MXPA06006886A

MXPA06006886A - Composiciones estabilizadas de polipeptidos del factor vii.

Info

Publication number: MXPA06006886A
Application number: MXPA06006886A
Authority: MX
Inventors: Troels Kornfelt
Original assignee: Novo Nordisk Healthcare Ag
Priority date: 2003-12-19
Filing date: 2004-12-17
Publication date: 2006-09-04
Also published as: SI2298287T1; JP2013116899A; US20200046812A1; US20160101163A1; KR20140093711A; RU2373953C2; WO2005058283A2; AU2004298789A1; CN1917861B; EP2298287B1; ES2676644T3; EP2298287A3; CA2549593C; EP2298287A2; US20070021338A1; US20140127181A1; JP2007519623A; EP1703899A2; ATE507822T1; KR20150138427A

Abstract

La invencion se refiere a equipos tanto quimica como fisicamente estables y composiciones que comprenden polipeptidos, en particular el Factor VII o polipeptidos relacionados con el Factor VII, de tal manera que estas composiciones se puedan almacenar, manipular y utilizar a temperatura ambiente.

Description

COMPOSICIONES ESTABILIZADAS DE POLIPEPTIDOS DEL FACTOR VII CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a equipos que comprenden composiciones tanto química como físicamente estables que comprenden el Factor VII o un polipéptido relacionado con el Factor VII de tal manera que estas composiciones se puedan . almacenar, manipular y utilizar a temperatura ambiente .

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los medicamentos que contienen polipéptidos son composiciones complejas. Cuando se desarrolla este medicamento, es necesario considerar varios parámetros. Por ejemplo', el medicamento necesita ser efectivo, seguro y es necesario que conduzca a una buena tolerancia del paciente . Además, el medicamento se puede formular para la administración parenteral utilizando excipientes farmacéuticamente aceptables , los cuales tendrán que cumplir con la aprobación de varias agencias de regulación médica a nivel mundial. Con el propósito de la administración parenteral, es altamente deseable que la formulación sea aproximadamente isotónica y que el pH de la formulación esté en un rango fisiológicamente adecuado con la inyección/infusión, de otra manera puede dar por resultado REF: 173841 dolor e incomodidad para el paciente. Para una revisión general de las formulaciones de polipéptidos véase, por ejemplo, Cleland y colaboradores.: The development of stable protein formulations : A closer look at protein aggregation, deamidation and oxidation, Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems 1993, 10(4): 307-377, y Wang y colaboradores, Parenteral formulations of polypeptides and peptides: Stability and stabilizers, Journal of Parenteral Science and Technology 1988 (Suplemento), 42 (2S) . Sin embargo, para los medicamentos que comprenden polipéptidos, la seguridad puede estar relacionada directamente con la estabilidad física y química del polipéptido. Los polipéptidos son susceptibles a la degradación física, inclusive la desnaturalización y agregación tal como la formación de agregados solubles o insolubles en la forma de dímeros, oligómeros y polímeros o a la degradación química, inclusive, por ejemplo, hidrólisis, desamidación y oxidación. Consecuentemente, la inestabilidad física y química puede conducir a la pérdida de actividad del polipéptido, la formación de productos de degradación tóxicos e inmunógenos, en el caso de los polipéptidos del factor de coagulación existe un serio riesgo de introducción de trombosis con la inyección de los polipéptidos degradados, atascamiento de las agujas utilizadas para inyecciones y riesgo de falta de homogeneidad, por nombrar solo algunos.

