UA122671C2 - Композиція, що містить рекомбінантні клітини bacillus і фунгіцид - Google Patents

Композиція, що містить рекомбінантні клітини bacillus і фунгіцид Download PDF

Info

Publication number
UA122671C2
UA122671C2 UAA201703574A UAA201703574A UA122671C2 UA 122671 C2 UA122671 C2 UA 122671C2 UA A201703574 A UAA201703574 A UA A201703574A UA A201703574 A UAA201703574 A UA A201703574A UA 122671 C2 UA122671 C2 UA 122671C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
amino acids
protein
plant
exosporium
targeting sequence
Prior art date
Application number
UAA201703574A
Other languages
English (en)
Inventor
Даміан Куртіс
Дамиан Куртис
Брайан ТОМПСОН
Original Assignee
Байєр Кропсайєнс Лп
Байер Кропсайенс Лп
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Байєр Кропсайєнс Лп, Байер Кропсайенс Лп filed Critical Байєр Кропсайєнс Лп
Publication of UA122671C2 publication Critical patent/UA122671C2/uk

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01CPLANTING; SOWING; FERTILISING
    • A01C1/00Apparatus, or methods of use thereof, for testing or treating seed, roots, or the like, prior to sowing or planting
    • A01C1/06Coating or dressing seed
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12YENZYMES
    • C12Y302/00Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01004Cellulase (3.2.1.4), i.e. endo-1,4-beta-glucanase
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02Bacterial antigens
    • A61K39/07Bacillus
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01GHORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G7/00Botany in general
    • A01G7/06Treatment of growing trees or plants, e.g. for preventing decay of wood, for tingeing flowers or wood, for prolonging the life of plants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N37/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids
    • A01N37/44Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids containing at least one carboxylic group or a thio analogue, or a derivative thereof, and a nitrogen atom attached to the same carbon skeleton by a single or double bond, this nitrogen atom not being a member of a derivative or of a thio analogue of a carboxylic group, e.g. amino-carboxylic acids
    • A01N37/50Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most two bonds to halogen, e.g. carboxylic acids containing at least one carboxylic group or a thio analogue, or a derivative thereof, and a nitrogen atom attached to the same carbon skeleton by a single or double bond, this nitrogen atom not being a member of a derivative or of a thio analogue of a carboxylic group, e.g. amino-carboxylic acids the nitrogen atom being doubly bound to the carbon skeleton
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N43/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
    • A01N43/72Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with nitrogen atoms and oxygen or sulfur atoms as ring hetero atoms
    • A01N43/80Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with nitrogen atoms and oxygen or sulfur atoms as ring hetero atoms five-membered rings with one nitrogen atom and either one oxygen atom or one sulfur atom in positions 1,2
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/50Isolated enzymes; Isolated proteins
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74Bacteria
    • A61K35/741Probiotics
    • A61K35/742Spore-forming bacteria, e.g. Bacillus coagulans, Bacillus subtilis, clostridium or Lactobacillus sporogenes
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12YENZYMES
    • C12Y302/00Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01132Chitosanase (3.2.1.132)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K2035/11Medicinal preparations comprising living procariotic cells
    • A61K2035/115Probiotics

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Ecology (AREA)
  • Forests & Forestry (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Soil Sciences (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Abstract

Винахід стосується композиції, що містить а) рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Bacillus, які експресують злитий білок, що містить: (І) принаймні один стимулюючий ріст рослин білок або пептид і (II) націлюючу послідовність, яка локалізує злитий білок на екзоспорій клітин Bacillus; і б) принаймні один переважний фунгіцид, описаний у даній заявці, у синергетично ефективній кількості. Крім того, даний винахід стосується застосування цієї композиції, а також способу посилення росту рослини, сприяння життєздатності рослини та/або зменшення сумарного ураження рослин і частин рослин.

