CZ20032481A3 - 4-(2-Butylamino)-2, 7-dimethyl-8-(2-methyl-6-methoxypyrid-3-yl)pyrazolo[1,5-A]-1, 3, 5-triazin, jeho enantiomery a farmaceuticky prijatelné soli jakoligandy receptoru faktoru uvolnujícího kortikotropin - Google Patents

Abstract

Vynález popisuje antagonistu faktoru uvolnujícíhokortikotropin (CRF) vzorce I a jeho použití pri lécbe úzkosti, deprese a dalších psychiatrických, neurologických, stejne jako imunologických, kardiovaskulárních nebo kardiálních onemocnení a hypersensitivity tlustého streva asociované s psychopatologickými poruchami a stresem.

Description

4-{2-feutylamino)-2,7-dimethyl-8-(2-methyl-Ó-methoxypyrid-3yl)pyrazol-(l, 5-a]-l, 3, 5-tria2in, jeho enantíomery a farmaceuticky přijatelné soli jako ligandy receptoru pro kortikotropin-uvolňujíci hormon

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká léčby psychiatrických onemocněni a neurologických onemocnění, včetně organické deprese, úzkostných poruch, post-traumatických stresových poruch, supranukleární obrny a poruch příjmu potravy, stejně jako léčby imunologických, kardiovaskulárních nebo jiných kardiálních onemocnění a střevní hypersensitivity asociované s psycho-patologickými poruchami a stresem, pomocí aplikace 4(2-butylamino)-2,7-dimethyl-8-(2-methyl-6-methoxypyrid-3-yl)pyrazol-(1,5-a]-1,3,5-triazinu, jeho enantiomeru a farmaceuticky přijatelných soli jako ligandu receptoru pro kortikotropin-uvolňujíci hormon.

Dosavadní stav techniky

Faktor uvolňující kortikotropin (dále CRF) je peptid délky 41 aminokyselin a je primárním fyziologickým regulátorem sekrece peptidu odvozeného od propiomelanokortinu (POMC) z přední části hypofýzy [J. Rivier et al., Proč. Nat. Acad. Sci. (USA) 80:4851 (1983); W. Vale et al., Science 213:1394 (1981)]. Kromě jeho endokrinní úlohy v hypofýze byla prokázaná široká extrahypothalamární distribuce v centrálním nervovém systému a produkce širokého spektra autonomních, elektrofyziologických a behaviorálních efektů odpovídajících úloze neurotransmiteru a neuromodulátoru v mozku (W. Vale et al., Rec. Prog. Horm. Res. 39:245 (1983); G.F. Koob, Persp. Behav. Med. 2:39 (1985); E.B. De Souza et al., J. Neurosci.

♦ « « · « * • · · 9 9 9 9

999 99 99 99

5:3189 (1985)]. Existují také důkazy, že CRF má významnou úlohu v integrování reakce imunitního systému na fyziologické, psychologické a imunologické stresové podněty (J.E. Blalock, Physiological Reviews 69:1 (1989); J.E. Morley, Life Sci. 41:527 (1987)].

Klinická data poskytují důkazy, že CRF má úlohu v psychiatrických a neurologických onemocněních, včetně deprese, úzkostných poruch a poruch příjmu potravy. Také byla naznačena úloha CRf v etiologii a patofyziologii Alzheimerovi nemoci, Parkinsonovi nemoci, Huntingtonovi nemoci, progresivní supranukleární obrny a amyotrofické laterální sklerosy, protože tato onemocnění souvisejí s dysfunkcí CRF neuronů v centrálním nervovém systému (pro přehled viz E.B. De Souza, Hosp. Practice 23:59 (1988)3.