De esta manera, las composiciones que comprenden polipéptidos necesitan ser estabilizadas de manera que se permita el almacenamiento y la manipulación a temperaturas ambientales. Un planteamiento para la estabilización de un polipéptido se refiere a la remoción de agua del polipéptido, por ejemplo tal como la provisión del polipéptido en la forma de una torta liofilizada, la materia final obtenida en un proceso de deshidratación por congelamiento. Sin embargo, el proceso de deshidratación por congelamiento mismo también es perjudicial para los polipéptidos; durante la deshidratación por congelamiento, la solución del polipéptido es enfriada primero hasta que se congela de manera adecuada y la mayoría del agua en la solución del polipéptido formará hielo en esta etapa. Con lo cual, el polipéptido es propenso a la tensión inducida por el congelamiento dando por resultado la deformación y precipitación. En el siguiente paso, la comúnmente llamada etapa de deshidratación primaria, el hielo se sublima y en la etapa de deshidratación secundaria, el agua absorbida o enlazada es retirada bajo temperaturas elevadas. Durante esta remoción del agua, los polipéptidos pueden perder su configuración apropiada que es proporcionada principalmente a través del enlace de hidrógeno. Por lo tanto, para conservar la conformación, actividad y estabilidad del polipéptido durante la deshidratación por congelamiento, la solución del polipéptido necesita ser complementada con suficientes cantidades de excipientes apropiados con propiedades crioprotectoras y/o-lioprotectoras para proteger el polipéptido de la tensión inducida por el congelamiento y/o la tensión durante la remoción del agua, respectivamente. El documento U.S. 20010031721 (American Home Products) trata sobre formulaciones del Factor IX altamente concentradas,, liofilizadas y líquidas. El documento WO 97/26909 (Genetics Institute) trata sobre preparaciones liofilizadas del Factor IX que son adecuadas para el almacenamiento y la administración. Las preparaciones pueden comprender sacarosa o manitol como un crioprotector. El documento WO 95/28954 (Genetics Institute) trata sobre preparaciones del Factor IX que son adecuadas para el almacenamiento y la administración. Las preparaciones pueden comprender sacarosa como un crioprotector. Adicionalmente, cuando se proporciona un producto liofilizado, una característica esencial se refiere a las propiedades de la torta liofilizada. Necesita tener buenas propiedades en cuanto a su forma y estructura, ' es decir no debe colapsarse ya que estas tortas colapsadas pueden ser duras o aún imposibles de disolver (reconstituir) antes del uso. A la inversa, la estructura física de la torta liofilizada no puede ser muy suelta y suave. Por lo tanto, se adicionan uno o más agentes comúnmente llamados de carga a la solución del polipéptido antes de la deshidratación por congelamiento . Además de seleccionar los agentes de carga correctos, también es esencial evitar excipientes que desestabilicen las propiedades físicas de la torta. La concentración de estas sustancias debe ser tan baja como sea posible. Además, es importante que la solución reconstituida no sea muy hipotónica o hipertónica ya que esto causará la inconveniencia para inyección o aún causará dolor para el paciente ' cuando sea administrada. Por lo tanto, es normalmente necesario adicionar tonicidad a la composición. Otro excipiente podría ser una sustancia amortiguadora a fin de mantener estable el pH de la solución reconstituida durante el almacenamiento. Los polipéptidos dependientes de la vitamina K son un grupo de polipéptidos implicados en el proceso de coagulación de la sangre; el grupo incluye el Factor VII, Factor IX, Factor X, Proteína C, Proteína S, gas6 y polipéptido Gla de la matriz ósea o puede ser una proteasa seleccionada del grupo que consiste del Factor Vlla, Factor IXa, Factor Xa, Factor lia y proteína C activada. Los Factores Vlla, IXa y Xa son proteasas particularmente útiles. El Factor VIII es un polipéptido implicado en el proceso de coagulación de la sangre. Se puede elaborar por medio de técnicas recombinantes o se puede preparar a partir de plasma y se utiliza ampliamente en el tratamiento de episodios de sangrado en pacientes con hemofilia. El Factor VII es un polipéptido implicado en el proceso de coagulación de la sangre. Hoy en día, el Factor Vlla puede elaborarse por medio de técnicas recombinantes (rFVIIa) y se utiliza ampliamente como un agente prohemostático. El Factor VII (natural, humano) ha sido descrito en la patente norteamericana No. 4,784,950. El Factor rFVIIa ofrece hoy en día una respuesta pro-hemostática rápida y altamente efectiva en individuos hemofílicos que experimentan sangrado. De manera ventajosa, el rFVIIa se puede utilizar para tratar a individuos hemofílicos que no pueden ser tratados con otros productos de factores de coagulación debido a la formación de anticuerpos. También los individuos que sufren de deficiencia del Factor VII o los individuos que tienen un sistema de coagulación normal pero que aún experimentan un sangrado excesivo pueden ser tratados exitosamente con el rFVIIa. Hoy en día, el polipéptido del FVII elaborado de manera recombinante se proporciona como un producto deshidratado por congelación que es propuesto para ser almacenado a temperaturas entre aproximadamente 2 y aproximadamente. 8°C. El requerimiento de condiciones frías causa una carga a y es inconveniente para el fabricante o proveedor así como también para el usuario final (el paciente) . El producto actual del FVII elaborado de manera recombinante es NovoSevenMR (Novo Nordisk A/S, Dinamarca) que consiste en 1.2 mg del Factor Vlla humano recombinante, 5.84 mg de NaCl, 2.94 mg de CaC12, 2 H20, 2.64 mg de Glicilglicina, 0.14 mg de polisorbato 80 y 60.0 mg de manitol. Cuando es reconstituida por 2.0 ml de agua para inyección (WFI, por sus siglas en inglés), el pH es 5.5 y la solución que contiene FVII preparada de esta manera es suficientemente estable durante 24 horas a temperatura ambiente. Los presentes investigadores han descubierto que con el almacenamiento del producto liofilizado NovoSeven™ durante 6 meses a 25°C, aproximadamente de 6 a 7% p/p del contenido inicial del rFVIIa está presente en la forma de agregados. De esta manera, las composiciones que comprenden los polipéptidos del Factor VII necesitan ser estabilizadas para permitir el almacenamiento y la manipulación a temperaturas ambientales . Un objetivo de la presente invención es proporcionar composiciones mejoradas, equipos y métodos para producir éstos, en donde las composiciones secas que comprenden los polipéptidos son estabilizadas contra la degradación química y física (tal como, por ejemplo, dando origen a formas de degradación diméricas/oligoméricas) ; con buenas propiedades de la torta liofilizada en cuanto a su forma y estructura, es decir que no debe colapsarse; con una estructura física tanto buena como estable de la torta liofilizada; donde la composición seca está exenta de excipientes los cuales desestabilizan las propiedades físicas de la torta, por ejemplo al disminuir el punto de fusión eutéctico y al incrementar de esta manera el riesgo de colapso de la torta; en donde la composición reconstituida que se prepara al disolver la composición seca que contiene el polipéptido en el vehículo de administración es isotónica, o casi isotónica, y tiene un pH bien definido (pH estable) . Particularmente, un objetivo es proporcionar composiciones mejoradas que comprenden polipéptidos del Factor VII, sustancialmente sin la presencia de productos de degradación y sin actividad disminuida de los polipéptidos del Factor VII, preferiblemente después de un almacenamiento prolongado a condiciones ambientales, por ejemplo, durante al menos seis meses. Además, un objetivo es que las composiciones estables sean adecuadas para la administración parenteral de manera que no causen ninguna inconveniencia para el paciente.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Los presentes investigadores han descubierto que los medicamentos que contienen polipéptidos pueden ser provistos como un equipo de partes que comprende una primera forma unitaria que consiste de una composición seca (por ejemplo, deshidratada por congelamiento) que comprende un polipéptido y al menos un agente estabilizador en donde la composición tiene un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3% y un medio de envase para contener la primera forma unitaria; y, en el medio de envase para contener esta unidad, una segunda forma unitaria que consiste de un vehículo de administración que comprende un solvente para solución (reconstitución) de la composición y al menos uno de los componentes seleccionados de la lista de: i) un agente adecuado para mantener el pH de la composición en el rango de 3 a 9 cuando se disuelve en un solvente acuoso en una cantidad de aproximadamente 0.1 mM a 100 mM; y ii) un agente modificador de la tonicidad en una cantidad suficiente para hacer esencialmente ísotónica la solución reconstituida que resulta de la disolución de la composición de la primera forma unitaria en el vehículo de administración de la segunda forma unitaria. Las sustancias que están presentes usualmente en la formulación como sustancias amortiguadoras y modificadores de la tonicidad disminuirán muy frecuentemente el punto de fusión eutéctico e incrementarán el riesgo de colapso de la torta. Si están presentes estas sustancias durante la deshidratación por congelamiento, la temperatura del hielo durante la deshidratación primaria debe ser disminuida para evitar el colapso y consecuentemente se prolonga el tiempo para la deshidratación por congelamiento. La concentración de estas -sustancias en la torta deshidratada por congelamiento debe ser tan baja como sea posible o estas sustancias deben ser evitadas por completo. En cambio, se pueden adicionar de manera benéfica al líquido para la reconstitución. Al disminuir la concentración de estos excipientes o al retirarlos por completo, la solución reconstituida se volverá hipotónica en algunos casos y es necesario adicionar modificadores de la tonicidad al solvente para mantener una solución con la tonicidad necesaria, tal como isotonicidad, o casi isotonicidad ("esencialmente isotónica") . Otro excipiente necesario en el solvente podría ser una sustancia amortiguadora a fin de mantener estable el pH de la solución reconstituida durante el almacenamiento. El equipo de partes es suficientemente estable para permitir el almacenamiento a temperatura ambiente durante al menos aproximadamente 8 meses. Además, se ha descubierto que los polipéptidos del Factor VII se pueden proporcionar en una composición que es suficientemente estable para permitir el almacenamiento a temperatura ambiente durante al menos aproximadamente 8 meses. Los investigadores han descubierto que la estabilización se relaciona con la combinación apropiada de algunos excipientes farmacéuticamente aceptables. Por consiguiente, la presente invención se refiere en un primer aspecto a un equipo (que contiene un medicamento/tratamiento farmacéutico) , el equipo comprende a) una composición que comprende un polipéptido y al menos un agente estabilizador, en donde la composición tiene un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3%, en una primera forma unitaria y un medio de envase para contener la primera forma unitaria; y b) un vehículo de administración que comprende un solvente para la reconstitución (solución) de la composición y al menos uno de los componentes seleccionados de la lista de: (i) un agente adecuado para mantener el pH de la composición en el rango de 3 a 9 cuando se disuelve en un solvente acuoso, en donde el agente está presente en una cantidad de aproximadamente 0.1 mM a 100 mM, (ii) un agente modificador de la tonicidad en una cantidad suficiente para hacer esencialmente isotónica la solución reconstituida que resulta de la disolución de la composición de la primera forma unitaria en el vehículo de administración de la segunda forma unitaria; en una segunda forma unitaria y un medio de envase para contener la segunda forma unitaria. En un segundo aspecto, la invención se refiere a un método para preparar una formulación líquida de un polipéptido, el método comprende los pasos que consisten en: a) proporcionar una primera forma unitaria y una segunda forma unitari como se describiera anteriormente, y b) mezclar la primera forma unitaria y la segunda forma unitaria para proporcionar una solución líquida, disuelta de la composición en el vehículo de administración. En un tercer y cuarto aspectos, la invención se refiere a un método para tratar un síndrome sensible al factor de coagulación, que comprende administrar a un sujeto en necesidad del mismo una cantidad efectiva de una formulación líquida de un factor de coagulación preparado por medio del método descrito anteriormente y al uso de la formulación para la preparación de un medicamento en la forma de un equipo como se definiera anteriormente para el tratamiento de un síndrome sensible al Factor VII. En un quinto aspecto, la invención se refiere a una composición que comprende un polipéptido del Factor VII y al menos un agente estabilizador seleccionado del grupo que consiste de a) una combinación de un antioxidante y manitol; b) una combinación de metionina y un poliol; c) una combinación de un sacárido y manitol; d) una combinación de sacarosa y un poliol; e) metionina; y un surfactante de polisorbato en una cantidad de aproximadamente 0.06 a 0.08 mg/mL; la composición que tiene un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3%; En un sexto aspecto, la invención se refiere a un método para preparar las composiciones definidas anteriormente, que comprende los pasos que consisten en: i) proporcionar un polipéptido del Factor VII en una solución que comprende al menos un agente estabilizador seleccionado del grupo que consiste de a) una combinación de un antioxidante y manitol; b) una combinación de metionina y un poliol; c) una combinación de un sacárido y manitol; d) una combinación de sacarosa y un poliol; y e) metionina; y un surfactante de polisorbato en una cantidad de aproximadamente 0.06 a 0.08 mg/mL; ii) procesar la solución para obtener una composición sólida con un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3% p/p- En un séptimo y octavo aspectos, la invención se refiere a un método para tratar un síndrome sensible al FVII, que comprende administrar a un sujeto en necesidad del mismo una cantidad efectiva de una composición como se definiera anteriormente y al uso del polipéptido del Factor VII para la preparación de un medicamento para tratar un síndrome sensible al Factor VII, el medicamento comprende una composición como se definiera anteriormente.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a equipos estables en el almacenamiento y composiciones que comprenden polipéptidos, inclusive polipéptidos del FVII, polipéptidos dependientes de la Vitamina K y polipéptidos del FVII. Las composiciones se pueden almacenar a temperatura ambiente durante un período de tiempo extendido sin causar la degradación sustancial del' polipéptido. Por temperatura ambiente se propone la temperatura ambiente dentro de una habitación, que varía normalmente de aproximadamente 5°C a aproximadamente 40 °C, tal como de aproximadamente 10 °C a 30 °C o de 15°C a 25°C. Por medio de una combinación predeterminada, apropiada de excipientes particulares, farmacéuticamente aceptables, los presentes investigadores han proporcionado composiciones estabilizadas que comprenden polipéptidos, particularmente polipéptidos del Factor VII, permitiendo de esta manera que las composiciones sean almacenadas a temperatura ambiente durante un período de tiempo extendido tal como al menos aproximadamente 8 meses. De manera ventajosa, las composiciones estabilizadas no necesitan ser almacenadas en condiciones frías, tal como entre 2 y 8°C. La presente invención también se refiere a composiciones estables en el almacenamiento que son estables durante al menos aproximadamente 8 meses con el almacenamiento a aproximadamente 30 °C. La composición se almacena preferiblemente en la oscuridad. De esta manera, la presente invención hace posible almacenar estas composiciones a temperatura ambiente sin incrementar el riesgo de eventos adversos para el paciente al administrar estas composiciones. De manera ventajosa, la estabilidad mejorada en el almacenamiento también dará por resultado un costo reducido ya que no se requieren condiciones frías, especiales en el almacenamiento, dando por resultado además una manipulación más conveniente de la composición por el usuario. Los polipéptidos que son formulados de acuerdo con la presente invención incluyen, sin limitación, factores de coagulación de la sangre que incluyen polipéptidos dependientes de la vitamina K, tales como, por ejemplo, sin limitación, factor VIII, factor V, factor XI, factor VII, factor IX, factor X, factor II, Proteína C, Proteína S, gas6 y polipéptido Gla de la matriz ósea; FVIII activado, factor Va, factor Xla, factor Vlla, factor IXa, factor Xa, factor lía y Proteína C activada. El término "polipéptido dependiente de la Vitamina" K" incluye polipéptidos seleccionados del grupo que consiste-del factor VII, factor IX, factor X, factor II, Proteína C, Proteína S, gasß y polipéptido Gla de la matriz ósea o puede ser una proteasa seleccionada del grupo que consiste del factor Vlla, factor IXa, factor Xa, factor lia y Proteína C activada. Los Factores VIIA, IXa y Xa son proteasas particularmente útiles. El término "polipéptido del Factor VII" es designado para indicar cualquier polipéptido del Factor VII que sea efectivo en la prevención o el tratamiento del sangrado. Este incluye los polipéptidos del Factor VII derivados de la sangre o el plasma o que son producidos por medios recombinantes. Como se utiliza en este documento, el "polipéptido del Factor VII" incluye, sin limitación, el Factor VII, inclusive variantes del mismo, así como también polipéptidos relacionados con el Factor VII, derivados del Factor VII y conjugados del Factor VII. El término "Factor VII" se propone para incluir, sin limitación, polipéptidos que tienen la secuencia de aminoácidos 1-406 del Factor VII humano, natural (descrito en la patente norteamericana No. 4,784,950), así como también el Factor VII natural derivado de otras especies, tal como, por ejemplo, bovino, porcino, canino, murino y de salmón, el Factor VII derivado de la sangre o el plasma o producido por medios recombinantes. Incluye además variantes alélicas, naturales del Factor VII que pueden existir y se pueden encontrar en un individuo u otro. También, el grado y la ubicación de la glicosilación u otras modificaciones post-traducción pueden variar dependiendo de las células hospedantes, seleccionadas y la naturaleza del ambiente celular, hospedante. El término "Factor VII" también se propone para incluir los polipéptidos del Factor VII en su forma no escindida (zimógeno) , así como también aquellos que han sido procesados de manera proteolítica para producir sus formas bioactivas, respectivas, las cuales pueden ser designadas Factor Vlla. Típicamente, el Factor VII es escindido entre los residuos 152 y 153 para producir el Factor Vlla. El término "derivado del Factor VII" como se utiliza en este documento, se propone para designar un polipéptido del FVII que exhibe sustancialmente la misma actividad biológica o una actividad biológica mejorada con relación al Factor VII natural, en el cual uno o más de los aminoácidos del polipéptido precursor han sido modificados genética y/o química y/o enzimáticamente, por ejemplo por medio de la alquilación, glicosilación, conjugación con PEG (PEGilación) , acilación, formación de éster o formación de amida o similares. Este incluye, pero no está limitado a, el Factor Vlla humano conjugado con PEG, Factor Vlla humano conjugado con cisteína-PEG y variantes de los mismos. Los ejemplos no limitantes de los derivados del Factor VII - incluyen derivados del FVII conjugados con GlicoPEG como se describe en el documento WO 03/31464 y las solicitudes de patente norteamericanas 20040043446, 20040063911, 20040142856, 20040137557 y 20040132640 (Neose Technologies, Inc.); conjugados del FVII como se describe en el documento WO 01/04287, solicitud de patente norteamericana 20030165996, documentos WO 01/58935, WO 03/93465 (Maxygen ApS) y WO 02/02764, solicitud de patente norteamericana 20030211094 (University of Minnesota) . El término "actividad biológica mejorada" se refiere a los polipéptidos del FVII con i) sustancialmente la misma actividad proteolítica o una actividad proteolítica incrementada en comparación con el Factor Vlla humano, natural, recombinante o ii) a péptidos del FVII con sustancialmente la misma actividad de unión a TF o una actividad de unión a TF incrementada en comparación con el Factor Vlla humano, natural, recombinante o iii) a polipéptidos del FVII con sustancialmente el mismo período de vida promedio o un período de vida promedio incrementado en el plasma sanguíneo en comparación con el Factor Vlla humano, natural, recombinante. El término "Factor Vlla humano conjugado con PEG" significa el Factor Vlla humano, que tiene una molécula de PEG conjugada con un polipéptido del Factor Vlla humano. Se debe entender que la molécula de PEG puede unirse a cualquier parte del polipéptido del Factor Vlla inclusive cualquier residuo de aminoácido o porción de carbohidrato del polipéptido del Factor Vlla. El término "Factor Vlla humano conjugado con cisteína-PEG" significa el Factor Vlla que tiene una molécula de PEG conjugada con un grupo sulfhidrilo de una cisteína introducida en el Factor Vlla humano. Como se mencionó, el término "polipéptidos del Factor VII" también es designado para indicar "polipéptidos relacionados con el Factor VII". El término "polipéptidos relacionados con el Factor VII" se propone para incluir estos polipéptidos en su forma no escindida (zimógeno) , así como también aquellos que han sido procesados proteolíticamente para producir sus formas bioactivas, respectivas. Como se utiliza en este documento, los "polipéptidos relacionados con el Factor VII" incluyen, sin limitación, polipéptidos que exhiben sustancialmente la misma actividad biológica o una actividad biológica mejorada con relación al Factor VII humano, natural y los polipéptidos en donde la actividad biológica ha sido reducida sustancialmente con relación a la actividad del Factor Vlla humano, natural (como se describe en la patente norteamericana No. 4,784,950). Estos polipéptidos incluyen, sin limitación, el Factor VII o el Factor Vlla que ha sido modificado químicamente, tal como, por ejemplo, al hacer reaccionar el Factor VII con un inhibidor irreversible tal como incompuesto de organofosforo, un sulfuro de sulfonilo, una halometil-cetona peptídica o un azapéptido o por medio de la acilación, como un ejemplo no limitante, y las variantes del Factor VII en las cuales se han introducido alteraciones específicas de la secuencia de aminoácidos que modifican o mejoran ligeramente la actividad biológica del polipéptido, tales como, por ejemplo, polipéptidos en donde la actividad catalítica del Factor Vlla es inhibida por la derivatización química del sitio catalítico o triada. El término "sitio catalítico" o "sitio activo", cuando se utiliza en este documento con referencia al FVIIa, se refiere al sitio de enlace catalítico y de sustrato de zimógeno, que incluye el sitio "Si" del FVIIa como es definido ese término por Schecter, I. y Berger, A., (1967) Biochem. Biophys. Res. Commun. 7:157-162. El sitio catalítico de las proteínas del Factor VII humano y bovino comprende los aminoácidos Ser344, Asp242 y Hisl93 (la numeración del subíndice indica la posición en la secuencia) que están formando una comúnmente llamada "triada" catalítica. Los sitios catalíticos en el Factor VII de otras especies de mamíferos se pueden determinar utilizando técnicas actualmente disponibles que incluyen, entre otras, el aislamiento de proteínas y el análisis de secuencias de aminoácidos. Los . sitios catalíticos también se pueden determinar al alinear una secuencia con la secuencia de otras serina proteasas, particularmente quimiotripsina, cuyo sitio activo ha sido determinado previamente (Sigler y colaboradores, J. Mol. Biol., 35:143-164 (1968)) y determinar de la misma, a partir del alineamiento, los residuos de sitios activos análogos. Los polipéptidos relacionados con el Factor VII, inclusive las variantes, que tienen sustancialmente la misma actividad biológica o una actividad biológica mejorada con relación al Factor Vlla natural incluyen aquellos que exhiben al menos aproximadamente 25%, preferiblemente al menos aproximadamente 50%, más preferiblemente al menos aproximadamente 75%, más preferiblemente al menos aproximadamente 100%, más preferiblemente al menos 110%, más preferiblemente al menos 120% y mucho más preferiblemente al menos aproximadamente 130% de la actividad específica del Factor Vlla natural que ha sido producido en el mismo tipo de células, cuando se someten a prueba en uno o más ensayos de coagulación, ensayo de proteólisis o ensayo de enlace a TF como se describe en la presente especificación. Los polipéptidos relacionados con el Factor VII, inclusive las variantes, en donde la actividad biológica ha sido reducida sustancialmente con relación a la actividad del Factor Vlla humano, natural incluyen aquellos polipéptidos que exhiben menos de aproximadamente 25%, más preferiblemente menos de aproximadamente 10% o 5% o 3% o 2% y mucho más preferiblemente menos de aproximadamente 1% de la actividad específica del Factor Vlla natural, cuando se someten a prueba en uno o más ensayos de coagulación, ensayo de generación de FlXa o FXa, ensayo de amidolisis o proteólisis como se describe dentro de la presente especificación. En algunas modalidades, los polipéptidos del Factor VII son polipéptidos relacionados con el Factor VII, en particular variantes, en donde la relación entre la actividad del polipéptido del Factor VII y la actividad del Factor Vlla humano, nativo (FVIIa natural) es al menos aproximadamente 1.25 cuando se somete a prueba en el "Ensayo de Hidrólisis In Vitro" (véase los ejemplos, métodos generales, posteriores); en otras modalidades, la relación es al menos aproximadamente 2.0; en modalidades adicionales, la relación es al menos aproximadamente 4.0. En algunas modalidades de la invención, los polipéptidos del Factor VII son polipéptidos relacionados con el Factor VII, en particular variantes, en donde la relación entre la actividad del polipéptido del Factor VII y la actividad del Factor VII humano, nativo (FVIIa natural) es al menos aproximadamente 1.25 cuando se somete a prueba en el "Ensayo de Proteólisis In Vitro" (véase los ejemplos, métodos generales, posteriores) ; en otras modalidades, la relación es al menos aproximadamente 2.0; en modalidades adicionales, la relación es al menos aproximadamente 4.0; en modalidades adicionales, la relación es de al menos aproximadamente 8.0. Los ejemplos no limitantes de las variantes del Factor VII que tienen sustancialmente la misma actividad biológica o una actividad biológica mejorada como el Factor VII natural incluyen S52A-FVII, S60A-FVII (Lino y colaboradores, Arch. Biochem. Biophys. 352: 182-192, 1998); L305V-FVII, L305V/M306D/D309S-FVII, L305I-FVII, L305T-FVII, F374P-FVII, V158T/M298Q-FVII, V158D/E296V/M298Q-FVII, K337A-FVII, M298Q-FVII, V158D/M298Q-FVII, L305V/K337A-FVII, V158D/E296V/M298Q/L305V-FV?I, V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII, V158D/E296V/M298Q/L305V/K337A-FVII, K157A-FVII, E296V-FVII, E296V/M298Q-FVII, V158D/E296V-FVII, V158D/M298K-FVII y S336G-FVII; las variantes del FVIIa que exhiben una estabilidad proteolítica incrementada como se describe en la patente norteamericana No. 5,580,560; el Factor Vlla que ha sido escindido proteolíticamente entre los residuos 290 y 291 o entre los residuos 315 y 316 (Mollerup y colaboradores, Biotechnol. Bioeng. 48:501-505, 1995); las formas oxidadas del Factor Vlla (Kornfelt y colaboradores, Arch. Biochem. Biophys. 363:43-54, 1999); las variantes del FVII como se describe en el documento PCT/DK02/00189 (que corresponde al documento WO 02/077218) ; y las variantes del FVII que exhiben una estabilidad proteolítica incrementada como se describe en el documento WO 02/38162 (Scripps Research Institute) ; las variantes del FVII que tienen un dominio Gla modificado y que exhiben un enlace a la membrana mejorado como se describe en el documento WO 99/20767, las patentes norteamericanas 6017882 y 6747003, la solicitud de patente norteamericana 20030100506 (University of Minnesota) y el documento WO 00/66753, las solicitudes de patente norteamericanas 20010018414, 2004220106 y 200131005, las patentes norteamericanas 6762286 y 6693075 (üniversity of Minnesota) ; y las variantes del FVII como se describe en el documento WO 01/58935, la patente norteamericana 6806063, la solicitud de patente norteamericana 20030096338 (Maxygen ApS), el documento WO 03/93465 (Maxygen Aps) y WO 04/029091 (Maxygen Aps) ; las variantes del FVII que tienen una actividad biológica incrementada en comparación con un FVIIa natural como se describe en los documentos WO 01/83725, WO 02/22776, WO 02/077218, PCT/DK02/00635, la solicitud de patente danesa PA 2002 01423, la solicitud de patente danesa PA 2001 01627; el documento WO 02/38162 (Scripps Research Institute) ; y las variantes del FVIIa con una actividad mejorada como se describe en el documento JP 2001061479 (Chemo-Sero-Therapeutic Res Inst.). Los ejemplos no limitantes de los polipéptidos del Factor VII que tienen una actividad biológica sustancialmente reducida con relación al Factor VII natural incluyen R152E-FVIIa (Wildgoose y colaboradores, Biochem 29:3414-3420, 1990), S344A-FVIIa (Kaza a y colaboradores, J. Biol. Chem. 270:66-72, 1995), FFR-FVIIa (Holst y colaboradores, Eur. J. Vasc. Endovasc. Surg. 15:515-520, 1998) y el Factor Vlla que carece del dominio Gla (Nicolaisen y colaboradores, FEBS Letts. 317:245-249, 1993). Los ejemplos no limitantes también incluyen el FVIIa humano, el cual tiene el residuo de usina en la posición 341 reemplazado por otro residuo de aminoácido; el FVIIa humano, el cual tiene el residuo de serina en la posición 344 reemplazado por otro residuo de aminoácido, el FVIIa humano, el cual tiene el residuo de ácido aspártico en la posición 242 reemplazado por otro residuo de aminoácido; el FVIIa humano, el cual tiene el residuo de histidina en la posición 193 reemplazado por otro residuo de aminoácido; FVII- (K341A) ; FVII- (S344A) ; FVII-(D242A); FVII- (H193A) ; Phe-Phe-Arg-FVII (FFR-FVII) , D-Phe-Phe-Arg-FVII (D-FFR-FVII) , Phe-Pro-Arg-FVII (FPR-FVII) , D-Phe-Pro-Arg-FVII (D-FPR-FVII) , L-Glu-Gly-Arg-FVII (EGR-FVII) y D-Glu-Gly-Arg-FVII (D-EGR-FVII) , Dansyl-Phe-Phe-Arg-FVII, Dansyl-D-Phe-Phe-Arg-FVII, Dansyl-Phe-Pro-Arg-FVII, Dansyl-D-Phe-Pro-Arg-FVII, Dansyl-L-Glu-Gly-Arg-FVII y Dansyl-D-Glu-Gly-Arg-FVII . Los ejemplos no limitantes de los polipéptidos del factor VII modificados químicamente y las variantes de secuencias se describen en, por ejemplo, la patente norteamericana No. 5,997,864. Los ejemplos del factor Vil o los polipéptidos relacionados con el factor Vil incluyen, sin limitación, el.. factor VII del tipo natural, L305V-FVII, L305V/M306D/D309S-FVII, L305I-FVII, L305T-FVII, F374P-FVII, V158T/M298Q-FVII, V158D/E296V/M298Q-FVII, K337A-FVII, M298Q-FVII, V158D/M298Q-FVII, L305V/K337A-FVII, V158D/E296V/M298Q/L305V-FVII, V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII, V158D/E296V/M298Q/L305V/K337A-FVII, K157A-FVII, E296V-FVII, E296V/M298Q-FVII, V158D/E296V-FVII, V158D/M298K-FVII y S336G-FVII, L305V/K337A-FVII, L305V/V158D-FVII, L305V/E296V-FVII, L305V/M298Q-FVII, L305V/V158T-FVII, L305V/K337A/V158T-FVII. L305V/K337A/M298Q-FVII, L305V/K337A/E296V-FVII, L305V/K337A/V158D-FVII, L305V/V158D/M298Q-FVII, L305V/V158D/E296V-FVII, L305V/V158T/M298Q-FVII, L305V/V158T/E296V-FVII, L305V/E296V/M298Q-FVII, L305V/V158D/E296V/M298Q-FVII, L305V/V158T/E296V/M298Q-FVII, L305V/V158T/K337A/M298Q-FVII, L305V/V158T/E296V/K337A-FVII, L305V/V158D/K337A/M298Q-FVII, L305V/V158D/E296V/K337A-FVII, L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII, L305V/V158T/E296V/M298Q/K337A-FVII, S314E/K316H-FVII, S314E/K316Q-FVII, S314E/L305V-FVII, S314E/K337A-FVII, S314E/V158D-FVII, S314E/E296V-FVII, S314E/M298Q-FVII, S314E/V158T-FVII, K316H/L305V-FVII, K316H/K337A-FVII, K316H/V158D-FVII, K316H/E296V-FVII, K316H/M298Q-FVII, K316H/V158T-FVII, K316Q/L305V-FVII, K316Q/K337A-FVII, K316Q/V158D-FVII, K316Q/E296V-FVII, K316Q/M298Q-FVII, K316Q/V158T-FVII, S314E/L305V/K337A-FVII, S314E/L305V/V158D-FVII, S314E/L305V/E296V-FVII, S314E/L305V/M298Q-FVII, S314E/L305V/V158T-FVII, S314E/L305V/K337A/V158T-FVII, S314E/L305V/K337A/M298Q-FVII, S314E/L305V/K337A/E296V-FVII, S314E/L305V/K337A/V158D-FVII, S314E/L305V/V158D/M298Q-FVII, S314E/L305V/V158D/E296V-FVII, S314E/L305V/V158T/M298Q-FVII, S314E/L305V/V158T/E296V-FVII, S314E/L305V/E296V/M298Q-FVII, S314E/L305V/V158D/E296V/M298Q-FVII, S314E/L305V/V158T/E296V/M298Q-FVII, S314E/L305V/V158T/K337A/M298Q-FVII, S314E/L305V/V158T/E296V/K337A-FVII, S314E/L305V/V158D/K337A/M298Q-FVII, S314E/L305V/V158D/E296V/K337A-FVII, S314E/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII, S314E/L305V/V158T/E296V/M298Q/K337A-FVII, K316H/L305V/K337A-FVII, 316H/L305V/V158D-FVII, K316H/L305V/E296V-FVII, K316H/L305V/M298Q-FVII, K316H/L305V/V158T-FVII, K316H/L305V/K337A/V158T-FVII, K316H/L305V/K337A/M298Q-FVII, K316H/L305V/K337A/E296V-FVII, K316H/L305V/K337A/V158D-FVII, K316H/L305V/V158D/M298Q-FVII, K316H/L305V/V158D/E296V-FVII, K316H/L305V/V158T/M298Q-FVII, K316H/L305V/V158T/E296V-FVII, K316H/L305V/E296V/M298Q-FVII, K316H/L305V/V158D/E296V/M298Q-FVII, K316H/L305V/V158T/E296V/M298Q-FVII, 316H/L305V/V158T/K337A/M298Q-FVII, K316H/L305V/V158T/E296V/K337A-FVII, K316H/L305V/V158D/K337A/M298Q-FVII, K316H/L305V/V158D/E296V/K337A-FVII, K316H/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII, K316H/L305V/V158T/E296V/M298Q/K337A-FVII, K316Q/L305V/K337A-FVII, K316Q/L305V/V158D-FVII, K316Q/L305V/E296V-FVII, K316Q/L305V/M298Q-FVII, K316Q/L305V/V158T-FVII, -K316Q/L305V/K337A/V158T-FVII, K316Q/L305V/K337A/M298Q-FVII, K316Q/L305V/K337A/E296V-FVII, K316Q/L305V/K337A/V158D-FVII, K316Q/L305V/V158D/M298Q-FVII, K316Q/L305V/V158D/E296V-FVII, K316Q/L305V/V158T/M298Q-FVII, K316Q/L305V/V158T/E296V-FVII, K316Q/L305V/E296V/M298Q-FVII, K316Q/L305V/V158D/E296V/M298Q-FVII, K316Q/L305V/V158T/E296V/M298Q-FVII, K316Q/L305V/V158T/K337A/M298Q-FVII, K316Q/L305V/V158T/E296V/K337A-FVII, K316Q/L305V/V158D/K337A/M298Q-FVII, K316Q/L305V/V158D/E296V/K337A-FVII, K316Q/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII, K316Q/L305V/V158T/E296V/M298Q/K337A-FVII, F374Y/K337A-FVII, F374Y/V158D-FVII, F374Y/E296V-FVII, F374Y/M298Q-FVII, F374Y/V158T-FVII, F374Y/S314E-FVII, F374Y/L305V-FVII, F374Y/L305V/K337A-FVII, F374Y/L305V/V158D-FVII, F374Y/L305V/E296V-FVII, F374Y/L305V/M298Q-FVII, F374Y/L305V/V158T-FVII, F374Y/L305V/S314E-FVII, F374Y/K337A/S314E-FVII, F374Y/K337A/V158T-FVII, F374Y/K337A/M298Q-FVII, F374Y/K337A/E296V-FVII, F374Y/K337A/V158D-FVII, F374Y/V158D/S314E-FVII, F374Y/V158D/M298Q-FVII, F374Y/V158D/E296V-FVII, F374Y/V158T/S314E-FVII, F374Y/V158T/M298Q-FVII, F374Y/V158T/E296V-FVII, F374Y/E296V/S314E-FVII, F374Y/S314E/M298Q-FVII, F374Y/E296V/M298Q-FVII, F374Y/L305V/K337A/V158D-FVII, F374Y/L305V/K337A/E296V-FVII, F374Y/L305V/K337A/M298Q-FVII, F374Y/L305V/K337A/V158T-FVII, F374Y/L305V/K337A/S314E-FVII, F374Y/L305V/V158D/E296V-FVII, F374Y/L305V/V158D/M298Q-FVII, F374Y/L305V/V158D/S314E-FVII, F374Y/L305V/E296V/M298Q-FVII, F374Y/L305V/E296V/V158T-FVII, F374Y/L305V/E296V/S314E-FVII, F374Y/L305V/M298Q/V158T-FVII, F374Y/L305V/M298Q/S314E-FVII, F374Y/L305V/V158T/S314E-FVII, F374Y/K337A/S314E/V158T-FVII, F374Y/K337A/S314E/M298Q-FVII, F374Y/K337A/S314E/E296V-FVII, F374Y/K337A/S314E/V158D-FVII, F374Y/K337A/V158T/M298Q-FVII, F374Y/K337A/V158T/E296V-FVII, F374Y/K337A/M298Q/E296V-FVII, F374Y/K337A/M298Q/V158D-FVII, F374Y/ 337A/E296V/V158D-FVII, F374Y/V158D/S314E/M298Q-FVII, F374Y/V158D/S314E/E296V-FVII, F374Y/V158D/M298Q/E296V-FVII, F374Y/V158T/S314E/E296V-FVII, F374Y/V158T/S314E/M298Q-FVII, F374Y/V158T/M298Q/E296V-FVII, F374Y/E296V/S314E/M298Q-FVII, F374Y/L305V/M298Q/K337A/S314E-FVII, F374Y/L305V/E296V/K337A/S314E-FVII, F374Y/E296V/M298Q/K337A/S314E-FVII, F374Y/L305V/E296V/M298Q/K337A-FVII, F374Y/L305V/E296V/M298Q/S314E-FVII, F374Y/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII, F374Y/V158D/E296V/M298Q/S314E-FVII, F374Y/L305V/V158D/K337A/S314E-FVII, F374Y/V158D/M298Q/K337A/S314E-FVII, F374Y/V158D/E296V/K337A/S314E-FVII, F374Y/L305V/V158D/E296V/M298Q-FVII, ' F374Y/L305V/V158D/M298Q/K337A-FVII, F374Y/L305V/V158D/E296V/K337A-FVII, F374Y/L305V/V158D/M298Q/S314E-FVII, F374Y/L305V/V158D/E296V/S314E-FVII, F374Y/V158T/E296V/M298Q/K337A-FVII, F374Y/V158T/E296V/M298Q/S314E-FVII, F374Y/L305V/V158T/K337A/S314E-FVII, F374Y/V158T/M298Q/K337A/S314E-FVII, F374Y/V158T/E296V/K337A/S314E-FVII, F374Y/L305V/V158T/E296V/M298Q-FVII, F374Y/L305V/V158T/M298Q/K337A-FVII, F374Y/L305V/V158T/E296V/K337A-FVII, F374Y/L305V/V158T/M298Q/S314E-FVII, F374Y/L305V/V158T/E296V/S314E-FVII, F374Y/E296V/M298Q/K337A/V158T/S314E-FVII, F374Y/V158D/E296V/M298Q/K337A/S314E-FVII, F374Y/L305V/V158D/E296V/M298Q/S314E-FVII, F374Y/L305V/E296V/M298Q/V158T/S314E-FVII, F374Y/L305V/E296V/M298Q/K337A/V158T-FVII, F374Y/L305V/E296V/K337A/V158T/S314E-FVII, F374Y/L305V/M298Q/K337A/V158T/S314E-FVII, F374Y/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII, F374Y/L305V/V158D/E296V/K337A/S314E-FVII, F374Y/L305V/V158D/M298Q/K337A/S314E-FVII, F374Y/L305V/E296V/M298Q/K337A/V158T/S314E-FVII, F374Y/L305V/V158D/E296V/M298Q/K337A/S314E-FVII, S52A-Factor VII, S60A-Factor VII; y P11Q/K33E-FVII. T106N-FVII, K143N/N145T-FVII, V253N-FVII, R290N/A292T-FVII, G291N-FVII, R315N/V317T-FVII, K143N/N145T/R315N/V317T-FVII; FVII que tiene sustituciones, adiciones o supresiones en la secuencia de aminoácidos de 233Thr a 240Asn, FVII que tiene sustituciones, adiciones o supresiones en la secuencia de aminoácidos de 304Arg a 329Cys y FVII que tiene sustituciones, supresiones o adiciones en la . secuencia de aminoácidos Ilel53-Arg223. Para propósitos de la invención, la actividad biológica de los polipéptidos del factor VII ("actividad biológica del Factor VII") puede ser cuantificada al medir la capacidad de una preparación para promover la coagulación de la sangre utilizando plasma o tromboplastina deficiente del Factor VII como se describe en, por ejemplo, la patente norteamericana No. 5,997,864. En este ensayo, la actividad biológica es expresada como la reducción en el tiempo de coagulación con relación a una muestra de control y se convierte a "unidades del Factor VII" por medio de la comparación con un estándar de suero humano acumulado que contiene 1 unidad/ml de actividad del Factor VII. Alternativamente, la actividad biológica del Factor Vlla puede ser cuantificada al (i) Medir la capacidad del Factor VII o un polipéptido relacionado con el Factor Vlla para producir el Factor X activado (Factor Xa) en un sistema que comprende TF incrustado en una membrana lipídica y el Factor X. (Persson y colaboradores, J. Biol. Chem. 272:19919-19924, 1997); (ii) Medir la hidrólisis del Factor X en un sistema acuoso ("Ensayo de Proteólisis In Vitro", véase los Ejemplos, Métodos Generales, Posteriores); (iii) Medir el enlace físico del Factor Vlla o un polipéptido relacionado con el Factor Vlla al TF utilizando un instrumento basado en la resonancia de plasmón superficial (Persson, FEBS Letts. 413:359-363, 1997) ; y (iv) Medir la hidrólisis de un substrato sintético por el Factor Vlla y/o un polipéptido relacionado con el Factor Vlla ("Ensayo de Hidrólisis In Vitro", véase los Ejemplos, Métodos Generales, posteriormente) ; y (v) Medir la generación de trombina en un sistema in vitro independiente de TF. El término "actividad biológica del Factor VII" o "actividad del Factor VII" se propone para incluir la capacidad para generar trombina; el término también incluye la capacidad para generar trombina sobre la superficie de plaquetas activadas en ausencia del Factor del tejido. Los "Ejemplos, Métodos Generales" de la presente especificación describen en detalle ensayos que son útiles para el ensayo de la actividad biológica del FVII. Además, por toda la presente especificación, los términos posteriores tienen el siguiente significado: El término "equipo" o "equipo de partes" se propone para indicar una combinación de un producto seco, en una primera unidad, que contiene un polipéptido y uno o más agentes estabilizadores; y un vehículo de administración que consiste de un solvente adecuado para disolver el producto seco de la primera unidad, en combinación con al menos un agente amortiguador en una cantidad de aproximadamente 0.1 mM a 100 mM y/o al menos un agente modificador de la tonicidad, en una segunda unidad. El equipo contiene un tratamiento farmacéutico, particularmente de episodios de sangrado. Antes del uso, la composición seca de la primera unidad se mezcla con y se disuelve en el vehículo de administración contenido en la segunda unidad, proporcionando con lo cual un medicamento listo para utilizarse. El medicamento listo para utilizarse es esencialmente isotónico. El término "vehículo de administración" se propone para incluir líquidos preferiblemente estériles, farmacéuticamente aceptables que son adecuados para la administración por medios inyectables, tal como la infusión o la inyección, por ejemplo por medio de la inyección intravenosa, subcutánea o intramuscular. El vehículo de administración es "preferiblemente acuoso. El vehículo de administración comprende un solvente o una mezcla de solventes que son adecuados para la reconstitución (solución) de la composición del polipéptido (por ejemplo, Agua para Inyección/WFI) y uno o más agentes adecuados para mantener el pH de la composición en el rango de 3 a 9 cuando se disuelve en un solvente acuoso en una cantidad de aproximadamente 0.1 mM a 100 mM; y/o uno o más agentes modificadores de la tonicidad en una cantidad suficiente para hacer esencialmente isotónica la solución reconstituida que resulta de la disolución de la composición de la primera forma unitaria en el vehículo de administración de la segunda forma unitaria. El vehículo de administración puede contener además sustancias tales como sales de metales, por ejemplo sales de calcio y/o magnesio, aminoácidos, por ejemplo, glicilglicina. Las composiciones reconstituidas están propuestas para la administración parenteral para el tratamiento profiláctico y/o terapéutico. Una "cantidad efectiva" de un polipéptido se refiere a la cantidad de polipéptido que, cuando se administra de acuerdo con la invención, produce un mejoramiento mesurable en al menos un parámetro clínico de hemostasia conocido para aquellas personas de experiencia ordinaria en el campo. Se entenderá que una cantidad efectiva de un polipéptido puede variar de acuerdo con el estado hemostático del sujeto, el cual, a su vez, puede ser reflejado en uno o más parámetros clínicos que incluyen, por ejemplo, los niveles relativos de factores de coagulación circulantes; la cantidad de pérdida de sangre; la velocidad de sangrado; el hematocrito y similares. Se entenderá además que la cantidad efectiva en dosis individuales puede ser determinada por aquellas personas de experiencia ordinaria en el campo por medio de la experimentación de rutina, al construir una matriz de valores y al someter a prueba diferentes puntos en la matriz. El término "estabilización" se propone para incluir la minimización de la formación de agregados (insolubles y/o solubles) y/o degradación química así como también proporcionar un mantenimiento del pH y una conformación apropiada del polipéptido durante el almacenamiento o la producción de las composiciones de manera que se mantenga la retención sustancial de la actividad biológica y la estabilidad del polipéptido. Además, la estabilización también es designada para indicar una lioprotección y una crioprotección del polipéptido durante la producción de las composiciones en condiciones de deshidratación por congelamiento . El término "agente estabilizador" se propone para incluir sustancias o una mezcla de sustancias que sean capaces de estabilizar un polipéptido durante el almacenamiento o la producción de una composición que comprende el polipéptido. El término "estabilización estructural" o "estabilidad estructural" se propone para incluir la capacidad para formar un tapón o torta liofilizado con buenas propiedades y apariencias, por ejemplo de tal manera que no se colapse y se disuelva fácilmente antes del uso. El término "estable en el almacenamiento" se propone para definir un producto que es estabilizado con el almacenamiento a temperaturas entre 5°C-40°C y permanece dentro de las especificaciones de producto preseleccionadas durante un periodo de tiempo adecuado - frecuentemente varios meses . El término "estabilidad física" de los polipéptidos del Factor VII se refiere a la formación de agregados insolubles y/o solubles en formas diméricas, oligoméricas y poliméricas de los polipéptidos del Factor VII así como también cualquier deformación estructural y desnaturalización de la molécula. El término "estabilidad química" se propone para referirse a la formación de cualquier cambio químico en los polipéptidos del Factor VII con el almacenamiento en un estado disuelto o sólido a condiciones aceleradas. Los ejemplos son hidrólisis, desamidación y oxidación. En particular, los aminoácidos que contienen azufre están propensos a la oxidación con la formación de los sulfóxidos correspondientes . El término "crioprotectores" utilizado en este documento incluye generalmente agentes, los cuales proporcionan estabilidad al polipéptido de las tensiones inducidas por el congelamiento. Los ejemplos de crioprotectores incluyen polioles tales como, por ejemplo, manitol e incluyen sacáridos tales como, por ejemplo, sacarosa así como también incluyen surfactantes tales como, por ejemplo, polisorbato, PoloxamerMR o polietilenglicol y similares. Los crioprotectores también contribuyen a la tonicidad de las formulaciones. El término "lioprotector" como se utiliza en este documento incluye agentes que proporcionan estabilidad al polipéptido durante la remoción de agua en el proceso de deshidratación del proceso de liofilización. Por ejemplo, al mantener la conformación apropiada del polipéptido. Los ejemplos de lioprotectores incluyen sacáridos, en particular di- o tri-sacáridos . Los crioprotectores también pueden tener efectos lioprotectores. El término "agente adecuado para mantener el pH en el rango de 3 a 9" o "agente amortiguador" incluye aquellos agentes que mantienen el pH de la solución en un rango aceptable entre 3.0 y 9.0. Los ejemplos típicos de agentes capaces de mantener el pH dentro de un rango de 3 a 9 son la forma acida o las sales de ácido cítrico, ácido acético, histidina, ácido málico, ácido fosfórico, ácido tartárico, ácido succínico, MES, HEPES, PIPES, imidazol, TRIS, ácido láctico, ácido glutárico y glicilglicina. Se debe entender que una combinación de agentes, en donde la combinación de agentes es adecuada para mantener el pH en el rango descrito anteriormente, también se puede utilizar en la presente invención. El término "torta liofilizada" como se utiliza en este documento es designado para incluir la composición sólida obtenida con el procesamiento de una composición disuelta o al menos parcialmente disuelta bajo condiciones que implican al menos un paso de enfriamiento de la composición disuelta/parcialmente disuelta hasta el hielo seguido por al menos un paso de deshidratación al vacío.

