TWI472529B - ２－氟－Ｎ－甲基－４－〔７－（喹啉－６－基－甲基）－咪唑并〔１，２－ｂ〕〔１，２，４〕三－２－基〕苯甲醯胺之鹽類及其相關製備方法 - Google Patents

２－氟－Ｎ－甲基－４－〔７－（喹啉－６－基－甲基）－咪唑并〔１，２－ｂ〕〔１，２，４〕三－２－基〕苯甲醯胺之鹽類及其相關製備方法 Download PDF

Info

Publication number
TWI472529B
TWI472529B TW98116761A TW98116761A TWI472529B TW I472529 B TWI472529 B TW I472529B TW 98116761 A TW98116761 A TW 98116761A TW 98116761 A TW98116761 A TW 98116761A TW I472529 B TWI472529 B TW I472529B
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
compound
formula
salt
degrees
hydrate
Prior art date
Application number
TW98116761A
Other languages
English (en)
Other versions
TW201008943A (en
Inventor
Lingkai Weng
Lei Qiao
Jiacheng Zhou
Pingli Liu
Yongchun Pan
Original Assignee
Incyte Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=41058602&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=TWI472529(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Incyte Corp filed Critical Incyte Corp
Publication of TW201008943A publication Critical patent/TW201008943A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI472529B publication Critical patent/TWI472529B/zh

