CN109402015A - 一株热噬淀粉芽孢杆菌及其应用 - Google Patents

一株热噬淀粉芽孢杆菌及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一株热噬淀粉芽孢杆菌及其应用，属环境生物技术领域。本发明的热噬淀粉芽孢杆菌B202具有良好的秸秆木质素降解能力，与其他各菌株可良好共生，复配比例科学合理，使用该菌剂堆制堆肥，堆体达到高温所需时间短，高温持续时间长，木质素降解率高，不仅可有效加快堆肥反应的速度，还可改善堆肥的无害化效果，具有极为广阔的应用前景。

Description

一株热噬淀粉芽孢杆菌及其应用
技术领域
本发明涉及一株热噬淀粉芽孢杆菌及其应用，属环境生物技术领域。
背景技术
堆肥化是依靠自然界广泛分布的细菌、放线菌和真菌等微生物，在一定的人工条件下，有控制地促进可被生物降解的有机物向稳定的腐殖质转化的生物化学过程，因此固体废物好氧堆肥化过程实际上也是基质的微生物发酵过程。在这种堆肥化过程中，有机物由不稳定状态转化为稳定的腐殖质类物质，堆肥化的产品称为堆肥。原始的堆肥过程主要是农民将有机材料堆成垛，然后在自然条件下分解至一种相对的可以被土壤接受的稳定的程度，获得土壤有机肥料。该过程没有人为的控制，其产品可以为土壤提供大量腐殖质类物质和以有机状态存在的营养物质(如氮、磷和钾等)。现代堆肥化过程是通过上述原始的方法发展而得来，广泛运用于处理城市甚或垃圾和污泥，已逐渐成为有机固体废弃物的主流处理工艺之一。
添加微生物菌剂可提高木质纤维素的降解速度，加快含秸秆堆肥原料的堆肥化进程，缩短堆肥周期。ZL 201110200665.3公布了一种利用包含菌剂与木质素磺酸钠或氢氧化钠的化学腐熟剂加快园林废弃物堆肥腐熟的方法，解决了园林废弃物难降解、堆肥腐熟时间过长的问题。ZL 201010574304.0公布了一种降解秸秆的地衣芽孢杆菌CH15及其菌剂，能够高效降解秸秆纤维素、木质素和半纤维素，具有降解多种作物秸秆的能力。ZL201010574302.1公布了一种降解秸秆的赭绿青霉Y5及其菌剂，可通过降解现为木质素提高秸秆的降解效果。ZL200910233575.7公布了一种烟草秸秆降解真菌及其菌剂，可有效降解废弃烟草秸秆中的木质纤维素。可见，添加微生物菌剂可有效提高植物秸秆中木质纤维素的降解效率，实现农业可持续发展。
漆酶是一种含铜离子的多酚氧化酶，广泛存在于真菌、细菌以及植物中。漆酶在微生物降解木质素中发挥着关键作用。筛选产漆酶、高效降解木质素的菌株、并与其他微生物菌种复配获得复合微生物菌剂，对加快堆肥化进程、提高堆肥化效率和成品品质意义重大。
发明内容
本发明的第一个目的是提供一株可产漆酶的热噬淀粉芽孢杆菌(Bacillusthermoamylovorans strain)B202，已于2018年7月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No:M 2018471，保藏地址为中国，武汉，武汉大学；该菌株的发酵培养条件为：温度30℃-60℃，通气量0.5-1.0vvm，搅拌转速200-600r/min，溶解氧大于10％，pH值7.0-7.5。
本发明的第二个目的是提供含有上述热噬淀粉芽孢杆菌B202的微生物菌剂。
在本发明的一种实施方式中，所述微生物菌剂由热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus boronitolerans strain)、蔬菜芽孢杆菌(Bacillusoleronius strain)、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis strain)B211组成。
在本发明的一种实施方式中，所述Bacillus thermolactis strain B209，已于2018年7月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No:M 2018474，保藏地址为中国，武汉，武汉大学。
在本发明的一种实施方式中，所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis strain)B211，已于2018年7月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No:M2018475，保藏地址为中国，武汉，武汉大学。
