TW496737B

TW496737B - Improving the tolerability of pharmaceutically active β-amino acids

Info

Publication number: TW496737B
Application number: TW085108582A
Authority: TW
Inventors: Michael Matzke; Hans-Christian Militzer; Joachim Mittendorf; Franz Kunisch; Axel Schmidt
Original assignee: Bayer Ag
Priority date: 1995-07-19
Filing date: 1996-07-16
Publication date: 2002-08-01
Also published as: CN1115145C; JPH09202761A; EE03803B1; ES2154761T3; AU5948896A; MA23940A1; NO963000L; RU2181123C2; YU20050685A; RO118656B1; CZ287896B6; BR9603124A; US5935988A; IL118869A; GR3035601T3; YU41796A; SI1043332T1; MX9602836A; UA46725C2; TNSN96100A1

Description

496737 '-A7 B7 五、發明説明（1 ) 由EPU71870、DOS 4302155、JP 02174753 A2和J· Antibiot· (1991)，44(5), 546-9中得知環戊垸-厶-胺基酸和環戊烯-乃-胺基酸。這樣的/3 -胺基酸具有抗微生物、特别是抗徽菌作用❶然而它們有副作用。現已令人驚異地發現·· α-胺基酸和/或其衍生物與環戊炫胺基酸和/或其衍生物的混合物、來自上述α-胺基酸和上述環戊烷•乃-胺基酸的二狀和上述混合物與上述二肽的混合物沒有不合需要的副作用或者副作用較小，因此在溫血動物中的可耐受性得到改善。因此，本發明涉及包含一種或多種α-胺基酸和/或其衍生物和一種或多種環戊烷->8 -胺基酸和/或其衍生物的混合物。術語π衍生物”包括衍生自相應的氨基酸並具有類似的作用的那些化合物，特别是相應的鹽。適宜於本發明混合物的胺基酸優選式（U) 胺基酸 R3 5 4人 ⑽， r5r4n 八 cox 式中經濟部中失樣準局g〈工消費合作社印製 R3代表具有3-8個碳原子的環烷基，或代表具有6-10個碳原子的芳基或氫或代表具有至多8個碳原子的直鏈或支缝燒基，其中所述垸基可任選地被氰基、甲硫基、m基、妓基、胍基或者式-NR7 R8或R9 -0〇基困取代，式中本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 496737 • A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（2 ) R7和R8相互獨立地代表氫、具有至多8個碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基，和 R9代表m基、苄氧基、具有至多6個碳原子的垸氧基或上述的基團-NR7 R8，或者所述垸基可任選地被具有3-8個碳原子的環垸基或具有6-10個碳原子的芳基取代，所述環垸基或芳基又被羥基、卣素、硝基、具有至多8個碳原子的垸氧基或基團-NR7 R8取代，式中R7 和R 8的定義同上， R4和R5代表氫，或者 R3和R4 一起形成式-(CH2 )3 -基图，代表氫 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 和 X代表程基、具有6-10個碳原子的芳氧基、具有至多6個碳原子的烷氧基或基图_NR7R8，式中R7和R8的定義同上。特别適宜的α_胺基酸是式（la)α_胺基酸：

RJ

r5r4n COX ⑽，本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇X297公釐） 496737 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（3 ) 式中 R3代表具有至多6個碳原子的直鏈或支鏈垸基，該垸基可任地被m基或苯基取代，所述苯基又可被m基取代 R4和fi5代表氫，或者 R3和R4 —起形成式- (CH2 )3 -基困， R5代表氫，和 X 代表羥基。更適宜的α-胺基酸是式（la)α-胺基酸：I ⑽， r5r4n"^cox 式中 R3代表甲基，或代表式-CH(CH3)CH2CH3基團， R 4和R 5代表氫，或者 R3和R4 一起形成式-(CH2 ) 3 -基團， R5代表氫，和 X代表麟基。可提及的這樣的α-胺基酸的實例是：（S)-異亮胺酸， (S) -丙胺酸和（S)-脯胺酸。適宜於本發明混合物的環戊垸>8 -胺基酸優選式（lb)環 (請先閲讀背面之注意事項再

書臂· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 496737 A7 B7 五、發明説明（/ 戍垸>8-胺基酸

YHN R1 R2

CO，Re 式中 R1和R2代表氫，或者R1和R2 一起形成式：zCH2基團， R6代表氫，或代表具有至多8個碳原子的直鏈或支鏈垸基或苯基，和 Y 代表氫、具有至多8個碳原子的直鏈或支鏈烷基或芳基。特别適宜的環戊烷>5 -胺基酸是式（lb)環戊烷>5 -胺基酸

侧 c〇2r6 ⑽，式中經濟部中央標準局員工消費合作社印製 R1和R2代表氫，或者ΪΜ和R2 —起形成式=CH2基團， R6代表氫，或代表具有至多6個碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基，和 Y 代表氫。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 496737 A7 B7 A7 五、發明説明（5 更適宜的環戊统厶-胺基酸是式（lb)環戌统厶

