JP4441313B2 - ２’−デオキシ−５−パーフルオロアルキルウリジンの製造法 - Google Patents
２’−デオキシ−５−パーフルオロアルキルウリジンの製造法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4441313B2 JP4441313B2 JP2004109609A JP2004109609A JP4441313B2 JP 4441313 B2 JP4441313 B2 JP 4441313B2 JP 2004109609 A JP2004109609 A JP 2004109609A JP 2004109609 A JP2004109609 A JP 2004109609A JP 4441313 B2 JP4441313 B2 JP 4441313B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- acid
- salt
- magnesium
- anion
- general formula
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 17
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 42
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 34
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 28
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 claims description 21
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 19
- 108010009099 nucleoside phosphorylase Proteins 0.000 claims description 16
- OQRXBXNATIHDQO-UHFFFAOYSA-N 6-chloropyridine-3,4-diamine Chemical compound NC1=CN=C(Cl)C=C1N OQRXBXNATIHDQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 102100036286 Purine nucleoside phosphorylase Human genes 0.000 claims description 15
- VTHJTEIRLNZDEV-UHFFFAOYSA-L magnesium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Mg+2] VTHJTEIRLNZDEV-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 15
- 239000000347 magnesium hydroxide Substances 0.000 claims description 15
- 229910001862 magnesium hydroxide Inorganic materials 0.000 claims description 15
- -1 alkali metal cation Chemical class 0.000 claims description 9
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 7
- 102000013537 Thymidine Phosphorylase Human genes 0.000 claims description 6
- UEGPKNKPLBYCNK-UHFFFAOYSA-L magnesium acetate Chemical compound [Mg+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O UEGPKNKPLBYCNK-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 239000011654 magnesium acetate Substances 0.000 claims description 6
- 235000011285 magnesium acetate Nutrition 0.000 claims description 6
- 229940069446 magnesium acetate Drugs 0.000 claims description 6
- 101710132082 Pyrimidine/purine nucleoside phosphorylase Proteins 0.000 claims description 5
- 239000000395 magnesium oxide Substances 0.000 claims description 5
- CPLXHLVBOLITMK-UHFFFAOYSA-N magnesium oxide Inorganic materials [Mg]=O CPLXHLVBOLITMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- AXZKOIWUVFPNLO-UHFFFAOYSA-N magnesium;oxygen(2-) Chemical compound [O-2].[Mg+2] AXZKOIWUVFPNLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 4
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 125000005010 perfluoroalkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- GVALZJMUIHGIMD-UHFFFAOYSA-H magnesium phosphate Chemical compound [Mg+2].[Mg+2].[Mg+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O GVALZJMUIHGIMD-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims description 3
- 239000004137 magnesium phosphate Substances 0.000 claims description 3
- 229960002261 magnesium phosphate Drugs 0.000 claims description 3
- 229910000157 magnesium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000010994 magnesium phosphates Nutrition 0.000 claims description 3
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 34
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 33
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 32
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 30
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 29
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 28
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 26
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 26
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- 239000000047 product Substances 0.000 description 14