Description

способу посилення росту рослини, сприяння життєздатності рослини та/або зменшення сумарного ураження рослин і частин рослин.
ПЕРЕХРЕСНЕ ПОСИЛАННЯ НА СПОРІДНЕНІ ЗАЯВКИ
У даній заявці заявляється пріоритет попередньої заявки на патент США Ме 62/051,915, поданої 17 вересня 2014 р., зміст якої повністю включено в дану заявку шляхом посилання.
ПОСИЛАННЯ НА ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ, ПОДАНИЙ ЕЛЕКТРОННО
Офіційна копія переліку послідовностей подана електронно через ЕЕ5-Умер у вигляді АБ5СЇІІ- форматованого переліку послідовності з файлом за назвою "ВС5149058УМ0 5Т251ХГ, який був створено 14 вересня 2015 р., і має розмір 152 кілобайт, і поданий одночасно із заявкою. Перелік послідовностей, що міститься в АЗСІІ-форматованому документі, є частиною опису й, таким чином, включений повністю шляхом посилання.
ПЕРЕДУМОВИ СТВОРЕННЯ ВИНАХОДУ
Галузь техніки, до якої належить винахід
Даний винахід стосується композиції, що містить (І) рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васпивз, які експресують злитий білок, що містить: (а) принаймні один стимулюючий ріст рослин білок або пептид; і (б) націлюючу послідовність, яка локалізує злитий білок на екзоспорій клітин Вастив; і (ІІ) принаймні один фунгіцид, вибраний із переважних фунгіцидів, описаних у даній заявці, який проявляє здатність поліпшувати ріст рослини та/або життєздатність та/або активність по відношенню до комах, кліщів, нематод та/або фітопатогенів у синергетично ефективних кількостях. Крім того, даний винахід стосується застосування цієї композиції, а також способу посилення росту рослини, сприяння життєздатності рослини, та/або зменшення сумарного ураження рослин і частин рослин.
Рівень техніки
Для захисту сільськогосподарських культур, існує постійна потреба в застосовуваних препаратах, які поліпшують життєздатність та/або ріст рослин. Здоровіші рослини в цілому забезпечують більшу врожайність та/або кращу якість рослини або її продуктів.
Для сприяння життєздатності рослини, в усьому світі використовуються добрива, як на основі неорганічних, так і органічних речовин. Добриво може представляти собою одну речовину або композицію, і використовуватися для забезпечення рослин живильними речовинами. Значним відкриттям у застосуванні добрив була розробка азотного добрива див5іи5 моп Мебрід приблизно в 1840 р. Проте, добрива можуть приводити до підкислення грунту й
Зо дестабілізації балансу живильних речовин у грунті, включаючи виснаження запасів мінералів і збагачення солями й важкими металами. Додатково, надмірне удобрювання може приводити до зміни фауни грунту, а також до забруднення поверхневої води й грунтової води. Крім того, шкідливі для здоров'я речовини, такі як нітрат, можуть у великій кількості збагачувати рослини й плоди.
Додатково, інсектициди й фунгіцид застосовуються в усьому світі для боротьби зі шкідниками. Синтетичні інсектициди або фунгіциди часто є неспецифічними й, отже, можуть діяти на організми, що відрізняються від цільових організмів, включаючи інших корисних організмів, що зустрічаються в природі. Внаслідок їх хімічної природи, вони також можуть бути токсичними й біонерозкладними. Користувачі в усьому світі усе більше й більше усвідомлюють потенційні проблеми впливу на навколишнє середовище й здоров'я, пов'язані із залишками хімічних речовин, особливо в харчових продуктах. Це приводить до зростаючого тиску користувачів на зменшення застосування або принаймні кількості хімічних (тобто, синтетичних) пестицидів. Таким чином, існує потреба керування харчовими ланцюжками, при цьому усе ще надаючи можливість ефективної боротьби зі шкідниками.
Іншою проблемою, що виникає внаслідок застосування синтетичних інсектицидів або фунгіцидів, є той факт, що повторне й монопольне застосування інсектициду або фунгіцидів часто приводить до селекції резистентних тварин-шкідників або мікроорганізмів. У звичайних умовах, такі штами також перехресно резистентні до інших активних компонентів, що мають такий же спосіб дії. Таким чином, ефективна боротьба з патогенами за допомогою вказаних активних сполук більше не є можливою. Проте, складно й дорого розробляти активні компоненти, що мають нові механізми дії.
Застосування агентів біологічної боротьби (ВСА), які діють як засоби, що підсилюють життєздатність рослин та/або агентів, що захищають рослини, є альтернативою добривам і синтетичних пестицидів. У деяких випадках, ефективність ВСА не знаходиться на тому ж рівні, що й для загальноприйнятих інсектицидів ії фунгіцидів, особливо у випадку важкого інфекційного тиску. Отже, за певних умов, агенти біологічної боротьби, їх мутанти й метаболіти, продуковані ними, особливо, у низьких нормах внесення, є не повністю задовільними. Таким чином, існує постійна потреба розробки нових композицій, що підсилюють життєздатність рослин, та/або композицій для захисту рослин, включаючи агенти біологічної боротьби, використовувані в комбінації із синтетичними фунгіцидами й інсектицидами, для досягнення відповідності вищеописаним вимогам.
Короткий виклад суті винаходу
З урахуванням вищевикладеного, особливо, задачею даного винаходу є забезпечення композицій, які мають збільшену здатність поліпшувати ріст рослини та/або збільшувати життєздатність рослини або які проявляють збільшену активність по відношенню до комах, кліщів, нематод та/або фітопатогенів.
Таким чином, було виявлено, що ці задачі вирішуються за допомогою композицій відповідно до винаходу, як визначено далі. Шляхом застосування а) рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Вас//Лих, які експресують злитий білок, що містить: (І) принаймні один стимулюючий ріст рослин білок або пептид, вибраний із групи, яка включає фермент, залучений у продукцію або активацію сполуки, що стимулює ріст рослин; фермент, який розкладає або модифікує бактеріальне, грибкове або рослинне джерело харчування; і білок або пептид, який захищає рослину від патогена, або шкідника; і (ІІ) націлюючу послідовність, яка локалізує злитий білок на екзоспорій клітин Васіив; і б) принаймні одного переважного фунгіциду, описаного в даній заявці, який здатний підсилювати переважно понададитивним способом (І) ріст рослини, урожайність рослин та/або життєздатність рослини та/або (Ії) активність по відношенню до комах, кліщів, нематод та/або фітопатогенів.
Посилання в даній заявці на націлюючі послідовності, білки екзоспорію, фрагменти білків екзоспорію, злиті білки, і рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васійи5, які екпресують такі злиті білки, не повинні розглядатися як відокремлені варіанти здійснення винаходу. Замість цього, для всього даного винаходу, посилання на націлюючі послідовності, білки екзоспорію, фрагменти білків екзоспорію, злиті білки, і рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Вас/ив, які екпресують такі злиті білки, повинні розглядатися, як описані й заявлені тільки в комбінації (їі переважно в синергетичній комбінації) з одним або декількома переважними фунгіцидами, описаними в даній заявці. Крім того, посилання на "переважний фунгіцид, описаний у даній заявці" охоплюють фунгіциди, описані нижче в абзацах (0001851-(0001871.
Даний винахід спрямований на композицію, що містить а) рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васшив, які експресують злитий білок, що містить: (І) принаймні один
Зо стимулюючий ріст рослин білок або пептид, вибраний із групи, яка включає фермент, залучений у продукцію або активацію сполуки, що стимулює ріст рослин; і фермент, який розкладає або модифікує бактеріальне, грибкове або рослинне джерело харчування; або білок або пептид, який захищає рослину від патогена; і (ІЇ) націлюючу послідовність, яка локалізує злитий білок на екзоспорій клітин Васптив; і б) принаймні один переважний фунгіцид, описаний у даній заявці в синергетично ефективній кількості.
У деяких варіантах здійснення націлююча послідовність включає: амінокислотну послідовність, що має принаймні приблизно 4395 ідентичність із амінокислотами 20-35 з ЗЕО ІЮ
МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 5495; націлюючу послідовність, яка містить амінокислоти 1-35 з 5ЕО ІЮ МО: 1; націлюючу послідовність, яка містить амінокислоти 20-35 з БЕО ІЮО МО: 1; націлюючу послідовність, утримуючу амінокислоти 22-31 з БО ІО МО: 1; націлюючу послідовність, яка містить амінокислоти 22-33 з БЕО ІЮО МО: 1; націлюючу послідовність, яка містить амінокислоти 20-31 з ЗЕО ІЮО МО: 1; націлюючу послідовність, яка містить 5ЕО ІЮО МО: 1; або білок екзоспорію, що містить амінокислотну послідовність, що має принаймні 8595 ідентичність із «ЕО ІЮ МО: 2.
У деяких варіантах здійснення, продукуючі екзоспорій клітини Вас//и5, представляють собою клітини представника сімейства Вас//из сегеив. Рекомбінантний представник сімейства Васпив сегеиз може представляти собою будь-який з Васійиб5 апійгасіх, Васіййи5 сегеиз, Васшив
Іпипіпдіепвзібх, Васійи5 тусоідез, Васіи5 рхеидотусоїідез, Васійи5 затапії, Васйив5 даетокепзвів,
Вастиз шеїпепвеіерНепвзів, Васійи5 Ісуоіепвів і їх комбінації. В подальшому варіанті здійснення, рекомбінантні клітини Вас//Лих представляють собою клітини Васі/ив Іпигіпдіепвіз ВТО1ЗА.
У певних аспектах, злитий білок включає фермент, залучений у продукцію або активацію сполуки, що стимулює ріст рослин, вибраний із групи, яка включає ацетоїн-редуктазу, індол-3- ацетамід-гідролазу, триптофан-монооксигеназу, ацетолактат-синтетазу, са-ацетолактат- декарбоксилазу, піруват-декарбоксилазу, діацетил-редуктазу, бутандіол-дегідрогеназу, амінотрансферазу, триптофан-декарбоксилазу, аміноксидазу, індол-З-піруват-декарбоксилазу, індол-3-ацетальдегід дегідрогеназу, оксидазу бічного ланцюга триптофану, нітрил-гідролазу, нітрилазу, пептидазу, протеазу, аденозинфосфат-ізопентеніл-трансферазу, фосфатазу, аденозин-кіназу, аденін-фосфорибозилтрансферазу, СУР7З5БА, 5'-рибонуклеотид- фосфогідролазу, аденозин-нуклеозидазу, зеатин цис-транс-ізомеразу, зеатин о- бо глікозилтрансферазу, В-глюкозидазу, цис-гідроксилазу, СК цис-гідроксилазу, СК М-
глікозилтрансферазу, 2,5-рибонуклеотид фосфогідролазу, аденозин-нуклеозидазу, пуриннуклеозид фосфорилазу, зеатин редуктазу, гідроксиламін редуктазу, 2-оксоглутарат діоксигеназу, гіберелінову 2В/3В гідролазу, гіберелін З3-оксидазу, гіберелін 20-оксидазу, хітозаназу, хітиназу, В-1,3- глюканазу, В-1,4-глюканазу, ДВ-1,6-глюканазу, дезаміназу аміноциклопропан-1-карбонової кислоти, і фермент, залучений у продукцію поа-фактора.
В інших аспектах, злитий білок включає фермент, який розкладає або модифікує бактеріальне, грибкове або рослинне джерело харчування, вибраний із групи, яка включає целюлазу, ліпазу, лігнін-оксидазу, протеазу, глікозид гідролазу, фосфатазу, нітрогеназу, нуклеазу, амідазу, нітрат-редуктазу, нітрит-редуктазу, амілазу, амоній-оксидазу, лігніназу, глюкозидазу, фосфоліпазу, фітазу, пектиназу, глюканазу, сульфатазу, уреазу, ксиланазу, і сидерофор.
У ще інших аспектах, злитий білок включає білок або пептид, який захищає рослину від патогена, і білок або пептид мають антибактеріальну активність, протигрибкову активність, або обидві активності: антибактеріальну й протигрибкову. Такий білок може включати бактеріоцин, лізоцим, лізоцим пептид, сидерофор, нерибосомальний активний пептид, кональбумін, альбумін, лактоферин, лактоферин пептид, ТазА, або стрептавідин.
У деяких варіантах здійснення, принаймні один фунгіцид вибирають із групи, яка включає бітертанол, біксафен, бромуконазол, карбендазим, карпропамід, дихлофлуанід, фенамідон, фенгексамід, фентин ацетат, фентин гідроксид, фторпіколід, флуопірам, флуоксастробін, флухінконазол, фосетил, іпродіон, іпровалікарб, ізотіаніл, метоміностробін, офурац, пенцикурон, пенфлуфен, прохлораз, пропамокарб, пропінеб, протіоконазол, піриметаніл, спіроксамін, тебуконазол, толілфлуанід, триадимефон, триадименол, триазоксид, трифлоксистробін, М-(5-хлор-2-(трифторметил)бензил|-М-циклопропіл-3-(дифторметил)-5-фтор- 1-метил-1Н-піразол-4-карбоксамід, і 2,6-диметил-1Н,5Н-|1,4|дитіїно(2,3-с:5,6-С|дипірол- 1,3,5,7(2Н,6Н)-тетрон.
В інших варіантах здійснення, принаймні один фунгіцид вибирають із групи, яка включає карбендазим, флухінконазол, ізотіаніл, пенцикурон, пенфлуфен, протіоконазол, тебуконазол, і трифлоксистробін.
У деяких варіантах здійснення, композиція згідно із даним винаходом включає а)
Зо рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини ВасіЛив, які експресують злитий білок, що містить: (І) принаймні один стимулюючий ріст рослин білок або пептид, вибраний із групи, яка включає фермент, залучений у продукцію або активацію сполуки, що стимулює ріст рослин, і фермент, який розкладає або модифікує бактеріальне, грибкове або рослинне джерело харчування або принаймні один білок або пептид, який захищає рослину від патогена; і (І) націлюючу послідовність, яка локалізує злитий білок на екзоспорій клітин Васі//их; і б) принаймні один фунгіцид вибраний із групи, яка включає карбендазим, флухінконазол, ізотіаніл, пенцикурон, пенфлуфен, протіоконазол, флуопірам, тебуконазол, і трифлоксистробін у синергетично ефективній кількості.
У переважному аспекті вищеописаних варіантів здійснення винаходу (І) принаймні один фунгіцид представляє собою карбендазим; (ІІ) націлююча послідовність включає амінокислотну послідовність, що має принаймні приблизно 4395 ідентичність із амінокислотами 20-35 з ЗЕО ІЮ
МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 54905; (І) стимулюючий ріст рослин білок або пептид включає ендоглюканазу, фосфоліпазу або хітозиназу, переважно с послідовністю, ідентичною принаймні на 9595 з БЕО ІЮО МО: 107, 108 і 109, відповідно; і (ІМ) рекомбінантні клітини представника сімейства Васі//Ли5 сегеиз включають клітини Васійи5 Іигіпдіепзіз або Васійиз тусоіїдез. У ще іншому переважному варіанті здійснення, рекомбінантні клітини представника сімейства Вас//их сегеих представляють собою клітини Васійи5 ІПигіпдіепві5 ВТО1ЗА.
У переважному аспекті вищеописаних варіантів здійснення винаходу (І) принаймні один фунгіцид представляє собою флухінконазол; (І) націлююча послідовність включає амінокислотну послідовність, що має принаймні приблизно 4395 ідентичність із амінокислотами 20-35 з БЕО ІО МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 5495; (ПІ) стимулюючий ріст рослин білок або пептид включає ендоглюканазу, фосфоліпазу або хітозиназу, переважно с послідовністю, ідентичною принаймні на 9595 з БЕО ІЮ МО: 107, 108 і 109, відповідно; і (ІМ) рекомбінантні клітини представника сімейства Васі//Ли5 сегеиз включають клітини Васійи5 Іигіпдіепзіз або Васійиз тусоіїдез. У ще іншому переважному варіанті здійснення, рекомбінантні клітини представника сімейства Вас//лих сегеих представляють собою клітини Васійи5 Іпигіпдеіпві5 ВТО1ЗА.
У переважному аспекті вищеописаних варіантів здійснення винаходу (І) принаймні один бо фунгіцид представляє собою ізотіаніл; (І) націлююча послідовність включає амінокислотну послідовність, що має принаймні приблизно 4395 ідентичність із амінокислотами 20-35 з ЗЕО ІЮ
МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 54905; (І) стимулюючий ріст рослин білок або пептид включає ендоглюканазу, фосфоліпазу або хітозиназу, переважно с послідовністю, ідентичною принаймні на 9595 з БЕО ІЮО МО: 107, 108 і 109, відповідно; і (ІМ) рекомбінантні клітини представника сімейства Васі//Ли5 сегеиз включають клітини Васійи5 Іигіпдіепзіз або Васійиз тусоіїдез. У ще іншому переважному варіанті здійснення, рекомбінантні клітини представника сімейства Вас//их сегеих представляють собою клітини Васійи5 Іпигіпдеіпві5 ВТО1ЗА.
У переважному аспекті вищеописаних варіантів здійснення винаходу (І) принаймні один фунгіцид представляє собою пенцикурон; (Ії) націлююча послідовність включає амінокислотну послідовність, що має принаймні приблизно 4395 ідентичність із амінокислотами 20-35 з ЗЕО ІЮ
МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 5495; (ПП) стимулюючий ріст рослин білок або пептид включає ендоглюканазу, фосфоліпазу або хітозиназу, переважно с послідовністю, ідентичною принаймні на 9595 з БЕО ІЮО МО: 107, 108 і 109, відповідно; і (ІМ) рекомбінантні клітини представника сімейства Васі//Ли5 сегеиз включають клітини Васійи5 Іигіпдіепзіз або Васійиз тусоіїдез. У ще іншому переважному варіанті здійснення, рекомбінантні клітини представника сімейства Вас//их сегеих представляють собою клітини Васійи5 Іпигіпдеіпві5 ВТО1ЗА.
У переважному аспекті вищеописаних варіантів здійснення винаходу (І) принаймні один фунгіцид представляє собою пенфлуфен; (ІІ) націлююча послідовність включає амінокислотну послідовність, що має принаймні приблизно 4395 ідентичність із амінокислотами 20-35 з ЗЕО ІЮ
МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 54905; (І) стимулюючий ріст рослин білок або пептид включає ендоглюканазу, фосфоліпазу або хітозиназу, переважно с послідовністю, ідентичною принаймні на 9595 з БЕО ІЮО МО: 107, 108 і 109, відповідно; і (ІМ) рекомбінантні клітини представника сімейства Васі//Ли5 сегеиз включають клітини Васійи5 Іигіпдіепзіз або Васійиз тусоіїдез. У ще іншому переважному варіанті здійснення, рекомбінантні клітини представника сімейства Вас//их сегеих представляють собою клітини Васійи5 Іпигіпдеіпві5 ВТО1ЗА.
У переважному аспекті вищеописаних варіантів здійснення винаходу (І) принаймні один
Зо фунгіцид представляє собою протіоконазол; (І) націлююча послідовність включає амінокислотну послідовність, що має принаймні приблизно 4395 ідентичність із амінокислотами 20-35 з БЕО ІО МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 5495; (ПІ) стимулюючий ріст рослин білок або пептид включає ендоглюканазу, фосфоліпазу або хітозиназу, переважно с послідовністю, ідентичною принаймні на 9595 з БЕО ІЮ МО: 107, 108 і 109, відповідно; і (ІМ) рекомбінантні клітини представника сімейства Васі//Ли5 сегеиз включають клітини Васійи5 Іигіпдіепзіз або Васійиз тусоіїдез. У ще іншому переважному варіанті здійснення, рекомбінантні клітини представника сімейства Вас//их сегеих представляють собою клітини Васійи5 Іпигіпдеіпві5 ВТО1ЗА.
У переважному аспекті вищеописаних варіантів здійснення винаходу (І) принаймні один фунгіцид представляє собою флуопірам; (ІІ) націлююча послідовність включає амінокислотну послідовність, що має принаймні приблизно 4395 ідентичність із амінокислотами 20-35 з ЗЕО ІЮ
МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 54905; (І) стимулюючий ріст рослин білок або пептид включає ендоглюканазу, фосфоліпазу або хітозиназу, переважно с послідовністю, ідентичною принаймні на 9595 з БЕО ІЮО МО: 107, 108 і 109, відповідно; і (ІМ) рекомбінантні клітини представника сімейства Васі//Ли5 сегеиз включають клітини Васіиз5 Іпигіпдіепвіз або Васілиз тусоідев.
У переважному аспекті вищеописаних варіантів здійснення винаходу (І) принаймні один фунгіцид представляє собою трифлоксистробін; (І) націлююча послідовність включає амінокислотну послідовність, що має принаймні приблизно 4395 ідентичність із амінокислотами
БО 20-35 з БЕО ІО МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 5495; (ПІ) стимулюючий ріст рослин білок або пептид включає ендоглюканазу, фосфоліпазу або хітозиназу, переважно с послідовністю, ідентичною принаймні на 9595 з БЕО ІЮ МО: 107, 108 і 109, відповідно; і (ІМ) рекомбінантні клітини представника сімейства Васі//Ли5 сегеиз включають клітини Васійи5 Іигіпдіепзіз або Васійиз тусоіїдез. У ще іншому переважному варіанті здійснення, рекомбінантні клітини представника сімейства Вас//лих сегеих представляють собою клітини Васійи5 Іпигіпдеіпві5 ВТО1ЗА.
У переважному аспекті вищеописаних варіантів здійснення винаходу (І) принаймні один фунгіцид представляє собою тебуконазол; (ІЇ) націлююча послідовність включає амінокислотну послідовність, що має принаймні приблизно 4395 ідентичність із амінокислотами 20-35 з ЗЕО ІЮ 60 МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 54905; (І)
стимулюючий ріст рослин білок або пептид включає ендоглюканазу, фосфоліпазу або хітозиназу, переважно с послідовністю, ідентичною принаймні на 9595 з БЕО ІЮО МО: 107, 108 і 109, відповідно; і (ІМ) рекомбінантні клітини представника сімейства Васі//Ли5 сегеиз включають клітини Васійи5 Іигіпдіепзіз або Васійиз тусоідез. У ще іншому переважному варіанті здійснення, рекомбінантні клітини представника сімейства Вас//их сегеих представляють собою клітини Васійи5 Іпигіпдеіпві5 ВТО1ЗА.
У деяких аспектах, композиція додатково включає принаймні одну допоміжну речовину, вибрану із групи, яка включає модифікуючі агенти, розчинники, спонтанні промотори, носії, емульсифікатори, диспергуючі речовини, речовини, що захищають від замерзання, загусники й ад'юванти.
В інших аспектах, винахід стосується насіння, обробленого будь-якою з композицій, описаних у даній заявці.
Крім того, даний винахід стосується застосування описаних композицій як фунгіциду та/або інсектициду. У певних аспектах, описані композиції використовуються для зменшення сумарного ураження рослин і частин рослин, а також втрат зібраних фруктів або овочів, викликаних комахами, кліщами, нематодами та/або фітопатогенами. В інших аспектах, описані композиції використовуються для посилення росту рослини та/або сприяння життєздатності рослини.
Додатково, даний винахід стосується способу обробки рослини, частини рослини, такої як насіння, коренів, ризома, бульбоцибулина, цибулина або бульба, та/або локусу, на якому або біля якого рослина або частини рослини ростуть, такого як грунт, для посилення росту рослини та/або сприяння життєздатності рослини, що включає стадію одночасного або послідовного використання на рослині, частині рослини та/або локусах рослини: а) рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Вас//ив5, які експресують злитий білок, що містить: (І) принаймні один стимулюючий ріст рослин білок або пептид, вибраний із групи, яка включає фермент, залучений у продукцію або активацію сполуки, що стимулює ріст рослин; фермент, який розкладає або модифікує бактеріальне, грибкове або рослинне джерело харчування; і білок або пептид, який захищає рослину від патогена; і (ІІ) націлюючу послідовність, яка локалізує злитий білок на екзоспорій клітин Васіив; і б) принаймні одного фунгіциду, вибраного із переважних фунгіцидів, описаних у даній заявці, який проявляє активність по відношенню до комах, кліщів,
Зо нематод та/або фітопатогенів у синергетично ефективній кількості.
В іншому варіанті здійснення, даний винахід забезпечує спосіб зменшення сумарного ураження рослин і частин рослин, а також втрат зібраних фруктів або овочів, викликаних комахами, кліщами, нематодами та/або фітопатогенами, що включає стадію одночасного або послідовного використання на рослині, частині рослини, такій як насіння, коренів, ризома, бульбоцибулина, цибулина або бульба, та/(або локусу, на якому або біля якого рослина або частини рослини ростуть, такого як грунт: а) рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин
Васійиз, які експресують злитий білок, що містить: (І) принаймні один стимулюючий ріст рослин білок або пептид, вибраний із групи, яка включає фермент, залучений у продукцію або активацію сполуки, що стимулює ріст рослин; фермент, який розкладає або модифікує бактеріальне, грибкове або рослинне джерело харчування; і білок або пептид, який захищає рослину від патогена; і (ІЇ) націлюючу послідовність, яка локалізує злитий білок на екзоспорій клітин Васійив; і б) принаймні одного фунгіциду, вибраного із переважних фунгіцидів, описаних у даній заявці, який проявляє активність по відношенню до комах, кліщів, нематод та/або фітопатогенів у синергетично ефективній кількості.
У вищенаведених абзацах, термін "включають" або будь-яке його похідне (наприклад, що включає, включає) може бути замінений на " складаються з" або його застосовне відповідне похідне.
КОРОТКИЙ ОПИС ФІГУР
На Фігурі 1 представлене вирівнювання амінокислотної послідовності аміно-кінцевої частини штаму Васйи» апілтгасів ВСА і з відповідною ділянкою з різних білків екзоспорію із представників сімейства Васі/и5 сегеийв.
ДОКЛАДНИЙ ОПИС
У цілому "пестицидний" означає здатність речовини підвищувати смертність або інгібувати швидкість росту шкідників рослин. Термін використовується в даній заявці, для опису властивості речовини проявляти активність по відношенню до комах, кліщів, нематод та/або фітопатогенів. У контексті даного винаходу термін "шкідники" включає комах, кліщів, нематод та/або фітопатогенів.
Варіант вказаного номера доступу МККІ або АТСС може також бути ідентифікований як штам, що має геномну послідовність, яка більше ніж на 8595, більш переважно більше ніж на 60 9095 або більш переважно більше ніж на 9595 ідентичність послідовності генома вказаного номера доступу МЕКГ. або АТСС. Полінуклеотид або полінуклеотидна ділянка (або поліпептид або поліпептидна ділянка), яка має певний відсоток (наприклад, 8095, 8595, 9095, 9595, 9695, 9795, 9895 або 9995) "ідентичності послідовності! до іншої послідовності означає, що при вирівнюванні, відсоток основ (або амінокислот) є ідентичним при порівнянні двох послідовностей. Це вирівнювання й відсоток гомології або ідентичність послідовності можна визначити, використовуючи програмне забезпечення, відоме в даній галузі техніки, наприклад, як описано в Сигтепі Ргоїосої5 іп МоїІесшціаг Віоіоду (ГЕ. М. А!,зибеї, еї а!., ред., 1987) доповнення 30, розділ 7.7.18, Таблиця 7.7. 1.
МЕР представляє собою скорочення для Аагісийига! НКезєагсп бегмісе Сийиге СоїПесійп, розташованому за адресою Маїйопа! Сепієї їТог Аагісийига! ігайоп Везвєагсіп, Аагпсийигаї
Везеагсп БЗегуісе, 0.5. Юерапйтепі ої Адгісийиге, 1815 Мопй Опімегейу 5ігеєї, Реогпа, Шіпоіб 61604, 0.5.А.
АТСС представляє собою скорочення для Атегісап Туре Сийиге СоЇПесійоп, розташованому за адресою АТСС Раїгїепі Оерозйогу, 10801 Опімегейу Вошемага, Мапаззав, Мігдіпіа 10110, О.5.А.
Усі штами, описані в даній заявці, що й мають номер доступу, у якому префікс представляє собою МЕРІ. або АТСС, були задепоновані у вищеописаній відповідній депозитарній установі відповідно до Будапештського договору про міжнародне визнання депонування мікроорганізмів для цілей патентної процедури. «Фермент, залучений у продукцію або активацію сполуки, що стимулює ріст рослин», включає будь-який фермент, який каталізує будь-яку стадію в біологічному синтетичному шляху для сполуки, яка стимулює ріст рослини або змінює структуру рослини, або будь-який фермент, який каталізує перетворення неактивної або менш активної похідної сполуки, яка стимулює ріст рослини або змінює структуру рослини на активну або більш активну форму сполуки. Такі сполуки включають, наприклад, але не обмежуючись тільки ними, низькомолекулярні рослинні гормони, такі як ауксини й цитокініни, біологічно активні пептиди, і невеликі молекули, що стимулюють ріст рослин, синтезовані бактеріями або грибами в ризосфері (наприклад, 2,3- бутандіол). «Білок або пептид, який підсилює імунну систему рослини", як використовується в даній заявці, включає будь-який білок або пептид, який має сприятливий ефект на імунну систему
Зо рослини.
Термін "стимулюючий ріст рослин білок або пептид", як використовується в даній заявці, включає будь-який білок або пептид, який збільшує ріст рослини в рослині, підданій впливу білка або пептиду.
Терміни "сприятливий росту рослини" і "стимулюючий ріст рослини" використовуються в даній заявці взаємозамінно, і стосується здатності підсилювати або підвищувати принаймні одну з характеристик рослини: висоту, вагу, розмір листя, розмір коренів, або розмір стебла, збільшувати вихід білка з рослини або збільшувати врожай зерна білка з рослини. «Білок або пептид, який захищає рослину від патогена", як використовується в даній заявці, включає будь-який білок або пептид, який робить рослину, піддану впливу білка або пептиду, менш чутливою до інфікування патогеном. «Білок або пептид, який підсилює стресостійкість рослин", як використовується в даній заявці, включає будь-який білок або пептид, який робить рослину, піддану впливу білка або пептиду, більш стійкою до стресу.
Термін "білок або пептид, що зв'язується з рослиною," стосується будь-якого пептиду або білка, здатного специфічно або неспецифічно зв'язуватися з будь-якою частиною рослини (наприклад, коріння або повітряні частини рослини, такі як листовий покрив, стебла, квіти або плоди) або рослинним матеріалом.
Термін «націлююча послідовність, як використовується в даній заявці, стосується поліпептидної послідовності, яка приводить до локалізації більш довгого поліпептиду або білка на екзоспорій представника сімейства Васі//Ли5 сегеийв5.
Рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васійив, що експресують злиті білки
Злиті білки містять націлюючу послідовність, білок екзоспорію, або фрагмент білка екзоспорію, який (а) націлює злитий білок на екзоспорій представника сімейства Васйив сегеив і: (а) стимулюючий ріст рослин білок або пептид; (б) білок або пептид, який захищає рослину від патогена; (в) білок або пептид, який підсилює стресостійкість рослини; (г) білок або пептид, що зв'язується з рослиною; або (д) білок або пептид, який підсилює імунну систему рослини. При експресії в бактеріях представниках сімейства Вас//ив5 сегеийв, ці злиті білки націлюються на шар екзоспорію спор й фізично розташовуються таким чином, що білок або пептид виводиться на зовнішню сторону спори.
Ця система відображення екзоспорію Вас//Лих (ВЕМО)) може використовуватися для доставки пептидів, ферментів, і інших білків рослинам (наприклад, на листя, плоди, квіти, стебла, або коріння рослин) або на середовище росту рослини, таке як грунт. Пептиди, ферменти, і білки, що доставляються в грунт або інше середовище для росту рослини таким чином, продовжують існувати й проявляють активність у грунті протягом тривалого періоду часу. Введення рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Вас//Лих, що експресують злиті білки, описаних у даній заявці, у грунт або ризосферу рослини, приводить до сприятливого посилення росту рослини в багатьох різних грунтових умовах. Застосування ВЕМО для створення цих ферментів надає їм можливість продовжувати проявляти їх сприятливі результати на рослину й ризосферу протягом перших місяців життя рослин.
Націлююча послідовність, білки екзоспорію, і фрагменти білків екзоспорію
Для зручності використання, номера 5ЕО ІО МО5 для послідовностей пептидів і білків, на які посилаються на даній заявці, перераховано в таблиці 1 нижче.
Тзблиня 1. Посліловності пептидів і білків послідовність послідовності
СЯ. пиійнатіх Зіетпе)
АА1-33з ЗБЕ ПО: З із ин він
СЯ. пиійнатіх Зіетпе)
ВАБАБІЯ
Я. смпійкасії Біетпе
СЯ. пиійнатіх Зіетпе) (Я. секент УТОФТІ 7 "
послідовність посліловності (В. секвция УП ОБ
АА 1-39 гінотетичного білка КО 040553 5БОІВ МО: 195
ПЕ нн піні частковий (Я. ній енсіврненяії КВАВАЇ
КВвАВА (Я. звезійепзієрняпхіх КВАВА
Повнорозмірний гінотетичний білок зво МО: 24 т ню квАВА ів. пеїйснзіврнєняіх КВАВА
Бсегкбава 2131
Аді Зб потрійного спірального повтору, що зво МО: 27 містить колаген
Тека 0000 що містить коаляген КВА ВА
ЇЯ. тусонівх 2045)
ВтусоКН ЗБ
АА 1 30 тінотетичного білка БпусОюОї 25408. | ЗВО МО: ЗІ
ДНУ нні Піно
Повнорозмірний гіпотетичний білок ЗЕО ТЗ МО: 32
Петлі нн подо
АА 1-21 гіпотетнчного білка бпусО0Ої 2151018. | ЗБЕО ТО МО: 33 зе
БліусО0ЮОї 21510
АА 1-32 колагенового білка потрійного БО МО: 35 спірального повтору песвавне МІННЯ ПА спірального повтору
ІВ. сегенх)
пагліловність послідовності
ЇВ. секти
ЇВ. секенгі
УВО
ХВ. секемгі
СВ. секенхі (8, семи)
АД 1-35 гіпотетичного білка ХРООВБ12525 5ЕСКІ МОК 55
Біне
Уран 1252х
ЄВ. тусоїйєві (Б. анійкасія Вістне)
ІВ. анійрасії Бістве
Ме Б АА 12-27 з ВЛ А/ВА Іо ЗБЕО Мох ві баня 000001
ІВ. нвійено рент КВАВЯ
ІВ. зеїйеноїєрйснзіх КВАНА
Б. секемх УББ
Ме АдА 15-33 УУТМ В-пропелерного білка ЗЕОІО МС: 65 бере ВАВ
Ме АА ЗО 24 гіпотетичного білка ЗБОКУ ба гг кн как
ІВ. зеїйеноїєрйснзіх КВАНА
Бсегкбаба 2131
ІВ. жеїйеновопензія КВАНЯ)
Ме АА 9-24 гіпотетичного їМлкд 5БЕСБІ МОХ 55
БІ ню «СВ. жмусоїйех МОЯ)
посліловність посліловноасті
МЕ АА З 24 з ЗБ: Бо
ВАБІВВ2 (Я. апійкастх бістпе!
ЇЯ. секенхі «В. мусоїехі (В. анійгасія бістпе!
Повнорозмірний ВАБІ144 г ВхрВ/Ех5ЕА ЗБЕО МО: 73 «В. авійкасії Містпе)
Повнораозмірний ВАБІЯАЗіСо) ЗБОЮ МО: та (В. апійкасіх Вісти)
ЄЯ, ппійгаєтх егпте! (В. апівкагії НОЗОТ)
ЄВ. ге тнріємсії НОТА, «В. сегеня АТСС 10876)
СВ. секвняї
Я. анійгасія Аттьх)
СВ. тійкасіяї «В, апійкасія Місті)
Повноразмірна кисла фосфатаза ЗБЕО ТО МО: 53 (Ваєнінз гіигіпдієнгії серовар Еопкиківи штам 27-87) «В. гпихінатенхія НУТ)
Ал - змінОКИСЛОТН "В. апіпгасіз ее штам ВсіА має 10095 ідентичність послідовності з 8. Іигіпдіепвіх ВСІА.
Таким чином, 5ЕО ІЮ МОБ: 1, 2, і 59 також представляє собою амінокислоти 1-41 з В. (пипіпдіепвзіх ВсіА, повнорозмірний 8. Іпигіпдіепвів ВСІА, і амінокислоти 1-196 з В. ІПигпіпдіепвів
ВСІА, відповідно. Аналогічно до цього, ЗЕО ІЮ МО: 60 також представляє собою метіоніновий залишок плюс амінокислоти 20-35 з В. Іпигіпдіепвів ВСІА. "є гіпотетичний білок ТІЗКО3720 8. тусоїдез має 10095 ідентичність послідовності з 8. тусоідез гіпотетичний білок УУРОО3189234. Таким чином, ЗЕО І МО5: 57 і 58 також представляє собою амінокислоти 1-136 гіпотетичного білка 8. тусоїйез М/РОО3189234 і повнорозмірного гіпотетичного білка В. тусоїбез МУРО0О3189234, відповідно.
Васіиз представляє собою рід паличкоподібних бактерій. Сімейство бактерій ВасіЛи5 сегеив включає види Васшйив» апінгасіх, Васійи5 сегеив, Васшпив5 Іпиппдіепвзів, Васшпивє тусоіде5, Васійив5 рзепйотусоїдез5, Васійи5 5атапії Васійиє даетокКепвіх5, Васійи5 їоуоіепвзіб, і Васшив шеїпепвіерНепвзіз. У стресових умовах навколишнього середовища, бактерії сімейства Васійив сегеиз зазнають спороутворення й утворюють овальні ендоспори, які можуть залишатися сплячими протягом тривалого періоду часу. Зовнішній шар ендоспор відомий як екзоспорій і включає базальний шар, оточений зовнішнім ворсом волосоподібних виступаючих частин.
Філаменти на волосоподібному ворсі головним чином утворені колагеноподібним глікопротеїном ВСсСіА, у той час як базальний шар складається з декількох різних білків. Інший колагено-подібний білок, ВсІВ, також присутній в екзоспорії й експонований на ендоспорах представників сімейства Васив сегеив.
Було показано, що ВсіІА, основний компонент поверхневого ворсу, приєднаний на екзоспорії з його аміно-кінцем (М-кінець), розташованим на базальному шарі, і його карбокси-кінцем (С- кінець), що розташовані назовні зі спори.
Раніше було відкрито, що певні послідовності з М-кінцевих ділянок з ВсіА і ВсІВ можуть використовуватися для націлювання пептиду або білка на екзоспорій ендоспор ВасШПШив сегеив (см. Опубліковані заявки на патенти США МоМо 2010/0233124 і 2011/0281316, і Тпотрзоп, еї аї., "Тагдейпуд ої Ше ВсіА апа ВсІВ Ргоїєіїп5 то Ше Васшивє апійгасіє Зроге Зипасе, Мо!іесшіаг
Містобіоіоду, 70(2):421-34 (2008), повний зміст кожної з них таким чином включено в дану заявку шляхом посилання). Також було виявлено, що ВеггА/ВА5З3290 білок з ВасшШив5 апінгасів локалізований на екзоспорії.
Було виявлено, що амінокислот 20-35 з ВСІА зі штаму Васшив апі/тасіз Мегпе, достатньо для націлювання на екзоспорій. Вирівнювання послідовності амінокислот 1-41 з ВсіІА (ЗЕО ІЮ
МО: 1) з відповідними М-кінцевими ділянками декількох інших білків екзоспорію сімейства
Васійи5 осегеивз і білків сімейства Васійиє сегеих, що мають споріднені послідовності, представлено на фігурі 1. Як можна побачити на фігурі 1, існує високогомологічна ділянка серед усіх білків у ділянці, що відповідає амінокислотам 20-41 з ВСІА. Проте, у цих послідовностях, амінокислоти, що відповідають амінокислотам 36-41 з ВсіІА містять вторинну структуру й не є необхідними для локалізації злитого білка на екзоспорії. Консервативна ділянка націлюючої послідовності з ВСІА (амінокислоти 20-35 з БЕО ІЮ МО: 1) виділені жирним шрифтом на фігурі 1 і відповідає мінімальній націлюючій послідовності, необхідній для локалізації на екзоспорії. Більш високо консервативна ділянка, що містить амінокислоти 25-35 з ВСсІА у межах націлюючої послідовності підкреслені в послідовностях на фігурі 1, і представляє собою послідовність розпізнавання для Ех5ЕА/ВхрВ/Ех5ЕВ і гомологи, які націлюють і збирають описані білки на поверхні екзоспорію Амінокислотні послідовності, представлені в ЗЕО ІЮ МО: 3, 5, і 7 на фігурі 1, представляє собою амінокислоти 1-33 штаму Васі/Лих апійгасіє ВегА/ВА5З3290, метіонін з наступними амінокислотами 2-43 штаму Васійи5 апійгасіє ВА54623, і амінокислотами 1-34 штаму Васшйив апінгасіх ВСІВ, відповідно. ( Для ВА54623, було виявлено, що заміна валіну,
Зо присутнього в 1 положенні в нативному білці, на метіонін приводить до переважної експресії.)
Як можна побачити на фігурі 1, кожна із цих послідовностей містить консервативну ділянку, що відповідає амінокислотам 20-35 з ВсіІА (5ЕО ІО МО: 1; виділено жирним шрифтом), і більш високо консервативна ділянка, що відповідає амінокислотам 20-35 з ВсіА (підкреслено).
Додаткові білки із представників сімейства ВасіШив сегеиз також містять консервативну націлюючу ділянку. Особливо, на фігурі 1, ЗЕО ІЮ МО: 9 представляє собою амінокислоти 1-30 штаму ВасшШив апійгасіє ВА51882, 5ЕБЕО ІЮ МО: 11 представляє собою амінокислоти 1-39 продукту гена Васійив5 мшеїНПепвіернпепзіз КВАВА4 2280, 5ЕБО ІЮ МО: 13 представляє собою амінокислоти 1-39 продукту гена Васійивз шеїйепвіернепзіз КВАВА 3572, ЗЕО І МО: 15 представляє собою амінокислоти 1-49 лідерного пептиду екзоспорію Васійив сегеиє МО200,
ЗЕО ІЮО МО: 17 представляє собою амінокислоти 1-33 лідерного пептиду екзоспорію Васійив сегеих МО166, 5ЕО І МО: 19 представляє собою амінокислоти 1-39 гіпотетичного білка
ІКа 04663 Вас/лЛих сегеих МО200, 5ЕО ІЮО МО: 21 представляє собою амінокислоти 1-39 р- пропелерного білка ВасПив5 шеійпепеіернепзіз КВАВА УУТМ, ЗЕО ІО МО: 23 представляє собою амінокислоти 1-30 гіпотетичного білка рсегкраб4 2363 Васшив5 шеїпепвіернепвзіз КВАВ4А, 5ЕО ІЮ
МО: 25 представляє собою амінокислоти 1-30 гіпотетичного білка Бсегкрабв4 2131 Васшив шеїпепвіернепзіз КВАВ4, 5ЕО ІЮО МО: 27 представляє собою амінокислоти 1-36 потрійного спірального повтору, що містить колаген, Вас/Либх шеїНепвзіерпепзіз КВАВ4А., 5ЕО ІЮ МО: 29 представляє собою амінокислоти 1-39 гіпотетичного білка бтусо0001 21660 Васійив тусоідев5 2048, БО ІО МО: 31 представляє собою амінокислоти 1-30 гіпотетичного білка ртусО001 22540 Васив5 тусоїдез 2048, ЗЕО ІЮ МО: 33 представляє собою амінокислоти 1-21 гіпотетичного білка бтус0001 21510 Васійив тусоїдез5 2048, ЗЕО ІЮ МО: 35 представляє собою амінокислоти 1-22 колагенового білка потрійного спірального повтору Васшив5 Іигіпдіепвів 35646, 5БО ІЮ МО: 43 представляє собою амінокислоти 1-35 гіпотетичного білка МУР 69652
Васійи5 сегеих, ЗЕБЕО ІЮ МО: 45 представляє собою амінокислоти 1-41 лідера екзоспорію
М/РО16117717 Васійиє сегеиб5, «БО ІЮ МО: 47 представляє собою амінокислоти 1-49 пептиду екзоспорію М/РОО2105192 Васіив сегеих, ЗЕО ІЮ МО: 49 представляє собою амінокислоти 1-38 гіпотетичного білка М/Р87353 Васі/их сегеих, 5ЕО ІЮ МО: 51 представляє собою амінокислоти 1-39 пептиду екзоспорію 02112369 Васійиє сегеих, ЗЕБЕО ІЮО МО: 53 представляє собою амінокислоти 1-39 білка екзоспорію М/РО16099770 Васіли5 сегеив, БО ІЮ МО: 55 представляє 60 собою амінокислоти 1-36 гіпотетичного білка УРО0О6612525 Вастиз Іпигіпдіепвів, і ЗЕО ІЮ МО:
57 представляє собою амінокислоти 1-136 гіпотетичного білка ТІЗКО3720 Васілих тусоідевз. Як показано на фігурі 1, кожна з М-кінцевих ділянок цих білків містить ділянку, яка консервативна з амінокислотами 20-35 з ВСІА (ЗЕО ІЮ МО: 1), і більш високо консервативна ділянка, що відповідає амінокислотам 25-35 з ВСІА.
Будь-яку частину з ВсІА, яка включає амінокислоти 20-35, можна використовувати як націлюючу послідовність. Додатково, повнорозмірні білки екзоспорію або фрагменти білків екзоспорію можна використовувати для націлювання злитих білків на екзоспорій. Таким чином, повнорозмірний ВсіА або фрагмент із ВсіІА, який включає амінокислоти 20-35, можна використовувати для націлювання на екзоспорій. Наприклад, повнорозмірний ВсіІА (ЗЕО ІЮО МО: 2) або фрагмент середнього розміру з ВСІА, у якому відсутній карбокси-кінець, такий як ЗЕО ІЮ
МО: 59 (амінокислоти 1-196 з ВсіА) можна використовувати для націлювання злитих білків на екзоспорій. Фрагменти середніх розмірів, такі як фрагмент із БЕО ІЮО МО: 59, мають менше вторинної структури, ніж повнорозмірний ВсіА, і було виявлено, що вони є придатними для застосування як націлююча послідовність. Націлююча послідовність також може включати більш короткі ділянки з ВсСІА, які включають амінокислоти 20-35, такі як 5ЕО ІЮ МО: 1 (амінокислоти 1-41 з ВсІА), амінокислоти 1-35 з ЗЕО ІЮО МО: 1, амінокислоти 20-35 з 5БЕО ІЮ МО: 1, або 5ЕО ІО МО: 60 (метіоніновий залишок, зв'язаний з амінокислотами 20-35 з ВсіА). Навіть більш короткі фрагменти з ВсіА, які включають тільки деякі з амінокислот 20-35, також проявляють здатність націлювання злитих білків на екзоспорій. Наприклад, націлююча послідовність може включати амінокислоти 22-31 з БЕО ІЮО МО: 1, амінокислоти 22-33 з 5БЕО І
МО: 1, або амінокислоти 20-31 з БЕО ІЮ МО: 1.
Альтернативно, будь-яка частина з Веї!/ВА5З3290, ВА5З4623, ВсІВ, ВА5З1882, продукту гена
КВАВ4 2280, продукту гена КВАВ4 3572, лідерного пептиду екзоспорію 8. сегеивх МО200, лідерного пептиду екзоспорію 8. сегеиз МО166, гіпотетичного білка ІК 04663 8. сегеиз МО200,
УМУТМ В-пропелерного білка 8. шейепеІернепвзіз КВАВА, гіпотетичного білка рсегкрабрі4 2363 В. шеїпепвіернпепзіз КВАВ4А, гіпотетичного білка рсегкраб4 2131 8. у/е/лепвзіернепвзіз КВАВА, потрійного спірального повтору, що містить колаген, 8. ше/лепеІернпепвзіх КВАВА, гіпотетичного білка Бітусо0001 21660 8. тусоїдез 2048, гіпотетичного білка Бтус0001 22540 В. тусоідев5 2048, гіпотетичного білка Ббітус0001 21510 8. тусоідез 2048, колагенового білка потрійного
Зо спірального повтору 8. ІПигіпдіепвіз 35646, гіпотетичного білка МУР 69652 В. сегеив, лідера екзоспорію МУРО16117717 8. сегеих, пептиду екзоспорію УУРО02105192 В. сегеив, гіпотетичного білка М/Р8Ф7353 8. сегеив, пептиду екзоспорію 02112369 8. сегеив, білка екзоспорію
МУ/РО16099770 В. сегеив, гіпотетичного білка УРОО6612525 В. Іпигіпдіепвіз, або гіпотетичного білка ТІКО3720 В. тусоі/де5 який включає амінокислоти, що відповідають амінокислотам 20-35 з ВСІА, може служити як націлююча послідовність. Як можна побачити на фігурі 1, амінокислоти 12-27 з ВегА/ВА5Б3290, амінокислоти 23-38 з ВАБ4623, амінокислоти 13-28 з ВсІВ, амінокислоти 9-24 з ВА51882, амінокислоти 18-33 продукту гена КВАВА 2280, амінокислоти 18-33 продукту гена КВАВА 3572, амінокислоти 28-43 лідерного пептиду екзоспорію В. сегеив5
МО200, амінокислоти 12-27 лідерного пептиду екзоспорію 8. сегеиз МО166, амінокислоти 18-33 гіпотетичного білка ІК 04663 В. сегеих МО200, амінокислоти 18-33 УУТМ В-пропелерного білка
В. шеїНепзіернепвзіз КВАВ4, амінокислоти 9-24 гіпотетичного білка Бсегкраб4 2363 В. шеїпепвіернепзіз КВАВ4, амінокислоти 9-24 гіпотетичного білка рсегкраб4 2131 8. шеїНепвіерпепзіз КВАВ4А4, амінокислоти 15-30 потрійного спірального повтору, що містить колаген, 8. ше/пепеІернепвзіхз КВАВА, амінокислоти 18-33 гіпотетичного білка бтусо0001 21660
В. тусоїдез 2048, амінокислоти 9-24 гіпотетичного білка Бтус0001 22540 В. тусоіїдез5 2048, амінокислоти 1-15 гіпотетичного білка бтус0О001 21510 8. тусоіде5 2048, амінокислоти 1-16 колагенового білка потрійного спірального повтору 8. ІПигіпдіепвіз 35646, амінокислоти 14-29 гіпотетичного білка М/Р 69652 В. сегеив, амінокислоти 20-35 лідера екзоспорію М/РО16117717
В. сегеив, амінокислоти 28-43 пептиду екзоспорію УУРО02105192 В. сегеив, амінокислоти 17-32 гіпотетичного білка М/Р87353 В. сегеих, амінокислоти 18-33 пептиду екзоспорію 02112369 В. сегеих, амінокислоти 18-33 білка екзоспорію М/РО16099770 В. сегеив, амінокислоти 15-30 гіпотетичного білка УРОО6612525 В. Іпигіпдієепвів, і амінокислоти 115-130 гіпотетичного білка
ТІШНОЗ2О 8. тусоіїдез відповідають амінокислотам 20-35 з ВсіІА. Таким чином, будь-яка частина цих білків, яка включає перераховані вище відповідні амінокислоти, може служити як націлююча послідовність.
Крім того, будь-яка амінокислотна послідовність, що містить амінокислоти 20-35 з ВсіА, або будь-які з перерахованих вище відповідних амінокислот, може служити як націлююча послідовність.
Таким чином, націлююча послідовність може включати амінокислоти 1-35 з БЕО ІЮО МО: 1, 60 амінокислоти 20-35 з БЕО ІЮ МО: 1, 5ЕО ІЮ МО: 1, 5ЕО ІЮ МО: 60, амінокислоти 22-31 з ЗЕО ІЮ
МО: 1, амінокислоти 22-33 з 5ЕО ІО МО: 1, або амінокислоти 20-31 з 5ЕО ІЮ МО: 1.
Альтернативно, націлююча послідовність складається з амінокислот 1-35 з 5ЕО ІЮ МО: 1, амінокислот 20-35 з 5ЕБЕО ІЮ МО: 1, 5ЕБЕО ІО МО: 1, або 5ЕБЕО ІО МО: 60. Альтернативно, націлююча послідовність може складатися з амінокислот 22-31 з БЕО ІЮ МО: 1, амінокислот 22- 33 з 5ЗЕО ІЮО МО: 1, або амінокислот 20-31 з 5ЕО ІО МО: 1. Альтернативно, білок екзоспорію може включати повнорозмірний ВсіІА (5ЕО ІЮ МО: 2), або фрагмент білка екзоспорію може включати фрагмент середнього розміру з ВСІА, у якому відсутній карбокси-кінець, такий як ЗЕО
ІЮ МО: 59 (амінокислоти 1-196 з ВсІА). Альтернативно, фрагмент білка екзоспорію може складатися з БЕО ІЮ МО: 59.
Націлююча послідовність також може включати амінокислоти 1-27 з 5ЕБЕО ІЮО МО: 3, амінокислоти 12-27 з 5ЕО ІЮ МО: 3, або 5ЕО ІЮО МО: 3, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний ВетА/ВА5З3290 (ЗЕО ІЮ МО: 4). Також було виявлено, що метіоніновий залишок, зв'язаний з амінокислотами 12-27 з ВегА/ВА5З3290 можна використовувати як націлюючу послідовність. Таким чином, націлююча послідовність може включати 5ЕБО ІЮ МО: 61.
Націлююча послідовність також може включати амінокислоти 14-23 з 5ЕО ІЮО МО: 3, амінокислоти 14-25 з БЕО ІЮ МО: 3, або амінокислоти 12-23 з ЗЕО ІО МО: 3.
Націлююча послідовність також може включати амінокислоти 1-38 з 5ЕО ІЮО МО: 5, амінокислоти 23-38 з 5ЕО ІЮ МО: 5, або 5ЕО ІЮО МО: 5, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний ВА54623 (ЗЕО ІЮО МО: 6).
Альтернативно націлююча послідовність може включати амінокислоти 1-28 з БЕО ІЮО МО: 7, амінокислоти 13-28 з 5ЕО ІЮ МО: 7, або 5ЕО ІЮО МО: 7, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний ВсІВ (ЗЕО ІЮ МО: 8).
Націлююча послідовність також може включати амінокислоти 1-24 з 5ЕО ІЮО МО: 9, амінокислоти 9-24 з 5ЕО ІЮО МО: 9, або 5ЕО ІЮО МО: 9, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний ВАЗ1882 (5ЕО ІО МО: 10). Метіоніновий залишок, зв'язаний з амінокислотами 9-24 з ВА5Б1882, також можна використовувати як націлюючу послідовність. Таким чином, націлююча послідовність може включати 5ЕО ІЮ МО: 69.
Націлююча послідовність також може включати амінокислоти 1-33 з 5ЕО ІЮ МО: 11, амінокислоти 18-33 з БЕО ІЮО МО: 11, або 5ЕО ІЮО МО: 11, або білок екзоспорію може включати
Зо повнорозмірний продукт гена В. шейепвіерпепвіз КВАВА 2280 (З5ЕО ІО МО: 12). Метіоніновий залишок, зв'язаний з амінокислотами 18-33 продукту гена 8. ше/Пепвіерпепвзіз КВАВА 2280, також можна використовувати як націлюючу послідовність. Таким чином, націлююча послідовність може включати ЗЕО ІЮ МО: 62.
Націлююча послідовність також може включати амінокислоти 1-33 з 5ЕО ІЮ МО: 13, амінокислоти 18-33 з БЕО ІЮО МО: 13, або 5ЕО ІО МО: 13, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний продукт гена В. шейепвіерпепвіз КВАВ4А 3572 (ЗЕО ІО МО: 14). Метіоніновий залишок, зв'язаний з амінокислотами 18-33 продукту гена 8. ше/пепвіерпепзіх КВАВА 3572, також можна використовувати як націлюючу послідовність. Таким чином, націлююча послідовність може включати ЗЕО ІЮ МО: 63.
Альтернативно націлююча послідовність може включати амінокислоти 1-43 з БЕО ІЮ МО: 15, амінокислоти 28-43 з БЕО ІЮО МО: 15, або 5ЕО ІЮО МО: 15, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний лідерний пептид екзоспорію 8. сегеиз МО200 (ЗЕО ІО МО: 16).
Націлююча послідовність також може включати амінокислоти 1-27 з 5ЕО ІЮ МО: 17, амінокислоти 12-27 з БЕО ІЮО МО: 17, або 5ЕО ІЮО МО: 17, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний лідерний пептид екзоспорію 8. сегеих МО166 (ЗЕО ІО МО: 18). Метіоніновий залишок, зв'язаний з амінокислотами 12-27 лідерного пептиду екзоспорію 8. сегеиз МО166, також можна використовувати як націлюючу послідовність. Таким чином, націлююча послідовність може включати ЗЕО ІЮ МО: 64.
Націлююча послідовність також може включати амінокислоти 1-33 з 5ЕО ІЮ МО: 19,
БО амінокислоти 18-33 з БЕО ІЮО МО: 19, або 5ЕО ІЮО МО: 19, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний гіпотетичний білок ІКО 04663 В. сегеиз МО200 (5ЕО ІЮО МО: 20).
Альтернативно націлююча послідовність включає амінокислоти 1-33 з 5ЕО ІЮО МО: 21, амінокислоти 18-33 з БЕО ІЮО МО: 21, або 5ЕО ІЮО МО: 21, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний МТМ В-пропелерного білка 8. ме/лепеіернепзіз КВАВА (5ЕО ІЮ МО: 22).
Метіоніновий залишок, зв'язаний з амінокислотами 18-33 ММУТМ В-пропелерного білка 8. шеїіНпепвіерпепзіз КВАВ4, також можна використовувати як націлюючу послідовність. Таким чином, націлююча послідовність може включати 5ЕО ІЮ МО: 65.
Націлююча послідовність також може включати амінокислоти 1-24 з 5ЕО ІЮ МО: 23, амінокислоти 9-24 з 5ЕО ІЮО МО: 23, або 5ЕО ІЮО МО: 23, або білок екзоспорію може включати 60 повнорозмірний гіпотетичний білок Ббсегкрарі4 2363 В. шеїіпепвіернепзіз КВАВА (5ЕО ІО МО: 24).
Метіоніновий залишок, зв'язаний з амінокислотами 9-24 гіпотетичного білка рсегкрар4 2363 В. шеїіНпепвіерпепзіз КВАВ4, також можна використовувати як націлюючу послідовність. Таким чином, націлююча послідовність може включати ЗЕО ІЮ МО: 66.
Націлююча послідовність включає амінокислоти 1-24 з БЕЕО ІО МО: 25, амінокислоти 9-24 з
ЗЕБЕО ІЮ МО: 25, або 5ЕО ІО МО: 25, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний гіпотетичний білок бсегкрар4 2137 В. шеїпепвіернпепзіз КВАВА (ЗЕО ІЮ МО: 26). Метіоніновий залишок, зв'язаний з амінокислотами 9-24 гіпотетичного білка Бсежрар4 2131 8. шеїіНпепвіерпепзіз КВАВ4, також можна використовувати як націлюючу послідовність. Таким чином, націлююча послідовність може включати ЗЕО ІЮ МО: 67.
Альтернативно націлююча послідовність включає амінокислоти 1-30 з 5ЕО ІЮО МО: 27, амінокислоти 15-30 з БЕО ІЮО МО: 27, або 5ЕО ІЮО МО: 27, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний потрійний спіральний повтор, що містить колаген, 8. шейепзіернепвзіз КВАВА (ЗЕО ІО МО: 28).
Націлююча послідовність також може включати амінокислоти 1-33 з 5ЕО ІЮ МО: 29, амінокислоти 18-33 з БЕО ІЮО МО: 29, або 5ЕО ІЮО МО: 29, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний гіпотетичний білок бтусо0001 27660 В. тусоіїде5 2048 (5ЕО ІЮ МО: 30).
Націлююча послідовність також може включати амінокислоти 1-24 з 5ЕО ІЮ МО: 31, амінокислоти 9-24 з 5ЕО ІЮО МО: 31, або 5ЕО ІЮО МО: 31, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний гіпотетичний білок рітус0001 22540 В. тусоїйез 2048 (5ЕБЕО ІО МО: 32).
Метіоніновий залишок, зв'язаний з амінокислотами 9-24 гіпотетичного білка бітус0001 22540 В. тусоїдез 2048, також можна використовувати як націлюючу послідовність. Таким чином, націлююча послідовність може включати 5ЕО ІЮ МО: 68.
Альтернативно націлююча послідовність включає амінокислоти 1-15 з БЕО ІЮО МО: 33, ЗЕО
ІО МО: 33, або білок екзоспорію включає повнорозмірний гіпотетичний білок бітусО001 27570 В. тусоїідез5 2048 (З5ЕО ІЮ МО: 34).
Націлююча послідовність також може включати амінокислоти 1-16 з ЗЕО ІО МО: 35, 5ЕО І
МО: 35, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний колагеновий білок потрійного спірального повтору 8. (пиппдіепвіз 35646 (5ЕО ІЮ МО: 36).
Націлююча послідовність може включати амінокислоти 1-29 з БЕО ІО МО: 43, амінокислоти
Зо 14-29 з ЗЕО ІЮ МО: 43, або ЗЕО ІЮ МО: 43, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний гіпотетичний білок МУР. 69652 В. сегеивз (ЗЕО ІО МО: 44).
Альтернативно націлююча послідовність може включати амінокислоти 1-35 з БЕО ІЮ МО: 45, амінокислоти 20-35 з БЕО ІЮО МО: 45, або 5ЕО ІО МО: 45, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний лідера екзоспорію М/РО76117717 В. сегеих (ЗБО ІЮ МО: 46). Метіоніновий залишок, зв'язаний з амінокислотами 20-35 лідера екзоспорію УУРО16117717 В. сегеив, також можна використовувати як націлюючу послідовність. Таким чином, націлююча послідовність може включати ЗЕО ІЮ МО: 70.
Націлююча послідовність може включати амінокислоти 1-43 з БЕО ІО МО: 47, амінокислоти 28-43 з ЗЕО ІЮ МО: 47, або ЗЕО ІЮ МО: 47, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний пептид екзоспорію М/Р002105192 В. сегеив (ЗЕО ІЮ МО: 48).
Націлююча послідовність може включати амінокислоти 1-32 з БЕО ІО МО: 49, амінокислоти 17-32 з ЗЕО ІЮ МО: 49, або ЗЕО ІЮ МО: 49, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний гіпотетичний білок М/Р 87353 В. сегеив (ЗЕО ІЮО МО: 50).
Альтернативно націлююча послідовність може включати амінокислоти 1-33 з БЕО ІЮ МО: 51, амінокислоти 18-33 з БЕО ІЮО МО: 51, або 5ЕО ІО МО: 51, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний пептид екзоспорію 02112369 В. сегеив (ЗЕО ІО МО: 52).
Націлююча послідовність може включати амінокислоти 1-33 з БЕО ІО МО: 53, амінокислоти 18-33 з ЗЕО ІЮ МО: 53, або ЗЕО ІЮ МО: 53, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний білок екзоспорію М/РО16099770 В. сегеив (ЕС ОО МО: 54).
БО Альтернативно націлююча послідовність може включати кислоти 1-30 з 5ЕБЕО ІЮО МО: 55, амінокислоти 15-30 з БЕО ІЮО МО: 55, або 5ЕО ІЮО МО: 55, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний гіпотетичний білок УРО06612525 В. Іпигіпдіепвів (ЕС ІО МО: 56).
Націлююча послідовність також може включати амінокислоти 1-130 з 5ЕО ІЮ МО: 57, амінокислоти 115-130 з БЕО ІЮО МО: 57, або 5ЕО ІЮ МО: 57, або білок екзоспорію може включати повнорозмірний гіпотетичний білок ТІЗКО3720 В. тусоідез (ЗЕО ІО МО: 58).
Додатково, легко можна побачити з вирівнювання послідовностей на фігурі 1, що, у той час як амінокислоти 20-35 з ВсіІА є консервативними, і амінокислоти 25-35 є більш консервативними, то в цій ділянці може відбуватися варіантність деякою мірою без впливу на здатність націлюючої послідовності націлювати білок на екзоспорій. На фігурі 1 представлений відсоток 60 ідентичності кожної з відповідних амінокислот кожної послідовності до амінокислот 20-35 з ВсіА
(20-3595 Ідентичність") і до амінокислот 25-35 з ВСІА (25-3595 Ідентичність"). Таким чином, наприклад, у порівнянні з амінокислотами 20-35 з ВСІА, відповідні амінокислоти з Вех//ВА5З3290 ідентичні приблизно на 81,395, відповідні амінокислоти з ВА54623 ідентичні приблизно на 50,095, відповідні амінокислоти з ВсІВ ідентичні приблизно на 43,895, відповідні амінокислоти з
ВА5З1882 ідентичні приблизно на 62,595, відповідні амінокислоти продукту гена КВАВ4А 2280 ідентичні приблизно на 81,395, відповідні амінокислоти продукту гена КВАВ4 3572 ідентичні приблизно на 81,395. Ідентичності послідовностей вище цієї ділянки для послідовностей, що залишилися, представлено на фігурі 1.
Стосовно амінокислот 25-35 з ВсіІА, відповідні амінокислоти з ВегА/ВА53290 ідентичні приблизно на 90,995, відповідні амінокислоти з ВА5Б4623 ідентичні приблизно на 72,7905, відповідні амінокислоти з ВсіВ ідентичні приблизно на 54,595, відповідні амінокислоти з ВА51882 ідентичні приблизно на 72,795, відповідні амінокислоти продукту гена КВАВА 2280 ідентичні приблизно на 90,995, і відповідні амінокислоти продукту гена КВАВА 3572 ідентичні приблизно на 81,895. Ідентичності послідовностей вище цієї ділянки для послідовностей, що залишилися, представлено на фігурі 1.
Таким чином, націлююча послідовність може включати амінокислотну послідовність, що має принаймні приблизно 4395 ідентичність із амінокислотами 20-35 з ЗЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 5495. Альтернативно, націлююча послідовність складається з амінокислотної послідовності, що складається з 16 амінокислот, і яка має принаймні приблизно 4395 ідентичність із амінокислотами 20-35 з 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 5495.
Націлююча послідовність також може включати амінокислотну послідовність, що має принаймні приблизно 5095 ідентичність із амінокислотами 20-35 з ЗЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 6395. Альтернативно, націлююча послідовність складається з амінокислотної послідовності, що складається з 16 амінокислот, і яка має принаймні приблизно 5095 ідентичність із амінокислотами 20-35 з 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 6395.
Націлююча послідовність також може включати амінокислотну послідовність, що має принаймні приблизно 5095 ідентичність із амінокислотами 20-35 з ЗЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність
Зо із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 7295. Альтернативно, націлююча послідовність складається з амінокислотної послідовності, що складається з 16 амінокислот, і яка має принаймні приблизно 5095 ідентичність із амінокислотами 20-35 з 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 7295.
Націлююча послідовність також може включати амінокислотну послідовність, що має принаймні приблизно 5695 ідентичність із амінокислотами 20-35 з ЗЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 6395. Альтернативно, націлююча послідовність складається з амінокислотної послідовності, що складається з 16 амінокислот, і яка має принаймні приблизно 5695 ідентичність із амінокислотами 20-35 з 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 6395.
Альтернативно націлююча послідовність може включати аміно послідовність, що має принаймні приблизно 6295 ідентичність із амінокислотами 20-35 з ЗЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 7295. Націлююча послідовність також може включати амінокислотну послідовність, що складається з 16 амінокислот, і яка має принаймні приблизно 6295 ідентичність із амінокислотами 20-35 з ЗЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 з БЕО ІО МО:1 становить принаймні приблизно 7295.
Націлююча послідовність може включати амінокислотну послідовність, що має принаймні 6895 ідентичність із амінокислотами 20-35 з БЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25- 35 становить принаймні приблизно 8195. Альтернативно, націлююча послідовність складається з амінокислотної послідовності, що складається з 16 амінокислот, що й має принаймні 6890
БО ідентичність із амінокислотами 20-35 з 5ЕО ІЮО МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 8195.
Націлююча послідовність також може включати аміно послідовність, що має принаймні приблизно 7595 ідентичність із амінокислотами 20-35 з 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 7295. Альтернативно, націлююча послідовність складається з амінокислотної послідовності, що складається з 16 амінокислот, і яка має принаймні приблизно 7595 ідентичність із амінокислотами 20-35 з 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 з ЗЕО ІО МО: 1 становить принаймні приблизно 7295.
Націлююча послідовність також може включати аміно послідовність, що має принаймні приблизно 7595 ідентичність із амінокислотами 20-35 з 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із бо амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 8195. Альтернативно, націлююча послідовність складається з амінокислотної послідовності, що складається з 16 амінокислот, і яка має принаймні приблизно 7595 ідентичність із амінокислотами 20-35 з 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 з ЗЕО ІО МО: 1 становить принаймні приблизно 8195.
Націлююча послідовність також може включати амінокислотну послідовність, що має принаймні приблизно 8195 ідентичність із амінокислотами 20-35 з ЗЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 8195. Альтернативно, націлююча послідовність складається з амінокислотної послідовності, що складається з 16 амінокислот, і яка має принаймні приблизно 8195 ідентичність із амінокислотами 20-35 з 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 8195.
Націлююча послідовність може включати амінокислотну послідовність, що має принаймні приблизно 8195 ідентичність із амінокислотами 20-35 з 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 9095. Альтернативно, націлююча послідовність складається з амінокислотної послідовності, що складається з 16 амінокислот, і яка має принаймні приблизно 8195 ідентичність із амінокислотами 20-35 з 5ЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 9095.
Для кваліфікованого фахівця в даній галузі техніки буде зрозумілим, що варіанти вищеописаних послідовностей також можна використовувати як націлюючу послідовність за умови, що націлююча послідовність включає амінокислоти 20-35 з ВсіА, відповідні амінокислоти з Вех/ВА53290, ВА54263, ВсІВ, ВА51882, продукту гена КВАВА 2280, або продукту гена КВАВ 3572, або присутня послідовність, що містить будь-які з вищевказаних послідовностей, ідентичні до амінокислот 20-35 і 25-35 з ВсіА.
Крім того, було виявлено, що певні білки екзоспорію сімейства ВасіШив сегеив, у яких відсутні ділянки, що мають гомологію до амінокислот 25-35 з ВсСІА, також можна використовувати для націлювання пептиду або білка на екзоспорій представника сімейства
Васійи5 сегеив. Особливо, злиті білки можуть включати білок екзоспорію, що містить 5ЕО ІЮ МО: 71 (8. тусоїідез ІппА), білок екзоспорію, що містить 5ЕО ІЮ МО: 72 (В. апі/тасів хіете ВА51141 (ЕХ5У)), білок екзоспорію, що містить ЗЕО ІЮ МО: 73 (8. апійгасів Єїете ВА51144 (ВхрВ/Ех5ЕА)), білок екзоспорію, що містить ЗЕО ІЮ МО: 74 (8. апійгасіз 5іегпе ВА5ЗІ1145 (СоїУ)), білок екзоспорію, що містить 5ЕО ІЮО МО: 75 (8. апійгасіз біегте ВАБЗІ1140), білок екзоспорію, що
Зо містить ЗЕО ІЮО МО: 76 (8. апійгасіз НО401 ЕХ5ЕВ), білок екзоспорію, що містить 5ЕО ІЮ МО: 77 (В. Іпигіпдіепвіз НОТА ІппАТ), білок екзоспорію, що містить ЗЕО ІЮ МО: 78 (8. сегеиз АТОС 10876
Ех5.)), білок екзоспорію, що містить ЗЕО ІЮО МО: 79 (8. сегеив Ех5Н), білок екзоспорію, що містить БЕО ІЮ МО: 80 (8. апійгасіх Атез У|сА), білок екзоспорію, що містить ЗЕО ІЮО МО: 81 (8. апійгасів Х|СВ), білок екзоспорію, що містить БЕО ІО МО: 82 (8. апійгасіз З(егпе ВсісС), білок екзоспорію, що містить ЗЕО ІЮ МО: 83 (Васшив ІПигіпдіепзіє серовар Копкикіап штам 97-27 кисла фосфатаза), або білок екзоспорію, що містить 5ЕО ІЮ МО: 84 (8. Іпшгіпдіепвіз НО74
ІппА2г). Включення білка екзоспорію, що містить 5ЕО ІЮ МО: 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 178, 79, 80, 81, 82, 83, або 84 у злиті білки, описані в даній заявці, буде приводити до націлювання на екзоспорій представника сімейства В. сегеив.
Більше того, білки екзоспорію, що мають високий ступінь ідентичності послідовностей з будь-якими повнорозмірними білками екзоспорію або фрагментами білків екзоспорію, описаними вище, також можна використовувати для націлювання пептиду або білка на екзоспорій представника сімейства Васійиє сегеив. Таким чином, злитий білок може включати білок екзоспорію, що містить амінокислотну послідовність, що має принаймні 8595 ідентичність із кожною з 5ЕО ІЮ МО5:2,4,6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 44, Аб, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 59, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, і 84. Альтернативно, злитий білок може включати білок екзоспорію, що має принаймні 9095, принаймні 9595, принаймні 9895, принаймні 9995, або 10095 ідентичність із кожною з ЗЕО ІЮО Мов: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, Зб, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 59, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, і 84.
Альтернативно, злитий білок може включати фрагмент білка екзоспорію, що містить амінокислотну послідовність, що має принаймні 8595 ідентичність із 5ЕБО ІЮ МО: 59.
Альтернативно, злитий білок може включати фрагмент білка екзоспорію, що містить амінокислотну послідовність, що має принаймні 9095, принаймні 9595, принаймні 9895, принаймні 9995, або 10095 ідентичність із ФЕО ІЮ МО: 59.
У будь-якій із націлюючих послідовностей, білків екзоспорію, або фрагментів білків екзоспорію, описаних у даній заявці націлююча послідовність, білок екзоспорію, або фрагмент білка екзоспорію може включати амінокислотну послідовність ЗХТ на його карбокси кінці, де Х представляє собою будь-яку амінокислоту.
У будь-якій із націлюючих послідовностей, білків екзоспорію, і фрагментів білків екзоспорію, описаних у даній заявці націлюючу послідовність, білок екзоспорію, або фрагмент білка екзоспорію, може включати аланіновий залишок у положенні націлюючої послідовності, яке відповідає амінокислоті 20 з БЕО ІЮ МО: 1.
Злиті білки
Злиті білки можуть включати націлюючу послідовність, білок екзоспорію, або фрагмент білка екзоспорію, і принаймні один стимулюючий ріст рослин білок або пептид. Стимулюючий ріст рослин білок або пептид може включати пептидний гормон, негормональний пептид, фермент, залучений у продукцію або активацію сполуки, що стимулює ріст рослин або фермент, який розкладає або модифікує бактеріальне, грибкове або рослинне джерело харчування. націлюючу послідовність, білок екзоспорію, або фрагмент білка екзоспорію можуть представляти собою будь-яку з націлюючих послідовностей, білків екзоспорію, або фрагментів білків екзоспорію, описаних у даній заявці.
Злиті білки можуть включати націлюючу послідовність, білок екзоспорію, або фрагмент білка екзоспорію, і принаймні один білок або пептид, який захищає рослину від патогена. націлюючу послідовність, білок екзоспорію, або фрагмент білка екзоспорію можуть представляти собою будь-яку з націлюючих послідовностей, білків екзоспорію, або фрагментів білків екзоспорію, описаних у даній заявці.
