SK98695A3 - Process for growing porcine reproductive and respiratory syndrome virus and its use in vaccines - Google Patents

Process for growing porcine reproductive and respiratory syndrome virus and its use in vaccines Download PDF

Info

Publication number
SK98695A3
SK98695A3 SK986-95A SK98695A SK98695A3 SK 98695 A3 SK98695 A3 SK 98695A3 SK 98695 A SK98695 A SK 98695A SK 98695 A3 SK98695 A3 SK 98695A3
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
prrsv
virus
vaccine
tissue culture
prrs
Prior art date
Application number
SK986-95A
Other languages
English (en)
Inventor
Thomas Sanderson
Ginley Michael J Mc
Jeffrey J Zimmerman
Howard T Hill
Michael C Meetz
Eugene C Pirtle
Sabrina L Swenson
George P Shibley
Original Assignee
Bayer Ag
Univ Iowa State Res Found Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bayer Ag, Univ Iowa State Res Found Inc filed Critical Bayer Ag
Publication of SK98695A3 publication Critical patent/SK98695A3/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5254—Virus avirulent or attenuated
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
    • A61K2039/552—Veterinary vaccine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/10011—Arteriviridae
    • C12N2770/10034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
    • Y10S424/815—Viral vaccine for porcine species, e.g. swine

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Description

SPÔSOB KULTIVÁCIE VÍRUSU REPRODUKČNÉHO A RESPIRAČNÉHO SYNDRÓMU OŠÍPANÝCH A JEHO POUŽITIE VO VAKCÍNACH
Oblasť techniky
Predložený vynález sa týka vírusového izolátu reprodukčného a respiračného syndrómu ošípaných (porcine reproductive and respirátory syndróm virus - PRRSV) . Špecifickejšie sa predložený vynález týka diagnostických a ochranných antigénov a vakcín pre reprodukčnú chorobu prasiatok a spôsobov jeho výroby a použitia.
Doterajší stav techniky
Reprodukčný a respiračný syndróm ošípaných je rýchlo sa rozmáhajúci ekonomicky devastujúci problém v USA a i v európskej produkcii ošípaných. Syndróm bol najprv popísaný v US v roku 1987 a o dva roky neskôr s podobnými popismi v Európe a Kanade. Syndróm choroby bol označovaný mnohými rôznymi názvami, zahrňujúcimi záhadnú chorobu prasnic, abortus blau, choroba prasiat s modrými ušami, epidemický abortus u ošípaných a respiračný syndróm (PEARS), syndróm neplodnosti a respiračný syndróm u prasníc (SIRS - swine infertility and respirátory syndróme). Názov reprodukčný a respiračný syndróm u ošípaných (PRRS) bol používaný až neskôr.
Etiologické činidlo schopné reprodukovať syndróm choroby bolo identifikované ako malý obalový sférický RNA vírus, s priemerným priemerom viriónu 62 nm a 25 - 30 nm jadrom obklopeným obalom. Vírus bol predbežne zaradený ako člen rodu Arterivirus v rodine Togaviridae. Tu popísaný izolát vírusu bravčového reprodukčného a respiračného syndrómu (PRRSV) naplňuje túto predbežnú klasifikáciu a bol pokladaný za reprodukujúci chorobný syndróm.
Chorobný syndróm spojený s PRRSV je charakterizovaný akútnym a chronickým zlyhaním schopnosti reprodukcie u dospelých prasníc a chronickým zlyhaním schopnosti reprodukcie u dospelých prasníc a ťažkou až strednou respiračnou chorobou u mladých prasiatok. Reprodukčné zlyhanie je charakterizované neskorým potratom, čo vedie k zvýšenému výskytu mumifikovaných, mŕtvo narodených a oslabených narodených prasiatok s výrazne zníženými šancami na prežitie. Chronické problémy s oneskoreným navrátením maternice u infikovaných prasníc bolo tiež popísané. Nasledujúca respiračná choroba zahrňuje od horúčky a intersticiálnej pneumonitis až príznaky strednej choroby horných ciest dýchacích (t.j. kýchanie, kašlanie a nasálne alebo očné ťažkosti) u malých prasiatok. V poslednej dobe (1990) sérologické a chovné štúdie indikujú, že aspoň 50 % chovu ošípaných v USA bolo vystavených PRRSV alebo prešlo chorobou reprodukčného zlyhania a respiračnou chorobou indikovanou u PRRSC infekcie.
Vzhladom k nebezpečnosti tohto chorobného syndrómu boli v poslednej dobe štúdie patogenézy, epidemiológie a kontroly choroby obmedzené. Je potrebné chápať, že účinný . vývoj a propagácia antigénov, obsahujúcich PRRSV bude ulahčovať vývoj PRRSV vakcíny za účelom prevencie a kontroly reprodukčného a respiračného syndrómu u ošípaných.
Podstata vynálezu
V súlade s vyššie uvedeným zahrňuje predložený vynález vírusový izolát označený ako ISU-P, ktorý je použitelný pri príprave antigénov pre diagnostiku reprodukčného a respiračného syndrómu u ošípaných a vyvolanie ochrannej imunitnej odozvy na vírus reprodukčného a respiračného syndrómu ošípaných (PRRSV). Do rozsahu vynálezu tiež spadajú spôsoby výroby a použitia antigénov.
V predloženom vyhotovení vynálezu môže byť PRRSV izolát získaný spôsobom, zahrňujúcim izoláciu PRRSV ko-kultiváciou 10 % hmot./obj. plúcnych homogenátov z vírusom infikovaných prasiatok s primárnou alveolárnou makrofágovou alebo kontinuálnou bunečnou kultúrou pri 35 °C.
Predložený vynález ďalej zahrňuje rozmnožovanie vírusu na vysoký titer v určitých bunečných líniách ako je Afričan Green Monkey Kidney kontinuálna bunečná línia (MA 104) a jej unikátny klonovaný derivát (9009B).
Vo vynáleze sú tiež zahrnuté spôsoby prípravy a použitia živých vírusových alebo usmrtených vírusových antigénov (bežných alebo rekombinantných) a vakcíny, ktoré sa z nich získajú kombináciou imunologický účinného množstva vírusu s riedidlom a/alebo prísadou.
Bolo zistené, že priama experimentálna imunizácia prasníc živým vírusom alebo kontaktom s prasnicami imunizovanými živým vírusom, bráni reprodukčnému zlyhaniu po intranasálnom podnete virulentným PRRSV.
Bolo tiež zistené, že inaktivované PRRSV vakcíny s prísadami chránia prasiatka pred PRRS infekciou po podnete merané stratou replikácie vírusu vo vakcinátoch v porovnaní s nevakcinovanými kontrolnými prasiatkami.
Ako je uvedené vyššie, je predložený vynález riadený na izoláciu PRRSV vírusového izolátu ISU-P za účelom získania vírusových antigénov na použitie vo vakcínach a diagnostických štúdiách. ISU-P izolát bol získaný z plúcneho tkaniva oslabených narodených prasiatok. Ilustratívne, 10 % hmotn./obj. tkanivový homogenát z pľúc, slinivky a lymfatických žliaz bol pripravený v minimálnom základnom médiu (Minimal Essential Média) doplnenom antibiotikami (MEM+A) pre minimalizáciu potenciálnej kontaminácie. Surový homogenát bol vyčírený odstredením pri 4 °C pod 15 minút pri 1500 x g. Číry supernatant bol zriedený 1:5 v MEM+A a 1,0 ml bol adsorbovaný na 48 hodín starú konfluentnú monovrstvu MA 104 buniek alebo primárnych alveolárnych makrofágov v 25 cm2 fľaštičkách. Po 2 hodinách adsorpčnej periódy pri 35 C boli monovrstvy premyté dvakrát s MEM+A a 5,0 ml MEM+A doplnených 50 % gama-ožiareného fetálneho telacieho séra. Vírusové izolačné flaštičky boli inkubované pri 3 5 °C v 5 % C02 atmosfére a denne sledované na výskyt cytopatických účinkov (CPE). PRRSV ISU-P cytopatický účinok začal obklopením malého miesta 5 až 10 buniek a pokračoval, až bolo vela buniek pyknotických a umiestnených od substrátu počas priebehu 4 až 7 dní po infekcii.
ISU-P izolát bol potvrdený ako PRRSV izolát fluorescenčným vyfarbením protilátky s PRRSV skupinou špecifickej monoklonálnej protilátky, označenie verejne ako SDOW17. Naviac boli negatívne vyfarbené vírusom infikované bunky skúšané transmisnou elektrónovou mikroskopiou na prítomnosť vírusových častíc. Pozorované vírusové častice boli sférické a obalené s priemerným priemerom viriónu 65 nm a priemerom jadra 27 nm. Tkanivová vírusová kultúra charakterizovaná týmto spôsobom bola použitá pre pokusnú reprodukciu neskorého potratu a u brezivých prasníc (tabulka mladé prasnice vystavené homogenátom (PRRS-hm) alebo
1). Tabulka buď ISU-P reprodukčného
ISU-P rastlému ukazuje, že infikovaným v bunečnej zlyhania brezivé plúcnym kultúre (PRRS-tc) demonštrujú typické znaky reprodukčného a respiračného syndrómu ošípaných (PRRS). V PRRS-hm skupinách neboli nájdené vrhnuté žiadne normálne prasiatka. V PRRS-tc skupinách boli iba z 33 prasiatok vrhnutých normálne. V porovnaní, bolo 29 z 30 (96,7 %) nevystavených prasiatok pri vrhu normálnych. Skutočnosť, že ISU-P, i po purifikácii tkanivovej kultúry, môže reprodukovať
PRRS potvrdzuje, že izolát je správne klasifikovaný ako rod Arterivirus v rodine Togaviridae. Tento izolát bol tiež zistený ako produkujúci miernu intersticiálnu pneumóniu u pokusne infikovaných prasiatok.
Rysom predloženého vynálezu je, že PRRSV podlá vynálezu môže rásť v určitých bunkách tkanivovej kultúry, ktoré účinne replikujú vírus na hladinu dostatočnú na poskytnutie antigénovej hmoty nevyhnutnej na inkorporovanie do vakcín, ktoré môžu chrániť prasiatka a/alebo brezivé mladé prasnice alebo prasnice pred PRRS podnetom. Ilustratívne PRRSV môže byť pestovaný na tkanivovej bunečnej kultúre označenej MA104 od Whittaker BioProducts. Pokusy s množením vírusu, používajúce rovnaké kultivačné odmienky, s MA 104 bunkami získanými z troch rôznych zdrojov naznačujú, že existuje vysoký stupeň variability medzi MA 104 bunkami, pokial ide o schopnosť podporovať PRRSV replikáciu na vysoký titer. Jedna MA 104 bunečná kultúra označená MA 104(M) od Miles Inc., Agriculture Division, Animal Health Products Group, a použitá vo vyššie popísaných štúdiách, konzistentne podporuje PRRSV replikácii na vysoký titer. Ďalej kloň bunečnej línie, vyvinutý v Miles Inc., Agriculture Division, Animal Health Products Group, ktorý je odvodený od MA 104(M) označený 9009B, podporuje replikáciu PRRSV na titre vyššie ako rodičovská bunečná línia. Preferovanou tkanivovou bunečnou kultúrou pre rast ISU-P je 9009B. Ďalej je podrobnejší popis propagácie bunečnej kultúry PRRSV ISU-P.
Bunky tkanivovej kultúry (MA 104(M) a 9009B) boli kultivované a udržiavané v Dulbeccovom modifikovanom minimálnom základnom médiu, s vysokým obsahom glukózy (DMEM/HG), doplnenom 5 % fetálneho telacieho séra a pufrovanom 1,3 g/1 hydrogénuhličitanu sodného. Bunečné pasáže boli vykonané s dostatočným počtom buniek na udržanie po 48 hodín. PRRSV ISU-P vírusové konfluentnej monovrstvy základy boli zriedené v DMEM/Hg + 5 % fetálnym sérom pufrovaným na pH 6,8 g s PIPES.
Vírus bol inokulovaný na bunečnú vrstvu pri malej multiplicite infekcie (MOI) a inkubovaný pri 36 'C. Infikované kultúry boli zozbierané, keď bol evidentný 90 - 100 % CPE. Maximálna vírusová antigénna hmota bola získaná po jednom cykle -70 °C zmrazenia/roztopenia. Priemerný vírusový titer získaný z propagácie v MA 104(M) bunkách sa pohybujú od 103'0 až 104'5 fluorescentnej protilátkovej infekčnej dávky 50/ml (FAID50/ml). Vírusové titre dosiahnuté propagáciou v 9009B bunečnom klone sa pohybujú od 105'5 do 106'5 FAID50/ml. Titre v tomto rozsahu umožňujú, aby bola inkorporovaná dostatočná antigénna hmota do komerčných PRRSV vakcínových prípravkov väčšieho objemu ako 50 1.
Ako bude zrejmé odborníkom v odbore, pretože PRRSV môže byť rozmnožovaný na vysoké hladiny antigénnej hmoty, deriváty vírusu, zahrňujúce jeho podjednotky, ktoré sú účinné podlá vynálezu, môžu byť získané prostriedkami známymi v odbore ako je extrakcia z vírusu. Ďalej môžu byť ochranné antigény identifikované v molekulovej úrovni a reprodukované a exprimované za použitia rekombinantnej technológie.
Virálne kvapaliny pre vakcínové prípravky boli inaktivované dvoma metódami. Zvolenými inaktivantmi boli formalín a binárny etylénimín (BEI). Inaktivácia bola vykonaná štandardnými metódami tu podrobnejšie popísanými. Formalínová inaktivácia bola vykonaná zmiešaním virálnych kvapalín so zásobným 37 % formaldehydom na konečnú koncentráciu formalínu 0,05 %. Zmes formalín - vírus bola udržiavaná pri teplote miestnosti (približne 25 °C) za nepretržitého miešania počas 24 hodín. Vzorky boli odoberané v čase 0,8, 12 a 24 hodín a skúšané na živý vírus v 9009B bunkách. Cytopatický efekt a fluorescenčné vyfarbenie so skupinou špecifickej monoklonálnej protilátky detegujúcej živý PRRSV iba v dobe = 0 hodín.
Inaktivácia s BEI bola vykonaná spojením zásobného 0,1 M BEI (20,5 g/1 2-bróm-etylamínu HBR v 0,175 N NaOH) s virálnymi kvapalinami na konečnú koncentráciu 1,0 mM BEI. Inaktivácia bola vykonaná udržiavaním zmesi BEI - vírus pri teplote miestnosti za konštantného miešania skončená prídavkom počas 48 hodín. Vírusová inaktivácia bola
1,0 M tiosíranu sodného na konečnú koncentráciu 0,1 mM za miešania po 2 hodiny.
Vzorky boli odoberané v čase 0, 2, 4, 8, 12, 24 a 48 hodín a skúmané na živý vírus ako je popísané vyššie. Živé PRRSV boli detegované iba v časoch = 0, 2 a 4 hodiny.
Pri príprave modifikovanej živej alebo zoslabenej vakcíny podía vynálezu je PRRSV zmenený tak, že ešte môže infikovať hostiteía obmedzeným spôsobom, ale nemôže spôsobiť príznaky choroby u hostiteía. Normálne takáto zmena vírusu sa vykonáva jeho pasážovaním v nehostitelskej bunke ako sú bunky Afričan Green Monkey obličiek. Na začiatku vírus nerastie dobre alebo nerastie vôbec. V poslednom uvedenom prípade môže byť nevyhnutné zosilniť vírus, aby sa adaptoval na rast v bunečnej kultúre. Toto môže byť dosiahnuté prídavkom vírusu k bunečnej kultúre pri vysokej alebo nízkej multiplicite infekcie (MOI). Alternatívne môže byť vírus posilnený pasážovaním alebo slepým pasážovaním samotným s bunkami, až je pozorovaný cytopatický efekt, čo indikuje, že vírus bol adaptovaný. Len čo sa objaví adaptácia, bude sa titer vírusu zvyšovať ako je izolát ISU-P pasážovaný z MA 104 bunečnej línie, pasážovaný PRRSV ten, ktorý bol (M) Tabulka 1 ukazuje, ISU-P (PRRS-tc) môže izolovaný z pľúcneho homogenátu pozorované, keď je PRRSV bunečnej línie do 9009B že tkanivovou kultúrou byť menej virulentný ako ako typický výsledok adaptácie. Hodnoty popísané v tabulke 2 indikujú, že spôsob výroby vakcín podlá predloženého vynálezu poskytuje vakcíny, ktoré sú najmä účinné pri dosiahnutí ochrany proti PRRS.
Inaktivovaný PRRSV ISU-P bol spracovaný s prísadami nasledovne. K inaktivovaným kvapalinám boli pridané prísady vybrané zo skupiny, zahrňujúcej Freundovo kompletné adjuvans (FCA), Freundovo nekompletné adjuvans (FIA), adjuvans na báze carbopolu a Diamond Scientific Adjuvans B (adj. B). Tieto adjuvans predstavujú hlavné typy používané pri výrobe vakcín. Adjuvans na báze oleja predstavujú FCA, FIA a ADJ B. Adjuvans na báze vody sú predstavované carbopolom. Inaktivovaný PRRSV ISU-P môže prípadne obsahovať vhodnú chrániacu látku.
Vakcínové prípravky s FCA a FIA boli pripravené emulgáciou inaktivovaného vírusu, typicky v rovnakých objemoch inaktivovanej vírusovej kvapaliny a adjuvans za použitia 18 guage dvojitého luer uzatváracieho zariadenia a dvoch striekačiek. Kvapaliny boli stláčané opakovane zostavou medzi striekačkami až do vytvorenia hustej polopevnej emulzie. Emulzie boli plnené priamo do striekačiek na podávanie.
Vakcínové prípravky s Adj B boli pripravené zmiešaním
V zásobného Adj B s rovnakým objemom inaktivovanej PRRSV ISU-P vírusovej kvapaliny. Adjuvans a vírus boli zmiešané za miešania pri teplote miestnosti po 1 hodinu. Vakcína s adjuvans bola aseptický prenesená do sterilných multidávkových fľaštičiek a skladovaná pri 4 ’C pred podaním.
Vakcíny na báze zásobného carbopolového kvapalinami na konečnú carbopolu boli pripravené zmiešaním adjuvans s inaktivovanými vírusovými koncentráciu adjuvans 10 % obj./obj.
Adjuvans a vírus boli zmiešané miešaním pri teplote miestnosti po 4 hodiny. Vakcína s adjuvans bola aseptický prenesená do sterilných multidávkových fľaštičiek a skladovaná pri 4 ’C pred podaním.
PRRSV ISU-P vírus v preinaktivačnom titre tak nízkom ako 10 5,0 FAID50/ml bol použitý v rôznych vakcínových prípravkoch, ako je popísané.
Za účelom preukázania, že PRRSV izolát ISU-P by mohol chrániť voči reprodukčnému a respiračnému syndrómu ošípaných, boli vyhotovené dve štúdie vakcinácia/podnet. V prvej štúdii boli 4 mladé prasnice imunizované živým PRRSV ISU-P oronasálnym vystavením vírusu bu<í priamou cestou alebo kontaktom s chorými prascami. Dve mladé prasnice rovnakého veku boli ponechané neimunizované (nevystavené) a boli ustajnené oddelene a slúžili ako kontrola. Priamo vystavené vakcináty (č. 57 a č. 58) dostali 3,0 ml vírusového inokula intranasálne. Sérokonvertovali 14 dní po vystavení podľa Indirect Fluorescent Antibody Test. Kontaktom vystavené mladé prasnice (č. 476 a č. 480) boli imunizované orálnou cestou po umiestnení do tesného kontaktu s chorými prascami. Tieto prasce sérokonvertovali 90 dní po expozícii. Sérokonverzia je indikovaná IFA titrom vyšším ako 1:20.
Potom čo imunizované mladé prasnice sérokonvertovali, bol ich estrus synchronizovaný a boli brezivé. Brezivosť bola potvrdená ultrazvukom. 90. deň brezivosti dostali vakcinované a kontrolné brezivé mladé prasnice 3,0 ml PRRS vírusového podnetu intranasálne pri titre 1 x 104 FAID^q.
Kontrolné mladé prasnice č. 52 a č. 477 demonštrujú včasné príznaky choroby tým, že majú zníženú chuť ku kŕmeniu a zvýšené telesné teploty (103 - 104 ’F) dva až tri dni po podnete. Žiadne klinické príznaky neboli zaznamenané u ISU-P vystavených (vakcinovaných) mladých prasníc. Tieto výsledky demonštrujú ochranu pred klinickým syndrómom respiračnej choroby.
Všetky mladé prasnice boli chované až do odstavenia mláďat (4 týždne po vrhu). Tabuľka 2 ukazuje výsledky z tohto pokusu.
Výsledky sú pri vrhu zaznamenané ako dĺžka brezivosti (dĺžka brezivosti je normálne skrátená PRRS infekciou) mŕtvo narodenými alebo mŕtvymi plodmi, oslabenými prasiatkami a múmiami. Tieto ťažkosti pri vrhu sú všetky indikáciou pre PRRS infekciu u brezivých mladých prasníc alebo prasníc. Naviac bol zaznamenaný počet normálnych prasiatok.
Žiadna z kontrolných mladých prasníc nevrhla normálne prasiatko (0 až 22 prasiatok . je normálnych). Sedem (7) z 22 prasiatok sa narodilo mŕtvych a 15 až 22 prasiatok bolo oslabených. Dĺžka brezivosti u kontrolných mladých prasníc bola skrátená o 2,5 dňa, čo je typické pre PRRS u brezivých prasníc. V imunizovanej skupine (n = 50) 40 prasiatok alebo 80 % bolo narodených normálne. Šesť (6) z 50 prasiatok bolo narodených mŕtvych a 4 z 50 plodov sa javilo pri vrhu ako mumifikované. Vo vakcinovanej skupine neboli žiadne oslabené prasiatka. Je zrejmé, že mladé prasnice vopred vystavené živému PRRSV ISU-P, ktoré boli brezivé a potom im bol podaný podnet, sú chránené pred podnetom ako je demonštrované stratou priamych klinických príznakov choroby u mladých prasníc a ochranou plodov, ktoré nosia.
Je zrejmé, že pretože IFA testovacie činidlá, ktoré boli použité na stanovenie sérostatusu mladých prasníc v tejto štúdii, boli odvodené od PRRSV ISU-P a pretože je tu priamy vzťah medzi stavom séra mladých prasníc a ochranou pred PRRS, PRRSV ISU-P izolát by mohol byť použiteľný v diagnostických testoch ako sú Indirect Fluorescent Antibody testy, ako je tu demonštrované, ELISA testoch, skúškach sérovej neutralizácie, Direct Flurescent Antibody skúškach a iných diagnostických skúškach. Preto môžu byť pripravené diagnostické skúšky odvodené od antigénu získaného z PRRSV ISU-P a použité podľa vynálezu.
V druhej štúdii vakcinácia/podnet boli mladé prasiatka (4 až 6 týždňov staré) vakcinované niekoľkými inaktivovanými, adjuvans obsahujúcimi PRRSV ISU-P vakcínami. Vakcínový antigénový pool bol pripravený inaktiváciou PRRSV ISU-P s BEI ako bolo prv uvedené a spracovaný s prísadou bud’ Carbopol, FCA/FIA alebo Ad j . B. Druhý vakcínový pool bol pripravený inaktiváciou PRRSV ISU-P s formalínom ako už bolo popísané a spracovaný s rovnakými uvedenými 3 prísadami. Boli pripravené tri imitované vakcíny za účelom potvrdenia toho, že prísady a bunky by nemali stimulovať falošnú imunologickú odpoveď. Imitované vakcíny boli pripravené pridaním neinfikovaných buniek tkanivovej kultúry. Každou vakcináciou boli infikované dve prasiatka. Vakcíny boli podávané subkutánne vakcinácii v dňoch 0, 21, 42 a bol prasiatkam podaný
64. Sedem dní po poslednej podnet intranasálne 103,5
FAID50 virulentného živého PRRSV.
Všetky prasiatka boli po podnete denne sledované na klinické príznaky choroby. Naviac boli odoberané vzorky krvi a spracované na v tkanivovej kultúre. Živý vírus nájdený v získanie vírusu krvnom prúde po podnete znamená, že sa objavila virémia.
Sérové štúdie, v poznamenať, IFA porovnať výsledkami.
neutralizačné titre boli hodnotené deň podnetu a 19 dní po podnete, že test sérovej neutralizácie je menej test použitý v predchádzajúcej štúdii. Preto tieto titrové výsledky s predchádzajúcimi titrovými na začiatku potrebné
Je citlivý ako nebolo možné
Tabuľka 3 uvádza výsledky podnetu. Neboli pozorované žiadne klinické znaky choroby u vakcínovaných alebo kontrolných prasiat. Ďalej ani vakcináty ani kontroly nevyvinuli titre sérovej neutralizácie počas vakcinačnej periódy. Toto indikuje, že neboli vystavené živému vírusu počas tejto časovej periódy (kontroly zostali negatívne) a tiež to indikuje, že vakcíny nestimulovali humorálnu odozvu dosť vysokú nato, aby bola meraná sérovým neutralizačným testom. Skutočnosť, že sérová neutralizácia titrovej odozvy po podnete bola významná, indikuje, že všetky prasce boli účinne podnietené živým PRRS vírusom. Overením tohto vystavenia podnetu sú percentá kontrolných prasiatok demonštrujúcich virémiu. Všetky kontrolné prasiata bez jedného (87,5 %) boli infikované. Imunitná odpoveď u vakcinovaných prasiatok bola tak silná, že boli schopné blokovať virémiu. Iba 1 z 12 vakcinovaných prasiat. (8,3 %) demonštrovalo virémiu. Vakcína tak chráni 91,7 % prasiat.
Bez obmedzenia a viazania akoukolvek teóriou vynálezu sa predpokladá, že zosilňujúce pasážovanie pôvodného PRRSV izolátu cez špecificky upravený kloň MA104(M) Afričan Green Monkey Cells (9009B) mohlo úspešne zmeniť jeden alebo viac epitopov vírusu, čo vedie k zvýšenej imunogenicite tohto vírusu a je tak umožnená výroba vakcíny v oblasti, kde doteraz vedci zlyhávali.
I keď bol vynález podrobne popísaný za účelom ilustrácie, je treba chápať, že to bolo vykonané pre účely ilustrácie a že je možné vykonať rôzne variácie, čo bude zrejmé odborníkom v odbore bez toho, aby bol porušený rozsah a myšlienka vynálezu, ktorý je obmedzený iba predloženými nárokmi.
Tabuľka 1 Reprodukcia neskorého abortu a reprodukčné zlyhanie u prasníc vystavených PRRSV izolátu ISU-P v porovnaní s nevystavenými kontrolnými prasnicami
I. PRRS vystavená skupina
Prasnica č. doba brezivosti Príprava vírusu Mŕtvo nar. Oslabené Múmia Normál (a)
57 112 dní PRRS-hmb 6 8 0 0
54 108 dní PRRS-hm 6 1 0 0
649 112 dní PRRS-hm 3 7 0 0
58 112 dní PRRS-hm 4 4 3 0
166 112 dní PRRS-tc'J PRRS-tcf 0 2 6 1
164 118 dní 2 2 5 1
80 110 dní PRRS-tce 2 2 2 2
Celkom 23 26 16 4
a = normálna doba brezivosti prasníc je 14 b = PRRSV pozitívny gnotobiotický pľúcny homogenát prasiatok jakoinokulom c = tkanivová kultúra získaná z PRRSV, 10^'θ fluorescentná protilátková infekčná dávka 50 na ml (FAID 50/ml) d = tkanivová kultúra odvodená od PRRSV, 1Ο4'θ FAID^/ml e = tkanivová kultúra odvodená od PRRSV, 10^'θ FAID^/m
II. Nevystavená kontrolná skupina
Prasnica č. doba brezivosti Príprava vírusu Mŕtvo nar. Oslabené Múmia Norm
52 114 dní na 0 0 0 11
56 115 dní na 0 0 0 12
163 116 dní na 1 0 0 7
Celkom 1 0 0 30
Tabuľka 2 Výsledky vrhu ISU-P imunizo.vaných a neimunizovaných mladých prasnic
Prasnice č. IFA titer Dĺžka brezivosti Mŕtvo narodené Oslabené Múmie Normálne alebo mŕtve prasiatka
57v + 113 dní 2X 0 0 7
58V + 114 dní 4 0 3 11
476V + 113 dní 0 0 1 10
480V + 114 dní 0 0 0 12
52C - 111 dní 5 7 0 0
477 - 112 dní 2 8 0 0
Celkom 6 vakc. 0 vakc. 4 vakc. 40 vakc.
kont. 15 kont. 0 kont. 0 kont.
+ označuje IFA titer nad 20
- označuje IFA titer pod 20 V označuje vakcináty
C označuje kontroly
Tabulka 3 Súhrn pokusov s PRRSV inaktivovanou vakcínov
Vakcínová Priemerná SN Priemerná SN Vírová
skupina každého podnetu každého podnetu* izolácia
BEI, PRRS-Carbopol n=2 <1:2 1:82 neg./neg.
BEI, PRRS-FCA/FIA n=2 <1:2 1:4 neg./neg.
BEI, PRRS-Adj B n=2 <1:2 1:5 neg./neg.
Form., PRRS-Carbopol n=2 <1:2 1:23 neg./poz.
Form.,PRRS-FCA/FIA n=2 <1:2 1:2 neg./neg.
Form.,PRRS-Adj B n=2 1:3 1:8 neg./neg.
Imitovaná vakcínová
skupina
Imitácia AG-carbopol n=2 <1:2 <1:2 poz./poz.
Imitácia AG-FCA/FIA n=2 <1:2 <1:2 poz./poz.
Imitácia AG-AdjB n=2 <1:2 <1:2 poz./poz.
a = SN odozva 19. deň po podnete, skončenie pokusu b = vírusová izolácia z plazmy v akúkoľvek dobu počas 19. dňa po podnete periódy testu vírusová izolácia detegovaná CPE v 9009B bunkách a potvrdená FA vyfarbením rovnakého PRRSV skupinou špecifickej monoklonálnej protilátky SD0W17

Claims (20)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Spôsob kultivácie PRRSV v tkanivovej kultúre, ktorá je citlivá na infekciu pre replikáciu vírusu na množstvá ktoré sú dostatočné na ochranu živočíchov pred PRRS alebo použitie v diagnóze PRRS alebo identifikácii molekulovej štruktúry PRRSV pre vývoj rekombinantných produktov, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje inokuláciu vírusu do tkanivovej kultúry a získanie replikovaného vírusu.
  2. 2. Spôsob podlá nároku 1, vyznačujúci sa tým, že tkanivová kultúra obsahuje bunečnú líniu.
  3. 3. Spôsob podlá nároku 2, vyznačujúci sa tým, že tkanivovou kultúrou je bunečná línia Afričan Green Monkey Kidney.
  4. 4. Spôsob podlá nároku 3, vyznačujúci sa tým, že bunečná línia Afričan Green Monkey Kidney je typu označeného MA 104 (M).
  5. 5. Spôsob podlá nároku 4, vyznačujúci sa tým, že bunečnou líniou je kloň bunečnej línie Afričan Green Monkey označený 9009B.
  6. 6. Tkanivová kultúra obsahujúca PRRSV uvedený v nároku 1.
    7. v nároku Tkanivová 2. kultúra obsahujúca PRRSV ako je uvedený 8. v nároku Tkanivová 3. kultúra obsahujúca PRRSV ako je uvedený
  7. 9. Tkanivová kultúra, obsahujúca PRRSV vyrobený podlá nároku
    1 v komerčnom meradle nad 25 1 pri FAID^q titre nad ΙΟ^'θ/mi.
  8. 10. Spôsob prípravy vakcíny účinnej pri ochrane prasiatok proti PRRS, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje poskytnutie PRRSV ako je uvedený v nároku 1, uvoľnenie vírusu z tkanivovej kultúry buniek a upravenie antigénnej hmoty riedením, koncentráciou alebo extrakciou pre produkciu imunologický účinného množstva antigénnej hmoty pre modifikovaný živý (zoslabený), inaktivovaný, podjednotkový alebo rekombinantný prípravok.
  9. 11. Spôsob úpravy PRRSV pre produkciu modifikovanej živej alebo zoslabenej vakcíny zosilňovacím pasážovaním PRRSV cez nehostitelské bunky a bunečné línie až vírus už ďalej neprodukuje príznaky PRRS.
  10. 12. Vakcína, vyznačujúca sa tým, že je pripravená spôsobom podlá nároku 10, kde PRRSV je modifikovaný živý (zoslabnutý) a je v kvapalnej, zmrazenej alebo vysušenej forme.
  11. 13. Vakcína pripravená použitím spôsobu podlá nároku 9, kde PRRSV je inaktivovaný a zmiešaný s prísadami a prípadne obsahujúci vhodné ochranné látky.
  12. 14. Vakcína podlá nároku 13, kde prísada je buď na olejovej báze alebo na vodnej báze.
  13. 15. Vakcína podlá nároku 13, kde prísada je vybraná zo skupiny, zahrňujúcej Freundovo kompletné adjuvans, Freundovo nekompletné adjuvans, adjuvans na báze carbopolu a Diamond Scientific Adjuvant B.
  14. 16. Vakcína podlá nároku 13, kde inaktivačným činidlom je binárny etylénimín, beta propiolaktón alebo formalin.
  15. 17. Vakcína pripravená spôsobom podlá nároku 10, kde tkanivovou kultúrou je bunečná línia typu klasifikovaného ako Afričan Green Monkeys bunky.
  16. 18. Vakcína pripravená podlá spôsobu z nároku 10, kde Afričan Green Monkey je bunečná línia klonu označeného 9009B.
  17. 19. Vakcína pripravená spôsobom podlá nároku 10, kde antigénna hmota je inaktivovaná, modifikovaná živá (zoslabená), extrahovaná a použitá ako podjednotka alebo získaná rekombinantnou technológiou.
  18. 20. Vakcína pripravená spôsobom podlá nároku 10, kde PRRSV obsahuje viac PRRSV izolátov.
  19. 21. Vakcína pripravená spôsobom podľa nároku 10, kde PRRSV je izolát označený ako ISU-P.
  20. 22. Spôsob zmenenia epitopov PRRSV na zvýšenie imunogenicity pasážovaním vírusu cez bunečnú líniu Afričan Green Monkey Kidney označenú 9009B.
SK986-95A 1993-02-08 1994-01-26 Process for growing porcine reproductive and respiratory syndrome virus and its use in vaccines SK98695A3 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US1491593A 1993-02-08 1993-02-08
PCT/US1994/000951 WO1994018311A1 (en) 1993-02-08 1994-01-26 Process for growing porcine reproductive and respiratory syndrome virus and its use in vaccines

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SK98695A3 true SK98695A3 (en) 1996-11-06

Family

ID=21768529

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK986-95A SK98695A3 (en) 1993-02-08 1994-01-26 Process for growing porcine reproductive and respiratory syndrome virus and its use in vaccines

Country Status (21)

Country Link
US (2) US5510258A (sk)
EP (1) EP0683816B1 (sk)
JP (1) JP3710095B2 (sk)
KR (1) KR100374295B1 (sk)
CN (1) CN1080300C (sk)
AT (1) ATE197314T1 (sk)
AU (1) AU681874B2 (sk)
BG (1) BG63170B1 (sk)
CZ (1) CZ289743B6 (sk)
DE (1) DE69426228T2 (sk)
DK (1) DK0683816T3 (sk)
ES (1) ES2152304T3 (sk)
FI (1) FI117513B (sk)
GR (1) GR3035257T3 (sk)
HU (1) HU218430B (sk)
NO (1) NO317662B1 (sk)
NZ (1) NZ261992A (sk)
PL (1) PL178609B1 (sk)
PT (1) PT683816E (sk)
SK (1) SK98695A3 (sk)
WO (1) WO1994018311A1 (sk)

Families Citing this family (60)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2290906C (en) * 1991-06-06 2003-04-01 Stichting Centraal Diergeneeskundig Instituut Causative agent of the mystery swine disease, vaccine compositions and diagnostic kits
US6080570A (en) * 1991-08-26 2000-06-27 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Method of producing a vaccine for Swine Infertility and Respiratory Syndrome
US6982160B2 (en) * 1991-08-26 2006-01-03 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Immunogenic compositions that include SIRS virus
US5846805A (en) 1991-08-26 1998-12-08 Boehringer Ingelheim Animal Health, Inc. Culture of swine infertility and respiratory syndrome virus in simian cells
US6042830A (en) * 1992-08-05 2000-03-28 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Viral agent associated with mystery swine disease
US5695766A (en) * 1992-10-30 1997-12-09 Iowa State University Research Foundation Highly virulent porcine reproductive and respiratory syndrome viruses which produce lesions in pigs and vaccines that protect pigs against said syndrome
US6773908B1 (en) * 1992-10-30 2004-08-10 Iowa State University Research Foundation, Inc. Proteins encoded by polynucleic acids of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV)
US6592873B1 (en) 1992-10-30 2003-07-15 Iowa State University Research Foundation, Inc. Polynucleic acids isolated from a porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) and proteins encoded by the polynucleic acids
US6380376B1 (en) 1992-10-30 2002-04-30 Iowa State University Research Foundation Proteins encoded by polynucleic acids of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV)
ES2074950B1 (es) * 1993-09-17 1996-03-16 Iberica Cyanamid Vacuna para la prevencion de la enfermedad reproductiva y respiratoria de la cerda.
US5690940A (en) * 1995-06-21 1997-11-25 Regents Of The University Of Minnesota Low pathogencity PRRS live virus vaccines and methods of preparation thereof
ES2102971B1 (es) * 1996-01-25 1998-03-01 Hipra Lab Sa Nueva cepa atenuada del virus causante del sindrome respiratorio y reproductivo porcino (prrs), las vacunas y medios de diagnostico obtenibles con la misma y los procedimientos para su obtencion.
CZ273798A3 (cs) * 1996-03-01 1999-02-17 Schering Corporation Vakcína a způsob ochrany proti reprodukčnímu a respiračnímu syndromu vepřů
US6015663A (en) * 1996-03-01 2000-01-18 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Restriction enzyme screen for differentiating porcine reproductive and respiratory syndrome virus strains
US5866401A (en) * 1996-03-01 1999-02-02 Schering Corporation Porcine reproductive and respiratory syndrome vaccine
US5976537A (en) * 1996-07-02 1999-11-02 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Porcine reproductive and respiratory syndrome vaccine
DE69704011T2 (de) * 1996-10-09 2001-06-07 Akzo Nobel Nv Europäische Vakzinstämme des Fortplanzungs-Atmungs-Syndromsvirus des Sweins (PRRSV)
EP0839912A1 (en) * 1996-10-30 1998-05-06 Instituut Voor Dierhouderij En Diergezondheid (Id-Dlo) Infectious clones of RNA viruses and vaccines and diagnostic assays derived thereof
US20040224327A1 (en) * 1996-10-30 2004-11-11 Meulenberg Johanna Jacoba Maria Infectious clones of RNA viruses and vaccines and diagnostic assays derived thereof
WO1998035023A1 (en) * 1997-02-07 1998-08-13 Origen, Inc. Method for growing porcine reproductive and respiratory syndrome virus for use as vaccines and diagnostic assays
PT980387E (pt) 1997-05-06 2007-07-31 Boehringer Ingelheim Vetmed Sítios antigénicos de prrsv que identificam sequências peptídicas do vírus prrsv para utilização em vacinas ou em ensaios de diagnóstico
AU8393398A (en) * 1997-07-10 1999-02-08 Regents Of The University Of Minnesota Causative agent of sow abortion and mortality syndrome (sams), vaccine compositions, antibodies and method
UA78180C2 (uk) 1997-10-03 2007-03-15 Меріаль Кільцевий вірус свині типу ii, вакцини та діагностичні реагенти
FR2772047B1 (fr) 1997-12-05 2004-04-09 Ct Nat D Etudes Veterinaires E Sequence genomique et polypeptides de circovirus associe a la maladie de l'amaigrissement du porcelet (map), applications au diagnostic et a la prevention et/ou au traitement de l'infection
NZ513289A (en) 1998-12-22 2003-04-29 Pfizer Prod Inc Infectious cDNA clone of north american procine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) virus and uses thereof
JP3961222B2 (ja) * 1999-03-08 2007-08-22 ベーリンガー インゲルハイム フェトメディカ ゲーエムベーハー Ｐｒｒｓｖワクチン
DK2251419T3 (da) 1999-04-22 2012-07-02 Us Agriculture Porcint reproduktions- og respirations-syndrom-vaccine baseret på isolat JA-142
US6497883B1 (en) * 1999-06-10 2002-12-24 Merial Porcine circovirus recombinant poxvirus vaccine
ES2170622B1 (es) * 1999-12-03 2004-05-16 Consejo Superior De Investigaciones Cientificas Clones y vectores infectivos derivados de coronavirus y sus aplicaciones.
US6673349B2 (en) * 1999-12-20 2004-01-06 Simon Johannes Barteling Method of inactivating microorganisms
WO2001059077A1 (en) * 2000-02-08 2001-08-16 Regents Of The University Of Minnesota Porcine reproductive and respiratory syndrome virus and methods of use
US6740490B2 (en) * 2001-01-29 2004-05-25 Kansas State University Research Foundation Identification and applications of porcine reproductive and respiratory syndrome virus host susceptibility factor(s) for improved swine breeding
US6841364B2 (en) * 2002-01-22 2005-01-11 Protatek International, Inc. Infectious cDNA clones of porcine reproductive and respiratory syndrome virus and expression vectors thereof
US7906311B2 (en) 2002-03-20 2011-03-15 Merial Limited Cotton rat lung cells for virus culture
BRPI0510928A (pt) 2004-06-18 2007-11-13 Univ Minnesota identificação de organismos viralmente infectados e vacinados
US7632636B2 (en) 2004-09-21 2009-12-15 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Porcine reproductive and respiratory syndrome isolates and methods of use
PT2460817T (pt) 2004-12-30 2017-07-03 Boehringer Ingelheim Vetmedica Inc Composições imunogénicas de pcv2 e métodos de produção de tais composições
US7691368B2 (en) 2005-04-15 2010-04-06 Merial Limited Vaccine formulations
ES2386973T3 (es) 2005-06-24 2012-09-10 Regents Of The University Of Minnesota Virus PRRS, clones infecciosos, mutantes de los mismos, y métodos de utilización
CN102698263B (zh) 2005-12-29 2016-07-06 贝林格尔.英格海姆维特梅迪卡有限公司 多价pcv2免疫原性组合物和制备此类组合物的方法
CN100523177C (zh) * 2007-01-09 2009-08-05 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 猪繁殖与呼吸综合症病毒弱毒疫苗株及其应用
MX2009007457A (es) 2007-01-12 2009-08-12 Univ Illinois Celulas que no son de mono para el desarrollo del virus del sindrome porcino reproductor y respiratorio (prrs).
US7666585B2 (en) * 2007-06-15 2010-02-23 Protatek International, Inc. Construction of chimera PRRSV, compositions and vaccine preparations
JP2010531143A (ja) * 2007-06-25 2010-09-24 サウス ダコタ ステート ユニバーシティー 組換え北アメリカ１型ブタ生殖器呼吸器症候群ウイルス及び使用方法
FI122778B (fi) 2008-03-31 2012-06-29 Metso Power Oy Pyrolyysimenetelmä kattilan yhteydessä ja pyrolyysilaitteisto
CN101363865B (zh) * 2008-05-26 2013-03-06 北京庄笛浩禾生物医学科技有限公司 一种猪蓝耳病毒胶体金检测试纸条、其制备方法及其应用
MX2011002046A (es) * 2008-08-25 2011-04-21 Boehringer Ingelheim Vetmed Vacuna contra sindrome disgenesico y respiratorio porcino altamente patogeno (hp prrs).
AR078253A1 (es) 2009-09-02 2011-10-26 Boehringer Ingelheim Vetmed Metodos para reducir la actividad antivirica en composiciones pcv-2 y composiciones pcv-2 con mejor inmunogenicidad
KR101746880B1 (ko) 2009-09-10 2017-06-14 메리얼 인코포레이티드 사포닌-함유 면역보강제를 포함하는 신규 백신 제형
UA112860C2 (uk) 2011-02-17 2016-11-10 Бьорінгер Інгельхайм Ветмедіка Гмбх Спосіб одержання prrsv у комерційному масштабі
MY161198A (en) 2011-02-17 2017-04-14 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Novel european prrsv strain
EP2737058A1 (en) 2011-07-29 2014-06-04 Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH INFECTIOUS cDNA CLONE OF EUROPEAN PRRS VIRUS AND USES THEREOF
US9187731B2 (en) 2011-07-29 2015-11-17 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh PRRS virus inducing type I interferon in susceptible cells
ES2626297T3 (es) 2011-08-12 2017-07-24 Merial, Inc. Preservación asistida por vacío de productos biológicos, en particular de vacunas
US9149518B2 (en) 2012-12-07 2015-10-06 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Porcine reproductive and respiratory syndrome virus compositions and uses thereof
WO2014150822A2 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, compositions, vaccine and methods of use
MX2016003855A (es) 2013-09-25 2016-08-04 Zoetis Services Llc Composicion de vacuna de circovirus porcino tipo 2b divergente y procedimientos de uso.
TWI745278B (zh) 2014-10-10 2021-11-11 以色列商艾畢克生物實驗有限公司 發泡性降低之疫苗組合物
CN104694485A (zh) * 2015-02-13 2015-06-10 广西壮族自治区兽医研究所 Z-ietd-fmk在提高prrsv体外培养滴度方面的应用及其方法
CA3027877A1 (en) 2016-06-17 2017-12-21 Merial, Inc. Novel immunogenic formulations comprising linear or branched polyacrylic acid polymer adjuvants

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5213795A (en) * 1990-10-24 1993-05-25 Oxford Encephalomyocarditis virus vaccine
CA2290906C (en) * 1991-06-06 2003-04-01 Stichting Centraal Diergeneeskundig Instituut Causative agent of the mystery swine disease, vaccine compositions and diagnostic kits
DE69214657T4 (de) * 1991-08-26 2003-07-17 Boehringer Ingelheim Vetmed Vakzine gegen und diagnosemethode für das schweine-unfruchtbarkeits- und atmungs-syndrom (suas)
MX9204885A (es) * 1991-08-26 1994-05-31 Boehringer Animal Health Inc Composicion de vacuna que comprende virus del sindrome de infertilidad y respiratorio de los cerdos.
WO1993006211A1 (en) * 1991-09-16 1993-04-01 Collins James E Vaccine for mystery swine disease and method for diagnosis thereof
CA2121241C (en) * 1991-10-14 2007-12-04 Nicolaas Visser Porcine reproductive respiratory syndrome vaccine and diagnostic
FR2682966B1 (fr) * 1991-10-29 1994-12-02 Rhone Merieux Preparation d'antigenes et de vaccins du virus de la mystery disease, antigenes et vaccins obtenus pour la prevention de cette maladie.
US5695766A (en) * 1992-10-30 1997-12-09 Iowa State University Research Foundation Highly virulent porcine reproductive and respiratory syndrome viruses which produce lesions in pigs and vaccines that protect pigs against said syndrome

Also Published As

Publication number Publication date
HU218430B (hu) 2000-08-28
NO953091D0 (no) 1995-08-07
DE69426228T2 (de) 2001-03-01
FI117513B (fi) 2006-11-15
EP0683816B1 (en) 2000-11-02
EP0683816A1 (en) 1995-11-29
WO1994018311A1 (en) 1994-08-18
PT683816E (pt) 2001-03-30
JP3710095B2 (ja) 2005-10-26
NO317662B1 (no) 2004-11-29
CN1117742A (zh) 1996-02-28
PL310126A1 (en) 1995-11-27
NZ261992A (en) 1996-06-25
AU681874B2 (en) 1997-09-11
CZ289743B6 (cs) 2002-03-13
DE69426228D1 (de) 2000-12-07
US5510258A (en) 1996-04-23
BG99850A (bg) 1996-02-28
HU9502330D0 (en) 1996-05-28
PL178609B1 (pl) 2000-05-31
FI953731A (fi) 1995-08-04
KR100374295B1 (ko) 2003-12-24
CZ203195A3 (en) 1995-12-13
JPH08506486A (ja) 1996-07-16
ATE197314T1 (de) 2000-11-15
AU6128594A (en) 1994-08-29
US5587164A (en) 1996-12-24
FI953731A0 (fi) 1995-08-04
NO953091L (no) 1995-08-07
BG63170B1 (bg) 2001-05-31
DK0683816T3 (da) 2001-01-08
GR3035257T3 (en) 2001-04-30
HUT72917A (en) 1996-06-28
CN1080300C (zh) 2002-03-06
ES2152304T3 (es) 2001-02-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0683816B1 (en) Process for growing porcine reproductive and respiratory syndrome virus and its use in vaccines
EP0676467B1 (en) European vaccine strains of the porcine reproductive respiratory syndrome virus (PRRSV)
US6001370A (en) Attenuated strain of the virus causing the porcine reproductive respiratory syndrome (PRRS), and vaccines
EP0830142B1 (en) Prrs (porcine reproductive and respiratory syndrome) virus vaccine
KR101152012B1 (ko) 돼지 생식기 및 호흡기 증후군 바이러스 균주 및 조성물
KR100531491B1 (ko) 백신으로서 소 호흡 코로나바이러스
US5213795A (en) Encephalomyocarditis virus vaccine
JP3043353B2 (ja) ワクチン
CA2155533C (en) Process for growing porcine reproductive and respiratory syndrome virus and its use in vaccines
US6416764B1 (en) Vaccine
MXPA97007302A (en) New attenuated cepa of the virus causing the respiratory and reproductive swine syndrome (prrs), vaccines and diagnostic media obtained with the same and the procedures for your obtenc