TR201809670T4 - Faktör VII polipeptitlerinin stabilize edilmiş kompozisyonları. - Google Patents

Abstract

Mevcut buluş; Faktör VIIa içeren, hem fiziksel hem de kimyasal olarak stabil olan ve bu şekilde oda sıcaklığında saklanabilecek, işlenebilecek ve kullanılabilecek kompozisyonları ihtiva eden kitlerle ilgilidir.

Description

TARIFNAME FAKTÖR VII POLIPEPTITLERININ STABILIZE EDILMIS KOMPOZISYONLARI BULUSUN ILGILI OLDUGU ALAN Mevcut bulus; Faktör VIIa içeren, hem fiziksel hem de kimyasal olarak stabil olan ve bu sekilde oda sicakliginda saklanabilecek, islenebilecek ve kullanilabilecek kompozisyonlari ihtiva eden kitlerle ilgilidir.

BULUSUN ARKA PLANI Polipeptit içeren ilaçlar, kompleks bilesimlerdir. Böyle bir ilaç gelistirilirken, çesitli parametrelerin dikkate alinmasi gerekmektedir. Örnek vermek gerekirse, ilaç, etkili ve güvenli olurken iyi bir hasta uyumuna da yol açmalidir. Ayrica, ilaç, dünya çapindaki çesitli tibbi düzenleyici kurumlarin onay gereksinimini karsilamasi gereken farmasötik olarak kabul edilebilir eksipiyanlar kullanilarak parenteral uygulamaya yönelik olarak formüle edilebilmektedirler. Parenteral uygulama amaciyla, formülasyonun yaklasik olarak izotonik olmasi ve formülasyonun pH degerinin, enjeksiyon/infüzyon için fizyolojik olarak uygun bir aralikta olmasi çokça arzu edilmektedir. Aksi takdirde hasta için agri ve rahatsizlik ile sonuçlanabilmektedir. Polipeptit formülasyonlarinin genel bir incelemesi için örnek olarak bakiniz: Cleland ve digerleri, "The development of stable protein formulations: A Closer look at protein aggregation, deamidation and oxidation", Critical Reviews of polypeptides and peptides: Stability and stabilizers", Journal of Parenteral Science and Technology .

Bununla birlikte, polipeptit içeren ilaçlar için güvenlik, dogrudan polipeptidin fiziksel ve kimyasal stabilitesi ile iliskili olabilmektedir. Polipeptitler; dimerler, oligomerler ve polimerler formlarindaki çözünebilir veya çözünmeyen agregalarin olusumu gibi topaklasma ve denaturasyon da dahil olmak üzere fiziksel bozunmaya veya hidroliz, deamidasyon ve oksidasyon örnekleri dahil kimyasal bozunmaya karsi duyarlidirlar. Sonuç olarak, söz konusu fiziksel ve kimyasal instabilite, birkaçini adlandirmak gerekirse; polipeptit aktivitesinin kaybina, toksik ve immünojenik bozunum ürünlerinin olusumuna neden olabilmektedir ve pihtilasma faktörü polipeptitleri durumunda, bozunan polipeptitlerin enjeksiyonu ile tromboz meydana gelmesi, enjeksiyon için kullanilan ignelerin tikanmasi ve homojen olmama açilarindan ciddi bir risk bulunmaktadir.

Bunun için, polipeptit içeren kompozisyonlarin ortam sicakliklarinda saklanabilmesi ve elleçlenebilmesi için stabilize edilmeleri gerekmektedir. Bir polipeptidin stabilize edilmesine yönelik bir yaklasim, polipeptitten suyun uzaklastirilmasi ile ilgilidir. Örnegin polipeptidin, bir dondurarak kurutma isleminde bir son madde olarak elde edilen bir Iiyofilize edilmis kek formunda saglanmasi gibi. Bununla birlikte, dondurarak kurutma isleminin kendisi de polipeptitlere zararli olmaktadir. Dondurarak kurutma sirasinda, polipeptit çözeltisi, ilk önce yeterince donduruluncaya kadar sogutulmakta ve polipeptit çözeltisindeki yigin su, bu asamada buz olusturmaktadir.

Polipeptit, deformasyon ve çökelmeyle sonuçlanan donma kaynakli strese maruz kalmaktadir.

Birincil kurutma asamasi olarak adlandirilan bir sonraki asamada, buz süblimlesmekte ve ikincil kurutma asamasinda, emilen veya baglanan su, yüksek sicakliklarda uzaklastirilmaktadir. Bu sekilde suyun uzaklastirilmasi sirasinda polipeptitler, daha çok hidrojen bagi yoluyla saglanan uygun konformasyonlarini kaybedebilmektedirler.

Bu nedenle, dondurarak kurutma sirasinda polipeptit yapisi, aktivitesi ve stabilitesini muhafaza etmek üzere, polipeptit çözeltisinin, polipeptidi donma kaynakli stres ve/veya suyun uzaklastirilmasi esnasindaki stresten korumak için sirasiyla kriyoprotektan ve/veya Iiyoprotektan özelliklere sahip yeterli miktarlardaki uygun eksipiyanlar ile desteklenmesi gerekmektedir. sivi Faktör IX formülasyonlari ile ilgilidir.

WO , depolanma ve uygulamaya uygun Faktör lX'un Iiyofilize edilmis preparatlari ile ilgilidir. Preparatlar, bir kriyoprotektan olarak sakaroz veya mannitol içerebilmektedir.

WO , depolanma ve uygulamaya uygun Faktör lX'un preparatlari ile ilgilidir. Preparatlar, bir kriyoprotektan olarak sakaroz içerebilmektedir.

Ek olarak, Iiyofilize edilmis bir ürün temin edilirken, önemli bir özellik, Iiyofilize edilmis kekin özellikleri ile ilgilidir. Biçimi ve yapisiyla ilgili iyi özelliklere sahip olmasi gerekmektedir. Yani, çökmemesi gerekmektedir zira bu tür çökmüs kekler sert olabilmekte ya da kullanimdan önce çözülemeyebilmektedir / yeniden yapilanamamaktadir. Tersi bir sekilde, Iiyofilize edilmis kekin fiziksel yapisi, fazlaca gevsek ve yumusak olmayabilmektedir. Bu nedenle, dondurarak kurutma isleminden önce polipeptit çözeltisine bir veya daha fazla sözüm ona tamponlama maddesi eklenmektedir.

Dogru tamponlama maddesinin seçiminin yani sira, kekin fiziksel özelliklerini destabilize eden eksipiyanlardan kaçinmak da önemlidir. Bu maddelerin konsantrasyonu mümkün oldugunca düsük tutulmalidir. Ayrica, sulandirilarak hazirlanan çözeltinin, uygulama sirasinda hastaya enjeksiyon kaynakli rahatsizlik veya hatta aci vereceginden fazla hipotonik veya hipertonik olmamasi önemlidir. Bu nedenle, normalde, kompozisyona tonisite eklenmesi gereklidir. Bir baska eksipiyan, depolama sirasinda sulandirilarak hazirlanan çözeltinin pH degerini sabit tutmak için bir tampon madde olabilmektedir.

K vitaminine bagimli polipeptitler, kanin pihtilasma sürecine katilan bir grup polipeptittir. Grup; faktör VII, faktör IX, faktör X, faktör Il, Protein C, Protein S, gas6 ve kemik matrisi Gla polipeptidini içermekte veya faktör VIIa, faktör lXa, faktör Xa, faktör IIa ve etkinlestirilmis protein C'den olusan gruptan seçilen bir proteaz olabilmektedir. VIIa, IXa ve Xa Faktörleri özellikle faydali proteazlardir.

Faktör VIII, kanin pihtilasmasi sürecinde yer alan bir polipeptittir. Rekombinant tekniklerle meydana getirilebilmekte veya plazmadan hazirlanabilmekte ve hemofili hastalarinda kanama ataklarinin tedavisinde yaygin olarak kullanilmaktadir.

Faktör VII, kanin pihtilasmasi sürecinde yer alan bir polipeptittir. Günümüzde Faktör VIIa, rekombinant tekniklerle (rFVIIa) meydana getirilebilmekte ve yaygin olarak bir pro-hemostatik ajan olarak kullanilmaktadir. Faktör VII (insan dogal tipi), ABD Patenti No. 4,784,950'de tarif edilmistir. rFVIIa, günümüzde, kanama geçiren hemofili hastasi bireylerde hizli ve oldukça etkili bir pro-hemostatik tepki ortaya koymaktadir. Avantajli olarak, rFVIIa, antikor olusumu nedeniyle diger pihtilasma faktörü ürünleri ile tedavi edilemeyen hemofili hastasi bireyleri tedavi etmek için kullanilabilmektedir. Ayrica Faktör VII eksikliginden mustarip bireyler veya normal bir koagülasyon sistemine sahip olan ancak hala asiri kanama yasayan bireyler, rFVlIa ile basarili bir sekilde tedavi edilebilmektedirler.

Günümüzde, rekombinant kaynakli FVII polipeptidi, yaklasik 2 ila yaklasik 8 °C arasindaki sicakliklarda saklanmasi amaçlanan dondurarak kurutulmus ürün olarak temin edilmektedir.

Sogutulmus kosul gereksinimi, üretici veya tedarikçi ile birlikte son kullanici (hasta) için ilave yüke neden olmakta ve bu durum uygunsuz olmaktadir.

Gerçek bir rekombinant kaynakli FVII ürünü; 1,2 mg rekombinant insan Faktörü VIIa, 5,84 mg içeren NovoSeven®'dir (Novo Nordisk A/S, Danimarka). Enjeksiyon için 2,0 ml su ile sulandirildiginda (WFI), pH 5,5'tir ve bu sekilde hazirlanan FVII içerikli çözelti, oda sicakliginda 24 saat boyunca yeterince stabildir.

Mevcut arastirmacilar, Iiyofilize edilmis N0voSeven® ürününün 6 ay boyunca 25 °C'de saklanmasi ile rFVIIa'nin baslangiçtaki içeriginin agirlikça yaklasik %6 ila 7'sinin kadar agrega formunda mevcut oldugunu bulmuslardir.

Bunun için, Faktör VII polipeptidini içeren kompozisyonlarin ortam sicakliklarinda saklanabilmesi ve elleçlenebilmesi için stabilize edilmeleri gerekmektedir.

Mevcut bulusun bir amaci; gelistirilmis kitler ve bunlarin üretimi için yöntemler ortaya koymaktir; burada, polipeptitleri içeren kuru kompozisyonlar, Iiyofilize edilmis kekin form ve yapisi bakimindan iyi özellikler ile (yani çökmemelidir) ve Iiyofilize edilmis kekin iyi ve stabil fiziksel yapisi ile, kimyasal ve fiziksel bozunuma (örnegin daha az dimer/oligomer bozunum formlari olusturma gibi) karsi stabilize edilmislerdir; burada, kuru kompozisyon, kekin fiziksel özelliklerini destabilize eden, örnegin ötektik erime noktasini düsüren ve bu sekilde kekin çökme riskini artiran eksipiyanlardan yoksundur; burada, kuru polipeptit içeren kompozisyonun uygulama araci içinde çözülmesiyle hazirlanan sulandirilmis kompozisyon, izotoniktir veya neredeyse izotoniktir ve iyi tanimlanmis bir pH degerine (pH-stabil) sahiptir. Özellikle, tercihen ortam kosullarinda uzun süreli depolamadan sonra (örnegin en az 6 ay) bozunum ürünlerinin büyük oranda mevcut olmadigi ve Faktör VII polipeptitlerinin aktivitesinin azalmadigi, Faktör VII polipeptitlerini içeren gelismis kompozisyonlarin temin edilmesi, bir diger amaçtir. Ayrica, stabil kompozisyonlarin, hasta için herhangi bir rahatsizliga yol açmamasi sayesinde parenteral uygulama için uygun olmasi diger bir amaçtir.

BULUSUN ÖZETI Mevcut arastirmacilar tarafindan, polipeptit içeren ilaçlarin; bir polipeptit ve en az bir stabilize edici madde içeren ve yaklasik %3'ten fazla olmayan bir nem içerigine sahip bir kuru (örnegin dondurarak kurutulmus) kompozisyondan olusan bir birinci birim formu; ve söz konusu birinci birim formunu ihtiva eden saklama araçlarini; ve böyle bir birimi muhafaza etmeye yönelik saklama araçlari içinde, bahsi geçen kompozisyonu ve asagidaki listeden seçilen bilesenlerden en az birinin çözeltisi (sulandirma) için bir çözücüyü içeren bir uygulama aracindan olusan bir ikinci birim formunu; içeren parçalarin bir kit olarak temin edilebilecegi bulunmustur: (i) sulu çözücü içinde yaklasik 0,1 mM ila 100 mM arasinda bir miktarda çözündügünde adi geçen kompozisyonun pH degerini 3 ila 9 araliginda tutmak için uygun bir ajan; ve (ii) ikinci birim formun uygulama araci içinde birinci birim formun kompozisyonunun çözündürülmesiyle olusan sulandirilmis çözeltiyi esasen izotonik hale getirmek için yeterli bir miktarda bir tonisite modifiye edici ajan.

Tampon maddeler ve tonisite düzenleyiciler gibi formülasyonda genel olarak mevcut olan maddeler, siklikla ötektik erime noktasini azaltacak ve kekin çökme riskini artiracaktir. Bu maddeler, dondurarak kurutma sirasinda mevcutsa, birincil kurutma sirasindaki buzun sicakligi, çökmeyi ve dolayisiyla dondurarak kurutma süresinin uzatilmasini önlemek için azaltilmalidir. Bu maddelerin dondurarak kurutulmus kek içindeki konsantrasyonu mümkün oldugunca düsük tutulmali veya tamamen önlenmelidir. Bunun yerine, sulandirma sivisina faydali olacak sekilde eklenebilmektedirler.

Bu eksipiyanlarin konsantrasyonunun düsürülmesi veya tamamen çikarilmasiyla sulandirilmis çözelti, bazi durumlarda hipotonik hale gelecektir ve izotoniklik gibi ihtiyaç duyulan tonisiteye sahip veya buna yakin ("büyük ölçüde izotonik") bir çözelti elde etmek üzere çözücüye tonisite düzenleyicilerin ilave edilmesi gereklidir. Çözücü içerisinde gerekli bir baska eksipiyan, depolama sirasinda sulandirilarak hazirlanan çözeltinin pH degerini sabit tutmak için bir tampon madde olabilmektedir.

Parça kiti, en az yaklasik 8 ay boyunca oda sicakliginda saklanmaya imkân verecek sekilde yeterince stabildir.

Ayrica, Faktör Vll polipeptitlerinin, en az yaklasik 8 ay boyunca oda sicakliginda saklanmasina imkân verecek sekilde yeterli derecede stabil bir kompozisyonda saglanabilir oldugu bulunmustur.

Arastirmacilar, stabilizasyonun, bazi farmasötik olarak kabul edilebilir eksipiyanlarin uygun bir sekilde birlestirilmesi ile iliskili oldugunu bulmuslardir.

Buna göre, mevcut bulus, farmasötik bir ilaç içeren bir kit ile ilgili olup, bahsedilen kit asagidakileri içermektedir: a) Bir birinci birim form içerisinde, 1,0 mg/mL rekombinant Faktör VIIa, 2,34 mg/mL sodyum mg/mL mannitol, 10 mg/mL sakaroz içeren bir kompozisyon ve bahsedilen birinci birim formunu ihtiva eden saklama araci; burada, kompozisyon, %3'ten fazla olmayan bir nem içerigine sahiptir; ve b) Bir ikinci birim formu içerisinde, sulu çözücü içinde çözündügünde bahsedilen kompozisyonun pH degerini 6,0'da tutmak için uygun olan 0,5 mg/mL ila 3 mg/mL araliginda L-histidin içeren bir uygulama araci; ve bahsedilen ikinci birim formunu ihtiva etmek için saklama araci.

Bulus ayrica, rekombinant Faktör Vlla'nin bir sivi formülasyonunu hazirlamaya yönelik bir yöntem ile ilgili olup, yöntem, asagidaki basamaklari içermektedir: a) yukarida açiklandigi gibi bir birinci ve bir ikinci birim formu temin edilmesi, ve b) söz konusu birinci ve ikinci birim formlarinin, uygulama araci içinde kompozisyonun çözünmüs bir sivi çözeltisini temin edecek sekilde karistirilmasi.

Ayrica, bulus; bir Faktör VII duyarli sendromun tedavi edilmesinde kullanima yönelik yukarida tarif edildigi gibi bir kit ile ilgilidir ve burada, adi geçen sendrom, asagidakilerden olusan gruptan seçilmektedir: kazanilmis veya dogustan gelen hemofili A, kazanilmis veya dogustan gelen hemofili B, Faktör XI eksikligi, Faktör VII eksikligi, Glanzmann trombasteni, trombositopeni, von Willebrand hastaligi, VIII veya IX faktörlerinin inhibitörleri gibi bir pihtilasma faktörü inhibitörünün varligi, ameliyat, travma, dilüsyonel koagülopati ve antikoagülan tedavisi.

BULUSUN DETAYLI AÇIKLAMASI Bu tarifnamede; FVIII polipeptitleri, Vitamin K-bagimli polipeptitler ve FVII polipeptitleri dahil olmak üzere polipeptit içeren depolamaya dayanikli kitleri ve kompozisyonlar açiklanmaktadir.

Kompozisyonlar, polipeptidin önemli ölçüde bozulmasina neden olmadan uzun bir süre boyunca oda sicakliginda saklanabilmektedirler. 'Oda sicakligi', bir odanin içindeki ortam sicakligini ifade etmekte ve normalde yaklasik 10 °C ila 30 °C veya 15 °C ila 25 °C durumlarinda oldugu gibi yaklasik 5 °C ila yaklasik 40 0C arasinda degismektedir.

Farmasötik olarak kabul edilebilir belirli eksipiyanlarin önceden belirlenmis uygun sekildeki kombinasyonu ile mevcut arastirmacilar; polipeptit, özellikle de Faktör VII polipeptitlerini içeren stabilize edilmis kompozisyonlar saglamislardir. Böylece kompozisyonlarin oda sicakliginda en az yaklasik 8 ay gibi uzun bir süre boyunca depolanmasina izin verilmistir. Avantajli bir sekilde, stabilize edilmis kompozisyonlarin, 2 ila 8 °C araliginda oldugu gibi sogutulmus kosullarda saklanmasi gerekmemektedir.

Burada tarif edilenler, yaklasik 30 °C'de depolamadan sonra en az yaklasik 8 ay boyunca kararli kalan depolamaya dayanikli kompozisyonlardir. Kompozisyon, tercihen karanlikta saklanmaktadir. Bunun Için, mevcut bulus; bu tür kompozisyonlari kullanan hastanin basina gelebilecek olumsuz olay riskini arttirmadan bu tür kompozisyonlarin oda sicakliginda saklanmasini mümkün kilmaktadir. Avantajli bir sekilde, depolamaya karsi gelistirilmis stabilite ayrica, saklama için özel sogutulmus kosullarin gerekliliginin olmamasina bagli olarak daha düsük maliyetlere de yol açacak ve dahasi, kompozisyonun kullanici tarafindan daha uygun sekilde elleçlenebilmesini saglayacaktir.

Mevcut bulusa uygun olarak formüle edilecek polipeptitler arasinda; bunlarla sinirlama olmaksizin faktör VIII, faktör V, faktör XI, faktör VII, faktör IX, faktör X, faktör Il, Protein C, Protein S, gasß ve kemik matrisi Gla polipeptidi örneklerinde oldugu gibi K vitaminine bagimli polipeptitleri; aktive edilmis FVIII, faktör Va, faktör Xla, faktör Vlla, faktör IXa, faktör Xa, faktör Ila ve aktive edilmis Protein C içeren kari pihtilasma faktörleri bulunmaktadir. gasö ve kemik matrisi Gla polipeptidinden olusan gruptan seçilen polipeptitleri içermekte veya faktör Vlla, faktör IXa, faktör Xa, faktör Ila ve aktive edilmis protein C'den olusan gruptan seçilen bir proteaz olabilmektedir. Vlla, IXa ve Xa Faktörleri özellikle faydali proteazlardir.

Faktör VII polipeptidi anlamina gelmektedir. Bu, kan veya plazmadan elde edilen veya rekombinant yollarla üretilen Faktör VII polipeptitlerini içermektedir.