Злитий білок може бути отриманий, використовуючи стандартні методи клонування й молекулярної біології, відомі в галузі техніки. Наприклад, ген, що кодує білок або пептид (наприклад, ген, що кодує стимулюючий ріст рослин білок або пептид) може бути ампліфікований шляхом полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) і лігований із ДНК, що кодує будь-яку з вищеописаних націлюючих послідовностей з утворенням ДНК молекули, яка кодує злитий білок. ДНК молекула, що кодує злитий білок, може бути клонована в будь-якому підходящому векторі, наприклад, плазмідному векторі. Вектор підходяще включає сайт множинного клонування, у який легко може бути вставлена ДНК молекула, що кодує злитий білок. Вектор також підходяще містить селектований маркер, такий як ген резистентності до антибіотика, таким чином, що бактерія, трансформована, трансфектована або матована за допомогою вектора, легко може бути ідентифікована й виділена. Якщо вектор представляє
Зо собою плазміду, то плазміда підходяще також включає точку початку реплікації. ДНК, що кодує злитий білок, підходяще знаходиться під контролем промотору спороутворення, який буде викликати експресію злитого білка на екзоспорії представника сімейства 8. сегеих ендоспора (наприклад, нативний БСІА промотор із представника сімейства 8. сегеиз). Альтернативно, ДНК, що кодує злитий білок, може бути інтегрована в хромосомну ДНК хазяїна представника сімейства В. сегеийв.
Злитий білок також може включати додаткові поліпептидні послідовності, які не є частиною націлюючої послідовності білка екзоспорію, фрагмента білка екзоспорію, або стимулюючого ріст рослин білка або пептиду, білка або пептиду, який захищає рослину від патогена, білка або пептиду, який підсилює стресостійкість рослин, або білка або пептиду, що зв'язується з рослиною. Наприклад, злитий білок може включати мітки або маркери для полегшення очищення або візуалізації злитого білка (наприклад, полігістидинову мітку або флуоресцентний білок, такий як СЕР або ХУЕР) або візуалізації рекомбінантних продукуючих екзоспорій спорових клітин Васіивз, що експресують злитий білок.
Експресія злитих білків на екзоспорії, використовуючи націлюючі послідовності, білки екзоспорію, і фрагменти білків екзоспорію, описані в даній заявці, підсилюється завдяки відсутності вторинної структури на аміно-кінцях цих послідовностей, що надає можливість нативного укладання злитих білків і збереження активності. Належне укладання додатково може підсилюватися шляхом включення короткого амінокислотного лінкера між націлюючою послідовністю, білком екзоспорію, фрагментом білка екзоспорію, і білюом партнером злиття.
Таким чином, будь-які зі злитих білків, описаних у даній заявці, можуть включати амінокислотний лінкер між націлюючою послідовністю, білком екзоспорію, або фрагментом білка екзоспорію й стимулюючим ріст рослин білком або пептидом, білком або пептидом, який захищає рослину від патогена, білком або пептидом, який підсилює стресостійкість рослин, або білком або пептидом, що зв'язуються з рослиною.
Лінкер може включати поліаланіновий лінкер або полігліциновий лінкер. Також можна використовувати лінкер, що містить суміш як залишків аланіну, так і гліцину. Наприклад, якщо націлююча послідовність включає 5ЕО ІЮ МО: 1, то злитий білок може мати одну з наступних структур:
Без лінкера: БЕО ІО МО: 1 - Білок партнер злиття 60 Аланіновий лінкер: БЕО ІО МО: 1-Ап-Білок партнер злиття
Гліциновий лінкер: ЗЕО ІЮ МО: 1-сп-Білок партнер злиття
Змішаний аланіновий і гліциновий лінкер: БЕО ІЮО МО: 1 - (А/С)п - Білок партнер злиття де Ап, Сп, і (А/5)п представляють собою будь-яку кількість аланінів, будь-яку кількість гліцинів, або будь-яку кількість аланінів і гліцинів, відповідно. Наприклад, п може представляти собою від 1 до 25, і переважно дорівнює від б до 10. Якщо лінкер включає суміш залишків аланіну й гліцину, то можна використовувати будь-яку комбінацію залишків гліцину й аланіну. У вищеописаних структурах, "Білок партнер злиття" представляє собою стимулюючий ріст рослин білок або пептид, білок або пептид, який захищає рослину від патогена, білок або пептид, який підсилює стресостійкість рослин, або білок або пептид, що зв'язується з рослиною.
Альтернативно або додатково, лінкер може включати сайт розпізнавання протеазою.
Включення сайту розпізнавання протеазою надає можливість націленого видалення, при впливі протеази, яка розпізнає сайт розпізнавання протеазою, що стимулює ріст рослин білка або пептиду, білка або пептиду, який захищає рослину від патогена, білка або пептиду, який підсилює стресостійкість рослин, або білка або пептиду, що зв'язується з рослиною.
Білки й Пептиди, які стимулюють ріст рослин
Як було вказано вище, злиті білюи можуть включати націлюючу послідовність, білок екзоспорію, або фрагмент білка екзоспорію й принаймні один стимулюючий ріст рослин білок або пептид. Наприклад, білок або пептид, що стимулює ріст рослин, може включати пептидний гормон, негормональний пептид, фермент, залучений у продукцію або активацію сполуки, що стимулює ріст рослин, або фермент, який розкладає або модифікує бактеріальне, грибкове або рослинне джерело харчування.
Наприклад, якщо стимулюючий ріст рослин білок або пептид включає пептидний гормон, то пептидний гормон може включати фітосульфокін (наприклад, фітосульфокін-с0), клавату З (СІ М3), системін, 27тісСЕ, або ЗСЕ/5Р11.
Якщо стимулюючий ріст рослин білок або пептид включає негормональний пептид, то негормональний пептид може включати ККМ 16010, Но-Зум4б6, емоЮр40 пептид, мелітин, мастопаран, Ма57, ЕНРР, РОЇ АКІ5, або інгібітор трипсину Кунітца (КТІ).
Стимулюючий ріст рослин білок або пептид може включати фермент, залучений у продукцію або активацію сполуки, що стимулює ріст рослин. Фермент, залучений у продукцію або
Зо активацію сполуки, що стимулює ріст рослин, може представляти собою будь-який фермент, який каталізує будь-яку стадію в біологічному синтетичному шляху для сполуки, яка стимулює ріст рослини або змінює структуру рослини, або будь-який фермент, який каталізує перетворення неактивної або менш активної похідної сполуки, яка стимулює ріст рослини або змінює структуру рослини на активну або більш активну форму сполуки.
Сполука, що стимулює ріст рослин, може включати сполуку, яка продукується бактеріями або грибами в ризосфері, наприклад, 2,3-бутандіол.
Альтернативно, сполука, що стимулює ріст рослин, може включати гормон росту рослини, наприклад, цитокінін або похідне цитокініну, етилен, ауксин або похідне ауксину, гіберелінову кислоту або похідне гіберелінової кислоти, абсцизову кислоту або похідне абсцизової кислоти, або жасмонову кислоту або похідне жасмонової кислоти.
Якщо сполука, що стимулює ріст рослин, включає цитокінін або похідне цитокініну, то цитокінін або похідне цитокініну може включати кінетин, цис-зеатин, лтранс-зеатин, 6- бензиламінопурин, дигідроксизеатин, Мб-(О2-ізопентеніл) аденін, рибозилзеатин, Мб-(02- ізопентеніл) аденозин, 2-метилтіо-цис-рибозилзеатин, цис-рибозилзеатин, транс- рибозилзеатин, 2-метилтіо-транс-рибозилзеатин, рибозилзеатин-5-моносфосфат, Мб- метиламінопурин, Мб-диметиламінопурин, 2'-дезоксизеатин рибозид, 4-гідрокси-З-метил- транс-2-бутеніламінопурин, орто-тополін, мета-тополін, бензиладенін, орто-метилтополін, мета-метилтополін, або їх комбінацію.
Якщо сполука, що стимулює ріст рослин, включає ауксин або похідне ауксину, то ауксин або похідне ауксину може включати активний ауксин, неактивний ауксин, кон'югований ауксин, ауксин, що зустрічається в природі, або синтетичний ауксин, або їх комбінацію. Наприклад, ауксин або похідне ауксину може включати індол-3-оцтову кислоту, індол-3- піровиноградну кислоту, індол-З-ацетальдоксим, індол-З-ацетамід, індол-3-ацетонітрил, індол-3-етанол, індол-3- піруват, індол-З-ацетальдоксим, індол-З-масляну кислоту, фенілоцтову кислоту, 4- хлоріндол-3- оцтову кислоту, кон'югований із глюкозою ауксин, або їх комбінацію.
Фермент, залучений у продукцію або активацію сполуки, що стимулює ріст рослин, може включати такі ферменти: ацетоїн-редуктаза, індол-З-ацетамід-гідролаза, триптофан- монооксигеназа, ацетолактат-синтетаза, а-ацетолактат-декарбоксилаза, піруват- декарбоксилаза, діацетил-редуктаза, бутандіол-дегідрогеназа, амінотрансфераза (наприклад, бо триптофан амінотрансфераза), триптофан-декарбоксилаза, аміноксидаза, індол-3- піруват декарбоксилаза, індол-3-ацетальдегід дегідрогеназа, оксидаза бічного ланцюга триптофану, нітрил-гідролаза, нітрилаза, пептидаза, протеаза, аденозинфосфат-ізопентеніл-трансфераза, фосфатаза, аденозин-кіназа, аденін-фосфорибозилтрансфераза, СУР7З5А, 5'-рибонуклеотид- фосфогідролаза, аденозин-нуклеозидаза, зеатин цис-транс-ізомераза, зеатин о- глікозилтрансфераза, р-глюкозидаза, цис-гідроксилаза, СК цис-гідроксилаза, СК М- глікозилтрансфераза, 2,5-рибонуклеотид фосфогідролаза, аденозин-нуклеозидаза, пуриннуклеозид фосфорилаза, зеатин редуктаза, гідроксиламін редуктаза, 2-оксоглутарат діоксигеназа, гіберелінова 2В/3В гідролаза, гіберелін З3-оксидаза, гіберелін 20-оксидаза, хітозиназа, хітиназа, В-1,3- глюканаза, ДВ-1,4-глюканаза, р-1,6-глюканаза, дезаміназа аміноциклопропан-1-карбонової кислоти, або фермент, залучений у продукцію под-фактора (наприклад, подА, поаВ, або поаі).
Якщо фермент включає протеазу або пептидазу, то протеаза або пептидаза може представляти собою протеазу або пептидазу, яка відщеплює білки, пептиди, пробілки, або препробілки, утворюючи біологічно активний пептид. Біологічно активний пептид може представляти собою будь-який пептид, який проявляє біологічну активність.
Приклади біологічно активних пептидів включають ККМ 16010 і ЕНРР.
Протеаза або пептидаза, яка відщеплює білки, пептиди, пробілки, або препробілки, утворюючи біологічно активний пептид, може включати субтилізин, кислу протеазу, лужну протеазу, протеїназу, ендопептидазу, екзопептидазу, термолізин, папаїн, пепсин, трипсин, проназу, карбоксилазу, серин-протеазу, глутамінову протеазу, аспартат-протеазу, цистеїн- протеазу, треонін-протеазу, або металопротеазу.
Протеаза або пептидаза може розщеплювати білки в багатому білками борошні (наприклад, соєве борошно або дріжджовий екстракт).
Стимулюючий ріст рослин білок також може включати фермент, який розкладає або модифікує бактеріальне, грибкове або рослинне джерело харчування. Такі ферменти включають целюлази, ліпази, лігнін-оксидази, протеази, глікозид-гідролази, фосфатази, нітрогенази, нуклеази, амідази, нітрат-редуктази, нітрит-редуктази, амілази, оксидази амонію, лігнінази, глюкозидази, фосфоліпази, фітази, пектинази, глюканази, сульфатази, уреази, ксиланази, і сидерофори. Включення в середовище для росту рослини або нанесення на
Зо рослину, насіння, або площу, що оточує рослину або насіння рослини, злитих білків, що містять ферменти, які розкладають або модифікують бактеріальне, грибкове або рослинне джерело харчування, може сприяти переробці живильних речовин поблизу рослини й приводити до збільшення поглинання рослиною живильних речовин або сприятливими бактеріями або грибами поблизу рослини.
Підходящі целюлази включають ендоцелюлази (наприклад, ендоглюконазу, таку як ендоглюканазу Васійи5 5!йршіє, ендоглюканазу Васшив5 пигіпдіепві5, ендоглюканазу Васшив сегеиз, або ендоглюканазу ВасшШив сіаивзі), екзоцелюлази (наприклад, екзоцелюлазу
Тпсподегта геезеї), і ВД-глюкозидази (наприклад, В-глюкозидазу Вас//и5 вирійів, ДВ-глюкозидазу
Вастйиз Іпигіпдіепвів, ВД-глюкозидазу Васі/их5 сегеиз, або В-глюкозидазу Васійи5 сіаивії).
Ліпаза може включати ліпазу Васіивє 5ибій5, ліпазу ВасшШив Шигпіпдіепвів, ліпазу Васійи5 сегеиз, або ліпазу Васйиз» сіаийвії.
В одному варіанті здійснення, ліпаза включає ліпазу Васі/ив вирців. Ліпаза Васійив вирі може бути ПЛР ампліфікована, використовуючи наступні праймери: ддаїсса(ддсідаасасааїсс (прямий, 5ЕО ІО МО: 37) і ддаєсснаайсоїансіддсс (зворотний, 5ЕО ІО МО: 38).
В іншому варіанті здійснення, целюлаза представляє собою ендоглюканазу Васійив вирійів.
Ендоглюканаза Васі/Лих ие може бути ПЛР ампліфікована, використовуючи наступні праймери: дда(ссаїдааасддісааєс (прямий, ЗЕО ІЮ МО: 39) і ддаїссЧасіаашоонсюі (зворотний,
ЗЕО І МО: 40).
У ще іншому варіанті здійснення, злитий білок включає протеазу РІВ Е. соїї. Протеаза РІВ
Е. сої може бути ПЛР ампліфікована, використовуючи наступні праймери: ддаїсса(дсіассаааадсс (прямий, 5ЕО ІЮ МО: 41) і дда(ссЧадіссдсаддсдіадс (зворотний, 5ЕО ІЮ
МО: 42).
У певних варіантах здійснення, злитий білок містить ендоглюканазу, яка має походження з нуклеотидної послідовності в ЗЕО ІЮ МО: 104.
Амінокислотна послідовність для типової ендоглюканази, яка може бути злита з націлюоючою послідовністю, білком екзоспорію, або фрагментом білка екзоспорію й, необов'язково, лінкерною послідовністю, такою як полі-А лінкер, представляє собою злитий білок, забезпечений як 5ЕО ІЮ МО: 107.
В інших варіантах здійснення, злитий білок містить фосфоліпазу, яка має походження з 60 нуклеотидної послідовності, представленої в ЖЕО ІЮ МО: 105.
Амінокислотна послідовність для типової фосфоліпази, яка може бути злита з націлюючою послідовністю, білком екзоспорію, або фрагментом білка екзоспорію й, необов'язково, лінкерною послідовністю, такою як полі-А лінкер, представляє собою злитий білок, забезпечений як 5ЕО ІЮ МО: 108.
У ще інших варіантах здійснення, злитий білок містить хітозаназу, яка має походження з нуклеотидної послідовності, представленої в 5ЕО ІЮ МО: 106. Амінокислотна послідовність для типової хітозанази, яка може бути злита з націлюючою послідовністю, білком екзоспорію, або фрагментом білка екзоспорію й, необов'язково, лінкерною послідовністю, такою як полі-А лінкер, у злитому білку забезпечена як 5ЕО ІЮ МО: 109.
Для створення злитих конструкцій, гени можуть бути злиті з нативним БСІА промотором ДНК
Васійи5 Іпигіпдіепвзіз.-що кодують перші 35 амінокислот з ВсіА (амінокислоти 1-35 з БЕО ІО МО: 1), використовуючи техніку зрощування шляхом розширень, що перекриваються (5ОЕ).
Правильні амплікони клонували в Є. со//Васі/ли5 в «човниковому» векторі рНРІ13, і правильні клони піддавали скринінгу шляхом секвенування ДНК. Правильні клони електропорували в
Вастиз ІПигіпдіепвів (Сту-, плазміда-) і піддавали скринінгу для визначення резистентності до хлорамфеніколу. Правильні трансформанти вирощували в бульйоні із серцево-мозковим екстрактом протягом ночі при 30 "С, висівали в планшети з живильним агаром, і інкубували при 30 "С протягом З днів. Спори, що експресують злиті конструкції (ВЕМО спори), можуть зібрані із планшет шляхом промивання у фосфатно-сольовому буферному розчині (РВ5) і очищені шляхом центрифугування й додаткового промивання в РВ5.
У таких злитих білках, ендоглюканаза, фосфоліпаза або хітозиназа може включати нуклеотидну послідовність, що кодує амінокислотну послідовність, що має принаймні 8595 ідентичність із ФЕО ІЮ МО: 107, 108 або 109, відповідно.
У таких злитих білках, ендоглюканаза, фосфоліпаза або хітозиназа може включати амінокислотну послідовність, що має принаймні 9095 ідентичність із «ЕО ІЮ МО: 107, 108 або 109, відповідно.
У таких злитих білках, ендоглюканаза, фосфоліпаза або хітозиназа може включати амінокислотну послідовність, що має принаймні 9595 ідентичність із «ЕО ІЮ МО: 107, 108 або 109, відповідно.
У таких злитих білках, ендоглюканаза, фосфоліпаза або хітозиназа може включати амінокислотну послідовність, що має принаймні 9895 ідентичність із «ЕО ІЮ МО: 107, 108 або 109, відповідно.
У таких злитих білках, ендоглюканаза, фосфоліпаза або хітозиназа може включати амінокислотну послідовність, що має принаймні 9995 ідентичність із «ЕО ІЮ МО: 107, 108 або 109, відповідно.
Підходящі лігнін-оксидази включають лігнін пероксидази, лакази, гліоксаль оксидази, лігнінази, і марганецьпероксидази.
Протеаза може включати субтилізин, кислу протеазу, лужну протеазу, протеїназу, пептидазу, ендопептидазу, екзопептидазу, термолізин, папаїн, пепсин, трипсин, проназу, карбоксилазу, серин-протеазу, глутамінову протеазу, аспартат-протеазу, цистеїн-протеазу, треонін-протеазу, або металопротеазу.
Фосфатаза може включати фосфоровмісну моноефіргідролазу, фосфоромоноестеразу (наприклад, РпоА4), фосфоровмісну діефіргідролазу, фосфодіестеразу, трифосфорну моноефіргідролазу, фосфорилангідрид-гідролазу, пірофосфатазу, фітазу (наприклад, фітазу
Васійивз виріб ЕБЕ148 або фітазу Васійив Іпигіпдіепзіз ВТО1ЗА), триметафосфатазу, або трифосфатазу.
Нітрогеназа може включати нітрогеназу сімейства Мії (наприклад, Раепірасйив таввіпепвів
МІИВОЕНКМУХМ).
Білки й Пептиди, які захищають рослини від патогенів
Злиті білки можуть включати націлюючу послідовність, білок екзоспорію, або фрагмент білка екзоспорію, і принаймні один білок або пептид, який захищає рослину від патогена.
Білок або пептид може включати білок або пептид, який стимулює імунну реакцію рослини.
Наприклад, білок або пептид, який стимулює імунну реакцію рослини, може включати білок або пептид, який підсилює імунну систему рослини. Білок або пептид, який підсилює імунну систему рослини, може представляти собою будь-який білок або пептид, який має сприятливий ефект на імунну систему рослини. Підходящі білки й пептиди, що підсилюють імунну систему рослини, включають гарпіни, с-еластини, рД-еластини, системіни, фенілаланінамоній-ліазу, еліситини, дефензини, криптогеїни, флагелінові білки, і флагелінові пептиди (наприклад, Пд22).
Альтернативно, білок або пептид, який захищає рослину від патогена, може представляти 60 собою білок або пептид, який має антибактеріальну активність, протигрибкову активність, або як бактеріальну, так і протигрибкову активність. Приклади таких білків і пептидів включають бактеріоцини, лізоцими, лізоцимні пептиди (наприклад, Гу5М), сидерофори, нерибосомальні активні пептиди, кональбуміни, альбуміни, лактоферини, лактоферинові пептиди (наприклад,
І сіпВ), стрептавідин і ТазА.
Білок або пептид, який захищає рослину від патогена, також може представляти собою білок або пептид, який має інсектицидну активність, гельмінтицидну активність, пригнічують комах або знищують гусениць, або їх комбінацію. Наприклад, білок або пептид, який захищає рослину від патогена може включати інсектицидний бактеріальний токсин (наприклад, МІР інсектицидний білок), ендотоксин, Сту токсин (наприклад, Стгу токсин від ВастШивз ІПигіпдіепвів), білок або пептид, інгібітор протеази (наприклад, інгібітор трипсину або інгібітор гостроголової протеази), цистеїн-протеазу, або хітиназу. Якщо Сгу токсин представляє собою Сгу токсин від
Васійиз Іпигіпдіепвівї, то Сту токсин може представляти собою Сту5В білок або Сту21А білок.
Сту5В і Сту21А мають обидві активності: інсектицидну й нематоцидну.
Білок, який захищає рослину від патогена, може включати фермент. Підходящі ферменти включають протеази й лактонази. Протеази й лактонази можуть бути специфічними для бактеріальної сигнальної молекули (наприклад, бактеріальної лактонової гомосеринової сигнальної молекули).
Якщо фермент представляє собою лактоназу, то лактоназа може включати 1,4-лактоназу, 2- пірон-4,6-дикарбоксилат лактоназу, З3-оксоадипат єнол-лактоназу, актиноміцин лактоназу, дезоксилімонат А-кільце-лактоназу, глюконолактоназу І! -рамноно-1,4-лактоназу, лімонін-О- кільце-лактоназу, стероїд-лактоназу, триацетат-лактоназу, або ксилоно-1,4-лактоназу.
Фермент також може представляти собою фермент, який є специфічним для клітинного компонента бактерії або гриба. Наприклад, фермент може включати ВДВ-1,3-глюканазу, ІВ-1,4- глюканазу, ДВ-1,6-глюканазу, хітозиназу, хітиназу, хітозиназа-подібний фермент, лутиказу, пептидазу, протеїназу, протеазу (наприклад, лужну протеазу, кислу протеазу, або нейтральну протеазу), мутанолізин, стафолізин, або лізоцим
Білки й Пептиди, які підсилюють стресостійкість рослин
Злиті білки можуть включати націлюючу послідовність, білок екзоспорію, або фрагмент білка екзоспорію й принаймні один білок або пептид, який підсилює стресостійкість рослин.
Наприклад, білок або пептид, який підсилює стресостійкість рослин, включає фермент, який розкладає зв'язану зі стресом сполуку. Зв'язані зі стресом сполуки включає, але не обмежуючись тільки ними, аміноциклопропан-1-карбонову кислоту (АСС), активні форми кисню, оксид азоту, оксиліпіни, і фенольні смоли. Специфічні активні форми кисню включають гідроксил, пероксид водню, кисень і супероксид. Фермент, який розкладає зв'язану зі стресом сполуку, може включати супероксиддисмутазу, оксидазу, каталазу, дезаміназу аміноциклопропан-1-карбонової кислоти, пероксидазу, антиоксидантний фермент, або антиоксидантний пептид.
Білок або пептид, який підсилює стресостійкість рослин, також може включати білок або пептид, який захищає рослину від стресу під впливом факторів навколишнього середовища.
Стрес під впливом факторів навколишнього середовища може включати, наприклад, посуху, затоплення, жару, заморозок, сіль, важкі метали, низький рН, високий рн, або їх комбінацію.
Наприклад, білок або пептид, який захищає рослину від стресу під впливом факторів навколишнього середовища, може включати білок, який індукує формування мікрокристалів льоду, проліназу, фенілаланінамоній-ліазу, ізохорисмат-синтазу, ізохорисматпіруват-ліазу або холіндегідрогеназу.
Білки й Пептиди, що зв'язуються з рослиною
Злиті білки можуть включати націлюючу послідовність, білок екзоспорію, або фрагмент білка екзоспорію й принаймні білок або пептид, що зв'язується з рослиною. Білок або пептид, що зв'язується з рослиною, може представляти собою будь-який білок або пептид, який здатний специфічно або неспецифічно зв'язуватися з будь-якою частиною рослини (наприклад, коренів рослини або повітряна частина рослини, така як листок, стебло, квітка або плід) або рослинним матеріалом. Таким чином, наприклад, білок або пептид, що зв'язується з рослиною, може представляти собою білок або пептид, що зв'язується з коренем, або білок або пептид, що зв'язується з листками.
Підходящі білки й пептиди, що зв'язуються з рослиною, включають адгезини (наприклад, рикадгезин), флагеліни, омптини, лектини, експансини, біоплівкові структурні білки (наприклад,
ТазА або уцавВ) пілус білки, курлус білки, інтиміни, інвазини, аглютиніни, і афімбріальні білки.
Рекомбінантні Вас/ив, які експресують злиті білки
Злиті білки, описані в даній заявці, можуть експресуватися за допомогою рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Вас//иб5. Злитий білок може представляти собою будь-який зі злитих білків, описаних вище.
Рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васі//Лих можуть спільно експресувати два або більше будь-яких злитих білків, описаних вище. Наприклад, рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Вас/из можуть спільно експресувати принаймні один злитий білок, який включає білок або пептид, що зв'язується з рослиною, разом із принаймні одним злитим білком, що містять стимулюючий ріст рослин білок або пептид, принаймні одним злитим білком, що містять білок або пептид, який захищає рослину від патогена, або принаймні одним білком або пептидом, який підсилює стресостійкість рослин.
Рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васійих можуть включати Васшив5 апійтгасів,
Васійи5 сегеихз, Васіни5 (пипіпдіепзіх, Васйи5 тусоіде5, Васійи5 рхенаотусоїдез, Вастив затапії,
Васшив5 даетокепвзів, Васпив шеїНепвіерНепвів, Васшпив гоуоіепвів або їх комбінацію. Наприклад, рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини ВасШив можуть включати Васіи5 сегеив, ВасшпШив
Іпигіпдіепвзі5, Васійй5 рзеййотусоїдез, або Васійиз тусоіїдбез. Особливо, рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васі//их можуть включати Васі Шиппдіепвіз або Васшив тусоідев.
Для створення рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васіивз, що експресують злитий білок, будь-який представник сімейства Вас//их сегеи5 може бути кон'югований, трансдукований або трансформований з вектором, що кодує злитий білок, використовуючи стандартні методи, відомі в даній галузі техніки (наприклад, шляхом електропорації). Після цього бактерії можуть бути піддані скринінгу для ідентифікації трансформантів за допомогою будь-якого методу, відомого в даній галузі техніки. Наприклад, якщо вектор включає ген резистентності до антибіотика, то бактерія може бути піддана скринінгу для визначення резистентності до антибіотика. Альтернативно, ДНК, що кодує злитий білок, може бути інтегрована в хромосомну ДНК представника сімейства хазяїна 8. сегеив. Рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Вас//Лих згодом можуть бути піддані умовам, які будуть індукувати спороутворення. Підходящі умови для індукування спороутворення відомі в даній галузі техніки.
Наприклад, рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Вас//Лиз можуть висівати на агарові
Зо планшети, і інкубуватися при температурі приблизно 30 "С протягом декількох днів (наприклад,
З дні).
Інактивовані штами, нетоксичні штами, або генетично оброблені штами будь-яких перерахованих вище видів також підходить можна використовувати. Наприклад, можна використовувати Васі Іигіпдіепвіз, у якому відсутній Стгу токсин. Альтернативно або додатково, як тільки були створені рекомбінантні спори сімейства 8. сегеиз, що експресують злитий білок, вони можуть бути інактивовані для запобігання подальшого проростання відразу після використання. Можна використовувати будь-який метод для інактивації бактеріальних спор, який відомий у даній галузі техніки. Підходящі методи включають, але не обмежуючись тільки ними, термічну обробку, гамма-опромінення, рентгенівське опромінення, УФ-А опромінення, УФфФ-Б опромінення, хімічну обробку (наприклад, обробку за допомогою глутаральдегіду, формальдегіду, перекису водню, оцтової кислоти, відбілювача, або будь-яку їх комбінацію), або їх комбінацію. Альтернативно, можна використовувати спори, що мають походження з нетоксиногенних штамів, або генетично або фізично інактивованих штамів.
Рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Вас/Лиз, що мають стимулюючі ефекти на ріст рослин та/або інші сприятливі властивості
Багато штамів представників сімейства Васіивє сегеиє мають властиві сприятливі властивості. Наприклад, деякі штами мають стимулюючі ефекти на ріст рослин. Будь-які зі злитих білків, описаних у даній заявці, можуть експресуватися в таких штамах.
Наприклад, рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васійив можуть включати штам бактерій, що стимулює ріст рослин.
Штам бактерій, що стимулює ріст рослин може включати штам бактерій, який продукує інсектицидний токсин (наприклад, Сгу токсин), продукує фунгіцидну сполуку (наприклад, ВД-1,3- глюканазу, хітозиназу, лутиказу, або їх комбінацію), продукує нематоцидну сполуку (наприклад,
Стгу токсин), продукує бактеріоцидну сполуку, яка є резистентною до одного або декількох антибіотиків, включає одну або декілька плазмід, які вільно реплікуються, зв'язаних з коріннями рослин, що колонізують коріння рослин, що утворюють біоплівки, солюбілізують живильні речовини, секретують органічні кислоти, або будь-яку їх комбінацію.
Наприклад, якщо рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васійив включають штам бактерій, що стимулює ріст рослин, то штам бактерій, що сприяє росту рослин, може включати 60 Васійи5 тусоїде5 ВТ155 (МАНІ Мо. В-50921), Васіих тусоїдез ЕЕ118 (МАНІ Мо. В-50918),
Васійи5 тусоїдех5 ЕЕ141 (МАНІ Мо. В-50916), Васі тусоїдех5 ВТ46-3 (МАНІ Мо. В-50922), представник сімейства Васі/Лиз сегеих ЕЕ128 (МАНІ Мо. В-50917), Васілив5 Вигіпдіепві5 ВТО1ЗА (МАВ Мо. В-50924), або представник сімейства Васі/Лиз сегеиз ЕЕ349 (МАНІ Мо. В-50928).
Васійи5 Пигіпдіепвіє ВТО1ЗА також відомий як Васійих Пигіпдіепві5 4037. Кожний із цих штамів був задепонований у міністерстві сільського господарства США (О5БА) Адгісийига! Незеагсн зЗегмісе (АК5), розташованому за адресою 1815 Могій Опімегейу 5ігеєї, Реогіа, Шіпої5 61604,
О.5.А., 10 березня 2014 р., і ідентифікується за номером депонування МЕКІ, вказаним в круглих дужках.
Ці штами, що стимулюють ріст рослин були виділені з ризосфер різних сильних рослин і були ідентифіковані відповідно до їх послідовностей 165 рРНК, і за допомогою біохімічних аналізів. Штами були ідентифіковані принаймні до їх родової назви за допомогою загальноприйнятих біохімічних і морфологічних індикаторів. Біохімічні аналізи для підтвердження грампозитивних штамів, таких як Вас//и5, включають ріст на РЕА середовищі й живильному агарі, мікроскопічне дослідження, ріст на 595 і 7,595 масі середовищі, ріст при рН 5 і рН 9, ріст при 42 "С і 50 "С, здатність продукувати кислоту при ферментації із целобіозою, лактозою, гліцерином, глюкозою, сахарозою, а-манітом і крохмалем; продукувати флуоресцентний пігмент; гідролізувати желатин; відновлювати нітрат; продукувати каталазу, гідролізувати крохмаль; оксидазну реакцію, продукцію уреази й рухливість.
Наприклад, рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васійив, що містять штам бактерій, що стимулює ріст рослин, можуть включати Васйив5 тусоіїдез ВТ155, ВасшШив тусоїде5 ЕЕ141, або Васшйив іІпигіпдіепзіз ВТО1ЗА. Рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини ВасіЛих можуть експресувати будь-які злиті білки, описані в даній заявці, наприклад, злитий білок, що містить націлюючу послідовність, з ЗЕО І МО: 60 і негормональний пептид (наприклад, інгібітор трипсину Кунітца (КТІ)), фермент, залучений у продукцію або активацію сполуки, що стимулює ріст рослин (наприклад, хітозиназу), білок або пептид, що зв'язується з рослиною, (наприклад,
ТазА); білок або пептид, який захищає рослину від патогена, (наприклад, ТазА), або фермент, який розкладає або модифікує бактеріальне, грибкове або рослинне джерело харчування (наприклад, фосфатазу, таку як РПОА або фітазу, або ендоглюканазу).
Промотори
Зо У будь-якому з рекомбінантних представниках сімейства Вас//и5 сегеив, описаних у даній заявці, злитий білок може експресуватися під контролем промотору, який нативний для націлюючої послідовності білка екзоспорію, або фрагмента білка екзоспорію злитого білка.
Наприклад, якщо злитий білок включає націлюючу послідовність, має походження з 8. апі/тасів зіегпе ВСІА (наприклад, амінокислоти 20-35 з БЕО ІЮО МО: 1, амінокислоти 1-35 з БЕО ІЮО МО: 1,
ЗЕО ІЮО МО: 1, або ЗЕО ІЮ МО: 60) або якщо злитий білок включає повнорозмірний ВСІА (ЗЕО ІЮ
МО: 2) або фрагмент повнорозмірного ВсіА (наприклад, 5ЕО ІЮ МО: 59), то злитий білок може експресуватися під контролем промотору, який в звичайних умовах асоційований з ВСІА геном у геномі В. апійгасіє Мегпе (наприклад, промотор з БЕО ІЮ МО: 85).
Альтернативно, злитий білок може експресуватися під контролем високоекспресованого промотору спороутворення. У деяких випадках, промотор, який є нативним для націлюючої послідовності білка екзоспорію, або фрагмента білка екзоспорію, буде представляти собою високоекспресований промотор спороутворення. В інших випадках, промотор, який є нативним для націлюючої послідовності білка екзоспорію, або фрагмента білка екзоспорію, не буде представляти собою високоекспресований промотор спороутворення. В останніх випадках, може бути сприятливим заміняти нативний промотор на високоекспресований промотор спороутворення. Експресія злитого білка під контролем високоекспресованого промотору спороутворення забезпечує збільшену експресію злитого білка на екзоспорії представника сімейства Васі/и5 сегеийв.
Високоекспресований промотор спороутворення може включати одну або декілька промоторних послідовностей сигма-К полімерази, специфічної для спороутворення.
Підходящі високоекспресовані промотори спороутворення для застосування в експресуючих злитих білках у представниках сімейства Васі/Лиз сегеиз включають ті, які представлено в
Таблиці 2 нижче:
Таблиня 2, Промоторні Послідовності
ВеїА промотор | ТААТСАСССТСТТССАААТСААТСАТАТСТТАТАСАТАТАСТАААСТ
ЄВ. апійкасіх ТТССАТТТТІТТАААТТОСТІСААСТАСТІТААСАТТІСТТТТСААТААТ деетеї ТСАААТОТСССТОТСАТІТІСТТТОССТІТТОСАТСТАСТАТАТААТО рідвни НИ ААСОСТІТАТОСАСОТОСААТТТАТО (5БО Ю МО: 853
Вера промотор | АІТІТТАТІТСАТТСААТТТТТОСТАТТТАСТАССТАССОСАСТСАСАААА
ЄВ. апівкасів АОСАССІСТСАТТААТІТАТАТТАТАСТСАТТОСАААТСТААТТТААТОА тет) ААТСАТСАТАСТАТАТОТІТТАТААСААСТАААССТАССАТАСТТАА вірі ВИДИ ТТААТАСАТАТСТАТАСАСТІСААТАТСАСАССАТОСАСТТОСААТТАТ «ЗБ МО: АТССААСТТІСАТІТСАЗАТТАААТААСТОССТОСОСТАТТСТОААТО
В ТСАТТТАСТСТСССТАСТАСАТТТААТААТТАТОСАСААССААТСАТАЄ
САССТТАСТАСАТО
Пвромотер ; В 5ЕО ІВ ХО. Послідовність вАКІЕЗ ААТТАСАТААСААСААСТАСАТТАСССАССАЗССАСТСТАССОАААЄ промотор СТААСТЛОЮСТЕТТТІТАТТАААТААЄТАТІТТАТТАААТІТСАТАТАТА СА
ЄВ. аплйкасіх АТСОСТІСТССАТТТСАТІ ВТС АСССАСОСАТІТАСТАТТАСТА. м. апітаст АТАТОААТТТТТСАСАССТОСАТІТТАТТІ етпе!
Ї5БО ТО МО:
Тен зя72 СТАТСАТТТААСАТАСАСААТАССААААСАСАЛАСАТАТТАТАТААС промотор: САТАААТСААЛАСТІТАТОСТАТАТСОТАТССТААСТОТАТАТАТТАЮЄТАСА еВ | АЛАСАСОТАТАСТСАТА САНТА КАТ (Я. меійєентієрнєнсяї
КВАВ 4) збо МО: яв
Прометор СОСТАОССТАСАТІЗАААТАТОА САС АСОЛАТААСТААААСОСА чит В- шІССАТАТОССАСТССТІТТАОІТАТАААТААТОТаСаАТТАСАСТАЕ пода пе лезного ААТТГТАТАТАСЄСТАТАТІСТАТІАСАТСААСОСТТТАТССТІТА АТО - Р зпелер й ТБАТТААТСАТОВАТ ТА АСАаАСААСсОССТТАСАСОТКСТІТТТЕТАК й щ ка СТО ІТАТААСКЮТІТ ТАЛА ОСС ТАССТАССК ТА САС СА ААА
Я. КАК ОМ АТААСТАСАТАТІССАТСОСТРТІЕОТААССТАСААСАА зейенкіербенті | СОСТАТТААТТАСССТОТАААТААСТТАТСТОСТАТАТААОСТААЄТТІ « КВАВ АТАТАТІСТССТАСААТаАлАатТаААЄСсаАсстТаАтТААаСт
І5ЕО ТО МО: 55)
Ст А ААМСССТТААТСОСАТ ПОСТ ТАДАСАТТСТАЛАСТСТАА АС САТОССАТА А промотор ТЕН АСААСТААСТАСАТІСТТААСАСССТОО СА ААТЕСАГ «В. Ебнкінетєнтіх АТІТАСТААААТТАСТТОАСТТТОТОСАТЕТТТТСАТААЗАТСАСТЄ
Куля 7 АТАТСІТТТАЗАТІСТАстТАатсАзАЗАСАСТАтТТатТатсатаате но- ! 3) АзАТРТССТАТСТТАЕЛАЗАСААТсСАССТААСІТА іББО ро МО: 90)
ЕкууУ промотор | ТЛАТТССАССТІСССТТАТССТСТІТСОССТАТІТАААААЛАСОТСТТО (В. Пнтіпетєнвіх АСАТТОТОАССАААТСТОСТСААСТОСААТАТСТІТАТТААТОТАААТА й м ГАААСААСААСАТААССАСІСАСАТІДА серевадй
Коокиківв штам 97-27) ізо МО: 9
Соїх промотар АССАТСТСТТІТІТТАТАТІОТАТТАТОТАСАТОССТАСТАТАТАААТІ
ІВ. СОСТОСТІТТАТСОТА САТ АС ААТАТСААССАТАТОСУТІС ей чкінеієняхіх ДІ АТАТІЕСТАСТАСТСТАТСТСАБААСІСТАСсСАСсАсосавІСАСаАТА
ТНЕУ г а
Накаті що
І5ЕО ТО МО:
МУ
ЖрА промотар | ТТААТОТСАСТССТТАТСТІСТТОТІТОТАТІТАСАТТААТААСАТАТІ
В ійнтінсіснсії ПОЗСТТСАССАСАТТТОСТСАСААТСТСААСАССТТТТТТТТАААТАЄ і т «| ШОСА А АСАССАТА АС ЗА ОСІ ОСААТТА серовар КигвізКі штам НІ
ЇБЕО 1 МО:
УСВА промоторо | АТАТАТІТТСАТААТАССАСАААААОСОСАСТІТААААСААТОАСОЮ
ЇВ. грутінеієнсіє | ЗАСОСАААТАААСАСТТОТТСАТАТАСТАААТАСАСАСААТТСАСАЄ серовар Кияк штам НІТ3) (ЗБОЮ МО: 94
ВхрВ прамотор | АЛАСТАЛАТААТОАССТАЛОСАТОСАТТСОСТООССАОСААТТАТСТОС (В. САСССААТССАТОСТІААССАСТАТТАТТАТОТАААТТІСТТАлАаАТТ фреїнятензіх А! | ОССААСТТОТСТАСААСАТАСААССТОТОСТТТТСАТТААСТОАААО
МОНБНЯ ЛІ | ТАС ААСАСАТАААССАСТОАААААСА
Накат!
ЗВО МО: ох
Кіштвпохе АТТСАСТАСААСОСОСАТСАСТІТСАТОСОСАТАСАТАТСАСААСТА промотор (8. ССООАААСТОТТТСТАСААСАТТАСАААСАТАТАТТАТСТОСАТСАТА
КК, | ААОСАСАСАТОСАААЄ ійнгіпрієнкіх А1
Накаті
С5БО МО:
Сеауоїя СОСОСАССАСТІССТССТАСААСААСОСААПААСсВАСТТОСССАТАЄ промотер (В. АОСАСТАТТСТТАТТСАСТОАТТТАОСАСОСООСОТААСАСОАСАЛА ср АСАТТСАССТІСАТТСАСОСТАТСАТАТСТТАОСАТАААТАТААТАТТ апійтасіз ААТТТТАААПСАСААТСТСТАСАТОСТІСАСАТТОТОСТІТІТАТТІСТТ
Зісвпе) СТТАВАААСААССАТТТТТААССАААСТІСТТАССАССТТАТСААТАТ (БО ТО МО: ААСТАТААТАСТАСАССАТТТАТТСАССТАССТА от
ВсіС промотор | ТОААСТАТСТАСАССТААТІТАСОСАААОСААТСТСАСОАСААСАЄТ (В. анійкагіз ТТСОСААСАССТАТАТТТТАААТТТААТАААААААСАСАСТОСОСАСТ дтєтпе) САСАЛАТТАТААЛОСТАССТООСТТСАААТСАААААТЕТСАСТАААА пора ССАТАТТАТСААТАСОСАСААААТОСААААААСОССТТАТСАТААОО
БО МО: СОТТТТТТОСАТТТТТІСТІСАЗАСАЯЗАССАТТІТАСТАТОАССАТТТА о АСТААТІТТТОСАТСТАСТАТСАТСАСТТТСАТТСАСАТІСТСАТТАЄ заапсАсасатттаата бізта К ТАТАТСАТАТСТААААТТАСТІСІТАТТОССАСАТАТСАТАТАСААТС промотер ОССАТАТТАТАСАТОСАСААААСТААОТАТОСТАТТАТТСТТА АТО еВ. пнтйкаєтх ТТІАССАССТІСТААТАТТАСАСАТАСААТСООТСАТТІТСААСАЄТО с НИТИгИе ААСАТОСАТІТСТІСТОСААСАСААСТСТІТТІСТТТССТТАТТТССА А
Містпе) ААВААДАЛМОСАССССАТІТТААЛАТАСООССТОСТІСТААТОТАСАТТА
СВОИ МОУ:
ВВА промотор | ТАТСАСАТААСІСТІТАТІТТТААТАТТІССАСАТАААОТСАААСТІТ (В. ААТСАСТОСОСОСТІТОТТСАТССССОСАСТСАТТАТТААТТСААССА
Пи АОССАТАААААСАТАСАСОСТСТПАССАСААААСТОСАССОСАТСА пнелихієноїх АР | ттстАТААСААЗААОСТТАЗТСТІТАТАСААТТАТСТСТТТТТАТАТАЄ
Накат) СПАСОСТАСТАААСАСАСАТТТОСАСАААААТОСАССОАТТТАТСТО (ЩО МО: ЗаАТТІТААСсТТТТАатТАдАадВсссабААЛАТО 100)
ВеіА опероні АТТІТІТАСТТАССАСТААААСТОСАТАТСАСІТТТАСТОСТІТТТСАТЕ клястерної ТТТАААТТСААТСАТТАААТСТТССТІТТСТАСАТАСТСАТААТОТТОТ : АТСАСАТТОСОСТАССАСОСАСТТАТА тпіКкахил трансферазн івчтінвієнтія тсгеровар
КаопкиКіай штам 7-37
ГБО МО:
НОНу
НеіА оперон 2 | АСАТАААТТСАССТОСАТА А АСССТТСАТТАТАТАСТАСАТОСААААЄ кластерної ССАААСААЛАТСАСАСОСАСАТТТСААТТАТТСААААСАААТСТТАА глікознл АСТАСТІСААСААТТТАЛАААЛАТОСАААСТІТАЄТАТ АТСТАТААС : АТАТСАТІСАТТТССААсСАСосСТЄІтТА трансферази (В. їйнкінрвієпттія серовар ЕцтвізКі штам НІ73) сзБО ТО що:
ННЯ;
Промотор ТІСТАТІТТССААСАТЛАСАТОСТАССАТТАААТОСІТТІТТОСАААТ глікозил СССТІСТТОССААСААСОСАТТАСАСОССТІТІТТТАТАСАААССАААА
ТСАТТААСААТІТТААСТТААТСАСтТТттТтОТІТОоССтІтААСАСсСсТТ трансферазн ТТАТОТТАСТАТААТТАТАСТАТСАССТАСТААТААСААСТАТААСТА (5. ТТТСТООССАССАТАТАТСА ійцкінвієнпвіх АД
Накаті
ЗЕ О МО: 103
У промоторних послідовностях, перерахованих у Таблиці 2 вище, розташування промоторних послідовностей сигма-К полімерази, специфічної для спороутворення, вказані жирних шрифтом і підкреслені. СтутА промотор (8. Іпигіпдіепзіз НО-73; ЗЕО ІЮО МО: 90) має всього чотири сигма-К послідовності, дві з яких перекриваються одна з одною, як вказано подвійним підкресленням у Таблиці 2.
Переважні високоекспресовані промотори спороутворення для застосування в експресуючих злитих білках у представниках сімейства Васійиз сегеих включають ВеїА промотор (8. апілтгасіх біегпе; ЗЕО ІЮ МО: 86), ВсіІА промотор (8. апілгасіх бівтте; 5ЕО ІЮ МО: 85), промотори оперонів 1 і 2 ВсіА кластерної глікозил трансферази (8. апійгасів біете; 5ЕО І
Мов: 101 ї 102), ії Промотор УУТМ ВДВ-пропелерного білка (8. шейепеІернепзіз КВАВ 4; 5ЕО І0
МО: 89).
У будь-якому з рекомбінантних представниках сімейства Вас//и5 сегеив, описаних у даній заявці, злитий білок може експресуватися під контролем промотору спороутворення, що містить нуклеотидну послідовність, що має принаймні 8095, принаймні 9095, принаймні 9595, принаймні 9895, принаймні 9995, або 10095 ідентичність із нуклеотидною послідовністю з будь-якої з БЕО ІЮ
МОБ: 85-103.
Якщо промотор спороутворення містить нуклеотидну послідовність, що має принаймні 8095, принаймні 9095, принаймні 9595, принаймні 9895, або принаймні 9995 ідентичність із нуклеотидною послідовністю з будь-якої з «ЕО ІЮ МОБ: 85-103, то промоторна послідовність або послідовності сигма-К полімерази, специфічної для спороутворення, переважно мають 10095 ідентичність із відповідними нуклеотидами з 5ЕО ІЮО МО: 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, або 103. Наприклад, як вказано в Таблиці 2 вище, ВсІіІА промотор з 8. апійгасіх Зіегпте (5БО ІО МО: 85) має Промоторні послідовності сигма-К полімерази, специфічної для спороутворення, на нуклеотидах 24-32, 35-43, і 129-137. Таким чином, якщо промотор спороутворення включає послідовність, що має принаймні 9090 ідентичність із нуклеотидною послідовністю ЗЕО ІЮО МО: 85, то є переважним, що нуклеотиди промотору спороутворення, що відповідають нуклеотидам 24-32, 35-43, і 129-137 з БЕО ІЮ МО: 85, мають 10095 ідентичність із нуклеотидами 24-32, 35-43, і 129-137 з БЕО ІЮ МО: 85.
У будь-яких з методів, описаних у даній заявці для стимуляції росту рослини, ріст рослин у середовищі для росту рослини, що містить рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васійив і принаймні один фунгіцид, вибраний із переважних фунгіцидів, описаних у даній заявці, проявляє посилений ріст у порівнянні з ростом рослин в ідентичному середовищі для росту рослини, яке не містить рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васійив.
У будь-яких композиціях і методах, описаних у даній заявці для стимуляції росту рослини, рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Вас/йиз можуть включати будь-які рекомбінантні штами бактерій, що стимулюють ріст рослин, описаних вище.
У будь-яких композиціях і методах для стимуляції росту рослини, описаних у даній заявці, злитий білок може експресуватися під контролем будь-якого із промоторів, описаних вище.
Фунгіциди
У цілому, "фунгіцидний" означає здатність речовини підвищувати смертність або інгібувати швидкість росту грибів.
Термін "гриб" або "гриби" включає різні ядерні спорові організми, у яких відсутній хлорофіл.
Приклади грибів включають дріжджі, цвілеві гриби, іржасті гриби і їстівні гриби.
Композиція відповідно до даного винаходу включає принаймні один переважний фунгіцид, описаний у даній заявці.
Активні сполуки, вказані в даній заявці під їх загальноприйнятими назвами, відомі й описані, наприклад, в "Ревіїсіде Мапиаї!" або в інтернеті (наприклад: пер:/Лумли.аіапмиоса.пеї/резіїісідев).
У деяких варіантах здійснення, фунгіциди вибирають із групи, яка включає бітертанол, біксафен, бромуконазол, карбендазим, карпропамід, дихлофлуанід, фенамідон, фенгексамід, фентин ацетат, фентин гідроксид, фторпіколід, флуопірам, флуоксастробін, флухінконазол, фосетил, іпродіон, іпровалікарб, ізотіаніл, метоміностробін, офурац, пенцикурон, пенфлуфен, прохлораз, пропамокарб, пропінеб, протіоконазол, піриметаніл, спіроксамін, тебуконазол, толілфлуанід, триадимефон, триадименол, триазоксид, трифлоксистробін, М-(б-хлор-2- (трифторметил)бензил|-М-циклопропіл-3-(дифторметил)-5-фтор-1-метил-1 Н-піразол-4- карбоксамід, і 2,6-диметил-1Н,5Н-/1 4|дитіїно(2,3-с:5,6-с|дипірол-1,3,5,7(2Н,6Н)-тетрон.
Зо В іншому варіанті здійснення згідно із даним винаходом фунгіцид вибирають із групи, яка включає карбендазим, флухінконазол, ізотіаніл, пенцикурон, пенфлуфен, протіоконазол, тебуконазол, і трифлоксистробін.
У ще іншому варіанті здійснення, фунгіцид представляє собою М-(5-хлор-2-ізопропілбензил)- п-циклопропіл-3-(дифторметил)-5-фтор-1-метил-1Н-піразол-4-карбоксамід.
Композиції відповідно до даного винаходу
Відповідно до даного винаходу композиція включає а) рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васійив, які експресують злитий білок, що містить: (І) принаймні один стимулюючий ріст рослин білок або пептид, вибраний із групи, яка включає фермент, залучений у продукцію або активацію сполуки, що стимулює ріст рослин; фермент, який розкладає або модифікує бактеріальне, грибкове або рослинне джерело харчування; і білок або пептид, який захищає рослину від патогена; і (ІЇ) націлюючу послідовність, яка локалізує злитий білок на екзоспорій клітин Васіййив; і б) принаймні один переважний фунгіцид, описаний у даній заявці в синергетично ефективній кількості. «Синергетично ефективна кількість» відповідно до даного винаходу представляє собою кількість комбінації рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васійив, які експресують злитий білок і принаймні одного переважного фунгіциду, як описано в даній заявці, яке є більш ефективною по відношенню до комах, кліщів, нематод та/або фітопатогенів, ніж рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Вас/ивз, які експресують злитий білок або такий фунгіцид окремо. «Синергетично ефективна кількість» відповідно до даного винаходу також представляє собою кількість комбінації рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васійив5, які експресують злитий білок і принаймні одного переважного фунгіциду, як описано в даній заявці, яка є більш ефективною для посилення росту рослини та/або сприяння життєздатності рослини, ніж рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини ВасіЛив, які експресують злитий білок або фунгіцид окремо.
Даний винахід включає всяку й кожну комбінацію кожного з фунгіцидів, вказаних у даній заявці, з рекомбінантними продукуючими екзоспорій клітинами Вас//ив.
Додаткові адитиви
Один аспект даного винаходу забезпечує композицію, як описано вище, що додатково містить принаймні одну допоміжну речовину, вибрану із групи, яка включає модифікуючі агенти,
розчинники, спонтанні промотори, носії, емульсифікатори, диспергуючі речовини, речовини, що захищають від замерзання, загусники й ад'юванти. Ці композиції позначаються як препарати.
Таким чином, в одному аспекті згідно із даним винаходом забезпечуються такі препарати, і застосовувані форми, приготовлені з них, як засоби захисту сільськогосподарських культур та/або пестицидних агентів, таких, як просочувальні, капаючі й розпилювальні рідини, що містять композиції згідно з винаходом. Застосовувані форми можуть додатково включати засоби захисту сільськогосподарських культур та/або пестицидні агенти, та/або ад'юванти, що підсилюють активність, такі як пенетранти, прикладами яких є рослинні олії, такі як, наприклад, рапсова олія, соняшникова олія, мінеральні масла, такі як, наприклад, рідкі парафіни, алкілові складні ефіри рослинних жирних кислот, таких як рапсова олія або складні метилові ефіри соєвої олії, або алканол алкоксилати, та/або заповнювачі, такі як, наприклад, алкілсилоксани та/або солі, прикладами яких є органічні або неорганічні солі амонію або фосфонію, прикладами яких є сульфат амонію або діамоній гідрофосфат, та/або промотори утримання, такі як діоктил сульфосукцинат або гідроксипропілгуарні полімери та/або зволожуючі засоби, такі як гліцерин, та/або добрива, такі як, наприклад, амонієві, калієві або фосфорні добрива.
Приклади типових препаратів включають водорозчинні рідини (51), емульгувальні концентрати (ЕС), емульсії у воді (ЕМ/), суспензійні концентрати (5С, ЗЕ, Е5, ОБ), дисперговані у воді гранули (М/5), гранули (ЗК) і капсульні концентрати (С5); ці й інші можливі типи препаратів описані, наприклад, в Стор І їе Іпіегпаййопаї апа іп Резіїсіде 5ресіїїсайопв, Мапиаї оп
ЮОеєемеІортепі апа О5е ої ЕАО апа мно б5ресіїісайопв Тог Ревіїсідез5, ЕАО Ріапі Ргодисіп апа
Ргоїесіоп Рарегз - 173, підготовленому ЕАОЛЛ/НО доїіпі Мееїіпу оп Ревзіісіде 5ресійсайопв5, 2004,
ІЗВМ: 9251048576. Препарати можуть включати активні агрохімічні сполуки, що відрізняються від однієї або декількох активних сполук згідно з винаходом.
Дані препарати або застосовувані форми переважно включають допоміжні речовини, такі як модифікуючі агенти, розчинники, спонтанні промотори, носії, емульсифікатори, диспергуючі речовини, речовини, що захищають від замерзання, біоциди, загусники та/або інші допоміжні речовини, такі як, наприклад, ад'юванти. Ад'ювант у цьому контексті представляє собою компонент, який підсилює біологічний ефект препарату, при цьому сам компонент не має біологічної дії. Прикладами ад'ювантів є агенти, які сприяють утриманню, поширенню,
Зо приєднанню до поверхні листка або проникненню.
Ці препарати готують відомим способом, наприклад, шляхом змішування активних сполук з допоміжними речовинами, такими як, наприклад, модифікуючі агенти, розчинники та/або тверді носії та/або додаткові допоміжні речовини, такі як, наприклад, сурфактанти. Препарати готують або в підходящих рослинах або ще до або після застосування.
Підходящими для використання як допоміжні речовини є речовини, які є підходящими для надання препарату активної сполуки або застосовуваних форм, приготовлених із цих препаратів (таких як, наприклад, придатні агенти для захисту сільськогосподарських культур, такі як розпилювані рідини, або протруювання насіння) переважних властивостей, таких як певні фізичні, технічні та/або біологічні властивості.
Підходящі, модифікуючі агенти, представляють собою, наприклад, воду, полярні й неполярні хімічні рідини, наприклад, із класів ароматичних і неароматичних вуглеводнів (такі як парафіни, алкілбензоли, алкілнафталіни, хлорбензоли), спиртів і поліолів (які, якщо це є підходящим, також можуть бути заміщені, етерифіковані та/або естерифіковані), кетонів (такі як ацетон, циклогексанон), складних ефірів (включаючи жири й масла) і (полі)ефірів, незаміщених і заміщених амінів, амідів, лактамів (такі як М-алкілпіролідони) і лактонів, сульфонів і сульфоксидів (такі як диметилсульфоксид).
Якщо використовуваним модифікуючим агентом є вода, то також є можливість застосовувати, наприклад, органічні розчинники як допоміжні розчинники. Головним чином, підходящі рідкі розчинники представляють собою: ароматичні речовини, такі як ксилол, толуол або алкілнафталіни, хлоровані ароматичні речовини й хлоровані аліфатичні вуглеводні, такі як хлорбензоли, хлоретилени або метиленхлорид, аліфатичні вуглеводні, такі як циклогексан або парафіни, наприклад, петролейні фракції, мінеральні й рослинні олії, спирти, такі як бутанол або гліколь і також їх прості ефіри й складні ефіри, кетони, такі як ацетон, метил етил кетон, метил ізобутил кетон або циклогексанон, сильно полярні розчинники, такі як диметилформамід і диметилсульфоксид, а також вода.
У принципі, представляється можливим використовувати всі підходящі розчинники.
Підходящі розчинники представляють собою, наприклад, ароматичні вуглеводні, такі як ксилол, толуол або алкілнафталіни, наприклад, хлоровані ароматичні або аліфатичні вуглеводні, такі як хлорбензол, хлоретилен або метиленхлорид, наприклад, аліфатичні вуглеводні, такі як бо циклогексан, наприклад, парафіни, петролейні фракції, мінеральні й рослинні олії, спирти, такі як метанол, етанол, ізопропанол, бутанол або гліколь, наприклад, і також їх прості ефіри й складні ефіри, кетони, такі як ацетон, метил етил кетон, метил ізобутил кетон або циклогексанон, наприклад, сильно полярні розчинники, такі як диметилсульфоксид, і вода.
У принципі, можна використовувати всі підходящі носії. Підходящі носії представляють собою, особливо: наприклад, амонієві солі й подрібнені природні мінерали, такі як каоліни, глини, тальк, крейда, кварц, атапульгіт, монтморилоніт або діатомову землю, і подрібнені синтетичні мінерали, такі як тонкодисперсний діоксид кремнію, глинозем і природні або синтетичні силікати, смоли, воски та/або тверді добрива. Аналогічно до цього можна використовувати суміші таких носіїв. Носії, що підходять для гранул, включають наступні речовини: наприклад, роздроблені й фракціоновані природні мінерали, такі як кальцит, мармур, пемза, сепіоліт, доломіт, і також синтетичні гранули неорганічного й органічного борошна, і також гранули органічного матеріалу, такі як тирса, папір, кокосова шкарлупа, качани кукурудзи й стебла тютюну.
Також можна використовувати зріджені газоподібні, модифікуючі агенти, або розчинники.
Особливо переважними є ті модифікуючі агенти, або носії, які при стандартній температурі й при стандартному тиску є газоподібними, їх приклади включають аерозольні пропеленти, такі як галогеновані вуглеводні, і також бутан, пропан, азот і вуглекислий газ.
Приклади емульсифікаторів та/"або піноутворювачів, диспергуючих речовин або змочувальних агентів, що мають іонні або неїонні властивості, або сумішей цих поверхнево- активних речовин, включають солі поліакрилової кислоти, солі лігносульфонової кислоти, солі фенолсульфонової кислоти або нафталінсульфонової кислоти, поліконденсати етиленоксиду з жирними спиртами або з жирними кислотами або з жирними амінами, із заміщеними фенолами (переважно алкілфеноли або арилфеноли), солі сульфоянтарних складних ефірів, похідні таурину (переважно алкілтаурати), фосфорні складні ефіри поліетоксилованих спиртів або фенолів, складні ефіри жирних кислот і багатоатомних спиртів, і похідні сполук, що містять сульфати, сульфонати й фосфати, їх приклади включають алкіларил полігліколеві прості ефіри, алкілсоульфонати, алкіл сульфати, арилсульфонати, білкові гідролізати, лігнін-сульфітні відпрацьовані луги й метилцелюлозу. Присутність поверхнево-активної речовини є сприятливою, якщо одна з активних сполук та/або один з інертних носіїв нерозчинні у воді і
Зо якщо застосування відбувається у воді.
Додаткові допоміжні речовини, які можуть бути присутні у препаратах і в застосовуваних формах, похідних від них, включають барвники, такі як неорганічні пігменти, їх приклади включають оксид заліза, оксид титану, берлінську лазур, і органічні барвники, такі як алізаринові барвники, азо барвники й метал фталоціанінові барвники, і живильні речовини й мікроелементи, такі як солі заліза, марганцю, бору, міді, кобальту, молібдену й цинку.
Стабілізатори, такі як низькотемпературні стабілізатори, консерванти, антиоксиданти, світлостабілізатори або інші агенти, які поліпшують хімічну та/або фізичну стабільність, також можуть бути присутні. Додатково можуть бути присутні піноутворювачі або протиспінювальні агенти.
Крім того, препарати й застосовувані форми, приготовлені з них, також можуть включати, як додаткові допоміжні речовини, клейкі речовини, такі як карбоксиметилцелюлоза, природні й синтетичні полімери у формі порошку, гранули або латексу, такі як гуміарабік, полівініловий спирт, полівінілацетат, і також природні фосфоліпіди, такі як цефаліни й лецитини, і синтетичні фосфоліпіди. Інші можливі допоміжні речовини включають мінеральні й рослинні олії.
Також у препаратах і застосовуваних формах, приготовлені з них, можуть бути присутні додаткові допоміжні речовини. Приклади таких адитивів включають ароматизуючі речовини, захисні колоїди, сполучні, адгезиви, загусники, тиксотропні речовини, пенетранти, промотори утримання, стабілізатори, секвестранти, комплексоутворюючі речовини, зволожучальні засоби й розподільники. У цілому, активні сполуки можна комбінувати з будь-якими твердими або рідкими допоміжними речовинами, звичайно використовуваними для готування препаративних форм.
Підходящі промотори утримання включають усі ті речовини, які зменшують динамічний поверхневий натяг, такі як діоктгилсульфосукцинат, або підвищують в'язкопружність, такі як, наприклад, гідроксипропілгуарні полімери.
Підходящі пенетранти в контексті даного винаходу включають усі ті речовини, які типово використовують для посилення пенетрації активних агрохімічних сполук у рослини. Пенетранти в цьому контексті визначаються таким чином, що, з (звичайно водного) застосовуваного розчину та/або покриття, що розпилюється, вони здатні проникати в кутикулу рослини й у такий спосіб підвищувати рухливість активних сполук у кутикулі Цю властивість можна визначити, 60 використовуючи метод, описаний у літературі (Вашиг, єї аї., 1997, Резіїсіде Зсієпсе, 51, 131-152).
Зо
Приклади включають спиртові алкоксилати, такі як етоксилат жирних кислот кокосової олії (10) або ізотридецил етоксилат (12), складні ефіри жирних кислот, таких як рапсова або складні метилові ефіри соєвої олії, алюоксилати жирних амінів, такі як таллоуамін етоксилат (15), або солі амонію та/або фосфонію, такі як, наприклад, сульфат амонію або діамоній гідрофосфат.
Препарати переважно включають у діапазоні від 0,000195 до 9895 за вагою активної сполуки або, особливо переважно, у діапазоні від 0,0195 до 9595 за вагою активної сполуки, більш переважно в діапазоні від 0,595 до 9095 за вагою активної сполуки, на основі ваги препарату.
Вміст активної сполуки визначається як сума рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин
ВасіЛиз і принаймні один переважний фунгіцид, описаний у даній заявці.
Вміст активної сполуки застосовуваних форм (продукти для захисту сільськогосподарських культур), приготовлених із препаратів, може змінюватися в широких діапазонах. Концентрація активної сполуки застосовуваних форм може перебувати типово в діапазоні від 0,000195 до 95960 за вагою активної сполуки, переважно в діапазоні від 0,000195 до 195 за вагою, на основі ваги застосовуваної форми. Застосування здійснюють загальноприйнятим способом, адаптованим до застосовуваних форм.
Крім того, в одному аспекті згідно із даним винаходом забезпечується складений комплект, що містить рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васійиз і принаймні один переважний фунгіцид, описаний у даній заявці в синергетично ефективній кількості в просторово розділенім пристосуванні.
В подальшому варіанті здійснення даного винаходу, вищевказаний складений комплект додатково включає принаймні один додатковий фунгіцид та/або принаймні один інсектицид.
Фунгіцид та/або інсектицид може бути присутній або в компоненті рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васі//Лих складеного комплекту або у фунгіцидному компоненті складеного комплекту, які просторово розділені або в обох цих компонентах. Переважно, фунгіцид і інсектицид присутні в компоненті агент біологічної боротьби на основі рекомбінантного представника сімейства Васшизв сегеив.
Більше того, складений комплект відповідно до даного винаходу може додатково включати принаймні одну допоміжну речовину, вибрану із групи, яка включає модифікуючі агенти, розчинники, спонтанні промотори, носії, емульсифікатори, диспергуючі речовини, речовини, що захищають від замерзання, загусники й ад'юванти, як вказано нижче. Ця принаймні одна допоміжна речовина може бути присутня або в компоненті рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васі//Лих складеного комплекту або у фунгіцидному компоненті складеного комплекту, які просторово розділені або в обох цих компонентах.
В подальшому аспекті даного винаходу композиція, як описано вище, використовується для зменшення сумарного ураження рослин і частин рослин, а також втрат зібраних фруктів або овочів, викликаних комахами, кліщами, нематодами та/або фітопатогенами.
Крім того, в подальшому аспекті даного винаходу композиція, як описано вище, підвищує сумарну життєздатність рослини.
Термін "життєздатність рослини" у цілому включає різні види поліпшення в рослин, які не пов'язані з боротьбою зі шкідниками. Наприклад, сприятливі властивості, які можуть бути згадані, представляють собою поліпшені характеристики сільськогосподарських культур, включаючи: проростання, урожайність культур, вміст білка, олійність, вміст крохмалю, більш розвинену кореневу систему, поліпшений ріст коренів, поліпшена підтримка розміру коренів, поліпшену ефективність коренів, поліпшена толерантність до стресу (наприклад, до посухи, жари, солі, УФ, воді, холоду), зменшення етилену (зменшення продукції та/або інгібування рецепції), збільшення пагоноутворення, збільшення висоти рослини, більша листова пластинка, менше базальних листя, що загинули, більш сильні пагони, більш зелений колір листя, вміст пігменту, фотосинтетична активність, менша потреба в речовинах, що поглинаються (такі як добрива або вода), менша потреба в насінні, більш продуктивні пагони, більш раніше цвітіння, більш раніше дозрівання зерна, менше падіння рослин (полягання), збільшений ріст пагонів, посилена потужність рослин, збільшена густота стояння рослин і рання й переважна схожість.
Стосовно застосування відповідно до даного винаходу, поліпшена життєздатність рослини переважно стосується поліпшених характеристик рослин, включаючи: урожайність культури, більш розвинену кореневу систему (поліпшений ріст коренів), поліпшена підтримка розміру коренів, поліпшену ефективність коренів, збільшення пагоноутворення, збільшення висоти рослини, більша листова пластинка, менше базального листя, що загинуло, більш сильні пагони, більш зелений колір листя, фотосинтетична активність, більш продуктивні пагони, посилена потужність рослин, і збільшена густота стояння рослин.
У контексті даного винаходу, поліпшена життєздатність рослини переважно особливо бо стосується поліпшених властивостей рослини, вибраних з: урожайність культури, більш розвинена коренева система, поліпшений ріст коренів, поліпшена підтримка розміру коренів, поліпшену ефективність коренів, збільшення пагоноутворення, і збільшення висоти рослини.
Вплив композиції відповідно до даного винаходу на життєздатність рослини, як визначено в даній заявці, можна визначити шляхом порівняння рослин, які росли в аналогічних умовах навколишнього середовища, відповідно до цього частину вказаних рослин обробляли композицією відповідно до даного винаходу, а іншу частину вказаних рослин не обробляли композицією відповідно до даного винаходу. Замість цього, вказану іншу частину не обробляли зовсім або обробляли за допомогою плацебо (тобто, застосування без композиції відповідно до винаходу, таке як застосування без усіх активних компонентів (тобто, без агента біологічної боротьби на основі рекомбінантного представника сімейства Васі//и5 сегеив, як описано в даній заявці, і без фунгіциду, як описано в даній заявці), або застосування без агента біологічної боротьби на основі рекомбінантного представника сімейства Васі//и5 сегеив, як описано в даній заявці, або застосування без фунгіциду, як описано в даній заявці.
Композиція відповідно до даного винаходу може застосовуватися будь-яким бажаним способом, таким як у формі дражирування насіння, просочування грунту, та/або безпосередньо в борозну та/або у вигляді розпилення на листя й застосовуючи перед сходами, після сходів або обидва варіанти. Інакше кажучи, композицію можна використовувати на насіннях, рослині або на зібраних фруктах і овочах або на грунті, де рослину вирощують, або де їй бажано рости (локус росту рослини).
Зменшення сумарного ураження рослин і частин рослин часто приводить до більш здорових рослин та/або до підвищення потужності й урожайності рослин.
Переважно, композицію відповідно до даного винаходу використовують для обробки звичайних або трансгенних рослин або їх насіння.
Даний винахід також стосується способів стимуляції росту рослини, що використовують будь-які з композицій, описаних вище, що містять рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини
Васійиз, які експресують злитий білок і принаймні один переважний фунгіцид, описаний у даній заявці. Спосіб стимуляції росту рослини включає нанесення на рослину, частину рослини, на локус, що оточує рослину, або в якому рослину будуть вирощувати (наприклад, грунт або інше середовище для росту) композиції, що містить рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини
Зо Васійиз, які експресують злитий білок, що містить: (І) принаймні один стимулюючий ріст рослин білок або пептид; і (ІЇ) націлюючу послідовність, білок екзоспорію, або фрагмент білка екзоспорію, і принаймні один додатковий переважний фунгіцид, описаний у даній заявці в синергетично ефективній кількості.
В подальшому аспекті даного винаходу, забезпечується спосіб зменшення сумарного ураження рослин і частин рослин, а також втрат зібраних фруктів або овочів, викликаних комахами, кліщами, нематодами та/або фітопатогенами, що включає стадію одночасного або послідовного використання рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Вас//их і принаймні один переважний фунгіцид, описаний у даній заявці в синергетично ефективній кількості.
В іншому варіанті здійснення згідно із даним винаходом, композиція включає принаймні один інсектицид та/або принаймні один фунгіцид додатково до рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Вас//из і переважного фунгіциду, описаного в даній заявці. В одному варіанті здійснення, принаймні один інсектицид представляє собою синтетичний інсектицид.
Спосіб згідно із даним винаходом включає наступні методи застосування, тобто два компоненти рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Вас/их і принаймні один переважний фунгіцид, описаний у даній заявці, вказані раніше, можуть бути приготовлено у формі однієї, стабільної композиції із сільськогосподарськи прийнятним строком зберігання (так званий "соло- препарат"), або їх комбінують перед або під час використання (так звані "комбіновані препарати").
Якщо спеціально не було вказано інакше, вираз "комбінація" означає різні комбінації рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васіиз і принаймні одного переважного фунгіциду, описаного у даній заявці, і необов'язково принаймні одного додаткового фунгіциду та/або принаймні одного інсектициду, у соло-препараті, в одній "готовій до змішування" формі, у комбінованій суміші для розпилення, що складається із соло-препаратів, таких як "бакова суміш", ії в особливості при комбінованому застосуванні окремих активних компонентів, якщо застосовуються послідовно, тобто, один після іншого в межах доцільно короткого періоду, такого як декілька годин або днів, наприклад, від 2 годин до 7 днів. Порядок застосування композиції відповідно до даного винаходу не є важливим для здійснення даного винаходу.
Таким чином, термін "комбінація" також охоплює присутність рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васі//из і принаймні одного переважного фунгіциду, описаного у даній заявці, і бо необов'язково принаймні одного додаткового фунгіциду та/або інсектициду на або в рослині, що піддається обробці або її навколишнє середовище, місце виростання або місце зберігання, наприклад, після одночасного або послідовного застосування рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Вас//из і принаймні одного переважного фунгіциду, описаного в даній заявці, і необов'язково принаймні одного додаткового фунгіциду та/або принаймні одного інсектициду на рослину її навколишнє середовище, місце виростання або місце зберігання.
Якщо рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васійих і принаймні один переважний фунгіцид, описаний у даній заявці, і необов'язково принаймні один додатковий фунгіцид та/або принаймні один інсектицид застосовують або використовують послідовно, то є переважним обробляти рослини або частини рослин (які включають насіння й рослини, що проросли з насіння), зібрані фрукти й овочі відповідно до такого способу: По-перше, застосовують принаймні один переважний фунгіцид, описаний у даній заявці й необов'язково принаймні один додатковий фунгіцид та/або принаймні один інсектицид на рослину або частини рослини, і по- друге застосовують рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Вас//Ли5х на та ж саму рослину або частини рослини. При використанні таким чином, кількість інсектицидів, що залишилися, /фунгіцидів у рослині при зборі врожаю є мінімально можливою. Часові періоди між першим і другим застосуванням у межах циклу росту (культури) може змінюватися й залежить від ефекту, що досягається. Наприклад, перше застосування здійснюють для попередження зараження рослини або частин рослини комахами, кліщами, нематодами та/або фітопатогенами (це особливо переважно у випадку, якщо здійснюють обробку насіння) або для боротьби із зараженням комахами, кліщами, нематодами та/або фітопатогенами (це особливо переважно у випадку обробки рослин і частин рослин) і друге застосування здійснюють для запобігання або боротьби із зараженням комахами, кліщами, нематодами та/або фітопатогенами та/або для стимуляції росту рослини. Боротьба в цьому контексті означає, що рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васійив» не здатні повністю знищити шкідників або фітопатогенних грибів, але здатні підтримувати зараження на прийнятному рівні.
