієнтів або мікронутрієнтів або вмісту тканини рослини шляхом збільшення її кореневої системи, збільшення вмісту білка, збільшення засвоєння азоту, модифікований вміст олій, модифікований вміст цукрів або сахарози, збільшений вміст медичної сполуки, збільшений вміст канабіноїдів, або їхню комбінацію. (0016491 Варіант здійснення 454 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 357-379, 390-396, 400-414 і 420-453, де середовище для росту рослин доповнюють субстратом або кофактором ферменту. 0016501 Варіант здійснення 455 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 454, де або субстрат кофактор включає триптофан, аденозинмонофосфат, аденозиндифосфат, аденозинтрифосфат, індол, триметафосфат, ферродоксин, ацетоїн, діацетил, піруват, ацетолактат, пектин, целюлозу, метилцелюлозу, крохмаль, хітин, пектин, білкове борошно, похідне целюлози, фосфат, ацетоїн, хітозан, неактивне похідне індол-З-оцтової кислоти, неактивне похідне гіберелової кислоти, ксилан, арабіноксилан, жир, воск, олію, фітинову кислоту, лігнін, гумінову кислоту, холін, похідне холіну, пролін, пролін-багатий білок, пролін- багате борошно, фенілаланін, хоризмат, І-аргінін, МАОН, МАОРН, АТР, СТР, цитохром С, цитохром р450 або їхню комбінацію. 001651) Варіант здійснення 456 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 455, де аденозинтрифосфат включає аденозин-З-трифосфат. (0016521 Варіант здійснення 457 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 357-379, 390-396, 400-414 і 420-456, що включає покриття насіння рекомбінантним представником сімейства Васійй5 сегеи5, рекомбінантною спороутворювальною бактерією або фрагментами екзоспорію або складом, що містить рекомбінантний представник сімейства
Васійй5 сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або фрагменти екзоспорію, перед посівом. 001653) Варіант здійснення 458 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 357-379, 390-396, 400-414 і 420-457, що включає нанесення рекомбінантного представника сімейства Васіи5 сегеи5, рекомбінантної спороутворювальної бактерії або фрагментів екзоспорію, або складу, що містить рекомбінантний представник сімейства Васі сегеи5, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або фрагменти екзоспорію, на надземну частину рослини. (0016541 Варіант здійснення 459 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 357-379, 390-396, 400-414 і 420-458, де внесення рекомбінантного представника сімейства Васійн5 сегеи5, рекомбінантної спороутворювальної бактерії або фрагментів
БО екзоспорію в середовище для росту рослин включає внесення в середовище рідкого або твердого складу, що містить рекомбінантний представник сімейства ВасшШиє сегецв, рекомбінантну спороутворювальну бактерію або фрагменти екзоспорію. 001655) Варіант здійснення 460 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 459, де спосіб включає внесення складу в середовище для росту рослин до, або одночасно після посіву насіння, проростків, пагонів, цибулин або рослин у середовище для росту рослин.
І001656| Варіант здійснення 461 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 357-379, 390-396, 400-414 і 420-460, що додатково включає внесення щонайменше одного агрохімікату в середовище для росту рослин або нанесення щонайменше одного агрохімікату на рослини або насіння. 60 І001657| Варіант здійснення 462 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 461,
де агрохімікат включає добриво, матеріал мікродобрива, інсектицид, гербіцид, фунгіцид, моллюскоцид, альгвцид, модифікатор росту рослин, бактеріальний інокулят, грибний інокулят або їхню комбінацію.
І001658| Варіант здійснення 463 являє собою склад, насіння рослини або інокулят відповідно до варіанта здійснення 350 або спосіб відповідно до варіанта здійснення 462, де агрохімікат включає добриво, і добриво включає рідке добриво; де агрохімікат включає матеріал мікродобрива, і матеріал мікродобрива включає борну кислоту, борат, борну фриту, сульфат міді, мідну фриту, хелат міді, натрію тетраборат декагідрат, сульфат заліза, оксид заліза, сульфат заліза амонію, залізну фриту, хелат заліза, сульфат марганцю, оксид марганцю, хелат марганцю, хлорид марганцю, марганцеву фриту, молібдат натрію, молібденову кислоту, сульфат цинку, оксид цинку, карбонат цинку, цинкову фриту, фосфат цинку, хелат цинку або їхню комбінацію; де агрохімікат включає інсектицид, і інсектицид включає фосфороорганічну сполуку, карбамат, піретроїд, акарицид, алкілфталат, борну кислоту, борат, фторид, сірку, галогенароматичну заміщену сечовину, складний ефір вуглеводню, інсектицид на біологічній основі, або їхню комбінацію; де агрохімікат включає гербіцид, і гербіцид включає хлорфеноксисполуку, нітрофенольну сполуку, нітрокрезольну сполуку, дипіридильну сполуку, ацетамід, аліфатичну кислоту, анілід, бензамід, бензойну кислоту, похідне бензойної кислоти, ганусову кислоту, похідне ганусової кислоти, бензонітрил, бензотіадіазинону діоксид, тіокарбамат, карбамат, карбанілат, хлорпіридиніл, похідне циклогексенону, похідне динітроамінобензолу, сполуку фтординітротолуїдину, ізоксазолідинон, нікотинову кислоту, ізопропіламін, похідне ізопропіламіну, оксадіазолінону, фосфат, фталат, сполуку піколінової кислоти, триазин, триазол, урацил, похідне сечовини, ендоталл, хлорат натрію або їхню комбінацію; де агрохімікат містить фунгіцид, і фунгіцид містить заміщений бензол, тіокарбамат, етилен біс-дитіокарбамат, тіофталидамід, сполуку міді, ртутьорганічну сполуку, оловоорганічну сполуку, сполуку кадмію, анілазин, беноміл, циклогексамід, додин, етридіазол, іпродіон, метлаксил, тіамімефон, трифорин або їхню комбінацію; де агрохімікат включає грибний інокулят, і грибний інокулят включає грибний інокулят сімейства Сіотегасеає, грибний інокулят сімейства Сіагоідодіотегасеаеє, грибний інокулят сімейства Сідазрогасеає, грибний інокулят сімейства Асашозрогасеає, грибний інокулят сімейства бассціозрогасеає, грибний інокулят
Зо сімейства Епігорпозрогасеаеє, грибний інокулят сімейства Расідзрогасеає, грибний інокулят сімейства Оімегзізрогасеає, грибний інокулят сімейства Рагадіотегасеаеє, грибний інокулят сімейства Агспаеозрогасеає, грибний інокулят сімейства Сеозірпопасеає, грибний інокулят сімейства АтрБрізрогасеає, грибний інокулят сімейства ЗсщшеїйПозрогасеає, грибний інокулят сімейства ОепіізсиНагасеає, грибний інокулят сімейства Касосеїгасеає, грибний інокулят відділу
Вазідіотусоїга, грибний інокулят відділу Азсотусоїа, грибний інокулят відділу 7удотусоїа або їхню комбінацію; або де агрохімікат включає бактеріальний інокулят і бактеріальний інокулят включає бактеріальний інокулят роду РПі2обішт, бактеріальний інокулят роду Вгадугпі2орічшт, бактеріальний інокулят роду Мезогпігобішт, бактеріальний інокулят роду А?огпі2обБіцт, бактеріальний інокулят роду АЇогпі2обішт, бактеріальний інокулят роду Зіпогпі2орішт, бактеріальний інокулят роду Кіпумега, бактеріальний інокулят роду Алоїобасієг, бактеріальний інокулят роду Рзепйдотопав, бактеріальний інокулят роду Аго5рігШит, бактеріальний інокулят роду Васійн5, бактеріальний інокулят роду Зігеріотусе5, бактеріальний інокулят роду
Раепірасійш5, бактеріальний інокулят роду Рагасосси5, бактеріальний інокулят роду
Епіегорасіег, бактеріальний інокулят роду АїЇсаїїдепе5, бактеріальний інокулят роду
Мусобрасіегішт, бактеріальний інокулят роду Тгісподегта, бактеріальний інокулят роду
Сііосіадіит, бактеріальний інокулят роду Сіотив5, бактеріальний інокулят роду Кіерзіва або їхню комбінацію.
І001659| Варіант здійснення 464 являє собою склад, насіння рослини або інокулят відповідно до варіанта здійснення 350 або спосіб відповідно до варіанта здійснення 462, де агрохімікат включає фунгіцид, і фунгіцид включає алдиморф, ампропілфос, ампропілфос калій, андоприм, анілазин, азоконазол, азоксистробін, беналаксил, беноданіл, беноміл, бензамакрил, бензамакрил-ізобутил, біалафос, бінапакрил, біфеніл, бітертанол, бластицидин-5, боскалід, бромуконазол, бупіримат, бутіобат, полісульфід кальцію, капсиміцин, каптафол, каптан, карбендазим, карвон, хінометіонат, хлобентіазон, хлорфеназол, хлоронеб, хлорпікрин, хлороталоніл, хлозолінат, клозилакон, куфранеб, цимоксаніл, ципроконазол, ципродиніл, ципрофурам, дебакарб, дихлорофен, диклобутразол, диклофлуанід, дикломезин, диклоран, діетофенкарб, диметиримол, диметоморф, димоксистробін, диніконазол, диніконазол-М, динокап, дифеніламін, дипіритіон, диталімфос, дитіанон, додеморф, додин, дразоксолон, едифенфос, епоксиконазол, етаконазол, етиримол, етридіазол, фамоксадон, фенапаніл, бо фенаримол, фенбуконазол, фенфурам, фенітропан, фенпіклоніл, фенпропідин, фенпропіморф,
фентин ацетат, фентин гідроксид, фербам, феримзон, флуазинам, флеметовер, фторомід, флухінконазол, флурпримідол, флусилазол, флусульфамід, флутоланіл, флутриафол, фолпет, фосетил-алюміній, фосетил-натрій, фталід, фуберидазол, фуралаксил, Ффураметпір, фуркарбоніл, фурконазол, фурконазол-цис, фурмециклокс, гуазатин, гексахлорбензол, гексаконазол, гімексазол, імазаліл, імібенконазол, іміноктадин, іміноктадин албесилат, іміноктадин триацетат, йодокарб, іпробенфос (ІВР), іпродіон, ірумаміцин, ізопротіолан, ізоваледіон, касугаміцин, крезоксим-метил, препарати міді, такі як: гідроксид міді, нафтенат міді, оксихлорид міді, сульфат міді, оксид міді, оксин-мідь і бордоська рідина, манкупрум, манкозеб, манеб, меферимзон, мепаніпірим, мепроніл, металаксил, метконазол, метасульфокарб, метфуроксам, метирам, метомеклам, метсульфовакс, мілдіоміцин, міклобутаніл, міклозолін, диметилдитіокарбамат нікелю, нітротал-ізопропіл, нуаримол, офурас, оксадиксил, оксамокарб, оксолінову кислоту, оксикарбоксим, оксифентіїн, паклобутразол, пефуразоат, пенконазол, пенцикурон, фосдифен, пімарицин, піпералін, поліоксин, поліоксорим, пробеназол, прохлораз, процимидон, пропамокарб, пропанозин-натрій, пропіконазол, пропінеб, протіоциназол, піразофос, пірифенокс, піриметаніл, піроквілон, піроксифур, хіноконазол, квінтозен (РСМВ), сірку і препарати сірки, тебуконазол, теклофталам, текназен, тетцикласис, тетраконазол, тіабендазол, тиціофен, тифлузамід, тіофанат-метил, тіоксимід, толклофос-метил, толілфлуанід, триадимефон, триадименол, триазбутил, триазоксид, трихламід, трициклазол, тридеморф, трифлоксистробін, трифлумізол, трифорин, уніконазол, валидаміцин А, вінкозолін, вініконазол, зариламід, зинеб, зирам, а також Юаддег б, ОК-8705, ОК-8801, а-(1,1-диметилетил)-(3-(2- феноксієтил)-1 Н-1,2,4-триазол-1-етанол, а-(2,4-дихлорфеніл)-ІЗ-фтор-З-пропіл-1 Н-1,2,4- триазол-1-етанол, а-(2,4-дихлорфеніл)-(З-метокси-а-метил-1Н-1,2,4-триазол-1-етанол, -а-(5- метил-1,3-діоксан-5-іл)-ІЗ-Ц(4А-(трифторметил)-феніл|метилені-1 Н-1,2,4-триазол-1-етанол, (55, 6А5)-6-гідрокси-2,2,7,7-тетраметил-5-(1Н-1,2,4-триазол-1-іл)-3-октанон, (Е)-а-(метоксіїміно)-М- метил-2-феноксифенілацетамід, 1-ізопропілі2-метил-1-|((1-(4- метилфеніл)етиліаміно|карбоніл|пропіл)укарбамат, 1-(2,4-дихлорфеніл)-2-(1Н-1,2,4-триазол-1- іл)у'етанон-О-(фенілметил)оксим, 1-(2-метил-1-нафталеніл)-1 Н-пірол-2,5-діон, 1-(5,5- дихлорфеніл)-3-(2-пропеніл)-2,5-піролідиндіон, 1-Кдийодометил)сульфоніл|-4-метилбензол, 1- (2-(2,4-дихлорфеніл)-1,3-діоксолан-2-іл|метилі/-1 Н-імідазол, 1-(2-(4-хлорфеніл)-3-
Зо фенілоксираніл|метил|-1Н-1,2,4-триазол, 1-(1-(2-К(2,4-дихлорфеніл)-метокси|феніл|етеніл/|-1 Н- імідазол, 1-метил-5-ноніл-2-(фенілметил)-З-піролідинол, 2",6'-дибром-2-метил-4"- трифторметокси-4-трифторметил-1, З-тіазолкарбоксанілид, 2,2-дихлор-М-(1-(4-хлорфеніл)етил|- 1-етил-3-метилциклопропанкарбоксамід, 2,6б-дихлор-5-(метилтіо)-4-піримідинілтіоціанат, 2,6- дихлор-М-(4-трифторметилбензил)бензамід, 2,6-дихлор-М-(4- (трифторметил)феніл|метилібензамід, 2-(2,3,3-трийод-2-пропеніл)-2Н-тетразол, 2-((1- метилетил)-сульфоніл|-5-«"трихлорметил)-1,3,4-тіадіазол, 2-І((б-дезокси-4-0-(4-0О-метил-(3-0- глікопіранозил)-а-Ю-глюкопіранозил|аміно|-4-метокси-1 Н-піроло|2,3-4|Іпіримідин-5-карбонітрил, 2-амінобутан, 2-бром-2-(бромметил)пентандинітрил, 2-хлор-М-(2,3-дигідро-1,1,3-триметил-1 Н- інден-4-іл)-З-піридинкарбоксамід, 2-хлор-М-(2,6-диметилфеніл)-М-(ізотіоціанатметил)ацетамід, 2-фенілфенол и (ОРР), 3,4-дихлор-1-(4--дифторметокси)феніл|пірол-2,5-діон, З,5-дихлор-М-
Іціано((1-метил-2-пропініл)окси|метилі|бензамід, 3-(1,1-диметилпропіл-1-оксо-1 Н-інден-2- карбонітрил, / 3-(2-(4-хлорфеніл)-5-етокси-3-ізоксазолідиніл|Іпіридин, 4-хлор-2-ціано-М, /-М- диметил-5-(4-метилфеніл)-1Н-імідазол-1-сульфонамід, 4-метилтетразоло|1,5-а)хіназолін-5(4Н)- он, 8-(1,1-диметилетил)-М-етил-М-пропіл-1 ,4-діоксаспіро|(4,5|декан-2-метанамін, сульфат 8- гідроксихіноліну, 9УН-ксантен-2-(феніламіно)карбоніл|-9-карбоновий гідразид, біс-(1-метилетил)-
З-метил-4-((З-метилбензоїл)окси)|-2,5-тіофендикарбоксилат, цис-1-(4-хлорфеніл)-2-(1 Н-1,2,4- триазол-1-іл)уциклогептанол, цис-4-І(3-І4-(1,1-диметилпропіл)феніл-2-метилпропіл)|-2,6- диметилморфоліну гідрохлорид, етил ((4-хлорфеніл)-азо|ціаноацетат, бікарбонат калію, метантетратіол-натрієву сіль, метил 1-(2,3-дигідро-2,2-диметилінден-1-іл)-1Н-імідазол-5- карбоксилат, метил М-(2,6-диметилфеніл)-М-(5-ізоксазолілкарбоніл)-ОЇ -аланінат, метил-М- (хлорацетил)-М-(2,6-диметилфеніл)-О0І -аланінат, М-(2,3-дихлор-4-гідроксифеніл)-1- метилциклогексанкарбоксамід, М-(2,6-диметилфеніл)-2-метокси-М-(тетрагідро-2-оксо-3- фураніл)ацетамід, М-(2,6-диметилфеніл)-2-метокси-М-(тетрагідро-2-оксо-3-тієніл)уацетамід, М-(2- хлор-4-нітрофеніл)-4-метил-З-нітробензолсульфонамід, М-(4-циклогексилфеніл)-1,4,5,6- тетрагідро-2-піримідинамін, М-(4-гексилфеніл)-1,4,5,6-тетрагідро-2-піримідинамін, М-(5-хлор-2- метилфеніл)-2-метокси-М-(2-оксо-3-оксазолідиніл)лацетамід, М-(6-метокси)-3- піридиніл)уциклопропанкарбоксамід, М-(2,2,2-трихлор-1-Кхлорацетил)аміно|етил|бензамід, М-(3- хлор-4,5-біс(2-пропінілокси)феніл|-М'-метоксиметанімідамід, М-форміл-М-гідрокси-ОЇ -аланін- натрієву сіль, О, О-дієетил (2-(дипропіламіно)-2-оксоетилІієтилфосфорамідотіоат, О-метил 5- бо фенілфенілпропілфосфорамідотіоат, 5-метил-1,2,3-бензотіадіазол-7-карботіоат і спіро(2НІ-1-
бензопіран-2,1'(З'Н)-ізобензофурані|-3'-он, М-трихлорметил)тіо-4-циклогексан-!, 2-дикарбоксімід, тетраметилтіопероксидикарбоновий диамід, метил-М-(2,6-диметилфеніл)-М-(метоксіацетил)-ОІ - аланінат, 4-(2,2-дифтор-1,3-бензодіоксол-4-іл)-1-Н-пірол-3-карбонітрил або їхню комбінацію.
І001660| Варіант здійснення 465 являє собою склад, насіння рослини або інокулят відповідно до варіанта здійснення 350 або спосіб відповідно до варіанта здійснення 462, де агрохімікат включає бактеріальний інокулят роду Васіїйш5, і бактеріальний інокулят роду Васійи5 включає Васійи5 агогі, Васійи5 аїгаулаі, Васійи5 аїроїасіїх, ВасшШив5 аптуїоїїдцнетасіеп5, Васійн5 сегеив, Васійй5 соадшапз, Васійй5 епаорагавзіїсив, Васійй5 епаогпуїтовз, Васійив Китгеїакі,
Васійив5 Іасіїсоїа, Васійив5 Іасіїтоїрив5, Васійи5 Іасії5, Васійшив5 Іаїегозроги5, Васійив5 Іепіітогрив,
Васіив Іпспепітогтів, Васі тедаїегішт, Васійи5 тедиза, Васіїйи5 теїйепз, Васійи5 пано, Васіи5 піднтісапх5, Васійи5 роріїає, Васійи5 ритіїш5, Васйи5 взіатепвів5, Васійи5 5рпєагісив5, Васійи5 5рр.,
Васійи5 з,ибій5, Васійи5 (игіпдієпві5, Васійи5 ипі'тадеПац, або їхню комбінацію.
І001661| Варіант здійснення 466 являє собою склад, насіння рослини або інокулят відповідно до варіанта здійснення 350 або спосіб відповідно до варіанта здійснення 462, де агрохімікат включає гербіцид, і гербіцид включає 2,4-О0, 2,4-Ю0В, ацетохлор, ацифлуорфен, алахлор, аметрин, атразин, амінопіралід, бенефін, бенсульфурон, бенсулід, бентазон, бромацил, бромксиніл, бутилат, карфентразон, хлоримурон, хлорсульфурон, клетодим, кломазон, клопіралид, клорансулам, циклоат, ЮОСРА, десмедифам, дикамбу, дихлобеніл, диклофоп, диклосулам, дифлуфензопір, диметенамід, дикват, діурон, ОБМА, ендотал, ЕРТС, еталфлуралин, етофумесат, феноксапроп, флуазифоп-Р, флукарбазон, флуфанецет, флуметсулам, флуміклорак, флуміоксазин, флуометурон, флуроксипір, фомесафен, форамсульфурон, глюфосинат, гліфосат, галосульфурон, гексазинон, імазаметабенц, імазамокс, імазапік, імазаквін, імазетапір, ізоксабен, ізоксафлутол, лактофен, линурон, МСРА,
МСОСРВ, мезотрион, метолахлор-с, метрибузин, метсульфурон, молінат, М5МА, напропамід, напталам, нікосульфурон, норфлуразон, оризалін, оксидіазон, оксифлуорфен, паракват, пеларгонову кислоту, пендиметалін, фенмедифам, піклорам, примісульфурон, продіамін, прометрин, пронамід, пропаніл, просульфурон, піразон, піритіобак, квінклорак, квізалофоп, римсульфурон, сетоксидим, сидурон, симазин, сульфентразон, сульфометурон, сульфосульфурон, тебутиурон, тебацил, тіазопір, тифенсульфурон, тіобенкарб, тралкоксидим,
Зо триалат, триасульфурон, трибенурон, триклопір, трифлуралін, трифлусульфурон або їхню комбінацію.
І001662| Варіант здійснення 467 являє собою склад, насіння рослини або інокулят відповідно до варіанта здійснення 350 або спосіб відповідно до варіанта здійснення 463, де склад або інокулят включає гербіцид і штам бактерій, що здатний деградувати гербіцид. 001663) Варіант здійснення 468 являє собою склад, насіння рослини, інокулят або спосіб відповідно до варіанта здійснення 467, де штам бактерій, що здатний деградувати гербіцид, включає представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕЗ349 (МККІ Мо В-50928), представник сімейства Васіїйи5 сегеиз ЕЕ-800377 (МАНІ. В-67119), Васійи5 рсендотусоїде5 ЕЕ-800366 (МАНІ.
В-67120) або ВасіШи5 тусоіїдез5 ЕЕ-В00363 (МА ВІ. В-67121) або їхню комбінацію. 001664) Варіант здійснення 469 являє собою склад, насіння рослини, інокулят або спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 463-468, де гербіцид включає сульфонілсечовину, арилтриазин, дикамбу, феноксигербіцид, 2,4-О, піретрин, піретроїд або їхню комбінацію. (001665) Варіант здійснення 470 являє собою склад, насіння рослини, інокулят або спосіб відповідно до варіанта здійснення 469, де сполука сульфонілсечовини включає сульфентразон.
І001666| Варіант здійснення 471 являє собою склад, насіння рослини або інокулят відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 350 і 463-470 або спосіб відповідно до будь- якого з варіантів здійснення 461-470, де добриво включає сульфат амонію, нітрат амонію, сульфат нітрат амонію, хлорид амонію, бісульфат амонію, полісульфід амонію, тіосульфат амонію, водяний аміак, безводний аміак, поліфосфат амонію, сульфат алюмінію, нітрат кальцію, нітрат кальцію амонію, сульфат кальцію, кальцинований магнезит, кальцинований вапняк, оксид кальцію, нітрат кальцію, доломітовий вапняк, гашене вапно, карбонат кальцію, фосфат диамонію, фосфат моноамонію, нітрат магнію, сульфат магнію, нітрат калію, хлорид калію, сульфат калію магнію, сульфат калію, нітрати натрію, магнезіальний вапняк, магнезію, сечовину, сечовини-формальдегіди, сечовини амонію нітрат, покриту сіркою сечовину, покриту полімером сечовину, ізобутилиден дисечовину, К25О04-2М495О», каїніт, сильвініт, кізерит, англійську сіль, елементарну сірку, вапняну глину, подрібнені устричні черепашки, риб'яче борошно, макухи, риб'яче добриво, кров'яне борошно, фосфатну руду, суперфосфати, шлак, кісткове борошно, деревний попіл, гній, гуано кажанів, торф'яний мох, компост, глауконітовий 60 пісок, борошно з насіння бавовнику, борошно з пір'я, крабове кормове борошно, риб'ячу емульсію, гумінову кислоту або їхню комбінацію.
І001667| Варіант здійснення 472 являє собою спосіб доставки корисних бактерій тварині, що включає годівля тварини рослиною, модифікованою так, щоб вона містила рівень ендофітного і пробіотичного штаму бактерій, що перевищує рівень ендофітного і пробіотичного штаму бактерій у тій же рослині, яка не було модифікована, вирощеній в тих же умовах. (0016681 Варіант здійснення 473 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 472, де рослина, якою годують тварину, включає рослину, вирощену в середовищі для росту рослин, що містить ендофітний і пробіотичний штам бактерій або склад, що містить ендофітний і пробіотичний штам бактерій, рослину, на яку нанесений ендофітний і пробіотичний штам бактерій, рослину, вирощену з насіння, на яку був нанесений ендофітний і пробіотичний штам бактерій, рослину, вирощену в області, на яку нанесений ендофітний і пробіотичний штам бактерій, або насіння, вирощене в області, на яку нанесений ендофітний і пробіотичний штам бактерій. (0016691 Варіант здійснення 474 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 472 або 473, де ендофітний і пробіотичний штам бактерій включає вид Васіїйи5 або І узіпібрасійи5. 001670) Варіант здійснення 475 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 474, де вид Васійй5 включає Васійи5 5зибій5, Васійи5 Ягти5, Васіїйи5 атуїоїїднетасіеєп5, Васійи5 сегеив5,
Васйиз їоуосетіп, Васійшв5 тедаїетішт, Васійи5 ритіш5, Васії,и5 Іспепітогтів або їхню комбінацію. (0016711 Варіант здійснення 476 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 472-475, де ендофітний і пробіотичний штам бактерій включає представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ349 (МКК! Ме В-50928), представник сімейства Васійи5 сегеи5
ЕЕ439 (МАНІ В8-50979), Васіїйи5 игіпдіепбвіє ЕЕ417 (МАНІ В-50979), ВасшШи5 сегеи5 ЕЕ444 (МАВ. В-50977), Васіїїи5 тедаїенит ЕЕЗ85 (МАНІ В-50980), Васійи5 зр. ЕЕ387 (МАНІ. В-50981),
Васійн5 сіксшапе ЕЄЗ88 (МАНІ 8-50982), Васійи5 зиИибійв ЄЕ405 (МАНІ В-50978), І узіпірасіїїшв5
Тивіоптів ЕЕ442 (МАВ В-50975), або І узіпібасійи5 5рпаєгісиз ЕЕ443 (МКК В-50976), Васійив ритіїнв ЕЕ-800143 (МАВІ. В-67123), або їхню комбінацію. (0016721 Варіант здійснення 477 являє собою спосіб доставки білків або пептидів тварині, що включає годівлю тварини рекомбінантним представником сімейства Васійи5 сегеи5, який експресує злитий білок, який містить білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну
Зо послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5, або годівлю тварини фрагментами екзоспорію, які походять з рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5, який експресує злитий білок, який містить білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васіїйи5 сегец5. 001673) Варіант здійснення 478 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 477, де рекомбінантний представник сімейства Васійн5 сегеи5 включає рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-29, 48-63, 125-141 і 186-296 або де фрагменти екзоспорію включають фрагменти екзоспорію, які походять з представника сімейства Васіїйи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-124. (0016741 Варіант здійснення 479 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 477 або 478, де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 включає ендофітний штам бактерій. (001675) Варіант здійснення 480 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 479, де ендофітний штам бактерій включає представник сімейства Васійй5 сегени5 ЕЕ349 (МК. Мо В- 50928), представник сімейства Васійи5 сегеиз ЕЕ439 (МКК В-50979), ВасіШив ІПигіпдіепвів
ЕЕ417 (МАНІ В8-50979), Васіїйи5 сегеих ЕЕ444 (МАНІ В-50977), ВасшШив5 ІПигпдіепбзіє ЕЕЗ319 (МАВ 8-50983), ВасіШив5 Шигіпдієпзіє ЕЕ-800184 (МАНІ В-67122), представник сімейства
Васіїйн5 сегеиз ЕЕ-800377 (МАНІ. В-67119); Васійи5 рхендотусоїде5 ЕЕ-800366 (МАНІ. В-67120) або Васійн5 тусоїде5 ЕЕ-800363 (МАВІ. В-67121). (0016761) Варіант здійснення 481 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 480, де ендофітний штам бактерій включає представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ439 (МЕНІ В- 50979), Вас ІПигіпдіеєпвіз ЕЕ417 (МАВ В-50979), Васійи5 сегеиз ЕЕ444 (МАНІ В-50977), або
Васійн5 Шигіпдіепзіє ЕЕЗ319 (МАНІ В-50983), Васійив5 ІПигіпдіепзіз ЕЕ-800184 (МАНІ В-67122), представник сімейства Васійи5 сегеиз ЕЕ-800377 (МАНІ В-67119); Васіїїн5 рзепдотусоїіде5 ЕЕ- воОоЗ366 (МАВ. В-67120) або Васійи5 тусоіїдез5 ЕЕ-В00363 (МАВ. В-67121).
І001677| Варіант здійснення 482 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 477-479, де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 включає пробіотичний штам бактерій. 60 (0016781) Варіант здійснення 483 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 482,
де пробіотичний штам бактерій включає представник сімейства Васіїйй5 сегеи5 ЕЕЄ349 (МАК Мо
В-50928), представник сімейства Васійй5 сегеи5 ЕЕ439 (МКК В-50979), Васійи5 Пигіпдієепвів
ЕЕ417 (МАНІ В-50979), Васійн5 сегеиз ЕЕ444 (МАНІ В-50977), ВасшШив (игіпдіепзіз ВТО1ТЗА (МЕКІ. Мо В-50924) або їхню комбінацію. (0016791 Варіант здійснення 484 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 479-481, де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеиб5 знаходиться в рослині, якою годують тварину. (0016801 Варіант здійснення 485 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 477 або 478, де рекомбінантний представник сімейства Васіїйй5 сегеи5 включає штам бактерій, який здатний колонізувати філоплану рослини. (001681) Варіант здійснення 486 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 485, де штам бактерій, що здатний колонізувати філоплану рослини, включає Васійй5 тусоїде5
ВТ155 (МКК Мо В-50921), ВасШив5 птусоїдех5 ЕЕ118 (МЕКІ Мо В-50918), Васійи5 тусоіїдез5 ЕЕ141 (МК. Ме В-50916), Васійи5 тусоїде5 ВТ46-3 (МКК Ме В-50922), представник сімейства Васіййи5 сегеи5 ЕЕ218 (МКК. Мо В-50926), ВасшШив (пигіпдіепзіз ВТО1ТЗА (МКК. Мо В-50924), представник сімейства Васіїйи5 сегеиз ЕЕ-800377 (МАНІ. В-67119), Васійи5 рсендотусоїде5 ЕЕ-800366 (МАНІ.
В-67120) або ВасіШи5 тусоіїдез5 ЕЕ-В00363 (МА ВІ В-67121). (0016821 Варіант здійснення 487 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 485 або 486, де рекомбінантний представник сімейства Васійц5 сегец5 знаходиться на філоплані рослини, якою годують тварину.
І001683| Варіант здійснення 488 являє собою вакцину, що містить фармацевтично прийнятний носій і рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5, що експресує злитий білок відповідно до варіанта здійснення 12.
І001684| Варіант здійснення 489 являє собою вакцину, що містить фармацевтично прийнятний носій і фрагменти екзоспорію, де фрагменти екзоспорію походять з рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-124 і містять злитий білок, і злитий білок містить антиген.
І001685| Варіант здійснення 490 являє собою вакцину, що містить фармацевтично прийнятний носій і рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь- якого з варіантів здійснення 17-27, де злитий білок містить антиген. (0016861) Варіант здійснення 491 являє собою вакцину відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 488-490, де вакцина є прийнятною для внутрішньовенного, внутрішньоартеріального, внутрішньоочеревинного, внутрішньом'язового, підшкірного, внутрішньоплеврального, місцевого, перорального, інтраназального, внутрішньошкірного, трансепітеліального введення або за допомогою інгаляції.
І001687| Варіант здійснення 492 являє собою вакцину відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 488-490, де вакцина є прийнятною для перорального або трансепітеліального введення.
І001688| Варіант здійснення 493 являє собою спосіб індукції імуногенної відповіді в індивідуума, причому спосіб включає введення індивідууму вакцини відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 488-492. (0016891 Варіант здійснення 494 являє собою спосіб зменшення кількості забруднювачів у навколишньому середовищі, що включає вплив на забруднене навколишнє середовище спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5, які експресують злитий білок відповідно до варіанта здійснення 13. (0016901 Варіант здійснення 495 являє собою спосіб зменшення кількості забруднювачів у навколишньому середовищі, що включає вплив на забруднене навколишнє середовище фрагментів екзоспорію, де фрагменти екзоспорію походять з рекомбінантного представника сімейства Васіїйш5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-124 і містять злитий білок, і де злитий білок містить фермент рекультивації. 0016911) Варіант здійснення 496 являє собою спосіб зменшення кількості забруднювачів у навколишньому середовищі, що включає вплив на забруднене навколишнє середовище спор рекомбінантного представник сімейства Васійш5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 17-27, де злитий білок містить фермент рекультивації. (0016921 Варіант здійснення 497 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 494-496, де забруднена навколишнє середовище включає газ, рідину, напіврідку речовину, гель, плівку, напівтверду речовину або тверду речовину. (001693) Варіант здійснення 498 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 497, де тверда речовина включає поверхневий грунт, підорний шар грунту, компост, пожнивні 60 залишки, листя, мульчу, зрубані дерева, біоплівку, шар бруду, гумус, відстій, пісок, шлак,
осадові відкладення, стічні води, порожню породу, ядерні відходи, боєприпаси і снаряди, лікарняні відходи, частини автомобілів під прес, металевий обріз, ізоляційні відходи, харчові відходи, азбест, елементи харчування, брухт металообробки, полігонні відходи, відходи деревообробки, відходи текстильного виробництва, скляний бій, шкіряні відходи, гумові відходи, пластмасові відходи, відходи електронних компонентів, сільськогосподарські відходи, фотографічні відходи, керамічні відходи, фармацевтичні відходи, віск, витрачені каталізатори або їхні комбінації (0016941) Варіант здійснення 499 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 497, де рідина включає питну воду, підземні води, поверхневу воду, сольові розчини, резервуари, відстійники, водяні екосистеми, промислові стічні води, кислі шахтні води, витрачену автомобільну рідину, витрачені електролітичні ванни, розчини для знежирення, розчини для сухого очищення, машинні охолодні рідини, відходи бурових рідин, відходи мастильно- охолодних рідин, відходи рідин гідророзриву пласту, відходи мастильних речовин, фарбу, побутову стічну воду, нафтозабрудні стоки, стоки целюлозних заводів, системи підготовки води, систему очищення стоків, каналізацію, відстійник для осадження, накопичувач стічних вод, озеро, ріку або їхню комбінацію. (001695) Варіант здійснення 500 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 497, де газ включає повітря, вихлопний газ, такий як викиди енергостанцій, сміттєспалювальних заводів, крематоріїв або нафтоперегінних заводів, технологічний вихідний потік, звальний газ, природний газ, пропан або їхню комбінацію. (0016961 Варіант здійснення 501 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 494-500, де забруднювач включає хімічний бойовий засіб, включаючи зарин (СВ; о- ізопропілметилфосфонофлуоридат); зоман (50; о-пінаколілметилфосфонофлуоридат); циклозарин (СЕ; о-циклогексилметилфосфонофлуоридат); УХ (О-етил-5-(2- (дізопропіламіно)детил|метилфосфонотіоат); табун (СА; М, М- диметилетилфосфороамідоціанідат), ОЕР (дізопропілфосфорофлуоридат) або іприт. (0016971) Варіант здійснення 502 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 494-500, де забруднювач включає неорганічну сполуку, що включає миш'як, сурму, барій, бериллий, кадмій, хром, мідь, залізо, свинець, марганець, ртуть, нікель, селенів, срібло,
Зо олово, талей, уран, цинк або їхню комбінацію. (0016981 Варіант здійснення 503 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 494-500, де забруднювач включає органічну сполуку, що містить поліциклічний ароматичний вуглеводень (РАН), хлоровану ароматичну сполуку, хлоровану аліфатичну сполуку, нітроароматичну сполуку (МАС), фенольну сполуку, ціаносполуку, діоксин або їхню комбінацію. 0016991 Варіант здійснення 504 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 494-500, де забруднювач включає неочищену нафту, очищену нафту, паливну нафту, дизельне паливо, бензин, масло для гідросистем і гас або їхній леткий компонент. 0017001 Варіант здійснення 505 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 494-500, де забруднювач включає вибухову речовину, добриво, пестицид, інсектицид або гербіцид. 0017011 Варіант здійснення 506 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 494-500, де фермент включає фосфатзв'язувальний білок, протеазу, гідролиазу вуглеводів, ліпазу, фосфоліпазу, нуклеазу, білок, що зв'язує поживні речовини, целюлазу, оксидоредуктазу, монооксигеназу, діоксигеназу, лаказу, лігнінпероксидазу, марганцеву пероксидазу, пероксидазу, дегалогеназу, каталазу, амілазу, редуктазу, оксидазу, амідазу, лігніназу, ксиланазу, пектиназу, ксилозидазу, ендоглюканазу, екзоглюканазу, глюкозидазу, інгібуючий біоплівку пептид, фермент, що деградує гербіцид, фермент, що деградує пестицид, або їхню комбінацію. 0017021 Варіант здійснення 507 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 506, де деградуючий пестицид фермент включає піретриназу. 0017031) Варіант здійснення 508 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 506, де фермент включає деградуючий гербіцид фермент або деградуючий пестицид фермент, і рекомбінантний представник сімейства Васійш5 сегеи5 включає штам бактерій, який здатний деградувати гербіцид або пестицид. (0017041 Варіант здійснення 509 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 508, де штам бактерій, що здатний деградувати гербіцид або пестицид, включає представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ349 (МАК! Мо В-50928), представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ- вО00377 (МАВІ В-67119); Васіїйнє рзепдотусоїдез ЕЕ-800366 (МАВІ В-67120) або ВасшШив5 (510) тусоїде5 ЕЕ-800363 (МАНІ. В-67121).
0017051 Варіант здійснення 510 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 494-509, де спори рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 або фрагменти екзоспорію приводять у контакт із забрудненим зовнішнім середовищем шляхом включення спор або фрагментів екзоспорію в потік, що містить забруднювач, приведення в контакт потоку, що містить забруднювач, з іммобілізуючим матеріалом, що містить спори або фрагменти екзоспорію, включення спор або фрагментів екзоспорію в гранули, що підлягають змішуванню з забрудненим зовнішнім середовищем, розпилення спор або фрагментів екзоспорію на або в забруднене навколишнє середовище, инжектирования спор або фрагментів екзоспорію в забруднене навколишнє середовище, або поливу забрудненого навколишнього середовища спорами або фрагментами екзоспорію. 0017061 Варіант здійснення 511 являє собою спосіб фіторекультивації забрудненого грунту, причому спосіб включає: внесення спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 у забруднений грунт; або нанесення спор рекомбінантного представника сімейства Васійй5 сегеи5 на рослину, посаджену в забруднений грунт, або насіння рослини для посадки в забруднений грунт, або область забрудненого грунту, що оточує рослину або насіння рослини; де спори рекомбінантного представника сімейства Васійц5 сегеи5 експресують злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій спор рекомбінантного представника сімейства Васійй5 сегеи5, де злитий білок містить злитий білок відповідно до варіанта здійснення 13 і де рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегени5 включає ендофітний штам або бактерій штам бактерій, що колонізує корені.
І001707| Варіант здійснення 512 являє собою спосіб фіторекультивації забрудненого грунту, спосіб, що включає експресію ферменту рекультивації в спорах представника сімейства Васі сегеи5, де експресія ферменту рекультивації в рекомбінантному представнику сімейства
Васійи5 сегеи5 збільшена в порівнянні з експресією ферменту рекультивації в спорах представника сімейства Васійи5 сегеи5 дикого типу.
Зо 001708) Варіант здійснення 513 являє собою спосіб фіторекультивації забрудненого грунту, причому спосіб включає: внесення рекомбінантної спороутворювальної бактерії в забруднений грунт; або нанесення рекомбінантної спороутворювальної бактерії на рослину, посаджену в забруднений грунт, або насіння рослини для посадки в забруднений грунт, або область забрудненого грунту, що оточує рослину або насіння рослини, де рекомбінантна спороутворювальна бактерія експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і білок оболонки спори, що націлює злитий білок на поверхню спори бактерії, де білок оболонки спори включає білок СоїЇВ, білок СоїС, білок СдеА, білок
СОЇВ/Н, білок СоїсС, білок оболонки спори Х або білок СоїУу; рекомбінантна спороутворювальна бактерія включає ендофітний штам бактерій або штам бактерій, що колонізує корені; і білок або пептид, що представляє інтерес, включає фермент рекультивації. 0017091 Варіант здійснення 514 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 513, де рекомбінантна спороутворювальна бактерія включає ендофітний штам бактерій. 0017101 Варіант здійснення 515 являє собою спосіб фіторекультивації забрудненого грунту, причому спосіб включає внесення фрагментів екзоспорію в забруднений грунт або нанесення фрагментів екзоспорію на рослину, посаджену в забруднений грунт, або насіння рослини для посадки в забруднений грунт, або область забрудненого грунту, що оточує рослину або насіння рослини, де фрагменти екзоспорію походять зі спор рекомбінантного представника сімейства
Васіїи5 сегеци5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-124 і містять злитий білок, де злитий білок містить фермент рекультивації. 0017111 Варіант здійснення 516 являє собою спосіб для фіторекультивації забрудненого грунту, що включає внесення спор рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеийв5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 17-27 у забруднений грунт або нанесення спор рекомбінантного представника сімейства Васіїйш5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 17-27 на рослину, посаджену в забруднений грунт, або насіння рослини для посадки в забруднений грунт, або область забрудненого грунту, що оточує рослину або насіння рослини, де злитий білок містить фермент рекультивації. 0017121 Варіант здійснення 517 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 511-516, де спори або фрагменти екзоспорію наносять на рослину або насіння 60 рослини, і рослина або рослина, вирощена з насіння рослини, є толерантною до заданого забруднювача, який підлягає рекультивації з забрудненого грунту. 0017131 Варіант здійснення 518 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 494-517, де спори рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 включають ендофітний штам бактерій. (0017141 Варіант здійснення 519 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 518, де ендофітний штам бактерій включає представник сімейства Васійн5 сегеи5 ЕЕ349 (МКК. Мо В- 50928), представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕ439 (МАНІ 8-50979), ВасшШив ІПигіпдіепвів
ЕЕ417 (МАВ. В-50979), Васійн5 сегеиз ЕЕ444 (МАВ В-50977), або Васійи5 (игіпдіепзіз ЕЕ319 (МАВ 8-50983), ВасіШив5 (Пигіпдіепзіз ЕЕ-800184 (МАНІ В-67122), представник сімейства
Васійи5 сегеиз ЕЕ-8В00377 (МАВ. В-67119); Васійи5 рзендотусоїде5 ЕЕ-800366 (МАНІ В-67120); або Васійн5 тусоїде5 ЕЕ-800363 (МАВІ. В-67121). 001715) Варіант здійснення 520 являє собою спосіб зменшення кількості домішок у навколишньому середовищі, що включає вплив на забруднене навколишнє середовище спор штаму представника сімейства Васійи5 сегеци5, що здатні деградувати гербіцид або пестицид; де забруднювачі у навколишному середовищі включають гербіцид, пестицид або їхню комбінацію; і де представник сімейства Васіййи5 сегеи5, який здатне деградувати гербіцид або пестицид, включає представник сімейства Васійи5 сегеи5 ЕЕЗ349 (МККІ Мо В-50928), представник сімейства Васіїйи5 сегеиз ЕЕ-800377 (МАНІ. В-67119); Васійи5 рсендотусоїде5 ЕЕ-800366 (МАНІ.
В-67120); Васіїйнв5 тусоїдез5 ЕЕ-800363 (МАВ В-67121) або їхню комбінацію. 001716) Варіант здійснення 521 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 520, де штам представника сімейства Васійи5 сегеи5, який здатний деградувати гербіцид або пестицид, включає рекомбінантний представник сімейства Васійн5 сегей5, що експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегец5. 0017171 Варіант здійснення 522 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 521, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає деградуючий гербіцид фермент, що деградує пестицид або фермент їхню комбінацію. (0017181 Варіант здійснення 523 являє собою спосіб обробки рідини гідророзриву пласту для
Зо руйнування емульсії або гелю в рідині, причому спосіб включає додавання спор рекомбінантного представника сімейства Васійй5 сегеи5 у рідину гідророзриву пласту, де рекомбінантний представник сімейства Васійш5 сегеи5 експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васіййй5 сегеи5, і білок або пептид, що представляє інтерес, включає фермент, прийнятний для руйнування емульсії або гелю. 0017191 Варіант здійснення 524 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 523, де рекомбінантний представник сімейства Васійн5 сегеи5 включає рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 16-29, 48-63, 125-141 і 168-296. 0017201 Варіант здійснення 525 являє собою спосіб обробки рідини гідророзриву пласту для руйнування емульсії або гелю в рідині, причому спосіб включає додавання фрагментів екзоспорію в рідину гідророзриву пласту, де фрагменти екзоспорію походять з рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-124 і містять злитий білок, і де злитий білок містить фермент, прийнятний для руйнування емульсії або гелю. 0017211 Варіант здійснення 526 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 523-525, де злитий білок включає злитий білок відповідно до варіанта здійснення 14. 0017221 Варіант здійснення 527 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 523-526, де фермент включає геміцелюлазу, амілазу, пектиназу, гідролиазу вуглеводів, целюлазу, агаразу, полігалактуроназу, ендоглюканазу або їхню комбінацію. 0017231 Варіант здійснення 528 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 523-527, де або емульсія гель включає полімер, аравійську камедь, агар, ксантанову смолу, целюлозу, карбоксиметилцелюлозу, карбоксиметилгідроксиетилцелюлозу, гідроксіетилметилцелюлозу, гуар, похідне гуару або їхню комбінацію. (0017241 Варіант здійснення 529 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 523-528, де спори інжектують у свердловину, яка знаходиться в контакті з підземним шаром, який містить вуглеводні. 0017251 Варіант здійснення 530 являє собою спосіб дезінфекції поверхні, що включає вплив бо на поверхню рекомбінантного представника сімейства ВасіШи5 сегеи5, що експресує злитий білок відповідно до варіанта здійснення 15. (0017261 Варіант здійснення 531 являє собою спосіб дезінфекції поверхні, що включає вплив на поверхню фрагментів екзоспорію, де фрагменти екзоспорію походять з рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-124 і містять злитий білок, і де злитий білок містить антибактеріальний білок або пептид.
І001727| Варіант здійснення 532 являє собою спосіб дезінфекції поверхні, що включає вплив на поверхню рекомбінантного представника сімейства Васіїйи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 17-27, де злитий білок включає антибактеріальний білок або пептид. (0017281 Варіант здійснення 533 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 530-532, де антибактеріальний білок або пептид мінімізує або попереджує утворення вірусних агентів, бактерій, амеб, паразитів або цвілі на поверхні або їхнє зв'язування з поверхнею. 0017291 Варіант здійснення 534 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 530-533, де антибактеріальний білок або пептид включає протеазу, нуклеазу, протимікробний пептид, ГІ у5М, І їсіпВ, лізостафин, альбумін, дефензин, бактеріоцин, ліпопептид, пептид уродженої імунної системи, лізоцим, літиказу або їхню комбінацію.
І001730| Варіант здійснення 535 являє собою застосування злитих білків, що містять фермент як білка або пептиду, що представляє інтерес, відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 13 або 15, або рекомбінантного представника сімейства ВасіШиє5 сегеив5, який експресує злитий білок, який містить фермент як білок або пептид, що представляє інтерес, відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 13 або 15, для або обробки дегумування мастила, масла або жиру; переробки шкур у шкіру; одержання біопалива, біодизеля або біоетанолу; переробки або конверсії цукрів; обробки крохмалю; переробки паперу або льону; обробки побічних продуктів тварин або грибів або виділення амінокислот; спрямованого розщеплення технічних відходів; добавок у їжу і корми; дієтичних добавок; кормів для тварин; промислового очищення; переробки зерна; косметичного виробництва; дезодорації; переробки продуктів харчування або напоїв; оптимізації пивоварства або добавки для пивоварства; детергентних добавок або переробки тканин або пряжі. 0017311) Варіант здійснення 536 являє собою застосування фрагментів екзоспорію для
Зо обробки або дегумування мастила, маслаабо жиру; переробки шкур у шкіру; одержання біопалива, біодизеля або біоетанолу; переробки або конверсії цукрів; обробки крохмалю; переробки паперу або льону; обробки побічних продуктів тварин або грибів або виділення амінокислот; спрямованого розщеплення технічних відходів; добавок у їжу і корми; дієтичних добавок; кормів для тварин; промислового очищення; переробки зерна; косметичного виробництва; дезодорації; переробки продуктів харчування або напоїв; оптимізації пивоварства або добавки для пивоварства; детергентних добавок або переробки тканин або пряжі; де фрагменти екзоспорію походять з рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеиб5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 100-124 і містять злитий білок, і де злитий білок містить фермент. (0017321) Варіант здійснення 537 являє собою застосування рекомбінантного представника сімейства Васійи5 сегеи5 відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 17-27 для або обробки дегумування мастила, масла або жиру; переробки шкур у шкіру; одержання біопалива, біодизеля або біоетанолу; переробки або конверсії цукрів; обробки крохмалю; переробки паперу або льону; обробки побічних продуктів тварин або грибів або виділення амінокислот; спрямованого розщеплення технічних відходів; добавок у їжу і корми; дієтичних добавок; кормів для тварин; промислового очищення; переробки зерна; косметичного виробництва; дезодорації; переробки продуктів харчування або напоїв; оптимізації пивоварства або добавки для пивоварства; детергентних добавок або переробки тканин або пряжі; де злитий білок містить фермент. 0017331) Варіант здійснення 538 являє собою застосування відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 535-537, де фермент включає р-лактамазу, протеазу, ліпазу, фосфоліпазу, целюлазу, ендоглюканазу, екзоглюконазу, пектиназу, лігніназу, амілазу, полігалактуроназу, глюкозидазу, галактозидазу, гідролиазу вуглеводів, гідролазу клітинної стінки, нуклеазу, геміцелюлазу, ксиланазу, маназу, лаказу, лактазу, естеразу, фітазу, фосфатазу, інвертазу, глюкозаоксидазу, каталазу, літиказу, ацетолактатдекарбоксилазу або уреазу.
І001734| Варіант здійснення 539 являє собою застосування відповідно до варіанта здійснення 538, де амілаза включає а-амілазу, В-амілазу або глюкоамілазу; або де естераза включає пектинметилестеразу. (0017361 Варіант здійснення 541 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 540, 60 де націлювальна послідовність містить:
амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 5095 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 63 95; амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 5095 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 72 95; амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 5695 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 63 95; амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 6295 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 72 95; амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 68595 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 81 95; амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 75595 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 72 95; амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 7595 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 81 95; амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 8195 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 81 95; або амінокислотну послідовність, яка має щонайменше приблизно 8195 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 90 95.
І001737| Варіант здійснення 542 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 540, де націлювальна послідовність складається 3: (а) амінокислотної послідовності, яка складається з 16 амінокислот і має щонайменше приблизно 4395 ідентичності з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 складає щонайменше приблизно 54 95; (Б) амінокислот 1-35 5ЕО І МО: 1; (с) амінокислот 20-35 5ЕО ІЮО МО: 1; (4) ЗЕОІЮ МО: 1; (є) ЗЕО ІЮ МО: 96; або (У ЗЕО ІЮ МО: 120. (0017381 Варіант здійснення 543 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 541, де націлювальна послідовність складається з амінокислотної послідовності. (0017391 Варіант здійснення 544 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 540, де білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 90 95, щонайменше 95 95, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з зЗЕО ІЮО МО: 2, 4,6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 95, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121 і 122. (0017401 Варіант здійснення 545 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 477-544, де націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію містить амінокислотну послідовність ОХТ на її С-кінці, де Х являє собою будь-яку амінокислоту.
БО (0017411 Варіант здійснення 546 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 477-545, де націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію містить залишок аланіну в положенні націлювальної послідовності, що відповідає амінокислоті 20 5ЕО ІЮО МО: 1. (0017421 Варіант здійснення 547 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 477-546, де націлювальна послідовність, білок екзоспорію або фрагмент білка екзоспорію додатково містять залишок метіоніну, серину або треоніну в положенні амінокислоти, яке безпосередньо передує першій амінокислоті націлювальної послідовності білка екзоспорію або фрагмента білка екзоспорію, або в положенні націлювальної послідовності, що відповідає амінокислоті 20 5ЕО ІЮ МО: 1. 60 (0017431 Варіант здійснення 548 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 477-547, де злитий білок додатково містить амінокислотний лінкер між націлювальною послідовністю, білком екзоспорію або фрагментом білка екзоспорію і білком або пептидом, що представляє інтерес. (0017441) Варіант здійснення 549 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 548, де лінкер включає поліаланіновий лінкер, полігліциновий лінкер або лінкер, який містить суміш залишків як аланіну, так і гліцину. (0017451) Варіант здійснення 550 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 548 або 549, де лінкер містить ділянку розпізнавання протеазою. (0017461 Варіант здійснення 551 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 447-550, де злитий білок експресується під контролем промотору споруляції, нативного для націлювальної послідовності білка екзоспорію або фрагмента білка екзоспорію злитого або білка його частини. (0017471) Варіант здійснення 552 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 447-551, де злитий білок експресується під контролем промотору споруляції з високою експресією. (0017481) Варіант здійснення 553 являє собою спосіб відповідно до будь-якого варіанта здійснення 552, де промотор споруляції з високою експресією включає послідовність промотору специфічної до споруляції полімерази сигма-К. (0017491 Варіант здійснення 554 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 551-553, де промотор споруляції містить послідовність нуклеїнової кислоти, що має щонайменше 80 95, щонайменше 90 95, щонайменше 95 95, щонайменше 98 95, щонайменше 99 95 або 100 95 ідентичності з будь-якою з послідовностей нуклеїнової кислоти 5ЕО ІЮ МО: 157- 231. 0017501 Варіант здійснення 555 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 553 або 554, послідовність або послідовності промотору сигма-К специфічної до споруляції полімерази або послідовності мають 100 95 ідентичності з відповідними нуклеотидами будь-якої з ЗЕО ІЮ МО: 157-231. 0017511 Варіант здійснення 556 являє собою спосіб доставки білків або пептидів тварині, що включає годівлю тварини рекомбінантною спороутворювальною бактерією відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 147-149, 151-153 і 156-167. 0017521 Варіант здійснення 557 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 556, де рекомбінантна спороутворювальна бактерія включає ендофітний і пробіотичний штам бактерій. 001753) Варіант здійснення 558 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 557,
З5 де ендофітний і пробіотичний штам бактерій включає Васійи5 птедаїегішт ЕЕЗ85 (МЕКІ В- 50980), Васійи5 5р. ЕЕЗ387 (МАНІ В-50981), Васійи5 сієсшапе ЕЄЄЗ88 (МАНІ 8-50982), ВасшШив з,ибБійв ЕЕ405 (МАВ В-50978), І узіпібасіив5 тТи5йоптів ЕЕ442 (МАВ. В-50975) або І узіпірасійи5 зрпаєтісиз ЕЕ443 (МАНІ В8-50976), ВасшШив5 ритішив ЕЕ-В800143 (МАНІ В-67123), або їхню комбінацію. (0017541 Варіант здійснення 559 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 556-558, де рекомбінантна спороутворювальна бактерія міститься в рослині, якою годують тварину. 0017551 Варіант здійснення 560 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 472-487 і 540-559, де рослину переробляють перед годівлею тварини. (0017561 Варіант здійснення 561 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 472- 487 і 540-560, де спосіб додатково включає: внесення ендофітного штаму бактерій або складу, що містить ендофітний штам бактерій, у середовище для росту рослин; або нанесення ендофітного штаму бактерій або складу, що містить ендофітний штам бактерій, на рослину, насіння рослини або область, яка оточує рослину або насіння рослини; де рослина, якою годують тварина, включає рослину, вирощену в середовищі для росту рослин, що містить ендофітний і пробіотичний штам бактерій або склад, який містить ендофітний і пробіотичний штам бактерій, рослину, на яку нанесений ендофітний і пробіотичний штам бактерій, рослину, вирощену з насіння рослини, на яку нанесений ендофітний і пробіотичний штам бактерій, рослину, вирощена в області, на яку нанесений ендофітний і пробіотичний штам бактерій, або насіння, вирощене в області, на яку нанесений ендофітний і пробіотичний штам бактерій. 0017571) Варіант здійснення 562 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 477-487 і 540-561, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає фермент. 60 (0017581) Варіант здійснення 563 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 562,
де фермент включає ксиланазу, ксилозидазу, фітазу, фосфатазу, протеазу, целюлазу, ендоглюканазу, екзоглюконазу, глюканазу, амілазу, ліпазу, фосфоліпазу, глікозилазу, галактаназу, а-галактозидазу, В-глюкозидазу, амілазу, пектиназу, біотиназу, полігалактуроназу, лігніназу або їхню комбінацію. 0017591 Варіант здійснення 564 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 563, де ліпаза включає фосфоліпазу Аї, фосфоліпазу А2, фосфоліпазу С, фосфоліпазу 0, лізофосфоліпазу або їхню комбінацію. 0017601 Варіант здійснення 565 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 563, де амілаза включає а-амілазу або рВ-амілазу. 001761) Варіант здійснення 566 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 563, де фермент включає ксиланазу або фітазу. (0017621 Варіант здійснення 567 являє собою спосіб відповідно до будь-якого з варіантів здійснення 472-487 і 540-566, де тварина включає ссавця, птицю, рибу або ракоподібне. 001763) Варіант здійснення 568 являє собою спосіб відповідно до варіанта здійснення 567, де ссавець включає вівцю, козу, корову, свиню, оленя, альпаку, бізона, верблюда, осла, коня, мула, ламу, кролика, собаку або кішку; де птиця включає курку, індичку, качку, гусака, перепела або фазана; де риба включає лосось, форель, тиляпію, тунця, сома або коропа; або де ракоподібне включає дрібну креветку, велику креветку, лобстера, краба або рака.
І001764| Через вищесказане, можна бачити, що досягається кілька задач винаходу, і забезпечуються інші переважні результати. 001765) Оскільки в описані вище продукти, композиції і способи можна вносити різні зміни без відхилення від обсягу винаходу, мається на увазі, що весь матеріал, який міститься в описаному вище описі і показаний на прикладених кресленнях, варто інтерпретувати як ілюстративний, але не обмежувальний.
тис тяи Ум УМ сну. зам, СІНО І ММ У ПИ
БУ Ззипком ЩІ Кам у Тих
Дт СЕСІЮ ЗАКО ЗБХОІУ екю ати піна
МІКЛЕЮЕВИМ,. БЕЗ ім дну сухе ач. ша У
У ер елект сот ев меути тв щен мали у соте чити «их ЛУ НН ЕКО КАМЖАТ АКТІ ї ТИКИ НИКІВ дпа Лутими. ет
ЕВЖОМиТадитТНМХ ВАМИ «3 Фк щи ш БМ ОЖЯУмюЕ ЗК У тех ро «іо тра вості вих
А К МД М и Мк У ТИХ гц или ке хі ану «ши 313 шу ду єтузуу юю тку хви і путі СО, сим щгеашиМмиМ ЖК Ух «Еш
МУЖНІ я «ша» У пух уктожехм ед ІМТ, і и ях па дк
Он ХА МАЛО БОМ ЧУХІХ «дк х «аа мож бо ву Бодя суму Хм бик судах її3ли им лету Уест Мир й: Шоу бах
Ма пет Ват; БТ дом бут пе вв ЗІ» Бе бат БрО Жар о песо тим
Кк - ге ї Бе її 15
Фо Вл ву Ал Яни шт фу ит тил ЗІ (рах ему Мах тим Ше ших ек дав Жех Ада ІМ АЛЕ Б) ХЕ блих УВО Ку ЖЖО СТВ Би ШКО КО ню т пл хи ша ЗЕ фу чит мих Му Чак о Го Буу Че
Же о бБксш Бо Бе Зк іме Бус сжмкЕ ціх зп її
М се оси : ви и З Й их лю : ет МТК. пи Н «ВАШ БІД Ю : мо АБИ : дл пли жо Кк ом : «АН ХАТА АМВ. ФМЛЛАМАТЬЯВ :
Аа пе !
ОК БУ Н тріо кр ує дж до хх Сх У хту Дж Мі лу сбушшту боту ЖІ ІМ доріх (Мі: тує хоаху ! мех щох Ам дБА вно БЖ щшеХх ди щу У Хі й ж АБО Же хек : я « з чиї : не ку -О Ж Й со Ж що ме М Му ау умах Ка та пед У : лежу Ки йк- у :
Щек Бі: їат Віа Кеш Ва КІ Бирй ім щі БІж БІ ХВ (ем БкОо вхо : тЕфу п Зх Й
М хо ве Й ве чо як Хуфсв Зм Єошер Хкеу ою ТЯ кю хну у фа лу Ужузуу Мебфхсу Мои Мою Н
Жао жу Мт БІ. Тих Ха: КО Лех Му БЖ тмх суж Би Бр бах ЖДЕ : з Ще :
Я У МІ Й
Каб думи Улюяє юю дк ЗУу ж и у дж Мр У у ІМяємю Ууйя сМИф у Фрлю СМ Ми и : сіу ек рми шо БЕ КБ шар ЕХО КЕ св КО СБК У БЕ уми суку : пк СЯ З :
УК яжкж ох . їх сту туту Уж иї сут ТУЇХ ду: й їх дідух пью Зх су р туї дк :
КР ОСАХЗУКМ ХМОЦУ КД ММ УхММ МЖК Сам БМ ОМ АХ тип отМиж і хе Н
З ЗХ Ь; З х В: : та те 20 ! «мує УУутзх ритм МУ хх фіюуу СИМ Муза штржиу Ср Ул серятиу МИрує Мт Шресе ТМ у. Й
ЩИХ хлу ІМ СБКХ схлу ЯМУ ЧЕЖХ слу жа БЖ лу ша ДИХ сМю Бш ИХ :
КУ а па : м ЗУ п :
Тс Меч сім тузїхое Ме Мі ух ТУє.єх ЧУ йти ЛУ плід Уктх бю п кю Ми Й су ХА сю БЕХ СМ Ес СУМ Од ІМ КО БА ю са У Би : «гц і «зм :
МАПИ Мо ВАМ Й тре (1 хх Жук. Ен г хи Хе іх їх щу па й чи пт. пф Ух Уж Ай Н
Мн І Ж ОО КЕКСюУК САУ БЕЖ СМУМО Му МЖК СІМКА ХТО СКІКК кА МАК У Й та тугі Ул Й ше жк в Н 3 ую ПЧ 03» ми пЧут ук ЩїУуєи,. хи їх Люки; біжу бл Же ху : паж сх СХМмЖ бу КЕ СХМДЖ А БХхОе ХМмж сКу хм слу ВМ сх Ол : яких ти тах Н
Мам Ма МЕ Н тт Су Ех Женя СМ Лк Ши ха ТУхях Жкутих Ух ФУ. їх чую и суху Н
ТМХОЖМХ ЗхУЖ м ЖК їхУМ МО ХМК їм КЛ ЖАХ їх БО Ал ОУхХ БО :
Зх за «шщ чий :
МО КУ Ма шу : «см іли Шеча лу ші Чігча ре жйчеа Сан (лях Же ну Лак печу Мк Ух : мо а шж ЖЖ ЧІ схую Же СИМ чл іп щАУ ше СХ сах ЖЕО МК БУ Н ще за пт : «Б ТО її :
Туатух тю (ЗУ вла ті гХ году тери талии ФУм у сиву ТАЙ їуиіу еф г пк: :
МЕЖ КМУ ВІВ ХЕ МІЖ ТПжМЛО ІА а У Ка жу ам ККОУ Су КЕ ща КО :
МАО В ХВО Я
Хе ФЛ тик МАТ я Мокія Ман ско Межа Мох Ціхим Сп до іч су М п ен чн :
Мед оси у хнх їхКу БеНА шт Асолю ТАЖ НІ ую Аза бпя лЕР Зх БУ (ЗУЄ : тек, зЗпиА лі Н
АЖ СУ ММ :
Ха ему Тизу ст ох сіли УЗ пт пух жі сві кам ок хашю М: хг : її пах »воа вно Бей слу Хлш о ана вне о вБЕО сві ЕКО ЕВ АБИ ОТНЕ ЕХ : хх З Тит Й жа же хм :
Ж б я лиха: фізи: ун (Зелену жк суд ЇХ Уч тим щих ЩІ що КУ : пі Зак пі Бпвобиз їде Зі ЩИЖ ів ї3єе Зак о пієз пз да Бі Бо :
Ум ТУТ Ук "МАУ Й ее пиши ТАТУ ши : бе їм їх ж ух Її Уух хни ЖЇТІ1 хе дУМух бчує Тих Ж би ск ТІ МІ Н
УЖ ЮК МАК ЖЕ МАМ ОЖИЖ ХОМ Бл щУК шуй МАО СТВ Жжшл. АФ ОДА :
А ХО хх :
Кк ся Тпреих Щлох оо он «их дж ру еше ни ие аа АТИ Шик онко ШК ех ї я
Зджиоххх баФсуМмш Фо їх Ж мам ої у АЖ ЗР СЮМАМ даУю ст МА БАЗ яки ЗІ пкере о Бохкя ТВ ххх Щї УхУч 373 думку їїїх: Чую сії Мік и т Ж жк жи Хм бхїхх щі х кА МА шля А БЖ ше Ж СКМмЖХ Ж Ж ши Бех ЇМ Бе оїхУЖ
ЗВ ЗА Ех
ИЙ ХМ Кий тих лави Ме ох хг ТЗ жа й тА Мк са Су уу Ср су СИМ ю йрич шЖО Та ТИХ Ті А ло Ол Аа два хм ле тих тТвБХ тех ша 225 Зх ЗВ
ХУдіує лом ЗУ ж р Ж хм Хе Елі тату Ти Фодата люде жом А сУ хлсу пех лика УМ ОСАЦО б дж ба гли слу їм Фблу Бей же їжи лів реа
Б Б іх КО ек Ми дуе йл а они Ст тим те (Зо бу ту дх
ІХМЖ СМАК юМФ ЖМЖМ хо хом ХМ ЇМО Му захо Зккє. деп зх їх: хг «ТАТ ОХ пк й мамо Я яті -х «Еш З
Меч геттихе
ЕМ БІЛОК па сек Вишків «вла ша і ак ЗИИлЕВИ пох . «ни» З сек о Моє (22 Ж см МУ їх ЖлЛІх бим ЩШс слЬаю ках бами ШТ ІіУ дееух йому хЖеї ЩеЕх са хв ЖЕ же жа бл Ківі ТБ ДУ бос шЖЖО ДЕНХ і ї їх хи
А НЕ Же АХ тТодуєі Ж ше Хе їм жу Мох: Ук: Ухаюих ЖЖ Хачич. Жкучия Ух и: бобу ШУ: Ухучих. Мом інже хіІФ ОСА БО лю ім хо БХО Кі КО КхЄ КОЖ ик БЕ: БхО дО па що тт ох. КА ке
Кл и
Ге ду 5 : «хіп й : «ай МУ Й Я тт шим : чик шо К : служ хо сені Дак пев : кЙІУй» шапки гисппУвилхх : кт є : «ВМ й : дим: бо її гиму сус тлу ж тмум ІЗ4Уу її хи ук М ту ЇУТх дум че : еп оОеж їіхма муш Ху ші іш ізо Баш їх лиш аа їз І шХО Ва : ї в хо Я Я то їз Щі зк фах му жтапіхм ЗжтУ Ж С0Слу жіреих СЖічєту мс паз іі Жіжста Своу Н
МЕ ОМА МАУ жо ЖЕХ На фа Уж доля БЖ ЖІ Бхуз ХХ ХВ ж 5 : сих чия суши ! ха хх : :
Жх «ТЕ ях : пух пу ри кі и шо ри ух їх ух Му пАЇ хи ху Му г пружин Уго Н су Бхеа си су хів МК фу МЕ Ве су Віз тв сі ЕБе оту іх : зе т Я :
ШТ З ре : ж дю ся хи Му пн хи Жкусих бу їжи їж Має а Укмсис фуяю хх ух її хіх Й жа їхкж ме жХлх їж жу» их ще мяз гИлх КУ бо їм бух ХЗБ ОдВІіУ : хи тущ Бу : хх ПУ 5 п :
Же бує ті ау фр Мляу сті дідо мляау слу Чим тях СГОт Фу току Соч З ЖИ :
МАжОл малу ШКО ТПУ САУ Аг топ ау Хна ЗА аю зда З ал БИ : ах с Ел ру : ах И КУ Б Н
ТІЛ бирку Сг ж» ТИТую тиху до ді мк СВ ню ХУ ху им КИМ мм: ШУДОЇ мг Н
МОЖ СУХО ЖИ КМХ ОБО ЖАХ СЖ ла ЗІ БЩАФ беж КдА ХІІ МАХ БАХ :
В о щЕ : реа сх У Ще: СМ ту и ЩЕ лу им ХА З Фа Ум ую ТИ томегх Н
КНУ чна Іде ема Бе сгХ дю о жо жду жо Маї ех ще Тв ТВХ тах :
М АХ Ах :
ше ех вх думу 2. я їз. ті Ж мих бр хни УЖ Ем кн о Н вви Хо Уві аз вва пе ХіФ ХА Хі Аз о жМми жи бу УВУ уж Ах : ха. їх худ Й
МАК Мах Ма : я Жуля УХіио З ож Же ж жхічи 1 З жи Ж що ж худу ух мож хо Н ух сек БИлс БК Хіт уУВХ Бе УвА АЖ (КБ А кв Ів сек бек же : че. сх чай : хАЕ Ма МЕ : ток ша. боці мує Сум ах лохя си СТУС дю ЖИ ЮМ. ЖИ Док тах жах сш Ах Н
МЕЙХ ЗМІХ Ма ДАМ АВ ТАТІ ВЖЕ ХОМ їж: ХВ ТАМ дю Зам ще УК : зих ий це лоту :
АБ КБУ А їщ5и :
Тіт іх їХіче 12 Му іх» 5 овбачжж Міша дою Бі Жамж ма Мету тех :
ХА І У пі КУ КО КаУ ува вк дов таж дош Ло ЛЕ ЗХ Ащрогпец : тк че хх :
Ух МО Мт Я ода Жим тм Дани ло «т ду щу ХХ ормі щажк ХК де шк дум пот що :
МЕ леж ЗИМ ОБ їх їж Бод ЗАМ Ж МВА ОБЖ Ха ВЕ УМО хо : їЖЗ ТЖУ Аа : тк Щі Вед Ті Кіа лох бу ву Зм рих томі лк с Шум тут тої :
ВУ пі ер о Х3Зв іа тТх ех ДКИЙ А ше ХаВаі Ущо У шЖжех в Ма :
ШО. хі :
ТЗІ : ка ОМ : «ім : ле Ох : жа 0 ли :
Іуди ЖЮЯ шику Н мезо Щеух й З мулу г Й чле ММІдАамВвО ЗлИлиаИВ : зх ї :
ІД Х :
дриє ХІІ б ща «ря Ж дю ПУХ Пи біди буге. Тож су тих то дугу Н мет Уаі Муз Маї ха їх УМ ши Му ху хво инх МУ о ха му жех : 4 - зи чщ : х а їх : 5. ш У Ко : лечеию божу Ди ую жу дико МЕ бла Ж дх тожих там Ат тем хг Ул пуху сх Н
Ето ме; ий шишки вала Кие уз ЇХ б; ших АЮ їн; УА Ку ро ТЕ : тп В Зх : ях МРЛЛ. зх Н
ЗУ ШУ, дея Зх дМметх хр сті ж ие бХре (З Ж Зоо укр : іш БО БІ ува БИК сСАЖ ММ ЛУ МАУ ХА ЗЧУЄ : ск ек :
У 5 Я вра 5 : «ВІЙ В Я «т пд :
КАМИ Се Н
ШУ ож ЖЖ пе : вия АН :
Оки Можу 1 у семи мим хх Й са шжрІвла ва але : «ах в : їжі ду їли лі МЕ с1131: тю щих о т тиші бе Там т злу се : зах о аЩх Буш мМ МВА ласку ю ЗАТ ОС ХУ душ ІМ Буш ха удо м Н ї з ІЄЇ МЕ :
Шу ж ни ШрУ Ви Шо бот улам Три ме м Тая 0 сяк фоєелу прю : ж ем ема ВХ І Жжле мМудошУв хе Лех Фе Симон КВ ОЧИХ : т тк ут : сх хо ве Й
Ус: ут ЇМе Мві Му а 3; Му бр мі жі у хи Фк ме че : кое ХО БО отв гХхо би Сі ше Тое піУ Хі Же СуУ жк жпж шу : пи щи п :
Ж У раз Н з м тю а М У юних ЗМную ж В Іх Ми и у А Мн яю пи иує : вла ж бі йдем о ТОх ау ЖЕО их збу ад оОКих ЗУ Азв'фнх бу ЕХ : зе 5 ще
Хісю гі Ж Кри гхіх» Шахи ре гії хх ТУМТУ Че гіїх» бок реє. ЕХ ух па кю глфхах
АФС АМ АФ ЗУК КАХ МВ УК СА КЕ КУМ ОА ВІ СХКЖ ОО ХМ ХА Е
У ТО Ше нт їЗіхе (Мум сбежую їм Му лумє Зх щу лхже їі ВХ ан ЇХ Фе ху їх.
Су шеЖ ТЕ ЮА ВЕС Тв щу а Ти пет Ада тових шіУ щеж пе су
У З Зх
Хе іх сх ою сію ху ХВЖІ сМміхат 25 ие ту ж ШК хх Ук ік
А СЕМ ОАЖ Зак ХМК су ХА СЖЛК ІМУЖ ЇМЖК МК сім Мдх МЖК ца БЕК
А УЗУ МІ сх МУ хм г ж Мр шт Му МУ ех Лех сю МИ ях мл рх ТМ ШИ м Й кож Мн
ТМ АД О МЕІ АЗА СКУ ЛЕШЖХ СБОХ сбкоу ла ЯКУ ду пово сю су УКЕ ух М Шх г ху их Кр її Щілл хутро сухе ук Зо мряка чи ех: Ум Ж сіж пав ве сі тв оте Оу щеє тп ді іа те ЩІ у БЕ МЕ хаУ пра сл -
Ущо 135 їя же М «Тир фот їх «КУ бхмлих А сх сю. стук сх ОК соя ле сухо жодя
ЩА СТИК ОКХ ХО ФКЖТХ АХМХ ХЖМУ ЖЕ Ж ХК жМиМ СУА ШХМУ ЕЕ ХО їх М ОХ их ви тп КРУК
АЛЕ АМЕ ЗО Мах паю тах ем и ХУ єю Мотах Мр МУТеоя МИТ ям Ифою о Меоюю луку шен МЕТУ им реж ММ ях,
ТУ ху шЕЖО ЛО ХУ Ж БАЛА ІПЬХ су заду СХ сну ОНБХ меш сх У ЖЕ ОЖХХ -К5 зрост яса
МОХ Ко Ал їхУхи її: бЧхе сзїхх ЩЖИА сує ТУухи бою Му тури хи божу ги брутто еру ТУ
ЗУ лм СХУх ХМ МА ХУ Ж ІМК ЖКЖ СІ бл ЖХМщЕ СІМ щаЕшЖ ВЕ Су щі тещ хх їЖе їх їз ха й гли бедх кує (ли Мч ре (і рух Мом Фіз ЗР па Фах Кут
МО КОЖ ОКУ ММА СУБ шАх ЖЕО ЗУ су Ж БМ Му Мша ББЖ НАУ СБКХ хтхмІ ти зл
ЛК ДЕ М пи тя бу я ук пу ск Жди Має «чу тяеА МИ ли пли МУ: Фе ХА УМ тик овж УдА ЧИХ ЗУ Бех чих бу ко Тих бу ех ТИХ бух За) стТпх
Ку а ЯКО гіїах рю сирою фр ає фіиєу ЛУМою тлу Шен сбрре (Фр и хащі опа сфрзи шШееує бує 2 ку ех Чак бе КО ТИХ Зіу Бех ТЕ СБУ УВА РБХ сі шЖвж Ти ЇїуУ лк я ек Ат
Ра ВОК) КК я чх сирі Кх ха ЖАшк ут уже урни ЕХ хи ох прорче уз х ЩКУ сбряе у ху. слух
Фві Те щіу дво з Зіу Б Квже сїУ пає ЖЖ сіУ УВА бі У ви 245 зяо зх трек жк бук срок фут ім чек ур що пт узі ях при ах бе; Ме
Как оку Щек ТЕХ же ЖЕ ТЕ об ів Пк яку їхМо Тбх ба бу Ме
Уж так сут «би вас ДО 73 «тиж бі КЗ Зо опяриях у яти ун й рух дату Мр г кож хр ух сім шШеєт Ти Оу За Ме зу Мне БВ сЇЖж Бко КБж ОЇ бла тиж соду че ТЕХ п щ «й АХ ІК пах МДж. т у: Міра са ки ЧЦухм сук мм чує У оуче бік буїяа и хз ЕЕ лу ХххмоО Зх БУ Еш жлХ УЖ сш мл зу КО лк Оу ВО ан тик зах захи «л Зо чує тлу Я Має аж птнвує м Фр Ещ Чу тю уки ри тік рН ле ж Са у дя чл ж Ж СК ау МБО. КВ ОХ Ж ЖЕО ПУ САУ УК пу тк тк ад яв хи вче ке лим ка Мід дує їх А ун їйїїх БУТ Чую Зах мери. НМ (Яд, рук Ме ФК, пе Бек отих Бе маї Тех ту щі Тих бу Ето лах бе Бех Чак БУ у 335 338 315
Ж ху жі хи утіх Лу ж сити Жан Кк (їз хни Р тк бу хе дру да ких сі зи о ббве Сі Бо тах сіУж Фу ток сі сю ХпЕ (Ж шеЕ
За ад пе
Ка ша ЗО чхає ля ідо пе «я Жиую сн ах лі Ме (У йжтУ Моє Лю лети ЗИ ах Й тах їхую хв жИлХ їхУуМ щЗеХх ЖИХ їхуюЖ ХА СИХ оїхУую ДЕ ЖОох їУкю БІ СУДАХ : зЕо зе
Та» жує Ме Чі» ХАІ ит тла Що сту їїлАХ ДЛ смію І ХА прю Хе АТ ! їхуж СК ХХИК їж ВА ЖАХ їхУЮ ЕТ ОЖАХ І ска ЮХУМ ШУ УМ СХАМ ОЇ : дю чук «мя :
ЗУ ЗУ жа : (хан ХК ШИ зу дудіух Му у Ті ол тях фу МНрує ХИТ ту Січ Ду Тк :
Бека сви лі У вив оквж жАЖ Ах отвВж ат Аа тпХ Ху же дмх щу са : ту їх сх. зих Н
ТВ хи 35 а : сптує: їх КР прут дує у Ух, мсу Мах (і (ах ру гуми хр имя : м ОА УА Сх Ве щі МОЖ Оу Ме мА мЖЗ І шу мАМОУ веошу Ж Ж СГОХ : дека дх ал: :
В ЗМ «УТ : тубах ку ЛИМрм. сах печу Мою мот ач ум о сйха щі Мпа са т пам жук Н
ТЕ БЗ ех рИХ Ох ху ЖИВ УюХ о їхаАш ших ху Ж МІідю УМЖ ЦАЖ ШІ УМХ ОКУ Й лах дій до : їі У бкОКхе Н лу Укус 11 м дує МЛЮІує (ле ХМ Му сл жиму УМ ФЛ по ТМ мо фло «ло гу Й вій кни слу шнх МІХ ж Мі бни у ша СИХ ау ВЖК ВХ Се МИ : до ЛОБ о Н ее чех ек Й пару СІ вн пу Їх Му су: Її) дух сах (35 хг суху пан т хі селах :
Чак їхуж КЕ ХМЖ щі шк Ум СУ Кхо хаж- Біб Ве тмжЕ ім дів те : до дощ паї Н
У ал вх :
Прі ЗАЗ О СМ хх йшли ФІ У Жетеуу СбМім шлю мух ПОМ хі щі цк у ки :
МУ ел М Му АЖ ГОХ бхму тла ТИХ бхуу Бех реж ку ЕВ осКИд сУЄ : «І Сук Ач ас Н
МЕ о ХУ зи : і пу і бом. Має Гі Ума р 3 му. аю 0 3луи Мур фею ті хх а :
За ОСХлАХ сш сао СХАХ СсАЖ БЖ СХМЖ САУ їж КУЄ слу СУМ КА су АХ :
ВА 430 ря :
но ай зл сту р, дош аю Шут Мету рум тях Між св пе о ж пвЕЖопші У УА СИХ у вва оОТпХ бу жа ТВ ху АХА ОТНХ ша У, хх ким долу кв и ех лм тб ськ доро сиру стру Др чем блю Ха ши є фо раю Ше УТ тв жьх Афвовву пек дів а Абв А да ВХ Жех бі ЕХ ЗМК ла шк шо Укх
НЯ ши я
Сех бло тїизу; бах сх ім ЩТБУ вну Хіш бує їлпзх бус Ярі вих біт вп шИЗИ Уш ВМ АХ МО о У СВІМО село наш о ККеУ ММ КАХ «в м осалльЬ Кг пе поли ках
З 535 ко
Форум ритму ххх тус поча лив м фіг рух оди: чебум лущ їі Пух лид їі піх Во біж її ЖК уві дек вує іх вза їТйк маі Бра очнх Уді ах Й ИХ ЕЙ чи 2 . ге шу Ум кн од СУ ами Мр » Фокую о МИ ря іа ки вів біу дим о БУю ТеХК Кі Аза ТЕ Ти іш лам беза Те АТ «ак ск « вужа Тих Тихе їх ох Зх тт їж: біз як оч ФУ мими и Бим іш Бей їх Уві Беж бек дхо Зіж УЖ УВУ дви сіу пшжЖ Бк Бем олива
ВИ ку ВО пар УМ Си Дек ке. іже Мч Хі Алі Мам фот шу Ех Су КЛ у су й Ті АБО БшЕ жо ЩЕ бі Алла оллю ау ек Біне шШех йая Тих с шле ІС
МУ ЩО их ясне Ст Ко а ох ну М и Мія З ЄМО їЗфуєх Том АЛЬ то Бо
Ті ХІІ Бі ех ізо Ехо Ві сі Зій о віа Уа. Беж пем ба Се) сце ща БЖ дл що ЗУ Би ту ЗІ уд дл ткиу М ям СТкну Ше пух др сті рою Тіма Хі ву щу чаї ак Аа Тема КА ОБОХ Хава мех тв під ск шиОо піУ дл тТВХ шу ве пок под чий ра БУ шо та МУкш сту» Ст й Кот ух цезч ЖЕ фія Ле лю БЕ пех вах сійж з «ам З кпк че жд Ж
ЦЕЖ Фо «и 0 МАЛИМ ке лу пед Ура ре дн «йії» жаєсзлфоа лев оїе «й хх
УЗ мо Жояищшео ФЖ ж Мт жовто Мои Хомут Фе Моє дах Єжи жи СТ ру Стих уп Мета
Мат сум ії вет Бої Бу мк Чт Бен о бзм о мув З їів та пу Бо
У ту 15 З
Урі шт хг Сі тс тех Ба бо ві рей БЕОЗ бус її: шо т ши Ух щшем ЩО АВ су се Кп ге КІ УВО са ЖК клю МАС ло оОМаж КО ту тк зх
КИ хо Ко «бук їх
ХМК ОКУ
«Ай В ж зак ук м Ка «Ам БІЛОК шк їмІї Туз заиМйищИа кА с «пов Я лева їм КУЄ усі суші бло Тим сб вх Мі БдушШО вх жі ті мк ух
Мет Буш САМ ВВА АБродуд Блеа КЮ о ЗшМ ве о вуш СбАш хаАФО мишу КЕ ї Би 35 М ст пе Уста шу діду МИ У п держ МА пр НЕ шт сою Ех ті ет сід да із сіу Бсо Тих Бїьз рЕс тві їхні БЖ Бей їїе НІВ Ті БКО в хх зи
КУ Ко» щи турне КА Ж ря тт хи хх пн ух іт пи їх хз ри піку За пре послу Хле уВи сїуУ вла тож сіУ та тре ОЇ Хі СКБж Оїу іш ТБЕ «Кк ж ак,
Бан и Ах
ТХХ ка скани ся ка пе сухі щі а ху сеанс ю ех КМ З се Ж Ух Ж аж БЖ Тих БУХ тиж ЖрЕ бі і Ул БІУ Ах ОЖжИиХ сут ХА ОЖВЕ СА цу це Я
НУ зу Кан
ЖЕ ХИТ «ла ОО МИТ ля тка «тях лу Мито «лу що ху ле КЛ у
ХА САМКИ їм ТККВОСХАХХ їЇхХу хом ОХАХ УЖ мах САКЕ їхУужЖ де Хм ОЇ ХОМ
Кк зх с ай
ТУЗ Ж їх пе стежу жуї хе Я у жхї и Ул стра кт 2 Храм ан жк ММ
УТ О КАЖУ КМУ МАЖ ВА ОКБЕЖ СК ЖАФОСКВЕ САУ ЗВО СКОИ щАаАУ БЕООТВХ зо 55 (ха т я сміх Ух жу ЩО що сту З ду бух и ххх З шо смфбу их ля пвх ця г
ХМК Ада САМ КЗ КВ УМХ Оса КЕ СУМК УМ ХЛ СХ ХУКУ БИ ІХС У ца 15 КНУ
Ша ім страх Жах М діля щі р ау і ТЕМ Кр СЯ ду спі межах же йо жАМ Баш ТРХ ща ж вх ху Жже тБолх хху ШО ОСТВХ ХК ОЇ же 3 че як
ВМ НЯ их схе її лях фу Жах фх ме Хряе СЖУ уже їж пк фу. ШМК гу п Крем
ЗТ МАМО БЖО УК КАШ СЮАЖ УМ АЖ УВА УВО сІіУ БОТИ ХУ ВЕ СКИХ хїх чи сх
МЕ Ж хе плям жах ою ях доти УМ ШИ пу Мч ую «Ли Вт ММ стю ти Лю их пе хі пам о саУу Вл СНХ сб КЖЕжОо ВХ сі Ав о жих ЗУ їду ДІ ОТУКУ з.дх, гц ом лоту
Ж ХОМ КУ АХ
Лоу Мпдюця ХУ ку ТУюуу бйфреи кі ки оту пк хх М тедхце ск т би Ки т іш ЖжмЄ бішж Бхо Ме рі БиБ отв піу Бі та піу Ву ТвжЖ іх Же тик лот хотк
МОВ ЧЕК. МУ
А ШЕ НИ жошо жа Ж що тн вия лиечну ою бю йо Тр тлу бТеиУ Му тих ЗМУ ших АК Є пі НК ос м ЖЖ МЕ їхКу МВ. тех обр Хдих Тв
СТУ зх п
Во Ми ке херюх рію спр прах Вл лм ур В м прах тля буїлю АЛ жах Жах р су Аз тиж че Ав о тн пу ДЗа тих бру шу Сум ААУ 3 КХеа КО ах зп «те їх им пп : ІЧ г ях чн уча тужою Ж сот тлу мяч хи ій мя томі що вка дів шет сФтіУ КЕ ТВ вхо ВІ Бе їні УЗ) два ла УВУ беи жд тп т ц тзулкту шу ХА шах хв Тв ЖХ і е ЧТ бен; їхКу Ш-ле бу ра о дех сл Бео су Ті із
ТБ МИХ їхбУ ДЧХ Баш Б; їхМу УКВ схху МД ОпеХ МІХ КО МКУ Ам КВ их -уц тк суд дя ке їх Би
Тис туту А ху ті фе ти НИ т шо тор, їЗкіх (13; пал о мя г, йцх рРхо І ча ошму СбІЖ ХВ пек е Х ії бай БхЗ Зі ува УВУ су вад ча зай зкц ее ке «ТИЙ те. ож с Се к 75 К. г. Мити чених Шия ОБж У шия кх чо шк Міда Ви ХХ пл чия тУук диво Ву Кіа ут. ЖИ З а БМ їв біз тв пок їдмі. БІіЗ пу зп тк г «У КУ йо і с с яю их Ме їй їде щіщб тег їм Сп їМесу в пі ті
РЕе Бве де йіа те Віа вій пев Аіа Бу Бей виє БФ св пів тав зе зуще яхт ше пе вжи
Р и жи ФЛ я ЧЕ их ІК их их ККЗ Же ж ПАТ ху «Мом. фот ру Ж УП рУх свя бій Мені Тіз аа тб дів Бл оо Віз Щек щи ТИХ БІ ЖЕ жЖа пат «ви ххх чи ЗЕ ща тяж пло уж мк Том Тих бом Че їукиу Кі їде жу щі ік ді тт
ММ але Би БЕ аб ої бом жклєе Бхос діб Бей хз Біа іє Бі Я ле
З Ки ЗА зви пл бю ву дю лі тіс« ій дів теуУ дви ЗВі ко ові бі дід
Му тих тих Аза ТЕ су ХА сід Аля ТЕХ Ам У Бк У Ся х
Ічня ам я
ЗЕ БЖ 35 че по де ж до їн ті п цію ев Тішоїнм ЗІ реж ві Пак р тп пі дій йесж БрОо їіх шщіу вво Був іє бедоЗві теє чві неЄ Га бує му ї1д чай пд У аю зах ХХУМ жі щі мо цле щі док Ук їз. док ща зе Бас вва тів ді
Щ5із ів ува дво МУ БИ чай ММК ОВ ЕхЕ Сх землю х хх мк тушу зх а ва за «тій З пл я чи ча АМОоО лю «им ВІДО «ій БвоиЗффив викли сьв ту «
КМ - ду «с щ Ше г літу шШеую із Зло бжщдз Зими бує (іч Ше щі т меб див 240 Бе век щее Бех Вів діа По; Ви вкФ ту пек ОВ А У г у5,
В її ХЕ ух св їла Бусз Ву Мер осіб Вб Бве біз Бе та Шмак пу
БО МИлХ Бела туш КУА МеМмЗ ЄЮ БУЄ клЕе іль км Мт АЖ Ку за У зп 2о 2 ЗО ня Ах
ЕОМ ТЕ Ак свт Ж меча хх «їй БІЛО «шій» Бастіатоав зпслхаслів «аю ОКУ ее тих сх буру і Жуків суху За тон ніч Туман З «у спі КУЗ
Мей дробів бле ем о беєс Бас овішд Біш ва вва Бо Оу Ше Зах шіу ї ВІ М Хе йжеия І У бами; буму МК 05 ТУхет, Міо ЇХ У лУюхху ощожеж Грею т духу Миру ж ХК лив ри БЖжО Мак Ол БХхО пе сі беж душ о ЖВе сім БЕшОВНЕ
Бячи Ех, лу то їх КЕ:
Тутах Фу Мою ут аю Або би тв фі тт рух споді іє УТА куеке перу Ів щу шах твх сі Вів Му МЕ йіз їїв БУ да тк Біб ВЕ Чую Че зУц ша 4
Еш як до 13 ок У пе Фкіх тлілу Ти х2щА Хомут» бору УМ УуєЄ Моє ле зі бив ку
Ів тТЕЕ іу вка РЕзЗ щі У хе щі Ха) Сеа тах бух зе ЛО УВО ех па «5 шй
ЗУ па ук сх: жа су рр ни Кох ба що ще ях т у жо зе
Бей жк Щіє Бек бле ба ЕЛЕ ду хів БеМм шо ХоФ БШеЕ 85 ТО 7 «т 55 я ДДКХ МА ех о ях ІЗ
Ей су лик сій ЖХЛОК
Ко межею т руху лу буикоухю є ко см г «лк Шасі шж мпеілецЕсерлавикав тут, 3 ха АХ пд СКК Мох мок и« кс Ми г Ся ех з т ОСТ Шрек М Ср тоже КТ І
Мет Бе дво Сук АЛЕ Ж» іє сіаА Му Те вен осье Те Без іє ВЗ. з х; 18 18 ва с Кк Кк: лиху ОХ п ижхА хуя дух, гак пох У шо УЛ т Хуюи хін Тс ех, пет ті У е бе» вза їм бат БЕо Вди їм. Хі бі рЕЗз тв Бая Бе Бхо ХА рКо
КУ як т «М їх Кк пу оз а и я НИ вкОо вне ТВ б шо Мих су
ІТК ух ча
Меси я сті ства «МАМО и «ВІйм БІЛОК
ТИСКУ о ни но у рах и т сайт пасів зеулерн с рнатиз Уа т зх кафе сп тал Мох; т ох Мая ко хх ох их не зон У ТМ сук А 5 т
Мах жа до їм дю ЖзЛю жів ів Худ Те вжи ОБУ Ще бер 0 АВ 4 « «и в х х Іо Ко с - - - Фе ух, лій у щу УУХвжних Ж гонки го кі, Гожея вві вій пеи Ай БО ввО о Шей тіш шу ВКО ТЕ Бей о вке РсО таш КО ху т й, У
ХО Ка ДО пкутих ЖКусу ут То: УКуеих стаю їх: фути сах СУТ. лЛУлуд сах ФУжи фхулих сВіх (ху;
Кто Кре мк ої БЕФ ЖИх Бі Ко блкх бі Маз чмк и Бхо ве оту
У ту БЕ м З А жа же жави мив У п чи хщю хулюучєе т у дуютя УУМз у я Мащенко ж зві тиж шах РкбБстнаи ші за ти сіУ Бр тн Оу Увь тм слу вж по Я шО «ач гу жу л смед ди муси: сера Ж ФУ ПИ су их МХАу ї3лки дув еруче. бих пуж мщі бмжЕ пи КЖхО ХМК о щкш ХО СУК ЛУ Бо м Біш тдХ хм
БЕ т ха Во пе зи їх Луки ери а ЇМуУчх сту ке ім хр их Дюма і шу Бл лЖ КУ жа СКК МУ БЕ ОТО «к У ча отих Су Брест су
Кк С 5 жа Ум ую ШІ хо фе, Му стЛляж хйюі МИ дж обр у ЗИ Тю луУ Ж Мих их жи
ТВ СТБх су бжо Так обьм аї бак боку Ето лк ж ЩА тах ую жа пух ом т
Ка Б Кер скан М «Ки ру ли В сви іа «ун м т Ши бр Кр ує р. пр
ТВ сам ву таж шу Ко тТВж САУ бе Мао слу ко с тНж щі ср; ТО як дол як
МЕХх Не а
Фіу ко тТве ББу піу ТЕ Би щіу Сув бек оСув Яхв осСУв Су З бе 135 з: па шк 185 хо тухку км й ж Іжа ЩО ху их ек ши неви кое ее сяк дв вх ж
Бур; Ме бів Бак УВА ем Зав о ЗІ бом бів ЗКУ БІО тот ув Еш БЦ їх ЖИ Ух МБО тк см тім добро дах мн біечу Деу са бік бієчу бах БИчухМ Зір Тахую ОЯ пт Тих Тіз АЗа Аве тн оо АБО) о тбиху бо бшо лена іа фл Тен; БДе зах з те 1855 175 ї75 ри 3 пжфріяи ахах ЧІ лухмах с мізха брсї Тим дм п зхд па хх ж яко бихк
Жавс Хі ЖБК о цеажЖ сві вва о жах ББш ви УВА ЯлжЖ УМ Тк двеосІіуУ ТОЖ
То МАХ Не ча ЯМ Же хг и шу Ср ем Мох Хі є ушу ех Итх тп ом тих ть йбче чаї тазі вжи бі» Щек дЕВ МАВ ТИХ КУ Мал ому БЕН їде
ІН5 япУ БЕ
Тех бу із Мк риє Ті Фі тим ту туичу юс б босу с ги
Боб ба сіУ Бо Бро хіст Тип їм їшя бгОо БкоОо Та АВ УВІ. щіу Суд зх зад лу
Ах А ве турі б (Зі бло дет (і дах ет їііх Де см ж їосиз й йод у са сСжв см хв Меч сах ка Бо фас Аж бо лева Бевз жи За Бра трбуки треки те се ку як ЮА Кеш КМ су ру пад Ім мох Код Мом: Мо Зх лу ЇУУя лу жи Ма до Моя
Їте З Кф ЗШ Ул я ва їмак Б Бех лів ших МщшІЬ ОпіУу ЗежЕ їБе Бі Вів
Зкк "им зак
БЕ 255 ХХ лах їди му ли хуя их ще тую Коша хх киш ту су: ЕХ ха сс я ав о Бде Бех ЧАЇ Зо Бій пах СЕУ Бдеб уу хів ді Бебошум жМЖ Пец хумах сен тс ле Ку шт ати СТ их ха пеичич ж нює СМ А кет ТУ пор Слух ха ж Жоххх
Ше Щі о шко ох тв тих тав ви ре Аза бів Бех Чл був Лу кпк зи: чик п ЩО МУ
Уа ку зу хЕщ ших ру СТ де Па Ли мок хааосрих лій ві Вшаа хів ЖПУ вт Кі тих мех пап ЗЕ
ЗЕ ша Ах «пі У «іп» 33
У Кк ват З «ій» БІЛОК «13» пайсміїсба «емпепавернмва
ММ КБ
Злиху. Узин оЖіуі бобуд Дод: ФУ МиШЕ ложу тлу СР що ля ХЕ дви ла дя
Мен ри даю ую т ле Мен; Бу Був МЕЖ МАТ ЇХіЛЬ МА ВМ Лю ВІ - до тн А жу сбохлу блю лих ЕТ ю спро СЛУ бохїх Сп, пи тлі ще ши Аж фец о фино БФ о АНМ АЖ Баш лу Же СКМХ ендо же ЖЖУМ (А ЖЖМЙ р р за а шк З у ІК аа ШИК ов ко Клео Кай) МІХ ХМК ОС кКуУ
ЗЕ
Сн тт. р хи Ж чн
УМ кони ши нт кн, мити би ких я щоці іл мі Бодя ум рути ія «ках ІІ МАВ О УА ЛНМУ Дпят ке ех А
ВК их мае бі дл Голд ща сх, Му о гожи обох у плуг ув гм лу; що
Мен бле Бдю Був дже ма: Мех Був пу Смс дя ОЛд Мві зем сля Вів ї 5 їв 15 ах З таці шт бу шт п уз Сг хм фею сфере сири тод у притиу СТРУ ре вай дів їжа АБЮ БЕ АБИ Гі ді ау БевосрпхХ сені бе ж швея БТ ук т за
Ки М БЖ тку» ух гоуж ту ми. сухих їв ан КУТ й. бує УЗ Фу ми ДУХ
Ехо Бе таж Сем о бхОо тп щАмУ ЕКО ЖІ дом ЕКО ТУ Ху КО жи Оу
Оу а ах хни Мч ля, дужка лі ю сл чних Ту пк нику Мі ка МУ те ЖІ ХУуж сту
Буа тце бу Ба оОждЕ бу БЕжО жблАх пат БО дних ЗУ Вуз ТкЕж бу ха у Ки о
ЗО 55 у
Зедр УТ а Жвиту "Ком тає даєу УМ ЕХ пу лУм ТУуї хе му кри ах Ж я ну
ГПЗ шеу ЕЖжО СТБ су шжОо ТВ піу ЕКО ТБХ ФУ ЕКО СРНХ У жено «сх се сх 2 ро ТЕ Не ЕУ щ пек їх ри хо стукем Три Жуки Локк Че т коЖуюта За ух Мом кн тр Ах бі Без Те біу БЕЗ Тв О1Уу еб Кк бу Б фе бі би ЗБЕ СУ
Ж дг зе
ОХ о ЗУ учи бу шручу хау шутлж года му Кт гуру мя КМ Фа ря фу Вк то ТВу щу Бо ТЕЖ шу бе) тв см щід отих шу шех тах ху РЕЖ зи зи з35 го ЕН їх тиру жі ку Дідо пифюи ж: Мтхх мк Ха Мб Дав блхищо лк ух ухмжа мах МО.
ІЕЕ осі вів теж Зі: БЗіфФ був зе; бук перо ув маї Жие ру ме ох їх лак
Кн ММ ем ож ни о ЕН я
Піх бів уві беб Ахш пі: бом уві слі СМ жмк УВІ їіФ Фо вів тех «луг чад Кк
КЗ КУ вис
Же лом ду в що Зуєту джут з Об що Укшчих осщрусит Же УКІз Можу УК Мо т її щі барв обі БІ) ЗЕ маї Вів БЕ Во БВ Бе баб Бие Аве Км 45 чаду зп зве
КМХ М ЗАСТ КУ птувохх Жду ит ол децду БКЦ бамую ХУ Луна Укр. меду дилеох т ше й тех о жшх ша АБИ АЮ АНА мЕМА да ОС КИХ уед вних див Бе» аз шах Ана ди уч ле їх КЗ КБ
Аж йьух ТМ ху ФІ ЦП щу вол А АК НЕО шу их их дк п уя їЕк БАЖАН
ХМ ОхмЖ о ЛЕ Я МА М Ха хМат БЕ УА Зі хів бі У б1 БЖ Беж з щи - сх ік КВ мк а Не Ж саше, Фа Ме рок ни Ши НО Б тод жу хе їні жа Май жже ме ТВА ТУ Кеву їди) ШО ЕфЖО АВ ЛЮ ЇМ УХу СУВ 19 05 за5
КЕ яю «МТУ 13. ху Киуч тег бах ом їни Ж луках Зак Тими Той ху бом Тж оіМм Су зв Су ВХщш Зм: Бищ схо ХІішЖ Вхщ ба Бен Без дв м Би тора -5 щ лк
КК УК КУ
«тре муїзе ам спе А й Ж бі зву бат Хом ху ад тва дл до Мк
Та у Зах Тк о таї Аа їси Бевз маї бах ложу Бек їз» Віа ТЕХ су сут МАЯ ТУ кож. ОХ ях ій КО. ту їХфсх іх М КТ ух чує щу им вт хе Ж ам духут ж пе ах тих
Сім Бпж вд ЗВУ Січ ій тТпкК діа Пец бі ха УВК де шоу УВК бу их У "КІ шк ВАХ ЛИ тушку. ж що жую КЗ що мих шум Туш Шукемю дух Ме току, плен де дин Кк Уж вЕОУ ті о БкоОо ті вци Кк РхО БЕ ЕКО СУМІ бий Ві Аво бів ха А зай зу чд кю ХМ хі слив Ху тов ж ма Кі млюує у ІВ пла я Ме пику ХЕ дани МЕ 5 3 шЖех Таж Сув їжа ха Бах Аза Уві ве лає Хв Б тн Бус Ти вта я ща цк лк УВ яю виш пня ст «х чо АХ тр са «ії а
СО дж тих ка ОМеУ КУКА оче ьо Я «й фаст гиав сек кг і
Ж МТ мек ЗежЖ вк цу БЮ» Був Бе що вхо се дит меб беж вт о муш йБр ї х їй БКя дати У: пу Сак Ж Же СИ тики МИ ка и КУ ТЕТ Саух т хм УЄ Щит БЖ
Ат КОЖ ДАЖМ ЛлЬБХ БУЗУ МОЖ АЖ АЮ ЛЕХ ЇХАЛА ОКА МЕЖ О АФ ОЛЯ ГІЛУ ВЕ
ВІ ж 35 зд Яхнут о її зу лу зу ТУмку умах ХЗаЄ їужух см ЗМ бує тофу ІЗ ух ре
Мем Ума ау ЕЖО МЕ КЕ ЕКО КЖО ла ЕКО ше Клео Ул їз гЖО ле ле дя Б ве лк лк
І сій 15 «Ех» ВЕ
ХК мчч хк ви ших лю же п ружисУМхс хх Шасі лиш сем ха Б лами А м: дехю фу со дух тихими Ме фах фауни бом щиру Мох Х тир их
Же пек дз Суд Аве Буш Ббе дви ДКЗ пак о дхФф ме пежЖ Ахоб СУ ДЕ ї 5 ї5 15
Фет; її щих мує би; тихо їла тиж бік (УТА: Сл дує т що Фмує ри; шк ко Кмлє бр б КжОо ПУБ ха У ЗшЕ ШІ ХхіФ ОшВЕ Хі Беж вхо в5Е
ЕН з та сію Еш бутлю лиже СИВУ ка. усу Сита тої сщре Жуки бичу СИРИ б ці жи ПЕ мем же А жши г сла Я ж СА ж УКХ ВО Сухі Бен ЛИ СК їй й
Ка ж Бе 2 жа бує ЇХ Ффуту бує біо ких т воду й жу ЖІ ах їх й
СУ хі тиж бьу КЖжО тМажЖ Впе бари хів два гра йхо дів пі ма ДЕВ 5 х Ге
Зидиї дло бл гу Жук ух ТК о о че ту шт дув похше сбеум сх чаї Аква Зах жЖиеотТох ва БОй ЛУ ЛЕВ жав ОоБАв УВУ дах тТук ОК щи М пе ди
Б І хО Мо
В-ш Хі Ул ж ших хм йшщує Ту тах Ям жу шавує 2 ня дах У деці Та фо ше ди ди шу «ФМ шу ТУЮ Ших ШЕ ЗА РИХ Аа ЖИХ пи «о щи
Іза БІ а
Жпе тих 5ів рЕЄ жфе Баб цію жів ТУХ їмо УКе ВЕК мів вк їі Їх зай КЕ У
МО м МАМ
Ук а пе Хии ММЕяю Тушк п жу жи Мія дтшКує ЗУ о су меж СТ Ми ує М я дрерх
Тімж ВЕ БА СТБЕ ОМ САМ СКЛ СсКтхК Нв КЕ ма ке Бе ЧК КОЖ АК 375 хи з
МА Мем Мила во АЕлх Тимі Ми щи дві А сире Стр о пруре сіла те Сх ппхух руд СЕК
Тс ЕМ їсих МЩЬ ЗШ МК Ав ши УМ Ам їж АК ля ХАІ ХИЖІ 475 тк чим я Кк КО петлю фе Кто стоки ФУТ Стах М стю ті - Жов то Мо г сі гИах Же сів їжа ща За тТеКОтТВІ Бе ре Атроцжим ем йіа яву лох НЕ Зх У
А ше МТУ аж зо с см Тих с - ум - г Кк Ж ж: уч епі Косухт ЖИ чи пі жЗю Хі др Ті Біб бе беж Аія іа Бім Беж Бім ХНе пебз хм 13 МО Мт ха тля лиж лим ЩІ: ККУ: А он ик ОК жо хом Ухжух
УА їж ЗшЖ дек дб Клео шфлв бах Оу Вів сем та жи типа їв,
Ал КО
Вч ШЕ
ЖЕКи х: ЕН «ШО 33 о порт и М ІА ел, ен НН
ЖАКА ХМ АМІВО Ме КеНІЕ атм тя «а Ох? о Шо В птах беж ау т чи Я ою ТІ. кг 1 г ТУТ пет чт.
Мет нм сад свй тУуХ ШУ Хі би Ків ліу ХО ва ее Фа рХє Вих ї 5 Ма М їде) Їїе СЮ бу ЯК о їжец о жто ак діє бтее фе жів тех же же ПЕ - ве - гм Й М гена а че у МІ У «Втім па
Є ух, пу уки «Вій ЕК
ЧА ОК
АКТУ Ов о Я
АДМ ОО ЖМЕНЮ СеКАВ «або ІВ жи по шля жи я ку мує Ж іщх тому хІій од (тку дУюЧА Ху кум Ті пк у щмеї зам о сІи бій ЖЖ ще Хіш ем Вів Ку КО дів іа Уа г) ЕВ 3 г хх Зк
Кз ЛЕ АК щем тому Ж и г дб и тизух їх ую Ж лих В ш п страхи ТВ - те тих з її буму ко ххх зи МУ сі бут фу их Му ших (меч ТКУ
ШНМ ЖЖ СУМВЕ зх ож шк Аа Би УщХ уІУгЕ БО БО ОУЗуЕ ки ХХ З тшеу ШемУх Мр ФЛ Ст смію сїл с» бе сх їі Щі пі й яв дур бю що сю ЖЕ ЖАХ ЗУ хо АДЖЕ ЗОМ МЕЖ СКМ ХУ ЗІЗ СМАК сус МИЛЕ СХИЛ АЖ зо С ДЕ я БУ ХЕ тла щі тлах ку сли фугу М зи ха тк лю Шу має сах т пах хлеб ша гав СтВЕ лу Ж ОТВУ щу У тм слу ЕКО ТтБЕ жу Ба сх БУ «іх г ще
ІНІ Тх С
З сік гу дХучиу бе схіх» щі сбфра їтіхе ФУ бі ух Ж ув В Хня
КАЖЕ Ам СА УС ММ са МАВ ОСКЕ САМ БЕ СЮ Су ХА КУ ХА ЕЕ
КБ ХВ БЕ
МАЖ ЖЖ Ку счцт її ск : ваза АХ оку Б ви ях я змо жк 0ОшЖУВМ мкА тей Слів сом «ВУЛ ВИ ілий смути я й СЯ
КВККТЬ А ем соту Кент о НА я кт що сто Лю Ах ун АНЯ Си сих и мтс був дез бе ЗВУ Зав За сш оЗув Ода ла ЖЕ пев о пає бе ди ї 5 її 15 їмих Ме ви дих дк Ї31 ух гук Ул Фен; бу дУнНуи КІ) їх Згщ Зк не дк тіФ« Бро ркБ о Фаід цем їіє ЗіУ вхо о ТВе Бе БЕЗ Бхо бва рха "ха тк За
КМ яку дя тири Ко ТУБч хо тру «жк ло ЯК св ООЗКжЖ впЕОЖДЕ ОА дае су
Зх «Бім С тя «ке хто их ММТМХ ення ж ана МАХИ
ТЕТ ке я Свв чуму шли ЕХО ЛІДЕЕ МЖК шелак Боян жу щи сих тих Ве Миг хе хат вет г то х ІЗ ек деки тк ШЕ Має й
Мат їв Ар кс ДЕ ДЕЙ дви дело му сум Ай ех пебошеє ех А ї щ У У 4. ж (ШЕ де ОХ їУгчез Щек р, Тут ТУхем; ЇХ божі Ж ву лук сім лісо. Уижтих Меусиу ру Мк млн ж жом кБжер Ржш УМО ЗМО ха УЖ БЕшІшВоуМХ гм мах ЖЕ ча БЕ ту ск Чи
То я У м КУТ ім ме жах бутху раю фія фУраи бла кує М гкіх р (К-Ї
ТЕЖ ОСА У діва Ту шіУу ТАЖ щіУ Те ТБ зу ЕКО ТЕ бу ВЕБ обл су р ЗУ
Жухєи ПФ иє се хх Жичжию Ки ЕХ а Мних сйонит ШК ки Жодутх оф их ЖАХ и Мюжтию Мету а КЕ
ВХ о бАк паю Б спо!лу їм Бе бхб ЇхКЖ бе) см су Ж Мас осхУМм їх іх
Зо ЗЕ БКУ ха (З їкни пе ТУ ІЗж хі Ул УЛ хи ли тю й т г ут жк Ми М
Ме (ж БЖ МК Зам ХЕ ді ша м ЖаА ОД С Хі су ХМ САЖА, я чх зх и
Ох Кх Нео Ми
ЇМ хе лм яхтах УТ Мі лм ут сту Пляж угни ТУ му; ПУ кю ссддних, путахояух слу вхо ще лу йо о ТВХ лу ще ос зиму садом су же м Ку
Же за зи ти пуж ТЛ пк ПТУ Тк ах МКрух КУТ Ва ик а шт прю г ю хг ем овшш спуу во Бій лу сі ТЕ Фу Аа стра у У КМ му їх му ад ап 3 ЕК зп5 ДЧХ Кк лах тут Тим; (рр їх їж Ж (їх Зк фу їі ли бух тих ух фу
Яке спе ес сі Сі БОС ожіФ слу Буш таж Сі дав б паж ДА ОХ т зл тк
МА вл сли ку не кн но п яж Клод лов ля отих ж дю Жужуу З ку хи щу па КУ и уж дає Зм їУМУ Аз пло БаЖаб бат леж мо лів Ж ВБла МИ ОКУ 133 ЕКУ ча уки; Щллю М уз ау я жі пляж жи пут г то ту 0 А
ЕКО ШІ шу шеЖ АВ ОшУУ АФ шАМ ЖАХУ М. МАТ зу АНА ДМА фо КАТ ї55 АЖ 155 ІБ я ях ТУ ж 0 ху т т ил ж іх о жу хх мо им жк ух р тує бл білу БхЗ ба о БМУ бЗе Бі З а За ЗУ Зі 1 У Би оВу
ХЕ та їл7я (Сл; фкту Ше шах й бю пух дл Мк схе дім См: лю др СИМ рах слу ККО БВЕ шШЬУ АЙ Тих ЗУ АІА тних ЗЖУу Аз ТвЕ пу Аз ТИ Оу дк те тих яМх АЩшля Кк й Ше Стос мо ФЖлю Мхиия промо ук С ше Ту ру Жкюуєиє сб р хх Ж и «жуки би Кт же о Ффик о тсЕж Беж рик Сам іє ТВЖ піхЖ Бхо ТВ пі За Бе те зам зац
АТО ж ший
У рю сиву: фі хж 11 ФМ фе фік фу Ну. у Світу СМКрУЄ сплю Дощ мтеу
Сау кхоО леж су блу бю Кб базу БеУ ТИХ о блу БЖ Жах бу І ОКИХ лій ско, тилу ках ЖАХ шо туби ни «чи У цю УЄаю Хаетх ЖШиюо Фу сддфю ЛИ ю 2 кю А до сю Мт ю Ал пу
МУ ЖЖ їж їхУую їхмУ шо БЕЖ їх м ех Тех яку кв ОБпХ схе АкВОТлХ хак склу «зд суд
ХВ ши ах ХМ пулу ж мМ іх Ал у мУмах Фдрлю сутуу мм фуфли ло. То лах ДЗ ма тку
Ж МН КМ Му КВ СКЦХ КМ УКХ КОХ УЖ ща Ж Х ЗМ АМС ОХ КУ тки щи тю «ЛАТ «М пОЖІУ
Шум ож іх дме ба (ж уза бе (їх ДТ 1 їжу Лоти ла у СУ шЕЖ УВЖ са БЖО ТЕ пе Шеж пи сут Дів М КАХ У див НАМ ОДУ МАВ се «уж и тп т Кая І
ХУ За ОХ
Є ж юю ин хх кю їн т Кл т сла чи а кл Ки ким я уМалЬ АМІМ длде МІДЬ УМКБу оТжЖР АЖ МУ ЖЕ ХМК ХМ МЖ) їхІДЬ ІЛ ХВ ХМІЛЬ пек ек сук
КУ ка ве пл Хі ід сіли лих щі, хе пух лм. вит т лу ке МУ: стю КІ
МА ДОМА ЗЛА Км до ЖОМУ ЖЖ ЩИХ аж Ма. ТИХ Ж сх ІХС Є
ЕІ дах її ті їі сх Ву утіх су Жук ух їх Зо мя хи КА Ли г ких
ХА паж ОА Зах лю щБІіЖ хі ОО Са ві Мх ді Віа сУве Су Мао чи сер чщ лихих ам А ЗАЗ зак пох Ух шк бере сх (лк ик Фо ет м тих ку феї би жук п пад зум Му БЖ мл ек ДМ сума бум аз її бу мл» боях пу хаЇ НЕ пед хи зх
БУ ка З її бла лм іх вурух 2315 Фі х фу Фх155 Щ жі їі її що шві 1 чу щі БІВ ТБВЖ лІіІУ де осла ШУ БО мій осла М іє І жі ЗВ Бо щу; - г пам ж
ОХ КХ М
Чех хо Мет дк пі сім хом жу Мбіт слу хежло сл Ул ах сг сло (у ж чих ех сю хм супХ сбпюш шт са буду сша б Бош дУш був ЇМ Ж їх: ті У ях ЖЕ БЕ в Ж ке щем Сн Ки уки Пан «Ли ких Кі ки них 31; тії то Її мес бі Ввбоїле Бім БжОо Тл о бім жо біз обі КжО б пе Бех І зу я ц «жу
ІМ Те ТО
Зк люруу Губи її тд гля ук Хвуї уч Й їбкту Зйтуї їМ Щі пу 2 пьшж о кжа піз ж дів об пу Мах КІ бі ЕХО Маі ці іє ЇВ ОщІЄЮ
За З З ям
Дж Пуіла (я Же 1 дю мл «17 ги Кік іт МЕТА ету Мало со Мід
ВЕ їхАЩ ЗНА М Жах ЛЕАТО ЗНМ ДІВ АД НКУ ОМ Зк А У яЕ жа МУ ФІЛЕ
БУ 35 дх ач мя Ви ще яму т них гля КУ пем бля ум ха й зх ТУ (Ач хни є х це шау кКжО ІК Юлу кЖш ож юмАУ Маш БАЛ У ха Ол у ах щі г
БД іа до зе с зо тих лу Йо балах А о у сіл І и ей доз им о схїх: біс її їх еВ яму Ср ау кКшк СИХ бу жало тет му ТАМ ЛУ Ку МЕЖ ХВАТ хх Ту зл 45 345 7 Км «У палкі ки Зоре я и буди (за ти ня прю и у охо ті ів щу шій ті слі вів Ки 5іу РХБ ші О1у вк ща сшре УІ ах зе и 5 з УК ря єн о ур га В ція Мктих Чі фа ух Мо: Уха жи у я, ль БУ АквосхМп їх ЖОЗАХІЮ лому ОїХМУ МтИ ХК о їхУу Кут МО яку КЖю бХВтК ик ати ТК, пи зо ІМ КО Зо у ин нон кишок шоку ни оси За ро и шо і хх ск жи
С моль аг САУ МК с ОА Ха СХ Є 4 ж МАВ ому су від оса са ка зщц за длуц .
ВЗ Зо СУ хг ОД граю фету рт (лу т стрибали тою сур сля еру хау (ЛлуУ Щ чаї шоу шлам шЖО ЛОЖКУ ЩА ВО У Як с у У Бтж тТвЕ ТКУ Ва. спр сп ІЙ
То МІХ жу тра си аж Мить фі о рух Ж що Чи тюки БИКА й прут Ан УМ тп бує дв ме їхмм ма бим їх юка би бю була хх КУ ЖМК МИХ КІ
Х їх Х в: Х Ь з кох ЯЗ пул
Ме М в зпих Моє (лу ЖЖ ММ (ту фр МУ (лю хр ПИ (Лу філ пбодах Лех стю т» тих сбуу УА ТИХ бу ВКМ ОТЕХ сю ма отак КУ бом ее пу Є цип зії 54 тк хів іх фу бу іх фрі лах іх им би КУТ ях уеу Дт ЛУ тах а кхта ав БаУЖ ХОЛ САУ БЮТЗу шлу ЖЖ щиЖ лу ЯМУ Му бу ФІ
Аг Оу КО ож
А Кво хх КИ
Міхал юю ли мих Лю и уже ЛК. Уж СбханНих КТ У я ная 1.
ТМ Зі Бо За Су ЗІЖ ВЗ о БЕО ОБУ БЕЖ ЖК Сіу відб ве ОБу іх щЕЗ вто 525 би зу хх бу Шк є ом «уж ПУТ юю ТО х тає швах мер аю Я зу ст жк
Тв ші Че ТБ ум Ма о тТве Уу щі ах щу див сю у мя їлх пове ша вч
ВО Бах 3 їх копи сію вх уух сум р хи у лу чай и ку ХХ му Ку щи а МИ я сг вта ти сі У АОС САМ Ва Кб ША МВ ОТНУ Ху хна іт ому
ІК зо а сил ТІ суд тих у ах да ге вки Ух Ст кі Ух Духу пф: З Ук
Штаб БУ Хоє БВ пли ма см Ж се Хі Зі хз ВУ зу БхУ зи ВУХ Ж ї3л я хи (що їАТ Ух ІІ дфуух МУ УТА 1 дю С ДУ чи ху бат Соя Лов шаг ау зам ша У КІ ША шУуу АФ ошАВ о шАУ ХП ТОЮ ху да ОСУпХ кещ чия Кук сл що 5 ай гук й лог плям чию і жи оку хр жі жхутиї вх ях Уж Жлауч Ж УТ
Му УМ АБ ЗУ Жтл? зхаЛТЬ їх АОМУК пп їж Бтш зіву вве ІФ ОВІХ ще «5 вв зни А мч суки жу Я пра Кия ж рее хких ж ту ах ул та жк Кк вхо); твк ЗК Б: БМ Бі її бал ці Бтеа біз бух Зак бій о3У тів вЕО ще та сах хх ів ую ба «рах рн па що Урим учи йуту (и її т туф и сід щу віз тех бе ру ТВх бі ЗВ озЕлц хім Куб біап бію їїе а ск ще тах іх кво в: и Умусу ФАТА й усі ХЛ (лу ту Мує г ж хо У. ту лу фе МУ (т сту ро бій сту Яке охівз 2БуУу ей тних сіу Шежк бій су Еже Тих буру шт дл: ах а Зах ТУ чефке у їх ж уж ТУХ бої то їх ік; бу У Тут тт г пн їі пі 0ІіМ їТіє іп Зум сша лі сіжЖ Бо тв Зі БЕКо ІБ І Бк зп Чі т шо
МУ то А ТЕЙ «УЮ Як бака (Ж г лж сшниух фіто тю Ку Б: бах б дх Фу 2 учжу їдЖї іа зУМу шина бе бу ЖІ ЗАМ оз уУ ЩА В із для ска осбзКж тр ЕІ
Я Уа й, шле х тек ти ди У т кі г туї ло пух туї жо КУТУ УТ пі діа тла сСуУ БО Ожиа СУ Бхо хв ошіУ ХіЄ шзв шу Ще оди шу "Кат 7а5 тку
Ко Її п хро лм лу АЛ до Мию МУ ку ще Уілку стою зичу М т кх Ст ж ма а А УЮ па СТИХ сли КО сг сни ЖИ ІМІХ їх у домі їх МЕ їхМЖ рому
Ух ЕЙ ТВ
ТУ КУМ хи І й их я Ж що йре кхухи За бр ки М и я их 3 ря
ОІе шУ Чи сад ші ХББСТКЕ ЗУ вав Кп сі вів сій У БА СТВ су я зей га ТВ Іо їх в пк мує и Тл ля ЖУБіІЄ га й ес и МОВ и Каси с Сх бі іє іл су Шо ше су ах поса су Аів Ку Беж в Су та то за БИ
Зреуж Мет мл хх ХЕ й їй хх Бу й й дл гл бла Жієїу бу бл хх реє тт сів одіт ад ол бу жвмеохув іхку лЛув жа бу жа ТвЕ м ЖЖ ді пла ях
Ж в шу по сухі До гурт хг хащі Фах гою Ті лах ут тру ФУР Фк М р
Мей У да мшаАДВржхМу Май мА ОБУ ДАВ ОсАД АЮ ЛВ ЗО Му АМВОГОЮ пер сто ХО рас ре БУК хх щі ту и як вд о Фу хіх ж т й жи щі ну У щу іа ів пу сві бій бі Бк і 03 уУ Хі Ба МУ Уві ім су поїп при Ва ма хИКМ вв
Жаалиу СМ й М о тпм с ую ау ех тр адм їх: ЩО що дян їх У шВтсо Тех обу іа бек оку хви Щек ЗУ АТ ОК пі діа жмх Зм КЕ
Аа Б БУВ муках лиже лубуту й и їх Суб 3 зи що ура ит ти Фк ую УК ку. хг хуй (пл ді Бе Тне сіУ РЕБб ТнЕ біу УЗ МК і и БЕ Тпх сіу У Тих сід пок пуд шов щук пев ца ще І шк ЕМ ЗІ БО укцчи. їз рху ФУТ ку Що Уж р їумано ся булу дих Тедує ТЗ Уют с3румо Уха кт жех Зі бу Кто Хівз бі Бк мк фу Бхо Те 03 Ко Бех 01У зЗЕВ шу? пк з-5 що З о ти КИ кю ЗА би КУБ х ве даю МутТла УТ ю рах смачних Фр ю жриуу МП Шо хх же дха Ху Же ГМЖ ду вк ех хау бу жжа шо ку БО тах ЗЗую реч УКЛ, т як мя й що Міичю Ух Кв щод, Тачки певних УЗ хуя, чиї их сх тухіч их ЖИ ке СІ
МВА ск Ж БІ СА Оу МАЛО ЗЗХИ АЖ М СХВИЛО ду В СКК Ху ІН
ТЛОХ чай чи роя ень С чо Ме Ки ее но о а НОЯ МС у Мн ух Р пу тУук вим УМ те бху Ада отих За АХвотех су Да флх МУ ММ ОСТх й З За
Ба Как ЗО ех бо тов Ж ка. Жуан ру т ху С фу ту аку хащі лі тержю літу пу їм бопосУ Бас Му ле шжЕм аю ХЕ жАДОЗАУ ЗАМ ОДЛ АХ зах ах сце тил за зай ух ЗВО пон МУХри фудноя Ку й т ж Км дух Кі гія ту т кл во ТЕ см ж вЖжО бій о жіУ Ті іп о суУ бро биьому іа пу ошлу Ува
ЗЕ вто та ср Кк суху ЕХ аж улуано ТУ дк їхати ло їі щи т У я Ля му ТЛ я тиж слі діа стаж пім Ада сії пу Кхо м іш хі аль З мо (хм за зя5 я стру йому хх ря фіднтх. МУ (Уву щу Фр ию їх жи Ж но ж Ух Іри ях клі сх сф др тів сі Еко ТЕ сіб ех Бій Су її Біб біш Бе сл Ху ту іщай їіивЕ диму дих жуххи ЕХ У ю сктрож ем хх тю зх стцум ух хе шу співа фах би тілу фгічх
Бус Зі ім їз біг: сім Аза бик біу Віз Тв оБію Аля сіл су чи прі чув
МАМ ї5Ух ке е перех С У жуки Ві га ух ху ил (1 сю (41 Кі дол їхучю пу што ій бі» їі а бі вхо ін їУ Фа ГІ бу Би ХМжЖ бу зи чт мк
ККУ Маю Ви пику Ж жи ТУ се туя с т межах ти хати и вх ті у 1
БтІсОс ЗМ щу бо бай обу із БІ пі БЕа са УМе МА ХХ МУ чик ува та кПа Щі055 по ук ух Ки
ЕС їхуЄ
МУ ау Ше «ж 0 тултх поеууцх
У ІХС АХХ ето где Зате ик Бокові В «вх ВесМдюм: алей срімеиха ет р «опи ВІ змо хм йому. Той бо їх Ми о сТоим о лий сеї» пох 144 дув Кома ві 5. мес ек йо Бук Нав Об Мак обу Бу їїЩо дек біб ба) їх Лід діда
З ц її же
Ж й ММ МІХ
ФУ Мох сі Дах ші Мох ти Хі ут Же жом бен жи СКЛ их ТИ
Вуз Аа ії ДО ШКО дев тещі Ба ошлу Бо жо Зсйпх йо» т їв
СУ -й а ям ха У
Те У бук ЇшХе.:х усе аа жи кб РІ ОХпУ па РЕ СУДИ Су «йїй Й «ЕМ БУ «Едие ШУ
Сокаль АХ НИЖНИК зва Меири у ви ЖК ВЕ чую. ОБиДжиь ох МІ БЛОКА ПЛАТИТИ
Мн тот
КД. ке рек схе ушу ож фі мо лу ду ток ХХ хо У бони ух ух тя стало ха
МецбоІми За мм БлЛф ша ЩЕ мух МУ Хіш Має с УА ПОМ СТ ад 1 У 16 їх зт Ах тон й рен ьу х: това их ТА ТЕ п. Тури ВИК ше лах Ук
Жів Ак ЕХ Аж да АБ Кей гу лу шко шо ем ОККО хо ше ТЕ «й тк, з и хол Бе желе ку пу их Уххет Бу лк аю ПУ М юне МІК їж Мод лику хх ялтиз тІна ССглХ тиж толк су Ж ОСС Х суму ли ССпаХ буму ОХ ССЛХ соку
КІ СУ 45 су хи КІ У дує, Ехим сті хх Ши прим о г ка оо ІНК с Лд Ужитиу Уа Лк Мжих ет ХЛ пу БЕОсохиК ау щешоумйх МУ ви Ол се шо СИК со у тд
ЗИ ЗЕ во с ЗИ дл їжею су бе о довх бом дозу сфрумо тк пре КРУК Як діду тре піж хо Бус Уві ці ЖевЕ бат мем дою пс їз гук ді АЖ дать ще за пе; 35
СЯ го 75 по жд т Фах ші см Фу М ті лану зу ша ммруУє алу ККУ хг дер оті ех Аа ЛЕ УулЛІ шЩеах Дів їіз Ашо піу Дкаорчах шо БИх чаї
Б Зо За то гуму треих пря Ку ЇМ Я кт сь Ж Ху Я Ех хе іх УЖ ЯК гу їмнзи ЖЖ Ж Кі МЕТ МВ 03 ХХ пк Ява вис М САУ аа маш УМХ Аа пе -к «по їпо вже хе
ХЖіуп сх рим ТТ) же соку то СТ ух ко ХА хи доши дош Сі ую пе рони мех пах ТБ АВ Хто ЛУ СМХхХ УА МаАА АЛ АЖ Му ОКО БЮ сг Аме
Ух 3 25 їх п їх су т пс бю Фев ру шо бле Зх тростім Уі шбуєу А дек Узі ів йБА сім дет ТОХ йБа ОТОЖ уза Уа Ів тиж лав ВКОо УФ під спа г Мих ЖИха, так ка гу лу йо би: одесі) дротах джу слх їМп о рус кла о їкю малою май о Бдто мо КО ХлК І Мемі док 345 ІВ ї55 кі суду кт Ж я пу ми ббчяю фивує КЕ пох І бука ЖК т тн Кт ПКУ
Тк УзМ дій вва ке ли шик ж емо Шах УМ Кіа Був Му ху
АХ то АТ тим доми МКУ ХА Ж ощд Мррую ск уУ. мл б Зі ІТ хх сИЖри да жу ХО мл тих Ан ж аб бе Тих ЖИх їх БО чі У Жах дшЕМЙ БУ Уж бу їн і85 Їх чаш тлі лх Ук се леж дує ЗУ шим о бама Кк чу ХК має дж сі хі че шАУ У ті Анд ожбевх бах ТО яв бно Ї3е гу сі тих да ша Буг
Я во ап
ІЧ ям А тех г сих шо нь вия ШЕ пу Уж в тус І ЩА вхо вний беж Зах Чек ові Ті Бе о сіу СУ Би Аню бе Зах ві Аїа те пи па ее 25 кача ср Ж отих уюмекі ЗУ їн тим Хвнх їУюоя їбеи. Їх Зх її 5у5мл о жерух ум б хзу
Тв іш гхо Ма сежЖ Бе ит гхо Бе ШІ Ууда пе Ува дви о шжеУ дя зп ра хх пкт чи па жа ХМ тт ох сто СТ р» Міхею ТІ ж Щет й Тр бух Лія кі лу А бум тка
ТАК бат Хені Щі ЖУх Мах чя 5дбЗ баз бек жо За баз в Ват ба за Зще ку
МАТ КУНВУ ТЕТ ях ту ке ех яку фо Спр Жим брму раує бую ух рум щу Жутчу уж те АзВр о сІу дело ТЗІ Ал таж мех зи пи бу жав шЕх Зал ку ВХ рози тт тих ка Уа АХ
Фа Туди ДЖ жк лляної ик її Щі б; бордуйт Й т ще Тл Ж ому хи
КЕ МА УЖ дю Оу Ма БиЖ БМ щОаЖ сХТЮй а Яимщь МАЕ ОСКУХ МВА
В КО веж хів ду УТ А ще ух ше тих Фо т тих шах їч бат фуру спріже й
ДА ЛЖМА АВ Мал жЖКО АБИ АБ АФ ОХ да АЖ АМІ їХКУ 2 Ля Мая «их де ик
Бе УОМІХ ам тире во - М бах при МЕ т со Ухжниу З оо го Ммреих Уж хе: тії їх пики
Тр УВА їм ЖК САКЕ жів Б мащзф Ж Жве ТвЕ ру рф спі ЗУ лі
Ко Ку за ий хату тує тує «Теуж УМ ую у ше ше ин у о ги фол сплиує ок ві вави ме Шех Ти за би дае ТЕЖ щі ех ех сві ДЕ БЕХ АВ
Хе ЯН Ба дет га ит АЖ тлу до пляж Мих дл даху Му УВЩ Стлом длод почує Мк
Ада УВІ Зх а жи А жу ЗЕ БІВ ФшВ ших ек па уИхХ Усе
Е дах Зк зай жа Уа жено ж їж жує хг дет дек яю СК ву МИ ях УТ жи ие
Ето» ах уж Бех М вже аже сему жа шу Мі дув т
Б Ех вен ШИ
ЗНИК
«ие ЗУ
ІК щих дк ДАН ІИАХ.
