TWI335332B

TWI335332B - Cross-linked vancomycin-cephalosporin antibiotics

Info

Publication number: TWI335332B
Application number: TW091123091A
Authority: TW
Inventors: Fatheree Paul; S Linsell Martin; D Long Daniel; Marquess Daniel; J Moran Edmund; B Nodwell Matthew; Derek Turner S; Aggen James
Original assignee: Theravance Inc
Priority date: 2001-10-12
Filing date: 2002-10-07
Publication date: 2011-01-01
Also published as: US20080108558A1; JP2009040795A; MXPA04003273A; HK1066007A1; EA200400530A1; HU230158B1; ES2254738T3; SK2052004A3; US7601690B2; US7341993B2; CN1568325A; HRP20040243A2; US20080194464A1; UA80098C2; US7649080B2; DE60208404D1; NZ531576A; US7553962B2; US6974797B2; YU29504A

Description

1335332

發明背景發明節.If) 本發明係專注於用作抗生素之新穎交聯之萬古黴素頭孢子黴素化合物。本發明也專注於含有這些化合物之醫藥 ’且σ物，使用這些化合物作為抗細菌劑之方法及製備這些化合物之方法和中間物。發展現況 ' 在本技藝中已知各種抗生素化合物種類，例如，Ρ内醯胺抗生素（如頭孢子黴素）及糖肽抗生素（如萬古黴素在本技藝中也已知交聯之抗生素化合物。例如，參考頒予w L.楚以德（Truett)及以“抗生素及製備方法（Antibi〇tics and Process for Preparation)”為標題之美國專利申請案第 5,693,791號，在1999年12月16曰發表及以“新穎抗細菌劑 (Novel An-ribacterial Agent)’’為標題之 WO 99/64049 A1。三不論這些化合物’仍對具有改進特性之新抗生素有需求 ’包括以貫例說明的增加抗革蘭氏陽性菌之效力。仍對具有非常有效的抗耐抗生物素菌株的新穎.抗生素特別有需求，如耐二甲氧笨青黴素之金黃色葡萄球菌（MRSA)及耐二甲氧苯青黴素之白色表皮葡萄球菌（MRSE)。本發明的概述本發明係提供用作抗生素之新穎交聯之萬古黴素-頭抱子徽素化合物。在其它的特性之中，頃發現本發明的化合 -物具有驚訝及意外的抗革蘭氏陽性細菌之效力，包括耐二甲氧笨青黴素之金黃色葡萄球菌（MRSA)及耐二甲氧笨青 012581 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4规格(210X297公#)

裝訂

線T \ 1335332 A7 B7

1335332 五、發明説明（3 立選自以之取代基取代；

Ya&YbS獨立是c伸烧基， A Μ « * 及在w係環伸烷基、伸芳基或雜伸方基時，則Ya及Yb係獨 ^ ^ ^ ^ , 司立選自由共價鍵及（：丨_5伸烷基所構成的鲆組，其中將每— 獨立選自·⑽、视V c〇Rd /Μ基視需要以1至3個之取代基取代； 2、.C(〇)NHV 及 _S(0)2NRdRe r2係氫或cK6炫基； c 係獨立選自由Cl·6烷基、k彿基、C2_6炔基、 3-6展烷基、C6.1〇芳基、C2.9雜芳基、CM雜環系基及^所構成的群組，或將兩個鄰接的R3基接合，以形成“伸烧基或-〇-(Cw伸烷基）_〇_，其中將每一個烷基、伸烷基、稀基及块基視需要以⑴個獨立選自由^RC所構成的群組之取代基取代，並將每一個芳基、環烧基、雜芳基及雜環系基視需要以1至3個獨立選自由構成的群組之基取代；每一個Ra係獨立選自由-0Rd、i基、-SRd、_s(0)Rd、 -S(0)2Rd、-S(〇)2〇Rd、_s(〇)2NRdRe、_NRdRe、_c〇戊d、 -0C(0)Rd ^ -C(0)NRdRe , -NRdC(0)Re ^ -OC(〇)NRdRe . -NRdC(0)0Re、-NRdc(〇)NRdRe、-CF3及 _〇CF3所構成的蛘組；每一個Rb係獨立選自由Ci·6烷基、CM烯基、Cw炔基及 Ram構成的群組； Λ 每一個RC係獨立選自由C3.6環烷基、<：6·10芳基、C2 9雜芳基及C3·6雜環系所構成的群組，其中將每一個環院基、 8- 1335332 A7

芳基、雜芳基及雜環系基視需要以1至3個獨立選自由C 烷基及Rf所構成的群組之取代基取代； 1 ·δ 每一個Rd及Re係獨立選自由氫、Cl·6烷基、Gw歸.基 C2.6炔基、C：3·6環院基' c6·丨〇芳基、C2_9雜芳基及C·» 3-6雖壤系所構成的群組，或將Rd及Re和與彼附著之原子一起形^ 具有1至3個獨立選自氧、氮或硫之雜原子之C3 6雜環系環 ’其中將每一個烷基、烯基及炔基視需要以1至3個獨立選: 自由Re& Rf所構成的群組之取代基取代，並將每—個芳基-、環烷基、雜芳基及雜環系基視需要以1至3個獨立選自由 c 1 _6烧基及“所構成的群組之取代基取代；每一個Rf係獨立選自由-OH、-0C丨_6烷基、-SCU6院基、-F、-C卜-NH2、-NH(C丨.6烷基）、-N(Cm烷基）2、-OC(〇)Cl.6 烷基、-(:(0)0(^.6烷基、-NHC(0)Ci.6烷基、-C(0)〇H、 7 -C(0)NH2.、-C^CONHCw烷基、-C(0)N(C〖-6 烷基）2、-CF3 彡及-OCF3所構成的群組； w係0、1、2或3 ;及 «係0或1 ° 本發明也專注於製備式I化合物有用的中間物及其鹽類 β因此，在本發明的組合物其中的另一個特點中，本發明係提供式II化合物：本紙張尺度適用中國国家搮準(CNS) Α4規格(210 X 297公釐) 1335332 A7 B7 五、發明説明（5 ) 〆0 R1—N—pi

或其鹽I其中 R1及R2係如本文之定義； p 1及P2係獨立是氫或胺基保護基； p3係氫或羧基保護基； Q係離棄基或式

R3及m係如本文之定義；及X-係視需要存在的陰在此，離子，以該化合用作製備式I化合物之中間物及/或用作抗生素。 *本發明係在本發明的組合物其中還有的另一個特點中提供式III化合物：

0—R1—N~~~·ρ

Ο—Ρ4 ΠΙ -10- 012585__ 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210 X 297公釐) ---

或其鹽類’其中R '^^、^^及^^係如本文之定義及^^ 係虱或羧基保護基；以該化合用作製備式1或11化合物之中間物。在各自及不同的組合物特點中本發明也提供如本文定義之式2、 5b、 7、 8、 in , ^ ，一一 — i 设、辽及辽化合物或其鹽類或經保 ^之+Ϊ生物’以該化合用作製備式^化合物之中間物及/或用作抗生素。在本發明的組合物其φ 兵甲的另一個特點中，本發明係提供 :有在醫藥上可接爻之載體及有效的治療劑量之式】化合物或其在醫藥上可接受之鹽的醫藥組合物。雖然不想以理論限制，作县A4 了儿人此人上 ^ 仁疋咸^舌式I化合物會抑制細菌的細胞壁生物合成，获^ ^ Αι 达u 曰乂抑制細囟的生長或造成細菌的溶 ®作用。因此，在其它的姓 ^ ^ 匕的特性之中，以式I化合物用作抗生素。 _ 因此，在本發明的方法其中的一個供—種治療在哺乳類令的細菌二含有在醫藥上可接受之载體及有:：方法包含以你七甘户L 载體及有效的治療劑量之式I化合物或其在醫藥上可接受之睡的盤兹4人又tΛ的醫樂組合物投予哺乳類。此外’在本發明的方法盆中的x 裎枇一锸«试丄、一個特點中，本發明係 k供種抑制細函生長之方法，該茨万法包含以細菌盥且右生長抑制劑量之式I化合物或其在醫藥卜/、 ^ ^ ^ 酋樂上可接受之鹽接觸。在本發明的方法其中還有的另一 ,L u符點中，本發明株接供一種抑制細菌的細胞壁生物合成 ^ 口 π〈万法，該方法細菌與具有細胞壁合成抑制劑 ^ 3 ^ 利則置之式I化合物或其在醫藥 -11 - C12580 _ 本紙法尺錢財S S家標準(CNS) A4«^(21GX297公釐） 1335332 A7 B7 五、發明説明（上可接受之鹽接觸。本發明也專注於製備式丨化合物或其鹽之方法。因此，在本發明的方法其中的另一個特點中，本發明係提供製備式I化合物或其鹽之方法，該方法包含： (a) 將萬古黴素或其鹽與如本文定義之式z化合物反應：戋 (b) 將如本文定義之式^化合物與如本文定義之式η化合物反應；或 (c) 將如本文定義之式殳化合物與如本文定義之式^化合物反應；以提供式I化合物或其鹽❶在一個較佳的具體實施例中 ’以上的方法尚包含形成式I化合物在醫藥上可接受之鹽的步驟。本發明也專注於以任何這些方法製備的式〗化合物或其鹽》本發明也專注於式I化合物或其在醫藥上可接受之鹽在治療法中的用途。此外，本發明專注於式J化合物或其在醫藥上可接受之鹽在製造用於治療在哺乳類中的細菌感染之藥劑的用途。本發明的詳細說明本發明係提供式I之新穎萬古黴素-頭孢子黴素化合物或其在醫藥上可接受之鹽。這些化合物具有數個對掌性中心 ’關於此點’希望分子的萬古徽素部位具有萬古徽素本身的立體化學性。希望分子的頭孢子黴素部位具有在本文展示之立體化學性。但是，那些熟悉此項技藝者應瞭解少量具有與展示不同的立體化學性之異構物可以出現於本發明 01^587 本紙張尺度適用中Η國家標準(CNS) A4規格(210X297公爱)

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的組合物中，其先決條件係以這些異構物的出現整體而言不會明顯減低組合物的實用性。此外，本發明化合物的連接部位（即R1)可以包括一或多人=]掌也中。。典型係將分子的該部位製備成外消旋性混。物。但是，若必要’彳以使用純立體異構物(即各個對 :異構物或非對映異構物）或可以使用富含立體異構物之此。物。所有廷些立體異構物或富含立體異構物之混合物均包括在本發明的範圍内。此外本發明的化合物包括許多酸性基（即羧酸基）及許多鹼性基（即一級及二級胺基），並因此使式I化合物可以不同的a形式存在。所有這些鹽形式均包括在本發明的範圍内。也因為式I化合物包括吡錠環，故可視需要有吡錠環之抗衡陰離子的存在，包括（但不限於此）函化物（如氣化5 物）'叛酸.鹽（如醋酸鹽）及類似物。 +《而且，那些熟悉此項技藝者應瞭解易變化或化學不穩定性之化合物不包括本發明的範圍内，由於彼等的不穩定性而使彼缺乏實用性》例如，式T化合物最好包括至少兩個介於在-O-Ri-NCR2)·部份中的任何氧（_〇_)、氮（_N<)或硫 (-S-)原子之間的碳原子，因為在以單一碳原子分開這些原子時’則所得化合物（即包括縮醛、半縮醛、縮酮、半縮網、胺链、半胺醛或硫縮酮基及類似物）在酸性條件下可能具有水解不穩定性。二較佳的具體f施你丨在式I化合物t，以以下的取代基及意義較佳： 012583 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規297公¥)

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線 1335332 五、發明説明（9 ) 在一個較佳的具體實施例中，R1係_Ya_Yb_，即在„係〇時。在該具體實施例中，Ya及Yb係獨立是伸烷基，其中將每一個伸烷基視需要以丨至3個獨立選自如本文定義之-OR、-NRdRe、-C02Rd、-C(0)NRdRe&-S(0)2NRdRe2 取代基取代。疒及Yb係以獨立是Ci3伸烷基較佳，並以Ci2 伸烷基更佳。將Ya與Yb以一起接合（即Rl)形成·（(：Η2)2·8·基更佳。將Ya與Yb以一起接合形成_(CH2)2-、-(CH2)3_、 -(CH2)4-、-(CH2)5-或-(dh-基還更佳。在特別佳的具體貫施例中’將丫3與丫15一起接合形成_(CH2)3-基。在另一個較佳的具體實施例中，…係_Ya_w_Yb_，即在” 係1時。在該具體實施例中，Ya及0係獨立是C15伸烷基，或在W係環伸烷基、伸芳基或雜伸芳基時，則丫3及”係獨立選自由共價鍵及C1_5伸烷基所構成的群組。可將在該具體實施例中的每一個伸烷基視需要以丨至3個獨立選自如本文定義之-ORd、-NW、_C〇2Rd、.c(〇)NRdRU(〇)2NRdRe 之取代基取代。在Y或Yb係伸烧基時，則伸统基係以[门伸烷基較佳，以Cl·2伸烷基更佳，以·（CHAd基還更佳。在特別佳的具體實施例中，Ya及Yb係同時是^^-及貿係視需要以I至3個獨立選自如本文定義之取代基取代之 CV丨〇伸芳基；w係以伸苯基較佳。在另一個較佳的且體施例t , Ya及Yb係同時是_CH2CH2_&琛係_〇… 在有W的存在時，則料以。“。伸芳基或·〇·較佳以伸苯基或-〇·更佳β ’、 R係以氫或C丨_3烧基較佳。R2係以氫更佳。 '14" 本紙T S B家標準(CNS> A4規格“·Χ 297公发） 1335332 A7 B7 五、發明説明（1〇 )