Даний винахід також забезпечує способи посилення знищуюючої, інгібуючої, запобігаючої та/або відлякуючої активності композицій згідно із даним винаходом шляхом багаторазових застосувань. У деяких інших варіантах здійснення, композиції згідно із даним винаходом застосовують на рослині та/або частини рослини два рази, під час будь-яких бажаних стадій
Зо розвитку або при заздалегідь визначеному тиску шкідників, в інтервалі приблизно 1 година, приблизно 5 годин, приблизно 10 годин, приблизно 24 години, приблизно два дні, приблизно З дні, приблизно 4 дні, приблизно 5 днів, приблизно 1 тиждень, приблизно 10 днів, приблизно два тижні, приблизно три тижні, приблизно 1 місяць або більше. Ще в деяких варіантах здійснення, композиції згідно із даним винаходом застосовують на рослині та/або частини рослини більше, ніж два рази, наприклад, З рази, 4 рази, 5 разів, 6 разів, 7 разів, 8 разів, 9 разів, 10 разів, або більше, під час будь-яких бажаних стадій розвитку або при заздалегідь визначеному тиску шкідників, в інтервалі приблизно 1 година, приблизно 5 годин, приблизно 10 годин, приблизно 24 години, приблизно два дні, приблизно З дні, приблизно 4 дні, приблизно 5 днів, приблизно 1 тиждень, приблизно 10 днів, приблизно два тижні, приблизно три тижні, приблизно 1 місяць або більше. Інтервали між кожним застосуванням можуть змінюватися, якщо це є бажаним.
Кваліфікований фахівець у даній галузі техніки зможе визначити кількість застосувань і довжину інтервалів залежно від видів рослин, видів шкідників рослин і інших факторів.
При здійсненні вищевказаних стадій, можна досягти надзвичайно низького рівня залишків принаймні одного фунгіциду та/"або принаймні одного інсектициду на оброблених рослинах, частинах рослин, і зібраних фруктах і овочах.
Якщо спеціально не було вказано інакше, обробку рослин або частин рослин (які включають насіння й рослини, що проросли з насіння), зібраних фруктів і овочів композицією відповідно до винаходу здійснюють безпосередньо або шляхом впливу на їх навколишнє середовище, місце виростання або місце зберігання, використовуючи загальноприйняті методи обробки, наприклад, занурення, розпилення, атомізацію, зрошення, розпарювання, запилення, створення туману, розкидання, утворення піни, фарбування, намазування, полив (просочування), краплинне зрошення. Крім того, представляється можливим застосовувати рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Вас//Лих, принаймні один переважний фунгіцид, описаний у даній заявці, і необов'язково принаймні один додатковий фунгіцид та/або принаймні один інсектицид у вигляді соло-препарату або комбінованих препаратів за допомогою методу наднизького об'єму, або ін'єкувати композицію відповідно до даного винаходу у вигляді композиції або у вигляді підошовних препаратів у грунт (у борозну).
Термін "рослина, що піддається обробціт охоплює кожну частину рослини, включаючи її кореневу систему й матеріал - наприклад, грунт або живильну - середовище яке має радіус 60 принаймні 10 см, 20 см, 30 см навколо стебла або стовбура рослини, що піддається обробці,
або яке становить принаймні 10 см, 20 см, 30 см навколо кореневої системи вказаної рослини, що піддається обробці, відповідно.
Кількість рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васі/ив5, які використовують або застосовують у комбінації із принаймні одним переважним фунгіцидом, описаним у даній заявці, необов'язково в присутності принаймні одного додаткового фунгіциду та/або принаймні одного інсектициду, залежить від кінцевого препарату, а також від розміру або типу рослини, частин рослини, насіння, зібраних фруктів і овочів, що піддаються обробці. Звичайно, рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васі//их5, які застосовують або використовують відповідно до винаходу, присутні в кількості від приблизно 195 до приблизно 8095 (мас./мас.), переважно від приблизно 195 до приблизно 60595 (мас./мас.), більш переважно від приблизно 1095 до приблизно 5095 (мас./мас.) його соло-препарату або комбінованого препарату із принаймні одним переважним фунгіцидом, описаним у даній заявці, і необов'язково додатковим фунгіцидом та/або принаймні одним інсектицидом.
Також кількість принаймні одного переважного фунгіциду, описаного в даній заявці, який використовують або застосовують у комбінації, з рекомбінантними продукуючими екзоспорій клітинами Вас//и5, необов'язково в присутності принаймні одного додаткового фунгіциду та/або принаймні одного інсектициду, залежить від кінцевого препарату, а також від розміру або типу рослини, частин рослини, насіння, зібраних фруктів і овочів, що піддаються обробці. Звичайно, переважний фунгіцид, який застосовують або використовують відповідно до винаходу, присутній у кількості від приблизно 0,195 до приблизно 8095 (мас./мас.), переважно 195 до приблизно 60595 (мас./мас.), більш переважно приблизно 1095 до приблизно 5095 (мас./мас.) його соло-препарату або комбінованого препарату, з рекомбінантними продукуючими екзоспорій клітинами Вас//и5, і необов'язково принаймні одним додатковим фунгіцидом та/або принаймні одним інсектицидом.
Застосування рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин ВасіЛих може здійснюватися у вигляді розпилення на листя, у вигляді грунтової обробки, та/або у вигляді протруювання насіння/дражирування. Якщо використовують у вигляді листової обробки, в одному варіанті здійснення, від приблизно 1/16 до приблизно 5 галонів цільного бульйону застосовують на акр.
При використанні у вигляді грунтової обробки, в одному варіанті здійснення, від приблизно 1 до
Зо приблизно 5 галонів цільного бульйону застосовують на акр. При використанні для протруювання насіння від приблизно 1/32 до приблизно 1/4 галонів цільного бульйону застосовують на акр. Для протруювання насіння, кінцевий використовуваний препарат містить принаймні принаймні 1 х 107, принаймні 1 х 105, принаймні 1 х 106, 1 х 107, принаймні 1 х 108, принаймні 1 х 109, принаймні 1 х 1019 колонієутворюючих одиниць на грам.
Рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васійиз і принаймні один переважний фунгіцид, описаний у даній заявці, і, якщо присутній, переважно також додатковий фунгіцид та/або інсектицид, використовують або застосовують у синергетичному ваговому співвідношенні.
Кваліфікований фахівець здатний установити синергетичні вагові співвідношення для даного винаходу за допомогою звичайних методів. Кваліфікований фахівець розуміє, що всі ці співвідношення стосуються співвідношення в межах комбінованого препарату, а також розрахованого співвідношення рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васйив, описаних у даній заявці, і принаймні одного переважного фунгіциду, описаного у даній заявці якщо обидва компоненти застосовуються у вигляді моно-препаратів на рослині, що піддається обробці.
Кваліфікований фахівець може розрахувати це співвідношення шляхом простих математичних обчислень, оскільки об'єм і кількість рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Вас/Лиз» і принаймні одного переважного фунгіциду, відповідно, у моно-препараті відомо кваліфікованому фахівцеві в даній галузі техніки.
Співвідношення може бути розраховане на основі кількості принаймні одного переважного фунгіциду, описаного в даній заявці, у момент часу застосування вказаного компонента з комбінації відповідно до винаходу на рослині або частині рослини й кількість рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Вастив незадовго до (наприклад, 48 год, 24 год, 12 год, 6 год, 2 год, 1 год) або в момент часу застосування вказаного компонента з комбінації відповідно до винаходу на рослині або частині рослини.
Застосування рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васійивх і принаймні одного переважного фунгіциду, описаного в даній заявці, на рослині або частині рослини може здійснюватися одночасно або в різний час доти, поки обидва компоненти присутні на або в рослині після застосування (нь). У випадках, якщо рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини
Васійиз і переважний фунгіцид, описаний у даній заявці застосовують у різний час і переважний фунгіцид, описаний у даній заявці застосовують перед рекомбінантними продукуючими бо екзоспорій клітинами Васі/йих, то кваліфікований фахівець може визначити концентрацію фунгіциду на/у рослині за допомогою хімічного аналізу, відомого в даній галузі техніки, у момент часу або незадовго до моменту часу застосування рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васійив. | навпаки, якщо рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васшив застосовують на рослині першими, то концентрацію рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васі/Лиз можна визначити, використовуючи тести, які також відомі в даній галузі техніки, у момент часу або незадовго до моменту часу застосування фунгіциду.
Особливо, в одному варіанті здійснення синергетичне вагове співвідношення рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васіиз і принаймні одного переважного фунгіциду, описаного у даній заявці знаходиться в діапазоні від 1:1000 до 10001, переважно в діапазоні від 1:500 до 500:1, більш переважно в діапазоні від 1:300 до 500:1. Особливо переважні співвідношення перебувають в інтервалі 20:1 і 1:20, такі як 10:11, 51 або 2:11. Слід зазначити, що ці інтервали співвідношенню стосуються агента біологічної боротьби на основі рекомбінантного представника сімейства Васі/и5 сегеив ( для комбінування із принаймні одним переважним фунгіцидом, описаним у даній заявці або препаративною формою принаймні одного переважного фунгіциду, описаного в даній заявці). Наприклад, співвідношення 100:1 означає, що комбінують 100 вагових частин препарату спор агента біологічної боротьби на основі рекомбінантного продукуючого екзоспорій Васійш5 і 1 вагову частину переважного фунгіциду, описаного в даній заявці (або у вигляді соло-препарату, комбінованого препарату або шляхом окремих застосувань на рослинах таким чином, що комбінація утворюється на рослині). В одному аспекті цього варіанта здійснення, препарат спор рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Вас//их представляє собою висушений препарат спор, що містить принаймні приблизно 1х107 КУО/г, принаймні приблизно їх105 КУО/г, принаймні приблизно їх105 КУО/г принаймні приблизно 1х107 КУО/г, принаймні приблизно 1х108 КУО/г, принаймні приблизно 1х109 КУО/г, принаймні приблизно 1х10!2 КУО/г, або принаймні приблизно 1х10" КУО/г.
В іншому варіанті здійснення, синергетичне вагове співвідношення рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васшйи» і принаймні одного переважного фунгіциду, описаного у даній заявці знаходиться в діапазоні від 1:100 до 20,000:1, переважно в діапазоні від 1:50 до 10,000:1 або навіть у діапазоні від 1:50 до 1000:1.
В одному варіанті здійснення згідно із даним винаходом, концентрація рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васі/Лиз після диспергування становить принаймні 50 г/га, наприклад, 50-7500 г/га, 50-2500 г/га, 50-1500 г/га; принаймні 250 г/га (гектар), принаймні 500 г/га або принаймні 800 г/га.
Норма внесення композиції, застосовуваної або використовуваної відповідно до даного винаходу, може змінюватися. Кваліфікований фахівець може встановити підходящу норму внесення за допомогою загальноприйнятих експериментів.
В подальшому аспекті даного винаходу забезпечується обробка насіння із застосуванням композиції, як описано вище.
Боротьба з комахами, кліщами, нематодами та/або фітопатогенами шляхом обробки насіння рослин була відома протягом тривалого часу й вона є предметом постійних поліпшень. Проте, обробка насіння викликає цілий ряд проблем, які не завжди можуть бути вирішені задовільно.
Таким чином, є бажаним розробляти способи захисту насіння і пророслої рослини, у якому усунута потреба, або принаймні суттєво зменшена, додаткової доставки композицій для захисту сільськогосподарських культур протягом періоду зберігання, після висівання або після проростання рослин. Крім того, є бажаним оптимізувати кількість застосовуваного активного компонента таким чином, щоб забезпечити найкращий можливий захист для насіння і пророслої рослини від нападу комах, кліщів, нематод та/або фітопатогенів, але не викликаючи при цьому ушкодження самої рослини застосовуваним активним компонентом. Особливо, способи обробки насіння повинні також брати до уваги властиві інсектицидні та/або нематицидні властивості резистентних до шкідників або толерантних до шкідників трансгенних рослин, для досягнення оптимального захисту насіння і пророслої рослини при мінімальному використанні композицій для захисту сільськогосподарських культур.
Отже, даний винахід також стосується, особливо, способу захисту насіння і пророслих рослин від нападу шкідників, шляхом обробки насіння рекомбінантними продукуючими екзоспорій клітинами Вас//и5, як визначено вище, і принаймні одного переважного фунгіциду, описаного у даній заявці в синергетично ефективній кількості. Спосіб згідно з винаходом для захисту насіння і пророслих рослин від нападу шкідників охоплює спосіб, у якому насіння обробляють одночасно за одну операцію, за допомогою рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васі//из і принаймні одного переважного фунгіциду, описаного у даній заявці, і бо необов'язково принаймні одного додаткового фунгіциду та/або принаймні одного інсектициду.
Він також охоплює спосіб, у якому насіння обробляють у різний час, за допомогою рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васіиз і принаймні одного переважного фунгіциду, описаного у даній заявці, і необов'язково принаймні одного додаткового фунгіциду та/або принаймні одного інсектициду.
Аналогічно до цього, винахід стосується застосування композиції згідно з винаходом для обробки насіння для захисту насіння і отриманої рослини від комах, кліщів, нематод та/або фітопатогенів.
Винахід також стосується насіння, які одночасно були оброблені рекомбінантними продукуючими екзоспорій клітинами Васі/их і принаймні одним переважним фунгіцидом, описаним у даній заявці, і необов'язково принаймні одним додатковим фунгіцидом та/або принаймні одним інсектицидом. Винахід також стосується насіння, які були оброблені в різний час, за допомогою рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Вас//Лих і принаймні одного переважного фунгіциду, описаного в даній заявці й необов'язково принаймні одного додаткового фунгіциду та/або принаймні одного інсектициду. У випадку насіння, які були оброблені в різний час, за допомогою рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Вас//их і принаймні одного переважного фунгіциду, описаного в даній заявці, і необов'язково принаймні одного додаткового фунгіциду та/або принаймні одного інсектициду, індивідуальні активні компоненти в композиції згідно з винаходом можуть бути присутні у різних шарах на насіннях.
Крім того, винахід стосується насіння, які, після обробки за допомогою композиція згідно з винаходом, зазнають процесу нанесення плівкового покриття для запобігання механічного ушкодження насіння частинками пилу.
Однією з переваг даного винаходу є те, що, завдяки переважним системним властивостям композицій згідно з винаходом, обробка насіння цими композиціями забезпечує захист від комах, кліщів, нематод та/або фітопатогенів не тільки для самого насіння, але також і для рослин, що виросли із цього насіння після проростання. Отже, може відсутня необхідність обробляти культури безпосередньо під час висівання або відразу після нього.
Подальшою перевагою є той факт, що, при обробці насіння композицією згідно з винаходом, можна сприяти проростанню й схожості обробленого насіння.
Аналогічно до цього, є сприятливим, що композицію згідно 3 винаходом також можна
Зо використовувати, особливо, на трансгенному насінні.
Також слід зазначити, що композицію згідно з винаходом можна використовувати в комбінації із засобами технології передачі сигналів, у результаті чого поліпшується, наприклад, колонізація симбіонтами, такими як бульбочкові бактерії, мікориза та/або ендофітні бактерії, наприклад, підсилюється, та/або оптимізується фіксація азоту.
Композиції згідно з винаходом придатні для захисту насіння будь-яких видів рослин, придатні в сільському господарстві, у теплиці, у лісовому господарстві або в садівництві. Більш переважно, дані насіння представляють собою насіння зернових (наприклад, пшениця, ячмінь, жито, овес і просо), кукурудза, бавовник, соя, рис, картопля, соняшник, кава, тютюн, канола, олійний рапс, буряк (наприклад, цукровий буряк і кормовий буряк), арахіс, овочеві культури (наприклад, томати, огірок, бобові, капуста, лук і салат-латук), плодові рослини, газонні трави і декоративні рослини. Особливо переважним є обробка насіння зернових (таких як пшениця, ячмінь, жито й овес) кукурудза, соя, бавовник, канола, олійний рапс і рис.
Як уже було вказано вище, обробка трансгенного насіння за допомогою композиції згідно з винаходом є надзвичайно важливою. Ці насіння представляють собою насіння рослин, які звичайно містять принаймні один гетерологічний ген, який контролює експресію поліпептиду, що має, особливо, інсектицидні та/або нематицидні властивості. Ці гетерологічні гени в трансгенному насінні можуть мати походження з мікроорганізмів, таких як Васив, Нгрігорійт,
Резеййотопавз, бетайа, Пісподепта, Сіауірасієї, Сіотив або сСіосіайійт. Даний винахід особливий придатне для обробки трансгенного насіння, які містять принаймні один гетерологічний ген з Васійив 5р. Особливо переважно, даний гетерологічний ген має походження з Васійив Іпипіпдіепвів.
Для цілей даного винаходу, композиція згідно з винаходом застосовується окремо або в підходящому препараті на насіннях. Насіння звичайно обробляють в умовах, у яких воно стабільно таким чином, щоб не відбувалося ушкоджень у процесі обробки. Загалом, насіння можуть бути оброблено в будь-який період часу між збором урожаю й висіванням. Типово, використовують насіння, які були відділені від рослини й з яких були вилучені стрижні качанів кукурудзи, стручки, стебла, лушпайка, волосся або пульпа. Таким чином, наприклад, можна використовувати насіння, які були зібрані, очищені й висушені до вмісту вологи менше, ніж 1595 за вагою. Альтернативно, також можна використовувати насіння, які після висушування були 60 оброблені водою, наприклад, і потім знову висушені.
Зб
При обробці насіння необхідно, у цілому, забезпечувати, щоб кількість композиції згідно з винаходом, та/або інших адитивів, яка застосовується на насіннях, вибирали таким чином, щоб не виявляти негативного впливу на проростання насіння, та/"або щоб рослини, які виросли із цього насіння, не були ушкодженими. Це особливо важливо в тих випадках, коли активні компоненти можуть проявляти фітотоксичні ефекти при певних нормах внесення.
Композиції згідно з винаходом можна застосовувати безпосередньо, інакше кажучи, вони не містять додаткових компонентів і не були розведені. Звичайно, переважно застосовувати композиції у формі підходящого препарату на насіннях. Підходящі препарати й способи протруювання насіння відомі кваліфікованому фахівцеві й описані, наприклад, у наступних документах: патенти 05 МоМо 4,272,417 А; 4,245,432 А; 4,808,430 А; 5,876,739 А; опублікована заявка на патент 5 Мо 2003/0176428 А1; УМО 2002/080675 А1; УМО 2002/028186 А2.
Комбінації, які можна використовувати відповідно до винаходу, можна перетворювати в загальноприйняті препарати для протруювання насіння, такі як розчини, емульсії, суспензії, порошки, піни, суспензії або інші композиції для нанесення покриттів на насіння, і також ОЇ М препарати.
Ці препарати готують за допомогою відомого способу, шляхом змішування композиції із загальноприйнятими ад ювантами, такими як, наприклад, загальноприйняті модифікуючі агенти, і також розчинники або розріджувачі, барвники, змочувачі, диспергуючі речовини, емульсифікатори, протиспінювачі, консерванти, вторинні загусники, клейкі заповнювачі, гібереліни, а також вода.
Барвники, які можуть бути присутні у препаратах для протруювання насіння, які можна використовувати відповідно до винаходу, включають усі барвники, які звичайно використовуються для таких цілей. У цьому контексті, представляється можливим використовувати не тільки пігменти, які погано розчиняються у воді, але також розчинні у воді барвники. Приклади включають барвники, відомі під позначеннями ЕПподатіп В, С.І. Рідтепі
Кеа 112 і С.І. оїмепі Кей 1.
Змочувачі, які можуть бути присутні у препаратах для протруювання насіння, які можна використовувати відповідно до винаходу, включають усі речовини, які сприяють змочуванню і які звичайно використовуються в препараті активних агрохімічних компонентів. Переважно
Зо можна використовувати алкілнафталінсульфонати, такі як діїзопропіл- або діїзобутил- нафталінсульфонати.
Диспергуючі речовини та/або емульсифікатори, які можуть бути присутні у препаратах для протруювання насіння, які можна використовувати відповідно до винаходу, включають усі неіонні, аніонні й катіонні диспергуючі речовини, які звичайно використовуються в препараті активних агрохімічних компонентів. Переважно можна використовувати неіїонні або аніонні диспергуючі речовини або суміші неіїонних або аніонних диспергуючих речовин. Підходящі неіонні диспергуючі речовини представляють собою, особливо, блок-полімери етиленоксид- пропіленоксид, алкілфенол полігліколеві прості ефіри й також тристририлфенольні полігліколеві прості ефіри, і їх фосфатовані або сульфатовані похідні. Підходящі аніонні диспергуючі речовини представляють собою, особливо, лігносульфонати, солі поліакрилової кислоти, і конденсати арилсульфонат-формальдегідів.
Протиспінювачі, які можуть бути присутні у препаратах для протруювання насіння, які можна використовувати відповідно до винаходу, включають усі інгібітори піноутворення, які звичайно використовуються в препараті активних агрохімічних компонентів. Переважно можна використовувати силіконові протиспінювачі й стеарат магнію.
Консерванти, які можуть бути присутні у препаратах для протруювання насіння, які можна використовувати відповідно до винаходу, включають усі речовини, які можна використовувати для таких цілей в агрохімічних композиціях. Приклади включають дихлорфен і напівформаль бензилового спирту.
Вторинні загусники, які можуть бути присутні у препаратах для протруювання насіння, які можна використовувати відповідно до винаходу, включають усі речовини, які можна використовувати для таких цілей в агрохімічних композиціях. Ці компоненти переважно включають похідні целюлози, похідні арилової кислоти, ксантан, модифіковану глину й високодиспергований діоксид кремнію.
Клейкі заповнювачі, які можуть бути присутні у препаратах для протруювання насіння, які можна використовувати відповідно до винаходу, включають усі загальноприйняті сполучні, які можна використовувати в продуктах для протруювання насіння. Переважно можна згадати полівінілпіролідон, полівінілацетат, полівініловий спирт і тилозу.
Гібереліни, які можуть бути присутні у препаратах для протруювання насіння, які можна 60 використовувати відповідно до винаходу, включають переважно гібереліни А7ї, АЗ (-
гіберелінова кислота), А4 і А7, де особливо переважно використовується гіберелінова кислота.
Гібереліни відомі (порівн. КЕ. Умедієг, "Спетіе аег РПапгепзспшї2- ипа зепаадіїпдзбекатріипудзтіне!", тому 2, Зргіпдег Мегіад, 1970, стор. 401-412).
Препарати для протруювання насіння, які можна використовувати відповідно до винаходу, можуть використовуватися або безпосередньо або попередньо розведені водою, для обробки насіння будь-яких різних типів. Таким чином, концентрати або препарати, одержувані з них шляхом розведення водою, можуть застосовуватися для протруювання насіння зернових, таких як пшениця, ячмінь, жито, овес і тритікале, і також насіння кукурудзи, рису, олійного рапсу, гороху, бобів, бавовнику, соняшника й буряка, або також насіння будь-яких різних сортів овочевих культур. Препарати для протруювання насіння, які можна використовувати відповідно до винаходу, або їх розведені препарати, також можна використовувати для протруювання насіння трансгенних рослин. У цьому випадку, можуть відбуватися додаткові синергетичні ефекти при взаємодії з речовинами, утвореними при експресії.
Для обробки насіння препаратами для протруювання насіння, які можна використовувати відповідно до винаходу, або препаративними формами, отриманими з них шляхом розведення водою, підходяще устаткування для змішування включає все таке устаткування, яке типово можна застосовувати для протруювання насіння. Більш переважно, процедура, коли здійснюють протруювання насіння, полягає в поміщенні насіння у змішувач, додавання переважної бажаної кількості препаратів для протруювання насіння, або як таких або після попереднього розведення водою, і здійснення змішування до однорідного розподілу препарату на насіннях. Після цього можна здійснювати етап висушування.
Норма внесення препарати для протруювання насіння, які можна використовувати відповідно до винаходу, можуть змінюватися у відносно широкому діапазоні. При цьому керуються переважною кількістю агента біологічної боротьби на основі рекомбінантного представника сімейства Вас//и5 сегеих і принаймні одного переважного фунгіциду, описаного в даній заявці в препаратах, і насіння. Норми внесення для композиції в цілому знаходяться у діапазоні від 0,001 і 50 г на кілограм насіння, переважно в діапазоні від 0,01 ї 15 г на кілограм насіння.
Крім того, композиція відповідно до даного винаходу переважно має сильну мікробіцидну
Зо активність і її можна використовувати для боротьби з небажаними мікроорганізмами, такими як гриби й бактерії, для захисту сільськогосподарських культур і для захисту матеріалів.
Винахід також стосується способу боротьби з небажаними мікроорганізмами, який характеризується тим, що композицію відповідно до винаходу застосовують на фітопатогенних грибах, фітопатогенних бактеріях та/або місцях їх проживання.
Фунгіциди можна використовувати для захисту сільськогосподарських культур для боротьби з фітопатогенними грибами. Вони характеризуються надзвичайно хорошою ефективністю по відношенню до широкого спектра фітопатогенних грибів, включаючи грунтові патогени, які, особливо, є представниками класів Р/азтоаіорнпоготусеїез, Регопозроготусеїез (Син.
Оотусе!ез), Спутаітусе!їев, 7удотусеїез, Азсотусе!ез, Вазійіотусеїез і белеготусеїез (Син.
Еипді ітрепесії). Деякі фунгіциди є системно активними і їх можна використовувати для захисту рослин як листового фунгіциду, протруювача насіння або грунтового фунгіциду. Крім того, вони є придатними для боротьби із грибами, які, зокрема, інфікують деревину або коріння рослин.
Бактерициди можна використовувати для захисту сільськогосподарських культур для боротьби з Рзеййотопайасеае, НРігобріасеаеє, Епіегобасієпасеае, Согуперасієегпасеає і огеріотусеїасеає.
Необмежуючі приклади патогенів грибкових захворювань, з яким можна боротися відповідно до винаходу, включають: захворювання, які викликаються патогенами справжньої борошнистої роси, наприклад, види
Віитепа, наприклад, Віитегла дгатіпіє; види РодозрНнаєга, наприклад, РойозрнНаєга Іеисоїпісна; види бріаегоїйеса, наприклад, брнаєгоїнеса ПШшіїдіпеа; види ШОпсіпиіа, наприклад, Мпсіпиа песаог, захворювання, які викликаються патогенами іржастих захворювань, наприклад, види
Сутповрогапдіит, наприклад, Сутпозрогапдійт забіпає; види Нетієіїа, наприклад, Неті/еїа уавзіаніх; види РНакорзога, наприклад, Рракорзога распутігі і Рракорзога теіротіає; види
Риссіпіа, наприклад, Риссіпіа гесопайе, Р. Ісіпа, Р. дгатіпіз або Р. 5тійоптів або Р. ПпПогаеї; види готусев, наприклад, Лотусез аррепаїсшаишв; захворювання, які викликаються патогенами із групи Оотусеїез, наприклад, види А/рБидо, наприклад, А/дибо сапаїда; види Вгет/а, наприклад, Вгетіа /асіисає; види Регопозрога, наприклад, Регопозрога різі, Р. рагазййса або Р. Бгазвісаех види Рпуїорпїйога, наприклад, 60 РРуїюрнійога іпіевїапе; види Р/азторага, наприклад, Р/азєторага Уйсоа; види
Резеийорегопозрога, наприклад, Резеидорегопозрога пити!ї або Рзеидорегоповрога сибрепвів; види Руїйіит, наприклад, Руїіит иПітит; захворювання плямистості листя і захворювання зів'янення листя, які викликаються, наприклад, такими збудниками: види А/ег/пага, наприклад, АЛетагіа 5о/апі; види Сегсоврога, наприклад, Сегсоз5рога бБеїїсоїа; види С/адіозрогійт, наприклад, С/айіовзрогпит сиситегтіпит; види Сосні/обо!и5, наприклад, Соспійоброїи5 взайуив (конідіальна форма: ОЮгеснвіега, Син:
Не/тіпіпозрогійт), СоспНійобоїиз тіуабреапив; види Со/еюйтіспит, наприклад, Со/ефтгіспит
Ппаетиїапійт; види Сусіосопішт, наприклад, Сусіосопішт оІеадіпит; види Оіаропне, наприклад, ДіаропНе сії види БЕ/віпое, наприклад, Е/віпое 7ам/сейії; види С/беозропит, наприклад, С/оеозропит /аейсоюг, види СіотегеЛа, наприклад, С/отегеЛа сіпдиага; види
Сиідпагдіа, наприклад, Сшідпагоїа бБіймуе!й; види Геріозрпаєглпа, наприклад, /еріозрНаеєга тасиапе, Геріозрпаеєпа пойогит; види Мадпаропе, наприклад, Мадпаропне дгізеа; види
Містодоспіит, наприклад, Містодоспіит пімаієе; види МусозрНнаєге/а, наприклад, МусозрНаєгеї!а дгатіпісоїа, М. агаспіаїсоїа і М. йепвів; види РпаеозрНаеєгіа, наприклад, Ріаеозрпаєтіа подогит; види Ругепорнога, наприклад, Ругепорнога Іеге5, Ругепорнога Іпйсі герепіїх; види Натиїагіа, наприклад, Нати/ана сопо-судпі, Натшиапа агеоїа; види НРупспоз5рогіит, наприклад,
ВНупспозрогіит зесаїїв; види беріогіа, наприклад, беріопа арії, еріогіа Іусорегзії, види Турпиїа, наприклад, Турпиа іпсатаїга; види Мелішгіа, наприклад, Мелішла іпаедиаїів; захворювання коренів і стебел, які викликаються, наприклад, такими збудниками: види
Сопісіит, наприклад, Сопісішт дгамінагит; види Ризагпит, наприклад, Ризапит охувгрогит; види Саешитаппотусез, наприклад, Саештаппотусев5 дгатіпіє; види МНРігосіопіа, такі як, наприклад, МРігосіопіа 50о/апі; багосіаайшт захворювання, які викликаються наприклад, багосіааіит огугає; бсіегойит захворювання, які викликаються наприклад, бсіегоїййт огулавє; види Таревзіа, наприклад, Гарезіа асиїоптівє; види ТНієіаміорвзіх, наприклад, ГНіе/аміорвзів равісоїа; захворювання качанів і волоті (включаючи качани кукурудзи), які викликаються, наприклад, такими збудниками: види АЛетагіа, наприклад, види АЛетапа; види Азрегді/и5, наприклад,
Азрегоїив Намив; види Сіайаозрогіит, наприклад, С/айозрогійт сіадозропіоідев; види С/амісерв, наприклад, С/ауісерх ригригеа; види Ризагіит, наприклад, Ризапит си!тогит; види Сірбегепа, наприклад, С/ббеге/а 7еає; види Моподгарне!/Іа, наприклад, Моподгарнега пімаїїв; види беріогіа,
Ко) наприклад, беріолпа подогит; захворювання, які викликаються сажковими грибами, наприклад, види бр/асе/оійеса, наприклад, брнасе!оїпеса гейапа; види П/ема, наприклад, Г/емна сапев, Т. сопігоуегва; види
Мгосузіїх, наприклад, госузіїх оссипа; види єШадо, наприклад, узШадо пида, ). пида Іпісі; плодова гнилизна, яка викликається, наприклад, такими збудниками: види Азрега/ив, наприклад, Авзрегділиз Мами; види Воїгуїйх, наприклад, Воїуїйвє сіпегеа; види Репісшит, наприклад, Репісйіит ехрапзит і Р. ригригодепит; види 5бсіегоїїпіа, наприклад, 5бсіегоїпіа 5сіегойогит; види Мепісійит, наприклад, Мелісйит аїроатит; захворювання насіння і які передаються через грунт псування, цвіль, зав'ядання, гнилизна й зів'янення, які викликаються, наприклад, такими збудниками: види А/е/пагіа, які викликаються, наприклад, АЛетала Бгаввзісісоїа; види Арпапотусе5, які викликаються, наприклад,
Арпапотусев ешеїісНпе5; види Азсоспуїа, які викликаються, наприклад, АзсосНуїа /епіївє; види
Азрегді/и5, які викликаються, наприклад, Азрегоив5 Памив; види Сіайозрогіит, які викликаються, наприклад, С/айовзрогійт Регбрагит; види Соспіобои5, які викликаються, наприклад,
Соспіїобош5 зайуив; (коніді(аальна форма: Огеснз/іега, Віроїагіз Син: Не/тіпіпозрогпійт); види
СопПеїоїпспит, які викликаються, наприклад, Со/еййтіспит соссоде5; види Еизапит, які викликаються, наприклад, Ризапит сиїтогит; види Сірбеге/а, які викликаються, наприклад,
СіббрегеПа 7геає; види Масторпотіпа, які викликаються, наприклад, Масторпотіпа рНазео/іпа; види Моподгарнег/а, які викликаються, наприклад, Моподгарнела піма/із; види РепісшШит, які викликаються, наприклад, Реплісійит ехрапзит; види Ріота, які викликаються, наприклад,
Ррота /пдат; види РІоторзіх, які викликаються, наприклад, РПоторвзіз во0ає; види
РРуїорнійога, які викликаються, наприклад, РНуїорнпійога сасіогит; види Ругепорнога, які викликаються, наприклад, Ругепорнога дгаміна; види Ругісшагіа, які викликаються, наприклад,
Рупісшага огугає; види Руїйійт, які викликаються, наприклад, Руїліит шПітит; види Нгрігосіопіа, які викликаються, наприклад, Нгігосіопіа 50іапі; види Нрігорив, які викликаються, наприклад,
ВНігорив огулає; види бсіегоїйит, які викликаються, наприклад, бс/іегойит гоїївії; види беріогіа, які викликаються, наприклад, беріопа подогит; види Турпшіа, які викликаються, наприклад,
Турпиїа іпсатага; види Мепісшіит, які викликаються, наприклад, Мелісшит ааніає; рак, галли й відьмові мітли, які викликаються, наприклад, збудниками: види Леесіла, наприклад, Лесіла да//депа;
в'янучі захворювання, які викликаються, наприклад, такими збудниками: види Молі/лі/а, наприклад, Мопіліа Іаха; захворювання пухирчастості листя і кучерявості листя, які викликаються, наприклад, такими збудниками: види Ехобазідіит, наприклад, Ехобавзіаіит уехапв; види Тарнпа, наприклад, Тарпппа деютгтапе в'янучі захворювання деревних рослин, які викликаються, наприклад, еску винограду, які викликаються, наприклад, Ріаетопліе/а сіатудйозрога, Ріаеоастетопіит аіеорпйит і Еотійрога теаіїетапеа, етипоз, викликуваний, наприклад, Ешура /аїа; захворювання Саподегта, які викликаються наприклад, Саподегта ропіпепзе; захворювання Кідідороги5, які викликаються наприклад, Нідійорогих //Ідпо5ив5; захворювання квітів і насіння, які викликаються, наприклад, збудниками: види Воггуїїв, наприклад, Вогуїїх сіпегеа; захворювання бульб, які викликаються, наприклад, збудниками: ПРігосіопіа види, наприклад, Нгрігосіопіа 5о01апі; види Не/тіпіповрогіит, наприклад, НеІтіпіпохропит 5о01апі; кила, яка викликається, наприклад, збудниками: види Р/азтоаіорнога, наприклад,
Ріатоаіорнога Бргазвісаеє; захворювання, які викликаються бактеріальними патогенами, наприклад, такими збудниками: види Хапійотопаз, наприклад, Хапійотопах сатревзііз ру. огугає; види
Рхеййотопавх, наприклад, Рзхеййотопавз 5уппдає ру. Іасптутапе; види Епуїпіа, наприклад,
Етуіпіа атуомога.
Наступні захворювання сої можна переважно контролювати:
Грибкові захворювання на листах, стеблах, стручках і насіннях, які викликаються, наприклад, збудниками: А/Легпагла плямистість листя (А/Летаа врес. айапе5 Іепиїіввіта), антракноз (СоЛеютснпит діоеозрогоїдез детанйит маг. шипсаїшт), бура плямистість (беріога діусіпез5), церкоспорозна плямистість і гнилизна листя (Сегсоз5рога Кікиспі), ушкодження листя споаперпога (Споапернога іпіипаїрийега пізрога (Син.)), ушкодження листя аасішіорпога (басішорнога діусіпех), несправжня борошниста роса (Регопозрога тапе5пипса), плямистість, викликана агеспз5іега (Огеснзіега діусіпі), сееленофомозная плямистість листя (Сегсозрога в5о/їпа), плямистість листя, викликана Іеріозрпаегиіпа (Геріобзрпаегиїйна пої), філостиктозна
Зо плямистість листя (РНу/озіїсіа зо/аесоїіа), гнилизна бобів і стебел (Ріоторзів здає), справжня борошниста роса (Місгозрпаєта айивза), плямистість листя, викликана ругепоспаєїа (РутепосНаєїа діусіпез), ризоктоніозна повітряна, листова й павутиниста гнилизна (Нгрі/госіопіа зоїапі), іржа (РраКкорзога расНутігі, РРакорзога теіротіає), парша (бррасеюта діусіпев), стемфілійна плямистість листя (біетрну!йт броїгуозит), мішенеподібна плямистість листя (Согупезрога сазвіїсо!а).
Грибкові захворювання на коріннях і основі стебла, які викликаються, наприклад, збудниками: чорна коренева гнилизна (Са/опесіла сгогаіапає), вугільна гнилизна (Масгорпотіпа рНазеоїїпа), фузаріозна гнилизна або зів'янення, коренева гнилизна, і гнилизна стручків і гілок (Ризапит охубзрогит, Бизапит опросегаз, Гизапит взетйесішт, Еизагит едиїізеї), коренева гнилизна, викликана тусоіІеріодізсив (Мусоіеріоаізсиє / Теітевігів), пеосо5тозрога (Меосозтозрога уавзіпіеєсіа), гнилизна бобів і стебел (Діаропне рНазеоюгит), рак стебла (бПіароппе рпазеоюгит уаг. сашімога), фітофторозна гнилизна (Ррутюрнійпога тедазрегта), бура гнилизна стебел (РНіайрнога дгедага) грибна гнилизна (Руїййит арнНапідегтташт, Руштійт штедиіаге, Руїпит аерагуапит, Руїйит тупоїуит, Руїйішт ийітит), ризоктоніальна коренева гнилизна, руйнування стебла й чорна ніжка (Нрігосіопіа зоіапі), склеротинічне випрівання стебла (5сіегоїпіа 5сіегоїйогит), склеротинічна південна гнилизна (5с/іегої/піа гоїїві)), коренева гнилизна, викликана Півеіаміорвіз ( ГПієіаміорвів Бавісо!а).
Композиції відповідно до винаходу можна використовувати для лікувальної або захисної/ профілактичної боротьби з фітопатогенними грибами. Отже, винахід також стосується лікувальних і захисних способів боротьби з фітопатогенними грибами шляхом застосування композиції відповідно до винаходу, яку наносять на насіння, рослини або частини рослин, плоди або грунт, у якому росте рослина.
Той факт, що композиція добре переноситься рослинами при концентраціях, необхідних для боротьби із хворобами рослин, надає можливість обробляти надземні частини рослин, стовбур і насіння для розмноження, і грунт.
Відповідно до винаходу можна обробляти всі рослини й частини рослин. Під рослинами мають на увазі всі рослини й популяції рослин, такі як бажані й небажані дикі рослини, культивари й сорти рослин (які захищені або незахищені правами власника сорту рослини або селекціонера). Культивари й сорти рослин можуть представляти собою рослини, отримані бо шляхом загальноприйнятих методів розмноження й селекції, які можуть доповнені або посилено за допомогою одного або декількох біотехнологічних методів, наприклад, шляхом використання подвійних гаплоїдів, злиття протопластів, випадкового й спрямованого мутагенезу, молекулярних або генетичних маркерів або за допомогою біотехнологічних і генно-інженерних методів. Під частинами рослин мають на увазі всі вищевказані надземні й підземні частини й органі рослин, такі як черешок, листок, квітка й корені, таким чином, наприклад, перелічуються листи, голки, стебла, гілки, квіти, плодові тіла, плоди й насіння, а також коріння, цибулини й ризоми. Також до частин рослин ставляться врожай, вегетативний і генеративний матеріал розмноження, наприклад, черешки, цибулини, ризоми, вуса й насіння.
Композиція відповідно до винаходу, коли вона добре переноситься рослиною, має сприятливу гомеотермічну токсичність і добре переноситься навколишнім середовищем, придатна для захисту рослин і органів рослин, для посилення зібраного врожаю, для поліпшення якості зібраного матеріалу. Переважно вона може використовуватися як композиції для захисту сільськогосподарських культур. Вона є активною по відношенню до чутливих і резистентних видів у звичайних умовах і по відношенню до всіх або деяких стадій розвитку.
Рослини, які можна обробляти відповідно до винаходу, включають наступні основні культурні рослини: кукурудза, соя, люцерна, бавовник, соняшник, насіння олійних культур
Вгазвіса, такі як Вгабззіса пари (наприклад, канола, насіння рапсу), Вгаззіса гара, В. /ипсеа (наприклад, (польова) гірчиця) і Вгавзвіса сагіпага, Агесасеае 5р. (наприклад, олійна пальма, кокосова пальма), рис, пшениця, цукровий буряк, цукровий очерет, овес, жито, ячмінь, просо й сорго, тритікале, льон, горіхи, виноград і виноград і різні фрукти й овочі з різних ботанічних таксонів, наприклад, Нозасеає 5р. (наприклад, м'ясисті зерняткові плоди, такі як яблука й груші, але також кісточкові плоди, такі як абрикоси, вишні, мигдаль, зливи й персики, і ягідні плоди, такі як суниця, малина, червона й чорна смородина й агрус), Нібезіоідає 5р., "Чидіапдасеае 5р.,
Веїшасеае в5р., Апасагаіасеае 5р., Радасеаеє 5р., Могасеае 5р., ОІеасеае 5р. (наприклад, маслинове дерево), Асілідасеае 5р., Гаигасеае 5р. (наприклад, авокадо, кориця, камфора),
Мизасеае 5р. (наприклад, бананові дерева й плантації), Нибіасеае 5р. (наприклад, кава),
Тнеасеае зр. (наприклад, чай), біегсиїїсеае 5р., Нласєає 5р. (наприклад, лимони, апельсини, мандарини й грейпфрути); боіапасеаеє з5р. (наприклад, помідори, картопля, перець, стручковий перець, баклажан, тютюн), //Ласеае 5р., Сотровйаєе 5р. (наприклад, салат-латук, артишок і
Зо цикорій - включаючи кореневий цикорій, салатний або звичайний цикорій), тбеЛегає 5р. (наприклад, морква, петрушка, селера й корінь селери), Сисигойасеаеє 5р. (наприклад, огірки - включаючи корнішони, гарбузи, кавуни, гарбузове дерево й дині), А//ласеае 5р. (наприклад, цибуля-порей і цибуля), Стислегає 5р. (наприклад, капуста білокачана, капуста червонокачанна, броколі, кольорова капуста, брюссельська капуста, пекінська капуста, кольрабі, хрін, крес-салат і капуста китайська), / едитіпозає 5р. (наприклад, арахіс, горох, сочевиця й бобові - наприклад, квасоля звичайна й кормові боби), Спепородіасеає 5р. (наприклад, листовий буряк, кормовий буряк, шпинат, столовий буряк), / ласеєає 5р. (наприклад, коноплі), Саппабеєасеа 5р. (наприклад, саппабіз), Ма/масеаеє 5р. (наприклад, окра, какас), Рарауегасеає (наприклад, мак), Азрагадасеаеє (наприклад, спаржа); корисні рослини й декоративні рослини в садах і лісах, включаючи дерен, газони, траву, і Єеула герацйдіапа; і в кожному випадку генетично модифіковані типи цих рослин.
Залежно від видів рослин або культиварів рослин, їх місцезнаходження й умов росту (грунт, клімат, період вегетації, харчування), використання або застосування композиції відповідно до даного винаходу, обробка відповідно до винаходу також може приводить до понад-адитивних (синергетичних") дій. Таким чином, наприклад, шляхом застосування або використання композиції згідно з винаходом для обробки відповідно до винаходу, імовірно зменшується норма внесення та/або розширюється спектр активності та/або підвищується активність переважного росту рослини, збільшується толерантність до високих або низьких температур, збільшується толерантність до посухи або вмісту води або солі в грунті, підвищується продуктивність цвітіння, більш ранній збір урожаю, прискорене дозрівання, більш високий зіораний урожай, більші плоди, більша висота рослин, більш зелений колір листя, більш раніше цвітіння, переважна якість та/або більш висока живильна цінність зібраних продуктів, більш висока концентрація цукру в плодах, переважна стабільність при зберіганні та/або перероблюваність зібраних продуктів, що перевищує ефекти, які фактично припускають одержати
При певній нормі внесення композиція згідно з винаходом для обробки відповідно до винаходу може також мати зміцнювальний ефект на рослинах. Мобілізовується захисна система рослини від нападу небажаних фітопатогенних грибів та/або мікроорганізмів та/або вірусів. Речовини, що зміцнюють рослини (індукуючі резистентність), означають, у контексті даного винаходу, ті речовини або комбінації речовин, які здатні стимулювати захисну систему бо рослин таким чином, що, при наступній інокуляції небажаними фітопатогенними грибами та/або мікроорганізмами та/або вірусами, оброблені рослини проявляють істотний ступінь резистентності до цих фітопатогенних грибів та/або мікроорганізмів та/або вірусів, Таким чином, шляхом використання або застосування композиції відповідно до даного винаходу, для обробки відповідно до винаходу, рослини можуть бути захищеними від нападу вищевказаних патогенів протягом певного періоду часу після обробки. Період часу, протягом якого здійснюється захист, у цілому становить від 1 до 10 днів, переважно від 1 до 7 днів, після обробки рослин активними сполуками.
Рослини й культивари рослин, які також переважно обробляють відповідно до винаходу, резистентні до одного або декількох біотичних стресів, тобто, вказані рослини проявляють переважний захист від тварин і мікробних шкідників, такий як від нематод, комах, кліщів, фітопатогенних грибів, бактерій, вірусів та/або віроїдів.
Рослини й культивари рослин, які також можна обробляти відповідно до винаходу, представляють собою ті рослини, які резистентні до одного або декількох абіотичних стресів, тобто, які вже проявляють підвищену життєздатність рослини стосовно толерантності до стресу.
Абіотичні стресові умови можуть включати, наприклад, посуху, вплив холодної температури, тепловий вплив, осмотичний стрес, затоплення, підвищену засоленість грунту, підвищений вплив мінералів, підвищений вплив озону, вплив променів світла, обмежена доступність азотистих живильних речовин, обмежена доступність азотистих фосфорних речовин, уникнення тіні. Переважно, обробка цих рослин і культиварів за допомогою композиції згідно із даним винаходом додатково підвищує сумарну життєздатність рослини (порівн. вище).
Рослини й культивари рослин, які також можуть бути оброблені відповідно до винаходу, представляють собою ті рослини, які характеризуються збільшеними характеристиками врожайності, тобто, які вже проявляють підвищену життєздатність рослини по відношенню до цієї характерної ознаки. Підвищена врожайність вказаних рослин може бути результатом, наприклад, поліпшеної фізіології рослини, росту й розвитку, такого як ефективність використання води, ефективність затримки води, поліпшене використання азоту, поліпшена асиміляція вуглецю, поліпшений фотосинтез, збільшена ефективність проростання й посилене дозрівання.
Крім того, на врожайність можна впливати шляхом поліпшеної архітектури рослини (у
Зо стресових і нестресових умовах), включаючи, але не обмежуючись тільки ними, раніше цвітіння, контроль цвітіння для продукції гібридного насіння, потужність проростків, розмір рослини, кількість і відстань міжвузлів, ріст коренів, розмір насіння, розмір плодів, розмір стручків, кількість стручків або колосків, кількість насіння на стручок або колосок, маса насіння, збільшене заповнення насіння, зменшене розкидання насіння, зменшене розтріскування стручків і резистентність до полягання. Подальші характерні ознаки врожаю включають склад насіння, такий як вміст вуглеводів, вміст білка, олійність і композиція, живильна цінність, зменшення антиживильних сполук, поліпшення здатності до переробки й переважна стабільність при зберіганні. Переважно, обробка цих рослин і культиварів за допомогою композиції згідно із даним винаходом додатково підвищує сумарну життєздатність рослини (порівн. вище).
Рослини, які можна обробити відповідно до винаходу, представляють собою гібридні рослини, які вже експресують характеристики гетерозису або гібридної потужності, що приводить у цілому до більш високої врожайності, потужності, здоров'я й резистентності до біотичного і абіотичного стресових факторів. Такі рослини типово одержують шляхом схрещування інбредної батьківської лінії, що має чоловічу стерильність (жіноча батьківська рослина) з іншою інбредною батьківською лінією, що має чоловічу фертильність (чоловіча батьківська рослина). Гібридні насіння типово збирають із рослин, що мають чоловічу стерильність і продають рослинникам. рослини, що мають чоловічу стерильнісь, можуть декілька раз (наприклад, у кукурудзи) бути отримані шляхом видалення суцвіття-волоті, тобто, механічного видалення чоловічих репродуктивних органів (або чоловічих квіток), але, більш типово, чоловіча стерильність є результатом генетичних детермінант у рослинному геномі. У цьому випадку, і, особливо, якщо насіння представляють собою бажаний продукт, який слід зібрати з гібридних рослин, то типово корисно забезпечувати, що чоловіча фертильність у гібридних рослинах повністю відновлюється. Це можна здійснити шляхом забезпечення того, що чоловічі батьки мають підходящі гени відновлення фертильності, які здатні відновлювати чоловічу фертильність у гібридних рослинах, які містять генетичні детермінанти, відповідальні за чоловічу стерильність. Генетичні детермінанти для чоловічої стерильності можуть бути розташовані в цитоплазмі. Приклади цитоплазматичної чоловічої стерильності (СМ5) описані, наприклад, для видів Вгаззіса. Проте, генетичні детермінанти для чоловічої стерильності також бо можуть бути розташовані в ядерному геномі. Рослини, що мають чоловічу стерильність, також можуть бути отримані за допомогою методів біотехнології рослин, таких як генетична інженерія.
Особливо переважні способи одержання рослин із чоловічою стерильністю описані в. УМО 89/10396, у якій, наприклад, рибонуклеаза, така як барназа, селективно експресується в клітинах тапетуму в тичинках. Потім фертильність може бути відновлена шляхом експресії в клітинах тапетуму інгібітора рибонуклеази, такого як барстар.
Рослини або культивари рослин (отримані за допомогою методів біотехнології рослин, таких як генетична інженерія), які можуть бути оброблені відповідно до винаходу, представляють собою толерантні до гербіцидів рослини, тобто, рослини, яким була надана толерантність до одного або декількох гербіцидів. Такі рослини можуть бути отримані або шляхом генетичної трансформації, або шляхом відбору рослин, що містять мутацію, що надає таку толерантність до гербіциду.
Приклади
Приклад, 1: Формула для визначення ефективності комбінації множинних активних компонентів
Синергетичний ефект активних компонентів присутній, якщо активність комбінацій активних компонентів перевищує загальні активності активних компонентів при застосуванні індивідуально. Передбачувана активність для даної комбінації двох активних компонентів може бути розрахована в такий спосіб (порівн. СоїЇБбу, 5.К., "СаІсцайпу Зупегдівіс апа Апіадопівіїс
Везропзез ої Негїбісіде Сотбріпайіопв", М/ееаз 1967, 75, 20-22): якщо
Х представляє собою ефективність, якщо активний компонент А застосовують у нормі внесення т част./млн (або г/га),
У представляє собою ефективність, якщо активний компонент В застосовують у нормі внесення п част./млн (або г/га),
Е представляє собою ефективність, якщо активні компоненти А і В застосовують у нормах внесення т і п част./млн (або г/га), відповідно, і то
Е-Ххчу- 100
Зо Якщо фактична активність перевищує розрахункове значення, то активність комбінації є понададитивною, тобто існує синергетичний ефект. У цьому випадку, ефективність, яка фактично спостерігається, повинна бути більша, ніж значення для розрахованої ефективності (Е), розрахованої відповідно до представленої вище формули.
Наприклад, формулу й аналіз можна застосовувати для оцінки стимуляції росту рослини. У такому аналізі оцінку здійснюють через декілька днів після застосування на рослинах. 10090 означає вагу рослини, яка відповідає такому необробленої контрольної рослини. Ефективність означає в цьому випадку додатковий 95 ваги рослини в порівнянні з такою необробленого контролю. Наприклад, обробка, яка приводила до ваги рослин, що становить 12095 у порівнянні з необробленою контрольною рослиною, буде мати ефективність 2095. Якщо ефект сприяння росту рослини для комбінації (тобто, спостережувана ефективність для 95 ваги рослин, оброблених комбінацією) перевищує розрахункове значення, то активність комбінації є понададитивною, тобто існує синергетичний ефект.
Формулу й аналіз також можна використовувати для оцінки синергізму в аналізах боротьби із хворобами. Позначений ступінь ефективності, виражена в 95. 095 означає ефективність, яка відповідає такій контролю, у той час як ефективність 100 95 означає, що не спостерігається захворювання.
Якщо фактична інсектицидна або фунгіцидна активність перевищує розрахункове значення, то активність комбінації є понададитивною, тобто існує синергетичний ефект. У цьому випадку, ефективність, яка фактично спостерігається, повинна бути більша значення для розрахованої ефективності (Е), розрахованої відповідно до представленої вище формули.
Подальшим варіантом демонстрації синергетичного ефекту є спосіб Татте5 (порівн. "Івороїе5, а дгарпіс гергезепіайоп ої зупегдізт іп Резіїсідев5" іп Леїр. У. Ріапі Раїгр., 1964, 70, 73- 80).
Приклад, 2: Сприяння росту рослини із Трифлоксистробіном і рекомбінантними клітинами
Васійизх Іпигпіпдіепвів
Експерименти здійснювали для аналізу ефективності комбінації трифлоксистробіну й продукт ферментації рекомбінантних клітин Васіив Іигіпдіепвії, що експресують ендоглюканазу (ВЕЕ"). Насіння кукурудзи вирощували в стерильній суміші синтетичного середовища й засипали піском у невеликих тридюймових квадратних горщиках на освітлених поличках для росту рослин у кімнаті при 25-28 "С і 5095 вологості приблизно протягом 14 днів. У кожний горщик висаджували по дві насінини. При вирощуванні, ростове середовище в кожному горщику просочували обробками, описаними нижче. Через 14 днів, рослини вимірювали для визначення сумарної біомаси рослини. У таблиці, представленій нижче, ОТС стосується необробленого контролю. «Розрахований» стосується передбачуваного ефекту, розрахованого з використанням вищеописаного рівняння Колбі й «ефективність» стосується фактичного спостережуваного ефекту.
Продукт ТКІСЕХ?У, який містить трифлоксистробін як його активний компонент (2295 трифлоксистробін), розводили в 50 мл води й розведений розчин використовували для просочення ростового середовища. Норму внесення, вказану нижче, що стосується кількості активного компонента (тобто, трифлоксистробін) застосовували на ростовому середовищі.
Рекомбінантний представник сімейства Васійив сегеиз (ВасшШив ІШигіпдіепвіз ВТО1ЗА), що експресує ендоглюканазу на його екзоспорії (ВЕЕ), створювали в такий спосіб. Для створення плазмід для експресії злитих білків у представниках сімейства Вас//их сегеих, створювали ПЛР фрагменти, які кодують ВСсІА промотор (ЗЕБЕО ІЮ МО: 85), метіоніновий стартовий кодон, і амінокислоти 20-35 з ВсіІА (5ЕО ІЮ МО:1) з наступною лінкерною послідовністю із шістьма аланінами, спряженою в рамці з Вас//и5 Іпигіпдіепзіє ВТО1ЗА ендоглюканазу (ЗЕО ІЮ МО: 107).
Ці ПЛР фрагменти розщеплювали за допомогою ХпПоЇї і лігували в заїЇ сайт Р2ЗОРЕК плазміди для створення плазмід реШРЕК-ВсіА 20-35-Ендоглюканазу. РООРЕК плазміду створювали шляхом злиття рОС57 плазміди (що містить касету резистентності до ампіциліну) з рРВС16-1 плазмідою з Вас//их (що містить касету резистентності до тетрацикліну). Ця плазміда з 5,5 т.п.н. може реплікуватися в обох Є. со// і Васійибє 5рр. Плазміди рР23АОРЕН-ВсіА. 20-35-Фосфоліпаза трансформували в і розмножували в дат-метилаза негативних штамах БЕ. со)// і на завершення трансформували в Васйив ІПпиппдіепвзіз ВТО1ЗА.
Для одержання цільних бульйонних культур ВЕЕ, 15 мл конусооподібних, що містять бульйон із серцево-мозковим екстрактом (ВНІ), інокулювали з ВЕЕ і вирощували протягом 7-8 годин приблизно при 30 "С у шейкері, установленому на 300 об./хв. Наступного дня, 250 мкл аліквот з кожної колби інокулювали в 250 мл колби, що містять 50 мл середовища на основі дріжджового екстракту й вирощували приблизно при 30 "С. Після інкубували приблизно
Зо протягом 2 днів, коли спороутворення завершилося принаймні на 9595, культуральний бульйон збирали й розраховували колонієутворюючі одиниці. Ферментаційний бульйон розводили до 595 в 50 мл води й для кожного горщика застосовували наступні колонієутворюючі одиниці.
Результати експерименту представлено в Таблиці 3, нижче.
Таблиця З
ШЕ З Я с кс
Обробка цільної о о о внесення /о о о рослини (г) шт 17111111 2671лою 1111111 (Трифлоксистробін| 0,024 мглорщик | 269 | 101 / 1 / о 7,85х108 вве | о блращик 29) в |в 0,024 мг/горщик жк
КУО/горщик
Результати вказують на суперадитивний ефект на врожайність рослин при комбінуванні трифлоксистробіну й ВЕБЕ.
Приклад, З: Сприяння росту рослини за допомогою ізотіанілу й рекомбінантних клітин
Васійиз Іпипіпдіепвів
Насіння кукурудзи вирощували в суглинному піску в теплиці при 20 "С ї 70905 вологості приблизно протягом 11 днів. Приблизно через 11 днів від часу обробки сходи зрізали вище грунту й визначали свіжу вагу.
Рекомбінантні ВасіЛив5 Іпигіпдіепвіз, що експресують ендоглюканазу, кодовану ЗЕО ІЮ МО: 107 або фосфоліпазу С, кодовану 5ЕО ІЮ МО: 108 і приготовлені, як описано вище, застосовували в кількості приблизно 50 мкг/зерно. Також може застосовуватися |ізотіаніл приблизно при 250 мкг/зерно.
Вважають, що рослини кукурудзи, оброблені за допомогою рекомбінантного Васшив
Іпигіпдіепвіз у комбінації з ізотіанілом, будуть мати 95 ваги проростків, яка перевищує розрахункове значення на основі 96 ваги проростків з рослин кукурудзи, оброблених двома активними компонентами окремо, тобто буде спостерігатися синергетичний ефект.
тика тро т тм дич
ПуЕЕИБСК СК ПЕОМ ку БМ щук сюди вок ори стилі шал си бетеєтиит Балади БТ лм йде ллІртя тищо о йо штТа Тит
АХ кОшМПСМЦХа, ЯК ОМІСтТяТЬ шЕКОМІКОВМТНУ КЛІТКИ НАТО лав ОУН ІЦИИ пБрр спе дух сеішйл ВСЕ аОптю ВК сети жи дик щік чи ЦЕ осот штук зразки шен в ана вч лм 103 сил пах дім СО сп» о Батбенпіхв дароїя 5,5
СЕК З
А Ку «шій Білох лк их Фі ку сна Ку коду сатана Ал ашАє ект 4
ХА 1
Мех т АЖИ Мо ли лем ЕХ Актлоіх сим ом бла бл соми дело Хе р щ «З 1 ше о Вздодиат мли Врих В хи пе. оди та ДОЮ ЩО см бе пре тат фот пк шк о ладо ває бід Кмс пло бло йо само жа а М о Бжое злжх. хе шля Еко яки я о пд батту ри: Дір ЗУ Тама сб СсВЕрм хр ша Мою тот ЕЛЕ За Ое вл АБК ху х5 0 стиМиМм о г «тля пл «лю що
УК Яги захо руку их жид ша ЛИП кА В
МЕ пет віп о дяєб дай лк при ти ща сопе; дат о бисю дов тд Дшж тд:
ЕХ ях ЛП ої дл г ху Обозто яю ле ЖІ Бу ЛУ хі сих Б. дал КОМ де Дулодо и я, як. Дефо Мох ТД ря у роту ВК Фон век Атіа бшт Ві Би Дер Вс одЕжп оцей Уді пу би тТнжЕ їх Во БЕо -ф ее, зу п МУ 32 пощо веву Сжкучя Уміу АЖ То Фри, Чу пл ємо, тра рах Уни І шо Ух х жожшжю сх ЖК шум АТЬЖ ЗІ ЕДТА СМ шт ж ЖК К сам ЧО жит лам скл. зе Я Б дю ану ик пили Детаці три я дния лиуу Тетя дш т пелосу лмитїу сАТуй ФУ: бід Би жк шу Бі Тцт обу Бко беж Піу Біо сБпт жі вжи тк Зіу іх зх кі бору тик о ру у пух піти. его рід стали ую пок бах рю тя ли пе
Сто тп 0І1Уу Бсх тк оси бо Тих бЗіУу дв ОХвЕ сю АК Тих осжУУ Ко кг та п ад п 0 їй й лягай ми бум жу уз понех Я йти Бека сте 0 ку ау Он. т дк доки; мук пло Екс у 1 у гай; КИ крам шле їй сті М Мала ск щем б ТУ пе з З білу арку ТР тили, сриуу ри тя Ед тд лаз зимно бух СОМ Ж Хі и
СКУ СКЛ СМпХ у бо слт о сбіу БО ах САУ ше й ОТО Ст су КУМ
Іще тла ллй
КУ 1Нпх Мк бро 133, рих Мн алко оу ау. ФА о кт Ли алу тя є Мі хх їх г тих бЗіу Кро Льд ому сто Тит лу йзо о жмш Ппуу бал отие о піУ Бо ту
Зх Яза 155
Ех їйо а щі деку йо ЛВ у Їюуї Яуає гіч: рен. Ма Їу1ар уч ма тт яю доуиє п (03
ФМ ЖІ те СВІЙ КХе ХУ Му Кг МА еу ши мих ААУ ВТ СИЛ
КН мя аг пре бук ші фур е піз ко Ж бе фут Жат біл ко Фк то ше
ТЕ тп шу Бо Тмгобліу Бо Тк обу Бкб Твжх РУ бро ТЕю обі ко
МА хи їх 15 тиж с прим МУ щі ших ти Мр сен гум пр; те (А жо ав ля шиї сКфу КЖЕО ЖиХ сію тео Тл рршШохлуУ (у БЖО ТтТахосуУ тжо Хит Кгу
РЕ М 5 ехо Мат При М що бу піт т ду Мр пт поет Кр я ри пуфи пли ок х
Би скмя ЯКО Мів тТьЕ о поу без ТВ м то ЯК фу Бе Ти Фум Бус ї5о х5 151 шЕсКосп3аи Лози суб Тим: пох для пла тат лій АЛ ле йяи ле пт МИ шт осіюж Бай сте Боб вро Вів о пзу баз тм Ала та свя пах ПКУ МУ пох пера чих спо ТЕ: лі дови о тити бо лю оч полку ЕВ дек, Сну фол вин А
АВ (УВА лічі ДЕ евмо мо кіш малу ВОЮ гл я вт дае ВО УПХ Уві щі ШЕ ТЕО пози пи 1 тУМиш ТИМ: пі є шк рід лох стотих сп о тя дя ою ех блему мах сам б Ще ТплоФфьМ ТбиЖ Бій хюш о ошЕ ба дшМ мдшв ліва пд б хіп пух, од ях дош гео Ех. тіат СЕета ка га а нн нн вн нн в а нн в не НН ь
Твлошпю Мі Ха ек пою Тих сю цею стма мукою ть чаї тоже КМ пд се -хщ акту яти еп шоп яю вд си й п ти гло І ду стан тнє ті мік їх дім ТВЕ Аза тах АТа пек Узі РТ буу су дим Та дів ів Уді да
ПО шо ша мох лм лУри: ЛА фу пихи я МТ у пу риє тих тішосшемю тмму пл міш
Біт МаЮоБро Уда фе пу Тпж пу дяк ек обі Ті де пемобтуУ із шх БЕ пе
Я а ло пу жа дк Стою 123 ДУДІ бл шо дл дО го сти гля Сто еру ср у пре р;
Еко тп ТМ дів ві Таз піп хв Ме їмт Зі хі вх о бТапЕ тТиложКо вх сіув дл я п Зп ще о тими ля пуху ил тт ці ст для темна у б, лю тела кто бе ше о їйец Чі ли Уві ів Уші ТВгобіу без ошім Шчм дет ем вія Бей тп 48 Моя уза дЕМХ АЙ кош с йляю тн о бщшко ьо шию Тло Ж тд ля сиди булі ВЛ Я бЕУ САпМ ОМ ян МІ дів а зд сЗАХЕ пул а КН зи Я
«п й тик А ші 0 ІМ Их ся Фиря лах дм елияло дах шид пал ЯМАХ А АЮ чай
Міехіє бере. «ти тк ре тю тя пл ЩІ ее) Мая у І ун ун,
Мет дех са ша ТУ їм і Гц ніш лу ЗВЕ Аа дме шій Кто Бл тки: т де буїлуи Змії СВУ є тк п ше. Тов дея віч ЗМУ ЯМ они фену А бецотфбе о зхім жо ха зх Біля Бте 1ТЄ жує шує Біде жк сеть бл ДЖЕМИ п ск я
СЕУ шіп а нитА вел ил Ж «ЕЛА ООВІМЯМУЮ, сту пдпотлати пені и ух ди 0 УЗИ спилуєтт у аа 4 тоуйіо а там ШК да; тую бтю о тІшю бір ти ма д ле чук дій тим б Бхє дощ:
Ме шШтх шу тую Ті дів оїмні Ніз су ТВА олій поем о сІМ Ехо ди там Ж хі Чу тома Буча ет ЖІ тий СДП жияху Чі бах Хе точ
Та ха БАУ Бах Ту сем ЕКО БгОо АФ о Клеа геб Буре Чі жа вБжОо Ба п п З
М и а шу деку станов тлу Сб рую ри гли Фу мл шу Ж Ам у: руку Му м хи шу вто тм ліУ хіх ЖиХошку Бз бе ім Віж лХОпх су Бак тля ух
З чо Зх ях ойУтах бор м (хе терю йбНоує ті й Чихму п ху сти ЛИ ві у ту МТ М
Ті сю та ТИ ЗУ Бро тТпс опір ді Тих і по ль су Ті щі бо не: ща сполук стУ,Іт спи Мох їх щІйя Спа грот буря тро жі бу кдд.
ШОЕ ОСЯХ САМО СКЛЯЮ СКМ бхіЛу Ал Ю ТКЕК Єхеу и5. лм Клін ва ою у, ВН тех. Гея ню НК т 7 шая мо тов ху та махи Ар фу ті дю рія ЛУКИ пли я ЛІ я жу да пи так тів УМ отве Дяк Уві бу тів оф роз шеш щі ТЕО ММ Ай ж во 5
Беж т із и тво її днк ВЕД ну с. те, АЛ СКМ, МИ сш ул М Ина вк од 13вобЕИ ББе ах Бий: Біо ШТ шШУЄ Ха. пеЖ ЗА У Тех ТВО Хей з иг лекала, т по 105 М
Змди Баху ЗАжі Аету ово що бі фі т вишок ТВ пря хі сб ШшеуК
Ма Кал ба лу лм ат в Фі ла ВІ СсудДрЕ ОК бу лим хм х тиху
МИХ 17 155 ху си Ти и ре у оо нн ов ни и ни кн НА КН НС тв дз га пет біз ах це з їїе лій Віз дез Жек Бек ех Хі и зх и
Кс я пк ги сан Жим ую Ж ро очі: фо, Фо Тк я рих що ло пла бик Вих
Сян Длй опти Те л3е зи Ат) Же рук «ТУ Ба Віз ша лою ЖЕ Ат пом Ул ях ше
ІТУх МІХ АЛЮТ ВЕЛИ тіть З па дк тилеки сроиуу итяю ун ви Кл ця шик ді пк сх кл ти
Зав МАЮ СА У бгО о стІУу ХЗві БУ Мав ових Вел о лед де Сл й ве
А Ве ТТ, пак тех Тож. Фет; Арт фону УЖ си Туя Ле дуття у ух
Тед сед лнме ой ста спо йшІі узі пед овлете За Ат іже АЛ ОЗВІМ віз
КУ пе, ке ми МІ М пер й ухи свою ду ж рю пл. Фо ди Ал йду Тит ла дипло у Ссбхияу ку
ТвхосууУ Ашу Хі хі бух бехм дей Аза пае Ме млі ай Бек бух Ма
І5 ШО ША
Мою ешУПЕ 5 «Ло лх «ЕЛА ООВІМЯМУЮ, сту пдпотлати пені и ух чи 0 ВЗшВугию спотугату вира таж дк сту жк Ул ДА ТІЇ) домо лу Ал дк тишу пд Жоадшо строю тла фе
Мо мні тпуй Ук маї Зіш бЗРу вав оду Су ллем хат У ЛІВ Вуз ШЕ їзжу їм! дю Шен о Ва Бару тилу Жах тим шк до та що ШТ хх Вже ку ж мМ волю ше Ж Фа МИ юЖ ОД зм жк ЖОМУ КО жу
І пк за пік боку ху Ла Думі Я Ах ЖЕ ме сли гу тм
Ве бто Кто мазі ВХ пд шу Мао блю ім ів лих
У КО
КН НУ сиди сля ща ху, 131 ру пли опінлОик шо, дптр ку сжув ве
Жив таро: жилети л чЯМих ох
Таз Ж Жоуд МЖуі ма»ві ів Шу о джй пс бару уд они гум Тле Ху ак чЧах жах ух Ма чаї піз шу ши су схіУу Був іме пул ле соя ах 7 х 8 Я
ВкКтопею деВодек Зап бпз Муз БІ пеб ех дев емо Узі слу Бе ОКХ со зх ат й З їй лір їхку ки; АЙ Ееиачо При спо Варойн Зрує тт є т потоки ел таки ХК
Бе БХО Блс Увпа бує тіб обу Мет су су Хлєб ТИМ офі ех тн Зіу шо ра дово мер ти щоми ТУК ко ТІ ферит, Мф сл хи сті рю у ду ря: «и УК
АМа чаш тім бу ЛЬ спХу Биз Тк пу с Мт о зіу Му» о лтпЕ су поех
СЯ пи йй и ШО Й
Фу, п ох, ліки (хи уж прах ит ши, ЛИЖ І1Лоху Дух Ку УТ) ал л» ТЕ жі лк ІМ тот Зі пло УМО пу Бо Тл: мм ІМ МК пАу пам г «5 ав р що
Їх -Щ т СН
Мтех ме оУВик. ТІК фе три шт щем см тіла ду ла (ки Мам са уЩі
Там ЖМЕУ АПА ОКУ ЖЕО І І Вл МОХ слу Ай ТММ селу Ми ХУ ЗУ
ЗЕ чо Зх зт Мт зл рен и ТА о б дили ср Ман іх ля Мін хи им
Зах биту ше Тьк осі Чаї Тве бі дек ТВ Осі У Уа! Тв У деаг тай тах Тай трико піЯ, ХА Стах фут стек р жду фему, Чо УТА) п ко г» гІзлу цеху мах тих Зіу ех жпХ см ВЕУ ТДдЕОСКУ ЗРШОТву пу ХО ТИК 115 тва 25 щі шеротбавк пак мило ср брюк диж суду ті Вл ля щі миє Су і у бЗіу ек о УвБк пп мах бла Зі дех Сью слу АхМа такс обі вет ТБ у
Та ТЕ ї40 зущ сви г тілу ФИи тркО ут деку Рв 3 риє Ку пуюіх влщо пю ол оя
Зах ТЕ сРу ВЗю тТпЕ о СІЖ го ТЕ піу пет їВМт обі дід Типл оку дам я ау 15 я, з шт чен ож ох КК прє ую у. Ми Фк КП Мена ки МІХ и я и ПИ ха стр Ян Сб ст» Щи МЕ тво ші ве Лі Б1Ру пла Тек споу су тил 1 ю дек Мед осуу Бах лік
Жов, Ктй тр пі ши твкоіу маї Тит бір дек ТЬЕ ЩіЮ щу тк обу бат ТЬХ бі спе МАЙ тлпх сим Мах о спт ру пеЖ о жах су пух тТйпгобіу Бе Ху балу я яит, чай їщо тих Ма зе 1 пноую кл дю ЗИФ дж Жбучу Сріуаз ї313 ру ан их пра Чу о ку ві жЖОВх САУ йо СБУ іш БкОо же плу пед во оп чЧах Тит Зі пох
Не зай ха
МІ ради ОО бро фбхи лиц сему фура шу и плям я ду ери Ар. ТА ху хеуло мате
Тв офі ма) Я» бі йех тТпиш шу хо Трто Зі цех бах спум ЖЕ Св ау тіж Кк, пот
КМ мол рлкчя ще буїя» ери Среро хх фею Мом кілу юю Мк стиск Лю ти дух Пк МТ ох пу шяХх п су Вт лЛвт о біу штюЖ тстпкоФфУу Ма пс бору пе тах о щшІФ пИЛУ ЗИ п ап тді жо журі доле, Мдко пух; фев Севрю см ші Мр о бр, УДО ср туттм Вот. св Жах пом Апео Мел пох Бе ТЕ о сху шеш Лв ше що Би ЗІ ВЗ се. Ім Мочут, тис біз дише же ру танк б пл дій жна йіця пах тв о пюум Вка М вхо бшт УМ Зі тах Тв бу лій тр бу сх таж ОхУ Вго Мах дл РЕЖ р м мя БЧНИ мМ о дО схі М їз вх су у мн селі ХО АТХ АЖ мч пам жк
ТЕ ЗНО Зх а о нн и ни АН а р НН бал СМ Ю ше у. шалі ЗЕ бі у су В су ЖЖ СКМ сум шуЕх ет сі Бл шо їЗ5 Зо еко гію ут лекух ліру ші опіум джу пре) ге сирою о же Ак баку
ІпсозіУу ді УВУ біт велотиж су УзО уМмж бу ше так шу УЗА ЦЕ пт тп я г РОН
Уго Ми а ло. ди шию Сн ж ЕІ атм таки лют авдету лру ут тю Мих сп хи
ШИ йеВИ ІМЛІ бю ЖаІ ВХ МУ сфчОфуд сву ЖЕО ХпХ МАУ ше ли сах пок Б хх
Щіожщм паю лож ую пи фо сво і у чук сш ху ли стю у СИ
Мат Хо АБО ТУШ МЕ Оу ХО КТЬХ БАХ у МАМ ТИЖ ом бу Дт саду чу
ЗА Ал з би ці щі ЖМУ фра чими у лю й пу ЛІЯ Ду п т Ах но у тих біу Кіз ЛЬ шу дає Тит паУу уві жЖиш ПУ Ат Ту о піУ Бто ту
Кох дае ук
АТ со То пихи куди Спи пот х 1241 ух ги ай Маус утхи М тн рдхю й; Ин (01ху
ФМ пий те ВІЙ УлЗІ ЗХ Му жий МА шу Біщ мих А У щпАПОСКИЛО ах им НЯ стуй
Три бак о Шієс дев ме піз дід Ше се Депп Жат біл бро фа хто ви
Вклотис ші Аши мг обліу із ТВЕ ост дЕж Твжх пщшіУ БО ТЕХ біт бін пух пл Бо зс0б трек р лік М І му Спо лому Ме Ам ст И1ур Сперму ЗУ ТАМ чих жу млі Ух спі зас Тл біІУ МЕО ХМХ суУу шу бак Ом МОЖ
