TR201809676T4 - Humanize anti-il-6 antikorları, bileşimleri, yöntem ve kullanımları. - Google Patents

Humanize anti-il-6 antikorları, bileşimleri, yöntem ve kullanımları. Download PDF

Info

Publication number
TR201809676T4
TR201809676T4 TR2018/09676T TR201809676T TR201809676T4 TR 201809676 T4 TR201809676 T4 TR 201809676T4 TR 2018/09676 T TR2018/09676 T TR 2018/09676T TR 201809676 T TR201809676 T TR 201809676T TR 201809676 T4 TR201809676 T4 TR 201809676T4
Authority
TR
Turkey
Prior art keywords
antibody
seq
drug
amino acid
human
Prior art date
Application number
TR2018/09676T
Other languages
English (en)
Inventor
Chen Yan
Gardner Debra
M Knight David
W Lark Michael
Liang Bailin
J Shealy David
R Song Xiao-Yu
Stojanovic-Susulic Vedrana
W Sweet Raymond
H Tam Susan
Wu Sheng-Jiun
Yang Jing
Matthew Marquis David
Michael Smith Eric
Philippe Vasserot Alain
Original Assignee
Applied Molecular Evolution Inc
Janssen Biotech Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Applied Molecular Evolution Inc, Janssen Biotech Inc filed Critical Applied Molecular Evolution Inc
Publication of TR201809676T4 publication Critical patent/TR201809676T4/tr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/244—Interleukins [IL]
    • C07K16/248—IL-6
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)

Abstract

En az bir anti-IL-6 antikorunu vektörleri, konakçı hücreleri, transgenik hayvanları veya bitkileri kodlayan izole edilmiş nükleik asitleri içeren bir anti-IL-6 antikoru ve bunu yapma ve kullanma yöntemleri dahil olmak üzere, bunun tanı ve/veya terapötik bileşimlerde, yöntemlerde ve cihazlardaki uygulamaları.