Burada kullanildigi sekliyle "Faktör VII polipeptidi"; bunlarla sinirli olmamak üzere, varyantlari da dahil Faktör Vll'yi, bunun yani sira Faktör VII ile ilgili polipeptitleri, Faktör VII türevlerini ve Faktör VII konjugatlarini kapsamaktadir. "Faktör VII" terimi; bunlarla sinirli olmaksizin, dogal tipteki insan Faktörü VII`nin (ABD Patenti No. 4,784,950'de açiklandigi gibi) ve ayrica sigir, domuz, köpek, fare ve somon örnekleri gibi diger türlerden elde edilen dogal tipteki Faktör VII'nin 1-406 amino asit sekansina sahip polipeptitleri kapsamayi amaçlamaktadir. Söz konusu Faktör VII, kan veya plazmadan türetilmekte veya rekombinant yollarla üretilmektedir. Ayrica, bir bireyden digerine var olabilen ve meydana gelebilen Faktör VII'nin dogal alelik varyasyonlarini da kapsamaktadir.

Ayrica, glikosilasyon veya diger translasyon sonrasi degisikliklerin derecesi ve konumu, seçilen konakçi hücrelere ve konak hücresel ortaminin dogasina bagli olarak degisebilmektedir. "Faktör VII" terimi, ayni zamanda; ayrilmamis (zimojen) formlarinda Faktör VII polipeptitleri ile ayni zamanda, Faktör VIIa olarak adlandirilabilecek ilgili biyoaktif formlarini meydana getirmek üzere proteolitik olarak islenmis olanlari kapsayacak sekilde tasarlanmistir. Tipik olarak, Faktör VII; Faktör Vlla'yi ortaya çikarmak üzere 152 ve 153 kökleri arasindan bölünmektedir.

Burada kullanilan "Faktör VII türevi'i terimi; ana peptidin amino asitlerinden birinin veya daha fazlasinin, alkilasyon, glikozilasyon, PEGilasyon, asilasyon, ester olusumu veya amid olusumu ya da benzerleri örneklerinde oldugu gibi enzimatik olarak ve/veya kimyasal olarak ve/veya genetik olarak degistirildigi, dogal tipteki Faktör VII'ye göre büyük ölçüde ayni veya gelistirilmis biyolojik etkinlik sergileyen bir FVII polipeptidini tasvir etmek üzere tasarlanmistir. Bu; PEG'Ienmis insan Faktörü Vlla, sistem-PEG'Ienmis insan Faktörü VIIa ve bunun varyantlarini içermekte ancak bunlarla sinirli kalmamaktadir. Faktör VII türevlerinin sinirlayici olmayan örnekleri arasinda; WO Üniversitesi) açiklanan FVlI konjugatlari bulunmaktadir. karsilastirildiginda esasen ayni veya artirilmis proteolitik aktiviteye sahip FVIl polipeptitlerine ya da ii) rekombinant dogal tip insan faktörü Vlla ile karsilastirildiginda esasen ayni veya artirilmis TF baglama aktivitesine sahip FVII polipeptitlerine ya da iii) rekombinant dogal tip insan faktörü Vlla ile karsilastirildiginda kan plazmasi içinde esasen ayni veya artirilmis yari ömre sahip FVII polipeptitlerine atifta bulunmaktadir. "PEGIenmis insan Faktörü Vlla" terimi, bir insan Faktörü Vlla polipeptidine konjuge edilmis bir PEG molekülüne sahip olan insan Faktörü Vlla'yi ifade etmektedir. PEG molekülünün, Faktör Vlla polipeptidinin herhangi bir amino asit kalintisi veya karbonhidrat parçasi dahil olmak üzere Faktör Vlla polipeptidinin herhangi bir kismina baglanabilecegi anlasilmalidir. "Sistein-PEG'Ienmis insan Faktörü Vlla" terimi, insan Faktörü Vlla'ya verilen bir sisteinin sülfhidril grubuna konjuge edilmis bir PEG molekülüne sahip olan Faktör Vlla anlamina gelmektedir. Belirtildigi üzere, "Faktör VII polipeptitleri" terimi; "Faktör VII ile ilgili polipeptitler" anlamina da gelmektedir. "Faktör VII ile ilgili polipeptitler'i terimi; ayrilmamis (zimojen) formlarinda bu gibi polipeptitler ile birlikte ilgili biyoaktif formlarini meydana getirmek üzere proteolitik olarak islenmis olanlari kapsayacak sekilde tasarlanmistir. Burada kullanildigi haliyle "Faktör VII ile ilgili polipeptitler"; bunlarla sinirli olmaksizin, dogal tipteki insan Faktörü Vll'ye göre büyük ölçüde ayni veya gelistirilmis biyolojik aktivite sergileyen polipeptitler ile biyolojik aktivitesinin, dogal tipteki insan Faktörü Vlla'nin aktivitesine göre önemli ölçüde azaltildigi polipeptitleri (ABD Patenti No. 4,784,950'de açiklandigi gibi) kapsamaktadir. Bu polipeptitler; bunlarla sinirli olmaksizin, örnegin, faktör Vll'yi bir organofosfor bilesigi, bir sülfonil florür, bir peptit halometil keton veya bir azapeptit gibi tersinmez bir inhibitörle reaksiyona sokarak veya sinirlayici olmayan bir örnek ile asilasyon yoluyla kimyasal olarak modifiye edilmis Faktör VII veya Faktör Vlla'yi ve polipeptidin biyolojik aktivitesini hafifçe degistiren veya iyilestiren spesifik amino asit sekansi degisikliklerinin dahil edildigi Faktör VII varyantlarini (faktör Vlla'nin katalitik aktivitesinin, katalitik bölgenin veya triadin kimyasal olarak türevlendirilmesi yolu ile inhibe edildigi polipeptitler gibi) içermektedir.

Burada, FVIIa'ya atifla kullanildiginda "katalitik bölge" veya "aktif bölge" terimleri; I. Schecter ve FVIIa'nin "81" bölgesi de dahil olmak üzere katalitik ve zimojen substrati baglanma bölgesini ifade etmektedir. Insan ve sigir Faktörü VII proteinlerinin katalitik bölgesi; bir sözüm ona katalitik "triad" olusturan Ser344, Asp242 ve His193 amino asitlerini (alt simge numaralari dizideki pozisyonu göstermektedir) içermektedir. Diger memeli türlerinden elde edilen Faktör Vll'deki katalitik bölgeler, digerlerinin yani sira protein izolasyonu ve amino asit dizisi analizi dahil olmak üzere su anda mevcut olan teknikler kullanilarak belirlenebilmektedir. Katalitik bölgeler, ayrica; bir dizinin, serin proteazlarinin, özellikle de kimotripsin dizisi ile hizalanmasi ve burada bahsedilen hizalamadan analog aktif bölge kalintilarinin tayin edilmesi yolu ile belirlenebilmektedir.

Dogal tipteki Faktör VIIa'ya göre büyük ölçüde ayni veya gelistirilmis biyolojik aktiviteye sahip olan, varyantlari da dahil olmak üzere Faktör VII ile ilgili polipeptitler; ayni hücre türünde üretilmis olan dogal tipteki Faktör VIIa'nin, bu tarifnamede anlatildigi gibi pihtilasma tahlili, proteoliz tahlili veya TF baglanma tahlillerinden bir veya daha fazlasi ile test edilen spesifik aktivitesinin en az yaklasik %25'ini, tercihen en az yaklasik %50'sini, daha tercihen en az yaklasik %75'ini, daha tercihen en az yaklasik %100'ünü, daha tercihen en az yaklasik %110'unu, daha tercihen en az yaklasik %120'sini ve en çok tercihen en az yaklasik %130'unu sergileyenleri kapsamaktadir.

Biyolojik aktiviteleri, dogal tipteki insan faktörü Vlla'nin aktivitesine göre büyük ölçüde azaltildigi, varyantlari da dahil olmak üzere faktör V” ile ilgili polipeptitler; dogal tipteki faktör VIIa'nin, bu tarifnamede anlatildigi gibi pihtilasma tahlili, FlXa veya FXa üretim tahlili, amidoliz veya proteoliz tahlillerinden bir veya daha fazlasi ile test edilen spesifik aktivitesinin yaklasik %25'inden daha az, daha tercihen yaklasik %10'undan veya %5'inden veya %3'ünden veya %2'sinden daha az ve en çok tercihen yaklasik %1'inden daha azini sergileyen polipeptitleri kapsamaktadir.

Bazi yapilanmalarda, Faktör VII polipeptitleri; belli varyantlarinda, "In Vitro Hidroliz Tahlili" (bkz. Örnekler, Genel Yöntemler, asagida) ile test edildiginde söz konusu Faktör VII polipeptidinin aktivitesi ile tabii insan Faktörü VIIa'nin aktivitesi (dogal tipteki FVIIa) arasindaki oranin, en az yaklasik 1,25 oldugu Faktör VII ile ilgili polipeptitlerdir. Diger yapilanmalarda oran, en az yaklasik 2,0 ve baska yapilanmalarda oran, en az yaklasik 4,0'dir. Bulusun bazi yapilanmalarinda, Faktör VII polipeptitleri; belli varyantlarinda, "In Vitro Proteoliz Tahlili" (bkz. Örnekler, Genel Yöntemler, asagida) ile test edildiginde söz konusu Faktör VII polipeptidinin aktivitesi ile tabii insan Faktörü VIIa'nin aktivitesi (dogal tipteki FVIIa) arasindaki oranin, en az yaklasik 1,25 oldugu Faktör VII ile ilgili polipeptitlerdir. Diger yapilanmalarda oran, en az yaklasik 2,0, baska yapilanmalarda oran, en az yaklasik 4,0 ve baskaca yapilanmalarda oran, en az yaklasik 8,0'dir.

Dogal tipteki Faktör VII ile büyük ölçüde ayni veya gelistirilmis biyolojik aktiviteye sahip olan Faktör VIl varyantlarinin sinirlayici olmayan örnekleri arasinda; 852A-FVII, SöOA-FVll (Lino ve A.B.D. Patent No. 5,580,560'da açiklandigi gibi arttirilmis proteolitik stabilite gösteren FVIIa Faktör Vlla'nin oksitlenmis formlari (Kornfelt ve digerleri, Arch. Biochem. Biophys. 363: 43-54, 02/38162'de (Scripps Arastirma Enstitüsü) açiklandigi gibi arttirilmis proteolitik stabilite gösteren basvurusu ve WO 00/66753, ABD patent basvurulari US (Minnesota Üniversitesi) açiklandigi gibi artirilmis zar baglanmasi gösteren ve modifiye edilmis ve WO 04/029091'de (Maxygen FVIIa ile kiyaslandiginda artirilmis biyolojik aktiviteye sahip FVII varyantlari; ve JP FVIIa varyantlari bulunmaktadir.

Dogal tipteki faktör VII'ye göre büyük ölçüde azaltilmis biyolojik aktiviteye sahip olan faktör VII polipeptitlerinin sinirlayici olmayan örnekleri arasinda; R152E-FVlla (Wildgoose ve digerleri, bulunmaktadir. Sinirlayici olmayan örnekler ayrica; 341 pozisyonundaki Iisin kalintisinin baska bir amino asit kalintisi ile yer degistirmis oldugu insan FVlla'yi; 344 pozisyonundaki serin kalintisinin baska bir amino asit kalintisi ile degistirmis oldugu insan FVIIa'yi; 242 pozisyonundaki aspartik asit kalintisinin baska bir amino asit kalintisi ile degistirilmis oldugu insan FVIIa'yi; 193 pozisyonundaki histidin kalintisinin baska bir amino asit kalintisi ile degistirilmis oldugu insan FVIIa'yi; ve FVII-(K; Phe-Phe-ArgFVII (FFR- FVIl), D-Phe-Phe-Arg-FVII (D-FFR-FVII), Phe-Pro-Arg-FVII (FPR-FVII), D-Phe-Pro-Arg-FVII (D- FPR-FVII), L-Glu-Gly-Arg-FVII (EGR-FVII) ve D-GIu-GIy-Arg-FVIl (D-EGR-FVII), DansyI-Phe- Phe-Arg-FVII, DansyI-D-Phe-Phe-Arg-FVII, Dansyl-Phe-Pro-Arg-FVII, DansyI-D-Phe-Pro-Arg- FVII, DansyI-L-Glu-Gly-Arg-FVII ve DansyI-D-Glu-Gly-ArgFVII'yi içermektedir. Kimyasal olarak degistirilmis faktör VII polipeptitlerinin ve sekans varyantlarinin sinirlayici olmayan örnekleri, örnegin ABD Patenti No. 5,997,864'te tarif edilmistir.

Faktör VII veya faktör VII ile ilgili polipeptitlerin örnekleri arasinda, bunlarla sinirlama olmaksizin; E296V-FVII, L305V/E296V/M298Q-FVI I, K31 6H/L305V/V1 58T-FVI I, K316H/L305V/K337A-FVII, K316H/L305V/M298Q-FVH, amino asit dizisinde ikameler, eklemeler ya da çikarmalari içeren FVII, 304Arg ile 32QCys arasindaki amino asit dizisinde ikameler, eklemeler ya da çikarmalari içeren FVII ve Ile153 ile Ar9223 arasindaki amino asit dizisinde ikameler, eklemeler ya da çikarmalari içeren FVII bulunmaktadir.

Bulusun amaçlari dogrultusunda, Faktör VII polipeptitlerinin biyolojik aktivitesi ("Faktör VII biyolojik aktivitesi"), örnegin ABD Patenti No. 5,997,864'te tarif edildigi gibi, Faktör VII-eksikligi olan plazma ve tromboplastini kullanarak kanin pihtilasmasini tesvik etmek için bir preparatin kabiliyetinin ölçülmesiyle belirlenebilmektedir. Bu tahlilde, biyolojik aktivite, bir kontrol numunesine göre pihtilasma zamaninda azalma olarak ifade edilmekte ve 1 birim/ml Faktör VII aktivitesi içeren bir toplanmis insan serum standardi ile karsilastirilarak “Faktör VII birimlerine" dönüstürülmektedir. Alternatif olarak, Faktör Vlla biyolojik aktivitesi su yöntemlerle de belirlenebilmektedir: (i) Faktör Vlla veya Faktör Vlla ile ilgili bir polipeptidin, Faktör X ile bir Iipit zar içine gömülü TF içeren bir sistemde aktive edilmis Faktör X (FactorXa) üretme yeteneginin ölçülmesi (ii) Bir sulu sistem içinde Faktör X hidrolizinin ölçülmesi ("ln Vitro Proteoliz Tahlili", bkz. Örnekler, Genel Yöntemler, asagida); (iii) Faktör Vlla veya Faktör Vlla ile ilgili bir polipeptidin, yüzey plazmon rezonansina bagli bir enstrüman kullanilarak TF'ye fiziksel olarak baglanmasinin ölçülmesi (Persson, FEBS (iv) Sentetik bir substratin Faktör Vlla ve/veya bir Faktör Vlla ile ilgili polipeptit tarafindan hidrolizinin ölçülmesi ("ln Vitro Hidroliz Tahlili", bkz. Örnekler, Genel Yöntemler, asagida); (v) TF'den bagimsiz bir in vitro sistemde trombin üretiminin ölçülmesi. içerecek sekilde tasarlanmistir. Terim, ayrica, doku Faktörü yoklugunda aktive edilmis trombositlerin yüzeyinde trombin olusturma yetenegini de ihtiva etmektedir.

Mevcut tarifnamenin "Örnekler, Genel Yöntemler" bölümünde, FVII biyolojik aktivitesinin analiz edilmesi için yararli olan tahlilleri detayli bir sekilde tarif etmektedir.

Ayrica, mevcut sartname boyunca, asagidaki terimler su anlamlara sahiptir: stabilize edici madde içeren bir kuru ürün ile bir ikinci birim içinde, birinci birimin kuru ürününü çözmek için uygun bir çözücüyü, yaklasik 0,1 mM ila 100 mM arasinda bir miktardaki en az bir tamponlama maddesi ve/veya en az bir tonisite modifiye edici ajan ile kombinasyon halinde bir uygulama aracinin bir kombinasyonu anlamini ifade etmeyi amaçlamaktadir. Kit, özellikle kanama ataklarina yönelik olmak üzere birfarmasötik tedavi içermektedir. Kullanmadan önce, birinci birimin kuru kompozisyonu, ikinci birimde bulunan uygulama aracinda karistirilarak çözülmekte ve böylece kullanima hazir bir ilaç temin edilmektedir. Kullanima hazir ilaç büyük ölçüde izotoniktir. oldugu gibi enjeksiyon ve infüzyon benzeri enjekte edilebilir vasitalarla uygulanmaya uygun farmasötik olarak kabul edilebilir ve tercihen steril sivilari kapsamaktadir. Uygulama araci, tercihen suludur. Uygulama araci; polipeptit kompozisyonunun sulandirilmasi (çözelti) için uygun bir çözücü veya bir çözücü karisimini (örn. Enjeksiyon için Su /WFI); bahsedilen kompozisyonun pH degerini, sulu çözücü içinde yaklasik 0,1 mM ila 100 mM arasinda bir miktarda çözüldügünde 3 ila 9 araliginda korumak için uygun olan bir veya daha fazla maddeyi; ve/veya birinci birim formundaki kompozisyonun ikinci birim formu içindeki uygulama aracinda çözülmesinden kaynaklanan sulandirilmis çözeltiyi büyük oranda Izotonik hale getirmek için yeterli bir miktarda bir veya daha fazla tonisite modifiye edici madde içermektedir.

Uygulama araci; metal tuzlari (örnegin kalsiyum ve/veya magnezyum tuzlari) ve amino asitler (örnegin glisilglisin) gibi baska maddeleri içerebilmektedir.

Sulandirilmis kompozisyonlar, profilaktik ve/veya terapötik tedavi için parenteral uygulamaya yönelik tasarlanmistirlar.

Bir polipeptidin "etkili miktari"; bulusa uygun olarak uygulandiginda, teknikte uzman kisilerce bilinen hemostazin en az bir klinik parametresinde ölçülebilir bir iyilesme saglayan polipeptit miktarina karsilik gelmektedir.

Bir polipeptidin etkili bir miktarinin, örnegin dolasimdaki pihtilasma faktörlerinin nispi seviyeleri, kaybedilen kan miktari; kanama orani; hematokrit ve benzerleri dahil olmak üzere bir veya daha fazla klinik parametrede yansitilabilen, hastanin hemostatik durumuna göre degisebilecegi anlasilacaktir. Tek-doz-etkili miktarin, bir degerler matrisi olusturma ve matriste farkli noktalarin test edilmesi yoluyla gerçeklestirilen rutin deneyler yardimiyla teknikte uzman kisilerce belirlenebilecegi anlasilacaktir. ve uygun konformasyonunun muhafazasinin saglanmasinin yani sira, agrega (çözünmez ve/veya çözünebilir) olusumu ve/veya kimyasal bozunumunun en aza indirgenmesini ve böylece biyolojik aktivite ve polipeptit stabilitesinin önemli ölçüde devam ettirilmesini kapsamaktadir.

Bunun yaninda, stabilize etme ayrica, kompozisyonlarin dondurarak kurutma kosullarinda üretimi sirasinda polipeptidin Iiyoproteksiyonu ve kriyoproteksiyonu anlamina da gelmektedir. sirasinda polipeptidi stabilize etme kabiliyeti bulunan maddeler veya maddelerin bir karisimini kapsamasi amaçlanmaktadir. hemen önce çözünmekte) kapsamak üzere tasarlanmistir. stabilize bulunan ve uygun bir zaman periyodu (genellikle birkaç ay) için önceden seçilmis ürün spesifikasyonlari kapsaminda kalan bir ürünü tanimlamak için tasarlanmistir.

Faktör VII polipeptitlerine yönelik "fiziksel stabilite" terimi; Faktör VII polipeptitlerinin dimerik, oligomerik ve polimerik formlari ve ayrica molekülün yapisal deformasyonu ve denaturasyonu seklinde çözünmeyen ve/veya çözünebilir agregalarin olusumu ile ilgilidir. polipeptitlerinde herhangi bir kimyasal degisiklik olusumu ile ilgili olmak üzere tasarlanmistir. Örnek olarak hidroliz, deamidasyon ve oksidasyon bulunmaktadir. Özellikle, sülfür içeren amino asitler, oksidasyona ve ilgili sülfoksitleri olusturmaya egilimli olmaktadirlar.