Их 3 Я стаю леж, ат сли Мжма Мт сиху Ж см Ж Маля ІК бзАСУЄ ММИК ОТ ХУ їхали
Са й Бяту ло ре й хол, лек ух вушка нен и он ни о о и КН р а
Яхно ДК. Мел с АК. зу ж ЗК шум РАДО, СУК са у мюК и ХО АТА У Мі
ВІВ БІ З пк; уд ли: бум ки ма СТАЖ мо г. їв ОМ оО бе йд спноко йлу ВІ доль. «ЮК УЮ Кт СКМ шум лезт Же бу МЖФ ОМ ін лев жил сті віМЖ КАПУ йо КИ лита поши хх КЯК полу лящ тАоає ТУ рах Спок, І Шу бахих тлу Ек ск тя ил дк ти ох пу жа то біт жала тТйХ ОБУ Еко му ліу бшжЕ ТАК шим АТа отих У кв яп Ся т вжи м ТЕ те.
Бор пули сжрую АК піт шок; ЯЧУ о и бом бури ОТ СВО тек. а и да
Аа стю см мето жи Лу Боб; Тих сЗж ех Тр оЗіу ТвУу ТВх пу дев - до ци и ре тви при чаї танк щі дор бі бл фФруу хи Ля Аіщ па іт» хі тер тТвжЕх си За Тв оУ деаротне смт БЕ тах пі Аза лтье біу лі Бех п их вій Фтраж тен ді що их для йно ій мям о мА Ж ши 41 буки удо тих
Тв ХУу віз о Тву Тек Аза о впе від Бали йли ТВрошак Фу Ват Уві дає шах ща «и п Мал Жим ям фури: тт м ши м нн и А А депдослак дай їх баішЖ піу БП п оізМе жо Ме) Била вай Вп сп лай
Ас еВ Зап тро губа) дуету путюю ст дах Ер Щу пее їду шт Му пре жа вв: рю АРК
Тіш сбіу Еко сїу Ї1ш Тв оУуші пек осбту шїу Ав) нг Же Бе і Ущі. ви пла ож що т вом: що сили Дод. хи чу Ту що йчимо вах ш доз Пошнх Ту Лрд т ті оФетІМ А хі У УСЮ ДМЕ сл мА СКМ СКМ Масло АЛ УЮ ВІ ТР ХО БА З.
ТКУ шШм піт піки т овує Жим ЛИЦІ бер фею фотку ня Ід хм сірі ше Ффижу Жду Кл пуж лам лева Мі цех мех олтч Ті би МаАї Бамп бу їж бот Сем Аза зда так «оп й те ре дою иа пи ие 37 Ся и ДИ Щм иа ни лет код ТІ мМ ЖК. ловуб ФВ сш Кс сКИХ МаАдос тщл ма УЖ ТК еК ломи С МпХ ку по лк
НО то дл жах КАЄ ВАЕ Леви ДевМмо стю Мія сі СТАТ БА У ЛВ НК тм БК КІН
Ії ЖЕ г пу жа Ома Кіз їв хід тав Сей лев їтнт бо тах БЕ СУК оАМа ЛЕ пох гак де дат
МИМО що щих спа
Гки Би гі їх вим їм ет
МИ ім ок ла АЮ ДМ та
БЯ
«ЛИХ оо ж зд «Аа опи дох я Едіт ий свое
АХ ВЛ АВ МЕТИ
Фу їй фишую о тохидо Ла лоюяю щошеу Тл У п сть сот, дк рю р ЧИ де, ме пу шал ЕМ БЕрОБую Бе. ТжеЕ Сем обшр обу зву де Тл пою Еко 1 5 тп 15 мл мя ул тих рив ль б а МАЛ тоні фату Ст де я 1 1хнА пішов кА шум бі паж Бл рою МЕ пже; Би» БТ іш МІ іш БЕ и 2 Зп іпЕ оЗіу
Ка З зе їх клі аб
Кая ЧИ скло паті дили
ЗИ пилами влТЛЬКИ ХО жа З ит р шо сто пи уч лодрі том стих. а жу оія тудж ти Уві у
Мен Ву Зіп Взв оАлро пуд їй С БЕробви Азвобпув сю ле ТЗ ху вро я т я зе яе У ве У п, дя Ії8 пла Вус УВУ Біне орех, до хом буд ру Хі ія пт Би шалі АЖ лом сті У ДО МаХО Єлях їй СМж дл АКТА ХА СК Ж І ом КО
Ха жа жо тв о Зту тї5 твлошім Аїа тТвгозІіУу Бі тах пьж о ТМе лик о сіу Від обтко м й 12 п хо Се деане а нон ен на в о Зк кан о а ов А Но КОН Нв Шо не сему БО ХХ АХ КОКО Тахо шьУ Ллщ ому слу ВАМ ОЖАК о шию Бе сп ау тал теє дпзлу філо как тю тку у п дитя, тро у клі ин пли 13 захо свв ім Віж льки Ткз Тк осі УДО же ЗУ Вуз тих пумоїха
-к чи ту, й ши й; ле па такуу сіл яйя сачую Фху тощо см ТІ Чх с іно пи хр ло сикок йзу бі Ку ть о бХу ма тп осУ АТ ЖИиХ о біУу ха Мих шуб Мак оте 1У Биб КАХ ве о тк они ша нон на нн Ша о ан ен Вени у о Шо ЗИ пу ха хи пу Ака лих У БгоОо шу бу ХЛ Там оши М АХів он бу зп «де чл
МУ хау ІМ ших АСК йутАу Сі туру ТІ А МР пІАИ дея СВври Зруб фу. «п А
Вт Акад ох Хі у пу чай тв ші жто Мт фу ха ту ним АХА хх: рено я сук іх і шал
ТвЕ ОМ Кеосотих щіУу Шанс тм обі Ма) тагошіє бло Тв о буу зи Тл
НІ п Щло прю Ті ск 414 дооя. Та. Б хИ зйуч сСеує тш дпютт ту (кг тмх дл щі
ІЙ вВс-ш віз пу діа тп ші вто ту пу уз тах о суУ дей Віщ БЗіу хай Еш Мп М до мату чи бут ТЕ плед уро (тлу Ж ри М; Тбреу Суфуу плат АТ
Аля Б КР блю. ТЖьЕ поу пп Тая м дів ЯК фу Бе ТБю Фаум Аа їх и ОО перо глуху тем ол рю Вот о лу и, их ЩО Мі фі сє тку біта тя іх
Тс шіж жен о Ала Зіу віз так оспту Бо Тип шоб Бвй бот плу без тих їщО ТЕ ве мл» домов пи бази облік удо сйнуя ЩЕ лУ пте слухи й Сб тів
Зау вія ЖиЖ пу Аа тах обіУ ВІш ТЬх піу ПЕб СЕУ два ів їі Буй зу тва З: сп ій дов стро Му те бтгу Ал та тТиду А Жмт дл бю тим ух спе піз бат пі ТЕ ОТВХ бо Ат бБем ої Узі йлй дта Зах їв ІЗ 3 2ІВ тий дод тт пПубли сафиєо Чурео Ток: й4 4 р п хи Жені и ах ре лю пли Ва
Кат СБ ім т Змі Тит; (щує Ба! шою ші Бех Зі Ба мом тіжю КМ ил пап ке ай
Бий іш лк ще тн тім Пи Ото до тане фея іля МУ Ма іл сг
Вже спош ац сріо б Жва Бл ЧК Ті де Еш осі в. Мяї сіУу Да дп впй лют, бехе о цід пн пд ОСВоря фату Хв дя ці хи Ул и се шу тету Дід діє
Ж Яд. г Мав. иа. тд ЛЬ ВЕ у мая ма СКК Ку иа МО ві АСУ я. тХт МА продо ад блю щодо тк о Вмбх дала тим й а он НН НН
ЕВ» їтпе де люд ТЕ Вів ія емо Аза шхо Мецолих Бе Зі й 118 рія бе пив й хх Ж ето ждцлюо що ти ШИ проф т ВЗ, дл и слова. Ки Кл у и спі Мет ошів Тіз о Бце лів вів о Бже Вів Алтя Бет схви Те Бо р Бо сп вах сих ям Ох вже зу що СТЕ. ато ост тех пух ликом. За о сви: бок ад щу і сві важ Бибт Блих дм о дтй Бей ТЕ Бо вв оїйеебч БоЗ АК і ові Хе
Зп кики п ти пути Мід стае КОМА тяга п Ж я й що прохо м даної луку др хлал там бах лиж Ві тБК сту Бе спополіа тУг Ой Мп ск Зах ма лаа пох 3 СУБ й спите тон те ет я туя ої кю ті Чиж рес тд. плит Фттн Лх, пи Аж шуй Її Бо хві ТУЮ УВА Ше ем о тве пі вуз шах Бл Ту 345 34 яті пр, що сла дик що ДУХИ азу. їкц дпшмо ві шо тлу ст дя спід хйй ісю валка Аля їх те Зі Вековів пу пеб о Аит 1 ух
МКУ ко 1
УА ст1ї по «ФЛ І рю шк ци та дивних чт ЕЛ АЛІ КО МАЛЕ ВАТ Во дн В меж вер трірв ові Та: Заг дах щі ідо їці ду пит Фу мит Ма ІЗ
Мет Бар о За б Спйбшм Зах Ве під Бі імМ) Длк БгтЗ о Фіу бак хХзі Му шерих Мате тла бут Зах мет пі ой доку) беж ЩІ. Мрія Буде мк піч
Шли сБмря лдеаща ба Мжс Мет штй фо бле пів кб Боб сп слу ще ее з «паби А сивих Бінпок ешіе Баба мл дельувохя чн її апп У їду лм Му зи пд пд й я Ал Жим Колту уту ря: т хева (хи
Ме Ашросхім БІВ іх ех шем Ада Аді ам Бл Бл су жив СУ ал т ч се 5
Фк о отТтею стомір ее Вест Му о єтря о фмтх ІЗ. ТИ єр фе добу йо ивілу ни; Ро
Ехо тах нь ето Вго Месбосбів рез Бе оф тп Ахо ль спуу Бк Ух п Б а морях дю ру. підт д пут бутяя щодо бо шт дат твор І Урі салту тет піт ех шпак шує Аа ся біУу ів тав о сіу ви тагосбіц БЕ тух шрр
В 40 5
МівБ ТАКЕ ЗЕХ Бра БЕ фо Бі Ущі шви Бец о Жів о Тею АвровмнЕ Оую Зак ща «с дп
За соту їй спо ту т ЖЄащо сф ЛУК ту НЕО локо Тло хо ему сті пек шпж: Мао лом Уш М ед Елч УчроОюь ММА ХА СКАЖУ шк п п,
ЩХ «ЛЕ ли пул 34 чих КУ кн
АК ІМІАЦИТ я й зЗдІУЮ вим ме уч вві й уж ОМ М. ЗА ЕК ТО У ВИНА "Ат х ч«ацим У пек о Блзру Фонує ток ож УТ пр йо отлюмо Те дом шах ж тлі ту ДЯ
МК ЕЛрУ ЛшУ. шу ОЛИ Зм МАВ сапу дш о фБ бшй РУ хіФ о пПтм пп ока : 5 ней З ди о ер одочи феегту йду тимі лам сіро иви; Же Тема шко думу ла Мне ее М Я а па НИ З ма о ВИ я я В У В і З ка п а со ВК ЗЕ що Тон КУ бек бе их А ян Жили Трек ко Єбпе де Їй Боб тако та я лихо пе вою падок ся паса жтАнеЖйес яшма мали «ап» 418 нео спіудю бовуу ут своя МЛ: Ж ду ль. Сбяджєю 1 ду ил фл с тав А СА
Мін жав АщИи о Мумш ов ся Бе сип олууп о ціФойМм сш Кіш інші шапка дк ст дою зу ще Тих тезосудл ою жерат, Я ко Ток би и ия ву ФК
Взи: оВіз бом ат бгоОо й Бзи Ті щ1іу Еко Тйлобеи Бо Бо тт Кох пт хи та я - еШ
Фут жа Ж РеЮ. товка, фе ти жі Бк лу щи ад Укр фік Мо Як іо
Бе Бімв ХХ бев би таб обіУ БЖ ХЬьХ пху УВА ТЛОМ шЖО ст у й чо Сун жує знаю кути жк ою тили хи Фе т, ази ТК їм. їв.
Зах титру Бий о тьк пі Чаї Тве і й у їв бу Уві тТвЖ У Бе «й сл й
Пбх в ж пек стуку й стара (Лех ретро т Фк й ти 211) Му Ве (т фло
Де ше саду. УІАХ ШеЯу Ж Баш Сп А АЖ Ма ул ВИМ ЛИ ТА А УА СТЮ йх пі тхх, СИ шо С ГУ че
Рут фбиту Срок ЛІЯ ЗдиО ечує турою фур пд тд т Ми ІІ и ко жу
ЗІУ Клео тах шоу маю їйк ЗУ БЕ хх спту У ТпкошіУу Еш УВУ ЗДУ ще - Зо рес нн НН на А таври ля. Ми рухах Ул хуя Сп (ку Лутих,
УВО СКИХ Ку пе лук ше у і лк су ККО С ЖнИи шкУ мах Тв УМУ Би
М МКУ ІЗ пчаю ока; й пяуи укр лук Дом о тля Хр те Ех нуту ЯВИ Мо Се ПЕ лак
Твлохуу мі ХМЖ іш Би Тикх шу ах жит осві Уу Блю жах спум шу цк 115 155 123 тля ділу пп я, «ру ТНях й: ТТ. тукДд ост дм люк В чик кв МА тоді пу шк ТАКО М бу свт бі бІіу ша щей бут аз ослУуш УЗ Маї фен тя «ке дою ек ел м їто Мей сіц бер Мах Тимх піц йл м Ти Хе «Боб ім ие ма Ті Бай
МАЛОЮ УБАЯК дек м ЛУК бЖІ ЩА бМІЛЬ ОМ МЕ лом ія САЛО МК Аз зок хі, тих гу хх іх МО Ех пущі ня гію що мо цу ую ери; доме Мате фу їх: било 1Мче: схил Ви
Фе их дів вл КОМ КІлт м МА ЖЕКсС ДО бе лек рили ємо ЄМ. зе, сте чц ве її Не тка т уиу ре духа ЗК ще ом. Пес опиту. ЗА Чек кі ЛИ є бхчт 74
ТВЕОБбУ ло дає УВІ Зв оз о Біж о сем МАК ОТ м ьХ дазропую чо. те "ай
АМУ. че Мк тро тм Ми я ху пи т ему Ми дл реє ІВ ах хджло милу УНІ 1
ШЬх ЖИХ Ін УА МАХ АБИ фіз Зет Маю Уі Б шу ща Ма вра Бе
Вк тва Зо пе и НА н 13 ке хо пу ин бом одн Ух ли Лю сту Же Іл кра ко го ру Бір оБахх Ля бах бе уми Зо обро лю дет бло ул пу. й зр ге
Ялту хат СМ ккух ма стіти дор ги б: Же ПО таз ьо отче ло СБлхех шк шу шу дух вла спі А БК Ма Ат га ред Бе во АМа Бпх пи ДО ХО лап хів піу пек ово мдії Зв Беп о Бецп Віз ек Вжи сім екю Та вія Мід тА хи п, дош Вих дове МД Ж ло рин жк дам ри ов у? Роварро пою СМР хо им йЕео пе дтвт о Уді б) був так птУу суч облі її Мі пен Щуж тло Ббей пп шу БО кофе в ее Шк и о нн а и о но о о Нв Не
Еко Ті АвИи ско ТКкоунУ Тпх Уда дез їде Аза лів НпшЕ ТВБг оса мук яти НО СХ тівоствк ой я лей тів тнуУ ре талі тк Ми хів охпх вла ах Аж Ті тих вхо ХА тих Мах лих сл стаю та ж ЗОМю М
ОД не ий А ща шт пр с ик АН ик пе КУ МЕТКИ М У еру «аопм о уз
Мвж о Бішх Ал їлиш Авпоспома Ме Бу іуз СПЖ АЛлОВМиа Мах рн ім Віз дол що Лід ло гу дах ме ша ен нен о
ТУШЛА А. Я МИХ БИЙ ЗАМ Ам ДИВ су ГЛ М лим сюкух ло ла МО руни З Зо
Біл жиє тм Тл ра тах сп 3 сяду 47 «За тх ї
ЗАМ Щох «пе ВО «кл» Біле коли, Пол хі зи Керку м пуху яд цпатілУчжх ечапаейлошюихиа МИ «ап» їх зишюо сша вити пою ти м стро хут Чл оту рт я мит ст Ат п ШИ ТАЖУу Ух ХУ УА МЖК пуд пемТЕ ТО Сам САМО жа сп АЙ ОМА 1 5 то - к
Ід ВО т яку Ат ки бо БІ іс жала дими КО ох се м М ту Ки
Ми о Вів іні АвУя ВТО Ай Тра іш бу Боб тво осеаМ вро Кко ллю БЕо й Ук за
ХМ «5 з
Ту п таки Зовуни фФижеру. трун ЛИХ дао фах пр а очи о нн скан М ан он ФВ На НН о ро спе тр Оле Бек тако ощіУ го стих біУу сколи к су го тА о Угу
Ко 50 зу они Чиє пУзяЯх Муха ТЙАМає паж лу фін, ЗМР мо й свя раю ки ОФеру У рет пллт еуу
Его тає поля тка тр опту Бе» ТВ пім го жБж бу Бе Тв осує ко
ЗИ 5 1 тпевржо туба шери Сяє ри лаку пкиує ета ДУ Є. ке офис их тлі СІК
ТЕ о бфу Жкпоїпк опи ба їмт бір БЕФ тд шім БО Чт о ЗаУ Без Тпу ща то ле. - а т У шо плюса ТАМ піч фо Лис ія Жим му. ЕІ: пи; М ПУХ тех ка І бу шо сх хі шЖжУЮ УМ ЖІуУ зи у слу гЯл сим шММ мому хау пе п пе при Ср пурях зуко о ккО с ріджею СПК о хи ам рр тля ші ЕК Од ху жі СК ОосхілЛи сла МІК. су Ж ЗК іїхМу біл АК см КЕ БИК ам ЕКО я пери 1 їмо ІМ Щі тре і вла сті (во ім лм Тими чадо дж, бив, шт ЖАЛО ВМ Деу фу
ТвЕ осіУу за тйпс бій Зіу сбуз Кеш слиз дме упо був хі Ева Бкє БУХ 115 зла 155
Мбіт но ста КИ оди дисж ПУТ ким Ух страх аю рн хе тлу тю Ко ку сх ЗАМОЖНІ ММ З МАХ АНА СУМ О Ж А СБІБ ОЕМ БІО АЛІ т меж тату її Аза АзровВіз Б йкв За Ат бро йоа Кеш Ббхх ем оба дай лі тав ди тут, де
Ало 15 Мхл ке пек ши й мая мо мех ит: МР ма лу Чари чт Бре Мало ем ви
ТБ людях им ИЙ им гія хи МА Ол х ж тро у Мою міра му ЖИ
М не Не; теку стю Штєг реа Зди жЖідах бід дно кл тло тік м бля» рЕду сик
ВЕ оХах вп Уві Мак дп лів пек вас ха уте пу Макостіч Бім пеу зец Ма ой
ЩО кил ша тм татимо ми ІЙ що феижи пови АН мі тр му пет: Ал лову ту 3, м зей охих Заа сб БУ што тик Бещосуза Кл г Аза одшю теп о сУуву су
МІК лоо ох і бує йхуо буд о вуй пййш діт фу 13 дже гц тими тм; дет Ви піш Муж АвроМув ха пі Дії вт 115 Аже бвіц Тим) іме Ва твх Бек
І ШІ пил яерЕ ІД бах ше сти Лів вд сти: шип ши дв І Тху маг о дю Міо му
Таз ошху БЕЖ би Ха: фе їжкі Бжши жа фех Алі пе ха ж МУК п їх ра жо оо ІМ почи АК пт сна. дл тим ах Ж що зе тю су лави тити
ЗІМ Кн оКли Упа ім осптім блт йіщобяжм сту Ул Мк БіЖоі У БУ ЬБси лико пд БажЬо
Бе Ре фу їз хи ту бе бету ха ТК т Хкі ЮМухо Віхров Аза 118 ко іХе хо бів хХли Ку Біб б бо пт зм) Бін: Мебу епох А Ма 118 ша ща я ші Чріяеие ху ожкх КО их ли у А оту ТЛ Ср Стани ЛИ и не Ах
ШКО БЖ лю мує ох Те ьо діз Уві шу Ук ЖИ де маш гБлбСКОМожма
Ул зга спо, яд щ Ко сх. «дл Ії ші я
ФЛ ЖБК
Ул. де іне ит я вес швпІішаЕ Имя
МАМО Ко в нс о нн о Ое о ши я и о о Но Ши ША
Меб дек Ар їжа йтеро тен о Бне бли бго о бег Меч Мет вет Ака мух Бр є с. т як
Довж пін ол. пр пт тися бл тт оч 011312 дув т у Конт ке ку А тд ває Аа йеж Бжт пчл пе їлйв см ори бів опе в кіш швЕ Бл АЮ й дл У тиви яр о пурюю десиу бю бою ниє рекет рен, Шахи Жмих прє Мі Фу; ік
То Ха ші Еко ТмКоОБце Ехо Еко Т.З Еко Вел вла Лькобем Бк тВх їй 45 бігу ем Ії льш тая жіояв тут кт
ФЛ ЖБК и Ж яю вині
ОВО шеа і ЕЛ С Аи
ІДИ їв пул Кщ
Мао ли дир о тА док ляє їні демо ща діду. фор о йшев о Фази йно ль тр меж їм Ар із йро хи Клео вла вис мех овал мало лек вжи муш вл
Ху пюезех ов. су умо мм Тіесрлйщ сов, бл жі Мер оті кат ге де ліп;роче Ав опяету Ба Бма Тео оїлкя дез схилів перохає Щах оо хЕр т х, зт жо шт пев зов ЗАКО пути рух тамоує Тех ев м СТ дю сб, дити Тих ЯМрах Тот: ди МУ пече Ул сім то ти Кне БЕК Бк фе што ех Муза ЖБХ о Пеаз бкз Кду їх «4 їх
Зі жі Хна СХ Вгоа тне Ба овдли даш Ви вве Ат дів бі Бух Вли цл кої, й ле р. КУ єр СИНУ. рух Бе пу в ою їж МЕ й ЗЛ: ст хх 1
Жак ота сій їх Бім Тпх бро ВО бій Кор обі пз Май бек ук б1у я: о тр дя
Ля че Ск па яшнМО Фут дош мА УМ ТД МАУ АЖ ШОУ Ми ИЙ т жК Ула с К НП ОТ п Зо а
Кіз тик вла кто 1185 йявпосіьУ біз тек єв: Бпе о щас о йів пат хі Бу ї25 ЩЕ мА
Пр буря ли ую Тов МІ ді Чтв Бо екю маю ямі м ект Му
ЕБв Ап обра ЖБК о Їйчь ЩІ Тахо Тв дек ТБ о пез ой ті Тип 18 Агоа «Як аж тк
МАХ їх їж
Па оАки Хей Хві БзроМаії Аля шШек пі Тпт- ЗУ Люк тує ТвБЕоТВо ух
КОН М 15 ук бю. дере Па Ффохрах тт фс по поко кт А тир Мийте код хлею
СЕУ Жйх Жкоосвів Ффеуо лій 1із ТВ отих хе їТж- сао їхви Це віл шШежх п ла 199 15 йно тА тд удари МУ я рух их. В о і жи ДУ и я ис Жожо ТА
Зп жЖнЕ хіх Дав оті шій Єне бек ойів Віз поч ер сп Те Бецш Жпу ито ка
Зак шву Зах о дех Влио гін Бе Щек пу Аів бед Бе КБЕе ї5-О Ка кед шт У ейлек о ач ей 17 стжя х вчання 33 чай підло хол Бас ХМ чи» 17 меж дет пар ос ик о йеу тла шкб що 2 бр ах Ура» Зуб цо Лувр Стах Фотир до
Мах смт Ледь Осхіх Жук ехо ТУле бе Ва п бро Бін о Бею спо: Бо Акт
Та Ж цю ит я из ЗУ дл Лу ді; ни МВ тиж емо фа НО
Ге кю А жо гм Сей кре ше дає Коб КО БП аеро віє Кибч пі ст т ла
А У М кліп її ших п «или ЩЕ НОЮ «дж шапі Бий селяя как Щ15
Злі сихию о щіи тлі тим: Мі тт ігри: МЛодо ту ВЛ дУеох и тк: ЖІ ХАЕС зу МІ хе ЄЮ І МО МАЛИ ФТІ, - З 1 5 таж г пузяж Му том о г тку и сг о о и вн в НН ОН ау м: Ме схал»у ЖЖ ЖЕ КЕ Кп лею іме штс Ес Кеш смадОо епе елб ІД
Б 2 пу пря одини бірек о пуєхя стих струн гри уки ме ян Ав МЕ: ул дяк Яр ую
ЗУ Жити тТНжх ту ї1е бе оЗРу Бе Тих шїУ АМа тво ор вва тет су ув зй щк
А У У пів обі хв ть» сіє го ФНЕ бу хяї ШВУ Пи Без тик ші хз му и Са що п Ки ж
Тл рови луфлх зму пк пдв ва ши ау рр іх лож: пк Ту Му ті Бах Зі ба тТвЕ о споу Аза Тв ху то Шоу є пу ле тих шк -- «т вх п ЩІ ля пк пхю Бл тв Ту ств п сив В «ВТ ох «ваш піде
ЖИ НИХ ЛУКИ талих ТЗ
АХ 4
Мах Буз Ми Ач Зшробзп й Вер о Бжх ція Ав дай узи бек бех Мат тні пер Хо рт о фато мит тм ті хи ІЗре: СУфею лях: спр их ЗУ Ук пе ВХ ХА БЕЗ Бо оф мец ІФ щу гла ув Бе тро о сгжОо хі БЖ тп Кк Зо
Тв ожУух жна се Зі хх ск
А режи с ее Ко мл 15 ой Бінох
ФТІ перу ли сюшледи
ПК сту
СЕУ нини
Меї ут ди дхш лю вн Ав Ат лут бе бли пек їн жеу пилодем
У ї З о ій ц п ли тк тую бюро би фею лях Тими Ж Ума фемч СМрок сб ЛУ кує тн их вм Акту 138 ОТО Ріо бій Бач їж СХЮ Вико тиж Спе Бо Бо ді БЕ п Б а тару жУфля Піещо иа (Іхия т отіз. бут СІ му укл діжку т КІ АИ пи тут мо т тьЕОрУу Кп тво осі 1 ру ФівОТИХ пу к.з Так осі БЕЗ ЗІВ Пі 25 40 й пі пе сну Ми рі пуд фе. Довж ля Твоя тю я ру Ме пк го Так о ЗіУ Брз Біл бі ВОЗ АВш пу ши бал су Кей Метою Би ї - у Я ща ск пл
За ст шо ей тА лет и урну и ж до білу ДЕД ут ПИ ст рф ул я пря и ллщі мех шу жк Бе Му БІ о спюй о шУу вл іх ім ЛА бл лим ем ву. шк п п, в п 1 МІ о рія шану Хо пах В «таз а звану я дея МИ Упоие ЕЛоюу ми іу ЖЕ рі я бі Би їде шу Аа тцт обу Бко ли Піу шіп ска бу ти ЗЕМ ошзіу шт Го доме пожиє тк их кт БИ мих п їни т пах трах теє, ож хи й
Вед омхд У БК о шіпо су шкм тиж бму ВАЗ ОХ о Су ж шум буку М їй пах 5 шЛІ ЖКМ дНД тКіу 1 у Кам; Блю кА М шли ть сті М Буш сш СОМ Ай ОМА
ІТ їх вх пзітяу ера ту пликю ти см. їх тими ст т, слдт Фея. тд или зу сяк фр пУ Ка спам су іТеосвій ліу мі бадв о сСьу то 1ф8оз1у лів сх Оу ка так то їз «4112 ті фу р шу Ту дя «1 жк ХІТ; о мілдх жаму ФШаму пл Зх птоа Бі біфу ех осіб піж лі піу Маф піросКУ ему сто Зі Віз тд я хх, до ха 12 УБИ ВО перо уки ему пт фа реко о І у пк А Тут Ж У ст ту І; й ду ро дит
Твх су жтоа ім Зі Хі шко шу Аїд осхів ія Ха ВА пАш Тло то
Ух Кв пл бтл ню Шк пух йоахує Соч са Лу: до ВМ ю таку Вед Мою тло т жу У сх оку ЕК. ШК ст сум ПО ау мо Упе шу ма шт зу пух окОх шах
З Тит, тд а хіх: тех ій озіу хіх ЖВБХх ЧУ тео їв ЗІіу ЩіФ ХМЗЕ пу ВОЗ СТк щІю ЇЇ ТЕ їпх ат хв пухчю бю ту сімю сту Уфа море фррир іх б ти «Щі ту ЗУжу во піз для кит пуж о Жте бат сі іш Брто бБтб ху шко Тк осі Мих вк су Аа отцю
Іо Ех ЕТ пови дет пе реє Пози Фо бу кю их ЩО мб фі тку біли делЛодо І спи овоз БІ б Зіу вро пер опту Ше ти Щи м о Біш Теж пу Ада ти
УЛ пи хи ОВ мл» ди ев о піхт В тар бут шум слу і» ла оті Чай) дощ сти ух: сам М ЗлЛІЖ лу Ама таж ої М опи Ап су Уа Кл о ійІМм ві МКК У ееилу «п тру, що сами і при Мі дит шими спо їли щі лора ти пт см тів аж лу саУ БЕХ ТОК о сою паж фижЖ блауУ ваз осв бу ем о шепосУуУ діє тя ВЕ Ба як (ши Стіл мо 31 Пе Тр й и оФфжиї т 111 33 13 ну У1 1 дя цу ПІ у пап ші Ті см и РУ Бро Тіє пу Бл тних ім Бо АЮ смом Є щу пк Оу ЗЕ гутях обу т пишне КУ оно на нн ин нн Не нон но Шо
Оу Кб ошів пі їфіФе ба біт Бжхс тож осьУ Уа лист оліУ Піх бів ші шуй пап ЗО тза кі сля пд жа пили ті пи я і млн Ура тили вл тири сля Ме їз пів іу Чад ста пи їз пі Му ді ТВ су Аза Тв т» Блр ле ху тях по ох Ід ПІЛЕ а шу ФАя би у вул шу ТІ Іл ха Стах щі дит мм тут Зал мят пмпову шко сім Зі тає шоп оуу бал Бе су Блє бал сту Уві тп
ЖИ т хо прідя добу пиши пух буру ро щі фс ж г, ще тво ла у МОХ дметі
У Аз Тих сліМ бжробіп ЗіУу Кжо Фів ші фії ЛІп ЗР Ма БКоз су 345 халх ал лоКо СКУ Мих хау пд тт сили МЛ пору ау мл я Толя ло КАХ Тло МИТА ля УА
Кто о їмеу Сам хпиф ТК ОшІМ Бу бло Май сла су фі ШрвОУМи БЕй пух Яка ї25 їв пляшку Жаиту пХю бедо сті Щі Блхї ії плрч Чех щів
Мах жі хви лів бі Бак тах пах го бій гу Ба цю су боемоів
Зх Ук пл
ХХ ху зи
ЗаЖ БЕХ ШЛМ ОТ іє сів осху УА Бо шЕЖ ЖжОо Хі ЗАМ Ам ТУ УФ дІх пи та а
Тире хі для шоеу фра хи б Мі мо хіт Ж І ер олія ую ЗЕД 11 іх
Ех Худ юку и чіп шо КО бхІЛЬ ЗАМ Має ЛІТОМ жу осі у Ат дош й дк. ря 3 ат - сотя; теку у арк іржу ПО силі тих тя іс тя ло ту де Зав Фея ппЕ фу БЕ СО сіб Бл ФшМпосіуМ Ті зРй бу Хашж спа сум Ах ОГи ах ЗИ КАН ки Ту Чи. ло ом пью ил ри кол, рани шо нон нн АН а мом ФМ Стах са у Віз хих Паша Мп стіМм пхіщ КЕ бум о ба пи лах їх Б ах, тів пін пі сйлр ріж У Дід ту ау Бшт ші щі ту бімй піз уві пек АЛ ж ААУ тий РОМЖК сні Су ОМА ДК А У Кп мл пабу ТКА бкІ МВ СІМ ла о рано Б полю єї Міо сут вМрех лож ти йо ки Ж ЛЯ КТ ою рак де р кт бою ся пупобпіх діз бів о бфУ Аха Біт піу бо тв бу Би Мах оштУу бго ій
БУ Сян ТЕ 435 пу Чаї пав о бді пов пу гі см пЦізю щі Лук о мжіу йа св щих ст сід ме ліси млі шоу укмує з жо Сі ха КА СЛ ху. Жулоею клол КхаЛу тп БЕХ ап
Чаї ще щі бух я щіяж бршо сум для те пу прє Збери кі бліх лід
Маї бів Бі Еко Бтіп Біт Тіш бів сту ХУе ші лім Бро ТьгосСіу Дій сих дпа ща
Ех: Шобт мя ж ім вл о мекв ші іа Чл о зіІУ важ ОЖвВи пиш ші ше Тв Хв ЗУ
Сх кох кпк, шу пня пУїя; ЗУ фтруво су фериту ЧА 2 си зи | па страх ер дю Ки ІА
Бко тЖне Зіу Мі тТЬх слу Вл Так опіш УАЗ) о ТЬт бі Бро Мак щу ум мг; соц пай пл я ж
Штаз Ск лях Же лаком. тт фею; ік й дент иа реа ре пт пз м Ху
Бо Ауд сім Бут тк плу Еко Тахо шу што Лех міУу Бо Ваз члху ах пра пл Би сл пІХ НЯ ОКЮХ КІМ тру турі Ши ббюенм о Ехи спломи Зк. фо В ро пет, ЗЧук хи діщо бьих сф В:
ТЕХ пру Бо Вех шу щі Бо Бут су кА ТВ ТМ Аів Ж Зір Вів ти ШО БЕ
Тв щі Ма) ЖК Фіра вет Чис пах Ді жк піз бйдте бик пу аз ву
Твеобку Мазі ТВт о ЄбїЇ Ав о Тв МІУ Бій ТЬ»ж бСіу Бех тТпхожуУ Ма оте
Бий де -ч срічу Др сть сут (Зо тах й в пр пли пут хр М С та лк им 41 пре о у се ВАЄ зЗтіш тВУ сх У Аа МК 3 КИ яю АЙ ЛУд ус с пУКІ АЛЬОМУХ косу ши ІТ, пах ХЛ МАЛУ мрії туби сла дк лу бури сх ми ім га вух; У лих тат шию жу фут ДК вже паз саУ Бу бій іу ді бів бу 2 Те піу вро БЖ бІУ БЕО лей щи що мМ А щу пн яю МА Кт ут. пек у я хх т хр Ай ке п хе дл си кую шхпопіб мі бів ошіУ жо Мп піУ ї18 Зіп обу Уві тТвж шує Аїа тв в що; дае
Й Ям рн пу. гум джу ЩА дос іх по пу зе сто щі Вро бін обу йо Мі «х сш дж а сх» Бах плн о су Ті са ші бро бід о біу во іє су» яр ту т ЩшБЮ їни: ЯМ ик фелу а пз Ж тм о юяюодіє и п як пмш во яі1ах ж
Бклотнх біуУ вто фа сіб їіз бів обіу Козошіпйстім ЗеЕолів біуУу Ті: коту п да
Мене» МУ а лоно яти що и МУ у. па ТИ ях Кн ИН лог и ах Ми те піп бі Аїв о тТьи пфу ШІм ТНя У бів бЕропіж Бі» шу щі 18 лін для. сл пес.
У БО ко ду бе пад рогу вро біо ер гий ск деж Зі гл пет Пк пл шоу сш жях схід сві вро ма щу лийм МЛ сх РАХ Ам ля ПЛОау щої хх иа
Во пБо го яр 2, ук т Ся з ка ни я Нв кі и Не А НН
Хв ат ім іме бій зіу бій Ті шу Еко Тйлоліу тк сім бу Би якою чі, оц ми
ТУ ТІ т тд іш фо пев ши аши што оюіщ о Хі щу Пє птаКе обр щих Бу ді зіш о яжУу пе шу тткокрцдосзіу ЛА Емо Бе бій ЗІ КЖО Уві
ТЕ Я Тх шля АЮ мая тля Зо Тит пил кт фею Да ек Я б; фля у лож «и спро УАД СТ і Мах піч шу Бо сій бі Чі попу Бе ол ху - а зах сту т тай ек тлрто (ца чу М ТМ тілу ша йо КІ. дети Це ре сте пр піл Су
Мід ше мем схід ЖЕК лу БЖ АЙ шоу тус сем у АТО шАВ А ТОМ брвогх МОЗ що Я піл гІрля мя й хи спі сб 317) Від У пуєт ді ів слі дід твКЕ сор АХ зЗяа лй нілЛуУ па Мт «ЗУ ВАВ ох ль дЕи їРа СхІу Ба АП Е пане ті 780 пі хів спа сплу Бі ші сі У пли лів пу Віз тик ошію їжа м догу вх хх пах до пори фе сіл км укра тю лиц що ПІ АУ СА тов СКЛ у СМТ уреу ом печі бок тлу блю бу Мт ЗД пу. Блез дп м АІіщ о Шіш обу Біл Тахо шуу вто
ЯН в ув
Ех зах ща пий фури й тлу фтор йутія тлу йМещо ди ст дол ик Кі що ме мех ФКу діа сій лі УЗ обів бі Те воші дів піп балу Жовта о ши п по вих ха ле відо тіні За по. ія тах тата Ж мі дити лиш лан У,
ІМ ях с су мах їм бу ММуМ ха сту З Кл бсі смх о. ЗІ ду
ШК по АВ пон Мі бут ЩО мо УМО гі Ікру сили тов ча гару улов (п гл
КО лю тхір мМ АЮ МОХ. шу М ОСТ им хі ДМ ЗАМ КК У хау ОМ ри шк паз п ве Шо лах Чи лу полях Їрер й тд» Шові лев сл футу наб міх у і я хх щкж ад лик пім ро хи пу УВА такою ВЕ СВІ пЕшУ Ма КАХ ОФУух тик, пн хх пд ше ТИ БУК щи змату мету Ттт2 ТІЛ феету ДУ ШТ м фрі йо мк ую хи лм мі щі па шу су с вто Аішо сі» Буш сих пху Блб ТИМ ФІ хо патоу
ЗО че пу бек А хи І ек тили ване. ШЩодхє ХУ, ша ли Мк пило сим МІК «ля ко діяв ру Уві лек см Бі» леж слі бу Ко Біхх шу ого Суп ху пл яки кл
З пах ЗІ висо чИт Мія Мол ТАМ тт ті пі яи А Ссркаб о сурхх ма що трах ІЗ ЛУ от, дхв отак тіж Аїа тру плду Уяі ТК шу Ав Три о ЗіУ во ЖЖ сх ек туї па так, "ис граю па ри ші ху ул В Вляя Мод Ж ТК АР хо ту лк Ак
Тв опру Чі хну фу да Тл бу ів туп пу АвВа тнє ліУ Уві тву поло ЗЕ яло палке ем пі пі рих Моро ша 1 іт ліз уді бай щі п ту Чи іУ Бей олій і БЕ св» БіУу із опійп бпіу Узі біп обі щіМ лі8г 519 335 то яд Вк шо. мя суху Ку аорти тлу т до ВІХ и Де м. ПИ лу СМОфр ко жк т ті ла
Ж сви ау от ЄМ слу Б АЖУ упо шум ЖЕ МІ СМ лю ІД МО У п, У зт тки сдлУ йлу тіє (ху жо йно Із ри М, ти РАІ ту ни й сх шХхУ вда тп ом від сів біу БЕко су шу 118 бій сІУу Ехо бе тату Іри, ща
Зо ЗЕ ча пла соту им іх рити Піни Ок. Шу паю я те ТІ у лу три роті пу чар охАш о цуЄ би Тр УКУуЗ мех я ЗУ МАЯК ОСАД МАЮ лю рн шоу пух; я тех:
БИ ВЕН МНЕ пн в кн пр М А А ИН М п дою ту сту
КО ат др Дав І САМ ВО Твхосту Вів тилом АКа тів ту
НУ зп алі
МУ МКУ уч пу гу крах та пі и па чі бір т рі ферм. ву шо
Ех осв штУу 1 іп Зі БІО ЗіпозЗіМ сСіщ дов о пуу БЕУ ТВЕ ШЕУ др я куту т
НЕО Мо БІО тет т пу пот мб сля г пре пом жк тв Тр: Сб плоту ля
МЕ ХА» МОМ гл люпослаж іт шітросалх же самому щи ше АТАМ тла ім а: їпа4о КАМУ МУ
Вр отвЕ о пля
ЕМО ТяКк о сМу пуп, пом ШО чик ли пиши СА сх юю ща ножх уже ту пада кт, Філе до де ит уро сотки
ЖИ БАЛ ПЛ Болі фе АТНЕЦ ЕТ ЛЕДМЛЕЄТИ ТОД р НН не ВУ паю сим код лотами 114 мо ІЙ мя йо жах СТУ Іі ам да сн «І
Ме важ гро пу Мід сво Ме блуз фу іє им дп зАДЯ бю Ми І ій ц -є 5 щої ДЯ А том дю їхню щро гхиї Тл пу фе фугу їм бро біт тік наз о АкМа ам дО БІ пло бен фат ше с Ера ОоМСжМ Бо Бе гм ІМ,
Зй ря п туту Мена жиє. дм: ее, г МД ру Бра ут рн Феєгу рю пт У
Бл тий СМП тлі ЕІ Ба А СІ У
Сі й «КІ ех
З е И я
КК шов хе мА ет є плели «шій шасі леЕ зевІіптиалештеляа шини ту шани» ИЙ
Мат бе сти Тай РА ПИЛУ МОВ тУмтя тдум те ше ра За Тиму пли Мід
Ме дзу дДзроїша Мій шій Має Буш Буш Хе ер о шкя Заз бейл іа Бі ч г У Як шт ді тії. фата ет т Я пз шо фй ки м псжкю ді зе Лінн КУ мА є
НЧлп о Ака шва оВвлжв о Бит фот биж: Те» МУ шо шо Мей Мб Блбт Ку СТЕ пи ле за пи дл У
Ба шля. бик Бу зу ПЛ Ерає ія ще. Лриу Ля де лік, Щі Дію тро
Ехо пе Таж пе Рго Тне бі бек Теж бу Его ТЛІ Зіу ет тв біх
Зп їх дв. 5 ВІ я дим ЯМУ гУрлЮ ліф, ЧИ путАх діа САВрм. ста ді; ри Іри перу сьо ті1зх Ук
ФМЕЖ АПУ УТА У Ка ЛА ТІЛУ Кто (ЕКО ХА КЛ СМ О шОМИ Ж пт ЗІ МО БАТУ чл кою, ша
М. ли ше тТвх бі ЗкОо Бра Уві ші ТБо йвоп оуши Мзроїье лі тТую Зал тро Ази шт три ої дя п ТО ТУ Сн вв о Бк» Зах й Бали Узі век Ах 115 АжросіУу Тит ню Кв ОТВХ Му п Зо а тод рю трек гло ек хищ бурою ство жому, ди, ще то1Ах Зищо Уілв Хі шт
Беш хіх длпх боже Би Уді св ік вив оБшб І сь Уужьостім о яі Ва зх мае я
НЕО; МІ ах ек ОосМВХ ХпХ ЛИ ДЕМО оце УК Ва мі І ть ша лек мл ЗА ХЛ з ух хо т
ХА їго й пер ЗЕМ Ст Кума зр маже ЯМ о доте сялзує ЗАМ В Ом Момот сти дк МЕ пед ож лів Ве іш Мпех тик оджЖп ти ма Ома мів лек Клея Бест Ма
КІ зів, тп
На ЗА а поря пити Кт сбтулу Пизих лою з йттй ау вах дек стук пах луду; логи: ті, сху ЖАХ ошАВ шу Клео бу Улі ба ва ЕТ жо сш Ж ВОМ мМ Б Ату
ТАТУ їла Що 1850 тими МУ ія де бут Ліве дім демо ям ла ст зла тіше Тл Ф133 551
УЖ жа уд жи Ух Ба мат о йлщ зи сл В охакоУмлх іх» МУ ЗІМ ма Уу
НИ шт че вих ТЕХ Мі
ВЕ о дшп їж Мі Бчн уп тпм ТБ ож Мі ЗіУ лих Вип о Бо щі му 150 185 т т-р1 фл ю хидян еху ЛЛухх пиїяю дет, Сток Тл ср Я лико щує т Тх
МеА М Ж 1йхшИ сК Мч о СКпу йсаїь шм РМ тут Ум МЕ ле опмза У
Не гттд пл,
зх я шою. Я споур д тт шо сіті с) Кри ди и У щі Мі по най о йеш Мах шен лах ів Му су пху УйХ Ей таб Узі Узі вів
А ЛІВ шо трас ті кро ММ о УмраМ їм шва беж би стізи Шщі й ше Ша: о йшмх Хом Тим
Твх тів ЗКО Мі бі дей Вбне Боро бле і Маї бі Ма! о дябв Хе Лу пі пап п ха пив сну т оте я у Вт т михає ат мі мл ма сдж. Хю цех оляй хем тів туї узі УЯї Ая оАВЄб ЗежЖ Ів піж ВЗВ ла шах Уду вжи Ра тва тіше мот. турі доти а жо Сп МО о да ро тож и ртту АКА --іЩа пл о мАаж пп оп лоКВ г ХВ зища сп задом ча косу ХІМ САТКЮ ро зе ля ши ТУ ша дит бек у щ пллу мо Мхутяш хо дом бух дра ву ши тер во смутт ля дес сжОо Мі Зі Уві божі Авип сем опт їЇМт о бди фр тує туп охщі 275 ов, хпиз
Оу п кою. мкА боту и ах ЖИ лих В оч У Ж гія. дл о ща ул ад пух спа
Ата о Аеаи пам Мат Во Вли Дав о Тїє фас Уві ї185 бли Зуу дай ТВО Аяе
ОО Я по тк лиш ост овя я чию тю ких ху сл тім рю шию их ту КО Ал тех кі цач тТпУ тик оті Бо Уві слу тах твА ОБО ма сім Мі п4у тах та З зго тат ціях ло Шу ЧИ дя жама лах сліух. Ех де док ду де учення сві бли бек Чем ТОМУ дик їв (12 бух У) Мед о Абт сем Див» о ЗеК Б 2 ВО ах де хе ую СО Ст ру р; І, Фах АЛ дя стю ла ЩА тн кед
Аж ЮА діт Мазі Хі вени ошку Му АїТа Аа Мт Ма а АВ ТВО, 43 а ІВ
Тит ал КО щує бука ул їх; щомиті Ух у Тк Хо блудю у
Ех оМкаА шіфФ дай Ма: Бк АкКслосплу Тюв фу ау муш БКо 335 КЗ 55 кН Ач кри. МАМИ шо «да Во
Али ОА ОТІ каже Басов язіцепхуернеийная тапо їй плюс, ПИЛ вих та ли ре щі Лтд дових Шязух тт як ті МУ
МЖК Ат шАМ Кле бам о ЗзЗзуУ Б ла мА ем А КІЗ бу Сех А У ї. х то М бл Мою. тота: ой ебеачо Зк еуя ету Мія т4оно тЧче: лик; Мі Ту па жах о інни Ееб бжує М КО КЕФ опе сно БВБеЄ бло Литі т ХВ ди ст ЗА тили яд туш Кан «ші Щпіном пити вВБваатізпле звели вяз че ОК ВЕТЕ
Мей о деросзіц ме ре бек о Бпе Атвд Аїд Бей дав о Боз СУ ет їзе ту
КУ Я а От
Бяоз ба ви Бо; Бус Мая Бе Бе бпе пів ба Вла баг опууУу Бо тик
ЯН пе Я хг даю КД пт дур СРЕИО Фтіею фунт пк п шнек п пу яж сфе ери ФТІ; яку ШЕ СКдХ сла ше о ІпЕ ЗаУ Кс уп МУ ек пп оба пеЕ жпХ слу
У Й У
Там ТА ДН Су. Дод. ох Же, доля лю Ліни Тур же Ти Тис Жои ТАКояя
ТИ пу осаду тих Ушб ашІ Ку бів ба МО БІЛЯ СЯ ВЕЖУ бою Є З пу шлу шо. пит що ТеТя Кк. пошоодовую пузу жу тю ЩО, птдящо ал еру Спи ія буря лото доти маю оди
Ве пий схід олію ЖЖ Воля УВО Жад осв Тит оЗій бали впловат ТВломдей щи тр т, ви
КК шо ж Ах
Бір дич ко ли (Ж хи типи; ЯКОЇ каш сплю шик бачду пен би рі
Ріє Бе Шах см бій хаі Бзи обі ДЕ БУ Бей о бтОо ТЕ Ехо бу УВІ п ре Бк тт ДАВ жікою. ДИми.: худу ем думи дом тя ке сТаме; Ал пах бив 1 думи ві сла ще Кт; ле лай (Мт бл КАмсб пжу а ж аю МУЛУ Мі Бут м МУ Ал їх Да ЗК Холм Мк о й йо Шдхе ДТ пою ЛУ пе ОДлолу ак ку Жом цем Аді мі її ТВ о йне Аза дж слі за Са Си о а Ущі Ве бум с алу ха кт,
ЕК ї55 нич мс дл жук тут їУвеч сітл брюк ря ха их чарж ва во шею сп: Чак Ди еп кВ ТАЖ сі М КАМ о млпу А МА сл х хи Тожрлоа шедопюву бик же) їли Мих па пд фут Тд.т уд: КМ клі дах ло тм ул у пром Мови ги ки паж Блое САшЖ Увр Мат ких же ві хх хе ТЖвкоБівз ух вза Муз Бк
БК Ян чих ап
Ал хм каси м сллйМ о 5 «ил ОТО чаш лави ю шля зудаж іх дит де гри Я дит ух, хи МАО ААЦЕ. ЗБЖІ ЦІНИ
Ой у и СК, -АШИЛО йЙ вНжу Моб ід Же дамо ит мет нт Бад пе) и БТО см бет хів ДУ - І Ух як
Те ах і жк ни А Ох Мт б аю Лв мир банк ПУХ ко тт цей Бе Бут мах сп бто Сблзе бій ге Боз тая жує п 33 зт
Си я и мА ле лихо суз
Аня щі Ум туш АЖ К сиїйх БайлідхЗ зезейттейиевиваи
ВАННЯ из хо тю о лодує бі Ми Тоді фяЙЕ ше тва й я тд тя ех бло ши ТУДИ
Мас, ложшух а ме Змче мех бек Твк Ліва тема Мп Бляа ШУ Щек оОКІув пух щі їх З ня
Фо: ух теру леми бли пут ех тка шляхті уки ку пою. у кра бі» Фу ТІХ
Елих ЖЕ. доамО жу. Вус с блю БУ Бе щік Жне обо тах пу Ел ти ях ні хо мл» ем пе пе Мн и з зн ую ля ше гі що у лувіУ оно уд: піч педожиЕ шию тиж таж буру ро аж пу ше о пре щім ЕжОо ХБІ бБау ї5 що 5 дозах пе тк тив пу и дова по я и Прак прах лето. юю. ри ве дай о жакоіу Тих ТБ са Аа Тв су шо ТВт обі Ка тих Ку во
Те мем о Укпу АХ 1У рве «их ох «ша їА ВЕ «діжа ладом чих мзоїкнев умкіпевстеренха са у пишую тод шля ую ще Б'ш бі сюда ХУ там долях иа сн ШИН Деу Лот, маю аа шелаку ФУШЕЬ ОЛИ ст Атю ж Оу КД Ми Ж ж Ку ло юхя 1 5 ія 15 цевуоБиєФ вВапоїму 1тМїже лушж о Вжо ТУ Бас БлебоБлб Удю го ди бЗіу Бін и 2 за твЕ о ЗРру дів слу чт, парк а зе еВ
Кене лай талиМ о БІнНОх оре ОК ТАННЯ НЯ сть шати ЛО же ТІ ЛО што В мА хх шо сто про ун; ЛодрІ Ме пла дова ди Хрухі лудтр ню Лов сф Од т мех Ву Зі Ві Алродея ій оАжп дек Би Ва шес Аа ЕМ Ага 318 я І я з а - и ко ше ооввмю Дам отемі Сб шля фік, Чу блуд дом булу у Бр ТВО пл се шосту й И ЛА ам РА У ЖОД ТА. СМ И те жу ХМ жі ТУ СМ ХО ку. ЕХ
ХУ їй що тру. ТІ бях хи: пили тю ри ря дак жу ел) ди, Ше ушу Лмиту САТух Вл тт о сЗау ті Ім ТМ тн Зіу Бе сеї пу Бо шуп обу жи УрБх бзу х5 0 о
Яни УТ рю му пом писк КЕ ля їни бух и крах ил хишюко ми гто зЗіп біу вс Ак ю Бпе о біпоблу пЕо ЇВУЄ бу шив Мет оЗіУ БЕо
Тв шум жТО и бІ1Уу ай ша пу тео вій ліз Біла Ву см ло Мет,
шк че б, й шпй ІН ле па піну ри рю кю рих пт 1 з ФТІ мо СТ ТД люки пз о ФІ и би фут сп Мая СМПЖ ЗУ біо сві сзіу бл РА МАУ ж свій бу мех ВвхУ Су ще чо ВХ їх КЗ кт она ен но нки но он Аа ко ВИШНЯ п тати ха пів пу пу таУу піж йіщ жвт злу Клоун пр Чалопів ЗРУу Бе зп кяе я в хау ІМ дуби щуки бух У фа рем ліве МО п дв ти ЕІ а удо і з дк гад. (Ех шипом у жа хів Зі вкУ тТйпх о шиУ Аза ле ія Вів оба пам гі ХМ хе як ясу іх і шал изілх жи ла тля ім пло мех км т тк Для Мел чи кг УТ: і би Ха шів Штб змо лів бі Бк її ціУ Аха ТЕ о біу Бл обі бі їла кож да
НЕО я ЛО їі 1 ж. іх лу щі ших що лоз для тарт: і» вла тн цу цик
Кто Зі Зпіу Ха шій о Фет Уа б у УДІЬ БКО пу Ава тик БІ Ех кс зок пе - ха аю Кл Ка поле сім лів діях Зі йлтв пт хе ї1е Рая щі Бук пін Мч бу ек
ШТКЛЬ ХУ ТЛ бі Ум АЮ ІА кОм ІМ жать І у мл дз Шу ОМ їх и ОО пута вони, шу, плх щрдо тих бу зл лук опа пил тт пив ли вис
ЗАЖ Аве о бтиж Те Бід тих бху Ууда те» шЬжЖ шій Зі ЇХ пед пу Бо
З пев ки;
Іо п Кк чин на о нн у в НН в ан в и в НН ан о «ЮК Зх МА СКЛ шум М ДІЮ І 0У ЛАВ СМ ХУ БТ дн сті М СІМ МЕТ зу тва ЗО соти Уж Тк сти Лежую ураху. сл хя Жлох сих ут» Тл ай п ка и них бто зЗіуУу Кхо жбьу сі да стлк Бі Віа уве бЛУу Бо ошьє ШУМ БУ БЕо
ВО пі я шести УК и кдд. Ти урн Дт у СИ й и ДИ ТК 1 ха СВ, Ка и дя ХА Тут
Пежо шум дж Ж ЗУ Вів Жах пу оАЇД Ти ім Ви ТВ лу У«ю Та пп пай й ай йуїяих шию йо лих З Ст тру я пк у Шик тає Уфі ж тр г яку ши лака шк ХА лІаЮ сту КИТ ЗА длУю БЖ оОлЛЛг ЛІіУ пу Бл ОшІ зап вип лют рен нан ес нн в НН и не оч нн НК ни нн Но я а МУ ху Лоу Та си А неви ни ен п а по в з В ВЕ
ОМ тХт М подо Фокля му Се вугрі пи, ІЛ ПІ Я бо па прут Спр У гро І те хе
Мхе см шко КЕ бдУу Бк осі шує Бгто бра ЗУ ха да сум те о тко але ов по ах хх ко пріду фер. біжк пух. Зб тури гріти ху тА о сУєс тл- й я ща МА би щу пу Жим стих сім шві сне оЗіу бів шій ші РХБ о ЛІпоЗІУ МУї сів обі хоп ЛАК ЗО боіх ж Мі тд: лото я шлхе щіщо Фк о щля: дл лі ра віх МЛ ли іш «ТВО ХВАЛА ИЮУ Мои БМ; МОЛ лк. ДІЄ сзА М ла МУ ЄКУуХ схКп об А Аж,
Зп кики вх ти дл пери ія ту ут рю уки й У М фу Я Що том пут ло сїп ої вів тів обі КБко пів о сх Ті тику ія тах су Ак опів пої зд. Я пох 335 СМ при о вігує пря су тлех чл ст АЮ шен утлу у тк УЗ дод р МА
Ам Ел ШО і М ав з му ща то меж уУ ХУ лу Ал ЗВУ лих 345 34 я те у ую лю фр их б де МІ мо ху літу Ммшю хлрхя полку бю тіл м пек іп о пау лі шій су бів бік су Бе Ме су Алроїів Зі Буй
МКУ ко ке т сія лик бу али Ше ЛЮЄ ді бом ще тіся би фо тиша дв т пря тп ОБУ БЕ СИ пуб Ей шки пі Меп оРй бу Бойл опа сум їМе зи 31 з 5
Кри А О яка Лю Тих щу й ри До що мл сатну й р яллю и т; пу пам мах АС хі М ШОЮ Ат ША АКА СК у ОМА А Юм дл А А
Ех пп зо шо тів мін Ммацт Пси ву бі ста у дО ЯчЧУю у бух ВМ І ВК іш спало шаш пекан сіУу ВО іє су щі тТвж вЕх тросі су БК зи дл ших ви ях КЕ пла ти в т Мр ло, аж т к К у ие беж Дт ТВ пупобпім їіз бів бду То яп лу дів бів лу тож так У Ат та ж БУ и по пав ощиз ри пу со дал о би ах гі зу лицо У УМ дк Ті щує пуж Аза ла 1» ВЗ ХаУ сту вд сп опію Хвні біб обту кб обіе с1х пОже дай Б
Зло бік и бум рр щоежх ух ум ждляю Ай пра йоряк сти стіл ятртю Тоде
ВЕ ОТНІ Зі їхо Б БіУу Бо бій о шіу Уві піт; лім Те обов осі Ер дО ас й их Б ше борг ух три: СИХ Три опису. Мф. лек ант МН жилу рало СИ моху сти 14 хів обу БЕб лм шім жо Мат бу БЕ сан олуУ Мак осі ші дів бів пе кот ут, ств ях йти ру ах шим БМе віп зі Бу Тв лу Аха сій м ме сапу ВК пої
ФК обр доитх л КВ што пет ух ни пуб хи хм ха ит тя ди. ЧА я йти а, Чан я мол и хх, ПІ ух ТІ:
Пт лм хім іє 1 пу Би ТВХ шу АТ Се У лю овалу Бах
КО ха п чу турію дощ щи Ти спла ср ме мл у Мер фйтхх лиш Ар фур твЕт пу вв отТйплошУ під осві у Тит Тео сту Му Ти бі ХВ) Ху ОДУ
НН ЗИ воно пу бе Щі млі бек шо Бе доме ЖщЩіле і Бу фар ро ух сКр Фф7 ко бет оліУу Улі ТЕХ пОуж без дек о боу ліх го Вуз ску Бо тре о а1у
ОМ ай ох ра ми. поли Уже пимує ут фраки ЯЧх у пі А. та ня Мр ую рт ІЗ 1) пУККІ
Бали ля І МКО паю пу Бу ТК шує Кам Жрломів бро шеш «су щу шк пай я сли ко; ли Ух ще вхо Ех Сі вто отбмт біу Ба Тк сту Ма тТвлопіу бі Ма» Біу Вер тю в МЕ тру біз дя ж угтк доее Чл ухІ ЗЯдО хмм ах срряю Ж у р поїв зр пк
Те пі діа ХВ Бі Бахотпх щіУ Уа Тег по Аза тТпжх сюу ув тег
ЗИ вх У пуЖ о АХа сти 751 Б лює сту Бема СЮ лах бро бЗбм обу Же се Ух ве шо п па гурт ші ду та) пічх ркиа тв шлю мет ші піз ма лів пі ше чі шій щЬуУ Аши ії о ліу БКо їТВЕобіу Коб ошій сім ові бів обі БК пз дл дух сій ЗА ХМ шле ді жаш спла ші Тл ть для міш оце п Вт, Шою МИ би ді піп бі хаш сне пфУу Тл ТНя У бів о Жво піж жо ШУ щі ВЕо бін
ОЗ шле шах чо шум о Бке олій літ Вт йду Був пи сі хо лик ЇМ у Бл ут пух їх п Б5 яр 2, Ук ли жа т фени лм и яю ли шоу ПО ря т ТАуя стах в,
Хв аа ам сим іп зіу КЕо бів осху Ще ша ліу ді ТВт слу Віа ший пах дл оо ВХ я чрржо тффію дя у ле хи кі «БМ и Хв піл ТІ ду ія лу Мі Мі: ст фу Віз см шу ттомокіщ у ла пи опи пТБео вій і» Мзі Зір
Ох ва кад лок бачу ПАМ тля Зоя ТИЙ шин нн нн НН НК НН ШИ пу Бгто тви літ Має пів шу Биоосіьх іх Чі пошу бал сл ху ді пав тлу
СОТ ша ЕТ штат Ку ух ух ТАМ тт; пачку й пі и ХА ОпПЛеМ Море Тир сала стю фе пт Бр» сш ВО тТеЕопгу Ба спе шує ма охрм ЗіУ Без осв су Бо т пу ж зт зутле ФУТ Ффриг бищд: (21 ху Жде СРУгі 315 їМот Стр Мч; Шуст уія9 зер ТУ: піп срфу Еко Лви біл; каротин зву Бо тих пу Бо шій Зі Ву Зі
Ук, пух риф,
КК це ще пря хів пів пу Бо ота піу ді ау пу Віз ТАК ОшІУ Звж зд Зргу ха ТУ ре
Ме сіл у же вх пу ла ТМ шум Діщ ші бзфу шах ВОМ 11
ТЕ ТЕО БЕ тво ФАТУ фер, тю фору дю ую тт. ду т, ти 0 де пихи, МІ щО туу пт ожКу жк о тлЕ о зЗіУу Бі ЩТЬХ СІУ де тп ові ів ле спі ов ото вчи рх, т3о зЗіІМ із упо сплю жі типо відо шжмчУу сбу УА ТИМ бом мМ ех лух ЩО їх а тв. дій сни бо мету вує йід дей Аяй ви и піз пер дл ої ло
Тв діа тт бух пежх Ку АВВ о Ажап дай тт дз біу Бек оАма 1те лах пт пк пуд
Що ри ти ті Бох, долу йо тт ом кн нн но А о Но НН ня
МаА тм шевй о пам бі ХВ Аа філ Бо де Бо бло дан АВ бо 1 У пло й й
Митех ету ТТ ли: Ме хе дім о ща стр сю: фе см й вот ащ свщ у сам МАМО ІА У Ма МА ОМ у и У ВАМ МИЛОМ МА БУВ Села. АПУ
ЗУ що 25 двподіз Зі вази Тек бек Т1іа Аїш о бТух ТМт Ті Бали Т1е Тв Аза АТ
ДІ сг сс пом Жй пол
Ковит Сто МАЯ скан Пи Мютт тори ха зт дов 17; паху ЛУК Тег кл МІК ійле взшМмосуч ФК сжЕ лиш АЖ МЛМ УдА ОЛЕЙ ЗМ УЖЕ КЕО пт Хв шу пе пт; али пам пяХх а Ії ЕН
Тв хів вВапобах Сто) олова ві Аза Хе» плу КЖевх па Ай дід Те лі
ЗЕ пай позує ря ша Ля нен нн и не КН Н безчх її дв АЗИ бо Мій дів ші щЖек дія тів пет рей Сів їи БВпе пі;
ММ пе ЗІй тот то ад жи раю ТТ ти ро Ттх диз и ие бачу ул кодом тою раз оїамх Аїш Уаі Ат уУ Бо Шеротиє тн Тк Бу Зду Аз То бот зі чпа прое пк жи тк, ли тн лик
ТЕЖ Ка Іде лдЕФ ши лах
За «КІ пли ТВ ел» КУ о ИН сан УМ отже фр зу ее пз Ам шусти ти «ум ОВ. 1 р джу глІн й пл біо: ідея Ул Дорі АХ глав лив. МІ це ха Бі овл їлеш Авпостпома вел іму Хе вл Ем ее нка ім Віз дол що Лід араб ги дах ул ролу жи яю Мати КМ Сбищт сб медик ек ух,
ТУШ АЛ МИ ЛЬ: ошОИ7У. ЗАШЛХ ОМЄМА дів бзАСУ ГлЛО2 Олю дже сш ли ла МО руни З Зо
Бл жиє тпло ем Ба ХХ Су 3 ач ло тлАме о ще пи роя тки ех З з чих БікоЖ
ОД Насізуех пуття соки лег чих то їлют сша ши ит пяти жа ло плит 1 жор сю тех Мр Фе хід Щит ВАШУ ем У УРА. МАЮ ЗІАЙЛЬ пет дове ТАЛА КА И ААЯ ЕК ЖАЛО КОМ
Я 5 то 18
Мевовіб бен Аа о вто дав бе Тіз бу Кре ТтвКосСвМи ко ко лі Бко зл хв Б ши 5 зп
Три ЗУ смт дм фут бви хе фе ту щі рі бля щу дна тру ще ро спе тр Оле Бек так ощіУ го стих біУу поУу лак осіУ го тА о Угу
Ко 50 зу яп Мр студ яд буті АК О пу ЗІ Мр мо піт бен, СЕК у ЛО Ст тА фер,
Чаї Та щоля бука тк опту лі ТВ сім го ж св Улі ТБг о сує ко
ЗИ 5 1 тпевржо туба ай сміяяє фурхи лаку пкиую тла Цю пкт фу кю их ЩІ тк їх біу чаї їпкопуи ба їм обі» Маї тах о шім БО вт обіУу Уві тТВу ща та "те - а т У КО плюса ТАМою спіл ЗИ Лис Мія йкетюу Сер. ЕТ: МОН ЯМ СПУ пеню в І піу жо бек спам Малобівю У БкоотбЗзУ бу УБіа тат шум шко ШНЕК й у пе п пе
Фоало спія пуїях бухт тууко М'яч Ретро пли би рр трі фа тів сту и бах тилом бю Ж слу Чаї Тйк сушу с шшо м ЗЕу ай вах ум Ко я пери ум
МАКО ІМ ва хни ни не нов А о НА нон о о а НН и На Я
ТвЕосіуУу щі Тпгобіу БЕо тег о бау бі тТпх шуцопіу був Ге ух йяр 133 Ми 155 тт йти р, бів феї; Мт бфрм деву Март Тк 0іужу МІР те ті пі щи п В З ВНИМ ЗБ ва ЕВ о а ВЕ ЗК В ВС п АН с М ВВС
М КЕ 129
Жве мат лігу Зяиї рам те Гі дів дає Ме бус хи Фві сут бер то
Твхомві іа сну бі Тв БТї6 Ат ВОЮ лм бро ли тбвк ово Ббго у тав зи тут, де
Ало 150 Мхл ке фіто буру жтдхур Ум ТУ тля рю дух зл Доля жовт МУ Тир шле уд
Бр. ожае ша бо ЖБК са Зп шеф Уха Ал опе ДМла їм; Майо ах З
М не Не; тавро Воиту туюік и ик реч зУюлх дя дк шт, Убошосхсру долу ХиИГО текоуе жу
Хто Вр о сдашЖ жУавротТиг отак бе ові УАЇ олово хХМе шаек ою Ма ХУ БІу чик яп, ув
ЩО кл ша хи уїтхі ІН Ств пає шу турую фу ба се ра рони Тим лиж і В
ВОМ гж Ппжеиє БУК вхо їу Буш вхо кає лі жі ХМК їжа Бу Ху я п бу ех
ЕН аши ши дошию ЗЕ сія до ур би пу тпкищо дж луг ун лог ж и и пи т сдовї; А У лу дів шуй лі ШУул о мта жи Вжц Кам лі Клео й ЕМ
І ШІ пил
Ін: Длв дів впе лів лпіу биу ТВромад Щек ем їм дій йеах дл піт
І Ат» вла Ела 1128 ліу бех ТВ оМаї шек шецз рем піз пех ли с1їуУ
У За п ж тТехмо бю ЩИТ Ку бно Шоу Вих. УКЦО 1133 йно Лан мії т поту тла бу дж А Жло Укжрх та им о ут Ам сла СУК ВМО ІМ ХІМ пак, пд пк тим. фборли спасе Мамі Дуги бо дов бе ку ме чий и ла ер міну ді ги
Се обу тво оїмну БК пе Ава біз бак тт Мт ЗІ Мер по Ака 118 п ай НН ше муж тя ке Ж ех п Фут і дет тре сфррю сус сб іх Ке ко
ШКО БЖ лю мує ох Тео Жье Віз Уві Авт 12 отих бко ліс Тех мак
Ул деп ще яд щ Ко хм Ах «ті» хо чпЕяЖи Віда. джу Мед літ илитхуюі гія чим Васі пеустйах
СИН п ля їх па ще, Шл; сшіялю боуах ст фер и 2І1 по дю щ, торхк; Дошеку біжи (ж тех ру ТЕ
Мет дор оФуМ вда їм ге рій Віз дав опем Авт ЕКО бу де отав оду
Тала ТА яю Тло Фриз жу УК ЯМ Мету Мах НН ВЕ ку лк М
КО пом шже жує лах ож; Ж Уа см гл об х МЛК І а їх 3
ООН 37
Какьшкья Зо
ЕВ їпО коди пАНОЖ «пил иМх о папі ми пустим с Ли х хх, ау раки бе йбозжх 115 ба отці. би ри йо М стаю м аку фл жа У сх.
Мет гаю лій бі іє бух ваш дій піз Мем обов Вих сум кодове ху - Ї: хм яю їх т М М
Бяоз ба ви Бо; Бус Ха) со Бе бпе пів ба Вла тбпгопууУу Бо тик и пе то брія жим біт путхя Ж. три щі шк пк ав Ще ИН рі ее пом щі спіУу шк Тня ім із ТЕ оЗзіу бек лит СТУ Бек тн Біт пег Тпж осі 38 Я 45 тату ЛА Та г шою Побут йду бом тд тром. Мах ТА их Си сля лУМИА
КжкО жк саУу ехо тик о шім пек ТЕ балу бек жвк су пек те уми Бей щи «о ще
ВИ п шо тагоїхуу шва Ялту Ккб Жпх шу сб тм сі Бл Жах пу Біо тк
ЩІ Та їз я шлях лихі бохту тим ис фютоу тк: рек А ди СТ тою з Мою. пПую дос спимо Ей йшп!;ромед ршс Ваз о пі БК КУ шах іш ТІ Ма ух ех АЕЙ п зе 5 іш й Ура дл чи ци СА Ем ІЛ дося Дохжи Чари ди Мне дих бТпшО ЖЖ СМП од Поу Я. мет Сну св ду Ми мл гл па Кіма фу
КО Мах ке сбеже. біз 1 Мі оці З до п ж бю жі Ж мер кт хек я худ зав зрубів о Улі Інь ді АвпощіУу дек пхо ЖЕ Биз су дії УвВЕ ху ря нує лах ххх 1255 їж ше фуру жи ЗМУ Пиво Мом: фу тур ххх СА ЖИ и то и фари А ж ша св. МАМ КМУ ие Баш ши пато АНА ЛЮ жу ли УТ ук: май, їх Мих па вин ав и НН Не нн в и в Нр не ис Не НЯ
Маї ТЯ тах Ав Ат дак біо вдл ре Тлх о Ала уйлі Ємпе лимх Бій Бі
В М Ао 15 х. ді я ст ОМ ге еще ре «бю щорвео аву Тихи те ие нн лАвпобБпіх Бра обсіу ТК оМаї тах уза тиху дія ШОК оГбеб їшмю йшло о Зшх Бо 155 ХТО ТЕ пат вон нн нн м а НН НН о а НН ВИ сш тю Меб Від пероМаі Ту їзїеобїпе бів омаї ВЗ одУло Бе ї150 15 Тв
ФУ Ух вена 2 пиши піди дім паті пустих «пдв дат ються ПУ й лий сайт ми бує ами Зоя уч біг фі, риє, М бив бут Бех Пед; Пат Фк її жк
Ме дир давай Муш м ла ши Би Кая сдже ШО бла Бей оБат Же Ме 1 ї ТО 15
МБжи Біне Кб тп» ші шлю да сит З «пл ВОНО хпдяє МзсівіцЕ ЩШуспуїсв вки ТЕ : ходте жЕ.г о Те бод Та тек Зно лю ше: фа; сту Жир лук: дж жі
Медова їедш м лом і ЩесбуіуУ Бий лЬХх Бпе о Блб вт» гц жо пеЕІ ха я ІЗ хх ях доза би тки ему р А стіну. ол хи ЖИ сажу їі» Вл рок п юю Ах
Ав оБле БКхОо тих бі ду тк у бйц ум бСду Віа о тТвк о шуу У ВЕ пи я хи и Пл то ім дій ліуе йляю вро тік пе лає ню й троль узі дня М ДУ пом Аза сти кі ВР их пу пут тиж олію Бра ло Зуу сом Три шух 3 4 45 бутлі Я у пуєхт ПД Фет лях Мід о птв тел Вл и сті хх тд Бу ях Ух пе» ЖаЕОСУф За ТМИгОліу Віз ТВЕ слу Вів отТпх пі піз ТІ сі ШО пла чк кл тре жі лящ ств жиру до т Мі М ймдая кіля МЛ Вл хе М лм тт біфу віз ТА ЧУ Аза отих у Мід Убх о спуУ ла АТ ПІУ Віа Ву ще зв чі ци ля ще їх по пк и тиж бліУ Віз Тахо су шо Тих пам на тих буу сп. тах озУує
І я ав як
Н ри г кот чехи Тк Ту; ПА жд хо Я Яча о пуряє УМХ СК я тік
ВЕвОЖНІ Зі шт Тнг оЗіу Віз Тр остіу УВІ о тТвж пім іш Тв осіу дій яв тир а
Аме ІМ и то кіфт ять ох ши дл щі що лк хі йо ли То мили Мі як лк Кв
ТЕ АУ ЩА Ом ші Аа ВіащосіуУ їмо У Ме сб і Мі ХЕ 115 159 т йттят бюруу сте Ук утри прю или А мих мк рію тую фут я Кн и сиру же жевто біт бів тих пі АЛа биєоліє Зі Тьуролу ла Тл хіх 125 Ти ц4й хі тя шоху тла тро бля ді, фра шлАУ ті Чах па ща дл чи до йо кат мем ДІ ЖК су уп Мед о штюу ОБУ сут оку шли МА КАТА У ка
МАХ 1уй вза ЩО тпхі суд іх кі: ін у хи ТО до ся. хр у КТ денну поко лу ідо тка «ЮК їх МАО СКпЛ шум вал САКЕ СТІ ЗАЛА МИЛО М БТ ЮЛ тім від тах
ЕВ ас те ви Мо ТУ пе дій лів ЗУ Аіва пт ши Алла тик із доп тад пу та СтьУу сх пі хід лів ЗІ Аза ХУ МУ Ада їм сліу Во ХХ сою ТБ Тих Ру
МЕ Я КН гло чляни фу ху йо лаку ля и пяти 1,
Мах отих шіш міш мк су суз ТЦК опо Ака ойів ла уУ Був ж по Ме так ши ШАХ, там гріх аю С хи йо у тую ле» ср жу ІА ДО Ст оу ти ху Мій о ку ше слу чай о тпл ші Аій отит бу сам олслх шу АвВа дів овіУ Від ОжхиХх ах Мане Ж плоті пах кт Ср. Ту и ки у ту у учи и ом а онов ліра «ТД шЕЖ КК Оед с АМ ОА ЯТаоталошту її85отнчт бу Уаї Вів сх Лев тах і І: тку, Б «щі са я шк тях пе ле Чиє пут яЯх Муха ТАМ піл ул тер фа СЖи Сфору ублну Мом Ет Доки тома уж Маю ря ка жк о пху Те Боб м м ід Блеа вого ЖвБі Адт се мя, вет ств пови ббюа дірнему М яю Хких темм Тк я жи тож тех, т1 тій рун юю ди т,
Тло тТук о Жпе тТпг Бе дехто вро Оу біс ув одем 115 ТУуЄ ТБІ о Влв йій яки ШУ и дому утіли жа до юр а жжи фудяя сбакруи сАжу. ЖН ОС о То бут міш хх 1
Втролім хат див шій Тут У ТЕ ОУлХ СИ Мулобені пек Хо ЗевЕх ЗА
Ш па ав саловцау певжо Ж хх о пяея не ТЖіе Ачи слиз, тів о Тейт Цап Ше сво Вка бах осбшає тут жі Ви пт вБпе Ті Ап лу тів Гей їзп бло сл вка ох Ж шПплй ік ул дз Зкдл сам Му тк: ті й стажу. СТИ. Тихі; бе чі бюмех Пілот
Ре; БУЄ ма Мадлен Ж Вад сАОсАп им сли Ме Мед Млр ода лу Бе пт З з кит, зач его РУ; лк; бами дІУ Ст бІ2х Са ло 1 я тот кам
Бра Бер су сМуж дему іт іш фі ії) ФО вве пїтфе 112 бід Бах ух Уа тує тку ше МЛ
ДМ ОПО што пз
Фев щінсю пух шен ха в ук и лі «ій Басів ЄцИилінЧтопяїв пай їх
ЩА ОДУ мо жо Іа: пу Ка дае поталу Мету ум Піо Фо тре бо ху ТУКА
Мей ХА опишу Б шім див ле озіу Бк лах Бва о Бте Еш хви бхо по ї Б г о
Лола же ПО ув ЗМ пн У шт ух ів М пт їх пй не жн мий «ЛА шя БУ «палі я сивих Бінпок -еШіяе Бас ізма Тбехіпцізисія ее ня мах БХеоскім Кхе о біш Влво БА шу бла ЧУВ Бе Ба ХА ЇшШМІ би; Фа чт бер Жан фуарсйми пл и Ж сбьяю фут Жато стаю лі Шмя жто Ка ж ЖешЮ тв жхоОСТМмЕ бу с ТЕ сю Кк Твж щіУ Кіш ТЕ біб Кая т соту пох йпи ж и теж р гір тм іх ект сн гу Се ду УМ Жду ри СТВО суху сеою ТАТ ших Ку СЗАО Ух ші то Тл біІУ Ха ХМХ су Без осваК Ом ІФ КІ
ІЗ БУ ЗЕ пух АХ тм сі» б ух сте може х лм люКу я ТК МАУС ДІЮ ЛДМУ а 55 З ку «тях вушка на Ма нон А І о и кН ро А Не мил: УМО ШЛАКУ ж ЗК тм ЕЕ А ЗА У А СК АКТУ ка рай г че щи
МО ях Гу Сжи я пд; уд фтю бю, т ря ую шо З. тло Я мо й ДО спін їі лу с3ри ств «ЮК їх МАО СКпЛ шум М ДІшЖ сі А САпЛОУ АКА ЮЛ ті М ЗаЕОлтЕ ди Б З полу пох, Аа ураху ті у ую щока пу Ен Ж до тя о вило тку Ти Ох блебу БО ЖЖ дж де тд ММ шовк му стажу ХК ЖАХ о шУМм щем щих СКУ
Май ло ни яра тт пуїхи Там о тку мам й. Я пи дет, Жах іа кл пт мА дя вич
Зах ти Фі Хей би пйлу пс Тахо сзЗж тс ів оБЗіу ТХє ТВх спа Білу пах пд хе
ТО Мих спакижо пд жк Міні ри ин Пе. и гу ДИ хе Ді Мах іт їх СРек.
ТвВЕ о сіжЖж ті тТпкоБ1У Ба Теж см Уві тах о шіМ Афа олье о біу БЕ ТОПх 1 ШУ МО полю ті ха кутах фу Тая ри ВК м м СТ ЖФоли Мри сбеяжча ТУЕуч ЛУК их
Біт пу хавшОЦУу Божв Ті Тип ТВЕР о СЗу йлнобебч Як тує Тут тет ра - ке, не я щл и
У Но Ух кое доб Аояфу ТУ1ЯЖ т здо дат бло тА Мт; дя я ол М тку пит (1
Ака о Атр сімоійш Бу пе гл Ту Тих Ар о ївт ВЗмойху бле вл Ап а Кт кі тост Щи рю да жи бе фл дев фе, еле ПИОМО ХЯ Я лю буде тру ло тУД су Тих би джпо лів Бо йер КЕ ат о шім Ущчі пек ТУЮ оті йле
КН тел ма и Оу ММ
Бей Біє мя. дай шіфіш ді Бей бій Бо сло Бо Які бук ші Мао пед зх за зв твЕофу жує бе ТВ Ге Бо вух би обіп Бо Бозі шах сб омую дах хх Ж шоп шию Хомко томат утро пи т подо т що А
Шеротіє 1 Сей Зін Баш ТМ Те 15 шт пи хо сил ж восени од дових в вия МзльтУ пи» шШтузних послідов иИшь тую сити прийме «аа З здалися стосмювссва пос х сйтпх ой слі тА «Аж ДЕК
ОА ше ни пОоебпіІдОависн
ФУТ» «со» «пл праймою чЯопс 3З аск мем ар вовк вок Мо жерти тд
Ззашелоееаль списи пис «ЖЕ пи «дій» Зх здо лей ВИК
ТИЛ и пен тув фев мо тири тов шииЗнА ПОСЛА ДСсЕНХСКЕ сииИх
Бачення МпраМнмаею калу ЯЗ пішлдсвоиі ит Уа паидоаєтєтуйт от дих т ловля али є ря
ХА ООО кл из паї ДЕК сій йртучца поса
ОМАН вика «ке прайМмзо аю ло аожтлуетатх сайту пу ра дп І «Ей ДНК «кій щшнучзща пводАдошчАтть.
ЯКИМ сих МН
КЕ при щео та їх бомхттиамщ т МІУ т спла й
В ру 5 епірдм о дек сади» йкуУучнва пПосакдоВиХтеь весни дих Праймаю и Ар км
ЯК вся
Чавлалсккфлл лоба дци паче пл пит йлю ад «В ОЗ
АХ пАНОЖ ел гових га «пли о палі мля сала ох п «апа сво дов зи для вяз Тл боєм до бе бе СбМх» Бали дих йдем бр Мох
Ме оба Аза о пль Аяп їде: Бго деЕ схо бме БМ оБаз дЕВ лей Бе Ази - є хм як йх т МІ ХУ
Его са ви їі БгУу Бкб ТИХ Ре обто бо Фіз Ва Бі Сез ТВО сей 28 те І тери ук пух
БЕспоЖпІ сАХ уд
ТІ, Ко
Км о «ик ши ую де зе МОЯ А МТВ Слів тат, ї са о хх мет шеюк ЕВ лях Ал ті Ву йму фр шле не би йзя ли Бісу дет мет шах ЕВ Хай о Ап Ті Буш о йеЕЖ Бр ЕЖплєе пе Се зл Алі Бе де тех ЯТІ литі СУ жуки сере сл УМ мех ит Хо их оеу шелиуо тоиху СА Тож
Бгто іп оьеч гля сю У тах Ева БКо БПлє Хе Бр шко фей Є БеО та 5 ло аж Че пул Зущ жк ЩщІЮ Ше Чак м Ав чу гу ду од сік ач ж:
Еко рих ал Кха тБЕ пйлу Щек Тк ошіМ Ат шви Су Ва бик со жо
Зх по 1 тази фах Ар стаю срхи ач Аа курія ВОЮ Ме 1 хх Ден их ик 1:35 кл до Ж тТвгобіїУу Алла тис Бу Бго то оту М» Тих опіУ Ба ть о пІіу Віл тик кп що пох
МУ УВУ ра лек ощдо про ит де СПІрКО утряю щодо см. РІ: пи; лм и лоді
ЗКУ ВАЖОСЕММ хі МІ КИ ЧУ мЗиФб АТХ лу БЖ ше кі УТУ А у
Бе ли ТЕ я провело те фр Морі й, йо рю 1 ЗИйОК яву жу т до дику ФІ Ку твговае лк о Беї Віз Вир оАТа ак тів АТ о ЖКт Бо) вул бот дсп отак пл З Зк ча сб, йляхя тям ЩО пом ОО бод тих лиху йо сплю шю ДИ Ту; Ст кр
Уа Аа оймЕн о Лем Від Бо ТМ п Бе тая йхба бе мало пні Ту жовЕ по тов У зу вар змад Упл о бля Авви буру Чі оз о Хах Бпе баг оліє сіц лів Буд
МАМУ 129 ї25 пуд ставу пз ун УК рен т, ДК ДОЗ виє ЗИ є опи слот дова пн и шу джий Тут Ме о Ббе пе Му Атлас Ме ТВ обеЕ АЕАаА Аж см Аа
КЕ 5 тій кл ки жах юи желе та т ля зику пу лу М А ех те ту рик хх
Ам ж МІК. ха смс: УМО МЕ ША У ша ЛШ на М ЩА КИ КА Єтх шо таз под Би й їх я лих А тбем' бу піз САТ дова Тих КТ. ТКУ ку М піт тр тах й ТВ т
Тем лю хау ля АЖИ УТ бу Є Ка му мом сало мх:іІЦ Мі МзЗі ух
У ШЕ звфощ сти лив й Мр лог тих їзахих ЩІ голе ке она нн ИН По жом хи
Ве оз гео Бех СОфе хв її Бго Аіз бау Му Так тує дав сом Ух
МИХ ша ах
Алтпо їз Зве вав Буд Льи Те Жек о гТїе п А Вів баг о йха Аля ух 185 на ХК ни на ви ША и и Нв я НК и НН и пед Оошек ті6 ді йіва ліз втеа їн ШІ Жпе ЖЕНЕ ост Ті де -їй пе пол ях ях аа сиг Ж сю «й ох ул т мех
ША ша дах сиг кіля жи Ме ага УМ ОБМОЛІВ пр їх
ІН У тплех Шизх ЖШемк лах зи Ли ДОКИ ях Жонту тах тло щоку бен и Та ехо Бір вх душ пу Бк пу Вшж лем одіж Сто про оллм Беж Сем бл що ли: УЗА, ТЕ ох Ше НН нн НН но ШК я ет пів гро Ва ем о дюЕБ Кто бл зем Ха Пух Ба Таб пе Буа Бус та М ло
Ме шує дет УБе о жмЕ Пеер Кі Тк ОСИ
Ба по а сх ДЕ «ій а шелак хх хі йти лим Малих ема Васі иУуча сяде «пив ак
Ммело бі дхаж 1 Вухо па Апч Буо Аму мед іа Рол Взб ав ВйЄе ем в х 12 1 пре Кр пет дл тіма пит емо щем тий: Узі пи ти стнюою УКХ їбксу ши
ІІ Вдя Кто льма щем су БЮ бо ім о Кл шум ТОЮ С Іа БХЄ гУУ 2 пт й їм ре Как ся чу ФІ ЖИфУе бама облеу ка їм бе Же кіл) Леучх ріж 21 ТУ іш Бо шеш о бти ВОМУ лима КО фр у пед су пух КО ТПУ Зі КЕ
У Ка ня пар хи соду сеї древо ліве Чем пря сфе ВТК Жди и Аж
ТвхосууУ Аву лит Зі вкУ ТИХ о шиуу БО ЛІ Від лХух ХА ЦП гм оАгд
Б 5 5 твУ дим Бес дет ду спе бом ду Мі Вл мл й лах ІЛ у ді
ТЕ о Кор КеосоАлродап Зіу Суз пеКоМаї Аве сій пі бер оби ть ву щ У Б ще ах Ба т т дол дм ті Ма вооя чеи дл що дл ля хо шо трщ и створ су дл ті вІіа о сцтех спаду гий жіа зас міш ді см ваз СЕЗ АЖА СТИК ІЙ ВІЩ діє. ше НИ п пт УАЖЕДЕХ СЕ ТО тю А БОЮ Злом Ми: лох Мія п бАВО щеЕК Фу ТЦК
З я їя хо 5 ци лог, рун и НО нон збут ет ро на ОН ба ул хх лит ДК ск
Арно ше Мі Зла За слу Бер тТювЕ тик о Айа дозу зу Бе Жуа Бдає
Ах Та Тих тя дося бук, пк о хи в мо В дові в дона бери йшто іХ що сек пішохах ср шу етос хі дБ вав оВвироВоа Аа ши ело гі СУуТу 132 135 45 пен у нан нн не нн нн НУ НО ху Жде Я Зої лр айлоюю шк ас т ух ем обу ха вли ЖОаХ о КЕ МаХ йдшо хз ца пад гл шию жи Еш Щі 185 ай МУ що міхи (ти Жди формам 3: Ям б мо феєю Фоми Жолоб Ярі І! 5 тон Да
Ми. шум же Би ЗфУ лих Жах АкЗ Єштя ех Жра беложлю Бла Ел АМа
УТ. пи ан пфепту Стах ото пр дл лу ки юю болі: Де щих і М бдю т: 1 т
Поля: см шеЕмЕ дя МАВОлЬу Бо йеу іль» Вшоа Зак Афв МВ дує сю Бі як чи я у:
Мих ее Тл зло те дя ув Чи бе» ТУ дет пл ШАЛ Ома те ке ту дм міц чні ЖХищ ож Аля емо ослує бед взр обту хаї Ууау ТіБожеат та бами Міз ї5 МН вих доб одояжу стаж що РУгІЕІ ме фен пІХУ. Моне Ст тах луйт суєту тт як як сво
Аа АтЮ лфує віж бли Мет ве шоу Тилоів нлробіх Вал опей те о Атер тай жк лихту ке ди. ушу І
М даю аа о дян й стррно фугл. бно дея дк, студ т шани дя я Те
Маї Біу тух Жпа Зі Тс Ба Теробту сїо дув 115 Ар Буд бів див ре 238 щІВ тка я очи ля Лют бу ТТ гугл Хв лід кю ВИ дО Мих хо меш гай
Вів Вб Вл ода ЧУ 116 Бей обіу мні май еп Ака бах ХО Ві Ме
ЖАХ ХВ й и и НА А пр а а А А Чи
Кое тАЗМе сювіЬ лю, ЩШеЗК ни Же ж бгрома я о йзд МепоКиє Чаї дпа Авр зд ЖЕ ча пох Фу, щу ям же ит пух ДІД мух. Хрех т ся лених ат Тед Жокх шій Ж ошіх Аха тросів жує Муз шу; щі ал он Біо шя їх ке ря тео пк оо КО «ТМ маш вія ни: сплю ній
ЗО ува 47 «жі же «ст» Шіною
З, Шен 1 Зк Т.І вжи ЗИМ налив са ме сту др тот ва пит Бе щих дув па дереро ух: ши ож фут лу мех о жих КО пу Кжро шує кла о вх Бхе ля ВЖК Ат ЗИ ТЗ добі масу сйосі сег фу Тато МЛ бли жує. (ШТ Сх ут р ду фр Ат
Алл ме лом смат о Зйи Мел о Бле Боєзх до. ВИ Я о Мейх ха ЩЕ бує АК о со з т Маї ші жо Бк о Баш Бо Ето бу фут шжЖ бі тат пеаз Бо тах т я ях, пу тем чи «тля їх «лю що
УТ Жди 1 я сах дит МзИизАмя декана пйлтну ж й хат с тд ср Стир поту доджу бло У ли вени пд до ттщопіви ще вий Вар
ЕК пл ОКО уп ддросемй Ки лі ВЕ меш вия ке ей ВЕ Овис вар дер На о бю рі м ТІ Тнушо бю РО Ж тити тлу Ше Ву А лдкп вне дзп ше Кяо пми ТМе бук бек Зі біс Тез; іш щех Вго Ар п є, пу ти М Ти "'ажА. зЗйАуя оХхю Ум у аж я ли р тло жк, ди МКУ ПИ тішити ТІ
ПСелі У КМ шЖО ХЕ О Бо Бл Биб, ГУ шк се ІНВ СИХ. ПЕК. фло СТИК 2 Б А сту Мі теж о хую бтт тт Зіу блм лежу сту Біб ато іш сбБж дід ця п що боеу тик о рі оч пу діти. его рід стали ую пок бах яю, Пиза шли тії сто тлу 01у Вздо тек ою бто тн обіу влю ожВЕ бу вв тп оЗіУ дів кг та п аа пл 0 їй то тло жо
«і» а
До че и їх чия ЗікОох яУШИ Ля Кум пе сабо» я мет ша дЕш дух вар овкч Бл Адь жах о тоо Буд Лів був БЕХ пПуя ЗІ
Щ п І 1 що Ж еко дес йому лм лим 15 їМиту Мах Да фею тою 1 Мі ту ет Хі пек о КсоЗ АвроХе ві біу Бр уп вп во гро сів Бо мед й п р щи -5 за спе ТтНЕ пем Бр ТпХ Оу ст т
Се ШИ ил ек ший ВІНОК
Он сиди 1 ла дв уми вичННи ло! ли мВ лкиая аа ННи о ее в нн и о и АН НН и вне
Ма Зее Бра о Буз вав оту Бпе йшоп ех бо о лЛух Лоях лу жає «Фа ї 5 її хи пек Бр» За ВкО взроїпєяо Ма осю Без тва ЖНОо ба вро Ху Бо жах я та до
ЕМ тож фено вс тТМилоуу тре тек бу Ба Твкросьу дав оте бу БЕ що дО 15 "пір тітхю люд ще ША шШжтх сАнау лає уро я Пре дж лю дяв би Ми тнх зам ВЗ о тТВи шу ши фл пі БЕО ЖиХ В-во Дж БЕ дша МН ОВУ
ОН кг ЩО щи з що пох ях жа тудає вра гло ЛА Фут бу що пах Му Лукту лют в о т их ки озкіи пух дужі дж Вув о шо Шею Бий пт вро Кам дл Вт БЛЕК СсюМАа
ОК пи т т шк НІ ще пе
Марі шари бю пт, ет ті ті сБвшо Вшт е х лтт жу т блю шу ше
Маї Шех тукосжім зи 018 КІіБ раз Див дет оо біз слу ТУЮ ех БК
У Зо ЗА ча вхмоу. Щршфр Ме рах Лаки дім ех жі пит чу піхва б Ві йсж сві Жву вацо лле Бл Тис лі го Ха дав сум іх мир Ток Біда пе за теру, ли
МУ мг лм ен о А и в А п В А я
АВ ЛАМИ ЛОВ ЛІ томи Кот МК сам сім ж ХХ о шедо спи мм ло
Як пк я хх їж Мо пови чмя а Ст дур «нт щої Тула: Боуї мли лик Вір ди Іі пф тлу дог таж отцю тів Аж Буш пз оїхеї Уві дес Уущі Кіа лег бій ТХ Тіз дер 13 1 МО пл жд пн їІвМ о Аа А бщІР оду. ор ММ Сіидаф СТ ЗДО Малу МмщоМ мк ла и кт шШех Аїда йод обі аю Ку хи ш ім) ам од мису Зал ту
МАХ хо 15 ї5о
Доти й УК: ач ня оса
Ед щі шило УЗ яужщм 0 шАЛОК сй1а5 палі стих
АЙ Ол ядево йххе ПУТ Мм що свомту фФежят ФІЛО бики су о т2 3 я ду тощо; Дего ков дех
Мін мут сій вхо вро ДИМл сиу лууп осіла ек ій) вої Мелоой
Фе стен Ториу диеи ян я Та емо тАт аю дет, и них их ин 155 ди
Різ дк ті ка Бо Зі Бпзш Ті шу Еко Тл оБле ко Ехо Маї би ст си їй хи т ди тхори птею ТВ щі ріж ср
ХХ ру те Тйпх шу фі су з ел Ба ешіи ли «ДЛ ЖОВ и Ж яю вині
ОВО шеа і ЕЛ С Аи яАІНнО Жо тк о Турнх 2Т3 1 юите дод й яд Ук дитя ИН КТ чо тр щи у чи
МеЖ пул паю дя йтро Еш Буг ЗІУ Муш СхП хх Мей сей пай пев вл
Кіл Ди ті зи п ТА тиша те, ми и тире ати рт списку г" їх
ЕВ Ага лів оба Вуж оч фижях Ті о сіу што Жвт Бас Бр Кот ах ко
Кі ХУ Зо
Пе ук шахах ля жа р, тех ит шх Я ж. ММ ля Мене ТАК. Ух Ми ни Й М
ТЕ ОдлУу дж лм ЗИ Тл п рим лаком Ешта свт Ам о Бжз лМп шУу їх «4 їх
Бра Жих пім же ча пу Вк обкщоєу кпме с пру бро Мет Зо Зі п Мої, ЩІ
Мх біз луки Мк крАМ Ле й ах сл хи яд ті тт б тю ПУХ бо ові
Мекобіу бко ЇМ МУ Вк ій пІіу Узі бівосіуУ Хі ступ пу ВТО ліз
СЯ то Та чо пл с Мо сц1 Зуб мук сті фжт, шлл. пе яр лам брам Ми (ла: ІК ше Ж ЕК МАУ, хі У мів оОтех МАУ БЖ демо сміх сум с удух Х п о а
Ме: о Кх Сі віта омавотіу Брід оТЬЕ обу йта ТВкозЗім їжи собів БІ Уві ї25 щЕ мА помно фею стою тур Кр фриро у що у ху бик ямках ті ВІ бю поужхн до пля пе ху дов хх ШУ жи Кто іс ЗХ УпІ СУ ім ТИЖ шу ма б
Ме тий вх
ОМ їж НЕ сш зе ла сх» лів плн су же с іє бро лашобліу ха так оух т М 157
БЕпобіб біуУ вто фа літ їіз бів о біу ча) шій сім ви БшшобіУ йій виш Мох іо 15 ее у я стих. Ід пи тА ан аннЕ КН Ушлнно плоди на Кс. о
ТУ о Зфу про сб пію Чаї піп о іу Хз1і Збропую Чаї її- с» Вухо бів пл 4-х шим што ЗЕ біт пеЖ лих су шу тилом Від лаку МК Ім СлюХ
Кр ту ллум кед ат У ре ня тиж для фену ри (ри тик пт я Пе прю ою ЗЕ лах ит» Фу шк
Твеодшіу во ТПУ Тіз ть бом пезротпх Щі Уві о лькосіу Бк ех їж ІП сп із гріх Шри: Діє, Ф(Рхи ле РР тя Фрі у піл Алое и милу зхкоу МіО бі фу БЕШ БЖО шу тт жито ЗіУу Ко дих ПУ АМа ти Зі Ко піу й тк порту посох у ко пече бі ес Твк іу Ул Ткк ЗУ пек Так У Авп тп п ай т пас рія Др сть сут пидро пре б ладі пли пуитхе жі дос жалю пи рек пре ко у че п В М Я Всю В а м а З Я М В ПО Я з и и З ЕК зи не а СХ пах зо 55 пф тв сік АЛ Тв іх бі кім ал п Му пі тів об м міт Хд ев паж АпХ СА ла плоту ліб ал обху мех лай пу дає ий ІУ МАЯ. я пк У пет хх пл БК
Ек піч піш сб шум жо Бей оплу Бро жЖУж пі оБу ШИЛЛю пі Вуз пад
ЗАХО ХА ОМА ХІМІЮ М ТК МеВ У ТЕО СМП ХО у У о БУ бхі У МАЮ МАЮ щих бай хх шк я Ой. пЕшж о Бке сім сі хасо риє луу Бі ти овіу Дію сх пу сл; шМп о хїУ шо шВО ша зерж ду Пил хх ж (и стлію фрі т: У, хх тли, Чув ст плід ТОВ ую 1 лох, таз сія щі Узі ой ліу ТіВв о бів шу т1їе Тк орУ віз Тв Ос0ІіУ де ох зїВ з зий бу пу ей ух тля ля хмелю Мо
Ми шІБКТ ОІД гул пу лін мрія шила таль ілі ле гЕКІВ кедр т
УЗ х
Меп дет сій о бет А Ав бук Арго о біп бЗіпоБівх шер ім бло Бто и
К У М А
Бе Аа рів сш Бус спр Бек» Ті м жЖео фа бохо боту Бо алко за пе п
ТвВЕЖ ОТу Жпе тик осзїБИ зі2 зЗіу тк г, що сій ох «сит ам ск тупих чих АН
Уч Машу СИВУ тХ мах м
УМО о
Кляйн почи ІЗ А ту Дом дош тиме ри дно ау сті б тем дум фксу дом
Меї вхо поз вл АгроАви Му Аки бі пу; НУз чек їм Али БЮ вл
І ІЗ т ях,
Фох они Стів йщу Ух йшла фемі їб щі бур Жва рм Бе дет ва ее
Бе дк лів вах Бут шум вд фі сли хо Ме Б Брест ії БІО
Ку п ЗИ тТвростіу бив тк Зі Те сту Ттіеотїпе пі бро ук обу Бей осла щу 3 Б С лих м ПІ є пан Не І С ШЕ о кл Ки ЦЯ Ок лют лико жі зх ща
БКро ЖНЕ Бі Еко БТ віт Бро бка сту Кп ошів лім Бро Ме бі БІЙ пи 5 БУМ
Млахй ут і я стітЕни. ПИ» и оптжох ря ак М но му ши мстяу ут АЛ меж ім га м ші лихі ЗІ У МЕ спи спи Ме шій щіУ вхо хв
Ух лш ТЕ о умо феод тів 1 ру ви сі Фет У сля Зроблю бек я ля им тт лів сті Віз тв слух Біт ба ім Зі ап У Кот п ст» шт й ях
Що п по «рот де пот рух (т тт их Я й с п ур яя їи иуУгох Пл Ай пяим Аллу і Кто Зійш плу с тТвХ шу ьо сіє Ру Бко пдУу Зуу Уду хо та М
Ми о фУуріх цу бло губки уж. Ж тім ему ум Уа іти Али алу спиля кі що м бійпоспфи Пе о сМмої Чу сто (біз обі Кео пу пу Аіш тп Зі Від Зіх хх за ЗЕ м. Ії ККУ КО пох ід й тії Ж ти би фініки ти жор) дк лот кр єї ку Уві бів сіб Те шов ШУ Ббецосій бі Бюл Тіз су оте зі1у їзЗо 12 15
Бал іі суху Му (ноту фо й й жі. МАЖР умо Мрех Тит) ми и піл лю ор
Бат Фім І МЖО ЗТ оду КК в шує ми спа піт їм; Куб ку дуй 1 АТУ з я їщи же: я А Ух ек тиж ог УЖ пек ст щі волів біУ жі ів опує 1Рф2а обі овіУу БЕ дам їФ5 нкш У побу хну ря жу ьо пяти ря Ж тя я юю М пох ті піУу ВТО о взгОу йхт Так ошіуУу Атдолнху пі йіз лаб осіУ п бу ї11е з, яд ха
М Я М
Лв пох сн тку фУряк Хо ур. піл яу фен ри ЩА Ті М піч ут жк
Трос у вто ТК ЗіУ Те ТП спі то їм ЗУ Хе баг осту Бго дак 185 на ХК вік Уфі шуру лужиу ФОрхи луку пи тля шу бю ли А ою ту фи ВІРІг піт біу Кктовто ру то їм біу БЕФ тд ші ла тв сіУ хо Біу 238 ККЗ ет ж їО до У пом пл ді при фйше фія мли Чи п я до ля до тарт МИ Демо кр пі бЗ2АУ Кро шен о ші Бех Тих бу пів Же» оплю Аля Так Оу Дах ТПУ зу, чх при, зд
МЖЛХ щу их ре шим Акад Тит осі» вВлиолпх пу Був билосфім Ві лак алу шек Тло шоу пед сві
Ох ак шо
Бто бак ші Час твколІіУ діа дім щі ох пів) піу тів дів гу ті
Бо Тк обі Зес ЖИ оЗіу діа бів ошбіу Ппемошів ліУ 1185 о5Зів оту 5 вит СЯ зла жо Бл иа мрій фІх при: сла: фр. ие СВ щу Фет ІЛ й біля их й я ху Іі МІ бі у БЕ Хшє Шу тт жито ЗіУ КЕ пух У Вес бій І щі ОЗіх
БУ й ВЕУ ляє кій луки тлу рат рр й кт Хі жи ета «рр о ря ул ил «я пе фі БЕ сіУ Ба Тл ошуу за Сх у З мо у Бо доля су
Я тв зт
ВИ ша і тлрто (ца чу Зху их но 1; фло ях піку А Чан ех мл гр піл) ри, дл ши і Ще ЗТ пу КК Так ошУЄ АТ ТІ Зі влроспув лу Бо пу в Зк Бек хутло гічрля Хе ТІ (хи хи СІ ЗІ Б дО МД у хдьа тату бля» вдо ту тв МАУ ХА пп омілу М ді обут вав са пут сяк тва сті БВ КЕ
ЗЕ ат о пі Блю ап о пум рик шів обу ів бів плу Уяї Би ФУ БЕ ЗеЕж гу ха чаз РЕЯ че Зх по да ня ех ложе хро п мо Кр сил 1 СРІ1ш І о бреу Мих пом Дек ка лих пу же Дт пу. Мар дип см іш зу Біт шо Ум Аве
ЗО ЧУВ. яебрш Фах Фор, жк (Лу А І: МИТ дет, Ук 0 ди бодвух КТ и, ок МУ
Таз су шко тик обпіу Бе слі сбіу Ес сій шіУ зм опапосіу хе дв али Беж З3о бе рих тро рію ли евро губи егу П ттх Дд щут поли ду ле. 1, зі ма АН ШУ мах тех бу МХюМ ла слу М ОЛЯ. бом жо зЗІМ ма У
Пух ще ВЕ по доку кує ти жу Урі тич ТА пило хи ж ФВ ау дузі: І и ху
Бктл сіло мМ Хі біп о пу Бе сій пу ми тій пзіу Мк» Тк ошУуу т аг, для доц
З Ак Зо
Божа нов ен ан нм нн Не Но НН нн На и и о он НН Не шко ЕМ ЖЕ св 51 ЖАЛО МАТ МІУ ом оче ме М ма: ЗАЛ ПКУ АК Ж 42 я СВІ бай мало СМпХ ху ши ВХ «Ліло па
ФЛ ЖБК у шов хе фізрик блудюл віт; дій шасі вилЕ СпИлІЧЛІЕТ ВЕ ша» о 55 ет. з з х ох тота ИЖННО ло; бее Млаю пра по тих
Має МЗужх Ази ди дар жк Буш бі БЗуш ДЖ піз ек оди Св Ага Ї18 є г. т ок до бус схід диму Жде су пу Тйх бле с тшжо жа ві Боб ках сум це
УП Та хо ть одіо ті пи
ТЕ оса У тео сюу з сив шк «пл р «ше піде чи ВасіїішЕя БГМиковтрішня є тапихм о 58
Ме жа Ак о Атш йпжройви Муз СОІУ жа шШУув іль дей ДпобБа вхш тії ! 5 12 15
Ту 711 ото 1 ам сю Юа ко МУ бі При; рало сві си ля Пи
Кжкое пло спад о їжка 11 Ім Бу ТЕ бе Бпом Бе Мак ско Те УМ ге м шу Зо тв оку тів сі фе ба лу бо тТилофіу жо бій аж Би Так оФпіУ я 4 СУ
Шале (ти їли ноу ру пт р (ЛО ШИЮ сбетт, Мине) у214р Мер Пл и
Буро шу ім Ку БдЧ о палу Було сАп шУуж шт Мет біу пам осеу пу Б
Б ц 5 о пу З
ЕЕ пу Бдшб сл щу мал обід у ла в пу Ето уд сім Биеб хі
Я т п ВО лох: Ж пк й Мих, пух й хе пло Жах ік о щі й по б де ще ку піж те пі Бют шо шіУу піпосбій пі ліз спос Уу Се АТФ Чі1У
КУ КІ о рах Фіви спо силят скл тт В Чу рю лі. шеути, ПИ рю тот піл) тем
Ялх Фа сел зі КК му Ак пошу ж шжус осами жла мА ОшАМ ДМ. й птих. А ня га і
МО їмо КМ ут гля фриг гл Іру ким сб діт) вх тд ти АТА Іі и Хот льоду БЕбо Бл біл гу тнг о біу Вл отпх шує Ава бівобіу Хі щі ххх - рана
У Тл їх лях та бут окуляри ІЛ ря ПИ мя брати ті: щі прю Ло ач «тля хх ім жі св у бек Фів обу го сів о ЗіУ Діоз так осУ ЕГО бмоїхру 32 15 їх
Бе шує пияя Тв би шу баз пл я шсє Хем о Вро фу Влад тв спі БУ
Бк сах ща Хв Бі пу Уві шоп см Хем бро бу Ва Тв ослле Бо та 5 Кая Еш 145 15 їх Сени ті ул тки пут сухих гри тля п Ул ке аю жувах ит ху дит Мк піп обіу 116 жів и ді Зі бі» ту Був ошем пс обій ау Биш шеХ же ти г пл яя под ТИВ тіл ке ска шинянь кон А Ме ОК НОЯ сука те брих и (3 ТУих піуУ Ази Ух пуу Аїд ті ЗіУ вла о ХЗЕ діу поз шрУу ай тТве суху БЕо
Мих тю ЗО
МІХ БУХ - тах су ОМ АХ Оу Еит ТЯ шЕмотМе стіиплоіс» Бах пек сум ку ко їЗЕ що ВІУ ги ач нн В А о НН В Не ве Шо АННИ Не чн
Ехо саду Еко Тис обу Бо то су Мхз тля ШІ Ето Зіу сіу бу Би пк пе, За ряд шити Ух! пише стрів ще хи. Да Свірж из Клод м гія даму и Му ідо ку ех спіу йеш ТИХ о шу Хі ОЛитоЗіУ Віз ХИХ пу деротАєЄ ЗІ Бі ХХ
ШИХ КУА КУ Я
ПЛожк щомам ТИаз ту у, рога нен ок ни нн я нн кН ГЕННІ пило сих я «я пу ет ти літ Маі Тих ошУу Ах ох бі Віз п о пуу го Ма У
Мк пот ек сл пли Тех тлрто (ца чук ех мно гі ау Я ах піи Ат Чан рю ма мах піл Ар здо ши і Ще З бу Бу ТК ошУЄ АТ о Трл пів хз ТЕ осМУ дуй под вищ С
ХЛ М, хе тре турі шШрияг омля ф3х» гів бур «іх іт Тв Му Бгто ІЙ Іл фугу ву
Кто су БкоосшолоМу ІБе сій біт БЕО сМоощпу бів обівостім БЕ двЕ
Ву здо Ка пух фо прю па своя я гу пд Мах УЗ Ву: ПА 6 У ки ду жд. рих пу я ЖЕ пу Аїа тий су ЕЕ бами йпху БЖ ТК ОоФІіМ да шн їхгу п жа Ну при пн сх гм фура тю и що ПІ АУ би сю МІХ ре Том пе КТ
Вт щук бу бех зд пу. Блез дип пу шує іє бу Біля Тх ошУм Аза сх яд пе де
МУ шу з Хе лях жа лик ПА, КТ тня б дій бук пу дл тик о ді МА Вер студ
СУ Ав так озіМ Віз Свт біду дів тах ту Ма тп блду хаї Нех ть
БО хо Зх бури Вдома бю ПА Жйчею йо дош Мах Мих. ше чи Шан Ла Ж йилхк
Оп віз ХП мА Аівю тат йЛіщ плащ о йзи мЕ шдеюкошвУ йдемо іш Хі ау
ЗА пре їжи п М ТАМ кул Жлмм Тим тт фур би дош 3 шо би и ск пли о вец бл дом 11
Ух А шМ еВ тім Ух І 5 жпМОоАВИ Ба то М що ва Мило шМп АВ 1
Ух ЗЛО ІБ тах шу Шде бля саму лу бук ту пятою ту ТК ме ті я ше ж шу Я АК жа ше м ШОУ ЛУ УМ умі: ТС БлХ МЛ гума
Ул тя, 33О ди о тт дочиу ЗИ ти ре дод сумо но ти ди т "Зкржо ло мія мом ТА дп ЖК ум дІш ВІЩ МУ МПД ХА ЕЙ АЮ сн МІД МІУ
Зх зо ІВ але
Таж бму Ма Шик Шшво отр Ті Жне кл дя і» дес о бсхі Тдуй дл ся цем ем мзі бно Шек обл іє Тв У дв Зо пек оБет їди й 1» а т доц
КУ ЯМ Я тв тлу йоту дет їх кіш удо зо я сі ди ТМ пек юри м. хо
Пе Бк Ави Зех Кже Муз ді хз Аа о веж ре птю ВЗ Ма Бу пото яп ах ке ж Я чіт Ма Ват теле фу лі сію щі Мід ца Фу Там (Міо де Ввеа щіе лів Вт Вапоївч біо; да бЗішж вів ів о Маї Жалт їі бій бедра А у ап А ї4й зх те до мит Мр дамб ходи стю дід тв ря пу А "чво Жоям ах Ере дія їні Мід уп бо о жек тих діа їБт Бех Зі Ата тло Бей 455 Іва тв ті тво ди ум пер
Тв олі бла Ахи Зумщ Беж аж 470 сл сл нами шт «Вл З вчи вив чих пінлоИх -ШШю Ма з пуюнухея тсашив оо В зишУю бут о ФЕЕУ сао Туомо То ру бує здо ду Миша фл сте Мід У То пи ААУ МАУ ул ют шк ОЗ п Ук ЯАШАТ МЕ ЛМШшу УА ДАО МАМ ММ х їй 15
Вт на я Чек Сушо мМ ВА чів Зешо ве поки Ук окр пі ВІ Ме ях сук зе ше 5 Зо тля у душе спід А си ЗА йаніу их КА дя те ил ох шви ЛУК