YHN R1 R2

CO.R® (lb), 式中 it基国， R1和R2代表氫，或者R1和112 一起形成式 R6代表氫，和、代表氫。胺基一可提及的這樣的環戊燒—召-胺基酸的實例是蘇。 4-爻甲基環戍垸-I —羧酸和〗，2_順-胺基環戊垸4 — 優選的本發明混合物包含式（la)α -胺基酸和通式環戌垸->8-胺基酸，所述式（la)如下： R3 r5r4n 入 cox (la), I%—— 广锖先聞讀背面之注意事項—填寫本頁) -I^rw I i I - 111— ·! 式中 R3代表具有3-8個碳原子的環垸基，或代表具有6-1〇個碳原子的芳基或氫，或代表具有至多8個碳原子的直鏈或支鏈垸基，其中所述烷基可任選地被氰基、甲硫基、羥基、妓基、胍基或者式-NR 7 R 8或R 9 -OC-基困取代，式中 R 7和R 8相互獨立地代表氫、具有至多8個碳原子的本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210Χ297公釐）鬌. 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 496737 A7 B7 五、發明説明（6 直鏈或支鏈烷基或苯基和 R9代表m基、苄氧基、具有至多6個碳原子的烷氧基或上述的基图-NR7R8，或者所述烷基可任選地被具有3-8個碳原子的環垸基或具有6-10個碳原子的芳基取代，所述環垸基或芳基又被麟基、自素、硝基、具有至多8個碳原子的烷氧基或基團-NR7 R8取代，式中R7 和R 8的定義同上， R4和R5代表氳，或者 R3和R4 —起形成式-(CH2 )3 -基图， R 5代表氳，和 X代表m基、具有6-10個碳原子的芳氧基、具有至多6個碳原子的烷氧基或基團-NR7R8，式中R7和R8的定義同上；所述式（lb)如下：經濟部中央標準局員工消費合作社印製

6 R

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 496737 A7

經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（7 )式中 Ι-ΓΗ 9基困， R1和R2代表氫，或者R1和R 2 一起形成式4 R6代表氫，或代表具有至多8個碳原子的直娃或元基或苯基，和 Y 代表氫、具有至多8個碳原子的直鏈或支键垸基或芳基。特别優選的本發明混合物包含式（la)α -胺基酸和式（lb) 環戊烷->8-胺基酸，所述式（la)如下： R3 5 4人 ⑽， R5R4N COX 式中 R3代表具有至多6個碳原子的直鏈或支鏈垸基，該坑基可任選地被m基或苯基取代，所述苯基又可被m基取代， R4和R5代表氫，或者 R3和R4 一起形成式一 (CH2 )3 -基图， R5代表氫，和 X代表羥基；所述式（lb)如下： (請先閱-^5背面之注意事項再本頁) %, -、可

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 496737 A7 B7 五、發明説明（式中

YHN

R R

CO.R0 (lb)， R1和R2代表氫，或者和R2 —起形成式二ch2基團， R6代表氫，或代表具有至多6個碳原子的直鏈或支鏈垸基或苯基，和 Y 代表氫。更優選的混合物包含式（la)α -胺基酸和式（lb)環戊垸->8-胺基酸，所述式（la)如下： R3 ⑽，

r5r4n 人 COX 式中 R3代表甲基，或代表式-ch(ch3 )ch2 ch3基图 R4和R5代表氫，或者 R3和R4 一起形成式-(CH2 ) 3 -基團，經濟部中央標準局員工消費合作社印製 R5代表氫，和 X 代表m基；所述式（lb)如下： -10 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）

496737 Α7 Β7 五、發明説明（9 ) 式中 R1和R2代表氫，或者R1和R2 —起形成式=CH2基團， R6代表氫，和 Y 代表氫。可提及的這樣的本發明混合物的實例是：（S)-異亮胺酸與2-胺基-4-胺甲基環戊垸-1-羧酸的混合物，（S)-丙胺酸與2-胺基-4-亞甲基環戌烷-1-羧酸的混合物或（S)-脯胺酸與1,2-順·胺基環戊垸-1-羧酸的混合物。在混合物的情況下，〇(-胺基酸和/或其衍生物與環戊烷-厶-胺基酸和/或其衍生物的莫耳混合比在1:99至99:1 孽圍内，優選在1:10至10:1範園内，特别優選在1:5至5:1 範園内，更優選在1 : 3至3 : 1範固内。本發明混合物通常通過將優選的細粉狀各組分混合來獲得。本發明還涉及含有α-胺基酸或其衍生物和環戊烷-厶-胺基酸或其衍生物的二肽。

適宜於本發明二肽的胺基酸優選在上面描述本發明混合物時所述的式（I a) α -胺基酸，其中在式（I a)中的X 代表所述α -胺基酸與所述環戊烷->8 -胺基酸結合的共價鍵部分。 -11 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Μ規格（2ΐ〇χ297公釐）

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 IT 、τ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