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/53—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with three nitrogens as the only ring hetero atoms, e.g. chlorazanil, melamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D253/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D251/00
    • C07D253/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D251/00 not condensed with other rings
    • C07D253/06—1,2,4-Triazines
    • C07D253/065—1,2,4-Triazines having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D253/07—1,2,4-Triazines having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms, or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基-甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三 -2-基]苯甲醯胺之鹽類及其相關製備方法
本發明係關於適用於治療癌症及與激酶路徑調節異常有關之其他疾病的激酶抑制劑2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺之二鹽酸鹽及二苯磺酸鹽。本發明進一步係關於用於製備2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺及其鹽之方法及中間物。
蛋白激酶(PK)為一群調節尤其包括細胞生長、存活及分化、器官形成及形態發生、新血管生成、組織修復及再生之多種重要生物過程之酶。蛋白激酶藉由催化蛋白質(或受質)的磷酸化且藉此調節受質在各種生物環境中之細胞活性來發揮其生理功能。除了在正常組織/器官中之功能外，許多蛋白激酶亦在包括癌症之人類疾病之主體中起更專門的作用。蛋白激酶亞群(亦稱為致癌蛋白激酶)在調節異常時可引起腫瘤形成及生長，且進一步造成腫瘤維持及進展(Blume-Jensen P等人，Nature 2001,411(6835):355-365)。迄今，致癌蛋白激酶代表癌症介入及藥物研發之最大且最誘人之蛋白質靶群之一。
原癌基因c-Met為異二聚體受體酪胺酸激酶之獨特亞家族(包括Met、Ron及Sea)之一員(Birchmeier,C等人，Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2003,4(12):915-925；Christensen,J. G.等人，Cancer Lett. 2005,225(1):1-26)。c-Met之唯一高親和力配體為肝細胞生長因子(HGF)，亦稱為擴散因子(SF)。HGF結合至c-Met經由引起受體依賴性信號轉導增加之自體磷酸化誘導受體之活化。c-Met及HGF皆廣泛表現於多種器官中，但其表現通常分別限於上皮細胞及間葉細胞來源之細胞。c-Met(或c-Met信號轉導路徑)在正常組織及人類惡性疾病(諸如，癌症)中之生物功能已有多個文獻證明(Christensen,J. G.等人，Cancer Lett. 2005,225(1):1-26；Corso,S.等人，Trends in Mol. Med. 2005,11(6):284-292)。
HGF及c-Met各自為正常哺乳動物發育所需，且所報導之HGF-缺失型及c-Met-缺失型小鼠之異常與器官形態發生期間之胚表現與上皮細胞-間葉細胞轉變缺陷近似一致(Christensen,J.G.等人，Cancer Lett. 2005,225(1):1-26)。與此等發現相一致，HGF/c-Met路徑之信號轉導及隨後之生物效應已顯示對發育期間的上皮細胞-間葉細胞相互作用及細胞遷移、侵入、細胞增殖及存活、血管生成、三維管狀結構之形態發生及組織化(例如，腎小管細胞、腺形成)之調節具有重要作用。c-Met路徑活化在指定細胞/組織中之特定結果與環境高度相關。
調節異常之c-Met路徑在腫瘤形成、生長、維持及進展中起重要作用且有時起主因性作用(在遺傳改變之狀況下)(Birchmeier,C.等人，Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 2003,4(12):915-925；Boccaccio,C.等人，Nat. Rev. Cancer 2006,6(8):637-645；Christensen,J.G.等人，Cancer Lett. 2005,225(1):1-26)。HGF及/或c-Met過度表現於大多數人類癌症之大部分中，且通常與不良臨床結果有關，諸如更強侵入性疾病、疾病進展、腫瘤轉移及患者存活期縮短。此外，具有高含量之HGF/c-Met蛋白之患者對化學療法及放射療法更具抗性。除異常HGF/c-Met表現之外，c-Met受體亦可經由遺傳突變(生殖系與體細胞)及基因擴增在癌症患者中活化。儘管基因擴增及突變為所報導之患者中的最常見遺傳改變，但受體亦可藉由缺失、截短、基因重排以及異常受體加工及缺陷性負調控機制活化。
c-Met所涉及之多種癌症包括(但不限於)：癌瘤(例如，膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、膽管癌、結腸直腸癌、食道癌、胃癌、頭頸癌、腎癌、肝癌、肺癌、鼻咽癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、甲狀腺癌)；骨骼肌肉瘤(例如，骨肉瘤、滑膜肉瘤、橫紋肌肉瘤)；軟組織瘤(例如，MFH/纖維肉瘤、平滑肌肉瘤、卡波氏肉瘤(Kaposi's sarcoma))；惡性血液病(例如，多發性骨髓瘤、淋巴瘤、成人T細胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病)；及其他贅瘤(例如，神經膠母細胞瘤、星形細胞瘤、黑素瘤、間皮瘤及威姆氏腫瘤(Wilm's tumor))(www.vai.org/met/；Christensen,J.G.等人，Cancer Lett. 2005,225(1):1-26)。
多項臨床前研究已進一步證實經活化之c-Met路徑導致腫瘤形成及進展且可為有效癌症介入之良好標靶的觀點(Birchmeier,C.等人，Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2003,4(12):915-925；Christensen,J.G.等人，Cancer Lett. 2005,225(1):1-26；Corso,S.等人，Trends in Mol. Med. 2005,11(6):284-292)。舉例而言，研究顯示tpr-met 融合基因、c-met 之過度表現及經活化之c-met 突變均引起不同型細胞株之致癌性轉型且導致小鼠體內之腫瘤形成及轉移。更重要的是，已使用特異性削弱及/或阻斷HGF/c-Met信號轉導之藥劑活體外及活體內證明顯著抗腫瘤(有時腫瘤消退)及抗轉移活性。彼等藥劑包括抗HGF及抗c-Met抗體、HGF肽拮抗劑、誘餌c-Met受體、c-Met肽拮抗劑、顯性負性c-Met突變、c-Met特異性反義寡核苷酸及核糖核酸酶及選擇性小分子c-Met激酶抑制劑(Christensen,J.G.等人，Cancer Lett. 2005,225(1):1-26)。
除已確立之在癌症中之作用之外，異常HGF/c-Met信號轉導亦涉及動脈粥樣硬化、肺纖維化、腎臟纖維化及再生、肝臟疾病、過敏性病症、發炎性及自體免疫病症、腦血管疾病、心血管疾病、與器官移植有關之病狀(Ma,H.等人，Atherosclerosis. 2002,164(1):79-87；Crestani,B.等人，Lab. Invest. 2002,82(8):1015-1022；Sequra-Flores,A.A.等人，Rev. Gastroenterol. Mex. 2004,69(4)243-250；Morishita,R.等人，Curr. Gene Ther. 2004,4(2)199-206；Morishita,R.等人，Endocr. J. 2002,49(3)273-284；Liu,Y.,Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 2002,11(1):23-30；Matsumoto,K.等人，Kidney Int. 2001,59(6):2023-2038；Balkovetz,D.F.等人，Int. Rev. Cytol. 1999,186:225-250；Miyazawa,T.等人，J. Cereb. Blood Flow Metab. 1998,18(4)345-348；Koch,A.E.等人，Arthritis Rheum. 1996,39(9):1566-1575；Futamatsu,H.等人，Circ. Res. 2005,96(8)823-830；Eguchi,S.等人，Clin. Transplant. 1999,13(6)536-544)。
c-Met及其他激酶之抑制劑報導於美國專利第11/942,130號中，該等抑制劑包括具有下文所示之結構的化合物2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺(I)。
不斷需要抑制諸如c-Met之激酶之現有藥劑的新穎或改良形式以便研發治療癌症及其他疾病之更有效藥物。本文所述之鹽、組合物及方法係關於此等需要及其他目的。
本發明提供一種作為2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺二鹽酸鹽之鹽或其水合物或溶劑合物。
本發明進一步提供一種作為2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺二苯磺酸鹽之鹽或其水合物或溶劑合物。
本發明進一步提供包含本發明之鹽或其水合物或溶劑合物及至少一種醫藥學上可接受之載劑的組合物。
本發明進一步提供抑制受體或非受體酪胺酸激酶活性之方法，其包含使激酶與本發明之鹽或其水合物或溶劑合物接觸。
本發明進一步提供抑制細胞中HGF/c-Met激酶信號轉導路徑之方法，其包含使該細胞與本發明之鹽或其水合物或溶劑合物接觸。
本發明進一步提供抑制細胞之增殖活性之方法，其包含使該細胞與本發明之鹽或其水合物或溶劑合物接觸。
本發明進一步提供抑制患者腫瘤生長之方法，其包含向該患者投與治療有效量之本發明之鹽或其水合物或溶劑合物。
本發明進一步提供抑制患者腫瘤轉移之方法，其包含向該患者投與治療有效量之本發明之鹽或其水合物或溶劑合物。
本發明進一步提供治療患者疾病之方法，其中該疾病與HGF/c-MET信號轉導路徑之調節異常有關，該方法包含向該患者投與治療有效量之本發明之鹽，或其水合物或溶劑合物。
本發明進一步提供治療患者之癌症之方法，其包含向該患者投與治療有效量之本發明之鹽或其水合物或溶劑合物。
本發明進一步提供本發明之鹽供治療使用。
本發明進一步提供本發明之鹽的用途，係用於製造供治療使用之藥物。
本發明進一步提供製備2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺之二鹽酸鹽的方法，該方法包含：
a)　使包含2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺與水之第一混合物與至少2當量之氫氯酸在包含水之溶劑中反應以形成第二混合物；及
b)　將該第二混合物與甲基第三丁基醚組合。
本發明進一步提供製備2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺之二鹽酸鹽的方法，該方法包含：
a)　使包含2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺與甲醇之第一混合物與至少2當量之氫氯酸在包含異丙醇之溶劑中反應以形成第二混合物；及
b)　將該第二混合物與丙酮組合。
本發明進一步提供製備2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺之二苯磺酸鹽的方法，其包含：
a)　使包含2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺與甲醇之第一混合物與至少2當量之苯磺酸在包含異丙醇之溶劑中反應以形成第二混合物；及
b)　將該第二混合物與甲基第三丁基醚組合。
本發明進一步提供製備式I化合物或其鹽之方法，
該方法包含使式II化合物：
與式III化合物：
反應以形成式I化合物或其鹽；其中X1 為氯、溴或碘。
本發明進一步提供製備式I化合物之方法，
該方法包含：
a)　使式II化合物：
與式VII化合物：
反應以形成式VI化合物：
及
b)　使式VI化合物與Zn(CN)2 及Zn在催化劑存在下反應，其中X6 為氯、溴或碘。
本發明進一步提供式III化合物：
或其鹽。
本發明進一步提供式II化合物：
其中X1 為氯、碘或溴。
本發明尤其提供c-Met激酶抑制劑2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺(參見上文之式I)的二鹽酸鹽及二苯磺酸鹽。本發明之鹽優點在於其可以結晶形式獲得,使得其尤其適用於醫藥調配物中。
二鹽酸鹽
二鹽酸鹽可如(諸如)下文實例1中所述藉由將2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺與莫耳過量之氫氯酸組合而製備。如藉由圖1所示之XRPD圖所證明，二鹽酸鹽可以結晶固體形式獲得(亦參見下文之實例2)。基於圖3所示之TGA結果，二鹽酸鹽亦可以水合物形式獲得(亦參見下文之實例4)。DSC表明二鹽酸鹽在約220至約224℃下，或更特定在約222℃下熔融(參見圖2及實例3)。25℃下之溶解度得知為：在水中，約4.5mg/mL；在pH值7.4之緩衝液中，0.002mg/mL；在pH值8.0之緩衝液中，0.002mg/mL；且在0.1N HCl水溶液中，約24mg/mL。發現藉由實例1之方法所製備之鹽可以良好溶解特性合乎需要的再生。
在一些實施例中，二鹽酸鹽具有包含以約26.0度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。在一些實施例中，二鹽酸鹽具有包含以約24.7度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。在一些實施例中，二鹽酸鹽具有包含以約18.2度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。在一些實施例中，二鹽酸鹽具有包含以約29.3度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。在一些實施例中，二鹽酸鹽具有包含以約26.0度及24.7度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。在一些實施例中，二鹽酸鹽具有包含以約7.8度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。在一些實施例中，二鹽酸鹽具有包含以約26.0度、24.7度、18.2度及29.3度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。在一些實施例中，二鹽酸鹽具有包含以約7.8度、26.0度、24.7度、18.2度及29.3度之2θ角度表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。
二苯磺酸鹽
二苯磺酸鹽可如(諸如)下文實例5中所述藉由將2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)-咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺與莫耳過量之苯磺酸組合而製備。如藉由圖4所示之XRPD圖所證明，二苯磺酸鹽可以結晶固體形式獲得(亦參見下文之實例5)。DSC表明二苯磺酸鹽在約268℃至約272℃下，或更特定在約270℃下熔融(參見圖5及實例7)。25℃下之溶解度得知為：在水中，約3.9mg/mL；在pH值7.4之緩衝液中，0.003mg/mL；在pH值8.0之緩衝液中，0.003mg/mL；且在0.1N HCl水溶液中，至少為29mg/mL。
在一些實施例中，本發明提供二苯磺酸鹽之特定形式，其具有包含以約20.2度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。在一些實施例中，二苯磺酸鹽具有包含以約15.0度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。在一些實施例中，二苯磺酸鹽具有包含以約16.3度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。在一些實施例中，二苯磺酸鹽具有包含以約18.3度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。在一些實施例中，二苯磺酸鹽具有包含以約23.8度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。在一些實施例中，二苯磺酸鹽具有包含以約4.9度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。在一些實施例中，二苯磺酸鹽具有包含以約15.0度、16.3度、18.3度、20.2度及23.8度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。在一些實施例中，二苯磺酸鹽具有包含以約15.0度、16.3度、18.3度、20.2度、23.8度及4.9度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。
定義及其他實施例
本發明包括上述鹽之水合物或溶劑合物。溶劑合物係指在晶格內含有溶劑或以溶劑作為晶格之組份的鹽。本文所用之術語「水合物」係其中溶劑為水之特定溶劑合物且意欲指具有結合水的物質。實例水合物包括半水合物、單水合物、二水合物等。
在一些實施例中，本發明之鹽為結晶體。如本文所用，「結晶體」物質係指含有至少一些結晶材料之物質。可藉助於例如XRPD偵測結晶材料之存在。本發明之鹽可以具有不同晶格之不同結晶形式結晶且因此具有不同物理特性。一些結晶形式可具有不同水或溶劑含量。不同晶格可藉由固態表徵法(諸如X射線粉末繞射(XRPD))鑑別。諸如差示掃描熱量測定(DSC)、熱解重量分析(TGA)、動態氣相吸附(DVS)及其類似方法之其他表徵法進一步有助於鑑別結晶形式且有助於測定穩定性及溶劑/水含量。
特定物質(諸如，本發明之鹽)的不同結晶形式可包括彼物質之無水形式與彼物質之溶劑化/水化形式，其中無水形式及溶劑化/水化形式中之每一者藉由藉以指示不同晶格之不同XRPD圖彼此區分。在一些狀況下，單一結晶形式(例如，藉由獨特XRPD圖所鑑別)可具有不同水或溶劑含量，其中儘管組成相對於水及/或溶劑改變，但晶格實質上保持不變(XRPD圖亦實質上保持不變)。
具有反射(峰)之XRPD圖通常視為特定結晶形式之指紋圖譜。已熟知XRPD峰之相對強度尤其可視樣本製備技術、晶體粒度分布、所用之各種濾光片、樣本安裝程序及所採用之特定儀器廣泛變化。在一些狀況下，視儀器類型或設定而定，可觀測到新峰或現有峰可消失。如本文所用，術語「峰」係指具有最大峰高度/強度之至少約4%之相對高度/強度之反射。此外，儀器偏差及其他因素會影響2θ值。因此，峰指認(peak assignment)(諸如，本文所報導之彼等峰指認)可偏離正或負約0.2°(2θ)，且如本文在XRPD之上下文中所用之術語「實質上」意欲涵蓋上述偏差。
同樣地，視儀器、特定設定、樣本製備等而定，與DSC、TGA或其他熱學實驗有關之溫度讀數可偏離約±3℃。因此，應瞭解本文所報導之具有「實質上」如圖式中任何圖所示之DSC溫譜圖之固體或結晶形式適用該偏差。
本發明之鹽亦可包括鹽中存在之原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子數但質量數不同的彼等原子。舉例而言，氫之同位素包括氚及氘。
本發明之鹽及其固體形式可與其他物質一起存在或可分離。在一些實施例中，本發明之鹽或其固體形式實質上經分離。「實質上經分離」意謂鹽至少部分地或實質上自其形成或偵測於其中之環境分離。部分分離可包括(例如)富含本發明之鹽的組合物。實質分離可包括含有至少約50重量%、至少約60重量%、至少約70重量%、至少約80重量%、至少約90重量%、至少約95重量%、至少約97重量%或至少約99重量%本發明之鹽的組合物。用於分離化合物及其鹽之方法為此項技術中之常規方法。
方法
以本發明之鹽處理表現蛋白激酶之細胞(活體外或活體內)可抑制配體/激酶信號轉導路徑並抑制與信號轉導路徑有關之下游事件(諸如細胞增殖及增加之細胞活動力)。舉例而言，本發明之鹽可阻斷及/或減少由c-Met路徑活化引起的生物化學及生物學過程，包括(但不限於)c-Met激酶活化(例如，c-Met磷酸化)及信號轉導(細胞基質(諸如，Gab1、Grb2、Shc及c-Cb1)之活化及募集及隨後多種信號轉導子(包括PI-3激酶、PLC-γ、STAT、ERK1/2及FAK)之活化、細胞增殖及存活、細胞活動力、遷移及侵入、轉移、血管生成及其類似過程。因此，本發明進一步提供藉由使細胞與本發明之鹽接觸來抑制細胞中之配體/激酶信號轉導路徑(諸如，HGF/c-Met激酶信號轉導路徑)的方法。本發明進一步提供藉由使細胞與本發明之鹽接觸來抑制細胞增殖活性或抑制細胞活動力之方法。
本發明進一步提供治療個體(例如，患者)之與調節異常之激酶信號轉導路徑(包括蛋白激酶之異常活性及/或過度表現)有關之疾病的方法，該方法係藉由向需要該治療之個體投與治療有效量或劑量的本發明之鹽或其醫藥組合物來進行。在一些實施例中，調節異常之激酶為Met家族的激酶(例如，c-Met、Ron或Sea)。在一些實施例中，調節異常之激酶過度表現於患者的病變組織中。在一些實施例中，調節異常之激酶在患者的病變組織中具有異常活性。c-Met及HGF/c-Met信號轉導路徑之調節異常意欲包括經由各種機制之酶活化，該等機制包括(但不限於)HGF依賴性自分泌及旁分泌活化、c-met 基因過度表現及擴增、點突變、缺失、截短、重排以及異常c-Met受體加工及缺陷性負調控機制。
在一些實施例中，本發明之鹽適用於治療疾病，諸如癌症、動脈粥樣硬化、肺纖維化、腎臟纖維化及再生、肝臟疾病、過敏性病症、發炎性疾病、自體免疫病症、腦血管疾病、心血管疾病或與器官移植有關之病狀。在其他實施例中，本發明化合物可適用於抑制患者之腫瘤生長或腫瘤轉移之方法中。
可由本文之方法治療之癌症實例包括膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、膽管癌、結腸直腸癌、食道癌、胃癌、頭頸癌、腎癌、肝癌、肺癌、鼻咽癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、甲狀腺癌、骨肉瘤、滑膜肉瘤、橫紋肌肉瘤、MFH/纖維肉瘤、平滑肌肉瘤、卡波氏肉瘤、多發性骨髓瘤、淋巴瘤、成人T細胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、神經膠母細胞瘤、星形細胞瘤、黑素瘤、間皮瘤或威姆氏腫瘤及其類似癌症。
如本文所用，術語「細胞」意欲指活體外、離體或活體內之細胞。在一些實施例中，離體細胞可為自諸如哺乳動物之有機體切除之組織樣本的一部分。在一些實施例中，活體外細胞可為細胞培養物中之細胞。在一些實施例中，活體內細胞為在諸如哺乳動物之有機體中生存之細胞。
如本文所用，術語「接觸」係指使指定部分在活體外系統或活體內系統中集合在一起。舉例而言，使本發明化合物與蛋白激酶「接觸」包括向個體或患者(諸如，人類)投與本發明化合物以及(例如)將本發明化合物引入含有蛋白激酶之細胞製劑或純化製劑的樣本中。
如本文所用，可互換使用之術語「個體」或「患者」係指任何動物，包括哺乳動物，較佳為小鼠、大鼠、其他齧齒動物、兔、犬、貓、豬、牛、綿羊、馬或靈長類動物，且最佳為人類。
如本文所用，術語「治療」係指以下一或多者：(1)預防疾病；例如，預防易患疾病、病狀或病症、但尚未經歷或呈現疾病之病理或症狀之個體的疾病、病狀或病症；(2)抑制疾病；例如，抑制正經歷或呈現疾病、病狀或病症之病理或症狀之個體的疾病、病狀或病症；及(3)改善疾病；例如，改善正經歷或呈現疾病、病狀或病症之病理或症狀之個體的疾病、病狀或病症(亦即，使病理及/或症狀消退)，諸如降低疾病之嚴重程度。
組合療法
一或多種其他藥劑或治療方法(諸如，化學治療劑、抗癌劑、細胞毒性劑或抗癌療法(例如，輻射、激素等))可與本發明之鹽組合用於治療本文所述之疾病、病症或病狀。該等藥劑或療法可與本發明之鹽一起投與(例如，組合成單一劑型)或該等藥劑或療法可藉由單獨投與途徑同時或依序投與。
合適抗癌劑包括激酶抑制劑，包括曲妥珠單抗(trastuzumab；Herceptin)、伊馬替尼(imatinib；Gleevec)、吉非替尼(gefitinib；Iressa)、氫氯酸埃羅替尼(erlotinib hydrochloride；Tarceva)、西妥昔單抗(cetuximab；Erbitux)、貝伐單抗(bevacizumab；Avastin)、索拉非尼(sorafenib；Nexavar)、舒尼替尼(sunitinib；Sutent)及(例如)WO 2005/004808、WO 2005/004607、WO 2005/005378、WO 2004/076412、WO 2005/121125、WO 2005/039586、WO 2005/028475、WO 2005/040345、WO 2005/039586、WO 2003/097641、WO 2003/087026、WO 2005/040154、WO 2005/030140、WO 2006/014325、WO 2005/070891、WO 2005/073224、WO 2005/113494及美國專利申請公開案第2005/0085473號、第2006/0046991號及第2005/0075340號中所述之RTK抑制劑。
合適化學治療劑或其他抗癌劑進一步包括(例如)烷基化劑(包括(但不限於)氮芥、伸乙亞胺衍生物、烷基磺酸鹽、亞硝基脲及三氮烯)，諸如尿嘧啶芥(uracil mustard)、甲氯乙胺(chlormethine)、環磷醯胺(CytoxanTM )、異環磷醯胺(ifosfamide)、美法侖(melphalan)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、哌泊溴烷(pipobroman)、三伸乙基-三聚氰胺(triethylene-melamine)、三伸乙基硫代磷胺、白消安(busulfan)、卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)、鏈佐星(streptozocin)、達卡巴嗪(dacarbazine)及替莫唑胺(temozolomide)。
合適化學治療劑或其他抗癌劑進一步包括(例如)抗代謝物(包括(但不限於)葉酸拮抗劑、嘧啶類似物、嘌呤類似物及腺苷去胺酶抑制劑)，諸如甲胺喋呤(methotrexate)、5-氟尿嘧啶、氮尿苷(floxuridine)、阿糖胞苷(cytarabine)、6-巰基嘌呤、6-硫鳥嘌呤、磷酸氟達拉濱(fludarabine phosphate)、噴司他丁(pentostatine)及吉西他濱(gemcitabine)。
合適化學治療劑或其他抗癌劑進一步包括(例如)某些天然產物及其衍生物(例如，長春花屬生物鹼、抗腫瘤抗生素、酶、淋巴因子(lymphokine)及表鬼臼毒素(epipodophyllotoxin))，諸如長春鹼(vinblastine)、長春新鹼(vincristine)、長春地辛(vindesine)、博來黴素(bleomycin)、放線菌素(dactinomycin)、道諾黴素(daunorubicin)、多柔比星(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、伊達比星(idarubicin)、阿糖胞苷(ara-C)、太平洋紫杉醇(paclitaxel；TaxolTM )、光神黴素(mithramycin)、脫氧考福黴素(deoxyco-formycin)、絲裂黴素-C(mitomycin-C)、L-天冬醯胺酶、干擾素(尤其IFN-a)、依託泊苷(etoposide)及替尼泊苷(teniposide)。
其他細胞毒性劑包括那韋比尼(navelbene)、CPT-11、阿那曲唑(anastrazole)、來曲唑(letrazole)、卡培他濱(capecitabine)、瑞洛昔芬(reloxafine)、環磷醯胺、異環磷醯胺及屈洛昔芬(droloxafine)。
以下細胞毒性劑亦合適，諸如表鬼臼毒素；抗贅生性酶；拓撲異構酶抑制劑；丙卡巴肼(procarbazine)；米托蒽醌(mitoxantrone)；鉑配位錯合物，諸如順鉑(cis-platin)及卡鉑(carboplatin)；生物反應調節劑；生長抑制劑；抗激素治療劑；甲醯四氫葉酸(leucovorin)；替加氟(tegafur)；及造血生長因子。
其他抗癌劑包括抗體治療劑，諸如曲妥珠單抗(Herceptin)、協同刺激分子(諸如CTLA-4、4-1BB及PD-1)之抗體，或細胞因子(IL-10、TGF-β等)之抗體。其他抗體治療劑包括酪胺酸激酶及/或其配體之抗體，諸如抗HGF抗體及/或抗c-Met抗體。術語「抗體」意欲包括完全抗體(例如，單株、多株、嵌合、人類化、人類等)以及其抗原結合片段。
其他抗癌劑亦包括阻斷免疫細胞遷移之彼等抗癌劑，諸如趨化因子受體(包括CCR2及CCR4)之拮抗劑。
其他抗癌劑亦包括強化免疫系統之彼等抗癌劑(諸如佐劑或授受性T細胞轉移劑)。
其他抗癌劑包括抗癌疫苗，諸如樹突狀細胞、合成肽、DNA疫苗及重組病毒。
安全且有效投與上述大多數藥劑之方法已為熟習此項技術者所知。此外，其投與描述於標準文獻中。舉例而言，多種化學治療劑之投與描述於「Physicians' Desk Reference」(PDR，例如，1996版，Medical Economics Company,Montvale,NJ)中，其揭示內容以引用的方式併入本文中，如同其全文闡述一樣。
中間物及方法
在一些實施例中，本發明提供藉由以下方法製備特定形式之二鹽酸鹽的方法，該方法包含：
a)　使包含2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺與水之第一混合物與至少2當量之氫氯酸在包含水之溶劑中反應以形成第二混合物；及
b)　將該第二混合物與甲基第三丁基醚組合。
在一些實施例中，步驟a)係在約20℃至約30℃之溫度下進行。
在一些實施例中，步驟a)及b)係在約室溫下進行。
在一些實施例中，本發明提供藉由以下方法製備特定形式之二鹽酸鹽的方法，該方法包含：
a)　使包含2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺與甲醇之第一混合物與至少2當量之氫氯酸在包含異丙醇之溶劑中反應以形成第二混合物；及
b)　將該第二混合物與丙酮組合。
在一些實施例中，步驟a)及b)係在約50至約60℃之溫度下進行。
在一些實施例中，步驟a)及b)係在約55℃之溫度下進行。
在一些實施例中，本發明提供藉由以下方法製備特定形式之二苯磺酸鹽的方法，該方法包含：
a)　使包含2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺與甲醇之第一混合物與至少2當量之苯磺酸在包含異丙醇之溶劑中反應；及
b)　將該第二混合物與甲基第三丁基醚組合。
在一些實施例中，步驟a)及b)係在約50℃至約60℃之溫度下進行。在一些實施例中，步驟a)及b)係在約55℃之溫度下進行。
本發明尤其亦提供適用於製備2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺及其鹽(包括本發明之鹽)之方法及中間物。
舉例而言，在一供式III化合物：
或其鹽。
本發明亦提供式II化合物：
其中X1 為氯、碘或溴。
在一些實施例中，X1 為氯。
本發明進一步提供製備式I化合物或其鹽之方法，
該方法包含使式II化合物：
與式III化合物：
反應以形成式I化合物或其鹽；其中X1 為氯、溴或碘。
在一些實施例中，X1 為氯。
在一些實施例中，反應係在諸如乙二醇之溶劑中進行。
在一些實施例中，反應係在約120℃至約150℃，或約130℃至約140℃之溫度下進行。在一些實施例中，反應進行約3至約4小時。
在一些實施例中，該方法進一步包含使式I化合物或其鹽與強酸反應以形成式IV化合物：
或其鹽。
在一些實施例中，酸為氫氯酸或氫溴酸。在一些實施例中，酸為濃氫氯酸。
在一些實施例中，式I化合物與強酸之反應係在約80℃至約120℃，約90℃至約110℃，或約100℃之溫度下進行。在一些實施例中，反應進行約15至約24小時，或約18小時。
在一些實施例中，該方法進一步包含使式IV化合物或其鹽與CH3 NH2 在至少一種偶合劑存在下反應以形成式V化合物：
或其鹽。
在一些實施例中，該偶合劑係選自1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳化二亞胺(EDC)、N-羥基苯并三唑(HOBt)、六氟磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三(N-吡咯啶基)鏻(PyBOP)及其鹽。
在一些實施例中，式IV化合物與CH3 NH2 之反應係在約15℃至約40℃，約15℃至約25℃，約30℃之溫度或約室溫下進行。在一些實施例中，反應係在包括(但不限於)乙腈之溶劑中進行。在一些實施例中，反應係在包括(但不限於)三級胺(諸如，三乙胺)之鹼存在下進行。在一些實施例中，CH3 NH2 係以約1至約10當量、約2至約8當量，或約3至約6當量之量存在。