- AHKZTVQIVOEVFO-UHFFFAOYSA-N oxide(2-) Chemical class [O-2] AHKZTVQIVOEVFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- VSQQQLOSPVPRAZ-RRKCRQDMSA-N trifluridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(C(F)(F)F)=C1 VSQQQLOSPVPRAZ-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 8
- KBDKAJNTYKVSEK-VPENINKCSA-N 2-deoxy-alpha-D-ribose 1-phosphate Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](OP(O)(O)=O)C[C@@H]1O KBDKAJNTYKVSEK-VPENINKCSA-N 0.000 description 7
- LMNPKIOZMGYQIU-UHFFFAOYSA-N 5-(trifluoromethyl)-1h-pyrimidine-2,4-dione Chemical compound FC(F)(F)C1=CNC(=O)NC1=O LMNPKIOZMGYQIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 6
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 6
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 5
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 4
- 229940085991 phosphate ion Drugs 0.000 description 4
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 3
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 3
- 241000588914 Enterobacter Species 0.000 description 3
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000187654 Nocardia Species 0.000 description 3
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 3
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 3
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 3
- MXHRCPNRJAMMIM-SHYZEUOFSA-N 2'-deoxyuridine Chemical class C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 MXHRCPNRJAMMIM-SHYZEUOFSA-N 0.000 description 2
- 241000590020 Achromobacter Species 0.000 description 2
- 241000589291 Acinetobacter Species 0.000 description 2
- 241000589158 Agrobacterium Species 0.000 description 2
- 241000186063 Arthrobacter Species 0.000 description 2
- 241000186146 Brevibacterium Species 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 2
- 241000186321 Cellulomonas Species 0.000 description 2
- 241000588923 Citrobacter Species 0.000 description 2
- 241000186216 Corynebacterium Species 0.000 description 2
- 241000588698 Erwinia Species 0.000 description 2
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 2
- 241000606790 Haemophilus Species 0.000 description 2
- 241000588731 Hafnia Species 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 description 2
- 241000186809 Kurthia Species 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000192041 Micrococcus Species 0.000 description 2
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 2
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 2
- 241000589180 Rhizobium Species 0.000 description 2
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 2
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 2
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- 108010019092 Uridine phosphorylase Proteins 0.000 description 2
- 102000006405 Uridine phosphorylase Human genes 0.000 description 2
- 241000607598 Vibrio Species 0.000 description 2
- 241000589506 Xanthobacter Species 0.000 description 2
- XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N Zinc monoxide Chemical compound [Zn]=O XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- QVQLCTNNEUAWMS-UHFFFAOYSA-N barium oxide Chemical compound [Ba]=O QVQLCTNNEUAWMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TZCXTZWJZNENPQ-UHFFFAOYSA-L barium sulfate Chemical compound [Ba+2].[O-]S([O-])(=O)=O TZCXTZWJZNENPQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- CJNBYAVZURUTKZ-UHFFFAOYSA-N hafnium(IV) oxide Inorganic materials O=[Hf]=O CJNBYAVZURUTKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- BLGKEJUTTUUIEN-IUYQGCFVSA-N (3s,4r)-3,4,5-trihydroxypentanoyl chloride Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)CC(Cl)=O BLGKEJUTTUUIEN-IUYQGCFVSA-N 0.000 description 1
- HWBPAGFLYJHNSJ-VOBHOPKGSA-N (3s,4r)-3-(4-chlorobenzoyl)-6-(4-chlorophenyl)-3,4,5-trihydroxy-6-oxohexanoyl chloride Chemical compound O=C([C@](O)(CC(Cl)=O)[C@H](O)C(O)C(=O)C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=C(Cl)C=C1 HWBPAGFLYJHNSJ-VOBHOPKGSA-N 0.000 description 1
