PT2300455T - Sais de 2-fluoro-n-metil-4-[7-(quinolin-6-il-metil)-imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il] benzamida e processos relacionados com a sua preparação - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO "SAIS DE 2-FLUORO-N-METIL-4-[7-(QUINOLIN-6-IL-METIL)-IMIDAZO[1, 2-B][1,2,4]TRIAZIN-2-IL] BENZAMIDA E PROCESSOS RELACIONADOS COM A SUA PREPARAÇÃO"

CAMPO DE INVENÇÃO A presente invenção refere-se a sais do ácido dihidroclórico e do ácido dibenzenosulfónico do inibidor da cinase 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)-imidazo [1,2- b] [1,2,4) triazin-2-il) benzamida, útil no tratamento do cancro e de outras doenças relacionadas com a desregulação das vias de cinase. A presente invenção refere-se ainda a processos e intermediários para a preparação de 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil) imidazo[1,2- b][1,2,4]triazin-2-Il) benzamida e dos seus sais.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

As proteínas cinases (PKs) são um grupo de enzimas que regulam diversos processos biológicos importantes, incluindo crescimento celular, sobrevivência e diferenciação, formação de órgãos e morfogénese, neovascularização, reparação e regeneração de tecidos, entre outros. As proteínas cinases exercem as suas funções fisiológicas através da catalisação da fosforilação de proteínas (ou substratos), modulando assim as atividades celulares dos substratos em vários contextos biológicos. Além das funções em tecidos/órgãos normais, muitas proteínas cinases desempenham também papéis mais especializados numa série de doenças humanas, incluindo cancro. Um subconjunto de proteína cinases (também conhecido como proteína cinases oncogénicas), quando desreguladas, podem causar a formação e o crescimento de tumores, contribuindo ainda para a manutenção e progressão de tumores (Blume-Jensen P et al, Nature 2001, 411 (6835): 355-365). Até agora, as proteinas cinases oncogénicas representam um dos maiores e mais atraentes grupos proteicos alvo na intervenção contra o cancro e no desenvolvimento de drogas. A c-Met, um proto-oncogene, faz parte de uma subfamilia distinta de tirosina cinases recetoras heterodiméricas que incluem Met, Ron e Sea (Birchmeier, C. et al., Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2003, 4 (12): 915-925; Christensen, JG et al. , Câncer Lett. 2005, 225 (1):1-26). O único ligante de alta afinidade para a c-Met é o fator de crescimento de hepatócitos (FCH), também conhecido como fator de dispersão (SF) . A ligação de FCH a c-Met induz a ativação do recetor por autofosforilação, resultando num aumento da sinalização dependente do recetor. A c-Met e o FCH estão amplamente expressos numa variedade de órgãos, mas a sua expressão confina-se normalmente às células de origem epitelial e mesenquimal, respetivamente. As funções biológicas da c-Met (ou via de sinalização c-Met) em tecidos normais e doenças malignas em humanos, tal como cancro, estão bem documentadas (Christensen, J.G. et al., Câncer Lett. 2005, 225(1) :l-26; Corso, S. et al., Trends in Mol. Med. 2005, 11(6):284-292). O FCH e a c-Met são ambos necessários para o desenvolvimento normal dos mamíferos, e as anomalias relatadas nos ratinhos FCH e c-Met-null são compatíveis com a proximidade da expressão embrionária e com as anomalias de transição epitelial-mesenquimatosas durante a morfogênese do órgão (Christensen, JG Et al., Câncer Lett. 2005, 225 (1) : 1-26) . De acordo com estes achados, a transdução do sinal e os subsequentes efeitos biológicos da via FCH/c-Met mostraram ser importantes na interação epitelial-mesenquimal e na regulação da migração celular, na invasão, na proliferação e na sobrevivência celular, na angiogénese, morfogênese e na organização das estruturas tubulares tridimensionais (por exemplo, células tubulares renais, formação de glândulas) durante o desenvolvimento. As consequências especificas da ativação da via c-Met numa determinada célula/tecido depende muito do contexto. A desregulação da via c-Met desempenha um papel importante e, por vezes, causal (no caso de alterações genéticas) na formação, crescimento, manutenção e progressão de tumores (Birchmeier, C. et al., Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 2003, 4 (12):915-925; Boccaccio, C. et al., Nat. Rev. Câncer 2006, 6 (8) :637 — 645; Christensen, JG et al., Câncer Lett. 2005, 225 (1) : 1-26) . O FCH e/ou o c-Met encontram-se sobreexpressos na maioria dos cancros humanos e são frequentemente associados a maus resultados clínicos, como doenças mais agressivas, mais rápida progressão da doença, metástases tumorais e sobrevida reduzida do doente. Além disso, doentes com altos níveis de proteínas FCH/c-Met são mais resistentes à quimioterapia e à radioterapia. Além da expressão anormal de FCH/c-Met, o recetor c-Met pode também ser ativado em doentes com cancro, através de mutações genéticas (germinais ou somáticas) e de amplificação genética. Embora a amplificação genética e as mutações sejam as alterações genéticas mais comummente relatadas em doentes, o recetor pode também ser ativado por deleções, truncagens, rearranjo genético, bem como pelo processamento anormal do recetor e por mecanismos de regulação negativa defeituosos.

Os diversos cancros em que a c-Met está implicada incluem, mas não se limitam a: carcinomas (por exemplo, da bexiga, mama, cervical, colangiocarcinoma, colorrectal, esofágico, gástrico, da cabeça e pescoço, dos rins, figado, pulmão, nasofaringeo, do ovário, pâncreas, próstata, tireoide); sarcomas músculo-esqueléticos (por exemplo, osteossarcoma, sarcoma sinovial, rabdomiossarcoma); sarcomas do tecido mole (por exemplo, HFM/fibrossarcoma, leiomiossarcoma, sarcoma de Kaposi); malignidades hematopoiéticas (por exemplo, mieloma múltiplo, linfomas, leucemia de células T adultas, leucemia mielóide aguda, leucemia mielóide crónica); e outros neoplasmas (por exemplo, glioblastomas, astrocitomas, melanoma, mesotelioma e tumor de Wilm (www.vai.org/met/; Christensen, JG et al., Câncer Lett. 2005, 225 (1):1-26). A noção de que a ativação da via c-Met contribui para a formação e progressão do tumor, podendo constituir um bom alvo para uma intervenção eficaz no cancro, tem se solidificado ainda mais através de numerosos estudos pré-clínicos (Birchmeier, C. et al., Nat. Rev. Mol Cell Biol. 2003, 4 (12) : 915-925; Christensen, JG et al., Câncer Lett. 2005, 225 (1) :l-26; Corso, S. et al., Trends in Mol. Med. 2005, 11 (6): 284-292). Por exemplo, os estudos mostraram que o gene de fusão met-tpr, a sobre-expressão de c-met e as mutações c-met ativadas, causam a transformação oncogénica de vários modelos de linhas celulares, resultando na formação de tumores e metástases em ratinhos. Mais importante ainda, demonstrou-se in vitro e in vivo, uma atividade antitumoral significativa (por vezes, regressão tumoral) e uma atividade antimetástase com agentes que afetam e/ou bloqueiam especificamente a sinalização de FCH/c-Met. Esses agentes incluem anticorpos anti-FCH e anti-c-Met, antagonistas de péptidos FCH, recetor c-Met decoy, antagonistas de peptídeos c-Met, mutações negativas dominantes c-Met, oligonucleótidos antissentido específicos de c-Met e ribozimas, e inibidores de cinase c-Met seletivos de pequenas moléculas (Christensen, JG et al., Câncer Lett. 2005, 225 (1): 1-26).

Para além do papel desempenhado no cancro, a sinalização anormal HGF/c-Met está também envolvida na aterosclerose, fibrose pulmonar, fibrose renal e regeneração, doenças hepáticas, doenças alérgicas, doenças inflamatórias e auto-imunes, doenças cerebrovasculares, doenças cardiovasculares, doenças associadas ao transplante de órgãos (Ma, H. et al., Atherosclerosis. 2002, 164(1):79-87,- Crestani, B. et al.,

Lab. Invest. 2002, 82(8):1015-1022,- Sequra-Flores, A.A. et al., Rev. Gastroenterol. Mex. 2004, 69(4)243-250; Morishita, R. et al., Curr. Gene Ther. 2004, 4(2)199-206; Morishita, R. et al. , Endocr. J. 2002, 49(3) 273-284; Liu, Y., Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 2002, 11(1):23-30,- Matsumoto, K. et al., Kidney Int. 2001, 5 9(6):2 023-2038,- Balkovetz, D.F. et al., Int. Rev. Cytol. 1999, 186:225-250; Miyazawa, T. et al., J. Cereb. Blood Flow Metab. 1998, 18(4)345-348; Koch, A.E. et al., Arthritis Rheum. 1996, 39(9):1566-1575,- Futamatsu, H. et al., Circ. Res. 2005, 96(8) 823-830; Eguchi, S. et al.,

Clin. Transplant. 1999, 13(6)536-544).

Os inibidores de c-Met e outras cinases são descritos em W02008/064157, incluindo o composto 2-fluoro-N-metil-4-[ 7-(quinolin-6-ilmetil)-imidazo[1,2-b][l,2,4]triazin-2-il] benzamida (I) com a seguinte estrutura.

Em W02008/051805 apresentam-se moduladores da proteína cinase triazolopiridazina são apresentados.

Procuram-se continuamente novas ou melhoradas formas de agentes existentes que inibem cinases como c-Met, para desenvolver produtos farmacêuticos mais eficazes no tratamento do cancro e de outras doenças. Os sais, composições e utilizações aqui descritos destinam-se a suprir essas necessidades e a outros fins.

SUMARIO DA INVENÇÃO A presente invenção fornece o sal 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)-imidazo[1,2-b] [1,2,4] triazin-2-Il] benzamida ou um seu hidrato ou solvato. A presente invenção proporciona ainda o sal 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)-imidazo[1,2— b][1,2,4]triazin-2-il] benzamida do ácido dibenzenosulfónico ou um seu hidrato ou solvato. A presente invenção proporciona ainda composições que compreendem um sal da invenção ou um seu hidrato ou solvato, e pelo menos um veículo farmaceuticamente aceitável. A presente invenção proporciona ainda os sais da invenção, ou um seu hidrato ou solvato, para utilização no tratamento de uma doença, doença associada à desregulação da via de sinalização FCH/c-met. A presente invenção proporciona ainda processos para a preparação de um sal hidratado de ácido dihidroclórico de 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)-imidazo[1,2-b] [1,2,4]triazin-2-il] benzamida, caracterizado por ter um ponto de fusão entre 220°C e 224°C compreendendo: a) Fazer reagir uma primeira mistura compreendendo 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2— b] [1,2,4]triazin-2-il] benzamida e água, com pelo menos dois equivalentes de ácido clorídrico, num solvente compreendendo água, para formar uma segunda mistura; e b) combinar a segunda mistura com éter metil-terc-butílico. A presente invenção proporciona ainda processos de preparação de um composto de Fórmula I:

ou de um seu sal; compreendendo a reação de um composto de Fórmula II:

com um composto de Fórmula III:

para formar um composto de Fórmula I, ou um seu sal; em que Xi é cloro, bromo ou iodo. A presente invenção proporciona ainda um processo para a preparação de um composto de Fórmula V e dos seus sais

compreendendo (a) fazer reagir um composto de Fórmula II:

em que Xi é cloro, bromo ou iodo, com um composto de Fórmula III:

para formar um composto de Fórmula I ou um seu sal; e

(b) fazer reagir o referido composto de Fórmula I, ou um seu sal, com ácido hidroclórico, para formar um composto de Fórmula IV ou um seu sal; e

(c) fazer reagir o composto de Fórmula IV, ou um seu sal, com CH3NH2 na presença de pelo menos um agente de ligação, para formar um composto de Fórmula V:

ou um seu sal, em que o referido agente de ligação selecionado de l-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida, N-hidroxibenzotriazolo, hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxil) tripirrolidinofosfónio, e os seus sais, ou (d) (i) reagindo com o composto de Fórmula IV ou com os seus sais,

com um agente halogenante, para formar um composto de Fórmula VI ou um seu sal; em que X2 é halogénio e o referido agente halogenante é preferivelmente cloreto de tionilo; e (d) (ii) fazer reagir o referido composto de Fórmula VI, ou um seu sal, com CH3NH2, para formar um composto de Fórmula V ou um seu sal. A presente invenção proporciona ainda compostos de Fórmula III:

ou os seus sais. A presente invenção proporciona ainda compostos de Fórmula II:

em que Xi é cloro, iodo ou bromo.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS A Figura 1 mostra um padrão de difração de raios X de pó (XRPD) caracteristico de um sal de ácido dihidroclórico da invenção preparado de acordo com o processo do Exemplo 1. A Figura 2 mostra um gráfico de calorimetria de varredura diferencial (DSC) caracteristico de um sal do ácido dihidroclórico da invenção, preparado de acordo com o processo do Exemplo 1. A Figura 3 um termograma, análise termogravimétrica (TGA) caracteristica de um sal do ácido dihidroclórico da invenção, preparado de acordo com o processo do Exemplo 1. A Figura 4 mostra um padrão de difração de raios X de pó (XRPD) caracteristico de um sal do ácido dibenzenosulfónico da invenção preparado de acordo com o processo do Exemplo 5. A Figura 5 mostra um gráfico de calorimetria de varredura diferencial (DSC) caracteristico de um sal do ácido dibenzenosulfónico da invenção, preparado de acordo com o processo do Exemplo 5.

DESCRIÇÃO DETALHADA A presente invenção proporciona, entre outros, ácido dihidrocloridrico e sais de ácidos dibenzenosulfónico do inibidor da cinase c-Met 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)-imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il] benzamida (ver a Fórmula I acima). Os sais da invenção são vantajosos porque podem ser obtidos sob a forma cristalina, tornando-os particularmente adequados para utilização em formulações farmacêuticas.

Sal de ácido dihidroclórico 0 sal de ácido dihidroclórico pode ser preparado por combinação de 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)-imidazo[1,2-b] [ 1,2,4]triazin-2-il] benzamida com um excesso molar de ácido cloridrico, como se descreve no Exemplo 1 abaixo. 0 sal de ácido dihidroclórico pode ser obtido como um sólido cristalino como se verifica através do padrão XRPD apresentado na Figura 1 (ver também o Exemplo 2 abaixo). 0 sal de ácido dihidroclórico pode também obter-se como um hidrato, com base nos resultados de TGA mostrados na Figura 3 (ver também o Exemplo 4 abaixo). A DSC indica que o sal de ácido dihidroclórico funde entre cerca de 220 e cerca de 224°C, ou mais particularmente a cerca de 222°C (ver Figura 2 e Exemplo 3). Verificou-se que a solubilidade a 25°C era aproximadamente 4,5 mg/mL em água; 0,002 mg/mL em tampão de pH 7,4; 0,0 02 mg/mL em tampão de pH 8,0; e aproximadamente 24 mg/mL em HC1 aquoso 0,1 N. Verificou-se que o sal preparado pelo método do Exemplo 1 era desejavelmente reprodutível com boas propriedades de solubilidade.

Em algumas formas de realização, o sal dicloridrato possui um padrão de difração de raios X de pó que compreende um pico caracteristico expresso em graus 20 a 7,8, 26,0, 24,7, 18,2 e 29,3.

Sal de ácido dibenzenosulfónico O sal de ácido dibenzenosulfónico (sal de dibesilato) pode ser preparado pela combinação de 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)-imidazo[1,2-b][l,2,4]triazin-2-il] benzamida com um excesso molar de ácido benzenossulfónico, como se descreve abaixo no Exemplo 5. O sal de ácido dibenossulfónico pode ser obtido como um sólido cristalino como se mostra pelo padrão XRPD apresentado na Figura 4 (ver também o Exemplo 5 abaixo). A DSC indica que o sal de ácido dibenossulfónico funde entre cerca de 268 e cerca de 272°C, ou mais particularmente a cerca de 270°C (ver Figura 5 e Exemplo 7) . Verificou-se que a solubilidade a 25° C era aproximadamente 3,9 mg/mL em água; 0,003 mg/mL em tampão de pH 7,4; 0,003 mg/mL em tampão de pH 8,0; e pelo menos 29 mg/mL em HC1 aquoso 0,1 N.

Em algumas formas de realização, o sal dibenzenosulfonato apresenta um padrão de difração de raios X de pó que compreende picos caracteristicos expressos em graus 20 a 15, 0, 16, 3, 18,3, 20,2, 23, 8 e 4,9.

Definições e formas de realização adicionais A presente invenção inclui hidratos ou solvatos dos sais acima referidos. 0 termo solvatos refere-se a sais contendo solvente em si ou enquanto um componente da rede cristalina. 0 termo "hidrato", como aqui é utilizado, representa um solvato especifico em que o solvente é água e refere-se a uma substância contendo águas de hidratação. Exemplos de hidratos incluem hemihidratos, monohidratos, dihidratos, etc.

Em algumas formas de realização, os sais da invenção são cristalinos. Como é aqui utilizado, uma substância "cristalina" representa uma substância que contém pelo menos algum material cristalino. A presença de material cristalino pode ser detetada, por exemplo, através de XRPD. Os sais da invenção podem cristalizar em diferentes formas cristalinas com diferentes redes cristalinas, possuindo, consequentemente, propriedades físicas diferentes. Algumas formas cristalinas podem ter diferentes teores de água ou de solvente. As diferentes redes cristalinas podem ser identificadas por métodos de caracterização em estado sólido, tais como por difração de raios X de pó (XRPD) . Outros métodos de caracterização, como a calorimetria de varredura diferencial (DSC), a análise termogravimétrica (TGA), a sorção dinâmica de vapor (DVS), ajudam também a identificar a forma cristalina e a determinar a estabilidade e o teor em solvente/água.

Formas cristalinas diferentes de uma determinada substância, como um sal da invenção, podem incluir as formas anidras dessa substância e as formas solvatadas/hidratadas dessa substância, em que cada uma das formas anidras e solvatadas/hidratadas se distinguem umas das outras através dos diferentes padrões de XRPD, mostrando assim diferentes redes cristalinas. Em alguns casos, uma única forma cristalina (por exemplo, identificada por um padrão exclusivo de XRPD) pode ter água variável ou conteúdo de solvente, em que a rede permanece substancialmente inalterada (assim como o padrão XRPD) apesar da variação da composição relativamente à água e/ou solvente.

Um padrão de XRPD de reflexões (picos) é normalmente considerado como uma impressão digital de uma forma cristalina específica. As intensidades relativas dos picos de XRPD podem variar amplamente, dependendo, nomeadamente, da técnica de preparação das amostras, da distribuição de tamanho dos cristais, dos vários filtros usados, do procedimento de montagem da amostra e do instrumento específico utilizado. Em alguns casos, podem observar-se novos picos, ou os picos existentes podem desaparecer, dependendo do tipo de instrumento ou das suas configurações. Tal como aqui é utilizado, o termo "pico" refere-se a uma reflexão com uma altura/intensidade relativa de pelo menos cerca de 4% da altura/intensidade máxima do pico. Além disso, as variações do instrumento e outros fatores podem afetar os valores 2 teta. Assim, os valores de pico, como os aqui apresentados, podem variar em cerca de mais ou menos 0,2° (2-teta), e o termo" substancialmente" como aqui é utilizado no contexto da XRPD, pretende incluir as variações acima referidas

Do mesmo modo, as leituras de temperatura relacionadas com DSC, TGA ou outros testes térmicos podem variar cerca de ± 3°C dependendo do instrumento, configurações especificas, preparação da amostra, etc. Assim, uma forma sólida ou cristalina apresentada aqui como tendo um termograma DSC "substancialmente" como mostrado em qualquer uma das Figuras, é entendida como acomodando uma tal variação. O sal da invenção pode também incluir todos os isótopos de átomos que ocorrem no sal. Os isótopos incluem os átomos que têm o mesmo número atómico, mas números de massa diferentes. Por exemplo, isótopos de hidrogénio incluem tritio e deutério. O sal da invenção, e as suas formas sólidas, pode ser encontrado em conjunto com outras substâncias ou isoladamente. Em algumas formas de realização, o sal da invenção, ou as suas formas comerciais, encontra-se substancialmente isolado. Por "substancialmente isolado" entende-se que o sal é pelo menos parcial ou substancialmente separado do meio em que se formou ou onde foi detetado. A separação parcial pode incluir, por exemplo, uma composição enriquecida do sal da invenção. A separação substancial pode incluir composições contendo pelo menos cerca de 50%, pelo menos cerca de 60%, pelo menos cerca de 70%, pelo menos cerca de 80%, pelo menos cerca de 90%, pelo menos cerca de 95%, pelo menos cerca de 97%, ou pelo menos cerca de 99% em peso do sal da invenção. Métodos de isolamento dos compostos e dos seus sais são rotineiros na especialidade.

Utilizações médicas O tratamento de uma célula (in vitro ou in vivo) que expressa uma proteina cinase com o sal da invenção, pode resultar na inibição da via de sinalização do ligando/cinase e inibir os eventos a jusante relacionados à via de sinalização, tais como a proliferação celular e o aumento de motilidade celular. Por exemplo, o sal da invenção pode bloquear e/ou afetar os processos bioquímicos e biológicos resultantes da ativação da via c-Met, incluindo, mas não se limitando a, ativação da cinase c-Met (por exemplo, fosforilação c-Met) e sinalização (ativação e recrutamento de substratos celulares como Gabl, Grb2, She e c-Cbl, com a subsequente ativação de alguns transdutores de sinal, incluindo PI-3 cinase, PLC-γ, STATs, ERK1/2 e FAK), proliferação e sobrevivência celular, motilidade celular migração e invasão, metástase e angiogénese. Assim, descrevem-se aqui também métodos de inibição de uma via de sinalização de ligando/cinase, como a via de sinalização de FCH/c-Met-cinase numa célula, pondo a célula em contacto com um sal da invenção. Descrevem-se aqui também métodos de inibição da atividade proliferativa de uma célula ou de inibição da motilidade celular, pondo a célula em contacto com um sal da invenção.