Ля» ож ие А яким 0 ЖМУЛА АН МАХНО сл ту об Хе пух дог я Коди ТокІх . о Мі Ох кожи. й Кіголо паж оди пи мес дер а бе ей ех Ве дів до їн Ам о йто Чіу шх Ті щу ї х що ях дує бує Х то Жуан дух ЛЛУХ ТУяеих Тука Уфчиь Лк фах бхучи. Зі р ж бут жИйх бе Бут Бус; МЕ хв Ба бле б Бие бха жд пуф о ї5 зо
ІМ Ла «Ем ВК нд У ЛМА хіидююкєх ОБ АТИЛ стр шити ми ри и вух «й Шасі іок «атипова «Ук ха, «дсує міт кУф ля У» Форму ліз де З. Жах жоту усе трат «яю миши Ко и ме: вив сій Бие їжа чвї кла йізвз Вій Ба до БкО сіб ще та су
У - щ 15
Кз КУ 12 М прин Теж. сЖоюші и Ужаєсих лиху пейзих кис, ку. тр их сук кити. тку. вич хи тому. жжше ших Бена БО Бут МаАдф Бже Без Клео біб ре те ТСТви обім вже ве -к Зк ке шо й Бе
Мира лук сум МУбає му рем. рах и у ЧЛ МУ. мм ТИКим бе бод МИ ек бвкж лах СТІК схуж луУшХ МИХ о буж Ба ТВХ беж пек ех БУ Бех о чЧлх ЗВУ зи ту Я ке пу и пу чн Сх ЩО оре НН Же ЩО Ух ня ЩО ред ЗОВ КО ьо Ши ІМмтук
Ж ох ху жив ож зм жо БІО БЖ ЗАЗ осомик дос І ЛЮ дту -к шк па ТА с сту гг и ШН ту ж ду ку гі ЕІ ха ух духа ую ток цех ави осі КОЖ Зх Аха Суд ЗМ де Таж сів шоу дБ АБДАОБНХ Ха пу, су т ча 73 Не; ва ух їзих фЗуаче (ЗЛ Аг жу дин Бизму; їх Щиду; й Тит ту Струч їуучз ПЕТ ху СИВУ? уде о кме їмає су і Удх іа да бах Зі бас ку схажх КхОа Одіж вл їх що п не нн в и ан в НН и НН НН рі Ул ану чаї Чаї ек бїна ше жна деу дви бе щеж їжа Дів Жіне Мет. Мало та 1 па 1 НЕ мМ ОКХ А
У зу СКУ ФУ жк пах Мі КТ Мох її хи Щщезує ЗМіхуз ТАЇюю ЩО ЖМІМІ ІМ: У іїіша Віз Уді сті супе дви діа меж Сім БВ Блек ва А МЕ РТМ чак а тчщ че МЕМ Кос
КС ЖК що Дажеу Мік Жажнеу ЗМ яю ІМ м мА Мн НЯ С МВ ем Сток Толя Я дів лів дЕМ МУ БТ АФ тТВх Ма Б ад БТО-аХ Аа же А МЕВХ АЮ м зах 7 ді
Аж че ло
Се. раження ок Ффли АННА че Хе СД теру ск З шу тйуєух туш» у Труб жу цеє кхо бі Сак Мет Зіш ес ЗАЗ ЖАХ Хі ДК Хан УВА БО МПуко ву 5 аЩщ ду ок їх їа5 КК МИУ їО
ФМ» ох «шкі ЗО
«зії ОХ
А АТАК елютлюх 0оМюдемі 1 а пі гумору іх «ДЖ» ЖеоЗАТф аю шедевр сврінів «аа й дою дух лах тури їм лою Хом Ме Що боще пит Лу їх жан. му ЇХ: ек о бдю хм ВМ іди; ек Зеє Хм БІВ ім) Ват Кхо Пух аж хе ЇУКУ х СЯ ЩЕ їх яццеич СИМ Хот Мкеих меичих Вжу КЛ 6 Міичих Же у Ме жк му нкчичи у род ВТ их ши СИХ Ха) Ж ШИ МУ бжм тла жЖума лх ума Іа ТК ху КЗ -п ук сут
У я :
ЕХ «З НК «А жа я дл: дш мат ТУХ
Ук щу
КАХ Іа ож но и в «их щас хів жеідайвлМи ит зкЕ «виш ХВ днк думих (ях Ук їл-хмх ме бум фе ЖК грим п дум но ім Ж прю мим. ЗЕ СК БФ їх Щшеат це ТБ іа Бе Аа БЖ сСжж ж Ха ау х х : тк х щу ІЗ ВО
Чит юю бі бужті Же Мак фі ррту Жихем ХЛ жим Щуєту Зіжах Лоу бю ТЕХ ж жлК їх Му кжЕ Зак ММЗ ЖЖ ЖАН ОМ Хе БЖ ЖІ ІЇхМм Кжа ЖЕ
За тлу зи дм КЛ пре 51 рух скул бу ми ЛІ хе Фу Укр (лізе бум бі їі фугу Має ТІ ху мал мяЖ СУМУ ам КЗЖ УЗЕЖ КАМ ЕКО УМХ «Ам ЖЖ АЖ КАМ КО СУХУ Кох їх Я КУ ее як в хну ба Мгтдх ТС лу бак юву Ями сх Че Па тах блуз Мк сйЛих Жму
ХНА РИХ ОсВА4Ю аЖИА СКТПХ Зх Ау АЖНХ СБПХ о сбхАт ших слі їв до ух зу БЕ кої жо щи
Мо Й Ух пає (бл ях даті кає с :
АК Аж плЕ ОК шоу :
Я : «ЕМО У : «Кл Дух :
ЛЬ КОМИ МК Н
«пи 0 БІЛИХ : шк ткдихй жі чай іме коми : шу МЕТ лав ме Іа НЕ Ко Й «ВіІНУє У : г такж їх ут Мову щеик ВХ Мох поки тих щпях ши дюмжу. М и :
МеЄб оБуш СІ ха дв дХо пи АХ гу фти вай о Как дай пе Ах що : 3 БУ Щи МУ :
Фе Шесі Хм їз М зм жу Має бичеу бйжиух буки Й бух Мах У ТМ : дек ЕЖУО ших Мах Ше У МОЗ щих бле без бе Мазі БЖ жде оту ВДЕ : те склі т Н
Ка я с Й сежіхи ЇХ жк Ж их пух !
ТЗЖ СЗу каф о Суу :
ОХ : «пійх ІК де шоу :
КЗ НИ СЯ :
ФМ БУЛО К : в е шині З тя чиї Кк ср худими пи Н (ушШКи ОМТТЬОМНІВ ХЕ ІМНІЗ КИ : оду За : у «хх Н
Хо бо Ці дос ох лим Ж Жодет Сім оди. Щодчм брюк лам ЖУхюиє доме У и Н
Мамо УЖЕ ЕМ, СКЖу ЗМК МІЛЕ ХЕМТЬ ЗМЖТЕ Ж Бук) ЗУщЛЬ Ж им Кл оо АФ Й
З щ я г че :
АХ їх Кк ККУ Н ик ХУюие оМблує шавт І 0у ШІ єю дви СКУ Кох р, о о нн НН Й пеЖО БИО ЖИМ ам МА КРАЮ ЖКО ТОЖ ЖІ БО жує є ЗУ ГБ слу да Н «уз че х; :
МИХ 53 :
Зучує ту СМ рю Тл су й зк фазою у ТМ тує їі т тих ле г хх пі ау фо шАХ БА БЖ Шу ВЕС СГТВЖ ААУ КО ЛА САМ ЖЕО БЖ ОА ї5 и 45 уч 1 тіл ур М тп Пих ст іУких фухе Щ й дузі 1 Мк
Бра с су про ка су КОе си СІ РКО МмеЄ пум см Ме у гу
ЩІ ту СУ щх Ко ме ста Яви хи ую Кк лу ли ля Лор Лк Ля пи мо й юю т Мо їй бкж жо бій піУу Майї бла Зі дія бій у Куб йо б БІ Ме же «ко чу ще їй ТЕ З пеня Ж пу лк перу КІ іх пт ж ТТ ФХРчк пе, їі хр Фіз тдври дес пут хх сІіуУу АХ ТВХ лу ло «Фа саду ж в у же Що Од Мейо де ху ж За 55
Пуер жуки їх іх хх що тлі лю Уют я ху и тм КЗ я ти
Бхша ЗІ Ол жа ОБУ іш ХВЄ ХУКУ вВхпоОмМУ ЗІУ Мах ЗІ ЗІУ їм я тац чав
ЗАКО Ма КАМ птлх рак ше СТОКгУ тік дру блуд тях тар Має фу До сах ут плоду Ло шим шьуУ бе пав о щау ЖОМУ ТОЖ жу мій твк ахмуУ АЛ СХ Ам ЛВ бНХ лак З7а зл: ве ХУ 155
Кхл ку сто у ху беххі ХЛ й я Ума тлу Ки пз су їж й хи уж иу ТЗ 11; ау ха ша пішм пе зай о Озаіж Бхх хіш бу ВашФфосхВх сбаЖ БХО Ози слу дух ук з ки їх В о
Шечих УТ лою лю Й ух ТД, хх пл у Ск ху тіучну ФУу Алд мує жиру пляж йжеа щас Таб ожімй шу Ма шал шу у я што дім Ва ТИХ шу М лен зе хх яке а кщ 14х Іо ІБ ї55 км гл ту (біс сх йо мЄрет ож СК вчу суки хи р с би ххх би іа Слюм ХІМ ХМ ІМ ХУ ХМ а Ж Ху у Ттхль ШО їхУ Ж кЕЩ СЕ чик чолЕт пр ц, ке Бе У ї ля чо пах дже сиру (їла Ал ср у (іду Хо би уйл лу уйлм сзаж СКух ли ує таж лу
Су Ашщи» Тих бу Зі ожих бом ах ожили МУ бат аж фі век ою ВХ
УиирУЄ ФДдіах лм смкри ж ему сиурує ху СТ мичу Сх а Я пляж лок я ек тих і да цю ба вЖа ЛИ бу ді тож су БЖ ве о шиУу ЗиУу БУ так жив гук їх ми Мих зуцу лік бееу тм гіч Кі ту г кі леж щу Ух тУуїхє гр, вхо СІіу дко ТВ спам й ТтВу лу ді Ти шу дк лу щем ша кое су "Куц ли кА «АЙ ІМ бр А щи спі 3 щі пк хх щі прю т бум би фі м су ек ЗУ Бех жк лі ж ха Жак Зі ів тах бу бі Тр піт МЕ Тв пуд -З зх туда па ВЕЖ МО ВЕЖ гу Фбеує хі сук ха тв т хв м (ік Феую Ме ФУРаХ Шен ПИ С хх слу ШЕ дів щу У Тім депо тТВЕ іу ЕХ ОТНХ сбфу БЕ Тих Ку я такт вчЯ ре ДОМ ЯСЛІХ хх ві хи А в я у жи Фоеука их яті хи її кі схе др кі гі хек тк біш ЖЖ пі іа бій ЗУ Бей пал опіш Хіт Біб лі Уві лій сіу Бха чЕши ЗЕ, р сум шуй Ку уча пз дено Мк жліля бать ФМРаю лу фщеєу Фа (сплю СТ у (пл жу Фета тех піде
Та сщу со тв шу КО а у же бів ос бе бай ум Ме ше сучує люк "чук
МК т сшМ ях іУ Бій бек дім Ха б ді йіч біз пф її міх йЙіш сді йійб пі шЕж КБищУМмК сум Ущх УМАЖ Кеш КА АХ шШЕМ СБ КІЛЬ шАМ ЗАКА МІДЛЯЬ КАУ
ДЕК тукуц М
КУ п У хи 1 є Ко фах Аїд он фуру дер й шукіх фррух 0 гелоюю С в
Хі ів ім їі Тих сіу Аза стТнЕ пу лЕЮДХ МЛ Сіу ВЕ пав сту іЖ тп Зо 15 ЗО гум лох дл ох парки опиту Су бура их Ям Мр. Ал вн гіч ак ка пуве сл шу дів ТЕ оду шко пап обу ТЗ отр су Або тих бу Аве я зд де з
ЗВ 33 за лю дмуж «А татко Мах ФІ юєш лю Хл пу: их форте сп уУЄ гу до прю (ТТ 4х
Зі ко їм ау Баш да см хшЖр же був ЕКО Дах БУ Аве шик бю заг чих Зк
Зк ее зи між піА ЕЙ ід ї315 іх ті мі щі З диво фіз шу ті тя пр аж сій сем ув кій мі ща си пу кб мес сі двролів сУ Ба ща КЕ 55 зу». степ Ти у я ж я дну ск ди то Ох Сіли лу Лу Ул ши ян
ХЛ ОЯхУЖ Мже їхм3 їзму ХЕ їх ЗУ Мем ба Бім пжш и Зм ха Ол та УТ з їх ехо ду дугу Вл гію АВ СТУ гу Шачу ОМ р ПЧ, реч гру тах по Уві ЕКО щу Жте йла шу Ада тах ук Мо пУБоїуж Же ма о е
Ух а ця що т й ха т ку ую зни Ж, тт хв ЯМА пани фу ВУ 213 4 и по
Хі БІО бОЖ Хіш Б СБіУ БЕЗ За Осо У ле ФУ Бкш ос іо бу Бк зго ях йти
ЕХ вах я их тУурУю ТЯ ох трах Фран Су тири Фряю тю пра жук іш сю Кк у плуг св ощі її сн бу їі піп обу бів опа біс іє Тр Буг Аза тик
БУ У ах тУраух Ж у сх лу тре схе дум фу ба сУня ст пе
СУ Бі см сі Віа ЖпжЖ пі ах бі ср» св с шіІУ ви сіє Ім ях хц дод А 3 40 45
З сих й хо дк ля ММ ую сжвених МЛК ЮУ тих Ул ит хю М'х Мр ий еМльфу Св у від Не сі Уж В ЗК о сжАУ жі бЗБ су ЩА с сзЕ КК са о сеж БИ жк й, ще о Як «Ба я я я г ни и ти як фуучнє бек КЗ пи мук блю йхо ім іє пд і іє хів Ж
Ті піУ Био Тв Сум ко мес см хо бат о шУЖ вх бі Бішж ті 5 485 чта тк асо є я ех і скдеиу пикун ТИХ Що я (У І гуртку ТлУХУ; ГУСТО пі лі бій бішж хо таж бішж вла Бій пІіжЖ Зах Зи бі вхо Ом ОСЬХ дк яка ав ех У 5 я пил ил шт та пою фер ср тлу ХЕЩЛ Спр сту Ав ПУ сита Му
Іїв іп ослушж Ше ма сем Б» Так о пту Ма так обслу Ар ту су Ж ам єм ід зи пах ЗУ п х х т тро вмч сах ТУ м сетучн ТУ цім плю бак оте пі вій ве пі МВА же ІМ тв Сі Аза таж СУ іш біу жмЕ хм бі Ба хмЖ бСіу Ума ММмЖО сІу цилц цлах БЦ
АС Зям ММ т пкт у шин шани пщо стідяи жий бечь Адо зла жу при МеРах ша ще бу Уа вк оку я) пек пау слу БО Аква баку ЖЕО срОах сяду
Б кх аа її Е; - Кт Шитсу фу ЇЇ те. сбУкую. ТА їх гЕУХ СбБую (лізу бус ЩШуує Зх се шко тТпу Лу Кжо БЕХ лІУу КО ТтВХ слу цем ожтмпе Фах еко шях шАм Ух п дс плит дхоц се пас пк: укл Бе
ВАМ ЗО ЗО У
З бек ЛК ск прю рі дідо спе ло и ую ті жу Ма її Доу
ВЕ БЕ ВК БЕ БИК сх. Ві Жак су Ма тих щу Му Мао шу Ве
Сн кот Кк
Ж й ее ; Кк. У бр ЗХ ли Меує Уж хи ха Нє хи кт Же хи Зі Же
Тв шу Бі Квт слу вет Бе бТу бва їж ЗУ вБіабсхкж сі УВУ КЕ пек пчй
ВО иа 5-х шо ОТ н « - ух ще з ек суди У ямі КУ ху пит т Яма рю АЛ о мк йбрах баці сл турку сбРцх сіл тії Об хх сл А Гах Му ІВ ОТИХ ху Ж МЖЕМА СНІЛХ їх їм Вста полх бу Ла хм уу св тає дах 5 Ся чт ит пік лугу. бі их тую, ре фу Те Їж жук» дк ЖК утіх ме сві ім біУу вве обі ІУ Бхо ТБ бі БЕез іп осі У п сі Рух нчщ -чв хека ки вкл пах тет сі тв вх хх Ж сх сі тя жк мія же уж фу: вух и піт пі хіє БІ ОбіУ Хі ТЕ бі ів Тв бі вЗи біль бу БЕХ БМ ке х по шк поту вих ЗО ВХ а
Ок е как ЕК Фах же (ТЛ ФУ ТУ лу и. ТП х ЗБ чи Ти пит х, пі іє бі ум бо іп су дев оі У КО ТОК бу БЖ БЖ у
УЯсечя шує Ка
А МО ва жим тля гру фу ж хіх перу її щі Тіщ 1 ті Ві и ші Аа теж ша сі» СУ а СУ Во си ОМ уУ тів 215 КУ Аїіа Тож шЕУ Аїд ча ках штам шах Туз. мі ті» о є Ж ЛЕ де чОч Ми ПЛ ст ФЛ Та С ще ЕЛ шк пика лих Боня
Жак Аквоіів уж Бк бло у Же од км шм пі об мі 0
ВУ щИй М серію дні МУ (тю Фрі іч стік буде сн ТИ жі трі ві хк ях пла кг су ЖЕ СБЛХО б БО АД жа БЕ СКПЖО САМ МА ШОЮ МАУ СУК шАМ О МУ ак: зийд вах щік ТО
ЯН пла УМ и лаку Ми Ми Оп у лях А ід о НИ ЗИ я ля хх жк їз хле сш МУ ЖЖ їхМм МЖУ ЇМ їхМмЖ МАХ см о їЇхиЖ Бе хм см о Бу
БИ т Ід тла туї тт хе ух сускузи хо субкули ЇХ ших ту г тку -т- їх М шАТ МАУ ЖКО Ух слу еЮОжаЕ шуу ЕКО Зп ФбаУ КО ша маУу КЕШ ша чи «мех «Куц й УТ/й 5 ТИ ті хіх супро фе ну т ва досту пах Ал пу і Шу прє
ТУ ши св пу БЕЖ СТИХ СУМУ АВ ОСЖИХ ївкМУ бл БИХх су еЖ їм ої
ТАЗ тах па ж бої «лі дюк Хету юю ст» дл пу боях Во на сяк шукаю Ов Як т
Ха бо їзьУ ж уйх пу пово окхах блОж йпхв о жих бу ФК оса ОБМУу Хв
ТАЛУ ЗВ та яті Безу Ччх м Еа АЛ ик о дід важ шу дід тв ші о Аїд пе
ЗА ошауУ ЖЖ Тих Божу Ал блпх МУ Аід ол МУ АІА СТИХ ду лав ощИих
КИ ТУ ЕО туї лож ув 2 т бекуж тУХ хх хау КУ дю рахує КУ Як слрухє ум щік Аза тв шум вла тТВж слу йаа тв слу Уві ств бук У Шех ТВ тд «в грддх «р га сщу ТЯ БАЧЯ си дл шо смію тим обухух Хі ХЛ що Жук сйбрмж Мур спаде Су хи дідо Ми жо годи
Так діа их Жук век Бне БЕЗ да дво їде ек оці ше дова жі Не пи щи пл що пі ча бжмх фжм (раю фури ЗМ ух Фу пит Ж ошиа фженох й Ден МЛ саму СТ
Уві ем о бнва сбіу СБУ ТУ Ай їз ко їн БЖ Аж йдоп Бій шт бів туп че ЩСРТх хх Мат Б рух зу хе жк сб худ дру туї, ТИ ії бі хх лу кум хуко о пхуяе аж вхо Уж ха ОУх ях шеЖ Ам Сам Б УлЕ Уа ЖІН Ву УЗА СТИХ й що пав джу У ПІ як Дим их Тихе СК йод Між скруту боту ТЗ су ткач до лм а«шп ода о сАУ ЕТ ОСС КУХ дав ме сту их дО ШІ хо ХА лОльОВ МЕ сих лих ж
ЗУ ож ше
У ді бом кА о ду сут Між Лоб хи Сяжуч КУ «Му ум тодух З дю жу мез са МА їж цВет вхщ Та стпт УдМ вав Сі шекх ко Пед о Вів ФУ пек се пт пу ще пе тв щи
БОжжоя Іс шо Зв тре лю и а оч ьо не о ни НН тп окавж дюд оди жо Лав Ме да ех ему щах тва ВЕБ Ам Тех Я яке БЖ Ва
-х : - з Кн я : з ще пи а З АН зав
Ха мих ве ло йла я слу хнає щі Хлш ма ім жи вед Клео лу пак Кк че шо зи шу тех Тем їв й У сти том их хи іч Піх УуУи їла я уза спрею тиж пес пен вів У Ва НЄ Бен їм ТКж Жвж паж рха З ж ВА СК их пе пе дез: жа чи зи кон ен о Я
ТО пох ло ММ НЕ СХ
Бе аа
Вій» ЯЗ «ак ЗЯ са ся люки чек Мао
Ко шоя іти го схуд «їм Бастізіцв усі дае «У т «вешмх хо
ХА І; се Слюсаю ту Фе пе іх пл їди Кс ТУгІх тт ге ох оо м р сві Ббпе вве обу вв бій Ті сій» Ба їі два сбіУЖ Кі їж 05 Аїд 1 х 10 У "Я ех. КК У их ив, СУути дж Мох чи ях Хюуиих ух тиха Ж уюих их, яю Му их,
Адт Мі йо Вт Бл Злть Кеш) Хе о їхмю Хо їх ке бух Буш ХО Бу хх -Е що
ЕК ил З тет им ле тож ле Кох
Ес БІ СУМЛЖ ДОМ ОБУ КП ОО САУ в «ій За уз ож 0 ЗщИа удо Я еру пли жчм м 0 ДОН кю 0 Уа В трах кое Я ик ки п ДК УКОЛИ кА п жа ве «щі шк Ме тр сах іх ли ух їхав ті дае сли у ба ПпУрИ ОВ я тех вва дво був дам ос да шум в Же в шум Б бах А Ам 1 ке тв 5 4 ї- ЕБУ Ко дев Що бохо боже тую ло ема тм хх шрифт Жуєюстя шує Ж Туя
Мих і пево бат бкоО два ої: іш ЗУ БЕ тої БЕо ЕФ Хі РЕ пк - зх пк хх їх й х стешнию тих Сх: Же Ухаєие рук би хи. Сі жУрЯе ик іч дж буденних поко ух
Вже жтя трх Кан Муз тих бр Кз так Бім їх Тих о е БЕ ТИЖ ху Іа "У ж лах
З У Я
Фе мухи чи фуюех раю фе ХЕЩО Су Ку же тк; ху хещ Має (Й ку єр ча Сг бо Боб ЧК У Уч ТИХ слу БЖО ЖЕ СсІУ УБІР ТК лу Вже пах пк у чі те г З щи я У ср фжу т Лу сф їх ус: са КУА ЛЕщо туч: СУХУ. Уч кує ххх ЩЕ стру, тк їж ах УМ ум КХОо ик Ім ча же щіш МО ха обІіМ а о Тпе
ЗЕ І 1х ха пе оюж дека МИХ кіз хащі Мр жахи сприя Мр ІЛ ку рю ШИ лях рити ЛУ, Кр хх са БИЛЄ ГП аю а СХ у Ж ЖЕО КПХ лу жо Ж КУ ши Мах зу туту титану КУ ди зум кі и й ФСК Сленг Туди ПИ Кк зухріче у тут
Уа М сл КО У Мау Ж о СюУЄ ау МвЕО ЖЕ ща У У і Те ху КЖХо та та ува
МО ММ о сіє пхІ и ха у ле ри СУ но ПУТ ФУїх умах ТУ іх Я и біхут Тощд стю Мк
Та хи б та са ШКО тв пу Щи ТЕ да шу сСув їши СУД АЮ
ХЕ пе ле
ТІВ їх їх итюти фту ХА жокжра сбрне пк в нн в о и а НН ово схе чув ві бе та Меп сп жех ас Бей само зл сі дов ба Си зи зв чай
М люд ки м хг ст ву Жора гг м СТУ АЛ ли Члаю шіну доашух ру бін Міжн Жоцу пеу чаї тів Без; о тех жів пів Ажротнх бто вшйо тв Бе) што так Б тп З
Я А АПУ МБО
ЕУих би бах ех Мох тах му рух хх дао ук ких слу хг рн хак
ЖТна іна беах Че ТВ Се Тих Жах АХ Ао дао ЕВ ве УВУ ТВ Ма 4 185 175 тя пу щу 7 пре: руці беру Тая у я ха о ет трі А ля ШИК чан ххх гас Оу жи УВК не Еш ОЗУБА ча дви Хо щас бдш дО ХК ОЗІХ ча ха за
БІ Го Нав 559 ММ ШЕ т кю Жди болт жи пеичию рат ле Спок рих МУ бо Том биу беру ММ ую
Уаї піс бе Бей ве што діє йо Жез фа тих ей дев ше ве Сствх з шк жав ча
АЖО я ки жеу ЗД ї3 ли Тому Т3Тах (ру ПЛ їх ох туф жі ою Уже; У ши домі У Хом двоМооУвА САУ МюЖшО ЮММЬ ОЛЕЖ УХКМО ІМ ВЕ Ох ХО БЖИ іш ХХ АЛ М чі «яд сік же ке А
Ж: джу т чу хз іч кре срок ла жрк тд та ДЗ што дши же
КИНЕ ЕТ та ДЕ ж ху М КИ жа ЗХ ХИМІА МЖИХ ХАТА МА ФЖІХ Збму хек Ул мя їх
МЕ ШО МАТ І сСеує Мк че зе тт ЗЕ Й дви дощ Ума ж тир ТІ Ж ожя жи тс дз
БВ: тІішж Кі ів дО Ре ет од са мам ХК оса фл баУ ха оОаАХх
М КЕ окр При Лк стоку фія Тих В дк ОМ МВ жу хещ ж іх їй хі їни СЛЕУ ТВХ ем КО тів Ани Бо тре тБЕ ТВО УВУ га ке вій ХЕ жо ша ЖІ шує ММ усе томи КлаМ Мне АЛ ЕІ йо У ММ их шк МУ Ми е Н шЖХ ЩИХ сжЖвВ був Бі ТБ дз ді вм фе отих БО її ща Мао : «айв ОЗ :
ААУ Мк: : ель ТЕ Н
ААУ «КЗ : ек ЖІЛОХ :
ШТ ож 0 ут тах ппомку т шко : ша 0 ЖУТД ОМ УКВ : дв я :
УЦИККХТІТХ Я : схе о даур (лах Ура То: саке би Щі Щі томі Щлу Ме й йде Хіщ іх :
Мак обБаю (м пл т: Ху БлЕ Бі ЗІ пен о бдий БтОа Оз Ве Хі ЇЙ Х :
Х Бе Мо М : тю СМ тов Жеучну ее Зло де ум ЛЕ б ЗМ шУу бе СПфрє жу Й ши СТБ УЖБА М ЖИ МшА їх ЖЖ ХІТ ель ДЖ МО СЖМХ їхУХ :
А хи пк : их пл ваз : «Ма БУ : «13» ЗИ :
ЕМ я а :
Дю пути Й ка пи. : печеня тім їз ее гм Й
КАН КМУ ОМАЛАЮ МУКАХ. Й «пи» 5 Я духи ще Їх ЩУКИх тару бу о Н МІішШб тхю» шум ІІ У Із ШуУх Ст хх :
Меї дви ОСІ ЖЗш Сем 68 Ва Аа Ів сем Аа ХО Му ЕХ ЛАФ Омуу : ї т 1 75 :
Чіесу З Жощії Жхжтжу Жуєту ЗІ От Жеету оче б ех Мо» Сдеєі МОУ їх ужї ПЦцуж :
Ж ГПХ о ХиНА ж ет) У: схАЩ ж БІО (Ор шу ж Мак СМ БЖ ДЕ : слу т Зх Н же че ве :
Ж ки пи хи Ущдо лифи. хни «Тими Мф Кук я сут М У жу Ки умз Урич У Й їм ЗМ ОМ ОК У ВІщ МУ и У МАК СЕІММ КА уЄ ШИВУ СМТАЮ ОА ДА СЮ З ау Н
Зк 35 45 :
пит СТ лу Мкрус СИ У «(М лу бшує МЛ о (лу шШигрує УМТрУЄ ЩАЯ ху Сум МТУ Фах фу
ЕКО ТЕХ сім шЕВХ ТИХ бу ББЖ СБИХ бу БшеЕ КПУ сам Щек ТПУ бу БК «ки ши шу пи пи пи міняє пл зу Фет СТКру мл я жу СМ слу Шик ср 1 як М «ра Фу дьрих ляє тиж щу Еко Ббпх о біУ ВК ТОХ ААУ ЕХ КН ау ВКОо Стаж лу КО ТОХ тк п вом пе
З То КУ дО тзха Уіукі Щохує Мом Му Ж о хз же у ух М ду ТИХ дя пу охумє бу ФУ Мох маш виФо ть Меп вк даш ую ЕЖо са ж хі ХМ о 158М СМ ХМК ВМТ й за ЗЕ пило ММ Мі Дона симеКєі Хе сшцеи Мч у лк Ук джту Ду ме Ще тож зЗкзотах тнУ вів Сук Майї Зак тн М ЗУ дев два вк без; Бі ня ча зх г м яко Іс - яки ЩУ
Ся І ух и 2 сзуах Лудчуу Леуч ІВлдни ТУ АН Мис ун
Шиеж пІж пів тах сто са дви СіУу Бех РюО о твЕ БО бБу Тв тв У -етц як зак
МА що осно со их пд ЖИчух Зло Хату біжу сук сх вію Код жлн шо уж п ин ех аз ех БІБ о Зек сш Бжо» Зак Бей ліва тля Ммеб є вБшОа Бен обпав яд пк хо
А дежту АХ зд ку пу міх гасу ку пух УЮ. умру З ха дУумох ту ч. К ччеь хів Тв вв діж шву ШЕУ й Ре тис від сВвМ вне реа; дів вах зх ка зкц то
У Ол МУУ МУ. даже Мих зичу и том А мим зж млн АС. ду Тоді о Хощуи спа Му мое дви іш БО У ЖК Уві твх МаЗ Ех Айва ех ей бен дв пех у чих Ка а
АБУ ККУ Ух
Тл ки стиха МУую Щодо бе ших тру Ж що вн т ша ДЕ щохуї ехо ух
Зіж бле Мей Бі бе ЧЗві ЖвЕ Ха ТВЖЕЖ хін да Биб був БЖ ко ху хо
«пам 3 япряяу В ж дум ях суку ут пУМУ ве МАУ кру хрдтмі З ріж зжектих і их
АД ОЮМ 0 ЖМИХЛО АЮ пУусзикх ха» 35 шу Жажущо мих тожикх бод СГ дз МИ хю ЖМіжу ЧЛ ЖІ смезьу іч Торі Хе шт СТ
Ме: дао Зежх був зв зів лу Вт ВХ о ВНе Кто вто Ха ЕКО ех дв 2 щ ТЕ 15 х й К. й же ха пу. У себфужн т дви ог вКО УЖ ОКУ а
У
ТМ За еп «Ак 335
ШК. ши ячхуДт ЛИХ
Шейк ль Жду й Стаж імлі іш «ша е Бешимив пусти «ацИию З че дю отож сом СТ ду МИТ ху Мих во Ши Чину томат Же ша Тих
Мех Во Бек ув ЕВ фіз лу Вже ББЖ бе жУєб Ж Хшяд ЖК ех Ж
КУ л БУ Ал фехую дУмуя. джу Ту: Куй дхщл обирає тлом; пуху ху іти ох стр жу КТ ж два Ева хо тає біу Зах хи С1Уу Зі би Згу бів ЖЖ ЗУ ол сте ло ТБ о пер Жив ляє Кт уєЄ подо ме ТУТ хе рух Має СУТзе М кре Ух ТУТ.У УМ: ТУЇ су да КОХ о сфлАУ Дав ОКХ (оу чо КБУ шоу мов жВМ жлу шхмщ жи шу
Зк Не к а 5 у; лу УТ. хо пирію СУТ Щ-х тю и М лит Ук и що лися аДН ан бач ТИЖ зу Алла ХА Бі Б жХАЖ ЗІЖ іш жнЕ БУ Бі хМлЖ Сім Б
З че хв а я Фо ліка Й кю Ох слжюих Ж ки спе Ж щх тиф Ух ох хх сон о нка ню
ЕКО а ХК аж маш АТО ОЛЮ Бад хв Зі м Зі БІ 4 жо БЕ
У їх ЕКО, сеткх фот сн т хх до спр сі ша ом би дл цю ідх жах пою ут ах їзЕшосМх х вх о Ж МА МИХ бхКу їх сих Му МЕ ЄМ лхКу хх МАО СДМХ су зо 25 хї тм ТУ Урі см гу М Му туту Ж перу ту лу ну сти Ве
Абе Тв о Фім сл Тих слу вів отих сі уві Тахо сббУу Са Тих су іа зп ик за о ДМ ке точ тлі г; Мих й що щі ух ех Мф гі ж с пам жк дв ую ас обжж Ом ож обі Ба Вів УЖ ЗМ осв Є ДЕ СКИЕ пев «ах ЖИХ 5 З тех яті
ЛЯ М Ол так ший Ма рах ФУТ Ям туру лою дян раю Фрі йМмає гру дл ММ сЕрху пі што тм ру св лм Му Ді тах су СО ОТИХ чіу АХ ЗЛЕ у 135 35 їжи хо бі ж Ух Ж ри ух ху що сан тк жи хр утіх дув Ах ххх що
Ма ХК бі Лів Кр су іа ЗИ АЖ Ті Так осі УА віз сЕЖж Від
МУ М МУ МИ
"мн ни Ж МУКУ и хі А теж (У Чу Фу ет х МИТІ ІТ Ху Муя тих шу Фа Тих У Аза діа шу 3 Тих баж же п ХУ ВАВ ОБОХ 185 в ля 185 ї75 хи пек ам мож ту жах мо оту Фр жо прю Фжуч пл; ср УЖ СЕУ Мк ЯЖУСх бум А Я БЕ ех ж Мпа лк ПпЕЖ щів льх су Ж МІВ чих їх жа Слх зику зе «й дк їй їхх МО та бра вутхю М ру Му й не ФУ ую УТ ую САС С схо Ля АТ, Тк т ку СУ
ЗВ шви ші ж АХА ІТПХ ААУ ШшШАЦОЧИХ їлху ЛАВ о йлоскау Ав оКпХ зу БМ «пк их «Ак
Ж МИ Ох б хі к хм ху й ж ура СУФу ср У й аю яю дл шо и тах о сроу ча ТвЕ бу АМаА СТеЕ у бі тн хі АкВОАЇВ ОМ Аза рвх сія «тк сет
Ки и ЗЛЕ жк М -щ жду кру й хи З пу: 23 жд уррує г лих лов жу У; 3 крім бі тіж ТЕ біу іа тв сім Мі ТЕ зі Уві із сфу іа Тих сту па за прє Заг ха кам дода же
З Кку пак її хм и сбіхшж ух ри учи г а стен хо у их яю су Мем Би тів Твпх літ Бк Тих пі їі хо бБуУ ТИЖ їзід Бхо тТВж о тТвЕ Бу Пец ух зи чек 253 й Кен суух СУ фних МсИчУ білим шах фуктюю «Ех пилу тла банею СТ дк МА УВУ дже ше аеро гУх Те рах Бі ек Ав ос мм Шув їде: ЩА Тек пх Аж дід "кову кг ти ка хи шт мм кт и їх мує її яу Ме мя У Ж 1 тим дірку ЇМ, сухе КЛІ ав обі хі діва шай о тшЕ «САУ Уве ТВ ХО ТіФ Сем Бех ЕМО меж Ди чех ух зац 7 ВИ 85 жк «Жажуме: ЛІ су еко Мои жом ках УТ доти ТЗ ях ук жом ке б Лях би чаї Бах ЖУК Хо Аж Млма Ка є щи суму Ха сна М КЕ ЗО ЕКО па ху З яки «бу КІ уд буди Мі та тую кун То в : Ме; тзух ре тую Пра Уа Тмх да спін баз БПем отв Сем цюм вер о ввр січ Ко
ТЕ пра ТК Іх ПИ зо Та 15 Щщш
По и а и НК А в НН В о НН
Еко Бех сСупослхюу ех ех БА бів хі слюла тва АФ дає Ба лей зулк ут че
ЗЕ З ЗЕ
«бій» ЗЕ сія» За шт т жЖКАОММ «о ето ожина сих Мп я, плн талих Мих узи мих
У 0ОБВшМИ А ММ СОУ ХА дл лет, ей Ух «мам Ук дз яло кку Фу 1. шов У ж ях листу мує ОБх ух Ух ср тих ее
Ме Хіж ОїУ Бк бій дви Ті Су БкоОо ТВ рве бкО їз Бер о Бже МО х ве 10 лу чок сх СР ре хи спря ср хх я Кук ДА КК М САУ
З о
Уа ть ві Ха 5 я У жй
ЖАХ
ФК плит «кі тА шт «щі Кіті Кз і тару ти мови 0 ЖИЛА СИХ АЛІ хати ЗВ нм С ФУ М ку жо, Тл дою СКЛ ру «ЛЯХ о буєуу мужа бух бУючм СКЛ оку Хо щі бек ТУЖ
Мас жі Зау вто ба ем яю» Бу хе ле жде хо дів Бе о бхо ва ль х М ЗЕ: яко -. их іх я ко Лек ж ке їКріІ бум т лох пери Кк тую хе йдки У що ря чи
Хі тТтЕ Ха вКО ТБ у ШО ТВО шу вкО оте аку хі тв су ж дух
І ТІК КЖ
Я хо Зх піфдаю ФУ ух Ци Укус. рум я С у спам сх них, рр ФЛ СВ и Трах три ХЕ Мо ТИХ бу Ве их Ух зе тТви бі ее бек оЄуж хз. те «уд Ки Я
Б Бона км Ві ву ті муху су фія Фк ЕЕ Крюк Суду пух ми У 1ту пу шк щі вів Тв щіУу Бій ТОК сі пеЖ ЗУЄ Му па пе шіу Аза тмх шу пох кх пт що А ТУ Ко бузїло прюих зх Фу три ТЗ дя Афін й ка кит т що М тла Три У ще
Зін тв слу Беж Хома Хі ХВ ЗіЖ вхо їі Зі тіж Те Зі віх
Ук а ПЕ а рак хліб лшу бі тм жом фу й ху кл их їв ЗУ Біб ле бу хз бів Зі Хе ТВ бі Бі Ж бі 0 ОБИАх му ЗО Б
Фр юю оди з Ак ТК сет сю ММ да ТЕ тр Ля Жахи п Ах бду щжкоОо тих о же Тк обу пшЖх от бі т.е тих бу Хо хх ху зт зх зій ке ас 115
ЧІ крає жи тод хни шви лі 3я кн їі ки Ті зу То мує гли Те
Ві Кп Оу евро баж су Би ба су БкОа хів су Ті то су БК дю ла ТТ тії Щі МеИхи січ жк Ту Те. У бЯх ЕХ мосту ств и Мети х ТТ юю тих сш пе тих му жжжо тих ж Май жи їх із чик ую мо АК хх жк ТАТ ке. А А пізосу ик Мощі ре Тррчх СР о сих у Му шу тях Ти Ст тя ри У іт іУ Мі іУ Ба іє ТБ о ТВЖ тв Ав їй; Бей ТУухХ тТжЕЖ МЕ Біда ї48 55 МУ ТБ ія щу Млхи (3: Тлкщо Блщ: Ста чук Ме ща ее щу бах т лУмт лат бі. МККИ ХУ КІЛЬ пух й АОМБО МУК ОХ ЛИ ФАХ Мк МА; ом ЛО КХХщ алі 128 ї7о ї78 так Фі Тв ЄМ дом Ті бТам; СЮ бро бюу ФМ; сдлб дех бом Го де
ТЕЖ слу МЗЖ ГПУ лм КАФ ЧЕ жу КО Еш Ам У Ж ЖК ДА ДК хд тк ад ха 155 ко тона бич г дес «іх Кр Уа с ер є жук мі ик З М щу
Мн) Же с ЕЕ ж ма Мена МЕ ТК БОКУ МІ ЛИЖ с тк ек зщи да сах во и «ух піхоту кє Мамі бе томі: Мод Щозжу сббхян рт хи: Ух їй уч їж би тик с Бут Бей Мих Бем Бе дв Тв СЮ) Бо БхО дек си Оу пет з-за лак ек м ЖАХ «и зак Сг а Там; Я хан ру ж щу дл
Щек Тіз бтТе тс; б Кве Ті» зів пт Да зл В «шк КЕ. ау» 37 іх У «Юм Ох
Коен пи
ЖИ цик пт з Менкуящ Уроі мури ян ДМЕ ЮЧНа ТІМ АВМ КТ пора
УСИНеся «ВЕУ» пюаймао «дв п «ап ОЇ оку ию ог я п зезипюзКог сила фло КО «М 0 38 «йМме ай як пли коди 0 АМЕХ «ДОК МЕТУ ЗВ ПОЛІ Кх ши
КчЬЯ тести «иа Праннее ех У
ХХ Б тс темам пес що. 4
БАЛКОНІВ МИХ КК ше «Зійх У кл з ва а с хомню ОДМИХ
ТУ Ух, ХМ итя С юті жи кт и МІХ що Утаня рел ЛАЗ ЦИХ птугхг «Ах «аа прайшер «по» 35 зчатесвхча засошесани о рн
Ки аль «МУ и
ШТ ух п
АХ МУ. «Кз КК «ВІ Ух ШрмучевА ПеКЗлЯ ДОА Кору
У Д ех «й пПюраммею отити Ба
Фах їй : ; ; ча си ки кам кад кнацеи скат хе
ФАНТОМ ХМХ КО БЖ и ДЛ хе А КМ А, джтря "т
ХА дод тя Тх ПМ «КК МИХ
КД шу ІМ АКА КИТЕ
ХЕ» «ка» праймаю «дод» 41
ЕІ СОКІВ хх
Та тя Рш сах Я кокон ге «их п бу ую Уж
АДМ ща
ШТ Зими єкти нти юю Я п -
АЙ НРЖ ЧЕНІ ТМ ДІТИ еру
Ех ле н г ях «ВЗ» Прайжер
КО У.
АЛЕ ЦМ ря
Чавес косо сао вен ку їх дл - в ме пд
Том т
КА й ро ел
Фа ШАМИЖ хх. же ім бе хат ЖІ дЯ ЛО Сех кН жк лих Мк дах дама СМСК У СД стук, Же для Ле». чи хх ху жи хх
Мес Бех Ап оАші! АБО жів Его йеї што За Ве Ма АБ дви бе Ав 1 й 18 3 ту хз Мам Ж кх панич тя Ли Уж ЛУдеи тоСх Тухеу; ТУхєт Ломіі лах т М
ЕХО дім ем їз Бі вВЖО и Ме БжО ха Хіш БЖ БЕК З ЖК МеВ кутя Що Ух «м п вже
БЕЖ БИК бу
МУ нт уж й «шАМИЖ ОО щУ ст ситу ху дих дик кими КЕН шк. дусі 1 ік чу ум ший Ват маш спи «хе ЧА жкх сдшиУ йдем дети де ке ту ке и туї в сі Уже йогу а НВ КАЯНЯ
Ме Бех дшо баб соми дос бо» Б5Бшх ЕКО БМ де бе йшов дав БІ ща ї х 10 15 тують сИЛаВ Жар тлу ау пусту СРИфеує іч у3 Жіятих жу Ле уУ бжтух бічну бу: МК ч -
ШК ЄВ о МеЕНЬ дом ХУ ВЖЕ СКК ша ЖАХ Ж док М ДИ АН КК хо що ло оо Ше ема МТ ко дух бує Шут хЄ Лю маю УТ ях Ат ух Те пе вка стик пл Ве тп ЩІ у шшЖоУВх СУ вад ТЕ щАУ ААВОСТЛХ ФА КИ 5 5 сту Ух Са каже ки їУшуу бАрииє ту ху Бл тями хуя пору ях змо гир тре ші кла ТВЕ СіЖ РЖО Тв о ОЛу Бій тТВж бІУ БО Те ЗіУ Б отТве щл цк, дії пи о Кт пе х ло сиру т еко ом тт до и тую Жпету СИМ ає сія КТ СТЬ я бЗтУ діа тку щіу ех жнЕ Бі дія ТЕ щі БЖжОе твЕ Му АЖА ТНХ слу тк -й сук ст
І ТО ре: ме
Мура. УМА дл дуя пу ха п сх уче ши і ин ЖК Ує у Зк, Ж му р
ТВ Бо беї Ши ВІ ку йіа шеяє Хьш бві УВУ БЕ Айва хо см СХ сови сг ще
МІ ща пе їж дує сАаудь ходу свято сречиу СТ уу ЛК ЩО Стрию о АЛ міру ЗИ. бору их у аз до дЕбй їм Від вух пі захід Ша ЖК дім ша Майо Еах Ті Ех
Бе щи. хг
А ПАМ чу тях у «ЕЦСК о жхуручє уро п жи то вич Хе ТУ у: ЕН жа ву ту Ж нг пе вує ча ве Баш АБИ ОЇ У Ка ш ВВЕ пе Бест їз1ш З2ЮК З1ш бу па ї150 128 птю щі ббхжю пИчеу ию Лрах раю А хащі мех Шу Дату люк пах АЛ міч АЕЛОТУХ Ше жі Гі ру Ада се МЕеє ту Жиж лев ЕВ ші віх
ТЗ 1535 ех пики и ї8щ1 дл дві Ах АЖ лях ие дм 1 Ку ему хлібу ку сбіш Бу Мад Аа що е ща ую Блю ЗЕМ похж же КЕ Уа КЕ Бех ак чи доця: 4 А
МУ 5 МУ що
Ток до паж ло Аж У: УЛ луУ Мч дви МУ ФІ ем т тУ Фу хЕщ хг ких ї«і Вп У За ДЕ ОУх сш ЧЕ шко Тахо ба тм ав УЮ У СВ яке дме ДІЯ
Ксноя ша. Ж
Урич кл Ши Фбузух хх ЕТ Я ТІ Їх А т їм ура Жах Мід т слу
Бе у ІМ мед ау АХА БО пад МАУ СУДЖ СКМ КАФ АХ ож ЗУ я сук й п 180 155 ЛО щедат жи спід оду; Тих сбіфую Сб си Тл що фі хи пк й що спе дл ка о
Зап оХаФс сел зщю МРШ ЖК жо Ма й Ом їху З ХК сі КН ЩЕ ах шо БЕН ско жим ту М дл лав дачу То уро фа ИлІх дяичу Ті щу шеЖ БЗеХ з ла Аля а АЖеа МЕНА леж Є ре шила де 4 ов омих шо МЕ ший «ЕТО» 45 шт й хААВО ВА шк ту, пе
М ени пуогумих шлю тудазі о схе во МОЛОДИХ че Кк кВА Я
Тих ХУїут. «уж ля То Уж бек ТУ Докія: СТ З шУ ТУхтит бух Щоху, МЕУЕ Ту шиМТ МОЇМ а пут УББ О Бш Буш б мимо У ГЕО у ФМ де Бе т В З че
ХМ З А М вух В джу З тлу Вк биг пуб от Мах Фу Б йких Фугу Шк;
ЄвЕш дів кКОо дій іти ввов о вхо дни Пед Ка щмау ЖКО То гір» РКО БКО 28 ЗУ КІ: "і уз жеу ух ХМ Пк Ха Мбктх екУ ЕЛ хо
Ж» Вжє хею Бт ах Хе: Бта их схру ук хх 35 З
УК Се «шій ВЕ «ил З ше БМК ср я аа із ЄДИ иа» Ве цт саке «апа В
Сотвой ЖІ: бу ЖУК ІМ Же тот ьо НА йаху КК тло и ТУК йєх ЖИТ Жах
Мет Жан ех ЖЕ) ув Кв де ж во їі фа БЮ АЩОо ДЕМО ще Мер хі г зв 5
КУ тк їх Ал
Сех 3 Тумч. ДЮ Тем ин сбужчих дя ток Ст УТ хи тех Спуує ска ке Дах пет вій руб ВІ Бео» вав Бо Ав Ба ті ПУ БК о щтВЖж Блае Бре Вго зв Зк За ох т. -Ж1х
ПИ их еизих хх ки Таз Хочу, лит УМ Ух Ся, «ск ТМ Ех жаще кри Я Же: її йВкеа дек Бе тик їн; БУЗ тТаКобМУ Зак отвк обу бжо ща обу БЕЗ 35 КУ 5 «тру у дак ти Кі Мн. бю їі к пух р на а Ше ума тих око пи ос У ВЕ ОТЖЕ Ку БІ УВК слу тТбКа КВжЖ Аа ТБЖ АФ ОМА МАФОАЖ па За ОЗ
У Доу Мун Щоки До еВ си ЛЕМ Ан тях. уж и ки нях ДК,
ХА ОЄМАМІ МЖК Маю Мт ж бод см ал Фі сік ху МВ СО ХМ УКХ п -в «т ах й т г що таб сууює ГУЗ ФУмНих ЖІ ух Я є М Ух М дю їм й ре М СК т лів меж сбіш БЕПе дід ШежЖ ній Вів и Ала Се дю тах ід А Ка зи шк
Уллояж сб мук Мем ЗХ фо Св що морю ме дя ії жду Со си мо а гро Мецомо зх ях пі піт Аве ув йех Мів Айвобаа обі іп ВВ Аза о твк Ак лек Му ТЕХ 100 ак 18 хи весля яко ла и не нь І КИ Но іч и ЛИ ТТ ом си сх ЖИ, їх «жилих дів пах ів Азвз оба муж Біле ол» ТВХх та йо век сім віра Іа ех ц чи прищ
МАЛУ ки Ко жах ТИ. гу лк Жогу (л МИ пищах Ах док дл Має бух ху Мт, Мч ух
Мів пах біз бі ер обію ЖБХ жди дів АшЕЖ Аз Аши бівз Вжех о НЕвоих ах схе подих їх 125 иаИ
Ух ля. ую Ко лугу бХомяе 1 хі ул її лем Що лУ.Єу (11 мух ці ж т бій: су хі ддл оте ХіФ Уві АБ Уві Бе йія хо пі Шеж ніш оті 4 153 чаш їкл ї45 15 Зх М те бух фрожже щехМ я» СІМ схо фот ою СМ Тим Ли геть ЯМ балу ДТ
Меп обі Був бат ом Так чих Бк бак дес ле пек що Нав о бсез ІВ ї155 ІТ 175 пає жо бони са їх І ож г. о тож Ух Тк с ух рен Інше То ІД ох вза Чі їши;и йід Ма» су бра Шех БМ Ав Жжеж Ал ве А І пух тра "Кк Зх зд Вал ту ти тля сте, Толі бе Ху ж. о БК хх Ко ян ошья Юа иЯ поз щу мя жи ім У М ЖУК оба бю ба Маг бах дов соФЕ хха пла ія ка БЕХЦУ ХУ и пу Уж їх У1 їдою. Мих 1 ни утіх КУ міх ОМ тимх Хіти су діва Ар Тух ій сл Ме Бе із ТУ іє Зв о шАУ дви сей Ще до пп Кая тугу
М хе ем
Ул гл ку смужує лиху УТ жо схе сл кю ситі Ум лу дже тля й до й
УА ЖЖ СКУ КО о ЮК Де УЖ АХ сх МЛуТ ДОЗ АЖ МУК РА АЖ
Я КН ХУ Ка з живе Жовч Жрауч се учи жук яке луг удо ух Мод тя лужач Млщ хе ла пот Ав леву Шу ЩА їла Си ува Мах о свж бів МК хо ке Ме -яц зи й лид ке - сх сх І -- їх Ме:
ті Ал пе під слюда това Дожчею бачу щі Ману Ті Ух хг фетр й
Ка» від ЯН Аза жНх АВ ожец А КО КИ МО ма ХМ ЖІа ше АиЩО АВ ска де Хе ше ших шли їхі ху ті шхуч ху. «учи Я ях гл «щі ху яз дугу Тх КАК сіра тсЕо щу Арт що ТЕХ КА о шУш Ух УвО УВІ КО Ам ств Муш ож тд ди «СЕ ов ис - по хо мим 3 г
Меч Бі Мах ба Ол ли «ЯМ ве де
МАЮ щі «пі «піїх 43 ря БІ пе ех БУЛИДК нт: А Ку. же живем т. «самі Маска фця Фен «абз 47 чек, м ЕК НН ШК пи СД Хек и. Же КИ Шик дак домжут Ме мес тих джзб ЗВ лкЮ МУ же Ахо ЗЕЧ о Зшх ле І Бек пе Аж АЮ х « ях з 4 Ки 12 Я рен Шу дж дме жи Ах Ж шу тих хр г я Ллям ти жк ДМ «ї аха Беж вва пек БхО Буш Хі пед ЖеЖ са Кіа жа Ку ех Бго Абе и я й проку хр Ілюк ферум ЗИ ЖК вано ех мне у ких те СМР. Томії Шу МИ, їжі У шоку БЖ ЛК Іва БЕЖ Вже Же Бе ек Бе ах їжі ша ЖЕ дл ІВ г ве ж т їІУ
ТУлОобу С жд
Ко жья «иа С: чик 0 ЛИК кю ух. ЕД М дяк уже квухия хека байта сюхкак «апа» Ах пеню сміх» Дагте отож. Кожух ох бУїуу щохях щит болти яки С доки дер батеу дот мекв жили Зк с Зам зу Рдж о баб Бу Заст БЖ ХлЛа бат хе би дю ї З щі ПТ сек пу дамо юки ги пише Хе Мр. СК полі ру Ж жрю Еих, ря
ЕФ ща ЖД Оехкх жа мук лу му хшх тах Ті їжею Ті ех же АЖ
М 5 Б
Н ІА Жук Ох, г; т. ХХ Тука, тот Ус ут кт Смачні СЕ Аг УК тих УТ» тат хр и мех МВА Ім вхо ХВ БЕ БхОо Бхо іє БЕЗ пет ББеостве физи БЕЗ СНУ
Зх Б Б му ті пек хі Мктих Мем храм щобуєх Мік ЇХ Жхутиї см хх Ж п ку ру Маї бик ім Ко Вк оре Дав бик пі Бо ди іх її ТВ о бІХ й 58 5 тую пре хх зужя Уся Ж ж бю хм й хх сах сх и хи рн пт же вхо Же біУу вво те Зі Веб тв СУ двевоОі слі Бк тпе сіуУ Та і ти І чи ж а шля юю ак ОМ Ку Тх «вію аа жк С хакі ЛЕ «Ул 0 БУК со ле. ж ЗК учи томити УК «ВІ Басіїммх сехенав
«що 55
Ме дим щи Ти Щдуу щжжі ік Ще пох Шу бо б Тих йо я: чі
Ме ж КК УЖ Мат ж КО МБЛХ сш Ох КЕ їуш А МУКБ пеЖк осел я
З х зп за ж -е ом БА рен не дя Дожие жом жк бах же ррує ДИМ ис Кано тах Бяякя см ех ї3За ШЖех ЖЕО др ом аз сіУу Бо ТаХх це ко БЖжО Її КО ех ий зд її
М М ли лихих СХмяє ТМ Тука Че ха
Бпе тиви ії БКко же сІЕХ як по
ЩО цк шк ММ У «а 85
Код шою в УКНеСя шАНОИХ ней, Ух лм грот ру ами 0 БМ сшДКЕМАВ ох, НЯ «дм 0 ВА сом ОО жиле у ще т Фо пожиж о Ух Дах сиюю бути У Фотон сЖозж Ху Тл ту
Мет дек ЗІ цу баг дж Бр; ша бах БУВ дув лю уу аж СМ Оля
Х У їо Зх уж т сіру Фк см тоєоу с пловя. птах є. ШУМИ Ффачих діячем ОК рух беж Щісухч кавхш їі Беж РКО Акр о бтеа ту су ВКО ТБуУ Ре ро БЕЗ Ті шо Бшх п ах з я а Ж тав дамо Уже ки ік фе стра чн ку р и іч ба Кв сухих ге ожну вес во тв бі Зі тв бі во пе Бі два ТЕ піУ Ка
З: ди ях
Зк ТЯ тТвЕ ОПЬУ Ащротаж су БЕФбостТНе ЄХу бкОУ тих Бе Ав т4че дну фа й
ЩІ ре п ще. Хо щу ох тля тот йог пити АХ У Фу ЩІ прю ев СКУ МИ У вне ил
Аївоса їа Аа жу Азїв о шех Же Тих Кко Ко дів АБ ота СІМ «ок «р -к и
ТЗ 15 Ме зок худучи ббуучи кХї пишу Х ох ко ТУуЖАЯ пах Ми тхл хх їз тучовм: схдуже тгва шЕж теж шуй й Те Кьае Каб АВК два бі Ім зу Тех Шеж Бах
КУ КВ В дж гпіхих бух пт ТУєр іє що УУє я Ж км тт Ж Мур ух. Хе ух ті Бе йде жи виш ЖАлЄ Ві БО Хі вв бу Хв КУЄ фе МБдЕ Са
ГИ, «цк гл 162 В їа
Ач дол лих ри Мих СВК и ЗМ той прак ММ Мк шШеде СУ тод й
Хів зАжп гія сбоу БТ)» еп же БЖ бах ре СвлМ Тв БшК ЕХ їн ДЖ
ТЕО уз но піка СТ рн тує: пову бах ля ши да щі я би 2 су т ши оз
Хі ЖЖ Їж ВОМ Бут ВІ й Мвб пек ув) Аза Бек Да блх та До 1 Т55 Мк льше Сов ее Ав й ла бах ую ЖИ сю од Ту СИ бл у. ик ів хал щі ех із дав сб Бех бож ЧЕК б«из ТИХ Маї бим ех Фу тах ТО шВЕ 83 ух їх Тех
ЖБК ОРІ ОБІМУ ав З сх -х ах Ух 2 пт шт сих ДК
МК и ша МЛ. АМЕ СЛІНВОХ. тя пл
ОХ пах
Фе голу хз ск; оду о ргдух 231 и тки З; ріс бзях їм дл до йду
Ме Ппуш ім уч БО й Буш СІЖ Буш їх НЕ ОБет ім вд ож Бах ї ту хо Ії о ни а НК они и они ША Но ШО жит биту ЗЕ рлжеуу
ЕЕ БЖ ЛІіЖ БЖ жо б Без бе бе бжо Тл вДе бує ба Ма бо за ЗЕ 3 жк ий У рю и ну бічним МЛ я Куям у ж жи шим Віва БНЖ шу КАФ ху т жи шу ую та ут. Зх «ши дк «Иит 0 ОБЛЯСЕ. оче леї т Хі су кт «ША ЦУ ле Іл ЕК І ей ще
Мк ах г. і поїла Ку щих: МУ Ту ТМ хи тлу ач а ко Ще Тим ща бум зх мех опт ШО Ба БАЮ Я Бтш Зі МБуюД см Між БО б о БдУОа по ЗЕ х Ку М ХЕ су кю СК ду Жіечу щем МУТІіУ фар СКЛУ МУ ум Жуля ЕЦХ же вритю Хдох жи
Жив дж ів шт шеє схід Їва Ба лу жо ВХ ін вже ВжЖО Маз пе й хи З
НІ хх БУ поту й ха Лв. сбмую г уи Т Зк ху Ж шу су (їх ЛУю уз тлі їх бе т тк чле БішЖж БМйш жтдж Зішж Хіж Ом Ха Жах ЗУ ха ЖД ЗУ БЕю ма Оу де дог а їх що ЩО
Ежя чан пі хи думу Ел хі тету бомеж Тих 0 (31, ку МУ (чи р
ЖкКо ТВХ су Ко с слу КО йож шіу Ре обр осщу вкО мес слу ШИ
БМ ТУ І гу ВЛ дкту МЕТУ 31 хи бу тк (и хг го -л хід а (сх дн Е ве обі ркЕо ж сту РЕз сій біу ті СЯ Щіу сі бів сФіу Вуз азів
КВ то Бе КИ узи гії м гум хх и З щорік Іза хі фІ и к ик й яуи МУчн КА жКику ді шій мес біу іа Тк біу Без Бій С1У 1 ІК біУ ке бій ЇХ чх що ЖУ че жнива учи: дв їх Ку кує Іі Ж у хи Ко ЇМ я їжи ал
Меч вхо спіуУ Бо Уві спі діа тиж пі діа жа Мі пез шал слу Увх ам з а що Ма На бю я Сх Тан ж че Тс льш юку питеаж ОД Миту дае ач ям лох км жав оса пу жЖО то у Ве жах леж ваз ЛЕ пу Вів об 115 З їй пі жі її гліхе Єви їж ФУ ти туту 1 хе ду під х. окосту ВУЗ сі МО КАФ ФРАУ ХашЬ КА ФУ їиБа мл шу ЕКО АФ АЙ іа тиж У їЗ0 ха 140 пежиї СУ: Ж жу ПЕ лю ст сі я ху уч ау Жду Лем ту дід те їм яму УЖ: ЇМ буму шЖУБОІММЗ Ол Мах о Їх Му пон) БЖ лук ЛАВ. и, иа Уцх пи
КЕ КЗ ХХ хи сли дн» пра ім біз сд шллу ско жур МІ з та т шу ПЗ
ГОж осі вка с ло УМ пох ААУ Уа. ам Млу З Та біу вх сам
ТАБ 1лО МІВ бля тугу Ікя сеодю лу о «ду тю ТМ Тк дош лі жд» Ж хх ку се Буш о ск мих ЛК їм Ос ХМК ОоМУ Бах Ми (УЖ ЗАБОЗМУ Ух їщО МЕ що собі ТУ хг фуру муці лох мо ТУТ пігучи Уа туя, КУщОВ о бучи ут хує
Твжх пі Бко Тих Сім Її тв бі швж ЖЕ Сім Уві Те СБУ ВхюоОїмУє їа5 йо ШУ
2-х ТУ кк суку Зк ку дих бкфрмн КУХ кя дум ббфіух У Ж че КУї Фея М сьу шіу вХБ Рхе біу РО ТУ СіУу ЕКО тТпу сі дів ЗУ плу ко шуу ті п ц ИН
КАМ ЕК М
- пл їукау бихує 11» псує фе хи Іще А яки дум ріує 1 хх п Хр
О1у Віу кб бах 1У це Те 1іу зві та 0іу Бех ТБ О1У ни КЕ мк тип пл пуд рез М кт «о їіїх: Що сміє ух сію Ух, їх уд бум їх щі х схем узі хе дк тую г цБіж Віз Тв діу дшаж рус Піх Уві Ток о піу дів Тек пре Бксо тп 0пІУ зх зе зшк йо ВЗ
Феди ТИКИ УК, т тиру КК же п Аа ТЕ я ток о ях С шк зе ТЕ о йпУу 5 Так ОБУ тів поз піж бат Сх Зо їі а Зм Та реч ке єутктх
АК патУ «ТІ сіХху Зх Же ос (ли ЇЗео» лір; Фе Шро бУдає фіз пПр(/ (Т. (1зе Ше сій СКУ і с А Бро Пец бушЖ БКОо тчЕ СЕУ ББе сі СІ бі с п Тї ТК іл ТАМ ЖХУЛЬ в мк ния дл не ЬШК: ту КК Мже прудх ли рю. ни ня оно хх їхцу дає ою Оп Хі БЖ Ом МЕЖ Є хну хає хАК бу о ост бу ща яжкУу па вх ПеЯкя п хи хх мя ЕК же у музою т срлеже МУ С на си о Тестх
Ха АМОША У ел ших фа У БВ ША їжу АЖ ОБУ жуУ да оОЗХ шум де жо Іо ТВ Зхо дае но оо,
МК Ж ХУ
«й
Зал ЗО адм ЗУ сему ХЕ вдих ЯМІ ек: пд зії гав
Ов ІНМЛлЛОМА В ле ех З уд Ссдечх СМ лою А хх дату Хе дор БТ ту ФЛ МЕ йбучує жор лому божих ех
Мет Ажеа жа вжа АЮ Ат був Ажо сі 0 Му оБек пені Аж БМ Аа з к ПК ци я хх А яко дум кг ж оч сет п ших жи они бін 0 КИ пи ше ххх Фе
Бе дич гі ВЕ шко сах демо бе су Ежо ТВх йБе ВКОо бе Ма) БУ
КІВ й зп сих й ке ЩУЄтя рр й и У шШО х те 00 У Баш Те Зі Хі 0Іу
ЗЕ
«хх 5 єхк-х пи «км б ит фути хе БІЛОК
ТЕ, Фу р ою, «йБае Васі би спе дал» За ди лютих, ке сних божі ша бом КУнса ТЯ сен реж нка Фе ам уж Ще: ри
Ммек дж М АКИ дао щЕтТ Муз АК ОД б мів о Зпх Мащ о АН Еш АЖ ї В зх 7
Кк п ям Аа
Щуйотя урни В х с. ре. Те, Пе з жі хх схе Кит ОК ех т» м їн Ту ік
Би: ВхЯ ХіФоЦеК Бк осі Бум Хі сіУ Бк бКе Бисг Бхо БО Св Бо
І ШЕ ТЕТХ
Уртю ШЕ ЖИМ ОМЕрух Іду пилодж Ж а ух фі МТ У: Лоу фс КИ у ІД сх
ХК ем ХР ШИК сбеАУ дам жюу ДА ХХ шум жЖЖе ХИХ бАУ БК схАМ ОАХ в: 40 5 дих стани т їх КЛ я їх Кут хлхю їМаи їЗл У З хи Ме ую сля п: хо о уМмЕ СЕМ Кжо бів СУ Бкб Кк шіУ Кве бо Сем БО и БіЖ Оле
БУ Б що міх г Туші фу їх бу бл и ік балах туї яд тата г пит жук ес БІж Бжо Тв ЗІЮ РЕ 1 пі чів о пІім хів БІЙ Оу рхе тв
БУ ТВ ЩЕ й й духи Сил Й й що пл ХА ких лужча У лк м их ТЛ ки ун 1 УЗ
УМ мЖЕ дл м ХМ со Хоб СУ блю баде бсаіУЖ БХш ба ду їх чи як
Уа дже гл єх диетя тах сш КИ ек тк що пом о ст Мхжиу си ст тля
Хна Мис їж ВІТЬ ХМІх бхкш ха ДК о їху КЕВОСДИЛХ бкЕКуУ БІЛА СБУ ЇМ мух зле ЗІ чів
ВИ КУ МАМ гак гдз сі и пк ті (ок Фет зруяри (ліз й5ід жМнюи сі: дід «їх бів і У Сва зій осіУу БЕО Кіш о біУу БЕ ОТИЄ сіу ВІД ЩЕ у Аза с че За зе їх КМ Ко
Кк кт дж узяти шу їі лм: ух хе їм Ж їУ кА Ко пу ух щі маі (аз Зіж їі ПУ Бі Беб пу бух Бк її БУ діа ти СУХ ях хх зай
ЕчаЕ МА КУ шрек ії Мк верх ФЛ їилях стем й пдляю хв сту Мід їх хо сту сю кт що
ЖИ сам ко сам шує га шип шуУ Уві бан У Без ях У Аза.
АХ ї це та
АХ їх 155 Аа ту УТ хи ау: 2313 віхи Ж г тати їхи т Ж гіки що ст г дукі га
БЖ о шам хи шаль шу дає ша шу ско. щмАМ.О Юм ЗІ ЛИ ху хо сій іх5 їто : по я и Но о ен В в о о о Не Ше На
Ат вшОе ЕХ АЮ АЕН КОЖ бу ла ОЇ Му лАОїЖ слу ЗАВ бу АЖ зіїїв за зп
ХО АВЕ АЖУ
Мірує ПУХ М Туди йЕж их жк оду піюю ж ди ТУ іх. хи т у пух хх лих Суха бік ЗЛУ Баш жДдже ЗІ бі ТК ОЗІіІЄ БжО Теж ОЗУУ ХІТИ ЗУ ха бах 5» зап чзащц хи жМК ОА хви їі фр Шу тях фанеру слу ШечУу прах тяж Ал стю ря руту Фу
ОїУу піУ Би хо су Бе бах діУ Вже лук біт фа пт Яму ЖЖМ у зп кя и ще -е МУ им зх ФУ Ск пух друю бух г хі тв мі дою ба гутяк шві сту плу вхо шех сі шеЖ ТВуУ пі йів ТВ шіУ Іі тах пуУ АБ ТЕ ре 3 Кк ап тях ло птах т ки щи п кю т рих У що пи и тече бтфричия ИТЯ пу а ХА обл Ват ХВЖж За Хьш о ХВ Ом Аа хцЕ бу паж ти с У
БЕ БО а ех тую ел Хек МІ дю Шо о Кт к зрех и жи ТТ ве Ж 7 Се
Жжеа тв оку ех ЧЕ Оки Аза ом Б3Жж є МУ бі піє умо піж ху
Зако а ат ле ші ей ті (3 ІЗниа бу (3 ЗР (71 із рий Чл із тд хх вів біу пуб тів У Бр оте ФфіУ ко бій біУу Без бій щу Хі ій зу ха дл хо КЕ ФМ сови не ати, Ки ть ТТ ЗА т си ІЛ, не ул нн я ж їху я ша о БжОо їУмЖ БжО Жмлх Яку Мдх мк уж Ме с Бім ше СОС 2О З55 ва се слух фія Ті Фу ФІ Ж у ші» ДщостмяУ Фічх дез гу срок ес ува ФЕху шАуУ бАашОошАЛ ОСА У Ка ТВх лу МАДОТИХ соду дЕЮ ЖАТЬ СХ ОБО зщ Б щня ік уле ил АХ «АЛ зда «ло ж юю тре жах ит юю жи тлух лк в т гл дю ЗЕ спри й и гр по см Же бл ЗУ М Жію ХУ вла 01 Оу МАХ ЖИ Оу ВЛ СККО за зав з35
Ге хіт Щлл шхх ут т ті ОВУ "що пучу Фу фею сут сіу ввЮ ОШІй лу РЕ ШІів Бім Кале дів фу Чех бко Яку ко шИХ СЖУу хг за їй вже що ле
А му (ау че й хе Худ і фік ті ху іх пу х тк ду вів Тих: бі кб опал шу ЗМ см лу Ка са пхМ Ко Как опІУ де 355 5 55 "З зх Мих Чудле (Тіху Фк 1 іх бує ія іх буму її Му (т ще су БІЄСуВЖ су БКе сі су Бк бра Суб ем Сіл шу Бко аль шт та ВИ схуд: и: фу; ги су пи; ФУТ» бу. ла їла» Щі снах жк фемру г хх пі їзє пал ріж хі Кхо бію Бо да біз Лів жк беж вже ба КЕ
КжБи ЗНО ща ща стук (во я Кі м і ті ім фік пйді бах що Хі мем ті Вус в біл у ї із и щі М ХЕ іл ле а слух І Аа те поу Бо ійе лій ях их А АЙ хх меча о Укутих бут жи Ух Ек Ех и ж ше й бики жу лету «жу Кл Ми сі опію Бе піт піуж хів 00 шу ї3е о Зів о бУЖ Мах БЕпоЗЕю двох ши 55 ІЗ піл ху сов пика Ах су Тюма ЖИМ ау жк 445 «Ві Б стр є жарких «М стр сижмикних сижїяе ОБМУЛИК
ОТ, ери і Мжк спря кс сек, «ЕКЗ шати киш БІ х МО ВАЬЕ «Я. 55 о у НО ня хе ж хм сл и сх (сл (о шує що тугу яке т мес іш аБи дЕЧ др ан цу Шіу бжЕе зів шій ек ана Ре дк ХІТ
У Е їй 15 гзучю дже (тла бийх Кл (лю бух ую шу Фрі Фк хе жУю:х Муз (лу МВ; шко во ів ЕМ ДЗЗ шу Без рих Бе Би вкш бі виб сКле сіу ве
Зк сук хв
М Б няня
Те іх їі їх «ак ЛВ стр с «й ТИ «йїйЗ БУС пулу. Ів ик Лк дека им ох «ІЗ даси спалахнув хи пе «пам ВЕ
ЧУ У жі оси Щоя мряка Кук бу ФУ их сим Щештя Шбтих дент р
Мах Був дить ВХ ВЕД БО Бує ЩУш му ОМ ХМ! мех ся Мун Бе Хе ї З 15 ХЕ суму Шиту сі) тих Ті шля Ше Му ших Юр Ше а бує СТВ іл пи шт шко ж Мш зав ша ЕФЕ СУЩЕ ІНВ ЄКЮ ЖшЄ УА ЖК М СОМ дл
За вм м ях Ко Ка ти мі Хіт йпі її о тмк й їм Жх є твЕобіш Бжїт; Між ці Вуй ве опію
Ми АХ МА суму АЖ УМ ху Ехо ЗК МУ ОБЖ ХІТ МУ З САХАКО їхасу по У
Фу Ха (и Ве ше піти ких 23 м (Ії Фууиу и ФІ да М п ях о Дюєту вВко ід осі Рг Яку (У бе ік Чі РКО Ме бу сїа ме «У Б
ЧО 5 «й тра Фа тих рих пах хг паю Ек першу рах фан тр сирк о фнеух Ті й
Чи обку Ж; ка беж баб та їі бо бій су вхо Уа, Зм Бе Те еп г -чЕ м
ЗУ ти ве ЕІ
"7 МІ ун т їх СУХУ пи тт т тт кл УК то уд гу аж ло тмж сам ЖК шо шу ім шал шоу дже с жу а Ак су -х З у їх її гіХ ехлахо умія и скощо пеае КУ У ень шу 2 том
Ккхо бій ФМ спім жви рпамж Віа ЖЕ ЗЕМ кжхо а СБУ ва Бім дбіу пеИ зе Ак рас по АТХ М лих ж дв усу су ЖК ху сію їз хх Що тер ех З щу ху жд З ву их ях
Зав дО Вже Ха ОЗАУ БУВ ОЖих се БІБ Кл Оу БІ Оз су Ха ОО їх тий їи5 их С их рах Жди босих ФОЛОюУ ву Хі их ру Дрю спря жу Му «ех сих ти Пе УМХ ЖУКу Хан су жу БО ліво й лях б Бо мм ше
НЕ 135 149
Фу 11 стік у ФТІ ху ЗІ Фах ТУТ у тку бе фу Дів у фл дер
Бас пал лаУ дає «сш КАМ УФ САД Ос У ше БУЄ ХУ ій ТВ Фу ве
Кк зт чкд кт 145 Бо 155 155 й ач м аж Ж а Мох НЯ весни ньш оче Ук тире Кл ач. М ди Лат, І піз пі їз (Ма бішж Біб ЗІЗ біж Ха Ба Бе ЖАК Ол бі Бус веж але долу сх
АЗЦІХ АСК МЕ еру джу яру Кт ю МЛ мУму. МИТ ту туру. МУ алу мк то СІЙ а Мк ре
ЩШпху АВМ ОТО Шшху Ада отих шху лад иих лу ФМ обжхуУ хна БВХ бхАЖ шт тах ха: зах
НЕОН Ід ло сті що ду руни ж ди ЛУжуу прю жа ох руш ЕК хи ум; фує и хм Ук, їв ож дає тТдж Зі по ЖК ООІУ Хі ША Со БхО Беж ЗІ Ж ом вхо
М В я п у Фзату ме УТ хи мо пУрее гяи лох прю т души. кл вхмрчи хі т ко пі ЕКО ТЕХ сбіу ХО ТИХ щу Аза ТВ су ШКО щу му ЩАУ ЕКО ве МНК ТЕ жЖАМ юЗ яку
Сб их иа рю Ку пере ххх щлх пре ехлоюи щож пиріяая И пла лука бек ПУ пає Тс ЗіУ За ЖАЄ ПУУу Зі ли спішЖ ою Хиж біу Віва ЦЕ зт дк уз кв и 230 і зад
Кл ка Жим ух Ж в 1 ни ля Клод вх лох ох Гоа нь шо пося лок
АЖ Зак хм с Уха ХлАХ о ЗУю аа ХиЖ ЗА за ЗАВ бі БХдУ Од ІМ хІ5 Бен: аж ти мух юю Сг хм БО юю и Чіоє лу щЩ хо пмуже Фа що ск ж м ча бат бу ДО ЇХКа буму ЖМа Стах ху Же ОСТах бу АЕВОКИлХ п роя
КЗ Ей ати яри хи уко й зу Зм зи фр (рі УЛ ур фр и пл пу тТнж шіу вк їв зу Хі їй О1іу ко їй су Кіз їм Ру ЕКО ТНЕ пк ІТК тут хо ХМ Ви хх ох жу і Що пу Зх са їУТУ їі їх ку СТУ. ЇЖА Мом ух хи ші вав тиж сІшЖ дів тля уж Зай шиь сім Бхо хакі Уу дви отвЕ СУ зу бус чи ща аа мю танк МИТНЕ ФЛ ж кує лою дл лх КЛ ЛО зу ю орех ру ДЛою бідних Уа .Хтж ДТ вже тах о блу дек лав осбум ба сам ж Бе СБ бу шКО ЖАК су Ак. хо Зх за -ж х стр жи сечу ке М себя ух ЩЛомообмін тУї Мис о дхуує мае пі діа ТпжЖ пі Кіа тиж іш діа тн Ві Віа тв Сіу Уві Шеж ТБ п З я їц и ТО 35 тий САТ Миру мих им Ко і Яке хо дату СИН бити І ак о дод ту Сг оз сук,
Ж ла ТК Ух Ася ІН Адм о АЕМ ЛМ ОТИХ ЛОЗХ слу хх и КАВИ Х пулу ти «и
Аз ах ОО тк т . гу суд тич фо Сто Туз то а НН
У їмо їм: Зі ЗУ ЖЛлЄ Бду їз Бус бум БЖ Зх йдт ЗІ вах ТІ
Б КУ Зк л бу ж юри в дує Ух КУ ше пкт дя Лу. йбхячя хв чи
Оу кхо і Хі ТБ ові беж іж ЗУ вве ТВО УВУ ВВе тв ові дів пог пли прІДОРх
ЕМ ШК ВИ хи 5 хи ді сік мне То Ущ суУмце УйЖроує Ух . В Урр лу ух ни Бі фу яви жує Тут Кі віє тує ТБ Тіш ввий Бедсрнх дій Ту зац Зегу КЕ РУ ЯЗНЕИ вихо ОБ ю ДС М
Ук боді їз муху их ни. Ср: с їж Жду сх со зх тм мох гі хх ем Бей зві Бак Зак лу їіє ЗЛЕ уві ВЗ обі БОЖЕ рЕс їй Аз Шіу кт дів Сея жи ше п
Ух Жим лох пу ше А у хи Аль о я фа жи Жири бирую Що овю Мю К ух
Тих їз ЕВ дек БЕЗ діа ві дза ла пом пек Бл сек а АК ЖІє до ай ТО тії. ді ка тлмі Ми ха гли ЩІ хіх си дух т г; ту Мем її
Хі: лів дай Сей Бо вів пу діла Вів Уа Шеж іі щЩІіЙй БМ вне Що ск пох ди й ЗИ АЙ са ен Я Мою ух Хоми. Миру ЗИ У АЛУ СКеує беутуу КУ ло Ма хом бах Яма хи с ЗОЗ п Мев о осмХ лах із джхих кжО о ОзЗауУ АФ АХ МеВ
У да ре.
Фк ті ті щу т пух
ЗИйЖ АФ ХАФ ОА ДН ЖЕ п ит «ТУ тк а м гру
Ед М шо
Ден и жк А АТО ета Ди шлІняЕ их ХИИХА ж Мои 0 ТЕМА А АЗІШ БУ ТМУМТАЕНЯ «ах ОВ чаш бо Мах ау Же Жив ши СИМ. т Мох шах фея 7 Мих ТИ ЛЕрау Уохугі че дув На яку ХВ о Муз йех БГпЕЖ Маї Ащшо ех пех фа аз хх КУБ їх 5 їй 15 роз З ЩО р ма Удод єм гдуЄ Слд г ж Се Ха хи брауж лУу ре Ше шуху» пха Мах туя шеЖ мув Ух ДЕМО ТіФ їни АкУ Сі тухХ АЕродій Аа дах ж У ЗИ схжжши Ж у щоежеу лож шу ЩЕмл Ку уз см її шу. ЖК їли и жона ТУрЕя
Су са аю ому йзр ов Бр оЗзі БЕ ОоЗахє виб осві САУ ШІ Ски сне її 4 5
Чер лу Жбмшу дик Жов Ух: би. Мис Єр. Ж Ем сих УТ філ до їм іх пах то Бипев дже Бук зеи вва мес біб Бі бек УВА б Боце бук Мій щук хи «к 9 5 ВУ чі шт сСкіж «їх ому нене миюгує ми Кт и ОС йде лю хех схе ю чів о АБМ ше Ті шу БВ ТИХ жУЮ Тух ДІ СТИХ Хі ВЛ Сл Майї ЧАК дк т «п кг
ТВ пу У тйУ ут дуг гоїуши кА м тому АК у сб лручи баку торуму жом тує «рухи мах кис Уха лих ча» іїзм о пен пз Тут шеж тиж ем тіФ о шьУ спі Бех в пд пк
З ЗІ В
5 хі шнех да бла йти Св «тр ож хе сг ша ж жі су там тх
ТУух ща вп Зем оди АЖ ОБ дж сум Був шля Ж ЗУ ХА МИ ЗАВ тд тр ах
М ХУ ТІ іш ат зд їх пуб ку дюедує їм. Ми сли кух МУМрує ї ср фемож Же, Ул бі ВЕ дід ей дл гкоОо йди Бе: хаосу БкО СТУ БО Блб ко БТ 5 їх зе
КА Мах Мк де ші» Ха чик о бами их Те (Я ж ЖЧМХ Та пл фе: мує рлх у 135 їх5 кт В с и В див лю Зп зт Од суха плити «аж БАХ -З 3 феї рію кит тк хай Ввезаі То спуУССЯНЕ п Ка ками ЗЕ жи Жоювех Жак само У хто Є Щи кн у ож Маю Жах Ти уч кт божу
Мен одеУв Киев ех Му Му би ТЕХ Мі КЕ шов ШИ хів жа о їхук Ку ї З ї2 її пою Же ху жи, жа УТ жк шу жука. дит вн ТМ. домі Хлору ну
АЕ щ жа Уа Ж муз ша мЖшМ вл з ме ІНВ КЖХ дев опа МЕ ЕХ ех т х
БУ в в їзчуюю Її Ж Кихео Меч Ли бом ТЗ ІУючих ДЖ Щіхух ФКдот КУ ху бує іх ув би йБо Буш ВЕВЮ УВІ дю слу КЕБе о УвЕ бвЮ тдх Сам са ба КЕ
З п 45 чле тло дя й б тацір Дт деко Кт км кри о хи Б и ша НЯ жи Ще ДО А ЦУВ дині А мех пор ошму ВеЖ ей фо БНж ув олад «У тк ран
ТО У КЗ
«вд ух що глухі ик ші р У п НЕ тру аж шу ЖУТач жд уж
МНів дви одех дів сім Ге Ве Беж ТЕ Же КЕ Хі ва сім За Отух кг Я ТЕЖ, ш по те но га хі аїхуз З тіж З тах Ла ел ІМ. Жде ППНК о Хар СБ дю сок Ж хи шеу
Уяшро Жана ща САМЕ А ЖІ жна б САУ ЖК СЕТЖ кожних до ск сх Му ОХ
Зо З єс КН ТУ «ух тоб пек Ж Ж ми КУ я ее ту що ух Ж їм Й
Тут М Мие ана Бтш дви Олю ха Ар овувВ хішв ВВ ЗА Хе Бема ї1с5 115 115 не 5 ре Ха ес хе Дом Три Мур» плачу жи скоюаю СУх ши ж
Алха вка АКА їхні АБИ СЖО АБ хни па щу жо ТБ Хе о жжОо жо ла лящ ЛоттЕ 155 ою и «КоЖІВ.
Зх уми Ху У А Хомик ММ. ау жил ох Яжме Сх ЖІтах МУ лю Му Тт4дк жу Ку ут; ЖЖ Жве фах цей ота дих сш Еш ЩИХ дю АК СИХ шу вже СЦХ ка БЖ апа хх ХЛ Кк тзчлю щі ск гУфах рих СИМ (тт АЛЛО ПМ ах стю денних СТМИм пут лох Смик сх зму ша СТА сх АУ ЛИ? ДИ ККУ жа СКИХ сх Ку ДЛ Ух лхКу жа АТХ Кк КХ шах КБ ЗХ 15
Жуки люки Шк ху Мхунче (хи Ду Уже шк и хащі ммнАЄ УТ уи швах УМжум: ки
МО ХК ОСлу М КВК Ссху ХК с і пе і БЕБ ОТ оту ВХ зи Улза зх
М ОМ кий дом пли хе юю їх лу Пан «Ул Укиєєя спр сти ле чумі пух сх
ТИХ хе Ж СЖИх лхуж Ма СЕМК лххЖ Кто Чиж су мах их ук Ба ие чий з пк «их
Ам ке ХЖе "3 дих сухе Ії су кі «що миля шлю С ФУмі:х Зулюяє (ну хг ин живу
ФУ ча Беж сію БЕ ЖЕ Фіу М че КУ Бкосстах Фу Уві а ую 135 І ВІ сб; стжця їй ЮК ля КЛ хи Лумаух сту КМУ. КУ ки пе КУА. ЖУХ хи хм Тож сх
МЕ ОСХАМ їх уУ ЖАКЕТ (МІЖ БЕ СХМЖ СІУ Ку жхмяж ШЛЕ СОМ СУш їм МУ ох ІВ бютухі сл ку хі М хар» Пед о З Хокді феєю Ми сік ех З Ходи сте сшіч Та ху сх
ЕЕ ОшЖи Ж жщи АКА ЖжЖЧМХ МНС СКАТ ІНХ ЖЖ МЕНА БОС МНО Бема ДЕ ОМ яя ШОН ж чи
Ух мах дк Же Ту ю хр 3 у люту жів, МЕ Тухжуу хе СЛХЕиИМ їУатуу Дюка ха ХДХ АХ ХО ЇМ ОА ХМ Ма А МУК СХЗХК ОХ Ох ОВІДЬСКМИт КХО БЕ «и тА чкк
АК М «ТКУ
Тєзує оФМЕМих ДУХ бом Мн МУ Кі ух МКУ щамє ХАЖ лом Меуж ШИЧУх жо лиж
Сем кине жпФ оба яме ТИХ ба рпЕ 5жхУ а В Ля) ве З: ад Ом лк ту Сея
ЖИ ХІТ У ха й й голу СМ у. СИ мс жим ов І туя ж СТІ хх ую хшУЄ ЗІ тм Н тах жах (Б бу аж ОСІпЖ СБЬБХ БІВ Ук: УФ АММ АФ жеХУ ЛЕВ КМ ЗУ Й лад УУту сх, Н
ТЗ ЖИМ УМХ Н тутях ол ух Мих сви СМмачу Шк сла шкі. рих т см їв ім Му бе : ду жи зидш ЖІШ лчжМ ЖжКО ЕКО ЩА ЕХО ЕХО Машу щем о зе га г : о БУ БУ : труни пок МАЯ СУХУ киу «ух жу чужу Ж хх ща их щем Лу Жду ху Й
ХА КУ; ха юМІЛю хОКЕ УгІДІ МОЖ КМ ХОуУ МУ КМ Ж КЕ ХА ОХ л Н пр пря «ул ж зт : зу: тій хх 17 :
К І ЗІ ке : тки тонка ср, дотю СУМОЮ рою пУїяу сбрех Спір ха рих боду бий й шуми Ви :
МВА ХНА ЕЙ ЛА ТІВ ЛОВ ху ЕХ ОТОЖ ЖАХ ОМЖХ УВА хаВА Ла БКХ А : сут туту я :
ТЕ З ЗЕх : хі пи Ж З Ми М: бух ДІЛО гії тії бухт їх тих їх: тіх Й бЗіж пе хі Віа ВІ вах Беж ЖЖ во «Маю Од МИ бю Бе ру хх : ях ки, вче Н
КАХ ОКО. МАХ Н же ск ода «шу тру жом. Жушчих ЖЖ их пол Ше ТИфрує спружє Мун ЛУ щагеі да Щ д Н
ХА ЗАМ їх СТАЖХ ЗАЖиХ РЕМ ЖИМ СКАТ ІМ ДК О ЖАХ О ХА ДА МУ ЗАКО ФКІЕ : зх ча Ек : ща ам їх : ви шин не а Не ме я Не Я сх 1 а ух. ет 1 шу му ду Й
Ті Лех тВх Суд Сей ТА Мах вав УЗ Авм ослів ТМ шк пАшОТВХ МЕМУ :
Ти зв зай : жо аа 25 :
ШІ У :
А ПУ ! слу та пт : скл ВІДОЖ :
ВАК я А хм ху !
У Оея МИЛО АЗАЖЬ ФИЗИКА Н
УТ шо Н в :
хи узи жи жи щоджу Мито їз дет Енн би; шт сек лет шко уст
Мат Буш Сі БО Ба фут схвех ЕТ Бу Бе ДЕБОсеюХ ВпОЖІКа ЛФ ОА Те - КЕ 36 як і г со 15 по жи сАлухєт божа: лиж пуф Зиеух ЯМ мох сбероу фту 2 биту МК (и БИ ек ожсо де бе; Ма Бе Во ТпХ Бін ро во сві Еко З Ву біу вне щі я КУ зяяріує КУ Улою ит
Тв СУ Хі оХу ях «ШЛЕ БО
В ААХ БО тр узах вис НЕх Ваня стколрею 0 УТ «ик щи. «Мо Мана хМУЄСЄМЕ жене шт жу М пон я и и НК и в Не НН сн и в о ШЕ
Мет ув Їх Ас ВО Мув бе АВ сек Б) дей о вжх Ам жі де ва з к зе 35
Х во зе ІБ и м ФУ пух Ж их я жи хі їни їни їни ЗА думи пхрде їх Бо бат о бхо вний їз Ха ш ОрЖ Буе ЖИ Бпе о БхоО Бхб УЗ БеоОо Те о суУ БИие ке 75 Ж рек КУТ ТУТ ЯК», Тих «у ЖИ, ме я шле Ту че Ки Уже ШТ
Тих о спюу в ошуУ Іа тв су ШКО Ту сам Ко бр осіУ КО ТБх Оу и Я жудеию ОКХ м ЖК кути сних жЖжю Код Крик ТУ нг худ лет УЖ. Мода УТ пт вхйп бій пі ш Бшеа АХО ж Та С іх Бжа М о сУуш Спо Мешко Ує Кихх коту кої їй в Ж пе сля Ух у їх лю ХА хи ЖІ їх ую ж тру тю слу фе МИХ У шифру СК
Тлдк Сам Ехо Сів овіМ МА ОЗ су же ом зму т ща ду Бех ха к то те в сі вдо смію сах Жук ау сбах г х ле «Мік ж са М бе джу де
Зх Ва жах ЗМУ БЖ Па су Епос ЗАшЖ вже ЗА ЕК Се Аз у да З 5 пручу тгРІх Фах У ща й хе Дрю рф гаю фр Уа 2; МА тр Хі як т штке дл шк сх тех Му Аді тп ху Вже що мАм Мей сю му Хе
НЯ ід 315 їУляч, хх бу що Зі луку січня ПУ кр нон и они они на ок
ХМЕХЕ БЕХ МКК кіс МАЛУ жо УМ ху Вл МІЖ ОО сш ОовІй Сашу наш о сат 115 38 125
МА ям ей птах СТО ау. АТ п юю Хоащі Му би ую щи т шу прая Кб ом МУ ния У рах у в жах КУ Мена ка Ку Же лі ку АВаоО тел бхМю ту хм У
Но ЕХ 145 їмач 31 Уу гля Ух Кіл ую гх хи кн и гу ли ри їум ую Я ху З Укус І ко дух
Бхб Самому КАшж балом ва СІ Су Бей обо біу АддОТпх Ху вх
Ту Те Я 158 зо ню В НН п: у - и М КТ -е. Ся бю Ли Ах злу г. ті. З жа сиза тре. ль якж Же уми йпту Ві біб КУ мекоЗій іє беуб біб бі Куб беж тих сти т
Кщш іо ЩІ пря ким Яд Жлтиаю Уми ут» М ми (Зізи туту (тю тою лим Бути пр
СІ БИ Зп САУ Ада Кпж оспІУ йащ ОКХ ХУ да ОсСлУу БА ОТИХ ду КО
Ва пах та мтурю, ти Хроуі ро фл я Ше ТИВ ЛУ т Ею ПИТ: ІЛ) бек: бури їх» яю ую дк о бзм жах ХХ бу МЕЖ ИХ Ум ХУ АХ бує хж ЗзшК У їж БУХ пут, укилих "хрум,
АЛЕ «МУ КМ
Уха ЇХ хю Убуих сте гли ках свінг М таж пухка ки ТА ТУ ми и уки,
Ка щу Ко жа сі ЕФ УВЕ Су аж ж бах Бе оду Сі сі Би сет чт пулоту хОДОХ ХАТИ «км оз с жи ау пек чи хх пу и ЩО, паукаї Є Ауи щежт ли кали що тик
ЩІбЖ аж шаж ХМК ум ЗІ ХМЖ І Ж Ві ХМЖ ау ЗМК ХА ХМК БІ ХАТЕ соку зх зх лай «М шо а шо тік ую Млух (т ла пл жит ошдем МДУ Ж Лїдеї слизу ж «В Мод лиму Ах ди ЗК пах бю мА УВК ЗА ВХ КК сю ЖК Суп бу МФ СКМ Є 245 ЕІ их
ФРдтху СУухю ДАя, ооо но НИ сек ою лю В УМ ГУБ зж тлу ГУ пУїах Ти
Жвх ТВ шАУу ККко ств шуУу шах ТЕХ щу А ов ім Ба ос ем Щуа сут ері птІ шиє ХМ поОКАХ їжі же хіх іс зе с хни бо й їх Сі джу их їТї ЖК туя тм
АХ ОСА А СА СК Ж Же ща СКУ ЕХ СКК щу КБХш І КІЮМ БХС С та ЗБ ІЗ пах Ух ву дих Мох фШечу Ф034х фе» ММ іх ХВ сих зах «т СКУ
МАХ БА ОЧАМ СУ ща ЖЕО У ЖЕО ОЖИК їжу У МА СБ ЗК їхУБ жХТЮ СКК
Б «ІК хи «Лю ЯМИ м т тут стУХ Іущ ткач хх я У в х -- стю 1 п КТ й тіж ІЗ їЗтх їв Зах іх т Пі 01 Ж тм ФУїАХ КЛІ тих ХУ м за шал ПІ Уві СМ шоу ха мІМ Бі дала тТВЕ мІб да ТВ іУ Ар. тки; ЧІ жк ти
Кая АХ ру ЗАМ ух Межа Хужту Уж ху З Фу т іх й жу М Ж ти у їж що ух
Тік ау ОРЕЛ сх сх у БЕ МТ ЗМУ (Ваш дош ХМ Б ХУТЬ АЖ А СМКЕ
ЗІ ЗИ Ж
УЖ ли у пр Ух ух дах її у Ж у дум ую гі тубах КЗ ШйХ уж ви думуж ГА
МУ ад Кми СА ЛЮ САМОЮ КБлЛЯМ бат су ОКХ ОА у чі КЖО шу аг Ж щи люк ий ак тату із 713 у ря її хи їни її їі» МАЯ бліх; хи Тиха їв тіж Мк вЕО ех Ці від о жЖвие слі БЕсб Сл ос4Уу Уві біт со БшЩемоєїВ СЕ Ре чи чат чик ї5О да зимі жк пів 3 8, т хе УХА бу ХЛ да и ВХ «Ж ха ли У т тах и ат Ол вве Х і 2 МО УЩО МЛ Ж ОХ КО іш Сх КЕ хУДЕ щу шо Бе Ой че зчуц зах
Каже Я іще
МЕ ЖМктех ЖИ є п ОХ ду піч ТЕ Же ди ин лу ЖИ й лю М уж Би Яхве же см ХК Май Без буму кКжО шаф б АХ Тех Кх зах «ці: «4 хм
ЗУ ЩО ща БЕН жу КЗЗ Уї Фуко ху ках Між ху їх сю жу м ки фуку ЖІ й и 1
КО шам сшмУ КЕКО о жКВ ФУ ДАЄ хім Фу те ам ау КЕ А пі у лад а й ОН зу що ж сауєо гі фут ла; я іт лу; їх; т її їй жк: ля М по пл ти пі БЕОо бе бію Кжш сю ріж Хіє рік оса хіє бах Ом чвА шах пла па й аа Ах й пт ію млі Мн о бу АЛ ли одоку Зд Иг єикю Адо рюк стяк газ Ко хх су ва скцх У Аа о кКпХх сет да М обсау Ам ХА М 4 хм ну й ай Б ЖУ
Ко в ід тлі ух 1 їхУтах ж ТУ щі лін їзку: Га ЇХ тку їла У іх іш Зівослам баш же бЗіш Вів жВЕЖ Оду Кко Бім дж Бк барв о бку бах
КлКЯУ дк ща
ХК а ЗО пл кграх дл ситах мурах мурхю бору Жграх теку Чую тк дет Ме прах о жекту ТЛ сід ослу дів оівй жу шу ія жу МСООТЬх іу Вт МЕ ХК БО ХЕ ва о СЯ чо бл щої тах йхухх Де Ту жетух ту ку хх що тях тУтхя для тя ЖКЬХХ
За МщА ЗА ОО МАХ зів осі ХхаАшО сі Зі Бак сХлхХ Зм Вл От ЗУ дошк де лк
МТ Я ЛЕТ чл жу слі фуру дім стік жа ях сті Ж и пліхя в іх же че сій сі хо с о ліУ іє й СЕУ бТіє сі спе Ав шоп пух те дк чн пай пилка ж лам чу й ж шує. Орвух Уха М су сяє ух ха ух тек тії М тн т: ЩІ пк чіслі Бо Те пі діа тре СУЖ АВІ Те БЕ дів тиж СІ пі УМ зі хай Ба сети пу Ж бю ух стю хх Фах хинчих Ман ФІЛ у лих УМ слу же Иувю Лх пече їхкм Мо їж Чийх Мк у мже тїлдк ск ад отих Ко тро Так ОїхКК ЯЖКО пт пок пах
У 55 зай сухе АЛЬ ау їх хі гія фуюаа УЛ 143 у де сю я У Се дих ку ек су і ЕКО для сау вка тп щау БК БІЄ жу БКкО о жеж слу РЕ пай УЗ І Х щу
Щодо тут: лжлют пауч УТ я ЩУмух ох «и Жуана «ЗЛ ну птучє Ул уи В а у А ХАКІ ОМ ІБК УкКУ хМкЖ ХК Кл Му КІ АЖ УМ о «ех ех «тк
З Ута 515 пятою йо сим ух МАЛО СМ пах Вод СИвеко Іл хх Дод сг ю йграу мода ТИМУю тах об АзсА ТОах пу ев тах шу аеро гих жа А ОТИХ щіу ех СгОХ щей зах вав т. пу пери п хи. Чакя сно они оо жна УВК лють Еф жири я, зЗішЖ МаА сх Сім ВіФ хаЖ ім Бім ХМ Ос МБІіш О ЖАЄ ОМ Ухо ТВвЖ Оу щих БО ву поживу МИ ШУ ки КАТ ик ср ух ФУізаа х с мУтює Шуба СТ ДИТ Щи,
Їлні ій чу Вт чів лу тяж Ул ошуу УЛ Ж су (ДА Ті у ЩО й роя рен тиф кл ку стуючкх о лк дих й Муки ет у т ше ЖЖ же Уж кх ЩО Маю
Тр одіж БЖ дім Зі УЗ б у БВхОа ІВ о ЗУ їв ба су УВІ ВЕ
Вже вжи Ах ай пхзи р М ША аи дя 2 ФАТИ бу Є гази хід да СТУК ли мох гу пут
МУ АВ СЕТІМ Зи МУ АБО са МІУ ЖЖ ВА пу Же А Ку КТК ЗХ НУ нас «що ших
АХ ГУваН перо пу Ж 231у ку КЕ с11у дуг (13 сїи У с (и пе: ги гли мує во Кі лу Бл супу слу БІБ о ші Су ді шум слу КК шій бі Бех
Б М 5 її їі хо їі т З бу сбаяє її же їх лм те щі її їі їМенк їх
МАХ ОМАУ АФ ОКА МАМ БВ О УК ХМУМ КА МЕ Каб МАВ КЛ САУ БЕ ОК кц Ал «ка:
МОУ УС Ол тк ЕХ вв її я Її ку: 293 сл жу; ЩЕ ки сумує см Ух ую су іх
ШПОУ ОАОМТЕ УМО сл ЕХ ХМ ОЖУКЖ БЮ МАО ХМОЖ МУХЬ СХАК Ж БУ ТЕ ХКУЖ вк Би ТКУ
Шечх Мухи (ЛІ зи Тих слух Лізи бух сах (іа «іі ту й сечею СПУ МЛюю слу
ЖЕО Ж Ма Жах му А А ОАЖ МА дом сх Ж ВЖИ ЧЦТХ ХДУ ЛІ тус: трясту єр чут га
ТІМ Тх ТА МІ тії: тіж хи; 33 їх вом т тт їни Мі хи т що га тку хм тям кум А Кхш Кам Са ЗМ Ол лу Блю ма САУ ХЕ Ал ДАМ ЯКА БАД их 5 5 пла фе хащі лях що смію (т Фенут ПЧ: Зх ри: її 233 що тії схе бЗаую ЖЖ УА ЗМУ лю АК Оу МЕ УМ, ЖЖ Мо УМІТЬ ХМ АВ О ХІЛЛ АЖ
Зо Члих тк ххМіЇ ТК КК
Уліх Утую їх хе хм ст Ує гуру Ді ббМим стю узи СУТ сут аю регу Ера печу
МА ОКА шу жа хМилЛх му ДАМ КЗХ Ам шЕЖ схАМ хау ха АБ бЖУУ
Ки во ТЕХ жах Же оду Зм ку Лу беж тю ЖЖ Мах тк ж вк гу же Куди х БА ще ОВНА СА ХЕ КИ ЕЕ КУМ 11 КО но аа н а еч
ТМ осМм хм їх сла ю ад Баш о чЕю ХАОСУ ща За ОКИК СУ АдодоОс В
КЕ ШК КУ
У Не рю КМ хи кі МУ, ЯН мов У нь ян НЕ Ь ан ин ЯН яти СуЖКи х
СЕжЖ Аа ЛО У Хіже Ша Ом Хі ЇХМБОЇЗЕМ дм ся ХхУМУ кіш АК ОС У тру 7 жд ВИ
ТО НЯ ТЯМ ща їууу тіла 213» суєту 251 315 Ще хз її ідроб хх бла ж сх ж кЖжш шаль ши У вх АЮ ау т А ам МІУ му СОУ сам маш У Жах ака и пл
ВІКУ ьо ВІВ а нь по КЕ їмо Же Кк яю ле Мк Кл кю ХйЮ Мет й ж ку РИ ж
ХХ їж Би Ми хх У ока АБ Ос ю Фа хі САМ МА жХАТЬ УЖ КМ ОТЕ а оо УТ вжи пе Ал іх вів вик ги Мі ху (хи ад лах сли то ЗУ хи Тих УЮ 1
МАУ АЖ ЖЕК у ОМА: МмЕХ мису ожешеаю ххюхю Мммеу АК КІ шу ОА ех чиу, шк су щи о ВУ ку
Зб ну «Же М Хуст поем стік що що Цех рт хи краї паюмо сю М що пт ха хів бів пл хз вх пі ів Тих Бі см Тих пі віз бре піж діа яегу ик, ВЕ пли ок ПУ
Єфрем ру и суху ЯУує страх хг мує фл тх хе зимує лях
МЕЖ см шАМм У КМЕ ЖКХ бу ЮК СЮ п су м МЕ зим ж ЩИХ У Ку шик ша пе щлуг яв ЕТО Бн ящО сбаї шум їх Зк Мом її бу бу щі їх бут; має їх ВБко; спе и
У СМЖ ХхшМУ жк ше ду ху Ес лад КОМУ БЖЖю Ум жу ХО Уж о куу
КВУ ВО ша гру Єкіно й х ачя Ко филєю Хр сля фл к жу пиу МЛ єю мк хна Хаус КЕ
КК Бех шую БЕ дав бум бай лк бам БЕ Зех сут злу ВХ БУМ ою зи Зге ежНеН виє Мах ші тру сдуУуЮ Тіхю З з плУЮ їх; Що соту її; М теє г «Урі са хи Кит
Уж ХМК ОїнЮ Мік ХАКІ Ж Біє ХМлЖ Пішж Бі ХЕ осі МАХ ом ім бЗБо м зо з38 сгдуєх (3 З щоліта кс фун КЗ Ух Лев сюрои гр дя прах сту ел ах пи тв слу ВІ ОХ Ве Бі бет ЖАЄ ЗУ УМХ ЖЕ ЗУ ВХ Тле ЗЕ 9 ОГИХ
І зах п я що кі яки Ж мишах лк Жид й г хх сих УЖ м гл я жу УЖ ехо
Зі Вів ХА ІМ Удх Тв Оу Бебосукт схе БІ Іф іще дав Біб пху зах Тр ех ЗЕ
ЖИ шо ТЕТУ я
УТ бтілу фл ФІ: году стю еру ПУ. фут ееєм ЖІ шутер суттю т пе: же ап ОшЕУ ШАМ БА ААУ ЖЕ КМУ шу шЖЕО БАМ ОЖАУ ОБУЗ о шАМ пАХ ККУ пд тв де
ЖЕ В Мо гл їх жи жі п хи ЖАТЬ учи Зх що рум гл хг Зо жа пуху Ум У шими лі Ме пій біж зак о твж біжЖж вів тв Оу Бі Олю ВІ Бе о
Бу зе ПУ зай пл КК: пераж ств я еру учу ву тк дж я У ли лумі пре й и ожину СБ г тп жЖУе пам шу жа см бжУУ Ар Ха У Би СХМ Му 00 шма схо ЯМ
Зм 05 МОХ --ї рон ек муси МИТЬ КК Моск ті у КУ дю Ж ям й ж р рн фра хів шій БЕ Би пл о ЗЕ Же Сл о ши Бле Бій Ох Аді их ТУ хтух ах ттурй їх
Вии АБАХ КИ
Дідо пк ТУТ Ж пат и Ох: Філ др та УЛ «ех ХХ їх пз тях
Мі Тк о бі Аїв сій шім ко бл Зі ів ій іє бе бів су лір яти чик
КААДТЯ ТИ ша ш
Ул ма Ме стих ТИВ Же ска гілок Тумоз КЗЗ ух (хи че ду Кл била «а Хе жу БЕЗ ОЩИХ ЗК Ж Са фу БхоО бій ом о фі м Тхує йди чпеЗ їн
Ка же ви замком ПМ гухжи тло У ик ук тм (аю й МУ СУБ Хо пах г пжЖе м са ха смт Оу БКоО Ти ру із ТБ о Та Жак лух ви пе ОК пі т па ж тх пІУ соки 1, ТІтту сія» бід пошу УЖ їж вт хх віз их Біт бец5осіп су Хі б; обі БЕ ба хи Ті сіл СЕУ чив тет чив
ММ М АЮ
Ярич МУР хи ті і ки Ук тн дак Ах Бу стю Ж до струни го вто чи біУ хі бі Бе тТнЕ сім Або тре бі Вів ТЕЖ бує лтсд це х мк їшЕ МО І а рих й Мод Ж их ик кож я з Кі х тії хе Я З шля у
Аїв те У Без пе бу жів бій сліу Боб са Ху лив ЇМО їх у ах чівц 31
ВІКУ ЩІ Ме
Ухитих КК ях. ки МЛ ху дих сен телує «Уїхю що гаю їх пу мя при ва й собу Кіз сіл скКу же тйпх бі Мі жЖвх біж дід тик сіу т318 1і1535 15 жити, яесфим кокиж 4 пря ся Коли ФУ их ж З г ит р ху туя деку КК ю Чо шу й м ФУТ
Аїв те йішЖ Мем іє БїУу ів ів Му Ркооім біу Хле Уж Ку їх чле тий
М ках МАЕ ки чн, пий Кі у фл х ее пає їх КЛ се їх хи ходом пу хо лю м да АМОиМ ЖЕО тиж бі Ва ТМ Сі Ата их сію «так тих ттих
Мах КО МАША
Аа Мк Га ЯМмує а 11 хг Чл іт лах тк Ам хг; ах 131 дів сх (Му бек ПМ3 Зіх Біб бу сі зБроОЖвх ШЕУ бхо тв Оу
Зла З тіще талу;
ДОК АДМІ Кто хх и Аді ивом Мер іх А шо мак ті чи та. Арх кул хи щі пенрмо тиф и
Ві піж дія тех щі Азбв о твх слу АТа ТВ БіУу Уві оЗех сх Чх зле ча і13пхк
МІХ МіО Мах
У е Мас пек ох ІТ ЩО -х ї ся пекти жнив ма М х ЛУ У ке тжлкю мі да лу тк Вів БА ВіФ Вл жах ТЕ вх су ТЕХ а хіш їМаК
МАО Мля ква жа роя Ти їх ЇЛИ. Дому ли зму ТЕ Ухускт Щохчу дату (1лУу Ве та рем Їж іш бу бах Аа За ш Бу ша бх дш ай мах Би 1205 і3їй і215 сти Штз Ж 0 беру їх жо си Ек тару КЗ гжл ха щи: сію щі МН п ле Ам КЖжО ож хи ЕК ЯМ ОК М бру БО Ум УМО ЕТО СКХ
Тай тв тлу
Ех ї ам хо сину ор Уч Зау ит хх ще ку Ума ТЯ АЛ Ж м УМ У че Ж ше одлвя Ж:
Уві Кіз Беу вів спУуу вий Бу Тех гів дів тех сРвОх ЗШ МІХ Бк зд кт зу 235 ие КВ еко ге Кат. Кодут ТИ холи «Межа руч 1 Кк у Фах «тах ж
Тих а БУж їн Бе Уа Ве пе ХУ КАШ УМХ УазМ дало БЕ ли уче «ре
Її 355 тло
Жкилих Ж Уют ки ря ши с килА о жен ТИМУСА чо сесфркни ТУ ххх
Вт бе о важ у ви Хієж Вви Аза то Тих Уді Аз бне ці пе лих Злам пу. ке ВЕ Ми ут ах лах авт А до ет шо чу А вд» тиму Фу Мі і за дл б
Ба о Шех дія Ж її їїз ів Ба Ба Бий Віа сбіу Лів Зав бує
МиВО 1385 каз ик о Хом па у бок М Фах Тим ве о Шм кл як томі дови ле
Вело цши бій беа Бпе сім їима Маї із піз Іа Тих їм КК КИ пот зах зт
Кекси Ми Ка кутку зум у Меизи ЛІ Що тую Ху суки Кох тім вда сь ех ЖІ лю М ХМ м УП Має пак ВЧ ЗИ тек 3 ї1х15 Ме суху КЕ «МАМ І кан ле я М ПІ
ККЗ пра Різ счечмих шо М Вас бик свиню
УЛ що «І вх я в. о ба Коли лу Межа умо Ул ТУ єр Моди Ж Ми жа Тоди: Же й
Мас мо Сі Ав Буш Буш СжЖ шех Бук НЕ лшащ їм МЕ бе» Бех люка. ї х Мо хх олег. Ж до Укіуко ой Же сних Жах Сл иа у ет Мн бої фія біде І Дн
Му вія Без вда Мо бвжої Маї ХУ БЄЗ Тих бец бжОо вже Уа ЕКО за -к їй
КЕ В За
Фа ІМ ІЖ ММ оката їЗКем Кр (у
Шах Бі срви Пец БЕ тТвкК ТУ зв дз вки п пт те хи ДО шк т шожмуе чик ОК «ил» васкі вия сим в
Ко НИХ сви 5 пише тив ЖИ я й това Кожищі бек ие бум жа пох сі у дичшх б що дя
Мн: ХО ЇМО МІХ Мов Му мм лих МВ У ол М Ел ЗИЮ ЗжЖХ Ла 4 Е а ах
КУ т КЕ. А тд ме пря пз дме из Тим У км Ди бу т и и їжа вій Ім Ави Буєб ази бе Ух спіУ БМ тТвж пем гКОо БЕО УВУ Бхо и й жа рек ФУ их кю жи пе сля юю лю бін оМУрує їм М сплю дхлам Млод пьрю оКУТ
Щек обоє АК ОїмеиМ бе Чак ож кб ТЕ пау Лада сих ше вав ОТ у
ЩА р УЗ та учи вх: ЩО пує сх: До му їх: ДО секр пух Що й хи тех ува хи Сбуш БіФ жмижЖ ФУ Віва ожмг Ак бі Ум ІМ Міс ЖЖ ху МАХ не Зх в
Мт лу вс лм утіх Ху М я ЗЕ мм лом сх Маю (ху ху му ! тих пху пав 'упх пу ліІівСстах лу хшФл ЩИХ САУ лав оТих сбхУ ДІВ ОТлХ :
У КК а що : тутля хвої жом пу хю оті стає пути бо туф ПУБ ах шо лає ТУрхх до стро ге хх :
МАЮ ЖИ. АВК ЗкАУ КАТ ЮК скАУ УХА ОХ ска АЛ ОХ сбкМу лях Є бх Му Н кВ За У :
Зйщ схрк ху хи Здю ре УХ За Мр КУ я ж сука УЛ Я З жуаче тУх хло Н че те шу ваш тв сі вів о тве ши За ТО іу Вів о тВХ оту ДЕ :
Ме з-хц чи :
МЕ м Ко :
Пде Лера ЗУ мук сяг 0 у пн тех: до пд їх: 1-ЗУ соч у У 1 поч Н
Тл їхішж МАХ ЖИ бух ліз тих іш діз їйх ці Уві ТВжЖ су Уві тоЕ :
З3А Ех зи :
ХУ ох Кая Н піз віщо сту сліз вл и сту А рю фі лу щу Му гІїлу Жінох МИ ххх : бат ха тп ау да ТМ ау Ха КНУ ау УВІ ТЕ бу ж» ТИХ МУ : тд пух тату :
Ой ОКХ ве : доц мляч Со ую ЖЖ хи Мо перу ТУ сто хи їх Уч Му г я : іш хХМжЖ у іш тМЕж сліжх Зав Таж Су УВА ТБ па бхоОо ТЗ су ДІВ : -ац хх «ех У Й че шоУХ ОТ Але Н пою мк СВ смокче у шо Му я ль У охі мо Уж йо о Мкужихо ЖЖ ж Н
ЖЖ сх Ж схо Сум Х їхУЖ УВО СКвХ їхМуУ щОЖ Бест Уща Ба Баш ВК ах Н ові, Егу слотрх Н ее Я Ме Н
Ж лу Мік. Хреяє сли поруч З м сл ЗУ лм ще шк му ШОК «міх их Й аа наш СУМ Беж ОКижЖ вав ск СКМ УВУ нровнуи Бе о ЗБ Бл У ФУ : сих х хе : ве УвЕ Мо : ван У ХО хх Жук БЕХА Жов Ж. ах. Щоб Мах лу чо ше хг Ех ща ФМ пи Н
Елде стих ха жо МА Бевз тумб пи» вай мак Маз їв БП лат Ж МЕ : зах ск лк : ке ІК в :
оку бйфтуя Тур бфрних Чт бом дж о їмеєу їі ха ов бек Мох зує Є УЗ ох дво тиж Ба ЖБе Уві їщь в) бос ОБУ Ло ую ЩШук Сук Хі (5 щеХ яп чт хуй ме Й хи
СОСВЖуда. Жкачию ЩО вжи спр. Кк ж см. УК у «кіт у А их о не їж Мем Без діа дів ик біт вх ЗІЖ Бко Бае хУз баї БЖ Для у ях Б ух зей ях «ки «ОБ Пл тка йти Чл. Ту шШету ХЕ Щечу Ам тет джу сі зи хі Ам нн Вів іх
Їхні Ден Ху Та ЕКО Маї со діл ба Ар хм дів Ал ТУх дід сій а т т
ПА М Ух о В ни ен и оо і НН лю хх: ул жа Тож пе Ух фі ку Ле шу Ук ат іш бу Зі бпімМ Узі УЗА бі бе о бБу бами бик С шаль хів реє зт зве туге «ЧИ ББА СКУ ха Мк Му УМмаю ЖІ шу боти ЛМох ше д дня пл лю ї мо Мт іо шеухх
Аїв щУум тТнХ ТМХх Сі ШеЕх Ха ба Ас) бжйх Шшх Ух ВАЗ оИах Ка мех ке я тр ве лм о тор й хх ех кю бік Хв ух го ше ни ев Я НО АН ї1їш ЗІ БВішЖ ЖК Хі Бек Зі» Віа тис Бек о Уа Бі вів БхЗ бемо Бе ча зак -Ет
ЕХ се ЕЕ
Фоюиіу ЛИХ де Я ах мату» цЕНОХИЄб АЖ БМВ ВИХ лих
Зп нтЕ гу зо
Бек па
СА руку
АК ІМ жк «ши БКНОК
ТА я шасі хвіпепшЕкасипавлниція чо Ж ОК. УЖЕ ТАКІ Є ХУ МУ ЛА УАТІМ Ме тат: щ аю БА де Лан да бом доме спа Мои де гу боді дить ту дж Урі: ЖИВ То :
Меп ех їх Бет ЗЕ Сук ОХ пд іїУхУ дна сдІх жу Зо їх ЖИМ Хат. :
КУ З хх КУ : сли ох са й о дн по тес де Хом ХА Ол ж бе Мижує бом лиж пт : ш-тх Вів же в Же Ва же Зап їн Малоуу дже ЖИМ їм ЖЖ ЕКО : и Бе З : то ДМ їх їм пежж та дних пжухю ЖК хх Й
АЖ КИ ЕКО БІ УЛ см ОБО Б о хау :
У БІ Я жхКАМУ ЮК :
СК НУ : жд І еукух, : зни :
У ЗАС БІЛИМИ ЛЕВА : вх щ- : сВІНЕМ ве : ди о ЧК сах ШЩухе ущах дію там ат фея Ма Фах чу соц Н шт ще два дай дз ОбУЖ диж Заи щі у АНА АЖ ККжО АшК са Орів ХиКа :
Х зу Ти В : пак М Шум. ло бечев доме ще ху ім. ЖК их лки жан Ту Ло шує ху ДУ Й ще а УФ 3 ЖАН ЗОВ МЖК сим) Чи дМуж М М лиМ Ма жо : хо Еш КЗ : жи ме бек ФУМиИх СУМ ж то сУМ Фа яку Ук зя им Вуж Ах хаєих Іри. Аа Мои :
ВАШОЖЖО ККО КТК ТмХ Мем ОЖЖжО ОХ лк Ж СРХХ схмуУ ЖЖ Ду сх Ку ЖК :
З За з :
Чем о хшлєм Жуу МПЗУх їж» Мухи ПО ЗМ бе Мін -тУх» дж, іє їі» Хр пеню !
Жрх оку БЖтв ах Ку ХО ЗБЕ ува рус бак ді бе ве пу БЕ те :
Бе ЗЕ БУ :
й їмо ЗУ сліск Ще бу їЗіях Жччу щу слілю Мі ба тах булку Н сбіУ Бе ту Мі Без)» тах ші Втоа тнх Пі Ар бах шіо тву Сбьх іо :
У ж Мо у г ІП жу ЖЖ І У ЕМ 1 шуУ І п о щшАх : пи ек «зи до :
ЕХ БЕ їх щи :
Щотию бах те дач сб уз м ОМ тю бопух Му ЕлІЗ» т Ст Блкю Ще : дав ЗХ шу Й ЗМУ шу Мпа ОСМЙХ ша АВМ ОТИХ шху мор ИпХ мду тт :
Ж 5 5 : сх и ау Лук ки Ми Ск пух така ТУ ХУатіх рія ТУТ Пауля !
УК АМІК КЖО УТ плау бр охХвВе су ІБ ОСЖЦЕУ оду гБхб ОХ слу ко ту : зп хг, їх :
МО ХМ дам :
Ук лу Ям сля щі що чем стяг хі ру й ЖУК іх їзіх» щи Пе Й івшу ша Ж МУ за АЖ У ТЕО ХМ ЗКУ ги ЗА АЖ УЗ СУМИ ОХУКСуЮ :
Ех зд чих :
МАХ КМ. и. Й при Зимує Ля дн МИКІМ ОО (ЛА жо фен Мч уз іх домах ММ піл АТ миє (Лях М : вій отих сСиу БЕК зу Еш СБИХ пу ВО СБИХ У дів ОСИ щЕшЖ А : 3 їх, зи :
Ам КОЖ КАХ Н теми їх дУдеи; хкуєє їх Уке дзмух бум ЇМ дЗучиу би їі и, дих тік тм ТІ хх Й
АК ОХ МУ АЖ САМ КЕ УМЕ Ам БКО УПЕ кКаУ БІ шеЖ МАМшЖ МО МХУ : чащ поко ких з дл Н
У ТУ МІК ТУЮ Й ході ижчжУ Щодо дю Хом: сим Ж до с» ето думи бл м Му ш тих сих Том М : вне м п А о С а и з М ЕХ М В о КМ З В ЕМ У КІ :
Ка АТО Кт : те сут Хі ц ш п в ШК М МУ ХМ пуф ж ух (пою ЖИМ Н
Мем осіу Кіш ди дво о жко ті Бко ме Аа Тих У су ЖшХ ММ ще :
Ух за зам Н
Є МАМ Ал Н сел см ще их суша Я Хе дохух щоб о дощу ах умі о п од Її Н
МЕМ СКМ ЖАМЕК АоМт КМ УМОМТЬ и У МАТ БІ АШІ АК ОБАМА Я МО УМ КХІЛЕ Н та сулох зт :
Ір, ЗІ хг; :
Ех РЕ ж Я си (їх шуми бу Ти Ж ку м С що лох ск ою і Ку МКУ
Мп ОС Вп ОКУуХ Бу А СКМЕ М МАЕ іш У САЖАМ ЖМіЖЕ ЛЬ Маю ЖК з за 230 же хи М зт им Ті ом Зх іще тік їн жа ци її1іх ха би жі бу хх
Ті їм Су йеж Мч АК Ті пи ча Ав Біб 583 да хі Вс БуУ "ух їй 53 ЗА ки хІУК СУЯ кб И
Я св о пеки АНА ННІ Си Фени С в, я. БУША тки т СО ШЬХ їх тю я СУЯ ціа їхум ЗЛЕ сш З хуя п ЗМО їхУю Ма мі МА аж їі сх яри сли Кт ж рам му іх тв СТЬех дух зро т шу АЮ т ту ую ха тп ша БА Тих Так СБпЕ Бе) ех Мецу бат ма Аля мем Уа БО Х ко Б шт їхл хх Том їз иді ие тема кл т пл пхфкє (ру З «дме хо хх зішЖ їм пі Бер ож їз Ві БК сіжЖ ж Бет Зі БеЄ Кіш і те
БУВ шВе
Зі ув Те БВ. за «2 «ПЕ кВ ел зи
КЕКВ БЖ єкк, пух я яви ПМК чо МОХЖАМАЦІЮ БЛОГАХ МИХНУМО са» У муз Ми туту і ко Моз сМмут тує М ж жахом дю Мои, пвх зхють туз ще МвюЮ хм Ве шцео ше мем іа йьа Аж дви Ехо два Бий о УвЗЕ шу ї Я 1 НЯ гоже се тож жити Жеух хи мрян жЖежтих обруеу раю У щі сечу ТИБую МОХ
ЖЖО ЖЗХ лижна БМ жа мал. БІ шу Ж ах буєна Бала Мах ху ких дк че
В п І «Ж ке «й1їх 833 мл ІІ ІМчЕ
Хедаю хх ХАТИ пі З Фі таж кв ві кн чим Маша лив ЗЛМХ ЛКК «ІН жита кре ЕХ у. Же Ж ошето Шум Шум й хо щі що Жов ту уєє келих Моди Ху ТЯ ужіхх
МЕ АВ ЯМ ОяхА КУМ Мих Мах о Бех ска. км Же ЗМ Бус ус ЗИ. Мах хау ї х їщ Ка
Ж З кл я їМе2х Сн Тошк пес Інною І ех Шк у СДИНІх и ох Шетх МИрує ЛЛу ниА УМСУя
БЕЖ СКК їх Бела жо М БЕЖ КО ВОЖОСКВК демо БО бвцх бю ШКО СРИХ хх чк о
У: У «м
ХХ яи сбдує сіє Ку думу Гоа СМ ху питуч сту Ка и їжу пучн К и ша ОН шу ла ЖМЖ юМКЖ МЖе яЖМЛЖ Сх МЕ Же шам КО Ум ом жХхО І лу сш ся я
У РУ с пах о жлах о жАУ ЧУ лох зу тих ох бу Же сх се БЖ их ОК жи о неза ож ух КЗ ую їмо ХЕ Ж и хна КУТ Мі Ух КУТ я жУжіу МУМічян Ми ух моя
ТВ ОТу Бхо ЖБе бРу Бке Тв птТу жне тви Сфу ТБ СКМ ру Еко тн гук, зрїх як п
БВ Ти т жу и ве см їі Ми у ги ше жі що сум схіа ЛУ ЇХ схасих їхХ ж МУ їх СТИХ Сл їхМУ их сеї Зех Мах два обу їм ва о БМие т пз ожлЕ ща ще ЗЕ ори нич но НЯ їЄе Тих У с Тк ЦО Си: Мих пс КІТ ян
ЯКУ МАЛЕ ХАШЕОСЮТАЖ СУ ВЕЖУ БМ САМО меж жо Бпш чия ча яви ших мА
Як Мах 15
Ух ухуниу джу: КО Ул и до ач шо бокмт де» Жуших спшуюо пре м СЕЛ гу хх пу хо мес о мдх у їж жом іїмаб о Бекі Бо Ядто Кто чйк жмЕ хв ооек чі: тр чл ха РК) Ми зЗенх Та ул фут Ли пожеж зі лиш бичих ТМ Шу ів СКЛ ух й їх док осел БО їж Ощю жук а МдаА Зм Ки жо век шк Шо Ва зх 5 чив ї13а їх ха
Фодх ХА кова топи хг лом пе ик жди бени С ЗК яю хм Ст ру Ж
Мена СКцХ Уаі йлА ме Уб Бе жо КМХ шех вже БО ба веж бле са дод ак сп Зк ї4х ЖЕ ЗЖЯ бо т . Сг мих То - щі думу пого дуб тм айва ЛУреом У тс Тосуу
Пе ни Байоїмає цем ЇТ1Б рхО вБи Бе цув Віа ТВ Бе Зіу пем ей та сту ж 155 то ТБ хи дя тор МЕМ я я і чн Ач й га таці реа Моя ТЕ і ую їле хв АЛЕЮ бе ох: во Маї вЕЙ Чув ЗВ де Кей Ек У шо УКХ
Ух зп ат
ММ ЗХ щи ки готух Фша що Ах и сі. птЕуч Мухи Жодуюу тову. о УМА Фк
Хі во пе ХА вхо і Би шою ве реа бій Пе» БТіФ оди мі ех 12уд зпипа ко
КЗ их вся їн Ле ер Мох: щоучня Щоадих СТ о Мних С мо сумкид щих щі ри тих дови клє хаз бі Ба лоб бах іє лЖЧ МлХ У лю жкща ос Ж ха ВИ І зи 215 ве
Токшх ох ких. Сиру ти Нв Чо ТпокІх. ди
МИ МАО АИА СКБЖ ОБЛ КАСУ мА ЕМ
З ЩО
ШО ге гу дм М саке В
«аск плчиуіх «ЖІ БІЛОК «ах пагтіїфиав пшкжпе ик КАК МКК теж ФАХ др шо «ам
УБО ч жо ах от І бик У ау МА М У сих с:
Мат о жнЕв ДЕ ому емНнх мух Тс їв Зх дв ди діа ЮБе ща Беж ЖИ 4 є айв ЗЕ
Х 5 а І тому Ж й ук їУктх бе фТиж питу ЇМ ті тм. їх. хх ср бух о ухия МК те їжи їі СіУ БиО КБ Бей вЕОМ БЕЗ Хі Би вис Бош отих бек БкО КАХ зу -к т
КИ У о сти ау «или КВ
ША ЖАХ шк можу «ХЕ х 0 БІЛОЮ лю гіпо уд ик ее Завахав слеЕ жа капи па хан МИ жде пУЩЕ пох дів дту ТД хіх тайм Фу та щує В тва вах шоми Жду
Ме рйе дер бе дви БУ Ті бец са Ада АБМЛ від ББе Аа жеж АВ ї Бо ка М
Кома Жив А Меч и Ж чих Мк. пло туя фути ех а м. топ, Ще Лю
Мем її о їхуж Без тах сбхкх КО КСО їз хо Жко же Ялю дез КЕ СУОх я па ЗО ха дужки, Па утіх ЕТ ее ха тюки те їла думі тдж тах дзаисиу сБЖжеМ ОО ДМ «кі ХО Кп са Буш ХпжЖ СІ БХс Суп о суУ АХ СХИЖ АЖ Кт М МУ зе де ке
Ка ж ет ул жХуєи сту усу ти ГУТІ ЯК бах ТУутхи жи сх сут: хі б фут Му :
УМ ЗОЖ сам ВЖО гл у во таж щБіУ ЕХО МЕ ХУ УВО СТЕ Сі рКо : що яу ща : сехуи т хе ЦО беКще У хи ЛУмух бфімє М ми Сула м бе пути Фуко зок їли хх Ям Н твжЕ ша УЮ УВУ Сблу ВО СТУ Ах Же Тмх слу вхо отТве шеу СА ТВх : ща ККУ ТЕ ШИ :
ТУ бе Се г лим ОК. хх уж Сун тт ху ДЯ пі лю дує. рю ху Й
ОІЖ КІ ОХ ХУКЮ УМА СМАК ОД БЖ СУМЖ ЗУ МІХ ОХАХ САЖ ХО ХАЖ слу : н 5 М : тА СЕМ м си Щи бро сяк І чу. я» фииих Зрре їде туї ною уч Мхуия : ща СелХ о їхКу ЖЖ ТИХ їхМу мах жтлх їхкую ЖИ СТИХ бум Мао мХ їхму БЖ : з зх З :
ІП хх Я : схуче ки ил ха ті їУєи ЗУфує тлі Ід сур г хи дУжею Кукуз млі кт хі суфух Й ве су Уві Тис САУ БО пу піу Зв) УБЕ СаАшж Би КВУ БіУ че СгОХ : її 155 : її же МУ ХЛ сх Зак жия Злз ек с ЖЕО Ба У ЗМК и. Еш Су ча ін Н м тлющ од Н
Кк: ЯК шХ Н дюн ен не ж НН о ие СК и я оо нь о Ь Ш Й
Бо Же їжа де ши Од сХАВ сх ден ОА КА УЖ ОХ СК м жна КБ. :
Ух АБО І Ії : ху Мі тю Ду щем Ко ТУ те ЖЕКи Ух, ТУжеуу. ло їх ІХС І. :
Ма Ск ха Ва сим вав БЖ ЕМО СКцИ БЖ БО зей пие БЕ с БЕ Н ск «т «жи :
У ГКУ Іх :
Же Жах лим о стжує ха вах Вед ох бо ща стМа- ща СИМ ду Крат ую :
ІЗ ш- Ж БЖ ща ФМ МЕД ХІМ Ха А ТИХ аа ХХ даром 0ИІХ : а Уа зай :
Ам АД Ак Н пає слу мкм М т споша тЬсм Мои одадту ЗАЛ МлЛюм 1 І.:х ЗІДЛО Ух ЖИ шх удо ! зЩзах Зх бЩух шал ад А Ж схе Зх дер Ер ТИХ ба Майо осзау ІНВ да : чех сл хугух, :
ІВ «МО ХО : чия Же ШУ я риму бу Ст і Спр тацію бо Сфричту Студ стру МЕ зх фтюика ! ж ЖМХ їх у жа ЖАКА ЛОВ ОБОХ ХКА НА ЖОМУ ла жд М дон їх У мли Н п пчик домуху (бу му. Момох Ух іх жа Філ хм гм домах Маю. ам : с-м сСжа -еов Сх Ак оба ха КО гів дк соц сх би Дер т Ха : "ак ше рожа плащ Н аа: Ж КОТ ТАМ : жі Кк хе их сне жк щих бом блю Ж) би брак вх шум б ут ща : хаАщш су ЩО ОхДЕ УМ дими Бе ша лій їшаж ЗБК о саУ межЖ о ха дій йдад : зац Б «ка : вело ТМ «АТХ Н доме хз дом ЗМІ сл (лот се яліах Хоми її їі Ж бом ля лу ту !
ФМ ХХ ХХ МА їх ЗМ АК ЗУ ми їхУуМ йо с їхОУ ШИК ОО :
Б пед пези :
БО «КМІХ ЕК Н
Фе Жіх сема фур соМах лм ЖІ що дою Мих от т ру хбруху кю ту ий :
КО ОМАФОРІВА жо ТД Ту де У АК ЖОВ АБО ЛОВ ЕХ ОСЕМЛА ММ о Ммую :
Ех Бе те :
МОЖ ЕМ КЕ Н
Жоуеу сф ле думех СЖ шо их :
КАДЕ СХКИ ЖУК КА МІК МАЕ ОЦ : хз я :
КУ доле :
АДМ МІ Н ех ШК : пла п Н
ЕТ пл !
ЖАКА АХ Н
ЗЕ честі її жемеохх : шлю лЕВЛАЛОАЛІЖ ШИМИ НВ. : тали щшЗ : ви» ЗУ :
Мах их сх УТ Ті дат Са б жди Мих спину сйкету СТ І3 би дл ст дл :
Мет по да мощоАм дал ожАМм му УЗ о тУЖ ше дамо АВ б АВ СУХО ЛОЮ Н
Може: жа он НК Бен А Ел БО 2че ФС Жоамлї ха пак СЕ нед до їв: її ше дів йія Аа Тра йно БЕ пех Са а ау БКО ОТВХ яЯ я х і ек ти лох
ЗО щІх ду соку ЖМеею фуру лу Пуер бан Ши тм сум; Буре вк їх
Се БК КО ТЗ Бах пе жі пу цем ОККО УлпЕ соду тк БВ стр ех і чих НН ши ке ту вжи пОБОНМТМ ро нах НН хи Вдстілих сема «Щацум Зх сеї сзевах дозу їз дар тлу Же бок сту спір довту Ж Хояз Вл см щі
Мем ек бу паб ба ха БА му УК Зак Матв см ав с ва х У хе І пах ле ншН ла У ОС У то че гово пої а оня Фе кує Ток: яищ тяж Леви Укр.
А Же ГА жеу Аа й Аа ВІН дви ОСЛО мех хм ва Жду ХЖО ТИХ
За Б за - ро Я т слу Тхух ук Ту бух ШИХ бе стхах тома. Тер Опт «ЛУ Уж; жає лк вл їв КО о КЖО жи о Бус БЖ Блез ожиЄ пе БЖ МЛК їуБУ Бу СУ схМУ ТММ м віхи пі труди сти М теме т У хі сеуічи УЗ свя У
Таж ОА Жта Ву пу АР ТВ су ШКО ТІ с-щу віз Таж бїу шву ТтБ5 ща У За обл хр Му ут фею ТИМ Лу Ха сля 1 Му Три сжхлау дл доли го хх їм ай ЗИХ Ж ЖЖ Тпх сих Уа: ЩИХ пу БК ТП бом АЛВОТИХ бу ши ст сті чиї ту ТІ г пе ки «іш сухі М сн ен Но ти пп юки ПИ аз ті пк про таж пі Аіа ТЕ бішж беж ие пом чді ик опе Бе их сх 15 я5 зо 35 мил мої Меч се 4 АЛ до пу ак шир ПОМ ун сах ММ Ма (у бух рю тик ої во ВЗек обі Вів Яїйкх ббож щех тлпх бу ше Бах ЗУ жо ех 4 пх УкЕ лях їп5 ї1п5 ке тра шоку тя фра ди Моє а В аж СКЛУ фу тах Му лу ХЛ м ру слу ВЕБ ТЕ зу БЖО ТЕХ шоу Кут посі Ж КЖшОсСК шАМ УМХ Су
КУ зла 15.