Description

TARIFNAME HUMANIZE ANTI-IL-6 ANTIKORLARI, BILESIMLERI, YÖNTEM VE KULLANIMLARI MEVCUT BULUSUN ALANI Mevcut bulus, en az bir IL-6 protein veya parçasina yönelik spesifik olan belirtilen parçalar ve varyantlar dahil olmak üzere antikorlar` ve bu tür anti-IL-6 antikorlarini kodlayan nükleik asitler, tamamlayici nükleik asitler vektörler, konakçi hücreler ve terapötik formülasyonlar, uygulama ve cihazlar dahil olmak üzere bunlari yapma ve kullanma yöntemleri ile ilgilidir. BULUSUN GEÇMISI hücreleri olmak üzere birçok hücre türü tarafindan üretilen ve salgilanan bir pleyiotropik proenflamatuvar sitokindir. IL-6, B hücresi büyümesi ve farklilasmasi, T hücresi aktivasyonu, hematopoez, osteoklast aktivasyonu, keratinosit. büyümesi, nöronal büyüme ve hepatosit aktivasyonu gibi çesitli aktivitelere katilir. IL-6, transmembran veya çözünür IL-6R'ye baglanir ve birkaç baska sitokin tarafindan paylasilan gpl3O ile sinyalleme yapar. lenfoproliferatif rahatsizlikta gösterildigi üzere B hücresi anomalilerinde önemli bir role sahiptir. Benzer bir sekilde IL- 6 ayrica, romatoid artrit ve osteoartrit gibi otoimmün ve enflamatuvar hastaliklarin patogenezinde de implike edilir. Yakin zamanda dolayli delil, tip 2 diyabette IL-6 ve kronik obstrüktif pulmoner hastalik ve insülin direnci arasinda bir iliski oldugunu öne sürer. IL-6, bu sitokinin, hastaliga olan fizyolojik yaniti regüle etmede merkezi bir rol oynadigini belirtmek üzere proenflamatuvar ve anti-enflamatuvar etkilere sahiptir. Bu nedenle, IL-6'nin hedeflenmesi potansiyel olarak birçok hastalik alaninda terapötik fayda saglayabilir. IL-6 üretiminde bir artis, asagidakiler dahil olmak üzere birçok hastalikta gözlenmistir: Alzheimer hastaligi, romatoid artrit, enflamasyon, miyokard enfarktüsü, Paget hastaligi, osteoporoz gibi otoimmün hastaliklar, kati tümörler (böbrek hücreli karsinom), prostat ve mesane kanserleri, nörolojik kanserler ve B-hücre maligniteleri (örnegin Casteleman hastaligi, belirli lenfomalar, kronik lenfositik lösemi ve multipl miyelom). Arastirmacilar, IL-6'nin, özellikle kanser olmak üzere bu hastaliklardan birçogunun patogenezine bagli oldugunu ve bu nedenle IL-6'nin bloke edilmesinin, klinik faydalara yorumlanmasi gerektigini belirtmistir. Mürin, kimerik ve diger insan olmayan anti-IL-6 antikorlari gelistirilmistir (örnegin WO ; ancak bunlar, etkilerinde sinirlanabilir, etkinlik siklikla, istenmeyen bir immün yaniti (diger bir deyisle immünojenisite) tetikleyebilir ve/veya yüksek bir dozaj gerektirebilir (Bakiniz, insan olmayan parçalari içeren antikorlar, siklikla insanlarda immün yaniti arttirir. Buna göre, tekrarli antikor uygulamasi, terapi olarak uygun degildir ve antikorun sirkülasyondan immün kompleks aracili klirensi, antikorun etki/etkinligini azaltabilir. Serum hastaligi ve anafilaksi, insan olmayan parçalara sahip antikorlarin tekrar uygulamasinin neden olabilecegi iki örnek durumdur. Bu baglamda, immünojenisiteye yönelik daha az potansiyele sahip olan, diger bir degisle insanlarda daha tolere edilebilir ve daha önce kullanilan anti- sekilde daha kuvvetli olan bir anti-IL-6 antikoruna ihtiyaç BULUSUN ÖZETI (i) Mevcut bulus tamamiyla insan çerçeveli ve sabit bölgeli izole edilmis bir IL-6 antikor saglar, bu antikor asagidakileri içerir: SEQ ID NO:3'ün bir tamamlayicilik belirleme bölgesi hafif zinciri l (CDRLl) amino asit sekansi, SEQ ID NO:21'in bir CDRLZ amino asit sekansi, SEQ ID NO:29'un bir CDRL3 amino asit sekansi ihtiva eden bir hafif zincir degisken bölgesi ve SEQ ID NO:39'un bir tamamlayicilik belirleme bölgesi agir zinciri 1 (CDRHl) amino asit sekansi, SEQ ID NO:59'un bir CDRH2 amino asit sekansi ve SEQ ID NO:89'un bir CDRH3 amino asit sekansini ihtiva eden bir agir zincir degisken bölgesi içerir; veya (ii) CDRLl'in SEQ ID NO:3'ün amino asidini içerdigi, CDRL2'nin SEQ ID NO:21'nin amino asidini içerdigi, CDRL3'ün SEQ ID NO:29'un amino asidini içerdigi bir hafif zincir degisken bölgesi ve CDRHl'in SEQ ID NO:4l'in amino asidini içerdigi, CDRHZ'nin SEQ amino asidini içerdigi bir agir zincir degisken bölgesi; (iii) CDRLl'in SEQ ID NO:15'in amino asidini içerdigi, CDRL2'nin SEQ ID NO:27'nin amino asidini içerdigi, CDRLB'ün SEQ bölgesi ve CDRHl'in SEQ ID NO:47'nin amino asidini içerdigi, CDRHZ'nin SEQ ID NO:57'nin amino asidini içerdigi ve CDRH3'ün SEQ ID NO:91'in amino asidini içerdigi bir agir zincir degisken bölgesi; CDRLl'in SEQ ID NO:15'in amino asidini içerdigi, CDRL2'nin SEQ amino asidini içerdigi bir hafif zincir degisken bölgesi ve CDRHl'in SEQ ID NO:45'in amino asidini içerdigi, CDRH2'nin SEQ amino asidini içerdigi bir agir zincir degisken bölgesi; veya (iv) CDRLl'in SEQ ID NO:7'nin amino asidini içerdigi, CDRL2'nin SEQ ID NO:21'in amino asidini içerdigi, CDRL3'ün SEQ bölgesi ve CDRHl'in SEQ ID NO:4l'in amino asidini içerdigi, CDRHZ'nin SEQ ID NO:75'in amino asidini içerdigi ve CDRH3'ün SEQ bölgesi, burada bahsedilen antikor, insan IL-6'sina veya bunun bir fragmanina KinExATM yöntemiyle belirlendigi üzere O,l-9,9 x 10'14 M'lik bir afinite ile baglanir. Bulus ayrica, bulusun bir antikorunu kodlayan bir izole nükleik asit molekülünü saglar. Bulus ayrica, bulusun izole nükleik asit molekülünü içeren bir izole nükleik asit vektörünü saglar. Bulus ayrica, bulusun izole nükleik asit molekülünü içeren bir prokaryotik veya ökaryotik konakçi hücreyi saglar. Bulus ayrica, bulusun nükleik asit moleküllerinin, IL-6 antikorunun algilanabilir veya geri kazanilabilir miktarlarda eksprese edilecegi sekilde in vitro, in vivo veya in situ kosullar altinda transle edilmesini içeren en az bir IL-6 antikorunun üretilmesine yönelik bir yöntemi saglar. Bulus ayrica, bulusun az bir izole IL-6 antikorunu ve en az bir farmasötik. olarak kabul edilebilir tasiyici veya seyreltiyi içeren bir bilesimi saglar. Bulus ayrica, terapide kullanima yönelik bulusun en az bir izole Bulus ayrica, bir hücre, doku, organ veya hayvanda bir IL-6 baglantili vakayi teshis etme veya tedavi etmeye yönelik bir yöntemde kullanima yönelik bulusun bir antikorunu saglar, burada bir kardiyovasküler hastalik, bir enfeksiyöz hastalik veya bir habis hastalik ve bir nörolojik hastaliktan olusan gruptan seçilir. Bulus ayrica, bulusun bir IL-6 antikorunun bir solüsyon veya bir liyofilize formunu içeren bir kap ve paketleme materyalini içeren insan farmasötik veya tanisal kullanimina yönelik bir üretim maddesini saglar. SEKILLERIN AÇIKLAMASI Sekil 1, insan gelistirilmis ve kimerik anti-IL-6 antikorunun Sekil 2, mevcut bulusun insan gelistirilmis anti-IL-6 antikoru için baglanma epitopunu göstermektedir. Sekil 3, insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun, ELISA ile ölçülen sekilde U937 hücrelerinden IL-6 uyarilmis MCP-l salgilamasini inhibe ettigini göstermektedir. Sekil 4, insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun, ELISA ile ölçülen sekilde HepGZ hücrelerinden IL-6 ve IL-lß uyarilmis SAA salgilamasini inhibe ettigini göstermektedir. Sekiller 5A ve SB, insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun, jel elektroforezi yoluyla gösterilen Western Blot analiziyle ölçülen sekilde IL-6-aracili stat3 fosforilasyonunu bloke ettigini göstermektedir. Sekil 6, insan gelistirilmis ve kimerik anti-IL-6 antikoru tarafindan Balb/C farelerinde insan IL-6'si indüklü SAA üretiminin inhibisyonunu göstermektedir. Sekil 7, anti- IL-6 mAh tarafindan NZB/W F1 farelerinde anti- dsDNA otoantikoru üretiminin inhibisyonunu göstermektedir. Sekil 8A, IL-6'nin insan gelistirilmis anti-IL-6 antikoru varliginda veya yoklugunda insülin indüklü Akt fosforilasyonu üzerindeki etkisini göstermektedir. Sekil 8B, insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun varliginda veya yoklugunda insülin indüklü Akt fosforilasyonu üstünde IL-6'nin etkisinin bir western blot analizini göstermektedir. Sekil 9, Örnek. 3'te tarif edilen. ELISA. baglanma testinin sonuçlarini göstermektedir. Sekil 10, IL-6 bagimli hücre hatti kullanarak Örnek 3'te tarif edilen bir anti-proliferasyon testinin sonuçlarini göstermektedir. Sekil llA, insülin, IL-6 proteini ve anti-IL-6 antikoru ile tedavi edilen siçan hepatositlerindeki PI3 kinaz aktivasyonu göstermektedir. Sekil llB, siçan hepatositlerinde PI3 kinaz aktivasyonu çalismasi için kontrolü göstermektedir. Sekil 12A, IL-6'nin, IR'in insülin indüklü fosforilasyonu iliskin olarak siçan hepatositlerindeki sinyalleme üstündeki etkisini göstermektedir. Sekil 12B, IL-6'nin, Akt'nin insülin indüklü fosforilasyonu iliskin olarak siçan hepatositlerindeki sinyalleme üstündeki etkisini göstermektedir. Sekil 13A, anti-IL-6 antikoru ile tedaviden sonra DIO farelerindeki glükoz düzeyini göstermektedir. Sekil 13B, anti-IL-6 antikoru ile tedaviden sonra DIO farelerindeki insülin seviyesini göstermektedir. Sekil l3C, anti IL-6 antikoru ile tedaviden sonra DIO farelerindeki homeostatik model degerlendirme (HOMA) indisini göstermektedir. Sekiller 14A-F, anti-IL-6 antikoru ile tedaviden önce ve sonra lipit seviyelerini göstermektedir. Sekil 15, intraperitonal glukoz tolerans testi (ipGTT) için anti IL-6 mAb ile farelerin tedavi programini göstermektedir. BULUSUN AÇIKLAMASI Mevcut bulus, izole, rekombinant ve/Veya sentetik anti-IL-6 antikorlarinin yani sira en az bir anti-IL-6 antikorunu kodlayan en az bir polinükleotidi içeren kodlayan nükleik asit molekülleri ve bilesimleri saglar. Mevcut bulus ayrica, bunlarla sinirli olmamak üzere, tanisal ve terapötik bilesimler ve cihazlar dahil olmak üzere bu tür nükleik asitler ve antikorlari yapma ve kullanma yöntemlerini içerir. Burada kullanildigi üzere bir "anti-IL-6 antikoru," "IL-6 antikoru," "anti-IL-6 antikoru parçasi," veya "anti-IL-6 antikoru fragmani" ve/veya "anti-IL-6 antikoru varyanti" ve benzeri, mevcut bulusun bir antikoruna dahil edilebilen bunlarla sinirli olmamak üzere, bir agir veya hafif zincirin veya bir ligand baglama parçasinin en az bir tamamlayicilik belirleme bölgesi (CDR), bir agir zincir veya hafif zincir degisken bölge, bir agir zincir veya hafif zincir sürekli bölge, bir çati bölgesi veya herhangi bir parçasi veya bir IL-6 reseptörü veya baglayici proteinin en az bir parçasi gibi bir immünoglobulin molekülünün en az bir parçasini içeren molekül içeren herhangi bir protein veya peptidi içerir. Bu tür bir antikor, istege bagli olarak ayrica, spesifik bir ligandi etkiler, örnegin bununla sinirli olmamak üzere bu tür bir antikor, in vitro, in situ ve/veya in vivo olarak en az bir IL-6 aktivitesi veya baglamasini veya IL- 6 reseptör aktivitesi veya baglamasini modüle eder, azaltir, arttirir, antagonize eder, agonize eder, yatistirir, hafifletir, bloke eder, inhibe eder, ortadan kaldirir ve/veya buna müdahale eder. Sinirlayici olmayan bir örnek olarak, uygun bir anti-IL-6 antikoru, mevcut bulusun belirli bir kismi veya varyanti olan uygun bir anti-IL-6 antikoru, en az bir IL-6 molekülünü veya belirli kisimlarini, bunlarin varyantlari veya domenlerini baglayabilir. Bunlarin uygun bir anti-IL-6 antikoru, belirli kisim veya varyanti ayrica tercihe göre en az bir IL-6 etkinligi veya fonksiyonunu, örnegin bunlarla sinirli olmamak kaydiyla, RNA, DNA veya protein sentezi, IL-6 salimi, IL-6 reseptör sinyallemesi, membran IL-6 klevaji, IL-6 etkinligi, IL-6 üretimi ve/veya sentezini etkileyebilir. parçalari dahil olmak üzere bir antikor veya belirtilen fragmani veya parçasinin yapisi ve/veya fonksiyonunu taklit eden antikorlarin parçalari veya antikor taklitleri dahil olmak üzere antikorlar, sindirini parçalari, belirtilen parçalari ve varyantlarini içermesi amaçlanir. Fonksiyonel parçalar, bir memeli IL-6'ya baglanan antijen-baglama parçalarini içerir. Bulusta, örnegin IL-6 veya bunlarla sinirli olmamak üzere, Fab (örnegin papain sindirimi ile), Fab' (örnegin pepsin sindirimi ve kismi indirgeme ile) ve F(ab')2 (örnegin pepsin sindirimi ile), facb (örnegin plazmin sindirimi ile), pFc' (örnegin pepsin veya plazmin sindirimi ile), Fd (örnegin pepsin sindirimi, kismi indirgeme ve yeniden kümelenme ile), FV veya scFV (örnegin moleküler biyoloji teknikleri ile) parçalari dahil olmak üzere parçalarina baglanabilen antikor parçalari içerilir (bakiniz, örnegin Colligan, Immunology, yukarida). Bu tür parçalar, teknikte bilindigi ve/veya burada açiklandigi üzere enzimatik klevaj, sentetik veya rekombinant teknikler ile üretilebilir. Antikorlar ayrica, bir veya birden fazla durdurma kodonunun, dogal durdurma bölgesinin yukari akisina uygulandigini antikor genleri kullanilarak birçok kirpilmis formda üretilebilir. Örnegin bir F(ab')2 agir zincir parçasini kodlayan bir kombinasyon geni, agir zincirin CHi bölgesi ve/veya mentese bölgesini kodlayan DNA dizilerini içermek üzere tasarlanabilir. Antikorlarin çesitli parçalari, klasik yöntemler ile kimyasal olarak birbirine baglanabilir ve genetik gelistirme teknikleri kullanilarak bir bitisik protein olarak hazirlanabilir. Burada kullanildigi sekilde, "insan gelistirilmis antikor" terimi, en az tamamen insan çerçeveli ve sabit bölgeli (CL, CH domenleri (örnegin, CHl, CHZ, 63) VE mentese) bir antikor ve antijen baglanma antikorlardan elde edilen CDR'lerdir. Tam insan çatilar, insan germ hatti dizilerine karsilik gelen çatilarin yani sira somatik mutasyonlara sahip dizileri içerir. CDR'ler, herhangi bir antikor çerçevesi baglaminda IL-6'ya baglanan bir veya daha fazla CDR'den türetilebilir. Örnegin, mevcut bulusun insan gelistirilmis antikorunun CDR'leri, bir fare antikoru çerçevesi baglaminda IL-6'yi baglayan CDR'lerden türetilebilir ve daha sonra tamamen insan iskeleti baglaminda IL-6'yi baglayacak sekilde gelistirilir. Siklikla insan gelistirilmis antikor, insanlarda büyük ölçüde immünojenik degildir. Benzer sekilde primat (maymun, babun, sempanze, Vb.), kemirgeni (fare, siçan, tavsan, kobay faresi, hamster ve benzeri) ve diger memeliler ile eksprese edilen antikorlar, bu tür, alt cins, cins, alt aile ve aile spesifik antikorlari eksprese eder. Ayrica kimerik antikorlar, yukaridakilerin herhangi bir kombinasyonunu içerebilir. Bu tür degisiklikler ve varyasyonlar, modifiye edilmemis antikorlara göre insanlar veya diger türlerde immünojenisiteyi istege bagli olarak ev tercihen korur veya azaltir. Bu nedenle bir insan gelistirilmis antikor, bir kimerik veya Bir insan gelistirilmis antikorun, fonksiyonel olarak yeniden düzenlenmis insan veya insan gelistirilmis immünoglobulin (örnegin agir zincir ve/Veya hafif zincir) genlerini eksprese edebilen bir insan olmayan hayvan hücresi veya prokaryotik veya ökaryotik hücre ile üretilebilecegi vurgulanir. Ayrica, insan gelistirilmis bir antikor tek zincirli bir antikor oldugunda, dogal insan antikorlarinda bulunmayan bir baglayici peptit içerebilir. Örnegin bir FV, iki ila yaklasik sekiz glisin veya agir zincirin degisken. bölgesini. ve hafif zincirin. degisken bölgesini baglayan diger amino asit kalintilari gibi bir baglantilayici peptit ihtiva edebilir. Bu tür baglayici peptitlerin, insan kökenli oldugu düsünülür. Ayrica monoklonal, tercihen insan, insan gelistirilmis veya hümanize olan bispesifik, heterospesifik, heterokonjugat veya benzer antikorlar, en az iki farkli antijene yönelik baglanma spesifikligine sahip antikorlar kullanilabilir. Mevcut durumda baglama spesifikliklerinden, biri, en, az bir IL-6 proteinine yöneliktir, digeri ise diger antijenlerden herhangi birine yöneliktir. Bispesifik antikorlarin yapimina yönelik metotlar ilgili teknikte bilinmektedir. Geleneksel olarak bispesifik antikorlarin rekombinant üretimi, iki agir zincirin farkli spesifikliklere sahip oldugu iki immünoglobulin agir zincir- hafif zincir çiftinin birlikte ekspresyonuna dayalidir (Milstein zincirlerinin rastgele düzenlenmesinden dolayi, bu hibridomlar (kuadromlar) 10 farkli antikor molekülünün potansiyel bir karisimini üretir ve bunlardan yalnizca birisi dogru bispesifik yapiya sahiptir. Dogru molekülün saflastirilmasi, genellikle afinite kromatografisi adimlari ile yapilir. Benzer prosedürler Mevcut bulusun yöntemleri ve bilesimlerinde faydali anti-IL- 6 antikorlari, istege bagli olarak IL-6'ya yüksek afiniteli baglanma ile ve istege bagli olarak ve tercihen düsük toksisiteye sahip olarak karakterize edilebilir. Özellikle, degisken bölge, sürekli bölge ve çati gibi ayri bilesenlerin ayri olarak ve/veya toplu olarak, istege bagli olarak ve tercihen düsük immünojenisiteye sahip oldugu bulusun bir antikoru, belirtilen parçasi veya varyanti, mevcut bulusta faydalidir. Bulusta kullanilabilen antikorlar, istege bagli olarak hastalari, semptomlarin ölçülebilir hafiflemesi ve düsük ve/Veya kabul edilebilir toksisite ile uzatilmis periyotlar boyunca tedavi etme yetenegi ile karakterize edilir. Düsük veya kabul edilebilir toksisite ve/Veya yüksek afinitenin yani sira diger uygun özellikler, elde edilen terapötik sonuçlara katki saglayabilir. "Düsük immünojenisite" burada, tedavi periyodu boyunca tavsiye edilen terapi süreci boyunca tavsiye edilen doz ile tedavi edilen hastalarin tercihen %lû'undan az olmak üzere tedavi edilen hastalarin %25'inden azinda meydana gelmek üzere anti-lL-6 antikoru ile tedavi edilen hastalarda antikorlarin anti-IL-6 antikoruna titre edilebilir seviyelerinin insidansi olarak tanimlanir. Mevcut bulusun izole nükleik asitleri, bunlarla sinirli olmamak üzere bir immün rahatsizlik veya hastalik, bir kardiyovasküler rahatsizlik veya hastalik, bir enfeksiyöz, habis ve/veya nörolojik rahatsizlik veya hastalik veya diger bilinen veya belirtilen IL-6 baglantili vakadan seçilen en az bir IL-6 vakasini tanilamak, izlemek, modüle etmek, tedavi etmek, hafifletmek, insidansini önlemeye veya semptomlarini azaltmaya yardimci olmak üzere bir hücre, doku, organ veya hayvanda (memeliler ve insanlar dahil) ölçüm yapmak veya etkilemek üzere kullanilabilen en az bir anti-IL-6 antikoru veya belirtilen varyantinin üretimine yönelik kullanilabilir. Bu tür bir yöntem, semptomlar, etkiler veya mekanizmalarda bu tür bir Hwdülasyon, tedavi, hafifletme, önleme veya azalmaya ihtiyaci olan bir hücre, doku, organ, hayvan veya hastaya en az bir anti-IL-6 antikorunu içeren bir bilesim veya bir farmasötik bilesimin etkili bir miktarinin uygulanmasini içerebilir. Etkili miktar, burada açiklandigi veya ilgili tekniklerde bilindigi üzere bilinen yöntemler kullanilarak yapildigi ve belirlendigi üzere buradaki herhangi bir etkili aralik veya deger veya tek, çoklu veya sürekli uygulama basina 0.01-5000 ug/ml serum konsantrasyonu olan bir serum konsantrasyonunu elde etmek üzere bir miktar veya tek (örnegin bolus), çoklu veya sürekli uygulama basina yaklasik 0,001 ila 500 mg/kg'lik bir miktari içerebilir. Mevcut Bulusun Antikorlari - Üretim ve Olusturma Mevcut bulusun en az bir anti-IL-6 antikoru, teknikte iyi bilinen bir hücre hatti, bir karisik hücre hatti, ölümsüzlestirilmis bir hücre veya ölümsüzlestirilmis hücrelerin klonal popülasyonu tarafindan istege bagli olarak üretilebilir. Bakiniz, örnegin, Ausubel ve digerleri, ed., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, Inc., NY, NY (1987- 2001); Sambrook ve digerleri, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Edition, Cold Spring Harbor, NY (1989); Harlow ve Lane, Antibodies, a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor, NY (1989); Colligan, Vd, eds., Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons, Inc., NY (1994-2001); Colligan Vd, Current Protocols in Protein Science, John Wiley & Sons, NY, NY, (1997- 2001). Insan IL-6 proteinleri veya parçalarina yönelik spesifik olan insan gelistirilmis antikorlar, bir izole IL-6 protein ve/Veya bir parçasi (sentetik peptitler gibi sentetik moleküller dahil) gibi uygun bir immünojenik antijene karsi olusturulabilir. Diger spesifik veya genel memeli antikorlari benzer sekilde olusturulabilir. immünojenik antijenlerin hazirlanmasi ve monoklonal antikor üretimi, herhangi bir uygun teknik kullanilarak gerçeklestirilebilir. Bir yaklasimda, bir hibridom, uygun bir ölümsüz hücre hattinin (örnegin, bir miyelom hücre hatti, örnegin, bunlarla sinirli MLA 144, ACT IV, MOLT4, DA-l, JURKAT, WEHI, K-562, cos, RAJI, NIH 3T3, HL-60, MLA 144, NAMALWA, NEURO 2A veya benzerleri veya heteromiyelomlar, bunlarin füzyon ürünleri veya bunlardan türetilen herhangi bir hücre veya füzyon hücresi veya teknikte bilinen herhangi bir baska uygun hücre hatti) (bakiniz, örnegin, www.atcc.org, www.lifetek.coni ve benzerleri), antikor üreten hücreler ile, örnegin, bunlarla sinirli olmamak kaydiyla, izole edilmis veya klonlanmis dalak, periferik kan, lenf, tonsil veya diger immün veya B hücresi içeren hücreler veya, endojen veya heterolog nükleik asit olarak, rekombinant veya endojen, Viral, bakteriyel, alg, prokaryotik,amfibi, böcek, Sürüngen, balik, memeli, kemirgen, at, küçükbas, keçi, koyun, primat, ökaryotik, genomik DNA, cDNA, rDNA, mitokondrial DNA veya RNA, kloroplast DNA veya RNA, hnRNA, mRNA, tRNA, tek, çift veya üç iplikçikli, hibritlestirilmis ve benzerleri veya bunlarin herhangi bir kombinasyonu seklinde agir veya hafif zincir sabit veya degisken bölge veya çerçeve veya CDR sekanslarini ekprese eden herhangi baska hücreler ile kaynastirilmasiyla üretilir. Bakiniz, örnegin, Ausubel, (yukarida yer alan) ve Colligan, Immunology, (yukarida yer alan), bölüm 2. Antikor üreten hücreler ayrica, ilgili antijen ile immünize edilmis insanlar veya diger uygun hayvanlardan periferal kan veya tercihen dalak veya lenf nodlarindan elde edilebilir. Diger uygun bir konakçi hücre ayrica, mevcut bulusun bir antikoru, belirtilen parçasi veya varyantini kodlayan heterolog veya endojenöz nükleik asidi eksprese etmeye yönelik kullanilabilir. Kaynasik hücreler (hibridomlar) veya rekombinant hücreler, selektif kültür kosullari ve bilinen diger uygun yöntemler kullanilarak izole edilebilir ve sinirlayici dilüsyon veya hücre ayirma veya bilinen diger yöntemler ile klonlanabilir. Istenilen spesifiklige sahip antikorlari üreten hücreler, uygun bir analiz (örnegin ELISA) ile seçilebilir. Insan olmayan veya insan antikorlarin gelistirilmesi veya hümanize edilmesi yöntemleri de kullanilabilir ve teknikte iyi bilinir. Bir hümanize veya gelistirilmis antikor, bunlarla sinirli olmamak üzere, fare, siçan, tavsan, insan olmayan primat veya baska memeli olmak üzere insan olmayan bir kaynaktan bir veya daha fazla amino asit kalintisina sahip olabilir. Bu insan olmayan amino asit kalintilari, tipik olarak bilinen bir insan dizisinin bir "harici" degisken, sürekli veya baska bölgesinden alinan siklikla "harici" kalintilar olarak refere edilen kalintilar ile degistirilir. Bilinen insan Ig sekanslari açiklanmistir, örnegin, www. ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi; www.ncbi.nih.gov/igblast; www.atcc.org/phage/hdb.html; www.mrc- cpe.cam.ac.uk/ALIGNMENTS.php; www.kabatdatabase.com/top.html; ftp.ncbi.nih.gov/repository/kabat; www.sciquest.com; www.abcam.com; www.antibodyresource.com/onlinecomp.html; www.public.iastate.edu/~pedro/research_tools.html; www.whfreeman.com/immunology/CH05/kubyOS.htm; www.hhmi.org/grants/lectures/l996/vlab; www.path.cam.ac.uk/~mrc7/mikeimages.html; mcb.harvard.edu/BioLinks/Immunology.html; www.immunologylink.com; pathbox.wustl.edu/~hcenter/index.html; www.appliedbiosystems.com; www.mal.usda.gov/awic/pubs/antibody; www.m.ehime-u.ac.jp/~yasuhito/Elisa.html; www.biodesign.com; www.cancerresearchuk.org; www.biotech.ufl-edu; www.isac- net.org; baserv.uci.kun.nl/~jraats/linksl.html; www.recab.uni- hd.de/immuno.bme.nwu.edu; www.mrc-cpe.cam.ac.uk; www.ibt.unam.mx/vir/V_mice.html; http://www.bioinf.org.uk/abs; antibody.bath.ac.uk; www.unizh.ch; www.cryst.bbk.ac.uk/~ubch7s; www.nimr.mrc.ac.uk/CC/ccaewg/ccaewg.html; www.path.cam.ac.uk/~mrc7/humanisation/TAHHP.html; www.ibt.unam.mx/Vir/structure/stat_aim.html; www.biosci.missouri.edu/smithgp/index.html; www.jerini.de; Kabat ve digerleri., Sequences of Proteins of Immunological Bu tür harici diziler, immünojenisiteyi azaltmak veya teknikte bilindigi üzere baglama, afinite, on-orani, off-orani, avidite, spesifiklik, yarilanma Ömrü veya diger herhangi bir uygun karakteristigi azaltmak, arttirmak veya modifiye etmek üzere kullanilabilir. Genellikle, CDR kalintilari, antijen baglanmasini dogrudan ve en önemli ölçüde etkilemede rol oynar. Buna göre insan olmayan veya insan CDR dizilerinin bir kismi veya tamami korunurken. degisken ve sürekli bölgelerin insan olmayan dizileri, insan veya baska amino asitler ile degistirilebilir. Antikorlar ayrica, hümanize veya gelistirilmis veya antijen veya istenilen diger biyolojik özelliklere yönelik yüksek afinitenin retansiyonu ile gelistirilmis insan antikorlar olabilir. Bu amaci gerçeklestirmek üzere hümanize (veya insan) veya gelistirilmis antikorlar, istege bagli olarak. parental, gelistirilmis ve hümanize dizilerin üç boyutlu modelleri kullanilarak parental diziler ve çesitli kavramsal hümanize ve gelistirilmis ürünlerin analizinin bir prosesi ile hazirlanabilir. Üç boyutlu immünoglobülin modelleri yaygin olarak bulunabilir* ve teknikte uzman kisiler' tarafindan iyi bilinir. Seçilen aday immünoglobülin dizilerinin nmhtemel üç boyutlu konformasyonel yapilarini resmeden ve görüntüleyen bilgisayar programlari mevcuttur. Bu görüntülerin incelenmesi, rezidülerin, aday immünoglobülin dizisinin isleyisindeki olasi rolünün analizine, baska bir deyisle, aday immünoglobülin'in kendi antijenini baglama kabiliyetini etkileyen rezidülerin analizine olanak tanir. Bu sekilde çati (FR) kalintilari, hedef antijenlere yönelik artmis afinite gibi istenilen antikor karakteristiginin elde edilecegi sekilde konsensüs dizleri ve harici dizilerden seçilebilir ve kombine edilebilir. Ayrica, mevcut bulusun insan gelistirilmis IL-6 antikoru bir insan germ hatti hafif zincir çerçevesi ihtiva edebilir. Özel uygulamalarda, hafif zincir germ hatti sekansi, bunlarla sinirli olmamak kaydiyla, Al, AlO, All, A14, Al7, Al8, Al9, A2, AZO, arasindan seçilir. Belirli uygulamalarda, bu hafif zincir insan arasindan seçilir. Farkli germ hatti dizilerinin açiklamasi için Diger uygulamalarda, mevcut bulusun insan gelistirilmis IL-6 antikoru, bir insan germ, hatti agir zincir çerçevesi ihtiva edebilir. Özel uygulamalarda, bu agir zincir insan germ hatti Farkli germ. hatti dizilerinin açiklamasi için PCT WO Özel uygulamalarda, hafif zincir degisken bölgesi ve/veya agir zincir degisken bölgesi, bir çerçeve bölgesi veya çerçeve bölgenin en az bir kismi (örnegin, 2 veya 3 altbölge içeren, örnegin FR2 ve FR3) içerir. Belirli uygulamalarda, en az FRLl, FRLZ, FRL3 veya FRL4 tamamiyla insandir. Baska uygulamalarda, en az FRHl, FRHZ, FRH3 veya FRH4 tamamiyla insandir. Bazi uygulamalarda, en az FRLl, FRLZ, FRL3 veya FRL4 bir germ hatti sekansidir (örnegin, insan germ hatti) veya özel çerçeve için (yukarida tarif edilen bilinen insan Ig sekanslarinin kaynaklarinda kolayca bulunabilen) insan konsensus sekanslari ihtiva eder. Baska uygulamalarda, en az FRHl, FRHZ, FRH3 veya FRH4 bir germ hatti sekansidir (örnegin, insan germ hatti) veya özel çerçeve için insan konsensus sekanslari ihtiva eder. Tercih edilen uygulamalarda, çerçeve bölgesi, bir insan çerçeve bölgesidir (örnegin, asagida Tablo 13 ve l4'te gösterilen insan çerçeve bölgeleri). Bazi uygulamalarda, çerçeve bölgesi SEQ ID Mevcut bulusun antikorlarinin insanlastirilmasi veya mühendisligi herhangi bir bilinen yöntemle, örnegin Winter Carter ve digerleri, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.AJ 89:4285 229246'da tanimlananlar kullanilarak yapilabilir. Belirli uygulamalarda, antikor degistirilmis bir (örnegin, mutate edilmis) Fc bölgesi ihtiva eder. Örnegin, bazi uygulamalarda FC bölgesi, antikorun efektör fonksiyonlarini azaltmak veya arttirmak üzere degistirilmistir. Bazi uygulamalarda Fc bölgesi, IgM, IgA, IgG, IgE veya diger izotiplerden seçilen bir izotiptir. Alternatif veya ek olarak amino asit modifikasyonlarini, bir kompleman bagimli sitotoksisite (CDC) fonksiyonunu degistiren bir veya birden fazla amino asit modifikasyonu ile kombine etmek üzere faydali olabilir. Ilgili baslangiç polipeptidi, Clqua baglanan ve kompleman bagimli sitotoksisite sergileyen olabilir. Önceden var olan Clq baglama aktivitesine sahip, istege bagli olarak ayrica, CDC'ya aracilik etme yetenegine sahip polipeptitler, bu aktivitelerden biri veya her ikisinin artacagi sekilde modifiye edilebilir. Clq'yu degistiren ve/Veya kompleman bagimli sitotoksisite fonksiyonunu modifiye eden amino asit modifikasyonlari, örnegin WOOO42072'de açiklanir. Yukarida açiklandigi üzere örnegin Clq baglamasi ve/veya FcyR baglamasinin. modifiye edilmesi. ve dolayisiyla. CDC aktivitesi ve/Veya ADCC aktivitesinin degistirilmesi ile degismis efektör fonksiyona sahip mevcut bulusun insan gelistirilmis IL-6 antikorunun bir FC bölgesi tasarlanabilir. "Efektör fonksiyonlar", biyolojik aktiviteyi aktive etmeden veya azaltmadan (örnegin bir öznede) sorumludur. Efektör fonksiyonlarin örnekleri, bunlarla sinirli olmamak üzere: Clq baglanmasi; kompleman bagimli sitotoksisite (CDC); Fc reseptör baglanmasi; antikor-bagimli hücre-aracili sitotoksisite (ADCC): fagositoz; asagi regülasyon hücre yüzeyi reseptörleri (örnegin, B hücresi reseptör; BCR) ve digerleridir. Bu efektör fonksiyonlari, Fc bölgesinin bir baglanma alaniyla (örnegin bir antikor degisken alani) birlestirilmesini gerektirebilir ve çesitli analizler (örn., FC baglanma testleri, ADCC testleri, CDC testleri, Vb.) kullanilarak degerlendirilebilir. Örnegin, gelistirilmis Clq baglanmasi ve iyilestirilmis FcyRIII baglanmasi (örn., hem gelismis ADCC aktivitesine hem de gelistirilmis CDC aktivitesine sahip) ile insan gelistirilmis lL-6 antikorunun bir varyant Fc bölgesi üretilebilir. Alternatif olarak, efektör fonksiyonunun azaltilmasi veya kesilmesi istenirse, bir varyant Fc bölgesi, azaltilmis CDC aktivitesi ve/veya azaltilmis ADCC aktivitesi ile gelistirilebilir. Diger uygulamalarda, bu aktivitelerden sadece biri arttirilabilir ve istege bagli olarak, diger aktivite de azaltilabilir (örnegin, artmis ADCC aktivitesi ancak azaltilmis CDC aktivitesi ve bunun tersine sahip bir FC bölge varyanti üretmek için). FC mutasyonlari ayrica, neonatal FC reseptörü (FcRn) ile etkilesimlerini degistirmek ve bunlarin farmakokinetik özelliklerini gelistirmede uygulanabilir. FcRn'ye artmis baglanmaya sahip insan FC varyantlarinin bir koleksiyonu açiklanmistir (Shields vd., (2001). Insan lgGl'i üzerindeki baglanma alaninin FcyRI, FcyRII, FcyRIII ve FCRn için yüksek çözünürlüklü haritalanmasi ve FcyR'ye daha iyi baglanan lgGl Amino asit sübstitüsyonunun bir diger türü, insan gelistirilmis IL-6 antikorunun FC bölgesinin glikosilasyon modelini degistirmek üzere islev görür. Bir Fc bölgesinin glikosilasyonu, tipik olarak N-bagli veya O-baglidir. N baglantili glikosilasyon, karbonhidrat parçasinin bir asparagin rezidüsünün yan zincirine baglanmasi anlamina gelir. O-bagli glikosilasyon, sekerler N-asetilgalaktozamin, galaktoz veya ksiloz sekerlerinden birinin, 5-hidroksiprolin veya 5- hidroksilizin de kullanilabilmesine ragmen en yaygin olarak serin veya treonin olmak üzere bir hidroksiamino aside baglanmasina refere eder. Karbonhidrat kisminin asparagin yan zinciri peptit dizilerinin enzimatik baglanmasina yönelik tanima dizileri, asparagin-X-serin ve asparagin-X-treonindir, burada X, prolin hariç herhangi bir amino asittir. Bu nedenle, bir polipeptitte bu peptit dizilerinden herhangi birinin varligi, potansiyel bir glikosilasyon bölgesi olusturur. Glikosilasyon modeli, örnegin polipeptitte bulunan bir veya birden fazla glikosilasyon bölgesinin silinmesi ve/veya polipeptitte bulunmayan bir veya birkaç glikosilasyon bölgesinin eklenmesi ile degistirilebilir. Bir insan gelistirilmis IL-6 antikorunun Fc bölgesine glikosilasyon bölgelerinin eklenmesi, yukarida bahsedilen tripeptit dizilerinden (N-bagli glikosilasyon bölgelerine yönelik) biri veya birden fazlasini içerecegi sekilde amino asit dizisinin degistirilmesi ile uygun bir sekilde basarilabilir. Örnek bir glikosilasyon varyanti, agir zincirin Asn 297 kalintisinin bir amino asit sübstitüsyonuna sahiptir. Alterasyon, orijinal polipeptidin dizisine (O-bagli glikosilasyon bölgelerine yönelik) bir veya daha fazla serin veya treonin kalintisinin eklenmesi veya bunlar tarafindan substitüsyon ile yapilabilir. Ek olarak, Asn 297'nin Ala'ya bir degisimi, glikosilasyon bölgelerini uzaklastirabilir. Belirli düzenlemelerde mevcut bulusun IL-6 antikoru, GnT asetilglukozaminiltransferaz III (GnT III) eksprese eden hücrelerde eksprese edilir. Bu sekilde antikor üretilmesine Subat 1999'da saglanir. Bir insan anti-IL-6 antikoru, istege bagli olarak burada açiklandigi üzere ve/Veya teknikte bilindigi üzere insan antikorlarin bir repertuarini üretebilen bir transgenik hayvanin (örnegin fare, siçan, hamster, insan olmayan primat ve benzeri) immünizasyonu ile olusturulabilir. Bir insan anti-IL-6 antikorü üreten hücreler, bu tür hayvanlardan izole edilebilir ve burada açiklanan yöntemler gibi yöntemler kullanilarak immortalize edilebilir. Insan antijenlerine baglanan insan antikorlari repertuarini üretebilen transgenik fareler bilinen yöntemlerle üretilebilir yayinlanan: Lonberg ve digerleri', Jakobovits ve digerleri WO Kucherlapate ve digerleri EP 0463 151 BI, Kucherlapate ve digerleri EP 0710 719 Al, Surani ve digerleri US. Pat. No. Lonberg ve digerleri GB 2 272 440 A, Lonberg ve digerleri Nature Genel olarak, bu fareler fonksiyonel olarak yeniden düzenlenmis veya fonksiyonel yeniden düzenlemeye tabi tutulabilen en az bir insan immünoglobulin lokusundan DNA içeren en az bir transgen içerir. Bu farelerde endojen immünoglobulin lokuslari, hayvanin endojen genler tarafindan kodlanan antikorlari üretme kapasitesini ortadan kaldirmak için bozulabilir veya silinebilir. Benzer proteinlere veya fragmanlara spesifik baglanma için tarama antikorlari, peptit gösterim kitapliklari kullanilarak uygun sekilde elde edilebilir. Bu yöntem, istenen islev veya yapiya sahip bireysel üyeler için büyük peptit koleksiyonlarinin taranmasini içerir. Peptit görüntüleme kütüphanelerinin antikor taramasi, teknikte iyi bilinmektedir. Görüntülenen peptit sekanslari, genellikle 5-100 amino asit uzunlugunda ve siklikla yaklasik 8 ila 25 amino asit uzunlugunda, 3 ila 5000 veya daha fazla amino asit olabilir. Peptit kütüphaneleri üretmek için dogrudan kimyasal sentetik yöntemlere ek olarak, birkaç rekombinant DNA yöntemi tarif edilmistir. Bir tip, bir bakteriyofaj veya hücrenin yüzeyi üzerinde bir peptit sekansinin görüntülenmesini içerir. Her bir bakteriyofaj veya hücre, özel olarak görüntülenen peptit dizisini kodlayan nükleotid dizisini içerir. Peptit kütüphanelerinin üretilmesi için diger sistemler, hem in vitro kimyasal sentez ve rekombinant yöntemlerin görünümlerine sahiptir. Bakiniz, PCT Patent Yayin No'lari kütüphaneleri vektör ve tarama kitleri, Invitrogen (Carlsbad, CA) ve Cambridge Antibody Technologies (Cambridgeshire, Ingiltere) gibi tedarikçilerden temin edilebilir. Bakiniz, Cambridge Antibody Technologies'a atanmis; 5750373, Genentech'a Xoma'a atanmis, Colligan, (yukarida yer alan); Ausubel, (yukarida yer alan) veya Sambrook, (yukarida yer alan). Mevcut bulusa ait antikorlar, ayni zamanda, sütlerinde bu tür antikorlari üreten keçiler, inekler, atlar, koyunlar, tavsanlar ve benzerleri gibi transgenik hayvanlari veya memelileri saglamak için nükleik asidi kodlayan en az bir anti-IL-6 antikoru kullanilarak da hazirlanabilir. Bu tür hayvanlar bilinen yöntemler kullanilarak saglanabilir. Bakiniz, örnegin, bunlarla sinirli olmamak kaydiyla, US Patent No'lari 5,827,690; ve burada açiklanan benzerleri. Mevcut bulusun antikorlari ek olarak, transgenik bitkileri ve bu tür antikorlari üreten kültürlenmis bitki hücrelerini (örn., tütün ve misir gibi), bitki kisimlarinda veya bunlardan kültürlenen hücrelerde belirtilen kisimlari veya varyantlari üretmek için nükleik asidi kodlayan en az bir anti-IL-6 antikoru kullanilarak hazirlanabilir. Sinirlayici olmayan bir örnek olarak, rekombinant proteinleri eksprese eden transgenik tütün yapraklari, örnegin bir uyarilabilir promotör kullanilarak büyük miktarlarda rekombinant proteinler saglamak için basariyla kullanilmistir. Bakiniz, örnegin, Gramer ve digerleri, Curr. referanslar. Ayrica, transgenik misir, diger rekombinant sistemlerde üretilenlere veya dogal kaynaklardan saflastirilanlara esdeger biyolojik aktivitelere sahip, ticari üretim seviyelerinde memeli proteinlerini eksprese etmek için kullanilmistir. Bakiniz, örnegin, Hood ve digerleri, Adv. Exp. Med. Biol. 464:127-147 (1999) ve burada bahsedilen referanslar. Antikorlar ayrica tütün tohumlan ve patates yumrulari dahil olmak üzere tek zincirli antikorlar (sch'ler) gibi antikor fragmanlari da dahil olmak üzere transgenik bitki tohumlarindan büyük miktarlarda üretilmistir. Bakiniz, örnegin, Conrad ve digerleri, Plant Mol. nedenle, mevcut bulusun antikorlari, bilinen yöntemlere göre, transgenik bitkiler kullanilarak da üretilebilir. Bakiniz ayrica, örnegin, Fischer vd., Biotechnol. Appl. Biochem. 30:99- Burada açiklanan antikorlar, birçok afinite araliginda (Km insan IL-6'ya baglanabilir. Tercih edilen bir düzenlemede mevcut bulusun en az bir insan mAb'si, istege bagli olarak insan IL- 6'ya yüksek afinite ile baglanabilir. Örnegin, burada açiklanan bir insan veya insan gelistirilmis mAb, teknikte uzman kisilerce uygulandigi üzere KinexaTM yöntemi veya yüzey plazmon rezonansi ile belirlendigi üzere, bunlarla sinirli olmamak kaydiyla, 0,1- 9,9 (veya buradaki herhangi bir aralik veya deger) X 10", 10-& bir aralik veya deger gibi yaklasik 10_7 M'ye esit veya bundan daha az olan bir KDile insan IL-6'yi baglayabilir. Mevcut bulusa göre, antikor, insan IL-6'sina veya bunun bir fragmanina Kinexa yöntemiyle belirlendigi üzere O,1-9,9 x 10"14 M'lik bir afinite ile baglanir. Bir antikorun bir antijen için afinitesi veya aviditesi, herhangi bir uygun yöntem kullanilarak deneysel olarak belirlenebilir. (Bakiniz, örnegin, Berzofsky ve digerleri, Paul, W. E., Ed., Raven Press: New York, NY (1984); Kuby, Janis burada tarif edilen yöntemler. Belirli bir antikor-antijen etkilesiminin ölçülen yakinligi, farkli kosullar altinda (ör., tuz konsantrasyonu, pH) ölçüldügünde degisebilir. Bu nedenle, afinite ve diger antijen-baglama parametrelerinin (örnegin Km Km, KOÜ) ölçümleri, tercihen antikor ve antijenin standartlastirilmis solüsyonlari ve burada açiklanan tampon gibi bir standartlastirilmis tampon ile yapilir. Yarismali analizler, hangi proteinler, antikorlar ve diger antagonistlerin, IL-6'ya baglanmaya yönelik mevcut bulusun antikoru ile yaristigini ve/veya epitop bölgesini paylastigini belirlemek üzere mevcut bulusun antikoru ile gerçeklestirilebilir. Teknikte uzman kisilerce teknikte kolaylikla bilindigi üzere bu analizler, bir protein üzerinde sinirli sayida baglama bölgesine yönelik antagonistler veya ligandlar arasindaki yarismayi degerlendirir. Protein ve/Veya antikor, immobilize edilir veya yarisma öncesi veya sonrasi çözünmez hale getirilir ve IL-6'ya bagli numune, örnegin bir kaptan digerine aktarma (burada protein/antikor ön-çözünmez hale getirilir) veya santrifüjleme (burada protein/antikor, yarismali reaksiyon sonrasi çöktü rülmüstür) ile bagli olmayan numuneden ayrilir. Ayrica yarismali baglama, fonksiyonun, antikorun proteine baglanmasi veya baglanma yoklugu ile fonksiyonun degisip degismedigi, örnegin› antikor molekülününr örnegin› bir etiketin enzimatik aktivitesini inhibe edip etmedigi veya kuvvetlendirip kuvvetlendirmedigi ile belirlenebilir. ELISA ve diger fonksiyonel analizler, teknikte iyi bilindigi üzere kullanilabilir. Burada açiklanan tercih edilen anti-IL-6 antikorlari, asagida Tablo l-5 ve 12-14'te gösterilen dizilere sahiptir. Örnegin burada açiklanan bir anti-IL-6 antikoru, Tablo 1'de gösterilen hafif zincir CDR dizilerinden birine (diger bir deyisle, CDRLl, CDRL2 ve CDRL3) Tablo 2'de gösterilen agir zincir CDR dizilerinden birine (diger bir deyisle, CDRHl, CDRH2 ve CDRH3) sahiptir. Daha spesifik olarak bir anti-IL-6 antikoru (molekül AME- A9), SEQ ID NO:15'e ait CDRLl, SEQ ID NO:27'ye ait CDRLZ, SEQ ID NO:35'e ait CDRL3, SEQ ID NO:47'ye ait CDRHl, SEQ ID NO:61'e ait CDRHZ, SEQ ID NO:9l'e ait CDRH3'e sahiptir. Nükleik Asit Molekülleri Burada saglanan bilgiler kullanilarak, örnegin, burada açiklanan diger sekanslarin arasinda, SEQ ID No'lari: 93, 97 ve lOl'in hafif zincir degisken bölgelerinin en az birinin bitisik amino asitlerinin en az %70-100'ini kodlayan nükleotit sekanslari ve burada açiklanan diger sekanslarin arasinda, SEQ en az biri, bunlarin belirltilen fragmanlari, varyantlari veya konsensus sekanslari veya bu sekanslarin en az birisini, en az bir IL-6 antikorunu kodlayan mevcut bulusun bir nükleik asidini ihtiva eden tortulu bir vektörü, burada tarif edilen yöntemler kullanilarak veya teknikte bilinen sekilde elde edilebilir. Mevcut bulusun nükleik asit molekülleri, mRNA, hnRNA, tRNA veya baska bir form gibi RNA formunda veya klonlama veya sentetik olarak üretimle veya bunlarin herhangi bir kombinasyonu ile elde edilen bunlarla sinirli olmamak kaydiyla, cDNA ve genomik DNA dahil olmak üzere DNA formunda olabilir. DNA, üç-iplikli, çift- iplikli veya tek-iplikli veya herhangi bir kombinasyonu olabilir. DNA veya RNA'nin en az bir ipliginin herhangi bir parçasi, sens ipligi olarak da bilinen kodlama ipligidir ve bu, ayrica anti-sens ipligi olarak refere edilen kodlayici olmayan iplik olabilir. Burada açiklanan izole edilmis nükleik asit molekülleri, istege bagli olarak bir veya daha fazla intron ile bir açik okuma çerçevesi (ORF) içeren nükleik asit moleküllerini, örnegin en az bir agir zincirin (örnegin, SEQ ID No'lari: 38, 40, 42, 44 ve digerleri) veya hafif zincirin (örnegin, SEQ ID No'lari: 2, 4, 6, 8 ve digerleri) CDRl, CDR2 ve/veya CDR3 gibi en az bir CDR'nin belirtilen en az bir kismi ile sinirli olmamak üzere; bir anti- diger sekanslar arasinda SEQ ID No'lari: 94, 98 ve 102 hafif zincir degisken bölgeleri ve SEQ ID No'lari: 96, 100 ve 104 agir zincir degisken bölgeleri) için kodlama dizisini içeren nükleik asit molekülleri; ve nükleik asit molekülleri, yukarida tarif edilenlerden önemli ölçüde farkli olan fakat genetik kodun dejenereliginden ötürü, burada tarif edilen ve/Veya teknikte bilindigi gibi en az bir` anti-IL-6 antikorunu. hala kodlayan nükleik asit moleküllerini içerebilir. Elbette genetik kod, teknikte iyi bilinir. Bu nedenle, teknikte uzman kisilerce mevcut bulusun spesifik anti-IL-6 antikorlarina yönelik kodlayan bu tür dejenere nükleik asit varyantlari olusturmak rutin olacaktir. Bakiniz, örnegin yukaridaki Ausubel, Vd. ve bu tür nükleik asit varyantlari, mevcut bulusa dahil edilir. Burada belirtildigi üzere bir anti-IL-6 antikorunu kodlayan bir nükleik asidi içeren mevcut bulusun nükleik asit molekülleri, bunlarla sinirli olmamak üzere, kendisi tarafindan bir antikor parçasinin amino asit dizisini kodlayanlari; bunlarla sinirli olmamak üzere uç birlestirme ve poliadenilasyon sinyalleri (örnegin ribozoni baglama ve mRNA'nin stabilitesi) dahil olmak üzere transkripsiyon, mRNA islemesinde bir rol oynayan transkribe edilmis, transle edilmemis diziler gibi kodlama yapmayan 5' ve 3' dizileri dahil olmak üzere ek kodlamayan diziler ile birlikte en az bir intron gibi yukarida bahsedilen ek kodlama dizileri ile veya bunlar olmadan en az bir sinyal lideri veya füzyon peptidinin kodlama dizisi gibi ek dizilerin yani sira bir antikor, fragman veya parçasina yönelik kodlama dizisi; ek fonksiyonaliteler saglayanlar gibi ek amino asitlere yönelik kodlayan bir ek kodlama dizisini içerebilir. Bu nedenle, bir antikoru kodlayan dizi, bir antikor fragmani veya parçasini içeren kaynasik antikorun saflastirilmasini kolaylastiran bir peptidi kodlayan bir dizi gibi bir Inarkör diziye kaynastirilabilir. Burada Açiklanan Sekildeki bir Polinükleotide Selektif Olarak Hibridize Olan Polinükleotitler Ayrica, burada açiklanan bir polinükleotide selektif hibridizasyon kosullari altinda hibridize olan izole nükleik asitler açiklanir. Bu nedenle bu düzenlemenin polinükleotitleri, bu tür polinükleotitleri içeren nükleik asitlerin izole edilmesi, algilanmasi ve/Veya ölçülmesine yönelik kullanilabilir. Örnegin bu polinükleotitler, bir depolanan kütüphanede kismi veya tam boy klonlari tanimlamak, izole etmek veya çogaltmak üzere kullanilabilir. Bazi düzenlemelerde polinükleotitler, bir insan veya memeli nükleik asit kütüphanesinden bir cDNA'ya diger sekilde tamamlayici olan veya izole genomik veya CDNA dizileridir. Tercihen cDNA kütüphanesi, en az %80 tam uzunlukta diziler, tercihen en az %85 veya %90 tam uzunlukta diziler ve daha çok tercihen en az %95 tam uzunlukta dizileri içerir. cDNA kütüphaneleri, nadir dizilerin temsilini arttirmak üzere normalize edilebilir. Düsük veya orta katilikta hibridizasyon kosullari, özel olarak olmamak üzere tipik olarak tamamlayici dizilere göre azalmis bir dizi benzerligine sahip diziler ile kullanilabilir. Orta ve yüksek katilikta kosullar, istege bagli olarak daha yüksek benzerlikte dizilere yönelik kullanilabilir. Düsük katilikta kosullar, yaklasik %70 dizi benzerligine sahip dizilerin selektif hibridizasyonuna olanak saglar ve ortolog ve paralog dizilerini tanimlamak üzere kullanilabilir. Istege bagli olarak bu polinükleotitler, burada açiklanan polinükleotitler tarafindan kodlanan bir antikorun en az bir parçasini kodlayacaktir. Burada açiklanan polinükleotitler, mevcut bulusun bir antikorunu kodlayan bir polinükleotide selektif hibridizasyona yönelik kullanilabilir. Bakiniz, örnegin, Ausubel, (yukarida yer alan): Colligan, (yukarida yer Nükleik Asitlerin Olusturulmasi Mevcut bulusun izole nükleik asidi, teknikte bilindigi üzere (a) rekombinant yöntemler, (b) sentetik teknikler, (c) saflastirma teknikleri ve/veya (d) bunlarin kombinasyonlari kullanilarak yapilabilir. Nükleik asitler, mevcut bulusun bir polinükleotidine ilave sekanslari uygun sekilde ihtiva eder. Örnegin bir veya daha fazla endonükleaz restriksiyon bölgelerini içeren çoklu klonlama bölgesi, polinükleotidin izolasyonuna yardimci olmak üzere nükleik aside eklenebilir. Ayrica transle edilebilir diziler, mevcut bulusun transle edilmis polinükleotidinin izolasyonuna yardimci olmak üzere nükleik aside eklenebilir. Örnegin, bir hekza- histidin markör dizisi, mevcut bulusun. proteinlerini saflastirmak üzere uygun bir araci saglar. Kodlama dizisi hariç tutulmak üzere mevcut bulusun nükleik asidi, mevcut bulusun bir polinükleotidinin klonlanmasi ve/veya ekspresyonuna yönelik bir vektör, adaptör veya baglayicidir. Ek diziler, polinükleotidin izolasyonuna yardimci olmak üzere veya polinükleotidin bir hücreye uygulanmasini gelistirmek üzere klonlama ve/veya ekspresyondaki fonksiyonlarini optimize etmek üzere bu tür klonlama ve/veya ekspresyon dizilerine eklenebilir. Klonlama vektörleri, ifade vektörleri, adaptörler ve baglayicilarin kullanimi, teknikte iyi bilinir. (Bakiniz, örnegin, Ausubel, (yukarida yer alan) veya Sambrook, (yukarida yer alan)) Nükleik Asitlerin Olusturulmasina Yönelik Rekombinant Yöntemler RNA, cDNA, genomik DNA veya herhangi bir kombinasyonu gibi bu bulusun izole nükleik asit bilesimleri, teknikte uzman kisilerce bilinen herhangi bir sayida klonlama metodolojileri kullanilarak biyolojik kaynaklardan elde edilebilir. Bazi düzenlemelerde kati kosullar altinda mevcut bulusun polinükleotitlere selektif olarak hibridize olan oligonükleotit problari, bir cDNA veya genomik DNA kütüphanesinde istenilen diziyi tanimlamak üzere kullanilir. RNA'nin izolasyonu, cDNA ve genomik kütüphanelerin olusturulmasi, teknikte uzman kisilerce iyi bilinir. (Bakiniz, örnegin, Ausubel, (yukarida yer alan) veya Sambrook, (yukarida yer alan)) Nükleik Asit Taramasi ve Izolasyon Yöntemleri Bir cDNA veya genomik kütüphane, burada açiklananlar gibi mevcut bulusun bir polinükleotidinin dizisine dayali bir prob kullanilarak taranabilir. Problar, ayni veya farkli organizmalarda homolog genleri izole etmek üzere genomik DNA veya cDNA dizileri ile hibridize olmak üzere kullanilabilir. Teknikte uzman bir kisi, hibridizasyon katiliginin çesitli derecelerinin analizde kullanilabilecegini ve hibridizasyon veya yikama ortaminin kati olabilecegini kabul edecektir. Hibridizasyona yönelik kosullar daha kati oldukça prob ve meydana gelecek dupleks olusumuna yönelik hedef arasindaki daha büyük bir tamamlayicilik derecesi olabilir. Katilik derecesi, sicaklik, iyonik kuvvet, pH ve formamid gibi bir kismi olarak denatüre olan solvent varligindan biri veya daha fazlasi ile kontrol edilebilir. Örnegin hibridizasyon katiligi, örnegin formamid konsantrasyonunun, %0 ila %50 araliginda manipülasyonu ile reaktan solüsyonun polaritesinin degistirilmesi ile uygun bir sekilde degisiklik gösterir. Algilanabilir baglamaya yönelik tamamlayicilik (dizi benzerligi) derecesi, hibridizasyon ortaminin ve/veya yikama ortaminin katiligina göre degisiklik gösterecektir. Tamamlayicilik derecesi, optimal olarak %100 veya Ancak, problar ve primerlerdeki minör dizi varyasyonlarinin, hibridizasyon ve/veya yikama ortaminin katiliginin azaltilmasi ile telafi edilebilecegi anlasilmalidir. RNA veya DNA'nin amplifikasyon yöntemleri, teknikte iyi bilinir ve burada sunulan Ögreti ve kilavuz temelinde gereksiz deneylendirme olmadan mevcut bulusa göre kullanilabilir. Bilinen DNA: veya RNA amplifikasyonu yöntemleri arasinda, bunlarla sinirli olmamak üzere, polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) ve ilgili amplifikasyon islemleri (bakiniz örnegin ABD DNA sentezi için bir sablon olarak hedef diziye anti-sens RNA kullanan (Ringold) ve RNA aracili amplifikasyon (ABD Patenti No: yer alir. (Bakiniz, örnegin, Ausubel, (yukarida yer alan) veya Sambrook, (yukarida yer alan).) Örnegin polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) teknolojisi, mevut bulusun polinükleotitlerinin dizilerini ve genomik DNA veya cDNA kütüphanelerinden direkt olarak baglantili genleri çogaltmak üzere kullanilabilir. PCR ve diger in vitro amplifikasyon yöntemleri de, örnegin nükleik asit dizilemesi veya diger amaçlara yönelik numunelerde istenilen mRNA varliginin algilanmasina yönelik problar olarak kullanmak üzere nükleik asitler yapmak üzere eksprese edilecek proteinlere yönelik kodlayan nükleik asit dizilerini klonlamak faydali olabilir. Yetenekli kisileri in vitro amplifikasyon yöntemleriyle yönlendirmek için yeterli tekniklerin örnekleri, Berger, yukarida, Sambrook, yukarida ve Ausubel, yukarida ve Mullis, Protocols A Guide to Methods ve Applications, Eds., Academic Press Inc., San Diego, CA (1990). Genomik PCR amplifikasyonu için ticari olarak temin edilebilen kitler, teknikte bilinmektedir. Bakiniz, örnegin, Advantage-GC Genomic PCR Kit (Clontech). Ayrica, örnegin, uzun PCR ürünlerinin verimini artirmak için T4 geni 32 proteini (Boehringer Mannheim) kullanilabilir. Nükleik Asitlerin Olusturulmasina Yönelik Sentetik Yöntemler Mevcut bulusun izole nükleik asitleri ayrica, bilinen yöntemler ile direkt kimyasal sentez ile hazirlanabilir (bakiniz, örnegin yukaridaki Ausubel, vd.). Kimyasal sentez genel olarak, bir tamamlayici dizi ile hibridizasyon ile veya bir model olarak tek iplik kullanilarak bir DNA polimerazi ile polimerizasyon ile çift iplikli DNA/ya dönüsebilen bir tek- iplikli oligonükleotidi üretir. Teknikte uzman bir kisi, DNA'nin kimyasal sentezi, yaklasik 100 veya daha fazla baz olan diziler ile sinirli olabilirken daha uzun dizilerin daha kisa dizilerin ligasyonu ile elde edilebilecegini kabul edecektir. Rekombinant Ekspresyon Kasetleri Mevcut bulus ayrica, mevcut bulusun bir nükleik asidini içeren rekombinant ekspresyon kasetlerini saglar. Örnegin mevcut bulusun bir antikorunu kodlayan bir cDNA veya bir genomik dizi olmak üzere mevcut bulusun bir nükleik asit dizisi, en az istenilen konakçi hücreye uygulanabilen bir rekombinant ekspresyon kasedi olusturma üzere kullanilabilir. Bir rekombinant ekspresyon kasedi, tipik olarak amaçlanan konakçi hücrede polinükleotidin transkripsiyonunu yönlendirecek transkripsiyonel baslangiç düzenleyici dizilerine islevsel olarak bagli mevcut bulusun bir polinükleotidini içerecektir. Heterolog ve heterolog olmayan (diger bir deyisle endojenöz) promotörler, mevcut bulusun nükleik asidinin ekspresyonunu yönlendirmek üzere kullanilabilir. Bazi düzenlemelerde promotör, hizlandirici veya diger elementler olarak görev yapan izole nükleik asitler, mevcut bulusun bir polinükleotidinin ekspresyonunu yukari veya asagi regüle etmek üzere mevcut bulusun. bir polinükleotidinin. bir heterolog olmayan formunun uygun pozisyonuna (yukari akis, asagi akis veya introna) uygulanabilir. Örnegin endojenöz promotörler, mutasyon, delesyon ve/veya sübstitüsyon ile in vivo veya in vitro degistirilebilir. Vektörler ve Konakçi Hücreler Mevcut bulus ayrica, teknikte bilindigi üzere mevcut bulusun izole nükleik asit molekülleri, rekombinant vektörler ile genetik olarak. gelistirilen konakçi hücreler ve rekombinant teknikler ile en az bir anti-IL-6 antikorunun üretimini içeren vektörler ile ilgilidir. Bakiniz, örnegin, Sambrook ve digerleri, (yukarida yer alan); Ausubel ve digerleri, (yukarida yer alan). Polinükleotitler, istege bagli olarak bir konakçida çogalmaya yönelik seçilebilir Hmrkörü içeren bir vektöre baglanabilir. Genel olarak bir plazmid vektörü, bir kalsiyum fosfat çökeltisi gibi bir çökeltide veya bir yüklenmis lipid ile kompleks halinde uygulanir. Vektörün bir virüs olmasi durumunda bu, uygun bir paketleme hücre hatti kullanilarak in vitro paketlenebilir ve akabinde konakçi hücrelere transdüse edilebilir. DNA eki, uygun bir promotöre islevsel olarak baglanmalidir. Ekspresyon yapilari ayrica, translasyona yönelik transkripsiyon baslatmaya yönelik bölgeleri, sonlanma ve transkribe edilmis bölgede bir ribozom baglama bölgesini içerecektir. Yapilar tarafindan eksprese edilen olgun transkriptlerin kodlama parçasi, UAA ve UAG'nin memeli ve ökaryotik hücre ekspresyonuna yönelik tercih edilmesi ile tercihen baslangiçta bir translasyon baslatma ve transle edilecek mRNA'nin sonunda uygun olarak konumlandirilan bir sonlanma kodonunu (örnegin UAA, UGA veya UAG) içerecektir. Ekspresyon vektörleri, tercihen ancak istege bagli olarak en az bir seçilebilir markörü içerecektir. Böyle markörler arasinda, örnegin, bunlarla sinirli kalmamak kaydiyla, metotreksat (MTX), dihidrofolat redüktaz (DHFR, US Pat. No'lari ,179,017, ampisillin, neomisin (G4l8), mikofenolik asit veya ökaryotik hücre kültürü için glutamin sentetaz (GS, US tetrasiklin veya E. coli ve diger bakteri veya prokaryotiklerde direnç genleri kültürlemek için ampisillin yer alir. Yukarida tarif edilen konakçi hücreler için uygun kültür ortamlari ve kosullari teknikte bilinmektedir. Uygun vektörler, teknikte tecrübeli kisilerce kolayca anlasilacaktir. Bir vektör yapisinin bir konakçi hücreye sokulmasi, kalsiyum fosfat transfeksiyonu, DEAE-dekstran aracili transfeksiyon, katyonik lipid aracili transfeksiyon, elektroporasyon, transdüksiyon, enfeksiyon veya diger bilinen yöntemler ile gerçeklestirilebilir. Böyle yöntemler teknikte açiklanmaktadir, örnegin Sambrook, (yukarida yer alan), bölüm s 1-4 ve 16-18; Ausubel, (yukarida yer alan), Mevcut bulusun en az bir antikoru, bir füzyon proteini gibi modifiye bir formda eksprese edilebilir ve sadece salgilanma sinyallerini degil ayni zamanda ek heterolog fonksiyonel bölgeleri de içerebilir. Örnegin özellikle yüklü amino asitler olmak üzere ek amino asitlerin bir bölgesi, saflastirma esnasinda veya sonraki isleme ve saklama esnasinda konakçi hücredeki stabiliteyi ve sürekliligi gelistirmek üzere bir antikorun N-terminaline eklenebilir. Ayrica, bu bulusun bir antikoruna saflastirmayi kolaylastirmak için peptit parçalari ilave edilebilir. Bu bölgeler, bir antikorun nihai hazirlanmasindan önce veya bunun en az bir fragmanindan çikarilabilir. Böyle yöntemler birçok standart laboratuvar manuelinde tarif edilmistir, örnegin Sambrook, (yukarida yer alan), Bölüm 16, 17 ve 18. Teknikte uzman kisiler, bu bulusun bir proteinini Sifreleyen bir nükleik asidin ekspresyonu için mevcut sayisiz ekspresyon sistemlerinde bilgili olabilirler. Alternatif olarak, bu bulusun nükleik asitleri, mevcut bulusun bir antikorunu kodlayan endojen DNA'yi içeren bir konakçi hücrede (manipülasyonla) açilarak bir konakçi hücrede eksprese edilebilir. Böyle yöntemler, örnegin, ,733,761'de tarif edilen sekilde teknikte iyi bilinmektedir. Antikorlarin, belirtilen bölümlerin veya bunlarin varyantlarinin üretimi için yararli hücre kültürlerinin örnekleri, memeli hücreleridir. Memeli hücre sistemleri, genellikle memeli hücre süspansiyonlari veya biyoreaktörler de kullanilabilmekle birlikte, hücrelerin tekli katmanlari halinde olacaktir. Intakt glikosile proteinleri eksprese edebilen bir dizi uygun konak hücre hatti teknikte gelistirilmis ve COS-l (örnegin, ATCC CRL , HEK, CHO (örnegin, ATCC CRL hücre hatlari, Cos-7 Agl4, 293 hücreleri, HeLa hücreleri ve benzerlerini kapsar, bunlar örnegin, Amerikan Type Culture Collection'dan, Manassas, Va (www.atcc.org) kolaylikla temin edilebilir. Tercih edilen konakçi hücreler, miyeloni ve lenfoma hücreleri gibi lenfoid menseli hücreleri içerir. Özellikle tercih edilen konakçi hücreler, P ve SP2/O- Agl4 hücreleridir (ATCC Erisim No CRL-1851). Özellikle tercih edilen bir uygulamada rekombinant hücre, bir P3X63Ab8,653 veya bir SP2/0-Agl4 hücresidir. Bu hücreler için ekspresyon vektörleri, bunlarla sinirli olmamak üzere, bir replikasyon orijini gibi, asagidaki ekspresyon kontrol sekanslarinin bir veya daha fazlasini içerebilir; bir promotör (örnegin, geç veya erken SV4O promotörleri, CMV promotörü (US Pat.No'lari 5,168,062; promotörü, bir EF-l alfa promotör (US Pat.No. 5,266,491), en az bir insan immünoglobülin promotörü; bir arttirici ve/Veya isleme enformasyon bölgesi, örnegin ribozom baglama bölgeleri, RNA ekleme bölgeleri, poliadenilasyon