Os sais da presente invenção destinam-se a ser utilizados no tratamento de doenças associadas com uma via de sinalização desregulada da cinase, incluindo a atividade anormal e/ou a sobreexpressão da proteína cinase.

Em algumas formas de realização, a cinase desregulada é da família Met (por exemplo, c-Met, Ron ou Sea). Em algumas formas de realização, a cinase desregulada está sobre-expressa no tecido doente do doente. Em algumas formas de realização, a cinase desregulada está anormalmente ativa no tecido doente. A desregulação da c-Met e da via de sinalização de FCH/c-Met inclui a ativação da enzima através de vários mecanismos, incluindo, mas não se limitando a, ativação autócrina e parácrina dependente da FCH, sobreexpressão e amplificação do gene c-met, mutações pontuais, deleções, truncagem, rearranjo, bem como processamento anormal do recetor c-Met e mecanismos regulatórios negativos defeituosos.

Em algumas formas de realização, o sal da invenção destina-se a ser utilizado no tratamento de doenças tais como cancro, aterosclerose, fibrose pulmonar, fibrose renal e regeneração, doença hepática, doença alérgica, doença inflamatória, doença autoimune, doença cerebrovascular, doença cardiovascular ou doença associada ao transplante de órgãos. Em outras formas de realização, os compostos da invenção destinam-se a ser utilizados na inibição do crescimento tumoral ou de metástase de um tumor num doente.

Exemplos de cancros tratáveis pelas utilizações aqui referidas, incluem cancro da bexiga, cancro da mama, cancro cervical, colangiocarcinoma, cancro colorretal, cancro do esófago, cancro gástrico, cancro da cabeça e pescoço, cancro do rim, cancro do fígado, cancro do pulmão, cancro da nasofaringe, cancro do ovário, cancro do pâncreas, cancro da próstata, cancro da tiróide, osteossarcoma, sarcoma sinovial, rabdomiossarcoma, mfh/fibrossarcoma, leiomiossarcoma, sarcoma do Kaposi, mieloma múltiplo, linfoma, leucemia das células T adultas, leucemia mielóide aguda, leucemia mielóide crónica, glioblastoma, astrocitoma, melanoma, mesotelioma ou tumor de Wilm.

Tal como é aqui utilizado, o termo "célula" refere-se a uma célula in vitro, ex vivo ou in vivo. Em algumas formas de realização, uma célula ex vivo pode fazer parte de uma amostra de tecido excisada de um organismo, como um mamífero. Em algumas formas de realização, uma célula in vitro pode ser uma célula numa cultura de células. Em algumas formas de realização, uma célula in vivo é uma célula que vive num organismo, como o de um mamífero.

Tal como aqui é utilizada, a expressão "por em contato" refere-se à reunião das frações indicadas, num sistema in vitro ou in vivo. Por exemplo, "por em contato" um composto da invenção com uma proteína cinase, inclui a administração de um composto da presente invenção a um indivíduo ou doente, como um ser humano, bem como, por exemplo, a introdução de um composto da invenção numa amostra contendo uma preparação celular ou purificada da proteína cinase.

Tal como aqui são utilizados, os termos "indivíduo" ou "doente", utilizados indiferentemente, referem-se a qualquer animal, incluindo mamíferos, de preferência ratinhos, ratos, outros roedores, coelhos, cães, gatos, suínos, bovinos, ovinos, cavalos ou primatas, e mais preferencialmente seres humanos.

Tal como aqui é utilizado, o termo "tratar" ou "tratamento" refere-se a um ou mais dos seguintes (1) prevenção da doença; por exemplo, prevenir uma doença, afeção ou desordem num indivíduo que possa estar predisposto à doença, afeção ou desordem, mas ainda não experimente ou exiba a patologia ou sintomatologia da doença; (2) inibição da doença; por exemplo, inibir uma doença, afeção ou desordem num indivíduo que experimente ou exiba a patologia ou sintomatologia da doença, afeção ou desordem; e (3) melhorar a doença; por exemplo, melhorar uma doença, afeção ou desordem num indivíduo que experimente ou exiba a patologia ou sintomatologia da doença, afeção ou desordem (ou seja, reverter a patologia e/ou a sintomatologia) , bem como, diminuir a severidade da doença.

Terapêutica de combinação

Um ou mais agentes farmacêuticos adicionais ou métodos de tratamento, tais como, por exemplo, agentes quimioterápicos, agentes anticancerígenos, agentes citotóxicos, ou terapêuticas anticancerígenas (por exemplo, radiação, hormonas, etc.), podem ser utilizados em combinação com o sal da presente invenção para o tratamento das doenças, distúrbios ou afeções aqui descritas. Os agentes ou terapêuticas podem ser administrados em conjunto com o sal da invenção (por exemplo, combinados numa única forma de dosagem), ou os agentes ou terapêuticas podem ser administrados simultaneamente ou sequencialmente, por vias de administração separadas.

Os agentes anticancerígenos incluem agentes inibidores da cinase, incluindo trastuzumab (Herceptin), imatinib (Gleevec), gefitinib (Iressa), cloridrato de erlotinib, cetuximab (Erbitux), bevacizumab (Avastin) , sorafenib (Nexavar), sunitinib (Sutent) e inibidores RTK descritos, por exemplo, em WO 2005/004808, WO 2005/004607, WO 2005/005378, WO 2004/076412, WO 2005/121125, WO 2005/039586, WO 2005/028475, WO 2005/040345, WO 2005/039586, WO 2003/097641, WO 2003/087026, WO 2005/040154, WO 2005/030140, WO 2006/014325, WO 2005/ 070891, WO 2005/073224, WO 2005/113494 e nas Pub. de Pedido de Patente N°s 2005/0085473, 2006/0046991 e 2005/0075340.

Agentes quimioterapêuticos adequados ou outros agentes anticancerígenos incluem ainda, por exemplo, agentes alquilantes (incluindo, sem se limitarem a, mostardas de azoto, derivados de etilenoimina, sulfonatos de alquilo, nitrosoureias e triazenos), tais como a mostarda de uracilo, clormetina, ciclofosfamida (Cytoxan™), ifosfamida, melfalano, clorambucil, pipobromano, trietilenomelamina, trietilenotiofosforina, busulfano, carmustina, lomustina, estreptozocina, dacarbazina e temozolomida.

Agentes quimioterapêuticos adequados ou outros agentes anticancerígenos incluem ainda, por exemplo, antimetabolitos (incluindo, mas não se limitando a, antagonistas do ácido fólico, análogos de pirimidina, análogos de purina e inibidores da adenosina desaminase), como metotrexato, 5-fluorouracilo, floxuridina, citarabina, 6-mercaptopurina, 6-tioguanina, fosfato de fludarabina, pentostatina e gemcitabina.

Agentes quimioterapêuticos adequados ou outros agentes anticancerígenos incluem ainda, por exemplo, alguns produtos naturais e os seus derivados (por exemplo, alcaloides de vinca, antibióticos antitumorais, enzimas, linfocinas e epipodofilotoxinas), tais como vinblastina, vincristina, vindesina, bleomicina, dactinomicina, daunorubicina, doxorrubicina, epirrubicina, idarubicina, ara-C, paclitaxel (Taxol™), mitramicina, desoxicoformicina, mitomicina-C, L-asparaginase, interferões (especialmente IFN-a), etoposido e teniposido.

Outros agentes citotóxicos incluem navelbene, CPT-11, anastrazol, letrazol, capecitabina, reloxafina, ciclofosfamida, ifosamida e droloxafina.

Adequados são também agentes citotóxicos, como a epidofilotoxina; uma enzima antineoplásica; um inibidor da topoisomerase; procarbazina; mitoxantrona; complexos de coordenação de platina tais como cisplatina e carboplatina; modificadores da resposta biológica; inibidores do crescimento; agentes terapêuticos anti-hormonais ; leucovorin; tegafur; e fatores de crescimento hematopoiético.

Outro agente(s) anticancerígenos incluem anticorpos terapêuticos tais como trastuzumab (Herceptin), anticorpos para moléculas coestimuladoras, tais como moléculas de CTLA-4, 4-1BB e DP-1, ou anticorpos para as citocinas (IL-10, TGF-B, etc.). Outras terapêuticas por anticorpos incluem anticorpos contra tirosina cinases e/ou os seus ligandos, como anticorpos anti-FCH e/ou anticorpos anti-c-Met. 0 termo "anticorpo" inclui anticorpos inteiros (por exemplo, monoclonais, policlonais, quiméricos, humanizados, humanos, etc.) bem como os seus fragmentos de ligação ao antigénio.

Outros agentes anticancerígenos incluem também os que bloqueiam a migração de células imunitárias, tais como os antagonistas dos recetores de quimiocinas, incluindo CCR2 e CCR4 .

Outros agentes anticancerigenos incluem também os que estimulam o sistema imunitário, como sejam os adjuvantes da transferência de células T.

Outros agentes anticancerigenos incluem vacinas anticancerigenas, tais como células dendriticas, peptídeos sintéticos, vacinas de ADN e vírus recombinantes.

Os métodos para a administração segura e eficaz da maioria dos agentes citados, são conhecidos dos especialistas. Além disso, a sua administração encontra-se descrita na literatura de referência. Por exemplo, a administração de muitos dos agentes quimioterápicos está descrita em "Physicians' Desk Reference" (PDR, e.g., Edição de 1996, Medicai Economics Company, Montvale, NJ).

Intermediários e Processos

Em algumas formas de realização, a presente invenção fornece um processo de preparação de uma forma específica do sal de dicloridrato, através de um processo que compreende: a) Fazer reagir uma primeira mistura compreendendo 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2- b] [1,2,4]triazin-2-il] benzamida e água com pelo menos dois equivalentes de ácido clorídrico, num solvente compreendendo água, para formar uma segunda mistura; e b) combinar a segunda mistura com éter metil-terc-butílico

Em algumas formas de realização, o passo a) é efetuado a uma temperatura entre cerca de 20 e cerca de 30°C.

Em algumas formas de realização, o passo a) e b) são realizados à temperatura ambiente.

Um outro processo aqui descrito para a preparação de uma forma especifica do sal de dicloridrato compreende: a) fazer reagir uma primeira mistura compreendendo 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2— b] [1,2,4]triazin-2-il] benzamida e metanol, com pelo menos dois equivalentes de ácido clorídrico num solvente compreendendo isopropanol, para formar uma segunda mistura; e b) combinar a segunda mistura com acetona.

Os passos a) e b) podem ser efetuados a uma temperatura entre cerca de 50 e cerca de 60°C.

Os passos a) e b) podem ser efetuados a uma temperatura de cerca de 55°C.

Um outro processo aqui descrito para a preparação de uma forma específica do sal de ácido dibenzenosulfónico, compreende: a) Fazer reagir uma primeira mistura compreendendo 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2- b] [ 1,2,4]triazin-2-il] benzamida e metanol com pelo menos dois equivalentes de ácido benzenossulfónico num solvente compreendendo isopropanol; e b) Combinar a segunda mistura com éter metil-terc- butílico.

Os passos a) e b) podem ser efetuados a uma temperatura entre cerca de 50 e cerca de 60°C. Os passos a) e b) podem ser efetuados a uma temperatura de cerca de 55°C. A presente invenção fornece também, entre outros, processos e intermediários úteis na preparação de 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)-imidazo[1,2-b][l,2,4]triazin-2-il] benzamida e dos seus sais, incluindo os sais da invenção.

Por exemplo, em algumas formas de realização, a presente invenção fornece um composto de Fórmula III:

ou um seu sal. A presente invenção fornece também um composto de Fórmula II:

em que Xi é cloro, iodo ou bromo.

Em algumas formas de realização, Xi é cloro. A presente invenção fornece ainda um processo de preparação de um composto de Fórmula I:

ou um seu sal; compreendendo a reação de um composto de Fórmula II:

com um composto de Fórmula III:

para formar um composto de Fórmula I ou um seu sal; em que Xi é cloro, bromo ou iodo.

Em algumas formas de realização, Xi é cloro.

Em algumas formas de realização, a reação é efetuada num solvente como o etilenoglicol. Em algumas formas de realização, a reação ocorre a uma temperatura entre cerca de 120°C e cerca de 150°C, ou entre cerca de 130°C e cerca de 140°C. Em algumas formas de realização, a reação ocorre durante cerca de três a quatro horas. A presente invenção proporciona ainda um processo para a preparação de um composto de fórmula geral V e dos seus sais

compreendendo (a) Fazer reagir um composto de Fórmula II:

em que Xi é cloro, bromo ou iodo, com um composto de Fórmula III:

para formar um composto de Fórmula I, ou um seu sal; e

(b) Fazer reagir o referido composto de Fórmula I, ou um seu sal, com ácido clorídrico concentrado para formar um composto de Fórmula IV ou um seu sal; e

(c) Fazer reagir o composto de Fórmula IV, ou um seu sal, com CH3NH2 na presença de pelo menos um agente de ligação, para formar um composto de Fórmula V:

ou um seu sal, em que o referido agente de ligação é selecionado a partir de l-etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida, N-hidroxibenzotriazole, hexafluorofosfato de (benzotriazol-l-iloxil)tripirrolidinofosfónio, e os seus sais, ou(d)(i) fazer reagir o composto de Fórmula IV ou os seus sais,

com um agente halogenante, para formar um composto de Fórmula VI ou um seu sal;

em que X2 é halogénio e o referido agente halogenante é preferivelmente cloreto de tionilo; e (d) (ii) fazer reagir o referido composto de Fórmula VI, ou um seu sal, com CH3NH2 para formar um composto de Fórmula V ou um seu sal.

Em algumas formas de realização, a reação do composto de Fórmula I com ácido clorídrico concentrado é efetuada a uma temperatura entre cerca de 80°C e cerca de 120°C, entre cerca de 90°C e cerca de 110°C ou a 100°C. Em algumas formas de realização, a reação ocorre durante cerca de 15 a cerca de 24 horas, ou cerca de 13 horas.

Em algumas formas de realização, a reação do composto de Fórmula IV com CH3NH2 ocorre a uma temperatura entre cerca de 15°C e cerca de 40°C, entre cerca de 15°C e cerca de 25°C, a 30°C, ou à temperatura ambiente. Em algumas formas de realização, a reação ocorre num solvente, incluindo, mas não se limitando a, acetonitrilo. Em algumas formas de realização, a reação ocorre na presença de uma base, incluindo, mas não se limitando a uma amina terciária, como trietilamina. Em algumas formas de realização, a CH3NH2 está presente numa quantidade entre cerca de 1 e cerca de 10 equivalentes, entre cerca de 2 e cerca de 8 equivalentes, ou entre cerca de 3 e cerca de 6 equivalentes.

Em algumas formas de realização, X2 é cloro. Em algumas formas de realização, o agente halogenante é cloreto de tionilo. Em algumas formas de realização, o agente halogenante é cloreto de oxalilo.

Em algumas formas de realização, a reação do composto de Fórmula IV com um agente halogenante é efetuada a uma temperatura entre cerca de 50°C e cerca de 80°C, entre cerca de 60°C e cerca de 75°C, ou a 72°C. Em algumas formas de realização, a reação é realizada num solvente, incluindo, mas não limitado a tolueno. Em algumas formas de realização, 0 agente de halogenação está presente numa quantidade entre 1 e cerca de 20 equivalentes, entre cerca de 8 e cerca de 12 equivalentes ou cerca de 10 equivalentes.

Em algumas formas de realização, a reação do composto de Fórmula VI com CH3NH2 é efetuada a uma temperatura entre cerca de 0°C e cerca de 35°C, entre cerca de 0 e cerca de 10°C, ou perto da temperatura ambiente. Em algumas formas de realização, a reação é realizada num solvente, incluindo, mas não se limitando a tetrahidrofurano. Em algumas formas de realização, o CH3NH2 está presente numa quantidade de cerca de 1 a cerca de 20 equivalentes, de cerca de 8 a cerca de 12 equivalentes, ou de cerca de 10 equivalentes.

Em algumas formas de realização, o passo b) é efetuado na presença de uma base (por exemplo, uma amina terciária).

Em algumas formas de realização, o processo compreende ainda a preparação do composto de Fórmula II:

através de um processo que compreende a reação de um composto de Fórmula lia:

com um composto de Fórmula Ilb:

em que Xi é cloro, bromo ou iodo.

Em algumas formas de realização, Xi é cloro.

Em algumas formas de realização, a reação é realizada na presença de prolina. Em algumas formas de realização, a reação é realizada na presença de prolina e de ácido benzóico. Em algumas formas de realização, a reação do composto de Fórmula lia com o composto de Fórmula Ilb é realizada a uma temperatura entre cerca de 0°C e cerca de 50°C, entre cerca de 20°C e cerca de 40°C, ou a cerca de 20°C. Em algumas formas de realização, a reação é realizada num solvente, incluindo, mas não limitado a cloreto de metileno. Em algumas formas de realização, o composto de Fórmula Ilb está presente numa quantidade entre cerca de 1 e cerca de 2 equivalentes, entre cerca de 1 e cerca de 1,5 equivalentes, entre cerca de 1 e cerca de 1,2 equivalentes, ou cerca de 1,05 equivalentes. Em algumas formas de realização, a prolina está presente numa quantidade entre cerca de 0,1 e cerca de 0. 5 equivalentes, ou entre cerca de 0,1 e cerca de 0,2 equivalentes. Em algumas formas de realização, a prolina está presente numa quantidade de cerca de 0,1 equivalentes e o ácido benzóico está presente numa quantidade de cerca de 0,1 equivalentes.

Em algumas formas de realização, o processo compreende ainda a preparação do composto de Fórmula lia através de um processo que compreende a reação de um composto de Fórmula IIc:

com prop-2-en-l-ol, na presença de um catalisador de paládio e uma base; em que X3 é cloro, bromo ou iodo.

Em algumas formas de realização, X3 é bromo.

Em algumas formas de realização, utilizam-se as condições da reação de acoplamento de Heck, utilizando catalisadores de paládio (0) ou paládio (II), realizada sob condições conhecidas na especialidade (ver, por exemplo, Melpolder e Heck, J. Org. Chem. 1976, 41, 265-272, ou Littke e Fu, J.

Am. Chem. Soc. 2001, 123, 6989-7000) . Em algumas formas de realização, o catalisador de paládio é

Pd2 (dba)3(tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0)). Em algumas formas de realização, o catalisador de paládio está presente numa quantidade de cerca de 0,01 a cerca de 0,1 equivalentes, de cerca de 0,01 a cerca de 0,05 equivalentes, de cerca de 0,01 a cerca de 0,02 equivalentes, ou de cerca de 0,015 equivalentes. Em algumas formas de realização, a reação compreende ainda a reação na presença de um ligando de fosfina ou de um seu sal. Em algumas formas de realização, o ligando de fosfina ou o seu sal, é tetrafluoroborato de tris(t-butil)fosfónio. Em algumas formas de realização, o ligando está presente numa quantidade entre cerca de 0,01 e cerca de 0,05 equivalentes, ou de cerca de 0,03 equivalentes.

Em algumas formas de realização, a base é uma base inorgânica. Em algumas formas de realização, a base é uma base orgânica. Em algumas formas de realização, a base é uma amina terciária, incluindo, mas não se limitado a N-metil-N-ciclo-hexil-ciclo-hexilamina. Em algumas formas de realização, a base é um carbonato de metal alcalino. Em algumas formas de realização, a base está presente numa quantidade de cerca de 1 a cerca de 5 equivalentes, de cerca de 1 a cerca de 2 equivalentes, de cerca de 1 a cerca de 1,5 equivalentes, ou de cerca de 1,2 equivalentes.

Em algumas formas de realização, a reação do composto de Fórmula IIc com prop-2-en-l-ol é realizada a uma temperatura entre cerca de 40°C e cerca de 80°C, entre cerca de 50°C e cerca de 70°C, ou entre cerca de 50°C e cerca de 55°C. Em algumas formas de realização, a reação é realizada num solvente, incluindo, mas não se limitando a dioxano. Em algumas formas de realização, o prop-2-en-l-ol está presente numa quantidade entre cerca de 1 e cerca de 3 equivalentes, ou de cerca de 2 equivalentes.

Em algumas formas de realização, o processo compreende ainda a preparação do composto de Fórmula lia através de um processo que compreende a reação de um composto de Fórmula Ild:

com um ácido de fórmula HX'; em que X' é cloro, bromo ou iodo.

Em algumas formas de realização, X' é cloro.

Em algumas formas de realização, a reação do composto de Fórmula Ild com o ácido é realizada a uma temperatura entre cerca de 0°C e cerca de 20°C, entre cerca de 0°C e cerca de 10°C, ou entre cerca de 0°C e cerca de 5°C. Em algumas formas de realização, a reação é realizada num solvente, incluindo, mas não se limitando a acetato de etilo.

Em algumas formas de realização, o processo compreende ainda a preparação de um composto de Fórmula Ild, através de um processo que compreende a redução de um composto de Fórmula lie:

com hidrogénio gasoso na presença de um catalisador de hidrogenação.