496737 A7 B7 五、發明説明（10 ) 適宜於本發明二肽的環戊烷胺基酸優選在上面描述本發明混合物時所述的式（ib)環戊垸-厶胺基酸，其中在式（lb)中的Y代表所述α-胺基酸與所述環戌垸-乃—胺基酸結合的共價鍵部分。本發明涉及含有式（Ia)a-胺基酸和通式（lb)環戊坑-厶 -胺基酸的優選的二肽，所述式（Ia)如下： (la), R3

R5R4n/^COX 式中 R3代表具有3-8個碳原子的環垸基，或代表具有6-10個碳原子的芳基或氫，或代表具有至多8個碳原子的直鏈或支鏈烷基，其中所述燒基可任選地被氛基、甲硫基、經基、妓基、脈基或者式-NR7 R8或R9 -〇〇基困取代，式中 R 7和R 8相互獨立地代表氫、具有至多8個碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基，和經濟部中夬標準局員工消費合作杜印製 r9代表m基、苄氧基、具有至多6個碳原子的垸氧基或上述的基困-NR7 R8 , 或者所述垸基可任選地被具有3-8個碳原子的環垸基或具有6-10個碳原子的芳基取代，所述環烷基或芳基又被羥基、自素、硝基、具有至多8個 -12 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS )八4雜（21〇χ297公釐） 496737 A 7 B7 五、發明説明（11 ) 碳原子的烷氧基或基图-NR7 R8取代，式中R7 和R 8的定義同上， R4和R5代表氫，或者 R3和R4 一起形成式-(CH2 ) 3 -基图， R5代表氫，和 X 代表所述α-胺基酸與所述環戊燒_胺基酸結合的共價鍵部分；所述通式（lb)如下： (請先閱讀背面之注意事項#填寫本頁) Η 秦填寫太

••訂式中

Ri和R2代表氳，或者R1和R2 —起形成式=CH2基團， R6代表氫，或代表具有至多8個碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基，和經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Y 代表所述α-胺基酸與所述環戊烷-胺基酸結合的共價鍵部分。特别優選的二肽含有取代基如下定義的式（la) α_胺基酸和式（lb)環烷->8-胺基酸； -13 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 7 73 6 9 4 A7 B7 、發明説明（12 ) 在所述式（la)中 R 3代表具有至多6個碳原子的直鏈或支鏈垸基，該垸基可任選地被维基或苯基取代，所述苯基又可被钱基取代， R 4和R 5代表氫，成者 JJ3和R4 一起形成式-(CH2 )3 -基困， R5代表氫，和 X代表所述α-胺基酸與所述環戊垸->8 -胺基酸結合的共價鍵部分；在所述式（lb)中：和R2代表氫，或者R1和R2 —起形成式=cil 2基團， R6代表氫，或代表具有至多6個碳原子的直鏈或支鏈垸基或苯基，和 y 代表所述α -胺基酸與所述環戊垸-石-胺基酸結合的共價鍵部分。更優選的二肽含有取代基如下定義的式（la)α-胺基酸和式（lb)環戊垸->8-胺基酸；經濟部中央樣準局員工消費合作社印製在所述式（la)式中： R3代表甲基，或代表式-CH(CH3)CH2CH3基困， R 4和R 5代表氫，或者 R3和R4 一起形成式-(CH2 ) 3 -基困，本紙張尺度適用中國國家襟準（CNS ) A4規格（210X297公釐）經濟部中央標準局員工消費合作社印製 496737 A7 _ B7 ______ -, ----—---------- ._____- 1 M，五、發明説明) R 5代表氨，和 X代表所述α -胺基酸與所述環戍垸-厶-胺基酸結合的共價鍵部分；在所述式（lb)中： R1和R2代表氫，或者R1和R2 —起形成式=CH 2基图’ R6代表氫，和 Y 代表所述α -胺基酸與所述環戊烷—胺基酸結合的共償鍵部分。下列二肽是特别優選的： 1.2- m-2-(S)-異亮胺醢基胺基-4-亞甲基環戊垸-1-羧酸和 1.2- 順-2-(S)-丙尨醢基胺基-4-亞甲基環戊垸-1-羧酸。本發明混合物和二肽可以包含基本純的立體異構體或立體異構體的混合物。 •上面所述的α-胺基酸、環戊垸->8-胺基酸和二肽還可以以其盤的形式存在。這裡一般可以提及與有機或無機驗或酸形成的鹽和内鹽。可使用的酸最好包括氫由酸例如氫氣酸和氫溴酸，特别優選氫氣酸，此外還包括磷酸，硝酸，硫酸，單和雙官能竣酸和程基羧酸，例如乙酸、馬來酸、丙二酸、草酸、葡糖酸、琥珀酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、水揚酸、山梨酸和乳酸，和磺酸，例如對甲苯磺酸鹽、1,5-蒸二績酸或樟腦磺酸。生理上可接受的鹽還可以是具有游離羧基的本發明化合本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再本頁) £ 、ir 496737

