TW201930333A - 源自三氟胸苷之相關物質的檢測方法 - Google Patents

源自三氟胸苷之相關物質的檢測方法 Download PDF

Info

Publication number
TW201930333A
TW201930333A TW108100350A TW108100350A TW201930333A TW 201930333 A TW201930333 A TW 201930333A TW 108100350 A TW108100350 A TW 108100350A TW 108100350 A TW108100350 A TW 108100350A TW 201930333 A TW201930333 A TW 201930333A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
trifluorothymidine
salt
related substance
mobile phase
deoxy
Prior art date
Application number
TW108100350A
Other languages
English (en)
Other versions
TWI759575B (zh
Inventor
武田大典
小島章代
Original Assignee
日商大鵬藥品工業股份有限公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from CN201810821041.5A external-priority patent/CN110007010A/zh
Application filed by 日商大鵬藥品工業股份有限公司 filed Critical 日商大鵬藥品工業股份有限公司
Publication of TW201930333A publication Critical patent/TW201930333A/zh
Application granted granted Critical
Publication of TWI759575B publication Critical patent/TWI759575B/zh

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/36—Control of physical parameters of the fluid carrier in high pressure liquid systems
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
    • C07D239/52—Two oxygen atoms
    • C07D239/54—Two oxygen atoms as doubly bound oxygen atoms or as unsubstituted hydroxy radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
    • C07D239/52—Two oxygen atoms
    • C07D239/54—Two oxygen atoms as doubly bound oxygen atoms or as unsubstituted hydroxy radicals
    • C07D239/545—Two oxygen atoms as doubly bound oxygen atoms or as unsubstituted hydroxy radicals with other hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/557—Two oxygen atoms as doubly bound oxygen atoms or as unsubstituted hydroxy radicals with other hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms, e.g. orotic acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C07H19/073—Pyrimidine radicals with 2-deoxyribosyl as the saccharide radical
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
    • G01N2030/027—Liquid chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
    • G01N2030/8809—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample
    • G01N2030/884—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample organic compounds
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
    • G01N2030/8809—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample
    • G01N2030/884—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample organic compounds
    • G01N2030/8845—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample organic compounds involving halogenated organic compounds

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Abstract

一種用以檢測源自三氟胸苷之相關物質的方法，含有將含三氟胸苷或其鹽之試料供於高效液相層析之工序，該高效液相層析使用由有機相及水相構成之移動相，且前述供於高效液相層析之工序含有滿足以下要件之步驟1及2：
步驟1：有機相對移動相整體之比例為1~14體積%。
步驟2：步驟1之後，施加梯度以使有機相對移動相整體之比例增加