Em algumas formas de realização, o catalisador de hidrogenação é paládio sobre carbono. Em algumas formas de realização, o gás hidrogénio está a uma pressão de cerca de 1 atmosfera. Em algumas formas de realização, a reação do composto de Fórmula lie com hidrogénio gasoso é realizada a perto da temperatura ambiente.

Em algumas formas de realização, o processo compreende ainda a preparação de um composto de Fórmula lie através de um processo que compreende a reação de um composto de Fórmula IIc com um composto de fórmula Ilf (com acoplamento de Sonogashira, por exemplo, método de Ziesel ou Kelly, Suffert e Ziesel Tetrahedron Lett. 1991, 32, 757; Kelly, Lee e Mears, J. Org. Chem. 1997, 62, 2774) :

na presença de um catalisador de acoplamento e de uma base.

Em algumas formas de realização, o catalisador de acoplamento é um catalisador de paládio, incluindo, mas não se limitando a acetato de paládio. Em algumas formas de realização, o catalisador é uma mistura de acetato de paládio e Cul. Em algumas formas de realização, a base é uma base inorgânica. Em algumas formas de realização, a base é uma base orgânica. Em algumas formas de realização, a base é uma amina terciária, incluindo, mas não se limitando a trietilamina. Em algumas formas de realização, a base é um carbonato de metal alcalino. Em algumas formas de realização, a base está presente numa quantidade entre cerca de 2 e cerca de 10 equivalentes, entre cerca de 4 e cerca de 9 equivalentes, entre cerca de 6 e cerca de 8 equivalentes, ou de cerca de 7,2 equivalentes.

Em algumas formas de realização, a reação compreende ainda a reação na presença de um ligando fosfina, ou um seu sal, incluindo, mas não se limitando a trifenilfosfina. Em algumas formas de realização, o acetato de paládio está presente numa quantidade entre cerca de 0,01 e cerca de 0,05 equivalentes, ou de cerca de 0,03 equivalentes. Em algumas formas de realização, o iodeto de cobre (I) está presente numa quantidade entre cerca de 0,005 e cerca de 0,2 equivalentes, ou de cerca de 0,01 equivalentes. Em algumas formas de realização, o ligando de fosfina, ou um seu sal, está presente numa quantidade entre cerca de 0,005 e cerca de 0,2 equivalentes, ou de cerca de 0,012 equivalentes.

Em algumas formas de realização, a reação é realizada a uma temperatura entre cerca de 70°C e cerca de 100°C, entre cerca de 80°C e cerca de 100°C, ou de cerca de 90°C. Em algumas formas de realização, a reação é realizada num solvente, incluindo, mas não se limitando a dimetilformamida. Em algumas formas de realização, o composto de Fórmula Ilf está presente numa quantidade entre cerca de 1 e cerca de 3 equivalentes ou de cerca de 2 equivalentes.

Em algumas formas de realização, o processo compreende ainda a preparação um composto de Fórmula Ild:

através de um processo que compreende a reação de um composto de fórmula geral II-G:

com 9-borabiciclo[3.3.1]nonano ( 9-BBN), seguido de reação com um composto de Fórmula IIc:

na presença de um catalisador de acoplamento para formar o composto de Fórmula Ild, em que X3 é cloro, bromo ou iodo.

Em algumas formas de realização, X3 é cloro.

Em algumas formas de realização, o 9-BBN é adicionado diretamente. Em algumas formas de realização, o 9-BBN é gerado in situ (Soderquist e Negron, J. Org. Chem., 1987, 52, 3441-3442) . Em algumas formas de realização, o composto de Fórmula Ilg está presente numa quantidade entre cerca de 1 a cerca de 3 equivalentes, ou entre cerca de 1,5 a cerca de 2,5 equivalentes ou de cerca de 1,75 equivalentes.

Em algumas formas de realização, são utilizadas as condições de reação de acoplamento, utilizando catalisadores paládio (0) ou paládio (II) e realizada sob condições conhecidas na especialidade (ver, por exemplo, Miyaura e Suzuki, Chem. Rev. 1995, 95, 2457 -2483) . Em algumas formas de realização, o catalisador de paládio é o acetato de paládio (II). Em algumas formas de realização, o catalisador de paládio está presente numa quantidade entre cerca de 0,01 e cerca de 0,1 equivalentes, entre cerca de 0,01 e cerca de 0,1 equivalentes, entre cerca de 0,02 e cerca de 0,07 equivalentes ou de cerca de 0,05 equivalentes.

Em algumas formas de realização, a reação compreende ainda uma reação na presença de um ligando de fosfina, ou de um seu sal. Em algumas formas de realização, o ligando de fosfina é triciclo-hexilfosfina. Em algumas formas de realização, o ligando de fosfina, ou o seu sal, está presente numa quantidade entre cerca de 0,05 e cerca de 0,2 equivalentes ou de cerca de 0,1 equivalentes.

Em algumas formas de realização, a segunda etapa é realizada num solvente, incluindo, mas não se limitando a tetrahidrofurano, água ou às suas misturas.

Em algumas formas de realização, a segunda etapa é efetuada à temperatura de refluxo.

Em algumas formas de realização, o processo compreende ainda a preparação do composto de Fórmula III através de um processo que compreende a reação de um composto de Fórmula 11 Ia:

com um composto de Fórmula Illb:

na presença de um catalisador de paládio e de uma base; em que: X4 é cloro, bromo ou iodo; e cada Ra é, independentemente, C1-6 alquilo; ou cada Ra, juntamente com os dois átomos de oxigénio e o átomo de boro formam um anel heterociclico de 5 ou 6 membros; em que o anel heterociclico está opcionalmente substituído com 1, 2, 3 ou 4 grupos Ci-4 alquilo independentemente selecionados.

Em algumas formas de realização, X4 é bromo.

Em algumas formas de realização, o composto de Fórmula Illb tem fórmula IIIb-1:

Em algumas formas de realização, X4 é bromo.

Em algumas formas de realização, utilizam-se as condições de reação de acoplamento de Suzuki, utilizando catalisadores de paládio (0) ou paládio (II), sob condições conhecidas na especialidade (ver, por exemplo, Miyaura e Suzuki, Chem. Rev. 1995,95, 2457- 2483).

Em algumas formas de realização, o catalisador de paládio é 1,1'-bis (difenilfosfino) ferroceno dicloropalio (II) (Pd(dppf)2CI2) · Em algumas formas de realização, o catalisador de paládio está presente numa quantidade de cerca de 0,1 a cerca de 0,5 equivalentes, de cerca de 0,2 a cerca de 0,4 equivalentes, ou de cerca de 0,3 equivalentes.

Em algumas formas de realização, a base é uma base inorgânica. Em algumas formas de realização, a base é uma base orgânica. Em algumas formas de realização, a base é uma amina terciária. Em algumas formas de realização, a base é um carbonato de metal alcalino (por exemplo, carbonato de potássio ou carbonato de sódio).

Em algumas formas de realização, a reação é realizada a uma temperatura entre cerca de 60°C e cerca de 100°C, entre cerca de 70°C e cerca de 90°C, entre cerca de 80°C e cerca de 90°C, ou de cerca de 86°C. Em algumas formas de realização, a reação é realizada num solvente, incluindo, mas não se limitando a dioxano. Em algumas formas de realização, o composto de Fórmula Illb ou IIIb-1 está presente numa quantidade entre cerca de 1 e cerca de 2 equivalentes, ou de cerca de 1,3 equivalentes.

Em algumas formas de realização, o processo compreende ainda a preparação do composto de Fórmula Illa por reação de 1,2,4-triazina-3-amina, com um agente de halogenação.

Em algumas formas de realização, X4 é bromo; e o agente halogenante é N-bromossuccinimida. Em algumas formas de realização, o agente de halogenação está presente numa quantidade entre cerca de 1 e cerca de 2 equivalentes, ou entre cerca de 1 e cerca de 1,1 equivalentes. Em algumas formas de realização, o processo compreende ainda a preparação de 1,2,4-triazina-3-amina através de um processo que compreende a reação de glioxal com aminoguanidina ou com um seu sal.

Em algumas formas de realização, o processo compreende ainda a preparação do composto de Fórmula IIIb-1 através de um processo que compreende: a) fazer reagir um composto de Fórmula IIIc:

com um reagente de Fórmula RiMgY, reagindo de seguida com um composto de Fórmula B(0R2)3 para formar um composto de Fórmula Illd:

e b) após a reação do passo a) , fazer reagir o composto de Fórmula Illd com um ácido, reagindo depois com pinacol para formar um composto de Fórmula IIIb-1; em que:

Ri é Ci-6 alquilo; cada R2 é, independentemente, C1-6 alquilo; e X5 é cloro, bromo ou iodo.

Em algumas formas de realização, X5 é bromo. Em algumas formas de realização, Ri é isopropilo. Em algumas formas de realização, R2 é metilo. Em algumas formas de realização, Β (OR2) 3 está presente numa quantidade entre cerca de 1 e cerca de 2 equivalentes, ou de cerca de 1,4 equivalentes. Em algumas formas de realização, a etapa a) é realizada uma temperatura entre cerca de 0 e cerca de 25°C, ou entre cerca de 7 e cerca de 16°C.

Em algumas formas de realização, o pinacol está presente numa quantidade entre cerca de 1 e cerca de 3 equivalentes, ou de cerca de 2 equivalentes. Em algumas formas de realização, a etapa b) é realizada a uma temperatura entre cerca da temperatura ambiente e cerca de 50°C. Em algumas formas de realização, o passo b) é realizado num solvente, incluindo mas não se limitando a ciclohexano.

Em algumas formas de realização, qualquer dos intermediários descritos nas formas de realização aqui apresentadas pode estar presente sob a forma de base livre. Em algumas formas de realização, qualquer dos intermediários descritos nas formas de realização aqui apresentadas pode estar presente como um sal. Em algumas formas de realização, os intermediários aqui descritos estão sob a forma de hidrato ou solvato.

Em algumas formas de realização, a presente invenção proporciona qualquer dos passos individuais do processo ou dos compostos intermediários acima descritos.

Em vários locais do presente documento, os substituintes dos compostos são apresentados em grupos ou em intervalos. Pretende-se especificamente que os compostos incluam cada uma e todas as subcombinações individuais dos membros de tais grupos e intervalos. Por exemplo, o termo "C1-6 alquilo" destina-se especificamente a designar individualmente, metilo, etilo, C3 alquilo, C4 alquilo, C5 alquilo, e C6 alquilo.

Prefere-se ainda que certas características, que se descrevem, para maior clareza, no contexto de formas de realização separadas, possam também ser fornecidas combinadas numa única forma de realização. Por outro lado, várias caracteristicas que, para sermos concisos, são descritas no contexto de uma única forma de realização, podem também ser apresentadas separadamente ou em qualquer subcombinação adequada.

Tal como aqui é utilizada, a frase "opcionalmente substituída" significa não substituído ou substituído. Tal como aqui é utilizado, o termo "substituído" significa que um átomo de hidrogénio é removido e substituído por um substituinte. Entende-se que a substituição num determinado átomo é limitada pela sua valência.

Tal como aqui é utilizado, o termo "Cn-m alquilo", utilizado por si só ou em combinação com outros termos, refere-se a um grupo hidrocarboneto saturado que pode ser de cadeia linear ou ramificada, contendo n a m átomos de carbono. Em algumas formas de realização, o grupo alquilo contém 1 a 12, 1 a 8, 1 a 6 ou 1 a 4 átomos de carbono. Exemplos de frações alquilo incluem, mas não se limitam a grupos químicos como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, terc-butilo, isobutilo, sec-butilo, 2-metil-l-butilo, n-pentilo, 3-pentilo, n-hexilo, 1,2,2-trimetilpropilo, n-heptilo, n-octilo e similares.

Tal como aqui é utilizado, o termo "anel heterocíclico de 5 ou 6 membros", no contexto de uma fração de fórmula -B(0Ra)2, refere-se a um anel monociclico saturado com 5 ou 6 membros, incluindo os dois átomos de oxigénio e o único átomo de boro, em que os restantes 2 ou 3 membros do anel são átomos de carbono.

Tal como aqui é utilizado, o termo "cerca de" refere-se a mais ou menos 10% do valor.

Tal como aqui são utilizadas, as expressões "temperatura ambiente" e "temperatura do local", são bem conhecidas na especialidade, e referem-se geralmente, por exemplo, a uma temperatura de reação cerca da temperatura da sala em que a reação ocorre, por exemplo, uma temperatura entre cerca de 20°C e cerca de 30°C.

Os processos aqui descritos podem ser monitorizados de acordo com qualquer método adequado conhecido na especialidade. Por exemplo, a formação do produto pode ser monitorizada por meios espectroscópicos, como espectroscopia de ressonância magnética nuclear (por exemplo, 1H ou 13C) , por espectroscopia de infravermelhos ou por espectrofotometria (por exemplo, UV-visivel) ; ou por cromatografia, como cromatografia liquida de alta eficiência (HPLC) ou por cromatografia em camada fina (TLC).

Tal como aqui é utilizado, o termo "reação" é usado tal como é conhecido na especialidade e refere-se geralmente à junção de reagentes químicos, de modo a permitir a sua interação no nível molecular para obter um produto químico ou uma transformação física. Em algumas formas de realização, a reação envolve dois reagentes, em que um ou mais equivalentes do segundo reagente são utilizados relativamente ao primeiro reagente. As etapas de reação dos processos aqui descritos podem ocorrer durante um tempo e sob condições adequadas para a preparação do produto em causa.

Os compostos podem também incluir formas salinas dos compostos e intermediários aqui descritos. Exemplos de sais (ou formas salinas) incluem, mas não se limitam a sais de ácidos minerais ou orgânicos, ou residuos básicos tais como aminas, sais alcalinos ou orgânicos, ou residuos ácidos, tais como ácidos carboxilicos. Geralmente, as formas salinas podem ser preparadas fazendo reagir a base ou o ácido livre com quantidades estequiométricas ou com um excesso dos desejados ácidos ou bases inorgânicas ou orgânicas, num solvente adequado ou em várias combinações de solventes.

Os compostos e intermediários incluem também sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos aqui divulgados. Tal como aqui é utilizada, a expressão "sal farmaceuticamente aceitável" refere-se a um sal formado pela adição de um ácido ou base farmaceuticamente aceitável a um composto aqui apresentado. Tal como aqui é utilizada, a expressão "farmaceuticamente aceitável" refere-se a uma substância que é aceitável para utilização em aplicações farmacêuticas a partir de uma perspetiva toxicológica e não interage de forma adversa com o ingrediente ativo. Sais farmaceuticamente aceitáveis, incluem monossais e dissais, incluindo, mas não se limitando a derivados de ácidos orgânicos e inorgânicos, tais como, mas não se limitando a ácido acético, láctico, citrico, cinâmico, tartárico, succinico, fumárico, maleico, ácidos malónico, mandélico, málico, oxálico, propiónico, clorídrico, hidróbromico, fosfórico, nitrico, sulfúrico, glicólico, pirúvico, metanossulfónico, etanossulfónico, toluenossulfónico, salicilico, benzóico e também ácidos similares aceitáveis. Listas de sais adequados podem encontrar-se em Remington's Pharmaceutical Sciences, 17a ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418 e Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1997). 1985, p. 1418 e Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1997). A preparação de compostos pode envolver a proteção e a desproteção de vários grupos químicos. A necessidade de proteção e de desproteção e a seleção dos grupos protetores apropriados pode ser facilmente determinada pelo especialista. A química dos grupos de proteção pode ser encontrada, por exemplo, em Greene, et al., Protective Groups in Organic Synthesis, 4d. Ed., Wiley & Sons, 2007.

Em função dos vários substituintes, podem ser realizados, conforme necessário, ajustamentos aos grupos protetores e aos métodos de formação e clivagem aqui descritos.

As reações dos processos aqui descritos podem ser realizadas em solventes adequados, os quais podem ser facilmente selecionados por um especialista em síntese orgânica. Os solventes adequados podem ser substancialmente não reativos com os materiais de partida (reagentes), com os intermediários ou com os produtos, às temperaturas às quais as reações são realizadas, temperaturas que podem variar, por exemplo, entre a temperatura de congelação do solvente até à temperatura de ebulição do solvente. Uma dada reação pode ser realizada num solvente ou numa mistura de mais do que um solvente. Dependendo do passo específico da reação, podem ser selecionados solventes adequados para um passo de reação específico. Em algumas formas de realização, as reações podem ser realizadas na ausência de solvente, como ocorre quando pelo menos um dos reagentes é um líquido ou um gás.

Solventes adequados podem incluir solventes halogenados, como tetracloreto de carbono, bromodiclorometano, dibromoclorometano, bromofórmio, clorofórmio, bromoclorometano, dibromometano, cloreto de butilo, diclorometano, tetracloroetileno, tricloroetileno, 1,1,1-tricloroetano, 1,1,2-tricloroetano, 1,1-dicloroetano, 2- cloropropano, a,a,a-trifluorotolueno, 1,2-dicloroetano, 1.2- dibromoetano, hexafluorobenzeno, 1,2,4-triclorobenzeno, 1.2- diclorobenzeno, clorobenzeno, fluorobenzeno a as suas misturas.

Solventes etéreos adequados incluem: dimetoximetano, tetrahidrofurano, 1,3-dioxano, 1,4-dioxano, furano, éter dietilico, éter dimetilico de etilenoglicol, éter dietilico de etilenoglicol, éter dimetilico de dietilenoglicol, dietilenoglicol dietiléter, trietilenoglicol dimetiléter, anisol, éter metil-terc-butilico e as suas misturas.

Solventes próticos adequados podem incluir, a titulo de exemplo e sem limitação, água, metanol, etanol, 2-nitroetanol, 2-fluoroetanol, 2,2,2-trifluoroetanol, etileno glicol, 1-propanol, 2-propanol, 2-metoxietanol, 1-butanol, 2-butanol, álcool i-butilico, álcool t-butilico, 2-etoxietanol, dietilenoglicol, 1-, 2- ou 3-pentanol, álcool neopentilico, álcool t-pentílico, éter monometilico de dietilenoglicol, éter monoetilico de dietilenoglicol, ciclohexanol, álcool benzilico, fenol ou glicerol.

Solventes apróticos apropriados podem incluir, a titulo de exemplo e sem limitação, tetrahidrofurano (THE), N,N-dimetilformamida (DMF), N,N-dimetilacetamida (DMA), 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1H)-pirimidinona (DMPU), 1,3- dimetil-2-imidazolidinona (DMI), N-metilpirrolidinona (ΝΜΡ), formamida, N-metilacetamida, N-metilformamida, acetonitrilo, sulfóxido de dimetilo, propionitrilo, formato de etilo, acetato de metilo, hexacloroacetona, acetona, etilmetilcetona, acetato de etilo, sulfolano, N,N-dimetilpropionamida, tetrametilureia, nitrometano, nitrobenzeno ou hexametilfosforamida.

Solventes hidrocarboneto adequados incluem benzeno, ciclohexano, pentano, hexano, tolueno, cicloheptano, metilciclohexano, heptano, etilbenzeno, m-, o-, ou p-xileno, octano, indano, nonano ou naftaleno. 0 dióxido de carbono supercritico e os líquidos iónicos podem também ser utilizados como solventes.

As reações dos processos aqui descritos podem ser realizadas a temperaturas adequadas, as quais podem ser facilmente determinadas pelo especialista. As temperaturas de reação dependerão, por exemplo, dos pontos de fusão e de ebulição dos reagentes e do solvente, se presente; a termodinâmica da reação (por exemplo, reações vigorosamente exotérmicas podem ser realizadas a temperaturas reduzidas); e a cinética da reação (por exemplo, uma barreira de energia de alta ativação pode precisar de temperaturas elevadas). A expressão "Temperatura elevada" refere-se a temperaturas acima da temperatura ambiente (cerca de 22°C).

As reações dos processos aqui descritos podem ser realizadas ao ar ou sob uma atmosfera inerte. Habitualmente, as reações que contêm reagentes ou produtos que são substancialmente reativos com o ar podem ser realizadas utilizando técnicas de sintese sensíveis ao ar que são bem conhecidas dos especialistas.

Em algumas formas de realização, a preparação de compostos pode envolver a adição de ácidos ou bases para efetuar, por exemplo, a catálise de uma reação ou a formação das desejadas formas de sal, como sais de adição de ácido.

Os ácidos podem ser, por exemplo, ácidos inorgânicos ou orgânicos. Os ácidos inorgânicos incluem ácido clorídrico, ácido bromidrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico e ácido nitrico. Os ácidos orgânicos incluem ácido fórmico, ácido acético, ácido propiónico, ácido butanóico, ácido benzóico, ácido 4-nitrobenzóico, ácido metanossulfónico, ácido p-toluenossulfónico, ácido benzenossulfónico, ácido tartárico, ácido trifluoroacético, ácido propiólico, ácido butirico, ácido 2-butinóico, ácido vinilico acético, ácido pentanóico, ácido hexanóico, ácido heptanóico, ácido octanóico, ácido nanóico e ácido decanóico.

As bases incluem, por exemplo, hidróxido de litio, hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, carbonato de litio, carbonato de sódio e carbonato de potássio. Alguns exemplos de bases fortes incluem, mas não se limitam a, hidróxido, alcóxidos, amidas metálicas, hidretos metálicos, dialquilamidas metálicas e arilaminas, onde: os alcóxidos incluem sais de litio, sódio e potássio de óxidos de metilo, etilo e t-butilo; as amidas metálicas incluem amida de sódio, amida de potássio e amida de litio; os hidretos metálicos incluem hidreto de sódio, hidreto de potássio e hidreto de litio; e as dialquilaminas metálicas incluem sais de sódio e de potássio de amidas de metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, t-butilo, trimetilsililo e ciclohexilo.