El término "liofilización" y "deshidratación por congelamiento" incluye un proceso durante el cual el líquido es retirado de una composición disuelta o al menos parcialmente disuelta bajo condiciones que implican al menos un paso de enfriamiento de la solución disuelta o parcialmente disuelta hasta el hielo seguido por la deshidratación al vacío. La liofilización, o deshidratación por congelamiento, es el proceso más común para elaborar productos farmacéuticos, sólidos de polipéptidos. El proceso consiste en dos pasos principales: el congelamiento de una solución de polipéptido y la deshidratación del sólido congelado bajo vacío. El paso de deshidratación es dividido adicionalmente en dos fases: la deshidratación primaria y secundaria. La deshidratación primaria retira el agua congelada (sublimación del hielo) y la deshidratación secundaria retira el agua "enlazada" no congelada (desorción de agua) . Un análisis más detallado de cada paso de la liofilización se proporciona en, por ejemplo, Wang y colaboradores, International Journal of Pharmaceutics 203 (2000) : 1-60 (véase sección 4, página 16 en adelante) . Típicamente, una composición es deshidratada por congelamiento al verter en frasquitos, congelar en los estantes del deshidratador por congelamiento, después de lo cual se establece un vacío y los estantes se calientan para implementar la deshidratación primaria (o sublimación del hielo) . Después, la deshidratación secundaria (o desorción del agua absorbida) toma lugar a una temperatura más alta hasta la consumación del proceso, es decir, donde la composición contiene un contenido suficientemente bajo de humedad (agua) . Los métodos para la deshidratación por congelamiento son conocidos generalmente en el campo, véase por ejemplo Wang y colaboradores, International Journal of Pharmaceutics 203 (2000) : 1-60. Está dentro de la experiencia ordinaria del practicante el optimizar las condiciones de deshidratación por congelamiento con respecto' a la(s) temperatura (s) , tiempo (s) en cada temperatura y también la presión que debe utilizarse durante el proceso para una composición específica. El término "contenido de humedad" se propone para incluir el agua asociada con el producto que incluye, sin limitación, el agua en forma adsorbida, tal como agua descongelada que está atrapada en o que es absorbida por la fase del soluto congelado y/o que está asociada con la fase amorfa o que es adsorbida por el sólido cristalino. El término "contenido de agua" se utiliza de manera intercambiable con el "contenido de humedad". El nivel de humedad residual, deseado (contenido de humedad) es una función de la duración y la temperatura del paso de deshidratación secundario. Varios métodos para determinar el contenido de humedad residual durante la liofilización son conocidos en el campo; por ejemplo, se puede utilizar un higrómetro electrónico o un analizador de gas residual. Los contenidos de humedad de formulaciones deshidratadas por congelamiento se pueden determinar por medio de varios métodos conocidos en el campo tales como, por ejemplo, pérdida en la deshidratación, trituración de Karl Fischer, análisis gravimétrico térmico (TGA, por sus siglas en inglés) , cromatografía de gas (GC, por sus siglas en inglés) o radicación de infrarrojo cercano (véase, por ejemplo Wang y colaboradores, International Journal of Pharmaceutics 203 (200) : 1-60) . Los métodos para la determinación de los contenidos de agua (contenidos de humedad) también se describen en la farmacopea tanto europea como la farmacopea norteamericana. Por ejemplo, la determinación del contenido de agua se puede realizar por medio de la trituración coulométrica de Karl Fischer como se describe en la farmacopea norteamericana (USP <921, Ic>) o la farmacopea europea (EP <2.5.32>). En resumen, el método es como sigue: Determinación del contenido de agua por medio . de la trituración coulométrica : La reacción de Karl Fischer se utiliza en la determinación coulométrica del agua basándose en la reacción cuantitativa del agua con dióxido de azufre y yodo en un medio anhidro. El yodo se produce electroquímicamente en la celda de reacción por medio de la oxidación de yodo. El yodo producido en el ánodo reacciona inmediatamente con el agua y el dióxido de azufre contenido en la celda de reacción. La cantidad de agua en la sustancia es directamente proporcional a la cantidad de electricidad hasta el punto final de la trituración. Cuando se ha consumido toda el agua en la celda, se alcanza el punto final y de esta manera aparece un exceso de yodo el cual es detectado electrométricaménte indicando de esta manera el punto final. Entonces se calcula el porcentaje de contenido de agua presente en la sustancia. El contenido de humedad se puede definir en términos del peso de la muestra en el frasquito al momento del análisis (es decir, sólidos más el agua presente -llamado base en peso en húmedo) o se puede definir en términos donde se corrige por el agua medida en la muestra (es decir, base en peso en seco) . En el caso de los productos deshidratados por congelamiento con bajos contenidos de humedad, las dos mediciones (base en peso en húmedo contra base en peso en seco) producen resultados muy similares. Como se utiliza en este documento, los contenidos de humedad se definen en términos de los sólidos más el agua presente (es decir, base en peso en húmedo) . El término "agente de carga" incluye generalmente agentes, los cuales proporcionan buenas propiedades de torta liofilizada, los cuales forman un producto farmacéuticamente elegante, los cuales ayudan a que el polipéptido supere varias tensiones, por ejemplo corte/congelamiento, asociadas con los procesos de liofilización y los cuales ayudan a mantener los niveles de actividad del polipéptido durante el proceso de deshidratación por congelamiento y el almacenamiento subsecuente. Los ejemplos no limitantes de agentes de carga incluyen manitol, glicina, sacarosa, lactosa. Estos agentes también pueden contribuir a la tonicidad de las formulaciones. Las soluciones isotónicas tienen una tonicidad dentro del rango fisiológico de la sangre, fluido periférico u otros fluidos corporales relevantes. Por isotonicidad se propone una solución con una presión osmótica que corresponde a la presión osmótica de una solución de NaCl 0.9% (=286 mOsM) . El término "esencialmente isotónico" se propone para indicar una tonicidad que corresponde a la presión osmótica de una solución salina que contiene de aproximadamente 0.7 a aproximadamente 1.5% de NaCl, tal como, por ejemplo, de aproximadamente 0.8 a aproximadamente 1.3%, de aproximadamente 0.8 a aproximadamente 1.1%, de aproximadamente 0.8 a aproximadamente 1.0% o aproximadamente 0.9% de NaCl. El término "modificador de tonicidad" o "agente modificador de tonicidad" es designado para indicar cualquier agente o mezcla de agentes capaces de ajustar la tonicidad de la composición de tal manera que con la disolución de la composición al momento del uso, la composición disuelta (o reconstituida) sea esencialmente isotónica. Obviamente, la tonicidad de la solución reconstituida puede depender de los contenidos de agentes modificadores de tonicidad tanto en la composición seca como en la composición de reconstitución. Los agentes modificadores de la tonicidad incluyen, sin limitación, componentes seleccionados de la lista de: acetato de sodio, lactato de sodio, cloruro de sodio, cloruro de potasio, cloruro de calcio, manitol, glicerol, propilenglicol o mezclas de dos o más de estos. Las cantidades de los agentes modificadores de la tonicidad anteriores que son adecuadas para proporcionar una composición que tiene una tonicidad como se definiera anteriormente son, por ejemplo, de 0 a aproximadamente 9 mg/ml de cloruro de sodio, de 0 a aproximadamente 17 mg/ml de dihidrato de cloruro de calcio, de 0 a aproximadamente 51 mg/ml de manitol, de 0 a aproximadamente 26 mg/ml de glicerol, de 0 a aproximadamente 21 mg/ml de propilenglicol, dependiendo de si el modificador de la tonicidad individual se utiliza solo o en combinación con uno o más modificadores de la tonicidad. El término "surfactantes" incluye generalmente aquellos agentes que protegen al polipéptido de las tensiones inducidas por la interfaz de aire/solución y las tensiones inducidas por la solución/superficie. Por ejemplo, los surfactantes pueden proteger al polipéptido de la agregación. Los surfactantes adecuados pueden incluir, por ejemplo, polisorbatos, éteres alquílicos de polioxietileno tales como Brij 35^R o _µn PoloxamerMR tal como Tween 20MR, Tween 80m o el Poloxamer 188m. Los surfactantes preferidos son Poloxamer1^, por ejemplo Poloxamer 188R, Poloxamer 407MR; éteres alquílicos de polioxietileno, por ejemplo, Brij 35MR, Cremophor A25MR, Sympatens ALM/230m; y polisorbatos/TweensMR, por ejemplo polisorbato 20, polisorbato 80. Son más preferidos los Poloxamer1411, por ejemplo el Poloxamer 188ffi y los Tween1111, por ejemplo, Tween 20MR y Tween 80^. Típicamente, los surfactantes se adicionan en una cantidad de 0.005 a 5 mg/ml. Las cantidades preferidas son de 0.01 a 3 mg/ml, más preferiblemente de 0.01 a 0.3 mg/ml para Tween 20MR y/o Tween 80^ y de 0.05 a 3.0 mg/ml para el Poloxamer 188^. El término "contenido inicial" se refiere a la cantidad de los polipéptidos del Factor VII adicionada a una composición al momento de la preparación. La concentración dada en este documento (mg/ml) se refiere ya sea a la concentración en la solución del polipéptido del Factor VII antes de la remoción de la humedad (por ejemplo antes de la deshidratación por congelamiento) o en la composición reconstituida o es referida como el % p/p, el cual entonces se relaciona con la concentración en la composición sólida, por ejemplo la torta liofilizada. Como se utiliza en este documento, se entiende que las cantidades especificadas son ± aproximadamente 10%; de esta manera aproximadamente 50 mM incluye 50 mM ± 5 mM, 4% incluye 4% ± 0.4%, etcétera. Como se estableciera anteriormente, los presentes investigadores han contribuido esencialmente a la técnica al estabilizar los polipéptidos del Factor VII permitiendo con lo cual el almacenamiento a largo plazo sin causar un riesgo incrementado e inconveniencia al usuario. Los presentes investigadores han descubierto que es necesario ajustar una variedad de parámetros cruciales en la estabilización de los polipéptidos del Factor VII. Un parámetro importante se refiere, al menos en parte, al contenido de humedad, por ejemplo agua. El contenido de humedad debe ser limitado. Como un parámetro esencial adicional, la composición debe incluir al menos un agente estabilizador. Los agentes estabilizadores incluyen, sin limitación, antioxidantes, sacáridos, polioles, surfactantes y agentes adecuados para mantener el pH en un rango predeterminado . En una modalidad de la presente invención, un agente estabilizador apropiado incluye la combinación de al menos dos grupos de excipientes farmacéuticamente aceptables que se seleccionan del grupo que consiste de antioxidantes, .sacáridos y polioles. Los sacáridos y los polioles tienen propiedades lioprotectoras y/o crioprotectoras que pueden ser importantes, al menos en parte, en el caso donde la composición es deshidratada por congelamiento. En general," la estabilidad mejorada se puede lograr, en parte, por medio de la combinación apropiada de al menos dos de estos grupos de excipientes. Sin embargo, más específicamente, se descubrió que cuando la combinación comprende un sacárido (sacarosa) o un antioxidante (metionina) , el efecto estabilizador puede ser aún más significante. Además, también se descubrió sorprendentemente que la metionina impide la degradación oxidante de los polipéptidos del Factor VII. Como se estableció, en una modalidad de la invención el agente estabilizador incluye la combinación de al menos dos grupos de excipientes farmacéuticamente aceptables . De acuerdo con la invención, el polipéptido del Factor VII se propone que incluye los polipéptidos como se describiera anteriormente. En las modalidades adecuadas de la invención, el polipéptido del Factor VII se selecciona del grupo que consiste del Factor Vlla humano, Factor Vlla humano recombinante y una variante de secuencia del Factor VII . Preferiblemente, el polipéptido del Factor VII es el Factor Vlla humano o el Factor Vlla humano recombinante o un polipéptido relacionado con el Factor VII en donde la relación entre la actividad del polipéptido relacionado con el Factor VII y el Factor VII natural es al menos 1.25 cuando se somete a prueba en uno o más del "Ensayo de Proteólisis In Vitro" y el "Ensayo de Hidrólisis In Vitro" como se describe en la presente especificación. Como se estableció, el contenido de humedad debe ser limitado. Para propósitos de la presente invención, los polipéptidos del Factor VII, cuando se proporcionan a granel, se pueden proporcionar en forma sólida o líquida. Sin embargo, típicamente los polipéptidos del Factor VII, cuando se proporcionan a granel, están en forma líquida. De esta manera, el procesamiento adicional de los polipéptidos a granel para la manufactura de las composiciones requiere los pasos que consisten en adicionar excipientes adecuados y retirar el líquido del volumen, la adición de excipientes se puede llevar a cabo antes o después de la remoción del líquido. Un medio de este tipo para la remoción del líquido de un polipéptido está relacionado con la deshidratación por congelamiento. Por lo tanto, en una modalidad preferida de la presente invención, la composición está en la forma de una torta liofilizada. Sin embargo, la presente invención no incluye otros procesos que sean adecuados para la remoción del líquido del polipéptido a granel para lograr una composición sólida con un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3% p/p.

Además, de acuerdo con la invención, el contenido de humedad es preferiblemente no mayor que aproximadamente 2.5% p/p, preferiblemente no mayor que aproximadamente 2% p/p, mucho más preferiblemente no mayor que aproximadamente 1.5% p/p. Como se puede entender, la invención se refiere, en parte, a la limitación de la degradación de los polipéptidos del Factor VII durante la preparación, por ejemplo durante el mezclado de los excipientes y la remoción del líquido para lograr una composición sólida con un contenido de humedad como máximo de 3% p/p y a la limitación de la degradación desde el momento de la manufactura de la composición sólida hasta el momento del uso, por ejemplo, hasta el momento cuando la composición debe ser administrada por un paciente. Por lo tanto, como un parámetro aún adicional en la estabilización de equipos y composiciones que comprenden los polipéptidos del Factor VII, el pH debe mantenerse en el rango de pH dentro de 3 a 9 cuando se disuelven en un solvente acuoso tal como, por ejemplo, agua pura o un amortiguador acuoso. Es decir que el pH en la solución de polipéptido al momento antes de la remoción del contenido de humedad, por ejemplo antes de la deshidratación por congelamiento, debe mantenerse dentro de un pH de aproximadamente 3 a aproximadamente 9. De manera ventajosa, este rango de pH también - está dentro del rango fisiológico deseado, evitando causar con lo cual un daño al usuario con la administración de la composición por medios parenterales. Preferiblemente, el pH de la solución es de aproximadamente 4.0 a aproximadamente 9.0, tal como 4.0 a 8.0, 4.0 a 7.5, 4.0 a 7.0, 4.5 a 7.0, 4.5 a 6.8, 4.5 a 6.5, 5.0 a 7.0, 5.0 a 6.5, 5.0 a 6.0, 5.5 a 6.0 o de aproximadamente 5.5 a aproximadamente 6.5 tal como aproximadamente 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, 5.9, 6.0, 6.1, 6.2, 6.3, 6.4 o 6.5. En las modalidades adecuadas de la invención, el agente adecuado para mantener el pH en el rango de 3 a 9 se selecciona del grupo que consiste de un ácido o sales de ácido cítrico, ácido acético, histidina, ácido málico, ácido fosfórico, ácido tartárico, ácido succínico, MES, HEPES, imidazol, TRIS, ácido láctico, ácido glutárico, PIPES y glicilglicina o una mezcla de al menos dos de estos agentes listados, en donde la mezcla es capaz de proporcionar un valor de pH en el rango especificado. Además, el agente adecuado para mantener el pH en el rango de 3 a 9 también puede ser una mezcla de al menos dos de estos agentes listados, en donde la mezcla es capaz de proporcionar un valor de pH en el rango especificado. La concentración de los agentes adecuados está en el rango de aproximadamente 0.1 mM a 100 M; de aproximadamente a aproximadamente 50 M; tal como de aproximadamente 0.1 mM a aproximadamente 40 mM; de aproximadamente 0.1 mM aproximadamente 35 mM; de aproximadamente 0.1 M aproximadamente 30 mM; de aproximadamente 0.5 mM aproximadamente 25 mM; de aproximadamente 1 mM aproximadamente 20 mM; de aproximadamente 1 mM aproximadamente 15 mM; de aproximadamente 5 mM aproximadamente 20 mM; o de aproximadamente 5 mM aproximadamente 15 mM. En una modalidad de la invención, el agente adecuado para mantener el pH en el rango de 3 a 9 es histidina, preferiblemente L-histidina. La degradación del polipéptido del Factor VII por medio de la vía oxidante así como también por medio de la vía de agregación son parámetros sensibles de estabilidad. Típicamente, las composiciones son estabilizadas con la consumación de la deshidratación por congelamiento de tal manera que menos de 5% p/p, tal como menos de 4, 3 o 2% p/p del contenido inicial del polipéptido del Factor VII se convierte en sus formas oxidadas. El contenido inicial del polipéptido del Factor VII es la cantidad adicionada a la composición con la preparación de la composición antes del paso de deshidratación por congelamiento. Además, menos de 5% p/p, tal como menos de 4.0%, 3.0%, 2.5%, 2%, 1.5% o menos de 1% p/p del contenido inicial del polipéptido del Factor VII se recupera como formas agregadas, determinado por medio de métodos analíticos convencionales (por ejemplo, tal como se describe en los ejemplos de la presente solicitud) . Los presentes investigadores han descubierto que la degradación adicional (es decir, calculada desde el momento de la terminación del proceso de manufactura hasta 8 meses de almacenamiento a 30°C) de un polipéptido del Factor VII es mínima con el almacenamiento bajo condiciones ambientales. Se descubrió que las composiciones que comprenden un antioxidante (metionina) son más estables hacia la degradación oxidante del polipéptido del Factor VII. Por lo tanto, las composiciones adecuadas tienen un incremento limitado en el contenido de formas oxidadas con el almacenamiento durante al menos 8 meses en condiciones ambientales. Es decir que en las modalidades aún más interesantes, la composición es estable de tal manera que no más de aproximadamente 6% p/p del contenido inicial del polipéptido del Factor VII se degrada adicionalmente en formas oxidadas con el almacenamiento de la composición durante 8 meses a 30°C después de la terminación del proceso de manufactura, por ejemplo, el proceso de deshidratación por congelamiento. En las modalidades adecuadas, adicionales de la misma, no más de aproximadamente 5, 4, 3, 2 o 1.5% p/p del polipéptido del Factor VII se convierte adicionalmente en formas oxidadas, calculado desde el momento de la consumación del proceso de manufactura hasta 8 meses de almacenamiento a 30°C. En estas modalidades de la invención, las composiciones son estables de tal manera que no más de aproximadamente 5% (4, 3, 2 o 1.5%) p/p del contenido inicial del polipéptido del Factor VII se convierte a formas oxidadas con el almacenamiento de la composición a 30°C durante 8 meses. Como se estableciera anteriormente, el contenido inicial se refiere a la cantidad del polipéptido del Factor VII adicionada a la composición con la preparación de la composición antes del paso de deshidratación por congelamiento . Como se indicó, la degradación de los polipéptidos del Factor VII por medio de la vía de agregación también se puede considerar como un parámetro que indica estabilidad esencial. De esta manera, las modalidades interesantes de la invención se refieren a composiciones que son estables de tal manera que no más de aproximadamente 5% p/p del contenido inicial del polipéptido del Factor VII se convierte a agregados con el almacenamiento de la composición a 30°C durante 8 meses. Como se estableciera anteriormente, el contendido inicial del polipéptido del Factor VII es la cantidad adicionada a la composición con la preparación de la composición antes del paso de deshidratación por congelamiento. Por la optimización apropiada de, al menos en parte, los contenidos de sacáridos, polioles y antioxidantes, la composición es estable de tal manera que no más de aproximadamente 4.0%, 3.0% p/p, tal como 2.5, 2.0, 1.5 o 1.0% p/p, del contenido inicial del polipéptido del Factor VII se convierte a agregados con el almacenamiento de la composición a 30°C durante 8 meses. De esta manera, las composiciones de la invención tienen, de manera ventajosa, bajos contenidos de formas oxidadas y agregados con la consumación del proceso de manufactura, es decir con la consumación del proceso de deshidratación por congelamiento y de esta manera las composiciones de acuerdo con la invención están caracterizadas por tener un bajo contenido inicial de formas oxidadas y agregados antes de sujetarse al almacenamiento, por ejemplo no más de aproximadamente 5% p/p, tal como 4%, 3% o 2% p/p de los contenidos iniciales del polipéptido del Factor- VII se convierte en una forma oxidada y menos de 5% p/p, tal como no más de aproximadamente 4.0%, 3.0%, 2.5%, 2%, 1.5% o no más de aproximadamente 1% p/p, se convierte en una forma di érica o polimérica de orden superior con la consumación del proceso de manufactura. Además y de manera ventajosa, los equipos y las composiciones de la invención son estables en el almacenamiento, por ejemplo menos de 10% p/p, tal como 6%, 5%, 4%, 3%, 2% o 1.5% p/p de los contenidos iniciales del polipéptido del Factor VII se convierte en una forma oxidada y menos de 5% p/p, tal como 4%, 3%, 2.5%, 2%, 1.5% o 1% p/p se convierte en una forma dimérica o polimérica de orden superior con el almacenamiento a 30 °C durante al menos 8 meses en la oscuridad. Como se mencionó, la estabilidad mejorada se refiere a la combinación apropiada de excipientes particulares. De acuerdo con la presente invención, los agentes estabilizadores se pueden seleccionar del grupo de sacáridos, polioles y antioxidantes. En las modalidades adecuadas, los sacáridos de interés son di- y tri-sacáridos y polisacáridos de tal manera que los sacáridos se pueden seleccionar del grupo que consiste de sacarosa, dextrosa, lactosa, maltosa, trehalosa, ciclodextrinas, maltodextrinas y dextranos. Además, en algunas modalidades, el poliol se selecciona del grupo que consiste de manitol, sorbitol y xilitol. En modalidades aún interesantes, el antioxidante se selecciona del grupo que consiste de homocisteína, cisteína, cistationina, metionina, glutationa y péptidos que contienen cualquiera de homocisteína, cisteína, cistationina, metionina y glutationa. Se entiende que los excipientes de sacáridos y poliol, respectivamente, también pueden ser una mezcla de al menos dos de estos agentes listados. En una serie de modalidades de la invención, el excipiente de sacárido utilizado es una combinación de al menos dos di-, tri- y/o polisacáridos tales como, por ejemplo, sacarosa en combinación con ciclodextrina, trehalosa en combinación con ciclodextrina, sacarosa en combinación con dextrano o sacarosa en combinación con lactosa. En una serie de modalidades de la invención, el excipiente de poliol utilizado es una combinación de al menos dos polioles tales como, por ejemplo, manitol en combinación con sorbitol, manitol en combinación con xilitol o sorbito en combinación con xilitol. En una serie de modalidades de la invención, el excipiente de antioxidante utilizado es una combinación de al menos dos antioxidantes tales como, por ejemplo, metionina en combinación con uno o más de homocisteína, cisteína, cistationina, glutationa y péptidos que contienen cualquiera de homocisteína, cisteína, cistationina, metionina y glutationa. En las modalidades particulares de interés, el antioxidante se selecciona del grupo que consiste de homocisteína, cisteína, cistationina, metionina, glutationa y péptidos que contienen cualquiera de homocisteína, cisteína, cistationa, metionina y glutationa. En una modalidad preferida, el antioxidante es metionina. En las modalidades interesantes, adicionales de la invención, los polioles deben estar presentes en una cantidad que varía de aproximadamente 5% p/p a aproximadamente 90% p/p. Preferiblemente, la cantidad del poliol debe estar presente en un rango de aproximadamente 18% p/p a aproximadamente 88% p/p, tal como de aproximadamente 18% p/p a aproximadamente 83% p/p, 25% a 80%, 30% a 65%, 30% a 80%, 40% a 80%, 50% a 80%, 30% a 75%, 40% a 75%, 50% a 75% o de aproximadamente 50% a aproximadamente 70% p/p. El poliol debe estar presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.5 a 75 mg/ml, tal como de aproximadamente 2 a 60 mg/ml, 5 mg/ml a 55 mg/ml, 8 a 45 mg/ml, 10 a 40 mg/ml, 10 a 30 mg/ml o de aproximadamente 2 a 45 mg/ml, 5 mg/ml a 45 mg/ml, 5 a 35 mg/ml, 5 a 25 mg/ml, 5 a 20 mg/ml, 20 a 40 mg/ml o tal como de aproximadamente 20 a 30 mg/ml. Además, en las modalidades interesantes de la misma, así como también en algunas otras modalidades interesantes de la invención, el sacárido debe estar presente en la composición en una cantidad que varía de aproximadamente 0 a aproximadamente 85% p/p- En las modalidades interesantes, adicionales de la misma, la cantidad varía de aproximadamente 3% p/p a aproximadamente 80% p/p, tal como de aproximadamente 7% p/p a aproximadamente 75% p/p, 10% a 70%, 10% a 50%, 20% a 50%, 10% a 40% o de aproximadamente 10% p/p a aproximadamente 35% p/p. El sacárido debe estar en una cantidad que varía de aproximadamente 0.5 a 75 mg/ml, tal como de aproximadamente 2 a 60 mg/ml, de aproximadamente 5 mg/ml a 55 mg/ml, de aproximadamente 8 a 45 mg/ml, de aproximadamente 10 a 40 mg/ml, de aproximadamente 10 a 30 mg/ml o de aproximadamente 2 a 45 mg/ml, de aproximadamente 5 mg/ml a 45 mg/ml, de aproximadamente 5 a 35 mg/ml, de aproximadamente 5 a 25 mg/ml, tal como de aproximadamente 5 a 20 mg/ml. El antioxidante se debe proporcionar en una cantidad que varía de aproximadamente 0.05 a 10 mg/ml, preferiblemente de aproximadamente 0.1 a 5 mg/ml, más preferiblemente de aproximadamente 0.1 mg/ml a 2.5 mg/ml, aún más preferiblemente de aproximadamente 0.1 a 2 mg/ml, mucho más preferiblemente de aproximadamente 0.1 a 1 mg/ml. La relación entre el poliol y el sacárido necesita ajustarse apropiadamente. En las modalidades adecuadas de la invención, el poliol está en una relación en peso con relación al sacárido que varía de aproximadamente 100:1 a 1:50. En las modalidades aún más adecuadas de la misma, la relación en peso es de aproximadamente 50:1 a 1:10, más preferiblemente de aproximadamente 20:1 a 1:50. En otras modalidades adecuadas, la relación en peso se refiere a rangos de aproximadamente 10:1 a 1:2 y de aproximadamente 6:1 a 1:2. Las modalidades adecuadas se refieren a aquellas en donde el alcohol de azúcar está en una relación en peso con relación al sacárido que varía de aproximadamente 4:1 a 1:1, tal como de aproximadamente 4:1 a 3:2 o de aproximadamente 1:1 a 3:2. En algunas modalidades de la invención, el poliol es manitol y en modalidades aún adicionales, el sacárido es sacarosa. Además, en las modalidades aún adicionales, el antioxidante es metionina. En modalidades aún preferidas de la invención, la composición comprende además otros excipientes farmacéuticos que actúan como el agente de carga. Es decir que los agentes de carga diferentes de manitol son incluidos en las composiciones. En particular, los agentes de carga son incluidos en composiciones preparadas por medio de la deshidratación por congelamiento. Los contenidos iniciales del polipéptido del factor VII en la composición son preferiblemente de aproximadamente 0.6 mg/mL a aproximadamente 10.0 mg/mL, tal como de aproximadamente 0.6 mg/mL a aproximadamente 8 mg/mL, de aproximadamente 0.6 mg/mL a aproximadamente 6 mg/mL, de aproximadamente 0.6 mg/mL a aproximadamente 5 mg/mL, de aproximadamente 0. 6 mg/mL a aproximadamente 4 mg/mL, de aproximadamente 0.6 mg/mL a aproximadamente 3 mg/mL, de aproximadamente 1.0 mg/mL a aproximadamente 5 mg/mL, de aproximadamente 1.0 mg/mL a aproximadamente 4 mg/mL o de aproximadamente 1.0 mg/mL a aproximadamente 3 mg/mL, por ejemplo, aproximadamente 1.0 mg/mL, aproximadamente 2.0 mg/mL, aproximadamente 3.0 mg/mL, aproximadamente 4.0 mg/mL o aproximadamente 5.0 mg/mL. En una modalidad, la composición contenida en la primera forma unitaria del equipo comprende: el polipéptido del Factor VII, manitol, sacarosa y polisorbato, preferiblemente polisorbato 20 u 80, tiene un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3% y tiene un pH en el rango de 5.0 a 7.0 cuando la composición se disuelve en agua. En una modalidad, la composición comprende además uno o más componentes seleccionados de la lista de: CaC12, NaCl y Glicilglicina. En una modalidad, el polipéptido del Factor VII es el Factor Vlla humano. En una modalidad, la composición contenida .en la primera forma unitaria del equipo comprende: el polipéptido del Factor VII, manitol, sacarosa, metionina y polisorbato, preferiblemente polisorbato 20 u 80, tiene un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3% y tiene un pH en el rango de 5.0 a 7.0 cuando la composición se disuelve en agua. En una modalidad, la composición comprende además uno o más componentes seleccionados de la lista de: CaC12, NaCl y Glicilglicina. En una modalidad, el polipéptido del Factor VII es el Factor Vlla humano. En otra modalidad, la composición contenida en la primera forma unitaria del equipo comprende: el polipéptido del Factor VII, manitol, sacarosa, histidina y polisorbato, preferiblemente polisorbato 20 u 80, tiene un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3% y tiene un pH en el rango de 5.0 a 7.0 cuando la composición se disuelve en agua. En una modalidad, la composición comprende además uno o más componentes seleccionados de la lista de: CaCl2, NaCl y Glicilglicina. En una modalidad, el polipéptido del Factor VII es el Factor Vlla humano. En una modalidad, la composición contenida en la primera forma unitaria del equipo comprende: el polipéptido del Factor VII, manitol, sacarosa, metionina, histidina y polisorbato, preferiblemente polisorbato 20 u 80, tiene un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3% y tiene un pH en el rango de 5.0 a 7.0 cuando la composición se disuelve en agua. En una modalidad, la composición comprende además uno o más componentes seleccionados de la lista de: CaC12, NaCl y Glicilglicina. En una modalidad, el polipéptido del Factor VII es el Factor Vlla humano. En otra modalidad, la composición contenida en la primera forma unitaria del equipo comprende: el polipéptido del Factor VII, manitol, sacarosa y Poloxamer 18d1111. tiene un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3% y tiene un pH en el rango de 5.0 a 7.0 cuando la composición se disuelve en agua. En una modalidad, la composición comprende además uno o más componentes seleccionados de la lista de: CaC12, NaCl y Glicilglicina. En una modalidad, el polipéptido del Factor VII es el Factor Vlla humano. En otra modalidad, la composición contenida en la primera forma unitaria del equipo comprende: el polipéptido del Factor VII, manitol, sacarosa, metionina y Poloxamer 18d101, tiene un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3% y tiene un pH en el rango de 5.0 a 7.0 cuando la composición se disuelve en agua. En una modalidad, la composición comprende además uno o más componentes seleccionados de la lista de: CaC12, NaCl y Glicilglicina. En una modalidad, el polipéptido del Factor VII es el Factor Vlla humano. En otra modalidad, la composición contenida en la primera forma unitaria del equipo comprende: el polipéptido del Factor VII, manitol, sacarosa, histidina y Poloxamer 188^, tiene un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3% y tiene un pH en el rango de 5.0 a 7.0 cuando la composición se disuelve en agua. En una modalidad, la composición comprende además uno o más componentes seleccionados de la lista de: CaC12, NaCl y Glicilglicina. En una modalidad, el polipéptido del Factor VII es el Factor Vlla humano. En otra modalidad, la composición contenida en la primera forma unitaria del equipo comprende: el polipéptido del Factor VII, manitol, sacarosa, histidina, metionina y Poloxamer 188^, tiene un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3% y tiene un pH en el rango de 5.0 a 7.0 cuando la composición se disuelve en agua. En una modalidad, la composición comprende además uno o más componentes seleccionados de la lista de: CaC12, NaCl y Glicilglicina. En una modalidad, el polipéptido del Factor VII es el Factor Vlla humano. En una modalidad, el vehículo de administración contenido en la segunda forma unitaria del equipo comprende: agua e histidina. En una modalidad adicional el vehículo comprende además uno o más componentes seleccionados de la lista de: CaC12, NaCl y Glicilglicina. En una modalidad adicional de la misma, el vehículo comprende uno o más componentes seleccionados de la lista de. CaC12 en una concentración de aproximadamente 5-15 mM, NaCl en una concentración de aproximadamente 30 a 60 mM tal como, por ejemplo, de aproximadamente 40 mM o aproximadamente 50 mM. En una modalidad preferida, el método para preparar un polipéptido del Factor VII estable comprende la deshidratación por congelamiento. La deshidratación por congelamiento se refiere a un proceso, en donde la solución que comprende el polipéptido del Factor VII es vertida en frasquitos de liofilización o similares. El polipéptido del Factor VII puede sujetarse opcionalmente a una filtración de manera estéril antes del inicio de la deshidratación por congelamiento. El enfriamiento se aplica a los estantes del deshidratador por congelamiento a fin de congelar los frasquitos y la solución debajo de las temperaturas de producto críticas. El agua se retira por medio de la introducción de vacío y la condensación de vapor de agua sobre el condensador de hielo del deshidratador por congelamiento. Cuando el producto está seco, usualmente menos de 3% de contenido de humedad residual (por ejemplo, medido por medio de la trituración coulométricarlde Karl Fischer como se describiera anteriormente) , los frasquitos son cerrados y tapados. La manufactura se finaliza y la composición ahora está en la forma de una torta liofilizada. Las composiciones reconstituidas se proponen para la administración parenteral para el tratamiento profiláctico y/o terapéutico. Preferiblemente, las composiciones farmacéuticas son administradas por la ruta parenteral, es decir, por la ruta intravenosa, subcutánea o intramuscular o se administran a manera de una infusión continua o pulsátil. Por lo tanto, un aspecto aún adicional de la invención se refiere al uso de la composición estabilizada, sólida para la preparación de un medicamento para tratar un síndrome sensible al factor de coagulación. En una modalidad, la invención se refiere al uso del polipéptido del Factor VII para la preparación de un medicamento para tratar un síndrome sensible al Factor VII. En diferentes modalidades, el síndrome sensible al Factor VII es hemofilia A, hemofilia B, deficiencia del Factor XI, deficiencia del Factor VII, trombocitopenia, enfermedad de von Willebrand, presencia de un inhibidor del Factor de coagulación, cirugía o trauma. Adicionalmente, el síndrome sensible al Factor VII puede estar asociado con la terapia anticoagulante. Como se estableció, las composiciones de la invención están en forma sólida. Por consiguiente, en una modalidad adecuada, el medicamento debe ser adecuado para disolverse, lo cual permite la administración parenteral del medicamento. De esta manera, cuando se administran las composiciones a un paciente, comprende el paso que consiste en disolver la composición en un líquido adecuado antes del paso de administración.

Abreviaciones utilizadas en este documento: FVII: Factor de coagulación VII en su forma de cadena individual FVIIa: Factor de coagulación VII en su forma de dos cadenas activada, escindida rFVII (rFVIIa) : Factor recombinante VII (Factor recombinante Vlla) Modalidades: En una serie de modalidades de la invención, la primera forma unitaria del equipo comprende los excipientes, y cantidades de los mismos, y tiene el pH mostrado en la lista de formulaciones 1 a 48: (Tabla 1) (Tabla 1, continuación) (Tabla 1, continuación) (Tabla 1, continuación) (-Tabla 1, continuación) En otra serie de modalidades, la primera forma unitaria del equipo comprende los excipientes, y cantidades de los mismos, y tiene el pH mostrado en la lista de formulaciones 100 a 124: (Tabla 2) (Tabla 2, continuación) En una serie de modalidades, la concentración del polipéptido del FVII en cualquiera de las composiciones 1 a 48 y 100 a 124 es de aproximadamente 0.6 mg/mL a aproximadamente 10.0 mg/mL, tal como de aproximadamente 0.6 mg/mL a aproximadamente 8 mg/mL, de aproximadamente 0.6 mg/mL a aproximadamente 5 mg/mL, de aproximadamente 0.6 mg/mL a aproximadamente 3 mg/mL, de aproximadamente 1.0 mg/mL a aproximadamente 5 mg/mL o de aproximadamente 1.0 mg/mL a aproximadamente 3 mg/mL.

En otra serie de modalidades, la concentración del polipéptido del FVII en cualquiera de las composiciones 1 a 48 y 100 a 124 se selecciona de la lista de: aproximadamente 0.6 mg/mL, aproximadamente 0.7 mg/mL, aproximadamente 0.8 mg/mL, aproximadamente 0.9 mg/mL, aproximadamente 1.0 mg/mL, aproximadamente 1.1 mg/mL, aproximadamente 1.2 mg/mL, aproximadamente 1.3 mg/mL, aproximadamente 1.4 mg/mL, aproximadamente 1.5 mg/mL, aproximadamente 1.6 mg/mL, aproximadamente 1.7 mg/mL, aproximadamente 1.8 mg/mL, aproximadamente 1.9 mg/mL, aproximadamente 2.0 mg/mL, aproximadamente 2.1 mg/mL, aproximadamente 2.2 mg/mL, aproximadamente 2.3 mg/mL, aproximadamente 2.4 mg/mL, aproximadamente 2.5 mg/mL, aproximadamente 2.6 mg/mL, aproximadamente 2.7 mg/mL, aproximadamente 2.8 mg/mL, aproximadamente 2.9 mg/mL, aproximadamente 3.0 mg/mL, aproximadamente 3.1 mg/mL, aproximadamente 3.2 mg/mL, aproximadamente 3.3 mg/mL, aproximadamente 3.4 mg/mL, aproximadamente 3.5 mg/mL, aproximadamente 3.6 mg/mL, aproximadamente 3.7 mg/mL, aproximadamente 3.8 mg/mL, aproximadamente 3.9 mg/mL y aproximadamente 4.0 mg/mL. En una serie de modalidades, la concentración de polisorbato en las formulaciones 1 a 48 y 100 a 124 es de aproximadamente 0.05 a 0.08 mg/mL, tal como de aproximadamente 0.06 a 0.08 mg/mL o aproximadamente 0.07 mg/mL. En otra serie de modalidades, las primeras formas unitarias comprenden una composición como se describe en cualquiera de las composiciones 1 a 48 y 100 a 124 y la segunda forma unitaria comprende L-histidina en una cantidad de aproximadamente 0.5 mg/mL a 3 mg/mL, tal como de aproximadamente 1.0 a aproximadamente 2.0 mg/mL o aproximadamente 1.55 mg/mL. En todavía otra serie de modalidades, las primeras formas unitarias comprenden una composición como se describe en cualquiera de las composiciones 1 a 48 y 100 a 124 y la segunda forma unitaria comprende NaCl de aproximadamente 30 a aproximadamente 60 mM, tal como NaCl de aproximadamente 40 mM, aproximadamente 45 mM o aproximadamente 50 mM. En todavía otra serie de modalidades, las primeras formas unitarias comprenden una composición como se describe en cualquiera de las composiciones 1 a 48 y 100 a 124 y la segunda forma unitaria comprende NaCl de aproximadamente 30 a aproximadamente 60 mM, tal como NaCl de aproximadamente 40 mM, aproximadamente 45 mM o aproximadamente 50 mM; y L-histidina en una- cantidad de aproximadamente 0.5 mg/mL a 3 mg/mL, tal como de aproximadamente 1.0 a aproximadamente 2.0 mg/mL o aproximadamente 1.55 g/ML. Otro aspecto de la invención es la provisión de composiciones novedosas que comprenden un polipéptido del Factor VII y al menos un agente estabilizador seleccionado del grupo que consiste de a) una combinación de un antioxidante y manitol; b) una combinación de metionina y un poliol; c) una combinación de un sacárido y manitol; d) una combinación de sacarosa y un poliol; e) metionina; y un surfactante de polisorbato en una cantidad de aproximadamente 0.06 a 0.08 mg/mL; la composición que tiene un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3%; En una modalidad, la combinación de un antioxidante y manitol (a) comprende además un sacárido. En otra modalidad, la combinación de metionina y un poliol (b) comprende además un sacárido. En otra modalidad, la combinación de un sacárido y manitol (c) comprende además un antioxidante. En otra modalidad, la combinación de sacarosa y un poliol (d) comprende además un antioxidante. En una modalidad interesante, el antioxidante se selecciona del grupo que consiste de homocisteína, cisteína, cistateonina, metionina, glutationa y péptidos que contienen cualquiera de homocisteína, cisteína, cistationina, metionina y glutationa o mezclas de los mismos; preferiblemente metionina o mezclas que contienen metionina. En otra modalidad interesante, el sacárido se selecciona del grupo que consiste de sacarosa, dextrosa, lactosa, maltosa, trehalosa, ciclodextrinas, maltodextrinas y dextranos o mezclas de los mismos; preferiblemente sacarosa o mezclas que contienen sacarosa. En todavía otra modalidad interesante, el poliol se selecciona del grupo que consiste de manitol, sorbitol y xilitol o mezclas de los mismos; preferiblemente manitol o mezclas que contienen manitol. Las composiciones pueden comprender además un agente adecuado para mantener el pH de la composición en el rango de 3 a 9 cuando se disuelve en un solvente acuoso. Los ejemplos no limitantes de estos agentes así como también de los rangos preferidos de pH han sido descritos anteriormente. La composición puede comprender además un modificador de la tonicidad. Los ejemplos no limitantes de estos modificadores de la tonicidad han sido descritos anteriormente . El surfactante de polisorbato se selecciona del grupo que consiste de polisorbato 20 u 80, preferiblemente polisorbato 80. En una modalidad de la invención, las composiciones novedosas se seleccionan de la lista de: (Tabla 3) En una modalidad de la misma, las composiciones se seleccionan de la lista.de: (Tabla 4) En una modalidad de la misma, las composiciones se seleccionan de la lista de: (Tabla 5) En una serie de modalidades, la concentración de polisorbato en las formulaciones I a XVI es de aproximadamente 0.05 a 0.08 mg/mL, tal como de aproximadamente 0.06 a 0.08 mg/mL o aproximadamente 0.07 mg/mL. En una serie de modalidades, el polisorbato en las formulaciones I a XVI es polisorbato 20, por ejemplo Tween 20MR. En una serie de modalidades, el polipéptido del FVII en las formulaciones I a XVI es polisorbato 80, por ejemplo, Tween 8O1®. En aún otra modalidad, las composiciones se seleccionan de la lista de: (Tabla 6, continuación) (Tabla 6, continuación) En una serie de modalidades, las formulaciones I a XXVIII comprenden además uno o más componentes seleccionados de la lista de: Ca2+, preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 5 a aproximadamente 15 M, tal como aproximadamente 10 mM y preferiblemente como CaC12 x 2H20; NaCl, preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 50 mM o aproximadamente 40 mM, por ejemplo 39 mM; Histidina, preferiblemente L-Histidina, preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 10 mM; y Glicilglicina, por ejemplo, en una cantidad de aproximadamente 10 mM. En otra serie de modalidades, las composiciones contienen los excipientes, y las cantidades de los mismos, como se describiera en cualquiera de las formulaciones I a XXVIII pero tiene un pH de 5.5 o 5.6 o 5.7 o 5.8 o 5.9 o 6.1 o 6.2 o 6.3 o 6.4 o 6.5. En una serie de modalidades, la concentración del polipéptido del FVII en las formulaciones I a XVI es aproximadamente 1.0 mg/mL.

En una serie de modalidades, el polipéptido del FVII en las formulaciones I a XXVIII es el factor Vlla humano, natural. En una serie de modalidades, el polipéptido del FVII en las formulaciones I a XXVIII es una variante del FVII. En diferentes series de modalidades, el polipéptido del FVII en las formulaciones I a XXVIII se selecciona de la lista de: L305V-FVII, L305V/M306D/D309S-FVII, L305I-FVII, L305T-FVII, F374P-FVII, V158T/M298Q-FVII, V158D/E296V/M298Q-FVII, K337A-FVII, M298Q-FVII, V158D/M298Q-FVII, L305V/K337A-FVU, V158D/E296V/M298Q/L305V-FVII, V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII, V158D/E296V/M298Q/L305V/K337A-FVII, K157A-FVII, E296V-FVII, E296V/M298Q-FVII, V158D/E296V-FVII, V158D/M298K-FVII y S336G-FVII; En diferentes series de modalidades, el polipéptido del Factor VII en cualquiera de las composiciones 1 a 48 y 100 a 124 se selecciona de la lista de: de aproximadamente 0.6 mg/mL a aproximadamente 10.0 mg/mL, tal como de aproximadamente 0.6 mg/mL a aproximadamente 8 mg/mL, de aproximadamente 0.6 mg/mL a aproximadamente 6 mg/mL, de aproximadamente 0.6 mg/mL a aproximadamente 5 mg/mL, de aproximadamente 0.6 mg/mL a aproximadamente 4 mg/mL, de aproximadamente 0.6 mg/mL a aproximadamente 3 mg/mL, de aproximadamente 1.0 mg/mL a aproximadamente 5 mg/mL, de aproximadamente 1.0 mg/mL a aproximadamente 4 mg/mL, de aproximadamente 1.0 mg/mL a aproximadamente 3 mg/mL, apro imadamente 0.6 mg/mL, aproximadamente 0.7 mg/mL, aproximadamente 0.8 mg/mL, aproximadamente 0.9 mg/mL, aproximadamente 1.0 mg/mL, aproximadamente 1.1 mg/mL, aproximadamente 1.2 mg/mL, aproximadamente 1.3 mg/mL, aproximadamente 1.4 mg/mL, aproximadamente 1.5 mg/mL, aproximadamente 1.6 mg/mL, aproximadamente 1.7 mg/mL, aproximadamente 1.8 mg/mL, aproximadamente 1.9 mg/mL, aproximadamente 2.0 mg/mL, aproximadamente 2.1 mg/mL, aproximadamente 2.2 mg/mL, aproximadamente 2.3 mg/mL, aproximadamente 2.4 mg/mL, aproximadamente 2.5 mg/mL, aproximadamente 2.6 mg/mL, aproximadamente 2.7 mg/mL, aproximadamente 2.8 mg/mL, aproximadamente 2.9 mg/mL, aproximadamente 3.0 - mg/mL, aproximadamente 3.1 mg/mL, aproximadamente 3.2 mg/mL, aproximadamente 3.3 mg/mL, aproximadamente 3.4 mg/mL, aproximadamente 3.5 mg/mL, aproximadamente 3.6 mg/mL, aproximadamente 3.7 mg/mL, aproximadamente 3.8 mg/mL, aproximadamente 3.9 mg/mL y aproximadamente 4 .0 mg/mL. En otro aspecto, la invención proporciona un . método para preparar las composiciones novedosas definidas en las Tablas 3 a 6, que comprende los pasos que consisten en : i) proporcionar un polipéptido del Factor VII en una solución que coinprende al menos un agente estabilizador seleccionado del grupo que consiste de a) una combinación de un antioxidante y manitol; b) una combinación de metionina y un poliol; c) una combinación de un sacárido y manitol; d) una combinación de sacarosa y un poliol; y e) metionina; ii) procesar la solución para obtener una composición sólida con un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3% p/p- En una modalidad, el poliol está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.5 a aproximadamente 75 mg/ml, preferiblemente de aproximadamente 2 a 45 mg/ml, tal como de aproximadamente 5 mg/ml a 45 mg/ml, de aproximadamente 5 a 35 mg/ml, de aproximadamente 5 a 25 mg/ml, de 5 a 20 mg/ml, de 20 a 40 mg/ml o de aproximadamente 20 a aproximadamente 30 mg/ml. En una modalidad, el sacárido está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.5 a 75 mg/ml, preferiblemente de aproximadamente 2 a 45 mg/ml, tal como de aproximadamente 5 mg/ml a 45 mg/ml, de aproximadamente 5 a 35 mg/ml, de aproximadamente 5 a 25 mg/ml o de aproximadamente 5 a 20 mg/ml. En una modalidad, el antioxidante está en una cantidad que varía de aproximadamente 0.05 a 10 mg/ml, preferiblemente de aproximadamente 0.1 a 5 mg/ml, más preferiblemente de aproximadamente 0.1 mg/ml a 2.5 mg/ml, aún más preferiblemente de aproximadamente 0.1 a 2 mg/ml, mucho más preferiblemente de aproximadamente 0.1 a 1 mg/ml. En una modalidad, el sacárido es sacarosa. En una modalidad, el antioxidante es metionina. En una modalidad, el poliol es manitol. En una modalidad, el procesamiento comprende la deshidratación por congelamiento. Las composiciones novedosas de la presente invención son reconstituidas utilizando un diluyente o portador aceptable, preferiblemente estéril, preferiblemente un portador acuoso. Los ejemplos no limitantes de portadores acuosos incluyen Agua para Inyección (WFI) así como también los solventes descritos en la presente especificación (anteriormente) que contienen al menos uno de los componentes seleccionados de la lista de: (i) un agente adecuado para mantener el pH de la composición en el rango de 3 a 9 cuando se disuelve en un solvente acuoso en una cantidad de aproximadamente 0.1 mM a 100 mM; y (ii) un agente modificador de la tonicidad en una cantidad suficiente para hacer esencialmente isotónica la solución reconstituida. En una modalidad, el portador es WFI; en otra modalidad, el solvente comprende histidina.

Modalidades de la invención Modalidad 1: un equipo que contiene un medicamento farmacéutico, el equipo que comprende a) una composición que comprende un polipéptido y al menos un agente estabilizador, en donde la composición tiene un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3%, en una primera forma unitaria y un medio de envase para contener la primera forma unitaria; y b) en una segunda forma unitaria, un vehículo de administración que comprende un solvente para la reconstitución (solución) de la composición y al menos uno de los componentes seleccionados de la lista de: (iii) un agente adecuado para mantener el pH de la composición en el rango de 3 a 9 cuando se disuelve en un solvente acuoso, en donde el agente está presente en una cantidad de aproximadamente 0.1 mM a 100 mM, (iv) un agente modificador de la tonicidad en una cantidad suficiente para hacer esencialmente isotónica la solución reconstituida que resulta de la disolución de la composición de la primera forma unitaria en el vehículo de administración de la segunda forma unitaria; y un medio de envase para contener la segunda forma unitaria. Modalidad 2 : ün equipo de acuerdo con la modalidad 1, en donde la primera forma unitaria comprende al menos un componente seleccionado del grupo de: surfactantes, antioxidantes, sacáridos y polioles.

Modalidad 3: Un equipo de acuerdo con la modalidad 2 o la modalidad 3, en donde la segunda forma unitaria comprende además al menos un componente seleccionado del grupo de: surfactantes, antioxidantes, sacáridos y polioles. Modalidad 4 : Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades 1 a 3, en donde el polipéptido es un factor de coagulación de la sangre, tal como el Factor VIII, Factor IX, Factor X, Factor II, Factor V, Factor VII. Modalidad 5 : Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades 1 a 3, en donde el polipéptido es un polipéptido dependiente de la vitamina K, tal como el Factor VII, Factor IX, Factor X, Factor II, proteína C, proteína S, protrombina. Modalidad 6: Un equipo de acuerdo con las modalidades 4 o 5, en donde el polipéptido del factor de coagulación se selecciona de la lista de: Factor VIII humano, Factor Vlla humano, un polipéptido relacionado con el Factor VII, Factor IX humano, Factor X humano, proteína C humana activada. Modalidad 7: Un equipo de acuerdo con la modalidad 6, en donde el polipéptido relacionado con el FVII es una variante del Factor VII seleccionada de la lista de: L305V-FVII, L305V/M306D/D309S-FVII, L305I-FVII, L305T-FVII, F374P-FVII, V158T/M298Q-FVII, V158D/E296V/M298Q-FVII, K337A-FVII, M298Q-FVII, V158D/M298Q-FVII, L305V/K337A-FVII, V158D/E296V/M298Q/L305V-FVII, V158D/E296V/M298Q/K337A-FVII, V158D/E296V/M298Q/L305V/K337A-FVII, K157A-FVII, E296V-FVII, E296V/M298Q-FVII, V158D/E296V-FVII, V158D/M298K-FVII y S336G-FVII. Modalidad 8 : Un equipo de acuerdo con la modalidad 6, en donde el polipéptido relacionado con el FVII es una variante del factor VII en donde la relación entre la actividad de la variante del Factor VII y el factor Vlla humano (Factor VII natural) es al menos 1.25 cuando se somete a prueba en uno o más del "Ensayo de Proteólisis In Vitro" y el "Ensayo de Hidrólisis In Vitro" como se describe en la presente especificación. Modalidad 9: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades 1 a 8, en donde el "agente adecuado para mantener el pH de la composición en el rango de 3 a 9 cuando se disuelve en un solvente acuoso" está presente en una cantidad de aproximadamente 0.1 mM a aproximadamente 50 mM; tal como de aproximadamente 0.1 mM a aproximadamente 40 mM; de aproximadamente 0.1 mM a aproximadamente 35 M; de aproximadamente 0.1 mM a aproximadamente 30 mM; de aproximadamente 0.5 M a aproximadamente 25 mM: de aproximadamente 1 mM a aproximadamente 20 mM; de aproximadamente 1 mM a aproximadamente 15 mM; de aproximadamente 5 mM a aproximadamente 20 mM o de aproximadamente 5 mM a aproximadamente 15 mM.

Modalidad 10: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades 1 a 9, en donde el "agente adecuado para mantener el pH de la composición en el rango de 3 a 9 cuando se disuelve en un solvente acuoso" se selecciona de la lista de: ácido cítrico, ácido acético, histidina, ácido málico, ácido fosfórico, ácido tartárico, ácido succínico, MES, HEPES, imidazol, TRIS, ácido láctico, ácido glutárico, PIPES y glicilglicina o una mezcla de al menos dos de estos agentes listados, en donde la mezcla es capaz de proporcionar un valor de pH en el rango especificado. Modalidad 11: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades 1 a 10, en donde la segunda forma unitaria comprende un agente adecuado para mantener el pH de la composición en el rango de 4 a 7 cuando se disuelve en un solvente acuoso; preferiblemente en el rango de 4.5 a 7.5, tal como de 5 a 7 o 5.5 a ß.5. Modalidad 12 : Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades 1 a 11, en donde la segunda forma unitaria comprende histidina. Modalidad 13: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades 1 a 12, en donde el "agente modificador de la tonicidad" se selecciona de la lista de: acetato de sodio, lactato de sodio, cloruro de sodio, cloruro de potasio, cloruro de calcio, manitol, glicerol, propilenglicol o una mezcla de al menos dos de estos agentes modificadores, listados; seleccionados preferiblemente de la lista de: cloruro de sodio, manitol, glicerol, ' propilenglicol, cloruro de calcio o mezclas de los mismos. Modalidad 14: Un equipo de acuerdo con la modalidad 13, en donde el agente modificador de -la tonicidad comprende Ca2+ o Mg2+. Modalidad 15: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades 1 a 14, en donde una o ambas de la primera forma unitaria y la segunda forma unitaria contienen además un conservador. Modalidad 16: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores; en donde la primera forma unitaria comprende al menos un agente estabilizador seleccionado del grupo que consiste de: a) una combinación de un antioxidante y manitol; b) una combinación de metionina y un poliol; c) una combinación de un sacárido y manitol; d) una combinación de sacarosa y un poliol; e) metionina; y f) un surfactante; la composición que tiene un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3%. Modalidad 17 : Un equipo de acuerdo con la modalidad 16, en donde la combinación de un antioxidante y manitol comprende además un sacárido.

Modalidad 18: Un equipo de acuerdo con la modalidad 16, en donde la combinación de metionina y un poliol comprende además un sacárido . Modalidad 19: Un equipo de acuerdo con la modalidad 16, en donde la combinación de un sacárido y manitol comprende además un antioxidante. Modalidad 20: Un equipo de acuerdo con la modalidad 16, en donde la combinación de sacarosa y poliol comprende además un antioxidante. Modalidad 21: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades 16 o 17, en donde la combinación de un antioxidante y manitol (a) comprende además un surfactante. Modalidad 22: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades 16 o 18, en donde la combinación de metionina y un poliol (b) comprende además un surfactante. Modalidad 23: ün equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades 16 o 19, caracterizado porque la combinación de un sacárido y manitol (c) comprende además un surfactante. Modalidad 24: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades 16 o 20, en donde la combinación de sacarosa y un poliol (d) comprende además un surfactante. Modalidad 25: Un equipo de acuerdo con la modalidad 16, en donde el agente estabilizador es una combinación de un surfactante y metionina (e) .

Modalidad 26: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores, en donde el antioxidante se selecciona del grupo que consiste de homocisteína, cisteína, cistationina, metionina, glutationa y péptidos que contienen cualquiera de homocisteína, cisteína, cistationina, metionina y glutationa. Modalidad 27: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores, en donde el sacárido se selecciona del grupo que consiste de sacarosa, dextrosa, lactosa, maltosa, trehalosa, ciclodextrinas, maltodextrinas y dextranos . Modalidad 28: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores, en donde el poliol se selecciona del grupo que consiste de manitol, sorbitol y xilitol. Modalidad 29: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores, en donde la composición de la primera forma unitaria es estable de tal manera que no más de aproximadamente 5% p/p del contenido inicial del polipéptido del Factor VII se convierte en agregados con el almacenamiento de la composición a 30°C durante 8 meses, preferiblemente no más de aproximadamente 4.0% p/p, 3.0% p/p, 2.5% p/p, 2.0% p/p, 1.5% p/p o no más de aproximadamente 1.0% p/p. Modalidad 30: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores, en donde la composición de la primera forma unitaria es estable de tal manera que no más de aproximadamente 6% p/p del contenido inicial del polipéptido del Factor VII se convierte a formas oxidadas con el almacenamiento de la composición a 30°C durante 8 meses, preferiblemente no más de aproximadamente 5% p/p, 4.0% p/p, 3.0% p/p, 2.5% p/p, 2.0% p/p o no más de aproximadamente 1.5% p/p. Modalidad 31: Un equipo de acuerdo con Cualquiera de las modalidades anteriores, en donde el poliol está en una cantidad que varía de aproximadamente 5% p/p a 90% p/p, preferiblemente de aproximadamente 18% p/p a 88% p/p, 18% a 83%, 25% a 80%, 40% a 80%, 50% a 80% o de aproximadamente 50% p/p a 70% p/p. Modalidad 32 : Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores, en donde el sacárido está en una cantidad que varía de aproximadamente 0 a 85% p/p, preferiblemente de aproximadamente 3% p/p a 80% p/p, 7% a 75%, 10% a 70%, 10% a 50%, 10% a 40% o de aproximadamente 10% p/p a 35% p/p. Modalidad 33: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores, en donde el poliol está en una relación en peso con relación al sacárido que varía de aproximadamente 100:1 a 1:50, preferiblemente de aproximadamente 50:1 a 1:10; 20:1 a 1:5; 10:1 a 1:2; 6:1 a 1:2; 4:1 a 1:1; o de aproximadamente 4:1 a 3:2.

Modalidad 34: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores, en donde la primera forma unitaria comprende además un modificador de la tonicidad. Modalidad 35: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores, en donde el surfactante se selecciona del grupo que consiste de polisorbatos, tal como polisorbato 20 u 80; éteres alquílicos de polioxietileno, tal como Bruj 35m; o PoloxamerMR, tal como Poloxamer 188 o 407^; y otros polímeros de bloque de etileno/propileno o polietilenglicol (PEG) tal como PEG8000. Modalidad 36: El equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores, en donde el sacárido es sacarosa. Modalidad 37 : El equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores, en donde el poliol es manitol. Modalidad 38: El equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores, en donde el polipéptido del Factor VII está presente en una concentración de aproximadamente 0.6 mg/ml a aproximadamente 10.0 mg/ml, tal como de aproximadamente 0.6 mg/ml a aproximadamente 6 mg/ml, de aproximadamente 0.6 mg/ml a aproximadamente 5 mg/ml o de aproximadamente 0.6 mg/ml a aproximadamente 4 mg/ml . Modalidad 39: El equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores, en donde el contenido de humedad no es mayor que aproximadamente 2.5% p/p, preferiblemente no mayor que aproximadamente 2% p/p, mucho más preferiblemente no mayor que aproximadamente 1.5% p/p. Modalidad 40: El equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores, en donde la primera forma unitaria es una torta liofilizada. Modalidad 41: El equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores, en donde la primera forma unitaria comprende: el polipéptido del Factor VII, manitol, sacarosa y un surfactante seleccionado de un polisorbato o un Poloxamer*®, tal como Tween 80MR o Poloxamer 188MR. Modalidad 42: El equipo de acuerdo con la modalidad 41, el cual contiene además metionina. Modalidad 43: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 41 o 42, en donde la segunda forma unitaria contiene L-histidina en una cantidad de aproximadamente 0.1 mM a aproximadamente 50 mM; tal como de aproximadamente 0.1 mM a aproximadamente 40 mM; de aproximadamente 0.1 mM a aproximadamente 35 M; de aproximadamente 0.1 mM a aproximadamente 30 mM; de aproximadamente 0.5 mM a aproximadamente 25 mM: de aproximadamente 1 mM a aproximadamente 20 mM; de aproximadamente 1 M a aproximadamente 15 mM; de aproximadamente 5 M a aproximadamente 20 mM o de aproximadamente 5 mM a aproximadamente 15 mM. Modalidad 44: Un equipo de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 41 a 43, en dónde la segunda forma unitaria contiene además uno o más componentes seleccionados de la lista de: CaC12, NaCl y Glicilglicina. Modalidad 45: Un método para preparar una formulación líquida de un polipéptido, el método comprende los pasos que consisten en: a) proporcionar una primera forma unitaria y una segunda forma unitaria como se describe en cualquiera de las modalidades 1 a 44; b) mezclar la primera forma unitaria y la segunda forma unitaria para proporcionar una solución líquida, disuelta de la composición en el vehículo de administración. Modalidad 46: Un método para tratar un síndrome sensible al factor de coagulación, que comprende administrar a un sujeto en necesidad del mismo una cantidad efectiva de una formulación líquida de un factor de coagulación preparado por medio del método de la modalidad 45. Modalidad 47: Un método de acuerdo con la modalidad 46, en donde el síndrome sensible al factor de coagulación es hemofilia y el factor de coagulación es el Factor VIII o Factor IX; o el síndrome es sepsis y el factor de coagulación es la proteína C o la proteína C activada. Modalidad 48: Un método de acuerdo con la modalidad 46 para tratar un síndrome sensible al FVII, que comprende administrar a un sujeto en necesidad del mismo una cantidad efectiva de una formulación líquida .del agente biológico preparado por medio del método de la modalidad 45. Modalidad 49: El método de acuerdo con la modalidad 48, en donde el síndrome se selecciona del grupo que consiste de hemofilia A, hemofilia B, deficiencia del Factor XI, deficiencia del Factor VII, trombocitopenia, enfermedad de von Willebrand, presencia de un inhibidor del Factor de coagulación, cirugía, trauma, coagulopatía dilucional y terapia anticoagulante. Modalidad 50: El uso de un polipéptido del Factor VII para la preparación de un medicamento en la forma de un equipo como se definiera en cualquiera de las modalidades 1 a 44 para el tratamiento de un síndrome sensible al Factor VII. Modalidad 51: Una composición que comprende un polipéptido del Factor VII y al menos un agente estabilizador seleccionado del grupo que consiste de a) una combinación de un antioxidante y manitol; b) una combinación de metionina y un poliol; c) una combinación de un sacárido y manitol; d) una combinación de sacarosa y un poliol; e) metionina; y un surfactante de polisorbato en una cantidad de aproximadamente 0.06 a 0.08 mg/mL; la composición que tiene un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3%.

Modalidad 52: La composición de acuerdo con la modalidad 51, en donde la combinación del antioxidante y manitol comprende además un sacárido. Modalidad 53: La composición de acuerdo con la modalidad 51, en donde la combinación de metionina y un poliol comprende además un sacárido. Modalidad 54: La composición de acuerdo con la modalidad 51, en donde la combinación de un sacárido y manitol comprende además un antioxidante. Modalidad 55: La composición de acuerdo con la modalidad 51, en donde la combinación de sacarosa y un poliol comprende además una antioxidante. Modalidad 56: La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 51 a 55, en donde el antioxidante se selecciona del grupo que consiste de homocisteína, cisteína, cistationina, metionina, glutationa y péptidos que contienen cualquiera de homocisteína, cisteína, cistationina, metionina y glutationa. Modalidad 57 : La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 55 a 56, en donde el sacárido se selecciona del grupo que consiste de sacarosa, dextrosa, lactosa, maltosa, trehalosa, ciclodextrinas, maltodextrinas y dextranos . Modalidad 58: La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 51 a 57, en donde el poliol se selecciona del grupo que consiste de manitol, sorbitol y xilitol. Modalidad 59: La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 51 a 58, en donde la composición es estable de tal manera que no más de aproximadamente 5% p/p del contenido inicial del polipéptido del Factor VII se convierte en agregados con el almacenamiento de la composición a 30°C durante 8 meses, preferiblemente no más de aproximadamente 4.0% p/p, 3.0% p/p, 2.5% p/p, 2.0% p/p, 1.5% p/p o no más de aproximadamente 1.0% p/p. Modalidad 60: La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 51 a 59, en donde la composición es estable de tal manera que no más de aproximadamente 6% p/p del contenido inicial del polipéptido del Factor VII se convierte en formas oxidadas con el almacenamiento de la composición a 30°C durante 8 meses, preferiblemente no más de aproximadamente 5% p/p, 4.0% p/p, 3.0% p/p, 2.5% p/p, 2.0% p/p o no más de aproximadamente 1.5% p/p- Modalidad 61: La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 51 a 60, en donde el poliol está en una cantidad que varía de aproximadamente 5% p/p a 90% p/p, preferiblemente de aproximadamente 18% p/p a 88% p/p, 18% a 83%, 25% a 80%, 40% a 80%, 50% a 80% o de aproximadamente 50% p/p a 70% p/p.

Modalidad 62: La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 51 a 61, en donde el sacárido está en una cantidad que varía de aproximadamente 0 a 85% p/p, preferiblemente de aproximadamente 3% p/p a 80% p/p, 7% a 75%, 10% a 70%, 10% a 50%, 10% a 40% o de aproximadamen'te 10% p/p a 35% p/p. Modalidad 63: La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 51 a 62, en donde el poliol está en una relación en peso con relación al sacárido que varía de aproximadamente 100:1 a 1:50, preferiblemente de aproximadamente 50:1 a 1:10; 20:1 a 1:5; 10:1 a 1:2; 6:1 a 1:2; 4:1 a 1:1 o de aproximadamente 4:1 a 3:2. Modalidad 64 : La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 51 a 63, que comprende además un agente adecuado para mantener el pH de la composición en el rango de 3 a 9 cuando se disuelve en un solvente acuoso, preferiblemente el pH está en el rango de 4 a 7, más preferiblemente en el rango de 4.5 a 6.5, aún más preferiblemente en el rango de 5.5 a 6.5. Modalidad 65: La composición de acuerdo con la modalidad 64, en donde el agente se selecciona del grupo que consiste de: ácido cítrico, ácido acético, histidina, ácido málico, ácido fosfórico, ácido tartárico, ácido succínico, MES, HEPES, imidazol, TRIS, imidazol, ácido láctico, ácido glutárico, PIPES y glicilglicina o una mezcla de al menos dos de estos agentes listados, en donde la mezcla es capaz de proporcionar un valor de pH en el rango especificado. Modalidad 66: La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 51 a 65, que comprende además un modificador de la tonicidad. Modalidad 67: La composición de acuerdo con la modalidad 66, en donde el modificador de la tonicidad se selecciona del grupo que consiste de: acetato de sodio, lactato de sodio, cloruro de sodio, cloruro de potasio, cloruro de calcio, manitol, glicerol y propilenglicol. Modalidad 68 : La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 51 a 67, en donde el surfactante se selecciona del grupo que consiste de polisorbato 20 u 80, preferiblemente polisorbato 80. Modalidad 69: La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 51 a 68, en donde el sacárido es sacarosa. Modalidad 70: La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 51 a 69, en donde el poliol es manitol. Modalidad 71: La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 51 a 70, en donde el polipéptido del Factor VII se selecciona del grupo que consiste del Factor Vlla humano, Factor Vlla humano recombinante y una variante de secuencia del Factor VII.

Modalidad - 72: La composición de acuerdo con la modalidad 71, en donde el polipéptido del Factor VII es el Factor Vlla humano o el Factor Vlla humano recombinante. Modalidad 73: La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 51 a 72, en donde el polipéptido del Factor VII es un polipéptido relacionado con el Factor VII en donde la relación entre la actividad del polipéptido relacionado con el Factor VII y el Factor VII natural es al menos 1.25 cuando se somete a prueba en uno o más .del "Ensayo de Proteólisis In Vitro" y el "Ensayo de Hidrólisis In Vitro" como se describe en la presente especificación. Modalidad 74: La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 51 a 73, en donde el polipéptido del Factor VII está presente en una concentración de aproximadamente 0.6 mg/ml a aproximadamente 10.0 mg/ml, tal como de aproximadamente 0.6 mg/ml a aproximadamente 6 mg/ml, de aproximadamente 0.6 mg/ml a aproximadamente 5 mg/ml o de aproximadamente 0.6 mg/ml a aproximadamente 4 mg/ml. Modalidad 75: La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 51 a 74, en donde el contenido de humedad no es mayor que aproximadamente 2.5% p/p, preferiblemente no mayor que aproximadamente 2% p/p, mucho más preferiblemente no mayor que aproximadamente 1.5% p/p. Modalidad 76: La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 51 a 75, en donde la composición es una torta liofilizada. Modalidad 77: La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores, en donde la composición comprende: un polipéptido del Factor VII, Manitol, Sacarosa y Poloxamer 80MR, tal como Tween 801®. Modalidad 78: La composición de acuerdo con la modalidad 77, la cual contiene además metionina. Modalidad 79: La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 77 a 78, que contiene además L-histidina. Modalidad 80: La composición de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 77 a 79, que contiene además uno o más componentes seleccionados de la lista de: CaC12, NaCl y Glicilglicina. Modalidad 81: Las composiciones de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 51 a 80, seleccionadas de la lista de: Modalidad 82: Las composiciones de acuerdo con la modalidad 81, seleccionadas de la lista de: Modalidad 83: Las composiciones de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 81 u 82, que contienen polisorbato 80 en una cantidad de aproximadamente 0.07 mg/mL. Modalidad 84: Las composiciones de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 81 a 83, que contienen un polipéptido del FVIIa en una cantidad de aproximadamente 1.0 mg/ml . Modalidad 85: Las composiciones de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 81 a 84, que comprenden además al menos uno de los componentes seleccionados de la lista de: Ca2+ en una cantidad de aproximadamente 10 mM, preferiblemente como CaC12 x2H20; NaCl en una cantidad de aproximadamente 50 mM o aproximadamente 40 mM, por ejemplo, 39 mM, histidina, preferiblemente L-histidina en una cantidad de aproximadamente 10 mM. Modalidad 86: Las composiciones de acuerdo con cualquiera de las modalidades anteriores 81 a 85, que tienen un pH de 5.5, o 5.6, o 5.7, o 5.8, o 5.9, o 6.0, o 6.1, o 6.2, o 6.3, o 6.4 o 6.5. Modalidad 87: Un método para preparar las composiciones definidas en las modalidades 51 a 86, que comprende los pasos que consisten en: i) proporcionar un polipéptido del Factor VII en una solución que comprende al menos un agente estabilizador seleccionado del grupo que consiste de a) una combinación de un antioxidante y manitol; b) una combinación de metionina y un poliol; c) una combinación de un sacárido y manitol; d) una combinación de sacarosa y un poliol; y e) metionina; y un surfactante de polisorbato en una cantidad de aproximadamente 0.06 a 0.08 mg/mL; ii) procesar la solución para -obtener una composición sólida con un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3% p/p- Modalidad 88: Un método de acuerdo con la modalidad 87, en donde el antioxidante se selecciona del grupo que consiste de homocisteína, cisteína, cistationina, metionina, glutationa y péptidos que contienen cualquiera de homocisteína, cisteína, cistationina, metionina y glutationa. Modalidad 89: Un método de acuerdo con la modalidad 87, en donde el sacárido se selecciona del grupo que- consiste de sacarosa, dextrosa, lactosa, maltosa, trehalosa, ciclodextrinas, maltodextrinas y dextranos. Modalidad 90: Un método de acuerdo con la modalidad 87, en donde el poliol se selecciona del grupo que consiste de manitol, sorbitol y xilitol. Modalidad 91: Un método de acuerdo con la modalidad 87, en donde el poliol está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.5 a aproximadamente 75 mg/ml, preferiblemente de aproximadamente 2 a 45 mg/ml, tal como de aproximadamente 5 mg/ml a 45 mg/ml, de aproximadamente 5 a 35 mg/ml, de aproximadamente 5 a 25 mg/ml, 5 a 20 mg/ml, 20 a 40 mg/ml o de aproximadamente 20 a aproximadamente 30 mg/ml. Modalidad 92 : Un método de acuerdo con la modalidad 87, en donde el sacárido está presente en una cantidad que varía de aproximadamente 0.5 a 75 mg/ml, preferiblemente de aproximadamente 2 a 45 mg/ml, tal como de aproximadamente 5 mg/ml a 45 mg/ml, de aproximadamente 5 a 35 mg/ml, de aproximadamente 5 a 25 mg/ml o de aproximadamente 5 a 20 mg/ml . Modalidad 93 : Un método de acuerdo con la modalidad 87, en donde el antioxidante está en una cantidad que varía de aproximadamente 0.05 a 10 mg/ml, preferiblemente de aproximadamente 0.1 a 5 mg/ml, más preferiblemente de aproximadamente O'.l mg/ml a 2.5 mg/ml, aún más preferiblemente- de aproximadamente 0.1 a 2 mg/ml, mucho más preferiblemente de aproximadamente 0.1 a 1 mg/ml. Modalidad 94: Un método de acuerdo con la modalidad 87, en donde el sacárido es sacarosa. Modalidad 95: Un método de acuerdo con la modalidad 87, en donde el antioxidante es metionina. Modalidad 96: Un método de acuerdo con la modalidad 87, en donde el poliol es manitol. Modalidad 97: Un método de acuerdo con la modalidad 87, en donde el procesamiento comprende la deshidratación por congelamiento . Modalidad 98: Un método para tratar un síndrome sensible al FVII, que comprende administrar a un sujeto en necesidad del mismo una cantidad efectiva de una composición como se definiera en cualquiera de las modalidades 51 a 86. Modalidad 99: El método de acuerdo con la modalidad 98, en donde el síndrome se selecciona del grupo que consiste de hemofilia A, hemofilia B, deficiencia del Factor XI, deficiencia del Factor VII, trombocitopenia, enfermedad de von Willebrand, presencia de un inhibidor del factor de coagulación, cirugía, trauma, coagulopatía dilucional y terapia anticoagulante. Modalidad 100: El uso del polipéptido del Factor VII para la preparación de un medicamento para el tratamiento de un síndrome sensible al Factor VII, el medicamento que comprende una composición como se definiera en cualquiera de las modalidades 51 a 86. Modalidad 101: El uso de acuerdo con la modalidad 100, en donde el síndrome se selecciona del grupo que consiste de hemofilia A, hemofilia B, deficiencia del Factor XI, deficiencia del Factor VII, trombocitopenia, enfermedad de von Willebrand, presencia de un inhibidor del factor de coagulación, cirugía, trauma, y terapia anticoagulante. Los siguientes ejemplos se ofrecen a manera de ilustración y no a manera de limitación: EJEMPLOS Métodos generales Ejemplo 1 Métodos analíticos utilizados en la determinación de los parámetros que indican la estabilidad A. Determinación de Formas Oxidadas por medio de la CLAR de Fase Inversa (CLAR-FI) : Columna de CLAR: Columna de 4.5x250 mm empacada con sílice enlazado a butilo con un tamaño de partícula de 5 µm y un tamaño de poro de 300Á. Temperatura de columna: 70 °C, eluyente A: agua 99.9% v/v y ácido trifluoroacético 0.1% v/v.

Eluyente B: acetonitrilo 80% v/v. Acido trifluoroacético 0.09% v/v y agua 19.91% v/v. La columna se eluyó con un gradiente lineal de X% de B a (X + 13)% de B en 30 minutos. Velocidad de flujo: 1.0 ml/minuto. Detección: 214 nm. Las formas oxidadas son sulfóxidos de metionina de los polipéptidos del Factor VII. Por ejemplo, los dos derivados principales de FVII son Met (O) 298 FVII y Met (0)306 FVII. El contenido de formas oxidadas es expresado como el porcentaje de la cantidad inicial del Factor VII en la composición con la preparación que es recuperada como formas oxidadas del Factor VII. B. Determinación de agregados de los polipéptidos del Factor VII por medio de la Cromatografía de Permeación en Gel de Alto Desempeño (CLAR-PG) . La CLAR-PG se condujo en una columna Waters Polipeptide Pak 300 SW, 7.5x300 mm, utilizando sulfato de amonio 0.2 M pH 7.0 que contenía isopropanol 5% como la fase móvil. Velocidad de flujo: 0.5 ml/minuto y detección: 215 nm. El contenido de agregados es expresado como el porcentaje de la cantidad inicial del Factor VII en la composición con la preparación que es recuperada como formas diméricas, oligoméricas y poliméricas del Factor VII.

Ejemplo 2 Ensayos para someter a prueba la actividad biológica de los polipéptidos del Factor VII Prueba para la actividad del Factor Vlla: Un ensayo adecuado para someter a prueba la actividad del Factor Vlla y seleccionar con lo cual las variantes del Factor Vlla adecuadas se puede realizar como una prueba Jn vitro preliminar, simple: (el "Ensayo de Hidrólisis In Vitro") .

Ensayo de Hidrólisis In Vitro El Factor Vlla nativo (natural) y la variante del Factor Vlla (ambos referidos posteriormente como el "Factor Vlla") se pueden someter a ensayo por las actividades específicas. Estos también pueden someterse a ensayo en paralelo para comparar directamente sus actividades específicas. El ensayo se lleva a cabo en una placa de microtítulo (MaxiSorp, Nunc, Dinamarca) . El substrato cromogénico D-Ile-Pro-Arg-p-nitroanilida (S-2288, Chromogenix, Suecia) , concentración final 1 mM, se adiciona al Factor Vlla (concentración final 100 nM) en Hepes 50 mM, pH 7.4, que contiene NaCl 0.1 M, CaCl2 5 mM y 1 mg/ml de albúmina de suero bovino. La absorbancia a 405 nm se mide continuamente en un lector de placas SpectraMax 3401® (Molecular Devices, EUA) . La absorbancia desarrollada durante una incubación de 20 minutos, después de la substracción de la absorbancia en urí pocilio blanco que no contiene enzima, se utiliza para calcular la relación entre las actividades del Factor Vlla variante y natural: Relación = (Factor Vlla variante A405 nm) / (Factor Vlla natural A05 nm) • Basándose en eso, se pueden identificar las variantes del factor Vlla con una actividad comparable a o más alta que el factor Vlla nativo, tal como, por ejemplo, las variantes donde la relación entre la actividad de la variante y la actividad del factor VII nativo (FVII natural) está cerca de, contra superior a 1.0. La actividad del Factor Vlla o las variantes del Factor Vlla también se puede medir utilizando un substrato fisiológico, tal como el Factor X, de manera adecuada a una concentración de 100-1000 nM, donde el factor Xa generado es medido después de la adición de un substrato cromogénico, adecuado (por ejemplo S-2765) ("Ensayo de Proteólisis In Vitro") . Además, el ensayo de actividad se puede conducir a una temperatura fisiológica.

Ensayo de Proteólisis In Vitro El Factor Vlla nativo (natural) y una variante del Factor Vlla (ambos referidos posteriormente como el "Factor Vlla") se someten a ensayo en paralelo para comparar directamente sus actividades específicas. El ensayo se lleva a cabo en una placa de microtítulo (MaxiSorp, Nunc, Dinamarca). Él Factor Vlla (10 nM) y el Factor X (0.8 microM) en 100 microL de Hepes 50 mM, pH 7.4, que contiene NaCl 0.1 M, CaCl2 5 mM y 1 mg/ml de albúmina de suero bovino, se incuban durante 15 minutos. La escisión del Factor X entonces se detiene mediante la adición de 50 microL de Hepes 50 mM, pH 7.4, que contiene NaCl 0.1 M, EDTA 20 mM y 1 mg/ml de albúmina de suero bovino. La cantidad del Factor Xa generado se mide por medio de la adición del substrato cromogénico Z-D-Arg-Gly-Arg-p-nitroanilida (S-2765, Chromogenix, Suecia) , concentración final de 0.5 mM. La absorbancia a 405 nm se mide continuamente en un lector de placas SpectraMax1® 340 (Molecular Devices, EUA) . La absorbancia desarrollada durante 10 minutos, después de la substracción de la absorbancia en un pocilio blanco que no contiene el FVIIa, se utiliza para calcular la relación entre las actividades proteolíticas del Factor Vlla variante y natural: Relación = (Factor Vlla variante A405 nm) / (Factor Vlla natural A405 nm) . Basándose en eso, se pueden identificar las variantes del Factor Vlla con una actividad comparable a o mayor que el factor Vlla nativo, tal como, por ejemplo, las variantes donde la relación entre la actividad de la variante y la actividad del factor VII nativo (FVII natural) está cerca de, contra superior a 1.0.

Ensayo de generación de trombina: La capacidad del Factor VII o los polípéptidos relacionados con el Factor VII o el Factor VIII o los polipéptidos relacionados con el Factor VIII (por ejemplo, variantes) para generar trombina se puede medir en un ensayo que comprende todos los Factores de coagulación relevantes e inhibidores a concentraciones fisiológicas y en las plaquetas activadas (como se describe en la página 543 en Monroe y colaboradores (1997) Brit . J. Hae atol. 99, 542-547 la cual es incorporada en este documento a manera de referencia) .

Ensayo de coagulación: La actividad de los polipéptidos del Factor VII también se puede medir utilizando un ensayo de coagulación de una etapa (ensayo 4) esencialmente como se describe en el documento WO 92/15686 o la Patente Norteamericana 5,997,864. En resumen, la muestra a ser sometida a prueba se diluye en Tris 50 mM (pH 7.5), BSA 0.1% y 100 µL se incuba con 100 µL del plasma deficiente en el Factor VII y 200 µL de tromboplastina C que contiene Ca2+ 10 mM. Los tiempos de coagulación se miden y se comparan con una curva estándar utilizando un estándar de referencia o una acumulación de plasma humano, normal con citrato en una dilución en serie.

Ejemplos de trabajo Ejemplo 3 Datos de estabilidad para las composiciones de rFVIIa deshidratado por congelamiento con y sin Histidina, respectivamente Se observará que es una ventaja la deshidratación por congelamiento sin la presencia de Histidina ya que se formarán menos dímeros/oligómeros.

Composiciones Para la reconstitución de las composiciones Al, Cl, El, Gl, II y l se utilizará 1.55 mg/mL de solventes de Histidina; para las composiciones Bl, DI, Fl, Hl, Jl y Ll se utilizará Agua para inyección (WFI) .

Ejemplo 4 Datos de estabilidad para las composiciones de rFVIIa deshidratado por congelamiento con y sin Histidina y/o Glicilglicina y/o NaCl, respectivamente Se observará que es una ventaja la deshidratación por congelamiento sin la presencia de NaCl ya que esto disminuirá el riesgo de colapso de la torta.

Para la reconstitución, se utilizará 1.55 mg/mL de solventes de Histidina para las composiciones A2, 12 y Q2; para las composiciones B2, J2 y R2 se utilizará Agua para inyección (WFI) . Para la reconstitución, se utilizará 1.55 mg/mL de solventes de Histidina para las composiciones C2, K2 y S2; para las composiciones D2, L2 y T2 se utilizará Agua para inyección (WFI) . Para la reconstitución, se utilizará 1.55 mg/mL de solventes de Histidina con 2.92 mg/mL de NaCl para las composiciones E2, M2 y U2; para las composiciones F2, N2 y V2 se utilizará 2.92 mg/mL de Agua salina. Para la reconstitución, se utilizará 1.55 mg/mL de solventes de Histidina con 2.92 mg/mL de NaCl para las composiciones G2, 02 y X2; para la composición H2, P2 e Y2 se utilizará 2.92 mg/mL de Agua salina.

Ejemplo 5 Manufactura de las composiciones En" general, las composiciones se prepararon a partir de una solución a granel purificada. Los excipientes se adicionaron y la solución se diluyó a la concentración deseada de rFVIIa. La solución resultante se filtró de manera estéril utilizando un filtro de membrana esterilizado (tamaño de poro de 0.2 mieras o equivalente) y se vertió en frasquitos de vidrio estériles. Los frasquitos se deshidrataron por congelamiento, se cerraron con tapones de caucho y se sellaron con tapas de tipo flip-off1® (de fácil remoción) de aluminio.

Ejemplo 6 Comparación del contenido de agregados solubles que se forman en las formulaciones con y sin la adición de L-histidina antes de la deshidratación por congelamiento Las siguientes formulaciones se prepararon (todas las concentraciones están establecidas en mg/ml) : Las formulaciones se prepararon como se describe en la tabla 5 utilizando un volumen de relleno de 5.3 ml. Después de la deshidratación por congelamiento, los contenidos de formas diméricas, oligoméricas y poliméricas se midieron por medio de la CLAR-PG como se describe en el ejemplo 3. Los resultados se establecen a continuación: Los resultados muestran que las formulaciones 1 y 2 sin la adición de L-histidina tuvieron contenidos más bajos de formas diméricas y oligoméricas después de la deshidratación por congelamiento en comparación con las formulaciones correspondientes 3 y 4, las cuales contuvieron L-histidina.

Ejemplo 7 Estabilidad de una formulación de rFVIIa deshidratada por congelamiento Una formulación que contenía rFVIIa 1.0 mg/ml NaCl 2.34 mg/ml CaC12, 2H20 1.47 mg/ml Glicilglicina 1.32 mg/ml Polisorbato 80 0.07 mg/ml L-Metionina 0.5 mg/ml Manitol 25 mg/ml Sacarosa 10 mg/ml pH 6.0 se preparó como se describe en el ejemplo 5 utilizando volúmenes de relleno de 1.1 ml. La formulación se colocó a 25°C y 40°C en la oscuridad. Las muestras se recolectaron de acuerdo con las tablas posteriores. Después de la reconstitución del producto deshidratado por congelamiento en solvente de L- histidina 10 mM, los contenidos de formas diméricas/oligoméricas/poliméricas y oxidadas se midieron como se describe en el ejemplo 3, mientras que la actividad se determinó por medio del ensayo de coagulación de una etapa como se describe en el ejemplo 4. n.d.: no determinado Ejemplo 8 La influencia del cloruro de sodio sobre la apariencia visual de la torta deshidratada por congelamiento se investigó en un estudio de diseño factorial. Entre los parámetros variables estuvo el contenido de cloruro de sodio. El resultado de cuatro formulaciones incluidas en el estudio se muestra en la tabla Todas las formulaciones contuvieron además: rFVIIa 1.0 mg/mL Cloruro de calcio 1.47 mg/mL Glicilglicina 1.32 mg/mL Polisorbato 80 0.1 mg/mL Manitol 40 mg/mL Sacarosa 10 mg/mL Además, las formulaciones 1 y 2 contuvieron 0.5 mg/mL de metionina. el pH se ajustó a: 6.0 (formulaciones 1 y 4) 5.0 (formulaciones 2 y 3) Ejemplo 9 Datos de estabilidad para las composiciones del polipéptido del FVII Se observará que las composiciones son estables con respecto a la formación de dímeros/oligómeros después del almacenamiento a 25°C durante 6 meses.

Composiciones Para la reconstitución de las composiciones A-9 a H-9, se utilizará Agua para inyección (WFI) . Para la reconstitución de las composiciones B-9, D-9, F-9 y H-9, también se puede utilizar 1.55 mg/mL de solventes de histidina. También se prepararon composiciones que contenían los mismos ingredientes y cantidades de ingredientes que las composiciones A-9 a H-9 pero que tenían un pH de 4.5. Además, también se prepararon composiciones que contenían los mismos ingredientes y cantidades de ingredientes que las composiciones A-9 a H-9 pero que tenían un pH de 5.5.

Para la reconstitución de las composiciones A-9-1 a H-9-1, se utilizará Agua para inyección (WFI) . Para la reconstitución de las composiciones B-9-1, D-9-1, F-9-1 y H- 9-1, también se puede utilizar 1.55 mg/mL de solventes de histidina. También se prepararon composiciones que contenían los mismos ingredientes y cantidades de ingredientes que las composiciones A-9-1 a H-9-1 pero que tenían un pH de 4.5. Además, también se prepararon composiciones que contenían los mismos ingredientes y cantidades de ingredientes que las composiciones A-9-1 a H-9-1 pero que tenían un pH de 5.5.

Para la reconstitución de las composiciones A-9-2 a H-9-2, se utilizará Agua para inyección (WFI) . Para la reconstitución de las composiciones B-9-2, D-9-2, F-9-2 y H-9-2, también se puede utilizar 1.55 mg/mL de solventes de histidina. También se prepararon composiciones que contenían los mismos ingredientes y cantidades de ingredientes que las composiciones A-9-2 a H-9-2 pero que tenían un pH de 4.5. Además, también se prepararon composiciones que contenían los mismos ingredientes y cantidades de ingredientes que las composiciones A-9-2 a H-9-2 pero que tenían un pH de 5.5.

Para la reconstitución de las composiciones A-9-3 a H-9-3, se utilizará Agua para inyección (WFI) . Para la reconstitución de las composiciones B-9-3, D-9-3, F-9-3 y H-9-3, también se puede utilizar 1.55 mg/mL de solventes de histidina. También se prepararon composiciones que contenían los mismos ingredientes y cantidades de ingredientes que las composiciones A-9-3 a H-9-3 pero que tenían un pH de 4.5. Además, también se prepararon composiciones que contenían los mismos ingredientes y cantidades de ingredientes que las composiciones A-9-3 a H-9-3 pero que tenían un pH de 5.5, Para la reconstitución de las composiciones A-9-4 a H-9-4, se utilizará Agua para inyección (WFI) . Para la reconstitución de las composiciones B-9-4, D-9-4, F-9-4 y H-9-4, también se puede utilizar 1.55 mg/mL de solventes de histidina. También se prepararon composiciones que contenían los mismos ingredientes y cantidades de ingredientes que las composiciones A-9-4 a H-9-4 pero que tenían un pH de 4.5. Además, también se prepararon composiciones que contenían los mismos ingredientes y cantidades de ingredientes que las composiciones A-9-4 a H-9-4 pero que tenían un pH de 5.5.

Para la reconstitución de las composiciones A-9-5 a H-9-5, se utilizará Agua para Inyección (WFI) . Para la reconstitución de las composiciones B-9-5, D-9-5, F-9-5 y H- 9-5, también se puede utilizar 1.55 mg/mL de solventes de histidina. También se prepararon "composiciones que contenían los mismos ingredientes y cantidades de ingredientes que las composiciones A-9-5 a H-9-5 pero que tenían un pH de 4.5. Además, también se prepararon composiciones que contenían los mismos ingredientes y cantidades de ingredientes que las composiciones A-9-5 a H-9-5 pero que tenían un pH de 5.5.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : 1. Un equipo que contiene un medicamento farmacéutico, el equipo está caracterizado porque comprende a) una composición que comprende un polipéptido del factor de coagulación de la sangre y al menos un agente estabilizador, seleccionado del grupo de: surfactantes., antioxidantes, sacáridos y polioles, en donde la composición tiene un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3%, en una primera forma unitaria y un medio de envase para contener la primera forma unitaria; y b) en una segunda forma unitaria, un vehículo de administración que comprende un solvente para la reconstitución (solución) de la composición y al menos uno de los componentes seleccionados de la lista de: (v) un agente adecuado para mantener el pH de la composición en el rango de 3 a 9 cuando se disuelve en un solvente acuoso, en donde el agente está presente en una cantidad de aproximadamente 0.1 mM a 100 mM, (vi) un agente modificador de la tonicidad en una cantidad suficiente para hacer esencialmente isotónica la solución reconstituida que resulta de la disolución de la composición de la primera forma unitaria en el vehículo de administración de la segunda forma unitaria; y un medio de envase para contener la segunda forma unitaria.
2. Un equipo de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la segunda forma unitaria comprende además al menos un componente seleccionado del grupo de: surfactantes, antioxidantes, sacáridos y polioles.
3. Un equipo de conformidad con las reivindicaciones 1 o 2, caracterizado porque el polipéptido se selecciona de la lista de: Factor VIII humano, Factor Vlla humano, Factor IX humano, Factor X humano, proteína C humana activada o una variante de la secuencia del Factor VII. 4. Un equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque el "agente adecuado para mantener el pH de la composición en el rango de 3 a 9 cuando se disuelve en un solvente acuoso" está presente en una cantidad de aproximadamente 0.1 mM a aproximadamente 50 mM; tal como de aproximadamente 0.1 mM a aproximadamente 40 mM; de aproximadamente 0.1 mM a aproximadamente 35 mM; de aproximadamente 0.1 mM a aproximadamente 30 mM; de aproximadamente 0.5 mM a aproximadamente 25 mM: de aproximadamente 1 mM a aproximadamente 20 mM; de aproximadamente 1 mM a aproximadamente 15 mM; de aproximadamente 5 mM a aproximadamente 20 mM o de aproximadamente 5 mM a aproximadamente 15 mM. 5. Un equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque el "agente adecuado para mantener el pH de la composición en el rango de 3 a 9 cuando se disuelve en un solvente acuoso" se selecciona de la lista de: ácido cítrico, ácido acético, histidina, ácido málico, ácido fosfórico, ácido tartárico, ácido succínico, MES, HEPES, imidazol, TRIS, ácido láctico, ácido glutárico, PIPES y glicilglicina o una mezcla de al menos dos de estos agentes listados, en donde la mezcla es capaz de proporcionar un valor de pH en el rango especificado. 6. Un equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque la segunda forma unitaria comprende un agente adecuado para mantener el pH de la composición en el rango de 4 a 7 cuando se disuelve en un solvente acuoso; preferiblemente en el rango de
4.5 a 7.5, tal como de 5 a 7 o
5.5 a
6.5.
7. Un equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizado porque la segunda forma unitaria comprende histidina; preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 0.1 mM a aproximadamente 50 mM; tal como de aproximadamente 0.1 mM a aproximadamente 40 mM; de aproximadamente 0.1 mM a aproximadamente 35 mM; de aproximadamente 0.1 mM a aproximadamente 30 mM; de aproximadamente 0.5 mM a aproximadamente 25 mM: de aproximadamente 1 mM a aproximadamente 20 M; de aproximadamente 1 mM a aproximadamente 15 mM; de aproximadamente 5 mM a aproximadamente 20 mM o de aproximadamente 5 mM a aproximadamente 15 mM.
8. Un equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizado porque el "agente modificador de la tonicidad" se selecciona de la lista de: acetato de sodio, lactato de sodio, cloruro de sodio, cloruro de potasio, cloruro de calcio, cloruro de magnesio, manitol, glicerol, propilenglicol o una mezcla de al menos dos de estos agentes modificadores, listados; seleccionados preferiblemente de la lista de: cloruro de sodio, cloruro de magnesio, manitol, glicerol, propilenglicol, cloruro de calcio o mezclas de los mismos.
9. Un equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la primera forma unitaria comprende al menos un agente estabilizador seleccionado del grupo que consiste de: a) una combinación de un antioxidante y manitol; b) una combinación de metionina y un poliol; c) una combinación de un sacárido y manitol; d) una combinación de sacarosa y un poliol; e) metionina; y f) un surfactante; la composición que tiene un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3%.
10. Un equipo de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la combinación de un antioxidante y manitol (a) comprende además un sacárido.
11. Un equipo de conformidad con lá reivindicación 9, caracterizado porque la combinación de metionina y un poliol (b) comprende además un sacárido.
12. Un equipo de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la combinación de un sacárido y manitol (c) comprende además un antioxidante.
13. Un equipo de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la combinación de sacarosa y un poliol (d) comprende además un antioxidante.
14. Un equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 9 a 13, caracterizado porque comprende además un surfactante.
15. Un equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el antioxidante se selecciona del grupo que consiste de homocisteína, cisteína, cistationina, metionina, glutationa y péptidos que contienen cualquiera de homocisteína, cisteína, cistationina, metionina y glutationa; preferiblemente metionina.
16. Un equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el sacárido se selecciona del grupo que consiste de sacarosa, dextrosa, lactosa, maltosa, trehalosa, ciclodextrinas, maltodextrinas y dextranos; preferiblemente sacarosa.
17. Un equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el poliol se selecciona del grupo que consiste de manitol, sorbitol y xilitol; preferiblemente manitol.
18. Un equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la composición de la primera forma unitaria es estable de tal manera que no más de aproximadamente 5% p/p del contenido inicial del polipéptido del Factor VII se convierte en agregados con el almacenamiento de la composición a 30°C durante 8 meses, preferiblemente no más de aproximadamente 4.0% p/p, 3.0% p/p, 2.5% p/p, 2.0% p/p, 1.5% p/p o no más de aproximadamente 1.0% p/p.
19. Un equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones - anteriores, caracterizado porque la composición de la primera forma unitaria es estable de tal manera que no más de aproximadamente 6% p/p del contenido inicial del polipéptido del Factor VII se convierte a formas oxidadas con el almacenamiento de la composición a 30°C durante 8 meses, preferiblemente no más de aproximadamente 5% p/p, 4.0% p/p, 3.0% p/p, 2.5% p/p, 2.0% p/p o no más de aproximadamente 1.5% p/p.
20. Un equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el poliol está en una cantidad que varía de aproximadamente 5% p/p a 90% p/p, preferiblemente de aproximadamente 18% p/p a 88% p/p, 18% a 83%, 25% a 80%, 40% a 80%, 50% a 80% o de aproximadamente 50% p/p a 70% p/p.
21. Un equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el sacárido está en una cantidad que varía de aproximadamente 0 a 85% p/p, preferiblemente de aproximadamente 3% p/p a 80% p/p, 7% a 75%, 10% a 70%, 10% a 50%, 10%- a 40% o de aproximadamente 10% p/p a 35% p/p.
22. Un equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el poliol está en una relación en peso con relación al sacárido que varía de aproximadamente 100:1 a 1:50, preferiblemente de aproximadamente 50:1 a 1:10; 20:1 a 1:5; 10:1 a 1:2; 6 : 1 a 1:2; 4 : 1 a 1 : 1 ; o de aproximadamente 4:1 a 3:2.
23. Un equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la primera forma unitaria comprende además un modificador de la tonicidad.
24. Un equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el surfactante se selecciona del grupo que consiste de polisorbatos, tal como polisorbato 20 u 80; éteres alquílicos de polioxietileno, tal como Brij 35MR; o PoloxamerMR, tal como Poloxamer 188 o 4071®; y otros polímeros de bloque de etileno/propileno o polietilenglicol (PEG) tal como PEG8000.
25. El equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado -porque el polipéptido del Factor VII está presente en una concentración de aproximadamente 0.6 mg/ml a aproximadamente 10.0 mg/ml, tal como de aproximadamente 0.6 mg/ml a aproximadamente 6 mg/ml, de aproximadamente 0.6 mg/ml a aproximadamente 5 mg/ml o de aproximadamente 0.6 mg/ml a aproximadamente 4 mg/ml .
26. El equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la primera forma unitaria es una torta liofilizada.
27. Un equipo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque la segunda forma unitaria contiene uno o más componentes seleccionados de la lista de: CaC12, NaCl y Glicilglicina.
28. Un método para preparar una formulación líquida de un polipéptido del factor de coagulación de la sangre, el método está caracterizado porque comprende los pasos que consisten en: a) proporcionar una primera forma unitaria y una segunda forma unitaria de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27; b) mezclar la primera forma unitaria y la segunda forma unitaria para proporcionar una solución líquida, disuelta de la composición en el vehículo de administración.
29. Un método para tratar un síndrome sensible al factor de coagulación, caracterizado porque comprende administrar a un sujeto en necesidad del mismo una cantidad efectiva de una formulación líquida del factor de coagulación preparado por medio del método de conformidad con la reivindicación 28.
30. Un método de conformidad con la reivindicación 29, caracterizado porque el síndrome es un síndrome sensible al FVII y el factor de coagulación es un polipéptido del Factor VII.
31. El método de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado porque el síndrome se selecciona del grupo que consiste de: hemofilia A adquirida o congénita; hemofilia B adquirida o congénita; deficiencia del Factor XI; deficiencia del Factor VII; trombastenia de Glanzmann; trombocitopenia; enfermedad de von Willebrand; presencia de un inhibidor del factor de coagulación, tales como los inhibidores para los factores VIII o IX; cirugía, trauma; coagulopatía dilucional y terapia anticoagulante .
32. El uso de un polipéptido del Factor VII para la preparación de un medicamento en la forma de un equipo como se definiera de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27 para el tratamiento de un síndrome sensible al Factor VII .
33. Una composición, caracterizada porque comprende un polipéptido del Factor VII y al menos un agente estabilizador seleccionado del grupo que consiste de a) una combinación de un antioxidante y manitol; b) una combinación de metionina y un poliol; c) una combinación de un sacárido y manitol; d) una combinación de sacarosa y un poliol; e) metionina; y un surfactante de polisorbato en una cantidad de aproximadamente 0.06 a 0.08 mg/mL; la composición que tiene un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3%.
34. La composición de conformidad con la reivindicación 33, caracterizada porque la combinación de un antioxidante y manitol comprende además un sacárido.
35. La composición de conformidad con la reivindicación 33, ' caracterizada porque la combinación de metionina y un poliol comprende además un sacárido.
36. La composición de conformidad con la reivindicación 27, caracterizada porque la combinación de un sacárido y manitol comprende además un antioxidante.
37. La composición de conformidad con la reivindicación 27, caracterizada porque la combinación de sacarosa y un poliol comprende además una antioxidante.
38. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores 27 a 37, caracterizada porque el antioxidante se selecciona del grupo que consiste de homocisteína, cisteína, cistationina, metionina, glutationa y péptidos que contienen cualquiera de homocisteína, cisteína, cistationina, metionina y glutationa; preferiblemente metionina.
39. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores 27 a 38, caracterizada porque el sacárido se selecciona del grupo que consiste de sacarosa, dextrosa, lactosa, maltosa, trehalosa, ciclodextrinas, maltodextrinas y dextranos; preferiblemente sacarosa.
40. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores 27 a 39, caracterizada porque el poliol se selecciona del grupo que consiste de manitol, sorbitol y xilitol; preferiblemente manitol.
41. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores 27 a 40, caracterizada porque la composición es estable de tal manera que no más de aproximadamente 5% p/p del contenido inicial del polipéptido del Factor VII se convierte en agregados con el almacenamiento de la composición a 30°C durante 8 meses, preferiblemente no más de aproximadamente 4.0% p/p, 3.0% p/p, 2.5% p/p, 2.0% p/p, 1.5 p/p o no más de aproximadamente 1.0% p/p.
42. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores 27 a 51, caracterizada porque la " composición es estable de tal manera que no más de aproximadamente 6% p/p del contenido inicial del polipéptido del Factor VII se convierte en formas oxidadas con el almacenamiento de la composición a 30 °C durante 8 meses, preferiblemente no más de aproximadamente 5% p/p, 4.0% p/p, 3.0% p/p, 2.5% p/p, 2.0% p/p o no más de aproximadamente 1.5% p/p.
43. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores 27 a 42, caracterizada porque comprende además un agente adecuado para mantener el pH de la composición- en el rango de 3 a 9 cuando se disuelve en un solvente acuoso, preferiblemente el pH está en el rango de 4 a 7, más preferiblemente en el rango de 4.5 a 6.5, aún más preferiblemente en el rango de 5.5 a 6.5.
44. La composición de conformidad con la reivindicación 43, caracterizada porque el agente se selecciona del grupo que consiste de: ácido cítrico, ácido acético, histidina, ácido málico, ácido fosfórico, ácido tartárico, ácido succínico, MES, HEPES, imidazol, TRIS, imidazol, ácido láctico, ácido glutárico, PIPES y glicilglicina o una mezcla de al menos dos de estos agentes listados, en donde la mezcla es capaz de proporcionar un valor de pH en el rango especificado.
45. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores 27 a 44, caracterizada porque comprende además un modificador de la tonicidad.
46. La composición de conformidad con la reivindicación 45, caracterizada porque el modificador de la tonicidad se selecciona del grupo que consiste de: acetato de sodio, lactato de sodio, cloruro de sodio, cloruro de potasio, cloruro de calcio, cloruro de magnesio, manitol, glicerol y propilenglicol o una mezcla de al menos dos agentes modificadores listados; preferiblemente seleccionados de la lista de: cloruro de sodio, cloruro de magnesio, manitol, glicerol, propilenglicol, cloruro de calcio o mezclas de los mismos.
47. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores 27 a 46, caracterizada porque el surfactante de polisorbato se selecciona del grupo que consiste de polisorbato 20 u 80, preferiblemente polisorbato 80.
48. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores 27 a 47, caracterizada porque el polipéptido del Factor VII se selecciona del grupo que consiste del Factor Vlla humano, Factor Vlla humano recombinante y una variante de secuencia del Factor VII.
49. La composición de conformidad con la reivindicación 48, caracterizada porque el polipéptido del Factor VII es el Factor Vlla humano o el Factor Vlla humano recombinante.
50. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 27 a 49, caracterizada porque el polipéptido del Factor VII es una variante de la secuencia del Factor VII, en donde la relación entre la actividad de la variante y el Factor VII natural es al menos 1.25 cuando se somete a prueba en uno o más del "Ensayo de Proteólisis" In Vitro" y el "Ensayo de Hidrólisis In Vitro" como se describe en la presente especificación.
51. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 27 a 50, caracterizada porque el polipéptido del Factor VII está presente en una concentración de aproximadamente 0.6 mg/ml a aproximadamente 10.0 mg/ml, tal como de aproximadamente 0.6 mg/ml a aproximadamente 6 mg/ml, de aproximadamente 0.6 mg/ml a aproximadamente 5 mg/ml o de aproximadamente 0.6 mg/ml a aproximadamente 4 mg/ml.
52. Las composiciones de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 27 a 51, caracterizadas porque se seleccionan de la lista de:
53. Las composiciones de conformidad con la reivindicación 52, caracterizadas porque se seleccionan de la lista de:
54. Las composiciones de conformidad con la reivindicación 52, caracterizadas porque se seleccionan de la lista de:
55. Las composiciones de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 52 a 54, caracterizadas porque contienen polisorbato 80 en una cantidad de aproximadamente 0.07 mg/mL.
56. Las composiciones de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 52 a 55, caracterizadas porque contienen el polipéptido del FVIIa en una cantidad de aproximadamente 1.0 mg/mL.
57. Las composiciones de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 52 a 56, caracterizadas porque comprenden además al menos uno de los componentes seleccionados de la lista de: Ca2+ en una cantidad de aproximadamente 10 mM, preferiblemente como CaC12 X2H20; NaCl en una cantidad de aproximadamente 50 mM o aproximadamente 40 mM, por ejemplo, 39 mM; histidina, preferiblemente L-histidina en una cantidad de aproximadamente 10 mM.
58. Las composiciones de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 52 a 57, caracterizadas porque tienen un pH de 5.5 o 5.6 o 5.7 o 5.8 o 5.9 o 6.0,' o 6.1 o 6.2 o 6.3 o 6.4 o 6.5.
59. Un método para preparar las composiciones definidas de conformidad con las reivindicaciones 27 a 58, caracterizado porque comprende los pasos que consisten en: i) proporcionar un polipéptido del Factor VII en una solución que comprende al menos un agente estabilizador seleccionado del grupo que consiste de a) una combinación de un antioxidante y manitol; b) una combinación de metionina y un poliol; c) una combinación de un sacárido y manitol; d) una combinación de sacarosa y un poliol; y e) metionina; y un surfactante de polisorbato en una cantidad de aproximadamente 0.06 a 0.08 mg/mL; ii) procesar la solución para obtener una composición sólida con un contenido de humedad no mayor que aproximadamente 3% p/p-
60. Un método para tratar un síndrome sensible al FVII, caracterizado porque comprende administrar a un sujeto en necesidad del mismo una cantidad efectiva de una composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 27 a 57.
61. El método de conformidad con la reivindicación 60, caracterizado porque el síndrome se selecciona del grupo que consiste de: hemofilia A adquirida o congénita; hemofilia B adquirida o congénita; deficiencia del Factor XI; deficiencia del Factor VII; trombastenia de Glanzmann; trombocitopenia; enfermedad de von Willebrand; presencia de un inhibidor del factor de coagulación, tal como inhibidores para los factores VIII o IX; cirugía, trauma; coagulopatía dilucional y terapia anticoagulante .
62. El uso de un polipéptido del Factor VII para la preparación de un medicamento para tratar un síndrome sensible al Factor VII, el medicamento comprende una composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 27 a 58.
63. El uso de conformidad con la reivindicación 62, en donde el síndrome se selecciona del grupo que consiste de: hemofilia A adquirida o congénita; hemofilia B adquirida o congénita; deficiencia del Factor XI; deficiencia del Factor VII; trombastenia de Glanzmann; trombocitopenia; enfermedad de von Willebrand; presencia de un inhibidor del factor de coagulación, tal como inhibidores para los factores VIII o IX; cirugía, trauma; coagulopatía dilucional y terapia anticoagulante.