Description

源自三氟胸苷之相關物質的檢測方法
本發明有關於利用高效液相層析之含有三氟胸苷(Trifluridine)製劑之相關物質(related substances)的測定方法。
一般而言，醫藥品相關物質之測定是利用液相層析來進行，且常使用以水及有機溶劑之混合液作為移動相之正相或逆相管柱系統。以往，三氟胸苷以Viropic(註冊商標)之名稱而用作為感染治療用的點眼劑。申請人製品之LONSURF(註冊商標)是含有三氟胸苷及替吡嘧啶(Tipiracil)之製劑。該含有三氟胸苷及替吡嘧啶之醫藥品是作為抗腫瘤劑來販售，且就該製劑已有多數的報告(專利文獻1、2、3、4)。
然後，在三氟胸苷的相關物質方面，已知5-三氟甲基尿嘧啶及5-羧基尿嘧啶，且有報告以高效液相層析來測定該等(非專利文獻1)。
有報告指出，三氟胸苷相關物質之5-三氟甲基尿嘧啶可透過各式各樣逆相液相層析的條件來測定(非專利文獻2)。
有報告指出，為了測定腫瘤細胞對三氟胸苷的攝取，而使用液相層析(非專利文獻3)。
有報告指出，在判斷三氟胸苷之TK1的受質專一性上，可使用液相層析(非專利文獻4)。
有報告指出，在測定酵素合成中的三氟胸苷時，可使用液相層析(非專利文獻5)。
又，針對含有三氟胸苷及替吡嘧啶之醫藥品，有報告提出定量液相層析的分析(非專利文獻6、7、8)。
為了測定三氟胸苷相關物質之5-三氟甲基尿嘧啶，有報告提出使用有乙腈之各式各樣高效液相層析的條件(非專利文獻2)。
為了測定腫瘤細胞對三氟胸苷的攝取，有報告提出使用有乙腈之高效液相層析的條件(非專利文獻3)。
為了判斷三氟胸苷之TK1的受質專一性，有報告提出使用有乙腈之高效液相層析的條件(非專利文獻4)。
為了確認酵素合成中的三氟胸苷，有報告提出添加乙酸三甲銨，並施加有梯度之高效液相層析的條件(非專利文獻5)。
為了定量測定LONSURF所含有之三氟胸苷與替吡嘧啶，有報告提出使用有乙腈之高效液相層析的條件(非專利文獻6、7、8)。
針對作為點眼劑之三氟胸苷，有報告提出使用有甲醇之高效液相層析的條件(非專利文獻9、10)。
針對三氟胸苷，有報告提出使用了添加有乙酸緩衝液、三氟乙酸或乙酸之移動相之高效液相層析的條件(非專利文獻11、12、專利文獻6、13)。
又，為了確認三氟胸苷的純度，是使用高效液相層析，然卻未記載其條件(專利文獻7)。
但在該等報告中，針對將三氟胸苷之相關物質以使用有2個梯度條件之步驟並利用高效液相層析來檢測之方法，並無暗示。
先行技術文獻
專利文獻
專利文獻1：WO2013/122134
專利文獻2：WO2013/122135
專利文獻3：WO2006/080327
專利文獻4：WO96/30346
專利文獻5：CN106749194A
專利文獻6：CN105198947A
專利文獻7：CN105461772A
專利文獻8：日本特許4603274
專利文獻9：日本特許4441313
專利文獻10：日本特許4437786
非專利文獻
非專利文獻1：P.Horsch等, International Journal of Pharmaceutics 222(2001), p.205-215
非專利文獻2：D. V. Moiseev等, Pharmaceutical Chemistry Journal 41, 1(2007), p.25-33
非專利文獻3：N. TANAKA等, Oncology Reports 32(2014), p.2319-2326
非專利文獻4：K. SAKAMOTO等, International Journal of Oncology 46(2015), p.2327-2334
非專利文獻5：A. Fresco-Taboada等, Catalysis Today 259(2015), p.197-204
非專利文獻6：M. S. H. Rizwan等, International Journal of Innovative Pharmaceutical Sciences and Research 5(2017), p.32-42
非專利文獻7：S. GODAY等, International Journal of Research in Applied,Natural and Social Sciences 5(2017), p.93-104
非專利文獻8：K. Jogi等, International Journal of Research in Pharmacy and Chemistry 7(2017), p.63-70
非專利文獻9：B. Paw等, Pharmazie 7(1997), p.551-552
非專利文獻10：T.Briggle等, Journal of Chromatography 381(1986), p.343-355
非專利文獻11：M.Riegel等, Journal of Chromatography 568(1991), p.467-474
非專利文獻12：G.Balansard等, Journal of Chromatography 348(1985), p.299-303
非專利文獻13：T. Kawauchi等, Journal of Chromatography 751(2001), p.325-330
發明概要
發明欲解決之課題
本發明要解決之課題是提供一種新穎方法，可從含有三氟胸苷或其鹽之試料中，透過使用有2個梯度條件之步驟並利用高效液相層析來檢測源自三氟胸苷之相關物質。
用以解決課題之手段
本案發明人等全心研究，結果發現一種檢測方法，透過在特定條件下使用高效液相層析，可有效率的檢測三氟胸苷或其鹽之相關物質，且同時可適用於保證其品質。
因此，本發明提供以下[1]~[31]。
[1]一種用以檢測源自三氟胸苷之相關物質的方法，含有將含三氟胸苷或其鹽之試料供於高效液相層析之工序，該高效液相層析使用由有機相及水相構成之移動相，且前述供於高效液相層析之工序含有滿足以下要件之步驟1及2：
步驟1：有機相對移動相整體之比例為1~14體積%。
步驟2：步驟1之後，施加梯度以使有機相對移動相整體之比例增加。
[2]如[1]之方法，其中前述相關物質是選自於由下述相關物質1~6所構成群組中之至少1者：
相關物質1：5-羧基尿嘧啶，
相關物質2：5-羧基-2’-去氧-尿苷，
相關物質3：2’-去氧-5-甲氧基羰基尿苷，
相關物質4：三氟胸腺嘧啶，
相關物質5：5-甲氧基羰基尿嘧啶，
相關物質6：5’-(4-氯苯基羧基)-2’-去氧-5-三氟甲基尿苷。
[3]如[1]或[2]之方法，其在步驟1檢測相關物質1~5，在步驟2檢測相關物質6。
[4]如[1]至[3]]中任一項之方法，其中，步驟1是在等度(isocratic)狀態下進行。
[5]如[1]至[4]中任一項之方法，其中，有機相為乙腈。
[6]如[1]至[5]中任一項之方法，其中，在步驟1中，有機相對移動相整體之比例為2~10體積%。
[7]如[1]至[6]中任一項之方法，其中，在步驟2結束時，有機相對移動相整體之比例為25~70體積%。
[8]如[1]至[7]中任一項之方法，其中，在步驟2中，施加使有機相對移動相整體之比例在1分鐘增加0.9體積%的梯度。
[9]如[1]至[8]中任一項之方法，其中步驟2之測定時間為10~50分鐘。
[10]如[1]至[9]中任一項之方法，其中，步驟2結束時的流量為步驟1之流量的1.0~1.5倍。
[11]如[1]至[10]中任一項之方法，其中，水相進一步含有磷酸鹽。
[12]如[1]至[11]中任一項之方法，其中，水相進一步含有甲醇。
[13]一種5-羧基-2’-去氧-尿苷(相關物質2)，是用於含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑的品質管理。
[14]一種5-羧基-2’-去氧-尿苷(相關物質2)，是用作為在含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品。
[15]一種5-羧基-2’-去氧-尿苷(相關物質2)作為標準品之用途，該標準品是在含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品。