bölgeleri (örnegin, bir SV4O genis T Ag poli A ekleme bölgesi) ve transkripsiyonel terminatör sekanslari. Bakiniz, örnegin, Ausubel ve digerleri, (yukarida yer alan); Sambrook ve digerleri, (yukarida yer alan). Mevcut bulusa ait nükleik asitlerin. veya proteinlerin. üretimi için yararli olan diger hücreler, örnegin, Amerikan Tip Kültür Koleksiyonu Hücre Hatlari ve Hibridomlar (www.atcc.org) veya diger bilinen veya ticari kaynaklardan bilinmektedir ve/veya temin edilebilir. Ökaryotik konakçi hücreler kullanildiginda, poliadenilasyon veya transkripsiyon terminatör dizileri tipik olarak vektöre dahil edilir. Bir terminatör sekansinin bir örnegi, sigir büyüme hormonu geninden poliadenilasyon sekansidir. Transkriptin dogru sekilde birlestirilmesi için sekanslar da dahil edilebilir. Bir ekleme sekansinin bir örnegi, SV40'dan VPl intronudur (Sprague hücrede replikasyonu kontrol etmek için gen sekanslari, teknikte bilindigi gibi vektör içine dahil edilebilir. Bir Antikorun Saflastirilmasi Bir anti-IL-6 antikoru iyi bilinen yöntemlerle, bunlarla sinirli olmamak kaydiyla, A proteini saflastirma, amonyum sülfat veya etanol çöktürme, asit ekstraksiyonu, anyon veya katyon alis-veris kromatografisi, fosfoselüloz kromatografi, hidrofobik etkilesim kromatografi metodu, afinite kromatografisi, hidroksilapatit kromatografi ve lektin kromatografisi yoluyla rekombinant hücre kültürlerinden geri kazanilabilirn ve saflastirilabilir. Yüksek performansli sivi kromatografisi ("HPLC") de ayrica saflastirma için kullanilabilir. Bakiniz, örnegin, Colligan, Current Protocols in Mevcut bulusun antikorlari arasinda dogal olarak saflastirilmis ürünler, kimyasal sentetik prosedürlerin ürünleri ve örnegin maya, yüksek bitki, böcek ve memeli hücreleri dahil olmak üzere bir ökaryotik konakçidan rekombinant teknikler ile üretilen ürünler bulunur. Bir rekombinant üretim prosedüründe kullanilan konakçiya bagli olarak, mevcut bulusun antikoru glikosile edilebilir veya glikosile edilmemis olabilir, glikosile olan tercih edilir. Böyle yöntemler, birçok standart laboratuvar mauelinde, örnegin Sambrook, (yukarida yer alan), Bölümler l7,37-l7,42; Ausubel, (yukarida yer alan), Bölümler 10, alan), Bölümler 12-14'te tarif edilmektedir. Anti-IL-6 Antikorlari Burada açiklanan bir anti-IL-6 antikoru, bunlarla sinirli olmamak kaydiyla, en az bir ligand baglama kismi (LBP) gibi, örnegin bunlarla sinirli olmamak kaydiyla, bir agir veya hafif zincirin bir tamamlayicilik belirleme bölgesi (CDR) veya bunun bir ligant baglanma kismi, bir agir zincir veya hafif zincir degisken bölgesi, bir çerçeve bölgesi (örnegin, FRl, FR2, FR3, FR4 veya bunlarin fragmani veya SEQ ID No'lari: 105-112'de gösterilen sekilde, ayrica tercihe göre en az bir ornatim, ekleme veya silme içeren), bir agir zincir veya hafif zincir sabit bölgesi, (örnegin, en az bir CHl, mentesel, menteseZ, mentese3, mentese4, CHZ veya CH3 veya bunlarin fragmanini içeren, ayrica tercihe göre en az bir ornatim, ekleme veya silme içeren) veya burada açiklanan bir antikora dahil edilmis olabilen bunlarin herhangi bir kismi gibi bir immünoglobulin molekülünün en azindan bir kismini içeren herhangi bir protein veya peptid içeren molekülü kapsar. Burada açiklanan bir antikor, örnegin bunlarla sinirli olmamak kaydiyla, bir insan, bir fare, bir tavsan, bir siçan, bir kemirgen, bir primat veya bunlarin herhangi bir kombinasyonu ve benzerleri gibi bir memeliyi kapsayabilir veya bunlardan türetilebilir. Mevcut bulusun izole edilmis antikorlari, burada açiklanan herhangi bir uygun polinükleotit veya herhangi bir izole edilmis veya hazirlanmis antikor tarafindan kodlanan antikor amino asit dizilerini içerir. Tercihen, insan antikoru veya antijen baglayici fragman, insan IL-6'yi baglar ve böylece, proteinin en az bir biyolojik aktivitesini kismen veya büyük ölçüde nötralize eder. En az bir IL-6 proteininin veya fragmaninin en az bir biyolojik aktivitesini kismen veya tercihen büyük ölçüde nötralize eden bir antikor veya bunun belirtilen bir kismi veya varyanti, proteini veya fragmani baglayabilir, bu suretle IL- 6'nin IL-6 reseptörüne baglanmasi yoluyla veya diger IL-6'ya bagimli veya aracili mekanizmalar yoluyla aracilik edilen aktiviteleri inhibe eder. Burada kullanildigi sekilde, 97, 98, 99, 100 veya daha fazla. oranda inhibe edebilen. bir antikor anlamina gelir. Bir anti-IL-6 antikorunun bir IL-6'ya bagimli aktiviteyi inhibe etme kapasitesi, tercihen burada tarif edildigi ve/Veya teknikte bilindigi gibi en az bir uygun IL-6 proteini veya reseptör analizi ile degerlendirilir. Bulusa. ait bir insan antikoru, herhangi bir sinif (IgG, IgA, IgM, IgE, IgD, vb.) veya izotipte olabilir ve bir kappa veya lambda hafif zincirini içerebilir. Bir uygulamada, insan antikoru, bir IgG agir zinciri veya tanimlanmis bir fragmanini, örnegin, IgGl, IgGZ, IgG3 veya IgG4 (örnegin, yl, y2, y3 veya y4) izotiplerinden en az birini içerir. Bu tip antikorlar, burada tarif edildigi gibi ve/Veya teknikte bilindigi gibi en az bir insan hafif zinciri (örn., IgG, IgA ve transgenik insan olmayan memeli kullanilarak hazirlanabilir. Bir baska uygulamada, anti-insan IL-6 insan antikoru bir IgGl agir zinciri ve bir IgGl hafif zinciri içerir. Bulusun en az bir antikoru, IL-6 proteini, alt birimi, fragmani, kismi veya bunlarin herhangi bir kombinasyonuna özgü en az bir belirli epitopu baglar. En az bir epitop, proteinin en az bir kismini içeren en az bir antikor baglama bölgesini içerebilir, bu epitop tercihen proteinin en az bir hücre disi, çözünür, hidrofilik, harici veya sitoplazmik kismindan olusur. En az bir belirtilen epitop, en az 1-3 amino asitlik en az bir amino asit sekansindan, SEQ ID NO:115'in bitisik amino asitlerinin belirtilen tüm kisimlarina, örnegin, 151-178 amino asit kalintilarina, daha spesifik olarak, 171-182 kalintilarina kadar herhangi bir kombinasyonu içerebilir. Genellikle, mevcut bulusun insan antikoru veya antijen baglayici fragmani, en az bir agir zincir degisken bölgesinin en az bir insan tamamlayicilik belirleme bölgesini (CDR1, CDR2 ve CDR3) veya varyantini ve en az bir hafif zincir degisken bölgesinin en az bir insan tamamlayicilik belirleme bölgesini (CDR1, CDR2 ve CDR3) veya varyantini ihtiva eden bir antijen baglama bölgesini içerecektir. CDR dizileri, insan germ hatti dizilerinden türetilebilir veya germ hatti dizileri ile yakin sekilde eslesebilir. Örnegin, orijinal fare CDR'lerinden türetilen bir sentetik kütüphaneden CDR'ler kullanilabilir. Bu CDR'ler, orijinal fare dizisinden konservatif ornatimlarin dahil edilmesiyle olusturulabilir. Sinirlayici olmayan bir örnek olarak, antikor veya antijen baglayici kisim veya varyant, SEQ seçilen bir amino asit sekansina sahip olan en az bir agir zincir CDR3 ve/veya SEQ ID No'lariz29, 31, 33 ve 35`den olusan gruptan seçilen bir amino asit sekansina sahip olan bir hafif zincir CDR3 ihtiva edebilir. Özel bir uygulamada, antikor veya antijen baglayici fragman, en az bir agir zincir CDR'nin (baska bir deyisle, CDR1, CDR2 ve/veya CDR3) en az bir kismini içeren karsilik gelen CDR'ler 1, 2 ve/Veya 3'ün (örnegin, SEQ ID No'lari: 37, 49 ve 79) amino asit sekansina sahip olan bir antijen baglayici bölgeye sahip olabilir. Bir baska özel uygulamada, antikor veya antijen baglayici kisim veya varyanti, en az bir hafif zincir CDR'nin (baska bir deyisle, CDR1, CDR2 ve/veya CDR3) en az bir kismini içeren karsilik gelen CDR'ler 1, 2 ve/veya 3'ün (örnegin, SEQ ID No'lari: l, 17 ve 29) amino asit sekansina sahip olan bir antijen baglayici bölgeye sahip olabilir. Tercih edilen bir uygulamada, antikorun veya antijen baglayici fragmanin üç agir zincir CDR'si ve üç hafif zincir CDR'si, burada tarif edilen sekilde AME-A9, AME-lb, AME-18a, AME-22a, AME-ZOb, AME-23a ve AME-l9a mAb'inin en az birinin karsilik gelen CDR'sinin amino asit sekansina sahiptir. Böyle antikorlar, geleneksel teknikler kullanilarak antikorun çesitli kisimlarini (örnegin, CDR'ler, çerçeve) kimyasal olarak bir araya getirme yoluyla, geleneksel rekombinant DNA teknikleri veya herhangi bir baska uygun yöntem kullanarak antikoru kodlayan bir (baska bir deyisle, bir veya daha fazla) nükleik asit molekülünü hazirlayarak ve ekprese ederek hazirlanabilir. Anti-IL-6 antikoru, tanimlanmis bir amino asit dizisine sahip olan bir agir veya hafif zincir degisken bölgenin en az birini içerebilir. Örnegin, tercih edilen bir uygulamada, anti-IL-6 126 ve l30'dan olusan gruptan seçilen bir amino asit sekansina sahip olan en az bir en az bir agir zincir degisken bölge ve/veya l28'den olusan gruptan seçilen bir amino asit sekansina sahip olan en az bir hafif zincir degisken bölge içerir. Insan IL-6'sina baglanan ve tanimlanmis bir agir veya hafif zincir degisken bölge içeren antikorlar, örnegin faj gösterimi gibi (Katsube, Y. ve digerleri, Int J Mbl. Med, 1 (5):863-868 (1998)) uygun yöntemler veya bu alanda bilinen ve/Veya burada tarif edildigi gibi transgenik hayvanlar kullanan yöntemler kullanilarak hazirlanabilir. Örnegin islevsel olarak yeniden düzenlenmis bir insan immünoglobülin agir zincir transgeni ve fonksiyonel yeniden düzenlemeye tabi tutulabilen bir insan immünoglobulin hafif zincir lokusundan DNA içeren bir transgen içeren bir transgenik fare, antikorlarin üretimini ortaya çikarmak için insan IL-6 veya bunun bir fragmani ile immünize edilebilir. Arzu edilirse, antikor üreten hücreler izole edilebilir ve hibridomlar veya diger ölümsüzlestirilmis antikor üreten hücreler burada tarif edildigi ve/veya teknikte bilindigi sekilde hazirlanabilir. Alternatif olarak antikor, belirtilen kisim veya varyant, kodlayan nükleik asit veya bunun uygun bir konakçi hücredeki bir kismi kullanilarak eksprese edilebilir. Amino Asit Kodlari Bu bulusun anti-IL-6 antikorlarini olusturan amino asitler genellikle kisaltilir. Amino asit tanimlari, amino asidin, tek harfli kod, üç harfli kodu, adi veya üç nükleotid kodon (lar) ile belirtildigi gibi, teknolojide iyi anlasildigi sekilde gösterilebilir (see Alberts, B. ve digerleri, Molecular Biology of The Cell, Üçüncü Baski, Garland Publishing, Inc., New York, 1994). Mevcut bulusun bir anti-IL-6 antikoru, burada belirtildigi gibi, dogal mutasyonlardan veya insan manipülasyonundan bir veya daha fazla amino asit ornatimi, silimi veya ilavesi içerebilir. Fonksiyon için gerekli olan bu bulusun bir anti-lL-6 antikorundaki amino asitler, örnegin alan- yönelimli mutagenez ya da alanin-tarama mutagenezi gibi teknikte bilinen yöntemler ile tanimlanabilir (örnegin, Ausubel, yukarida, Bölümler 8, 15; Cünningham ve Wells, Science 244:108l- 1085 (1989)). Bu son prosedür, moleküldeki her kalintida tekli alanin mutasyonlari getirmektedir. Elde edilen mutant moleküller, örnegin en az bir IL-6 nötralize edici aktivite gibi, ancak bununla sinirli olmamak kaydiyla biyolojik aktiviteye yönelik olarak test edilir. Antikor baglanmasi için kritik olan siteler, kristalizasyon, nükleer manyetik. rezonans veya fotoaffinity etiketleme gibi yapisal analizlerle de tanimlanabilir (Smith ve digerleri, J. Mol. Biol. 224z899-904 Burada açiklanan anti-IL-6 antikorlari, bunlarla sinirli digerlerinin en az birinin bitisik amino asitlerinin 5'i ila tümü arasindan seçilen en az bir kisim, sekans veya kombinasyon içerebilir. Listelenen faaliyetlerden en az birini artirabilecek 'veya koruyabilecek sinirlayici olmayan varyantlar, bunlarla sinirli olmamak kaydiyla, yukaridaki polipeptitlerden herhangi biri, ayrica açiklanan varyant amino asit sekanslari arasinda degisen kalintilardaki en az bir ornatim ile karsilik gelen en az bir mutasyonu içerir. Bir anti-IL-6 antikoru ayrica istege bagli olarak, SEQ ID NO'lari: 95, 99 ve 103'ün en az birinin bitisik amino asitlerinin sekansindan degisen bir amino asit sekansina sahip bir polipeptid içerebilir (örnegin burada saglanan sekanslardan bir veya daha fazla koruyucu ornatim). Ayrica, SEQ ID No'lari: 93, 97 veya 101'in bir hafif zincir bölgesinin amino asit sekansinin 91'in bir agir zincir bölgesinin amino asit sekansi burada açiklanmistir. Teknikte uzmanlarin takdir edecegi gibi, mevcut bulus, mevcut bulusun en az bir biyolojik olarak aktif antikorunu içerir. Biyolojik olarak aktif antikorlar, natif (sentetik olmayan), endojen veya ilgili ve bilinen antikorunkinden en az %20, %30 veya %40 ve, tercihen, en az %50, %60 veya %70 ve, bilhassa spesifik. aktiviteye sahiptir. Enzimatik aktivite ve substrat spesifitesinin ölçümlerinin ve miktarlarinin belirlenmesi için yöntemler, teknikte uzman kisilerce iyi bilinmektedir. Baska bir yönüyle bulus, bir organik parçanin kovalent baglantisi ile modifiye edilen, burada tarif edildigi gibi insan antikorlari ve antijen baglayici fragmanlarla ilgilidir. Bu tür modifikasyon, gelistirilmis farmakokinetik ozelliklere sahip bir antikor veya antijen baglayici fragman üretebilir (Örnegin, arttirilmis in Vivo serum yarilanma ömrü). Organik kisim, düz veya dalli bir hidrofilik polimerik grup, yagli asit grubu veya yagli asit ester grubu olabilir. Özel uygulamalarda, hidrofilik polimerik grup, yaklasik 800 ila yaklasik 120.000 Dalton'luk bir molekül agirligina sahip olabilir ve bir polialkan glikol (örnegin, polietilen glikol (PEG), polipropilen glikol (PPG)), karbohidrat polimer, amino asit polimer veya polivinil pirolidon olabilir ve yag asidi veya yag asidi ester grubu yaklasik sekiz ila yaklasik kirk karbon atomu içerebilir. Degistirilmis antikorlar ve bulusun antijen baglayici fragmanlari, antikora dogrudan veya dolayli olarak kovalent olarak baglanmis bir veya daha fazla organik kisim içerebilir. Mevcut bulusa ait bir antikora veya antijen baglayici fragmana baglanan her bir organik kisim bagimsiz olarak bir hidrofilik polimerik grup, bir yagli asit grubu veya bir yagli asit ester grubu olabilir. Burada kullanildigi haliyle, "yagli asit" terimi, mono-karboksilik asitleri ve di-karboksilik asitleri kapsar. Burada kullanilan terim olarak bir "hidrofilik polimerik grup", su içinde oktandan daha çözünür olan bir organik polimere deginmektedir. Örnegin, polilisin su içinde oktandan daha çözünürdür. Böylece, polilisin kovalent baglantisi ile modifiye edilen bir antikor, bulus tarafindan kapsanmaktadir. Mevcut bulusa. ait antikorlarin Inodifiye edilmesine uygun hidrofilik polimerler, düz veya dalli olabilir ve örnegin, polialkan glikolleri (örnegin, PEG, monometoksi-polietilen glikol (mPEG), PPG ve benzerleri), karbohidratlar (örnegin, dekstran, selüloz, oligosakkaritler, polisakkaritler ve benzerleri), polimerler hidrofilik amino asitler (örnegin, polilizin, poliarginin, poliaspartat ve benzerleri), polialkan oksitler (örnegin, polietilen oksit, polipropilen oksit ve benzerleri) ve polivinil pirrolidon yer alir. Tercihen, bulusun antikorunu modifiye eden hidrofilik polimer, ayri bir moleküler varlik olarak yaklasik 800 ila yaklasik 150,000 Dalton'luk› bir moleküler agirliga sahiptir. Örnegin, PEGSOOO ve PEG2m0w kullanilabilir, burada alt simgede yer alan sayi, Dalton cinsinden polimerin ortalama moleküler agirligidir. Hidrofilik polimerik grup, bir ila yaklasik alti alkil, yagli asit veya yagli asit ester grubu ile ornatilabilir. Bir yagli asit veya yagli asit ester grubu ile ornatilan hidrofilik polimerler, uygun yöntemler kullanilarak hazirlanabilir. Örnegin, bir amin grubunu içeren bir polimer, yagli asit veya yag asidi esterinin bir karboksilatina baglanabilir ve bir yagli veya yag asidi esteri üzerinde aktiflestirilmis bir karboksilat (örnegin, N, N-karbonil diimidazol ile aktive) bir polimer üzerinde bir hidroksil grubuna kenetlenebilir. Bulusun antikorlarini modifiye etmek için uygun yag asitleri ve yagli asit esterleri doymus olabilir veya bir veya daha fazla doymamislik birimi içerebilir. Mevcut bulusun antikorlarini modifiye etmeye uygun yag asitleri arasinda, örnegin, n- dodekanoat (C12, laurat), n-tetradekanoat (Cih miristat), n- oktadekanoat (Cim stearat), n-eikosanoat (sz arasidat) , n- dokosanoat (C2, behenat), n- triakontanoat (Cm), n- tetrasontanoat (Cm), Cis-A9-oktadekanoat (Cm, oleat), all (cis- A5,8,ll,l4-eikosattraenoat (sz arasidonat), oktandioik asit, tetradekandioik asit, oktadekandioik asit, dokosandioik asit ve benzerleri yer alir. Uygun yagli asit esterleri, düz veya dalli bir düsük alkil grubu içeren dikarboksilik asitlerin mono esterlerini içerir. Alt alkil grubu, bir ila yaklasik on iki, tercihen bir ila yaklasik alti karbon atomu içerebilir. Modifiye edilmis insan antikorlari ve antijen baglayici fragmanlari, bir veya daha fazla modifiye edici ajan ile reaksiyon gibi uygun yöntemler kullanilarak hazirlanabilir. Terimin kullanildigi bir "modifiye edici madde", bir aktive edici grup içeren uygun bir organik grup (örnegin, hidrofilik polimer, bir yagli asit, bir yagli asit esteri) anlamina gelir. Bir "aktive edici grup", uygun kosullar altinda, ikinci bir kimyasal grupla reaksiyona girebilen ve böylece modifiye edici ajan ve ikinci kimyasal grup arasinda bir kovalent bag olusturabilen bir kimyasal grup veya fonksiyonel gruptur. Örnegin, amin-reaktif aktive edici gruplar arasinda tosilat, mesilat, halo (kloro, bromo, floro, iyodo), N- hidroksisüksinimidil esterler (NHS) ve benzerleri gibi elektrofilik gruplar bulunur. Tiyoller ile tepkimeye girebilen aktiflestirici gruplar arasinda, örnegin, maleimit, iyodoasetil, akrilolil, piridil disülfitler, 5-Tiyol-2-nitrobenzoik asit tiyol (TNB-Tiyol) ve benzerleri bulunur. Bir aldehit fonksiyonel grubu, amin veya hidrazid içeren moleküller ile birlestirilebilir~ ve bir azid grubu, fosforamidat veya fosforimid› baglantilarini olusturmak için üç degerlikli bir fosfor grubu ile reaksiyona girebilir. Aktive edici gruplarin moleküllere dahil edilmesine yönelik uygun yöntemler, teknikte bilinmektedir (bakiniz örnegin Hermanson, GT, Bioconjugate Techniques, Academic Press: San Diego, CA (1996)). Bir aktive edici grup dogrudan organik gruba (örnegin, hidrofilik polimer, yag asidi, yag asidi esteri) direkt olarak veya bir baglantilayici parçasi araciligiyla, örnegin bir veya daha fazla karbon atomunun bir heteroatom, örnegin oksijen, nitrojen veya sülfür ile degistirilebilecegi iki degerlikli bir Ci-Cn grubu araciligiyla baglanabilir. Uygun baglayici parçalar arasinda, örnegin, tetraetilen glikol, -(CHn3-, -NH-(Cng-NH-, -(CHQ2- NH- ve - CHz-O-CH2-CH2-O-CH2-CH2-O-CH-NH- bulunur. Bir baglayici parçasi içeren degistirici maddeler, örnegin, bir mono-Boc- alkildiaminin (örnegin, mono-Boc-etilendiamin, mono-Boc- diaminoheksan) 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) karbodiimit (EDC) varliginda bir yag asidi ile serbest amin ve yag asitli karboksilat arasinda bir amit bagi olusturmak üzere tepkimeye sokulmasiyla üretilebilir. Boc koruyucu grup, tarif edilen sekilde baska bir karboksilatla birlestirilebilen bir primer amini açiga çikarmak için trifloroasetik asit (TFA) ile muamele edilerek üründen çikarilabilir veya maleik anhidrit ile reaksiyona sokulabilir ve elde edilen ürün, yag asidinin aktive edilmis bir maleimido türevini üretmek. için siklize edilir. (Bakiniz, örnegin, Thompson ve digerleri, WO 92/16221.) Mevcut bulusun modifiye edilmis antikorlari, bir insan antikoru veya antijen baglayici fragmanin modifiye edici bir madde ile tepkimeye sokulmasiyla üretilebilir. Örnegin, organik parçalar, amin reaktif bir modifiye edici madde, örnegin PEG'in bir~ NHS esterinin kullanilmasiyla, bölgeye özgü olmayan. bir sekilde antikora baglanabilir. Modifiye edilmis insan antikorlari veya antijen baglayici fragmanlar, bir antikorun veya antijen baglayici fragmanin disülfür baglarini (örnegin, zincir içi disülfür baglari) azaltarak da hazirlanabilir. indirgenmis antikor veya antijen baglayici fragman daha sonra bulusun modifiye antikorunu üretmek için bir tiyol-reaktif modifiye edici madde ile reaksiyona sokulabilir. Modifiye edilmis insan antikorlari ve mevcut bulusun bir antikorun belirli bölgelerine baglanan bir organik parça ihtiva eden antijen baglayici fragmanlar, uygun yöntemler, örnegin ters proteoliz (Fisch ve digerleri, Bioconjugate Chem., 3:147-153 Capellas ve digerleri, Biotechnol. Bioeng., 56(4):456- 463 (1997)) ve Hermanson, G. T., Bioconjugate Techniques, Academic Press: San Diego, CA (1996)'da tarif edilen yöntemler kullanilarak hazirlanabilir. Anti-II-6 Antikor Bilesimlerine Anti-Idiotip Antikorlari Monoklonal anti-IL-6 antikorlarina ek olarak, bu antikorlar için spesifik bir anti-idiyotipik (anti-id) antikor da burada açiklanmaktadir. Bir anti-id antikoru, genel olarak bir baska antikorun antijen baglayici bölgesi ile iliskili benzersiz belirleyicileri taniyan bir antikordur. Anti-id, ayni türden bir hayvanin ve genetik tipin (örn., fare susu), antikorlu Id antikorunun kaynagi veya bunun bir CDR içeren bölgesi olarak immünize edilmesiyle hazirlanabilir. Bagisiklik kazandirilmis hayvan, bagisiklik kazandirici antikorun idiyotipik belirleyicilerini taniyacak ve tepki gösterecek ve bir anti-id antikoru üretecektir. Anti-id antikoru, bir baska anti-anti-id antikoru üreten bir baska hayvanda bir immün tepkisi olusturmak için bir "immünojen" olarak da kullanilabilir. Burada ayrica, burada tarif edilen ve/Veya teknikte bilinen sekilde, dogal olarak olusmayan bir bilesim, karisim veya formda saglanan en az bir, en az iki, en az üç, en az dört, en az bes, en az alti veya daha fazla anti-IL-6 antikoru içeren en az bir anti-IL-6 antikor bilesimi açiklanmaktadir. amino asitlerinin %70-lOO'ü veya bunlarin belirtilen fragmanlari, domenleri veya varyantlarindan olusan gruptan seçilen anti-IL-6 antikoru amino asit sekansinin, en az bir veya iki tam uzunluklu, C- ve/Veya N ucu silinmis varyantlari, domenleri, fragmanlarini veya belirtilen varyantlarini içeren dogal olarak olusmayan bilesimler içerir. Tercih edilen anti- antikoru sekansinin, örnegin, SEQ ID No'larizlS, 27, 35, 47, 61 Ve 91'in %70-lOO'ünün kisimlari veya bunlarin belirtilen fragman, domen veya varyantlarini içeren en az bir CDR veya LBP olarak en az bir veya iki tam uzunluklu, fragman, domen veya varyantlari içerir. Baska tercih edilen bilesimler, örnegin, SEQ en az birinin %40-99'u veya belirtilen fragman, domen veya varyantlarini içerir. Bu kompozisyon yüzdeleri, teknikte bilinen veya burada tarif edildigi gibi, sivi veya kuru çözeltiler, karisimlar, süspansiyonlar, emülsiyonlar, tanecikler, toz veya kolloidler olarak agirlik, hacim, konsantrasyon, molarite veya molalite cinsinden elde edilir. Daha Fazla Terapötik Olarak Aktif Madde Içeren Antikor Bilesimleri Mevcut bulusun antikor bilesimleri, tercihe göre ayrica, bir etkili miktar en az bir bilesik veya protein den seçilen en az biri bir anti-enfektif ilaci, bir kardiyovasküler (CV) sistem ilaci, bir merkezi sinir sistemi bozuklugu (MSS) ilaci, bir otonom sinir sistemi (OSS) ilaci, bir solunum sistemi ilaci, bir gastrointestinal (GI) sistem ilaci, bir hormonal ilaç, sivi veya elektrolit dengesi için bir ilaç, bir hematolojik ilaç, bir antineoplastik, bir bagisiklik düzenleme ilaci, bir oftalmik, otik veya nazal ilaç, bir topikal ilaç, bir besleyici ilaç veya benzerlerinin en az birinden seçilen en az bir bilesik veya proteinin etkili bir miktarini da içerebilir. Bu tür ilaçlar, burada (bakiniz, örnegin, Nursing 2001 Handbook of Drugs, 21. baski, Springhouse Corp., Springhouse, PA, 2001; Health Professional's Drug Guide 2001, baski, Shannon, Wilson, Stang, Prentice-Hall, Inc., Upper Saddle River, NJ; Pharmcotherapy Handbook, Wells V.d.,baski, Appleton & Lange, Stamford, CT) sunulanlarin her birine yönelik formualsyonlari, indikasyonlari, dozlamayi ve uygulamayi içermek üzere teknikte çok iyi bilinir. Anti-efektif ilaç, amebisitler veya en az bir antiprotozoaller, anthelmintikler, antifungaller, antimalaryaller, antitüberkülotikler veya en az bir antileprotikler, aminoglikositler, penisillinler, sefalosporinler, tetrasiklinler, sülfonamitler, florokinolonler, antiviraller, makrolit anti-enfektifler ve muhtelif anti-enfektiflerden seçilen en az biri olabilir. CV ilaci, inotropikler, antiaritmikler, antianjinaller, antihipertansifler, antilipemikler ve muhtelif kardiyovasküler ilaçlarin en az biri olabilir. Merkezi Sinir Sistemi ilaci, narkotik olmayan analjeziklerden seçilenlerin en az biri veya antipiretikler, steroidal olmayan anti-enflamatuvar ilaçlar, narkotiklerden seçilenlerin en az biri veya opiod analjezikler, sedatif hipnotikler, antikonvülsanlar, antidepresanlar, antianksiyete ilaçlari, antipsikotikler, merkezi sinir sistemi uyaricilari, antiparkinsonyanlar ve muhtelif sinir sistemi ilaçlari arasindan seçilenlerin en az biri olabilir. ONS ilaci, kolinerjiklerden (parasempatomimetikler), antikolinerjiklerden, adrenerjiklerden (sempatomimetikler), adrenerjik blokörlerden (sempatolitikler), iskelet kasi gevseticilerinden ve nöromüsküler blokörlerden seçilenlerin en az biri olabilir. Solunum sistemi ilaci, antihistaminikler, bronkodilatörler, ekspektoranlar veya antitusiflerden seçilenlerin en az birisi ve muhtelif solunum ilaçlari olabilir. Gastrointestinal sistem ilaçlari, antasitlerden seçilenlerin en az biri veya adsorbanlarin en az biri veya antiflatulanlar, sindirim enzimlerin en az biri veya safra kesesi tasi çözücü, antidiyaretikler, laksatifler, antiemetikler veya antiülser ilaçlardan seçilenlerin en az biri olabilir. Hormonal ilaç, kortikosteroitler, androjenlerden seçilenlerin en az biri, anabolik steroid, östrojenlerin en az biri veya progestin, gonadotropin, antidiyabetik ilaçlarin en az biri veya glukagon, tiroid hormonu, tiroid hormonu antagonisti, hipofiz hormonu ve paratioid benzeri ilaçlarindan en az biri olabilir. Sivi ve elektrolit dengesi için ilaç, diüretikler, elektrolitler veya en az bir degistirme çözeltisi, asitlestirici veya en az bir alkalinizer arasindan seçilenlerin en az biri olabilir. Hematolojik ilaç, hematinikler, antikoagülanlar, kan türevleri ve trombolitik enzimler arasindan seçilenlerin en az biri olabilir. Antineoplastikler, alkilleyici ilaçlar, antimetabolitler, antibiyotik antineoplastikler, hormon dengesini degistiren antineoplastikler ve çesitli antineoplastiklerden seçilenlerin en az biri olabilir. Immünomodülasyon ilaci, immün baskilayici maddelerden, asilardan veya en az bir toksoid, antitoksin veya en az bir antivenin, bagisiklik serumundan ve biyolojik tepki modifiye ediciden seçilenlerin en az biri olabilir. Oftalmik, otik ve nazal ilaçlar, oftalmik anti-enfektifler, oftalmik anti- enflamatuvarlar, miyotikler, midriyatikler, oftalmik vazokonstriktörler, muhtelif oftalmikler, otikler ve nazal ilaçlardan seçilenlerin en az biri olabilir. Topikal ilaç, lokal anti-enfektif, skabisitlerden seçilenlerin en az biri veya pedikülisit veya topikal kortikosteroidlerin en az biri olabilir. Besleyici ilaç, vitaminler, mineraller veya kalorilerden seçilenlerin en az biri olabilir. Bakiniz, örnegin, içindekiler: Nursing 2001 Drug Handbook, (yukarida yer alan). En az bir amebisit veya antiprotozoal, atovakuon, klorokin hidroklorür, klorokin fosfat, metronidazol, metronidazol hidroklorür ve pentamidin isetiyonattan seçilenlerin en az biri olabilir. En az bir antelmintik; mebendazol, pirrantel pamoat ve tiyabendazolden seçilenlerin en az biri olabilir. En az bir antifungal; amfoterisin B, amfoterisin B kolesteril sülfat kompleksi, amfoterisin B lipit kompleksi, amfoterisin B lipozomal, flukonazol, flusitozin, griseofulvin mikrosiz, griseofulvin ultramikrosiz, itrakonazol, ketokonazol, nistatin ve terbinafme hidroklorür arasindan seçilenlerin en az bir tanesi olabilir. En az bir antimalaryal; klorokin hidroklorür, klorokin fosfat, doksisiklin, hidroksiklorokin sülfat, meflokin hidroklorür, primakin fosfat, pirimetamin ve sülfadoksinli pirimetaminden seçilenlerin en az biri olabilir. En az bir antitüberküloz ya da antideprotik; klofazimin, sikloserin, dapson, ethambutol hidroklorür, izoniazid, pirazinamid, rifabutin, rifampin, rifapentin ve streptomisin sülfattan seçilenlerin en az biri olabilir. En az bir aminoglikozit; amikasin sülfat, gentamisin sülfat, neomisin sülfat, streptomisin sülfat ve tobramisin sülfat arasindan seçilenlerin en az biri olabilir. En az bir penisillin; amoksillin/klavulanat potasyum, amoksisillin trihidrat, ampisillin, ampisillin sodyum, ampisillin trihidrat, ampisillin sodyum/sulbaktam sodyum, kloksasillin sodyum, dikloksasillin sodyum, mezlosillin sodyum, nafsillin sodyum, oksasillin sodyum, penisillin, G benzatin, penisillin G potasyum, penisillin G prokain, penisillin G sodyum, penisillin V potasyum, piperasillin sodyum, piperasillin sodyum/tazobaktam sodyum, tikarsillin disodywn ve tikarsillin disodyum/klavulanat potasyum'dan seçilenlerin en az biri olabilir. En az bir sefalosporin; sefaklor, sefadroksil, sefazolin sodyum, sefdinir, sefepim hidroklorur, sefiksim, sefintazol sodyum, sefonisit sodyum, sefoperazon sodyum, sefotaksim sodyum, sefotetan disodyum, sefoksitin sodyum, sefpodoksini proksetil, sefprozil, seftazidim, seftibuten, seftizoksim sodyum, seftriakson sodyum, sefuroksim aksetil, sefuroksim sodyum, sefaleksin hidroklorür, sefaleksin monohidrat, sefradin ve lorasarbef'ten seçilenlerin en az biri olabilir. En az bir tetrasiklin; demeklosiklin hidroklorür, doksisiklin kalsiyum, doksisiklin hislat, doksisiklin hidroklorür, doksisiklin monohidrat, minosiklin hidroklorür ve tetrasyklin hidroklorürden seçilenlerin en az biri olabilir. En az bir sülfonamit; ko-trimoksazol, sülfadiazin, sülfametoksazol, sülfizoksazol ve sülfizoksazol asetil'den› seçilenlerin. en az biri olabilir. En az bir florokinolon; alatrofloksasin mesilat, siprofloksasin, enoksasin, levofloksasin, lomefloksasin hidroklorür, nalidiksik asit, norfloksasin, ofloksasin, sparfloksasin ve trovafloksasin mesilattan seçilenlerin en az biri olabilir. En az bir florokinolon; alatrofloksasin mesilat, siprofloksasin, enoksasin, levofloksasin, lomefloksasin hidroklorür, nalidiksik asit, norfloksasin, ofloksasin, sparfloksasin ve trovafloksasin nesilattan seçilenlerin en az biri olabilir. En az bir antiviral abakavir sülfat; asiklovir sodyum, amantadin hidroklorür, amprenavir, sitofovir, delavirdin mesilat, didanozin, efavirenz, famsiklovir, fomivirsen sodyum, foskamet sodyum, ganciklovir, indinavir sülfat, lamivudin, lamivudin/zidovudin, nelfinavir mesilat, nevirapin, oseltamivir fosfat, ribavirin, rimantadin hidroklorür, ritonavir, sakinavir, sakinavir mesilat, stavudin, valasiklovir hidroklorür, zalsitabin, zanamivir ve zidovudinden seçilenlerin en az biri olabilir. En az bir makrolin anti-enfektif azitromisin; klaritromisin, diritromisin, eritromisin bazi, eritromisin estolat, eritromisin etilsüksinat, eritromisin laktobiyonat ve eritromisin stearattan seçilenlerin en az biri olabilir. En az bir muhtelif anti-enfektif aztreonam, basitrasin, kloramfenikol sodyum susinat, klindamisin hidroklorür, klindamisin palmitat hidroklorür, klindamisin fosfat, imipenem ve silastatin sodyum, meropenem, nitrofurantoin makrokristaller, nitrofurantoin mikrokristalleri, kinupristin/dalfopristin, spektinomisin hidroklorür, trimetoprini ve vancomisin hidroklorürden seçilenlerin en az biri olabilir. (Bakiniz, örnegin, sf. 24-214 Nursing 2001 Drug Handbook.) En az bir inotropik amrinon laktat; digoksin ve milrinon laktattan seçilenlerin en az biri olabilir. En az bir antiaritmik adenozin; amiodaron hidroklorür, atropin sülfat, bretilyum tosilat, diltiazem hidroklorür, dizopiramit, dizopiramit fosfat, esmolol hidroklorür, flekainit asetat, ibutilit fumarat, lidokain hidroklorür, meksiletin hidroklorür, morikizin hidroklorür, fenitoin, fenitoin sodyum, prokainamit hidroklorür, propafenon hidroklorür, propranolol hidroklorür, kinidin bisülfat, kinidin glukonat, kinidin poligalakturonat, kinidin sülfat, sotalol, tokainit hidroklorür ve verapamil hidroklorürden seçilenlerin en az biri olabilir. En az bir antianjinal, amlodipin besilat, amil nitrit, bepridil hidroklorid, diltiazem hidroklorid, izosorbid dinitrat, izosorbid mononitrat, nadolol, nikardipin hidroklorid, nifedipin, nitrogliserin, propranolol hidroklorid verapamil ve verapamil hidrokloridden seçilen en az biri olabilir. En az bir antihipertansif, asebutolol hidroklorid, amlodipin besilat, atenolol, benazepril hidroklorid, betaksolol hidroklorid, bisoprolol fumarat, kandesartan, sileksetil, kaptopril, karteolol hidroklorid, karvediol, klonidin, klonidin hidroklorid, diazoksit, diltiazeni hidroklorid, doksazosin mesilat, enaprilat, enapril maleat, eprosartan mesilat, felodipin, fenoldopam mesilat, fosinopril sodyum, guanabenz asetat, guanadrel sülfat, guanfasin hidroklorid, hidralazin hidroklorid, irbesartan, isradipin, labetalol hidroklorid, lizinopril, losartan potasyum, metildopa, metildopa hidroklorid, metoprolol süksinat, metoprolol tartar, minoksidil, moeksipril hidroklorid, nadolol, nikardipin hidroklorid, nifedipin, nisoldipin, nitroprussid sodyum, penbutolol sülfat, perindopril erbumin, fentolamin mesilat, pindolol, prazosin› hidroklorid, propranolol hidroklorid, kinapril hidroklorid, ramipril, telmisartan, terazosin hidroklorid, timolol maleat, trandolapril, valsartan ve verapamil hidrokloridden seçilen en az biri olabilir. En az bir antilipemik, atorvastatin kalsiyum, serivastatin sodyum, kolestiramin, kolestipol hidroklorid, fenofibrat (mikronize), fluvastatin sodyum, gemfibrozil, lovastatin, niasin, pravastatin sodyum ve simvastatinden seçilen en az biri olabilir. En az bir muhtelif CV ilaci; absiksimab, alprostadil, arbutamin hidroklorür, silostazol, klopidogrel bisülfat, dipiridamol, eptifibatit, midodrin hidroklorür, pentoksifillin, tiklopidin hidroklorür ve tirofiban hidroklorürden seçilenlerin en az biri olabilir. (Bakiniz, örnegin, sf. En az bir narkotik olmayan analzejik veya antipiretik, asetaminofen, aspirin, kolin magnezyum trialisilat, diflunisal ve magnezyum salisilattan seçilen en az biri olabilir. En az bir steroidal olmayan anti-enflamatuar ilaç, selekoksib, diklofenak potasyum, diklofenak sodyum, etodolak, fenoprofen kalsiyum, flurbiprofen, ibuprofen, indometasin, indometasin sodyum trihidrat, ketoprofen, ketorolak trometamin, nabumeton, naproksen, naproksen sodyum, oksaprozin, piroksikam, rofekoksib ve sulindaktan seçilen en az biri olabilir. En az bir narkotik veya opioid analjezik, alfentanil hidroklorür, buprenorfin hidroklorür, butorfanol tartrat, kodein fosfat, kodein sülfat, fentanil sitrat, transdermal fentanil sistemi, transmukozal fentanil, hidromorfon hidroklorür, meperidin hidroklorür, metadon hidroklorür, morfin hidroklorür, morfin sülfat, morfin tartrat, nalbufin hidroklorür, oksikodon hidroklorür, oksikodon pektinat, oksimorfon hidroklorür, pentazosin hidroklorür, pentazosin hidroklorür ve nalokson hidroklorür, pentazosin laktat, propoksifen hidroklorür, propoksifen napsilat, remifentanil hidroklorür, sufentanil sitrat ve tramadol hidroklorürden seçilen en az biri olabilir. En az bir sedatif- hipnotik, kloral hidrat, estazolam, flurazepam hidroklorid, pentobarbital, pentobarbital sodyum, fenobarbital sodyum, sekobarbital sodyum, temazepam, triazolam, zaleplon ve zolpidem tartrattan seçilen en az biri olabilir. En az bir antikonvülsan, asetazolamid sodyum, karbamezepin, klonazepam, klorazepat dipotasyum, diazepam, divalproeks sodyum, etoksuksimid, fosfenitoin sodyum, gabapentin, lamotrijin, magnezyum sülfat, fenobarbital, fenobarbital sodyum, fenitoin, fenitoin sodyum, fenitoin sodyum (uzamis), primidon, tiagabin hidroklorid, topiramat, valproat sodyum ve valproik asitten seçilen en az biri olabilir. En az bir antidepresan, amitriptilin hidroklorid, amitriptilin pamoat, amoksapin, bupropiyon hidroklorid, sitalopram hidrobromid, klomipramin hidroklorid, desipramin hidroklorid, doksepin hidroklorid, floksetin hidroklorid, imipramin hidroklorid, imipramin pamoat, mirtazapin, nefazodon hidroklorid, nortriptilin hidroklorid, paroksetin hidroklorid, fenelzin sülfat, sertralin hidroklorid, tranilsipromin sülfat, trimipramin maleat ve venlafaksin hidrokloridden seçilen en az biri olabilir. En az bir anksiyete ilaci, alprazolam, buspiron hidroklorid, klordiazepoksit, klordiazepoksit hidroklorid, klorazepat dipotasyum, diazepam, doksepin hidroklorid, hidroksizin embonat, hidroksizin hidroklorür, hidroksizin pamoat, lorazepam, mefrobamat, midazolam hidroklorid ve oksazepamdan seçilen en az biri olabilir. En az bir antipsikotik ilaç, klorpromazin hidroklorid, klozapin, flufenazin dekanoat, flufenazin enantat, flufenazin hidroklorid, haloperidol, haloperidol dekanoat, haloperidol laktat, loksapin hidroklorid, loksapin süksinat, mesoridazin besilat, molindon hidroklorid, olanzapin, perfenazin, pimozid, proklorperazin, ketiapin fumarat, risperidon, tiyoridazin hidroklorid, tiyotiksen, tiyotiksen hidroklorid ve trifloperazin hidrokloridden seçilen en az biri olabilir. En az bir merkezi sinir sistemi uyaricisi, amfetamin sülfat, kafein, dekstroamfetamin sülfat, doksapram hidroklorür, metamfetamin hidroklorür, metilfenidat hidroklorür, modafmil, pemolin ve fentermin hidroklorürden seçilen en az biri olabiliri En az bir antiparkinson ilaç, amantadin hidroklorür, benztropin mesilat, biperiden hidroklorür, biperiden laktat, bromokriptin mesilat, karbidopa- levodopa, entakapon, levodopa, pergolid. mesilat, pramipeksol dihidroklorür, ropinirol hidroklorür, selejilin hidroklorür, tolkapon ve trihekzifenidil hidroklorürden seçilen en az biri olabilir. En az bir muhtelif merkezi sinir sistemi ilaci, bupropion hidroklorid, donepezil hidroklorid, droperidol, fluvoksamin maleat, lityum karbonat, lityum sitrat, naratriptan hidroklorid, nikotin polakrileks, transdermal nikotin sistemi, propofol, rizatriptan benzoat, sibutramin hidroklorid monohidrat, sumatriptan süksinat, takrin hidroklorid ve zolmitriptandan seçilen en az biri olabilir. (Bakiniz, örnegin, En az bir kolinerjik (örnegin, parasempatomimetik.), betanekol klorür, edrofonyum klorür, neostigmin bromür, neostigmin metilsülfat, fisostigmin salisilat ve piridostigmin bromürden seçilen en az biri olabilir. En az bir antikolinerjik, atropin sülfat, disiklomin hidroklorid, glikopirolat, hiyosiyamin, hiyosiyamin sülfat, propantelin bromür, skopolamin, skopolamin bütilbromür` ve skopolamin hidrobromürden seçilen en az biri olabilir. En az bir adrenerjik (sempatomimetikler), dobutamin hidroklorür, dopamin hidroklorür, metaraminol bitartrat, norepinefrin bitartrat, fenilefrin hidroklorür, psödoefedrin hidroklorür ve psödoefedrin sülfattan seçilen en az biri olabilir. En az bir adrenerjik. blokör (sempatolitik), dihidroergotamin mesilat, ergotamin tartrat, metiserjid maleat ve propranolol hidroklorürden seçilen en az biri olabilir. En az bir iskelet kasi gevseticisi, baklofen, karizoprodol, klorzoksazon, siklobenzaprin hidroklorür, dantrolen sodyum, metokarbamol ve tizanidin, hidroklorürden seçilen. en az biri olabilir. En az bir nöromusküler blokör, atrakuryum besilat, cisatrakuryum besilat, doksakuryum klorür, mivakuryum klorür, pankuronyum bromür, pipekuronyum bromür, rapakuronyum bromür, rokuronyum bromür, süksinilkolin klorür, tubokurarin klorür ve vekuronyuni bromürden seçilen en az biri olabilir. (Bakiniz, örnegin, sf. 531-84 Nursing 2001 Drug Handbook.) En az bir antihistamin, bromfeniramin maleat, setirizin hidroklorür, klorfeniramin maleat, klemastin fumarat, siproheptadin hidroklorür, difenhidramin hidroklorür, feksofenadin hidroklorür, loratadin, prometazin hidroklorür, prometazin teoklat ve triprolidin hidroklorürden seçilen en az biri olabilir. En az bir bronkodilatör, albuterol, albuterol sülfat, aminofilin, atropin sülfat, efedrin sülfat, epinefrin, epinefrin bitartrat, epinefrin hidroklorür, ipratropiyum bromür, izoproterenol, izoproterenol hidroklorür, izoproterenol sülfat, levalbuterol hidroklorür, metaproterenol sülfat, okstrifilin, pirbuterol asetat, salmeterol ksinafoat, terbutalinb sülfat ve teofilinden seçilen en az biri olabilir. En az bir balgam söktürücü veya antitüsif, benzonatat, kodein fosfat, kodein sülfat, dektrametorfan hidrobromür, difenhidramin hidroklorür, guaifenesin ve hidromorfon hidroklorürden seçilen en az biri olabilir. En az bir muhtelif solunum sistemi ilaci, asetilsistein, beklometazon dipropiyonat, beraktant, budesonid, kalfaktant, kromolin sodyum, dornaz alfa, epoprostenol sodyum, flunisolid, flutikason propiyonat, montelukast sodyum, nedokromil sodyum, palivizumab, triamsinolon asetonid, zafirlukast ve ziletondan seçilen en az biri olabilir. (Bakiniz, En. az bir antasit, adsorban. veya antiflatulent, alüminyum karbonat, alüminyuni hidroksit, kalsiyum. karbonat, magaldrat, magnezyum hidroksit, magnezyum oksit, simetikon ve sodyum bikarbonattan seçilen en az biri olabilir. En az bir sindirim enzimi veya safra tasi çözücüsü, pankreatin, pankrelipaz ve ursodiolden seçilen en az biri olabilir. En az bir antidiyareik, atapuljit, bizmut subsalisilat, kalsiyum polikarbofil, difenoksilat hidroklorür ve atropin sülfat, loperamid, oktreotid asetat, afyon tentürü ve afyon tentüründen (kafurlu) seçilen en az biri olabilir. En az bir laksatif, bizokodil, kalsiyum polikarbofil, kaskara sagrada, kaskara sagrada aromatik sivi ekstrakt, kaskara sagrada sivi ekstrakt, hint yagi, dokusat kalsiyum, dokusat sodyum, gliserin, laktuloz, magnezyum sitrat, magnezyum hidroksit, magnezyum sülfat, metilselüloz, mieral yag, polietilen glikol veya elektrolit solüsyonu, psilyum, sinameki ve sodyum fosfatlardan seçilen en az biri olabilir. En az bir antiemetik, klorpromazin hidroklorür, dimenhidrinat, dolasetron mesilat, dronabinol, granisetron hidroklorür, meklizin hidroklorür, metokloproamid hidroklorür, ondansetron hidroklorür, perfenazin, proklorperazin, proklorperazin edisilat, proklorperazin maleat, prometazin hidroklorür, skopolamin, tietilperazin maleat ve trimetobenzamid hidroklorürden seçilen en az biri olabilir. En az bir muhtelif antiülser ilaci, simetidin, simetidin hidroklorid, famotidin, lansoprazol, mizoprostol, nizatidin, omeprazol, rabeprozol sodyum, rantidin bizmut sitrat, ranitidin hidroklorid ve sukralfattan seçilen en az biri olabilir. (Bakiniz, örnegin, sf. 643-95 Nursing 2001 Drug Handbook.) En az bir kortikösteroid, betametazon, betametazon asetat veya betametazon sodyum fosfat, betamnetazon sodyum fosfat, kortizon asetat, deksametazon, deksametazon asetat, deksametazon sodyum fosfat, fludrokortizon asetat, hidrokortizon, hidrokortizon asetat, hidrokortizon sipiyonat, hidrokortizon sodyum fosfat, hidrokortizon sodyum süksinat, metilprednizolon, metilprednizolon asetat, metilprednizolon sodyum süksinat, prednizolon, prednizolon asetat, prednizolon sodyum fosfat, prednizolon tebutat, prednizon, triamsinolon, triamsinolon asetonid ve triamsinolon diasetattan seçilen en az biri olabilir. En az bir androjen veya anabolik steroid, danazol, floksimesteron, metiltestosteron, nadrolon dekanoat, nandrolon fenpropiyonat, testosteron, testosteron sipiyonat, testosteron enantat, testosteron propiyonat ve transdermal testosteron sisteminden seçilen en az biri olabilir. En az bir östrojen veya progestin, esterlesmis östrojenler, östradiol, östradiol sipiyonat, östradiol/transdermal noretindron asetat sistemi, östradiol valerat, östrojenler (konjuge), östropipat, etinil östradiol, etinil östradiol ve desogestrel, etinil östradiol ve etinodiol diasetat, etinil östradiol ve desogestrel, etinil östradiol ve etinodiol diasetat, etinil Östradiol ve levonorgestrel, etinil östradiol ve noretindron, etinil östradiol ve noretindron asetat, etinil östradiol ve norgestimat, etinil östradiol ve norgestrel, etinil östradiol ve noretindron ve asetat ve ferröz fumarat, levonorgestrel, medroksiprogesteron asetat, mestranol ve noretindron, noretindron, noretindron asetat, norgestrel ve progesterondan seçilen en az biri olabilir. En az bir gonatropin, ganireliks asetat, gonadorelin asetat, histrelin asetat ve menotropinlerden seçilen en az biri olabilir. En az bir antidiyabetik veya glukagon, akarboz, klorpropamid, glimepirid, glipizid, glukagon, gliburid, insülinler, metformin hidroklorür, miglitol, pioglitazon hidroklorür, repaglinid, riziglitazon maleat ve troglitazoridan seçilen en az biri olabilir. En az bir tiroid hormonu, levotiroksin sodyum, liotironin sodyum, liotriks ve tiroidden seçilen en az biri olabilir. En az bir tiroid hormonu antagonisti, metimazol, potasyum iyodid, potasyum iyodid (doymus solüsyon), propiltiyourasil, radyoaktif iyot (sodyum iyodid 131l) ve güçlü iyot solüsyonundan seçilen en az biri olabilir. En az bir hipofiz hormonu, kortikotropin, kosintropin, dezmopressin asetat, löprolid asetat, depo kortikotropin, somatrem, somatropin ve vazopressinden seçilen en az biri olabilir. En az bir paratiroid benzeri ilaç, kalsifediol, kalsitonin (insan), kalsitonin (somon), kalsitiriol, dihidrotasisterol ve etidronat disodyumdan seçilen en az biri olabilir. (Bakiniz, örnegin, sf. En az bir diüretik, asetazolamid, asetazolamid sodyum, amilorür hidroklorür, bumetanid, klortalidon, etakrinat sodyum, etakrinik asit, furosemid, hidroklorotiyazid, indapamid, mannitol, metolazon, spironolakton, torsemid, triamteren ve üreden seçilen en az biri olabilir. En az bir elektrolit veya replasman solüsyonu, kalsiyum asetat, kalsiyum karbonat, kalsiyum klorür, kalsiyum sitrat, kalsiyum glubiyonat, kalsiyum gluseptat, kalsiyum glukonat, kalsiyum laktat, kalsiyum fosfat (dibazik), kalsiyum fosfat (tribazik), dekstran (yüksek molekül agirlikli), dekstran (düsük. molekül agirlikli), hidroksietil nisasta, magnezyum klorür, magnezyum sülfat, potasyum asetat, potasyum bikarbonat, potasyum klorür, potasyum glukonat, Ringer enjeksiyonu, Ringer enjeksiyonu (laktatli) ve sodyum klorürden seçilen en az biri olabilir. En az bir asitlestirici veya alkalilestirici, sodyum bikarbonat, sodyum laktat ve trometaminden seçilen en az biri olabilir. (Bakiniz, Örnegin, En az bir hematinik, ferröz fumarat, ferröz glukonat, ferröz sülfat, ferröz sülfat (kurutulmus), demir dekstran, demir sorbitol, polisakkarit-demir kompleksi ve sodyum ferrik glukonat kompleksinden seçilen en az biri olabilir. En az bir antikoagülan ardeparin; sodyum, dalteparin sodyum, danaparoit sodyum, enoksaparin sodyum, heparin kalsiyum, heparin sodyum ve varfarin sodyumdan seçilenlerin en az biri olabilir. En az bir kan derivesi, %5 albümin, %25 albümin, antihemofilik faktör, anti- inhibitör koagülan kompleksi, antitrombin III (insan), faktör IX (insan), faktör IX kompleksi ve plazma protein fraksiyonlarindan seçilen en az biri olabilir. En az bir trombolitik enzim, alteplaz, anistreplaz, reteplaz (rekombinant), streptokinaz ve ürokinazdan seçilen en az biri olabilir. (Bakiniz, örnegin, sf. 834-66 Nursing 2001 Drug Handbook.) En az bir alkilleme ilaci, busulfan, karboplatin, karmustin, klorambusil, sisplatin, siklofosfamid, ifosfamid, lomustin, mekloretamin hidroklorür, mefalan, mefalan hidroklorür, streptozosin, temozolomid ve tiyotepadan seçilen en az biri olabilir. En az bir antimetabolit, kapesitabin, kladribin, sitarabin, floksuridin, fludarabin fosfat, florourasil, hidroksiüre, merkaptopürin, metotreksat, metotreksat sodyum ve tiyoguaninden seçilen en az biri olabilir. En az bir antibiyotik antineoplastik, bleomisin sülfat, daktinomisin, lipozomal daunorubisin sitrat, daunorubisin hidroklorür, doksorubisin hidroklorür, lipozomal doksorubisin hidroklorür, epirubisin hidroklorür, idarubisin hidroklorür, mitomisin, pentostatin, plikamisin ve valrubisinden seçilen en az biri olabilir. Hormon dengesini degistiren en az bir antineoplastik, anastrozol, bikalutamid, östramustin fosfat sodyum, eksemestan, flutamid, goserelin asetat, letrozol, löprolid asetat, megestrol asetat, nilutamid, tamoksifen sitrat, testolakton ve toremifen sitrattan seçilen en az biri olabilir. En az bir diger antineoplastik, asparajinaz, bacillus Calmette-Guerin (BCG) (canli intravesikal), dakarbazin, dosetaksel, etoposid, etoposid fosfat, gemsitabin hidroklorid, irinotekan hidroklorid, mitotan, mitoksantron hidroklorid, paklitaksel, pegaspargaz, porfimer sodyum, prokarbazin hidroklorid, rituksimab, teniposid, topotekan hidroklorid, trastuzumab, tretinoin, vinblastin sülfat, vinkristin sülfat ve vinorelbin tartrattan seçilen en az biri olabilir. En az bir immüno baskilayici, azatiyoprin, basiliksimab, siklosporin, daklizumab, lenfosit immün globülin, muromonab-CD3, mikofenolat mofetil, mikofenolat mofetil hidroklorür, sirolimus ve takrolimustan seçilen en az biri olabilir. En az bir asi veya toksoid, BCG asisi, kolera asisi, difteri ve tetanos toksoidleri (adsorbe edilmis), difteri ve tetanos toksoidleri ve adsorbe edilmis aselüler bogmaca asisi, difteri ve tetanos toksoidleri Ve tam hücre bogmaca asisi, Hemofili b konjugat asilari, hepatit A. asisi (etkinlestirilmemis), hepatit. B asisi (rekombinant), influenza Virüsü asisi 1999-2000 üp degerlikli tipler A & B (saflastirilmis yüzey antijeni), influenza Virüsü asisi 1999- 2000 üp degerlikli tipler A & B (subvirion - veya saflastirilmis sub Virion), influenza virüsü asisi 1999-2000 üp degerlikli tipler A & B (tam Virion), Japon ensefalit virüsü asisi (etkinlestirilmemis), Lyme hastaligi asisi (rekombinant OspA), kizamik ve kabakulak ve kizamikçik Virüsü asisi (canli), kizamik ve kabakulak ve kizamikçik Virüsü asisi (canli atenüe), kizamik virüsü asisi (canli atenüe), meningokoksik polisakkarit asisi, kabakulak virüsü asisi (canli) veba asisi, pnömokoksik asi (çok degerlikli), poliovirüs asisi (etkinlestirilmemis), poliovirüs asisi (canli, oral, üç degerlikli), kuduz asisi (adsorbe edilmis), kuduz asisi (insan diploid. hücre), kizamikçik ve kabakulak Virüsü asisi (canli), kizamikçik virüsü asisi (canli, atenüe), tetanos toksoidi (adsorbe edilmis), tetanos toksoidi (sivi), tifo asisi (oral), tifo asisi (parenteral), tifo asisi (oral), tifo Vi polisakkarit asisi, suçiçegi virüsü asisi ve sari humma asisindan seçilen en az biri olabilir. En az bir antitoksin veya antivenin, karadul örümcegi antivenini, Crotalidae panzehri (çok degerlikli), difteri antitoksini (at) ve Micrurus fulvius antivenininden seçilen en az biri olabilir. En az bir immün serum, sitomegalovirüs immün globülin (intravenöz), hepatit B immün globülin (insan), intramüsküler immün glöbülin, intravenöz immün globülin, kuduz immün globülini (insan), intravenöz solununi sinsitiyal virus immün. globülini (insan), Rho(D) immün globülini (insan), intravenöz Rho(D) immün globülini (insan), tetenos immün globülini (insan) ve varicella- zoster immün globülininden seçilen en az biri olabilir. En az bir biyolojik yanit degistirici, aldeslökin, epoetin alfa, filgrastim, enjeksiyonluk glatiramer asetat, interferon alfakon- l, interferon alfa-Za (rekombinant), interferon alfa-2b (rekombinant), interferon beta-la, interferon beta-lb (rekombinant), interferon gama-lb, levamisol hidroklorid, oprelvekin ve sargramostimden seçilen en az biri olabilir. (Bakiniz, örnegin, sf. En az bir oftalmik anti-enfektif, basitrasin, kloramfenikol, siprofloksasin hidroklorür, eritromisin, gentamisin sülfat, sodyum, %15'lik sülfasetamid sodyum, %30'luk sülfasetamid sodyum, tobramisin ve vindarabinden seçilen en az biri olabilir. En az bir oftalmik anti-enflamatuvar, deksametazon, deksametazon sodyum fosfat, %O,1'lik diklofenak sodyum, florometolon, flurbiprofen sodyum, ketorolak trometamin, prednizolon asetat (süspansiyon) ve prednizolon sodyum fosfattan (solüsyon) seçilen en az biri olabilir. En az bir Huyotik, asetilkolin klorür, karbakol (intraoküler), karbakol (topikal), ekotiyofat iyodid, pilokarpin, pilokarpin hidroklorür ve pilokarpin nitrattan seçilen. en az biri olabilir. En az bir* midriyatik, atropin sülfat, siklopentolat hidroklorür, epinefrin hidroklorür, epinefril borat, homatropin hidrobromür, fenilefrin hidroklorür, skopolamin hidrobromür ve tropikamidden seçilen en az biri olabilir. En az bir oftalmik vazokonstrüktör, nafazolin hidroklorür, oksimetazolin hidroklorür ve tetrahidrozolin hidroklorürden seçilen en az biri olabilir. En az bir diger oftalmik, apraklonidin hidroklorür, betaksolol hidroklorür, brimonidin tartrat, karteolol hidroklorür, dipivefrin hidroklorür, dorzolamid hidroklorür, emedastin difumarat, flöresin sodyum, ketotifen fumarat, latanoprost, levobunolol hidroklorür, metipranolol hidroklorür, sodyum klorür (hipertonik) ve timolol maleattan seçilen en az biri olabilir. En az bir otik, borik asit, karbamid peroksit, kloramfenikol ve trietanolamin polipeptit oleat-kondensatindan seçilen en az biri olabilir. En az bir nazal ilaç, beklometazon dipropiyonat, budesonid, efedrin sülfat, epinefrin hidroklorid, flunizolid, flutikason propiyonat, nafazolin hidroklorid, oksimetazolin hidroklorid, fenilefrin hidroklorid, tetrahidrozolin hidroklorid, triamsinolon asetonid ve ksilometazolin hidrokloridden seçilen en az biri olabilir. (Bakiniz, örnegin, En az bir lokal anti-enfektif, asiklovir, amfoterisin B, azelaik asit krem, basitrasin, butokonazol nitrat, klindamisin fosfat, klotrimazol, ekonazol nitrat, eritromisin, gentamisin sülfat, ketokonazol, mafenid asetat, metronidazol (topikal), mikonazol nitrat, mupirosin, naftifin hidroklorür, neomisin sülfat, nitrofurazon, nistatin, gümüs sülfadiazin, terbinafin hidroklorür, terkonazol, tetrasiklin hidroklorür, tiyokonazol ve tolnaftattan seçilen en az biri olabilir. En az bir skabisid veya pedikülosit, krotamiton, lindan, permetrin ve piretrinlerden seçilen en az biri olabilir. En az bir topikal kortikosteroid, betametazon dipropiyonat, betametazon valerat, klobetasol propiyonat, dezonid, dezoksimetazon, deksametazon, deksametazon sodyum fosfat, diflorason diasetat, flosinolon asetonid, flosinonid, fluandrenolid, flutikason propiyonat, halsinonid, hidrokortizon, hidrokortizon asetat, hidrokortizon bütirat, hidrokortizon valerat, mometazori furoat ve triamsinolon asetonidden seçilen en az biri olabilir. (Bakiniz, En az bir Vitamin veya mineral, A. vitamini, B vitamini kompleksi, siyanokobalamin, folik asit, hidroksokobalamin, lökovorin kalsiyum, niasin, niasinamid, piridoksin hidroklorür, riboflavin, tiyamin hidroklorür, C Vitamini, D vitamini, kolekalsiferol, ergokalsiferol, D Vitamini analogu, doksekalsiferol, parikalsitol, E vitamini, K Vitamini analogu, fitonadion, sodyum florür, sodyum florür (topikal), eser elementler, krom, bakir, iyot, mangan, selenyuni ve çinkodan seçilen en az biri olabilir. En az bir kalori veren ilaç, amino asit infüzyonlari (kristalin), dekstroz içindeki amino asit infüzyonlari, elektrolitler ile olan amino asit infüzyonlari, dekstroz içinde elektrolitler ile olan amino asit infüzyonlari, karaciger yetmezligine yönelik amino asit infüzyonlari, yüksek metabolik strese yönelik amino asit infüzyonlari, böbrek yetmezligine yönelik amino asit infüzyonlari, dekstroz, yag emülsiyonlari ve orta Zincirli trigliseridlerden seçilen en az Handbook.) Mevcut bulusun anti-IL-6 antikoru bilesimleri ayrica, en az bir TNF antagonisti (örnegin bunlarla sinirli olmaksizin bir TNF kimyasal veya protein antagonisti, TNF monoklonal veya poliklonal antikoru veya parçasi, çözünebilir bir TNF reseptörü (örnegin p55, p70 veya p85) veya parçasi, füzyon polipeptitleri veya küçük moleküllü bir TNF reseptörü, örnegin TNF baglama proteini I veya II (TBP-l veya TBP-II), nerelimonmab, infliksimab, etanersept, CDP-57l, CBF-870, afelimomab, lenersept ve benzerleri), bir antiromatizmal (örnegin, metotreksat, auranofin, orotiyoglukoz, azatiyoprin, etanersept, altin sodyum tiyomalat, hidroksiklorokuin sülfat, leflunomid, sülfasalzin), bir kas gevsetici, bir narkotik, steroid olmayan bir anti- enflamatuvar ilaç (NSAID), bir analjezik, bir anestetik, bir yatistirici, bir lokal anestetik, bir nöromüsküler bloker, bir antimikrobiyal (örnegin, aminoglikosid, bir antifungal, bir antiparazitik, bir antiviral, bir karbapenem, sefalosporin, bir florokuinolon, bir makrolid, bir penisilin, bir sülfonamid, bir terasiklin, diger bir antimikrobiyal), bir antipsöriyatik, bir kortikosteroid, bir anabolik steroid, diyabet baglantili bir ajan, bir mineral, bir besin, bir tiroid ajani, bir vitamin, kalsiyum baglantili bir hormon, bir antidiyareik, bir antitüssif, bir antiemetik, bir antiülser, bir laksatif, bir antikoagülan, bir eritropoetin (örnegin, epoetin alfa), bir filgrastim (örnegin, G-CSF, Neupogen), bir sargramostim (GM-GSF, Leukine), bir immünizasyon, bir immünoglobulin, bir immünosupresif (örnegin, basiliksimab, siklosporin, daklizumab), bir büyüme hormonu, bir hormon replasman ilaci, bir östrojen reseptör modülatörü, bir midriyatik, bir sikloplejik, alkillestirici bir ajan, bir antimetabolit, bir mitotik inhibitör, bir radyofarmasötik, bir antidepresan, antimanik ajan, bir antipsikotik, bir anksiyolitik, bir hipnotik, bir sempatomimetik, bir uyarici, donepezil, takrin, bir astim ilaci, bir beta agonisti, bir inhalasyon steroidi, bir lökotrien inhibitörü, bir metilksantin, bir kromolin, bir epinefrin veya analog, dornaz alfa (Pulmozyme), bir sitokin veya bir sitokin antagonistinden seçilen en az birini istege bagli olarak ihtiva eden böyle bir modülasyon, tedavi veya terapiye ihtiyaç duyan bir hücre, doku, organ, hayvan veya hastaya temas ettirilen veya uygulanan en az bir IL-6 antikorunu içeren bir bilesim veya farmasötik bilesimin herhangi bir uygun veya etkili miktarinin en az birini içerir. Bu tür sitokinlerin sinirlayici olmayan örnekleri arasinda, bunlarla sinirli kalmamak kaydiyla, herhangi bir IL-l ila IL-23 (örnegin, IL-l, IL-2 ve digerleri) bulunur. Uygun dozajlar, teknikte çok iyi bilinir. Bakiniz örnegin, Wells vd., eds., Pharmacotherapy Handbook, 2nd Edition, Appleton and Lange, Stamford, CT (2000); PDR Pharmacopoeia, Tarascon Pocket Pharmacopoeia 2000, Deluxe Edition, Tarascon Publishing, Loma Linda, CA (2000). Bu tür anti-kanser veya enti-enfektifler ayni zamanda, mevcut bulusun en az bir antikoru ile iliskili, bagli, es formüle edilmis veya es uygulanmis olan toksin moleküllerini içerir. Bu