- 0 *C(C(N1)=O)=CNC1=O Chemical compound *C(C(N1)=O)=CNC1=O 0.000 description 1
- GLXNCCKMEDEHOO-UHFFFAOYSA-N 1,1,1-trifluoro-n-nitroso-n-(trifluoromethyl)methanesulfonamide Chemical compound FC(F)(F)N(N=O)S(=O)(=O)C(F)(F)F GLXNCCKMEDEHOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-N 2-Methylbenzenesulfonic acid Chemical compound CC1=CC=CC=C1S(O)(=O)=O LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000589220 Acetobacter Species 0.000 description 1
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 1
- 241000607534 Aeromonas Species 0.000 description 1
- 108090000145 Bacillolysin Proteins 0.000 description 1
- 108091005658 Basic proteases Proteins 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910021503 Cobalt(II) hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M D-gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000701959 Escherichia virus Lambda Species 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241001467578 Microbacterium Species 0.000 description 1
- 241001024304 Mino Species 0.000 description 1
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 1
- 108091005507 Neutral proteases Proteins 0.000 description 1
- 102000035092 Neutral proteases Human genes 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009097 Phosphorylases Human genes 0.000 description 1
- 108010073135 Phosphorylases Proteins 0.000 description 1
- 241000193804 Planococcus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241000186429 Propionibacterium Species 0.000 description 1
- 241000586779 Protaminobacter Species 0.000 description 1
- 241000187603 Pseudonocardia Species 0.000 description 1
- 102000001853 Pyrimidine Phosphorylases Human genes 0.000 description 1
- 108010054917 Pyrimidine Phosphorylases Proteins 0.000 description 1
- 108010046685 Rho Factor Proteins 0.000 description 1
- 241000316848 Rhodococcus <scale insect> Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108700023160 Thymidine phosphorylases Proteins 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FMRLDPWIRHBCCC-UHFFFAOYSA-L Zinc carbonate Chemical compound [Zn+2].[O-]C([O-])=O FMRLDPWIRHBCCC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N acetic acid;zinc Chemical compound [Zn].CC(O)=O.CC(O)=O ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910001413 alkali metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 1
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000012870 ammonium sulfate precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- ITHZDDVSAWDQPZ-UHFFFAOYSA-L barium acetate Chemical compound [Ba+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O ITHZDDVSAWDQPZ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- WDIHJSXYQDMJHN-UHFFFAOYSA-L barium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ba+2] WDIHJSXYQDMJHN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910001626 barium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- RQPZNWPYLFFXCP-UHFFFAOYSA-L barium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ba+2] RQPZNWPYLFFXCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910001863 barium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- VSGNNIFQASZAOI-UHFFFAOYSA-L calcium acetate Chemical compound [Ca+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O VSGNNIFQASZAOI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001639 calcium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000011092 calcium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229960005147 calcium acetate Drugs 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L calcium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- BRPQOXSCLDDYGP-UHFFFAOYSA-N calcium oxide Chemical compound [O-2].[Ca+2] BRPQOXSCLDDYGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000292 calcium oxide Substances 0.000 description 1