在有R·3的存在時’則每一個R3係以獨立選、日L 1 ·6坑基、 C3.6環烷基、-〇Ru、-SRd、-F或-C1較佳，或將 R3接合形成（：3.6伸烷基。兩個鄰接的

在一個較佳的具體實施例中，所係〇。在另一個較佳的具體實施例中，m係1或2，以1更佳》在還有的另一個較佳的具體貫施例中，/77係2，並將兩個鄰接的r3接合形成 C；3-5伸烧基，以C3-4伸统基更佳。一種較佳的式I化合物群組係那些其中Ri係_Ya_(w)nYb_ (在此η係0)及將Ya與γ»一起接合形成·（(：Η2)2·8·基，R2係氫及w係0之化合物或其在醫藥上可接受之鹽。在該具體實施例中’ R1 (即將丫3與0接合在一起）係_((：112)2-、_(Ch2)3_ 、-(CH2)4-、-((：ίί2)5-或-((：ϋ2)6-基較佳，以-((：Ιί2)3-更佳。另一種較佳的式I化合物群組係那些其中Rl、r2、尺3及w 係如表I之定義的化合物或其在醫藥上可接受之鹽。

表I 實例編號 R1 R2 R3 m Ya W Yb n 1 -CH,CH,- ·—- •CH，- 0 -H 〇 2 -CH,CH,- ——— -CH,- 0 -H 2-CHv 1 3 -CH2CH7- -CH,- 0 -H 3-CHv 1 4 -CH,CH,- -CH,- 0 -H 4-CHv 1 5 -CH?CH,- -CH,- 0 -H 2-CH^O- 1 6 -CH,CH,- ——— -CH,- 0 -H 3-CH,0- 1 7 ^ch7ch,- ——— -CH,- 0 -H 4-CH,0- 1 8 -CH,CH,- -CH,- 0 -H 2-CHiS- 1 9 -CH,CH,- 一—· -CH,- 0 -H 3-CH^S- 1 10 -CH,CH,- — -CH,- 0 -H 4-CH,S- 1 01^590 本紙張通用中g g家標準(CNS) Μ规格(加撕公爱） 15

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1335332 A7 B7 五、發明説明（11 11 -ch7ch2- -CHr 0 -H 2-F- 1 12 -CH,CHr — -ch2- 0 -H 3-F- 1 13 -CH,CH2- --- -CH,- 0 -H 4-F- 1 14 -CH2CH2- -ch2- 0 -H 2-C1- 1 15 -CH7CH2- -ch7- 0 -H 3-C1- 1 16 -CH,CH2- -CH,- 0 -H 4-C1- 1 17 -ch,ch2- -ch2- 0 -H 2-Ph-1 1 18 -CKbCHr — -CH?- 0 -H 3-Ph- 1 19 -CH,CHr — -CH,- 0 -H 4-Ph- 1 20 -CH7CH2- — -CH,- 0 -H 4-環丙基- 1 21 -CH^CHi- — CH” 0 -H 4-rHOOCCH2S-l 1 22 -CH,CH2- — -CH,- 0 -H 4-NH,C(0)- 1 23 -ch,ch2- -ch2- 0 -H 2,3-di-CHv 2 24 -ch,ch2- -CH,- 0 -H 3,4-di-CHr 2 25 -ch,ch2- --- -ch2- 0 -H 3,5-di-CH,- 2 26 -ch,ch2- ——— -ch7- 0 -H 3,4-di-CHiO- 2 27 -ch,ch2- -CH,- 0 -H 3-CH3-4-CH,0- 2 28 -CH7CH2- -— -ch7- 0 -H 3-CH,0-4-F 2 29 -ch?ch2- --- -ch7- 0 -H 2,3-r-(CH,Vl 2 30 -ch,ch2- 一- -ch7- 0 -H 2,3-(-CH,CH,CH,-) 2 31 -fCH7)v -iCH,V 0 -H --- 0 32 -ch,ch2- -0- -ch,ch2- 1 -H — 0 33 -ch7- l,4-(-Ph-)2 -ch7- 1 -H --- 0 1 ph =笨基. 2 l，4-(-Ph-)= Μ-伸笨基在式II之中間物中： Q係以鹵基或經定義之0比旋基較佳。 P1係以氫或特丁氧基羰基較佳。 P2係以氫或三苯基甲基較佳。 P3係以氫或對-甲氧基苄基較佳。 -16- C12S91_ 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4规格(210 X 297公董） 1335332 A7 B7 五、發明説明1 ~~) " R1、R2、R3及m係如本文之定義較佳，包括任何較佳的具體實施例、取代基或意義。在式III之中間物中： P1係以氫或特丁氧基羰基較佳。 P2係以氫 '甲醯基或三苯基甲基較佳。 P4係以氫、Cw烷基或對-曱氧基苄基較佳。 R1及R2係如本文之定義較佳’包括任何較佳的具體實施例、取代基或意義。定義在說明本發明的化合物、組合物、治療方法及製備方法時’以下的術語具有以下的意義，除非有其它另外的指示。以“烷基”術語表示可以是直鏈或支鏈之單價飽和烴基。這些烷基典型係包括從1至10個碳原子，除非有其它另产外的定義―。代表性烷基包括以實例說明的曱基、乙基、正 i 丙基、異丙基、正丁基、第二丁基、異丁基、特丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基 '正壬基、正癸基及類似物。以“伸烷基”術語表示可以是直鏈或支鏈之二價飽和烴基。這些伸烷基典型係包括從1至10個碳原子，除非有其它另外的定義。代表性伸烷基包括以實例說明的亞曱基、乙烷-1，2·二基（“伸乙基”）、丙烷-1，2-二基、丙烷-1，3-二基、丁烷-1,4-二基、戊烷-1,5-二基及類似物。 ^ 以“烯基”術語表示可以是直鏈或支鏈及具有至少一個碳-碳雙鍵（並典型係1、2或3個）之單價不飽和烴基。這些 r - 17-C12532_____ 本纸張尺度逋用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐）

裝訂

線 ^ ! 1335332 A7 B7

五、發明説明（13 ) 烯基典型係包括從2至1〇個碳原子，除非有其它另外義。代表性烯基包括以實例說明的乙烯基、正丙歸基的又丙稀基、正丁- 2-稀基、正己_3_婦基及類似物。異以炔基”術語表示可以是直鏈或支鏈及具有碳-碳參鍵（並典型係丨、2或3個）之單價不飽和煙基炔基典型係包括從2至1 〇個碳原子，除非有其它另外義。代表性炔基包括以實例說明的乙炔基、正的定至少 •2-炔基、正己·3_炔基及類似物。内块基、正以“芳基，，術語表示具有單環（即苯基）或稠合環（即茂單價芳族烴。這些芳基典型係包括從6至10個碳環^%)之除非有其它另外的定義。代表性芳基包括以實例明: 基和萘-1-基、萘·2-基及類似物。本以伸芳基”術語表示具有單環（即伸笨基）或稠合環（即萘二基）之二價芳族烴。這些伸芳基典型係包括從6至1〇個碳環原子，除非有其它另外的定義。代表性伸芳基包括以實例說明的1，2-伸苯基、1,3-伸苯基、1，4_伸苯基、萘_丨，5_二基、萘-2,7-二基及類似物。以環炫基術sf·表示早價飽和碳環系煙基。.這此環烧基典型係包括從3至10個碳原子’除非有其它另外的定義。代表性環烷基包括以實例說明的環丙基、環丁基、環戍基、環己基及類似物。以環伸烧基術語表示一價飽和碳環系煙基。這些環伸烷基典型係包括從3至10個碳原子，除非有其它另外的定義。代表性環伸烷基包括以實例說明的環丙烧-12_二基、 -18 - 本中國®家搮準(CNS) A4规格(210 X 297公釐) 訂

線 1335332

农丁基-1’2-一基、環丁基·13二基、環戊基_12_二基環戊基-1，3·二基、環己基二基 '環己基-U3-二基、環己基-1，4-二基及類似物。以“齒基”術語表示氟基、氣基、溴基及碘基。以“雜芳基，，術語表示具有單環或雙稍合環及包括至少一個在環中選自氮、氣志# + & _ 次；IL之雜原子（典型係1至3個）之單價芳族基。這些雜芳基典型係、包括從5至1()個總環原子除非有其它另外的定義。代表性雜芳基包括以實例說明的單價類之料、㈣号唾，、嘆吩、三。坐"比唑異可坐、異售唾、。比咬、。比0坐、0比嗓、建嘻、喷咬、三嗓H笨并苯并B塞吩、苯并^坐、苯并嗔唾奎琳異<4蛛、峻唾琳”奎„号琳及類似物，在此附著點係在任何適合的碳或氮環原子上。以雜伸芳基術語表示具有單環或雙稠合環及包括至少一，在環中選自a、氧或硫之雜原子（典型係⑴個）之二價芳族基。這些雜伸芳基典型係包括從5至1〇個總環原子，除非有其它另外的定義。代表性雜伸芳基包括以實例說明的二價類之吡咯、咪唑、噻唑、噚唑、呋喃、噻吩、三唾…比4、異、異嘧唾、。比咬、t峻、。比嗪、噠嗓' 痛咬—#、η弓|嗓、笨并咬喃、苯并嗟吩、苯并味嗤、苯并噻唑、喹啉、異喹啉、喹唑啉、喹。号啉及類似物，在此附著點係在任何適合的碳或氮環原子上。以雜環基或“雜環系，，術語表示具有單環或多濃缩環及包括至少一個在環中選自氮、氧或硫之雜原子（典型係1至 -19- 困國家標準(CNS) A4規格(210X297公I) 1335332 A7 B7 五、發明説明（ 15 3個）之單價飽和或不飽和（非芳族）基。這些雜環系基典型係包括從2至9個總環原子’除非有其它另外的定義。代表性雜環系基包括以實例說明的單價類之吡咯烷、味嗤烧、。比唑烷、六氫吡阱、1，4-二呤烷、嗎啉、硫代嗎啉、哌嗪、3-吡咯啉及類似物，在此附著點係在任何適合的碳或氮環原子上。在本文以本技藝認知的方式使用的“頭孢子黴素，，術語表示具有以下通式及編號系統之β-内醯胺環系統：

0， 0Η 在本文以本技藝認知的方式使用的“萬古黴素，，術語表示已知係萬古黴素之糖肽抗生素。參考例如馬什爾戴克公司 (Marcel Dekker Inc.)以 R.納加拉珍（Nagarajan)之“糖肽抗生素（Glycopeptide Anitibiotics)”（1994)及在其中引用的文獻。在本發明的化合物中，鍵合部位的附著點係在萬古黴素之“C-末端”上。以“在醫藥上可接受之鹽’，術語代表可以投藥病患（如哺乳類）接受之鹽（例如’以既定的劑量攝取具有可接受之哺乳類安全性之鹽類）。這些鹽類可以衍生自在醫藥上可接爻之無機或有機鹼及在醫藥上可接受之無機或有機酸。衍生自在醫藥上可接受之無機鹼的鹽類包括鋁、銨、鈣、銅、鐵 '亞鐵、鋰、鎂、錳、亞錳、鉀、鈉、鋅及類似物。 -20- 本纸張尺度適用中困固家標準(CNS) χ挪公釐）裝訂線 1335332 A7 __ B7 五、發明説明（~16~^ " 以銨、鈣、鎂、鉀及鈉鹽特別佳。衍生自在醫藥上可接受之有機驗的鹽類包括一級 '二級及三級胺之鹽類，包括經取代之胺、環系胺、天然生成之胺及類似物，如精胺酸、甜菜驗、咖啡鹼、膽鹼、N，N，-二苄基乙撐二胺、二乙胺、2-二乙基胺基乙醇、2_二曱基胺基乙醇 '乙醇胺、乙標二胺、N-乙基嗎啉、N_乙基六氫吡阱、葡聚胺、葡糖胺、組胺酸、哈胺（hydrabamine)、異丙胺、賴胺酸、甲基葡聚胺、嗎啉、哌嗪、哌啶 '聚胺樹脂、普魯因、嘌呤、可可驗、三乙胺、三曱胺、三丙胺、胺基丁三醇及類似物。衍生自在醫藥上可接受之酸的鹽類包括醋酸、抗壞血酸、苯項酸、笨曱醆、樟腦磺酸、檸檬酸、乙烷磺酸、富馬酸、葡糖酸、葡糖醛酸、谷胺酸 '馬尿酸、氫溴酸、氫氯酸、羥乙磺酸、乳酸、乳糖酸、馬來酸、蘋果酸、扁桃酸、曱烷磺酸、黏酸、萘磺酸、煙酸、硝酸、雙羥萘酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、對-甲苯磺酸及類似物》以檸檬酸、氫溴酸、氫氣酸、馬來酸、磷酸、硫酸及酒石酸特別佳。以“其鹽”術語表示在以陽離子（如金屬陽離子或有機陽離子及類似物（例如，NH4+陽離子及類似物））置換酸之氫時形成的化合物。鹽係以在醫藥上可接受之鹽較佳，雖然未必需要不想投予病患之中間化合物的鹽類。以“有效的治療劑量，’術語表示在投予需要治療之病患時充份達成治療之劑量。如本文使用的“治療（treating)，，或“治療（treatment)”術語 C12596 本纸張尺度適用中國固家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) A7 B7 五、發明説明（17 ) 係表不治療在病患巾（如哺乳類，特別是人類的疾病或醫學症狀（如細菌感染），其包括：一 (:)避免病患發生疾病或醫學症狀，即預防治療, 患中的疾病或醫學症狀，即消除或致使疾病或醫學症狀復原； (C)抑制在病患中的疾病或醫學痄灿_ ... 納X酋字症狀，即減緩或遏阻疾病或醫學症狀疾的發生；或 (d)減輕在病患中的疾病或醫學症狀的徵候群。乂生長抑制劑量術語表示充份抑制微有機體（包括革蘭氏陽性細菌）生長或再生或充份造成微有機體死亡或溶菌之劑量。以“細胞壁生物合成抑制劑量”術語表示充份抑制在微有機體（包括革蘭氏陽性細菌）中的細胞壁生物合成作用之劑量。 /以“離棄基”術語表示可在取代反應中（如親核性取代反應）以另一個官能基或原子置換的官能基或原子。以實例說明的代表性離棄基包括氣基、溴基及碘基和磺酸酯基 (如甲磺酸鹽、曱苯磺酸鹽、溴基笨磺酸鹽（brosylate)、硝基苯磺酸鹽及類似物）、活化酯基（如7-氮雜苯并三唑-1-氧基及類似物）、醯氧基（如乙醯氧基、三氟乙醯氧基及類似物）0 以“其經保護之衍生物”術語表示特定的化合物之衍生物二-，其中以保護或阻斷基保護化合物的一或多個官能基免於不希望的反應。可以保護的官能基包括以實例說明的羧酸 -22- 本纸古+^逋对f國國家搮準(CNS> A4規格(210X297公I) 爷；I ：ft 訂