toksin istege göre, patolojik hücre veya dokuyu selektif olarak öldürecek sekilde görev yapabilir. Patolojik hücre, bir kanser hücresi veya baska bir hücre olabilir. Bu tür toksinler, bunlarla sinirli olmamak üzere saflastirilmis veya rekombinant toksin veya örnegin risin, difteri toksini, yilan zehri toksini veya bakteriyel bir toksinden seçilen toksinin en az bir fonksiyonel sitotoksik bölgesini içeren toksin parçasi olabilir. Toksin terimi ayni zamanda, ölümle sonuçlanabilen toksin soku da dahil insanlarda ve diger memelilerde patolojik herhangi bir vakaya neden olabilen dogal olarak görülen, mutant veya rekombinant bakteriler veya virüsler tarafindan üretilen endotoksinleri ve ekzotoksinleri içerir. Bu tür toksinler, bunlarla sinirli olmamak üzere enterotoksijenik E. coli isiya dayaniksiz enterotoksini (LT), isiya dayanikli enterotoksin (ST), Shigella sitotoksini, Aeromonas enterotoksinleri, toksik sok sendromu toksin-1 (TSST-l), Stafilokoksik enterotoksin A (SEA), B (SEB) veya C (SEC), Streptokoksik enterotoksinler ve benzerlerini içerebilir. Bu tür bakteriler, bunlarla sinirli olmamak üzere enterotoksijenik E. coli (ETEC), enterohemorajik E. coli (örnegin 0157:H7 serotipinin suslari) türlerine ait suslar, Stafilokok türleri (örnegin, Staphylococcus aureus, Staphylococcus pyogenes), Shigella türleri (örnegin, Shigella dysenteriae, Shigella flexneri, Shigella boydii ve Shigella sonnei), Salmonella türleri (örnegin, Salmonella typhi, Salmonella cholera-suis, Salmonella enteritidis), Clostridium türleri (örnegin, Clostridiumperfringens, Clostridium dificile, Clostridium botulinum), Camphlobacter türleri (örnegin, Camphlobacter jejuni, Camphlobacterfetus), Heliobacter türleri (örnegin, Heliobacter pylori), Aeromonas türleri (örnegin, Aeromonas sobria, Aeromonas hydrophila, Aeromonas caviae), Pleisomonas shigelloides, Yersina enterocolitica, Vibrios türleri (örnegin, Vibrios cholerae, Vibrios parahemolyticus), Klebsiella türleri, Pseudomonas aeruginosa ve Streptokoklari içerir. Bakiniz örnegin, Stein, ed., INTERNAL MEDICINE, 3'üncü baski, sayfa 1-13, Little, Brown ve C0., Boston, (1990); Evans vd., eds., Bacterial Infections of Humans: Epidemiology and Control, 2d. Baski, sf. 239-254, Plenum Medical Book Co., New York (1991); Mandell ve digerleri,, Principles and Practice of York (1990); Berkow ve digerleri, eds., The Merck Manual, l6'nci baski, Merck ve Co., Rahway, N.J., 1992; Wood ve digerleri,, Mevcut bulusun anti-IL-6 antikoru bilesikleri, bilesimleri veya kombinasyonlari ayrica, yardimcilarin uygun herhangi uygun birini, örnegin, bunlarla sinirli olmamak kaydiyla, seyreltici çözücüler, koruyucu, adjuvan veya benzerlerini içerebilir. Farmasötik olarak kabul edilebilir yardimci maddeler tercih edilir. Kisitlayici olmayan örnekler ve bu tür steril solüsyonlari hazirlama yöntemleri, Gennaro, Ed., Remington's Pharmaceutical Sciences, 18'inci Baski, Mack Publishing Co. (Baston, PA) 1990'da da yer aldigi üzere, teknikte iyi bilinmektedir. Teknikte bilindigi üzere veya burada açiklandigi üzere anti-IL-6 antikorunun, parçasinin veya varyant bilesiminin uygulama yoluna, çözünürlügüne ve/Veya stabilitesine uygun olan farmasötik olarak kabul edilebilir tasiyicilar rutin bir sekilde seçilebilir. Mevcut bilesimde yararli olan farmasötik eksipiyanlar ve katki maddeleri, bunlarla sinirli olmamak üzere tek basina veya agirlikça veya hacimce %1- 99,99 kombinasyon halinde olmak üzere tek. basina veya kombinasyon halinde bulunabilen proteinler, peptitler, amino asitler, lipidler ve karbohidratlari (örnegin, monosakkaritler, di-, tri-, tetra- ve oligosakkaritler de dahil sekerler; alditoller, aldonik asitler, esterlesmis sekerler ve benzeri gibi türevlendirilmis sekerler ve polisakkaritler veya seker polimerleri) içerir. Örnek. niteligindeki eksipiyanlar, insan serum albümin (HSA), rekombinant insan albümini (rHA) gibi serum albümin, jelatin, kazein ve benzerlerini içerir. Tamponlama kapasitesinde de islev görebilen temsili amino asit/antikor bilesenleri, alanin, glisin, arginin, betain, histidin, glutamik asit, aspartik asit, sistein, lizin, lösin, izolösin, valin, metiyonin, fenilalanin, aspartam ve benzerlerini içerir. Tercih edilen bir amino asit glisindir. Bulusta kullanilmaya uygun karbohidrat eksipiyanlar örnegin, fruktoz, maltoz, galaktoz, glukoz, D-mannoz, sorboz ve benzeri gibi nmnosakkaritler; laktoz, sükroz, trehaloz, selobinoz ve benzeri gibi disakkaritler; rafinoz, melezitoz, maltodekstrinler, dekstranlar, nisastalar ve benzeri gibi polisakkaritler ve mannitol, ksilitol, maltitol, laktitol, ksilitol, sorbitol (glusitol), miyoinozitol ve benzeri gibi alditolleri içerir. Mevcut bulusta kullanilmak üzere tercih edilen karbohidrat eksipiyanlari, mannitol, trehaloz ve rafinozdur. Anti-IL-6 antikor bilesimleri ayni zamanda, bir tampon veya pH ayarlama ajani içerebilir; tipik olarak tampon, organik bir asit veya bazdan hazirlanan bir tuzdur. Temsili tamponlar, sitrik asit, askorbik asit, glukonik asit, karbonik asit, tartarik. asit, süksinik asit, asetik asit veya ftalik asit tuzlari gibi organik asit tuzlarini; Tris, trometamin hidroklorür veya fosfat tamponlarini içerir. Mevcut bilesimlerde kullanilmak üzere tercih edilen tamponlar, sitrat organik asit tuzlaridir. Ayrica bulusun anti-IL-6 antikor bilesimleri, polivinilpirolidonlar, ficol (polimerik bir seker), desktratlar (örnegin, 2-hidroksipropil-ß-siklodekstrin gibi siklodekstrinler), polietilen glikoller, lezzet verme ajanlari, antimikrobiyal ajanlar, tatlandiricilar, antioksidanlar, antistatik ajanlar, sürfaktanlar (örnegin, "TWEEN 20" ve "TWEEN 80" gibi polisorbatlar), lipidler (örnegin, fosfolipidler, yag asitleri), steroidler (örnegin kolesterol) ve selatlama ajanlari (örnegin, EDTA) gibi polimerik eksipiyanlari/katki maddelerini içerebilir. Bulusa göre anti-IL-6 antikor, parça veya varyant bilesimlerinde kullanilmaya uygun bu ve bilinen ek farmasötik eksipiyanlar ve/veya katki maddeleri örnegin, "Remingtonz The Science & Practice of Pharmacy", 19. baski., Williams & Williams'ta (1995) ve "Physiciams Desk Reference", 52. baski., Medical Economics, Montvale, NJ'de (1998) listelendigi üzere teknikte bilinir. Tercih edilen tasiyici veya yardimci maddeler, karbonhidratlar (örnegin sakkaritler ve alditoller) ve tamponlar (Örnegin sitrat) veya polimerik maddelerdir. Örnek bir tasiyici molekül, intraartiküler uygulama için faydali olabilecek mukopolisakkarit, hiyalüronik asittir. Formülasyonlar Yukarida belirtildigi gibi, bu bulus, tercih edilen tuz veya seçilmis bir tuzu ile bir fosfat tamponu içeren stabil formülasyonlari, korunmus çözeltiler ve koruyucu madde içeren formülasyonlar ve farmasötik olarak kabul edilebilir bir formülasyonda en az bir anti-IL-6 antikoru içeren farmasötik veya veteriner kullanimi için uygun çok kullanimli korunmus formülasyonlar saglamaktadir. Korunmus formülasyonlar en az bir bilinen koruyucu veya tercihe göre, fenol, m-krezol, p-krezol, o-krezol, klorokrezol, benzil alkol, fenilmerkürik nitrit, fenoksietanol, formaldehit, klorobutanol, magnezyum klorür (örnegin, heksahidrat), alkilparaben (metil, etil, propil, butil ve benzerleri), benzalkonyum klorür, benzetonyum klorür, sodyum dehidroasetat ve timerosal, polimerler veya sulu bir seyreltici içinde bunlarin karisimlarindan seçilenlerin en az birini içerir. Teknikte bilinen herhangi bir uygun konsantrasyon veya karisim, örnegin yaklasik %0,0015 veya. herhangi bir aralik, deger veya bunlarin bir kesrini kullanilabilir. Sinirlayici olmayan örnekler arasinda, koruyucu› yok, yaklasikr %0,1-2 m- Yukarida belirtildigi gibi, bulus, ambalaj malzemesi ve önceden belirlenmis tamponlar ve/veya koruyucu maddeler, istege bagli olarak bir sulu seyreltici içinde, bahsedilen ambalaj tutulabilecegini gösteren bir etiket içerdigi, en az bir anti- içeren bir imalat ürünü saglar. Mevcut bulus ayrica, ambalaj malzemesi, en az bir anti-IL-6 antikorunu liyofilize eden bir birinci Viyal ve önceden belirlenmis tampon veya koruyucu maddenin sulu bir seyrelticisini içeren ikinci bir Viyal, bahsedilen ambalaj malzemesinin, yirmi dört saat veya daha fazla bir süre boyunca tutulabilen bir solüsyon olusturmak için sulu seyreltici içinde en az bir IL-6 antikorunu yeniden olusturmak için bir hastaya talimatlar saglayan bir etiket içerdigi bir imalat ürününü ihtiva eder. Mevcut bulus ile uyumlu olarak kullanilan en az bir anti-IL- 6 antikoru, burada açiklandigi veya teknikte bilindigi üzere memeli hücresi veya transgenik preparatlar da dahil rekombinant araçlar ile üretilebilir veya diger biyolojik kaynaklardan saflastirilabilir. Mevcut bulus ürünündeki en az bir anti-IL-6 antikorunun miktar araligi, sulu/kuru bir sistemde olmasi halinde sulandirma üzerine yaklasik 1,0 ug/ml ila yaklasik 1000 mg/ml olan konsantrasyonlari veren miktarlari içermekle birlikte daha düsük ve daha yüksek konsantrasyonlar da kullanilabilir ve bunlar, hedeflenen uygulama aracina baglidir, örnegin solüsyon formülasyonlari, transdermal yama, pulmoner, transmukozal veya ozmotik veya mikro pompa yöntemlerinden farklilik gösterecektir. Tercihen sulu seyreltici istege göre ayrica, farmasötik olarak kabul edilebilir bir koruyucu içerir. Tercih edilen koruyucular, fenol, m-kresol, p-kresol, o-kresol, klorokresol, benzil alkol, alkilparaben (metil, etil, propil, bütil ve benzerleri), benzalkonyum klorür, benzetonyum klorür, sodyum dehidroasetat ve timerosal veya bunlarin karisimlarindan seçilenleri içerir. Formülasyonda kullanilan koruyucunun konsnatrasyonu, anti- mikrobiyal bir etki olusturmaya yeterli olan bir konsantrasyondur. Bu konsantrasyonlar, seçilen koruyucuya baglidir ve uzman kisiler tarafindan kolaylikla belirlenir. Diger eksipiyanlar örnegin izotonisite ajanlari, tamponlar, antioksidanlar ve koruyucu pekistiriciler istege göre ve tercihen seyrelticiye eklenebilir. Gliserin gibi bir izotonisite ajani, bilinen konsantrasyonlarda yaygin bir sekilde kullanilir. Fizyolojik. olarak tolere eden tampon tercihen artirilmis pH kontrolü saglamak üzere eklenir. Formülasyonlar yaklasik pH 4 ila yaklasik pH 10 gibi genis pH araliklarini ve tercihen yaklasik pH 5 ila yaklasik pH 9 araligini ve daha çok tercihen yaklasik 6.0 ila yaklasik 8.0 araligini kapsayabilir. Tercihen, mevcut bulusun formülasyonlari yaklasik 6.8 ve yaklasik 7.8 arasinda bir pH'ye sahiptir. Tercih edilen tamponlar, fosfat tamponlarini, en çok tercihen sodyum fosfat, özellikle, fosfat tamponlu tuzlu su (PBS) içerir. Tween 20 (polioksietilen (20) sorbitan monolorat), Tween 40 (polioksietilen (20) sorbitan monopalmitat), Tween 80 (polioksietilen (20) sorbitan monooleat), Pluronic F68 (polioksietilen polioksipropilen blok kopolimerler) ve PEG (polietilen glikol) gibi farmasötik olarak kabul edilebilir çözündürücüler gibi diger katki maddeleri veya polisorbat 20 veya 80 veya poloksamer 184 veya 188, Pluronic® poliller, diger blok ko-polimerler ve EDTA ve EGTA gibi selatlama ajanlari gibi iyonik olmayan surfaktanlar istege göre topaklanmayi azaltmak üzere formülasyonlara. veya. bilesimlere eklenebilirx Bu katki maddeleri özellikle bir pompa veya plastik konteynerin formülasyonu uygulamak üzere kullanilmasi halinde yararlidir. Farmasötik olarak kabul edilebilir surfaktanin varligi proteinin topaklasma egilimini azaltir. Mevcut bulusun formülasyonlari bir sulu seyreltici içinde fenol, m-krezol, p- krezol, o-krezol, klorokrezol, benzil alkol, alkilparaben, (metil, etil, propil, bütil ve benzeri), benzalkonyum klorür, benzetonyum klorür, sodyum dehidroasetat ve timerosal veya bunlarin karisimlarindan olusan gruptan seçilen en az bir anti-IL-6 antikorunun ve bir koruyucu maddenin karistirilmasini içeren bir proses ile hazirlanabilir. Bir sulu seyreltici içinde en az bir anti-IL-6 antikorunun ve koruyucu maddenin karistirilmasi klasik çözme ve karistirma prosedürleri kullanilarak gerçeklestirilmistir. Uygun bir formülasyon hazirlamak üzere, örnegin tamponlanmis bir solüsyon ipinde en az bir anti-IL-6 antikorunun ölçülmüs bir miktari istenen konsantrasyonlarda protein ve koruyucu madde saglamak ipin yeterli miktarlarda tamponlanmis solüsyon ipinde istenen koruyucu madde ile kombine edilir. Bu prosesin varyasyonlari, teknikte uzman bir kisi tarafindan taninir. Örnegin bilesenlerin eklendigi sira, ek katki maddelerinin kullanilip kullanilmadigi, formülasyonunun hazirlandigi sicaklik ve pH degerinin tümü, konsantrasyona ve kullanilan uygulamanin araçlarina yönelik olarak optimize edilebilen faktörlerdir. Istemlerde belirtilen formülasyonlar, açik solüsyonlar olarak veya bir sulu seyrelticide suyu, bir koruyucuyu ve/Veya eksipiyanlari, tercihen bir fosfat tamponunu ve/veya salini ve seçilen bir tuzu içeren ikinci bir Viyal ile yeniden olusturulan, liyofilize edilen en az bir anti-IL-6 antikorunun bir Viyalini içeren ikili viyaller olarak hastalara saglanabilir. Tek solüsyonlu bir viyal veya yeniden olusturmayi gerektiren ikili viyal, birçok kez yeniden kullanilabilir ve hasta tedavisinin tek veya çoklu döngüleri için yeterlidir ve böylece halihazirda mevcut olandan daha uygun bir tedavi rejimini saglayabilir. Halihazirda istemlerde belirtilen üretim maddeleri, anliktan yirmi dört saat veya daha fazla saate kadar degiskenlik gösteren bir periyot boyunca uygulamaya yönelik olarak yararlidir. Benzer sekilde halihazirda istemlerde belirtilen üretim maddeleri, hasta için önemli avantajlar sunar. Mevcut bulusun formülasyonlari, istege bagli olarak, yaklasik 2 °C ila yaklasik 40 °C arasindaki sicakliklarda güvenli bir sekilde saklanabilir ve proteinin biyolojik aktivitesini uzun süreler boyunca veya 96 saat veya daha fazla bir süre boyunca tutulabilecegini ve/veya kullanilabilecegini belirten bir ambalaj etiketine imkan verebilir. Korunan seyrelticinin kullanilmasi halinde bu türdeki etiket, l-12 ay, yari yil, bir buçuk yil ve/veya iki yila kadar olan kullanimlari içerebilir. Bulusun en az bir anti-IL-6 antikorunun solüsyonlari, en az bir antikorun bir sulu seyrelticide karistirilmasini içeren bir proses ile hazirlanabilir. Karistirma, klasik çözünme ve karistirma prosedürleri kullanilarak yürütülür. Uygun bir seyrelticiyi hazirlamak üzere örnegin su veya tampondaki en az bir antikorun ölçülen bir miktari, istenen konsantrasyonlarda proteini ve istege bagli olarak bir koruyucuyu veya tamponu saglamaya yetecek miktarlarda kombine edilir. Bu prosesin varyasyonlari, teknikte uzman bir kisi tarafindan taninir. Örnegin bilesenlerin eklendigi sira, ek katki maddelerinin kullanilip kullanilmadigi, formülasyonunun hazirlandigi sicaklik ve pH degerinin tümü, konsantrasyona ve kullanilan uygulamanin araçlarina yönelik olarak optimize edilebilen faktörlerdir. Istemlerde belirtilen ürünler, açik solüsyonlar olarak veya bir sulu seyrelticiyi içeren ikinci bir viyal ile yeniden olusturulan, liyofilize edilen en az bir anti-IL-6 antikorunun bir Viyalini içeren ikili Viyaller olarak hastalara saglanabilir. Tek solüsyonlu bir viyal veya yeniden olusturmayi gerektiren ikili viyal, birçok kez yeniden kullanilabilir ve hasta tedavisinin tek veya çoklu döngüleri için yeterlidir ve böylece halihazirda mevcut olandan daha uygun bir tedavi rejimini saglar. Istemlerde belirtilen ürünler, eczanelere, kliniklere veya bu türdeki diger tesislere açik solüsyonlarin veya sulu seyrelticiyi içeren ikinci bir viyal ile yeniden olusturulan, liyofilize edilen en az bir anti-IL-6 antikorunun bir viyalini içeren ikili Viyallerin saglanmasi yoluyla dolayli olarak hastalara saglanabilir. Bu durumda açik solüsyon, en az bir antikor solüsyonunun, daha küçük olan viyallere transfere yönelik olarak bir veya birçok kez geri alinabildigi veya eczane veya klinik tarafindan müsterilerine ve/veya hastalarina saglanabildigi büyük bir hazne saglanarak boyut bakimindan bir litreye veya daha fazlasina kadar olabilir. Tekli viyal sistemlerini içeren taninmis cihazlar arasinda, bir çözeltinin dagitimi için kalem-enjektör cihazlari, örnegin BD Pens, BD Autojector®, Humaject®' NovoPen®, B-D®Pen, AutoPenß ve OptiPen®, GenotropinPen®, Genotronorm Pen®, Humatro Pen®, Reco-Pen®, Roferon Pen®, Biojector®, Iject®, J-tip Needle-Free (Franklin Lakes, NJ, www.bectondickenson.com) tarafindan yapilmis veya gelistirilmis olan sekilde, Disetronic (Burgdorf, Switzerland, www.disetronic.com; Bioject, Portland, Oregon (www.bioject.com); National Medical Products, Weston Medical (Peterborough, UK, www.weston-medical.com), Medi-Ject Corp (Minneapolis, MN, www.mediject.com) ve benzeri uygun cihazlar bulunur. Çift viyal sistemi içeren taninmis cihazlar arasinda, HumatroPen® gibi yeniden olusturulmus solüsyonun dagitimi için bir kartusta liyofilize bir ilaci yeniden olusturmak üzere kalem-enjektör sistemleri yer alir. Diger cihazlarin örnekleri arasinda, önceden doldurulmus siringalar, otomatik enjektörler, ignesiz enjektörler ve ignesiz IV infüzyon setleri bulunur. Halihazirda istemi yapilan ürünler arasinda ambalaj malzemesi bulunmaktadir. Ambalaj malzemesi, düzenleyici kurumlarin gerektirdigi bilgilere ek olarak, ürünün kullanilabilecegi kosullari da saglar. Bu bulusun ambalaj malzemesi, hastaya, bir çözelti olusturmak ve iki viyal, islak/kuru ürün için 2-24 saat veya daha fazla bir süre boyunca çözeltiyi kullanmak üzere sulu seyreltici içinde en az bir anti-IL-6 antikorunu yeniden olusturmak için talimatlar saglar. Tek viyalli, solüsyon ürününe yönelik olarak etiket, bu tür solüsyonun, 2-24 saat veya daha fazla. olan bir periyot boyunca kullanilabilecegini gösterir. Halihazirda istemlerde belirtilen ürünler, insanin farmasötik ürün kullanimina yönelik olarak yararlidir. Mevcut bulusun formülasyonlari, en az bir anti-IL-6 antikorunun ve seçilen bir tamponun, tercihen salini veya seçilen bir tuzu içeren bir fosfatin karistirilmasini içeren bir proses ile hazirlanabilir. En az bir anti-IL-6 antikorun ve tamponun bir sulu seyrelticide karistirilmasi, klasik çözünme ve karistirma prosedürleri kullanilarak yürütülür. Uygun bir seyrelticiyi hazirlamak üzere örnegin su veya tampondaki en az bir antikorun ölçülen bir miktari, istenen konsantrasyonlarda proteini ve tamponu saglamaya yetecek miktarlarda kombine edilir. Bu prosesin varyasyonlari, teknikte uzman bir kisi tarafindan taninir. Örnegin bilesenlerin eklendigi sira, ek katki maddelerinin kullanilip kullanilmadigi, formülasyonunun hazirlandigi sicaklik ve pH degerinin tümü, konsantrasyona ve kullanilan uygulamanin araçlarina yönelik olarak optimize edilebilen faktörlerdir. Istemlerde belirtilen stabil veya korunmus formülasyonlar, açik solüsyonlar olarak veya bir sulu seyrelticide bir koruyucuyu veya tamponu ve eksipiyanlari içeren ikinci bir Viyal ile yeniden olusturulan, liyofilize edilen en az bir anti-IL-6 antikorunun bir viyalini içeren ikili viyaller olarak hastalara saglanabilir. Tek solüsyonlu bir Viyal veya yeniden olusturmayi gerektiren ikili Viyal, birçok kez yeniden kullanilabilir ve hasta tedavisinin tek veya çoklu döngüleri için yeterlidir ve böylece halihazirda mevcut olandan daha uygun bir tedavi rejimini saglar. Anti-IL-6 antikorunu stabilize etmek için diger formülasyonlar veya yöntemler, antikoru içeren liyofilize tozun temiz bir çözeltisinden baska bir sonuç verebilir. Berrak olmayan çözeltiler arasinda, parçacikli süspansiyonlari içeren formülasyonlar bulunur, bahse konu parçaciklar degisken boyutta bir yapida anti-IL-6 antikoru içeren bir bilesim olup, bir mikro kürecik, mikro parçacik, nanoparçacik, nanosfer veya lipozom gibi çesitli sekillerde bilinir. Bir aktif ajan içeren nispeten homojen, esas olarak küresel, parçacikli formülasyonlar, aktif madde ile bir polimer ve sulu olmayan bir faz içeren sulu bir fazin temas ettirilmesi, ardindan ABD 4,589,330'da ögretildigi gibi sulu fazdan parçaciklarin birlesmesine neden olmak amaciyla susuz fazin buharlastirilmasiyla olusturulabilir. Gözenekli mikropartiküller, sürekli bir çözücü içinde dagitilmis bir polimer ve aktif madde içeren bir birinci fazin kullanilmasi ve ABD 4,8l8,542'de ögretildigi gibi çözücünün donma-kurutma veya seyreltme-ekstraksiyon-çökeltme ile süspansiyondan çikarilmasiyla hazirlanabilir. Bu tür preparatlara yönelik olarak tercih edilen polimerler, jelatin agari, nisasta, arabinogalaktan, albümin, kolajen, poliglikolik asit, poliaktik asit, glikolid-L(-) laktit poli(epsilon-kaprolakton, poli(epsilon- kaprolakton-CO-laktik asit), poli{epsilon- kaprolakton-CO-glikolik asit), poli(B- hidroksi bütirik asit), polietilen oksit, polietilen, poli(alkil-2-siyanoakrilat), poli(hidroksietil metakrilat), poliamidler, poli(amino asitler), poli(2-hidroksietil DL- aspartamid), poli(ester üre), poli(L-fenilalanin/etilen glikol/l,6- diizosiyanatohekzan) ve poli(metil metakrilat)tan olusan gruptan seçilen dogal veya sentetik kopolimerler veya polimerlerdir. Özellikle tercih edilen polimerler, poliglikolik asit, poliaktik asit, glikolid- L(-) laktit poli(epsilon-kaprolakton, poli(epsilon-kaprolakton- CO-laktik asit) ve poli(epsilon-kaprolakton-CO- glikolik asit gibi polyesterlerdir. Polimerin ve/veya aktifin çözünmesine yönelik olarak yararli olan solventler asagidakileri içerir: su, hekzafloroizopropanol, metilenklorür, tetrahidrofuran, hekzan, benzen veya hekzafloroaseton seskuihidrat. Ikinci bir faza sahip fazi içeren aktif dagitilmasi prosesi, damla olusumunu etkilemek üzere söz konusu birinci faza bir nozüldeki bir açiklik boyunca baski yapan basinci içerebilir. Kuru toz formülasyonlari, sulu veya sulu olmayan solventi uzaklastirmak üzere püskürtmeli kurutma yoluyla veya bir veya daha fazla adimi takiben bir kristalin bilesiminin buharlastirilmasi yoluyla veya çökeltilmesi yoluyla solvent ekstraksiyonu gibi liyofilizasyonun disindaki proseslerden kaynaklanabilir. Püskürtmeli kurutulmus bir antikor preparatinin hazirlanmasi, U.S. 6,019,968'de ögretilir. Antikor-bazli kuru toz bilesimleri, solunabilir bir kuru tozu saglamak üzere olan kosullar altinda bir solventte püskürtmeli kurutma solüsyonlari veya antikorlarin sulu karisimlari ve istege bagli olarak eksipiyanlar ile üretilebilir. Solventler, kolay bir sekilde kurutulabilen su ve etanol gibi polar bilesikleri içerebilir. Antikor stabilitesi, bir nitrojen örtüsünün altindaki gibi olmak üzere oksijen yoklugunda püskürtmeli kurutma prosedürleri yerine getirilerek veya kurutucu gaz olarak nitrojen kullanilarak pekistirilebilir. Diger bir nispeten kuru formülasyon, WO 9916419'da ögretilen sekilde tipik olarak bir hidrofloroalkan itici gazini içeren bir süspansiyon ortaminda dagitilan delikli mikro yapilarin birçogunun bir dagilimidir. Stabilize edilmis dagilimlar, bir ölçülü inhalasyon aleti kullanilarak bir hastanin akcigerine uygulanabilir. Püskürtülerek kurutulmus bir ilacin ticari üretiminde yararli olan ekipman, Buchi Ltd. veya Niro Corp. tarafindan üretilir. Burada açiklanan stabil veya korunmus formülasyonlar veya solüsyonlardaki en az bir anti-IL-6 antikoru, SC veya IM enjeksiyonunu içeren çesitli dagitim. yöntemleri araciligiyla mevcut bulus ile uyumlu olarak bir hastaya uygulanabilir; teknikte çok iyi bilindigi üzere, transdermal, pulmoner, transmukozal, implant, ozmotik pompa, kartus, mikro pompa veya teknikte uzman kisiler tarafindan kabul gören diger yollar. Terapötik Uygulamalar Burada açiklanan, teknikte bilinen veya burada açiklanan sekilde, mevcut bulusun en az bir IL-6 antikoru kullanilarak, örnegin hücre, doku, organ, hayvan veya hastaya IL-6 antikorunun terapötik olarak etkili bir miktari uygulanarak veya bu miktar bunlar ile temas ettirilerek bir hücre, doku, organ, hayvan veya hastadaki en az bir IL-6 baglantili hastaliginin modüle edilmesine veya tedavi edilmesine yönelik bir yöntemdir. Ayrica burada açiklanan, bunlarla sinirli olmaksizin, obezitenin, immün baglantili hastaligin, bir kardiyovasküler hastaligin, bir enfeksiyöz hastaligin, bir habis hastaligin veya bir nörolojik hastaligin en az birini içeren, bir hücre, doku, organ, hayvan veya hastadaki en az bir IL-6 baglantili hastaligin. modüle edilmesine veya tedavi edilmesine yönelik bir yöntemdir. Ayrica burada tarif edilen, bunlarla sinirli olmaksizin, romatoid artrit, juvenil romatoid artrit, sistemik baslangiçli juvenil romatoid artrit, psoriatik artrit, ankilozan spondilit, gastrik ülser, seronegatif artropatiler, osteoartrit, osteoliz, ortopedik implantlarin aseptik gevsemesi, inflamatuar bagirsak hastaligi, ülseratif kolit, sistemik lupus eritematozus, kütanöz lupus eritematozus, lupus nefriti, antifosfolipid sendromu, iridosiklit/üveit/optik nörit, idiyopatik pulmoner fibrozis, sistemik vaskülit/ wegener granülomatözü, sarkodoz, orsit/vazektomi geri çevirme prosedürleri, alerjik/atopik hastaliklar, astim, alerjik rinit, egzama, alerjik kontakt dermatit, alerjik konjonktivit, hipersensitivite pnömonisi, transplantlar, organ transplant reddi, graft-versus-host hastaligi, sistemik inflamatuar yanit sendromu, sepsis sendromu, gram pozitif sepsis, gram negatif sepsis, kültür negatif sepsis, fungal sepsis, nötropenik ates, ürosepsis, meningokoksemi, travma/hemoraji, yaniklar, Iyonlastirici radyasyona maruziyet, akut pankreatit, yetiskinde solunum güçlügü sendromu, romatoid artrit, alkole bagli hepatit, kronik inflamatuar patolojiler, sarkoidoz, Crohn patolojisi, orak hücreli anemi, diyabet, nefroz, atopik hastaliklar, hipersensitivite reaksiyonlari, alerjik rinit, saman nezlesi, perennial rinit, konjonktivit, endometriyoz, astim, ürtiker, sistemik anaflaksis, dermatit, pernisiyöz anemi, hemolitik hastalik, trombositopeni, herhangi bir organin veya dokunun greft reddi, böbrek transplant reddi, kalp transplant reddi, karaciger transplant reddi, pankreas transplant reddi, akciger transplant reddi, kemik iligi transplant (BMT) reddi, skin allogreft reddi, kikirdak transplant reddi, kemik greft reddi, ince bagirsak transplant reddi, fötal timüs implant reddi, paratiroid transplant reddi, herhangi bir organin veya dokunun Ksenogreft reddi, allogreft reddi, anti-reseptör hipersensitivite reaksiyonlari, Graves hastaligi, Raynaud hastaligi, tip B insüline dirençli diyabetler, astim, miyastenya gravis, antikor-aracili sitotoksisite, tip III hipersensitivite reaksiyonlari, POEMS sendromu (polinöropati, organomegali, endokrinopati, monoklonal gamopati ve deri degisimleri sendromu), polinöropati, organomegali, endokrinopati, monoklonal gamopati, deri degisimleri sendromu, antifosfolipid sendromu, pemfigus, skleroderma, karisik bag doku hastaligi, idiyopatik Addison hastaligi, diyabet hastaligi, kronik aktif hepatit, primer biliyer siroz, vitiligo, vaskülit, MI sonrasi kardiyotomi sendromu tip IV hipersensitivite, kontakt dermatit, hipersensitivite pnömonit, allogreft reddi, hücre içi organizmalar nedeniyle granülomlar, ilaç duyarliligi, metabolik/idiyopatik, VVilson hastaligi, hemakromatoz, alfa-l - antitripsin eksikligi, diyabetik retinopati, hashimoto's tiroidi, osteoporoz, hipotalamuz-hipofiz-böbrek üstü bezi ekseninin degerlendirilmesi, primer biliyer siroz, tiroidit, ensefalomiyelit, kaseksi, sistik fibrozis, neonatal kronik akciger hastaligi, kronik obstrüktif pulmoner hastaligi (COPD), ailevi hematofagositic lenfohistiositoz, dermatolojik vakalar, psöriyazis, saç kiran, nefrotik sendrom, nefrit, glomerüler nefrit, akut renal yetmezlik, hemodiyaliz, üremi, toksisite, preeklampsi, okt3 terapisi, anti-cd3 terapisi, sitokin terapisi, kemoterapi, radyasyon terapisi (örnegin, bunlarla sinirli olmaksizin, asteni, anemi, kaseksi ve benzerini içerir), kronik salisilat intoksikasyonu ve benzerini içeren, bir hücre, doku, organ, hayvan veya hastadaki en az bir IL-6 baglantili immün baglantili hastaligin modüle edilmesine veya tedavi edilmesine yönelik bir yöntemdir. Bakiniz, örnegin Merck Manual, 12.-17. 1992, 1999), Pharmacotherapy Handbook, VVells V.d. baskilar, Ikinci Baski, Appleton and Lange, Stamford, Conn. (1998, 2000). Ayrica burada tarif edilen, bunlarla sinirli olmaksizin, kardiyak sok sendromu, miyokardiyal enfarktüsü, konjestif kalp yetmezligi, inme, iskemik inme, hemoraji, akut koroner sendromu, arteriyoskleroz, ateroskleroz, restenoz, diyabetik ateriosklerotik hastalik, hipertansiyon, arteriyel hipertansiyon, renovasküler hipertansiyon, senkop, sok, kardiyovasküler sistemin sifilisi, kalp yetmezligi, cor pulmonale, primer pulmoner hipertansiyon, kardiyak aritmi, atriyal ektopik atimlar, atriyal flatter, atriyal fibrilasyon (sürekli veya paroksismal), post perfüzyon sendromu, kardiyopulmoner bypass enflamasyon yaniti, kaotik veya multifokal atriyal tasikardi, düzenli dar QRS tasikardi, spesifik aritmi ventriküler fibrilasyon, His demeti aritmisi, atriyoventriküler blok, demet dali blogu, miyokardiyal iskemik bozukluklar, koroner arter hastaligi, angina pektoris, miyokardiyal infarksiyon, kardiyomiyopati, açilmis konjestif kardiyomiyopati, kisitlayici kardiyomiyopati, valvüler kalp hastaliklari, endokardit, perikardiyal hastalik, kardiyak tümörler, aortik ve periferik anevrizma, aortik diseksiyon, aort enflamasyonu, karin aortunun ve bunun dallarinin tikanikligi, periferik vasküler rahatsizliklar, arter tikanikligi rahatsizliklari, periferik aterosklerotik hastalik, tromboanjit obliterans, fonksiyonel periferik arteriyel rahatsizliklar, Raynaud fenomeni ve hastaligi, akrosiyanoz, eritromelalji venöz hastaliklar venöz tromboz, varisli damarlar, arteriyovenöz fistüller, limfederma, lipedema, kararsiz angina, reperfüzyonu yaralanmasi, pompa sonrasi sendromu, iskemi- reperfüzyon yaralanmasi ve benzerlerinin en az birini içeren, bir hücre, doku, organ, hayvan veya hastadaki en az bir kardiyovasküler hastaliginin modüle edilmesine veya tedavi edilmesine yönelik bir yöntemdir. Bu tür bir yöntem, istege bagli olarak, en az bir anti-IL-6 antikorunu içeren bir bilesimin veya farmasötik bilesimin etkili bir miktarinin, bu türdeki modülasyona, tedaviye veya terapiye ihtiyaci olan bir hücreye, dokuya, organa, hayvana veya hastaya uygulanmasini içerebilir. Ayrica burada tarif edilen, bunlarla sinirli olmaksizin; akut veya kronik bakteriyel enfeksiyon, bakteriyel, viral ve fungal enfeksiyonlari içeren akut ve kronik parazitik veya enfeksiyöz prosesler, HIV` enfeksiyonu/HIV nöropatisi, menenjit, hepatit (örnegin, A, B veya C veya benzeri), septik artrit, peritonit, pnömoni, epiglotit, e. coli 0157:h7, hemolitik üremik sendrom/trombolitik trombositopenik purpura, sitma, dengue hemorajik atesi, laysmanyaz, cüzzam, toksik sok sendromu, streptokoksik miyozit, gazli kangren, miyobakteriyum tüberküloz, miyobakteriyum avium intracellulare, pnömokistik carinii pnömoni, pelvik enflamatuVar hastalik, orsit/epididimit, lejyonella, laym hastaligi, influenza a, epstein-barr virüsü, viral-baglantili hemafagositik sendrom, viral ansefalit/aseptik menenji ve benzerlerinin en az birini içeren bir hücre, doku, organ, hayvan veya hastadaki en az bir IL-6 baglantili enfeksiyöz hastaligin modüle edilmesine veya tedavi edilmesine yönelik bir yöntemdir. Ayrica burada tarif edilen, bunlarla sinirli olmaksizin: lösemi, akut lösemi, akut lenfoblastik lösemi (ALL), akut lenfositik lösemi, B-hücresi, T-hücresi veya FAB ALL, akut miyeloid lösemi (AML), akut miyelojenöz lösemi, kronik miyelositik lösemi (CML), kronik lenfositik lösemi (CLL), tüylü hücreli lösemi, miyelodisplastik sendromu (MDS), bir lenfoma, Hodgkin hastaligi, bir habis lenfoma, hodgkin olmayan lenfoma, Burkitt lenfoma, multipl miyelonu Kaposi sarkomu, kolorektal karsinom, pankreatik karsinom, nazofarinjeal karsinom, habis histiyositoz, paraneoplastik sendrom/habis, kati tümörlerin hiperkalsemisi, mesane kanseri, meme kanseri, kolorektal kanser, endometriyal kanser, bas kanseri, boyun kanseri, Herediter polip disi kanser, Hodgkin lenfoma, karaciger kanseri, akciger kanseri, küçük hücreli olmayan akciger kanseri, yumurtalik kanseri, pankreas kanseri, prostat kanseri, böbrek hücreli karsinom, testis kanseri, adenokarsinomlar, sarkomlar, habis melanom, hemanjiyom, metastatik hastalik, kanser baglantili kemik rezorbsiyonu, kanser baglantili kemik agrisi ve benzerinin en az birini içeren, bir hücre, doku, organ, hayvan veya hastadaki en az bir IL-6 baglantili nörolojik hastaligin modüle edilmesine veya tedavi edilmesine yönelik bir yöntemdir. Ayrica burada tarif edilen, bunlarla sinirli olmaksizin: nörodejeneratif hastaliklar, multipl skleroz, migren bas agrisi, AIDS bunama kompleksi, demiyelinizan hastaliklar, örnegin multipl skleroz ve akut transvers miyelit; ekstrapiramidal ve serebellar rahatsizliklar, örnegin kortikospinal sistemin lejyonlari; bazal gangliya rahatsizliklari; hiperkinetik hareket rahatsizliklari, örnegin Huntington hastaligi ve senil kore; CNS dopamin reseptörlerini bloke eden ilaçlar tarafindan ind'üklenenler gibi ilaca bagli hareket rahatsizliklari; hipokinetik hareket rahatsizliklari, örnegin Parkinson hastaligi; Progresif supra- nükleo Palsi; beyincigin yapisal lezyonlari; spinoserebellar dejenerasyonlar, örnegin omurga ataksisi, Friedreich ataksisi, serebellar kortikal dejenerasyonlar, multipl sisteni dejenerasyonlari (Mencel, Dejerine-Thomas, Shi-Drager ve Machado-Joseph); sistemik rahatsizliklar (Refsum hastaligi, abetalipoprotemi, ataksi, telanjiyektazi ve mitokondriyal multi-sistem rahatsizligi); demiyelinizan çekirdek rahatsizliklari, örnegin multipl skleroz, akut transvers miyelit; ve motor biriminin nörojenik m'üsküler atrofileri (amiyotrofik lateral skleroz, infantil spinal m'üsküler atrofi ve j'üvenil spinal müsk'üler atrofi gibi ön boynuz hücresi dejenerasyonu) gibi rahatsizliklar; Alzheimer hastaligi; orta yaslarda Down Sendromu; Lewy cisimli demans hastaligi; Lewy cismi tipi Senil Bunamasi; VVemicke-Korsakoff sendromu; kronik alkolizm; Creutzfeldt-Jakob hastaligi; Subakut sklerozlu panensefalit, Hallerrorden-Spatz hastaligi; pugilistik bunama; nörotravmatik yaralanma (örnegin, spinal kord yaralanmasi, beyin yaralanmasi, beyin sarsintisi, tekrarlayici betin sarsintisi); agri; inflamatuar agri; otizm; depresyon; inme; bilissel rahatsizliklar; epilepsi; ve benzerinin en az birini içeren bir hücre, doku, organ, hayvan veya hastadaki en az bir IL-6 baglantili nörolojik hastaligin modüle edilmesine veya tedavi edilmesine yönelik bir yöntemdir. Bu tür bir yöntem, istege bagli olarak, en az bir TNF antikorunu veya spesifiklestirilmis kismi veya varyanti içeren bir bilesimin veya farmasötik bilesimin etkili bir miktarinin, bu türdeki modülasyona, tedaviye veya terapiye ihtiyaci olan bir hücreye, dokuya, organa, hayvana veya hastaya uygulanmasini içerebilir. Bakiniz, örnegin, Merck Manual, l6'inci Baski, Merck Ayrica burada açiklanan, bunlarla sinirli olmaksizin: periodontal ameliyati içeren oral ameliyat ile baglantili vücut yaralanmasi veya bir travma, dis çekim(ler)i, endodontik tedavi, dis implantlarinin yerlestirilmesi, dis protezlerinin uygulanmasi ve kullaniminin en az birini içeren, bir hücre, doku, organ, hayvan veya hastadaki en az bir IL-6 baglantili yaranin, travmanin veya doku yaralanmasinin veya baglantili kronik vakanin modüle edilmesine veya tedavi edilmesine yönelik bir yöntemdir; veya burada yara, aseptik yaralar, çürümüs yaralar, kesilmis yaralar, yirtilmis yaralar, nüfuz etmeyen yaralar, açik yaralar, nüfuz eden yaralar, delici yaralar, delik açici yaralar, septik yaralar, infarksiyonlar ve subkütanöz yaralardan olusan gruptan seçilir; veya buraya yara, iskemik ülserler, basi yaralari, fistüller, ciddi isiriklar, termal yaniklar ve donör alanindaki yaralardan olusan gruptan seçilir; veya burada yara, bir aftöz yara, bir travmatik yara veya herpes baglantili bir Yaralar ve/veya ülserler normalde, deriden çikinti yapan sekilde veya bir mukozal yüzeyin üzerinde veya bir organdaki ("inme") bir infarksiyonun bir sonucu olarak görülür. Bir yara, bir yumusak doku kusurunun veya bir lezyonun veya bunun altinda yatan bir durumun. bir sonucu olabilir. Bu baglamda, "cilt" terimi, bir insanda dahil olmak üzere bir hayvanin vücudunun en dis yüzeyine iliskindir ve saglam veya neredeyse saglam bir cilt ve ayrica yarali bir cilt yüzeyini de kapsar. "Mukoza" terimi, bir insan gibi bir hayvanin hasar görmemis veya hasar görmüs mukozasi ile ilgilidir ve bu, oral, bukal, aural, nazal, akciger, göz, gastrointestinal, vajinal veya rektal mukoza olabilir. Mevcut baglamda "yara" terimi, doku yapilarinin normal bütünlügünün bozulmasi ile bir vücut yaralanmasini belirtir. Terimin ayni zamanda, "yara", "lezyon", "nekroz" ve "ülser" terimlerini de kapsamasi hedefleniru Normalde "agri" terimi, deri veya muköz membranlarinin neredeyse her lezyonuna yönelik popüler bir terimdir ve "ülser" terimi, nekrotik dokunun pul pul olmasi yoluyla üretilen, bir organin veya dokunun yüzeyinin lokal kusuru veya kazilmasidir. Lezyon genel olarak, herhangi bir doku kusuru ile ilgilidir. Nekroz, enfeksiyon, yaralanma, enflamasyon veya enfarksiyonlardan kaynaklanan ölü doku ile Mevcut baglamda kullanilan "yara" terimi, herhangi bir yarayi (yaralarin bir siniflandirmasi için asagiya bakiniz) ve herhangi bir iyilesmenin baslamasindan önceki veya hatta. bir cerrahi insizyon gibi spesifik bir yaranin olusmasindan (profilaktik tedavi) önceki evreyi içeren iyilesme prosesindeki herhangi bir özel evreyi belirtir. Engellenebilen ve/veya tedavi edilebilen yaralarin örnekleri, örnegin aseptik yaralar, çürümüs yaralar, kesilmis yaralar, yirtilmis yaralar, nüfuz etmeyen yaralar (diger bir deyisle derinin bozulmadigi fakat altta yatan yapilarin yaralandigi yaralar), açik yaralar, nüfuz eden yaralar, delici yaralar, delik açici yaralar, septik yaralar, subkütanöz yaralardan ve benzerleridir. Yaralarin örnekleri, yatak yaralari, aftöz ülserler, krom yaralari, uçuklar, basi yaralari ve benzerleridir. Ülser örnekleri arasinda, örnegin, bir peptik ülser, duodenal ülser, gastrik ülser, gutlu ülser, diabetik ülser, hipertansif iskemik ülser, stasis ülser, ulcus cruris (venöz ülser), sublingual ülser, submukoz ülser, semptomatik ülser, trofik ülser, tropikal ülser ve örnegin, gonorenin neden oldugu (üretrit, endoservisit ve proktit dahil olmak üzere) veneral ülser bulunur. Basarili bir sekilde tedavi edilebilen yaralar veya yanmalar ile baglantili vakalar, yaniklar, sarbon, tetanos, gazli kangren, kizil, erizipel, saç kiran, foilkülit, bulasici impetigo veya bülloz impetigo ve benzerleridir. Genellikle "yara" ile "ülser" ve "yara" ile vardir ve ayrica terimler genellikle rastgele kullanilir. Bu nedenle yukarida bahsedildigi üzere mevcut baglamda "yara" terimi, "ülser", "lezyon", "yanma" ve "enfarksiyon" terimlerini de kapsar ve terimler, aksi belirtilmedikçe ayrim gözetmeksizin kullanilir. Tedavi edilecek olan yaralarin türleri ayrica (i) örnegin cerrahi, travmatik, enfeksiyöz, iskemik, termal, kimyasal ve büllöz yaralar gibi genel yaralari; (ii) örnegin dis çekiminden sonraki yaralar, özellikle kistlerin ve apselerin tedavisi ile baglantili olan endodontik yaralar, ülserler ve bakteriyel, viral veya oto immünolojik kökenli lezyonlar, spesifik örneklerinin herpes ülserleri, stomatit aftöz, akur nekrotizan ülseratif gingivit ve agiz yanmasi sendromu olan mekanik, kimyasal, termal, enfeksiyöz ve likenoid yaralar gibi oral bosluga spesifik yaralari; ve (iii) örnegin neoplazma, yaniklar (örnegin kimyasal, termal), lezyonlar (bakteriyel, viral, otoimmünolojik), isiriklar ve cerrahi insizyonlar gibi deri üzerindeki yaralari içerir. Yaralarin siniflandirilmasinin diger bir` yolu, (i) cerrahi insizyonlar, küçük siyriklar ve küçük isiriklardan dolayi küçük doku kaybi gibi veya (ii) önemli doku kaybi gididir. Ikinci grup, iskemik ülserler, basi yaralari, fistüllere, laserasyonlar, ciddi isiriklar, termal yaniklar ve donör alanindaki yaralar (yumusak ve sert dokularda) ve infarksiyonlari içerir. Önemli olan diger yaralar, iskemik ülserler, basi yaralari, fistüllere, ciddi isiriklar, termal yaniklar ve donör alanindaki yaralardir. Iskemik ülserler ve basi yaralari, normalde sadece çok yavas bir sekilde iyilesen yaralardir ve özellikle bu tür durumlarda gelistirilmis ve daha hizli bir iyilesme prosesi, elbette hasta için oldukça önemlidir. Ayrica, bu tür yaralardan muzdarip hastalarin tedavisindeki maliyetler, iyilesmenin gelistirilmesi ve daha hizli bir sekilde olusmasi durumunda önemli derecede azaltilir. Donör alanindaki yaralar, örnegin transplantasyon ile baglantili olarak sert dokunun vücudun bir parçasindan vücudun diger bir parçasina çikarilmasi ile baglantili olarak meydana gelen yaralardiru Bu› tür ameliyatlardan kaynaklanan› yaralar, oldukça agrilidir ve gelistirilmis bir iyilesme bu nedenle çok önemlidir. "Deri" terimi, bu durumlarda deri yüzeyinin az ya da çok yaralanmis oldugu derinin epidermal katmanini ve ayrica derinin dermal katmanini kapsayan çok genis bir anlamda kullanilir. Stratum korneumdan ayri olarak derinin epidermal katmani, distaki (epitelyal) katmandir ve derinin daha derindeki bag doku katmanina dermis denir. Ayrica burada açiklanan, bunlarla sinirli olmaksizin immün baglantili hastalik, kardiyovasküler hastalik, enfeksiyöz, habis ve/veya nörolojik hastaligin en az birini içeren, bir hücre, doku, organ, hayvan veya hastada, IL-6 baglantili olarak yukarida listelenen diger hastaliklarin arasinda osteoartrit, sistemik lupus eritematozus, kütanöz lupus eritematozus, lupus nefrit, tip II diyabet hastaligi ve kronik obstrüktif pulmoner rahatsizliginin modüle edilmesine veya tedavi edilmesine yönelik bir yöntemdir. Bu tür bir yöntem, istege bagli olarak, en az bir anti-IL-6 antikorunu içeren bir bilesimin veya farmasötik bilesimin etkili bir miktarinin, bu türdeki modülasyona, tedaviye veya terapiye ihtiyaci olan bir hücreye, dokuya, organa, hayvana veya hastaya uygulanmasini içerebilir. Burada açiklanan herhangi bir yöntem, en az bir anti-IL-6 antikorunu içeren bir bilesimin veya farmasötik bilesimin etkili bir miktarinin, bu türdeki modülasyona, tedaviye veya terapiye ihtiyaci olan bir hücreye, dokuya, organa, hayvana veya hastaya uygulanmasini içerebilir. Bu tür bir yöntem, istege bagli olarak ayrica, bu tür hastaliklarin veya rahatsizliklarin tedavi edilmesine yönelik olarak birlikte uygulamayi veya kombinasyon terapisini içerebilir, burada söz konusu en az bir anti-IL-6 antikorunun, spesifiklestirilmis kisminin veya varyantinin uygulanmasi ayrica, en az bir TNF antagonisti (örnegin bunlarla sinirli olmaksizin bir TNF kimyasal veya protein antagonisti, TNF monoklonal veya poliklonal antikoru veya parçasi, çözünebilir bir TNF reseptörü (örnegin p55, p70 veya p85) veya parçasi, füzyon polipeptitleri veya küçük moleküllü bir TNF reseptörü, örnegin TNF baglama proteini I veya II (TBP-l veya TBP-II), nerelimonmab, infliksimab, etanersept (Enbrelm), adalimulab (Humiram), CDP-57l, CDP-870, afelimomab, lenersept ve benzerleri), bir antiromatizmal (örnegin, metotreksat, auranofin, orotiyoglukoz, azatiyoprin, altin sodyum tiyomalat, hidroksiklorokuin sülfat, leflunomid, sülfasalzin), bir kas gevsetici, bir narkotik, steroid olmayan bir anti-enflamatuVar ilaç (NSAID), bir analjezik, bir anestetik, bir yatistirici, bir lokal anestetik, bir nöromüsküler bloker, bir antimikrobiyal (örnegin, aminoglikosid, bir antifungal, bir antiparazitik, bir antiviral, bir karbapenem, sefalosporin, bir florokuinolon, bir makrolid, bir penisilin, bir sülfonamid, bir terasiklin, diger bir antimikrobiyal), bir antipsöriyatik, bir kortikosteroid, bir anabolik steroid, diyabet baglantili bir ajan, bir mineral, bir besin, bir tiroid ajani, bir Vitamin, kalsiyum baglantili bir hormon, bir antidiyareik, bir antitüssif, bir antiemetik, bir antiülser, bir laksatif, bir antikoagülan, bir eritropoetin (Örnegin, epoetin alfa), bir filgrastim (örnegin, G-CSF, Neupogen), bir sargramostim (GM-GSF, Leukine), bir immünizasyon, bir immünoglobulin, bir immünosupresif (örnegin, basiliksimab, siklosporin, daklizumab), bir büyüme hormonu, bir hormon replasman ilaci, bir östrojen reseptör modülatörü, bir midriyatik, bir sikloplejik, alkillestirici bir ajan, bir antimetabolit, bir mitotik inhibitör, bir radyofarmasötik, bir antidepresan, antimanik ajan, bir antipsikotik, bir anksiyolitik, bir hipnotik, bir sempatomimetik, bir uyarici, donepezil, takrin, bir astim ilaci, bir beta agonisti, bir inhalasyon steroidi, bir lökotrien inhibitörü, bir metilksantin, bir kromolin, bir epinefrin veya analog, dornaz alfa (Pulmozyme), bir sitokin veya bir sitokin antagonistinden seçilen en az birinin, önce es zamanli olarak. ve/veya sonra uygulanmasini içerir. Uygun dozajlar, teknikte çok iyi bilinir. Bakiniz örnegin Wells V.d., baskilar, Pharmacotherapy Handbook, 2. Baski, Appleton and Lange, Stamford, CT (2000); PDR Pharmacopoeia, Tarascon Pocket Pharmacopoeia 2000, Delüks Baski, Tarascon Publishing, Loma Linda, CA (2000); Nursing 2001 Handbook of Drugs, 21. baski, Springhouse Corp., Springhouse, PA, 2001; Health Professional's Drug Guide 2001, baski, Shannon, Wilson, Stang, Prentice-Hall, Inc., Upper Saddle River, NJ. Bilesimler, kombinasyon terapisi, birlikte uygulama ve/veya mevcut bulusun (ayrica mevcut bulusun en az bir antikorunu, özellestirilmis kismi veya 'varyantini da içerir) cihazlarina yönelik olarak uygun olan antagonistler, bunlarla sinirli olmaksizin, anti-TNE' antikorlarini (örnegin, yukarida tanimlandigi üzere en az bir TNF antagonisti), antijen-baglama parçalarini ve TNF'ye spesifik olarak baglanan reseptör moleküllerini; talidomit, tenidap, fosfodiesteraz inhibitörleri (örnegin, pentoksifilin ve rolipram), A2b adenozin reseptör agonistleri ve A2b adenozin reseptör arttiricilari gibi TNF sentezini, TNF salimim veya hedef hücreler üzerindeki etkisini engelleyen ve/veya inhibe eden bilesikleri; mitojen aktive protein (MAP), kinaz inhibitörleri gibi TNF reseptör sinyallesmesini engelleyen ve/veya inhibe eden bilesikleri; metalloproteinaz inhibitörleri gibi membran TNF klevajini bloke eden ve/veya inhibe eden bilesikler; anjiyotensin dönüstürücü enzim (ACE), inhibitörler (örnegin kaptopril) gibi TNF etkisini bloke eden ve/Veya inhibe eden bilesikleri; ve MAP kinaz inhibitörleri gibi TNF üretimini ve/veya sentezini bloke eden ve/Veya inhibe eden bilesikleri içerir. Burada kullanildigi üzere bir "tümör nekroz faktörü antikoru," vitro, in situ ve/Veya tercihen in ViVO TNFd etkisini azaltir, bloke eder, inhibe eder, iptal eder veya buna müdahale eder. Örnegin uygun bir TNF insan antikoru, TNFd'ya baglanabilir ve anti-TNF antikorlarini, antijen-baglama parçalarini ve spesifik olarak TNFd'ya baglanan spesifiklestirilmis mutantlarini veya bölgelerini içerir. Uygun bir TNF antikoru veya parçasi, ayrica TNF RNA, DNA veya protein sentezini, TNF salimini, TNF reseptör sinyallesmesini, membran TNF klevajini, TNF etkisini, TNF üretimini ve/veya sentezini azaltabilir, bloke edebilir, iptal edebilir, müdahale edebilir, engelleyebilir ve/veya inhibe edebilir. Bir TNF antikorunun veya antagonistinin bir örnegi, kimerik antikor cA2'dir. Kullanilabilecek olan monoklonal anti-TNF antikor örnekleri teknikte açiklanmaktadir (bakiniz, örnegin, (yayinlanma: Subat 21, 1991); Rubin vd., EPO Patent Yayin No. 0 No. 0 ; Liang, vd., Biochem. Biophys. .57-62 (1987). TNF Reseptör molekülleri Yararli olan tercih edilen TNF reseptör molekülleri, yüksek afiniteye (bakiniz, örnegin, Feldmann vyd., Uluslararasi Yayin (1990)) sahip TNFd'ya baglanan ve istege bagli olarak düsük immünojenesiteye sahip olanlardir. Özellikle 55 kDa (p55 TNF-R) ve 75 kDa (p75 TNF-R) TNF hücre yüzey reseptörleri yararlidir. Reseptörlerin veya bunlarin fonksiyonel kisimlarinin (bakiniz, hücre disi bölgelerini (ECD) içeren. bu reseptörlerin tepesi kesilmis formlari ayrica yararlidir. ECD'yi içeren TNF reseptörlerinin tepesi kesilmis formlari, 30 kDa ve 40 kDa TNFa inhibitör baglama proteinleri (Engelmann, H. V.d., J. Biol. edilmistir. TNF reseptör multimerik molekülleri ve TNF immünoreseptör füzyon molekülleri ve bunlarin deriveleri ve parçalari veya kisimlari, burada tarif edilen yöntemlerde ve bilesimlerde yararli olan TNF reseptör moleküllerinin ek örnekleridir. TNF reseptör multimerik molekülleri, polietilen glikol (PEG) gibi, bir veya daha fazla polipeptit baglayicisi veya peptit olmayan diger baglayicilar araciligiyla baglanan iki veya daha fazla TNF reseptörünün ECD'sinin tümünü veya fonksiyonel bir kismini içerir. Bu tür bir TNF immünoreseptör füzyon molekülünün bir örnegi, TNF reseptörü/IgG füzyon proteinidir. TNF immunoreseptör füzyon moleküller ve bunlarin üretim yöntemleri teknikte açiklanmaktadir (Lesslauer vd., Eur. J) Immunol. 1995)). Immünoreseptör füzyon moleküllerinin üretilmesine yönelik yöntemler, ayrica Capon V.d., U.S. Patent No. 5,116,964; Capon V.d., U.S. Patent No. 5,225,538; ve Capon V.d., Nature Sitokinler, bilinen herhangi bir sitokini içerir. Bakiniz, örnegin, CopewithCytokines.com. Sitokin antagonistleri, bunlarla sinirli olmaksizin, herhangi bir antikoru, parçayi veya mimetigi, çözünebilir herhangi bir reseptörü, parçayi veya mimetigi, herhangi bir küçük molekül antagonistini veya bunlarin herhangi bir kombinasyonunu içerir. Terapötik Tedaviler Burada tarif edilen herhangi bir yöntem, en az bir anti-IL-6 antikorunu içeren bir bilesimin veya farmasötik bilesimin etkili bir miktarinin, bu türdeki modülasyona, tedaviye veya terapiye ihtiyaci olan bir hücreye, dokuya, organa, hayvana veya hastaya uygulanmasini içeren, bir IL-6 aracili rahatsizligin tedavi edilmesine yönelik bir yöntemi içerebilir. Bu tür bir yöntem, istege bagli olarak ayrica bu tür hastaliklarin veya rahatsizliklarin tedavi edilmesine yönelik olarak birlikte uygulamayi veya kombinasyon terapisini içerebilir, burada söz konusu en az bir anti-IL-6 antikorunun, spesifiklestirilmis kisminin veya varyantinin uygulanmasi ayrica, bir anti- enfektif ilaç, bir kardiyovasküler (CV) sistem ilaci, bir merkezi sinir sistemi (CNS) ilaci, bir otonom sinir sistemi (ANS) ilaci, bir solunum yolu ilaci, bir gastrointestinal (GI) kanal ilaci, bir hormon ilaci, sivi veya elektrolit dengesine yönelik bir ilaç, bir hematolojik ilaç, bir antineoplastik, bir immüno modülasyon ilaci, bir oftalmik, otik veya nazal ilaç, bir topikal ilaç, bir besinsel ilaç veya benzeri, en az bir TNF antagonisti (örnegin, bunlarla sinirli olmaksizin bir TNF antikoru veya parçasi, çözünebilir bir TNF reseptörü veya parçasi, bunlarin füzyon proteinleri veya bir küçük molekül TNF antagonisti), bir antiromatizmal (örnegin, metotreksat, oranofin, orotiyoglukoz, azatiyoprin, etanersept, altin sodyum tiyomalat, hidroksiklorokuin sülfat, leflunomid, sülfasalzin), bir kas gevsetici, bir narkotik, steroid olmayan bir anti-enflamatuvar ilaç (NSAID), an analjezik, an anestetik, bir yatistirici, bir lokal anestetik, bir nöromüsküler bloker, bir antimikrobiyal (örnegin, aminoglikozid, bir antifungal, bir antiparazitik, bir antiviral, bir karbapenem, sefalosporin, bir florokuinolon, bir makrolid, bir penisilin, bir sülfonamid, bir terasiklin, diger bir antimikrobiyal), bir antipsöriyatik, bir kortikosteroid, bir anabolik steroid, diyabet baglantili bir ajan, bir mineral, bir besin, bir tiroid ajani, bir vitamin, kalsiyum. baglantili bir hormon, bir antidiyareik, bir antitüssif, bir antiemetik, bir antiülser, bir laksatif, bir antikoagülan, bir eritropoetin (örnegin, epoetin alfa), bir filgrastim (örnegin, G- CSF, Neupogen), bir sargramostim (GM- CSF, Leukine), bir immünizasyon, bir immünoglobulin, bir immünosupresif (örnegin, basiliksimab, siklosporin, daklizumab), bir büyüme hormonu, bir hormon replasman ilaci, bir östrojen reseptör modülatörü, bir midriyatik, bir sikloplejik, alkillestirici bir ajan, bir antimetabolit, bir mitotik inhibitör, bir radyofarmasötik, bir antidepresan, antimanik ajan, bir antipsikotik, bir anksiyolitik, bir hipnotik, bir sempatomimetik, bir uyarici, donepezil, takrin, bir astim ilaci, bir beta agonisti, bir inhalasyon steroidi, bir lökotrien inhibitörü, bir metilksantin, bir kromolin, bir epinefrin veya analog, dornaz alfa (Pulmozyme), bir sitokin veya bir sitokin antagonistinden seçilen en az birinin önce es zamanli olarak ve/veya sonra uygulanmasini içerir. Bu tür ilaçlar, burada (bakiniz, örnegin, Nursing 2001 Handbook of Drugs, 21. baski, Springhouse Corp., Springhouse, PA, 2001; Health Professional's Drug Guide 2001, baski, Shannon, Wilson, Stang, Prentice-Hall, V.d.,baski, Appleton & Lange, Stamford, CT) sunulanlarin her birine yönelik formualsyonlari, indikasyonlari, dozlamayi ve uygulamayi içermek üzere teknikte çok iyi bilinir. Tipik olarak, patolojik vakalarin tedavisi, ortalama olarak, bilesimde bulunan aktif ajanin spesifik etkisine dayanilarak, doz basina hastanin kilogrami basina en az bir anti-IL-6 antikorunun en az yaklasik 0.01 ila 500 miligraminin arasinda veya tercihen tekli veya çoklu uygulama basina hastanin en az yaklasik 0.1 ila 100 miligram antikor/kilogrami arasinda degisen sekilde toplama sahip en az bir anti-IL-6 antikoru bilesiminin etkili bir miktarinin veya dozajinin uygulanmasindan etkilenir. Alternatif olarak, etkili serum konsantrasyonu, tekli veya çoklu uygulama basina 0,1-5000 ug/ml serum konsantrasyonunu içerebilir. Uygun dozajlar, tip doktorlarinca bilinir ve elbette özel hastalik durumuna, uygulanan bilesimin spesifik etkisine ve tedaviyi alan özel hastaya bagli olacaktir. Bazi örneklerde, istenen terapötik miktari elde etmek üzere, tekrarlanan uygulamanin, diger bir deyisle özel bir izlenen veya ölçülen dozun tekrarlanan ayri uygulamalarinin saglanmasi gerekli olabilir, burada ayri uygulamalar, istenen günlük doz veya etki elde edilene kadar tekrarlanir. Tercih edilen dozlar, istege bagli olarak, yaklasik 0,1-99 ve/Veya 100-500 mg/kg/uygulamayi veya bunun herhangi bir araligini, degerini veya fraksiyonunu veya tekli veya Çoklu uygulama basina yaklasik 0,1 -5000 ug/ml serum konsantrasyonu olan bir serum konsantrasyonunu elde etmek üzere bunun herhangi bir araligini, degerini veya fraksiyonunu içerebilir. Mevcut bulusun anti-lL-6 antikoruna yönelik tercih edilen bir dozaj araligi, hastanin vücut agirliginin yaklasik 1_ mg/kg'sinden, yaklasik 3, yaklasik 6 veya yaklasik 12 mg/kg'sine kadardir. Alternatif olarak uygulanan dozaj, özel ajanin farmakodinamik karakteristikleri ve bunun uygulama yöntemi ve yolu; alicinin yasi, sagligi ve agirligi; semptomlarin dogasi ve kapsami, es zamanli tedavinin türü, tedavinin sikligi ve istenen etki gibi bilinen faktörlere dayali olarak degisiklik gösterebilir. Genellikle aktif içerik maddesinin bir dozaji, vücut agirliginin kilogrami basina yaklasik 0.1 ila 100 miligram olabilir. Uygulama basina veya yavas salimli bir formda kilogram basina normal olarak 0,1 ila 50 've tercihen, 0,1 ila 10 miligram, istenen sonuçlari elde etmek üzere etkilidir. Sinirlayici olmayan bir örnek olarak, insanlarin veya hayvanlarin tedavisi, mevcut bulusun en az bir antikorunun tek seferlik veya periyodik bir dozaji olarak günde, 1-40 günün en az birinde veya alternatif olarak veya ek olarak 1 52 haftanin en az birinde veya alternatif olarak veya ek olarak 1-20 yilin en az birinde veya bunlarin herhangi bir kombinasyonunda, tekli, infüzyon veya tekrarlanan dozlar kullanilarak yaklasik 0.1 ila 100 mg/kg veya bunun herhangi bir araliginda, degerinde veya fraksiyonunda saglanabilir. Iç uygulamaya yönelik olarak uygun olan dozaj formlari (bilesim) genel olarak, birim veya konteyner basina aktif içerik maddesinin yaklasik 0,001 miligrami ila yaklasik 500 miligramini içerir. Farmasötik bilesimlerde aktif içerik maddesi, normal olarak bilesimin toplam agirligina dayanilarak agirlikça yaklasik %0,5- 99,999'luk bir miktarda bulunacaktir. Parenteral uygulamaya yönelik olarak antikor, bir solüsyon, süspansiyon, emülsiyon, partikül, toz veya birlesme halindeki liyofilize toz olarak formüle edilebilir veya farmasötik olarak kabul edilebilir bir parenteral araç ile ayri olarak saglanabilir. Bu tür araçlarin örnekleri, su, salin, Ringer solüsyonu, dekstroz solüsyonu ve yaklasik %1- 10 insan serum albüminidir. Lipozomlar ve sabit yaglar gibi aköz olmayan araçlar da ayrica kullanilabilir. Araç veya liyofilize toz, izotonikligi (örnegin sodyum klorid, mannitol) ve kimyasal stabiliteyi (örnegin tamponlar` ve koruyucular) koruyan katki maddelerini içerebilir. Formülasyon, bilinen veya uygun teknikler ile sterilize edilir. Uygun farmasötik tasiyicilar, bu alandaki standart bir referans metni olan Remington's Pharmaceutical Sciences, A. Osol'un en son baskisinda açiklanir. Alternatif Uygulama Bilinen ve gelistirilen birçok yöntem, mevcut bulusa göre en az bir anti-IL-6 antikorunun farmasötik olarak etkili miktarlarinin uygulanmasina yönelik olarak kullanilabilir. Pulmoner uygulama, asagidaki açiklamada kullanilirken uygulamanin diger yöntemleri, uygun sonuçlar ile kullanilabilir. Mevcut bulusun IL-6 antikorlari, inhalasyon veya burada açiklanan veya teknikte bilinen diger yöntemler ile uygulamaya yönelik olarak uygun olan çesitli araçlarin veya yöntemlerin herhangi biri kullanilarak bir tasiyicida, bir solüsyon, emülsiyon, kolloid veya süspansiyon olarak veya bir kuru toz olarak dagitilabilir. Parenteral Formülasyonlar ve Uygulama Parenteral uygulamaya yönelik formülasyonlar, ortak eksipiyanlar olarak steril su veya salini, polietilen glikol gibi polialkilen glikolleri, bitkisel orijinli yaglari, hidrojenize naftalinleri ve benzerlerini içerebilir. Enjeksiyona yönelik aköz veya yagli süspansiyonlar, bilinen yöntemlere göre uygun bir emülsifiye edici veya nemlendirici ve süspanse edici bir ajan kullanilarak hazirlanabilir. Enjeksiyona yönelik ajanlar, bir solventin içinde aköz solüsyon, enjekte edilebilir steril bir solüsyon veya süspansiyon gibi toksik olmayan, oral olarak uygulanamayan seyreltici bir ajan olabilir. Yararli bir araç veya solvent olarak su, Ringer solüsyonu, izotonik salin ve benzerine izin verilir; siradan bir solvent veya süspanse edici solvent olarak uçucu olmayan steril yag kullanilabilir. Bu amaçlara yönelik