Burada kullanilan "kriyoprotektanlar" terimi, genel olarak; donma ile indüklenen streslere karsi polipeptide stabilite saglayan ajanlar içermektedir. Kriyoprotektanlarin örnekleri arasinda, örnegin; mannitol gibi polioller ve örnegin sakaroz gibi sakaritler ve ayni zamanda örnegin polisorbat, poloksamer veya polietilen glikol gibi sürfaktanlar ve benzerleri bulunmaktadir.

Kriyoprotektanlar ayrica formülasyonlarin tonisitesine de katkida bulunmaktadirlar.

Burada kullanildigi sekliyle "Iiyoprotektan" terimi, Iiyofilizasyon prosesinin kurutma islemi sürecinde suyun uzaklastirilmasi sirasinda polipeptide stabilite saglayan maddeleri içermektedir. Örnek olarak, polipeptidin uygun konformasyonunu korumaktadirlar. Liyoprotektanlarin örnekleri; sakaritleri ve özellikle de di- veya tri-sakaritleri içermektedir. Kriyoprotektanlar ayrica, terimi, pH degerini 3,0 ila 9,0 arasindaki kabul edilebilir bir aralikta tutan maddeleri kapsamaktadir. pH degerini 3 ila 9 arasinda tutabilen ajanlarin tipik örnekleri; sitrik asit, asetik asit, histidin, malik asit, fosforik asit, tartarik asit, süksinik asit, MES, HEPES, PIPES, imidazol, TRIS, Iaktik asit, glutarik asit ve glisilglisinin asit formu veya tuzlaridir. Ajanlarin bir kombinasyonunun, pH degerinin yukarida tarif edilen aralikta muhafaza edilmesi için uygun olan maddelerin bir kombinasyonu olarak kullanilabilecegi de anlasilmalidir.

Bu tarifnamede kullanildigi haliyle "liyofilize edilmis kek" terimi; bir çözünmüs veya en azindan kismen çözünmüs kompozisyonun, bahsedilen çözünmüs / kismen çözünmüs kompozisyonun buz olana degin sogutuldugu en az bir adim ile onu takip eden en az bir vakum kurutma adimi ihtiva eden sartlar altinda islenerek elde edilen kati kompozisyonu kapsamaya adanmistir. çözünmüs kompozisyondan uzaklastirildigi ve bahsedilen çözünmüs / kismen çözünmüs kompozisyonun buz olana degin sogutuldugu en az bir adim ile onu takip eden vakum kurutma islemini ihtiva eden sartlari kapsayan bir prosesi kapsamaktadir. Liyofilizasyon ya da dondurarak kurutma, kati polipeptit ilaçlarini üretmek üzere kullanilan en yaygin prosestir. Proses, iki ana asamadan olusmaktadir: bir polipeptit çözeltisinin dondurulmasi ve donmus kati maddenin vakum altinda kurutulmasi. Kurutma asamasi ayrica iki asamaya bölünmektedir: birincil ve ikincil kurutma. Birincil kurutma, donmus suyu (buzun süblimlesmesi) ortamdan çikarmakta ve ikincil kurutma, dondurulmamis "bagli" suyu (suyun desorpsiyonu) uzaklastirmaktadir. Her Iiyofilizasyon asamasinin daha ayrintili analizi, örnek olarak Wang ve digerleri tarafindan International Journal Tipik olarak, bir kompozisyon; küçük siseler içine doldurulmasi ve dondurucu-kurutucunun raflarinda dondurulmasi ve ardindan bir vakum olusturarak raflara birincil kurutma (ya da buzun süblimlesmesi) için isi verilmesi yolu ile dondurularak kurutulmaktadir. Daha sonra, prosesin tamamlanmasina degin yani kompozisyonun yeterince düsük bir nem (su) içerigine sahip oldugu anda daha yüksek bir sicaklikta ikincil kurutma (veya emilen suyun desorpsiyonu) islemi yer almaktadir. Dondurarak kurutma yöntemleri teknikte genel olarak bilinmektedir. Örnek olarak, sicakliklarda belli bir kompozisyon için dondurarak kurutma kosullarinin sicaklik (sicakliklar) ve süre (süreler) ve ayrica islem sirasinda kullanilacak olan basinç açilarindan optimize edilmesi, uygulayicinin var olan tecrübesi kapsaminda bulunmaktadir. emilen donmamis su gibi adsorbe edilmis formdaki su da dahil ürün ile iliskili olan suyu ve/veya amorf faz ile iliskili veya dondurulmus kristalli katiya emilmis suyu kapsamaktadir. "Su içerigi" terimi, "nem içerigi" terimi ile degismeli olarak kullanilmaktadir. Istenen nem kalinti seviyesi (nem içerigi), ikincil kurutma asamasinin süresinin ve sicakliginin bir fonksiyonudur. Liyofilizasyon sirasinda kalinti nem içeriginin saptanmasi için birkaç yöntem teknikte bilinmektedir. Örnegin, bir elektronik higrometre veya bir kalinti gaz analiz cihazi kullanilabilmektedir. Dondurarak kurutulmus formülasyonlarin nem içerikleri; örnegin kurutma sirasindaki kayip, Karl Fischer titrasyonu, termal gravimetrik analiz (TGA), gaz kromatografisi (GC) veya yakin IR (bkz. örn. birkaç yöntemle belirlenebilmektedir. Su içerigini (nem içerigini) belirlemeye yönelik yöntemler, hem Avrupa hem de ABD Farmakopesi'nde de tarif edilmistir. Örnek olarak, su içeriginin tespiti, ABD Farmakopesi (USP <921, Ic>) veya Avrupa Farmakopesi'nde (EP <2.5.32>) tarif edildigi gibi Karl Fischer kulometrik titrasyonu ile gerçeklestirilebilmektedir. Özetle, yöntem asagidaki gibidir: Kulometrik titrasyon ile su içeriginin belirlenmesi: suyun susuz bir ortamda kükürt dioksit ve iyodin ile kantitatif reaksiyonuna dayanan suyun kulometrik tayininde Karl Fischer reaksiyonu kullanilmaktadir. Iyot, iyodürün oksidasyonu ile reaksiyon hücresinde elektrokimyasal olarak üretilmektedir. Anotta üretilen iyot, reaksiyon hücresinde bulunan su ve kükürt dioksit ile hemen reaksiyona girer. Maddenin içindeki su miktari, titrasyonun son noktasina degin verilen elektrik miktariyla dogru orantilidir. Hücredeki suyun tamami tükendiginde, son noktaya ulasilir ve böylece elektromanyetik olarak tespit edilen ve böylece son noktayi belirten iyot fazlasi görünür. Daha sonra, madde içinde mevcut Nem içerigi, analiz sirasinda sise içerisindeki numunenin agirligina göre tanimlanabilmekte (yani, katilar ile birlikte mevcut su miktari - islak agirlik bazli olarak adlandirilmaktadir) veya numune içindeki ölçülen su miktarinin düzeltildigi sekliyle (yani, kuru agirlik bazli) tanimlanabilmektedir.

Düsük nem içerikli ürünlerin dondurarak kurutulmasi durumunda, her iki ölçüm (islak agirlik bazli ve kuru agirlik bazli) de çok benzer sonuçlar vermektedir. Burada kullanildigi sekliyle, nem içerikleri, katilar ile birlikte mevcut su miktari (yani, islak agirlik bazli) cinsinden tanimlanmaktadir. olarak kesme/donma gibi çesitli streslerin üstesinden gelmesine yardimci olan farmasötik olarak uygun bir ürün olusturan iyi Iiyofilize kek özellikleri saglayan ve polipeptit aktivite seviyelerinin dondurarak kurutma islemi ve sonrasindaki depolama sirasinda korunmasina yardimci olan ajanlar içermektedir. Tamponlama maddelerinin sinirlayici olmayan örnekleri arasinda; mannitol, glisin, sakaroz ve Iaktoz bulunmaktadir. Bu maddeler, formülasyonlarin tonisitesine de katkida bulunmaktadirlar.

Izotonik çözeltiler; kanin, periton sivisinin veya diger ilgili vücut sivilarinin fizyolojik araligi içinde bir tonisiteye sahiptirler. Izotoniklik; %0,9'Iuk bir NaCI çözeltisinin ozmotik basincina (= 286 mOsM) karsilik gelen bir ozmotik basinca sahip bir çözelti anlamina gelmektedir. “Büyük ölçüde ila yaklasik %1,0 veya yaklasik %0,9 oraninda NaCl örneklerinde oldugu gibi yaklasik %0] ila yaklasik %1,5 araligindaki oranlarda NaCI içeren bir tuz çözeltisinin ozmotik basincina karsilik gelen bir tonisite anlamini ifade etmek üzere kullanilmaktadir. sirasinda çözünmesi ile kompozisyonun tonisitesini ayarlayabilen herhangi bir madde veya madde karisimi anlamina gelmektedir. Çözünmüs (sulandirilmis) kompozisyon büyük ölçüde izotoniktir. Açik bir sekilde, sulandirilan çözeltinin tonisitesi, hem kuru kompozisyondaki hem de sulandirilan çözeltideki tonisite modifiye edici maddelerin içerigine bagli olabilmektedir. Tonisite modifiye edici maddeler; bunlarla sinirli olmamak üzere, sodyum asetat, sodyum Iaktat, sodyum klorür, potasyum klorür, kalsiyum klorür, mannitol, gliserol, propilen glikol veya bunlardan ikisinin veya daha fazlasinin karisimlari arasindan seçilen bilesenleri içermektedir.

Yukarida tarif edildigi gibi bir tonisiteye sahip bir kompozisyonun temin edilmesi için uygun olan yukaridaki tonisite modifiye edici ajanlarin miktarlari; bireysel tonisite modifiye edicinin tek basina veya bir veya daha fazla tonisite modifiye edicisi ile kombinasyon halinde kullanilmasina bagli olarak örnegin, 0 ile yaklasik 9 mg/ml arasinda sodyum klorür, 0 ila yaklasik 17 mg/ml araliginda kalsiyum klorür dihidrat, 0 ila yaklasik 51 mg/ml arasinda mannitol, 0 ila yaklasik 26 mg/ml araliginda gliserol, 0 ila yaklasik 21 mg/ml arasinda propilen glikoldür. çözelti/yüzey kaynakli streslerden koruyan maddeleri içermektedir. Örnek olarak, sürfaktanlar, polipeptidi agregasyondan koruyabilmektedirler. Uygun sürfaktanlar arasinda; örnegin, polisorbatlar, Brij 35® gibi polioksietilen alkil eterler veya Tween 20 veya Tween 80 gibi poloksamerler ya da poloksamer 188 bulunmaktadir. Tercih edilen sürfaktanlar; Poloksamer 188, Poloksamer 407 örnekleri gibi poloksamerler, polioksietilen alkil eterler (örn. Brij 35®, Cremophor A25, Sympatens ALM/230) ve polisorbatlar/Tweens'dir (örn. Polisorbat 20, Polisorbat 80). Daha çok tercih edilenler ise Poloksamerler (örn. Poloksamer 188) ve Tweens'dir (örn. Tween 20 ve Tween 80). Tipik olarak, sürfaktanlar, 0,005 ila 5 mg/ml arasindaki bir miktarda eklenmektedirler. polipeptitlerinin miktari ile ilgilidir. Burada verilen konsantrasyon (mg/ml): nemi uzaklastirmadan önceki (örn. dondurarak kurutmadan önce) Faktör VII polipeptidinin çözeltisinde veya sulandirilmis kompozisyon içinde konsantrasyona isaret etmekte ya da agirlikça % olarak gösterilerek ardindan kati kompozisyondaki (örn. Iiyofilize edilmis kek) konsantrasyon ile iliskilenmektedir.

Burada kullanildigi sekliyle, belirtilen miktarlarin %6 ila yaklasik %10 oldugu anlasilmalidir.

Dolayisiyla yaklasik 50 mM, 50 mM ± 5mM içermekte, %4, %4 ± %O,4 vs. içermektedir.

Yukarida belirtildigi gibi, mevcut arastirmacilar, Faktör VII polipeptitlerini stabilize etmek ve bu sekilde kullaniciya daha fazla risk ve rahatsizlik vermeden uzun süreli depolamaya izin vermek suretiyle bilinen teknige esasli bir katkida bulunmuslardir.

Mevcut arastirmacilar, Faktör VII polipeptitlerinin stabilize edilmesinde bir dizi önemli parametrenin ayarlanmasi gerektigini bulmuslardir. Önemli parametrelerden biri, en azindan kismen, nem ve örnek olarak su içerigi ile ilgilidir. Nem içerigi, sinirli olmalidir. Diger bir önemli parametre olarak, kompozisyonun en azindan bir stabilize edici madde içermesi gerekliligidir.

Stabilize edici maddeler; bunlarla sinirli olmaksizin, antioksidanlar, sakaritler, polioller, sürfaktanlar ve pH degerini belli bir aralik içerisinde muhafaza etmeye uygun ajanlari içermektedir.

Mevcut bulusun bir yapilanmasinda, uygun bir stabilize edici madde; antioksidanlar, sakaritler ve poliollerden olusan gruptan seçilen en az iki farmasötik olarak kabul edilebilir eksipiyan grubunun kombinasyonunu ihtiva etmektedir. Sakaritler ve polioller; kompozisyonun dondurarak kurutulmasi durumunda önemli olabilen Iiyoprotektan ve/veya kriyoprotektan özelliklere en azindan kismen sahiptirler. Genel olarak, iyilestirilmis stabilite, bu eksipiyan gruplarinin en az ikisinin uygun kombinasyonu ile kismen saglanabilmektedir. Bununla birlikte, daha spesifik olarak, söz konusu kombinasyonun bir sakarit (sakaroz) veya bir antioksidan (metionin) içerdigi zaman, stabilize etme etkisinin daha da önemli olabildigi bulunmustur. Ayrica, sasirtici bir sekilde, metioninin, Faktör VII polipeptitlerinin oksidatif bozunmasini önledigi de bulunmustur.

Belirtildigi gibi, stabilize edici madde, en az iki farmasötik olarak kabul edilebilir eksipiyan grubunun birlestirilmesini içerebilmektedir.

Faktör VII polipeptidinin, yukarida tarif edildigi gibi polipeptitleri kapsamasi amaçlanmistir. Faktör VII polipeptidi; Insan Faktörü Vlla, Rekombinant Insan Faktörü Vlla ve Faktör VII Sekans Varyantindan olusan gruptan seçilebilmektedir. Tercihen, Faktör VII Polipeptidi; Insan Faktörü Vlla veya Rekombinant Insan Faktörü Vlla veya Faktör VII ile ilgili bir polipeptittir, ve burada bahsedilen Faktör Vll ile ilgili polipeptit ile dogal tipteki Faktör VII'nin aktivitesi arasindaki oran, mevcut tarifnamede açiklandigi üzere "in vitro Proteoliz Tahlili" ve "in vitro Hidroliz Tahlilinden" bir veya daha fazlasi ile test edildiginde en az 1,25'tir.

Belirtildigi üzere, nem içerigi, sinirli olmalidir. Mevcut bulusun amaçlari dogrultusunda, Faktör VII polipeptitleri, yigin halinde temin edildiginde kati veya sivi formda saglanabilmektedirler. Bununla birlikte, tipik olarak, Faktör VII polipeptitleri, yigin halinde temin edildiginde sivi formdadirlar.

Böylelikle, kompozisyonlarin üretilmesi için yigin polipeptitlerinin daha ileri bir isleme tabi tutulmasi, uygun eksipiyanlarin eklenmesi ve sivinin yigindan ayrilmasi adimlarini gerektirmektedir. Sözü geçen eksipiyanlarin ilavesi, sivinin uzaklastirilmasindan önce ya da sonra gerçeklestirilebilmektedir. Bir polipeptitten sivinin uzaklastirilmasi için bu tarz bir araç, dondurarak kurutma ile ilgilidir. Bu nedenle, bu bulusun tercih edilen bir yapilanmasinda, kompozisyon bir Iiyofilize kek biçimindedir. Bununla birlikte, bu bulus, agirlikça yaklasik %3'ten daha fazla olmayan bir nem içerigine sahip bir kati kompozisyonun elde edilmesi için sivinin yigin polipeptitten çikarilmasi için uygun olan diger Islemleri engellememektedir. Ayrica, bulusa göre, nem içerigi tercihen; agirlikça yaklasik %2,5'ten fazla degildir, tercihen agirlikça yaklasik %2'den fazla degildir, en çok tercihen agirlikça yaklasik %1 ,5'ten fazla degildir.

Anlasilabilecegi gibi, bulus, kismen; örnegin eksipiyanlarin karistirilmasi ve agirlikça en fazla %3 oraninda nem içerigine sahip kati bir kompozisyon elde edilmesi için sivinin uzaklastirilmasi sirasinda oldugu gibi hazirlik asamasinda Faktör VII polipeptitlerinin bozunmasinin sinirlandirilmasi ve kati kompozisyonun üretim anindan kullanilacagi zamana, örnegin kompozisyonun bir hasta tarafindan uygulanacagi ana kadar söz konusu bozunumun sinirlandirilmasi ile ilgilidir.

Bu nedenle, Faktör VII polipeptitlerini içeren kompozisyonlarda ve stabilize edici kitlerdeki baska bir parametre olarak, pH degeri, örnegin saf su veya sulu tampon gibi sulu çözücü içinde çözündügünde 3 ila 9 arasindaki bir pH araliginda tutulmalidir. Yani, polipeptit solüsyonundaki nem içeriginin uzaklastirilmasindan önceki (örnegin dondurarak kurutmadan önceki) anda pH degerinin, yaklasik 3 ila yaklasik 9 arasinda bir pH degerinde tutulmasi gerekmektedir. Avantajli olarak, bu pH araligi da arzu edilen fizyolojik aralik içinde olup, böylelikle kompozisyonun parenteral yollarla uygulanmasi sirasinda kullaniciya zarar vermemektedir. Tercihen, çözeltinin pH degerini 3 ila 9 araliginda tutmak için uygun madde; sitrik asit, asetik asit, histidin, malik asit, fosforik asit, tartarik asit, süksinik asit, MES, HEPES, PIPES, imidazol, TRIS, Iaktik asit, glutarik asit ve glisilglisinin asit formu veya tuzlarini veya listelenen bu maddelerden en az ikisinin belirlenen aralikta bir pH degeri saglama yetisi olan bir karisimini içeren gruptan seçilebilmektedir.

Ayrica, pH degerini 3 ila 9 araliginda tutmak için uygun madde, ayni zamanda; listelenen bu tarz maddelerden en az ikisinin belirlenen aralikta bir pH degeri saglama yetisi olan bir karisimi olabilmektedir. Uygun maddelerin konsantrasyonu; yaklasik 0,1 mM ila 100 mM; yaklasik 0,1mM 15mM, yaklasik 5mM ila yaklasik 20mM veya yaklasik 5mM ila yaklasik 15mM olmak üzere yaklasik 0,1mM ila yaklasik 50mM araliginda bulunmaktadir. pH degerini 3 ila 9 araliginda tutmak için uygun madde; histidin, tercihen de L-histidin olabilmektedir.

Faktör VII polipeptidinin oksidatif yolun yani sira agregasyon yolu ile bozunmasi, stabilitenin hassas parametreleridir.

Tipik olarak, kompozisyonlar; Faktör VII polipeptidinin baslangiç içeriginin agirlikça %4, 3 veya dönüstürülecegi sekilde dondurarak kurutma isleminin sona ermesi ile stabilize edilmis olmaktadirlar. Söz konusu Faktör VII polipeptidinin baslangiç içerigi, dondurarak kurutma adimindan önce kompozisyonun hazirlanmasi sirasinda kompozisyona eklenen miktardir.

Ayrica, Faktör VII polipeptidinin baslangiç içeriginin agirlikça %4,0'ünden, %3,0'indan, bir miktari, geleneksel analitik yöntemlerle belirlendigi gibi (örnegin, mevcut basvurunun Örneklerinde açiklandigi gibi) agrega formlari olarak geri kazanilmaktadirlar.

Mevcut arastirmacilar; bir Faktör VII polipeptidinin ortam kosullari altinda depolanmasi halinde daha fazla bir sekilde bozunmasinin (yani, imalat isleminin sonlanmasindan sonraki 30 °C sicaklik altinda 8 aylik depolama süresi boyunca hesaplandigi sekliyle) minimal oldugunu bulmuslardir.