[16]一種含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品，是由5-羧基-2’-去氧-尿苷(相關物質2)構成。
[17]一種2’-去氧-5-甲氧基羰基尿苷(相關物質3)，是用於含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑的品質管理。
[18]一種2’-去氧-5-甲氧基羰基尿苷(相關物質3)，是用作為在含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品。
[19]一種2’-去氧-5-甲氧基羰基尿苷(相關物質3)作為標準品之用途，該標準品是在含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品。
[20]一種含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品，是由2’-去氧-5-甲氧基羰基尿苷(相關物質3)構成。
[21]一種5-甲氧基羰基尿嘧啶(相關物質5)，是用於含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑的品質管理。
[22]一種5-甲氧基羰基尿嘧啶(相關物質5)，是用作為在含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品。
[23]一種5-甲氧基羰基尿嘧啶(相關物質5)作為標準品之用途，該標準品是在含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品。
[24]一種含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品，是由5-甲氧基羰基尿嘧啶(相關物質5)構成。
[25]一種5’-(4-氯苯基羧基)-2’-去氧-5-三氟甲基尿苷(相關物質6)。
[26]一種5’-(4-氯苯基羧基)-2’-去氧-5-三氟甲基尿苷(相關物質6)，是用於含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑的品質管理。
[27]一種5’-(4-氯苯基羧基)-2’-去氧-5-三氟甲基尿苷(相關物質6)，是用作為在含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品。
[28]一種5’-(4-氯苯基羧基)-2’-去氧-5-三氟甲基尿苷(相關物質6)作為標準品之用途，該標準品是在含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品。
[29]一種含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品，是由5’-(4-氯苯基羧基)-2’-去氧-5-三氟甲基尿苷(相關物質6)構成。
[30]一種含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之製造方法，含有實施如[1]至[12]中任1項之方法的工序。
[31]一種含有三氟胸苷或其鹽、及替吡嘧啶或其鹽之摻合劑的品質管理方法，含有實施如[1]至[12]中任1項之方法的工序。
本發明利用高效液相層析，且該高效液相層析使用由有機相及水相構成之移動相，而可有效率的檢測三氟胸苷或其鹽之相關物質，且可適用於保證其品質。
用以實施發明之形態
本發明中的三氟胸苷(FTD)是α,α,α-三氟胸苷，且為具有下述結構之化合物。
[化學式1]
本發明中之三氟胸苷具有光學異構物、立體異構物、旋轉異構物、互變異構物等異構物時，在無特別明記之下，任一異構物或混合物皆包含在本發明化合物中。
本發明中，在無特別明記並非如此之下，所謂鹽意指藥學上容許的鹽，可舉鹼加成鹽或酸加成鹽。
該鹼加成鹽可舉例如鈉鹽、鉀鹽等鹼金屬鹽；例如鈣鹽、鎂鹽等鹼土類金屬鹽；例如銨鹽；例如三甲基胺鹽、三乙基胺鹽、二環己基胺鹽、乙醇胺鹽、二乙醇胺鹽、三乙醇胺鹽、普魯卡因鹽、N,N’-二苄基乙二胺鹽等有機胺鹽等。
該酸加成鹽可舉例如鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、過氯酸鹽等無機酸鹽；例如乙酸鹽、甲酸鹽、順丁烯二酸鹽、反丁烯二酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、抗壞血酸鹽、三氟乙酸鹽等有機酸鹽；例如甲烷磺酸鹽、羥乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽等磺酸鹽等。
可用於本發明的三氟胸苷或其鹽宜為未形成鹽之三氟胸苷自由體。
本發明方法中，可透過調整三氟胸苷或其鹽與溶劑做成試料，並將其注入高效液相層析，來檢測三氟胸苷之相關物質。
本發明中的試料可含有三氟胸苷之相關物質。相關物質可舉相關物質1~6化合物。
[表1]
相關物質1是5-羧基尿嘧啶。有時亦稱為2,4-二側氧-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-羧酸。
相關物質2是5-羧基-2’-去氧-尿苷。有時亦稱為1-((2R,4R,5R)-4-羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-基)-2,4-二側氧-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-羧酸。
相關物質3是2’-去氧-5-甲氧基羰基尿苷。有時亦稱為1-((2R,4R,5R)-4-羥基-5-(羥基甲基)四氫呋喃-2-基)-2,4-二側氧-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-羧酸甲酯。
相關物質4是三氟胸腺嘧啶。有時亦稱為5-(三氟甲基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮。
相關物質5是5-甲氧基羰基尿嘧啶。有時亦稱為2,4-二側氧-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-羧酸甲酯。
相關物質6是5’-(4-氯苯基羧基)-2’-去氧-5-三氟甲基尿苷。有時亦稱為4-氯苯甲酸((2R,3R,5R)-5-(2,4-二側氧-5-(三氟甲基)-3,4-二氫嘧啶-1(2H)-基)-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲酯。
可用於本發明之試料，不僅可使用製劑或從原藥本身調製而成之試料，亦可使用為了確認穩定性等之在試驗中所調製之試料、為了確認各相關物質之滯留時間等而添加有各相關物質之試料、為了確認製劑或原藥之製造步驟所調製之試料等。試料可為含有摻合在LONSURF(註冊商標)中之替吡嘧啶或其鹽者，實質上不含前述替吡嘧啶或其鹽者、亦可為不含前述替吡嘧啶或其鹽者。
在本發明可使用之製劑中含有三氟胸苷或其鹽。並且，可視需要摻合藥學上容許之載劑，並可視預防或治療目的而採用各種投予形態，該形態可為例如口服劑、點眼劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、貼片劑等任一，且宜採用口服劑。該等投予形態可藉由各種習於此藝者所公知慣用的製劑方法來製造。
藥學上容許之載劑可使用在製劑素材上慣用的各種有機或無機載劑物質，且可作為固態製劑中的賦形劑、結合劑、崩解劑、潤滑劑、著色劑等來摻合，作為液狀製劑中的溶劑、助溶劑、懸浮劑、等張劑、緩衝劑、無痛劑等來摻合。又，視需要亦可使用防腐劑、抗氧化劑、著色劑、甘味劑、穩定劑等製劑添加物。
在調製口服用固態製劑時，可在三氟胸苷或其鹽中添加賦形劑，且視需要添加結合劑、崩解劑、潤滑劑、著色劑、矯味/氣味改善劑等之後，依常法製造錠劑、被覆錠劑、顆粒劑、散劑、膠囊劑等。
調整點眼劑時，可藉由在三氟胸苷或其鹽中使用助溶劑、等張化劑、緩衝劑、防腐劑等來製造。
又，具有上述投予形態之藥劑的每1日投予量可依患者之症狀、體重、年齡、性別等適宜決定。