五、發明説明（14 ) 物的金屬Μ或鍵Μ。特别優選的Μ是例如斯鹽、鉀豫、援鹽或鈣鹽，還有衍生自氨或有機胺的銨鹽，所述有機胺有例如乙胺、二或三乙胺、二或三乙醇胺、二環己胺、二甲胺基乙醉、精胺酸、賴胺酸、乙二胺或苯乙胺。本發明混合物和二肽可以立體異構形式例如以鏡像（對映體）或非鏡像（非對映體）形式存在，或者可以非對映體混合物或者純的順式或反式異構體形式存在。本發明既涉及對映體、外消旋體和非對映體混合物，也涉及純的異構體。外消旋體像非對映雜一樣，可用已知方法分離成立想異構單一的成分❶分離成立體異構單一的化合物這一操作可利用非對映的醏和醢胺來進行，或在光活性相上進行。還可以利用非對映藍的結晶。在本發明中，由基困（R5 R4 -N-CHR3 -C0-)定義的胺基酸基困是L-胺基酸。本發明還涉及本發明二狀的製備方法。這些二肽可用包括下述步驟的方法來製備：首先使式 (I )化合物通過舆式（ΙΠ )保護的胺基酸在溶劑中並在檢存在下反應，而將其轉化成式（IV)化合物，所述式（][)、 (in)和（IV)如下： (請先閱讀背面之注意事項再本頁)

,ιτ 經濟部中央標準局員工消費合作社印裂

式中R 1和R2的定義同上， -16 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇χ297公釐） 496737 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（15 R3 R10 - NR4/^CO-R11 (ΙΠ), 式中 R3和R4的定義同上， R1G代表胺基保護基困，和 RU代表在肽化學中習知的活性保護基图，優選經基琥珀醢亞胺醏基困，或者 Ri〇和RU—起代表基困、 y R10—NR4

RJ

CO-HN C 一0 0 R1\ R2

COM (IV)，式中 R 1 、R2 、R3 、R4和RIO的定義同上；和，最後，將胺基保護基困（RIG)裂解，若合適，將立體異構體分離，而且，在醏（在式（lb)中R6參H)的情況下，將該酸用習知方法與相應的醇反應。若合適，將二狀用習知方法轉化成鹽。按照本發明的方法可用下面的反應式舉例説明： -17 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐）

496737 A7 B7 五、發明説明（16 )

NaHC〇3 7 H2° 二甲氧基乙烷

co2h (請先閲讀背面之注意事項再本頁)

經濟部中央標準局員工消費合作社印製

哌啶

H2N CO--NH C〇2H 咚本發明中的胺基保護基图（RIO)是在肽化學中所用的習知的胺基保護基图。所述胺基保護基困最好包括苄氧基羰基，3,4-二甲氧基苄氧基黢基，3,5-二甲氧基苄氧基获基，2,4-二甲氧基苄氡基获基，4-甲氧基苄氧基黢基，4-硝基苄氧基羰基，2-硝基苄氧基获基，2-硝基-4,5-二甲氧基苄氡基羰基，甲氧基获基，乙氧基默基，第三丁氧基获基，烯丙氧基羰基，乙烯氧基默基，3,4,5-三甲氧基苄氧基默基，鄰苯二甲醯基，2,2,2-三氣乙氧基默基，2,2,2-三氣第三丁氧基羰基，蓋氧基默基，4-硝基苯氧基获基，芴基-9-甲氧基羰 -18 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇'乂297公釐）訂 496737 A7 B7 五、發明説明（ 17