olarak, dogal veya sentetik veya yari sentetik sabit yaglari veya yag asitlerini; dogal veya sentetik veya yari sentetik mono- veya di- veya tri-gliseritleri içeren uçucu olmayan yagin ve yag asidinin herhangi bir türü kullanilabilir. Parental uygulama, teknikte bilinir ve bunlarla sinirli olmaksizin, klasik enjeksiyon araçlarini, U.S. Patent No. ,851,198'de açiklandigi üzere gaz basinçli ignesiz bir enjeksiyon cihazini ve U.S. Patent No. 5,839,446'da açiklandigi üzere bir lazer perforatör cihazini içerir. Alternatif Dagitim Ayrica burada tarif edilen, parenteral, subkütanöz, intramüsküler, intravenöz, intraartik'üler, intrabronsiyal, intraabdominal, intrakapsüler, intrakartilajinöz, intrakaviter, intraseliyal, intraserebellar, intraserebroventriküler, intrakolik, intraservikal, intragastrik, intrahepatik, intramiyokardiyal, intraosteal, intrapelvic, intraperikardiyak, intraperitoneal, intraplöral, intraprostatik, intrapulmoner, intrarektal, intrarenal, intraretinal, intraspinal, intrasinoviyal, intraathorakik, intraüterin, intravesikal, intralezyonel, bolus, nal, rektal, bukkal, dil alti, intranazal veya transdermal yollar ile en az bir anti-IL-6 antikorunun uygulanmasidir. En az bir anti-IL-6 antikoru bilesimi, parenteral (subkütanöz, intramüsküler veya intravenöz) veya özellikle sivi solüsyonlar veya süspansiyonlar formundaki diger herhangi bir uygulamaya yönelik olarak kullanilmaya yonelik; bunlarla sinirli olmaksizin kremler ve supozituarlar gibi Özellikle yari kati formlarda, vajinal veya rektal uygulamaya yönelik; bunlarla sinirli olmaksizin tabletler veya kapsüllerin formu formundaki gibi bukal veya dilalti uygulamaya yönelik; veya bunlarla sinirli olmaksizin tozlarin, nazal damlalarin veya aerosollerin veya belli ajanlarin formu gibi intranazal olarak; veya bunlarla sinirli olmaksizin deri yapisini modifiye etmek veya transdermal yamadaki (Junginger` ve digerleri, In "Drug Permeation Enhancement;" Hsieh, D. S., Eds-, sf. 59-90 (Marcel Dekker, Inc. New York 1994) ilaç konsantrasyonunu arttirmak üzere dimetil sülfoksit gibi kimyasal arttiricilar ile veya proteinleri veya peptitleri içeren formülasyonlarin deri üzerinde (WO 98/53847) uygulanmasina veya elektroporasyon gibi geçici tasima yolaklarini olusturmak üzere veya iyontorofez gibi deri üzerinden yüklenmis ilaçlarin mobilitesini arttirmak üzere elektrik alanlarinin uygulanmasina veya sonoforez (U.S. Patent taniyan oksitleyici ajanlar ile bir jel, merhem, losyon, süspansiyon veya yama dagitim sistemleri gibi transdermal olarak hazirlanabilir. Pulmoner/Nazal Uygulama Pulmoner uygulamaya yönelik olarak tercihen en az bir anti-IL-6 antikoru bilesimi, akciger veya sinüslerin alt hava yollarina ulasilmasina yönelik olarak etkili bir partikül boyutunda dagitilir. Bulusa göre en az bir anti-IL-6 antikoru, inhalasyon yoluyla bir terapötik ajanin uygulanmasina yönelik olarak teknikte bilinen çesitli inhalasyon veya nazal cihazin herhangi biri ile dagitilabilir. Bir hastanin sinüs boslugunda veya alveollerinde aerosol haline getirilmis formülasyonlari biriktirebilen bu cihazlar, ölçülü inhalasyon aletini, nebulizörü, kuru toz jeneratörlerini, püskürtücüleri ve benzerlerin içerir. Antikorlarin pulmoner veya nazal uygulamasinin yönlendirilmesine yönelik olarak uygun olan diger cihazlar ayrica teknikte bilinir. Bu türdeki tüm cihazlar, bir aerosol ipinde antikorun dagitilmasina yönelik uygulamaya yönelik olarak uygun olan formülasyonlari kullanabilir. Bu tür aerosoller, solüsyonlardan (hem aköz hem de aköz olmayanlar) veya kati partiküllerden olusabilir. Ventolin® ölçülü inhalasyon aleti gibi ölçülü inhalasyon aletleri, tipik olarak bir itici gazi kullanir ve inspirasyon aktivasyonu gerektirir. Inhale Therapeutics tarafindan pazarlanan TurbuhalerTM (Astra), Rotahaler® (Glaxo), Diskus® (Glaxo), SpirosTM solunum (Dura) Cihazlari ve Spinhaler® toz solunum cihazlari (Fisons) gibi kuru toz solunum cihazlari, bir nefes ile aktivasyonunu kullanir. AERXTM Aradigm, Ultravent® nebulizörü (Mallinckrodt) ve Acom II® nebulizörü (Marquest nebilizörler, solüsyonlardan aerosol üretirken ölçülü inhalasyon aletleri, kuru toz inhalasyon aletleri ve benzerleri küçük Tercihen, en az bir anti-IL-6 antikorunu içeren bir bilesim, bir kuru toz inhalasyon aleti veya bir püskürtücü ile dagitilir. Mevcut bulusun en az bir antikorunun uygulanmasina yönelik bir inhalasyon cihazinin istenen birkaç özelligi vardir. Örnegin inhalasyon cihazi yoluyla dagitim, avantajli bir sekilde güvenilir, yeniden üretilebilir ve kesindir. inhalasyon cihazi istege bagli olarak, iyi solunabilirlige yönelik olarak örnegin yaklasik 10 um'den daha az, tercihen yaklasik 1-5 um olan küçük Bir Sprey olarak IL-6 Antikor Bilesimlerinin Uygulanmasi lL-6 antikor bilesimini içeren bir sprey, en az bir anti-IL- 6 antikorunun bir süspansiyonunun veya solüsyonunun basinç altinda bir nozül boyunca itilmesi ile üretilebilir. Nozül boyutu ve konfigürasyonu, uygulanan basinç ve sivi besleme hizi, istenen sonucu ve partikül boyutunu elde etmek üzere seçilebilir. Bir elektrosprey, örnegin bir kapiler veya nozül beslemesi ile baglantili bir elektrik alani ile üretilebilir. Avantajli olarak, bir püskürtücü tarafindan dagitilan en az bir anti-IL-6 antikoru bilesiminin partikülleri, 10 um'den daha az, tercihen, yaklasik 1 iHn ila yaklasik 5 1Mn ve en çok tercih edildigi üzere yaklasik 2 pm ila yaklasik 3 um'lik bir aralikta olan bir partikül boyutuna sahiptir. Bir püskürtücü ile kullanilmaya yönelik olarak uygun olan en az bir anti-IL-6 antikoru bilesimin formülasyonlari, solüsyonun ml'si ve mg/ml'si basina veya buradaki herhangi bir aralik, deger veya fraksiyon basina en az bir anti-IL-6 antikoru bilesiminin yaklasik 0.1 mg ila yaklasik 100 mg'lik bir konsantrasyonunda bir aköz solüsyonda antikor bilesimini içerir. Formülasyon, bir eksipiyan, bir tampon, bir izotoniklik ajani, bir koruyucu, bir sürfaktan ve tercihen çinko gibi ajanlari içerebilir. Formülasyon ayni zamanda, bir tampon, indirgeyici bir ajan, bir kitle proteini veya bir karbohidrat gibi antikor bilesiminin stabilizasyonuna yönelik bir eksipiyan 1 veya ajani içerebilir. Antikor bilesimlerinin formüle edilmesinde yararli olan kitle proteinleri, albümini, protamini ve benzerini içerir. Antikor bilesimlerinin formüle edilmesinde yararli olan tipik karbohidratlar, sükroz, mannitol, laktoz, trehaloz, glukoz veya benzerlerini içerir. Antikor bilesimi formülasyonu ayni zamanda, bir aerosolün olusturulmasinda solüsyonun atomizasyonunun neden oldugu antikor bilesiminin yüzey-indüklenmis kümelenmesini azaltabilen veya engelleyebilen bir sürfaktani içerebilir. Polioksietilen, yag asidi esterleri ve alkoller ve polioksietilen sorbitol yag asidi esterleri gibi çesitli klasik sürfaktanlar da kullanilabilir. Miktarlar genel olarak, formülasyonunun agirlikça %0.001'i ile 14'ü arasinda degisiklik gösterecektir. Bu bulusun amaçlarina yönelik olarak özellikle tercih edilen sürfaktanlar, polioksietilen sorbitan monooleat, polisorbat 80, polisorbat 20 veya benzerleridir. IL-6 antikorlari veya spesifiklestirilmis kisimlari veya varyantlari gibi bir proteinin formülasyon una yönelik teknikte bilinen ek ajanlar, ayrica formülasyona da dahil edilebilir. Bir Nebulizör ile IL-6 antikor bilesimlerinin uygulanmasi Bulusun antikor bilesimleri, jet nebulizör veya bir ultrasonik nebulizör gibi bir nebulizör ile uygulanabilir. Tipik olarak bir jet nebulizöronde, bir basinçli hava kaynagi, bir açiklik boyunca yüksek hizli bir hava jetini olusturmak üzere kullanilir. Gaz, nozülün ötesinde genisledikçe bir sivi rezervuarina bagli olan kapiler bir tüp araciligiyla antikor bilesiminin bir solüsyonunu çeken düsük basinçli bir bölge olusturulur, kapiler tüpten sivi akintisi, tüpten çiktikça, aerosolü olusturmak üzere stabil olmayan filamentlere ve damlaciklara kesilir. Kilcal borudan gelen sivi akisi, aerosolü olusturan tüpten çikarken kararsiz filamanlar` ve damlaciklar seklinde kesilir. Bir dizi konfigürasyon, akis hizi ve bölme tipi, belli bir jet nebulizöründen istenen performans özelliklerini elde etmek üzere kullanilabilir. Bir ultrasonik nebulizörde, yüksek frekansli elektrik enerjisi, tipik olarak bir piezoelektrik güç çevirici kullanilarak titresimsel, mekanik enerjiyi olusturmak üzere kullanilir. Bu enerji, antikor bilesimini içeren bir aerosol olusturularak, direkt olarak veya bir eslestirme sivisi araciligiyla antikor bilesiminin formülasyonuna iletilir. Avantajli olarak bir nebulizör ile dagitilan antikor bilesiminin partikülleri, yaklasik 10 um'den daha az, tercihen yaklasik 1 um ila yaklasik 5 um'lik ve en çok tercih edildigi üzere de yaklasik 2 um ila yaklasik 3 um'lik bir araliktaki bir partikül boyutuna sahiptir. Jet veya ultrasonik olan bir nebulizör ile kullanilmaya yönelik olarak uygun olan en az bir anti-IL-6 antikorunun formülasyonlari, tipik olarak, solüsyonun ml'si basina en az bir anti-lL-6 antikoru proteininin yaklasik 0.1 mg ila yaklasik 100 mg'lik bir konsantrasyonunu içerir. Formülasyon, bir eksipiyan, bir tampon, bir izotoniklik ajani, bir koruyucu, bir sürfaktan ve tercihen çinko gibi ajanlari içerebilir. Formülasyon ayni zamanda, bir tampon, indirgeyici bir ajan, bir kitle proteini veya bir karbohidrat gibi en az bir anti-IL-6 antikoru bilesiminin stabilizasyonuna yönelik bir eksipiyani veya ajani içerebilir. En az bir anti-IL-6 antikoru bilesimlerinin formüle edilmesinde yararli olan kitle proteinleri, albümini, protamini ve benzerini içerir. En az bir anti-IL-6 antikorunun formüle edilmesinde yararli olan tipik karbohidratlar, sükroz, mannitol, laktoz, trehaloz, glukoz veya benzerlerini içerir. En az bir anti-IL-6 antikoru formülasyonu ayni zamanda, bir aerosolün olusturulmasinda solüsyonun atomizasyonunun neden oldugu en az bir anti-IL-6 antikorunun yüzey-indüklenmis kümelenmesini azaltabilen veya engelleyebilen bir sürfaktani içerebilir. Polioksietilen yag asidi esterleri ve alkoller ve polioksietilen sorbital yag asidi esterleri gibi çesitli klasik sürfaktanlar da kullanilabilir. Miktarlar genel olarak, formülasyonunun agirlikça %0.00l'i ile 4'ü arasinda degisiklik gösterecektir. Bu bulusun amaçlarina yönelik olarak özellikle tercih edilen sürfaktanlar, polioksietilen sorbitan monooleat, polisorbat 80, polisorbat 20 veya benzerleridir. Antikor proteini gibi bir proteinin formülasyonuna yönelik teknikte bilinen ek ajanlar, ayrica formülasyona da dahil edilebilir. Bir Ölçülü Inhalasyon Aleti ile IL-6 antikor bilesimlerinin uygulanmasi Bir ölçülü inhalasyon aletinde (MDI), bir itici gaz, en az bir anti-IL-6 antikoru ve herhangi bir eksipiyan veya diger ek katki maddeleri, sivilastirilmis bir basinçli gazi içeren bir karisim olarak bir teneke kutuda bulunabilir. Dozaj valfinin aktivasyonu, tercihen yaklasik 10 um'den daha az, tercihen yaklasik 1 um ila yaklasik 5 um'lik ve en çok tercih edildigi üzere de yaklasik 2 um ila yaklasik 3 um'lik boyut araliklarindaki partikülleri içeren bir aerosol olarak karisimi serbest birakir. Istenen aerosol partikül boyutu, jet-ögütme, püskürtmeli kurutma, kritik nokta yogunlastirmasini veya benzerini içeren, teknikte uzman kisilerce bilinen çesitli yöntemler ile üretilen antikor bilesiminin bir formülasyonunun kullanilmasi ile elde edilebilir. Tercih edilen ölçülü inhalasyon aletleri, 3M veya Glaxo tarafindan üretilenleri ve bir hidroflorokarbon itici gazini kullananlari içerir. Bir ölçülü inhalasyon cihazi ile kullanilmaya yönelik en az bir anti- ortamda, örnegin, bir sürfaktan yardimiyla bir itici gaz ile süspanse edilen bir süspansiyonun olarak en az bir anti-IL-6 antikorunu içeren çok iyi bölünmüs bir tozu içerecektir. Itici gaz, kloroflorokarbon, bir hidrokloroflorokarbon, bir hidroflorokarbon veya bir hidrokarbon gibi, trikloroflorometan, diklorodiflorometan, diklorotetrafloroetanol ve l,l,l,2- tetrafloroetan, HFA-l34a (hidrofluroalkan-l34a), HFA-227 (hidrofluroalkan-227) ve benzerini içeren, bu amaca yönelik olarak kullanilan herhangi bir klasik materyal olabilir. Tercihen, itici bir hidroflorokarbondur. Sürfaktan, aktif ajani kimyasal degradasyona ve benzerine karsi korumak üzere itici gazdaki bir süspansiyon olarak en az bir anti-IL-6 antikorunu stabilize etmek üzere seçilebilir. Uygun sürfaktanlar, sorbitan trioleat, soya lesitini, oleik asit veya benzerini içerir. Bazi durumlarda solüsyon aerosolleri, etanol gibi solventler kullanilarak tercih edilir. Bir proteinin formülasyonuna yönelik teknikte bilinen ek ajanlar, ayrica formülasyona dahil edilebilir. Teknikte uzman bir kisi, burada tarif edilen yöntemlerin, burada açiklanmayan cihazlar araciligiyla en az bir anti-IL-6 antikoru bilesiminin pulmoner uygulamasi yoluyla elde edilebilecegini kabul edecektir. Oral Formülasyonlar ve Uygulama Oral uygulamaya yönelik formülasyonlar, enzimatik degradasyonu inhibe etmek üzere enzimatik inhibitörlerin (örnegin pankreatik tripsin inhibitörleri, diizopropilflorofosfat (DFF) ve trasilol) birlikte uygulanmasinin yani sira bagirsak duvarlarinin geçirgenligini yapay olarak arttirmak üzere adjuvanlarin (örnegin, polioksietilen oleil eter ve n-hekzadesilpolietilen eter gibi resorsinoller ve iyonik olmayan sürfaktanlar) birlikte uygulamasina da baglidir. Proteinleri ve antikorlari ve oral, bukal, mukozal, nazal, pulmoner, vajinal transmembran veya rektal uygulamaya yönelik olarak hedeflenen en az iki sürfaktanin bir kombinasyonunu içeren hidrofilik ajanlarin dagitimina yönelik formülasyonlar, U.S. 6,309,663'te ögretilir. Oral uygulamaya yönelik kati-tip dozaj formunun aktif kurucu bileseni, sükroz, laktoz, selüloz, mannitol, trehaloz, rafinoz, maltitol, dekstran, nisastalar, agar, arjinatlar, kitinler, kitosanlar, pektinler, kitre, arap zamki, jelatin, kolajen, kazein, albümin, sentetik veya yari sentetik polimer ve gliseridi içeren en az bir katki maddesi ile karistirilabilir. Bu dozaj formlari ayrica, katki maddelerinin diger tip(ler)ini, örnegin inaktif seyreltici ajan, yaglayici, örnegin magnezyum stearat paraben, koruyucu ajan, Örnegin sorbik asit, askorbik asit, alfa-tokoferol, antioksidan, örnegin sistein, parçalayici, baglayici, kivamlastirici, tamponlama ajani, tatlandirici ajan, lezzetlendirici ajan, koku verici ajan ve benzerini içerebilir. Tabletler ve haplar ayrica, enterik-kapli preparatlarda isleme tabi tutulabilir. Oral uygulamaya yönelik sivi preparatlar, medikal kullanima yönelik olarak izin verilebilen emülsiyon, surup, eliksir, süspansiyon ve solüsyon praparatlarini içerir. Preparatlar, söz konusu alanda normal olarak kullanilan inaktif seyreltici ajanlari, örnegin suyu içerebilir. Lipozomlar ayrica, insülin ve heparin (U.S. Patent No. 4,239,754) yönelik ilaç dagitim sistemleri olarak açiklanmistir. Son zamanlarda karisik amino asitlerin (protenoidler) yapay polimerlerini mikro küreleri, farmasötikleri (U.S. Patent No. 4,925,673) dagitmak üzere kullanilmistir. Ayrica, U.S. Pat. No. 5,879,681 ve ,5,871,753'te açiklanan ve biyolojik olarak aktif ajanlari oral olarak dagitmak üzere kullanilan tasiyici bilesikler de teknikte Mukozal Formülasyonlar ve Uygulama Ortaya çikan mikro kapsüllerin uygun boyutundan dolayi mikro kapsüller saglanarak bir veya daha fazla biyouyumlu polimer ve kopolimer eksipiyaninda, tercihen biyolojik olarak parçalanabilen bir polimer veya kopolimerde kapsüllenen bir biyoaktif ajanin oral olarak uygulanmasina yönelik bir formülasyon, aksi taktirde gastrointestinal kanalin içinden geçen ajandan dolayi etkinlik kaybi olmaksizin hayvanin "Peyer plakasi" veya "GALT" olarak bilinen, foliküli lenfatik agregatina ulasan ve bunun tarafindan alinan ajan ile sonuçlanir. Benzer foliküli lenfatik agregati, bronslarda (BALT) ve kalin bagirsakta bulunabilir. Yukarida açiklanan dokulara, genel olarak mukozal olarak baglantili lenforetiküler dokular (MALT) olarak refere edilir. Mukozal yüzeyler araciligiyla absorpsiyona yönelik olarak en az bir anti-IL-6 antikorunun uygulanmasina ait bilesimler ve yöntemler, birçok mikron alti partikülü, bir mukoyapiskan makro olekülü, bir biyoaktif reaktifi ve bir emülsiyon partiküllerinin (U.S. Patent No. ,514,670) mukoadezyonunu saglayarak mukozal yüzeyler boyunca absorpsiyonu ilerleten bir sulu sürekli fazi içeren bir emülsiyonu içerir. Mevcut bulusun emülsiyonlarinin uygulamasina yönelik olarak uygun olan muköz yüzeyleri, korneal, konjunktival, bukal, dil alti, nazal, vajinal, pulmoner, mide, intestinal ve rektal uygulama yollarini içerebilir. Vajinal veya rektal uygulamaya yönelik formülasyonlar, örnegin supozituarlar, eksipiyanlar olarak örnegin polialkileneglikolleri, vazelini, kakao yagini ve benzerlerini içerebilir. Intranazal uygulamaya yönelik formülasyonlar kati olabilir ve eksipiyanlar olarak örnegin laktozu içerebilir veya nazal damlalarin aköz veya yagli solüsyonlari olabilir. Bukal uygulamaya yönelik olarak eksipiyanlar, sekerleri, kalsiyum stearati, magnezyum stearati, prejelatinize nisastayi ve benzerlerini içerir (U.S. Patent No. ,849,695). Transdermal Formülasyonlar ve Uygulama Transdermal uygulamaya yönelik en az bir anti-IL-6 antikoru, bir lipozom veya polimerik nanopartiküller, mikropartikül, mikrokapsül veya mikrosfer (aksi belirtilmedikçe toplu olarak mikropartiküller olarak refere edilir) gibi bir dagitim aracinda kapsüllenir. Poliaktik asit, poliglikolik asit ve kopolimerleri gibi polihidroksi asitler, poliortoesterler, polianhidridler ve polifosfofazenler gibi sentetik polimerler ve kolajen, poliamino asitler, albümin ve diger proteinler, aljinat ve diger polisakkaritler gibi dogal polimerler ve kombinasyonlari dahil olmak üzere birçok uygun araç bilinir (U.S. Pat. No. 5,814,599). Uzatilmis Uygulama ve Formülasyonlar Mevcut bulusun. bilesiklerini, özneye, tek. bir uygulamadan örnegin bir hafta ila bir yillik periyotlar boyunca olmak üzere uzatilmis zaman periyotlarinda dagitmak istenebilir. Çesitli yavas salim, depo veya implant dozaj formlari kullanilabilir. Örnegin bir dozaj formu, örnegin (a) fosforik asit, sülfürik asit, sitrik asit, tartarik asit, tannik asit, pamoik asit, alginik asit, poliglutamik asit, naftalin mono- veya di-sülfonik asitler, poligalakturonik asit ve benzeri gibi bir polibazik asit ile bir asit ekleme tuzu; (b) çinko, kalsiyum, bizmut, baryum, magnezyum, alüminyum, bakir, kobalt, nikel, kadmiyum ve benzeri gibi çok degerlikli bir metal katyonuna veya örnegin, N,N'-dibenzil-etilendiamin veya etilendiaminden olusan bir organik katyona sahip bir tuz; veya (0) örnegin bir çinko tannat tuzu olmak üzere (a) ve (b) kombinasyonlari olmak üzere vücut sivilarinda düsük derecede çözünürlüge sahip bilesiklerin farmasötik olarak kabul edilebilir bir toksik olmayan tuzunu içerebilir. Ek olarak, mevcut bulusun bilesikleri veya tercihen henüz açiklananlar gibi nispeten çözünmez bir tuzu, enjeksiyona yönelik uygun örnegin susam yagi ile örnegin bir alüminyum monostearat jel olmak üzere bir jelde formüle edilebilir. Özellikle tercih edilen tuzlar, çinko tuzlar, çinko tannat tuzlari, pamoat tuzlar ve benzerleridir. Enfeksiyona yönelik yavas salim depo formülasyonunun bir diger türü, örnegin U.S. Pat. No. 3,773,919'da açiklandigi üzere bir poliaktik asit/poliglikolik asit polimeri gibi bir yavas bozunan, toksik olmayan, antijenik olmayan polimerde enkapsülasyona yönelik dagitilan bilesik veya tuzu içerir. Bilesikler ve tercihen yukarida açiklananlar gibi nispeten çözünmez olan tuzlar ayrica, özellikle hayvanlarda kullanima yönelik kolesterol matriks silastik pelletlerinde formüle edilebilir. Örnegin gaz veya sivi lipozomlar olmak üzere ek yavas salimli, depo veya implant formülasyonlari, literatürde bilinir (U.S. Pat. No. 5,770,222 ve Robinson ed., Marcel Dekker, Ine., N.Y., 1978). Genel olarak açiklanmis olan bulus, gösterim amaciyla saglanan ve sinirlayici olma amaci olmayan asagidaki örneklere referans Endikasyonlar Romatoid artrit (RA) Romatoid artrit (RA), otoimmün özelliklere sahip bir kronik sistemik enflamatuvar hastaliktir. RA'nin birçok özelligi, disregüle lL-6 aktivitesi ile açiklanabilir. RA'da potansiyel olarak baglantili IL-6 etkileri, bir B hücresi farklilasma faktörü olarak IL-6'nin etkileri ile poliklonal hipergamaglobulinemi ve oto-antikor üretiminin (romatoid faktör) indüklenmesi; IL-2 ile uyum içinde sitotoksik T hücresi gelisimin artmasi; hepatosit uyarici aktivite ile akut faz proteinlerinin (CRP, SAA, fibrinojen) üretimi; periartiküler osteoporoz ve kemik yikimina neden olan osteoklast aktivasyonu; megakaryosit farklilasma faktörü olarak etki ile trombositozun indüklenmesi ve VEGF'nin regülasyonu ve dolayisiyla potansiyel olarak IL-Iß ve TNFa ile uyum içinde anjiyogenezi içerir. fibroblastlar ile üretilir ve RA'da sinoviyal sivi (SF) ve serumda yüksek konsantrasyonda bulunur. Serum seviyeleri ve hastalik aktivitesinin klinik/laboratuvar endeksleri arasinda iliski bulunur. Anti-IF-6/IF-6R mAb'ler, aktif RA'ya sahip hastalarda bazi klinik çalismalarda çalisilmistir. Bugüne kadar olan sonuçlar, asagida kisaca açiklanir. Faz l/ll çalismalari Bu çalismalarin ilkinde bir mürin anti-IF-6 mAb (BE-8), RA'ya sahip 5 hastaya ardisik 10 gün boyunca günlük olarak uygulanmistir ve geçici klinik ve laboratuvar gelisimi ile iliskilendirilmistir (9) 6R (80kDa) mAb (MRA; Chugai), RA'ya sahip hastalarda bazi faz l/ll çalismalarinda test edilmistir. Bunlarin ilkinden MRA, 6 aya kadar hafta basina 50 mg'lik idame tedavisi ile haftada bir veya iki kez 1-50 mg'lik dozlarda IV infüzyonu ile uygulanmistir. Bu, akut faz ölçümleri, C-reaktif protein (CRP) ve fibrinojen ve düsük kademeli ates, halsizlik ve sabah sertligi ve siskinligi ve hassas eklem sayimlari gibi klinik skorlarda hizli düsüs ile sonuçlanmistir. Ayrica, anemi, trombositoz ve hipergamaglobulinemide gelismeler not edilir. Bir sonraki Çalismada 45 hasta, 0.1-10 mg/kg'lik bir dozda MRA'nin tek bir seviyelerinde klinik skorlarda gelisme egilimleri ve akut faz reaktanlarinda azalmalar ile sonuçlanmistir. Faz II çalismalari Bu çalismalarin ilkinde 15 hasta, MRA (24 hafta boyunca iki haftada bir 2, 4 veya 8 mg/kg'lik doz seviyeleri) ile tedavi edilmistir ve CRP/Serum Amiloid A (SAA) normalizasyonu ile 24. haftada 13/15'lik ACR2O yanitlari göstermistir. Hiçbir majör akut güvenlik endisesi olmamasina ragmen hastalarin üçte ikisine kadari, önemli ölçüde artmis LDL kolesterol seviyeleri göstermistir. çalismasinda DMARD'lere dirençli RA'ya sahip 164 hasta, IV infüzyonu (3 ay boyunca 4 haftada bir verilen 4 veya 8 mg/kg'lik doz seviyeleri) ile plasebo veya MRA ile tedavi edilmistir ve plasebo, 4 ve 8 mg/kg'ye yönelik sirasiyla %11, Son olarak aktif RA'ya sahip 359 hasta, tek basina MTX (10-25 mg/hafta), tek basina MRA (IV infüzyonu ile aylik olarak uygulanan 2, 4 veya 8 mg/kg doz seviyeleri) veya MTX ve MRA almistir. MRA ve MRA + MTX, ACRZO yaniti ile belirlendigi üzere tek basina MTX'ten daha etkili olmustur. Sistemik lupus eritematozus (SLE) SLE, birçok protean belirtisine sahip bir kronik, potansiyel olarak ölümcül, otoimmün hastaliktir. Etiyoloji bilinmemektedir. Hastaligin bir özelligi, B hücresi hiper-proliferasyonu, aktivasyonu ve çesitli oto-antijenlere karsi oto-antikor üretimini içerir. TL-6, antikor olusturan hücrelere farklilasmak üzere B hücrelerini indükler. SLE'de bu antikor olusturan hücreler ve immün kompleksi depolamasi ile oto- antikorlarin(ANA, anti- dsDNA) artmis üretimi vardir. IL-6, sitotoksik T hücresi gelisimi arttirir, hepatik akut faz reaktanlarini, mezanjiyal hücre proliferasyonunu, keratinosit büyümesini, megakaryositik farklilasmayi ve trombozu arttirir. artmistir. B hücreleri üzerindeki IL-6 reseptör baglamasinin, B hücrelerinin oto-antikor üreten hücrelere terminal farklilasmasini indükledigi gösterilmistir. Linker-lsraeli Vd. karsi nötralize eden antikorlar kullanildiginda spontan poliklonal antikor üretiminde azalmalari göstermistir- Kitani ve 6'nin in vitro T hücresi üretimin, SLE kültürlerinde iki katina çiktiginin ve SLE B hücrelerinin, kontrol B hücrelerinden bes kat daha fazla IL-6 üretimine sahip oldugunun gösterilmesi ile bu bulgulari desteklemistir. Ancak, oto- antikorlarin SLE içinde patolojik üretimi, yalnizca IL-6'nin etkileri ile sinirli degildir. IL-6 reseptörünün rolüne de çalisilmistir. Nagafuchi ve digerleri, SLE B hücreleri ila normal B hücrelerinin çogunda TL-6 reseptör yukari regülasyonunu göstermistir. Anti-IL-6 reseptör antikoru, bu B hücrelerinin antikor olusturan hücrelere terminal farklilasmasini inhibe etmistir. Ancak çözünür IL-6 reseptörünün SLE'deki rolü, belirlenmelidir. Tip II Diyabet Hastaligi (T2DM) Insülin direnci (zarar görmüs insülin etkisi) ve zarar görmüs p-hücresi fonksiyonunun (pankreatik p-hücrelerin, insülin salgilama fonksiyonel kusuru), TZDM gelisimin ana nedenleri oldugu düsünülür. Insülin direnci, periferik dokularin insülin yüklemesine yeterli bir sekilde yanit verme yetersizligi, dolayisiyla kan glukoz seviyelerinde bir artisa› neden olma, olarak gösterilir. Insülin direnci ve kan glukoz seviyelerindeki artisi, hastaligin erken seviyelerinde pankreatik S-hücreleri tarafindan insülinin telafi edici hiper- sekresyonu takip eder. T2DM ilerlerken ß-hücrelerinin insülin salgilama yetenegi kötülesir. Insülin direnci gelisiminden sorumlu altta yatan mekanizmalar belirsizdir. En yaygin olarak TZDM gelisimi ile iliskilendirilen bir vaka, obezitedir ve orta derecede bir kilo kaybi, TZDM'ye sahip hastalardaki glukoz seviyelerini büyük ölçüde gelistirir. Dislipidemi ile kombinasyon halinde obezite ve insülin direnci/hiperinsülinemi, Metabolik Sendrom olarak adlandirilan vakayi karakterize eden glukoz toleransi ve hipertansiyona zarar vermistir. Metabolik Sendromun T2DM'ye dogal ilerlemesi, bireyleri, kardiyovasküler (CV) hastalik ve nihai olarak ölüme neden olabilen mikro- ve makro-vasküler degisikliklerin gelisimine predispoze eder. Obezite, insülin direnci ve hiperinsülinemi, TZDM ve CV hastaligi arasindaki en nmhtemel Adipoz doku, hem bir enerji saklama deposu ve insülin duyarlilik regülasyonuna karilan çesitli molekülleri salgilayan endokrin organi olan metabolizmayi regüle eden majör organlardan biri olarak tanimlanmistir. Leptin, resistin, adiponektin ve TNFd'ya ek olarak adipoz doku, obezite, enflamasyon, T2DM ve kardiyovasküler (CV) hastalik arasindaki bagli temsil ettigi öne sürülen IL-6'yi salgilar. Adipozite ile IL-6 seviyelerinin arasindaki pozitif bir korelasyon belgelenmistir. Obezitede artan adipoz dokusunun, insüline yanit veren dokularda enflamasyonun desteklenmesi ile insülin duyarliligini azaltabilen veya insülin- sinyalleme kaskadinda bulunan proteinlerin etkisine ve ekspresyonuna müdahale ederek insülin direncine neden olabilen dolasimdaki IL- 6'da sürekli artislari saglayabilir. Insülin direncinin gelismesinde IL-6'nin potansiyel rolünü destekleyen veya buna karsi çikan hem in vitro hem de in vivo veriler de bulunur. Karacigeri (HepG2)(44), yagi (3T3Ll) veya izole edilmis siçan pankreatik ada hücrelerini içeren iyi tanimlanmis hücre sistemlerinin kullanildigi in vitro veriler, IL-6'nin sirasiyla insülin› sinyallemesi, glukoz alinu, ve insülinr salgilamasinin üzerindeki direkt negatif bir etkisini gösterir. Diger bir taraftan iskelet kasi biyopsilerinin üzerinde yapilan deneylerden elde edilen veriler, IL-6'nin egzersiz yapan kasta glukoz alimim arttirabilecegini ileri sürer. ilgili in vivo veriler esit bir sekilde karistirilir. IL-6 asiri ifadesinin veya tam ablasyonunun modelleri, IL-6 etkisinin tam inhibisyonunun, faydali bir etkiye sahip olamayabilecegini ileri sürer. Örnegin transgenik obez olmayan diyabetik (NOD) farelerde, insan IL-6'sinin asiri ifadesi, diyabetin baslangicini geciktirir ve hayatta kalma süresini uzatir. Ek olarak IL-6 içermeyen farelerden veriler, bu hayvanlarin geç baslangiçli obezite ve yüksek glukoz seviyelerini gelistirmesi nedeniyle IL-6'nin enerji dengesi regülasyonunda bir rol oynayabilecegini ileri sürer. Insanlarda IL-6 promotörü bölgesindeki dogal olusumlu bir mutasyon, IL-6 salgilama hizinda bir artisa yol açar. Bu mutasyon, insülin duyarliliginda hem bir artis hem de bir azalma ile baglantilidir. Deneylerin diger bir dizisinde, egzojen IL-6'nin etkisi degerlendirilmistir. Normal öznelerde IL-6 uygulamasi, plazma insülin konsantrasyonlari etkilenmeksizin glukoz seviyelerinde artislara yol açarken kanser hastalarinda IL-6'nin eklenmesinin glukoz bosaltimini arttirmistir. Ek olarak IL-6 seviyeleri ile insülin direnci arasindaki korelasyon incelenmistir. Bu deneylerden elde edilen veriler, hem erkeklerde hem de kadinlarda, IL-6'nin dolasimdaki yüksek seviyelerinin, bir sebep sonuç iliskisinin belirlenmis olarak kalmasina ragmen daha yüksek insülin direnci ile iliskili oldugunu ileri sürmüstür. önemli bir tol oynadigini belirtilmistir. Ancak, çelisen in vitro ve in vivo veriler, insülin direncinde bunun potansiyel rolünü destekleyecek veya karsi çikacak sekilde bulunur. Osteoartrit IPA 0A, artiküler kikirdaginin kaybi ve subkondral kemikteki ilgili degisimler ile karakterize edilen, kronik, dejeneratif bir eklem rahatsizligidir. Enflamasyonun degisken derecelerinin, artroskopide veya sinoviyal biyopsi numunelerinde gözlenmesine ragmen hastalik birincil enflamatuvar degildir. Bunun yerine bunun, kondrosit ve/veya osteoblast metabolizmasindaki degisimlerden kaynaklandigi düsünülür. TNF, IL-l ve IL-6, çok güçlü bir sekilde bu degisimler ile baglantili olan sitokinlerdir. Agents and Actions 41: 90-92) görülenlerin büyük oranda altinda olan seviyelerde olmasina ragmen OA hastalarindan elde edilen sinoviyal sivida tespit edilebilir. IL-6, hepatik akut faz protein sentezine yönelik bir primer uyarti olarak taninir ve CRP seviyeleri, CRP ile obezitenin (Mohtai, M. V.d. 1996 J Orthopedic Research 14: 67-73) arasinda bilinen iliski hesaba katildiktan sonra dahi diz OA'sinin varligi ile iliskilendirilir. kondrositlerde ifade edilir (Sowers, M. vd. 2002 Osteoarthritis and Cartilage 10: 595-601). In vitro kondrosit sitokin ekspresyonu üzerindeki mekanik stres etkilerini test eden deneylerde, sivi indüklü kesme gerilimi IL-6 mRNA ve proteini önemli derecede yukari regüle etmistir. Bu, OA kikirdakta IL-6 ekspresyonunun mekanik yüklemeden kaynaklanabilecegini gösterir. IL-6 kondrositler üzerindeki IL-l etkisine yanit olarak da üretilebilir (Dozin, B. vd. 2002 Matrix Biology 21:449- 459). Diger deneylerde, etkinin IL-l ile karsilastirildiginda orta seviyede olmasina ragmen, sIL-6R ile kombinasyon halinde, IL-6 ex vivo kültürlenen insan artiküler kondrositler ile proteoglikanin inhibisyonuna yol açar (Guerne, P. vd. 1999 Matrix Biology 18: 253-260). Kronik Obstrüktif Pulmoner Hastalik (COPD) COPD tamamen tersinir olmayan hava akiminin kisitlanmasi ile karakterize edilen bir hastalik durumudur. Hava akiminin kisitlanmasi genellikle progresiftir ve zehirli partiküllere ve gazlara karsi akcigerlerin anormal enflamatuvar yaniti ile baglantilidir (Pauwels RA vd. 2001 Am.J1Respir Crit Care MEd normal gerilemedeki hizlanma ile karakterize edilir. Yavas bir sekilde ilerleyen hava akimi kisitlamasi güçsüzlüge ve erken ölüme yol açar. COPD ölümün ve güçsüzlügünün baslica nedenidir, ancak yalnizca son zamanlarda hücresel ve moleküler bakis açisindan incelenmistir (Barnes P. J. vd. 2003 Eur Respir J 22:672-688). COPD'de, küçük hava yollarinin sabit daralmasina ve alveolar destrüksiyona (amfizem) yol açan bir kronik enflamasyon bulunur. Enflamatuvar yanit, artan sayida alveolar makrofaj, nötrofil ve sitotoksik T-lenfosit ve çoklu enflamatuvar aracilarin salimi (kemokinler, sitokinler, büyüme faktörleri ve lipidler) ile karakterize edilir. Yüksek seviyede oksidatif stres enflamasyonu pekistirebilir. Ayrica, artirilmis elastolizis ve birkaç elastolitik enzimin tutulmasina yönelik kanit bulunur. COPD'de enflamasyon ve proteoliz sigara dumanina karsi normal enflamatuvar yanitin pekistirilmesidir. Astimin aksine, enflamasyonun kortikosteroidlere karsi dirençli oldugu görülür (Barnes P.J. vd. 2003). Hayvan modellerinde, bakteriyel endotoksin veya lipopolisakkaritler (LPS) ve sigara dumani maruziyeti nötrofiliyi ve bronkoalveoler lavaj (BAL) sivisindaki artmis IL- 902). Fare akcigerlerinde asiri IL-6 ifadesi anfizemi indükler (Kuhn III Ch. vd. . Insanlarda, bir saniyede zorunlu ekspiratuar hacim (FEVl) BAL'deki IL-6, IL-8 seviyeleri ve polimorfonükleer hücre sayilari ile ters Plazma TNFa, IL-6 ve CRP seviyeleri hafif ila orta dereceli COPD'si olan Öznelerde artirilir (YasudaN. Vd. 1998 Respir Med 92:993-999). COPD'nin akut siddetlenmesi baslangiçta akut olan ve normal ilaçta degisim gerektiren, stabil durumdan normal günden güne varyasyonlarin ötesine, hastanin durumunun sürekli kötülesmesi olarak tanimlanir (Burge S. vd. 2003 Eur Respir J 21: Suppl. 41, 468-538). Artmis semptomlarin ve akciger fonksiyonunun kötülesmesinin hastaneye yatisinin ortak sebebi olmasina ragmen (ABD'de her yil yaklasik olarak 500,000), önde gelen hücresel ve moleküler mekanizmalar genis çapta incelenmemistir ve yetersiz 1415). Akut siddetlenmeler uzun süreli olabilir ve yasam kalitesi üzerinde önemli etkiye sahiptir ve COPD'nin ilerlemesini hizlandirabilir (Soto F.J. Vd. 2003 Pulm Med 9:117- 124). Respiratuar enfeksiyonlar COPD siddetlenmelerinin en yaygin nedenleridir. Bu enfeksiyonlarin çogunlugu bakterilerden kaynaklanir, ancak birçogu viral enfeksiyonlar, özellikle rinovirüs kaynaklidir (Soto F.J. vd. 2003). Çevresel faktörler, hava kirleticiler ve sicaklik da rol oynayabilir. Siddetlenme esnasinda, COPD'si olan hastalarin balgaminda IF- 6, IL-8, TNFa ve FTB4 konsantrasyonlarinda ve nötrofillerde artis vardir. Orta ila siddetli COPD'si olan bazi hastalar sik siddetlenmelere egilimlidir (yilda üç veya daha fazla siddetlenme). Bu hasta grubu ("sik siddetlenme gösterenler"), COPD stabil oldugunda dahi, daha düsük seviyede sekretuar lökosit proteaz inhibitörüne ve daha yüksek seviyede IF-6'ya 1112-1119). Oksidatif stres ve bakteriyel kolonizasyon gibi birkaç diger mekanizma COPD siddetlenmesinin patofizyolojisinde kapsanmistir. Örnek 1: Memeli Hücrelerde IL-6 Antikorunun Klonlanmasi ve Ekspresyonu. Tipik bir memeli ekspresyon vektörü mRNA transkripsiyonunun baslamasina aracilik eden en az bir promotör element, antikor kodlayan sekans ve transkripsiyonun sonlandirilmasina ve transkriptin poliadenilasyonuna yönelik gerekli sinyalleri içerir. Ilave elementler artiricilar, Kozak dizileri ve yaninda RNA birlesmesine yönelik donör ve akseptör bölgeleri bulunan müdahaleci diziler içerir. Oldukça etkili transkripsiyon SV40'tan erken ve geç promotörler, retrovirüslerden uzun terminal tekrarlari, örnegin RSV, HTLVI, HIVI ve sitomegalovirüsün erken promotörü ile elde edilebilir. Ancak, hücresel elementler de kullanilabilir (örnegin insan aktin promotör). Mevcut bulusun gerçeklestirilmesinde kullanilmaya yönelik uygun ekspresyon vektörleri örnegin pIRESlneo, pRetro- Off, pRetro-On, PLXSN veya pLNCX (Clonetech Labs, Palo Alto, CA), pcDNA (Invitrogen), PSVL ve PMSG (Pharmacia, Uppsala, Isveç), pRSVcat (ATCC gibi vektörler içerir. Uygun memeli ve diger konakçi hücreler insan Hela, 293, H9 ve Jurkat fareleri, fare NIH3T3 ve Cl27 hücreleri, Cos 1, Cos 7 ve CV 1, bildircin QC1-3 hücreleri, fare L hücreleri ve pin hamsteri yumurtalik (CHO) hücreleri içerir. Alternatif olarak, gen bir kromozoma entegre edilen gen içeren stabil hücre hatlarinda eksprese edilebilir. Dhfr, gpt, neomisin veya higromisin gibi seçilebilir bir markör ile es transfeksiyon transfekte hücrelerin tanimlanmasini ve izolasyonunu saglar. Transfekte gen ayrica kodlanan antikoru yüksek miktarlarda eksprese etmek üzere pekistirilebilir. DHFR (dihidrofolat redüktaz) markörü ilgili genin birkaç yüz veya hatta birkaç bin kopyasini tasiyan hücre hatlari gelistirmek üzere kullanilir. Diger yararli seleksiyon markörü enzim glutamin sentazidir (GS) memeli hücreler selektif ortamda büyütülür ve en yüksek dirence sahip hücreler seçilir. Bu hücre hatlari bir kromozoma entegre edilen pekistirilmis gen(ler) içerir. Çin hamsteri yumurtalik (CHO) ve N80 hücrekleri siklikla antikorlarin üretilmesine yönelik kullanilir. Ekspresyon vektörleri pCl ve pC4 Rous Sarkoma Virüsünün güçlü arti CMV-gelistiricisinin (Boshart, Vd., Cell 41:521 -530 (1985)) bir fragmanini içerir. Örnegin, kisitlama enzimi BamHI, XbaI ve Asp718 klevaj bölgeleri ile çoklu klonlama bölgeleri, ilgilenilen genin klonlanmasini kolaylastirir. Vektörler 3' introna ek olarak, siçan preproinsülin geninin poliadenilasyon ve sonlandirma sinyalini içerir. CHO Hücrelerinde Klonlama ve Ekspresyon. Vektör pC4 IL-6 antikorunun ekspresyonuna yönelik kullanilabilir. Plazmid pC4 plazmid pSVZ-dhfr'nin (ATCC Erisim No. 37146) bir türevidir. Plazmid, SV40 erken promotörün kontrolü altinda fare DHFR geni içerir. Bu plazmidler ile transfekte edilen dihidrofolat aktivitesi içermeyen Çin hamsteri yumurtalik veya diger hücreler kemoterapötik ajan metotreksat ile eklenen bir selektif ortamda (örnegin alfa eksi MEM, Life Technologies, Gaithersburg, MD) hücrelerin büyütülmesi ile seçilebilir. Metotreksata (MTX) dirençli hücrelerde DHFR genlerinin pekistirilmesi iyi bir sekilde belgelenmistir (1978); J. L. Hamlin ve C. Ma, Biochem. et Biophys. Acta Biotechnology 9:64-68 (1991)). Artan MTX konsantrasyonlarinda büyütülmüs hücreler DHFR geninin pekistirilmesinin sonucu olarak hedef enzim, DHFR'nin asiri üretilmesi ile ilaca direnci gelistirir. Ikinci genin DHFR genine baglanmasi halinde, genellikle ko-amplifiye edilir` ve asiri eksprese edilir. Bu yaklasimin pekistirilmis gen(ler)in 1,000'den fazla kopyasini tasiyan hücre hatlarini gelistirmek üzere kullanilabildigi teknikte bilinir. Akabinde, metotreksat geri çekildiginde, konakçi hücrenin bir veya daha fazla kromozomuna (kromozomlarina) entegre edilmis pekistirilmis geni içeren hücre hatlari elde edilir. Rous Sarkoma virüsünün uzun terminal tekrarinin (LTR) güçlü promotöründen baska yüksek etkinlik promotörleri ayrica örnegin insan p-aktin promotörünün, SV4O erken veya geç promotörleri veya diger retrovirüslerden, örnegin HIV ve HTLVI'dan uzun terminal tekrarlarinin ekspresyonuna yönelik. kullanilabilir. Clontech'e ait Tet-Off ve Tet-On gen ekspresyon sistemleri ve benzer sistemler memeli hücrelerinde düzenli bir sekilde IL-6 antikorunu eksprese etmek üzere kullanilabilir (M. Gossen ve H. poliadenilasyonuna yönelik, örnegin insan büyüme hormonu veya globin genlerinden gelen diger sinyaller de kullanilabilir. Kromozomlara entegre edilmis ilgili geni tasiyan stabil hücre hatlari ayrica gpt, G418 veya higromisin gibi seçilebilir bir markör ile es transfeksiyona göre seçilebilir. Örnegin G418 ve metotreksat olmak üzere, baslangiçta birden fazla seçilebilir markör kullanilmasi avantajlidir. Plazmid pC4 restriksiyon enzimleri ile kesilir ve akabinde teknikte bilinen prosedürler ile buzagi intestinal fosfataz kullanilarak defosforile edilir. Vektör akabinde %1 agaroz jelden izole edilir. Bütün IL-6 antikoru kodlayan DNA dizisi örnegin bilinen yöntem asamalarina göre, sirasiyla mevcut bulusun bir IL-6 antikorunun HC ve LC degisken bölgelerine karsilik gelen SEQ ID NO'lari: 98 ve 96 sunuldugu üzere kullanilir. Uygun bir insan sabit bölgesi (HC ve LC bölgeleri) kodlayan izole nükleik asit ayrica bu yapida kullanilir. Izole degisken YKB sabit bölge kodlayan DNA YKB defosforile vektör akabinde T4 DNA ligaz ile baglanir. E. coli HBlOl veya XL- 1 Mavi hücreler akabinde transforme edilir ve örnegin restriksiyon enzim analizi kullanilarak plazmid pC4'e eklenen parçayi içeren bakteriler tanimlanir. Bir aktif DHFR geni içermeyen Çin hamsteri yumurtalik (CHO) hücreleri transfeksiyona yönelik kullanilir. 5 mikrogram ifade plazmidi pC4 lipofektin kullanilarak 0.5 mikrogram plazmid pSVZ- neo ile es transfekte edilir. Plazmid pSV2neo baskin bir seçilebilir markör, 6418 dahil bir grup antibiyotige karsi direnç gösteren bir enzimi kodlayan TnS'ten neo gen içerir. Hücreler l mikrogram/ml G418 ile eklenen alfa eksi MEM'de tohumlanmistir. 2 gün sonra, hücreler tripsinize edilir ve 10, veya 50 ng/ml metotreksat ve 1 mikrogram/ml G4l8 ile eklenmis alfa eksi MEM'de hibridom klonlama plakalarina (Greiner, Almanya) tohumlanmistir. Yaklasik 10-14 gün sonra, tek klonlar tripsinize edilir ve akabinde farkli konsantrasyonlarda metotreksat (50 nM, kullanilarak 6 gözlü petri kaplarina veya 10 ml balonlara tohumlanir. En yüksek metotreksat konsantrasyonlarinda büyüyen klonlar akabinde daha da yüksek konsantrasyonlarda metotreksat (l mM, 2 mM, 5 mM, mM, 20 mM) içeren yeni 6 gözlü plakalara transfer edilir. Ayni prosedür, 100 - 200 mM konsantrasyonda büyüyen klonlar elde edilene kadar tekrar edilir. Istenen gen ürününün ekspresyonu örnegin SBS-PAGE ve Western blot yoluyla veya ters faz HPLC Örnek 2 - Anti-IL-G Antikorlarinin Yapilandirilmasi ve Taranmasi ve aktiviteye yönelik taranmistir. Bu örnekte ve burada baska bir yerde, CDR'ler Kabat ve Chothia tanimlarinin özeti olan CDRHl istisnasi ile Kabat tarafindan tanimlandigi gibidir. CDRHZ uzunlugu tüm bölgeyi kapsamak üzere iki ayri kütüphanenin yapilandirilmasini gerektirmistir. Ilgili klonlar dizilenmistir ve ayrica ELISA ile ve bir hücre bazli analizde karakterize edilmistir ve kinetik sabitler belirlenmistir. Saflastirilmis IgG'ler ile yapilan bir ELISA'nin bir örnegi Sekil 9'da gösterilir. ELISA genellikle bir kepi anti-insan kappa antikoru ile kaplanan Costar 3366 mikrotitre plakalarini kullanmistir. Fab (veya IgG) dilüsyonlari 22`°C'de 1 saat süreyle kaplanmis gözlerde enkübe edilmistir. Gözler akabinde PBS ile yikanmistir, %O,1 Tween 20 ve 200 ng/ml'de biyotinlenmis NeutrAVidin alkalin fosfataz konjugati eklenmistir ve 22 °C'de 1 saat süreyle enkübe edilmistir. Bir kolorimetrik substrat kapsamli yikamadan sonra eklenmistir ve bagli IL-6 belirlenmistir. Bu ELISA'nin bir varyasyonu, biyotinlenmis IL-6 enkübasyonundan sonra 37°C'de PBS, %0,0l BSA beher kabinda uzatilmis bir yikama adimi, Örnegin 18 saat uzatilmis bir yikama adimi içerir. Bulusun üretilen birkaç insan gelistirilmis IL-6 reaktif IgG monoklonal antikorlari 1xlO9 ve 9x1012 arasindaki afinite sabitlerine sahiptir. Bu insan gelistirilmis monoklonal antikorlarin yüksek afiniteleri onlari IL-6-baglantili hastaliklarda, patolojilerde ve ilgili durumlarda terapötik uygulamalara yönelik uygun hale getirir. Çoklu farkli insan gelistirilmis anti-IL-6 antikor varyantlari antikorun CDR bölgelerinden bir veya daha fazlasinin degistirilmesi ile elde edilmistir. Tablo 3 asagida, ayri CDR kütüphanelerinde bulunan yararli mutasyonlarin kisa açiklamasini göster (amino asitler AME-A9 varyanti ile baglantilidir). Ilaveten, Tablo 13 asagida olasi sübstitüsyon pozisyonlari ("X" olarak isaretlenen) ile hafif ve agir zincirli CDR'lere yönelik amino asit dizilerini gösterir. Bir "kombinatoryel" kütüphane ayri CDR kütüphanelerinde bulunan en iyi klonlara (yani varyantlar) bagli olarak yapilandirilmistir. Tablo 4, "kombinatoryel" kütüphanede bulunan mutasyonlari listeler. Kombinatoryel kütüphane taranmistir ve yukarida açiklandigi üzere karakterize edilmistir. Daha iyi klonlarin altisinda bulunan Hmtasyonlar asagida Tablo 5 Afda gösterilirken, bu klonlardaki CDR'lere yönelik dizi ID numaralari Tablo 5B'de gösterilir. Bir Hücre Bazli Analizde Anti-IL-6 IgG'lerin Analiz Edilmesi Kimerik anti-IL-6 ve insan gelistirilmis anti-IL-6 (klon AME- l9a) antikorlari bir IL-6 baglantili hücre hattinin büyümesini önleme kapasitesine yönelik test edilmistir. 7TD1 hücreleri göz basina 200 hücrede bir Costar 3610 96 gözlü plakaya plakalanmistir. IMDM ortaminda seyreltilen antikorlar gözlere eklenmistir, akabinde 500 ug/ml nihai konsantrasyona insan IL-6 eklenmistir ve plakalar 64-72 saat bir doku kültürü enkübatöründe enkübe edilmistiru Bu sürede, ATPIite kitinden (Packard. Bioscience) 50 uL hücre lizis tamponu tüm. gözlere eklenmistir ve plakalar 3 dakika Çalkalanmistir. 50 pl ATPlite substrat eklenmistir ve kaplanan plakalar 1 dakika Çalkalanmistir. Kemilüminesans luminometre üzerinde belirlenmistir. Bir hücre-bazli analizin sonuçlari asagida Tablo 6'da gösterilen hesaplanmis ECm degerleri ile Sekil 10'da gösterilir. ng/ml) ve insan gelistirilmis anti-IL-6 (klon AME-l9a) müdahaleci degerler dahil, yaklasik 10 kattan yaklasik 60 kata kadar gelisme elde edilmesi mümkün olsa da, insan gelistirilmis antikorun ECw degeri yaklasik 10 kat gelisme gösterir. Örnek 3 - Insan Gelistirilmis Anti-Insan IL-6 Antikorlarinin Baglama Kinetikleri. ELISA analizi, bu konakçi hücrelerden saflastirilmis antikorun konsantrasyona bagli bir sekilde IL-6'yi bagladigini dogrular. Bu durumda, es kökenli antijenine (epitop) yönelik antikorun afinitesi ölçülmüstür. Kantitatif baglama sabitleri BlAcore analizi ve KinExA 3000 aleti kullanilarak elde edilir. Sonuçlar, insan gelistirilmis monoklonal antikorlarinin birkaçinin 1x10'9 ila 3x10"14 araliginda KD ile oldukça yüksek afinitede oldugunu belirtir. etmek üzere anti-insan IL-6 monoklonal antikorlari (AME-A9, AME- Al6, AME-18a, AME-20b, AME-22a ve AME-23a) ve pozitif bir kontrol olarak kullanilan CNTO 328 kullanan bir enzim immüno-analizi (ELA) gerçeklestirilmistir. Çözülebilir insan IL-6 reseptör, SIL-6R ve rekombinant insan IL-6 R&D Systems'den (Minneapolis, edilmistir. KEçi anti-insan IgG- yabanturpu peroksidaz-bagli (H+L zincir) Jackson Immunoresearch'ten (West Grove, PA) (Katalog # 109-035-003) elde edilmistir. Hidrojen Peroksit ve OPD tabletler Sigma'dan (St. Louis, MO) (sirasiyla, Katalog #H- 1009 ve P- 8287) elde edilmistir. sgp80/IL-6/anti-IL-6 mAb kompleks olusumuna yönelik enzime bagli immüno-analiz Costar EIA. plakalari (Corning/Costar, Acton, MA) (Katalog ile kaplanmistir. Plakalar % Tween 20 içeren 0,15M tuzlu su ile yikanmistir ve gözler oda sicakliginda bir saat PBS içinde %1 (w/v) BSA, 200 ul/göz ile bloke edilmistir. Gözler yeniden yikanmistir, akabinde sirali formatta oda sicakliginda bir saat PBS içinde 200 ng/ml insan IL-6 (100 ul/göz) ile enkübe edilmistir. Antikor, oda sicakliginda bir saat 100 ul/gözde 10 ug/ml baslangiç konsantrasyonundan 10 katli seri dilüsyonlar halinde tüm gözlere eklenmistir. Yikamadan sonra, gözler oda sicakliginda 30 dakika keçi anti-insan lgG (H+L)-HRP-bagli, (PBS içinde 10 ug/ml) ile enkübe edilmistir. Gözler yikanmistir ve 100 ul/göz sitrat-fosfat substrat solüsyonu (0,1 M Sitrik Asit ve oda sicakliginda dakika süreyle ilave edilmistir. Reaksiyon 25 ul/göz 4N sülfürik asit eklenmesi ile durdurulmustur ve OD4m› otomatik ELISA plaka okuyucu (Molecular Devices Spectromax Plus, Sunnyvale, CA) vasitasiyla okunmustur. Anti hIL-6 monoklonal antikorlar veya CNTO 328 ile IL-6 preenkübasyonunun etkisini test etmek üzere 200 ng/ml IL-6 (100 ul) oda sicakliginda bir saat 10 ug/ml ile baslanarak, antikorun (100 ul) on katli seri dilüsyonlari ile enkübe edilmistir. Bu önceden enkübe edilmis karisim akabinde oda sicakliginda bir saat SIL-6R ile enkübe edilmistir ve slL-6R/IL-6/anti insan IL- 6 kompleksinin algilanmasi oda sicakliginda 30 dakika keçi anti- insan IgG (H+L)-HRP-bagli, (PBS ipinde 10 ug/ml) kullanilarak tespit edilmistir. Analiz kosullarinin sonucu önceki paragrafta açiklanan ile aynidir. Önceki çalismalar, EIA plaka ipi teknik rapora göre kaplanan sIL-6R ile yakalandiginda CNTO 328'in IL-6'yi algilayabildigim göstermistir. Ilaveten, AME-A9, AME-Alö, AME-18a, AME-ZOb, AME- 22a ve AME-23a EIA kullanilarak doza bagimli bir sekilde sgp80'e baglanan (sIL-6R) IL-6'yi tespit edebilir. Her bir insan gelistirilmis anti-IL-6 antikor CNTO 328'e refere edilerek degerlendirilmistir. Ancak, IL-6 preink'übasyonu ve bu anti hlL- 6 monoklonal antikorlarin herhangi biri slL-6R'nin IL-6'yi Anti-IL-G IgG'lere yönelik Kinetik Sabitlerin Ölçülmesi Sapidyne tarafindan üretilen KinExATM 3000 aleti baglama kinetiklerini ölçmek üzere kullanilmistir. Kisaca, insan IL-6 alzakton boncuklara kovalent bir sekilde baglanmistir ve serbest KD'yi ölçmek üzere, seri bir sekilde azalarak seyreltilen insan tüpler %0,l BSA, PBS içinde 20°C'de 3-4 gün enkübe edilmistir. Toplam 13 tüp her bir KD'nin belirlenmesine yönelik kullanilmistir. Örnegin, kimerik anti-IL-6 antikor 5 üM sabit konsantrasyonda kullanilmistir ve ayri tüpler 0-200 üM IL-6 ile enkübe edilmistir. Diger IgG'lere yönelik enkübasyonlar benzer bir sekilde ayarlanmistir. Enkübasyondan sonra, her bir dengelenmis numune içindeki serbest IgG üreticilerin talimatlarina göre KinExATM 3000 aleti üzerinde belirlenmistir. KD asagida. daha detayli açiklandigi üzere KinExA. 3000 aleti kullanilarak KinExA 3000 yazilimi ile belirlenmistir. Km'u ölçmek üzere, 200 pM'de ayri IgG'ler 100-200 pM insan üzerindeki alzakton boncuklarina kovalent bir sekilde baglanan insan IL-6'ya baglanma ile tespit edilmistir. Zamanla bir dizi ölçüm yapilmistir. Ortaya çikan veriler KinExATM 3000 yazilimi ile Km hesaplamak üzere kullanilmistir. KMf degeri KD = koff/kor formülü kullanilarak hesaplanmistir. Anti-IL-6 IgG'lere yönelik kinetik sabitlerin kisa açiklamasi Tablo 7'de gösterilmistir. Örnek 4: Anti-IL-6 Antikorun in vitro Karakterizasyonu In vitro çalismalar diziyi, epitop spesifikligini, afiniteyi ve anti-IL-6 antikorunun biyolojik aktivitesini karakterize etmek üzere yürütülmüstür. Insan Gelistirilmis mAb Dizi analizi, mevcut bulusun anti-IL-6 antikorunun (farkli varyantlarda/kolonlarda gösterilen) tam insan çatilarini içerdigini dogrular. Tablo 5 a, kimerik anti-IL-6 antikor (PCT WO O4/O39826'da açiklanan) ile karsilastirildiginda, mevcut bulusun anti-IL-6 antikorunda (antikorun farkli varyantlarinda) CDRl, 2 ve 3'ün agir ve hafif zincirlerinde degisen toplamda 10 amino asit kalintisini gösterir. Epitop spesifikligi Mevcut bulusun anti-IL-6 antikoru ve kimerik anti-IL-6 antikor insan IL-6 üzerinde benzer bir epitopu algilar. Bu antikorlar, R&D anti-IL-6 mAb'ninkinden benzersiz bir sekilde farkli olan bir epitopu algiladiklarini göstererek, R&D Systems #MAB-206'dan ticari fare anti-insan IL-6 mAb ile yarismaz. Mevcut bulusun anti-IL-6 antikoru ve kimerik anti-IL-6 antikor R&D siçan anti- insan IL-6 mAb ile yarismaz. Insan IL-6 (200 ng/ml), plakaya bagli anti-IL-6 mAb (yalnizca insan IL-6'yi yakalamak üzere plakaya bagli mAb olarak kullanilan fare anti-insan IL-6 mAb, MAB-206) (10 ug/ml) ile yakalanmistir ve mevcut bulusun anti-IL-6 antikorunun seri dilüsyonlari ve kimerik anti-IL-6 antikor X ekseni etrafinda gösterildigi üzere akabinde plakaya eklenmistir. IL-6'ya baglanma Y ekseni etrafinda ODwo'da artis olarak ölçülmüstür. Mevcut bulusun anti-IL-6 antikoru ve kimerik anti-IL-6 antikoru IL-6'ya doza bagimli baglanma gösterir. Bunun aksine, iki molekülün IL-6 üzerinde benzer baglama epitopunu paylastigini göstererek, mevcut bulusun anti-IL-6 antikoru ve kimerik anti-IL-6 antikoru yarismali bir sekilde insan IL-6'ya baglanir. Insan IL-6 (200 ng/ml) plakaya bagli MAB-206 (10 ug/ml) ile yakalanmistir. X ekseni etrafinda gösterildigi üzere mevcut bulusun anti-IL-6 antikorunun seri dilüsyonlari ve 50 ng/ml biyotinlenmis kimerik anti-IL-6 antikoru akabinde plakaya eklenmistir. Biyotinlenmis kimerik anti-IL-6 antikorunun IL-6'ya baglanmasi streptavidin-HRP ile tespit edilmistir ve Y ekseni etrafinda ODwo okumalar olarak ölçülmüstür. ilaveten, insan gelistirilmis ve kimerik antikorlar sIL- 6/sIL-6R kompleksine baglanmaya yönelik benzer özellikler gösterir (Sekil 1). Mevcut bulusun anti-IL-6 antikoru sIL-6/sIL- 6R kompleksine baglanir. Çözülebilir IL-6 reseptörü (sIL-6R) 10 pg/mL konsantrasyonda plaka üzerinde kaplanmistir. Insan IL-6 akabinde 200 ng/ml konsantrasyonda plakaya eklenmistir. Mevcut bulusun anti- IL-6 antikorunun veya kimerik anti-IL-6 antikorunun seri dilüsyonlari, X ekseni etrafinda belirtildigi üzere, akabinde plakaya eklenmistir ve IL-6/SIL-6R kompleksine baglanma HRP-anti-insan IgG kullanilarak tespit edilmistir ve Y ekseni etrafinda ODwo okumalar olarak ölçülmüstür. Yukarida bulgulari ilaveten dogrulamak üzere, çapraz türler reaksiyon testi 7TD1 (IL-6 bagimli mürin hibridom hücre hatti) hücre bazli proliferasyon analizinde farkli türlerin LPS ve IFNY ile uyarilmis PBMC'Ierden üretilmis IL-6 içeren kosullu üst faz kullanilarak yürütülmüstür. Bulusun insan gelistirilmis antikorunun insan, marmoset, sinomolgus maymunu, sempanze, rhesus maymunu, babun, domuz kuyruklu naymun ve pamuk basli maymun dahil çesitli primat türlerinden 7TD1 hücre proliferasyonunu uyarmada kosullu üst fazlarin aktivitesini nötralize ettigi gösterilmistir ve kimerik antikor ile karsilastirildiginda benzer bir çapraz türler reaksiyon yapisi göstermistir (Tablo 8). Son olarak, epitop eslestirme triptik kesme yöntemi kullanilarak yürütüldügünde, insan IL-6 üzerinde insan gelistirilmis ve kimerik antikorlarina yönelik ayni baglama epitopu gözlenmistir ve amino asit kalintilari 168-184'ü kapsayan Sarmal D (Sekil 3) üzerinde bulunur. Güncel mutasyonal analiz, kalintilar 179 ve l82'nin bulusun antikorunun IL-6'ya baglanmasina yönelik önemli oldugunu dogrulamistir. Epitop (amino asit kalintilari 168-184) insan gelistirilmis anti-IL-6 antikor varliginda döteryumu muhafaza eden IL-6'nin yüzeyi olarak tanimlanmistir. Biyolojik Aktivite Insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun IL-6 nötralizasyon etkisi 7TD1 hücre bazli biyoanaliz ile belirlenmistir. Insan gelistirilmis anti-IL-6 antikoru 7TDl hücre proliferasyonu analizinde kimerik anti- IL-6 antikoru ile karsilastirildiginda kat daha yüksek nötralizasyon etkisi göstermistir. 7TD1 hücreleri 72 saat insan gelistirilmis anti-IL-6 antikoru veya kimerik anti-IL-6 antikoru veya izotip kontrol mAb'in seri dilüsyonlarinin varliginda 500 üg/ndi hIL-6 ile uyarilmistir. Hücre proliferasyonu Y ekseninde gösterildigi üzere saniye basina sayimlar olarak Ölçülmüstür. Hata çubuklari iki kopya halindeki numunelerin SD'sini gösterir. Bir kapali daire IL-6 olmaksizin hücreleri gösterir; açik daire 500 üg/ml hIL-6 ile uyarilmis hücreleri gösterir. Insan gelistirilmis anti-IL-6 antikor ayrica U937 hücrelerinden IL-6-indüklü monosit kemoatraktant protein-l (MCP- l) üretimini (Sekil 3) ve HepGZ insan hepatom hücrelerinden IL- 6/IL-lß-indüklü serum amiloid A (SAA) üretimini (Sekil 4) indükler. Sekil 3, insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun U937 hücrelerinden IL-6 ile uyarilmis MCP-l salgilamasini inhibe ettigini gösterir. 5 x 105 hücre/göz 72 saat insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun seri dilüsyonlari ve 1 ng/ml hIL-6 ile tedavi edilmistir. 5 x 105 hücre/çukur, 1 ng/ml hIL-6 ve insan gelistirilmis bir anti-IL-6 antikorunun seri dilüsyonlari ile 72 saat süreyle tedavi edilmistir. Hücre kültürü üst fazlari MCP-l varligina yönelik ELISA ile üç kopya halinde analiz edilmistir. Sekil 4, insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun, HepG2 hücrelerinden IL-6 ve IL-lß uyarilmis SAA salgilamasini inhibe ettigini göstermektedir. 2,25 x 105hücreleri, lOO ng/ml hIL-6, 200 ng/ml sIL-6R ve 1 ng/ml IL-lß varliginda insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun seri dilüsyonlari ile 24 saat süreyle tedavi edilmistir. Hücre kültürü üst fazlari akabinde SAA varliginda yönelik ELISA ile iki kopya halinde analiz edilmistir. IL-6 Bagimli Stat3 Fosforilasyonu Insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun IL-6'nin IL-6R ve gpl30'a baglanmasindan kaynaklanan sinyalleme kaskadini bloke etme kapasitesini degerlendirmek üzere bir immün çöktürme analizi hücre yüzeyinde gp130 eksprese eden THP-l hücrelerinde üzere gerçeklestirilmistir. mAb'ler steril filtreleme ile filtrelenerek sterilize edilmistir ve 4°C'de PBS içinde depolanmistir. R&D Systems'den (Minneapolis, MN) rekombinant insan IL-6 (206-IL-010) ve SIL-6R etkisizlestirilmis fötal bovin serum. (16000-069), L-Glutamin (11360-070) Invitrogen'den (Carlsbad, CA) elde edilmistir. Ayrica, TBS (lO mM Tris, pH7.5, kullanilmistir. Arastirma hücre bankalarindan alinmis bir insan akut monositik lösemi hücresi olan THP-l'in mikoplazma negatif ve bakterisiz oldugu test edilmistir. Bu hücreler %10 fötal bovin serum, 2mM glutamin ve 1 mM sodyum piruvat içeren RPMI ortaminda kültürlenmistir. Kültürler yaklasik olarak %85 konflüansa ulastiginda hücreler alt kültürlenmistir ve hasat edilmistir. Hücreler rutin olarak her üç günde 1:5 bölünmüstür. Tirosin fosforilasyonuna yönelik, hücreler T- 225 balonlarinda %80-90 konflüansa büyütülmüstür. Ortam uzaklastirilmistir ve serum olmadan taze ortam ile degistirilmistir ve bir gece enkübe edilmistir. Serum açligini takiben, hücreler` her` bir balondan hasat edilmistir, pellet haline getirilmistir ve vaka basina nihai konsantrasyonda 20x106 hücre serum olmadan 0,5 ml ortam içinde yeniden süspanse edilmistir. RhIL-6 (0,1 ug/ml) asagidaki ayiraçlar ile 15 dakika süreyle 37°C'de ön enkübe edilmistir: 0,5 ml tek basina ortamlar, anti- anti-IL-6 Ab (10 ug/ml) akabinde 15 dakika 37°C'de enkübasyona yönelik sirasiyla anti-IL-6 Ab ve SIL-6R ile önceden enkübe edilmis hücrelere eklenmistir. Hücreler akabinde negatif kontrol ve IL-6/Ab/sIL-6R kompleks olarak kombine edilmistir ve 6 dakika 37°C'de enkübe edilmistir. Hücreler buz soguklugunda TBS içinde iki kez yikanmis ve hücre pelletleri Bölüm 5.4'te açiklandigi üzere islenmistir veya -70°C'de depolanmistir. Immün çöktürmeye yönelik, hücre pelletleri bütün proteaz inhibitör kokteyl tableti (1697498, Roche, Basel, Isviçre) Triton-X-lOO) (T-9284, Sigma, St. Louis, MO) içinde çözünmüstür. Hücreler 30 saniye vortekslenmistir ve 20-60 dakika -70°C'de enkübe edilmistir. Hücresel kalinti 20 dakika 13,000 rpm'de santrifüjleme ile uzaklastirilmistir. Spesifik olmayan altyapi boyamasini azaltmak üzere, numuneler bir orbital karistirici üzerinde 4°C'de 1 saat 2 ug tavsan IgG (15006, Sigma, St. Louis, MO) ve 50 ul Protein A agaroz (SC-2001, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) ile enkübasyon yoluyla önceden temizlenmistir. Agaroz boncuklar 5 dakika 2500 rpm'de santrifüjleme ile uzaklastirilmistir. Temizlenen lizatlar mikrosantrifüj tüplerine transfer edilmistir ve bir orbital karistirici üzerinde 4°C'de bir gece anti-STAT3 (2 ug/ml) (SC- 7179, Santa Cruz Biotechnology) ile enkübe edilmistir, akabinde 50 u Protein A agaroz boncuklar eklenmistir ve bir orbital çalkalayici üzerinde 4°C'de 2 saat enkübe edilmistir. Agaroz boncuklar 5 dakika 2500 rpm'de santrifüjleme ile toplanmistir ve 4°C'de buz soguklugunda TBS içinde 5 kez yikanmistir. Agaroz boncuklar °C'de 5 dakika süreyle isitilmistir. (EA üzerinde çözülmüstür. (LC2001, Invitrogen, Carlsbad, CA) transfer edilmistir. Membranlar 4°C'de bir gece TBS-T'de %10 yagsiz kuru süt (Nestle, Glendale, Kaliforniya) içinde bloke edilmistir. Oda sicakliginda TBS-T'de birkaç yikamayi takiben, membranlar bir orbital çalkalayici üzerinde 4°C'de 4 saat TBS-T'de 121000 seyreltilen fare monoklonal anti-p-STAT3 Ab (SC-8059, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) ile enkübe edilmistir. Birkaç yikamadan sonra, membranlar akabinde bir orbital karistirici üzerinde 2 saat oda sicakliginda esek anti-fare IgG-HRP (1:1000) (SC-2318, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) ile enkübe edilmistir. Birkaç yikamadan sonra, numuneler üreticilerin protokolünü takiben ECLplus Western Blot Algilama Reaktifleri ve Biosciences, Piscataway, NJ) kullanilarak tespit edilmistir ve ECL filme maruz birakilarak görsellestirilmistir. Membranlar akabinde çalkalanarak 30 dakika lOO°C'de 100 mM DTT, %2 SBS, Membranlar akabinde TBS-T'de yikanmistir ve %10 yagsiz kuru süt ile bir gece bloke edilmistir. Membranlar yikanmistir ve 4°C'de Biotechnology) ile enkübe edilmistir, 5 kez yikanmistir, akabinde keçi anti-tavsan IgG-HRP (1:1000) (SC2030, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) ile 1 saat enkübe edilmistir ve ECLplus kullanilarak tespit edilmistir. Tüm membranlar rutin bir sekilde ayirilmistir ve STAT3 proteini varligini göstermek üzere STAT3 ile yeniden problanmistir. Sonuçlar, insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun IL-6 sinyalleme yolaginda bir anahtar bilesen olan IL-6- aracili stat3 fosforilasyonunu bloke ettigini göstermistir (Sekiller 5A ve 5B). Insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun (AME- 19A) IL- 6/sIL-6R-indüklü stat3 fosforilasyonunu inhibe eder. Rekombinant insan IL-6/sIL-6R-indüklü stat3 fosforilasyonu THP-l hücrelerinde (Sekil 5B) tespit edilmistir. 