Após a preparação dos compostos de acordo com os processos aqui descritos, para isolar os produtos desejados podem utilizar-se operações de isolamento e de purificação habituais, tais como, concentração, filtração, extração, extração em fase sólida, recristalização e cromatografia.

Formulações Farmacêuticas e Formas de Dosagem

Quando utilizados enquanto produtos farmacêuticos, os sais da invenção podem ser administrados sob a forma de composições farmacêuticas, como um sal da invenção combinado com pelo menos um veiculo farmaceuticamente aceitável. Estas composições podem ser preparadas de um modo bem conhecido na especialidade e podem ser administradas por uma variedade de vias, dependendo de se desejar um tratamento local ou sistémico e da área a ser tratada. A administração pode ser tópica (incluindo oftálmica e mucosa, incluindo administração intranasal, vaginal e retal), pulmonar (por exemplo, por inalação ou insuflação de pós ou aerossóis, inclusive por nebulizador, intratraqueal, intranasal, epidérmica e transdérmica), ocular, oral ou parentérica. Os métodos para administração ocular podem incluir administração tópica (gotas oculares), injeção subconjuntival, periocular ou intravitrea, ou introdução por cateter de balão, ou inserções oftálmicas colocadas cirurgicamente no saco conjuntival. A administração parentérica inclui injeção intravenosa, intra-arterial, subcutânea, intraperitoneal ou intramuscular ou por infusão; ou intracraniana, por exemplo, por administração intratecal ou intraventricular. A administração parentérica pode ser sob a forma de uma única dose de bolus, ou pode ser, por exemplo, através de uma bomba de perfusão continua. Composições e formulações farmacêuticas para administração tópica podem incluir sistemas transdérmicos, unguentos, loções, cremes, géis, gotas, supositórios, pulverizações, líquidos e pós. Veículos farmacêuticos convencionais, aquosos, pós ou bases oleosas, espessantes e outros, podem ser necessários ou desejáveis. A presente invenção inclui também composições farmacêuticas que contêm como ingrediente ativo, um sal da invenção em combinação com um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis. Ao preparar as composições da invenção, o ingrediente ativo é habitualmente misturado com um excipiente, diluído por um excipiente ou incluído num tal veículo, por exemplo, sob a forma de cápsula, saqueta, papel ou outro recipiente. Quando o excipiente serve como diluente, este pode ser um material sólido, semissólido ou líquido, que atua como veículo ou meio do ingrediente ativo. Assim, as composições podem apresentar-se sob a forma de comprimidos, pílulas, pós, pastilhas, saquetas, elixires, suspensões, emulsões, soluções, xaropes, aerossóis (como meio sólido ou líquido), pomadas contendo, por exemplo, até 10 % em peso do ingrediente ativo, cápsulas de gelatina dura ou mole, supositórios, soluções injetáveis estéreis e embalagens de pó estéreis.

Na preparação de uma formulação, o composto ativo pode ser moído para se obter o tamanho de partícula apropriado antes de o combinar com os outros ingredientes. Se o composto ativo for substancialmente insolúvel, ele pode ser moído até um tamanho de partícula com menos de 200 mesh. Se o composto ativo for substancialmente solúvel em água, o tamanho de particula pode ser ajustado por moagem para proporcionar uma distribuição substancialmente uniforme na formulação, por exemplo, cerca de 40 mesh. 0 sal da invenção pode ser moído utilizando procedimentos de moagem conhecidos, como moagem húmida para obter um tamanho de partícula apropriado para a formação de comprimidos e para outros tipos de formulações. As preparações finamente divididas (nanopartículas) do sal da invenção podem ser preparadas por processos conhecidos na especialidade, ver por exemplo, o Pedido de Patente Internacional No. WO 2002/000196.

Alguns exemplos de excipientes adequados incluem lactose, dextrose, sacarose, sorbitol, manitol, amidos, goma de acácia, fosfato de cálcio, alginatos, tragacanto, gelatina, silicato de cálcio, celulose microcristalina, polivinilpirrolidona, celulose, água, xarope e metilcelulose. As formulações podem incluir adicionalmente: agentes lubrificantes tais como talco, estearato de magnésio e óleo mineral; agentes molhantes; agentes emulsionantes e de suspensão; agentes conservantes, tais como hidroxibenzoatos de metilo e propilo; agentes edulcorantes; e agentes aromatizantes. As composições da invenção podem ser formuladas de modo a proporcionar uma libertação rápida, sustentada ou retardada do ingrediente ativo após administração ao doente, empregando procedimentos conhecidos na especialidade.

As composições podem ser formuladas sob a forma de dosagem unitária, cada dosagem contendo entre cerca de 5 a cerca de 100 mg, mais usualmente entre cerca de 10 a cerca de 30 mg, do ingrediente ativo. O termo "formas de dosagem unitária" refere-se a unidades fisicamente discretas adequadas como dosagens unitárias para indivíduos humanos e outros mamíferos, cada unidade contendo uma quantidade predeterminada de material ativo calculada para produzir o efeito terapêutico desejado, em associação com um excipiente farmacêutico adequado. 0 composto ativo pode ser eficaz num amplo intervalo de dosagem e é geralmente administrado numa quantidade farmaceuticamente eficaz. Contudo, entende-se que a quantidade do composto efetivamente administrado será geralmente determinada por um médico, de acordo com as circunstâncias relevantes, incluindo a doença a ser tratada, a via de administração escolhida, o composto concreto a ser administrado, a idade, peso e resposta do doente individual, bem como a gravidade dos sintomas do doente.

Para a preparação de composições sólidas tais como comprimidos, o ingrediente ativo principal é misturado com um excipiente farmacêutico para formar uma composição de pré-formulação sólida contendo uma mistura homogénea de um composto da presente invenção. Ao referirem-se estas composições de pré-formulação como homogéneas, isso significa que o ingrediente ativo é habitualmente disperso uniformemente em toda a composição, de modo que a composição possa ser prontamente subdividida em formas de dosagem unitárias igualmente efetivas, tais como comprimidos, pilulas e cápsulas. Esta pré-formulação sólida é então subdividida em formas de dosagem unitárias do tipo descrito acima, contendo, por exemplo, entre 0,1 e cerca de 500 mg do ingrediente ativo da presente invenção.

Os comprimidos ou pilulas da presente invenção podem ser revestidos ou formados de outro modo para proporcionar uma forma de dosagem proporcionando a vantagem de ação prolongada. Por exemplo, o comprimido ou pilula pode compreender uma dosagem no interior e um componente de dosagem exterior, estando este último a envolver o anterior. Os dois componentes podem ser separados por uma camada entérica que serve para resistir à desintegração no estômago e permitir que o componente interno passe intacto para duodeno ou que a sua liberação seja adiada. Pode utilizar-se uma variedade de materiais para produzir tais camadas entéricas ou revestimentos, incluindo uma série de ácidos poliméricos e misturas de ácidos poliméricos com materiais tais como goma-laca, álcool cetilico e acetato de celulose.

As formas liquidas nas quais os compostos e composições da presente invenção podem ser incorporadas para administração por via oral ou por injeção, incluem soluções aquosas, xaropes adequadamente aromatizados, suspensões aquosas ou oleosas, e emulsões aromatizadas com óleos comestíveis tais como óleo de sementes de algodão, óleo de sésamo, óleo de coco ou óleo de amendoim, bem como elixires e veículos farmacêuticos similares.

As composições para inalação ou insuflação incluem soluções e suspensões em solventes aquosos ou orgânicos farmaceuticamente aceitáveis, ou nas suas misturas, e pós. como de descreve acima, as composições líquidas ou sólidas podem conter excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados. Em algumas formas de realização, para obter um efeito local ou sistémico, as composições são administradas por via respiratória, oral ou nasal. As composições podem ser nebulizadas através da utilização de gases inertes. As soluções nebulizadas podem ser respiradas diretamente através do dispositivo de nebulização, ou então, o dispositivo de nebulização pode ser ligado a uma tenda de máscaras faciais ou a uma máquina de respiração sob pressão positiva intermitente. Composições em solução, suspensão ou em pó, podem ser administradas por via oral ou nasal, através de dispositivos que distribuem a formulação de um modo adequado. A quantidade de composto ou de composição administrada a um doente variará em função do fármaco a ser administrado, da finalidade da administração, de se tratar de profilaxia ou de terapêutica, do estado do doente, do modo de administração, e outros fatores. Em aplicações terapêuticas, as composições podem ser administradas a um doente que já sofre de uma doença, numa quantidade suficiente para curar ou pelo menos para aliviar parcialmente prender os sintomas da doença e as suas complicações. As doses efetivas dependerão da doença a ser tratada, bem como do julgamento do clinico assistente, dependendo de fatores como a gravidade da doença, a idade, peso, a condição geral do doente e outros fatores.

As composições administradas a um doente podem sê-lo sob a forma das composições farmacêuticas acima descritas. Estas composições podem ser esterilizadas por técnicas convencionais de esterilização, ou podem ser esterilizadas por filtração. As soluções aquosas podem ser embaladas para utilização tal como estão, ou ser liofilizadas, sendo a preparação liofilizada combinada com um veículo aquoso estéril antes da administração. Deve-se entender que a utilização de alguns dos excipientes, veículos ou estabilizadores anteriormente referidos resultará na formação de sais farmacêuticos. A dosagem terapêutica do sal da presente invenção pode variar de acordo com, por exemplo, a utilização específica a que o tratamento se destina, o modo de administração do composto, o estado de saúde do doente, e o julgamento do médico prescritor. A proporção ou concentração do sal da invenção numa composição farmacêutica pode variar dependendo de uma série de fatores, incluindo a dosagem, as caracteristicas quimicas (por exemplo, hidrofobicidade) e a via de administração. Por exemplo, o sal da invenção pode ser formulado numa solução aquosa fisiológica tampão contendo cerca de 0,1 a cerca de 10% p/v do composto para administração parentérica. Algumas doses típicas vão de cerca de 1 pg/kg a cerca de 1 g/kg de peso corporal por dia. Em algumas formas de realização, a gama de doses vai de cerca de 0,01 mg/kg a cerca de 100 mg/kg de peso corporal por dia. A dosagem dependerá de variáveis tais como o tipo e extensão da progressão da doença ou afeção, o estado geral de saúde do doente especifico, a eficácia biológica relativa do composto selecionado, a formulação do excipiente e sua via de administração. As doses efetivas podem ser extrapoladas a partir de curvas dose-resposta derivadas de sistemas de teste de modelos animais ou in vitro.

Os sais da invenção podem também ser formulados em combinação com um ou mais ingredientes ativos adicionais, que podem incluir qualquer agente farmacêutico, tais como agentes antivirais, vacinas, anticorpos, intensificadores imunitários, imunossupressores e agentes anti-inflamatórios.

Compostos marcados e métodos de ensaio

Um outro aspeto da presente invenção refere-se a um corante fluorescente, marcador de spin, metal pesado ou sal marcado com rádio, da invenção, que seriam úteis não apenas em imagem, mas também em ensaios, em in vitro e in vivo, para localizar e quantificar a proteína cinase alvo, em amostras de tecido, incluindo humano e para identificar ligandos de cinase por inibição da ligação de um composto marcado. Assim, descrevem-se aqui também testes de enzima cinase que contêm o sal marcado.

Incluem-se ainda compostos da invenção marcados por isótopos. Um composto "isotopicamente" marcado ou "marcado radioactivamente" é um composto da invenção em que um ou mais átomos são substituídos por um átomo com uma massa atómica ou um número de massa diferente da massa atómica ou do número de massa habitualmente encontrado na natureza (i.e., de ocorrência natural). Os radionuclídeos adequados que podem ser incorporados em compostos da presente invenção incluem, mas não se limitam a 2H (também representado por D para deutério), 3H (também representado por T para trítio), nC, 13C, 14C, 13N, 15N, 150, 170, 180, 18F, 35S, 36C1, 82Br, 75Br, 76Br, 77Br, 123I, 124I, 125I e 131I. 0 radionuclídeo a incorporar nos presentes compostos marcados radioactivamente dependerão da aplicação específica desse composto marcado radioativamente. Por exemplo, para marcação in vitro e ensaios de competição, os compostos que incorporam 3H, 14C, 82Br, 1251, 131I ou 31S são geralmente mais úteis. Para as aplicações de radio-imagem o nC, 18F, 125I, 123I, 124I, 131I, 75Br, 76Br ou 77Br são geralmente mais úteis.

Entende-se que um "composto marcado radioactivamente" ou um "composto marcado" é um composto que tem incorporado pelo menos um radionuclídeo. Em algumas formas de realização, o radionuclídeo é selecionado a partir do grupo que consiste em 3H, 14C, 125I, 35S e 82Br.

Os métodos de síntese para a incorporação de radioisótopos em compostos orgânicos são aplicáveis a compostos da invenção e são bem conhecidos na especialidade.

Um sal da invenção marcado radioactivamente pode ser utilizado num teste de rastreio para identificar/avaliar compostos. Em termos gerais, um composto recentemente sintetizado ou identificado (isto é, composto de teste) pode ser avaliado quanto à sua capacidade para reduzir a ligação à enzima, do sal da invenção marcado radioactivamente. Assim, a capacidade de um composto de teste para competir com o sal marcado radioactivamente para a ligação à enzima, relaciona-se diretamente com a sua afinidade de ligação.

Ki ts

Descrevem-se aqui também kits farmacêuticos úteis, por exemplo, no tratamento ou prevenção de doenças, como cancro e outras doenças aqui referidas, kit incluindo um ou mais recipientes que contêm uma composição farmacêutica compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz do sal da invenção. Tais kits podem incluir, se desejado, um ou mais dos vários componentes do kit farmacêutico convencional, tais como, por exemplo, recipientes com um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis, recipientes adicionais, etc., como será claramente evidente para os especialistas. 0 kit pode também incluir instruções, como inserções ou como marcadores, indicando as quantidades dos componentes a serem administrados, instruções para administração e/ou instruções para misturar os componentes. A invenção irá ser descrita em maior detalhe através de exemplos específicos. Os seguintes exemplos são apresentados para fins ilustrativos e não se destinam, de qualquer modo, a limitar a invenção. Os especialistas reconhecerão facilmente uma variedade de parâmetros não criticos que podem ser alterados ou modificados para produzir essencialmente os mesmos resultados.

EXEMPLOS

Exemplo 1

Preparação do sal do ácido dihidrocloridrico 2-Fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)imidazolo[l,2-b][1,2,4]triazin-2-il] benzamida

Aqueceu-se a 55°C uma suspensão de 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)imidazolo[1,2-b][l,2,4]triazin-2-il] benzamida (421.2 G, 1,021 mol) (para preparação ver US Ser. N° 11/942 130, cuja divulgação é aqui incorporada por referência na sua totalidade) em metanol (MeOH, 6600 mL) , adicionou-se depois, gota a gota, uma solução aquosa pré-misturada de ácido clorídrico concentrado (HC1 concentrado, 37% em peso, 12 M, 420 mL, 5,10 mol, 5,0 equiv.) em álcool isopropílico (IPA, 1510 mL) a 55°C. A solução límpida resultante foi agitada a 55°C durante 30 min antes de se adicionar éter metil-terc-butílico (MTBE, 6750 mL) através de um funil de adição, durante 30 min. Os sólidos precipitaram lentamente após a adição de éter metil-terc-butílico. Agitou-se a mistura resultante a 55°C durante mais 1 h antes de ser gradualmente arrefecida até à temperatura ambiente. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. Os sólidos foram recolhidos por filtração, lavados com éter metil-terc-butílico (MTBE, 3 x 500 mL) e secos a vácuo, em estufa a 45-55°C até peso constante.

Obteve-se o pretendido dicloridrato de 2-fluoro-Nmetil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)imidazolo[1,2-b][l,2,4]triazin-2-il] benzamida (470,7 g, 495,5 g teóricos, rendimento de 95%) como um sólido cristalino de cor entre esbranquiçado e amarelo claro. P.f. (decom.) 222°C; 3H RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 9,46 (s, 1H) , 9,25 (dd, 1H, J = 5,4 Hz, 1,4 Hz), 9,12 (d, 1H, J= 8,3 Hz), 8,51 (m, 1H) , 8,47 (d, 1H, J= 0,9 Hz), 8,34 (d, 1H, J= 1,3 Hz), 8,23 (s, 1H), 8,21 (dd, 1H, J = 9,0 Hz, 1,8 Hz), 8, 09-8,02 (m, 3H) , 7,79 (dd, 1H, J = 7,5 Hz, 8,3 Hz), 4,77 (s, 2H) , 2,78 (s, 3H, J= 4,5 Hz); 13C RMN (100 MHz, DMSO-de) δ ppm 163,4, 159, 4 (d, J = 249, 9 Hz), 145,8, 145,4, 144,5, 143,8, 140,4, 138,8, 136,8, 135,9, 135,7 (J = 8,6 Hz), 131,2 (J = 3,1 Hz), 130,7, 128,7, 128,2, 126,2 (J = 14,9 Hz), 126,0, 123,1 (J = 3 Hz), 122,5, 121,0, 114,9 (J = 5,6 Hz), 28,4, 26, 3; 19F RMN (376, 3 MHz, DMSO-de) δ ppm -113,2; C23Hi7FN60 (base livre, MW 412,42), LCMS (EI) m/e 413,1 (M+ + Η) e 435, 0 (M+ + Na).

Exemplo 2

Difração de raios-X de pó do sal do ácido dihidrocloridrico A XRPD foi realizada utilizando um aparelho Rigaku MiniFlex X-ray Powder Diffractometer (radiação de raios-X emitida por cobre (Cu) a 1.054056 Â, com um filtro Κβ, angulo inicial -3; angulo de paragem - 45; amostragem - 0,02; velocidade de leitura - 2) . A amostra em pó foi dispersa numa câmara de amostra de fundo zero. A Figura 1 apresenta o padrão XRPD do sal de ácido dihidroclórico preparado pelo processo do Exemplo 1. Os valores de pico 2-teta são apresentados na Tabela 1.

Tabela 1

Exemplo 3

Calorimetria de varredura diferencial do sal de ácido dihidroclórico 0 sal de ácido dihidroclórico preparado pelo processo do Exemplo 1 caracteriza-se pelo traçado DSC mostrado na Figura 2 . 0 termograma DSC revelou um evento endotérmico com inicio a 216,1°C e um pico a 221,91°C. Os testes foram realizados num aparelho de calorimetria de varredura diferencial Mettler Toledo (DSC) 822, com uma câmara de amostra de alumínio (40 pL) , temperatura inicial de 30°C até uma temperatura final de 280°C usando uma taxa de aquecimento de 10 °C/Min.

Exemplo 4

Análise termogravimétrica do sal do ácido dihidroclórico O sal de ácido dihidroclórico preparado pelo processo do Exemplo 1 carateriza-se pela TGA apresentado na Figura 3. A TGA mostrou perda significativa de peso a partir dos 150°C. quando a amostra foi aquecida de 20°C a 600°C a uma Taxa de aquecimento de 20°C/min. Seguiu-se então um evento exotérmico com um pico a 221,9°C, que se considerou ser o pico de fusão. Os testes foram realizados num TA Instrument Q500 .

Exemplo 5

Preparação do sal do ácido dibenzenosulfónico 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)imidazolo[1,2-6][1,2,b]triazin-2-il] benzamida

Uma suspensão de 2-4-fluoro-N-metil-[(quinolin-6-il-metil)imidazolo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il] benzamida (500 Mg, 1,212 mmol) em metanol (MeOH, 12 mL) foi aquecida a 55°C antes de se adicionar uma solução pré-misturada de ácido benzenossulfónico (578 mg, 3,65 mmol, 3,01 equiv.) em álcool isopropílico (IPA, 3,66 mL) a 55°C°C. A solução límpida resultante foi agitada a 55°C durante 30 min antes de se adicionar éter metil-terc-butílico (MTBE, 12 mL) , gota a gota, através de um funil adicional. Os sólidos precipitaram lentamente após a adição de éter metil-terc-butílico. A mistura resultante foi agitada a 55°C durante mais uma hora antes de ser gradualmente arrefecida até à temperatura ambiente. Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante a noite. Os sólidos foram colhidos por filtração, lavou-se com éter metil-terc-butílico (MTBE, 2 x 10 mL) e secou-se em estufa sob vácuo, entre 45 e 55°C, até peso constante. O produto do ácido dibenossulfónico desejado (848 mg, 883,3 mg teóricos, 96% de rendimento) foi obtido como um sólido cristalino esbranquiçado. Mp (decom.) 270,5°C; 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 9,51 (s, 1H) , 9,30 (dd, 1H, J= 5,4 Hz, 1,4 Hz), 9,13 (d, 1H, J= 8,3 Hz), 8,45 (m, 1H), 8,36 (d, 1H, J = 0,9 Hz), 8,30 (s, 1H) , 8,21 (dd, 2H, J = 9,0 Hz, 1,8 Hz), 8,10 - 8,04 (m, 3H) , 7,80 (dd, 1H, J = 7,5 Hz, 8,3 Hz), 7, 62 - 7,56 (m, 4H) , 7,33 - 7,27 (m, 6H) , 4,79 (s, 2H) , 2,78 (d, 3H, J= 4,5 Hz); 19F RMN (376, 3 MHz, DMSO-de) δ ppm -113,2; C23H17FN6O (base livre, MW 412,42), LCMS (EI) m/e 413,0 (M+ + H) e 435,0 (M+ + Na).