在一些實施例中，該方法進一步包含：
a)　使式IV化合物：
或其鹽與鹵化劑反應以形成式VI化合物：
或其鹽；及
b)　使式VI化合物或其鹽與CH3 NH2 反應以形成式V化合物：
或其鹽；其中X2 為鹵素。
在一些實施例中，X2 為氯。在一些實施例中，鹵化劑為亞硫醯氯。在一些實施例中，鹵化劑為乙二醯氯。
在一些實施例中，式IV化合物與鹵化劑之反應係在約50℃至約80℃，約60℃至約75℃，或約72℃之溫度下進行。在一些實施例中，反應係在包括(但不限於)甲苯之溶劑中進行。在一些實施例中，鹵化劑係以約1至約20當量、約8至約12當量或約10當量之量存在。
在一些實施例中，式VI化合物與CH3 NH2 之反應係在約0℃至約35℃，約0℃至約10℃之溫度或約室溫下進行。在一些實施例中，反應係在包括(但不限於)四氫呋喃之溶劑中進行。在一些實施例中，CH3 NH2 係以約1至約20當量、約8至約12當量，或約10當量之量存在。
在一些實施例中，步驟b)係在鹼(例如，三級胺)存在下進行。
在一些實施例中，該方法進一步包含藉由以下方法製備式II化合物：
該方法包含使式IIa化合物：
與式IIb化合物反應：
其中X1 為氯、溴或碘。
在一些實施例中，X1 為氯。
在一些實施例中，反應係在脯胺酸存在下進行。在一些實施例中，反應係在脯胺酸及苯甲酸存在下進行。在一些實施例中，式IIa化合物與式IIb化合物之反應係在約0℃至約50℃，約20℃至約40℃，或約20℃之溫度下進行。在一些實施例中，反應係在包括(但不限於)二氯甲烷之溶劑中進行。在一些實施例中，式IIb化合物係以約1至約2當量、約1至約1.5當量、約1至約1.2當量，或約1.05當量之量存在。在一些實施例中，脯胺酸係以約0.1至約0.5當量，或約0.1至約0.2當量之量存在。在一些實施例中，脯胺酸係以約0.1當量之量存在且苯甲酸係以約0.1當量之量存在。
在一些實施例中，該方法進一步包含藉由以下方法製備式IIa化合物，該方法包含使式IIc化合物：
與丙-2-烯-1-醇在鈀催化劑及鹼存在下反應；其中X3 為氯、溴或碘。
在一些實施例中，X3 為溴。
在一些實施例中，使用鈀(0)或鈀(II)催化劑、利用Heck偶合反應條件，且在此項技術中已知之條件下進行(參見例如Melpolder及Heck,J. Org. Chem. 1976,41,265-272 ，或Littke及Fu,J. Am. Chem. Soc. 2001,123,6989-7000 ，該文獻全文以引用的方式併入本文中)。在一些實施例中，鈀催化劑為Pd2 (dba)3 (參(二亞苯甲基丙酮)二鈀(0))。在一些實施例中，鈀催化劑係以約0.01至約0.1當量、約0.01至約0.05當量、約0.01至約0.02當量，或約0.015當量之量存在。在一些實施例中，反應進一步包含在膦配位體或其鹽存在下反應。在一些實施例中，膦配位體或其鹽為四氟硼酸參(第三丁基)鏻。在一些實施例中，配位體係以約0.01至約0.05當量，或約0.03當量之量存在。
在一些實施例中，鹼為無機鹼。在一些實施例中，鹼為有機鹼。在一些實施例中，鹼為三級胺，包括(但不限於)N-甲基-N-環己基環己基胺。在一些實施例中，鹼為鹼金屬碳酸鹽。在一些實施例中，鹼係以約1至約5當量、約1至約2當量、約1至約1.5當量，或約1.2當量之量存在。
在一些實施例中，式IIc化合物與丙-2-烯-1-醇之反應係在約40℃至約80℃，約50℃至約70℃，或約50℃至約55℃之溫度下進行。在一些實施例中，反應係在包括(但不限於)二噁烷之溶劑中進行。在一些實施例中，丙-2-烯-1-醇係以約1至約3當量，或約2當量之量存在。
在一些實施例中，該方法進一步包含藉由以下方法製備式IIa化合物，該方法包含使式IId化合物：
與式HX'之酸反應，其中X'為氯、溴或碘。
在一些實施例中，X'為氯。
在一些實施例中，式IId化合物與酸之反應係在約0℃至約20℃，約0℃至約10℃，或約0℃至約5℃之溫度下進行。在一些實施例中，反應係在包括(但不限於)乙酸乙酯之溶劑中進行。
在一些實施例中，該方法進一步包含藉由以下方法製備式IId化合物，該方法包含在氫化催化劑存在下將式IIe化合物：
用氫氣還原。
在一些實施例中，氫化催化劑為鈀/碳。在一些實施例中，氫氣壓力為約1個大氣壓。在一些實施例中，式IIe化合物與氫氣之反應係在約室溫下進行。
在一些實施例中，該方法進一步包含藉由以下方法製備式IIe化合物，該方法包含使式IIc化合物與式IIf化合物
在偶合催化劑及鹼存在下反應(使用例如Ziesel 或Kelly,Suffert及Ziesel,Tetrahedron Lett. 1991,32,757 ；Kelly,Lee及Mears,J. Org. Chem. 1997,62,2774. 之方法之薗頭偶合反應(Sonogashira coupling))。
在一些實施例中，偶合催化劑為鈀催化劑，包括(但不限於)乙酸鈀。在一些實施例中，催化劑為乙酸鈀與CuI之混合物。在一些實施例中，鹼為無機鹼。在一些實施例中，鹼為有機鹼。在一些實施例中，鹼為三級胺，包括(但不限於)三乙胺。在一些實施例中，鹼為鹼金屬碳酸鹽。在一些實施例中，鹼係以約2至約10當量、約4至約9當量、約6至約8當量，或約7.2當量之量存在。
在一些實施例中，反應進一步包含在膦配位體或其鹽(包括(但不限於)三苯膦)存在下反應。在一些實施例中，乙酸鈀係以約0.01至約0.05當量，或約0.03當量之量存在。在一些實施例中，碘化銅(I)係以約0.005至約0.2當量，或約0.01當量之量存在。在一些實施例中，膦配位體或其鹽係以約0.005至約0.2當量，或約0.012當量之量存在。
在一些實施例中，反應係在約70℃至約100℃，約80℃至約100℃，或約90℃之溫度下進行。在一些實施例中，反應係在包括(但不限於)二甲基甲醯胺之溶劑中進行。在一些實施例中，式IIf化合物係以約1至約3當量，或約2當量之量存在。
在一些實施例中，該方法進一步包含藉由以下方法製備式IId化合物：
該方法包含使式IIg化合物：
與9-硼雜雙環[3.3.1]壬烷(9-BBN)反應，隨後與式IIc化合物：
在偶合催化劑存在下反應以形成式IId化合物，其中X3 為氯、溴或碘。
在一些實施例中，X3 為氯。
在一些實施例中，9-BBN係直接添加。在一些實施例中，9-BBN係當場形成(Soderquist及Negron,J. Org. Chem .,1987 ,52,3441-3442)。在一些實施例中，式IIg化合物係以約1至約3當量，或約1.5至約2.5當量，或約1.75當量之量存在。
在一些實施例中，使用鈀(0)或鈀(II)催化劑、利用偶合反應條件，且在此項技術中已知之條件下進行(參見例如Miyaura及Suzuki, Chem . Rev . 1995,95,2457-2483，該文獻全文以引用的方式併入本文中)。在一些實施例中，鈀催化劑為乙酸鈀(II)。在一些實施例中，鈀催化劑係以約0.01至約0.1當量、約0.01至約0.1當量、約0.02至約0.07當量，或約0.05當量之量存在。
在一些實施例中，反應進一步包含在膦配位體或其鹽存在下反應。在一些實施例中，膦配位體為三環己基膦。在一些實施例中，膦配位體或其鹽係以約0.05至約0.2當量，或約0.1當量之量存在。
在一些實施例中，第二步驟係在包括(但不限於)四氫呋喃、水或其混合物之溶劑中進行。
在一些實施例中，第二步驟係在回流溫度下進行。
在一些實施例中，該方法進一步包含藉由以下方法製備式III化合物，該方法包含使式IIIa化合物：
與式IIIb化合物：
在鈀催化劑及鹼存在下反應；其中：X4 為氯、溴或碘；且各Ra 獨立地為C1-6 烷基；或各Ra 連同兩個氧原子與硼原子一起形成5員或6員雜環；其中該雜環視情況經1個、2個、3個或4個經獨立選擇之C1-4 烷基取代。
在一些實施例中，X4 為溴。
在一些實施例中，式IIIb化合物具有式IIIb-1：
在一些實施例中，X4 為溴。
在一些實施例中，使用鈀(0)或鈀(II)催化劑、利用鈴木偶合(Suzuki coupling)反應條件，且在此項技術中已知之條件下進行(參見例如Miyaura及Suzuki,Chem. Rev. 1995,95,2457-2483，該文獻全文以引用的方式併入本文中)。在一些實施例中，鈀催化劑為1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)(Pd(dppf)2 Cl2 )。在一些實施例中，鈀催化劑係以約0.1至約0.5當量、約0.2至約0.4當量或約0.3當量之量存在。
在一些實施例中，鹼為無機鹼。在一些實施例中，鹼為有機鹼。在一些實施例中，鹼為三級胺。在一些實施例中，鹼為鹼金屬碳酸鹽(例如，碳酸鉀或碳酸鈉)。
在一些實施例中，反應係在約60℃至約100℃，約70℃至約90℃，約80℃至約90℃，或約86℃之溫度下進行。在一些實施例中，反應係在包括(但不限於)二噁烷之溶劑中進行。在一些實施例中，式IIIb或IIIb-1化合物係以約1至約2當量，或約1.3當量之量存在。
在一些實施例中，該方法進一步包含藉由使1,2,4-三-3-胺與鹵化劑反應來製備式IIIa化合物。
在一些實施例中，X4 為溴；且鹵化劑為N-溴琥珀醯亞胺。在一些實施例中，鹵化劑係以約1至約2當量，或約1至約1.1當量之量存在。
在一些實施例中，該方法進一步包含藉由使乙二醛與胺基胍或其鹽反應之方法製備1,2,4-三-3-胺。
在一些實施例中，該方法進一步包含藉由以下方法製備式IIIb-1化合物，該方法包含：
a)　使式IIIc化合物：
與式R1 MgY之試劑反應，隨後與式B(OR2 )3 化合物反應以形成式IIId化合物：
b)　在步驟a)反應後，使式IIId化合物與酸反應，隨後與四甲基乙二醇反應以形成式IIIb-1化合物；其中：R1 為C1-6 烷基；各R2 獨立地為C1-6 烷基；且X5 為氯、溴或碘。
在一些實施例中，X5 為溴。在一些實施例中，R1 為異丙基。在一些實施例中，R2 為甲基。在一些實施例中，B(OR2 )3 係以約1至約2當量，或約1.4當量之量存在。在一些實施例中，步驟a)係在約0至約25℃，或約7至約16℃之溫度下進行。
在一些實施例中，四甲基乙二醇係以約1至約3當量，或約2當量之量存在。在一些實施例中，步驟b)係在約室溫至約50℃之溫度下進行。在一些實施例中，步驟b)係在包括(但不限於)環己烷之溶劑中進行。
本發明進一步提供製備式I化合物：
或其鹽之方法；該方法包含：
a)使式II化合物：
與式VII化合物：
反應以形成式VIa化合物：
及
b)使式VIa化合物與Zn(CN)2 及Zn在催化劑存在下反應以形成式I化合物或其鹽，其中X6 為氯、溴或碘。
在一些實施例中，藉由上述方法步驟將式I化合物轉化為式V化合物。
在一些實施例中，X6 為溴。
在一些實施例中，式II化合物及式VII化合物分別係以約1.1至約0.67當量存在。在一些實施例中，步驟a)係在包括(但不限於)1-丁醇之溶劑中進行。在一些實施例中，步驟a)係在約100℃至約120℃，或約110℃之溫度下進行。
在一些實施例中，催化劑為鈀(II)或鈀(0)催化劑。在一些實施例中，催化劑進一步包含膦配位體。在一些實施例中，催化劑為1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)(Pd(dppf)2 Cl2 )。在一些實施例中，Zn係以約0.1至約0、3當量，或約0.2當量之量存在。在一些實施例中，Zn(CN)2 係以約0.5至約1當量，或約0.6當量之量存在。在一些實施例中，催化劑係以約0.03至約0.1當量，或約0.06當量之量存在。在一些實施例中，步驟b)係在包括(但不限於)二甲基乙醯胺、水或其混合物之溶劑中進行。在一些實施例中，步驟b)係在約100至約120℃，或約110℃之溫度下進行。
在一些實施例中，該方法進一步包含藉由以下方法製備式VII化合物，該方法包含使式VIII化合物：
與胺基胍或其鹽及鹼反應；其中X6 為氯、溴或碘。
在一些實施例中，X6 為溴。
在一些實施例中，鹼為鹼金屬氫氧化物(例如，氫氧化鈉或氫氧化鉀)。在一些實施例中，鹼為氫氧化鉀。在一些實施例中，胺基胍或其鹽係以約1至約3當量，或約2當量之量存在。在一些實施例中，鹼係以約3至約5當量，或約4當量之量存在。在一些實施例中，反應係在約60℃至約80℃，或約75℃之溫度下進行。
在一些實施例中，該方法進一步包含藉由以下方法製備式VIII化合物，該方法包含使式IX化合物：
與原甲酸三乙酯在酸存在下反應以形成式VIII化合物；其中X6 為氯、溴或碘。
在一些實施例中，X6 為溴。
在一些實施例中，酸為對甲苯磺酸。在一些實施例中，反應係在約100℃至約120℃，或約110℃之溫度下進行。在一些實施例中，原甲酸三乙酯係以約1至約4當量、約2至約3當量或約2.5當量之量存在。在一些實施例中，酸係以約0.1至約1當量、約0.2至約0.6當量或約0.4當量之量存在。
在一些實施例中，該方法進一步包含藉由以下方法製備式IX化合物，該方法包含使式X化合物：
與強酸反應以形成式IX化合物v其中X6 為氯、溴或碘。
在一些實施例中，X6 為溴。在一些實施例中，酸具有式HX'，其中X'為氯、溴或碘。在一些實施例中，X'為溴。在一些實施例中，反應係在包括(但不限於)二甲亞碸之溶劑中進行。在一些實施例中，酸為與DMSO組合之HBr，如Floyd,Du,Fabio,Jacob，及JohnsonJ. Org.Chem .,1985 ,50,5022-5027中所述。在一些實施例中，強酸之添加係在約室溫下進行且接著將反應混合物加熱至約50℃至約70℃，或約60℃之溫度。
在一些實施例中，該方法進一步包含藉由以下方法製備式X化合物，該方法包含使式XI化合物：
與CH3 MgBr反應以形成式X化合物；其中X6 為氯、溴或碘。
在一些實施例中，CH3 MgBr係以約1至約3當量，或約1.7當量之量存在。在一些實施例中，反應係在約0℃至約15℃，約0℃至約5℃，或約0℃之溫度下進行。
在一些實施例中，該方法進一步包含藉由以下方法製備式XI化合物，該方法包含使式XII化合物：
與乙二醯氯或亞硫醯氯反應，隨後以二甲基羥基胺或其鹽處理以形成式XI化合物。
在一些實施例中，係與乙二醯氯進行反應。在一些實施例中，乙二醯氯係以約1至約2當量，或約1.4至約1.5當量之量存在。在一些實施例中，反應係在包括(但不限於)二氯甲烷之溶劑中進行。在一些實施例中，反應係在約室溫之溫度下進行。
在一些實施例中，本文實施例中所述之任何中間物可以游離鹼形式存在。在一些實施例中，本文實施例中所述之任何中間物可以鹽形式存在。在一些實施例中，本文所述之中間物為水合物或溶劑合物形式。
在一些實施例中，本發明提供上述任何個別方法步驟或中間化合物。
在本說明書內之多處，化合物之取代基以群組或範圍揭示。特別希望該等化合物包括該等群組及範圍之成員之一切個別次組合。舉例而言，術語「C1-6 烷基」特別意欲個別地揭示甲基、乙基、C3 烷基、C4 烷基、C5 烷基及C6 烷基。
應進一步瞭解，為清晰起見描述於各別實施例之上下文中之某些特徵亦可組合提供於單個實施例中。相反，為簡潔起見描述於單個實施例之上下文中的各種特徵亦可單獨地或以任何合適次組合提供。
如本文所用，短語「視情況經取代」意謂未經取代或經取代。如本文所用，術語「經取代」意謂氫原子被移除且由取代基置換。應瞭解，指定原子處之取代受化合價限制。
如本文所用，單獨或與其他術語組合使用之術語「Cn-m 烷基」係指可為直鏈或支鏈、具有n至m個碳原子之飽和烴基。在一些實施例中，烷基含有1至12個、1至8個、1至6個或1至4個碳原子。烷基部分之實例包括(但不限於)諸如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第三丁基、異丁基、第二丁基、2-甲基-1-丁基、正戊基、3-戊基、正己基、1,2,2-三甲基丙基、正庚基、正辛基及其類似基團之化學基團。
如本文所用，在式-B(ORa )2 之部分之上下文中，術語「5員或6員雜環」係指具有5個或6個成員(包括兩個氧原子及一個硼原子，其中其餘2個或3個環成員為碳原子)之飽和單環。
如本文所用，術語「約」係指數值之正或負10%。
如本文所用，本文所用之表述「環境溫度」及「室溫」在此項技術中已為人所瞭解且一般係指作為反應所進行之約室內溫度(例如約20℃至約30℃之溫度)之溫度，例如反應溫度。
可藉由此項技術中已知的任何合適方法監測本文所述之方法。舉例而言，可藉由光譜術(諸如核磁共振光譜(例如，1 H或13 C)、紅外光譜或分光光度測定法(例如，UV-可見光))或藉由層析法(諸如高效液相層析法(HPLC)或薄層層析法(TLC))監測產物形成。
如本文所用，術語「反應」如此項技術中所知使用且一般係指將化學試劑以容許其在分子水準相互作用之此方式集合在一起，以實現化學或物理轉化。在一些實施例中，反應涉及兩種試劑，其中相對於第一試劑使用一或多個當量之第二試劑。本文所述方法之反應步驟可在適於製備所鑑別之產物的時間及條件下進行。
化合物亦可包括本文所述之化合物及中間物的鹽形式。鹽(或鹽形式)之實例包括(但不限於)諸如胺之鹼性殘基的無機酸鹽或有機酸鹽，諸如羧酸之酸性殘基的鹼性鹽或有機鹽，及其類似鹽。一般而言，鹽形式可藉由使游離鹼或酸與化學計量數或過量的所要成鹽無機酸或有機酸或無機鹼或有機鹼在合適溶劑或溶劑之各種組合中反應來製備。
化合物及中間物亦包括本文所揭示之化合物的醫藥學上可接受之鹽。如本文所用，術語「醫藥學上可接受之鹽」係指藉由向本文所揭示之化合物中添加醫藥學上可接受之酸或鹼所形成之鹽。如本文所用，短語「醫藥學上可接受」係指就毒理學角度而言可為用於醫藥應用所接受且不會與活性成份發生不利相互作用之物質。醫藥學上可接受之鹽(包括單鹽及二鹽)包括(但不限於)由有機酸及無機酸產生之彼等鹽，該等酸諸如(但不限於)乙酸、乳酸、檸檬酸、肉桂酸、酒石酸、琥珀酸、反丁烯二酸、順丁烯二酸、丙二酸、扁桃酸、蘋果酸、乙二酸、丙酸、氫氯酸、氫溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、乙醇酸、丙酮酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、甲苯磺酸、水楊酸、苯甲酸及已知的類似可接受之酸。合適鹽之清單見於Remington's Pharmaceutical Sciences，第17版，Mack Publishing Company,Easton,Pa.,1985，第1418頁及Journal of Pharmaceutical Science,66,2(1977)中，該等文獻之全文各自以引用的方式併入本文中。
化合物的製備可涉及各種化學基團的保護及去保護。熟習此項技術者可容易地判定對保護及去保護之需要及適當保護基之選擇。保護基之化學處理可見於(例如)Greene等人，Protective Groups in Organic Synthesis，第4版，Wiley ＆ Sons,2007中，該文獻全文以引用的方式併入本文中。本文所述之保護基之調整及形成及裂解法可視需要根據各種取代基加以調整。
本文所述方法的反應可在熟習有機合成技術者容易選擇之合適溶劑中進行。合適溶劑與起始物質(反應物)、中間物或產物在反應所進行之溫度下(例如溶劑冷凍溫度至溶劑沸騰溫度範圍內之溫度)可實質上不反應。指定反應可進行於一種溶劑或一種以上溶劑之混合物中。視特定反應步驟而定，可選擇用於特定反應步驟之合適溶劑。在一些實施例中，反應可在溶劑不存在下進行，諸如當試劑中至少一者為液體或氣體時。
合適溶劑可包括鹵化溶劑，諸如四氯化碳、溴二氯甲烷、二溴氯甲烷、三溴甲烷、三氯甲烷、溴氯甲烷、二溴甲烷、丁基氯、二氯甲烷、四氯乙烯、三氯乙烯、1,1,1-三氯乙烷、1,1,2-三氯乙烷、1,1-二氯乙烷、2-氯丙烷、÷,÷,÷-三氟甲苯、1,2-二氯乙烷、1,2-二溴乙烷、六氟苯、1,2,4-三氯苯、1,2-二氯苯、氯苯、氟苯、其混合物及其類似物。
合適醚溶劑包括：二甲氧基甲烷、四氫呋喃、1,3-二噁烷、1,4-二噁烷、呋喃、乙醚、乙二醇二甲醚、乙二醇二乙醚、二乙二醇二甲醚、二乙二醇二乙醚、三乙二醇二甲醚、苯甲醚、第三丁基甲基醚、其混合物及其類似物。
合適質子溶劑可包括(舉例而非限制)水、甲醇、乙醇、2-硝基乙醇、2-氟乙醇、2,2,2-三氟乙醇、乙二醇、1-丙醇、2-丙醇、2-甲氧基乙醇、1-丁醇、2-丁醇、異丁醇、第三丁醇、2-乙氧基乙醇、二乙二醇、1-戊醇、2-戊醇或3-戊醇、新戊醇、第三戊醇、二乙二醇單甲醚、二乙二醇單乙醚、環己醇、苯甲醇、戊醇或甘油。
合適質子溶劑可包括(舉例而非限制)四氫呋喃(THF)、N,N-二甲基甲醯胺(DMF)、N,N-二甲基乙醯胺(DMA)、1,3-二甲基-3,4,5,6-四氫-2(1H)-嘧啶酮(DMPU)、1,3-二甲基-2-咪唑啶酮(DMI)、N-甲基吡咯啶酮(NMP)、甲醯胺、N-甲基乙醯胺、N-甲基甲醯胺、乙醯胺、二甲亞碸、丙腈、甲酸乙酯、乙酸甲酯、六氯丙酮、丙酮、乙基甲基酮、乙酸乙酯、環丁碸、N,N-二甲基丙醯胺、四甲基脲、硝基甲烷、硝基苯或六甲基磷醯胺。
合適烴溶劑包括苯、環己烷、戊烷、己烷、甲苯、環庚烷、甲基環己烷、庚烷、乙基苯、間二甲苯、鄰二甲苯或對二甲苯、辛烷、茚滿、壬烷或萘。
超臨界二氧化碳及離子液體亦可用作溶劑。
本文所述方法之反應可在熟習此項技術者容易測定之適當溫度下進行。反應溫度視以下因素而定：例如試劑及溶劑(若存在)之熔點及沸點；反應熱力學(例如，劇烈放熱反應可能需要在低溫下進行)；及反應動力學(例如，高活化能障壁可能需要高溫)。「高溫」係指高於室溫(約22℃)之溫度。
本文所述方法之反應可在空氣或在惰性氣氛下進行。通常，含有與空氣實質上反應之試劑或產物之反應可使用熟習此項技術者熟知的空氣敏感性合成技術進行。
在一些實施例中，化合物之製備可包括添加酸或鹼以實現(例如)所要反應之催化或鹽形式(諸如酸加成鹽)之形成。
酸實例可為無機酸或有機酸。無機酸包括氫氯酸、氫溴酸、硫酸、磷酸及硝酸。有機酸包括甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、苯甲酸、4-硝基苯甲酸、甲烷磺酸、對甲苯磺酸、苯磺酸、酒石酸、三氟乙酸、丙炔酸、丁酸、2-丁炔酸、乙烯基乙酸、戊酸、己酸、庚酸、辛酸、壬酸及癸酸。
鹼實例包括氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鋰、碳酸鈉及碳酸鉀。一些強鹼實例包括(但不限於)氫氧化物、醇鹽、金屬醯胺、金屬氫化物、金屬二烷基醯胺及芳基胺，其中醇鹽包括甲基氧化物、乙基氧化物及第三丁基氧化物之鋰鹽、鈉鹽及鉀鹽；金屬醯胺包括醯胺鈉、醯胺鉀及醯胺鋰；金屬氫化物包括氫化鈉、氫化鉀及氫化鋰；且金屬二烷基醯胺包括經甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第三丁基、三甲基矽烷基及環己基取代之醯胺的鈉鹽及鉀鹽。
根據本文所述之方法進行化合物之製備時，可使用一般分離及純化操作(諸如濃縮、過濾、萃取、固相萃取、再結晶、層析及其類似操作)來分離所要產物。
醫藥調配物及劑型
本發明之鹽當用作藥物時可以醫藥組合物之形式投與，諸如本發明之鹽與至少一種醫藥學上可接受之載劑之組合。此等組合物可以醫藥技術中熟知之方式製備，且視是否需要局部或全身治療及待治療之區域而定，可藉由多種途徑投與。投藥可為局部(包括投與眼及黏膜(包括鼻內、陰道及直腸傳遞))、經肺(例如，藉由散劑或霧劑之吸入或吹入(包括藉由噴霧器)；氣管內、鼻內、表皮及經皮)、經眼、經口或非經腸投藥。用於經眼傳遞之方法可包括局部投藥(滴眼劑)、結膜下、眼周或玻璃體內注射，或藉由氣囊導管或手術置於結膜囊中之眼用插入劑引入。非經腸投藥包括靜脈內、動脈內、皮下、腹膜內或肌肉內注射或輸注；或顱內(例如，鞘內或心室內)投藥。非經腸投藥可以單次劑量之形式進行，或可(例如)藉由連續灌注泵進行。用於局部投與之醫藥組合物及調配物可包括經皮貼片、軟膏、洗劑、乳膏、凝膠、滴劑、栓劑、噴霧劑、液體及散劑。習知醫藥載劑、水性、粉末或油性基質、增稠劑及其類似物可為必需或合乎需要的。
本發明亦包括醫藥組合物，其含有作為活性成份之上述本發明之鹽與一或多種醫藥學上可接受之載劑之組合。在製備本發明組合物時，通常將活性成份與賦形劑混合，藉由賦形劑稀釋或封裝於呈(例如)膠囊、藥囊、紙或其他容器形式之該載劑中。當賦形劑用作稀釋劑時，其可為固體、半固體或液體材料，充當活性成份之媒劑、載劑或介質。因此，組合物可呈以下形式：錠劑、丸劑、散劑、口含劑、藥囊、扁膠劑、酏劑、懸浮液、乳液、溶液、糖漿、霧劑(呈固體形式或於液體介質中)、含有(例如)高達10重量%之活性化合物之軟膏、軟及硬明膠膠囊、栓劑、無菌可注射溶液及無菌封裝散劑。
製備調配物時，可將活性化合物研磨以提供適當粒度後，再與其他成份組合。若活性化合物實質上不溶，則可將其研磨至小於200目之粒度。若活性化合物實質上為水溶性的，則可藉由研磨調整粒度以在調配物中提供實質上均一分布，例如約40目。
可使用已知研磨程序(諸如濕法研磨)研磨本發明之鹽，以獲得適於錠劑形成及其他調配物類型之粒度。可藉由此項技術中已知之方法來製備本發明之鹽的經精細分開(奈米微粒)之製劑，例如參見國際專利申請案第WO 2002/000196號。
合適賦形劑之一些實例包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、澱粉、阿拉伯膠(gum acacia)、磷酸鈣、海藻酸鹽、黃蓍膠、明膠、矽酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯啶酮、纖維素、水、糖漿及甲基纖維素。調配物可另外包括：潤滑劑，諸如滑石粉、硬脂酸鎂及礦物油；濕潤劑；乳化劑及懸浮劑；防腐劑，諸如羥基苯甲酸甲酯及羥基苯甲酸丙酯；甜味劑；及調味劑。本發明之組合物可調配成在藉由使用此項技術中已知之程序投與患者後提供活性成份之快速、持續或延遲釋放。
組合物可調配為單位劑型，各劑量含有約5mg至約100mg、更通常約10mg至約30mg之活性成份。術語「單位劑型」係指適合以單一劑量用於人類個體及其他哺乳動物之實體離散單元，各單元含有經計算可產生所要治療作用之預定量之活性物質以及合適醫藥賦形劑。
活性化合物在廣泛劑量範圍內可為有效的且一般以醫藥學上有效之量投與。然而，應瞭解實際所投與之化合物之量一般由醫師根據相關情形判定，該等情形包括待治療之病狀、所選投藥途徑、所投與之實際化合物、個別患者之年齡、體重及反應、患者症狀之嚴重度及其類似情形。
製備固體組合物(諸如錠劑)時，將主要活性成份與醫藥賦形劑混合以形成含有本發明化合物之均質混合物的預調配固體組合物。當稱此等預調配組合物為均質時，活性成份通常均勻分散於整個組合物中，以便容易地將該組合物再分為諸如錠劑、丸劑及膠囊之等效單位劑型。隨後將此固體預調配物再分為含有(例如)0.1mg至約500mg本發明之活性成份的上述類型之單位劑型。
本發明之錠劑或丸劑可經包衣或混配以提供得到長效優點之劑型。舉例而言，錠劑或丸劑可包含內部給藥組份及外部給藥組份，後者以包膜形式覆蓋於前者上。兩種組份可藉由腸溶衣層隔開，腸溶衣層用於阻止內部組份在胃中崩解且允許內部組份完整進入十二指腸中或延遲釋放。該等腸溶衣層或包衣可使用多種材料，包括多種聚合物酸及聚合物酸與諸如蟲膠、十六烷醇及醋酸纖維素之材料的混合物。
可併有本發明化合物及組合物以經口或藉由注射投與之液體形式包括水溶液、經適當調味之糖漿、水性或油性懸浮液，及具有可食用油(諸如棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油)之調味乳液，以及酏劑及類似醫藥媒劑。
用於吸入或吹入之組合物包括醫藥學上可接受之水性或有機溶劑或其混合物中之溶液及懸浮液，及散劑。液體或固體組合物可含有如上文所述之醫藥學上可接受之合適賦形劑。在一些實施例中，組合物係藉由經口或經鼻呼吸途徑投與以達局部或全身性作用。組合物可使用惰性氣體來霧化。霧化溶液可自噴霧裝置直接吸取或噴霧裝置可附接至面罩托或間歇正壓力呼吸機上。溶液、懸浮液或散劑組合物可自以適當方式傳遞調配物之裝置經口或經鼻投與。
投與患者之化合物或組合物之量視以下因素而變：投與何物、投藥目的(諸如預防或治療)、患者狀態、投藥方式及其類似因素。在治療應用中，組合物可以足以治癒或至少部分抑制疾病及其併發症之症狀之量投與已罹患疾病之患者。有效劑量視所治療之疾病病狀而定且由巡診臨床醫師視諸如疾病嚴重程度、患者之年齡、體重及一般狀況及其類似因素之因素而定加以判斷。
投與患者之組合物可呈上述醫藥組合物之形式。此等組合物可藉由習知滅菌技術滅菌，或可經無菌過濾。水溶液可經封裝以原樣使用或經凍乾，凍乾製劑係在投與之前與無菌水性載劑組合。化合物製劑之pH值通常將介於3與11之間，更佳為5至9且最佳為7至8。應瞭解使用某些前述賦形劑、載劑或穩定劑可形成醫藥鹽。
本發明之鹽的治療劑量可根據(例如)進行治療之特定用途、化合物之投與方式、患者之健康狀況及處方醫師之判斷而改變。本發明之鹽在醫藥組合物中之比例或濃度可視多種因素而變，該等因素包括劑量、化學特性(例如疏水性)及投藥途徑。舉例而言，本發明之鹽可提供於含有約0.1%至約10% w/v化合物之水性生理緩衝溶液中以用於非經腸投與。一些典型劑量範圍為每日每公斤體重約1μg至約1g。在一些實施例中，劑量範圍為每日每公斤體重約0.01mg至約100mg。劑量可視諸如以下可變因素而定：疾病或病症之類型及進展程度、特定患者之總體健康狀況、所選化合物之相對生物功效、賦形劑之配方及其投與途徑。有效劑量可自由活體外或動物模型測試系統所得之劑量-反應曲線外推而得。
本發明之鹽亦可與一或多種其他活性成份組合調配，該等活性成份可包括任何藥劑，諸如抗病毒劑、疫苗、抗體、免疫增強劑、免疫抑制劑、消炎劑及其類似物。
標記化合物及檢定方法
本發明之另一態樣係關於經螢光染料、自旋標記、重金屬或放射性標記的本發明之鹽，其不僅適用於成像，且亦適用於活體外與活體內檢定中對組織樣本(包括人類)中之蛋白激酶標靶定位及定量，及藉由標記化合物之抑制結合來鑑別激酶配體。因此，本發明包括含有標記鹽之激酶檢定。
本發明進一步包括本發明化合物的經同位素標記之化合物。「同位素」或「放射性標記」化合物為其中一或多個原子經具有不同於通常存在於自然界中(亦即，天然存在)之原子質量或質量數之原子質量或質量數的原子置換或取代之本發明化合物。可併入本發明化合物中之合適放射性核素包括(但不限於)2 H(氘亦寫作D)、3 H(氚亦寫作T)、11 C、13 C、14 C、13 N、15 N、15 O、17 O、18 O、18 F、35 S、36 Cl、82 Br、75 Br、76 Br、77 Br、123 I、124 I、125 I及131 I。併入本發明之放射性標記化合物中之放射性核素視放射性標記化合物之特定應用而定。舉例而言，就活體外標記及競爭檢定而言，併有3 H、14 C、82 Br、125 I、131 I、35 S之化合物一般最適用。就放射性成像應用而言，11 C、18 F、125 I、123 I、124 I、131 I、75 Br、76 Br或77 Br一般最適用。
應瞭解「放射性標記」或「標記化合物」為已併有至少一種放射性核素之化合物。在一些實施例中，放射性核素選自由3 H、14 C、125 I、35 S及82 Br組成之群。
將放射性同位素併入有機化合物中之合成方法適用於本發明化合物且在此項技術中已熟知。
本發明之放射性標記之鹽可用於篩檢檢定中以識別/評估化合物。一般而言，可評估新合成或鑑別之化合物(亦即，測試化合物)使本發明之放射性標記之鹽與酶結合減少的能力。因此，測試化合物與放射性標記之鹽競爭結合酶之能力與其結合親和力直接相關。
套組
本發明亦包括適用於(例如)治療或預防疾病(諸如癌症及本文中提及之其他疾病)的醫藥套組，其包括一或多個含有包含治療有效量之本發明之鹽之醫藥組合物之容器。如顯而易見於熟習此項技術者，需要時該等套組可進一步包括一或多種不同習知醫藥套組組份，諸如具有一或多種醫藥學上可接受之載劑的容器、其他容器等。套組中亦可包括指示待投與之組份之量、投藥指引及/或組份混合指引、呈插頁或標籤形式之說明書。
本發明藉助於特定實例更詳細地加以描述。提供以下實例用於說明性目的，而非意欲以任何方式限制本發明。熟習此項技術者容易識別多種非關鍵參數，其可改變或修改以得到基本上相同之結果。
實例 實例1 2-氟- N -甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2- b ][1,2,4]三 -2-基]苯甲醯胺二鹽酸鹽之製備
將2-氟-N -甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺(421.2g，1.021mol)(製備方法參見美國專利第11/942,130號，其揭示內容以引用的方式全部併入本文中)於甲醇(MeOH，6600mL)中之懸浮液加熱至55℃，隨後在55℃下逐滴添加濃氫氯酸水溶液(濃HCl，37重量%，12M，420mL，5.10mol，5.0當量)於異丙醇(IPA，1510mL)中之預混溶液。將所得澄清溶液在55℃下攪拌30分鐘，隨後經由加料漏斗歷經30分鐘添加甲基第三丁基醚(MTBE，6750mL)。添加甲基第三丁基醚後，緩慢沈澱出固體。將所得混合物在55℃下再攪拌1小時，隨後逐漸冷卻至室溫。將混合物在室溫下攪拌隔夜。將固體藉由過濾收集，以甲基第三丁基醚(MTBE，3×500mL)洗滌，且在真空烘箱中、在45-55℃下乾燥至恆重。獲得呈灰白色至淡黃色結晶固體狀之所要2-氟-N -甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺二鹽酸鹽(470.7g，理論值495.5g，產率95%)。熔點(分解)222℃；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.46(s,1H),9.25(dd,1H,J =5.4Hz,1.4Hz),9.12(d,1H,J =8.3Hz),8.51(m,1H),8.47(d,1H,J =0.9Hz),8.34(d,1H,J =1.3Hz),8.23(s,1H),8.21(dd,1H,J =9.0Hz,1.8Hz),8.09-8.02(m,3H),7.79(dd,1H,J =7.5Hz,8.3Hz),4.77(s,2H),2.78(s,3H,J =4.5Hz)；13 C NMR(100MHz,DMSO-d 6 )δppm 163.4,159.4(d,J =249.9Hz),145.8,145.4,144.5,143.8,140.4,138.8,136.8,135.9,135.7(J =8.6Hz),131.2(J =3.1Hz),130.7,128.7,128.2,126.2(J =14.9Hz),126.0,123.1(J =3Hz),122.5,121.0,114.9(J =5.6Hz),28.4,26.3；19 F NMR(376.3MHz,DMSO-d 6 )δppm-113.2；C23 H17 FN6 O(游離鹼，MW 412.42),LCMS(EI)m/e 413.1(M+ +H)及435.0(M+ +Na)。