U efektivních poruch nebo u organické deprese je koncentrace CRF významně zvýšena v mozkomíšním moku (CSF) nemocných bez medikamentosní terapie (C.B. Nemeroff et al., Science 226:1342 (1984); C.M. Banki et al., Am. J. Psychiatry 144:873 (1987); R.D. France et al., Biol. Psychiatry 28:86 (1988); M. Arato et al., Biol Psychiatry 25:355 (1989)}. Dále, hustota CRF receptorů je významně snížena u sebevražd , což je v souladu s hypersekrecí CRF (C.B. Nemeroff et al., Arch. Gen. Psychiatry 45:577 (1988)3. Dále existuje přímá adrenokortikotropinová (ACTH) odpověď na CRF (podaný i.v.), která je pozorována u pacientů s depresí (P.W. Gold et al., Am

J. Psychiatry 141:619 (1984); F. Holsboer et al.,

Psychoneuroendocrinology 9:147 (1984); P.W. Gold et al., New Eng. J. Med. 314:1129 (1986)]. Preklinické pokusy na krysách a primátech poskytují další podporu pro hypotézu, Že hypersekrece CRF se může podílet na příznacích pozorovaných u lidských pacientů s depresí (R.M. Sapolsky, Arch. Gen.

• ·*·

Psychiatry 46:1047 (1989)]. Existují předběžné důkazy, že tricyklická antidepresiva mohou měnit hladiny CRF a tak modulovat počet CRF receptorů v mozku [Grigoriadis et al., Neuropsychopharmacology 2:53 (1989)]

Také se předpokládá, že CRF má úlohu v etiologii úzkostných poruch. CRF vyvolává anxiogenní účinky u zvířat a interakce mezi benzodiazepinem/nebenzodiazepinovými anxiolytiky a CRF byly prokázány v mnoha behaviorálních modelech úzkosti [D.R. Britton et al., Life Sci. 31:363 (1982); C.W. Berridge a A.J. Dunn, Regul. Peptides 16:83 (1986)]. Předběžné studie využívající domnělého antagonisty CRF receptoru a-helikálního ovčího CRF (9-41) v mnoha typických příkladech chování ukázaly, že antagonista produkuje anxiolytikům-podobné efekty, které jsou kvalitativně podobné benzodiazepinům [C.W. Berridge a A.J. Dunn, Horm. Behav. 21:393 (1987), Brain Research Reviews 15:71 (1990)].

Neurochemické, endokrinní a vazebné studie s receptorem prokázaly interakce mezi CRF a benzodiazepinovými anxiolytiky, což poskytuje další důkaz pro podíl CRF na těchto onemocněních. Chlordiazepoxid zmírňuje „anxiogenní efekty CRF jak v testu konfliktu (K.T. Britton et al., Psychopharmacology 86:170 (1985); K.T. Britton et al., Psychopharmacology 94:306 (1988)), tak v testu vylekání zvukem (N.R. Swerdlow et al.,

Psychopharmacology 88:147 (1986)] u krys. Antagonista benzodiazepinového receptoru (Rol5-1788), který je bez behaviorální aktivity, když je použit samostatně v testu operačního konfliktu, zabraňuje efektům CRF způsobem závislým na dávce, zatímco benzodiazepinový inversní agonista (FG7142) zesiluje účinky CRF (K.T. Britton et al., Psychopharmacology 94:306 (1988)].

• · • ·**

Mechanismy a místa účinku, kterými standardní anxiolytika a antidepresiva působí, musí být ještě vyhodnoceny.

Předpokládá se však, Že se podílejí na potlačení hypersekrece CRF, které je pozorována u těchto onemocnění. Zejména zajímavé jsou předběžné studie hodnotící efekty antagonistů CRF receptoru (a-helikálního CRF9-41) v mnoha modelech chování, které prokázaly, že antagonista CRF produkuje „anxiolytikům podobné efekty kvalitativně podobné efektům benzodiazepinů [pro přehled viz G.F. Koob a K.T. Britton, In: CorticotropinReleasing Factor: Basic and Clinical Studies of a -Neuropeptide, E.B. De Souza and C.B. Nemeroff eds., CRC Press str. 221 (1990)].

Dále se předpokládá, že CRF má úlohu u kardiovaskulárních nebo jiných kardiálních onemocněních, stejně jako u gastrointestinálních onemocněních způsobených stresem, jako je hypertenze, tachykardie a městnavé srdeční selhání, mrtvice, syndrom dráždivého tračníku, post-operační ileus a střevní hypersensitivita asociovaná s psychopatologickými poruchami a stresem [pro přehled viz E.D. DeSouza, C.B. Nemeroff, Ed.; Corticotropin-Releasing Factor: Basic and Clinical Studies of a Neuropeptide, E.B. De Souza and C.B. Nemeroff eds., CRC Press str. 221 (1990) a C. Maillot, M. Million, J.Y. Wei,