Exemplo 6

Difração de raios-X de pó do sal do ácido dibenzenosulfónico A XRPD foi realizada utilizando um aparelho Rigaku MiniFlex X-ray Powder Diffractometer (radiação de raios-X emitida por cobre (Cu) a 1.054056 Â com filtro Κβ, ângulo inicial - 3; ângulo de paragem - 45; amostragem - 0.02; velocidade de leitura - 2) . A Figura 5 apresenta o padrão XRPD do sal preparado pelo processo do Exemplo 5. Os valores de pico 2-teta são apresentados na seguinte Tabela 2.

Tabela 2

Exemplo 7

Calorimetria de varredura diferencial do sal de ácido dibenzenosulfónico 0 sal do ácido dibenzenosulfónico preparado pelo processo do Exemplo 5 carateriza-se pelo traçado de CRD apresentado na Figura 5. 0 termograma DSC revelou um evento endotérmico com um início a 269, 4 °C, seguido de um evento exotérmico com um pico a 270,45°C. Os testes foram realizados num aparelho de calorimetria de varredura diferencial (DSC) 822 Mettler Toledo, com uma temperatura inicial de 30°C até uma temperatura final de 280°C usando uma taxa de aquecimento de 10 °C/min.

Exemplo 7A

Características físicas do sal do ácido dibenzenosulfónico 0 sal do ácido dibenzenosulfónico é geralmente um pó branco sujo a amarelo claro numa inspeção visual contra um fundo branco.

Exemplo 7B

Solubilidade do sal do ácido dibenzenosulfónico 0 sal do ácido dibenzenosulfónico obtém-se habitualmente como um pó de cor branco sujo a amarelo claro em pó quando inspecionado visualmente contra um fundo branco. Verificou-se que a solubilidade do sal de ácido dibenossulfónico a 25°C era aproximadamente 3,9 mg/mL em água; 0,003 mg/mL em tampão de pH 7,4; 0,003 mg/mL em tampão de pH 8,0; e pelo menos 29 mg/mL em HC1 aquoso 0,1 N. A solubilidade de equilíbrio foi determinada por mistura da amostra nos solventes aquosos selecionados (HC1 0,1 N, água, tampão a pH 7,4 e pH 8,0) durante pelo menos 12 horas. A concentração da amostra foi então determinada por HPLC utilizando uma calibração de ponto único.

Exemplo 8 4-Bromo-3-fluoro-N-metoxi-N-metilbenzamida (3) A uma suspensão de ácido fluorobenzóico 4-bromo-3 (1, 967,9 g, 4,4 mol) em diclorometano (5,9 L) e DMF (21 mL) foi lentamente adicionada uma solução de cloreto de oxalilo ((COCl) 2, 560 mL, 6,4 mol, 1,45 equiv.) em diclorometano (520 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 20 h sendo depois arrefecida a 0°C por um banho com água gelada. Adicionou-se então cloridrato de hidroxilamina N,0-dimetilo (826 g, 8,4 mol, 1,9 equiv.) seguido da adição lenta de trietilamina (TEA, 2,5 L, 17,7 mol, 4,0 equiv.), a 0°C. A mistura de reação foi então gradualmente aquecida até à temperatura ambiente e agitada à temperatura ambiente durante a noite. Uma vez completada a reação de acoplamento, a mistura de reação foi lavada com uma solução de bicarbonato de sódio aquoso saturado (NaHCCb, 2L). A fase aquosa foi novamente extraída com diclorometano (1 L) . As fases orgânicas combinadas foram lavadas com água (1 L) , salmoura (1 L) e concentradas sob baixa pressão. O resíduo sólido resultante foi dissolvido em éter metil-terc-butílico (MTBE, 5L) , lavado sequencialmente com água (5 x 1L), salmoura (1 L), e secou-se com sulfato de sódio anidro (Na2SC>4) . A solução filtrada foi concentrada sob baixa pressão e o sólido resultante foi seco a vácuo numa estufa a 45°C para dar 4-bromo-3-fluoro-iV-metoxi-iV-metilbenzamida (3, 1106 g, 1153 g teóricos, 95,9% de rendimento) que foi utilizado para na reação seguinte sem purificação adicional. Para 3: XH RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7,78 (t, 1H, J= 7,47 Hz), 7,56 (dd, 1H, J= 9,3, 1,6 Hz), 7,18 (d, 1H, J= 8,1 Hz), 3,53 (s, 3H) , 3,25 (s, 3H) ; C9H9BrFN02 (MW 262,08), LCMS (EI) m/e 262,0/ 264,0 (M+ + H) .

Esquema 1 (Exemplos 8-14) (fora do âmbito da invenção)

Exemplo 9 1-(4-Bromo-3-fluorofenil)etanona (4) A uma solução em bruto de 4-bromo-3-f luoro-W-metoxi-iV-metilbenzamida (3, 1106 g, 4,2 mol) em tetrahidrofurano anidro (THF, 11L) adicionou-se lentamente uma solução 3,0 M de cloreto de metilmagnésio (MeMgCl, 2,5L, 7,5 mol, 1,7 equiv.) em THF a 0°C. A mistura de reação resultante foi agitada a 0°C durante 2 h extinguindo-se depois cuidadosamente com cloreto de amónio aquoso saturado (NH4CI, 1,5 L) . A solução resultante foi concentrada sob baixa pressão para remover a maior parte do THF. O residuo foi então diluído com acetato de etilo (EtOAc, 5 L) e a solução resultante foi lavada com água (2 L) . A fase aquosa foi extraída com acetato de etilo (EtOAc, 2 x 2 L) . As fases orgânicas combinadas foram lavadas com água (2 L), salmoura (2 L) e secou-se com sulfato de sódio anidro (Na2 SO4) . A solução filtrada foi concentrada sob baixa pressão e o sólido resultante foi seco num forno a vácuo, a 45°C, para se obter 1- (4-bromo-3-fluorofenil)etanona (4,890,8 g, 911,6 g teóricoss, 97,7% de rendimento) como um sólido que foi utilizado na reação seguinte sem purificação adicional. Para 4: !H RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 7, 89-7, 84 (m, 2H) , 7,71 (dd, 1H, J = 8,30, 1, 87 Hz), 2,57 (s, 3H) .

Exemplo 10 2- (4-Bromo-3-fluorofenil)-2-oxoacetaldeído (5) A uma solução de 1-(4-bromo-3-fluorofenil)etanona (4, 890,8 g, 4,1 mol) em DMSO (4 L) foi lentamente adicionada uma solução de brometo de hidrogénio aquoso a 48% (HBr, 1420 mL, 12,5 mol, 3,0 equiv.) . Durante a adição, a temperatura de reação foi gradualmente aumentada de 20°C para 50°C. A mistura de reação foi depois aquecida a 60°C e agitada a 60°C durante a noite. O sulfureto de dimetilo resultante foi removido por destilação e o residuo foi vertido em água gelada (28 L) . O precipitado amarelo resultante foi recolhido por filtração (conservar o filtrado) e lavado com água (5 L) . O sólido amarelo foi dissolvido em acetato de etilo (EtOAc, 5 L) , lavou-se com salmoura (1 L) e secou-se com sulfato de sódio anidro (Na2 SO4) . A solução foi então concentrada sob baixa pressão e o sólido resultante foi seco numa estufa sob vácuo a 45°C para dar o produto desejado, 2-(4-bromo-3-fluorofenil)-2-oxoacetaldeido, como o seu hidrato (hidrato de 5,730,6 g, 1020,9 g teóricos, 71,6% de rendimento) . A fase aquosa (filtrado) foi extraida com acetato de etilo (3 x 5 L) e a fase orgânica combinada foi lavada com água (2 x 2 L) , salmoura (2 L) e secou-se com sulfato de sódio anidro (Na2 SO4). A solução foi concentrada sob baixa pressão e o sólido resultante foi seco numa estufa sob vácuo a 45°C para dar a segunda colheita de hidrato de 2-(4-bromo-3-fluorofenil)-2-oxoacetaldeido (hidrato de 5,289,4 g, 1020,9 g teóricos, 28,3% de rendimento; total 1020 g, 1020,9 g teóricos, 99.9% de rendimento) que foi utilizado na reação seguinte sem purificação adicional. Para hidrato de 5: RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8, 00-7, 70 (m, 3H) , 6,69 (s 1, 2H) , 5,59 (s, 1H) .

Exemplo 11 1-(4-Bromo-3-fluorofenil)-2,2-dietoxietanona (6) À temperatura ambiente, carregou-se um frasco de 22 L com hidrato de (4-bromo-3-fluorofenil)-2-oxoacetaldeido(5, 1020 g, 4,41 mol), tolueno (7,5 L), ortoformato de trietilo (1,633 g, 1,8 L, 11,04 mol, 2,5 equiv.), ácido para-tolueno sulfónico (33,5 g, 0,176 mol, 0,4 equiv.)/ e a mistura de reação resultante foi aquecida a 110°C e agitada a 110°C durante 6 h. Quando a HPLC mostrou que a reação estava completa, a mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente antes de ser vertida para um funil de separação de 50 L, juntamente com acetato de etilo (7,5 L) e a solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (NaHCC>3, 3 L). A mistura foi agitada e as camadas foram separadas. A camada aquosa foi extraida com acetato de etilo (2 L) . As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (4 L) , secou-se então com sulfato de sódio (Na2SC>4) , e concentrou-se sob baixa pressão para se obter 1-(4-bromo-3-fluorofenil)-2,2-dietoxietanona (6, 1240 g, 1345,7 g teóricos, 92,1% de rendimento) que foi utilizado na reação seguinte sem purificação adicional. Para 6: 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 7, 94-7, 94 (m, 2H) , 7,78 (dd, 1H, J= 8,51,2,08 Hz), 5,40 (s, 1H), 3, 77-3, 60 (m, 4H) , 1,16-1,14 (m, 6H) .

Exemplo 12 6-(4-Bromo-3-fluorofenil)-1,2,4-triazin-3-amina (7) À temperatura ambiente, carregou-se um frasco de 22 L com cloridrato de 1-(4-bromo-3-fluorofenil)-2,2-dietoxietanona (6, 1,240 g, 4,07 mol), etanol (11 L) , água (1,4 L) , hidróxido de potássio (KOH, 910 g, 16,3 mol, 4,0 equiv.) e bicarbonato de aminoguanidina (1105 g, 8,13 mol, 2,0 equiv.). A mistura de reação resultante foi então aquecida a 75°C durante 14 h. Quando a HPLC mostrou estar completa a reação de condensação, a mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente antes de ser filtrada. O filtrado foi então concentrado sob baixa pressão para remover a maior parte dos solventes. A solução aquosa residual foi extraida com acetato de etilo (EtOAc, 3 x 6 L). As camadas orgânicas foram combinadas e concentradas sob baixa pressão para dar um sólido castanho escuro. Este sólido foi dissolvido em etanol (4 L) e a solução resultante foi tratada com uma solução aquosa de ácido clorídrico 0,2 M (4 L). A suspensão resultante foi depois aquecida a 50°C durante 6 h antes de se deixar arrefecer até à temperatura ambiente. Adicionou-se lentamente uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (NaHCCç 2 L) à pasta e a mistura resultante foi depois concentrada sob baixa pressão para remover a maior parte dos solventes. O resíduo aquoso foi então tratado com acetato de etilo (20 L) para dissolver os sólidos. As duas camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com acetato de etilo (2 x 2 L) . As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob baixa pressão. Os sólidos castanhos escuros foram tratados com éter metil-terc-butílico (MTBE, 4 L) e a suspensão resultante foi aquecida a 30 °C e agitada a 30°C durante 30 min. A mistura foi filtrada e os sólidos (de cor verde a laranja) foram recolhidos (reserve o filtrado) e lavados com éter metil-terc-butílico (MTBE, 2 L) para fornecer a primeira colheita do produto bruto desejado (7). O filtrado foi evaporado sob baixa pressão e os sólidos castanhos escuros resultantes foram tratados com éter metil-terc-butí lico (MTBE, 2 L). A suspensão resultante foi aquecida a 30°C e agitada a 30°C durante 30 min. A mistura foi filtrada para dar a segunda colheita do produto bruto desejado (7) que foi lavado com MTBE (1 L) . Os sólidos combinados foram secos sob vácuo a 40 - 45°C para fornecer 6-(4-bromo-3-fluorofenil)-1,2,4-triazin-3-amina (7, 585 g,

1095,1 g teóricos, 53,4% de rendimento) que foi utilizado na reação seguinte sem purificação adicional. Para 7: RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,86 (s, 1H) , 7,97 (d, 1H, J= 10,79 Hz), 7,81 (m, 2H) , 7,52 (s 1, 2H) ; C9H6BrFN4 (MW 269, 07), LCMS (EI) m/e 269, 0/271,1 (M+ + H) .

Exemplo 13 6- ((2-(4-Bromo-3-fluorofenil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin- 7- il)metil)quinolina (12)

Em 1-butanol (1800 mL) suspenderam-se 1-(2-Cloro-l-hidroxi- 3-(quinolin-6-il)-propil)-pirrolidina-2,5-diona (11, 228 g, 0,74 mol, 1,1 equiv.) e 6- (4-bromo-3-fluorofenil)-1,2,4-triazin-3-amina (7, 181 g, 0,673 mol) e a suspensão resultante foi aquecida a 110°C e agitada a 110°C durante 18 h (a mistura de reação torna-se homogénea neste ponto). A mistura de reação foi então arrefecida gradualmente até à temperatura ambiente antes de ser arrefecida até 10 °C através de banho de gelo. O sólido amarelo resultante foi recolhido por filtração (reservar os filtrados de 1-butanol) , lavou-se então com 1-butanol frio (3 x 100 mL) e secou-se por sucção. Este sólido foi depois suspenso numa solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (NaHCCd, 500 mL) e a suspensão resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h para neutralizar o correspondente sal cloridrato. A base livre foi então filtrada, lavada com água (500 mL) e seca numa estufa sob vácuo a 45°C durante 18 h para se obter a primeira colheita da 6-((2-(4-bromo-3- fluorofenil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-il)metil)quinolina bruta (12, 125,1 g, 292,3 g teóricos, 42,8% de rendimento). Os filtrados 1-butanol foram depois concentrados sob baixa pressão e os sólidos resultantes foram dissolvidos em diclorometano (CH2CI2, 2 L) . A solução foi então lavada com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (NaHCCb, 1 L) , secou-se com sulfato de sódio (Na2S04), e concentrou-se sob baixa pressão. 0 resíduo foi então purificado por cromatografia flash em coluna (SÍO2, gradiente de eluição 0-10% de MeOH-CH2Cl2) para se obter a segunda colheita de 6- ( (2-(4-bromo-3- fluorofenil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-il)metil)-quinolina (12, 19,7 g, 292,3 g teóricos, 6,7% de rendimento, 144,8 g, 292,3 g teóricos, 49,5% de rendimento) como sólidos amarelos. Para 12: XH RMN (400 MHz, DMSO-ch) δ ppm 9,23 (s, 1H), 9,11 (dd, 1H, J= 4,98, 1,55 Hz), 8,85 (d, 1H, J = 8,09 Hz), 8,25 - 8,18 (m, 2H) , 8,12 - 8,00 (m, 3H) , 7,93 - 7,86 (m, 3H) , 4,70 (s, 2H) ; C2iHi3BrFN5 (MW 434,26), LCMS (EI) m/e 434,00/435, 95 (M+ + H) .

Exemplo 14 2-Fluoro-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il)benzonitrilo (13)

Suspenderam-se 6-((2-(4-Bromo-3-fluorofenil)imidazo[1,2— b][1,2,4]triazin-7-il)metil)quinolina(12, 200 g, 0,461 mol ), cianeto de zinco (ZnCN2, 32,7 g, 0,277 mol, 0,6 equiv.), pó de zinco (Zn, 6,0 g, 0,093 mol, 0,2 equiv.) e Pd(dppf)2Cl2 (22,6 g 0,028 mol, 0,06 eqiv) numa solução pré-misturada de N,N-dimetilacetamida (DMAC, 2000 mL) e água (H2O, 40 mL) . A suspensão resultante foi então desgaseifiçada com um fluxo de azoto durante 20 min antes de se aquecer até 110°C e agitar a 110°C durante 1 a 2 h (observou-se uma solução homogénea). Quando a LC/MS indicou que a reação estava concluída, a mistura de reação foi arrefecida primeiro à temperatura ambiente e depois num banho de gelo a 5°C. A mistura de reação arrefecida foi diluída com uma mistura de uma solução aquosa saturada de cloreto de amónio (NH4CI aq.), uma solução aquosa concentrada de hidróxido de amónio (NH4OH aq.) e água (4:1:4 por volume, 8.1 L) e a mistura resultante foi então agitada à temperatura ambiente durante 30 min. Os sólidos resultantes foram recolhidos por filtração e secos sob vácuo numa estufa durante a noite, a 45°C, para obter o produto bruto desejado (13). Este material em bruto foi então purificado por cromatografia flash (S1O2, gradiente de eluição, sequencialmente com, 1% de trietilamina em diclorometano, 2,5% de acetona e 1% de trietilamina em diclorometano, 5,0% de acetona e 1% de trietilamina em diclorometano, e 10,0% de acetona e 1% de trietilamina em diclorometano) para se obter o 2-fluoro-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)-imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il) benzonitrilo ( 13, 127,4 g, 175,4 g teóricos, rendimento de 72,6%) sob a forma de sólidos amarelos. Para 13: 2H RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 9,24 (s, 1 H) , 8,81 (dd, 1H, J = 4,15, 1,66 Hz), 8,26 - 8,12 (m, 4H) , 8,02 (s, 1H) , 7, 95 - 7, 93 (m, 2H) , 7,76 (dd, 1H, J = 8,71, 2,08 Hz), 7,47 (dd, 1H, J = 8,70, 4,15 Hz), 4,62 (s, 2H) ; C22H13FN6 (MW 380,38), LCMS (EI) m/e 381,0 (M+ + H) .

Exemplo 15 6-(3,3-dietoxiprop-l-inil)quinolina (22)

Uma mistura de 6-bromoquinolina (8, 2,63 g, 12,6 mmol) , propargilaldeído-dietil-acetal (3,73 mL, 25,2 mmol, 2,0 equiv.), trietilamina (TEA, 12,7 mL, 90,8 mmol, 7,2 equiv.), iodeto de cobre (I) de (Cul, 24,0 mg, 0,126 mmol, 0,01 equiv.), e trifenilfosfina (PPh3, 0,39716 g, 1,5142 mmol, 0,12 equiv.) em N, N-dimetilf ormamida (DMF, 15,6 mL, 202 mmol) foi desgaseifiçada com borbulhamento de azoto durante 5 min. Adicionou-se acetato de paládio (Pd(OAc)2, 0,08499 g, 0,3786 mmol, 0,03 equiv.) e a mistura foi desgaseif içada com borbulhamento de azoto durante 5 min. A mistura de reação foi aquecida a 90°C, sob azoto e sob agitação. Após 3 h e 10 min, a HPLC indicou que a reação estava completa. A mistura de reação foi diluída com acetato de etilo (EtOAc, 100 mL) e lavou-se com água (H2O, 2 x 100 mL). A camada aquosa foi extraída com acetato de etilo (EtOAc, 20 mL) . Os extratos orgânicos combinados foram então concentrados sob baixa pressão para fornecer o produto em bruto como um óleo preto. O produto em bruto foi purificado por cromatografia flash em coluna (SÍO2, gradiente de eluição 0-40% de EtOAc em hexano) para se obter 6-(3,3-dietoxiprop-l-inil)quinolina (22, 3,2 g, 3,22 g teóricoss, 99 % de rendimento) como um óleo incolor. Para 22: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,92 (dd, 1H, J=4,35 Hz, 1,86 Hz), 8,36 (d, 1H, J= 8,40 Hz, 1,66 Hz), 8,20 (d, 1H, J = 1,78 Hz), 7,99 (d, 1H, J = 8,71 Hz), 7,76 (dd, 1H, J= 8,71 Hz, 1,87 Hz), 7,57 (dd, 1H, J= 8,09 Hz, 4,05 Hz), 5,58 (s, 1H), 3,75 - 3,55 (m, 4H), 1,17 (t, 6H, J= 7,16 Hz); C16H17NO2 (MW 255,31), LCMS (EI) m/e 256, 0 (M+ + H) .