實例2 二鹽酸鹽之X射線粉末繞射
使用Rigaku MiniFlex X射線粉末繞射儀進行XRPD(X射線輻射係以1.054056來自配有Kβ濾光片之銅(Cu)，開始角-3；停止角-45；取樣-0.02；掃描速度-2)。將樣本粉末分散於零背景樣本固持器上。藉由實例1之方法製備之二鹽酸鹽的XRPD圖提供於圖1中。2θ峰值提供於下表1中。
實例3 二鹽酸鹽之差示掃描熱量測定
藉由實例1之方法製備之二鹽酸鹽由圖2中所示之DSC跡線表徵。DSC溫譜圖揭示位於216.1℃之峰始點及位於221.91℃之峰值的吸熱事件。實驗係在具有鋁樣本盤(40μL)之Mettler Toledo差示掃描熱量測定(DSC)822儀器上進行，初始溫度30℃至最終溫度280℃，使用10℃/min之加熱速率。
實例4 二鹽酸鹽之熱解重量分析
藉由實例1之方法製備之二鹽酸鹽由圖3中所示之TGA跡線表徵。TGA顯示當以20℃/min之加熱速率將樣本自20℃加熱至600℃時始於150℃之顯著重量損失。此後為位於221.9℃之峰之放熱事件，咸信此峰為熔融峰。實驗在TA儀器Q500上進行。
實例5 2-氟- N -甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2- b ][1,2,4]三 -2-基]苯甲醯胺二苯磺酸鹽之製備
將2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺(500mg，1.212mmol)於甲醇(MeOH，12mL)中之懸浮液加熱至55℃，隨後在55℃下逐滴添加苯磺酸(578mg，3.65mmol，3.01當量)於異丙醇(IPA，3.66mL)中之預混溶液。將所得澄清溶液在55℃下攪拌30分鐘，隨後經由加料漏斗逐滴添加甲基第三丁基醚(MTBE，12mL)。添加甲基第三丁基醚之後，緩慢沈澱出固體。將所得混合物在55℃下再攪拌1小時，隨後逐漸冷卻至室溫。將混合物在室溫下攪拌隔夜。將固體藉由過濾收集，以甲基第三丁基醚(MTBE，2×10mL)洗滌，且在真空烘箱中、在45-55℃下乾燥至恆重。獲得呈灰白色結晶固體狀之所要二苯磺酸產物(848mg，理論值883.3mg，產率96%)。熔點(分解)270.5℃；1 H NMR(400MHz,DMSO-d6 )δppm 9.51(s,1H),9.30(dd,1H,J =5.4Hz,1.4Hz),9.13(d,1H,J =8.3Hz),8.45(m,1H),8.36(d,1H,J =0.9Hz),8.30(s,1H),8.21(dd,2H,J =9.0Hz,1.8Hz),8.10-8.04(m,3H),7.80(dd,1H,J =7.5Hz,8.3Hz),7.62-7.56(m,4H),7.33-7.27(m,6H),4.79(s,2H),2.78(d,3H,J =4.5Hz)；19 F NMR(376.3MHz,DMSO-d6 )δppm-113.2；C23 H17 FN6 O(游離鹼，MW 412.42),LCMS(EI)m/e 413.0(M+ +H)及435.0(M+ +Na)。
實例6 二苯磺酸鹽之X射線粉末繞射
使用Rigaku MiniFlex X射線粉末繞射儀進行XRPD(X射線輻射係以1.054056來自配有Kβ濾光片之銅(Cu)，開始角-3；停止角-45；取樣-0.02；掃描速度-2)。藉由實例5之方法製備之鹽的XRPD圖提供於圖4中。2θ峰值提供於下表2中。
實例7 二苯磺酸鹽之差示掃描熱量測定
藉由實例5之方法製備之二苯磺酸鹽由圖5中所示之DSC跡線表徵。DSC溫譜圖揭示始點位於269.4℃之一吸熱事件，隨後為峰值位於270.45℃之放熱事件。實驗在Mettler Toledo差示掃描熱量測定(DSC)822儀器上進行，初始溫度30℃至最終溫度280℃，使用10℃/min之加熱速率。
實例7A 二苯磺酸鹽之物理特徵
二苯磺酸鹽在白色背景下目測一般為灰白色至淡黃色粉末。
實例7B 二苯磺酸鹽之溶解度
二苯磺酸鹽一般以在白色背景下目測為灰白色至淡黃色粉末之形式獲得。二苯磺酸鹽在25℃下之溶解度得知為：在水中，約3.9mg/mL；在pH值7.4之緩衝液中，0.003mg/mL；在pH值8.0之緩衝液中，0.003mg/mL；且在0.1N HCl水溶液中，至少為29mg/mL。
藉由將樣本混合於選定水性溶劑(0.1N HCl、水、pH值7.4之緩衝液及pH值8.0之緩衝液)中至少12小時來測定平衡溶解度。接著藉由HPLC、使用單點校準法測定樣本濃度。
實例8 4-溴-3-氟- N -甲氧基- N -甲基苯甲醯胺(3)
在室溫下向4-溴-3-氟苯甲酸(1， 967.9g，4.4mol)於二氯甲烷(5.9L)及DMF(21mL)中之懸浮液中緩慢添加乙二醯氯((COCl)2 ，560mL，6.4mol，1.45當量)於二氯甲烷(520mL)中之溶液。將所得反應混合物在室溫下攪拌20小時，且接著藉由冰水浴冷卻至0℃。在0℃下，添加N ,O -二甲基羥基胺鹽酸鹽(826g，8.4mol，1.9當量)，隨後緩慢添加三乙胺(TEA，2.5L，17.7mol，4.0當量)。接著將反應混合物逐漸溫至室溫且在室溫下攪拌隔夜。偶合反應一旦完成，即將反應混合物以碳酸氫鈉飽和水溶液(NaHCO3 ，2L)洗滌。將水相以二氯甲烷(1L)反萃取。將經組合之有機相以水(1L)、鹽水(1L)洗滌且在減壓下濃縮。將所得固體殘餘物溶解於甲基第三丁基醚(MTBE，5L)中，依次以水(5×1L)、鹽水(1L)洗滌且經無水硫酸鈉(Na2 SO4 )乾燥。將經過濾之溶液在減壓下濃縮且將所得固體在真空烘箱中、在45℃下乾燥以產生4-溴-3-氟-N -甲氧基-N -甲基苯甲醯胺(3， 1106g，理論值1153g，產率95.9%)，其不經進一步純化即用於隨後反應。對於3 而言：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 7.78(t,1H,J =7.47Hz),7.56(dd,1H,J =9.3,1.6Hz),7.18(d,1H,J =8.1Hz),3.53(s,3H),3.25(s,3H)；C9 H9 BrFNO2 (MW 262.08),LCMS(EI)m/e 262.0/264.0(M+ +H)。
流程1(實例8-14)
實例9 1-(4-溴-3-氟苯基)乙酮(4)
在0℃下向粗4-溴-3-氟-N -甲氧基-N -甲基苯甲醯胺(3 ，1106g，4.2mol)於無水四氫呋喃(THF，11L)中之溶液中緩慢添加氯化甲基鎂(MeMgCl，2.5L，7.5mol，1.7當量)於THF中之3M溶液。將所得反應混合物在0℃下攪拌2小時，且接著以飽和氯化銨水溶液(NH4 Cl，1.5L)極小心地驟冷。將所得溶液在減壓下濃縮以移除大部分THF。接著將殘餘物以乙酸乙酯(EtOAc，5L)稀釋且將所得溶液以水(2L)洗滌。將水相以乙酸乙酯(EtOAc，2×2L)萃取。將經組合之有機相以水(2L)、鹽水(2L)洗滌且經無水硫酸鈉(Na2 SO4 )乾燥。將經過濾之溶液在減壓下濃縮且將所得固體在真空烘箱中、在45℃下乾燥以產生呈固體狀之1-(4-溴-3-氟苯基)乙酮(4 ，890.8g，理論值911.6g，產率97.7%)，其不經進一步純化即用於隨後反應。對於4 而言：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 7.89-7.84(m,2H),7.71(dd,1H,J =8.30,1.87Hz),2.57(s,3H)。
實例10 2-(4-溴-3-氟苯基)-2-側氧基乙醛(5)
向1-(4-溴-3-氟苯基)乙酮(4 ，890.8g，4.1mol)於DMSO(4L)中之溶液中緩慢添加48%溴化氫水溶液(HBr，1420mL，12.5mol，3.0當量)。在添加過程中，使反應溫度自20℃逐漸升高至50℃。隨後將反應混合物加熱至60℃且在60℃下攪拌隔夜。藉由蒸餾移除所得二甲亞碸且將殘餘物傾注入冰水(28L)中。將所得黃色沈澱物藉由過濾收集(保存濾液)且以水(5L)洗滌。將黃色固體溶解於乙酸乙酯(EtOAc，5L)中，以鹽水(1L)洗滌且經無水硫酸鈉(Na2 SO4 )乾燥。接著將溶液在減壓下濃縮且將所得固體在真空烘箱中、在45℃下乾燥以產生水合物形式之所要產物2-(4-溴-3-氟苯基)-2-側氧基乙醛(5 之水合物，730.6g，理論值1020.9g，產率71.6%)。將水相(濾液)以乙酸乙酯(3×5L)萃取且將組合之有機相以水(2×2L)、鹽水(2L)洗滌且經無水硫酸鈉(Na2 SO4 )乾燥。將溶液在減壓下濃縮且將所得固體在真空烘箱中、在45℃下乾燥以產生第二批2-(4-溴-3-氟苯基)-2-側氧基乙醛水合物(5 之水合物，289.4g，理論值1020.9g，產率28.3%；總計1020g，理論值1020.9g，產率99.9%)，其不經進一步純化即用於隨後反應中。對於5 之水合物而言：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 8.00-7.70(m,3H),6.69(br s,2H),5.59(s,1H)。
實例11 1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2-二乙氧基乙酮(6)
在室溫下，將(4-溴-3-氟苯基)-2-側氧基乙醛之水合物(5 ，1020g，4.41mol)、甲苯(7.5L)、原甲酸三乙酯(1633g，1.8L，11.04mol，2.5當量)、對甲苯磺酸(33.5g，0.176mol，0.4當量)饋入22L燒瓶中，且將所得反應混合物加熱至110℃且在110℃下攪拌6小時。當HPLC顯示反應完全時，將反應混合物冷卻至室溫，隨後與乙酸乙酯(7.5L)及碳酸氫鈉飽和水溶液(NaHCO3 ，3L)一起傾注入50L分液漏斗中。攪拌反應混合物且使各層分離。將水層以乙酸乙酯(2L)萃取。將組合之有機層以鹽水(4L)洗滌，經硫酸鈉(Na2 SO4 )乾燥且在減壓下濃縮以產生粗1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2-二乙氧基乙酮(6 ，1240g，理論值1345.7g，產率92.1%)，其不經進一步純化而用於隨後反應中。對於6 而言：1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )5ppm 7.94-7.94(m,2H),7.78(dd,1H,J =8.51,2.08Hz),5.40(s,1H),3.77-3.60(m,4H),1.16-1.14(m,6H)。
實例12 6-(4-溴-3-氟苯基)-1,2,4-三 -3-胺(7)
在室溫下，將1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2-二乙氧基乙酮(6 ，1240g,4.07mol)、乙醇(11L)、水(1.4L)、氫氧化鉀(KOH，910g，16.3mol，4.0當量)及胺基胍碳酸氫鹽(1105g，8.13mol，2.0當量)饋入22L燒瓶中。接著將所得反應混合物加熱至75℃歷時14小時。當HPLC顯示縮合反應完成時，將反應混合物冷卻至室溫，隨後過濾。接著將濾液在減壓下濃縮以移除大部分溶劑。將殘餘水溶液以乙酸乙酯(EtOAc，3×6L)萃取。將有機層組合且在減壓下濃縮以產生深褐色固體。將此固體溶解於乙醇(4L)中且將所得溶液以0.2M氫氯酸水溶液(4L)之溶液處理。隨後將所得漿液加熱至50℃歷時6小時，接著使其冷卻至室溫。將碳酸氫鈉飽和水溶液(NaHCO3 ，2L)之溶液緩慢添加至漿液中且接著將所得混合物在減壓下濃縮以移除大部分溶劑。接著將水性殘餘物以乙酸乙酯(20L)處理來溶解固體。將兩層分離且將水層以乙酸乙酯(2×2L)萃取。將經組合之有機層在減壓下濃縮。將深褐色固體以甲基第三丁基醚(MTBE，4L)處理且將所得漿液加熱至30℃且在30℃下攪拌30分鐘。將混合物過濾且將固體(顏色為綠色至橙色)收集(保存濾液)且以甲基第三丁基醚(MTBE，2L)洗滌以產生第一批粗的所要產物(7)。將濾液在減壓下蒸發，且將所得深褐色固體以甲基第三丁基醚(MTBE，2L)處理。將所得漿液加熱至30℃且在30℃下攪拌30分鐘。將混合物過濾以產生第二批粗的所要產物(7)，將其以MTBE(1L)洗滌。將組合之固體在真空中、在40-50℃下乾燥以產生6-(4-溴-3-氟苯基)-1,2,4-三-3-胺(7 ，585g，理論值1095.1g，產率53.4%)，其不經進一步純化即用於隨後反應中。對於7 而言：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 8.86(s,1H),7.97(d,1H,J =10.79Hz),7.81(m,2H),7.52(br s,2H)；C9 H6 BrFN4 (MW 269.07),LCMS(EI)m/e 269.0/271.1(M+ +H)。
實例13 6-((2-(4-溴-3-氟苯基)咪唑并[1,2- b ][1,2,4]三 -7-基)甲基)喹啉(12)
將1-(2-氯-1-羥基-3-(喹啉-6-基)丙基)吡咯啶-2,5-二酮(11 ，228g，0.74mol，1.1當量)及6-(4-溴-3-氟苯基)-1,2,4-三-3-胺(7 ，181g，0.673mol)懸浮於1-丁醇(1800mL)中且將所得懸浮液加熱至110℃且在110℃下攪拌18小時(反應混合物在此時變得均質)。接著將反應混合物逐漸冷卻至室溫，隨後在冰浴中進一步冷卻至10℃。將所得黃色固體藉由過濾收集(保存1-丁醇濾液)，以冷1-丁醇(3×100mL)洗滌且藉由抽吸乾燥。接著將此固體懸浮於碳酸氫鈉飽和水溶液(NaHCO3 ，500mL)中且將所得懸浮液在室溫下攪拌1小時以中和相應鹽酸鹽。接著將游離鹼過濾、以水(500mL)洗滌且在真空烘箱中、在45℃下乾燥18小時以產生第一批粗6-((2-(4-溴-3-氟苯基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-7-基)甲基)喹啉(12 ，125.1g，理論值292.3g，產率42.8%)。接著將1-丁醇濾液在減壓下濃縮且將所得固體溶解於二氯甲烷(CH2 Cl2 ，2L)中。將溶液以碳酸氫鈉飽和水溶液(NaHCO3 ，1L)洗滌、經硫酸鈉(Na2 SO4 )乾燥且在減壓下濃縮。接著將殘餘物藉由急驟管柱層析法(SiO2 ，0-10% MeOH-CH2 Cl2 梯度溶離)純化以產生第二批呈黃色固體狀之6-((2-(4-溴-3-氟苯基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-7-基)甲基)-喹啉(12 ，19.7g，理論值292.3g，產率6.7%；總計144.8g，理論值292.3g，產率49.5%)。對於12 而言：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.23(s,1H),9.11(dd,1H,J =4.98,1.55Hz),8.85(d,1H,J =8.09Hz),8.25-8.18(m,2H),8.12-8.00(m,3H),7.93-7.86(m,3H),4.70(s,2H)；C21 H13 BrFN5 (MW 434.26),LCMS(EI)m/e 434.00/435.95(M+ +H)。
實例14 2-氟-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2- b ][1,2,4]三 -2-基)苯甲腈(13)
將6-((2-(4-溴-3-氟苯基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-7-基)甲基)喹啉(12 ，200g，0.461mol)、氰化鋅(ZnCN2 ，32.7g，0.277mol，0.6當量)、鋅粉(Zn，6.0g，0.093mol，0.2當量)及Pd(dppf)2 Cl2 (22.6g，0.028mol，0.06當量)懸浮於N ,N -二甲基乙醯胺(DMAC，2000mL)及水(H2 O，40mL)之預混溶液中。接著將所得懸浮液以氮氣流脫氣歷時20分鐘，隨後加熱至110℃且在110℃下攪拌1-2小時(觀測到均質溶液)。當LC/MS指示反應完成時，首先將反應混合物冷卻至室溫且接著在冰浴中冷卻至5℃。將冷卻之反應混合物以氯化銨飽和水溶液(水性NH4 Cl)、濃氫氧化銨水溶液(水性NH4 OH)與水之混合物(體積比4:1:4，8.1L)稀釋且將所得混合物在室溫下攪拌30分鐘。將所得固體藉由過濾收集且在真空烘箱中、在45℃下乾燥隔夜以產生粗的所要產物(13 )。接著將此粗物質藉由急驟層析法(SiO2 ，依次以如下梯度溶離：二氯甲烷中之1%三乙胺、二氯甲烷中之2.5%丙酮及1%三乙胺、二氯甲烷中之5.0%丙酮及1%三乙胺及二氯甲烷中之10.0%丙酮及1%三乙胺)純化以產生呈黃色固體狀之純2-氟-4-(7-(喹啉-6-基甲基)-咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基)苯甲腈(13 ，INCB034222，127.4g，理論值175.4g，產率72.6%)。對13 而言：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.24(s,1H),8.81(dd,1H,J =4.15,1.66Hz),8.26-8.12(m,4H),8.02(S,1H),7.95-7.93(m,2H),7.76(dd,1H,J =8.71,2.08Hz),7.47(dd,1H,J =8.70,4.15Hz),4.62(s,2H)；C22 H13 FN6 (MW 380.38),LCMS(EI)m /e 381.0(M+ +H)。
實例15 6-(3,3-二乙氧基丙-1-炔基)喹啉(22)
將6-溴喹啉(8 ，2.63g，12.6mmol)、炔丙醛二乙縮醛(3.73mL，25.2mmol，2.0當量)、三乙胺(TEA，12.7mL，90.8mmol，7.2當量)、碘化銅(1)(CuI，24.0mg，0.126mmol，0.01當量)及三苯膦(PPh3 ，0.39716g，1.5142mmol，0.12當量)於N ,N -二甲基甲醯胺(DMF，15.6mL，202mmol)中之混合物經由氮氣鼓泡脫氣5分鐘。添加乙酸鈀(Pd(OAc)2 ，0.08499g，0.3786mmol，0.03當量)且將混合物經由氮氣鼓泡脫氣5分鐘。將反應混合物在氮氣下、在攪拌下加熱至90℃。3小時10分鐘後，HPLC指示反應完成。將反應混合物以乙酸乙酯(EtOAc，100mL)稀釋且以水(H2 O，2×100mL)洗滌。將水層以乙酸乙酯(EtOAc，20mL)萃取。接著將組合之有機萃取物在減壓下濃縮以產生呈黑色油狀之粗產物。將粗產物藉由急驟管柱層析法(SiO2 ，己烷中之0-40% EtOAc梯度溶離)純化以產生呈無色油狀之6-(3,3-二乙氧基丙-1-炔基)喹啉(22 ，3.2g，理論值3.22g，產率99%)。對於22 而言：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 8.92(dd,1H,J =4.35Hz,1.86Hz),8.36(d,1H,J =8.40Hz,1.66Hz),8.20(d,1H,J =1.78Hz),7.99(d,1H,J =8.71Hz),7.76(dd,1H,J =8.71Hz,1.87Hz),7.57(dd,1H,J =8.09Hz,4.05Hz),5.58(s,1H),3.75-3.55(m,4H),1.17(t,6H,J =7.16Hz)；C16 H17 NO2 (MW 255.31),LCMS(EI)m/e 256.0(M+ +H)。
流程2(實例15-18)
實例16 6-(3,3-二乙氧基丙基)喹啉(23)
方法A 。在室溫下(內部溫度升至40℃)，歷經1小時將3,3-二乙氧基-1-丙烯(548g，4.2mol，1.75當量)添加至饋有9-硼雜雙環[3.3.1]壬烷於四氫呋喃中之0.5M溶液(THF中之9-BBN溶液，8.4L，4.2mol，1.75當量)的22L燒瓶中。將所得反應混合物在室溫下攪拌隔夜。此時，反應混合物之等分試樣的1 H NMR指示所有3,3-二乙氧基-1-丙烯均已耗盡。將6-溴喹啉(8 ，500g，2.4mol，1.0當量)、碳酸鉀(K2 CO3 ，662g，4.8mol，2.0當量)、三環己基膦(67.4g，0.24mol，0.1當量)、乙酸鈀(Pd(OAc)2 ，27g，0.12mol，0.05當量)及水(90mL)依序添加至反應混合物中，隨後以氮氣脫氣0.5小時。接著將反應混合物加熱至回流歷時4小時。一旦TLC及LC/MS顯示起始物質已耗盡，即將反應混合物在攪拌下冷卻至室溫，隨後以水(7.5L)及乙酸乙酯(EtOAc，7.5L)驟冷。分離各層且將水層以乙酸乙酯(EtOAc，4L)萃取。將經組合之有機層以飽和鹽水溶液(NaCl，4L)洗滌，經硫酸鎂(MgSO4 )乾燥且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由管柱層析法(SiO2 ，庚烷中之10-60%乙酸乙酯梯度溶離)純化以產生呈無色油狀之6-(3,3-二乙氧基丙基)喹啉(23 ，520g，理論值622.4g，產率83.5%)。對23 而言：1 HNMR(DMSO-d 6 ,300MHz)δppm 8.81(dd,1H,J =4.23Hz,1.73Hz),8.28(d,1H,J =8.07Hz),7.91(d,1H,J =8.62Hz),7.75(s,1H),7.61(dd,1H,J =8.63Hz,1.92Hz),7.46(dd,1H,J =8.25Hz,4.22Hz),4,46(t,1H,J =5.60Hz),3.61-3.38(m,4H),2.79(t,2H,J =8.53Hz),1.95-1.85(m,2H),1.11(t,6H,J =6.84Hz)；C16 H21 NO2 (MW 259.34),LCMS(EI)m /e 260.2(M+ +H)。
方法A-替代方法。 9-BBN係當場形成且如下文所述用於製備化合物23 ：在氮氣氛下，將無水1,2-二甲氧基乙烷(DME，47.0mL)饋入500mL裝備有蒸餾設備之3頸燒瓶中。添加硼烷-二甲亞碸複合物(12.1g，151mmol，2當量)且使溶液溫度自20℃升高至22℃。在30分鐘期間向此溶液中逐滴添加1,5-環辛二烯(16.3g，151mmol，2當量)以保持反應溫度為50-60℃，在此期間藉由蒸餾設備收集少量二甲亞碸。接著將反應混合物在氮氣下蒸餾直至餾出物溫度達到84℃。所收集之餾出物具有約21mL之體積。移除油浴且添加無水THF(49mL)。取少量反應混合物樣本用於1 H NMR分析且結果指示烯烴耗盡。此9-BBN溶液直接用於下一步驟。
向上述9-BBN溶液中逐滴添加3,3-二乙氧基-1-丙烯(19.3g，142mmol，1.89當量)，同時保持溫度低於30℃。反應為稍微放熱反應且白色沈澱物緩慢溶解。接著將反應混合物在室溫下攪拌18小時。
向上文製備之溶液中添加6-溴喹啉(8， 15.7g，75.4mmol，1當量)、三環己基膦(1.27g，4.52mmol，0.06當量)、碳酸鉀(20.8g，151mmol，2當量)及水(0.421mL，23.4mmol)。將混合物經由氮氣鼓泡脫氣10-15分鐘。添加乙酸鈀(Pd(OAc)2 ，0.508g，2.26mmol，0.03當量)且使氮氣鼓泡再繼續10分鐘。將反應混合物加熱至75℃且在75-78℃下保持2-3小時。當HPLC顯示反應完成時，停止加熱且將反應混合物冷卻至室溫。添加乙酸乙酯(EtOAc，162mL)及水(H2 O，162mL)且分離有機層。將水層以乙酸乙酯(EtOAc，2×60mL)萃取且將經組合之有機萃取物經硫酸鈉(Na2 SO4 )乾燥且在減壓下濃縮。將殘餘物藉由急驟管柱層析法(矽膠，己烷中之0-40% EtOAc梯度溶離)純化以產生呈透明油狀之6-(3,3-二乙氧基丙基)喹啉(23， 17.6g，理論值19.6g，產率90%)，發現其與方法A所製備之物質在每個可比方面均相同。
方法B 。將6-(3,3-二乙氧基丙-1-炔-1-基)喹啉(22， 56mg，0.22mmol)與10%鈀/碳(5mg)於THF(5mL)中之混合物在H2 下、在1 atm下氫化6小時。將反應混合物經矽藻土床過濾且將矽藻土床以THF(2×2mL)洗滌。將經組合之濾液在減壓下濃縮以產生呈透明油狀之6-(3,3-二乙氧基丙基)喹啉(23 ，56mg，理論值57mg，產率98%)，發現其純足以用於隨後反應中而無需進一步純化，且與方法A所製備之物質在每個可比方面均相同。
實例17 3-(喹啉-6-基)丙醛(9)
方法1 。在室溫下，將參(二亞苯甲基丙酮)二鈀(0)(70.0g，0.076mol，0.015當量)、四氟硼酸三-第三丁基鏻(44g，0.152mol，0.03當量)及二噁烷(12L)饋入22L燒瓶中。接著將所得溶液以穩定氮氣流脫氣20分鐘，隨後在室溫下添加6-溴喹啉(8 ，1055g，5.07mol，1.0當量)、烯丙醇(588g，10.1mol，2.0當量)及N -甲基-N -環己基環己基胺(1186g，6.08mol，1.2當量)。將所得反應混合物在50至55℃下攪拌8-12小時。當TLC及LC/MS顯示反應完成時，使反應混合物冷卻至室溫，隨後向反應混合物中添加甲基第三丁基醚(MTBE，10L)。將所得混合物在室溫下攪拌10分鐘，隨後經由矽藻土塞過濾。將濾液在減壓下濃縮且將殘餘物藉由急驟管柱層析法(SiO2 ，庚烷中之20-80%乙酸乙酯梯度溶離)純化以產生呈黃色油狀之3-(喹啉-6-基)丙醛(9 ，495g，理論值939.1g，52.7%)，其在0-5℃下靜置時部分固化。對於9 而言：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.75(t,1H,J =1.24Hz),8.83(dd,1H,J =4.15Hz,1.66Hz),8.25(dd,1H,J =8.3,1.03Hz),7.93(d,1H,J =8.71Hz),7.76(d,1H,J =1.45Hz),7.64(dd,1H,J =8.72Hz,2.08Hz),7.48(dd,1H,J =8.30Hz,4.36Hz),3.05(t,2H,J =7.26Hz),2.89(t,2H,J =7.26Hz)；C12 H11 NO(MW185.22),LCMS(EI)m /e 186(M+ +H)。
方法2 。將6-(3,3-二乙氧基丙基)喹啉(23 ，實例16之方法A，520g，2.08mol，1.0當量)於乙酸乙酯(EtOAc，2.2L)中之溶液冷卻至0℃，隨後歷經1小時添加2N氫氯酸(HCl)水溶液(2.2L)，同時保持反應溫度低於5℃。將所得反應混合物在0-5℃下再攪拌2小時。當TLC及HPLC/MS指示反應完成時，將反應物在0℃下以冰冷之3N氫氧化鈉(NaOH)水溶液驟冷直至pH值介於8至9之間。分離各層且將水層以乙酸乙酯(EtOAc，2L)萃取。將組合之有機層以鹽水(2L)洗滌，經硫酸鈉(Na2 SO4 )乾燥且在減壓下濃縮以產生呈黃色油狀之粗3-(喹啉-6-基)丙醛(9 ，385.3g，理論值385.3g，100%)，發現其與方法1所獲得之物質在每個可比方面均相同。因為發現此粗物質足夠純，所以其無需進一步純化即直接用於隨後反應中。
方法3 。在0-5℃下將饋有9-硼雜雙環[3.3.1]壬烷於四氫呋喃中之0.5M溶液(9-BBN，5.75L，2.89mol，2.0當量)及四氫呋喃(THF，6L)之22L燒瓶以3,3-二乙氧基-1-丙烯(393g，3.02mol，2.10當量)處理且隨後將所得反應混合物溫至室溫且在室溫下攪拌14小時。在室溫下將6-溴喹啉(8， 300g，1.44mol，1.0當量)、乙酸鈀(Pd(OAc)2 ，16.1g，0.072mol，0.05當量)、碳酸鉀(K2 CO3 ，398g，2.89mol，2.0當量)、三環己基膦(22.3g，0.079mol，0.055當量)及水(52g，2.8mol)添加至反應混合物中，隨後以氮氣脫氣1小時。將所得反應混合物加熱至75℃歷時1小時。當TLC及LC/MS顯示反應完成時，使反應混合物冷卻至室溫，且添加水(2L)以使鹽溶解。接著將所得混合物在減壓下濃縮至約4L之體積，隨後經由矽藻土塞過濾。將矽藻土塞以乙酸乙酯(EtOAc，2L)洗滌。將濾液在減壓下濃縮至約2L之體積且接著在0-5℃下將此殘餘溶液歷經5分鐘緩慢添加至含有2.0M氫氯酸(HCl)水溶液(2L)的燒瓶中。將所得溶液在0-5℃下攪拌14小時，隨後在0℃下以碳酸氫鈉(NaHCO3 )飽和水溶液驟冷直至pH值介於8至9之間。分離各層且將水層以乙酸乙酯(EtOAc，2L)萃取。將經組合之有機層以鹽水(1L)洗滌，經硫酸鈉(Na2 SO4 )乾燥且在減壓下濃縮。將含有粗3-(喹啉-6-基)丙醛(9 )之殘餘物藉由急驟管柱層析法(SiO2 ，庚烷中之20-80%乙酸乙酯梯度溶離)純化以產生呈黃色油狀之3-(喹啉-6-基)丙醛(9， 139g，理論值266.7g，52.1%)，發現其與方法1及2所獲得之材料相同。
實例18 1-(2-氯-1-羥基-3-(喹啉-6-基)丙基)吡咯啶-2,5-二酮(11)
方法I 。將3-(喹啉-6-基)丙醛(9， 407g，2.2mol，1.0當量)於三氯甲烷(CHCl3 ，1700mL)中之溶液冷卻至0℃，隨後添加脯胺酸(52g，0.44mol，0.2當量)及N -氯琥珀醯亞胺(NCS，303g，2.31mol，1.05當量)。使所得反應混合物緩慢溫至室溫(變得均質)且在室溫下攪拌隔夜。當其達到室溫時，反應放熱達到約40℃，且此時形成沈澱物。一旦TLC及LC/MS顯示反應完成時，即將反應混合物以乙酸乙酯(EtOAc，1700mL)稀釋且將所得混合物冷卻至0℃。將固體藉由過濾收集且將所收集之濕固體濾餅置於燒瓶中且以水(750mL)濕磨。將所得懸浮液在室溫下攪拌30分鐘，隨後藉由過濾收集固體。將所收集之固體以水(250mL)及甲基第三丁基醚(MTBE，500mL)洗滌且在真空烘箱中、在45℃下乾燥至恆重以產生呈灰白色粉末狀之1-(2-氯-1-羥基-3-(喹啉-6-基)丙基)吡咯啶-2,5-二酮(11 ，378.7g，理論值701.3g，產率54%)。對於11 而言：1 HNMR(DMSO-d 6 ,400MHz)δppm 8.86(dd,1H,J =4.15Hz,1.66Hz),8.33(dd,1H,J =8.51Hz,1.04Hz),7.98(d,1H,J =8.72Hz),7.85(d,1H,J =1.66Hz),7.68(dd,1H,J =8.51Hz,1.87Hz),7.51(dd,1H,J =8.29Hz,4.15Hz),7.36(d,1H,J =7.05Hz),5.28(dd,1H,J =9.54Hz,6.85Hz),5.07(dt,1H,J =9.75Hz,2.70Hz),3.65(dd,1H,J =14.52Hz,2.49Hz),3.09(dd,1H,J =14.52Hz,9.75Hz),2.64(s,4H)；C16 H15 ClN2 O3 (MW 318.75),LCMS(EI)m/e 319.2(M+ +H)。
方法II。 將3-喹啉-6-基丙醛(9 ，74.8g，0.404mol)於乙腈(202mL，3.87mol)中之溶液冷卻至0℃，隨後在0℃下添加L-脯胺酸(4.70g，0.0404mol，0.10當量)、苯甲酸(4.96g，0.0404mol，0.10當量)及N -氯琥珀醯亞胺(NCS，57.8g，0.424mol，1.05當量)。將反應混合物在0℃下攪拌3小時，且使所得透明溶液溫至室溫且在室溫下攪拌18小時。反應混合物變成黏稠懸浮液且LCMS顯示反應完成。將乙酸乙酯(EtOAc，202mL)添加至反應混合物中且將所得混合物在室溫下攪拌1小時。將固體藉由過濾收集，以乙酸乙酯(EtOAc，100mL)洗滌且在真空下、在40-45℃下乾燥至恆重以產生呈灰白色粉末狀之1-(2-氯-1-羥基-3-(喹啉-6-基)丙基)吡咯啶-2,5-二酮(11 ，88.8g，理論值128.8g，產率69%)，發現其與方法I所製備之物質在每個可比方面均相同。
流程3(實例19-21)
實例19 2-氟-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2- b ][1,2,4]三 -2-基)苯甲酸(14)
將2-氟-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基)苯甲腈(13 ，277.5g，0.73mol，1.0當量)於濃氫氯酸(2500mL)及水(250mL)中之懸浮液加熱至100℃(此時呈均質)且在約100℃下攪拌18小時。當LC/MS指示反應完成時，將反應混合物冷卻至70-80℃，隨後以水(2500mL)稀釋。接著將所得經稀釋之反應混合物冷卻至室溫(在40-50℃下形成黃色固體)且隨後冷卻至0-5℃。接著將固體藉由過濾收集，以少量1N HCl水溶液(100mL)洗滌且在真空烘箱中、在45℃下乾燥至恆重以產生呈黃色至嫩黃色粉末狀之2-氟-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基)苯甲酸(14 ，271g，理論值291.5g，產率93%)。對於14 而言：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.34(s,1H),9.23(dd,1H,J =5.19Hz,1.45Hz),9.08(d,1H,J =8.29Hz),8.38(d,1H,J =8.92Hz),8.30(d,1H,J =1.24Hz),8.18(dd,1H,J =8.72Hz,1.87Hz),8.12(s,1H),8.08-8.00(m,4H),4.75(s,2H)；C22 H16 Cl2 FN5 O2 (MW 472.30),C22 H14 FN5 O2 (游離鹼：MW 399.38),LCMS(EI)m /e 400.0(M+ +H)。