Пушобіп ВлЗропма А мах Ашросіу Пе У) Вар ав шім шій Зчи пе
З то 2 тв вЗіе жів Ві буух бїжеу дова Майо пі бод х Заї щевз фрі їлуш Аз
Тв вБЗМе о жЖне ВХхч Вуж їм; шо Ме сіл охіу плт Ма пдв ов цими Аза хи т с хи чо ЗО ція де ше о ти сх Тиз пу ст те тля. Чу тд пе бр му о стяхр
НІіз Див Бак ої1е бі пзуз ТЬх ТУЮ ТЕХ Ії ТЕ дів пз сім о Ммеї ТУЮ дл я БУ й п НО Я ви тд їм МАЛО ЙМаєн ля тим Хм мо Адм о фу к МВе ти Тк су 3 йлж еЗВІ КТИх Ул лл ма жи зма бл шу ше СУБОЮ мм ОБЖ іт: М ЗМ у
Зк НВ мк,
Чуто ХЕ хну жолте рімо бур; 22АЯ. ра шо п Жим різ щу рн; мл ку толу (лм
МАК ха жмя Ж Мм ЗУу МнЕ кемМ Баж силі меж АВМ ду БМмїк що «ай плрх 11
Мо чи А ее о ше вн НН На ШК, ші. лю бюучия яю р жи и,
Жркль Жив схїю иа Бл БІіс о Азло й Ме шу ЕКО МИХ МБЗЦОКле Би ТУ 41 зл Вих
Б мл гл плодам о тгтТюМ (Ос У 175 тив
ЩІК 53 -Ліл пл «ДЛ ЖОВ с вазіїіив востійвш «шій Жасіїїчв тустіцев шани» юю кн а о нн ов нн и нь нн НН Не ге ля Тоня
Меб ому Пп о ше Пул та дає ТЕ о Хаї йдароцес ер Тео МБ (УТ мує чі г. ки я,
Атді сах МвАІ йеж Ммуд зна Аипо Бі вм о Ата шва о жук Влровля Аглопех ши ле Я пи дл У пл іс вт лихе ру Ма демо дл фе зи А ім ти ти шву
Ух бів Авробув Ажромаі Ар обіу Бе Зщі Ак Мал обі бід Бе жпе хи їх дв. 30 я
ХХ Хі те й ей Хм ев мех са пу ВВУ Мах офі ква Буш віз чл кує, шт п ях шо здо до інею Жолую фМрум Борех Лв го бує бує Стах Се Ж» ля ля Еш Ку «іпоАшп што хі бі реа о Твл Ту Тух Ба Же Ло вна слі я бух щи ТО т 32 сто фуру хм тя що ій фот, лоту хрущ ЧА Ху скоюеу пт» піт Ух
Зах жив мам тн мзі 1); Бткю ЛК ОТуУх де Три ба тд спМу ЧМУ ШИХ пк ре за
ХЕ Хна Епе Ащез Їле Ав біз Сів обав о П0Цуд ге Авто ші ців Бод баг ах вх КД
Щи Кано ах ож ще лю ЩО Ст, до по ау ша СЕ Ех жання р СИ р тод ни гани 1 дк
Вів оаЗи ваз оба: Ашт ши АБИ ОМещ Ота паху ЖлрогаАк де йо Вус хів ух жа тих
ХА ї2о ий вт жає дя АЛАХ зим кат КИ лу ттс тм освату Ам СХ см І СТА
Ка зсіг тай
На ЛИШ а пл ю здо пп я аиу ТЯМ Ії» ЗУ му дю лик ком тя; рю ам МаА ТИЖ СКМ КО дж су УВА МАХ о су ЖІ СІ б0щу УА ЖАХ ОКУ тах 1 Ка 15
Тхуту ЯМ сті (АЙ Чируи сіту нт пах 1 ДО йо мії яю лена прі 13 1 пуо жу пі Уві тТау щіж Бко тТеве піу Улі тУвБропіє бус тт Зі мл вих ХЕТЕ М
Тв осі хо їв бі Зі тп шу хо ТТ обі Мі тах пум Бгто сце
МО 185 15 ттта» ай лиж сл хх їх лиже тілу у т слот сут Кк суті кляр Ин ко. шпАшж ах лк пім ро хи спаУ УВА такою Ера ОМ т пум Ма КАХ ОшУуЄ т тт п,
зурту Мах сот щі прє щи хуге Тк сіруедім рт лі фі пев зі Пух жа ЖМиХ лу УВА ОТИХ ПІ БусБОоТнНу су спьу УйЖ Ма сш ту Бем пух
ВН ря поту дво обую дув Малі Бей Кк Меїф тп де» Бі Ле боб шУв ба ТТе 51»
З 7 7 ще ср. пот п Од ря пп при Ки ма що ри пт т тім ВЗ дет тину Бус мл шви руту гг сп зйпКоуяМ А жи пу ПАХ Ат оДУуй ЛЕМ ШИЛО ХО пох Бо ККУ мис ря -д
Мая о Бле Бвпе о Геп Вие бла Ті оту Как Маїф дки Акт мае Ти Уві Жжну
Іо Ух та гало т вх зрілу Фк ви Фі бно седло ма я бас би ду маски
Зах ЖЕ Авробіу ТИЖ о Тпх тик о ЕБе тах Уві для ті шк сю мах ЖпІ се. «ву пит мая ВЕУ ее т зга пох Бе бе Мою Шви, щи жи деку ТЛ ттую Тула; о Талья фрез фот пі Уа шіх Хме Бе Би ко пу Бо Ж Т1ез ТБ Бер обуює Б Кг я ТЛЕЖ Зо шк леткі. ха й: КД ем пуУародокиє крім ті Бут щі
ЧьІ КявочУаа св буш о пійш був бі сша ВАЗ пюиль Ат БЕО ДІВ вхо Ба;
Тех о Аоде ай сам бух зіщ слу 5 ї й ше зт зх Кк за їх а 5 Зоя
Н т п дю Ту т ому. Суує ЗК Фе Туди бах долях сф Тут
Тл Мч фар оон оо 1 Ммшо буку хек це Уві Ме їм ем Аіа Зв Бод
Кс ЗО ух шум да гів Біл Віз дит Біше Жим що. сій біц тих щу мі у 118 пу дак 118 іх о Жіз дні ВБпже де со. сбхБа Зі о лпх лу м жуу 118 я 45 У
Ма Бей Шіє тат фм Бо жі дат Бике Пи тва ср бе дж Ен Дія
Уаї жи Щіф тп вм Бо Щізж Бл Бко тах отих Тит Уж кю Бе Ада
Зх ка Ба
ШОЕ ЖІ СхП Слиш ИЙ а Кл Вояж вит Має иа ро дао ЛІ Уж шо ТІ Б
ТЕХ ту З сля я йх сли 0355 «ЛШ жожт у же як Кір ція ка ши ших МО ВпУлоЗсх паца» у
Меї Мету Шацо ща дими Лех Диу б 31 Тжи) Дт Бу; Дух ПОС ем Бе
Меї пех МКзи жЖеає жи бум пет вл лу іже) вец бло Доу па пек б) перо да дім Жло ке би; ну Дожеотдмм хи 1» бух яко гамі бе вки
Зак Афд лзт Біж Бізе вну Кіт» Дол сови УЖ обу Вих о жвхо їні БтО ста за ле. ло «Й С щи тіж Бгто фео фа твт т бує Тврошку Бест тТаду щі бро п Тр ж
Долю ш Ух ШЕФ ІА ЛЕ ТІ Бе ТК шу вс Стих діУ во Бе СКМ ІМ, х їй я яп ях милях сту Вико ТіК фе ри ШТ зві су фляги: пл (ки думі Св удо лам Бе жид хм жо баггі БИ ОллХ слу БА ТИМ ос шо ЖнБу оду
За кої, щі
ХМ. ля шу ах ння кни о нев Не нн у я НІ НН пряме мин ние нин: нини а нан Жухлях, то ти обі Ба ть оці Біо Тве щі Хзротьу бу Тв Тв щу ко шт три ої дя п ТО НІ Сн трико піЯ, у Стах фут ке а жду фему, Чо УТА) Ло КО г» діт у ехо Уу жЖжо Тл З1Уу Блє ЖПХ см БЕ ТДдЕОСКІУ схе ту пуУу БО тик пк ре кВ
ЗРу Бхле твк сля біо; обає Бім Бростьк плу БВ так огуО БТ У Бко ху яовре, чив зму тп І "го фр, и кує тр лет Чо йУткк повуу СИмою тлу тро ою пу фу вну тпя аУб Бра ТВ бі Ши ТАЖ о пІУу дДве тп бу ТЕ ОотпЕ шує вто тп я нище тк
Кл Ах кое пси деку ли М їхллих СИМ пух фі ту шля зе ТИ ул дит р й паж о Бтє тк п» Буро бу пйху Бк отТнс тю то ТБ оБуу дав о тТвУу слу вий Мк 50 пкуи см кт дир ЧУ яю рр т ко сл ши, рук сту кі СЕ я хату шох
Тех о жпх паю те тик озгу КО ТБ шу БО ТВА схім БЕО ль ОСІ БКУ тату їх їБ5 яп тиж піч Бра Лк жо ну ВВа ну лаку Вр там шим Бус ву зу
МБ б У ГБО лаву дев жо Ух А ТК слу ГЛ ДЮ шо: МО Ж ХХ ЗУ їж НУ їз доку Мер ту ЩО мо УМ КО ТІ годні Му сл хи пи СК у ік ЛИ ФІ щи Ек
КО лю тхір мМ Я юЮ ЯМО ХО шу КМ Та пи ЖЕО дм їзду ку Чу ху ФТИ ї3о їа5 т ше: ЗУЄ стомхр 7 хх штХ АК дам сх їз.
ОД й ши МОХ ча Тх
Али ОА ОТІ ам БохУва АЛІ іт «Опт Ко ше від вит дет бо Ади їі УЗ фл вт ЧЧук Тел Ву пжгл бі ше ше АХ жи ларобто За Бе Уві ШУуУ гЕО ТВЖ рем о БЕО Кока СКУ 1. ж то МА жа яшщии о х
МИТИ и ЯТУ хмелю КА
Ми шІБКТ ОІД вод ня талів детвудсід шили тапліїля олпсікролХх хат тек жищцрк ох: фу ев там Ті сля Пат Жатки шву нт тт ие
Мех дія Бец осі Кт Ав ей Г1е бБ1у Бе ЯБЕ оБес Еріх го Їе Бо ї Е їй 15 х 5 М
Бо нти НУ вена я «дк 3 диХйє пілих дім паска -ззінеаплустйепхЕ ша пи туї пооЖож йони ек оч лах Тл ШУ бує тро Тему Фр Шар Ті жух
Ме. Афа дима Ди Бас физм опжї Ті ж Бфо Ах дме) Биб лаб іх Ех з Ву пл 15
Кт шли ва сш 17 «пло ВОНО «пай МзсівіцЕ чел тонспої «аю ва
Мат оВід їж; дит Бгто дви бів Чі хуру Бо ЗК їм ко буо біг пр
Меса пе Ана Сг АщИ іш (ло сду тпб плодам тус оту тів БЕЗ
У Ух 1 што та я кети 7 талиМ о БІнНОх
ФМ. пори гі їху серед
ДОК. шпалхілаоли стеешиа што а ви А ЕЕ води хо З ря Ма тм т пі Вис прє Ти фр Щек 36 бго
МеБ діа бец біз Бал два ем 118 5Ту Бгроа жк Ту Кр ще ле Врго щ п я пе я. я хм Мо т суху ик жом шт «815 17 днк ІМІТАЦИТ ля ІМТ Ім Ук теме мі ху ев і уж ОМ М. ЗА ЕК ТО У ВИНА
АТО п ж ал п тек ДЖ, их пл - щедро тм ти ки бе Бут їм Вре й тік Тк
Ме Ака дев Ав Роб пзБофен;о Тіз пую бе ро Мем бро БЕ г ТЛ 1 5 19 Нее
"то дю МУ тм, т сшІх 7
ФЛ ЖБК и ут ше лю сові кре штук ца шк швсптацдЕ ІП аТеОа
ЯН: Ба ї щі т тд Її Му ши я Фк ил Ко Тит пра пек БОУХАНН злих
Меблів БечоАви Бу щі Має іа Бім Бус Зо Таб руб тро зі Бо ій г, й Як
ЕТ слот шт
УДИАА К хи яю дал жит, Ран яоя я Бапіїучях етап апз сви е «пит ШУ
Мак ба лам ви Бус сел ех Ті см жо ва Меп о бет Бут Мей ст
Кг си1х се гля - «ил 17 пороша юну Тдоан фах ачцимсіу Бифетих ще йзеїтлімя вус шсвнея «аг си се БИ пав «кот ди ач лох рух тя жі дію вояк тора ж них У мех Від лем: ЕЙ го біу Пе о Тів СуУ Бл Тих сем обке Бхо Уді в
КО и УЗ як я 17 яд БІ ехо шиї таж діду г мн» салі ДТ
АЛ УЗ ве лу тів що Се мт; ФИбХИ. дих. Ер та пу пох сти еру у МІЯ У мех піз па бли Кк Би дек Узі бу БО ЗБЕ бе) кре бжО Ме си їх п. Бл Кия ет суд зк чих Ще
ДО а
Би нн чих Вінах «ШОЮ Малі сееми сао о зишк тт дах ее м; Ти Та т пІи сут, Срна Ме ук бите мл ше гршх любо АЄЙМ ОЙ Ю КЖО ФІ ілию ЗАТЕ ШО Шу ЮЛ ЛлоО ле Ко сже БАЛ ОКУ 1 С га 18 плих гу «с
ББИНИКя ТЕ «ди ВЗ «й ша НОМ
СКК НН теки ях зрання ки «вії» Васі! їй щустічев дамам о ло зей титмо дуг ти Ме ит МИ яма йлу т птем ие жу те жо жів жк
Меї Пух ВЕ їжи ТИАлОштоО Бишо Муж Мал Бе вл осв ем Алі ХІІ ХХ я і тт хх
Тве Мав леа діб пов Тв ва діш бдум ім Пре бак о Чаї й що сим АЛ вх Мат опем літ бух Тв Бе Ат ши біУ ТВ Бек о Уві бла стуМ Віз т се зе и хх о штат МА ення и НН І но р НВ шт тя тиж вах би ше БУЙ АМОША ло им тТ АЙ КЛ ТИ ТИ лОАл ЖОНОУ хе ДІ хх, пд Вл їв гло буря тла бурі и отці ДОЩ ЛА, до тару тиме ми ук
Ми овамо ем о флш о щіпйпоспма бі оВЕо меш вх» пі АК ей дух бід Бкл
Б Ух щ пу тати ЖЕ щОо ючи. чи до мо ія жа па жк пря щі АЙ
ПУ ЖиХх ха Ал ші вет Абшщ ж ЗУуш да см ТАКО дум Ві Ха р пло ТЕ ци пилок ту іє зи туя Ярий Чруй сну ов сі ках Ват ма ша 11
Я 35 ак оте ділему ОД, Доу осв ни нон я а ані нка НА НН НА КО їх жа де лав сто Бі БУуз слам о дхх ех о АІР ЖИФ УЗИ МУЗ БУХ МА
МО Тх їм таз щі тям о тако Ви ста йо Тит ал тд лет Си те уз Ед ЖИ пу Зі пед о пжа Мех ід оба Буш Бім пул Мах пу худ ж зі Зі
Ох їх 1-5 дош Ага сімю зді БУрре От Чл офеккі мих 1 Кому т фло пику Сбинуу СА хх
Ажп Афа біт ех б мВ обпм бл) лахк сів бли Мум ім Фу би: ДЕЙ
КИ шк, зай
ХІМ ша МА діа тора ли ки Аа лу мк тло тс ДН НО. тн тис пі Іл» ЛО пою Кеди МЕ УЮ ОК БчЕ БО Віз судофьи біта сло УЖ пов опМУ ла ду ШОУ зе НЕТ 1 ЗЛ АТУш 15 батони Ме дочи Трту ХДУ мч т: укл про 1, пбїлх Мас дамо свик «мі мл о СМП и уж М ММА Ж М ІЙЖМО УФ млі ШТ ЇМЛЛО ЗлЮ ХУ
Тхлу У те
Тож Зх ху Студ ор ТИ й ших їж буси ТИ й нн Доєво ДоУк
Тож бно бвроїечлу іх тїчо п дж бро м фею Мем бує вл дай вар їдп как 154 пре еру ето сулуу 115 ті гувт ит дек та Р іх дулю путч фі и фл е;
Вплз дек де ОсКІД Мі ух суп о Бу мат хем два спі в пз Б це :85 зи пре,
Тв Бер о гвш Див ші Зв бю Уві зу МХнюЖ БНЄ Тв о щів бут бут а
КК 1 КВ похж су сов тлу Ку сих Чіхет Че те є г ях тк Яд: р дл я віп аїи пет Зі біс Щек тк Таж ТЕ Азв обу ТУЮ Уві Тл о аїо ТтЕв ок ж пе сиг пе км ІТТ ях
Февла м ХА. бух ре Тл діа й лу лЛиоу пе сдуг о хлту ли ТАудО пов, зт сви зл фі слову лові Том тю кг нн а нн темі ля тлі
СУ Нхз дев джй Шуйлозгу БЕО БУ у Ма оАІц лав лим Уві Бу си я о. Же ша
Щек лі іст кт тю В дя и зго ЇМ тіж. Ди Гостя ЧИН Ше тут». віх зе пуд о йомо жа ма У Буш ЗУ ж ет Яка дво пилу Біда обл «ту БК хе м щу рес ле це демо йуч Туру о йим Чи дет п) йчу іо Ва й деп сх Бк: пт тає гор виш Ух Мн ПМ ож соу ФкМИ сві У ВЯМ ОА Л лм полі ФГ бат лк тт ями Щи я Ще томи бура лив ті йому МН бом: Я М т МІ 8-0 Ді тк іх біл) р пзш осях ж дев Бшр Ома БянАі вБжО Уа БУЄ пай о Зіш бу ха шує ша
У хи 315 зо бЗівовів сСашж шує спішу пух Бец обу Бзровлр й із тро дет піз вкл
Ід піп Зах ша сту ь улов ртр ляхи фея гав т три р пилу тва тк ооо ек о тууж Бен Віл біт дя Вб Узі Аія тів бо бі Тк бук дей ух
БО лак пл 4 ва У що кл Уривки ДІ Може я жк ал сл, ди тах Кох пух ух СІ. Ка
Матожшеє тут ЩЕ Блю о сСлу ПУуз ча Ах о хів ла вла олМЕ Тех бе шій зх Ук пп
Вам тс вв лм й хяа бс» їху 1 шШтне ой СІ що ФІ ні 1» лож вяр ж їм ворожі Аза Уві фу Мак Ебе ска ля М обнш сі Бі Вар пло але зх сом утік тв мих долу пит Тхуц. Дон «пу шою Прехах тя о ал А я ВІху
Вед обзіу МІЖ ОККО Жлро с було шо му ЛИ ОКУ ЖАХ ОшУю Ха: суму СЕ зле ап хх а ї5о ши А Я
Бл; ях ів пл лхропьх іде МЕМ пек овіу 1» пех ткрожих пум Ах)
пе Ій КУ
Тх ки У тт ворщ мк Кут (Лу сш Ам Деу Ст фару юки пи зімую тиха ко нм
За Кая САШ ЛИ сшрМ т дих ОХ Кпув ех то сій лом Оу й Тех шо ЗЕ кла ни нн ки нь а нн нн нн НН ни и нан НВ НН
ТЦ ба озуз очи Ме лит бу бла ЖК Вуз ан тах Мол па ХЗі Бпр
АТХ їй аа пит дошуу Же ТУ дл дю и ПІІ у ІІ сит я т ук тих дов (21
ТЕ лу У шо АВ О Бух МА оАуУ МА ім ди туф ХУ ЖУХО МАТ АЖУХ Ол
СЯ БУ тп дет мат сть блех дів перо др Бгто й. фе; ил Джо УВА бли їж Бе ех Маї тих бук йдшг плов одкУ Бедь у У мезо ча Ор вла без КЕ де аа Бен це пі ум пет шлю жа ази тла Тут сб Тука Ми: пз стлкег за у дл су
ЗМ Буш пед о Жйа Фі так іа БМ шоу су БВз пую шує пла ВІЩ ОтУух
Зх 4 ях
Тк ол тиж Би Зіч зро ода Мах а тк ЖЖ бу А ТКА бі Сем
Зо 5 ши
Біб Вже тлу ти Трою ВІіш для ддй й тій Філь дю пат ТА Дідо лов
Ен Аве ождай тп Буш ВІЗ Аа Ана оАТа ми ЖНОе Бар о тТУуЄ Пед Хі Лех тк пд мок, спхку до лі пу в болях умо тв Хо Ус; лозу я уз б тв «МТ УкАТ ит талі Акя спід ох ша мл ТЕ має ІЙ Мія УУТТ ВМІВ САТЬЕ
Ва 3: ла поля лю юю пюежуу Тим пу рима Ту ох жду тир ах дану ти КІВ т дамою су хХиЖш ЗМУ тд оБед її: Зб о пшУуШ ЦПЕМ ФУ ШЕ ду СУ УМХ 545 и Зах до «рорикю Ки ля о вришня п ВТ Й и тях тю, ту Ду Тими ши МУ
ЖИ атм тешує хі й БЮ Он СК ул шаожЖ мм Ірода о йпл о шим оту лук хх Зо В пкт томі ЖШему лож ехо Тут т» «га тет айв сожжао боруу УІ я Бе лит бек
Вл обені Ве ой бле Ма СбфУ пПуз ж Мі уж сем іл бе Блю тУЖ ех че вли змо тро ла тод ми лют ритм яр стек ра ек рих тру Ми МЛ о АН
Т1а Жук йяроБеб Аля теці бах Ту Буй Піу БВ Алла Мет дар о бли Узі 255 ЗО й діл Хлпьи сим АЛЬ фешту щу ря радо хдал ту дю у чу дп І (я
Апп осях КО Мі Вдрослу лиш ад ся діа дув влий ва вла м хм що З БИ ті Ду то МИЙАУВО бою из дм ха ДУ ру А Гаю кі Мову 1155 Мр ат спі Аїй ув Мей буд о пецп оба Оіу Б Увьф бат дви дзробам тТржОсі1Й мМ МИХ УМ Кт птобжя Туя Іри «БІ ЩО бу хи и іх Тире 2 МЕЧ ер ода Мід жд чи шоу
Буд оїззуш Битва Жук тож бух рБецпобаш дор одоя Аве бук вів зУуїМ пеу ше МИХ гулит аж сх бу моих ух я му Ку ху та май тек вив ТК ОЧЗУМ цем
ЯН Я т ча ЕВ шу мді злу ри лях я до Ви Ай. Шр дліє тата й ви три пз сти ди
Чаї Маї ткротує Від о Влро йно ше о Бие БМ оАшробхи рр Ома пух Ак пк. пий вч
Ко п хи тя ся о дфзатюу Іл І ф КХи аларах. Ки я. МД Фк, ЗШ т кіз Т3рлі і під оа сщУ пл чїх аз БІ бій ті М аа ода по КМТ М Зв жів
ЗО в З ам ЗЕМ гріху ждав Тед; лох ШІ стеж бою хг, тела пл сМанту бю. и том щи ж озіу Бр їн: Аль о сМу був тт У Тут зі АЕА Тих Му Кам пен лк мл ек
Ти Іо М Тихо ин а ЧОН полям В. у ту ФЛ. шим ду дан, МО я пкт Уже хи жі до
Шо їОМЖю ук КИ Біз віз Б Шк имо ТЖАЛ ста МО АТ Мал молю ллуМ си
Пт жо тих
Фзі Вли бек впєб ТК Аа біу пи Біне о бяи ТУк о Ббтє ім Мед о Бхе Зі
Ат. ТЕ ч, бут:
Бек БО 1 її щі те бу вот до Шен їлхт щи то Дике дян бра п ТУ бе
Зі із тТвЕ Б до йшу Бек о буш ж МК ШК ДЕР Тих ФУ ОЇ рго
ТЛУх пе ЕВ
Але ота спро вис Будо Жя й Бате п бом (20 і Бус бр стр ало Во
ТИ ІН 7 нене шо ие шик шен оч НИ Ши нан ен но НВ НН су бів Аза Ав о бжропувх бак Вів осту Ат іч оттв ТІ Мет вк алу аа тив
Ж ки р ою 1 п упало ща ех зе мезо КД ю «ах То. псих шеую пе лк о йлм тд піл ще я лу шк йо МІ бра Ол пд мех шек Су ЕМ би дплмп о пуз НаЗ Біз су тк лей нів Суз Улі Уву дллу МА вд стихи ля Тая од МТ я же би фею сошки ми рин Мер
Влрохвні Уві ПУ БЕ ТІіВоАХЦ СІ ти ПУ бю СУБ ше Ти НЄ Ху пп М ли спимо жкУу ех сіУ пух пай Був ВБЕОожде хека ЗІіУу Ві КА йо ТаК одіа
Ба по 1 шо ЦД Аа ха Жрачую дух Фр Лу тою жу ПЕ: уся ол ек ТО пек оХаї Аза Ап Тир олеч Бро Бе Ті рез Бут НІ Беж Ві сіу ій кп що пох
Ух УВУ ра там ЛУ а: Ті т різ, лом і сію ЩО ошо пох пкиф І базу мя фр а
Кжко пе са Ав Би АІВ ВуО век Вів Вши бен тал Одек ду вжи пех
Я зв ни
Фет Ст. дх Ля дух. їМмщ ЛИ пе га йде дош Туш птєрує пли Мах лах
Бо тб сля пло ме: сь Ве удо АшроАВЮ пр обею мо бою і М п пи Зк практ одно не я ІНШ с ел страж, дру у я тою Ки. ФР Ен пІх
Алиж МТ дамо Зсмо ммі Хі Теж» Фо у А шаг одеж бо лі Кот Бо ТИ їпо тов У
Вди ВЗропке ле дує тат Віе Би вів ві гдз о Ах АЗа вх Бе Уві хх 132 а
ТУХ 179 їх з зе на нн На нан а в Я Ко НН о НА В и За о НН деж Так обатг Хьмт Су тіе Та чаї паб Мей пью Шуз вп Су Аза 112
КЕ 5 тій кл ки жах
АН нн о йожи трлтх дя рт
См: мох: МА КЕ сш. жа хйлоО МАЕ
КА шо «вищ чч «ИЛ іх НК ши п ЕЕ «паї 1 «діжа ладом пах мзоїанЕ яавочгятій
УМІНи хх
Же. ЕВ: дет Зоб Бшросуй піз Бе Тих ме о Ті Вхросую піз Кіа Ку 1 5 5 15
Тк Відом бие пут щід Бі хі» пщ Вб облі олію діа Дщк Міг жо Ва її» пл див шу ід Кіш ому Бпе о вха ре дал піхв певІ Кіш и 2 Зп гору УТ и до юр тити КЕ піде ббюіу Ту Тим; ти ек. Ши АК цу то озійп ге віз шШек птем о Ббце тиж хо пейобем є ре ек УЗ ех
К Кв 15 ог; слоалжу Спб Камо рах ум рик, хи Ст, ще Воду Ин дл кут А
Его Ата жу бши Лі їнх о Уді Бпо Уа іш ВБза Алротьу ЧУді ЯЄже Уду ьо кх З дах фі сля; ен а нн Нв В НН НН
Су Він» щі Те Ат бі Бл ВЕУ діл Фу ле Луг ліІл ЇЛе беш ТУЖ шо 5-х ак ши гум пі КН ЩО "Жброжо лужні САМ СМ муж Споючхї йойжу що су и Ма доти у м У
Твт мес УББ Гол ше ей Аж облі лу Блєс Уа Ма кОм лій У дор жд мив тям ме пф ф плям ТВі обході сто жо шт; зх тд
ЯХЕлу є ха о Можлх жит и су пк огто лійа нам аж А КЛ хо та, «ле «и п шу шо ік сіУу ТТН Алла ді дга дес бази та Ті шу Тнж о лім Біш Хиі1 Вази УщІ їх 178 як їж Я як тд під тат А они у дя ші яти; пІрАХ Доу лю Кт льки йпех йпех саУу ва 11 им ле о вли Бзи вжи Бо СБУ Ашродей дів вк 130 135 14 тон те лхуя ЛЕ Уфі тя: Жир Ух спо ий хр тт рох вч й дм кл тя сла Вера Ме бі пе Бе пу бик УАї о Вхро пз вк ла АТа Аза 45 зм чув ло 125 150 З НЕ тях жах щі Ат БЯт дів цех «ФЛ» тА «Вт» 15 «ил піде
НН пЗИиТААМА ЧИМАЛО оАтугух ве «Во ТА нн нн в НН нн с НН НН і Но ев ШК НН НН ше о шекК ук о Ашй сш Ммлпосій ле она Ніж о лш чі пЗроСуд Ки Бпе дово жу пед ше спи и лий дач Ме кт ЕТЕоч тла т пис ди гей дви пу лі шех жа УйУ щі) вХш МФ Хатш цу пу хе сій ЗІ ОСуй тд Кк Зо дос Мат офі. стугяю здій ТІ Фдумо йоду ку КОТУ мит душе М: що підт АХ ла свя ле же бух пу сек смож жмж СХВИ чил Бах Бе Пенз мм Аза и ах, а пе У щу споня, буду, лою у я лют до сюди сля ее СПИ ку тот Ту Мб
Мах дево лає са Бе зі йо жи пи олЕц ко та бл рем лмК Ск и 5 В
Туя Від о їуьсо вла б бно би фут а ВВ пт лов й дян и ск мод Федя зу АЖ Іо Лама хр мл НІ Ба Би» лев о Мка Али вм ОАЕ ще зла р ий
Б НЕ т що щемт о тує уки й їбшуу ТК Бах Дахик ям йти т днк до лу вози хек опут ВЗ БьжХ Бк їх бе Ака Узі іш осжЕ ХЕЮзЗ Аерв да» ЗО Бар мет ща ТК пихикі СТА мм тими Ат Фени А ту, поета ОВТ дусог Мф. ий: Емо сжаоАїа Мі Там Ву Майї же) Ше сбущу жі Хе о Зіу Вас Ж Же Бу чт АК я я їпо 15 їх мені Шеує фе Пак йо ато кий біт схе личу шва Чому йіа щі Шик бот
Чаї Вкм Бо Тв Авролоер Бкс Тісв Сбуз тах опе М о йіз Улі Бу бат
НЕ їй т
ТОМ я сю ен ен а ня не вно о Не: НН НН Ше ан
Вів дуб Бе бля жЖет Табодхц Тв Суя Мез ТВроУах йародецй а пух
В ЛЕВ 14 ред суд дог гурар со ро доки дощ до рр тт пе сух дія лів ба лез Бас йод АзЗо Уі вт хів лап їм же
І ДІ ко
Ве ШК
УМ т пвлях о ру хі Дах луки Па лОою «там Вахімміа дахптатіз
Ух Те міш (их м лю ро А фа р бут нм хи щи тям мем о Фиєм гіхг меч шій мі У біУу Тих бек зді й всл Буг Ви іфлил бе ж Гак в х 125 15
ПІ гір ток ств иу Вима тим схо жд о ге, лит пух жмут: Ве
Уві ША пуп сте ща сах ЖУуХ ле ЖАВ св ду сбюат М бі БМ Вди ах пк й їм ре Как но нн о и Н ЧИИЬИ ПН тд ри ПИ. Щпетутю тях гл яю я дл тут ві пло леудо лат ус Іжа ж мкм сх жу бір опію ші о ЗІМ бло хв Ка 5 дит Хе ім що фюх Вар; пр Вже ім дм Мі М: пешх Чем дова мщ
Ат Куй ім о позу виь Вал то пух ода ча! Зі пек бе Аїд Уду
Б 5 5 11 ВУт,: фра порно слово г ти БМК, пло мя 01 ат Ялом тла, кт У іп щію чи ге ім піп обі ЗІш е ші дар ошімМ зЗій сі лів Бін що п --г ще ах БО ТЕ шО прі жфРх гір орі ля фут Сун се тувіз я рощшіз (и лий Мла1 цІЖ зві ові пі спо ад спі бмЖ ох спр Ма ша силь сій Зі хі ше НИ пу тлі фе ев ти Бус Хяі ята Та, о Увахотто Тут вбям Бут пвх Бош пух їло Уа їх зол МЕ йшли бли Бл Ж мод ож Тим Тит сли душ фі міх
Але МЕ йМшн зви За сій Був Те МЬЕ Фе лу Ми дали Ач Бк МА
Ах Ти Тих тота Же лерег Тон Зла о бі чаю іт тост Же Ду спокою адже шт МА Ес п У БД тю БК дл пУОУЙК МЖК ЖИ лі ОУЗЕ ХХХ 1 135 45 хо тк леви іс тре хі похки Дах дя ші ідо ІІ дл Тл МЕМ бе тав зі йет Хід піс шЕелх ту Акп баці 312 Уа Але Ге Ме го хо а Ми що оту слолжу сих Мчаф о бек фе Те Дюк СТилує по ТЛА 1 21 Сл томити МД
ЕХ) п леви ву Бр о МАК Мт дай лету ла ста М АН МАЮ Мп ОК
УТ. пи Мо
Хі тн» М: Ат лю бе
МИ сл1п ля кни ЯН. чит Відом пил звали впущевВи
У тв тйсеї тт тлу йо віко йти фодмо МО буті и Фурм їх дові бок. умі се
Ммтмоспух дм Лір олако стій бфови Мел ВЕС ЖЖ дек сл Ер мово Бе ХК я ІУ хх тк чн НН чан для бу стриж пк ти век; ко жом лях ваш окпе Аза СУ пий дв ошка ллш шо ше БЖ М жд дищ ХВ СхКу тп ек и шо па то січ дію страх шина ро альо фа рек, па шк о ляже їоеді Бах бін жу ваз Аза ме пли Віз отих ехо Бек шій же дід лиж Бе Бе отрбЖ рт а Ба ах їмжр іл; пам оте деко ст бліу Вк фл БА вай 115 їЕ УМ БХсо Хві
БІ Зх Би тів й фар му їїхж Зах фнУ й на лу її Дим тіж ші Зв міц «Ж сюди арок демо ДИ алу ДИКО ху ОМ МТД Ж ЗІ хі ета «ех ще -к А б ТИ х ЗБ ши торі сти со ж ре му жим КР стада Св СК йшов тро до дови МА шМУ Бе отут ім хі йпехотУМ ТК сам те Ці опех бе ВжЖтх Аж щу 32 55 ви за котре беж еє три ж Хі до дюктр о їМчеК Ши Тіма Має бу бл й
БЕйх Мак отих хо 1й під лів йо Бе Кпе їв бат узи длв бех ву
Золнх тре, пл я Кй хх АХ таж мах хіш ті дя сухе ою лох сту ді м дати ха дай сте тІє ших ВБдіх ХА Ай жа шу ще бБІУ ХУ Ваз о Уда й ек АЙ хІіФ діє ях, з їз
ЖАЛЬ де Ж тю УМ сх сзіл Ма то МА довж ливу ЖЖ мл. США ОЧНУ МАЕ ОМВО ХМ,
КК ня їй тож. еф, Лу ло яч тт ет з подо ДИ сдкмат, и рі Сл пути рІх дже Бруд Бош Лів сб Хі Мал о фує Мал озЗри Мало Тс спуж тих
МАХ ЗМ вза 1 и я пе нн ан а плов пи ст ди док «зі Взротав Ал шет віз Бій зви Тьвж Заі Алла ска діє вхо
ВЕУ І
«шій о «лю що «вих дит їни фунти хИДИ йизпїіпЕ сви КУувсУЕлЕ кА Ох тан М пхущо сти ри ну пк Жим зх тії ше кан то із пат Ах В
МЕ меж душ їжи Бпо се Був Уві Бей пек вк їз о Аїа ей ТІ Віз тро сти. В Тая пе Де. лю Аля ли т роли Вод стеки дя
Мвт би Зфу ГТ Шев КН ім Ала ЗКУ ТїТБМг обі ошег Аза тує Аїд БИ п ев пут п М 32 повен, Тим дожтхх, ших Мо мор що Чун те шеміч о Щнху й пі ЖІ я стад. ДОЮ,
Твковжо ХМ ши Буш Шах ія ТК Щек є ЗаЗ1 дазвовар онів бай ле я ду риб са шаня Авт беам о Аій Блю Бій Вей пух ЛЗ Атщ у Мі тіє Вар 1 ох, ФО ее ши нки шо: кн но нн нн КН НК ВИШНЯ горище чи ЛИщО зек вуз пі БжХ біб тйх ові тиж бух пуд ВІЗ ад о шим бух ух УЩІ
У Ке А о
А. доки дм ху ум т дм ік, Пи жим пл що лу я піти дотчум піно дж пти Му о зіш 39 Ай Бі ші Шут Зі о Віш Вів Ва ПМ Аг пе з З зо бедт Фі ля дою йомио Пт бе рр сій сту беж ЗО удо до В в са оійнІ Жах ОсСУх др лі пе ВлроКйит цем см Су мазі Му йлр вла их тла ллй
КУ 1Нпх Мк ин и нн ран ан на пах о жрлтх лою сю В Мт Фу тре ТУжтих,
Буш піз зро пс шум Буш ід Май си геб Аа рю У ОА МА
Зх їз Не
М лу Кен; де АЮ Сток тях фу Дт сруищо пях пи жом Хот З Яреу тик ВУ фену М с М ФММ ВІТИ кКде ЗАХО ма шАУ пі М БМ БАКУ уст УМА. ЖИТО ТУ
КН я аг
Бек Бут Ва бук щіп був йзро ТУЮ ВивостУ до Уві пера о бУуз дам Гух уд порт чиц їй
Я лю Ао ще тещі тю ле теги ихур хи ил Чет мідо м р: хр мі ди мем тт
Вова млі пені пшм Уща бій бує від Вл о БВЗ Пул мій дай Бай діє
ТВ хх хх аю и блю Зі лек МЕ тм да дело Вал ма сл Мід ї5о хе5 151 тт шій ук Меб о Босп Бус сту Ап оз шко бе тТьУ ТМ ДА де м зі БНТЗ цетомуд ав шо мо тає бух сім пУуХ ЗМ ШМЗ в шій Звж Зі Бау щі ШЕ ТЕО щем свчую тКом МА фот: пт ву. ЗЕ пу Таро фр темі Як ДЮ бе діях
ЗЕ ОХУК ХХ о Ущда жало со ТИЖ ЗМ му щшУуФ ХК Гео суапк мах о югОо сугу баг р п, пай я дош т ОТ ХМ. «дик С Ко Ку су тт ую. Ди ни, 113 тах УА ЩІ о даті Для ниж ло ск ІМ УК у Алло жур іх шу ості М ба У МАУ пл ЛАЖУХ УчЖА пд се -к акту яти еп
ТЕЖ а фен ллює (| би ка фа бпмі: Мщроллек дя іо Ті Му для
Гу сою вВзих уж о б1У Бо Ах ВКЗшоЇїле: Уді їм Аве біз пи Муз діа
ПО ша ша під уві дз пех бе іа йо Її длу пі. грлодетз спа пе Я Зі
Від о Хвні дзрошем сі сі АЖе Бецоімту бує ГВлОоОДОр й ли бли ба о хво ще пЧлхдо долу ущо дат фур дю, ІЗ чл шо лу додав рр у ючи путч т дич ІЛ пмЕ тр о маі Ви обЗіУ ВЗ сю вип оїма Ажа Бій Била Ва су безпо ії4їе и ВЗ ЗО
Зо що т заго сте т 124 с 701 хо Для Ж ЯР Пп хх йо я. ах, удо их щу вазв она псм Мей ї1ш Ті Кіз віз шіу Уві щі» піп БІіШ Бі сіу сі зп 48 Моя уза дЕМХ Ж кош с як ту Пр или дов. ож. щі р до ліхатях дм КТ шо Вау Мат сис туту 14 ех
КИ мул омеу слям жтро шу я. ліф лЕфо їн ЛЬ хтль ККИ ОБ Зі заду зи Во пах
Ек; тую ква Биш о риє ле щіє. ую тні блін Від Те ві Шету пот тут
Его сут вро ме р бує фл ПАЮ бю обіп Від Бе Єві бот тує тр зча заб ЗБ йди ух тор Заек щрп. Вт Бо люд т літ тіса пліт бр йти дай ши пхю МУ шуй Мер вів Віз Бе АвБ оте. таб оті спі Бр п Аве о лую тах да Ах що ду тую ять Бічне Ту щою тм чаю у Іі дату жиму ах ту ІХКй
Мат Мн шу мА. бук ве іл об СЛУХ А Уу ТІЛУ ер Мем сті ЗНА Мт
Во ла М пожежу Та по щодо о сичи. ще й т 35 Я Брю, п я Ах лю сім жУт ВЗ ВЕ сво ТУм век су сп о сбзру ЗАМ Ост ТтосжУм Ла ха У дих крам ї5З в М що маю мінути СТ до МАВ. Шезу бло ий ри Шут им. В МИ ха тях от Лу и СТІ
Ж хни ож Тит шеЖ мо у шу ШшшМ БтТю лЛьщ сам му шо ла МА А ТЕ ж ялд дих ї Ми кА рн пу Км ЖИМ ша Бр. шт тЕо Зам дав пило шо Баш пабі Бут лу а ах м пл сті ік пу ж Мт їла ід ул т о На кА а боже тотМ зоб, ім вай ті Да де ї12еожш ліц Ма ит уж іл бує їм я те кт лав
Ох я ЖИ
Дт бум пря Че ри Нео йл а ТВ м оз Хизмо лі б ел Ша Мао Тур
АлпоХук і лів БіУ Пе Аля Тк обоє ївуМу Блросвбк БекобЗаї ТВО суд ряСИ Ах ал пек дії дя був й Ме Лів дей Мал два тен ба дягю тдая дж Мр его вів Ака Еко Ту Ме Тіш Вел о Маї ка сгем Еге Ажробув Вл УВУ ря; та але зо побжя ун Я що и роми Дт пр Лек лдля Ж бу пряжі Мік дю ТАК Тим
Туш склу Ха хпиї Бу АЛ ВМле би уУ Буш сип ОжУМЕ ЖТбую чую мае ТУ Буш яшх ап ах
Ех Но Я пу Джух Щи о бумі нНід УТру лев МЕ сім селу у БМейт Бвє дет Зав ЖИЕ шкЕм о Ащо Авиосимі мнід пу ув оМмаЕахМ оіч тмт ож Бей о Бпє дво бфем те че суту ес Фототт
Зп ах ХЕ доли. КА СПИ. ую ра, Мртма Фк. пбогмєт Жак ту ит Тит лиштих У СТ ки ЗИ У
Ал Аза лади пес Віз пул Б. Ал бат хуй сх Мед ЖЕ САЗ БА щЩ3М
Бека й птн хи й пи
ВБіх спду Хую овен биш сещобіц ха) Біш Вуз ах Ти бі йлрозір бух щи холют, т
ШОМО Ту Ко лах иа Ж ти МЕ р у дк ТЛ хи Ж Тита тож Пп Ж дух я пжпожпт цей Хі Ме Ам о бец піу си Буш Ліз дип о шак о УУ АЕЙ Ліа за ОП Зх па
Ян лий ща МИ ШеЯу У пПжа тк ХВО АВо Бут йешЖ ук лю яму Ше «щуп пух, до тр
Ук тп тик гл блуд хе сТиує Тихі б пи, Дом смутку СрІ ж ру дому Тур
Бібз мул су їлЛяБ о їлоя Ущі Був Бей отих Бл Ат бук Бі ие взм Бу
Се порт, пох
Зо БпА Б пояу тн яром Мить под Фриту для тн дош ЖІ; М спек тону жі лід жіУ ви діа Бех Кит су Впе Аїд ей Аза дан о Атя шах Сей жлнкх Уді тах ОО ка
Але сли ти Ма Мві Блез КШек вв о Ащо Лів іп сб впро Бог се Хе
Іду гаНя от ти гови: дош, лики фонах тд гео дує, ПИ нок о ої, бут ли тд Я їжа цей о йеротію Бле узі Узі пек дае 5У Так олій БУ Пуг Бу НІХ
БИ по Іо по
Для Аз лим фл Фу. Дух До Спяую шо могу СВ До долю й Ми ат
Вви Хуг Хуг лі пі Тв обти бли Ху діз пою Ая АжроАжви Зів Бер ся ще як
Глямо тлі доски; в ве дян ца рт Ме шал ода жтяу ххх
Суп о тпе дія вх бЗіУу БиУ Чві Бе АЛИ дл ві Меп жв чай тло БУК
З Кш Б ша
ЩІщЩ СМ ше, Шев АЛ ляже п фуає о Тед доврм бу 1 пло ХЕ Ж що жи пуття 15 х віз Вар оБек Але тую тн Ар оди» о Тиев о Зщі ші Уді Між хо сту ніх
СВ ев 555
МІізх їМеха біді ал Мо Зк щоді дме М3 що пі ми; ТІМ; Але тлу и ті зх ку біш КИ пФМмоУуМмУУ мА ММ ФеВу МЖК ТАЖ КА; уми) Ж І МОЗ ІМ КАПІ пай ак зв
Пе дай бі Муз Би Тв Чаї Бук дах дет ТК Бі о рпе п 116 Аа ре -в ср, п ти ГНН; ТЕ ее
Виши. САроя о ЗМУ пПипьо Мі Жт гпроолаую ета Ж спе дум ла дало ее и ки КИ МКК засо Не СН гу ожило тусомиМ КУМ мул ДА МА ЛИХ
Тих хо ТВ укр ою дор пік и ба спр сти о Кор тс г; Дію і Ми факту 1474
ЕЖш ХХ вАЕО ОА ТИпгодце ТЕ ТУЮ Во о сму пФ Ак шіУу МВ БЕ ОБуд вно; Та п пив ості Кл ше Дами: ЮДИ ХМК шив ол лах с Ми ЖК Уух ММ ві ху
ТД чо 1Е яри ти жимі з Тем това ТК: саше; стін Хід ту Ле фі Сью Доу КО дж фе лаву жа Ту Тк; ХУ Фан: охоуя же сві мл аа ФМ ой Ада т у за
Тем божу Де да МТ ліз Дідова тома спУєт Ми
Вже Ас» дев ост Зіз ліу дів УВІ дкЗ щей ту З ду таз прик
І Я т
Фо я
ИВА ОО ща ел дя Ук рум изих іти, ик 0ОЛИЗДДООМ МО А У КОХ чий лу
Мет о Буз Бій Авй о Авролув Ба о Ввлю Кіз Айва о Адл буювойва Кко осі Уві
Еге ле; діз Блювоюмую су. уж йшй Сто Зіп шкода Бех їз тн Ага
Нри -е ул ку йо Ли спі си ей Ваше бЗіп Беж Кз ТВ осбваєй зими йли пПялюе Веб Чаї Бех Дів 3 Б С я іг ше оВло шчим дих сво Фо. и пише о ет; й ов оди шик Миші 181 теці ів 'шшЕ ів вда Бпш ліз Ах КЕЖо БЕїЇ Ей Ама лап Аа пед ві Бе 0 в р жом роди Тих. пу дод. М. бен Жим те и иа Ви Фичи ти Жук ТУЮ п Уж от же УТ ме Дь Кле т ШАФ ля ом ЕЛЬ КО м ми ско щх яп те Га ше ША схід ма Воло тре ДІ ЛИ хамлоемА АК К СРАЛЕ дО СБ Бек Мія на Зо з
Т-ш пед дів о Зес го піз Ехо бвБопйтм Фу Іа їзи бшкоТвг фо їі
КОН тра 1 1-0 ТІК їі піно гри Іде хи ху в тут до сірим о птм ІД пак сту лту ту 1
ЗіпоЕ; Бий тТУх шело Мій фе Біщ бів о Блпе Бе ве Аза кам Ва Би ях за я
ТУ їй 125
ТЛ бан Ту душу сти Мир Шик Да Зі Що ен Здоровя там ля Жим із обста збіз бе» Суз нев о Жеає йвп о Уві бзродек Бін Ти бе сл ут
Км 15 НЕТ гжит ану шує там Тит блем й Ті бло дм жд Сов Юре пли ло М ямі Би АЖИУ Тая лупу де «КТ. Ще ТУ дж ОВІМ ЖУК ро бу А ОопТих тА 353 Ки щи
МАХ я А УЖ ек
ЗУ Ехо тТвжх лилю Бпо їлйє ЗРУу БЕ т Тех Му Бхз отак ошьу до вВіжЖ пу їж ши у тв уже дю ЩО па гуми Срки (ЗЛ ДЛ мо им жу Дю ДО СПА ПУ ки лов Ак хх» шлОАМ МА ШУ БТ КДЖ бі У йшя МПХ бхжу млн лам фе М хі КПЛО ху
МІ МУ шМ
Віз тах У Віш жБх су. Баба ФштУ тптгоУ Ду віз Тих ху Аза ї155 то ло ткож о дугу яр зр я ху мМ тт Дт Ту, ли п Ку лика пі, іще твсоспуу яза тп бу Узі Тех сбоу йх тах оіУ від тех пду Жля Тих
У п пог, «об яю. ТТ лено мн, им тях дич Пі (ці Дод сирую ит уко СТ пили Лю лаком 1, зЗІу БХОо ХХ сю Бту тис бу Від осьу бху Боб так осі Аіа лу Зі1у ях ЗУ пд пав дос Між туту Ж м. РУК о та бери у (йти о сти тару гр оті: (па як Ах
АЛ СМ тжіЛИ ВКілю ТХ му КІЛ МК спе Фі ДЗК ДУ Ку у золу ТАЗА п Зла «пи шх шк пе пен фл жа пйхяю (1 щтаМ паю ит що А ПЛ ху мрах улію щлощо лу Т,
ТЕ ось їж Тит Б1у піз ум піФ АхМа АТ щі пі Бім Дів тіж ТІЇ зи пошук, пул лю ра шо зх» їМіна Щі о люжм апрфхя три Св зни міш ле стих мої соди АЮ ти В
Баш о гтма Бан шех шу У пе тло Еко ну Вуз о іїше УДА ДІЙ МпІЩВ БМ о УВІ ах пло зш5
Док Дю мая Ту юки тики М ди буки Жак пах ди йетіучо бири А ЗД дж о АШИ МИ су ЖВЕ меш о бшкі ШОУ че біб Са бер о шів ого Ім Ма
Я тав зт
ВИ ша і
Моск товця Сп Тл ур КРУ ем пи Та мли хіх М тим удізк мл із свт дж о шев таж о скіУу Зі1У ХХ пех ЩА лих ем діа рядова Мяй ХУ хе й Би Зо ит бере Мід пн ага дош пеки даю щідо ля Жіцаю Ул в жк Ха дути ще
ШЕ ою Кт МА Лади то ФКрц Ван у п Хе лик лек ли Кз ау з ЗО п ї Зп о лве що тк Втщ А -емодіх бви тів пек о шфре а щін уд пе Ба джт Віш тпу дів АТ Ге діа БЕо її Беж БК щі ІпоОхщ р прик спек их ху хх що сту. пола тех уч МО дк 5 и, А А отити що вом дю рр: а піс Тішбсйв ла б. ну Два Бо Аза Аза сек бли ЖЕ опе тро та й хв Ах пік галу вл три Тім Тим Темі тт сф й дячи т тідо тт Жтцн. те слі пХУ вда Ето їм о беш Би ТБ БО ка пе лій дпіщ дів АЮ КА
ТИ З що те Дод Ж о ЖЕ пе їла їла щі до ла КЗ гіху коту Ух) дід Мі ки со КЕ ес Я я Ва В а М ЗИ ВК З КО ЖЕ С З В В о МВ с и чи ЗА С КА З що пп чо шеучи дан тим Ж У ці шиї: Чим ЧУ жду тим Ск щира: дулзоу кт ун Го преу ТАМ ММ Ладо іфмйні Пе осрУМ ЗА леми мам См пал Мов ха ех 13 ат де ду
З Ак Зо п МА ЛАН для шрхи Ті 5 ди хост колом. лі их
Жов Аза Уві Ада іу ге тлі шШек Аха шу Ті дай ТіФ Ма1 хо жЖТ БТ ери чня
СИЛИ НК кл дих
Али ОА ОТІ тодшмто МОХ УВЛ АЗИ СУТ АМІЙ «ап а пиши тод там Дах Кох три ле тт ща до й дози ож сте уд; ллки т г, ше пул Кий лайл су Кп сбоу Кл дет АЕЛЬ лора пом ОО БХКе Кахх 1. ж то МА їх ТМ тв ти. нє лим лах доля Жуитах о ІХлсеї ЖИ ту хо Ж Ж ку «по КМ хо Килб укр ми душ бла мли гу ща КК осеихМ жи ха ох у т ХВ ди шою Ух умо ит фрак ме тоюмі З шо Ма хр Тир фа Ме пани ГА Аз деко оса стій сбмау біт влт дм; ТіК їм сбимі ям о Шек їм; Пе Аа
З чо Зх кеш не о о Ша нс нс НН о На НН Не Не ххх
Кіото йАЛа Аіа ре ги Аз Ваші Бко ше йшо оБіш дав А ло Мій п у ЩА
Х 88 М
Ми пчМмоО Вл о белі ВО Тце бі чи ЗМзу ЖлЛИ іш; сем дай ід Бе міз
Б ще т ЗБ бек ом жи 1 ро с ско іх їм тах ка и рю р Кат т гне ро Зее ко бій бі дише Бпе бе луйх ІВ Лю Ло ув о Яет 116 1183 пох щ лк
ЩЕ о пк жило еши М сп же дО АЮ БЖ о АШ ВМО СВУМ СВД БИ ЕКО щи ЖО Ой М ярок и та
А Нд МІЯ
Мерів са ЕНесвиє Зв Аїд о Бецп бів Бий ББУ Бпа шмт Ме їмзм Кл 115 ї2а хв пуб щоеуу лек лодо ЩІК ОЇ То ух сх бух сті дк Ти вдо А сля Хом їемд дво Бго вів ошЖеЖ Пец іп бе сум їзидоВоя Те Пер ба спо шем сплю зи ча її шо ап и пау йіх ка Туллим т У ик иа и ВО и ОП ха лу Тахо сб» Щи УК
Тан ші МІ лих Вре піу су пу Алла ти (Бі мо ЖБкосуу Б Ту тях зх Ек НЕ
АЛ У ДОЛ пу петля дру фа дк Ті, (Ех Жодо тп РІЗ лю жіно и но лок ту ДЕК и мМ ЖАВ САУ ААУ шарм ях ЖиХ У КАС ОЖжаХ че ЕІ МО слу КОСА
То п т» Бу Кіз тем ст ужо Тих пу Вів п їУ Бум Тв пу дво? ожВЕ ит тд чат
МУ МІ м пуху ж лю ту ри рух пли до ма сти кутя сим рел ую Мом (ул ху шу ем ді лі Бін Тилошку Аза бе сім Бус лих су шт тля ОочУух хи зи мя
Ах ХМ М. ші А ОО Щи лес Маю тю рми тую мує фею, СМроко ст хе боку прю жд Том
УМаї Аза ші вто біз бліу Бхс ТВЕОЄхУ ВБко Тих піу вар от сію пев яки те спо
МИ па шко вів дру йла плво сі сто фл біз БЕОо тпЕ пу Ащду п ощіУ Бец Віз хх я типті пла й по киЛХ шал рень и АН ве и пе пл Аля ую р г, КЛ ДЮ Ме А пІ1шж діва твт обі Ко Тахо шіУ Аза тах о зЗіу їжі дів пі Ахая тв оЗіуУ ле клю сет, яю ЖАХ мини тож т пох Кл я ит, - чу АОС и Стрию ср у тощо я ги КВ шт жа М Б ЧЕ пу ршо. ВЕ шо Аді ШвЖЕ ОЛлім Во ВХ слу ла
Ей ЗЕ стру зути Ті бях бук пили в тота тот зання Ву Фуко як рію ПТру,жо му Мо
Біт бЗау ша ші Аза Те Тіз ре ЕЗе ово Бак ошум пн Те Ко Вів алу на ТО дво тм м о Вп т. Й во ижуж тру тя тя тому (Ли щу вікд'зацохзі ли Кіз цем є Ллш Дай хм САУ УАХ о демо дей су сце
ЗО пе шуй яри бек дю ШУ хни 1 ру йди сту в 0 у ра о мем Тк млі
ШИ ТЛ сВхАЛІ ХІМ МАК ААУ МА РАМ см КАЛІ стій с М МК ХХ 1сЖю тА чих пай 35 35 тиме ри; товщу Лек У Удуло гшлк додтв спи сом пі; лу СА суч кт ту ЕТрет іншу ВАХ БМ ом МІщА СВІУ Бр ОбУХ БАЗ га оУДА лрд ото вХМ лю Ху зе хх 535 зало бів Вт о Яер їм діа сіу вва бо» бе Діаз Там дів дів см дих «п КА Сх ше Дивмо Кн ку МА пе се Жов 102 І ба м у
Зах ла ух. 241 У у п нн НН ин кн и ни НН НН
Біб Хемосмат ма мі св оч шайо їпе схій Щішф о Теи ХХ О АХОМ тп АХА их я їх
Що беруи фбусх МІ бух мах 1 км ша Ду вені Туш ем. яру ки
Щі Жек опр стих Бре одне аа бів остю Аме шко їх ум бе ТЬХ Бко чи дя КУ шо В УВУ дов ІМ хі САЛОН ТЛ доля СТ лу миє Аж ут пиву й р сет лук ві ОКпФ Кіз Ада Олі АТ ІФ ОбІУ ЦПЗТ ХпЕ Вуз шад шим (Ів ді ОКХо
ЗЕ 182 ВХ Апо пл АХа лів схо М» о Мяї Аква сту Адурожв Я Меп Бевз бух Мало пех
Ах, до й алу ча жо та «ти пт лю иа пк то улов С аю я ри МН и дтЩО я ОО плив жк Ук кА БЕ. КОМУ уж буд ум жа їм ва у ть а мл ха жо я А пі КА вай оБля Ух ду чшМиМ Оу «Ше 1113 сил піною ня Жди їн деки дімі т яд шия Хелм лю кА ОО
Мо рн Пієщ Мвт шо жі Ти Буді Пгтум для, БТ щ о йящ ді поді ід Ві
МЕ іню Кп ЩЛвгожеє тур оБсц о беш ппев о Кпе Хі баз о Аід ей від Від ге ти і пАжуже ого то КН хЕвл ек А а ная ОК я НН СНУ Ху ве дк оьвц ШУвме Аля їх фі Уві Ту Азрвропув ря Так сю Бме Бей з ЄМ, и я тА хе дор сдовую лем Му бра ли щшизч ПЛЯ. тя фври мі Бр дати чи хр
Аг Аж жуш ра Ле Взросуз ба ШУ іш ЖБК ЛаЦ Бро дав су в.
Б Ах т» цею лих впе о тТпв бух уві Бу єму пул ПУ ЗИ Ага бук Тхр о її5 іл по о поле ут товща тий ЗИ Сх жур ре ттху спижух тт» ДдІІ стук, ДЮ Си КУ пу Б пе їжи шеК фу тую ТЕРОЛУуй УВІ слу Жах ТЕС Мах ех МіЗ я та п вда я що їй ве ях бохо тиву ЗЕМ ца би мо Дочиу Яте ше и шви ен нон вве одвм о пем Зі зм: МУХ Аийй т ге шУЄ шо мні Вази шиї Бл Хо пе з чк
Тих ВХя печей Аа ів БІБ обІУ БАЗ Ва ма 118 ті біз ХХ хі іо тах тд бр (11, міх СІМ дико й и, з сп білу Худ о Бтих Мебо шо шій
С
Ех шиХШи Ві
ДЕ щ «ЕЛ, речо
Кене Фін злу дет уиті я сіно Каті! Мниь»з вибікуайів «ВН В ливо бно ід и шко аеро до шу сич о пі юки дк ховух (1
Ммеї пе ліз Узі ЖеК ДО АБИ Его да лій вла ше офУук дО бе озій
Ах їм хи ж пра нує пла ту из и птки чо до шля тя для ро ул т мод папоттре тую Вл Мец біп ось Ффіб На ошій Ат піп Зап осв Алла тую пл по С зі і шле бах шт дів бід й Дт 3 тхящшо Тож лив І из АВ: сії широ сей ша зЗіп слів о бІіУу пе чаї їм ув ух сІ1Уу ПУ ди за їй хг,
З п кл
Фа щі томо Гео Ток ми Пір тлі тя ро пив ил с
ТЖМ ОА У лудо шу лева ЖИ даФф о муй пхшОСУЖХ ХМ Фг1 й я Кг - ах ше ст тех а зшити мо й бе А
Ми шІБКТ ОІД
СУХО г тлі дивак
Уха шапліБИиБ аповиуЖсхх
Аню МУ
Ух пи туші см дюруг УяЕ сдояжи доні дум Ло Вч тям ПИШИ шуро Ст, ян жує ЛУДІВ
ІА сх МО ММ лу ЗАМ ЗХ біді МЛ МУ кре ше орг ли му нти
Бк Ву лож відо їврУ дит тією Вих Ам тт бує нею іже Бут ЗДУ тлу даму ж Лети зе докт Бе БтлУ йо Ж вро спек мліє ет а тик пла се; зл з ОН тами й тя мл: пут в Тл. 1, тд стподу их щу там пу Ах ав осови жо дах Бош АкКм ода Бе фкш дав спро М КИ ХО ЇлЛИТЬ хі хг ДОК, ме М Бу ях т ри то Бу шт дім Ам мч фе бурж пі дик ТТ й о
М АД МЕС дж Дж. тай йащ; о йлщ МПЖС се кит шкй АЕЗ дашщоЗзІМ бар ща кос, що п х ш
Гемі ф их бр сбМух про крр боюму Сбама бах Хихма Мі Ст жу сим кв болеух дю
Сеч офХе АзройвМт іхні Внноїшми: Сама сдиек Шев Ба сіб ШеУз бек їм дер шт тегу х, п по о хх ЩО
Фут, М я, Ши дух, ен с не не и ни Нови Шов НН НН НН
Жоть АкМи ат мли БО пев Ада пай сю де Та ліф ха Ж ЕМ пл р ка птах Ма жо тки Тут й ху таб и ІКАО ху шежт й тоя ху ДУ 1
ЛВ ЖИХ Ха пен. ЇЙ АЕИ БЖ ТВ зе У. ув сдеА АТ Ма вна Кал «і тихе Ка
У МГУ лм пло тому 1 учи ця у Дак Му тонн Лама ре Ж бу бра Ток болю ВК сл: ЛУВМО Зп ел Тну ТИ Ай буж жми ля пек Лі тах буш бе Ва с Ка кт,
ЕК 15 нич ват гру во ус т рю рим бр, ІЛ А тра тил; тлу зльоти вл віх
КК БЕЖ АБКОХЖУЄС дуж шХ их мА ля АМОНО Буш Вт ДАЄ АХ МИ 1 я тлу
Ми біб ов Але бен о маз одав ех вів пек БНЄ ЗТа сів ощіЗ Бро ту
Ах їх 05 ша поле ку му піл режи т кт Дек ст ж сяк луки що Ак А "зв бу іУ жо тТБг і БЕ Тйх БВУ Ве ток обпіу гжс Віз і Ата тТплоЗІУ
ХХ ІМ ее мкА мяч ху Жоучнуи аа з, 1 од ВІХИ де є ДО Кр яю у то М. ит Со лукть КИ схалу отЕО бут лу м ії ср Ж Ж кі ау тА ККУ ІК хх зак те щ тлу ши УЛ КА ткрж тах фари, Ту (Укхи яд три йбізх душу ну шли т чо бргзу щштцоО вк
Тех ХУ Кепослй ім Уві сів обі БО Дьа шу лій то о біу Кіз отих 158 ХО ее пла лучу «т ла діт ан Шо он ик нн о вени у Шо На пу КБЕО САН псує Ака о шув У ВгоОо о Бівз сллу оз Там оши мМ АХівонХ бу м ху тулету ди яко чи
Бо сло стім Біло іп су Буз ла пм Аа Мт зіу Мр» ТК шу т бюл лет ря єди ох ши «ли дих бут губах тк тя «хх тер МИХ Ті М п т ху Др ую иві Сшеки; УТ г
УЖ ЖК ле спо їх 1 киш и мож и ка м п о а Кл М о В п а п п СА морях ДК жу до як ори ет ух щі мому жукдю що буру, ходою спуск дн бу М од пу по так обрУу Віз о сУпю су Ме ші о ЖУ БЕ ОЗІт БКОо
Ка «пул пи бі «іх ле дою уврем пд фе. Для ля р я рек ПИ спон Ваг
Твж обі бос Шеж ЗІ шує Его АТа о сіу Аід о жвг су Кр спос Бго псже щі пох ту Кз 5 ета тА Жоляї о ий ун В що йно лу горця ст фу сут ж калину Форт ДВ мМ Сем о Кши А МХ І шо АТО СМКИМ шоу ЖИ? хі у мМ сл ЗАВ му ДТ лом ий Мк, ОО ан ОВ Парк біля зо ся Й Те) АЛ ти хи ложі до гВІ
Зі Вхя жлвЕ шу Аза тцт у Бо дв о спіу Аха ска бу ти Від Біт
ОХ 31 2 пд дов тишу тк що п дИбща феркию ох ти Ся тора тяуюу Пн яю ФО ди у,
Аза о тнпу 01Уу Віз ТК ОБУ бо бій бу ді бод се Кве тТпЕ бі ВІЗ
ВКЛ 5 У «У юки ст шо таці умо піч фіни, Млує слу Жнту ерує УТ Муки ик Є
Тк оку ТТ мі жих шк БО був су КжО пех о бду Ботл же ФІ
Уа дах их туту Зі су ут тори йди зн саму дулі дод, т ли Фет СР дк 1 хи
Би мні ваха тп іїТї28е уд Улі ТБ вл овев ТМесвій зів Бл шві Ме
ЗІ Іл ЗЕ лає їМе.х Лрлгр чг. би СТ шу чих Доля су ую Фю Ж до Ка д дося 1 ліц опІн Ваза жи БЖ гі Врпе бла ЗЕ БЕЗ Зі Атбп об Аии пши Ле
ТУ ж ее
Туз влє Ашжи ІМ ЛЬ Во тпм УЩі бак ма)М іш Бал біз пам гія Стух зиц п злу де шо КС Пп жк 121 же шк ХА име Сблах су Му й ою у фену уко ижекею Лу ех Ти
Май Жах Шик Заї дтшт філ йер ТВ оТне Але Бко ЩРУ бо Кід Бе бе т ЗЕ ах прю М туї лу хо тло ще сло 1 ха ли о дач ке уко лін бій ж Му Хі ШК ЗБ Кай о бБІіУу Вів Узі Вдз тах дер оАЇІй Би пл
БИ БО вне піт Аню тим ту Хр и Крут Бда о жихе бю ри см ж то в тод щас оджи лах ліж Зі йно сек о бенй дал ма о ЯТт те Хає см ТУ Сем ще «а ах тре свя щі поле щодене тт Фа 374 ду Чую би пн гі Сто ТІх
Те Аля іх йла Бай Тіз пек Уа суб ай тних Ти дядо му тая тах ал їо соту лани слулощо сиди ДУХИ ух Чи т отит пон пе ння нн НН СЯ
АВ Мою ВАСУ їх ви ле мл Є ВАДУ ен СИЛІ бо п БЕ КА
М Х ря АЛІ 15
ОН
Ка п зи тка мл МЕ
Кая ЧИ скло грі зі фі імя
ДОК. шпали сиМикІіпалтли
Кома ни ни 2-5 ви А о с ден нн З РА МАН Чиє пе Жоруєі Стіни яма ол я хор
Мен Вухо Ме: пу Ак фе Бі Тих б Ббши ТА оШес щі ла Ма рей я т я з яе У ве У шості пудри мі щу кум дур АД СТ ше Чарую ріт стдям в Зв дщ шк ожаловЕато ма мові бл УМ ши ші ж да ЖК ЗАМ МУ ОфИХ ЗА ка
Ха жа жо тот тіні лю, оте хи тяж Хм СВ духо: ле щ, й ар ср Мі дом фхшту тд
Ту їз Ще; плує сищ ож бмзм ТвВгоБао Фо ша Фе Мет Аім Бло їм) х5 0 се ле ве не и В На а зпюряо ПЕ р Стаж сту ря У пл хи ву оте Жук си ХМ Кіз споум шодо Мет пуй ві цем ТК тУК шуму Дух де ги злу Ла уро Теж буки фо, доб й жі фу тям дк Чин сп
Аді Бі скім и змі ПМ Фк: шо Аз УА Бе Віз іруш су Сі и чи п. пт шпй й; ле па зохтмо тт спати до тори яд жимі: дог тюлі дові просимо зо тайу дл вл пз о пуз КкУ Ал о їТ8 уд їм: Блроїйкі Ве смлю ста Ома Ма Блю ВЗ
ЗЕ о тк бак їх до й ОВ М духу. УО спую пи ЖИ Глен Кн лихууя
ВФУ пд надо Жда мет мат УЗ пуш сихм їмою МУЗ шіМм бут МХО пух их пе чл в хау ІМ пми Тіз» Адже Вер жХв лу вла ма Аза осхіМ Від сі ЖАЗ о їшМі пл ух ле р ли
Ал 1-х шт їх Жди домах їх Зо ук ох р КД: шк Ко жк и Теми т ти; йогу
Ж ах нує Жие бвм о пу жУЮ ТЕ ос век ов сі же Блю ке ДО
Не я па
Не ла шлМ "пу У піч Ве дит стока йяа дових ето ліз ДюМи: Омлет тон лу «ЖІ АФ ТчУ АЛЕ У шМшО Слх ВЛА сбКОмМ лю Вл жи МК дій ому пли хай пе Мп хо г нн нн нн нн нн и НН
Свиа м Ага Мі ЗУ Хв б см АХМа тку пуд 0 Мал Ми буде: б їх и ОО йти сф, кулер о Тожк УМрр. Тл ту то мух. тірущо ж рює й тую Ту лк то хи
За АнрожЖтут Шу З мул Ху Бжа шу хуя АБО ВУ зл Тєм Ми) Беж
З те ки; хо ТЕ Кк м'яти сті бат ото хе им ЇМ: схо ст» Вояж, дя тТіму ие фхту пд пад вх Наз Ап рве уд бедо ББа пт піу вбо Алта зи Зеж Бзро міна тіру зва зов тік пі та пут тру торижо фиуу хр тоуш оньо пурср Бмф ил о й АК КТ св ліу гео дла сі Пух ває 33 пу ЛЬ дк дип піп діа уз піз
Б ІВ тий фо. ідею Жиоам щі ї31 0 Пі пли лає Суто Жеіюе Сх сті Мах Шу дошк Вих
Мол) ХеИ УЮ КВ іп Бі ПУ ЖоМмаш муйо ЖІ дощ дак між блт Мои ж ших пап же зай шахту Феркошіс дай бум бли стро Мід ацетат бук дер бе тр о Трх
Шех Тую Фі Аве Ттр піц бр Віз іже) Тук дав Луп Взробье Муз буд дп пи лют буде о поту Я КТ рити дуле уУмам о ТЛаз Ми дет ж шт тю Ти ден ЛУдИ
Зех дзродіз сиг цу АкЕЮ Бу іо Бра долу Вшю ЖЕ Ффенк пуп ит пВш под дие ск я. тХт ММ дод є жк
АйеоБпх ув пре «ії ЩА чіп ща «вл па гене тт чими мілою ши 43, 00 по хі я іл тин «тім Васімуза кочеіпзівині З сапив о ня жим стою бод зх роли Текля их яко дети дм у у теді ее гін КУ мЕЖт ЖИ бфи МУуМ З)уло гул БЖ: ма шле щем під мні Беєб ТИХ Тл ду в х 12 1 йіж хі цем ошем о сак спт Бім Бал о Кп пу шує нів дія йо сух Ва ох пт їй їм ре Как ща Му Пре те Ше чаю тим: Вк тії Асі яр о що ам їх о Вва лір лЗіщ жЖВхХ Бо ли ше дес їц БгОо ща вл ос ЯЗ ши 018 ВТО и
У Ка ня щі: дит тим щодо фари Фу та чо біт дж жу а о дауиу «Ши м шмі: Аа ем Від бій Вуз їшко Па Зб Ах зі Мі ХА Вжт НМ Ха
Б В І щІіз бер о йія дл о жтве ср фаз ФМ рома; Тло вокух що Іти іл
Дів Жек Шів Алло сім Тв пер о Буз Вуз ча ти бує Жеш маї о біц їлух що п --г що ах ви ТЕ ши тома ий тру ті в ких (МІУ ТАТ І Ук» ідир я у (а о св ВИ
Муш ПУуш ау с Жша ше МІУ БмжЖ си ха Не ТакК осі ду пет Бу ше НИ п
Твкожів ти Міз пек ло о бре Меаї ор лу Маиі Буд о баро ве бохо Мі
Мо Уа їх
Мито уи йтц суки дановіш пія бла шт пуб Муалопас бро Мді для мо далю ші йМЕМК ТИ бат о ВІЗ ЯМ ою жо шТМ Ма ЗУ Вро Ма Да МІХ
Ах Та Тих муки уд до дотое бо дра їжак І я. Тудамо тТодюєт Ди І я б ХВО дз Уту вк бліх УУку МАЕ Ми ДевМмо ем жо «і лю о пжМІ ДП Оп МУ й км МАМІ СХТКХ 132 135 45 кре пики лу до сто кт, І мох Чічже Жов яю Щі дл дра ти ля ку ту спе дау Віз ПУ о біп о Ба від Тук 3 оліУ ВОЗ Уаї ДЕ бух Зштп Буг 185 ай МУ Що
Яга и нн НЕ НА Фу Фі для; МАО ня ТІ я, ух доні ТЗ ха
Заї ем Мі їде Те: Маї спі Бвеа шає Атр Жра Буш Куш вв о Аве 11
УТ. пи ан жлію міт бум блекох схе пис Мо сте дме тост йо бно яп дит о тіц із
Алю ос шум ха бу Ток оМаеї ТК Шбех ус дво спе зп дж СІ НІХ о яхт
ХО ТВО ка ехо ЖК лдуяо дит шізех схе ще ділі Пт Мф сн тек пт дам діє
Шж яром д ду беро тп щі да ЗЕ Бл БКВлоТак їни пе блю да У 155 МН вих пе ту сів щи пек Кі ря ла Мзхю лят лаз губ ім йпЕ сах сДдля
Вед оду по м смЕ тре БУВ мАЛОЧМА СДУМтТОсТіЦ Мих МАО ЖК су ща 21 З йПТ но ен НА ви НН нн Не НН и ол НЕ НН НН ше ЖЕ п Уді дяросзіу те Зі пт ша Брб ож аг сі Ка плІ их ша п я
Мо ЖИМ ПІК ЗОМ МЛ Балко ВфиВЕ см МА у ЛО и КУДИ МА пу п п Б пу ше Лища сі ря ПУ вжи Тем мл леж міц овен лимк Туз Аха Айа кий 5 ач чт Ка пох тих б шт с Тезодростчя, сжелату, Мед ЗМР: я пли Хди. КТ РІДО хх ай Аза ую ху 12 ло фез о Ахав о АЩюЕ їдт о йшЕрОПіЙй Тух Дао спіа тек
ОБО ще «У. йВдв оса вВап о шує май сум ойлц бух ог спо Бл Авт хім дув хів Бор
З ї35 5:
ЯеішоЖормиз Зжуме ЗК дич Бе йо піді Мед тя пір ху тої де І ху
Ми Бад ме оУЗі Маї Ноя Аа піу Ж Ру бів обі Аха сум Му лу 3-5 1 Зх зе їжа хе дер ЕВ БЗрощатв КАе То Ша Баш джу де о Биш пе шою ШЕ 2 їх ца
Ту Ки Жук Ада 11ф5 Авфросвіу ТБ о пеж Бех пек омАВ пет пай Ххю пі 5415 Бо У поету укю ин 1 ОСІ, и дою ух яю ТІМ 1: ранку фр Лю («хи В пім ше Ма Мід Ада бух Атро Тує Тит Тіз бл оБиє ше дат си А
ПУХ о Бак чаї їж мах ба вів НІіЗз со ТУЮ ШІ мів оБлзр ом) бу пЦез о Бко Авр
З па за
Ваши ка яз Тита пд Кук КД, пи я, До влнн єв У ие спі тюІ Авробих буд Ту пз бтіу Фів шум шТМ бро Ма біл ше те пн за М 306 бЗдж ж у де пла Ми сук и чеку Дощ МК: підт пре дл Мої яу Тв у11 йпех хавомет ел ошім ім йпех брова слу м Біе АТ ШІ ТЕ СЯ ш хг БА Але,
ХХ їх Я шу сини ск КУ Перо дереу Я дова бла сф тв чу ТЗ ТАЖ дово Ме
Бдо жало ст та Пех Еко іп дело сум да Бл ізо Іжа Авяи Мах
ЗИ и их «дк Ло дохуу уч що, дю; ше ДІЛ. ЗА Моди Піду. Мої оди стокє Ж пжа слу де тв ові зво бал ше шуб жі йаросут Вар о пу бек шоу
ТІ. й в мима ТМріх У ли; мли ММ ло ду Те; тях С души РІЛохр й Чадо Тож лем щу тм сім хаб см мах жі тн бут Хві ща спла ол бий ЧУ Бух НеХ ї50 Ж о уж ую Ум 11 Ж, ле дани і ща тих ле ми; бно дон т тв. ув опт ТКо пір їі Уві Ага уза зи Бей Бус Маш їул дао о їТе Був ак а ак, че ко око Ле я дви оБр» са дат віз кре пу Бу Ук їн тут штук ня ЖЖ фБулошує о дж
Мав оба та ОІВ МЕ ТвИй Бец об. Тих Кит щі пе йяр лях ЖЬт Ва по НІ З дожив ДК тля ри йовху Чеуф тла дів ре бок фло тету лм хів лід обуюш дат Віз Було ша олацу Тух пу дів Бе бек с ле би Мід ще, СИ пот
Ат птАМ й
Глямо чиє Жди ке епоВле ба чек Аза ів хів і дату тв ту лин чую Адюо Ма Бей о ВпроУні ТУК о Ата ів оМа піп Вар опуу ТУ суп
АВС Я щит тв вим зе Ашух дач мит стр є; пече т Тл стеув ущіх ія ія Вер
ТВх йху 115 Аши Ага мех біу бі Зжз й фе Був Су Зі У Віл ВІ пк че Га яко
Ох пли що во "реє тат дует пи Ток АЗ Ліхму. ХК йоух Тит ср пт ду те ди ло ки
ТЕ ЖБЕ Хар осід ух тує ЧВ3 бароБув Ззг Те Аих ей бе-х ія БК ку и віх
Глут ги їди тля тм лАщО печу боді ло біде сті стер Тейт як дет, пт А
Омп Км ОАЄ му о ме У Ди спо я хім М ХХХ дю ОА ха уко 5 що мні Ві лек ллє і Тих дія ви оет йо Аа Міг Тим; Тв пар вар
Май Від лу я 1 Ве дій Те Ав де Аа Мій тує вгоМаі Вар таі Вів тук бут 1 не дів Тен Аве ОАЕ зи ТЕ . з
У ПИ дих мах ил сли ча фази хни дод лі Ба до ща бі рат Шнкі що фани ф жк зішЖ мул оУна маАО БИ ши ФеВу лю Ба Ам О мл ше ТУ І МТ АПУ 7 ЕеЯч о тах буки іх Мк в фа шою й ле ЄкіІх Зроби лихо Ти ре Аех ем луу хіу Ми Тло Бе схшлі блісбу сптий с са Я гу еуш БЕ УКВ 525 сло їх БА пи Мік Ух люту еру Мч фи Сфрктр до полю дини ошту Ти. ло вич и
ЖК ОстмУм схадм зхі АМОМ АЛІ ЗА лю мер Имя Й АК ОВАЛ дум: МИ та ох шли тик я гоп фени хищ ую що Спр сталу дяк трохи стру ту Ця
ШЕ ВЕ АКТ ІА Бтпо уді Бпеобазп хпЖх о їМму Мек Уж уж о пЕИ Ху Віз 15539; пт Ах вве Зій пе онмих ти дим дози тр си йоу Ууаї щЩіз сбрую ші ю бллу дат
ТУШІ ХАТУ ІН СКЛІ ВО АД НО ДЕМО хо лиху тло ту ЗКУ У сза о хкмгу у Б В шіями. Зими КМ ЛЮКМЛ о бе пу М бом тя. А ти щі ка мм ве дамо обу Мі Меі Ваш пек оЧха то яри Від Хе сад о бьм тв ок
Я пе ог тех гр и стою чиє що тихдо ще ук лик одер те тт т в іо пох щих о шуУ АВ обу ТлЕ УЗ: Буз сек шк От АТ ЛУГ балда КМ АХ те тт т шо,
Ка ідо ви ши зічхе долу а мя СВК ЇМ Ж М; и кА дзаую сірим ких
Відшф Віз Без Ше Бл АВш Об тн по уз блю пуз ба Дим су МЕ з тай тах во диполя Ж с дю шт хи и щі Жамм брі с» дл дл тм БИ
ТЕ дтц сі» бів Бієс вних БМ уз пу са БЕо біУу ЗАД АМВ Су це зай тав ле м нн нь нан Ши с А ВАНЯ а ша Ши в и дош оАер має пу бій жує Гі Ват бас оа фі бо с дзро біз піу дк рт чи спи
ГЕЙ ти п
Буд пам Бібл їж бшм о щіу Боец Буш ма паб чаї о УдА ФІ ід Від и чт поц ЗЕ дво Зу йзи Ві бі ла бі Тор обми Ні вка тв що пж
Ед ВУ жил Де ді ДиЖ «іа ПпЯапі1ічз пеомедсіїд «АЦП» по флейта утиск коллитегиті та гла сс ТИВ сад що У бодидст нт тити от, дах іл тлих хи уссвлали пІКот Мшатложх ле ошчтщ им М МТВ, по пев оку в тстдо сек шої Кв до пре ри вк доводимо сук ик п вжив ск засттусютас плоска вже сту забаджєєстз вакукссутає ласки ююх Ми ти Тит. Майк УААН І МАТКИ ДИКІ ЛХУ УАД МАО СЯ ще щих Зо я ОО ші НЕК ел тиви Так ув ВК М «пішя їйзсії1цпЕ5 спе чай пе дивецевкоц ва цов Ка смак факиу дини метчик веде рів Єретик у кт а вл плеса стека ви дапіглсеюртя лібсмастівняй пешеалеспае ГУК
Муза тлята словмьсчясаи лили АЛІ Ва Зттваасоааа оаїелютити ВакЗКцУуєття ли фесльлиєт ік тях лег тьитилад тс и ол фот пли лилтдл вия слу юю Коди пуф оту див тя зам
Гдловакзи етчіассвта сталлю али девізи лат юєлидт зестповиау ХЕ ни и с че ЧК и СК НИ дев сти ко и ен чи ЧК зсазитсавдає сатагстазо Зо сщкоїса забтезатаз пблестссоє паста сера Я а со а пи п и т бюст рю мунтвия сли Ким а рт от др т і, Мп; лаки х стлешеаств павтшавияяа палає сао иали змуорелалиях Б ли па сь ШИН пути Бо ча ТЗ
Але ВЕ же Ваелодтв аехикалів тарпх о й чвилансикат савани сах Ваза чаас взосачієтв сопевациуа Ве ОЮТх, аг кави каре здавав але пиву БІВ кллите п бативаасзив сливи еезл звакБсссатв візова той поситссой БоВКЕсИО хо пером щирих пев екв о Кок да дв куля схо др за гтвптсжиае акукаскаха тай зіла зпбБккіслазаз пухчаспатиох аку їта и ах ВЕ
ОВ чном що ші кю аку, лей ВИК «жаВм Васіїзмзд зеїпепаовена хе тай оВ чхизтчакета азиабасзсава шеффрузсііз овезсакзше заказсчах залиши х о акошцататиа паслодівихи чізатагвява мтшлумавиата Якабасиуся осот хо кий 125 (ЗІЗ іх сплео цЗ шт, 1 жУшип шо епірдм о дик тла жага їли феійнальсийжиняі й жи ПДяЛ ог алдй а КИМ ШЕ ап ва
КК ЗЕ заз цллира лет хода возах ФАТА рат итио я ч бситесваць бабизитазо фосавабсно зобабзаео баклосваууєз нега Зова ма макси може муть ВВ руки сте емаф ять ролу мія гикию ее фоже м я итизааєчо пес ева в'вуксаткв штуках зезаззоавая пасе її ірон Еснтнуєи и відер св дімтея дови дети й
МАЛУ ИЛУВ Ж о ДИ и Устим Хеель СТАТИ ЛАВ. А чаш учнах сахизстата Зак зхих спос вслзеоааустт заказ та зб нн а кН нн ни нн и НН а А НН АН т плода вах зздбоьідта Сакаїсируус пса зсиптостат шалена Тео ажптьсщявх паза пе слі с «піц о ух ок «ПІ Ки чих Ви «ШУ Малі лізя Бімерілаіиия стави» Бо айссстювах зовртачвла звсообіатаяз ясла зспцесваву допшзсалує ВЕ домені мМ кидати смів Кук т роми позив хо
МЕМ я У АЕС пото Аца я Стать улАТ тя суми У ТТ Ка посаткткт сачиздцачіз атлавакає стдавссаьв спбавусвавз вози таттах во ев нн у и Нм НН НК ло апзавалета зо астм баальааичя озкссачєтй са ТЕХ шлю чт «ил» 17 чі шЕ Ди их Здано фа Кіра ис ит
АВ 0 КАТА ПММ ТУТ
Ой у и це мовив па бватледис сботликтасоу солуфк сих усна пастир лети ше зеехсотисис пзсобсєзата соска тКано пхазакосва зоаабазах запо вае ге деяких ях, лах МЕ «тю ші, аю іх КІ
ЗОН 4 поллюк о пре
Ти Зх ю да Вау ох ТМ в
КОАуг, цл тащИиЖ Би пліт ред мит видів звати авцьв ЗАВ МталЕ вт дащимт плусив ов. БО тстпизадавХ пизодлвтта пад ятах случитлвиа МЕП зако Мк вн НН нок 145 зсппассвув апа боазос поши 14 «Лаба спало» ї1ХЕ ши БЖ плід, ша лит іі ну їі
ХЕ ВАКЛЮ паті ма Тихі пд ех «ра ву по на он а ми пр и м о ке п о пр о п КД ор и в де тлу поста тстх шах кккзсатхза запаси часта. ху зак щцакуз сазустлави аск овУукх баласту дазоаалузиа зчпизои я 12
Чивлка їшЕ шлю а птх тя Зх «ші їх еВ ДНЕ от ех ШИН НН ал ху. яких «ил их о паптіїми тдМліилепнія
ЗЛ ух
Не Ух дення кі шеопилтажці пцід пелет секр дізшоаирі пбгтмієттроту пріо мат да палатку аплатжтивоа завачассапа прумуаваиатя пгопадперях пет утяа я о нулю кусах апвлужавиз пппзиазиг восжаМзиво ах іш чих Зх лох ї55 епірдм о дик с шипа жит. Яна мкм сил Бала імя Сум кічшлеитлух
АЛ вух зх т емісія пи уже В нки питомій пре нки ууя ситу и ча агтуансх шле слихК да лат плавав Куца росви сла то 5 вн нн НН чаї пухових вблнисувтяу щпвуєтсуїв взваличчдав сблеатстасв щфлаоадизох М ручок ри Комоди єтьм се Вод омтио кемК мориия Квт іх оду кзуссвежсо зібадекоава апа аасз поза тала їКч «лм пд. гул я си 11 чі шЕ Ди вита я Зкдая ана Кр ис пек рижесо х у ШИ мас цАБЖЕ ПММ ТИ «охутун, це
АЛ о зишпалудйии дидпсастита жоеЕца спри чис дала састо ява Ж сег межа меатих дж ке кетй. Киев щиа пн Кевивлух о с КК: паса твух зсааатастІаух такс бтнутаазлова зЗвсщичтоаае 1 «ше 7 што у
Ши ДНК со ух шен чию гумі дод ххій5 БазсіїВив епсптапІв яаАе ОВ? семи ву СУК КІ Ки пути ут падає пили дети с ти сестро зстатс стос лас азот чева чай хоя фжївивлаЗш частка б вет пиття складі лофт п ери тив тої парео рлуйтсоства спасе щловатт суспобераєх Ап тюо ІА:
ТИТРІВ ЕХ КУ сли МАК тла лах тром ру са А Мо
«ден БЮ доню соєю рити ФО одиєратож гунів фури А т де ре я аг сипле сгас пихкзсадаза авсопаВе звсзаащо скпзссатає пабадатата А ас шай пслалУуии уста пох ти ел З ешіи шо али ОДНЕ и ут шар ле дежіидил ок, дих шасі мЕ лорі ша» о ЗВ я зав мо межи и Когтеча иа ижиу ста ів тр или и ув жи вит пе сова апеостааїт слбоствазич зпакоссацяз сазовлувИи подалася о вина ві хтялудиадмо ери співи вед ВЕ абцдіавен пити 15; ву твваї стясасвздазв йеяздвцапісо зозаБсадаз вітагравалоу паче ій мн нн в и и ННЯ мет тодсгеВ фра сгутх сало отити ти «г мату БУША ду МАТ. ОСТ ТВ Зоо ЩО сиве у ЕН дрих ду дужий ою рчов жв увнии дов лиоватич о СВК вих ди дики Во их 4 зсссгтачиус пови тса ЗІ соєт завтиааліз БЕсЕдствосп восакоюах о
Малу лихе Мана ми Зшювсха. сАМЗОзеадиМ затаааи а МС акту зп
Фк» ях «лох сл
ПИ пр лики ВИК ких МАМО акт ес пай ща «Ця ща
Маша тиитютиіях сруедевзілІнй локус слюда вівчар «утво и д'їсвцазва спад зуца ума дану ос чЧовсестата засво Мо оно Ши о о нн и КО ТИМИ ву ню ж риі віль см дк ки КК по бзаввзсссах гас тазо взЗЕсалсзва част тю пазозсвасе ско ім поля чексх засно щаво досясиссакх ппжаввувсо сштлистлоз лутаса та а кліп Щїпо «лм Б «лит ОДНЕ «дж шапісБаЕ тпм ліпаленяки
АТЦ ЧИ кан БНО фечаль сднен в орру жде иа ди вождя МОДИ пиво ик дути із Ко тт иу й у саБсамаках спот асиє сиілатежЕкс сапаєзатує паззсвттвна сосзаупоаг щИ поклауусях сспчловогз вдів сррзлссевац жішозаацву вазу 17 впливали сиїсмащрт. лова лим ладатохХ тя ую мМ СЛИД т Мо но и не м о не пок м ОД и Я оофорит то слот емо итив ЖЖ іто зай стпукатахоз пулзопокт пзавстьзала хобосасваз дакочсаьсяя Кат да кап шва» сатиозийУ пазли м слашли Що
ТИЛ Ко
М ьч їх й Я «іш ЩНЕ стУлив Васі ї1пЕ смлихічдІіенніх сан Що деяка Била ліц вита ци д Каті БЕ ридав Без і вихов Пбидасенла сесія лита Кто МЕС сяст бсадесбей» че
Кл АЛОЕ ПЛИБТІ ШКОЛИ вла БеКДЛлітах сало ат, 1 тах їх едівхм ЗХ «М 170 шу че епі ше дних я щиколотки тур вт г
УМА шою цшЕ Пи КопОаТепЯЕ «едіНІМ о 10 дрилі доли дна иа тях рн но в А я Гоа зситадийтл щисльосалза апоспічєезух згшласуваа торсласайасси пизипдазаа що пу и в НК НК ви птжодчаєвя пуща я Каже сдаплиоаат пава оми бовалаяхх бала Ах зав» воп бапАТИШИЗля вВСаблаходио шаБпсадаза ях КН «лих 03 ж о хол ВЕК пд мазоліня ТБипхілутачнїя еп 3 канрувомк и сн і, до хм піт діт я се их ді когкахикти сласацащтла слу Вл Коделитв секту Кг ацизодеабІів папсабсІшо гідтілсвали пдялазяцуілвзй Зарвсщягтї вагова їхе
ЕТ вахМ сосок аза аз лкквта тгахкзеває таУузутатув дугаєтаззеа. НЯ атаитчесзиа ЗсаБтЕсслО паузах пе СЕЗ тЕмиМ 10А «жі 4 «ил ОДНЕ. сим Жди тах ді чддит золі мЕ лита кА ЩА зтпасєзостах сапесуво порошку зе сптлкзиан тель су дела ло ши пзсІзоЯаакат сиссоутоплх доладсвася пзувсалхаа соспечеаят сао че їх поеми ази зби єечуюМ мтехтилувс лица оз ії пат УДЛюУуА ЦЯ хИвИ сплю екдтито Ацетон рт, силендтлу а ня МИ зайпатсвиаті саснсосдасу поза уве цип зіаля тод дупла. аг нн НН а о в питаю т и у Кит лат костел широ САЛО Ма му ау тах сорта зх пиявецекммМ веденим вує Во дов ви мою йвоо аль пу гечиєттов у их вх пилу захтвсовьт. апжасстутх писдажаваах жентюаавва пачсачтиаа всдодкщане оо чзистдидал о сжллротт»у пплклпалтио лабйакоттаз зфтлоощвя тловалесав зап ие и Кв о ВН о в Но на ов НН 1 аасхзавизчи зчпасавцаця зго освзау сьииабцосва зостксвидфу алеля че вра итетум Кз тмуте вих с мозухих ит мит тку фе сте тиф китів ща двоє вузи вас засести валтччтавто МЯнаостачаа ЗОВ 54 зп зн сммуш ває сви и сплачені сш ци ви шл; взвссвуатл сплизпвачу дисубенаУ вусстлозайа деблатсспов сизаалито шк шовку ужєвтций голи В дути ту сел ук жену пра яд аукшискмдєчза члпопбетати опмруучаище прута ссосУзоця сощутуаих зе дачоюяатте пк метцє ворс. ЄбаБоєсучив паса епоха ств ззсайзссай пилаусорачи сойсаазчи плоска тео бощоль Ззбчсапозиа зв аасапивоа сополта сопшчраккс співів садиба пезеунася 3 стсдвсапиз апоєесактяц оо азат Бидевбооє сбувсаазся удав «вв кивапикква золи весен литадсидат пал шесяа МК во зе кхасуласав коотьачаох заасастеки сдосзссаза| зктодасдал пдв мете 102Е
Зааатуссаво сазладисая асссатасдя чапатащия ЗКЕсттежоа ЧуасаЗаоа 105 зчаспдатфпца зіакчавпаяз пилоданвімй собпсосвал сісава'ійвзз вавувалаци «та ваахзорсветчи біатесвнай сито лопат беру спало петлі зиастаажкату соухогутаа тізоеусяу встожасота псеАсахоус возсавУЄех ча5о зутасчукуух злпалзесана Фплизедмою сешастуий тадазетихУ актуа ви о цс свосудузце звусасвуу закзЕковус пссрібсіска саябсвтуво та козлатлозахо птсзсваищ слусанвови соскЕтлз щаховаатво Чуб тозанита з44В атудааезаа шовсастах. спвхсааух пече едчазоааВ асужааиюми їла ші ї05 «йідк ЕЕ ей» ОДНЕ «15 Взоівця Євитінутвияїв «ап» Що5 зусанзават дазоаскозое слквисслоста зоба Я тсюос вЕгатаах ї
Чтталясот стпяахчавая сОпатоаапеа спот цвдішатлто щитки пе цстсчадлов длоятчазиця зшцрлчецалу луска хз заз ваа ков чсвая ї15о чзЕшьозкцю стодувахай авозотЕуея звасезувтя ачкЕдстис агтавакова зо
Козедфтеска заббалтадан спон Ее плоосплась кодах СК клюх що дашаесалах Ммуоцехлвий плиту аат лика оесаачо сдунвшалома патч хм зу зсаалчсвая саллцавазо тетвитвзад сві раває гаолеоцьяв сг коза. а фасзайвята спсаводацу аБесЕВеКЕ ВЕлаоаєКах сбобковіка генна їва зопшзвссевс попаде зподнаєиу жовваосУо пОуАМИсВвоВ випаде час сталей дтя заалияствмє азу пвацаквалі вблазуани збу ах, шир чуєтайєьса встшуеаанчоа басозатося сизсдатсзспа сбсатзчцаат чплечоаЗне «кі зедевасивзи пилу спи завам пакет Фест плед аечту х зскдчвисао Зазезівто атвувантоа тосалічавня їбасзосавну диво ЗВ сзктраліци веосаєаво Битом озвквеавкс алсттец гопезовияо ще ппалакалих ду цАо «і» 105 шк пк «ие тд яхт ВИК дих Масізася шими ія сао 0 ееітетутвИкВ МЕ вцтрит сушепиууир жию в ах жгрвпікоце ШК вх ди п шттипахепа зіалдитаст зайтусаттая длесдавивас їпаслзашат сКттоваяах шо
Заслосадсера окт ьиа пила шатами за підста са зидпиятамо МО
Спицолоц сесрІсгзо алсоестаси пчопдласспсес бдоляецх хрущ зт ш шртлєюатиуво дл плесатаєв спало аза початі пеопшеутот лицо ша далцдісвавд слід ТуєвивуУ вдаладеиєт сажі суду товки БЖ
ГОЛУ КУТАМИ МАС вДУЄТАХИИТИ сп АЛІ СМ ШАХИ ЛАДИ по рет тлі лиж егітуф в кл чити Кит педалі вод сх ге КЗ зар зсадашеаалта волаизЕтлчза осо Еска часалзаваз волоки зиіЗЕахсад ЖК шану лежить з Кереверг тут и г Ворон тр вик вх жк п стюастатай злпидесооле бавсозсодув стзаазвозя сабтусогау залесЕцата 2 вати кети сири сдатт сабстдоши переве то ит Ж баповтале повібєвчев пицалоїату цабчЧассосй ясуопкетитя соте я зивоцизсаи аслсозатут зпдЯодависа лзогадзаво аа аляз зазаваица п посдвадійавтї псоцбадлчнсце зпазовіало дейбстоалоза зоссблоса бобер со. ап ча зниспаай подив вастс алеваєєсе підсчздситний Бвісасвсжци хмссанцаш щп сабоницава пали лоїа класс у підшзаистізо брас сово лепсазаапя шо пдовеи ста ве ващотри лися еко оваа воспвстаєтх база бля далі ІА АХ ОВТ ВИ АЛОКСТАХ, стада ВДОВИ г СЛУХ Ж прю вн г птах тих шия, Не сипж ЛИ т «лі пу упало Ба ех хат МЗшІлАМЕ ЛОЮ АТ там 3 ен и ен А ННЯ б Ж Ди о тику сяк СТ осва ЖурььМ бік ню Тая мес пух де о Вех їТе пек хів Бе Хі Тахосук сем о бец тліє ьо бля; дин би див Сухе Ме СТУ дя пу кт лоджію АТ ил для лМиря пед о жЖну Ме опуу чу мит їз Асбдодяу поз Вів ЯКО АТ йійотУ яву та М ло
Полин Бах шко М вів Пе Або сп їх Зеу пів Буд шум Тв осів
Ба по шу тд т їх с Аж Ку ИЩоежо ж АЛ Коли ЛЕ това, оз ЛУ сю кл» ер
Тен Уві шо Акт бжробЗіу Муз Віз Маї сшхв огем був ЗІ Ті Шею Ме пл ту кох
Ух УВУ ра
Ед ую іш мли Ми жи с фр ля сля ую Луш лууу Тотях жу Микиті чаш о ХхАМ мч сш спор скл хЕУу лі Мухожай вда деп леаросивея Мем мух
Бе ли ТЕ чо яр стає тують о Щушт ру бак; пхи Ки ле Ле КО Кия щи тд я ерогя їпвобем бру взИи о блротяв о і ТТ тля УАї Ба о блу вія вла Мекотує п з ви тТве Аза о дЕр ОМ ЗіУу ТуУую Те дер ода ко дек Зі Би дапцо Тлдло щу
КЕН ТОВ Мхл тла суді щфркщо ле яті до оті ин Стодоля Ті що чияи ЗЛО тро жі мод УА ВАВ ОМА ші АТ Від УА мЖМі ІМ ОБ ЕЖЮ ЯСЕО еМоО ІА МА зхх 2 щі
ТУХ їхо її дових тех 14 Тео ти лох дов, ЛІ Да би Щи же слати (ля ти джроттр нів іш їн: хв Ато пі Авйп сто длю обій дЕа бу су мух 4 ук з Ух зай 130 1-5 1А т, сплууии Била ла Тк их о Тиси ит кн а ни НН Чи жи
Жіаомо лад ЗМО лІма Мая пут шт МЕМ. ШВУ лю еВ жу Ам Ал СИМ ДТ таз од Би й їх п ТУ шо чн я тт дій фдммо млі пи дир тп долу ущ фмосаюи
Бали ма Ха тУкошіМм Ті ОБід Влас Бдб Вдаю щрУ дерма! Мамо же
У ШЕ в но нн и а ан ок нив не ВАК НВ КУ Храчи
Буш схде жо ат ую шою уж схьщ лу ст Уа БАЖ ЩНВЖ МІ де Ха з т пе - ве
М Кан ах
Гляя Аніх лу Мутх рр ор Тл ст тео Мокра тре ред Утім стук лин Акт Али Бу; Млровлнн Те Ті Те ві ЗІ лик обу Тв отр дек 185 на ХХХ туги дових, Ал. Але ушу що 1 до дах ЛУшуу у ствах тек Мови до вд АК
Сай й Упі дип вжЖр ліз Вів оБаю дво осув сем Кпув дв ові вдо У -139 те, ох
ЖАХ м ММ
Мей Жук Ав о їжк: КЛ дл ТУук Виішо їбмомМ ЗХ Ж му шій ие »Мащо вич й ли пах Ку
Лема Пуск Ж Йю тущи. блю Ж рода ШЕ: б'ю хи М зу лот кю лат не лдвлюК ук Ал Би ух бла феже Бек ов су Мія БЖ ха впє у СЕ дж у по ла рух «цім Ук пт вдо діл ШЕ Є Деу сщім 31 хі У кю. Деу см БЖ ух МО ДУХУ зи дО МАЛО Юм шо и сті М саду жа кб дл лАКЕ йо її шт шій пев даня ТЛ. Чу тд Ми свяхмо б: дуеті йо Те аа ту сміє бар брілю жену виро ум пр леми Уж бут Ем кшНа КВОТ ДІ Бу АК
Я» 2ла тв щі дом тур фол; из см дох з Ж іо й Ше жах що Тему Хров бах сш ТЕ Во іч Хек Аво Туж сім бід опет Бех ек ди ем Му лози п зт
ЗИ я Я рат сіїху й са Тим ах і й дк я А тил пит мл тих дю А ях ша М мІщ МАУ Му ОХ МАУ шАМ тю АУХ мМ жу Вл пу М пу в Зк ваш
Удля тУурлю им фодих Згиб рю Урі ла: ти ті МІ СИФУ жа чу реє сток нет оажу тпжх кпе о УудА пт бсіц бал лах ІБ: лу так од Ар пет охпу утй хх тоюхшю тр три узи МутРрі три бує Ду и дода. укл флеш бр ля я
Пт дав хів Без Бі гак о Бго дес бук дл сш Бі тих Ов см бжп 4 За ее спиш 1 дек Мзі Зіп бук АтЯ діл сту Ар і пяляе Мет Ап обех Акт 3 хо ЯК іш ем виток пря пт три Жідо ля вет; Аошху слп чюо девую Ту тк гц біп жі йку вто їй о пза Зіп іс без вжа Авй сім дзп о їльЕ ТІ УЗ шій їх 385 джу т Лу Тут ЛШ Ліги й т й піду. тд т СтАТА ОО М о Ш вжи сш з»уй мл Уа у йашо ми ую хр ши сво мух се зу ідо що ЗВ їпо шим Ми Алл сума вВлроцел бо ЗК ож тва Дів ор ух см Ай У
АТХ 1 У
Тв нія ту ЕТМО УВІ ТУ Тзи нія їм Еко Був оспій Бім Лід Бад ТВі
ТвЕ о Ніз Буд Бпе щі ТТН Бпзи нів Га шко Був осліп Зі Лід о беш о ЖВЕ хі ЗХ ка жо тує т бак ри та Зима дл су Юдеї іш Шут щІЗ Від пу
ШТ ік. ОЗ біб шу таш о Муд бла су хпд ії ди ша іх Між пЗх
Не жо 45 бр стїхи ам тлу КУМ. Ти Дохо жом шу М діх ом бр Ши до Су
Тв Яку зп Хі бі» о Бен Алі Бе Вій Ма оВзЗроЖви беробеє дао бух ахлу 455 зал дсклю «ті и пут Зруб шт рр Фі: Ти о Хли бущ ко ми глуло ху дк оФфМиа Затоскі» Блротбую ше Бе Еце кує шк ут лиК Біне бул отТцх аУму БИ жІЕ БО тре о гдяд схо гл Зно сбдма сбіхує. щохтх же б гли Повіє гі сну іх тв. тт о Буз БУВ Бо отжийг Мей тую йзросСав Ху ім Шамо іє тлу Зіу ХЕ коня й ах,
С ЕВ алжх що БхОо Вп
КАН НН дамо нти я му сну мання «УК «лід бомю
М ких тидтмі а злі УлМмІцеляиХ «апа ДО «х мія Жим Тл Аг тот РН ше мі щі Ж би тах ЗЕ Ох
Меї Був пуд Душ Уваі їдкі Аза Тем бій дізовіз Тіз Тих їхні Уві Бій х 5 хи хо
Біт Хамі ЗИ дет зі Мі Вп ДІп Нілоп дл були ба йху спі дж: ж ж СМемту МАУ омезі. Фбут. Бихю буАЛЬ КуМІ еру ою й А м лу МАЛО
ШИ те ло уки спіл Чаї гли ту дачу те див Бій Щщтюк Арі лох Мі ла цдтц ціу
Бібз іжу а бле вто Алла тТжу пер оВі5 Біб олЕТ ув МІ бух Бі ОБУ їй їх хрипів ЦД тя пт Ту ха да щоку Ж шо му у Ме піо бтаАї деп БТ НіЗ Бе теє їі УЗ Ап од йіз ТТ Ар ТТ Мет бе 8 вт ст
ЗУ ке шу
Ат Акт Жпе їв Меп о ЖяЗ Був ші п оАво одед мні Від обею ек Аж 3 шк ч-а ех, вл та їх ща товщі фур рік пики І Фущи. біт т: бик Аа слі дові фу яз Впр
ТЕ о йхбЗ ЖжИпХ са о жфеш сі Али біу її ТУХ Аза лій АВрвОотТУуЮ СІЗО ДЕР де рн мае
Там тлу Али ТЛугачо подає Хеюриє бі бр ОМ рн КТ у лаг, бли о йодлх ит Туш го Хуг Ук йлш Уют лат фл ма жащ ни юУх БИ Злек Еш ЕО. млр зап поту ІВ дови їди бля жу тідтрво сх що фрик. Пр Ат ов тяа плію ЖМдостя мл в 0213; я КИ хиб АТХ МУуЖО АЖ МІЛА БК УАЛАЙ ЄТФ СВІ ОВАЛ МУ АТ ЛИЛОКУ чле ти як 115 155 ТЕЗ
Віз їде бек ютММ Тизщо лю Діло см пила Ше ей бо в пе туя дови ук віз иа Тук пе пу Бей дів біу 1 Бех Тук Туз дп Пеа Бе мех
БИ 55 їй пітомів Віз штну фрмх о блеои Здмд з) з Мюд сбима ра Чер Удар 2315 Вар
ЗШ АТ ВАВО КИпб БОШ МОМ есе у МЗМ ом ами) МТ КУЄ ням осІМ Бл
Мах їх 1Кх5 КЗ ху Адже й м. Вк йо дач М ие йох таб Кит ми Ху.
Чаї джип ій Ба Ме Мін Аза Ат о дай за Же ли ме ба сбмух Бе 157 хУта ке ср: (пуху чар М де пудрою ую та Віда й Ми ут Ве бло ря я шт шум ж ВЛ Ж дає пут тую ЄС Аме те хз Вл они Ки бул хор
За те 133
АЖ Щи КВ ди бик г ва сив; да із Мам Ел у рт; де СсВЕух дещо друк тк
М САЖХ пуд Уже мг ті лять слу УЖ КЖО жи бр зу ам сюпу
І щу оо ЗІ дош Ум стро дочо Пеижи тд 24 мо лю М ру мА дорос гм пр
Те КЛО АЗК Хит ОБ р пес ГКУ бі ВАЛА БА щу М СЗЗ МА ОЖЮ чат ел соту я, лі шої пут йому сту ох лк я добж, Ди туя ж вд балу них РА доки Во
МЖК Кщ бу ска ма ВИТ ЛушІ ли Ма меж о йлю Ам КМУ бал мг ка 5 Мой пах таб пі ай Жак Пух ам сг ої до дод тАЖД ОСТ, дз Мі тар А пу ше іх о маї вакосій бім сбух Вів длш їв ТЕМ йМіа лій ми хай Тех ОКО дип лі т,
Мей АМуу. ето» Тдчо Вт бама Ма о Де від бан од здат иа хі лу тик
ГМЕУО СХЛАЮ ААУ рю Ух ил ММ йлросльхи стен см Уща с мІіЩщ ЗІ хух «ит пре, рЖ шлях ЛУ ко
Таж ру Тим бух ДУМ ши СМ у п чую ко
Шия а ВМ ХМ БІК мий ЗпМ УК пу зи Бу ря пев а хЩО сити 4-4 сх ММ АСУ
ТКУ Ка
«ПЕ» Білою «их 105
Сем ім Аа сті ім. ВО» о БУуЗз ат Мб шУутовшиа ВХ Воля скОг ступ щем
Свт оБжке Хїв ВиБ ЗМ дм біу Те оте 015 1185 шій теп біу Того ні ід вже іч Ат вав ошіт Ат Біу Ху їх Су ду Акй АТа ЗіУу пе й 3 15
ТвВествпя дів те ЗБу зро Аа о Ббес сплі Уві Хві Бій оХлі Ум Ух щуп
Ві ша! Еко дал бей їй Тв о Ге ПмЗз Жук їх бо бі Мел Вхст вкл
Мет Від туз лі ім ех Блю взЗю сбьзх Бех доо сем пп сі Біне Вів даю Дід три бух шет пев лів Яшп Ав Був пін Раз Ася йта Аза и ма У їту
Айр їй Мві Ви Вдропів бий; ТК тує щій Бус Біц Меп опм'я Ажб ех 115 ТО 15
Взродап вла Іл Всем слУти МИХ Вів їмб,і Віа Ага ді м мех тух вар свт шві хат де міт пі Амур обі Бл взроптЄб Абу поет ве бух Віз
Сбджм о їХе ув пу льж вна Був був АТ о сву Зі пек БЕ ум Ат ми тхз оАеу ім Шу пуш бро їх) Ви ма їлпт шу бле оМаі1 БрУ ТУ Оле хо 12 М
Зв бе з: Але виз АЛа ван Зі Кзе Хв вч дЕТ бІМ їтМ Вже Зі
Зах Уві дів Втелу Маї Вшй Уві Сем обра дес Чі Бін з сло дво лап тТжЕ дей жо Али ЗіУу Бір МАТ Ба що лтЄ 0Маж ли ба ОУУЖ КУ ДЕЙ
Епе ж лів пу