本發明中所使用的高效液相層析可使用通常市售者。
針對色層分析所使用的管柱，已知將有機相做成移動相並分離具有脂溶性之化合物的正相管柱，與將水相做成移動相並分離化合物的逆相管柱，然在高效液相層析中，大多使用逆相管柱，而在本發明中亦宜使用逆相色層分析。
本發明中可使用的高效液相層析管柱可自以下管柱選擇：矽膠管柱、表面經十八烷基矽基修飾的矽膠管柱(ODS管柱或C18管柱)、表面經辛基修飾的矽膠管柱(C8管柱)、表面經氰丙基修飾的矽膠管柱(CN管柱)、表面經苯乙基修飾的矽膠管柱(Ph管柱)、表面經胺基丙基修飾的矽膠管柱(NH管柱)、表面經二羥基丙基修飾的矽膠管柱(Diol管柱)、經各種聚合物填充的管柱(聚合物管柱)、經離子交換樹脂填充的管柱(離子交換管柱)等；然本發明中宜為ODS管柱。
ODS管柱方面，可使用矽膠粒徑、細孔徑、十八烷基矽基之鍵結方法、十八烷基矽基之取代度等不同的各種ODS管柱。在本發明中宜為使用高純度矽膠，且將十八烷基化後殘存之矽醇以低分子矽基化劑處理過的ODS管柱(經終結( End Capping)之ODS管柱)。
ODS管柱方面，可使用矽膠粒徑、細孔徑、十八烷基矽基之鍵結方法、十八烷基矽基之取代度等不同的各種ODS管柱。本發明中，矽膠之平均粒徑例如宜為2~10μm，且以3~5μm為佳。矽膠之平均粒徑可藉由雷射繞射法等來測定。矽膠之平均細孔徑例如宜為6~20nm，且以8~13nm為佳。矽膠之平均細孔徑可藉由氣體吸附法等來測定。矽膠中十八烷基矽基的鍵結形式例如宜為單體形式、聚合物形式等。十八烷基矽基之取代度可藉由各種方法來測定。矽膠之碳量例如宜為3%以上，且以10%以上為佳。矽膠之碳量例如宜為25%以下，且以20%以下為佳。矽膠之碳量可藉由各種方法來測定。
可用於高效液相層析之移動相的有機相可使用己烷、環己烷、庚烷、二乙基醚、四氫呋喃、氯仿、氯化亞甲基等非極性溶劑；丙酮、二甲基亞碸、乙腈等非質子性極性溶劑；乙酸、甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈等。該等溶劑可1種單獨使用，或做成2種以上之混合溶劑來使用。本發明中的有機相宜為甲醇或乙腈，且以乙腈為佳。又，有機相中亦可含有10%以下的水。
可用於高效液相層析之移動相的水相中，可不只含有水，亦可含有10%以下之有機溶劑，然相對水相整體，宜為含有10%以下甲醇之水相，且以含有5%以下甲醇為佳、以含有2%以下甲醇更佳、以含有0.1~1%甲醇特別為佳。
從確保重現性之觀點來看，高效液相層析之移動相可添加各式緩衝劑。可添加例如乙酸或其鹽、檸檬酸或其鹽、酒石酸或其鹽、磷酸或其鹽。乙酸或其鹽可舉乙酸、乙酸鈉。檸檬酸或其鹽可舉檸檬酸、檸檬酸一鈉、檸檬酸二鈉、檸檬酸三鈉。酒石酸或其鹽可舉酒石酸、酒石酸鈉，磷酸或其鹽可舉磷酸、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀。本發明中水相之添加劑方面，從測定物質具有之性質、測定時獲得之波峰形狀及測定之重現性來看，宜為磷酸鹽，且以磷酸二氫鈉為佳。該等添加劑可1種單獨使用，或2種以上組合使用。
本發明可使用之緩衝劑之濃度，只要是在高效液相層析之測定中緩衝劑不會析出之濃度，則可適宜調整。宜為1~50mM，且以5~40mM為佳、以10~30mM更佳、以18~20mM特別為佳。
高效液相層析之移動相可使用有機相與水相之混合液。在本發明中，在相關物質1、2、3、4、5及三氟胸苷之滯留時間內，有機相對移動相整體之比例宜為1~14體積%，且以2~10體積%為佳、以3~7體積%更佳。
高效液相層析之移動相可使用有機相與水相之混合液，且常會使其等之比例在測定中變化，並稱為施加梯度。通常，考慮到作為目的化合物之滯留時間及作為目的之化合物與相關物質的分離，常會施加梯度。
在本發明，特徵是含有步驟1與步驟2之梯度條件。
步驟1：有機相對移動相整體之比例為1~14體積%。
步驟2：在步驟1之後，施加梯度以使有機相對移動相整體之比例增加。
步驟1中，可對移動相施加梯度，亦可為等度狀態，然宜為等度狀態。又，步驟1中，有機相對移動相整體之比例可舉1~14體積%，然宜為2~10體積%，且以3~7體積%為佳。本發明中，所謂「步驟1中，有機相對移動相整體之比例為X~Y體積%」意指在步驟1之間，上述比例為X~Y體積%之範圍內。
步驟1之起始是從將試料注入高效液相層析後的5分以內，且宜為3分以內、以1分以內為佳、以與注入同時更佳。
步驟1之結束是從將試料注入高效液相層析後的13~30分後。考慮三氟胸苷不要與基線(base line)之凹陷及假峰(ghost peak)重複，步驟1之結束宜為從注入的15~28分後，且以17~25分後為佳。
步驟1中的測定時間只要是在上述起始與結束之範圍內則無特別限制，宜為15~28分鐘，且以17~25分鐘為佳。
步驟1中移動相之流量上限只要是可在高效液相層析上通常使用的即可，然考慮到各相關物質之滯留時間的分離，流量宜為2.5mL/min以下，且以2.0mL/min以下為佳、以1.5mL/min以下較佳、以1.3mL/min以下更佳、以1.1mL/min以下特別為佳。又，步驟1中移動相之流量範圍並無特別限定，例如宜為0.5~2.5mL/min，且以0.5~2.0mL/min為佳、以0.7~1.5mL/min較佳、以0.8~1.3mL/min更佳、以0.9~1.1mL/min特別為佳。
依此，在步驟1可檢測選自於由相關物質1、2、3、4、及5構成群組中之1種以上之三氟胸苷的相關物質。宜為在步驟1可檢測相關物質1、2、3、4及5。
又，從在更為等度狀態之狀態下進行步驟1的觀點來看，當已在步驟1檢測出相關物質1、2、3、4及5中至少1種的情況下，在相關物質1、2、3、4及5中經步驟1檢測出之物質各自的滯留時間內，有機相對移動相整體之比例中最大値與最小値之差宜為移動相整體之5體積%以下，尤以1體積%以下為佳。
步驟2中，是對移動相施加梯度使有機相之比例增加。在步驟1有施加梯度的情況，在步驟2是施加梯度以使有機相之比例更為增加。在步驟1為等度狀態之情況，在步驟2是施加梯度以使有機相對移動相整體之比例增加。
步驟2結束時，有機相對移動相整體之比例為25~70體積%，且宜為30~65體積%，以35~60體積%為佳。本發明中所謂步驟2之結束時，意指停止施加步驟2之梯度，有機相對移動相整體之比例開始下降的時間點。
步驟2之起始若是在步驟1結束後3分以內開始則無特別限制，宜為1分以內，且以步驟1結束當下為佳。
步驟2之結束只要比相關物質6之滯留時間還要晚則無特別限制，是從將試料注入高效液相層析後的35~65分後，且宜為40~60分後。
步驟2中的測定時間只要是可測定相關物質6之滯留時間，則無特別限制，宜為10~50分鐘，且以15~45分鐘為佳。
步驟2中的梯度只要使有機相對移動相整體之比例增加，則無特別限制，宜為使有機相對移動相整體之比例在1分鐘增加0.9體積%以上，且以在1分鐘增加1.0體積%以上為佳、在1分鐘增加2.0體積%以上尤佳。有機相對移動相整體之比例的增加上限並無特別限定，例如宜為在1分鐘增加10體積%以下等，且以在1分鐘增加5.0體積%以下等為佳。本說明書中，每段時間(例如，在1分鐘)有機相對移動相整體之比例增加X體積%，意指每單位時間，相對於移動相整體100體積%，將有機相對移動相整體之比例增加X體積%。又，在本發明，在步驟2之測定時間中，有機相對移動相整體之比例變化(在測定時間中，有機相對移動相整體之比例中最大値與最小値的差)宜設為移動相整體之30體積%以上，且以設為50體積%以上尤佳。步驟2之測定時間中，有機相對移動相整體之比例變化的上限並無特別限定，例如宜設為移動相整體之80體積%以下，且以設為70體積%以下尤佳。
步驟2中移動相之流量只要是在高效液相層析上通常可使用者即可，然考慮到各相關物質之滯留時間的分離，流量宜在2.5mL/min以下，且以2.0mL/min以下為佳、以1.5mL/min以下更佳。又，步驟2中移動相之流量範圍並無特別限定，例如宜為0.5~2.5mL/min，且以0.5~2.0mL/min為佳、以1.0~1.5mL/min更佳。從使整體之測定時間縮短的觀點來看，亦可從步驟2開始後慢慢提升流量，且宜為步驟2結束時，流量是步驟1結束時之流量的1.0~1.5倍。