10 ug/ml insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun (AMR-19A) veya kimerik anti- tamamen inhibe etmistir. Sekil 5A, farkli insan gelistirilmis anti-IL-6 klonlarina karsilik gelen tüm numunelerde benzer bir miktarda fosforile edilmemis stat3 proteininin varligini gösterir. Burada kullanildigi üzere, CNT328 (veya 328) kimerik, insan-mürin antikorunu (dogal sus olarak da refere edilir (WT)) belirler, 140 klon AME-ZOb'yi belirler, 136 klon AME-19a'yi belirler, 130 klon AME-18a'yi belirler, 106 klon. AME-Al6'yi belirler, 104 klon AME-A9'u belirler. Insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun in vivo etkinligi Insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun etkinligi iki farkli in vivo modelinde degerlendirilmistir. Birinci, insan gelistirilmis ve kimerik anti-IL-6 antikorunun etkileri test edilmistir ve farelerde bir insan IL-6-indüklü Matrigel anjiyogenez analizi ile karsilastirilmistir. 200 ng/ml insan IL- 6 Matrigel dolguya eklenmistir. Iki Matrigel dolgu her bir çiplak fareye enjekte edilmistir. Alti fare grubu 1, 3 veya 6 mg/kg insan gelistirilmis veya kimerik anti-IL-6 antikorunun i.v. enjeksiyonunu almistir. PBS veya bir izotip kontrol ayrica mAh kontrol gruplarina yönelik uygulanmistir. Dolgular 7. günde uzaklastirilmistir ve anjiyogenez dolgularda hemoglobin içerigi, mikrodamar uzunlugu ve mikrodamar sayisi ile ölçülmüstür. Sonuçlar, insan IL-6'nin (PBS grubu) üç parametrenin hepsi ile ölçüldügü üzere Matrigel dolgu modelinde anjiyogenezi uyardigini göstermistir. Insan gelistirilmis anti-IL-6 antikoru (AME-19A) Matrigel dolgularda ortalama sayida mikrodamari inhibe eder. Ilaveten, insan gelistirilmis anti-IL-6 antikoru (AME-19A) Matrigel dolgularda ortalama uzunlukta mikrodamari inhibe eder. Ayrica, insan gelistirilmis anti-IL-6 antikoru (AME-19A) Matrigel dolgularda hemoglobin seviyesini inhibe eder. Ilaveten, insan gelistirilmis (AME-19A) ve kimerik anti-IL-6 antikoru doza bagimli olarak çiplak farelerde IL-6-aracili anjiyogenezi inhibe etmistir. Son olarak, insan gelistirilmis ve kimerik anti-IL-6 antikoru test edilen en yüksek doz olan 6mg/kg'de IL-6-indüklü anjiyogenezi inhibe etmede karsilastirilabilir aktivite sergilemistir. Kimerik anti-IL-6 antikorunun damar uzunlugu ve damar sayisi ile ölçüldügü üzere 3 mg/kg'de insan IL-6-indüklü anjiyogenezi önemli ölçüde inhibe etmesine ragmen, bu dozlarda insan gelistirilmis ve kimerik anti-IL-6 antikoru arasinda istatistiksel olarak önemli herhangi bir farklilik tespit edilmemistir. Ilave bir in Vivo model, insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun insan IL-6-indüklü akut faz reaktani, Balb/C farelerinde serum amiloid protein A (SAA) üretimi üzerindeki etkisini ilaveten degerlendirmek üzere gelistirilmistir. Fareler ug/kg insan IL-6 (Sekil 6) i.V. uygulamasindan 4 saat önce 0,01, 0,5 veya 5 mg/kg insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun i.p. uygulamasini almistir. PBS ve izotip kontrol mAb kontroller olarak kullanilmistir. Serum SAA seviyeleri IL-6 enjeksiyonundan sonra 16. saatte belirlenmistir. Insan gelistirilmis ve kimerik anti-IL-6 antikor 0.5 ve 5 mg/kg'de Balb/C farelerinde insan IL- 6-indüklü SAA üretimini büyük ölçüde inhibe etmistir ve insan gelistirilmis anti-IL-6 antikoru test edilen en düsük dozda SAA üretimini büyük ölçüde inhibe etmistir. Ancak, test edilen üç dozun hepsinde insan gelistirilmis ve kimerik anti-IL-6 antikoru arasinda istatistiksel olarak önemli herhangi bir farklilik gözlenmemistir (Sekil 6). Sekil 6, insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun insan IL- 6-indüklü SAA üretimini inhibe ettigini gösterir. Her bir nokta her bir hayvana yönelik ortalama SAA degerini temsil eder ve çizgi her bir gruptaki tüm veri noktalarinin ortalamasini temsil eder. Çiftli karsilastirma yapilmis ve genel tip I `hatasini kontrol etmek için Tukey'in %95 es zamanli güven araliklari kullanilmistir. (** p<0,001, *p<0,05). Örnek 5 - Anti-IL-S mAb için terapötik gerekçe Romatoid artrit. Anti-IL-6 mAb'nin Kollajene Bagli Artrit (CIA) üzerindeki etkisi - romatoid artritin bir hayvan modeli Preklinik in Vivo hastalik modelleri murin modellerinde siçan anti-fare IL-6 antikoru ya da primat modellerinde ve insan/fare SCID modelinde hümanize anti-IL-6R (80kDa) mAb (MRA; Chügai) kullanilmistir. Kemirgen kollajen kaynakli artritte (CIA), anti-IL-6, erken kullanildiginda (kolajen ile immünizasyondan sonra O'inci veya 3'üncü gün) hastaligin önlenmesinde etkili olmus, ancak daha sonraki zaman noktalarinda olmamistir. Insan sinovyal dokusunun immün yetmezlikli farelere transplante edildigi insan/fare SCID nakil modelinde, MRA tedavisi doku implantlarinin küçülmesine ve enflamatuvar hücrelerin ve osteoklastlarin azalmasina yol açmistir. Sinomolgus maymunlarindaki CIA'da, MRA artrit gelisimini inhibe etmis ve akut faz ölçümlerini iyilestirmistir. Hastaligin gelismesi üzerindeki tasiyici anti-fare IL-6 mAb'nin etkisi CIA. modelinde degerlendirilmistir. Sonuçlar, hastaligin indüksiyonundan önce 1 mg/fare/haftada anti-fare IL- 6'nin i.p. uygulamasinin hastaligin siddetinde önemli bir azalma ile yansitildigi üzere kolajen indüklü artritin gelismesini önemli ölçüde baskilamistir. Artrit kuyrugun kökünde intradermal olarak Freund'un bütün adjuvaninda (FCA) lOO ug bovin tip II kolajen ile 8 haftalik DBA/l LacJ farelerinde indüklenmistir. Fareler hastaligin baslangicina yönelik günlük olarak klinik olarak izlenmistir. Anti- IL-6 mAb veya izotip kontrol mAb CIA indüksiyonundan 2 gün önce i.p. olarak ve daha sonra 1 mg/farede hatalik olarak uygulanmistir. Artrit skoru sisme, eriteni ve eklemin bozulmasi bazinda belirlenmistir. Histopatolojik veriler, anti-fare IL-6 mAb'nin haftalik i.p. enjeksiyonunun kolajen indüklü artritin parametrelerini gelistirdigine dair klinik gözlemi dogrulamistir. Inflamatuar yanit (sinovit ve pannus olusumu) ve asindirici degisimler (asinmalar ve genel eklem yapisi) dahil incelenen artritin tüm parametreleri kontrol mAb ile tedavi edilmis hayvanlar ile karsilastirildiginda anti-fare IL-6 ile tedavi edilmis farelerde büyük ölçüde gelistirilmistir. Anti-IL-6 mAb bir histopatolojik seviyede artriti baskilamistir. Sinovit sinoviyal membranin kalinligi bazinda skorlanmistir; pannus olusumu eklem bölgesine göre pannusun kapsami bazinda skorlanmistir; ve asinmalar kikirdak ve subkondral kemige yayilim bazinda skorlanmistir. Kikirdak matriks proteinleri kaybi, anti-fare IL-6 mAb ile tedavi edilmis farelerde önemli ölçüde azaltilmistir. Çalismanin sonunda (53. gün) kontrol ve anti-IL-6 mAb ile tedavi edilmis hayvanlardan elde edilen temsili eklem kisimlari, kikirdak matriksine yönelik Toluidin Mavi Boyama ile incelenmistir. Mikro-CT analizi, anti-fare IL-6 terapisinin, ayri eklem içerisinde hastalik ilerlemesi seviyesinde kullanildigi klinik gözlemini desteklemistir. Tipik 3D CT görüntülerin görsel incelemesi, anti-fare IL-6 tedavi edilmis hayvanlardaki hakim olarak hafif yumusak doku enflamatuvar degisikliklere kiyasla izotip kontrol mAb- tedavi edilmis grupta meydana gelen eroziv degisikliklerin isaretli derecesini belirtir. Deneyler, kontrol mAb ile tedavi edilmis hayvanlar ve anti-fare IL-6 mAb ile tedavi edilmis hayvanlarla gerçeklestirilmistir. Lupus. Anti-IL-6'nin NZB/W Fl Farelerindeki Etkisi Ön-klinik in vivo hastalik modelleri Mürin modeller, SLE'ye yönelik bulunur ve bunlar, insan hastaliginda yakin benzerliklere sahiptir. MRL/lpr ve NZB/W Fl suslarinin çalismalari, insan hastaligina yakin olarak benzeyen B hücre hiper-proliferasyonu, oto-antikor üretimi ve immün kompleks depolamasini göstermistir. Anti-IL-6 mAb, oto- antikor üretimini inhibe etmede, proteinüriyi azaltmada ve NZB/W F1 farelerinde hayvan hayatta kalimini gelistirmede etkili oldugu görülmüstür. Bir temsil anti-fare IF-6 mAb'nin lupus hastalik gelisimindeki etkisi, NZB/W F1 farelerinde degerlendirilmistir. Baslangiç sonuçlari, 22 hafta boyunca 1 ng/fare/haftada anti-fare IF-6 mAb'nin i.p. uygulamasinin, bu hastalik modelinde bir majör patojenik oto-antikor olan anti-dsDNA oto-antikorunun üretimini baskilamistir (Sekil 7). Anti-IF-6 mAb tedavi edilmis hayvanlardaki anti- dsDNA oto-antikor seviyeleri, salin ve kontrol Ab tedavi edilmis hayvanlardakine kiyasla çalisma boyunca tutarli olarak daha düsüktür. Yukarida tartisildigi üzere Sekil 7, NZB/W F1 farelerde anti- lF-6 mAb ile anti- dsDNA oto-antikor üretiminin inhibisyonunu gösterir. Her numuneye yönelik ayri O.D. degeri, bir pozitif kontrol serumuna normalize edilmistir ve 6 pozitif kontrol olarak sunulur. Her nokta, her numunenin % pozitif kontrolünü temsil eder ve çizgi, her grupta veri noktalarinin tamaminin ortalamasini temsil eder. Anlamli fark, * p<0,0l olarak belirtilir. Ek olarak anti-IL-6 mAb, hayvanlarin küçük bir alt kümesi incelendiginde B- hücre proliferasyonunu inhibe edilmistir ve böbrek hasarini inhibe etmistir. Çalismanin sonunda farkli tedavi gruplari arasinda T hücre proliferasyonunda anlamli fark yokken anti-lgM ve anti-CD4O ile indüklenen B-hücresi proliferasyonu, spesifik olarak 34 hafta sonra olmak üzere zaman içinde salin tedavi edilmis farelerinkine kiyasla anti-IL-6 mAb tedavi edilmis farelerde daha düsüktür. Bu sonuç, yukarida rapor edilen azalmis anti- dsDNA oto-antikor üretimi ile tutarlidir ve oto-reaktif B hücrelerinin, anti-IL-6 mAb tedavisine yönelik direkt ve hakim hedefler olabilecegini öne sürer. Histopatolojik analiz, hayvan çalismasindaki hayvanlarin, 3 böbrek hastalik siddeti grubuna (hafif, orta ve siddetli) kategorize edilebilecegini belirtmistir (Tablo 9). NZB/W Fl farelerindeki böbrek hastaligi patolojisi, glomerüler bazal membranindaki immün kompleks depolanmasi ve karisik lenfoid hiperplazisini endike eder. Anti-IL-6 mAb ile tedavi edilmis hayvanlar, daha az siddetli böbrek hastaligi gelistirmistir. Perivasküler karisik lenfoid hiperplazisi ve protein depolamasi, anti-IL-6 mAb tedavi edilmis hayvanlarda mevcut degilken salin ve kontrol Ab ile tedavi edilmis hayvanlar, orta ve siddetli perivasküler karisik lenfoid hiperplazisi ve protein depolamasi gelistirmistir. Ayrica, glomerüler bazal membranindaki immün kompleks depolamasi, diger iki tedavi grubundakilere kiyasla anti-IL-6 mAb tedavi edilmis hayvanlarda hafiftir. B, T ve makrofaj hücre fonksiyonlari üzerinde anti-IL-6 mAb'nin etki mekanizmasinin daha fazla incelemesi, bu hücrelerin SLE patogenezinde önemli roller oynamasi nedeniyle gerçeklestirilmistir. Tip II Diyabet Hastaligi gelisiminde önemli bir rol oynadigi belirtilmistir. Ancak, bugüne kadar olusturulan in vitro ve in vivo veriler, bunun insülin direncindeki potansiyel rolünü hem destekler hem buna karsi çikar. In vitro deneyler Insüline yanit verene dokularin, ins vitro Inodelleri (adipoz dokuya yönelik 3T3 Ll hücreleri, hepatik hücrelere yönelik HepG2, iskelet kasina yönelik C2C12 hücreleri) ve db/db fareleri gibi insülin direnci ve T2DM'nin in vivo modelleri kullanilarak lL-6'nin insülin sinyalleme üzerinde insülin sinyalleme ve biyolojik etkiler ve glukoz alimi gibi insülin fonksiyonu, gen regülasyonu ve ilgili mekanizmalar üzerindeki etkilerini daha iyi anlamak üzere deneyler gerçeklestirilmistir. In vitro veri, IL-6'nin karacigerdeki insülin sinyallemesi üzerindeki primer etkisini kullandigini öne sürer. HepG2 hücrelerinin lL-6 tedavisi, insülin indüklü Akt fosforilasyonun inhibisyonuna neden olur. IL-6'nin insülin sinyallemesi üzerindeki bu inhibitör etkisi, bir anti-IL-6 antikoru ile bloke edilir. Karacigerdeki glukoz metabolizmasi ve insülin etkileri üzerindeki degisikliklerinin, insülin direnci ve T2D'nin gelisimin tetikleyici nedenleri oldugu öne sürülmüstür. IL-6'nin 3T3 Ll hücreleri (adiposit hücre hatti) ve C2C12'deki (iskelet kasi hücre hatti) insülin sinyallemesi üzerindeki etkileri, IL- 6'nin T2D'deki mekanizmalarini belirlemek üzere incelenir. Deneyler, 3T3 Ll fare adiposit hücre hatti kullanilarak yapilmistir. %90 farklilasmis 3T3 Ll hücrelerinde IL-6'nin insülin indüklü glukoz alimi üzerindeki etkisi degerlendirilmistir. Bu deneylerde lO ng/ml TNFd ile 24 saat boyunca tedavi, insülin indüklü glukoz aliminin tutarli bir sekilde inhibe ederken 20 ng/ml IL-6 herhangi bir etkiye sahip olmamistir. Bu veriler, adipoz doku üzerindeki IL-6 aktivitesinin, IL-6 aracili insülin direncinin primer mekanizmasi olmadigini, ancak bunun yerine adipoz dokunun, akabinde karaciger' ve kastaki insülin duyarliligina. müdahale eden IL-6'nin bir ana kaynagi olabilecegini öne sürer. Ayni veri, subkütanöz depodan farklilasmis primer insan adipositleri kullanilarak elde edilmistir. Bir viseral yag deposundan insan primer adipositler kullanilarak glukoz alimi üzerindeki IL-6 etkileri, bu deponun, obezite baglantili insülin direncine yönelik daha baglantili olabilmesinden dolayi test edilir. HepGZ. HepG2 hücreleri, karaciger dokusunun in vitro temsili olarak seçilmistir. HepGZ hücreleri, insan hepatom hücre hattidir, burada IL-6'nin insan sinyalleme üzerindeki etkisi, daha önce gösterilmistir. Deneylerde 20 ng/ml IL-6, 60 dakika enkübasyonun ardindan gözlenen maksimum etki ile insülin sinyalleme yolagindaki önemli bir kinaz olan insülin indüklü Akt fosforilasyonunu bloke etmistir; bu, bilimsel literatürde rapor edilen sonuçlar ile tutarlidir. cm kaplarda konflüent-alti HepGZ hücreleri üzerindeki Akt ng/ml) enkübasyonu sonrasi ölçülmüstür. Enkübasyonun son 5 dakikasi boyunca 0,5 nM, 1 nM ve 5 nM insülin, Akt fosforilasyonunu indüklemek üzere eklenmistir. Hücreler, modifiye RIPA liziz tamponu kullanilarak parçalanmistir ve Akt fosforilasyonu, Ser-Fosfo- Akt ELISA kullanilarak ölçülmüstür. Sonuçlar, pAkt ve Akt ELISA kitleri (BioSource) kullanilarak elde edilmistir. Bir fizyolojik konsantrasyonda insülin (0, varliginda 60 dakikalik IL-6 tedavisinde Akt fosforilasyonu, kontrol grubuna kiyasla ~%50 inhibe edilmistir. Protein konsantrasyonlari, Pierce BCA protein analiz kiti ile ölçülmüstür. Insan gelistirilmis anti-IL-6 antikorunun insülin-indüklü Akt-fosforilasyonu üzerindeki IL-6 etkilerini inhibe etme yetenegi ölçülmüstür. 20 ng/ml insan gelistirilmis anti-IL-6 antikoru, HepGZ hücrelerindeki IL-6 etkilerini inhibe edebilmistir. Sekil 8A ve 8B, IL-6'nin insan gelistirilmis anti- lL-6 antikoru varliginda veya yoklugunda insülin indüklü Akt fosforilasyonu üzerindeki etkisini gösterir. En üstteki resimde (Sekil 8A) veriler ortalama +/- SEM'i temsil etmektedir. (* (+) insülin, IL-6 ile karsilastirildiginda anlamli, P=0,029; ** (+) insülin +IL-6 ile karsilastirildiginda anlamli, P: 0,02). Alt-konfluent. HepGZ hücreleri, 60 dakika boyunca 20 ng/ml IL-6 ile tedavi edilmistir. Tedavinin son 5 dakikasi esnasinda, l nM insülin ilave edilmis ve hücreler modifiye edilmis RIPA tamponu kullanilarak modifiye edilmistir. Numuneler, Akt'in Ser 473'ünde fosforilasyonu tespit eden ELISA ile analiz edilmistir. Tüm veriler, ELISA ile ölçülen toplam Akt'a normallestirilmistir. AME-l9a tedavisi normal Akt sinyalini geri kazanmayi basarmistir. Alttaki resimde (Sekil 88), temsili bir western blot gösterilmistir. Üst bantlar, IL-6 (20 ng/ml, 60 dakika, 1 nM insülin ile 5 dakika), AME-19a (20 ug/ml +/- IL-6, 20 ng/ml'de 60 dakika süreyle, 1 nM insülin. ile 5 edilmis örnekleri kapsar. Blot, anti-fosfo Ser/Akt antikoru (üst panel) (pS473, Biosource) ile incelenmistir. Alt bantlar (ayni leke soyulmus ve BioSource'tan anti-Akt ile tekrar incelenmistir), her bir seride esdeger proteinin yüklendigini göstermektedir. Yöntem: HEPGZ hücreleri, konflüansa kadar 100 mm doku kültürü kaplarinda büyütülmüstür. Hücreler, DMEM-%1BSA ipinde bir gece aç birakilmistir. AME-l9a (20 ug/ml), IL-6 eklemesi öncesi ~30 dakika boyunca enkübe edilmistir. IL-6 (20 ng/ml) +/- AME-l9a (20 ug/ml), hücrelerin ilavesinden ~30 dakika önce enkübe edilmistir. Numuneler, 37°C'de 60 dakika boyunca hücreler üzerinde enkübe edilmistir; akabinde 1 nM insülin (nihai konsantrasyon), 5 dakika boyunca oda sicakliginda hücrelere eklenmistir. Hücreler, hemen 3 durulama çok soguk PBS ile yikanmistir. Plakalar, lizize kadar dondurulmustur. Fosfo Akt ve toplani Akt, ELISA kitleri (BioSource ve Sigma) kullanilarak belirlenmistir. Referans: JJ Senn, PJ Kover, IA Nowak ve RA Mooney. Interleukin 6 induces cellular insülin resistance in Primer siçan hepatositleri Primer hepatositler insülin sinyalleme üzerindeki IL-6 ve anti-IL-6 antikorlarinin (veya diger IL-6 antagonistlerinin) etkisinin veya karaciger glukoz üretimi üzerindeki insülin etkisinin test edilmesine yönelik uygun daha uyumlu bir in vitro sistem sunar. Insülin, IL-6 ve/veya IL-6 mAb ile tedavi edilen siçan hepatositlerinde PIB kinaz (PI3K) aktivasyonunu belirlemek üzere, izole hücreler` 5 ng/ml IL-6 varliginda ve yoklugunda insülin ile tedavi edilmistir ve insülin reseptörü, IRS-l (Sekil lZA) ve Akt (Sekil 12B) fosforilasyonu ELISA analizleri ve Western blot analizi ile belirlenmistir. Ilaveten, insülin ile uyarilmis IRSl/p85 birlesmesi üzerindeki IL-6 etkileri incelenmistir (Sekiller llA ve B). Deneyler asagidaki gibi gerçeklestirilmistir: 6 gözlü kolajen kapli plakalarda primer siçan hepatositleri (~2 aylik) Hepatoczyme ortaminda gece boyunca dengelenmistir. Bir sonraki gün, hücreler DMEM-%l BSA-penn strep içinde 6 saat aç birakilmistir; akabinde 37°C'de 90 dakika hIL-6 (5 ng/ml); anti-IL-6 antikoru (AME-l9a) (20 ng/ml) veya anti-IL-6 antikoru (AME-l9a) +hIL-6 ile enkübe edilmistir. Hücreler kombinasyonun eklenmesinden önce anti-IL-6 antikoru (AME-l9a) ile 1 saat önceden tedavi edilmistir. Kombinasyon ayrica hücrelere eklenmeden Önce önceden inkübe edilmistir. 5 nM insülin (BioSource'den) 5 dakika hücrelere eklenmistir, akabinde hücreler aspire edilmistir ve BioSource özütleme tamponu + proteaz inhibitörleri ile derhal ayristirilmistir. Lizatlar santrifüjlenmistir ve üst fazlar lle seyreltilmistir ve ELISA'larda (Biosource'den) test edilmistir. Esit miktarlarda protein (45 ug) 2 ug anti-IRS-l poliklonal antikor (Upstate'den, Ürün #06-248) ile bir gece enkübe edilmistir. Numunelere 1 saat protein A boncuklari ile immün çöktürme uygulanmistir ve SBS-PAGE için 3x numune tamponu ile ayristirilmistir. IP numuneleri %4-12 SDS-Page jel üzerinde çalisilmistir ve akabinde Western blot analizine yönelik membrana transfer edilmistir. Membranlar (l) IRS-l baglantili p85, yani, aktif PI3K'ye yönelik 1:100 seyreltilmis p85 mAb (Upstate'den, Ürün #OS-217) (SEKIL llA'da gösterildigi üzere): ve (2) yükleme kontrolü olarak. toplani IRS-l'e yönelik 1:600 seyreltilmis IRS-l mAb (BD Biosciences'den, Ürün #611395) ile problanmistir (SEKIL llB'de gösterildigi üzere). Veriler, IL-6 tedavisinin IR, IRS-l ve Akt'nin insülin indüklü fosforilasyonunun azalmasina yol açtigini gösterir. IL-6'nin bu etkisi, hücreler anti-IL-6 antikoru (klon AME-19a) ile önceden tedavi edildiginde ortadan kaldirilir. Ilaveten, IL-6 IRS-l ile baglantili insülin indüklü p85'i (PI3K alt birimleri) inhibe etmistir. Yine, IL-6'nin bu etkisi anti-IL-6 antikoru ile ön tedavi yoluyla inhibe edilmistir. /n Vivo deneyler Insülin duyarliligi üzerinde IL-6 etkileri hayvanlarda kapsamli olarak test edilmemistir. Anti-IL-6 terapisinin insülin duyarliligini ve TZDM'yi gelistirip gelistirmedigini degerlendirmek amaciyla, db/db fareleri ve C57/B16 erkekleri yüksek yagli beslenme üzerine ticari anti-fare IL-6 antikoru (R&D Systems'den elde edilen) tedavi edilmistir. db/db fareleri Anti IL-6 tedavisinin etkileri farkli yaslarda db/db fareleri kullanilarak test edilir. 8-10 hafta arasinda fareler hastaligin erken evrelerini temsil ederek hiperinsülinemi ve insülin direnci ile karakterize edilir, 12-14 haftalik fareler T2DM'nin gelismis evrelerini temsil ederken hiperinsülinemiye ek olarak artmis glukoz seviyeleri ile karakterize edilir. Her iki yas grubundaki fareler intraperitoneal glukoz tolerans testinde (ipGTT) anti IL-6'nin insülin duyarliligini ve glisemik kontrolü gelistirme kapasitesini test etmek üzere kullanilir. db/db fareleri leptin reseptöründe mutasyon nedeniyle fonksiyonel olmayan leptin sinyallemesine sahiptir. Fareler 6-8 haftalikken, bu fareler tespit edilen ilk semptomlar ile fareler yaslandikça obezite, hiperinsülinemi ve insülin direnci gelistirir. 8 ve 12 haftalik - farkli yaslarda iki fare grubu 5 mg/kg anti IL-6 mAb ile test edilmistir ve bir intraperitoneal glukoz tolerans testi (ipGTT) tedaviden sonra birinci ve 7. günde gerçeklestirilmistir. Tedavi programi Sekil 15 `te gösterilir. 8 haftalik farelerde, anti lL-6 mAb ile tedavi GTT esnasinda glukoz klirensi üzerinde bir etkiye sahip degildir. Etki istatiksel olarak önemli olmasa da (p=0.063), anti IL-6 mAb tedavisi 12 haftalik hayvanlarda glukoz toleransinda (GT) artisa yol açar. GTT'deki bu gelisme, tedaviden sonraki 7. günde görülmüstür. Ilaveten, çalismanin tamamlanmasindan önce ve sonra serum numuneleri adipokin ve adiponektin profillerine yönelik analiz edilmistir. IL-6, TNFa ve MCP-1 seviyeleri algilama seviyelerinin altindadir. ipGTT'den alinan sonuçlar ile bir araya getirilen bu veriler, db/db hayvanlarinin insülin direnci üzerindeki anti IL-6 etkilerini arastirmak üzere iyi bir model olmadigini ve IL-6'nin insülin direncinin ve TZDM'nin gelismesinde oynayabilecegi olasi bir role yönelik IL-6 doku seviyelerinin daha uygun oldugunu ileri sürebilir. Beslenme /ndüklü Obezite (DIO) - Obezite ve Znsülin Direncine Yönelik Hayvan MOdeli C57/Bl erkek fareler 20-35 hafta %60 yag içeren bir beslenme ile beslenmistir. Obezite (ortalama vücut agirligi 50.5 gram olmustur) ve açlik kan sekeri seviyelerinde (FBG 145 mg/dl) artis gelistirmislerdir. Ilaveten, GT'yi bozmuslardir. DIO hayvanlari lO mg/kg mürin anti IL-6 Ab (R&D Systems) ile tedavi edilmistir. Genel olarak, 3 haftalik bir süre boyunca 50 mg/kg anti IL-6 mAb almislardir. ipGTT ilk 2 dozdan (5. gün), 4. dozdan sonra (12. ve 16. gün) ve 5. dozdan sonra (23. gün) gerçeklestirilmistir. Ayni zamanda, kan adipositokinlerin ve adiponektinin ölçümlerine yönelik elde edilmistir. Anti IL-6 tedavisi 5. ve 12. günde glukoz toleransini artirmamistir; ancak, 16. ve 23. günde gerçeklestirildiginde, glukoz klirensinde ve glukoz ekskürsiyon seviyelerinde artis gözlenmistir. Bu gelisme GTT boyunca 39, 60 ve 90. dakikada istatistiksel öneme ulasmistir. Bir diger deney dizisinde, DIO hayvanlari i.p yol vasitasiyla ve 20 mg/kg anti IL-6 Ab ve 20 mg/kg IgG izotip kontrol ile haftalik olarak (birinci hafta boyunca 2 doz ve akabindeki 4 hafta haftada 1 doz) tedavi edilmistir. HOMA-IR (tedaviden 2, 4 ve 6 hafta sonra), ipGTT, ipITT ve adipokin profili (tedavinin 6. haftasinda) gerçeklestirilmistir. Anti-IL-G Ab ile Tedavi Edilmis DIO Hayvanlari Üzerinde HOMA- Bu çalismalarda, 10 ve 20 mg/kg mürin anti-IL-6 Ab ve izotip kontrol ile tedavi edilmis DIO hayvanlarindaki açlik kan sekeri ve insülin seviyelerinde azalma mevcuttur. Hayvanlar kesilmistir ve açlik sekeri ve insülin seviyeleri sirasiyla Trace/DMA glukoz (ox) (thermo Electron Corp) ve Ultra Duyarli Siçan Insülin Elisa (Crystal Chem) kullanilarak belirlenmistir. Bu degerler, HOMA- duyarliligi durumunu yansitir ve klamp çalismasindan elde edilen bulgu ile iyi bir sekilde bagdasir. HOMA-IR (Açlik sekeri (mM) X açlik insülini (mIU/Lit))/22,5 formülü ile hesaplanir (Sekiller l3A, B ve C). HOMA-IR'deki gelismeler tedaviden 2, 4 ve 6 hafta sonra gözlenmistir (Sekiller l3A-C tedaviden 6 hafta sonraki verileri gösterir). Çalismanin sonunda, ipGTT ve ipITT gerçeklestirilmistir. Testlerin her ikisinde de, anti-IL-6 tedavisi (ZOmg/ml) izotip tedavi edilmis hayvanlar ile karsilastirildiginda glukoz ekskürsiyonunu ve klirensi önemli ölçüde gelistirmistir Kontrol ve anti-IL-6 ile tedavi edilmis hayvanlardan alinan serum. numunelerinin adipokin ve sitokin analizi, IL-6 nötralizasyonunun azalan MCP-l egilimi ve resistin seviyeleri ile birlikte sirküle eden IL-6 ve TNFa seviyelerinde bir düsüse neden oldugunu göstermistir. Bir diger veri kümesinde, adinopektin seviyeleri anti-IL-6 tedavisi ile artirilmistir. Tedavi ve kontrol gruplarindan alinan karaciger numunelerinin histolojik analizi gerçeklestirilmistir. Numuneler karaciger parenkimasindaki lipid içerigini belirlemek üzere Oil Red O boyamasi ile boyanmistir. DIO hayvanlarindaki karaciger lipid içerigi mürin anti-IL-6 antikoru ile tedaviye yanit olarak azalmistir. Boyama, araç ile tedavi edilmis karaciger numesinin %34'ünün ve 20 mg/kg anti-IL-6 ile tedavi edilmis hayvanlarda %8'inin tedavi edilmemis hayvanlarda lipid bagli oldugunu gösterir (Sekiller l4A-F). Sekiller 14A, ve D kontrol grubunu sunar; Sekiller l4B ve E tedavi edilmemis DIO hayvanlarini sunar; ve Sekiller l4C ve F anti-IL-6 ile tedavi edilmis hayvanlari sunar. Artirilmis lipid karaciger içerigi insülin direncinin ve Tip 2 diyabetin gelisimi ile baglantilidir. Bu nedenle, IL-6 nötralizasyonunun karaciger lipid netabolizmasini etkileyerek insülin duyarliliginda ve T2DM'de gelismeye neden olmasi düsünülebilir. Bir araya getirilen bu veriler güçlü bir sekilde Tip 2 diyabetin patolojisinde IL-6'nin rolünü ve IL-6'nin nötralizasyonunun insülin duyarliligini gelistirebildigini gösterir. Ilave Çalismalar veya yoklugunda, insülin uyarilmis IRSl fosforilasyonu, p85/PI3K ile iliskilendirme, insülin reseptörü (IR) fosforilasyonu, glikojen sentezleri ve HepGZ hücrelerindeki SOC83 ve STAT sinyallerinin katilimi üzerindeki etkisi izlenir. Ilave deneyler, IL-6'nin, pankreatik adaciklardan glukoz kaynakli insülin salgilanmasi üzerindeki etkisini incelemektedir. Bugüne kadar yayinlanan veriler, IL-6'nin siçan adaciklarindan insülin salgilanmasi üzerindeki hem inhibitör hem de uyarici etkilerini açiklamaktadir. Taze olarak izole edilmis siçan adaciklari (Liefscann'dan), glikoz varliginda veya yoklugunda IL-6 ve insan gelistirilmis anti-IL-6 antikoru (AME-19a) ile tedavi edilir. Çesitli tedaviler altinda adaciklardan salgilanan insülin seviyeleri ölçülür. C2C12. C2C12 hücreleri, insülinin iskelet kasi üzerindeki etkisini incelemek için kullanilir. IRSl ve Glut4 ekspresyonunu, insülin kaynakli IRS l fosforilasyonunu ve adiponektin aksiyonu üzerindeki IL-6'nin etkilerini incelemek için deneyler yapilir. Avantajlar: Mevcut bulusun IL-6 antikoru ile IL-6 aktivitesinin inhibisyonu, mevcut ajanlarin yan etkileri olmaksizin insülin duyarliligini ve metabolik kontrolü gelistirebildigi için önemli bir terapötik ilerlemeyi temsil edebilir. Buna ek olarak, mevcut tedavilerin T2DM'nin altta yatan nedeni, iliskili diyabetik komplikasyonlar oldugu düsünülen sistemik enflamasyonu kontrol etmek için yapabilecegi çok az sey vardir. Mevcut bulusun IL-6 antikoru gibi bir terapötigin, insülin duyarliliginin artmasina ek olarak, sistemik. enflamasyonu. inhibe etmesi ve diyabetik komplikasyonlarin gelismesini önlemesi beklenir. TZDM'den etkilenen hasta sayisi artmakta ve 2025 yilina kadar 300 milyona çikacagi tahmin edilmektedir. Bir anti-IL-6 antikoru, bir monoterapi olarak veya sülfonilüreler, biguanidler (Örn., Metformin), tiazolidinedionlar, meglitinid (Örn. Repaglinit), alfa-glukosidaz inhibitörleri (örnegin akarboz) gibi diger hali hazirda bulunan OAD ile kombinasyon halinde kullanilabilir. Ek olarak, insülin duyarliligini ve glisemik kontrolü iyilestirmek ve insülin tedavisiyle iliskili hipoglisemik vakalardan kaçinmak gibi insülin veya diger terapötiklerle kombinasyon halinde kullanilabilir. Ayrica, T2D ve Metabolik Sendromlu hastalarda insülin duyarliliginin ve glikoz düzeylerinin düzenlenmesinin yani sira anti IL-6 tedavisinin, bu hastalarda siklikla görülen CV degisiklikleri üzerinde yararli bir etkiye sahip olmasi beklenmektedir. Hansen, BC., 1995. Diabetes Care 18:A2-A9; Diabetes Prevention Hsueh, WA. ve Quinones, MJ., 2003, Am. J. Cardiology, 93: lOJ- Fernandez-Real, JM., Vd., 2001, J Clin Endocrinol Metab., Am..J Physiol Endocrinol Metab., 280:E745-E751; Bastard, JP., Klon Sekans SEQ ID CDRLl 33 SAsmüßYMY SEÇ) ID CDRLl 33 AGTGCCAGCCATAGTGTAAGTTACATGTAC SEQ ID CDRLl 34 &$19KWMY SEÇ) ID CHIRLl 34 AGTGCCAGCATTAGTGTAAGTTACATGTAC SEQ ID CDRLl 35 SARSSVSYMY SEQ ID CDRLl 35 AGTGCCCGGTCAAGTGTAAGTTACATGTAC SEQ I D CDRLl 3 6 SASYSVSYMY SEQ I D C DRL 1 3 6 AGTGCCAGCTATAGTGTAAGTTACATGTAC SEQ ID CDRLl 37 SASSSVFYMY SEQ ID CDRLl 37 AGTGCCAGCTCAAGTGTATTTTACATGTAC SEQ ID CDRLl 39 SGSSYVSYMY SEQ 1 D CDRLl 3 9 AGTGGCAGCTCATATGTAAGTTACATGTAC SEQ ID CDRLl 40 SALSSVSYMY SEQ ID CDRLl 40 AGTGCCCTGTCAAGTGTAAGTTACATGTAC SEQ I D CDRLl A9 SASSSVSYMY SEQ I D CDRLl A9 AGTGCCAGCTCAAGTGTAAGTTACATGTAC SEQ ID CDRL2 41 DFSNLAS SEO_ ID CDRL2 41 GACTTTTCCAACCTGGCTTCT SEQ ID CDRL2 43 DLSNLAS SEQ ID CDRL2 43 GACCTGTCCAACCTGGCTTCT SEQ ID CDRL2 44 DMSNLAS SEQ ID CDRL2 44 GACATGTCCAACCTGGCTTCT SEQ ID CDRL2 46 DTSNLTS SEQ ID CDRL2 46 GACACATCCAACCTGACGTCT SEQ ID CDRLZ 48 IHSEmß SEQ ID CDRLZ 48 GACACATCCGAGCTGGCTTCT SEQ ID CDRL2 A9 DTmuAS SEQ ID CDRLZ A9 GACACATCCAACCTGGCTTCT SEQ ID CDRL3 49 wmwaßmYT SEQ_ ID CDRL3 4 9 ATGCAGTGGAGTGGTTACCCATACACG SEQ ID CDRL3 50 CmeHPYT SEQ ID CDRL3 50 TGTCAGTGGAGTGGTTACCCATACACG SEQ ID CDRL3 52 SCWSGYPYT SEQ ID CDRL3 52 TCTGTGTGGAGTGGTTACCCATACACG SEQ ID CDRL3 'A9 SQWSGYPYT SEQ ID CDRL3 A9 TCTCAGTGGAGTGGTTACCCATACACG SEQ ID CDRL3 Alt. QQWSGYPYT *CDR'ler Kabat ve Chothia tanimlarinin özeti olan CDRHl istisnasi ile Kabat tarafindan tanimlandigi gibi olmustur. TABLO 2- Agir Zincir CDR'leri SEQ ID NO Klon Sekans SEQ ID IMD:CDRH1 4 GFTFSSFALSSEQ ID NochRHl 4 GGATTCACCTTTAGTAGCTTTGCCCTTTCT CDRHl 5 GFTFSPFAMSSEQ I DCDRHl 5 GGATTCACCTTTAGTCCTTTTGCCATGTCT SEQ I DCDRHl 6 GFQFSSFAMS SEQ I DCDRHl 6 GGATTCCAGTTTAGTAGCTTTGCCATGTCT SEQ IDcpRnl 8 GFTTSSFAMS SEQ I DCDRHi 8 GGATTCACCACTAGTAGCTTTGCCATGTCT SEQ IDCDRHl Q + GFQFSPFAMS SEQ I DCDRHl Q + GGATTCCAGTTTAGTCCTTTTGCCATGTCT SEQ IDcpRHl A9 GFTFSSFAMS SEQ I DCDRHl A9 GGATTCACCTTTAGTAGCTTTGCCATGTCT SEQ I DCDRH2 1 O KASSGGSYTYYPDTVTG SEQ I DCDRH2 AAÄGCGAGTAGTGGTGGGAGTTACACCTACTATCCTGA NO : 5 0 1 O CACTGTGACGGGC SEQ ID NO: CDRH2 11 KISSGGSYEYYPDTVTGSEQ I D NO : CDRHZ AAAATTAGTAGTGGTGGGAGTTACGAGTACTATCCTGA 2 l 1 CACTGTGACGGGC SEQ IDCDRHz 12 KISSGGSYYYYPDTVTG SEQ I D NO: CDRH2 AAAATTAGTAGTGGTGGGAGTTACTATTACTATCCTGA 4 1 2 CACTGTGACGGGC SEQ IDCDRHZ 14 KISSGGSWTYYPDTVTG SEQ I DCDRH2 l 4 AAAATTAGTAGTGGTGGGAGTTGGACCTACTATCCTGA NO : 5 6 CACTGTGACGGGC CDRHZ 16 KISPGGSYTYYPDTVTG SEQ ID NO: CDRH2 AAAATTAGTCCGGGTGGGAGTTACACCTACTATCCTGA 6 6 l 6 CACTGTGACGGGC 866 I D NO: CDRHz P +W KISPGGSWTYYSDTVTG (1 8a , SEQ I D NO: CDRH2 P +w AAAATTAGTCCGGGTGGGAGTTGGACCTACTATTCTGA 6 6 + 5 CACTGTGACGGGC (l8a, CDRH2 A9 KISSGGSYTYYPDTV TG SEQ I D NO: CDRHZ A9 AAAATTAGTAGTGGTGGGAGTTACACCTAÇTATCCTGA 6 2 CACTGTGACGGGC SEQ I D CDRHZ Alt' EISSGGSYTYYPDTVTG CDRHZ 17 KISSGGSYTYFPDTVTGSEQ I D NO: CDRHZ 1 7 AAAATTAGTAGTGGTGGGAGTTACACCTACTTTCCTGA 6 4 CACTGTGACGGGC CDRH2 1 9 KISSGGSYTYYPDTVAGSEQ I D NO: CDRH2 l 9 AAAATTAGTAGTGGTGGGAGTTACACCTACTATCCTGA 6 6 CACTGTGGCTGGC CDRH2 20 KISSGGSYTYYDDTVTGSEQ ID NO:0DRH2 AAAATTAGTAGTGGTGGGAGTTACACCTACTATGATGA 6 8 2 O CACTGTGACGGGC CDRHZ 2 1 KISSGGSYTYYSDTVTGSEQ ID NO:CDRH2 AAAATTAGTAGTGGTGGGAGTTACACCTACTATTCTGA 7 O 2 1 CACTGTGACGGGC SEO_ ID NO: 7 CDRHZ 22 KISSGGSYTYYPDTXTPSEQ ID NO:CDRH2 AAAATTAGTAGTGGTGGGAGTTACACCTACTATCCTGA 72 22 CACTGTGACGCCG CDRH2 2 3 KISSGGSYTYYPDTDTGSEQ ID NO:CDRH2 23 AAAATTAGTAGTGGTGGGAGTTACACCTACTATCCTGA 7 4 CACTGATACGGGC SEQ ID NO:CDRH2 P + 3 KISPGGSYTYYSDTVTG 75 (20b, SEQ ID NO:CDRH2 P + S AAAATTAGTCCGGGTGGGAGTTACACCTACTATTCTGA 76 (ZObi CACTGTGACGGGC SEQ ID NO:CDRH2 P +W KISPGGSWTYYDDTVTG (22a) SEQ IDCDRHZ P +W AÃAATTAGTCCGGGTGGGAGTTGGACCTACTATGATGA NO : 7 8 + CACTGTGACGGGC (22a) SEQ ID NO=CDRH3 32 QLWGYYALDISEQ IDCDRH3 32 CAGTTATGGGGGTACTATGCTCTTGACATT SEQ IDCDRH3 A9 QLWEWAMH SEQ IDCDRH3 A9 CAGTTATGGGGGTACTATGCTCTTGACTAC SEQ ID CDRH3 Alt' GLWGYYALDY 1CDR'ler Kabat ve Chothia tanimlarinin özeti olan CDRHl istisnasi ile Kabat tarafindan tanimlandigi gibi olmustur- TABLO 3 - Tekli CDR kütüphanelerinden mutasyonlar Klon CDRHl Klon CDRLl 4 M34L 33 SZ7H S31P 34 8271 6 T28Q 35 826R 8 F29T 36 827Y 37 SBOF Klon CDRH2 38 8271 11 T57E 4O $26L 12 T57Y 14 Y56W Klon CDRL2 16 852aP 41 T51F 17 Y59F 43 T51L 19 T64A 44 T51M P6OD 46 A55T 21 P6OS 47 T51L 22 G65P 48 N53E 23 V63D Klon CDRL3 Klon CDRH3 49 Q89M Y99S 50 Q89C 26 YlOZT 52 Q9OC 27 Y99S 29 Y99T 3O Y99N 31 YlOZF 32 YlOZI TABLO 4 - Kombinatoryal Kütüphanede Yer Alan Mutasyonlar S31P Y56W YlOZI SZ7Y T51M n_ o m a v_ 0 _2 _2 › mmmmsz 0 a v. w Sms& 0 x .w îmsz nußaCoux mzmgmünß& un TABLO 5B - Insan Gelistirilmis Anti-IL-G Antikor Klonlari ve Karsilik gelen CDR'ler AME-A9 SEQ ID: 61 SEQ ID:91 ID:27 35 ID247 AME-l6 SEQ ID:57 SEQ ID:91 ID:27 35 ID:47 AME- SEQ ID:SEQ ID:SEQ SEQ AME- SEQ ID:SEQ SEQ SEQ 19a 3 ID:21 ID:29 ID:39 AME- SEQ ID:SEQ SEQ SEQ AME- SEQ ID:SEQ ID:SEQ SEQ 22a 7 17 IDz29 IDz45 AME- SEQ ID:SEQ SEQ SEQ Tablo 6 - EC& Degerleri Klon EC& Degeri gelisme) TABLO 7 - Anti-IL-G IgG'ler için Kinetik Sabitleri Gelisme Antikor koff (sn' Orani kon Konsant Ko Gelisme 1) Gelisme Klon (kimerik (M'1 rasyon (pM) Orani (hesaplan Orani ab' ye sn'l) kiyasla) 1( 4.4 X 3 1 1 1 antiko 106 1.3 x 10'5 1 0,78 3,8 1 ~ 3,5 Insan Gelistirilmis ve Kimerik Antikor Türlerinin çapraz tür reaktivitesi Inhibisyon Insan Gelistirilmis) (Kimerik ve reaktif Marmoset Sinomolgus Sempanze Domuz Kuyrugu Cotton Top Maymunu Bilinmeyen Belirlenmemis Reaktif olmayan Kobay Faresi Yucatan minipig Insan Gelistirilmis ve Kimerik Antikorun çapraz tür reaktivitesi Insan gelistirilmis ve kimerik antikorlar, insan, marmoset, sinomolgus maymunu, sempanze, rhesus maymunu, babun, domuz kuyrugu maymunu ve pamuklu maymunlarin PBMC'lerinden kosullandirilmis süpernatanlar tarafindan uyarilan 7TD1 hücrelerinin proliferasyonunu nötralize edebilir. "+" nötrlestirme testinde pozitif; nötrlestirme testinde negatif; N/D, belirlenmemis. Tablo 9 - NZB/W F1 farelerinde anti-IL-G mAb tedavisinin renal patoloji üzerindeki etkisi * Siddetli - Perivasküler karisik lenfoid hiperplazi, mezanjyial hipersellülerite, protein. birikimi, glomerüler* bazal membran immün kompleks birikimi Orta - Orta perivasküler karisik lenfoid hiperplazi, orta derecede mezanjyial hipersellülerite, glomerüler bazal membran immün kompleks birikimi, protein biriktirme yok Hafif - Hafif mezanjiyal hipersellülerite, hafif glomerüler bazal membran immün kompleks birikimi, perivasküler karisik lenfoid hiperplazi yok, protein biriktirme yok Tedavi grubu Siddetli* hutedil* Hafif* Tablo 10 - Degisken bölge klon sekanslari Zincir V Bölgesi Sekans -JF.__ IS-ÄIUZIILL-Âî.." Nükleoti Nükleoti YM\W\',Kiu Nükleoti ITIAIIICLTIIIIC `. TA?1'i.".i`îug`I`L`in`TI`AÜ I 'TC/`L L ÄÜ *IFJ'2-N-I1`III7. AIÜKI'TDJJ! 7- `-. Nükleoti AIF .`[u`i`\`. :11`: `1` ?jî .II/`X ki". 7 .ÃI'J Nükleoti Nükleoti Nükleoti Nükleoti AJAJl.h.hhni~lAÇla1WhÜJTÜÜ" 7,,AAJEAS.I . 3.9, 4 li& ;isi "IV|›P;ÇF?$.HJ. Nükleoti .II 3 IVI -I_` .KI-'I` I ÇîîûmKNÇ '_ 'i' ;CT-INS '_ RA: L IÃVY 1" .' F:1'«.':5L'V\'v7"_' YILI, I WII" `TTK-TI` Nükleoti A .'A il'îiî-:IÂI-'Â 4 JIA .'lA'l `Ä'.'Ä'."."I' 4A .AI"I lI-`I-"-`i.iiî .3x9 31' -i'- ,i"-".".I- 1 MALJ n 'a 124 AME- L 20b Zinciri 125 L -i :i ' '.r'-.l'-'i"\. îl 1.3(1' Nükleoti IÃ'V'Y 1' `IF-.1's'g ::VE 7113. ;1. I HIM: L"I'î"v"I"/Ç-î ,'-' Zinciri ';':A "I îî:':;2.i't.':_ . .2. ,Iif'i'î Nükleoti IK: A îi"\› ` I' ` f.'j'i',iî-`. 1771)". ITFTI" I""I'›`vi"\ .Ã "I"I'IV"` ` " "" " 128 AME- L 22a Zinciri AA ;I IYH'" PÜF-`i Zinciri '"V- Nükleoti ..gß,;7 ZinCiri _VHKI fWVAKI;Â-üîiîslNlYE NüklEOti ii'.' '- "i :mi IZ.?\J"I_."\.I.I-Ii_îiil`îx I I :I 'FL'IÄII'Ç Ã'Iîa IIIIÇSTI "17" ?x :IÄTSZFIIT I,"I"I›_`iîi.î1`î II Tablo 11 - Serpistirilmis etiketli CDR sekanslari olan bir L6 insan hafif zincir çerçeve bölgesinin amino asit sekansi (FRLl -SEQID N():1(IS) CDRL] (FRLî-SEQID 5102106) CDRLS fFRL-'i - SEQ 1D NO:10& (FRL3 - SEQ ID NO:10?) Tablo 12 - Serpistirilmis etiketli CDR sekanslari olan bir VH3-7 insan agir zincir çerçeve bölgesinin amino asit sekansi (FRIH -SEQIDNUÜIIUJ CDRH] (FRIIZ-SEÇHDNOHIH) . ,15" ..Vw-..5... l:: i. H CDRHÄ (FRH-l-SFQID N():1121 Tablo 13 - CDR Sekanslari CDR AA Sekansi* 1 32 CDRLl SgiXszXaV&YMY 1 3 3 CDRLZ DÄSJLÄ S 1 3 4 CDRL 3 X9X10WSGYPYT 1 3 5 CDRHl GFXi iXnSQFAXES 136 CDRH2 KÄgSÄmGGSXnXmYXwaDTXanXn 1 3 7 CDRH3 QLWG&YALDÄÄ *X, Tablo 1 ve 2'nin SEQ ID No'lari: l-92'de ve Tablo 3, 4, 5A ve 8'de açiklanan sekanslarda gösterilen örnekleyici, sinirlayici olmayan amino asit ornatimli herhangi bir uygun amino asit anlamina gelir. Ayrica, X asagidaki degerlere sahip olabilir: X1 = A veya G X2 = S veya R X3 : H, I, 8 veya Y X4 = S veya Y X5 = 8 veya F X6 = F, F, M veya T X7 N veya E A veya T X9 = M, C veya 5 Q veya C T veya Q XM = F, S veya T T, E veya Y Y veya F , D veya F Xu = V veya D X22 = T veya A K& : G veya P X24 = S, X25 = Y, Y, T veya N T, F veya I SEQ ID No:115 - IL-6 PROTEINININ AMINO ASIT SEKANSI 1.-1."r›'1 ..JÇi'IEISIu VKIITGLLE`EVILEILQN3F350- › '::I["-JI/.IIIE'IiIiiî-?Il-IF.'..EE'IFJP-J1.H 1,I"FII"]:"-'.1'.I*I[Ç'II1'I`i* îI îîîlîîg› I`«.'}*.5'.'L`I'I.'. QâRâ$QMSTKTLZQFLQKKEFXLtâîîîPE QUHTTEIIIHSFHHFILESLFÄLHÜM DIZI LISTESI <110 Cenlocor, lnc. Applied Molecular Evolution. Inc <120 Anti-IL-S Antikorlari. Bilesimleti, Yontemleri ve Kullanimlari <130 CEN5094 PCT <151 ?DOS-0499 <1GO 138 <170 FastSEO for Windows Version 4 O 4210›1 <2111Ü <212 PRT <213 Homo sapiens <400 1 Ser Ala Ser His Ser Val Ser Tyr Met Tyr <2102 <211 30 <212 DNA <213 Homo sapiens (400› 2 <210 3 <21110 <212 PRT <213 Homo sapiens 0100› 3 Ser Ala Ser Ile Ser Val Ser Tyr Met Tyr <210'› 4 <21130 <212 DNA <213 Homo sapiens 0100'› 4 <210 5 <21110 <212 PRT <213 Homo sapiens (400› 5 Ser Ala Ser Ile Ser Val Ser Tyr Met Tyr <2106 <211 30 <212 DNA <213 Homo sapiens <4ÜO 6 <210› 7 <21110 <212PRT <213 Homo sapiens (400)? Ser Ala Ser Ile Ser Va! Ser Tyr Met Tyr <2108 <21130 <212 DNA <213 Homo sapiens <4008 <210 9 <21110 <212 PRT <213 Homo sapiens (400›9 Ser Ala Ser Ile Ser Val Sar Tyr Met Tyr <21010 <211 3D <212 DNA <213 Homo sapiens <400 10 <210 11 <21110 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 11 Ser Ala Ser Ile Ser Val Ser Ty! Met Tyr <21012 <211 30 <212 DNA <213 Homo sapiens <400› 12 <21013 <21110 <212 PRT <213 Homo sapiens <4ÜO 13 Ser Ala Ser Ile Ser Val Ser Tyr Met Tyr <21014 <211 30 <212 DNA <213 Homo sapiens 0100› 14 <210 15 <2111Ü <212 PRT <213 Homo sapiens <400 15 Ser Ala Ser Ile Ser Val Ser Tyr Met Tyr <21016 <21130 <212DNA <213H0m0 sapiens <4ÜO 16 <21017 <211 7 <212 PRT <213 Homo sapiens <210 18 <21121 <212 DNA <213› Homo sapieris <400 18 gacmtcca acctggcnc t <210 19 <2117 <212 PRT <213 Homo sap'iens <400 19 <21020 <21121 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 20 <21Ü21 <211 7 <212 PRT <213 Homo sapiers <400 21 <21022 <21121 <212 DNA <213 Homo sapiens (400 22 <210 23 7 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 23 <210 24 <21121 <212 DNA <213› Homo sapiens <400 24 gacacatcca acctgacgic l <210 25 <211 7 <212 PRT <213 Homo sapiens <210 26 <21121 <212 DNA <213 Homo sapiens 9100› 26 <210 27 <211 7 <212 PRT <213› Homo sapiens <210 28 <21121 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 28 <210 29 <211 9 <212 PRT <213 Homo sapiens 9100› 29 Met Gln Trp Ser Gly Tyr Pro Tyr Thr <210 30 <211 27 <212› DNA <213 Homo sapiens <400 30 <210 31 <211 9 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 31 Cys Gln Trp Ser Gly Tyr Pro Tyr Thr <210 32 <21127 <212 DNA <213 Homo sapiens <4ÜO 32 <210` 33 <2119 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 33 Ser Cys Trp Ser Gly Tyr Pro Tyr Thr <210 34 <211 27 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 34 <210 35 <211 9 <212 PRT <213 Homo sapiens <4ÜO 35 Ser Gli` Trp Ser Gly Tyr Pro Tyr Thr <210 36 <21127 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 38 <210 37 <211›10 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 37 Gly Phe Thr Phe Ser Ser Ph& Ala Leu Ser <210 38 <211 30 <212DNA <213 Horro sapiens <~100 38 <210 39 <21110 <212 PRT <213 Horro sapier's <400 39 <210 40 <211 30 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 40 <21041 <21110 <212 PRT <213 Homo sapiens <~1ÜO 41 Gb; Phe Glr Phe Ser 381' Phe Ala Mel Ser <210 42 <211 33 <212DNA <213 Homo sapiens <4ÜÜ 42 <210 43 <21110 <212 PRT <213 Homo sapiens 0100'› 43 <211 30 <212 DNA <213 Homo sapiens (400› 414 <210 45 <21110 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 45 Gly Phe Gli` Phe Ser Pro Phe Ala Mel Ser <210› 48 <211 30 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 48 <21047 <21110 <212 PRT <213 Homo sapiens Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe Ala I'v'et Ser <210 48 <211 30 <212› DNA <213› Homo sapiens 0100› 48 <210 49 <21117 <212› PRT <213 Homo sapier's <4ÜO 49 Lys Ala Ser Ser Gty Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Val Thr 1 5 10 15 <210 50 <211 51 <212 DNA <213› Homo sapiens <400 SD <210 51 <211 1.7 <212› PRT <213› Homo sapiens <400 51 Lys lIe Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Glu Tyr Tyr Pro Asp Thr Val Thr <21Ü 52 <21151 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 52 <210 53 <21117 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 63 Lys lIe Ser Ser Gly Gly Set Tyr Tyr Tyr Tyr Pro Asp Th( Val Thr 1 5 10 15 <210` 54 <211 51 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 54 <210 55 <211 1.7 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 55 Lys lle Ser Ser Gly Gly Ser Trp Thr Tyr Tyr Pro A5p Thr Vai Thr 1 5 10 15 <210 56 <211 S1 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 56 <210 5? <21117 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 57 Lys Ile Ser Pro Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Val Thr 1 5 10 15 <210 58 <211 51 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 58 <210› 59 <21117 <212 PRT <213 Homo sapiens Lys Ile Ser Pro Gly Gly Ser Trp Thr Tyr Tyr Ser Asp Thr Val Thr 1 5 10 15 <210 so <211 51 <212 DNA <213 Homo sapiens <4ÜO 60 <210 61 <21117 <212 PRT <213 Homo sapiens Lys Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Vai Thr 1 5 1D 15 <210 62 <211 51 <212› DNA <213› Homo sapiens <400 62 <210 63 <211 17 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 63 Lys Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Phe Pro Asp Thr Val Thr 1 5 10 15 <210 84 <211 51 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 84 <210 65 <211 17 <212 PRT <213 Homo sapiens <4ÜO 65 Lys Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyf Tyr Pro Asp Thr Val Ala 1 5 10 15 <210 68 <211 51 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 66 <210 67 <21117 <212 PRT <213 Homo sapiens 0100› 67 Lys Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Asp Asp Trr Val Thr 1 5 10 15 <21068 <21151 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 68 <210 69 <211 17 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 69 Lys Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ser Asp Thr Val Thr 1 5 10 15 <210 70 <211 61 <212DNA <213 Homo sapiens <210 71 <21117 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 71 Lys Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro ASp Thr Vai Thr 1 5 10 15 <210 72 <211 51 <212 ONA <213 Homo sapiens <400 72 <210› 73 <21117 <212 PRT <213 Homo sapiens <400› 73 Lys Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr ASp Thr 1 5 10 15 <210 74 <211 51 <212 DNA <213 Homo sapiens <4ûû 74 <210 75 <21117 <212 PRT <213 Homo sapiens Lys Ile Ser Pro Gly Giy Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ser Asp Thr Val Thr 1 5 1D 15 <210 76 <211 51 <212› DNA <213› Homo sapiens <400 76 <210 77 <211 17 <212 PRT <213 Homo sapiens 0100› 77 Lys Ile Ser Pro Gly Gly Ser Trp Thr Tyr Tyr Asp Asp Thr Vai Thr 1 5 10 15 <210 78 <211 51 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 78 <210 79 <21110 <212 PRT <213 Homo sapiens Gm Leu Trp Giy Ser Tyr Aia Leu ASp Tyr <210 8D <211 30 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 80 <210 81 <21110 <212 PRT <213 Homo sapiens 0100› 81 Gm Leu Trp Gly Tyr Tyr Ala Leu Asp Thr <210` 82 <211 30 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 82 <210 83 <2111O <212 PRT <213 Homo sapiens 9100› 83 GlnLeu Trp Gly Thr Tyr Ala Leu Asp Tyr <21084 <211 30 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 84 <210`› 85 <21110 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 85 Gm Leu Trp Giy Asn Tyr Ala Leu Asp Tyr <21086 <21130 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 86 <210 87 <21110 <212 PRT <213 Homo sapiens 0100› 87 Gm Leu Trp Gly Tyr Tyr Ala Leu Asp Phe <21088 <211 30 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 88 <210 89 <21110 <212 PRT <213 Homo sapiens <~400 89 Gln Leu Trp Gly Tyr Tyr Ala Leu ASp Ile <210 90 <211 30 <212 DNA <213 Homo sapiens <4ÜO 90 <210` 91 <21110 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 91 Gln Leu Trp Gly Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr <210 92 <211 30 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 92 <210 93 <211106 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 93 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Sar Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Net 25 30 Tyr Trp Tyr Gln Gir Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr 40 45 Asp Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly SEI' Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr He Ser Ser Leu Glu Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Val Tyr Ty!' Cys SerGh Trp SerGry Tyr Pro Tyr Thr 85 90 95 PheGiy Giy Giy Thr Lys Val Glu ile Lys 100 105 <210 94 <211 318 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 94 <210 95 <211 119 <212 PRT <213 Homo sapiens Glu Val Gln Leu `~/al Glu Ser Gly Gly Gly Leu Va! Gln Pro Gly Gly 1 5 1-9 15 Set Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 25 33 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Vai 40 45 Ala Lys He Ser Ser Giy Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Vai 50 55 60 Thr Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Ly-s Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Giu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gin Leu Trp Gly Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 <210 96 <211 357 <212 DNA <213 Homo sapiens <210 97 <211106 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 97 <210 98 <211 318 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 98 <210 99 <211 119 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 99 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 25 33 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 40 45 Ala Lys He Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Val 50 55 60 Thr Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Ly-s Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Giu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gin Leu Trp Gly Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 <210100 <211357 <212DNA <213 Homo sapiens <210101 <211106 <212›PRT <213 Homo sapiens (400 101 Glu Ile Val Leu Thi Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Lou Ser Cys Ser Ala Ser Ile Ser Val Ser Tyr Met 25 30 Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu lle Tyr 40 45 Asp Met Ser Asn Leu Ala 'Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gty Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp PheThr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Mel Gln Trp Ser Gly Tyr Pro Tyr Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210102 <211 318 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 102 <210 103 <211 119 <212 PRT Homo sapiens Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pfo Gly G|y 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 25 33 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 43 115 Ala Lys He Ser Ser Giy Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Vai 50 55 60 Thr Gly Arg Phe Thr ne Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Mel Asn Ser Leu Arg Ala Giu Asu Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Leu Trp Gly Tyr Tyt Ala Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 <210104 <211 35? DNA <213 Homo sapiens <210105 <211 23 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 105 Glu le Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 <210 106 <211 15 <212 PRT <213 Homo sapiens 0100› 106 Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr 1 5 10 15 <210107 <211 32 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 107' (Sw ile Pro Ala Arg Phe Set Gly Ser Gly Ser Gry Thr Asp Phe Thr 1 5 10 15 Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys 25 33 <210 108 <21110 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 108 Phe Gly Gly G|y Thr Lys Val Glu Ile Lys <210 109 <211 25 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 109 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 1D 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Sar <21Ü110 <2111<1 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 110 Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala <210111 <211 32 <212 PRT <213 Homo sapiens 0100› 111 Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln 1 5 1D 15 Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu ASp Thr Ala Val Tyr Ty!' Cys Ala Arg 25 30 <210112 <21111 <212PRT <213 Homo sapiens <400 112 Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser <210113 <211 17 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 113 Glu le Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Val Thr 1 5 10 15 <210 114 <21110 <212 PRT <213› Homo sapieris <400 114 Gly Leu Trp Gly Tyr Tyr Ala Leu Asp Tyr <210115 <211212 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 115 <210116 <211106 <212 PRT 165 170 <213 Homo sapiens Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Ser Ile Ser Val Ser Tyr Met Tyr Trp Tyr Gln Gin Lys Pro Gly Gln Aia Pro Arg Leu Leu Ile Tyr 40 45 Asp Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Pne Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu 65 ?O 75 80 Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Met Gln Trp Ser Gly Tyr Pro Tyr Thr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thi Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210› 117 <211 378 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 117 <210113 <211 119 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 118 Thr Thr `.fal Thr Val Gly 61);Ile Ser <210 119 <211›414 <212 DNA <213 Homo sapiens <4ÜO 119 <210120 <211106 <212 PRT <213 Homo sapiens <~1ÜO 120 Glu Ile Val Leu Thr Glr Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thf Leu Ser Cys Ser Ala Set Ser Ser VaI Ser Tyr Mel 25 30 Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr 40 45 Asp Phe Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thi Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu 65 ?O 75 80 Asp Phe. A|a Val Tyr Tyr Cys Met Gln Trp Ser Gly Tyr Pro Tyr Thr 85 90 95 Phe Gly Gly'Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 !05 <210121 <211 378 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 121 <210122 <211 119 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 122 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly G|y Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Gln Phe Ser Pro Phe 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 40 45 Ala Lys Ile Ser Pro Gly Gly Ser Trp Thr Tyr Tyr Ser Asp Thr Val 50 55 60 Thr Gly Arg PheThr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 ?0 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Leu Trp Gly Tyr Tyr Ala Leu Asp Ile Trp Gly Gln Gly 100 105 110 <210123 <211414 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 123 <210124 <211 106 <212 PRT <213 Homo sapiens .:400› 124 Glu Ile Va! Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser LeLi Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met 25 30 Tyr Trp Tyr Gln Gin Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg LeLi Leu Ile Tyr 40 45 Asp Phe Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Ph: Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Vai Tyr Tyr Cys Met Gln Trp Ser Gly Tyr Pro Tyr Trr 85 90 95 Phe Gly Gly Gty Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210 125 <211 3.78 <212 DNA <213 Homo sapiens <210 126 <211 119 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 126 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser GîyGly @y Leu Val Gln Pro (513; Gly 1 5 10 15 Ser I_ eu Arg l eu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Gln Phe Ser Pro Phe 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 40 45 Ala Lys Ile Ser Pro Gly Gly Ser Trp Thr Tyr Tyr Ser Asp Thr Val 50 55 60 Thr Gly Arg PheThr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Ty( Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Leu Trp Gly Tyr Tyr Ala Leu Asp Ile Trp Gly Gln Gly 109 105 110 <210127 <211 414 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 127 <210 128 <211 106 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 128 GILi Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser LeLi Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met 25 30 Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu lie Tyr 40 45 Asp Phe Ser Asn Leu Ala Ser Gly ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp PheThr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Met Gln Trp Ser Gly Tyr Pro Tyr Trr 85 90 95 Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210129 <211 378 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 129 <210 130 <211 119 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 130 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 S 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Gln Phe Ser Pro Phe 25 30 Ne Mer Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 40 .45 Ala Lys Ile Ser Pro 617 Gly Ser Trp Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Asp 50 55 GO Thr Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met A511 Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Leu Trp Gly Tyr Tyr Ala Leu Asp Phe Trp Gly Gln Gly 100 105 110 <210 131 <211414 <212 DNA <213 Homo sapiens <400 131 <210 132 <21110 <212 PRT <213 Homo sapiens <220 <221 belirsiz <222 (2l (3) (4) (5) (7) <223 Burada Xaa yirmi dogal olarak olusan amino asitten herhargi oiri olabilir Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Val Xaa Tyr Met Tyr <210 133 <211 7 <212 PRT <213 Homo sapiens <220 <221 belirsiz <222 (2) (4) (6) <223 Burada Xaa. yirmi dogal olarak olusan amino asiuen herhargi biri olabilir <400 133 <210134 <2119 <212 PRT <213 Homo sapiens <220 <221 belirsiz <~222 (1 ](2) <223 Burada Xaa, yirmi dogal olarak olusar amino asitten herhangi bin' olabilir. <400 134 Xaa Xaa Trp Ser Gly Tyr Pro Tyr Thr <210 135 <21110 <212 PRT <213 Homo sapieris <220 <221 belirsiz <222 (3) (4) (6) (9) <223 Burada Xaa. yirmi dogal olarak olusan amino asitten hemargi bin olabilir. <400 135 Gly Phe Xaa Xaa Ser Xaa Phe Ala Xaa Ser <210 136 <211 17 <212 PRT <213 Homo sapiens <220 <221 belirsiz <223 Burada Xaa. yirmi dogal olarak olusan amino asitten herhai*gi biri olabilir_ <400 136 Lys Xaa Ser Xaa Gîy Gly Ser Xaa Xaa Tyr Xaa Xaa Asp Thr Xaa Xaa 1 5 10 15 <210137 <21110 <212 PRT <213 Homo sapiens <220 <221 belirsiz <222 (5› (10) <223 Burada Xaa. yirmi dogal olarak olusan amino asitten herhargi bin olabilir. Gm Leu Trp Gly Xaa Tyr Ala Leu .Asp Xaa <210 138 9 <212 PRT <213 Homo sapiens <400 138 Gm Glr Trp Ser Gly Tyr Pro Tyr Thr OD490 055 ~ ____. - ~_-_-__ -. _. m 0.50 ' +CNTO 328 0.451 1 -i- CNTO136' 0.30_ 0.25J 0.20 * 010-_ 0.00 WTTW'IW 'T` 3 Imlrmm [TIVTWIIVI'Ü \ L ug/ml antikor 168RSFKEFLQSSLMLRQM uglml antikor A Kontrol mAb 50'* v -I-CNTO 136 +Simüle edilmis o".rgt-_4 _vr'iir- 'I '1- H'TYI_ _r- rh' ""ivii _ i_' W# ?11"rni ughnlanükor TR TR TR TR