k 1335332 • A7 B7 五、發明説明（18 ) ：基、胺基、羥基、硫赶基 '羰基及類似物。代表性保護基包括用於羧基之酯（如對-甲氧基苄基）、醯胺及；用於胺基之胺基曱酸酯（如特丁氧基羰基）及醯胺；用於羥基之_及酯；用於硫赶基之硫醚及硫酯；用於羰基之縮醛及縮網與類似物。那些熟悉此項技藝者熟知這些保護基，並在例如紐約Wiley之T. W.葛林（Greene)及G.M.烏茲（Wuts)的第三-版“在有機化學中的保護基（Protecting Groups in Organic Synthesis)”（1999)及在以該文引用的文獻中說明。以“胺基-保護基”術語表示適合於避免在胺基上不希望的反應之保護基。代表性胺基-保護基包括（但不限於此）特丁氧基羰基（BOC)、三苯曱基（Tr)、苄氧基羰基（Cbz)、9-芴基曱氧基羰基（Fmoc)、甲醯基、三甲基曱矽院基（TMS) 、特丁基二曱基甲矽烷基（TBS)及類似物。、以“羧基-保護基”術語表示適合於避免在羧基上不希望的反應之保護基。代表性羧基-保護基包括（但不限於此）酯，如曱基、乙基、特丁基、苄基（Bn)、對-甲氧基苄基（pbm) 、9-芴基曱基（Fm)、三甲基甲矽烷基（TMS)、特丁基二曱基甲矽烷基（TBS)、二苯甲基（二苯甲基，DPM)及類似物。通用的合成步驟使用以下的通用方法及步驟，以可輕易取得的原料可以製備本發明的交聯之萬古黴素-頭孢子黴素化合物。應認知的是在此係提出典型或較佳的方法條件（即反應溫度、二時間、反應物的莫耳比、溶劑、壓力等），也可以使用其它的方法條件，除非有其它另外的說明。最適宜的反應條 ·23· 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210X 297公羹) 五、發明説明（19 ) 件可以隨所使用的特殊反應物或溶劑而改變，但是以熟悉此項技藝者可以最適宜的慣例步戰可輕易測定這些條件。此外’因為那些熟悉此項技藝者易明白有必要或希望以慣用的保護基避免特定的宫能基免於進行不希望的反應。在此項技藝中熟知適合於特殊的官能基之保護基與適合於這些官能基的保護及去保護條件的選擇。若必要，可以使用除了那些在本文說明的步驟中例證的保護基之外的保護基。例如，在紐约Wi丨叮之丁 w葛林及〇河烏茲的第三版 “在有機化學中的保護基’，（1999)及在以該文引用的文獻中說明許多保護基及彼之引入與除去。在較佳的合成方法中，式Γ化合物之製備係藉由萬古黴素（1)或其鹽與式2化合物： -(R3)n (其中R1、R2 之衍生物反應物。

R3及m係如本文之定義）或其鹽或經保護以提供式I化合物或其鹽或經保護之街生該反應的進行典型係以萬古黴素或其鹽與約〇 9至約^ 當量之式1化合物在惰性稀釋劑中（如DMF)使用慣用的羧酸-胺（肽）偶合劑偶合。在該反應中，典型係將萬古徵素或其鹽先與偶合劑在過量胺（以約18至約22當量較佳）（如一 -24- 1335332 ’ A7 ___ _ B7_ 五、發明説明（2〇 ) 異丙基乙胺）的存在下及在從約-20。〇至約25°c為範圍之溫度下（以在室溫下較佳）接觸約0 2 5至約3小時。接著以加入過量二氟醋酸（典型係約2當量）較佳，以形成任何過量二異丙基乙胺之丁？八鹽》接著通常將反應冷卻至約^。充至約1 〇 C之溫度（以至約〇。(3較佳），並加入中間物1，接著加入過量2,4,6-三f基吡啶。典型係將該反應在約〇«c下維持約1至約6小時或直到反應幾乎完成為止β 用於該反應中較佳的偶合劑包含約〇9至約1丨當量之六氟磷酸苯并三唑-1·氧基三吡咯烷并鐫（PyB〇P)及約〇 9至約 1.1當量之1-羥基苯并三唑（HOBT)或1-羥基-7-氮雜笨并三唑（HOAT)。其它適合的偶合劑包括六氟磷酸〇_(7氮雜苯并二唾-1-基四曱基脉陽離子（HATU)、雙（2_氧基-3-嘮唑烷基）次膦酸氯（BOP_c丨）、二苯基磷醯疊氮化物 _ (DPPA)、一本基次膦酸氣、氣基碟酸二苯醋（Dpcp)及一 HOAT、五氟苯基二笨基次膦酸酯及類似物。在完成偶合反應之後’接著使用慣用的步驟及試劑除去存在於產物中的任何保護基《—旦完成該反應時，則將反應產物（即式I化合物）使用慣用的步驟分離及純化，如管柱色層分離法、HPLC、再結晶作用及類似作用。以市售原料及試劑使用慣用的步爾可輕易製備在以上步驟中使用的頭孢子擻素中間物1。可以實例說明的方式製備中間物1’如方程式A的展示： -25

〇i^6CO 本紙^^用中s S家樣準(CNS> A4规格⑽χ 297ϋ 1335332 A7

等··

1335332 * A7 ______B7____ 五、發明説明（22 ) 基（如特丁氧基羰基（BOC))及Z1係離棄基（如氯基、溴基、碘基、甲磺酸酯、曱笨磺酸酯及類似物）反應，在除去羧基-保護基（即R5)之後提供式中間物。該反應的進行典型係以先與約1 ·〇至約1.1當量（以約 1.02至約1.06當量較佳）之式生化合物在惰性稀釋劑中（如 DMF)及在從約0°C至約50°C為範圍之溫度下（以在室溫下較佳）接觸約0.5至約6小時或直到反應幾乎完成為止。該反應典型係在過量鹼（以約1.1至約5當量較佳）（如碳酸铯）的存在下進行。此外，當Z1係氣基或溴基時，則視需要加入催化量（以約0.2至約0.5當量較佳）之碘化三烷基銨（如碘化四丁基敍），以加速當場產生生之蛾基衍生物之反應。接著以除去羧基-保護基（即R5)供應中間物么。例如，當羧基-保護基係院基酯時（如乙基），則將酯與過量驗金屬氮氧化物（以約1.1至約2.5當量較佳）（如氫氧化鈉或氫氧化鉀）接觸’可將醋輕易水解成羧酸。該反應典型係在惰性稀釋劑中（如乙醇）及在從約〇t至約loot為範圍之溫度下進行約0.5至約6小時或直到反應幾乎完成為止，以供應中間物 5a ° 式2_之噻唾化合物係購自例如威斯康辛州米爾瓦美 (Milwaukee)之阿爾德克（Aidrich)或可以市售原料及試劑^ 用慣用的步驟製備。同樣以市售原料及試劑使用慣用的步驟可輕易製備式4 之ω-官能化胺。較佳的式化合物包括以例證說明的？ BOC-3-演基丙胺、#.B0C-6_埃基己胺、mocw-雄基 01,.60^ '27' 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公爱〇 1335332 A7

乙氧基）乙胺、N-B0C-4·(碘甲基）苄胺及類似物。以市售原料使用熟知的試劑及反應條件可輕易製備這些化合物。接著將中間物^氯化，以提供中間物&。該反應的進行典型係以k與約1.0至約ι·2當量之氣化劑（如#•氣基琥珀醯亞胺）在惰性稀釋劑中（如氣仿或DMF)及在室溫下接觸約6 至約24小時或直到反應幾乎完成為止。接著將5-氣基-1,3-噻唑中間物公|_與中間物6 (其中R7係氫或適合的羧基保護基，如對-f氧基苄基）偶合，以提供中間物；L。當R7係對-曱氧基苄基時’則中間物反係購自曰本大塚製藥（Otsuka)。該反應的進行典型係以5b盘約0·8至約 1當量之色在偶合劑的存在下在慣用的偶合反應條件下接觸。用於該反應較佳的偶合劑係填醒氣（典型係約1.1至約1 2 當量）及過量胺，如2,4,6-三曱基吡啶或二異丙基乙胺。偶合反應典型係在惰性稀釋劑中（如THF)及在從約-5CTC至約 25 °C為範圍之溫度下進行約〇_5至約6小時或直到反應幾乎完成為止，以供應中間物I»為了避免異構物作用，該反應典型係在-3 5°C下使用2,4,6-三甲基吡啶作為鹼進行。接著將中間物I與吡啶或經取代之吡啶反應，以供應中間物(在此R3及《係如本文之定義）。該反應的進行典型係先以碘基交換在1中的氯基，其係藉由以1與約1當量之碘化鈉在丙酮（芬可斯坦（Finkelstein))或DMF中及在室溫下接觸約0.25至約2小時。典型係不分離所得碘基中間物，但是將其當場與約1.1至約1.6當量之吡啶或經取代之吡啶反應，以供應及。該反應典型係在室溫下進行約1至約12小 012603 本紙張尺度逋用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公爱) 1335332 A7 B7 五、發明説明（24 ) 時或直到反應幾乎元成為止。在該反應中使用的〇比咬或經取代之°比啶或市售商品，或可以市售原料及試劑使用慣用的步驟製備。用於該反應的代表性„比咬衍生物包括。比咬' 2-皮考啉、3-皮考啉、4-皮考啉' 2_曱氧基吡啶、3_甲氧基0比咬、4-甲氧基0比咬、2 -硫代甲氧基〇比咬、3_硫代甲氧基'•比咬、4-硫代甲氧基》比啶、4-羧基硫代甲氧基吡啶、2_ 氟基°比咬、3 -礼基。比咬、4 -襄基η比咳、2 -氣基〇比咬、3 -氯基。比啶、4-氣基吡啶、2-苯基《•比啶' 3-苯基吡唆、4-苯基 β比啶、4-環丙基批啶、煙酸、異煙酸、煙醯胺、異煙醯胺、2,3-盧剔啶、3,4-盧剔啶、3,5-盧剔啶、3,4-二甲氧基吡啶、4-甲氧基-3-曱基吡啶、4-氟基-3-f氧基吡啶、2,3-環戊烯吡啶、2,3-環己烯吡啶及類似物。或者可將中間物处與式i化合物偶合：

(其中R3、R7及w係如本文之定義），以供應中間物該反應的進行典型係以&與約0.9至約1.1當量之中間物殳或其鹽在惰性稀釋劑（如DMF)及在偶合劑（如1-(3-二甲基胺基丙基）-3-乙基碳化二醯亞胺（EDC)、ByBOP及HOAT或HOBT 、HATU、BOP-C1、DPPA、DPCP和 HOAT及類似物）的存在下接觸。偶合反應通常係在從約-40°C至約25 °C為範圍之溫度下進行約1至約12小時或直到反應幾乎完成為止。〇126〇,5 -29- 本紙張尺度適用中國8家標準<CNS> A4規格(210 X 297公釐) 1335332

發明説明（25 以中間物6可輕易製備式义化合物其係藉由么與〇比啶或經取代之吡啶在類似於那些上述的反應條件下反應。接著使用慣用的步驟及試劑除去中間物及之保護基，以供應頭抱子徽素中間物2_。例如，當R4係三笨甲基' R6係特丁氧基羰基及R7係對-曱氧基苄基時，則以過量三氟醋酸及過量茴香醚或三乙基甲矽烷在惰性稀釋劑十（如二氣甲烷或庚烷）及在室溫下以約i至約丨2小時處理反或直到反應幾乎完成為止，方便除去保護基。典型係使用慣用的步驟分離及純化所得經保護之頭孢子黴素义，如沉澱作用、凍乾作用及反相HPLC » 或者式I化合物的製備可藉由式^之萬古黴素衍生物：