基（Fmoc),甲醢基，乙醢基，丙醢基，新戊醢基，2-氣乙链基，2-溴乙链基，2,2,2-三氟乙酿基，2,2,2-三氣乙酿基’苯甲醢基，苄基，4-氣苯甲醢基，4-溴苯甲醯基，4-硝基苯甲璉基，苯二醯亞氦基，異戊醯基或苄氧基亞〒基，4-確基+基，2,4-二確基辛基，4-確基苯基或2-确基苯基亞磺醢基。Fmoc基困是特别優選的。適宜的活性羧基基困（RU )—般是與下述物質的加合物 ••碳化二亞胺，例如Ν,Ν’-二乙基、ν,Ν，-二異丙基或Ν,Ν， -二環己基碳化二亞胺，Ν- ( 3-二甲胺基異丙基）-Ν，-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽或Ν-環己基-Ν，- ( 2-嗎琳代乙基）碳化二亞胺metho-對甲苯磺酸鹽，或获基化合物，例如碳醢二咪唑，或1,2-噁唑铖化合物，例如2-乙基-5-苯基-1,2-噁咬傾-3-磺酸鹽或2-第三丁基-5-甲基異噁唑條高氣酸鹽，或醢胺基化合物，例如2-乙氧基-1-乙氧基羰基-ι，2-二氫砝琳，丙垸膦酸酑，或氣甲酸異丁酯，或六氟磷酸苯並三嗤基氧基二（一甲胺基）麟’ 1-經基苯並三咬或經基破珀链亞胺醏。此外，〇(-胺基酸成分還可以以Leuchsf (式 (1 )中的Rl〇和R11 —起代表基图 \ / )。 C一 0 // 0 優選經基琥珀醢爻胺酯。適宜的溶劑是在反應條件下不變化的習知有機溶劑，最好包括醚類，例如乙醚、二氧六環、四氫〇夫喃、乙二醇二甲醚或二甲氧基乙垸，或烴類，例如苯、甲苯、二甲苯、己垸或環己烷，或石油餾份，或二甲基甲醢胺。也可以使 _ 19 _ (請先閲讀背面之注意事項再^^本頁) 訂 ^ I 1 I In n n -in n 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇X：^公釐） 496737 A7 B7 五、發明说明（18) 用所述溶劑的混合物。四氫0夫喃、乙醚和二甲氧基乙烯是優選的。還可以使用水或上述溶劑與水的混合物。此外，例如還可以使用鹼金屬碳酸鹽，例如碳酸鈉或碳酸鉀，或者碳酸氫鈉或碳酸氳鉀，或有機鹼，例如三烷基胺類例如三乙胺、乙基二異丙基胺、N-甲基哌B辰或N-甲基嗎琳。N_甲基嗎琳是優選的。助劑和鹼的用量爲每莫耳式（ΙΠ )化合物1·〇-3·0πιο1，優選 1 ·〇-1 ·2ιηο1 〇反應一般在常壓下在OeC至100¾、最好是0¾至30eC的溫度範園内進行。反應可在常壓或者加壓或減壓（例如0.5-5巴）下進行，最好是在常壓下進行。胺基保護基圏一般用本身已知的方法在酸性或鹼性條件下將其裂解掉，或者通過催化性氫化作用例如用Pd/C在有機溶劑例如醚類如四氫〇夫喃或二氧六環或醇類如甲醇、乙醇或丙醇中還原將其裂解掉。所述氳化反應一般在〇°C至80¾的溫度範園内進行，最好是在〇eC至40eC的溫度範園内進行。所述氫化反應一般在2-8巴、最好是3-5巴的加壓下進行經濟部中央標準局員工消費合作社印製〇驗例如派咬、嗎琳、二環己胺、對二甲胺基〇比咬、二異丙基乙基胺或哌螓適宜於裂解胺基保護基圏（Rio =Fmoc)。派啶是優選的。助劑和鹼的用量爲每莫耳式（IV)化合物1.0-3.Omol，優 -20 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 496737 A7

選1·0-1·2mo1 〇反應一般在當壓下在〇t)至100eC、最好是Oec至30¾的溫度範園内進行。反應可在常壓或者加壓或減壓（例如0.5-5巴）下進行，最好是在常壓下進行。式（Π )化合物是已知的。式（ΙΠ )化合物在某些情況下是已知的，或者可用習知方法來製備。 ^ 上述製備方法僅用於舉例説明。X和γ —起代表共價鍵部分的本發明式（la)和（lb)化合物的製備不限於這些方法，該製備可以以相同的方式使用這些方法的任何的變更形式。本發明的出發點是澄清下列機理·· 所述式（H )環戊燒- 胺基酸由利用厶-胺基酸轉運體的各種各樣的酵母富集。>8-胺基酸的轉運被脂肪族胺基酸、特别是L-異亮胺酸、L-亮胺酸、L-丙胺酸、L-蛋胺酸和L-纈胺酸抑制。乃-胺基酸抑制蛋白質生物合成。該抑制作用可被脂肪族胺基酸、特别是L-異亮胺酸或L-丙胺酸之一所拮抗。同時給與以混合物形式和/或共價鍵部分結合的二肽形式的>5-胺基酸和所述具有拮抗作用的天然存在的胺基酸，能降低對溫血動物的副作用，同時在體内保持抗徵囷作用。因此，本發明化合物或混合物顯示出意想不到的、有價値的藥理作用譜。本紙張尺度適用中國國家檩準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 496737 A7 B7 五、發明説明（2〇 ) 按照本發明的式（la)和（lb)化合物或混合物及其酸加成鹽在體内具有抗微生物、特别是強力的抗擻菌作用。同時 ’由於其毒性較低，因此它們具有較好的可耐受性。它們具有廣譜抗擻菌作用，能抗皮眞菌例如鬚發癖菌和犬小孢子菌，酵母菌例如白色念珠菌、glabrata假絲酵母和絮狀表皮癖菌以及黴菌例如黑曲黴和煙曲黴。所列的微生物僅用於舉例説明，按照本發明的式（la)和（lb)化合物或混合物及其酸加成鹽所能殺滅的病菌不限於這些。因此，它們適於治療皮眞菌和系統性黴菌病。體内活性就給用系統性小鼠念珠菌病作爲體内抗黴菌作用的試驗模型 ••通過給每隻動物由尾靜脈注射3χ1〇 5 CFU的白色念珠菌使體重爲20g的雄性CFWi小鼠感染。所有未治療的對照動物在感染（p.i.)後一星期内均死於泛化念珠菌病，並伴隨腎臟中肉芽腫形成。爲試驗活性，將溶於濃度爲0.2%的葡萄糖瓊脂水溶液中的製劑通過胃管經口給與感染的動物，每天兩次。曰劑量爲2x25mg/kg體重（BW)和2x50mg/kg體重，治療持續時間爲5天。每天記綠治療動物的存活率直至P.i.後第10夭。在此時，未治療的動物中無一存活。就所述製劑而言，在每種情況下，每個劑量使用10隻動物和對照組。結果見表A。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公羞） (請先聞讀背面之注意事項\|^寫本頁) -訂