- ODINCKMPIJJUCX-UHFFFAOYSA-N calcium oxide Inorganic materials [Ca]=O ODINCKMPIJJUCX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000008618 cell wall macromolecule catabolic process Effects 0.000 description 1
- 229940011182 cobalt acetate Drugs 0.000 description 1
- GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L cobalt dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Co+2] GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000428 cobalt oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- QAHREYKOYSIQPH-UHFFFAOYSA-L cobalt(II) acetate Chemical compound [Co+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O QAHREYKOYSIQPH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- ASKVAEGIVYSGNY-UHFFFAOYSA-L cobalt(ii) hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Co+2] ASKVAEGIVYSGNY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- IVMYJDGYRUAWML-UHFFFAOYSA-N cobalt(ii) oxide Chemical compound [Co]=O IVMYJDGYRUAWML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 108010055641 deoxyuridine phosphorylase Proteins 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- MXHRCPNRJAMMIM-UHFFFAOYSA-N desoxyuridine Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 MXHRCPNRJAMMIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 1
- 125000006343 heptafluoro propyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- XGZVUEUWXADBQD-UHFFFAOYSA-L lithium carbonate Chemical compound [Li+].[Li+].[O-]C([O-])=O XGZVUEUWXADBQD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052808 lithium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940097364 magnesium acetate tetrahydrate Drugs 0.000 description 1
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000014380 magnesium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011147 magnesium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- XKPKPGCRSHFTKM-UHFFFAOYSA-L magnesium;diacetate;tetrahydrate Chemical compound O.O.O.O.[Mg+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O XKPKPGCRSHFTKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000005246 nonafluorobutyl group Chemical group FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)* 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 239000004246 zinc acetate Substances 0.000 description 1
- 235000013904 zinc acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011667 zinc carbonate Substances 0.000 description 1
- 235000004416 zinc carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000010 zinc carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 description 1
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000011787 zinc oxide Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
本発明は、抗がん剤や抗ウイルス薬として有用な２’−デオキシ−５−パーフルオロアルキルウリジンの製造法に関する。
２’−デオキシ−５−パーフルオロアルキルウリジンは、それ自身制癌剤として有用であると同時に、他の医薬上有用な化合物の原料となるので、その需要は高まっている。
従来、２’−デオキシ−５−パーフルオロアルキルウリジンの製造法としては、例えば、次の様な製造法が知られていた。
１） −パーフルオロアルキルウラシル誘導体をトリアルキルシリル化し、水酸基を保護した１−クロロ−２−デオキシリボースと触媒存在下、反応させ、次いで脱保護して目的物を得る方法。（特許文献１）
２） 水酸基を保護した２’−デオキシウリジン誘導体にＮ−トリフルオロメチル−Ｎ−ニトロソトリフルオロメタンスルホンアミドを反応させトリフルオロメチル化後、脱保護して目的物を得る方法。（特許文献２）
３） クレオシド−２’−デオキシリボース転移酵素を用いて、チミジンと５−トリフルオロメチルウラシルの核酸塩基交換反応を行い、目的物を得る方法。（特許文献３）
特開平２−２８９５９５号公報
特開昭６３−１４５２９６号公報
特開平２−３１６８６号公報
１） −パーフルオロアルキルウラシル誘導体をトリアルキルシリル化し、水酸基を保護した１−クロロ−２−デオキシリボースと触媒存在下、反応させ、次いで脱保護して目的物を得る方法。（特許文献１）
２） 水酸基を保護した２’−デオキシウリジン誘導体にＮ−トリフルオロメチル−Ｎ−ニトロソトリフルオロメタンスルホンアミドを反応させトリフルオロメチル化後、脱保護して目的物を得る方法。（特許文献２）
３） クレオシド−２’−デオキシリボース転移酵素を用いて、チミジンと５−トリフルオロメチルウラシルの核酸塩基交換反応を行い、目的物を得る方法。（特許文献３）
１）の方法では目的物を得る為に多工程を要し、且つ目的物であるβ体の選択性が低く、精製に多大な労力がかかり、製造コスト上問題が多い。また、２）の方法では原料である２’−デオキシウリジンが高価である事、且つ工程も長く収率もあまり高くない事から工業的製造法とは言い難い。３）の方法は酵素反応である為、１工程で目的物を得られ、且つβ体の選択性は１００％であり非常に良いが、収率が低い。更に、２’−デオキシ−５−トリフルオロメチルウリジンは弱アルカリ水溶液中での安定性が著しく乏しい（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，５７，１１１７（１９６８））。その為、酵素反応を用いる場合は反応の転化率もさることながら、水中で反応することによる生成物の分解を抑制した効率的な２’−デオキシ−５−パーフルオロアルキルウリジンの製造法の開発が望まれていた。
本発明は、従来技術の問題点に鑑み、２’−デオキシ−５−パーフルオロアルキルウリジンの分解を抑え、簡便で効率的かつ高収率な酵素法による２’−デオキシ−５−パーフルオロアルキルウリジンの製造方法を提供することを目的とする。