Esquema 2 (Exemplos 15-18)

Exemplo 16 6- (3,3-dietoxipropil)quinolina (23)

Método A. À temperatura ambiente, adicionou-se 3,3-dietoxi-1-propeno (548 g, 4,2 mol, 1,75 equiv.) a um balão de 22 L carregado com uma solução de 9-borabiciclo[3.3.1]nonano em tetrahidrofurano (solução 0,5 M de 9-BBN em THF, 8,4 L, 4,2 mol, 1,75 equiv.) (a temperatura interna elevada a 40°C) durante 1 h. A mistura de reação resultante foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. No momento em que a 1H RMN de uma alíquota da mistura de reação indicou que todo o 3,3-dietoxi-l-propeno tinha sido consumido. Adicionaram-se à mistura de reação, por esta ordem, 6-bromoquinolina (8, 500 g, 2,4 mol, 1,0 equiv.), carbonato de potássio (K2CO3, 662 g, 4,8 mol, 2,0 equiv.), triciclohexilfosfina (67,4 g, 0,24 mol, 0,1 equiv.), acetato de paládio (Pd(OAc)2, 27 g, 0,12 mol, 0,05 equiv.) e água (90 mL), procedeu-se depois a desgaseificação com azoto durante 0,5 h. A mistura de reação foi então aquecida sob refluxo durante 4 h. Quando as TLC e LC/MS mostraram que o material de partida tinha sido consumido, a mistura de reação foi arrefecida com agitação até a temperatura ambiente, antes de ser extinta com água (7,5 L) e acetato de etilo (EtOAc, 7,5 L). As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com acetato de etilo (EtOAc, 4 L) . As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com uma solução saturada de salmoura (NaCl, 4 L) , secou-se com sulfato de magnésio (MgS04) e concentrou-se sob baixa pressão. O residuo foi purificado por cromatografia em coluna (S1O2, gradiente de eluição 10 a 60% de acetato de etilo em de heptano), para fornecer 6-(3,3-dietoxipropil) quinolina (23, 520 g, 622,4 g teóricos, 83,5% de rendimento) como um óleo incolor. Para 23: 1HRMN (DMSO-de, 300MHz) δ ppm 8,81 (dd, 1H, J= 4,23 Hz, 1,73 Hz), 8,28 (d, 1H, J = 8,07 Hz), 7,91 (d, 1H, J= 8,62 Hz), 7,75 (s, 1H) , 7,61 (dd, 1H, J = 8,63 Hz, 1,92 Hz), 7,46 (dd, 1H, J= 8,25 Hz, 4,22 Hz), 4,46 (t, 1H, J= 5,60 Hz), 3,61 - 3.38 (m, 4H) , 2,79 (t, 2H, J = 8,53 Hz), 1, 95 -1,85 (m, 2H) , 1,11 (t, 6H, J= 6,84 Hz); C16H21NO2 (MW 259, 34), LCMS (EI) mLe 260,2 (M+ + H) . Método A-alternativo. O 9-BBN foi gerado in situ e utilizado para preparar o composto 23 tal da forma como em seguida se descreve: sob uma atmosfera de azoto, o 1,2-dimetoxietano anidro (DME, 47,0 mL) foi carregado num balão de 500 mL com 3 tubuladuras equipado com um aparelho de destilação. Adicionou-se um complexo de borano-sulfureto de dimetilo (12,1 g, 151 mmol, 2 equiv.) e a temperatura da solução aumentou de 20 para 22°C. A esta solução, adicionou-se, gota a gota, 1,5-ciclooctadieno (16,3 g, 151 mmol, 2 equiv.) durante um periodo de 30 min para manter uma temperatura de reação de 50 a 60°C, periodo durante o qual se recolheu uma pequena quantidade de sulfureto de dimetilo pelo aparelho de destilação. A mistura de reação foi então destilada sob azoto até a temperatura do destilado atingir 84°C. Os destilados colhidos tinham um volume de ~21 mL. O banho de óleo foi removido e adicionou-se THF anidro (49 mL). Recolheu-se uma pequena amostra da mistura de reação para análise de RMN e o resultado indicou que a olefina tinha sido consumida. Esta solução de 9-BBN foi utilizada diretamente no próximo passo. À solução anterior de 9-BBN adicionou-se, gota a gota, 3,3-dietoxi-l-propeno (19,3 g, 142 mmol, 1,89 equiv.) enquanto se mantinha a temperatura abaixo de 30°C. A reação foi ligeiramente exotérmica e o precipitado branco dissolveu-se lentamente. A mistura de reação foi então agitada à temperatura ambiente durante 18 h.

À solução preparada acima, adicionaram-se 6-bromoquinolina (8, 15,7 g, 75,4 mmol, 1 equiv.), triciclo-hexilfosfina (1,27 g, 4,52 mmol, 0,06 equiv.), carbonato de potássio (20,8 g, 151 mmol, 2 equiv.), e água (0,421 mL, 23,4 mmol). A mistura foi desgaseifiçada por borbulhamento com azoto durante 10 a 15 min. Adicionou-se acetato de paládio (Pd (OAc)2, 0,508 g, 2,26 mmol, 0,03 equiv.) e o borbulhamento de azoto prosseguiu durante mais 10 minutos. A mistura de reação foi aquecida a 75°C e mantida a 75 - 78°C durante 2 a 3 h. Quando a HPLC mostrou que a reação estava concluída, o aquecimento foi descontinuado e a mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente. Adicionou-se acetato de etilo (EtOAc, 162 mL) e água (H2O, 162 mL) e a camada orgânica foi separada. A camada aquosa foi extraída com acetato de etilo (EtOAc, 2 x 60 mL) e os extratos orgânicos combinados foram secos com sulfato de sódio (Na2S04) e concentrou-se sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em coluna (sílica gel, gradiente de eluição 0 a 40% de EtOAc em hexano) para dar 6-(3,3-dietoxipropil)quinolina (23, 17,6 g, 19,6 g teóricos, 90% de rendimento) como um óleo transparente, idêntico, em todos os aspetos comparáveis, ao material obtido no Método A. Método B. Uma mistura de 6-(3,3-dietoxiprop-l-in-l-il)quinolina (22, 56 mg, 0,22 mmol) e de 10% de paládio em carbono (5 mg) em THF (5 mL) foi hidrogenada sob H2 a 1 atm durante 6 h. A mistura de reação foi filtrada através de um leito de celite e o leito de celite foi lavado com THF (2 x 2 mL). Os filtrados combinados foram concentrados sob baixa pressão para se obter 6-(3,3-dietoxipropil)quinolina (23, 56 mg, 57 mg teóricos, rendimento de 98%) sob a forma de um óleo límpido, que se revelou suficientemente puro para ser utilizado na reação seguinte sem purificação adicional, sendo idêntico, em todos os aspetos comparáveis, ao material obtido pelo Método A.

Exemplo 17 3-(quinolin-6-il) propanal (9) Método 1. Carregou-se um frasco de 22 L com tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0) (70,0 g, 0,076 mol, 0,015 equiv.), tetrafluoroborato de tri-terc-butilfosfónio (44 g, 0,152 mol, 0,03 equiv.), e dioxano (12 L) à temperatura ambiente. A solução resultante foi então desgaseifiçada com uma corrente constante de azoto durante 20 min antes de se adicionar, à temperatura ambiente, 6-bromoquinolina (8, 1055 g, 5,07 mol, 1,0 equiv.), álcool alilico (588 g, 10,1 mol, 2,0 equiv.) e N-metil-N-ciclo- hexil-ciclohexilamina (1186 g, 6,08 mol, 1,2 equiv.). A mistura de reação resultante foi agitada a 50-55°C durante 8 a 12 h. Quando a TLC e a LC/MS mostraram que a reação estava completa, a mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente antes de se adicionar éter metil-terc-butílico (MTBE, 10 L) à mistura de reação. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 10 minutos antes de ser filtrada através de uma almofada de celite. O filtrado foi concentrado sob baixa pressão e o resíduo foi purificado por cromatografia flash em coluna (SiC>2, gradiente de eluição 20 - 80% de acetato de etilo em heptano) para proporcionar 3-(quinolin-6-il)propanal (9, 495 g, 939, 1 g teóricos, 52,7%) como um óleo amarelo, que solidificou parcialmente após atingir uma temperatura entre 0 e 5 °C. Para 9: RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 9,75 (t, 1H, J= 1,24 Hz), 8,83 (dd, 1H, J= 4,15 Hz, 1,66 Hz), 8,25 (dd, 1H, J= 8,3, 1,03 Hz), 7,93 (d, 1H, J= 8,71 Hz), 7,76 (d, 1H, J= 1,45 Hz), 7,64 (dd, 1H, J= 8,72 Hz, 2,08 Hz), 7,48 (dd, 1H, J= 8,30 Hz, 4,36 Hz), 3,05 (t, 2H, J= 7,26 Hz), 2,89 (t, 2H, J = 7,26 Hz); C12H11NO (MW 185,22), LCMS (EI) m/e 186 (M+ + H). Método 2. Uma solução de 6-(3,3-dietoxipropil)quinolina (23, Método A do Exemplo 16, 520 g, 2,08 mol, 1,0 equiv.) em

acetato de etilo (EtOAc, 2,2 L) foi arrefecida a 0°C antes de se adicionar uma solução aquosa de ácido clorídrico 2 N (HC1) (2,2 L) durante 1 h, mantendo a temperatura da reação abaixo de 5°C. A mistura de reação resultante foi agitada durante mais 2 h a 0-5°C. Quando as TLC e HPLC/MS indicaram que a reação estava completa, a reação foi extinta com uma solução aquosa de hidróxido de sódio 3 N (NaOH), arrefecida a 0°C, até o pH ficar entre 8 e 9. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com acetato de etilo (EtOAc, 2 L) . As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2 L) , secou-se com sulfato de sódio (Na2S04) , e concentrou-se sob baixa pressão para dar o produto bruto 3-(quinolin-6-il)propanal (9, 385,3 g, 385,3 g teóricoss, 100%) como um óleo amarelo, idêntico, em todos os aspetos comparáveis, ao material obtido do Método 1. Uma vez considerado suficientemente puro, este material bruto foi utilizado diretamente na reação seguinte sem purificação adicional. Método 3. Um balão de 22 L carregado com uma solução 0.5 M de 9-borabiciclo[3.3.1]nonano em tetrahidrofurano (9-BBN, 5,75 L, 2,89 mol, 2,0 equiv.) e tetrahidrofurano (THF, 6 L) foi tratado com 3,3-dietoxi-l-propeno (393 g, 3,02 mol, 2,10 equiv.) a 0-5°C e a mistura de reação resultante foi depois aquecida até à temperatura ambiente e agitada à temperatura ambiente durante 14 h. Antes de serem desgaseifiçada com azoto durante 1 hora, adicionaram-se à mistura de reação, durante 1 hora, 6-bromoquinolina (8, 300 g, 1,44 mol, 1,0 equiv.), acetato de paládio (Pd(OAc)2, 16,1 g, 0,072 mol, 0,05 equiv.), carbonato de potássio (K2CO3, 398 g, 2,89 mol, 2,0 Equiv.), triciclo-hexilfosfina (22,3 g, 0,079 mol, 0,055 equiv.) e água (52 g, 2. 8 mol) . A mistura de reação resultante foi aquecida a 75°C durante 1 h. Quando as TLC e LC/MS mostraram que a reação estava completa, a mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e adicionou- se água (2 L) para dissolver os sais. A mistura resultante foi então concentrada sob baixa pressão até um volume de aproximadamente 4 L antes de ser filtrada através de uma almofada de Celite. A almofada de Celite foi lavada com acetato de etilo (EtOAc, 2 L) . 0 filtrado foi concentrado sob baixa pressão até um volume de aproximadamente 2 L e esta solução residual foi então adicionada lentamente durante 5 minutos a um balão contendo uma solução aquosa de ácido clorídrico (HC1) 2,0 M (2 L) a 0-5°C. A solução resultante foi agitada a 0-5°C durante 14 h antes de ser extinta com uma solução de bicarbonato de sódio aquoso saturado (NaHCCç) a 0°C até o pH ficar entre 8 e 9. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraida com acetato de etilo (EtOAc, 2 L). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (1 L) , secas com sulfato de sódio (Na2S04), e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo, que contém o 3-(quinolin-6-il) propanal (9) bruto foi purificado por cromatografia flash em coluna (SÍO2, gradiente de eluição 20-80% de acetato de etilo em heptanos) para proporcionar 3-(quinolin-6-il) propanal (9, 139 g, 266,7 g teóricos, 52,1%) como um óleo amarelo, que se verificou ser idêntico ao material obtido nos Métodos 1 e 2.

Exemplo 18 1-(2-cloro-l-hidroxi-3-(quinolin-6-il)propil)pirrolidina-2,5-diona (11) Método I. Uma solução de 3-(quinolin-6-il)propanal (9, 407 g, 2,2 mol, 1,0 equiv.) em clorofórmio (CHCI3, 1.700 mL) foi arrefecida a 0°C antes de se adicionar prolina (52 G, 0,44 mol, 0,2 equiv.) e N-clorossuccinimida (NCS, 303 g, 2,31 mol, 1,05 equiv.). A mistura de reação resultante foi deixada a aquecer lentamente até à temperatura ambiente (tornou-se homogénea) agitando-se à temperatura ambiente durante a noite. A reação foi exotérmica até cerca dos 40°C quando atingiu a temperatura ambiente, tendo-se então formado um precipitado. Quando as TLC e LC/MS mostraram que a reação ficou completa, a mistura de reação foi diluída com acetato de etilo (EtOAc, 1700 mL) e a mistura resultante foi arrefecida a 0°C. O sólido foi recolhido por filtração e a massa sólida húmida recolhida foi colocada num balão e triturada com água (750 mL) . A suspensão resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min antes de os sólidos serem recolhidos por filtração. Os sólidos recolhidos foram lavados com água (250 mL) e éter metil-terc-butílico (MTBE, 500 mL) e secaram-se numa estufa a 45°C sob vácuo, até o peso se tornar constante, obtendo-se 1- (2-cloro-l-hidroxi-3-(quinolin-6-il)propil)pirrolidina-2,5-diona (11, 378,7 g, 701,3 g teóricos, 54% de rendimento) como um pó esbranquiçado. Para 11: 1HRMN (DMSO-d6, 400MHz) δ ppm 8,86 (dd, 1H, J = 4,15 Hz, 1,66 Hz), 8,33 (dd, 1H, J = 8,51 Hz, 1,04 Hz), 7,98 (d, 1H, J= 8,72 Hz), 7,85 (d, 1H, J= 1,66 Hz), 7,68 (dd, 1H, J= 8,51 Hz, 1,87 Hz), 7,51 (dd, 1H, J= 8,29 Hz, 4,15 Hz), 7,36 (d, 1H, J= 7,05 Hz), 5,28 (dd, 1H, J= 9,54 Hz, 6,85 Hz), 5,07 (dt, 1H, J= 9,75 Hz, 2,70 Hz), 3,65 (dd, 1H, J= 14,52 Hz, 2,49 Hz), 3,09 (dd, 1H, J= 14,52 Hz, 9,75 Hz), 2,64 (s, 4H) ; C16H15CIN2O3 (MW 318,75), LCMS (EI) m/e 319,2 (M+ + H) . J = 8,51 Hz, 1,87 Hz), 7,51 (dd, 1H, J = 8,29 Hz, 4,15 Hz), 7,36 (d, 1H, J = 7,05 Hz), 5,28 (dd, 1H, J = 9,54 Hz, 6,85 Hz), 5,07 (dt, 1H, J = 9,75

Hz, 2,70 Hz), 3,65 (dd, 1H, J = 14,52 Hz, 2,49 Hz), 3,09 (dd, 1H, J = 14,52 Hz, 9,75 Hz), 2,64 (s, 4H); C 16 H 15 C1N 20 3 (PM 318,75), LCMS (EI) m/e 319,2 (M + + H). Método II. Uma solução de 3-quinolin-6-ilpropanal (9, 74,8 g, 0,404 mol) em acetonitrilo (202 mL, 3,87 mol) foi arrefecida a 0°C antes de adicionar, a 0°C, L-prolina (4,70 g, 0,0404 mol, 0,10 equiv.), ácido benzóico (4,96 g, 0,0404 mol, 0,10 equiv.) e N-clorossuccinimida (NCS, 57,8 g, 0,424 mol, 1,05 equiv.) . A mistura de reação foi agitada a 0°C durante 3 h e a solução límpida resultante foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada à temperatura ambiente durante 18 h. A mistura de reação tornou-se uma suspensão espessa e a LCMS mostrou que a reação estava concluída. Adicionou-se acetato de etilo (EtOAc, 202 mL) à mistura de reação e agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante 1 h. Os sólidos foram coletados por filtração, lavados com acetato de etilo (EtOAc, 100 mL) e secos sob vácuo a 40-45°C até o peso se tornar constante, obtendo-se 1-(2-cloro-l-hidroxi-3-(quinolin-6-il)propil)pirrolidina-2,5-diona (11, 88.8 g, 128.8 g teóricoss, 69 % de rendimento) de um pó esbranquiçado idêntico, em todos os aspetos comparáveis, ao material obtido pelo Método I.

Esquema 3 (Exemplos 19-21)

Exemplo 19 Ácido benzóico 2-Fluoro-4-(7-(quinolin-6- ilmetil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il) (14)

Uma suspensão de 2-fluoro-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)-imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il)benzonitrilo (13, 277,5 g, 0,73 mol, 1,0 equiv.) em ácido clorídrico concentrado (2.500 mL) e água (250 mL) foi aquecida a 100°C (homogénea neste ponto) e agitada a cerca de 100°C durante 18 h. Quando a LC/MS indicou que a reação estava completa, a mistura de reação foi arrefecida até 70-80°C antes de ser diluída com água (2500 mL) . A mistura de reação diluída resultante foi então arrefecida até à temperatura ambiente (formas sólidas amarelas a 40 - 50°C) e depois a 0-5°C. Os sólidos foram então recolhidos por filtração, lavados com uma pequena quantidade de HC1 aquoso 1 N (100 mL) e secos num forno a vácuo a 45°C até peso constante, para se obter ácido benzóico 2-fluoro-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2- b][1,2,4]triazin-2-Il) (14, 271 g, 291,5 g teóricos, 93% de rendimento) como um pó amarelo a amarelo brilhante. Para 14: RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 9,34 (s, 1H) , 9,23 (dd, 1H, J= 5,19 Hz, 1,45 Hz), 9,08 (d, 1H, J= 8,29 Hz), 8,38 (d, 1H, J= 8,92 Hz), 8,30 (d, 1H, J= 1,24 Hz), 8,18 (dd, 1H, J = 8,72 Hz, 1,87 Hz), 8,12 (s, 1H), 8,08 - 8,00 (m, 4H) , 4,75 (s, 2H) ; C22H16CI2FN5O2 (MW 472,30), C22H14FN5O2 (base livre: MW 399, 38), LCMS (EI) m/e 400,0 (M+ + H) .

Exemplo 20 2-Fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il)benzamida (15).

Uma suspensão de ácido benzóico 2-fluoro-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)-imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il) (14, 431,4 g 0,914 mol, 1,0 equiv.) e hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tripirrolidinofosfónio (PyBOP, 570 g, 1,1 mol, 1,2 equiv.) em N,N-dimetilformamida(DMF, 3700 mL) foi tratada com uma solução de metilamina 2 M em THF (1.830 mL, 3.656 mol, 4.0 equiv.) durante 15 min à temperatura ambiente. A temperatura de reação aumentou para 30°C durante a adição de metilamina e a mistura de reação tornou-se homogénea quando a adição de metilamina ficou completa. Adicionou-se então trietilamina (TEA, 382 mL, 2,742 mol, 3,0 equiv.) à mistura de reação e a mistura de reação resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2 a 4 h. Quando a LC/MS mostrou que a reação de acoplamento estava completa, a mistura de reação foi tratada com água (950 mL) . A suspensão resultante foi arrefecida até 0-5°C num banho de gelo e agitada a 0-5°C durante 30 min. Os sólidos foram recolhidos por filtração e lavados com água (200 mL). A massa sólida húmida foi então suspensa numa mistura de água e acetonitrilo (1/1 em volume, 2.000 mL) e a suspensão resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. Os sólidos foram recolhidos por filtração, lavados com água e acetonitrilo e secos numa estufa sob vácuo a 40-45°C até peso constante, para se obter 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)Imidazo[1,2-b] [ 1,2,4]triazin-2-il)benzamida (15, 322 g, 377 g teóricos, 85,4% de rendimento) sob a forma de um pó amarelo a amarelo brilhante. Para 15: XH RMN (400 MHz, DMSO-ch) δ ppm 9,20 (s, 1H), 8,82 (dd, 1H, J= 4,05, 1,56 Hz), 8,38 (m 1, 1H), 8,27 (dd, 1H, J= 8,50 Hz, 1,25 Hz), 8, 06 - 7, 93 (m, 5H) , 7,81 -7,74 (m, 2H) , 7,49 (dd, 1H, J= 8,40 Hz, 4,35 Hz), 4,62 (s, 2H) , 2,78 (d, 3H, J= 4,36 Hz); C23Hi7FN60 (MW 412,42), LCMS (EI) m/e 413,1 (M+ + H).