A. Gauthier, Y. Tache, Gastroenterology, 119, 1569-1579 (2000)].

Nadměrná nebo snížená exprese CRF se považuje na základní příčinu několika onemocnění. Mezi taková léčitelná onemocnění patří, například: afektivní poruchy, úzkost, deprese, bolesti hlavy, syndrom dráždivého tračníku, post-traumatická stresová porucha, supranukleární obrna, imunosuprese, Alzheimerova nemoc, gastrointestinální onemocnění, mentální anorexie nebo jiné poruchy příjmu potravy, lékové závislosti, abstinenční příznaky při alkoholismu nebo lékové závislosti, zánětlivá onemocnění, kardiovaskulární nebo kardiální onemocnění, problémy s fertilitoou, infekce virem lidské imunodeficience, stres při krvácení, obezita, infertilita, traumata hlavy a míchy, epilepsie, mrtvice, vředy, amyotrofická laterální sklerosa, hypoglykemie, hypertense; tachykardie a městnavé srdeční selhání, mrtvice, osteoporosa, předčasný porod, psychosociální zakrnělost, stresem indukovaná horečka, vředy, průjem,, postoperační ileus a hypersensitivita střeva spojená s psychopatologickými poruchami a stresem [pro přehled viz

J.R. McCarthy, S.C. Heinrichs a D.E. Grigoriadis, Cuur. Pharm. Res., 5, 289-315 (1999); P.J. Gilligan, D.W. Robertson a R. Zaczek, J. Medicinal Chem., 43, 1641-1660 (2000), G. P. Chrousos, Int. J. Obesity, 24, Suppl. 2, S50-S55 (2000); E. Webster, D.J. Torpy, I.J. Elenkov, G.P. Chrousos, Ann. N.Y. Acad. Sci., 840, 21-32 (1998); D.J. Newport a C.B. Nemeroff, Curr. Opin. Neurobiology, 10, 211-218 (2000); G. Mastorakos a I. Ilias, Ann. N.Y. Acad. Sci., 900, 95-106 (2000); M.J. Owens a C.B. Nemeroff, Expert Opin. Invest. Drugs, 8, 1849-1858 (1999); G. F. Koob, Ann. N.Y. Acad. Sci., 909, 170-185 (2000) ] .

Následující přihlášky popisují CRF antagonistické sloučeniny; žádná však nepopisuje sloučeniny podle předkládaného vynálezu: W095/10506; W099/51608; WO97/35539; WO99/01439; WO97/44308; WO97/35846; W098/03510U WO99/11643; PCT/US99/18707; WO99/01454; a WO00/01675.

Podstata vynálezu

V jednom aspektu předkládaný vynález poskytuje nové sloučeniny, farmaceutické prostředky obsahující takové sloučeniny a způsoby, které mohou být použity v léčbě efektivních poruch, úzkosti, deprese, syndromu dráždivého tračníku, post-traumatické stresové poruchy, supranukleární obrny, imunosuprese, Alzheimerovi nemoci, gastrointestinálních onemocnění, mentální anorexie nebo jiných poruch příjmu potravy, abstinenčních příznaků při alkoholismu nebo lékové závislosti, lékových závislostí, zánětlivých onemocnění, problémů s fertilitou, onemocnění, jejichž léčba může být provedena nebo usnadněna antagonizováním CRF, včetně například onemocnění indukovaných CRF nebo s podílem CRF, nebo onemocnění vybraných ze skupiny zahrnující zánětlivá onemocnění, jako je revmatoidní artritida a osteoartritida, bolest, asthma, psoriasa a alergie; generálizovaná úzkostná porucha; panická porucha, fóbie, obscesivně-kompulsivní porucha; post-traumatická stresová porucha; poruchy spánku indukované stresem; vedení bolesti, jako například při fibromyalgii; poruchy nálady, jako je deprese, včetně organické deprese, deprese s jedinou epizodou, recidivující deprese, deprese indukované týráním dětí, poporodní deprese; dysthimiw; bipolárních poruch; cyklothymie; syndromu chátrání; stresem-indukované bolesti hlavy; nádorů, infekce virem lidské imunodeficience (HIV) ; neurodegenerativních onemocnění, jako je Alzheimerova nemoc, Parkinsonova nemoc a Huntingtonova nemoc; gastrointestinálních nemocí, jako je vředová choroba, syndrom dráždivého tračníku, Crohnova nemoc, spastický tračník, průjem, post-operační ileus, a střevní hypersensitivita asociovaná s psychopatologickými poruchami nebo stresem; poruchy příjmu potravy, jako je anorexie a bulimia nervosa; hemorhagický stres; stresem-indukované psychotické episody; syndrom euthyroidních nemocných; syndrom poruchy sekrece antidiuretického hormonu (ADH); obesita; infertilita; trauma hlavy; trauma míchy; ischemické poškození neuronů; cerebral ischemia such as cerebral hippocampal ischemia); excitotoxické poškození neuronů; epilepsie;