Bir antioksidan (metionin) içeren kompozisyonlarin, Faktör VII polipeptidinin oksidatif bozunumuna karsi daha dayanikli oldugu bulunmustur.

Bu nedenle, uygun kompozisyonlar, ortam kosullarinda en az 8 ay boyunca depolandiktan sonra oksitlenmis formlarin içeriginde sinirli bir artis göstermektedirler.

Diger bir deyisle, daha ilginç yapilanmalarda, kompozisyonun; Faktör VII polipeptidin baslangiç içeriginin yaklasik %ö'sindan daha fazla olmayacak sekilde, kompozisyonun üretim sürecinin sona ermesinden sonra (örn. dondurarak kurutma prosesinden sonra) 8 aylik süreyle 30 °C sicaklikta saklanmasi sirasinda ilave olarak oksitlenmis formlara ayrismaya karsi dayanikli oldugu söylenebilmektedir. Diger uygun yapilanmalarda, Faktör VII polipeptidi; agirlikça yaklasik °C'de 8 ay boyunca depolamaya degin hesaplandiginda ayrica oksitlenmis formlara dönüstürülmektedir. Bulusun bu yapilanmalarinda, kompozisyonlar; Faktör VII polipeptidinin baslangiç içeriginin agirlikça yaklasik %5'inden fazla olmayacak (%4, 3, 2 veya 1,5) sekilde, söz konusu kompozisyonun 30 °C'de 8 ay boyunca depolamasi sirasinda okside edilmis formlara dönüstürülmeye karsi dayaniklidirlar. Yukarida belirtildigi gibi, baslangiç içerigi, dondurarak kurutma adimindan önce kompozisyonun hazirlanmasi ile kompozisyona eklenen Faktör VII polipeptidinin miktari ile ilgilidir.

Belirtildigi gibi, Faktör VII polipeptitlerinin agregasyon yolu ile bozunmasi, temel bir stabilite gösterge parametresi olarak kabul edilebilmektedir.

Bu nedenle, bulusun ilginç yapilanmalari; Faktör VIl polipeptidinin baslangiç içeriginin agirlikça yaklasik %5'inden fazla olmayacak sekilde, söz konusu kompozisyonun 30 °C'de 8 ay boyunca depolamasi sirasinda okside edilmis formlara dönüstürülmesine karsi dayanikli olan kompozisyonlar ile ilgilidir. Yukarida belirtildigi gibi, söz konusu Faktör VII polipeptidinin baslangiç içerigi, dondurarak kurutma adimindan önce kompozisyonun hazirlanmasi sirasinda kompozisyona eklenen miktardir. Sakaritlerin, poliollerin ve antioksidan içeriklerinin en azindan kismen uygun sekilde optimize edilmesiyle kompozisyon; Faktör VII polipeptidinin baslangiç dönüstürülmesine karsi dayanikli olmaktadir.

Dolayisiyla, avantajli olarak, bulusa konu olan kompozisyonlar; imalat isleminin sona ermesi üzerine, yani dondurarak kurutma isleminin bitmesi ile düsük miktarda oksitlenmis formlara ve agregalara sahip olmaktadir ve dolayisiyla bulusa uygun kompozisyonlar, depolamaya tabi tutulmadan önce oksitlenmis formlarin ve agregalarin düsük bir baslangiç içerigine sahip olmalari ile karakterize edilmektedirler. Örnegin, üretim sürecinin sona ermesi üzerine, Faktör VII polipeptidinin baslangiç içeriginin agirlikça yaklasik %4'ü, %3'ü veya %2'si gibi %5'inden fazla olmayacak sekilde oksitlenmis birforma dönüstürülmekte; ve agirlikça en çok %5, örnegin en çok yüksek dereceden bir polimerik forma dönüstürülmektedir.

Ayrica ve avantajli olarak, burada açiklanan kitler ve kompozisyonlar, karanlikta en az 8 ay boyunca 30 °C'de depolamaya karsi stabildirler. Yani, Faktör VII polipeptidinin baslangiç içeriginin agirlikça %6'si, %5'i, %4'ü, %3'ü, %2'si veya %1,5'i gibi agirlikça en çok %10'u, oksitlenmis bir forma dönüstürülmekte ve agirlikça %4, %3, %2,5, %2, %15 veya %1'i gibi agirlikça %5'ten azi bir dimerik veya daha yüksek dereceden bir polimerik forma dönüstürülmektedir.

Bahsedildigi gibi, söz konusu gelistirilmis stabilite, belirli eksipiyanlarin uygun kombinasyonuna baglidir. Mevcut bulusa göre, stabilize edici maddeler; sakaritler, polioller ve antioksidanlardan olusan gruptan seçilebilmektedir. Uygun yapilanmalarda, ilgiye konu olan sakaritler; di- ve tri- sakaritler ve polisakaritlerdir. Öyle ki sakaritler; sakaroz, dekstroz, Iaktoz, maltoz, trehaloz, siklodekstrinler, maltodekstrinler ve dekstranlardan olusan gruptan seçilebilmektedirler. Ayrica, bazi yapilanmalarda, poliol; mannitol, sorbitol ve ksilitolden olusan gruptan seçilmektedir. Hala ilginç olan yapilanmalarda, antioksidan; homosistein, sistein, sistationin, metionin, gluthationdan ve homosistein, sistein, sistationin, metionin ve gluthationun herhangi birini içeren peptitlerden olusan gruptan seçilmektedir.

Sakarit ve poliol eksipiyanlarinin, sirasiyla, bu gibi listelenen en az iki maddenin bir karisimi olabilecegi anlasilmaktadir. Bir dizi yapilanmada, kullanilan sakarit eksipiyan; siklodekstrin ile kombinasyon halinde sakaroz, siklodekstrinle kombinasyon halinde trehaloz, dekstranla kombinasyon halinde sakaroz veya Iaktoz ile kombinasyon halinde sakaroz örneklerindeki gibi en az iki di-, tri- ve/veya polisakaridin bir kombinasyonudur. Bir dizi yapilanmada, kullanilan poliol eksipiyani; sorbitol kombinasyon halinde mannitol, ksilitol ile kombinasyon halinde mannitol veya ksilitol ile kombinasyon halinde sorbitol örneklerinde oldugu gibi en az iki poliolün bir kombinasyonudur. Bir dizi yapilanmada, kullanilan antioksidan eksipiyani; homosistein, sistein, sistationin, gluthation ile homosistein, sistein, sistationin, metionin ve gluthationdan herhangi birini içeren peptitlerden biri veya daha fazlasi ile kombinasyon halinde metionin örneginde oldugu gibi en az iki antioksidanin bir kombinasyonudur.

Belirli ilginç yapilanmalarda, antioksidan; homosistein, sistein, sistationin, metionin, gluthationdan ve homosistein, sistein, sistationin, metionin ve gluthationun herhangi birini içeren peptitlerden olusan gruptan seçilmektedir. Tercih edilen bir yapilanmada, antioksidan, metionindir.

Baska ilginç yapilanmalarda, polioller; agirlikça yaklasik %5 ila agirlikça yaklasik %90 arasinda degisen bir miktarda mevcut bulunacaktir. Tercihen, poliolün miktari; agirlikça yaklasik %18 ila arasinda degisen bir miktarda mevcut olacaktir.

Dahasi, ilginç baska yapilanmalarda ve diger bazi yapilanmalarda, sakarit; kompozisyonda, agirlikça yaklasik %0 ila yaklasik %85 arasinda degisen bir miktarda mevcut olacaktir. Bundan baska ilginç yapilanmalarda, miktar; agirlikça yaklasik %7 ila agirlikça yaklasik %75, %10 ila Sakarit; yaklasik 2 ila 60 mg/ml arasinda, yaklasik 5 mg/ml ila 55 mg/ml araliginda, yaklasik 8 ila yaklasik 2 ila 45 mg/ml araliginda, yaklasik 5 mg/ml ila 45 mg/ml arasinda, yaklasik 5 ila 35 mg/ml araliginda, yaklasik 5 ila 25 mg/ml arasinda, örnegin yaklasik 5 ila 20 mg/ml araliginda oldugu gibi yaklasik 0,5 ila 75 mg/ml arasinda bir miktarda olmalidir.

Antioksidan; yaklasik 0,05 ile 10 mg/ml arasinda, tercihen yaklasik 0,1 ile 5 mg/ml araliginda, daha tercihen yaklasik 0,1 mg/ml ila 2,5 mg/ml arasinda, daha da tercihen yaklasik 0,1 ile 2 mg/ml araliginda ve en çok tercihen yaklasik 0,1 ila 1 mg/ml arasinda bir miktarda saglanmalidir.

Poliol ve sakarit arasindaki oranin, uygun sekilde ayarlanmasi gerekmektedir. Uygun yapilanmalarda, bahsedilen poliol; bahsedilen sakaritlere göre yaklasik 100:1 ila 1:50 arasinda degisen bir agirlik oranina sahiptir. Daha da uygun yapilanmalarda, bahsedilen agirlik orani; Uygun yapilanmalar; bahsedilen seker alkolünün, bahsedilen sakaritlere göre yaklasik 4:1 ila 1:1 (Örnegin yaklasik 4:1 ila 3:2 veya yaklasik 1:1 ila 3:2) arasinda degisen bir agirlik oraninda oldugu kompozisyOnlar ile ilgilidir.

Bazi yapilanmalarda, poliol, mannitoldür ve yine baska yapilanmalarda sakarit sakarozdur.

Ayrica, yine baska yapilanmalarda, antioksidan, metionindir.

Yine tercih edilen yapilanmalarda, kompozisyon, ayrica; tamponlama maddesi olarak islev gören baska farmasötik eksipiyanlar içermektedir. Yani, mannitol disindaki tamponlama maddelerinin kompozisyonlara dahil edildigi söylenebilir. Özellikle, tamponlama maddeleri, dondurarak kurutma ile hazirlanan kompozisyonlara dahil edilmektedirler.

Kompozisyondaki Faktör VII polipeptidinin baslangiçtaki içerigi, tercihen; yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 8 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 6 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 5 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 4 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 3 mg/mL, yaklasik 1,0 mg/mL ila yaklasik 5 mg/mL, yaklasik 1,0 mg/mL ila yaklasik 4 mg/mL veya yaklasik 1,0 mg/mL ila yaklasik 3 mg/mL (örn. yaklasik 1,0 mg/mL, yaklasik 2,0 mg/mL, yaklasik 3,0 mg/mL, yaklasik 4,0 mg/mL veya yaklasik 5,0 mg/mL) örneklerinde oldugu gibi yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 10,0 mg/mL araliginda bulunmaktadir.

Bir yapilanmada, kitin birinci birim formunda bulunan kompozisyon; Faktör VII polipeptidi, Mannitol, Sakaroz ve polisorbat, tercihen polisorbat 20 veya 80 içermekte ve yaklasik %3'ten fazla olmayan bir nem içerigini ihtiva etmekte ve kompozisyon suda çözündügünde 5,0 ila 7,0 araliginda bir pH degerine sahip olmaktadir. Bir yapilanmada, kompozisyon, ayrica; CaCl2, NaCI ve Glisilglisinden olusan listeden seçilen bir veya daha fazla bileseni içermektedir. Bir yapilanmada, Faktör VII polipeptidi, insan Faktörü Vlla'dir.

Bir yapilanmada, kitin birinci birim formunda bulunan kompozisyon; Faktör VII polipeptidi, Mannitol, Sakaroz, metionin ve polisorbat, tercihen polisorbat 20 veya 80 içermekte ve yaklasik 7,0 araliginda bir pH degerine sahip olmaktadir. Bir yapilanmada, kompozisyon, ayrica; CaClz, NaCl ve Glisilglisinden olusan listeden seçilen bir veya daha fazla bileseni içermektedir. Bir yapilanmada, Faktör VII polipeptidi, insan Faktörü Vlla'dir.

Diger bir yapilanmada, kitin birinci birim formunda bulunan kompozisyon; Faktör VII polipeptidi, Mannitol, Sakaroz, histidin ve polisorbat, tercihen polisorbat 20 veya 80 içermekte ve yaklasik 7,0 araliginda bir pH degerine sahip olmaktadir. Bir yapilanmada, kompozisyon, ayrica; CaCIz, NaCI ve Glisilglisinden olusan listeden seçilen bir veya daha fazla bileseni içermektedir. Bir yapilanmada, Faktör VII polipeptidi, insan Faktörü Vlla'dir.

Bir yapilanmada, kitin birinci birim formunda bulunan kompozisyon; Faktör VII polipeptidi, Mannitol, Sakaroz, metionin, histidin ve polisorbat, tercihen polisorbat 20 veya 80 içermekte ve yaklasik %3'ten fazla olmayan bir nem içerigini ihtiva etmekte ve kompozisyon suda çözündügünde 5,0 ila 7,0 araliginda bir pH degerine sahip olmaktadir. Bir yapilanmada, kompozisyon, ayrica; CaCI2, NaCl ve Glisilglisinden olusan listeden seçilen bir veya daha fazla bileseni içermektedir. Bir yapilanmada, Faktör VII polipeptidi, insan Faktörü VIIa'dir.

Bir diger yapilanmada, kitin birinci birim formunda bulunan kompozisyon; Faktör VII polipeptidi, Mannitol, Sakaroz ve Poloksamer içermekte ve yaklasik %3'ten fazla olmayan bir nem içerigini ihtiva etmekte ve kompozisyon suda çözündügünde 5,0 ila 7,0 araliginda bir pH degerine sahip olmaktadir. Bir yapilanmada, kompozisyon, ayrica; CaCI2, NaCI ve Glisilglisinden olusan listeden seçilen bir veya daha fazla bileseni içermektedir. Bir yapilanmada, Faktör VII polipeptidi, insan Faktörü VIIa'dir.

Baska bir yapilanmada, kitin birinci birim formunda bulunan kompozisyon; Faktör VII polipeptidi, Mannitol, Sakaroz, metionin ve Poloksamer 188 içermekte ve yaklasik %3'ten fazla olmayan bir nem içerigini ihtiva etmekte ve kompozisyon suda çözündügünde 5,0 ila 7,0 araliginda bir bir pH degerine sahip olmaktadir. Bir yapilanmada, kompozisyon, ayrica; CaCI2, NaCl ve Glisilglisinden olusan listeden seçilen bir veya daha fazla bileseni içermektedir. Bir yapilanmada, Faktör VII polipeptidi, insan Faktörü VIIa'dir.

Bir baska yapilanmada, kitin birinci birim formunda bulunan kompozisyon; Faktör VII polipeptidi, Mannitol, Sakaroz, Histidin ve Poloksamer 188 içermekte ve yaklasik %3'ten fazla olmayan bir nem içerigini ihtiva etmekte ve kompozisyon suda çözündügünde 5,0 ila 7,0 araliginda bir pH degerine sahip olmaktadir. Bir yapilanmada, kompozisyon, ayrica; CaCI2, NaCI ve Glisilglisinden olusan listeden seçilen bir veya daha fazla bileseni içermektedir. Bir yapilanmada, Faktör VII polipeptidi, insan Faktörü VIIa'dir.

Diger bir yapilanmada, kitin birinci birim formunda bulunan kompozisyon; Faktör VII polipeptidi, Mannitol, Sakaroz, Histidin, metionin ve Poloksamer 188 içermekte ve yaklasik %3'ten fazla olmayan bir nem içerigini ihtiva etmekte ve kompozisyon suda çözündügünde 5,0 ila 7,0 araliginda bir pH degerine sahip olmaktadir. Bir yapilanmada, kompozisyon, ayrica; CaCI2, NaCI ve Glisilglisinden olusan listeden seçilen bir veya daha fazla bileseni içermektedir. Bir yapilanmada, Faktör VII polipeptidi, insan Faktörü VIIa'dir.

Bir yapilanmada, kitin ikinci birim formunda bulunan uygulama araci; sunlari içermektedir: Su ve histidin. Diger bir yapilanmada, araç, ayrica; CaCI2, NaCI ve Glisilglisinden olusan listeden seçilen bir veya daha fazla bileseni içermektedir. Bir baska yapilanmada, araç; asagidakiler arasindan seçilen bir veya daha fazla bilesen içermektedir: yaklasik 40mM veya yaklasik 50 mM gibi yaklasik 30 ila 60 mM'Iik bir konsantrasyonda NaCI, yaklasik 5 ila 15 mM araligindaki bir konsantrasyonunda CaClz.

Tercih edilen bir yapilanmada; stabil bir Faktör VII polipeptidi hazirlamaya yönelik yöntem, dondurarak kurutmayi ihtiva etmektedir. Dondurarak kurutma, söz konusu Faktör VII polipeptidini içeren çözeltinin Iiyofilizasyon siselerine veya benzerleri içine dolduruldugu bir proses ile ilgilidir.

Bahsedilen Faktör VIl polipeptidi, istege bagli olarak, dondurarak kurutmanin baslatilmasindan önce steril bir filtrasyona tabi tutulabilmektedir. Siseleri ve içindeki çözeltiyi kritik ürün sicakliklarinin altinda dondurmak için dondurarak-kurutucunun raflarina sogutma uygulanir. Su, vakum uygulanmasi ve dondurarak-kurutucunun buz yogunlastiricisi üzerinde su buharinin yogunlastirilmasiyla uzaklastirilir. Ürün kuru oldugunda, yani genel olarak %3'ten daha az artik nem içerigine sahip ise (örn. yukarida tarif edildigi gibi Karl Fischer kulometrik titrasyon ile ölçülen), siseler kapatilir ve kapatilir. Üretim tamamlanir ve kompozisyon simdi liyofilize bir kek formunu alir.

Sulandirilmis kompozisyonlar, profilaktik ve/veya terapötik tedavi için parenteral uygulamaya yönelik tasarlanmistirlar. Tercihen, farmasötik kompozisyonlar; parenteral olarak, yani intravenöz, subkütan veya intramüsküler olarak uygulanmakta ya da sürekli veya pulsatif infüzyon yoluyla verilmektedir.

Bu nedenle, burada tarif edilen, bir Faktör VIl duyarli sendromun tedavisi için bir ilacin hazirlanmasinda bir Faktör VII polipeptidinin kullanilmasidir.

Farkli yapilanmalarda, söz konusu Faktör VII duyarli sendrom; hemofili A, hemofili B, Faktör XI eksikligi, Faktör VII eksikligi, trombositopeni, von Willebrand hastaligi, bir pihtilasma Faktörü inhibitörünün varligi, ameliyat veya travmadir. Ek olarak, Faktör Vll duyarli sendrom, antikoagülan tedavisi ile iliskili olabilmektedir.

Belirtildigi gibi, burada açiklanan kompozisyonlar kati formdadir. Buna göre, uygun bir yapilanmada ilaç, ilacin parenteral yoldan verilmesine izin verece sekilde çözünme için uygun olmalidir. Dolayisiyla, kompozisyonlari bir hastaya uygularken, kompozisyonun, uygulama adiminda önce uygun bir sivi içinde çözülmesi adimini içermektedir.