A7 B7

cr ο 五、發明説明（--：--- 主或其鹽（其中r1&r2係如本文之定義）與式11之頭孢子黴素衍生物：

Cl ο 或其鹽或經保護之衍生物（其中R3及m係如本文之定義）反應，以供應式I化合物或其鹽。該反應的進行典型係以m與約1至約1.5當量之u_在惰性稀釋劑中（如水、曱醇或其混合物）及在從約4至約6.5為範圍之PH下接觸。該反應通常係在從約_2〇<>(：至约4〇它為範圍之溫度下進行約i至約6小時或直到反應幾乎完成為止。將萬古黴素或其鹽與下式之酞醯胺基衍生物：

，可輕易製備在該反應中使用的式之萬古黴素衍生物。例如，該反應的進行典型係以萬古黴素與約hl至約12當量之酞醯胺基化合物在偶合劑（如pyB〇p和HO AT及類似物）與適合的驗（如二異丙基乙胺）的存在下接觸。反應通常係在惰性稀釋劑中（如DMF)及在從約-20eC至約40eC為範圍之溫度下進行約0.5至約6小時或直到反應幾乎完成為止。使用慣

丄 A7

:的步驟及試劑可輕易製備在該反應中使用的酞醢胺基化合物。式之頭孢子黴素衍生物之製備可藉由例如以式义化合物與式12_之噻唑化合物：

或其鹽（其中R8係氫或胺基-保護基（如甲酿基或三苯甲基）) 偶合。該偶合反應的進行典型係以殳與約〇 9至約1丨當量之 1Z在惰性稀釋劑中（如DMF)及在偶合劑（如EDC及HOAT)及適合的鹼（如2,4,6-三曱基吡啶）的存在下接觸。該反應通常係在從約-20°C至約2〇t為範圍之溫度下進行約0.5至約 6小時或直到反應幾乎完成為止。此外’式I化合物之製備可藉由式11之萬古黴素衍生物： C1l6Q?__ 本纸張尺度制中s S家料(CNS) A4_21QX297公釐)

裝人訂

1335332 A7 B7 五、發明説明（28 )

13 0

或其鹽（其中R1及R2係如本文之定義）與以上的式2_化合物反應，以供應式I化合物或其鹽。該偶合反應的進行典型係以il_與偶合劑（如DIPC及 HOAT)及約0.5至約2當量之i在惰性稀釋劑中（如DMF)及在適合的鹼（如2,4,6-三曱基吡啶）的存在下接觸。該反應通常係在從約-20 °C至約40 °C為範圍之溫度下進行約1至約6 小時或直到反應幾乎完成為止。以萬古黴素與以上的中間物使用本文說明的慣用的偶合步驟可輕易製備在該反應中使用的式11化合物。 -33- 國國家標準(CNS) Α4規格(210 X 297公釐）

1335332 A7 -------- —__B7 五、發明説明（29 ) ' 在以下陳述的實例中說明更多關於用以製備本發明的代表性化合物特殊的反應條件及步驟的細節。醫樂調配物典型係將本發明的交聯之葸士谢去% 7 μ * J 乂聊之禺古黴素·頭孢子黴素化合物以醫藥組合物形式投予病患。因此，在本發明組合物立中的一個特點中，本發明係專注於含有在醫藥上可接受之載體或賦形劑及有效的治療劑量之式J化合物或其在醫藥上可接受之鹽的醫藥組合物。可在本發明的冑藥組合物中使用任_慣用的載體或賦形劑特殊的載體或賦形劑或載體與賦形劑之結合物的選擇將依據用於治療特殊病患的投藥模式或細菌感染型式而定。關於此點，適合於特殊的投藥模式（如口服、局部 '吸入或非經腸投藥）之醫藥組合物的製備作用係在那些熟悉醫藥技藝者熟知的範圍内。此外，這些組合物之成份係購自例如密蘇里州聖路易（St. Louis) 63 178郵政信箱第14508 號之西佳瑪（Sigma)。在賓州費城梅斯發行公司（Mace Publishing Co.)的第17版雷明頓製藥科學（Remingt〇n，s Pharmaceutical Sciences)( 1985年）及馬什爾戴克公司的第3 版“現代製藥學（Modern Pharmaceutics)，，（G· S.班克（Banker) & C. Τ·洛迪（Rhodes)出版）中說明更多以例證說明的慣用的調配技術》本發明的醫藥組合物典型係包括有效的治療劑量之式I 化合物或其在醫藥上可接受之鹽。這些醫藥組合物典型係包括從約0· 1至約90重量％之活性劑，並以從約1 〇至約30% -34-

Ci2o〇Q_ ___ 本纸張尺度適用中S 8家料(CNS) A4規格(21GX297公I)' 1335332 A7

苹，· 訂

k ^35332

為外範:糊精對活性劑之重量比典型係以從約w 型，將二二的適醫，合物以袭填成單劑型較佳。以“單劑尘術。。表不適合於病患服藥的散裝單元，即每一個包括經計算出以或單獨或與—或多個附加單元合併產生預广的活性劑量。例如，可將這些單-劑型裝填在，..、囷及密封的安瓶及類似物中。以下的調配物係例證本發明的代表性醫藥組合物。

調配物啻例A 適合於製備注射溶液之冷凍溶液的製備如下：成份 3 —...... 活性化合物 10至1000毫克賦形劑（例如，右旋糖）0至5 0公克 >主射溶液用的水_1〇至1〇〇毫升生H :將任何存在的賦形劑溶解在約80%之注射用的水中，並加入活性化合物及溶解。將pH以i克分子量氫氧化鈉調整成3至4.5，並接著將體積以注射用的水調整成95%的最終體積。若必要’則核對及調整pH，並將體積以注射用的水調整成最終體積。接著將調配物經由0.22微米濾紙以無菌過濾，並在無菌條件下放入無菌小瓶中。將小瓶封蓋、貼標籤及以冷凍貯存。

調配物膏例B 適合於製備注射溶液之凍乾粉末的製備如下： -36- 哪濟ί a S家標準(CNS> Α4規格(210 X 297公釐） 1335332 A7

'舌性化合物 10至1000毫克職形劑（例如，甘露醇及/或蔗糖）0至50公克緩衝劑（例如，檸檬酸） 0至500毫克液用的水__10至100毫升_ :將任何存在的賦形劑及/或緩衝劑溶解在約6 0 A之注射用的水中，並加入活性化合物及溶解，並將pH以1克分子量氫氧化鈉調整成3至4 5，並接著將體積以注射用的水調整成95%的最終體積》若必要，則核對及調整pH，並將體積以注射用的水調整成最終體積。接著將調配物經由0.22微米濾紙以無菌過濾，並在無菌條件下放入無菌小瓶中。然後將調配物使用適當的凍乾循環冷凍乾燥《將小瓶封蓋（視需要在部份真空或無水氮氣下）、貼標籤及以冷藏貯存。

調配物管你丨C 自以上的調配物實例B製備用於經靜脈内投藥之注射溶液如下：代i '味步驟：將調配物實例B之凍乾粉末（例如，包括1〇至1000毫克活性化合物）以20毫升無菌水重組，並將所得溶液在100毫升藥用軟袋中以80毫升無菌食鹽水再稀釋。接著將稀釋溶液以靜脈内經30至120分鐘投予病患。實用性以本發明的交聯之萬古黴素-頭孢子黴素化合物用作抗生素。例如’本發明的組合物可用於治療或預防在哺乳類 01^612 _37- 本紙張尺度適用辛國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐)

訂

1335332 A7 _______ B7_ 五、發明説明（33 ) 中（包括在人類及與彼相伴的動物（即狗、貓等））以對本發明的化合物敏感的微有機體引起的細菌感染及其它的與細菌相關的醫學症狀。因此，在本發明的方法其中的一個特點中，本發明係提供治療在哺乳類中的細菌感染之方法，該方法包含以含有在醫藥上可接受之載體及有效的治療劑量之式I化合物或其在醫藥上可接受之鹽的醫藥組合物投予需要治療之哺乳類。以例證說明本發明的化合物可特別用於治療或預防以革蘭氏陽性細菌及相關的微有機體引起的感染。例如，本發明的化合物具有治療或預防以特定的腸球菌屬、葡萄球菌屬（包括凝Jk酶陰性葡萄球菌（CNS))、鏈球菌屬、李斯特菌屬、梭狀桿菌屬、枯草桿菌屬及類似物之療效。以本發明的化合物有效治療的細菌種類之實例包括（但不限於此）耐二曱氧笨青黴素之金黃色葡萄球菌（MRSA)、二甲氧笨青黴素易感型金黃色葡萄球菌（MS SA)、糖肽中間物易感型金黃色葡萄球菌（GISA)、耐二甲氧苯青黴素之白色表皮葡萄球菌（MRSE)、二曱氧苯青黴素敏感型白色表皮葡萄球菌（MSSE)、萬古黴素敏感型糞腸球菌（EFSVS)、萬古黴素敏感型糞腸道球菌（EFMVS)、耐盤尼西林之肺炎鏈球菌 (PRSP)、化膿性鏈球菌及類似物。本發明的化合物具有較低或不具治療或預防同時耐萬古黴素及頭孢子黴素之菌株引起的感染之療效。可以本發明的化合物治療或預防的代表性感染或與細菌 C1-6I3 -38- 本纸银尺度適用中國國家揉準(CNS) A4規格(210X297公爱) 1335332

相關的醫學症狀種類包括（但不限於此）皮膚及皮膚結構感杂、尿道感染、肺炎、心内膜炎、與插管相關的血流感染、骨髓炎及類似種類，在治療這些症狀時，病患可能已被欲治療之微有機體感染或只是易感染，在此情況下’活性劑係以預防投藥。典型係將本發明化合物以有效的治療劑量經任何可接受之投藥路徑投藥。將化合物以非經腸投藥較佳。可將化合物以每天單次日劑量或多次劑量投藥。治療攝取可能需要以長期投藥，例如，經數天或一至六週或更長。典型係由病患的醫師決定每次劑量投予的活性劑量或總投藥量，並依據如感染的特性及嚴重性、病患的年齡及一般的健康狀況、病患的耐活性劑、引起感染之微有機體（類）、投藥路徑及類似因素等之類的因素而定。通常適合的劑量係以從約0.25至約10_0毫克/公斤/天之活性劑為範圍’以從約0.5至約2毫克/公斤/天較佳。就平均70公斤的人而言，該劑量可以每天約15至約7〇〇毫克之活性劑’或以每天約3 5至約1 50毫克較佳。此外’本發明的化合物具有抑制細菌生長乏療效。在該具體實施例中，將細菌或在活體外或活體内與具有生長抑制量之式I化合物或其在醫藥上可接受之鹽接觸。生長抑制量典型係以從約0.008微克/毫升至約50微克/毫升為範圍，以從約0.008微克/毫升至約25微克/毫升較佳，並以從約 0.008微克/毫升至約10微克/毫升更佳。典型係以降低或無細菌再生作用及/或細菌的溶菌作用證明細菌生長的抑制

丄 A7

:二即與未治療的細菌比較，經既定的降低在既定體積中(即每毫升)的菌落形成單位。 :發明的化合物也具有抑制在細胞中的細胞壁生物合成之療效。在該具體實施例中 τ將細函或在活體外或活體内〃/、有細胞壁生物合成抑制量之式〖化合物或其在醫藥上可接受之鹽接觸。細胞壁生物合成抑制量典型係以從約 0.04微克/毫升至约5〇微克/毫升為範圍，以從約0.04微克/ 毫升至約25微克/毫升較佳，並以從約〇〇4微克/毫升至約 10微克/毫升更佳。典型係以抑制或無細菌生長(包括細菌之溶菌作用）證明在細菌中的細胞壁生物合成之抑制作用。除了令人驚訝及意外的細菌特性之外，也發現本發明的化〇物具有可接爻之哺乳類安全性及可接受之水性溶解度。此外，已發現本發明的化合物具有令人驚訝及意外的抗特定細菌之快速Cidality，包括耐二甲氧苯青黴素之金黃色葡萄球菌（MRSA)及耐二曱氧苯青黴素之白色表皮葡萄球菌（MRSE) »可以使用那些熟悉此項技藝者熟知的各種在活體外及活體内的檢定作用例證本發明化合物的這些特性與抗生素實用性。例如，在以下的實例中吏詳細說明代表性檢定作用。實例在以下係提供例證本發明的合成及生物實例，並不是以任何方法將其解釋成限制本發明的範圍。在以下的實例中，以下的縮寫具有以下的意義，除非有其它另外的指定。以下未定義的缩寫具有彼一般公認的意義。 C12615 本纸張尺度適用中國蠲家搮竿(CNS) A4規格(210X297公釐) 1335332 A7 B7 五、發明説明（ 36 ) BOC =特丁氧基羰基 CFU =菌落形成單位 DCM =二氣曱烷 DIPEA =二異丙基乙胺 DMF =二甲基曱醯胺 DMSO =二甲基亞礙 EtOAc =醋酸乙酯 HOAT =1-羥基-7-氮雜苯并三唑 HPLC =高性能液相色層分離法 MIC =最低的抑制濃度 MS =質譜儀 PMB =對-曱氧基苄基 PyBOP =六氟磷酸苯并三唑-1-氧基三。比咯烷并鎸 THF = 四氫吱喃 TLC =薄層色層分離法 TFA =三說醋酸 .所有在以下實例中提出的溫度係以攝氏度數計（°C )，除非有其它另外的指定。所有的試劑、原料及溶劑係購自市場上的供應商（如阿爾德克、弗魯卡（Fluka)、西佳瑪及類似供應商），除非有其它另外的註解，並以未進一步純化使用。萬古黴素氫氣酸鹽半水合物係購自新澤西州新州李堡（Fort Lee) 07024之雅來大藥廠（Alpharma，Inc.)(挪威奧斯陸（Oslo)之雅來大藥廠）。典型係使用C18管柱及（A) 98%水、2%乙腈、0.1% TFA 01 2616 -41 - 琴Λ 4 ：t 本紙浪尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210x297公釐)