經濟部中央標準局員工消費合作衽印製 496737 A7 B7 五、發明説明（21 ) 表 A : 實施例序號劑量 [mg/kg，2χ每曰] 給禁方式動物存活數對照 0/10 2 25 ρ · 〇 · 6/10 " 2 50 ρ · 0 . 10/10^^ 或者，體内活性還可以用Wistar大鼠進行試驗。這就需要較低的日劑量（基於mg/kg Bff )，以達到相似的治療效果。在這種情況下，試驗如下進行：將出生8星期且體重爲200g的特種無抗原雄性Wistar大鼠通過側尾靜脈用在〇·5ιη1 PBS中的5Xl〇6 CFU的白色念珠菌感染。、這導致在8天之内的死亡率爲1〇〇%。注射後〜天，動物眼睛的近中角部位已經出血；除腎臟外，其它組織器官例如腦、心、肝、脾、視網膜和肺均受到感染。自感染的當天，在每種情況下按lml葡萄糖（5%)~瓊脂（0.2%) 溶液經口給與所述物質，每天兩次，持績5天。經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項^^寫本頁j

本發明二狀或混合物較佳的可对受性按下述方法進行試驗：用相應的物質每天飼餵Wistar大鼠，並記綠重量曲線。給與乃·'胺基酸本身或等莫耳量的相應的混合物或含有^、胺基酸的二肽。處理5天後，大鼠仍然保持原來的體重，或者在給與本發明二肽或混合物的情況下，體重略有増知本紙張尺度適用中國國家標準（CNS )八4麟（210X297公瘦） 496737 ‘ A 7 —.____ B7 ’而用乃-胺基酸處理的動物體重減輕大约5-10%。本發明還涉及用於治療疾病、特别是眞菌病的含有本發明混合物和/或二肽的藥物和無毒、惰性的禁用賦形劑與助劑。、右合適’所述活性化合物（一種或多種）還可以是在— 種或多種上述的賦形劑中的微囊化形式。可k及的優選的藥用製劑有片劑，包衣片劑，膠囊劑，丸劑，顆粒劑，栓劑，溶液劑，混懸劑和乳劑，糊劑，軟膏劑，凝膠劑，乳膏劑，洗劑，粉劑和喷霧劑。治療活性化合物或混合物在上述藥用製劑中存在的濃度應爲該混合物總重量的大約〇·卜99.5¾(重量），優選大约 0·5-95%(重量）。除按照本發明的化合物外，上述禁用製劑還可以含有其它的藥用活性化合物。所述活性化合物或禁物可經口和胃腸外途徑使用。經濟部中央標準局員工消費合作社印製業已證明，爲獲得期望的效果，一般在人用和獸用藥方面，每24小時使用本發明的化合物（一種或多種）的總量大約爲0.5-500mg/kg體重有利，優選5-100mg/kg體重，若合適，以若干單劑量形式使用。單劑量最好含约1-80、特别是3-30mg/kg體重本發明的化合物（一種或多種）。按照本發明的藥物通常爲用於在治療疾病中同時、分開或交錯使用的組合物製劑。用於同時使用的組合物製劑是本發明混合物的各組分以物理混合物形式存在的產品，尤其包括片劑、包衣片劑、本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）

五、發明説明（23) 膠囊劑、丸劑、栓劑和安瓶劑。還可以設想用這樣的混合物作爲溶液、混懸液或乳液。本發明混合物的單獨組分一方面包括α-胺基酸和/或其衍生物（以下稱胺基酸組分），另一方面包括環戊垸-厶_胺基酸和/或其衍生物（以下稱>8-胺基酸組分）。用於分開使用的組合物製劑是本發明混合物的各組分以在空間上彼此分離的形式存在的產品。能滿足這種要求的片劑、包衣片劑、膠囊劑、丸劑和栓劑特别適於此目的。還可以設想用於交錯使用的組合物製劑。這種製劑允許間隔一定的時間給與本發明混合物的各組分。在交錯使用這樣的組合物製劑的情況下，設想相對於乃-胺基酸組分的使用，以特殊的方式使用α -胺基酸組分。胺基酸組分可以與/5-胺基酸組分相同的使用方式來使用，或者以另一種習知的使用方式來使用，例如>8-胺基酸組分可靜脈给與，而胺基酸組分可經口或靜脈給與。在交錯使用的情況下，還可以按上述的根據時間使用>5 一胺基酸組分的關係使用部分劑量的α_胺基酸組分，並將剩餘劑量的α-胺基酸在給與該>8-胺基酸組分後的一定的時間内一次或分多次給與。

(_) —1，2-順-2- ( (N- ( 9_芴基甲氧基默基）-(S)-異亮％酿基）每；|-4-亞甲基環戊烷-1-狻酸本紙張尺度適用中國國家檩準（CNS ) a4規格（210X297公釐）五、發明説明（24 )