Ам ДИМ в
Узяяих аз тя ко мен ти Укуси цею ж МЛ ощо сп їх лхутчих пік ба що
ВХ их їж Ві охмя сш БО ХМК мух вія хм ол МОЄ ХИКОМУ ІЗ чик КЕ КБУ
МЛ КОКУ Зо уж: КА хи пев Уа и Ха Ми (си о фкох мМ и хг м и пу. ну гне сім Шеж ТВО У ЧЗві уп біУу Бк отвЕ сбіу ті тп осХу ек Тих
А о МУХ ї5З стік щу юку жк Ху и. сі ги що су Її пу с 3 Ат ДУ ер У ваш див ам сю ЕЕ ХМК СІ ві МЕ мАУ ЗЕ МК щи м МЖАОСЖМЛК СБАХУ за зе з сец
МЛЮТЕ Вих Мій зату вт ФІ сх Мах ру дію фе рух фі а у ді мли сим лю пщдк
Еш ви сОСХУ ге рпах Ам БксосКпУ ФУ Ам ОСІ ХУ ТПХ ТПУ лу дех прут т 157
КЛ АБИ о тех ї3 хи зн у ті хи ХА чує Зх ЗУ; чує їх щу су ТУ хи ЛУМИ бу
УМ МОУ МЕ МК У МмлОСУМК ХхеУу МЕМ СУМ с ема ХМК ху ОКХ ХМ аовре сот ут к. щк КНУ шале Узі ю Ім Зам зе Аїд; тю лу шум спа стік ул б хх
Ко У вла Тпж слу БЕ ТтТпВжОощшлУу йха Уж слу ех тож шу УВО жВЕ Куу кругу студ пучка
ФАХ ян КІМ
Фу Ме Шило Мі Му Шу Шк Мн КУН ож ме й Ди від Му й у кдд :
Же м жу ЗА ЧЛ Ам ЖЕ Мол ау ад сиТЕк у ЕОМ БпХо жа у жЕх Й пл тора Ух ку ! яю ла рок УЖ Н са їі їтроу ба ттізх ал сії: бучу их щі Біщ тах іх бро тку :
ЖОМУ БО ГБЖ Ам УМ ОСКЛЖ щу гл УВУ шоу МА ОКХ БА БКО СГІХХ :
ХХ З ХУ : пу дл у У Ху спіуд жу що фу хи сх Мр ТУУк ЩІ: кю пух : іму с АЗХУМ и ОМХХР АМКО ХМ І АТАК ЮМІЖ ХМК У ПОС МА ЖЕ Ук Н сих -кЕ пре :
СЕ КЯЯ зак ІК Н о; СО ШК :
Фе Тім сік З мем бі жа дає пах Вл пає са куму Зам са : ша УМХ су дл ЧаХ слу шОЧИЗ ОХ їхМЖ кВ ОСС Х саму БІ СИХ їхМу тю : сю зах -удх : «А «М ке : пежеи ЖУЗ и имих Кури ли хо мркия тки сти МУХА до Укфремо дир у дних Зутукч Й
Тв сЗру пдв бе біу Уві ЗБЕ щіу БЕЗ СТВ біу вів рих пі БКО о ТНх : пог зац ж : чаш М Ми :
Теж ож т р ця ІМ ира: емо и 13 се УХА ких сам їх ду соки сх :
УМ ЗКУ СКУ ЖХМУ сш СумА фхМу А ЗАТ ХУХ Му їж М Ух ЗУ Са Н зла ій з4к рю Н
У ще А хо : фе СИЛ ДЛ ду Мн для жк МУ як до ЛУ ПЕ ця зи МІХ ст ху дл :
ЖК КПУ А А ПЛІХ САУ ЖЖ СсКОПХ шу тая ЖИ су Ж УМ сх сх : ус зх чи : их вок ХУ : муть (лу спбуут ситу бл у дю Г бите тіль їх у: би Муки Ма ля ит хи лукум Лу :
ХО ХМОМ ММ КО СМ я ОЖМЖ УЖ БХсю ЖК СІМ Віа ХМ Олі МХО МУ : дах чаш жк :
С чи пог : пк КЗ а2Ю : ті В сміє пут хи бучих ОМ йУї3е Жлов Мах Фі ссСвух СИКМуюо ФУїлу ли лиМую Буча Й щі йаа тТНжЖ шаМ ЕКО ТМНх хУух вав пу ху БЕХ ТЕХ бод та ТИХ ху : ах зво Зк :
си бе гр Ср пу са ки. Брю Фа АБ М сля Ве ор гли рю
І ОТКЕ пі Же ЖИ су жо Тих сж Ага оСТех ХУ СХ ТУ -АУу шЕЕ чиння туктк ах а З «У про ста; Херуу мою Фк а рн суїлю Шету Ме сля а ве си бу Ну гЕвх обу та тих са Майо пу оскм ЕКО Тих Фбку ЗУБІ Твх су хе тцЕ
Б заг ЗІ: лих
Зв зо 355 по й цк спхфріян жи думу Мф йти М хи хи Щи я р хи бутті хх сїУ зві тБЕ о 0Іу рез гне біу діа бле бі Бу Жде б1уУ да тиє СІ
С за за щ
ІК 4 АЛ по с тях ті сплю жі хазих Ле Уфа. ср спе я чия ММ юю Ах век Тих Су Уак жах км ж ах їж ріж Тих хм їйжоз тих бу дід ту АСУ ж
КУЗУ А З пф Уч фу при іх птоз рух г їХне рф ТАТУ пуер бр ххх Тури ПИ тв Зіу те Бе бі ес ТВ о сО1у Бк Тв ОобІіуУ Уві БД (У Бус ие щи зх вид
ДК щиКУ граю зе мб Як Ухчеу сіре уч, ДЯ а пи ух єму Мою рах ллюі спщю гіЬфах чи мах тик ох ВМО БЖ ССМИХ ХУ КМ ДИ їх Ту ше так о щ мадО ЖлХ О їх Е КЗ
ВО фх Се тах УЕрує жи До М г жу ду Же й жк су хе ВТ ул мк ру Ме рес тни шщіУу віза Тиж іт Бл це сФіу дів тТве пі вза т»ж Аза тце ящ ОН ДТЕК, КК
УМ ОК солі ТАТА ние Шарю Чичує Там дім тих бом ЖМчих ЩО ск ММх У делу дл ушьх Кичех м
ЯК с Я БУВ Оп дош у Бу бум БЖ МИ ЗЕМ (КВ ЇВ МУ ЖІ СЕАТЕ
УК ща іа дж ж ше и (т хе шум пах схе ща см Фрухе їх сади Мам ул сб уд
ЯАЖАХ Хаш аю щу ЖЖ Же сей да вв о ше АХ ЛЕ цем КК Оу ду
ЩЕ па УВО
- шо що ж Ар жу яю Же ХЛ хг ою шкі жує МІ й Фет Ті дл хо тиж дів ої Уж лав оїхкУу зе ха УА АХ Ебли шЕХ дів Мих 18 ДИ сві
Щі БУ БЕ де Ви «дм біля м ті ли їла мм гм 25 и Ше пт дщдуЮ 25 да дав їм) ам ТЕ Оу У ТеЖ ілех ін йхч бі Св днроаБХ 5 ї дії пе сп
БІК вени шим тнє рія хх бимх У Мих Мису ттіхе КІ рух тіж Сб ку й ре спе ж пес ти дви йба вій це риб слі ді маУ сій іє Мах бек Зк хе
ЗЕ БУК зи ВО чих о Коди: Ищат томі ПЛ діа дещо ти лия (ау гру ух хр ж ки
Так Бен СВК їз ЧАК Міз о йда те блю Бу ТК ШО ді фХна Бех ДУ дл нт «ик
УК я: Вт
Жде Ми й ск Же гу І га їМмчч Мал сли ам йит Вп бут дл
Мущ мий ГнПЖ МЕ КАЄ САУ ов КАЛОКИС УФЮ це УЗ РОСЬ АХ ВХ АСК
УВУ АВ УЗ зати: ЕС О джщі ща їм. ща Му див ММ тету Му и Миру ТЛ вк фас до. хо маІї мах Віз МЕЖ Мо ЗАМ ща СХ ОЩЖЮ ЖИМ с ЗДЛУК дом шиє УУ зп ВН БУКВІ хе Шах ІА й регу ак В то ті бю гі босу Ті ку бе ті
АБ БК УФі лій АЛЛО ТОХ дер ола АФ ЮКЖ диМА БІЩа БбАФОСКПЕ ШКО щАУ пк що Вл
За па пли
ЧФоледя гмією ту шию о що ле сх еах о духу ЗА ж Сех сшХдую МР Аломо хе ж ХМ ду Ма мі жаХ СуУЖК ІМК ж ОЖХНІ ДО КК ССО УМ ОХ
ВЖх БМ па чюЕКМи Х «хі ДВ ск поч : кмин БУДИ К : пз Мая Кі двух : дя ММА шЕХБХВ :
Укл т :
ВИ и Я ! «ет сг жо їм люк зго ЕУвих Ссбюцує ФПеме м дів Хі ду Щи їз Ж, : ме: щем де Був БО вхщ Бе о аБХ мя Бас БУВ ХА Буш МЕЖ САУ Моє :
У 5 За ве : бух Мою и божа Укуси Щоужи У хх ТУ: УХ їжа Ухаєих ЕД кю Ухічту Мкюмек: їХаєкт: СЖ У Шик ож Н щожх Зіш ек БхФ БМ о Бем УВА п5/еж ЖжО ЖжМК Кбе Бо БК діа БОш : пе з :
Яичох Уч Лоу би ММ Я ах :
КО ТЛХ зхакІ Ж ГК ОО шУЄ : шежл тя есть : вас Ух Й шля тк : даю АЖА Н куту. У : «У пОМИМ Н вх ней ума самим : адм ІМЕшШ Аа ОУН : ч СЯ т Н едцих т Й дтУк дує пах їх и пух Цих о се кг; Таж ли їх «Чу с хх Й ві шви хи ів во Зжхц гое ан ше БЕЗ Су Ха Бу шШеж «с тре : ї ц їп їх :
Уа МУ шо Ух Ууутиу мохажа У мах МУ жи Ухусих б м хі Мхитихи Укуних Жов Уже бе Й
Ваек хів Бек Бус вжшо бама Зах Уж Ба жлйх БМ Буш риє їМ-ш рус пек :
ЗИ ж зи :
БЖ КЛ 35 :
УХухше ЛЮ Том Мк СУ Мі Ж ще смуме М) їн Муяє п по Кл хх 3 Н киш КЛ БО БЕ КМ мо МА ММ САУ Мис КТК САУ аЕйоуми «А У лід Н їх ве 5 прю птах Духу ТПука я ЗЖізмєу сф Ух тях ями спе бхуУ до плов Де сту де ївкоіУ Вдуи бдс Зі Зфоа ЖБК обі Бу їде Бе Ай дів зав оба» аге
КН БО
Фо ЗЛ Ж чи спаму сх АЛЬО МОР Жук УзуУруу Мф осбриуч сирих ому «Клося МК іх зі був бо МУ Аів оса! бек Бе Трах Бо вже Зі б ше ШЕ ц 7 зи о го 1 15 5 с коду рук Ура; ад тах Тл де й п зх буру бр селучя ву чаї Шах ТУю У дя Іа ге Па дай ша лу Ша ру БУХ ших ЕХ чк щ хх 5 и З ктУТ МиУвжних з кухни ХЕ хх. г зи кох Духу ме ут ук у хрихних Сг ТУ. Сеутих чаі хво Вей оОтТни Бе ХЕ Віа Буш Хі Аве осі Хі Теж пбеай БЕ о БеЄ -й ще щи
НЕ їв ІВ
У. ц одно. З кх, ши Мк ох ин ТЕ тоди Си пис ЇМ еощрхю ЛОТ «зи Шолимих
Ліз дет її щу Кбе Ал йо Жих Ме їм тах тих век рик МІ ЛЖя зак докт дк
ЩІ ІВ 55
Ж оажо УМмяє Хр усе Тв шлх бук ХМ «оз хр З що ми ту ту Кк г ї1е ТБ Тіш Асх був дм о Ббем сві Щек ві Віа цех сів те Ті дов
УЗ 1535 М -щ жи ЖИ Мн Кк мох що ки судин їжи ня Ж оюжуу ру сту їх ба Пк
Ті пі Бе йек Віа Вів Зі беж бБіш тТМс Бей тих Маї 01у Вес оБеЕ чих ч ей ік тай
М по А ти дат фчох Бо
ЕТ ЕМ КІР
ІЙ та «ВИ» 73 ями ШЕ рани ІТ хід АХ БшиЖ
ТЕ р ше В бх тру тмя м «М Балі род сожжма дит ох : «Ми т : тире Хі іх Мана жор Жук Шиємо и В тя чех МОЯ У Шуєм Мило гу !
Мас о дев сх ТУ Цанц ЖЕ шу жів ЛУВ ХНаА ДЕНІМУ Ше су ЖшХ Ма ОхАуУ : з х Ж та :
Ж 5 МУ ей. Й
Шоу СМ У її ему Мих шен сш «сл Шмих ру шко чую ТИМ Кох Н ко ТУ Се) кю бко Ме сім КО Бе осбд Є шШех ТЕ ху : с тк хв :
КМ У -УМ Й тр тя та : ване їх Н ик: тт : ее ки КУ Н дими 0 ШЕНКК :
Кона ок я : дамо о фМапша Ми схе : окт за :
ЯАМАКЮХ ся : масу щитує 23735 МИ тор а ри Кз та тім жи пре ТУТ уч хв Ст :
Ме жа омла Кб Пем о мя Бек Але Іа Бо дБ ОБКО сі швж ЗМ жу :
У З М ЛУ :
Сухе Тую ух Ходюро беюле уж пюкоО т Жхжау ху Ли бе Жим Пучає Ух ТУхкю слух Й ха о щмах сві Бо Ви Мех йог ЗЕ шоу баз Боже обБек БМК осУуМу пхйа ТвЕ : ке «жк з :
У ший М Н
Тл и вус Му: (ік В мм жу ДУ МК УТ ах ди сМфію «тт жрУтх МУ гу : шу ХИЖХ Упх єї У да БО у ва Тих су ащл Тпх хм шко Тух тТЖо :
Зх «х х Й
ЕХ І З : ше те рук ЯКОЮ Мих, Уже «шу Жив жу Моди. Кощух СФЕ. пеки мо Щоки. МУК ш Коник мух Н
ТКА ХМ у ОМ'лх МУХА КМУ лом ях ММ ЖИ СУДШК САМО МВ БІК ЗУ У Ме Н
Ук ЗИ : то-и Ж3 Жк ФС ИИ 1-56 Му Ин Ж том їх ті Фк Н їмМмО Каже Ха чех Бе бай БНшО ІТ М соя Ба ПА ЖЕ : 5 ЕЕ: та сама МУ : - Ай :
АЛ КО Н пе зкж вдихи :
Ле БК, :
ЛУ 3 З ач под ЗфУм кут г : ху ДИ ДЕ ВИЛО ЛЛЛІВ ме тем А иа ГЕНА КА Н «ад ОКУ : гару їх ої узух 1 хе ге хх бух фа Її: Же бло доц тд бик, бує ЄМ : шШеї Ве ем оСаМ ОІУу ІУу Тух меш сіб дО СстшЖ Аа БУВ о тКЮ ТУуХ САУ : я х хе хх : ня ТЕ вже. ПОЛУ : толк божі лик щи тю щюжі Тим: Щбою й шо ому ох ри» дозу ХХ Що Тих Н ша ЗАТ За зе УА БЗаВЩщО ЗМ шщБеЖ а ЇМ БОЖКО МЛш БІ Еш ФММ ДИ : хо 5 З : хг сла фе МУ хм пе те Ух Жеує ба ох би ХА фунию Ман жу Й са шхж ЕКО С ТВХ бе) же жо ТІ: ше йо їз шах аз БО ТБ ЗхКу :
Зк У я :
Ух и ве : хи ЇВ !
ТУ іх суд Н хуя УЖ Н -ухх пов ри : ха ПІ Є Й кт, прий іт кої Мом ому коми їх : я Юх засл ічзв зелена :
Ах ЗЕ Й «КІ ИХ їх : оз бро там Зла си ЖУК мож: Зв УТ Ж ти их сгдую бух чо 2 :
Ме БОе ім бе Слу ШІм УЮ Мих ма дк пт ща цу ТКвоОтжІ щу : і СЯ 15 їх : та Ват бе щу г Воках Тайру бут до хбдіх шву СШОих сдоадту жу смт божі :
Їїжнл Лена ех Дю о Мшо ДЕ Бем о щеХ дім лази дах Біне де З ЧИХ АЖ ЛЕНА Й 5 З :
хх піч жо у Мр жому ЛУ х іму СТ У Шк біле С Фк ХЕ іт Лу гу зах їхім рЕйЙ ОХМщх Беру МЕЖ КЕ да ЗжХ ЕЖО ду ШК шо ем СКП СХУ зе ях хг
М ве ву жур ту «Мк ил М шлю СКУ ІК ФІ ж бе Мр Зло СД пла пуїтею її бує Так осеу БМ ОЖИАХ сю Де НЕ пу БЖ БЦ пу БО ОГИХ фу КЖО -кх «ц руч пи а ТуМ дбає дже ку буря КЛ я ХК ую Вуз не ехкухе гла дж би ЇХ же Хати. схе
ТЕЖ ОСІ ККа тах ЩА У ГЗК ЩА АФ ЛІМА БО УЛЖ су КО СУМЕ ек -вг -к пе
У т ТУ МО що пу Лю и лика й чи Жуки их СИжа «Ли Жде сти. Ля ХЛ я сти З, пам фе ХА О БІМ Ха УЖ Ос БХшОАК о Озау КАК ОХ УМ ХЕ ООІУ ех, Божу п
ВЕ см 55
Трах су Ге печу СИЖкх лю двох Фах нн Ж рум тах тд Фу Тож
АОС ВЕ ШУ ЖЖ СКМ А БО яю КО КБЖ СУМ МЕЖ РАД АХ Ж АННА лих я ри Уч
КЗ во ЖАХ тлех кри М х со ух гу ХВ у сиву хни чар пк ях: Меч их Ж в Ту: тус Ма» ій В гіф дву Зам ват СК о УвМ СІМ о ха мух УЮ Ха БК: 15 ІхО МВ дощем Сех Стр м Жде би Хр че ТИ пут пр йдем пути (и шу тоді
ЕЛ ОВО Лі ІННУ ХМ МЛ АКш ОТО бхзлх Ж АЕНМ Шу МАУ АНА ХЖЕВІ р з чкЕ хх
ЛУ 55 ЩЕ і г бе Божа зу а Кл 5ЖЯ р Же Чую Кі ж ту пу То біжи Ер, суки іа би схе діа му їі Аза Хі ре біб Тв ба Бей о Тує УВУ ве ех кгц в
МО МИ МИ ї6ї
Жмт мем січ дл дж СИМ ха й Ж окол дштву УЧ тих в пкіу Ж
Агро ху ДЕ АП ТМЕ УВА МАМ жа СоРЖХ Аню За це): Айова Гуз а дк ст Усзи ї55 7 Ах
З пу кції жі хто г хи 35 Зх ду й «лк т Тихі бо гл ід вкоОо ові ів Уві ім бі Бе вка 515 ЗУ по їй Ба МБ ОБЖ ку хи Со іо ВЕ хи па їі хк тлу Ву ті шу ри КЗ и мех тхриих Ух бю дих ЩІ що ре пи зви» оОЗіуУ Май аа Ха а уп ба ХМ де їм бує бі вія дав БД дви хЗ5 85 355 пох сту сім жу Ж С су умо я чу Уоало щолті Усеку бу М х пити СТЕК бат: ба вх УВІ біб біз ух Ажеа зів Мен АЗИ БтО їїе Аз кто ха
УК туя к, ту
ЗІ ВУ Вк дя РИ Фк СК у шу я ТА. дод рок Си ши КК 4 Фллж бок дкч Чаї Зі біз Бе дл із сіу Дей Са Ше Шех хо дів фу Би срус «уд пл мал г зу Се заг хх ке ке ша шкиИ ож Си ММ ох Може ін
Яд АФ ро ак бе ме ке аз «й
АЖ за кА КУ ж ся дет цих «аа ВОК. «ий жЖастіїав секеци «Аа ТУ
Ме вер оду хх Хана шек о шеЖ БУ сей їз Ява бо лю одна лена Ііу ч 15 тв 1 х що Аа
Пруст, СМтую. Тіхі бу йому зику Жккиит Туз сМИрую Жмтр Ше» стпррю сих
БЖ Жах їм; Бут Зі дос БЖ жо МлдхОаю ба Ми ХК ТУХМУ їх ВЕН 35 стю ща се
ОО Ех пив пе
ХА АЛЬ. Ка «ВЕЖ» ВІЛОК ту, лами СО А стеку ух
Бе яни ТАТИ АОРЛНИХ КЛЕВД ЖАВ ех 5 бук их (ІТ бимх тм ЖЕУую фірух бУМіхе тод зе сег те ее т.і тота хх
Ще: дв оса Сейм їв же шШех ТМ цем са дм ще дво беза Мем Оу ї 5 Ід 5
Жхиеиту ки їде т Ли Жов їх ТУ лхе: Пам їх їж Пк Ку бур сйри
ТЕЖ сХмлЕ Мем о Кшш фа ха би БЕЖ БижшОУУАМ їм БХс Же баУ БЕ ОСУКЕ
М ах їй пах Шев рію їла пт сію (ку фон Сію (їхи М сп ЖЖ хе ху хм сухе їж ОжЕ СТИК їн Ку оОЖлк ку Мт ЖлХ ХУ БК ОСУМЖЕ їхіЖ КЕО ХМК ух
У хх Ж:
Х Зх ЕТ бут буває стілю Швук см Піх Бр б іху Фр сим діжу Шк о млу фл аю та
МЖК КАУ ЖЖ МХ АЖ шЖО ОХ щжАД ЖЖ ЖИ бу ех тп сжхУу Пец
БУ гру кл паю їж юю Хрмі Сі тлума Три ТЗ хи стиму Уфа тУТАІ Уж Ма жу У дах м
УМО ММ ОСКМАК сну ХР СХКЄ Оу МЖК СХ Бе у КжО ХМ Оу КО ТЕ
ТО ТЕ щи лю ин х Мч дулю бю х МИ би Ми тую «Утиу Хо суч Ж кеих я гак
Уж Же ЖЕ ЯКУ ХУ» ЩИХ Му пе ЛИХ Ж бо Тех уж Бест ТБ щує
Б Зо ЗЕ ут дуду; пхує щу бе іх ро буму стю фроу ож ттїзу діях Мб їх
Ккхо ам ощшеж дв ОВК ПУ Бк жмуУ бу БУХ СЮ су фі сКмя ЛА Взлх
Ма М ха
Єву Де Так о щУчю М ож ухютиу пк сл ал од сію сх бе МЕ (ху Ум жщх ве зару жил дя су ЖК Уч ху У ХМК О ХМ МАХ ААМ хну мЖю їх І, ри
ВАТ хх ХХ йугу Злих піз шушу Кох гі еру ОМ сліли п бує. Хі буру СМ МІ хе тич вхо дев олуу вКОо ТУ пу девогБУ слу Шо тцх су Швх ТМ щу ЖЕО ее чаш Ат 1 І35 1 ттрижю З ших урн их туту Уфа е сизл и дууже к Ічух спимо КМ Ху пиву
Тв Оїу ВЕБ ТВ сім рРюхз ств зу БВ ТВЖ шШІМ БК ТтНх бу аБроОтТВЕ чащ уки тки з ке ї45 ї55 155 1 ге ху сере ВЕ их пи гл Щи хни фа ач сб ди и хуя гру бує хо Биж ді пек тих бі БЕЗ Тпж пі вв Ооти Сі Бус жне біу
МУ МТ ут
Зам Зиля лю бика Му Сх ря ру лах ер ЗМІЮ Є» аю Меч ки б чек чих ла ЕМО ЖДЕ бом ше жк ОЗ пЖже ли З век ЖУК 0 Бо - ах за «щи
АХ АЩУ АЖО ссткучн г щх прац ти дих лк У Фея би Ух Шеазеу Ми пулу фут пу їЗж щіУу вро отих піу вхо ТВ пі ших ТВО муУЖ ЖоО ТОЖ Фу Без Ху вк тут «тус
Дей лем ки ти СЛ р У я Туман Тима їжи: (бе сфер» Сеня ія Ж шу ДЯ ки ЯкщЯ хе году
Су Хіт сь рхоОа бен бо Жах Биж Чую ЗИ Хі МВ ве їтоУвь пи Су зв з тд
Ам хи ших ж ли ДК дош ХУ ОД по. ФЛ к, спам Аа тив рок Лу ме ока, азів осоУ В АЕюв Вів ТК за Аше су Баш ЗБ бук аліа Кут Мб бар ат; Ех тт су кас и ака РИ ЛК тай лдУдулт гучне лшн ху мл Іо Ж отоимо ха а щих 1 лим їх. ах, жк А хаж МО йАів Мей дів БЕЖ Хі жМЖ вве дів іє Віа Бо гтма пиц ях птагц
ОО КК ХУЙ дя піх Шрту Сток дату СТ фу МТК жо сних Тих С зх ММ у ши СЛ ду. МД жу же йо Во Хі ва БА тех Був Ба тТук вв їхе Зах жі Зі БЕ й пух ТТ ту
КИ Ух ж
Шерех о дал ме тлі (у ее Тіні бл до тат тс УТ пт ло я ту щіУу АБИ ОТУух Ті а Бко Пе) КТлє ів ей їжа 5ів Ал оує бій Її сут, ча лютує дО ях АЛ ху 1 же силу уєш Ту: бю ою т манія йоит М: хе І
Мао охкосу би ех ВХ Сей ее ТУ дк шеи Сл гів БК га дво мів стук «ак рт зо за ЖПО цу; щозух ЗУ; бух бух Віхи щи тиху: Щи ро бухе У зч Щеуу ТУЄт; щу цу до бдо БІ Бат о Хуюв Ме Здаю 155) Бай Бдє бах ля Ба о МХо Бущ о щеж чиї зт; дв пк а ЗХ їжа яю Км УТ сдашех схожі СИ; ує. Жачре Мокеіх Фрушю МИХ Же стору Сдох «аічех сдаштх ЖИ п їн УФ АЖ НА БОХ бе ХНА леж му ЄЮ На де ЖІН АЕН ВТНЗ ут ж зак
Зах За 335 лу теє щі их пух ТС му ж тлі Гоєумю ї3Урих Уйуї ЗД их ЗТ ля зів охво вів си пес Зв Є С1У ЗуУуш о см ББш о бБЕЖ ЗВО ЇмУЄ Удахо вх злаїй 5 Ко и МУ Ка
Я шу му о сжруичи дою Жеиу Стих жОбчиу Мі й що Улціє ом СИЧ я лющшає ли де су
ЖХуев тех што КЕ БО бу Бе бл й БЕХ пе ЖЛХ ех ща сум хм
Зах зей зе
Зх БО «АК сш ше Ух ніж п уж йдгй ст Су ках, ну ки Хумрали УУХух я КТ ше Ж чу теї вва оїТів ко ве це оМме би дае бРу бІЖ бух тТви бій Ява су о 5 хи стра й Ме й ло Ме чих ДЛ сла бичим Ло и са (ЖЛах фжхту СТ сю
Ті вжт мес із Меп о брсе Авфвз опех є мМаї пешхМ бе си Вт фі ту жд суще зак Ат 585 3 Зх СУС
Же щохєу іх УТ ЦЗ ху ХМ и бббахи дугу бум їі дущ хмуу тих Мало жу хе ух
ХТш БВ йпежЖ сб із ТМвкЕ Таж Бор тиж Пій Ма Ана іє бві сі пух ппц ЕК дл
ЗАЛРА ТО сх АЛ
"уж у Івх кни а Ше Ша в Ко КН Шо м кодам у у. Дука, ва ХаАш ВИ Саму АВК ОУВМ ЗМАФ о хАш АВМ О Ма. їДЬ ОрХ 1 У МА ОКА БА аз алу 335 ям Ос зе чи щу жи Би п ее сачи о Ми їХени М Ж кщш бан ЕІ Туш Ж Ти дних їїє див Бхо Бем от Зах тиж беж Бе діа За тпЖ ФО вв іє Би с СУЯ пд ц жа КВ: ай ро кв си В Ь од Не НО о Ох дет том. лізу ЛІК Кк Ян С ДО АН о НИ У
Зап обу» бек бхо Зав пек бі Аа б: Блє аі бив Зі Вів Баз Блю 53 ах ай «що ті бу жк гло дм Мі Му хг Вл Фр то Фет Тл де дя
Уа. КАФ АЕЧ Ус АЛЯ ДА ЗЛ УФ йщЕ леж са ба ДАВ ОА ЕХ
ЕЕ их кт СОТ п ле КЛ о
Де тлу що Тахур о Кк х Ми бики пф соки Лі шо кю ЕК І Мо щих
Ох хі Бай БеМмо хі с ж ОК (Є іх: хі БЕЖ Мах Ба ЗБЕ
Б ЗУ У йо пух да Тош Добова Кум У СТ дю Ва ізуж АЛ й тину АЛЛО В
Ав МЕЖ ОАЖЮ. ше А ОСБУХ фКх У подат ж АЛ ДБ ОТИЮ АВ ОО
Б Ох Вл
Тем ми, їУкич Сб бує ді та хи зу лу Доу були Ту - щі лхУ віл тм їжи БХО БжО жи БИК УЗ сіл ЗІ ва бо Ап ВХ біє діа війа Лихо зіз ча за чи дощок зує КЛ фл МКУ ех миши дів ЖюеБ тип АБ олуУ ТИХ ЕХО
ПЗУ ЗІ ча «у;
Мих ТЗ «ВК 33 ел шутплмУ Н жк 00 ЗВАЙМ ХА : ех - ня Й Й : и МИТА АЖ КЛІ Н «Ве ЗЕ Я же тож Що мух зу Кох Щохк Джт єм хх до лим Хм им ую Н
Мат гу Ода Ощ бю с бод ох Мув БІВ За Бек б Зак Зак ода :
Її 5 15 їх : ех речі С.У Ще ех Урі Та СТ м рету 7ИМра ОНИ Цари З щи :
Жтїва Аля ла ЖжМАа Ж хіх дина джу СБУ ОХ ЖІН Хна Жтх МадО ЖиХ : зд щ зи : «М «ЛУ ях : зуфіхе зи рах бр (31 т ху :
ТЕ о Олу Бе Твж І Ж Аж шу : у : ел те ца : вес п Н снея ж их Н «ак» КЗОВ :
С шостому Н хихее МОХ : хИМе МалМА ли са Я с У : «ЩІ» Во :
М нь дит. Ку ЩикуУх Триді, Фу. ШЩначо ТЄочУуші Ж ще сих Таран о гони соня. оч Н
ТІ ЗХ СМТ ЗХ МАША ит. ФМаЖЕ Зк мує Пл о дуджЬ пня ем МЕЖ маю я : х З хі 5 : пМих бачу біс дьесу Ще БУТІїх Соки і іх Щеегх Зб и ех Теефу ЗЕ, іч Й
ІННИ МмЖщ АО ШУМУ КЖжО МІХ АЖИА ОКА МАУ КМУ КОХ да ша дехх шило жа : «і лук Зх :
У ХО - Н тік шк СУ МК їх Ст щшуУ КУ т еу Іжа ХЛ бек МЮУ я :
ШК ІМ ЗО З Ю Ж А МУ до КАХ су БАХА слу жа МЛ БАХ : з за з пучх см схе Шрі їїїз Ййкс тт іх Тому Щі їі Щечу Хода лю (т: : хе та пі ШКО сій пі Бр Ах 4 шжАЖ АЖМ МАМ ОМлУ ЖЖО Ж. 3 У А : шт шщ -х Н
М к в Й фе із Шу М іли прух сах 31 тя журби путч їх сУРах сш ую дл :
Ме о жлу ШО ТІ ху ЖЕ Од ух а Чи ХХ У Ла Хе ху У пох ха :
У та У хо : іі їжі т де 31 міш є КЗ луУ 32: (31 (313 2 (1 зу дно СУ ГУК : сСЗлішж БІБ хоаж СбрУ вла твс бу КХОБ БІ ім сб сами бу кб оси Ку :
ШУ щи ЗУ :
Усикх: щуку хїїїч2 мив її жі їх У хі Чен хх що пак їх жи їз хо її дім Н
Ма Мт ЩщМх фо сіль сю ПМ Ол СбУж аа Як КЖ ЕХ БА МАЖ УВУ : зах ча іх ! жк х 5 Ах Н пів пк Ж о кт у члілю жаху Кіш «ах ше МУ (ТЛ лам сю (їх й : чав зу ММ ЗАМ МУ ЖЕО ду бу КО БІ ЗМ юЖ ЗАВ ОК зу СУМ їУЗ. : 135 ЗЛЕ ка :
Тл ке б гля СУ и ж сх ух їТ1 хе о пдумх УТА УЗ пит тло М ЖІ см т !
МА ОК КАХ ШКУУ АФ мА МАУ МД Юдш мЗаАМ ХОМ гав ошжау Ммаіщ о пщдуУ :
У чук ях :
МО ВД КИ : уххнтх Ж: сх дахю ох ськ муку тх вуж Ме Ух Ух Кох тних гу Ж Й
ЖЕ їм ЗМУ ЗХ ХИТ ХМКУ ДМЕ ХХІЛЬ ХХУЖ м М аж З КЕ спе вав : тах «цу г «Ел :
ААУ 3; СЕ Мк Й бУкрує ї31 ж думух (УМ Іди си си В «ух сти ТІ бле ки лі М ше Й
НУ сСіж вх Фів шу хі бій сі Віа сів су Хів ів Фу ТБУ БЖО : з зи ятК Й ва ря А :
ПЕ о лхчеию Му У хи ую Ж Хо рук ую Хо сей їн ші що чаю хх Н
У пла ІБЖКМ ххУЖ АЖ АХ їж зм КМ хх Му КАШ АХ ХМ лі ло УХ : дя зах еп : їв ЗУ КУ Н б сл тез сМуюю сл юх Пюре рю С(ХляХ Тл сиррр (5 ах фер пив (хз То пиме :
ІДУ ів А УМО ХУ БЕЖ ХМК іму ла ХЛ О су ЖЖ СХ Хм Ха КУ Ю : дк ее - т : 155 що 55 ! лк Меч Ми Ж Тк жу с пон но и нн о он кн На о НК, СН Кік Н па шт За су ПСЖ бо б о ЗУж пхаоОХах ЗМУ М ЛК Обі бла КИ : хау зу ж зай :
Ам КАЛУ ке Н паж Шачу сю гла іди щеитх ит стік ік пак (її, ВЗ що чпцую сх щі в чаю :
Яку ДЖ зену ху схм жо пд ху Еш ХХ бхЗу БувоОстТмАкх їж ів о жлЕ : при ря ах ЗИ :
ДК МУ висо кл Й ож по ліфа їх їду хх ли МУ (зи ХЕ УЖКає (ту Ам Му их Н зву вци»охпх САУ яХа ств сбаУ шах бю Бім ММ КцУ дім дів пу Ід : божа па Ли Шут стю Лю пу сля и що ж їжа лу КМ СУ ди о Н
УВК ХМК їх МЕ ХЛ Му аУаМ АЖУК хім а Ха АЖ 18 Ма Оуу вав : зЕа ЕВ тт :
Каке. ХК кА :
Мт М. Ту МЕ Моїх чхає Флрфу молю рути у ТИФ Ла бунт МЕ ххх КК ех Н
АТОМ у МАМО АК СХАУ ЖИ ДОВ іму ТИТА СТИХ Му РИХ їм їх Ж М : код ж МХ УМХ : 2Ути ху су слу удо дукту ї3ї ху дхжох мріє г «щі пре У зу тарі га :
ЗУ ді Мав Оу Її БуО ЗіЖ вхО ТВО ВіМ ві ТЕ фу спіЩ ів Ту : пд уд ха :
А ДЛЯ Без : дере сі са в хі г. іх и сх: вдо ча хіх і пах їх: щодух : її ів Ок МАХ со Му За обу сук віз тих бух вів тик дух Блю : лю, с Е (- жу Н
Зх ЗІ Зх І : жан Ук жу й т Ж тю тіж І Су и дують тлу ми ХТщ птвуия Й
Ваш омАМ сХАк Ам А МА МАМ САУ УМ КАШ АЮ ИЙ ОшШАМ САУ УФ СТУ Н жа з з
ГО Мішщоору т сп гі г тм Іа й УЗ ха й с- о дуютх г су Ві ТЕ піу дна І Оу вВко сім БіЖ хів ій О1м св ВЕБ о Ску чий ча пкт
ЗМ БЕ ЗУ
Хзжхуу ХВруя? и ки Ка жк г Тулі. тт ср й й ки Ж дю (ту хи п ке БшАеЄ СіЖ ЩО ХО бі РюЕшШ сім О3У МВва осів ЗІУ Кі їй сту вхо
Ба БО зв ми Уж щохя са бл у Ух бух ст ж Ум хе вх їни гля ха жом кт
Мет бу Би бів пі ВХ бидк бі хо б сіУу хо біль сах Б СІВ
Х З: х і: х З чи чи А
М КУ шум
Са ен УТ прє Ж уз Ма фл АЮ тує ух сх Й У м му. их им КО їхМІх їх АВ їУММ хм Ма шуй зам яЖжО ад зм МО ХК ООХ
ЗЕ За Зах а
Те ж пон ноня т» о ко Ух Тк ЛЬ окя КУ ща он ЇВЛох Ух
ЕКО сам оса Кб Ка СУ А БАХ КАМ БА ША о шау КБЖша Увь щау ма щ мл т ку
КУН ВІ
Ти кних оЗНЕ ОН лок їУжуч жу Кк то Ж у Рон ж Кл ки їх Ух
Ам ФММ БІ ла хм БЖ ша іш іш Ох КУ ха ОЗіх Вам А ОД дату дух утугх
СЕУ о ЗО тп -х тех був пут Мі лях йхтзу хтх ГУТІ сю рю лм гія Ті Сі лих шу ДАФОСКНЕ ЛУ АХА ОСКНЖ іїхлуУ УФ СХ ЗНУ АТО БМХ ХК Ж жо б ху
ЕЕ, а з45.
З да я Мк кі ж т их щу тлі Ух хе жу фуд хни їі тк г
МЕ З кУКЮ ФМ ха ААУ Ба СЖКИ СИМ КЕ ка Сам БЖ Сам ОО Ух дет дл СУ
Й дя кс сут (чи М сл ую гі ск А сих рах дну Ябя (лю фх шого (іх их ИЙ сп ослу ДІВ ій сх вів Ба лем во Те слу рКО Мже біу КО Ід ще ле А: пе зах Бе Ух ях
АЖ ки у У уч ла 1 ФУТ Ух Ти ня КТ ит міч вени в он о НОЧІ Я ає Кк шішж уві піз бу ую шву бі хі ші обі Вів пк У Аз Ба сту 2 а зак 455 ВИ БК ув я ля ух, их оз у нал и а ДН и що КЛ (лока Жечих Мф ЯМ ж я
Уа ша ум БЖ ма Ж Хе МО У х і- УКВ їхиш БЖХУ МЛМ їхУМ ФО дату КО кт
ВУ ЗУ Зо ле, СІ ях ди пк шу ну ую лу Аа ую М у ТІ я я НИ їх бі ше Мес піу Аа тах оску йфа тик лі ма ШУ тТМйх ЖОХх Єку «ик: «ад штук; по па пт лис у що стюх мі їхучу тк ШТ М и Фі фигу Ум (11 фе
Бо тв пу Уві їбвХх су БО Таж СіУ УВА те бу ККОо шежЖ САМ Су 550 ЗА вд тужту Щі іх Жмуу жа тло» Жужру Гру т кю ту хо Тл ТУуютх Що ях Ех
ТЕ Ав їж БшжЕ ЛК ЗУ БЖ Ху сиьУ БЕ Зак Обл БЕшО Був ок ах
Зах УВО ЗУ ей сур сгдічх Шу Жрухє гліху ЩЛ й фйучу ЩІ Пачх лм Міо лю лтя
Таж шо м МО шЕХ шжАш МАУ КО КВ МАУ КЕ ОНЕУ АХ ОО ЗЕ шАУ АД
КУБ я КБ мчаа єхіхх Ж Мчхує їх» уч бах їх хх щу пору сх Щоми Че г вл пр те ду УВА жк сі Зло Кк пу ів ЖК ЗУ Бах оТле бі МВА ТЕ ко ЗВУ я п ха слу пак лір ср су Вїд свчУ стає щі р док ба (сл пух шу ДВОХ шу я СУТ СХ У Мао мим Уа Ти ду Бий иуу саке пі пуд
ЛЕ ши БІ
Жте пі: ж її» сіб бу ді щі поту би ів ту Ву Бех обїкю Во
МЕ 55 БУК ті у Фк ся --т дує булу ся сл тут їх лущі Нлпее їхав ах бій сг; бах ши СУ ВХ (Фо Сіу хі 0 бішЖ УЗ тиж БіЖ Бу о члЕ ах КУ ІЗ й я км туз зи ТУ її ж шо уум их фл ур хи Щодо ж шк сі Аз по пі ко піч дім Хі СМ бБім ВХ лю іш Бор їі СТУ
ВЖНУ В В пев Муза ки Ту (ТЛ ХУ СК у є хх бемух ФИЧоту йшло к Му гу Лях Му вжи жк ом БЕТОН (ЗКУ Душ о болоаю в БУВ ОК ЖК б У ай ех ВТ у лм до сода ЖУТ ах МУуїх ба те дроту Тл хе пику т жі що т сип ошхУ даАОТпХ Фу ау ТЕХ Лу мА АВ жчАЖ ЖЖ АЮ ШУМ КАФ ОК ай «Во а
НАННЯ кухни жи шу ДЛ ка ит во я сл ВЛ Є саке Мік алея, сі хо 0ІіпопВіМ баб їі бам Бжо Жак бі Зах оба бу жо Тлх бу
Клутх шщх кр
Зо ЗІЗ щи то у фл у ру пока ККУ її ті УгКту Фк стр тки о фур лу ши
Же сю зму БУ шАМ сЗауу ША МА АТ ВЕС СУБЕ ХУ ис ода АК Бе ах ЛЕ ТАЗ Ти ех га я щи; їли щу Лози. рин т шк а Ж ти у гл лю екю лу піз пе Су Зх ую Хкщ опи Я Хе їх їм А Ох бю МЖе меру
ІБ та ТІВ алюжж су Му. Лю Од: Ех ух ее жі х лок, Ех Ті ко що Її Їл хг су Аа НЕ Зшду БУ НАЦ АЖ ЖЕК АЛЛУ КАМ ОКА САХЬ КУУ АК МАЮ БАКУ «кит ча чех
Не Т 1 яв фл ж пої що смак» сбруную (Ло пики Жуля же ФМ ж Тра молоюу селу Ст чаі бль ЗУж ВІВ ЛИ їЗМу Ка п о їщу БЕ А УК ООЮ Ще шхм шх УК їв
ТУ ай ТУ
У пла джу Не «АТ Ж ее, стіл Я МЛ У у пт кю КМ, пл я я п діжЖ МА Са Зі де СВК У Вів Хм шум Лів Єла УМу йАаоУх хи т ля и юю о и я их кю юю тек кю дл мо сМл ую дя Жуки Лю гля
АЖ Хв ХЕ МУ Ха ХХ (ЗУЖ ху ДОКЖО ЖУК су УК ху У БХЕ хх Ома у
ТУ 7за т ВІ чреєу ЖИТ ту соб хх жк Кт тМ Увркх ру й пбьхх А того Ух Фрету Чу ік ро втеа саюр она мало сх ЩЕУ ЖАВ Сл ба АЛ ОДА АМ ЖЖ СКЕХ фл ШК их дея іх
ТКУ МІХ рАЖАНКЯ ддтут гу кій ік іхи зт бів ІТ тлі лу гУтАХ у що гу и хі що те вс щу а бів сім ах св Сі ТіФ дв У хі м у Ва Ти аа а З шк ше ам мержа й о ФЕМ и ке ТУ жа в жа кутих лих жк Сл су Ж у їх їУУу ж СЕ пат Кіз ія ке Уві біб бі БЕ оба У хе щі осіж Уві ба ціх
Бе ца 545
Фачх мує їх ж мм и жк Ум з обмує пу ра м гри
РЕФ ТЕО Су йів Тр су даю ТЕ Оу дія Кн Сі діа тах схУу а
БЖ раси БО їх хо МО Чо ЖІ узи у Чу ви и їх нє ха жи Жкулку Ум їж їж хв узі жк пі рж о Жвх бЗБу Бус Жах бу Маї ТвБсе бі Вто бохо бру Уві ЗБЕ сі
ВЕ пт ЩИХ ЗВ пто Шеу і піш што дів іш Еко цу біу Бк отих іо бо Шех су ке шеБХ АХ ївАш ЖЖ га оша ЖЖ дпх ЗАМ БЖ Ех беж Же шех бу пих пог ше
ТТ У ак си-ух БУК Тіло лю тією Як бкуєих Маг С до щи тити з ал Пюуєих Пркю т ко Віз беж Мах Бр оБує Бо бек о паж біш ме МО бум Бур о хАк їхкш гуггих гук зїв
НУ Я зп хім их Хлт вх т дк оку ТА пе суне КУ плов тан ТУ служ діа тих долу дів ТВ су ЧА: ТВж Сі вою Тв опо ММ ХЕ піу ше і жо як торуж вух Зими гії бро умру тах о о хи прє Кдху Тогууу пА У те Оу ЗВ ТвжЖ іу віз Тв ІіУу ва ТЕЖ сту МЕМ тТБЕ шу еиа ЇВ 53 35 ща
УЖ уже пяти як Ж хх Щхя ХУ хх ках т штрих Мф г бьж вхо ба Оу їі ЗІБ бі Уві в Біт біб їз ЗІУ БЕ ТК СІ чав зп зе ЗИ мсизих, ШИ из ЛИ ТТ МЕЖ зх питих, «Те они ня ФЕб ю Ху ТІМ ж ри АТ
Жтоа іа хку жа сть хх то бок За ска ху Маї тах ок АХ.
Зах п Ох, ср пи Ж ту й ту іх ту ст й и джу й ТТ х пт фіг. ке іу Аза сій Сіу кБхб СМ зу Те СОЇ с1у Буш бій «СУ ЗвроТае
ВО зах БВ пере Укани Чач уки сим Мир УЖ хи св пу Б жи де БІТ пу Тут: УТ ур Ли пішж БЕ Тих сту Бак а бі її бій Сау Вк ІМ Ху Бую піл обіх жах чплй х вих
Зх хмиМ АЛІКИУ я м ти жо лідя м си р зуйли лу поту утіх ху и Їх ї1е о сіш у АіБСТВх Бім Аіз бе бі дій сід су Бо Ба О01у 115 Ки ака
МАЙ ММ шу
Мне КК т. ши пат ую сти ФЛ нн ЯМ и нут глзіхаю ол сх, пу щл
Хі БМ слу ШКО шхд ау шхцо хаосі КО Хиж оБеж жКОа хм ху
Кен впХа За ке 1 х піз ду Жах фе лк р щи йти ті їх Туди рух Лю ке сіл йо їі» Зв опаж Вже ша ОКУ ТАБ КО КУ КЕР ОСХМК ОСАУ
Шк МУ ха5о тар мах лю ід пи се щі Кі Мусх Хі хім тт ст що :
КАЗНИКИ ЗЕ БА ОУлАМ ІМ І ІМ Ку АК та ху маш кА Оу У : тла тод Ул :
ДУ МОоБО КБ : пам ТУТ хі Ст жк її хх ку лом шли Ж СУТ «їх Жхжеи. МЕ т ж :
ЖЖ мА З ХА ОІВ Оса Б шАМ ша КАФ мо шу 0 шХИОСХМЖ ІХУЖ : іх жи РЕМ : «ТМ АМОТЬ КЖеУ : до при бла Хв Ма сах кл хан її; Ху; і їі 0 ли тую сут : ж КК Ж ОМ ЛК УЖ КОХ УМ ОА ЕС АД ХУ ОМ їхХХТю ХУ Н я з4ий г :
ММ Кк. З х МОХ Н ит. ЖЕ - п я СК тах п дес Тл ж їх и т шо (У ХУ ся дм т :
Кто їх сві У ТІ ІА ФУ Бк бе ж же їм біж Веб Те ЗКУ : зжхйпт тих зз2п :
АХ Мам КАХ : че сети що спа Ху миру ШТ хи Вету ФМ ТІах Му тлу ух у хх ! їв отих Бі Віз ХАЖ бі Віз ПОЛУ ж шАЙ ХУ ха шАЛЬ МАХ :
ММУУ хіго НО :
Укуси: Ж я. Ку СТУ МИ Мн те ФУ хи жо ху У ки зичних п МУ х Н
МАК ХІТ Ззху ОМА ОЗІХМ ХУ ЖЕНА АЗІЮ ХМУЖ АОБЖК юХІДК АХ Ла СТ су :
ММ ік Не : хз ле тло кл жан хі мує Мід мех Жеччеу лом (чу стух жи ТА Ах Й дів ОТИйХ ШІ іш ТМЕшЖ Баш БЖ ов оду ша тевБх се ваш ТВ Сау : на З Куту зак Н
МОМ ЗАМ АВТО : дудних ЛЕ тах сл жу що ух Ух Ху Ук пою 1 «фа ча и Н
УЖ ЗЛА ЇхМуУ МЕ ху ОК УМХ ктЛу а КК Ко ій Ам км АХ Н тз1щх зі Не :
МАХИ «ОМЛЕТ А Н
Фу М тлі у у лих Му сх Ко хх хх ою СОМ Си УЗ ке КЕ Н
ЖЖ ОГЛУ МІЖ МИ МУК ож ЖИМ АМІАК ЛОТА ЖАХ паж ОСЬ МЕ :
ТА АЖ їУВх :
Ві ті бу У точи он тку тк чу о лує Зк гену Гостя Ми поет. ді Ті Зак о УЩі Зх Се хурми щі ТИХ дви Уві) вк боб Ко дяа вче ї1535 заши зує о ХИТ ри бич ЖК кх о до ому Ти дих хх «би ем М же аа ОСАД жМаТЮ А ОЇїУуХ МО їхку хюАФОТВи Увх ше о шпаУ їхЖ МЗщБОхИК кул зсув тт
МАУ КАМ їйпоО т юки плн хг З хе т їх Малу спі спек и ді са мусу. мину мах ме ср Узі йзя АЙ о йха бі дв ОтУЄ УМ Хі АХА тую ТИХ ятректу тб зх хм ших Ким
ЗИ яко доки торі ба лу т жо Я пйухах сМихух пе хі ме си шо ши цем о лаж діжа ІМ БеМм бен бак ах й ЛА ВЕ ва чу ц Зах чидц
КАМ яд Млин їх Чех чию ок, домо Мох пн т Ж М Шаг тоже ЗЕ ло йвиошехХ Бек БТ Бей ва їжу тМпе гів Я йо шо жит Мал З зда зх УЗ жк ся як
Чи ж Же Мах о швує Ва ває ті т ді дл Тим поету ДІ пурлу (Зм пу Жве Бра ЕХ Дів ТНХ Хіш Хіш Бі бить їящЬ БпОо дія су чл Зв рази
УК КМ Мт хі хіх лк о щоми биме Ж Ким; о фичех «ах Хр се АТ ча ід ах зв ДІ У шеє імхм сі Бу п сюм чад ах ха У де СКпу ша чрлуфук лугу
ЕМ Ей її
У. я ах пу до МУ дн п дж Ж сб Змі бут жу Ко бенеж о тт ем пек ТНх Дів Тих бос сіє дія Твж Мем БЕ ті бе Ат Бей люду їзай хсУтух, зи КУ ЗХ
Кегу. ех пл я шт тими МУ «її» ах «Вій» ВІВ
ЄВ Зо и зим «їй Васі ії1 0 сини
Ух рем чани ОХ чем Ма ти Ма ат лі (ху ди дуже (Ту таке бе о тихщо Сб о тях був
Мет Мах пу Мах Мах Олю оЗіУ бач 5 Зі Пув бежб пу Хіє Бе Ве ї х КЕ їх
Фу таці жо Жук й я щу ти Ж охо оп сита Хо: лиху хх Укуси Мох
ЕХ жи ВЕК лек дви йиВ Му бе пек лек їхнє Кене Ма а ее ЧЕ -г жк --
М: 5 Зо
У т чх ї хреи й уи Кт мк у срок роя
Бішо БЕ Бк бе Бк ТЕ О1у ме тп фу Хі ТБЕ пк ях а зи еп» МУ 1 мая
Ки ки «Дій ХМК
ХХ 0 туди бури ск г хи пеДжМ АОС НЕ дО их
Ас БУ сах ти тоже У Ж ху хуя щи ду Жоххшу Суду Тому ме сову Соужх
Мат сах пу МАЛА УВА ОЗ СУ бай Беає дім БевБобЗеє Бу Хо муш бет їх у 15 їх
Фриз Жіх М Фтетух даму дм Ж от Шемет ю Жоаміх Хр таж струму СН х
МЕЕЖ ХЕ САЖА СЛУЖ АНІ ЖИМ Ху хеа лах БЕХ о зхмУ ХшБА ша ху ХМ СМ -й ц зи пк. Б БУ
УЖЕ І Мужик Мужих лиж ху боб ух Ми сеЕхчи жи ж бр ж «Хо пря Кк х ви рхб Бто Ух бує бйпЕ о піж Ме отв бу Хі Тих бІіУу Важ ЖЖ ЗУ пує Б й ее: о пт т тю гу: жило м й, дви пах я схуд УТ пе З А ва ТМ бі дива ТВ паіу йко тах ФА сла ТтЗЖ ші Дід тв щі У щих «ке -д гг о 5 СЯ трун гі ху ХЕ Кк ги усу унє г Фуніх Яброме АЗ пута му гли хм туя
Твж су сві КН іх зано» отТве дім во ТВ шіу см тм пу Чаї ТВХ
КІ вАЯчН тр ши що ТЕ їх ви іх» «ух бен фі Шу хі. ут хе ях Пе й и и мя віхи щи лящ ку
ЗУ бат Тк сі Без бик бі Біб мк сум щає ТБ бі ввий жа одпіх 85 зо ча
Ху ср» 235) УЖ СМ (їх еру ее сія рую сп са» Для ма (у деле
ФЕМ їж їх ХАК ЇМ У ЖЕ ХХ їхОЖ Мак ЖК УЮ Ві лк (мм зх вах т же Ко А МУ буму із я й (1132 суху пня фіз» Шро лу їі» шм бМму іх пу би пе щу бе ту ФУ Ше ЖК СіУу Бке жи су ав ТВви пу Бк Ву
БЯ ялугі зак їх На Ем лк 25: пра хи дущі сіхах 375 Довах пр й» ТУми: Мбуро Ху ох стру СКУ по Ма ли Бі МдА ХХ ОДУ ЗЕ ОХАК ОБУ Бус ХХ ОБУ БА ОККО Оу
Яке чув тив
МО А. ко
З що мк тота (Я м пух Жверу блю спізю Юа ТМ стпіх пес Мох путую ПУугру
Аме отих шуб пост нвХ силу жа Бах хау ХО Кцх ху Ма МЕ У ПОХ 143 М 15 Іо сих Ух ях ДЮ тлі б ж их рух М КІ тліє ях ух иу сМіха /хла Млох Муз тиме дж ЩЕ ЖД дію щас Жвс ЗУ Мі ЖАЄ ОБУ БЖ ще по Ума шле
Мо МУ 21 пл Яке ут и хю Мр г Фсухи п 2 по бр г пт бю Й іх дна Та сі дів ТВ Їж ех ТВ бум Уві ТБЕ 01у йно Хв щу зай оче яд зе каз КУ рин тиуую блю ВШ, ую бі лю Мк біля ми пцум лу лихеит Трест щік жо Сщах сх Зм Мах шт мащХ КИиК ЗІ ЗеЕ их бу БХш ЖАХ ОБУ ВАдт то зе зі
ТКА КІ М пр сірі да пи бибію фо о сх їкижу Чім бе І пЧаую вжи ою мцум ги іш Аівствх те ви ов ху БО бик осбж ПЗ чвЕ БУ Зех тах -Зімх жк сю «З ожЯНу че пік хар мУну «діл шою СОтрУ «(шли Від МкруУє схтли сшбиужо МО алілю ха ММ Ах
Фа се тих бу ше СИХ сбУ ВВ БЕ бу БЕЖ НК Є МА жИих Зх да я т тк зи
КЗ МЕМ па й би хе їїїх сло паж гі ху у си сіла т спу їі» худ у іч бро
Еко жи пу Уво тиж СУ ко таж сі лм Так пу УВА ТВ СіуУ дах ай зов гук шо шуй ку пли ит ля Фу пи чі кк да спе (лях дл ую ллєю ща тифу Лю ут ТТ пк ошам веб СВК о шаУ аАшВОДЖМК їкУ їх. дах о сМУ Ж ОСКМК їж ЕХО САХИЙ
Би их чут везе Ех йти тити Ж кун их «що хх У НЯ стих КН Х Коша троє прах лу січ ТВж сбьу БА ТВІ сім Бах ТЕ плу БжОо Тих Ос Аа Тбх ху тр яв дає кт жов «о а лю ню ож Тут ж ля мухи я хо ки ле КА КІ КК ож ж ту
Кіш жк Сі в ол Зі да Тих о сЕУ сі тає пі пеж ЖИ бі слі аа ах КЕ ямі ую ри ииш УЖ Кри ху Ура пишу УМірує фр АСУ у. ФМ и піду УМЛмя м м ау ШЕ БПК о блу КА ЖпХ су де ЖЕ лю Лаври Аж Бех ТИХ зах тк п її хо хм Ух Бе
Кут ли пня дя дош Наум тукхуУ да до т фу: ЗУ Сех ЇУТ я: Мо прах вх їхуУу мах ЖК Му БУАТЬ ХМК ФУ Мф скл Ох Бе СУМ О САУ В тм ва почи 4 пи
ЯМо 333 ЗХ бух ММ ФА жа Уж ху їх щі пам ха ха Ху її 4ЖМДО Хі їх ум Й
БаВТОХАЖХ Оса БЖ УДК сЗАЖ лАшОСУМДК сі НУК сХМмЖ сі УВУ ХМмх Сі БИ : злий зак -й : жа ЯК ІІЕ : тріо теці хв Чем їх: її по хУжх: зх Чаум ту: ик суд т3їх: дує с Н щих їхуж Ж чмх ху бе чих пі бос Мих паж ек УЖ біж Ехо ТКЕ :
ЗВ ЗНО АЛУ : сік шо мл сію дл Мп стю дж пи балу АЛ Мйхдя стлкх З що Мод сл Ах : -УУ и ОТО ау Лев отих ду Ва Жак о бУую дів Жак б ЗАВ ШК їхху :
Іта АТ за : щі сескужи КІ їх Ми ЄМ сезон УТ Фе СУМУ ТЗ зи уж Ск Зк В х Й аа сус Му йіа ТІ біжу ша ТВ шу БЖОо ТУ жа де Тех уж АВ :
ЗА ПО За ее : пає гл дае Кф жк ра Мі уУс ех п сиру Ухіхх ще сб і Уха. хр Н
Такому АВТ жах сою жи су ЖАХИ САУ ІМА ХВ ФА ГБХсх СХ Й гх ох пт. Н
МД БУ МАЛ Н стю Шу бр сіл с У ах С сах іа фе ЧК ак Ха Мих :
ЧУ ех Тнх ау а ОБбих ху да шу бум ШО ТВх у Ол ВК БІіх : пси я хх Й в тх БУ : п пемзи ре САМІ лік їЗу;у сбму сх ри сбМмає утиск Кутах Же : хаос АаУ ше ВЕ КАМ ЕКО УВЖ САУ БЕ ТВХ шаУу дАВОГаХ фу ДЕД : щіц кох лиц :
МА ЖК и Н
Чи ах сечу Ти Ії) Ул пух От Ях о що сиза ех ух Мч Ж кх т жа Кі Й п Об дУ Ж За Х за о їхУМ Хм З: ОСАХ сСож їМах СХАК Сашу ОБОХ : пе аих ук : мМ ВУ яки :
Тут 23 суху ЖУ ку Уж, Ми: Ж ки 1 Уфі фу хи хр мМ ураху має т Н
Зіш сш хм ОБУ ХО СУме ЗУ сій стне шу ЗвА ТВО шу ех ту бу Я
Кк ди зад ди :
Я ко І Зо :
ЖФрулюх Має бубхж де смію ах йо Мічах бутик Даю ЗИРує іду фен ЗР ду
ЕжО жаМ ої Зм ЖАХ ож Мо ХА ОїЇУУЖ БО ЖАХ їхМу ЖЕО ЖИХ ЇХМу ОМА ач яяЕ з
МХтерю ФІЛ ак ха МИ фИлк Мирю М ФА фжчу 0 Тая акт ік т у дл МІУ
ЩбТпх о шію В тп су Беж Тих пу КО Жак о паУ б ЖК бів АМВОТИХ мМ ІАМУ ЗІ тут МстуУХ бю Фі хк вки см тю Мах ма тру па Ме Ту ХО я ВУ ку
У Авиотиж шау БВКО ТЕЖ Фру спла тах жіУу ЩЕ ОТВЖ лу Ме НЕ Ж у щц пла пу
Киев А с іх твою ек ЛК Ек о ою робо ан С ЧНх тери й а і ті тих р
За МАЕ ЗІ В ЖД оОЗуУ ди АЖ ЗУ Ві Лв За шу ТВ 1 ва 5 5
ЄМ ПУ йдеш Ма «утли спдусу ЯМ так «ру он сяк й Мн дю о пеену пн
Ту сбіж дей Тих бум шко Ти У о ТВ Ку АкволЧае у шко твЕ
Бах но ШЕ ай пз ВІЗ яю при ух жу тво зИри я у ивди пхюни тку де мя зу ушу ЗУ ще гху сі ві Кв слу Уві бе сіуУ де тБе слу бус тв слу БМ ние сту вав цта ятя
Кия пив КАХ УЛ у тю КТ а ново І о бах п и А тп или НЬ
ЧИ ЖАХ їхМу їхмО м їх лей СИХ ху ОН ХА ЇУМ іє ЛЕ им пл пит ку
ЗО У ЗИ стае Тїї т що бух гуску учи тую Ж прі туї яю УТ ку УТ пом мо аж сі Уво таж сдаУ дра ожле СІ ва о ЖжнХ Сі п ТВЖ Флу вКО Сствх 5 ОВ спе пляж жд и КИ як ло а тка досту сх у жи щодо сію ех дя, мі пл хх мах ше СБК ївЕУ Ак Сх МУ БЕаподиаК ою Ла Жах їУУУ ЇБУМОСИК ОЇ У
ВІВ хів кий
Фірут прю (зу вдо спіує ТМ ХлЖжі спів їж луку Му лах ри бід «іх Хдщ
М ХЖ божа АК Оса МА СЮ ОЗаАЖ Кий ОСА Оу ОХ ЖК би Ж пляж док; ер как
Ух ща Ух БУ мб їх би Му бах ЖШжуу Пе бхл юю й пЧи Чак ім о ма бак одід пе
Тахо пі Зех Лех літ Бже Же бке Зах Же піт Зі отах фу За тВх вах «ще «вк -е фра ук ЕМ г Че гук фо фу пути тм м хе бе т
Фу шЖеу ТВ слу ЖшкОо ТВХ щіу яву ТВ у ТБ ТЕ слу деЮ оте Су пк пд сх жо «85 о и тик ак ОН пон Шо стужча Пхіжи сифрею щлом о ді Нізеух що Жіху лох, бич Жлдк бі Ві их пі Уві Бай о бих Хв о вів Бл Жук Вл Бе дів
ЕВ БО БЕ пери ду СОМ рих ПУугхк фуру я Ст их бух г това фам 0 зи ЛУ хи має Ву еп да тВІ ех шу ших баз Ті Жих Мей Хавх ем ошім Ам то ЕД ш- а тп
У що ун ху ХУ щу Ж кХ а ту Ж ох зх» Же ж ях Ж ух Зв ох
Ті БЕ і; ХО бат ОТ Ода йди ХІш Оу ГХБ ха Ом УМА Бек
НЯ чад зац тай
Ве МАМ АЛ межу граю граю й Че трі ФичУх Че ої дід дж й слу й ка сту ТІ х
ГКУ мобіж йща тах УВА Це тах МАК дів АЖ ів ос до тух Ух Те
Т5 а тя іл от би жк им гом ба пі міх вима Тиха йУТ их іх й Чі іа туш Тв Зі бат Без тв діа пу ха Бе УА пек цех БтУ Те
У ух че: охо ЧИН пара пиши Ен ще Мо пиши Ми що ста Шу хр т тв тві Ана Сі ЖнЕ Бо ії. дія су ЗИ: Ті дБ Же кот Є Уві
ТЕ Во Тт85
Жлодю темх сіру УМ -- КІ че Ж т А см зм ЖІ жи дів о тмж спі веж Ба дви вів от тах хі їз Біз Беж ем о Бхш мів пух хх тжуц З. та НІ ги
Рани що ох пу киян им ьо то Та блохи ож ДН Жояж Що лу С Тоущ
Ба іш мл ЗИМИ ім (М ім мл ЗіЖ МАХ МА б ЗМ З ХМ іх
Зк "У тк ді
МКУ 15 Б Вова
Заг спр Мід пак о щшка міо дід пье їджм спьЕО Лі бі» де Ужеах КЕ за умйи тьма их же осмуУ гос БАЧ СОК сло дому ЕКМИЯ ХНА ЗХ
ВУ КУ Вих «іл» 5
КТК ле зх шо М ме галолвИЙ же БАНОК
Тож тн ак щуміємоехі й вижене ЕС ВАМ ЛЦОЛЕ ОВ ен» мн ее Меауу. КУ УЗ гл пт ток стр ле сту Пани Ср ог що ижчю мес ші хім дви оФіу дау Був Бех цев Кіш пу ех РХО и дви ОпеЄ : т її 15 явки дер Жоуиш 7Ж Єву іі под вх Хщхт тях тях хіх січ Жббух Мою мету леї вв Вре Бук їі їм; век ОА Бе маф їж со Тех Бе жте Ку Ма з зх -й
М «І УКХ по пд ту «ду спі ка их жо туя ко ХВ ба ме хм рам ХА СХКЕ хх БЧН
Ява о кю пе
КМ о «ака БАЛОК кове Аж ННІ пу Кік ко вве ПЕРІ А НЕО АЗК ВИХ А ке ечНЬ па ей п «це ВЕ їду хх псує лі їх то дує їди и тиск ЗууУЮТ ДУ тах ХУ слух цес км щі два сум КУ Буш мех БУ Ка Му ем КО Бех дах ЖеХ т я, «
Її т ТИ 15 хі ЛУре. Тож Ст ді лодхру ха и пли т ткани іх ЛУбєду Ук Уж а Оки Буш хлжш ім ІМ Блю їм: Мщх ЗУ Бут СХКЕ Бпшеж Бус БО бу б ї5 35 хе пефул сла Мощі м я СТ фу НИ юс ою Мод Ман раю й що сп ЖЕ поз вто ожах БЖ Ме их бу фе тик бю ех очах У дів Ялх ху вел 735 й Як в 5 зуургух кУф и дк букує гл яу КУ ур КК я Зо хе ит Сізе МТ ЖД ки Миру типу сім еко Бе ші сій Тв бі Вій тп озУу Ще АївВ осїуУ Хі ОСТ яд 5 Що ях пбуже ІДфрю я Ужхуних сф ух кю Тим Уфа рю рух ех вок Чу Ек сі бек лк пу Би Ккк о шкМУу вза тих пі бу фмнх біж Зах жвх Ту де ча уд зо йо ях що Хе «іже ММ са тий зум Зупинки тки хумуім фл хи ох Уест чу ву
Шах ТЕ сМу ЖИ ОТИХ Фбіу Аз ти соху ех ти зу Уві ги су Бах яв зе їв рун ха ев аа ект сум мою ва їй пу фури пшн спаук ЛІ ШИЮ спіда тве опіУ Уві жвЕ спі бек тех бу ві мк бу Бех баб ж да тих з ях зак ч1йА чо 5 Її ку личку ду ри Кт ху й ху хр Кв ху лі ою б рт Фе вк вх
ФіУ ше КБ бі БО ЗУ бік іа ТМЕ сту (У ЖК СУ щаж тн су;
І 15ї 5 жу Мхах ху бурю пу. бу ля Мр. ул ню. Пи я ищ сумо їх а ож
Мдх жи о сжмю о ЖКлК їхіу Аа СЖХН їхМу шк А МУ чаї тах ау Ве ук чук з хх їх Ка Бе
Мо ТУ КУ титр. лю ел лих лю Ля спіхах схлю фугех різу Ж; хау учи 3) ло хім
ЖК ОЇКЖ жа ЖАКА УЖ ЇМ АК ду кує З ОїКУ сам Охмж ку Ме ЕМ 145 ай ШУ в. паж о дом сири Зло ем плех жшт ФІ і лу бах М Ю ТИрЕ Зж ах Можу ТМ Отах бю НА СР бю ЕОМ ОТОХ схАУ ЕМО СКПЕХ слу бу СИХ КУ ЗК ДК ЗА
Ам а Мих шт ня КАТ У Уд'о чн Же се шфрнах й пря фруяе
Аді УЖ слу шех ТВО Сду то ти бі БрвожнЕ ФУ КО Стах шо мех
ВО МА Іо
Фа ха ж се сук жовту ча ств жо спр сжухі уухі бою духи йхсих срх тис пу Уві ЗБЕ ду Аа Бк ді дів Тек бу БК тТвк осі БЕ ТЕ
Ме оо ВІН трах ши сим позах ди Ма тури Вам ск Фа» Фачу Ябмує дак тю мч А чу Аа Тех шу Вів тих ЗУ Ав от у жо Бі см са лих бл т тю с тру
КТ ІБ вам зув р же їїх, пом Мр сті, фу Те сх її о її ді Ж фі пу
МВА жає бмУу щдеажх др СБУ ржс жах су СА ак пе УВУ ме сі щех
Бе йщИ пав КИ кують дляерж УК ФЛ ж хр (тік АЛ ду ру. (І лж «ІА МУчУуУх гІТАЖ лому МУ
Ми шхУ КО ОТах біуУу Ай Тих ху АКА Тих Фу са их бУ й ОКХ
ТЕ ча ЗЕ хи ха М век сумо іч м ха лу сук УТА: ща лтфую ЛУКИ сири ТІК Ух 24: сумо бух щшАХ Сх тк ОощУ ж Уа ХМ Му зщлтЬ МА УЖ ошМ ХМК Ох їх спа ол їх
За З ФНЧ й пах Ов тт Чак міх дич тв Мі фут бе туї щу бро січ В стіни стік па
ЖЕ СУМК ХМ же ЛК ОО їУ иа Ам Щи ЛАК САУ вів тк щі Ж Уа ха вад жов сін Ух щу сон У Ухмлу Аїд Ух у тебя Сто жу КУ Її селище тиж піУу вний твжЖ пі Руб тах Зі цеЕ тТвХх осі дів твх діу Дія ТЕ зай лк зай
ВО кл Мо сода тех люки Ух Слух лях дю слух ФЛ ки лиха лжюю бик ЛИКю М и їзму ек шик сш МЖжЕ ЖК ЗМУ За дл ОЗ ЖИ ХМ оОЗіУу БдвоОКАК ОЗІіУ ще за; чів ї:
Б 13 35 зх хе мч их хх а у пумую й ук сш пи Метки пише Ск т чай свнж бу дже тк слу ШЖО ТЕ ще дів тТвЕ ок ай ех о твЕЖ ТВ ах Зо з
Сл бух сук З цМ5 кл жі; усі сАрних Фууж їх би и т А ду
Ата ТВ тус вів РНе іш дат Ват Вс беж бі Бек мі тів їм Мах зах чад чкх що я їБе там: їм те сісти ее; вії ет Тим ке до дай фр дай же бере
М Бема ха: КЗ МУ СУХУ ЖУшИА БОМЕМ ЖТОТХ МИХ лю ЕжЖІМ МТВ ХМК КАТА ОМ
Зах зай ЗБЕ тумжуу яру мм хкщо харучє КЗ у; г хи пу ріже щі ри на СИ що Віт вро дім Кі тВх тії Бек Біу Сіу зви ТВ чі вБескве ВЕ Аа АБИ ту зтлщ ле ялто Ка дл ло уж жи сов Чак Чим о З. Щі пехм ж їі Ка бом Чі ла бл т кіш бу вве бук тТук 318 вів бух Жах іш жать Мей жи АМС З, зак а чит де ях Зап За І тез дл дих дМуух дужі Ст ку, буркун сш сах тими ни, Тим щу кю пе їзм ЗВіЕ деЄ пезУу вхщ хів пи УдУ ва Сі Чет Бут сей пу Бу СЕ ща 415 Зі
Чо ше аж дн кн їі ли пло тлую УТ «сих як воно ке нет они и В шХ її взп Зак Бо Аг Мах Вів хх Зім пек Бог деко біз ЗИлХ хів ле 4 пл дж
Б хх ки лю их ах бен Щі до їі й Кл хи пи Тс укл да Лис Ту лихі іш мк бе Хжже жюме. щІішЖ Ва Аж МОМ МАО їх Бої КМТ ОЇхЕЖ МАХ до хат лих ду дай ЕВ
Уа Я ння Кл МЛ У и шен М А юр чу фл АЮ Му тоді МД чаї йіз сс йга бак бсемі жк Тк о йів ак жЕО БІ у ДМ ОГНХ сжна СКЦХ
Се Зх ЩЕ ті біо дес тих слух
КАШ АФ АКОЧЯ мМ ДеХ «КЕ су км пе яІМА ЩХ вдо «КМ Ха шкі Ку. злети
Еш ХМ МАА рожа жуки лу кажу кут котуєя «ша Бл Маш шпик пецелЕа
Ах пх -іМім ПЕ г. хо охо дахи хе Ж ви спи У п тоди рак йти тд Уттак дю мес був Пул ев ор був шко КЕЮ сві Аве ожжя бу БАФО АХА У БУ х. ок о 4 п ке дл
І туге жи КЗ Укр бхюкує Ех и МО ГУК ЛюУя ди ок р СИ ка тру
Фіз дви ХіФ ощІіМ БК ТОЖ впе о КХхо Мах ої Ко КЖш хв БУВ о хіш БУЄ й ШУ и кру Ки жк
Тих су стяг ЗЕ
ЖАТИ по ти за
УС «МКУ сту ко зу си ОБ ж гад аз они зе гу а «ай ЛІМА шІНХЕалеяМКХ а «ПОП КЕ
УК о не Ше Счя и ОН тот Сп гою МУ кю СТ ву СТ щу Ме яю еру
Ме ослжа що АБА А Му сем жроужна Ар мух МАУ жі ша пулу ве з « з «г ї 5 її ке:
Яіохки Жах (сх Фе Же Юнак Бугу ха Же ком пуб Уфі пів тс бкх сш дяк гі сту вк сте Бе Рхо ті Бей кКкО вхо хіФф нів Іф ро пах сп зи и КУ ЗИ
Федя Ек Ж ну Ж їх п щу Сея є щу Жан уж ки Че фі Щі ту. їж су іє Те бі дів тв Сіх дів ТЕ сліж її Твт спіу да ВЕ
ЗБ й ї5 пах жу Зр сИу пю СКРрУ «лю дім чих лу Ж зршщУє схіфлу М Яажх Мм ях іш Еш СБеБи б ТЕ их У іа ТИХ ЯКУ Адвот бу» фе рах ух пл с І щи ТЗ ЗУ тд си сті Кі суми вт ие т дк сечу (уже Ж слухи пт хи ж
Заеалотвх сі Аа таУ леж Ті БЕЖ пішЖ УЗвЕ ЖЕ пі вів тМЖ паж Ав лк т гу "хк: їх «У ТО хх МО лиху тії дл миро єіаж биту Му Ух КЗ ех кри шк Ав Му хх фу до
ТК Ж вл ЖК Ім же ЧЕ з АУ І ЛИХ аж ОА ЗК БУ ши лад з З; Ук
В ЗИ що йіле ті: бук ім ЖІ тьи ім Вусу кіш ім Хі ть іх Жта в іх
ХА ОА ТУЮ Жду А ЮК алу МС баФ о м Маш ак хи мм АМОАЮ
М Уа35 КО пут Міс іх хх Му сх Мі сику чМ іх чу мух міти Ті сла сля Мід вкгз дів лу Ше ТЕХ су АЗОТ Е си ЕКО п що хае тих бл дха те НИ ЗЕ ю ше жк г тля дет Ин фл У у А хх зх мумяє их и дХеиу ре ут хи Ж сне так осі Бе тр су Тіз бе ФбіУ Аза бо б1У БЕОо ТБ обу ХА СТЕ
ІВ їх 1485 кое Ал ее пу 1 три г у цужиу І: жи т м ся у п у «о Укуси йЧк іх сіу вій Те сі кхО Віа бі ді ТБ О1У Бі Тих СІшЖ Бе бах Піх дк си кк зей 155 її МВ іо трон прин и ти пра ля ДЛ ТИВИ Фах км тах г см Ел Ж
Фіат обик їЗвУ аі ЖКк опе із тах ху і тах Зб Маї Тих бу дів чех 4 зе
Кс) То КЕ чук (зу твоя 1 3у у ни ск ЇМ і 3 хх уми рих (їх дл су т іу і ти біу жа же СКУ ех оте бі Кп тп су ва УВО зд ск в їва їв 35 ех Мена см Мсрау я лих УР, Жеряу их прруюю пером сИКом о дани бази бовдо блчих ку ж тп Ку Мак фай бум жжеа фа тах срех их ДАЕ ШХ Мах Хна ЖЖиВ
З пух ух стр
МУ А йАНУ зухтух ст Ки пт (тя т. де тив Тл т я Вот Мом діт (1 їх
Тмж о тВж Бишж лід дво сіб бів буЗ їн їла сБже ле Аве оЯех ве Сех дай я хи
ХХ Зі За т: по кін прю тк Че Чйюе стй шо тих Там; опо фу позу о а Жах іо КК їмо Ух їх лЖЕ УМХ по ХУ їєм. пек БжО БдюошУуз Мах се; пах ЗЕ тих тм
Ге. КИ ЯЗ МИ стеж ті Метух токах пе в Фев (Лі хе Ж шо ту Між бу. т За тжУх буж
Теж ха ЛІ їжа Бме тає БИ АЖ АФ ем Би Бе щоб о БЕО Мем оОтух зд Ж туту
СЕТИ УК ПО
Тік ХЕ сУгує М ЖИ ою КИ ту би МЛ Жак» ба Й й мчч їз) Же
ОКщЖх Ма се ШИХ А УМ НІ СУТЖ жа Зшк3 дю бе бал ОЕЖОо жо ше ск ск че хм Ох хх х се ги саше Ж нт суут (З Міна Ст лоша тки т ум бе піз осіу веж бек їі їі іїзм Олль Бін Хе ЇХ її; вдо «жи еешот тод
ІВ шо шо «АК ОМ
Как вх вия Кк тк кі ие
Ек ВОК ее як кл юдих ств ни «Ме паста ай се еца ше Дю т «м МІ я фо лу п Ха лом т з би. Хо Мох бе 2 кю Ми хіх мир жи
Ме бдяа бек аз Сл БУВ г) Бех бе ша У бЗьу Ме Уа жа му
Ко с хм дО ії Би бло ї1хе їЗру бе бух Мои зд тТуюх йо Шегу тах бу ті м шАЦОАБХ бл ща БО СУЛЕ ЕТНО КХО УЗ зсшц КК Бе АФ ГУЮ Ід ггО
МеВ: жу з ких СИ
КМ ОХ
Ей ПЕ ях Зед
КМ МАХ и 0 БІК «иа БІДЕ сю Вася КьцЕ спеки «Оз КА шк гхуч. ск пух УЛ ку дого лоути Фшжих Лошуєї ЛУ вк ЖК ух дує т уж Ук
Зеаї ну їМЗЄ БЕК СМ пПлуш їмзи НУЄ Б вв Буш П1Уу МОЄ Зв ВХ КО к 5 15 15
Же ик см уу Мія суху Урує Мчиз йіяту ЗИ От ре пох тлі бю тих ве пів Зав ше ку ую би фіз й Уай дещо БО ВкО Та тех Таж ВКО о що 30 пийчж ІМ кю СУошо п гучу Мощо ручю та; А см жі: Ме спе Во т ех ої АївотнЕ ку ів ТЕ щу Айа отв піУу вла тв Ух АХА ОТОХ за Ко ц мя 5 а Зв имя КУ я роя пк 1-х ож жк щх лики й ки хх сла кл спіу ві тв ЗіМ вів ТВ Зі вів тн сш ві ХМК оОЗіІЖ Вів ЖвЕ Оу та Ук хо
Ал Му їІтяю лом спуюує ху дл Тихе ФйЛх Ж о ЛЕ МИ хх Жили сій ги м ДК кв зм мив жиК сю аа стпх о секуУ Ма ОКХ сквУу Ул СЕМ Х сбнУм АК якиц сут щ жу
Б ЕІ 5 ка перу туї Ла оопхреє ст Зв хр: У др омфру ил кю Ж трі их З що фр
ЇВ опіУ віз тс сі віз Те біу Ув3 тн Зішж іа ТБ су вій ТЕ ях о Б пк Ем п яю р ж іх жд ЗЛИХ ПК кл ом МІвеК о їх що сфе У. іх пу УШО ЛІК о зі Зла ТИХ ку МшЖа ЖИ ОбМу МАВ ОСТВХ аб Вів Як оку чит ех зх я я че жо кун КУ Зорян М яким о бр Ме прут 31 хи Ул ощо же 1 1 бе ТЕ щу діа ТЕ ОО ВІ тс сту вів Хе сіУу Аа Тип зу вів хщ ї 7 уч
ВАХ їж 25 моб й юю ту птує жах лом чию с ці тру ма Др плм й що пух
ЖАХ ще ува жах Су вів отТАХ паж Ам очЧИах бУуж Ам ЖИ УКЖ Ж АХ
Ек 5 Ай чт чно СТАЛИ
Ж ржи м хи лук уся прути и хе КТ хр фл хх ЩА сени тка усу ху ххх
Оу Ук щас бі» Віа же бі баб тах бі Уа бик ді ува ХвпЕ о бІх
ХА їв ца іо іш стаж ли вх 1 бу б Ли ад хх 1 и МУ Ха бе Яку
Аа лм слу ді ТБ лом ЕХО ТБжЖ САУ ЧУ аж пі БжОо їз ОтТКе тТвЕ : ІБ Кв, З сйхучи Же тм ко ІХрудх схуд: уж ще. ТІ ТТ тд ту яю пам
ТВ ЕТ ща де ЕМе сбує сію ЕЕ ЖУВУ ММ шу ша ую Ви аж КУЄ
М до БАНК Ук тов що Є стихи ул ку гум сю щі ж бом пух ккал ов ж и ЗОЖ ОО баавоот Кук му ХАКОХаХ МБ лю ММ ЇМ я за з
МО ше МУ
Те ие ХУгах хи ех они зе дк, Ті» Я Уови да Ура и То луг сло вороху ВИХ ЕХ Ла АХ МеНА ЕМ ла ДЕ ам Я А МЕ ік тк Ба и жі ий ков во Бек ем чув ех бр іа ж тома рух Там тя п вхо сі Бо заЩаб жує сій УЗ) дес ХВ Су Ай бяи ТВО єм Бей дев
З зи ту ах хе Ло МІ ЄМ ке мож (Та лиже Мити Жави ЖЛ у МЛ нен в с нн НН и не о нн ЛЬ дих їхУпромах) мує пай КУТ їх МИ сам хм Хі іїммО Зал мл ХО 1
Зах зр сук кА ЧО ЛУ
Ті АВ ча іх емАМ М
СН КУ шк ОС пеня сли
ЖАХ. др МХХ «МК» жщейізсняе сепема одтуги, а
Фе щу йкие Ж их вад Мая Фон фіг Мрюмо Хом тихо Уют гіч Ми о 07 ру см хи
Меп ла дЕш АВ Аве з Кб сзшх їжі ДАЕ ув обу Мей бе екБу пу
А ж їх ха базу щур жк були ух у; Труд їУкут бУжух СКЛУ Ст і ее в о НК о НН НІО сія: піл баз її Зау МЕ ХАХ КД ВЖжа же с шжЄо Бже Же ШУхХ дав Ка т «ке п а я ЗУ жк ЖК пильно ТМ «кре ЗИ
Ку тка
БА Кя ше «ВШ ВИМИ туту прес 13 гм ких см Маси екю «ай» 53 узи і Мт Жецх вищі Хцт їнмх їМмежш їду ціх гдажшо Ма тла Сх БЕ шиє цуш ДХЧ АБИ во Ем інд беж Мем ЗІ Зуш сім Ба Ха паж БО 1 5 1 їх як пет: Кл ке реле: мл с дит ККХ жокщі перете ач ше ТП Ти сі АВ Об сроб шЖжа СТИ Ж ля ше лох Хна ж ШУ т СМ КУ ше
ЗА жи за -жм о КК стяжки брід страти у Ду пАфуч тро жемрею хи ушу ефе я Кут пуркуя тт віУу Віа тн сім Бхш тн осі ХЛ тв Олу БЕЗ ТВ ЗЬИ ОЦ ше зв 4в Як тик Свічету спі жах Зах Має пера ю мит стю рак г М палю Ма м кох іду лося СИХ КЕ А АИХ КЕ ШевотвюЕ с ж мащаа БА жеАХ ЖЖ СВЕХ АХ кі КЕ БУ ж Миху Уч» Хужхжєу Сію сл ха Ан и ану ар не МН СЛИНИ о АВК НН я їх дк Зіж ВЕ ЖИих Зі зі ОСКАах У БЕ Жах пу жа сих ж БЖ «- За зе да та їх 75 «
чик сок дів М ах бачу Яма сля ТЗ м сю ух жен ну Зі тку
Тех бу діа ТВ сх ЖЕО ТЕХ ЗМУ Ще тих пі Во ТтВх жхуУу АР ОТВХ
ЖЕ зп а
БУ зи 5 їй» ку ср фл юю 47 ня фи ек дзуся МУ стїху Ко Мд стіау демотю Мур мАЮ ЖЕЛЕ ФАУ ЗАМОК НАМ ЖЕК КМ ХУ КАСЕТ ФАХУ ЖЕО У
Іа Тл по мМ АК ХХ щіщосекрв тутхи думі софіт яти тен гУТхє дис Мен тУїхс МТ м у хх ще хм СІМ ВкО тТМЕ Сім ша Стах СбІЖ БКО твБЕЖЕ пі Ада ти СІ У ЕжХО хІ5 ти зи
МА иа ТИ бек зам стр пЧю хх жк смію ккал у стою их км Жук юю Ул кю Зх Мих
Тип ЗаЖ І сХпХ їхуУ БЕМОИДХ хуЖ їхУм оса со ш БЕХ К сш ХХ ОМ хлО Мк МУ стаж спи Мріє ит кр Мі ситі пня мудрі и, дою пУї ст ур -кч
Іо ЕК КИ іесрви ші БЕОСТрБу су ді; Ом ше СМ іх паж ЖЕО ТП ху дае Ту бі вхо ТЕ су дів отих КУ шо тех Од зд зуп іще зай пул дл ЛИХ АщУ сс бує Зх кру сажу схїх Щі щу си їх їх б утіх узі Кує КТ жу Ме
МОЖ УМ Маю КЕ УМЕ сах ДА СУМмЖ КА БЕ Суд СІМ СаУЩСупУ слу ККО
ЗУ іти ххх
З Мт Не приро (хлоп шУ МІ лях Ж УМО лях що МЦе хля лижу Ср уєЄ ТЛ ця их хх Й шх
ХКХ о сву ДАШОК Х САш ЖЖ УМХ сх ММ СУМ КМУ ЖЖ ХХ ХхУЖ ХМКЖ ХЕ чЗ щу ом, жа
Ме ММ ща тя дюміи КЗ що худих сфе зу ху Ж шуму ФО2УхА ЗУмхч УЙчомих Мвче дмах Ж У жаіух ХХ
Ж БЕХ МаАЖ СК КРУК СКК бу їлзи їни ЖуЖ бу ТУ Бе дов дО сах мае ЗО ВО
Фі тм ти СКЛ сжухе спі бує лож ше ЖЖ Фо Х шу ючих и тещу Х іх пух їжі МОЖ МЖКА ЖОВ УК САКЕ Мар СКМ ЗО їх МУ жом ЖтТ їхЛЬ СУМ їх УЖ МЕ ту г уки в ВХ ІЙ де Жолажи СТОК пу Коди булу Ухаєих ух ба, ду йо ся им шу жк Кома Укив лй тик вжи їі Пеб бас Кто дек Біб Ууяі век отух їв Ав Боб Би- Уді лящ тлу "хм, Зак чи Ки За МИ фрежтю СУ» Сл ох тк о жхнух я хни Же єни лу и літу ю саду ту йдт Бі бів їі ЗО охтє ій БЕ п) Ул ОоЇхМ дл ОЇМаК ХА ЇЖУ
ДУ ЗБ шу жокатю ЗМ тот Сбокщтї Дж СМ лк скит Же «люд ФІ 0 ху. уд СИЛ яри хека УЖ дина диБаА АЖ ОКПХ БУМ ом т шх б су шжЖж леЕх АФ Бл вжи Жах Еш ге ся Уміло Жду мем о СаАтТЕ Кле дає ха хі ВИ "ре ху яхта й» З
ТЕЛ» Зх ха З ту ТАЙМ ІТМ кожи соти лі АННА чл ЖМКІХ ЛІ ЕКАХИХ «вод» ЗІ ще йо жує Жив хи 3 Вашу ЗА Мугтлю сир. Ст шУ Що СлИБМюо ср ЖОщев чи тої
Мет АЖ Жех ші мах Вер ма схе пла жі же ти фе жа дет мМуВ
З « лк лк
КУ -ї А Ал гом в МИ 3 их ж ик лихі. КЛ ТУ бик їх мя о ля дих дик вх хо їхмі Зае оеаб Ом ЗБ БОЖІ б бОш Був за наш Вал ЇМУК мех СА
МЕ Кн фу Сб моя кує М хр Ж ую ман я ж ум ХУДІ ммху ха му хі їРрав о тпх тТуУжЖ ТУХ Хі ТУ із АНщОСІй Уві Ттух УВІ ТтУХ ВІ ПЕ ЗВУ
ХУ и 35
Фо фо Ж у Ма техн УК сбиму КЗ шли ки лу баку хх ди хм. ТА іх їх ав ТУХ шех ТБ ем ожіВ су ШЕУ Ше ХжЕ У БВ дво БУ ях Кк: вгях
ТЕ ТЕХ шк шах У их ціх чих а о Го зЯе хх ших З ях т ви си Хі шій же Хів аБа СІу Хі Бей шій Вій ва іа Би дахи а тб У В
Ухучих уж Тім: Ж ТЕ Те Зх сам Жохх: Мхули УМумскт Сб ду ЖУжсих Зх ЗХ Сбіфею Ток кЕшОоБа зе хе ку РУШ ОУМХ БМ ОРЕ КЕ МБО КЕО РЕ МБ Ол Бе цк зи ЕЕ
Же ЖИХ АЖ
УК кт
АХ чех «А Ах ее зижкиху мА ТЛОМ, хі дю дей Тим спа у
М ЕММТІ АХ ТЕКА
«хм ФУ «им Ж ат. люєсях су Зах ЧІ «3. ие не ни не шо еф Ух ІУЖе Же жу
ХВО ВЕУ ВЕ ГРІБЖО ЖЕ Еш ЖЕ Фу вам о баФф Бе ОО КА ОО Ме дк МЕ ї 5 ТЖкУ Ух я хофих та Ж у Ки ля болі МТ м лхКи анти люд ІЇУЯ Фо Що ІМомує ЗХ, у: г
Тема дат ММ (МІЛА Ж За їн: Мп БМє МБ і МБ оба Воек Бе СпІх хг, зщ чк п 5 не їх Чим фЖчаже сах ду Кн усіх їх ку хи м лишь МІ ХУ ЛЬ
ЯгжЕ ЗМ УЖ ух ХА МИ кає аВА дій М їжи Зе рух Се о тБХ бе
Кох 43 їх їх щл ТУ божі т (м пжи суд Мах тод Ки туї сі Фе сх хг шк шу хх : їжи бе лУмй ТЖЕ щеХ ТВ ББц ба о АУ ШУ ж ТЕ УА КПА дер цУуЗ : да с; т : и 55 Би дош «и Кіа дім жи тах ша іх Мі б й діа лм ідо из дж : ах ж АЖ ЗАМ МВ Ка Ех МЕЖ ШО МЕМ ЗЕМ ФММ ЄМЩІМ ТЮМЖХ МА УМІХ Й
Кк ч-йх чц шт :
БОБ Ки. 7. и : бува, ах Том о Хі М ткутх бах блмх бу Ву біт ким Поч Щука бе ту :
КхсО ах ее ха ду шЖО ЗІ ма вхо ХО МА КО БУ БО СЛ СЕМА : м ча т !
ХУ О І Н їв Це (5 уж ЗЧлюрю (Зх Щі стю сїЗЗде юку сблуюо їЗї и ї3З1 у Ар їУї хе Бук :
Бус жмЖ їж БЖ ХМК ж МАО СХАЖ ЩШКЖ Кжш СКК сСОпу Су жа Зі ВХ : тот сх гу :
КК АМІ АЙ Н беру лізу ЗІ Члюрує лох и СМ МУ хв ж соку ет ж Мур сх хг щу Н
Тахо УФ СБУ АХ ШКО КпХ За у УА ББХ склу ШЖЛУ ДБХ ху же ТОБІ : іх 158 да Я 4 І ХХ Н
ХЛ кт ДЖ сени ЖУК у ку. хмрумх У ух Вк птіже ХЛ Уже бхжаче тгЛки З Ух их Н
УМ ОМА САЮКУХ ЮК МлУЮ ККУ КМІЛЮ ХАОСУ Му МЖК МІХ балу СУМ СКК лу Н хх чу ай : 155 35 Та : деиу : зак : сту ху тех : килик А : мое З. Н «КМ ХХ : «Віз шле : хх туда Я зу пе Му ом : «ВМ аослалня зеквплетна меми : штани ОХ : чщМИМ ОХ : мем жує КМе пе бує фу Щек жЖМмЖ мах їюат ек дек Її Уві ПУжЖ Би :
їх ХУ Ма М ре ень не НН ИН нн в НН в оо НК а Ноя й мА ХА ЗСЖ Мув мл ММ ха о пеМ о ЗЕОу Ма лук др же ву оси -к як як п « З тину б гу т охишео сйшжу ЗУ щаужу ж УМ тро сп зичу ше я мод Ко тшжев щі деа Бук джав Уві па пі Бае Мазї бжа Майї ше Би ев Бе зи зх жк я: ММ я пуху Жах Мих Мч ба т шу ія Фев хо ГУ шУЦх сбдію М в ти Оліє жа Акт бу БвИи АЖИ Мис дід су шевІ БА сь о ВБе ств ді «и Ге до
У що 3-й дум Ж хх озиме хх жих тах Ж шу сті шо Мох б хі лю бух нів Ба бе бів 0ЛУ Бук ХдЕ Бук Ту із ЖлК хів пз обме Уж Бук до за Б ца вх о я що та плям 2 У хг тож Тор бла у сту фу СУМ їм ШК кт пу тах
Чаї вве чаї Ти тва їаві й сій ТУЮ ЕВЕ ТБ Пежо гів су ші шву 5 ЗО БА ба з їм дум Їдимо беж кіл ті г ик Ж З ші, Туга хи б кт, т: її бух сви рт два Буш ви біль хіФ Ід Буш ХАшо дав БЖ ха Бем СА я хАщ хз
Ккчее МИ МАМ
СК» до ЮК БУ екя ие ке нене сок нако и ИН т Ук» У
Аза Ап Іа іїспі й БЖО дЕЩЛ Їм) ЇБе Бі жо ТЕХ ей я ЖЖ Те 155 їй їз їх їх Мах
Бхо Вто БВБе Те ше Бо Твж о піх сх глюц
МВ М
«Мі» За лу дл вала кжк
Соло шим ване ХАЖАМНКХ «ІЗ ВЕЖІ ков жетони і чі, «аоМ ла
Ми тлу Ко: лих флеш Такт бом мхрее иЄЬ жк ве бе Ж рих Я й як тот
Ме Бут ВБше пе Бу Буш бат жНе У Аз ше Це Хаш бі 1 М шу ї Б Не, МУ
Фо ШК ле скид Ж жен Лоли Шошжк ОХ Ток: ожфовия С3Ххч и соєю Доу ЩІ що щу пі г мал МА 1 дак У от ії пд лів о іїКєнь Ахо БиБОЛТук АЮ о йпіш вх Бек п У чи
А реж ие урязкц их пт б щ- зу шк ес Іг шо п ймвю му лю жо т
Тева АБО їжа авроМаМ АВ СУ ве Уа Бр оОчаї шву сх їла Буре з Ем ц
З по о са то Му аг тими тям до Мерую са й єзг Зх ї3135 ди гою КІ сс хв Ме ах муж сяМмі ваду мех сл бу веж УЖУ сій вце Ст Вів
Ва 5 ЯН тло Дамо Ме Сг ку їй Удищо ТІВ сих 0мхиу Ст фу ІК. СТ бу Сбають Ж ТЖУУ гля ид ків АБА ВЕЖ жів Лю Був тех тТУХ Тух мя тах її0» ВБй Обі ЗА) ук я за з за ве Те ТІ по ух вишок шо НЕ о схух Ж Зукрюих Кттум Убруче Ту. т щу сплю (ФЛоми ку
МВ БЕшЕК Од фоплвУ св емо ем мл ую шк ОСУ пи ін КІФ вах ХМ ших дод «ту -уц ві Ме КК ач Кк спожи х Я Кн КМ ша со Кожуст МО Шия ри У еще х в их ул май пт АЮ Був АЖЛОЇУМа жі сх Му (Ме Мат бу йо би! ль па т ІЙ
МА хАКІУ ля ж лю бує, Жах тиж г пе. ЖІх тТайма Хо іже ШУ буки ху Шах ден 1 пі ваг Ді Бей вв Бко дам ої; ТАЄ бу в ОСЬ беа боб був тав чи Я ух
АВ мя Бо уч ії Ше б тв; пПрсу бе м кг бум мі пд сб їх ти ркОо Бі Мих їТц го сл пі хо тп бі Сам хм»Е пух
Ту ад їч5 «й БЕН як пада ни
КЛ Васі лв пли ал пк сеИх ЗУ ту г о М о КА ау ЇМ ою У ло я КА ут хау Ган о ШАШКУ ОМ мезо пешх Ав дві Бай тує Беж Бдт Зі їм ват БЖ ВМ Оу Ямаж зе ї 5 М їх
У мошю маю Кощій У З зд, дод тації а ня слричу Мф Ж оди йритеу Спи ек Ахв о Беж АВ БІВ АБИ та га жна Майк їжу сБяМА ЗХ гена ЖЕК ЖИМ -- сец зга
М «Й «о ж пу. їжу ФМ бик тоуую зму бобах г среу СХри жу хи усу УЮ Мрія пр те ЕКО вхо вБе тп їм ВЕОо ТБ бі м ЖК необіхм Бк ВЕБ гІе Тих «ВУХ Б їх бе жх о уми МИ вх Жити і жк сини МІК кА Жних ЗМ фл Жим фу
Бу БуОЗ Твк обу Бі жвЕоОскУу БЕЗ тТЬБЕ бу Бе МЕ сур Бут Тек ОКУ ще ЩЕ 5 пк МЕ их й ту ШУюія МЕ 1 ху думу Ифия У хх шу Му чх кВ ух Тих дк т жи Шк виє КУ бу кас скМЄс бу Бик слу АБЕСЕ пт осбім бпх Кл СІМ Бу пк ча Бе па спо КЕ ТУ що бу ФУТ паху рф Мі хе жін пом СУТ у тіки у Сухі ку біти Уж ФМ юю Хишечу УМ ух ех ос да ТЕЖ шум жже Тв Ах шо ти обу яжо Тв су Бжо те я БІВ Ж
РК: ро ям щі пусту лу суч Шу ТМ щі па бу бачу си Мк ре :
МАМ ЖКО ЛЗ ша ЖЕО ЗИ щу ж СКЛЖ М жНе бОХ БКО жпХ ша ЖЖО : зп 1пЕ їх :
А «ВАМ А Н схружи її хи дує ЯМ ЇХ хи дмуух йуує ЇЗ13е бах ббврує їла Му мує хи дачу ж :
ЗЗжЖ о хм жом а ЕХО СУМ па йЕЮоїтВУ ща УБХ СУБ У Ж ЗХ : зд з пунк : же АЖ їЕ Я
Зк ух стю туї жи Сі, та кю лужну Три и ду ЛУ, уже Ух ул. Люк. Урни КК я, Н
Зіж хо Хах ЗУЖ пз ХА У БО ЖАЄ ООУу БО ХК іх ве ви Зі : з «ох хи «ол ! 13 х5 і М Н
Чем М ах Жееух ММ Фр інею СМ Фу пмю лУюи Жкуче Мох сут Укус Й
Іщх иХ лу ЖЖ ЩЖлХ МУ Ж ЧИХ ху шЖжЗ ОСУМмХ сх КИ ТИМ щі Ко : лак зх зе чих :
Ка 5 55 Му : сраки утри Ще Хм хи хіх ШУєЄсх Хм думах СТбмоує й лу ие ожх СКУ Шин Жентж Мр МИТ Н
ХП ОосаУ КБКО СЖПЖ САМ БЕН бпеосховх зчаАУ БКб ОПХ ФАшЖ КЕ ОТМВХ УЮ :
В Мт тк :
Жухет Тих ах жЖУвауУ щлом гийхах «Ж и ложхт сиру ю и уми; жа и ки суки УХА ІУши Н
МЕЖ СХМЖ МИУ Мі ХМК ХМУЖ ФМ ХМК ХМ МЖК АВІМ БО ТИЖ СОУ ЕХО Н зшИй ху зва :
МО хз М Й щЕШЖ МУ МИЩА ду : парк : са чК : хо КАМУ же : трохи їх : химли 47 : жи ямок мах : «лихих БМК Н т ух, р А : дим Маму ча вп АВй : «щи ЗЕ :
ин Шо Жук щжі т мі МО су СПИС тов ТУ ЛУужуй б7а в їйут
Ме ові БОЕБ БЮ БЖ ЗдЖ Пеб баз Зі ВжхО ЖИМ ев БхоО БЖ Хв онЖжО їх У ТО тА ту
КО
«шах «іі 17
Хежкяю СИ паж, тут пи
МК т. ЛАУХАТІХ кое седик З а му фею сі «им 0 шайвахниЕ побу ав З тери зх сг СУБ Меичих ОМ Коти Я ТЕ дк лити ЛЕТ Мои ую Шк, Чо и Ухаєйя.
МЕЖ о АізвосбевоїхАв Моз В їди фе ще хо Тех гео Бо Бус іа БЕ ї п Ах Ах кеш с за ау У «МУ
ЖИР Мк, пк сисети ху.
Ж МТ,
Кене яку як МУ жк ких гу сш а ве ТКА БЛИВО ПФ ЕМ «ща ЗЕ дин лм Хом бок Хуєиу бу Ходкк: СТ сх хх Ухжтих ТКфули ох Уха: Зах Ми Со шу даху мес пн Бей; дви жа пер обеб; Ще осбіУ БЕЗ СКиХ би Бий РКО Хо оби з к зи че
КУ Ух Ме Мт вхо и Ех з хи хм ВУ «Ва» ВЗ чиї 7 дія дет «хм БІЛСЕ «31 хз вдзпізіпи мі воли єаетяї пи ІМЛІ МАЦЕМ УМПЛЛЕМЛВ КУМ А В
А схТУ хуйми шу ши а їм дош чт што Кіа КЛ ФУБАЮ вм млн Жоема чу Шемо гі шу
Ме: вів вив йкшв ЖЕО йнмл їв ЇХ ою ЖЖ ЖИих бе мжше Бе Ї3а яко 1 х, їй я ц
КУ ве КМ Кл кг
ХХ пух. ми
Ам Кл «Ам М «ями БАК «ВІ Беєсві Ком сек еов
Ки чи ме шва в ту м ою КК сти ит, Ки Не А ч п Я СО тих кю Х - Уже х Ск: с рун
Мак Вів бе З же бли рев її оці Вже жМЕх їж Бо дек Хі БЖ 4 « че че
К З КУ Кл
КУ
2 полю жа АМА о ех хх чдКАЬ 14
КОаКЯ шле. «хм ПАЛ.
Мосс кеди т сш й уко од уки п
ФК ІнКаклі ЕЕ меле перила или ех Кн «вом хм х ти 515 Здм; ХУ: Му бл; там те жі у ЗУ и тим; Му хи ТЛ ко схе мек дів мезо ло Бо дж ем їі по БЕО Буш Би вто БК ів ТКЕ м че «г
Х во 30 МО
Ки,
Яутх що «й у и
ДЖ я ие ча дтж в тп
УФХ ДІЖКИ нОКя зе іх очі ук в ки пен в «каша посі А ладВОшипавзеКпА ха
Бах ху ка дух шодо тіваі шах Жіичу ураху СтЯ о бурю Жіейуу ба боді жриєу фе А ше
Ме до же ЕХ ЖИМУ жу ЕЕ ану ж БИХ жна ж ШшІММ МОЖУ ї Ка те І
Р ва АЖ --я т ван М
КН др лих хи 0 ЩЕХОХКУМ или я теги З ту шкі Мову ку В «жав ЖасЗМкик хіп нацеизі нт лох «У КМУ еп 5. Форух ше о кі ни ния МИ бита дюн: тн им Ме
Ме дів їн АБИ БКО сив шех БЇзае жі Вк тах жа БЕ; вк Же Їй ї 5 15 15 ха п ма «Де Ах я яр
АК Х 42 сл» мІмее «юки МАЛИХ
МТК, мисте ра. Ух, «и шко 0 йЕИХАЛ ОА ДІЖКИ. пн НН: хи КМ щі од що стації ше ех Ск ак Тих фр еру у бар щу шету що БУТ меш Аля Хана АБ же сп ж ВХ БАФ ОА ЕКО ТПУ мшц же КО УЖ МД 1 х, за І ї х 15 їх
БА) стат ї ки нер 2 в ЯНиВЯ
Каши грип «акт БАЛОК. нд лю сей Ки вив «ів ватьізва аповжевиКе кати тик каре БЕХ
Фет Сі х Жаміх уд ди м а и ШИЯ ше Уж оби се філе жив ре мес дія їні Дай ОжиоО жу БЕХ Ві су ВКО ТИХ їди) КО Бк МЕ с і 5 18 18 ух
БкФ ль шк мк
Ул дАМХ тр. зх кові 47 ві» БІЛО атак де й у пледи чай ЩОКА ДА ця пи й злЕ «МИ А пЕ мае йім отїки Ах їбжеся фошову бод, Хм фіни СМ чем бічну Су ГК що
Ме: ха їв дов БО дев се дів зу БО ТИХ Біне БЖ же жів КО 4 - Щ 5
А єх Ач А ше жах «ЖИ ОЛІЇ
Кк 8 чих 53 пох се теж «ЕК Оу де як були Вар Маха тихі кр
Ку Заліза списи «ДТ чу ка ОщАХ, и ни и в о нн НО НИ ННЯ вус Су. Хом Му Жуднх ІК
Место віз 5 Ха баб КО баг сб УЩІ Оу Ба жд їз Бо Б щу х К: м АХ
Кка ко стр В УпЕ хі ХМ ООІХ ема ТАЗ керу шт. «ил 0 КАХ «да» Желі іде шуплійна кед ДОВ с о Жоюефио сли ко Хохуєт ЛА мо Жити Жбуєу бли ста Мб бух Жим Хоже ко С о ул
Мек був Бу Му« Зк о вВсо Жбе Був уві Же бек Бек Боб дів їі ТВЕ
Ж їх ж ся х З ї5 ї5 надан ме Ху хх фбеюио ат Жбчсх Ж т шия МЕЧ ЦПМке ше Кк що х ситах Ах їйк Мем Гео їхМЄ пу вих пл Жвво вен СП; У жллопшжх ях АБО Гух МІВ туї еї й
У «5 З
Ура сум линяє киуує сю уеух ті фл зу шує ТІ; шкі МУ УП Фан Кох до жів Тих ТИХЕ их іл Бех Був оАУ МВ ОЇ із ях ти ТЕ ЕКО Щі Нш -ук хх х
ЗА и ща дв ов Тим тік їі 03134 ти ек Тим: Аз я тм тд хх ук дви Ва іїма ТіФ осіб сі піз ВК беу АїВ бр Віа уза Буш 3 Ду
Б ЗЕ їх лок у тех де я дир дл Же Тл Я ла Ми аа тон до ли їж дал хі бю вив пах й 5жЕ МУ ОО ос о жих сп ому пах хх мк -к -ц км
ТУ Ж ке ФМ фіз Фу су Мох 45 туш ТдюжЖ тд іх Мет йім бує Жиуу кв лах Ті жіц сій о тжу піФошАЙ пев Се пу СІ йвроспі гКо Му БУ Са АФ
МУ ча У
Тома шШееух йо ожух ТУхуУ дО шостої лї дою шию сло ЗШІірУ ЗЖУЮ У озео бхех АТ
Пе МЖжт В ск жа Зм Му За Зав о зак пав КАН жа му МУ ЖАХ тій тв Уа
АХ КМТ ЖОУХ тТода ЕІ тд тд її її їлаю їЛІі1з тиж бУЩ т їдою ум Зм її
Буд «І пуд Буж Жеж см бід був Сіл о СУуш ВЕ Буш Буш МВ ЗАМ СІЙ тц я ЕД
МАСИ ях М дж лох ли и бл ліку Мляю фечу «юри Р дохту ЖАН лм й тку Да
Ат дів ше ех сао шАМОжНЕ вже деХ АЛ БЛОКА Ум ож Ха АВМ чек ЧУ чад їою ев Та тік їди м лу лу хливУ ше Ма їх У т. фереу сббитяє ба ля 3 піу бе УЗ БК тп деж БК Аза пу КМ вів Бо ТужЖ Ав ошіу дід їтйищ зщй ще да ї45 ї5а Ух ї5О іс бла х Ко тд ат я такзрУ токзхх сг ФУких служу дум му узи» вра тах Аве Сей УЗ о бем Уа ма Сей ва лій За ех Дюротуу з-д, яд я ва На М т: мі Я ух ч. нн з они он їх т ІЧ пух, т, пПув Вішж аАви бат Хі Бім осів Ват вх Сі Хує мет Ту іа вв во по с ц, ложе
ММ 155 Ме січ у аж билин М: ММ де му ш М і Ж ох Мб боях От У ау іх Футих ХО жтне Бех ле їла Ба бук їм; був Мей о беб Мре їж вв сбхолі Бу БИ
ТК У бУгук
АХ 53 «ККУ сту о толзує ди шу (хи Щфує сус ЗШ Буду теє бРБрх ої, о ух бони бух ух
ТЕ мем КТ аю жу ше цуш мех шуш аю КІФ сошш ал Кук скукМ шах т Кене т ком де У піл кю ких Мк Ж ху ю сИхи ПИМеМмО пу ю су шлю деко дю пИфу хе КО ру Тита м тр Ше ОЇуУХ У ж Зах бух їли брх ЕІ ху ух ма тих сах ге уз ух, клю пуск, сх
Й и МОЗ М; то кі жа думою Кхї тях хх 1- пк чи іх, хе ех й хи бак рух їв тв ча вВЕБ б1іу це йів вів ко Кук О1Уу діа дво бу Ба ЖЕ 345 ЗБЕ та
Ме М шо са щу йодял У ищшо ЖЕ Зйчеюю Жищо Юди у божа СХДЮЗ бл СІ їі МБ ОБО дя Мун хну З Му їхкш о У ш МеТ Ме мкА МУув Сех ай Ех я ся тому тот зо жі і тя тил сука тим йому Том ом (15 ре ах віа ік Буш ва дій вжа спам вуж САМ їхжи Бо ба йежЖ СОМ Бл ол
У ши зи 5 КИ ах
С Фо ди Деу их о де тру йшм Щтж До пек Ми п х док АН «Че
Сай ве АБО од тух АБО НХ з ЩІіУ Аве сїу Ай обі й бій ро зай ек мл иа У БІС вбішжу тю ха су Аштх Щі ту Му З тт що Зло (ру З тях УТ аБросЕху КА дів Ав Мія їні Мес Мат блЄ із дів ху Ме жу ЗХ
Угук п й Ус п
ОВ МО БИ БУ ія іа М Ге Тізе тиж буму ЩІ хом бу Бій: ті отр сук Між фе
Фтацо вай шАУ ШАХ МАУ дж джяМ шАУ ЛЕ ОДВЮ лає Маю СУКюе шех маш Ку в ха 3 лих жк хощл ик щозуд ни Щи ДЯ зби Ух лю Мах те пихи тоже
Зеш цу: ем Ві Ол Ба б УвАХ іа ХЛ ЩОБ ОСІ ЖИ Буш БЕЖ Му
Зо Жах КІ хг Фк ек их Вшту (рю тим ма дл х Я що шу хи мат тур чаї Шех Тк тер Ав лу Пцуц Ууал Азв АТ Мі дЕфб бух ТБ пів ід 355 Зак зах тут (3345 дудту ха БКдо пів й; я бтщшу Бід мія (1 т и ТІ з, шт кхо бий ВЕУ ба у ДЕ В СЕМ ЗМ БП В ій Біш си Бі осі У ніш ЯКО
ЕЗБНУ АВ ВО таміх лю Ж ти жк фошяь Ж а Мю дух рю й сю. МИ їжі М жк
МЕ бу ЗЕМ БИ АЖ М МК ЩЕ СТИ ОКИС УдОжмлМ їхМУ Зк їхМУу У 354 за ап зЗшх лМЙ З ж о ку Шен їх сх Фряи акме жимі ше їі ню Ка «Ли юю Му МУ ---
Бро Уві січ Аїда сте Юфопаж ії мн Че СУ спо дв ТЕО су АгУ ап: тв ил
Іа ВЗ А
Кл Ал ато х пе у лу мух СМею ау іх ик» Я пат до боже фот Ж:
КУ лаву АК бен ЖЖ ших Зак ле зе бо ув Ода Бу Зак Хе
АТ, дв дскт
У як й тую ЩІ тдукх х ххх пух Лов лях бат Ву тущо МУ ха же УТ о ди й сіро бу ДВО ОМех ще осі бяж Уже бе му ди А ХМ ММА М їла Б дах а ро ЕК точ жду ім тт ги перо ач Ті ее Пи пи тлу дах их тех ВвЮомУШ КІФ Буш ВХ БЖ МА СьЖ БДде бує ХлАК Оу Хом осАю а до дв ла та я я буму Ха сміх ти Мщи хи мет С пи се жЖонщтю Ж ат З йшла Ж горах ек ЧАЇ ик був Бех Ал АжЯа ЖЕЖОо буУ їжа У Ак се АБй хима вка п дм ке Ко ати УТ ря фії Тдийо Фк З 1 би ти злу б чи Внщш ЩІ тя іє ут те піц цта лЕК Уа мА ТОЖ Аж ЗУБ ТВЖ САУ БОЖЕ Ом ПУБ міш ДІЄ ТЕЖ 8 ВО 5
Тр Си ПІ К;із йоую л юж ие Ух жи ІА ТИХ Мі ує Жошці З: ТМУрує ре Хі бик Зеж хх ОЕещ У БЮ ао Мас МЕ одкх ЖК сна Барссих ба бе
БУ о Уа йо ще тази кю їв ві мів Ве іш та ес і ех горю МІ ще ее дво ї-ц Зх Суд Вій діа два діа дуд БЗе двр о БУух муз дій де ціх Б ах стр Ж Те ен новин НН Уж. кто їжею жор тої Мкокх тує сіль ім Ла оба см був зав оБиля ха о За АХ вав о впаа ВХ оюмХ пт пк сиг ад 55 ай птах сх Кутя люьух ки УМ тк: З с: ЖАж тм п з тд ЗЕщ щої ша дю о шлу жпх дО КОХ щем АФ две бе Мем ща дер оду УМ Па жд ст чт ща ах пе по КЕ т: От до и в доме Му лимеу: МЛ іди Жоюищх мч СТЬ пах. хх Сен ха ши йвшж сОО За КК Жх ЗК лм обу БУВ лож ЛЕ шум схеХ РУХ
Мах кла сив пу тов сш А ах ЩЖК У би пл Тл Тит Я тим о Тож Уа. ук Жозжх реа
Аве Пе) де бід БФ бух СУ Буш буд ам бу ле ЗриоБее да пух поп пов пт па ча и
У ша птах пе Ах Ми фе буд гл хх виш ща ух Ху щи цу
Ха те дв БО Ала іще ТАЄ УЖ Бу ПІ рій ді век Ж двх аз вве ВПО пІму прю хто пд и спожи ут У хи тя тло умів пдую Хахтх соди А я рах вип озаї жрх маЩаї АЖЮ їхЇжЖ Був Мал Уді Бл пшЖх шо Бо Ам об їМУ щі 5Іі5 щпи
ЗО ЗІ ши яки п су Жши бду то й г чу їн ХІЩ шТтЦ В дих у шя "Ж ж Має са лів жав Ме жа бе дей осіу Бна о беї 953 Че Авроєіу Ме ли слу пд ли сл
Бех ЗО БИ 5 доли Жорує Ухуєиу ІЛ сфе: смію бю ківі ЯМ бул дочио ща тем лом Ух хуя
Би МУ БЕ п ЖУК ТУуК ЖУК БО їха тбтю БЕ Ва Сук Бі Бім ВЕЖ
ЗО БІВ дж (Ля даю томи Жомна Хіщ маю бере лу аж ХК гу дау пу Мак ох ки о бе їж са МУ о еаА Ж АЖ ЗУ БЕЖ МЖК АБИ СЗАУ НА
Ім ТУШе т
ФУ лу сххулиу бою СМ Ло що Жіхух щу сЗуучи Мак охо Мізу Катя су КМТ КУЄ що че Мал туш туш вів Вир о двр веж ме ую Бар о ово ххр оч оту ВХ пожщц пий ду
МВ. ЦТУХХ що ер Аа ИН сншж боку пек т хи ся шкі А жі КУТ ДОК
Нів бе буу ма шу Ів сева шу і шЩ) АЮ ех Мі о шелУМ аз длА
ЩО ще ТОМ
Са «их тп дищОСВ де узята г фан ки Жоскх їхю, ЩЕ спе лк Мир остуще білак ля
А мА ру БЖ з БАК ОЗІЖ Му Мжт дл овіМ БВ ХА сх Ба «пк - чук ту г їв ТУ ТЯ горах рих Мо дека хї хо шк НН туя ян духу АЛ пк шт сп ле іа дао Аза лів РІО жу М АБО САМ ОТ БЕЗ дув ТЕЮ А та ат є тах ЕД 435 хв М ша КИМ СОКУ лока Сіли Ж у шк Фпию Учорит дуюуУу ( т кі (їх "ех дал шЕх Ба ТВ ДЕЩО ро БИ де тую КК СУМ би ЕКО шу «ак ера ект тя ТА Не же Ж що прю туя ЩлмУ буму Мих Тл Зх ши бик щу бух 1 тя ух бви від чує Рпе одве Аж дек БУЖ УВУ тує же дач Ж АК Ха вис зи за ки
З ТМ ТУ ше т сорти кожи ти Мити ОВ сосую Й ук от рої зічкм іч її ші ав лів Зк вВку Му Мал те реа бе у Кен о був кКіме ва ді мі зв я зво ен чи ще чн чн о и А НН А НЯ ок що ді бій віз Аве ав Бе пес дій пі лій Хі тЕВБ оХіє дка ла ща за тав ме 7 З М ІВ У - «0 СОЯ
ШЕ а ще вони ме кшик БІЛ
КОЖ, лу инт тя ення як Маю АЛДЛНИВ МОХУПОІКХА сот ух аа хаци щУЗ тик шир сту два ях щоках Тому М М о дк ие ою ща шо ми ЛЕ
Мер Зах см дя їх бат Був і Вт Зишж т пФ Ваш Сую УАХ ОМА
З 5 18 їх
Же ЗКщЛО жк где Ми ті веур тах сум ТУТ п гаки двух МУ мах ре дво ота Уа їм ЕЖВа хід му Ів бе сів зАББосСтЕ ШЕ ТБЕ ТВ ОН т ту ух прі
Кк ку «МІХ тя Мир ах кю юю ех ише М ю СТ шу бідних Же бодех ках до жі с всех мм сах суп сзАшж бак са Сук пай де БЕ Бе Беб о бЗІж Аів Бін вапоКиХ пів тк ях Я 5 5
Фстиу ЩЕ 51 тра Со ож не ках ве ня Тов схід Ро. лож Кох пе ув) бів вва ле Ах ро Бра Ха бе ТУужЖ ТЕ БЖ Аа Сет Кі 5 як во сюутит кіна У до шо як Мо и. бод Му Му Холі Пра іще щу бух
ВХ пе цій Дів Кл віз МУ ск Віа до де ЖИ бек о уж хЩроах
Кок зу чБ хг
ВУ го Не З
Зк рах ДИМ як ХЛ Із жує ХУ Ак домах шах шує (ти Ат що б
Еко ТфФ Ж це дет Узі бі) ех аз Ар оАянов ан дек сув Дів Зв) ба зо а пн нн ШК гут щу ІЗМУут мує 0; (Мо їзущ суку; КЕ дху Узі пео пеж Уві Уйі шо ім дру беж пек Бхо Узі РО Бк ТЕ ай яїуц т
Ми МАО МАМ домту Дж фієту ТЗ ех сем Юічує Швих ХХ а АЛ шт Ам дл А и Хдц даю дно же фо був о бих Бе Бай за а жо дюМ АЛЛА ФЕВ ей а їх Аж вовон уки хи доку учи уча бл ян до баку тим діву їує ЗВнх б'ю ЖІ НИ пеж ТйкК шек Ки Мпууш Щі УМвж УВУ дЕБб бем Беж Су БМа сСУшЖ віє іє їм зх «й
МУ М ДОА сі ую фе б ових боку йохту й р. СТ пООСЖВ з«пр їж ошш А ЩИХ вує
ХК У
«А МО «Ек АХ решчя чер
МУХИ. «ЛУ шалі вові
БНО ША МОХ ПММ МУ ХУ КОЮ АХ сеаоп» О ск. М С їх Яга ЛИ ббраае о жодних їли у Тля Ух ж
Ме: КМЗа дах йеу АБО Су ма ве Ти дув ЛА ВВ ОСУуз ід лід Тк з х їй 5 х. ве АХ кЙ па ра рухи кажи тодух ху ше шлам ГТ пе Ж Шк М, хх Фу І х ко діла Шех тТБж пев хо Ал ва см Ше дів Бе ди Аа ших дід дО яв ЗВ ет б ж Три: ЩІ що уж Тбежу; ЛУ: іх лужну пе Том Ти уми и їх ду пПез ЗіБ Бл. і (ат ви Бе ТАК хо Бей бер аб Буо бе Уві пяє
ЗЕ щи Ак беихию ФУ Оч дя Лю лм лящ стем ле дя ех юр: би У прик рих то; аж о што дЕВ ТЯ тих аі то аз їі дщл» о бчое СЕ да дек да й тв а
Ох ПУ пх брак о дудт и Тл ех Ті тому Мр Аоарогтізю та у ху тлу квує сзіу ВББ о ї У тів Аа Ті їн Акб Аїа си КіФотмк ів Ті ех Ге Х та У о слу кал ПМЕхче Ст му Та: одежу: СХтгут тут; ЗйщЩІ ДА сх 3: Клод А; тик о БбЖМ МЕ Ще їх їм; Маю ЗАЗ а БЖжО АХ і МЖК Оллі Бі ОХУ вжи а ах тту ЖИЛІ НІВ боені СЕ тайм фітя ну розу Ві де тіше тлу шах Ла» Су лу ВІ тва мед жеХ Хиюд шоу Бах Ж АХ ЖБХ ТА Бл жЯМа хх у лову їз МИХ ве ла сію пл хх: дае ом дош ХЛ СКЛУ 31 ПЬЮ сля її13р ЗЛюЮІ док Лі бПЗуж хлю із МадО ОБЖ ще ФММ; Удла жо буму АК ОСОУ бі Мих УЖЕ МАЛ лет тр
КО МИ АКТУ ше Шемет тему ТТ ий тейі вим бу хау ти т мо ек ще СЬУ Уві щі мем їз вва зем Овни КО бі АБ ом щі КУ їй «и г и ее КО ж ко ЩЕ дуже; Хв зх тими т суху стру лі дух тю дет мл щі що кіш ща КЖО МУ дю би льох М АХ ОДА вщЮ дає вх Ві Вів Ва я лу ду з кгц ж
АК п ко. лу т о Мих Зх: що й СКЛ ву ух емо ухх А ММ СУМУ дош ТУЕ 165 «йІйм 111 сум их
АХ МО ших фуги
ХІД дкхх ВАНИХ кт ту ро но пк рев в «ий 0 КОЛОД ЗК КО ЕХ ех, З
АЦИЕ Ах 1 аж Маю фот йєтиз о ся Лома ЯТ:х йш шт ЕК Ж іс хх оо «и
Вес: лех УВО АЖ Су НА ж АБО КУ нів Кіз Кіз дЕр оТув даже Той 1 я 12 хВ
Мік чт Хі Фут судо ІА ДА бухт Їхня Ха ЗУ т 4 Ту му Ж авиоОСую о їІВИ Б Ух ЗМ ВХщшОБлИ Хі БІБ и Бий сли 5 ЖЕ
Що 5 Зо сим сивою чуми бує ниє бр сб фури хг тік пі о, КЕ я дів жих ах жБх був хм ех бу сувої шко Бе о Кшй зхМу А. и 5 її боді, «Хохт ие їх с Щозж ФВ Ю бХуусит о УУутич Ухухє З га ЖХовжх бака Те ків вдо пежЖ Аза Зак Чавь діва Бал ТИ дДхлр орви Бе 3 їммь бує ТВЕ
ЗО 5 БО ех Вл т хв фу рих (4 З по їз рус спаде віх п гм у
МуУув Аїа щіу дія т ЕМе сій Аа вне вія РО бек вія АБИ ба ЗМ
В Я ях що
Ткдухо ячят учи к о ки Жкутих СЕ ух ОВ фожечиє ХВ ОТ дю их ох ох ож Фрехя рек СУБ ЗКУ ВШ кто ХА о Боє Меч Жах біль Бех й БЮ Зжо ЗЖЮ Ашо
ЗБ зо ще тіж Вл А жому ик й тових пе ю хр хи жи (тд й МИ УЄШ уює Фіих
МВ да Ма Зах Зшя ша Мей Лек жа Ма ЗхшиХ Зх Ум сш ЯлХ Бех КЗ ах м С ії КІ АК Ам кащ стук пухку рух п шо пи Жити ун ФУ Тк с Зх ме их ув вк РКО їй ав АБО вка Хі Су Твж ов Без дід Увх Ве Авий ко 17 НЯ вас А люжі ог, щ пк ям Се дл. літ же До МиУ нн ня АНІ пробку осв: ся хни віз о вжа Бек ї1є КЕ жиє ба ЖК ОСУВ їв Лак о МаА ду пе ФК бух й «55 Заг и яАКОУ ве б ств в гл ФУ и т «хх де Мао Же гів
Біне сбув йіяв дв Ум Суд о їмка Кб о АвБЕ ме ЧО ХВ
ТА і5 15 дж ож АХ ре зах вини я «31» ВХ жд КМ студ дяк
ІІ АЄВІХ ТІЛУ, клю ух туди ої Турщо реч кі «а пасліїв взотюиалій
ЯН 517
УЖ КАДИ мюкокї чн гом ФА Ул Ух лях дує ХМ ток: о няно АЖ я ож но АННА щ-Кт Бім тва шім шу Хм паж ЗВ Був о йай Буш зви Бу пежЖ Беж о уе ї 5 їо х5 «тд тд ШручУу тай тв сб ті і як фр то пт Блум іх че су ПУуд що Би бем тую АФ ВАЛА ща ува шШех дей ошом Бей ові в: ж ла
Ж о дужку Усзкди Че ти бруси Ж шу Сток Мох ПЕНЮ жу УМ Уто Жж сбіхі Ул що
АВ БЕ Бук ККЖ мук У їі Ів ем тах пев ВбвобЗіц пе ЗІ ТММ з ак ак
КЕ 36 Як ятих бук я: Ж вАї шеужах дах жити сжЖрмужют Тят Щозжі ль дув Мох са що ли
Ах Бу ЗХ: піс пес дво АХ дв Б: Ав Маї Узі Бех дек дув ді
МІН 55 о сблх хо Мазф їЗа Я Мп бідах Км ОК с СУА ба Зх б Є Ка ке --й ек -
БУ М гам ож пе тях я жи хІЩ ду «3 тд ли ує Із а 2 ху Іі ді т дз Бій сій бів чЧв3 біб бий бжа ТП дм ста бій сла сам аа со яв за 5 «хх яз їж я и: луєуї йон, жає УЖ СТУ ТИуух що Хоб бика ЛУМую Лоб іш пз Сі біл; Кхо Ума Вжоа лак Мах КжОо дух БА Му сЗФжЖ Кл омую чай лк КУ ї50 М їх ка св Мету сша фИтах Урау сб Мія ЩІ жін х тот жо хіх дих жує БІ ле аю Ме А о Заг ша із Су Ка Мая же иа хима АБХЬ Ана же ЩИХ (я 15 1215
КОВІ паю ник
Феміда Ми их Коти рзяуєю УруУ й; СЕЛ хо лоляму Мая МЛ, лиреє судо біду лю
УЖЕ ТІ БхО СУуш УВІ КО СУ Хр ок пу ХАМ ЖК ЖК Же пепосхух сло сх СЯ
УЗИ Еж їщО я фа пиши СКЛ ях СК ду Ктием Мржи дуету дм ля Ж т дотоУ блоду фднке Д, баз пу жек її шк ШІ ЧЩЖх да АБ ОФЕУ БА Же Ахл паж МеХп Бл за 15 зАЩЦ ЗАЙ 155 ВУ 155 Ма чених для бВашеют В щит щеших Сех Що Жов бе Ум КК о тля Єбжемо сш
Ух ВБилю пек Мек ЗУ БЮ Яоме б зи пек бів їмо ЗМ фот КУБ ож зе де су їв ї7и 175 тру вх ОД тт ДМ
Ті до Ми: Абв шву ДМ тп
АЖ
-а й ЕК «АП 513 стру як
ЖАХ МІ тк т рон ши 0 БІК ту умі іх ду мих хи): масі кожд аошижасих сатщаУ а
Ж МАМ ке мак Бу ОМ: Ако ек біль вал Ме виб Веб бек ес вже пу їй НЕ
ХМ ХХ їх їх пе ЖІН х шплу фіг сою Зрж й кху сутя фу Му МЛ тод Сфре хо боку хх
Ашип о Бпае Ап Сув Акта ія дій їй Бо ех сЖнЕЖ їжнїі ЖЖ АЛ Кеа пу лету чц ЗА щи ха 58
Удай Мн щоку ЗУ ТИ За хи: схо ДУЇ и СКЛ ощо о пхтує т Три: ех Ту
Киш що МИ фоз щіш лк веж БХхО см КІ БИ ЛУ ЛОбищо У ХЛ БХО
ЖЕ о хх
Жодні Жах Жах сміху СПИ йбтях Жуєту спбожту мет мує Ст? ху Ма упеї Жир дими їжі ме Єна ЕМ ех Сук буд ж та жа зУшНІ ла ЖЕ мало тих Кл «тя ой дх я й я ті вет о ве їі бе ти іх ве біли хі вит хі ів бі йій жа йиМма йеЮОжЕ а хиЗЕ СУПУ сБуУ сХЛЕжЖ му МАО ЖЕ Ма ал УМ пк ча -х ях мл У бух З
Корм Стів спляйу її Ср иу аа их и ТИМ ю там: Ср тр бро Тони й ха хг їжию ЛА ОСТУХ бал БВ хх СбМмЖ СББХ ХНА СИХ ДОВ ЕХ ММА БО АЖМА СУ їхнє: дж руд тую: бля щлодо що ща тічки Зб хг тіж Торі ді ха ок
МЖжх ДА ХЛ ОКХ Оллі ів Болі Б Кл БУМ: УМ ХМ Бе ЗАТ: УВК УМО Х
НН те КК
А хХ. Мт КО бом ик Тих Мі й сх беру (з ККУ Вів гі дачу ше йшли хі під
ТЕЖ о дикв Іза тіФ дів сту Єви бу ТБЖ дів ві ха шех АВ діа КІ яке дсуУц ня
ЕХО БК хуя пр жі хи КА чл ущом Я.М шими ох (лтіх» ба тіж су жі Ваг тку 1іу Кве обі ій Уві вББ Уві пре пак о брУ ув) Ті Без іє дБИ Би ек лд їди
Зо 155 35 пхж Мк їж ща Мом СТ воду их Ж ку Ж їжу їм лк хи ра дк дав поБеоа су ет Беб їзе ат Ме Уві кт МА Мо Мі ЗА уж ТвЕ
За КБУ їх КИ.