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k 1335332 A7 B7 五、發明説明（37 (具有過量梯度（例如，〇至約70%)之（B) 1〇%水、9〇。/。乙腈、0.1% TFA進行反相HPLC ’除非有其它另外的說明。

實例A (7R)-7-[(Z)-2-(2-胺基-5-氣基噻唑_4_基）-2-(3-胺基丙氧基亞胺基）乙酿胺基】-3·[(1-"比咬并）甲基卜3-頭抱子菌素·4_叛酸鹽雙-三氟醋睃鹽之合成作用以下的合成作用係例證部份以上的方程式Α。步驟1 —氧基羰基）-3-溴基丙胺（如仆厶铷a , ρ p R1係-(Cjj：山R2係氡’ r6係BOC及z1係溴篡）之芻偌作网將3-溴基丙胺氫溴酸鹽（1〇〇公克，457毫莫耳）懸浮在1.6 公升無水T H F中。將該混合物在冰/水浴中冷卻至〇〇c及劇烈搜拌’同時加入1 90毫升三乙胺。將在2〇〇毫升THF中的特丁氧基羰基酐（112_6公克，516毫莫耳）逐滴加入該混合物中。允許冰洛溫熱至室溫’並將混合物搜掉隔夜，在此時以TLC顯示反應完成。接著將混合物過濾及將過濾物在真空下濃縮》將殘餘油以1500毫升己烷稀釋及在·2〇充下貯存3天。接著將混合物傾析，並將殘餘固體在真空下乾燥，以得到成為結晶狀白色固體之101公克（94%產量）標題中間物。 'H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): δ 1.35-1.39 (s, 9H), 1.9i， 1.95 (m, 2H), 2.99-3.04 (t, 2H), 3.43-3.52 (t, 2H), 6.95-6.99 (t, 1H) 〇步驟2 — LZ) -2- (2-三菜基甲基胺某嗓0-4-甚 g·^-—胺某而氧早ρ晬某）醋酸乙酯（gp化合物Sa夕r + ^ -42- 0x2 本紙張尺^^ T B a家樣準(⑽）μ规格(2iGx挪公爱) 1335332 A7 ____ B7 五、發明説明（38 ) 在此R1傜-fCHd”，R2係氪，R4係三笨基甲篡，R6係BOC 及A係an之劁備作用將（Z)-2-(2-三苯基曱基胺基）噻唑-4-基）-2-(羥基亞胺基）醋酸乙酯氫氣酸鹽（100公克，202.4毫莫耳）溶解在700毫升無水DMF中》將碳酸铯（230.8公克，708.5毫莫耳）及接著將蛾化四丁基敍（18.7公克，50.6毫莫耳）加入該撥拌混合物中。接著經30分鐘逐滴加入在DMF (1〇〇毫升）中的 BOC-3-溴基丙胺（50_6公克，212_5毫莫耳）》將混合物攪拌 2小時，在此時以HPLC顯示反應完成。接著將混合物過渡及將過濾塊以200毫升DMF清洗。將過濾物溶解在2公升醋酸乙酯中，並以700毫升之1當量HC1、接著以700毫升飽和水性碳酸氫納及最後以500毫升食鹽水清洗。將有機層經硫酸鋼乾燥，過j慮及在真空下漠縮。將殘餘油溶解在2 5 〇毫升沸騰的乙醇中及倒入燒杯中。在物質一旦完全冷卻時，則將殘餘的似灰色固體放入布氏（Biichner)漏斗中，並以先冷卻至-20°C之50毫升乙醇清洗（注意：產物會適度地溶解在乙醇中，使用較大量的乙醇將降低最終產物的總產量）。在以空氣乾無之後’將殘餘固體在研体中以研杵研磨成細粉末，並在真空下乾燥’以得到成為灰白色細粉末之 117公克（94%產量）標題中間物。 NMR (DMSO-d6, 300 MHz): δ 1.01-1.1 (t, 3Η), 1.31 (s, 9H), 1.60-1.70 (t, 2H), 2.94-2.99 (m, 2H), 3.95-4.04 (m, 4H), 6.77-6.81 (t, 1H), 6.95 (s, 1H), 7.16-7.38 (m, 15H), 8.80 (s, 1H) »

Gi^618 '43' 本纸張尺度制中S 8家料(CNS) A4規格(210 X 297公羡) ----- 1335332 A7 B7 五、發明説明 MS m/z: 615.4 [M+H]+。步驟 3 — (Ζ)-2·(2二某嶁岫·4-芊 gOC-胺幕丙氧皋亞胺皋）靖醜鹽（gp化会物5a，夺斗pl_ ’ r2係亂’ R係-三策篡曱早，R6傜BOC及A係gn 之盥備作用將來自以上步驟2之乙基酯（84.2公克，137毫莫耳）懸浮在400毫升無水乙醇中及在油浴中以攪拌加熱至8〇t。在全部的物質溶解之後，將在150毫升乙醇中的氫氧化_ (23_1公克，411毫莫耳）經20分鐘逐滴加入溶液中。在加完鹼之後的10分鐘開始形成沉澱物，並在再1〇分鐘之内，昆合物形成固體。自油浴取出混合物及在冰浴中冷卻。將醋酸乙醋及水加入冷卻的混合物中，接著倒入分液漏斗中。將辱合物以1當量鱗酸清洗，其會造成白色固趙的形成（注意.以較強的酸（如1當量HC1)清洗產物會造成產物降解）。將水加入分液漏斗中，以溶解該固體，並接著將有機層以飽和水性碳酸氫納及食鹽水清洗。將有機層經硫酸鈉乾燥’過濾及在真空下濃縮，以得到成為深褐色固體之標題中間物（80公克，99%產量ρ 步驟4—LZ_^2-(_2二^苯幕甲茱胺某·5·氳某蠄地-早v〇_ (3 - B Q.C -胺基丙氡基亞胺某1醋酸藜（g卩化合物5b，_此 R1係-(m二K2係氫’ R4係三笑某L甲矣，R6後A碑氢某）之製備作用將來自以上步驟3之中間物（10公克，17 〇4毫莫耳）溶解在70毫升氣仿中及授拌’同時加入氯基琥珀酿亞胺固趙〕i2G13 -44 - 本紙張尺度適用中國國家搮竿(CNS) A4規格(210X 297公釐)

線 1335332 A7 ________B7 ；_____ 五、發明説明（4〇 ) (2.28公克’ 17.〇4毫莫耳）（注意：實驗者建議過量的NCS可能引起不希望的副產物）。將混合物授拌隔夜（最少1 5小時），在此時以HPLC顯示反應完成。接著將混合物在真空下濃縮，並將殘餘物溶解在最少量的DMF中。將該混合物加入劇烈攪拌的水中，以形成沉澱物，接著以過濾收集。將固體以空氣乾燥，以得到成為褐色固體之9.5公克（90%產量）標題中間物。NMR顯示只殘留最少量的琥珀醯亞胺 (注意：沒有必要為了以下步驟的連續偶合作用而分離氯化產物’但是實驗者建議殘留的琥珀醯亞胺可能干擾後續的。比啶置換作用）。或者，在完成氣化反應之後，將反應混合物以水（3x)及食鹽水清洗，並接著經無水硫酸鈉乾燥。接著將該溶液過濾及在真空下濃縮，以得到成為褐色固體之標題中間物（90%)。 'H NMR (DMSO-d6s 300 MHz): δ 1.37 (s, 9H), 1.63-1.74 (t, 2H), 2.94-2.99 (m, 2H), 3.97-4.05 (t, 2H), 6.80-6.85 (t, 1H)，7.18-7.41 (m，15H), 8.97 (s，1H)。 MS m/z 621_3 [M+H]+。步驟5—(7R)-7-丨（Z)-2-(2-三茉某甲某肱美-5·氤某噢岫· 4-基）-2-(3-A^-BOC -胺基丙氣基亞胺甚崎胳疾1_3 -裔甲基-3-頭抱子菌素-4-翔酸鹽針-甲氣某笮早酯（gp化合物7，在此R1係，R2係氫，R4係三芣篡甲篡，R6係ΒΟΓ. 及R7係掛-甲氪臬芊某）之製備作用將來自步驟4之中間物（0.62公克，1毫莫耳）溶解在6毫升無水THF中’並將在4毫升無水THF中的〇34公克（0.83毫莫 -45- 本紙張尺度逋用中國國家搮竿(CNS) A4規格(210X 297公釐) ------ 裝.· 訂

k 1335332 A7 B7 五、發明説明（41 耳）7-胺基-3-氣甲基頭孢子菌素酸對·甲氧基苄基酯氫氣酸鹽（即化合物反，在此R7係PMB，自日本大塚製藥獲得的）加入該混合物中。將所得混合物在氮氣下攪拌及冷卻至 -3 5 °C。將二異丙基乙胺（0.52毫升，3毫莫耳）及接著將磷醯氣（0.11毫升，1.2毫莫耳）加入該冷卻的混合物中。將該混合物在-20 °C下攪拌30分鐘，並接著以濕THF中止及以醋酸乙酯稀釋。將該混合物以水、1當量HC1及食鹽水清洗，經硫酸鈉乾燥，過濾及濃縮，以得到成為棕-紅色固體之0.88公克（100%產量）標題中間物。4 NMR顯示沒有任何不希望的異構化作用及沒有任何殘留的琥珀醯亞胺。 !H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): δ 1.37 (s, 9Η), 1.63-1.74 (t, 2H), 2.94-2.99 (m, 2H), 3.4-3.74 (q, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.97-4.05 (t, 2H), 4.40-4.59 (q, 2H), 5.11-5.25 (m, 3H), 5.49-5.54 (m, 1H), 6.75-6.81 (t, 1H), 6.90-6.96 (d, 2H), 7.18-7.41 (m，17H)，8.97 (s，1H)，9.41-9.44 (d，1H)。 MS m/z 972.0 [M + H]+。 (注意：實驗者建議在以較大的規模進行以上的反應時，則DIPEA會造成異構化作用。以使用2,4,6-三曱基吡啶作為鹼及將整個反應期間（約10分鐘）的溫度維持在-35°C的改良式步驟避免該問題）。步驟ό — (7RV7-「m-2-(2-三笑某甲某胺基-5-氣某嘍吔1 4-某）-2-n-W-BOC-脖基兩氩某砟胺某）乙醯脖美1-3-171-叫. H)甲基1-3-逋抱子菌素-4-韃酸鞔對-甲氳某芊某酯fgP 金8，在此R1係彳CH,h-，R2係氤，R4值三茉某甲某，Rj 本纸張尺度適用中囷國家標準(CNS) A4規格(21〇)<297公釐)

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1335332 A7 I------B7 _ 五、發明説明（42 ) 盤·Β0(：及R7係對-曱氧基芊某；Φ tn之製備作用將來自步驟5之中間物（500毫克，0.514毫莫耳）溶解在2 毫升無水丙酮中，並使用箔片遮光。將溶液在氮氣下授拌 ’並加入77毫克（0.5 14毫莫耳）碘化鈉及將所得混合物搜拌 1小時。加入吡啶（63微升，0.772毫莫耳），並在90分鐘之後’將混合物加入2 5毫升乙中。將該混合物離心，並將所得片狀物以乙醚清洗及再離心。將醚傾析及將片狀物在真空下乾燥，以得到成為褐色固體之定量標題中間物，使用未進一步純化之該中間物。 lH NMR (DMSO-d6, 300 MHz): δ= 1.37 (s, 9Η), 1.63-1.74 (t, 2H), 2.94-2.99 (m, 2H), 3.3-3.50 (q, 2H), 3.4-3.74 (q, 2H)} 3.75 (s, 3H), 3.97-4.05 (t, 2H), 5.10-5.12 (d, 1H), 5.21 (s, 2H), 5.50-5.55 (m, 1H), 5.6 (s, 2H), 6.75-6.81 (t, 1H), 6.90-6.96 (d, 2H), 7.18-7.41 (m, 17H), 8.16-8.21 (t, 2H), 8.61-8.70 (t, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.98-9.02 (d, 2H), 9.41-9.44 (d, 1H)。 MS m/z 1014.2 [M+H]+。步驟 7 — (_7R)-7-「（Z)-2-(2-胺某-5-氡篡读岫-4-某、-2-(3-眩基丙氣某亞胺某）乙酿胺某l-3-ΙΎΙ-η比哈其）甲某1-3-通抱年蔗素-4-羧酸鹽雙-三氟醋酸鹽（即化合物2，在此R1係-(CHdp 」_R2係氫及m係0)之贺備作用將來自步驟6之中間物（14.4公克）溶解在i:i之三氟醋酸與二氣甲烷之混合物（120毫升）中。將6.2毫升茴香醚加入該搜拌混合物中，並將所得混合物在室溫下搜拌3小時。 C12622 .47- _本纸張尺度適用中@ S家標準(CNS) Α4規格(21GX297公釐) " 1335332 A7 _______B7 五、發明説明（43 ) 接著將混合物濃縮，並將殘餘物溶解在醋酸乙酯中及以水萃取。將水層凍乾，並將所得粉末溶解在水中及使用反相製備性HPLC純化。接著將所得純化水溶液凍乾，以得到 3 · 3公克（3 0 %產量）標題中間物。 *Η NMR (DMSO-d6, 300 MHz): δ= 1.80-1.97 (t, 2Η), 2.79-2.92 (m, 2H), 3.29-3.57 (q, 2H), 4.02-4.15 (t, 2H), 5.15-5.19 (d, 1H)S 5.41-5.63 (q, 2H), 5.83-5.92 (m, 1H), 7.39 (s, 2H), 7.77 (s, 3H), 8.17-8.22 (t, 2H), 8.60-8.70 (t, 1H), 9.0-9.08 (d, 2H), 9.59-9.62 (d, 1H)。 MS w/z 553.1 [M+H]+ » (注意··使用以三乙基甲石夕炫置換茴香越也可以進行以上的反應。此外’使用乙醚濕磨作用可以分離產物）。實例B (7R)-7-[(Z)-2-(2-胺基-5-氣基嗟嗤-4-基）-2-(3-胺基丙氧基亞胺基）乙醢胺基]-3·[(2,3-環戊烯-1-吡啶并）甲基】·3_頭孢子菌素-4-羧酸鹽雙-三氟醋酸鹽之合成作用使用實例Α說明的步驟及以2,3-環戊烯吡啶（自日本艮〇以獲得的）取代在步驟6中的吡啶，獲得標題中間物》 *H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 5= 1.82-1.947 (t, 2H), 2.18-2.29 (m，2H)，2.40-2.58 (m，2H)，2.81-2.95 (m，2H)， 3.09-3.17 (t, 2H), 3.21-3.30 (t, 2H), 4.10-4.19 (t, 2H), 5.15-5.19 (d, 1H), 5.40-5.61 (q, 2H), 5.83-5.92 (m, 1H), 7.39 (s, 2H), 7.77 (s, 3H), 7.89-7.96 (t, 2H), 8.42-8.48 (d, 1H)，8.62-8.69 (d, 1H), 9.60-9.63 (d，1H) » -48-C12623 _ ____ 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4规格(210X297公《)