Exemplo 21

Dicloridrato de 2-Fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6- ilmetil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il)benzamida (21, dicloridrato)

Uma suspensão de 2-fluoro-N-metil-4-[7-imidazolo(quinolin-6-ilmetil)[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il]benzamida (15, 421,2 g, 1,021 mol) em metanol (MeOH, 6600 mL) foi aquecida a 55°C antes de adicionar, gota a gota, a 55°C, uma solução pré-misturada de ácido clorídrico concentrado aquoso (HC1 concentrado, 37% em peso, 12 M, 420 mL, 5,10 mol, 5,0 Equiv.) em álcool isopropílico (IPA, 1510 mL) . A solução límpida resultante foi agitada a 55°C durante 30 min antes de se adicionar éter metil-terc-butílico (MTBE, 6750 mL) através de um funil adicional, durante 30 minutos. Os sólidos precipitaram lentamente após a adição de éter metil-terc-butílico. A mistura resultante foi agitada a 55°C durante mais 1 h antes de ser gradualmente arrefecida até à temperatura ambiente. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. Os sólidos foram recolhidos por filtração, lavados com éter metil-terc-butílico (MTBE, 3 x 500 mL) e secos em estufa sob vácuo a 45-55°C até peso constante. O desejado dicloridrato 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)imidazolo[1,2-b][l,2,4]triazin-2-il]benzamida (21, dicloridrato, 470,7 g, 495,5 g teóricos, 95% de rendimento) foi obtido como um sólido cristalino de cor entre esbranquiçado e amarelo claro. Para 21 (dicloridrato) : pf (decom.) 222°C; 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 9,46 (s, 1H) , 9,25 (dd, 1H, J= 5,4 Hz, 1,4 Hz), 9,12 (d, 1H, J= 8,3 Hz), 8,51 (m, 1H) , 8,47 (d, 1H, J= 0,9 Hz), 8,34 (d, 1H, J = 1,3 Hz), 8,23 (s, 1H) , 8,21 (dd, 1H, J = 9,0 Hz, 1,8 Hz), 8, 09-8,02 (m, 3H) , 7,79 (dd, 1H, J= 7,5 Hz, 8,3 Hz), 4,77 (s, 2H) , 2,78 (s, 3H, J= 4,5 Hz); 13C RMN (100 MHz, DMSO-de) δ ppm 163,4, 159, 4 (d, J= 249, 9 Hz), 145,8, 145,4, 144,5, 143,8, 140,4, 138,8, 136,8, 135,9, 135,7 (J = 8,6 Hz), 131,2 (J = 3,1 Hz), 130,7, 128,7, 128,2, 126,2 (J = 14,9 Hz), 126,0, 123,1 (J= 3 Hz), 122,5, 121,0, 114,9 (J = 5,6 Hz), 28,4, 26, 3; 19F RMN (376, 3 MHz, DMSO-de) δ ppm -113,2; C23H17FN6O (base livre, MW 412,42), LCMS (EI) m/e 413,1 (M+ + H) e 435, 0 (M+ + Na).

Esquema 4 (Exemplos 22-25)

Exemplo 22 1,2,4-triazin-3-amina (16)

Adicionou-se uma solução aquosa de glioxal (57 kg de solução aquosa a 40% em peso, 393 mol, 0,73 equiv.) a uma suspensão de bicarbonato de aminoguanidina (73 kg, 536,3 mol) em água (400 L) , à temperatura ambiente. A evolução do dióxido de carbono (CO2) começou quase imediatamente. A mistura de reação foi então agitada à temperatura ambiente durante 18 h e a evolução do gás cessou quase completamente após cerca de 2 h. A mistura de reação foi então filtrada e o filtrado foi evaporado até à secura sob baixa pressão. O residuo foi então extraído com metanol frio (MeOH, 3 x 120 L) e a solução de metanol combinada foi arrefecida até 0-5°C antes de ser filtrada para remover os sólidos residuais. O filtrado foi então concentrado sob baixa pressão, e o resíduo foi recristalizado em acetonitrilo para proporcionar 1,2,4-triazin-3-amina (16, 34 Kg, 37,76 Kg teóricos, 90% de rendimento) como agulhas brancas finas. Para 16: RMN (400 ΜΗζ, DMSO-de) δ ppm 8,54 (d, 1H, J= 2,33 Hz), 8,20 (d, 1H, J= 2,33 Hz), 7,15 (s 1, 2H).

Exemplo 23 6-bromo-l,2,4-triazin-3-amina (17)

Uma solução de 1,2,4-triazin-3-amina (16, 33 kg, 343,4 mol) em água (500 L) e acetonitrilo (300 L) foi tratada com N-bromossuccinimida (NBS, 66 kg, 370 mol, 1,08 equiv.) a 5-15°C, e a mistura de reação resultante foi agitada a 10-15°C durante 1 a 4 h. Quando as TLC e LC/MS mostraram que a reação de bromação estava completa, a mistura de reação foi tratada com uma solução aquosa de carbonato de sódio saturado (Na2C03) . A solução resultante foi então extraída com acetato de etilo (EtOAc, 3 x 500 L) . Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água (2 x 100 L), secou-se com sulfato de magnésio (MgS04) , e concentrou-se sob baixa pressão para se obter 6-bromo-l, 2,4-triazin-3-amina (17, 10,3 Kg, 60 Kg teóricos, 17,2% de rendimento) sob a forma de pós amarelos acastanhados. Para 17: 2Η RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,39 (s, 1H) , 7,47 (1, 2H) ; C3H3BrN4 (MW 174, 99), LCMS (EI) m/e 175, 0/176, 9 (M+ + H) .

Exemplo 24 2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-±l)benzonitrilo (19)

Passo 1. Uma solução de 2-fluoro-4-bromobenzonitrilo (18, 12,5 kg, 62,5 mol) em tetrahidrofurano anidro (THF, 30 L) foi tratada com uma solução de cloreto de isopropilmagnésio gerado a partir de magnésio (Mg, 1,8 kg 150 mol, 1,2 equiv.) e 2-cloropropano (7,2 Kg, 92 mol, 1,47 equiv.) em THF (20 L) e 2-(2-(dimetilamino)etoxi)-N,N-dimetiletilamina (11 Kg, 69 mol, 1,1 equiv.), à temperatura ambiente. A mistura resultante foi então agitada a 12-20°C durante mais 2 h antes de ser tratada com trimetilborato (9 Kg, 86,7 mol, 1,4 equiv.) a 10-15°C. A mistura de reação foi agitada a 7-16°C durante 40 min. Quando as TLC e LC/MS mostraram que a reação estava completa, a mistura de reação foi extinta com ácido clorídrico aquoso 1 N (HC1, 35 Kg) à temperatura ambiente. A mistura de reação aquosa extinta foi então extraída com acetato de etilo (EtOAc, 4 x 35 L) . Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água (50 L) , secou-se com sulfato de magnésio (MgS04) e concentrou-se sob baixa pressão. Os sólidos residuais foram então recristalizados a partir de acetonitrilo (20 L) e hexanos (45 L) para se obter o ácido 3-fluoro-4-cianofenilborónico bruto correspondente (5,0 Kg, 48% de rendimento).

Passo 2. Uma suspensão em ciclohexano (150 L) , de ácido borónico 3-fluoro-4-cianofenil em bruto (9,2 kg, 55,8 mol) foi tratada com pinacol (13,2 kg, 111,6 mol, 2,0 equiv.) à temperatura ambiente, e a mistura de reação resultante foi aquecida a 40°C durante 4 h. Quando as TLC e LC/MS mostraram que a reação estava completa, a mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente antes de ser lavada com água (2 x 75 L). A camada orgânica foi depois seca com sulfato de magnésio (MgSCb) e concentrou-se sob baixa pressão para proporcionar 2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l, 3,2-dioxaborolan-2-il)Benzonitrilo (19, 11,8 Kg, 13,8 Kg teóricos, 85,6% de rendimento) sob a forma de um sólido amarelo claro. Para 19: Ή RMN (300 MHz, DMSO-de) δ ppm 7,92 (t, 1H, J= 7,00 Hz), 7,62 (m, 2H), 1,29 (s, 12 H) .

Exemplo 25 4-(3-amino-l,2,4-triazin-6-il)-2-fluorobenzonitrilo (20).

Uma mistura de 6-bromo-l,2,4-triazin-3-amina (17, 100,0 g, 571,47 mmol) e 2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l, 3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (19, 145,43 g, 588,61 mmol, 1,03 equiv.) em 1,4-dioxano (1200 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 10 min antes de adicionar carbonato de potássio (K2CO3, 355, 4 g, 2572 mmol) em água (600 mL) para dar uma solução de cor vermelho escuro. A mistura foi desgaseifiçada por borbulhamento com azoto durante 10 min antes de se adicionar, à temperatura ambiente, complexo de 1,1'-bis (difenilfosfino) ferroceno dicloropaládio (II) com diclorometano (1:1) (Pd(dppf)2CI2, 14,14 g, 17,14 mmol, 0,03 equiv.). A mistura de reação resultante foi desgaseifiçada por borbulhamento com azoto durante 10 minutos, sendo depois aquecida sob azoto, a 86°C. Após 2 h, a HPLC mostrou que a reação estava completa e a mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e depois a 0-5°C através de um banho de água gelada. Adicionou-se 1,4-dioxano (400 mL) à mistura de reação arrefecida antes de se adicionar, gota a gota, uma solução aquosa de ácido clorídrico 3,3 (HC1, 1900 mL) com agitação, para ajustar o pH a 0,40-0,93. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min e filtrada. O sólido recolhido foi agitado com 1,4-dioxano (260 mL) adicionando-se então HC1 1 N (400 mL) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 10 minutos e filtrada. O filtrado foi combinado com o filtrado obtido anteriormente e lavado com acetato de etilo (EtOAc, 2 x 2 L). Os extratos combinados de acetato de etilo foram extraídos com uma solução aquosa de ácido clorídrico 1 N (HC1, 3 x 200 mL) . A solução aquosa combinada foi então tratada com carvão ativado (20 g) e agitada à temperatura ambiente durante 30 min. A mistura foi filtrada através de uma almofada de celite e o filtrado foi arrefecido a 0-5°C com um banho de água gelada. A 5-12°C, para ajustar o pH a 10,6-11,6, gota a gota, adicionou-se uma solução a 50% de hidróxido de sódio em água (NaOH, 240 mL, 4500 mmol). A mistura foi agitada a 0-5°C durante 30 min sendo depois filtrada. Os sólidos recolhidos foram lavados com hidróxido de amónio aquoso (1 para 3, de NH4OH concentrado a 28% em água, 1,900 mL) e secos sob vácuo a 40-45°C até peso constante, para obter 4-(3-amino-l,2,4-triazin-6-il)-2-fluorobenzonitrilo (20, 101,2 g, 122,9 g teóricos, 82,3% de rendimento) sob a forma de um pó esbranquiçado. Para 20: 1H RMN (400 MHz, DMS0-d6) δ ppm 8,94 (s, 1H) , 8,12 (d, 1H, J= 11,41 Hz), 8,08 - 8,00 (m, 2 H) , 7,71 (s 1, 2 H) ; CioH6FN5 (MW 215,19), LCMS (EI) m/e 215,9 (M+ + H) .

Esquema 5 (Exemplo 26)

Exemplo 26 2-fluoro-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[l,2-b][1,2,4]triazin-2-il)benzonitrilo (13).

Passo 1. Um reator de 22 L equipado com um agitador mecânico, um par termoelétrico, um aparelho de destilação e uma entrada de azoto foi purgado com azoto antes de carregar o reator com 4-(3-amino-l,2,4-triazin-6-il)-2-fluorobenzonitrilo (20, 300 g, 1,39 mol), 1-(2-cloro-l-hidroxi-3-(quinolin-6-il)propil)pirrolidina-2,5-diona (11, 635 g, 1,99 mol, 1,43 equiv.) e etilenoglicol (3,0 L) , à temperatura ambiente. A mistura de reação resultante foi aquecida a 130-140°C com borbulhamento continuo de azoto. O destilado foi recolhido com o aparelho de destilação. Após 3 a 4 h, a HPLC indicou que a reação estava completa (presença de <1,5% de material de partida 20). A mistura de reação foi gradualmente arrefecida até à temperatura ambiente. Durante 60 min, com agitação, adicionou-se ao reator uma solução aquosa de carbonato de sódio a 2,5% (Na2CC>3, 14,1 L) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1-2 h. A mistura foi então filtrada e o sólido foi lavado com água (9,6 L) e seco sob vácuo para dar o produto bruto desejado (13, 980,4 g) , que foi combinado com outros lotes para purificação, como se descreve abaixo.

Passo 2. Uma solução do produto em bruto (13, 2,754 g) em cloreto de metileno (CH2CI2, 37,8 L) e metanol (0,54 L) foi tratada com sílica gel (S1O2, 2.700 g) à temperatura ambiente, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 90 min. A mistura foi filtrada e o bolo de filtração foi lavado com uma mistura de CH2CI2 (18 L) e metanol (0,26 L). Os filtrados combinados foram tratados com sílica gel (S1O2, 1.800 g) e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 90 min sendo depois filtrada. O bolo de filtração foi lavado com uma mistura de CH2CI2 (18 L) e metanol (0,26 L). Os filtrados combinados foram concentrados sob baixa pressão entre 20 e 60°C até cerca de 8-12 L. O residuo foi tratado em porções com uma mistura de isopropanol (IPA) e água (1:1, 9 L) e a destilação continuou a uma pressão de 1 atm até a temperatura atingir 68-75°C. A mistura foi arrefecida até à temperatura ambiente e os sólidos foram recolhidos por filtração. Os sólidos recolhidos foram lavados com isopropanol (IPA, 3, 6 L) e secos sob vácuo a 40-45°C até peso constante, para se obter 2-fluoro-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b] [1,2,4]triazin-2-il) benzonitrilo puro (13, 940,27 g) como um pó amarelo vivo. O processo de reação e purificação acima descrito deu o produto 13 com um rendimento de 59 a 64%. Os dados espectroscópicos do composto 13 resultante deste processo de sintese revelaram-se idênticos aos obtidos a partir de material feito por cianação do composto 12, anteriormente descrito. Para 13: XH RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9,24 (s, 1H) , 8,81 (dd, 1H, J= 4,15, 1,66 Hz), 8,26 - 8,12 (m, 4H) , 8,02 (s, 1H) , 7,95 - 7, 93 (m, 2H) , 7,76 (dd, 1H, J = 8,71, 2,08 Hz), 7,47 (dd, 1H, J = 8,70,4,15 Hz), 4,62 (s, 2H) ; C22H13FN6 (MW 380,38), LCMS (EI) m/e 381,0 (M++ H) .

Esquema 6 (Exemplo 27-29)

Exemplo 27 Ácido benzóico 2-fluoro-4-(7-(quinolin-6- ilmetil)imidazo[l,2-b][1,2,4]triazin-2-il) (14).

Carregou-se um reator de 22 L equipado com um agitador mecânico, um par termoelétrico e uma entrada de azoto, com o composto 13 (900 g, 2,37 mol) , água (0,9 L) e HC1 concentrado (9,1 L) à temperatura ambiente. A mistura de reação resultante foi aquecida a 100°C durante 12 h. Quando a HPLC mostrou que a reação estava completa, a mistura de reação foi arrefecida a 90°C e adicionou-se água (4,9 L) durante 15 min enquanto se mantinha a temperatura entre 65 e 90°C. A mistura de reação foi ainda arrefecida até à temperatura ambiente e agitada à temperatura ambiente durante 3 h. Os sólidos foram recolhidos por filtração, lavados com água (1,2 L) e secos sob vácuo a 40-45°C até peso constante, para se obter ácido benzóico 2-fluoro-4- (7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il) (14, 945 g, 946,5 g teóricos, rendimento de 99,8%) sob a forma de um sólido amarelo claro, que se revelou idêntico ao material produzido por um método anterior. Para 14: 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 9,34 (s, 1H) , 9,23 (dd, 1H, J= 5,19 Hz, 1,45

Hz), 9,08 (d, 1H, J = 8,29 Hz), 8,38 (d, 1H, J= 8,92 Hz), 8,30 (d, 1H, J= 1,24 Hz), 8,18 (dd, 1H, J= 8,72 Hz, 1,87

Hz), 8,12 (s, 1H), 8,08-8,00 (m, 4H), 4,75 (s, 2H); C22H16CI2FN5O2 (MW 472,30), C22H14FN5O2 (base livre: MW 399, 38), LCMS (EI) m/e 400,0 (M+ + H) .

Exemplo 28 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il)benzamida (15). Método A. À temperatura ambiente, a uma solução sob agitação de ácido benzóico 2-fluoro-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)-imidazo [1,2-b] [1,2,4] triazin-2-il) (14, 1000 g, 2,12 mol) em acetonitrilo (5 L) e CH2CI2 (10 L) foram adicionados HOBt (358 g, 2,65 mol, 1,25 equiv.) e cloridrato de EDC (508,4 g, 2,65 mol, 1,25 equiv.)· Adicionou-se depois outra porção de CH2CI2 (10 L) à mistura de reação e a mistura de reação resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 20 min. Mantendo a temperatura a 15-30°C, com agitação, adicionou-se uma solução 2,0 M de metilamina (MeNfo) em THF (3,44 L, 6,88 mol, 3,25 equiv.) . A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h antes de adicionar uma porção adicional de solução de metilamina 2,0 M (MeNEb) em THF (1,06 L, 2,12 mol, 1 equiv.). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante lhe adicionou-se uma segunda porção de cloridrato de EDC (406 g, 2,12 mol, 1 equiv.), continuando a agitação durante 6 h. Quando a HPLC mostrou que restava menos de 1% do material de partida (14), a mistura de reação foi concentrada sob baixa pressão a < 50°C. Durante a destilação adicionou-se acetonitrilo (20 L) e a destilação continuou até que o volume remanescente atingisse cerca de 20 L. 0 residuo foi tratado com uma solução aquosa de carbonato de sódio a 2,5% (Na2CC>3, 40 L) e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min. Os sólidos foram recolhidos por filtração, lavados com água (3 x 4,0 L), secos com ar aplicando vácuo ao filtro, para obter o produto desejado em bruto (15). Os sólidos em bruto foram tratados com CH2CI2 (17,6 L) e MeOH (5,2 L) à temperatura ambiente e a mistura resultante foi agitada até se obter uma solução clara. A solução foi filtrada para remover os materiais insolúveis. Com agitação vigorosa, adicionou-se uma solução aquosa de carbonato de sódio a 2,5% (Na2C03, 17,6 L) ao filtrado e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 60 min para fornecer uma suspensão. Adicionou-se heptano (20 L) e a mistura foi agitada durante mais 60 min. A mistura foi filtrada e os sólidos foram lavados sequencialmente com água (3 x 4,0 L) e heptano (4,0 L) e secos sob vácuo para dar 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetilo)imidazo[1,2— b] [1,2,4]triazin-2-il)benzamida (15, 1095, 3 g, 874,3 g teóricos) como um sólido amarelo claro, que se verificou não estar totalmente seco e conter ~ 25% de solventes residuais. Este sólido húmido foi utilizado diretamente para na reação de formação do subsequente sal dicloridrato (21), sem secagem adicional. Uma pequena amostra foi seca completamente para análise espectroscópica e os dados foram consistentes com os obtidos pelo método anterior: Para 15: 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 9,20 (s, 1H) , 8,82 (dd, 1H, J = 4,05, 1,56 Hz), 8,38 (m 1, 1H), 8,27 (dd, 1H, J = 8,50 Hz, 1,25 Hz), 8,06 -7,93 (m, 5H) , 7,81 - 7,74 (m, 2H) , 7,49 (dd, 1H, J= 8,40 Hz, 4,35 Hz), 4,62 (s, 2H) , 2,78 (d, 3H, J= 4,36 Hz); C23Hi7FN60 (MW 412,42), LCMS (EI) m/e 413,1 (M+ + H) . Método B. A dicloridrato de ácido 2-fluoro-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)-imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il] benzóico (14,

50,00 G, 0,1059 mol) adicionou-se tolueno (300 mL) e cloreto de tionilo (SOCI2, 77,2 mL, 1,06 mol, 10,0 equiv.) à temperatura ambiente. A mistura de reação resultante foi aquecida a 72 °C sob atmosfera de N2 e a reação foi seguida de análise por HPLC do desaparecimento do material de partida, o ácido benzóico (14) . Após 48 h, a HPLC indicou ~4% de material de partida remanescente e a reação foi interrompida. A mistura de reação foi concentrada até à secura por destilação a vácuo a 40-50°C. Os sólidos residuais foram adicionados a tolueno (300 mL) e o solvente foi removido por destilação a vácuo a 40-50°C. Adicionou-se THF (250 mL) e a mistura foi arrefecida com um banho de água gelada. Adicionou-se, gota a gota, metilamina 2,0 M (MeNíb) em THF (529 mL, 1,06 mol, 10 equiv.). A mistura de reação resultante foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada à temperatura ambiente durante 17 h. Adicionou-se água (600 mL) à mistura de reação e o THF (400 - 500 mL) foi removido por destilação a vácuo, a 40°C. Adicionou-se carbonato de sódio (15,60 g, 0,147 mol) e agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 30 min. A mistura foi filtrada e os sólidos foram lavados com água (3 x 30 mL) e seco. Dissolveram-se os sólidos em cloreto de metileno pré-misturado (CH2CI2, 1.000 mL) e em metanol (MeOH, 300 mL) . Sob agitação vigorosa, adicionou-se, gota a gota, uma solução de 0,236 M de carbonato de sódio (Na2CC>3 em água (1.000 mL) . O sólido precipitou lentamente após adição de uma solução aquosa de carbonato de sódio (Na2CC>3) · Sob agitação, adicionou-se depois hexano (1000 ML), gota a gota. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 a 40 minutos e os sólidos foram recolhidos por filtração. Os sólidos recolhidos foram lavados com água (3 x 200 mL) e secos sob vácuo a 40-50°C até peso constante para obter 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2— b] [ 1,2,4]triazin-2-il)benzamida (15, 42,2 g, 43, 67 g teóricos, rendimento de 96,6%) como um sólido amarelo vivo, que se verificou, em todos os aspetos comparáveis, ser idêntico ao material produzido pelo Método A. Para 15: RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 9,20 (s, 1H) , 8,82 (dd, 1H, J = 4,05, 1,56 Hz), 8,3 8 (m 1, 1H) , 8,27 (dd, 1H, J = 8,50 Hz, 1,25 Hz), 8,06 - 7, 93 (m, 5H) , 7,81-7,74 (m, 2H) , 7,49 (dd, 1H, J= 8,40 Hz, 4,35 Hz), 4,62 (s, 2H) , 2,78 (d, 3H, J= 4,36 Hz); C23H17FN6O (MW 412,42), LCMS (EI) m/e 413,1 (M+ + H) .