М Ми КО щи иа нн р о НН НН КН Ну НН он ан ША чаї див Їхав Алла ек Аа Аза мед тих Меї Аля о сАМ о гів ВАЖКО же І пай тки чЕшМ ДА иа ТМ кканьон Ух ме рони пп
Ся Зх Мп лалих сІнаІслн вав апа тій
Ж ГУ МАХ
Тая беж Ток Ток уж Урі сТозажу ЩЕ Ло о но нон в НК НН
Мевоімаж Бу Буш бхоа Ба Пух ЗАМ Лев бет ет Їж Вл їн аж вла ї ТО їх чт ооталух ЖУТаю тому сФбугю дуМих СУБ Ал Фут ху ср гУгу ху доб блю Мі ФУТ
Уа ши ААУ МЕМА лЛИяБУ шжИКч щу ло ААУ пос Же АещоО М яка и
Ж т ку «хх ло о
Ти Хемух лдІмї Може бе Мін що ін Мох хи Лімо хх пожу З бр С
ХК ОКУ Хща ЛЗдТ Бу сухих АФ УМХ са сш Уа ЗД ОВ Бл ве ле
Ук Би де 35 З ше, р ДУ Жені точ М що фею Мо Хі Тит бом дик їх гі т доле
Ко її бу во іно АІХВ дО ВпзоЗ ом БУВ ому ЕЛ шу ха В ЕД т тя ве ст божа Ас шу (Чаус Має Я хх фл й хм Урі бом ха хіх
Бах був ліз ек БМ3 ТВ СЗЗ) Ту їз Був Лів за) сід а БЖх зі
ТИ та я кс, пе дев фо 13 73 ду їУкУу (Іху Ту ни в а НН ОК сій аВе жа дуже су са овБХ Риб бут жа БЕХ ода вада Би САУ АНУ яв зв 5 г таза ау глум щлуу Моя бере Жду і бома бе го Хі бл для ді ціз пев чне пуб Бдух Віа бек до НЕ Гєв о сбуйа Був Мала МЗув Даю й «отр «щи «дк
Ку МУ КУ
Яд дя пт Му т ГТ313 Ти Тим пр (піз пеий ігр обл і ви пуд па АХА дно о ТтаК Се са пуд о лика ви Сам еко вай БУ СпІУ УП ОКхе
М ув ех: кл що що гля су тУтит М Тек Зк Ук оо Диєту ХЛ Хожкши ЖК ун ЛУ
Віз вія ХМЖ бІіМ вх Ма МуУушБ іш ОКУ ім БАТ жОУ Му що КхО ХХХ 135 125 12 «струс фу Додому Жде Лдх бМхеу о сдшту (рю Піч пл Же тки лу тА ше КЕ Аля мух Ам Оу АБИ ОТуХ АБ ОшАУу КЛІ Зезл ка їм дав опУд їх М У 15 о тм їх тую те хі й секту о Дохух ТІ Улямо Міс дае мет Ку
ФАК їм Ма бами їм). щі ОЗ Хує Бі бдю плєе Чув Ме бл папою
ЕХ ї7а іт дом Тдуто із фр СТІ, б ру бум шуму дур бом Хе: оту Тих пі длиш Беж сі БЕоО Фі Теж Мих тТУуХ Шеу Аах вау БМ дах Му ХМ Ну тд з ши ху
ТЯ М А щу
ЗЯжсуб 0771 їлмі Мод Тоії ШУ Фк шт (ті ту Шу ЗМ МН їз хх ду 21 ху жк ШІй жа Мес оБа ББе сту АБИ сли) бує ББа ЖК зей Аве оби є у
ЕНН ННЯ
ЕКО МУ ХА пика тилу ті тт іш їХвиу Бл вх жу бує ббіуе ж хі ки жу ох Їхі ху Фк
Пежо Буш Ті сра тп Бош Буш СБ о тТУЖ ЖбУЮ СРО ОСЬ щу еж Сі Сех 2 тц т
АХ КАСА УМ
«ау чт ут гі де ху рум Хлруї осизах Тохеі сх Тез З Харві думу о
За ОК КК да М їх ЖИВИ МА СХ Беж ж МАО СЖМК мало Ми Оу стук пк суху в де ВІЙ п ща тя та Ал с лк зх Вір йо Ж теру тю 01 зх ідо шт Ме хуй дав маш ЛЕВ ОТЖЖХ ху дів ев Аза ба слу су У У КАВОВЕ АВ шах я МУ тушу ЗЛУ зи; Кози «Ли їх. дат обои Лоу. дув тома фо ло вує б Клод
Буш су КХо БУШЖш їЇхМу МХхш аж ж ПОМ да Му дю за М Оу ід
Вк ва Ота йо в пли пломба дак ходи Краю СТ дату боки) юр чаї Ж дош ОБУ жо ду пр
Вів а дв (ек сем па Аме сені ЕХ СХАБОЖІНВ АЖ ох ЖІН дю їх
СТЕК, Зп ТЕ
ІВ «М БУК стю фово 4КщО Му алу ож (у щоатУЄ из шує ТЕТ УЮ їУєт ще гу хи Тв Ж в тут ввЕ УА Ват Ом ОБ ОБІУ БАИ Буш бу сіл БХЖ ВВЕ ОСІ АБИ Ха п МА КУН
ПО З КЕНЕ дже ВІ о тд ші тах рух ші дод гра МАЛ. бутзю СУБ ую ПОР; дрів пз Сухе дЕЮД МОВ жі Ме ОО Ті МАВ Ал іхум МАО МА с АВ ОХУХ УЖ суд се За СК
Зп БУ Б Ба тло сжожежУ ХЖосмде ежлоюю лрууюь Молрхх по що С шу бжчаху уж ЗД кі доти сія, Мі ує зу сх ох паж Був цем бою Ов Ба ом Хо Сх аж Не сум сжвоОжик Уж Су
Ка Зло їх
-к щоб че лк Там зу лу чу й у Ул г ХІІ їх лм те
БуоО цу ож це ко Ї1їе ба осау Тих шоп Ал сжа З Ю бкостух тк 345 155 пУгаж жі от Му Тл МІ їн фо бу м тих пусу 31 а РО сіуУу піУу пуд МВ діа Аза Бе Авротух ТЕ Ті січ ко іх Ар ощу
БУХ 50 зв ті ху «м дума МІ чх 134 и Й стече Ук М дожух То о т ву: Ух
Віз вх сь чЧах БпФ обі ніш с Ху ПІ ВТБ ОБЕЮ іве Сішм ім рХО пре ек зал
НІ 5 МБУНІ) ду іі сплювм й пк бігу хи о чаухк ги ах сміту 1: пі дини гі гі дід
Азв осів ук Ажи Тих сій тТух ех Ам с слу Ма Бета БАЗ щМа АхВ
Зах зо зах Ро тм су ух дру сум ТУ т Фут ку М гля ти шу х УЗ хх ун то оБеЕЖ Тіє МеЗ58 ет сСішж 01Уу беж тХхв Віа сі Му хі Віа су ТК ду Я дл 4055 рек 515 пвЕобчлу ги ду бл дек те лій Ей їУд т: на інн с т Ту хх КО пХ ех ел Фе УТ сх РАНА АЛЕЮ ЗЛ АЗА СТІНИ КТ бхАЩО МуВосгоХ я сек дн и их У ще хіх т пу бю я КЯ жу дл и мину уча (ча гато У хів оду сі1у дм тхв вів дви Хі зві бімй Звх вав тує ста був ів
Зк БЖ 45 435 445 ее дос тА ях Ті бі У ці дл ТК тик о Ти децрю 0 Фрік г СТ Тл щхалйлохув о іїшлу (а їхМу хХжНА МУ ОбаХ їУХ Ма БО мод оджех Мах о їпХ Му
МО 55 заг
Зудю М чо моаиу тутих и ху сіх йони ще ЗХ дов Холм дк щовжу змо дезу їй зак оАТа Бжщ хо Зі МУ хі ОХ МАХ ВАХ зем РжО БАХ Бум еВ УА аск ази ах Ки
ВЕУ АТО АВ Зо тихщшо бує тт її: луку Щі до б 33 ти жу смхха сих Тк Фірми пифуєє Тож нуш о жмж ха Обі БХхоО ЗаФ РУ СІЮ Був оюам ух Му хХут тк хм ЗУБ ик ас ик
З 459 ее ль ск щи То: Ем Тих Тл Зм т є: брухту Уижкі ХВ: щоаху Тих Чи пі Ба БВ Пеб нів жде Бу Ма ОА ТвЕ Бор їж Бпе дзом бами де ци цик цім
Мк ли АХ
Фффрае Мортю Тех ие. Мб тар ЖИчІв одтю ВИ гео ри Жошлх сяк (ла тик Й
Вайт; лав жвх ши АізЗ ХВ Же Ат МТ їм ПЧ МБ ОДУКМ лу ХМ чне щі ялВ що хі У их ою 5 хо ех» ча жит їмо тиху тії г 0 х у щиро бУкди 2135 Жуля дк зід су Тух Ав Бле іїуза БІ УМ Май Ада УВУ тТВж о сбаа дозрошу ПЕД пл пл ща т
З ве ще
Жив юю Жди Тим ря нин жд УМ М боже Мо ши ма у ще ло хх ЮОСЖАТК ЗЕМ; я МЕМ ХхвлА ЗАТ БЖиХ їхМУ бі БУуї КФК УЖТМ ХМК ОУМІУ МАТИ ско как якщо шик шо
Уа 55 ВУ ший шо Шех зе ДЖ ШУ бла пз БІ Али їли Шен сббшж де їці шви (і
Аве ях ВХ АБИ ЗІіУ їжа ткрогіе АБЕ ув йеу тую ДЕД осей йеж Фі пк скла ровеЯ меж я -Я с шк їУіхка Лоб ТІК Тожхю. блозами ДЖИЮТ О тохххі. Єву Тир руно щуку пат шу Між печу їх ху ви Бум СІЖ Буш оце ЗА Буш ом ХА ОБИє бБдюожут хаАш Ти вв Оу ке «те чт
ЗИ щих 5 потік тині Іі Тему ау іх їй Кі му джу Ви дл бум бом тм лад і ем дій ши Ал осАюУ БЕВе Ада ми лем ло дій ех жемосТМх Мал чат о КИ о ов нь Нв ЯН ен ОНА Я НН ШИЯ жом кл й я ру ж Ух хх
ЕІ сам МУ Май УщА КІМ? сМВЖ др ОЗ За см о сУуМУ ЛЕ Ж О Хушію зе я ВІ я тах бю: щих їх бічхи га дж фе Мі їз ху сем їз тих им їижи Мч
Бу Без АВ Су па: Зі Ума бжЗЕЖ Авй саіуУ жиЖ січ цу цУуш цу ніш дз дій кац дах пял 23 п пи
Уа гла пк лі 1 ен ШАНИ зи Мія пу; ху; МТА ТИ
Зак Ху УЖ МАХ СІЛЬ СХ БЦ ЗО луЄ ВіФ осі віп БЮ еБИ Бій ямі
ВУ тай АВ же ЕИчу Ал йччу йграх сп хгщі ун спам ПО сля Ми злж зи сечу 2мхих
Був ве лів Аєз спі Бе Уфі пе Ашжо Твх бує Мех міф Уві юдОтух аа За ти хіх То ФЗеуж 1 их бу па щу ему хг Лізи худ 13-х мм 313 Кі
Ада др о шех дій о тТУЄ ТМ ДЕв о Авки тТЕроУІ сі УВІ НІВ овВкОо ші НІ п: пд пе
Не щас пл
Сл хх ТУижеа Жир ку в тА дозжу ли Ми уми ті: ді тку ли хіх сть бу їме гі Зк Уа зам Алю век Ба Ббхш був Аза жа МАХ блю ТАХ ух ау ЧІ тео йти ї3 із тю фу Мах хто шує лову СИМуєЄ докт дну (лм ТА пед де спіу цу ЕКО ТУ таз дУуВ Жшжх ШЖеБЖ ТП дещо це біл їз Ада трас: зд леї сег
Лу ТК. ЕВ аю пан Ах щі суку (мн із: сук, Тих Хм ки ЩІ п и І НН А чи ази АіВ о Аїа Би спек Біб Ав бу тТвжЕ Бкро діа Тур оБуш ях Ух ак зац -У --3ц веж 755 ТА шт. ММ докт ЧИ х СМ ФУ ИмУує мамо домтя Фу т ких дм лих хлеб вк тп акоошаУ Тих божих ТУух лив обу їні Дав овМУ Уа бо ля ст седе чи
ТО Не ме ува ла сАЩЕЮ МВА БУВ СМ СУХО ХЕ МАТ ХЗІЛЬ ІЛ ХОМ Бус БАЮ піз ЇхмУу тах зда ПЕ
Шон Ж шу холу УЖних У ле М хи Б жх Ж осдхи Жозио УєЄату Ма тек ху зі вух ку пхш Аж Бе вжсй Бу пе ЗУ Бес Бут Бе зів УЗЩІО Чвл обі ім від зв зт М хх пику бохо жк ОХ що са МОХ що стжуТ Мити Коххуи Симон,
Лише Зеаи свт ех ів КУ Вів жі Бу Км Бук БОКУ
КЕ То ах «1 315
КАМ МА ке УЖ чл хі «айши ЛКК сенсу тт біз комет,
АК ОО ШЕУ КВ
Сржичь 15
Кл КІ ко сббхе е дтух плеч таж. Мах МІФ лах Халтм схем Ди - пт хх ії
Мей туя Ні Ов Зав був бле щи ів Ашп о бето дж дав во тяж ді ї КУ 15 і па Сех Ух 2 г їм тм Лу Ши Та хагуєю їди ки жах лм Ме на о дежх За вро Суд СУ ж вам ЕКО дв шеж бах КО тає ТОЖ АК
Кв: я Бо склу ж То и г жав тую ща жав тощо дожт стик ож ду ж тк А їхІ їЗМТ ЗИ Іа їх М жо дяк сеМІ ее лЕВ ож мі УА ОЗ ЛІВ зи КІ хц дк в ж хіт сухе хів йнаиа ба. М ху фут мує вик лох жду п А НН
Хі ШИК Віа Бе БПе о йів дБ РрІО ше АБО йіш дяХ Же ем У Бех
Сн пр ОЗ пе Аж їжі БП дже са жів Кжні То ЖІ теп деп деЖ бан еп шжо
Но -г ск що гу б г БУ шву фу Лі ЗІ ше Ж Тай Том (Я бедх Ума ст шу т тро т
Бех Ежо сіб Ущі деп Обте Їх Муз СЯ сей Сх піп жех Ще ті ма хх ах и
БУ Зо З чових оби см ше Шк ла бр ур било (ах (їх ба слодУ ЗМ ода би їхка їжу пі ше ЕКО Азія бкз до їхні ші ій бец ШЖеу ЗХ бе інших лох Кт їх
КАМ ТУ КУ пі о фу бо полу 5 ху ЗУ іх не бБебсо ШМії Хіщ о тлшмх будує Тим лій сом пе БужЖ пах ліа ба від сі Бе Бім пле Ада бзи дви Сем є ц й хх
АВ Мих Ми
Чо укмах Ми (Мі зує Щихуї бою у сухо й бик що сту боти то їце Бхо хі бек туш йо сек Бо Мах вдо Зак Ві ж БМ3 см Зажа зл тд чиї хай КО ї5 човні з Ла Тор хода СК слі Тшмі гі дом ві лм йо іч хіщ твх
Шана штиМм Ані ХИБА лина а А лад га й АТХ БО сла ДАО Е тА і по з як як
Ак 5 з Ай
А ІУх лих пе -- дич а тая думи бує її їх па КУ ТУмат сах гУлюю ху М хх
СаУу ЕКО СУМКУ кМЛу МА УМХ ІМ Ж СУМУ Юа ХХ СМ Осло м ваш о 155 Її М тру ск СА що Мет км жати у ач МАТ Хо минокю МИТ кю МО ря Мюслі
ММК осн ше лю ЕІ СКМ Х сну АЛІ КОЖ сн ХАТА ЗАХО Бхху й КОХ ху :йй ха тай
АХ ЖХ ЗО
ХМ, ттж що Ті. куту ля ЄМ сп Хлу ика що п ю йх Дх ко ХюАЖ ху а ММК оо У ЕТО Віа З МУ ж ХУ Зам ке СКК Ос чщи тт схух т,
ПОЖТУ ОМ А су Кі юю СК учи ТІ се ХІД мує КТ хе Ух хан З хх дю тох бує 31 хи: ДЮ пух. ти сі У Азія таж пі УЗ отїмйжЖ сдіУ Аа тат пі дав о тВе бу ла вх праг скл сих
АК КАТ о
Зб о їзмтх МУвує (їли Фут Хм (я Зою ун и лених и хх ХУ бі ти біт ко тс пі Ркб Те сі вій тп сім БЕЗ тує сїіу ВІВ те (Му прут ту з зда до М ша жо зі ту ж хи хх хуя хх уми хм хх іх ве хи и св їх іа жк спі та жЖНе спіУу Бо ТЕ пі Віа жо» іу риє Тл бу кіс у а ТИХ пек У боти. Па ся» дл миую їі» що Вл уїляу сах ги шо оюю Ту СТУ
ХлЖОоїхрУ їж ТЛ їхху а жк СБУ Мав їх їхМуУ ЇХУЮ їхМУ їх лою А
ЗЕ ек пух
КІЖКА У КК ек Ілрсх З Сун Ж хо бруд бу в я 1 т чат Тк ке тах яущ
Бжсб Бпе дід шех «у ТпЄ їВи Бкб йеих Ада Беца Узх АБ Аіа бета Удх я тк з шт ах ВУ
ОО а ще. Пух ля МІ Ти ок и чиШьКи От Тл: и и тихе І. Як хе 1 йно ват бл їхМУ СД Мебпу фа їхМУу МІЛЄ їзБУм ХМ смак сви мКЕО Їм А судриє ще Ум лм ях щих
Я форм тую Те У хг туди дек Ту и т У чНкУ їх «ал г мух
Аа їм УВЖ САУ СУ тиж щеж ХіФт ТОЖ Сема Ада Бема спдм ва сі ввр
ЗИ. пу т ц тає
МІ ХМ ХАІ щи тмжю йому хяи Комо ж док лом лю рю Сл Фу мо би Там й ощо ік ук ва сле Уі ів вже туп Вів СУ ЖК діє Шах Жак Її: АХА
ЗУ аа Ух дуУкуих С ЗУїзи се З бан Му не оду дує Ж ни зу лумох а ху, кт ве вне пек дів Таж Бі Дів ем вій КО Тіє ЇВ ОБО Ящо по М за за
УЛУ тлу шию ЗИ КІ чужу ля Дан пою: Се му Хе дя що сао СІЯ ла Аж ЖАЛА КАФ ХИВа ТпХ дУдоежеа лох Ал лах ЛЕНА ВИХ ОБОЄ СКБУ Уа 155 158 355 тля лю В фея то боміх Тип: ну чу Аїда рих лів о йїв гі АТ ти сій Фіу ія Бкб їн Тл (на ТИХ бро Аїд Рпе дів Дів Тіз Аїя Ті зд Вк їди
КУ и ее піз йду тиє дій ск іч тій Ті Уі йіз Вій тій шнечу Му лід Аа слі шеу ТП АзА ЩшЕХ ПіУ Кіш ТіФе вза са ій Та бо бе дів лід я -в58 -аг з кут ха х зощ ал
ХХ КО ха5 ад 1 Шіт ги Ті їаУ те тек їх пек сіє що то бтум Му Ті
Сім дви СУБ ТіФоівза пПез бук У Беж сем тмж Ві Дій ших ЕХО Те дтп 418 пл
КІ Ам А хіх дім їдх лом тлу ічру ЛІ ие Ал лам слу дет ст ву ле
Вщів БВпІаів хща Зав о сзаУ ха УщА Зевсу Ка М ХВО У
СЕ іп їй о ла лм ша д 35 ха Ав «дю 37 «Ай БО хи ЕЛЛА ІМК
Дт ЧЕ керує
Фе Тв мі хм Асі Му Шо пута кіс су ам гу дих хе ше х мес гу Ніз Ап олно о сСув Ре сіУу Ні Аа зви Сув Ажцп АВ РЕФ Їх 4 « я ак 4 Не КУ АХ тж хім спо У иу Маму чик ттчищі щожжі ощозжі хи и бе сі ї1хх3 зх и Ж ні сб
УВА БАК ОТИХ БО АВи Су СУТ АІС АЖІ БІО ЗМ. тнх У Кто їі отиЕ ук Зк че же ши Б
Фе УВУ У му рон ли шеж па хі що має сг му душ ву гоша мм А б Сім са ба лу хо ба бле б Бей Ба БА дех се Кл дід
Б У й шо сте ді й маше бує до йо биту Чо джу дід дж дачу Тл діа ав о жі АМВОАОКО. Илж ЖИМ ОМ ЗА НЯМ ПНІ джюЮ Зав о ш МАЯ М ОА пе як ск т ж М тоди бої бази Ті фе СП СУри беиз тях дет тд белі йши «ій їли ді їше Мжи Авпїшну Щі тех бів їн Се) Аа би сем Ав оса ба щі ках ча «кЕ п
ТЕ М Б тушу «слезує вк пи вцля 4УБих тФамі тТдиз т гшмі Жіс хр под жів ті
РЕз Чех БЕ Сій щіу зна Бпе ба Бу Шій о Бемй Хі сій пежЖ Хі ТіФш
Ек ж 5 ж р; о
У У ьИ - «ж ІВ. м. он Щі Уж учи що ох - ЖЕ мае нь ШО її що Си ще ї ат. їйжмі бе; діє пет Буш дач Бут брак ін; але УЗ фам їз; Зек тугу. ий зла з1й ями ММ Ам сля (тн (в ШИН Мхт ке Зо жі А др рр БНех БУ обі пк жо Ле пе сій сів пе тмЕ шЕЖ Аза Сей лід шко БНО ЖІНВ Бл ЩеЖ Шец Ба те лсуж тує
Кк во А то жолу їзуи Ж ие виз її пу 1 тя що пе т кла т т іїнжо вам оБхсо дав пек Беам о сі їм ін їм Бар оїем зм а С су ях хх я «й не Іа КИ лю ть хгшул М» зу ПІТ Х «ях ФіТах Ма тує сь ех ЛИ ем чих Му же пАжЖ ЗА УИХ жо бу ау Ку пд ом сш ЕЛОдаХ ЗзаЖ Еш ХИХ а тугу - п тка
А УМ Кен КИ тут зу тки їли хи Ж) пе гли уз Мр їх ом бе ЖУля виру СУ вах УХО АЖ СОУ Ммау ма яЛжЖ Му ЛО Кіх У м жЖО тцЕ шу шик ау 155 128 М пра шир АЛІУЖ бек КИМ ну Мк гамою МЛ ог брідекя ММ чию р иа ду ЛИКУ ки щік дія Тих жу Вс ТОЖ пу Ав ожех уж УМХ Вих КУ АЮ Тех 185 Бяне іо жк тояутю ок жу що М так дош мк Ж ж пре МУ м ж зум їж п біФ щу ВБФ КАК зАЖ «мМ АХ КХ Оу ши их ЗМУ пе о шчх їжа жк -к тк
Та ЗО я же пото фл ку тушчо оз ж зм олу беру. ММ КИ иж даже Пр фл хх УМ ди ру ша мав сі вжОо йьавосзхУ 3 ЩИХ пу ЖЕ НЕ піт АБвОЖНХ ху Се тк тож сулуих яп З МА ох екю КТ ря М жк суне Шк ши Є Й Тех Єбтвужи МУР Уж тах і дів 'вму дМАОТИХ лу БЖ СТБХ Ау шт Жж У деввотвж шу ста дов прю БЖ пре па ех ша АХ ка
У жи що скати ЖЖ жи кути ЖК МК КЕ лю пики Ж ки ни ан НН о о НК о
Віж щіФ тм Бім Бхо хм Ж Бл бл Сам ВМО Бі СУ БІД ЖАБУ
ДЖ Ед зт се ЧМр митюу СХл оо мМ МУуТ хх талі пуд пут Ж що яю ДУутая А ра ут я вжЖа Кп саму йо КИаХ ау НА БТКЛ лу АХА ОСКНХ МАУ АлхА СР щЖАу Ал чик «пк «ух ша «Бх я зош ЖУК ТА Удома жо; жк ші ну ТУрОом ЖЗсщуо Ук и у пф сука о ТУ, Зв
Ав БУ ША Ж Баш слі даж Ву КБЕ Обі дж Ам СЕ Ве Кв вхо Мій пи пк хх ших ФМ КЕ тел ЖИ й Я о нн у НН Я ШО го скучив шлю ТК СХ щу КЕ я СМ
Аїв'івц Уі два Ав ої ря ів о дЕЖ СХ Зх Ж тах Ба Мен їхлУ га ах «уд г рах ЧЕ ЗО пік ЛУ сему ІЗ пи їла Ж тю тод В Ку ци щу «слизу Ка що Ен
ЗУ впе шеу Са вхо МУ ХХ сіу из вів СІшЖ (ДУ Бе яее пі ТНХх зх ля й зд чем
М хАМ ХА КК тп Ля сто би чу ХА ПУЛУ паж гу Й тех хр Мі у Фк йо екю їди й зшех бму МА о сххУ ЗЕ ОїТУХ БУВ лає аа дв БО Мох АЮ МУ кое ее я
ВАТ КИ Б з ж сеЖжули. руч тоух ж їзмиє ЇЗбух бузхеє М й ін щу М що тзУї сут зло жде тв ех дев дів ша ЕВЕ ваш беж Мід ХМЖ іш йо і Беж
У а ц про
БИ л И
Фудчич Жосуїх Крус ж зм пух хх жі жу ТУ т ву рух зо т вх то їни ЕВШ БЕО Уві шій Ух ЗІ Ха шій сь ОМБем о Жжвс Ма Бхш Ів
ТЗ ЛО вив
Що би щур сур пизих спі ЛИ ббі р тю ДК ох тет Ходи Хом х їж жу: ів мак дл жах пул Мах ОЗ ОА Вів Ж се Бе Бе их З зт т ЗО ре мо шк» жи; сло доти т. ГА оню Фк у Тв ру я и и ту. дл жо Ал Ах ЛА АХА КАФ шу Лях УЗЖ йЛАй о шеЖ мА ЛА ОМА КК а: Ух Злру йтні
АЛ хви зп зи жу Дт тую ду ду що куди шов океше З шу сх У ех Ху пиві че
За о Бай ха БЖ Зло ба ба сл сем мутв МАО ОМ зм МУ УМ ОеаК ке а зл рез ха ЛУ іграх блю Ух МІ Ми жі ие п/е Сх хг же пу рез СОЯ Фк МИ їшні ТХ дів Дів ек жо ТіФф АХА ДІВА МЕМ Аіа шу АрТа Уа Ех АВ 425 зх ча кокони нь Кох сішЖж хі БУ Ха ма
КУ жила чкмМ оо Ма: «М Т15 «ій БІ секти гідні у ду му ший ІЛ БА ДЕ БВ кат кт «их як
Мет нам БРЕШЕ УВУ Ше би бнзи зи ре БВБе біш Бе вій о пези ій від шийУХ СЯйЙМО МлЛш УУЄ см КЕ дна сим УТ БМ Мах КІХ ЖД лик АЛЬ ИЙ
1 кі 1: їх -ко. я 18 ІК при дуачижи ої ХК дужктиє тод Ж и дю бли жах суху жк серце т хх їх Мой
Бе Ак Бай тп ко зем ді МАМ ЖУК дво БУ ЩА ЖИ У Бл Бе а я ча кА я Й жоу щосияо Укуси ія Ст дво ща ФЛ; То тля тло ню йбую лк Фужух дух сах те дк вл Бе БМлЄ хо дмивш м. Мей била ха Чл ік ЖжОо ду іхуж ОашЕ чЕ ек як її М в хо и Му дні МУЖім блмаи їЩЗ дм (тк бл філ Томі фероу Тою бру тг ба ех МИХ Ббітвз бли ув 3 п мА У пуд о шлуУ дика Ака суд ТЖКВ КАФ
ГВ х;ц щи
ЗМ еле мож жи УЗ ве Тоую Зах бат Сббучн сту сх хмУ. Луч (хи ЛЕО сля и? дух ЩЛ ох піж піш їби пох Пежо Су5 Тує ую Су ТК Сіу ВА Хр сві бек вія ке -ї- че Зх
Ген У Я по ех бу Же Хо бів пихмех Дах сечу ру ше ги ло їмо ЕТ Шриу Ка
Вп сні Хбшні М їна ЖЖ Аж ся гля жжеа хе Мей й ЇХМЕ ЖЖ КВ
Зо ЗВ іїзм Дій сямр бе; іа її Ді дім ВМ та міа її Ті сіллю тр Ті змо бід цем о бзм о йіа їі Ді сім Бе іа піФ іш Хі Блю ХМК ха жа зга Іі
МО МО КУ
Плита Ме ЖИцо іно тку ЖУР
Че озжАУ ЧОХ жЕНЕ МУ бу ПАХ
НЯ
Аж «ій» ТІК сих що и щ дех леж шу ше КН ри нн хм МЗЕИТБАСЦЕМВ МУСНЕНТЬХ
«и ТХЯ жде ДУМИ У. її ли Ух сх ТЕ ке 1 Ту Фк блузи Малу тут ТУТ мет Бе вій Уа пеУ дпа АВИ БКО Ако Сів два шеж У» ВО Сем САМ і 5 та Ту
С секутух бух ЛІЯ у бу ту чу ля дії ах б м мл у 1 ил вл их
КАСКО СМУЖ БЕЖ Ма ХЕ ХКЕМРОЖИЛЬ Лід МІЛЬ І АЮ каль о За СТУ 23 25 Б скл ех КМУ юю Том Фе лу Ж м селах Мк дике З тоже Ж ожетх Хомеф (ТЛ хг луєох о йомух ж их їЗІтЬ ії; УЗ бю їх їж хе Май УВО МУЗ шУВ бу слу ЛЗ
ЧЕ БЖ з їх ке 5 їз їі тн тих жд У бах ти Тура ЖІ юю кажи ЕТ Ту
Сей спі сей пед опт БеЖ ТЗ Ті дув НУ теж слу ші
В БУ - ли Кк хидК М КН сих ОД вуж жених
БК НЯ
Сеня тів зу подаю вчи хх «Ак Вал АьвЕ АПОМЕВСТХВ «дує 15
Ми оїкууг фани пут ух Я жілуде тю щука Мои Ж жа Хочу УМ сажу Ух их ех ЗеК о джс дух пер о Ашое Бек оса БО мує ке Б5еЖЕ Бук куш сук лш їх 5 о Кая вкуо пет шеЄ вів сО1Уу Вкб їі ово вна ОК вЕЇ Ше Міша о вКо бах сту
Тх ПЕ, рН ї Я Ка тофяши СА йо Жорж ріж Машу йоичи т ттршж Стих Ж щу жу Тоюирх Тр туші
МУ Аз б Зснх р АХ Кая З Аа Де лі ЗТ» щу бе СК Мув
З5 За 5 кс чн ОН НН Змія Ж кі уки бджі Узусих їЗЛож оду Ж шо ж йому їі Ще Вухо Буш іїзвм БО о дліФ бат Бхо їМак БФ Бі вва хе СРО дер
З У З сосй Ж ші одежу Сак б а бод Тамиа сбаую би ЖИ тло б бік там дух ії шо Ав ЖК Бжек Мао Бебодемі пе ов ОЖХиМ хіт був ЖК ЗМО. МАЮ
Я то ЗЕ ще
Бе Ве що хх Зою пики боку Сто Ядра т ік т ідрогі гі ру бецо акту жил ліз дів шех бек фиму ке аа іп пі ем АзА Ка гля Був й Бей 0 ЗВ ті сб жі їм тд фі Бу; ве бе ді щіщ реє Мі ба шко тік хіФ ТИХ Хісбіїех Бу Во Буо Ти пе о Мщді діа Беж йБьа ЗВ Бе Ота ко МКУ МО сі 5з тові ж ох; ті Су дохрропчиек о Урі лак бу п ул Тим ЗК
Зі їж бла ЛЕВ 3 ІХе ДЕВ ЖУх їі; бен Бех жав ЩАЕ бу Без Баш ту ДЕК пак
АУУ жОхХА Жде
Жит Жлих дому дум бю ку то ТУТ пт її тож. бо ти ах Арк і я йЖЧ зав ОБО ЕКО Му У мМ МАЮ АЗАМ щмЕМа ем еБжв МНМА ДАВ лав Ма
УЗ зу зац
НЯ ля ке хом лк сур що беж лиш ов МАК О до ах ік т су т33 А ТУ Ср ем ОБ оЖАх вив бе: аа зви БеЕ пав БеЕ Бе ож СБ бі БхО СТЕ ха їв В їі
КУ тан ж тумчо йхь: уУї пуюху яру ГУИ З су йти м'я мм туї хи ім РО СТцЕ слу гкОо т ІМ Ро тв сіу хо вів у Аів Тих Бу зи: скгу дл
АмУ МІ й жо ством гля ее Трах ет лу жа шебаю фу й ср ДІ о пає туї щі з
Ат БЖ схМу ЖИТ сн бхМ/ до лхмж їжКу тла моїм ік ЯМ ум Міша
КН и, "ж.
КМ ДТ Ми
Фр сю спричи ях фу ха ЛА о ОК рю А Мт; ує тілу ДУ МУ
Ккх о пюж жо ех їх У ща їхУПо їхМу Еко Вова слу Дав отТВх -АУ дае МЕ 4 «ка тру їх Ми КЕ
Крут дк, г тпрує Влоу будує три душ Зоя ря ЯЗ во Ух ЧИ му тлу ре ім ШО ЩА У Дав сх ст У ЖЖ В еху м ва ТЕЖ сіу ВІД СЕ ТО У
В якЯ трхц шо МІЙ о їні; (ЗТ бли ві а п тку: Щі тк р чи їх що хек схо чи
МЕШ бл БІш Вій аю БЕш БЖО ВІВ СІЮ ій ЖЖ ЗУЄ ВІВ Сбих пе БЕ «зи яру зак дв
Ва 3 35 245 де сах СТУ жур прбау жеиту Фр си ра сим спа Вл нє лу Жрисх «ТЕ
То бхАш ЗА Оїх Те ж ОО ЖлЛиИХ Ох. ів Аа тк сім Дів фе у вк сь шах 25 я -л ши гхладо сур хи бе рей а дл спри тая то ті ЗІ ломи 1; ут, гам АХ БіІШЖ ОсДу КЕ СМКЕ бі Ві жа У Хі: бі ув) Вп ЗА БКх уки чик ча
КАФ ОКХ шу че яю мити Км У би амиу дово рю ту Трах у сту ДТ ФЛ ю Жериу
Твх о їхМУу Жтиз Пе бку (Му жу схе оїхУую Мід ЧА їхУ БЕ М Оїхкш о жКОо
ШТ их зи ху ЖЕ пу Че ух кю ру ит ки уки КИ жу 1 АУ жи хі хіх У, Щщ зам охму ни тт сту ваш ЧАЄ САМ ЕХ КАХ САУ МА пі осі Бхш дід 7 буд зиї «сх МУ 5. МУ бік лою ММ жах покоях ЗМІ М ху пи МУр У Ти й ок ув аю ж Мов ут пулу дів Тих б іа бОпК обаим жо Оп оку Аза ої їди ЖЖ ем СУК у зи 3 БІ о жо та суху Ку сі мг и У; Зх лк ся Ух хи; соту» туї щі дві жЖАс ЗБУ Віа твжЕ ПЕ Бк ІБ одіж так ща пу Бк й ТК пі діа
Соя 50 З пфдниє ШО юю хіх їжу би яю Ухутиу пф Уж хе Шедкме С х дич бхуж у їх
Тек бут хів Бк узі ЗМК шву Б хо їх Кот Щек Зі Бус; дах ЗЦе
БУ сах БУ 15. Ка щи «учи ЗУ АЛЬ до прак Я ух лугу її ню Моди. ячіа мурах Фах а лим кош йто маії Віз чх жів Мщі Уді Тих два вп б ол а ви МАВ Бе ха зай ЗЕ спам ше «м о Вий бвоа УХіш ве «паотну дій і с: сг делі бо Гу сій вве дяй лай Рпе гіф ре ний ТПУ Аза КІФ ана СВІ лей ей Ще із екс під о ТЕ дя жі Хр бл й схуи доух Че Хжм і ХК Ли Ж щу ЩІ ее ше нь
АЖ СІМ МИТЬ САМ ЛК ОВ Тв ома) тиж Май їі Аз йіа пі ОА У Кк их чл лози а:
УЗ щу ЗО ЯН чаї тів дев уві дк олію Чер ожнЕ чну дів шко сло ма дій Бум ей и ан м вк М о З З М я ЗК МЕ НЕ ско Ж М Му жк КК Кі хг дя й х
ХУ Ко ЖИМУ поізх ал йтіую ул духу ТІ 0е виту лі сві щі ме цу жи й щур со бе. ЛА МіФ йеж Мі два ау Кіа тве пЬа ти АБр ОА Ба меж
За зв их поет ПСИ ко рук ду товщі Кк зах ще йоарко тм ер Фичу» пе тля СКлрх її: см тм
Зако З Ха їхОУ щу КО (Жора КО СІЛЬ ошхха УМХ СКК КМ ж Ку их
ЩІ мк Ж стру МІ т Ж п Уч мує КдО гул руди п ух Же ТУТ Ж що ме те ві СІМ ЖЕа ва ХіФошж Мах см ощяжЖ ХМ гемо вра с хі те й Б Я
ТИ ж лк ті шкі дід у спіл» дшт Пк о Аштя гі ( Аргр таєті ма що дич дачу Мох іш Км АВ БИК слу ЕТ ОД емо да АЛ хи ЇХ УР тн мар Ода я «рт тк дк «5 ТО віх 250 пло
Ж
НО ВИН пал кут «Ат «Ох хи Уже моя ЕНН воож не т. о ТЕЖ уди яхти Я я «ма 0 Ваша ХОЗЖллЯХМи Ма «й ях «ПО 18 ау їх да тих смт ГТ хо шо уруч пАфрух тору тору сах чн Ул хащі г с
Ве тв Ме Б ВХ СІМ Ті ТБ тс пед цем БаЄ бтві за вх цей і у 16 їх
Зах дон о сода Кох: 155 щтрооїхуєи Кеш о Р ув рух У Жокжех стаж ЖК я ех жЖикК опех Темі Ма Од оОя ув жк кох Те отих Хо, муУФТ ЧИЖ МІ АК я те з
М а ХУ шості я и, пох год «ут че хх мли жу Ж му є, ши Кт реч
Сжвожа аа Був ВА їв Сема тис дво єп бій Ба Ме да яю Бе
Кк х «и
Аз 50 В и Не ья сеїха щі хо тТУхА М УМ: во су М що Томмі гм ку у ту спхучи
ТЕО тТУК щі тик Аква ом сви Мак осУЮ фе Бема лук ЖУК Сп БІ ТУК гг це 55
БЖ 5 п сх каз жил Кк ож ошннх дих к душ Ул хи стою Млолу тд І ту Мира фу вБпоОбаш о АУ Ам о їнА СЖжА Мей др АД УєЗ хи ам ув бу СБИПХ ба 2 Бе вом шоу
ВУ У ту щи божа соеше уж А три ту ти Федя ТМ Доше Ул я: стихах 3 гом: довх Ду їх УЗ Му МКжо ма хол Мах Мен Бжю пе бар їм ХХ ХХ іЇмМмЬ БЮ Мох
Я т ЗЕ
З За по
«кує фрхх ЗІ? а сті дл код о сер ЗБАЛО тео Му фол хх Х1хк же фета Мт зехк РкЕбЗ оВів о сів АІа мес щех УФ Шу ТНК Осау Су сту б БЕ СТЕ ий тах гу
КО МО Кен хо кт дих де Мчч гій ВФСТ дл ра їв й дл оташіу Шачх (хх був о Жжкв АНУ АБ ТЕБЕ КЛ АБИ сжВв ода а АД ОА дав їдшна БЖ ку їж У 195 кн КАТЯ юки т бі Бум ІЙ р тир ох бурю зу бр по ИЙ сдло ху тА ТОЮ дів тіє БЮ Бе лем о мпУуБ БУХ ЖВХ ІМ ЖЖ птш ІМ чтВві дер та ТУух ка З: за
НК Не: 145 ти ТК ут щу поле Тозхгх Нюх йо т Сто: Дому Дом Ма тло тт щи ху хі ами ВАТ що ПУ СКМ МАТ ОБО ЇМ ЗА се С Ох мув о Заа 145 ща тце еп
Ко АЙ Ма Май тощич чіт дя ід ж хі бе и ра лих тот с піж о тло бі те сні щаАц ла Уа щАУ Ах шо Ап йо жмНХ мед Ам о цУув АФ ве мим
НЯ 7 575
ДУХ о ОТ булу Жах їн тощо суху; тож ЛК Томи ХЛ ни дав ще з: У мл йди де ща бодт Мхуш Буш сім УКВ ЗЕМ Буш си Був виб ОБУщ мм оцаВ ща оЗФЕ їй МЕ ї5О строк Мт Аж Ті ЗАЛ Там МІ пас Ууїю биту Мі гц мах лю В жАВОТНХ Мід дже ло Ум хх Ста Ха су АБО ЛЕМ шемоию АЮ Оце 185 й жи спі ул муху ще, хіх Жозе ем ЩЕ уз дови дир ве У м їжа ах
ХО ЗІ Клш БНВЕб МОЮ МУФО ОК т УТ: ЗЕ ОБО ЛУЗІ ХЗАТЬ БК М тА 318 за 256 г ем сту Мід 31 Ух Ша 13. ою таж Ка біо її Ка ко щує Ми дов ошех пуй йіа щій рве сіу шій бут вве тіж хів Ре ржЇ адм оРхО ль т ту З шк М ша ШО мех пек Як Вих Пе ки ЩО що Ттеяч щолухо стчуєє ЩовуУХ СТУК лобухи СТ туш
МВТ УМ Ооххкш ММ УХХУ малі умиу кі МО УуЖ вро кУК Кия ПУ Буш тА ц хі "ККУ я дО «ХХ
ЯХораи щу Що Кл Жожжеро Щодо ЛохуюТ Ж ше Мк щи хи Му Тему Тіз хах о су хи
Зеял ді Бі Сім муш бБаЮр ОБУ хів Б вх БЮ дО бар о Буш пав Бе
Зк зЗЕКЗ ще ких «КО км хх Ми жи пт мах ув салЕк,
ЕВ
МІ Ор ки кА
СО ШИЯ шок 0 ІДОЛ К чиїм ВвсзхзАаЕ сопсухлухеивав «а ТЕ зайву ідо бак гуд где жир Тура бхіщо фету в З щі гошма Ма мує ух
Ме цУув Шу Був це Був пе ув БЕБО пей йів Уа без БЕ о тТйпе лід
Б її БУ їх 4 не Ак ХО п чи І о НН Не, нт Ж шко СУК шу ие вок ше. щу Ку Чим М г
Віа ма) Бер цес бек Жак Бе ів о ББе Сі б Бі Аз Кіз тТух КІВ бух туї стук
М «М же осн чо Не -- п Хі дику й іх го Уїи п пет щи ти вк Ти шех шЖеХ бе) вк їі Аве» о сій Кіз їжа ХА БЕ са у Б од
Пп и Кк. кер дико хо оч У: щу тон Коля. ФЛ И: щу; у лану жк щи ри бу
ЛІ АТ о УП пК в Юлі УК ММ Му клю ит Му хх А ОД УВК УУМІМ УЖНУ ко «д кА кА З пи од. слух хлібне шум фл 1 Яхдл тв тим блю Чу УЗ дух
За щаеє ПІ іа (іа Тис пек Був дав УЗ сім Буд ТУуХ УВУ СИ Буш
«ж -к «к х де 10 т щи
Ко ЕКО. її по жохиші Ж Жука МУугЬт Лод Св Мр бат (іх рих тв МУ суїлу йся Фі тс мук мВ іму щщМц ОБ Ж їх дж ув см З би ро У дЕФОМЕХ З ц За и
З Зо я ярі пута З су мі Обна еко где о Бл хг тлу : Зоб су
Тв спів сій дів Ше Бр обпе Ме пжв БУ Уві Буш Аею іа бш Ме зе тик за
Ко ря вже жичжищо Жюля ж. же жо АЖ Я: Жуусих тру ти сЗЛад о Ууюито їжу м лошо ухкУх
Ж ХМ Ба сао лаг Біт з вхо іч уві ЗішЖ вхо ува дів БА чух зи члух
МллІ М А. бу «тах Ві лід ст их дек Ячек паля живо бо дош (ші лм Же ХАІ фею Мч У ла лу дів іа їдшні Аж БО іУу Був їх АЕМ оса У мУуВв ах жо КЕ зл зл Хот 44 15 АК тк пос діа буш ПИ БМ пі тУк вв обі Вів чі БКа пУш Ап меш
МІК О ж Ва БУ О БАХ о ба ХУ ВВ бу Мі жа ВКЯ шук дЗЕЮ БУХ 325 МО М НЕ
У би й тових фоаміх гі «743 бичем прю ді ср Ж хе і ше тю СК чаї їни чай Мих Менп3 ж б че соч льш хе МОЖ БЕ сФудтх МБО ХОЖЕ ліз тив Ся
АХ їжа Ах жо г Му фл х сбтюює дах б зи дою щмі Миу жи фо ЕУТіу Ії дз оси сій Бко Піу тую БОС ТУЮ БЖ Буш йМЮ Бе дЕХ дкУ І вія пох з тк їв МУЗ хво м'яку оф т. ока Мін Тоюнма флнем ою доме бу Жгечху Чу Ле Хо Моно бою Коля тТух дій був Ме ей Же Ку Ак» рих Ж ШТНа НХ Хана Шітра Бе чу та: тип ск,
Ше м ЕМ пам Клує тлі Код леж уро току ЛЯ ни чує ля у ТУ у бує сля й кі " ЖЕ ОБО ОМЖЕ МАХ У ОМВО 3УУБ ХІТ УЖ СМУХ УМІЛІ: ІЛ: ХМІЛЬ МВ МІ Юм мчч зац еру шлам хе й АК тходлх бив бін їж жду хз собом ля ме Урі поичу Ж ошд Яеке ау йти Крах пек тує Тис сбаі дз БЕЖ Тих Уві чик біс бо Бей чих щі Кже бує
КУ бул зх Зах
КО Юм я лм отже дж жа люк пло ща дл тлу Му (лах Кріс слхех дм бхму
Мув Вів сах Вщо Ум м Віа блю ака ку их пу М3в о ашо ану пу ух «уп Аме зах В ас трах ІМюУА Тома бах ЖЕучя г пах томі ХІН тд її дуб тд» Вії 12 бі вк ба су БУ Буж Ав спеям УМ жа СІ Ада без жа вах дід яд «КЕ з кни «В ХК М туї МЛ же. ее КА Хо СДН Фо Вже ки щу УЛ их теж що У ни Ме у. ді ща ху (У шМм Зя імжщо є БЮ БХме Бо сб ий Ба о Бей ом «упх сх ок ат з ЗВУ пхх ШУБА биту фу дусі т ушу Ти шу 13 ре ціх та Тл тлі Ду во осами АБ СУ ВЕ сАУ Ах ху ем ста бЕею БЕ ЖЄКУ КАШ ЛА АЙ
Зщт тд піку
З ак КЕ
ІЗ туї Миую дж т пріо Мо ЇХ хи Худо їх» й Ел у хо гу ці ем щем халочал Вів віа ба МахосіЖ пі бал вв вію Ох бі вк Е члк 47
Уа5 38 315 з жа хна лу ВИ АЛЕЮ Ла сля рр о шжеХ БІБ ОЛЯ ПВХ са а йУу Ех
ЗЕ 35 З х. с а ни хАКИ лом ЗКлошх Ан Ган но она ори ничька БЖ Фищук
МедІМ ХО СХух же дош г ОЗ ХК Бут ПпЯФЖ БОЖКО У жМаАЖ БлАТ ХХІ МОУ
Зо я з (іже тм Ух іх М ше ча деду лах кри Сл их Мі. ФК Ті Хагух ЇХ І
Су цБ ше йаВ йо ту ДЕ ТтТух ТВ БіФ шли КО шій др ощуУу Ід
Зещ чи пох
ДІР ЕХО ПКУ т дк й Час» Що а У піуйм о сх Ж ше довту Хе у Хода жу що уві шк маї Бе вів Бі Би тТух 51 МР вжи Бео яку Бей Бай АжИ дк зуту шт
КУ Бе зв о се М Ж дам суму сирах (ля жу жу СУБіІх димух а а ст ие сі: ТУЮ Азов Тих Бев ТУЮ БФ СКУ сій біуУу 55: РЕ Уді б Бек ТК при: зх ак ДУГУ зах 385 ач що дю СТЕ де биту (Лі (іх фюми ббемт В5ігр гію тд ти роти нує дпеж ХА мет пеуУ СФіУ сАУ шеж тир овай сі жа Хе Аїд сКУ ЗЕ В а Мщ от З
ТАКА А чо
Перу спі и аіхуит бух їУнух (б Що та 33 Фін Ме ЛУ тлу йду дою жо АК Зак йди Зеб БО ма до МуБ Обом вл Кл ОМ Був дув Ме зп кл за и аа У дих Уштю дару 7» ла дев тік там ЩІ ЗгАЛ Ваш тях дру Тл ту ек пУХОМмАУ А ЛЖВ ААЩО ЛЕВ КА хиїа дО Уві АБИ ОТУХ АЮ Хлищ ХНА лНХ : й ад й ве ах тах Зх ж ме ЇМ хи Зх БА МуЄ мує Ка Маму; ЛУ дує бар фр гами чує
Птш Зі хі біУ СВІ Ба ТАЄ тут тво вро сад оІаЄє Ве ТК БПуво Би яч зшц Ей щи КО о т сеї еиу Бах торух І ба до «ої Жінку дару Ку й У тує їв о Ата жо ку Та те Ате Маї Ав ої КО Ашжо їм АБе те о Кув я "хр че ж их Ом Мо ЗК дих Же 33: дом й лУве утіх Тихо Ту Ура: бу сб арюе Яхае Блюм ої о двшж о Хі січ бек Аза бле ось Буш Бук бреше БУХ бук пЖ ТЕ Бут (су зай кла ях я БжЕя
Я пт хіх Рі тр сту болі Сі ср дж чУу хро діти йеду Ж иа Ср дм ве дою ЇЗе ів тТБх тих їла і Тих вкОо Уі ВО Ав ої ТИХ ДЕ плей це пла
У ЗКТИ АК іх тло ї5 1 Туш Ша бий божі Мій йМа тож т хі ря йіж мрЕ йБр ойіа цУв Бе бр Ту Мт вла ВМФе ТУЮ Ла Ем діа Аїх пл пл шк
М я сі тож пе щікух хз их ще хи спе лу т Ж її фі КК ри тях
Пуфо жУут дать БКш опи Вди Уві ЖУЄ Кіа 7 ВІ БІ: Зв З ОО щока цу о 535 я
Чю сйрими СТ ду дова дет Мих трах хх Уро одлиу р іу Хижі тк Ж що од геих оде со АЖИЙ БТІ ВАСУ же ТХВІК ЗУУТЬ ЯкЕТА КВ у ХМК їх ВКБЕК КВТ 53 вай 5 ВО зр зухрі у шум пут фа Мк ХІТ шо божа кує Ха ше тож Ши ЛИ м и
Те гне авроСіУ цез ткр о УВхМ аБЮ пу Бех БУЄ АвЕ фима ех с пе
За5 Є ай позик оту Хот ж сгожжд кв г но їМіуку (ЗІ тест Можаі. ств що ш д цу бішж БУЄ Бук маї БУ ії. БМ Биє Оічє фук мем оїмжЖ ВвБб ші в
ЕЕ щя зво хуя М МК Чо ям КИ хо о дош ря Бе Хо бом ПИ хг бо 7аї дів гух був спі Че ія ей део» дев діа дід їні ЖВх Мей йо нак че МИТ (ее пу сдо бді бе паж о бцу; ду; Кіа й що пл Вжо іш Мезе тне
Шпщуу муУШ ща УМА ЕЛМК ЖЕ сиро мат йЗаіш умо ху МОЛЬ КХОо пащ ХоЗХ ЗЕ дім 537 5 гул на ша шшМ тиці сйдтт 1 юю Уру Стйнчрує 2 и пух КЛ хм дич й ї5 я Сб тою МІ да
ХНА ХІД ЗА У ЖЕНВОКОЗХ Меко о спеЖ АЖИХ сему ЖІН ОА АМЛОдВ ХУ МАЖ АЖ сяк пух г сл дих «ща ах А ті. зх хви І я. масу Жухеро Дух мим що Ж хю щу дотеу сфе що ла «ля
ХОМ мало хм СМХЕ Хі ФММ КУ ові КУ УВО ЖК ОХ бу ЗяММО ОД
ВУ що ВУ
ТДукху МО що дини; КЕ Зхуси; юю Узі» божу сем хх Мих й жа пут си м ук Вів вх Ту біс: уві Бе Бет Бк о Зк Мекозаї ува) Тер тує ДІВ ший ик шли ви ВЕ вто алу пу стеж ВИмах СИ ах ох ЧУукуу хАщо (сти хх ті ших (ХЛ Ух бі дав сід ошЖиех ба те до ве сгрко Маі сі ба Муз Бжо шу СО У штук шапй ках т шо ЗИ
Тіни гГдму іх» ха хщ пі Шк па о них Й ії жі ці алі сту тт
Кне рен с1У Уві свв Б йпех нів рев бів вій хі баі їУ Тпх їжи пай Ка Б пе ах мех де Фк и я й жує У охо А: су ях у ех м т до ки
ВТ їж ут кЕта твк хмаї МУш иК же СМ БА АК їМль Хе Ід Як 75 ЗІй 715 п
УЗ Ам У ? ОЇ о З ІТ: сш мон зх по лик ГожалЬ чик рак рик щл я аль шо ани ід дів Впе щех іа яв с бля БК АХА ТЕЖ ОСуй Уа Аа Жах яке т т я «тору спйомиє Ку Ж ші ЖХф ис Муки Смуто охушх ТЕЛА : іхяеих ЄМ тал Що том ЇМ
Те йхя СІ їз КВе Бар о буУую МБ СО1Ж ми Кто (Ж Маї Аза пу Бе ла "7аАх ле п хо нн Не нь А НК Не НН Шо НЯ дю ух дос
Аа АН ЕХ ху АЛОЕ Х Я АВМ ВЕЖ УА АЖ КЕ ОА Дос сну А КИ «и «іди сх
Му КИ ТЕХ т Хода балу тло томі лях Та би стру ЖІ ві чл до Клод
ТАЖ ТА жи Мут іп: сим Ка 0)уї Беж ду УА МА БМ УТ ЮК
ЧИ у ТЕ бує, Ти сдехж і лі МІХ до тух т.к ща ук
Ваг оБух йсежЖ Іі лпіУу ВА ОВ тКквоПеиа Ні АкЯ зак зча зЗац
У Ме ше
ОК НЕННО. жк
ХА М 125 п сту хи ТО Х «яв 0 БЛУНИЮ кош ІУу я ТТ тихе и ве, ли Вас ШУСОХСеХЕ «ал 8 т ких Жди куяю. Да те тд її УМХ бою б б шмх Ж х сбюре ряе жа ака цу Таж БКОо БЗФ гуща УВІ ба Шех ех їж дла ле тож тВЕ ї 5 ЕН пу оо ен ТЕЖ я. же Гру. ШК ко Ж и ан Тр Жир СІ ку а я НИ НИ ОН
Мер схе СЮ СУБ Бе біо із м ЖК ЗЕкоМах Мав о шухк вів М зд Зк зх йо МТА Не ке ння а Си тА і яко Сш ТТ Фкзж ПО тужи Ін. дог Ж тВжЖотТпжЖ йех Щщій дех Сей с-іу йдеш Лів ех тпх баЕЖ Вко іа дво ОА
БВ. У
Щур гдм 07 тат їла лях ше бо Вл тую щі томи ти Є: би дів пн Щі ЗЛ ЇМО Обл ВІ ем о Бі Ол Бі МБем Був БІО Буш ЗКУ за ЗЕ зо
ТОрує ін Ме МУ о Я Жак тя. Кутах МІХ СОМ МУ ут. Се хещ Ух м тех Кі АвБросіа длех дід щих хв см ема вх ЩІ му Лов Уа мох кВ 7а пу я силу та Су дю Іі тео тиші Тис їх ож хх ТУ пи сти ах сту Уч бЗбе жук іш За бух Ду бу бі Баш Зі РхЗ ба мЗук ма ши Бей де дуг пи 5 що 5 бугу щу му пу хі тд Зах Ал еує сх шиє ХРч ба гл ЩО тещу ко йвр ово вхо іа сеш сь ВІ ес Ар овне БМ Був БУ УВА Пух з иг хек 44
АТО дО Ми шах тя ул чи СЕ а ЖИ Ж чиє р: Жуля Йи тА СУ хг буд ЛИХ тлу: ху са Км ому мес осме їмо Мув є. Був ча цу ув Хек чаї 16 Аве дут ом потля
МО КК ше хл Єбирях биую тії Ти ЖИМ Шицчизо Ди бі дош То Жов фл точ Щщовту у чу ліз Бах Бек сів м бви жо ер бів АштТ гУВ був ПІ Її. Вей ОБіХ ха пт чих
АЮ ХОМІУ Ка тео чЧваі Ве сТюк су Бгто дід їшла Ів дід фуєс тстеу дви сій від в веж шва кас ММЗ Зх КО мая худ шлам мл вис Ух БМ су Мая УК 145 ща ТАЗ хг
Бе ем щу ОМ ду ую Щихух бл дк обома її тему їлсаммр Фут ЗА; У бує Дивує сту п олхху йжфту Ук мар о му УМА шМ МщМ БК що ФАХ мо МД 3 ар ОоОчУужЖ мУю 4 ий а еру 4
МУ 173 ут сеї хо шах суши Фа силою лаку сМкшю ж Кл лю пкт щен блю АС дат дах жйч хв аа дей кое За м деж жа БА СБМХ Ме гух Алі ЛЕНІ Аж тв.
Іра їпх НУ хо СЛУ шИ
Уж Що чу их і ж бує їх бле Ам бизує їМнє 37 и им КУТУ ЛУмує Маю Ту щиж впр аль паж УЖ САль пуУЬ ОБУ Нац Ки су БУ ХеЕМО Ка КІ М «У чай сих
З шИ У є: лі хх оч чн 7 боями МИ коли ТМ Прямо Мія емо МИТ я. Тр пен: ВІН АвросхмМу ЗВХ був Мда Мун СТИХ в о гув ід Тухк м їн ЛЕК с г ск Кк, т ху лим їх УХУ Ж сим бу ли Мати хижі Ах. пихи ЗІ сМрую у мишки Сум сіл жи су У ЇМ Ку АК УМО БІ Зіж ут МАЙ Вт Злі СЕ їй о ек ект ох а сих «ЛУ пІАХ зе КО
КИлти. пе їУ. ЗО Кия ЕК АТ ЬжЯ буряк У ВХ їх Мк ства ТМ ує ЛЬ, тк оув гКо сі ув Аха Ас до ТтУуХ ще Аза АБрошлу ЖдЖжА ТЕ слеу т; т ме «ЕЛЕ лю ЛИХ ціш днк йАву тАЙМ ЩІіх вух ги піс дір дя духа їм МАЯ їдеш (5 А; ніш Ази Ав Буш пі ВХ цУу пут діЗ ху а бач Уві бе СІМ Аа
Зк «З зл мл МВ. ХА ме їзаєс КЛ щі кі що ту Мушу тУХМХю фіз Щлдут У Кз ЄМ и СУМІ: щіхує Ж ж
Бей Буш Афіші Віз біб БуБ Бі ем о Ббзрю Без їхак спі ле вв опУує путихх ща п
ОО ХМ ТУ зічжУ М Хжеут Яви о Даю ку Ам лм дет пак де Пл дожту (ЛЮ яю дже пе см» ЗЕ Жук АБО бпЕ дав уж дер осУуУ Аша пом Аша ба БК ЗХ ха ВХ їа пліт їх ЖИ ваїку ЩІ ст Тр дуую и ж шт МТ ще «Ущо пути (1 ФТІ шу Ж. гів ар міш Ем Ме БО. між Аж діа Су УВА ШУМУ ж КА се З зац оз
ОТ п ПКАВ БИ щоох хх Зк б юю Хо жа лож Уж до Що жу с сих Зло щит. оку
Віа Зі бпІМ СбсІЬЖ МЗуб м оС Ж ВИ СВ ба лав Чл Бек БІ БО Зх 325 350 335 яд тай ТВО пос ту ІК іт Ж ТУ ПХЛхи УК Ток тую блю хг жа ши Аа ОщАД ЛЕВ КО ем МАО АФ ОА МАУ У ЗЕ був Жих Кущ ах
Фхумих гмзха вжтучх Можу й ки лю для Зх ті ди тТрлжує Му Ж су т 51 ТУмя ай Ух ЖХЩЇ Ах Оу ЗУ Уа За їх БЕ ОБ ОХУК ЗК аж ОА Рх
ЗЕ КЕ: З лі ох п ьо НН якщо ММ МІ ее нео У Не їі хе тож пі дер см дів сеї ші УВІ жЕМеа іа нів СБ пе МіуУу Ніж кю без
ЗУ з" ло о ОКУ КМ ля аж жі ет: дх. Тк Межує доку люк о дату ик сиИщЕ шт А що Ло Крус чу лож Мем БЕ ФА Сх МУЖА СТВ АшЖХМ МЖОСЕИХ бхуш Ам іш БЕХ я хіх -щ Зах: Ка их з зак що чик хіх ча Стати Жіємх дян гри ку ил» «лиш М Урі фтряю жд
Узі са віза Тер шаг бе) мес в 0іУ бі Бех ТКооОтТнк бі дет їте яву де уч их 518 ЖІ
ЖІ т сек Ку Дю «суУєсуяє фувкає См. пе сет Боже Ше в и ьо дк ша тиж спа БКо тож щеюх гбе ех Бро ба ЛЕМ ОШма Авро ЕТО Ще як КЕ кт яЗй я хг
Б их «ла пла гли Му Фу Му Й деку жу Сротимк хл кт жУх «ах ХУ б
Зі Пуш БИ Меш ВББоОЄСТу Вяй ТЕв ові му її ТВі Іще дер о тух їх ц хай Я р ря дод Жоуде Сстреу Мохисо сени мера зи их Кроу бхуених Мія три их жо жо ссквх дар обу чів Був ЛЕ ЗУ Ущі бі БМпе вро БЕ БУК ХІФ дар сІФ вих ду ск шу
ЖИМ Се ци щі нм бяхму шкУ МКУ дк ШК тк бокму хКкщ чт ХА ложе щих ситі Сх ті ех був шШеу пий да БкОо су їх бе для УЮ ДЕ їли; Бе ЯЗ я За пе зх зах Ще мя Ум їдеш шими Ма їі; ть Тіш гу тнЕж міс Ба й туш пеню Вт сум тя цуш ЩеЖ Ув3 Сід жи іш Буш ЖЖ пі Бпе сім СУ НІВ ВА КУ ТУХ
Ва 415 ЕЕ «и чує Кожух пит жо дом МХкору Мак Шах МлчуУ сиву ХХ у лу МИя у тТух Том Мих: пек ОХ що У см сш ж Зав лк ЖК са б гл О ХкЖжт: мемз ХА
Очна Ру, що пф ПО Іх лих дае о пез ТМ Бу Вів вів вва пі пуш РН ВЯЮ тус пу Вів дБ ОТтух 113 тут т
А хе ЕЙ тра жи Кур пошу рю пити г чих СТ перо хе щік Ах З пеню т сви сей шум й иа сСув ев іве гХж Ах еі Мхв Аа хе ру УМ пай пла шлях
Ок ЩО дам оч лю Му бу Лу 7 Ж ІУ дк Тож Ток І хм Мам То ІЛ т тд
ШЕ ожУЖ СІПХ мух ж АМА А о АМЕ АЮ ММ спА У МУ АЖ УКХ ке Я АТЕЖ
Ух УЗ ВУ Ж
ТИ хе міх Сллх сх СОВую буму (Лі 01 зу тд кує Ох ому Тих уз м пу сжіУ двроам деротмви тЗш доп лу му ТХБ ТІ двробжа шежЖ Тех дБЕ плет п'я пед
ТЕ ча хи т Хо Ло; жд: Том Тл ку лок Тем ЩИХ Тож Тих ху У ух ом елах тля ши ож сла Ми оЗмуБ Ж Буш МУ ЖАХ мушок лЕО аю уж хо кат «ек пе вежу 55 За тм дшлх слу До та СК хи би сл: Мо Діл Ме йжших Ваше що Воду вм дже Бо ДУ бен о ТВх ТжЕ Лев их чт па дув мех АБИ АМХ Мш АВНХ ше кий КЕ
АК КУ ТУ дід хе Ех до Їх Тлтш ця в дно Шиме ж да Зк їх сх их
М СК з. ДЕ СЛУ буд УВА Ух Бце лек зво вав ва піп о су СІЙ
МАМ МАЛЕ пах хло хо Мод то Тоддо покух «хх ші ЩА С ДЖАЮ сан що «ли ж «МУ: жу
Мор Бех Буш с сх їУїжЖ БаБоОсАА кі бек Ба ім лиж ПМ пу
Б рем І Уч
ХУ де код: о ша ана Тіжах хх. ехо Її слу бах. тд Ії Хм юУ 5 пев БКОа Мав шу КУХ СКУЖ лива мжАМОТКе АКОУ АБИ ОТУЖ дав мА МЕЖ АБО
ЖЕ У АХ хх лк Хм: ку ЩЕ сх юю щур тт ху МЕМ син щовхі МИХ ух и іх: ДК їм їж ММ БУВ о о ЗАА ХУМЖ ЗХ о їхиуУ БЕ ща СУ ММ САМО ХхиХ ІК: ЗХ шок пок птах
ТЕ п ТК що лУкух ож Ду ку сію жо ДК їм й Маую лдУумух щі ТЛ У ню І
М отв тТЖЕ дів вив БО ших ККЗ їжа вне о анИи тЕр осві ЩіУ дк МІВ пеуц Ж пе п пи ши
Фднуу (т у сх фу дмніх Товдх (232 ха Ж бите Шоме КЗ Пре бій щі Зал
Вт сум сб су ЕП Ожиа дам УМ ві вв Ле паж БФ пІім Ва КУ що З 7 дл кл їж тих сх; віхи ЩО ЖХужиу 47 бра хе гук хх Бик ві -іу вв іа вва Зі Бук Бус ув) ту сі два бржЖ бужЖ емо сСіт ча чав за ц кед
МУ АВ га М р СК КУА п КУКИ же. Хм Хол кн о тих Мих, Кк ТТ руенне К А тяж гію паб вів ВЗ Кие Зах Хе бас їла вх жо Біз теор ал ма. шека Мтум ФУй ру тек пе а ЯМІ де сту їКІх Чл Тома Ши Тк ХІД
Яни шех Бпе отих дЗка сбіу ша Бпе Ав отую во сіуУ бед ко слу Чаї тай 145 ха що Ко я. у КАША ни "бл Кожну, чт тек СИ. пода и КНИК Туя риму. дпіз Тис Кай Маю бат бак був Мді бук Зак Ба Ди Зк Хв Бу Бдуо тя зо зе5
Ялту су би а щ ОО 0чег кн Шо ние о жохивх жк Ж зу хг АЙЛО ХА МИю віщсехуУ КО цпув ме Бкососммл ем су дина ж ЖІН що У Уа ХУ ж тт В су що щодо ож Щі щЩ щи що и рю тхих тк, шує Ват из мі вав даю пу беж Бі бі Віз їла хр хів Би ВХ пев ла зуц
ТУ ГКІ и шле сх бу Еих Алл «і І клас І ХТМТУЮ. теж АКТУ штук 0 лу віт іме ут сі «вії» Васі ішв кдохійцеєнйвів сКТнх У
Ж Ече
Соя Крюк зУ ша од Сни и се пУї 5 жах тА Зх «м УТ «Іуа Ж аУ Док мес: Зх їжа Мет ех Су Ае жАМ вий му КЗ міш Лу Беж ШежЖ НО і Б 1 МУ кує дж Укр жом тло тими ВМ г тах ім (131; Мщау лах бує
Суд чав Уві дв св М цу БМЗе їж демо спад пем оса ввю С бЗаЕ
Ки де ЕН миуду Па лику ба лу Тл) б ПИЛ тору пуху ЩИХ то гл х АЛ рі
ТК ЖК АК був біжш ек се був см ла бут Вуж беб пе Аа Нв зе дк я:
Кк Зо 45
Хшту паче й опа зд Мі х йе ПОМм дожчу пе яви Ст Тому ж М тки
АБпОоТЗІ Дій Мах ва да АБИ ТМ Адже ожие шШІмА да Ева УЖЕ ТВХх ух їв «5 о щлощо т Що дума у и щу г що лук бує хом ща Том йди ех
Віа бі Кіа хо Бре СМ Вів Бде Зі Бо паб І би Фе лі ТЕ ве п р де ва Т ТЕ ЩО м'хуш оче од Мих Лу ЦВв йон лот Р сим ХУ. пу дося Зах ди си щу АКи Ех сжтиа ов ктВа Мт МЕ Ох їв ойпех ал що Ажо АН шЕХ См ще Зо ЗВ ан ни між ЩІ толк Ен я ЗЛО то У хуУ вам. ик Фоми Уха, тут
Фр о Утом лим фЖ М їн Бе У Мі жимі ау вро жнМме Іва ОБус дк хе «стук Ах м У Ма сухих бтхи ато дк пек тич СК як фе ТИМ тр Ех тод лі ул тен дв ВЛ жу ЖЖ Тех дев де йо хе ув Тих дБ ме) дха ма Еш дЕМ Аа
Уже Сан ск
Кая ху их поету Удх ля міхи башти Ван тк Сб ду кн їх Мами То; дир ртякк ЗУ г
ЗО еац Уа Бек били Бек о уля сбуБ до тиж Уа В Бей Бек Су ле оч ї ч ку КН
МО МАО 5 кни МОБ аю ти уч шо Ще щу (І Чем тіж
Куш да МаАФ ОМА уж цем МО мВ УА УДК МЕ хв МБи 355 ел Ол чим Мих ее ту жид Ам жк ту ту жа БАХ, соль їх ие сь гі у спеив «ШУ впасти МИХ ІЛИдАИМВ ХВ ходтуту ях ях Мих дою 33ічих дуже ую Щодую їз її. Мав спіфую бля Ж ше щує фах її ат ЩО що току ше мм мне ЗЕ хро щу КО Би МАМО МУ ХОМ ОБЖ гу. шо салі км Му - к «к зд х З мМ т
Фу ДОВ мине муру тодіху са. дотощо ЖИнем Фліс чих й їн Да дл сю дв тез Алла ех их їй о БжОо дадожле у У ЖІН лля вп А ША Ла о шеЖ АТ і -к чт - З «о дае І пу то ба т реа сбфує дугу ім іде Та бу їз ді Пре хо о ге діа пяж Сем ЕМ СУВ КХО іс ів Гм ХО пе Мах ку З хх же Хахмеї Жкутих ойхуєт СЯ ву Мф УЛ щини ми Сб вх да ТИ А уми ЖАХ жта Ат БІ Аж щі ре ові же Ма се АБ АЮ Тпх Ма сех Ма
ЗМ З о їх кла жу ут ож тую шому М дю ХЛ хи Ж у: см ких їла де у ою сСіж вв; оФаУ хлєБ ах Хі ти ах я Сім Ха тує ба Ха ув уж
З -ту зух: пт в ТО ТЕ що
Чат ще СГ ех юр Ум Лют Маю ум і, жищ й и сл Вів п
ТВ ОХЖНА Пед Бо жЕХ Хв) дар оОдЕДО ЗХ жа Фа лОЛА ЖЖ АД Аа шу ж КВ Ж ниж ШУ ато ІХЕх КК Фу тезу ни нн но Ше з Ж їі и Їли ур
Ак ве вїве їй Пежо їм сту ТБи Бро діа дви ків А Бхо ру щешж хе яд хх їй 1п5 МИ пк в А ЩЕНЯ щачою ЩШох щої дОУЦ жу ух хоіхя узі у їв що лю
Аж ХНА Віа ва ВК Бек дит чуві хі ПЕ ТБ пі біб ах ває в їз: кл 5 хц
Ви Ки ую Мекка ли шашки Жоиух З г: Аа КО юри ЯКЕ ох тел Я иж ойояе т
Бек пек ші Ма я ких й ів А Ме б Б» м ше ії Бе ди чик зх ча ке ї що зву Ка що "Зх хг шлекх Хі рі гу лю тая ху ху шт У пу Утію Уути 7 їі ча) Бко З) сію Сів іуУ ЩНК УМ дво Тл» АКка дій Азія лід тах їй ТУ їі їй Ку МУ МОУ
Без жил уві Біє ба їїв Беж
ВЕУ
АЛІ пт ц «для Ми ек ДИН ек шплпидя «дам ДЕД К
ЕТ у Б ьо АН ша 0 ШЕУ Л МІЖ сна НВ
ШІ ТУ, рах, хи о дея пер ше хе Дах сту (1713 дон Мій ЩЕ щі Мій дюду Ух бхцу МС мес лем Суд вд суд Ба са Аве оз МІ БЕ Ма АБО Су бу ще ї Бе Та ЛУ очи смжемо ЛЕТ йо аж зл Те жу СЕЛ у ВЖИ ую Ж жі Ж я хи
За пу аз пах 2 Май МАХ Ох БлЕжф дю ЧЗьа о бе бен мб м СуЄ
ТЕ Ж 3
Клуб буди жах годи и Чую 21 Зк ТАТ у що да Ми бу ПМ Ж дати те тЖвЕ сСЖжЕ щу ше шоу СУБ сл увь вхо же Сер ос й
25 вх 45 дез ж Мамі Шхоє А шШеую хг до УМрує вхж Кк; секх УЯ дк отож Му ку кіз дк обШех дів ших Оеі дів Ар о тн йкУ вхо Бе Ті Сей беж ЗЕ сп «сх щи п ша МА ще їж ія туючу їду 15 А и 1 Ууєту ие 51 и бм4 в
Буш вела су ВІ КЖОУ и: бій Віа бреше діа БО йпежх Вій дви Бей тре
Я тах че ща
ЕХ ТИ Ме МО м ту Молю очи, лк пити Уа пи ж мо Я о Ше Я ж КУ и ож, цщек ув лиш зЗех Во ївеожпе А МАХ хз Бек Та ТИВИ ЗКЖТ ку СКК 85 33 ЗЕ их 5 Сг шу хтщ 5 Фу хе щ хі ї-ех п зх пев ПИЛ хх о «Жди Бен сСев вів УБі би дяк УЗ ба меж Жах м ОБ щпау АБ гбнж о жеюК бо їх хек тах шк ОВ НН
Ж йсичихо Уют Сфує дод Мода їЖусих СТ шо їмо руч їВізжУ То: ЩО у ХЕ їУмач о Для шарі ши ше рих ХОЗКА ЗМАИ ЕЛ АОМЕК МОХ МО МЕ мелі л МА ОКХ МАТ яти 5
МА ке КІ пок теж тс Кіш ом ЗУфроує бусилу СУМ ує тяж б інату Мф ХЕ уми онау же ки аза вка вва Кі шШех ЖЕ Ана Би Сув ОБО ЧЛХ ЗМ Аше ей жЖех Суд ти їз їй
КОЖ Кл. дж умілих сбчеуєюю МИХ що Ст му й ут пуд оз Уч Мах: КщО сту тло
Ева о Сує Міс Хіє Сі шШуш ім Мо БЮ УМ ЛК ОХ
А оо зу ке У МО «ле ІХ5 пл и бе т Я тт, -ійу пуУиє ще Мен я сук т ме «швах Бані бив зиарлиасІв а ИН вах Кк па кг, Зк Уа сам сузч Щ1у Тожекз М г пок я НК о мо лома Пуха» мет біз паї іш лу ХЕ деє МА ПуБ бах Му баб Був ЗК ОК ЖДЕ х щ С я х З щі М хат худ зу ЛУ біжу. лом: Лю ЕХ мо й МІ пеиха Тож; Ж к:, Т ху. Од
УА БУ муж БЖ пев бе Жух Хі блєю біт Ума Ват Се ЗіБ бер БА як ЗЕ зи шо КО Кк
Мо іченюу Жохиє Чиє ит мих СТЬ СТ шу томі з В сих СЯ і Ва (іх ка
Кіа жі ув тТНх ув о жеа аю жі ж твЕК МА жТна о Аяапйосб АМо ь «їх яц о КН в оку хо УТ й су щу кож щує г секр як кА ших буки Ж вки муш БІМ Ол оцет заий ахх во сам ваИй чвО во аб (а ві УВУ т тк, Ах
У З во ин чн нн А Чо ан МИША А ЧНІ Ко АК ЗАЧ ТИЧ НК Ер їн їх Мао Ж сл нКл жд сх їх білі Ж КД би СОС ЗО ЗХ ц гот -к Км хе: їв Ах ВИ тля 31 тілу УщОр Єхлях Ж Фк пф КЛ й г їх їі хі 1 зів щі щі 1 чаї зів ої: Мт ТВ бій 03и бів бій сій ва ІЙ пк ча с ми че З ж Мб пе Ж ух Мричия ЛШ очи п ЖАВ Укуси ик дод Жояже бидою ЖУуия Я сн щі а б шжео Маї ве Кк чаї Еш тТух де МУ ЗБ бле МУ чих тк іх щи Ку хо зт им Мило бути ях й їн Ж шо Що бур бом фтх Мізмух укух їУк:у ФК х дух жна. ЯмУй дод Баш щи ПУ ХаіФ ав Бош їі іа дм Олиж кис ак я Е ув студ, 115 їло Ти «бірж СТ ах юну б т ех фетою СИ и Ж МУ й мм тт Ше Уже тми ліФ ша бу Мі дЕт Смв дир Бі ув Тих діа отих їх ех ТУ яоущ зе защ
НЕ 175 85 дя їх юю жан Ж т ух стем ще що хх то шт Ж що дик ту Й
УА їу ХМК Ха АФ ІМ Му Ес МУ САУ Ха Уві Аза іш ХНА ОБХЄЬ : 345 МО ВЗ ївЕ :
Бут щу бик б бут фу їла: рі їні фузе їли Мт Іі Ж тих жує :
КЖХУ ВКАТЬ ОКО жим о ську МЖК А М ІНВ хи КАФ КАМ АКА ЗАВ МУ ТЕ Н «жк мех хх :
МО ЯК Вих : тех де Ме ло тех Ж :
Же Ашо Мет ба лу КІ :
МВ :
ЯКУ Еух чу Й
МАУ докк ! шлях тр :
ЕКО ЮТЖ : ш-е пжких :
ЛИХ пла Н тр ух : ик «анти хи чеки Н
МЖК Мати пеена :
ДМ чех : масами ше Н жде сб (с: дет шує ПИ мо Ам ее даєш сло сли боєм томи пиюую Й
МН Хе там лю БЕ В дн) МК дат ве дах зе Б Му це Так : ї к ЕН чу Й
А М М А :
Щукін ща узкжми Ло лах МІ ШУ Фурмж СУМ тосух Ще МілеЄ тям І : щахЬ гОФ ОА КжЕ диФ лай мАХ да КО мех СЗЗЖ А ЖЕО Мпа з ААУ : ху сих зах : ххх КН а Н оце атм жшриу лет ом смфуае бохже сухих са Му жо аю ам мл сх ТК : та Ас БІО вже Бі: о ЩлХ ех ХО ст. БМе ЗЕ ОХИйах їджЬ Бур КДЖ ХО : пущу з ах: :
У же жМи :
Усеххо Хв бжхху їхмаУу сЗщуєх ХВ ху ум п мух ушу МЛ щу Має хі дкмуу Хі Й
ВУ і Аж: БЖІ їМаМб Є о бауУ БЕО вБИи КХхО ви КЕ ге ва вко в Н
Б па ш Я там даху Де пач слу й прю. шлам ТИ "«шіях гу домую МЛ ру стю леї до х ню ОЗшІ йАдЮОКиХх дош ж ЖК Оу ЖК обу дез ЕЕ дО бод мА ВІВ шц тк Б и кВ Б їх ЗИ
ТЯ ку СКЗ ду ху БИЧ СТ ду мруує ІЙхищтм ою Хе ИЗД СТУ Жим о Хо йужу ох пд ту Ма гух с же ех о гук тик Бе Тих ше хшх їі дат Зшж МЕ яї зб зе бічу МУ же пух М до ши м їм се НУМ тод дл сш щих
Вко та ТВ еко о шід дув Ада дл ема ема са ТЕ бевх Де жеХ ВХ их зик т их Ки Ме
Мб Жрхкю, ЖлЛшуУ б о ТЗяхк дих сх мб ки ев щи их сх Ст ЗЕ вс За бів бі діа піт Ват ОХ жЖ Тр да Мав бл бе Васю Зі же тей чо
Ма Мк Й суїд сив бах фувту лтярі дош лі ше ев слрхх ті тм тез тлі ет теп
Ему сх ад би ЖК ще а І ЗЕ Ду Мах БА Кер ХО дО Мевх сут п зд їж їх їди тре Ще М шо Стах ж іх б ут дл я 1 хх
Ав БО СІ Ав ої ліФ ща ха з Вже Уа сад Ма лі лаУ ОХ хх 5. «дп зх 135 15 ха о
ТО ШЕ до. и й лож од сти мір хг АТ Сл Ол ду ча хар ліс АЖжУ бек Ак ака см лк Мах АМв би ше ВО як К
АЖОУ кт шк пр добу вени жу
УМА САМ стулки жк ж у ха ЯН
ОТО ох У ях хи у у ІМЛІ КЕНЕ
ДТ. чл «вмиМо уки
Муз лит сх ме сбихах бат, ток Том МІ сфох іх до бак ніч що У
Меп вхо ск ошт И в Ммув пен охумЕ зд кл оп оСую вх іш са х ц ях ж ї З Ми ОЗ
БУМННи Шен. (Зуижа стлкю Тям У Вм тоич ку ЛВУхх: о на АЖ куту Кия ож ща МмхО ОК МК п БУХ Зо Бейі худу пл 8 КУМ ФУ і КИДОК я зх ч і «ля ж жЖишнет ТЛ ту ЖИМ СА шо Лях Жоккіі Жіа МТУ Сжеинюу Ходірі Жоктр;у оЖоктло ож, пк Мою Б ух - бі: впеш льш отих сСеваі штна Щпх ж МН на хжнх тт ех рих сут 35 5 Ве т пути Дю хащі бі їх Мк ах й Заму ММ рю шує я їхо дви одхо Ав гі ТБ УВА ЕКО ЗА ІБ АБИ дао Тих їі ЕХ ТИХ п т15 щих ка х ще хр вх фею они Его ви: св що їх ше сем у ях іх ки бі жЖБх спі їі йхо Зі ЗБ Уві біз ПішЖ їв Фуко ПІ Хі Ше буж я ту те ЦІ
Й т МО имя фаду тру и жо М ди ха шар хі мури фіютих (л Атв САЛТв тах їм ТИХ ГЕ БшХ їх Ан о дЕЛ ЗУ ЕХО ВІ РИХ Бл би; йіа АТ
Б З З
5 їУєа дм Ти сви Жук Мах ох би уч т их Мі сни муху вка БбшЖ Би їн МК б дві беж ех таж вав оті їі Аа Ко ех хай зт НУ
Ме мий МВА рах и ді и хе шару вшо Міи глм гутю еру стлну ФІ мкл дету іх сі тах вха аї дЕч ЕшеЕ Анни га гав шу жопХ у І Маї ДЕ О Мах ях хи їтух;
КО дж зак й
Фу З їх тю ж Мох ож: щує Мох: щеву: У ит я Дод одумх С шк У у шежЖ МЖК їм МА Ха імма ХБОБОВТЬ Їмо кат БЖ (ЗУ БЮ 1ібам Хор СІЛЬ ї55 ї1х5 Кай тс хи лину ЗА УТІХ АЗОТ У "він. хх хи хі: Ся ФМ та А ія чаї ЕпОо Майї сшдіО Чай ТБ ші ТВЕ ба Ар ОТАв дкже шах Аз ді зак рен тк зи ах ї5о ї5Е зЕш жил КИ хе що Фр То ит
Тшаи ТМ МАХ Аді Ух Та АХ
ЗА
АТХ
«Зі 375 ші ОХ сут шт дх пам шпали шу ШТ павсїї ї ЕОМ ІВ. ше У «кап 8 же о смухе яке (ще ІЮш Іо тт ст теж ска Єбшуу Ж ус Тікму ср я ка ех ШПеЗ ув ЕКО БМПе Беж ве без шеж ек хів Ай ока БВ лід ї ї о ух жу У ог он Я їх ФтолЛюжУ Мік ки по «є жк СУ их а Теюеух Що ОН
МА іще їххУ іно мех Клео Ж З їж МЖК ОМ аа іє УК о се
ТО 5 її
Чак ру хе Ж одамту бах мує А ду сту. ту Езху а ї дхмз дшву ЗІ Тому Ті хо КАС У ЕН Але КЗХ АХА ОКО чех їла бщалд АБ АБ ХА мА ло тв ЯМ ц
ХУ и У учи я: Її щит Мом я хм ЩО У ТУ Жіжш Моляко щоки ЄМ Кп І т дак хо Бім Січ дхор ехо віч Ваш о бій МЗеб Бу Му Бхщ бід У хаш бю ча 5 щи
М ПО І
Суму бла УТ лу лю (т лу ФК скрути тю та ту ЕХтТ.юЮ г юю тд ж пта За щдеж са тв са ви мед сша вів УЮ Са дув ТуХ Ус
Та 7 ка
Прі й Адм фол біля» «Ех Жатки пд тем сіл Ал дм дк ху Джо с Ап о Був ув біх ЗМ ба же жк був 533 лів вів ЕМ ОЗМУу АБИ
85 зо 35 бебаз о У ш ЛИМХх фо До хо тс, ох Тегі бої Тов божа ле бою дош ВХ лі їн) Чи МУ дО дів лек Дшю б їм Му був ві туз Ажо ід 4 хк че зх
В- ЩО ве гм Ах дамам ЗИ ж акти доц (лк дет А СМ ІБ ю лю шву
Гуз ів до бик був сам о суВ (б Аа сій БУЗ Ат о тНЕ шу ТЕ Бгеа де я їз їх Аж Мих хх 1 з ни на и КН і хе ФІ ти: Ху їли пд бЕд Му ве вів діа Зп Су Бхо ча3 Буш Сі с0іУ цем дви оці Буш Уа ВХхо КпЕ
М ху 159
Є п Ху Же ФЕТУ ботів дама ЗМК Ха сит дж шлю ХА дому бле де сх. Я вВзшеакт хо пахв ме об БУВ влю ух б БОМ зах жах АЖеЯ щу ож еВ за злу Я тв ї55 КУ КА аа джу ти фу Км т пе в Тем ЇМ іди Іф Ух ет
За Бей Уві їй Бей УЗ си тУуХ Аа дво обо Бе НІШ ВЕ АЕХУ КІ
ЗБ Мт іт фошуто То 7 Тут Лях ху Фу стих юух слуха Щохм бом Зір» Доххт Уже тт Зх: дю оМуюв са ку ху УК Мат отут БК Лат Злі било Зде Бук см фе зп Кк ага
МЕ М МЖІ блю 1 т трУЯх 0 Тоісзу йзнх ші зе децт іа ее Шах лУМУх тодзу их Ха
Теж са буд МЩеї їж ЕВе щу ДЕЙ ОС): ШКО КЗе стнУ Би ОДЕЮ ДЛЕЮБ ку за стуку три
Нв ОВ ХЛ сирки М пл лм шу бли жил гу Мамо М ожив ав жит мем 0 МУ веж ому сп. зач гаК ІВ Шув Зоо сУух ук їм оса їх ХХ схМую сх ху і ХЛВ жи
Мижте баки Срізжу Хр жду. 31 хуя тв ві лає птож биту ідма ує бві Ву: бі ешжЕ жу ам же. Мр кеву УМБМУ ск І Е муж МЕ сим КК жі ОККО ЮК
«и ла -ха й
Я ло 5 ве тує КЛ Код пахум блін ки о их Зо тку у ка их юю Я ок жк цу о вів вв о лує ЗіжЖ пів Вр оБаа БЖш он БЖ Ом Ка БЮ СИ вежу ВІ в оре чн в нн в НН НН ОН я фщостамі Ули Вк
Бук ЗА по ув ВІ ща жа Вва о б УЖО ЗВ оВшЖа Лів Бей Бук пий
КО Ех КК хх хо бух бує Фе Ж вх ї жену Юта лах Ми. Безу УТ ДМіх ем ЛІ дів Уві АБИ йеж щі хіФ Дву Бей Жех щі ЕВе дво бо ве де ша
ТИ З тд:
М ки ХО спе рив Кк поза п хи щохух лях Щи позик І Єжи прі Ж Ж ТЗ пух вав хщА БО Ол АД ЗУУ МА Му бат ЗіБ КБ ви о ЗішЖ бе зле уд: - «ух
Ва ША ваше пу Щі до т шко ті їі міш Кіш січ яд іхи рух бах Мі сх»
АЕН мА Хна МЕТ ЩА МАФ МІ Ахво шу Ж ку Шамо й о шАМ ККУ аж титов ло їх
Ох МИ ОК Бак уки сток Тому Ки щи щу Мод т хе их і т межу ТЕ дяк фа
Зішж МуУуш маш Змі Вам Ма ба Ма Каша Був ОБ СКЖЕСКЛЕ УМХ ОА 175 їз 535 трчих горя ех Де его бах ув ую брхю рам іш том Хо; піиуу сти тва
Штори Бе жде Штое Лів іа шу ТБ оо дащЩ дж Майї ШО ТУХ ТКЮ
А жо «кт 3435 ЗЕ 35 гул ж жу МИМО що що хо іч довж гаки сік сту ях Хужту ті: ще КО
Оу жЗАш Ууш Ще За ЗА дво гМма СУК СУДЖ Дом хом Еш СМ сла Му ж ЗЕ за хї їх о Ух з- дох ха щі УТ й іду Щі шах божу Кі ау Тома сук дів УВІ по Уа Рі йіа мів сій ТюЕ ЗІіЖ МІ Бр ілих ХУ люма Ех їх Тс їй
Я др ЛИ. дю А ау - о і а и о ИН Ук Ух У
Зно Сім Бех АБО Те ім БжЕ ше У бал слу ші: Бі) діжа жа хе хи СУ ак 385 ї35 335 ап сус ЗУ жом М Фух кхІ ре де х Не закис ншонашаюя тк пає Ті МО ШщежЖ сбІіІх СіУу шежЖ тв Ала су БтУш бі Ал Кім пе
ЕХ ЯК А хи ХА сон
ФТИ в Тех счлУую Ж Між бою бю; лом ми Тому бля. М Тіз Ху ток Тр
ХК Бут» ЛК сек Бмлж дай Ммж їх ВАЮ Уж Соль Мле ваш о біт Був хе
Для 455 338
А ТЕО ВУС шен Шут шт Лу роя Я ТУгІх ве пкт ут аз хи осо б. жо Жуки спокгіх
ПАНА У ШшАУ йАЕМЛО ТВ ла ОАЖИА БА уУшО п МФО АЕ ОСГБМЖХ сх Ха МЕ 435 485 чая жу лем й жи То; ж юю лих М що біжи анти ик у лану я ки и пек їх дух пуф хх ха: БЕЖ за Баг ХМК Оу с БЕК РТ ІН А Ха Буш
Дж ДЕ ДІ о Іо век
Кт. Об псичих битих Фіг шк т і оче лшоуї фени Хот соки Ше сот щоних 1: У пах віз Вкц йтп пік шк тів Аз Маї база Б Бжо Аве Му бло маї іде іл пс дат зе х и А ККУ ла ую ж хх їхМее Кк їУєом сл же ти я му чим хау уки ню то
Гру ЖЕ ХІш са Ббкго вій Буе п» мух са Оу Кут ЖК жешЖ СКПЖ РЕ
ЕЕ За за саткж йомтх йохт бах: й сту Хо Миук 0141 сМіхах сТухкиу Жботи ам дотмях томіу Мірру си ваш бще Її Зів дк Сувз Мек оба чле жо без сіна ше 3 Ду ях 5 УЗ фа що уми р КІ тим Умих фЖому сУМих їх сук. Тим мах ху Ж СІ ах іш жКжЕ пижЖ дів це МФ ОАБвр о БВа БУ шеЕж СБевоТУЖ КАМ Ба КАМ пли пери кзк ре воша ТТ жу Ух би дур жену Тим їм дув ща Ж у ди Чек ухіяя щазух ст хх тис
Віа са БУК ве Бе Бей о лпіМ УМ век ді май жВЖ и ЗОБА Бук щшїй цз3ц ща пах яд аск о и нн о нь с у и ФЛ оч жо бл ТК ю КОЖ, БУКА ож о но У оче и шке жа ви БТахо ПЛ ї5 дх срофшпх їхху ЗМ МУБО ОМ А ОЯИХ бххУ дай щізЗ. ца ща АВ ЩІ хх мае ТУЛІХ ОХ; ще лезу МИ шт КТ, года ук Ух пу тат Стих Км сут фонах пу их це ее Те вва сбоу Мув'укю ХІіє БЮ Бе хежЖ КУЄ Авш демо ше СИХ «дк Бе пл
МИХ м ВГ
Жуки Кл ХХ Устя Утухжи лу ше Мамі: сут Мік Мшту слі Ск тую Модхуч пе БУ Сім БУВ Буш МАХ УЮ ім УМ Биє Бо ХУ ХА жИпХ БЮ їх Ж пах «ик пе
ДІ щи пен
ЗУ ТУ зу птах о жокну АЛ току ххх фаху Їйнох Віл у тжму сх уп Ту хх соку Мир хг
Уж ем дів сем дев ому БІБ Аза їлеу йно йшМ Ат вх дина ЩИХ Уві. ак ща шт
З Ме Ух жодує їз жи кож КОТ дм дЖюш о сУдхче Модує Додує ОМ у Ж у; хи пек УХуих тм ох дви ша цУШ УВА 3 Биж їмак 83 ба о Віє (і; шу МмЖ КО Іл ем ша 5 ВИ щпАМм УКАЛВ и « їоожоахіх йхеру КЛ бх ЖИдчоу у т тує й ть щу (фе стю жи Ж гІогх
Су їхні Ажффік му Бр хай Май пе Ах ШУ СКНХх а був був Мув МНув пк тут во о
Ук ІА Ух ЖАКМ
Мох Пе слу КИ «хау сту Му Що ло Кл» лото Дах ще мл т
ЇМ о хух Ху АХ Сіл УХЮ Бач Ва Олую Які ху Зіш Од ват Басюк ТА
ІВ ча Би дує їЖкї МІ юю Кт к фричу їдь ВУМлу долу Жуан В о а а теж
ЕЕ пе діа АКо му БКОо аа БНеа демо тТВЗЕ ож МЕ УЗ у ТКо тух сееку І Кт.
УЖ ЗХ уки дл ат Му Мом Мих дух ру ах дохо сМянть ЗЕ лх ХЕ хг лк СЛ ЛІВ
Аза Ав Зек ав СУК дих ба ЗЕМ ож Мах діу УВА МВ Же су Ж шт ші пат ххх БУ ЗМУ горю УКХ Тему іх тд хг вану бюу Щі ро МО Мід тлом що хх пає
САУ Ба ба дАУ Заї У. деКощех Мід птеа сі Ада та бе шу тих
ЗО Зх о тов фра: ЖУК побу дей: лежать ду оку Зруєт ру ст щи ЛУ я жи кох
Медові Буш ЕХО МК Мах Буш аж шеж хлЕ БЕщ бле бю хі Ві бац та "ІЗ пкт ах ТА ТАЗ їх д до Спи пуу ме ре вх У хи СНІ Жірюу ЛШ я У дк жу иа кю
Ав о Ахв Аля жав Зех пе ДЕД ОБУ ССИаЖХ ву Мав отр Ку шві мдь лек
ЕХ В ЗМУ
ФМ и яку ежбущю ДУ бу бунти по их тек З хм Іл даю їх
КкхО Кв вхщш о піш В ве тн тує вою сім Сем овій фу у вх Буш па так тркутї ее Та г
Жорж лох доуту лим тим сиве плит поту фер б є шу Хана Ж ДО мо
БЕ зви бари Зах бук ЖЖ ШУук Щі бю пуб ші хів охо Ав овів СКУ зв тез кт Хі бу шою їм жи ШТ жк ба ду: 11 хх лях 1 ко Ті їнмх вк їли: їх ФЕМ (а ма ЕПпеа сій Зі та іш сій Аа сттухх ча тРуугх ти ТЕ ЛУ де дожту дове йо що її дл муз ж; бом спудат одну
ЗІ БАШТА АЖ ІК З ХХ МУ ЛАК МА ОМ МКК СТУ Х МОЯ тах зай зак ель ве
Уже ах
«11 ОТИХ «шій ЛЮМЛюЮХ
Му сТж має 3135 гу и уки «ех вола пуск
ООН їз
ХА ИМ дм жде гхмх доку ди МТМ Фк ХМ їх ЗІщО млі обов бе т що т жу
Меаб ев вка бе и вхо Біда ув Ма Бір йвкк дек їй Аа хів ТОЖ «кг ї: їх і 5 ІЗ МУ с; вот: їх лис спри уки що гі хи су У (КАК КІ до лк ДТ в тре мет ем пі Су тТве ВВЕ Аза пем Су ТВ деж маї вів тук вія за пк: тп
КУ ЯТЬ а ср мМ хо у ст ух суку Ж хе лях ди СК «шує Миру М ле нан Як і ЧК ЩИХ се б ЗжшХ МУ ої МИЖХ дав ск СІК КТК ж да ЛЕН жк х «ц у Б й те М Ти ті їх її 31 -г Ти: КІ їх В тре 1.28 0313 ЖК дпа ва ії щіФ СІ а ші йит сем ойла СБІМ о йіа цей о ств сум ДЕЯ ха 55 «а бі, юю СИ Док єї щи дл их том бл Од сиром г ЖИ дом те, биж АХ ТІ БдюЮ см ши Мав о ЗшкЕ Був за са жлК зав дув са ах п зе зе й 3 2 Го
УМХ УЛ Є я жи г т їх тихе Тк: їх ШУ ХкгуУх ек» сом лах со а тжу МіФ ща МУ Сей Му КІУ Дю Сів ОККО дви ду шо ТО ших ян си
Ж БИ ІХ чолі беху вш доку бруд ж ості А ко пед ло ЖІ У ХА УА тт хи пез вжи Ар ов За вив Му св пі ех Зак Бл УФ мук мув май їх ік, пра
АМмІх тю яки док ФУ: Мих Кихш фі га 3 тихе їїЛ7Уу. ломи ду тла: то цих Зк Й
Ми ХМ фУЮЖЬ Беж Ма шИЛ ВМ муж Ід ЗУБ чл зу мух ІНВ МА ХМ ла та
А КК; по ет й Шо кер Іл сиву М садно суку М даніх ЖАН Ж ПУБ таці лов
Вал дув овен щах без св ах бЕб ек оз дей осжяА ув о'ікм Хана дей
ЕН тля, НЕ
Ат ХОКТЬ м йон їди ЩІ фбечу Яйчу бору тре Ж т БУК той ху бук о даш щ хз
МУ їла ал же Зх деж БЕс дів жа ща Ада вко тую дадожУух Аз
Уа зат яд Ук шах А «УКЛ АБО их щ м. Мих КО гу Фк позах їз ло 73173 ІУНа (мує щу тих тва ке тиж Аве о Су ах ем о Уде пе Бе ММ ІМ БІБ Має мав отуУє а о хто си ЖІ доку ду г Ту мат МС, йуюу жіжмиу МОЯ пвихм о Ме Чех йти дош дя пу Бі бе 0: дл св о бБІів Зако бта ху пух мМек Тух Аз Аа Аа
Бе З вх ев хи Мо КУ суми ду Жачж тах 234 у бю ТУТуУу сам дум їм Офх 231хи иує а дну ІН вне ше др Пій Вів тутж СІ Му» Ме ем Бе СРЬу дей сів КО БНе тс Змі па
МУ шля аю ттіхах Тихі іч» Щухєх єї юю Уж ДІ Зозикі Сб4бае хін У ищо її; сб ле кі: тк оце мм ват Зі Бех був УВА Бут Жлк пе Бу СИЛ Тух Тух 5 о їй ВА ше» жах й ух дру УТ их Фу Ух Жах кі сту З хи сУчіяе хщої Уміє т уки чЧій со шех су ша шШех Ту ТУ ХВ дБЮ су Тух ТВА Бе са СККЮ тржку тугу з тп
КИ а шу ших осже ЛО мо зум Муки пт У ли б то и до ку Пк Кри що 5 ща ху Ул кю
Ме о блак ма юта МУ. їх МЖК ЕК ТБ ТУВІХ Тук ух віз паю Ух МуУВ яХЕ ах зих уд
ЗУ Во 255 --ї пі же по тд (ти дУКИ Тло (хи Ві домі демч Тима ЗАЛ тд ім іш пі Бвройви зсув су хз був Сім Бій вхшщ АБК ли Мах Буб сла лаг зац ди
КУ МТЗ ем
Мк тему та МІ щ ОМ м ХУ бю пл ую Ток сх гам буди МІ пух Ве ді мжм му й йащМ ХВ с МУ жу Мша йБО мем ша Майо де АЙ тр ад тах «ТЕ им я "У лк 5 іо би шу Клея шк хи шк ки шу їх див пІт3 дк щів вне ав аж тут ДЮ ТЕ дви Зіу яв су вв сій див піц Ко тур зач НН шо ЗО ШК жому Жах ж Сб у жЖодже Ж: ус хв їй Жов сп4 1: дл до ух дж сук я вису щаї хів вже Міш Бе: Мей Уві Хіз Бі Віз сш Уві Зі СІ здьи зІй іх приату их У до и пу; дід ли и сти тео бі «2 дов див дід го т дик міг дщу тю Аа АЖ ЗАМ м МУ КАХ бом ЗШ ші са до Ж ІМ ла Ви ди ту чх п пе» Ей
Сб лих Тех їх ТУТ тот, тк що ща ли її» 1 хе бУряє їд Фу т пек о Ббтд Бей Аза СІ дов БКо тУвУ аа те біб бі тп будо ше МУш ах чи пе
І ШК пи чі лу Міскує спянтх доз СІ тем дм доста дм с 2: Дому пе стру СТ рх чаї цех бук жи Олю беж ув Мі Віз в Зв Зав о жУХх ЛдАх ле 03, лик чий ких
Зах БЕЗБ ї8Б5 псу Міїу мг гію Міс сг іі я ба жі ці т Ма щі Мія Ме пре «кла дво лу вів Уві ба жЗа МІ МІХ слі Же щпіУ МІВ Дер трі птуц пз ки ДК ож
Тдмиз по Темі ВЖжУЖ дет Ли спе дме пльу ДЕДропмю ВЕ біб дід пріо ща мшиз УЖ БА кж ФУ са ту ТУ ад ша ук Ух М га с ЗЕ реч зе зпх ви
КЕ чо Ж що їз дяді й ла сйкує ув тиву; МУ дуУє (А Ум пух бух бує (їз КЕ
КкхОо МУ ша мі хЖф Юма Ву ЖАХ хВяш су КІ ХМ ОК БАК юх ШИК зп5 ід 15
Бе Че міч Тр мо МУ ка Тра Межа МКУ Шжкхл СЖритиу Мер дов Ж лит жоующ
ЖЖ АЛ бе ТИХ осях ЖІ ГеХ Бл жиле пах о фбеза бів за був о ЗЕ да пах ах ах
ВУ ЗвХКУХ щи екв СУ тоже, й ких я Стіч й Бен КУН Хо. т оч Фу ти А Доохя їі уп Муз Ащпа о Мих що у АЖ ОтТтЮ ів Був ле Уві їмо маваі сата рю Б удушення Ж ру тд дому фах З и ЕЛдок тк ММ жк С у дих м ук аБи жа Кл жа ЕВ САМ шо ку Ве ЕКО ЖЕ Ух же ДВ ОХ
У Ух 5 сзрує джує га. болуєо бі5ч Жохує пкач думи КА. Тозує ди? дачею аа ому Ех Ху
Зет да ХИЖ Муш дет ваз БЖ БК бу із УаУ вх тах йаул їм ККо посі С С ц Ср се. Бо й яко 58 пики охеяа. Мк де Та, плюмо СМС ду Хомут су МЛ дю Жчум Чак Хо М Ал нн що зуво яех ФА їх во шує ЖМХ обу Їж Зою зу НІВ їМ»а ОХУХ «пк ах Аж
З з ях тезу Ху бкухи лиж Ти жо; Ме дгує Рі м фу кує. тлум (313. Ме си туру туш БШет ТМ Бкгч БіУ дно ве Ме Кіш Ве тв іо Са Тв рхв Бех сг чи чл т п ПА ях важ жо сф Жага вод що тах дово Ух ХО сову Пулу Ул ло ли
Бе ДЕ вбобФес жк Бук оЗІв пів БЕ Вів Му БОе БО бух Бук лав Бши кі когВ по
ЛА КУ пд піки Ку їокує я с кіл ча густу ЛУ м т 3 дії Ії зу уз дл пре
Ту -ои мзи зі вій си КЕ В ню Птн ХО Ол ЗО маАщ ВА МАХ руа пл па пай з3х жу ле
Мис па кг Ін Ж дю м бощау фу шах буку Комі (Ма) щу фор ик тА хиба пож ех Му о жих Кшеб Ов му Мем осхах ВО Му шаф уга жах ЧО Бай БІ т ин Мет пух шля М у Кия пок ни но Ше ІК» Таж Лиха ни
ІжЖжвощіх Авросбал ши ЗІ ЧЛ сл У сжв гТхЮ бів БЕ Сжа БеКЖОТуХ з Х ЕЗ не г: - жому ЕЗ Їх Х 3 ж кеш т пах Маю ше дсемуу сийма бе тлі їм: Тдош їх Тим Гдує З Ту їсух іт КМ йлх Чем
Авт інма ЩЕ Сам Бпт Бе Сім ож бу УВУ Букі СЬО Бе: дви тує чо тех Щевух ух Що тм ПИ служ боку ли Мих Що же щу дошку Ха хаос В ОКХ бо ім ЖАХУ К Був сну мл года. Має до бЗдть МВА нем пт ЩА
Ж ЗчУ ЗКО ди хг му хо души М.Ю сти ХІІ тА ЗИМИ а А Є тут
Ав оче ТБ Узі АБрОожАУ са Уго Узі же шпех АБО дво лав ша слу шт іх пк
Ам мах щи о шо шин ШУ НЯ ти Уха У ІКТ сла дохо УЛ ку стаю блю іє Був Ме пУуБш їмо Бдиа бу ВБИВ ОМА МАХ оси МАЮ ЗУ ЛК ОБУ ве УЖ ЗА 6 и нн в а НН о НК нм о о НН НН мув ув жи дз ГуУуХ тТухХ МУ Хана ха ТІ БИЯ АЖ БУХ лев ху мех ща Би я діє Ух ж Ту Ток и їїл ях хе хм ди ВИТ М ще би Ж Тим з/пЕ Обл АЖ ВМ зуш МА ОАЖ Вища ХА СКУ ТИКИ Фе с Ж Ми ак кВ ща хг з мем дж йогу ху да Фет мих Фоем А Мет сек ха жи ой ах ма то ТУ лАщ А ЕЛЕ ж МОВ сАЩОЮ ЯМИ ОО БКЮ Ж хм ИЗУ шле «ут ша
ККУ Би ев
Зх де Ухуних сг тт ух: с Еяи Укічиу Коххї хи тив лиху модже Межа МК и Ухил
Маю Бх щу Ба Еш Бош Бе бу хві У ві п МЖК шо Бхс с ком «ак бкдтх реЗУ по Бе
У ши ен У о пеО худ ста тт хя ках сіра ЇХ ти
Уві Чаї бу ваг бемі Ви САУ бу БЕ УЗ. М оЖує СІ Ви АК су Бах тп их чи топ ще Мо БЕН тич іп Хів Аіа Ви іа Віа Бра пає Без ви сі отаЕ во Вів отр дат ч-ц «рю чужу
КТ як РІКУ
Ж уж. Уха ху тд чити и их. о КУА Трах я ЕТ яр Ж онУх Ки» т чаї ди цех вив ОотТвХх мтс їж ель Та жа гУх КО осуш сш о БКО пу "ух зак Уа
АН тах Ту чаш хом мя я ще пеню аву фл ЖЖ ббаут Фу ушу брхрашио ЕХ ж Ж и ДМ ві діа бе Бе жа во) Че Буз УВА тує ПеаєЄ АврожтЖ бе Ха БИ "ке тай п
ТБ Ти ТТуй о о я ни НН о ОО Я фс Жони я Ж лиж Тих дм ХР хи дат дів Еш Ми Му МА БЖжО їх Мп. ож и» Му іще їхквохщА Ал се 75 тво
ТЯ Т75 ТЕ біт іш лів Аво зно їув Щек Аля іт Аа Ті тк хіє Ак ле тк пл тету:
ТВ т ЗБ жи гу єї
ОАЕ ОК я них хтут чих ою плюси пт юки ШИК «иа Бала А Маж ска яд, ля
КАТЕ КА
Жабо АСУ й в Се г: дол Мт Акт Мега кла Ди гео тла хг
Ме св Міз Ав лев жа бір Аше Мов АвБМи ден осжА ЛЕМ БЖ Ка бе ї х М кое фчсу стжиює Й то Жруужу Меулщі б'ю У ис пббхутя Жеиєу т о нь о ние В м вив оба зів дво пув пув їв деп йо бій шжше Мак о фжєе сф ТЕХ Ат
З тв 38
КЗ; щЕ ще гу ЖТРре Та Жук р ба Та тм тд сі бе Же бейх їі шк віх сі жа їж щЩЕЖ ОМ їх ЩЕ ЕК ба бен ДІ ЖШЕХх бейзі Уві Бвш Ві ї8 48 45 чно руч З їм Ма Кл жа їУєх; ух су ох У же Лімо там їж веж ЗІ Раш Бе вій БЕ БЕЗ о БеЖ Аді Біо ЗИ вх Бо Мих 5 ві в Ба чом ху У хжк: Жчхз Се лях бу Ух: Я ик бив у йлуєх шко Жан Кошиця йбуих
Мені па Мазі БИ дЕТ слі КІМ БшШб жує р Каб ве ж бе Бе) жу кц за зц З їх не ТЕ ВО
Фіз їУКк:У (33 їх; дує Ме Тома дих (1 пух рани ит шфшкує т и пет ЕОМ вал ББшЖ пе ПУ ба Ст пеосів пе КІ гі МБ
Б що 5 жо Хе МЕЛЬ ря куди Мей р ж Ух ради Хо ви М Можу Пк тій Мох зд мЖНА МЕМ бах ІК БІ ФА БТ ЗАМ Маша їх ю Ж ик Беца ІНК СХ Фо бе. Дао, тив ЗК 11 зо Зм Ма кон но р и в КН НН о оо НН ЧК спон
САБО БІНВ СЕУ ЛІ МАМ сиМа Ма САМ БІС БІБ На мл дна лем на 18 іза рлк дж мент Фр ух ген не йошч буку щу жу джу их Моя. г руює тові ж мя мл ХОМ ЇМаМ ЗІуш боже КОМ МА Бр ПНІ ФіЮ ХХ Бе ХМ 1 їх 125 150
Темі ЗБ ця сдимі бум: іш ух Там би до т ниє чу гу ЖІ
Ме гін дам шим М КА с шим оса АБИ да жа Еко лу да ОКХ
Фаищц --д Ух хв їх ЗО МУ МО чн Фулянм храм Фляую пф и лужку бр я пен ри ти ке що их хх слу вхо ТБ Сім Бо Те осзу БЕ тво Ту Буз Тв Бу БЕЗ Віа Оу їв 175 ї75 кфрмєт ТУТ 1 їз усу Ууйіни Жїїхх шко Їх що хуя жи сю хі ках те С У вій ОКУ МхО Хв Бі ВА ОАЕ їж Бі тк пі іа жи о пру -и ек Зх 155 їх Мо змужеиу Міли ех ух СВ р остифую мб чт хай СОЯ од, «жа см жи ук для Мк (а, що та ТАХ ЗК Аква мк му т Ав лк о їхУу ХК МАЗОК їх Ж. чх ле за5
АЖ зим ОЗ пф ує УТ ли УЗ у ру гії хі буру ут узоу мує ті хи СУ у ую лу А су лу
Те сту Віз їн біу ові Теж бі йїд пах слу дід тих сбуу лій Чл в тр пу зовМу КИ кл фе Ухиих ау ті мули Зах їхїхУ щодо теля фу уки сп туї Щі слу ціх хе ЧИЙх Бі Бхо чик шу ла Ум Сйіж БО тм СБУ Бі жи ЗІ за сулюду Зх Дно
Мч «ТАМ пОАУ Се
АС силу «ІТ В о милу тилу пт МИМО «Лк АЛ Мч У ях Жрих пло ит ля Од лів тк щу Афа тво ЕКО ВЕ бі дів тезЕ пу ВКеа п ку Ал ії КЗ хх тік Уггі прут УЗ хі себе КУ хтів - - З що ут мли,
ТМжО ша фев ЖМЖ Ім ва ХМ спі уУу Вів аа Су шу пі вищ хів Кр
У т пи
КК ЖЕК НКУ пе ших Ал юю УВУ р яру Мтчу ха Ло тро хи Вшду Алі ті щі жо БІ Жаж щшжх ЩА ТПЕЖ ОКУ БО шеХ Аа ХхИиМАХ Мейо АБУ скАКУ МУЖА МФ тет рах туди «ВУХ Ки І ло лу; ах Ля сфе Хе Хомут 1 хи Міс їх их. бі Ж ж ту т хи дл ко т ЖЛУЄ Зм ХМК ТИ ФІ МАМИ БІМ: Об Буш жу Б гХ Ху АХ
ПО Зх КІМ пло жо Мою ме у ЖЖ кою Мк хх МИ су М м У міх водо Хо Мира хула Млхх вхуг Н сю зи Ум Ж У мих СМ дл ЩИХ БНх МОБ оздМЕ КУ УК су БЕ Н м Зх т, тут Н
КБ Ал «А ЯМ Н и йо ЖОих й дохо ле ди й сії Фрі лорі Ло Жан тод що сід :
Кухо ми ших ох щоки ЖОМУ УВУ УЖ ЖАКА Ам ОХ швЕ ХЕ АВ о У Н хаж пд Зк : ху. Тумби ЗУ хурму У: Зх тм бу дума. Жуля ХІІ с хг !
Бра Бра пеб дів ТБ ів вів їжи вій вхо гів Шев ВкоОо ба дій сві : ай ха щи :
ТЕ ЖАХ жде Н пе чо хи хо удій и КК що юю Коди лег ром се тд : їх. ділже бл ї3іш без; чл АУБ О Віз мпіз Зак бат и Ка шли МУ :
ЗІ ЕЙ ІА : пове ни и НН и ні НН в и Нв НН а Н
ЯШоАМошжууУ аж фе хна ха шжКАа Бах ж Аів вйвВ 5Іів дав дм Зо Лю : ати зт БЕ ! піч йорж ЖЖ Бл смзУ Му Ха лах Бл лі Кл ті буси кл тю я : ож аж Ж Бліж шежЖ ма м КУ ВІ сам вів Хі шко Уа пів й : чеац пк зу ка : тд зх ЗІ гу :
ІК Й М ПЛЕМ жЖЕМ : т щує Хм С ФУ Мод Моди сли А Ми Жак МК що кю хи Хе т х :
Ж ВА МК лов ме днях Ху Х вх Ж ЗАМ ХМК аш баб шк Кс ХА : зах 4 зах :
МАХ Ам мА Й хв зу жило Уудля хи УМА ЗІцл «лим З т ки Ск сх уч ох ох Н вій Ваш Ух Вл ЗУ вве Уві пет Зі м Ще лм Те а :
УНК худ дих Н ик и Жах : «дали ха : сеУ я дз : в м З : шу тло : ад ях ІЛ :
жи на их Масла шатах ен ч З
КАХ ою
Мук о бзаяшо Міо бе. божу сут сх ях Мббод Жохту Доу йо Щиект Мова: ха СР
Май оду НІШ дви дви Сук 5 їш ПІт Мі Ав Здобув ав дат ВЕОа іє: ї 5 М МЕ чи поки ЗИ жен шу Плуй бує й шт учту ах спри УЗ ей тс их
УФ. Чи Голо ж шо УВО ув АЖЯХ ЗЛЕТУ Ж МА ПХ Ма ХлИх дв Тих хх -хд чк о ее 30
Фу ху ха Фома вжи дуж Гож т що ху то ти Ву Сткуує Ток ве Ки цес бів осМе ем біУ Яка бе; Хі бчкоб во Сай два беє ев Бі Аїх дк «сх «Кк хх У 5
Ач їх Ма Аза Бе Кия Аз Бл Ву се що Моє Ват ояхс із щі 55 За В
Педро фо: дамо боки Спи. См ФМ ех о Жомеру Хот ду нн и НН НН
НА жа хЖИХ сша ІНВ ГИПХ ЗАТ жна Сена гАшИІ ЖНмА МЕ ТАЖ СЗЗ КеНІ ШКО ек хх -к я
КК ТТ пк їзки фуме ї3Зки. Мр ли де Уа Стожвуя Год КУ сут Мах му пит СК Ух
Бк бБає ВЕО За Сі» дви Бе педа пев бій бБза ЇТів 3 Шех Те тра
ШЕ ЖИ Ма
Фуршет. хи Кочт. Т пух Мумчих оду Ми дих У у Уж: їз о Боми Єлм: лУхУє Я
Ват їх бдиз БУ ОБеК сб дл Вит ддя ЗЛуих їм Ма їмо їмо ек їмо. дл чкЕ чякх
КЗ п Км таж утіх гіч ую Ями би Мій тими хі: тич ЖХВнн ЖЖ фун ек км СТ
Бемоса сл Бие Ту пек діа Бем діа рис Би Бора ре дес ам: КІФ
КН їх -д
МА мим Не
Ух дід хе Ко, ово тему; бриз ти бази: біда бом тиж ло р
Мей вро КХО Бі ОК пе ОО ім їм тамрР БО ім; ім ра а їм 335 35 ад бу Кк ки ЛЕТ пряних бух їду Є хх жк щу жає пляж тку ТИ Ж дя Ух рух
Хі ту чаА ЖК БЕО біжЖ Оу Бі За ХМК ОСЬУ Бе ТА ЗіУу Ба жмх их ей лов тп
ВУ шо МЛ а шу ше Міг У іо Дід пььх со фену пвх о МіУ Беа ву пі. Шо о ту ж їхАМ їж бу ФА СКОХ ік У ши УКХ сх ху ЖЕО СУТ Х сзУю БУХ те прие зи
МА ККУ МУ тях м хі пк М туз ббжуе У Ма тує г ших СУК Ух Жили пк пу ШІ Іа ти ЛУ ЕКО тМНЕ щіУ йла ТЕ міМм ко ТБ щу дБ ОТвЕ я ї гум ядУ ах АМ межи уже ЖК що вм ЩО о сімя са жо сен ую с жканих фун в ряжи проджя КЕ кряж
ЗУ ев пів бі Бл Тих ЗБ Ат Тл бі Бхо бТпе бі дав Тс бу хх ін зга ц
Ма МИ ам хх ло сп ж же ох ст блиух му «пло бічну УМ Фк мих (р лж я --ї й жу ЕКО дів ум шо ОТцЕ су же Яшх у дО ПУ бе ті п грек пз шАМ А МИ «лах тт М схем тки ЩУюи; бе у дм. бУкуєє УМ усу; бе ШТ ме то Ж:
ТА НАМ дл МЕ МУ БЕ УМ ДУ ЖК УЗ САМ апЮ ЖЖ ОшАМ МЕ МА збути ту че ххх аа че че Р пі Мт Мр Му сечу Му (Мах Ал м сим їх Ху лм й м Мих у лях їм ось КПЖ АЮ ЖЖ ОСИ Е За сем ХУ з пово балів жах ОЗІуУ я ск зх, кл Кеш КУ
Жлйуєт ТВі бЛедя МО лу тд ух те та Ух мово гу хх Мо тку т і ку ХА сб Бій ХЕ дм ев Ул сі Вів КАЄ бу Ві ТВ Сі ВІ
ТИ ма пла
ТІМ МІ У КН ді піс пл йіе іа лі ха дк Мі щі пок Фі фе смак Ум ді; каже хЕУу АкКУ ММ ам АК ШЕ КЖХА КЕ ОлЛаЮ ЖЕ Худ УМ ЗЕ гБХхжопІд
Я «Ул я кун ВИ шк
Що Тоащдк ЗАТ ол КН ших - Кох ме ах я о хи НН о. «Ук УА
Вів п маі Бади Віші: ї16 іа Дн ТЕЖ щі Ж жМжЖ сим цем шоу Ве зе ре пкт кс ХУ Зм шо КОХ МО тяжка Жхсз сбуюю ЖЕ Жхусия їі Фі хх лам кох ик их хх Мр сом СК шу ких
ТАЖ МЕ СХ їзіЛЬ тс МУ ХО Ж бю Ба паж аж Хм а Ха СУУЄ век зів ЗВ за тв) ім тами суфет ході жі, Воду ух вл их щі йо ум дим: су ЗК
Мах йо жа Ам ал шум Аею бух хз жа чаі дів жте ВО ТЕЖ ХУЄ ше ж хчк жо БУ 355 дим Сех св духу о Ще ЇХ; лдтМУх фо МІУ ли КТ о и "ак АФ ХЕ шеЖ М ваша ау Бе Бл»а леж пава ОК дк да ха ях пра Ж щ в
КО ОЛ АК поет сті рю їж ЛЕК ит ЩЖУЮ ж бл шк их мл му у пе х. яЖЖЖЬ МОЩІ УА СХ МА сим МА М ха МД Ха ім КВ Біа КО Бі зн зЕа за
Мі Фе ох сив ких сх ха гутух ста Сію хх бом Ж Жощі рю жених дощ ших ши СУПУ Іий ЗМ Жад АМС МУ Ма Ж СНІ Бо Ко СрМХ мул
Ки ня зп
ДЕ 375 ЗО щі Урсг іх Дій жі щі біс міх ки стру Мі бом їз Ж тло г ві БИпш ВІВ пів хі: Віа Хі СІ псж ТБ Аа щоит «С У МАША ОККО зи Зах сетущ ди
ЗУ ЖЕ за5 жи
ТІТлУ Ви т Шо Хі ХІІ й Жах Му хм лом Хот боиу Мою Ух юю
МКЛА ЖК МА ЕК УТА УЖ АВ їду ЕЕ УЮ ХВ ФК ЗВО ЖУК УВА УЖЕ й КУ ха лш БОжочАя 5 т НІ З саружу їхм у Ж ло Зоя ма: Вл злу Зв їй о Фу і мем ТЦ Віа вій бек Бхо хів вів ВІ базі Вів пі Бе ді йеж вів пу 5 Се
Ж ее вся сю Ж шо лиху З шо ІхАЮТ
ШЕ хв ВВЕ ОХ УВА ди теля жи Ме
АЛЕ АХ 13 Х ще З ях дОИЙ стр пховтрвух «же БТЛЮХ се зелені 1 ую сжруєтч ша Му ВН ЕМВ стук, Дер «арх хлА
Б 20 СХ дж: Жусу Чу аж усу т, іо Уже Мао вн: Ло нах Що зу хіх Міг
Мей ес; Виє Зх дес те Бе бер ме рі бі Би Біб Бо ді Кіа з щ тр че ї х 15 п
ФУ че Тошту КТ УЄ Мет доки нок щі Мжи кер жЖожеєу Бл сміє су бичом сб -ка вка Са Же дже Ба) їх і Ух Ав дже де ста бою Бжва щен, сиру т КУ
ХОМ дО М
Яку» тт У Ма лів дих ПЛ; їм щі ліс тек біз йо з іє шау
Та хо КБиФО КЕме А УЖЕ ХЕ де АКТАХ а ММК ша КО ло лу вх
Ж ха 5 тал ех спи тна пи їме Хдаї бек р Тл (ті їв дит То сх Тр
Фе БЕ СбИлЖ хнЗ ЩОох СУув о МшІі уувоАУ Був оскж Без Зх ву им Ів
В ТУ о они ни Ні ло «мих сб кюху бхкних букету й утри КУ хи Ум йіхяуї що хлтихче Ж бу ща ляще Бей о ВеЄ Су бу ЕВ оОсСуш ТВ ІМ ЗВУ тов Св ше від
ВЕ ТО та що
ФУМих тою бірру ХО бовшилю хи ом сСтпиче Стих бничу шк ливу що «ЛИ кати бот
ЕН се сджах Ма Кдих З ММ АЩІ Б и КЖХИЗ Бе мі дюхЗ ЗМО Ж ЕК пк 4 пк я ЗО МТУ
Ж алу о Її о сгУЄ "Ух Зх УЗ хх та є жа Ух іс (с я воша ті пон ок нь я пек іш іа Бези ВІш хі: Бта сі Віа Вів вла Хі хіФ осі ВЕ 18 їй тт тк вк МОЗ Ам хі вк спожи жи: Мам т кт:
Ми осАМ КУ Би меКосую ау
ТХ5 су й «жа ха
Учах ді в Ко МА ща ши сети «Ві БІЛОК шк ля ск 1 сви зум «иа Васі сек хв. «о» ЗХ жлюге о бйнох й М лютує дану Дамо хх бу (у дать си Пт Махть Єолу ФІ
Ме різ Аз Уві щех Аа АБ Бяо др ів вм о пех жи АЮ мед ХА
Її В ЕКЗ. М при пек, же ДЯ ше балу ст туя сля 11 чу туї що ту гла ту щу бух піз жує Тух Ні шЗЕ піз ІБ Сів ніІБ Іа ВІ ОЗ шІюЮ ОСІБ Аіа Ху буй же ях
З «З Іа гену их хх жо МУ УМ дя их Му щу ЗЖ жом Жди жоуиєт Мф блю й хку лом аа ме без по пив пав пу жчев УВО же Був був їх щу АЕл. у 33 ац -З ей що тихих 2 и и но НН КО на ьо
СУ ЗІ пух Був муш Бех ТВ Хі Му іш бує 3 дя зо 55 о сто ук «им КжУ «МІ БЕ лах жи «шо М ОБІЛОКЕ хх гіди й різ сок «чен МІХ ШОК ЕНІУХ ко пн пр, хе АОІХ кодііз мч хг ж міх ут ФТх йо ід кру й ех Пучу де іль бом цес; жнжЖ ХВ ле св Ме; шле Ав Уа! ех АВЛЮ АНА ме А АТ СКМ 4 х їв 75
ХМ вк в АЛЬ
Фу мує ж том ТУТ УЄ 1 У пз токужи 2 жару Тата 31 ст НА піші шиш ТУЖ АБО ЕВ ОжМй пай ОТКЮ ТуХ Кл ОМя Сам осів Св МІЖ Сам від пу тік, зи
В рен ОМ мех уж г В ж сх Ж р МИЛЕ: Єр ду Ж рр милі см ех нт 1 жи сеТетпоішмв сла па Ух ЗІ БА ов Бе ок см іх ЗМУ БбЗз Удало му зе 45 де:
З ж б т фах бю Дах сну г дви бок т дам шлруєЄ Сб Уа г Єт1 о хе жд Ммуд зжлу СЮ ЛЕНА Са ма Му ому му м МС баб сте пав Кут ща БЕ що
ХХ кт ту кА ух
ВЕ поз ННЯ
УА КУ
«жк кА ВХ
ВИМ ПОЛО В ши, мелісу жд МСА АВЕ МА лиВИЬЕ нет Усе ва Оки КЗ духо Му зубра уйєу Мах хи й ху чут Товжше су сум Той хати Хе Хр
Ме Зах йка Ту ВВ: ВО бе сій давж Був БМ: Бах Був БЕЗ Су ла ї 5 То хх те Фесжж дрхчи Ж -х хи тла дики Ж чан ди суша цУку (що зх
КО дес о шиЕЖ Ада са вищ хі вхо дво тиж Ехо меж а КЖФ Ж ЛЕ хо рооу ЗИ тиж хіх їі стдих кт нує б щу Ви тих іде хх дющух їду бю то цеУЕ МАВ МАЮ Сти ДЕС ЦЕ ре вх Іл їі же ха ВВБЮ їоЮМщЬ ХВЄ ОБУ
Ех Ки У ту сте ню Ту дози іже: МУ Що доме бехи ха» Тент ХЛ хи Дому т су 2 дух
Хі хо МАХ 1хуЖю Мей; КОЛИ Ме АТ ЖЕ хНЖж БЕ ХУ мл АЖ Ом ма
ТУ СУА И тая гл ах Др Ме бло ва башро томі; Фу тд ЖОмом то гум Шрек тд дв твна Ла ДЕ ОСББ єна АЖ ХЖНА ХеВАа ЕХ мув о шунх ЛОВ пор ех МН О Аве «5 та зе во лу що пихи сих То тем що хлор лю теж що М да шу У Ж Ту
За м ММ ОЇЗаЖ їж Буш екв ут МУ Зими Блек ха хащі Буш пи Ма п чі: З їх Чо ЗЕ бод св Стр іх Усе Же дах жи сумо жахи и до ши Ло лих То жа сх ра Кена Ху лЕ ЖЖ ТМХ КТ маї пов Жех й май тн Ті досту ай жа м не КОМОЮ.