Claims (13)

ISTEMLER
1. Tamamiyla insan çerçevelerine ve sabit bölgelerine sahip izole bir anti IL-6 antikoru olup, özelligi; asagidakileri içermesidir: (i) SEQ ID NO:3'ün bir tamamlayicilik belirleme bölgesi hafif zinciri l (CDRLl) amino asit sekansi, SEQ ID NO:21'in bir CDRLZ amino asit sekansi, SEQ ID NO:29'un bir CDRL3 amino asit sekansi ihtiva eden bir hafif zincir degisken bölgesi ve SEQ ID NO:39'un bir tamamlayicilik. belirleme bölgesi agir zinciri l (CDRHl) amino asit sekansi, SEQ ID NO:59'un bir CDRH2 amino asit sekansi ve SEQ ID NO:89'un bir CDRH3 amino asit sekansini ihtiva eden bir agir zincir degisken bölgesi içerir; veya (ii) CDRLl'in SEQ ID NO:3'ün amino asidini içerdigi, CDRL2'nin SEQ ID NO:21'nin amino asidini içerdigi, CDRL3'ün SEQ ID NO:29'un amino asidini içerdigi bir hafif zincir degisken bölgesi ve CDRHl'in SEQ ID NO:41'in amino asidini içerdigi, CDRHZ'nin SEQ amino asidini içerdigi bir agir zincir degisken bölgesi; veya (iii) CDRLl'in SEQ ID NO:15'in amino asidini içerdigi, CDRL2'nin SEQ ID NO:27'nin amino asidini içerdigi, CDRL3'ün SEQ bölgesi ve CDRHl'in SEQ ID NO:47'nin amino asidini içerdigi, CDRHZ'nin SEQ ID NO:57'nin amino asidini içerdigi ve CDRH3'ün SEQ ID NO:9l'in amino asidini içerdigi bir agir zincir degisken bölgesi; veya (iv) CDRLl'in SEQ ID NO:15'in amino asidini içerdigi, CDRL2'nin SEQ ID NO:17'nin amino asidini içerdigi, CDRL3'ün SEQ bölgesi ve CDRHl'in SEQ ID INO:45'in. amino asidini içerdigi, CDRHZ'nin SEQ ID NO:59'un amino asidini içerdigi ve CDRH3'ün SEQ bölgesi; veya (V) CDRLl'in SEQ ID NO:7'nin amino asidini içerdigi, CDRL2'nin SEQ ID NO:21'in amino asidini içerdigi, CDRL3'ün SEQ ID NO:29'un amino asidini içerdigi bir hafif zincir degisken bölgesi ve CDRHl'in SEQ ID NO:4l'in amino asidini içerdigi, CDRHZ'nin SEQ amino asidini içerdigi bir agir zincir degisken bölgesi, burada bahsedilen antikor, insan lL-6'sina veya bunun bir fragmanina Kinexa® yöntemiyle belirlendigi üzere O,l-9,9 X 10"14 M'lik bir afinite ile baglanir.
2. Istem l'e göre anti IL-6 antikoru olup, özelligi; burada çerçeve bölgelerinin, germ hatti insan çerçeveleri olmasidir.
3. Istemler l-2'in herhangi birine göre IL-6 antikoru olup, özelligi; burada bahsedilen antikorun bir lL-6 polipeptidinin en az bir aktivitesini modüle etmesidir.
4. Izole edilmis bir nükleik asit molekülü olup, özelligi; istemler l-3'ten herhangi birine göre en az bir izole edilmis anti IL-6 antikorunu kodlamasidir.
5. Izole edilmis bir nükleik asit vektörü olup, özelligi; Istem 4'e göre izole edilmis nükleik asit molekülünü ihtiva etmesidir.
6. Prokaryotik veya ökaryotik bir konakçi hücre olup özelligi; Istem 4'e göre izole edilmis nükleik asit molekülü içermesi, tercihe göre burada bahsedilen konak hücrenin, COS- l, CCS-7, veya lenfoma hücrelerinin en az birinden seçilmesidir.
7. En az bir anti IL-6 antikoru üretmeye yönelik bir yöntem olup, özelligi; isteni 4'e göre nükleik asit molekülünün, buradaki antikorun, insan olmayan bir hayvanda veya prokaryotik 'veya ökaryotik bir hücrede üretildigi anti IL-6 antikorunun saptanabilir veya geri kazanilabilir miktarlarda, in vitro, in vivo veya in situ kosullar altinda eksprese edilecegi sekilde transle edilmesini içermesidir.
8. Bir bilesim olup, özelligi; istemler l-B'ten herhangi birine göre izole edilmis en az bir IL-6 antikoru, ayrica en az bir farmasötik olarak kabul edilebilir tasiyici veya seyreltici içermesi, tercihe göre ayrica, saptanabilir` bir etiket veya raportörden seçilen bir bilesik veya polipeptid, bir TNF antagonisti, bir anti-enfektif ilaç, bir kardiyovasküler (CV) sistem ilaci, bir merkezi sinir sistemi (CNS) ilaci, bir otonomik sinir sistemi (ANS) ilaci, bir solunum yolu ilaci, bir gastrointestinal (GI) sistem ilaci, hormonal bir ilaç, sivi veya elektrolit dengesi için bir ilaç, hematolojik bir ilaç, bir antineoplastik, bir immünomodülasyon ilaci, bir oftalmik, otik veya nazal ilaç, bir topikal ilaç, bir besin ilaci, bir sitokin ve bir sitokin antagonistinden seçilenlerin en az birini içermesidir.
9. Istemler l-3'ten herhangi birine göre en az bir izole edilmis anti IL-6 antikoru içeren bir bilesim olup, özelligi; terapide kullanim için olmasidir.
10. Istemler l-3'ten herhangi birine göre bir antikor olup, özelligi; bir hücre, doku, organ veya hayvanda bir IL-6 baglantili vakayi teshis etmek için bir yöntemde kullanima yönelik olmasidir, burada IL-6 baglantili vakanin, obezite, bir immün baglantili hastalik, bir kardiyovasküler hastalik, bir enfeksiyöz hastalik veya bir habis hastalik ve bir nörolojik hastaliktan olusan gruptan seçilmesidir.
11. Istemler l-3'ten herhangi birine göre bir antikor olup, özelligi; bir hücre, doku, organ veya hayvanda bir IL-6 baglantili vakayi tedavi etmede kullanima yönelik olmasidir, burada IL-6 baglantili vakanin, obezite, bir immün baglantili hastalik, bir kardiyovasküler hastalik, bir enfeksiyöz hastalik veya bir habis hastalik ve bir nörolojik hastaliktan olusan gruptan seçilmesidir.
12. Istem 10 veya istem 11'e göre antikor ve kullanimi olup, özelligi; burada (i) IL-6 ile ilgili durumun, romatoid artrit, osteoartrit, osteoliz, ortopedik implantlarin aseptik gevsemesi, sistemik lupus eritematozus, kutanöz lupus eritematozus, lupus nefriti, tip 2 diyabet melitus, kronik obstrüktif akciger hastaligi ve renal hücre karsinomu olmasi; veya (ii) antikorun, sözü edilen hayvanin yaklasik 0,1- 100 mg/kilogram arasinda etkili bir Haktarda uygulama için uygun olmasi; veya (iii) antikorun, parenteral, subkütanöz, intramüsküler, intravenöz, intraartiküler, intrabronsiyal, intraabdominal, intrakapsüler, intrakartilajinöz, intrakaviter, intraseliyal, intraserebellar, intraserebroventriküler, intrakolik, intraservikal, intragastrik, intrahepatik, intramiyokardiyal, intraosteal, intrapelvik, intraperikardiyak, intraperitoneal, intraplöral, intraprostatik, intrapulmoner, intrarektal, intrarenal, intraretinal; intrasinoviyal, intraatorakik, intraüterin, intravezikal, intralezyonel, bolus, vajinal, rektal, bukkal, dil alti, intranazal veya transdermal yollar arasindan seçilen en az bir yolla uygulama için uygun olmasi; (iv) antikorun, saptanabilir bir etiket veya raportör, bir anti-enfektif ilaç, bir kardiyovasküler (CV) sistem ilaci, bir merkezi sinir sistemi (CNS) ilaci, bir otonomik sinir sistemi (ANS) ilaci, bir solunum yolu ilaci, bir gastrointestinal (GI) sistem ilaci, hormonal bir ilaç, sivi veya elektrolit dengesi için bir ilaç, hematolojik bir ilaç, bir antineoplastik, bir immünomodülasyon ilaci, bir oftalmik, otik veya nazal ilaç, bir topikal ilaç, bir besin ilaci, bir sitokin ve bir sitokin antagonistinden seçilen en az bir~ bilesik veya polipeptidin etkili bir miktarini içeren en az bir bilesimden önce, ayni anda veya bunlardan sonra uygulanmaya uygun olmasidir.
13. Insan farmasötik veya teshis kullanimi için uygun bir ürün olup, özelligi; Istemler l-3'ten herhangi birine göre bir ambalaj veya bir anti IL-6 antikorunun bir solüsyonunu veya liyofilize bir formunu içeren bir kap içermesi, tercihe göre burada bahsedilen kabin, bir parenteral, subkütanöz, intramüsküler, intravenöz, intrartiküler, intrabronsiyal, intraabdominal, intrakapsüler, intrakartilajinöz, intrakaviter, intraceliyal, intraserebellar, intraserebroventriküler, intrakolik, intraservikal, intragastrik, intrahepatik, intramiyokardiyal, intraosteal, intrapelvik, intraperikardiyak, intraperitoneal, intraplevral, intraprostatik, intrapulmoner, intrarektal, intrarenal, intraretinal, intraspinal, intrasinovyal, intratorasik, intrauterin, intravezikal, intralezyonel, bolus, vajinal, rektal, bukkal, dil alti, intranazal veya transdermal aktarim aygiti veya sisteminin bir bileseni olmasidir.
TR2018/09676T 2005-04-29 2006-04-28 Humanize anti-il-6 antikorları, bileşimleri, yöntem ve kullanımları. TR201809676T4 (tr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US67649805P 2005-04-29 2005-04-29
US67731905P 2005-05-03 2005-05-03