Exemplo 29 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[l,2- b] [1,2,4] triazin-2-il)benzamida dicloridrato (21, dicloridrato)

Carregaram-se 2-Fluoro-N -metil-4-(7-(quinolin-6- ilmetil)imidazo[1,2- b] [ 1,2,4]triazin-2-il) benzamida (15, 2100 g, contendo -25% de solventes residuais) e água USP filtrada (7,6 L) num reator de 50 L à temperatura ambiente. Com agitação, adicionou-se uma solução de ácido clorídrico aquoso 6 M (HC1, 3 L) com um funil adicional. A mistura de reação resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 h. Adicionou-se acetona (30,5 L) ao reator, com agitação durante lhe agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante 2,5 h. Os sólidos foram recolhidos por filtração, lavados com acetona (2 x 4,3 L) e secos a vácuo até peso constante, para se obter 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2-b] [1,2,4] triazin-2-il) benzamida (21, dicloridrato, 1629,2 g, 1830,6 g teóricos, 89%) como um pó cristalino amarelado pálido, que se verificou ser idêntico, em todos os aspetos comparáveis, ao material obtido pelo método anterior. Para 21 (dicloridrato): 3H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9,46 (s, 1H) , 9,25 (dd, 1H, J= 5,4 Hz, 1,4 Hz), 9,12 (d, 1H, J= 8,3 Hz), 8,51 (m, 1H) , 8,47 (d, 1H, J= 0,9 Hz), 8,34 (d, 1H, J= 1,3 Hz), 8,23 (s, 1H) , 8,21 (dd, 1H, J= 9,0, 1,8 Hz), 8, 09 - 8,02 (m, 3H) , 7,79 (dd, 1H, J= 7,5, 8,3 Hz), 4,77 (s, 2H), 2,78 (s, 3H, J=4,5 Hz); 13C RMN (100 MHz, DMSO-de) δ ppm 163,4, 159, 4 (d, J= 249,9Hz), 145,8, 145,4, 144,5, 143,8, 140,4, 138,8, 136,8, 135,9, 135,7 (J= 8,6 Hz), 131,2 (J = 3,1 Hz), 130,7, 128,7, 128,2, 126,2 (J= 14,9 Hz), 126, 0, 123, 1 [J= 3 Hz), 122,5, 121,0, 114,9 (J= 5,6 Hz), 28,4, 26, 3; 19F RMN (376, 3 MHz, DMS0-d6) δ ppm -113,2; C23H17FN6O (base livre, MW 412,42), LCMS (EI) m/e 413,1 (M+ + H) e 435, 0 (M+ + Na).

Exemplo 30

Caracteristicas fisicas do sal dicloridrato de 2-fluoro-N-metil-4-(7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[l,2-b][1,2,4]triazin-2-il) benzamida (21) 0 sal de ácido dihidroclórico é um pó branco sujo a amarelo claro, como se confirmou por inspeção visual contra um fundo branco.

Exemplo 31

Estudo de Solubilidade

Verificou-se que a 25°C, a solubilidade do dicloridrato (21, Ver Exemplo 21), era aproximadamente 4,9 mg/mL em água; 0,002 mg/mL em tampão de pH 7,4; 0,002 mg/mL em tampão de pH 8,0; e aproximadamente 24 mg/mL em HC1 aquoso 0,1 N. A solubilidade em equilíbrio foi determinada misturando a amostra nos solventes aquosos selecionados (HC1 0,1 N, água, tampão pH 7,4 e tampão pH 8,0) durante pelo menos 12 horas. A concentração da amostra foi então determinada por HPLC usando uma calibração de ponto único.

Exemplo A

Ensaios In Vitro da enzima cinase c-Met A 2-Fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil) imidazolo[1,2-b][1,2,4]triazin-2-il]benzamida foi rastreada in vitro relativamente à sua capacidade de inibir a atividade da cinase c-Met. 0 valor da CI50 para a inibição de c-Met cinase foi determinado como se descreve na literatura, com algumas modificações ( (Wang, X. et al, Mol. Câncer Ther. 2003, 2(11):1085-1092; Calic, M.et al., Croatica Chemical ACTA. 2005, 78(3):367-374). Resumidamente, no ensaio utilizou-se a proteina de fusão do dominio catalítico c-Met marcada com histidina (Invitrogen, # PV3143). As avaliações da CI50 foram realizadas com base no grau de fosforilação da poli-Glu-Tir (Sigma-Aldrich, # P0275) que revestiu (0. 01 mg/por poço) microplacas de 96 poços (R&amp;D Systems, # DY990). A reação foi realizada numa solução de 50 yL contendo 50 mM de HEPES (pH 7,5), 10 mM de MnCl 2, lOmM de MgC2, 0,5 de DTT, 100 μΜ de Na3V04, 5 pM de ATP (Cell Signaling Technology, # 9804) e diluições em série do composto de teste. A reação durou 25 minutos a 30°C. Após a conclusão da reação, os conteúdos das placas foram descartados. As placas foram então lavadas com TBS-T (250 yL/poço, 5x) sendo depois bloqueadas com TBS-T contendo 1% de BSA, durante 2 horas. O conteúdo das placas foi descartado e 100 yL (por poço) de anticorpo anti-fosfotirosina marcado com peroxidase (Sigma, # A5964) diluido (1:60, 000) em 1% de BSA contendo TBS-T, foram então adicionados e incubados durante 1 hora. As placas foram lavadas com TBS-T (250 yL/poço, 5x) seguindo-se a reação coloração usando 100 yL (mistura 1:1) de H2O2 e tetrametilbenzidina (R&amp;D Systems, # DY999). A reação foi interrompida em minutos com 100 μΐ de 2 NH2SO4. A densidade ótica foi medida imediatamente usando um leitor de microplacas a 450 nm com correção de comprimento de onda a 540 nm. Os valores da CI50 foram calculados com o programa GraphPad Prism. Determinou-se o intervalo linear (isto é, o periodo de tempo durante o qual a aliquota se manteve equivalente à taxa inicial) para a cinase e as determinações da CI50 foram realizadas dentro deste intervalo.

Wang, X., et al. Inibidores potentes e seletivos do recetor Met [recetor do fator de crescimento de hepatócitos/fator de dispersão (HGF/SF)] bloqueio de tirosina quinase crescimento e invasão de células tumorais induzidas por HGF/SF. Mol. Câncer Ther. 2003, 2(11):1085-1092.

Calic, M., et al. Flavonoides como inibidores das cinases Lck e Fyn. Croatica Chemica ACTA. 2005, 78(3):367-374. A 2-Fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)imidazolo[1,2— b] [1,2,4]triazin-2-il] benzamida apresentou uma CI50 inferior a 500 nM. Ver, por exemplo, US Ser. N° 11/942,130.

Exemplo B

Ensaios de Proliferação/Sobrevivência Celular

As linhas celulares representativas de vários cancros humanos (SNU-1 e SOL-5 gástricos, A549 e NCI-H441 do pulmão, U-87 de glioblastoma, HT-29 do cólon, 786-0 do rim, PC-3 do pâncreas) podem ser obtidas em American Type Culture Collection, podendo ser rotineiramente mantidas nos meios de cultura e nas condições recomendadas pela ATCC. A densidade celular ideal utilizada no ensaio de proliferação/sobrevivência pode ser predeterminada para linhas celulares individuais. Os compostos são pesquisados quanto à sua capacidade para inibir a proliferação/sobrevivência de células, e determinaram-se os valores da CI50. Abaixo, apresentam-se os protocolos de amostra para testes de proliferação/sobrevivência de células SNU-5 e SNU-1. As células SNU-5 e SNU-1 são semeadas em placas de cultura celular de 96 poços, respetivamente, a 4000 células/poço e a 2000 células/poço, em meios apropriados contendo 2% de FBS e suplementadas com diluições em série dos compostos individuais, num volume final de 100 pL/poço. Após 72 horas de incubação, adiciona-se a cada poço, 24 pL do reagente CellTiter 96® AQueous One Solution (Promega, # G3581) (concentração final=333 pg/mL) e as placas são incubadas durante mais duas horas, numa incubadora a 37°C. A densidade ótica é medida em intervalos lineares através de um leitor de microplacas a 490 nm com correção de comprimento de onda a 650 nm. Os valores Cl 50 são calculados com o software GraphPad Prism. Para ensaios de proliferação usando células A549, NCI-H441, U-87, HT-29, 786-0 e PC-3, as células são primeiro privadas de alimento durante 48 horas em baixas condições séricas (0,1-0,5% de FBS em meios de cultura apropriados), sendo depois tratadas com diferentes concentrações de compostos, durante 2 horas. Depois das células serem tratadas com FCH (50 ng/mL) (R&amp;D, # 294-HGN) durante 24 horas, adiciona-se o reagente CellTiter 96® AQueous One Solution e as placas são incubadas durante 2 horas. Os resultados são gravados com um leitor de placas.

Exemplo C

Testes celulares de Fosforilação da c-Met 0 efeito inibidor dos compostos sobre a fosforilação da c-Met em linhas celulares relevantes (SNU-5 do estomago, A549 e NCI-H441 do pulmão, U-87 de glioblastoma, HT-29 de cólon, 786-0 de rim e linhas celulares PC-3 do cancro pancreático e linhas celular HUVEC) pode ser avaliado utilizando a análise de imunotransferência e ensaios de fosforilação c-Met baseados em ELISA. As células são cultivadas em meios de cultura apropriados e tratadas com várias concentrações de compostos individuais. Para as células SNU-5, HT-29, 786-0, as células são cultivadas em meios apropriados suplementados com FBS a 0,2% ou 2% e tratadas com compostos durante 3-4 horas. Os extratos de proteínas de células inteiras são preparados utilizando reagentes e um protocolo (# FNN0011) da Biosource International, com pequenas modificações. Em resumo, extractos de proteína são transformados, a 4°C, por incubação em tampão de lise com inibidores de protease e de fosfatase [HEPES 50 mM (pH 7,5), NaCllOO mM, MgCl2 1,5, glicerol 10%, Triton X-100 1%, ortovanadato de sódio 1 mM, fluoreto de sódio mM, aprotinina (2 pg/mL), leupeptina (2 pg/mL), pepstatina A (2 pg/mL) e fluoreto de fenilmetilsulfonilo (1 mM) ] . Os detritos celulares são eliminados dos extratos de proteínas através centrifugação a 14 000 xg durante 20 minutos. As células A549, H441, U-87 e PC-3, são privadas de soro (0,2% de FBS) durante pelo menos 24 horas, sendo depois pré-tratadas com várias concentrações de compostos durante 1 hora. Os extratos de células inteiras são preparados depois de as células serem tratadas com FCH (50 ng/mL) durante 10 minutos.

Análise por imunotransferência

Os anticorpos relevantes são obtidos a partir de fontes comerciais: os anticorpos policlonais de coelho incluiam c-Met anti-humana (Santa Cruz Biotechnology, # sc-161) e c-Met antifosforilada (Biosource International, pY1230/4/5 e pY1003). Para a imunotransferência, 10 a 20 pg de extratos de proteínas provenientes de tratamentos individuais são tratadas por eletroforese em gel SDS-PAGE a 10%, e removidos por eletro-transferência para uma membrana de nitrocelulose (ou de PVDF). A membrana é bloqueada em PBS contendo 3% de leite e 0,1% de Tween-20 durante 1 hora, sendo depois incubada com anticorpos primários anti-c-Met, durante 1 hora, numa solução de bloqueio. Após 3 lavagens, a membrana é incubada com os apropriados anticorpos secundários conjugados com rábano, durante 1 hora. Após a lavagem final, a mancha é incubada durante 5 minutos com reagente de deteção de quimioluminescência e exposta a uma pelicula de raios-X. As imagens são digitalizadas, quantificadas e corrigidas com c-Met total e calculam-se os valores de Ciso. Os compostos com valores de CI50 de 10 μΜ ou inferiores são considerados ativos.

ELISA

Analisaram-se extratos de proteina celular utilizando um kit de fosfo-c-Met humano ELISA de acordo com as instruções do fabricante (R&amp;D Systems, # DYC2480). As quantidades ideais de extratos de proteínas são predeterminadas para linhas celulares individuais. Resumidamente, neste ensaio, quantidades apropriadas de extratos de proteínas são capturadas com um anticorpo de captura anti-humano c-Met, durante 2 horas, numa microplaca de 96 poços. Após as lavagens, adicionou-se um anticorpo de deteção (anticorpo anti-fosfotirosina conjugado com HRP) e incubou-se durante 2 horas. Após lavagens adicionais, adicionam-se a cada poço 100 pL de uma solução de substrato (mistura 1:1 de H2O2 e de tetrametilbenzidina) e durante desenvolvimento da cor, a reação é parada com 2 N H2SO4, durante uma quantidade de tempo apropriada. A densidade ótica é medida no intervalo linear utilizando um leitor de microplacas a 450 nm com correção de comprimento de onda a 540 nm. Os valores da CI50 são calculados com o software GraphPad Prism.

Lisboa, 9 de outubro de 2017

Claims (21)

REIVINDICAÇÕES

1. Um sal que é sal de ácido dihidroclorídrico 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2- b][1,2,4]triazin-2-il] benzamida, ou um seu hidrato ou solvato.

2. 0 hidrato de acordo com a reivindicação 1, que é caracterizado por apresentar um ponto de fusão entre 220 e 224°C, de preferência 222°C.

3. O hidrato de acordo com a reivindicação 2, que é cristalino.

4. O hidrato de acordo com a reivindicação 2, com um termograma DSC que é caracterizado por um pico endotérmico a 222°C, ou um termograma DSC substancialmente como mostrado na Figura 2, ou um TGA substancialmente como mostrado na Figura 3.

5. O hidrato de acordo com a reivindicação 2, apresentando um padrão de difração de raios X de pó que compreende picos caracteristicos expressos nos graus 2Θ a 26,0, 24,7, 18,2, 29, 3 e 7,8.

6. Um sal que é sal do ácido dibenzenosulfónico 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6-ilmetil)imidazo[1,2- b][1,2,4]triazin-2-il] benzamida, ou um seu hidrato ou solvato.

7. O sal de acordo com a reivindicação 6, em que o referido sal é anidro.

8. 0 sal de acordo com a reivindicação 6, que é caracterizado por um ponto de fusão entre 268 a 272°C, de preferência 270°C.

9. 0 sal de acordo com a reivindicação 6, que é cristalino.

10. O sal de acordo com a reivindicação 9, possuindo um termograma DSC que é caracterizado por um pico endotérmico a 270°C, ou um termograma DSC substancialmente como mostrado na Figura 5.

11. O sal de acordo com a reivindicação 6, possuindo um padrão de difração de raios X de pó que compreende picos caracteristicos expressos nos graus 2Θ a 15,0, 16,3, 18,3, 20,2, 23, 8 e 4,9.

12. Uma composição compreendendo o sal, ou um seu hidrato ou solvato, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-11 e pelo menos um veiculo farmaceuticamente aceitável.

13. O sal de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-11, ou um seu hidrato ou solvato, para utilização no tratamento de uma doença associada à desregulação da via de sinalização FCH/c-MET, em que a referida doença é de preferência cancro, aterosclerose, fibrose pulmonar fibrose renal e regeneração, doença hepática, doenças alérgicas, doenças inflamatórias, doenças autoimunes, doença cerebrovascular, doença cardiovascular ou doença associada ao transplante de órgãos, mais preferencialmente cancro da bexiga, cancro da mama, cancro do colo do útero, colangiocarcinoma, cancro colorretal, cancro do esófago, cancro gástrico, cancro da cabeça e pescoço, cancro do rim, cancro do fígado, cancro do pulmão, cancro da nasofaringe, cancro do ovário, cancro do pâncreas, cancro da próstata, cancro da tireoide, osteossarcoma, sarcoma sinovial, rabdomiossarcoma, HFM/fibrossarcoma, leiomiossarcoma, sarcoma de Kaposi, mieloma múltiplo, linfoma, leucemia de células T adultas, leucemia mieloide aguda, leucemia mielóide crónica, glioblastoma, astrocitoma, melanoma, mesotelioma ou tumor de Wilm.

14. Um processo de preparação do hidrato de acordo com a reivindicação 2, que compreende: a) fazer reagir uma primeira mistura compreendendo 2-fluoro-N-metil-4-[7-(quinolin-6- ilmetil)imidazo[1,2-b][l,2,4]triazin-2-il] benzamida e água com pelo menos dois equivalentes de ácido clorídrico, num solvente compreendendo água, para formar uma segunda mistura; e b) combinar a segunda mistura com éter metil-terc-butílico.

15. Um processo de preparação de um composto de Fórmula I:

ou de um seu sal; compreendendo a reação de um composto de Fórmula II:

com um composto de Fórmula III:

para formar um composto de Fórmula I, ou um seu sal; em que Xi é cloro, bromo ou iodo.

16. Um processo para a preparação de um composto de Fórmula V e dos seus sais

compreendendo (a) fazer reagir um composto de Fórmula II:

Em que Xi é cloro, bromo ou iodo, com um composto de Fórmula III:

para formar um composto de Fórmula I, ou um seu sal; e

(b) fazer reagir o referido composto de Fórmula I, ou um seu sal, com ácido clorídrico concentrado para formar um composto de Fórmula IV ou um seu sal; e

(c) fazer reagir o composto de Fórmula IV, ou um seu sal, com CH3 NH2 na presença de pelo menos um agente de acoplamento para formar um composto de Fórmula V:

ou um seu sal, em que o referido agente de ligação é selecionado a partir de l-etil-3- (3-dimetilaminopropil)carbodiimida, N-hidroxibenzotriazole, hexaflurofosfato de (benzotriazol-l-iloxil) tripirrolidinofosfónio e os seus sais, ou (d) (i) fazer reagir o composto de Fórmula IV ou um seu sal,

Com um agente halogenante, para formar um composto de Fórmula VI ou um seu sal;

em que X2 é halogénio e o referido agente de halogenação é de preferência cloreto de tionilo; e (d) (ii) fazer reagir o referido composto de Fórmula VI, ou um seu sal, com CH3NH2, para formar um composto de Fórmula V ou um seu sal.

17. 0 processo de acordo com a reivindicação 15 ou a reivindicação 16, compreendendo ainda a preparação do composto de Fórmula II:

através de um processo que compreende a reação de um composto de Fórmula lia:

com um composto de Fórmula Ilb:

durante um tempo adequado para preparar um composto de Fórmula II, em que Xi é cloro, bromo ou iodo, de preferência na presença de prolina, em que o processo compreende de preferência ainda os passos de: preparação do composto de Fórmula lia:

por um processo que compreende a reação de um composto de Fórmula IIc:

com prop-2-en-l-ol na presença de um catalisador de paládio e de uma base; em que X3 é cloro, bromo ou iodo, ou preparação do composto de Fórmula lia:

por um processo que compreende a reação de um composto de Fórmula Ild:

com um ácido de fórmula HX'; em que X' é cloro, bromo ou iodo.

18. Um processo de acordo com a reivindicação 17, compreendendo ainda a preparação de um composto de Fórmula Ild:

por um processo que compreende a redução de um composto de Fórmula lie:

com hidrogénio gasoso na presença de paládio sobre carbono, em que o referido processo preferencialmente compreende adicionalmente a preparação de um composto de Fórmula lie por um processo compreendendo a reação de um composto de Fórmula IIc com um composto de Fórmula Hf:

na presença de acetato de paládio e Cul e uma base; ou de preferência compreende ainda a preparação de um composto de Fórmula Ild:

por um processo que compreende a reação de um composto de Fórmula Ilg:

com 9-borabiciclo[3.3.1]nonano, seguida da reação com um composto de Fórmula IIc:

na presença de diacetato de paládio (II) para formar o composto de Fórmula Ild; em que X3 é cloro, bromo ou iodo.

19. 0 processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 15 a 18, compreendendo ainda a preparação do composto de Fórmula III por um processo que compreende a reação de um composto de Fórmula Illa:

com um composto de Fórmula Illb:

na presença de um catalisador de paládio e de uma base; em que: X4 é cloro, bromo ou iodo; e cada Ra é, independentemente, Ci-6 alquilo; ou cada Ra, em conjunto com os dois átomos de oxigénio e o átomo de boro formam um anel heterociclico de 5 ou 6 membros; em que o referido anel heterociclico é opcionalmente substituído por 1, 2, 3 ou 4 grupos Ci-4 alquilo independentemente selecionados, de preferência, em que o composto de Fórmula Illb tem a fórmula IIIb-1:

compreendendo o referido processo, ainda mais preferencialmente, a preparação do composto de Fórmula IIIb-1 por um processo que compreende: a) fazer reagir um composto de Fórmula IIIc:

um reagente de fórmula RiMgY, seguido de reação com um composto de fórmula geral B(OR2)3 para formar um composto de Fórmula Illd:

e b) após a reação do passo a), fazendo reagir o composto de Fórmula Illd com um ácido, seguido por reação com pinacol para formar o composto de Fórmula IIIb-1; em que: Ri é Ci-6 alquilo; cada R2 é, independentemente, C1-6 alquilo; e X5 é cloro, bromo ou iodo.

20. O processo de acordo com a reivindicação 19, compreendendo ainda a preparação do composto de Fórmula Illa por reação de 1,2,4-triazina-3-amina com um agente halogenante.

21. Um composto de Fórmula III:

ou um seu sal, ou um composto de Fórmula II:

em que Xi é cloro, iodo ou bromo. Lisboa, 9 de outubro de 2017