Таж птодур Ж ка «тт опт 3 ши думу. бли Тип бом ши Ж 1 бе туш ТМ пе бій пев 012 Вни за Хі Би УЖ зе і Ба ЕФ ОУКЄ Бу Гм бКЕ «в я ястк
М МЕМ МК: дожчея Стр Во їни би мож фонд ДУ в ФМ ори тоатах Же тб МХіфійє дл іх дос пів во вс су Бех їси ХМ ба їаенйх Бебі МУЗ Ж ші Ах ла
Ка ря за
Ам дО сю сажі йно маля ж Ж їжа щоажя сЖахат КО о сухо ЗХізе СР п» ут т ТУ Ухмух Че ем М жвЕ Бі бо ах дай Бек 5 дж ББЕ їів шу бух Бо ВЕ з а я чив з
МАУ МУ ай КІ и Іхміу Мф КУ Іюшх Улає грн думу Кри ли Фбузх жі Ки З оотру ит піу рко їв Оїу вх тв іу вк отих фу рю) дів с1у вія ТБ пу
ІБ іо ря пз рркя ки ку лу тіла хм їх тт о туют. Ух сті хи су с КТ жи 12 іа Тс бі БкФ ста сію УВІ «(ій сію вх АТїа слі бів бує біт від зи їх: ій тях ЛОКК, 185
Фреш Бу піз Бішж Уві бра біу ко дів і Ба тик пі Мій ТвЕ «ти ЗУ зЗаАц
М хи Кн
ТЕ яю деК Силу пак лох У кис НО на о я ро и хом смію ек уж ЕКО бал ошую лам ут бу вро вза су дов жах Зі Ми Ха ЗМУ аж пк зл ее ХО БУ рус їм пі Ві і мім уз Жій щі Мора бу те ЖІ тм (лях Й ке Пи су вав пи шжаУ хо іш Іі Аа тмВЕ пау йлюай тВж жу шко и 3 жа Я пити ВМТ Кл шу ж Ме ко зних Св оо Мет Ж мо Мф гул дя Мо хо М ЖУК хуя хх тів ої-Ж жо бл обОЖж Б пав Зі Бі СК Бі вів вк обі Бхо ЗУ зах За зу кал БИ я гхляи Хм те т я вує ит хз пнях Ура и ан НН са уві сов бу во тих буду аа би см рі су ТВі ТЕХ Сім БКо ких че й
Ка ау та спін же бууи де й бе ке ймення що кій щі и їх уч Кл х Мах по пк осбажЖ рис Сех зу бі вхо Бі бі ді тТлК бі Бхо щи спі БКо 5 285 суку (Ах Ваш ба ФР -х лю оЯурує Фр іх Ре ФИТІУ (тех іх ФУтлу (тм фік А стій Саж вла тп бу й Час слу ЖК бум озжМУу Бал ОсАТ СД БЕ АХ о их здо йирях УТ ярує Ух ДО аю Мт ЛИ, готує гУутую хі ТІ ж п, хлов СУ Ух
ЩА АХА ПВХ жу дАВОІЗЖ жу жа мох ААУ ДАМ ОМА шо Та ЛАВ шу зп тяж зак з
Мх о Зх зай ладом із, А см ГУуїю вих ФСУ сх хи хін гл зи жити СИХ ФУрая й
Аза ти іу ДОВ ОТвХ фіУ З у Ам че сом ау што Тех Ух дДіх
За Зо ЗІ ех: КУ сл щоку хо яки и и Ух ХЕ ких (1 чу ен Пи чу дм их УЮ тиж Зі хів біуУу сві Тв о сіУ БЕЗ Бе сім Бе пев су Без беж вра
ШЕ за5 вже ух їм що «піалу її спа дай йоду СТ шу ра фу пед 13 їж
ШК УВІ Мі о тТвхХ Зі уві мал тих дей вд зво ка піз тик Май їси
З ЗИ ЗЕ мл УЮ ше ше ГО БУК пут шу Ус Ух У шу що: ше пох сім ква Ана дБ Еїва Кіш Бін ДВА лих А ід Хі два Уві АВ ам пає тут яке ва
Ух вже во каже Би Бех сіє ХйЕ вве о їТлжЖ УЗ тА Ух ХА ява діа СКУ ХЛ СЕ Е тухін здох зей хУг г і: ле: їн
З З а 4099 жалю Кк х. штигаю схе мує СКЛ сю пику МИ мин АТХ пу А и а и а Бу ек жах ех де Ве пах ших лі юю ау був вв же сна дтут й зх вату вся я сом їх хлюи жк: дм МТ сах их и Мох я С що му г у Ім Кум
Сіу де ЗЕУ ХІє (Ук іє жи СУ Бі ЧА Бі ЖБе Же ко виб обех доку як щ ду аж хо алу
Фу фрштю жодяту Т.В кю дмтв Ж Жокшіх мале СДН У СТА яю С сруу іх ЛО Жах йпеЖ Ом осел А Де олЬВХ ха лож КЕ СГБХ лВБХ ло п СгЖ АшНХ ик де х
БУЄ 245 145 тренує Со о м юю мо слоуєт Ст ту уручну ує СИМ,хУ стбоаціт дає ШТ: ого чу
ХХ г су їмо ІІ хе о ЗжХ Ух сб ЖЖ гОХ АнНх АД ОбАЯА сАЗВОСКТХ
МОЖІТУ вам ЗК длюЙ ща о
КК ня Мом пийчи лак дуту Пак Мамо СІ дич тіки р хг же Хан зх о ЕКО мав шик сем ОМНЬ СПЕ ЕХ со сх МЕНА ОХ жа У лІЛУ я ак тут де п
ДЕ ІТ ЧТ ха пл лад ще хз «ГОМ нях мий. суч ие кут хання Уж
Кен КАХ код ае я хи Ж хх фтуохтю й
АЛЕ Х папа цав схе «ІН Ва
У ке ож же Вожиимо й С фу Мао п Же ок Ж г йо А тля мех см Мей був лет су ма Стих ЖИХ о бхнх Те сх М ТВО УЮ МЕНА т з і чк х З Мо Ах
Фр жи Жора тових ЗОМ «хомут у М рує Ук А гм ню хід За дех те Шик це) Уві дів сСув ку У ТЕХ Тв сім о Буз ЖЖ Уві ліз па тії ЕН
У хх У
Жохуже (жлау йх я бохж МК -ооможхх Мцяде Жохуже МАЛ ож М ехо Жук Межа Ж холу Ул
Му с-м о МУ ЗА му вед Од смт сом Бе Ж гМБЩ І Ну зве за де
ТЕ З хо зух вія чуми У БИ З ях ж я до їх ме Тим Уч бе у їх пи
Тхр Тжшх БІВ ТБ зів БіУу Бай Ме Був діа їсва ук жує 05 бі Кук
ЗЕ о
Хот рем фут виь Хот МК Коти йозмух Ся її толь й бхем ід ма У:
ЖІ Кі ду бхіл Бех Му бек ЗВ жа Маї Хе ІВ Му МУ ЖНХ ЗХ до те чик цип сх У ме ие мн чн ье З шо 1557 сот Жди Коса пАстхжу ую ПЗ их то йоштх дош
Бук буш Бхо дів їі УдДі Бей Аво Без Ви о бХо ЖНЕ Уа Беб Аве дав пе За 5 по У З -
Миже Меч ЩЕ ще фату Жере о сую ХА їжу МУНах тк бхму (тлу УК тгУ ит ТУ: ех мух Вів Пій діз Ме дех ді був ТНЕУ Був су бук ТКУ Х
Зх ак ат
Зп ї0У Ка том би пу ля Ум З, даху гл лу з ух ех М тк 03 гу му кю чо» БЕ ОККЮ Хі ВУ Сук о ваа Сад ВА САМ ва Ії Вис САМ 115 кВ Ти що тофу йодя жде Ул Же сраку им ах Та сМдуюк бом Яр лу Ху йохую ТЛх ху і жі Вт Км Бепа БУВ. ТУх ж М ек му сом Маї Аще Її Ух кчк 155 А
Гу я «5. «ФЛедлих о юс СНИ зав т ИЙ є бука. усіх 14 ся ьо туги їйг?Бих
Ку Кіш Мет ел ода жа ЖЖ Аа Сай їжа вве ВА З Та Буш А їх 138 Уа БІ жов ух, дк; ХР її що жк: (УЗ ях ЕЛ що пюре сблкцо УВУ їжу ле боку това
ПеЗз о сми пт М ім МіЗ БУОо іі хів ЖК БУВ о ЇУМЬ ла Хі Бе 1 «ех зх 4кк
Ко КУ ХУ о тугих Іще. жд г в С тих ТІ те ве ши. ША так вон самку ів за шко суд сша жа Сплу буд сам суд вич ака пай оШеМм УЗ хх 185 Ма жу Пе ляже До жо уМ ЕІ тр Шихух у пить Х-х До Хоми. сим. Мих ТЕЖ: хм чх БВ ос ха без ле Жде бах За ЗшВ Ме сах сш КК пд хгхїх Бе
А шим ее стін уж хи щем їх тд дару ях сту косих чиє лю СЗТ тк худ ЖІ
Тле ЗІ Биш лев су шт Беж Увь спУуБ Бр Одхч вла оса Ві Зах АХ ти зл лях
ЯНВ я АХ
Фу бах Тож ХО лам ХУ ТЛ юю лк точи. ЛЗххо ру Ст гу, жу хх фр уки,
Зв: За Був Зіш (Зм пд бу ла Буш блю хім ЖлЕ ств; БУ ЗТ ВЖИ йх5 ша ве їв ді лим і лх дшеу пбзету ИРіат ура Млщо Жах пхум йо При печу Ша тод тд
Меп ЖЕ су схжиа СКУа їх Яну АЮ МЕНА БУХ АшИЕ ТУХ АЮ ЖОВ муж МУЗ
Зах скіух ря ша ШУ а гу ще Зо тах пух ті хв ні 1 ст ша г їз Сх ПЕ ше йо Вів сій цу Бо ПУБ Ххіє дх Ні БО Би Па Був пе РЕ зАе дп та еле ХМ кА по пп т х хви ких Му хУтЕн,
Ки яп я рт тек «их ялд «й йхМ БІЛОК яку Філ 5 зо таж ж
ДЯ БВевезідбиБ сехевв кт хом «мм Ех жд їх їх чи году да їх чиУ хім чт гм ди ун
Ме Су був Був Сжа Шцжв цем о Сбже Бк Сава ва бе їм УБеОхВж аа ї ц їх їх
Ї 5. 19 хх ра ки чен НН дл ших фл ск ши йо Ам лях ді із Маї Хей пек ШЕ лих Ко Дів Короб ЗПХУу Мав АЗІЯ Ух лі як -5 хм
Б Й У прах бух ТУ ря уже дух Бомх їхми, ТЛ щу пк Щек ТМ ях на би, ЇХ сь Хвж БО Бе пе поеж і Бо хі дзвосім ді Без іш рхш ШО т ТУ. БОБ п ж п геї жи Комі КЗ що 3 що ти гли і дан у хек гл де см шу піз дхвБ пе дія ія віз БебЗ му б ОАЮдД СУ чай Же дию дм Вех дк й: ми 5 ве
Ба тд би дл до а; сива шу їв й доля іх бло мхею а сл м хів Хек с Дів оса ТВ дех уз Вів чай сил їжа ТтУК очі А ж нд -е -к пох ве т ва жо дій вдо фюи ї и дюх фах ди я бі гихм біах сії щує Щи гл
БУ Був се із дви обу СбіУ і бра бі ім ТЕ СОУ дву Бек ем пе за з
ШО о ие «щен пра уж Око п Сєуух чим УМЩщі бе бей хг їх дл хі що ба МщЕ
Кн схе МО Аз Бах Фа ХВ лАхжМО МУ ЗУМ МИ ОшеуВ сУАЮ Фа Мк Ме ду тУмк до шАНИ Ам АМО злу й жу пох па ля Сх кое Ще іх же не «Чаї їх ге вкхщ ім ви бій с іа ЗіБ Од хо сій ув су Бу УВУ дав осКУу їх ста Зк
МАЛ Ми ТОЙ
Фа па що й хм ох: Же. сьо лИНьи її гоп. Коня Ж тохжь ХЕ, ї деку Мр піп ку хів із Хай) Да Бо схе ув їм) ЕХ би ШУВ МЖА БЖжО ЖДЕ зв т х зи жи ЕХ АЖ сли ую ку то АННОЮ я 1. беж ох Пе 1 Ек у тую У тик тп йщеау діа Буд СІМ си сім ЕЕ два осіУ діа УзУ Акща о бжа дВю МУ хх тк з ж зх а ВІХИ ІК лу жЕул о столуИирх АТО т одд тод ЛА силу ленах лому йо сем хе і па Два СЛ
Мак меч. Мало слу са Май ма шале Зах ба жив був Нав о дев зем дю хх шт МТА йоуужу фер фа Уха; 3 б ВУрУЮ ба ух Бихш Щек: Миші обіезу домию 231: ру дв дід ослуц БО Соу теж ВБЗЕ тує ж ПуЖш др Бе зви ду оо пла чол Зх з мя ле ож
«бе УТ Ух дує Дух ох Ши їх пу т тр ХУкни би То ту дютуюх ЕІ хе
ТУ бі Суд МЕС бли Бе СіУ зе сл бо БФ ОУМйж а Бра дою Поу гу ит за 1535 ХУ КЗ фіз бл жк Мізує еф їМрка Тож Мі слу слух тілу; а: (у ум ху Й аж Бук хіє вах ме Ки МуБ їі жу УЖ МО СоОб ба шежЖ ЗАшЖ СбіХ тій тк тд
АЮ ке. ШІ "бики Ук Тилеює Ей «ж ля МВрУС ЖІ сМіух Уж; см Хом СМуєає ЗІхМ нею ех захи ЖжуУх лих аа Зще ж жКХ ад жи м сжЖе Кока ща мал БЕЗ о хю пух п тк се Ау
ХУ хай МОЖ ТМ ха з щих люуу данух сту А 1 Же Ж ла ко Те М даму м їх їУуд діа же дДвротуУух Сі Іа йвр дів су ТЕ ІМ Кіз др дк пух свт текду лжц хи ОМ хОЛІЙ слу буму оті 714» ЗУуту Тл дове дм Мало їли іі дід тд ли дід дл пу МЕЖ дені ЗО ШІ Був АшВ зн ЩА Му ба Ма з ук ема г
БЕН Ашмл че ся М Фото сут тах цу їд СЯ Же ФМ пи ім беж де щім бе
Уа Ма мта «СЧАМ Ге АБи певи ла двор ме аю осів Тух дробів Ту стек "б крат
ХУ хм Кая
Хату бат Же їм й 2 аю дамо Тлум сам і Же дже те тю тів дв
ЖЕ БОМ за Ох Вал су ЕМ оМУВ Туш ЗБОЇ АШЕ Хм ж В АТО «хори. «кдук Ул
КБУ «У ах 11 ж Ум: Ат ил дж діа; ху Ли що лк ах тя щу жахи тю хх
Ніш фімзи ей Зв А МлЛЕБ ВІ ам МжА САМ ам хМАЮ БЕа см АЖ АХ жа ЗІ З
Зою тем їм б дод ХІІ тлі сб муку Мі Жмж Хіруєю Б там пуу бла іа жа АЮ АБО дід МіФ ТкрошахК Нід дк ше Шув шещошАм ХЕ ва - В ху е га і: з Е зх 33 дз се МехУ МУ Аля Улас філо ЇМ) їму Ши о крує У пу амур ДЯ їв Бе Тук лів її лврозі ЖикЕ Сув Бшк Бех Заї Бех Ав) ЖЕ» обіу ит зле зи км ЗА Ах
Еллен лих ее и Ша Ше Чем Пр ду ФИМах ему Уряд Тилтяю ДМ їуУу пуд Мет хв МАМ ОУЖХ Ак да Бух о ЗГЖЖ БА А шжУММ ЛА ШІ бхлУу Ал вза Зк ЗЕ кал бущої о сур хе діб о лу сучки КА г: ше Тут КА тс їх ту щу
Ух МУХА КІМ Ві пів (ЦИ ОТ т шуУ мав впр шеВМ КМУ ИЗМО КАК вкр
Ії: р І о о що й кі у ож пурує Ж им сих Кт вл МЕ и. Жееєиу йду їх (о жим Мч піч одух Зевоах мук Тух Бех скж шому жу Шо Ба Маї аб Бек тив зх пов здЕ ри 355 зва з МОБ
Фуує У лшк їафуУуЄ ощшеує Їх їла шШуує бек Ва 021 зи тим 1 1 хи МК ших Хі Ме Бе ФУ С1Уу Бої Ткв вів ФУ це їі зі Ту КВЕСТ ап 4 35 ау Зо ЗА сячист МИд ле йбиж Жафчез их Сомсюю Ж хо ум У ой: Мч су ЖХхрусу ої У схмитх жд ВК виз жих ЗХ жтТва сх КЖа см осв МУуБ о ЖеЕО ЖКНя РИБ ХАКІ ЗВхуже ЕЛЕ МЖМІ
За пл й айви под У вдлимо ли вим опе Чо гемо «(13 хр вах бен ду їлсщо би бує ев Фіу Ав отТхр ія дви її ех Сі Усі Аврв отут БЮ Пух бешо дех де ху їд
Мая Бе плюй
Уже Мк то ка як и ру пцеремо п ічнмо їхруї бом Ж и Щи Члую Мк о Тома сію
Буш схую доб» їхіу Ма. АВ ЯМ ЖУК МА фмЩЮ їмо пшхосиах о уДщкЕ МБО леХ зо ях «во
Тодхро Щаєнт думу ФА ж ЩІ дричнж ЗІ пом Том їХн.иу их Блюм оп біл Тлки
Буш ЗХ КБХОЇ Са ха МАХ вк о Уву вай їі КХЄ дО БУ вазу хо мух зи нн дд я ря ЛИ ати ЖИ ше Ж КИ ших хх бвш хи Тихо тод Фмяиту Мото сою Чаї чищо кг ви тів ста пе іа бБш ЗУ Буш Бут БВдЖЕа Тук бук пах дих був ЗІ
Я ДК сїУц
Се йо ТИ бо Жан о Ж ше бул сфе Мом Б уї сф Жусиу ТК сомхз даму Бош пк й
Бах б ХА Б жила их Бей опа о Жмх ВшОа Мя Її ЕЦа ДВ т ОАЖКА ГУБ ОМЖЕЛХ
Зоо ох вів др тло вот Во тощо их Вшлу хо тТли дл шкі йо Урі божих грі Ал дав озув Аж Аж МУ о жтьа Дер Гук був Лі Ба тех с ба слів дід ії ВД ка хх о сх їх Ти пбслахє ЗИ стих Лю З-е віх я ум ж хе Тл ву тує дню Бпе іа дае о Уві Жуж іа їі пі Бі ав Віу БЦ Бук ав ккд пий
У БВ За буму лет Ср ЕУ йо дит Ме ах Ж бе йамту Ж лу хом сяк суїт й, лм
Тл смт чле да ААУ МЕ обу бю Хв да ж ЗОЗ ку йшМУ ДАХ ОЛАлЮ
Я сг ес кита кВ пЩщО ПЛ ЕМ суху рр пе айви Їде учня З ду тд ух бах Ми Тим ШМухез їх бе
Те тп аввБобЕ бСжа Тхв УВУ Аз мух щат тує дзвінка пе під Бо зда ТЕ хв бот ючи Мк Тем Жуки Тому ля их і ву тн ах домах СТВ АТ т
Му щу БуБ Му ща Му Кем сл кХиВ ОВ ТУко сви жк А шо 2.
УК 5 УщИ сло Кто б тд Мізе его Кіщ!їроїимі Бош дих Кіа жі тим ке худ ги уз Аа тк Бух ПАМ БМОе Ді івмі БЮ два діа дів їсмР смЖ гу АВ за В ви г Меч жжело єг у о й Х соте Ж сил ж т сі Дт бу СМТ с У ув таі аз Бпе бек Аве бе йла білу Пий Жез да Мек лох шо УМ ВИЗ
Же Жук жу Жфхеу ТМЇ є Хтяю деже Аошіка МИ ку ЖИМ ех МУ сАОССМ их тик Ти В и из Му зму вп отих шал о шех Аж су Є зма і жд ха їжа БІВ АВ
БЖ ВО ЕВ В нн ІН у ХНА НН жк ен ри тус ких Бе Пежо Фо То ро ж г то й
ЖХ СгЖХ Соя ЇхАМ ЖЕО АС АБ ОСУМХ АХ жу БІ лДЕрОЛНУ МА мА ОХ
Зк ді клук
У НУ ух то іш ким піле ркх Чаї рр вам ЖИ 3 Ще сді ві жу бує дій их мам МК у КХщю жк Кк МІЖК ЖК У Іжа ЖИ МА ЗІАМ ВАК Ох жу ЖАЛЬ
Зак шо шШІм лох й ех жу МОУ По са пед и т ви ах зийтНх уж до печу кг ЖІ
Ід Осн ЗХ жиє сгИаХ сш бЖИХ ТО жало їхму ФА БМ о жтих ухМж їх Ку
ЯлХ «Кг «Ех сб фс ЗИ 2 хущ ху щу Р о дя (1, 1 у хи чі вро тих
Ківшжфв о вТИ оса У ЧА Уві йно шве о мів Ехо сій вла Хіе Зв у ГИ бе ее ЗБ ван сову ля Ж: Жхуєтих Пі ТУ СК чут Ум. Мкдж те СЯ дочит Тих УЖ ух т хо КТ д зу.
Авт фу піл о Кто бвж МА Був Бек Бек че о Вгу Тук ШМО Її Дів йо бах ЗІ тав р недо) ми НУ їшУ си у ШЛюриж ож ІМ чн о о НІ НН и в НН ха ій ВНУ ЩшеХ спе Авр осів тТОх бко АлА БвКе жа Уа АВА Же Же тик ту та
ТЕ ею ау они о ансни шин НН НКЯН та джуєут ТЧУХ хх УМ Мох ну ІМіх кі
ХАЖ о ВХщ пІіЖ Хі БДБовдАЮ ХУ о МУ сш і Буш рі хх обі Буд БЕН тай 45 та пох безуу ую б Лі лх ббхую Ж хх Фран ЗІ Ж ту В Мі пт и лав пе шежх судо мамо БУХ МАВ ДВА мнЖж Ууєь МАаФ тКО дер олоК шу ЛК та ЩО те таж із фо тлхшо вимі хх пад Тем бу Мб Зі ж бр біду мо гу цужш їм Ехо Буш їх СУ ім о Су КАЛЖО ЗМО ж да ЇХ їх ть їі "тд тк п
ГЕ я З жкх Зо ух що й хо Зх ге Жожч Мршщо йоюих
ВдІ муз їшжЖ йо заю з УА ЕВ ши Мі ЗЕ
ЗЕ зо тв «ших їх «ФІж» За ера сип
АЖ Ігцеує я 0 МАТИ, ел хо ж які ши А 0 ЖшЕМИХ БА пек сит. ле «ех 175 ее сах при хтя йугу Шх бо жу й ба бку щі (іо Бі де гло мес сам сх дів вх вна оттХ вки веОо ТЕ тТхе сві спла ві Ан Се
Я 5 18 15 пл лом словм сут бо бозат. дяді смію Мод СТ ку У чек Хі Ж оз ку УХку ух
Вихж МУ Ха Ху ТМ ат ща СЕ БО ді МуБ її БлГЗ хів Еш ЗеК ху же ЗВ ва Ко вже хе г га р шим Ов Кк тд си й Ав ор (и пліт дероуь А тає Ма Мав се ти ув шу Лех лов оТУх КУ МУЗ АЮ
У «ИЙ У тре ЩА їжи їж дл но Ул тд жо томі: Кр що су що чу щук тим бук маї Б УЖ Аз був Її ді Беб бБіч Бі ці Віз ЧаУ дтФ цех и и щи
Те ЯК УК
З ху Зо дж га дог зо там Ма ги чн ЕН іа зак вів БЕе пев о ваю сій Віа во Уві їеб вк вх іа зу ХЕ м чі дж п т Бо що стру Ж у они чн ем ння -їх їздтучо ру їм хну бич ту Сн Ку
ВХ вій Буре пі бор о ЧУкі вен ім БІО Беж рхЗ Бжо Ви Б3ю ХЛ ви а ЧИ шк їхщл о ла я їла дну щиу; (Ар щі о там сіре дяді бу ба отож р ся
УВУ вів Бій с дви Бу БА Зієб іх Хлж ЖдУ КДБ осо Був вав осххЮ
Уо ОЗ 1 хг дат У Ж хо їх бе жо Мет шу гОТхк Ши о ШШую Зако Мше сл тк
Та Ав оса АВ дме св сані ТЖК ОЛЕНІ дум Жех ех лих МЕс ду оСгуХх в ли зх,
ААУ жи Кк чі Хіт нах Мах Бмух ШМурум (хе фу (хе жк Ті 1 Ае Хі дж (31 Ж
ХА ЗАЛИ ВХ Ю БФ ЛЮ дв КМ КВЗУ кА ЖК да ду аж м бах мо
Зх т ц Ка о 135 1-3 же тету ба тот (тЛю ЖИчую Та бо ще т тілах ттїх А до жу Жду тоді
Мув ом ме БуБ о їм кИжЖ щанзІ СУБ оспееЖ Кеі хм саму бів ви ошме пев ї55 ї55 КО Аа
Ті тою тт ут що жк тей ЩА їхню А суку КЗ Хе сп хащі ФА аа їжи даль шу М ТУЮ ТОЖ йЯхЕ пе ду тп Ав дво ша М шкц вяУ 5 А мичу сдуюу сизим бобу» щоку бак б пзиє шт Мпа у» Таж КЕ: Ж ст У ежк Може
ХЕ ах СКУ Ель мдЕ пут пл мух ем ЗХ БУМ ТАМ о діє беб дшЕ
Ел тих щи м МА Аве толку. Ту хх тУТьЮ шкі ГА ти суху 03 ма шШМіх хг ІЗ ав р Ки сег
Тв ми мМтш о сліз Бе оду Заі во вкОМ Штв ЕБа УМ М СКНеЄ вій БА км лин ть
ДМ МУ хі дико до що мн жі дних же сно гак ча чує жо дош йог дже дех дій дів стчзх Бе) ажа Бе Мі ощі же чмх Ве зЕИ дів Уві А
Б ре ре хм А шк чок мл скиду ЛЮ фуд схе «МЛК Жогуд Ми Ср, сукно хе МИ кон АННИ їе пу жів вла Мас бух АЖ Где3 щеХ Кб ех шо м ІЗ Аж Бе уую ти лютує Б х ва В ях в ур сс оо р в ОН Ку тує Му Фу Тло доб тд шва їжа БК БТ жа їн ША бе Ах жна шех шей Мій Таж м Ук
КО БА «УМХ кл що ФІЖй ще ско тля їх У жо маш т глуху хи ж до Жду тях: Щкуї Дуо ді нів хі ПУБ ШО Уві іє пуф Сім йвроОбУХ іє БежЖ буУЖ А АХ
ХОМ дих КМ
Уутперу слхжу двух Мі бом смію «віру кі тиж що аг сміє тина Хо скл Ух ткакожУх вка ших шШУув'Их ба паб же хів й сих Мало осв аж му
БІВ Ей ХУ ху (лк ТТ бек т дк кт гм Та Аля ШЕ плн лящ фдзУує Хщд тУух дів давфБоОспІУ ТХв Мега вх дКа пем шій СіУу ЕБе сій ту Мей бва «злу пу п «ким я Ба де б тло джем МІ бек лу Ми от дк ХпУТ спрее Мк сдозжь 0 ЗХ зва СУ Був хм Уа рус дл УДО бЗлу БЕ КА ЩИХ Ме ом па БЕ
ЗУ З 3 зи
ЗТ х Ах фаму Фей б гу ха ку Фоми АЛ чя Ум Ж хижі Має ба
Ме щі Кі беои бхо Су шій ек Еко Тех Шу ТИХ Пуз Зах стих С
Бе 539 335
ЗМ оду Мак йдичих ФК Мк хуя ЕМО бю сли С шу жд йо тю Фе КА ех т р
АЖ УМ КИ ХК ТОЖ Ж лях Куй КВ КОХ хви СУК жала А Ж НІю ТКА
Зо ЗА Зо хіти сив пух У У, ша Ху я ти що Уед жу СБ КУ пАчи Уату речух
ХУ Ох СХ ТВ Хі дви бух МИ ХА Кі КВ Ми Хе пвжж Бе вк чук зд «жк йТЙ шує ХВ хе сп ке з думою У шле КА яи пд хм я ж у ХІМ ж Мен ува ЕКО АК КІВ Еїца хіФ АХ щ зни оту МУшО хх ста ам Ува Ха Й
ЗчУд пк ха шо ке; ау бік тофу ЖолуУє Би УТ
ТЕЖ їм ви ДЕ КЕ
ХА
ЗІ -43
ОК жк ел Зо «их А «Ки МІ ЛОХ «кій» Вастіхив ска саун чаї ав о де ко шиюу Жокеі Хуст уко фі дм ож См торсу йди М 0 жд сш Довж
Ме: вед пе Бук Жух ШУ ЗУ Аве ТОБх тТе ма ЗК мал АВО ХМшну Два з х че лк х М Іо 15 і хз Феміда хм і м з о бхмих МУ хів ту че п, із Заї Сез Кіз деп ЗАї був Сід Бе уз був дк і два двБ ЗИ
Же МУ Бе ді біз Вів Ме Ме із вів Мі Був діа дат Піж бук Бук Мів ре пи 45 ди ма У Б хв хг (і жа дід ож лід ідо га і Ар фл п фу долу БІТ таці вза жа 3 ша лав ЗВ дів дів тів св Дія тм ДАЄ АЖ НАМ сина с «5 йв
ХО З щу ре чи Лота юки СТ мок, ля БУША чт ель рон о КУ ду тю
Віз її віз Би: МАХ паю ОТ Ма Хе о. гшаєб МО їхМе хаосу Яке їВ та п ва їожіх ее но Ше раю т й бехуж бив ру ЩО Кік А ПУТ ави ув хо сіє цемо жає ем о суху ТУШ ЖЖ БОЗжЖ ТВі Діва вів Мія сп -ц Зп ду
ХУ зи 5 єї Уде Кі Мк іх хо баг зу бр «Мо ху ше ху КК не. зім ві іш ЮІЮ Ту Вр Уві Мясо Ме ТБЖ о ЧвА тут дош ше БО й
УТ ЛЕ, ель их «У хх сові ІТ іх тік вет 3115 жі хіх им й Тим й ТА їла» Вій іх ва СІ бі їіс вза Бім Хі діа два Ах Бе сій БУ Пущз Віа ІВ
МІ їх ки ох ФТІ ня жо рак ох ТУ Їх Див бар ЧО сх. ли Тс: Ух хх
ІЗ ів Маї муз дів йаю тах ббоОх Мек Зек вх їЗе Бішж пеб пілот зи 1т5 зях
Ка коту АК
З 11 Ух їх7 тю ща. їж. тож ух Ух ТОК жи ту ви ОК Микиту са ша Уві суд БКОо Ббе лема ЛО са лю Суд ко мес і бух че зак зх ча лет «али лу ЛУ АК их для ямі их дих ТЗ Енач Мжчиє ІТ1 що ярих сту Мр п ит Ух ще
Ми: Ам СЖИКА ХзЗАЛЮ АТ. ОМЕЦЕ ОСХКУШ ділом СКУЛ щит СКТУК ля БЮ сій хе де 2
ВЕ: ЕК; х75
Же. Фах юю ТТ Шошиих ЩІ Фа Хе Ме голи вуж ек Ук, УКЛ що дю щу був тп Ух ТИХ Зх Мей ока ах смак Бк клему БУВ міш Ма ЯМУ их «ак 4 що ке Ех ї8о ср хо тлу т тю їі же т ах т тую Єбахує СУ Бі ЖІ жи пли их
У ВАВ СУуж сам хм КМУ МішВ ла Ба Бус суми Ха мав шеж ех ам чуц «ТУ ро
ЖІ ФИ кт Ал м ерує Му стиля мух Жорух Дохту Му беихуМ (лавр бух Ме дж бок шк ла ау йех Ме оби ще ЗжЕ ба жк Бл боль ода Бех да БЕ ту у кл лу ем ее ха кт й ям СТ ду. РК СТВ бюл МІХ лоз б їни; їлувяи тла Ух тд щу їх ю чаї у тіж лу КА тую у МЕС тТжУ БкоОо ше Буш СІМ Та дБ ОНнІЮ тульк жит сухуку «буд
М хм ОЛИВ А жи МЕщО й ра токлія І дах ЖІ тує ууує гезух Тодтмх сЛрує їз Ус Моз йед Ус УВІ ех їі ШІ БО Ада щем мех ем Був ех Буш ба АХ ч-йЕ пк з ша ЯМ хі тую пе ше блузу бл що мл ту щур й (лях лежі бирю сбуєю сллхх Що пух
Ніш Хіє Буш Ніж Бі пцую Бую ди вБхщ се ДА ЗШ Жук сш ПАБ ХМК
ЗЕ пе СУТ.
КАК І со жив ою сн ую Миру ср ФІ: ож Шену я жи се шо ень НН НН он а и шК же ль тпаХУ Фу ад АОС БА мА І ув ХМ Ба бу І1ЖХ тктЕ Гео лЕДУКЕ ве У ех 1 пе, лік о счмує Ж жу г гм має Жду вих 1 ців Бі гамі Тл дів А зу тТУуХ ДЕЙ ВКЯ Сів Мем опеж яв Бу БУ Ніш іа аа Хі луг луки п
За у Іо до сть ду ЛИЖ йзею ЗЕ три ХЕ склам йти ос, хто іл поем ту дра Хоми
Зап осушж чаї вка Майї БЕЖ Мщ фе ау еф Мас уй МЕМ бу а їжну пух : як Ул
Зх ха 315 33 ку ко фехуї скщ дае мол КІ Хоюю дути дум ЗЛ Щх ТУ ух сок КУЛІ мл йес пед вво тв шЗЖ Му дДуа ет вже Увх БЗіїх УдА мух во обам У пжп ду -5к тю 1 є
З 13 135
Уж Ж тУ Ікеа МИ Ях Жомешю бл жу мок вч фу Мі спам СТ А що ж ця У р май Бім ух КУ був в ос за ої вв А Ак-щ мах св шк хе зо 345 ЗО му до М том; Ух тую ж ашю щожу пбжчх їх у ХХІ юю (ху ко Гол вк іш мМ Мам оїзшмі СІМ СЖМЖ Ха МА ХМЖ сі мА СКУ О Су ЖМАТ с ОБ
Ех чЕй -з щи
БУК я 25 фури фрмачо Ст ж їУу но Момут ду оплот оту ЖЖ: Луч бе ат щх сткдї пк хор ла вхо Бхщу мА хуй мую см дж Вт. їхілРЬ лю Сл Ма У «реч дл дже
КІЗ ТІ КЗ
Ж щи тою гофри ток ду
МА Боль хо іо БЖ ПуВ БА зя5 Уво ут ти сте аю юю ку чо «АСЮ МУ МОДА сл КК шт шлю шАММК
МТА Ту примі ами укуси ху «ший БОМ НУМО кв пил «фе КА
Ммосмемух доме дозу ут сих о ож ох: уже Мо: МшуУє Ум дожив дк таж
Меп Зак дат овші ВЕ бук ех ба ої фо бо КО вв Фа дек у ї ту Ще У стеж чо СУК тром ух А ет и ки сту ММ шодикя нм зе бевх ДІВ жи Дів ме Аве ово дб бе УВУ Олу Бкж отих їдщхі ЖЕО СБК - ех ах их А М т Сухе УУжи. ДУМчит Си Бур зи Сн г Ме ем ої хи ЗИ, ви би сви
Хі ве РО БОБ бля Бо реє Же сім Бхо Тих біУу Бо бис Мк тик пе як Я ап Б я пік вхо Тих бау Еко сто 3 БЕОо сти су БкО би зу яжшОа щВх у си 5 РКО
УМ ШО 5 юуюня Трі тУАи Мем ик: стиха» УМА мух люк Сх Щодує сх їх Ту ТАТУ «ЗЛ хи
Еко дик бі хо жк ім БХхюб тк осьм БЮ лик обі Хм ЖлАЖ бі КІ кщ пи ух НИ с ШУ ме КУ спри У и уми ру г ххх бує пл ри му фі тру у Кут хж жЕрвоу Су
Те обі бо Тпх сіУ БФ тп ку БЕб о тТви сліУ БК бло ШЕУ жкО Тих
ЗА за з5 дж би вк Ан о ШО пт я Тл х хх. Мих лю М ие б утуєю кю Си у тя беж юже ШК МУ БЕЖ САНИ УМ жу СКЛ СМмО ККД СЕ йхе ХЛ Осі пХо па тип «ла
А АХ АХ би фтіл Шу сьо ля пу ЛИФбру. Ск дя Фк иа ЦЮ МО Лімо ФЕЯ Хужту МИ
ТВ о шЖлу Бо тТвх ЗАУ шЖже тах щу АЖОе ТвВу пу ЖВБЕОТвх ум ва ВЕ ек прашх зчк на дя жк хх ких скуті ли ду бифує йучу бує т фу Ким ваш ми ГУБУХ ку шхО ТЕЖ шу вхо УВЕ плу ЖкКоОо ТВ ку Кк отв ша дю оБМНх У т3й зач зи 3 35 Ам стро сю жк мих п те учи хр хх их сах хи Б ен тає жк ЗІ вх жа ЗУ бхз тТве пі Бо ТЕ Пі Бкре тп жіу Вка ах За чар и
КАХ Ми МУЗ ї5 зику сіл іму ЗМИчру. «тах фімах Му. Ббчух Ти ко сл ях му у МТУ блю» ТУМЕУ ФИіхух (хх уп б ЖЖ Тих сви У ЖЕ ТИХ Є ДЖ пу ЕЕ ОСДЛХ сб БЖ ОХлЛЕ ЗІіХ хе хі МІ ух пн Жісх сан їіїхм т сен У ТуУкеу ба тут фу Мах пл кю ку
КЕ Ул КАМ Да ау щем УМ МУ КО СУХУ ХУ ЖЕО КЗ А ЕЖУ ї80 ї85 о екю Б єх Ж г» То бу охо ех Тим: бук дл МУ бут йому єї ях хи
ЗК сю Ві ЗО ОБ ой Фа ОУш Б ХУуК БВ о гБмде сим об ЦІ СУ у
Іа За зи
АЖ БУ щУ
УЗає Ше тлу т Тизж тіш обом ніх Феху 23 бус Юда дих ж щі
Таж Нет лей А фнед ЩА у іа вни дню ко Уві кБкОо Біре дан Чл ві тп за ти
Ам жо ХІМ
Кук бо пор.» ЖИМ их чаю сн уже нм ЩО ж сет дю Мур їй Тим; й ДЗ о щодх: біу ЖЕ (Ж Же КОе тТМмк іє Як вла Хі ЗФк ся Без БЮ Аа ОБаАю табу "КЗ зт Ал хе А М «В ши сх їУюух дум Стих гу тбкучн ТЛ о и Не» ди уд ж хі. тп бве УЗА піс шежЖ сь сквжх сСІЖ БмЗе ТУЮ Пушо бла ТВ Уві ІФ Аїд ти, лук ті хМО ЖЖ За щк шок на ез кни и Не І А А А Я ви жих іа Чл Вл Вей Уж про Сім Зм пою би Же ім УА зей зе а алу Ре КО жльжж же пух Увщо й жсту тях НУ гав меня жд о Хокиї СК Іу аж тод вах вт їз м Уж ЯЗ Ума тиша ЗМУ СЕМ ху Еш СЗеЖХ сна док МК БеНнф А ТК дл ВИ 5 па УМ Ура о ьо кр т У щуо мркм йи Ж мує му УМроує ту йко Бре ТЕ Їфе ув) їіе Шік оАїз гів стме бій іє б тво ре РКО зад ЕН ча и я КУ дат Тим: УВІ пьн Уві жів Ма жи сУуїе Беру їде; Зак о Беб АВ ОБеко пам мшжМм ол ха Ух хи а СМ лОо ММ БЕЛК їж ММА МЖК М ТВО МеКХ
КАК 31. ЗІ зо кн кн І НЯ НК НН Я А ОН гм хі АТ ші Тех Жах Аз Шех Ї5е Ще Бе 3 був тва Ах
З- зви
ЗИ 5ю
ШТ з кит. же шило
У лк. што мас ІЛИК
Кая СИЧ пжех фр ит вх «йЗЗет Батіьзїсе воснвтвсїв дк таз
ЦИ ха пит ту Ва М пай стук Мир Ам лк тм хх шву До ТУБи ух Той
Мех джех Аац о Аши дай оТУуХ Бех Ал уу ії Айо) Еше АаФб м джем дах - г ах Кк ї їх Я їй су ІА бує Що бі дур дує Ми пл ев о НЄ дути ту вет бів юежЖ Біє бла о Баю ЖХОо Бр меш тв су ВХ ТИЖ цем БК виш к пох 1
Же тує, хе; Мої спрею Тахо бух хвою т хх Те сбфкче й ях ди ви ух як І
Хі ру Бхс ББш ож тям БО Тце о1у БЕБОТНжЕ О1Їу Бо таж зу ркФ чЕ Жах дк, й 45 ча ючи кути сумо сли Ухуєих дуже ЩІ Жумуси: сту хи УХусих ббадче т Ухулих Суд пах ож Кто Тих ке Ко Тих бух хо бах бішж шо тик Сум Бус ле за 55 чо пару дукяу. УИЖу Ку дея У, ти жу жиднех МУ рає смт брил лк Фк МЕ я ет сіу БЕ ТЕ сі КО ОТПЕ бі вЖО Так Біт Еко жпЕ ім БО ТИ Ос пи БК «ЦЦ ох
З ти Не во фону б ТЛ теру тет Ук, їхуси. бує ти ЖХусих ската ЇЗЗ Іуди. УК Її и; бофк СХЖК СКК ХК киш БО ХжлЖ блш вис жмжЖ шу Кс жМЖ у ККо
Бе за з иа ги ж реч Миру жилу дах смію била МІ сиру кю уча Му лю еую ТИМ у їпх о біУу жа бах ду АЮ ОаК б Х бах ЗУ БЕЖ Жах Му БЕ СГаХ зага тера 1
Аа ККУ Я їли Ву рас пли милу пУМрую пі зу іже КЗ дбучя ббвує (и фу Меч Ії хи пі ЕКО ТІ ау вкО ТБ шум ЕХО ТБ шу хо те Сім вкО СТВ Оу я зв зи пече «БМ ва зма Туру ЗШ ня у ТИВ СИ ду ж тк Мотя до пк фах рю СМ О иа Союз ше тру ую же вх уу Ба ть піЄ ЛЕО отв лу ТЕ ТЕ у ЖЕ зд з чк зЯх шк ЖУК А тефхах ки зує; тлі т хх тую МК уд їхні: пифуи Ух аку тру їх кю щи р
Кк Осуж Бимосхми су бхО Квт МУ Бар с ОПпІУ БЕ КДЖ ОЇ ва Ах ча З еу зежц их
АЮ ХХ ЛЮТ лу
Ул три пан ки зх собак є дих суч ЖУХ а дХуєих техн хї ФХаих пеая їх бух ТИЖ бл ім Кжхо тик бі БХхо тв віх Би жбмт Бім вхо жтпК шує зе ц ям зх ц «МТУ БУ М тумх бе духи; Сх ЇХ хи сбужн іуах укр іє 31) їУуту У гл хи дит
БЖ ХА су КК ХА Са нХх ХА ОМ ВХ ОХАЄ БІМ БХХ СТВ Оу РКО пк ОЛлх Не плнако Мк» Миж Пи жо жу ТІВ Філ Хе по «а ин Му тиаЖ о бдеу жа срих їх БЕ СГТИХ ет ХО ТВаХ бхВБУу ДЕД іо їхМЖ КМХ ГНЕ
ІЖ5 ха я их тужчяу УЯжає Ух Іюмую Мф. Кхї гук у я фун Уфри Кр зах Ма (я сСіу ко вх біу БкО отв О1уУ вк Кт сіу РКО Тж сіу ВЕБ тних бу пли че А вок ки кА фоака ум сх бує Чу міх ус Чу хх хуиу ба схе Ук бі уки У
Ав их ЗКУ Бик тд СТУ Бо бле о біу Біо бик пі рес отТмх су БК
ТУ Уч Зц зай сх ККЗ, ки ах КМ ру ат фанух Ту жил фа ЗИМ лу дежчях мин ує тили АЛ що ММаю бІЛх т и сМту тик оду Бк отих ху БО СТИК бу Вже ик о жуУ льох їж МІ СУМЛЕ а ци жк ве «А ТДТУ пін хо бек цім МжО Св пі хо пеуУу ЦпПім опнм йім стома БКОо Міф ім сам ЕХО УМЖ шим КБЖеСУЛЕ КИМ Ка БЖ КОУ мм осау мМ жо май шу бук зЕц пір «КИ но ве; їжи УЖ дідо штєз Детроличи сла іх пе) док боці дж тини С ті дам
ЗНА ЛЮ хх ЖИ АЖ ЗМК сх Мо у ниж МЖК НА ЛУЖНА ху до КУ рух. с се іх КО ШВА фряжу Уиит Слжк слби МЕн: щижу би м Сни ху Ху У утри у ване
АЮ Ехо МУ БжоОа ББе да аж УВУ ої м шиЖ Ж АзалІ Бра у хкЕ іш хі
ВО ЛО 10 суєта Дух що диух ска ЗІ у Лхт Ст) бю аа ПУ сил к ду Па їмаж їх 1 Од Зі. ЗдЮ их пи ша ДАО ЗшХ бах ЗХ сх тп Ух пр зле уз к ул
КЕ Є Я жи жук СЯ ву СсМурую ХАЛО Ск фу са що ау СИМ о Лю спра От шим 3 бод ла ФО ув дж Тих Май дів Лв латогИахХ МплЮТнХ Мав олнХ ЖАХ Мен бух їхху
КЗ Зх За тех их Ст мім сс Вецх ЩІ «що дк що ду 1 Аи р (хи мує ї(ЦцУує ї-ви отвУ Хі ій стві дв БІ ба БЖО зві КЕ зу Тв б1іу шах пве 4 Я хі ло ЛК УМ
Тими лу Фу бом км що би тку цу ї Чаші во ї ше ру в жи ку газо и о М о В ЗЕ КА В КВ я А ДА ах мів ЖЕ СУМ КАЛ КЕ
Ки З За
Ук тм СТУ Мп Скиба І п хі и о оо а аа тих отБЕ ТВХх вхо Ше Ей бі М УВА гі с бвь тТпе бу бе ХУ Кимх
У як хо лю ТЕ ау біжи Тім що Ух кл хх чне бохо ни ж жо бле т хх ги ві Мі ет з Бі бен ду Мих бек бів Бех жів лів біз БД Бу ВХ МЕ
ЗЕ зав зек апя
КУ КУ ЖАХ ами
Уа п сх «вії 353
МАМ хи хлюк их пк «ій Взвиз Брав захлпхаєемя «АЛЕ ил
Мавка ДОЖИХ жде столах Є хо лют пл їдеш їм у т бо Їлдє (же Хі тм жк Ух ще зу сій ви БЕ се о Бев оКЕшЖ Бе двроБУущ САМ Ха Ха ХУ ХО я х їй Ії їла: ще Стих їх їх геїха Мука ЇХяеих ЛУДОТ базу; о їси батут р Тулощи СР ду кутия,
МАЛ ЯМУ АФ ОКЮУ МЕС ХМК Ок хм Ж УА же мк Ж ХІІ пл А МшОКХ ОО да 25 3 чек ім чів бак о пйім діз щлвробіч діз швроплє шля птврЕ о піє іа у жк ол до жклК ахУум жк ММ ху вк ЛК ХУ ит АМК Ос ОУ жне УМК
ЗЕ дк хг х щп РЖЯ
Я ЖК п
Кутах реч Має фах Гуру Стр пр Кутя М їв и фютях Ст ду Ту Гуті ау БЕФОСТНХ бу ЧІ ТПУ шу Ада о гни шу дл ОСТПХ КУ ля СТВХ ау шо г хх и З по лудл о чауг сах: Клод стих ГУЗ тонко сла ТУХ «а чйує ля» Мі що мує тд
Уа мя сі піша ХМК муж іє хмЖ БУМ Мжо ж им віш хмаж сСаім ха м ТИЖ тик ще
Бо ее мае ГО сля у ПЛ ха см ЖИТ ю до ПК Сх СК их тю иа вк їв ШУ вк
ТИХ оса МщЩА УПК сзлУ Ол ОХ сбзмУ я ЗЛ сх а СЛИаХ суму КА СКЛ Х зе за 35 (хи ж сум Ух Мі й хи ву ри (хи жа су ши В сук и лу ІФ тТВх су вів тТпЕ сім ХО тп слу хе т сбфу АВ ОСКИХ слу хх з тах по 125 Во усе. домо фл Скло ру Из фжлох Хилюї лу ж му, пз ЕЛ га Ср у мах ххх ЛЕ м Катю уж хм СКК їз У ел сом сх Ж Ка уд їмУ дБ ОЖлК се МВ.
ІаНем трижу ох,
КНУ ЕУ жи пухричи УЛ юи дккую фрі: КМ ки ру мубуьчит Ж и Лі де й ки їн пу пу ная
ТЕ ошіу ЕКО оте ОфУу МО Кн бфіу баії Бе ої1уУ Бхо бе біу дерокцх поз т ц тях
УС кое Мах прак пня дл сич дод ста пух порру Трою ря й ож три бугая тази йщ (іх
ШО АНА ЯМІ іх АМС БТМЮ бЖАюО ЖИТА ех обу АМА ОТИХ їх їй У ХЖиХ АТ бю 1 з цу ще за
ІСЖЛЕ ЛМ ДЕ ЗМ
Мр Му й ку ер М: Сл жо ут тм Тк. У лу тр їх дю. стае хх: у
Аїз Тих і БЖ тп У АВЕОКНВХІ шаУ Ада ТВ МКУ Бо хпЕ ІМ Ва
ЩЕ 1 їта
АВ а Бо
Уж КУ - хі кіїх» Зах ух жк їх ех ті: и се о їли Бик рі те сіу їншу ла бі ва сувЕ Ку Бхо ак сою Ха тп Бору Боб ме г тЗци жу
Ве МТ хо ех що хін ух: щі се чи щі тет ТУТ ЗЛ КТ, ож рю СЕ сти еу
ЗіжЖ дів Тих пйіх дів жйпкх ШУ із аж бБіЖ ож Зеш Віз лів Хо КжУ ле студ лугу ц
М ау о шкіх Зою слов Фр яя МИ Мф Ме АЛ тонах їла І до то хі тод я вка дім Жех сі ТБХ Те БУ Лія ех іїнна Уві дви» Аїа УВІ Без Іа тр ак типу
У дес дк жотужх аа жуки ж том Хлмер ЇМ ку їХнаї їх біо ие їй ку; лах тех міх дах ик біб ЖЕ Бе го щі ие бі ме бек Бу вхю У хо ов. зи ту м - й аа о ах ла тюеую пл хг лях лю Має туш МИ сліз жах он и а пи ВК Ше
МЖж Ж са баку щу СЇПХ жена СОЮ дю ЗЖБА Я су ша ма. А ЛЕВ ах 5 ВХ сети Ж хо лу зма кі у хи му кує ТЗ я Є мі, «жу дх крути лосуму що що У ки кЖЕ па тім: ув дів БЕс виб дв м аж лає хм аж їиЗМ жі МУ зу ит "кт пит тю
У «ТИ же
Лех шу шк Ал до симУ й Мі та Ал ою фрер тоші Ср чу УЕщОМ ФТ ху Ті тва тв ще АХ ЛНХ ля Ал лина КМ ЖЖ ла ОСКИХ ЖНМа УФл. АТ ОБ
КЯ І ВЕ
Ки шик. ни МО и Му у Мк ТУхеут УНН а ак о но о КАШ МІ жу» поломам суп Ме о Кидя діб Ба рхш іа Ба пек ба яко му Оса му ач У м сг Зо фнеу Ж лонкх Жожжї Тік ух Ми дю, кі тиме й ці тім 1 те
Уч дій рес вБко Її лита бец таж БКа Аша Бех бКо діа плє дій ті че нут тт зу
ЗИ аа Ко хв те учи жує усу лм ТІ Тл їі ЩІ бу що ЕД дух «тм дух ло
У ТЕ ТВ Ада тп МІУ Щі сіл й тЖЖ М УВА бКО бУва ов Ка хх БЖ Б поки ще Ка СК шк стихи: Дт ік ю ЛЕІ и бух СІ сїляУ Хот и ех СТ ух іш Ваш МмуУБ Хі Б МАХ ОХул дах Зак Де дал ЗУшж Ві ее БЖ Халк зай У КНУ
Я Ка ї5и і АТ хі лох мі Ши да сбкую Ді Ух Та лм т хг ід Вів Узі Амд ож ПЕ УВО хвУ йащ шу хиЗм о ММ Ат,
Ух АвОо лох
ЗК ок. ох «ше 1
МН Ех в фен ги ти маже МИХ же хух, ФІ ЖІ пу іже їв,
ЛЬ Здоллалих вал Еамх ел аг «ах 153 пйсую т3З у душу пу тоне Посуд ща Мак бік тією жі мя уки ху ап обі Бай яю Муш сиза ХХ Її в Був са ха ХА оо БЕЗ Ох ї 5 о 15 дах СТУ т ашАфдю ру их фіни у у тами ацких рн Ух то тло ли ух дих НВ схАжЖ ЖИ ТЕХ ТММ Ше ФА КА КМУ МИФ СК ОБію жфме ша Тех ях -к зх и Бо ве ли тку ма сх дл до ре сл до сіни уза ср пак о сїїха Хі до мак ка пі дів бак пі Аза тре БУ Аза тва бі же о тех Бе ді вк Зх
ЗЕ КК :
А и 5 у сежі ЇХ ук Афін сф хи Що туя гли Що мачуха рах хкщї хо тн іш ТВ тв Зі Ата Тс ЗІ Лід тТлЄ Зіу Хв м У Уті щи цк ци ла до МОХ те (хи ДАІ опа г СК спір УЗ пащі пи юю ло пи буку Ж ую ТВ
ТМижЖ Бі йів жк ж ха ЖК щу МО ЖлК У Ба Лк су Оле о - худ пк
Зх т ТВ ЗУ «як Ха Ми сля Длодо сля ал яЯх г ух січ МУтах Хід сум 2 Ду сю СО Кх беж ам ших беж ав ОТИаХ шу ді сих ку Мах ШИХ бр АМмаА ТаХ іЇКУ о за ЗБ жи руч У «кб п ж «кри А м шко хр У зи фею КУ У ще тв шіУу чМ ж Оу вхо ЖЖ сту хі тре су вів тво бу вко зах ха ях що ВМО МАХ пк шлю ни пе й ак Хтд плям о бі дк шиєю ПЧ 2 дк да Фіви у Тих В
Тих У Шах пр їх Ж жа щих їхму лих МЕ ваш лААЩ ХМ схМуУ Меп лу іх зх зах
КИ Кеш ї25 г яи 1 що пря сл хи думу рих гіїлу Ж що кає (З г їд (13 А ск їх; пі вза тв сі Бкз Те су йіщ гне фу цес; дія сЬу ліва тиж су док Зк чай
МО 135 Та пох СБ хи йошж С сля що лах іх беру сію їх, Щодо лиха кю ат
Кже жах осКжЖ АЕи Ул Ку вка Чак МУ Еш СХУМЛМ їв у ОМ ХМК АМОМ О ИХ з ях з «дл чит
АХ АЛюЙ Корея їщО пі їх ві тих же їх фу іх Вір м ти їсмі бу пі Мох ня дів сдіжЖж Аза тра пі бо тв сі ів тв пі іста Так ПУ діа тих іа їта 155 нат ж АС ху Між «Лю лом ММ МЛ яю и лох ла леву Хбхеох СВЙ. а чн бе М ЛО шик ЗМУ сек чл бу сви їж ха до дя ЖЖ РІВ бло ех зи я тт
Мих АХ А
Ул МК Вк ди Лов лошмя обойма За у Зо їх тим. М хо ит фе їх сім ти ТЕ РКО діа цем імзхі ві яви ій УВА ім вія дв бКж су за чий зм ї55 емо й тиру: боєзує їм бі чи ЩУйу їі хи ЗБЕ им її їУютє (іх ті 8 М Зуха їхав
Тнж беви пев осіу Бе У РБе бає бій БО бі Хі о вів бу ОБУ УВУ п г з ча
М КЗ. пялМ їх тік Чи их Чек сію Ко ху уж; ул лі лах щоку Чек щі і
Еш бі Же їм чик ле їн Кто спі УДІ УВУ Харотух вія ша ак --й туя зи жид, сах Как Ва ен були се У Ура Жах Мр кош бо гхх їх Ух хи суму УТУ стихи тал вів кто дкаЧ йврошіу Щів тів ТБ йеї зи Іа шу Рпшф Бпе Чех тА пкт че ша УЮ АК кущ міч Ул що тами що жі Ул ср ут; лив ри зії :. ру іа вк вів Бі Беб пів Вже Мем тре Бус маф бій іє кп оМмеак су
Зк Ех т ча Бе ати
Узі ую жі кла туш т 5 струм ска УМречи СтХйеу. МУу Тухх «т і г хе ве ті дія Бк дів вів ше Знай Тих Бпе Бе ркБ ші діа Буш шк ами пір
КК ко я рес Бей огпши їжа Твх йБтєе дів рей о був А15 її вів їі П3іУ БЖ ВЕ
РЕЖ Бе овець беме мл Би Же Бедь кКхше Бі Бе яки КОЖ ХЕ УМО ОЮЛЕ
КА ра чи
Я «ЕХ чи
Яд сом (ля Кк «т х. Хо УжМмалтих Мих: хи щої ФУ КтИ чт хі 7 т. б т їв тиж шіу гла дій ля КшЖ дай У ва Уа УЗ лій ау даю Сжй зх їх ха не ко а і и НО НУ А ни нн сх ; ж - -
Гете сх их т Те. оелду СІ УЛ Му ше Дим. т а НО р ВІ ко Хе Мах бул МА ПЕ То ЧЕ би дів шеК ро її щіз Аза Уві душ дк я
ЗМ Зх лк з ж подо вх лиж Мол АЖ хі Кох: Жди Я ню лидіу вів слі БоФфоУвзУ пе дув сі Бе Ай бе Аз
Ап АК
КВ Б слЮх її те «и 155 кер дк «Кам вки шити
Пе чок ІК. «1 зх пови їмо вчену діт «ЩАЗ» Вавоз айв ваЕпеншве «ап ї45 т яке мех ща а юр Тит Зяси сбараю буті ЖЖ г ж уми ЗХрс: світу ЗУих ас мо ХУ ФЕХЬ БОМ сад БЕХ Бус ОМух БЕ ЗМО БА Ка Би ТУК БКО ї ї5 хо М оо мое ЕЕ я У дав ПУЕ Фк пила тка, Хамх СИ ит є тт и А
ГЖлх Зхалх ЛЮ МВ ХМ ТЕХ Ки сих ОХ ба ев п вт бом б У в тущ зх за й ЗИ (1 пен ух (1 дашки ищ пек щіщ би бут ти ду її 1 гомі 1 бід ожУж Ом бій ваи Ба бух АЖа жає Бе ОА дат щі СА Сем же їх ай до гру Же та сехая. сеичих См Му Ло фену ту Имя (Лю ІЛ яа фл Км Ку гух шо» рий дайошжео Тех ТЕХ Аха Бко їй ТЕХ бе у сл скл е «й т ща
КД п пи хе ж ж щем де сміх ху те щоию їх, дме бе клю су Щи Їжу Ко
І Бій дво Пеє тує ви бик АдхЖ БО дах бук паб ТУЮ Бо СІ ДНх -е кг Кк з
ТО Нв т чі ко А домо іще «ау ду фл гу Жокиз ФК стику ремух й м Аж
ЕЖже БУХ ДМ ха Ех ММ дм обо мм Ха ЧЛ СКух бе Іа о АшИ Ба ща ВО З прп укк УЖоУ З сф кю Ум уз еко тУХ р сут сир ж ММад (За Уч щоштр Шшємі ТК бук зх щи Бхе фл лм БМ пає б ол ле іль са бапоБхо ХуУХ я р ЗЕ пох
Ме й АХ мк; Мо кю ух уси Ж р пах у бих Сфхух уж и у Ми пози ИРюх печи вЕЗз отв пі Бжо бі щу БЕ тя Тук бі ба м Ме ТУук шпор хи сту чл їх жк М Ка ер не Не НО ЕН Не о чия а и ША пкт, ат МУ фИчам ціх ж
Ащпотех до дій йжм Уві вх РЕ ко був Бжо бкйотих Біб Богу лу аск хи
Холл. Алі Аж яти Кі ну сІ11. Ж темах дет фу тТУТхх регу Сн їумх Сущнх тт МКУ Уж їпє сім вхо сів Хі еп Бий рБКе с ж ЛО СУ лиМА дВМО ДАЧ ОС КОК КЛ
ТО 155 зва пух, ОБ Чо ш ор, Ту їхати он лк я и КО о маже ті Кк, КО де м їх Шоме бом мух БжОо МУ БЖ Км СХ ОЗ ЖЕ САМЕ ХВ ХУ ОХ їа5 17 МУ ті гу ст3у ЩО ХХ рук уже ту Шо Те Фу бу дей Тло Шу
ШАФ МД АЮ У. УА ША Ж ВХ МАМО ЖІН НДО СКО ЗМ худ А КЛИМ
ЧО 1 НЕО їні ддуг Боже МІ Ту бує Фут сві йдю о жет Ві бхмі дк бів Біа Був
ЯКИХ ЗК БІ МА ОМУЮ МЖК ДЮ ХА АЮ ШК ВхКУу ПЖМЮ ЗМО ІК МІЯ Буш 155 зо зо5 їде пуф» жи Щі й тдмю МІ А Ж стем см ут Зв лю в тя ик ЖИ
Нів тну де ід Її Мід Дів їж Таж Ом Ма КІВ АВ ОП МеК ВН меж жк ря
МК дупи й я жона ЗЕ лу Ж умо вх юю и Ми. Жук спі шу М ЗК бажає ФО шу ЩА Ж мні Уфа пі був ойоу бірж дз ба Сип бін Бі Мав о бує Хі од ЗК кт, чо хи Зах
Ма ХО ХЛ я пови хау. КУТІ Фома сш пМгії У дн аж туБ пів ев ви буд ши БІ рт же ро ННЯ ою я «ММ Ве «й БІТ шт шосту уки и «ве Вашу лкйпкасая щи хг «Мир п хащі хи тр хі що сті (З де сли сли дово шеує Тл Ки бло мех тах Чех цу Ме УВІ и ШУМ дл обу у ев шах Був ЇХ був ЖЕ
А Ф Ух зп
У - Ж Кашу суки гі бом ух им бе ги жо там Мем бум Тих за іх бах ве
Бо рей ват пат вза Ба Буш ЩЗіФ Сей меж Аз оОйм Уві спі БиФ щи зи п зла шо дя ТЕ Б яр пи ЛІ, ж пси ТІМ ж глід Же Ух о ду т ях рю лу межу Мат (ІЛ ж вЕт;а жо со Уа Бо тв оуу Ме Те ім БЗМе тих пі Бак ТаХ ОбБуУ
З 5 5 щи пін сх щоух сени 1 03 бхии т ФУ; су хи хх см їжи ру дід ТБ СуУ Ав тм СУ рес ТЗ су 3 тв піжЖ дії таж сх ше шт пе гу а ж що о жи Сл сію сля ШЖищю пихи шлях Жууту Мі бу дяту Мих бблах сь ія а бю У АК Ум ШК СКМ У уж сюМК сю ФМ АХ СХ ЗОМ АК
БІ ти ра: дО бе дю сб їм кг ум сх фу Пак іа фі оствю (хе су Хек їх
МУ де ІК СКУ Х КО УЗЖ СУ ЕМ ОЖЛЖ (ку АФ УМВЕ шу юю УЖ су
У що Ж хі сужтує сті х юр СП у сіла лід у сла им Лю мгрхх Хгд см слу лугу же жі сам век бопах бу мед сгтОаХх їхду БЖ осСупх о бхку Мао ТпХ у БНКХ хв тих ся г
МИ АК Км дуг ТУТ ло «та їх хх Пен раю битих Му жах 43 Яйче м лю Му тих пім Ух тик Бім пек Тл КУ же Пак обу сб тех бу су Тех «п їх зчк
МА у їй5
Мб Жорю чі «лоту ДЖ лину УЛЛЬЯУ Мф УЄ ТИТУЛ же УМ: Я у 0 Куна МИ у КЛ я щу За ТВ паж Маї ТІ бу Бах ЩИХ буж й ТпХ бу ех тих лу а ЗЕ чи
Ки АК Дю ст Му у сушу пух гаю діючу м ЖИ Фикує ЯУккує фу УТ хм міх вх бавских біт» дБА ОСКВХУ Фа шко СКОБУ слу жшекКоТвх САУ ДАО ССЕВПЕ са ах їЕ Кук МУЗ МБО сб Ту аж жош -к ТУ гатуу ла тю тя ую БЖ блю т Та тк одіж Важ її СТУ ШОЛю ОТАК ЗІШ БІ ЧК їж ек Меб о біж БЖ жде ик 4 сх я ж
ЗКУ КчНКУ ОХ тт фі пеки Хр бує Кт же ов вує ті ек хм Ех Фбехуи Суми рУїх
Зі щі чл ФУ УЗ КБ ФУ шеЖж Кл спі су УП лпіУ щекокКижЖ У ах з де тк
ЗК ВО БІО тд лсхкжнкю ЖК Хр юн т пат. СК С Бо ша о НЯ Б У нь и чаї спжЖ щі вв їит Піх КжЖо їй о 5ту дес бле БУ Мал ОЖТКК су Бек прору МУ ТЕХ
Ми «мо МО ма Ку ку Ум плю МУК ух миру Пи КУ зх т «Ям Ух и аю Му 1 кю хх Ям пПЖ ХА Май КпХ обу спех Бах су ЖЖ ТБ Млу лнх Ух їхМу Ущша ТМу я 5 ший
Хм сижих гліжч ИЛхх Ухеєу паж ИЛоюм имю счужа люю М, між кл бух Ті ки хх аж У ЖЖ ОБУ РУШ Ожи Оашж Зак Ус ОЗаУ ха су саеуУ ау жпау пух ох стр ч шлХ Іо Б м «до ї б ги Вау пкУк зи фгу бух ХЛ Ух брую Мун пл зи дю мом Ази Ме
У ВЖж слу Дж Ме жим ЕКО ТБ су ех ТМ су т ТБ ім дБЦ ак Ех ту
У Би ху сткую Хі Жує кує гати оку свує (їх Ж ю бає (3 хи ЗУЄ Ом хи Ко Мухе
ТШХ щу шшХ ОКХ шу АЮ ЛБХ малу ЗАЛА ЗМК АЛ ЕМО СЖТЮЄ А Ж ФВ в КЕ вежу
Ух. сх. хом жи М жаху У у УМ Аж Ух Бо нен Кен кю МТ, зи ЄМож СОБІ дату Мі су у ку жує ЗЛ и 1Мках СОБую (Зі сі вує та тАг члу м жу су Важ жщЕ мам Мом шаУу Ко ОюМУ шау Мам оОжш ХУ ке ЗИ Ка г; Зі хх Ж: Жим сті їжи Чан її сухе Чи с Ли См Ех що
МО СКК ХУ ЗАЛА СЕЗЖ ХРАМУ АЗК Ж ЖК ЗА КК ЗК Ку БЖ СКМ СУ Ж ЕМ
ВК оц сг аж «Ж ЯМІ мч сук й у му «ліси шруж их ФУуїзи хащі ММ «ділу ее св ушу хг СМ
УМХ Ам АКТ МЕ ОА У ЕХ СНУ у ЖЕ во У НК УМХ ЗМУ А ОСТКХ ша т Ая сх
АМО АО АВ я їзМтях сохм буд ф1ї1зе хі сю міх іже їх дк Ум се дід сти їі
МАЛЮЮ ЖК СУК ХУ УшКА СУЖХУК КУ МІДЛЮ ХК У БЕК СЮТЄ КшАЖ ХЕ СУП ОСА чек хх слу яю ЗЕ ЖАХ долом их лю дет сити стю Щешлух МИТ Оля їТЛору Илжає тля паю Між «з ие мВ оСЖикК леж ФМ ЖХ сем ЖЖ СИХ ОСсУЖ ЗМО ЖК їхум сш Ми їхуМ ЗЕ ох ж У ч зи БЕ За буку ТАТ зи ВЛ МУ С чи рух СОМ пУуї зи ха ях туї ую маму м ЕМІ У пу я км слу вів тв біУу шву ТБЕ шам та ТВх м АНА ЗІ цу ОО ТЗХ чи: «их ше
СО ТУЙ вес
Те шию пою ее ци мм жк мак ср МК я ж м Ху см т п их ку їхуж пехОсБиК схуж ЩА ЖвХ БУЄ па огих ЗіФ пів щих Уж Ми Жах 0УЄ
Вч ВВ зви гм Б: ЖИ
Фукя СбхЕкчю. й. Лу ую. ПИ тю фраоохульє ут у ушу шатун и ям я
ТИХ АТАК гу Длюм СКМ СХ У вІд'твш сх Ку А ШМлОСМНЕЖО САУ ЖЕСТ САУ РА
Б чуй «и сіхтї
Кке За ЕН; ре
РУпнух мах Хе Мжр «пл кг МУдає фУувлю спек МУйрус ті ут пік Ж Ту іш см Уві тнЕ сом ше ОХ ау БЖ тп сбуу ск сСтуу М ЗХ дстх ат але
ТУ Зм Ех
М ки кешу Ми (21 думою и г пу бу їх у З и ХК, БУ ИЖ яко жк У сіу шШек Жпж пі ВЕЖ ТВ Су ща ТИХ Сбор Ал ЖБж Фо сам ТВ су т Кая КЕ 455 па НКУ жор меха ФУрАх сук сф гії Хр цпую їїтхя жур сяє ба дує ру їх ак Б ків Тк пу ес ввЕ ЗУ У тих СОіу вав осо Ук Зее ТАК ОБУ доку аз ла ха еЗУ ААУ пли оду Фречу му УТ сувору ху шіечу ср сталу Шу лу стаю Ар их
ТИХ за БЖ КПХ са у Лех ОТПХ їзАу ЖЧНХА ББЖ о схАу тех пах сбхАУ А ХА СТКХ и 255 а
Ли ду ют суку КІ с тахачи СУТ и лумут лк З ки у пиених з а оАННеНИЯ
СУ Мах ОМ у ад ХЕ пам КжУ ХА Зал ма Сх ОК, У ваш обслу лу їла 5 а ще а ато ее ще дл сКисю о сля» ам пу Пе ках Жеежу СюМ й сю Мах січ сх и м ян и
Хі тих іт Зех Тих КУ Бе Жвх йБуу БеЕ їх щу вх чих ук Авт
Зх пр КК ре З ах бі КУ «кис о гефен й ср прю Ул ук Тумаиу Чбяє КЗ хи ЗА Аряе К дя ЖІ пт
ТТ дім тВМ Те щі зво ТЕ о сіу ко Же бі діа Те фу чл о шее ад ци ща
Ме У шАМ
Чех пла дощ спбрук о лихих ДС щу йо дать Мем аю Схдух (ЖУїаи дж ХИТ
ЦО шлех Кл ОСрЛПкХ У АХУв же АВ Да дп СТИХ пек ЗКУ пшжЖх Мал оту
Я хи ще
Син ФА їх ж и хх хни щих вк но Ток ТМ Ку Та. СУ вч пет МщУ Мем ог ЗУ ПУ Жлх дви Хі хо Бей о бхО дпа дех МАМ дей ща 535 54 тт у де УТ Ує ти жи хе ву 2 У Ж Мін В туУвх й сук їх оФлу ЖжЖОе лу АВ ОКХ ж ме шу шу МА МІЖ КЕ віце теж хх пах ЛИ ЛЛУй Зо
Мт жилу Ж М фаху ббчужи мих в з. бра спри С ки фуд босум рих у дів дв дів пі ши отеж ТУЮ їз вла Те Хе Хі Ву из ХМК ВАХ вка Бо ФЕВ п ж Ж оижхт Ж оже лу суд схудх дек СК лну МКУ їхуУ бує Я Межа уки Ул що х
Ок Бе см; Ущ3 ах пеш пхщ дош ОжКК УМ с ХЕ СМаК БУ бо КОЛ, ща ква хі
ХХ УЗИ паю ую Ту й Стеж Щи Имя и зму глічи Стує мех слу М оз ья шкуУу ТВХ Таж лев ех оо Тих УББ. АХ Тв сіу ШжеУ Вів щех да Тих ша МІ ех їх. ше У яд и Ж жде ож будинок лю жо У суха бом жи Кам УМ їіше жк Вів Бак беб БЕ лів біт ка Віз Уа ек їмо бал ТД БМ поз хх лм
БЖ ВІЗ БЕН ги хх Вр тм Ах мм тих Шеуєю СИ В Моє бе (ля Хі ю УМрує хм Ул М Ал ЕМ Лола бИиХ ма деЖ бах Ав отих Кб ху ам вих шт Б 35 ат ому: Я ши бо уж тихі Мох
ЗЄМщЬ Суху МАЕ Ада г ЗУБИ ХМК пах
УЗ АХ кл ях чи
В ни х1 І «щАКе Ва булу щуМкох тю плаАКтУю ок поті іо кращий «а Взиз ово плов г по «ЕТЦ А ул ул тую. Ха у с ах да лу лу тару Жеує Та КТах о бхолю еру чаї маї Кув Маї чаї су бю дЕЇ; ТУМУу хм БУВ ШЕ БУЗ Тв мЖВ БНХ ї З хх ї5
Шетх Там й Му й Фйчех бе КТ Ж ки Ши бамтх фол леї ато Кк Мн вео їх дл Же дим жна був діє її жк Еш ха ЖК ша БЕ СКНЕ
Ми ях КВ хи: бунт. Зк ШдЯ пу р ск Мука фу хе тр У їі хх Дух бе фі вп. обро БрО Уві Бра тн пі Ме Тв піУ тіФ отих пОу дек тиж Сім 15 ве 5 доб ру бах дош ТИР. чу пек мих У лу тт (лях пло сплю Му бою дів жих ббде вда бл жу БКО ТАК ШУ пз тар слу Бі жд см Бех
У в ще
Ля "ЖЖ ва би у хе жилих У іх дю Чуже філ же феткжу СбЗдли ЕІ хе Ж рухи діа сіє тає веж олпі Ше таж щу дамх ТОК іш Аа Таж ошеМ Кі У ЖЕ та 5 ж ія уча ур білки лм МіячУ Ку; щу ха и хи Що Ифк лю шує йфжих пл ху
Ж МЖК ХАЖ ІМ КМ ОІу ЗДОЛАЄ бл Ваг ОХМК су хв ха оОЗау пе зб пк «уд як гля ди ТИМ тю ХК же тре ди мн ТУ х хидУ СК гі Хр че ХО ША ЛОМХ ОБОХ пе Мш ТОХ Обкум о лемх СКБОХ їхху МаЛОСГрБХ сш сх зо за 1165 сту схлях и міру скло суха стік хх уми сфе лях ХУ жі сб хх ух жх ши о лдуюу АОС сМИЖ ВК ОСКМЖ ду БЕ СЖМЖ схем Ма ХУАХТО У ЇХ СК чАк ри солую
Не їх Мих
Хр хи у рух гдз Ми Ух й зи кує ЛУК пази Мі СЗУУЄ (пах фев СМ Мі зи
МАУ ЖЕ ЖІ беюу Уч МН бу чаю ЖЕО бу НИХ ЗЕ СЕУ ЖЕ СКМ сту
БО и ди ка ДОЛ ДОК
КУ мує фу спе М. пкт Др я гу хр ик фр їж Щура сих ри в бе Кн Фів ви бе лу Би бнж сі хе Кс БУ Віа тп КІУ АВ
Зак. з: ї1ЕЩ тки
МОХ ДУМ Ми Ми яри ФК ме жаб км» хуя ср вх т и ре сх мож Мох їла их ак
Тр Зі нує їі ос У Зі жВЕ ЗіУу Сі ТБ обЕж Бех Мак ос РІО ах «Ед ер Як
КВУ то Ме мері жу ча їжі; їт2у1 те бах барв пл урау сах Зою (рах лю СИ лу
Ж ЗХ СЕ пшту ші ЧЕ сш Зак чих ою бу ТИХ бу Бах ожих шу зах зак зщл
Ме У АБИ ящірку хи спла мит їтзТхю кт уки сті ху тих рах її З ху 3 ме
За хни ОБУ дамо ОІ1У вже типи біУу пає Те бі чві пе СІ пах їч5 ЗО кН ук а лив опе УА: сх сн о сУїху дими Чи уїах йо Че ФУ щі ще
Фк о Мі жИпк бе пех Щл бі Куб хи їз Зах Жак о: жа ТЕ зу за ле
Я: Ва я кА ПОМ пах єю Я гаях фу ММ (хе ших СсУЩау ай зу тд Ер сля Фр сб (тя
АЖ Ж Я Ду вч ЗЕ КУ де: пах знду хамон му лехОїпЕЖ слу ит чт ситу хм ий СУМ ВЕУ КВ хи пеіут жук пах Мою хи кт спі хи р дах о ЩЕ спри Ук Мав
МА ЛК у КМЬ МЕ поп МЕЖ ХЕ хМиу хуй ХК ОУМуУ чо СюМлОХМу БД де по С пла стін дру ба сті ду три ут віщо тв іх Тут У сут бу Му тВж ос Жах Таж щіу тТтВЕОТВЕ щі Аква тв іш ЛІ Ота іх оо Ме п хв ХО
Тл яу сур Мих їла» й охо плею сим пхах МЕ Тл юю мем Вею. сл юк (їз жу Мк їхшУ 5 ДК бі Зав о жщак Уж ас ак ось же уп ЗІ сх ших о хїшю
Вії Б их у Ух с КІ нон и но оо я оон Но на но о Ану нн АН зам СККи СЕУ ба СК бу сх МОХ Пашко МЕС КК ОО ЗИ
Зіх ММК ух ру За ву їх бі Таж 015 беє ТБ ЗІ Бес ТБЕ ЗІУ ви
Ії тиви мії
Е ода пою сті ку Що жи і ки пло Мцюю ех ле їх слухаю Чак ст кю добу пох
Тс ТУ Бі Жах бі патоки Зк МАХ тис ЗІУу зе жи Су УА ЖИ Е
З ЖК В здо
Уелоюи Ху ТИ иа лю лю Бут аю «Мах см фах щамУу СИМ лУї ж. ат СИМ Аа су НА СЕБХ зЕху А ЖЕ зи ху КАХ ОСБТХ Я Му ММ бМХ ку ВХ СМІХ лу зах зЗий хе юлЕ яка хх
Ту бурих КУ хи спо МУ Ти 3 бе ху тая Кф і ху тт уми їх бує дід сг іх дна тн Оу вхо хв ЗфУ іа тТБж сіУ гу тп беу пає яка зяц ев
МК ШК ах тк жа йоврло чєе бтї аа тифу ою лі тр; чхає у рих ТИВоє іч Же ПЕ
Тло з ок у м ЕКО хо ке -ї Тл їх Ку а ЛК їх БО Тл
З 35 35 - 5 мує улир яю хг жує ух пік Тур фл лу Я що мм лу КЛ яю ку рт бі щшеж лює бі ей ТО сту ви тп бФфу Аа теж шіж Шо ля шу ке ке хо уко тах лу пат си бу Ака бах бБіЖ вда блкК дім риб жає іш БІ «щи дей дир как «УЛ о ЗХ а сур гтічх хм Ст Кут ях поху ає тт яю Ду Стає Кт бю туя ру тю хіх щу тах мА УЗИ Жах сну шЕЖ УЖ щоух та ОКХ шу ЩА ОТНЖ ЖжАУ УДО шжлХ «м Бе БК чл ик МИЗу їх ух МПх (їл4х дату Муха щлом сМіх Лк жл у Мжю Фдх спмУ -ТЖ ЩИХ ж жи дик обу ав оах Оу мз жиК хм Ума лах СКУ дл ДІ али ях КО ж дао лює тугі буру ЛИМає сах ЗІ є сю дош мех сур ху Шрик ною ОД Тр о тів осрйакК зму пжх лих ОКУ М і тТмх У ши тру шу ЖЕК ОСВБЕ СУ их з4г 45 тла гаю фам, пУчає «лу су рук «лу лю Маю (Сх ЩШкгУу. ММ слу Дт Мтесуя их ші жо Тих пу шах бах слу Же ТИХ сум Бех ТНК АВ ОСІ Е це пе зи
З КУ 55 пе уж Зк Ото их лугах. Мр уже Пух ке у ко тю і 01 у и я бі ві тис бі дви Св біу Бхо ТЕ РУ пах отв пі Аза тик ФІу
ЗК да ша «ще
СЯ ща Ви діа си жає Жук су ія Шут ЦИ іх, Шерростір ко лу я в (315 дат
Аза тех яу БЕХ Чек бу КЗ ЧЕ бм ЗК тах божу ЖК ЧУЄ У бай «ак дови хх
В як ре ЩІ. ЛЮДУ мкрує ГІЇ лю хрщО ЧХм стаю дштх Мк (пі дачу сту (ту ДО пу там ХАЛО буре тих су Узі тик лу дЕЕ ОТИХ су БКОСКНЕ саУ МАВ ОХ ЗБК У ЧЕ МЕХ ле пад шах
КІН вах БЕК ут чих що я сна ЩІ Знищ хо ща яр оспічах бо (хи іх що тд: тре Яви віз ЧЕ о тУЮ Бівз КН Бій Би вд Се дес бі ВежЖ МАЕ Хі
ІІ ЗА УЗ
АСУ М Пат кт а Талі Тодтр слу фу б вд Сл Пе сну По ши дет пт шт шив б мм дв са У ААУ ББЖ аДоОА. Еко 5за БО Аж о Аж й АВ ше ФсЕ «ай жа Зах тю тод кю бен ЛЕТ Х тр отиуи У бою. 3 хи ту ту: пе щі ФМ ИН до кад дм БЖ ие дБ Хм до ЇМ Зам ЗИМУ Фа СМКАЖ Мам Буд КК ОЗ, ї
Дек а: У ВЕ х ще : й -к як я пий прмую КІ пи -
Мі жу НЕ їхе Мед Ух ке та М му тк то де тар гм М діх вва дів оса дюЕдоТуУуХ ТУх ТіФ Діва тую БЕ і Ави дей тах Ада ве вв тв ую жом Х сх ХУ тю жилку пон СКУ ду сту пах Ж худ буку Х я аз
Зі їм; ан УдУ пак олех п за о ХлХ Уа двт їм ех бо Мен КМУ,
ЗО ЛИХ МК пляж Му СК дахом ПхФу. жесту рю тА АЛ одЮ таж ях дум ЖИ би А мА су тих фіз вже Бех вже ТВ без Афа твнЕ Еу дах Бра жех Аза ТВХ
ЗУ роя ря ті ті АЛ шу та со лк хі х їх о Ко ан Су г ІН ті тав дів йшх Ем схо ДІВ щі Дів АТ УМ Ше Пе) сам Зіна Ка шлд щі па
А А ау ля лі лдююТ Ло Тіма. що Ме Жана ох а що Жуи їх м баж дж МА ФК М т СУМ БОМ (ЖЕ тис ха жах Бе ЗКУ Мі ТИХ
Ба ла вої тодії Лю ла. ТЕ Даче Ту р ва ЖЖ Же Бе Айова ех тує шх шк ЖАХ ря ях
М УТ
«ши ДИКУ когань тим уяв ие Му щі «жа» Засьззмна апвовхесІВ дж ти «Ас» Мав лиже. Демко Ж Я учи Мир сш СКУ Ж осях жи шо фра пк щу «ож сухе Дожа
Мас Бек Зі Бук Тук щі її бом ніж Сію Тк віз їму пі Кто Баш
Х в о її том Ж що ба хи ушу йурще Т ту туту ло їх дує, ХВ, ред ЛУрелу ТУміх бус» ям ЖЕ шу МЕКСТ Бе їли БХО Бу їі БЕЗ БЕ ББе о ЖнуУ гіда Бу вади дв дк з жу чо хо.
г хости Чи фа шо рани фл ж Тхниу хи хи ух хе 1 ром лхини хи пі Рос Тас бьУ бі Чак ЗіУу Бто Твої їх а МАХ са БІО КОСУ
ЗЕ Я ак р У
Чтв г т ЧА хх Ух Чбут їх зе сб ї31х бу бу фіз Же чл
Тїв зу ї1є Твк бі Ро Бк осі ді тТвЖ пі Бо Ти пуУ Тіє піу зх пр ції
У Те мо ж і я теки НУЄ «Ля АТО тих НА ВА «Ел ух тиж ли у Шк: ів тех бу Бу тах обу Аз отак бе їм БУ ля мм бує Мді БЕ -к ня -чЕ й
На ги 73 и теру раю Ж рю ру су хІлу шт у тот их КУТ хх Удод МАТ Сплову УК даху сиж БЖ ша С Чшх бТох АЮ Уа ше дл злу бе лех і щи Мал Ав пк г зи їв зо 5 тич МІ а шу, ІМ буяє гема Ум ухУ уко ХВ «дю и ЗУ УМфріух о гм
Те ви дае дує Бім ТВс Бей Бо сі БЕ УМ Не бфу ТБ Би фу мю їМп5 115 дуже рних мода ух бхщно Ж Сб их ср Стобеу йод ПО ру жур лк сур ух деп Ва хащі дшжр о дЕТ ВЕЖ я Пт іш дять ЧЕ Твх віх сві бук Зх лк чих чек
МУ ни Кн си хасуу Ф5Ю Фі М що хх пар я У их дю Ж я др сли клшуує Тих ві Бе вке ше їішж бві ре бві хів лій Зі Хі пе ех ему То чия хе я 135 58 зо
Уч си У шиї рю ст» дае йошту сли тд «яр жав До тд її: ау дух
МЕНА ЗЕМ ЗНА КМ ОМ КАМ ЗКЖТИ пошко бе їх мол ема хів Пл Зако щХ ХУ
ЗА 5 зах зай ах ІВ 155 їшо то її хх їх (хи Ше т; дві ек 1 бух хр ОТ дуюую тх «б Жах
Хі (У біт пі Бо бі Уві да діє ТВж пек Ака дра товх Авт їі че - тя хх Мо Ма там бо Том біу "ЗУ кл Ки їі Ж им: бле; дя щужеев о тло бек тих що
Перм Бе Ват ОдІт а У ФММ о »ев: БЕ до уд ХАОС с Бай зе се сту 188 ї85 їз тлічаз ххх жк Хв Ж с сб уе пихи ож Ж що іх Тома мил ж дохує Тло дк
Ток два діє Хі бук пає б Біш ат ам ад УМ Бе Бу УщУ зи пгущ
МО НУ пий по два фе ШІ «ак» о 3У «ТЛУЗ у ч Ох ух ММ алу ціпок
Си пали лу ень «ВВ» ВавсЗ Бе секенив кг зах «капОоз ща всі я - як х що спажхчи т лщо тд тр м т як
Ме опехж дім Бе дез бій Ті Мі ТтБж Був Аїа ЗБ УВУ ОБУ Буд МО 3 - тах 5
КУ - М бі
Ка Жоже си сф бик у Кук. шо пак дк ЛУ гм Щохх дожту ЛЗ бору
ВхУу Му Жук жТик Бук ВеЖ ЧУБ 'ХДЕ Су УМО пшУ КВТ МЕТ їх КЖжО зх уд зт «М и Б пхруце сш учє Ж о фону КІЗ ку чих лм, ЗІ ЖІ их чі мух чи ія іх хх
Те Бе Ха флма 3 У су Жлю вх Хлш АБ Маж де ТУЖ А вай АК поту У 5
ХУ я р ково ОХ жчжкі ЛЖЛ с ЛЕ прю ло тиж Ма фе гу Де ХА догою Іру
Му Ват бу Му МІВ УВА біз тові бі бле ТУХ Ар ма ва ТЕ тт -иї г
Пп Х ТУ
Тажутю Плсю шу Ужфрує, орружю ЕЖЛЖа о Ж теки Тууже суще ки дум 3 во ФУ: фут пи ут ож рве оди сіб дао ТЕ бує ТИ біб уві мазі Час біб дЕФф мох пт чи: Укту
МУ ЛЕ що як ут пу біжи см хи дж ик Ж су Кк яму бриит щозжа Можщо бріхєї фор
Зк ва. Куж ОМ ФМ ОСА чав олаекх жі п бук дет Бех бу ЗЕ Є фе й 55 5 кю Ж дя хуя ох Жозе ФТЬ ВИК мож х Зогивз йию З жи Кох но сія сала ЛУ
Ваш ши ДЕ АЖ СжЖНХ (ах ОА БА ха АЖ ж АК под ХЛ Же АВМ і05 195 ЇМО смаи тирмя У Ж тов «МК єдруш дум пі хи Ж тож Ж о в іще фе суд їжи СЬш дів цео Уві БВшШ Бхю ав ФіМ хе зу Ха бдМ ЧА ХК зчи лк ца
Не М я. ж СИ вомних о УЖ ту зе Л пцдє ххх мед у муть пуф: ЛИ ХУ ул С уз сти чаї бів Ах 1 ББе ух хе май Маб бку с ТвХ Худо тк пув ї30 ї138 145 п о ни ста Ін пул а КАЛ йххши ДИ КУЗЯ у бики стовті с не; Мер 7 ха ше те вВвл ОКО пі Сам му чт ШО ІМАЄ ЗНИЖКУ салі ему Кіт Ол яв: зх жц ам
Бах Маю Ма ва лу ле пах ше с жу Ка ру Ж сл тету подію СЖИчІз Сл и дах їїю Зею о ве же бої їмо била ба їні Ед жу АНА тва Че п Ов
ХХ жа Ух
Я пі пах (Зх да о шАМ ШАХ АКТАМ яоУкІх
АЮ ле яке «Дух Ук «Вк Ба шо л, ут
Ин кА них Філії дк уч ска Мед шАЦЕВ ПФК
СИСееанья Оу ! ли хе Н вжи гл ж т ах т що хх ж тихе ФУ хе що хи ту бух тд т ти :
Же Буш ХА Між ЗА УВУ КІ Бжа КАЄ дво ож Сапа ТВ пуд ЗА Ід : х х Ма І : рБлиш тими сб м уд Фу Це щу Мне км дм блю СУМУ ее би сх :
БУ пушо теж СЛУ УА ЗМцо КМЗа авЮ ТМ ім мптшх Му ТЕ дамо ТМНх ДХ : ша МУ Ба : тд: Ша Да: йукті дю ти бо Зх же її Мао Тлт фа г Хлик ли Те :
НА СВК сАШЯ: б тх у М дб ОМеЄ Бус АЖ щей о Зув ха Буш ЗАХО ОБКОЇ :
Б 2 ДЕ Й ш хх 45 Й шує бе Ше Ах щі ик о їх «см ст м ім «хіх й лу Му Лото кутю : шен удо шЕХ УК сх МЕ МОЖ ХОМ бе ТАМ Я УМ А КУМ ЗЕМ ОК МД Й чи п км : м ЛЕ Ух :
Зм. Буш їж стю Би хе їі Ам їх їх тах ТІ їй хі ую Мухи : кхоО ду СалЬ ЗЖЖх мМ Буш Ам ОВУ Ма ОА Сожж сі же Ал ав ОТнХ : т -ї- як я :
ЗЕ НеУ ж ка : тм 91МИ М Дію Жди яю Сл «жду ше (ТЛ фр лю ДЕ СЕУ бе А Ли :
ЕКО ЖПХ ЖЗУ їднМ ШЕУ ЖІ ЗА ЗЕМ ха сумі МА ОК бує МИ ОЦЕ : ац я п :
В З М : хів йкм ХА ОК 1 ФУ ух Моз дме ФМ ух емо (оч Ж що «лу лу ! вів гБхе їі сКЄ бій дів ко дів Ме сій ій тех сл Уку хм МА :
Ух хи хх Н в АХ Кк Й бут 5 М Томи УМкмсих ЇХ фічщі ут хм о ту лу зл уми Їх дик ух чаї :
ХМ дому ЗМущо Мо їхіт» фууБо їмо Ме щіль жі Буш БЖ ХМ Му Сл ду :
Ка и МВ : їм хх їдк фо рих ди ЖИ Мох СІ? хрдО Жохгщо пену гі ті житія хе :
КРАХ ЖК БМ БЛМ Ж МАЯ М ЖАБ ММ пущ шлях ів ув пл Уа : я лю 135: тод Н
УА ух Аж :
ел ТозжемМо кт хі ст кр тужеч. Ж м Ток хі ую Хе Зак Ж лк. їж Ши
ХА БУК ОЛЯ ОА РЖЖУ ХА ОТ БУУТю садю Буг ж Ума Од Буш БО ІМЛЮ 4 ккд мк ч«щ шт їч5 УЮ ВАМИ Али теуя с фу ки Моє Ухачисо ХХутих П1ЖУЗ Ж су уж я Кола уж УЖуиу ж ї тя фохуки
Уві іш см Бук Бо Бк УЗА дів ро БУ БУ Му Бхо Дів ІМ Буш
І У Мт
Тіз Дед бМа бхемо бал сет їй2у3 дош лову шо ам СУТ фбяеех фун Лов пе сл АЕН ТЕХ був жив дер Маї дв Уаї п КО со Бе ЕКО б ЕКО ту «ве дощ
Іо їн їчО ун жі тах у бли Ти їх, бан гидоти ом дух ЩИХ бли тд пхх ко Хі бе Би Суд ПУБ СМ ТУ пев Та деЖ дв Уа. ТА Буд ух вх сит тувук,
ТЗ хо хх. по пек ню Я их т кл до фбуту Пл скл ду йохує хм Мишко Тек ую ве щи їж пах п їн плов іа Ку б їж ак був Мак бу Бу ЗАЗ ЕВ
У ВУ ха тіщ Тіт бе пу (іо У душ ідух Вмур боур Тато тій юю пе іт я хів Хі пек БЕ лій Та пуд о Ццжа Аа Ал о хаАФО КАФ щих БО щодо жук сут тек ц піду хи Й че КОДУ як тод бле ля дому лЖиі Ухляю щомр ст лу ЩІ щико УуУхту тло З тоже духи т їх
Мушу їв м МА ЗМУ БА дано Бей оюжОа У жа бу о Ммут о за ле ва
Жемх симл 031ли му жі мл рук усу ІК щі їж гом тах шу ха Ту дви о шУуу ай АФ о УФО шЕш КХО шай УФ щЕжш муш май ОЛЕИЙ Я. шуу ревАжтя КОХ ко дм М дю Му деко уче сив УЖ Хо Ха Кі долу ХАД КОР ех дже су хе
А біс Уві Бех дже пав оМаї Бук муВ'іяц хапає жі ля а 1 75 289 ЗЕ5 сю Лія сно А б жим їх (3 Лмту ЗІ пит уки Таж Місії сим їн І ден ша Мп ща БЖ МУЗ бах Лв Заї ат АБ Аж Ущь ше бясб мал сл зах КЗ р зи КО сл б бою де Ми жи пу Ті ки Фе ух Ммки ЖЖ ХК тд тд
Че пз пув бій йни УВА біУ Ява Хі Уві шеєЄ Бис сій УЗА беж щмУш
ЗИ Ід ЖЕ ТВ.
Ж и жук тиху гл рик Ж ши Жуля Уки». М се ху скит. сн що 15
Зі Вас Уві пдіж ва дів Уяї беж Бхо йяв аз бек о пую ма бже Уа тц зт ск
Зх зо А як Жах фену фу жи М х фрмач фмес Аику у ттжУ Жди ді. дат вка. чад ЖЗш вк) спла чаї її ше бже дних БВ сах Мет ше ди ож Ме хд де зщг
БІ дж ОМ злуучино Же Вже жому жів Жахи: ж би; Ми Ме С ше фхиую ди; ж: Му щотух. ка Хі Же дзв ово Кощій рЕо рхо да охів Ме о ржо Хіж Мак др же п 75
ЛІКАХ ЗУ ШКО хх дев чн на ЕН ША и А НН кре жа ан бал во жо йо БІж Ме Без дае Мес дер лев ЕМ МА МЕС
ХУ Я па
ЗМ ах в
Ухил Кіз Мих Ме їх буді Мк щує ку що тету: фоУЮ ку Ж ФфоУю АоУХ
Бк дз ек Ме Бк бі Ме Боже мать Ввхль Філ ще хо дет щей ОБУ; з УВУ УБ5 м ее Яиша с ахтх сйту Даною дишло су дути. дківо іму Бл йо Во
Бжху Хі Мес Аве Аж дан ам Вино ЕЛ дж Мей Мей ше гає Мет лео яп ях йтоц
Я У х Я щу її хклй сп дош «Ура вжою їучих Щеня Му Хжиую сте. Ж Маре дат щу Можу ТЛОМ я вАзт дай схо Мен: бут Ваз Мей Мек бо Її 2-5 Май ЗШ аз ба ЗУ Мех їй дих вс пк ЛЕМ Ого туч Жах яса Жщоде сйу хо ве пу шу жду ВІТ кю умо ще Ми Му рхо дви Ма Мет вхо їж БМ ЗВ зни Емо НИХ БЕХ лим! Мщекожнає
Б зад ре 45 їз Од: Ти ому що Джеря ик Хм ща МАХ Зо лужку Сб су МОм дл
БІБ хІіж МКК Блю бди ба баб ощак БиОЗ вв Мел о Має Ей дав мех ЗИ мис ус зх ди да ЗЕ т Лоту. Мт Мб чис поши ВЖо. хии " г; жу пи до о С жи дви дж За Ме шу вда тів Мес: жо ве мех дво Аа За ле МЕ хоетя, АпІ йСт дух
КУЗЯ ХК 475 уш 5 х Ж з їх У та, Лу, Тех тка З де Ав З ку Ми хо Звт Шах Ме Бус Хі Меб вро дей оса БМК Бу дам Хаж ХМ зи ; дах 430 485 пе сло п. ТУ, бут х иа ДИ Ока ке ло ср Ми жи п Кия Мах
Жже ла Ме Аюоа дп АЕЦЛ сх МН жо Аж Меп Мей жа ТУ МЕС до кий тує що щу сгвх Ма умо ум пі ек до ІУмиу Зугує Із дим дУюоех чом і му деки ввиа ОР хо БкоОо дви Ме мех Ву сБую сім меї БО тек ік сіл 55 Ка ча
Вста Меп Ме Кт; шує двоє бух Ук їОа ба ме вав о шез Ух слу ка Ба НН злом тУм, сла ух гу іх ті їМииу УК їі їигу Мі Міс се др Ід
Мей бус же іа с сліУ Віа БиО Бе о соуУ БО пій Нащ хи ща мех паиц тут, пок тур леКТ ЛАТ жи ях се ши ПМ йо сих ун ошШеьня т й дет доли Фк Ким ко ЕН вже Ал са Аво Мак мес ко Мис дню ще сх Ме Ж ЕКО М тах
УК Оман ЛКК
ТАКИХ СТ ЕЙ
УЄіую шУтах УТІМ і Дома с УТ ю ким ТЛ п ах тую кі тм суми гу їх Яхлу ск Бл АШО Ж зу УЖ ру юммеу АЛЬ ДМЕ дкщ інем Кеш ШОЕ
Я Ох тІ23 шо по І й УТА Шу Ул шли дужі ух сх Ж тих їУуєхї Туує Мимех хи бю, ух
ЕЖко сл ЕКО сим шу КхО пів Теж іа ба ке фвю сКує ХУ ЗТ БА г
Бе БО 5-5 ок п о зощо пихих ДС бек у б тую ЛЬ А ІеЮ Міді СИ СТ БОЮ му тм Зм лек Лів осук хв о вжв пів овБша са ЩИХ Мет о рУх срУух І ОЗ
У БІ я
Хету Прус йо ве щі бід тм бли бу Ол шуує Л31а (1 Ла биту Ла дав ЕКО Бо дви о УВУ Ве ші доц Ко в» шеж СК Одю шІмх аю І кед щ3й ду да
ВХ о 5 ок зів осів Ущі «іде БІ «шк к БУК сх ду пЕдя «М - ІЛИК ник ФМпсні ї Я м ввіз сиктнах «МОМ ех о Ту 3 і дк пре тре Ху бін їх кр би учити Ко Бик хв мет Бе дій Аїа маЗ Схюв Бе БЕсО бик бід дар бук Бу СБЮВ Буш ТИЖ
У КУ Ме М чо Її хуух ббєдхує У яж ббмух Жрай бух мує Ти (и суму ТУТ У сухо ера Кум мур й леза Туш Су ТЕ оМе мУшБ ШЕ Бей о бІіу Уж бій аю Тут сш тн ж В КЗ вх ши НИ НН Но НА АН Шо ях жа щу бух ТУруда оплідечиє кю клі ох кхм ЖУК БдТЬ Му Ве дів Се Огю Ох Ба ххую пдв ОХХЮ ОСЬ ОО Вів ях хг Я,
ЗУ а 45 їла жу ХИЖІ ХИЖІ у плату "дар Ме Мих о тохкеї Тухуз сте стих Й ЛК там бін о Був УА Ми су УЮ З ЕВ Май Пух ж луУЮ ТВ ЗІБ Ме
Б Ук о т мере дохої ті Пк іч Ж Во гу смучау суха дів сжі и утри пе
ВІ жна ій; АЕВб От ТМмЕ ВБте Бе Атв сів тТуб Бук ває сік су ТЕ -ї - в и «а 5 ТК ве
Ся що ян в т Стих хи косив. стеж я 1Зсу жи шву КТ я
Св вна Уві ВЕ СБ бе УБЬ о вБеа шежЕ йкУ Тхр обЗа лід до ар оси як яй Бех тех х я, кити, Кк щ І 7. ло ст ТУШ з хЗлях щи т ТА Іо.
Те бот Тйк бі Ку: піз Бебомь сук біл Пішж М; бай СУ МЕ паЕ доти «тих «хх кеВ ХА МА чок жтиш Фднях УМ мих ях УЛ ох ЖшКу мя сих Уго шу дача АЛ ВТ св дик хх Тбопх тУух Ам обом ес лев дах Сб Уві зЗшх лез хв олаа тла т
КУ ї и. от КН
Щі га т Жіму лід кл о жу Си УЗ Ту бли Кім Мк нт спра З бат ораж ім цуш НлЛФ о біш Ба ХА бах му ОА БО Ток ЩО вх о тіє аль зи чат ам Мао ши биту Мі жесту дур рах еру и пом тал хи Ас дат Ходи йо зх ще гух мех ж Мет аж жше ба ОтТвУ УФ ей пд мех Ужна Двома ме ай 150 МУ 15 ожих Коня Б ИАНе Зах ву зо ан т Урі: сут КЛ ТУїхуз Лю Аз пух охле лу ВіФ же хіш Щщаж БхОо хі Бе беб бі Баш вій бе Бр
КЕ їта її
Як жи ур зи Що Р ю щ З яю й хи тує Їде лем Ул х. хухр у вів чУвІі МВ Те Зх о сбві бій овіа вза СУ пе Буш Меб Кіз Бе тих чий те 48х 155 УБ і
Зі думу (зх, Пет фбоме де фе р Те ті Зв о тм тлі лштх 1113 які виш ща КіФодМмАт вхо вх опа У цу її Уувз)3і леж Бец п АВМ Ам вк дв че 135 ОК чих тт х сш Що жк Ж. Еш чеку ших Ру слярдуі 45 Жим уд ді ти чаї дат зу дів був іо нів був ко бле мазі бів бу Уді Уві ї1к суху "ук тва веж ЗІ ЗО сл ї З КАЖУ шле ш-х Фа Му офорт Мам сАхту СИХ бамту Шич:х ук ві дкщ М3із лів у вий Ану Біне ТНЖ Б» міш ле БУХ Ащюо да ЗФЕ дк ОО ших Я стучу Уроку бТоруух Їх Тих ЇХ тд дУкіу МК, ща жМі ж ут тах (31їх щук
ТК дек ТВЖ Бец пі це іш ПУ РхО РБе УВУ Вів віз іш сла мех си ц лк вач
АВ дО З:
Н - х дхт се тоже ща бана Св плекає Медок б; стфюю мою ел нев овек ба лЕШ БЖ Бена мес пев же ух тих Бек сб дж лк гу зав лик ячх ем ших ТЕ т їЄ тд їх семан худ те бКжж хх т; ТУТ Ук вих бом. бю М пев вх Муш СПТУ ТИЖ УВІ бів ТНХ нів ВД ім ве вкоО са му АТ1а третє тд зак
МВ ша хх що ие лк доро Ж дм ЖНетз и Мах ше СБ ко Ух сх фл момиу буси їх то ЖтІМме Тмда пе оба Бпя їхкУ Мей дЕжЯ дл Був сть уж Ват дит ху ке шу ЗО ке со дк героя сор ЛИлУх 3 чи тлу Ду Мих їх ТУТ ЗУррд Її мм. ТТ змим Урих
Тер» ЖЖ МА ЖБЄ Ваю Ме С1у дк Мах Мей (у ПЕС Р і Бе БОЖЕ х де лаяв слуй за 118 т ав
Зах їй
М єм о Жеюююмо Жомхе: Сб бу саме Ех що що Му ую Ву зу Мбжно сли мо їжи Ж ки ТМ Укутих, ці ех Бен; її двб У дів Ко мес Маї Ме бук и Зі чі БЖ
Же 3 За меч и и и НК А НН шт тою тд екю Коуреу сек ру ал ож КЄо ув ощавВ Аж Ас Бе жу б тих Мах пар БУВ щук ги
КНУ Зх щей о вже ШО
Зах му іс боку (АЛ У ку фе Мп жи Кс оч ян лк же гих хз їні ХУ Ще Бек вхо ик їхні ж люЮЗ Бь о бев Мех лів ах вас ШО їдУує мл Аг м селую її дах їду ЩА о о о НН тах вт цущ Со ВЕ КА Оу У ві Дай Ммуш ли шу з зчуш ж А САМ Ух її ТВ 8 не й х сиру УЮ Сх БЕН Яну Те доеча Тахн доєхуе селу М уєе Жили 1 жор
Віа йо Зак аю ую бо Бе жжю бай вже Зб хз ор оМех в щем лок: 82 Уще аг 3Зи5 ЗВО Ки ру туру КЛ ку нує І т тик и п жк ду Тіт и ему кни флухат ве сіц Ви УЗ лож му деЖЇ Авлоззи ВКОо Хі СУ АБИ ОбТУх шЕЖ ОСДУ доц ГоБ ЕХ а ЕОВНКУ ша ср пу сл ку сука тах ту лох тіки ххх ща ЗО Ума т бо) том Хухту
Зм жд бла; ЖІ Ще се ЛУ Хв пи бу Ба УВА Бе жів бу вх да аку 45 ті Віа вхо хів Бех Бе Аки діа шех Бей ро шіу ме дра діа і с аг да 435 а 445 чаї їжа Аа Аврожіп пі? Дав о ВЕ пле Акоа дар обі; Уа ку ах Кн чн ЕХ Ех ххх ие їх їх Ізанух бу ХМ Здез йбких Фуко рух їУрих бух Ку шу
Су ев Сла БВ Бжо Тхшв Уві сСіу Меб о бйЄ Був бевт Кбе Ткв бій йо ака али йти «вп їз Бе «во
Шоу ж ук пи Я о рю па пу КМ уже хукиу Кая ЛЬ їх ку ах сів БЖ о жУж Увх Ввиотде КУ КшО ше ЕК Бош ЗІ Ада шу СКК 485 З 535 лу 0хж шо жк щих сум и лу слу додух «Ух УХА: ВЛ ур лює Ж м што перу ах маш оїкж Б Чо Мах Мах УК БАХ СУ а длЛЬ СсУЄ Хлж хі МК пи ЗІ щі
П,ои М МУЗ. а шко йиєеж о кує у хай МУ ж окнх, А т фс М яю Жожето Ло тра у СИ ях ну іх да шшх й ве обпх їдиз АБИ фол в ПА ШО Дж же ЗМУ жу
МТ пам куао
Ж гі чо їУї3ї уз тк бах М пл іх бл Мт їхщ бід тУ13ї Бл дів пра тТук біб Бех Ті ем ото СУ іш 2ви АвБр Об Ха сл ви цій ці ца дум ла Кк длаю Ал ти іх хв ге п ххх УА Уха ФЛ вх Має тю МІ уки
Ах аа Їіш му МД ЖЕ ЛЮ Аши Ме Блив паж ба. Маф Сук Вод Суд нах ВО ЗХ що три дід удо тлі Мао Щлїух КІ Ущої о сбйтуче сук тя КУ тУЇлА т томи лоза пе тудх бах ви Акч дію два УВО ТИХ ЕВе о тля су ім Бема пуху цу
ЛУК УК ТТ сов ен що Ми Жодіх У вх, зи МІ 2 ря у ОМ ях Жокищи йо ло боці Кт пере си їні Меб зак бе уУє лЕМ ОСЯХ МУВвОФфе ку УЖ АЗМА СЕН БЛУК МА с Ку ОК. шу
БУ ЗХ шо
Жуки щит Стрию Ж мо її жі щу; Тих Тут Ток сте укр бота би ток
ПУБ ММ ХОМ ша Мах МА ям дю їмо БЖ був ХЛ Ох бе Фе В
УВУ ВІН 55 ха мив угую почх чт ти тд віх В пу бл фтхе флує б би хх ві хе Акб дуб в хід сю вав ва ТУух рез спі Бу поч ії Піх вій пів ДВ пах пах сим холу Ти біхе Мік томі да дому м її: ду уд зу зи біо уч п дощ їси пає деко їх Уві Ж Бо пі уві Уві хо Бе 1 бу пу пух че щїц мії пи пли м Бе і- ЯН ї жо а Тож лох, ізн Філь еж пес пу опо
БЕХ тк 0ОощИЗ жк
А бути ко а
КОР аННКЯ мІТЕ а п -мря дві зи кремі
ВОК МИЛА НАЦІ ЛАТИ УМХ
СН зх кам АХ
Сун тож ах Ки ли хІщ хм хг ЕНН шви КТ ме Умее Тс ри
Мет жа їлмиз пи сухо мій а СЕМ СЯш МІ Опех ТА АНАЛИ АХА ЛНВ ЕМ дІЕХХ жіитх йжа Був ТЗ У мій Ша бе че БВе бу дшіу пфу ІЙ чор ех у В зи т5
А ще но ЛУ кас Кк вуж ти : деко ку СВ ж ХЛ, Панно. ТМ: що ел до ха Клод ти тТмЄ Су їде мл ХХЇ Бі хлЖж ща їх КМ Фі бла Ущл см лк за Ж Що хащах же п бли сх пе че фояю туккО туту ТУТ ти Мои їз
УМ гаЗХ Біне дна УХА ЛЯ ХХ хпЙ ХА ША БАС АБО Са Ла 23 5 хг ла: тлу до тий яр Тома сїйтяю Лу тим Міс пує а теці ле ще
Мал ма жа вів Муз Ма їм) Зім обі був Мав ожиакК Уа гені лероОМмес ак -Е шк пи пл ЗУ
Похає Жохки їомкжя о жа їй их Уж щи Му До що бач Мк Дим ЧИМ о доту Ми цат їм: їх дат піб ї5и Вів уз БАБИ дів Гаво ПМК АХ ом ЗАШІВ МЕМУ я "ж сб За вх То КЕ Б вжи Ж у їх о УЖ: сЖя; ри ФУТ; Ж фени. им ЛИМ є Я» ді йду І;
Зіш їі Тбвж мів БК Бо бі б бею БУбз Бекотак бе Мі БЕ му вк За 5 п що зи р в ИН сту дих Яд У А чес Зх то слі хЕщї
Акт ем бі еще о Бео Чех ге дів ів чаї ей ТВ був бій Ві 3 па як лож чи їх АМИ пк я фе ДІЯ Ж М сани ті З су 0 кни Мих УВУ; думюе їж
Зі віх ху піш ХА до жлжЖ бі МВА сбСУуш дліш жи авев БисФ йпех ПУ
Кк ги дух ка НЕ трехж їхених бу» бієа да Дт» дич Алі Ж бо божщи дожа ХЕ стю та
Тс жо оо БУВ о деш АВО ХУ ай шле УВІ ПУБ опспК капі гук жа ХМК МК домо 45 дат
АВ 45 ХІІ са тю сою лих Фотуюу кує Ше. ТМ бю ті 1 и хви 0 Ех, тот. бору. ух вч оїюа Щек Мес днвш беж БкОо БЗеа УВО Між Мід ТМ Во сем Же Ту їц дол ти зд
МЕ ї5О МУ УМ зов щує тиху Що З прю сію тиж поши ую дих Та му ил я що ТУ
ХЕ Од Му Фі о дл ОХЖУ Мухи: ко Фмаюі сю М ХУ са РУ
ЕВ Кт хх кі Мо іх кет дей я ід юю го бум вер ЩІ рах Ж хе ста ле Уггі вищ САМ пед лк ож УМ Суд БУХ ЯМ АЖ КАФ АФ жу
КВ Ма ВЕ дою лети их яю ІТ М думі ДОР фер и у бод дну Може СЛ чт ко око зви осАУ Зувоїцу оз СувоЕжа лов о сСув сам ок ла УЗ Во їхУМ КНХ хе ям Ма шо буфет би Стогух пл и фею 1 хе іа бух уп йчо ТБ ту рва бів сій дк сої сіу іа пе Вви три тр любу я Й реве ся щи пк кий 153
Ех Оу це Х ви МУ кутка, пд чех паями К, из пари ки «МЯк Вас кзив сауни
СОТНИК Зк ум Мих БЯж саке зо гама щі хін и (А оту ХО, шеру УЖ пика МЕТ є доутх САн
Меї вів їжа Ні Зі щіУ Ф1й бе шаї сій аку їщЖ Щех Мій дви Аж ї з 13 їв кла Ж Тим ЗМ дос ж ж ур хо пихи їх: ЖУЛЯ У що жо тим вк охЕ о Меаб Блє Бжо діє ЗБ ОСІ ха Буш БІ БІ Хі Біа хіФ Пе ве 5 За кр лю Фі Є скло дачу токиї Ед са ду Мох опиту жом рію ву жокде
ІНВ ХУ СЯАА КА ЩА АКОУ СЄ УВІ дл ОАЕ ЛОЛА ТЛІ БенІ ЇМО ОФЕВ щеНХ хц ат ац же ве ноя чл ру лах мих; 23 Мудх їх же іо їж по Жт а тму дж ТАТ ток
Хі Беж хх Ав оса ваш Се БІВ Буш БЕ важ ла Буш вка Ем СУ
ЗО ух БО
Мах мльок «кт КК, одчрю СМіщряя А чних жать МОН шУ Мт Ж, джу сим лу кош зад ожах Меп поля йашеа Тахо рУух ВУ Там; жЖнв ост ха ДВ обу х махових ек свт ек й ре М т по
ІйУЮ Тло жу. фра 13 5, А Біо сек ду пХркх пу ах чи ХЕ дою ТУ
Мет Бу ств БжхФш БІВ Олу БЖ ОСКМЖ фа Є бу ОЛу Кук СКЛ меж СА пе Б 8 худі пу стю шІМах су о ех (рах ач ЗАЗ та щі ж рих даю їх А тах дпа отУуХ Есе Ід Мас Воез шуУ ста уаф иа Ма тіж ДЮ ОБКУ Ашо подо яти ж
ЗА ли Ам
ЖЕ КО Су Ух о Мепі ох ому му іп) су Бек су лот) іх Уш МАО мА ау
З 5 Кс хв
КЕ Ме Мк зу Хр ож т сук тім рі о фуєщо жод туу ср жов Муз а їх стем Ж жо ЩА Зал олкжЖ ж Бо3в о Сув був баз фах ба Мех Чів о сМмо Пув МАХ зи тр; чив
КМ А м її таж т ро ую І ох ЇХ кут Тег хх --етї двух дж юри пн КИ ух
Маї ЗВ осла іс АВОр віаД БЗе дкя го дво о гле Сем оМаї є вх су 145 т тр 1
Мах У ЛПУ ви зі мажу; Мо пухких бфки тозжш их тож ЖК КА т зх хх дж ім зи хі вів вд іФ бр ЖИ Буш Важ Бук С1У ув) Бу ОБІіУ ваш ей йза вів «шк -к «п
МИ ут "хр до БА ко іх дит Міо Шьих ІЛ ли дою хі дату рію т щу т
ЖЕ дже із йву дж МівБ На Уві ла) лів Чаї Акщ ослаб щаї дез ув я зак ях
Ак. ДУ Ал торхую й тушу «Зах Топ кут ехчо й фо іт Ми. Хм М у у жк
Нпуш сш КЖАХ УМО лдищМм лу ЮМЕМ Би УФК МАМ ОБРА ХВ с У АХА ОК мА хх зей за
МИ че У хи їж ЩО пах ох Ух Ли чию Тр Ок ох КУ Що ді. болт ж. дах Мі Жля б Аїво сени іш де дово дів дЕБП Ей щі пам ее
МІ іх ІВ ту є. лужне Сб Ка ща Ж нн й тох боахму У КВ фа у дув ті рхо Как бхш Хі да бів БЖ КІВ БОМ о Авш бо УВА бує Уві Узі сууУ з по За зв
ОКУ м Ко ХА А тим ти вух ДИМ СЗИКІУЄ Ше ує НО ши М хжету ХА дит Ху тич дет хг цтво їла МЖеж іа рмих Бех Бін Меб бів дк Уві дер оУаі кв о Ане а грали БК сушу
КЕ ри по літі щу щі біз хлів туї имщц сля пимх Млоюю стр пл уро тая ах вт Бах Ж хі жмлЖ Са із Буш ШУ ЗМ су фі жа Олю СХМя уж яаец пед «щи КЕ шо лик «ях Кт Хм Дяк СМ Сх Ж мк. и се ож ЗК Ки чию ЛІ ик
ТЕТУ ше ме ж ДАК СЮ са БЕ ши о ЇМЮО ХУ балЬ (М
ТІМ шко Мих оо ИН
Очки АТАК ще ев и АХ Ж я туги не кал БМ рано ная жк их 00 КМЗ ДН НКЮ сит. Б «Ша ОЛМЕ век Хтію ха іх г Ж бе ті і ом перу мак ТЯ М дит
Мек ха тва Її щу де ше ЇЗае ті Віз ДЕ ТУЮ Же ТИХ дЕМ ОС з - зи 425
М їх її Ку суки й я їни ри іх щі їх тихим хх ті тих бом Є УМ ЖІ
Кут са вжи гБпш ВАВ Овід пи БУ ОСІВ ЩІ Хаш фе пе хі Ме дід зе ря Зі йо КІ - пфраж о вам ди (і Ж Му игує т йому МП УЄ бик йехоу Ж тиці сиру. СИ сі ах запо Ме стУух Бак БД Аа жа бек Бжо БМ бе Зах шле
З то 35 фл: Тл; бич о т вто ді би їла Хі вух Жук хі тищі і нм Би про іфнем фл іззи йху Уві би) діє Ті ТБХ ШеУ діа їм ба пер Ба в Ох Ів пі хх шк тіж ЖИМ их Мт ЖИМУ доме Сім Мку І вера умюю Жхфеу тут доші пе сам ошНК щу та А ЖтНвМ АВ ССО КТ бе сзми ех кіна дув о лЕВ жо ре -в «си тр
КУ ху ї5 Б
ОО ба и птВ. Юа УМтрУЄ лю Тома ау ЛИ лх ті лок ток ІТ и Дх сліпотух ТЕ оМуз дка фих Яек пе сум пає рн бо сах їні БЖ Ах за зп гук їх За я рю іо. Же бух Скла Дб ска у й жен стату ЖИ їні дже бах жук йаво ша кто яЖОЗ Зек див Мій даю їм З дме же був опе биу МУ сві и зогук, зх каз ХАКОУ вену та не и їх ее пу у, ту яти жи тих ши біжи т, п тУуЖж су жВЖж «и СУА дай ТВ да Мет ТК КА лі Не ТУЮ Ста АД так їх че
КА я лдхла тТолуєю бом биюю Лоді ею ГЛ Шок «Ми склу Журут Може Жуки и Жим йо
Па їм; Зако осв бук Зима Буш СЛ АК паж бло вущ пев хх біз вий оту тд Тит
А 115 КО
Фодкту стих Стікзху Си М лучух сксу "тк же щшл Тут тових т так лі М хи хи ли СуЖК КЗХ УКЕ деВОО ТУХ АюЕрощшо ЕВ СМ му мм АВ ОСКВУ її НО МБ ХО узжш сен УТ я или що т сх їм У я, Му Хо Ще пек Ліра Тобто
БУшОжЖМК ріж між дім МА КУ МІЖ ваш АБИ ха ху КИ БМУХ сл її8 ЕТ МУ сгету МБ тА де Шу Ал тва ті га; чу уртУ сугхмо сРрах ех СТВ а
Вс» ЩШів Уа дДБИи Вдто дів тв її ін то» ій су СЮ ди Зх ща лах зп зак 455 АЖИХ іо то Жах: Ух» бовут Хфусу Зі» фею би блю я хх їбхуї сх цювл о Ул Моє тує їде 01У ді Бе о бде ББе бук бі Мі пішж УЮ СУ Заза бує ТЕ
ХУ Мои Ну тд ілі (133 Тл Ті сою Вів ге й си Жкш Му шЯ їкоу бе г цУув пра иа Та ї1е ТЕЖ дів са аа Сід йхш хи Уві БкЗ тує ВІЙ
Уч тус БО жк реве деше т я хо лу 3 ІУ их Тошуує бфких п реє Ж мо біжи зе М У слух Кшучі ож вве іш Бе діа ББе при тат ввО ТБ їі ТБ Ажхж ті дво паж Аж тиху тех тис: а хх ку хе Й о тм Ми длюи бенки 148 кА би ТУ им хх Хати ху ср дих жі их їнщи Ма БАК СБуж Міш вів бе Ба бе ТЕ о БуО слй та ойеє Хі су 45 БО жа
ЖЄбука СК у хуей С шу их лиж дя ак ни и не с Шк Во нн
Жипи тео жу в об шо ЕІ ЗМ. Хв МА МБО СВлХ ха о їхуж АВ ОТАХ зай ЗВ За що у ОО
УУКу.. УМ и хг х жи
Ти оту сві ух ше прю 155 вежа Мих ве ТЕМ «иа ша «Вій» БЕЖ тут, чн Я
ОКУ. ПУДЖІ Л.О АСОМ ИНА НАЮ че зи щу тики фі З Тим; ти ща їду кр лк дідо лес» йду дл тям
Шейс міш Буш Нлшф о ШМІЛЬ іа МЖ ЗАТ захо КЖо ХУЖ Влє Ху КК їі 1 3 5 15 15 поля піс Чі шво Мф тт 8711; чи еко вшую ті щі щі ТМ тому міх піш Бо Ні бле Аве ож Сай ТЗ Ме АВ о Тіє Щіш Мід ТВ РЕНІ ад У за
ЖИ саюує ММьх сМжею т ту ММ ю йо Ж ли даху Вл лом жим Ма, С ху І ФУ Ал, я пиво И ЛИЖ Осук до дих й Ме ЗВ тема см Мені с їху Вів овій хи з: 5
ВУ БЖ о.
мисі тях дл дов ти ие лулуї тла бля тома Ля пло ди тома для ля їв цеЗз Аа лдшю су ФК о Мадов ме Б Уа щі б Тео Бдт Олі зи ух У
ХЕ ре я Ж гу дучу Мч дідо хи йжтр й до тб є ху су рі че жа са ода їх без Тих пла УшИА дЕщ Ом ОВ ОКУ БУ Ж НВ то Ка в хіх хх ще я ких Шах стату СМ. тлі фону Єви три шах Прах та. лах дів Ав Нід ТВ Бе Ве ткв тих тав бах ех ЖЕ ДЕих лу схуу Ку бля їмєг ЩЦЙл ту 351 їм: У жи Мі ж 1 1 тик ФУ о бо
Зі ха уві бО1У 5 м Віа ЖК Вів Хі 0105 Віа му БЖ ОЇУ па пр с ча
М МУ У збе д дою хочу Ул (шЧах «іх хоче дя. тлу щоб фак Дю паху фі: Кг
ЖЕО дви діЗз Же Ммув єблх ж Кіз дів Кув із би ВІВ Тих де ЕЙе чех зах іх
АТХ з КО
Кік кує аю мн Я мук ма І хі шо пах ли Щи ау тона сих хг ст беву сіу Бкородій кр обкоа ві За дБА Аа са У ший їн А їз ук ТАМ ке Мах М тер педа Чую усу доз їз: йду іо ан Ти тк. тії їх Миущшо Мб у жилдк опе ак є ям іі му ЕК Ул МО ХІМ ххІЛЕ ох пУЮ САМЕ В Ку
Ка их ЗУ я
ЛЬ ТУ ам АЗУ щу «чл ДЕЩО гі тк ще дл бро лі Чі Вірою ум Тов; Ват лм Ку там о увь пі иа АВ ОЗ Тс опйіЗ Бій дід Теж тух ша АБИ ту ПІД тк 17 чу дахтУ боях йони бе де сПлжюю Ж рю сллям лу ТЕ тіже Дохмту ХІІ дл дом Му
Од схем сх ХХ са КК є їх се Бл о жЮ Май ад Мах пдюЕСХХЮ тий чих ло
АЖО Ам АТА
Хуг щу У УМ тм цер й м т ро Ток апоЗій Баш За Бук ЗХЩ КУТ ХМ МЕ Бу 158 зей 15 З Юм ст «жи
Бен А «які КТ «Вій» БІК да зи та МІУ жири г
Усяке І КОМ ЖІМАК АКТ МВЗ руч сх «ай» 158 су стола с ужух С Тоихих мм фХющо сих убує фу т шах ТМ Ми т шле ЩО з
Ма Був Пуш ВЕУ їнщЬ БІ Рпе Че Су сСбущ Ба см Бл сим о мех Ада 1 во 15 15
Може тю Доу білу бами біжи Ех т ді ЛІ їж би и лм і СВО АЖ їх їпожку був ие був б Те Ве Маї Мув ос Нав ІВ
Ки «Е зх ше Я в
З 5 «муч та душе тіла ЕВ фу дуроух реє фр тю хр тя КУ суще дух хіа пес У вв о саш УВУ ау ке Ей ж МВ ЖлпК Си опи тпж Беж т г. й
КЕ Б Бек пек ля жу Сх юю Ст бо. Лу (ЛЬ ду лічити ут хг ціу мі Був Пл ОЖИк Хі Му СІ1У М БіЖ ис Мі РХюЮ СКУ ХО БЕВ
Ух 5 пу тим Щі ЗКщлоО ща 1 отя ен нево шиі ШО ее жк шШМмию
САУ Яма АЖ Ук о маЖ КМ Бо су шАч ОСУх сЖж дій КО йди Ба с «5 ЕВ їх м сю Ак (Як дж ЩМімо шМІв дише бінох лому де тхмх тт Ма сх Жар ох ек а бум АЖ Мів Те в ж ши Аше СВ обу мів ЗЕ їжнЕ Хжма що т лу
Ж щи ях
Ми Ху ток Між ло ЖЖ ик ж ух руку лю не НІШоН бдпорхуВ Бу ЗУ Зла Ом о БажЬ ОБУ дама їм о БЕЖ ЗЕ ЧА ХЛ Вій ВО й Я сл
Мне Мо 15 ен ок но нови ша и шок ши Ши о ке у хр пл
ЗУ Бак оса Буш Хі Буш Вів лю іш дв Віа Бу Баш ХА УК Буга
Зк сяк сх їТ5 МЕ хиЗ ба; пра; як То спфую «рію р У 0 дали; Тих ому ЇЇ: Мор им У тд їм КО ЯКУ Був ЛИикК жах жав ом Вже Бе ба іш га дБ Хі ХЕ їй 5 зах
Ми 135 Мо
Зх че умі ли є Мих до Іл Жири МЕ ІЛ сне МИ Тл Ж же щу т3з тих ум лав діа дю Аж сх Ме тнЕ бл овжЖОо тих бі ж о шех де з це 1 це їй та5 У не КО режи жов ж жк А о киш іх: ду ж дв Би их Що і щодуху Ме сі Бвш дО Ті віз Су бІіЖ Ух іє Ужї Бук Му дій беж йвю Ме
Ех чу поту
Ма КО МУ там бли жим
МО МОЙ Мт тк п як хишжм Ду сту я. «АУщя хиіїз ща
МІ СМ кл, ти т ік хни и «ше вата іча секеце у НИ ях лі де ви ве мух она і и п и НН и НЯ шт поОпсистадлсе скишталеюим паст помоамиа педа млоуа спе песВик спору що диким ід дови КОН вих кдд мі мкВ рокли Зк ашоююлсавии спсессвасайа перу паца шедшКЛОМЦХ ВОДНОЮ -- смичок су хмару ду мих су меми ми гу мим зщ5
ШОМУ СИС КНАЦИ МЕДИ ДИНИ сага Маха ОНА НВКНХ с КУ КУ жи ту жсущи т спи учи кофти мих о су я пулу под у дих би зжжсвквакжс сасбсессав сабсскскх ссеосавста аванси сопазаво паз стра пк ких дае кави ахак дгхаделе уз пс "ув длассававки сссбиавскос: вакаксиає савахцеавас всвазсавади рака 5 ик я іп же ОА «Ех ЗВ ливу 0 ЗУЩх шу ДНК ооо не ИН ож Ко ЖЕНА ОА МЕ МАКИ «ле АВ рони нн у НН в НН ВН я Я доисадатло плас А ІА КІЖМ сни веавиа сехисавива сплив В «ХВ 155 «ЕЛ зп даїй» ЖЕК ау ау м км ху іржа Ух даю дахах ВИС пХашх пд чшй
ФАВИМ ОЮУ астспвсшсвис чпасовоова плпеатани спек пензлем зем ш гади кет вЕдик кад пика сема ситет 1 хват авовИк сессосвоссе посавкесвач сб зоовквсвас чести шАМ «Елла кавазствоя бевпосзасев зУсанпованх зум яко Ууєх АМЕ дслодаєстла блсртдассв лива збававкесс сода сохму асо зай звтпйшгслвасстиа поеспесбаалов лива ЗолпвиИсЕКсК сававотсощмУ асо ютьм «и савсеовива спиш козсгазсоаЯ шен сала сова Ка «йо» ДИ «Ії В «ваз ЛЕК «вух васьіїбз айснеесів
ДО С
УНК Ми сет ОТ з: фу иа са з Іти Іран. 5 іт са сао клон маслу сіл г я «Ки зсзизовасо сешссмопот зссасесицай аУсзазазсов сала сом Ук еВ че «ій Б
Не КК «хх Щи к хх шаллюиш ацлЕасає «вп ЩІ опуиох вухах ужив сфери и що свои тифу ау хи жк вх тазаваааазча апесесчаска свЕссакзвсо саасЕвсяся зосовечаавчаа часа св. що ікрі жуки рин он вн ню. меру ж Кер пев В квт їх кекссссмо зсаах тих зааозазава васпасватай ашсосенсми капс ЕВ сич віч МЕЧ х зорю Ед ддутю и и п кю ха порицазазов Копасскочва завоаасвсосов сотвааЙсазещу ЧИНИВ ОЕ ВОВК МУ ската соессовама шзАзЗеке спис сзапаатоав сУупавовена шах уж ки як вени ук и кешу. Кох и уз тах східна Кс милу зай зссасапсно чпопахантя качества спритна есе са тідагаМх МН оон «ще «йМие ах «ВУХ іх ПЕ «КУ Васіїічв яаопуснххв «ЯПИз 1Кх оре у Я с Не соти те ди им кв ке пек и -х ща косздосози сс шлат МІ дшиащксаваЗ зстсоаседа саке МУ «ша щ студ пк ик ЗМИт ЩО «віїш ЗО зе Ни НИ Я їх КЕ ку у, пін зх соді вах всі війв ошжужце але. тв ше» ой педоханюяхи Посавстацяемй хлчавлаАц сзсвссаик спон ве сао 5С ни НН и А і я рух «апвлусщє запессимсви вок вОУх сезочакима сов щопеси павсвдоашх їжи пит ут хи фак но у их и Ему ВК од ивт тини Що пику юю сю дю дах, ХУ ше чнио зи спайптстав сис сисвитатва звовезакашт вЗвлишиаваАх хо чвивассесе вовка зскчкесеКих саке садове чав сзВКЕКЕКаа хм сови пИим пссзсесА шодо ез пана песевишшає позах ЗК ах си «Май хв «ум УТ птртря мне жит мИк «ЯМЯ» ваЄЗД ВО «есе. інн ка лЕжШиИх Ах юр де у вия понині че мету пулу ех их сх дю поеми ми ща встає ауд све звкскксезчак звасасавов стеааскскаа попоувсвавосх що боку ву дику нія ем и р улови; пітчиЗ ВК Е пли хи ковиасзста вази КЕ кіЗО сссгацаааз засво во азочаващех 15 сртасстеалУх пабоваваха аосвісанам киев ашссааскам ях я «210 155
ІК бух
УА хУтОВМ «ж ДИУК «А ЩеФІЛ АЛЕ сепелх «ЛК 15,
ЖИТ КУМ пра а и ин и а ніІсхІМмІМИе щбтети Кф мм іме муж оМоО в нн аж дол «савсзазавтс пасли ксЕс посвававах опе ововс поичпасшеЕ пшоушанУх Би порве ин нут и дн пк со ВЕК ВУ ВОК ух ши рем доти м Кия зр
ТИХІ ТАИТАТ МІСТ Це Семи ЛИХИВЛ ОНИ А ЗМІ ВИ Ч А
"ку и и пи гукати. У астму ми мкм лих пежети ви о р в фури ее кавсвавсове состава чаш посі аста вас числа їн фоифоку рити вує кидок кидай щу перен уч ач тудлу сво каса соло акксвстаха звевссвІв папІзизЗеке еспповосса рез пове кі Кедр фору міх дров сутки міх зе чзвасашуса КІаспашоса састасскав вав оа она о ХлКХ кт гу Ек о А МЛХ о чи да шк АЛЛО ле тиша ДНК
БА сег іх схууєтМ «ВА Бай ма сек «ВНІ 155 асо щоЩВваАкьиою зуВЗХУА А СПУСКИ пу ХО СВКИе БМ кусачки мапи гічвої шуютріи вжаЕ за пошнмусщнато усвзаствеата двасиЗасих вазі. за
Коза На.
ОК ее «ак ЖОВ кл пиже ринки вАІХЮ шт тім 3 З Тіз міру ух шум ян ОМЕЛИ МАСАМИ МУМДЕХ МІВ МЬ ЕХ риби ча «ие ЗЕ суді диню поміж цоіВ щити пе між міІю Мі кзоут соцівіе ще чщхо це ци вки шт авивсВвопак зале чех нчанах пемакапатче сеапсзеове зас кУка ни йо сторо етику Мет евока ви палав пек рее Б часнвавсза взабадвазвсо сбпсасплавс боссосатя сававстзвіва асо ЕН пні вини кац Умукіцці в Все це цвіт ких тай
ЕМВ М ВХ Кк Ба у МУКА КЕ ПЧ Ку ВК а пе жона неКККе дв» Кахвщвевик пива викиди «(таке пає слави окх зсвзавкакак Єдиазазсаке всаквзасасс зссвзакас злазвзавиакає ве о в ко ня прЯ гло ім й су важ ув г п Я су ії: ПЕ гу ви хи вс г с сту Вч боявосовв згвазАнКа випала пававсзиме впсзецеа омивача ЗМми «ЕМУу ЕВ
«їх Я хажши ОМ лЖ з х зм фі ї- жк тич ка «32 Васі кМов шпака їшиаАВ «а а зазамссаваес спас сесе пяпІзекаЄ сеапозооае мата А
У їх ке «Вір ЩЗЕ3
ЗШ пу ше я «ххх дик ни о хе ВМ Е ВЕУСНХ В каси АЩВ дор моумучищю активи юки о шфдшеи юн Муки і ре ре рі ді дру ка ватися попе пшсиуно щевпсмтссое птизаечоке спати ате апа кенаюо як дин мм мож іх сут мм и іх дуелі хх дез уєцум дув мумії 73 гу пулиавопстчо шоку вУасимачов вести возили вис цаиивме ща счавозЗзастас зпапеленава споцааласеи зсповиссов щвпсакадиав сеЗзЕчсшиЕ їво вок і мІЄМ ХУ мими пером ми мим. то мо зх хек ху и. ноу ам уже ду м Аг каста маєт земна созасвоскет зкаскаквча воски асблидене ЗУ свв цвиє авекаптеказ збуекавеси стщЕезсвах авбвлота «а БАШАКВ каве «Оз 10 «Мі ВО «ад НЕ ие не ке А ок муху хх
Ока ТЗІ АЛ МОЖЕ «аю ОК г п - с с г Ока нак вон АННА АН І ам ДК Узори о Ак На ЯКА КО вит новіви вобстлевиК совозісако азкеакокав воски ие ие и кахдемагмтиа пед квтк у гу
МЕМ ІЧА СОКУ пи кут г. 4 ами її суїх я ях «ай УКХ ша пис хх Ж ту х. ти и ат ові і ях «Уоут ТЕМА МО ХТЛМ ЛА ХХ
Сина отв
МО ККУ друк ри ю нн НН и и о п у у Я й аАичаХирУхі сазапомею са ХЗаМХІА ЗИМИ НУМАМ МУЛОМ деаце мл лямас ЗО сддюквимме мкм инм пеки дим рек мИєні Клусвлмім тки хх сависасикЕ массвхмаж зиск вв всвсксаса соус опаде тах АК дихати суши мя ШЕ сх сржеу
БО вея ноя «Віт та ж чи суду ІА
Ул туш лід Буді вимі «ие Ви лня ШІНАЖШЛ НІМ «80 УК ран Нр НН се пев о смжщовщовимаеи фе щ ки мін ще шли сидасшЧлал попасти ис пода вовио спав ще дпа цомзаинах за масам вушка З «піщм ТЗ ки зи
ЖЖ жо ю якою МАИЖ
ПК я ри о у кА Васі лює сасвив дж долу
ЕХУХ. ах хижа віче сем оці МЕ фофозуратицтвих М руслі пенні Клін ЗИ що віпаклискеаи Усповииеке Кееснсеая пелет спати позов по почи крему Ус ВлУх хлУх ве ем суку х ей кулууіиє сви позов - КН шВмниУвода зсалавсаав сісссовачЕс сиве а зставачесва бочзакеваЕма ї5а додтелот пКЕпАВЕСЬ сІдт кислі сдедарклих Уоуджурь век писк Е ци вазеататата йо запакак зазілсахчва сзІізаАассваз базежесесе аа што Я су рн крути СК кети щі оповиті іжщови споутіх гфириву уже де ех М. скул ху де ти що сук зе попи хевВО ЕбЗассЗзИзЗас зазовасота алевИшКЕкУк поса ах 230 емо недо ВИК Кір ги лукт пух півсвіту ц в ти стеки сеставсо спесвиазео зЗозазаслосє свзасозовав Запас Фея ния, ще «туту, ОЗ ий «вій 74
ТК ЗЕ
«дю МУ 5 «ка» ДЕК
ТЕ Ж Жар 11 зе етрухетхх хо ши ЖЕ КОХА
ОТ А
ДАК А
-додюї пк брат у ді ажькяож и ро до явки дат теме фе вах ах заКсшакчислаз ссасівзанасо васстазвтва сзусшнаа сота како зе ашикЕ щу пане (парами тя Ключ кчдаки веквиЕКЕки холи Укр ддитх Ка с-сеапаптптза зпдсассєив пимилпаану апп зфккеашеанкпхХ спла Ми ша й г ад вдидагогій вавсикеда скаканана впав датни скан йх :дл каса павсвспсе ставав папка пах 45; пи г ки
ОЗ Я КО
ЗКНе ИНА: ххх ОА ел ких і умі суті хор ко дахи ма ЛА ТЛІ КІВ РИМ ХХ «дах ЦІВ нор іржу МК ОК Малу ср сту щі переве Ми К дя теутдінате пн УСпАУ. ТІЛО ТаМО АТАЦІ МЦУЕ БОС УС ФА ТТХ зва ші дчусуюцує щі ИУє МИМО Іти Кор судину де фе е суди Ве рр вени пацсяани свопзоссасе палко а дела звайксвиє зва х Ку и и Нв ВН в и Но в НИМ щи плазсстсав сілсвовасо шоу васлсм сочечкекак поповеасна ВОВКИ ЕК гемо уче фік ій осв лу пф Куди Кеті ие КВ За лисвштсте зБсеканоно ивкаКосає Ввіпавсвада палет папи аОкох шо числами ковзсосЕ пекан ях зпосуавача сФоахавсоив засо аватх Зою «В І
ЕК ох, «тив или ОМ
СА, паж вас АЩКТХХ ее шем их З Сім бух іже іх с «А 0 МЕН ЛАВИ ЗУ УК КМЕКЕ «де ЗВ пику о жиди сити нх пеки вени диму шо пет ає впоьсасегка впаесесасМ хоащикшио вико Факс Би ера в фо жовт км ев. уже гине тд шале седан сему лето ща МИХ «ій» Р ху чив ух Ми чу щих вою Я «т Федора тн хи см все миша мам УМА ІМИ ВМ ек НН шутерів. вегето Кит фичтціуеутУу: пен ціх як ашіваскико зсвазачова жива зспазозаву суден Ашан й сек і р ууия Кок ух Коти и Мі ква пев и заг чих савани сеча кис ека стрази зіва кЗвах Кк нн и НН в НН НН Ух
ПИТАЮ МЕ дак. МХП Кто оса сел ки в козак зсвошеашвек Кізеосовоа вудаташашех Косвкватею зазавевє ха скине ція ніж КВІТ пси шир ВІК судову где запа зучацзьссзаз зувапозаа дещо се еии сесвозУупаа свінмнуа ЗО
НОЯ т дім І
АВМ ла сій ДИКЕ хлх хи ги М фукру ВМ КІ Кут ки «Чи 0 КН сНАЖ ПЛ НХ дл лшЛНІх кп 17Е ку ее учи хли Ком декор ФК Мате Маса х но
Ер На ФМ ІХИВИ АХ ВИ ТИУ К ЕЕ ПИВОМ АВ З?