實例20 2-氟- N -甲基-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2- b ][1,2,4]三 -2-基)苯甲醯胺(15)
在室溫下，將2-氟-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基)苯甲酸(14 ，431.4g，0.914mol，1.0當量)及六氟磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三(N-吡咯啶基)鏻(PyBOP，570g，1.1mol，1.2當量)於N ,N -二甲基甲醯胺(DMF，3700mL)中之懸浮液以2M甲胺於THF中之溶液(1830mL，3.656mol，4.0當量)處理15分鐘。在甲胺添加期間，反應溫度升至30℃，且甲胺添加一旦完成，反應混合物即變得均質。接著向反應混合物中添加三乙胺(TEA，382mL，2.742mol，3.0當量)且將所得反應混合物在室溫下攪拌2-4小時。當LC/MS顯示偶合反應完成時，將反應混合物以水(950mL)處理。將所得懸浮液在冰浴中冷卻至0-5℃且在0-5℃下攪拌30分鐘。將固體藉由過濾收集且以水(200mL)洗滌。接著將濕固體濾餅懸浮於水與乙腈之混合物(1/1體積比，2000mL)中且將所得懸浮液在室溫下攪拌1小時。將固體藉由過濾收集，以水及乙腈洗滌且在真空烘箱中、在40-45℃下乾燥至恆重以產生黃色至嫩黃色粉末狀之2-氟-N -甲基-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基)苯甲醯胺(15 ，322g，理論值377g，產率85.4%)。對於15 而言：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.20(s,1H),8.82(dd,1H,J =4.05,1.56Hz),8.38(br m,1H),8.27(dd,1H,J =8.50Hz,1.25Hz),8.06-7.93(m,5H),7.81-7.74(m,2H),7.49(dd,1H,J =8.40Hz,4.35Hz),4.62(s,2H),2.78(d,3H,J =4.36Hz)；C23 H17 FN6 O(MW 412.42),LCMS(EI)m /e 413.1(M+ +H)。
實例21 2-氟- N -甲基-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2- b ][1,2,4]三 -2-基)苯甲醯胺二鹽酸鹽(21，二鹽酸鹽)
將2-氟-N -甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺(15 ，421.2g，1.021mol)於甲醇(MeOH，6600mL)中之懸浮液加熱至55℃，隨後在55℃下逐滴添加濃氫氯酸水溶液(濃HCl，37重量%，12M，420mL，5.10mol，5.0當量)於異丙醇(IPA，1510mL)中之預混溶液。將所得透明溶液在55℃下攪拌30分鐘，隨後經由加料漏斗歷經30分鐘添加甲基第三丁基醚(MTBE，6750mL)。添加甲基第三丁基醚之後，緩慢沈澱出固體。將所得混合物在55℃下再攪拌1小時，隨後逐漸冷卻至室溫。將混合物在室溫下攪拌隔夜。將固體藉由過濾收集，以甲基第三丁基醚(MTBE，3×500mL)洗滌，且在真空烘箱中、在45-55℃下乾燥至恆重。獲得呈灰白色至淡黃色結晶固體狀之所要2-氟-N -甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺二鹽酸鹽(21 ，二鹽酸鹽，470.7g，理論值495.5g，產率95%)。對於21 而言(二鹽酸鹽)，熔點(分解)：222℃；1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.46(s,1H),9.25(dd,1H,J =5.4Hz,1.4Hz),9.12(d,1H,J =8.3Hz),8.51(m,1H),8.47(d,1H,J =0.9Hz),8.34(d,1H,J =1.3Hz),8.23(s,1H),8.21(dd,1H,J =9.0Hz,1.8Hz),8.09-8.02(m,3H),7.79(dd,1H,J =7.5Hz,8.3Hz),4.77(s,2H),2.78(s,3H,J =4.5Hz)；13 C NMR(100MHz,DMSO-d 6 )δppm 163.4,159.4(d,J =249.9Hz),145.8,145.4,144.5,143.8,140.4,138.8,136.8,135.9,135.7(J =8.6Hz),131.2(J =3.1Hz),130.7,128.7,128.2,126.2(J =14.9Hz),126.0,123.1(J =3Hz),122.5,121.0,114.9(J =5.6Hz),28.4,26.3；19 F NMR(376.3MHz,DMSO-d 6 )δppm-113.2；C23 H17 FN6 O(游離鹼，MW 412.42)，LCMS(EI)m /e 413.1(M+ +H)及435.0(M+ +Na)。
流程4(實例22-25)
實例22 1,2,4-三 -3-胺(16)
在室溫下將乙二醛水溶液(57Kg之40重量%水溶液，393mol，0.73當量)添加至胺基胍碳酸氫鹽(73Kg，536.3mol)於水(400L)中之懸浮液中。幾乎立即開始放出二氧化碳(CO2 )。接著將反應混合物在室溫下攪拌18小時，且氣體放出在約2小時後實際上停止。接著將反應混合物過濾，且將濾液在減壓下蒸發至乾燥。接著將殘餘物以冷甲醇(MeOH，3×120L)萃取，且將經組合之甲醇溶液冷卻至0-5℃，隨後過濾移除殘餘固體。接著將濾液在減壓下濃縮，且將殘餘物在乙腈中再結晶以產生呈白色細針狀之1,2,4-三-3-胺(16 ，34Kg，理論值37.76Kg，產率90%)。對於16 而言：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 8.54(d,1H,J =2.33Hz),8.20(d,1H,J =2.33Hz),7.15(br s,2H)。
實例23 6-溴-1,2,4-三 -3-胺(17)
在5-15℃下將1,2,4-三-3-胺(16 ，33Kg，343.4mol)於水(500L)及乙腈(300L)中之溶液以N -溴琥珀醯亞胺(NBS，66Kg，370mol，1.08當量)處理，且將所得反應混合物在10-15℃下攪拌1-4小時。當TLC及LC/MS顯示溴化反應完成時，將反應混合物以碳酸鈉飽和水溶液(Na2 CO3 )處理。接著將所得溶液以乙酸乙酯(EtOAc，3×500L)萃取。將組合之有機萃取物以水(2×100L)洗滌，經硫酸鎂乾燥(MgSO4 )且在減壓下濃縮以產生呈黃色至褐色粉末狀之6-溴-1,2,4-三-3-胺(17 ，10.3Kg，理論值60Kg，產率17.2%)。對於17 而言：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 8.39(s,1H),7.47(br,2H)；C3 H3 BrN4 (MW 174.99),LCMS(EI)m /e 175.0/176.9(M+ +H)。
實例24 2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼 -2-基)苯甲腈(19)
步驟1 。在室溫下將2-氟-4-溴苯甲腈(18 ，12.5Kg，62.5mol)於無水四氫呋喃(THF，30L)中之溶液以氯化異丙基鎂(由鎂(Mg，1.8Kg，150mol，1.2當量)及2-氯丙烷(7.2Kg，92mol，1.47當量)所產生)於THF(20L)中之溶液及2-(2-(二甲胺基)乙氧基)-N ,N -二甲基乙胺(11Kg，69mol，1.1當量)處理。接著將所得混合物在12-20℃下再攪拌2小時，隨後在10-15℃下以硼酸三甲酯(9Kg，86.7mol，1.4當量)處理。將反應混合物在7-16℃下攪拌40分鐘。當TLC及LC/MS顯示反應完成時，在室溫下將反應混合物以1N氫氯酸水溶液(HCl，35Kg)驟冷。接著將驟冷之水性反應混合物以乙酸乙酯(EtOAc，4×35L)萃取。將經組合之有機萃取物以水(50L)洗滌，經硫酸鎂(MgSO4 )乾燥且在減壓下濃縮。接著將殘餘固體自乙腈(20L)及己烷(45L)中再結晶以產生相應的粗3-氟-4-氰基苯基酸(5.0Kg，產率48%)。
步驟2 。在室溫下將粗3-氟-4-氰基苯基酸(9.2Kg，55.8mol)於環己烷(150L)中之懸浮液以四甲基乙二醇(13.2Kg，111.6mol，2.0當量)處理，且將所得反應混合物溫至40℃歷時4小時。當TLC及LC/MS顯示反應完成時，將反應混合物冷卻至室溫，隨後以水(2×75L)洗滌。接著將有機層經硫酸鎂(MgSO4 )乾燥且在減壓下濃縮以產生呈淡黃色固體狀之2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲腈(19 ，11.8Kg，理論值13.8Kg，產率85.6%)。對於19 而言：1 H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δppm 7.92(t,1H,J =7.00Hz),7.62(m,2H),1.29(s,12H)。
實例25 4-(3-胺基-1,2,4-三 -6-基)-2-氟苯甲腈(20)
將6-溴-1,2,4-三-3-胺(17 ，100.0g，571.47mmol)及2-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲腈(19 ，145.43g，588.61mmol，1.03當量)於1,4-二噁烷(1200mL)中之混合物在室溫下攪拌10分鐘，隨後添加水(600mL)中之碳酸鉀(K2 CO3 ，355.4g，2572mmol)以產生深紅色溶液。將混合物藉由氮氣鼓泡脫氣10分鐘，隨後在室溫下添加1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯鈀(II)與二氯甲烷之錯合物(1:1)(Pd(dppf)2 Cl2 ，14.14g，17.14mmol，0.03當量)。將所得反應混合物藉由氮氣鼓泡脫氣10分鐘，且接著在86℃下、在氮氣下加熱。2小時後，HPLC顯示反應完成，且將反應混合物冷卻至室溫且接著以冰水浴冷卻至0-5℃。將1,4-二噁烷(400mL)添加至經冷卻之反應混合物中，隨後在攪拌下逐滴添加3.3M鹽酸水溶液(HCl，1900mL)之溶液以將pH值調整至0.40-0.93。將混合物在室溫下攪拌30分鐘且過濾。將所收集之固體與1,4-二噁烷(260mL)一起攪拌且接著添加1N HCl(400mL)。將混合物在室溫下攪拌10分鐘且過濾。將濾液與早先所獲得之濾液組合且以乙酸乙酯(EtOAc，2×2L)洗滌。將組合之乙酸乙酯萃取物以1N鹽酸水溶液(HCl，3×200mL)萃取。接著將組合之水溶液以活性炭(20g)處理且在室溫下攪拌30分鐘。將混合物經矽藻土床過濾且將濾液以冰水浴冷卻至0-5℃。在5-12℃下逐滴添加50%氫氧化鈉水溶液(NaOH，240mL，4500mmol)以將pH值調整至10.6-11.6。將混合物在0-5℃下攪拌30分鐘且接著過濾。將所收集之固體以氫氧化銨水溶液(1至3次，28%濃NH4 OH至水，1900mL)洗滌且在真空下、在40-45℃下乾燥至恆重以產生呈灰白色粉末狀之4-(3-胺基-1,2,4-三-6-基)-2-氟苯甲腈(20 ，101.2g，理論值122.9g，產率82.3%)。對於20 而言：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 8.94(s,1H),8.12(d,1H,J =11.41Hz),8.08-8.00(m,2H),7.71(br s,2H)；C10 H6 FN5 (MW 215.19),LCMS(EI)m /e 215.9(M+ +H)。
流程5(實例26)
實例26 2-氟-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2- b ][1,2,4]三 -2-基)苯甲腈(13)
步驟1 。將裝備有頂置式攪拌器、熱電偶、蒸餾設備及氮氣入口之22L反應器以氮氣淨化，隨後在室溫下將4-(3-胺基-1,2,4-三-6-基)-2-氟苯甲腈(20 ，300g，1.39mol)、1-(2-氯-1-羥基-3-(喹啉-6-基)丙基)吡咯啶-2,5-二酮(11 ，635g，1.99mol，1.43當量)及乙二醇(3.0L)饋入反應器中。將所得反應混合物在連續氮氣鼓泡通過下加熱至130-140℃。以蒸餾設備收集餾出物。3-4小時後，HPLC指示反應完成(存在<1.5%之起始物質20) 。使反應混合物逐漸冷卻至室溫。在攪拌下歷經60分鐘將2.5%碳酸鈉水溶液(Na2 CO3 ，14.1L)添加至反應器中且將混合物在室溫下攪拌1-2小時。接著將混合物過濾，且將固體以水(9.6L)洗滌且在真空下乾燥以產生粗的所要產物(13 ，980.4g)，如下文所述將其與其他數批料組合用於純化。
步驟2 。在室溫下將粗產物(13 ，2754g)於二氯甲烷(CH2 Cl2 ，37.8L)及甲醇(0.54L)中之溶液以矽膠(SiO2 ，2700g)處理，且將所得混合物在室溫下攪拌90分鐘。將混合物過濾且將濾餅以CH2 Cl2 (18L)與甲醇(0.26L)之混合物洗滌。將組合之濾液以矽膠(SiO2 ，1800g)處理且將所得混合物在室溫下攪拌90分鐘且接著過濾。將濾餅以CH2 Cl2 (18L)與甲醇(0.26L)之混合物洗滌。將組合之濾液在減壓下、在20-60℃下濃縮至約8-12L。將殘餘物以異丙醇(IPA)與水(1:1，9L)之數份混合物處理且在1atm壓力下繼續蒸餾直至溫度達到68-75℃。將混合物冷卻至室溫且藉由過濾收集固體。將所收集之固體以異丙醇(IPA，3.6L)洗滌且在真空下、在40-45℃下乾燥至恆重以產生呈嫩黃色粉末狀之純2-氟-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基)苯甲腈(13 ，940.27g)。上述反應及純化方法產生產率為59-64%之產物13 。發現由此合成法所製備之化合物13 的光譜資料與自藉由將上述化合物12 氰化所製備之物質獲得之彼等資料相同。對於13 而言：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.24(s,1H),8.81(dd,1H,J =4.15,1.66Hz),8.26-8.12(m,4H),8.02(s,1H),7.95-7.93(m,2H),7.76(dd,1H,J =8.71,2.08Hz),7.47(dd,1H,J =8.70,4.15Hz),4.62(s,2H)；C22 H12 FN6 (MW 380.38),LCMS(EI)m /e 381.0(M+ +H)。
流程6(實例27-29)
實例27 2-氟-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2- b ][1,2,4]三 -2-基)苯甲酸(14)
在室溫下將化合物13 (900g，2.37mol)、水(0.9L)及濃HCl(9.1L)饋入裝備有頂置式攪拌器、熱電偶及氮氣入口之22L反應器中。將所得反應混合物在100℃下加熱12小時。當HPLC顯示反應完成時，將反應混合物冷卻至90℃且歷經15分鐘添加水(4.9L)，同時將溫度保持於65-90℃。將反應混合物進一步冷卻至室溫且在室溫下攪拌3小時。將固體藉由過濾收集，以水(1.2L)洗滌且在真空中、在40-45℃下乾燥至恆重以產生呈淡黃色固體狀之2-氟-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基)苯甲酸(14 ，945g，理論值946.5g，產率99.8%)，發現其與藉由上述方法所製備之物質相同。對於14 而言：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.34(s,1H),9.23(dd,1H,J =5.19Hz,1.45Hz),9.08(d,1H,J =8.29Hz),8.38(d,1H,J =8.92Hz),8.30(d,1H,J =1.24Hz),8.18(dd,1H,J =8.72Hz,1.87Hz),8.12(s,1H),8.08-8.00(m,4H),4.75(s,2H)；C22 H16 Cl2 FN5 O2 (MW 472.30),C22 H14 FN5 O2 (游離鹼：MW 399.38),LCMS(EI)m /e 400.0(M+ +H)。
實例28 2-氟- N -甲基-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2- b ][1,2,4]三 -2-基)苯甲醯胺(15)
方法A 。在室溫下將HOBt(358g，2.65mol，1.25當量)及EDC鹽酸鹽(508.4g，2.65mol，1.25當量)饋入2-氟-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基)苯甲酸(14 ，1000g，2.12mol)於乙腈(5L)及CH2 Cl2 (10L)中之經攪拌溶液中。接著向反應混合物中添加另一份CH2 Cl2 (10L)且將所得反應混合物在室溫下攪拌20分鐘。在攪拌下添加甲胺(MeNH2 )於THF中之2.0M溶液(3.44L，6.88mol，3.25當量)，同時將溫度保持於15-30℃。將反應混合物在室溫下攪拌2小時，隨後添加甲胺(MeNH2 )於THF中之另一份2.0M溶液(1.06L，2.12mol，1當量)。將反應混合物在室溫下攪拌1小時且添加第二份EDC鹽酸鹽(406g，2.12mol，1當量)且繼續攪拌6小時。當HPLC顯示剩餘起始物質(14 )少於1%時，將反應混合物在減壓下、在低於50℃下濃縮。在蒸餾期間，添加乙腈(20L)且繼續蒸餾直至剩餘體積為約20L。將殘餘物以2.5%碳酸鈉水溶液(Na2 CO3 ，40L)處理且將所得混合物在室溫下攪拌30分鐘。將固體藉由過濾收集，以水(3×4.0L)洗滌，藉由在過濾器上抽真空來風乾以產生粗的所要產物(15 )。在室溫下將粗固體以CH2 Cl2 (17.6L)及MeOH(5.2L)處理且將所得混合物攪拌直至獲得透明溶液。將溶液過濾以移除不溶性物質。在劇烈攪拌下，向濾液中添加2.5%碳酸鈉水溶液(Na2 CO3 ，17.6L)且將混合物在室溫下攪拌60分鐘以產生懸浮液。添加庚烷(20L)且將混合物再攪拌60分鐘。將混合物過濾且將固體依序以水(3×4.0L)及庚烷(4.0L)洗滌，且在真空中乾燥以產生嫩黃色固體狀之2-氟-N -甲基-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基)苯甲醯胺(15 ，1095.3g，理論值874.3g)，發現其未完全乾燥且含有約25%殘餘溶劑。此濕固體無需進一步乾燥而直接用於隨後二鹽酸鹽(21 )形成反應。將少量樣本完全乾燥用於光譜分析且資料與上述方法所獲得之彼等資料一致：對於15 而言：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.20(s,1H),8.82(dd,1H,J =4.05,1.56Hz),8.38(br m,1H),8.27(dd,1H,J =8.50Hz,1.25Hz),8.06-7.93(m,5H),7.81-7.74(m,2H),7.49(dd,1H,J =8.40Hz,4.35Hz),4.62(s,2H),2.78(d,3H,J =4.36Hz)；C23 H17 FN6 O(MW 412.42),LCMS(EI)m /e 413.1(M+ +H)。
方法B 。在室溫下將甲苯(300mL)添加至2-氟-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基]苯甲酸二鹽酸鹽(14 ，50.00g，0.1059mol)中且隨後添加亞硫醯氯(SOCl2 ，77.2mL，1.06mol，10.0當量)。將所得反應混合物在72℃下、在N2 下加熱且反應之後藉由HPLC分析起始物質苯甲酸(14 )之消失。48小時後，HPLC指示剩餘約4%起始物質且反應停止。將反應混合物藉由在40-50℃下真空蒸餾來濃縮至乾燥。向殘餘固體中添加甲苯(300mL)且藉由在40-50℃下真空蒸餾來移除溶劑。添加THF(250mL)且將混合物以冰水浴冷卻。逐滴添加THF中之2.0M甲胺(MeNH2 )(529mL，1.06mol，10當量)。使所得反應混合物溫至室溫且在室溫下攪拌17小時。向反應混合物中添加水(600mL)且藉由在40℃下真空蒸餾來移除THF(400-500mL)。添加碳酸鈉(15.60g，0.147mol)且將混合物在室溫下攪拌30分鐘。將混合物過濾且將固體以水(3×30mL)洗滌且乾燥。將固體溶解於預混之二氯甲烷(CH2 Cl2 ，1000mL)與甲醇(MeOH，300mL)中。在劇烈攪拌下，逐滴添加碳酸鈉(Na2 CO3 )於水(1000mL)中之0.236M溶液。添加碳酸鈉水溶液(Na2 CO3 )後，緩慢沈澱出固體。接著在攪拌下逐滴添加己烷(1000mL)。將混合物在室溫下攪拌30-40分鐘，且藉由過濾收集固體。將所收集之固體以水(3×200mL)洗滌且在真空中、在40-50℃下乾燥至恆重以產生呈嫩黃色固體狀之2-氟-N -甲基-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基)苯甲醯胺(15 ，42.2g，理論值43.67g，產率96.6%)，發現其與藉由方法A所製備之物質在每個可比方面均相同。對於15 而言：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.20(s,1H),8.82(dd,1H,J =4.05,1.56Hz),8.38(br m,1H),8.27(dd,1H,J =8.50Hz,1.25Hz),8.06-7.93(m,5H),7.81-7.74(m,2H),7.49(dd,1H,J =8.40Hz,4.35Hz),4.62(s,2H),2.78(d,3H,J =4.36Hz)；C23 H17 FN6 O(MW 412.42),LCMS(EI)m /e 413.1(M+ +H)。
實例29 2-氟- N -甲基-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2- b ][1,2,4]三 -2-基)苯甲醯胺二鹽酸鹽(21，二鹽酸鹽)
在室溫下將2-氟-N -甲基-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基)苯甲醯胺(15 ，2100g，含有約25%殘餘溶劑)及經過濾之USP水(7.6L)饋入50L反應器中。在攪拌下，以加料漏斗添加6M氫氯酸水溶液(HCl，3L)。將所得反應混合物在室溫下攪拌1.5小時。在攪拌下，在1小時期間向反應器中添加丙酮(30.5L)且將所得混合物在室溫下攪拌2.5小時。將固體藉由過濾收集，以丙酮(2×4.3L)洗滌且在真空中乾燥至恆重以產生呈淺黃色結晶粉末狀之2-氟-N -甲基-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基)苯甲醯胺二鹽酸鹽(21 ，二鹽酸鹽，1629.2g，理論值1830.6g，89%)，發現其與藉由上述方法所製備之物質在每個可比方面均相同。對於21而言 (二鹽酸鹽)：1 H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.46(s,1H),9.25(dd,1H,J =5.4Hz,1.4Hz),9.12(d,1H,J =8.3Hz),8.51(m,1H),8.47(d,1H,J =0.9Hz),8.34(d,1H,J =1.3Hz),8.23(s,1H),8.21(dd,1H,J =9.0,1.8Hz),8.09-8.02(m,3H),7.79(dd,1H,J =7.5,8.3Hz),4.77(s,2H),2.78(s,3H,J =4.5Hz)；13 C NMR(100MHz,DMSO-d 6 )δppm 163.4,159.4(d,J =249.9Hz),145.8,145.4,144.5,143.8,140.4,138.8,136.8,135.9,135.7(J =8.6Hz),131.2(J =3.1Hz),130.7,128.7,128.2,126.2(J =14.9Hz),126.0,123.1(J =3Hz),122.5,121.0,114.9(J =5.6Hz),28.4,26.3；19 F NMR(376.3MHz,DMSO-d 6 )δppm-113.2；C23 H17 FN6 O(游離鹼，MW 412.42),LCMS(EI)m /e 413.1(M+ +H)及435.0(M+ +Na)。
實例30 2-氟- N -甲基-4-(7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2- b ][1,2,4]三 -2-基)苯甲醯胺二鹽酸鹽(21)之物理特徵
該二鹽酸鹽在白色背景下為藉由目測所認定之灰白色至淡黃色粉末。
實例31 溶解度研究
二鹽酸鹽(21 ，參見實例21)在25℃下之溶解度得知為：在水中，約4.9mg/mL；在pH值7.4之緩衝液中，0.002mg/mL；在pH值8.0之緩衝液中，0.002mg/mL；且在0.1N HCl水溶液中，約24mg/mL。藉由將樣本在選定水性溶劑(0.1N HCl、水、pH值7.4之緩衝液及pH值8.0之緩衝液)中混合至少12小時來測定平衡溶解度。接著藉由HPLC、使用單點校準法測定樣本濃度。
實例A 活體外c-Met激酶檢定
活體外篩檢2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺抑制c-Met激酶活性之能力。抑制c-Met激酶之IC50 值如文獻中所述(其中有些修改)測定(Wang,X.等人，Mol. Cancer Ther. 2003,2(11):1085-1092；Calic,M.等人，Croatica Chemical ACTA. 2005,78(3):367-374)。簡言之，檢定使用經組胺酸標記之c-Met催化域融合蛋白(Invitrogen,# PV3143)。IC50 量測係基於塗覆(每孔0.01mg)於96孔微定量盤(R＆D systems,# DY990)上之聚Glu-Tyr(Sigma-Aldrich,# P0275)之磷酸化程度。反應在含有50mM HEPES(pH值7.5)、10mM MnCl2 、10mM MgCl2 、0.5mM DTT、100μM Na3 VO4 、5μM ATP(Cell Signaling Technology,# 9804)及測試化合物之連續稀釋液之50μL溶液中進行。反應在30℃下持續25分鐘。反應完成後，丟棄盤之內含物。接著將盤以TBS-T(250微升/孔，5次)洗滌且接著以含有1% BSA之TBS-T阻斷2小時。將盤之內含物丟棄，且接著添加100μL(每孔)稀釋(1:60,000)於含有1% BSA之TBS-T中的過氧化酶標記之抗磷酸化酪胺酸抗體(Sigma,# A5964)且培育1小時。將盤以TBS-T(250微升/孔，5次)洗滌且隨後使用100μL(1:1混合物)H2 O2 與四甲基聯苯胺(R＆D Systems，# DY999)進行顯色反應。數分鐘後以100μL 2N H2 SO4 中止反應。立即使用微定量盤讀取器、在450nm下(其中在540nm下校正波長)量測光學密度。以GraphPad Prism軟體計算IC50 值。測定激酶之線性範圍(亦即，速率保持等於初始速率之時間段)且在此範圍內進行IC50 測定。
Wang,X.等人，Potent and selective inhibitors of the Met[hepatocyte growth factor/scatter factor(HGF/SF)receptor]tyrosine kinase block HGF/SF-induced tumor cell growth and invasion. Mol. Cancer Ther. 2003,2(11):1085-1092。
Calic,M.等人，Flavonoids as inhibitors of Lck and Fyn kinases. Croatica Chemica ACTA. 2005,78(3):367-374。
得知2-氟-N -甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b ][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺具有小於500nM之IC50 值。參見例如美國專利第11/942,130號。
實例B 細胞增殖/存活檢定
代表各種人類癌症之細胞株(SNU-1及SUN-5胃癌、A549及NCI-H441肺癌、U-87神經膠母細胞瘤、HT-29結腸癌、786-O腎癌、PC-3胰腺癌)可自美國菌種保存中心(American Type Culture Collection)獲得且日常維持於ATCC所推薦之培養基中及條件下。可預先測定增殖/存活檢定中所用之個別細胞株之最佳細胞密度。篩檢化合物抑制細胞增殖/存活之能力且測定IC50 值。以下為用於SNU-5及SNU-1細胞增殖/存活檢定之取樣方案。在96孔細胞培養盤中，將SNU-5及SNU-1細胞分別以每孔4000個細胞及每孔2000個細胞接種於含有2% FBS且補充有個別化合物之連續稀釋液的適當培養基中，最終體積為每孔100μL。培育72小時後，向各孔中添加24μL CellTiter 96AQueous One Solution試劑(Promega,# G3581)(最終濃度=333μg/mL)，且將盤在37℃恆溫箱中培育2小時以上。使用微定量盤讀取器、在490nm下(其中波長在650nm下校正)量測線性範圍內之光學密度。以GraphPad Prism軟體計算IC50 值。對於使用A549、NCI-H441、U-87、HT-29、786-0及PC-3細胞之增殖檢定而言，首先使細胞在低血清條件(適當培養基中之0.1-0.5% FBS)下空乏48小時，接著以不同濃度之化合物處理2小時。將細胞以HGF(50ng/mL)(R＆D,# 294-HGN)處理24小時後，添加CellTiter 96AQueous One Solution試劑且將盤培育2小時。以盤讀取器記錄結果。
實例C 基於細胞之c-Met磷酸化檢定
可使用免疫墨點分析及基於ELISA之c-Met磷酸化檢定評估化合物對相關細胞株(SNU-5胃癌、A549及NCI-H441肺癌、U-87神經膠母細胞瘤、HT-29結腸癌、786-O腎癌及PC-3胰腺癌細胞株及HUVEC細胞株)中之c-Met磷酸化的抑制作用。使細胞生長於適當培養基中且以各種濃度之個別化合物處理。對於SNU-5、HT-29、786-0細胞而言，使細胞生長於補充有0.2%或2% FBS之適當培養基中且以化合物處理3-4小時。使用自Biosource International獲得之試劑及方案(# FNN0011)(其中稍有修改)製備全細胞蛋白質萃取物。簡言之，藉由在4℃下、在具有蛋白酶及磷酸酶抑制劑之溶解緩衝液[50mM HEPES(pH 7.5)、100mM NaCl、1.5mM MgCl2 、10%甘油、1% Triton X-100、1mM原釩酸鈉、1mM氟化鈉、抗蛋白酶(2μg/mL)、亮抑蛋白酶肽(2μg/mL)、抑胃肽A(2μg/mL)及苯基甲基磺醯氟(1mM)]中培育來製備蛋白質萃取物。藉由在14,000×g下離心20分鐘來分離細胞殘骸中之蛋白質萃取物。對於A549、H441、U-87及PC-3細胞而言，使細胞進行血清(0.2% FBS)空乏至少24小時，接著以各種濃度之化合物預處理1小時。在以HGF(50ng/mL)處理細胞10分鐘後製備全細胞萃取物。
免疫墨點分析
自商業來源獲得相關抗體：兔多株抗體，包括抗人類c-Met(Santa Cruz Biotechnology，# sc-161)及抗磷酸化-c-Met(Biosource International，pY1230/4/5及pY1003)。對於免疫墨點而言，將來自個別處理條件之10-20μg蛋白質萃取物藉由在10% SDS-PAGE凝膠上電泳來溶解，且電轉移至硝基纖維素(或PVDF)膜。將膜在含有3%乳及0.1% Tween-20之PBS中阻斷1小時，且接著在阻斷溶液中用一次抗c-Met抗體培育1小時。洗滌3次後，將膜用適當辣根結合之二次抗體培育1小時。最終洗滌後，將墨點用化學發光偵測試劑培育5分鐘且曝露於X射線膜。將影像掃描、定量且以總c-Met校正，且計算IC50 值。具有10μM或小於10μM之IC50 的化合物視為具有活性。
ELISA
使用人類磷酸化c-Met ELISA套組、根據製造商說明書(R＆D Systems，# DYC2480)分析細胞蛋白質萃取物。預先測定個別細胞株之蛋白質萃取物之最佳量。簡言之，對於檢定而言，在96孔微定量盤中以捕捉性抗人類c-Met抗體捕捉適量之蛋白質萃取物歷時2小時。洗滌後，添加偵測抗體(HRP結合之抗磷酸化酪胺酸抗體)且培育2小時。額外洗滌後，向各孔中添加100μL受質溶液(H2 O2 與四甲基聯苯胺之1:1混合物)且在顯色期間、在適量時間內以2N H2 SO4 中止反應。使用微定量盤讀取器、在450nm下(其中波長在540nm下校正)量測線性範圍內之光學密度。以GraphPad Prism軟體計算IC50 值。
除本文所述之彼等內容之外，本發明之各種修改經由上述說明顯而易見於熟習此項技術者。亦希望該等修改屬於隨附申請專利範圍之範疇內。本申請案所引用之各參考文獻(包括所有專利、專利申請案及公開案)全文係以引用的方式併入本文中。
圖1顯示表徵根據實例1之方法所製備之本發明之二鹽酸鹽的X射線粉末繞射(XRPD)圖；
圖2顯示表徵根據實例1之方法所製備之本發明之二鹽酸鹽的差示掃描熱量測定(DSC)跡線；
圖3顯示表徵根據實例1之方法所製備之本發明之二鹽酸鹽的熱解重量分析(TGA)溫譜圖；
圖4顯示表徵根據實例5之方法所製備之本發明之二苯磺酸鹽的X射線粉末繞射(XRPD)圖；及
圖5顯示表徵根據實例5之方法所製備之本發明之二苯磺酸鹽的差示掃描熱量測定(DSC)跡線。
(無元件符號說明)