如此一來，在步驟2可檢測相關物質6。
本發明中除了上述添加劑之外，還可添加離子對試劑。離子對試劑可使用戊烷磺酸鈉、己烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、十二烷磺酸鈉等烷基磺酸或其鹽(宜為烷基磺酸鈉)，十二烷基硫酸鈉等烷基硫酸或其鹽(宜為烷基硫酸鈉)，四乙基氫氧化銨、四丁基氫氧化銨、四丁基氯化銨、四丁基溴化銨等4級銨鹽，三己基胺、三辛基胺等3級胺。
本發明中移動相(典型上是水相)之pH可因應上述添加劑等適宜調整，且宜為2.0~5.0。
在本發明中之方法可使用的檢測波長，考慮到各相關物質之性質而可設為208~280nm，且宜為208~240nm、以208~212nm更佳。
在本發明中之方法可使用之管柱內移動相的溫度可適宜設定。考慮到外部環境的影響、重現性等，宜將該溫度保持在一定，且以25~50℃為佳、以35~45℃更佳、以40~44℃特別為佳。再者，該溫度在保持一定時，不僅可控制管柱整體的溫度，還可使用預熱混合器(preheat mixer)等。
本發明中的高效液相層析可適宜變更注入量、管柱內溫度等。
該等相關物質中，相關物質1~5可藉由眾所皆知的方法合成，或可自市售品獲得。又，相關物質6可從三氟胸苷或市售之化合物以眾所皆知的方法合成，或以後述之方法合成。藉由將如此獲得之相關物質之高效液相層析的滯留時間、質譜、光二極體陣列(PDA)，與經本發明檢測出之相關物質的該等資訊進行比較，而可特定出相關物質。
進一步，該等相關物質可藉由使用外部標準之方法、使用內部標準之方法的任一方法來進行定量測定。
該等相關物質可能以雜質形式含在醫藥品或製劑中時，該等相關物質可依照國際醫藥法規協和會之規範(ICH-Q3)來控制。本發明方法可用來確認是否滿足該規範之基準，因此非常有用。
又，該等相關物質可藉由本發明方法而自三氟胸苷或其鹽中檢測。進一步，本發明可將相關物質1~6中之1者或者2者以上作為標準品用於品質管理，且宜為相關物質1~6中之3者以上、以相關物質1~6中之4者以上為佳、以相關物質2、3、5及6特別為佳。
可用於如此標準品之三氟胸苷及源自其等之相關物質為高純度者。因此，透過該高效液相層析之條件而分離出的各相關物質可用作為標準品。就此，亦可換句話說，本發明是一種該相關物質之製造方法，特徵在於自含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑中分離。該相關物質可舉上述之相關物質1~6，且宜為相關物質2、3、5、6。
本發明提供之品質管理方法為含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑的品質管理方法，含有實施上述本發明方法之工序。本發明之品質管理方法，例如，當上述相關物質(例如，相關物質1~6之任1者以上)之含量(質量)在預定量以下時，則可評價為摻合劑滿足關於品質管理的基準。
本發明亦提供一種含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑的製造方法，含有實施上述本發明方法之工序。本發明之製造方法，例如可含有以下工序：製造三氟胸苷或其鹽之工序、將獲得之三氟胸苷或其鹽實施上述方法(宜為進行含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑的品質管理)之工序。
本發明中，在三氟胸苷中含有相關物質2、3、5或6是未知的，特別是相關物質6為新穎物質。因此，本發明包含可用於含有三氟胸苷或其鹽之醫藥組成物之品質管理的相關物質2、3、5或6，進一步，包含相關物質2、3、5或6，是用作為在含有三氟胸苷或其鹽之醫藥組成物之雜質檢測時的標準品。同時，本發明亦包含相關物質2、3、5或6的製造方法，特徵在於自含有三氟胸苷或其鹽之醫藥組成物中分離。
在本發明中的源自三氟胸苷之相關物質之檢測中，可使用利用高效液相層析的方法。
宜為檢測選自於由相關物質1~6所構成群組之至少1種源自三氟胸苷之相關物質，且含有以下步驟1與步驟2之條件的方法。
步驟1：有機相對移動相整體之比例為1~14體積%。
步驟2：步驟1之後，施加梯度以使有機相之比例進一步增加。
更佳為含有以下步驟1與步驟2之條件的方法。
步驟1：檢測選自於由相關物質1~5所構成群組之至少1種源自三氟胸苷之相關物質，有機相對移動相整體之比例為1~14體積%，且為等度狀態。
步驟2：步驟1之後，施加梯度以使有機相之比例進一步增加，檢測相關物質6。
更佳為含有以下步驟1與步驟2之條件的方法。
步驟1：有機相對移動相整體之比例為2~10體積%，且為等度狀態，並檢測相關物質1~5。
步驟2：步驟1之後，施加梯度以使有機相對移動相整體之比例進一步增加，檢測相關物質6。
更佳為在移動相中的有機相中含有乙腈，且含有以下步驟1與步驟2之條件的方法。
步驟1：有機相對移動相整體之比例為2~10體積%，且為等度狀態，並檢測相關物質1~5。
步驟2：步驟1之後，施加梯度以使有機相對移動相整體之比例進一步增加，步驟2結束時，有機相對移動相整體之比例為25~70體積%，並檢測相關物質6。
更佳為在移動相中的有機相中含有乙腈、水相中含有水、移動相中含有磷酸鹽，且含有以下步驟1與步驟2之條件的方法。
步驟1：有機相對移動相整體之比例為2~10體積%，且為等度狀態，並檢測相關物質1~5。
步驟2：步驟1之後，施加梯度以使有機相對移動相整體之比例在1分鐘增加0.9體積%以上，步驟2結束時，有機相對移動相整體之比例為30~65體積%，並檢測相關物質6。
更佳為在移動相中之有機相中含有乙腈、水相中含有水、移動相中含有磷酸鹽，且含有以下步驟1與步驟2之條件的方法。
步驟1：有機相對移動相整體之比例為2~10體積%，且為等度狀態，並檢測相關物質1~5。
步驟2：步驟1之後，施加梯度以使有機相對移動相整體之比例在1分鐘增加0.9體積%以上，步驟2結束時，有機相對移動相整體之比例為30~65體積%，並檢測相關物質6。
更佳為在移動相中之有機相中含有乙腈、水相中含有水、移動相中含有磷酸鹽，且含有以下步驟1與步驟2之條件的方法。
步驟1：有機相對移動相整體之比例為3~7體積%，且為等度狀態，並檢測相關物質1~5。
步驟2：步驟1之後，施加梯度以使有機相對移動相整體之比例在1分鐘增加0.9體積%以上，步驟2結束時，有機相對移動相整體之比例為35~60體積%，並檢測相關物質6。
更佳為在移動相中之有機相中含有乙腈、水相中含有水、移動相中含有磷二氫鈉，且含有以下步驟1與步驟2之條件的方法。
步驟1：有機相對移動相整體之比例為3~7體積%，且為等度狀態，測定時間為15~28分鐘，並檢測相關物質1~5。
步驟2：步驟1之後，施加梯度以使有機相對移動相整體之比例在1分鐘將有機相之比例增加0.9體積%以上，步驟2結束時，有機相對移動相整體之比例為35~60體積%、測定時間為10~50分鐘，並檢測相關物質6。
更佳為在移動相中之有機相中含有乙腈、水相中含有水、移動相中含有磷二氫鈉，且含有以下步驟1與步驟2之條件的方法。
步驟1：有機相對移動相整體之比例為3~7體積%，且為等度狀態、測定時間為15~28分鐘，並檢測相關物質1~5。
步驟2：步驟1之後，施加梯度以使有機相對移動相整體之比例在1分鐘增加0.9體積%以上，步驟2結束時，有機相對移動相整體之比例為35~60體積%，測定時間為10~50分鐘，且步驟2結束時之流量為步驟1之流量的1.0~1.5倍，並檢測相關物質6。
更佳為在移動相中之有機相含有乙腈、水相中含有水、移動相中含有甲醇及磷二氫鈉，且含有以下步驟1與步驟2之條件的方法。
步驟1：有機相對移動相整體之比例為3~7體積%，且為等度狀態、測定時間為15~28分鐘，並測定相關物質1~5。
步驟2：步驟1之後，施加梯度以使有機相對移動相整體之比例在1分鐘增加0.9體積%以上，步驟2結束時，有機相對移動相整體之比例為35~60體積%，測定時間為10~50分鐘，且步驟2結束時之流量為步驟1之流量的1.0~1.5倍，並檢測相關物質6。
實施例
透過以下之試驗條件進行高效液相層析之測定。
・檢測器：紫外吸光光度計(波長為210nm)
・管柱：在內徑4.6mm、長度15cm之不鏽鋼管裝入3μm或5μm之液相層析用十八烷基矽基化矽膠管柱
・管柱溫度：40℃
・流量：記載於各實施例
・移動相：記載於各實施例
・梯度：記載於各實施例
以高效液相層析測定之試料是如下調製。
使三氟胸苷溶解於與在各測定條件下可使用之移動相相同樣組成之溶液中，以使得三氟胸苷之濃度成為約0.8mg/mL，並將經適宜稀釋之溶液作為試料。
在本實施例，各移動相中之「%」表記意指體積%
實施例1-1
管柱：Hydrosphere C18、YMC公司製(3μm)
流量：1.0mL/min
移動相A：0.05mol/L之磷酸二氫鈉水溶液
移動相B：乙腈
梯度：將移動相A與移動相B如下變化來控制濃度梯度。0~18分：A 95% B 5%、18~55分：A 95→60% B 5%→40%、55~55.1分 A60%→95% B40%→5%、55.1以後 A 95% B 5%。
測定結果顯示於圖1。由此可確認到三氟胸苷之滯留時間為17.2分。可確認到在本測定方法中，三氟胸苷並未與基線之凹陷及假峰重疊。
實施例1-2
梯度：將移動相A與移動相B如下變化來控制濃度梯度。0~18分：A 95% B 5%、18~48分：A 95→60% B 5%→40%、48~48.1分 A60%→95% B40%→5%、48.1以後 A 95% B 5%。
管柱、流量、移動相A及移動相B是與實施例1相同條件。
確認到透過本測定，三氟胸苷並未與假峰重疊。
實施例1-3
梯度：將移動相A與移動相B如下變化來控制濃度梯度。0~20分：A 95% B 5%、20~50分：A 95→60% B 5%→40%、50~50.1分 A60%→95% B40%→5%、50.1以降 A 95% B 5%。管柱、流量、移動相A及移動相B是與實施例1相同條件。
測定結果顯示於圖2。由此可確認到，三氟胸苷之滯留時間為17.1分。確認到本測定方法中，三氟胸苷並未與基線之凹陷及假峰重疊。
實施例1-3-1 梯度：將移動相A與移動相B如下變化來控制濃度梯度。0~15分：A 95% B 5%、15~45分：A 95→60% B 5%→40%、45~45.1分 A60%→95% B40%→5%、45.1以後 A 95% B 5%。管柱、流量、移動相A及移動相B是與實施例1相同條件。
管柱：Inertsil ODS-3 GL SCIENCES公司製(3μm)
流量、移動相A及移動相B是與實施例1-3相同條件。
確認到透過本測定，三氟胸苷並未與假峰重疊。
實施例1-3-2
管柱：Inertsil ODS-4 GL SCIENCES公司製(3μm)
流量、移動相A及移動相B、梯度是與實施例1-3-1相同條件。
確認到透過本測定，三氟胸苷並未與假峰重疊。
實施例1-3-3
管柱：YMC-Pack Pro C18 RS(3μm)
流量、移動相A及移動相B、梯度是與實施例1-3-1相同條件。
確認到透過本測定，三氟胸苷並未與假峰重疊。
實施例1-3-4
管柱：YMC-Pack Pro C18(3μm)
流量、移動相A及移動相B、梯度是與實施例1-3-1相同條件。
確認到透過本測定，三氟胸苷並未與假峰重疊。
實施例2-1
管柱：Hydrosphere C18、YMC公司製(5μm)
流量：0~21分 1.0mL/min、21~46分 1.0→1.3mL/min、46~46.1分 1.3→1.0mL/min、46.1分以後 1.0mL/min
移動相A：將磷酸二氫鈉二水合物3.0g溶解於水1000mL中，添加磷酸並調整到pH2.2後，添加甲醇10mL。
移動相B：乙腈
梯度：將移動相A與移動相B如下變化來控制濃度梯度。0~21分：A 96% B 4%、21~46分：A 96→45% B 4→55%、46~46.1分 A45→96% B55→4%、46.1以後 A 96% B 4%。
測定結果顯示於圖3。由此可知，三氟胸苷之滯留時間為17.4分。又，相關物質1之滯留時間為3.1分、相關物質2之滯留時間為5.6分、相關物質3之滯留時間為4.1分、相關物質4之滯留時間為7.9分、相關物質5之滯留時間為8.8分、相關物質6之滯留時間為42.9分。
經檢測之各相關物質與另行購入或合成之各相關物質的滯留時間為一致，因此可確認到是顯示相關物質1~6之結構的化合物。
就結論來說，可確認到本測定方法中三氟胸苷並未之基線之凹陷及假峰重疊。同時，可知三氟胸苷之各相關物質及三氟胸苷可以分離。進一步，相關物質6之波峰與後述之合成相關物質6的滯留時間一致，因此判斷出在本測定中，滯留時間42.9分之波峰為相關物質6。
實施例2-2
管柱：Unison UK-C18、Imtakt公司製(5μm)
其他條件是與實施例2-1相同。
依據本測定之結論，是與實施例2-1相同。
實施例2-3
移動相A：將磷酸二氫鈉二水合物3.0g溶解於水1000mL中，添加磷酸並調整到pH2.2，之後，添加甲醇9mL。
其他條件是與實施例2-1相同。
根據本測定之結論，是與實施例2-1相同。
實施例2-4
流量：0~21分 0.95mL/min、21~46分 0.95→1.25mL/min、46~46.1分 1.25→0.95mL/min、46.1分以後 0.95mL/min
其他條件是與實施例2-1相同。
根據本測定之結論，是與實施例2-1相同。
實施例2-5
梯度：將移動相A與移動相B如下變化來控制濃度梯度。0~21分：A 95.8% B 4.2%、21~46分：A 95.8→43% B 4.2→57%、46~46.1分 A43→95.8% B57→4.2%、46.1以後 A 95.8% B 4.2%。
其他條件是與實施例2-1相同。
根據本測定之結論，是與實施例2-1相同。
實施例3
管柱：Inertsil ODS-2、GL Sciences公司製(5μm)
流量：1.0mL/min
移動相A：0.05mol/L 磷酸二氫鈉水溶液
移動相B：乙腈
梯度： 將移動相A與移動相B如下變化來控制濃度梯度。0~2分：A 85% B 15%、2~7分：A 85→60% B 15→40%、7分以後 A60% B40%。
根據測定結果，得知三氟胸苷之滯留時間為3.6分。又，相關物質1~5之滯留時間集中在1.0~2.5分，而無法算出該等之波峰面積。
就結論而言，得知在本測定方法中，儘管三氟胸苷之相關物質1~5的檢測不一定是正確的，然而，可以測定相關物質6。
實施例2
管柱：Inertsil ODS-2、GL Sciences公司製(5μm)
流量：1.0mL/min
移動相A：水
移動相B：乙腈
梯度： A60% B40%之等度狀態。
根據測定結果，得知三氟胸苷之滯留時間為1.8分、相關物質6之滯留時間為7.6分。儘管相關物質1~5之滯留時間集中在1.6~2.5分，無法算出該等之波峰面積，然而，如上述，可以檢測相關物質6。
參考例 5’-(4-氯苯基羧基)-2’-去氧-5-三氟甲基尿苷(相關物質6)之合成
[化學式2]
使市售之三氟胸苷(2.00g)溶解於吡啶(8mL)中，在冰浴下慢慢添加p-氯苯甲醯基氯(1.18g)，並在室溫下攪拌1小時。之後，蒸餾去除溶劑，將殘渣以矽膠管柱層析(氯仿/甲醇＝100/0~91/9)純化，獲得5’-(4-氯苯基羧基)-2’-去氧-5-三氟甲基尿苷(1.49g、相關物質6)及3’-(4-氯苯基羧基)-2’-去氧-5-三氟甲基尿苷(238mg、參考化合物1)。
相關物質6：1H-NMR(DMSO-d6、270MHz) δ(ppm)11.91(1H、s)、8.03(1H、s)、7.95(2H、d、J＝6.75Hz)、7.60(2H、d、J＝6.75Hz)、6.07(1H、t、J＝6.55Hz)、5.48(1H、d、J＝4.29Hz)、4.56-4.38(3H、m)、4.18-4.16(1H、m)
參考化合物1：1H-NMR(DMSO-d6、270MHz) δ(ppm)11.92(1H、s)、8.72(1H、s)、8.03(2H、d、J=8.07Hz)、7.63(2H、d、J=8.07Hz)、6.27(1H、t、J=6.75Hz)、5.48-5.42(2H、m)、4.28(1H、s)、3.72(2H、s)
圖1顯示實施例1-1的層析圖。
圖2顯示實施例1-3的層析圖。
圖3顯示實施例2-1的層析圖。