ет. пуху «и 175 но Б мс Кл ду то
У КИ пс І м Кл хи ах: же ке сууиит їх. «ших Васі це Зм «400» 175 венами місцю им Жозе пе ЗИМ ВКИ гилтцве я щи шен кех ака весна иа ак МЛС сенат ют Ви н очи мой о . ек же їх и. - - о Я як - в Я чол теме Кен ооМ отих. ТМ век вх промов т саслосвиавВи сСедалзеавеав западає зчшачиспеасеяа все снашм: Мас Мем повіки ЖД мя дк щік ее ці завинив Зі ВЕ зай павахсейев ик свсмве вас ака їсавсвсчов паза веазВшОККе Мах сет нових йон ККУ пива века дети не ит акшвлвавис Фисиписиа шибекесктєт зазсозазсча сисоаєсвох зшиоанпекийає я рукам кіс де ху ки МІК ищо Мфечуєчу тич ую ринви! мур «па авт сттле зо зИасакт ВКшиКУксив КСВ е сема меми. Кк. пап ха
Ах М «їм То
ТЕЗ і пу кими ких «Кат Кент А М пасвоВехв
КОЖЕН їщ «они І50 ху АНЯ ТУ ааоя ха Мету и ех ях кит Гея ему вок я м аж ху Ох зипакттазс пвассесссос зпсссвссасо зоозесквсз Коласа сб У ра ТО
ХЕ Кл сим АЖ ект
АТ ПМ яти 0 йнЕ їх проду я фі мація хе МАЮ МАЛНІ МЖК ЄХЕ ди сш вдос ОБУ ще пф диву чатніхи я падепкмовв Склютев ин кн щи щас веб шс лица сттесва ТАКА СС АМУ МЛК БУ пан нн НН в НН НК НН чех шу лашцое доиашешешоь пбаетесаци водвахсшнаАє пІчАЛЦТЧНИ МІЛЧЧШПИНКО я щу хе га тую п НК НН и НН тех звашивихаци спосо сбСамосанвасе пуегпсаешнатя сут БЛПУКХЮ їж
Мік віх ів: ук свустхще що узжодІЄ М ІюютьЬкоВ бом хакі те Медик х пад псепошстлях спос шоестаталя теселивацим салату ща КО скотх Му ка їн Ве ведучому мо му муху ви руч ми Ми мит зи азни нантє пипслоеака сехейаханйт всппчвекокс сеанс пас БОС ри уд си М кла «ЕІ» А жи ту. ода М
Є я Ман іх гаку
НАУ Шана ня сем
КК пул ках БУ всвсвахащцоя саазешешна сеасавамаво атілуюктулю спека ракаві шив х. БО мим кант синиці к вед їй
МАМА МАМ МАН КК Кая дна рф щі» Я сен зпи
Суть ж «йійх ДНК
ЯЗ гії зт затії ми ку г «шій ВВА лиж АИ ГМК чаш І185 сеатектт сток шодо пед пики халви два щі ашастслатчов візледшивн поса ластв звапеацпівозоа пзвазсвісов ато ЗО кс вазаа зло ссвочвокиви сек енпеоя ОКО зве Ка дме рекет стосу Криве МЕРИ КК астЕту ча зачиоахия пеЕавтпасат зелен ев такх поса КЕ МИ зд м ут и НН НИ в НН пд слачжи апа ВІК сачшешпевито чщмкчазастах зссазакщнЕ суп КИ слвзакакстт пес каксоз зсвазазасу злаки часткову Вей щи ях х й
Же. ле як ту «ії» 135 кий МИк
ТУ лиц би Туз отут ту я «13 каплі зоВ срБИихувоепдА я кт, чеки «вм МЕ а ак вико пкт щи декан неуу Міда щих п шентзічає срссссоус зіва ашсисссвес воски кпзчвавадув 5 фе бчивхуих фах муху г и кун. кулею м мови и мив ук г ша иеиу оп Крук У кесзвзасаске чів сачзиеекви сказ аксцур сВебаедаєсця хеМисеєн як,
ДАТУ ОДА КОЗУ. ке сук, «кк
ПММ З
«КУ Хай ил пи хи ХХ с Женя Я еухкмні ак 0 мала сша шк зе кати 5 шпон запазаваму докоденайх паштет ср швошосюв сипле и
Кутлдіуто іч пив диті Кекс Кі сумі де текіИ УФК ях педа спсептлався корона мона вовк списа хх роко ие будут СК Кук Фет ее и и ния ах
Чопик Зевс Котел спорстсаци пвосвинцваєч сис а суку и оо против их Код віти. митр М дк новив ему Ат азастксвов зчасоасочиза свіашаосе ссвсщизик сш сешекоз вадах ее свсете хмлмиє міти тих пре судити Кепки ги МІжМ вшити щодо и МУ зи сни «восени вазавоваа посзовивкс зпчпвівасе оеащещмиаех КБ мо рух, СК чІЖД АК Мю. ей ка
Вч тих сем МАХ «тарт ід іх тиме жах ІЇМепуХцю сх
«оше 45 4Зсі суму скор Муки Кім тую В дідусі ще 28 зізазаєчазе дак свев сассодсаснає запах ВЕК Бя сту й «Бім АЖ «ша Ук ЩО «аа ЛЕК «Мій» Бзиїііїав пложаве нм «Ше В сестстмнмак закозалесо пеззссчвас содашекахи сссвавшисва шосту аєа о рідкі ичищіти ще кивок сів денс ее ідея деко Кс тру сктшассосаєс зсскозасаз ваза ссчаАс засваскекА основа віщо їх з. лиж хв, я ще мом кни ях фея пн і НН зи Ст у у я: касавасаки заз ссЕєшсях зсапазсацк ОСИ а аксзовиха ї58 пор ни в НН В А тат касеісаввоє бсосзваваш сееЗпаЗеп засос ка попе ляА сшпапшаєсуює Ки азаштесвсв позассзозча вабвовают запосвазкеа сеовОаскаох вес вжи пл м чок
ДМ яАУ КУ. жа ем «кл МАХ «Ех дани ша КЛЕН хащШив АМЙ пороки тії п укр ие хори уки москве пкт Ім. КЕ оКИгІВ ВТ «ть сквкапІчсв сварити буедсУмсов заплав азс пещаЗКилац вер зак ациса НЕ сек я кА М М5У «ху ЗО «м дяк яТИТЕж. рда «тож
БО жк» шко КО ЕМУ сто хе «У» 155 шківи чі кй міц ее ова ци аа мусу чштти шен ис КІТ КК дІх втсспакацає века сва сбасевиває пімшосаса шеЕпшевев супами 5 мір озеру м и фрі Ав му педа у в І соду ою КО чи им т зесезассвтит шити штангу саше сеуднАЛсОЯМИ СТІН ММ ОЕМХ хх дану і юкіІх ооо уки дер дтвк птах кети хи
ПІК УХТАНИЛИХ ЕНОФРОХЕА Ма ІС ХИІО ЄВ ДКВС ВАША СЕУ Мп нюитчУиМих кеквимктИаяЕ виді сиди схо іще є А шт покла х Ома мех КУА КВОТ іх по В НК и НН пах лищишаємкх Чешиситх кропу МИТИ СМ ПВЛ лошат Кв ер гу яр ск З «Ки 50 деМлук, чеше ни МИТ ут ек Мо жтум суху сту аджами ОЖМаСІ ль ЕЕ дух де «ЯН Хо вашсватсцУхХЄ ати сатана МНМА Меса МУ хвцишамки те
Ффопюотиич сту а аю Ж унів ть ОО из р ел их си из уча Біти ки их за аздскшиши пепшовапенал сдогнмцумот Фчеделашео попе смео сеташасе ам пк двох сти еще иуУ ему МоугрхКМ Зх шили ПЧ Мч КАцХХАУЄ ТО
КУ Ук
ОК Мих «А ВИ сталлю пца вн МАХ ух Жесуйхи: Я ух пед ї укр вим їх «вав али е О»иИХВОЯМелиОх
КЮХМІВ АТХ о ни В и ни В НН НН ду шасссочовах песо воазезакЕх славодлезм шив КЕПОЕВУЮХ їй фе ват вію ковки кицю мом илуєтих скутер ж хек вису пови ту Оу сти певикат масо посвас ВЗсаазВксати ксзетехока вок авоах ваомаакЕка КУ ужив м що пф црецужее щі щік т уєтут мі сІФщци и ек це е це кі цІує чия зи
Филипа зе шиоах сек МЛН ВаАТХ ЩОКИ ша їКи - мя ї. вжи во слеслс сист нау та й. КК чу І Ай спін ким ем хмо Мф мам их зісавадав сис сві ви ВЕК нУ зай весла сє запас смакота отит чом чиск Вл. я пиши дию Кф міки в скік щі плац СОДИ ких УДЕ ЦЯ зах заеспатавак чепикакокс зх вапшао зазозазаз: зопочуазсоау заз кевА БМ оч їх кій 135 реч щ «им ях ту т ще ку. лю штуку ие су уки сві «ІЗ Шасі і1їсш сви палі шиВІВ пає ХВ визвисавава сщсволосвов запостеессла азвасуавовзав шеплЕевшиє сеспавкиау зи звазсвазваа сосозаведа зтосзахскя а Зх «ме ів
Се За
АК ва «Зх пую
НК» МК т поет сшлвіююди
ХА СХ АХ ІЗАТА МАЛЕ КЛІК ИЗЬЮ ее їсїури ко» ІЗ ов вт ку уроки ви ККУ ут км МКК дк жучки ді песто Звсо) сіасзосоУпо азу сазощ зеслайсесаа сюжЕаасв ЗПС во ди и и НН НН ях пласка оізлазавах зписсвщимув бепловесесо севкзеовтш садах чи яри кри кити уж фо жк т щи ик «хутро дл АК ке ке фике су нм фо виде кер «а стсевслосв сис клиаз вапаляске «пазавчиав ЗЕМ Еке СНО В ММ ковка, Ве думки жк ИичК ке МУКУ вени ккидкх зве
ПОМЕЛУ ИЬА СМ МАТВХО МЛМ ЛНАУ ЕНИЮ ФАО УК МЕНА МАМ ше пед од веди муе ие дров (МЕ ду дак ува міт Кращі З пакайероше спо лосвак паснасуєми суще млина ВИКО Зо «вит А
«в М ока нн пе МЕ т паті нчи дмкмкатів «Ем Васі Звпсиичв. м Туя М, чапоз 15243 асатаулувй шле шоси зсасеасстве шаспиаНиат папевОа сну БУ т мо «ам 35 лю зад «УК Нх ач «Ти ДЕК кож ухдиик | ік ре Же я «КУ ЕТ ВЛ САТАНА «а БУ соти пед папи Ми кнуюитк мала спаде щі сусиводеста псасамесена софт поиск ошивис Човасацчоава саги хі кит ик Ук су позик їх що чу и се Вусики щу Кир и УК у и ду ух цозазшнага везсвзовосов зсзкедсвся воскакосооя звгасвчаєа акабецакє їв ріст кино пдв дексу нлддові Кт и БО швспустоузцая сшлоплшесазю ваза зима тауомльеаеця що Км пвЕзжнавосс певмлсввгОо кра авали запам водна пава х иа ством аса соте Сказати Зак нечКУ водо коєтям запасах ЖК кідлижм лети сту вк Корюескоді коки щем смМІЄМТОИМ М умію ті зЗгнх птзалповоай зо щчсаних парам самост ех ЛЬ аю химе А деечечИ тк «шмат кл хви ОДНЕ ре Тай т ух курю ве хх.
ЦД ІМЗО МаЛІ АТМ «ДТ «лук ких УМО диваки екю хе лчакаки Кеди щецУ сцухют ци вив Кг ше завали кюис шле КАХ ОщА СИС ЦСВ ТИКИ сис З о о с о оре п ОА си оп и ки и с ЗИ и о р и рми иа упуг защчадетека амулошааи гайок сенат шиЗас уст тона МКК сере ії Іст Коло і пт сосок мимо зав випшазчивлощму подасчиито сазававтлвг вВ'итает орати МИ КОЕОВКТВ То сийрю дю М я позу ух Ми дув тр ащтляламиму падали мили вес КА «ІМ 157 шах ЛО як ОМ ми, мех х То ле Боже нанья «КУ Маск тоа впопевсї В
Кук, З щих «ак АБ дика кккот КведивКеКк кед еІВ Ви и НВ Кк кв а аве гуми ща впали са КксваскеЕс сспасесаці вассрармис ста єммаава паси хв. то ве мод юю кидуо покути ий фу и т пово цу Мат У ц пив НИ їй
КкЕеалката бпакатесах позазосеза рова возяав Косзесакасе панно їз печу стю тілом дтдкамкдк пилом ди хорт їв пзазлавосазв водзасстасе пибзавтзах зсзтасссв ас»лассвсває зпоенмерЗі А повела какаксовеаст КСВ ЕКсеВ заковзавоа зищоссеосє Как КОвах. п зепасптцтиати сих каста сапжепазтвза лоза мпсовзеа сезтлташия зок встх о «Ек АЗЕ па ННЯ
ХЕ Ам ккал НЕ «813» Вапліїна вислуги я капрую а «ап У у В в НН НН Не их кссозлузсей лиману сема вол шля єси оса Влас ж пре кк ву. Кожне івух сват мире жа сі Уфе юанів ве епос шеуліхютьнх Моєму вахта ФУ СНИсЬ СЕМИ аю зчссакикасх сісссивима само акаш пЕсИаюао песо ОМ КЕ
«30» 153 ках я зх чкАСМО ва «вів ДНК
Ск анНо тур т кю музу химат ВашУльВа спуєуе хТТух За «ах кокижрк ку сук пизду ди щує фтдіи фе ше рр р сих азс асзаа заасотлавни сстшхсасваанс зхахасанваи Засн Фома а ще пра ен в КН в НН ад пацзсасоакЕ кссавсваое пессадетаа весна певлюсане меш на мейгоутух оче МК тони Камо омечих хім Мо т кю чик
Фе кваз сзсчазсисатч см а павлавестав введи Зекаевоа ше ди тиву куди кедютьх ж діжу М луку «хау уві п лук зах счзазако апа ху аслшщза ссевасчтав пошиті а пазах Я граплалте зспаспепез сепаланлеви свачоравиа иа поцле оси ви скота люту хи ми МИ рен ря те Тк; слск пу
ЕМО ДАХ
М Тура хх слу сш ВВА ВВ Мак сапИ яп апашімиаит вишщщосвеос шпопущимМмонА чишавшваиу поташ масу в. меж
ВН НЕТ бю як я«БІ1їМ ЗОВ дат піде «пл піл жах щЕМх
КЛ їїмахі Ті мим тож х ЩИХ ХМК ДОМІ ЗИМА «капа яп аваламувств сспевововиа атазвоутсанвох чозщалосвВа тс всоя вавзвгсофсет же воре дме о и В НН в в у хижака сек ка со агских чер паеті ШисвевивІа КанвсшАсавА ня дефеавицала БОоссаих СПК шана сечам им СБС щит дк ясишмимахо воалошеь пса смачне папа гати ша сих яв усміх в Кудую хм іє юки Меденичі зай аазатаціе зепоша нм аклидиснИх тасеазахав поаудєаиВ олова Б кт яд я М х МЕ ких їх шАМИИЮ ОК? «ши ДНК «Ша» Бал інов секеща
ОК Уч лох члоаицм КО нив кеВ фу ди р Кр В ЮК милих дв й тех: жи ХО МИХ вс наєчоша Бпасадоен сцаавах 57
ДТ тк Ех «ФИЕХИх МОХ «ЕМ ЗК ша ЩЕ.
ШК ух, Зх хіх КОМ умі ле дк ї «ха» БВенвізінв спаді шов «капйх МОЗ споухеручетучисутеті см ожеитівом Муки УвУ зем фік Міо чвохм гум УТ де зватсистедче секс и Кжпоєсавакя вовк кокасекомих завер вс вв се жду тую и п ДУЛУ ЩИТ пики ик ЖИМ. БІК гук лити а нн ден учх за агешипстстах соеспеслазавст сппаслаззаае всвазаваша пак Касова їде твісвлазах апосвзекев щепи т вкловавива пт. ра МАО о сдуг аксуа щаму каву Ед ваше «пуд учи ді сода ецеввЕЕ заз застставпксожта азісовсзсоз засавзасал ааЗсасссесл сво мазва сах о пз лу со лурічин ММК піуивею итв оо: повеук Коиуиттх (жито т прим згслсотох дедзелемає птн «спав застала Фу ОМ «ек. тіж хіх АК х ви каз с шиАВМ СИХ «ил МЕ
«Ж Мом ЬАше ДМК ьеДее
ДН жа «де ХО козаче зспоасечов засассскох бкаресавос сезазасосе акме Бе шишок тспосв зпевешосату свласлоусазав са ря ех зле чи ХІМ «втіх пт п жд МАХ тр я ше как о муку
ЗЛИМ 0 ХМНИМА АМІНИ о.
Мих дим ше чини Є феик ин уж суху су хуя Ос дути жа сюбож ул Щи аузастІсвУ сбдомдасесих соски савсаксозазе касах асазазоаа щи пс ртмтяй фтвзлцовиови; чани пУрадивнквев кеВ паска Не вузазсстаза Гсазазаєсяо сопазаванс ринки спсопочсзапА пасаАпипУє Ну ри расу фірм уж дпа Кит уУКтУиУВ етику х мету сну Бех касаасавче сКссЕсвахо авадавочав коса чоВа Косова Ве КО. ММ виш к назлеаегя еще ФАКСИ Фах пак Еитит Мі чну - Ул и мим и им я «фр иттув хи хурму, затих А ЗІ ща саяк Ксвзаовасее сс КвексЗі є вововалвуе аа еня ЗО мах зай «п ЗЕ с їде том АЖ «КМ дик роча живи Тури тд м ем хх ий 0ОБЕМЛОА АН ЛЕК ЗНАВ «нн 305 зстатоззазва сасевсвос Буша дич пусшесеса сво осахя ре дер ВИМ оф юю: Мохоре міх мІжмІ сих КІМ зла везти есвсОазснс Мачедомна сера сову пог Мп ше еру
Щи я сестя ящу «Фк ОО суд тя пе яд ООСАТЮХ, «ши 0 ЖМУИЖВА МІД сМЗжема «цих ЩЕ шум утримує І. Комоди іч МІ ноту В КК му М М ді и секр зсвсва саосцоаняв сМопвесоМа Мварловут дахи ЯМ лоюо що ріж попки ге хи ие сучки сміє мо сидів і гоп 15 трасинуа мал рт пила мх ес пасма сце а мух Ме тую маетеро т ит що и міміка жих ад щі пед ж дк ми за «щопсзався сови совосса засаших засасоваче ашжочешеиво кс сВиВА що се нн В В НН и Не о зай ис КАФ тапаАлщ блеми нате МСС ТЕН КНТ щи змицаишаах да ХК Шия Мария АНА МЯКІ БИК МУК тує. Же «и: ЖОВ км 5
Дооженечя кн
УА маш ЛАДИ МИАЕПАМ че сич «й зов вза шк п о НН о а ди сФаксаскостаи веслсвсаск пода засах чпвачашче ства сае ща ах
Б
ШИ за ук, зи «жим ЗОЗ
СУК БУ ях ши
НТ ох пе
Ак Кая ж пз ліх Біз; гучл куук чи І МАЮ МАЛО ІМЛО ЕМ Е «ах ле «умо ММ И стежить милу ий Куля сх у Кт сю фі сивини М ку В ту. ци шспавастадав псашстосве сполвазвамос зосадУулено ахсзопосс зт ше
«спе созоодешохт седиснопає косзоУуаза моз захи їм рн и НН В НН яд заептакасс пегсававеси Кадазасацеа Сбвезссоза сазашчовсоо вес що сус ікта ач ні че Іти х и я мо дує и кожи соку ша яти ТЕТ дитвсваас позецсчеча беавадава сазвсолскаюх азчексвсво века хм - яру кін несу Кевін оц У троха хуй лам Фогхує змеудю дев ук чну псоаптишеєх сере стсайх зсоасхаккаЕ збазсзкаво вас сах ЗУ «Ех ЯМ «Мі У
АйіМоь ДЕ «ВАУх Ваші іча бокалів ях, т
БК ПХх дю М зстскерЕкс спос ся сасассесиа созсейдеекяє сасвІЖчЧа од емНилм пи
К 5 «ЛК ж КОЛ. хім рвав «шАЛИМ ОЙ сла те ки АХЮ АТХ «ЕЛ Жших о МЕ шесевв кару ля хОЖАКТИ А пюМоут учет в Мч кумі (Кер ІМ ІКТ ее М пк Іво уж г єди у м рух Га пис сома стосу ПВ НЕс пам фо ифкат 5
ОКА ККД вл піша ГУССЯ во кине ВЕ Зкпемусою спадок Мам ож тихі пт и КЕ кроси мМ схо іхитдтьвіож мок стик, 15
Семак Усе астоузавівня сСузосаскЕк вазах аа Мах ил к пазозасах пволвоваше запити БртлрлВос зсзесавкка пай чис ватався заз коа бсасекввах засво вадскоено зва у ат З ог ел
ЗАМ ОО жд сих пк вия ЛО уж дич чими ЛИК саше пути хі сах ус, «й3е Ватсьігух спиця
Вау, б
МЕМ «хх цикламен спе елх ду ецевени гака У зЗсектзачі сзаптатасав зро зча зочоавоя «КУ «или хі ее «І пн ит ру Вдала спекою
А 0 ШМКЦ МАВ ОЖКЕ АЮ а Ся «МАЛІ я щік митців за в вІУщо Буші кі уси пдечкодксьх Ко дерсвутВО Буре щи напала вавасіноє пек оОптла весоссамає паща шосе то ре мех есте ЗЕададг дим дви пуд жари прю я чес ах сЕЕслосавт зкчадвасаца згас сонет хоч їх пре ев уд шина в гмчеий БІ дю фену вою Сп че вкшкаксасс засо вова сптасекощс пакастєявих суша шосвє заводи щанв їжа застала сеанс то зранку систе савани ЗИ МНЕ ша в НН НН НН КН ЗТ папа пис су сом хх лечо ланм ЗОМ ОлО пе ук ІЗ
ЛЬОТУ. ЕТ жи М Ж сх пкт їх чим пий дк ту, псих тю в чо «Ел ФЛ оМДмВ жнив и КВЯ б А. хх кі їх зи ие гу жов сти и МІ уиих Ме ЖерІ ир М кеж му Ук мя поможи музи ЩІ
Кспозчазазх давссасдешиї тем ПЕС СМ УЕЮ МЛК щи песезегесе асани паби ккт ок ешсване саденлсаи цс ДО я сим сту дексу КЗ вет речи тай зчавааскхая зчававоаскак азоту зава ЗеаасвзУаа ссср ЕкУ ВЕБ СОоше Гах шпЕВкОсКсОМ пвсжашсиа удома АК ЕКесцУ ча их студ дж шжхюМ ою М а зе им АЛЕЮ «иа ЛИХ
ДОН ікуеі в хох же
Км ЖИ АщИ ЖЕСТ КЕ
Кен ву и вий скупо в Кожне цедри дже о т жд каввешасспЕ соссоовасс звсвсозиЗ зош сезаимелеК сви пЕкІя тк ср и изд пк пив окт ев ди дерили причи сі вою тА азс ізо ссаво асбелеКсс васавсссваа зе ша мм засо з спасе зозе дасуавсояИах поза цаМ чав їЕ5 ха т а ц є КМУ КМ шк ті п вени ке
Се і хі ти Мами ххили Халк а ау лЕВсИХх кт, Б
ЗА ет
Коен Во хватка вивазеоевзени авомизпека соемадахока ати З звастастасай се воску ар аиска сваха чик шо севеваедщ кави вецекв как едка вд Кокс вишки. зд
Бамізнасва список заазеопаха сзоівсвзашее ссшипспстане шиаиккещех ями ка НН и и НН З шок ХДАК ХЛУ ФСУ ВУЮНх ЗАПАЛЕННЯ ЖДЕ ТАТУ Я л «кт пре
Ж мот яю яикя
ТАЖ АК КА хлмие ДИКЕ «ВІЗ Васі зезпепвезоменевв я
«ом Я хін баку Жов силу мо иуху є. Жоєтучт кмин сел в вк с ств иичижщ і луг ер ти. в певбсоВгоМя водив вовеа папосвавата пзазсвевио вбовсозаєцв «нвапшувавио Божа свсзевсзсз Мапацчеавиє чат нов стасзапаса щианаєссях зу У шу
Кк ї53 «вт. дів о Зта дух ЗА кл я У
Ек УКХ
Є Ще За мує Мед хе ут «же Бас ЗеАІнМИ Ви МиМ як
Бе зв
ММ юАш
С охутех Фо фея ом ху змі мкВ су УцВ ксуте пивцовучеВІК Фкжіцтиирщи дл слквочаза сЕсозавкає заколадсчиаза замало заважало засос ЗМ шсшклнповзає какавахазе дае азскец зУпанавккг сзІзеізазів папа шим сахспваастск МезЕссЕКа акеоєтавкв зсмуакешяне мазок ск МИ жи М ння рук укр втатю пе г тин, и Но «хори ик кут зуп ОК кс иЕ дк оК збзацеиМме подолав кассашоситАа схилах. ком готи Клим МЕ емУджнтк Кф вим Здав ска я па пасстоседлоє свовассаса касета СЕЗ вапях зовазуваво ЗЕВЕсаВКе КН «сих назак задесанем зві заспів асжососсас запазавзсаа «ОМ села вва т ау М ша У о КН «йіїх ЗВ ск ІК
Соки ХУ
Ж ль» о Кеш Ск у ВИ м и ка Масла ВИХ ІпОепЕ «ВИ ОЙ руч вч у Я ода» уми тідЬдІ Дт звоизпецвах зЗосдЕхамлоє звоАЄСІщуна зссевааФ зЗУчазвсавлеа сома рез доти Кіл сит кскдих Кемакщивн судака Ки хе дашки шцещевосло Ффсвазаз позасасота здпанвавска соусу Я вона векиве сила просп падав педаг дана узами х ща паепапшишКт сера. ззавасцеяхх сповазесесв зквасшзвавна ес кацшу ХО авксвоваксв зе сзасадвавса замки ше я кій й жом пи о ча сах МАСІ
УК тп ху М
БУС жу валах вам ті ші я пт ка СИХ КЛИЧКА «дню ОА есе ае ММ о нн КН В НН и НН г
Тато попе Уу ам семи мсисм сапу сс САМУ во шк в дя я уд кед М МОВ М. Кеумаи ок кла ию кексу рик доми ж ож а о окужих з к зазвстсесєсти доестсюанов каста сквно счкйнасасав всаасазвино вве ВАЗ «ше ДЕ сх па
Ех АК «шІМШе дик ярі : ря ши шк «шал Ввшіїіав суто ипсьяМмн а «Ай ШК ее Мі М м угу и о се ВіУ куму вх иучиУє міх щу І Мі сере в що зако сист ЗІ катлка сешоссссвих пуФсенавкос сосен ра ведпуснвивак салона та пошстуа мо супутніх БищшаОМНаХ ЧУВ Ко пуер ем чем мих ХК КІх КУ
СТО АНІ КУН ИЕН А АЛЕЛЬЮ
«Вій» За
Моне « оо Ж садка дик ел пні до ВМдуюі мові в «їм Вви1іТиав сівхвадьмсюв в я тт нн - «хх. МЕ п Ух УИХ. п рн НН Нв НН вно о я г пасок песбшшатише сек шпал а сема иаАсКо ща Би вуж нн о НН в Но Но Ко Натан Кен
Завод ноя спасотосвас йшевивокив сабапашчоя меш восчасе восавацт ну се пеки їтущ ще Мо «щуп ха штаті вт «УА;
ОТ ТИ п
КИ дик «1 їм вашіїфик пфнеійсіювваі в жопа й кН пли «ай» Ж зиавилииоя влБЖБИФЄМІ спав писала апа слоувай пизазівавя о
Ф с Фе и ве у у є. иожкои пе теки дітки се Ї зош слпиово певлпташеанвив що йо ет ха хід М ку «им АЖ сини ННЯ «ЙМт Витік іза бпиКіоадішанів
АЖ йий пихи ВУ сире сухих фр ии иию ее ит и дух кими мех ру из до 23 пваслуавата зобу аесовач сапозасо чис паски сепсис що реж онн за схкдостаз вксзОопамаг заземисома яеактфеа схема яп їх касок сми аксазствсва часа засво Коха їх «ЇМ Ох «ші ЩІ
«им МИК «83» Вашііїіїцв шукати уИВив р пра чи квт Укус літ вити ху г
ВИХ АстЗИВв зо сна ЗБОКУ оаланАМТУМО ера сиаост сразхиу ет п пуф сдфутаулеМих В пурзкув отих их. Мои Модем ум лох зЗівевасаск асавазчасас зкезшсвссеа шсасазозуа злезаколава х нку
ЄДЕТК КУ тет ж ху шк ек хан ді х «КМ ЩЕ
Не це іл дуеті ема ВасьМАце ВвИшПИж ІВ са Жим нн в нн Вк В НН Бек пасасвоссем спи застесетя пацАлОЯКтІМ ХО ТАСНИІВО яз МОоМиа Зх пу НН В в В В ЗІ ше КДЖ И С СПО Д ПМЕМДЕЄН МИ ВИЛО КДО ФЕМ СТА КЛЕЮ Ешеу зу ек сливу сдкта сл сду тт та Од Зевсу в Ж мото силач мет слі ую, Фото мете им мо дути ве дтдкоиттию пи вт саиві виматалато сля пошани совка вчу 152 нн НН НН Нв В В НН тугу пита шу Миша сша ваеспаважйУЗОт попаСсесме саше ху дечи домів мсек о ХК фосзухетуєю их ото люту ацпевовацлт папи акшеаскаво сля 43 са МИ? «31 зай між ШЛХ и хх мкг мА тт це. шеут Я різ мк тиха шашиКаж пли
Канн УТ чех. лі
ОЗХлЮюста тв силах ху попи ссс папа ксвіх вод я згсеЩт птаха Вк веж их дао еує цих че сум ту Коху жити ит вище Ми мити зла аксона сиовУусвовУ ВасКакКсток азавожасса совок ссва ЗЕ касаца ї5У ше и мк Мих мує и щі підр и КА тон А а Ам тик тасащтлоепит сао саас Вуса сВОмМ шк фррасаславоих сет Ивкх ІВ схоже ких. ХВ поп мік Во поря гне о між ер зай певно вававувава псавцюсиМмакі ставав со свити шпшиловосм яао
КО ШО жи о «ЕЕ ЩЕ тіж им хек ААМКХ
ТЗ ж васії ри КО я узи, приз її клю МАУ МА КТ КМТ
Ма уя с ку
ЖЕО «КТ
Фета чу. лу ЧУ ит ШК же сла й ла ж поті «ев чу пу тд дл учи я свои ди хи кт, ся о щі плітки КкивкЕнЕКМе ВЕх чин ТУ: хвилі свіже ї текли симво шосе панно Дек Кеш ЄКИТУ що шовк ите іні ееиюінних Вина самі З пВалВВМ питвтену гу хв сплив пеессасия зкаксвасих звапозалес зпзавазевє аа Ми р НН НА НН ен в їй асивлпаавеас соподеливУ пакеповсвВ севзавлєсе здишкатака чек Ме ковдр сх сема пет садове Кров иви вався КЕ ква ил пЕжшсввовЗив спав пасе пп тлави тло пеплитеоуєа ша родом Музею зе що У шко тасумЕх Каже аку М дит ча «мах ОБО «їх» 33 тр тя пи хи ДАМ по Ша «УМ ІМК Я ТЛА ТИХА ит СТ
Кам їхЗ вва сих «усві. ми У ди як дує МК кава Мед учи КЗ азксикстаст сазчсазсвав зсочагасса чик ск кЕСВМХ сеІЗаВеКОчА ві зі рр ках мл хе ом сот рІВ МижМИЮю. тилу М Бум емо ж; ксетитещІн сшолслепитИ поз шсо ема спра малеих гуща їх дк БОКУ атА ЛИХ «ід дж стук. їз «и до Аю
М пн зх ди ут ек св і «ам Вас Хна Кт ВІВ яхт тлу ванни ке асасазванто зссстсловтза валося Ке: акакастезваа бщсвзаєсоса адм 5 саджиноуитую міни щу ступі руці ми ра валася 173 всасловсак хоовзетане здвазлзчазак сказав поззасазт пазавзава"те Ак злиті ий кв фощ фа ит ви ЕІ ох ак сот тежт их мечее - Кам пазатикт виз евив зсвквешаск пакетах воски ка и ле с лю пол «МІ У «ВІЙ ДЕК «813 ВасьМЕив БІК мів «ПИ 33 оо и НН НН уч ям кешу ужив ск лики шУ коствВіпкпо свзасамавзсов песезвсотаст азаречеьпес пезсвазсєс спосте. 5 тА КК ут М Ме рн у и НН їух азазвотшаста зас стаказавас сснвавУуксв свасеаеЕих варив Ве песо поасспепаса ач КІС мяаш шесезпаАм часта їн дугу Міо ми кни сто оси ку зсватіоатаа зоасксескох ча ся ше як пло
БОКИ ша «Екіт 35 шлю тк ж овриуко ха ІПеМШУуКИХ ел Заря аа
МІУ БМ МтТКАалЕх ДИЗХИУМА ЬІХ нія ку
Кл З Я «Ех я о они но ША сн чн НК На А тя мех бен дім чаї й) лов Нів ба Мес їхні бал б де ал осн шу з -е 4 1
З їх Ай ее гоюжію божу яти МЛ км фен бу ху ях ЕІ Хе лю длух єю у іх ув кув Бех шо Мат сум УЖ Ха ад слУЖ б БУ ОО СМ бе Оу тут Зк де а я У «що яр Ул хх м вхім ха т Ул дит (У км Мо йшов (моя ле ні ТБ ТЗ ТІ бра Уаї Тл ЩІ АБ всі ше дов ех ша шах Ме и ях й
ДО в-яя КУ із ти тд Ми іч блуч хе т св Кл т зх туту М тіше
БУ УЖ СБУ КО САМ ВХ ЗУ щем УВУ щМяМ кА МАМ ОшЖАМ А ДК жи М мМ пвх Оті дет Ме ст тм у п лим щі сх: пкт т ту дл тк їхщт Сех ЗШ ОК ЗОЗ о За сот ЗУБ Уа дув ех жав Бл ЗІ Оу ки Мн ня пт хе 2 То -кМ лах ших шеую мож ту Тому СТ «(їх Уа ії Жліох дту бля ії йо р ім Бе шик ТУуХ їв Ем ос: сам дз ли Та во тув зі Аз шах ж що КБ текст Ховхит Ст су лидб хе Мох а лм сб лі Ж ско вх, кН в -у о Зши їде о Ущх ж З цу СУТ ле УВУ СЕЛО ККОо Ав олій зи чи чех та
КО МА МАМ
"дТлж кт ті ХЕ Ху чт Аек ХАІ бод ХІТ Мч УЄ йж МИ ст ех Кихух хи івА у ЖЖ да с ЖЖ: СУМ дн аа лі Ме МО сУЮ БОМ Бема ЕХ Був 33 луку чл:
ММх каз п гоухі УЖ ут У суть ур сла тілі Ух ту: друку уки «АЛ йде щі ти із щі ржо біз пек залосмль річ бі Кл Бха БЖ твх шежЖ іа хе їх5 Ва 135
Де тут хе ялин горю Тл стає сур ре гл стік прю сАдую Ід диф вже Сх У Мет цу Я их схуу Те болі ТвЕ ЩЕЖ АД Май БМ я их чих чщЕ Іде у ІМ; ве ях пуху Лк ТК зд У Тож ТЦ У ЗУ СТУ, Мову Ус дб т щі моз гз щаух
Жуш ФІМ ха Має ма БУВ Ве Су хо димі ка оОжщА АЖ ЗМ ОО КИ 155 о і78 золи Жощхт же оо ж люсво сдочию Мхожає фОЖ шу и йняю ли сджи мушую Ту н С кт р вів же Бін Вів Бу ех іє із де чаї дви Бех Тк Ті бі їв зви Ки ща ї5И ЗМУ АЖ сухе оВатуу М з ех юю. дну м сли се (зи хи ТУТ лк й бок Мих хз дах АЮ ЛІТ фу ДА ХА вКО шум ЖЕ У Уві шу АЙ му АИш ЛВ
СЯ тт ле
ЛУ «ММ хММІЙ гу бок ох тилу їі и ума їх т ет Ма жі думу ті міх си кА ТУБМ же Буш МАЛО КАХ ОЖИ КЕ АФ БЕ Ух АКА АФ ОСА УВУ лап -ух их ве як «КАЛУ сх дату Яма ха ХУ диту Ав Аякже Мох Мч ру см Мч ТЛ ох доме Ин шко тп Уві Ві АЕю аа Уа БЕ Ка жк Бех ер хх Ша ДЕ Іа тру БЕЗЕ лі а я ко М кг КМ тд гдз Мих дж ах ЗЕ р хх тм пло г Ла м Ме Мк дк, дув хіт ЗИ МуУш НІШ БІ СІМ АкФф сл мет мУуШ СД Мі дерощмУвБ КО шу зай ух: "з їх БЕ. 5 дчесу му. боці баці ретх йодо гиаю Жнув ПЧ йчах Іа (Лі Ж ох Ж Жито Ж ну джоч Бек їені «ні Б дій ж БІО ЛК Бра бю бю уже їди тлу Кука кам хи МІ сти кі їла Жак: де 3 маро фиу т Фоххху дух уже мол фару ю ХМК: соду: Ки
АТА АТАЛК дзидіІ зад шу КЕ жиЖЕ Мем пуш ХУ МЖЕЖ мл У МКФ сеВо ау ями уж пу
ІВ шо 55
Мт хр Жутю тю том ГУБ: Вошех сах с; Тед спрею тд Тв лю хи ПУБ
МАО УжМВ ОМА й ух ми зх ЖЖ ЖК КА ІВ РИМУ НТ аж лох ШО ж АХ хутра, та гл ее я МИ шк дм Мо їх Саму схе Ії шо щі Гм дхие дир сту ху из тут: дикщї :
ММ еще МЕ 185 ХХІ БУК сит ДЯ М МЗКА СУХО КЖЖЮ У ЖЖ ОАМІЛЬ У Н злщ зап зі пом :
БИ. хАМ А ех Й долу ха ШИХ т «її дах Мк о й йду и та ді ло лк тоді ддя :
МІ) ЖАВ МАО ДОМ ХУІле в Ж ФКіХ. МАТЬ ХА ХО шків ІМК ХуМЖ МеИІ КАШ :
ЗЕ КУ ЗА :
Ху і тні Ти щи УМ. Ід сто пШлає Ме ха ПМрає МИТ ХХ Ж я смких Ух Н лив паж жи МВА МІВ Цолртаі лерошов дев оММХ ТЗХ лу АМАОСТМХ БЕ :
СКК шк -удет : ве 5 ЗО Я мів : ех «ух : яко Ку Х : ще пла : «Ж ММ о ВЕ : о пл : чаю 0 МАЛИК : клея ший В и чені ід : хи ЖАВ ВООЗ. :
ВЕ ИН : «У ІЛЕ «й Н
ЖиуУ Жохег ох Жим Лаз тому йому ЗЛА ох Ж сю Том Ж шум пу Мам Й
Мах ШУв Буш Фу їхиз Ме; даю Ма ба Уа УЮ г: ТІ ОБІД ТАКЕ КОЖ : х З хи Ух Я гам дотик ЗУ Ж так УК ги дить тім блуз ТМ МУ ЛІ путь Дт дю ха сти : м ма М Ам КОХ мУш жАМ й мех мав АЙ ЖАЛО АХА ОМ ЖЖ : тд Бе за : хи КМ БУ Н «из пт Краю стру Жду ча ХДУ Ст у БЖ Же МЕЖ сети оту 2 ж сх :
ТТЖО АФ схКїх лом мук лу ува до сами Му ХМ м Ве Фо сМу ку : ях що 45 :
тех бат дов ЗИ дж доме хі си ет УТ люк АЛ лиж жиру Ми,
Її їв їі дер Тих хаї й Ві ТЕ СУув сим ож дів б ев ВЕК «м ря да
По КЛІ ЗМ сік їдих їа ШІ) щі Аа тек їі мк їй Чі дів ймтй сл рі Джо
АМО АТУТ У В щжАМО жу ДЕ КУХ лив СУТ омжНа сл ом ХІМ бжАМ В М гу т а що (Утхо Мадує бому. хм 31х ду У ПЗлах таоюу 7 дчмУуєЄ 5 хг шк ХУ тах
Са им Ав я ба омщеу шАмомІМ муЕОУВО шву ДАЖ УФ. ЖІ ла КОД спи п прх ж ща з
Кеті: Стіч сток до іа бом жк: поджт Там: щих тс бок Ук вну А фо ав оЕме 5ЗеЖш вів бе рес біб па боб ла же вах Буг АБО вра й зи хи ям
Зо МІХ МАХ чаю бух ТЗ хіщ М ліс тофу. (11 дал боку лем А пан Діниу докт дл т ли дже вм ба чаї су Ма Сбху ДЕЙ ТКО дщпт УВК гТлХ Бо Аше А ге ат лу ясне
А ККУ їх ги були дак дк ж 3, пен гемі тему я тю ду МІ там ух Тлут
Без У ЕФ ще пса бах міч Вал ід цем УЗ ТВ АКа ВІ ба ЯТЬ жд
Золюгу хх ит
ММ МУ ЛЯ ока Ялту ту ФЛ Дах ту ХИЖІ бл ха лк Му щи Ух ЩЕИМЕ буме хо Зх
Емі їхАТ м їз ШІ ал о мов ос Кук ООщО га Мах УВО бІФ Бл тд лій их сад
ЖІ КЕ ХВ Бе
РУ ТуУхт, її КО маг єї М Уха их Беж я-отиу Ура и че и ж к вів ка і бі мак хи Ха сини сти Хі її ст МЕ їх 2 віа вхо бу БА МК ху КАФ ОЦЕ слу Бі си тих ех йБЮ ДІЄ Та хи ХлКЕх п
Ко: ММ ЛОЖІ туш ФШрлю тує Ж шх ія у рю Ху Жюмсні Щіджх СУКИ: ТУ Си Р щих Ко
МБ хм ХА лОМЕ хх їхав пшжЖ ЩуБ мл Бель кул о да жа АВ І Ват лат «ВЕ «А км ЗО ККУ пою жодні САС а Ал мо До Вот Я ТУТах Му хх шу лм сум пі хе ама пев ла пу о ажо лад Ома Амос дще Уа лей УМХ Є ми ле ша се «хх Зав пит
АМО що ж
Фр утру м іт т Щі бу їнзж І ді о йлля вим Був ду пов ек Ма ту лу ЇХ Мхй бКОо слу мех бум уже шу вний су дхш пБую
АХ КхОАТХ кА
М т би тоже щи мін тлі лм те сумку да Ок ж б є) Ак йду ду га ха Буш мМ ОСХКжоО БО ХУ ХУ ХХ МАЮ Ж худ ММ у і -чк чи х зд гло ша є ве їн: зе а УК АНА ЯМ схе хх НН брами и ше Фе. и. сх сббружи хр ХХ садно я
Бка тн ба усі дер дій Уа Те хі йо ех дво ТБ Че БО туш иа я 5 т Те ото Синя Тйчев Злі щу сх В ток щу Дт ож Уже ЩІ жи хвою ую Вів ВМ осУуку Б баба Бу аю Овен бо БЕК Бех БУ шк де ята
Штнаух жі ит пи Хв лою Мура рю М, йУутгаеж тов Жим бот ХК жо ЗУ» дек Хна У ЩеЄвз йо лу Мес Твж діа щук му Буд ува» Же ТИХ -Е че петує «Я ОХ УКХ тлу щує лиш, бом ТУ ущшяч У Том ух я кет ж ях сЗихех Ууфов, ой ТАТ т щі пом о Бдр о жне бимі хо аБЕоОсіІж Му сло вхЯ аль пек кош ОМ Са ОхАЖ зам зав чий
ТИ ХІТ вже яд УТ Має фол (См (лат дюшту (1. хм дж (11 жтоих Так ша Фіз хащі
Уа о шу ЧЕ бака чл б до ща му дер оскм иа Ба БВ А Ушв ук зай ач ху
ПУ Мо ММ КУ же пед ру жо жа ж сплю Хо Медує джу промо сХжуєтих Жук Ж ж йо
ЖжнН КБ мем їхМу Вул ЖІ Ме Ме Ма о сОпкх Кт Ху МЕ жк А ЇМО "Метх. «булу ЕЕ
Ен Зхй ЗХ5
«Може ЛЗ, вн рити Ще Ух ря прикуті СТУ хм ро мя сь А рих роми Н па БІМК хі БЮ Вр У вла м МУ ЗАМЬ о баФо Мат ОДУ 1 БИ ОСюЮХО Й чий ха пр Н
МК ДО ШО : ло жом 2 ді її Уж ОМ дім сля 03: що хм ХЛ ду чию жк ЗК Н
Її З ЗЛО ОМ му УА ЇМВМ ЇХ їх Б ЗуБ о їМУЖ сад оОХукх ДЕ ВІВ : 355 зе зав ж пед : хи «ЕЛ Н «ШІ ЗЕ : шт ну ЕП :
НИКА В АИДИНИХ Н ел я шк а сне : шим 0 ХМ ХЕ ЕОМ : ди тмя зла : хи МУ ! ен о в А НОЯ а нн ни нь Но Но ШЬЯ Н
Мес жмувБ ж ШКО Хата АаОо фр) пех Ху отУХ БшЖХ Ма Ум Ящик до Ха :
З Е Зв зх :
Х ї їх їх : дю ду ях За щі я стілі ух тм 1 й ет (7? Ті сі гот тлу : вів'УВІ ба вав хв щащО МЕ ши АД ОжАМ ДЕ рОжАТХ ХА ЗАЛА ЗЯАІХ АОУВ Н їй КУ з : пз Жов та «Ху ММиКІ Сл ХК Ток их. ще ХЛ Аль у жк ше Мужих Н еМЖ ХМ їх їхУУ ХА ХО МА УЖЕ (3 Ж ЩІ ХМ ДОМ ЗИ Ж ХІН СК Н хи хх хе !
У и мом Й хлах бю слу дл м и жених тах тла Міо фут ФУТ СМ Му сля бо :
ІФ Уж Муй ВА ТІ Мі дввоОщац лщаАа дам Бшх жма) ЕХ Мих Ожху Муй : їй фбожеки Же ку сухе чим боже М У. Ов т і ух ме ою Сб шу отих жк В Н муїк ячих їхму лЕЖТ Ж БЦМУ УКХ ЗАО ди МА ХК Ж ХОМ ВЖЕ МАЛО АЛЕ : ре те 7 що :
фо ЦИ и рою КУ т жк ди нує АЛ шо й бл баз аз до
Еш вх Мо їм) ММ 0 був Уа бій шжк аз Та діа їв ба ве пк З -ц
Я пи МИХ яви Страх Кі до «у «Ту ха у хи ботів 4313 дров ФА тт
Щек пух дна Тех БМ Ка че м ЗУБ Бех їжв ошімй Та Ще СУ се зу зх Я
ЩО Ми А та гл М ТАх їм Є я Луг ух, Жов бю бе Уужия бсук й тихі: її: Жук, їтшж о сУвА ОХ У Ббеи С МО ЛУ туш дп УВУ таж Би Авт Аа Бе УЖ ЖЕКу чкЕ - й чт
ІК 150 Ми чор її са я: да лів тоді; ЗІщрі спінує щу Що Ж овлу пичу Тахо Товиз у їїз чві Ууді ри дай ві ЗБ УА щи хх З Зла Ха Бу Му сих КО і їх їй тукітж Сизиз хми Ух я т А жи ФУ Щи дна За ших віх Тіто дат ре ко сій бе ве біз сла сіу Бпе Ал Бо ва ще А ів ті дКщ Бра е ще с чі ки ря 155 БО ов чи же А У ни Ме я ин ньЬшО Яни яку ТИ Щи БАЧ ПО шю гм е у ет. уж мя мен см поле ЖмЖ СВУ ХХ ме маш БЖ ОМА хі ХУ бі дек 4 см
Кевоу У ше кі т ду и в АНЯ тт ее Ка шли хі ті ре Бе с І ток. тіж кає са буд ТОПХ ду БО АВЕ БІ Ул. КАЖУ да БА МВНЮ Ж МД зїУй т кЕ зіуй
Де Кя ТУШ 1. п М хо хх Що Фа Ти КУ року Ел. КАК таж КЕ ух Гана мл БА Кн
Ве Бл щоб пе ла ВХ МЕ Ба бес аю ле ЛУ Хо Бах йпдю пк зм сек
АВ я М
Тв тім те щі дру г31х Єуму «що с Ж. гля же Та І тв щім АФ ОЯла ВКОо сеу Шеж сбАЖ СЕУ ШЕУ ри о ШУШ АХ Буш сш ЗИ за пи за
ХА ка ех с ИН яри їх У ж М до ж хи дк ми пух шехм хлжа АМКУ щем о шлу ВАФОЖЖО УЮ Ма йо маш Аху ХА ЖК КЕ дах 3 235 о
Фк о худих му. КЗ Фк ФМ ж др ян діа Щищух ян що ух Зо т що ХУ
Хв ах вне Аа Уві Беж іє ЖМЖ Беж Мар ОжмЖ жів що Бк ха 15 "их ц б хх ко см вен їсжеєю ЛЯ жі бу (ЯК Джин школу Ж кю дошку Хот шу пледом Адожтех СсХих у
ПУ Вл ММЄє УЦУу сжеросм пез) МуБо їх сеоу ФМ) Му же ЗеЖ ле щеХх
Ей а жа нн бод ве пої ТУТ бю же бубуле ЩО Та х п тує т Тех гзух СЕ 1 хм ква БЕЖ йЛхй лу ЖИВ КВХ СІВ слу ЩШАМ ПУ ху з ЗА ІТВЖ мА чекЕ зах зи
КІ роко М
ЖЖ фаху Міную Же дожух (ЛА тоже им дек Дж тек ЖиИчихУ Жим ЛЬ ЯЖ ДоовуСИК поз паю Ве ОБЖ бю бів був Бек Ба аа Мек БдЄ бе шу Ва ше
За ХУ М жи ру ток кт УТ ІТ гм тя. Тож ст т ти паю ШО «гр тою ау жИпХ ОБ ос суп осад са ЗЕ ди му о снищА ВАФОКМХ сжСАЦ ОУшО МЕ зт ву тр, те ах АМ Ух ХО сірки жу топі біз км ща ую това Мік ли бух буру тем Ж р жи пов жд ек Бус ме бі Яхве Зах пеб Меп ос ли ж Му За шал сю В лях дж 35
Шон іо ТАТУ хе Ху ше Хе ох виш» міх УМХ ТУТ тм Же хх: 51: ве ІФ са дер о Мес Ада АВ Зв і йо Бех слу пеЙй дей йзла ва
ЗА тлу тих ж ве ям же М МК сш ря у сту хх метри С бере Му МОХ вро мух Му їх цей во Баш об ев Ор со ЛАБ ша ОГИХ схАш дЕвОТУуХ ТОХ ВОІВ
Зах з БАХ стих хе чаша дл стю їни А
УМА ЗИ
«М ОПИНОИХ ах, духи т ях ФМжКУЮЮ Я ах я й 00 ХВАЛА КАЛУ ІУМКИО АСОМ т. щі чеМуки юти сярожк Я А Дт би М щі У МІ ях дб п ку й мя КІ пл жВх Ада дл СМ СКВХ йЛхж лав МАМ шу ШЕ КЗ ОБУ СУ ОЖВХ лад - т 4 з ї В вже кВ лах ЩО у У хи. Ле Леруа туго стаує КІ шо екю М паху тк р є чи
СУ вів Со та УМО твж бла БІВ се Віш ОЇ СУБ ХА ОСсІ1у Ід п п Ка від ча по сев дід Тнж біо чех Єбеш дьщ п дідо сма ближ лю й
Аза сув ау Са Аа ОКНХ о сшАЄ БЖ сш Ла ОжАУ Ал зма БИХ ББХ лу
Ух БЖ х5
З о ЗХ ее Ко З щу ху чим жі хх пвх жене щу р Кт я Ен Ку ка хХлж Бі слу Бій іш ЮМБУ Суш їхрю ЗУЄ СМС БІЩ СУ ж ба Кв і у за зх 58 мтхт М блиск Я що мий ик как ПН бік Чун спім сло у бик ТО
Туш см ом слу ск ШИ їх мж ув спо В о гмлХ Зм ОС АЖ му о жлх ках ма як їх що вп їц па нАоя ж Ге. ее оч Су ку Ми рих МИрих ТА дю зо Кл ки жахи Ж чашу КТЗ хе ри КО міни Ж хх ві ВІ сту ТБ СУБ ЖИ Вій сі Су бу Су Зі БАК КБЖ тв су я ах п ах, БЖ ЕХ, гіон а; но ех «УК дою хи, Тл Ах лугах Хо зм Урі М хіх Ал Ух. ДН ья
Аза ТЕХ дів жу Сбув АХА щу да ТЕХ рих Те із Ліз Тих су ТЕХ ак 4 й хх
ЗО сля шхО терем сем ха фзим уми ФУТ с щі и сл СА се сбжхуи ср ук Що є ки ке бах Зі Сук Су Біб тТпЕж діб Сбуш ЗМК ЩщоЖ ЖИих ЖК СУ Ка ОСую хчщ яю я З
ОА ЯМ. ме схуд ТИІЮЦя пущі бчхаму боку Між би КУ Мін юю йхухму ТУЮ щодо раю би Ж ух
СУш кА о Сую Су СУБ ХА Су Оу ХА Оса Ж Су СІ БІД ОХ сСЖжЖ ЛУ «т я як 132 ї35 М дощ ж Вміжах лока Ту хо жк МІУ муж 0 що в щу бики ЧОюЮ пмо До
Щі пі жЖидк пі Віз був ох пуп щі АЛЕ Тих дів Шу БЕ тик вуз тих З Зх чих
ЗХЮТУ КЕ Та Мо йти біс б Ат Ст хі пох ба й Ах тк Му Хтлю лу ММ. До
Ста ів отих аа лу дів дів сСбув Аа дів лу З ХУ АХ ОТИХ Аа де за НЯ
АХ Зо АТ три сміх бах Мк що Мб йзкн лм щу що юку жи іх їх я
ТиКОТнЕ Суб Кит Вів Жлдх Су Бі Віз ВЕ був Бі сі БЕ ім ді ка сш чех
ХК Ту Мо
За (че Аля слу дл дл ма Ум Філ (Сх дл дім рух дощ ху сте ма шу йів жу ів дів Тв тТшх пот Сув ді ів их Во ЗМУ СУ за БУ за
А. ям скл (іх сі сх Ал сах ке у Кі пк її Мі Віроіш м бум ак
Су вив оспауУ Аа ож СУ ВІВ ДАВ Оп (М дав ва пд УМО УЛи СУТЕ «кру я ц зіжугу лам А «ОР. бохо М ву сумує (лих ММнує Ах до с ее а п до» Аїд лк Ах дл
Св Ам ТЕХ бу ЧИЖ лав йМаа ДВ ау У ха лав лав бу хв о йпхх рук: Б тю: ЖЕ хі? ям кю хм чує й: учіухо їЗімоо сіє бе що суєти ян я тує САУ пт ту їм Сі па Су СПшжЕ ЗМК ТАЖ Аа ОжМЖ Бій см іш ХМ ОСЖМЛЖ СЕ. МЕ ба п пк «СО ват «А миля їли ех рію пух о САСТ ДО Три лих плям до дл фу Бе пис бах ау ху ХУ Аля Ла отих СМ о КВХ лов да СЖА КВУ АлАТ Х г дл си ов КК. НУ кот рю Ман вн ту гм риє що ря ті ля та фКщ Вр р ту чих
Аа ту ТБ ТБ ра Сув ТБ о яіва Те сбіу ів Іа тк ТБ ТУ Сук я ее ви они и шов нави неви Шен о ше и о паж пйпім 5із сш БЕЖ Ав Оу Зав об тю УВО ЗІ жи чек «щи
Ва ла шо кл» о да
БУ ОО
Аж ил
ХК Их ще стру лу кмумо дк ХАТАХ вл Фе тхе вре 1 шия 0 ЖМИЛАЛДАМЕ ВНД ЖУ ХО УЙ «аа шле пли жи Али Ал ме дл шт бот сю Ма сх віх ж бою лів ди щшлу ЄЖв ол да ОХ до шоу Кущ ОонуУ аа слу діа Ти Су дія й ї 5 То АХ ср Ху і шо КО у Мед фу рах жк Ж Су т хви ду Кс хх
ХЕ лу БІіФ ВА вла ЖК ТИЖ КЕ ОСУВ дів Тит біб ТИЖ лів діа діа хо хх Зо сут Фан АЛЬ Мох кое Ма, хіх хі ум У ЛОТ ояу фі М шлю НУЄ МУ АЛ я см хм Аа дв дик хкУу дха АЗА ТИХ лм ав ув сСув жНЕ ож Е ха пк сх -
З Бе Ух спад ж пфуе Ж що сеіхуе сф СР па тех рух іх їі її Щі ія Нлує їж Вів ТИЖ вів мк би флл ол кіш Ем в ржЖ в ВЕБ Ул Е пи п кт
Б З ВО мох буре СУ ча Злупко З ду МУрує Хв ин Зажо сук Ма ж ї с сСев о б ліз ваза сСув рих Ада Ки аз о тнж ТУ жи Ай шу УЮ АХА
БЕ ВЕ ТВ й тек «ХХ Хто що ли лебедя Зк буку хх пи ло кУх ТЕХ що ст КА
ХУ ХУ З Мах ЗМО ОУМХ ЮА Муш ау Юа еф СбУЖ МаАЖ дав АЖ вда
Х Хо» - В: ІЗ 4 Е; і: Я Х пе пе па жа У МО
Ммихає що сх хх
ХМ ОМ ЛИ КУ це ви Ка
Кеш ххх «ІМ гм
У ші сих ВАМ ел шдиїл маш сммеь ід хи АЛЮМ МЕРИ ММ МОДА ши ТУ с, й
Убіная Умах ММ смак Ж бат сжет Мер сЄпчхів, сек Птах до й тат щі цю
Тпх жпЕ ях СУвВ лав СУ ШУ О ЖАХ ЗВ СУух ХлкЕ (Аа Олю бМЖ Ам БАХ 5 їв їв
КЗ й КУ Кл й штчих Щі Іще ма пт тт Іду ху хи ик тд лих дива Ку дпа лай Суд Ж ВХ му БУ даж жауУ СМ ОААА СЖА ЛАД ОКУ р ХХ їй
Мік Тло ЛИКУ беж СЮ тую Кох кни он онов но но НЯ ТТ -х ЧК их,
А ОС У СЕЗУК Оу СКК СХ УЮ ЕК ІЗ: Ж Ж СХУУК СХ Б ВІ ВІ КМ зи: 3 Я
ТЕ ак МІХ ча Же ск сим сб ре жим та си жЖім Ма ми кі луги ді кі д
СФЕ жМмих ТИХ сш тМЖ Ти бе Ах сСУуВ Да АХ рих а шжхУу АХА ДІВ
В ВХ що сту Що о СА що ду паю ух ки рен ОК у Ми СА м у. умо Ом. Мод жати
МИЛЕ кА СКЮМІ Зккше МА ЖК Х ХЕМЮ СЕМЖ жав ОО МОМ У ожиХ Вив'Хих сує цк ех «хм: хх г 2 У: ц
УХ ТЕ ТУ хо жи ож до бчук М сла Ж гбощо бік сю ММ синя М о риє й пу дів Зашо лах СУ а МБ М СУ му АяКХ о ал АЛЬМ ЗК їх КЕ АХ щк зп вух я Зо 5 «па гла сг й дів мк в лим й дідо йо см ах МИ й дід лк обхкУ СУБ ода ходи Хм МО МИХ Тех. хів АВ Тих Му Тл ХВ Ав. дл з йх ах ї ХМ. АМИОУ КУ г ик зухрим З хи си ММ Мусую че чубуєяи или 1 у ху М урує М Ти та лів іх ТЕ лів таж ЖЕ тп тип тп був діа тає тнЕ БіуУ дід лід че 134 17
Дхл ва дет бїхх їх ен Чую чи С кущ рев сті чйюро пюре Щі іх їчУх МІХ пі СЕУ РЕ Так осує ЖТМк Шу ЖК МК жк Ах Тих Мі сі Су пі тій тік злих
ЕН до ке
ХпуУ шила ж Ал мч сивою Мк Ал сива Мр дих АД ит ги до що А
ТИХ бу Лащо'упйх Злх КжНх Алла чих ді ж мА ААУ КУ дл у Ах тат тай ТЕ Ка
Ку А АХ Б сезучи їх: їх см Ж ло їм КТ ціа ви що на т тут хи т сект тв пі пЩІіу Су іа Вів Су Бі Віа йо іа бкж Ба ім ІіЖ тв
Би зт ху
Кл очко ДОКИ площ гтяегу СМВр сих дл до А одо ли ст: Мед ЖУТУю До АЛ жах фу Ак сх км ув лу Стих маш Ат ОХ аку І силу зх АЖЮ ХА аю М БЖ їх АЮ як УвЕ хе
Тит Не ОК
А КА Ж тіки куму їм буму ух бухручя КЗ дя те мкЖ Еш Ммуш му шум хмлж км САТАХК «жк. теру холу НН
ОХ ак «Во пий яВії ет Е
Кт кА пот миде шлю 0ОІМАЛКЦИХ се Аа в НКИ : вза шу АММВЕ ШИХ КІ Й
НН полу : які ОК : гук З А Ж А гу тя Гру хжкш ск їх жу СК сіхах сту сивих Кт Н іш Бі Мою щі ІМ МДЖ ХМ Су хм Му ХМ схжЖ ХМ УК СЖМж Фа Н ї ї3 МЕ 15 : піл боже ота МИ у там вв сим у пиму щу Аля Му сим бли Щі мо б хи Й їж УУ КМ СУМ сзВу ММК ДМК СКМ Х УЮ АФ ОСуМХ СуМХ УЖЕ ТК ЗК Ж Ху : ще 5 ЗО : під Вл Мі му и ли ЇМ Ві Мі бек Зою ів МУ Азію ких дім : каш мав ла УЗ цАУ мху СЖЕ йо дав Са дах йо ТвХ АХА ОТИХ Ло : пр, че Кк Й
БЕ я У : ст ж по що би пери чаю що щік сію Ух сем її уз ЩІ І Н тамю АЖ ЕМХ ВХ Сук хм сх БІ осо ХМК СУ АК сАаш БА вла са : и ще г !
У шо Те Н паж дів сл іх (ак ссжмх фах бе гм М (тю хх :
Фаж дав аж жМу СЖв СВ сжЖа СЖа ТЕХ у Тих : кКц ех чц : мо ши тлу Й сті т Ка :
Ж Мми ККУ Н хишщав ха М : шк уки : нм ОРЕ Н я Мих хх ух Й
ФОМИ МИЛОМ ДІВ ЗиБУМОАЛЕ : аг та : «аю МІ Я
Тло» сту МЧрюух сі сію сл Піх пе їх Що пЕюих хр Жук 3 Н
ІЬЖ СУБ ХМХ СКМ ХМ СУД СХ СХ АЖ Бл КО ХВО Хвж Ск о слу вів : ї з ЩО МЕ : ги чом ох Зк Ян Зоре Ж м св сот А й слу й : ау сСжа СжЕ САУ ББЖ зв о ТБХ Мід тво Те був Лід дів жу Ав Мі. :
«у. Ся 42 : ка хх М : хи єхіуми ЄВ хх Ли слу ЩА ЇХ и щу піки ЩО ло маму Що пабюих ту лих Н їхуЖж Сущш аж соспж АЖ Мав сам сема ХМЖОКе бла ух Фо ХЛ МУЄ слу :
Зк аг їх : пу й Вл ощослку АЛщ вщ Млж ХЛіх. А ла Ди ке йамики МЧюкує є Нік е пік Н м сю У УЖ ТМ А ММК сю ЗАВ Му св мм АК УДЖ УКХ ОА : 233 Ко Уч :
ОХ ІТКІТЙ Го Н ббауя Млх аи їЗм гАтя Вїх Зім їв іх ім лох Зх слу «лм ММ Н твх вав ши Су шжУУ Аза дів Св Ім АХ У Ах ло жу УВ ТВХ : да ча ех до : ах ТЕ ТУ БУ : діт щі ох ії щі лі іх міх щі сміє Щхюєю о сгаж Їх й луку Му Н тм са ук АЖ се схих і Ба гас ХМК СУД ду САУ сСУущ лу ху :
Зо у : іх І х Фк МИ УЄ (лют МІХ ую Су МИ МІУ МЛ Кот що ом ЗК пух ло м Й за г ЗЛУ ДИМ ЗВ СКХК КИ Х Кл САХК (ха ММЗ сих СХ УВО : алук лож «А :
Км АК Ам Й «емши схручи уче ву мк ти 23 гу Ху дує м СТУ У рю я М Имя :
Іл хмжЖ сижх УВпЕ Ме Ада су СУ ТМ Куй Суд Та ща ТЗ ДІВ СТБЕ : її із 85. : лом їбеу й о йм пику си и йод шт жк лом щлх що щих Мі іх МЕ Й мому мав ФМ АХ ХЛХ а ММ Ж см се Ба УЮ СУКО СУК СКТАЕ : ли : ЗВ Сай :
КК УЖКУ У : брее убе ич «Усю Хе Й пух у Ум КТ зу. У М они шк на НА Н хво отв Су Ух сдіу дів аа м зу вів лі іх УЗ СУ ав ВЕ : ац тхда З ких 145 :
КК Ме АЛУХ ЗЕ : їх сб ут Троє прю нору ум ак щі що учи М до чує ПА що чук Пцумо бий : мА ЗУ ху Ух жлХ СУ СКМ їхУм су Оу рід ЗЕ Мід КМ СУМ О Ми !
зи па КН
ДУКУХ 173 МО рен Зо еру Що хм хх си до чит щі молодо г дб що хі вх
Те Бі ви Біг ПжЕ СК Туш Ба. му Зав ААУ ке Агоїх ну Же 15 155 ке
АХ - ка пвх бйіс дід щі діа лив Аїд ПУ
АХ ШУ км су сх бод т ух пк, -егук
Ач ШО
ХМК Ж
Кл рчне
МАЛ ООТУА
«й ТЛО коня тран а пан ях ях 0 МАЛ Малих БУЛО ЛЛВ ай сг «п» ай кеш он ши шо ОН щу щу хх б б шо Тк їх тіки й у пр пі діва Ві ХЛ бах іа Вів осІіЖ Муш сбущш и ик са Ж Зі КЕ
КУ ту То її мч Мур СМирю МИ хо лю Мо млкит АС Ну лм им нею А ТИМ ппЕ жах Жах лу для ОСЖВ Аа ув мав ГТМ МН СУБ ЩИХ ло ОТ Е дід сту -к А
Б Й БУ ушу бе ку ХНН Го сшН КУЯНх ЯЛли ж л ж щох ел І тя шлях ЩО ох, их х
СУ ЖЖ су сважшь мУушо жа а ки Юм Ба АХ Оу жа А Ж БА Ж зе Ко зе да Я
Мі жи Мі
Ада и ла ких ка я М лем соя ках зх «ЖЕ я шт: хокею «ий ЩАКИМ сх се спаумаліцг «ма» Вапсьіфця ваші ходжу т бат ча о шмУ з Щі Вл жюми б ха ж хи йбоко пи О пі їжа зх пхвем ср и аю дів Бій Вів сСуш ож ОЇ му хи вка щі ЗІ ПУ Чиж Тр лк ик я 5 її 15 мах сих чи й дош свя сфе буд чек оо ду ді їжак ка ик ик ве ож пах дів Тв жк Отрх пу сих ув Ав А ЯхУю Мі оСТмХ СрМХ у 25 за ж «З Б тля ЩІ їЗіжео Мох Зиму Зоо хім, 1, За мАфе зУТИи хх тухркних жан кт
ЗЕ іа Суш Суш Віа су Ва Су вла ва Км УМ му СКУ КУ Ст ря 5 зла си й до мМ яю АЛ сиву Па тою Трфуж тру бхущо жері Я дк би б спі Св За ах Зі дів их КЕ ле о жевх був був се КУ був Сув ху Ко ко
Мт пе кю муж: ем Мі мох чих йо рр хо з жк дю чи зу діа тн тв тв Тв Дів дів су Ада тп від вада ТпЕ ва се су ах За Та що мух до хіх сипфрюо ж що ж що хи о і цо умі сту хр жа її хи бич ще я
ТвЕ ОАіа бі ТвЕ пі бів Суб Вів діз піУу Сук був пі 1 був да 5 За пе що щи пат хе Ко бирку ху (ви рр пух ДУ фея СИ жо зга Віва сі Ск Іа Кве Те Оу су чі мо Кпж Кос вха су СУ Суд тех «ки тий по МЕ МАМ жу Музи М пут тая рми Мф фути пи Я «Йти ММ йЧрау су йог Сх
Ж шлу АХА ОСЖлУ щжАУ ШУДОПЄу ФУ СВО дав ож У СТОПХУ бу дев сСхв й зле азу, пре
ДК Ж ї5 зго фено тка (тк йод стелях Дод ко гл кю ЕК ку шлях ЗКіЖ ух М теки ДО жу суво'сув сСжв о плУ діа пу Ва дів б іш У Ди ТАх бе ів СЄУВ з гу уд ду
Ки АТ А
Ас ж АЛ Му пл Лях фУрлю Мн сх боки ВС до А гу МЛ ббхеі о хх дів зму йхАОЩИях жнНХх ху Бі Щдх Зі Був пів дьвобув скдх сдув ув ве ї5а ХУ Ак іх вич ех миня вЯк. з тах у й же хт ТЗ г о Ноя ючи дай ша ВЕЖ ТО АХ пав сш Ми СА пав пав юЖА Куй ДАВ ОСТМЗХ А еще яд ЕЕ
АВ ЕВ ХМ їххємо стру Млох ща о тпчуе З то що І що г их» що т Ах пув 'жхидє БішФ о Біва БІіш же ЗІ Фі БІ Бій Зі ЗІ (У Віа ЗІ Вій я хх по
МО МУ ЗЙМ пе нн и о р КН шви бах таж ни дів ув ВУ Сув 1 кі ля сут «МАШІ ж я А кох ач чим ве ме
Мини УЗ КУМИ
Вон иа Не у Я чяи м Вила мІи ВММИХ АДЖЕ «МА Ми ех ша ха М кру сих ххх ул сі куки щу А жи ау рим о фе М
ЗіУ Міа жЖле Тл пі бі лк бі Сук Аза Вів Суд ТИЖ Суш Су Бук х в ке МЕ их еф ух ше З у ик ред их 1 ЗУ ой йМмашо і ня А тя ші тк тв дів вів Су Св сСув ліва дів Ск Су ВІ тв віта сув ту Я ж ря хх КЕ ке хід й В вм дл вів хім йлтм» йлсю сію пт м дя смію Мід сх
ТЕ дій лів МА ТИХ дія дів дів А й ЗКУ ім Ді бу Ав тех хи ких ац в не 25 мури у ЗУ рн ит їх ил пи тих ТЕ ів сСув Лія сСев по «у
ХУ ТУ хи Ме кА лох чи «жи У
ЗІ» птпсех
УЗН НН ен ет часі на пиві іх сії» базсрііав о виМмсї ів ше тидлу
ЖАХУ Є Ка ре нка но Ша Шо и Нв в ША ШИН Ша Но НН пе отих Суд щпіУ Сюд пе тм Суд ТВ Су Суд Суд о лада Се УВЕ Ту
М х жах хож 1 з МО МУ
УВНШЕ; Що пі ни о НИ ШОН Татю кає Сп що з хх: що ТИВ жах ут хи ів ХЛ СУБ хакі ів лак о Хля жди жа пу в см СХ У я їх 3 пи ді Адже вк сію віщо Мі щр с я йсея с і від му сізе Ат М
Су діа лій сі іт Вій Аїя Тих Су Суд лій дій ТЕ сум Вів ТЕ 43 У пор ника я сини Мт во нон ше а не НЯ го нен сокола ьнм ОМ СК АВЦЕЧНЯ чия
Ж жає Бл жи Бій ж Ол рам Ваш ЗУ БІ ЖК Су АК А ВІ зн ен нн м Шо о и НН о нн НН Ж Шо нн нн НО На
Аїж дів сСув Аза ТВ Ада Ада ТЗ суд дів дів ТВ БЕ УББ Су
У КБ У ЩО й УМ У Мч сміху міч у сяк МІК бу Му осяє біхеє дош жа лит СУ Тр ха впх жах ах ах су жк Сук о жих дув Су гл СУ я ВИХ У Х п: за пре
М З У во тр би пах с лцує М щу лав іх Ма кіш щі щі х жі ми пууди
ТИЖ Су ЖК Хм Міз Ви же бі пів Бій ді вів Ді тами ТБ ОТтуХ а 185 Мій ож ох М муру сук ож МИ тк слу Уїлах ля уже ХЛ рн Кк я пики КО ага ак тах чих сСУуз ах так шак ЗУ ЗУ пу БУ ЖвжЖ ОЗ ж МУ ВІ х15 їх їх тп Мох Алтаю лю аю ую я о сах Аля яю УТ іЖ рю пря фек ли пу ж: тах Ах лад АХА СТПХ ТВХ Май ло Аа мА ОКИаХ ЛІВ ОВК ОИХ шу тих чия пе мч
ЗА ох З й ра ша а о ННІ Хо лу сту. Яхве й сушу же у их
Ста ТТН Су Су Віа ТЕ За Віа тп Афа тв сі Аїд Те ТВ Суя
Кк сх «п ш-х наз Мо Тк Іо й до А до йди Ар Мою пЕрау смедо лм ср ру ТИ й: СВІ Мах узд
ЇХ вх лЯх ЕХ СОМ юЮМІХ їхмю Ух ія МОМ С ХЛХ ТЕХ ОЕХ м КЕ ли жил КІ зах ї7в 5 15 172 175
Зою фра ук ро ни о о в НИ ОН ОН А ів тв БУ Аза Суз Від Су ЖМе БОЖ Тр вів САУ су Ах шах Аїд зх Я 14 зл МУ ха "Чармо сбжчаю щобл дов ня ДСбв дб їя
Її хо Мш о мАодю ха Кл Х малю о їх ху
Фе
КК чи тех МК хя чи КУ стр «ц «Мк т «Ми ОБО «8ї3» васзііїйз звів подруг р вени ее тки чною ща ко сур Ж у ве Ху с 3 З З що му МТ Ск
БВ жит Але Тв ві дів Ві пе ТБ Аїж вів вів дід У лЛіа дій ї х 1 1
М іс КУ ІЙ чаудюї жо бує їм бує тощо ож ду тв й та Маю тки лм пив слу Дт
УЖ о мМуш хВЕ Суш ем окЖжЖ ЖЕ пів ЗХ АВ ОА ОТВХ АХА ТИ Му Ах. хуй -к ту
КО п З уча сту ет щі КЯ Я ж Вл хх ся пох Те и й ка Кури ХЕ их тс Аг лУуВ Зі Бі Віа пу ді Дів 01 шоу МАК КМ САУ тик ОжНЕ
БУ хх хЖ че Я ОХ, їх хи І бр ж фл АЛ М о МЛ тм й киш СЮ Ін Чи до ХА е пл опа Мухи тОпХ АмА мив сум КЕ сут їмлк Ом жлК ож хУХ ту ши кщ кл ше ТУЗ щи
Між їх хе сл З З дур крвче їх че вів Су Іа УК сІ1У іа Віа тп вій ВІ ХУ ск зх -к
У то ХХ хІжю М ХУ
СКМ ЗТ
ХЕ ж М хе ОБІШШЕ
Ух. ев ши
ШІ 0 БдтКкамд ДУшМММАВЕ ди гудок «ам пах срде Длом отчий ХУ іч хи чик Кв хм ПО ж тки ТАЄ лу ху хи од су мив ху СУМЖ сут ДУБ ХЛЖ СУБ УМ Му муш ль УМК СУХЕ ч щ З їх хе х й» Ме Бу тр пу ти Вісь гм А Ка им й їла СУТ муру» зу мує (тю
Тве Жак біу Аза ств діа ТВх Тит був Суз вія Тву вія тек ТМЕ буз
І а У хале Мою у волі сх сот від Від бе сх сік сі Аз ей Ат сМщУ ДІ р
Ада і У щу Св лів ів Сув СЖЗ ау ув Азвосув дів Тих Аза дів чк зх п
УУ и 5 . їни (1 Зв чих вів (хи чих Аа що у дідо тк А ну Му: вів вів Ук Зіу ліз Сев вда с1У сСжа ліва їі АЛ Сув АЇВ о жВХ ТОК пт тк тк в У М хек и с сяє хо ЕТ жа ери ку Кт Фа ЖІ нан ЩІ м
Су ХЛ Ва бах вій па БЖ Чу ХИЖІ уУ Суп МІУ Суш Куй лав КУ й «г ярт 5 85 г ТІ ЖИ со в лм бі се мив ЖИЛЕ ОСУВ АД тв о плє бів іо дію сб бе т
СУ СУ Сжвобїум їхиж ММС Му ге о сЗОУ см су МУ ув СУ чим 35 зо з пот фія Ка рідин бує Ан тих Ху ую пи дує жи їм ЯМ буку дам КУ ЕМ ЗЕ МЛ бу аж вла тп бе зллж Ех ЗЕ Св ЗІ СЕ іа чав зд
МН І НІ тес Щодо й у що сю Що ста Тлїхах ХУ ух хе жує ом УЖ ники пПуш ск УЮ й Ма ую ее Я САМЕ ЖАХ ЗУ СУБ УВО ВАЄ ау У
МІВ хда 125 що твк дія вій і тем ві кіш Мі дю сит пвх що пліля см Мх дій тих Ада Абзд ва те Ада Аа йо Сей жа СУуш КЖЕ шу СБ вх
Та 135 146 тах жо МН Моє Мхах стуєсь й хо що ху Мак ох що ща Чим щу те Міз жах тає Хак Су дів Бі пів Сук бак о пха Аїв о ву ОТМих БЕ
ЦО ЗМ, зап
ААУ КМ Ам ке сук ІЗ їхіуху схе пізує п В Ко г Ух т яма пре бра інш рух
Су Пху Св пі тв ТЕ Вів Віа сім та й ТВ ТВ ве Су ве
А То Мт
Ящики що бе уз її Кі М щі Ж щ хе ти ут у У я їйк тн вів т Мих Сужш Сіу Ада лів дія ві АТа піу Ку лів спіу дід
КАХ ї3а гу ух хх лож КО льш Со Я
УДК ОМмАаЖ Как кі туї хуй тя МАЛЕ
М по
НН тд чАЦХУХ ЛО хи Я ЗЕ
З ши место «М ЧУМИ, жк у яз дом сплю «ша Виєедива ди А м тах «Ям ЇВ ух кіх чує Ж ко оо жито мкс ержа Я хо жу що лає А кі хі дув
Зі Су Віа Біва Сук Сук бі Сук Вів Су Віа ТпЕ Аза дів дів ДІВ ї БУ 5 їх тему йутаю дао суди Зло сіля ба Зі м спі зу Мі» сі АЛІ мує імя де Мр их ХУ дів су дів ожку СУ ВІВ у Зв ост Лад щих лк се ТИХ туп т лу п є Ук з А жу ххх пу ум ря Кт хе мує рухи слух ум Мі умо мує мух ві їн іа бі БИК сл ХВ Кі Су СКУ Су Суш Ада Су Суд СУБ ї5 й й тк гори (рук фах и и А ух каз (тлу (тю гм стю рю си іх сІю сту Му ау був тах сУуз Дій су аа ау ЗУ СУ Су Фе шу пи що сх щшІх п ТК ЗМ тах Мф бою руш пеню ЩО що пу сере прируию сю сф т руде тує бе т
Зуш жик тих тих жах вів їм жмЕ бах лю Чак СУБ ХМК ОПУЄ СУБ Код. ке «ут -щ-Е ту во то Не ЩО
Пк фея пл 5 РІЗ. ое іх Ман юн Мк ТИХ яти х. Лех ст пвх, о ту ще
СУвоАХв АХ СУвВ ЗА Аза бИиХ их бо СУВ СУВ дум шим ЄВ оО АВ Ох 39 35 жі М Хлор Ді х МІ х З Тож б бах ем (лях ЛИ Ал мн Ах ща Аз дів тих дів дів діа Су СІ ЗА МІУ ЗА Ж ша ОЖИХ Аів 38 105 118
Ка АС Кн
Усю ЖУХВе Вяи фт Не 1 1 мо НН 12 1 во ся т: узи вк твж ТОЖ сСух Віа діа дій СУ ТОЖ вів вів лів тп дів СУД о шуу зл: ха те
З Тих и г м ми пл що й жук М, Му щу Ах ян ат (ку пи Тк ги
Су пі Тл ЧАК Ме Бі піж 5іа Бі Жлх жк ак Су ХНЖ ХМК Хе дк з ук лях
Кене ях ау 43 Му фот тлу су лу кт ут До их ру лу КИ яю Др нує ЛЬ дз оту Суд САУ вла дій лів вла дія ху шику Ах АЮ Ак ОТВу У пезнше А АШ АНИ іа па діє жує сіє цу ел ЗА жа УВУ
АЛ т щдІсТИиЗЕ хід КАТ МАМЕИХ.
ТЯ, еф кни он о сало т ес пло «а» ша
Фк ах 13 М дк гу ДУМ мух де хе ЯУЕян бю кщУ «що Мету хі
Мис сій сід йія Бко бе тех дюш АБО ТВ Тк» УВІ бра За в Беш я « Е хк х 5 18 Ах
АБЮ Аза ті бук дж жа Майї ве Міє фі» Був (ма Же ча Же ших скву жтц й
ЖИ я ях щу тя гі; бі МИ ді дО хг тк УР йшло ху (м Міо лова дих Уже сам Км жа Аа Ул. ж ху Шу АБА ЛАВ ОТЖХ лу МІВ АД зи й «ц ш КО І-ої теж ощі бут хі для гою тла В г сла 81» си Від ви МЕ 4
Туш УВІ. ко УА ві бтв Хі вій Ме оса Ав у іа ли ле Фо
І У ОП що МиКі що що тбфрю Тих фін йхл а ло тик дж жодну жи их Ко ук ре
ВіФ ЩА від БР Їм свт обі Ві жи У ївс АКш ди ваш пі їз я чн -хЖ Б
Ех ТИ т й тури дл сер тою ту З Тед сСУуїля Шезу Ме ше Мет йчу дет Ті жи тик дія св Тіє ей Мем джем Су ШКО Шеж Же шко дкч де Її Аа а що жу зв ВІ зд ж уд пл зі Бім їше се до мс: 23 Кл іх ух тви вів Вій о Сій вви Баш Ув- ді Беч жд ви бле са душ СЬО Суху
За з хлй іпо Мпа МА їж ун А Ов що Ст дю тощо То пу ложу Я Мою Що сах Мам боже ху ша) хат пія Вів Я МУБ Без СКЮ ОЛІЮ Му Бек о Бек МЕ Ме був ТУХ чаї ах я
ОКУ М хі ті шо сту. Хм суламу их дя и хх учи Ту їх да и тя пк
НішБ хів зни БНЕ вве ПІЕЖ СУ МА Сі Ах аг сСаУу Щі АК Сім вх пух Кк си 135 135 МУЙ тав суп жд Тех стіле іна Та Їх Шах їдяз іп іт дід то Біце ща
М ОЗИМА Кат Мб обу ЖІ МеА МВ ше иа Ша ау май ОКЕс тва БМ дл ще тк: 155
А АТМ Кох пе
Уч: Ж одмло ях: жк їй сем чу пл хо Мі щі щ мк що дошеа ФК пл Кз
ПМ їв Змі Бі УР ТУЮ Тс БУ Бве вів бик ів ве БМ омаї зи ук «у
АБИ іт МІВ зу шу хг у ЕЙНІх Фіз Тл: ігр оЄчнУ ит У шо Тані лу; й тах бе
ТВ жЖек Ух Бе Ам осУвВ СІМ ТуХ А ТВЖ БМ сжмх КОДОМ НМА ех і859 135 ВК сряжі У: рих м уки: їх їм Жду їх тТизшо уро дО ФК дю сві Що ке
Тк їмо БУ суз4 Маг пішж Мах бо кто пу виє ХялоОНЬьЕ ЖЖ Блю ЗИМ ти тий лим
Ал МУ ХА МИЗ реа нон о в АН НО пил МІ АЖ СТ ру, СІ ре жа НН НА Он зех Зав За Там сві ВЕЖ бле бе іш дме СКК ЯК шо Ма суха пух ст ом хо жк
Тіт її Жди дух ле сетуєє тхї тиМі хз У Фу до Луї хх и кг
Ті спі хі діа же теж ФІ цем обек ко Беж Зах мл ті вх Ехо зх Б раки ЗАЗ
КУ ее) ях ЛА Гео зукуУ Жоахх біжу у Тем Том и сих жан Ср У аж бика Жоххі МЛ ТМ о Улушо їИдї шт: їхні Б Бе ув оїні баб жа Аж о Кеб Бех Бе Ба отих Му сад «ак вн Б хау шпй ях хі щі ті отих з т тож щу 21 Ул Шезує мож ба ли діа ВЕш КІФ цУд ЩІ ув сі муш ШБіІш Во СіУ Кі шеЕ ТУх ВВ ОчЕХ сим пу тр луМ ке» М
Мч сМхлує Дж Мік богу чи ру гл Ух Мов дл Мем о Зла дО С М ОЗ хх КУ ФУ ЛИ ЗУ ХК зр їх СУШКО буд ЗЕ яд гм ОМ їх у шх во ЗЕ тахує у щує її ум Тов Мт щи ем гу ки ІМ их 3 ди Ж им. їлут, тТтЖ Ві мк Зі ЖХхр ім; ЗЕМ о БХУЩ Ів Зак ху БІ См УА мк МА сУДИТ. зх чи «У си Зо хи Ух и тя я. хр та хі ших ме яу- к дйд г їі ОК дви осіуУ Бук йка бах Бо пів УВО сі Ак Уві ТБ Ме двр опа вва зх, - я ук рт
Зх зо З ЗО
Фу СТУ ЗИ дк Хом Ме Мтуре Ж г яю Ухаєй Бо МТ ак сію То еВ пу тот
Меп жа Мішобжні БМ ме їхма Ма КО Камо ку жи Му МВА ЖМх Бе зак еривх Ех
У зи ЗАВ тлу ди ду єр діля лу с бо ті ше дм смію «их і й сл же сдаУу ет піп зум А сю тех її Бех Аа ну со с аа ох в їх УЗИ сх «уж ух Ти ки іх лю би тот Тіто ля пи і Сум до Рея
Тут Ів сСаУу жк ха ВБщОКУЄ БА ОКА КАК СІЮ КБУ АФ ОшЄеХ БЖ лаМу «кк зх ЗЕ
ЕК хи зх
І55 КЕ тлу тлу Жеее фу т их ТУ ще дозу ЛОЮ Ток ли ЖЖ ті Лв Слух джу чад жито Єехлюрош ва Бл до АБ Ви ж Му ЖАХ ЗМО МА ХМ ОЗЕ
З 375 ЗМО тТтУЖ іви Яни ВЕ з «Що» зая «Еиів ЗІ «ие 0 БАЛОК хиМа» Ваєкігод сстюєуна дах УА каш па тик ме Стих ши КН тмкрує сг жу и ж До т ки ду
Меп ех Ще цу ЖУК ШІУ КЕ АЮ ОО Ще Уа ща УЩА ж ЕН лем 4 «є чи Зк
А в кб Кк що їла Тс її диму: суд тими їла Ше Тих; Бихш ду; Удіао влщУ Де Ла щВішв хі Бук Бл Ав Ух Му хі Млє мух муМм ех Міда их сю хи а й КУ
Хе ті дл теє Мишк дім й хі їхму й ло ул ах слує фу Лю У нах ба Або жжек Ме Аз й3за ай БУВ дв да злу ТУХ сМ ЛВ ОїхМу ук ди дк
У У ов ра хг 1 хо ШЕ Ач ке Ах Ук кг У и ЦЯ лоту т бал
Вів стві зі Уві ів уз ів іа їїіФ со) Аза сім їфе йшла А Се
ТИ по ж
Міф Тіт діа па лих ау Щі Мт ті лі ему дах Са; Мі Фе т
Віа її Аза Ве Уві Ав см Ага шле що емо Азхе с АВ пу да та 5 Сай: ет Ло Шен СТ ван Зк ин АН а ЯНА ніухає о птихає т що щит бат ма же да ем ха їжиз їж дух хлж оеЖ ХУщА Вав бо Вів ОЗ 3 За пе м то Ж Кі маю хилу ДЯ флшни Му лм ям чех бабу Фах КАХ зх СВ сі о Ата пає СМ ТУХ Аве о Уві Мед оМейх таж ба Су джщш ЕМ Мой дев так ї1пЕ 115 рн нин в ни в и КН ни о НЕ ОО пев ПпІУ її баи 013 Хо Зла Ба ода пе; 00 БУВ Бук Бі ПІ їй ЗУ
І-І КК к хх пін Мо а Кн их Фе Ми ОТ дич А КМ сх Ки шко
ХХ шій ж їУуВ ТА АБО ТНУ хау Ме шшу дич сш фу се СБ с 11 ї35 1
Уж: тю з боже УУте; ФМти Зх й ж ер Ук: зим фржеерко Може у є, Чим їла си обом Уж Бук губ Блю бе сій сіб Бе цу вх ме осі зчУук жх 145 ру МО БИ її яю дум хащі ядсгее ФУМих сяє Мі моя Моди уж тут пу т 3 лу их спіл Уві ах пі хе ЄБае ТВ Бів ТУуї Єву Те Вів но ба гі дБ 153 75 ут
Ул дк чеки Че щоже Ми г ж ем о фухие бах Хом і тля 1 КІ суще
Му ЗЛ ОЖуХ СИЖ дз мек баль сл беж Бей Бе СА Бу Дів Зах ВВ хм з тр
ОБУ ВІ ше
Миша Моро босу (Зх жом Ж ск ню у шк се ще кур сткюуи У що ЕХ шу дуже шу Жех хМЖО КЕ Уж фе імам їі ХЛ БІБ Ха кКхш хУуЮ Ка ОІВ пюх шЕХ А чу пк тату,
Кк ких хіКУ шк що ях Мох к же фл я; Уже ик бом січе Хе» її духу Уж ТУ жк век Аз й ку ек Мек тн бі Бек 0 лк Бпе біб вав Ме ЗЕ де ік тах «кт яя шо ТО зві 1 ті ім ті осБоех сх МЕ орех Шечту Же бллв їй уві дет В їд ет шк А ку ЖАВ БУХ Су ДЕК ОХ ЖЖ ЛЖВ НІХ Ма МТМ ТОМ тр ап лют АН
КАя. і Ку ТІЗи махи їв дю мохи Тим: стїх; Ха ща хо Жах ех бом бижм соми їйхх скл Мт пек Увх Ум ЩежЖ Бецб с БЕЗ ді фмщ. ще Бе бух пежЖ Бе У Лід -кк «вкогу леї
КУ. «КМ «ТЕ жі Кл оУ їхем фі м Хом тм т хи Док км ку 1 шию Си й дом Мч
МІВ о її був о НІВ да Шу уз йва ж б а ек Щух Зі Заг Ах
За зх УА
А У я хг тллухє ДЛ бач У УЗ тлу, їх кеди Мк Зо до фу У Кл ди Умкху
Хужх Ма лу КМ А МУЖ ФІ Ма ЖжХХУ Кл Аа ви ЧК Баш ТІ ду ТЕ
ЕХ шу ВЕ
Ми Ех КУТ аю лю дару ох БУГУ Жоуцх ошух дожух Жито ФМ а сф г А Жди СТ дал шу КЖЖХ лЖА ХК Бе Мені БЕХ дЕВ ХУуВобхму КУБ ОА жі Ж че ре Зп дою сіл ХЛ мех ЗУ хи, 4 Я бо; їх думи Щи жує Мід бо Фк Тим адиозхю УдА Еш МІ Бус ЗУ Хі У вич ві бух Ме дує с Бе
Б чу зц яку
ТУ Ах о ККЗ жу оду щує ХЖа;Ют сїрує 1 зу ОК ху ФУ рУую їУжмну КНУ їх я ЩО бул ут жаху КМУ зм ек опем ББЮ Ха шежЖ Буш Ві Бех КІФ Уа ЗІ ОчйщА зі ВБЮ ОСІ да ща, ух лю,
ЕТ и «Ля
ЖЖ тУМрхсу сйчжх клю том ххх, ху й хх жо т ву т ду жу и "в ви Ху БЗЖж Муш с ЗЛУ ЗМОВ БІ. ХУ Віа МВА Сім сі ТЕ зах дк чт
СЯ, КО Ка
За Ії о оосю сх Фире бііт Мі ю ЛА м. Ж У Сб Стихи рю ищоЗ прю тю Мих Жоажя Мои лав АшА МЕ бЕНХ ЗКУ Та дО АЖ Буд ої Мах ГВХ був мем: Бу МЕТ
З ЗНО ЗЕ ж о Ж Ім: ха а ка НИ її. шу шу ЗІЗ ся УМ Мі І щі вкл ка Тіз БО вки сві Туш же біз Ал ов Бій тих пе Лід ех
Ка М роз ву дя ХАМУ маф вас; же шо Ах Був в
Зх Зно «ші» аз дк х жарЕ шо у пот ди асо НИ я их г: яр сх зе чию куту с кЕТйх ВвшжМрав пустки
ТК п кум ких ля тд Та фліх тію дих ух жк жк ХУ, ЩЕ бр т ти БУТ ме Бу: Бе С ХА пек УВА Хі ЛІіМ У ВЕ ВХ БеЕ вро пешм ші СІВ ї 5 ї5 тк
Жолочя жона У хМюХ сш тг пт жк днк синя хіх кі дою Сук МІ юю
Меб АКкш АК Оу Хай АЖЮ МЕ СУ БЖ Щек Ал зе Аж Тук дів ших п пек Кв жи КАХ ТМ їкдрї баг та жител: (тая (315 ба її хи бує Мірч Яд тлу жало длуюю СУтАх
Мах їі бі ха Хіє СІ Ба ТАЄ Су теж АвроУВи: бев Ар МеяЄ ху
ТЕ ай 45 додуу Тв бо тла гум тм 3113: Бдхв (333 НЯ щує б бит нУ шевух пе ав о хан Су о хіжЖш ІЗ БЕш Ом пе сли ЗУБІ дров йкИа ТУ ех бе
ЗУ Зх У
Лот й У мл МОм тіж лих м хр ЛЯ тм божі їх зх що шо тдхт дже ЗЕ баб лк ойів Ук) Віз ТЕ Ма) Сує ва б3д їх Віа ож о Буж щи "вт ев ва
З То ТЕ пл хе В жчння тр шк СИЛ у ит пк жу Мер: ле том Хжи Жоат. ли лк чаї дво о Мівз Те ша ту с МУ Ак шт бо їшну Мад їк ЗУ ЗІ ха зо 35 пох ЩІ дм Зола ж хх пр тому Лют їх Мило у т аю сте
ДМА КАЖЕ ХМ ті Віа хі піж Тв їжу іа сбіУу бва Аза Суд Мід отух я «хи як й Ма КН
Тож йоєюя то у КТ х хижі ТЛюшю рю суху Дошух ДЛ охо с їла щих ХУ ху бок. Мі ю
МУ о А З їхмУ М А ЖУК ММ схій пла їхУш БЮ сити те СХ 115 їх Ж зо ж рана сх. Жду Су та Тех вен» ен пе мя и жом Хл. МЛ х
Фі сія таж де шко дех су Ай іш нів щі Ме: шах цей ді дія тк ли я Ку «М Ал во «Фуитує Ху с як тт волю Я ах о Аа пужеж, МК Ходм ЖйМию Ух хх ве еп ім Оу УЖ їх БО БУ СХАЖ зер жх БА ве СУУуЖ сь БІВ ОСУУХ лох Б лик зи
АЖ ха МЛ МБ
З нн З тки кі г. сих ско кт их з ще 1. ще кхОо це ті Буш ше Сів ви ві ві тів тіЄ біу Аза дЕХ Зіщ цей зКц хв Мк
КИ ії М дети Мб. Єр ьо Живу Жру СР ду Сдожтит соду Му: бул хх З фа дже Ухрох,
ЕІ З. ІЗ ХА МУУЇТЬ тА Зче П 2АхлУ гОШТЬ ЗМО ЇХМЖ Ла Му ха ко: зак чех у 1 Тих хо пив Маре М й бура ті шу пи Мор сі, Мак пом йо їй жк їх сук
Щек Мет вів б ліз дво де МЕХ ОС Уу Мей ЯМ Аз Маї век піз ух 155 Зоо ац5 я міх СХ жа фему тує ій М дих (лу ХЕ ЖІ бу де тод вх ги ів шій ТЖжу бе) БВ нів тн Ле сіУ ее А Ма УФ Я МК три ТОК, а слой М. реж Уж хо ж ххх Томи Щбсужу Ук 34 Ах КН чи схе Шут фЖ1 хе бує Шк Ух їм Бвт Сі їм: вав БЕс пі дае вів БК пі стві фу тлу ро зрикц, ій ліц тт из КАН Ка ще чл сю ил ж жу М Мижек о й СМ шо Жоит дсбщшо их у, Мк ххх:
Лв бу пу їду БЕК ЖуУхХ АюЗ ім; аю нив обебз Ліля А Зі мак бе лих «и "жек хх ОЙ В і 1 І хи жі «що Увнах ох М у шк хащі фу ХР М Имя, віш «и дій дв ті За ТнуУ ших діа киш Бе ба Зі: слаАї дай отих уж чех хх ок КО шо ма їіза: дк шкі зяижЕо ух дек пк о ще там Мк що дося п Хом МК їж їмо Фа М Бум 2; бУщ жах лід ск жах дів хаіф ву їм мае га 286 ях їх «За г Ме ТУТ 3 тю т Кг» шлаУу шежЖ меИ Клео лу фам муш шем Зжш пз лу кВ шо «жа Оп
СЯ: Ва сії» ЗВО
ДОН: щи тю тлу. «ад МАМА тал жі 3 чук сват ша вів секешя «ав чий мак щі Томмі Ж пики дл що щи ти Ат Єбмушо тихо КД Ще жд их ІУтхе
Мек ів Бек іє бУЄ Віз Ва МУ СК О Су БуУБ іа БвБожье БМ ОСЕу 3 в. ща МУ даю ха а Ку ММугує ПИТТЯ дае ХА бик дае 27Лаз Сп Ло их слу сові
Хе МВА хв і УМХ їхМУ ФЖМНЗ теад ОФжЕ вЖО се ж що ЖИ ОВО БАЗ вк в 35 дО чих Фо Тмі (іт дае тек бою ві т гу Ід ток т дю ТУ
ЕМ ОСКуХ ББе їі Пій АКкФф теж туї ДА ОТИХ КОСУ ХА ЖІ А ЗА а 45 ул ща що ку Туя Вже пф щу сли Кк ди Ух. ХВ ТуУре. шхету Ж тя шБіжЖж Біжа вІіШФ БЗЖщ ХІМ ОКлХ Зав с с Ба бум БІ БМ РЕ бли
З ЗЕ В
МК тіж дух З шт ак ПУуїхя бачу ФУТ лезу тр У вен Шин иа Я Хо тая Мі ос сію Мп осяМу ХЕВІ уж щЖО бе Ма ЖКО ЕКО йо Мис АЖ «аг «й -к т
КІ ВК ТУ Б
У жюшу Ток нію Ху ж. Ху йти ях Тем Ж ше Туз Тс жа й ко ух ха Су ПУБ вхщ Обл ли вес Ук о шам й ха Буш Ям Ха то
ЩЕ що Б тки Мет іх маю и и швУ вІшШЬни Шен ОН Ме бах Му Му бот
Сук ж МА АШЕ ЛІВ Ам Тіз аї дів о тЕЕ деку АКА МЕНІ ЗК СХ ха чив тає жа вим а е КМ жо оо Мах Хо Ус то: Тоді ср Ухуєит дих: ЕД Ме о дожу їси й їжи йод ха ТаАЖ бі ле бе обецо бул хо ДЕ У ал мк ТВА М У ях Лу о ІМЕ лх щи зх
КОВ Адм Ко
Пед бмхи мо Ст бу Му о стул єм бі щі УМ ет Ж оиххі Зрує». Лех т хви ТК сміху Туя
ХУ ОА АН ВАК ЗЗз-У У ВЕ РДЕ ОЗ Біне пс сом см ММ ОА Огша та «ту зай за Ії
А КОМ СК зах шию. їла ЩО шо мех ЗЗУутУу стзжех хіх бом Ху сплю Хм щі ох жо. Ж дм жд ЖК жк Вл МІ гм су АЖ ВШ ЖІ хол сгУдФЬ Лу ФЗТЬ орЕВ УТА тиц тар Я чу
А хз ЗІ їв їсрує Ж сих й блем да Ло ІК У СТ ий сіни Ххутих о Тотьк? ща. ЩЕ пт до
Меп КУБ ОТУХ дув МУ в о йАіз Мав обме бик м Таж) За Жах ХИлиХ їх зх п ек
Кс Мо МКУ иа від їшна Ті тип БКоозшів Же Уві дротів тів АБИ бед ЦО у
Кер ше ЯН Я АЖ ШАХ МЖКК. жк РИМ БЖ БА ДУХ ух МАМ у 1 їх ад
Во і85 НЕ салон туя Мр Що уко Ко Ж фон Моя ху Між Ж их щодух О1Хуйе спюудх пп ФЛ
Ум У хх іт Вів їх У мо їж Му ЕЖЖхО Мак хі вро Бл ОХУЄ УМ МЛ зак «уд зак я чо чу пил ск кує Сб, що тя смикає фе «ху М М са Фу сан ге тітоз мі лжи о Еца ТУЮ ув пев іа срУх жо бі ів Афін ще Бек БЖ КК ІЙ
Ме че скл т
Ух ії кю фл КО г фун лу: Ж умо руди ЗХ -лщ шу щує щиту Хо їМбоц буку бтуких
ХМ ем шжМ ККО ке ла шоу ІМ ЗаАФ ЛЮ йо БЮ хлЛж ММме мір кує иа г3В І ша жк жк жу ло ж Меч ст Уя сМаюю МИ я мом докт дах Уа мл де СМ ню м Му п-ех льа мл уж шою ОМ ЖК ах АЖ лЕа же сІпХоО У сх у их ск БЗЯ
КК ши Ви то ІУдуєх ШКАТО ЩО о Миша Мін Мати фам Ж щу У куту стає ес: іх кт піл Зежк зах Кіз Бо сла Вхбф був Хі Віа ЗМ; Бо тв Бжщ Бле бю т пу Сбп7ТА «у ХО пт ох дон ТУхєих СТО ри 1 Журн тож до в кА У ому стеж о ох рих ази ох ба біс Біт бхоб хі Бі Уві) оду Вле Бат ТУ РЕ Аіа Би шт й яВУ му ків оіхри Блез о Мет АКУ Тк ів бе Був Кто од був овеа зад зак Зоб т Ах «кИх. я айУюь ШІ кожи Зік
АКА СТАВ муха пот миди вами ХТД ТІТХ
УТ Фоми як ву тихих сус «М1йх БавсхіЗМіае КБохімМамдньв
КУН Ме хар мв о сю ждшую ЇМ дк яка хм Бема біс сю и Ж фе (113; бі сих п думах.
МЕ вк БУ Ов ЗМ о биМ Кі Бе Куй Авт БК спіуУу КІФ дев о лев ТОХ ї 5 а 15 жк ну шо ИН о НА о НН о НУ їі Же Ед КА колки ик. о вне ко их ек о Зм) Ва ід) ФКМа МХиВ ІВУ дО ди ЗО Дав й аж Хм ху «ххх тут зум ж с в яки АН УТІХ хх прю ге Же т ше жо тв. пвжа и. ак ль ТУТ ушу. пха У АХ ОАЕ ТУухХ ХУ Аа УВА ЖКО МудоО му МБО Мал Фі хо МА
С ЗВ по жів бі у бомдо Мрудю одомтї ЖЖ 31 ИФрЕх скит оку дою божу чок ухишо бив хр аа Бжв о Бве бен) ЗХ зош обоз аж піц Ба зт ово в о Бук А семЕ
ЗО ТУ о ху хи Уха пу А я ших хату СФогуза Ен туя Й тка ту ух ун. їЩрощОо при
Су Зі вет СЛи ка Бе гема ЖК слу Аа БжО шо Віа Бібшфо Бе блує кВ те ЧЕ 45 ї-хК-хх Ж їх по тир соту плоди рр жожоба мех Мат ік жиму ЛЕМ их Я шу Кия дз фу ля дух її жі МБ бу Му їх хм МЕНА їх Ж же Ло Я ХУ ВО ОЇМУ Ая
85 зо с
Щойно ки Укл кт іх стук хи їн. бури Ух яд о тк ки Ту Ух чи ТП аа слу Зі Ма Ов дю ки ре ам обо» Ха Би БМ їж зі Уки Уж 125 М вже «хліби зе м Лк Ж аххі ж шу Ст шу: ж ех Ум. Ти бручит Ух Лю
Зно ЗІБ Жук Буш Баш (и Беб бів хів УВУ пек обо бує жо Бей жи
У ЗВ
Кал МА Хо
Фе Там МТ тих тонну ШИХ СТ и КК нн НИ НЯ Фа ур
Щжх їжи Ада лі баці Ва ТІ» Ми Суп був спи ев) Меї Був сл 132 зав ак зах
А 15 ЕН позжех сивих пи их ТО хг пи. пох Не С е кю ати У. БЖ Я Кк г п гу
Ммуш їх Жут тут Уві МЖех сіУ БІіУ іа Бра поем Кіш рЕО опіУ Ада УВУ 145 Мо зи 158 ямі інн тро Фах СУТ аю Вл у. ЛИМІМ СІМ ри, Мом о літу Мія Лют ом йо й кт
Твх о дко лав Жех см Ахв дал жа рух ж йше БО ТВх да дув З а дк потвгх з
АХ КЯК З МОКІУ
Заж дд їрйчх жі ум сі Міо бугюуу сйшайх бю лах кю тю там Деу її тіє Чв3» їж сі пет діа Віа АВ шяеє Теж ХіФ беж пре ж дю У ч чай тай ія БУ МІ Мп пУумю Фах тю шт ХК ЧМ ММч біхитж МЄ) Му дл м Міхею СК ох їх лож ги ос ую їшех сжаї же так бкложма Мес ьо ТУух її» б іа зак «ке ле іЗ5 кА АКА тиж їм ит В мпуту їм Зі їду Мусу із (Мб цу; Ці сб сук б
Мт пі Пушо дій Бус бе Мі цеш о бкО Ме) Бе ВН Ніш ту Туш ТЕЖ зі зЗіц зад
А. «АЛ яю піз ли а Маус дм домту Ар о тому че досту Жау Тем ям ля Бе у Ід слу Кух Хшжж їла Яги АЛ Ха Бе жо Хжнза пуд оса йХ БО БТНх МОЛ ах пл тиув по
Би ЗО жа я ха стоку дру пу Ко тошух с НН ; сх Мету сух дз ОМ яку М мя
АвЕотВж МВ Всго ті пси Бі цеви цем» о дкв о ЗБщи Хеву Бе еБе тре тУух
А ЗО я її о тих су думу Ж. Ух фу тую З: Ку: Шоме су ме Зх Фах 1 1
Ніш Буш Беж ВхоО ті ві Бак Ме віє Бі Зет Тут вів са сі від т зщщ Бе а ши деихю СМ уу Мік Ж: і ту нев сша Ус Мбіжм ХУ хи Мххєку Мои Мужсит СУХМищУ Мк о дозж зах дІж шу АБ овле м ек ем осьу БУ жу; був вхо БлеоМмОеб Ав
Ук, ЗЕМ рес ях ВЕЖУ аа
У тужх кує 13 КУТ іже не Жлх ж Шелах Міуму М Хот дну спам хо еко шек піз ШЕ о хісг дів ГІе лвО бе дво ТУХх дБА ОАЕ бІне Віра
ТЕХ Іх НЯ ща шик «У дам
Усзишо ЖІ Уфа Можу сах Мохзхі Мед о чаа є ут яе дяху ФУХ У Ук
Му Мат бле Мей пек Бец Ме бик сім пі би де зах БЖ т
Зх А шк дію 0 лкщ зухч пе пах Утяи «а ВІК хх паАЙКиК 2 0 пд ірх пиві ія жук АМКУ ОА ВМАКОК ЛК чар СЕ др тими Ме й Лу т кут. дж Фора Мк Хе ЯК п нь ие а иа чи ех пев АК Ач мес цей ТУЮ Вій ет АвроАВвИи же був шЕх ТУЮ Тех х е 18 13
Джем Ше» бог й лох Ми Мозиєт щохжу бот жо ий сміє їїаю3 божих бат й х
Ашиа Еце бе Наш жк МК бує БВ Був Зі УВІ лк Ух Бук вкФф сх ху БО за
СК Очі У ни не нн и Но о о НН а о В НК бик
САМ БЕСК лам лОЖЖ суд лу шу муж лика бпХ Ал ел ХжВвОожнХ ЛЕЮОГУуХ їв жо с иа щі тету (УрУ Мід (зх тд Тк лах КА б ток у тек пі щі іже ща шжМ САМ ойІіш ША сув муж АФ ОВ ОСУУЮ ЩЕ КА БВМм ОмАМ ОКХ хо Ух «Й лик стос бихах ЖД р спліхах З діхті біжу щі; и хе руде сф хви Ж и ха був їв Хіш ЛК ОЗ Зв ХМЖ Ба даю а ОМ ЖД Ми ХАФО СО рак яхїх ж п
Ук у МЕ зи екраує МУТах о слі Мод Там Мах шк й де хіушкх МЕРІ ме лрдутх ат ТК ка ли Ж тТМнж щи Мет бе); же АЗв АБО Аж Біне Ма ЗЕшЖх Те б З кж Мая
У Зо З: таж та дл ія бе паї Фі ОВе Бай Я сті іх фр Я бю гхеї
Пе Куш АВ сАЩОВЄ МЖВУ вам ОбвжЖ Мей Са У САУ БО Ам щеж ма чи т гущ тей
Ме МВ. МАХ тож пк окт ши ха сла Рода Су боюкум о оежуло сю лож ро тку; о: Мія пер
ШУ АУ Ат їдь а рЕю їн: ПУХ ВО пр смуМ між Між 1Убці МАТЬ ХМК зе р «оч
КУ хх хх жах тях жука ЛІ хе ЩИХ дух ую ди дохо лм тах кує СТЬ кавхе бін дво ді Ух Уа бУЖ За Ах пів Вів оНІй пає буд Жеву а «жд тки дк
Ме МУ АЮ «анж бугра чт йохух Хо ді Жзищо ст ух ФА і лю МрЮЮ уеу ЗЯІ ху ще Клим ТУ ба шбИХ МЕИО Зежно »УБ хом маю їх се сша Би МА САМ
АК їх хх КИ ху го: 231; Мо хдт ші гозх су гАТіу хдо ф3Ммох г мУ Кв б у: ід
Мах Мен біз іа вит дБ о цем Бе сій сві Ре пев ву бец би Бі їх З аа тихо лУКУЮ ло. ку Тім Аж дока слі сля фу лі Мо паж МІУ іа между КІХ Х їі ех Гі джЖп дк ФошАж у вЖО ші Ак ге шал ку ДУ джу гЯя щук
А. Ах А пи чт гу Що їду душі фл яю ІВ мм Сум Км хи хто их лету їнма УЗ) зво дало дів дав Олі Ків тТуХ тТнх їівз бі їуз ролю Ка тлорк. РКО чиє їа5 КОМ я ши Ким жожоба 0Уму ЩІ Бен їх Дуую І суч т пути ці їн а ДЕК т Ах їк.уу їУмаф Щі ох 1 0х дж т оо тТмх Ілля тм
Уа веМи лкФф ас Ух ЖЕО ЕЛ ЛРЬЕ КАФ МУ шЯЖ АФ о дшю м ЖшАУ КИ їй у ту «Ах «Аа ХУ тоже (лях ли хи Хе То я йовжу ту Мои доме Тл Ку дохо т Ух її
МУЗ їм УКХ АЛУХ МЕ Ху сзаВ ФЛ ХУ УМ; ЗЕ СІЛЬ ЗА ХУДІ АУД чи й ек кг як аву ХУ ла
Я хи йшух шт тд МУ Єва М ство Мих ТО Фу шлюехє Там хр Тих йно йинмй дю дв озЗжЕ дер ошшХ сша хх ТИВ Ба ших лЕХ МУ тех ТУХ ко дО З би июу им тяж Дому иумю божі плей шо МОм Тохит ик ки буку ку тт дек ек дек Бут ЗБЕ ЇНУК Бук Лиш щдеЖж Би зу пек о йжЄ ВЗІи Ваш СЕ «ух их ям ли КД М
Флеучи флсухт боже ку СУТІ ж А Шия Шеує Ам сШиуу том их Миеую суду б іє ших же му дМХ лу АЖ ЕХ Ха АЖ ЛЕО Му ЛИЙ БЕХ ХО МОВО ЛИХ и таті ть
МЕТУ я МО мк тони о жи Ве стома: площі й дозах лану сбхюує у; хи пуащя тиск ср ТЛ
Еш му ит сш Бела. фу ж сек ом ЖУК хм ох ж БУ век сах
ЖИ 23 я буси «Зими сх» сЛуєтея жк жо ХК игує дру Ху Моди Та плин Же уче плати жо киш ще пе ку йдеш будо дек Щеж ше ХУ лех ше Шу лину щеж гена ї05 Зо 315 За
Усниєи Миколи спт її бо й.іую бли лу и Та ак ую б щук
Буш пах шнек ФАю хек смЬ Бек Бек Був зак ЗаЖах МУ Фу Бут ТО ки ж хз
ВО 335 «ба ие дожеа сМюжу хх и сб бе и бу КУ ІМйхХ перю сЖихюю СТ пі
Зенон їм УК З Зак ЗЕ ЗЕ пе БЕ ЗУ УЖ смаК Мах лек Од
З Б БО
Я пду Шюу ічзх тлі ТТ тд 1 шт; Тр рум суки (45 сб тих худ їжв Жех ех са хв Шій о Хже був АВВОтТуУХ Шах ТуЖ Мід СтТМХ ЛАФОУЬ
ВХ УЛ ха варту х ху ЕоБУуж вхщ о муюш кит лет дк
М ОКУ
«ил па
УМ «ДІ тус, се
КУН п штат БУК ТМЕх яку ких ХА АМ
БО доле З тт: ав і лід я ХМ АЛІЮО ЖМАТНАУК ХХ «фс» п5а «кре ІТ х Я стю ти тло ст тя Іл у стр том ру леді т тру
Меїт лю Тух гбЖжу ма хжа о ТшЖЖх пУуД БА ОО СКУ СКУХОЗ мех Уугі щдУВ лу ї х 12 їі тку пк ту точ бок тую бик жк ЙТИ о жому т. ФО ФІ оХУже смМаєто що КУ
МР ОСМУ ОКУ МУЇ Буш су УЖ Богу дж о МмУуБ о мук даму ФМ ху зх Я Б ж ре ях фгумх бує Ту будую бух г Же тиху Мен Тодам ТодУше бух бу шоу ДУ дзротух др о цУ Му Тех Бр одно тує йвромзуЄ Буш ТжЕж Жук аБЮ НЕ 1 БУ 35 хе Ти тних Ми ух чт дк ся ха хх ТУ пбубкижи жом бок 3 бе ше
АБромуУВ щу ДЕЮБ ОТЖЕ ДЕД ОТУХ МОУ я Ох гГУшЖ ГУ мВ МАВ МеВ МУЗ
Сн -- т
У пай зух
У г а зи им ох ей яке «ву КяК «Вій ВІК ее Таисия Ку ІЗ «ам 0 МДУ ВІЗУ МОМ Е ВКМ - я ее «ВП 5 стеки одер жу ж т содюя тд фиушео ВІ Удмя бла тика М хто зе пек сі АВ лів СБ Без Буш Бижш АВрошМ тоб меш діа УВО Ше ї Х 5 ї5
Стаж Же Жомту бичем сбієєех УЙТ фо лях тлу й ФІЛ ФІЛ лу до Яд Док ех У ем Бжє Її бе Кто БИах вза жах УЗ ке ЗУ біз шт Ме дев ок кг "Уц зи
У ом Я « то тд МІХ такУУх босу Сл 1 1 пе хх ТА ж тю ха хи Зах
Аз Ссжиа пт Аза мем ем дво вів дів сі др ос чую жа ВЕ хх л5 18 Б
Є Фу Му І Мтьрує Да ФЛ стажу СЕЛ у жом ех аж У оххх. ее, ж щ чек би шах Меж ожих За баб -Зак лов бев о Бшш Сех Бе о КжО я
БІ М ре мо пут ж 0Міхих Що бум хну мірки Лу хи перу При С «уже лоді ЖЕК дЕсч Тхо їі сде ВіФ Бхщ їі Теж вх О1уУ ЖВ ЖНУ ХВОЇ Хі УВО де як ЗЕ й щщх 1 7 ЩЕ млн дом со б ку дош Маші сте я пет За ищ лен ев й до тус дж їйЕ Ашрозех ЗА дЕВ БМ дов осхкуУ КЗ шах гл тп ща Зо о виде ля 0 ах ую хват мет ЖИТ ру СТРУ ул шоу хлу п мера тая му ау лю о кути са ах Нжвосалу Бл жаї пе ад оС біл рах ех ех ува лихо БІЛУ спе хг У
АМЕ ТО МАМ
Ві ші ім Дій бум Мах то тла дн ій Ву тод о ах бек Зо дхй шАМ М Да УВУ ЖЖ СМ МаФ ОлДЕЮ ОУуса МВ о МмУшоОх и Жах Уві
Ії5 125 115 сибручя хм ї1Мац мих
МДж КАН ме ЇМХЄ
Ж
КІ
«вк ла «пік ЗХ
ТИ ЩО К дю окАМ ХДМА
КО Ом ан нн НН Кв «ДОВИХ ОЖИНИ ХМа ЛА МУ МОДИ КЕ акт с, ек дух ятту Сп ючи Мама ух сх Те дом г Фа Меку ВИ Тс Фах їм Та
Мет мБта Ажа на ТО ап Ко Кі да ех дво БО ща ві Се: НЕ - т зла ук ке г ах ау йо Ви ж ка й ж стоки ЩЕ Сл ду у ях тем бунти жк УЖ ж Мих ФЛ Медик
ЗМіш Мет бі ЗІ бук о Удго шлю СКК Мад х спл ке ЗУМу Би ЇМО пХ жа Зц за
КК сл БеБУ
Ки пухка ди КА ег 1 УХУХ З. усу Ул У сСжує щує бу Хід 1: тим пу ТУ ду ДКтЧ мем дів йвр хі са ше дрож т ха Ва ЯящЕ АЙ у З АХ гаї ож до х. ФхОСТЬ зящеої хи си дя ТИ вк ьо аа то ких их саї де аа о Буя із ма) Чех тух зба пер дув Мівз Уйді уз Бнх УВІ тин ТЕЛА Щур Слхує сою тую о ЗУ: им ум; що що хі ЖИ що ж ко чт
Тк ла: йду ЖАЄ фей лм жа ва пак бо лав Ол Бек ваш см Сує до тт ве пт п т ТЕ хо мет о чн де че у ТИ й Ходи Ср гу Рута даже Ми й до щодо под оБув іа ваша зЗеЕш тез ав он БЕ ЖівЗоїМи мс мес Ав о леп де ве зе зе о нов НН о НН щл пл Пам (ЛІ Фу Тож му Флічю Тхех с
Ти УЗ САМ лава демо см ау лі шко лій ЕВ мУуш Пув Му бе КЕМ пух ок, чі
Мт Но То їж є кл тифу хх жк розу Зіхи ух 1 ех Ха сю її Хажи щоку (31
Ні ЗУ сЖди ЗУ ВЗвВи бар БК бр МаЗ Фа бас ТМйк бла дв о вАзв пПЕх чц чу чолі воя лм КЯКау
Жжлах мм жахи ДУМІ Жах хи Ам ії ХА фам шу хх ау х віх ті ув. ТЖх Ва дви Ле дво Ні УВА бра шеЖшЖ Їде ж дощ ши си 135 аб ях тУуМур щохмжі б3 бм Ж аї ЯїКУ жїх: щсзж 73334 Му Чи 13 УЮ: ї1ї3 Моз оО що
За авш Іо За бід бі бі БВ дім вх бл су ре па Мек доз їх з 155 що ет ех М тла ши Хі ше тм Аомеє боях то гі о їм Мем Хе шу
Атр одер Ба хв Ччхм Їм ЕБе би АЕЧ ла Ка БУВ був кв У шх о пли че
АТХ Ка Ах гу сот банних вжи би Укуси У щи ду фі; її жи там ХУ дод дів ви Бхш СЕУ су Бус во Ауів сві біб ку хе Мо Мах о Баю Бал зщжх Зах 135 пе Ма КБ
Фхдучє ему УТ ж не НН тпозиж тд ах ШТ ток шу т пет бадю ол НІВ ОКЖа БИПЄ ма ві жд А буш см ОЗ ее вх ТА
155 ще вах
ЖЖ бен Жоижях й ск х у они НС, р зно а НИ, НИКА жо ху Щх От
Ям о йжхО се Чтв же бу Зак Хо Бек Ві бе Ві Бу ЗІ Від Ва очи жк Б
БК хі пий
Ку шт. «о АТ КО і В Фе Холм о ит с ж я БЕ Ля М рк ЛУ блю МО їжа омув шк обМмх дев мук дере іс деаобсра пре схо Му ЗМО пу АХ тут се тут пкт вай «ли лх ше
Ті ах Зі їМммє 5 з «33115 (4 1 Кі Ку шує ше «22; ху шерпю бла шкм шам ща меш ІВ ем шаАМм см В п ше ек о мВ ек мУв роя тату тк кА о ОД
Дфячку Мох Мих Тихим їі: йому щуки іє іх Тими щу Дозу Фк Как гук пхт щОак фак Бук А ав БхУ ес ЗзжЖ Буш Ба взЕ бі меш біль ее ше ЗЕ МТУ «сам соя Ге; зУже шує Южтя АТ му УМ УЕ Ж ки Дасту МИМО ту дор мем Дню Мч тео Доу
ЖЕ шЕХ КУХх Ді тнХх сі їні Аж ТЕ Ба Ар стук АЛюз же СУ ле печу, А сук
ХО Т мМ Ка їли фу 1 мАЖ пи мує
УКХ ди ие ей ух Зі
АКА Х п и їси яко МОЙ ших ЮВАКАК
Божа ки а АН В ши ХМ МОМ АЖЬ ЖЛАТУЮ МО ОМ В. «ІМ ЖЕ
Імя ши
Тло туї ті у суч шум РА ме ру АЗК т б х : Мі ха жожсх сКецує АТО меможуУу Кіз отЕх ех мів оБшИ АЕЕ біз сх ха вів а ув ояну лід і. гЯ за 15 й ТЕ Ах А хр ти (тля «ік би бо деплу ду Тонту тує «115 2113 фе ріс сл ж бі їв вом Ам їди) ж АБЮ ТУ Ве Кух са сім БЕО Зав Му хв зд -Е 2 ке їй
ША Б вже го дл ск іх їдою їледо Шу Мід ді ну мій їди тка Же дну іжв дкя ех Ні ув був ЕХ МНів АК то Ні суд уд йдеу дЕЗ двУ
Ук й У по бдуш тоує ге т по їде дує фбеує сбіхю фо бує ії тих їду іє жу Фзяи Фі хо Ким б
НІ бух Буш Щеж о тУЖ СУШ Беж НПіш ПУуШш Му ШЗЕж Дхор ях МВіш ЦПувш т це що: оту
М Ме мох "Жиух січних бі шик ЗИТ і хм Хе сш йжту си ЧІ що Хот У. по жминоюю ММ подих шах Бе був Зех Мів ув був ек ли Зах нів о сув Був ВЗех пох сСув
З ко У 50 фо їм: г н д г їм .
Мухи (с тд дк дЗрух У Зсує і ги ги жує бу ще Зими» ЦІ то
МХе»ж ній пев Суш пе дкт бе Ні Стш МУ бек тут йуФф о щет ніш БУЮ
ХУ в Ж тож й ща ще пк Тео Так ПЕК поли де "ЗЖадд смхем схищо их со з г. ув БЗає Бжщц Зак о бУуК Був Му Беж Жук Ах Зех лук Був Му дек зи 4 по ук м АЖУ ня ен сини А а м Коня сухе Шк лок Ждан бух КК, тд с - «с ге х
Кеу Тех їв їж о шеж СУуш Ахц бех ТУХ Мув зе5 Швт оч бех теж ув жк я Зк
На МЖК жде Жоую хи жи спр М що тео тло Ули ко доб ша рю бло У ше пут Зак Жух Чув о жек МівБ'бУВБ Бу Му Бех дже ех тух Кв мущ сах. ха ах ча
Кк КА А
Му щомто бйучя СУЇ Ст тах біжи туман умо бух ЦІ току коту. г
Буш бука ТМ Ві Му мбтев бат Жук Вуд Зв нів зуБ Буш жує Кут Бук ак «же сих ог шх «дих
Ко: ЛЕК АТХ МАК
КУ же нн НН у оди ки Ск тоди; ЖЖ щу овжа сим дом
Туз БЖ Мав Мав ОВУ сш АВ Лат ЧИЖ Бо см БО І ВІ Бук да кот см в
ХУ МО МЕ сук ХА ех ЖЕ г сплежк СТиму гот йо ба» ще біюваю Леся ха б тихо ож щеХ ув їув ба тук тка муз АаооУму Бдо бу ле МА Ма Був МуБ зах зах КН
КО АСУ МО ди Му їде був Ту бжа
СХ чит
ФМ кове .
Кона УА «Ті» УА стю ту жо ни ММК оо шич ухиких я п сит цих да ложу «им пПдсіхіа пезастех
Ах уд
Ал хо? меня «дО
Фо сїуйх СМіхуїт бул бубджх нює ТУ хи Й жа Ж ку тії душу І су ШКИТх
Мет ес бою ок ЖЖ Хух Зішж завоБій Бай злу вій аБий сіл дви БА їх їв їх пу Меч огю стоки Жах Ша ко У Жохищо оту ща дуже длуєт ЛЬ щу б Мер» Зуту пошу век МА МУ ех СХ КА МуТ оАЖМУ СЕМХ ВИТя ТА ЖОВ КВТ. МаМО БУТ Зо за За 38 аб ий Зо їх хх т а єди дліви ЩІ шо їМУс: Тляшо ТУмеу бл фл ла в оду я хі схуд
Буш ОБІМ ХУ ЇМВЖ ЇМ НІЖ блш Буш БУЄ о Буш С1У вл У Уа Уле тя за до
ЛЕ 5 моху тку тку ТУЇ фу туш пи Фото бохо стру філ Мрхлує тд туї де хеа тва тету Ел ша у БЕ ба БЕХ му ЧК шу ЖЖ їн Мал ВЕЮ Ух щі са КТ іхану За Бе х Ф (Я ик пит Фо ох поса че с, Кк я Фут т лугу ту КА 2-2. пий Беж БароОжує ем Хі фе о Зіа УВА ОЛи пес Здщое дви дм дал ддх о т КО хи жу т біта о и о, ШК С ов ШИ ША, о ША,
ЗУ З: зи вої ви бай дви дат ОА АМУуС Ім спі дай ви ФСАлЬ АВ
У За Я
Ффеошє амез Мою Мт МУ і сих ОА о Уа ТУ сх Піч ЖК о бахаї іх їх сЕАЗ
ТУШІ ФМЖМУ МЕ сбзІт їм Хм СМ веж мА ук сухо ско У іш БО МАХ зт за ча
КН. У Ам тю жує т в гл селу бо стю о ту дштУ пезуї 51 и ра шим сину
МмуУуЕ ша МАСУ фам ОБО СБІМЮ У ВУ БИЙ ше мая МОСТИ жлтве
Кк лид т: ве М Ах па гу пюмо ЩО що свя Коадл 0УфРА: болжу; йони фоусиє УЛ ми ому ЇОхуче їм Жлох Ух
Сі із бек Кіз дв Без Оіц ісміь бук ха бі Був ХМЖ Вне Віа Оу и чиц чих и Ко Шюх. і яуувнми болю «ку фолх жила божа МИТНУ. Жде мли ую дО ПАЛ Кк хору июля ОЙ хх
Гпх о бе ех бе Мас їв ових вот ав ай ав лю са о Змжо злу пс; це пу о і ЕВ ММ щи
Ух Ж жагою Фо СМ ук У Мох Є олуге Щолямо джу тому о ШКО жо піз Бу Бу дів шАеж ТМ сем Беч жа Ма Без шоу шШешж а Ода
МБ то М шк Ж их ує ЛІВ ЗИ жоаціх сбащку СМ) КУТІ Ж до піде. Ст ех СтТуу рам щежЖ й гшх Аж ан Фжнх Хшна ЧМЖ и Аж ЛЕ жим Же ве бух ПО їй 15, 155 фут сттьруах доця Та ДУ лох би 4 би хат тах ж щу; в щи вті ЩИХ оса За ях муж еп МАлОаВЄ ОБИОСХуЖ сім сбБОа БО баб оОБАХ зво зо5 дод хо си мн ія «г ее Трах У в умах лщ Сех 1 шу рел аве сій тм тва Осій ше У ва Спа Бе беж ув шеж са сао БК то зви КУ а Ії жи
Мк боже М дике сухе Тим має Мас фбшує бю. бл; й бій їуух фура са теє мех БУ Беж душ Беж Бме дви вв ізо гЬе віє Кіш вем о дех тут зай тик ух я М ко хо су Тохе іжх ХЕ ХДС дожт фо била ж лк шжуу ті: що пт т
МО СУ ж Уа ОК Ха А М ЕМ см Ж ЗМ Ма Ми м АФ ик -ї пек 248 я ля лют ту Ід їХ1У Фах з Ух ТІ хе бух. лк Скажи кум ФЛ ух Фштух без іа ча с дек АКУ Яви Фо тв БО тТлпУ им); Уа ал де АК ви ха я с ж Там Мк лові її ЗУ щоки ща шо ЩІ тиф птахи Сб тк тк УА їв Ма БО ОБУщ їм Ол Бут БІш Б: Ущ3 Бу Ки Ка СУК ду Ах ї75 пЕЙ БВ
Ух Чи, Ге КУ пе йди ТЛ Мишка, лк У Мак З У, йшли ох і Б вх су шлу Май ша щу АЙ ДЕ БЮ ЛЕМ ОН АТ АХ АЖ яхАТА их слуг Бччя КЕ ло МК КИ тртяч Ук хх ща. хх стю тїЗуг що о ж піку Тіна й хо их
ХМ ХРО ОСсдл Юм Му ФСК аді о еа ею ХМ же ОЮА фам оса ЕВ зак во -зкк суку
МУ пал А шк буру ДА гу Мч ста У я пУрчя Мч ЗИМає тру «и додж Миру «сля Мих Дт тах шіу ФІ ДЕС ТВХ сі ФшРіУ дЕч отв фу ау ДлщОБИЕ су ЛЕШО АЖ
ЕК 35 3 тифу сля йони рити Мі щи дути о доитих фе Єр щу Дожче праж жхн щодиє туту гНЖОЗке всш ви ВЕ Зб би пз жвК ЗР пав вл Та ск яю Бюч ай Зах ЗЕ яри У ук лют зиж МЕ кл яи ук Тож бе хи т щу сере дви бозуу пив
КВ оОТу дво вкщ УП чу АХЯ АФ КБжЖ осСаАУ ІМ пхч ХАЕ АБ дви Ох о
Зк жи Зк
Ве КУ 157 дос шт міх щу пс Ж хе ім пуф діт Дім йта Би: ха 0; Бик ще ЗХ сі ВХ Бе дж Сам сшЕ вх меж ся па ЕКО ла обі пу яхт чут Ж те Ку жо я у Ж яру Ту Кок док Тека дає тя ток
Ма із о МУуБ їТлХ Муз щи ГУК БЕ ЖКЮ УУВ
З85 на какОз БВ 1 Ем дак ши «Ех БІЛОЮ
ІУОТуку, Фі Ж я БУМ и Я и Ки р І «АХ ла МІВ аву МУКА КИМ КМ -а5ї тру
ВХ Зно зви бла чт з» тд ій ій зе Жут дух с Веух бут я б Жщт
Ме: цех Су ІМ був Нійа ів сі ха дор осІіа АБ СУ УМ Су ДКЮ 1 х їі 15
Моя ж ТУ ож ние там МО тра г и хх лм лжжш ЖЖ си од сих ики
Мі МА ЇХіЛЬ Був Хо см; ФК ІЗ 3. ФММ ФМ чл АЛЬ Ма АБ щує т їй 30 сни Му же би бу друк В т Кох дл и. кує вм ому т тк. хо тву сло Се жУх шехм Аг ше беу ех БО ВЕ Че ту ща пе
С С дох хи гл зу СПИ обои ер У ОКХ Жожежа. бот Ос ла ОК дю Хокцих ЖІчІЗ щу
Аж Как ше же Же епі Ті БІО ФМ) УВО СуВ сзку бе Бена ЖІНВ ху ту жо ЩІ
Ух же ке мдф п ше т ст хх сих жо й дол х. педаю беж їз Жуля хо жа зЗїіу вп охаАф літ ді Зве лів ДЕС лава БВК ЗІ Су Бе обін
З те ТЕ що
Фе СТ СЛУ У Су ШУ офизез АРІ МК дими СА 1 ру ла Жткуши рт М шо см У лк ну ТА о жое ва АсСІ Аза оп) дез Уаі Був ЕВ ун щук МУ тТвХ де 30 35
Счує Є д бурю о йому Щумех Хі дах ХА хі У мех лУМмає Та Шеую хг пою.