Claims (68)

  1. 一種2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺二鹽酸鹽，或其水合物。
  2. 一種如請求項1之鹽之水合物。
  3. 如請求項2之水合物，其特徵為約220℃至約224℃之熔點。
  4. 如請求項2之水合物，其特徵為約222℃之熔點。
  5. 如請求項2之水合物，其為結晶體。
  6. 如請求項2之水合物，其具有以位於約222℃之吸熱峰為特徵之DSC溫譜圖(DSC thermogram)。
  7. 如請求項2之水合物，其具有實質上如圖2所示之DSC溫譜圖。
  8. 如請求項2之水合物，其具有實質上如圖3所示之TGA。
  9. 如請求項2之水合物，其具有包含以約26.0度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。
  10. 如請求項2之水合物，其具有包含以約24.7度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。
  11. 如請求項2之水合物，其具有包含以約18.2度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。
  12. 如請求項2之水合物，其具有包含以約29.3度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。
  13. 如請求項2之水合物，其具有包含以約7.8度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。
  14. 如請求項2之水合物，其具有包含以約26.0度及24.7度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。
  15. 如請求項2之水合物，其具有包含以約26.0度、24.7度、18.2度、29.3度及7.8度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。
  16. 一種2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺二苯磺酸鹽，或其水合物。
  17. 如請求項16之鹽，其中該鹽為無水鹽。
  18. 如請求項16之鹽，其特徵為約268℃至約272℃之熔點。
  19. 如請求項16之鹽，其特徵為約270℃之熔點。
  20. 如請求項16之鹽，其為結晶體。
  21. 如請求項16之鹽，其具有以位於約270℃之吸熱峰為特徵之DSC溫譜圖。
  22. 如請求項16之鹽，其具有實質上如圖5所示之DSC溫譜圖。
  23. 如請求項16之鹽，其具有包含以約20.2度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。
  24. 如請求項16之鹽，其具有包含以約15.0度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。
  25. 如請求項16之鹽，其具有包含以約16.3度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。
  26. 如請求項16之鹽，其具有包含以約18.3度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。
  27. 如請求項16之鹽，其具有包含以約23.8度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。
  28. 如請求項16之鹽，其具有包含以約4.9度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。
  29. 如請求項16之鹽，其具有包含以約15.0度、16.3度、18.3度、20.2度、23.8度及4.9度之2θ角表示之特徵峰的X射線粉末繞射圖。
  30. 一種組合物，其包含如請求項1至29中任一項之鹽或其水合物及至少一種醫藥學上可接受之載劑。
  31. 一種體外抑制受體或非受體酪胺酸激酶之活性的方法，其包含使該激酶與如請求項1至29中任一項之鹽或其水合物接觸。
  32. 如請求項31之方法，其中該激酶為c-Met。
  33. 一種體外抑制細胞中之HGF/c-Met激酶信號轉導路徑的方法，其包含使該細胞與如請求項1至29中任一項之鹽或其水合物接觸。
  34. 一種體外抑制細胞之增殖活性的方法，其包含使該細胞與如請求項1至29中任一項之鹽或其水合物接觸。
  35. 一種如請求項1至29中任一項之鹽或其水合物之用途，其係製造用於抑制腫瘤生長的藥物。
  36. 一種如請求項1至29中任一項之鹽或其水合物之用途，其係製造用於抑制腫瘤轉移的藥物。
  37. 一種如請求項1至29中任一項之鹽或其水合物之用途，其係製造用於治療疾病的藥物，其中該疾病與HGF/c- MET信號轉導路徑之調節異常有關。
  38. 如請求項37之用途，其中該疾病為癌症、動脈粥樣硬化、肺纖維化、腎臟纖維化及再生、肝臟疾病、過敏性病症、發炎性疾病、自體免疫病症、腦血管疾病、心血管疾病或與器官移植有關之病狀。
  39. 一種如請求項1至29中任一項之鹽或其水合物之用途，其係製造用於治療癌症的藥物。
  40. 如請求項39之用途，其中該癌症為癌瘤、骨骼肌肉瘤、軟組織瘤或惡性血液病。
  41. 如請求項39之用途，其中該癌症為膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、膽管癌、結腸直腸癌、食道癌、胃癌、頭頸癌、腎癌、肝癌、肺癌、鼻咽癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、甲狀腺癌、骨肉瘤、滑膜肉瘤、橫紋肌肉瘤、MFH/纖維肉瘤、平滑肌肉瘤、卡波氏肉瘤(Kaposi's sarcoma)、多發性骨髓瘤、淋巴瘤、成人T細胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、神經膠母細胞瘤、星形細胞瘤、黑素瘤、間皮瘤或威姆氏腫瘤(Wilm's tumor)。
  42. 一種製備如請求項2之水合物的方法，其包含：a)在包含水之溶劑中將包含2-氟-N-甲基-4-[7-(喹啉-6-基甲基)咪唑并[1,2-b][1,2,4]三-2-基]苯甲醯胺與水之第一混合物與至少2當量之氫氯酸反應以形成第二混合物；及b)將該第二混合物與甲基第三丁基醚組合。
  43. 如請求項42之方法，其中步驟a)在約20℃至約30℃之溫度下進行。
  44. 如請求項42之方法，其中步驟a)及b)在約室溫下進行。
  45. 一種製備式I化合物或其鹽的方法， 其包含使式II化合物： 與式III化合物： 反應以形成式I化合物或其鹽；其中X1 為氯、溴或碘。
  46. 如請求項45之方法，其進一步包含使該式I化合物或其鹽與強酸反應以形成式IV化合物： 或其鹽。
  47. 如請求項46之方法，其中該酸為濃氫氯酸。
  48. 如請求項46或47之方法，其進一步包含在至少一種偶合劑存在下使該式IV化合物或其鹽與CH3 NH2 反應以形成式V化合物： 或其鹽。
  49. 如請求項48之方法，其中該偶合劑係選自1-乙基-3-(3-二甲胺基丙基)碳化二亞胺、N-羥基苯并三唑、六氟磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三(N-吡咯啶基)磷及其鹽。
  50. 如請求項46或47之方法，其進一步包含：a)使該式IV化合物： 或其鹽與鹵化劑反應以形成式VI化合物： 或其鹽；及b)使該式VI化合物或其鹽與CH3 NH2 反應以形成式V化合物： 或其鹽，其中X2 為鹵素。
  51. 如請求項50之方法，其中該鹵化劑為亞硫醯氯。
  52. 如請求項45之方法，其進一步包含藉由以下方法製備該式II化合物： 該方法包含使式IIa化合物： 與式IIb化合物反應： 其中X1 為氯、溴或碘。
  53. 如請求項52之方法，其中該式IIa化合物與該式IIb化合物之該反應係在脯胺酸存在下進行。
  54. 如請求項52至53中任一項之方法，其中X1 為氯。
  55. 如請求項52或53之方法，其進一步包含藉由以下方法製備該式IIa化合物： 該方法包含使式IIc化合物： 與丙-2-烯-1-醇在鈀催化劑及鹼存在下反應；其中X3 為氯、溴或碘。
  56. 如請求項55之方法，其進一步包含藉由以下方法製備該式IIa化合物： 該方法包含使式IId化合物： 與式HX'之酸反應，其中X'為氯、溴或碘。
  57. 如請求項56之方法，其進一步包含藉由以下方法製備式IId化合物： 該方法包含將式IIe化合物： 在氫化催化劑存在下以氫氣還原。
  58. 如請求項57之方法，其中該氫化催化劑為鈀/碳。
  59. 如請求項57之方法，其進一步包含藉由以下方法製備式IIe化合物，該方法包含使式IIc化合物與式IIf化合物： 在偶合催化劑及鹼存在下反應。
  60. 如請求項59之方法，其中該催化劑為乙酸鈀與CuI之混合物。
  61. 如請求項57之方法，其進一步包含藉由以下方法製備式IId化合物： 該方法包含使式IIg化合物： 與9-硼雙環[3.3.1]壬烷反應，隨後與式IIc化合物： 在偶合催化劑存在下反應以形成式IId化合物；其中X3 為氯、溴或碘。
  62. 如請求項61之方法，其中該偶合催化劑為二乙酸鈀(II)。
  63. 如請求項45之方法，其進一步包含藉由以下方法製備該式III化合物，該方法包含使式IIIa化合物： 與式IIIb化合物： 在鈀催化劑及鹼存在下反應；其中：X4 為氯、溴或碘；且各Ra 獨立地為C1-6 烷基；或各Ra 連同兩個氧原子與硼原子一起形成5員或6員雜環；其中該雜環視情況經1個、2個、3個或4個經獨立選擇之C1-4 烷基取代。
  64. 如請求項63之方法，其中該式IIIb化合物具有式IIIb-1：
  65. 如請求項63或64之方法，其進一步包含藉由使1,2,4-三-3-胺與鹵化劑反應來製備該式IIIa化合物。
  66. 如請求項64之方法，其進一步包含藉由以下方法製備該式IIIb-1化合物，該方法包含：a)使式IIIc化合物： 與式R1 MgY之試劑反應，隨後與式B(OR2 )3 化合物反應以形成式IIId化合物： b)在步驟a)反應後，使該式IIId化合物與酸反應，隨後與四甲基乙二醇反應以形成該式IIIb-1化合物；其中：R1 為C1-6 烷基；各R2 獨立地為C1-6 烷基；且X5 為氯、溴或碘。
  67. 一種式III化合物： 或其鹽。
  68. 一種式II化合物： 其中X1 為氯、碘或溴。
TW98116761A 2008-05-21 2009-05-20 ２－氟－Ｎ－甲基－４－〔７－（喹啉－６－基－甲基）－咪唑并〔１，２－ｂ〕〔１，２，４〕三－２－基〕苯甲醯胺之鹽類及其相關製備方法 TWI472529B (zh)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US5499508P 2008-05-21 2008-05-21