本発明者らは、上記課題について鋭意検討した結果、酵素反応の転化率を上げる方法として、反応により生成するリン酸を不溶化することにより反応の平衡を目的物側に大きくずらす事が出来ることを見出した。更に、反応で同時に生成する２’−デオキシリボース−１−リン酸のカウンターカチオンがパーフルオロ基の加水分解を促進する事を突き止め、反応で生成するカウンターカチオンを酸のアニオンと反応させる事により目的物の分解を抑え高収率で２’−デオキシ−５−パーフルオロアルキルウリジンを製造出来ることを見出した。更に酸の加え方としてリン酸と不溶性の塩を形成すると同時に、酸成分を遊離する事が出来る金属塩を併用する事で滴下操作などの煩雑な操作も必要とせずに目的を達成できる事を見出し、本発明を完成するに至った。
即ち、本発明は、一般式（１）
（式中、Ｒ１は炭素数１から４のパーフルオロアルキル基を示す。）で表される化合物と、一般式（２）
（式中、Ｒ２はアルカリ金属カチオンまたは（Ｒ３）（Ｒ４）（Ｒ５）ＮＨ＋を示す。ただし、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５はそれぞれ水素原子または炭素数１から８のアルキル基を示す。）で表される化合物を、ヌクレオシドホスホリラーゼ、水酸化マグネシウムまたは酸化マグネシウム、および、マグネシウムイオンと酸のアニオンの塩または酸の存在下、水に不溶性のリン酸マグネシウムおよび一般式（２）中のＲ２の塩を生成させつつ反応させる、一般式（３）
（式中、Ｒ１は前記と同義。）で表される化合物の製造方法に関するものである。
本発明によれば、従来の方法に比べ高選択的かつ高収率で２’−デオキシ−５−トリフルオロメチルウリジンを製造する方法を提供することができる。
本発明の製造方法は、一般式（１）で表される化合物と一般式（２）で表される化合物を、ヌクレオシドホスホリラーゼの存在下、水に不溶性のリン酸塩および一般式（２）中のＲ２の塩を生成させつつ反応させる、一般式（３）で表される化合物の製造方法である。
一般式（１）および一般式（３）中のＲ１は、炭素数１から４のパーフルオロアルキル基を示す。
炭素数１から４のパーフルオロアルキル基としては、トリフルオロメチル基、ペンタフルオロメチル基、ヘプタフルオロプロピル基、ヘプタフルオロイソプロピル基、ノナフルオロブチル基、ノナフルオロイソブチル基、ノナフルオロｔ−ブチル基等が挙げられる。
一般式（１）および一般式（３）で表される化合物のなかでも、Ｒ１がトリフルオロメチル基である化合物は、本発明の製造方法を適用するのに好ましい化合物である。
一般式（１）で表される化合物は、その一部を市販品として入手することができるが、公知の方法、例えば、特開昭６０−９４９７１号広報や特開平７−３３７５０号広報等に記載の方法で容易に製造することができる。
一般式（２）中のＲ２は、アルカリ金属イオンまたは（Ｒ３）（Ｒ４）（Ｒ５）ＮＨ＋を示す。ただし、Ｒ３Ｒ４Ｒ５ＮＨ＋中のＲ３、Ｒ４およびＲ５は、それぞれ水素原子または炭素数１から８のアルキル基を示す。
一般式（２）で表される化合物のなかでも、Ｒ２におけるＲ３、Ｒ４およびＲ５がそれぞれ水素原子である化合物は、本発明の製造方法を適用するのに好ましい化合物である。
一般式（２）で表される化合物は、公知の方法、例えば、特開平１３−０２６５９９記載の方法で容易に製造する事が出来る。すなわち３，５−ビス（ｐ−クロロベンゾイル）−１−クロロ−２−デオキシリボースをリン酸によりアノマー位の置換反応後、脱保護して製造する事が出来る。
ヌクレオシドホスホリラーゼとしては、ペントース−１−リン酸とパーフルオロアルキルウラシルを反応させて相当するヌクレオシド化合物を生成できる活性を有するものであれば制限はない。
ヌクレオシドホスホリラーゼとしては、ペントース−１−リン酸とパーフルオロアルキルウラシルを反応させて相当するヌクレオシド化合物を生成できる活性を有するものであれば制限はない。
ヌクレオシドホスホリラーゼとしては、例えば、ピリミジンヌクレオシドホスホリラーゼ（ＥＣ２．４．２．２）、ウリジンホスホリラーゼ（ＥＣ２．４．２．３）、チミジンホスホリラーゼ（ＥＣ２．４．２．４）、デオキシウリジンホスホリラーゼ（ＥＣ２．４．２．２３）などが挙げられる。
ヌクレオシドホスホリラーゼは、Ｓｉｇｍａ社などの市販を入手することができるが、ヌクレオシドホスホリラーゼを有する微生物菌体及び菌体処理物またはそれらの固定化物なども使用できる。菌体処理物とは、例えばアセトン乾燥菌体や機械的破壊、超音波破砕、凍結融解処理、加圧減圧処理、浸透圧処理、自己消化、細胞壁分解処理、界面活性剤処理などにより調製した菌体破砕物などであり、また、必要に応じて硫安沈殿やアセトン沈殿、カラムクロマトグラフィーにより精製を重ねたものを用いても良い。
ヌクレオシドホスホリラーゼを有する微生物としては、例えば、ノカルディア(Nocardia)属、ミクロバクテリウム(Microbacterium)属、コリネバクテリウム(Corynebacterium)属、ブレビバクテリウム属（Brevibacterium）属、セルロモナス(Cellulomonas)属、フラボバクテリウム（Flabobacterium）属、クルイヘラ(Kluyvere)属、ミコバクテリウム(Micobacterium)属、ヘモフィラス（Haemophilus）属、ミコプラナ(Micoplana)属、プロタミノバクター(Protaminobacter)属、キャンディダ(Candida)属、サッカロマイセス（Saccharomyces）属、バチルス(Bacillus)属、好熱性のバチルス属、シュードモナス(Pseudomonas)属、ミクロコッカス(Micrococcus)属、ハフニア（Hafnia）属、プロテウス(Proteus)属、ビブリオ(Vibrio)属、スタフィロコッカス(Staphyrococcus)属、プロピオニバクテリウム（Propionibacterium）属、ザルチナ(Sartina)属、プラノコッカス(Planococcus)属、エシェリシア（Escherichia）属、クルチア(Kurthia)属、ロドコッッカス(Rhodococcus)属、アシネトバクター(Acinetobacter)属、キサントバクター(Xanthobacter)属、ストレプトマイセス(Streptomyces)属、リゾビウム(Rhizobium)属、サルモネラ(Salmonella)属、クレブシエラ(Klebsiella)属、エンテロバクター(Enterobacter)属、エルウィニア(Erwinia)属、エアロモナス(Aeromonas)属、シトロバクター(Citrobacter)属、アクロモバクター(Achromobacter)属、アグロバクテリウム(Agrobacterium)属、アースロバクター属(Arthrobacter)属またはシュードノカルディア(Pseudonocardia)属に含まれる微生物株を好適な例として挙げることができる。
近年の分子生物学および遺伝子工学の進歩により、上述の微生物株のヌクレオシドホスホリラーゼの分子生物学的な性質やアミノ酸配列等を解析することにより、該蛋白質の遺伝子を該微生物株より取得し、該遺伝子および発現に必要な制御領域が挿入された組換えプラスミドを構築し、これを任意の宿主に導入し、該蛋白質を発現させた遺伝子組換え菌を作出することが可能となり、かつ、比較的容易にもなった。かかる技術水準に鑑み、このようなヌクレオシドホスホリラーゼの遺伝子を任意の宿主に導入した遺伝子組換え菌も本発明のヌクレオシドホスホリラーゼを発現している微生物に包含されるものとする。
ここでいう発現に必要な制御領域とは、プロモーター配列（転写を制御するオペレーター配列を含む）・リボゾーム結合配列（ＳＤ配列）・転写終結配列等を示している。プロモーター配列の具体例としては、大腸菌由来のトリプトファンオペロンのｔｒｐプロモーター・ラクトースオペロンのｌａｃプロモーター・ラムダファージ由来のＰLプロモーター及びＰRプロモーターや、枯草菌由来のグルコン酸合成酵素プロモーター（ｇｎｔ）・アルカリプロテアーゼプロモーター（ａｐｒ）・中性プロテアーゼプロモーター（ｎｐｒ）・α−アミラーゼプロモーター（ａｍｙ）等が挙げられる。また、ｔａｃプロモーターのように独自に改変・設計された配列も利用できる。リボゾーム結合配列としては、大腸菌由来または枯草菌由来の配列が挙げられるが、大腸菌や枯草菌等の所望の宿主内で機能する配列であれば特に限定されるものではない。たとえば、１６ＳリボゾームＲＮＡの３’末端領域に相補的な配列が４塩基以上連続したコンセンサス配列をＤＮＡ合成により作成してこれを利用してもよい。転写終結配列は必ずしも必要ではないが、ρ因子非依存性のもの、例えばリポプロテインターミネーター・ｔｒｐオペロンターミネーター等が利用できる。これら制御領域の組換えプラスミド上での配列順序は、５’末端側上流からプロモーター配列、リボゾーム結合配列、ヌクレオシドホスホリラーゼをコードする遺伝子、転写終結配列の順に並ぶことが望ましい。