Бех ів беи бка ко УВА де ба із бі йно тму Єгову Жшху Саї ув а В ГИ Я СН
Аме Ам КМ
ЗУ ам тку тям пу Ти лугу схкуи ЇХ С кодутю их да бах ом Шрифти
Міш БІ о сСбжа АВвробкоОо Аве ОББа ре пам ем си Сеа Таж дво йЗе Суд жу зу
МА Мих Ми
КЛ: М о Дох Жоіжеу и сожеса ау е пух Ялом слову ХЛ беж Же. ЖЖ тухни ші пу ал Аве се ши бив хлю ес бе жив су Су сені еко хг поту лу тай
ОХ и У А м тісуух Як Вотух Же Бу ЩІ пре міх вай лір тк вд Щі фі гу піч їни тв АВЗр одпо го дія го Кз ств па са му ВХ Муд о шуу
Ва МО 155 1856 с п и МХ УІТМУ
КИ ск дота лих КД «ДЖх «акме БЛЛИЖ ет 3 хаті ко 3 ут Сіумії кШшМ МЕТ їх ОО КЛЕН Ах «але ви
ОБ з НМА ик Ж «дет ЛЯ г 4 сити ХУ сх КН пери їжи ЛК тю КУжАи
Мет ожеЕ Су бу Му Муз Маша ож пу НВО г був МА дув ше з ш з зд
Х х ке її дл хе ел: й тів то гдих сі хіх ду У тя м їх ри ме 5ув Ма 0 ЗІБ Хі їі дб 01 Сі Авт Віва о Маа бій бі бле те т ря КІ кети хи ЖІХ
Мі мує рур себфу дру їкин Урі Її» що ТУ позу їз Зугу бхеє до фра дк МУш ШК ОУМК ди СУ КМме ху МКМ зм ІЗ аж МХЖОо АК УА шах
ІТ хе СУ ях Ж куди до МЖУю т ку лхжуу Жехух Хома Ум. сіхках Щозхі У зак Ул лк тк тема паж Буш ба ОЖаК є БТ БлЗ ос Себ бук Заводу Був ЗІ МУ Пен ту Б Зо жльнуУ лу у Су Муїлм Да ЩО муїяаУ Щі МІУ рух Ваешук Ма ен (2 м тю
Інв Бах льш ЕН АУ АжАОомал Ху щом ЖжІНа ЕХ М лЖО МЕХ ОСЮДОСУВ шщ Ех пу що
Ух гм ке жи дзкзик та дує Ж дм х Ум Мк сл Ж хи то Їж Машу би мк від
ЖЕВе піс шас Ті вве о Кпе Вжш БІ ІМ пит їни ЗУБ Ав СУБ Сув Віа ах п пе -х ГУКА це
Ж нах ях и НН гоже дити жін ЗИ ля тчаю дж Шутко ПМ Том сдлюує вх Ха Вшх я гамі ДЖ Ка Мі АЕЮ Я вЕИ У АЕО ЯТИЖХ З ех с ІВ 15 я яю кожи з йо 21 шо Шк Маю саду Кт, пух бтже Бох іх їм: іч тб Же до без Ста нів Бко Св во бхО во Бе Бе с1у паб січ ж УВК ЗЕ ха лугу ту
МАХ МК Ма
Тех бер тів ді Май о Джев бі пвх се Шра гпбев щіщ Те ім сов їду
Вірш обу Щі біс; Ма лЛюрдоТеНІ ТВх був БМ дув ха фра с сю Хан чо зх ди
ОТ ОХ в гу ТУ. мух т с жу Щщктт МІ іх би Ток улщи 2115 хо мі ЩІК ІЗ ет вх де само св Ба Б ЗіБ Ба ла Буш Бук МЕ ЗОМЬ МБО 145 ВІ ВЕУ ВЕ «р що т х
МАЖ Оса У
«ие хви уд, скиту
АТ «КК ож укл «й 0 БІЛОЮ осика Фдиі та ії 5, «ЩАїк Васіздав вико ї І
Ла зап
КУДИ КМ сту Ух туї жо (т кі дн УП реж и кл жк Не чх кл М
Ме: шах Ав ЇВ бом ба ба бсю ЛІ Ба йо дув да виз їх Аа
Е Б КІ Ко до ху стаж й кт яжржх Кирик Ж ух и ЗУ ук Кая щи Ту
Але Суш бут СЛ (Ли ем Сі Буш СІЧ піз січ УЗ Буз дво дху їзгм
М й Кж лок УЗ ж як Я УТ Мет їжи Мк я Фа слу ХХ ЧА м ух дів Ар Те їуп ех пф її Ар ої ТК ЗУ Бех тТУх За) НІВ ОТИУ
Уц Ум ц
У С ау чн ВИ пух ТІ ку Щі що фл хе Ж тд люк Що ух док» т пзодчио Мох
Був біз М Би біз піщ 1 дій о Бтш мес ДА ТкВ диф ви ше ди жо 55 КВ дл см ТЕ ТЕ, Фет Жотгх ж ТИ й шШаує Є оших йом ес ал Жах до ис См ав КМ А Уа ХЛ УК мн ож Бк пО ФВ жа До АЖ КАшО ск - Б тд
Вт ех я що
Жіни жу ж що бу тим хх туї - зх ж їм 2: Ї3Мі ах Фах хз Авт вх Аа жвж цтУш біл Січ твУ вкЯ Аве ойів цем о БВе НІШ ПХВ
У за Зк тах ла ку У Мн света Ах тм гом ес Бета НМ Ті стру І ті бі же Аза Ти Ана ни сішж ув бів Аа БжЖо ЩИХ ге оте гла по п 15
Ве їх кА пи плату фугу (лу ЯОіх кв тлу Фі Же Ед Хв фра трюк Му обяя ЕЕ кре Вко ко бід Ка См МУ Сі; бжв ба аю б тю Уто Зажй пла же але Зх
Кия У ПО ІХ пах теме г зер жи Ал фм йжсу ЖИТ дод о шт Лю МОРІ: панк СКЛ уу Же ях сім бяо щі Аа ук о йій ХУ ЖЖ ха йех Аве фу УМ ода шу ПУ
Гея по, тих
ДОЛ КОЖ Б ку Урі шум оо Шу Тому ке діа що б ПУТІ Уфі тя пах у ви оБЕОо вІФфоюнЕЖ Ж ши ОМА ЗО ЛАВ ОМА СУХО АНАМ са МН У БЮ «хх з кох Я та
Не я й 15 йо; лу ху Дер ттіжа Що лу щошу Ті їм ТУ. Тиха жи їУрело бу Ми ащ ж пн зу жи Баш Біда пз ся би Бо ба ЗзАш бва вх «Ж
Кеду їто ут
Торт пути де ФУтах УТ ую фіиу хо "Меч и МУгіх бо їн Дж Щи ик; ІЙ
ЇУув ЩлАУ АЖЮ сблх ув жо Уві Тер ТУЮ БО їні ШКО Бе дак їде МІ та тих та
ЖЕ АЩЕ її
Ж ху з лу Ж Мр ща ах тує иу дулі То ау. Му Йо па ук, лок
Хі са Уві Бу Хі ХВ нів БуОЗз йвЕоХіФ біо дід фтьа о дех лем хи аа ВЗ ЖІ
ФУріз жо том имчих біжи (Ах тий ему т шк ст А иую. Щі ВИТ О Толуюь бом хх
УМ Хе МмУуВ ТО ук їзАж Мах Куб її» ТО Зшк Вр Мей Буш їм; Бл вч -хк кут
Ва ж їв іх іх жі щі бо п Мі Мій Бу Мед Ми М точ боту У» у сіЖ су ХА Кіш ОЖУЖ Ав діа вла Бо Кбе два пау ТК отТуХх Ки иа ша жа МУ паз ж (і КЗ3у іо дід дачу дм та дідо сджшяУ «ії Жим о сдумур мем ОО ДЕ сіу Таж іш гі і вія Аа Аж їі діа дЕО СІ їжа Ве ТУХ АВ хх БО ШЕ тд Тим ТД тд с М Фу щі Жах тт ді їду бот Беу душ да Пи ув УВМ Аза меж УВА Хі соду їла йіа Вів БЮ ОХух ВКА ша й шо слюда ім тку грошо дує Щі ДАТА ім; да ла їамі Мщ пуш ла й
ММ в Ммемоукхр муУш НМ юахь ол ШУ же ММ ЦНВМ НМ. суша М туукц туш лиц шо СУМ ХО тази а Жир сту тож ом (ям г» ли Мих лю ух дозі Ма б. Пе їчу Ні Бак отує Му Му Пол пу щі Бе бів і Ваза ПЗ Бі отТле
БЕ ХУ зп ут ти обоз стіл дУМих до лих мих пух. Суху У хі г тах М дю лій Ді Шеж спі пЗе педа Да Не шум ос шій сій піц си Аза су їз 1 ІБ дО поети ож т м тру ХЛ КІ ох Тут ЛРТИКЯ ТМжеру бохо то лоуу. мет ме ЛУ ух Таж ж му ЛЬ МОм АЮ ХЕ м ОСсжЖе Бе хо БЕ Мих дош ОБЖ БЕ
Зх З3и ЗАВ ла дуга мА гг сту Мих М Мч шує сухо Ме Же пит хг ха дій дів ТИХ ВОя а ща Мі Ак ех ТУХ ДЕР Ап БшХ ба ВА БУВ дк ак лцй за 345 ща
Жуяєтх Щоки че туру ся М хо ку им ти Труш г хі
БІ ЗА Жук Б: Тут й вд Брук б ЖУК су
ЗУ що «Віл 2
Уч ВИК «ху о На я я ОБОХ «Тім Взеі зів кпитімпомеайвав еспйз пу ки Хом те жах Тк ж ТУ Ст р ат 35: Бл шок оо біл т Пр :
Менк Зак цу ДУ ую (З ГТдь дь Оле бін БІВ ес БьБовдю Хлшо же : х З МО хх :
ЗКЛоуа їсюг С0Мхи бли 0 Хі дім Хо: Ск Ме: Ж охо ТЗ до хх уже ЗИМ, Н
Їй Му мух му ім шецЬ ВХ шуущ ЗАЩОШшКОСММВ с ЯМ КУ ЖИВИ, : зУуд ху БУ Н
КЕ Їх о :
Жим ЩИТ біз (а й і Жду ФУ І Хоб прю ФЕЯ ру их ЖЕ Лу де ху Н
Му сх ПАХВ ЇЖУ СМ ТКА Моїх Хо УЩОАМХ ХХ У Км чук мМ паж ХЕ Н хи ря дос :
ВУ У Б Н
ЖЕН 11: 4313 божих ЖУц ті их у бачу й до Мт дачу дж сли люк :
Біне біз біз се); те ів зу ек Акщ мес Аза жЮ дю бе Зах ба : «й я що : 2 с -х у Я - ск г - ях. «її У : - : дет г т їм мет сл бух жу їМує сим ЗАУЮ ії тот хмх шу М :
Мар шУю АЖ УМОУ МІФ НН КМУ ша ум ЖБВЦ БА АЖ ЩА ЛО аа : у ЧТ ТІК, щх :
Зх 2 ТИ ви :
Ду Тік УЛ сет дух У: жид Ж угон дж щі тих ї пі пк е :
Алла ту По жу: джли ж хз: т Мщі ше пі «о ті Пт Піх Н
ТЕ хі шо УБІК жу їЗКб ЗІ бКу Уа жу МВт вла ЇМ ХІвБ МА ОНА : хо о че ! уза їхмх ож Ах у лу дух сх фло Хв борщ битх п тк Мах Ста : тів тв ТтЕжІ Ві ТМ ДЕМО дев жу (ув тА тв жест ТЕХ бе ех де : а ін апти доюту :
АМУ Ам Алл: Н чий. Кожен я. Ух САичИ С ом й р ох т. жи ж, - ехї Н аж Бус Сх х їх Зх їх тії х У сх Я кг Тихо чо Кох Бе Н
Хе Бу шлю СХУЖ Мілю сІЖ (КІЛЬ Іі НИ ВХ хІіФ ДЕ ха ТУЖХ ДВМ ОВІй : «У ок зт Н
Кл Мам Мк Й тю Тен Ж фчу МИХа МІ Фах Млуду Ж счидю Срує ФЛ у Мн М УЖ ку ех Й
МАМО в КА ди ЩО кЖЕ леж іїхМу духо хлоп Х знах Ме жо ЖЖ Ам Му Н їх з че Ку : ту 1 тд :
МК дО кл :
ЖХшуу Шамо Ма до Мак ре Вл шинах лу дощ ши (би (А (І: ему (зи т
Ар ожжк Мів 5ФЕ ТИХ дІіщ БІБ Тих де Це був сам М їж ау КЕ
Ух ЕН їпиш Ул 145 Що АД ВО тах гати 5 си сум вд Бі шу а гм сет Тими бал смс Фу Же с шщіУ біз біу ТБ дви БнБе вну Узі ей Бхо Бе з реа їж КЕ
Ук зд «В
Мо Мо МІХ шо тм жо Мох їЖхутих ше Су У жи дл го Жкулих СУ хи аз рас їїщ їз дат У Душ Аз Бе її тує Бук Ма Се Бу Був ЗМ буз Мах Мув
ЕК р пл жи МЕ КЕ газ хг мдрму КЗ хх лі хі тку ШУ зЯ ча ує дат Ху «ух зу поши Ах 4 са сів таі вго їіз й нів РЕ СВІ ТУую РКО Хі ШЩБЄ ШвЖЕ ей у лІй 155 ЗІЗ ре
З шММ ших коди Меси сбуухи Ж жи й кмсих пд СТ гу зи Щосажу жущю йиче Модах та: т ж
Бут ЖЖ Ту Сі Мазі Бус Бе іє Бек Кат Мей олКУ Ко ма діє ух
Іо ЗАВ ВО йУїзюж Ум Му ру ЗИ ує МЛ х ше ді о дк. ТІ и МкаХ М Фе М ю Мля слу БУ ех бух Тих дів дала ВЖК ЕІНІ Аж сю БЕшОСБУХ Ме: слу Тих
ТЕ лаг т Ме ту кА рожа пли ярах жу жк ро щи ки бом Що Ми ТУЯ є оду сні стук щодо Лог: Стоп чім лівої ЛЕ із мл: пролювть ЗМ ЗК ЯюатІ ББЖ М ЗМО Ху ОК НЯ ах суку туту
КІ лм КК тк Зо до тт Ме ее фе Зіодтр дші м бик джу дер гію у
БкОо вла За Адя са мес мес Бо Сб АвБроТпж шжсж лжаЯа АБ ОжАУ КБУ п хі пежл
У дТУХ жі и Ши НН МВ НО гроши Ки готи ших ХА Од ж жк І їшни тТтромув жо МУ Аа Тейї йо сма їм де о Мах Аза о аА Хе НІВ ее яви гудує
МОІ «ЕКО Кай
Сон ПУЕ Ж оухю о Фо кут ел жу ЖИ ух Ж ву У що Щі 8 23 у пня я В
Зеє плє Муш Му со зу Ущо щепи хащ Мих ЗМ пав БІБ ЖЖ Бій ваш
Зк з55 180
ІЗЗ а чу тем їх: Жаву зи ен ак (зи тля пі бі Аія дій кує фі дуют ал
Бі піз Бве бом Си БКше сід Бу Бі бра іа дів Сук піж ВХФ МАХ зди -з й зак зво
У КО МАЙ КІ хе Фі шт Мами и ххх ми жо и их тож ди ки ЩО Мч: чаї тв жу дшщУу то ча бе бо Ка жо то шо щи Вже вія НЕ до З дж
Зх Зо Ух те іш тів фи ція їду руб ля Бр ой 01: Сто тату То ечж бл
Тих БІ о ТХішЖ БУ НІіш бе БО З м БЕК КАМ А А хиМа шЖА ЖЖ МОМ
За Зк а хм кл Зо
Клео БХВ Я Е же «КО щі шшХ «пк ЗВ ск. щу кам пвх оо кя жІума о Кв км У ох яки КОД м дея МАХИ ОС КИмк Ки тх тртю «ЛИ КУКИ мне тя ме Ск шоку Же Я сли. лих. іх ую том дея чиє я тече
Ме: Аза Юа до РЕ кий ел баї ФУ ЖО Тих іш жо вже КЗ БЕ ї 5 10 15 здшииу й що й йно щд о що що мед сх; БЕ: У туф Ск гін: спи ж
ЛУ ІХМІК хм ВІЗОАХ ФЕОЕЖМУ ЕХ ММ МО ХУхаІЛЬ ху Му шошола до ам СК КУ МОХ во й За б іх тн іх Мр 3 іх іш омчАх мем ті м Ух: 0тіхх тджшо : ад ота мук ві КМ А БІ ЛІ Су Му Х КІЛЬ КУМ вам ОосСКш ОБУЖ КА :
І ЕН ак :
Ух хі ж ЩО Жим о щує уми Ходкхя Щ привжя. ку ха МІИи ті: Ж ше му Зх Н мадь само Ум Буш ВЗВУ -ЗХФ Бе вав ово хів ому ШК ам ЗаАш ВМ С : хо 55 Ей ! лу бля см се З лм см Ж ому ЧЛ (Ля бом; «жа Лі лях пло їх Й
Ту озиуу ех ТУЮ МЩІ Ба о ЖК боту бив Меп) БІВ щи бю Вк МУує : ща зм зух що :
ТЕ ща ще : див тот тех о би би 0ущшимо фасту ба сту Гі дат Жук СЖДнІМ сич лох : меї Аїд Тк ага АБ дих дБА дж жа Те ху дя обежнх ШВБО тер дЕЖх : я М да :
См бом: одежа ДАТ ту щуку щомото щує мія ЯК кожи пл сте я пух хз Й їМаЖш їм за Жах хі еммх Би ХК а Ум БМ ХВО Буш А ІМ ВХ : «хх ех «сх : з 1 3 :
ЖК АД ДАМ. Н
Хачї йошех Дорош боці СИМ ух т: Щі ст пл: срок й що пом даджї одовти схе кКлує :
МН АЖ ОН МеЕКА ОСЛТККЙ щу о Мащо лоиа ХМ СБУ АХ ФЕОСАМЛІАО ТКШТЬ ЗИ ХМ ОБУ Н зх ЗВ зв :
АХ жу КІ Н
Му ом єю Хе Ст хр тя УЮ ІМету уч й у маку АЖ М ну Му ЖЖ Н
МАЖЕ КАХ ЖЖ КРАХ МАЖОСМІМУ МАК КАХ МКК А ЗНАЛА АЮ САУ СА МІЖ Н хх ЕЕ ху :
У З М у «ЛЕ У Н
С. й С ши сту Діут ЇХ шу Лю ва що ру Тк КТ. по о не Н
МЛК мил УхІЛЕЬ ХОМ ОСХХ ТІ ЖМАТХ НО ль ії їі Бу чохУХ о Вл ам МУ Ж КМ Н їдЕ зща їх зей :
Ко АК АЛ их Н
Шуху ому ЇТІ хе (1 ує фу Хі їМіх оду Ве: їх ляхи У брую бо Му Ах : бяет аз мі Пій йо хі щу дер огбХо дій жшеж Суд дах са ТИХ дом :
МА ТУ 15 :
хо су (у «сла жі силу стю. дру Фу у дор ри доку ШМх бю ток дід був фо са щей сі» Тко дка ЗіуУ сла Ак бу де ве юр обева ух ве ЗА
ТВО ї-5 Її
Фоку Фу жом ще ФІжех дчеєу Жим о ти ху гу лою Ух о ШУ на Сея їхиї Еко» їжи; БіФ Ебе АкУ Меї ув су МАВрош Мал Бяе же уЖрогму
ЧУ чт т
Аз кхе ема яку тож Му щу» ши Ей «жд жи ІЗ їкдо їни Хо без іх їх М: си ти Бе дхЯ йех о ем ув ха бі УВУ вхо хі тп НУ ХО Бр за 215 За
ЖАХ ЖАХ кум и Нч КН Бл лом Кіа хода Є яю, Жожжшу тжхх Тте сла о не А І дих их лоту
МК їмо дме КАМ ПпеХ Ома керів Уа ув жЕю хук шию А Хм Ха гсубук; тре Ук заг 25 й МЛМ аа
Жди ухи ту су Ко АННИ тах с хгм их пз ДУ Іо чу дл М Зх ті ех дво же пуд о сем сій У пі шу їла ів ту ДЕЙ ді діа сід «ек «тк
МА ХУЙ З
Же жу щовут ТЗ дя мжешя тМл ж ВИК С у тіж и у я дужка ке
Бус ллє БАм ОСьЖ ХХюЮ жук Мак по хижа хо су Віа Вхш М Беи пкт Я дючіх
ХІМ КУХ ККУ іх рин ТУ ах тю Уе и Ме спожи то А сти хТАЗЇ Хо бе А ах дай лжр ан БУВ АСЧ ТУЮ ЛЕО ху Ми о мУВБ ХУ ща мод о пех мах у я «й час
Ж РО тя ж су що г праву жи єр Ех ТЕЖ шо сек, же дека Вч рух їла Ві дж вм бує дат ле Баш їж ТЕ Буд ве сій Аа їй зай зе зах
КА а Б
Ущц'Я тата гу и ка АЛ хгщ поз Міо шо МУ: бах жу біжу ду чи тв ша їм й ув о йла і ва Мав ек бжюЕ Су лев б БАУ ма
За З пи Ка
Ба і Ж хх же ех у
ШФедожж ТИМ НО гом ща м мм Ат хм АХ ом лам СЛ МИ бе дому Мох пт Н ну Тіз Заї Ащзо Кіз ЗІЗ Зх Аза да ших хв ОоЕИме уз Лич ЕІ ув : кл жа че :
ЗЕ БІ 335 Я йхіїх І ті таз гію Аг КУБах чу їх блем Має лік дату ММ Муки. оч Й ші ша і ще: ІВ лів ші Асш МУ Бий Тих ощіУу що ГКОбоОТйнХ То : ков ЧУ зи Н
Іо Ки ве :
Жодна слХжт. ТУКиу б дока. їх ЛА що лю Що т їй дою бат Ддиме : мм аж го гХсх хаАФОШЧВЖ ГгЕО Мав ОВАаФСУВИ маш МАЄ БОШ МА Вл КЕ :
ЗЕ 55 5 : дух доме пошту Жан Ж у бу Тк дош: При ЖМіуда сеехан ТК Щодує Тозук джу Й
ТуХх ша АЖ Їж дм ХА БУВ КжО ВЕБ ЖУК Мало хуЖ І БО БУЄ Ки Н ду дек ше : 37 УКВ їка : си УА Н
УЖ КА :
ЕВ :
ТИ Ії ТЕ Н
ЄМО Ж : се. о : «и МУ її Н
ШК. уже ! «шли ОЗ, :
У їх хм Міо ху г м :
А УКЛ А МИ ТКА М АЮ Й мМ ХЕ :
Мак о щід свт: йду бхс бор Тим: Ма іх Мк сі соту Пух ФТІ про : 5-5 Бі Бджш БВ бе вах б слу пАш ТМ ТИХ па БИ БКе АФ ВЕНУ : ч ц й чЕ :
ХМ о ми 15 :
Ії із ке Бе Бе р Жлод тео сут бом МИМО Хом. ФЛ У ли СКЛ у ТІЛУ : ка йлв да Мав лів дів дав Мес же меобих Ббувофва тні Ж Ма й З хх Н
У «Й Я : ях жо сих Тут іхуто Ст Лейла чуже лок КУ аж 2 осум ХМоуж Лоємм гу х Н
ХМ ЖАВ ІМ Бл Біж Ха ЖЖ дає Суш о сКУЄ Сшежш (М сілем мах іст А :
ру ЗВ
Ії 5 тую Ж тах путі мч дю тих її тр У лох ля Ж я п нів шчна їі шій ЩШій дея Мая пев осів Хе сів За іш хі ЛАБ Оу «ох пк са гхруих или. прю бах 3 м МО. УМ б ії Тим дО зам її мок ку пуп о слу хе хуУуК см маш хи БУМ: льш с бе» Уві ніж бух пах хе
ЕЕ чи У. ЗІ й То Ух що
У А нн Дяч сйхуть бю о Мк дич (ха рем 2. дачу би ОТ йх МУ чж шоеух
Мес лпув реф мл АТ ех Ада ОТО МВ ісохлу АЖ ле БП СТЮ Бех -к 4 Зх ца Зо па тов жатут 25 5 Ж 2. т осут; У М м не виш рахує доз хі их ка ву Має Кіш Хі: їли ЗБЕ іа вх іч Уві ва вав бів січ Се уд
ЗИ холу за
ЕЕ ї55 Р «пахме іди СА том Ср ж ШИ їх ШЕ до ЧО ет жим Зрряхю ОК ж Иах соку дж (МЛ то
ТУух Мак ЩЕ ої ке БУВ ОоВУв Те МВ ТУух АВ ОТИХ оо Во ПБІш ПУ ті 322 зх
Ко М Бе хто фев Фут у ра Му с Ж ну. тих ти у дич гу Ку Із ГІ135 дою
Уа Був виш Ти Піаже Хі Ве Бу Фіз Беж сх шеуУ М Сім Ед і їз Ма теми Ж ик руту Я де п хая дож й ші Фі я їі Ст дк даю Мі ДОК о юю ж ох кап ція дл 15 Ай да Нв бо зе Дік Мур мМК сіє суху ЖМИХ Бую
Б Кс тах ЕЙ
АТХ А АЛІ Ку схе Кк 11 «но ху Ж г Семи вт бехує Хм М, їЖХМих ложа» ее уж сім Же дім во тпжЖ пі дв шеЖ Ной МУ ТМ Ба Це УВК о деЕ
ТАБ кто МЕ
ФУ стю ГИ слу жу у дж тік фимк Молока і І рр свою ИчоУ ойоше ЛИ,
Ера СУ м М бач бУке ж пом оку ча се лах Ам ле АЮ Уго ож лох, сг
М: «ТУ МО зару мус Жах Зб ХщасУ Му СТ ду сл туї Ух ДОБ шт СТ фу под тов КР тязі п: їд маЩї БИйая деки тую ЕД їхеУ МБО лм Ж Я ТУХ мук оц п склі тек
ХТІ «М КО я аж ШИ, тях лю Стах хх жк ах ха шу Мою у 135 -5 бу»у 3 чих
ХЬа бто ув дл що тА бе лід ві ко сзєе ща ів схо а ОТух дик хх т БЖ
КЕ МТУ М їз тк ою бухає Ті бе іх тля сю его бїікх й їУкту Мамо Ж Дому по їі Ват обеК їм СОУ Ві Бу ХМ ЖУК ЗУ Хв) рхиа Ме Хі БЕ зи Б тож ту кіш яки НКУ СКУ хх це Же Токпу і тлі лю Щі тлі Ше ле ств Ві А сих ШК дЕЦХ МЕ АЖ дашд щодо аФ лу су а оМшш БУХ ТвБХ АКА АВ ЖЖ ДТ
ХХ й их
Жук: ЛУ Ср бух Мо ко пчхи 3 тлі (їх щі ко Ах Темі Аз ххх їизш щу СХХтЕ ху щей пу сЖлЖ ль ха піт дій де до схе вла АВХЕ зай «зх тя се М 1 см дах лем же их бах баз бе й а дл «ту Му о Ме дока Ул
ЙО ХА ЗІ ГУ ш АЛ Їх шо бо Ав о щІ АВ СЯ Ме Ме ода МКК,
ТЕТ тд и «ОР ТУ пам т стає ху ума боєтю ач Р ж бек Тим у ТМ щі с лтдкМ ЖІ бхмх 1 1
УК СКК лиже ЖИ ММ САМ СКМ Се ЖКЕ ЗО Ам СУ МА пе МА КАЛ за туту зай ек З Клко
Фоеня о бе ХК у хи Жоюиз Іі оперує ФУ охо бли г ту Хв аю ха ФА ж лм УМ ме Мав ле жІна ЦУуз мжВ б су ха дю АЖ
ЗИ в АХ и
ТАЗ джу Ша шо чЗаме щі Мія Тк оо рука ЇМ аз Фут хи (Зла: Тихо аз Ав Мів Мі ЧК о йіз Мі З обу МБбшо У ЯЗМа БК ММ ув БМ пу че ши: ках М Ух
Мк У що Тут їчуш І дих Чи св яю Ук Мерху лю КАСУ товщею СТЕ біз Аза Алла суд шАУ Акщ У Уа ТУ «У Ав гжив ожай Ж лжнХ Чи
АЮ тай ЗБ
Ліна дуже газі; бує ух лах Ер Че ФК іх мл Щі ом окхе фбучу мо дич
БЕ Кхо ії бат БО За ТВ ТЕ Бі ТЬо УшЕ нів їв КО Тух КО 55 ша 35 дж жил Слову Мох Уоишо буси; йуме Е: Мі іх дви 5 Зі Бей бут ХО Ди БНцшее БНпш Ні щ зо вус
ФО ех тки дм ях оче о
Ан тю шт піп «МА ІННО век Фе ук а І «щіль ші зіце шалі
С жачнаи пев ха ЮИих
Муки о длоаю полу Та у деку о муюах бу хи ду доза Шовам Живу Хм Томи мес ска спав о Зах Аз зе б Зак Ов Ба ба о барв Зах Бей Бей
А т ЕН; М тла У; А КО кт дмує ХУ зу ЄМ ден гдм бом рія тру дя тіж ЕХО шлю Ві Іа ШеХ й Тхе шАм шал ме ба бе Ма ше А т а Зх хі хх УЧ хЕдию бе ах Машу чо т с Жодат «КЛІ щу трюк ск тех Кома щу Кс
ЯНА схеА ЖИВ Му мА ЖАТЬ Кл. УЖ о КМ ХМ сКМмЖ ак ХК ла ЛО
Бе ще ж «ших ІМ, їж гі и М Б су жи «г: ока хг до од дя мая З ож ІА Удеь СА сла ЩА ОА ЧІМ суд АКО хи ей. АКОУ Шещ дай Ам щи па й гл. Дожих ин, с сх КУТ Є у жк ТК т са Аа Ме їх шим їм Кив о нІіВ же «ти ЕВ и: Ж «ції» З
У зи ви шАмАМ их. о НК пря г ха Ве Анд ВОК АВ
ВИ жа з
ФАХ ШІ
Мідує Що жу фижут долу щу сихше сили шахту «бики Кін фак Тк тіше Ж туди ку
Мал лід ду: Ода бли Є зЗіУ ви пеЄ дви ввуи Їм) ОБ ЗУ Бус с У х 5 ії МУ ха жі білу Хр тих дошту стра ше о Ток Тазур Ж: б в й ит гля Мік
Аз дев ох Аз ра ЗЕД їх мес му Мен сю ПО ЖК спшех їм БУ зва бух чий ях я п ки дя днях тому Фе У: хивух ММмає р ую дою Мо Ватая ФЛ х лину Ул сг в БА пец сам вза два ти Тих щдех я АлвоЛАНУ ху ех ма ня хх й хо Су жу ежях лам «45 сту ую лото Ууч Тодуют Ху ие хуя, чн о ен гак Є груш бу їх Я. ЖК ГУБ БЕ ім; МдА бет га о Біа сх ІБ вим ях
ТО Ух ве їтче її е ФІ и тлу МИ шу МАУ му мА ЖИ 5 тм за
МУЖА С
КО ю п ік й
Ок щи жі ВАХ кожи ди ча плукіжиутучм і ща ХА ИУМАЧЕ МИСЦІ -аллп де вима я жк бхму шніх Кіз дит Тл фі шт КТ йно балі сдошт Й В де тА
В-е мМжЕ шо фі ЯМА БАК У АЮ СПЛЮ ЖТНЙ ЖИ АЖНА БІЛА БАЛИ УМО м «е ї: її 1 й 4 в 1 двух сММую бух буди бр би уми т т г 21 ШЬнх леж тс Мох
ІМ Ази ТВ тТУуЖ УВІ тЗЕЖ УЗ Бе ем цек ви ша Пе осв Сови Ах а же ЖИ зву ни шк ие шо, Щітуз поту М Сіна Зх о Тим Том у кр дими й хі
Км їж Піт оУдА Бу слу Бл баЮ ле о КИає СХвК мл їм БМЬ Оа ХМВХ с за аа 45 м. Ка: игт ок. ха Єр ви ВЕ я хх УК сша є СИ Мо ож сі ж сій сх їх дає тух був із дз Лі ших ТВ ВВ Аїд ро а -а дз
КЗ ОЗ їх її тло Му ДЕ й хх Тим лу г ов пла ДУБ БА МО шате Бе сим о тує км ще та
ХХХ вже «й ЩЕ
НТ а
ЖУК РОД
Сея п
БОНН Аа
КОН Феї тах дм МН Я Зх
Жид 0 МЕНА ЗАВ ВИДОМ сг стдея
Не ХВ туї зе Ус ще І феєю би мн йо дукім Му Фоила де їхмитч. Жах їн йео іа Ба йо вкоОо демо бе а бАм Баш сКци (иа му БЕЖ Каже хе і Бе 17 їх іч же лох. Пл ТА т, КУ Каже сх Мох МО УК У из пон «тих До ух ба АХА Аа ЛОМЕО Лю: Мав їв КО їх МЖУИ: З їх СО ЗзшЖХх площ зе
: хо 5 Ех дтчая Шюх дай дае дЕє Де Дт до бо їі» Вго бій діз із Жах дів
ТАТІ ПОХО АША ФКЖИНХ АЖНХ БАНІ ЕЙ ЗБК ні ОКУ Ж Ух ОКА БЮ ІМ ЛА ЗАХО БК ї5 о 5 ж Зими жа слов їх 103 жі сем сл ФМцх сли 32 (м те хе ха сій щей Се ве) см їьш вда еж сам віва Чу ва шал о їних це «-к пи же У Ще м й'в с; ба спам мі фе жо ул М ох в їїіхя їх мі ті
Зі пів БК; тах ЖК спек ода БІВ Ав бі Бак озаї де СУ прЯ Хек же -щ У 2
ТО Кв ка
ЯУмає фхІм Лулож бод ХАЖЛО ус фа АЛ (ло несу пом ту ереосжщлк фл Шу Тов
Тих був ку іЇспа Чаї джут їз дів піп о бїЮй вх Мекку БЗів вда
ЕАЯоУ Зо З же яЗійм бшВ
С п кр пах кош сиїйт БІЛОК шли 0 медиків вда их дж ко Й ЖЕ лЯ КІ БНЛТАЛОМЯ «доле ХВ но М Ми дшею чию фошею Копил ю хи х Суах Ж сУцему пчейу СТО Ех лютих мес ді Ж АЮ ШІ Вих Ме мад му Хбжта СЖжХ КемА МЕЖ МЖжТ ОМ УКХ 1 ту ЩО хх
ВЕс Ал лів діа діа Аза діа діа іа Ме Віа яв Ав Ази дет Му тут» пох З у ше фму ет тив сло дя му їх іа Мт 11 хх тах дж вва й ех ий дви пе; цем УщО КО слІЖ вів Іа См Віа ХІІ АВвБоОшуй
Со Ко х гаша лл тшум ЄМ жи щі мук їх Мох Ух» хм сок їду УА Ін я щяе пев о їм Шамо ха БІ ще Сам Клео ОІЖ хво мм Се су Зі ВВЕ за ЗЕ Я м. п. «М. ох. Зак, . ит ж. ож ЧИМ ме КУ Мт КЗ хи м. чу
Чи пихи юю де Ам ше пк махи Лі сте і с ху хі уловом кхХ СКМ ЗК жу сь 2АШИЗ СЗ УЖ ЗУБ ха зу су ВМО АВ СУМ УУХ ХЕ ше «в че дах хх ТО ТО що : жк шкі х хх де Й сон до ккз нд й їх шва ШКО Зі Зх ТАТУ ух шк 31 и лізу (іх ТАТУ ки
Бей Уві шЕЖ а ів щи СВ дани Ме у У му их Мих х Тих ци У
У ве сим ших «Піів ЗВ ча леж жее «шк У БКТХ яр Туди С хи лу ик си А
КМТ МАК АОЮАКа АКІ ЛЬКИ ой тку зи сами ах уми ЩІ ЛУ пже ЛумуУу Щі Лодуєу а кі ли Дука син І ук ду Ж ду щас БіФфО КВ Бу БуФ оф іє ЖЕ Обі БЕ ЖМЖ їм КхО вЕО КАЄ БК х 5 КУ М ша пох лоз Поза. поті Лют Ех под пох хни и АН ши ти ТИ МЖЛКжя всрАЗа дав ЛАВ мА ДАВ ДАВ мА ДАВ МЕХ Шум ЖІ БА ДЕН М пд їх я. й -усх
ЯК «ЖЕ БІ див м ХМашо У хі иа ТЗ Ж му лк жу що их се тим пиїня Ед
Зав оп бш їамо Бах осла ХаЖж ху ук Од; БІае Є Кут МЕаЕКОХАЄ УЖУ ук хх КЗ
Ба хи 45 жену о Жокщтх бу Да ШУтах Мих ЛИ тових дл У пУугує хг ко ЖУуїзя фбМмх хи
Біо бец о Озей дЕпосаж Баш сах Мей лечо шу щелх чем Я лаку РІ до ек шк ги
ЗМ хо 5 сх тУхУим Сбкечюи Кн Б ууах туї сухе птах Ії Фу тя ку думу Ж мо ке
Авподає твж тва мем осео) сли веж См о сау душ мам ам бе ха сту є «5 за та я тами сік що т пк сіє Мура 5 до тує лк тки о Що я Кож ув Наш оВІФ Ха Вес ЖК бле Ва р БІВ бут авт за б оба ОТО 8 зо за їі ЗМІ спи х пт «и ШО
Же «ака ТУ кіля лих ши ОХ
Св падей ід коти
Кл іМматловадеа Оу
УТ ожию Мія «ТАТ я, кто ги кижшт ММ рек и УюТИМ КУТ ЕК ЗИ ХІ МК УМХ ел х Зх їбух
КН, дм... АХА лук ш пох в ЯОИЯ їх БЕ ЩЕВ СІКМУЮЬКТ ше. КТ, ОО УММ СЮ «ги пла пи Виник Же КувщИКМ и жу ту ак оеу КК тогохутхстих мі ЩІ «чле зсосозщо поза сечова ато зевива солена і дротових тую сгж рі итпу г гі луйи жу кети путі фетру тини доли и вгптею мур г зсзачечини Ессе лна сша х ес ювицНоМ Фдоскнаоаа слииеще а Маки скіни им рутини Ківш Е ці сти із МЕ КК ие зах повсщсскіма дЗиВшссщоч кавсесякая лоша КЕзсоцовя шИЖЕСОщсЯ ля
Клер поко у и км кухріхм в міх студію дими км А квест човен босгтазаксок чахоковасо сссвозаски вассчонес КУ
ЧчсОпахессв зассезучата сишчачс зазоссзава зразок зола УК піпавака паз сзся сао тац пам єля сао щих ає ЗО шоу Уа за іх; ОК кс дн сх с» З Кол ко о пеиткжюн жи сти Кути т дупу скоротити Мт ук Ба
Ктратпастсас сриразавих чкощеасема ана свозсссмо мес Ал і п Се х т й МЖК с, ря по ті х 5 пчиуі совок кі щу их МЕТУ Кугутяк уиитич и дожити ик еко Ми ці дк песчазсчви зачепили сс МиешееВОСх Ка копа о ж лісу и тиви пек тек КА зб поетику пере жтееих - о АНА АНЯ я ис ие до кізаосесно сессхувамюем. чсеаюсює везе стсвавоав спалах пАУ оту тти ми І ие ка но п ничих о их скоса сс стимаА шли пуслаешсА шесоаєцав поса мк сицшейстявис пепсававих сови шести ПЕНЯ ДУКорАСх ак она а ча м и по а Си а о м п с а о су пи п в рак Як поса не сосоусади хоп хцкл вовк окоче сов Есос о Ед
ЛК лк пл ами шо р 3: тд ТАЗ «й пЕХ т фзии ркки змуге скік «Вії» веФаїісв мусоічнва «МИ» ж, пи и ЛІВЕ МЕМ Кл «ай» фЕЗЦ., 550)
ЛІ и хк рі сум З - ких ж пеки Мода МНа срок фр, У ФО
ХХ ся дийатЕоеА спади
ЄМ іди ЕшАТХ моя ХО у У «ша» Зозвище сеопою З, с. що с
ДТ пут
ЧУМИ и алу догово ее еса ува сездиссвй вашим БІ фени зтех ть УіМ си ту км хуя ЄРЕУ фл ВМ Іа тиви ту ер ик ие соках рив ге зи пхдмдааниц вувати уа щопсавлмяастя поса споши МБО ХСТ масони тьвясу ко гхизгву сю узи кити В Фут ие Ко из ою СКИТ щук зл словсоФсиве сесосище совосссеолия савасасосаес соди пелетах Мо зумов кітч дім гнити жує сі МІЖ МІД ЖАХ ап ткаслтощамо содесоссос шсдавошоехе соишпадицин папслконави сис кА засос нама зчксвісаа авскслЗ сепиапиа ша ЗА Є ЗМУ кн в в В В Ки ках азни поса садацеиаеи оса вИвст вико чесне зу пцсскчиес соми Зсзспвевзс зда засво сечо и
Кн в В ВН НН НН зх пвдтссасос сахавасави чвусосовах пеУктаоо селен повчає м
К доклав М зиму фирма жук Кф ужити уже тують оку вику их пору дЗкиаесноя шко сео ФустисоєУє песо вада сестра ш-Уу штат шокова ссезедовала слона песо сусло а текассзачеЕ сумках пого скачав паски кезусрашея п
Коен о о Ко и В По я і и СПИ ВИ о ЕН не В МИ МК пи р и за мамам сек утаномях теросемсц пото ха ХУЯВ БЕЛА Та студ кухея
ФА МУ ати не НА: ша МИХ
Ж льх Жклст 1іфш зм У КИ ку Й ше МУКИ АЖ аг «ут чащук ОМЖЕХ
ЗуУдшенУєс Чемсзвисца сидашисмої сщшссоствиа пастесчито бодосно БЖ даючи «клина сопе шо песзчевмшк засо аам сови ям меж лама сети Мпа стече Кекси В Кедр иум 1 ссвсмлозсса сдосмссочочяа пзасасесея спопесазссе Кивссоелаз псвесочесо Мо хавзацссспс диво чее пипозачеся пвезозавац сссенщритмос авосусшуая хо чоспсассисце звисоповса слспасетсв савивсосава чршзавесис заз овесо ми поцавапии сешедаєвас сазазастасо паб вацч шати х ех скл уроази ух про чи р и и ИН Сг паса попасти после нкмв васалевое пасасескол пап шиве Зах вн НН в В ТУ сувавасиве засос сзЕпазЗазле Кепесессио срвчоциароеє запас як з ощроуттує ки: мч лових б оку рода стае Є Бод пам підви МмХ: зе лпЕучою. чезвощоепсиа ааоєртсе попливе спос КМ жи жифи В жк вити Кук джу кох Є ву живу ик виють Кози и ср пеодововає сосіоовоса пакачекева Кесопвалове срайцаєо сбовссво 505 туги и и и МУК ун рус у Ки сних р де скоса саисс кекозсозасе сгаугеанау чебсспески кодує запо цх. ВЕ печінка кивок ви КИ уЧеКИ прі ку Миру тро «чекспсасзУ бесисвех позов азапамш повадеею ТУ «А
Кон м хиїив ЛНКЕ ук тушоні - «ММ асилімав сбшиукНуВ пЛтх
ХІТ сим» АХА ВИЖИТИ СЛР ОСЬ ех ле хх тлу «дл 851. .5 пня о фдмемихюх хм м о РУ НКЯ «Еш Її пжидж МОлюЮ Ф, б, опа
ТИ Тих ачииНеви ень тим прах т Іо я гір чех 0 ЖИТЛІ сМУй СИМ З. ее НИ Я пай яй щ й «ВИ одожелжне сСсИЗОКУ Ж. їх у ВЕУ
КК,
ДУ
Ух феепсте вита хек
СО НН пруктря тд шт хх тд. 5 оче што палсіхух си т- оди жи Ж) п СУШКО АК. Сх ОО И М. «ть, ка вав Кг тет ууи ик кит ря нуєиі и; сухих синів де им отих щи ВВ ую пох У щі кт
ОВУ МО ЦИХ КІН МВ ХЛ ІМ ОАКИМХ ХПеДУМХИИиЬ Фа юшимх ДК У мІдодси ВеКв пив и виН дини екв вивч вовк вечнК зх азсзвзашснлх зерішавова ліса сосна свшатлслзовав чИплтасоцилюа КУ ек хомиєр тати отих ск их сн тЕ их сх КиченВ сх Кк ик з дл вишеседут зт осноя зве соцєе сдешссаас ФЕВ сола ча Ми ен в В НН В НЯ сх зозазУласм сп ПЕЛЕХ крапок ОККО сеБАлюц у Не еру у жучок ох тові ко почи ме дожсвкувох ПХТ сТУЖУлю В з КИ ик их Хлдх сади кол вас пеки ще зовано зи пак ЗАКІ укие жи мих мук мими мя о в Ши НН ЕТ «ВІТ ЕМОАМОМІ ух Фраза плеса оре ше. ЗО укутати пут ЧУ КІлутТВМс сш еціВЕ и це цдуци сет уд Я чеше сества ср авеая сова вавасацивех завІвсесио спиш позся хиМ со НК В В НН «пе песни слимак ВУЗ пачае чишнесЧюсс моя вечМкавм: Ку кіидшщемІ Вк куту тік ін кЕ мак мі вита х ще ік ецуцХ щит
ЕХ ИВИМ МКК ЕКС ІМЕНА МОм а МІС ОПОВ З тлусетитевутилвулив ООЖИлУ Тит и утив и Щи и Дуже ВУ вк ШИ пихи шлг
УЛІТКУ КУ ЕМ КИЙ ЕК ДОМ ТИХ ЧЕКИ КИИ НА КИСК ВТМ пе мими пептид КІМ се кі Му ГКАТУК гс п пси ск ши посла сиди послав шачодашау пам моде пЕцепушо сосопочх запам човен ов ТУ як т, Ста леж Ми «ЕВ. пт ще
АНУ Есе» «83» пк
ЖИ дик
Кк Фі хх Міді ли км
ЖАХ ІМЗИА МА ММ МА хну ЗЕД
Уа п
КУКИ ху котре совав седозсснос базова шоком со нещаю кеша вия ви ззЗавцаайа пази таших опе чести тео шва їх соцекнеста смол свиса ОО сесв пасе сом ссавшенив сстусавика їй шоста соромом фе саше Фплевацист пошу есвео я пепсчуас свспловеВи епос печичсвав саше ия завис ке пеївдсомсомя зазсотосшози паса целев сазан осла зИикспепее ЗЕ сподовЕнею смс совмевеокО слово воша егацвк поко х СН тлєдоцисе азасозсча косозазе сзоазУчзакек созслосроіта зкостчаАао ща пазсчсоека асо собом ма соваспосавия зсозааВоо ваза а асо: щесосзазсну лЗаслпанч епопвчемсе сосацосниосаєс папа во зслоечексЕкх дасвтсексх севавссска овес осею псссесиех ооаисаоеи що зраллинукосе Фени ек сист тверапавое кемтуентиЕ звис сва ІВ серазсасвай соска «Фк овоо зскаачиот севссесаво Зоо То
Фавст: щесораинах Форюенимх подавав волошка сшасФпцомо Зо ден оимуку спасає спасе Вс У «а Ой сих ВЕ «шій» ДНЕ «ній» Басііїкце сежемля
«ах ат а ин ними шині иа У ШК С ин я ИН схутижути Фхулутя сек узи ро фу вин. шо зашцпикко поса стече люерувавоммає замші пазах туй сумі цічи в вв Во і ІТ вими еру док почув реч перу НИ пошив СК ЛЮ фАСНАи. ФЛЄО тах апчпчссває зоалсцсиа Ко піп твівиув сте вести вежу ки пелети сне ЕВ зво шоваче оса а. мксловаск Моб лояка веде куму юю КО кс сссов сСпсовзазос сао меова шосе Коза щася проце ОО дове ин цу пелети бук ие ут олті ух иМ. фу лді ут тик Ус уче пули мопс зозоасляє зраз Илил Чет залом дело осами щи пон НН форм оурсутщаитвму рибу и уиих ект сук те оезвасассвиа сблосозеашес Ччаскексокае Кесаваскса всем поза ч ко нки ик потоку піт фор пит качки он и Ка ждав си рамізцєя балет чакА дпеслесеу пасе щось чУ о жор ие. флак смажити МО схему ау пекти у уко ал «св сосок зап овах кКачецюе ек засво м слини О ун и зсщих дви цит дув чих
ДИКІ Ку В, іст анвлсш срасцорашх прали се сом щу У песо сюсва запезаваст спорах зве спон пстоаесв СЯ зижЕЕкаавк сиза севееем сао ю конадлаєокє сов сто НВ заз посилити ел сеоея толдещцчмичм плоти сша ци ко теж мот Мур міхи хе ми ЩЕ
ЧК иои пастух паЯКкх Ех кош туп
МІК по ие ее; «тд поде
Не дих «Ай» ожесі кам пусохчна сут
ВОК хи 0 МДЕ ХНА
ТЕТ Ка 3 чик рик кое Мн - еросуйму ект ЖК ВРУХЯТИУТ ШУТХМИАЖИ Фу ле, МК ОКО ЮХ еп вже ен яти лук ІМ ки ІЗ лот ошо спам кт х тях вух я ж ЛУ Я шал учу с суми пк їх сх М пе х явлаФо лою а. бо щроалОо
ОБУ вене хан хі ше Іждевих Мити уоих Муки КІ дерну сх діви СКМ г счислколамм зсесцстасе сш ешазов есе лиса пекти БО чрузвсваса «З зссс зпедкаецскя сполассштцево пси шЕи севфжавмюВ НІ пис зу ев. пакеті их Мети учених семою ие ким я їх пеевспаасклкв срсщсосвус спот спеспцуеЗщим пссещсщитв сна АгоВ МОЮ о ружа вести еитМх (Корма пов муку фік міжут мк МУхе УК ук що А У пече соеказ запесесеса Фоми каву шеох спеки воза Мч; рн и А НН пр судюютютек ета екю я пе селам сохне с спехчсох плицушслеадай падали спа есАТА Би куки оту мити мук кНУМИЄ зумів житя ин ву ц Ко пупастодася азасчсеаксз зовпасзазвоа лпавсаншсамх сосен Вих ще каучуку КУТИКИ что Ж гіч жит у Вуж сит оку н хх торс елитщ сен сода мо уран пошли ВІНОК ЗИю ну чи В НН НИ я АХА тисашцсссах спаси пол пшашешиЕ сФИшисИККо шоссе дааше а р и мчить Вт у луги р лук ца авиеасвщиоса шен тоМмІ спос са слшесоовес зисщиазИлисст авапиваюти ж декани не че счечижех пути и ЖИ з цію Ми КМУ ік ки поту цлг зашщсннс диван поса спекою педа саше Во пед фут ие ладен сили Мем стома па засос Засасеюии водесситв зЗашашеває попсссеося числа ща ю де уче у ех зач ли дної ий тру у тових тил р путі фот вижив хиих еру чавсвоозщ пса саше кстм МфшчстяжиаА ЗК ВИС КИу їх: «ил я хім тай
МК бум «вії ДЕК
ІМ У яю АМЛІ МАДАМ КНІВ криві хх
ТТ яку зк лютих МК В
Жохтин ОМАЗАКА ЄВ ТА МД, отут, ех а
Ж ж) хі «ВИ» бо валик сю ще, п. ОК їх
МТУ
ХХ
«йпіх додеунона свлЗжаЗ
УТ НЯ тт ви еи ім: .,їиКІ
ВО це пах ую иа - то дня
КО ТояЕлаж ТУ є, З. ОО ей хх
БОЗНеи до «пут с А лу мрч ен фри(кІн ваш снеків ще ТЕ ект А
Модест сао сВо чес зе одас сиди авас поши и сімома мі міх жк МІ МІМІКИ им (щі жо и міхи ІМК ее суд
ОО КАХ ФММ ЕІ ЕК. МІДНА Ки пн и ни В НИ НН ЕН Яру счставеляє ус асех соми шок сеадОошЕТМх сподоавосах БУ
Камо м м, УмеЗижезие умови КК ВиК У аю я змомоеж им и им, В диких ев нн МЯИн ще аа посилив зош але геь спе со Ушмм ли панк п ча а пн кн п а а а а а п нн ам спон ЕВ ОЖИНИ вен вила азс апее ОМ а не и о о о за
Іти вес откажа Звозос васлассхнІко поза св пе хс п ру мим пре отючия Бупетитуиц схмаиеци Ім зм ве х. пи ужиті ту исУхх кцеааикоВи ІлмУцЦе: призера сеу саше синя сх ФО ххх а у в м п кн п НН СИ сю ук Мою ме жи сстасчнор височин соя сеча сао мя лег ж им мих схе м КІТ міх гуму міІчоВ тУКрмсхрух соек М с май дасстсассава списи Боссфуенуєеє се осае соната плеса ЖЮ етику и ю сут УК фХерики ти и унію КУМ ог, ех пічка мими шт
СО аа ВИК Ср КІ ЕНН МІНИ Як мим вих уки к дидекчг щі. тайму М. Мк ачи а Жук схоже щи сш МКК РОВУ ВМС МКУ МАКСА НОМІКИ шк пух ужеті юю сумму вуха жуком тут емо у фу мох що М ем хх зах зЗсзмєсако саше кх сс ЗСУ слуха Кс ї»иМ д'тх Уа ша шу та о «чем пха ку ША
КО захи ля фу і ие Бах ване ІВАНЕ МІХ ТК «пух уж у ках стук п ви море това сила згрту мч рах
У НЕИНАШНЕХЯН
КУКИ х Фі сю мити СМАК Ох те тод їх ек її МЖК Х ШМК В, 0, ЩО КМ У
ТМ хх зу ж р
ТАКА УМ ИЗД КВЕКММИА ХМ ЕК КІ чай 3.. яю ЩОБИ Ф СІМС щ., х ОВО М
Кен
УМХ
«ух
АЙВІз ЛюМИЮМуви ТЦ КВ. «ий ЕР, (Кі вит у -х статі. лиж М. чо ЕКОя, ни «дим др ошлшУ ОМ дю, Сл, ОВО В о вечора
То теру шик УМ, ок ААМІААХАИ М ЖЮМЕКИХ СМТ,
ШЛЕ сша сш ходою іш, Си и жо фари ужитих ке по ща Су
У ька їКОБЕНРЯИ СЛАБО К є. 5 ОМ Є
ОК Кто, «ТУТ х, морів! соте х
МОУ ДдляНмаемІ КИМ с її: Калі седМ У ж у ор НЕ - їх кох лам Ммодалих суще в. 0, ОПО шив хи Ми с дачну я шисуУєемО пхмоета мла и дос дашЕа СІРА юю х ілхух ох ходижки ТЗІ... ГІ ух Ук у УРЕТИВ бек ін В шт. ж дм
Вся ТОЖЕМУННЕ ЛОНА В. ОВО Ох
СР сем нут п «дим 0 ЛЕ КИУНІЯ лихе тк. пах ідшх ит дух ах дах ОК. ВХ
УК, ше В В НК НН «дае т зада сю шк, Ж. ОЗ ОХ «є ЮТЕТх,
ШК
ЕНН сут о
Ак М ДОД ХМК
СЕТ МОМ ВА ща сих СТЕК. ОІВ п Х я 0 жі рах си й. жу сімю Є
Й можн ви си о. ж. З ОЖММ ОХ
ХЕ
МЕ ОА Чи ях САЛ ОО ШЩКЛДІИЯХНОЇ ХИТ чу НК мч чаш ХУ. шЕЛЕю т. ук о жщєми сус оо ж Ох їх дику МодвлдяФ сов ж, у, а хх
СОЯ
Ди ДУМИ УК ВНЕ ЛИШЕ ОМУХВ киутх І1йпу пі
Ти АЛЕ... КВ
УТ Бх оо он ії; их. яко сли ию ї- пух МОЗу Нс ОМА З п, У Х
ШЕ КОх. ва ек ох и НК мА СКЕЛЮ СМІХ, пику кт Там «вай ЇМ. . КАК «ПКМУ. ме щем мим Ум гу гео дич
ШТ АМТЕ о З о о В ЗИМ о ВАНЯ ккх
ММ п «спеку ех вони ОКА ВИНА СНО
СТЮ іш ЕНН «МАК ТАЙ я МІ
ПЛІУТЮЮ 0сту ухилом сАдЖМиО оо Фродич е
САУ ІОДЖжЛжНВА МУТсТ х. 2, ЮОХКХ Х
Ук туя
УСЕ лани
ДІ тА поеми емо суд
ХК АЛ ПОУПІЮсь ХИТ рт кат тд хм у ж
ШТ яХ ХЕ ОМИКЛЕЖІ ІХМЛН: жу М. УКОВІМОУ
Кос ем хихжах ДОП ажКОоваА пива кщ пл НЕК пух
ЕЕ ТІю Хе МІ клю о де М сит УКх в тео ою Ж етшшом ХЛ о йвлде сим й, бу обо кое
Каши
Кк УетеУютю ТАМ хе Мур Ку СИХ муру злих ух
АК реак меча ОЧАМ кожне по прІВ гла ники ж м с Кн
МОЯ ТЬОЖНАЛ СИЛИ є; 0. ХО МУ «туту и Ох
Сх моих сую СУПІ оа «кс «МАК ТИЖ СЛУ ОЙ пут Ебнт ке лиУ «ЮК А В я: реа опи слу г тет діду
Сови Бонд позою а. щш, й ЗХ ОК
Коен
ОКА ЛХ штук сени оум и земних
ИФІХ ЗИМ ДИН ИИЯ САМИМ трест пед Кут лях Ка ЕКЗ як жиУ ПЕВ. КК ожини ше І НІ НН ШК
Ід Мо дІеле сим щ., 0, ЩО Є пу хо М и 0ОМОМКажКвиа ЕН.
У кут ситі кишки. и пал м здлицдії собимща фр, ла У о В
Іл ИЙ МОЩІ НИ ІМ Фе 0, ОО У втутух
М ши сх зт УНІ жде Ол ОВ спи шт туя Сеча рама «ит Ах. 5М сорта шк щих хуя пан се ско во яя їх ОБЛЯ Ж ОЛУМАЛК жк. Ж ОО ЗКМУ прань ве
ТЕМ міхи мих узи жадюх ДУМИ ТИХ іх зд сля «их х їду.
ТА ща реа кити, т нн жо свт я «МИ М ж дина споов: ду б, щодо туту хо КА
ШТ я ку кох зер тх Уєтдумк м Мом, ях 0 ДОМА КЕКНЕЯ ХЕ еВ ря пече жи «Еш І1355..135І мату чо ши ев щ тощо ВУ М
Ек т ВИТРАТ СОСОК дю КЛ, У ОВУМО У сг
ЖЕхЕ ШКАЛУ
Сем зву ж се МпохУх Ух жодних 0 ДОМА ЖКОоВВ иа Ка от к их, тсусрих Ак я лВ Яр... 3 туту нн НВ НН НК
ДОШКУ їонпЕлжЄш ММ З. Шу ля ХМ Ю «А
ОН» шия деих стелити влше г КІ чи дищмиклняа сизим пу дк чи «й (3851. (ХВ ик тео ері склі й -- т дм дю 0 ЩА ДЕН СМОшКЮ до ше р «ЕЛ пут змов лезу секту он ЛОКК ТиМІКА ВИХ «тий У таза. УЗ, ка Ше потруиу семи с сич М пами її яйлзш см а. 7, що аБОо сечо жи
ШЕ Ку явити м и
Жжи кА днх ЖКАТАКЕИ ТИ ЖАТТЕЕ У ЧИХ УККтКІ ниття тд тож сил 0 їДюЬ. МЕ ня додат ум м я тоді СК «кА ЛЬ Ве ПегОюЮ од, б, ЩО шлю ен ни А лю 0ОДИТДЕЮТИОМИЬА МІК а РІ тала
ФХАЖИ М КЕ ха диАут Мі хво НН ШО НН нео «ко рин сх
ХІТ ЛЗ МО ЖИМЖНИ ПІНУ К ж, ФУ ТВА ХУ
КК чих шт дода ЛКВБА КИ
ТЕ т ду винен пас и ЧЕ ВУ певен міо сет етт я ичитіиж т ж шок У ххх Іво ЛУ ИХО «ФУ ОХ, АЖ ЛІЛЮЮ У «Ля пекти мок йуєтрнеиміу км зи 0 ДАМА ЕКЗ СИМ НАТО
УКЛ ЕК СКЗ кий» 145... 853 кА орати. тиж их если М шк 0 ЦО щ, 7. (ОКО ХХ нта хм
МЛК а сіхінатки що меч «ХК ДО ШКЮ4ЮТОЕХЬ ТИЖНЮ УВ.
Ух сади гак їж їз). еВ ку я жена сум -- поле ж. «аю ОХЮ хБИНе их ж: 7, ОК Ох з ттюгу х»пух
КА сю 00 зр лупи ьо вия ДАМА ТИХ СМІТА РА сутусх са ці га птух «ит ЇАЗЧрО Ка прі нн Не ; г Фе жа лю щшелцаш сто Я. о Фа
ПИ
Ех «їх 0 мав в сушка в. ДЕ ДХКНЕХІНЯ Вежа
ЕЛЕ ІІ У Щі пі ве вх ЗАД. МАМІ
ЛИХ ше полу пу - трохи юЕ чМкх йпоявиях лозою а. «. Б КМ
ЕЕ тя «ам ЩОДО а соня си Ірчан гл сек ТО кою КАК
ФТЕТЮя кн и НН НН «що т дж сок щ, Шо, ОВО Є чими
Сеня Уже ання еф мих А Дюма ВАК
ІКТ ххх тил тк ща ве ЕМО 6 ШЛМІ ш ки сто етос гемо сх тосту щи ХО щМ ХИЛЮМАХІ Фо ше МО Ху
ХАІ
Сни тм й сх шт п НЯ шок 0 ДХДМИЕТЕНИНА ЛІМА КЕ кутку кл, зашх едйхт Пи о І ел йо пет хх смт що г ден М кукі РО ни ЛУСОК Фк. ХУ; ОО ВХМУ М шк хЖМИ кое ни пе т ЯЗ ЕМ КК що щи КХ пу, сша ким «дж ВВ. . ЗАМ
АТ У "У УЖ. ана р и. - Беж їх «ел їх БЕЛЛ сою М. Шу ОВ х пе лак я
Клея М НН
НЯ ЕМВ СМАК. я- ек як я а. А тя и 2 уж вкщох кит ЇМ ВЕУ ск В, Ж, З ОК С «МАЛИ ку х мен им ств «ишщух КД У Кв оуикю гжидії тіхді пише МІК. ( УК ую з хх сим й - у дбдх В сохік то ЖЕО ДЕМІЖНО сою А. у рОМКХ Х
ШТ. жеви вени ШЕ ДЕСМІКУМИ УТА ВІЛАТХ, уник, Ех ги
Я ІЛЮЗІЇ. ІІ «Як 3) ддлає собу що, у. срок ие» хе двлвт си м. ро си
ВУС ДСК ІЕМ МО хх груз тк тру везе аю АВК люту хх, кА НН ШК і ери В ха ж ондалдИ пеобйою а, с. од; шим
ЛУ сети Ммохщих гумж яд ВМ 0 АДАМ КИОУ СИМ сроких кп каш
ОТАК цк ша «ЕК КК ТУМИ М я ою КМ.
КАН що стид лютих пів с хх тя пт Сх «и ТОКМАК ЛлЮМІВК З Є) що пух стр икх ик оо пеки гир жуть 0 МОНА К Ка ТУКА дЕлйх ЇВ Уі., ВЗ усу У ІТТ шихти міо т. 2коопуйття ЗУ тю их ХЬОБЛТЕО ик фу 0, ОК зу «Ех
ШМК що тіж рвм скік м
Мод йо ДІДИ сли оту «кад гшт
ККУ ія, ТБ чаші» ль яВлвж сОдюЮ З. йо ФфоаБо КЕ «апох тв мим рити туту г струму мох сука Море ее, кл пЕшсснвоаоасх злвазанзкох зе запаавсвзант сало пас Ко роУ що 7 ех ах х сь Х росу хх ; : «а пек рек и дерми кокер теми (МЕ по ря сеЕкоуасоми чссозасони аазоесслозоа скавскнх поссенмчнем позах 15 не іктУукучиуихиУ скиту Квіти ер оцю их фу таки ЧІВ и и ик ЩЕ жк Як т злу спо оуасй вста ссс Човастесшя родини пиедоцеаци пива Мо зум вие пічі учи жу куту густо ем рІ м к стМуУІ М У М го ст писнпостщ мтс ато сосисок спали іонами САТ ИЕКИХ ре опа свати ммс е ММ МАСОВИМ ХЛ ОХМИ КО ша ен плдуваапе Котика гало Мом сма ЕЕ Ат «лише запо зчеешет пос мстм сенси ат пос сшсеА ЗЕМ ИКАНМИ вах ашсавосим всстанлаканс сонна се зсусецпевие спали пази аа па у и аа вра унМма сим став ставу тва синам оемтуна воОСгБопспоВ ЗУ сВХ щи педа тих мою мое ееті ук а м о а оо о о м о о о Ко щдг сс СИ КИ ДА ОСЯМИ ЧИНУ СНИТИСЯ ЛИХ У їх су ща
БИК ННХ КАС КМЕНАкМ МИ МЛЯНХ БЕЗ СНМІ шумне ВНУКИ бик дк очи ву Мов кт
Власне ю ло пл я дя жк А МЕЛУ КУ я ее
БИЧ» ТУ «лона ЗМК - пи и На «АЛ Ша Ма спон «Вал» рози нео ША
УТА Мод юнуєать сл КИ нин ЕТИКх, ТЕХ у вано ха А
Є ТУти нх паза ріж и Жедижи пк з пошту ж
ХушЕУВ ТЮОЖПАПАшІ «ИЙУУМОЖІ Фф, ле ХО ЗЮОУ а 5 ви ШІ свсососаває чазедастоава Яаеспюви созсаааасх соусом зовезавсва та чл соачнЕо авсласдишом сешсокога сбсассхеАс воленессво сус кам гфеирти утік джитджитажирі й углиб стежиною схо и тов ве р кер гі хто СЕ чЧЕцсставсовя посох зе уи се счекамо скани ха ОКО стеження прі рр ок кох дулю Мч кре сикуееух ню тА крите я зах чичпусдсац чатах аазОксосов пемеаасєстмиа споемуеааси чи ЗО зпссеаваст сізвоасктя всоахосеозау рулон касах що ше зМмпслсоказа сдзозечазаУ запсассзанке щоденна Хосе ти шукаю во оздксіетяия укр спи вом ВНУТ МТМ Мі фі нам руда В їй астлащосо травазсвсва зщезсвавсв зоавосжайка шести пива я судну вики ма пики пути ваних зем ну ери жі кВ их оку В чл весчановзак соска лети ес ипуун спе т АПФ М ЖИ дреди Криту нич (ств доц п цУуЦцеици чай
Деми ксюусс фоосовссас осв седпававсшсв везавасках соди ИНе папвезичУє Ффоазсеоо Зіпіаакхов досл спафайосоив скнащапанов Но атпашссссов сааассєсвт еуакачицс кохесексо песен сина БИ за м океои ва ри поч я сур ри ока зх "кі саше чис ЗзпОоазсцацаи чому ле Я та дз еліт ТАЇ шлю птує
ОКА АМХ
«ві БесціцаЕ ТВаКІВд еВ
ЕТ» кВ «ие ноджжктва свинка воое сх :Щщії шля клю... (ЗІ ет г же жк пкт - - шо шу - кв ОБОДА Х СИМ 8, Ш, ОЗ Х ких жк. «ИЙ х ситий пт
Зх житьт АМІАК А ДИМИ ЖИ МКО СМУКУХХ УКХ, т луть, птлх зх
Ук Е.О
ФК» ті щіхнх ех М й ет оди М суху ЩО САМІ о , Кб що сжККХ «а тУл тей «даних ШЕ ее нн етикет сум Мі мМізитухик Казере дур Ус УКБІх г пезасснис дасцосслочи Зазсствмлаа леспсоу псспиввави ЗОЗ о повна чеки весло сассквоаосх чпасскяаеко еще їа0 тк ові сво Мис очи КИТ дили п хек студе з поисшплзастви чешсовИсей соппиапаз асосалисел саасошкавх слюда А Ми фужелумехуж ут у межи и уйи КТ і су чума Межа Кр В и гу М щишчолтиваа сдилпеспишви ЗЕечакеишкЕе вефпекщем поазазеєсшся сер вас хо пе тусі че пвх и о НН греч ух зва чтдодоччих воусавасо спо зазся зеселтанлазо хна ва шле ша
Жуан «Ку Ки сужиму С уча щимий пори щі ви жу рик и Кк и уце Зх штивссощие запа паса засос поса сопло ча сиетавсотово асржашасо завезена Зчадсваво зазКкакана соска ви теги укуси су те Ки свахи о куми Уу в ікюю муха ПМ спезсвастшка весчаслеали чив впаде ики шою хат енхх ХО арвпасвесав ссвстссчло мезо ає зпечсваа сиовавоспся заз екра жа силоси свое ЗувзсахЗщ чес лког ведчосласимс АЦСК вч хту куки жи пи ки и и г и и дви ут оливу оди и ви УМІВ же
СЕБЕ ЯМАМИ ДМА ЄТВЗО оБАБерЯФНИИ ЗК ВИО цеси ами ца всоотечана стаз рЕчиєс Чула Зпсусерацах муками єп ЗА сти яд кит о тд яра «Мія Ту «КЕ ЛЕ ех йди я суку ум «ах 0 ДЖ МАЛНІ ТВА ПКМУ лют
Се рр ян Я пом долина скан я. зуюту гад ді сх ха... іх
НК п ожнляш о сопою А с, рон їх
КАХ, «Й попка снака.
НОТУ ІЗ ух «вай ЗР, КО) хТЕКтх -о щує сих вкажи КВ ших п'аяпицК сом т, ж, о що ХУ
КВН Не «ЖАВ 0 ВОМуаАКУиВО сна А
Уют ги ша хи скл. О.ЖК хижа от ач: хинаю. З, Фе що її «і ях пани а чан нн а нн а а а п о п п и п НИ ке щевллсалоєс степова хозващсапсели спиш вас екя селом ти ВУ пн А НН скрасити Щі зхк ж ОКНЯ Я БНО ПЛЕНУМ БАФМЕЕКМАОНИ ТИЙ ПКЛЮУНЖОНЯКУ ЛНВ хо нн НИ В ом фури чи пасехарсвя сашссссоше зесесисесс поссавшсе хаос таве бакових Ки вав нМицІ са КЕ КУ ФММ СС ЖЦИТМА Ж пт ІЗАКУ Ба ї жи о у. сти. жу : я пов жамуж ся поки о Д-т. жит учу сю, ІЗ
УК ЕХ ПЕЛЕХ мале Ви ПЕК я полки ока я БЖ збамсвнни песо пф єосену вепеацавеє сцевавсссх сесосаесце м пн в НН В Ки НН у хи песен мии иа «если ласив соти даси шчиашереис стен Б аа аа по по о о р о в в В дз завсапсшцнт соссинм сопел зселпоасови вівсом закшпассе ЕЙ пес роки у дуже ЕК Рот ии Мф крчирихуия їз ЕК ожива пт вжи, БУД
Злато всих часа попе сви сшма шва тах тую и ЧК АНЯ ще итечеу и
Калетсесисс сс слсафестмиа взщсесавл сспЗазощлех Стас ЗАКО сетер ит ри оті тут сумі Ки Коцур се врудіи КЕ и дунтеї дя сбпичопвсваши чада ссас заз посзазцевас зе ацааои біз ко НВ пебвовлссв стеасавсисх пава Щек шоск плеса ся мери со інки крику Мк Кефеижія ниви пий Кит урни нфииту ВуЕ ди ФК дра р чу сошхдосвкою скобспьову сковсоссє садах дхезяуєсює це ее «Ат зує
ЖЕО МЕ шк ж «чо хат ме «ваз МЕ ну дух, Учити До урмо сх
ОС МВА Іо «ий шт зх щтяю КМ Мн
Му ДИКЕ КО ЕМА ВІКИ сила «і Кох
ОО ва КИ СКе
ДАЕ с ен и - я ех. Мих. м. «иа ж пЕНВЄ СОЮ В, чл. Б п «ВиИх стю 0 прумтм ючи см ся М 0 ДМЕ А СИМ «йде ГУ. «яки дм МОЮ слон й 2, ЩО ЗЛУ п
УК Тася сао м ос лАНЬАЬКІ МКУ стики
АЮ ЯМІ СИВА ЖА МИ пути ут гкох чишим ІЖАЗ и для оч щиро гли кі що ж Фк их
Ся» т ЯвДиФО СЛАНІ й, де ЩО «ах шах слі сутки тон ваєцииии Бум аку мкм й
КУМ НИМ ШОМУ МУК НИКИ ІК ПІКЕТ пи чина они шви саме. пвлогоанш ИН я пику АСПЕК Кк чЖи в ПТН ким Ух М т ін Б тещу ска евосстою сеакагуАш асом хо ме хи
У межі сус Келих рн ні гу заз и щФсащонаик Комо сша сопе асп Ж мету дивній ери м пам мІкиВиа сота ее мечем зн
Фа по уу асо «скора срадоцесаюра супорт вот сесму ЗИ етику нн и ни В В З зізразацоєт саововечт мовах ацодоюровк щошпассии писссекао вояж
Фотйхухітт і кіт гі ети Му Це Ж рити ут пози МмчІі В фу при ргжи Вуєр из рути ах пЗасоесаз сдеапсучаваце поет асан Ус иош пак о чем пкт співставити гине лен ква ситеавасцв звписслсопват семи Мобемиро повести: вола. хе пе оцІвем мі их схе у идутик М, таки дчерия овом жи жі що КУ из ом оф оо злаки, до певшосіннс сесссшоше Зиасцстесоце васласкааве сеспававееая скосу на епчучиху: май: рі тт ціІЖ бек мфеченозит й Укл их ЖК у ие жи систвовсиваз сазана зач епве потовачсваА стІудащаи поп БУК фею их фу критики ше Муки и спри фра Ви ожиижи вих и жо рив ци соусами поепшесеВІ спловоВи песо ю содеплевве ери Ву зима ів еру ущіех фе ил; Кепки де лій паслувине соду свис коре одя вувочкечщО КоваЗесете сова Ак уч «ух «ВО шЕХ ду тости века ше кока чл вени ФК Тх едосу паті ай сік епу вх а и З а си зем елек ам ета, миє. УМ ов чи 0 МКМ ВИЛМОЮМ ЛАТИ ких КН о «ВШ ІБР...
Ноя - шюопіує стумичА щ с што шк аю подЕлЛАК ПсСМК ше, КУ. ФО лу зику
Ух ИХ лев прилеттгІВ у и зчуШВ КЕ МЕ км ММ ШВЛ МОНІЙ СИ ЗВ. «ВшшВ ЇІ1р.. ал зх же ІЇМ, омели Ж не їж стаж В уже М Х ХЮОАЛІМИ ОЩІЮУУНК У шо КОСА У са пз «ЛКК «ТУ ч«ацистцанвоа сайпсвсспец списасечаес девзокопо сзассисвав виссеекеах во іноутхучтт утво Сет пКитІв ст речи луг іі оф ср ухетив уирет ов их шу перелити рик апозазсва свадовсваз вусавсецо сусвссісов сосдівоства ссадаваєие ТяИ р р НН НОЯ пи КА и ик оон я аа зсчцпссавс восьтоассачо епоспосчкв вкаодевВочо сосен е чис їв шини в пасе снмУ вним мів икл Коррдувми постав УК
ХУСТ СОКИ КИМ КЛ КАІХЛНХ ХДАК САМКИ «о ссасаслацдем и тослнвав соц о пове свиЗ зашодзачаче фуда кесяє ЖІГИ пути тити УуУ пав ефе век М ке, и я при супу тю У у що пед ассе чЧавасусаха паст сув зов сенці Тувауповацеас пасзКосису їх рити фоиж жу зивикх ужЛаТЖЄтТИХ ЖИ У цІУИКК йбткІфУ ЦІ УК ІВ щу гУцІхВ КІ зір ех лих сезони засоссзасчє чопеазаєте Зфцечсааа сек аоє расссскя 5 по м о п з ок и п а п а п п а в о А чЕсивИчис сзЗазвсослании живе Ко оо г поем а шестюу УМ
ХУ жи АМК Я мук ки «АКВА утК укіс уки Му ук жу ци «млі А павашсливко аедившеоси осот є асщесшоав садом сову ше
Ки В в ВН о НН сенс селом их шт песни сесасавлси зеудпецево есе свамт солена савсм сова пи ше теми мими фуру позу мс гм мот ут пухир а ассволКоК часам сови Фшеодасаов стеки соц по висовсозачО песо вецУх кексчесахк созпепсяюц зоммозепоцо спец ТХЖ
На й «АК ХМІВ КО
Лі ТІВ дм пи суду ди кіз суму як «КАМ ис МАМВ ВИК АШЕ ска чЧихмх «Й 0 ЩщИИшитнома пУБІ «кайда ЇБР. ОВ хай о охнвляє ою й. шу. Що бах суттту,
ВАЛИ.
Ка нон лине коня ших 0 ММА Їй щмами
КетАшКя іл г клю Ах а
КА де зх ух с че ее ня ту вих вх ких ФМ НЕНЩЦЄ БОПОоЮ З, «с, ЩО ї пт Ед ах ла а кп щепи щииссва миле омесм плоске ашЧпимшис сша схе кчвиа щи жзачансв золасстькс сласашлоу сеВвесЄмес поса сеайас савани КІ и пгт парі зт вивих чай ссошсхавите павслацов шеосодува возі зозачсека спо иха 155
НН НН КН В тк тео ос щесециа сш еоос хаос х зопвааесис поспесееаве ее у ні НК в В и зпа споживана чи сессодвавс СубЗсивасес зчашозувова шву чено щи сосен оо плвасслсосат вопаксовизаЗ Зачзосассах посовацеса есе х тва сАф з кети же міток С кове СУМІФоЖе лу Ех по св рен В ок в дох; зуслетваноза шва спав сиИ зи щсва Вар пе ДИЛИ БІ р В В В 35 поептодосос завсосдласлас пчпсевасоЕ сазчеленЕ сода в щи аа ша стваплосвиов едивлиеосзе спон педепусасе схеми сенат тк паливофитттЙки и ви Куиизитех Межа сумкою ситим ікру ле вІмфонщесос Фдсасазискл пошеяжовочк часа кс азвосавсс сеаиаасюкх пеХКи зЗссласихих Фест оасазтоский зе Зшошшсисла возцсеах сп пен ак чн ча ме в В НА чу часвлалпаве ово ше со х счЧхслозаще паска вашщоессЗе Ех «Ме п
Кий тру аку ТЗ лу ЖЕН люди щі мі а ок и и а мих МмУБАШІНМУЬМАММ ХМ КОМУ
«ту хи «ВИ» делатековия лений котутуткх, Кт Ехтя же я ГЕ. , Ім «М» ОХ ОЩаЛЕ ОТИХ й. ту (КОВО Х «МЕ
НТКУ хх прю ту о ут
А ЯКЛЛЛЬШАСАс ВІН кош» тал. 711
Тех хЕАМІІЇ, М АХ шах уж мі уУЄВМИ стук СУ щу ж Кк а мм пн в п у м а З а ем шВх и тт патенти спе Мет шМ стчвлняммІ: вспсопоюсткт шосе шасексшело сша пес ааох МИ
МІ Мт г п туди оку. и Виною мтий КЕ и Ук ит и кожи кт зчавчласавия паснпцстеачтв вскдасошіа сопе зКсЕкАнОоЗа дев Мих и НН а В и НН В дк сствамшвсояє лесвИисацсс посли свс чивеУчкноса заспчее повагу їБО п р сп вим гіф из жи умовити яки Ух дурити ЗА числове ис пе ища Мосс НО вела сосок ше мн а а м я пдчифиж густе ти их. ет ур ту луєт уз сувій утіх КО Мисик пртуд
Фета поддавссЗл Задассостм сасзавеалаз фасад зова соска Как вдимідссава сисосадоца попосаива сеспячеує чає алое БИ
Жора оси Киев срср ФК Кеди Ким я птрр, мзасллисас сспвожеслоша авосоюсия воза мврІ ЗИСК всВОВсСМ Зо с БУ аледепасвав поза о паче таз асо попссо спсптівося пудоваиех аа сесасиваси зиск доза содосавсасх заваоеосвва дав цаси 45 окрфетитехи ки сорту уки мет КІяКіІуи ОВ тує митом МІ осТМ І кт Ми вт
МО ОМА ФСП ЩА Хе она х ема МИ шию зачисстоес поисососхаа сСозшиаувии пасе шешекоєи свита БО посух ух смію туди іх мем си ко, гемо прое мч с наз зпапшусаш сеакувскчки чисвасосоах ЗсслсласВ писала БО 715
«А жа «Еш ОТ в чис жи ЩЕ
Ам пЕжІМЛаХюа ав них УКВ. «ШИ.
ШИ до НН пк ЯВНУ ФиаНяКлВ. нтухкту га і «усіх УА их жи
ЛИХ то шана лит их їродіма хе т 0 ЖЮ ВЕЛЬНЕ сМиМНо щі ж, фо «их
Кока пестливі «ше 0 Дюк лсю сирах
ЄУтЕ С ітпАх
СЯ с. КН;
Кр, о Іммарих. си мКі ко ж ди ен АЮ ем я Фк лу ЖК САМОК
Ми са КАХ ою 0 мм е му сік «ки 0 МОЛИТВУ ЛК ор НИ Еш
Жоие р
ТУ. У дики УЗИ в - зро С их З о налщя СМОЛ є, п, щЩропо М
КК шк
УЗ Кг ай шу пет МІХ Кон НН Я же м ажерижт СМоржифу лемки и мужик щуки. Кк птсракоснаце сис сетх прщоросмасена спиш хоп «ФПК ле ззавцнасиа чено» ас та В кОВи ли Маєтя срагенимиму шк : : ; ; ще : ро сего еще ее МІК Уюттм текти г ВИ, Я чисвасивищ помоздикос кзсолиаека пласти ведеш спа. ах улУЧУМІ ДІ суму Мер ую дет их вирі пуд Трек кв ие РІЯ
Фома лщет сорслиссвал сапу й допетевомМ завд се шо мічетІмчеуювімиа Змі мициеюг «смчтемжнимі я стічними цією аж акІвки зх пеуоаьик УКІЕшНМА и рем укр ВАВ шва ВиКшА УКВ их
Я помду Ех руці ему піст сусМмуєчлтМІчеВ см емтчумі Макет ахе. ду паби а запептолтаце шкосталм піматшсамисч сни шоу М геї лей стрретуУ Крему сл иа отити гени че ек ин ЕК Ж их, та чтлнасотчалУ созслсвом плашесее чали патпуддчасає список х ах скосу сет Стреси ОН Ку дич І ви вч да шести соч пазаа сопла калиє паспащеишос щпсопсешави опалим ада певен сим спр ФК и. Кум смочитд юогжх пд «спасти серпи сммм соломи сис кицимоІ ПО аа со п се нн п пр а м и п п ки а м а п о пив кап
Фа посот зо соа п сао АКЧи ПУХ ВИ З СФелом ФЕСТ ВМ сезоссета сайоссоома восайлеоова азасасазме сосок песо Бо зді дмавтнм се ста так Мами гла еп УМО тру жк саслиматмх осламемлоо своем тює хто попипщсшя ВИКО 15 «ДІ ОВ а ДИНЯ п А кто пе. «ах ДВК зт шле рт див кі ша ОО ЕМИЛАЛОА ЦЕ ЗЕМ а хх У
То, сити Ту В АК ОКАЖКЯ «ик АМО ЖУКИ МИМАИй ТМ ск ро їх «щих Р.О Я пику с Фічжтиж сетмиих з мк лем
І Тродаьлиш сХМУУ о 0, ХОМ Х «вн» ЗВУ пен в НВ НВ НК о я цех
Фасон: сети е акивастом сс а й Астма схе шау 5 ом еиічи пупжМутю муивЕ духи рити и, пох дк гм 1 весасиси поет спаси заосччеесте вессаавеля ссесикя хи
АЖ или ува я суйлустичкитмих ШУ КОЖ га ери жу и жі, УЖ г ри жи вд ри чи співсозшефшее жає шемтя павсвосчивш щшчовачия тво сиІаскНя Ма нак М кими пики уки ско ире н сІхд жит ф кл ивеуиУнт ЄлУетруєУєтЯ пз ІЗ и У МОХ, па чсивастсвоци сади щиВи помсвачесе зе спасе депо чат ке с в о А п п п п м в Ве М КН В В КК о и чо и о т ко о в т В ВИН Я Оу часу пастошоат пЕпоешМИМВ адноаая Фромма вок є ЗО середо гу дитин ря сумок Етики вадеИ де чсипазитвнсз пазазацти єї шавозазпвас заоч таву пед сЕКе сек поокане 350 копасссилед ооо ссополецов васпазааков паовосссоя али шсвсху 4 ук о и мечем УЖЕ и и СІК рутини Коди ии Де ри вимі щи баса асцас зач ссовах кое Касвя БеКосасссх спа ЕчсКох запуски. «о
Кеавцсастко сФфосеонута зЕасодксоЯо дазаскзава сесвавмвевй сова иу Б Я кпсшосиовиУ саЗзеиасв осо щншне Коса осея сосоаецайи сосен БО иа Між ихих. фккфоиа лу щи отв іх тир М пихи - кРуж ми хи тих ит оо сеЕпсдвивЗіл сідла сСозоузвавсе ами сто вс поса юлия пу качок чека вочиса спол слово сришениоє ссесавсга ТА
МТУ т т 5 Ех р ре ТУ 5; т - ХЕ - 53 А Мен -- вче, че
А тм, Зах «Ким ще «Ах ТІВ хх пт ши ВИТю ит. хі З біує пом хетуті ст й ух чкюии желе ах ук АХ
Ера «й 0 ЛЮК сяк «аа Б Р..ГВ чай» й йзвдявг сота й. Ж, або К рух
ОВО хи» поветкова стийка кишие їЗ., пон р реч ж, о гі и су по хх «ШИХ же ншлру ссихйиУю Фу с, вро ОВ тм че «ах пк пихи ши со тат ух сек ую ию пит дод міт ур Воррі кн ЗК степовим свсзспосос аск а ФСК шов шах аВ шо рю гер кути и ери соми зиму їм ожива Ан як завзазазсоза засо х засжотисщх доспуФрч сиасскагсума песо КВУ пи со и КН о нн о о НН о На КК, Ух зЗеищзсикасєт сумую сСесиатееаки сек саше пи седезапиаих ВК пере оздся ен ат с мито вар піотчеУри спимо зай шуцесчасю соло соМмиш сем стль ворс воо саайвсссоам сщисощес КУ п кН НН НК пи пжмникапел пошана сьо счичеавошеча ЧИС пава плитох диссевспк в пилососи мое «ис Зевса Фома сопел зай ке НК В В ВИ сук чивасисасе сопеосопчс пазвлснои здвдсазаєво саке со БАХ М стволи ссуа Мосс совка сао шосе качх чеком и а«песаксоваз бабсепочине зоодовацевоя збсдсвное шававоссово запасах 51
В я о пили ки кий сни сси асавздооче задово спсовантсов сзчсассмсоа ачцавспоюа по п в ВК в ННЯ шщ сацивотота бавспокопав савскопацяа звозоаєве соостксовоя оцоасвоанає Б
Де и Не оч ке чннн сетер » МК у п пвивоапоне овес сппосацивсї сечо зчала сао зуриеи ух
УЗ ух ВУ «Вал ВЗ зх ча чих га «ех ДИК шу сіни зу ВО тях «Ааї» Васі їіїцн Кудхма
АЛ
ТІЛ пуху ножу М ицив тю ик гук
ОБО Я яІзамажисва сна
Тит їй іх бек зу УМ т іх;
ТТ Ка здртІ ких аж ку іс ре. фе я «самим д чалис сок я, п, ЧО У «ЕХ «ШО ХМ КН САЖА шт. ул ту х ххх уж у Кл их то дай єни ж дм хдаю" а паля осо я, «Кл, ОВО М дог віх «ан ВЗ ри чию ори. сли ри иух, й аа вана под су У В Зиму ву ат. чин чиавзпсавоспос счоЧелалея взипчЧазечсо беболестов зпазвсишсен сесзоавзад и де т пу. У ке ска ай ення 523 деихаю кл ази пи: мит, «лу ат сх 7: Неля псвпаасопласв зоассавссо сЕБшевссте асо азспадаває позспулевза ко. ооо на АНА АННИ узи ет пенею ване жила ек ем ще п г ти МОБ стасшлАнисе Зоосдиссотя савзвсловса чсеслевалш сзвшлеслува Боасолеех ШУМ тзавососоє зчосвзшосччеМ обста зас Заващ сосвсзце вес КУ смижфсин ую ит супу таки Кий от елект теги тіж ут тих зи
ЧшесаАпЕзов зАпозацсва «сно вчсс срасеевай зоровою соц Зо пуфи ик тів учи рве тиху ут утро к Кг К ужери семи зи чиданасосея сасзвоазечся чеазовасалс азочоасоавац еще чолов щ Я
ЖІ вста СУ уи ту усу у оксидом ау акту вуК аю у думку ау ен еВ у у Ку пч«аеасосокоза зозсвас чне осв васезцвеса чеовожет ач овоце КН етапу ту Урвут тт Ки д кжі рові отут Коко ех шк ке діву Ка потвазстак зашоивавоа пескасчазом мишсодссюо скаче цевчо ашосавлоюа ЖИ шфовомуоюохи тити упо В сукустито Фуф ри чужатитевих куди ух СУ ух поеми цик сквадсвихи сестра засос гацаскчвнав соспазаЗлваеа СишаАсощОтУ о инаи я пу и ж иа у и и я пекучим м зу еие я км емо м кв, фл пмшопатазя слатчалчка коепоецчиптяа сусла мимикнасцмИ ФЕСТ п спЕбдасакос ехо соачасеат зош ссвоо Сосвуцат вози Ве ВИ сперми жид вк ур КЕ пу Кфеледе кг сірку цу Зк зош чола Фо павом паводок сша спра е КАХ их Зли
АК І
«А БІВ ж ДАНЖ муж о «и ишЕЛСНОСНАЖ КИМ ВЛ НН «ЕТ
ОН яТУЛК ю и я
АТХ ДЗ КАБАНА
«йшаж БЕР. .415 єутутх це путівки АЙ Ах лі г с ги Ж. жах ХО ЖАН НУО НЛЖ: жь, 35, «Ж НАС ОН ктітугх ки
ШУ 0 лине кеви сузні м
ОК и ПОЛИВ КІ ТЕ КУ. ки, хі ді люду ку МИХ сю КАК «ШМ лопанцю сим що, сл, ЩО ОВИ
ЛУ МНХ
ЗЕМ» доме иш сукна слютютья ех «дя «шик (а, їі клали сх Аа нн "х я Соня «Мих те жид шШОМЙсю ФВ, дб, ФК Ох «ах я чЧесосстова смлавцис сссвасевкох вааадевсви позйскодоа вояка о а фе чл о содпож Уу пОТВИВ их ічеуф ит фути ея пуруцаинучии сг кеквсолосе чавспавасео сЧшсстаглі песшосвоса доссщфсеумав сасоецау КНУ нафолу ма уж вх и фе ихимиу і ок му КУКИ фу пули и су ик гуси и що дер еру пет чисасчичк сесооваста сепдоепеч ва зщепевсякя Зосоущеаео заз сео У фризи ужитих ко ие орки слі ун тай чечазваш совок оват сссешазсоУ спжеоссзазас кшаисачисомеа песо во ХО кон в В НН ВК НИ зап ацетон сдавсшмспет петаовслеол азамесатве зозЗесошону зе ке поаслпавсозши осповохоаще шсозизсеков сушену сермеаценся зона Я зей. вжи о срижелижвужени же ий ов пастух Мч м лап оничаі окоту ДЛ ассесптанає азсососзесаз весасолсосм пасом сова шеи дае З сп тлує сенат Зла стешисптееи пом зпозеВаА ЗВО спвоавсокосв оса поши с всжечасеку чесаша ке ща аципасоуєцює щас иотас сим САМСОН сСеОрос сБАМеОВуЄТ я пет вмикати Кур У ку мочку ит Я лу В хи у смутку Кі деле
ФЕМ КИ весен сещусчепеє зує трот ХНА Тюо ПОТ ОрАВАМУ МІ вкінці цс Міисемх кїд
ЖДЕ МАТИ У яти вух Зал «шию чу дк хі
ОО б вано птн хх щи пли зу рідкими и ку київ БПК с КМЕМ
КА вени жи М ФМ ЛЕМНА ДМЕ
ОТИТУ я 1 НЕ
Мод. іш,
ТУ як дух жим т неоомуцут В
Я тю опЕелЯям СОЮ а, ш, М ОоЗщО корка межи «ля смерти МК тки ХТД МКК лах гра їла
Ах І. ГАК ж Ук сук УЄММ ЗИМИ Ох Кк ходи х шк МмозЕлиє димом що. ш. р ОУКХУ х «и.
ТТ ж я, ит СН КАШЬНЯ
АКОМЛ ДАЛИ Ю ЛИЖІ КУА
«аа 53,4 шт, з ач НЄ с й КО Фе «дою ОМ жди шу й шк ХУ
ФІ ях АХ
ТУ 0 см мехууюум. сюхІМУММх вия МОХ Т КУМ За уплужи іі щі шт
Міраж ХТАШІ. «ТУЮ М кави по тіттт и зу их е і пін М
МО нонои З озиме мимо в, Ф, щадну и Тих век и сх стем см
Худюжу тт «АЛІ КАЖН Я ТУМИЖВМА СУМІ ВУХОМ ХМ
ЛЕК с іт мух
Ов СКАЖИ гля не чн НН НН Не
КУ, со дяалджна сус щ. у щОпОЙ С ей лл кеди яма мір ухев мух тужити іже м и рик Мо ее тонам ди хх ати дититиух щи
СЕС ІНІ ІБК ОА ИНА СКЛІ КОМИ ОПЕК Ви
УФВ У. КК КИ тт В с гу сш ее. демо пет КН зчаЗаслчах за пацесв ввасовосвИ сви ошеме сеспошеесе пласти сих КК ствердив Курчик спо мит вв смаки чий зчсппессоУ сКиаес пухка свое вести чах сзчавикасте МИ тити вух су их етя еру кими им муку сад узи ех ум Кіз щи тк злчсусавач лоусасесаза сзЗсссуссв воша паза осо єее Ка
А ппиде вин фон ну роя суку ит вом. ісп суки (ЗОВ кача с заг соевссоса сеотаваску саодссвуа осскєотауа сбоуодсаса збхосацюку з кацсзакова зкосдрачау зоссдовзоча взкассУзкоЗ позою сососочсв. 583 усу жи учив тк ау ад авта ких КК ди Кох
Де сИомХир сли хо масах рисах завести соснову ки пассоссясза асо стук созиосскща сосни сомращисая ке пи НК пай стаєте сосочок зачазсасза спасдавцтт Фазвєхояьниа кулахтус А
Уже мм с фури фут. ХВ ех суши вим о КК ук шт
Фр оси мазомочоо сасаеатаи кшедеенає соснова сива СЯ сі зрив чину щи и ти в ви Я им див гри Мини. пу М я уихучикщ смикати СОКУ Н шик чесслесеазай сзпупшсслючво зла доспороцав Фест УА мужі йти их фору че сах у Міг доаєміюи ауцеди утни и г Зло зоадЕчскоса Сомова базових зи зечачиях сучка слозспвисих ТО вени тр писчсвеє Її «лиж ОВ оно» й
Мч ча «Емо т мл ТУ беж Ес АГУЛУ ет пе їз хору дей САМИХ ДАМ ХМ ОВО тут ви зек п
БУС» КЕ ЮКТІЖНХ САВА «УТА Ге гої «Ех шк
УК ен НН Я
АВ Ж ОМ ОСНО Я, ж, МИ Ол
ТУ я я «айЕе додавиова оаймека
«йдйж ВР, тугі пу сет ую я поеми ка косу «шим ж шви МИ бу б. ПП аа ее Ой ЧИЯ попавсопансв Все воспасцан пшикосвлви сЗбеаалсшс КщиЕВКнклУХ йо ок ди рома пи я у п п м М о п па о п и ня ях зчазсвасаза бвсазазчашноев зопаЖсопеса спсппоасчає вестсвасео парта ле жю пошвсосасшеЕ чсспадловосс сова чкаччсоеса чзсаккчкох пвх ЗУ сшитучеді модроуюих ІК тккру ції живо Ки лулю віх пр риетиітий ВИТКУ Зате пустот Зсппсосоцис дес епав Зклочакоу пелена Записки Ж зувозасоВК соозаассоч запаска спевозаці; залеазечава сесовуюо ЗО коре я вх в купу по НН НН зт ачоичаковай сссосазеазе сЗслчацЗав сасповосовс паса се петлю М тайскзуасоє созосодоа заасобоще; йосанасаца ЗксЗоасасо сбобказене 120 пуття іник м дух жи и жди ж иа Коли жк Кох ОК дує ки зу и В й всдесоасава сцпассвоастс кавова соч скосе Фома сус сах мий и ни в В А ціл списати аліслеЗссе зеслачовся ппопавеее дасахсоснва сао новея по сао ссписи сбеазоасолише езсвіамачи совастсцяа ссовсоасова задо ко суеж вав иауєя ик ит сук ув у: ДИ уд сту тм пд КИ из ки у Хм аесосииам еозЧамо сис усна на ож ск ку фризи вм УК при и ую ре у роюау ФК ою Се теки Ук аиаслелая сегазоане чешки к зе чне роки Ким «Ай» ЯЗ ча хуя «шим Ух
Кт Її
Жожючю я МІХ
Ел, ШсюікА З бує шлам хюмаи Баш АКА «их 33 сп ссємус В Зіоравовзачо столова Зсвдассого зкочскацец вадавсаиє її яти ут т гоп уу є ее ри, путч ви стилю сих ризи ит Кри лу --кЕ здо сава своп сссощшалеЗє асавосац авхмвузсву ставскатеє хо ие нн с и м и п В м НН С пон КУН чесвоссачот зок азеао дехмісозса вас зшавсравої зепчкаваеу ми че и п м и и чих ме оужас дж ит у и ІЗ режи ЖИ кт лулу и и чуже ту бах листа засо ва лиса само дшоиксвалсо скрути шоюМ
Жежуха кою сука цк и фетр циУщІУ сут ТвуснІТумх Кмин скаче зий пецазасооя чевескезау паса азоеа деаЗезкасве бом висо ОО я в НН НН ем Між иту НК я В тери песен ссср те лес сисинмромом пемелицесє Ки дуети их судити тих ефекту и Ах за фут зсуви сумок у й ух А совсосалода авоспсозол зоссвасазо астівовкасо сказ оо ава 45 ну их его я юс теки Кз инричив пкинаж ие ит фати ріж тут утіх ту спавоспашоне свасешиЕсаз спи спУ соссосаея пчфсозастехА сусп зви р ня ше ну од кІу ти Єжи ху кА чис зон асвоа псосавцзвсх зазастсснах Фавст понесе Б сао зап кашеЕ казна оре сеа ас юс ОХ чн а пр п а а м а а У а А СУ де аксссксовм: автсспкалеат али секс посилає чу цих от оо и НН НН НН що ср пе ексує седехкє секесеваю пси неє ко и «Й За яз кух
ДЕ УКО
«Вій НЕ «ут Вісзііссляй Евссвіїв ев ЯКА МАКИ МІВ поса
ЖАТИ Є
«ВИМ» дохаткови зевака «ваш МУ. (АЮ
АВ У аку похилу Я шк щи чл Мов ОД еК а. ом Ох «гру ду Кю, А НН я «ах лили сс3МмакА «й Зла .. З «й» б овал схимдо я. Кк, рова х «КЕ
Ух «хи дедавексова спмакха тки тку же ниЯ дя НИ кю МАТОК т їж пе сто що її дм В а ЇЖ Еацел иЛОю що 2, ОЕМ М «ІНт. Паша сказу ни Кл муч гтих сит зи кю хи, орех хори ях ду схе оч пасвдиасКоу спе Мминиа дуазазвив пепсин сша ту ке но пи ин Ко в по нн вк о С п о Ва ок п о и Ки и о и чи но птдаАлемнс сичсвладо всаписсцчсх заствоишошо свтсасисоас сдусавиаоче Ка схуд о и о п и а о и и пе и п о а и о Со и зи
Фо зсваз соц ну ВЕС судово поза лея солена АЩе дладккещай стр ден зале пдт ку Крщове стик рив Уа впсзасцивчав зопсплвсшос спассосоч ввсеосавке раастишя ап овнача «М пса фут завии сумах апиЗзаваницо ЗВО Ще МЯМІ хиМ ект тихо и НН КИ пепоччссаєи чцсеписиси подопсавла спласеслосж шахт лавац соусом даю
ШИНАХ ФКОНАХАМ МАХ РШМ КС ТЛККИИ ТІКАТИ ХИШХИТ ИМЯ СЛІПИМИ ЖКЖУ коуч паче стики КУ дове и НН ал стихи ст слеКацелов зЗееазсщоше бдаачесо чес пасок У пт У фути у єр Кифрууиттхило у щі пихи уки УК еуКет фетр де цай здазісавазо Мспаздодиаам песо Зо сезсаслочс запасах ЗзпорАееАх в кит жи уми УК ИЖох Мох хи М фіат учи федри ЖЕ Ул вия, сфе р ЗИ коесаннс чецававасс КЄасстасео сіоасакОшс Сепвзавессз везе ших тшижути ких руси Ст чі ді лини Мем суєту ї уз емУКосКИ м БУ песик сазфотє ис пес сих тс сосен чим ша чекав се З) «ие ли 5 хиїі» ва «вл ДНК -2ї35» баецірекіїіцЕ ЗМазвізівпщід «и «піз додатково сзника «Ви 55.5 «Вих й ождвАВЕ У а, й, Фщоаскх К хи «ие додав ова сенвака «иаИ 1ЙР,: «Еш подВижа сов З, с. щовоВ ш «Й» «Ух попа жкова ознака
ШИ ЯК. ЕТ «їх м оавине шШобою й. б, Фоайа
КИ
«ШК людаткоав санака «ВШ яр... (3 «МЕ» же щвляКш сою В. Ша ОБУ «Чий
ОС
«ах шини виоВа сввиЖа тиви (ІБ. І8 сих додвияш сте в. ду що Е «МИХ «ШИ подало сонника «Машк ЕЯЖЬ.. СМ хх в овадяю МОЮ Б. ж, ЩщоОВЕНа т
КОРОН ака ме АННА ННІ
Іди Зх ЛИКУ СВІ.
ТАТУ щі п жах іш...
Кочан с - сек ж му
НО їх ВЕЖ СЛюМИОЮ З. Ж. СХ ВУ У стул тю лих стукецешчужеі У ох мех
ХОДУ АХ ДОЩИК ШИБКУ ее ха й у СА. .1551 у ен чи ШО НН ШАШКУ ким Їх ДУМІ МУКУ тб, ЮК ЩО Х
ХК
АК ке кре МмИММ би «ЗИМ чим Поу ювисВа слиз г тд ка
БО в. 5 ик те суду МЕМ -о дж ди Ж ех Мосула димом ж, 0, ОВТ Х
СТЕ и МУ ту зе и І сим дс УТ
АЖ МЛ МОЮ КІВИК САУ
КИ. пох ве «Шшлшв 7... кет со де ух У ел щи ер їм малцдЕ сомОю в, Ж. ОВ ХХ ли
НЕ ХА люк «ийт ні ум уки» МВ ши 0 Деко УМ КО ва НА ТУ
Ех КД ах ході кит С хі
ТИХ ту зЖжеру рих зеюшу Сх их ше
Я Вяе: ЇХ мТл ДУМ М. ше щшОВОВ хх «Ух пкт о НН зеркс пошалткова спання х кі ЕКОН ге
У ла юю кі ти ср дугами сим тощо М «и Я І шо ДИКИМ «бу 7, ЩЕОНУКХ ОК сих
ВУ ени
ТЕ хе мтлетмщіх жим жд 0 ХИЕУАМКЕКОВИ сСУБаКИ рат лю нако Не вУХИєть ОН а Ап прут : як ов соло ща уро ге о ттшщи ет - сто я «ХМ ТУ дтМдЕНИ СІТКИ ре 0 9 ОВО ви кВ рю пемдомім сами м мдф КМУ КЛОМІЦІ ПИБЕКАТОА
«Вже 118411 «Вийх о швллш сиМУМО ду дл. ШОВ В «ФАО? «аа подавкива сени киш (Р, КК «йЯйж же жвляш сим ш, с, Фе ХЕ «ЯМ «ЕЛ доле шктво сина аа ОЗ А «ах З явище сзшсою а, б, З айс к «ЗО кий додаткова занака «ат (ЯР... ТО «пи» 5 пвпаш сою в. СО о
ВД
«ай лраднаумиса сна «щи ДЛ, 1 «Ол» мова яна соми я, Є, у ВУ «Же «Й Доу вм: ММК «Вк (У Р.,їІТХ ей о хюоанло шонобж я, й, Фо їх «мя «ШИ КМк жодомих зп ща «ййшх ЇВ. І 5 «вели т ОВЕДМІ СИЛОЮ В, р. у На СК
Сея «ВІ додаткишиа сани кий Зв. дЙ стуєех С я х ско «юю донна шою ща, й. Фо
Са хх Мих тут п «й посшеЕрува сваха штутЕт тлу й зи «ДИМ їх, шо
ОА ж чн ще ше Я «а» й пази сом й, п, Я ВО
Уют хо сне в шле 0 ОДЕСА ЖАН ВВА КА
ТУКА, СКАТ ОА ьЯм их ПАК. КІ тут тах стек го їж схКЦх Я ект модне сум щ. б, ОКО чих
ТЕМІ укус бУМЦМа Ух кУукЕК І Декан СБ иИ
Уха т ТАК
ВО шкі «ох Кут
Кк де ЦИиж мед ситу хропе «ха» Зо явиде попою а, сб, що суху «й тя соте тіох Мік код жа 0 ДО Оми ММ сти. и Іл коки у лу ие Н шою КАКУМАЇ
Кен км ск слемітх - но Ко поси зх.
Ср ООася паомЕиНнл сито М о, ФУ ЩО ККМИ «Де ит ж пихи утво
Ме ЖІН ЮММО УТІК
МИТ лх У кушІї
ЖКліт их ІМУХ у КНМ свя її педрад Ух х їх оду у
ХА зош жа щихимт щу ШО ЩО ХЕ літу
Не
Кан пути ууиуикх мл
У ОЖки ПАЛЮ лиж
АЛЛЛЮ гака У
ЧИ. Е.Ю КІ 1 кум ко пкт ет : хропе же ЛЮ БНО СПО ЮІ хшк. Шо щас Є
Кен чем мук, ен и НН
ОУН» ДИМУ А ХАН КИ ил Їй ВИ).. (и сих зх У щожеММ сти жити ох . Феоху г г.
ЗАД поадБлниш шию я. ше. ОА ях губу с зжхомети й шу, я а саке 0 доидатксовЗ стмиака суль суда суди «ИЙ е ТЕХ, и роко о І КИМ МИ Її їх ТЕ ся понят сомУМа ща, ш, ФММ Є пз шум
ШЛЕ ужив УК жк 00 Дома пинака стоки гущі тк «кийл: фр... ЙАл ру ни ши НЄ пбоожу ди хи ТОВЩ пли ше, бо щоеНМмх Е «ЯВИ «их дОХМЕЕКЕА МІНА
ЕІ сло Якої жд ау, Я ровно т щує ми г ще вк ому
УКХ повела с сам З, сб, ЩО «хх
ПТУ пункт сем мне УМА ЮРИ ДУЕТ лику тих ери тсиюах їли. , | кА сх о мовним сив во її дах дІХХ М МмоднмлжнаА сло: ж. 0, МОМ их иа п ПУТЬ пихи АКА хо 0 ЯКИМИ сиза «вим ІЗ ИМР.Ш ЗА
Ту Х, я щі ик ме сеоцрушиу СМ ен ек о ов а м З У М В З ВЗ «ий их Укмитумлестекеяжкц Ми ххх 0 АМОДНКІВЖНХ синя
СЕ ТЕТ іл тих о ОЧНІ х І ж ХК ок ТИ ших по піп сом до диоо«ї ди В
ОК ДдонрАха ММК М. -Ж, ОО БАУМ ОХ кад яко пох молі т пола хг ху тім 0 ВІЗИ СИВА ВОХ хи іЗАЛУ 34 ня ЗА. КІ лу, но щем чим г їж сдокхму М хх тю явила сут ш, ДО КК Х
Яка «ЖАХ поОмЕткоВа ханакв «ик ІЗ... 185 капі о оавлняє сом 8, ше. Щ ВО ХХ сутг я хх дОопатМОома пани ов нн жи ак о «3 Її жили шоп в, С, фа
Фа
ФЕМ ОД ВКОВВ жна на «ие ЩО. 1350 «ша Фронжюрнк об в. о шо М «их
Ши М шрудВЛКОНЕ ОПЕК є ІБ... щ «ел м одЕлнш сІМиа м, щ. М ВО Є
СТЮ хх
У
«ШОЮ дода тколвию првеВеВ «ше ЖЕК, СБ «ШИ ую жвлдю сим Фо, б. шодо В «ЙшИх «ШЕ 0 Ще ЕОЕОХ СНІЖКИ «иа ЗТ, 33 «ЯТЬ бу НВ СОМ дм, б» Ж ОВО
ШЛЕ ня «Йде попе укиоюа сосна ка «Вик 153. З «ших в ожшандє шою б. сл, Ох Є «ЛИХ ня
ФК ха прумімеецою совЕрке «дими 0 МОм УКоОВиИа сна ка лит зав пи яд ЗНМ... АВК
ОК К У зхУФутутрю оз лУК їх их веж сом я Мо одежа суми м, 2 ХХХ
РН аж «ТЕ ТТИЗТТІд тити «Ху тиск, «Вик МИШКИ ХМИЦ ІЛ
У га с ху СІ... 1їВіІ
Беж о А НН НН вас пКелелжшш ссомою м, М. З ХО. «ай» ях попазЕКксова слпизКа пеки ДАНУ, ТЕКИ МУКА СхеТИ ХХІ ХУКИМ
Моз ах ЗАЗНН лам іо. фі Ма
КК. ту слеуїе суки хе скоса «ака м аВинНна спосою д, пу Що х
ЕН
Кт туту му гу Сп ВІ Пт жит 0 ДОДАТИ ло ИЗД.
Коша Ал дод еКРЕхі тя. КНУ НИ ЯНА ил зо жесті ме пек в - К зе й ХРО ПХНМмО Ф, М, РОМ «ал
ФЛ 1 тими отмющо Силежід ув М
ШО УДЮМК СтшЕМа У
Бе каль кит х«шлдик уяву.» АВМ сту, хо піз и их печу т кодк дк ЖЕ ОЗНА СУМ ФУ ш, ЩОНМО
КТ х
ЕМ до ежтт жан, геммом мм жду их мана «ММК
Кк лаія Не ах
Хохкжук НУ яю Кі
СТЕ шин ВШ А НК я то джжма сИЗМа е ШУ ЩО С ру
СОВИ ки 0 ОДОНЖЮМИВ тиша куту гак кам йди» їз), вух жо шмлЕдЕх лук г под «Ж мМ Б Едищт щМми) й й, й одх їх «ВЕ Йх
Б
«м пичимихна випа пе12 0 Ди нлоВ сли
«ЕД 14521. .48 «йші3» й охала собою Ф, Ж, Фах В «ДУХ «хіт доОваткова ошивиа «Мих 454.1 «ЯМ Ж» шодш: синю Фу, З, дж ДК
ДК
«ил додаткова сани
С Не ВН
АВИЯУ» сїроявляє сим Фе, до ОН В «ЛИХ «МИ фихдіюнсмих см ЗКВ «ше сраВь. «ВЛ і дела сом г, с, З «ВТ» «Віт под тКОВа сне В «вий КО. НИ «Щи» можн сих: в, б, Ж ах Є ках хи сода пн хи фйВ.. Са «ВУ ж пвнщк сю є, Ж, ропи муки «ШОУ» мдодалкова созмака еп 157. еш фе о щиКища ле щ, б, Олю ОХ «де «Я додала севама «Ивла фАЯЕ,. А
«Вк мо заамиа себою й, Ф, Фо г «й» ейі» плушуткопа сопивка ших СУТЬ, АТ «ай» пове собою в, с. щ Зх КЕ
МИЛЕ их шим податкова ознака «влйж ЇаЗ3У..1ЯКИ «МЛ грОДЖЮНе ссиМокУ й: с, ЩщОБІМХ Ш худ «ВА додаткове сианака. «вам а. ІБ «3» в далис собию а, пу Фоале ї сту
УКХ
«дл пох тка пляжна а «шшЕи На О.М «МЕ У БВ ТИМ МОюЮ фу й, ОКО вшм «їв додаткова соамеака «ие СУ. СПД «ша лю йпвиВЕ СОММН В. б, ЩО Є «ие «ших долажкеова ознака «ше ЯВИ .Б «ВМ м ознуих сою в. б, Фо Ж
КУ кий додеткова стнака «да ЗОЗ, БЖ «ва» оданвЕ лИбею З, б. й ах
Коен лук Мт
Аня РВК Ж ТРУ Бе
МУКИ пахова сп зе кети кидо «йшйм (Сх)... шЛЕТУ я у сере ЕМВ -- ук дл
ХХІ Кт. подБиля стома ж, т, ОЗ Ох кВ тя ху
ІК моз мих сам іду ли 0 ДОМ ИКУВОЮ КВН. кпжтутух реле їлуз «ап б к- ЗЕ
Я вк суди сх в и АНЯ ши М о аБВИа сю о ш, З ОНОМІ шШ теор
ВТІЛИТИ. «й нолаюкова соанакя ока шал зла «ЕХ ща: МО шум що тех комі їх т Он ке од ХОЛІ НК сОЛуМОКУ М, Ж, КОКО
Б
«ких «ки Мова ткиЕа сива х
Сак гц тки си ХОЛ жо ХВО савани я сто у ази т 0 я Кт «ле 0 ЖК ШИН ДЕ МУ Фі 7. ЩОЛЖНХ пл
Я еви полу ХК ВАТУ пул хІдАжТМ 0 ДИКА ВКОНИХ НЕК Ц; слу папа шо «их МНК. гжАХІ кокони я Фут ХКе. лі т, те вки
Жду І МЕмЕЖ Юм шк. т, ОВ
ДУ
АКТИ шу петиція дицЕд вом ШИЛЕМУКИХММА лІЗМІВКХЇ злу ках шик
ЧЕКИ їжа, 154
ЕМ Х мовних пом д - ода є хек оч ма о м з з у З В Я
КК т та жд кан зачин че ки? дея тнсая сузнака сиру, пащі гер «ИЙ павук пав срікту шк Я «ШИЛО ов ж симосю я, сб, фай плитка
ТЕ УАИ Ти са тях домом КВ ги чаю БД И МОВА СО ХІЛКОВ, муху гишту зи «й іх.
НКИ лою ту дж умжтМ сх КЖУмх д ся о миле м. коки 5 ВЕВОие ле Оою о , Ж, ОМ ОС
Лу ах пи яют нев щи см «тов ив 0 ДОА РИТИ УНК отруту. гшЕЛУ вид сш іВЕИи.. МАХ «ШеПт їромжаннх сеНУ в. 7, 5 БОМ М «ВШ
Може п
ЧОДЧя ад никшнай ЕВ ЮКОХ
УК хх ци хіх ТІМ Х ху АД
Се льш У «суті вим уже Ух В т т см ж
Ех Ху ВВлиФ СО д, б, дамо х ке «ших
ХЛ ях УМ міт СУМІ МУ
ХА мас мс сома «ЛИХ Ех ПУ
Во Ки кю у хх по еу що тд Кох ож кож «ий Же ОшІЯВО СИТІМІХИ 2; б, (ЕЕ ОВ ХЕ как дум
ЛЕК тя, зх Кк Ея и МІК жд ДЕМО СУПИ ел чеаки щу вед «я дяк, сих) бр я Фе дшумржуцеш ОК уд т Кя копію и Ії ОЗНА СУМКУ дю. б, ОО Ю ку км
МОЖЕ 0 пут дтшеци поз бішри ШИМИ ОСА ЖИВКТВ. зх НЕ спа «ийшв Ї5Н4р,. ВА ктр ку ук сждожю пилу й бо «у ди х ви юшки ШМК ОО бе 0, ОА ХУ соя
ХА пт сх перук КУТ
ВУ ПИНЛЮТ КЛИМ СТІВА. кутю. ду Ед «ит 187 К,. ТЕЗ) пожее шо и ШК
Бе (4. ошлжАмйМмк СІМ З стр рому М
КМТ шаеке ща 0 ДАХ сове «МВА КА длУла ОМ МИ
ДАХ БОЖЕ. шк
ШЛЕ то дек умц смс й ФощеО їх с може силу о шу З ВУ ХХ
Ж
КЕ ХХ
ЄЮЖЖ есе села милу и сх пли,
МЛК зп изд тань 0 ДДМА Маки
ДАК. іш щих
УКВ га...
СЛУ по щу сему ж що пе жк ОД ЖИ СЛІМХМОХЬ Же 7, ОМ М «ВаЦе
КУ р КН сих ШЕЛЕСТ КІИХ СПІВ ЛТІАЛХ
Крвоі ТЕХ щі
ЧО ТАНК. 01
ЯМ М У «живих ЕМ и Я Фе сх
А МОВА мАЖ СИ ЛУМИ б, ЖЕ МКМ і ея чук я а и НА весни ОКХ ВКЛ САЖУЮИ НАХ
ТУТ талих ких киш АБИ. ВЕ даже о НЯ я хом зона т малдш СоСою Б. сл. Од З тт чим
БНО б ЕТ ЛЕВКО,
ОВ ДІД ЖКЕНУНМя ОСІВ дж СВІ, 13
КН шЖ ль ЯНА В -ож ден В и ТАХОЯМЕМІВИ СМІТ Б. їх С ЗВХИХ У «ЛУ
Сюжкож щи «ЛУ п НН бек «УА ВЦМТ І КУПЕ ВИХ «дише ЗБ. ВА
Кн ху сЗфеЄЦЦЦЙ пу их сх - о
ТТ ЩОКА ЗНИ ДЦ бе 01. ОВК
БУ КЕи ші зупозу ді сл
БУ жи поемами шпака
КТК тк лу ща во а и и ж тк делі хи семи ж а жо муки СЮ
АЛ Я а ОМ п В же «кр,
ЖАКА «ТКУ фе. я - що сект . - 2 хо
МЕ хуєУчІМ су ІУКУЙОТ УМ суху ІМ (УЧ ММи Мом У дими А ше
КСЕНІЯ ром т праєас вн шоссе совсмсес лоно: ах про но А їз пдехасвтупи зола пошоисУшащ СпВлоаУсе пасе си НЯ КУ
МИТО Ве аст спо ЯЗ сае осмосу сло ши песамосенив ази ацеєс копав пуер бра пато ШО п и и у и и в и Ки
Щосвасснота печати спам зЗусбщовате оком смс зни жому євиу их пух м М ух гу зуміти у у лу зупинимо пері вуУх люду вуж ККЗ коси за зсзазсвсай зеівссоссУчи чис ссс подлестали гасу ати чишикиЕ сспзезесе кайшцсслет Мосс є Кадгнювесщх иа хи ко ка о а а п о п я о а а а а я еп теасолесткяа зламав сла коссткезони списами Моніка Ки сен вуду КУ домо чав Керрі М иуву ку, В соку «й
ІЗ щу км МЛН ІМЕНА МЕНІ ТІ о о БИЧ КОХ МАХ КО ТІ не ду Ек КЕ уча вики мецвитІРт суми пет и у полк
КАМІН ММ ХО ЛАНМ ІХ МУСИТЕ ТлМ ССО ШИ КМУ ши пуф уК (т ІТ ВІКУ рт гуни АТМ Сх г УчІ Ух сх сійнупстиина Шеашосшкоа Валіза серовелтим Ко «БО ХУ ет у в чим ОБ яллюу НК
Хзжисй АГУХХ
КН сиву ру сее ЕЧаШН «их» ВІСІМ МАМІ «ДУ дж 0 ШУМУ ОЛЕСЯ
Кт гАСУЄ ках «щит ЗР. ВІ вКЯ зх фест пілихоитимто " соку димІМ Йо шнеяне сс ах й, й ле пт яшма
В сеттссе стертою гема хм дим 0 ДІА ТЕОВА сщиаКО люки хащі тав
УС Яи с5ап,.ї5аК
ВІТ Кн НН ОА 5 пи СЕ «их МОБІЛІ ДИТ ж, 7, КОКО ОХ
Ух ой ж Ми «Ел долдаркев сливи кока ка слі реа ге. , 5О ши, Сх сеТЕ Ів Ки УК - Ка ето сМЕки, т «ий йпоЕшНАинНш сСиДОУе щ. лу, ЩОДО ил ши мА шт У зу ше зим м чл 0 ЩОМАШМЄВИЛЕНЯ РШМ
ТУлЕ т мк ОХ ся ТЕТУ. ВА «ВИЗ к с очвивж сою в, Є, Фоабо бана -кв г «дм їз подиху ую (МВт ди листу (іч Уд и пуп а Б заст шици чн зодщсваз засазииатс чсссзвасад есе со пуашещиас о тзвиссвозвай щитах зсквсаеси офоаастоо ЧоевовсвевВ Зх Аж серии муц ЗЕ Креми Пед подо вед Морі чаг сис тсзаа зБИВпочччо Ззпазачете побсацосеє писттеящу пес. ких сере тив свв який спец пише мм виз сті станових ат мосту сепассооча ее со авастацец скат ага ам рр ин и ху
Зап шазелш стає зуп плеса пиах пралоциетлас ситуа ЕЕ при Вр ие ання о ун п нн а да
Фасшваспомз вБозсоахва сецасоикча лося сао павсвчаакх в пуиримодизтия ну урізу тК І луєиюм Міерлетветрзй ціх СМ М гімни СМ М Ку емН хх доащиожли со щузааплючнаха степи попе туютна смт МУКИ жим ; ших р кед смереки кад о а АННА ап сктеЕп и ево свопи актах сющесщуне во се салат Ах пелет Ук Ки цет (тммтіо ткемтІКе КИ Кент с запевнити дп му слину семла со все МН дЖМ чн В НН ня ет ух асо мишею ТУБАХ ЛЕТ СЛТОАІОАЦНАТ КАК ЕНИ ТО ме косому сексу Букеесеря букси сосетотеу: ововіево Бе
ПИЛ лМУцЦ рми в/В свв селуху ша АХА ЗУ нем «рих кА ж сюоея се «йМиз лик
ОТИХ Е. Ху и я зууги ох. у
ІЗ» васііїиа шосе пу кі шк ту січе вдих га у Мо чий ОМВК ут
Кока у ск КОЮ
Кук иих АБИ І кре п 2 пе де «и по нанцщє сЛМЛОЮ З, слу ЩО Є шоу тутя ем ки, твого тота МИХ «их ТИВИ БИ ВТК.
Кн нка паску «пХа їх... прик его шКНЕ. ин ч кою чн Мода сибЦУАИ: ЮК, лю ЩЮ АТИХЮ ОХ ие кю ІМ тих: пот цеииі емш лу ки» песмажказ сина ка «Вайт ІБВЯЖ, 553 ду тух мо шу ріех смути У пожж щем ю соня те оБИДЖщ ЄМ жк. б, ЛО УМО М
Ще чих
ЯК ДЕЩО КОВІ сил ктртуих ге Ти «Мийма ІУБ3В.. 0 ета по фтоттєрих мех т--о ху цу В чи бу шжлЕМИ Сом м, «Ж. щ ВО хх пон
Б ове
Я МЛН МК ЛЕНА ІВ
Ме прю Ті куди а и и них, Б срЕовримм.о а я ЖеТури г яко Ки, - «Ід хх ложа мще ПЛИММа Фе ж, ФО Є ялгух
ТУТ х, сштУсмс'ніхухщх коп яке МИЛОМ СМ. дежк вчи тя «ДУ СТВ, ЯК туту до сррвтетху омокжинио у тод М «ВИ Хо шана сома Фу б, Ф одох й декору «пл
ТИ, МмІЗЛУИТА М ложем ик 0 МН ЖкЕМмшна дез Ка туту перу ктууктхх «ВИШ СЕ. В «й з внано слив йо дл, щ Вл їх оп
ХМ
Мей МЕТИ ТЕХ ЛУБІуРИА
М У ЕК к; де 1242... «ТК Уж ее их - Ка У пух як сдтиМ М Ооятяй си У м, ОО ХХ
Ка ши
У чем есте. гупцих яка моматкава занайа тітутрх тут гетри
Моди 75. є Мити «их їла яаВиВви лю є, Ж, Щоам М «ПИ М» аиеМз яти мером мом см чаю Дод и «МЕТКИ
КАН лам тт
ХУЙ ЖЕ. 2 хх: вен и НЯ 2 скосу «лм Мода до Кк. я, МУ М в УБОеени ке А р хК КВ Ол хтнаст сиЗиаид «ТУТЕТУ у тА іти
Ера еї І Ге ЗОН
КТ но Ще стилях ; се опиту у шити ховав Нвш хиоуидк же, ЛО МОМ ОХУ «а слу
М й? пласти ут гуму порів фу КК вими пур о Адже жи щі наш Хана ужити шт щис Вуса тавио азопасезинх чових й чис сек атсхави шлами лх тешсиваким суму осла Ак ін овружужі мужик угусуиеккту М тм щі и що ВМ ис х ек щі ВИ итЕ о иФМтиуже і ек ват сзсцсЗзачоц зсоелсчхта Оса ЗЕ ВУсЦусоссс щи щиспосе їщУ заз зів сис восчпомонви сапопзасих сасішеваве пода «и о В В в в НН сит цЗацхестомоа дасте см свчхласвис хат паца ВИМИ мо о я - шви ср БІВІ МВ гИЖИ Кружка ки з
Фесюк ещи зОстлавищ чистив содпазолпов поса сапу хи ефе т, сот ик т ЯК се -х Гая алея ферит ї призи. еео нако оливи ше чолассазвас вИпчассвовОо пособие л спиасолом взасос село ди тоже и узи жи и пи вжи, соки В ие и и шим сасасишлок спос ше сосашУ Бвасолактв восени попала и песптшстоает осоки зазоазазЕеу дсдоцопише зиск соофзапаках аж по и о Й НВ НН ши
ОКУ Вантос правиастесина ами Замки мІо са ним расеВсистх ЗО ми ума ежи кірки В их пуху жесть хуох сту лу кру даже І пеазахацяни ис лсве оо расца скосу Ох зорове схо сх ше пух я с у Во вдцгжеенчевх ти ізн псує КІ Жтівуаууч тай сш лисшута Чесна Мпаещесисмх УМТКМИХНУИХМ хм ис СТВА ОВ 1
Ще ХНМНМ пеЗХеаХО АХ хРщу ее 27 ГП х ра чем «си «ЕМ жа
ВОК ИЗ
«да ШЕУ ЧИиХ ТМ ЛВ
ЛЮТ я «Уа ХМ. «ВІЗ» прашмеє «о» За шпажки щілини схе т
Зали ем як «ам КІ «ії 15 «симат МИК ж ПРЕУучНА ЛУК ДоНІ Є п «Вей» июИ х, Між тки ек І 0 ТІЕМЗУТМИЗХ: «ай» аз
Ффуссвевих секс їй дл тух КН мое Уа їх 15 «хг МАХ
У ух Піплміфиє фе МІХ ух жо мшюиБусЕни ПИТ МОМ КА» «ШИ дер ск «ШУМ 0 прайвля ре ПЕЖО гу стр «ап о чех саке Те хи ОСМут мили М Х суд паж «а жВО
Се. пі вежа ДАМ кт киці а рі учив ори і «до 0 ХНУ АЦІ ПІУФК ЗМИВ «ких «ля лмзидемтИММи сомів кал подала жна ситі зах 2381 кАХОНонке АХ я КМ ери я деІЖееИтКі ет ок жк чи же мИиЖИиЕш Ом фо, ж, ФО Є «Еш» «о дя ДІДІВ ЕЯ МКК киджлх КУРТКУ нене «и АКСМ ду, КІ
ТТ м мк - ме ї ох " пуЖох я сит В ОдяедЕЄ стїж о щ. ШУ ШОВ ХХ суд
МА
НТУ сх зер уки ут ставу
КАХ дик юклІю сиВІБа Му
Кохан ТА чат ях тик. и «ТИМ то ждтащи иМАтих М т сотих ле ес МОЖЕ МЛІКИ СЛІНСОЮХ р ул, КЕКСУ «То ооо мІхМеМ ММ АВК ИЙ ейиі» Дт сна сут іа ге «ТЕТ іа. СЯ их печу и в НН ЧК ся го вжюцра сиЛок: д. 2, о ОХ ие ря пи глум и Що понад ших
ШМАТ ЛАМИ САМА м ік гу ху ЛК ха хх 80 мк жу своих стик ро джосхеих «соми ох вал сижЖиМе й, м, щ ОО Х
ФО
ДИТ и 0 вІУпомоюуикИ СТВ ИчЕ чаш 0 МОДИ УЖИВАННЯ керу ут ЕХ «Ши ІМ .. ТЗІ как фо век сили точ ху 0ЖК Щи. ШЛЛЕМОКІ є, 7. (ОО У
СТИ
ХК ВИК. ши Доти саке штуль рук ІЕЕ «ую ТЗ 5 КІ
У ті жив см д тлу пд т «шкі що БшЕшАдж МОЮ щ. с, З БК х «де
АКЮ поетів пий я Кл 0 ЛДИЮМХВ СИВАК не ту рух зашектию АХ. ВА
ТЕХ со мм СТУК Утя мл. г їх ач Тих Ж;
ХА жРОЩІУНУНХ ОК ях, Л., ЩЕ ОВ У «ЕМ
КОЛА - п пиши". нти ги
Оки ДМОДИТИ КА ВИХ СТИКИ
Штутх НУ пай ди ТО з КІ
УЛ я сту пкт смію що ж, хр дах я «МИ попа мМІлК ще , 5 КМ ОХ
УТ, их «ТУ п дити ЛАДУ Т САМИЙ
ЛЕ, гає сват сил спав. «Зв б прдаю пойоюров. б, б або
Сян попевляак лосСев ош. б, й оаОо птуту ха МА аа кою. гм «ве дюидатесва зенака треті гл га хи йЛМ О.В с. Ех, кі А НЬ пи ми 2 - - мех -
АЙЯУюЄ от онианмє соЕилю в, 5, Фо
ПЕН шах
ЗЛУ Ж 00 мит умтахитткх сла
А ЗМУАКЕ КОМИ ЕИМ ЗИ ТЕТУ КЕКХ етитутх их ги «иа Шу. ЛІ
ШЛЮМ ди жо плн стек могу с аВмО В ххх ЮІх РОЗІ Флюс, б. ЩО то «ВІ ета ср суми хи ит 0 МДЕ КА СМАКИ и ве ТЕЛ и пи. ун ех ту лужкмеє суми я тк щих «ши З 'зецта солою а с, ОХ мкл
ХРАМ тугі Мч ук ДЕЛІ. С КІЛУЮОХ ет сао зп хід ТЕЖ Ух У КМ туту томи ще зх : ел т ол «(хе дж дви Ж ху подали со щ., ШУ ФО Х
Коси
ЕЕ
ЕЛЕ, запитую пихи
ВУ ДОМЕНУ ТИКИ поси ИНА тат ння ІІ я ОВО косе ко ФМ ЖхУ уми В еко АЖ «жа» б овиндю пейою од, с. З аби х тр «Ех ил у ометцнюумиї схеву и аю ЛЕНИХ МКя ХМЕКЦЕК І. «Таж пух мал «ших У. (НК оон я г оди таз зх деджЖня собою М, п, я йо 5 ке жя кА
ПУТ хо зимами уєм о пуп кит ДИКА ЖИ. ТІК им штебуту тала пе
Ху ІМ Мі нт ти медок сек г я --осжну т
АХ її пАлАЖжЖ ЛОТИ бух Сл. ЛУК «ТЕХ вл хх М чок 00 ЗОМ КТ меди я ал щі пло ких ХЖАМІЕ я ККЛАЮХ плн ух У смоачоии смеУлеУХИ сохиух Х «й опожнвлнж ослнлюі ж, Ж. ОМ зтряко ви
УК зму мости ТИМ ши ОЕМ СТИХ
ДЖ Кох із кі ге ШМК ошкч що шемомлтня ФІ ох бот ди Се «ший Ж яв: СЛАВИ Ф., 0. ОМ М «ЕХ пе кн НЯ
УБОУЯ УДК ТИКИЙ КВН
«ШИ МКК 1371 т КЕ уже Іл код НО Я т4-отх діму нео ва и о В у М я ВО ОВ чеку
АшОх
Ве В «ді 0 ДЩОХДІМЕИХМЕЙ ХМЕВНАКИХ я пору НОЖУ хід КАХ ша МУК соже ув дви нки с Е ККУ «ЕМО МО даже лою щу 0, ЕОМ
РТ д ши
ШТЛИ чк пижмо пер шин ІОН Х Мово спека
Ой ко, хх аа уки Я ою ЖІ песо м ор нн Я іх я щих «ШИХ лю жвнях сиМмООю В, С, Щщ ах
ШТ
УМХ
Ме жеВН сво сиг сем 0 Джина ФК
ТЕТ, іл кова «Мк ПШХ я КМІ поста еко хом В тож ку Ж дати МОАТЛ МУ СПУ ЛЯМУ Мк хе МО Мк киртугх хм тру у чн не шип Ода севажа кт хутки спшЗ тах
ОМ ЕНН му шими ТМ и КТ, ер со сих ом жо пух В ки повара соМмУОю я, Ку ОЗ су кю М хиліт дедажкоВа стнака тих гоп це: чавих ЗБ)... 58 «иа» м зване собою с, т, ВЕУ ш стю тя «ин
Зі» неуйчутй псих та ЛЛДІЄИТКМИя СІК кт І варт «ІКю АХ Пак. (мл
ФО ях їх лущєсрй смеиох х их тому
НК ТО ОЛАУВМЕНА АК ОО и щодВУу хх хихцх
УТ хи о оф НАННЯ жу: ре хикАВ дшДАжиІНМ МАК путі схе утжниих «ДЦ іт. В,
УЮ у «ЕВ Ж ХМ. ик х Гаї 5 ав її сешоМ щодвляс см м. 0, ча вади косу ськ кА слумелов и? смечучихутевусимв их. ЩжВ т и умо си в глотка ми юя оч траса сідасстуевст шоцосотаои ЗИ но пекли пес У
Фіто зд Бони ет дреди Ку и За часпопудс паелеановасл сопе сола веаавсгас всоссеовсс павсосаваи Кшя
ЗІасащесаєот спесавасловош хаос сскис сус сикалокаЗо песик ює їВМ потече ВОД ЖЕК МК Ви Жити вивих Кит вил утекти и РОД пайастьвт ЧОщшодеваву спосо БЕ а есе х пав сх сим піхемеу МІСТ цУсТКИ м ОМІЖХЄТУЮМ МУК ОМ гір живоУІ ВМО итИх УЛ ОЖИ Мих СЛОВ ия КО часто алсв пора скоса зав осиса зи ЗАЗ КМ : чи втусшсасцисе савасодпоаа воша ова аеасочеа зов шеці спав 8 сн ни А п о о о о п и м и о и о пк в и си и апа тишостане пЗхавссззсл сбосачдсвсе звацесоссиУ задсвазсва чавокашакає Ах ки нн НН Не в яті песни сесоссемаа зосчасенея содеЗасе зво се зи Ох р и и в В А си цпепензлмттий одеса стелу спо слова касе псополсашс сова Асекаа щих взааазеизесв спос тоо впазцещсез чапсозЕче пптЗАБшеО ЗОЗ ща ик в В и В В НЕ ше теассксас се сстза сасосксксв завсискоала свзеацели полк Уа дез а с дуктвуцеив дну ук уму Киев ке Урктравиа Кі кити тк ср амвиквеаа сао виш исзкя пошчсисмо Кочстерас слов Б кессозсавий сезсвсвасс свасецист сдопвсвоспеазс сзанвласввое шахи ає "ща скік Ум КИ ю. се кекси дупу ТАухВр рути З ед ж уухтьиих п ур ур учинво дай сецчипмлисихт: чспевсщалоа дао АЩСМпСеЮ ЗДдОлпепеЗзиОУ шен ицу ВИТКИ ше а и ен о о а п Ко а п о ка м лм о а и п а п Ко І поч пиизсчшеа пелосцео зсепонссзавако ващисасвом пом МХНХ сли пиМ еріжкеі ід гук емеміІКІ Сдзмещещо сут УТ кія: СрУКехщх их зай смадссиаит такти сирмицнІом скло Вищалотм се нее ЗЕ)
ПМЖ с кре тру ик оживе пе
ФПІМАМХАЕ ІННА СО БІ
«ій лап «М ТІЙ «кит ЛИ шк туя, жі коники дає ВАС НРУСТ ВОЮ. «Ем кт сеоавіь смхКеМоя жа диидатесва совиама яко ще «а «кл хр, 5
ШТуТяио пумшех уко досто дж В чий бо пап сон З, сю щ ВОЗ Є дашух
Тулі муки ЄуУКЄІ с ший ДлмиМиков сшнЗКх о п Я РИН
МСЕ - шій стану т боса ЖК
Сни що жати ОКХ У т, б ОАПо
ЯК м ча ки ту спожи пемтв А м яки 00 ДАЗАМУБКЕОТХ смаки
Ба пу ушу шили ЖК. КІ
КТ ре тему т т вк один У «ВИЗ подкдка собою в, с, б ве у
«СУ «ШДЮ»
ЛЮ ж злу пах кА ЯМІ УуМЕИ ХМ. кт ГЕО рт «киш ФУР, ТД
СК хо шщмщих соИНиМ то ди «ДК МО дтІж а СМ 0, 7, ОВО ОХ
Уа зим я пихи лих чи и, «Мих ШИХДІККУХМИЙ СІМ спа щеня ТУ хх пт, М
ТЕТУ їх зує тити х -о ж дим в хи ЇХ ОЖИНА ЛІТМТа м, ту ОКО М
СН» КУ
КИМ че при ЖЕ УмижУхя и и ис мив суму діІчци Мис тим сю дів. перу вух Я вашсскомену ФизсЗсоеЙ черева засос по кнайа сс Кз щуку уже ці ет лудікии (реко ер дет спонукав ху запослзасвеє вВеачиатшан Мозамазитх щочмеаимиог стлрутесхом стАСрадлиуєн ЯМ пдугзижеетімиюи гаму тики пис оижсуст ов мовити соти леву ВК тм 1щй ами иазис всодіжссали здососячка вівся сова вілашеааке 155 ручки що сповиічитіч кін ит ви дур В луцив рочки тка щаихссчссоов звоуссепцезе ач еит Беата ХлТраєа пе емо, ХЕ нику рв умо пит есе Мевдлуфретт м мУмо пі медиаь ж Ми зап пече соляна сором сс в звовсасаваш ах ва
Я -е ЗХ воски Мо х щи уж хочете духу жири сх пес ЛУ В ЕК (УК и КеУИМкХ с КК ча чизкеачитає зчазашчозов заз млихеа Заапсесиат сощслчас асист ВІ пет их Ма фовдовмню сокежм чих Суркіс помирав ее нь яти
ПЕ леАлІй пси ХиХ Чл х ср сроная аа ох УДК о серужитаитеи чия Ківичімиоі сЕКс В ВВ БВ одеввия бичем мер вм З ство вавсоасра поселити позови ссещсоспо ехо а одесі скине В струсу пику тест О су ту т етов ввк фелиМ ет ДУ ща вів рІашК ммс соди шосе усна тн ПЕЧАХ не епоху Уест енукох М ее коди дЕМмх сл дових ІЙ
ОКУ ФероєоеУю ЗО ТОЖ СОВИХ СЕКТИ У бите идии жит мит Безу повіт вит І Клум СТІ еВ щі
Кассмаутх сощосвЕсехих Бешаалимту. долину шуми сум ЗА судове фр ож вив Мом том сус Кеті уУЮИ фа сУККТЧ тег пзасасссвея песасоазокИа сексом зак зи ии наплив пу зспанлииаА Ве 7
ТЕ п
АН ЛАУ восени тп
КМУ ТОК сер сети яка 0 ВК шк пранні ідо пухом оолетеу і дв «ЩЕ Ввизі дв сохне сук. «МИ. до прита пвх адм 0 дру укслаа синяка плату ге п кис К51., «МЕ Ях до мнан с МОЮх у й, Фен ш еру ит «ийМа
ЮК ху зник ВИК ховхА ІВ додатку сша. «ХЕ З Зх
Мини 12. ії З 7 «Й ть вла сну ш, б що сопла
Ха хх их МОН МІДНА АЛЕ пл СЕ ЩІ
Хек их Ку и Я
Уют, на - тро дв Вк ху З опшпдє сн З, сб, щ Ох х «ЛИ гу «ПЕ пезднсвичУна «ами хи АЛ УМ МАМІ тлуткту Ел бли
Мік кри. АТО ейхит 3 дБЛИ сон що 0, чай хх «але ЛИ ну усу щем жимі их ім фати міці их Кін ди ща пла уМмх ВИНА спиця СПА У сивая поси п седіхопу ІМК Міо Вк пекти вм щещ Ук я
Ффмиразвсема поч сжмлІха Злато аспек тастл сисспставсста пазу КУ зесадогосч попсиссвицє спусцатвака сзбзоалосде ваезсзсиако судах ами ту доц ши итутитуовіхии КІ В й муза а тато их пк СУ Ех азсогасевя сассозовау пет юта зЗкссраЕ савиаоссово спаспенасоу аз дефжетІй учету Ж их о жити ЮК жі кот іти джин ох иіинк их кю Ку ин му и яса песпвщелосв созизазоска лоулуасекцв Зосемивиа поувевесочле зе ВН м НК в НН ЧК Зх пасли два пис зеЗозааУуа вовосачечи бСезваодено ЕКЕсюЕсвсЕ КЯ- М трепет фотжерстрветеиви ТИВ ти тезою СЕ Кт итлу візи их вен у ду сами ошиов спчазесие ази сачсозазсоза заппвоаннє попало яки ри и в В поруч учи лад спзсассотиве совка алчес сжалкчке сала св зиск зчпислааова. аа впшеЗзссаву свопсоселх су АнО десиусстЗи Моз сеня осн Бе ссср сивих (удегррІжкост Еко Ух слугу меч до споослеспосс зсвалезапя Заусахеое пехазшкесща персо ог исою ВІ меді Уут ти КІУщо жур сио да пиоміщо рраеруюи скеи куме щи Кік дл саввоссєков сапоссссов вадсссізав ипвчацеве ссосшксмя асо Еко
Тл ТИ сю фо ке ень помирити - ку тож кж іже ли кум кажи тп пезжекочсчс ппозлокчссх респ би следася подо шисх ЕН ок т тла важ хе тут чуищ хУКІ Я яхти ущЕ пул ую пдиї тій був чем ІМК МАЛНЮ СЕК УНАЖ «их «ШИ Ме ЛИКДДЕМВНЛЕ СЛИБНАЕЮ титул щі ж «ши Три У тах гу потр собою в о родних В век во т ог со оз о и В Я я В Я
КУ сту я щу 00 пеУпдмиценмйо суді пе ДЕУДУМЛУЮХ ЩМАМЮМІХ оо НИЗ чишимх ОР. ре но класи пеииемя ух їж жо ле ХЕ лін КОХ щ, Же ОО У
ТКУ
ЗІ МУ
ЖИ оч, тих сх. жена ех ЇХ «хе ДОД УКОМе СИНІВ «хз гтщі 3 5 жа М АЛЕ о АЛІ
ТИХ и У Ач пух я. ке Іти ря жил Боді СОБОЮ дм, п, й Ох шетктр ех,
КМ
Мо тис Ід тити ях спот, «їх ШІ ХМа СМАКУ «ло жо та яд ких Ту. хі тк укр тих гени - вухо сю «Сх ТО дЕМІЖНТ СКК 4, «т, ООЗАМО ОМ дви
Са
У смути нич ех тЖшомю 0 ДИЛИ Му ЗОЗ стутуту вч кт «ик 2705. ит уко керує муки м Я боки «вс повно соою я, «. щ ВОЗ Сх о Ев ушу тя чими» дсаджикОова сланажх
ЛЮТ туз Ел хау ки лю ші. Сх
Кура - ж ірих: стуки х я В хо салі днище сою й, п, щОпО хх стю ких ух
КК у пек т
Ор ІМК ІЕМ ши жту км трах паї
МІ вовче кт, но спот т си м - стосу М шо М ТР ошайце ЗМО Фу 0 Щщ пИМУ У тру юку
ОЕЯН ян КВУ БУ шк 0 ДИЗДЖ СУМА ММА КУХ прута ее зчиц «МИХ УК... АК хи в одждяна сонаою Б Фу ЩОБ б «ад чих хадпе За а ни о м и м СО Не Ма и о п М с и ОК Уа
Моисомосчм падсосмІ похо ода апешкеМсто лоспееаги блока му стевія спред ід отв ю схе ди ЕК да жд ловив й савчваса сипучих заз ЗаАаеке сало Кесая сала ЦМВ ким при и НК и зай пезсказска састессався зЗссподиевА шВсОСалоО ЗсЗВосесКаА сосок МО різни чичекя (ТЕ УТА (УК уК ВІК. Клде ке есущміЯ (КУМ помре кАВ В м зі: зпсоооеоказ засусочєчта зцсвУуплІвех пазевскоазе засос зо сесває во зе етрІлУстуТЕ си корон буктоудее тив сх УЮ УЮ Виттщх реугі и их У. фу ОК ур вх пупечаечх села пеаеоемо оео Іова чЧАсписнвеадія пак Б муж зичу. со жир ме сим МУ МВУ слу сЗУиУ ее еВ КК кутя я тдаозосочоя здахтеслццеом хирайжуєчун сраппеасовеи зцсцалацсщ ас сае ї5У сфе слі цУтІ УЧУД КО УРНИ ру ще чен и стічсвзасстща сеспсзомсВ сома спаламатас есе лав влив М косасаосх вас соасоаации паса соди шосецВ чес ЕМ опиту тю щук их, пн нн и НИ щи сапвпчсвисє пасли нссцє стада содспабвсзо ЗооЗвавлки авасшваши ВО зумовити жом іме У Мету и. гжеуе ум м у ще лгиИ ФММ с джу задум сосрлчиециуми Ммлорашечоцх чем Аум ваше еасо Ферма щ- чосвозесих часатесис Зваваєосов чЧасбфакає пилинки певне Во засвачех зелсзимоне соковаскез косо зи зирессосвх лат чес сшевошКиши соус сх ос сщ соми ККУ хіх паж Ук ШИМИ А
МНЕ аКНКАй СЛАЛМАКУТИМ я «ВО» ЗБЕ «ВК й «ДІ МДЕ паза ува «кій» Ватізїїиа риші ца дя шим
Ля кока ки у а ВАННЯ ходжшиМО ДАО ВИЗЕМИ КН КМ о. ся 5.5 ет жо пушки ие - шк ДИ Ух
ВУ МО НЖЛюМИ СУХУ їж; Хе; СЯ ФКММО У «АК
ТИ ІМТ УЄУМЄТМОМ МИ К жде 0 МОМУКХМИЮ сОШТИА КОХ диких о 25 сІшрАТ ХХ шу. я селу Я модчю скиди екосх «ЕЛ ТРроши я димар; ФУ М, (ОО
«ЕД» «ШОЇ дода нисва сзивзЕЗ хайи Тр. СКМ «иа лю Вияв собою б, сб, ща «й о и «й» дидееювова седаже «виш ГІВ... (5 тий В ваняєе собою З, «с. щ ж їх «ВИХ «МЛ шеоленеова сану ков «ай БУЖВЕ..1735І «т по джж силою В. . ФВ осх киш «Ще опопатлтисмжа она. «жи Ба 5. і кі п ожнляш собою щ,. ше Я ОВО «их «Ше пиття а сувна юка «ВЕ (ТАЗ 0. 3788 «ха ж ошЕпде МУ В, ш, щ ВМО «ШИХ тийіз щодвжкива занама «хай ЄРАУ, ТЮХ «ай мопвляш сом м. с. що х «Я» «ЛИ додав сузакя
Вдйя (ЯЖИВЬ.О «ВИ ов осв ак пебою й су З БУ сих «ві» додаткова сзнаєд хай ТВЕР. ТЯ «ЕЙ» Мав стою хх, п. ово ки «Елі люпажнсви сзнакя «й стать. лм ох авуна ззбю й. б, Ффоапо Є «ВВ «ит пода жкова панки «Ва жа. КИТ «хна хь ннвляаФ о соох а. й, оабе «МЕЧ «хай» модаткова отвика «шайи (ТЕР... ТРУ ей ЛЬ ншяЕ сою В, ле ЩО Х тан хдюк сих дюдатесва сбзкажа «АЙ ГКР. А «ЕЕ М Одже ММ ж. ж с ВЕМа ї
Фея «и» додатисиха соанаєд «шк (ЗВУ. ТА «ЕЕ водвлНш сштмимн: й, й. Щ ВО їх «ЕВ «МЛ додаткова педа еийиж 7. .Т «Ел моделі себе З. є, БЕ у
МТК пря під мтивиа г пед даю й 0 ЯБІМАВУШМО хата еру вед стр «ших ТВ. (Та шт тео суеууєтих спите я -ооркопжую р «жит М ЗЕ жХ ци м, с, 5 Зо долатя «ами ях перук утмчтих су а» податкова самка шт зап шЛгух
УКчея Ж А о ту махом ме туман Сх «хто нмжащеє собою а, ж, шо х «Вид
Се ае Убити сй сли тод 0 МОДІ ОММХ СМАКИ туту, сек зах ах мїКУ мал хх вих. шик пу то пакт сечу ц ек ціщи В че ІОСАЖМІЖНИ СЛОВ їй. ж, ЩОБЕМа ЛУ окр ку
МЕ чн НН жи 0 ПИСК СИАМАКІ млУтЕтУ ситу Ге
У Я хр. ши хо ДУХ БОдІМИНЧФж ОМ щи у ЙО ВМО Х служювти чАНАМХ хе іль МОМ тиша
Що кет гіулоху роя НЕ чи
Мун Шо о а луфох Ч хи РОДЕ СІМ су Ж. ЕЕ ВО Є й мя пу хі и, ніс се МА ххх МИЗАММТКІВ ОСІ Ма. ет ці З су ших БАКУ. ра НН и НН НН Я мМ ТАБ ТИЛ ТИМ 5. ЖЕ, у ОМ ОМ ст, вх. хіх пол иктша вн
Се» ІЛІЮМТИ ма ВОВКІВ. лк ху ее ПО
Ех В МКУ
Ко удт я ТІ см имид им п коти ші дю ОВІЛЯЖ: СИМ Фу 7, ОВ Ох «М тік ж в я
ОК ДІДОМ Сл
«Ек шле дл
Он ЖИМ я БУ
МІК У перех тих - й ши ї- дак ох Мп одІвлна сою д, Фу ЩОЗМо х
Кохати пу и А хдяши дю виОова ЗзЗиЗкЗ кт ЕЛ галі «вий ЇВ, 1831
ЖЕНЯ У пери аж их Кк г З чи чайпла в дедиш СІ м, т. З ЗО ї я
ЖАХ я лях подамо ссднцк
МА я лю УМК КУЄ ТВМХ ОО ля Ех ги «й ІІ, ВУХ, сук х г «ВИК повна о лосм щ, й. 5 ЩО ля ою дк пфтілусттевим новій
КН ПюМИЛАТУЕУИ В СИВА тухьтхх сд'яаз ит хи іпаш. .їЇлЗшА отити, со штУєсівии икрму ов шину дам ХВ ОЕМ сл а, Ж, ОВО труд «ШОК і дома тевя спиваха смю 0 гц тай жит УЖ я МЛК ки нн НН НН ННЯ «У повели семою є, с. ЩОДО х дтп заи чими ЗМУ узфукитм ІМ шу РЦцУКІвІЇ ІКТ МЕМ Ком двеняви ЖЕ Ме Е що шт стінних апоуссзезев вщУшчаешанм схемах потпаваеско ВИДОМ о схеми КІ КМЗІчиовх ДЕКО КічУю Каже поу тс ья ие тех 155 чолі смсщчацчота спе оючена сетстпасє оподат саден Ах ти тут КІ годи ІК піци друку кидає у щі скввстасях соеуасслинМІ ЧЗосдасеавхвн зол ссзлста азс зав еКо А п в В пре чив и Міфи иа каву вжив бл їх
Ччавсдозавцс сс, сша сосисок завбспссоЗ дчитсавсох БЕН; ек Кочетов спати Пи оЕ зах
За щацилАМ Педасвосвш зЗадайсущи босвозатац патлпазочова иссалусУє хх азосчакана асп пос мнна сзссачеи пава Фе Ко КокУ
-пдсудиху Віра цядочев але вониї піц лпадеденіІ тай скентедикие Баку бваскзвОовсу бзацчаоєссоа вазсасчаози заспавсат зскалашас стос М служити умо у ема сій риє Котів МІВИт іржу вітгию ек житі ит ФА між аа атлет сщев сс щшеше серцями стало сисопшкаше мшушссее 55 пені аквдони фр «бів ему ге евцісние сват стран сови ай сесаквазс забез м зопазсвстя обох зЗавапшсава швея ща и нн А НН р Я ши сзцдссосвосв сервис пезосвпшееут ствацеова смів ази стюЕмо ра рижики пекти суми м жиму М хто пет и шедчЕсттва еп оек щесоспиаам ее спосо сових во пон і В НН й здана шиком спасе са ВеВкиМ Кос еваЕ сосен КМ невуси фути их ум ЖИТТЄ ие но т ери
ТИЗКТКІНУНЧИ РИЗИКІВ НН М ДОХІД АеЕЮ ФОМА ВИТАЄ ВУ кмин миразае промах Солимо мо сонне сопе простих ІММО . є вий
МОНА ле кер в зак «ЩО пе серія т «ет ШЕ око Ше
ХЕ тк зх т клич умдучи ки КМСД пИХУ «ам ЗОВ змжацасьшциа ПОТОКУ У ут те «Ка ОМ птудотх хе шим М ашій» ЖЕНЕ
ФУ А с кдд ун Куя ах пижслЕ Уже яма ек ях мит. сімки т ма САМА ке ій таи яке А У
Ех. т хх кА
ТЕ тку м оо ХА.