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW201008943A TW201008943A (en) 2010-03-01
TWI472529B true TWI472529B (zh) 2015-02-11

Family

ID=41058602

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW98116761A TWI472529B (zh) 2008-05-21 2009-05-20 ２－氟－Ｎ－甲基－４－〔７－（喹啉－６－基－甲基）－咪唑并〔１，２－ｂ〕〔１，２，４〕三－２－基〕苯甲醯胺之鹽類及其相關製備方法

Country Status (30)

Country Link
US (7) US8420645B2 (zh)
EP (2) EP3287449A3 (zh)
JP (2) JP6022158B2 (zh)
KR (1) KR101706784B1 (zh)
CN (4) CN102083814B (zh)
AR (3) AR071873A1 (zh)
BR (1) BRPI0912882A2 (zh)
CA (1) CA2724742C (zh)
CL (1) CL2009001250A1 (zh)
CO (1) CO6300934A2 (zh)
CY (1) CY1119813T1 (zh)
DK (1) DK2300455T3 (zh)
EA (1) EA021364B1 (zh)
EC (1) ECSP10010685A (zh)
ES (1) ES2643363T3 (zh)
HK (1) HK1251568A1 (zh)
HR (1) HRP20171528T1 (zh)
HU (1) HUE034716T2 (zh)
IL (3) IL209229A (zh)
LT (1) LT2300455T (zh)
MA (1) MA32405B1 (zh)
MX (3) MX2010012718A (zh)
MY (2) MY187131A (zh)
NZ (2) NZ589622A (zh)
PL (1) PL2300455T3 (zh)
PT (1) PT2300455T (zh)
SI (1) SI2300455T1 (zh)
TW (1) TWI472529B (zh)
WO (1) WO2009143211A2 (zh)
ZA (1) ZA201008212B (zh)