Claims (22)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Композиція, що містить: а) рекомбінантні продукуючі екзоспорій клітини Васійив, які експресують злитий білок, що містить: (І) принаймні один стимулюючий ріст рослин білок або пептид, вибраний із групи, яка включає фермент, залучений у продукцію або активацію сполуки, що стимулює ріст рослин, та фермент, який розкладає або модифікує бактеріальне, грибкове або рослинне джерело харчування, де фермент вибраний із групи, яка включає ацетоїн-редуктазу, індол-3-ацетамід-гідролазу, триптофан-монооксигеназу, ацетолактат-синтетазу, а-ацетолактат-декарбоксилазу, піруват- декарбоксилазу, діацетил-редуктазу, бутандіол-дегідрогеназу, амінотрансферазу, триптофан- декарбоксилазу, аміноксидазу, індол-З-піруват-декарбоксилазу, індол-3- ацетальдегіддегідрогеназу, оксидазу бічного ланцюга триптофану, нітрил-гідролазу, нітрилазу,
пептидазу, протеазу, аденозинфосфат-ізопентеніл-трансферазу, фосфатазу, аденозинкіназу, аденін-фосфорибозилтрансферазу, СУР7З5БА, 5'-рибонуклеотид-фосфогідролазу, аденозин- нуклеозидазу, зеатин-цис-транс-ізомеразу, зеатин-О-глікозилтрансферазу, В-глюкозидазу, цис- гідроксилазу, СК цис-гідроксилазу, СК М-глікозилтрансферазу, 2,5-рибонуклеотид фосфогідролазу, аденозин-нуклеозидазу, пуриннуклеозид фосфорилазу, зеатин-редуктазу, гідроксиламін-редуктазу, 2-оксоглутарат-діоксигеназу, гіберелінову 28/3В-гідролазу, гіберелін-3- оксидазу, гіберелін-20-оксидазу, хітозаназу, хітиназу, В-1,3-глюканазу, В-1,4-глюканазу, ВД-1,6- глюканазу, дезаміназу аміноциклопропан-1-карбонової кислоти, фермент, залучений у продукцію поа-фактора, целюлазу, ліпазу, лігнін-оксидазу, протеазу, глікозид-гідролазу, фосфатазу, нітрогеназу, нуклеазу, амідазу, нітрат-редуктазу, нітрит-редуктазу, амілазу, амоній- оксидазу, лігніназу, глюкозидазу, фосфоліпазу, фітазу, пектиназу, глюканазу, сульфатазу, уреазу та ксиланазу; і (І) націлюючу послідовність або білок екзоспорію, де націлююча послідовність або білок екзоспорію включає: амінокислотну послідовність, що має принаймні приблизно 43 95 ідентичність із амінокислотами 20-35 з БЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 54 бо; націлюючу послідовність, яка містить амінокислоти 1-35 з БЕО ІЮО МО: 1; націлюючу послідовність, яка містить амінокислоти 20-35 з БЕО ІЮ МО: 1; націлюючу послідовність, яка містить амінокислоти 22-31 з БЕО ІО МО: 1; націлюючу послідовність, яка містить амінокислоти 22-33 з БЕО ІЮ МО: 1; націлюючу послідовність, яка містить амінокислоти 20-31 з БЕО ІЮ МО: 1; націлюючу послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 1; або білок екзоспорію, що містить амінокислотну послідовність, що має принаймні 85 95 ідентичність із «БОЮ МО: 2; і б) принаймні один фунгіцид, вибраний із групи, яка включає бітертанол, біксафен, бромуконазол, карбендазим, карпропамід, дихлофлуанід, фенамідон, фенгексамід, фентину ацетат, фентину гідроксид, фторпіколід, флуоксастробін, флухінконазол, фосетил, іпродіон, іпровалікарб, ізотіаніл, метоміностробін, офурац, пенцикурон, пенфлуфен, прохлораз, Зо пропамокарб, пропінеб, протіоконазол, піриметаніл, спіроксамін, толілфрлуанід, триадимефон, триадименол, триазоксид, трифлоксистробін, М-(б-хлор-2-(трифторметил)бензилі|-М- циклопропіл-3-(дифторметил)-5-фтор-1-метил-1 Н-піразол-4-карбоксамід, 2,6-диметил-1Н,5Н- П,4|дитііноЇ(2,3-с:5,6-с|дипірол-1,3,5,7(2Н,6Н)-тетрон, і М-(5-хлор-2-ізопропілбензил)-М- циклопропіл-3-(дифторметил)-5-фтор-1-метил-1 Н-піразол-4-карбоксамід; де вагове співвідношення рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Васійиз та принаймні одного фунгіциду становить від 1:100 до 20,000:1.
2. Композиція за пунктом 1, де продукуючі екзоспорій клітини Вас//Лих5 являють собою клітини представника сімейства Васшизв сегеив.
3. Композиція за пунктом 2, де представник сімейства Вас/и5 сегеих вибирають із групи, яка включає Васіив5 апінгасіх, Васійи5 сегеи5з, Васшив5 ІШиппдіепвіз, Васійй5 тусоїіде5, Васійи5 рзепйотусоїде5, Васійи5 затапії ВасшШиє даетокКепвзіх, Васійи5 мейепвіерпепвіз, Васшпив іоуоіепвівз і їх комбінації.
4. Композиція за пунктом 1, де фермент, залучений у продукцію або активацію сполуки, що стимулює ріст рослин, являє собою хітозаназу.
5. Композиція за пунктом 1, де злитий білок включає 5ЕО ІЮ МО: 109.
6. Композиція за пунктом 1, де фермент являє собою целюлазу, вибрану із групи, яка включає ендоцелюлазу, екзоцелюлазу та ВД-глюкозидазу.
7. Композиція за пунктом 6, де злитий білок включає ендоглюканазу Васійив виріів.
8. Композиція за пунктом 7, де злитий білок включає 5ЕО ІЮ МО: 107.
9. Композиція за пунктом 8, де рекомбінантні клітини Вас/их мають походження з Васшив Іпипіпдіепзі5 ВТО1ЗА.
10. Композиція за пунктом 1, де фермент являє собою фосфоліпазу.
11. Композиція за пунктом 10, де злитий білок включає 5ЕО ІЮ МО: 108.
12. Композиція за будь-яким з пунктів 1-11, де злитий білок експресується під контролем промотору спороутворення, нативного для націлюючої послідовності, білка екзоспорію або фрагмента білка екзоспорію злитого білка.
13. Композиція за будь-яким з пунктів 1-12, де злитий білок експресується під контролем високоекспресованого промотору спороутворення.
14. Композиція за пунктом 13, де високоекспресований промотор спороутворення включає бо промоторну послідовність сигма-К-полімерази, специфічної для спороутворення.
15. Композиція за будь-яким з пунктів 12-14, де промотор спороутворення включає нуклеотидну послідовність, що має принаймні 80 95 ідентичність із нуклеотидною послідовністю з будь-якої з ЗЕО ІЮО МОв: 85-103.
16. Композиція за будь-яким з пунктів 1-15, де принаймні один фунгіцид вибирають із групи, яка включає карбендазим, флухінконазол, ізотіаніл, пенцикурон, пенфлуфен, протіоконазол і трифлоксистробін.
17. Композиція за пунктом 16, де фунгіцид являє собою трифлоксистробін.
18. Композиція за будь-яким з пунктів 1-15, де принаймні один фунгіцид являє собою ізотіаніл.
19. Насіння, покрите композицією за будь-яким з пунктів 1-18.
20. Застосування композиції за будь-яким з пунктів 1-18 для посилення росту рослини та/або сприяння життєздатності рослини.
21. Застосування за пунктом 20 для обробки звичайних або трансгенних рослин або їх насіння.
22. Спосіб обробки рослини, частини рослин або локусу, що оточує рослину, для посилення росту рослини та/або сприяння життєздатності рослини, що включає стадію одночасного або послідовного використання: а) рекомбінантних продукуючих екзоспорій клітин Вас//их, які експресують злитий білок, що містить: (І) принаймні один стимулюючий ріст рослин білок або пептид, вибраний із групи, яка включає фермент, залучений у продукцію або активацію сполуки, що стимулює ріст рослин, та фермент, який розкладає або модифікує бактеріальне, грибкове або рослинне джерело харчування, де фермент вибраний із групи, яка включає ацетоїн-редуктазу, індол-3-ацетамід-гідролазу, триптофан-монооксигеназу, ацетолактат-синтетазу, а-ацетолактат-декарбоксилазу, піруват- декарбоксилазу, діацетил-редуктазу, бутандіол-дегідрогеназу, амінотрансферазу, триптофан- декарбоксилазу, аміноксидазу, індол-З-піруват-декарбоксилазу, індол-3- ацетальдегіддегідрогеназу, оксидазу бічного ланцюга триптофану, нітрил-гідролазу, нітрилазу, пептидазу, протеазу, аденозинфосфат-ізопентеніл-трансферазу, фосфатазу, аденозинкіназу, аденін-фосфорибозилтрансферазу, СУР7З5БА, 5'-рибонуклеотид-фосфогідролазу, аденозин- нуклеозидазу, зеатин-цис-транс-ізомеразу, зеатин-О-глікозилтрансферазу, В-глюкозидазу, цис- гідроксилазу, СК цис-гідроксилазу, СК М-глікозилтрансферазу, 2,5-рибонуклеотид- Зо фосфогідролазу, аденозин-нуклеозидазу, пуриннуклеозид-фосфорилазу, зеатин-редуктазу, гідроксиламін-редуктазу, 2-оксоглутарат-діоксигеназу, гіберелінову 2В/3В гідролазу, гіберелін-3- оксидазу, гіберелін-20-оксидазу, хітозаназу, хітиназу, В-1,3-глюканазу, В-1,4-глюканазу, ВД-1,6- глюканазу, дезаміназу аміноциклопропан-1-карбонової кислоти, фермент, залучений у продукцію под-фактора, целюлазу, ліпазу, лігнін-оксидазу, протеазу, глікозид-гідролазу, фосфатазу, нітрогеназу, нуклеазу, амідазу, нітрат-редуктазу, нітрит-редуктазу, амілазу, амоній- оксидазу, лігніназу, глюкозидазу, фосфоліпазу, фітазу, пектиназу, глюканазу, сульфатазу, уреазу та ксиланазу; і (І) націлюючу послідовність або білок екзоспорію, де націлююча послідовність або білок екзоспорію включає: амінокислотну послідовність, що має принаймні приблизно 43 95 ідентичність із амінокислотами 20-35 з БЕО ІЮ МО: 1, де ідентичність із амінокислотами 25-35 становить принаймні приблизно 54 бо; націлюючу послідовність, яка містить амінокислоти 1-35 з БЕО ІО МО: 1; націлюючу послідовність, яка містить амінокислоти 20-35 з БЕО ІЮ МО: 1; націлюючу послідовність, яка містить амінокислоти 22-31 з БЕО ІО МО: 1; націлюючу послідовність, яка містить амінокислоти 22-33 з БЕО ІЮ МО: 1; націлюючу послідовність, яка містить амінокислоти 20-31 з БЕО ІЮ МО: 1; націлюючу послідовність, яка містить 5ЕО ІЮ МО: 1; або білок екзоспорію, що містить амінокислотну послідовність, що має принаймні 85 95 ідентичність із «БО ІЮО МО: 2; і б) принаймні одного фунгіциду, вибраного із групи, яка включає бітертанол, біксафен, бромуконазол, карбендазим, карпропамід, дихлофлуанід, фенамідон, фенгексамід, фентинацетат, фентингідроксид, фторпіколід, флуоксастробін, флухінконазол, фосетил, іпродіон, іпровалікарб, ізотіаніл, метоміностробін, офурац, пенцикурон, пенфлуфен, прохлораз, пропамокарб, пропінеб, протіоконазол, піриметаніл, спіроксамін, толілфлуанід, триадимефон, триадименол, триазоксид, трифлоксистробін, М-(б-хлор-2-(трифторметил)бензилі|-М- циклопропіл-3-(дифторметил)-5-фтор-1-метил-1 Н-піразол-4-карбоксамід, 2,6-диметил-1Н,5Н- П,4|дитіїноЇ(2,3-с:5,6-с|дипірол-1,3,5,7(2Н,6Н)-тетрон і М-(5-хлор-2-ізопропілбензил)-М- циклопропіл-3-(дифторметил)-5-фтор-1-метил-1 Н-піразол-4-карбоксамід.
«Зігура З
ВО | 30-25 2-35
Вр КУ в ІСВТЬВРІВРЕТЕРМОЇї 15056 185 4 ( ПОРІБЕВІВЕЕТІКТО 15 Ме 8555 4 34- ЕЛСРІГРУІВРЕТЕКТО ТІСВРІРРЕТРЕТЕТО ІІСВІЕРРУРТСЕ Те ВІЄРТЬРЕУЮВЕОГРТЄ МІСЕТЕВНОРРІЬТО ГУСРІЕРРВІРБКТЬ РІО ТІСРІЕВРУРТСЕ ННЯ МІСВТЕВВУРЕСЕТОВ
СЕТ ТММ ТУКУТУТ УМІСТ ОАМАБКЕМІ НУТ ЕВІВВЕТІ БТ
UAA201703574A 2014-09-17 2015-09-17 Композиція, що містить рекомбінантні клітини bacillus і фунгіцид UA122671C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462051915P 2014-09-17 2014-09-17
PCT/US2015/050597 WO2016044533A1 (en) 2014-09-17 2015-09-17 Compositions comprising recombinant bacillus cells and a fungicide