Claims (29)

  1. 一種用以檢測源自三氟胸苷之相關物質的方法，含有將含三氟胸苷或其鹽之試料供於高效液相層析之工序，該高效液相層析使用由有機相及水相構成之移動相，且前述供於高效液相層析之工序含有滿足以下要件之步驟： 步驟1：有機相對移動相整體之比例為1~14體積%， 步驟2：步驟1之後，施加梯度以使有機相對移動相整體之比例增加。
  2. 如請求項1之方法,其中前述相關物質是選自於由下述相關物質1~6所構成群組中之至少1者： 相關物質1：5-羧基尿嘧啶， 相關物質2：5-羧基-2’-去氧-尿苷， 相關物質3：2’-去氧-5-甲氧基羰基尿苷， 相關物質4：三氟胸腺嘧啶， 相關物質5：5-甲氧基羰基尿嘧啶， 相關物質6：5’-(4-氯苯基羧基)-2’-去氧-5-三氟甲基尿苷。
  3. 如請求項1或2之方法，其在步驟1檢測相關物質1~5，在步驟2檢測相關物質6。
  4. 如請求項1至3中任一項之方法，其中，步驟1是在等度(isocratic)狀態下進行。
  5. 如請求項1至4中任一項之方法，其中，有機相為乙腈。
  6. 如請求項1至5中任一項之方法，其中，在步驟1中，有機相對移動相整體之比例為2~10體積%。
  7. 如請求項1至6中任一項之方法，其中，在步驟2結束時，有機相對移動相整體之比例為25~70體積%。
  8. 如請求項1至7中任一項之方法，其中，在步驟2中，施加使有機相對移動相整體之比例在1分鐘增加0.9體積%的梯度。
  9. 如請求項1至8中任一項之方法，其中步驟2之測定時間為10~50分鐘。
  10. 如請求項1至9中任一項之方法，其中，步驟2結束時的流量為步驟1之流量的1.0~1.5倍。
  11. 如請求項1至10中任一項之方法，其中，水相進一步含有磷酸鹽。
  12. 如請求項1至11中任一項之方法，其中，水相進一步含有甲醇。
  13. 一種5-羧基-2’-去氧-尿苷(相關物質2)，是用於含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑的品質管理。
  14. 一種5-羧基-2’-去氧-尿苷(相關物質2)，是用作為在含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品。
  15. 一種5-羧基-2’-去氧-尿苷(相關物質2)作為標準品之用途，該標準品是在含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之品質管理時的標準品。
  16. 一種含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品，是由5-羧基-2’-去氧-尿苷(相關物質2)構成。
  17. 一種2’-去氧-5-甲氧基羰基尿苷(相關物質3)，是用於含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑的品質管理。
  18. 一種2’-去氧-5-甲氧基羰基尿苷(相關物質3)，是用作為在含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品。
  19. 一種2’-去氧-5-甲氧基羰基尿苷(相關物質3)作為標準品之用途，該標準品是在含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品。
  20. 一種含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品，是由2’-去氧-5-甲氧基羰基尿苷(相關物質3)構成。
  21. 一種5-甲氧基羰基尿嘧啶(相關物質5)，是用於含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑的品質管理。
  22. 一種5-甲氧基羰基尿嘧啶(相關物質5)，是用作為在含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品。
  23. 一種5-甲氧基羰基尿嘧啶(相關物質5)作為標準品之用途，該標準品是在含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品。
  24. 一種含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品，是由5-甲氧基羰基尿嘧啶(相關物質5)構成。
  25. 一種5’-(4-氯苯基羧基)-2’-去氧-5-三氟甲基尿苷(相關物質6)。
  26. 一種5’-(4-氯苯基羧基)-2’-去氧-5-三氟甲基尿苷(相關物質6)，是用於含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑的品質管理。
  27. 一種5’-(4-氯苯基羧基)-2’-去氧-5-三氟甲基尿苷(相關物質6)，是用作為在含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品。
  28. 一種5’-(4-氯苯基羧基)-2’-去氧-5-三氟甲基尿苷(相關物質6)作為標準品之用途，該標準品是在含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品。
  29. 一種含有三氟胸苷或其鹽之摻合劑之雜質檢測時的標準品，是由5’-(4-氯苯基羧基)-2’-去氧-5-三氟甲基尿苷(相關物質6)構成。
TW108100350A 2018-01-05 2019-01-04 源自三氟胸苷之相關物質的檢測方法 TWI759575B (zh)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2018-000881 2018-01-05
JP2018000881 2018-01-05
US16/040,734 2018-07-20
US16/040,734 US10816517B2 (en) 2018-01-05 2018-07-20 Method for detecting trifluridine-related substance by high-performance liquid chromatography
CN201810821041.5 2018-07-24
??201810821041.5 2018-07-24
CN201810821041.5A CN110007010A (zh) 2018-01-05 2018-07-24 源自曲氟尿苷的类似物质的检测方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TW201930333A true TW201930333A (zh) 2019-08-01
TWI759575B TWI759575B (zh) 2022-04-01