在本发明的一种实施方式中，所述蔬菜芽孢杆菌(Bacillus oleronius strain)可选用Bacillus oleronius DSM 9356，所述耐硼赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillusboronitolerans strain)可选用Lysinibacillus boronitolerans ATCC BAA-1146。
在本发明的一种实施方式中，所述微生物菌剂是将获得的热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的发酵液按一定比例混合，使热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的活菌数之比为100-138:1-3:24-30:66-100:1.2-2.0。
在本发明的一种实施方式中，所述微生物菌剂的活菌总数为1.0×109～1.0×1010CFU/mL。
在本发明的一种实施方式中，所述微生物菌剂的活菌总数为1.0×109～1.0×1010CFU/g。
本发明的第三个目的是提供上述一种微生物菌剂的制备方法，所述方法为将热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strainB209与枯草芽孢杆菌B211分别接种至培养基中，获得热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的发酵液；将获得的发酵液按比例混合，添加载体辅料得到包含热噬淀粉芽孢杆菌B202的液态复合微生物菌剂。
在本发明的一种实施方式中，所述载体辅料包括但不限于褐煤、沸石、石粉中的一种或几种。
在本发明的一种实施方式中，所述微生物菌剂的制备方法为将热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的发酵液按比例混合，添加粉碎秸秆、炭化秸秆、麸皮中的一种或几种，热风干燥后，得到包含热噬淀粉芽孢杆菌B202的固态复合微生物菌剂。
在本发明的一种实施方式中，所述获得热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的发酵液为将热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillusthermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211分别接种至高温灭菌后的营养肉汤培养基中，接种量为发酵培养基体积的3％-10％(v/v)，静置培养20-30h；所述耐硼赖氨酸芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌B211的培养温度为28-37℃；所述热噬淀粉芽孢杆菌B202、蔬菜芽孢杆菌与Bacillus thermolactis strain B209的培养温度为30-60℃；当活菌数大于或等于1×108CFU/mL时，获得所述热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的发酵液。
在本发明的一种实施方式中，所述营养肉汤培养基为高温灭菌后的营养肉汤培养基。
在本发明的一种实施方式中，所述营养肉汤培养基的成分包含牛肉膏3.0g，蛋白胨10.0g，氯化钠5.0g，水1000mL。
本发明的第四个目的是提供所述微生物菌剂的应用。
在本发明的一种实施方式中，所述应用是用于市政污水处理厂剩余污泥、食品厂污水处理剩余污泥与秸秆混合堆肥。
在本发明的一种实施方式中，所述应用包含如下步骤：
(1)将所述堆肥复合微生物菌剂和堆肥原料按照0.1-0.5：100的比例进行混合；
(2)将混合物堆制堆肥，测量堆体温度，按照温度变化进行翻堆。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤(2)将所述混合物堆制堆肥，每天早上8:00和下午6:00测量堆体温度，当温度高于55℃时，每天翻堆一次，随着堆制时间的延长，堆体温度开始下降，当温度低于40℃时，停止翻堆，堆制结束。
本发明的有益效果：
(1)本发明公开了一株产漆酶的热噬淀粉芽孢杆菌(保藏编号：CCTCC No.M2018471)。该菌株可产漆酶，在营养肉汤中发酵22h后酶活可达8.6U/mL，具有较好的降解木质素的能力，具有极为广阔的市场应用前景。
(2)本发明提供的这种复合微生物菌剂，可用于市政污水处理厂剩余污泥、食品厂污水处理剩余污泥与秸秆混合堆制堆肥，较好实现上述混合废弃物的资源化利用。