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TR201809676T4 true TR201809676T4 (tr) 2018-07-23

Family

ID=37308556

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TR2018/09676T TR201809676T4 (tr) 2005-04-29 2006-04-28 Humanize anti-il-6 antikorları, bileşimleri, yöntem ve kullanımları.

Country Status (37)

Country Link
US (11) US7560112B2 (tr)
EP (3) EP2842968B1 (tr)
JP (4) JP4763043B2 (tr)
KR (1) KR101340950B1 (tr)
CN (2) CN102924596B (tr)
AR (1) AR053370A1 (tr)
AU (1) AU2006242347B2 (tr)
BR (1) BRPI0609869B1 (tr)
CA (1) CA2606348C (tr)
CR (1) CR9551A (tr)
CY (1) CY1120739T1 (tr)
DK (2) DK2842968T3 (tr)
EA (1) EA015262B1 (tr)
EC (1) ECSP077888A (tr)
ES (2) ES2676732T3 (tr)
HN (1) HN2006016512A (tr)
HR (2) HRP20150740T1 (tr)
HU (2) HUE025376T2 (tr)
IL (3) IL186965A0 (tr)
JO (1) JO3058B1 (tr)
LT (1) LT2842968T (tr)
ME (1) ME02185B (tr)
MY (2) MY143374A (tr)
NI (1) NI200700278A (tr)
NO (1) NO342898B1 (tr)
NZ (3) NZ598657A (tr)
PA (1) PA8672101A1 (tr)
PE (1) PE20061324A1 (tr)
PL (2) PL1874351T3 (tr)
PT (2) PT1874351E (tr)
RS (2) RS54133B1 (tr)
SI (2) SI1874351T1 (tr)
SV (1) SV2006002513A (tr)
TR (1) TR201809676T4 (tr)
TW (1) TWI445546B (tr)
WO (1) WO2006119115A2 (tr)
ZA (1) ZA200710264B (tr)

Families Citing this family (122)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9453251B2 (en) 2002-10-08 2016-09-27 Pfenex Inc. Expression of mammalian proteins in Pseudomonas fluorescens
EP2412816B1 (en) 2004-07-26 2014-12-03 Pfenex Inc. Process for improved protein expression by strain engineering
PA8672101A1 (es) * 2005-04-29 2006-12-07 Centocor Inc Anticuerpos anti-il-6, composiciones, métodos y usos
RU2446826C2 (ru) 2005-10-14 2012-04-10 Фукуока Юниверсити Агенты для подавления повреждения трансплантированных островков после трансплантации островков
JP5191235B2 (ja) 2005-10-21 2013-05-08 中外製薬株式会社 心疾患治療剤
AR057582A1 (es) 2005-11-15 2007-12-05 Nat Hospital Organization Agentes para suprimir la induccion de linfocitos t citotoxicos
JP5183484B2 (ja) 2005-12-09 2013-04-17 ユセベ ファルマ ソシエテ アノニム ヒトｉｌ−６に対して特異性を有する抗体分子
AR057227A1 (es) * 2005-12-09 2007-11-21 Centocor Inc Metodo para usar antagonistas de il6 con inhibidores del proteasoma
CN101346395A (zh) * 2005-12-30 2009-01-14 默克专利有限公司 阻止复合有IL-6Rα的IL-6与GP130结合的抗IL-6抗体
AR059213A1 (es) 2006-01-27 2008-03-19 Univ Keio Agentes terapeuticos para enfermedades que involucran neovascularizacion coroidal
IN2014DN10515A (tr) 2006-03-31 2015-08-21 Chugai Pharmaceutical Co Ltd
CA2648644C (en) 2006-04-07 2016-01-05 Osaka University Muscle regeneration promoter
EP2011880B1 (en) 2006-04-13 2012-10-24 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Taurine transporter gene
DK2021463T3 (en) * 2006-05-19 2017-01-16 Alder Biopharmaceuticals Inc Culture method to obtain a cloned population of antigen-specific B cells
CA2657581A1 (en) * 2006-07-11 2008-01-17 Roy C. Levitt Rhinosinusitis prevention and therapy with proinflammatory cytokine inhibitors
BRPI0715115A2 (pt) * 2006-08-03 2013-06-04 Vaccinex Inc anticorpo monoclonal isolado, molÉcula de Ácido nucleico isolada, vetor de expressço, cÉlula hospedeira, mÉtodos para tratar uma doenÇa, e para produzir um anticorpo monoclonal isolado, uso do anticorpo monoclonal isolado, e, composiÇço farmacÊutica
US20080081041A1 (en) * 2006-09-29 2008-04-03 Jeffrey Nemeth Method of Using IL6 Antagonists with Mitoxantrone for Prostate Cancer
TW200831528A (en) * 2006-11-30 2008-08-01 Astrazeneca Ab Compounds
KR101508019B1 (ko) 2007-01-23 2015-04-06 고쿠리츠 다이가쿠 호우징 신슈 다이가쿠 만성 거부반응 억제제
EP2135946B1 (en) 2007-03-15 2015-12-09 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for production of polypeptide
US9580719B2 (en) 2007-04-27 2017-02-28 Pfenex, Inc. Method for rapidly screening microbial hosts to identify certain strains with improved yield and/or quality in the expression of heterologous proteins
EP2615172A1 (en) 2007-04-27 2013-07-17 Pfenex Inc. Method for rapidly screening microbial hosts to identify certain strains with improved yield and/or quality in the expression of heterologous proteins
KR20170036814A (ko) * 2007-05-21 2017-04-03 앨더바이오 홀딩스 엘엘씨 신규한 래빗 항체 인간화 방법 및 인간화된 래빗 항체
TW201531484A (zh) 2007-05-21 2015-08-16 Alder Biopharmaceuticals Inc 抗ＴＮＦ-α之抗體及其用途
US20090238825A1 (en) * 2007-05-21 2009-09-24 Kovacevich Brian R Novel rabbit antibody humanization methods and humanized rabbit antibodies
US8404235B2 (en) 2007-05-21 2013-03-26 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to raise albumin and/or lower CRP
US8178101B2 (en) * 2007-05-21 2012-05-15 Alderbio Holdings Inc. Use of anti-IL-6 antibodies having specific binding properties to treat cachexia
US8252286B2 (en) * 2007-05-21 2012-08-28 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to prevent or treat thrombosis
US8062864B2 (en) 2007-05-21 2011-11-22 Alderbio Holdings Llc Nucleic acids encoding antibodies to IL-6, and recombinant production of anti-IL-6 antibodies
KR101741731B1 (ko) 2007-05-21 2017-05-30 앨더바이오 홀딩스 엘엘씨 Ｉｌ-６에 대한 항체 및 이의 용도
US7906117B2 (en) 2007-05-21 2011-03-15 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to prevent or treat cachexia, weakness, fatigue, and/or fever
US9701747B2 (en) 2007-05-21 2017-07-11 Alderbio Holdings Llc Method of improving patient survivability and quality of life by anti-IL-6 antibody administration
BRPI0812461A2 (pt) 2007-06-08 2017-06-13 Biogen Idec Inc método de prever a resposta de um indivíduo a uma terapia, método de tratamento de um distúrbio imunológico, composição e kit
TW200914048A (en) * 2007-07-17 2009-04-01 Combinatorx Inc Combinations for the treatment of B-cell proliferative disorders
CA2694983A1 (en) * 2007-07-17 2009-01-22 Combinatorx, Incorporated Treatments of b-cell proliferative disorders
WO2009014263A1 (ja) * 2007-07-26 2009-01-29 Osaka University インターロイキン６受容体阻害剤を有効成分とする眼炎症疾患治療剤
CA2695504C (en) 2007-08-03 2017-05-30 Nucitec S.A. De C.V. Compositions and methods for treatment and prevention of osteoarthritis
US8697397B2 (en) * 2007-08-07 2014-04-15 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method of producing heterogeneous protein
DK3059246T3 (en) 2007-09-26 2018-10-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Modified constant region of an antibody
MX336725B (es) 2007-09-26 2016-01-28 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Metodo de modificacion del punto isoelectrico de anticuerpos medinate la sustitucion de aminoacidos en region de determinacion de complementariedad (cdr).
RU2486245C2 (ru) 2007-10-15 2013-06-27 Чугаи Сейяку Кабусики Кайся Способ получения клетки, способной продуцировать гетеропротеины с высоким выходом
CA2703493C (en) 2007-10-24 2016-11-08 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha A cell for use in production of heteroproteins and production method using the same
TWI700293B (zh) 2008-04-11 2020-08-01 日商中外製藥股份有限公司 重複結合複數個抗原的抗體
AU2009246430B2 (en) 2008-05-13 2015-07-02 Novimmune S.A. Anti-IL-6/IL-6R antibodies and methods of use thereof
US8277804B2 (en) * 2008-05-21 2012-10-02 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to prevent or treat thrombosis
US10717781B2 (en) 2008-06-05 2020-07-21 National Cancer Center Neuroinvasion inhibitor
US20100009934A1 (en) * 2008-06-09 2010-01-14 Combinatorx, Incorporated Beta adrenergic receptor agonists for the treatment of b-cell proliferative disorders
US8188235B2 (en) 2008-06-18 2012-05-29 Pfizer Inc. Antibodies to IL-6 and their uses
TWI440469B (zh) 2008-09-26 2014-06-11 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Improved antibody molecules
AU2009313958B2 (en) 2008-11-13 2015-09-10 Femta Pharmaceuticals, Inc. Humanized anti-IL-6 antibodies
US8337847B2 (en) 2008-11-25 2012-12-25 Alderbio Holdings Llc Methods of treating anemia using anti-IL-6 antibodies
US9452227B2 (en) * 2008-11-25 2016-09-27 Alderbio Holdings Llc Methods of treating or diagnosing conditions associated with elevated IL-6 using anti-IL-6 antibodies or fragments
US8992920B2 (en) 2008-11-25 2015-03-31 Alderbio Holdings Llc Anti-IL-6 antibodies for the treatment of arthritis
US8323649B2 (en) 2008-11-25 2012-12-04 Alderbio Holdings Llc Antibodies to IL-6 and use thereof
US9212223B2 (en) 2008-11-25 2015-12-15 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to prevent or treat thrombosis
CN102292106B (zh) 2008-11-25 2016-02-03 奥尔德生物制药公司 Il-6抗体及其用途
US8420089B2 (en) 2008-11-25 2013-04-16 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to raise albumin and/or lower CRP
JP2012516158A (ja) * 2009-01-29 2012-07-19 メディミューン，エルエルシー 延長したインビボ半減期を有するヒト抗ｉｌ−６抗体ならびに腫瘍学、自己免疫疾患、および炎症性疾患の治療におけるそれらの使用
EP2409991B1 (en) 2009-03-19 2017-05-03 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antibody constant region variant
JP5787446B2 (ja) 2009-03-19 2015-09-30 中外製薬株式会社 抗体定常領域改変体
US8741601B2 (en) 2009-04-22 2014-06-03 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for producing a cell capable of high-yield production of heteroproteins
TWI523661B (zh) * 2009-07-31 2016-03-01 前田慎 Anti-IL-6 receptor antibody in the manufacture of inhibitors of metastatic inhibition of lung cancer metastasis to the liver
US9775921B2 (en) 2009-11-24 2017-10-03 Alderbio Holdings Llc Subcutaneously administrable composition containing anti-IL-6 antibody
CN102740888B (zh) 2009-11-24 2016-10-12 奥尔德生物制药公司 Il-6抗体及其用途
KR20130086141A (ko) * 2010-04-16 2013-07-31 메디뮨 리미티드 Ｃｏｐｄ 악화를 치료하기 위한 조성물 및 방법
EP4115906A1 (en) 2010-05-28 2023-01-11 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antitumor t cell response enhancer
US8524215B2 (en) 2010-08-02 2013-09-03 Janssen Biotech, Inc. Absorbable PEG-based hydrogels
CN101993152B (zh) * 2010-09-21 2012-06-20 浙江大学 一种增强油脂降解菌降解能力的激活剂及其用途和使用方法
US8992908B2 (en) 2010-11-23 2015-03-31 Alderbio Holdings Llc Anti-IL-6 antibodies for the treatment of oral mucositis
KR102568454B1 (ko) 2010-11-30 2023-08-18 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 복수 분자의 항원에 반복해서 결합하는 항원 결합 분자
MX344595B (es) 2010-12-31 2016-12-20 Bioatla Llc Humanizacion rapida de anticuerpos.
DK2683736T3 (en) 2011-03-09 2018-04-23 Cell Signaling Technology Inc METHODS AND REAGENTS FOR CREATING MONOCLONAL ANTIBODIES
PE20191242A1 (es) 2011-10-25 2019-09-16 Prothena Biosciences Ltd Formulaciones de anticuerpo y metodos
WO2013175276A1 (en) * 2012-05-23 2013-11-28 Argen-X B.V Il-6 binding molecules
JP6469012B2 (ja) * 2012-10-22 2019-02-13 ファウンテン バイオファーマ インコーポレーテッドＦｏｕｎｔａｉｎ Ｂｉｏｐｈａｒｍａ Ｉｎｃ． インターロイキン−６に対する抗体およびその使用
CN106421782A (zh) * 2012-10-25 2017-02-22 米迪缪尼有限公司 稳定的低粘度抗体配制品
WO2014200018A1 (ja) 2013-06-11 2014-12-18 独立行政法人 国立精神・神経医療研究センター 再発寛解型多発性硬化症（ｒｒｍｓ）患者の治療予後予測方法、及び新規治療適応判断方法
RU2545724C1 (ru) * 2013-10-08 2015-04-10 Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Дагестанская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения РФ Способ лечения трофических язв и длительно незаживающих гнойных ран
MX384984B (es) 2013-10-10 2025-03-14 Beth Israel Deaconess Medical Ct Inc Proteinas de union del miembro 1 de la familia de transmembrana 4 l-seis (tm4sf1) y metodos de uso de las mismas.
US8916341B1 (en) * 2013-11-04 2014-12-23 Allied Innovative Systems, Llc Methods for improving analyte detection using photochemical reactions
RU2550262C1 (ru) * 2014-02-28 2015-05-10 Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов" Федерального медико-биологического агентства Моноклональное антитело против интерлейкина-6 человека и гибридома, продуцирующая данное моноклональное антитело
KR20210014210A (ko) 2014-05-15 2021-02-08 내셔널 유니버시티 오브 싱가포르 변형된 천연 살해 세포 및 그의 용도
TWI713453B (zh) 2014-06-23 2020-12-21 美商健生生物科技公司 干擾素α及ω抗體拮抗劑
US9840553B2 (en) 2014-06-28 2017-12-12 Kodiak Sciences Inc. Dual PDGF/VEGF antagonists
JP2017523221A (ja) * 2014-08-04 2017-08-17 シルべストリ、 ファブリツィオ デ 多発性硬化症の治療におけるミノサイクリン、フルコナゾールおよびアトルバスタチンの単一丸剤／錠剤／カプセルでの使用
JP6849590B2 (ja) 2014-10-17 2021-03-24 コディアック サイエンシーズ インコーポレイテッドＫｏｄｉａｋ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｉｎｃ． ブチリルコリンエステラーゼ両性イオン性ポリマーコンジュゲート
EP3750918A1 (en) 2015-01-20 2020-12-16 IGM Biosciences, Inc. Tumor necrosis factor (tnf) superfamily receptor binding molecules and uses thereof
EP3263132B1 (en) 2015-02-27 2023-12-06 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Composition for treating il-6-related diseases
US10697883B2 (en) 2015-05-19 2020-06-30 National Center Of Neurology And Psychiatry Method for determining application of therapy to multiple sclerosis (MS) patient
KR102709681B1 (ko) 2015-07-31 2024-09-26 메디뮨 리미티드 헵시딘 매개 장애의 치료 방법
WO2017027325A1 (en) 2015-08-07 2017-02-16 Imaginab, Inc. Antigen binding constructs to target molecules
BR112018013407A2 (en) 2015-12-30 2018-12-18 Kodiak Sciences Inc. antibodies and conjugates thereof
EP3440108A4 (en) * 2016-04-07 2020-01-08 Janssen Biotech, Inc. DEPRESSION TREATMENT USING ACTIVE SUBSTANCES THAT BLOCK IL-6 BINDING TO THE IL-6 RECEPTOR
US20190192692A1 (en) * 2016-05-05 2019-06-27 The Trustees Of The University Of Pennsylvania DNA Monoclonal Antibodies Targeting IL-6 and CD126
WO2018144773A1 (en) 2017-02-01 2018-08-09 Yale University Treatment of diuretic resistance
CA3056439A1 (en) 2017-03-27 2018-10-04 National University Of Singapore Truncated nkg2d chimeric receptors and uses thereof in natural killer cell immunotherapy
AU2018245749A1 (en) 2017-03-27 2019-10-03 National University Of Singapore Stimulatory cell lines for ex vivo expansion and activation of natural killer cells
EP3620531A4 (en) 2017-05-02 2021-03-17 National Center of Neurology and Psychiatry METHOD OF PREDICTION AND EVALUATION OF THERAPEUTIC EFFECT IN DISEASES RELATING TO IL-6 AND NEUTROPHILS
US11692037B2 (en) 2017-10-20 2023-07-04 Hyogo College Of Medicine Anti-IL-6 receptor antibody-containing medicinal composition for preventing post-surgical adhesion
JP7395479B2 (ja) 2018-01-05 2023-12-11 ノヴォ ノルディスク アー／エス 免疫抑制なしにｉｌ－６媒介性炎症を処置する方法
SG11202007156QA (en) 2018-02-09 2020-08-28 Nat Univ Singapore Activating chimeric receptors and uses thereof in natural killer cell immunotherapy
SG11202008242XA (en) 2018-03-02 2020-09-29 Kodiak Sciences Inc Il-6 antibodies and fusion constructs and conjugates thereof
CN108588030B (zh) * 2018-03-30 2020-07-14 四川迈克生物新材料技术有限公司 抗人IgM单克隆抗体、其杂交瘤细胞株及应用
SG11202008976YA (en) * 2018-04-02 2020-10-29 Nat Univ Singapore Neutralization of human cytokines with membrane-bound anti-cytokine non-signaling binders expressed in immune cells
US12371497B2 (en) 2018-06-08 2025-07-29 Imaginab, Inc. Antigen binding constructs to CD4
US12486514B2 (en) 2018-08-29 2025-12-02 National University Of Singapore Method to specifically stimulate survival and expansion of genetically-modified immune cells
WO2020178193A1 (en) 2019-03-01 2020-09-10 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Method of treatment of sarcoidosis
KR20210137085A (ko) 2019-03-05 2021-11-17 엔카르타, 인크. Cd19 유도된 키메라 항원 수용체 및 면역 요법에서 이의 용도
CN109946129A (zh) * 2019-03-12 2019-06-28 江苏中济万泰生物医药有限公司 五分类血细胞分析仪用质控品制备方法
MA55809B1 (fr) 2019-05-01 2025-12-31 Novo Nordisk A/S Formulations d'anticorps anti-il-6
US20200405883A1 (en) 2019-06-20 2020-12-31 Baxalta Incorporated Method of treatment with viral-based gene therapy
US11912784B2 (en) 2019-10-10 2024-02-27 Kodiak Sciences Inc. Methods of treating an eye disorder
WO2021119669A1 (en) * 2019-12-12 2021-06-17 Loma Linda University Pathology Medical Group, Inc. Methods and compositions for treatment of acute myeloid leukemia
US20220017614A1 (en) * 2020-03-31 2022-01-20 Janssen Biotech, Inc. Anti-IL6 Agent for Treating Coronavirus Infection
WO2021236840A1 (en) * 2020-05-20 2021-11-25 The Regents Of The University Of California Rapid index for sab mortality kinetics ("risk") test
CN115697404A (zh) 2020-05-29 2023-02-03 中外制药株式会社 含有抗体的制剂
RU2745814C1 (ru) * 2020-06-05 2021-04-01 Закрытое Акционерное Общество "Биокад" Водная фармацевтическая композиция левилимаба и ее применение
WO2022005321A1 (en) * 2020-06-29 2022-01-06 Federal State Budgetary Institution Scientific center of biomedical technologies of Federal Medical and Biological Agency Inhaled tocilizumab for treating interleukin-6 related respiratory diseases
CN116981692A (zh) * 2021-01-14 2023-10-31 翻译生物公司 递送mRNA编码的抗体的方法和组合物
CN113409232B (zh) * 2021-06-16 2023-11-10 吉林大学 基于响尾蛇视觉成像的仿生假彩色图像融合模型及方法
CN113552116B (zh) * 2021-07-14 2023-08-18 四川农业大学 基于Ag@UiO-66-NH2/CsPbBr3的电致化学发光分子印迹传感器及应用
CN117949646B (zh) * 2023-12-31 2025-03-07 深圳市新产业生物医学工程股份有限公司 试剂组合以及免离心的全血中目标免疫抑制剂的检测方法

Family Cites Families (192)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
US4309989A (en) 1976-02-09 1982-01-12 The Curators Of The University Of Missouri Topical application of medication by ultrasound with coupling agent
FR2374910A1 (fr) 1976-10-23 1978-07-21 Choay Sa Preparation a base d'heparine, comprenant des liposomes, procede pour l'obtenir et medicaments contenant de telles preparations
FR2413974A1 (fr) 1978-01-06 1979-08-03 David Bernard Sechoir pour feuilles imprimees par serigraphie
US5326859A (en) * 1979-10-30 1994-07-05 Juridical Foundation, Japanese Foundation For Cancer Research DNA and recombinant plasmid
IL58765A (en) * 1979-11-21 1986-09-30 Yeda Res & Dev Process for the production of essentially pure messenger rna of human fibroblast interferon and process for the production of interferon beta
US5554513A (en) * 1979-11-21 1996-09-10 Yeda Research & Development Co. Ltd. Production of recombinant human interferon-beta2
US5179017A (en) 1980-02-25 1993-01-12 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4399216A (en) 1980-02-25 1983-08-16 The Trustees Of Columbia University Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4634665A (en) 1980-02-25 1987-01-06 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
GB2097032B (en) 1981-04-22 1984-09-19 Teron International Urban Dev A combined ceiling air and services distribution system mechanical chasse and structural roof member
US4656134A (en) 1982-01-11 1987-04-07 Board Of Trustees Of Leland Stanford Jr. University Gene amplification in eukaryotic cells
US5149636A (en) 1982-03-15 1992-09-22 Trustees Of Columbia University In The City Of New York Method for introducing cloned, amplifiable genes into eucaryotic cells and for producing proteinaceous products
US5001116A (en) * 1982-12-20 1991-03-19 The Children's Medical Center Corporation Inhibition of angiogenesis
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4818542A (en) 1983-11-14 1989-04-04 The University Of Kentucky Research Foundation Porous microspheres for drug delivery and methods for making same
US5807715A (en) * 1984-08-27 1998-09-15 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin
US5168062A (en) 1985-01-30 1992-12-01 University Of Iowa Research Foundation Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence
US4965188A (en) 1986-08-22 1990-10-23 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences using a thermostable enzyme
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
DE3588239T3 (de) 1985-03-30 2007-03-08 Kauffman, Stuart A., Santa Fe Verfahren zum Erhalten von DNS, RNS, Peptiden, Polypeptiden oder Proteinen durch DMS-Rekombinant-Verfahren
SE448277B (sv) 1985-04-12 1987-02-09 Draco Ab Indikeringsanordning vid en doseringsanordning for lekemedel
US4766067A (en) 1985-05-31 1988-08-23 President And Fellows Of Harvard College Gene amplification
US4870163A (en) 1985-08-29 1989-09-26 New York Blood Center, Inc. Preparation of pure human tumor necrosis factor and hybridomas producing monoclonal antibodies to human tumor necrosis factor
US4676980A (en) 1985-09-23 1987-06-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Target specific cross-linked heteroantibodies
US5576195A (en) 1985-11-01 1996-11-19 Xoma Corporation Vectors with pectate lyase signal sequence
US5618920A (en) 1985-11-01 1997-04-08 Xoma Corporation Modular assembly of antibody genes, antibodies prepared thereby and use
DE3600905A1 (de) 1986-01-15 1987-07-16 Ant Nachrichtentech Verfahren zum dekodieren von binaersignalen sowie viterbi-dekoder und anwendungen
GB8601597D0 (en) 1986-01-23 1986-02-26 Wilson R H Nucleotide sequences
US4800159A (en) 1986-02-07 1989-01-24 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences
SE453566B (sv) 1986-03-07 1988-02-15 Draco Ab Anordning vid pulverinhalatorer
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
US4767402A (en) 1986-07-08 1988-08-30 Massachusetts Institute Of Technology Ultrasound enhancement of transdermal drug delivery
NL8720442A (nl) 1986-08-18 1989-04-03 Clinical Technologies Ass Afgeefsystemen voor farmacologische agentia.
US4889818A (en) 1986-08-22 1989-12-26 Cetus Corporation Purified thermostable enzyme
US4946778A (en) 1987-09-21 1990-08-07 Genex Corporation Single polypeptide chain binding molecules
US5260203A (en) 1986-09-02 1993-11-09 Enzon, Inc. Single polypeptide chain binding molecules
US4704692A (en) 1986-09-02 1987-11-03 Ladner Robert C Computer based system and method for determining and displaying possible chemical structures for converting double- or multiple-chain polypeptides to single-chain polypeptides
DE3631229A1 (de) 1986-09-13 1988-03-24 Basf Ag Monoklonale antikoerper gegen humanen tumornekrosefaktor (tnf) und deren verwendung
US5763192A (en) 1986-11-20 1998-06-09 Ixsys, Incorporated Process for obtaining DNA, RNA, peptides, polypeptides, or protein, by recombinant DNA technique
US4921794A (en) 1987-01-14 1990-05-01 President And Fellows Of Harvard College T7 DNA polymerase
US4795699A (en) 1987-01-14 1989-01-03 President And Fellows Of Harvard College T7 DNA polymerase
EP0832981A1 (en) 1987-02-17 1998-04-01 Pharming B.V. DNA sequences to target proteins to the mammary gland for efficient secretion
DE3888224T2 (de) 1987-04-24 1994-07-21 Teijin Ltd Bestimmung vom Tumornekrosefaktor; monoklonaler Antikörper und Zusammensetzung.
US4873316A (en) 1987-06-23 1989-10-10 Biogen, Inc. Isolation of exogenous recombinant proteins from the milk of transgenic mammals
US4939666A (en) 1987-09-02 1990-07-03 Genex Corporation Incremental macromolecule construction methods
IL88375A (en) * 1988-11-14 1995-07-31 Yeda Res & Dev Monoclonal antibodies that specifically bind interferon-bia 2 natural and recombinant and a natural and recombinant interferon-beta 2 purification method and method
US6010902A (en) 1988-04-04 2000-01-04 Bristol-Meyers Squibb Company Antibody heteroconjugates and bispecific antibodies for use in regulation of lymphocyte activity
US4956288A (en) 1988-04-22 1990-09-11 Biogen, Inc. Method for producing cells containing stably integrated foreign DNA at a high copy number, the cells produced by this method, and the use of these cells to produce the polypeptides coded for by the foreign DNA
US5130238A (en) 1988-06-24 1992-07-14 Cangene Corporation Enhanced nucleic acid amplification process
US5601819A (en) 1988-08-11 1997-02-11 The General Hospital Corporation Bispecific antibodies for selective immune regulation and for selective immune cell binding
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
US5066584A (en) 1988-09-23 1991-11-19 Cetus Corporation Methods for generating single stranded dna by the polymerase chain reaction
US5091310A (en) 1988-09-23 1992-02-25 Cetus Corporation Structure-independent dna amplification by the polymerase chain reaction
US5142033A (en) 1988-09-23 1992-08-25 Hoffmann-La Roche Inc. Structure-independent DNA amplification by the polymerase chain reaction
GB8823869D0 (en) 1988-10-12 1988-11-16 Medical Res Council Production of antibodies
US6682896B1 (en) * 1988-10-14 2004-01-27 Schering Aktiengesellschaft Peptides representing epitopic sites on r-IFN-β, antibodies thereto and uses thereof
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US4994370A (en) 1989-01-03 1991-02-19 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services DNA amplification technique
US5225538A (en) 1989-02-23 1993-07-06 Genentech, Inc. Lymphocyte homing receptor/immunoglobulin fusion proteins
US5116964A (en) 1989-02-23 1992-05-26 Genentech, Inc. Hybrid immunoglobulins
US5266491A (en) 1989-03-14 1993-11-30 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. DNA fragment and expression plasmid containing the DNA fragment
DE3909708A1 (de) 1989-03-23 1990-09-27 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur herstellung bispezifischer antikoerper
FI915411A0 (fi) 1989-05-16 1991-11-15 Scripps Research Inst Samexpression av heteromeriska receptorer.
CA2016842A1 (en) 1989-05-16 1990-11-16 Richard A. Lerner Method for tapping the immunological repertoire
CA2016841C (en) 1989-05-16 1999-09-21 William D. Huse A method for producing polymers having a preselected activity
EP0399429A1 (en) 1989-05-22 1990-11-28 Toray Industries, Inc. Anti-human interleukin-6 monoclonal antibody
ES2096590T3 (es) 1989-06-29 1997-03-16 Medarex Inc Reactivos biespecificos para la terapia del sida.
JP3443119B2 (ja) 1989-08-07 2003-09-02 ペプテック リミテッド 腫瘍壊死因子結合リガンド
DK0494955T3 (da) 1989-10-05 1998-10-26 Optein Inc Cellefri syntese og isolering af hidtil ukendte gener og polypeptider
CA2071872A1 (en) 1989-12-15 1991-06-16 Abla A. Creasey Cytokine antibody for the treatment of sepsis
US5580575A (en) 1989-12-22 1996-12-03 Imarx Pharmaceutical Corp. Therapeutic drug delivery systems
ES2087997T3 (es) 1990-01-12 1996-08-01 Cell Genesys Inc Generacion de anticuerpos xenogenicos.
US5942220A (en) * 1990-03-16 1999-08-24 Chiron Corporation Inhibitor of cytokine activity and applications thereof
US5210075A (en) * 1990-02-16 1993-05-11 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Interleukin 6 antagonist peptides
TW212184B (tr) 1990-04-02 1993-09-01 Takeda Pharm Industry Co Ltd
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
CA2084307A1 (en) 1990-06-01 1991-12-02 Cetus Oncology Corporation Compositions and methods for identifying biologically active molecules
US5723286A (en) 1990-06-20 1998-03-03 Affymax Technologies N.V. Peptide library and screening systems
AU8295491A (en) 1990-06-29 1992-01-23 Biosource Technologies Incorporated Melanin production by transformed microorganisms
US5580734A (en) 1990-07-13 1996-12-03 Transkaryotic Therapies, Inc. Method of producing a physical map contigous DNA sequences
US5661016A (en) 1990-08-29 1997-08-26 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5789650A (en) 1990-08-29 1998-08-04 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5633425A (en) 1990-08-29 1997-05-27 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US6300129B1 (en) 1990-08-29 2001-10-09 Genpharm International Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5625126A (en) 1990-08-29 1997-04-29 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
ES2108048T3 (es) 1990-08-29 1997-12-16 Genpharm Int Produccion y utilizacion de animales inferiores transgenicos capaces de producir anticuerpos heterologos.
WO1992005258A1 (en) 1990-09-20 1992-04-02 La Trobe University Gene encoding barley enzyme
GB9022648D0 (en) 1990-10-18 1990-11-28 Charing Cross Sunley Research Polypeptide and its use
EP0557300B1 (en) 1990-10-29 1997-11-19 Chiron Corporation Bispecific antibodies, method of production, and uses thereof
DE69129154T2 (de) 1990-12-03 1998-08-20 Genentech, Inc., South San Francisco, Calif. Verfahren zur anreicherung von proteinvarianten mit geänderten bindungseigenschaften
US5582996A (en) 1990-12-04 1996-12-10 The Wistar Institute Of Anatomy & Biology Bifunctional antibodies and method of preparing same
EP0572529A4 (en) 1991-02-21 1994-11-02 Gilead Sciences Inc SPECIFIC APTAMER OF BIOMOLECULES AND PROCESS FOR PRODUCING THE SAME.
US5404871A (en) 1991-03-05 1995-04-11 Aradigm Delivery of aerosol medications for inspiration
DE69233069T2 (de) 1991-03-15 2003-11-27 Amgen Inc., Thousand Oaks Pegylation von polypeptiden
ES2134212T3 (es) * 1991-04-25 1999-10-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpo humano reconstituido contra el receptor de la interleuquina 6 humano.
DE4118120A1 (de) 1991-06-03 1992-12-10 Behringwerke Ag Tetravalente bispezifische rezeptoren, ihre herstellung und verwendung
US5637481A (en) 1993-02-01 1997-06-10 Bristol-Myers Squibb Company Expression vectors encoding bispecific fusion proteins and methods of producing biologically active bispecific fusion proteins in a mammalian cell
DE69230613T2 (de) 1991-07-02 2000-12-28 Inhale Inc Verfahren und vorrichtung zum abgeben von medikamenten in aerosolform
US5270170A (en) 1991-10-16 1993-12-14 Affymax Technologies N.V. Peptide library and screening method
WO1993008829A1 (en) 1991-11-04 1993-05-13 The Regents Of The University Of California Compositions that mediate killing of hiv-infected cells
US5641670A (en) 1991-11-05 1997-06-24 Transkaryotic Therapies, Inc. Protein production and protein delivery
US5733761A (en) 1991-11-05 1998-03-31 Transkaryotic Therapies, Inc. Protein production and protein delivery
US5932448A (en) 1991-11-29 1999-08-03 Protein Design Labs., Inc. Bispecific antibody heterodimers
ATE463573T1 (de) 1991-12-02 2010-04-15 Medimmune Ltd Herstellung von autoantikörpern auf phagenoberflächen ausgehend von antikörpersegmentbibliotheken
EP1291360A1 (en) 1991-12-13 2003-03-12 Xoma Corporation Methods and materials for preparation of modified antibody variable domains and therapeutic uses thereof
DE4207475A1 (de) 1992-03-10 1993-09-16 Goldwell Ag Mittel zum blondieren von menschlichen haaren und verfahren zu dessen herstellung
US5447851B1 (en) 1992-04-02 1999-07-06 Univ Texas System Board Of Dna encoding a chimeric polypeptide comprising the extracellular domain of tnf receptor fused to igg vectors and host cells
JPH05304986A (ja) 1992-04-28 1993-11-19 Tosoh Corp ｇｐ１３０蛋白質に対するモノクロ−ナル抗体
AU4829593A (en) 1992-09-23 1994-04-12 Fisons Plc Inhalation device
WO1994008038A1 (en) 1992-10-02 1994-04-14 Trustees Of Dartmouth College Bispecific reagents for redirected targeting of low density lipoprotein
ATE174804T1 (de) 1992-10-19 1999-01-15 Dura Pharma Inc Trockenpulverinhalator
EP0672144A1 (en) * 1992-10-20 1995-09-20 Chiron Corporation Interleukin-6 receptor antagonists
US5643252A (en) 1992-10-28 1997-07-01 Venisect, Inc. Laser perforator
AU5670194A (en) 1992-11-20 1994-06-22 Enzon, Inc. Linker for linked fusion polypeptides
US5849695A (en) 1993-01-13 1998-12-15 The Regents Of The University Of California Parathyroid hormone analogues useful for treatment of osteoporosis and disorders of calcium meatabolism in mammals
ATE172933T1 (de) 1993-01-19 1998-11-15 Glaxo Group Ltd Aerosol-spender und verfahren zu seiner herstellung
FI953812A0 (fi) 1993-02-12 1995-08-11 Univ Leland Stanford Junior Kohdistettujen geenien säädelty transkriptio ja muita biologisia toimintoja
JP3525221B2 (ja) * 1993-02-17 2004-05-10 味の素株式会社 免疫抑制剤
US5770428A (en) 1993-02-17 1998-06-23 Wisconsin Alumni Research Foundation Chimeric retrovial expression vectors and particles containing a simple retroviral long terminal repeat, BLV or HIV coding regions and cis-acting regulatory sequences, and an RNA translational enhancer with internal ribsome entry site
US5888511A (en) * 1993-02-26 1999-03-30 Advanced Biotherapy Concepts, Inc. Treatment of autoimmune diseases, including AIDS
JPH08509612A (ja) 1993-04-26 1996-10-15 ジェンファーム インターナショナル インコーポレイテッド 異種抗体を産生することができるトランスジェニック非ヒト動物
AU6808194A (en) * 1993-05-31 1994-12-20 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Reconstructed human antibody against human interleukin-6
US5789552A (en) * 1993-06-23 1998-08-04 Istituto Di Ricerche Di Biologica Molecolare P. Angeletti S.P.A. Interleukin-6 receptor antagonists
DE69435002T2 (de) 1993-07-19 2008-03-20 Angiotech Pharmaceuticals, Inc., Vancouver Anti-angiogene Mittel enthaltend Taxol und einen nicht biodegradierbaren Träger und deren Verwendung
US5888510A (en) * 1993-07-21 1999-03-30 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Chronic rheumatoid arthritis therapy containing IL-6 antagonist as effective component
FR2707882B1 (fr) * 1993-07-23 1997-08-01 Immunotech Sa Nouveaux kits thérapeutiques anti-médiateurs protéiques, procédé de préparation et compositions pharmaceutiques les renfermant.
US5514670A (en) 1993-08-13 1996-05-07 Pharmos Corporation Submicron emulsions for delivery of peptides
US5625825A (en) 1993-10-21 1997-04-29 Lsi Logic Corporation Random number generating apparatus for an interface unit of a carrier sense with multiple access and collision detect (CSMA/CD) ethernet data network
DE4337197C1 (de) 1993-10-30 1994-08-25 Biotest Pharma Gmbh Verfahren zur selektiven Herstellung von Hybridomazellinien, die monoklonale Antikörper mit hoher Zytotoxizität gegen humanes CD16-Antigen produzieren, sowie Herstellung bispezifischer monoklonaler Antikörper unter Verwendung derartiger monoklonaler Antikörper und des CD30-HRS-3-Antikörpers zur Therapie menschlicher Tumore
US5814599A (en) 1995-08-04 1998-09-29 Massachusetts Insitiute Of Technology Transdermal delivery of encapsulated drugs
US5827690A (en) 1993-12-20 1998-10-27 Genzyme Transgenics Corporatiion Transgenic production of antibodies in milk
AU692239B2 (en) 1994-03-07 1998-06-04 Medarex, Inc. Bispecific molecules having clinical utilities
US5641657A (en) * 1994-05-19 1997-06-24 Human Genome Sciences, Inc. DNA encoding an interleukin-6 splice variant
US8017121B2 (en) * 1994-06-30 2011-09-13 Chugai Seiyaku Kabushika Kaisha Chronic rheumatoid arthritis therapy containing IL-6 antagonist as effective component
US5738931A (en) * 1994-09-16 1998-04-14 Kabushiki Kaisha Toshiba Electronic device and magnetic device
EP0783893B1 (en) * 1994-10-07 2012-04-04 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Inhibition of abnormal growth of synovial cells using il-6 antagonist as active ingredient
US5763733A (en) 1994-10-13 1998-06-09 Enzon, Inc. Antigen-binding fusion proteins
IT1274782B (it) * 1994-12-14 1997-07-24 Angeletti P Ist Richerche Bio Metodo per selezionare superagonisti, antagonisti e superantagonisti di ormoni del cui complesso recettoriale fa parte gp 130
US5549551A (en) 1994-12-22 1996-08-27 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Adjustable length balloon catheter
JP4079461B2 (ja) * 1994-12-29 2008-04-23 中外製薬株式会社 Ｉｌ−６アンタゴニストを含んでなる抗腫瘍剤の作用増強剤
CA2211578C (en) * 1995-02-13 2010-09-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Muscle protein proteolysis inhibiting agent containing il-6 receptor antibody
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US6037453A (en) 1995-03-15 2000-03-14 Genentech, Inc. Immunoglobulin variants
US5656730A (en) 1995-04-07 1997-08-12 Enzon, Inc. Stabilized monomeric protein compositions
US6019968A (en) 1995-04-14 2000-02-01 Inhale Therapeutic Systems, Inc. Dispersible antibody compositions and methods for their preparation and use
CA2219486A1 (en) 1995-04-28 1996-10-31 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
IT1276555B1 (it) * 1995-04-28 1997-11-03 Angeletti P Ist Richerche Bio Antagonisti di interluchina-6 umana del tutto incapaci di formare un legame con gp 130, e loro uso per la preparazione di composizioni
US5730723A (en) 1995-10-10 1998-03-24 Visionary Medical Products Corporation, Inc. Gas pressured needle-less injection device and method
US5871723A (en) * 1995-06-06 1999-02-16 The Regent Of The University Of Michigan CXC chemokines as regulators of angiogenesis
GB9526100D0 (en) 1995-12-20 1996-02-21 Intersurgical Ltd Nebulizer
CA2241880A1 (en) 1996-01-03 1997-07-17 Glaxo Group Limited Inhalation device
US5714352A (en) 1996-03-20 1998-02-03 Xenotech Incorporated Directed switch-mediated DNA recombination
DE19624387C2 (de) 1996-06-19 1999-08-19 Hatz Motoren Kaltstartvorrichtung
US5854398A (en) * 1996-07-25 1998-12-29 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (KSHV) interleukin 6 (IL-6) and uses thereof
US6461604B1 (en) * 1996-08-16 2002-10-08 Genetics Institute, Llc Crystalline IL-6 and models of the molecular structure of IL-6
EP0826695B1 (de) 1996-09-03 2001-12-12 GSF-Forschungszentrum für Umwelt und Gesundheit GmbH Zerstörung von kontaminierenden Tumorzellen in Stammzelltransplantaten mit bispezifischen Antikörpern
EP2305027B1 (en) 1996-12-03 2014-07-02 Amgen Fremont Inc. Transgenic mammals having human Ig loci including plural VH and Vkappa regions and antibodies produced therefrom
US5879681A (en) 1997-02-07 1999-03-09 Emisphere Technolgies Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US5921447A (en) 1997-02-13 1999-07-13 Glaxo Wellcome Inc. Flow-through metered aerosol dispensing apparatus and method of use thereof
AU736282B2 (en) * 1997-03-21 2001-07-26 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha A preventive or therapeutic agent for sensitized T cell- mediated diseases comprising IL-6 antagonist as an active ingredient
US6235883B1 (en) 1997-05-05 2001-05-22 Abgenix, Inc. Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
IL120943A (en) 1997-05-29 2004-03-28 Univ Ben Gurion A system for administering drugs through the skin
ATE239447T1 (de) 1997-09-29 2003-05-15 Inhale Therapeutic Syst In verneblern verwendbare, stabilisierte zubereitungen
ES2434961T5 (es) 1998-04-20 2018-01-18 Roche Glycart Ag Ingeniería de glicosilación de anticuerpos para mejorar la citotoxicidad celular dependiente del anticuerpo
KR101077001B1 (ko) 1999-01-15 2011-10-26 제넨테크, 인크. 효과기 기능이 변화된 폴리펩티드 변이체
US6309663B1 (en) 1999-08-17 2001-10-30 Lipocine Inc. Triglyceride-free compositions and methods for enhanced absorption of hydrophilic therapeutic agents
WO2001016180A2 (en) * 1999-08-27 2001-03-08 Board Of Regents, The University Of Texas System Cd40 agonist compositions and methods of use
GB0001448D0 (en) * 2000-01-21 2000-03-08 Novartis Ag Organic compounds
TWI373343B (en) 2000-02-10 2012-10-01 Abbott Gmbh & Co Kg Antibodies that bind human interleukin-18 and methods of making and using
US8632778B2 (en) * 2000-08-11 2014-01-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Stabilized anti-interleukin-6 antibody-containing preparations
AU2002210952B2 (en) * 2000-10-25 2007-01-11 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Preventives or remedies for psoriasis containing as the active ingredient IL-6 antagonist
ITPD20010108A1 (it) 2001-05-08 2002-11-08 Fidia Advanced Biopolymers Srl Biomateriali polimerici elettricamente conduttori, loro processo di preparazione ed impiego nel settore biomedico sanitario.
RU2321630C2 (ru) 2001-08-03 2008-04-10 Гликарт Биотекнолоджи АГ Гликозилированные антитела (варианты), обладающие повышенной антителозависимой клеточной цитотоксичностью
DE10146643C1 (de) 2001-09-21 2003-08-14 Eads Deutschland Gmbh Verfahren zur Kalibrierung der Radarsignale an den Subaperturen der Antenne eines zweikanaligen SAR/MTI Radarsystems
ES2436206T3 (es) 2001-11-14 2013-12-27 Janssen Biotech, Inc. Anticuerpos anti il-6, composiciones, métodos y usos
AU2003225976A1 (en) 2002-03-26 2003-10-13 Centocor, Inc. Anti-tnf antibodies, compositions, methods and uses
EP2270049A3 (en) 2002-04-12 2011-03-09 Medimmune, Inc. Recombinant anti-interleukin-9-antibody
CA2496523A1 (en) * 2002-08-30 2004-03-11 Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute Human antihuman interleukin-6 antibody and fragment of the antibody
GB2401040A (en) 2003-04-28 2004-11-03 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Method for treating interleukin-6 related diseases
WO2005005604A2 (en) 2003-06-30 2005-01-20 Centocor, Inc. Engineered anti-target immunoglobulin derived proteins, compositions, methods and uses
WO2005028514A1 (en) 2003-09-22 2005-03-31 Biovation Gmbh & Co. Kg. Use of a compound for reducing the biological effectiveness of il-6
PA8672101A1 (es) * 2005-04-29 2006-12-07 Centocor Inc Anticuerpos anti-il-6, composiciones, métodos y usos
JP5470817B2 (ja) 2008-03-10 2014-04-16 日産自動車株式会社 電池用電極およびこれを用いた電池、並びにその製造方法
EP2638067A2 (en) 2010-11-08 2013-09-18 Genentech, Inc. Subcutaneously administered anti-il-6 receptor antibody
JP6136279B2 (ja) 2013-01-15 2017-05-31 株式会社ジェイテクト 転がり軸受装置
TWI503850B (zh) 2013-03-22 2015-10-11 Polytronics Technology Corp 過電流保護元件
TWI510996B (zh) 2013-10-03 2015-12-01 Acer Inc 控制觸控面板的方法以及使用該方法的可攜式電腦
US9816280B1 (en) 2016-11-02 2017-11-14 Matthew Reitnauer Portable floor

Also Published As

Publication number Publication date
HRP20181218T1 (hr) 2018-10-05
SV2006002513A (es) 2008-12-05
EP1874351B1 (en) 2015-04-08
RS54133B1 (sr) 2015-12-31
EP3421492A1 (en) 2019-01-02
EA015262B1 (ru) 2011-06-30
IL211132A0 (en) 2011-04-28
SI2842968T1 (sl) 2018-10-30
EP2842968B1 (en) 2018-05-23
EP1874351A2 (en) 2008-01-09
PL1874351T3 (pl) 2015-10-30
CA2606348C (en) 2012-12-11
IL211133A (en) 2015-03-31
CN102924596A (zh) 2013-02-13
HN2006016512A (es) 2010-06-08
US20060257407A1 (en) 2006-11-16
US12065488B2 (en) 2024-08-20
MY142835A (en) 2011-01-14
HUE039116T2 (hu) 2018-12-28
ES2551985T3 (es) 2015-11-24
US7833755B2 (en) 2010-11-16
JP2014080427A (ja) 2014-05-08
CN102924596B (zh) 2016-01-20
SI1874351T1 (sl) 2015-10-30
US8623362B2 (en) 2014-01-07
US20090239258A1 (en) 2009-09-24
USRE43672E1 (en) 2012-09-18
EA200702374A1 (ru) 2008-10-30
NI200700278A (es) 2013-01-29
LT2842968T (lt) 2018-09-25
US8067003B2 (en) 2011-11-29
CY1120739T1 (el) 2019-12-11
IL186965A0 (en) 2008-02-09
US20130017208A1 (en) 2013-01-17
US20110081355A1 (en) 2011-04-07
CN101415819A (zh) 2009-04-22
DK1874351T3 (en) 2015-04-20
WO2006119115A2 (en) 2006-11-09
HK1116398A1 (en) 2008-12-24
IL211133A0 (en) 2011-04-28
NO342898B1 (no) 2018-08-27
PA8672101A1 (es) 2006-12-07
JP2008538931A (ja) 2008-11-13
CA2606348A1 (en) 2006-11-09
ES2676732T3 (es) 2018-07-24
NZ598657A (en) 2013-06-28
PE20061324A1 (es) 2007-01-15
US20140099311A1 (en) 2014-04-10
US20120045453A1 (en) 2012-02-23
AU2006242347B2 (en) 2012-07-12
NZ562771A (en) 2011-03-31
ZA200710264B (en) 2010-05-26
US9631016B2 (en) 2017-04-25
JP5940565B2 (ja) 2016-06-29
HUE025376T2 (en) 2016-02-29
US20160222104A1 (en) 2016-08-04
PT1874351E (pt) 2015-06-16
BRPI0609869B1 (pt) 2021-08-24
JP4763043B2 (ja) 2011-08-31
PL2842968T3 (pl) 2019-05-31
US8226611B2 (en) 2012-07-24
US20170253651A1 (en) 2017-09-07
US11180549B2 (en) 2021-11-23
US20200115445A1 (en) 2020-04-16
PT2842968T (pt) 2018-09-28
NZ589820A (en) 2012-04-27
TW200716173A (en) 2007-05-01
ME02185B (me) 2016-02-20
ECSP077888A (es) 2008-03-26
JP2016117769A (ja) 2016-06-30
US7560112B2 (en) 2009-07-14
MY143374A (en) 2011-04-29
KR101340950B1 (ko) 2013-12-31
EP1874351A4 (en) 2010-07-28
JP2011201888A (ja) 2011-10-13
NO20076024L (no) 2008-01-18
TWI445546B (zh) 2014-07-21
HRP20150740T1 (hr) 2015-08-14
US20220048985A1 (en) 2022-02-17
AU2006242347A1 (en) 2006-11-09
JO3058B1 (ar) 2017-03-15
RS57474B1 (sr) 2018-09-28
CN101415819B (zh) 2012-10-10
EP2842968A1 (en) 2015-03-04
KR20080017014A (ko) 2008-02-25
HK1208035A1 (en) 2016-02-19
US9340613B2 (en) 2016-05-17
DK2842968T3 (en) 2018-08-06
AR053370A1 (es) 2007-05-02
BRPI0609869A2 (pt) 2010-05-11
WO2006119115A3 (en) 2008-01-03
JP5898413B2 (ja) 2016-04-06
CR9551A (es) 2009-07-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TR201809676T4 (tr) Humanize anti-il-6 antikorları, bileşimleri, yöntem ve kullanımları.
WO2008002893A2 (en) Anti-amyloid antibodies, compositions, methods and uses
CA2703050A1 (en) Anti-amyloid antibodies, compositions, methods and uses
HK1208035B (en) Humanized anti-il-6 antibodies, compositions, methods and uses
HK1116398B (en) Anti-il-6 antibodies, compositions, methods and uses