ここでいうプラスミドの具体例としては、大腸菌中での自律複製可能な領域を有しているｐＢＲ３２２、ｐＵＣ１８、Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＩＩ ＳＫ（＋）、ｐＫＫ２２３−３、ｐＳＣ１０１や、枯草菌中での自律複製可能な領域を有しているｐＵＢ１１０、ｐＴＺ４、ｐＣ１９４、ρ１１、φ１、φ１０５等をベクターとして利用することができる。また、２種類以上の宿主内での自律複製が可能なプラスミドの例として、ｐＨＶ１４、ＴＲｐ７、ＹＥｐ７及びｐＢＳ７をベクターとして利用することができる。
ここでいう任意の宿主には、大腸菌(Escherichia coli)および枯草菌(Bacillus subtilis)等のバチルス属菌、酵母および放線菌等の微生物菌株が挙げられる。
ヌクレオシドホスホリラーゼの使用量に制限は設けないが、通常、２４時間以内に反応が終了する量を使用する。
一般式（１）で表される化合物と一般式（２）で表される化合物を、ヌクレオシドホスホリラーゼの存在下で反応させると、一般式（３）で表される化合物の生成に伴ってリン酸イオンが生成することになるが、本発明においては、水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンとリン酸イオンを反応させて水に不溶性のリン酸塩を生成させるとともに、反応系内に存在するＲ２と酸のアニオンを反応させてＲ２と酸のアニオンとの塩を生成させつつ、一般式（３）で表される化合物を生成させる。
なお、水に不溶性のリン酸塩とは、その塩の水に対する溶解度が２５℃で０．２％以下となるリン酸塩を意味するものと定義する。
前記の水に不溶性のリン酸塩およびＲ２の塩の生成は、例えば、水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと水酸化物アニオンまたは酸化物アニオンとの塩と水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと酸のアニオンとの塩を用いるか、または水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと水酸化物アニオンまたは酸化物アニオンとの塩と酸を用いることにより行うことができる。
水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと水酸化物アニオンまたは酸化物アニオンとの塩としては、例えば、水酸化リチウム、水酸化マグネシウム、酸化マグネシウム、水酸化バリウム、酸化バリウム、水酸化亜鉛、酸化亜鉛、水酸化コバルト、酸化コバルト、水酸化カルシウム、酸化カルシウム等のイオンが挙げられるが、これらの中でも水酸化マグネシウムは好ましい。
水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと酸のアニオンとの塩としては、例えば、水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属イオンの酢酸塩、塩化物塩、硫酸塩、炭酸塩などが挙げられる。水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと酸のアニオンとの塩をより具体的に例示すれば、塩化マグネシウム、酢酸マグネシウム、炭酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、塩化カルシウム、酢酸カルシウム、炭酸カルシウム、塩化バリウム、酢酸バリウム、硫酸バリウム、塩化亜鉛、炭酸亜鉛、酢酸亜鉛、塩化コバルト、酢酸コバルト、炭酸リチウムなどが挙げられる。これらのなかでも酢酸マグネシウムは好ましい。
酸としては、Ｒ２と塩を形成するものであれば特に限定はないが、無機酸として、例えば、塩酸、硫酸、臭化水素酸、硝酸、有機酸として、例えば、酢酸、炭酸、メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、安息香酸等が挙げられる。これらの酸のなかでも酢酸は好ましい。
一般式（２）で表される化合物の使用量は一般式（１）で表される化合物に対し１当量以上、好ましくは１から２当量の間である。
水に不溶性のリン酸塩および一般式（２）中のＲ２の塩を生成させつつ反応させるに際して、水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと水酸化物アニオンまたは酸化物アニオンとの塩と、水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと酸のアニオンとの塩を使用する場合、これらの塩の合計使用量は、リン酸の場合、反応系内のリン酸イオンすべてを水に不溶性のリン酸塩に変換できる量以上であればよく、Ｒ２に対しては、酸のアニオンがＲ２に対し０．５から１．１当量になるように加えれば良い。水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと水酸化物アニオンまたは酸化物アニオンとの塩および水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと酸のアニオンとの塩の金属カチオンが一価のカチオンである場合は、リン酸イオンに対し３当量以上、好ましくは３から５当量となる量を、該金属カチオンが２価のカチオンである場合は、リン酸イオンに対し１．５当量以上、好ましくは１．５から３当量となる量を使用することができる。
例えば、一般式（２）で表される化合物として２−デオキシリボース−１−リン酸・２アンモニウム塩を使用し、水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと水酸化物アニオンまたは酸化物アニオンとの塩および水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンとして、水酸化マグネシウムおよび酢酸マグネシウムをそれぞれ使用する場合、水酸化マグネシウムを２−デオキシリボース−１−リン酸・２アンモニウム塩に対し０．５当量、酢酸マグネシウムを２−デオキシリボース−１−リン酸・２アンモニウム塩に対し１当量使用することは好ましく、反応系内のリン酸イオンおよびＲ２からリン酸マグネシウムおよび酢酸アンモニウムをそれぞれ生成させることができる。
水に不溶性のリン酸塩および一般式（２）中のＲ２の塩を生成させつつ反応させるに際して、水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと水酸化物アニオンまたは酸化物アニオンとの塩と酸を使用する場合、水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと水酸化物アニオンまたは酸化物アニオンとの塩の使用量は、反応系内のリン酸イオンのすべてを水に不溶性のリン酸塩に変換できる量以上であればよい。酸の使用量はＲ２に対し、０．５から１．１当量使用すればよい。水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと水酸化物アニオンまたは酸化物アニオンとの塩の金属カチオンが一価のカチオンである場合は、リン酸イオンに対し３当量以上、好ましくは３から５当量となる量を、該金属カチオンが２価のカチオンである場合は、リン酸イオンに対し１．５当量以上、好ましくは１．５から３当量となる量を使用することができる。
Ｒ２をＲ２と酸のアニオンとの塩を生成させるために使用する酸は、酸のアニオンが一価のアニオンである場合、反応系内のＲ２に対して０．５から１．１当量、酸のアニオンが二価のアニオンである場合、反応系内のＲ２に対して０．２５から０．５５当量となる量を使用することができる。
例えば、一般式（２）で表される化合物として２−デオキシリボース−１−リン酸・２アンモニウム塩を使用し、水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと水酸化物アニオンまたは酸化物アニオンとの塩および酸として、水酸化マグネシウムおよび酢酸をそれぞれ使用する場合、水酸化マグネシウムを１．５当量、酢酸を２当量使用することは好ましく、反応系内のリン酸イオンおよびアンモニウムイオンからリン酸マグネシウムおよび酢酸アンモニウムを生成させることができる。
反応は水溶媒中で行うが、一般式（１）で表される化合物の反応混合物中（反応系内）の濃度は、通常、１から２０ｗｔ％、好ましくは３から１５ｗｔ％である。
反応温度は酵素を失活させず、生成物の分解を起こさない温度であれば制限されないが、通常、１０から６０℃、好ましくは２０から５０℃の範囲である。