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k 1335332 A7 B7 ~ ~ 五、發明説明（44 ) - MS m/z 592.5 [Μ+Η]+。

實例C (7R)-7-[(Z)-2-(2-胺基-5-氣基嘍唾-4-基）_2·(6•胺基己氧基亞胺基）乙醯胺基】-3-[(1-»Λ啶并）甲基卜3·頭孢子菌素酸鹽雙-三氟醋酸鹽之合成作用、使用實例A說明的步驟及以A^B〇C_6_碘基己胺取代在步驟2中的W-B0C-3-溴基丙胺（及排除碘化四丁基敍），獲^ 標題中間物。 lH NMR (DMSO-d6, 300 MHz)： δ 1.2 ppm (bs> 4H)> χ 3 ppm (m, 2H)，1.5 ppm (m，2H)，2.7 ppm (m，2H)，3.3 ppm (dd, 2H), 4.0 ppm (t, 3H), 5.1 ppm (d, 1H), 5.5 ppm (dd, 2H), 5.8 ppm (dd, ΪΗ), 7.25 ppm (bs, 2H), 7.6 ppm (bs, 3H), 8.2 ppm (dd, 2H), 8.6 ppm (dd, 1H), 9 ppm (dd, 2H), 9.5 ppm (d, 1H)。 MS m/z 594.3 (M+)。

實例D (7R)-7-[(Z)-2-(2-胺基-5·氣基噻唑-4-基）-2-(2-(2-胺基乙氧基）乙氧基亞胺基）乙醢胺基】-3-[(1-吡啶并）甲基】-3-頭孢子菌素-4-羧睃里雙·三氟醋酸鹽之合成作用使用實例A的步驟，除了以以下的步驟取代步驟2之外：步驟2 — (ZV2彳2-三芏某甲某胺某嚓唑-4-篡V2-r2-(2-W-BOC-胺基乙基）乙氣某亞胺某1醋酸乙酯（即化舍物5a之乙基酯，在此R1係，R2係氤，R44三笨基甲基，R6係80(：及氣）之劁借祚用 012624 本紙張尺度適用中國S家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1335332 A7 _____B7 五、發明説明（45 ) 將來自實例A中的步驟1之中間物（42.5公克，86毫莫耳）加入在DMF (300毫升）中的#-BOC-2-(2-碘基乙氧基）乙胺 (自2-(2-羥基乙氧基）乙醇以三個步驟製得的，即⑴ BOC20，KOH，（ii) MsCn，Et3N 及（iii) Nal)(28.5 公克，90 毫莫耳）及碳酸铯（84.1公克，258毫莫耳）之攪拌懸浮液中。將懸浮液在室溫下攪拌16小時，在此時以HPLC顯示反應完成。接著將反應混合物過濾及將過濾塊以DMF (1 〇〇毫升）清洗。將過濾物以醋酸乙酯（1公升）稀釋，並以水 (300毫升）、1當量HC1 (200毫升）、飽和水性碳酸氫鈉（200 毫升）及食鹽水（200毫升）清洗。將有機層經硫酸鎂乾燥，過濾及在真空中濃縮。將殘餘物以閃蒸管柱色層分離法 (1:1之醋酸乙酯：己烷）純化，以供應成為灰白色固體之 49.7公克（90%產量）標題中間物。 •H NMR (DMSO-d6, 300 ΜΗζ): δ= 2.96 (寬3,211)，3.20- 3.55 (q, 2H), 3.59 (t, 2H), 3.70 (t, 2H), 4.19 (t, 2H), 5.13 (d, 1H), 5.31-5.64 (q, 2H), 5.80 (dd, 1H), 7.40 (s, 2H), 7.87 (寬 s，3H)，8.20 (t, 2H), 8.64 (t, 1H)，9.23 (d，2H)， 9.55 (d，1H)。 MS m/z 503.1 [M-°比咬]+。實例E (7R)-7-[(Z)-2-(2胺基-5_氣基噻唑-4-基）-2-(4-胺基甲基苄氧基亞胺基）乙醢胺基1-3-丨（1-咕啶并）甲基]-3-頭孢子菌素-4·羧酸里雙-三氟醋酸鹽之合成作用使用實例A和實例D之步驟2說明的步驟及以W-BOC-4-012625 -50·

裝％訂

k 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公藿) 1335332 A7 _____B7 五、發明説明（46 ) (蛾曱基）苄胺（自4-(胺基甲基）笨甲酸以四個步驟製得的，即⑴ B0C20，KOH，（ii) LiAlH4，（iii) MsC1，Et3N及（iv) Nal)取代在步驟2中的#-BOC-2-(2-碘基乙氧基）-乙胺3-溴基丙胺氫溴酸鹽，獲得標題中間物。 'H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 5=3.18-3.59 (q, 2H), 4·00 (寬 s，2H), 5.13 (s，2H)，5.15 (d，2H), 5.40-5.64 (q， 2H), 5.85 (dd, 1H), 7.38-7.43 (m, 6H), 8.19-8.23 (m, 4H), 8.64 (t，1H), 9.17 (d, 2H)，9.71 (d，1H)。 MS w/z 614.1 [M+H]+，535.1 [M-吡咬]+。實例F (比較性） (7R)-7-[(Z)-2-(2-胺基噻唑-4-基）-2-(3-胺基丙氣基亞胺基）乙醢胺基】-3-[(l-吡啶并）甲基】-3-頭孢子菌素-4-羧酸鹽雙- 三氟醋酸鹽之合成作用以排除以上的實例A之步驟4製備實例A之脫氣基衍生物中間物。咕蘭11(〇]^〇-<16, 300 ]^取)：5= 1.75-1.82 (1，211)，2.67-2.82 (m, 2H), 3.25-3.61 (q, 2H), 3.98-4.09 (t, 2H), 5.13-5.17 (d, 1H)S 5.38-5.58 (q, 2H), 5.79-5.85 (m, 1H), 6.62 (s, 1H)，7.15-7.25 (寬 s，2H)，7.60-7.75 (寬 s, 3H), 8.16-8.19 (t， 2H)，8.58-8.63 (t，1H)，8.95-9.01 (d，2H)，9.57-9.60 (d，1H) 〇 MS m/z 518.6 [M+H]+。

實例G 萬古街:素3-(胺氧基）丙基醮胺之合成作用步驟ί — #-(3-胺篡丙氳某）奸醯亞胺之製備作用 012626_~51' _

本紙浪尺度適用中國國家揉準(CNS) A4規格(210 X 297公D

訂

線 1335332 A7 B7 五、發明説明（47 ) 將"-(特丁氧基幾基）-3-漠基丙胺（來自以上的實例a之步驟1)(9.58公克，40.23毫莫耳）及沁羥基酞醯亞胺（6 36公克，39毫莫耳）溶解在70毫生無水DMF中。將二異丙基乙胺 (7.01毫升’40_23毫莫耳）加入該溶液中，生成深紅色。將反應在室溫下授拌16小時，在此時將反應倒入5 〇〇毫升二乙醚中。將所得白色沉澱物過濾及棄置。將有機溶液以 2x200毫升飽和碳酸氫鈉及2x200毫升水清洗。將有機溶液經無水硫酸鎮乾燥，過遽及濃縮，以得到白色固體。接著將該固體溶解在50毫升DCM及50毫升TFA中。在搜掉i小時之後’將該溶液倒入300毫升二乙醚中。將所得沉殿物過詖，以二乙醚清洗及在真空下乾燥，以供應成為其三氟醋酸鹽之標題中間物。 *H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 6=1.90 (2H, qn), 2 95 (2H，t), 4.18 (2H, t)，7.79 (4H, s), 7·92 (3H,寬 s)。步驟2-簋左J歎素3-(^醯砟胺氳某、呙其醢$今个丨備作用將萬古黴素氫氛酸鹽（1〇·〇公克，6·74毫莫耳）與來自步驟1之中間物（2.70公克，8.09毫莫耳）在1〇〇毫升無水DMF 中製成泥漿。加入二異丙基乙胺（4.70毫升，26.98毫莫耳），並將所得混合物在室溫下攪拌10分鐘。接著加入在dmf (20毫升）中的PyBOP (5.61公克，10.78毫莫耳）及H〇At (1.65公克，1〇_78毫莫耳）之溶液，並將反應在室溫下攪拌。在1小時之後’將反應混合物加入二乙醚（5 〇〇毫升）中。將所得沉澱物過濾，以二乙醚清洗及在真空下乾燥，以產生成為灰白色固體之標題中間物。 52- 中 B S 家標準(CNS) A4規格(21GX297公釐f 1335332

MS m/z= 1651.8 (M+H)+ 〇步驟3 — 1太邀^3-(胺氮莘）丙某醯胺之镅備作5 將來自步驟2之中間物（U.2公克，6.74毫莫耳）在8〇毫升無水DMF中製成泥毁，並加入肼單水合物（〇·65毫升， 1 3.48毫莫耳）。將反應在室溫下攪拌4 5小時，並接著將1 毫升二氟醋酸加入反應混合物中，接著加入3 〇〇毫升二乙謎。在劇烈攪拌之後’將所得沉澱物過濾，以二乙醚清洗及在真空下乾燥。將標題化合物以使用水/甲醇梯度之反相HPLC純化’以供應成為束乾粉末之標題中間物。 MS m/z= 1522.9 (Μ+Η)+。實例Η (7R)-7-[2-(2-胺基-5-氣基噻唑_4_基）-2-氧基乙醯胺基】·3· 【（1-nfc咬并）曱基卜3-頭抱子菌素_4-叛暖里雙·三氟睹酸鹽之合成作用步驟1 — 某胺某-ϋ某噻唑-4-篡备芊崎始乙酯之劁借作同將2-(甲酿基胺基噻唑-4_基）_2_氧基醋酸乙酯（9丨公克， 39.87毫莫耳）（自威斯康新州米爾瓦基（Milwaukee)之阿爾德克獲得的）在50毫升無水DMF中製成泥漿》加入成為固趙之氣基琥珀醯亞胺（5 6公克，41 86毫莫耳），並將懸浮液在室溫下攪拌。在18小時之後，將反應混合物倒入 500毫升水中。將所得白色沉澱物過濾，以水清洗及以空氣乾燥’以供應成為白色固體之標題中間物。，H NMR (DMS〇-d6, 300 MHz): 5=1.2 (t, 3H), 4.3 (q, 0JU62S .53- 本紙張尺度適用a轉竿x ---- 1335332