FVII: Tek zincir formundaki Pihtilasma Faktörü VII FVIIa: Aktive edilmis iki zincirli formundaki Pihtilasma Faktörü VII rFVII (rFVIIa): Rekombinant Faktör VII (rekombinant Faktör Vlla) Yapilanmalar: Bir dizi yapilanmada, kitin birinci birim formu, eksipiyanlari ve bunlarin miktarlarini içerebilmekte ve 1 ila 48 arasindaki formülasyon listesinde gösterildigi gibi pH degerine sahip olmaktadir: Kompozisyon 1 2 3 4 Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 5,50 5,50 5,50 Kompozisyon 5 6 7 8 Sodyum klorür - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 5,50 5,50 5,50 Kompozisyon 9 10 11 12 Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 5,50 5,50 5,50 Kom pozisyon 13 14 15 16 Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL Sakaroz 10 mg/mL 10 mglmL 10 mg/mL 10 mg/mL pH 6,0 6,0 6,0 Kompozisyon 17 18 19 20 Sodyum klorür - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 6,0 6,0 6,0 Kompozisyon 21 22 23 24 Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 6,0 6,0 6,0 6,0 (Tablo 1, devam) Kompozisyon 25 26 27 28 Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 5,50 5,50 5,50 Kompozisyon 29 30 31 32 Sodyum klorür - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 5,50 5,50 5,50 Kompozisyon 33 34 35 36 Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 5,50 5,50 5,50 Kompozisyon 37 38 39 40 Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 6,0 6,0 6,0 Kompozisyon 41 42 43 44 Sodyum klorür - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 6,0 6,0 6,0 Kompozisyon 45 46 47 48 Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 6,0 6,0 6,0 6,0 Diger bir dizi yapilanmada, kitin birinci birim formu, eksipiyanlari ve bunlarin miktarlarini içerebilmekte ve 100 ila 124 arasindaki formülasyori listesinde gösterildigi gibi pH degerine sahip olmaktadir: Poloksamer 1,0 mg/mL 1,0 mg/mL 1,0 mg/mL 1,0 mg/mL Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 5,50 5,50 5,50 Sodyum klorür - - - - Poloksamer 1,0 mg/mL 1,0 mg/mL 1,0 mg/mL 1,0 mg/mL Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL Sakaroz 10 mg/mL 10 mglmL 10 mg/mL 10 mg/mL pH 5,50 5,50 5,50 Poloksamer 1,0 mg/mL 1,0 mg/mL 1,0 mg/mL 1,0 mg/mL Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 5,50 5,50 5,50 Poloksamer 1,0 mg/mL 1,0 mg/mL 1,0 mg/mL 1,0 mg/mL Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 6,0 6,0 6,0 6,0 (Tablo 2, devam) Sodyum klorür - - - - Poloksamer 1,0 mg/mL 1,0 mg/mL 1,0 mg/mL 1,0 mg/mL Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 6,0 6,0 6,0 Poloksamer 1,0 mg/mL 1,0 mg/mL 1,0 mg/mL 1,0 mg/mL Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 6,0 6,0 6,0 6,0 Bir dizi yapilanmada, 1 ila 48 ve 100 ila 124 arasindaki kompozisyonlardan herhangi birinde FVII polipeptidinin konsantrasyonu; yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 8 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 5 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 3 mg/mL, yaklasik 1,0 mg/mL ila yaklasik 5 mg/mL veya yaklasik 1,0 mg/mL ila yaklasik 3 mg/mL gibi yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 10,0 Baska bir dizi yapilanmada, 1 ila 48 ve 100 ila 124 arasindaki kompozisyonlardan herhangi birinde FVII polipeptidinin konsantrasyonu, asagidakilerin listesinden seçilebilmektedir: yaklasik mg/mL, yaklasik 3,9 mg/mL ve yaklasik 4,0 mg/mL.

Bir dizi yapilanmada, 1 ila 48 ve 100 ila 124 arasindaki formülasyonlarda polisorbat konsantrasyonu, yaklasik 0,06 ila 0,08 mg/mL veya yaklasik 0,07 mg/mL araliginda oldugu gibi yaklasik 0,05 ila 0,08 mg/mL arasinda olabilmektedir.

Baska bir dizi yapilanmada, birinci birim formlar; 1 ila 48 ve 100 ila 124 arasindaki kompozisyonlardan herhangi birinde tarif edildigi gibi bir kompozisyon içerebilmekte ve ikinci birim formu, yaklasik 1,0 ila yaklasik 2,0 mg/mL veya yaklasik 1,55 mg/mL araliklari gibi yaklasik 0,5 mg/mL ila 3 mg/mL arasinda bir miktarda L-histidin içerebilmektedir.

Yine baska bir dizi yapilanmada, birinci birim formlar; 1 ila 48 ve 100 ila 124 arasindaki kompozisyonlardan herhangi birinde tarif edildigi gibi bir kompozisyon içerebilmekte ve ikinci birim formu, yaklasik 40 mM, yaklasik 45 mM veya yaklasik 50 mM NaCI gibi yaklasik 30 ila yaklasik 60 mM araliginda NaCI ihtiva edebilmektedir.

Yine diger bir dizi yapilanmada, birinci birim formlar; 1 ila 48 ve 100 ila 124 arasindaki kompozisyonlardan herhangi birinde tarif edildigi gibi bir kompozisyon içerebilmekte ve ikinci birim formu; yaklasik 40 mM, yaklasik 45 mM veya yaklasik 50 mM NaCI gibi yaklasik 30 ila yaklasik 60 mM araliginda NaCI ve yaklasik 1,0 ila yaklasik 2,0 mg/mL veya yaklasik 1,55 mg/mL gibi yaklasik 0,5 mg/mL ila 3 mg/mL arasinda bir miktarda L-histidin içerebilmektedir.

Farkli dizideki yapilanmalarda, 1 ila 48 ve 100 ila 124 arasindaki kompozisyonlardan herhangi birindeki Faktör VlI polipeptidi, asagidakilerden olusan listeden seçilebilmektedir: yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 8 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 6 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 5 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 4 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 3 mg/mL, yaklasik 1,0 mg/mL ila yaklasik 5 mg/mL, yaklasik 1,0 mg/mL ila yaklasik 4 mg/mL, yaklasik 1,0 mg/mL ila yaklasik 3 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL, yaklasik 0,7 mg/mL, yaklasik 0,8 mg/mL olmak üzere yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 10,0 mg/mL araligi.

Yapilanma/ar Yapilanma 1: Farmasötik bir ilaç içeren bir kit olup, bahsedilen kit asagidakileri içermektedir: a) bir polipeptit ve en az bir stabilize edici madde içeren bir kompozisyon, burada, kompozisyon, bir birinci birim formunda yaklasik %3'ten fazla olmayan bir nem içerigine ve bahsedilen birinci birim formunu ihtiva etmek için saklama aracina sahiptir; ve b) bir ikinci birim formunda, bahsedilen kompozisyonun sulandirilmasi (çözelti olusturulmasi) için bir çözücü ve asagidakilerden olusan listeden seçilen bilesenlerden en az birini içeren bir uygulama araci: (i) sulu çözücü içinde çözüldügünde bahsedilen kompozisyonun pH degerini 3 ila 9 araliginda tutmak için uygun bir madde, burada, madde, yaklasik 0,1 mM ila 100 mM araligindaki bir miktarda bulunmaktadir, (ii) ikinci birim formunun uygulama aracinda birinci birim formunun kompozisyonunun çözülmesinden elde edilen sulandirilmis çözeltiyi esasen izotonik hale getirmek için yeterli bir miktarda bir tonisite modifiye edici ajan; ve bahsedilen ikinci birim formunu muhafaza etmek için saklama araci.

Yapilanma 2: Yapilanma 1'e uygun bir kit olup, burada birinci birim formu asagidakilerden olusan gruptan seçilen en az bir bilesen ihtiva etmektedir: sürfaktanlar, antioksidanlar, sakaritler ve polioller.

Yapilanma 3: Yapilanma 2 veya yapilanma 2'ye uygun bir kit olup, burada ikinci birim formu ayrica, asagidakilerden olusan gruptan seçilen en az bir bilesen ihtiva etmektedir: sürfaktanlar, antioksidanlar, sakaritler ve polioller.

Yapilanma 4: Yapilanma 1 ila 3'ten herhangi birine uygun bir kit olup, burada polipeptit; Faktör VIII, Faktör IX, Faktör X, Faktör Il, Faktör V, Faktör VII gibi bir kan pihtilasma faktörüdür.

Yapilanma 5: Yapilanma 1 ila 3'ten herhangi birine uygun bir kit olup, burada polipeptit; Faktör VII, Faktör IX, Faktör X, Faktör II, Protein C, Protein S, protrombin gibi bir K vitaminine bagimli polipeptittir.

Yapilanma 6: Yapilanma 4 veya 5'e uygun bir kit olup, burada pihtilasma faktörü polipeptidi; asagidakilerden olusan listeden seçilmektedir: insan Faktörü VIII, insan Faktörü Vlla, bir Faktör VII ile ilgili polipeptit, insan Faktörü IX, insan Faktörü X, aktive edilmis insan Proteini C.

Yapilanma 7: Yapilanma 6'ya uygun bir kit olup, burada Faktör VII ile ilgili polipeptit; asagidakilerden olusan listeden seçilen bir faktör VII varyantidir: L305V-FVII, Yapilanma 8: Yapilanma 6'ya uygun bir kit olup, burada Faktör VII ile ilgili polipeptit; kendi aktivitesi ile insan faktörü Vlla'nin (dogal tipteki Faktör VII) aktivitesi arasindaki oranin, mevcut tarifnamede açiklandigi üzere "in vitro Proteoliz Tahlili“ ve "in vitro Hidroliz Tahlilinden" bir veya daha fazlasi ile test edildiginde en az 1,25 oldugu bir faktör Vll varyantidir.

Yapilanma 9: Yapilanma 1 ila 8'den herhangi birine uygun bir kit olup, burada "sulu çözücü içinde çözündügünde bahsedilen kompozisyonun pH degerini 3 ila 9 araliginda tutmak için uygun 1mM ila yaklasik 15mM, yaklasik 5mM ila yaklasik 20mM veya yaklasik 5mM ila yaklasik 15mM olmak üzere yaklasik 0,1 mM ila yaklasik 50 mM araliginda bir miktarda bulunmaktadir.

Yapilanma 10: Yapilanma 1 ila 9'dan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, "sulu çözücü içinde çözündügünde bahsedilen kompozisyonun pH degerini 3 ila 9 araliginda tutmak için uygun madde"; asagidakilerden olusan listeden seçilmektedir: sitrik asit, asetik asit, histidin, malik asit, fosforik asit, tartarik asit, süksinik asit, MES, HEPES, PIPES, imidazol, TRIS, Iaktik asit, glutarik asit ve glisilglisin veya listelenen bu maddelerden en az ikisinin belirlenen aralikta bir pH degeri saglama yetisi olan bir karisimi.

Yapilanma 11: Yapilanma 1 ila 10'dan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, ikinci birim formu; sulu çözücü içinde çözündügünde bahsedilen kompozisyonun pH degerini 4 ila 7 madde içermektedir.

Yapilanma 12: Yapilanmalar 1 ila 11'den herhangi birine uygun bir kit olup, burada, ikinci birim formu histidin içermektedir.

Yapilanma 13: Yapilanmalar 1 ila 12'den herhangi birine uygun bir kit olup, burada, "tonisite modifiye edici ajan", asagidakilerden olusan listeden seçilmektedir: sodyum asetat, sodyum laktat, sodyum klorür, potasyum klorür, kalsiyum klorür, mannitol, gliserol, propilen glikol veya tercihen asagidaki listeden seçilen bu tür modifiye edici ajanlardan en ikisinin bir karisimi: sodyum klorür. mannitol, gliserol, propilen glikol, kalsiyum klorür veya bunlarin karisimlari.

Yapilanma 14: Yapilanma 13'e uygun bir kit olup, burada, tonisite modifiye edici ajan, Ca2+ veya M92+ içermektedir.

Yapilanma 15: Yapilanma 1 ila 14'ten herhangi birine uygun bir kit olup, burada, birinci ve ikinci birim formlarinin biri veya her ikisi de bir koruyucu içermektedir.

Yapilanma 16: Önceki yapilanmalardan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, birinci birim formu, asagidakilerden olusan gruptan seçilen en az bir stabilize edici madde ihtiva etmektedir: 3) bir antioksidan ve mannitolün kombinasyonu; b) metionin ve bir poliolün bir kombinasyonu; 0) bir sakarit ve mannitolün kombinasyonu; d) sakaroz ve bir poliolün kombinasyonu; e) metionin; ve f) bir sürfaktan; söz konusu kompozisyon yaklasik %3'ten fazla olmayan bir nem içerigine sahiptir.

Yapilanma 17: Yapilanma 16'ya uygun bir kit olup, burada, bir antioksidan ile mannitolün kombinasyonu ayrica bir sakarit içermektedir.

Yapilanma 18: Yapilanma 16'ya uygun bir kit olup, burada, metionin ile bir poliolün kombinasyonu ayrica bir sakarit içermektedir.

Yapilanma 19: Yapilanma 16'ya uygun bir kit olup, burada, bir sakarit ile mannitolün kombinasyonu ayrica bir antioksidan içermektedir.

Yapilanma 20: Yapilanma 16'ya uygun bir kit olup, burada, sakaroz ile bir poliolün kombinasyonu ayrica bir antioksidan içermektedir.

Yapilanma 21: Yapilanma 16 veya 17'den herhangi birine uygun bir kit olup. burada, bir antioksidan ve mannitolün kombinasyonu (a) ayrica bir sürfaktani içermektedir.

Yapilanma 22: Yapilanma 16 veya 18'den herhangi birine uygun bir kit olup, burada, metionin ve bir poliolün kombinasyonu (b) ayrica bir sürfaktan içermektedir.

Yapilanma 23: Yapilanma 16 veya 19'dan herhangi birine uygun bir kit olup, burada. bir sakarit ve mannitolün kombinasyonu (c) ayrica bir sürfaktani içermektedir.

Yapilanma 24: Yapilanma 16 veya 20'den herhangi birine uygun bir kit olup, burada, sakaroz ve bir poliolün kombinasyonu (d) ayrica bir sürfaktan içermektedir.

Yapilanma 25: Yapilandirma 16'ya uygun bir kit olupi burada, stabilize edici madde, bir sürfaktan ve metioninin (e) bir kombinasyonudur.

Yapilanma 26: Bundan önceki yapilanmalardan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, antioksidan; homosistein, sistein, sistationin, metionin, gluthation ile homosistein, sistein, sistationin, metionin, gluthationdan herhangi birini içeren peptitlerden olusan gruptan seçilmektedir.

Yapilanma 27: Bundan önceki yapilanmalardan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, sakarit; sakaroz, dekstroz, Iaktoz, maltoz, trehaloz, siklodekstrinler, maltodekstrinler ve dekstranlardan olusan gruptan seçilmektedir.

Yapilanma 28: Bundan önceki yapilanmalardan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, poliol; mannitol, sorbitol ve ksilitolden olusan gruptan seçilmektedir.

Yapilanma 29: Bundan önceki yapilanmalardan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, birinci birim formunun kompozisyonu; Faktör VII polipeptidinin baslangiç içeriginin, bahsedilen kompozisyonun 30 °C'de 8 ay boyunca depolanmasi sirasinda agirlikça en çok yaklasik %5'inin, tercihen agirlikça en çok yaklasik %4,0, agirlikça %3,0, agirlikça %2,5, agirlikça %2,0, agirlikça Yapilanma 30: Bundan önceki yapilanmalardan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, birinci birim formunun kompozisyonu; Faktör VII polipeptidinin baslangiç içeriginin, bahsedilen kompozisyonun 30 °C'de 8 ay boyunca depolanmasi sirasinda agirlikça en çok yaklasik %6'sinin, tercihen agirlikça en çok yaklasik %5,0, agirlikça %4,0, agirlikça %3,0, agirlikça %2,5, agirlikça stabildir.

Yapilanma 31: Bundan önceki yapilanmalardan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, bahsedilen poliol; agirlikça yaklasik %5 ila agirlikça %90, tercihen agirlikça yaklasik %18 ila Yapilanma 32: Bundan önceki yapilanmalardan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, bahsedilen sakarit; agirlikça yaklasik %0 ila agirlikça %85, tercihen agirlikça yaklasik %3 ila ila agirlikça %35 arasinda degisen bir miktardadir.

Yapilanma 33: Bundan önceki yapilanmalardan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, bir agirlik oranina sahiptir.

Yapilanma 34: Bundan önceki yapilanmalardan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, birinci birim formu ayrica bir tonisite modifiye edicisini içermektedir.

Yapilanma 35: Bundan önceki yapilanmalardan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, sürfaktan; polisorbat 20 veya 80 gibi polisorbatlardan, Brij 35® gibi polioksietilen alkil eterlerden ya da Poloksamer 188 veya 407 gibi poloksamerlerden ve diger etilen/polipropilen blok polimerleri veya PE olusan gruptan seçilmektedir.

Yapilanma 36: Bundan önceki yapilanmalardan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, sakarit, sakarozdur.

Yapilanma 37: Bundan önceki yapilanmalardan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, poliol, mannitoldür.

Yapilanma 38: Bundan önceki yapilanmalardan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, Faktör VII polipeptidi; yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 6 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 5 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 4 mg/mL gibi yaklasik 0,6 mg/mL ile yaklasik 10,0 mg/mL arasindaki bir konsantrasyonda bulunmaktadir.

Yapilanma 39: Bundan önceki yapilanmalardan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, bahsedilen nem içerigi; agirlikça en çok yaklasik %2,5, tercihen agirlikça en çok yaklasik %2, en çok tercihen en çok yaklasik %1 ,5'dir.

Yapilanma 40: Bundan önceki yapilanmalardan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, birinci birim formu, liyofilize edilmis bir kektir.

Yapilanma 41: Bundan önceki yapilanmalardan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, birinci birim formu, asagidakileri içermektedir: Faktör VII polipeptidi, Mannitol, Sakaroz ile bir polisorbat veya Tween 80® veya Poloxamer 188® gibi bir poloksamerden seçilen bir sürfaktan.

Yapilanma 42: Yapilanma 41'e uygun bir kit olup, ayrica metionin içermektedir.

Yapilanma 43: Daha önceki yapilanmalar 41 veya 42'den herhangi birine uygun bir kit olup, burada, ikinci birim formu; yaklasik 0,1 mM ila yaklasik 40mM, yaklasik 0,1mM ila yaklasik 35mM, 20mM, yaklasik 1mM ila yaklasik 15mM, yaklasik 5mM ila yaklasik 20mM veya yaklasik 5mM ila yaklasik 15mM olmak üzere yaklasik 0,1 mM ila yaklasik 50 mM araliginda bir miktarda L-histidin içermektedir.

Yapilanma 44: Daha önceki yapilanmalar 41 ila 43'ten herhangi birine uygun bir kit olup, burada, ikinci birim formu; ayrica, CaCIz, NaCl ve Glisilglisinden olusan listeden seçilen bir veya daha fazla bileseni içermektedir.

Yapilanma 45: Bir polipeptidin bir sivi formülasyonunu hazirlamaya yönelik bir yöntem olup, yöntem, asagidaki adimlari içermektedir: a) yapilanmalar 1 ila 44'ten herhangi birinde tarif edildigi gibi bir birinci ve bir ikinci birim formunun saglanmasi; b) söz konusu birinci ve ikinci birim formlarinin, uygulama araci içinde kompozisyonun çözünmüs bir sivi çözeltisini temin edecek sekilde karistirilmasi.

Yapilanma 46: Bir pihtilasma faktörüne duyarli sendromun tedavi edilmesine yönelik bir yöntem olup, yapilanma 45'e uygun yöntemle hazirlanan bir pihtilasma faktörünün bir sivi formülasyonunun etkili bir miktarinin ihtiyaci olan bir özneye uygulanmasini içermektedir.

Yapilanma 47: Yapilanma 46'ya uygun bir yöntem olup, burada, pihtilasma faktörüne duyarli sendrom, hemofilidir ve pihtilasma faktörü, Faktör VIII veya Faktör lX'dur ya da sendrom, sepsistir ve pihtilasma faktörü, protein C veya aktive edilmis protein C'dir.

Yapilanma 48: Bir FVII duyarli sendromun tedavi edilmesine yönelik olarak yapilanma 46'ya göre bir yöntem olup, yöntem; yapilanma 45'e uygun yöntemle hazirlanan söz konusu biyolojik maddenin bir sivi formülasyonunun etkili bir miktarinin ihtiyaci olan bir özneye uygulanmasini içermektedir.

Yapilanma 49: Yapilanma 48'e uygun yöntem olup, burada, bahsedilen sendrom; hemofili A, hemofili B, Faktör XI eksikligi, Faktör VII eksikligi, trombositopeni, von Willebrand hastaligi, bir pihtilasma faktörü inhibitörünün varligi, ameliyat, travma, dilüsyonel koagülopati ve antikoagülan tedavisinden olusan gruptan seçilmektedir.

Yapilanma 50: Bir Faktör VII duyarli sendromun tedavisi için yapilanmalar 1 ila 44'ten herhangi birinde tanimlanan bir kit formundaki bir ilacin hazirlanmasina yönelik olarak bir Faktör VII polipeptidinin kullanimi.