链亞胺酯（89.2g, o#i98m〇i在600ml二甲氧基乙垸中的溶液於室溫滴加至（-)-1,2-順-2-胺基-4-亞甲基環戊烷一卜羧酸（35.1g, 0.198mol)和碳酸氫鈉（33.36g, 〇·397ιηο1) 在480ml水中的溶液中。將混合物於室溫攪拌過夜。然後將反應混合物用稀盥酸酸化至pH 2，並用乙醚萃取幾次。將合併的有機相用硫酸鈉乾燥並眞空濃縮。產物在乙石油酵中結晶析出。產章：70g (收率74%)

熔點：2071C

[a]g 二-24·1 (C=；L15,在氣仿中）經濟部中央標準局員工消費合作社印裂 ^-NMR (250 MHz, CDC13): δ = 0.88 (cm, 6H); 0.98 - 1.15, 1.40 - 1.51, 1.52 - 1.80 (3m, 3H); 2.40 - 2.84 (m, 4H); 3.12 (cm, 1H); 4.10 - 4.48 (m, 4H); 4.61 (cm. 1H); 4.90 (cm, 2H); 5.84 (d, 1H); 7.20 - 7.80 (3m, 9H). 0«H32N2O5 (476.6) 實施例Π 1,2-順-2- ( ( N- ( 9-¾基甲氧基羰基）-(S)_丙胺醯基）胺基-4-亞甲基環戊垸-1-羧酸 -26 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇X297公釐） 496737 A7 B7

經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（25 ) 〇 JU/NH co2h rNH ΰ ο 按類似於實施例I的方法，由2-順-2-胺基-4-亞甲基環戊垸-1-羧酸（2.27g, 16·1ηπηο1)、（Ν-(9-^ 基甲氧基羰基）-(S)-丙胺酸麟基琥珀醯亞胺醏（7.Og, 17.2 mmol)和碳酸氫鈉（1.49g, 17.7mmol)製得標題化合物。將粗產物用柱層析純化（甲苯/乙醇，9:1)。產量：5.7g (收率81%) H-NMR (500 MHz, CD3OD): δ = 1.30 (d，3H), 2.43 - 2.79 (m，4H)，3.10 (cm, 1H)， 4.12, 4.21，4.34, 4.50 (4 cm, 5H), 4.91 (br. s.，2H)，7.30, 7.39，7.66, 7.79 (4 cm, 8H). C2?H26N205 (434.5) 製備實施例實施例1 ( + )-1,2-順-2-(S)_異亮胺醢基胺基-4-亞甲基環戊垸-1-羧酸

ο

27 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 496737 A7 B7 五、發明説明（26 ) 將得自實施例1的化合物（24.0g, 0.050mol)在派啶 (200ml)中的溶液於室溫攪拌1小時。當反應結束時，眞空蒸除哌啶。將殘餘物溶於水中。用乙醚萃取幾次後，將水相眞空濃縮，加入T苯。產物由異兩晬/乙醚中結品析出。產量：8.5g (收率76%)

熔點：1981C

[α ]!5 二+23.9 (c = 1.08,在水中） (250 MHz, D20): δ = 0.70 - 0.88 (m, 611); 0.91 - 1.18, 1.19 - 1.43, 1.53 -1.72 (3m, 3H); 2.23 - 2.67 (m, 4H); 2.88 (cm, IH); 3.28 (d, 1H)； 4.30 (cm, 1H); 4.85 (cm, 2H). C,3H22N203 (254.3) 實施例2 ( + )-1,2-順-2-(S)_丙胺醯基胺基-4-亞甲基環戊垸-1_羧酸 (請先閲讀背面之注意事項再^^本頁) 1%;

〇經濟部中央標準局員工消費合作社印製按類似於實施例1的方法，由實施例Π化合物（5.7g, 13· lnunol)製得標題化合物。將粗產物用矽膠柱層析純化 (二氣甲垸/甲醇，1:1)，並用甲醇/異丙醇/丙酮結晶。產量：〇.7g (收率25%) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 496737 A7 B7 五、發明説明（27 )

熔點：218eC

[a]S=+5.4 (c=0.64,在甲醇中） !H-NMR (500 MHz, D2〇)： δ = L49 (d, 3Η), 2.45 (cm, 1H), 2.55 - 2.75 (m, 3H), 3.04 (cm, 1H), 4.01 (q, 1H), 4.49 (cm, 1H), 5.00 (br, d, 2H) C,〇Hl6N203 (212.3) 實施例3 (1R，2S)-2-胺基-4-亞甲基環戊垸-1-援酸x (S)_異亮胺酸

Λ ^ I Η2Ν C〇2H Η2Ν co2h 將（-)-(lR，2S)-2-胺基-4-亞甲基環戊烷-1-梭酸（25‘0g ，177mmol)和（S)-異亮胺酸（23.2g, 177mmol)溶於漆騰的水(250ml)和乙醇（i〇〇mi)中。將溶液放冷至室溫，炎於6〇 t!眞空蒸除溶劑。產量：48.2g (收率1〇〇%) 溶點：230¾ (分解） , I·99 H.NMR(D2〇)：6-〇.95(t,3H), 1.00(d,3H), 1.18-1.35, 1.40- 1.56(2^ ^ ^ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (cm, 1H), 2.52 · 2.67, 2.73 - 2.88 (2m, 4H); 3.09 (cm, 1H), 3.69 (A m ^ 1H), 5.09 (cm, 2H).