2H)，8.55 (s，1H)。秦步驟2—胺某-5-裔某螻唑-4-甚V2-惫早呀研之製備作用將1克分子量NaOH (30毫升，30毫莫耳）加入來自步驟i 之中間物（3.6公克，13.7毫莫耳）中。將所得懸浮液在室溫下攪拌2小時（在此時溶液變澄清），並接著加入丨克分子量 HC1 (30毫升，30毫莫耳），接著加入1〇〇毫升水。在劇烈攪拌之後，將所得沉澱物過濾，以最少量的冷水清洗及以空氣乾燥’以供應成為灰白色固體之標題中間物。 4 NMR (DMSO-d6, 300 ΜΗζ): δ= 8.5 (s，1H)。步驟3 一 @)-7-「2-α-甲醯篡脖某-5-翁其啤·崦_4_其）·9_ 氧基乙酿胺幕1_3 -氣甲篡-3-頭执子菌音·4_跆酴發斜·尹童基苄基酯之劁借作- 將來自步驟2之中間物（ι·〇3公克，4_37毫莫耳）、7-胺基-3-氣甲基頭孢子菌素酸對-甲氧基苄基酯氩氣酸鹽〇 95公克’4.81毫莫耳）及^[〇八1(0.74公克，4‘81毫莫耳）在15毫升無水DMF中製成泥漿。將反應容器以氮氣沖洗及以外用冰浴冷卻至〇t。將1-(3-二甲基胺基丙基）_3_乙基碳化二酿亞胺氫氣酸鹽（0.92公克，4.81毫莫耳）加入冷的反應混合物中，接著加入2,4,6-三曱基吡啶（0.64毫升，4.81毫莫耳）。將反應在0°C下攪拌2小時及倒入200毫升之〇·5克分子量HC1。將所得沉殿物過渡，以水清洗及以空氣乾燥，以供應成為紅色固體之標題中間物》使用未進一步純化的化合物。 012629 本紙蒗尺度適用中圏B家揉竿(CNS) A4規格(21〇 x 297公釐) 1335332 A7 B7 五、發明説明（50 ) MS m/z= 607 (M+Na)+。步驟4 — (710-742-(2-穿醯某胺某-5-氣某嘍·4·某氣基乙醯胺基1-3-(1-吡咹甲某-3-通孢子餡去始输對-甲氧基苄基酯之劁借作用將來自步驟3之中間物（2.5公克，4.27毫莫耳）及碘化鈉 (0.64公克，4.27毫莫耳）溶解在丙酮中及箔片遮光。將反應攪拌10分鐘，並接著加入吡啶（0.42毫升，5.12毫莫耳）。接著將反應在室溫下攪拌1小時，並接著加入3〇〇毫升水。將所得沉澱物過濾，以水清洗及以空氣乾燥，以提供紅色固體。將該固體在反相HPLC上純化，並將所得水溶液凍乾，以供應成為凍乾粉末之標題中間物β MS m/z= 628.1 (Μ)+。步驟 5 — (7ΙΟ-7-Γ2-(2-胺某-今-氟某漆-4-基、-7·窗. 龜.胺基1-3-(1-°比咬并）甲基-3-頭抱子菌素-4-跆醅鹽勢手鹽酸鹽之劁備作用將來自步驟4之中間物（〇·ιι公克，〇,18毫莫耳）溶解在$ 毫升甲醇中’並加入濃縮水性氫氯酸（〇5毫升將所得溶液在室溫下攪拌1.5小時❶在真空下除去甲醇，並加入丙腈（ίο毫升）。接著將溶液在真空中濃縮’ bDCM (2毫升）及TFA (2毫升）加入殘餘物中，並將所得混合物在室溫下攪拌1.5小時。接著加入二乙醚（5〇毫升），並以離心分離標題中間物。使用未進一步純化的該中間物。 MS m/z= 479.9 (M)+。

實例I 012630 '55-

丄335332 A7 I----------- B7 五、發明説明（51 ) 化合物13之合成作用，在此111係_((：112)3_，R2係氩及rn係0 步驟1 _ 0-2-(2-胺華.5-氩基魂4丄早1-2-Π-胺某丙氫基亞胺基）醋酸鹽之盤備你用將來自實例A的步驟4之中間物（〇 75公克，1.21毫莫耳）溶解在5毫升DCM及5毫升三氟醋酸中。在室溫下攪拌1小時之後’加入100毫升二乙醚。將所得沉澱物過濾，以二乙越清洗及在真空下乾燥，以供應成為棕色固體之標題中間物<* 步驟2 —化佥物13 (在此只丨後，R2係氤及所係w 1製備作用將萬古黴素氩氯酸鹽（1.3公克，0.88毫莫耳）及HOAt (0.14公克，0.88毫莫耳）在3.5毫升無水DMS0中製成泥聚 °加入在3.5毫升無水〇1^中的？丫丑0?(0.46公克，〇.88毫莫耳）之溶液，接著加入DIPEA (154微升，0.88毫莫耳）。在攪拌20分鐘之後’加入在1毫升DMF t來自步驟1之中間物（0.22公克，0.44毫莫耳）之溶液，接著快速加入DIEa (0.54毫升’ 3.08毫莫耳）。將反應混合物在室溫下授拌1小時’接者加入0.5毫升二氣醋酸，接著快速加入毫升 EhO。將所得沉澱物過濾，以EhO清洗及在真空中乾燥。將粗產物以反相HPLC純化及將所得水溶液凍乾，以供應成為凍乾粉末之標題中間物》 MS m/z= 1711.0 (M+H)+。實例1 式Ϊ化合物之合成作用，在此R1係-(CH2)3-，R2係氫及册係 012631 _^_ 本纸法尺度適用中因理家採準(CNS) A4規格(21〇 x 297公I) -- 1335332 A7 B7 五、發明説明（52 ) 0 (在表I中的化合物1) 將萬古黴素SL氣酸鹽（4.2公克，2.8毫莫耳）溶解在40毫升〇]^〇中。將在40毫升1>]^中的？丫8〇?(1.3公克，2.6毫莫耳）及HOAT (0.35公克，2.6毫莫耳）之溶液加入該溶液中 ’接著加入0.98毫升（5_68毫莫耳）二異丙基乙胺。將混合物在室溫下授拌30分鐘，並接著以〇_44毫升（5.7毫莫耳）三氟醋酸中止。接著將混合物冷卻至〇〇c，並加入在〇<»c下在 20毫升DMF中來自以上實例A之中間物（ι·3公克，2 6毫莫耳）之溶液，接著加入1.5毫升（11·4毫莫耳）2,4,6-三子基〇比咬。將混合物在〇C下維持4小時，並接著以1.1毫升二氣醋酸中止。接著將混合物加入乙醚中，以形成沉澱物，離心’以謎清洗，傾析及在真空下乾燥。將所得粉末溶解在水中及使用製備性HPLC純化》將包括預期產物之儀份束乾’以得到標題化合物之三氟醋酸鹽。接著使用 Amberlyte樹脂交換鹽之陰離子，以供應成為白色粉末之標題化合物的三氫氣酸鹽（1·4公克，27%產量）。 MS m/z 953.3 [[Μ+Η]+-吡啶]/2 ; 992.0 [Μ+Η]+/2。此外，使用實例Α和實例1之步驟製備在表丨中展示的化合物2-30，其係使用以下經取代之沘啶置換在實例A之步驟6中的0比咬：實例2-2-皮考啉實例3— 3-皮考啉實例4 一 4-皮考啉實例5—2-甲氧基吡啶 -57- 012632 本纸張尺度適用中a S家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) rI335332 A7 B7 五、發明説明（53 實例6 — 3 -曱氧基吡啶實例7—4-甲氧基吡啶實例8 — 2-硫代甲氧基吡啶實例9 — 3 -硫代甲氧基吡啶實例10 — 4-硫代曱氧基吡啶實例11 _ 2-氟基吡啶

實例12— 3-氟基吡啶實例13 — 4-氟基吡啶實例14 — 2-氣基吡啶實例1 5 — 3 -氯基吡啶實例16 — 4-氣基吡啶實例17 — 2-苯基。比啶實例18 _ 3-笨基吡啶訂

實例19 — 4-苯基°比啶實例20- 4-環丙基吡啶實例21 —4-(羧基硫代甲氧基”比啶實例22 -異煙醯胺實例23- 2,3-盧剔啶實例2 4 — 3，4 -盧剔咬實例25 — 3，5-盧剔啶實例26 — 3,4-二曱氧基吡啶實例27 — 4-甲氧基-3-曱基吡啶實例28 — 4 -敗基-3-曱氧基0比咬實例29- 2,3-環己烯吡啶 012633 -58- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1335332

五、發明説明（實例30— 2,3-環戊烯吡啶以上經取代之0比咬係或市售商。充·^… 吾珣°°或可以文獻步驟製備。實例3 1 式I化合物之合成作用，在此R^、_(CH2)<； _，R2係氫及故 0 (在表1中的化合物31) 、使用實例1之步驟及以實例C之中間物取代實例八之物，以製備標題化合物。间 MS m/z 2026.5 (M+)。實例32 式I化合物之合成作用’在此Ri係_(CH2)2_0_(Ch2；)2_，r2 係氫及w係0 (在表i中的化合物32)

使用實例1之步驟及以實例D之中間物取代實例A之中間物，以製備標題化合物。 S MS m/z 967.9 [(Μ-吡啶）/2]+。實例33 式I化合物之合成作用’在此R1係ΤΗγΜ-苯基·Ch2… R2係氩及w係0 (在表I中的化合物33) 使用實例1之步驟及以實例E之中間物取代實例a之中間物，以製備標題化合物。 MS m/z 1967.0 [M+H]+，984.2 [(M-吡啶）/2]+。實例34 (比較性）式Ϊ之脫氣基化合物之合成作用，在此R1係-(CH2)3-，係氩及w係0 (化合物34) 使用實例1之步驟及以實例F之脫氣基頭孢子黴素中間物 01^631 -59- 本纸張疋度逋用中國國家標竿(CNS) A4規格(210X297公釐）訂線 1335332 A7 _____B7 五、發明説明（55 ) 取代實例A之中間物，以製備標題化合物。 MS m/z 935.3 [[M+H]+-吡啶]/2 ; 974.9 [M + H]+/2。實例35 最低的抑制濃度（MIC)的測定使用在NCCLS指南陳述的培養液微量稀釋法進行最低的抑制濃度（MIC)檢疋作用（參考NCCLS. 2000. Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria

That Grow Aerobically; Approved Standard-第五版第 20冊編说2)。自美國模式菌種收集中心（American Type Tissue Culture Collection)(ATCC)、史丹佛大學醫院（su)、在柏克萊的1/1隨醫院區域實驗室（Kaiser Permanente Regional Laboratory in BerkeIey)(KPB) ' 麻州綜合醫院（MGH)、疾病管制中心（CDC)、舊金山退伍軍人管理醫院（SFVA)或加州舊金山醫院大學（UCSF)獲得菌株》將耐萬古黴素腸球菌以彼對替考拉寧（teicoplanin)之敏感性為基準分成van a或 Van B定義表型》也自梅佑醫學中心（May〇 ciinic)獲定成為Van A、Van B、Van Cl或Van C2定基因型之部份耐萬古黴素腸球菌。在該檢定作用中’將參考及臨床菌株之冷藏菌培養物在適S的填脂培養基上（即姨化路蛋白大豆培養基、具有去纖維蛋白之羊紅血球的胰化酪蛋白大豆培養基、腦心浸出複脂、巧克力瓊脂）以劃線分離《在允許形成菌落的培養作用之後，將這些平盤以石蠟膜密封及以冷藏貯存多達2 -週。為了製備檢定接種源及保證低變異性，故將許多來自 012635 -60- 未纸法尺度適用中8 ®家料(CNS) A4規格(21GX297公釐) ------ 五、發明説明（56 ) 瓊脂盤上培養之細菌分離物的菌落以接種圈種植及無菌方式轉移至慕勒-席頓（Mueiier_Hinton)培養液中（以二價陽離子補充至以製造商認可為基準之必要量）。將培養液在35它下隔夜生長，以新鮮的預溫熱之培養液稀釋及生長至對數增殖期；其相當於0.5麥克法蘭德標準（MacFarland Standand)或每單位毫升lxl〇8菌落形成單位（CFU/毫升）。在混濁度相當於馬克法蘭德標準時，由於物種變異性，故不是所有的細胞懸浮液包括lxl08 CFU/毫升，因此以不同的菌株稀釋液進行可接受之調整（以NCCLS指南為基準）。稀釋接種源，使得在慕勒_席頓培養液、補充之慕勒_席頓培養液或嗜血桿菌試驗培養基中的100微升該培養物在96 井微量滴定盤中也在1〇〇微升之對應培養基中的2_倍連續稀釋之抗生素濃缩物上層化時，則該培養物會生成 5χ 105 CFU/毫升之起始細菌濃度。接著將平盤在35〇c下培養1 8-24小時。以肉眼讀取完全沒有細菌生長的最低濃度 MIC。將細菌生長定義成超過3個以上的針點菌落、大於2 毫米直徑之鈕釦狀沉澱細胞或明顯的混濁度。在初篩選中例行測試的菌株包括二甲氧笨青徽素敏感型金黃色腸球菌（MSSA) '耐二甲氧笨青黴素之金黃色葡萄球菌（MRSA)、生產青徽素之金黃色葡萄球菌、二曱氧苯青黴素敏感型白色表皮葡萄球菌（MSSE)、耐二曱氧苯青黴素之白色表皮葡萄球菌（MRSE)、萬古黴素敏感型糞腸道球菌（EFMVS)、萬古黴素敏感型糞腸球菌（EFSVS)、也耐替考拉寧敏感之耐萬古黴素之糞腸道球菌（EFMVR Van