Family

ID=67139109

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW108100350A TWI759575B (zh) 2018-01-05 2019-01-04 源自三氟胸苷之相關物質的檢測方法

Country Status (5)

Country Link
US (2) US10816517B2 (zh)
EP (1) EP3736568A4 (zh)
JP (1) JP7257969B2 (zh)
MA (1) MA51528A (zh)
TW (1) TWI759575B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112362791A (zh) * 2020-12-10 2021-02-12 国药一心制药有限公司 一种曲氟尿苷与其异构体的hplc分离方法

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10866219B2 (en) 2017-12-22 2020-12-15 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Method for detecting trifluridine- and/or tipiracil-related substance
US10816517B2 (en) 2018-01-05 2020-10-27 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Method for detecting trifluridine-related substance by high-performance liquid chromatography
CN111505159A (zh) * 2020-05-09 2020-08-07 石家庄格瑞药业有限公司 盐酸阿罗洛尔中有关物质的检测方法
CN112630313A (zh) * 2020-11-06 2021-04-09 天地恒一制药股份有限公司 一种(s)-3-羟基四氢呋喃对映异构体的高效液相拆分方法
CN112595793B (zh) * 2020-12-31 2022-03-22 华南理工大学 一种基于苯酚测定的地龙注射液检测方法
CN117871740B (zh) * 2024-03-11 2024-05-10 炉霍雪域俄色有限责任公司 俄色果原浆液相色谱品质检测方法

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6056996A (ja) 1983-09-07 1985-04-02 Taiho Yakuhin Kogyo Kk ２′―デオキシ―５―トリフルオロメチルウリジン誘導体及びそれを含有する抗腫瘍剤
JPS6110565A (ja) 1984-06-26 1986-01-18 Takeda Chem Ind Ltd ウラシル−５−カルボン酸エステル類の製造法
WO1996030346A1 (fr) 1995-03-29 1996-10-03 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Derives d'uracile, agents de potentialisation d'effet antitumoral et agent antitumoral renfermant ces derives
CN100445393C (zh) 2003-11-11 2008-12-24 三井化学株式会社 戊糖-5-磷酸酯的制备方法
JP4603274B2 (ja) 2004-02-24 2010-12-22 三井化学株式会社 ２’−デオキシ−５−トリフルオロメチルウリジンの製造方法
JP4441313B2 (ja) 2004-04-02 2010-03-31 三井化学株式会社 ２’−デオキシ−５−パーフルオロアルキルウリジンの製造法
SI1849470T1 (sl) 2005-01-26 2017-10-30 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Zdravilo proti raku, ki vsebuje alfa,alfa,alfa-trifluorotimidin in zaviralec timidin-fosforilaze
US20140133433A1 (en) 2011-07-15 2014-05-15 Lg Electronics Inc. Communication method and wireless device supporting variable bandwidth
TWI503122B (zh) 2012-02-15 2015-10-11 Taiho Pharmaceutical Co Ltd Oral administration of pharmaceutical compositions
TWI526210B (zh) 2012-02-15 2016-03-21 Taiho Pharmaceutical Co Ltd Oral pharmaceutical composition
CN103788075B (zh) 2014-02-19 2018-03-27 齐鲁制药有限公司 一种胸苷磷酸化酶抑制剂的结晶形式及其制备方法
CN105198947B (zh) 2014-06-27 2019-05-14 江苏奥赛康药业股份有限公司 一种Trifluridine化合物及其药物组合物
CN105461772B (zh) 2015-11-23 2018-01-12 国药一心制药有限公司 一种曲氟尿苷中间体及曲氟尿苷的制备方法
JP6380369B2 (ja) 2015-12-25 2018-08-29 トヨタ自動車株式会社 車両用ピラー構造
CN106220699A (zh) * 2016-07-21 2016-12-14 嘉实（湖南）医药科技有限公司 高纯度曲氟尿苷的制备方法
CN108203437B (zh) 2016-12-20 2022-05-13 海南先声药业有限公司 两种替吡嘧啶杂质制备方法与应用
CN106749194B (zh) 2017-01-23 2019-05-07 齐鲁天和惠世制药有限公司 一种替匹嘧啶的制备方法
EP3730935A4 (en) 2017-12-22 2022-02-23 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. METHOD OF DETECTING ANALOGUES OF TRIFLURIDIN AND/OR TIPIRACIL
US10866219B2 (en) 2017-12-22 2020-12-15 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Method for detecting trifluridine- and/or tipiracil-related substance
WO2019135405A1 (ja) 2018-01-05 2019-07-11 大鵬薬品工業株式会社 トリフルリジン由来の類縁物質の検出方法
US10816517B2 (en) 2018-01-05 2020-10-27 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Method for detecting trifluridine-related substance by high-performance liquid chromatography

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112362791A (zh) * 2020-12-10 2021-02-12 国药一心制药有限公司 一种曲氟尿苷与其异构体的hplc分离方法
CN112362791B (zh) * 2020-12-10 2023-06-06 国药一心制药有限公司 一种曲氟尿苷与其异构体的hplc分离方法

Also Published As

Publication number Publication date
EP3736568A1 (en) 2020-11-11
US10816517B2 (en) 2020-10-27
EP3736568A4 (en) 2021-11-17
TWI759575B (zh) 2022-04-01
US10809237B2 (en) 2020-10-20
US20190369063A1 (en) 2019-12-05
US20190212309A1 (en) 2019-07-11
MA51528A (fr) 2020-11-11
JP7257969B2 (ja) 2023-04-14
JPWO2019135405A1 (ja) 2021-01-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TW201930333A (zh) 源自三氟胸苷之相關物質的檢測方法
EP3730935A1 (en) Method for detecting trifluridine- and/or tipiracil-derived analogs
JP2008507565A (ja) シナカルセトの精製
WO2019135405A1 (ja) トリフルリジン由来の類縁物質の検出方法
CN104965041A (zh) 一种帕瑞昔布钠异构体的高效液相色谱检测方法
Rao et al. Identification of oxidative degradation impurities of Olanzapine drug substance as well as drug product
CN107782805B (zh) 一种双嘧达莫合成的关键中间体杂质hplc分析方法
TWI721349B (zh) 源自三氟胸苷及/或替吡嘧啶之相關物質的檢測方法
Raggi et al. A rapid LC method for the identification and determination of CNS drugs in pharmaceutical formulations
CN107686477A (zh) 作为cdk4/6抑制剂的新型化合物及其应用
Amini et al. A new pre-column derivatization method for determination of gabapentin in human serum by HPLC using UV detection
CN109574975A (zh) 7,8-二羟基黄酮衍生物的晶型及其制备方法和应用
CN110007010A (zh) 源自曲氟尿苷的类似物质的检测方法
JP7466642B2 (ja) レンバチニブメシル酸塩結晶形ｘｉ及びその調製方法
CN115586272A (zh) 一种布瑞哌唑制剂溶出的检测方法和应用
Khalil et al. Vinpocetine (A comprehensive profile)
CN107870211A (zh) 一种分离测定盐酸帕洛诺司琼的液相色谱方法
CN104977368A (zh) 一种4-[(4-氟苯基亚胺)甲基]-苯酚的有关物质检测方法及其应用
CN105837514B (zh) 非马沙坦药物杂质的制备方法
CN112964794B (zh) 一种分离检测4,5,6,7-四氢噻吩[3,2-c]吡啶盐酸盐及其有关物质的方法
Hamsa et al. Analytical profile of cinacalcet hydrochloride: A review
Takeda et al. TECHNICAL FIELD
Patel et al. Advancements in the Analytical Methods for Ripasudil Hydrochloride Hydrate and Timolol Maleate: A Recently Approved FDC
CN105380912A (zh) 一种含有他达拉非的药物组合物
CN111812227A (zh) 一种多巴丝肼复方制剂中苄丝肼杂质a的分析方法