Ci3H24N204 (272·3) 實施例4 將（-卜（111,25)-2-胺基-4-亞甲基環戊烷-1-羧酸（14·12 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 496737 A7 - B7_ 五、發明説明（28 ) ,lOOmmol)和（S)-異亮胺酸（26.2g, 200mmol)研成細粉，然後以粉末形式混合。實施例5 按類似於實施例4的方法製備（-)-(lR，2S)-2-胺基-4-亞甲基環戊烷-1-羧酸（14· lg, lOOmmol)和（s)-異亮胺酸 (65.5g, 500mmol)的混合物。經濟部中央標準局員工消費合作社印製 30 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS〉A4規格（210X297公釐） 496737 A7 B7 五、發明説明（Μ ) 專利申請案第85108582號—_二丨 ROC Patent Appln. No. 85108582

補充之試驗資料中文本-附件二 Supplemental Test Data in Chinese - EncL II (88年3月23曰送呈） (Submitted on March 23 , 1999) 活體外試驗：㈠-(lR，2S)-2-胺基-4-亞甲基環戊烧-1·羧酸單獨以及與L-異亮胺酸併用之直接胞毒性效應係以倉鼠胰細胞進行研究（參見下表）。表：胰細胞之活力測試：與未經處理之控制組細胞相較下死細胞之百分比（n = 3) 濃度 [微克/毫升] ㈠-(lR，2S)-2-胺基-4-亞甲基環戊烧-l-羧酸實例3 實例4 10 - 一 100 25 一 _ 300 75 _ _ 500 80 一鋒 800 85 20 麵 1000 85 30 15 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 結論：於經物質處理之細胞中測定細胞活力之結果顯示： ⑴受測細胞之胞毒性係於南濃度的㈠-(1R，2S)_2-胺基-4-亞甲基環戊烧-1-羧酸處理後發生；取自倉鼠之胰細胞極為敏感 (EC5()el80 微克 / 毫升）。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐）

經濟部中央標準局員工消費合作社印I 496737 A7 _______B7 五、發明説明（3〇·) (2)添加L-異亮胺酸至(-)_(lR，2S)-2-胺基-4-亞曱基環戊烧小綾酸處理之細胞内乃明顯地減低此化合物之胞毒性效應。活體内試驗：說明：令15〇-200克重之Wistar鼠（八週大，每組5隻）以下列正常之劑量級數口服（管飼法）（-)-(lR，2S)-2-胺基-4-亞甲基環戊烷-1-羧酸歷時14天：每公斤體重〇/〇 - 0/600 -300/0 - 300/75 - 300/300 (=實例 3 ) _ 300/450 —300/600 (=實例 4) -150/0 毫克(-)-(lR，2S)-2-胺基 + 亞曱基環戊烷-1-羧酸/L-異亮胺酸。結論· 對動物之病理組織學檢視後發現有關(-)-(lR，2S)-2-胺基-4-亞甲基環戊烧-1-羧酸部分··心臟有肌纖退化現象，胃枯膜退化/萎縮，外分泌胰臟及胸腺皮質萎縮，輸精上皮退化伴隨少精/無精，以及附睪中有碎細胞及精囊與前列腺體積縮小，骨髓細胞過少、充血及脂細胞數量增加。這些現象的影響及嚴重程度在㈠-(lR，2S)-2-胺基_4_亞曱基環戊烧_ 1-羧酸劑量為300毫克/公斤以後乃高於15〇毫克/公斤者。於併用(-)-(lR，2S)-2-胺基斗亞甲基環戊烧-1-羧酸及L_異亮胺酸之組別中，這些現象的影響及嚴重程度乃隨著L·異亮胺酸之增加而減輕。 32 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) —訂

Claims

專利申請案第85108582號 ROC Patent Appln. No. 85108582 修正之申請專利科圍中文本—附件一 Amended Claims in Chinese - Enel. I (91年5月b日送呈）· (Submitted on May ι)，2002) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製種用於治療黴菌病的混合物，其係包含選自下列組合之胺基酸與環戊烷胺基酸··（S)_異白胺酸與孓胺基_4_ 亞甲基環戊烷-1-羧酸、（S)-丙胺酸與2-胺基_4_亞甲基環戊烷-1-羧酸，或其鹽類，該混合物亦包含藥學上可接受之載劑，其中α-胺基酸係以ι:1至5:1之莫耳比與環戊烷胺基酸合併。 2 ·根據申請專利範圍第丨項的混合物，其中α _胺基酸與環戊烷-万-胺基酸係包含(S)-異白胺酸與2-胺基_4_亞甲基環戊烷-1-羧酸。 3· —種用於治療黴菌病之藥學組合物，其係包含根據申請專利範圍第1項的混合物。 B85318-claims/EC 本紙張/^週时關家鮮（CNS)A4規格—公 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)