Yapilanma 51: Bir Faktör VII polipeptidi ve asagidakilerden olusan gruptan seçilen en az bir stabilize edici madde içeren bir kompozisyon: a) bir antioksidan ve mannitolün kombinasyonu; b) metionin ve bir poliolün bir kombinasyonu; o) bir sakarit ve mannitolün kombinasyonu; d) sakaroz ve bir poliolün kombinasyonu; e) metionin; ve yaklasik 0,06 ile 0,08 mg/mL arasindaki bir miktarda bir polisorbat sürfaktan; bahsedilen kompozisyon yaklasik %3'ten fazla olmayan bir nem içerigine sahiptir; Yapilanma 52: Yapilanma 51'e uygun kompozisyon olup, burada, bir antioksidan ile mannitolün kombinasyonu ayrica bir sakarit içermektedir.

Yapilanma 53: Yapilanma 51'e uygun kompozisyon olup, burada, metionin ile bir poliolün kombinasyonu ayrica bir sakarit içermektedir.

Yapilanma 54: Yapilanma 51'e uygun kompozisyon olup, burada, bir sakarit ile mannitolün kombinasyonu ayrica bir antioksidan içermektedir.

Yapilanma 55: Yapilanma 51'e uygun kompozisyon olup, burada, sakaroz ile bir poliolün kombinasyonu ayrica bir antioksidan içermektedir.

Yapilanma 56: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 55'ten herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, antioksidan; homosistein, sistein, sistationin, metionin, gluthation ile homosistein, sistein, sistationin, metionin, gluthationdan herhangi birini içeren peptitlerden olusan gruptan seçilmektedir.

Yapilanma 57: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 56'dan herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, sakarit; sakaroz, dekstroz, Iaktoz, maltoz, trehaloz, siklodekstrinler, maltodekstrinler ve dekstranlardan olusan gruptan seçilmektedir.

Yapilanma 58: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 57'den herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, poliol; mannitol, sorbitol ve ksilitolden olusan gruptan seçilmektedir.

Yapilanma 59: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 58'den herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, kompozisyon; Faktör VII polipeptidinin baslangiç içeriginin, bahsedilen kompozisyonun 30 °C'de 8 ay boyunca depolanmasi sirasinda agirlikça en çok yaklasik %5'inin, tercihen agirlikça en çok yaklasik %4,0, agirlikça %3,0, agirlikça %2,5, agirlikça %2,0, agirlikça Yapilanma 60: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 59'dan herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, kompozisyon; Faktör VII polipeptidinin baslangiç içeriginin, bahsedilen kompozisyonun 30 °C'de 8 ay boyunca depolanmasi sirasinda agirlikça en çok yaklasik %6'sinin, tercihen agirlikça en çok yaklasik %5,0, agirlikça %4,0, agirlikça %3,0, agirlikça %2,5, agirlikça Yapilanma 61: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 60'tan herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, bahsedilen poliol; agirlikça yaklasik %5 ila agirlikça %90, tercihen agirlikça yaklasik yaklasik %50 ila agirlikça %70 arasinda degisen bir miktardadir.

Yapilanma 62: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 61'den herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, bahsedilen sakarit; agirlikça yaklasik %0 ila agirlikça %85, tercihen agirlikça yaklasik %10 ila agirlikça %35 arasinda degisen bir miktardadir.

Yapilanma 63: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 62'den herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, bahsedilen poliol; bahsedilen sakaride göre, yaklasik 10021 ila 1:50, tercihen arasinda degisen bir agirlik oranina sahiptir.

Yapilanma 64: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 63'ten herhangi birine uygun kompozisyon olup, ayrica, sulu çözücü içinde çözündügünde, söz konusu kompozisyonun pH degerinin 3 ila 9 araliginda, tercihen 4 ila 7 arasinda, daha fazla tercihen 4,5 ila 6,5 araliginda, hatta daha tercihen ,5 ila 6,5 arasinda tutulmasi için uygun bir madde içermektedir.

Yapilanma 65: Yapilanma 64'e uygun kompozisyon olup, burada, bahsedilen ajan; asagidakilerden olusan gruptan seçilmektedir: sitrik asit, asetik asit, histidin, malik asit, fosforik asit, tartarik asit, süksinik asit, MES, HEPES, PIPES, imidazol, TRIS, laktik asit, glutarik asit ve glisilglisin veya listelenen bu maddelerden en az ikisinin belirlenen aralikta bir pH degeri saglama yetisi olan bir karisimini.

Yapilanma 66: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 65'ten herhangi birine uygun kompozisyon olup, ayrica, bir tonisite modifiye edici içermektedir.

Yapilanma 67: Yapilanma 66'ya uygun kompozisyon olup, burada, tonisite modifiye edici; sodyum asetat, sodyum Iaktat, sodyum klorür, potasyum klorür, kalsiyum klorür, mannitol, gliserol ve propilen glikolden olusan gruptan seçilmektedir.

Yapilanma 68: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 67'den herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, sürfaktan; polisorbat 20 veya 80'den olusan gruptan seçilmekte ve tercihen de polisorbat 80 olmaktadir.

Yapilanma 69: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 68'den herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, sakarit, sakarozdur.

Yapilanma 70: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 69'dan herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, poliol, mannitoldür.

Yapilanma 71: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 70'ten herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, Faktör Vll Polipeptidi; Insan Faktörü Vlla, Rekombinant Insan Faktörü Vlla ve Faktör VII Sekans Varyantindan olusan gruptan seçilmektedir.

Yapilanma 72: Yapilanma 71'e uygun kompozisyon olup, burada, Faktör VII Polipeptidi; Insan Faktörü Vlla veya Rekombinant Insan Faktörü Vlla'dir.

Yapilanma 73: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 72'den herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, Faktör VII Polipeptidi, Faktör VII ile ilgili bir polipeptittir ve burada, bahsedilen Faktör VII ile ilgili polipeptit ile dogal tipteki Faktör Vll'nin aktivitesi arasindaki oran, mevcut tarifnamede açiklandigi üzere "in vitro Proteoliz Tahlili" ve "in vitro Hidroliz Tahlilinden" bir veya daha fazlasi ile test edildiginde en az 1,25'tir.

Yapilanma 74: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 73'ten herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, Faktör VII polipeptidi; yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 6 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 5 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 4 mg/mL gibi yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik ,0 mg/mL arasindaki bir konsantrasyonda bulunmaktadir.

Yapilanma 75: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 74'ten herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, bahsedilen nem içerigi; agirlikça en çok yaklasik %2,5, tercihen agirlikça en çok yaklasik %2, en çok tercihen en çok yaklasik %1 ,5'dir.

Yapilanma 76: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 75'ten herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, kompozisyon, Iiyofilize edilmis bir kektir.

Yapilanma 77: Bundan önceki yapilanmalardan herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, kompozisyon, asagidakileri içermektedir: Faktör VII polipeptidi, Mannitol, Sakaroz ve Tween 80® gibi poloksamer 80.

Yapilanma 78: Yapilanma 77'ye uygun bir kompozisyon olup, ayrica metionin içermektedir.

Yapilanma 79: Bundan önceki yapilanmalar 77 ila 78'den herhangi birine uygun kompozisyon olup, ayrica, L-histidin ihtiva etmektedir.

Yapilanma 80: Bundan önceki yapilanmalar 77 ila 79'dan herhangi birine uygun kompozisyon olup, ayrica, CaCIz, NaCI ve Glisilglisinden olusan listeden seçilen bir veya daha fazla bilesen içermektedir.

Yapilanma 81: Bundan önceki yapilanmalar 51 ila 80'den herhangi birine uygun kompozisyonlar olup, asagidaki listeden seçilmektedir: Bilesik Formülasyon 1-81 Formülasyon Il-81 FVII polipeptidi 0,6 ila 10 mg/ml 0,6 ila 10 mg/ml Sakaroz 5 ila 20 mg/ml - Metionin 0 - 1 mg/ml O - 1 mg/ml ,0 ile 7,0 ,0 ile 7,0 Yapilanmalar 82: Yapilanma 81'e uygun kompozisyonlar olup, asagidaki listeden seçilmektedir: Bilesik Formülasyon III-82 Formülasyon IV-82 FVIIa polipeptidi 0,6 ila 3,0 mg/ml 0,6 ila 3,0 mg/ml Mannitol 25 mg/ml 25 mg/ml Sakaroz 10 mg/ml 10 mg/ml Metionin 0,5 mg/ml - pH 5,5 ile 6,5 5,5 ile 6,5 Yapilanma 83: Bundan önceki yapilanmalar 81 ila 82'den herhangi birine uygun kompozisyonlar olup, yaklasik 0,07 mg/mL'Iik bir miktarda polisorbat 80 içermektedir.

Yapilanma 84: Bundan önceki yapilanmalar 81 ila 83'ten herhangi birine uygun kompozisyonlar olup, yaklasik 1,0 mg/mL'Iik bir miktarda FVIla polipeptidi içermektedir.

Yapilanma 85: Bundan önceki yapilanmalar 81 ila 84'ten herhangi birine uygun kompozisyonlar olup, ayrica, asagidakilerden olusan listeden seçilen bilesenlerden en az birini içermektedir: yaklasik 10 mM'Iik bir miktarda CaZ+, tercihen CaCI2 x2H20 olarak; yaklasik 50 mM veya yaklasik 40 mM'Iik bir miktarda (örn. 39 mM) NaCI, ve tercihen yaklasik 10 mM'Iik bir miktarda L-Histidin olarak Histidin.

Yapilanma 86: Bundan önceki yapilanmalar 81 ila 85'ten herhangi birine uygun kompozisyonlar 6,5 ederinde pH degerine sahip olmaktadir.

Yapilanma 87: Yapilanmalar 51 ila 86'da tanimlanan kompozisyonlari hazirlamaya yönelik bir yöntem olup, asagidaki adimlari içermektedir: i) asagidakilerden olusan gruptan seçilen en az bir stabilize edici madde içeren bir çözeltide Faktör VII polipeptidi saglanmasi: a) bir antioksidan ve mannitolün kombinasyonu; b) metionin ve bir poliolün bir kombinasyonu; o) bir sakarit ve mannitolün kombinasyonu; d) sakaroz ve bir poliolün bir kombinasyonu; ve e) metionin; ve yaklasik 0,06 ila 0,08 mg/mL arasinda bir miktarda bir polisorbat sürfaktan; ii) agirlikça yaklasik %3'ten fazla olmayan bir nem içerigi olan bir kati kompozisyonun elde edilmesi için sözü edilen çözeltinin islenmesi.

Yapilanma 88: Yapilanma 87'ye uygun bir yöntem olup, burada, antioksidan; homosistein, sistein, sistationin, metionin, gluthation ile homosistein, sistein, sistationin, metionin, gluthationdan herhangi birini içeren peptitlerden olusan gruptan seçilmektedir.

Yapilanma 89: Yapilanma 87'ye uygun bir yöntem olup, burada, sakarit; sakaroz, dekstroz, Iaktoz, maltoz, trehaloz, siklodekstrinler, maltodekstrinler ve dekstranlardan olusan gruptan seçilmektedir.

Yapilanma 90: Yapilanma 87'ye uygun bir yöntem olup, burada, poliol; mannitol, sorbitol ve ksilitol içeren gruptan seçilmektedir.

Yapilanma 91: Yapilanma 87'ye uygun bir yöntem olup, burada, poliol; yaklasik 0,5 ila yaklasik 75 mg/ml, tercihen örnegin yaklasik 5 mg/ml ila 45 mg/ml, yaklasik 5 ila 35 mg/ml, yaklasik 5 ila yaklasik 2 ila 45 mg/ml arasinda bir miktarda mevcuttur.

Yapilanma 92: Yapilanma 87'ye uygun bir yöntem olup, burada, sakarit; yaklasik 0,5 ila yaklasik 75 mg/ml, tercihen örnegin yaklasik 5 mg/ml ila 45 mg/ml, yaklasik 5 ila 35 mg/ml, yaklasik 5 ila mg/ml veya 5 ila 20 mg/ml olmak üzere yaklasik 2 ila 45 mg/ml arasinda bir miktarda mevcuttur.

Yapilanma 93: Yapilanma 87'ye uygun bir yöntem olup, burada, antioksidan; yaklasik 0,05 ila 10 mg/ml arasinda, tercihen yaklasik 0,1 ila 5 mg/ml araliginda, daha tercihen yaklasik 0,1 mg/ml ila 2,5 mg/ml arasinda, daha da tercihen yaklasik 0,1 ila 2 mg/ml araliginda ve en çok tercihen yaklasik 0,1 ila 1 mg/ml arasinda bir miktarda bulunmaktadir.

Yapilanma 94: Yapilanma 87'ye uygun bir yöntem olup, burada, sakarit, sakarozdur.

Yapilanma 95: Yapilanma 87'ye uygun bir yöntem olup, burada, antioksidan, metionindir.

Yapilanma 96: Yapilanma 87'ye uygun bir yöntem olup, burada, poliol, mannitoldür.

Yapilanma 97: Yapilanma 87'ye uygun bir yöntem olup, burada, isleme, dondurarak kurutmayi içermektedir.

Yapilanma 98: bir FVII duyarli sendromun tedavi edilmesine yönelik bir yöntem olup, yapilanmalar 51 ila 86'dan herhangi birinde tanimlanan bir kompozisyonun etkili bir miktarinin ihtiyaci olan bir özneye uygulanmasini içermektedir.

Yapilanma 99: Yapilanma 98'e uygun yöntem olup, burada, bahsedilen sendrom; hemofili A, hemofili B, Faktör XI eksikligi, Faktör VII eksikligi, trombositopeni, von Willebrand hastaligi, bir pihtilasma faktörü inhibitörünün varligi, ameliyat, travma, dilüsyonel koagülopati ve antikoagülan tedavisinden olusan gruptan seçilmektedir.

Yapilanma 100: bir Faktör VII duyarli sendromun tedavisi için bir ilacin hazirlanmasinda bir Faktör VII polipeptidinin kullanimi olup, söz konusu ilaç, yapilanmalar 51 ila 86'dan herhangi birinde tanimlanan bir kompozisyonu içermektedir.

Yapilanma 101: Yapilanma 100`e uygun kullanim olup, burada, bahsedilen sendrom; hemofili A, hemofili B, Faktör XI eksikligi, Faktör VII eksikligi, trombositopeni, von Willebrand hastaligi, bir pihtilasma faktörü inhibitörünün varligi, ameliyat ve antikoagülan tedavisinden olusan gruptan seçilmektedir.

Asagidaki örnekler, sinirlama amaciyla degil, örnekleme maksadiyla sunulmustur: ÖRNEKLER Genel yöntemler Stabilite gösterge parametrelerinin belirlenmesinde kullanilan analitik yöntemler: A. Ters Faz HPLC (RP-HPLC) ile Oksitlenmis formlarin Tayini: HPLC Kolonu: 5 mm'lik bir partikül boyutu ve 300Ä'Iuk gözenek boyutu olan bütil bagli su ve hacimce %0,1 trifloroasetik asit. Eluent B: hacimce %80 asetonitril hacimce %0,09 trifloroasetik asit ve hacimce %19,91 su. Kolon, 30 dakika içerisinde %X B'den %(X+13) B'ye dogrusal bir gradyan ile elüt edilmistir. Akis hizi: 1,0 ml/dak. Algilama: 214 nm.

Oksitlenmis formlar, Faktör VII Polipeptitlerinin metionin sülfoksitleridir. Örnegin, FVII'nin iki ana türevi, Met(O)306 FVIl'dir.

Oksitlenmis formlarin içerigi, hazirlanmasi sirasinda Faktör Vll'nin oksitlenmis formlari olarak geri kazanilan kompozisyondaki Faktör VII'nin baslangiç miktarinin yüzdesi olarak ifade edilmektedir.

B. Faktör VII polipeptitlerinin agregalarinin Yüksek Performansli Jel Permeasyon Kromatografisi (GP-HPLC) ile belirlenmesi.

GP-HPLC, 7.5x300 mm'lik Waters Polipeptide Pak 300 SW kolonunda mobil faz olarak pH 7,0'de %5'Iik izopropanol içeren 0,2 M amonyum sülfat kullanilarak çalistirilmistir. Akis hizi: 0,5 ml/dak ve algilama: 215 nm.

Agregalarin içerigi; hazirlanmasi sirasinda Faktör Vll'nin dimerik, oligomerik ve polimerik formlari olarak geri kazanilan kompozisyondaki Faktör Vll'nin baslangiç miktarinin yüzdesi olarak ifade edilmektedir.

Faktör VII polipeptitlerinin biyolojik aktivitesini test etmek için tahliller: Faktör Vlla aktivitesi için test: Faktör Vlla aktivitesinin test edilmesi ve böylece uygun Faktör Vlla varyantlarinin seçilmesi için uygun bir tahlil, basit bir ön in vitro test olarak gerçeklestirilebilmektedir: (“in Vitro Hidroliz Tahlili").

Tabii (dogal tip) Faktör Vlla ve Faktör Vlla varyanti (bundan böyle "Faktör Vlla" olarak anilacaktir), spesifik aktiviteler için tahlil edilebilmektedirler. Ayrica, belirli aktivitelerini dogrudan karsilastirmak için paralel olarak da tahlil edilebilmektedirler. Tahlil, bir mikrotitre plakasinda (MaxiSorp, Nunc, Danimarka) gerçeklestirilmektedir.

Nihai konsantrasyonu 1 mM olan kromojenik substrat D-IIe-Pro-Arg-p-nitroanilid (8-2288, Chromogenix, Isveç): 0,1 M NaCI, 5 mM CaCIz ve 1 mg/ml bovin serum albümin içeren pH 7,4'Iük 50 mM Hepes içinde Faktör VIIa'ya (nihai konsantrasyon eklenmistir. 405 nm'deki absorbans, bir SpectraMax T” sürekli olarak ölçülmüstür. 20 dakikalik bir inkübasyon sirasinda olusan absorbans, hiçbir enzim içermeyen bos bir kuyucukta elde edilen absorbansin çikarilmasindan sonra, varyant ve dogal tip Faktör VIIa'nin aktiviteleri arasindaki oranin hesaplanmasi için kullanilmistir: Oran = (A405 nm Faktör Vlla varyanti) / (A405 nm Faktör Vlla dogal tip).

Buna dayanarak, örnegin tabii Faktör VII (dogal tip FVII) aktivitesi ile varyantin aktivitesi arasindaki oranin 1,0 civarinda, degilse üzerinde oldugu varyantlar gibi, dogal Faktör Vlla ile karsilastirilabilir veya daha yüksek bir aktiviteye sahip Faktör Vlla varyantlari tanimlanabilmektedir.

Faktör Vlla veya Faktör Vlla varyantlarinin aktivitesi ayrica; uygun bir kromojenik substratin (örn. konsantrasyonda uygun bir sekilde, Faktör X gibi bir fizyolojik substrat kullanilarak ölçülebilmektedir ("In Vitro Proteoliz Tahlili"). Ek olarak, aktivite tayini, fizyolojik sicaklikta çalistirilabilmektedir.

In Vitro Proteoliz Tahlili Tabii (dogal tip) Faktör Vlla ve Faktör Vlla varyanti (bundan böyle "Faktör Vlla" olarak anilacaktir), spesifik aktivitelerinin dogrudan karsilastirilmasi için paralel olarak tahlil edilebilmektedirler.

Tahlil, bir mikrotitre plakasinda (MaxiSorp, Nunc, Danimarka) gerçeklestirilmektedir. 0,1 M NaCI, mM CaClz ve 1 mg/ml bovin serum albümin içeren pH 7,4'Iük 100 mikroL 50 mM Hepes içindeki Faktör Vlla (10 nM) ve Faktör X (0,8 mikroM); 15 dakika boyunca inkübe edilir. Faktör X bölünmesi, daha sonra 0,1 M NaCI, 20 mM EDTA ve 1 mg/ml bovin serum albümin içeren pH 7,4'Iük 50 mikroL 50 mM Hepes ilave edilerek durdurulur. Üretilen Faktör Xa miktari, nihai konsantrasyonu 0,5 mM olan kromojenik substrat Z-D-Arg-GIy-Arg-p-nitroanilid (8-2765, Chromogenix, Isveç) eklenerek ölçülür. 405 nm'de absorbans, bir SpectraMax W 340 plaka okuyucusunda (Molecular Devices, ABD) sürekli olarak ölçülür. 10 dakika boyunca olusan absorbans, hiçbir FVIIa içermeyen bos bir kuyucukta elde edilen absorbansin çikarilmasindan sonra, varyant ve dogal tip Faktör VIIa'nin proteolitik aktiviteleri arasindaki oranin hesaplanmasi için kullanilir: Oran = (A405 nm Faktör Vlla varyanti) / (A405 nm Faktör Vlla dogal tip).