本発明の製造方法の実施態様として好ましい具体例を示すとすれば、水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと水酸化物アニオンまたは酸化物アニオンとの塩と水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと酸のアニオンとの塩を用いる場合、これらの塩、一般式（１）で表される化合物、一般式（２）で表される化合物および水との混合物にヌクレオシドホスホリラーゼを添加する方法、水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと水酸化物アニオンまたは酸化物アニオンとの塩と酸を用いる場合、水に不溶性のリン酸塩を形成しうる金属カチオンと水酸化物アニオンまたは酸化物アニオンとの塩、一般式（１）で表される化合物、一般式（２）で表される化合物、ヌクレオシドホスホリラーゼおよび水との混合物に対して酸を滴下しながら添加する方法が挙げられる。
一般式（３）で表される化合物は、分液、濃縮、シリカゲルカラムクロマトグラフィーまたは晶析などの公知の精製方法により反応混合物から分離、精製することができる。
以下に実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらによって限定されるものではない。
実施例及び比較例のＨＰＬＣ条件
カラム：ＹＭＣ ＡＭ−３１３（２５０ｍｍ×直径６ｍｍ）
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ．
カラム温度：４０℃
検出波長：２５４ｎｍ
移動相：２０ｍｍｏｌの酢酸アンモニウム水溶液（２．７Ｌ）に酢酸を加えｐＨを３．５に調整した後、ＭｅＯＨ（０．３Ｌ）を加え混和し、脱気する。
内標準物質：ニコチン酸
実施例及び比較例のＨＰＬＣ条件
カラム：ＹＭＣ ＡＭ−３１３（２５０ｍｍ×直径６ｍｍ）
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ．
カラム温度：４０℃
検出波長：２５４ｎｍ
移動相：２０ｍｍｏｌの酢酸アンモニウム水溶液（２．７Ｌ）に酢酸を加えｐＨを３．５に調整した後、ＭｅＯＨ（０．３Ｌ）を加え混和し、脱気する。
内標準物質：ニコチン酸
実施例１
２’−デオキシ−５−トリフルオロメチルウリジンの製造
２−デオキシリボース−１−リン酸・２アンモニウム塩２０ｇ、水酸化マグネシウム１．８２ｇ、酢酸マグネシウム４水和物２０ｇ、５−トリフルオロメチルウラシル１３．２ｇを８８ｇの水に懸濁し、Ｓｉｇｍａ社より入手したチミジンホスフォリラーゼ２ｇを加え、３０℃で５時間反応する。この際、反応初期のｐＨは８．３、反応終了後のｐＨは６．０であった。反応後、反応液をＨＰＬＣで分析した所、目的物である２’−デオキシ−５−トリフルオロメチルウリジンの収率は５−トリフルオロメチルウラシルに対し９７％であった。
２’−デオキシ−５−トリフルオロメチルウリジンの製造
２−デオキシリボース−１−リン酸・２アンモニウム塩２０ｇ、水酸化マグネシウム１．８２ｇ、酢酸マグネシウム４水和物２０ｇ、５−トリフルオロメチルウラシル１３．２ｇを８８ｇの水に懸濁し、Ｓｉｇｍａ社より入手したチミジンホスフォリラーゼ２ｇを加え、３０℃で５時間反応する。この際、反応初期のｐＨは８．３、反応終了後のｐＨは６．０であった。反応後、反応液をＨＰＬＣで分析した所、目的物である２’−デオキシ−５−トリフルオロメチルウリジンの収率は５−トリフルオロメチルウラシルに対し９７％であった。
実施例２
２’−デオキシ−５−トリフルオロメチルウリジンの製造
２−デオキシリボース−１−リン酸・２アンモニウム塩２０ｇ、水酸化マグネシウム８ｇ、５−トリフルオロメチルウラシル１３．２ｇを８８ｇの水に懸濁し、Ｓｉｇｍａ社より入手したチミジンホスフォリラーゼ２ｇを加え、酢酸９．７ｇをｐＨを確認しながら３０℃で４ｈｒかけて滴下し、その後３時間反応する。この際、反応マスのｐＨは、反応初期が８．５、反応終了時のｐＨは６．０であった。反応後、反応液をＨＰＬＣで分析した所、目的物である２’−デオキシ−５−トリフルオロメチルウリジンの収率は５−トリフルオロメチルウラシルに対し９３％であった。
２’−デオキシ−５−トリフルオロメチルウリジンの製造
２−デオキシリボース−１−リン酸・２アンモニウム塩２０ｇ、水酸化マグネシウム８ｇ、５−トリフルオロメチルウラシル１３．２ｇを８８ｇの水に懸濁し、Ｓｉｇｍａ社より入手したチミジンホスフォリラーゼ２ｇを加え、酢酸９．７ｇをｐＨを確認しながら３０℃で４ｈｒかけて滴下し、その後３時間反応する。この際、反応マスのｐＨは、反応初期が８．５、反応終了時のｐＨは６．０であった。反応後、反応液をＨＰＬＣで分析した所、目的物である２’−デオキシ−５−トリフルオロメチルウリジンの収率は５−トリフルオロメチルウラシルに対し９３％であった。
比較例１
２’−デオキシ−５−トリフルオロメチルウリジンの製造
２−デオキシリボース−１−リン酸・２アンモニウム塩２０ｇ、水酸化マグネシウム８ｇ、５−トリフルオロメチルウラシル１３．２ｇを８８ｇの水に懸濁し、Ｓｉｇｍａ社より入手したチミジンホスフォリラーゼ２ｇを加え、３０℃で７時間反応する。この際、反応マスのｐＨは、反応初期が８．３、反応終了時のｐＨは８．３であった。反応後、反応液をＨＰＬＣで分析した所、目的物である２’−デオキシ−５−トリフルオロメチルウリジンの収率は５−トリフルオロメチルウラシルに対し７６％であった。
２’−デオキシ−５−トリフルオロメチルウリジンの製造
２−デオキシリボース−１−リン酸・２アンモニウム塩２０ｇ、水酸化マグネシウム８ｇ、５−トリフルオロメチルウラシル１３．２ｇを８８ｇの水に懸濁し、Ｓｉｇｍａ社より入手したチミジンホスフォリラーゼ２ｇを加え、３０℃で７時間反応する。この際、反応マスのｐＨは、反応初期が８．３、反応終了時のｐＨは８．３であった。反応後、反応液をＨＰＬＣで分析した所、目的物である２’−デオキシ−５−トリフルオロメチルウリジンの収率は５−トリフルオロメチルウラシルに対し７６％であった。
Claims (5)
- 一般式（１）
（式中、Ｒ１は炭素数１から４のパーフルオロアルキル基を示す。）で表される化合物と、一般式（２）
（式中、Ｒ２はアルカリ金属カチオンまたは（Ｒ３）（Ｒ４）（Ｒ５）ＮＨ＋を示す。ただし、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５はそれぞれ水素原子または炭素数１から８のアルキル基を示す。）で表される化合物を、ヌクレオシドホスホリラーゼ、水酸化マグネシウムまたは酸化マグネシウム、および、マグネシウムイオンと酸のアニオンの塩または酸の存在下、水に不溶性のリン酸マグネシウムおよび一般式（２）中のＲ２の塩を生成させつつ反応させる、一般式（３）
（式中、Ｒ１は前記と同義。）で表される化合物の製造方法。 - 前記水酸化マグネシウムまたは酸化マグネシウムとして水酸化マグネシウム、前記マグネシウムイオンと酸のアニオンの塩として酢酸マグネシウムを用いる、請求項１に記載の製造方法。
- 前記水酸化マグネシウムまたは酸化マグネシウムとして水酸化マグネシウム、前記酸として酢酸を用いる、請求項１に記載の製造方法。
- 前記マグネシウムイオンと酸のアニオンの塩または酸をＲ２に対し、０．５から１．１モル当量使用する、請求項１から請求項３のいずれか一項に記載の製造方法。
- 前記ヌクレオシドホスホリラーゼは、チミジンホスホリラーゼである請求項１〜請求項４のいずれか一項に記載の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2004109609A JP4441313B2 (ja) | 2004-04-02 | 2004-04-02 | ２’−デオキシ−５−パーフルオロアルキルウリジンの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2004109609A JP4441313B2 (ja) | 2004-04-02 | 2004-04-02 | ２’−デオキシ−５−パーフルオロアルキルウリジンの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2005287448A JP2005287448A (ja) | 2005-10-20 |
| JP4441313B2 true JP4441313B2 (ja) | 2010-03-31 |
Family
ID=35321097
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2004109609A Expired - Lifetime JP4441313B2 (ja) | 2004-04-02 | 2004-04-02 | ２’−デオキシ−５−パーフルオロアルキルウリジンの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4441313B2 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2019124544A1 (ja) | 2017-12-22 | 2019-06-27 | 大鵬薬品工業株式会社 | トリフルリジン及び／又はチピラシル由来の類縁物質の検出方法 |