(3)本发明提供的这种复合微生物菌剂，堆制7d后，可使堆肥原料中木质素的降解率达22.3％-33.1％，而对照实验中木质素7d内未降解。
(4)本发明提供的这种微生物菌剂在堆制堆肥时优势明显，可有效缩短堆体升温时间，使得堆体达到高温55℃所需时间由对照实验的68h缩短至12-48h，有效缩短堆肥周期。
(5)本发明提供的这种微生物菌剂在堆制堆肥时优势明显，可有效提高堆体的最高温度，使得堆体达到的最高温度由对照实验的54℃提高至61-67℃，环境卫生条件较好。
(6)本发明提供的这种微生物菌剂在堆制堆肥时优势明显，可有效延长堆体的高温持续时间，堆体高温55℃持续时间为54-81h，而对照实验的堆体温度始终低于55℃，无害化效果好。
(7)本发明提供的这种微生物菌剂在堆制堆肥时优势明显，可有效提高堆肥速度及稳定化效果，堆制7d后，可使混合物料的碳氮比由对照实验的22.5降低至12.8-18.9，腐熟度高。
(8)本发明提供的这种微生物菌剂在堆制堆肥时优势明显，可改善堆肥的无害化效果，堆肥结束时，粪大肠菌群数与蛔虫卵死亡率分别为64-90个/g与95.9％-96.2％，而对照实验分别为460个/g与68.9％。
生物材料保藏
热噬淀粉芽孢杆菌(Bacillus thermoamylovorans strain)B202，已于2018年7月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No:M 2018471，保藏地址为中国，武汉，武汉大学。
Bacillus thermolactis strain B209，已于2018年7月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No:M 2018474，保藏地址为中国，武汉，武汉大学。
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis strain)B211，已于2018年7月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No:M 2018475，保藏地址为中国，武汉，武汉大学。
具体实施方式
漆酶酶活的测定方法，在50℃下，以0.3mM的ABTS为底物，在pH3.5下测定酶活。使用紫外分光光度计检测420nm处的波长。
检测方法参见我国生物有机肥质量标准(NY 884-2012)。
木质素含量的检测方法：采用试亚铁灵指示剂法进行检测。木质素的降解率为R(％)：
R＝[(m1-m2)/m1/*100％
其中，m1为起始原料中木质素的质量(mg)，m2为堆制一段时间后物料中木质素的质量(mg)。
粪大肠菌群数的检测方法：采用肥料中粪大肠菌群数的检测方法(GB/T19524.1-2004)进行检测。
蛔虫卵死亡率的检测方法：采用肥料中粪大肠菌群数的检测方法(GB/T19524.2-2004)进行检测。
具体实施方式中，蔬菜芽孢杆菌、耐硼赖氨酸芽孢杆菌可选用商业化菌株Bacillus oleronius DSM 9356、Lysinibacillus boronitolerans ATCC BAA-1146，但不受限于上述菌株。
实施例1热噬淀粉芽孢杆菌B202的筛选
(1)将市政污水处理厂剩余污泥、食品厂污水处理剩余污泥与玉米秸秆按0.75：0.75：1比例混合，接种5％(w/w)的江苏省无锡市某区腐烂稻草秸秆，混合物料的含水率为55％，C/N比为25，混合均匀后堆制堆肥，每天早上8:00和下午6:00测量堆体温度，当温度高于55℃时，每天翻堆一次，随着堆制时间的延长，堆体温度开始下降，当温度低于40℃时，停止翻堆，取样；
(2)称取堆肥样品10g，放入装有90mL灭菌水的三角烧瓶中，120r/min摇床震荡1h，得到10-1稀释液，并依次制成10-4、10-5和10-6的三种堆肥样品稀释液，分别吸取上述三种稀释液100μL均匀涂布于营养琼脂培养基、高氏一号琼脂培养基和马铃薯琼脂培养基平板上，分别置于45℃的培养箱中倒置培养1-7d，然后反复划线分离，获得纯菌株菌落；
(3)将0.5g愈创木酚加入到30mL体积分数为95％的乙醇溶液中，用此溶液滴定各纯菌株菌落，若显红褐色，表示有漆酶产生，并可据其颜色深浅判断菌株的产漆酶能力，最终筛选得到一株产漆酶能力最强的菌株(颜色最深)。
实施例2热噬淀粉芽孢杆菌B202的鉴定
在营养琼脂培养基平板上于45℃培养过夜后，形成的菌落奶油色，边缘不规则，略粗糙，直径1～4mm，用光学显微镜观察呈革兰氏染色阳性，呈单个或2～4个细胞链状排列，杆状，产芽孢，可利用碳水化合物产酸。
采用16SrDNA测序进行分类学分子鉴定，将测序结果(1493bp)在NCBI中进行Blast比对，发现其16SrDNA碱基序列与热噬淀粉芽孢杆菌(Bacillus thermoamylovoransstrain)的相似性最高，为99％。
综合上述形态特征、生理生化特征及遗传性特征，可鉴定该产漆酶菌株为热噬淀粉芽孢杆菌(Bacillus thermoamylovorans strain)，将其命名为热噬淀粉芽孢杆菌B202，并于2018年7月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，菌种保藏号为CCTCC No.M 2018471。
将热噬淀粉芽孢杆菌B202接种至营养琼脂培养基平板上，45℃培养22h，然后转接至营养肉汤培养基中，45℃培养22h。将发酵液离心，测定漆酶酶活，结果显示，酶活为8.6U/mL。
将市政污水处理厂剩余污泥、食品厂污水处理剩余污泥与玉米秸秆按0.75：0.75：1比例混合，混合物料的含水率为55％，C/N比为30，将热噬淀粉芽孢杆菌B202发酵液按0.3％的质量加入并与混合物料混合，混合均匀后，堆制堆肥，每天早上8:00和下午6:00测量两个堆体的温度，当温度高于55℃时，每天翻堆一次，随着堆制时间的延长，堆体温度开始下降，当温度低于40℃时，停止翻堆，取样，测定堆肥各项质量指标。结果表明，堆肥7d后，物料中的木质素降解率达18.1％。
实施例3热噬淀粉芽孢杆菌B202菌种活化与培养
将热噬淀粉芽孢杆菌B202接种至营养琼脂培养基平板上，45℃培养22h。营养琼脂培养基的组成为牛肉膏3.0g，蛋白胨10.0g，氯化钠5.0g。
将活化好的菌种接种于装有100mL液体培养基的250mL摇瓶中，45℃条件下，160r/min振荡培养22h。摇瓶培养基组成为牛肉膏3.0g，蛋白胨10.0g，氯化钠5.0g，pH为7.3。
将摇瓶培养液按体积比3％-10％接种3L发酵罐中，搅拌转速为200-600r/min，通气量为0.5-1.0vvm，溶解氧大于10％，30-60℃条件下发酵培养20-30h。发酵罐培养基组成为蛋白胨20.0g，葡萄糖30g，磷酸二氢钾2.0g，氯化钠5.0g，pH为7.3。
实施例4含热噬淀粉芽孢杆菌B202的液态复合微生物菌剂的制备
液态复合微生物菌剂由热噬淀粉芽孢杆菌B202发酵液与其他菌株发酵液按照不同活菌数配比复配而成，具体制备方法如下：
(1)热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillusthermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的发酵液为将热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211分别接种至高温灭菌后的营养肉汤培养基中，接种量为发酵培养基体积的3％-10％(v/v)，培养20-30h；所述耐硼赖氨酸芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌B211的培养温度为28-37℃；所述热噬淀粉芽孢杆菌B202、蔬菜芽孢杆菌与Bacillus thermolactis strain B209的培养温度为30-60℃；当活菌数≥1×108CFU/mL时，获得所述热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的发酵液；
(2)将获得的热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的发酵液按一定比例混合，使各菌种的活菌数之比为100-138:1-3:24-30:66-100:1.2-2.0，添加发酵液质量0.1～10％的市售的载体辅料褐煤、沸石、石粉中的一种或几种。获得活菌总数为1.0×109-1.0×1010CFU/mL的液态复合微生物菌剂。
实施例5含热噬淀粉芽孢杆菌B202的固态复合微生物菌剂的制备
将获得的热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillusthermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的发酵液按一定比例混合，使各菌种的活菌数之比为100-138:1-3:24-30:66-100:1.2-2.0，添加市售的粉碎秸秆、炭化秸秆、麸皮中的一种或几种吸附发酵液，热风干燥后，获得活菌总数为1.0×109-1.0×1010CFU/g的固态复合微生物菌剂。
实施例6堆肥复合微生物菌剂的应用
将市政污水处理厂剩余污泥、食品厂污水处理剩余污泥与玉米秸秆按0.75：0.75：1比例混合，混合物料的含水率为55％，C/N比为30，将热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的活菌数之比为120:2:28:80:1.6的液态复合微生物菌剂与混合物料按照质量配比为0.3：100的比例混合，菌剂添加量为0.3％，混合均匀后，堆制堆肥，每天早上8:00和下午6:00测量两个堆体的温度，当温度高于55℃时，每天翻堆一次，随着堆制时间的延长，堆体温度开始下降，当温度低于40℃时，停止翻堆，取样，测定堆肥各项质量指标。结果表明，堆体达到最高温度所需时间为18h，最高温度为63℃，高于55℃持续时间为78h；堆置7d后，木质素的降解率为30.2％；堆肥结束时，混合物料的碳氮比为15.5，粪大肠菌群数与蛔虫卵死亡率分别为78个/g与96.0％。
实施例7堆肥复合微生物菌剂的应用
将市政污水处理厂剩余污泥、食品厂污水处理剩余污泥与玉米秸秆按1.25：1.25：1比例混合，混合物料的含水率为55％，C/N比为25，将热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的活菌数之比为100:1:24:66:1.2的液态复合微生物菌剂与混合物料按照质量配比为0.5：100的比例混合，菌剂添加量为0.5％，混合均匀后，堆制堆肥，每天早上8:00和下午6:00测量两个堆体的温度，当温度高于55℃时，每天翻堆一次，随着堆制时间的延长，堆体温度开始下降，当温度低于40℃时，停止翻堆，取样，测定堆肥各项质量指标。结果表明，堆体温度迅速升高，达到最高温度所需时间为24h，最高温度为63℃，高于55℃持续时间为66h；堆置7d后，木质素的降解率为32.0％；堆肥结束时，混合物料的碳氮比为15.8，粪大肠菌群数与蛔虫卵死亡率分别为70个/g与96.0％。
实施例8堆肥复合微生物菌剂的应用
将市政污水处理厂剩余污泥、食品厂污水处理剩余污泥与玉米秸秆按1.25：1.25：1比例混合，混合物料的含水率为55％，C/N比为25，将热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的活菌数之比为120:2:28:80:1.6的液态复合微生物菌剂与混合物料按照质量配比为0.5：100的比例混合，菌剂添加量为0.5％，混合均匀后，堆制堆肥，每天早上8:00和下午6:00测量两个堆体的温度，当温度高于55℃时，每天翻堆一次，随着堆制时间的延长，堆体温度开始下降，当温度低于40℃时，停止翻堆，取样，测定堆肥各项质量指标。结果表明，堆体温度迅速升高，达到最高温度所需时间为12h，最高温度为67℃，高于55℃持续时间为81h；堆置7d后，木质素的降解率为33.1％；堆肥结束时，混合物料的碳氮比为12.8，粪大肠菌群数与蛔虫卵死亡率分别为64个/g与96.2％。
实施例9堆肥复合微生物菌剂的应用
将市政污水处理厂剩余污泥、食品厂污水处理剩余污泥与玉米秸秆按1：1：1比例混合，混合物料的含水率为55％，C/N比为27，将热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的活菌数之比为138:3:30:100:2的固态复合微生物菌剂与混合物料按照质量配比为0.1：100的比例混合，菌剂添加量为0.1％，混合均匀后，堆制堆肥，每天早上8:00和下午6:00测量两个堆体的温度，当温度高于55℃时，每天翻堆一次，随着堆制时间的延长，堆体温度开始下降，当温度低于40℃时，停止翻堆，取样，测定堆肥各项质量指标。结果表明，堆体温度迅速升高，达到最高温度所需时间为48h，最高温度为61℃，高于55℃持续时间为54h；堆置7d后，木质素的降解率为22.3％；堆肥结束时，混合物料的碳氮比为18.9，粪大肠菌群数与蛔虫卵死亡率分别为90个/g与95.9％。
对比例1
将市政污水处理厂剩余污泥、食品厂污水处理剩余污泥与玉米秸秆按0.75：0.75：1比例混合，混合物料的含水率为55％，C/N比为30，将不含热噬淀粉芽孢杆菌B202的上述液态复合微生物菌剂与混合物料按照质量配比为0.3：100的比例混合，菌剂添加量为0.3％，其中，耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的活菌数之比为2:28:80:1.6，混合均匀后，堆制堆肥，每天早上8:00和下午6:00测量两个堆体的温度，当温度高于55℃时，每天翻堆一次，随着堆制时间的延长，堆体温度开始下降，当温度低于40℃时，停止翻堆，取样，测定堆肥各项质量指标。结果表明，堆体达到最高温度所需时间为68h，最高温度为54℃，低于55℃；堆置7d后，木质素未降解；堆肥结束时，混合物料的碳氮比为22.5，粪大肠菌群数与蛔虫卵死亡率分别为460个/g与68.9％。
对比例2
具体实施方式同实施例6，区别在于，热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的活菌之比有差异，具体如表1所示。结果表明，堆体达到最高温度所需时间延长至52-69h，最高温度为48-57℃；堆置7天后，木质素降解率仅为2.3-11.2％；堆肥结束时，混合物料的碳氮比为22.0-25.9，粪大肠菌群数与蛔虫卵死亡率分别为320-900个/g与41.0-70.2％。
表1
虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

Claims (10)

1.一株可产漆酶的热噬淀粉芽孢杆菌(Bacillus thermoamylovorans strain)B202，已于2018年7月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No:M 2018471，保藏地址为中国，武汉，武汉大学。
2.含有权利要求1所述热噬淀粉芽孢杆菌B202的微生物菌剂。
3.根据权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，还含有耐硼赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus boronitolerans)、蔬菜芽孢杆菌(Bacillus oleronius)、Bacillusthermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis strain)B211。
4.根据权利要求3所述的微生物菌剂，其特征在于，热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的活菌数之比为100-138:1-3:24-30:66-100:1.2-2.0；微生物菌剂的活菌总数为1.0×109～1.0×1010CFU/mL或者CFU/g。
5.根据权利要求4所述的微生物菌剂，其特征在于，制备方法：将热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211分别接种至培养基中，获得热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的发酵液；将获得的发酵液按比例混合，添加载体辅料得到液态复合菌剂；所述载体辅料包括但不限于褐煤、沸石、石粉中的一种或几种。
6.根据权利要求4所述的微生物菌剂，其特征在于，制备方法为：将热噬淀粉芽孢杆菌B202、耐硼赖氨酸芽孢杆菌、蔬菜芽孢杆菌、Bacillus thermolactis strain B209与枯草芽孢杆菌B211的发酵液按比例混合，添加粉碎秸秆、炭化秸秆、麸皮中的一种或几种，热风干燥后，得到包含热噬淀粉芽孢杆菌B202的固态复合微生物菌剂。
7.权利要求1所述的热噬淀粉芽孢杆菌(Bacillus thermoamylovorans strain)在食品、生物、化工、环境领域的应用。
8.一种促进市政污水处理厂剩余污泥、食品厂污水处理剩余污泥与秸秆混合堆肥的方法，其特征在于，应用含有权利要求1所述热噬淀粉芽孢杆菌(Bacillusthermoamylovorans strain)B202的微生物菌剂进行堆肥。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，包含如下步骤：
(1)将权利要求2～6任一所述的微生物菌剂和堆肥原料按照0.1-0.5：100的比例进行混合；
(2)将混合物堆制堆肥，测量堆体温度，按照温度变化进行翻堆。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)将所述混合物堆制堆肥，每天早上和下午测量堆体温度1～2次，当温度高于55℃时，每天翻堆1～2次，随着堆制时间的延长，堆体温度开始下降，当温度低于40℃时，停止翻堆，堆制结束。
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