Buna dayanarak, örnegin tabii Faktör VII (dogal tip FVII) aktivitesi ile varyantin aktivitesi arasindaki oranin 1,0 civarinda, degilse üzerinde oldugu varyantlar gibi, dogal Faktör Vlla ile karsilastirilabilir veya daha yüksek bir aktiviteye Vlla sahip Faktör varyantlari tanimlanabilmektedir.

Trombin olusum tahlili: Faktör VII veya Faktör VII ile ilgili polipeptitlerin ya da Faktör VIII veya Faktör VIII ile ilgili polipeptitlerin (örn. varyantlarin) trombin üretme kabiliyeti, ilgili tüm pihtilasma Faktörleri ve fizyolojik konsantrasyonlardaki inhibitörler ve aktive edilmis trombositleri içeren bir tahlilde Pihtilasma tayini: Faktör VII polipeptitlerinin aktivitesi, ayni zamanda, esas olarak WO 92/15686 ya da US ,997,864`de anlatildigi gibi tek asamali bir pihtilasma tayini (tahlil 4) kullanilarak da ölçülebilmektedir. Kisaca, test edilecek numune 50 mM Tris (pH 7,5) içinde seyreltilir, %0,1 BSA C ile inkübe edilir. Pihtilasma süreleri ölçülür ve seri seyreltmede bir referans standart veya bir sitratli normal insan plazmasi havuzu kullanilarak standart bir egri ile karsilastirilir. Çalisma örnekleri rFVIIa'nin Sirasiyla Histidin ile ve Histidin olmadan dondurarak kurutulmus Kompozisyonlari için stabilite verileri.

Daha az Dimer/Oligomer olusacak sekilde Histidin varligi olmaksizin dondurarak kurutmanin bir avantaj oldugu görülecektir.

Kompozisyonlar Kompozisyon A1 B1 C1 D1 Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mglmL 25 mg/mL Kompozisyon E1 F1 G1 H1 Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL Kompozisyon I1 J1 K1 L1 Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL kullanilacaktir; B1, D1, F1, H1, J1 ve L1 kompozisyonlari için Enjeksiyon için Su (WFI) kullanilacaktir.

Sirasiyla Histidin ile ve Histidin olmadan (ve/veya Glisilglisin ve/veya NaCl) dondurarak kurutulmus rFVlla'nin Kompozisyonlari için stabilite verileri.

NaCI'nin varligi olmadan dondurarak kurutmanin bir avantaj oldugu görülecektir, çünkü bu, kekin çökme riskini azaltacaktir.

Kompozisyon A2 B2 C2 D2 Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL Kompozisyon E2 F2 G2 H2 Sodyum klorür - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL Kompozisyon I2 J2 K2 L2 Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 6,0 6,0 6,0 6,0 Kompozisyon M2 N2 02 P2 Sodyum klorür - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 6,0 6,0 6,0 6,0 Kompozisyon Q2 R2 82 T2 Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 6,0 6,0 6,0 6,0 Kompozisyon U2 V2 X2 Y2 Sodyum klorür - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 6,0 6,0 6,0 6,0 Sulandirmaya yönelik olarak, A2, I2 ve Q2 kompozisyonlari için 1,55 mg/mL'Iik Histidin çözücüleri kullanilacaktir; 82, .12 ve R2 kompozisyonlari için Enjeksiyon için Su (WFI) kullanilacaktir.

Sulandirmaya yönelik olarak, CZ, K2 ve 82 kompozisyonlari için 1,55 mg/mL'Iik Histidin çözücüleri kullanilacaktir; D2, L2 ve T2 kompozisyonlari için Enjeksiyon için Su (WFI) kullanilacaktir.

Sulandirmaya yönelik olarak, E2, M2 ve U2 kompozisyonlari için 2,92 mg/mL NaCl içeren 1,55 mg/mL'Iik Histidin çözücüleri kullanilacaktir; F2, N2 ve V2 kompozisyonlari için 2,92 mg/mL Tuzlu Su kullanilacaktir. mg/mL'Iik Histidin çözücüleri kullanilacaktir; H2, P2 ve Y2 kompozisyonlari için 2,92 mg/mL Tuzlu Su kullanilacaktir.

Kompozisyonlarin üretimi Genel olarak, kompozisyonlar, saflastirilmis bir yigin çözeltiden hazirlanmislardir. Eksipiyanlar eklenmis ve çözelti, istenen rFVIIa konsantrasyonuna degin seyreltilmistir. Elde edilen çözelti, sterilize edilmis bir membran filtre (0,2 mikron gözenek boyutu veya esdegeri) kullanilarak steril olarak filtre edilmis ve steril cam siselere doldurulmustur. Siseler dondurarak kurutulmus, lastik tipalarla kapatilmis ve alüminyum geçme tipi kapaklarla mühürlenmistir.

Dondurarak kurutmadan önce L-histidin eklenerek ve eklenmeksizin formülasyonlarda olusan çözünür agregalarin içeriginin karsilastirilmasi Asagidaki formülasyonlar hazirlanmistir (mg/ml cinsinden belirtilen tüm konsantrasyonlar): Bilesen Formülasyon no.

L-Metionin 0,5 0,5 0,5 0,5 L-Histidin - - 1,55 1,55 Mannitol 30 25 30 25 Sakaroz 8 12 8 12 pH 6,0 6,0 6,0 6,0 Formülasyonlar, 5,3 ml'lik bir doldurma hacmi kullanilarak örnek 5'te tarif edildigi gibi hazirlanmislardir. Dondurarak kurutma isleminden sonra, dimer, oligomer ve polimer formlarinin içerigi, örnek 3'te tarif edildigi gibi GP-HPLC ile ölçülmüstür. Sonuçlar asagida belirtilmektedir: Formülasyon no.

Dimerve oligomerformlari(%) 1,8 1,6 2,5 2,7 Polimerformlari(%) <0,3 <0,3 <0,3 <0,3 Sonuçlar, L-histidin eklenmeyen 1 ve 2 numarali formülasyonlarin, karsilik gelen L-histidin ihtiva eden 3 ve 4 numarali formülasyonlara kiyasla, dondurarak kurutmadan sonra daha düsük dimer ve oligomer formlari içerdigini göstermektedir. 10 Dondurarak kurutulmus bir rFVIIa formülasyonunun stabilitesi Asagidakileri içeren bir formülasyon rFVIIa 1,0 mg/ml NaCI 2,34 mg/ml CaCI2, 2H20 1,47 mg/ml Glisilglisin 1,32 mg/ml Polisorbat 80 0,07 mg/ml L-Metionin 0,5 mg/ml Mannitol 25 mg/ml Sakaroz 10 mg/ml pH 6,0 Örnek 5'te tarif edildigi gibi, 1,1 ml'lik doldurma hacimleri kullanilarak hazirlanmistir.

Formülasyon, karanlikta 25 °C ve 40 °C'ye yerlestirilmistir. Numuneler, asagidaki tablolara göre toplanmistir. Dondurarak kurutulmus ürünün 10 mM L-histidin çözücüsünde sulandirilmasinda sonra, örnek 3'te tarif edildigi gibi dimer/oligomer/polimer ve oksitlenmis formlarin içerikleri ölçülürken, aktivite, örnek 4'te tarif edildigi gibi tek asamali pihtilasma tahlili ile belirlenmistir.

Parametre 25 °C'de depolama süresi (ay) Dimer/oligomer formlari (%) 1,6 2,0 2,1 Polimer formlari (%) Oksitlenmis formlar (%) 1,4 1,3 1,4 Parametre 40 °C'de depolama süresi (ay) Dimer/oligomer formlari (%) 1,6 2,4 2,5 2,4 Polimer formlari (%) Oksitlenmis formlar (%) 1,4 1,2 1,3 1,5 b.yen: belirlenmeyen Sodyum klorürün, dondurarak kurutulmus kekin dis görünüsü üzerindeki etkisi, faktöriyel bir tasarim çalismasinda incelenmistir. Degisken parametreler arasinda sodyum klorür Içerigi bulunmustur. Çalismaya dahil edilen dört formülasyonun sonucu, tabloda gösterilmistir.

Formülasyon no. Sodyum klorür içerigi (mg/mL) Dis görünüs 1 O Kati homojen kek 2 O Kati homojen kek 3 3,50 Kismen çökmüs kek 4 3,50 Kismen çökmüs kek Bütün formülasyonlar ayrica sunlari içermektedir: Kalsiyum klorür Glisilglisin Polisorbat 80 Mannitol Sakaroz 1,0 mg/mL 1,47 mg/mL 1,32 mg/mL 0,1 mg/mL 40 mg/mL mg/mL Ek olarak, 1 ve 2 numarali formülasyonlar, 0,5 mg/mL metionin içermektedir. pH asagidaki seviyeye ayarlanmistir: 6,0 (formülasyon 1 ve 4) ,0 (formülasyon 2 ve 3) FVII polipeptit kompozisyonlari için stabilite verileri Kompozisyonlarin, 6 ay boyunca 25 °C'de saklandiktan sonra dimer/oligomer olusumu açisindan kararli olduklari görülecektir.

Kompozisyonlar Kompozisyon Glisilglisin - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 5,0 5,0 5,0 5,0 Kompozisyon E-9 F-9 G-9 H-9 Glisilglisin - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 5,0 5,0 5,0 5,0 A-9 ila H-9 arasindaki kullanilacaktir. kompozisyonlarinin sulandirilmasi için Enjeksiyon için Su (WFI) B-9, D-9, F-9 ve H-9 kompozisyonlarinin sulandirilmasi için 1,55 mg/mL'Iik Histidin çözücüleri de kullanilabilmektedir.

A-9 ila H-9 arasindaki kompozisyonlar ile ayni bilesenleri ve bilesen miktarlarini içeren fakat pH 4,5 degerine sahip olan kompozisyonlar da hazirlanmistir. Ayrica, A-9 ila H-9 arasindaki kompozisyonlar ile ayni bilesenleri ve bilesen miktarlarini içeren fakat pH 5,5 degerine sahip olan kompozisyonlar da hazirlanmistir.

Kompozisyon A-9-1 B-9-1 C-9-1 D-9-1 Glisilglisin - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 5,0 5,0 5,0 5,0 Kompozisyon E-9-1 F-9-1 G-9-1 H-9-1 Glisilglisin - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 5,0 5,0 5,0 5,0 Histidin çözücüleri de kullanilabilmektedir.

A-9-1 ila H-9-1 arasindaki kompozisyonlar ile ayni bilesenleri ve bilesen miktarlarini içeren fakat pH 4,5 degerine sahip olan kompozisyonlar da hazirlanmistir. Ayrica, A-9-1 ila H-9-1 arasindaki kompozisyonlar ile ayni bilesenleri ve bilesen miktarlarini içeren fakat pH 5,5 degerine sahip olan kompozisyonlar da hazirlanmistir.

Kompozisyon A-9-2 B-9-2 C-9-2 D-9-2 Glisilglisin - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 5,0 5,0 5,0 5,0 Kompozisyon E-9-2 F-9-2 G-9-2 H-9-2 Glisilglisin - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 5,0 5,0 5,0 5,0 Histidin çözücüleri de kullanilabilmektedir.

A-9-2 ila H-9-2 arasindaki kompozisyonlar ile ayni bilesenleri ve bilesen miktarlarini içeren fakat pH 4,5 degerine sahip olan kompozisyonlar da hazirlanmistir. Ayrica, A-9-2 ila H-9-2 arasindaki kompozisyonlar ile ayni bilesenleri ve bilesen miktarlarini içeren fakat pH 5,5 degerine sahip olan kompozisyonlar da hazirlanmistir.

Kompozisyon A-9-3 B-9-3 C-9-3 D-9-3 Glisilglisin - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 5,0 5,0 5,0 5,0 Kompozisyon E-9-3 F-9-3 G-9-3 H-9-3 Glisilglisin - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL DH 5,0 5,0 5,0 5,0 kullanilacaktir. çözücüleri de kullanilabilmektedir.

A-9-3 ila H-9-3 arasindaki kompozisyonlar ile ayni bilesenleri ve bilesen miktarlarini içeren fakat pH 4,5 degerine sahip olan kompozisyonlar da hazirlanmistir. Ayrica, A-9-3 ila H-9-3 arasindaki kompozisyonlar ile ayni bilesenleri ve bilesen miktarlarini içeren fakat pH 5,5 degerine sahip olan kompozisyonlar da hazirlanmistir.

Kompozisyon A-9-4 B-9-4 C-9-4 D-9-4 Glisilglisin - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 5,0 5,0 5,0 5,0 Kompozisyon E-9-4 F-9-4 G-9-4 H-9-4 Glisilglisin - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 5,0 5,0 5,0 5,0 Histidin çözücüleri de kullanilabilmektedir.

A-9-4 ila H-9-4 arasindaki kompozisyonlar ile ayni bilesenleri ve bilesen miktarlarini içeren fakat pH 4,5 degerine sahip olan kompozisyonlar da hazirlanmistir. Ayrica, A-9-4 ila H-9-4 arasindaki kompozisyonlar ile ayni bilesenleri ve bilesen miktarlarini içeren fakat pH 5,5 degerine sahip olan kompozisyonlar da hazirlanmistir.

Kompozisyon A-9-5 B-9-5 C-9-5 D-9-5 Glisilglisin - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL pH 5,0 5,0 5,0 5,0 Kompozisyon E-9-5 F-9-5 G-9-5 H-9-5 Glisilglisin - - - - Mannitol 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL 25 mg/mL DH 5,0 5,0 5,0 5,0 kullanilacaktir. çözücüleri de kullanilabilmektedir.

A-9-5 ila H-9-5 arasindaki kompozisyonlar ile ayni bilesenleri ve bilesen miktarlarini içeren fakat pH 4,5 degerine sahip olan kompozisyonlar da hazirlanmistir. Ayrica, A-9-5 ila H-9-5 arasindaki kompozisyonlar ile ayni bilesenleri ve bilesen miktarlarini içeren fakat pH 5,5 degerine sahip olan kompozisyonlar da hazirlanmistir.

Burada açiklanan yönler, sunlardir: 1. Farmasötik bir ilaç içeren bir kit olup, bahsedilen kit asagidakileri içermektedir: a) bir kan pihtilasma faktörü polipeptidi ve sürfaktanlar, antioksidanlar, sakaritler ve poliollerden olusan gruptan seçilen en az bir stabilize edici madde içeren bir kompozisyon, burada, kompozisyon, bir birinci birim formunda yaklasik %3'ten fazla olmayan bir nem içerigine ve bahsedilen birinci birim formunu ihtiva etmek için saklama aracina sahiptir; ve b) bir ikinci birim formunda, bahsedilen kompozisyonun sulandirilmasi (çözelti olusturulmasi) için bir çözücü ve asagidakilerden olusan listeden seçilen bilesenlerden en az birini içeren bir uygulama araci: (iii) sulu çözücü içinde çözüldügünde bahsedilen kompozisyonun pH degerini 3 ila 9 araliginda tutmak için uygun bir maddei burada, madde, yaklasik 0,1 mM ila 100 mM araligindaki bir miktarda bulunmaktadir, (iv) ikinci birim formunun uygulama aracinda birinci birim formunun kompozisyonunun çözülmesinden elde edilen sulandirilmis çözeltiyi esasen izotonik hale getirmek için yeterli bir miktarda bir tonisite modifiye edici ajan; ve bahsedilen ikinci birim formunu muhafaza etmek için saklama araci.

Yön 1'e uygun bir kit olup, burada ikinci birim formu ayrica, asagidakilerden olusan gruptan seçilen en az bir bilesen ihtiva etmektedir: sürfaktanlar, antioksidanlar, sakaritler ve polioller.

Yön 1 veya 2'ye uygun bir kit olup, burada, polipeptit; asagidakilerden olusan listeden seçilmektedir: insan Faktörü VIII, insan Faktörü Vlla, insan Faktörü IX, insan Faktörü X, aktive edilmis insan Proteini C veya bir Faktör VII ekans varyanti.

Yönler 1 ila 3'ten herhangi birine uygun bir kit olup, burada, "sulu çözücü içinde çözündügünde bahsedilen kompozisyonun pH degerini 3 ila 9 araliginda tutmak için uygun madde"; yaklasik 0,1mM ila yaklasik 40mM, yaklasik 0,1mM ile yaklasik 35mM, yaklasik 20mM, yaklasik 1mM ila yaklasik 15mM, yaklasik 5mM ile yaklasik 20mM veya yaklasik 5mM ila yaklasik 15mM olmak üzere yaklasik 0,1 mM ila yaklasik 50 mM araliginda bir miktarda bulunmaktadir.

Yönler 1 ila 4'ten herhangi birine uygun bir kit olup, burada, "sulu çözücü içinde çözündügünde bahsedilen kompozisyonun pH degerini 3 ila 9 araliginda tutmak için uygun madde"; asagidakilerden olusan listeden seçilmektedir: sitrik asit, asetik asit, histidin, malik asit, fosforik asit, tartarik asit, süksinik asit, MES, HEPES, PIPES, imidazol, TRIS, Iaktik asit, glutarik asit ve glisilglisin veya listelenen bu maddelerden en az ikisinin belirlenen aralikta bir pH degeri saglama yetisi olan bir karisimi.

Yönler 1 ila 5'ten herhangi birine uygun bir kit olup, burada, ikinci birim formu; sulu çözücü içinde çözündügünde bahsedilen kompozisyonun pH degerini 4 ila 7 araliginda, tercihen de Yönler 1 ila 6'dan herhangi birine uygun bir kit olup, burada, ikinci birim formu; tercihen yaklasik SOmM, yaklasik 0,5mM ila yaklasik 25mM, yaklasik 1mM ila yaklasik 20mM, yaklasik 1mM ila yaklasik 15mM, yaklasik 5mM ila yaklasik 20mM veya yaklasik 5mM ila yaklasik 15mM olmak üzere yaklasik 0,1 mM ila yaklasik 50 mM araliginda bir miktarda histidin içermektedir.

Yönler 1 ila 7'den herhangi birine uygun bir kit olup, burada, "tonisite modifiye edici ajan", asagidakilerden olusan listeden seçilmektedir: sodyum asetat, sodyum laktat, sodyum klorür, potasyum klorür, kalsiyum klorür, magnezyum klorür, mannitol, gliserol, propilen glikol veya tercihen asagidaki listeden seçilen bu tür modifiye edici ajanlardan en ikisinin bir karisimi: sodyum klorür, magnezyum klorür, mannitol, gliserol, propilen glikol, kalsiyum klorir veya bunlarin karisimlari.

Bundan önceki yönlerden herhangi birine uygun bir kit olup, burada, birinci birim formu, asagidakilerden olusan gruptan seçilen en az bir stabilize edici madde ihtiva etmektedir: ) bir antioksidan ve mannitolün kombinasyonu; b) metionin ve bir poliolün bir kombinasyonu; ) bir sakarit ve mannitolün kombinasyonu; d) sakaroz ve bir poliolün kombinasyonu; e) metionin; f) bir sürfaktan; söz konusu kompozisyon yaklasik %3'ten fazla olmayan bir nem içerigine sahiptir.

Yön 9'a uygun bir kit olup, burada, bir antioksidan ile mannitolün kombinasyonu (a) ayrica bir sakarit içermektedir.

Yön 9'a uygun bir kit olup, burada, metionin ile bir poliolün kombinasyonu (b) ayrica bir sakarit içermektedir.

Yön 9'a uygun bir kit olup, burada, bir sakarit ile mannitolün kombinasyonu (c) ayrica bir antioksidan içermektedir.

Yön 9'a uygun bir kit olup, burada, sakaroz ile bir poliolün kombinasyonu (d) ayrica bir antioksidan içermektedir.

Yönler 9 ila 13'ten herhangi birine uygun bir kit olup, ayrica bir sürfaktan içermektedir.

Bundan önceki yönlerden herhangi birine uygun bir kit olup, burada, antioksidan; homosistein, sistein, sistationin, metionin, glutation ile homosistein, sistein, sistationin, metionin, glutationdan herhangi birini içeren peptitlerden olusan gruptan seçilmekte ve tercihen metionin olmaktadir.

Bundan önceki yönlerden herhangi birine uygun bir kit olup, burada, sakarit; sakaroz, dekstroz, laktoz, maltoz, trehaloz, siklodekstrinler, maltodekstrinler ve dekstranlardan olusan gruptan seçilmekte ve tercihen sakaroz olmaktadir.

