CN108018233B - 一株暹罗芽孢杆菌及其微生物菌剂的制备与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一株暹罗芽孢杆菌Bacillus siamensis SW‑2,保藏号为GDMCC No.60287;并公开了一种利用该菌株制备微生物制剂的方法,包含以下步骤:将Bacillus siamensis SW‑2用LB液体培养基活化培养后,接入发酵罐中用LB液体培养基扩大培养;将扩大培养后的发酵液接入发酵罐中进行发酵培养;将发酵培养的发酵液加入固体辅料中,烘干,粉碎,分装。该微生物菌剂可明显促进堆肥前期起温速度,提高发酵温度,延长高温持续时间。堆肥后有机质含量增加,C/N及氨氮含量降低,含水率减少,堆肥腐熟程度高,效果显著,可以大规模应用。
Description
技术领域
本发明涉及微生物领域,特别涉及一株暹罗芽孢杆菌及在有机废物高温好氧堆肥中的应用。
背景技术
高温好氧堆肥是指人工控制下,在一定水分、C/N比及通风条件下通过微生物的发酵作用,将废弃有机物转化为肥料的过程,其本质就是在微生物作用下,不稳定状态有机物转化为稳定的腐殖质的过程。传统高温好氧堆肥一般是利用堆肥物料中的土著微生物,微生物数量少,繁殖周期长,导致有机废物发酵周期长、发酵效率低等问题。为加快发酵速度,通过在堆肥初期接种微生物制剂的办法能够提高堆肥初期微生物的群体,促进堆肥升温速度,促进有机废物的腐殖化过程。
芽孢杆菌分布广,具有耐热、pH和盐等多种优良特性。研究表明,芽孢杆菌如枯草烟包杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌等具有较强的蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶、果胶酶、葡聚糖酶及纤维素酶等活性,能够加快蛋白、淀粉、纤维素及脂肪的快速降解,在有机废物高温快速好氧堆肥中发挥重要作用。目前,芽孢杆菌已作为一种重要微生物,广泛应用于有机废物高温好氧堆肥过程。经文献与专利检索,在现有技术中尚未发现有关于暹罗芽孢杆菌作为接种剂应用于高温堆肥的报道。
发明内容
本发明的目的在于一株暹罗芽孢杆菌及在有机废物高温好氧堆肥中的应用。
本发明所采取的技术方案是:
本发明暹罗芽孢杆菌Bacillus siamensisSW-2于2017年11月24日保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼,广东省微生物研究所,保藏编号为GDMCC No.60287,建议的分类命名为Bacillus siamensis,已于2017年11月27日鉴定保藏的菌株是存活的。
一株暹罗芽孢杆菌Bacillus siamensisSW-2,保藏号为GDMCC No.60287。
暹罗芽孢杆菌Bacillus siamensisSW-2在高温堆肥中的应用。
暹罗芽孢杆菌Bacillus siamensisSW-2在制备高温堆肥菌剂中的应用。
一种利用暹罗芽孢杆菌Bacillus siamensisSW-2制备微生物制剂的方法,包含以下步骤:将Bacillus siamensisSW-2用LB液体培养基活化培养后,接入发酵罐中用LB液体培养基扩大培养;将扩大培养后的发酵液接入发酵罐中进行发酵培养;将发酵培养的发酵液加入固体辅料中,烘干,粉碎,分装。
优选的,固体辅料与发酵液的质量比为1.5∶1。
优选的,固体辅料含有活性炭和硅藻土。
优选的,固体辅料由60%活性碳和40%硅藻土组。
本发明的有益效果是:B.siamensisSW-2微生物菌剂可明显促进堆肥前期起温速度,提高发酵温度,延长高温持续时间。堆肥后有机质含量增加,C/N及氨氮含量降低,含水率减少,堆肥腐熟程度高,效果显著,可以大规模应用。
具体实施方式
实施例1菌株的筛选
称取堆肥样品10g,加入90mL无菌水,150rpm/min摇床振荡15min,静置30min后,取上清液1mL稀释至10-5-10-6,将稀释后的培养液0.1mL均匀涂布于LB培养基上,于30℃下恒温培养3d。挑选单菌落进行划线3-5次分离纯化,纯化后接种于TSA斜面培养基保藏。
所述LB培养基成分为(g/L):胰蛋白胨10.0;酵母粉5.0;氯化钠10.0;pH值7.2。
保藏菌株为Bacillus siamensis SW-2,已于2017年月日在广东省微生物菌种保藏中心保藏,保藏编号为:GDMCC No.60287。
所述Bacillus siamensis SW-2的鉴定特征为:
革兰氏反应阳性,兼性厌氧,周生鞭毛,具有运动性,能水解淀粉及纤维素。LB培养基上培养2d形成大小3-4mm、边缘整齐、凸起、白色粘性半透明的菌落。生长温度4-55℃,最适生长温度37℃,耐NaCl浓度为14%,生长pH为4.5-9.0,最适为6-7。
实施例2微生物菌剂的制备
(1)摇瓶培养:从B.siamensis SW-2斜面上挑取菌苔一环接入装有100mL LB液体培养基的锥形瓶中,37℃、200rpm/min摇床震荡培养18h。所述LB液体培养基配方为:胰蛋白胨10.0;酵母粉5.0;氯化钠10.0;pH值7.2。
(2)种子罐发酵:将上述培养好的B.siamensis SW-2发酵液接入10L发酵罐中,37℃、200rpm/min发酵培养18h;所述发酵培养基配方为上述LB液体培养基。
(3)发酵罐发酵:将上述培养好的B.siamensis SW-2发酵液接入发酵罐中,37℃、200rpm/min发酵培养24h;所述发酵培养基配方为上述LB液体培养基。
(4)菌剂制备:将发酵罐发酵后的发酵液加入固体辅料中,固体辅料与发酵液的质量比为1.5∶1,搅拌均匀,37℃烘干,粉碎,经40目过筛,包装装袋。固体辅料含有活性碳60%,硅藻土40%。制得的微生物菌剂成品经活菌计数,总菌数达到6.0亿/克。
实施例3微生物菌剂的应用
下面以城市污泥堆肥为例,说明本发明微生物菌剂在高温堆肥上的应用。
高温好氧堆肥物料为城市污泥,蓬松剂为木屑与秸秆,污泥、木屑、稻草按1:0.8:0.2比例混匀后,控制水分在50%左右,按5%的比例接种实施例2的微生物菌剂充分混合后进行堆置发酵。同时以不添加本发明微生物接种剂为对照。堆肥时间为30d,每天检测堆体温度,间隔5d翻堆一次,待堆温达到65℃时翻堆;每5d多点四分法取样检测堆肥腐熟度指标,对堆肥结束时样品还检测其养分等理化指标。结果见表1和表2。
从表1可知,与对照比较,接种微生物菌剂后,堆体最高温度为77℃,达到最高温度的时间比对照减少2d,高温期可达12d,说明B.siamensis SW-2可明显促进堆肥前期起温速度,提高堆体温度温度,而且高温持续时间长,堆肥反应速率加快。从表2可知,堆肥后有机质含量增加,C/N及氨氮含量降低,含水率减少,堆肥腐熟程度高。说明由本发明提供的微生物B.siamensis SW-2制得的微生物菌剂能够使堆体快速起温并迅速进入高温阶段,并维持较长高温时间,可促进物料的快速降解和腐熟进程,提高堆肥的质量和发酵效率。
表1微生物菌剂对堆肥温度的影响
表2微生物菌剂对堆肥腐熟度的影响
实施例4 B.siamensis SW-2微生物菌剂的应用
高温好氧堆肥物料为畜禽粪便,蓬松剂为秸秆,畜禽粪便及秸秆按1:1比例混匀后,控制水分在50%左右,按10%的比例接种实施例2的微生物菌剂充分混合后进行堆置发酵。同时以不添加本发明微生物接种剂为对照。堆肥时间为30d,每天检测堆体温度,间隔5d翻堆一次,待堆温达到65℃时翻堆;每5d多点四分法取样检测堆肥腐熟度指标,对堆肥结束时样品还检测其养分等理化指标。结果见表3和表4。
表3微生物菌剂对堆肥温度的影响
表4微生物菌剂对堆肥腐熟度的影响
从表3和表4可知,B.siamensis SW-2微生物菌剂可明显促进堆肥前期起温速度,提高发酵温度,延长高温持续时间。堆肥后有机质含量增加,C/N及氨氮含量降低,含水率减少,堆肥腐熟程度高。结果说明B.siamensis SW-2微生物菌剂可促进畜禽粪便高温好氧堆肥过程,提高发酵效率。
Claims (7)
1.一株暹罗芽孢杆菌Bacillus siamensisSW-2,保藏号为GDMCC No.60287。
2.权利要求1所述的菌株在高温堆肥中的应用。
3.权利要求1所述的菌株在制备高温堆肥菌剂中的应用。
4.一种利用权利要求1所述暹罗芽孢杆菌制备微生物制剂的方法,包含以下步骤:将BacillussiamensisSW-2用LB液体培养基活化培养后,接入发酵罐中用LB液体培养基扩大培养;将扩大培养后的发酵液接入发酵罐中进行发酵培养;将发酵培养的发酵液加入固体辅料中,烘干,粉碎,分装。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,固体辅料与发酵液的质量比为1.5∶1。
6.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,固体辅料含有活性炭和硅藻土。
7.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,固体辅料由60%活性碳和40%硅藻土组成。
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