Families Citing this family (43)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HUE026659T2 (en) 2006-11-22 2016-07-28 Incyte Holdings Corp Imidazotriazines and imidazopyrimidines as kinase inhibitors
SI2300455T1 (sl) 2008-05-21 2017-12-29 Incyte Holdings Corporation Soli 2-fluoro-n-metil-4-(7-(kinolin-6-il-metil)-imidazo(1,2-b)1,2,4) triazin-2-il)benzamid in postopki v zvezi z njihovo pripravo
AU2011269788B2 (en) 2010-02-03 2015-12-10 Incyte Holdings Corporation Imidazo[1,2-b][1,2,4]triazines as c-Met inhibitors
ES2691650T3 (es) 2011-09-15 2018-11-28 Novartis Ag 3-(quinolin-6-il-tio)-[1,2,4]-triazolo-[4,3-a]-piridinas 6-sustituidas como inhibidores de tirosina quinasa c-Met
DE102013100596B4 (de) 2012-01-27 2023-09-07 Samsung Electronics Co. Ltd. Nichtflüchtiges Speichersystem mit Programmier- und Löschverfahren und Blockverwaltungsverfahren
EP2834246B1 (en) * 2012-04-03 2021-07-28 Novartis AG Combination products with tyrosine kinase inhibitors and their use
RU2705095C2 (ru) * 2012-08-16 2019-11-05 Новартис Аг Комбинация ингибитора pik3 и ингибитора с-мет
MA38522A1 (fr) 2013-03-21 2017-10-31 Novartis Ag Thérapie de combinaison comprenant un inhibiteur de b-raf et un second inhibiteur.
WO2014174478A1 (en) 2013-04-26 2014-10-30 Novartis Ag Pharmaceutical combinations of a pkc inhibitor and a c-met receptor tyrosine kinase inhibitor
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
CU24481B1 (es) 2014-03-14 2020-03-04 Immutep Sas Moléculas de anticuerpo que se unen a lag-3
WO2016011658A1 (en) 2014-07-25 2016-01-28 Novartis Ag Combination therapy
HUE053346T2 (hu) 2014-07-25 2021-06-28 Novartis Ag 2-fluor-N-metil-4-[7-(kinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-B][1,2,4]triazin-2-il]benzamid tablettás kiszerelése
CA2954862A1 (en) 2014-07-31 2016-02-04 Novartis Ag Combination therapy
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
TWI716362B (zh) 2014-10-14 2021-01-21 瑞士商諾華公司 針對ｐｄ－ｌ１之抗體分子及其用途
JP6692826B2 (ja) 2015-03-10 2020-05-13 アドゥロ バイオテック，インク． 「インターフェロン遺伝子刺激因子」依存性シグナル伝達の活性化のための組成物及び方法
US20180207273A1 (en) 2015-07-29 2018-07-26 Novartis Ag Combination therapies comprising antibody molecules to tim-3
PT3317301T (pt) 2015-07-29 2021-07-09 Novartis Ag Terapias de associação compreendendo moléculas de anticorpo contra lag-3
JP2019503349A (ja) 2015-12-17 2019-02-07 ノバルティス アーゲー Ｐｄ−１に対する抗体分子およびその使用
JP7115746B2 (ja) 2016-01-27 2022-08-09 ウニヴェルズィテート・ツューリヒ 掻痒の処置のためのｇａｂａａ受容体モジュレーターの使用
EP3507367A4 (en) 2016-07-05 2020-03-25 Aduro BioTech, Inc. CYCLIC DINUCLEOTID COMPOUNDS WITH INCLUDED NUCLEIC ACIDS AND USES THEREOF
CN106496000A (zh) * 2016-10-19 2017-03-15 蚌埠学院 一种3‑氟‑4‑溴‑苯乙酮的合成方法
UY37695A (es) 2017-04-28 2018-11-30 Novartis Ag Compuesto dinucleótido cíclico bis 2’-5’-rr-(3’f-a)(3’f-a) y usos del mismo
EA202090104A1 (ru) 2017-06-22 2020-04-09 Новартис Аг Молекулы антител к cd73 и пути их применения
US20200172628A1 (en) 2017-06-22 2020-06-04 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
EP3781566A4 (en) * 2018-04-18 2022-06-22 Neurocycle Therapeutics, Inc. GABAA-POSITIVE ALLOSTERIC MODULATING COMPOUNDS, METHODS OF PRODUCTION AND USES THEREOF
CN110526916B (zh) * 2018-05-23 2021-07-13 海创药业股份有限公司 氘代Capmatinib化合物及其用途
TW202015726A (zh) 2018-05-30 2020-05-01 瑞士商諾華公司 Ｅｎｔｐｄ２抗體、組合療法、及使用該等抗體和組合療法之方法
US20210214459A1 (en) 2018-05-31 2021-07-15 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
BR112021018168B1 (pt) 2019-03-21 2023-11-28 Onxeo Composição farmacêutica, combinação e kit compreendendo uma molécula dbait e um inibidor de quinase para o tratamento de câncer
CN114502590A (zh) 2019-09-18 2022-05-13 诺华股份有限公司 Entpd2抗体、组合疗法、以及使用这些抗体和组合疗法的方法
KR20220098759A (ko) 2019-11-08 2022-07-12 인쎄름 (엥스띠뛰 나씨오날 드 라 쌍떼 에 드 라 흐쉐르슈 메디깔) 키나제 억제제에 대해 내성을 획득한 암의 치료 방법
WO2021148581A1 (en) 2020-01-22 2021-07-29 Onxeo Novel dbait molecule and its use
WO2021165818A1 (en) * 2020-02-17 2021-08-26 Novartis Ag Process and intermediates for the preparation of 2-fluoro-n-methyl-4-[7-quinolin-6-yl-methyl)-imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2yl]benzamide
CN111825678A (zh) * 2020-06-05 2020-10-27 连庆泉 一种卡马替尼的制备方法
WO2022007752A1 (zh) * 2020-07-06 2022-01-13 苏州晶云药物科技股份有限公司 苯甲酰胺类化合物及其二盐酸盐的新晶型及其制备方法
WO2022063869A2 (en) * 2020-09-24 2022-03-31 Merck Patent Gmbh Compounds for the treatment of viral infections
CN112480017A (zh) * 2020-11-13 2021-03-12 金仓(上海)医药生物科技有限公司 一种3-氨基-1,2,4-三嗪的制备方法
KR20240055778A (ko) 2021-09-01 2024-04-29 노파르티스 아게 Tead 억제제를 포함하는 제약 조합물 및 암의 치료를 위한 이의 용도
CN113896732B (zh) * 2021-10-13 2023-09-12 沈阳红旗制药有限公司 抗癌药物卡马替尼的制备方法及其应用
WO2023249994A1 (en) * 2022-06-22 2023-12-28 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods and materials for treating cancer

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008051805A2 (en) * 2006-10-23 2008-05-02 Sgx Pharmaceuticals, Inc. Triazolo-pyridazine protein kinase modulators
WO2008064157A1 (en) * 2006-11-22 2008-05-29 Incyte Corporation Imidazotriazines and imidazopyrimidines as kinase inhibitors

Family Cites Families (84)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US1411859A (en) 1920-12-08 1922-04-04 Marchand Robert Process for preparing hydrate of terpin
US2837520A (en) 1955-05-26 1958-06-03 Ind Chimica Profarmaco S R L Fluorescent materials on the basis of tetrazoindenes
US4220450A (en) 1978-04-05 1980-09-02 Syva Company Chemically induced fluorescence immunoassay
US4209621A (en) 1979-04-27 1980-06-24 American Cyanamid Company (Substituted-phenyl)-1,2,4-triazolo[4,3-a]-pyrimidines and (substituted-phenyl)-1,2,4-triazolo[1,5-a]pyrimidines
US4405619A (en) 1981-09-02 1983-09-20 Diamond Shamrock Corporation Antiinflammatory substituted-1,2,4-triazolo[4,3-b]-1,2,4-triazines
DE3311753A1 (de) 1983-03-31 1984-10-04 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Substituierte 6-aryl-1,2,4-triazolo(4,3-b)pyridazine - ihre herstellung und verwendung -
DE3421029C2 (de) 1984-06-06 1986-04-24 Walter Steinhausen Mathis Verfahren und Vorrichtung zum trockenen Bedrucken eines Werkstückes unter Verwendung einer Heißprägefolie
JPS6337347A (ja) 1986-08-01 1988-02-18 Fuji Photo Film Co Ltd 直接ポジカラ−画像形成方法
JPS63199347A (ja) 1987-02-14 1988-08-17 Konica Corp 鮮鋭性の向上した高感度ハロゲン化銀写真感光材料
JPS63310891A (ja) 1987-06-12 1988-12-19 Yoshitomi Pharmaceut Ind Ltd 縮合ピリダジン化合物
US5236917A (en) 1989-05-04 1993-08-17 Sterling Winthrop Inc. Saccharin derivatives useful as proteolytic enzyme inhibitors and compositions and method of use thereof
JPH0313934A (ja) 1989-06-12 1991-01-22 Konica Corp ハロゲン化銀写真感光材料
IL96432A0 (en) 1989-11-30 1991-08-16 Schering Ag Pesticidal compositions containing pyridine derivatives and novel pyridine derivatives
JP2664264B2 (ja) 1990-02-15 1997-10-15 富士写真フイルム株式会社 ハロゲン化銀写真乳剤及びこれを用いた写真感光材料
FR2662163A1 (fr) 1990-05-16 1991-11-22 Lipha Nouvelles 8-amino-1,2,4-triazolo(4,3-a) pyrazines, procedes de preparation et medicaments les contenant.
JPH04251243A (ja) 1991-01-09 1992-09-07 Konica Corp ハロゲン化銀写真感光材料
FR2671551B1 (fr) 1991-01-15 1993-03-12 Adir Nouveaux composes de structure aryl triazinique, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
JPH05232618A (ja) 1992-02-21 1993-09-10 Konica Corp ハロゲン化銀写真感光材料
DE4309285A1 (de) 1993-03-23 1994-09-29 Boehringer Ingelheim Kg Heterocyclen enthaltende Amidinderivate, ihre Herstellung und Verwendung
ES2137113B1 (es) 1997-07-29 2000-09-16 Almirall Prodesfarma Sa Nuevos derivados de triazolo-piridazinas heterociclicos.
JP4251243B2 (ja) 1998-11-26 2009-04-08 株式会社日立メディコ 領域拡張装置
JP4025468B2 (ja) 1999-07-29 2007-12-19 三井化学株式会社 有機電界発光素子
CN1255406C (zh) 1999-11-10 2006-05-10 奥索-麦克尼尔药品公司 取代的2－芳基－3－(杂芳基)－咪唑并[1，2－a]嘧啶类化合物以及相关的药物组合物和方法
AU1481701A (en) 1999-11-12 2001-06-06 Neurogen Corporation Bicyclic and tricyclic heteroaromatic compounds
PT1294358E (pt) 2000-06-28 2004-12-31 Smithkline Beecham Plc Processo de moagem por via humida
CA2440222C (en) 2001-03-09 2008-11-18 Pfizer Products Inc. Triazolopyridines as anti-inflammatory agents
GB0107751D0 (en) 2001-03-28 2001-05-16 Pfizer Ltd Pharmaceutically active compounds
CA2448076A1 (en) 2001-05-24 2002-11-28 Masahiko Hayakawa 3-quinoline-2-(1h)-ylideneindolin-2-one derivatives
KR20040087335A (ko) 2002-03-01 2004-10-13 야마노우치세이야쿠 가부시키가이샤 질소 함유 복소환 화합물
AU2003223295A1 (en) 2002-03-19 2003-10-08 Merck And Co., Inc. Process and intermediates to substituted imidazopyrimidines
US6790852B2 (en) 2002-04-18 2004-09-14 Hoffmann-La Roche Inc. 2-(2,6-dichlorophenyl)-diarylimidazoles
GB0210127D0 (en) 2002-05-02 2002-06-12 Merck Sharp & Dohme Therapeutic agents
GB0210124D0 (en) 2002-05-02 2002-06-12 Merck Sharp & Dohme Therapeutic agents
GB0211649D0 (en) 2002-05-21 2002-07-03 Novartis Ag Organic compounds
DE10230605A1 (de) 2002-07-08 2004-01-29 Bayer Ag Substituierte Imidazotriazine
DE10230604A1 (de) 2002-07-08 2004-01-29 Bayer Ag Heterocyclisch substituierte Imidazotriazine
PA8580301A1 (es) * 2002-08-28 2005-05-24 Pfizer Prod Inc Nuevos derivados de benzoimidazol utiles como agentes antiproliferativos
MXPA05002123A (es) 2002-08-30 2005-06-06 Pfizer Prod Inc Nuevos procedimientos e intermedios para preparar triazolo-piridinas.
US6784297B2 (en) 2002-09-04 2004-08-31 Kopran Limited Process for the preparation of anti-ischemic and anti-hypertensive drug amlodipine besylate
MXPA05006478A (es) 2002-12-18 2005-09-08 Vertex Pharma Triazolopiridazinas como inhibidores de proteinas cinasas.
WO2005002590A1 (ja) 2003-07-01 2005-01-13 Astellas Pharma Inc. 骨量増加誘導剤
OA13151A (en) 2003-02-26 2006-12-13 Sugen Inc Aminoheteroaryl compounds as protein kinase inhibitors.
US7122548B2 (en) 2003-07-02 2006-10-17 Sugen, Inc. Triazolotriazine compounds and uses thereof
WO2005005378A2 (en) 2003-07-02 2005-01-20 Sugen, Inc. Indolinone hydrazides as c-met inhibitors
US7037909B2 (en) 2003-07-02 2006-05-02 Sugen, Inc. Tetracyclic compounds as c-Met inhibitors
US7250417B2 (en) 2003-07-02 2007-07-31 Sugen Inc. Arylmethyl triazolo- and imidazopyrazines as c-Met inhibitors
EA009038B1 (ru) 2003-07-30 2007-10-26 Лабораториос С.А.Л.В.А.Т., С.А. Замещенные имидазопиримидины для предупреждения и лечения рака
TWI339206B (en) 2003-09-04 2011-03-21 Vertex Pharma Compositions useful as inhibitors of protein kinases
US7169800B2 (en) 2003-09-24 2007-01-30 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Imidazole compositions useful as inhibitors of protein kinases
SI2213661T1 (sl) 2003-09-26 2011-11-30 Exelixis Inc c-Met modulatorji in postopki uporabe
US7144889B2 (en) 2003-10-16 2006-12-05 Hoffman-La Roche Inc. Triarylimidazoles
US7169781B2 (en) 2003-10-17 2007-01-30 Hoffmann-La Roche Inc. Imidazole derivatives and their use as pharmaceutical agents
US7419978B2 (en) 2003-10-22 2008-09-02 Bristol-Myers Squibb Company Phenyl-aniline substituted bicyclic compounds useful as kinase inhibitors
GB0325031D0 (en) 2003-10-27 2003-12-03 Novartis Ag Organic compounds
AU2005207946A1 (en) 2004-01-23 2005-08-11 Amgen Inc. Quinoline quinazoline pyridine and pyrimidine counds and their use in the treatment of inflammation angiogenesis and cancer
TW200536851A (en) 2004-01-23 2005-11-16 Amgen Inc Compounds and methods of use
JPWO2005077953A1 (ja) 2004-02-18 2007-10-18 萬有製薬株式会社 含窒素縮合ヘテロ芳香環誘導体
MXPA06011423A (es) 2004-04-02 2007-01-23 Osi Pharm Inc Inhibidores de proteina cinasa heterobiciclica sustituida en el anillo 6,6-biciclico.
US20050277650A1 (en) 2004-04-20 2005-12-15 Sundaram Venkataraman Process for preparing aripirazole hydrate
MXPA06012613A (es) 2004-05-07 2007-01-31 Amgen Inc Derivados heterociclicos nitrogenados como moduladores de proteina cinasa y uso para el tratamiento de angiogenesis y cancer.
WO2005121125A1 (en) 2004-06-09 2005-12-22 Pfizer Inc. Ether-linked heteroaryl compounds
JP5368701B2 (ja) 2004-07-02 2013-12-18 エクセリクシス、インコーポレイテッド ｃ−Ｍｅｔモジュレーター及び使用方法
MY139689A (en) * 2004-07-20 2009-10-30 Osi Pharm Inc Imidazotriazines as protein kinase inhibitors
WO2006021884A2 (en) 2004-08-26 2006-03-02 Pfizer Inc. Enantiomerically pure aminoheteroaryl compounds as protein kinase inhibitors
US7456289B2 (en) 2004-12-31 2008-11-25 National Health Research Institutes Anti-tumor compounds
CN101137412B (zh) 2005-01-13 2012-11-07 布里斯托尔-迈尔斯·斯奎布公司 用作凝血因子XIa抑制剂的取代的二芳基化合物
WO2006124354A2 (en) 2005-05-12 2006-11-23 Merck & Co., Inc. Tyrosine kinase inhibitors
EP1904501A2 (en) 2005-07-11 2008-04-02 Smithkline Beecham Corporation Chemical compounds
WO2007015866A2 (en) 2005-07-20 2007-02-08 Kalypsys, Inc. Inhibitors of p38 kinase and methods of treating inflammatory disorders
US20100216798A1 (en) 2005-07-29 2010-08-26 Astellas Pharma Inc Fused heterocycles as lck inhibitors
US20070049591A1 (en) 2005-08-25 2007-03-01 Kalypsys, Inc. Inhibitors of MAPK/Erk Kinase
US20070078136A1 (en) * 2005-09-22 2007-04-05 Bristol-Myers Squibb Company Fused heterocyclic compounds useful as kinase modulators
NZ568666A (en) * 2005-11-30 2011-09-30 Vertex Pharma [1,2,4]Triazolo[3,4-b][1,3,4]thiadiazole derivative as inhibitors of c-Met
ME02736B (me) 2005-12-21 2017-10-20 Janssen Pharmaceutica Nv Triazolopiridazini kao modulatori tirozin kinaze
US8114874B2 (en) 2005-12-23 2012-02-14 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Substituted acetylenic imidazo[1,2-B]pyridazine compounds as kinase inhibitors
WO2007096764A2 (en) 2006-02-27 2007-08-30 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Bicyclic heteroaryl derivatives as cannabinoid receptor modulators
PE20121506A1 (es) 2006-07-14 2012-11-26 Amgen Inc Compuestos triazolopiridinas como inhibidores de c-met
US8217177B2 (en) 2006-07-14 2012-07-10 Amgen Inc. Fused heterocyclic derivatives and methods of use
WO2008021781A1 (en) 2006-08-07 2008-02-21 Incyte Corporation Triazolotriazines as kinase inhibitors
MX2009002842A (es) * 2006-09-18 2009-05-27 Vertex Pharma Inhibidores heterociclicos de c-met y usos de los mismos.
KR101546493B1 (ko) 2006-11-06 2015-08-21 톨레로 파마수티컬스, 인크. 이미다조[1,2-ｂ]피리다진 및 피라졸로[1,5-ａ]피리미딘 유도체 및 단백질 키나제 억제제로서의 이의 용도
JP2010528991A (ja) 2007-05-21 2010-08-26 エスジーエックス ファーマシューティカルズ、インコーポレイテッド 複素環式キナーゼ調節因子
SI2300455T1 (sl) 2008-05-21 2017-12-29 Incyte Holdings Corporation Soli 2-fluoro-n-metil-4-(7-(kinolin-6-il-metil)-imidazo(1,2-b)1,2,4) triazin-2-il)benzamid in postopki v zvezi z njihovo pripravo
AU2011269788B2 (en) 2010-02-03 2015-12-10 Incyte Holdings Corporation Imidazo[1,2-b][1,2,4]triazines as c-Met inhibitors

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008051805A2 (en) * 2006-10-23 2008-05-02 Sgx Pharmaceuticals, Inc. Triazolo-pyridazine protein kinase modulators
WO2008064157A1 (en) * 2006-11-22 2008-05-29 Incyte Corporation Imidazotriazines and imidazopyrimidines as kinase inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
CL2009001250A1 (es) 2010-02-05
CN102083814A (zh) 2011-06-01
US20210128568A1 (en) 2021-05-06
JP6105653B2 (ja) 2017-03-29
AR111428A2 (es) 2019-07-10
CA2724742C (en) 2016-07-19
LT2300455T (lt) 2017-11-10
EA201071337A1 (ru) 2011-06-30
EP2300455B1 (en) 2017-07-19
MX2010012718A (es) 2011-04-04
US20090291956A1 (en) 2009-11-26
JP2015145378A (ja) 2015-08-13
IL209229A (en) 2015-11-30
US11452726B2 (en) 2022-09-27
US20190167692A1 (en) 2019-06-06
IL249651A (en) 2017-10-31
HRP20171528T1 (hr) 2017-11-17
CN103936743B (zh) 2018-04-24
PT2300455T (pt) 2017-10-19
US10799509B2 (en) 2020-10-13
KR20110037962A (ko) 2011-04-13
BRPI0912882A2 (pt) 2017-05-16
CA2724742A1 (en) 2009-11-26
JP6022158B2 (ja) 2016-11-09
CN108586463A (zh) 2018-09-28
AR071873A1 (es) 2010-07-21
EP3287449A2 (en) 2018-02-28
IL249651A0 (en) 2017-02-28
MX2019011954A (es) 2019-10-30
JP2011520976A (ja) 2011-07-21
WO2009143211A2 (en) 2009-11-26
IL229229A (en) 2017-05-29
AU2009249154A1 (en) 2009-11-26
AU2009249154B2 (en) 2014-12-11
MA32405B1 (fr) 2011-06-01
CN102083814B (zh) 2014-04-23
SI2300455T1 (sl) 2017-12-29
MY155565A (en) 2015-10-30
US20130289036A1 (en) 2013-10-31
IL209229A0 (en) 2011-01-31
NZ602791A (en) 2014-04-30
US10245265B2 (en) 2019-04-02
ES2643363T3 (es) 2017-11-22
NZ589622A (en) 2012-10-26
US20230098850A1 (en) 2023-03-30
WO2009143211A3 (en) 2010-03-04
IL229229A0 (en) 2013-12-31
EA021364B1 (ru) 2015-06-30
DK2300455T3 (en) 2017-10-30
EP3287449A3 (en) 2018-05-30
PL2300455T3 (pl) 2018-02-28
ECSP10010685A (es) 2011-04-29
US20150148348A1 (en) 2015-05-28
US8420645B2 (en) 2013-04-16
HUE034716T2 (hu) 2018-02-28
KR101706784B1 (ko) 2017-02-14
MX368802B (es) 2019-10-17
AR123240A2 (es) 2022-11-09
MY187131A (en) 2021-09-02
HK1251568A1 (zh) 2019-02-01
CO6300934A2 (es) 2011-07-21
EP2300455A2 (en) 2011-03-30
US8901123B2 (en) 2014-12-02
CN103936743A (zh) 2014-07-23
TW201008943A (en) 2010-03-01
US20170258800A1 (en) 2017-09-14
ZA201008212B (en) 2014-04-30
CN113248510A (zh) 2021-08-13
CY1119813T1 (el) 2018-06-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI472529B (zh) ２－氟－Ｎ－甲基－４－〔７－（喹啉－６－基－甲基）－咪唑并〔１，２－ｂ〕〔１，２，４〕三－２－基〕苯甲醯胺之鹽類及其相關製備方法
JP2010500365A (ja) キナーゼ阻害剤としてのトリアゾロトリアジン
EP2531509B1 (en) Imidazo[1,2-b][1,2,4]triazines as c-met inhibitors
AU2009249154B9 (en) Salts of 2-fluoro-N-methyl-4-[7-(quinolin-6-yl-methyl)- imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-yl]benzamide and processes related to preparing the same