Bundan önceki yönlerden herhangi birine uygun bir kit olup, burada, poliol; mannitol, sorbitol ve ksilitolden olusan gruptan seçilmekte ve tercihen mannitol olmaktadir.

Bundan önceki yönlerden herhangi birine uygun bir kit olup, burada, birinci birim formunun kompozisyonu; Faktör VII polipeptidinin baslangiç içeriginin, bahsedilen kompozisyonun 30 °C'de 8 ay boyunca depolanmasi sirasinda agirlikça en çok yaklasik %5'inin, tercihen ya da agirlikça en çok yaklasik %1 ,0'inin agregatlara dönüstürülecegi sekilde stabildir.

Bundan önceki yönlerden herhangi birine uygun bir kit olup, burada, birinci birim formunun kompozisyonu; Faktör VII polipeptidinin baslangiç içeriginin, bahsedilen kompozisyonun 30 °C'de 8 ay boyunca depolanmasi sirasinda agirlikça en çok yaklasik %6'sinin, tercihen ya da agirlikça en çok yaklasik %1,5'inin oksitlenmis formlara dönüstürülecegi sekilde stabildir.

Bundan önceki yönlerden herhangi birine uygun bir kit olup, burada, bahsedilen poliol; agirlikça yaklasik %5 ila agirlikça %90, tercihen agirlikça yaklasik %18 ila agirlikça %88, agirlikça %70 arasinda degisen bir miktardadir.

Bundan önceki yönlerden herhangi birine uygun bir kit olup, burada, bahsedilen sakarit; agirlikça yaklasik %0 ila agirlikça %85, tercihen agirlikça yaklasik %3 ila agirlikça %80, %7 Bundan önceki yönlerden herhangi birine uygun bir kit olup, burada, bahsedilen poliol; oranina sahiptir.

Bundan önceki yönlerden herhangi birine uygun bir kit olup, burada, birinci birim formu ayrica bir tonisite modifiye edicisini içermektedir.

Bundan önceki yönlerden herhangi birine uygun bir kit olup, burada, sürfaktan; polisorbat 20 veya 80 gibi polisorbatlardan, Brij 35® gibi polioksietilen alkil eterlerden ya da Poloksamer 188 veya 407 gibi poloksamerlerden ve diger etilen/polipropilen blok polimerleri veya PEG olusan gruptan seçilmektedir.

Bundan önceki yönlerden herhangi birine uygun bir kit olup, burada, Faktör Vll polipeptidi; yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 6 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL ile yaklasik 5 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 4 mg/mL gibi yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 10,0 mg/mL arasindaki bir konsantrasyonda bulunmaktadir.

Bundan önceki yönlerden herhangi birine uygun bir kit olup, burada, birinci birim formu, Bundan önceki yönlerden herhangi birine uygun bir kit olup, burada, ikinci birim formu; CaCIz, NaCI ve Glisilglisinden olusan listeden seçilen bir veya daha fazla bileseni içermektedir.

Bir kan pihtilasma faktörü polipeptidinin bir sivi formülasyonunun hazirlanmasina yönelik bir yöntem olup, yöntem, asagidaki adimlari içermektedir: a) yönler 1 ila 27'den herhangi birinde tarif edildigi gibi bir birinci ve bir ikinci birim formunun saglanmasi; b) söz konusu birinci ve ikinci birim formlarinin, uygulama araci içinde kompozisyonun çözünmüs bir sivi çözeltisini temin edecek sekilde karistirilmasi.

Bir pihtilasma faktörüne duyarli sendromun tedavi edilmesine yönelik bir yöntem olup, yön 28'e uygun yöntemle hazirlanan bir pihtilasma faktörünün bir sivi formülasyonunun etkili bir miktarinin ihtiyaci olan bir özneye uygulanmasini içermektedir.

Yön 29'a uygun bir yöntem olup, burada, sendrom; bir FVll duyarli sendromdur ve bahsedilen pihtilasma faktörü, bir Faktör VII polipeptididir.

Yön 30'a uygun yöntem olup, burada, bahsedilen sendrom; asagidakilerden olusan gruptan seçilmektedir: kazanilmis veya dogustan gelen hemofili A, kazanilmis veya dogustan gelen hemofili B, Faktör Xl eksikligi, Faktör VII eksikligi, Glanzmann trombasteni, trombositopeni, von Willebrand hastaligi, Vlll veya IX faktörlerinin inhibitörleri gibi bir pihtilasma faktörü inhibitörünün varligi, ameliyat, travma, dilüsyonel koagülopati ve antikoagülan tedavisi.

Bir Faktör VII duyarli sendromun tedavisi için yönler 1 ila 27'den herhangi birinde tanimlanan bir kit formundaki bir ilacin hazirlanmasina yönelik olarak bir Faktör VII polipeptidinin kullanimi.

Bir Faktör VII polipeptidi ve asagidakilerden olusan gruptan seçilen en az bir stabilize edici madde içeren bir kompozisyon: a) bir antioksidan ve mannitolün kombinasyonu; b) metionin ve bir poliolün bir kombinasyonu; ) bir sakarit ve mannitolün kombinasyonu; d) sakaroz ve bir poliolün kombinasyonu; metionin; ve yaklasik 0,06 ile 0,08 mg/mL arasinda bir miktarda bir polisorbat sürfaktan; söz konusu kompozisyon yaklasik %3'ten fazla olmayan bir nem içerigine sahiptir; Yön 33'e uygun kompozisyon olup, burada, bir antioksidan ile mannitolün kombinasyonu ayrica bir sakarit içermektedir.

Yön 33'e uygun kompozisyon olup, burada, metionin ile bir poliolün kombinasyonu ayrica bir sakarit içermektedir.

Yön 27'ye uygun kompozisyon olup, burada, bir sakarit ile mannitolün kombinasyonu ayrica bir antioksidan içermektedir.

Yön 27'e uygun kompozisyon olup, burada, sakaroz ile bir poliolün kombinasyonu ayrica bir antioksidan içermektedir.

Bundan önceki yönler 27 ila 37'den herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, antioksidan; homosistein, sistein, sistationin, metionin, gluthation ile homosistein, sistein, sistationin, metionin, gluthationdan herhangi birini içeren peptitlerden olusan gruptan seçilmekte ve tercihen metionin olmaktadir.

Bundan önceki yönler 27 ila 38'den herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, sakarit; sakaroz, dekstroz, Iaktoz, maltoz, trehaloz, siklodekstrinler, maltodekstrinler ve dekstranlardan olusan gruptan seçilmekte ve tercihen sakaroz olmaktadir.

Bundan önceki yönler 27 ila 39'dan herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, poliol; mannitol, sorbitol ve ksilitolden olusan gruptan seçilmekte ve tercihen mannitol olmaktadir.

Bundan önceki yönler 27 ila 40'tan herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, kompozisyon; Faktör VII polipeptidinin baslangiç içeriginin, bahsedilen kompozisyonun 30 °C'de 8 ay boyunca depolanmasi sirasinda agirlikça en çok yaklasik %5'inin, tercihen ya da agirlikça en çok yaklasik %1 ,O'inin agregalara dönüstürülecegi sekilde stabildir.

Bundan önceki yönler 27 ila 51'den herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, kompozisyon; Faktör VII polipeptidinin baslangiç içeriginin, bahsedilen kompozisyonun 30 ya da agirlikça en çok yaklasik %1 ,5'inin agregalara dönüstürülecegi sekilde stabildir.

Bundan önceki yönler 27 ila 42'den herhangi birine uygun kompozisyon olup, ayrica, sulu çözücü içinde çözündügünde, söz konusu kompozisyonun pH degerinin 3 ila 9 araliginda, tercihen 4 ila 7 arasinda, daha fazla tercihen 4,5 ila 6,5 araliginda, hatta daha tercihen 5,5 ila 6,5 arasinda tutulmasi için uygun bir madde içermektedir.

Yön 43'e uygun kompozisyon olup, burada, bahsedilen ajan; asagidakilerden olusan gruptan seçilmektedir: sitrik asit, asetik asit, histidin, malik asit, fosforik asit, tartarik asit, süksinik asit, MES, HEPES, PIPES, imidazol, TRIS, Iaktik asit, glutarik asit ve glisilglisin veya listelenen bu maddelerden en az ikisinin belirlenen aralikta bir pH degeri saglama yetisi olan bir karisimini.

Bundan önceki yönler 27 ila 44'ten herhangi birine uygun kompozisyon olup, ayrica, bir tonisite modifiye edici içermektedir.

Yönler 45'e uygun kompozisyon olup, burada, tonisite modifiye edici, asagidakilerden olusan listeden seçilmektedir: sodyum asetat, sodyum laktat, sodyum klorür, potasyum klorür, kalsiyum klorür, magnezyum klorür, mannitol, gliserol, propilen glikol veya tercihen asagidaki listeden seçilen bu tür modifiye edici ajanlardan en ikisinin bir karisimi: sodyum klorür, magnezyum klorür, mannitol, gliserol, propilen glikol, kalsiyum klorür veya bunlarin karisimlari.

Bundan önceki yönler 27 ila 46'dan herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, polisorbat sürfaktan; polisorbat 20 veya 80'den olusan gruptan seçilmekte ve tercihen de polisorbat 80 olmaktadir.

Bundan önceki yönler 27 ila 47'den herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, Faktör VIl Polipeptidi; Insan Faktörü Vlla, Rekombinant Insan Faktörü Vlla ve Faktör Vll Sekans Varyantindan olusan gruptan seçilmektedir.

Yön 48'e uygun kompozisyon olup, burada, Faktör Vll Polipeptidi; Insan Faktörü Vlla veya Rekombinant Insan Faktörü Vlla'dir.

Bundan önceki yönler 27 ila 49'dan herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, Faktör VII Polipeptidi, Faktör VII sekans varyantidir ve burada, bahsedilen varyant ile dogal tipteki Faktör Vll'nin aktivitesi arasindaki oran, mevcut tarifnamede açiklandigi üzere "in vitro Proteoliz Tahlili" ve "in vitro Hidroliz Tahlilinden" bir veya daha fazlasi ile test edildiginde en az 1,25'tir.

Bundan önceki yönler 27 ila 50'den herhangi birine uygun kompozisyon olup, burada, Faktör VII polipeptidi; yaklasik 0,6 mg/mL ile yaklasik 6 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 5 mg/mL, yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 4 mg/mL gibi yaklasik 0,6 mg/mL ila yaklasik 10,0 mg/mL arasindaki bir konsantrasyonda bulunmaktadir.

Yönler 27 ila 51'den herhangi birine uygun kompozisyonlar olup, asagidakilerden olusan listeden seçilmektedir: Bilesik Formülasyon i Formülasyon ii FVII polipeptidi 0,6 ila 10 mg/ml 0,6 ila 10 mg/ml Sakaroz 5 ila 20 mg/ml - 53. Yön 52'ye uygun kompozisyonlar olup, asagidakilerden olusan listeden seçilmektedir: 54. Yön 52'ye uygun kompozisyonlar olup, asagidakilerden olusan listeden seçilmektedir: Polisorbat ,0 ila 7,0 ,0 ile 7,0 Bilesik Formülasyon iii Formülasyon iv FVIIa polipeptidi 0,6 ila 3,0 mg/ml 0,6 ila 3,0 mg/ml Mannitol 25 mg/ml 25 mg/ml Sakaroz 10 mg/ml 10 mg/ml Metionin 0,5 mg/ml - pH 5,5 ile 6,5 5,5 ila 6,5 Bilesik Formülasyon iii Formülasyon iv FVIIa polipeptidi 0,6 ila 3,0 mg/ml 0,6 ila 3,0 mg/ml Mannitol 25 mg/ml 25 mg/ml Sakaroz 10 mg/ml 10 mg/ml Metionin 0,5 mg/ml - pH 5,0 ile 6,0 5,0 ila 6,0 55. Yönler 52 ila 54'ten herhangi birine uygun kompozisyonlar olup, yaklasik 0,07 mg/mL miktarinda polisorbat 80 içermektedir. 56. Yönler 52 ila 55'ten herhangi birine uygun kompozisyonlar olup, yaklasik 1,0 mg/mL miktarinda FVlIa polipeptidi içermektedir. 57. Yönler 52 ila 56'dan herhangi birine uygun kompozisyonlar olup, ayrica, asagidakilerden olusan listeden seçilen bilesenlerden en az birini içermektedir: yaklasik 10 mM'Iik bir miktarda Ca2+, tercihen CaCI2 x2H20 olarak; yaklasik 50 mM veya yaklasik 40 mM'Iik bir miktarda (örn. 39 mM) NaCI, ve tercihen yaklasik 10 mM'Iik bir miktarda L-Histidin olarak Histidin. sahip olmaktadir.

Yönler 27 ila 58'de tanimlanan kompozisyonlari hazirlamaya yönelik bir yöntem olup, asagidaki adimlari içermektedir: i) asagidakilerden olusan gruptan seçilen en az bir stabilize edici madde içeren bir çözeltide Faktör VII polipeptidi saglanmasi: a) bir antioksidan ve mannitolün kombinasyonu; b) metionin ve bir poliolün bir kombinasyonu; c) bir sakarit ve mannitolün kombinasyonu; d) sakaroz ve bir poliolün bir kombinasyonu; ve e) metionin; ve yaklasik 0,06 ila 0,08 mg/mL arasinda bir miktarda bir polisorbat sürfaktan; ii) agirlikça yaklasik %3'ten fazla olmayan bir nem içerigi olan bir kati kompozisyonun elde edilmesi için sözü edilen çözeltinin islenmesi.

Bir FVII duyarli sendromun tedavi edilmesine yönelik bir yöntem olup, yönler 27 ila 57'den herhangi birinde tanimlanan bir kompozisyonun etkili bir miktarinin ihtiyaci olan bir özneye uygulanmasini içermektedir.

Yön 60'a uygun yöntem olup, burada, bahsedilen sendrom, asagidakileri içeren gruptan seçilmektedir: kazanilmis veya dogustan gelen hemofili A; kazanilmis veya dogustan gelen hemofili B; Faktör XI eksikligi; Faktör VII eksikligi; Glanzmann trombasteni; trombositopeni; von Willebrand hastaligi; VIll veya IX faktörlerinin inhibitörleri gibi bir pihtilasma faktörü inhibitörünün varligi; ameliyat; dilüsyonel koagülopati; ve antikoagülan tedavisi.

Bir Faktör VII duyarli sendromun tedavisi için bir ilacin hazirlanmasinda bir Faktör VII polipeptidinin kullanimi olup, söz konusu ilaç, yönler 27 ila 58'den herhangi birinde tanimlanan bir kompozisyonu içermektedir.

Yön 62'ye uygun kullanim olup, burada, bahsedilen sendrom, asagidakileri içeren gruptan seçilmektedir: kazanilmis veya dogustan gelen hemofili A; kazanilmis veya dogustan gelen hemofili B; Faktör XI eksikligi; Faktör VII eksikligi; Glanzmann trombasteni; trombositopeni; von Willebrand hastaligi; VIII veya IX faktörlerinin inhibitörleri gibi bir pihtilasma faktörü inhibitörünün varligi; ameliyat; dilüsyonel koagülopati; ve antikoagülan tedavisi.

Claims (1)

1. ISTEMLER Farmasötik bir ilaç içeren bir kit olup, özelligi; bahsedilen kitin asagidakileri içermesidir: a) bir birinci birim formunda asagidakileri içeren bir kompozisyon 1,0 mg/mL rekombinant Faktör Vlla, 2,34 mg/mL sodyum klorür, 1,47 mg/mL kalsiyum klorür, 2H20, 0,07 mg/mL polisorbat 80, 0,5 mg/mL metionin, 25 mg/mL mannitol, 10 mg/mL sakaroz, burada, kompozisyon, %3'ten fazla olmayan bir nem içerigine ve bahsedilen birinci birim formunu ihtiva etmek için saklama aracina sahiptir; b) bir ikinci birim formu içerisinde, sulu çözücü içinde çözündügünde kompozisyonun pH degerini 6,0'da tutmak için uygun olan 0,5 mg/mL ila 3 mg/mL araliginda L-histidin içeren bir uygulama araci; ve bahsedilen ikinci birim formunu ihtiva etmek için saklama istem 1'e uygun bir kit olup, özelligi; asagidakileri içermesidir: a) bir birinci birim formunda asagidakileri içeren bir kompozisyon 1,0 mg/mL rekombinant Faktör Vlla, 2,34 mg/mL sodyum klorür, 1,47 mg/mL kalsiyum klorür, 2H20, 1,32 mg/mL glisilglisin, 0,07 mg/mL polisorbat 80, 0,5 mg/mL metionin, 25 mg/mL mannitol, 10 mg/mL sakaroz, burada, kompozisyon, %3'ten fazla olmayan bir nem içerigine ve bahsedilen birinci birim formunu ihtiva etmek için saklama aracina sahiptir; b) bir ikinci birim formu içerisinde, sulu çözücü içinde çözündügünde kompozisyonun pH degerini 6,0'da tutmak için uygun olan 0,5 mg/mL ila 3 mg/mL araliginda L-histidin içeren bir uygulama araci; ve bahsedilen ikinci birim formunu ihtiva etmek için saklama istem 1'e uygun bir kit olup, özelligi; asagidakileri içermesidir: a) bir birinci birim formunda asagidakileri içeren bir kompozisyon 1,0 mg/mL rekombinant Faktör Vlla, 2,34 mg/mL sodyum klorür, 1,47 mg/mL kalsiyum klorür, 2H20, 0,07 mg/mL polisorbat 80, 0,5 mg/mL metionin, 25 mg/mL mannitol, 10 mg/mL sakaroz, burada, kompozisyon, %3'ten fazla olmayan bir nem içerigine ve bahsedilen birinci birim formunu ihtiva etmek için saklama aracina sahiptir; b) bir ikinci birim formu içerisinde, sulu çözücü içinde çözündügünde bahsedilen kompozisyonun pH degerini 6,0'da tutmak için uygun olan 1,55 mg/mL'Iik bir konsantrasyonda histidin içeren bir uygulama araci; ve bahsedilen ikinci birim formunu ihtiva etmek için saklama araci. istem 2'ye uygun bir kit olup, özelligi; asagidakileri içermesidir: a) bir birinci birim formunda asagidakileri içeren bir kompozisyon 1,0 mg/mL rekombinant Faktör Vlla, 2,34 mg/mL sodyum klorür, 1,47 mg/mL kalsiyum klorür, 2H20, 1,32 mg/mL glisilglisin, 0,07 mg/mL polisorbat 80, 0,5 mg/mL metionin, 25 mg/mL mannitol, 10 mg/mL sakaroz, burada, kompozisyon, %3'ten fazla olmayan bir nem içerigine ve bahsedilen birinci birim formunu ihtiva etmek için saklama aracina sahiptir; ve b) bir ikinci birim formu içerisinde, sulu çözücü içinde çözündügünde bahsedilen kompozisyonun pH degerini 6,0'da tutmak için uygun olan 1,55 mg/mL'Iik bir konsantrasyonda histidin içeren bir uygulama araci; ve bahsedilen Ikinci birim formunu ihtiva etmek için saklama araci. Rekombinant Faktör VIIa'nin bir sivi formülasyonunu hazirlamaya yönelik bir yöntem olup, özelligi; asagidaki basamaklari içermesidir: a) Istemler 1 ila 4'ten herhangi birinde tarif edildigi gibi bir birinci ve bir ikinci birim formunun saglanmasi; b) Söz konusu birinci ve ikinci birim formlarinin, uygulama araci içinde kompozisyonun çözünmüs bir sivi çözeltisini temin edecek sekilde karistirilmasi. Bir Faktör VII duyarli sendromun tedavi edilmesinde kullanima yönelik istemler 1 ila 4'ten herhangi birinde tanimlandigi gibi bir kit olup, özelligi; bahsedilen sendromun, asagidakilerden olusan gruptan seçilmesidir: kazanilmis veya dogustan gelen hemofili A, kazanilmis veya dogustan gelen hemofili B, Faktör XI eksikligi, Faktör VII eksikligi, Glanzmann trombasteni, trombositopeni, von Willebrand hastaligi, VIII veya IX faktörlerinin inhibitörleri gibi bir pihtilasma faktörü inhibitörünün varligi, ameliyat, travma, dilüsyonel koagülopati ve antikoagülan tedavisi.