『1335332 A7 B7 五、發明説明（57 ) A)、替考拉寧敏感型耐萬古黴素之糞腸道球菌（EFMVR Van B)、也耐替考拉寧敏感之耐萬古黴素之糞腸球菌 (EFSVR Van A)、替考拉寧敏感型耐萬古黴素之糞腸球菌 (EFSVR Van B)、盤尼西林敏感型肺炎鏈球菌（PSSP)及耐盤尼西林之肺炎鏈球菌（PSRP)。因為PSSP及PSRP完全無法在慕勒-席頓培養液中生長，故使用或以去纖維蛋白之血液補充之TS培養液或嗜血桿菌試驗培養基測定那些菌株之 MIC。接著在包括以上陳列的物種與同時敏感及耐二甲氧笨青黴素之未分化之凝血酶陰性葡萄球菌（MS-CNS及MR-CNS) 之更大的臨床分離物嵌板中測試具有明顯的抗上述菌株活性之試驗化合物的MIC值。此外，也檢定這些試驗化合物的抗革蘭氏陰性微有機體之MIC，如出血性大腸桿菌、綠膿桿菌、克雷白氏肺炎桿菌、陰溝腸桿菌、鲍氏不動菌、感冒嗜血桿菌及墨拉克氏卡他菌。與已知的抗生素（萬古黴素）比較，表Π展示抵抗耐二曱氡苯青黴素之金黃色葡萄球菌（MRSA)及耐二甲氧苯青黴素之白色表皮葡萄球菌（MRSE)之本發明化合物的MIC90數據。 012637 本纸張尺度適用中國国家標準(CNS) A4規格(210X297公釐)

訂

線 1335332 A7 B7 五、發明説明（58 )

表II 最低的抑制濃度（MICs) 微有機體試驗化合物 mic9〇2 (微克/毫升）财二曱氧笨青黴素之金黃色葡萄球菌(MRSA) (11=53)1 化合物1 <0.1 萬古黴素 3 耐二甲氧苯青黴素之白色表皮葡萄球菌 (MRSE)及其它的凝血酶陰性葡萄球菌(n=34) 化合物1 <0.1 萬古黴素 4 測試之菌株數。 90%之測試菌株最低的抑制濃度。此外，如表III的展示，在與相關的脫氣基衍生物（即化合物34)比較，本發明的化合物也具有令人驚訝及意外的抵抗各種耐二甲氧苯青黴素之金黃色葡萄球菌之MIC。

• € 裝▲ 表III 最低的抑制濃度微有機體 MIC (微克/毫升）化合物1 化合物34 MRSA 33591 <0.1 0.17 MRS A MED-103 <0.1 0.20 MRSA MED-104 0.10 0.58 MRSA MED-107 <0.1 0.34 MRSAMED-110 0.2 0.49 MRSA MED-572 <0.1 <0.1 MRSA MED-84 <0.1 0.29 MRSA MED-85 <0.1 0.32 MRSA MED-86 <0.1 0.29 MRSA MED-87 <0.1 0.49 MRSA MED-88 <0.1 0.34 MRSA MED-89 <0.1 0.18 訂

線〇126：8 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1335332

實例36 殺時間檢定作用該殺時間檢定作用係測量試驗化合物的殺菌活性速度之方法。這些步驟類似於那些在v勞瑞亞（Lorian)之第四版 Antibiotics in Laboratory Medicine5% Williams and Wilkins (1996)第104-1〇5頁說明的步驟《希望以快速的殺時間迅速阻止細菌的菌落作用及減少宿主組織的損傷。如測定MIC之實例35的說明製備細菌接種源。將細菌在搖動的燒瓶中以預溫熱之培養基稀釋及以搖動培養（2〇〇轉/ 分鐘’ 35°C )。在〇、1、4及24小時時，自燒瓶取出樣品，並以平盤計數方式計算細菌。在初次取樣之後，將欲檢定之化合物加入搖動的燒瓶培養物中。以殺時間曲線的圖示方式表現在加入化合物之前及之後的這些間隔的平盤計數量。將殺菌活性定義成經24小時具有之3對數降低的細菌數 (減少大於或等於99.9%)。在該檢定作用中，式I化合物（即化合物1)在4小時内以 S1微克/毫升濃度具有抗MSSA 13709及MRSA 33591之殺菌性》與在24小時内以4微克/毫升濃度具有MSSA 13709 及MRS A 33591之殺菌性的萬古徽素比較。實例37 在低白血球老鼠中的活體内效力研究自Charles Rivers實驗室（加州基爾洛（Gilroy))取得動物 (老鼠CD-1鼠’ 20-30公克），並允許以自由進食及飲水。在接種細菌之前，以4天及2天經由腹膜内（ip)注入2〇〇毫克/ -64 - 0126^9 本紙蒗尺度適用中困國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1335332 A7

公斤之環墙醯胺誘發嗜中性球減少症。所使用的有機體係對臨床上相關的革蘭氏陽性病源之易感型或耐菌株，如二甲氧笨青黴素敏感型金黃色葡萄球菌 (MSSA 13709)及耐二甲氧苯青黴素之金黃色葡萄球菌 (MRSA 33591)。細菌接種源濃度係〜1〇6 CFU/毫升。將動物以異敦醚輕微麻醉，並將50毫升細菌接種源注入前大腿内。在接種之後1小時，給予動物經靜脈内服用媒劑或適當劑量之試驗化合物》在治療之後的〇小時及24小時時，將動物安樂死（以C〇2窒息），並以無菌方式取下前及後大腿。將大腿玫入10毫升無菌食鹽水中及授勻β將勻漿的稀釋液覆蓋在胰酵素大豆瓊脂平盤上，將其以隔夜培養。以稀釋倍數乘以在既定平盤上的菌落數，除以大腿重量（以公克計），並以對數CFU/公克表示。以ED5〇 (造成減少最多50%大腿力價所需要的劑量）評估每一個試驗化合物。在使用MRSA 33591的該檢定作用中，與具有9毫克/公斤iv之ED”的萬古徽素比較，式I化合物（即化合物丨）具有 ED5〇< 0_20 毫克 / 公斤 iv。實例3 8 水性溶解度的測定使用以下的步驟測定本發明化合物的水性溶解度。以i 毫升之1當量氫氣酸（阿爾德克）加入99毫升之5重量％右旋糖水溶液中（巴斯特（Baxter))，以製備在pH 2.2下的5重量％之右旋糖緩衝溶液。接著以1毫克試驗化合物溶解在1毫升DMSO中，以製備 012640 .65. 1 本纸浪尺度逋用中S S家揉準(CNS) A4規格(210X297公着) 1335332 A7 五、發明説明

用作校正標準品的丨毫克/毫升之儲備溶液。將該溶液渦動 3〇秒及接著以1〇分鐘聲波化。接著將儲備溶液以水稀釋，以製備具有以下濃度之校正標準品：5〇、125、25〇、375 及500微克/毫升。將每一個試驗化合物（30毫克）稱重放入密理博（MilHp〇re) 無菌的Ultrafree-MC 0.1微米過濾單位中（密理博υροονγοο) ，並將磁攪拌棒加入每一個單位中。接著將5重量％之右旋糖緩衝溶液（750微升）加入每一個單位申，並將這些混合物渦動5分鐘。接著將過濾單位放入小離心試管架中及將試管架放在磁攪拌器上。接著將每一個單位使用丨當量 NaOH (VWR)滴疋成pH 3，並將所得溶液在7〇〇〇轉/分鐘下離心5分鐘。將著將每一個單位以5重量％之右旋糖緩衝溶液稀釋200倍，並將稀釋的樣品轉移至用於分析的自動取樣瓶中。使用以下條件的反相HPLC分析校正標準品及試驗樣品：管柱：路納（Luna) 150x4.6毫米；C18 ; 5u

移動相.A一5/95 ’ B=95/5，兩者= MeCN/H20 ; 0.1% TFA 方法. 10mLido 100 (在6分鐘内的〇_ι〇〇%Β) 注射體積：20微升波長： 214毫微米比較試驗樣品對校正曲線的波峰面積及乘以稀釋倍數，以計算每一個試驗樣品之溶解度。以重複的樣品製品使用以上的步驟發現化合物1具有>47.9毫克/毫升之溶解度。雖然已參考特殊的具體實施例說明本發明，但是那些熟 012641__ 本纸張尺度適用中國國家搮準(CNS> A4規格(21〇X 297公董) 五、發明説明（62 瞭解可以不違背本發明真實的精神及範圍改，以同等物取代。此外，可以進行許多修、物質組合物、方法U 特殊情況 '物質 y 方法、方法步驟或步驟等。希望所有的這些修改係在所附的申請專利範圍心此外將在本文引用的所有發表案、專利及專利文件以其全文至假如已個別併入以供參考的相同範圍併入本文以供參考。 012642 本紙張尺度適用中國國家揉準(CNS) A4規格(210X297公釐）

Claims

1335332 Α8 ΓΓΤ\口第 091123091 號專利申請案 $ -¾-- 中文申請專利範圍替換本(99年6月）/安D8丨‘… ^ 1 六、申請專利範圍 1.一種式I化合物，

裝訂或其在醫藥上可接受之鹽，其中 R1 係-Ya-(W)n-Yb-; W係選自由-Ο-及伸苯基所構成的群組； Ya&Yb係獨立為Cu伸烷基； R2係氫；每一個R3係獨立選自Cu烷基、-ORd、-SRd、-SCH2COOH、鹵素、苯基、C3.6環烷基及-C(0)NRdRe， O:\80\80794-990608.doc 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210x297公釐) 1335332 A8 B8 C8 _______ D8 六、申請專利範圍或將兩個鄰接的尺3基接合，以形成c3.6伸炫基；每一個Rd&Re係獨立為氬或Cw烷基； m係〇、1或2 ;及万係0或1 〇 2. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其中”係〇，ya&Yb 係獨立是(：丨_6伸烷基。 3. 根據申凊專利範圍第j項之化合物，其中”係〇 ,將與合在一起形成_(〇η2)2·8-基。 4. 根&據申請專利範圍第3項之化合物’其中”係〇，將γ3與 Yb結合在一起形成 _(CH2)2-、_(CH2)3_、_(CH2)4_ ' (ch^· 或-(CH2)6-基。 5. 根據申請專利範圍第4項之化合物，其中”係〇，將铲與 Yh#合在一起形成-(CH2)3-基。 6. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其中Λ係1，丫3與0 係獨立為C!_6伸烷基。 7 ·根據申請專利範圍第6項之化合物，其中w係伸苯基或· 0-。 8 .根據申請專利範圍第1項之化合物，其中^係1，γ3及γ1) 同時是-CH2·，及w係伸苯基。 9.根據申請專利範圍第1項之化合物，其中„係1，丫8及γΐ5 同時是·ί：Η2(：Η2-，及 W係-0- » 1 0.根據申請專利範圍第1項之化合物，其中历係〇。 11.根據申請專利範圍第1項之化合物，其中讲係1或2，及每一個R3係獨立選自由Cl-6烷基、C3.6環烷基、-〇Rd、 80794-990608.doc 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210x297公釐) 1335332 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 -SRd、-F或-Cl所構成的群組，或將兩個鄰接的R3基接合形成C3.6伸烧基。 12. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其中R1、R2、R3及 m係如表I中的定義。 13. —種式II化合物，

或其鹽，其中 P1及P2係獨立是氫或胺基保護基； P3係氫或羧基保護基； Q係離棄基或式 liTV-(R3)m 之基； X" 其中 R1 係-Ya-(W)n-Yb-; W係選自由-Ο-及伸笨基所構成的群組；丫3及丫15係獨立為Cw伸烷基； R2係氫； 80794-990608.doc -3- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210x297公釐) 1335332 A8 B8 C8 〇8 六、申請專利範圍母一個R3係獨立選自Γ 曰烷基、-0Rd、-SRd SCH2COOH、函素、笨基匕3.6環烷基及-C(0)NRdRe 或將兩個鄰接的以接合^形成&伸院基；每-個R及㈣獨立為μ、炫基； χ-係視需要存在的陰離子； W係〇、1或2 ;及 «係0或1。 14. 一種式III化合物， βΝ—ρι R1-

0- Η m *p4 或其鹽，其中 Ρ1及Ρ2係獨立是氫或胺基保護基； Ρ4係氫或羧基保護基； R1 係-Ya-(W)n-Yb-; W係選自由-〇-及伸苯基所構成的群組； Ya及Yb係獨立為Cu伸烷基； R2係氫；及 w係0或1。 15.—種治療哺乳類中細菌感染之醫藥組合物，其包含在醫藥上可接受之載體及有效治療劑量之根據申請專利範圍 80794-990608.doc 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210x297公釐) 1335332 Αδ Βδ C8

第1 -12項中任_項之化合物。 16.—種於活體外抑制細菌生長之方法， :具有=長抑制量之根據申請專利範：二包項之化合物接觸。以項中任 1 7· —種於活體外抑制細菌的細胞壁生物合成法包含以細菌與具有細胞壁生物合成抑制：：：掳：：專利範圍第1-12項中任一項之化合物接觸。明 18_—種製備根據申請專利範圍第i項之化合物的方法，該方法包含將萬古黴素或其鹽與式2_化合物：

或其鹽反應，以提供式I化合物成其鹽。 19· 一種製備根據申請專利範圍第1項之化合物的方法，該方法包含將式Μ化合物： 80794-990608.doc -5- ------ 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210x297公釐) ABC D 1335332 六、申請專利範圍

3 Η Η 5 5 h2n 或其鹽與式11化合物：

〇/ 0

或其鹽反應，以提供式I化合物或其鹽。 20. —種製備根據申請專利範圍第1項之化合物的方法，該方法包含將式乏化合物： 80794-990608.doc -6- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210x297公釐） 1335332 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 Μ

9

(R3)r 或其鹽與式11化合物：

OH 〇广〇 .、、〇H ΌΗ

或其鹽反應，以提供式I化合物或其鹽。 21.根據申請專利範圍第1-12項中任一項之化合物，其係用於製造有用於治療哺乳類中細菌感染之藥劑。 80794-990608.doc -7- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210x297公釐)