Коен уз хуиєт уки лу в ОЗАНья ХАЛАТІВ МНХХ «М ло ура ІМС з «ОЗИМІ МИЛЕНА ЗАКАХИАСТИМАЛМ ку хх, ЗАТ калу Ми «ШЛім й ктуму Ух «ик АК перен нн и у ши КОЮ ОСИ ЖЕЖмЕ ОО ІДТНАНадІЕ. «ВУХ
САНЯ ТЕ и Нд дово ої води я СУКИ ТТТТИХМ У М БОРУ ХВУ КЕН кайийх ЗМ тійищцеищ и КО між щі ух гу
КАМЮ КЕ КИ ма «ВО» 316
ЖУК ла «шк ху
М ух, яке чо ЩІ ше и ння ту ШЕИЖ ТАТИ БУХУТТІЛОЛИЛ ЖЕНИХ МУК «уко ж
Ту пе І В А код х екижшхунчиагштУНна коми тиукцая
ККУ. ча «поз ї ; : й суд учи имущо (киев ха
ШИТИ НАУКУ М лю ту КН ха МАХ «ВМ ба
«кими ОБУ еК лю ун Но Я «йІі3» Застітва вивід «Па 31 см Отл ул чи ТК Фр рака пси КуУ. ок ен ШЕ «рр то ке бжд дб Жах пі ЖЕж діє ТнНа Кхе ТВ пуд Скай бах па Тех ле ї Е КЗ! 15 пем о тве Ме Зішж Сім Бех дів іа Бех БхоО Ві пе ів іа О1у же їй хх и бух Зп й до Хо де (МК ЖЕ Ті шк СТ лик і ву зі ув тах же Уа й ому Лепосзную са КжНнІ ех ло Му їхню сих хм т ск пу мк п гли х хів пі т тм Ід (їли У лу ух ках: інж УБі йди Зк дор СУХ Буш Яра Зв оїки Бей Буш Су Кі Шет ях 23 що Й же юр я Жж жі в Кк меж, Ми сю Ку Ми липу сисеуєх Жуки дужі иа М охужі Тех,
Ів БЖ Ма ЗІЗ См Кук ЗУ Бе бух М дЕЄє Ко су БЕЖ меш Був й чі «и пт о ХА цс: ЕО туди товух зх Жак Жах бзмух ХХ Ух Урі м ТУ ух ом У чин
Ттхв це) вкл дно дво хо дім Те ТМ бах Бе вхщ дій їй Ме тух ц Ффт 5
У йо З мли САЗ що лох пра ки сх оф Спотуєт дова Кт срвую. ЗР Ток ан луг ха тех дів Аше бхуж хе Тух Бо ваю бай овжо ЗФх Уа му Бай оду ах зп ак хх
КОКО КЗ КУ тож 3 Щлово джим Іл т Ж Пл с ТА Се ку суч лу т ти му З32з Мі МАХ Обі але Аза Буш 01 Бе ПІ Ха ОСТУух УВУ ХА КА
ХЛ Мк Ка:
Меїу беру ші» За їз Ми ву сх дщи ис ЗщУ Пій шу бло с бл дар отв Бів Гі ле) Нв Ао Фу ий ко Аяв сій Ай Сув сій ге яхц ясує заг о ІЗ 1455 жу тушу кл Тфріх духо гла 3 чле суху Хиуих тогуєч ок и ших Хр учи йіж цу 01Б Біо Бе ув бій Ме йеу шву ово о тТУує СТУ АБИ тп Бхо зда 25 ї155 1
Ії45 ХО А УМ жо ХУ фо чем і Же Ж их м Ху Ко Жду їй іму сауує
ЗВТ ММ іш ТУ Су хі Ада дам Моя Би вюхь піж пев ув а СК їжа ра тв тов йде дош Зх тем бе сту йо (т 4 ААЯ СТ ех Ху ЖІ У де
ЇВ диш АкО ТУ був ик Ух Аза опал обі ха бе Бшх ад ке ЖЖ че зе тоди їНо У КК дже ту Луг Уют. бгзхя бля Ж жі тих пе ху сю КЛ буку ббучух р Ує ж дви вв обу дви дало жа іє Хі Уві мі ТИЖ пом ЖЖ о жщМ БЖ ч55 зай гц 138 ши о
Тебе хату ЕІ де делу, й іа дет тт іл баг то М й мо Хсету Ма
Зіб Ер чаї Ап йо Ав Діз Айо ДАО я без хв ев Ав Ав УФ
Б 315 вай фам сю. я ямі ії ах Ум бум Ві (1 х му о гли їУ1м ОБ їм Мк:
ШЖеас Тут Вів іа іш те теж діа шоу ВУ Ніш ШЕУ ср КБе гемо вих п ча «УЗ пап ший ше ре ря де тхм йео ду й дл таці щу бхмі о Ж що ше баз Же Зі РР до їжЗз Аза ет бух для їж БЕХ с0ув'змУу й же пе жін чаї ТИХ тд: се зак
ХХ я хх
Ера: ія Ше жи ср є бо Щи Ус Мч ТЛ фе «Ха ЕХ тато мух Том йому пін о бтвопіу Так бек Бар бій Веж Сію бах Ппішж бі АХ Ба Бема скит зе сечу що 355 п ло ою лев б тю Лоу лох ки бах ому имя туш прути т би пк піз зак Зхщосм жХю БМ Буш Жут ім вдає МПуш ХЛ Хажшо їМай ХУ з -а псецп
Ка У Іо хг даху СУ ах Мох суд окт Фо бля б хі аю. Меху Мою ЩА що мит, со «ща ІЗ Ж ЗшОЯ зе ек З Бут АЖ Олі Зак сш хек ов ОЙ вух 355 зо
Жебету Тіла Ма жди тор ср вч; стіл: Ту дж; тТашт Щіє дохув їде ДЛ жа зму ВІВ ВеХ ОМВО аХ бу їхМу СБЖЕ МжУ зт Бе бю ЗК І ха.
За іа зт: злих 3 хо 5 ж Зк БЖ
Фут 1 ук хр Те. ЧІ ее у судх 18 ек на А ОН НК Я цево Зі БЖ БОе Зах вх с1а вви осів бо щу ТО Суш дев о дех бл шт ки ча
КЕН КУ КУН
Жито ож чу речи ФУ са тих ббдьх боже Можу Ток. Жкатуих фур лад тля п
МуБ саше похжа жтих ск Срах БЕ їшжх ЗМУ о БотУ ПУБ о Ммжо ХУ МБТ (МмлЛію МИ ат лак и
ЗАЙ 345 за хр іи Ми Су НО т ку у міт З пляж дим МА хну Минжє. усу ут ох сі Міша пев чі АСУ Ук дкиш вій жаху АВ СЛУу ех Ме: АЕД же йАшА 2 СТЕ но Ку пули УЛ м їм: Ж я шо м ей мину М жи ему біле руни уд зі їїш ОМйХО Бус слль ЗО бі Хі Буш им Мам СіІЖ ЗУ СХБЖ ХДУ 1 дя аск зд
То З5 Зк п ин ня ШУ вно АН Шо а о бик Ж Ар тям Док т ох,
Ви їм сжа Ав узО гЗу Ада ке ТЖУ ТЖВОТУХ Суд за Му ЕІ Му зх ККУ а о пря ЖИ Дом іч ще йти док бю ДО м ту Слух Ж ху хх Дах Тих сему Мо еф БІБ маю був вдю бує Мі За Хв бю дув пи За У 1 хх дл хх вже ій Ел
Нео Мч охо Тих Мізкі УТ лу т Еш тижмх Ви Теми їж б: іх М гру тиж Вів Був Бе Мах ЖИМ іїхзм МІЖ пу Бк Му СЛ Пі вів двВЕ ТЕХ
ТЗ а ц й їжи п ІК «бплажхх Ходиє ЖЖ. Топаз (Ах хх бо ду; їїлАХ пі Тл Щі їн їли ЩІ хо бог ук Баеаб ве Тео їй ХЛ Му вд паю жк мк ВІВ КЕ Зі ВіФ Бе ак кава 245
А ЕІ АТО худу Кі у дм гі г жашті йчч Хі МІЖ йтв де МЕ поле «ши хх мли
Тк опаУ Аа Бі 3 щем Ак пех КОВО АЖНХМ АЖ Аж Ер еХ АЖ ТУХ що 355 258
Жак ох хх ощлмиу слух бЗеуує ЗМіиє ЗМ Тит ї3фує фу Лу миє Тукухх У е аль аж АКТІ МЕ ту ша МІ ЕМЕ ЦЕ ХУ НАМ КЕ Кл ее СУ
ТУ Зо гу АБО стриб тохету охе СКЗ ую Фі Жах; Тихе о А тже тях Улищо Ха жу тк НОЮ
Так озУув Шу Же Жах Каб бух два ж кт був се де дер і кж Тих
У зб Ка
ОК те пс лам БЕ Ага
ТК гук тії
Маму МИ же зак й
МСЕ шпик хіх Ат РАМА
Еш ке НК НЬК Я зи «чок жкет ху чи жМетІшшМаЕ МУЖА НВ
УА зах хау кю сш тд ТА ТА А тм ЖІ тим МІХ 1: мі Ула Мм тям хх л АТ
Же пуд о цу дМУщ УгьЬ їі Мід їм ді йіВ йла тає ТУ мМ ОУВБА йаа 1 БУ 12 хх туш тора А РУДИ З чи КН Ш 3 ме ших ху беа бій беж Свь діа Бйе дід Пів бл ази Ява сі бімж ій дкщ щи Зк Кн км хи як рих йію ві Ті о рко до Тк аж бій бій во пед ній їв шіц ЧУ кпк УЗ МА ККОо КВ КО ож ващ ша Ви мА А Ж НАМ СУ
Ук ше яд
ЕХ Ж У пжх доме бух у о Зм. ки Ж їй Мазуї Ку ідо ло Ком ти: фр фу ут боже еко фа т Щі щі базі Бк й хі вро жтіФ ВК шЕ хе о те док и. Мч Мр Ує то и Жожкно И М йо р века НН я НН Не и дк Ан» оОТВЕ бах їди; Маї Сув сп дев де Ж Аща Сез Хе лей см ст чем чх де хх и І 30 пух фі би од там ЯХТУ шує ж тк Ж Ж усу бах ЇУ1ах МИ тив дже тМлж ша їема Ши дви сім Хфеа тує Ба дов вБротше сл АЙ
ХУ В ях
Перу укух СТ Щи щи со сих ЗУ Щодо духи далі ХЗІВуз стих щу ТУ щх
Бхх УК уми Мр А ІМБИ ОС гХНі сб ех Баш о Бпев оує вар бу см ту ек А
АхКО мл -нх «ік із дю кум суха ух Му ки Ж г ТУ м Так отих 21 Сх: дж ж тв жа тУуХ ТІ КО ТУЖ Ада це бал вів му шКМ ОСТ у «ли якіх чи
МАХ Пп лі добою сти уз зано лк щщо жк тат жи тихе Хоми о щофжт бо: що мож
Баш сдеув КУ О БІТМВ Муть Мао сь хз АБО ух мує гом зу ста ТУ
Ха Мах ва т тілу ЖІ ІМ УМ смачно гот ТА стопу бу тоєзуї 120 що Убі гмух 01 хг ців осі бла вий ве тет рей о біу їнм щеах іно МмлішЖ хх Мем ощіУу БІ «ак дах чаш сш 45 КІ МУ МБО ха же ллУ щфіиу МеВ. ХЛ; І хк ложрех ЗУБІ: са б Слух тіж тва м бів Вко Ме нів йіз Вів дей ЕБе Ту Ед о цво Хе ТЖжЕ БЕ зак дсктх аск
АС Ка Ка пам піл Бба Міз се ств бує фіз дд Біх Згдї «т мли ті їй В щі сіу ве із ше Був Ту Бі Ав віках Уві йщо тн Ті буд Ар у щих дО жЖітхує си Хози Зк би ум Хе сдлзжі же бу беж ДІ бу вихо їх сх
ЗВТ ОМХУХ Бут уд ЛЕ ЄМ су БМ Оса Уж ХЕ Хм УЖЕ Буш кАУ УК -кк зи тут
За йОи шо ре жених ЛИКУ офойючх стае СТЮ шк тр г клю ЩА рен ьо о и Ше Но СЯ щи ЖжО бе вд ТбжЮ Ма ОБ У Ба Ба жа МАХ Але СУ 3 йаЮ 1 й па
У їх ті 12 ти ом оз ау беж тях фу ту си хх ее не тиж дів Сі Хі чі ди Ав Аа Ота Сей Аве о тк о ббе Уві вка лів
Беж чай же Я РА гу
Ка М ОМ кю
Що ХК о ЗЛО НЕ Кн росія рН КУрАХ, х ФОП жуть рук дв «р М тіж ххх, бів МА МЛ фі ХП ХУК о ВІВ С Му о хжМ ЗХщ Ма со УА МАК ОБЖ
Я ща м и си КЛ моих пи КІ у л пс МО, дожия ААЯ ую Мод Зх уд,
Мет бл сіУу мя Аа Си Ме ав одаж Ол Аа шал ТЕХ ха спду ТЕХ
ВУ 5 Ж тк; «ж Хом спижет, СТУ брикут ГИ пляжах КЕ От, у ха ох ЯМ ХХ Бик О Ба СХ Би Ж о зш МОХУ
В ХЕ
Сов ВИШНЯ
ДМК я шк
ЕЛ ОО Хшю пре наст юн пеБжУМ г хи» ваєвіївав МАХАЄ
«Арея ЗІЗ ж що й фу Ал ж сх сюди вух Мои йду СЯ и: Ко оте вних Ж що юки ж Коля
Без обі вк сіб Пе й Буй Зв біб Бук Аж БжУу БЕ СМ С Бех з ре КІ че - ан То МІК єикужх Ху іх. кдд ПУТ: ВЕ пух с м бурі рик Ура стул ує фл ж те
Ти о шЕХ діє ЕН ж Дело у ТКХ ББ бблх лі ож тек у Ух а - -к вчи хх За й я Тощя те це хи суртю уж сіл укр ху гії Ве ігр оггую не ій ку зи Бе ЗБ осіу дк МУ Ту ТПЖж Су (ІЇУ Аке Ада шо Біне дл 5 це вк й спам т й» Щі що тд; аз Зйвфі лящІ ях лі спе ск тлу ак отах АкзЗо жах гм АЮ Ам Зап) бо Ма ох КО МА ЖУК ХМК Му 51 Ін Мн ше пт о тиву б тк суки тя уч КУТ бтозух Лоиж Мав вів чЧвьЬ БЕ АБИ вл о СУ іш пуд пе тТух сашцо бю шал щей о дКЯ Ат
КІХ 7 те Кі со Ми ТІ пу со Щі до тло фа: с струк йовуз щожих СМР біз що тма тож тях Ума щд
Тен. йо Му їй а пк лах тА ОЗКАЮ СХХМІ ек бат Або БУ ом МлВОЗа й за СЯ ме Ку МУ
Фтиучи 5 уж око дае ПМ я дм УК лохтив її ДМ ах хі МІ гу
Швж діва ЖхЕ був йеЖх їйєц дід дей АВР обу СА дпа АКеЯ Аля дв тло т тух, 5 хх і та 115 й Хан ЗІ р нн На ан тпизи у Ма: хау куту лю Му х пт бони Куля що МУ Ма опал яю пав бен Сук жк ол Ку Юа ЇХ Му у сах зу за ле
Ам Кк УЮ з я що м шу ОХ лук лому Мох Козує 1 лося щі тя ду ок их дев: дат Біла бЗш бе Буш ЖМЖ діє ем йіз дк йів ЗХ Ме Ху Вр
У 35 145 тп Заі гів бів чів У АБросі ар оАжр Бо АвробЗек бло ТУК Зі 145 ІЗЙ 153 ї40 ем Ті Буш АкКЯ ТВ Ав обу СУ АЇа осіу піу дтеж ко їуз Аврошіу іа во б1б Був Му Жхр Мем о бля Дуб Ре Бен аву о УВЗі вкф тує ВБЮ ідо іх 135 зва ож Ме: дчп Еко Дів дей о Міз дер отв зу Ашросіо тт де 185 225 зо5
Зесє Уві Віа дк Уві ЗБЮочУва База вхо ца ті діа Бу 03іа дл Ави 318 215 235 тУух АБИ Її Аа ку то зе Мі Уа АкФ о Бжх АЖпОСс ТУуХ СТУ ЕП 315 230 235 ЗА те Уві Хі Бук

Claims (5)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Рекомбінантний представник сімейства Васі//Лих сегеих для зміни фенотипу рослини, де рекомбінантний представник сімейства Васіиз сегеих експресує злитий білок, який містить щонайменше один білок або пептид, що представляє інтерес, і націлювальну послідовність, білок екзоспорія або фрагмент білка екзоспорія, які націлюють злитий білок у екзоспорій рекомбінантного представника сімейства Васі/Лиз5 сегеих, де рекомбінантний представник сімейства Васі/и5 сегеийв: (ї) містить мутацію в гені СОЇЕ; (і) ексресує білок Ех5У, де експресія білка Ех5У збільшена порівняно з експресією білка Ех5У у представнику сімейства Вас/ив5 сегеив5 дикого типу в тих самих умовах, і де білок Ех5У містить С-кінцеву мітку, яка містить глобулярний білок; (ії) експресує білок ВсіВ, де експресія білка ВСІВ збільшена порівняно з експресією білка ВсіВ у представнику сімейства Васйих сегеи5 дикого типу в тих самих умовах; (ім) експресує білок х|сВ, де експресія білка УісВ збільшена порівняно з експресією білка хХісВ у представнику сімейства Васйих сегеи5 дикого типу в тих самих умовах; (у) містить мутацію в гені Ехв5уУ; (мі) містить мутацію в гені СоїУ; (мії) містить мутацію в гені Ех5А; або (мії) містить мутацію в гені СОЮ; і де мутація в гені СОЇЕ, мутація в гені Ех5У, збільшена експресія білка Ех5У, збільшена експресія білка ВсіІВ, збільшена експресія білка х|сВ, мутація в гені СоїУу, мутація в гені Ех5А або мутація в гені СОТО приводить до появи спор представника сімейства Васійив сегеийв, які мають екзоспорій, який легше видалити зі спори порівняно з екзоспорієм спори дикого типу.
2. Рекомбінантний представник сімейства Вас//Ли5 сегеив5 за 1, де рекомбінантний представник сімейства Вас//и5 сегеих містить мутацію в гені СОЇЕ.
3. Рекомбінантний представник сімейства Вас//их сегеийз за п. 2, де мутація в гені СОЇЕ частково або повністю пригнічує здатність СОЇЕ зв'язувати екзоспорій зі спорою.
4. Рекомбінантний представник сімейства Васі//и5 сегеиз за п. 2, де мутація в гені СОЇТЕ включає нокаут гена СОїЕ або домінантно-негативну форму гена СОїЕ.
5. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Лиз сегеибє за п. 1, де рекомбінантний представник сімейства Вас/их сегеиз експресує білок Ех5У, де експресія білка Ех5У збільшена порівняно з експресією білка Ех5У у представнику сімейства Васі/Лих сегеиз дикого типу в тих самих умовах, і де білок Ех5У містить С-кінцеву мітку, яка містить глобулярний білок.
6. Рекомбінантний представник сімейства Вас//иє сегеи5 за п. 5, де глобулярний білок має молекулярну масу від 25 до 100 кДа.
7. Рекомбінантний представник сімейства Вас//и5 сегеих за п. 5, де глобулярний білок включає зелений флуоресцентний білок (СЕР) або його варіант.
8. Рекомбінантний представник сімейства Васі/и5 сегеив за п. 5, де експресія білка Ех5У, який містить С-кінцеву мітку, яка містить глобулярний білок, пригнічує зв'язування білка Ех5У з його мішенями в екзоспорії.
9. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Лиз сегеибє за п. 1, де рекомбінантний представник сімейства Васійиз сегеиз експресує білок ВсіІВ, де експресія білка ВсІВ збільшена порівняно з експресією білка ВсІВ у представнику сімейства Васійив сегеи5 дикого типу в тих самих умовах.
10. Рекомбінантний представник сімейства Вас//иєх сегеи5 за п. 9, де експресія білка ВсСІВ призводить до утворення нестійкого екзоспорія.
11. Рекомбінантний представник сімейства Васшив5 сегеибє за п. 1, де рекомбінантний представник сімейства Васійиз сегеиз експресує білок х|сВ, де експресія білка ХісВ збільшена порівняно з експресією білка ХісВ у представнику сімейства Васійив сегеи5 дикого типу в тих самих умовах.
12. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Ли5 сегеи5 за п. 11, де експресія білка хісВв Зо викликає формування екзоспорія фрагментарно замість повної структури.
13. Рекомбінантний представник сімейства Васшив5 сегеибє за п. 1, де рекомбінантний представник сімейства Вас/и» сегеив5 містить мутацію в гені Ех5 У.
14. Рекомбінантний представник сімейства Вас//Ли5 сегеи5з за п. 13, де мутація в гені Ех5У включає нокаут гена Ех5У.
15. Рекомбінантний представник сімейства Вас//Ли5 сегеи5з за п. 13, де мутація в гені Ех5У частково або повністю пригнічує здатність Ех5М до повного формування екзоспорія або зв'язування екзоспорія зі спорою.
16. Рекомбінантний представник сімейства Васшив5 сегеибє за п. 1, де рекомбінантний представник сімейства Вас//их сегеив містить мутацію в гені СОГУ.
17. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив сегеи5 за п. 16, де мутація в гені Соїу включає нокаут гена СогуУ.
18. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив сегеи5 за п. 16, де мутація в гені Соїу призводить до утворення нестійкого екзоспорія.
19. Рекомбінантний представник сімейства Васшив5 сегеибє за п. 1, де рекомбінантний представник сімейства Васи» сегеив містить мутацію в гені ЕХ5А.
20. Рекомбінантний представник сімейства Вас//Ли5 сегеи5з за п. 19, де мутація в гені ЕХх5А включає нокаут гена ЕхХ5А.
21. Рекомбінантний представник сімейства Вас//Ли5 сегеи5з за п. 19, де мутація в гені ЕХх5А призводить до формування неміцного екзоспорія.
22. Рекомбінантний представник сімейства ВасшШив5 сегеибє за п. 1, де рекомбінантний представник сімейства Вас/и» сегеив містить мутацію в гені СОЮ.
23. Рекомбінантний представник сімейства Вас//Ли5 сегеи5 за п. 22, де мутація в гені СОЮ включає нокаут гена Со або домінантно-негативну форму гена Со.
24. Рекомбінантний представник сімейства Вас//Ли5 сегеи5 за п. 22, де мутація в гені СОЮ викликає формування екзоспорія смугами.
25. Рекомбінантний представник сімейства Васійи5 сегеиб5 за п. 1, де націлювальна послідовність, білок екзоспорія або фрагмент білка екзоспорія містять: (1) націлювальну послідовність, яка містить амінокислотну послідовність з щонайменше приблизно 43 95 ідентичністю з амінокислотами 20-35 5ЕО ІО МО: 1, де ідентичність з бо амінокислотами 25-35 становить щонайменше приблизно 54 965;
(2) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-35 5ЕО ІО МО: 1;
(3) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-35 5ЕО ІО МО: 1;
(4) націлювальну послідовність, яка містить хЕО ІЮ МО: 1;
(5) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю зЗЗЕБЕОІЮМО:2;
(6) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО ІО МО: 1;
(7) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІО МО: 1;
(8) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІО МО: 1;
(9) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО 10 МО: 1; (10) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО 10 МО: 1;
(11) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-27 5ЕО ІО МО: 3;
(12) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-27 5ЕО ІО МО: 3;
(13) націлювальну послідовність, яка містить зЕО ІЮО МО: 3;
(14) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮО МО: 4;
(15) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 5ЕО ІО МО: З;
(16) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО ІО МО: 3;
(17) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО ІО МО: 3;
(18) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО ІО МО: 3; (19) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-38 5ЕО ІО МО: 5;
(20) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-38 5ЕО ІО МО: 5;
(21) націлювальну послідовність, яка містить зЕО ІО МО: 5;
(22) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮО МО: 6; (23) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38 5ЕО І МО: 5;
(24) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІО МО: 5;
(25) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-38 5ЕО І МО: 5;
(26) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО 10 МО: 5;
(27) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО 10 МО: 5; Зо (28) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-38 5ЕО 10 МО: 5;
(29) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-28 5ЕО ІЮО МО: 7;
(30) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13-28 5ЕО ІО МО: 7;
(31) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 7;
(32) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮО МО: 8;
(33) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-28 5ЕО ІЮО МО: 7;
(34) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО ІЮО МО: 7;
(35) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-28 5ЕО ІЮО МО: 7;
(36) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІО МО: 7; (37) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІЮО МО: 9;
(38) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІЮО МО: 9;
(39) націлювальну послідовність, яка містить зЕО ІО МО: 9;
(40) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з ЗЕО ІЮО МО: 10; (41) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2 -24 5ЕО ІО МО: 9;
(42) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІЮО МО: 9;
(43) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО ІЮО МО: 9;
(44) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-39 БЕО ІО МО: 11;
(45) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО І МО: 11; БО (46) націлювальна послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 11;
(47) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 12;
(48) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 БЕО ІО МО: 11;
(49) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 11; (50) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 11;
(51) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО І МО: 11;
(52) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО І МО: 11;
(53) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-39 БЕО ІО МО: 13;
(54) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО І МО: 13; 60 (55) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 13;
(56) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з ЗЕО ІЮО МО: 14; (57) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 БЕО ІО МО: 13; (58) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 13; (59) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 13; (60) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО І МО: 13; (61) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІО МО: 13; (62) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-43 БЕО ІЮО МО: 15; (63) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 28-43 5ЕО І МО: 15; (64) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 15; (65) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 16; (66) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5БЕО ІО МО: 15; (67) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО ІО МО: 15; (68) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 БЕО ІЮО МО: 15; (69) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІО МО: 15; (70) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО ІЮ МО: 15; (71) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО І МО: 15; (72) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО І МО: 15; (73) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-27 5ЕО ІО МО: 17; (74) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-27 5ЕО ІЮ МО: 17; (75) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 17; (76) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 18; (77) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 5ЕО ІО МО: 17; (78) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО ІО МО: 17; (79) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-27 5ЕО ІО МО: 17; (80) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО І МО: 17; (81) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-39 БЕО ІО МО: 19; Зо (82) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО І МО: 19; (83) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 19; (84) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 20; (85) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 БЕО ІО МО: 19; (86) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5 33 5ЕО ІЮО МО: 19; (87) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 19; (88) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО І МО: 19; (89) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО І МО: 19; (90) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-39 БЕО ІО МО: 21; (91) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО І МО: 21; (92) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 21; (93) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮО МО: 22; (94) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5БЕО ІО МО: 21; (95) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 21; (96) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 21; (97) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО І МО: 21; (98) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО І МО: 21, (99) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІО МО: 23; (100) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО І МО: 23; (101) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 23; (102) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮО МО: 24; (103) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО І МО: 23; (104) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО І МО: 23; (105) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО І МО: 23; (106) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО І МО: 25; (107) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО І МО: 25; (108) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 25;
(109) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 26; (110) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО І МО: 25; (111) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО І МО: 25; (112) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО І МО: 25; (113) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-30 5ЕО І МО: 27; (114) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-30 5ЕО І МО: 27; (115) націлювальну послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 27; (116) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 28; (117) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО І МО: 27; (118) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО І МО: 27; (119) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО І МО: 27; (120) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО І МО: 27; (121) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО І МО: 29; (122) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 29; (123) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 29; (124) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 30; (125) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО І МО: 29; (126) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІЮ МО: 29; (127) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 29; (128) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО І МО: 29; (129) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 29; (130) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО І МО: 31; (131) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО І МО: 31; (132) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 31; (133) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮО МО: 32; Зо (134) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО І МО: 31; (135) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО І МО: 31; (136) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-24 5ЕО І МО: 31; (137) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО ІО МО: 33; (138) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 33; (139) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮО МО: 34; (140) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-16 5ЕО ІО МО: 35; (141) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 35; (142) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 36; (143) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-29 5ЕО І МО: 43; (144) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-29 5ЕО ІЮ МО: 43; (145) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 43; (146) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮО МО: 44; (147) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-29 5ЕО І МО: 43; (148) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-29 5ЕО І МО: 43; (149) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-29 5ЕО І МО: 43; (150) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-29 5ЕО ІЮ МО: 43; (151) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (152) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (153) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 45; (154) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 46; (155) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (156) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (157) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (158) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІЮ МО: 45; (159) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮ МО: 45; 60 (160) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-43 5ЕО І МО: 47;
(161) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 28-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (162) націлювальну послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 47; (163) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 48; (164) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-43 5ЕО І МО: 47;
(165) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-43 5ЕО І МО: 47; (166) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-43 5ЕО І МО: 47; (167) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (168) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-43 5ЕО ІЮ МО: 47;
(169) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-43 5ЕО І МО: 47; (170) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-43 5ЕО ІЮ МО: 47; (171) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-32 5ЕО І МО: 49; (172) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 17-32 5ЕО ІЮ МО: 49; (173) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 49;
(174) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 50; (175) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-32 5ЕО І МО: 49; (176) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-32 5ЕО І МО: 49; (177) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-32 5ЕО І МО: 49;
(178) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-32 5ЕО І МО: 49; (179) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-32 5ЕО ІЮ МО: 49; (180) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІО МО: 51; (181) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 51; (182) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 51;
(183) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮО МО: 52; (184) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 51; (185) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 51; (186) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 51;
Зо (187) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ МО: 51; (188) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 51; (189) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО ІО МО: 53; (190) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5ЕО ІЮ МО: 53; (191) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 53;
(192) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з ЗЕО ІЮО МО: 54; (193) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО ІО МО: 53; (194) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО ІО МО: 53; (195) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-33 5ЕО ІО МО: 53;
(196) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО ІЮ МО: 53; (197) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО ІЮ МО: 53; (198) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-30 5ЕО ІО МО: 55; (199) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (200) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 55;
(201) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 56; (202) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО ІО МО: 55; (203) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-30 5ЕО ІО МО: 55; (204) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-30 5ЕО ІО МО: 55;
(205) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-30 5ЕО ІЮ МО: 55; (206) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (207) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 115-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (208) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 57; (209) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 58; (210) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-130 5ЕО І МО: 57; (211) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-130 5ЕО І МО: 57; (212) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (213) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5ЕО ІЮО МО: 57;
60 (214) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5ЕО ІЮО МО: 57;
(215) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (216) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (217) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 60-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (218) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 70-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (219) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 80-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (220) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 90-130 5ЕО ІЮО МО: 57; (221) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 100-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (222) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 110-130 5ЕО ІЮ МО: 57; (223) фрагмент білка екзоспорія, що містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з ЗЕО ІЮО МО: 95; (224) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 96; (225) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 97; (226) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 98; (227) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 99; (228) націлювальну послідовність, яка містить ЗЕО ІЮ МО: 100; (229) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 101; (230) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 102; (231) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 103; (232) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 104; (233) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 105; (234) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 106; (235) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 108; (236) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 109; (237) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 110; (238) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 111; Зо (239) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 112; (240) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 113; (241) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮО МО: 114; (242) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 115; (243) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 116; (244) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 117; (245) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 118; (246) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 119; (247) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 120; (248) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 121; (249) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 22-31 5ЕО ІЮ МО: 1; (250) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 22-33 5ЕО ІЮ МО: 1; (251) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-31 5ЕО ІЮ МО: 1; (252) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-23 5ЕО ІЮ МО: 3; (253) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-25 5ЕО ІЮ МО: 3; (254) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-23 5ЕО ІЮ МО: 3; (255) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-30 5ЕО ІО МО: 59; (256) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 59; (257) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 60; 60 (258) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-30 5ЕО І МО: 59;
(259) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 4-30 5ЕО ІО МО: 59; (260) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 6-30 5ЕО ІО МО: 59; (261) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-33 5ЕО І МО: 61; (262) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-33 5БЕО ІЮ МО: 61; (263) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 61; (264) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю послідовності з «ЕО ІЮ МО: 62; (265) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-33 5ЕО І МО: 61; (266) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-33 5ЕО І МО: 61; (267) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-33 5ЕО І МО: 61; (268) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-33 5ЕО І МО: 61; (269) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-35 5ЕО ІО МО: 63; (270) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 63; (271) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮО МО: 64; (272) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-35 5ЕО ІО МО: 63; (273) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-35 5ЕО ІО МО: 63; (274) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 8-35 5ЕО ІО МО: 63; (275) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-35 5ЕО ІЮ МО: 63; (276) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-35 5ЕО ІЮ МО: 63; (277) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО І МО: 65; (278) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО І МО: 65; (279) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 65; (280) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 66; (281) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 107; (282) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО І МО: 65; (283) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО І МО: 65; (284) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-27 5ЕО І МО: 67; Зо (285) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-27 5ЕО І МО: 67; (286) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 67; (287) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 68; (288) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-27 5ЕО І МО: 67; (289) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-27 5ЕО І МО: 67; (290) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-27 5ЕО І МО: 67; (291) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-38 5ЕО І МО: 69; (292) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-38 5ЕО ІЮ МО: 69; (293) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО І МО: 69; (294) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 70; (295) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38 5ЕО І МО: 69; (296) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІО МО: 69; (297) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО ІЮ МО: 69; (298) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО ІЮ МО: 69; (299) білок екзоспорія, який містить ЗЕО ІЮ МО: 72; (300) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 73; (301) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 95965 ідентичністю з БЕО ІЮО МО: 74; (302) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-42 5ЕО І МО: 75; (303) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 27-42 5ЕО ІЮ МО: 75; (304) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 75; (305) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 76; (306) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-42 5ЕО І МО: 75; (307) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-42 5ЕО І МО: 75; (308) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-42 5ЕО І МО: 75; (309) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-42 5ЕО ІЮ МО: 75; (310) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-42 5ЕО І МО: 75; 60 (311) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 25-42 5ЕО ІЮ МО: 75;
(312) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-24 5ЕО ІО МО: 77; (313) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-24 5ЕО ІО МО: 77; (314) націлювальну послідовність, яка містить 5ХЕО ІЮ МО: 77; (315) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮО МО: 78; (316) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-24 5ЕО ІО МО: 77; (317) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-24 5ЕО ІО МО: 77; (318) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 80; (319) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-38 5ЕО ІО МО: 81; (320) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-38 5ЕО ІЮ МО: 81; (321) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 81; (322) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮО МО: 82; (323) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-38 5ЕО І МО: 81; (324) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-38 5ЕО ІО МО: 81; (325) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-38 5ЕО ІЮ МО: 81; (326) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-38 5ЕО ІЮ МО: 81; (327) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-38 5ЕО ІЮ МО: 81; (328) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-34 5ЕО ІЮ МО: 83; (329) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 83; (330) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮО МО: 84; (331) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 86; (332) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-28 5ЕО І МО: 87; (333) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13-28 5ЕО І МО: 87; (334) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 87; (335) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 Ко) ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 88; (336) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-28 5ЕО І МО: 87; (337) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО І МО: 87; (338) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО І МО: 87; (339) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-28 5ЕО І МО: 89; (340) націлювальну послідовність, яка містить ХЕО ІЮ МО: 89; (341) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 90; (342) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-28 5ЕО І МО: 89; (343) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 5-28 5ЕО І МО: 89; (344) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-28 5ЕО ІЮ МО: 89; (345) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-93 5ЕО ІО МО: 91; (346) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 91; (347) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮО МО: 92; (348) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-93 5ЕО І МО: 91; (349) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-93 5ЕО ІЮ МО: 91; (350) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-93 5ЕО І О МО: 91; (351) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-93 5ЕО ІЮ МО: 91; (352) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 40-93 5ЕО ІЮ МО: 91; (353) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 50-93 5ЕО ІЮ МО: 91; (354) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 60-93 5ЕО ІЮ МО: 91; (355) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-130 5ЕО ІЮ МО: 93; (356) націлювальну послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 93; (357) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮО МО: 94; (358) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-130 5ЕО ІЮ МО: 93; (359) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-130 5ЕО ІЮ МО: 93; (360) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-130 5ЕО ІЮ МО: 93; (361) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 30-130 5ЕО ІЮ МО: 93;
(362) білок екзоспорія, який містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮО МО: 122; (363) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-33 5ЕО ІЮ МО: 1; (364) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 21-33 5ЕО ІЮ МО: 1; (365) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-31 5ЕО ІЮ МО: 1; (366) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮ МО: 96; (367) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮ МО: 96; (368) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-25 5ЕО ІЮ МО: 3; (369) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13-25 5ЕО ІЮ МО: 3; (370) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-23 5ЕО ІЮ МО: 3; (371) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО І МО: 97; (372) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-13 5ЕО І МО: 97; (373) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-36 5ЕО ІЮ МО: 5; (374) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-34 5ЕО І МО: 5; (375) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 24-36 5ЕО ІЮ МО: 5; (376) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 26-34 5ЕО І МО: 5; (377) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13-26 5ЕО ІЮ МО: 7; (378) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13-24 5ЕО ІЮ МО: 7; (379) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-26 5ЕО ІЮ МО: 7; (380) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 16-24 5ЕО ІЮ МО: 7; (381) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-22 5ЕО ОО МО: 9; (382) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-20 5ЕО ОО МО: 9; (383) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-22 5ЕО ІЮ МО: 9; (384) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-20 5ЕО ІЮ МО: 9; (385) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО 10 МО: 105; (386) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-13 5БЕО 10 МО: 105; (387) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-31 5ЕО ІЮ МО: 11; (388) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-29 5ЕО І МО: 11; (389) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 19-31 5ЕО І МО: 11; Зо (390) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮ МО: 98; (391) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-13 5ЕО ІЮ МО: 98; (392) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-31 5ЕО І МО: 13; (393) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-29 5ЕО ІЮ МО: 13; (394) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 19-31 5ЕО І МО: 13; (395) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 21-29 5ЕО І МО: 13; (396) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО ІЮ МО: 99; (397) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-13 5ЕО ІО МО: 99; (398) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 28-41 5ЕО ІЮ МО: 15; (399) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 28-39 5ЕО ІЮ МО: 15; (400) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 29-41 5ЕО ІЮ МО: 15; (401) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 31-39 5ЕО ІЮ МО: 15; (402) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-25 5ЕО ІЮ МО: 17; (403) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13-25 5ЕО І МО: 17; (404) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО 10 МО: 100; (405) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-31 5ЕО ІЮ МО: 19; (406) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-29 5ЕО І МО: 19; (407) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 19-31 5ЕО ІЮ МО: 19; (408) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 21-29 5ЕО І МО: 19; (409) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-31 5ЕО І МО: 21; (410) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-29 5ЕО ІЮ МО: 21; (411) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 19-31 5ЕО І МО: 21; (412) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 21-29 5ЕО І МО: 21; (413) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО 10 МО: 101; (414) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-13 5ЕО 10 МО: 101; (415) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-22 5ЕО І МО: 23; (416) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-20 5ЕО І МО: 23; (417) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-22 5ЕО ІЮ МО: 23; (418) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-20 5ЕО ІЮ МО: 23; (419) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО 10 МО: 102; 60 (420) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-13 5ЕО 10 МО: 102;
(421) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-22 5ЕО І МО: 25; (422) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-20 5ЕО І МО: 25; (423) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-22 5ЕО ІЮ МО: 25; (424) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-20 5ЕО ІЮ МО: 25; (425) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО 10 МО: 103; (426) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-13 5ЕО 10 МО: 103; (427) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-28 5ЕО ІЮ МО: 27; (428) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-26 5ЕО ІЮ МО: 27; (429) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 16-28 5ЕО І МО: 27; (430) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-26 5ЕО ІЮ МО: 27; (431) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО 10 МО: 104; (432) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-13 5ЕО 10 МО: 104; (433) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-13 5ЕО ІО МО: 33; (434) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-11 5ЕО І МО: 33; (435) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 3-11 5ЕО І МО: 33; (436) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-14 5ЕО І МО: 35; (437) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-12 5ЕО І МО: 35; (438) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 2-14 5ЕО І МО: 35; (439) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-27 5ЕО ІЮ МО: 43; (440) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-25 5ЕО ІЮ МО: 43; (441) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-27 5ЕО ІЮ МО: 43; (442) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-33 5БЕО ІЮ МО: 45; (443) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 20-31 5ЕО І МО: 45; (444) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 21-33 5ЕО ІЮ МО: 45; (445) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО 10 МО: 106; (446) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-13 5ЕО 10 МО: 106; (447) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 28-41 5ЕО І МО: 47; (448) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 28-39 5ЕО ІЮ МО: 47; (449) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-31 5ЕО ІЮ МО: 53; Зо (450) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-29 5ЕО ІЮ МО: 53; (451) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 19-31 5ЕО ІЮ МО: 53; (452) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-31 5ЕО І МО: 61; (453) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 18-29 5ЕО І МО: 61; (454) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 19-31 5ЕО І МО: 61; (455) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-22 5ЕО І МО: 65; (456) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-20 5ЕО І МО: 65; (457) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-22 5ЕО ІЮ МО: 65; (458) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-15 5ЕО ІО МО: 107; (459) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 1-13 5ЕО 10 МО: 107; (460) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-25 5ЕО І МО: 67; (461) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-23 5ЕО І МО: 67; (462) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13-25 5ЕО І МО: 67; (463) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 15-23 5ЕО І МО: 67; (464) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-36 5ЕО ІЮ МО: 69; (465) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-34 5ЕО ІЮ МО: 69; (466) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 24-36 5ЕО ІЮ МО: 69; (467) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 26-34 5ЕО ІЮ МО: 69; (468) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 27-40 5ЕО І МО: 75; (469) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 27-38 5ЕО ІЮ МО: 75; (470) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-22 5ЕО ІО МО: 77; (471) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 9-20 5ЕО ІО МО: 77; (472) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 10-22 5ЕО І МО: 77; (473) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 12-20 5ЕО І МО: 77; (474) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-36 5ЕО ІЮ МО: 81; (475) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 23-34 5ЕО ІЮ МО: 81; (476) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 24-36 5ЕО ІЮ МО: 81; (477) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 26-34 5ЕО ІЮ МО: 81; (478) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13-26 5ЕО І МО: 87; (479) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 13-24 5ЕО ІЮ МО: 87 або 60 (480) націлювальну послідовність, яка містить амінокислоти 14-26 5ЕО ІЮ МО: 87.
26. Рекомбінантний представник сімейства Васі/йи5 сегеибе за п. 25, де націлювальна послідовність містить амінокислотну послідовність з щонайменше приблизно 50 95 ідентичністю з амінокислотами 20-35 5ЕО ІО МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 становить щонайменше приблизно 63 905.
27. Рекомбінантний представник сімейства Васі/йи5 сегеибе за п. 25, де націлювальна послідовність містить амінокислотну послідовність з щонайменше приблизно 62 95 ідентичністю з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 становить щонайменше приблизно 72 905.
28. Рекомбінантний представник сімейства Васі/йи5 сегеибе за п. 25, де націлювальна послідовність містить амінокислотну послідовність з щонайменше приблизно 81 95 ідентичністю з амінокислотами 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 становить щонайменше приблизно 90 95.
29. Рекомбінантний представник сімейства Васі/йи5 сегеибе за п. 25, де націлювальна послідовність або білок екзоспорія містить: (а) амінокислотну послідовність, яка складається з 16 амінокислот і має щонайменше приблизно 43 95 ідентичність з амінокислотами 20-35 5БО ІЮ МО: 1, де ідентичність з амінокислотами 25-35 становить щонайменше приблизно 54 905; (Б) амінокислоти 1-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (с) амінокислоти 20-35 5ЕО ІЮ МО: 1; (8)5ЕО!ІЮО МО: 1; (є) ЗЕО ІЮ МО: 96 або (9 5ЕОІЮ МО: 120.
30. Рекомбінантний представник сімейства Васіиє сегеиб5 за п. 25, де націлювальна послідовність містить ЗЕО ІЮ МО: 96.
31. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Ли5 сегеи5 за п. 25, де білок екзоспорія або фрагмент білка екзоспорія містить амінокислотну послідовність з щонайменше 95 95 ідентичністю з ЗЕО ІЮО МО: 2, 4,6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 44, Аб, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 95, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121 або 122.
32. Рекомбінантний представник сімейства Васіиє сегеивз за п. 1, де націлювальна послідовність, білок екзоспорія або фрагмент білка екзоспорія містять амінокислотну послідовність СХТ на їхніх С-кінцях, де Х є будь-якою амінокислотою.
33. Рекомбінантний представник сімейства Васіиє сегеивз за п. 1, де націлювальна послідовність, білок екзоспорія або фрагмент білка екзоспорія додатково містять залишок метіоніну, серину або треоніну в положенні амінокислоти, яке безпосередньо передує першій амінокислоті націлювальній послідовності, білка екзоспорія або фрагмента білка екзоспорія, або в положенні націлювальної послідовності, яке відповідає амінокислоті 20 5ЕО ІЮО МО: 1.
34. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Лив5 сегеив5 за п. 1, де злитий білок додатково містить амінокислотний лінкер між націлювальною послідовністю, білком екзоспорія або фрагментом білка екзоспорія і білком або пептидом, які представляють інтерес.
35. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив сегеи5 за п. 34, де лінкер містить поліаланіновий лінкер, полігліціновий лінкер або лінкер, який містить суміш залишків як аланіну, так і гліцину.
36. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Лив5 сегеив5 за п. 1, де білок або пептид, який представляє інтерес, містить білок або пептид, який стимулює ріст рослин, білок або пептид, який захищає рослину від патогена, білок або пептид, який підвищує стійкість рослин до стресових впливів, білок або пептид, який зв'язується з рослиною, фермент, який каталізує продукування оксиду азоту, або білок, або пептид, що зв'язує нуклеїнову кислоту.
37. Рекомбінантний представник сімейства Вас//и5х сегеив за п. 36, де білок або пептид, який представляє інтерес, містить білок або пептид, який стимулює ріст рослин.
38. Рекомбінантний представник сімейства Вас//и5х сегеив за п. 37, де білок або пептид, який стимулює ріст рослин, містить пептидний гормон або негормональний пептид.
39. Рекомбінантний представник сімейства Васіив сегеиз за п. 38, де пептидний гормон містить фітосульфокін, сіамаа З (СІМ 3), системін, 2тісЕ або 5СК/5Р 11; або де негормональний пептид містить ККМ 16 О 10, Но-5ум 46, пептид емо 40, мелітин, мастопаран, Мах 7, КНРР, РОГ АКІЗ або інгібітор трипсину Кипії (КТ).
40. Рекомбінантний представник сімейства Васі/и5 сегеив за п. 1, де білок або пептид, який представляє інтерес, містить фермент, залучений в продукування або активацію сполуки, яка стимулює ріст рослин.
41. Рекомбінантний представник сімейства Васі/и5 сегеив за п. 40, де сполука, яка стимулює ріст рослини, містить 2,3-бутандіол або гормон росту рослин, де гормон росту рослин включає цитокінін або похідну цитокініну, етилен, ауксин або похідну ауксину, гіберелову кислоту або похідну гіберелової кислоти, абсцизову кислоту або похідну абсцизової кислоти, або жасмонову кислоту або похідну жасмонової кислоти.
42. Рекомбінантний представник сімейства Васі/ив5 сегеив5 за п. 40, де фермент, залучений в продукування або активацію сполуки, яка стимулює ріст рослин, включає ацетоінредуктазу, індол-3-ацетамідгідролазу, триптофанмонооксигеназу, ацетолактатсинтетазу, а- ацетолактатдекарбоксилазу, піруватдекарбоксилазу, діацетилредуктазу, бутандіолдегідрогеназу, амінотрансферазу, триптофандекарбоксилазу, аміноксидазу, індол-3- піруватдекарбоксилазу, індол-3-ацетальдегідегідрогеназу, оксидазу бічного ланцюга триптофану, нітрилгідролазу, нітрилазу, пептидазу, протеазу, аденозинфосфатізопентенілтрансферазу, фосфатазу, аденозинкіназу, аденінфосфорибозилтрансферазу, СУР 735 А, 5'-рибонуклеотидфосфогідролазу, аденозиннуклеозидазу, зеатин-цис-транс-ізомеразу, зеатин-О-глюкозилтрансферазу, - р- глюкозидазу, цис-гідроксилазу, цис-гідроксилазу СК, М-глюкозилтрансферазу СК, 2,5- рибонуклеотидфосфогідролазу, аденозиннуклеозидазу, пуриннуклеозидфосфорилазу, зеатинредуктазу, гідроксиламінредуктазу, 2-оксоглутаратдіоксигеназу, о гіберелову 2В/3В гідролазу, гібералін-3-оксидазу, гібералін-20-оксидазу, хітозаназу, хітиназу, Д-1,3-глюканазу, ВД- 1,4-глюканазу, Д-1,6-глюканазу, дезаміназу аміноциклопропан-1-карбонової кислоти або фермент, залучений в продукування фактора лой.
43. Рекомбінантний представник сімейства Васі/и5 сегеи5 за п. 42, де фермент, залучений в продукування або активацію сполуки, яка стимулює ріст рослин, включає протеазу або пептидазу, яка розщеплює білки, пептиди, пробілки або препробілки з утворенням біологічно активного пептиду, де протеаза або пептидаза включає субтилізин, кислу протеазу, лужну протеазу, протеїназу, ендопептидазу, екзопептидази, термолізин, папаїн, пепсин, трипсин, проназу, карбоксилазу, серинову протеазу, глутамінову протеазу, аспартатну протеазу, цистеїнову протеазу, треонінову протеазу або металопротеїназу.
44. Рекомбінантний представник сімейства Васі/их5 сегеив за п. 1, де білок або пептид, який Зо представляє інтерес, містить фермент.
45. Рекомбінантний представник сімейства Вас//Лиз сегеих за п. 1, де фермент включає фермент, який деградує або модифікує джерело поживних речовин бактерій, грибів або рослин.
46. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив сегеи5 за п. 44, де фермент включає целюлазу, ліпазу, лігніноксидазу, протеазу, глікозидгідролазу, фосфатазу, нітрогеназу, нуклеазу, амідазу, нітратредуктазу, нітритредуктазу, амілазу, оксидазу аміаку, лігніназу, глюкозидазу, фосфоліпазу, фітазу, пектиназу, глюканазу, сульфатазу, уреазу, ксиланазу або хітозаназу.
47. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив сегеиє5 за п. 46, де фермент включає фосфоліпазу, і фосфоліпаза включає фосфоліпазу А71, фосфоліпазу А2, фосфоліпазу С, фосфоліпазу О або лізофосфоліпазу.
48. Рекомбінантний представник сімейства Васі/ив5 сегеив за п. 47, де фосфоліпаза включає фосфоліпазу С, і фосфоліпаза С містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 905 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 312.
49. Рекомбінантний представник сімейства Васі/ив5 сегеив за п. 47, де фосфоліпаза включає фосфоліпазу С, і фосфоліпаза С містить амінокислотну послідовність з щонайменше 95 90 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 312.
50. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Лих5 сегеив5 за п. 47, де фосфоліпаза включає фосфоліпазу С, і фосфоліпаза С містить амінокислотну послідовність з щонайменше 98 905 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 312.
51. Рекомбінантний представник сімейства Васі/и5 сегеив5 за п. 47, де фосфоліпаза включає фосфоліпазу С, і фосфоліпаза С містить амінокислотну послідовність з 100 95 ідентичністю з ЗЕО І МО: 312.
52. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Лиз5 сегеиб за п. 46, де фермент включає целюлазу, і целюлаза включає ендоцелюлазу, екзоцелюлазу або р-глюкозидазу.
53. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Ли5 сегеиб5 за п. 52, де целюлаза включає ендоцелюлазу, і ендоцелюлаза включає ендоглюканазу.
54. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Ли5 сегеиб5 за п. 52, де целюлаза включає ендоцелюлазу, і ендоцелюлаза включає ендоглюканазу Васшйив зи, ендоглюканазу ВастШив Іпигіпдіепвзіз, ендоглюканазу Вас//их сегеиз або ендоглюканазу Васйиз сіаийвії.
55. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Ли5 сегеиб5 за п. 54, де целюлаза включає ендоглюканазу Васійиє 5ирійй5, і ендоглюканаза Васійив 5иріййе містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 311.
56. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Ли5 сегеиб5 за п. 54, де целюлаза включає ендоглюканазу Васійи5 вирій, і ендоглюканаза Васшив5 5ибБіййє містить амінокислотну послідовність з щонайменше 95 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 311.
57. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Ли5 сегеиб5 за п. 54, де целюлаза включає ендоглюканазу Васійиє 5ирійй5, і ендоглюканаза Васійив 5иріййе містить амінокислотну послідовність з щонайменше 98 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 311.
58. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Ли5 сегеиб5 за п. 54, де целюлаза включає ендоглюканазу Васійиє 5ирійй5, і ендоглюканаза Васійив 5иріййе містить амінокислотну послідовність з 100 95 ідентичністю з ЗЕО ІЮ МО: 311.
59. Рекомбінантний представник сімейства Вас//и5 сегеийз за п. 46, де фермент включає ліпазу, і ліпаза включає ліпазу Васійив зирійв5, ліпазу Васійив5 Іпипіпдіепвів, ліпазу Васійи5 сегеив або ліпазу Вастиз сіаийсвії.
60. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив сегеиє5 за п. 46, де фермент включає оксидазу лігніну, і оксидаза лігніну включає пероксидазу лігніну, лаказу, гліоксальоксидазу, лігніназу або марганцеву пероксидазу.
61. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив сегеиє5 за п. 46, де фермент включає протеазу, і протеаза включає субтілізин, кислу протеазу, лужну протеазу, протеїназу, пептидазу, ендопептидазу, екзопептидазу, термолізін, папаїн, пепсин, трипсин, проназу, карбоксилазу, серинову протеазу, глутамінову протеазу, аспартатну протеазу, цистеїнову протеазу, треонінову протеазу або металопротеїназу.
62. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив сегеиє5 за п. 46, де фермент включає фосфатазу, і фосфатаза включає гідролазу складних моноефірів фосфорної кислоти, фосфомоноестеразу, гідролазу складних діефірів фосфорної кислоти, фосфодіестеразу, гідролазу складних моноефірів трифосфорної кислоти, фосфорилангідридгідролазу, пірофосфатазу, фітазу, триметафосфатазу або трифосфатазу.
63. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив сегеи5 за п. 62, де фермент включає Зо фосфомоноестеразу, і фосфомоноестераза включає РПоА 4; або, де фермент включає фітазу, і фітаза включає фітазу Васі/лив вирій ЕЕ 148 або фітазу Вастиз Іпигіпдіепві5 ВТ 013 А.
64. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив сегеиє5 за п. 46, де фермент включає нітрогеназу, і нітрогеназа включає нітрогеназу сімейства Мії.
65. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив сегеиє5 за п. 46, де фермент включає хітозаназу, де хітозаназа містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з ЗЕО ІЮ МО: 313.
66. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив сегеи5 за п. 46, де фермент включає хітозаназу, де хітозаназа містить амінокислотну послідовність з щонайменше 95 95 ідентичністю з ЗЕО ІЮ МО: 313.
67. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив сегеиє5 за п. 46, де фермент включає хітозаназу, де хітозаназа містить амінокислотну послідовність з щонайменше 98 95 ідентичністю з ЗЕО ІЮО МО: 313.
68. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив сегеиє5 за п. 46, де фермент включає хітозаназу, де хітозаназа містить амінокислотну послідовність з 100 95 ідентичністю з 5ЕО 10 МО: 313.
69. Рекомбінантний представник сімейства Васі/ив5 сегеив за п. 36, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає білок або пептид, який захищає рослину від патогена.
710. Рекомбінантний представник сімейства Вас//их5х сегеив за п. 69, де білок або пептид, який захищає рослину від патогена, включає білок або пептид, який підсилює імунну систему рослин.
71. Рекомбінантний представник сімейства Вас//иєх сегеив за п. 70, де білок або пептид, який підсилює імунну систему рослин, включає гарпін, гарпін-подібний білок, с-еластин, Д-еластин, системін, фенілаланінаміакліазу, еліцитин, дефензіни, криптогеїн, білок флажеліну або пептид флажеліну.
712. Рекомбінантний представник сімейства Вас//их5х сегеив за п. 69, де білок або пептид, який захищає рослину від патогена, проявляє антибактеріальну активність, протигрибкову активність, або як антибактеріальну, так і протигрибкову активність; або, де білок або пептид, який захищає рослину від патогена, проявляє інсектицидну активністю, гельмінтицидну активністю, пригнічує хижацтво комах або хробаків, або їхню комбінацію.
73. Рекомбінантний представник сімейства Вас//их5х сегеив за п. 72, де білок або пептид, який 60 захищає рослину від патогена, включає бактеріоцини, лізоцим, пептид лізоциму, авідин,
стрептавідин, нерибосомальний активний пептид, кональбумін, альбумін, лактоферин, пептид лактоферину, ТазА, інсектицидний бактеріальний токсин, ендотоксин, токсин Сгу, інгібуючий протеазу білок або пептид, цистеїнову протеазу або хітиназу.
14. Рекомбінантний представник сімейства Вас//и5х сегеив за п. 73, де білок або пептид, який захищає рослину від патогена, включає інсектицидний бактеріальний токсин, і інсектицидний бактеріальний токсин включає інсектицидний токсин МІР; де білок або пептид, який захищає рослину від патогена, включає інгібуючий протеазу білок або пептид, і інгібуючий протеазу білок або пептид включає інгібітор трипсину або інгібітор протеази агоу/пеай; або, де білок або пептид, який захищає рослину від патогена, включає токсин Сгу, і токсин Сту включає токсин Сту з Васійи5 ІПигіпдіепвів.
75. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Ли5 сегеив за п. 74, де токсин Сту включає токсин Сту з Васійи5 Іпигіпдіепвів, і токсин Сту, що включає токсин Стгу з Васшив (Пиппдіепвів, включає білок Сгу 5 В або білок Сгу 21 А.
716. Рекомбінантний представник сімейства Вас//их5х сегеив за п. 69, де білок або пептид, який захищає рослину від патогена, включає фермент.
77. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Лиз сегеих за п. 76, де фермент включає протеазу або лактоназу, де протеаза або лактоназа є специфічною до бактеріальної сигнальної молекули гомосерину.
78. Рекомбінантний представник сімейства Васійив сегеив5 за п. 76, де фермент є специфічним до клітинного компонента бактерії або гриба, де фермент включає р-1,3-глюканазу, В-1,4- глюканазу, Д-1,6-глюканазу, хітозаназу, хітиназу, хітозаназо-подібний фермент, літиказу, пептидазу, протеїназу, протеазу, мутанолізин, стафолізин або лізоцим.
719. Рекомбінантний представник сімейства Вас//и5х сегеив за п. 36, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає щонайменше один білок або пептид, який підвищує стійкість рослини до стресів.
80. Рекомбінантний представник сімейства Вас//их5х сегеив за п. 79, де білок або пептид, який підвищує стійкість рослини до стресів, включає фермент, який деградує сполуки, які обумовлюють стрес, де сполуки, які обумовлюють стрес, включають аміноциклопропан-1- карбонову кислоту (АСС), активні форми кисню, оксид азоту, оксиліпін, фенол або їхню Зо комбінацію.
81. Рекомбінантний представник сімейства Вас//их сегеив за п. 80, де білок або пептид, який підвищує стійкість рослини до стресів, включає фермент, який деградує сполуки, які обумовлюють стрес, і фермент включає супероксиддисмутазу, оксидазу, каталазу, дезаміназу аміноциклопропан-1-карбонової кислоти, пероксидазу, антиоксидантний фермент або антиоксидантний пептид.
82. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив сегеиз за п. 81, де фермент, який деградує сполуки, які обумовлюють стрес, включає супероксиддисмутазу, де супероксиддисмутаза включає супероксиддисмутазу 1 (ЗОБА 1) або супероксиддисмутазу 2 (БОБА 2).
83. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Ли5 сегеи5 за п. 82, де супероксиддисмутаза містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 155 або
156.
84. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Ли5 сегеи5 за п. 82, де супероксиддисмутаза містить амінокислотну послідовність з щонайменше 95 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 155 або
156.
85. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Ли5 сегеи5 за п. 82, де супероксиддисмутаза містить амінокислотну послідовність з щонайменше 98 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 155 або
156.
86. Рекомбінантний представник сімейства Васі/Ли5 сегеи5 за п. 82, де супероксиддисмутаза містить амінокислотну послідовність з 100 95 ідентичністю з БЗЕО ІЮ МО: 155 або 156.
87. Рекомбінантний представник сімейства Вас//их5х сегеив за п. 79, де білок або пептид, який підвищує стійкість рослини до стресів, включає білок або пептид, який захищає рослину від стресових впливів зовнішнього середовища, де стресові впливу зовнішнього середовища включають посуху, повінь, спеку, заморозки, сіль, важкі метали, низькі значення рН , високі значення рН або їхню комбінацію.
88. Рекомбінантний представник сімейства Вас//их5х сегеив за п. 87, де білок або пептид, який захищає рослину від стресових впливів зовнішнього середовища, включає білок, який індукує формування мікрокристалів льоду, проліназу, фенілаланінаміакліазу, ізохоризматсинтазу, ізохоризматпіруватліазу або холіндегідрогеназу.
89. Рекомбінантний представник сімейства Васі/и5 сегеи5 за п. 36, де злитий білок включає 60 щонайменше один білок або пептид, який зв'язується з рослиною.
90. Рекомбінантний представник сімейства Вас//их сегеив за п. 89, де білок або пептид, який зв'язується з рослиною, включає адгезин, рікадгезин, флажелін, омптин, лектин, експансин, структурний білок біоплівки, ТазА, МцаВв, білок пілуса, білок завитка, інтимін, інвазини, аглютинін, афімбріальний білок.
91. Рекомбінантний представник сімейства Вас//и5х сегеив за п. 36, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає фермент, який каталізує продукування оксиду азоту.
92. Рекомбінантний представник сімейства Васі/ив5 сегеив за п. 91, де фермент, який каталізує прокування оксиду азоту, включає синтазу оксиду азоту або аргіназу.
93. Рекомбінантний представник сімейства Васі/ив5 сегеив за п. 92, де фермент, який каталізує продукування оксиду азоту, включає синтазу оксиду азоту, де синтаза оксиду азоту включає синтазу оксиду азоту з Васі/ив Іпигіпдіепвіз або синтазу оксиду азоту з Васі/ив5 зирійів.
94. Рекомбінантний представник сімейства Васі/и5 сегеи5 за п. 93, де синтаза оксиду азоту включає синтазу оксиду азоту з Васійиз Іпигіпдіепвзіз ВТ 013 А або Васійих зи 168.
95. Рекомбінантний представник сімейства Васі/и5 сегеи5 за п. 81, де синтаза оксиду азоту містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з 5ЕО ІЮ МО: 260 або
281.
96. Рекомбінантний представник сімейства Васі/и5 сегеи5 за п. 81, де синтаза оксиду азоту містить амінокислотну послідовність з щонайменше 95 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 260 або
281.
97. Рекомбінантний представник сімейства Васі/и5 сегеи5 за п. 81, де синтаза оксиду азоту містить амінокислотну послідовність з щонайменше 98 95 ідентичністю з БЕО ІЮ МО: 260 або
281.
98. Рекомбінантний представник сімейства Васі/и5 сегеи5 за п. 81, де синтаза оксиду азоту містить амінокислотну послідовність з 100 95 ідентичністю з БЗЕО ІЮ МО: 260 або 261.
99. Рекомбінантний представник сімейства Вас//и5х сегеив за п. 36, де білок або пептид, який представляє інтерес, включає білок або пептид, який зв'язує нуклеїнові кислоти.
100. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив5 сегеив за п. 99, де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнові кислоти, включає білок Нід або малий розчинний в кислоті білок спори (5АБ5Р).
101. Рекомбінантний представник сімейства Вас//и5 сегеиз за п. 100, де БАР включає ЗАЗ5Ра, 5А5РВД або ЗА5РУ.
102. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив5 сегеив за п. 99, де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнові кислоти, містить амінокислотну послідовність з щонайменше 85 95 ідентичністю з будь-якої з ЗЕО ІЮ МО: 264-266.
103. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив5 сегеив за п. 99, де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнові кислоти, містить амінокислотну послідовність з щонайменше 95 95 ідентичністю з будь-якої з ЗЕО ІЮ МО: 264-266.
104. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив5 сегеив за п. 99, де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнові кислоти, містить амінокислотну послідовність з щонайменше 98 95 ідентичністю з будь-якої з ЗЕО ІЮ МО: 264-266.
105. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив5 сегеив за п. 99, де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнові кислоти, містить амінокислотну послідовність з 100 95 ідентичністю з будь-якої з ЗЕО ІЮ МО: 264-266.
106. Рекомбінантний представник сімейства Васійиє сегеив5 за п. 99, де злитий білок містить ЗЕО ІЮ МО: 267, 268 або 269.
107. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив5 сегеив за п. 99, де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнові кислоти, включає нуклеазу, яка має інактивований активний центр.
108. Рекомбінантний представник сімейства Васі/и5 сегеив5 за п. 99, який додатково містить молекулу нуклеїнової кислоти, зв'язану з білком або пептидом, який зв'язує нуклеїнову кислоту, де молекула нуклеїнової кислоти включає модулюючу молекулу РНК; молекулу РНК;; мікроРНК; аптамери; або молекулу ДНК, яка кодує модулюючу молекулу РНК, молекулу РНК;, мікроРНК або аптамери.
109. Рекомбінантний представник сімейства Вас//их сегеизх за п. 1, який відрізняється тим, що рекомбінантний представник сімейства Вас/Шиз сегеив включає Васійи5 апінгасів, Васійи5 сегеийв, Васійи5 Іиппдіепзіх, Васійи5 тусоіде5, Васійй5 рзеидотусоїде5, Васійи5 з5затапії, Васійи5 даетокепвівх, Васпиз шеїпепзіерНепвів, Васійиз іоуоіепвів або їхню комбінацію.
110. Рекомбінантний представник сімейства Вас/ив5 сегеив за п. 109, який відрізняється тим, що рекомбінантний представник сімейства Васі/Лих сегеиз включає Васіййи5 тусоїбез ВТ 155 МАНІ. Мо. В-50921, Васілих тусоіїдез ЕЄ118 МАНІ Мо. В-50918, Васивє тусоїде5 ЕЕТ1АТ1 МАНІ. 60 Мо. В8-50921, Васійих тусоїдехз ВТ46-3 МАНІ. Мо. В-50922, представник сімейства Васшйив5 сегеив
ЕЕТ28 МАНІ Мо. В-50917, ВасшШив Іигіпдіепвіє ВТО1ЗА МАНІ Мо. В8-50924, представник сімейства Васіих сегеих ЕЕЗ349 МАВ Мо. В-50928; представник сімейства Васив сегеив ЕЕ- во0377 МАНІ. В-67119; Васілих рзхеидотусоїдез ЕЕ-800366 МАНІ. В-67120; Васіли5 тусоїіде5 ЕЕ- 800363 МАВІ. В-67121; представник сімейства Васілих сегеиз ЕЕ439 МАНІ 8-50979; Васштив Іпипіпдіепвіє ЕЕ417 МАНІ В-50979; Васіи5 сегеих ЕЕ444 МАНІ В-50977; Вастив (пигіпдіепвів ЕЕЗ319 МАВ. В-50983 або Вас/из Іпигіпдіепвіз ЕЕ-800184 МАВ В-67122.
111. Рекомбінантний представник сімейства Вас//их сегеизх за п. 1, який відрізняється тим, що рекомбінантний представник сімейства Вас//их сегеих додатково містить інактивуючу мутацію в його гені ВСІА.
112. Рекомбінантний представник сімейства Васійив5 сегеив за п. 111, де інактивуюча мутація в гені ВСІА включає нокаут гена ВСІА.
113. Склад для зміни фенотипу рослини, який містить фрагменти екзоспорія, що походять із спор рекомбінантного представника сімейства ВасіЛи5 сегеиб5 за будь-яким з пп. 1-112, і прийнятний з точки зору сільського господарства носій.
114. Покриття насіння рослини, яке містить фрагменти екзоспорія, що походять із спори рекомбінантного представника сімейства Васійив сегеив за будь-яким з пп. 1-112.
115. Спосіб стимулювання росту рослин, який включає: внесення фрагментів екзоспорія в середовище для росту рослин; або нанесення фрагментів екзоспорія на рослину, насіння рослини або ділянку, яка оточує рослину або насіння рослини; де фрагменти екзоспорія походять із спори рекомбінантного представника сімейства ВасшШив сегеиз за будь-яким з пп. 1-112 і містять злитий білок, і злитий білок містить стимулюючий ріст рослин білок або пептид.
116. Спосіб захисту рослини від патогена або підвищення стійкості рослини до стресів, який включає: внесення фрагментів екзоспорія в середовище для росту рослин; або нанесення фрагментів екзоспорія на рослину, насіння рослини або ділянку, яка оточує рослину або насіння рослини; де фрагменти екзоспорія походять зі спори рекомбінантного представника сімейства ВасшШив Ко) сегеив за будь-яким з пп. 1-112 і містять злитий білок, і злитий білок містить білок або пептид, який захищає рослину від патогена, або білок або пептид, який підвищує стійкість рослини до стресів.
117. Спосіб іммобілізації фрагментів екзоспорія на рослині, який включає: внесення фрагментів екзоспорія в середовище для росту рослин; або нанесення фрагментів екзоспорія на рослину, насіння рослини або ділянку, яка оточує рослину або насіння рослини; де фрагменти екзоспорія походять зі спори рекомбінантного представника сімейства ВасшШив сегеих за будь-якого з пп. 1-112 і містить злитий білок, і злитий білок містить білок або пептид, який зв'язується з рослиною.
118. Спосіб стимулювання проростання насіння рослини, який включає: внесення фрагментів екзоспорія в середовище для росту рослин; або нанесення фрагментів екзоспорія на насіння рослини або ділянку, яка оточує рослину або насіння рослини; де фрагменти екзоспорія походять зі спори рекомбінантного представника сімейства ВасшШив сегеих за будь-яким з пп. 1-112 і містять злитий білок, і злитий білок містить супероксиддисмутазу або фермент, який каталізує продукування оксиду азоту.
119. Спосіб доставляння нуклеїнових кислот в рослину, який включає: внесення фрагментів екзоспорія в середовище для росту рослин; або нанесення фрагментів екзоспорія на рослину, насіння рослини або ділянку, яка оточує рослину БО або насіння рослини; де фрагменти екзоспорія походять зі спори рекомбінантного представника сімейства ВасшШив сегеив за будь-яким з пп. 1-112 і містять злитий білок, і злитий білок містить білок або пептид, який зв'язує нуклеїнові кислоти, і де білок або пептид, який зв'язує нуклеїнові кислоти, пов'язаний з молекулою нуклеїнової кислоти.
ов пп п о п п о пп пп п п п п о п п п п п пі п п пп п оп п по пп пп пп пп п п іп в поеми УЯВУ най т Кт і ї жо Чи ОІД ТНчЧНІСТЬ. Ї че Іа ві Н ща УЖЕ РО оз м. ї Н мМипнвижиноОюМЕКоКилАВАВНИМЦУЄЕТЕВІ КИТИ Зм НК Н Аа я Н Я ДОД ОП сот оо я І МЛ а п З КН КИ пі. век Н Ганни уч тот оте я тт ОТУТ ТУТ ТТ УТ У У туя рення птн пидтентнння і МУКУ КОЗКІКЕКІЛІМЕКХЬВО УТ Е ВВ У МУ шах н МЕНІ ОНКО Ки вІ ВТ вх зу Й ОКА Н МИБИБЛ ХАНЕНКІВ ЗИ ЗЕ Юм і оо і М М Ки іонів еесвавчя саговаюсто сп Н они КК КО и В ВЕ ШКЯ зр. ж МИЮТЬ нн и вк НИ а пає питне Н о о и Ки ЕК У в а а в ЗВАННЯ Н що, я лох : МІЙКОКЕМИЕшКИСММрЕКИРКВКИКІ ВКМ ДЛ РИБ т.х СКК ї ! ЕН В фл ШТ. Н ! ЕК о Ин вик А ШУ ЕД ЕЗНЯ Н п ВНД естерів не нн ! МЕНКВОМИКІВН МИНА МЕ КИ рКА ЕК ТК ВОЕТК-Мх ТИ : Н СДН КО і Її : нн а В ПД нон НН НЕ п і ИМЕНИ Не іме і п в ОН о нн М я В НКИ ЗА і МОЩЕТИсІАКМСВК КК ТЕ, хе НЕ 1 ! ЕН и а Я Пе ТЛО Кх Н поч ОВО нн МОМ З МД Н УКОЕМЖЕЦКХ МУ ТАМ АВМ ВК Я Ї Ех ро. Н Енн нні вві кн пінні пи пнів пі пн нн п КК КН он вк ск нн ми вав пато плімвмвввввнмя Н Мати КІтУанеюВ КТК У ОК |! ТОЖ рок Н ном и Кк М Дн о п п Н МОНЕТОЮ ї Лк аех фо.» Н ПОП Й осо то ИН СПД Сан пл Н МІОРЕМеСКТКВЕІВОВІВІ КК КЗ 14.55 і нн до і М нн п Н МОПЕМІБВСсКЕЖКЕНВИУВеВВІНЕТЕвиХЕЕІ Ми ВХ УВО КЕ 1. Н мана а а а а а а КН ОМ ВОАС іосьсоссоо со о ПОВНА ЗА КОД КОД Н МЗС КМКІ Ср ОшАКВМВЕМьК КЕКВ МИ Я ВУ НАЧИННЯ ї фунт ААААААА НААН АКА НЯ НАУКА НААН ля У ММ у дим уми повних пон Н МЕнЕИКЕННЕмІшКиМНЕМиИКкіКкнІрІВОоМУуЕ Ів ху ГУ ея Бл ! нн а ІНК ла В и А В Н міаклиокшноЗикіи ІВ ТЕТ Я х ХОМ НЕЕННЕ и Н Не о ОО о ОО сов о оозод осо ВИН ЗІ ад МИ Н З В ЗИ т. ШЕ ФО МУ і п а ЙО ДА В ДО сосок ВНИМ ЧИ опо Кк Е МАБКОНКАЮШНОУ ТМ МЕККА ХЕ І :нх А ї Її АН и А ШО х УМХ й ! і МВТ ОКИХУкНУ и УМІ ик Кух КАК ОНаВа М КАН ї 7 пт.ах У Н ПИЕЖЖ КУН ЮМ МИХ УВУ КОН КІПОК и вкеньк Же : чне 1А ! РЕЖ | ле а ! Н 0-8 М Й ЧИЯ . у Н РО» 0 ВажвтнчНнтТЕ х денти чить Зі ' ї пот п сУх і ЦЕХ май М ранянях паж ВАЖАААААААК ВВ ТВВВВВ В КУКА АААААЛ КТ ТЯ ее УК у и моні маавван коми инн Полная Н М ХУ ВК ТМВВКОПеЛОЮКЕНяКеУ БЕКЕБІМКХ І Х ХХ Мах КЕ нн и нн ни ння і МАННА МІХ КВН КОЖУХ НЕСеНЯ М.Х. знос оно о по о КН и нн нн В ни Уж п с чн Н ММК КПК ВЕдЕНЕИМОВЕ ХК КВК КХ Що ДОВ ВУ ту у І У ІІТ пер нини зів ода о ав і МОММНИТНИЬНУМЕКООВ АЮ ВЕТО Ж ВА ке еня раБох Н Н рас Ко вогі Я і ! ен нн нн нн нн вон нки мн т мання мс нон ! МИКОЛИ БАХМеУВеХМеРМЕВЕКИ ОО п ЩО фати І фошннннтннттттчаннттттиті ен двиддтаннт ти тт пптацнл тт дАААА тт ттт т Аа птн ч в с Н МЕШКМЕХОСВМЕМиМьХшевоКеКТе і В хи РУХ і Н МОПюМЕККУМиМ МАКАР ЬЕТО І У ж ная Н і денне Я Н Н ооо опо в Мо рн нм поз рн зар мон мм Н ВаКксБЕМсСиКХКНКІВЕНИВ ЇСТЕ ТІ рення тБІ.КЗ есе оон но нн но Пн ВИН і МИЕККИАММИВУиХОРЕМОВгО ЕК І АБ. РЕ У : Й Я Р СЯ ред. Н уки т ТК ТТ У я Н МЕТЯМЖУТМЕАВМКВУСІ НУК ВЕК Ми ие ВЕУ УМ НУК Н Н олово лввввваньнио ї Й шо і ї Н і Н Н нен и п п п т и а В М и в п па Н МюБІспЖТМІВввьматьвАХВектТЬкКО Ех | пон Н СЕК ьяя Н ін в в али моно ни оц нн зи нн Зак они низ ном : МЕБАОММЕКОПАІ НЕК Х ЕР ВЕХКвеМрИКИИх ЯМИ НЕ СЯ Н зн мн пиво новнннн оо око і пн ур ший Му тином пряме гегежнтяя ! МУКУМЕЦМЦКиКІКАВООИН ЕКО УВКЖЕКрИ ВЕК НХ щих. роя ; наш НН НН а а ов чи в птн - Н МЕНЕ КАКІКИ ОКУ УМ В ВУ Б. Мх В, рон аААА ння КУНА АНА У КА КААААААААХНАНЯя п в в НК в НК ПК ПД АЛ ен м ААААВАААААААХ т Н ВОЗ и У КК КИ З ЗК и КК НС ШЕ УАЧеЯ п. : ЛАДА АлА ля тнААхАчАя і нки п и и и ик п ВД МИ о па ! МИНЕ КОМУН ЕКМІШеРЕВУБЕКІ ТО В Зам З. нн и п пп п п нн и в нн пн Н МКНМІДПАП МЕМ ОрЕМІОКТЕВІКЕВУ Ех З ох йпауши Н МЕЗЕЧТАЛКА КЕКВ ММЕВНМІ КУМ: 1 3 М.Х ЗО,йх ПМЖ ІТІМЕУТуХ КУ ГОМ ИМЕНИ ав она А А и нн нн нн ння РОМЕКБЕЖККНЕМ ЗУ ВУЧВКУМІ МИХ МИЛОЮ Е УКХ им МКоІ м ККАНМИ А РО в. ІОПБЕЕТУХСТМЕУЕУЮУРТУ ХМК МУСИМО АНІ МЬТИОРЬВХ ВВЕ ТТ і Н Н роса ла та оса Н і «Кс чЧНк. ІВ д В С и иа я її сє 000 вв Й и с 0 к0й00000000Й0ЙйЙй000ЙйЙйЙ кЕжж с 6 й6ййЙЙЙЦМЦМЙЦМЦНСЦСЦСЦОССЦСЦСЦС-( А ' ДЗ ПО ОН Я ВН с 5 В и Йо и (А 1 Фе З : Середня інтененанієть на спору пе 15 Е рн 0 шен см "т Пон - «Б з ше ШИНИ пул ПЕЛОЖНЕВОЯ я : Контраль ЗАква зак ;
Фк.
же о Й ОХ о З о с М т п Бооох с с ОО МИ КК о о. я Ії КЕ КЕ З о. я о ТК о о с. о о
З. ОХ о Я я п с о о. ЇЇ МОЖЕ ЗХ СКоХ МК С КК КОХ о пе КЕН КК КИНЕ о Зх с о о. Ме КО о. о. ЗМ М о. І с о с ТК о. -- БО о их Ж о с ЩЕ А с 5 У 7 яти г г 7 ліні с ЕЕ ОХ е о. М о. х о с ках ЕК З КО ОХ ПУ о Ме С о. с. КО с ЗУ о о. о о» с о. с с . НН о ЗХ КЕ А ММ о ж хх я г В о у с С 5 ЛИХ о ох о Он Дт Зо с п ее ЕЕ вон С ОХ г щу 0: ще щнк Сех З с т КЕ ЗО вн ОО хх о о г ОБОВ Бе ох с г ; с о З г Бо с су с М Б. З с щі кущ ПЕ ен ПШОЕ ПШХ 5 о. же о - с Іл» ПІЕ о. ПІ с Ох ще п ня с с Д в с ж о не о ОХ ОЗ 1 с Ле о я с о ще с с о ет с в о КО с с ТК о с п о с я у с т с. с КК ПИ КИ же ОХ о. ЛК хх СХ З т п о С с ОХ о. КК и Ох ОЗ о. у о. ОВ г о З с КЕ У с «
ПА 12 6325 Сг
С
. о ОХ СХ ха А ХХ о хх ОО
. о о хх
Фіг. 5 ов рення ї : Н ЩЕ о. . Її є : о. :
А о. ше ЕЕ с ОО ШЕ о о : Е о М о. і і Конурольов спори дяк ок хо ла Зераимевв е : те СЕ дане Дерев : Фе Н : ВЕ о Ма во . . і ї ВИДИ щі Н я о. КО ЩЕ ТЕ о. . шо Ціютьх хз; Н и щ щ що НИ вк о о и шщ щ що щ Копиениванія перннцу
Фе.
Активність фосфатази ВЕР і і і : : : : ї К З х Я ї . Е Е . і КУ ї К Я : ох о. хх і і З Х їх Її В 5 Я ї ж с ; 1 ХУ СОЯ ї 3 і ще Б Н ї і В : ї : ОСОБ : І А ЗОВ : ї 3 КО Я 1 х І Б ОЗ Я і ОМ М: ВОМ ї і о Я М 1 ЕВ! сефнннняянннннн- ВВ МНК нн вин ннонаннвенни Дня і 4 Ж га З3 є с З 3 Зх. с М :
В. Мусодціе: В155 В. Мусодіез ВІЗ ї ; ч 1 - ЛерС : ра а а НН В
Фр. З і ! Активність «ндоглюканази і щха пути тен Кононенка нннякнх і ! ! і : пят і Ї я КЕ ут и т о мшшшшмшшмшлшлшлшмшшмшмммм мм мм о овен : : ' Я і : | о 3 ше -ШН і жив с ; В ср тт С іш | ша ; ЖЖ пре нн ВНС : Е ОК ВО ВО і ї ї ПОКИ В ППКП КОКЕ ик Н тр Я І І і Н Н ? Влишівдевців ВТБЕЗІВСО З ВТК ЗІЗ Я ВЕ Я СОН. Ї вза і
«г. 9
ЕЕ
ХК 6325 с о. о.
п. о. . о. ОБО о. о. пек о. о. о попе с с о. о с о. о. о. о. г с ОМА с ОКХ о. ХХ ОХ ОКХ ХХХ ОК у о. о. о. ОО о. що о. с. о. Е о о о. о. 5 о. о. 0. що . Ох п о. о о. о с с. . с о. - о с о. с о. СВ З СОС о. ЗО Е с о с с ОО о о о. с ха о. с БО о. ВВ вс Е с ООО 00 / Ма: 5 ЗК Е ОКХ ОКХ ОКХ Ех З В Ж КОС ОКУ М СК АХ ОК Е с СО а її 0 о о БАХ о. с ОО п 0/7 Я КО ЕН о с с СХ КОКО ЗО / : о. У ОХ ЕХ о ТОЖ ВО СК Ех ее СО о. 5 о. Ох КЕ В п о. З о с М с ОО о. ЗК а і. КК ОК о: с ОК о. Х ОХ с о. : о. М с с о о Ох СОУ ХХ о. ЗО ях ОКО ОХ ОКХ о. З ОО ХК о. КЕ ЗХ с о. а о с С ОО с СО Е о ОБ п. я г ОО Ж с СО о. У КУ ЗО НО М: ОК З о ОВО ОО ОО КО З 0 ОКО ВВ о КО Ох ОО ОК о о. о о. с с о о с о п Б З с о с ОХ о ОКХ Сх п Хе с З о о. ВО Ох ОК п. З с о КК зо о. о с ВХ с о с Ое с ОХ ЗО ХЕ с СІ СО Ох о о. ЗХ ЗВ З С о СК С о. с ПО С З ВК а о У п ЗОВ о. ща БО С п ТЕЖ ЩА с я о г СВ с о ОК с с с З ОО с СХ о ЯК ЗКУ с ХХ о. Ж ХК с ХК х п с с МО о ЗК КОКО ОЕе ЗО аа о. КОКО ще З с І ЗО с : о. ох с о х Я с ОХ КХ ОК ОК ХК КОХ КО ОХ ОО КВК ОККО ОХ МКК Х ОК ОО ОКХ ОК З з : п с ОО Я с - г с ОХ о. ОБОХ КО с ЗО г с ОХ ОО ЕЕ с о. с с Е п о. о З ОО ' с З ЗО З Ох ХХ ХХ о о. Я с Ме о. о о. о о С 5 ОО Ех СК 1 Оу о. о ОО ЕЕ ще с З с с З с о. о 5 о З 5 с с К о х Б КК с СО оо ОО ОК АХ ОХ КЕ ЗМО с г КОБВАЬ с як о о ОО, с с а о а: 0 о. о. Я о оо. Ко ни с ех ОО . о. с 0 ОО о ій а ща о с ОК СОН Я ОЗ ОК о. х ВО с КОХ с. 0. СКЗ ЗО он с ОО ОО с : о а СВК ХХ с ХЕ ОО о. ХХ ТЕЖ о ЗОКК ОХ ОХ хх і с КЕ о. ЗО ОВ БО Ох ХК ВЗ щ с 5. З с х Ох с о КК ОКХ с же Но: ОВ ОО о Ме с КОХ с но хо с с КО с за же В ХК - с Є Ми с о З с ТЕ зх Як с а З с їх ри 0/0 ЗВУК с ! Ту шо с аЛЬКН ня ОК зем і с хюже Фф о
UAA201703662A 2014-09-17 2015-09-17 Злитий білок, рекомбінантна бактерія і спосіб її застосування UA126325C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462051885P 2014-09-17 2014-09-17
PCT/US2015/050807 WO2016044661A1 (en) 2014-09-17 2015-09-17 Fusion proteins, recombinant bacteria, and methods for using recombinant bacteria

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA126325C2 true UA126325C2 (uk) 2022-09-21

Family

ID=54238608

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201703662A UA126325C2 (uk) 2014-09-17 2015-09-17 Злитий білок, рекомбінантна бактерія і спосіб її застосування

Country Status (16)

Country Link
US (4) US9845342B2 (uk)
EP (1) EP3194425A1 (uk)
CN (1) CN107208042A (uk)
AR (2) AR101953A1 (uk)
AU (3) AU2015317521B2 (uk)
BR (30) BR112017005326A2 (uk)
CA (1) CA2961641A1 (uk)
CL (4) CL2017000647A1 (uk)
CR (1) CR20170139A (uk)
IL (3) IL295968A (uk)
MX (2) MX2017003465A (uk)
NZ (2) NZ767896A (uk)
PH (1) PH12017500519A1 (uk)
UA (1) UA126325C2 (uk)
UY (1) UY36304A (uk)
WO (2) WO2016044655A2 (uk)

Families Citing this family (72)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9517257B2 (en) 2010-08-10 2016-12-13 Ecole Polytechnique Federale De Lausanne (Epfl) Erythrocyte-binding therapeutics
US9850296B2 (en) 2010-08-10 2017-12-26 Ecole Polytechnique Federale De Lausanne (Epfl) Erythrocyte-binding therapeutics
JP6017422B2 (ja) 2010-08-10 2016-11-02 エコール・ポリテクニーク・フェデラル・ドゥ・ローザンヌ（ウペエフエル）Ｅｃｏｌｅ Ｐｏｌｙｔｅｃｈｎｉｑｕｅ Ｆｅｄｅｒａｌｅ ｄｅ Ｌａｕｓａｎｎｅ （ＥＰＦＬ） 赤血球結合療法
US9573980B2 (en) 2013-03-15 2017-02-21 Spogen Biotech Inc. Fusion proteins and methods for stimulating plant growth, protecting plants from pathogens, and immobilizing Bacillus spores on plant roots
US9392796B2 (en) 2013-03-15 2016-07-19 Spogen Biotech Inc. Plant growth-promoting bacteria and methods of use
NZ723879A (en) 2014-02-21 2018-03-23 Ecole Polytechnique Fed Lausanne Epfl Glycotargeting therapeutics
US10046056B2 (en) 2014-02-21 2018-08-14 École Polytechnique Fédérale De Lausanne (Epfl) Glycotargeting therapeutics
US10946079B2 (en) 2014-02-21 2021-03-16 Ecole Polytechnique Federale De Lausanne Glycotargeting therapeutics
US10953101B2 (en) 2014-02-21 2021-03-23 École Polytechnique Fédérale De Lausanne (Epfl) Glycotargeting therapeutics
US10766799B2 (en) 2014-05-23 2020-09-08 Nch Corporation Method for improving quality of aquaculture pond water using a nutrient germinant composition and spore incubation method
RU2736562C2 (ru) 2014-09-17 2020-11-18 Байер Кропсайенс Лп Композиции, содержащие рекомбинантные клетки bacillus и инсектицид
WO2016044529A1 (en) 2014-09-17 2016-03-24 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising recombinant bacillus cells and another biological control agent
WO2016044655A2 (en) * 2014-09-17 2016-03-24 Spogen Biotech Inc. Fusion proteins, recombinant bacteria, and methods for using recombinant bacteria
MX2017003610A (es) 2014-09-17 2017-07-13 Bayer Cropscience Lp Composiciones que comprenden celulas recombinantes de bacillus y un fungicida.
BR112017005504A2 (pt) * 2014-09-17 2018-08-14 Bayer Cropscience Lp composições que compreendem células recombinantes de bacillus e um inseticida.
EP3193619A1 (en) 2014-09-17 2017-07-26 Bayer Cropscience LP Compositions comprising recombinant bacillus cells and another biological control agent
US10273193B1 (en) * 2015-09-29 2019-04-30 Evan James Schick Horticulture growth media
PL3430117T3 (pl) * 2016-03-14 2020-11-16 Henkel Ag & Co. Kgaa Sposób opanowywania nieprzyjemnych zapachów z zastosowaniem unieczynnionych przetrwalników bakterii zdolnych do hamowania lub zapobiegania powstawania nieprzyjemnego zapachu
CA3221966A1 (en) 2016-03-16 2017-09-21 Spogen Biotech Inc. Methods for promoting plant health using free enzymes and microorganisms that overexpress enzymes
US10897922B2 (en) 2016-04-05 2021-01-26 Nch Corporation Composition and method for germinative compounds in probiotic food and beverage products for human consumption
MY190858A (en) 2016-04-05 2022-05-12 Nch Corp Nutrient rich germinant composition and spore incubation method
BR112018069945A2 (pt) 2016-04-06 2019-02-05 Plant Health Care Inc micróbios benéficos para distribuição de peptídeos ou proteínas efetoras e uso dos mesmos
CN106282067B (zh) * 2016-08-24 2019-10-11 李丽丽 多功能农用复合微生物菌剂及微生态制剂与应用
CN106635942B (zh) * 2016-12-05 2020-05-29 齐鲁工业大学 一种芽孢表面稳定展示海藻糖合酶的工程菌及其构建方法
US20200071713A1 (en) * 2016-12-06 2020-03-05 Pebble Labs Usa Inc. System and methods for the biocontrol of plant pathogens
CN107223663B (zh) * 2017-04-24 2019-10-29 大连理工大学 春雷霉素及其衍生物为几丁质酶抑制剂的应用
WO2018232176A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 The University Of Chicago Compositions and methods for inducing immune tolerance
US20200170258A1 (en) 2017-07-20 2020-06-04 Spogen Biotech Inc. Bioactive polypeptides for improvements in plant protection, growth and productivity
MX2020003039A (es) * 2017-09-20 2020-09-28 Spogen Biotech Inc Proteinas de fusion, bacterias recombinantes y fragmentos del exosporio para promover la salud de las plantas.
US10988769B2 (en) 2017-11-16 2021-04-27 Bayer Cropscience Lp Paenibacillus-based endospore display platform, products and methods
CN108018233B (zh) * 2017-12-12 2021-09-21 广州融新科技发展有限公司 一株暹罗芽孢杆菌及其微生物菌剂的制备与应用
CN109988806B (zh) * 2017-12-29 2023-02-28 弈柯莱生物科技(上海)股份有限公司 一种n-乙酰-草铵膦盐的消旋方法
CN108018245A (zh) * 2018-01-12 2018-05-11 中国科学院成都生物研究所 一株产壳聚糖酶的枯草芽孢杆菌及其应用
US20190276834A1 (en) * 2018-03-07 2019-09-12 R.J. Reynolds Tobacco Company Methods and compositions for reducing bacterial load in tobacco
US11541105B2 (en) 2018-06-01 2023-01-03 The Research Foundation For The State University Of New York Compositions and methods for disrupting biofilm formation and maintenance
CN109138946A (zh) * 2018-07-16 2019-01-04 西南石油大学 一种10MPa监测水驱油过程三维渗流实验系统
US11401500B2 (en) 2018-08-29 2022-08-02 Nch Corporation System, method, and composition for incubating spores for use in aquaculture, agriculture, wastewater, and environmental remediation applications
CN109576233A (zh) * 2018-12-03 2019-04-05 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种蜱源性基因工程疫苗
EP3914068A4 (en) * 2019-01-23 2023-04-19 Spogen Biotech Inc. COMPOSITIONS FOR TREATING CITRUS DISEASES AND PROMOTING YIELD INCREASE IN ROW CROPS
CN109777755A (zh) * 2019-01-31 2019-05-21 自然资源部第三海洋研究所 一株暹罗芽孢杆菌dh35及其发酵上清液的应用
CN109730136A (zh) * 2019-02-26 2019-05-10 湖州周生记餐饮管理有限公司 一种卤肉熟食的储存方法
MX2021011358A (es) 2019-03-19 2021-10-13 Bayer Cropscience Lp Proteinas de fusion, bacterias recombinantes, y fragmentos de exosporio para el control de plagas y salud vegetal.
MX2021011361A (es) * 2019-03-19 2021-10-13 Bayer Cropscience Lp Proteinas de fusion, bacterias recombinantes y fragmentos de exosporios para la salud de las plantas.
AR118942A1 (es) * 2019-05-15 2021-11-10 Bayer Cropscience Lp Secuencias de selección dirigida para plataformas de visualización en endoesporas de paenibacillus
CN110862951B (zh) * 2019-09-06 2021-09-21 海南大学 一种维氏气单胞菌减毒菌株的构建方法、菌株及其应用
EP4061925A1 (en) 2019-11-22 2022-09-28 Bayer CropScience LP Methods of fermentation of recombinant bacillus spores
WO2021159068A1 (en) 2020-02-06 2021-08-12 Nch Corportion Composition and method of using germinative compounds in probiotics for inflammation reduction in humans
US10973908B1 (en) 2020-05-14 2021-04-13 David Gordon Bermudes Expression of SARS-CoV-2 spike protein receptor binding domain in attenuated salmonella as a vaccine
CN111748497B (zh) * 2020-07-07 2022-02-08 山东农业大学 一株大山芽孢杆菌及其在快速降解亚硝酸盐中的应用
CN111662856B (zh) * 2020-07-31 2022-05-06 河北省农林科学院生物技术与食品科学研究所 一种包含木醋液的复合微生物制剂及其制备方法与应用
WO2022061210A1 (en) 2020-09-21 2022-03-24 Bayer Cropscience Lp Novel serine proteases
CN112175921B (zh) * 2020-10-23 2022-06-07 中国科学院成都生物研究所 一种壳聚糖酶突变体g21r及其应用
CN114437954A (zh) * 2020-11-03 2022-05-06 中国石油天然气集团有限公司 一种降解磺化钻井液的弯曲芽孢杆菌、混合菌及其应用
CN112553230B (zh) * 2020-12-21 2021-08-24 山东省科学院生物研究所 高产iaa绿色木霉工程菌株及其构建方法与应用
CN112707953B (zh) * 2021-01-22 2023-05-30 南昌师范学院 Ev71病毒样颗粒产品、其制备方法及其应用
CN112795519B (zh) * 2021-03-01 2023-01-10 千禾味业食品股份有限公司 一种暹罗芽孢杆菌及其在富含乙偶姻食醋中的应用
EP4305151A1 (en) 2021-03-11 2024-01-17 Les Biotechnologies Ulysse Inc. Microorganism displaying antigenic protein of the sars-cov2 coronavirus
CN113046328B (zh) * 2021-04-13 2023-07-25 吉林大学 一株化脓隐秘杆菌噬菌体及其医用用途
CN113151123B (zh) * 2021-06-17 2022-07-08 吉林农业大学 一种低温产纤维素酶和木聚糖酶的蜡样芽孢杆菌
CN115363058B (zh) * 2021-07-18 2024-03-22 杭州绿键生物科技有限公司 一种有效灭活新型冠状病毒的消毒剂
CN114903824B (zh) * 2021-07-21 2023-12-29 广州梵之容化妆品有限公司 一种舒缓保湿面膜
CN113549626B (zh) * 2021-07-27 2022-08-09 昆明理工大学 与腐霉利特异性结合的核酸适配体Pr-A08及其应用
CN113403209B (zh) * 2021-07-30 2022-08-26 西南大学 天冬氨酸蛋白酶基因在改良球孢白僵菌菌株中的应用
CN113913431B (zh) * 2021-09-09 2023-10-24 湖南工业大学 一种辛硫磷核酸适配体、核酸适配体衍生物及其应用
WO2023092050A1 (en) 2021-11-20 2023-05-25 Bayer Cropscience Lp Beneficial combinations with recombinant bacillus cells expressing a serine protease
CN114158508B (zh) * 2021-11-30 2023-07-25 海南归耘田农业科技有限公司 一种有效预防小龙虾受寄生虫感染的方法
CN114410481B (zh) * 2021-12-30 2023-09-15 广州市土根旺生物科技有限公司 一株棘孢木霉及其应用
WO2023137458A1 (en) * 2022-01-14 2023-07-20 Syngenta Crop Protection Ag Compositions and methods for screening insecticidal proteins
CN114908030B (zh) * 2022-05-11 2023-11-14 南京工业大学 一种在枯草芽孢杆菌表面展示β-环糊精葡萄糖基转移酶的重组菌及其应用
WO2023245018A2 (en) * 2022-06-13 2023-12-21 Trustees Of Tufts College Methods for spore display
FR3138265A1 (fr) * 2022-07-29 2024-02-02 Biointrant composition antigerminative
CN116102640A (zh) * 2022-10-13 2023-05-12 浙江双糖生物科技有限公司 重组乳铁蛋白衍生肽及其在提高免疫力方面的应用

Family Cites Families (116)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5554521A (en) 1984-03-26 1996-09-10 Dna Plant Technology Corporation Chitinase-producing plants
CA1335364C (en) 1986-12-17 1995-04-25 Joseph Wayne Kloepper Beneficial, direct-acting soil bacteria
US5858962A (en) 1987-05-11 1999-01-12 Ambi Inc. Composition for treating mastitis and other staphylococcal infections
US5290914A (en) 1988-04-28 1994-03-01 Mycogen Corporation Hybrid diphtheria-B.t. pesticidal toxins
US5200182A (en) 1988-05-26 1993-04-06 Nika Health Products, Ltd. Antiviral or antibacterial composition and method of use
US6309440B1 (en) 1998-08-25 2001-10-30 Thomas T. Yamashita Method and composition for promoting and controlling growth of plants
PH30997A (en) 1990-03-12 1997-12-23 Ciba Geigy Antipathologenically effective compositions comprising lytic peptides and hydrolytic enzymes.
US5849870A (en) * 1993-03-25 1998-12-15 Novartis Finance Corporation Pesticidal proteins and strains
DE4412834A1 (de) 1994-04-14 1995-10-19 Bayer Ag Insektizide Mischungen
US5766914A (en) 1995-01-26 1998-06-16 Michigan State University Method of producing and purifying enzymes
GB9510459D0 (en) 1995-05-24 1995-07-19 Zeneca Ltd Bicyclic amines
US5650372A (en) 1995-05-30 1997-07-22 Micro Flo Company Plant treatment with bacillus strain ATCC
GB9624611D0 (en) 1996-11-26 1997-01-15 Zeneca Ltd Bicyclic amine compounds
US6110372A (en) 1996-12-17 2000-08-29 Perriello; Felix Anthony Bioremediation of petroleum pollutants with alkane-utilizing bacteria
JPH10203917A (ja) 1997-01-28 1998-08-04 Idemitsu Kosan Co Ltd 微生物種子粉衣組成物
IL121404A0 (en) 1997-07-27 1998-01-04 Yissum Res Dev Co Transgenic higher plants of altered structural morphology
US7432097B2 (en) 1997-08-13 2008-10-07 Verenium Corporation Phytases, nucleic acids encoding them and methods of making and using them
US6333302B1 (en) 1997-09-03 2001-12-25 Cornell Research Foundation, Inc. Use of hypersensitive response elicitor protein or polypeptide from Clavibacter michiganensis for disease resistance, growth enhancement and insect control
US5958104A (en) 1997-09-11 1999-09-28 Nonomura; Arthur M. Methods and compositions for enhancing plant growth
US6323023B1 (en) 1998-01-13 2001-11-27 Yissum Research Development Co., Ltd. Vectors containing nucleic acids coding for Arabidopsis thaliana endo-1,4-β-glucanase secretion signal peptide
AU5475399A (en) 1998-08-10 2000-03-06 General Hospital Corporation, The Transgenic plants expressing a dual-specificity mapk phosphatase and uses thereof
JP3140430B2 (ja) 1999-03-09 2001-03-05 株式会社 バイテク バチルス属微生物とその用途
US7033781B1 (en) 1999-09-29 2006-04-25 Diversa Corporation Whole cell engineering by mutagenizing a substantial portion of a starting genome, combining mutations, and optionally repeating
RU2160778C1 (ru) 1999-11-10 2000-12-20 Федеральное государственное унитарное предприятие "Пермский завод им. С.М. Кирова" Штамм бактерий bacillus сereus-продуцент нитрилгидратазы
US6630340B2 (en) 2000-03-01 2003-10-07 Novozymes A/S Family 5 xyloglucanases
WO2002000232A2 (en) 2000-06-26 2002-01-03 Maxygen, Inc. Methods and compositions for developing spore display systems for medicinal and industrial applications
US20020142917A1 (en) 2000-12-04 2002-10-03 Triplett Eric W. Bacterial inoculants for enhancing plant growth
KR20020045400A (ko) 2000-12-08 2002-06-19 반재구 포자 표면발현 방법
US20030167506A1 (en) 2001-03-22 2003-09-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Expansin protein and polynucleotides and methods of use
WO2003011487A1 (en) 2001-07-27 2003-02-13 Global Biosciences, Inc. Remediation of metal contaminants with hydrocarbon-utilizing bacteria
KR20030015943A (ko) 2001-08-18 2003-02-26 한국바이오비료 주식회사 섬유질 분해 효소를 분비하는 유전자, 유전자로부터분비된 효소, 유전자를 포함하는 미생물, 미생물을 이용한유기질 비료
AU2002347166B2 (en) 2002-01-07 2008-02-14 Lallemand Inc. Sulfur-oxidizing bacteria for promoting plant growth
US7615681B2 (en) 2002-02-05 2009-11-10 National Research Council Of Canada Methods for modifying plant responses to stress and correspondingly derived plants
GB0205378D0 (en) 2002-03-07 2002-04-24 Royal Holloway University Of L Bacterial spores
US20030228679A1 (en) 2002-03-27 2003-12-11 Smith Donald L. Compositions and methods for increasing plant growth by inoculation with bacillus strains
EP1495128B1 (en) 2002-03-29 2014-05-07 Genencor International, Inc. Ehanced protein expression in bacillus
ES2193892B1 (es) 2002-04-29 2005-05-16 Biotecnologicos Y Mercados, S.L. Fertilizante nitrogenado y procedimiento de obtencion del mismo.
AU2003251549B2 (en) 2002-06-14 2008-03-13 Bp Corporation North America Inc. Xylanases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
ES2354425T3 (es) 2003-02-06 2011-03-14 Cropdesign N.V. Método para modificar las características de crecimiento de las plantas.
AU2004254640B2 (en) 2003-07-02 2010-08-26 Bp Corporation North America Inc. Glucanases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
KR100518953B1 (ko) 2003-09-19 2005-10-12 주식회사 제노포커스 포자 외막단백질을 이용한 목적단백질의 표면발현 방법
JP2005298409A (ja) 2004-04-12 2005-10-27 Yukijirushi Shubyo Kk 植物発根促進剤
RU2006139953A (ru) 2004-04-13 2008-05-20 Е.И. Дюпон Де Немур Энд Компани (Us) Антраниламидные инсектициды
WO2006012366A2 (en) * 2004-07-20 2006-02-02 Phyllom Llc Methods for making and using recombinant bacillus thuringiensis spores
GB0416629D0 (en) 2004-07-27 2004-08-25 Univ Sheffield Crop spray
GB0504940D0 (en) 2005-03-10 2005-04-20 Secr Defence Vaccine formulation
WO2007086898A2 (en) * 2005-03-31 2007-08-02 University Of South Carolina Methods and compositions related to anthrax spore glycoproteins
US8080404B1 (en) 2005-04-05 2011-12-20 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Enzymatic decontamination
US7417181B2 (en) 2005-04-07 2008-08-26 The Samuel Roberts Noble Foundation Plants with increased phosphorous uptake
ES2437577T3 (es) 2005-07-18 2014-01-13 Basf Plant Science Gmbh Aumento del rendimiento en plantas que sobreexpresan los genes de ACCDP
JP2007117066A (ja) 2005-09-30 2007-05-17 Techno Giken Kk 植物種子の物理処理方法と育種、育苗方法
RU2313941C2 (ru) 2005-10-05 2008-01-10 ООО "БИО Агат Групп" Препарат для защиты растений от возбудителей болезней сельскохозяйственных культур и винограда с ростстимулирующим эффектом, способ получения этого препарата и штаммы для его осуществления
CA2629350A1 (en) 2005-11-17 2007-05-24 Mcgill University Use of bacteriocins for promoting plant growth and disease resistance
KR100784261B1 (ko) 2006-01-02 2007-12-11 한국과학기술원 탄저균의 포자외막 단백질을 이용한 목적단백질의 미생물표면발현방법
AU2007219122A1 (en) 2006-02-27 2007-08-30 North-West University Composition in the form of a microemulsion containing free fatty acids and/or free fatty acid derivatives
US20100055244A1 (en) 2006-08-09 2010-03-04 Henriques Adriano O Spore surface displays of bioactive molecules
US20100024067A1 (en) 2006-12-15 2010-01-28 Cropdesign N.V. Plants having enhanced seed yield-related traits and a method for making the same
CN101362799A (zh) 2007-08-10 2009-02-11 中国科学院上海生命科学研究院 调控植物株高的基因及其应用
EP2197893B1 (en) 2007-09-07 2013-07-24 Dyadic International, Inc. Novel fungal enzymes
GB0717911D0 (en) 2007-09-14 2007-10-24 Univ Stirling Vaccine
MX2010003064A (es) 2007-09-21 2010-04-07 Basf Plant Science Gmbh Plantas con rendimiento aumentado.
BRPI0704008A2 (pt) 2007-10-30 2009-06-23 Basf Ag uso de glicerina, método para tratamento de culturas, composição de mistura em tanque e um método para a preparação de uma composição de mistura em tanque
US8114659B2 (en) 2008-01-14 2012-02-14 Robert William Rawson Apparatus and method for catalytic treatment of a media
US9133251B2 (en) 2008-02-22 2015-09-15 The Curators Of The University Of Missouri Bacillus based delivery system and methods of use
DE112009002577T5 (de) 2008-10-23 2012-06-21 Basf Plant Science Gmbh Pflanzen mit erhöhtem Ertrag (NUE)
CN101481666B (zh) 2008-11-19 2011-08-24 黄晓东 植物促生菌、含有植物促生菌的微生物制剂及其制备方法
CN102257146B (zh) 2008-12-18 2017-11-28 港大科桥有限公司 通过在转基因植物中引入磷酸酶来加速植物生长和改进产量的方法
DK2411410T3 (en) 2009-03-27 2015-09-07 Gojo Ind Inc Compositions and methods for screening and use of compounds which counteract the track-surface interactions
GB0916570D0 (en) 2009-09-21 2009-10-28 Royal Holloway & Bedford New C Method
DE112010003738T5 (de) 2009-10-22 2013-08-14 Basf Plant Science Company Gmbh Pflanzen mit gesteigerten Ertragsmerkmalen und Verfahren zu deren Herstellung
EP2501816A4 (en) 2009-11-17 2013-07-03 Basf Plant Science Co Gmbh PLANTS WITH INCREASED PERFORMANCE
ES2627487T3 (es) 2010-02-28 2017-07-28 Los Alamos National Security, Llc Aumento del crecimiento de las plantas mediante modulación de la expresión de la amidasa omega en las plantas
KR101086367B1 (ko) 2010-03-11 2011-11-23 강원대학교산학협력단 식물생장 촉진 활성을 갖는 신균주 바실러스 아리아바타이 ｌｓ9 및 이의 용도
ES2378040B1 (es) 2010-03-31 2013-02-18 Probelte, S.A Un preparado biológico bionematicida y estimulador del crecimiento vegetal y cultivos puros de las cepas denominadas n11, sr11 y alo1, contenidas en el mismo.
RU2439148C1 (ru) 2010-05-21 2012-01-10 Российская Федерация, От Имени Которой Выступает Министерство Промышленности И Торговли Российской Федерации ШТАММ ГИБРИДНЫХ КУЛЬТИВИРУЕМЫХ КЛЕТОК ЖИВОТНЫХ Mus musculus 1E6 - ПРОДУЦЕНТ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ, СПЕЦИФИЧНЫХ К СПОРАМ Bacillus anthracis
WO2012001000A1 (en) 2010-06-30 2012-01-05 Dsm Ip Assets B.V. Spore surface display of bioactive molecules
CN101919407A (zh) 2010-07-21 2010-12-22 合肥工业大学 阿维菌素与苏云金芽孢杆菌复配的生物悬浮杀虫剂
CN102031231B (zh) 2010-11-03 2013-04-03 甘肃农业大学 一种植物促生菌及其菌剂与其制备方法和应用
CN103443278B (zh) 2011-03-23 2017-07-04 诺维信公司 生产分泌型多肽的方法
US20120259101A1 (en) * 2011-04-11 2012-10-11 Li Tan Isopeptide Bond Formation in Bacillus Species and Uses Thereof
JP5747625B2 (ja) 2011-04-12 2015-07-15 住友化学株式会社 マンデロニトリル化合物の製造方法
US8614078B2 (en) 2011-04-15 2013-12-24 The Curators Of The University Of Missouri Contaminant reducing amide functionalized ordered mesoporous carbon composition
AU2012247609B2 (en) 2011-04-27 2017-02-16 Aarhus Universitet High expression cereal phytase gene
CN103086784B (zh) 2011-10-27 2014-06-25 胡茂森 一种氨基酸加酶生物肥及其制备方法
CA3105047C (en) 2011-12-13 2023-08-01 Monsanto Technology Llc Plant growth-promoting bacillus thuringiensis strain and uses thereof
RU2615834C2 (ru) * 2012-01-25 2017-04-11 Байер Интеллектуэль Проперти Гмбх Комбинация активных соединений, а также содержащая комбинацию композиция и их применение, семя, обработанное комбинацией или композицией, и способ борьбы для защиты сельскохозяйственных культур
NZ702162A (en) 2012-05-30 2016-11-25 Bayer Cropscience Ag Compositions comprising a biological control agent and an insecticide
TR201816257T4 (tr) 2012-05-30 2018-11-21 Bayer Cropscience Ag Bir biyolojik kontrol ajanı ve trifloksistrobin içeren bileşim.
EP2854551A1 (en) 2012-05-30 2015-04-08 Bayer Cropscience AG Compositions comprising a biological control agent and a fungicide from the group consisting of inhibitors of the respiratory chain at complex i or ii.
JP2014001179A (ja) 2012-06-20 2014-01-09 Sumitomo Chemical Co Ltd 有害生物の防除方法
WO2014004487A1 (en) 2012-06-29 2014-01-03 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Manipulation of serine/threonine protein phosphatases for crop improvement
US9125419B2 (en) 2012-08-14 2015-09-08 Marrone Bio Innovations, Inc. Bacillus sp. strain with antifungal, antibacterial and growth promotion activity
GB2507760B (en) 2012-11-08 2015-07-08 Inst Of Food Res Methods
WO2014079814A1 (en) 2012-11-22 2014-05-30 Basf Se Pesticidal mixtures
US20160100585A1 (en) 2012-11-22 2016-04-14 Basf Corporation Pesticidal Mixtures
CN104918493B (zh) 2012-11-30 2018-02-06 拜尔农作物科学股份公司 三元杀真菌和杀虫混合物
US9573980B2 (en) * 2013-03-15 2017-02-21 Spogen Biotech Inc. Fusion proteins and methods for stimulating plant growth, protecting plants from pathogens, and immobilizing Bacillus spores on plant roots
US9392796B2 (en) 2013-03-15 2016-07-19 Spogen Biotech Inc. Plant growth-promoting bacteria and methods of use
US20160236996A1 (en) 2013-10-11 2016-08-18 Suunil Sudhakar CHANDHRY A Process for Producing Highly Nutritious and Bioavailable Organic Nitrogen Fertilizer from Non GMA Organisms
CL2013003780A1 (es) 2013-12-30 2014-06-20 Univ Concepcion Biofertilizante y su proceso de elaboración.
EP3102682A1 (en) 2014-02-04 2016-12-14 University of Florida Research Foundation, Inc. Pteris vittata phytase nucleotide and amino acid sequences and methods of use
HU231353B1 (hu) 2014-02-10 2023-03-28 BioFil Mikrobiológiai, Géntechnológiai és Biokémiai Kft Stressztalajok oltására szolgáló talajbaktériumok
EP3193619A1 (en) 2014-09-17 2017-07-26 Bayer Cropscience LP Compositions comprising recombinant bacillus cells and another biological control agent
WO2016044529A1 (en) 2014-09-17 2016-03-24 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising recombinant bacillus cells and another biological control agent
WO2016044655A2 (en) 2014-09-17 2016-03-24 Spogen Biotech Inc. Fusion proteins, recombinant bacteria, and methods for using recombinant bacteria
MX2017003610A (es) 2014-09-17 2017-07-13 Bayer Cropscience Lp Composiciones que comprenden celulas recombinantes de bacillus y un fungicida.
BR112017005504A2 (pt) 2014-09-17 2018-08-14 Bayer Cropscience Lp composições que compreendem células recombinantes de bacillus e um inseticida.
BR112017005379A2 (pt) 2014-09-17 2018-08-14 Bayer Cropscience Lp composições que compreendem células recombinantes de bacillus e um fungicida.
RU2736562C2 (ru) 2014-09-17 2020-11-18 Байер Кропсайенс Лп Композиции, содержащие рекомбинантные клетки bacillus и инсектицид
PT3209319T (pt) 2014-10-21 2021-09-24 Hexima Ltd Um método de tratamento
US10851027B2 (en) 2014-12-22 2020-12-01 Biomineral Systems LLc Phosphorus fertilizer bio-catalyst for sustainable crop production
CN104945164A (zh) 2015-07-07 2015-09-30 卞佳林 一种种植红薯用的肥料及其制备方法
CA3221966A1 (en) 2016-03-16 2017-09-21 Spogen Biotech Inc. Methods for promoting plant health using free enzymes and microorganisms that overexpress enzymes
BR112018068719A2 (pt) 2016-03-16 2019-01-22 Spogen Biotech Inc métodos para produzir uma resposta imunogênica em um animal aquático e composição farmacêutica
WO2018152411A1 (en) 2017-02-17 2018-08-23 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising recombinant bacillus cells and an insecticide
MX2020003039A (es) 2017-09-20 2020-09-28 Spogen Biotech Inc Proteinas de fusion, bacterias recombinantes y fragmentos del exosporio para promover la salud de las plantas.

Also Published As

Publication number Publication date
US10407472B2 (en) 2019-09-10
IL278745A (uk) 2020-12-31
US10836800B2 (en) 2020-11-17
US20180099999A1 (en) 2018-04-12
AR101953A1 (es) 2017-01-25
BR112017005326A2 (pt) 2017-12-12
NZ731011A (en) 2021-09-24
BR122023020910A2 (pt) 2024-01-30
BR122023020844A2 (pt) 2024-01-23
AU2021204089A1 (en) 2021-07-22
BR122023020928A2 (pt) 2024-01-30
CL2022003270A1 (es) 2023-05-26
BR122023020889A2 (pt) 2024-01-30
CL2022003269A1 (es) 2023-05-26
IL278745B2 (en) 2023-02-01
BR122023020822A2 (pt) 2024-01-23
AU2023201862A1 (en) 2023-06-08
MX2017003465A (es) 2017-06-19
BR122023020931A2 (pt) 2024-01-30
BR122023020829A2 (pt) 2024-01-23
PH12017500519A1 (en) 2017-08-07
BR122023020897A2 (pt) 2024-01-30
AU2015317521B2 (en) 2021-04-08
BR122023020925A2 (pt) 2024-01-30
CN107208042A (zh) 2017-09-26
BR122023020769A2 (pt) 2024-01-23
CA2961641A1 (en) 2016-03-24
NZ767896A (en) 2024-01-26
BR122023020799A2 (pt) 2024-01-23
BR122023020803A2 (pt) 2024-01-23
RU2017112965A (ru) 2018-10-17
US20200190149A1 (en) 2020-06-18
US20210179672A1 (en) 2021-06-17
AU2021204089B2 (en) 2023-07-27
WO2016044661A1 (en) 2016-03-24
US11905315B2 (en) 2024-02-20
BR122023020827A2 (pt) 2024-01-23
BR122023020869A2 (pt) 2024-01-30
BR122023020774A2 (pt) 2024-01-23
BR122023020809A2 (pt) 2024-01-23
IL251194A0 (en) 2017-05-29
BR122023020759A2 (pt) 2024-01-23
BR122023020863A2 (pt) 2024-01-30
CR20170139A (es) 2017-06-30
BR122023020835A2 (pt) 2024-01-23
WO2016044655A3 (en) 2016-05-12
WO2016044655A2 (en) 2016-03-24
US9845342B2 (en) 2017-12-19
EP3194425A1 (en) 2017-07-26
BR122023020858A2 (pt) 2024-01-30
BR122023020903A2 (pt) 2024-01-30
IL278745B (en) 2022-10-01
AU2015317521A1 (en) 2017-05-04
BR122023020779A2 (pt) 2024-01-23
BR122023020880A2 (pt) 2024-01-30
UY36304A (es) 2016-04-29
BR122023020788A2 (pt) 2024-01-23
BR122023020794A2 (pt) 2024-01-23
BR122023020883A2 (pt) 2024-01-30
CL2020000039A1 (es) 2020-06-12
NZ767895A (en) 2024-01-26
MX2021002717A (es) 2021-05-12
IL295968A (en) 2022-10-01
US20160108096A1 (en) 2016-04-21
CL2017000647A1 (es) 2017-12-22
BR122023020780A2 (pt) 2024-01-23
RU2017112965A3 (uk) 2019-05-06
BR122023020886A2 (pt) 2024-01-30
AR122050A2 (es) 2022-08-10
BR122023020904A2 (pt) 2024-01-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA126325C2 (uk) Злитий білок, рекомбінантна бактерія і спосіб її застосування
Sundin et al. Bacterial disease management: challenges, experience, innovation and future prospects: challenges in bacterial molecular plant pathology
UA122671C2 (uk) Композиція, що містить рекомбінантні клітини bacillus і фунгіцид
UA121093C2 (uk) Конструкція, яка містить токсиген, що кодує пестицидний білок, і спосіб її застосування для знищення напівтвердокрилих шкідників
UA124293C2 (uk) Рослина, яка має біологічну активність гаплоїдного індуктора, і спосіб її застосування
UA126807C2 (uk) Інсектицидний білок і спосіб його застосування
UA126971C2 (uk) Інсектицидний поліпептид з поліпшеним спектром активності і його застосування
RU2771828C2 (ru) Слитые белки, рекомбинантные бактерии и способы применения рекомбинантных бактерий