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA122671C2 true UA122671C2 (uk) 2020-12-28

Family

ID=54207790

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201703574A UA122671C2 (uk) 2014-09-17 2015-09-17 Композиція, що містить рекомбінантні клітини bacillus і фунгіцид

Country Status (15)

Country Link
US (4) US11044915B2 (uk)
EP (1) EP3203842A1 (uk)
JP (1) JP6975039B2 (uk)
KR (1) KR102667703B1 (uk)
CN (1) CN107105673A (uk)
AR (1) AR101960A1 (uk)
AU (1) AU2015317715B2 (uk)
BR (1) BR112017005507A2 (uk)
CA (1) CA2961505A1 (uk)
CL (1) CL2017000660A1 (uk)
MX (1) MX2017003610A (uk)
RU (1) RU2017113002A (uk)
UA (1) UA122671C2 (uk)
WO (1) WO2016044533A1 (uk)
ZA (1) ZA201702617B (uk)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9573980B2 (en) 2013-03-15 2017-02-21 Spogen Biotech Inc. Fusion proteins and methods for stimulating plant growth, protecting plants from pathogens, and immobilizing Bacillus spores on plant roots
BR122023020863A2 (pt) 2014-09-17 2024-01-30 Spogen Biotech Inc Método para estimular o crescimento de plantas
CA2961386A1 (en) 2014-09-17 2016-03-24 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising recombinant bacillus cells and an insecticide
WO2016044533A1 (en) 2014-09-17 2016-03-24 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising recombinant bacillus cells and a fungicide
US11154064B2 (en) 2014-09-17 2021-10-26 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising recombinant bacillus cells and another biological control agent
AR101959A1 (es) 2014-09-17 2017-01-25 Bayer Cropscience Lp Composiciones que comprenden células recombinantes de bacillus y un insecticida
KR102179224B1 (ko) 2014-09-17 2020-11-16 바이엘 크롭사이언스 엘피 재조합 바실루스 세포 및 또 다른 생물학적 방제제를 포함하는 조성물
MX2018011243A (es) 2016-03-16 2018-11-22 Spogen Biotech Inc Metodos para promover la salud de las plantas usando enzimas libres y microorganismos que sobreexpresan enzimas.
CN107114369B (zh) * 2017-03-24 2020-01-21 浙江大学 植物磺肽素-α在提高植物灰霉病抗性中的应用
WO2019060574A1 (en) 2017-09-20 2019-03-28 Spogen Biotech Inc. FUSION PROTEINS, RECOMBINANT BACTERIA AND EXIN FRAGMENTS FOR PLANT HEALTH
CN108018245A (zh) * 2018-01-12 2018-05-11 中国科学院成都生物研究所 一株产壳聚糖酶的枯草芽孢杆菌及其应用
UY38475A (es) * 2018-11-15 2020-06-30 Bayer Cropscience Lp Plataformas, productos y métodos para la expresión en endosporas
WO2020127364A1 (en) * 2018-12-18 2020-06-25 Futureco Bioscience, S.A. Microbacterium esteraromaticum strain, composition comprising the same, and uses thereof
CR20210478A (es) 2019-03-19 2021-11-05 Bayer Cropscience Lp Proteínas de fusión, bacterias recombinantes, y fragmentos de exosporio para el control de plagas y salud vegetal
CN113891894A (zh) * 2019-03-19 2022-01-04 拜耳作物科学有限合伙公司 用于植物健康的融合蛋白、重组细菌和孢子外壁片段
CN114127103A (zh) * 2019-05-15 2022-03-01 拜耳作物科学有限合伙公司 用于基于类芽胞杆菌属的内生孢子展示平台的靶向序列
WO2021092245A1 (en) * 2019-11-06 2021-05-14 Medicinal Genomics Materials and methods for detecting pathogen load
CN111117920B (zh) * 2020-01-07 2021-04-02 山东农业大学 一种产蛋白酶、产铁载体的蕈状芽孢杆菌及其应用
CN111254104B (zh) * 2020-01-21 2023-02-10 福建师范大学 基因工程化大肠杆菌及吲哚-3-乙酸的制备方法
CN115029277B (zh) * 2022-06-24 2023-08-22 四川省烟草公司凉山州公司 一株耐酸抗青枯病的假蕈状芽孢杆菌

Family Cites Families (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PH30997A (en) 1990-03-12 1997-12-23 Ciba Geigy Antipathologenically effective compositions comprising lytic peptides and hydrolytic enzymes.
US5849870A (en) * 1993-03-25 1998-12-15 Novartis Finance Corporation Pesticidal proteins and strains
US5650372A (en) 1995-05-30 1997-07-22 Micro Flo Company Plant treatment with bacillus strain ATCC
IL121404A0 (en) 1997-07-27 1998-01-04 Yissum Res Dev Co Transgenic higher plants of altered structural morphology
US7432097B2 (en) 1997-08-13 2008-10-07 Verenium Corporation Phytases, nucleic acids encoding them and methods of making and using them
US6333302B1 (en) 1997-09-03 2001-12-25 Cornell Research Foundation, Inc. Use of hypersensitive response elicitor protein or polypeptide from Clavibacter michiganensis for disease resistance, growth enhancement and insect control
JP3140430B2 (ja) * 1999-03-09 2001-03-05 株式会社 バイテク バチルス属微生物とその用途
WO2002000232A2 (en) 2000-06-26 2002-01-03 Maxygen, Inc. Methods and compositions for developing spore display systems for medicinal and industrial applications
WO2003066846A1 (en) 2002-02-05 2003-08-14 National Research Council Of Canada Methods for modifying plant responses to stress and correspondingly derived plants
EP2314698A1 (en) 2002-06-14 2011-04-27 Verenium Corporation Xylanases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
AU2004254640B2 (en) 2003-07-02 2010-08-26 Bp Corporation North America Inc. Glucanases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
KR100518953B1 (ko) 2003-09-19 2005-10-12 주식회사 제노포커스 포자 외막단백질을 이용한 목적단백질의 표면발현 방법
EP1778714A4 (en) * 2004-07-20 2008-05-21 Phyllom Llc PROCESS FOR THE PREPARATION AND USE OF RECOMBINANT SPORES OF BACILLUS THURINGIENSIS
GB0418047D0 (en) * 2004-08-12 2004-09-15 Syngenta Participations Ag Fungicidal compositions
US7417181B2 (en) 2005-04-07 2008-08-26 The Samuel Roberts Noble Foundation Plants with increased phosphorous uptake
EP1907552B1 (en) 2005-07-18 2013-10-23 BASF Plant Science GmbH Yield increase in plants overexpressing the ACCDP genes
JP2007117066A (ja) * 2005-09-30 2007-05-17 Techno Giken Kk 植物種子の物理処理方法と育種、育苗方法
KR100784261B1 (ko) 2006-01-02 2007-12-11 한국과학기술원 탄저균의 포자외막 단백질을 이용한 목적단백질의 미생물표면발현방법
WO2008017483A2 (en) 2006-08-09 2008-02-14 Dsm Ip Assets B.V. Spore surface displays of bioactive molecules
CN101362799A (zh) 2007-08-10 2009-02-11 中国科学院上海生命科学研究院 调控植物株高的基因及其应用
US9133251B2 (en) 2008-02-22 2015-09-15 The Curators Of The University Of Missouri Bacillus based delivery system and methods of use
EP2588614A1 (en) 2010-06-30 2013-05-08 DSM IP Assets B.V. Spore surface display of bioactive molecules
DK2689015T3 (en) 2011-03-23 2015-04-13 Novozymes As A process for the production of secreted polypeptides
UA117340C2 (uk) * 2011-12-13 2018-07-25 Монсанто Текнолоджи Ллс Штам pantoea agglomerans nrrl в-50483 та його культура для збільшення росту і/або врожайності рослини, композиція, яка містить вказаний штам, та спосіб запобігання, інгібування або пригнічення розвитку рослинних патогенів та інфекційних хвороб рослин
MX350563B (es) 2012-01-25 2017-09-11 Bayer Ip Gmbh Combinaciones de compuestos activos que contienen fluopiram, bacillus y un agente de control biologico.
EP2854551A1 (en) * 2012-05-30 2015-04-08 Bayer Cropscience AG Compositions comprising a biological control agent and a fungicide from the group consisting of inhibitors of the respiratory chain at complex i or ii.
US20150289514A1 (en) 2012-05-30 2015-10-15 Bayer Cropscience Ag Composition comprising a biological control agent and a fungicide selected from inhibitors of the respiratory chain at complex iii
EP2922399B1 (en) * 2012-11-22 2020-02-26 Basf Corporation Pesticidal mixtures
PL2922395T3 (pl) 2012-11-22 2019-11-29 Basf Corp Mieszaniny szkodnikobójcze
EA030236B1 (ru) * 2012-11-30 2018-07-31 Байер Кропсайенс Акциенгезельшафт Тройные фунгицидные и пестицидные смеси
US9573980B2 (en) 2013-03-15 2017-02-21 Spogen Biotech Inc. Fusion proteins and methods for stimulating plant growth, protecting plants from pathogens, and immobilizing Bacillus spores on plant roots
US20160340658A1 (en) 2014-02-04 2016-11-24 University Of Florida Research Foundation, Inc. Pteris vittata phytase nucleotide and amino acid sequences and methods of use
KR102179224B1 (ko) * 2014-09-17 2020-11-16 바이엘 크롭사이언스 엘피 재조합 바실루스 세포 및 또 다른 생물학적 방제제를 포함하는 조성물
BR112017005379A2 (pt) 2014-09-17 2018-08-14 Bayer Cropscience Lp composições que compreendem células recombinantes de bacillus e um fungicida.
US11154064B2 (en) 2014-09-17 2021-10-26 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising recombinant bacillus cells and another biological control agent
BR122023020863A2 (pt) 2014-09-17 2024-01-30 Spogen Biotech Inc Método para estimular o crescimento de plantas
AR101959A1 (es) 2014-09-17 2017-01-25 Bayer Cropscience Lp Composiciones que comprenden células recombinantes de bacillus y un insecticida
WO2016044533A1 (en) 2014-09-17 2016-03-24 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising recombinant bacillus cells and a fungicide
CA2961386A1 (en) 2014-09-17 2016-03-24 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising recombinant bacillus cells and an insecticide
WO2019060574A1 (en) 2017-09-20 2019-03-28 Spogen Biotech Inc. FUSION PROTEINS, RECOMBINANT BACTERIA AND EXIN FRAGMENTS FOR PLANT HEALTH

Also Published As

Publication number Publication date
EP3203842A1 (en) 2017-08-16
AU2015317715A8 (en) 2017-04-13
CA2961505A1 (en) 2016-03-24
AU2015317715B2 (en) 2019-10-03
RU2017113002A3 (uk) 2019-04-15
KR102667703B1 (ko) 2024-05-22
AR101960A1 (es) 2017-01-25
NZ730723A (en) 2024-04-26
MX2017003610A (es) 2017-07-13
JP2017534579A (ja) 2017-11-24
WO2016044533A1 (en) 2016-03-24
US20220159965A1 (en) 2022-05-26
US12005107B2 (en) 2024-06-11
RU2017113002A (ru) 2018-10-17
AU2015317715A1 (en) 2017-04-06
US11044915B2 (en) 2021-06-29
US20170295797A1 (en) 2017-10-19
ZA201702617B (en) 2023-07-26
CL2017000660A1 (es) 2018-03-23
CN107105673A (zh) 2017-08-29
BR112017005507A2 (pt) 2018-08-14
JP6975039B2 (ja) 2021-12-01
KR20170058966A (ko) 2017-05-29
US20240316173A1 (en) 2024-09-26
US20240285745A1 (en) 2024-08-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA122671C2 (uk) Композиція, що містить рекомбінантні клітини bacillus і фунгіцид
US20230332168A1 (en) Compositions and methods comprising endophytic bacterium for application to target plants to increase plant growth, and increase resistance to abiotic and biotic stressors
JP6923437B2 (ja) 組換えバチルス細胞および別の生物農薬を含む組成物
UA111935C2 (uk) ТРАНСГЕННА РОСЛИНА, ЯКА МІСТИТЬ ДНК, ЩО КОДУЄ ІНСЕКТИЦИДНИЙ БІЛОК Cry1Ab, І ДНК, ЩО КОДУЄ ІНСЕКТИЦИДНИЙ БІЛОК Cry1Be, ДЛЯ КЕРУВАННЯ РЕЗИСТЕНТНІСТЮ КОМАХ
UA126391C2 (uk) Композиція метилобактерій для пригнічення захворювань, викликаних грибами
ES2608927T3 (es) Resistencia a herbicidas que inhiben la acetohidroxiácido sintasa
UA125846C2 (uk) Мутант ahas
UA121093C2 (uk) Конструкція, яка містить токсиген, що кодує пестицидний білок, і спосіб її застосування для знищення напівтвердокрилих шкідників
UA124293C2 (uk) Рослина, яка має біологічну активність гаплоїдного індуктора, і спосіб її застосування
CN108271339A (zh) 栽培品种和物种间的种子内生菌、相关组合物及其使用方法
CN103718895B (zh) 控制害虫的方法
UA118841C2 (uk) Спосіб формування рослини, яка має підвищену стійкість до комахи-шкідника
UA126807C2 (uk) Інсектицидний білок і спосіб його застосування
CA2975486A1 (en) Compositions and methods comprising endophytic bacterium for application to target plants to increase plant growth, and increase resistance to abiotic and biotic stressors
UA128281C2 (uk) Одержання маїсу, стійкого до північної плямистості листя
BR112013015623B1 (pt) Composição, seu uso, uso de células mutantes para swra, e método de tratamento de uma planta para melhorar o crescimento da planta, promover a saúde da planta ou controlar uma doença de planta
UA126972C2 (uk) Аденовірус, озброєний біспецифічним рекрутером t-клітин (bite)
UA113273C2 (xx) ТРАНСГЕННА РОСЛИНА, ЯКА МІСТИТЬ ДНК, ЩО КОДУЄ І ЕКСПРЕСУЄ ІНСЕКТИЦИДНИЙ БІЛОК Cry1Da, І ДНК, ЩО КОДУЄ І ЕКСПРЕСУЄ ІНСЕКТИЦИДНИЙ БІЛОК Cry1Fa, ДЛЯ БОРОТЬБИ З СОВКОЮ ТРАВ'ЯНОЮ
UA128156C2 (uk) Пестицидний білок токсину, активний проти лускокрилих комах
WO2015092549A2 (en) Biologicals for plants
CN105766992B (zh) 除草剂耐受性蛋白质的用途
CN105746255B (zh) 除草剂耐受性蛋白质的用途
CN105724139B (zh) 除草剂耐受性蛋白质的用途
EA023545B1 (ru) Применение карбоксамида флуопирама на культивируемых растениях
UA72897C2 (uk) Спосіб боротьби з шкідником совкою