| WO2019135405A1 (ja) | 2018-01-05 | 2019-07-11 | 大鵬薬品工業株式会社 | トリフルリジン由来の類縁物質の検出方法 |
| US10809237B2 (en) | 2018-01-05 | 2020-10-20 | Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. | Method for detecting trifluridine-related substance by high-performance liquid chromatography |
| US10866219B2 (en) | 2017-12-22 | 2020-12-15 | Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. | Method for detecting trifluridine- and/or tipiracil-related substance |
-
2004
- 2004-04-02 JP JP2004109609A patent/JP4441313B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2019124544A1 (ja) | 2017-12-22 | 2019-06-27 | 大鵬薬品工業株式会社 | トリフルリジン及び／又はチピラシル由来の類縁物質の検出方法 |
| US10866219B2 (en) | 2017-12-22 | 2020-12-15 | Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. | Method for detecting trifluridine- and/or tipiracil-related substance |
| WO2019135405A1 (ja) | 2018-01-05 | 2019-07-11 | 大鵬薬品工業株式会社 | トリフルリジン由来の類縁物質の検出方法 |
| US10809237B2 (en) | 2018-01-05 | 2020-10-20 | Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. | Method for detecting trifluridine-related substance by high-performance liquid chromatography |
| US10816517B2 (en) | 2018-01-05 | 2020-10-27 | Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. | Method for detecting trifluridine-related substance by high-performance liquid chromatography |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2005287448A (ja) | 2005-10-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2002520067A5 (ja) | ||
| JP4441313B2 (ja) | ２’−デオキシ−５−パーフルオロアルキルウリジンの製造法 | |
| US6858721B2 (en) | Method for producing cytosine nucleoside compounds | |
| JP2002223771A (ja) | カダベリンの製造方法 | |
| JP2003310293A (ja) | ヌクレオシド化合物の製造法 | |
| WO2002072841A1 (fr) | Adn codant pour une hydantoinase, adn codant pour une hydrolase d'acide amine l carbamyle, adn recombinant, cellules transformees, procede de production de proteine et procede de production d'acide amine optiquement actif | |
| KR101818564B1 (ko) | 바실러스 유래 뉴클레오시드 포스포릴라아제 및 락토코쿠스 유래 아데노신 디아미나아제를 이용한 3'-아미노-2',3'-디데옥시구아노신의 제조 방법 | |
| JP5140242B2 (ja) | Ｃｍｐ−ｎ−アセチルノイラミン酸の製造法 | |
| JP3833584B2 (ja) | Ｃｍｐ−ｎ−アセチルノイラミン酸の製造法 | |
| WO2002031176A1 (fr) | Procédé permettant la production de nucléosides | |
| EP1179598B1 (en) | Process for producing nucleoside compound | |
| KR100680765B1 (ko) | 3'-아미노-2',3'-디데옥시구아노신의 제조 방법 | |
| US6890739B1 (en) | Use of uridine diphosphate glucose 4-epimerase | |
| JP4047574B2 (ja) | ヌクレオシド化合物の製造方法 | |
| JP4593608B2 (ja) | ヌクレオシド化合物の製造方法 | |
| JP4173815B2 (ja) | ２’−デオキシグアノシンの製造法 | |
| KR100468979B1 (ko) | 뉴클레오시드 화합물의 제조 방법 | |
| JP3766040B2 (ja) | シトシンヌクレオシド化合物の製造方法 | |
| JP2004024086A (ja) | シトシンヌクレオシド化合物の製造法 | |
| JP4469460B2 (ja) | ヌクレオシド化合物の製造方法 | |
| JPH1014580A (ja) | 耐熱性ホスホリラーゼ、およびその製造方法 | |
| JP2000135097A (ja) | 酵素法によるグアノシン５’−モノリン酸の製造法 | |
| JPH05219978A (ja) | 核酸関連物質の酵素的製造法及びそれに使用する酵素調製物 | |
| JP2001169797A (ja) | Ｓ―アデノシル−ｌ−メチオニンの酵素的製造法 | |
| JP2003250570A (ja) | ２’−デオキシリボヌクレオシド化合物の製造方法及びこの中間体の製造方法、並びにこれらに使用する２−デオキシリボース５−リン酸アルドラーゼ遺伝子 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20060614 |
|
| RD03 | Notification of appointment of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423 Effective date: 20071018 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20090113 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20090310 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20100105 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20100108 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130115 Year of fee payment: 3 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4441313 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130115 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140115 Year of fee payment: 4 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |