SK287603B6

SK287603B6 - 4-(2-Butylamino)-2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3- yl)pyrazol-[1,5-a]-1,3,5-triazín, farmaceutická kompozícia obsahujúca túto zlúčeninu, použitie tejto zlúčeniny v terapii a na prípravu farmaceutickej kompozície a výrobok obsahujúci túto zlúčeninu

Info

Publication number: SK287603B6
Application number: SK1157-2003A
Authority: SK
Inventors: Paul J. Gilligan
Original assignee: Bristol-Myers Squibb Pharma Company
Priority date: 2001-03-13
Filing date: 2002-03-06
Publication date: 2011-03-04
Also published as: WO2002072202A1; DE60218434D1; CN100427093C; NO20034023D0; EE200300435A; IL157615A0; KR20030080086A; MY146935A; EP1368094A1; TWI257388B; KR100875595B1; HRP20030822B1; EP1368094A4; HUP0303480A3; BR0208357A; JP4549630B2; NO20034023L; IS6947A; CY1106607T1; BG66331B1

Abstract

Je opísaný antagonista faktora uvoľňujúceho kortikotropín (CRF) vzorca (I) a jeho použitie pri liečbe úzkosti, depresie a ďalších psychiatrických, neurologických, rovnako ako imunologických, kardiovaskulárnych alebo kardiálnych ochorení a hypersenzitivity hrubého čreva asociovanej s psychopatologickými poruchami a stresom.

Description

Oblasť techniky

Predkladaný vynález sa týka liečby psychiatrických ochorení a neurologických ochorení, vrátane organickej depresie, úzkostných porúch, posttraumatických stresových porúch, supranukleámej obmy a porúch príjmu potravy, rovnako ako liečby imunologických, kardiovaskulárnych alebo iných kardiálnych ochorení a črevnej hypersenzitivity asociovanej s psychopatologickými poruchami a stresom, pomocou aplikácie 4-(2-butylamino)-2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)-pyrazol-[l,5-a]-l,3,5-triazínu, jeho enantioméru a farmaceutický prijateľných solí ako ligandu receptora pre kortikotropín- uvoľňujúci hormón.

Doterajší stav techniky

Faktor uvoľňujúci kortikotropín (ďalej CRF) je peptid dĺžky 41 aminokyselín a je primárnym fyziologickým regulátorom sekrécie peptidu odvodeného od propiomelanokortínu (POMC) z prednej časti hypofýzy [J. Riviér et al., Proc. Nat. Acad. Sci. (USA) 80: 4851 (1983); W. Vale et ah, Science 213: 1394 (1981)]. Okrem jeho endokrinnej úlohy v hypofýze bola preukázaná široká extrahypotalamáma distribúcia v centrálnom nervovom systéme a produkcia širokého spektra autonómnych, elektrofyziologických a behaviorálnych efektov zodpovedajúcich úlohe neurotransmitera a neuromodulátora v mozgu (W. Vale et al., Rec. Prog. Horm. Res. 39: 245 (1983); G. F. Koob, Persp. Behav. Med. 2: 39 (1985); E.B. De Souza et ah, J. Neurosci. 5: 3189 (1985)]. Existujú tiež dôkazy, že CRF má významnú úlohu v integrovaní reakcie imunitného systému na fyziologické, psychologické a imunologické stresové podnety (J. E. Blalock, Physiological Reviews 69: 1 (1989); J. E. Morley, Life Sci. 41: 527 (1987)].

Klinické dáta poskytujú dôkazy, že CRF má úlohu v psychiatrických a neurologických ochoreniach, vrátene depresie, úzkostných porúch a porúch príjmu potravy. Tiež bola naznačená úloha CRF v etiológii a patofyziológii Alzheimerovej choroby, Parkinsonovej choroby, Huntingtonovej choroby, progresívnej supranukleámej obmy a amyotrofickej laterálnej sklerózy, pretože tieto ochorenia sú v súvise s dysfunkciou CRF neurónov v centrálnom nervovom systéme (pre prehľad pozri E. B. De Souza, Hosp. Practice 23: 59 (1988)3.

Pri afektívnych poruchách alebo pri organickej depresii je koncentrácia CRF významne zvýšená v mozgovomiechovom moku (CSF) chorých bez medikamentóznej terapie (C. B. Nemeroff et ah, Science 226: 1342 (1984); C. M. Banki et ah, Am. J. Psychiatry 144: 873 (1987); R. D. France et ah, Biol. Psychiatry 28: 86 (1988); M. Arato et ah, Biol Psychiatry 25: 355 (1989)]. Ďalej, hustota CRF receptorov je významne znížená pri samovraždách, čo je v súlade s hypersekréciou CRF (C. B. Nemeroff et al., Árch. Gen. Psychiatry 45: 577 (1988)3. Ďalej existuje priama adrenokortikotropínová (ACTH) odpoveď na CRF (podaný i. v.), ktorá je pozorovaná u pacientov s depresiou (P. W. Gold et al., Am J. Psychiatry 141: 619 (1984); F. Holsboer et al., Psychoneuroendocrinology 9: 147 (1984); P. W. Gold et al., New Eng. J. Med. 314: 1129 (1986)]. Preklinické pokusy na krysách a primátoch poskytujú ďalšiu podporu pre hypotézu, že hypersekrécia CRF sa môže podieľať na príznakoch pozorovaných u ľudských pacientov s depresiou (R. M. Sapolsky, Árch. Gen. Psychiatry 46: 1047 (1989)]. Existujú predbežné dôkazy, že tricyklické antidepresíva môžu meniť hladiny CRF a tak modulovať počet CRF receptorov v mozgu [Grigoriadis et ah, Neuropsychopharmacology 2: 53 (1989)].

Tiež sa predpokladá, že CRF má úlohu v etiológii úzkostných porúch. CRF vyvoláva anxiogénne účinky u zvierat a interakcie medzi benzodiazepínom/nebenzodiazepínovými anxiolytikami a CRF boli preukázané vo veľa behaviorálnych modeloch úzkosti [D. R. Britton et ah, Life Sci. 31: 363 (1982); C. W. Berridge a A. J. Dunn, Regúl. Peptides 16: 83 (1986)]. Predbežné štúdie, ktoré využívajú domnelého antagonistu CRF receptora a-helikálneho ovčieho CRF (9-41) vo veľa typických príkladoch správania ukázali, že antagonista produkuje „anxiolytikom - podobné“ efekty, ktoré sú kvalitatívne podobné benzodiazepínom [C. W. Berridge a A. J. Dunn, Horm. Behav. 21: 393 (1987), Brain Research Reviews 15: 71 (1990)].

Neurochemické, endokrinné a väzobné štúdie s receptorom preukázali interakcie medzi CRF a benzodiazepínovými anxiolytikami, čo poskytuje ďalší dôkaz pre podiel CRF na týchto ochoreniach. Chlórdiazepoxid zmierňuje „anxiogénne“ efekty CRF tak v teste konfliktu (K. T. Britton et ah, Psychopharmacology 86: 170 (1985); K. T. Britton et ah, Psychopharmacology 94: 306 (1988)), ako v teste vyľakania zvukom (N. R. Swerdlow et ah, Psychopharmacology 88: 147 (1986)] pri krysách. Antagonista benzodiazepínového receptora (Rol 5-1788), ktorý je bez behaviorálnej aktivity, keď je použitý samostatne v teste operačného konfliktu, zabraňuje efektom CRF spôsobom závislým od dávky, zatiaľ čo benzodiazepínový inverzný agonista (FG7142) zosilňuje účinky CRF (K. T. Britton et ah, Psychopharmacology 94: 306 (1988)].

Mechanizmy a miesta účinku, ktorými štandardné anxiolytiká a antidepresíva pôsobia, musia byť ešte vyhodnotené. Predpokladá sa však, že sa podieľajú na potlačení hypersekrécie CRF, ktorá je pozorovaná pri týchto ochoreniach. Najmä zaujímavé sú predbežné štúdie hodnotiace efekty antagonistov CRF receptora (ahelikálneho CRF9-41) vo veľa modeloch správania, ktoré preukázali, že antagonista CRF produkuje „anxiolytikom podobné“ efekty kvalitatívne podobné efektom benzodiazepínov [pre prehľad pozri G. F. Koob a K.

T. Britton, In: CorticotropinReleasing Factor: Basic and Clinical Studies of a-Neuropeptide, E. B. De Souza and C. B. Nemeroff eds., CRC Press str. 221 (1990)].

Ďalej sa predpokladá, že CRF má úlohu pri kardiovaskulárnych alebo iných kardiálnych ochoreniach, rovnako ako pri gastrointestinálnych ochoreniach spôsobených stresom, ako je hypertenzia, tachykardia a ischemické srdcové zlyhanie, mŕtvica, syndróm dráždivého bedrovníka, post-operačný ileus a črevná hypersenzitivita asociovaná s psychopatologickými poruchami a stresom [pre prehľad pozri E. D. DeSouza, C. B. Nemeroff, Ed.; Corticotropin-Releasing Factor: Basic and Clinical studies of a Neuropeptide, E. B. De Souza and C. B. Nemeroff eds., CRC Press str. 221 (1990) a C. Maillot, M. Million, J. Y. Wei, A. Gauťhier, Y. Tache, Gastroenterology, 119, 1569 - 1579 (2000)].

Nadmerná alebo znížená expresia CRF sa považuje na základnú príčinu niekoľkých ochorení. Medzi také liečiteľné ochorenia patria, napríklad: afektívne poruchy, úzkosť, depresie, bolesti hlavy, syndróm dráždivého bedrovníka, post-traumatická stresová porucha, supranukleáma obrna, imunosupresia, Alzheimerova choroba, gastroíntestinálne ochorenie, mentálna anorexia alebo iné poruchy príjmu potravy, liekové závislosti, abstinenčné príznaky pri alkoholizme alebo liekovej závislosti, zápalové ochorenia, kardiovaskulárne alebo kardiálne ochorenia, problémy s fertilitou, infekcia vírusom ľudskej imunodeficiencie, stres pri krvácaní, obezita, infertilita, traumy hlavy a miechy, epilepsia, mŕtvica, vredy, amyotrofická laterálna skleróza, hypoglykémia, hypertenzia; tachykardia a miestne srdcové zlyhanie, mŕtvica, osteoporóza, predčasný pôrod, psychosociálna zakrpatenosť, stresom indukovaná horúčka, vredy, hnačka, postoperačný ileus a hypersenzitivita čreva spojená s psychopatologickými poruchami a stresom [pre prehľad pozri J. R. McCarthy, S. C. Heinrichs a D. E. Grigoriadis, Cuur. Pharm. Res., 5, 289 - 315 (1999); P. J. Gilligan, D. W. Robertson a R. Zaczek, J. Medicinal Chem., 43, 1641 - 1660 (2000), G. P. Chrousos, Int. J. Obesity, 24, Suppl. 2, S50 - S55 (2000); E. Webster, D. J. Torpy, I. J. Elenkov, G. P. Chrousos, Ann. N. Y. Acad. Sci., 840, 21 - 32 (1998); D. J. Newport a C. B. Nemeroff, Curr. Opin. Neurobiology, 10, 211 - 218 (2000); G. Mastorakos a I. Ilias, Ann. N. Y. Acad. Sci., 900, 95 - 106 (2000); M. J. Owens a C. B. Nemeroff, Expert Opin. Invest. Drugs, 8, 1849 - 1858 (1999); G. F. Koob, Ann. N. Y. Acad. Sci., 909, 170 - 185 (2000)].

Nasledujúce prihlášky opisujú CRF antagonistické zlúčeniny; žiadna však neopisuje zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu: W095/10506; W099/51608; WO97/35539; W099/01439; W097/44308; WO97/35846; W098/03510U WO99/11643; PCT/US99/18707; WO99/Q1454 a WOOO/01675.

Podstata vynálezu

Predmetom vynálezu je 4-(2-butylamino)-2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)pyrazolo[l,5-a]-1,3,5-triazín, jeho farmaceutický prijateľný liekový prekurzor, v ktorom je amínová funkčná skupina viazaná k skupine, ktorá sa pri podaní cicavcovi odštiepi za uvoľnenia uvedenej amínovej funkčnej skupiny, alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ.

Výhodne uvedenou zlúčeninou je 4-((R)-2-butylamino)-2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)-pyrazolo[l,5-a]-l,3,5-triazín vzorca (I)

4-((S)-2-butylamino)-2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)pyrazolo[l,5-a]-l,3,5-triazín alebo zmes uvedených stereoizomérnych foriem.

Výhodne uvedenou zlúčeninou je 4-((R)-2-butylamino)-2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)-pyrazolo [l,5-a]-l,3,5-triazín.

Výhodne uvedená zlúčenina je v podstate prostá svojho stereoizoméru (S).

Predmetom vynálezu je tiež farmaceutická kompozícia, ktorej podstata spočíva v tom, že obsahuje farmaceutický prijateľný nosič a terapeuticky účinné množstvo uvedenej zlúčeniny, liekového prekurzora alebo soli.

Predmetom vynálezu je tiež uvedená zlúčenia, liekový prekurzor alebo soľ na ich použitie v terapii.

Predmetom vynálezu je tiež použitie uvedenej zlúčeniny, liekového prekurzora alebo soli na prípravu farmaceutickej kompozície na liečenie ochorenia prejavujúceho sa nadmerným vylučovaním CRF teplokrvného živočícha, na prípravu farmaceutickej kompozície na liečenie ochorenia, kde toto liečenie môže byť ovplyvnené alebo podporené antagonizovaním CRF, alebo na prípravu farmaceutickej kompozície na liečenie úzkosti alebo depresie.

Predmetom vynálezu je tiež výrobok, ktorého podstata spočíva v tom, že obsahuje:

(a) obalový materiál;

(b) zlúčeninu, liekový prekurzor alebo soľ podľa niektorého z nárokov 1 až 4; a (c) etiketu alebo príbalový leták obsiahnuté na obalovom materiáli resp. v obalovom materiáli a uvádzajúce, že uvedená zlúčenina, liekový prekurzor alebo soľ je účinná pri liečení úzkosti alebo depresie.

Vynález poskytuje nové zlúčeniny, ktoré môžu byť použité v liečbe afektívnych porúch, úzkosti, depresie, syndrómu dráždivého bedrovníka, posttraumatickej stresovej poruchy, supranukleámej obmy, imunosupresie, Alzheimerovej choroby, gastrointestinálnych ochorení, mentálnej anorexie alebo iných porúch príjmu potravy, abstinenčných príznakov pri alkoholizme alebo liekovej závislosti, liekových závislostí, zápalových ochorení, problémov s fertilitou, ochorení, ktorých liečba môže byť uskutočnená alebo uľahčená antagonizovaním CRF, vrátane napríklad ochorení indukovaných CRF alebo s podielom CRF, alebo ochorení vybraných zo skupiny zahrnujúcej zápalové ochorenia, ako je reumatoidná artritída a osteoartritída, bolesť, astma, psoriáza a alergia; generalizovaná úzkostná porucha; panická porucha, fóbia, obscesívne-kompulzívna porucha; posttraumatická stresová porucha; poruchy spánku indukované stresom; vedenie bolesti, ako napríklad pri fibromyalgii; poruchy nálady, ako je depresia, vrátane organickej depresie, depresie s jedinou epizódou, recidivujúcej depresie, depresie indukovanej týraním detí, popôrodnej depresie; dystýmie; bipolárnych porúch; cyklotýmie; syndrómu starnutia; stresom-indukovanej bolesti hlavy; nádorov, infekcie vírusom ľudskej imunodeficiencie (HIV); neurodegeneratívnych ochorení, ako je Alzheimerova choroba, Parkinsonova choroba a Huntingtonova choroba; gastrointestinálnych chorôb, ako je vredová choroba, syndróm dráždivého bedrovníka, Crohnova choroba, spastický bedrovník, hnačka, postoperačný ileus a črevná hypersenzitivita asociovaná s psychopatologickými poruchami alebo stresom; poruchy príjmu potravy, ako je anorexia a bulímia nervosa; hemoragický stres; stresom-indukované psychotické epizódy; syndróm eutyroidných chorých; syndróm poruchy sekrécie antidiuretického hormónu (ADH); obezita; infertilita; trauma hlavy; trauma miechy; ischemické poškodenie neurónov; cerebrálna ischémia ako napríklad cerebrálna hippokampálna ischémia; excitotoxické poškodenie neurónov; epilepsia; kardiovaskulárne a ďalšie kardiálne ochorenia, vrátane hypertenzie, tachykardie a miestneho srdcového zlyhania; mŕtvice; imunitné dysfunkcie, vrátane stresom indukovaných imunitných dysfunkcií (napríklad stresom indukované horúčky, bravčového stresového syndrómu, horúčky indukovanej transportom dobytka, paroxysmálnej fibrilácie pri koňoch, a dysfunkcií indukovaných obmedzením pohyblivosti pri kurčatách, stresom pri strihaní pri ovciach alebo stresom vyvolaných porúch pri psoch); svalové spazmy, močová inkontinencia; senilné demencie Alzheimerovho typu; multiinfarktová demencia; amyotrofická laterálna skleróza; závislosti od chemických substancií a alkoholu (ako napríklad od alkoholu, kokaínu, heroínu, benzodiazepínov alebo od iných liekov); abstinenčné príznaky pri odvykaní závislosti od alkoholu alebo od liekov; osteoporóza; psychosociálna zakrpatenosť a hypoglykémia u cicavcov.

Uvedené zlúčeniny sa viažu na receptory faktora uvoľňujúceho kortikotropín, čím alterujú anxiogénne efekty sekrécie CRF. Zlúčenina podľa predkladaného vynálezu je použiteľná na liečbu psychiatrických ochorení a neurologických ochorení, úzkostných porúch, posttraumatických stresových porúch, supranukleámej obmy a porúch príjmu potravy, rovnako ako na liečbu imunologických, kardiovaskulárnych alebo kardiálnych ochorení a črevnej hypersenzitivity asociovanej s psychopatologickými poruchami a stresom u cicavcov.

Zlúčenina vzorca (I) je použiteľná ako antagonista faktora uvoľňujúceho kortikotropín. Zlúčenina podľa predkladaného vynálezu má aktivitu antagonistu faktora uvoľňujúceho kortikotropín a zdá sa, že potlačuje hypersekréciu CRF.

Definície

Termín „farmaceutický prijateľné soli“, ako je tu použitý, označuje soli pripravené z farmaceutický prijateľných netoxických kyselín, vrátane anorganických kyselín a organických kyselín. Medzi vhodné netoxické soli patria anorganické a organické kyseliny s bázickými zvyškami, ako sú napríklad amíny, napríklad kyselina octová, benzénsulfónová, benzoová, gáforsulfónová, citrónová, eténsulfónová, fumárová, glukónová, glutámová, bromovodíková, chlorovodíková, izotiónová, mliečna, maleínová, jablčná, mandľová, metánsulfónová, mucínová, dusičná, pamová, pantoténová, fosforečná, jantárová, sírová, vínna, p-toluénsulfónová a podobne; alkalické alebo organické soli s kyslými zvyškami, ako sú karboxylové kyseliny, napríklad soli alkalických kovov a jej stereoizomerické formy, alebo zmesi ich stereoizomerických foriem, a jej farmaceutický prijateľné soli alebo proliečivá.

[2] V inom uskutočnení predkladaný vynález poskytuje zlúčeninu z uskutočnení (1), jej izoméry, stereoizomerické formy, zmesi ich stereoizomerických foriem, jej farmaceutický prijateľné proliečivá alebo jej farmaceutický prijateľné soli, kde uvedená zlúčenina je 4-((R)-2-butylamino)-2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)[l,5-a]-pyrazol-l,3,5-triazín alebo 4-((S)-2-butylamino)-2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl) [1,5 -a]-pyrazol-1,3,5-triazín.

[3] V inom uskutočnení predkladaný vynález poskytuje zlúčeninu podľa akéhokoľvek z uskutočnení (1) až (2), jej farmaceutický prijateľné proliečivá; alebo jej farmaceutický prijateľné soli, kde uvedená zlúčenina v podstate neobsahuje (S) stereoizomér.

[4] V inom uskutočnení predkladaný vynález poskytuje zlúčeninu z uskutočnenia (lb), kde uvedená zlúčenina je 4-(2-butylamino)-2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)[l,5-a]-pyrazol-l,3,5-triazín.

[5] V inom uskutočnení predkladaný vynález poskytuje zlúčeninu z uskutočnení (1), kde uvedená zlúčenina je 4-((R)-2-butylamino)-2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)[l,5-a]-pyrazol-l,3,5-triazín.

[6] Farmaceutický prostriedok obsahujúci farmaceutický prijateľný nosič a terapeuticky účinné množstvo zlúčeniny podľa akéhokoľvek z uskutočnení (1) až (5).

[7] V inej realizácii predkladaný vynález poskytuje spôsob pre antagonizovanie CRF receptora u cicavca, ktorý zahrnuje podanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa akéhokoľvek z uskutočnení (1) až (5).

[8] V inom uskutočnení predkladaný vynález poskytuje spôsob liečby ochorení manifestujúceho sa hypersekréciou CRF u teplokrvného živočícha, ktorý zahrnuje podanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa akéhokoľvek z uskutočnení (1) až (5).

[9] V inom uskutočnení predkladaný vynález poskytuje spôsob liečby ochorení u cicavca, ktoré môže byť ovplyvnené alebo zmiernené antagonizovaním CRF, kde uvedený spôsob zahrnuje podanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa akéhokoľvek z uskutočnení (1) až (5).

[10] V inom uskutočnení predkladaný vynález poskytuje spôsob pre antagonizovanie CRF receptora u cicavca, kde uvedený spôsob zahrnuje podanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa akéhokoľvek z uskutočnení (1) až (5).

[11] V inom uskutočnení predkladaný vynález poskytuje spôsob liečby úzkosti alebo depresie u cicavca, kde uvedený spôsob zahrnuje podanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa akéhokoľvek z uskutočnení (1) až (5).

[12] V inom uskutočnení predkladaný vynález poskytuje spôsob na vyhľadávanie ligandov pre CRF receptor, ktorý zahrnuje:

a) uskutočnenie testu kompetitívnej väzby s CRF receptorom, zlúčeninou podľa akéhokoľvek uskutočnenia (1) až (5), ktorá je označená detekčným činidlom, a testovaným ligandom; a

b) stanovenie schopnosti uvedeného potenciálneho Ugandu vytesniť z väzby uvedenú označenú zlúčeninu.

[13] V inom uskutočnení predkladaný vynález poskytuje spôsob na detekciu CRF receptorov v tkanivových rezoch, ktorý zahrnuje:

a) kontaktovanie zlúčeniny podľa akéhokoľvek z uskutočnení (1) až (5), ktorá je označená detekčným činidlom, s tkanivom, za podmienok umožňujúcich naviazanie zlúčeniny na tkanivo; a

b) detekciu väzby označenej zlúčeniny na tkanivo.

[14] V inom uskutočnení predkladaný vynález poskytuje spôsob na inhibíciu väzby CRF na CRF-1 receptor, ktorý zahrnuje kontaktovanie zlúčeniny podľa akéhokoľvek z uskutočnení (1) až (5) s roztokom, ktorý obsahuje bunky exprimujúce CRF1 receptor, kde zlúčenina je prítomná v roztoku v koncentrácii dostatočnej na inhibíciu väzby CRF na CRF-1 receptor.

[15] V inom uskutočnení predkladaný vynález poskytuje výrobok obsahujúci:

a) obalový materiál;

b) zlúčeninu podľa akéhokoľvek z uskutočnení (1) až (5) a

c) príbalový leták obsiahnutý v uvedenom obale, na ktorom je uvedené, že uvedená zlúčenina je účinná na liečbu úzkosti či depresie.

[16] Predkladaný vynález tiež zahrnuje spôsob liečby afektívnych porúch, úzkosti, depresie, bolestí hlavy, syndrómu dráždivého bedrovníka, posttraumatickej stresovej poruchy, supranukleámej obmy, imunosupresie, Alzheimerovej choroby, gastrointestinálnych ochorení, mentálnej anorexie a iných porúch príjmu potravy, návyku na lieky, abstinenčných príznakov pri odvykaní závislosti od alkoholu alebo iných drog, zápalových ochorení, kardiovaskulárnych alebo kardiálnych ochorení, problémov s fertilitou, infekcie vírusom ľudskej imunodeficiencie, hemoragického stresu, obezity, infertility, traumy hlavy a miechy, epilepsie, mŕtvice, vredov, amyotrofickej laterálnej sklerózy, hypoglykémie alebo ochorení, ktorých liečba môže byť uskutočnená antagonizovaním CRF, vrátane ochorení indukovaných alebo podporovaných CRF, u cicavcov, kde uvedený spôsob zahrnuje podanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa akéhokoľvek z uskutočnení (1) až (5) uvedenému cicavcovi.

Definície

Termín „farmaceutický prijateľné soli“, ako je tu použitý, označuje soli pripravené z farmaceutický prijateľných netoxických kyselín, vrátane anorganických kyselín a organických kyselín. Medzi vhodné netoxické soli patria anorganické a organické kyseliny s bázickými zvyškami, ako sú napríklad amíny, napríklad kyselina octová, benzénsulfónová, benzoová, gáforsulfónová, citrónová, eténsulfónová, fumarová, glukónová, glutámová, bromovodíková, chlorovodíková, izotiónová, mliečna, maleínová, jablčná, mandľová, metánsulfónová, mucínová, dusičná, pamová, pantoténová, fosforečná, jantárová, sírová, vínna, p-toluénsulfónová a podobne; alkalické alebo organické soli s kyslými zvyškami, ako sú karboxylové kyseliny, napríklad soli alkalických kovov alebo kovov alkalických zemín odvodené od nasledujúcich báz: hydridu sodného, hydroxidu sodného, hydroxidu draselného, hydroxidu vápenatého, hydroxidu hlinitého, hydroxidu lítneho, hydroxidu horečnatého, hydroxidu zinočnatého, amoniaku, trimetylammónia, trietylammónia, etyléndiamínu, n-metylglukamínu, lyzínu, arginínu, omitínu, cholínu, Ν,Ν'-dibenzyletyléndiamínu, chlórprokaínu, dietanolamínu, prokaínu, n-benzylfenetylamínu, dietylamínu, piperazínu, tris(hydroxymetyl)-aminometánu; tetrametylammóniumhydroxidu a podobne.

Farmaceutický prijateľné soli zlúčenín podľa predkladaného vynálezu môžu byť pripravené reakciou voľnej kyseliny alebo bázy týchto zlúčenín so stechiometrickým množstvom vhodnej bázy alebo kyseliny vo vode alebo v organickom rozpúšťadle, alebo v zmesi týchto dvoch rozpúšťadiel; zvyčajne sú výhodné nevodné médiá, ako je éter, etylacetát, etanol, izopropanol alebo acetonitril. Zoznam vhodných solí je uvedený v Remington’s Pharmaceutical Sciences, 17. vydanie, Mack Publishing Company, Easton, PA, 1985, str. 1418, ktorá je tu uvedená v svojej úplnosti ako odkaz.

Termín „farmaceutický prijateľné proliečivá“, ako je tu použitý, označuje akékoľvek kovalentne viazané nosiče, ktoré uvoľňujú aktívnu zlúčeninu vzorca (I) in vivo, po podaní takého proliečivá cicavcovi. Proliečivá zlúčenín vzorca (I) sú - v rámci lekárskych znalostí - vhodné na použitie u človeka a živočíchov bez nežiaducej toxicity, dráždenia, alergickej reakcie a podobne, za prijateľného pomeru risk/zisk, a vtedy, ak sú účinné pre zamýšľané použitie, čo platí tiež pre „obojstranné iónové formy“ zlúčenín podľa predkladaného vynálezu. Termín „proliečivo“ označuje zlúčeniny, ktoré sú rýchlo transformované in vivo na pôvodné zlúčeniny vzorca (I), napríklad hydrolýzou v krvi. Funkčné skupiny, ktoré môžu byť rýchlo transformované - metabolickým štiepením - in vivo, tvoria triedu skupín reaktívnych s karboxylovou skupinou zlúčenín podľa predkladaného vynálezu. Medzi ne patria skupiny, ako je alkanoyl (ako je acetyl, propionyl, butyryl a podobne), nesubstituovaný a substituovaný aroyl (ako je benzoyl a substituovaný benzoyl), alkoxykarbonyl (ako je etoxykarbonyl), trialkylsilyl (ako je trimetyl- a trietysilyl), monoestery tvorené s dikarboxylovými kyselinami (ako je sukcinyl) a podobne. V dôsledku ľahkosti, s ktorou sú metabolický štiepiteľné skupiny zlúčenín podľa predkladaného vynálezu odštiepiteľné in vivo, pôsobia takéto zlúčeniny ako proliečivá. Zlúčeniny, ktoré nesú metabolický odštiepiteľné skupiny, majú tu výhodu, že môžu mať lepšiu biologickú dostupnosť v dôsledku lepšej rozpustnosti a/alebo rýchlosti absorpcie, kde tieto vlastnosti sú v porovnaní s pôvodnou zlúčeninou spôsobené prítomnosťou metabolický odštiepiteľnej skupiny. Podrobný opis proliečiv je uvedený v nasledujúcich publikáciách: Design of Prodrugs, H. Bundgaard, ed., Elsevier, 1985; Methods in Enzymology, K. Widder et al, Ed., Academic Press, 42, str. 309 - 396, 1985; A Textbook of Drug Design and Development, Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard, ed., kapitola 5; „Design and Applications of Prodrugs“ str. 113 až 191, 1991; Advanced Drug Delivery Reviews, H. Bundgard, 8, str. 1 - 38,1992; Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, str. 285, 1988; Chem. Pharm. Bull., N. Nakeya et al, 32, str. 692, 1984; Pro-drugs as Novel Delivery Systems, T. Higuchi and V. Stella, Vol. 14 of the A. C. S. Symposium Šerieš, a Bioreversible Carriers in Drug Design, Edward B. Roche, ed., American Pharmaceutical Association a Pergamon Press, 1987, kde tieto publikácie sú tu uvedené ako odkazy.

Za „proliečivo“ sa považujú akékoľvek kovalentne viazané nosiče, ktoré uvoľňujú aktívny pôvodný liek vzorca (I) in vivo potom, čo je takéto proliečivo podané cicavcovi. Proliečivá zlúčenín vzorca (I) sa pripravia modifikovaním skupín prítomných na zlúčeninách takýmto spôsobom, že tieto modifikácie sú štiepené, buď bežnou manipuláciou, alebo in vivo, na pôvodné zlúčeniny. Medzi proliečivá patria zlúčeniny, v ktorých sú hydroxy, amínové alebo sulfhydrylové skupiny naviazané na akúkoľvek skupinu, ktorá je po podaní cicavcovi odštiepená za vzniku voľnej hydroxylovej, amino alebo sulíhydrylovej skupiny, v príslušnom poradí. Príklady proliečiv sú acetátové, formiátové a benzoátové deriváty alkoholových a amínových funkčných skupín v zlúčeninách vzorca (I) a podobne.

Termín „v podstate bez (S) stereoizoméru“, ako je použitý pre zlúčeninu, znamená, že zlúčenina je tvorená významne vyšším podielom (R) stereoizoméru ako optického protipólu (t. j. (S) stereoizoméru). Vo výhodnom uskutočnení termín „v podstate bez (S) stereoizoméru“ znamená, že zlúčenina je tvorená aspoň z 90 % hmotnostných (R) stereoizomérom a približne z 10 % hmotnostných (S)-stereoizomérom.

Vo výhodnejšom uskutočnení termín „v podstate bez (S) stereoizoméru“ znamená, že zlúčenina je tvorená aspoň z 95 % hmotnostných (R) stereoizomérom a približne z 5 % hmotnostných alebo menej (S)-stereoizomérom. V ešte výhodnejšom uskutočnení termín „v podstate bez (S) stereoizoméru“ znamená, že zlúčenina je tvorená aspoň z 99 % hmotnostných (R) stereoizomérom a približne z 1 % hmotnostných alebo menej (S)-stereoizomérom. V inom výhodnom uskutočnení termín „v podstate bez (S) stereoizoméru“ znamená, že zlúčenina je tvorená takmer zo 100 % hmotnostných (R) stereoizomérom. Uvedené percentá sú vztiahnuté na celkové množstvo kombinovaných stereoizomérov zlúčeniny.

Termín „terapeuticky účinné množstvo“ zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu označuje množstvo účinné pre antagonizovanie abnormálnych koncentrácií CRF alebo množstvo účinné na liečbu príznakov afektívnej poruchy, úzkosti alebo depresie u jedinca.

Termín „označená“, ako je tu použitý, znamená, že zlúčenina je priamo alebo nepriamo označená značkovacím činidlom, ktoré poskytuje detekovateľný signál, ako je napríklad rádioizotop, fluorescenčné činidlo,

131 211 í enzým, protilátka, častica, ako je magnetická častica, chemiluminiscenčné činidlo, P ,1 aAt , atď.

Syntéza

Veľa organických zlúčenín existuje v opticky aktívnych formách, t. j. majú schopnosť rotovať rovinu polarizovaného svetla. V opisovaných opticky aktívnych zlúčeninách sú predpony D a L alebo R a S použité na označenie absolútnej orientácie molekuly okolo jej chirálneho centra (centier). Predpony d a 1 alebo (+) a (-) sú použité na označenie rotácie polarizovaného svetla zlúčeninou, kedy (-) alebo 1 znamená, že zlúčenina je ľavotočivá. Zlúčenina s predponou (+) alebo d je pravotočivá. Pre daný chemický vzorec sú tieto zlúčeniny, označované ako stereoizoméry, identické, s tým rozdielom, že sú zrkadlovými obrazmi. Špecifický stereoizomér môže byť tiež označovaný ako enantiomér a zmes takýchto izomérov je často označovaná ako enantiomerická zmes. Zmes 50 : 50 enantiomérov je označovaná ako racemická zmes.

Predkladaný vynález zahrnuje všetky stereoizomerické formy zlúčenín vzorca (I). Centrá asymetrie, ktoré sú prítomné v zlúčeninách vzorca (I), môžu mať nezávisle S konfiguráciu alebo R konfiguráciu. Predpony d a 1 alebo (+) a (-) sú použité na označenie smeru rotácie polarizovaného svetla zlúčeninou, kedy (-) alebo 1 znamená, že zlúčenina je ľavotočivá. Zlúčenina s predponou (+) alebo d je pravotočivá. Predkladaný vynález zahrnuje všetky možné enantioméry a diastereoméry a zmesi dvoch alebo viacej stereoizomérov, napríklad zmesi enantiomérov a/alebo diastereomérov, vo všetkých pomeroch. Tak môžu byť enantioméry v predkladanom vynáleze v enantiomericky čistej forme, tak ľavotočivej, ako ako pravotočivej zlúčeniny, a tiež vo forme racemátov a vo forme zmesi dvoch enantiomérov vo všetkých pomeroch. V prípade cis/trans izomerizmu zahrnuje predkladaný vynález tak cis formy, ako trans formy, rovnako ako zmesi týchto foriem vo všetkých pomeroch. Príprava jednotlivých stereoizomérov môže byť uskutočnená, pokiaľ je to žiaduce, separáciou zmesi bežnými spôsobmi, napríklad chromatografiou alebo kryštalizáciou, použitím stereochemicky uniformných východiskových materiálov na syntézu alebo pomocou stereoselektívnej syntézy. Prípadná derivatizácia môže byť uskutočnená pred separáciou stereoizomérov. Separácia zmesi stereoizomérov môže byť uskutočnená v štádiu zlúčenín vzorca (I) alebo v štádiu akéhokoľvek medziproduktu v priebehu syntézy. Predkladaný vynález zahrnuje všetky tautoméme formy zlúčenín vzorca (I).

Zlúčenina vzorca (I) môže byť pripravená s použitím postupov uvedených v schéme 1.

Schéma 1 x-ort alkytačné činidlo báza, rozpúšťadlo X-F alkoxid kow rozpúšťadlo bránové činidlo prísada rozpúšťadlo

t. alkyllitium rozpúšťadlo

2. B(OR.)i

3. kyselina, HiO «7

OD·

X

OM·

VO báza rozpúšťadlo

1. halogenačné činidlo

Zlúčenina vzorca (II), kde X = F, môže reagovať s alkoxidom kovu (napr. metoxidom sodným, metoxidom draselným; pripraveným vopred alebo generovaným in situ) v inertnom rozpúšťadle za zisku medziproduktu vzorca (III). Inertnými rozpúšťadlami môžu byť, napríklad, alkylalkoholy (1 až 8 atómov uhlíka, výhodne metanol alebo etanol), nižšie alkánnitrily (1 až 6 atómov uhlíka, výhodne acetonitril), voda, dialkylétery (výhodne dietyléter), cyklické étery (výhodne tetrahydrofurán alebo 1,4-dioxán), N,N-dialkylformamidy (výhodne dimetylformamid), Ν,Ν-dialkylacetamidy (výhodne dimetylacetamid), cyklické amidy (výhodne N-metylpyrrolidin-2-ón), dialkylsulfoxidy (výhodne dimetylsulfoxid) alebo aromatické uhľovodíky (výhodne benzén alebo toluén). Výhodné reakčné teploty sú v rozmedzí od 0 °C do 100 °C.

Alternatívne môže zlúčenina vzorca (II), kde X = OH, reagovať s alkylačným činidlom za prítomnosti bázy v inertnom rozpúšťadle, za zisku medziproduktu vzorca (III). Alkylačným činidlom môžu byť, napríklad, halogénalkány (napr. CH₃I), dialkylsulfáty (napr. Me₂SO₄) alebo alkyltrifluórsulfonáty (napr. CH₃O₃SCF₃).

Medzi bázy patria, napríklad, alkalické kovy, hydridy alkalických kovov (výhodne hydrid sodný), alkoxidy alkalických kovov (1 až 6 atómov uhlíka) (výhodne metoxid sodný alebo etoxid sodný), hydridy kovov alkalických zemín, karbonáty alkalických kovov, karbonáty prechodných kovov (napr. uhličitan strieborný), dialkylamidy alkalických kovov (výhodne lítium-di-izopropylamid), hydrogenuhličitany alkalických kovov, hydroxidy alkalických kovov, bis(trialkylsilyl)amidy alkalických kovov (výhodne nátrium-bis-(trimetylsilyl)amid), trialkylamíny (výhodne N,N-di-izopropyl-N-etylamín) alebo aromatické amíny (výhodne pyridín.).

Medzi inertné rozpúšťadlá patria, napríklad halogénuhľovodíky (1 až 8 atómov uhlíka, 1 až 8 halogénov), nižšie alkánnitrily (1 až 6 atómov uhlíka, výhodne acetonitril), voda, dialkylétery (výhodne dietyléter), cyklické étery (výhodne tetrahydrofurán alebo 1,4-dioxán), Ν,Ν-dialkylformamidy (výhodne dimetylformamid), Ν,Ν-dialkylacetamidy (výhodne dimetylacetamid), cyklické amidy (výhodne N-metylpyrrolidin-2-ón), dialkylsulfoxidy (výhodne dimetylsulfoxid) alebo aromatické uhľovodíky (výhodne benzén alebo toluén). Výhodné reakčné teploty sú v rozmedzí od 50 °C do 150 °C.

Zlúčenina vzorca (III) môže byť transformovaná na zlúčeninu vzorca (IV) reakciou s brominačným činidlom za prítomnosti alebo neprítomnosti ďalších činidiel v inertnom rozpúšťadle. Medzi brominačné činidlá patrí, napríklad, N-brómsukcinimid-2,2'-azobisizobutyro-nitril (AIBN), N-brómftalimid-2,2'-azobisizobutyronitril (AIBN)), bróm. Medzi aditíva patria, napríklad, fosforečnany alkalických kovov (napr. K₃PO₄, Na₃PO₄), hydrogénfosforečnany alkalických kovov (napr. Na₂HPO₄, K₂HPO₄), dihydrogénfosforečnany alkalických kovov (napr. NaH₂PO₄, KH₂PO₄). Medzi inertné rozpúšťadlá patria, napríklad, halogénuhľovodíky (1 až 6 atómov uhlíka, 1 až 6 halogénov (výhodne chlórov), voda, Ν,Ν-dialkylformamidy (výhodne dimetylformamid), Ν,Ν-dialkylacetamidy (výhodne dimetylacetamid), cyklické amidy (výhodne N-metylpyrrolidin-2-ón). Výhodné reakčné teploty sú v rozmedzí od 0 °C do 200 °C (lepšie 20 °C až 120 °C).

Zlúčenina vzorca (IV) môže byť premenená na zlúčeninu vzorca (V) sekvenčnými reakciami s (1) alkyllítiom v inertnom rozpúšťadle pri teplotách od -100 °C do 50 °C; (2) zlúčeninou vzorca B(OR^a)j (kde R^a je alkyl s priamym alebo rozvetveným reťazcom tvorený 1 až 20 atómami uhlíka) pri teplotách v rozmedzí od -100 °C do 50 °C; a (3) kyselinou za prítomnosti alebo neprítomnosti vody pri teplotách od -100 °C do 100 °C. Alkyl-lítium môže byť zlúčenina s priamym alebo rozvetveným reťazcom obsahujúca 1 až 20 atómov uhlíka. Medzi inertné rozpúšťadlá patria, napríklad, dialkylétery (výhodne dietyléter), cyklické étery (výhodne tetrahydrofurán alebo 1,4-dioxán) alebo aromatické uhľovodíky (výhodne benzén alebo toluén).

Medzi kyseliny patria, napríklad, alkánové kyseliny tvorené 2 až 10 atómami uhlíka (výhodne kyselina octová), halogénalkánové kyseliny (2 - 10 atómov uhlíka, 1-10 halogénov, ako je kyselina trifluóroctová), arylsulfónové kyseliny (výhodne kyselina para-toluénsulfónová alebo benzénsulfónová), alkánsulfónové kyseliny obsahujúce 1-10 atómov uhlíka (výhodne kyselina metánsulfónová), kyselina chlorovodíková, kyselina sírová alebo kyselina fosforečná.

Zlúčenina vzorca (VII) môže byť produkovaná reakciou zlúčeniny vzorca (V) so zlúčeninou vzorca (VI) za prítomnosti a komplexu alebo soli paládia alebo niklu, bázy a inertného rozpúšťadla. Medzi komplexy paládia alebo niklu patria, napríklad, fosfínové komplexy, ako je Pd(PPh₃)₄, PdCl₂ (PPh₃)₂, NiCl₂(PPh₃)₂ alebo (1,1 -bis (difenylfosfmo) ferrocén-1 -dichlórpaládium. Medzi bázy patria, napríklad, alkalické kovy, hydridy alkalických kovov (výhodne hydrid sodný), alkoxidy alkalických kovov (1 až 6 atómov uhlíka) (výhodne metoxid sodný alebo etoxid sodný), karbonáty alkalických kovov, karbonáty alkalických kovov (napr. uhličitan bámatý), karbonáty prechodných kovov (napr. uhličitan strieborný) alebo trialkylamíny (napr. trietylamín). Inertné rozpúšťadlá zahrnujú, napríklad, dialkylétery (výhodne dietyléter), cyklické étery (výhodne tetrahydrofurán alebo 1,4-dioxán) alebo aromatické uhľovodíky (výhodne benzén alebo toluén). Výhodné sú reakčné teploty v rozmedzí od -100 °C do 100 °C.

Medziprodukt vzorca (VII) môže reagovať s bázou za prítomnosti inertného rozpúšťadla za zisku zlúčeniny vzorca (VIII), kde M je katión alkalického kovu (napr. sodíka alebo draslíka). Medzi bázy patria, napríklad, hydroxidy alkalických kovov (napr. NaOH alebo KOH), alkoxidy alkalických kovov (1 až 6 atómov uhlíka) (výhodne metoxid sodný alebo etoxid sodný) alebo hydroxidy kovov alkalických zemín. Inertné rozpúšťadlá sú napríklad alkylalkoholy (1 až 6 atómov uhlíka, nižšie alkánnitrily (1 až 6 atómov uhlíka, výhodne acetonitril), voda, cyklické étery (výhodne tetrahydrofurán alebo 1,4-dioxán), Ν,Ν-dialkylformamidy (výhodne dimetylformamid), Ν,Ν-dialkylacetamidy (výhodne dimetylacetamid), cyklické amidy (výhodne N-metylpynOlidin-2-ón), dialkylsulfoxidy (výhodne dimetylsulfoxid). Výhodné reakčné teploty sú v rozmedzí od 0 °C do 150 °C.

Zlúčeniny vzorca (VIII) môžu reagovať s hydrazín-hydrátom za prítomnosti kyseliny a inertného rozpúšťadla pri teplotách v rozmedzí 0 °C až 200 °C, výhodne 70 °C až 150 °C, za zisku zlúčenín vzorca (IX). Medzi kyseliny patria, napríklad, alkánové kyseliny obsahujúce 2 až 10 atómov uhlíka (výhodne kyselina octová), halogénalkánové kyseliny (2 - 10 atómov uhlíka, 1 - 10 halogénov, ako je kyselina trifluóroctová), arylsulfónové kyseliny (výhodne kyselina p-toluénsulfónová alebo kyselina benzénsulfónová), alkánsulfónové kyseliny obsahujúce 1 až 10 atómov uhlíka (výhodne kyselina metánsulfónová), kyselina chlorovodíková, kyselina sírová alebo kyselina fosforečná.

Inertné rozpúšťadlá zahrnujú, napríklad, vodu, alkylalkoholy (1 až 8 atómov uhlíka, výhodne metanol alebo etanol), nižšie alkánnitrily (1 až 6 atómov uhlíka, výhodne acetonitril), cyklické étery (výhodne tetrahydrofurán alebo 1,4-dioxán), Ν,Ν-dialkylformamidy (výhodne dimetylformamid), Ν,Ν-dialkylacetamidy (výhodne dimetylacetamid), cyklické amidy (výhodne N-metylpyrrolidin-2-ón), dialkylsulfoxidy (výhodne dimetylsulfoxid) alebo aromatické uhľovodíky (výhodne benzén alebo toluén).

Zlúčenina vzorca (IX) môže reagovať so zlúčeninami vzorca H₃C(C=NH)OR^c (kde R^c je alkyl (1-6 atómov uhlíka)) za prítomnosti alebo neprítomnosti kyseliny za prítomnosti inertného rozpúšťadla pri teplotách v rozmedzí 0 °C až 200 °C za vzniku zlúčeniny vzorca (X). Kyseliny môžu zahrnovať, napríklad, alkánové kyseliny o 2 až 10 atómoch uhlíka (výhodne kyselina octová), halogénalkánové kyseliny (2-10 atómov uhlíka, 1-10 halogénov, ako je kyselina trifluóroctová), arylsulfónové kyseliny (výhodne kyselina p-toluénsulfónová alebo benzénsulfónová), alkánsulfónové kyseliny o 1 až 10 atómoch uhlíka (výhodne kyselina metánsulfónová), kyselinu chlorovodíkovú, kyselinu sírovú alebo kyselinu fosforečnú. Použijú sa stechiometrické alebo katalytické množstvá takejto kyseliny.

Inertným rozpúšťadlom môže byť, napríklad, voda, alkánnitrily (1 až 6 atómov uhlíka, výhodne acetonitril), halogénuhľovodíky (1 až 6 atómov uhlíka a 1 až 6 halogénov) (výhodne dichlóretán alebo chloroform), alkylalkoholy s 1 až 10 atómami uhlíka (výhodne etanol), dialkylétery (4 až 12 atómov uhlíka, výhodne dietyléter alebo diizopropyléter) alebo cyklické étery, ako je dioxán alebo tetrahydrofurán. Výhodné sú teploty v rozmedzí od 0 °C do 100 °C.

Zlúčenina vzorca (X) môže byť premenená na medziprodukt vzorca (XI) reakciou so zlúčeninami C=O(Rd)₂ (kde Rd je halogén (výhodne chlór), alkoxy (1 až 4 atómov uhlíka) alebo alkyltio (1 až 4 atómov uhlíka)) za prítomnosti alebo absencie bázy v inertnom rozpúšťadle pri reakčnej teplote medzi -50 °C až 200 °C. Bázou môžu byť, napríklad, hydridy alkalických kovov (výhodne hydrid sodný), alkoxidy alkalic9 kých kovov (1 až 6 atómov uhlíka) (výhodne metoxid sodný alebo etoxid sodný), uhličitany alkalických kovov, hydroxidy alkalických kovov, trialkylamíny (výhodne N,N-diizopropyl-N-etylamín alebo trietylamín) alebo aromatické amíny (výhodne pyridín).

Inertnými rozpúšťadlami môžu byť, napríklad, alkylalkoholy (1 až 8 atómov uhlíka, výhodne metanol alebo etanol), nižšie alkánnitrily (1 až 6 atómov uhlíka, výhodne acetonitril), cyklické étery (výhodne tetrahydrofurán alebo 1,4-dioxán), Ν,Ν-dialkylformamidy (výhodne dimetylformamid), N,N-dialkylacetamidy (výhodne dimetylacetamid), cyklické amidy (výhodne N-metylpyrrolidin-2-ón), dialkylsulfoxidy (výhodne dimetylsulfoxid) alebo aromatické uhľovodíky (výhodne benzén alebo toluén).

Zlúčenina vzorca (XI) môže reagovať s halogenačným činidlom za prítomnosti alebo absencie bázy a za prítomnosti alebo absencie inertného rozpúšťadla pri reakčných teplotách v rozmedzí od -80 °C do 250 °C, za zisku halogénovaného medziproduktu (XII) (kde X je halogén). Medzi halogenačné činidlá patria, napríklad, SOC1₂, POC1₃, PCI3, PC1₅, POBr₃, PBr₃ alebo PBr₅. Medzi bázy patria, napríklad, trialkylamíny (výhodne N,N-di-izopropyl-N-etylamín alebo trietylamín) alebo aromatické amíny (výhodne N,N-dietylamín).

Medzi inertné rozpúšťadlá patria, napríklad, Ν,Ν-dialkylformamidy (výhodne dimetylformamid), N,N-dialkylacetamidy (výhodne dimetylacetamid), cyklické amidy (výhodne N-metylpyrrolidin-2-ón) alebo aromatické uhľovodíky (výhodne benzén alebo toluén). Výhodné reakčné teploty sú v rozmedzí od 20 °C do 200 °C.

Zlúčenina vzorca (XII) môže reagovať s alkylamínom za prítomnosti alebo absencie bázy za prítomnosti alebo absencie inertného rozpúšťadla pri reakčných teplotách v rozmedzí -80 až 250 °C, za zisku zlúčenín vzorca (I). Medzi bázy patria, napríklad, hydridy alkalických kovov (výhodne hydrid sodný), alkoxidy alkalických kovov (1 až 6 atómov uhlíka) (výhodne metoxid sodný alebo etoxid sodný), hydridy kovov alkalických zemín, dialkylamidy alkalických kovov (výhodne lítium-di-izopropylamid), uhličitany alkalických kovov, hydrogenuhličitany alkalických kovov, bis(trialkylsilyl)amidy alkalických kovov (výhodne nátriumbis(trimetylsilyl)amid), trialkylamíny (výhodne N,N-di-izopropyl-N-etylamin) alebo aromatické amíny (výhodne pyridín).

Medzi inertné rozpúšťadlá patria, napríklad, alkylalkoholy (1 až 8 atómov uhlíka, výhodne metanol alebo etanol), nižšie alkánnitrily (1 až 6 atómov uhlíka, výhodne acetonitril), dialkylétery (výhodne dietyléter), cyklické étery (výhodne tetrahydrofurán alebo 1,4-dioxán), Ν,Ν-dialkylformamidy (výhodne dimetylformamid), Ν,Ν-dialkylacetamidy (výhodne dimetylacetamid), cyklické amidy (výhodne N-metylpyrrolidin-2-ón), dialkylsulfoxidy (výhodne dimetylsulfoxid), aromatické uhľovodíky (výhodne benzén alebo toluén) alebo halogénalkány obsahujúce 1 až 10 uhlíkov a 1 až 10 halogénov (výhodne dichlóretán). Výhodné reakčné teploty sú v rozmedzí od 0 °C do 140 °C.

Zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu môžu byť pripravené ako rádioaktívne označené zlúčeniny, pomocou syntézy s použitím prekurzorov obsahujúcich aspoň jeden atóm, ktorý je rádioizotopom. Rádioizotop je výhodne vybraný zo skupiny zahrnujúcej aspoň jeden uhlík (výhodne ¹⁴C), vodík (výhodne ³H), síru (výhodne ³⁵S) alebo jód (výhodne ^l25I). Takéto rádioaktívne označené zlúčeniny sa výhodne syntetizujú s použitím rádioizotopu od dodávateľa špecializovaného na syntézu rádioaktívne označených zlúčenín. Takýmito dodávateľmi sú napríklad Amersham Corporation, Arlington Heights, 111.; Cambridge Isotope Laboratories, Inc. Andover, Mass.; SRI International, Menlo Park, Calif.; Wizard Laboratories, West Sacramento, Calif.; ChemSyn Laboratories, Lexena, KS; American Radiolabeled Chemicals, Inc., St. Louis, Mo.; a Moravek Biochemicals Inc., Brea, Calif.

Trítiom označené zlúčeniny môžu byť tiež ľahko pripravené katalytický s použitím platinou katalyzovanej výmeny v trítiovanej kyseline octovej, kyselinou katalyzovanej výmeny v trítiovanej kyseline trifluóroctovej alebo heterogénnekatalyzovanej výmeny s trítiovým plynom. Takéto postupy sú tiež výhodne uskutočnené s použitím bežného rádioaktívneho označenia od dodávateľov uvedených v predchádzajúcom odseku a s použitím zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu ako substrátu. Ďalej, niektoré prekurzory môžu byť podrobené výmene trítium-halogén, redukcii nenasýtených väzieb plynným trítiom alebo redukcii s použitím nátrium-borotritidu.

Autorádiografia receptora (receptorové mapovanie) môže byť uskutočnená in vitro, ako je opísané Kuharom v kapitolách 8.1.1 až 8.1.9 Current Protocols in Pharmacology (1998) John Wiley & Sons, New York, s použitím rádioaktívne označených zlúčenín podľa predkladaného vynálezu.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Analytické dáta boli zaznamenané pre zlúčeniny opísané s použitím nasledujúcich všeobecných postupov: protónové NMR spektrum sa stanovilo na Varian VXR alebo Unity 300 FT-NMR prístrojoch (300 MHz); chemické posuny sa zaznamenávali v ppm (δ) z interného tetrametysilánového štandardu v deuterochloroforme alebo deuterodimetylsulfoxide, ako je uvedené. Hmotnostné spektrum (MS) alebo hmotnostné spektrum s vysokým rozlíšením (HRMS) sa zaznamenávali na Finnegan MAT 8230 spektrometri alebo Hewlett

Packard 5988A model spektrometra (s použitím chemoionizácie (CI) s NH₃ ako plynným nosičom, elektropostrekovej ionizácie (ESI), chemoionizácie pri atmosférickom tlaku (APCI) alebo plynovej chromatografie (GC)). Teploty topenia sa zaznamenávali na MelTemp 3.0 vyhrievanom bloku a sú nekorigované. Teploty varu sú nekorigované. Všetky merania pH počas spracovania boli uskutočnené s použitím papierika.

Činidlá boli zakúpené z komerčných zdrojov a boli, pokiaľ to bolo nutné, prečistené podľa všeobecného spôsobu opísaného v D. Perrin and W. L. F. Armarego, Purification of Laboratory Chemicals, 3. vydanie, (New York: Pergamon Press, 1988). Chromatografia bola uskutočnená na silikagéli s použitím systému rozpúšťadiel opísaného neskôr. Pre systém zmesi rozpúšťadiel sú uvedené objemové pomery. Inak sú podiely a percentá hmotnostné. Bežne použitými skratkami sú: DMF (Ν,Ν-dimetylformamid), EtOH (etanol), MeOH (metanol), EtOAc (etylacetát), HOAc (kyselina octová), DME (1,2-dietoxyetán) a THF (tetrahydrofurán).

Nasledujúce príklady sú uvedené na podrobnejšie dokreslenie predkladaného vynálezu. Tieto príklady nijako neobmedzujú rozsah predkladaného vynálezu.

Príklad 1

Príprava 2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)[1.5-a]pyrazolo-[1.3.5]-triazin-4(3H)-ónu

A. 2-Metoxy-6-metylpyridín

Sodík (31,0 g, 1,35 mol) sa pridá po častiach do metanolu (500 ml) počas 30 minút za miešania v banke s refluxným chladičom. Po dokončení adície sa reakčná zmes nechá vychladnúť na izbovú teplotu. Po častiach sa za miešania pridá 2-fluór-6-metylpyridín (50 g, 450 mmol). Reakčná zmes sa potom zohreje na teplotu spätného toku a mieša sa 48 hodín. Zmes sa potom ochladí na izbovú teplotu a rozpúšťadlo sa odstráni vo vákuu za zisku žltého oleja. Zvyšok sa odoberie vo vode (500 ml) a uskutočnia sa tri extrakcie s éterom (200 ml). Kombinované organické vrstvy sa sušia cez MgSO₄, prefiltrujú sa a rozpúšťadlo sa odstráni z filtrátu vo vákuu za zisku žltej kvapaliny: *H-NMR (CDC1₃, 300 MHz): δ 7,44 (dd, 1H, J = 8,7), 6,71 (d, 1H, J = = 7), 6,53 (d, 1H, J = 8), 3,91 (s, 3H), 2,45 (5, 3H).

B. 2-Metoxy-6-metylpyridín

Zmes 2-hydroxy-6-metylpyridínu (6,85 g, 62,8 mmol), uhličitanu strieborného (22,5 g, 81,6 mmol), jódmetánu (39,1 ml, 628 mmol) a chloroformu (200 ml) sa mieša pri izbovej teplote počas 40 hodín v tme. Reakčná zmes sa prefiltruje cez celit. Odobratý pevný materiál sa premyje éterom. Kombinované filtráty sa zahustia vo vákuu za zisku kvapaliny (6,25 g), ktorá je identická s produktom zo stupňa A.

C. 6-Metoxy-3-bróm-2-metylpyridín

Zmes 2-metoxy-6-metylpyridín (17,0 g, 138 mmol) a roztoku hydrogénfosforečnanu sodného (0,15 M vo vode, 250 ml) sa mieša pri izbovej teplote. Po kvapkách sa počas 15 minút adičným lievikom pridá bróm (7,1 ml, 138 mmol). Reakčná zmes sa potom mieša pri izbovej teplote počas 4 h. Číry bezfarebný roztok sa nariedi vodou (500 ml) a extrahuje sa trikrát dichlórmetánom (200 ml). Kombinované organické vrstvy sa sušia cez MgSO₄, prefiltrujú sa a rozpúšťadlo sa z filtrátu odstráni vo vákuu za zisku žltej kvapaliny. Rýchla chromatografia na silikagéli (EtOAc : hexán: 1 : 20) a odstránenie rozpúšťadla z vybraných kombinovaných frakcií vedie k zisku čírej bezfarebnej kvapaliny (15,4 g): ’H-NMR(CDC1₃, 300 MHz)l: δ 7,60 (d, 1H, J = 8), 6,46 (d, 1H, J = 8), 3,89 (s, 3H), 2,54 (s, 3H).

D. Kyselina 6-metoxy-2-metylpyridín-3-boritá

Roztok 6-metoxy-3-bróm-2-metylpyridínu (59,8 g, 296 mmol) v suchom THF (429 ml) sa ochladí za miešania v atmosfére dusíka na teplotu -78 °C. Po kvapkách sa počas 30 minút pridá roztok n-butyllítia (2,5 M, 130,4 ml, 326 mmol) v hexáne. Reakčná zmes sa mieša počas 3 hodín pri -78 °C. Po kvapkách sa počas 30 minút pridá roztok tri-izopropylboritanu (102,7 ml, 445 mmol) v suchom THF (100 ml). Reakčná zmes sa zohreje na izbovú teplotu, počas 16 hodín, za miešania. Do miešanej zmesi sa pridá kyselina octová (37,35 g, 622 mmol) a potom voda (110 ml). Po 2 hodinách sa vrstvy separujú a organická vrstva sa zahustí vo vákuu. Zvyšok sa odoberie v 2-propanolu (750 ml) a rozpúšťadlo sa odstráni na rotačnej odparke (teplota kúpeľa 50 °C). Zvyšok sa trituruje s éterom. Produkt sa odoberie filtráciou a suší sa vo vákuu (48,4 g): t. t. 200 °C; ’H-NMR (CD₃OH, 300 MHz): δ 7,83 (d, 1H, J = 8), 6,56 (d, 1H, J = 8), 3,85 (s, 3H), 2,44 (s, 3H); GC-MS: 168 (M⁺+ H).

E. 2-Metyl-3-(5-metylizoxazol-4-yl)-6-metoxypyridín

Zmes 4-jód-5-metylizoxazolu (18,2 g, 87 mmol), kyseliny 6-metoxy-2-metylpyridín-3-boritej (14,6 g, 87 mmol), hydrogenuhličitanu sodného (22,0 g, 262 mmol), vody (150 ml) a DME (150 ml) sa zbaví plynu (trikrát) miešaním za aplikácie vákua a potom atmosféry dusíka. Naraz sa pridá [l,l-bis(difenylfosfm)ferrocén)-dichlórpaládium (II) (2,14 g, 2,6 mmol). Reakčná zmes sa zbaví plynu rovnako ako predtým. Reakčná zmes sa potom mieša pri 80 °C počas 4 hodín a potom sa ochladí na izbovú teplotu. Tri extrakcie EtOAc, su11 šenie kombinovanej organickej vrstvy cez MgSO₄, filtrácia a odstránenie rozpúšťadla vo vákuu vedú k zisku oleja. Rýchla chromatografia (EtOAc : hexán: 1 : 9) a odstránenie rozpúšťadla z požadovaných frakcií vo vákuu vedú k zisku produktu (7,15 g): 'H-NMR (CDC1₃, 300 MHz): δ 8,16 (S, 1H), 7,33 (d, 1H, J = 8), 6,63 (d, 1H, J = 8), 3,95 (s, 3H), 2,35 (s, 6H); APCI+-MS: 205 (M⁺ + H).

F. l-Kyán-l-(2-metyl-6-metopyrid-3-yl)propan-2-ón, sodná soľ

Zmes metoxidu sodného (25 % hmotn./hmotn., 13 ml, 70 mmol), 2-metyl-3-(5-metylizoxazol-4-yl)-6-metoxypyridínu (7,15 g, 35 mmol) a metanolu (50 ml) sa mieša pri izbovej teplote počas 16 hodín. Rozpúšťadlo sa odstráni vo vákuu za zisku žltého oleja. Trituráciou s éterom, filtráciou a sušením vo vákuu sa získa surový produkt vo forme bielej pevnej látky (9,3 g).

G. 5-Amino-4-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)-3-metylpyrazol

Zmes l-kyán-l-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)propan-2-ónu, sodnej soli (9,3 g), hydrazín-hydrátu (6 ml, 123,3 mmol) a ľadovej kyseliny octovej (150 ml) sa mieša pri izbovej teplote počas 4 hodín. Reakčná zmes sa zahustí vo vákuu. Zvyšok sa rozpustí v IN HC1 a získaný roztok sa extrahuje dvakrát EtOAc. IN roztok NaOH sa pridáva do vodnej vrstvy do tej doby, ako sa dosiahne pH 12. Vzniknutý semi-roztok sa trikrát extrahuje etylacetátom. Kombinované organické vrstvy sa sušia cez MgSO₄ a prefiltrujú sa. Rozpúšťadlo sa odstráni vo vákuu za zisku a viskózneho oleja (5,8 g). 'H-NMR (CDC1₃, 300 MHz) 7,37 (d, 2H, J = 8), 6,62 (d, 2H, J = 8), 3,95 (s, 3H) , 2,36 (s, 3M), 2,08 (s, 3H); APCf-MS: 219 (M⁺ + H); 260 (M⁺ + CH₃CN).

H. 5-Acetamidín-4-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)-3-metylpyrazol, soľ kyseliny octovej

Etylacetamidát, hydrochlorid (6,46g, 52,2 mmol) sa rýchlo pridá do miešanej zmesi uhličitanu draselného (6,95 g, 50,0 mol), dichlórmetánu (60 ml) a vody (150 ml). Vrstvy sa separujú a vodná vrstva sa extrahuje dichlórmetánom (2 x 60 ml). Kombinované organické vrstvy sa sušia cez MgSO₄ a prefiltrujú sa. Rozpúšťadlo sa odstráni prostou destiláciou a rezíduum, číra svetložltá kvapalina, sa použije bez ďalšieho prečistenia.

Ľadová kyselina octová (1,0 ml, 17,4 mmol) sa pridá do miešanej zmesi 5-amino-4-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)-3-metylpyrazolu (3,8 g, 17,4 mmol), etylacetamidátu vo forme voľnej bázy a dichlórmetánu (100 ml). Vzniknutá reakčná zmes sa mieša pri izbovej teplote počas 16 hodín; na konci tejto doby sa zmes zahustí vo vákuu. Zvyšok sa trituruje s éterom, produkt sa prefiltruje a premyje sa veľkým množstvom éteru. Biely pevný materiál sa suší vo vákuu (5,4 g): 'H-NMR (CD₃OH, 300 MHz): 7,43 (s, 2H, J = 8), 6,69 (s, 2H, J = 8), 4,9 (br s, 2H), 3,93 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 1,88 (s, 3H); APCI⁺-MS: 260 (M⁺ + H).

I. 2,7-Dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)[l,5-a]-pyrazolo-[l,3,5]-triazin-4(3H)-ón

Pelety sodíka (3,9 g, 169 mmol) sa za dôkladného miešania pridajú do etanolu (200 ml). Potom, čo všetok sodík zreaguje, sa pridá 5-acetamidino-4-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)-3-metylpyrazol, soľ kyseliny octovej, (5,4 g, 16,9 mmol) a dietylkarbonát (16,4 ml, 135,3 mmol). Vzniknutá reakčná zmes sa zohreje na teplotu spätného toku a mieša sa počas 18 hodín. Zmes sa ochladí na izbovú teplotu a rozpúšťadlo sa odstráni vo vákuu. Zvyšok sa rozpustí vo vode a pomaly sa pridáva IN roztok HC1 do dosiahnutia pH 6. Vodná vrstva sa extrahuje trikrát EtOAc; kombinované organické vrstvy sa sušia cez MgSO₄ a prefiltrujú sa. Rozpúšťadlo sa odstráni vo vákuu za zisku pevnej látky. Trituráciou s éterom, filtráciou a sušením vo vákuu sa získa biely pevný materiál (3,9 g): 'H-NMR (CD₃0H, 300 MHz): 7,49 (d, 2H, J =8), 6,69 (d, 2H, J =8), 3,93 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,24 (s, 3H); APCI⁺-MS: 286 (M⁺ + H).

Príklad 2:

Príprava 4-((R)-2-butylamino)-2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)[l,5-a]-pyrazol-l,3,5-triazínu

A. 4-Chlór-2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)-[l,5-a]-pyrazoltriazín

Zmes 2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)[l,5-a]-pyrazol-l,3,5-triazin-4-ónu (príklad 1, 3,9 g, 13,7 mmol), di-izopropyletylamínu (9,5 ml, 54,7 mmol), oxychloridu fosforečného (5,1 ml, 54,7 mmol) a toluénu (75 ml) sa mieša pri teplote spätného toku počas 4 hodín. Prchavé zložky sa odstránia vo vákuu. Zvyšok sa vnesie na vrstvu silikagélu na celitu a eluuje sa 1 : 1 zmesou EtOAc a hexánu. Rozpúšťadlo sa odstráni z filtrátu vo vákuu za zisku oleja.

B. 4-((R)-2-Butylamino)-2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)[l,5-a]-pyrazol-l,3,5-triazín

Zmes 4-chlór-2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)-[l,5-a]-pyrazoltriazínu (2,0 ml, 20,5 mmol), di-izopropyletylamínu (9,5 ml, 54,7 mmol) a suchého THF (25 ml) sa mieša pri izbovej teplote počas 18 hodín. Rozpúšťadlo sa odstráni vo vákuu, chromatografiou zvyšku na kolóne (najskôr s použitím EtOAc : hexánu: 1 : 2, potom s použitím EtOAc : hexánu: 1 : 4) sa získa produkt. Odstránením rozpúšťadla vo vákuu sa získa biely pevný materiál (2,3 g): 1.1. = 118,3 °C; 'H-NMR (CDC1₃, 300 MHz): δ 7,41 (d, 1H, J = 8), 6,63 (d, 1H, J = 8),6,25 (br d, 1H, J = 9), 4,35 - 4,30 (m, 1H), 3,95 (s, 3H), 2,49 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 1,76 - 1,66 (m, 2H), 1,34 (d, 3H, J = 7), 1,02 (t, 3H, J = 7); (CDC1₃, 100,52 MHz): δ 163,8, 163,0, 155,7, 153,7, 147,8, 146,6, 141,6, 118,5, 107,4, 106,6, 53,3, 48,2, 29,7, 26,1, 22,9, 20,4, 13,1,10,3; IR (čistý, KBr, cm¹): 3380 (m), 3371 (m), 2968 (m), 2928 (m), 2872 (w), 1621 (s), 1588 (s), 1544 (s), 1489 (s), 1460 (s), 1425 (s), 1413 (s), 1364 (s), 1346 (m), 1304 (s), 1275 (s), 1247 (s), 1198 (m), 1152 (m), 1134 (m), 1112 (m),

1034 (s), 1003 (m); ESI( + )-HRMS: Vypočítané pre C₁₈H₂₄N₆O: 341,2089. Zistené: 341, 2093 (M⁺ + H). Analýza vypočítané pre ϋι₈Η₂₄Ν₅Ο: C, 63,51, H, 7,12, N, 24, 69. Zistené: C, 63,67, H, 7,00, N, 24,49.

Použitie

Test väzby na CRF receptor pri krysách na hodnotenie biologickej aktivity

Väzobná afinita ku krysím kortikálnym receptorom sa testovala publikovaným spôsobom (E. B. De Souza, J. Neuroscience, 7: 88 (1987).

Krivky inhibície väzby [¹²⁵I-Tyr°]-o-CRF na bunkové membrány pri rôznych riedeniach testovaného lieku sa analyzovali s použitím programu pre iteratívne vyhodnotenie krivky LIGAND (P. J. Munson a D. Rodbard, Anál. Biochem. 107: 220 (1980), ktorý určuje hodnoty Ki pre inhibíciu, ktoré sú potom použité na hodnotenie biologickej aktivity.

Inhibícia aktivity adenylát-cyklázy stimulovanej CRF

Inhibícia aktivity adenylát-cyklázy stimulovanej CRF môže byť uskutočnená spôsobom opísaným v G. Battaglia et al., Synapse 1: 572 (1987). Stručne, test sa uskutoční pri 37 °C počas 10 minút v 200 ml pufra obsahujúceho 100 mM Tris-HCl (pH 7,4 pri 37 °C), 10 mM MgCl₂, 0,4 mM EGTA, 0,1 % B SA, 1 mMizobutylmetylxantínu (IBMX), 250 jednotiek/ml fosfokreatinínkinázy, 5 mM kreatín-fosfátu, 100 mM guanozín-5'-trifosfátu, 100 nM oCRF, antagonistické peptidy (koncentrácia 10'⁹ až 10‘^9m) a 0,8 mg pôdneho tkaniva (nevysušené, približne 40 - 60 mg proteínu). Reakcie sa iniciovali pridaním 1 nM ATP/³²P-ATP (približne 2 až 4 mCi/skúmavku) a ukončili sa adíciou 100 ml 50 mM Tris-HCl, 45 mM ATP a 2 % dodecylsíranu sodného. Na sledovanie obnovy cAMP sa 1 μΐ [³H] CAMP (približne 40 000 dpm) pridal pred separáciou do každej skúmavky. Separácia [³²P]cAMP z [³²P]ATP sa uskutočnila sekvenčnou elúciou cez Dowex kolónu a kolónu s oxidom hlinitým.

In vivo biologický test

In vivo aktivita zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu môže byť hodnotená s použitím akéhokoľvek biologického testu dostupného v odbore. Medzi príklady takýchto testov patrí test akustického vyľakania, test behu po schodoch a test chronického podávania. Tieto a ďalšie modely vhodné na testovanie zlúčenín podľa predkladaného vynálezu sú opísané v C. W. Berridge a A. J. Dunu, Brain Research Reviews 15:71 (1990).

Zlúčenina môže byť testovaná na akomkoľvek druhu hlodavcov alebo malých cicavcov.

Zlúčenina podľa predkladaného vynálezu je použiteľná pri liečbe porúch spojených s abnormálnou koncentráciou faktora uvoľňujúceho kortikotropín u pacientov trpiacich depresiami, afektívnymi poruchami a/alebo úzkosťou.

Zlúčenina podľa predkladaného vynálezu môže byť podávaná na liečbu týchto abnormalít spôsobom, ktorý vedie ku kontaktu aktívneho činidla s miestom jeho účinku v tele cicavca. Zlúčeniny môžu byť podávané akýmikoľvek bežnými prostriedkami dostupnými v odbore, buď ako samostatné farmaceutické agens, alebo v kombinácii s ďalšími terapeutickými agens. Zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu môžu byť podávané samostatne, ale skôr sú podávané pospolu s farmaceutickými nosičmi vybranými podľa daného spôsobu podania a v súlade so štandardnou farmaceutickou praxou.

Podávané dávky veľmi závisia od typu použitia a od známych faktorov, ako sú farmakodynamické vlastnosti daného činidla a jeho spôsob a cesta podania; od veku pacienta, od jeho hmotnosti a zdravotného stavu; charakteru a rozsahu príznakov; typu súčasnej liečby; frekvencie aplikácií a od požadovaného efektu. Na použitie pri liečbe uvedených ochorení a porúch môže byť zlúčenina podľa predkladaného vynálezu podávaná orálne denne v dávke 0,002 až 200 mg/kg telesnej hmotnosti. Zvyčajne je dávka 0,01 až 10 mg/kg, rozdelená do viacej dávok, jeden raz až štyrikrát za deň, alebo v prostriedku so spomaleným uvoľňovaním, účinná v dosiahnutí požadovaného farmakologického efektu.

Dávkové formy (prostriedky) vhodné na podanie obsahujú približne 1 mg až približne 10 mg aktívnej zložky na jednotku. V týchto farmaceutických prostriedkoch je aktívna zložka zvyčajne prítomná v množstve približne 0,5 až 95 % hmotnostných vzhľadom na celkovú hmotnosť prostriedku.

Aktívna zložka môže byť podaná orálne v pevných dávkových formách, ako sú kapsuly, tablety a prášky; alebo v kvapalných dávkových formách, ako sú elixíre, sirupy a/alebo suspenzie. Zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu môžu byť tiež podané parenterálne vo forme sterilných kvapalných prostriedkov. Želatínové kapsuly môžu byť použité na podanie aktívnej zložky a vhodného nosiča, ako je napríklad laktóza, škrob, magnézium-stearát, kyselina stearová alebo deriváty celulózy. Podobné riedidlá môžu byť použité na výrobu lisovaných tabliet. Tak tablety, ako kapsuly môžu byť vyrobené ako prípravky so spomaleným uvoľňovaním, ktoré umožňujú kontinuálne uvoľňovanie lieku po určitý čas. Lisované tablety môžu byť poťahované cukrom alebo filmom, aby bola potlačená nepríjemná chuť, alebo aby sa dosiahlo selektívneho rozpadu tablety v gastrointestinálnom trakte.

Kvapalné dávkové formy na orálne podanie môžu obsahovať farbivá alebo chuťové korigens, aby sa zvýšila ich prijateľnosť pre pacienta.

Všeobecne, voda, farmaceutický prijateľné oleje, salinický roztok, vodný roztok dextrózy (glukózy) a podobné sacharidové roztoky a glykoly, ako je propylénglykol alebo polyetylénglykol, sú vhodnými nosičmi pre parenterálne roztoky. Roztoky pre parenterálne podanie výhodne obsahujú soľ aktívnej zložky rozpustnej vo vode, vhodné stabilizačné činidlá a pokiaľ je to nutné, tak pufrovacie substancie. Antioxidačné činidlá, ako je kyslý siričitan sodný, siričitan sodný alebo kyselina askorbová, samostatne alebo v kombinácii, sú vhodnými stabilizačnými činidlami. Tiež sa používa kyselina citrónová a jej soli, a EDTA. Ďalej môžu parenterálne roztoky obsahovať konzervačné činidlá, ako je benzalkóniumchlorid, metyl- alebo propyl-parabén a chlórbutanol.

Vhodné farmaceutické nosiče sú opísané v „Remington's Pharmaceutical Sciences“, A. Osol, v štandardnej literatúre.

Použiteľné farmaceutické dávkové formy na podanie zlúčenín podľa predkladaného vynálezu môžu byť ilustrované na nasledujúcich príkladoch.

Kapsuly

Veľké množstvo kapsúl sa pripraví naplnením každej štandardnej dvojdielnej želatínovej kapsuly 100 mg aktívnej zložky vo forme prášku, 150 mg laktózy, 50 mg celulózy a 6 mg magnézium-stearátu.

Kapsuly z mäkkej želatíny

Pripraví sa zmes aktívnej zložky v jedlom oleji, ako je sójový olej, olej z bavlníkových semien alebo olivový olej, a táto zmes sa injikuje do želatíny za zisku kapsúl z mäkkej želatíny obsahujúcich 100 mg aktívnej zložky. Kapsuly sa premyjú a sušia sa.

Tablety

Veľké množstvo tabliet sa pripraví bežným spôsobom tak, že dávková jednotka obsahuje 100 mg aktívnej zložky, 0,2 mg koloidného oxidu kremičitého, 5 mg magnézium-stearátu, 275 mg mikrokryštalickej celulózy, 11 mg škrobu a 98,8 mg laktózy. Na tablety môže byť nanesený vhodný poťah, aby sa zlepšila ich chuť a/alebo, aby sa oddialila ich absorpcia.

Zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu môžu byť tiež použité ako činidlá alebo štandardy v biochemických testoch pre štúdium neurologických funkcií, dysfunkcií a chorôb. Hoci bol predkladaný vynález opísaný vo svojich výhodných uskutočneniach, budú ďalšie uskutočnenia jasné odborníkom v odbore. Vynález nie je preto obmedzený na opísané realizácie a modifikácie a variácie týchto uskutočnení patria do rozsahu predkladaného vynálezu, ktorý je obmedzený iba pripojenými patentovými nárokmi.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. 4-(2-Butylamino)-2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)pyrazolo[l,5-a]-l,3,5-triazín, jeho farmaceutický prijateľný liekový prekurzor, v ktorom je aminová funkčná skupina viazaná k skupine, ktorá sa pri podaní cicavcovi odštiepi za uvoľnenia uvedenej amino vej funkčnej skupiny, alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ.
2. Zlúčenina podľa nároku 1, jej farmaceutický prijateľný liekový prekurzor, v ktorom je amínová funkčná skupina viazaná k skupine, ktorá sa pri podaní cicavcovi odštiepi za uvoľnenia uvedenej amínovej funkčnej skupiny, alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ, pričom uvedenou zlúčeninou je 4-((R)-2-butylamino)-2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)-pyrazolo[l,5-a]-l,3,5-triazín vzorca (I)

4-((S)-2-butylamino)-2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)pyrazolo[l,5-a]-l,3,5-triazín alebo zmes uvedených stereoizomérnych foriem.
3. Zlúčenina podľa nároku 1 alebo 2, jej farmaceutický prijateľný liekový prekurzor, v ktorom je amínová funkčná skupina viazaná k skupine, ktorá sa pri podaní cicavcovi odštiepi za uvoľnenia uvedenej amíno vej funkčnej skupiny, alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ, pričom uvedenou zlúčeninou je 4-((R)-2-butylamino)-2,7-dimetyl-8-(2-metyl-6-metoxypyrid-3-yl)-pyrazolo[ 1,5-a]-1,3,5-triazín.
4. Zlúčenina podľa nároku 1 až 3, jej farmaceutický prijateľný liekový prekurzor, v ktorom je amínová funkčná skupina viazaná k skupine, ktorá sa pri podaní cicavcovi odštiepi za uvoľnenia uvedenej amínovej funkčnej skupiny, alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ, pričom uvedená zlúčenina je v podstate prostá svojho stereoizoméru (S).
5. Farmaceutická kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje farmaceutický prijateľný nosič a terapeuticky účinné množstvo zlúčeniny, liekového prekurzora alebo soli podľa niektorého z nárokov 1 až 4.
6. Zlúčenia, liekový prekurzor alebo soľ podľa niektorého z nárokov 1 až 4 na ich použitie v terapii.
7. Použitie zlúčeniny, liekového prekurzora alebo soli podľa niektorého z nárokov 1 až 4 na prípravu farmaceutickej kompozície na antagonizovanie receptora CRF.
8. Použitie zlúčeniny, liekového prekurzora alebo soli podľa niektorého z nárokov 1 až 4 na prípravu farmaceutickej kompozície na liečenie ochorenia prejavujúceho sa nadmerným vylučovaním CRF teplokrvného živočícha.
9. Použitie zlúčeniny, liekového prekurzora alebo soli podľa niektorého z nárokov 1 až 4 na prípravu farmaceutickej kompozície na liečenie onemocnenia, kde toto liečenie môže byť ovplyvnené alebo podporené antagonizovaním CRF.
10. Použitie zlúčeniny, liekového prekurzora alebo soli podľa niektorého z nárokov 1 až 4 na prípravu farmaceutickej kompozície na liečenie úzkosti alebo depresie.
11. Výrobok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje:

(a) obalový materiál;

(b) zlúčeninu, liekový prekurzor alebo soľ podľa niektorého z nárokov 1 až 4 a (c) etiketu alebo príbalový leták obsiahnuté na obalovom materiáli resp. v obalovom materiáli a uvádzajúce, že uvedená zlúčenina, liekový prekurzor alebo soľ je účinná pri liečení úzkosti alebo depresie.