kardiovaskulární a další kardiální onemocnění, včetně hypertense, tachykardie a městnavého srdečního selhání; mrtvice; imunitní dysfunkce, včetně stresem indukovaných imunitních dysfunkcí (například stresem indukované horečky, prasečího stresového syndromu, horečky indukované transportem dobytka, paroxysmální fibrilace u koní, a dysfunkcí indukovaných omezením pohyblivosti u kuřat, stresem při stříhání u ovcí nebo stresem vyvolaných poruch u psů); svalové spasmy, močová inkontinence; senilní demence Alzheimerova typu; multiinfarktová demence; amyotrofická laterální sklerosa; závislosti na chemických substancích a alkoholu (jako například na alkohol, kokainu, heroinu, benzodiazepinech nebo jiných lécích); abstinenční příznaky při odvykání závislosti na alkoholu nebo na lécích; osteoporosa; psychosociální zakrnělost; a hypoglykemie u savců.

Podstata vynálezu

Předkládaný vynález poskytuje nové sloučeniny, které se váží na receptory faktoru uvolňujícího kortikotropin, čímž alterují anxiogenní efekty sekrece CRF. Sloučenina podle předkládaného vynálezu je použitelná pro léčbu psychiatrických onemocnění a neurologických onemocnění, úzkostných poruch, post-traumatických stresových poruch, supranukleární obrny a poruch příjmu potravy, stejně jako pro léčbu imunologických, kardiovaskulárních nebo kardiálních onemocnění a střevní hypersensitivity asociované s psychopatologickými poruchami a stresem u savců.

V jiném aspektu předkládaný vynález poskytuje novou sloučeninu vzorce (I) (která je popsána dále), která je použitelná jako antagonista faktoru uvolňujícího kortikotropin. Sloučenina podle předkládaného vynálezu · · * «· vykazuje aktivitu antagonisty faktoru uvolňujícího kortikotropin a zdá se, že potlačuje hypersekreci CRF. Předkládaný vynález také zahrnuje farmaceutické prostředky obsahující takové sloučeniny vzorce (I), způsoby použití takových sloučenin pro supresi hypersekrece CRF, a/nebo pro léčbu úzkostných poruch.

Použití kompetitivních vazebných testů se považuje za mimořádně užitečné pro vyhledávání kandidátů na nové léky, například pro identifikování nových CRF ligandů nebo jiných sloučenin, které jsou více účinné nebo více selektivní z hlediska vazebné afinity k CRF receptorům, kde takové ligandy mohou být potenciálně použitelné jako léky. V testech je možno určit schopnost testovaných ligandů vytěsnit z vazby značenou sloučeninu.

Proto další provedení vynálezu zahrnuje použití sloučeniny podle předkládaného vynálezu ve vazebném testu, ve kterém může být jedna nebo více sloučenin navázána na detekovatelný markér, který poskytuje přímý nebo nepřímý signál. Mezi různé detekovatelné markéry patří radioizotopy, fluorescenční sloučeniny, chemiluminiscentní sloučeniny, specifické vazebné molekuly, částice, například magnetické částice, a podobně.

V dalším provedení se předkládaný vynález týká použití sloučenin podle předkládaného vynálezu (zejména značených sloučenin podle předkládaného vynálezu) jako sond pro lokalizování receptorů v buňkách a tkáních a jako standardů a činidel pro použití ve stanovení charakteristik vazby testovaných sloučenin na receptor. Značené sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být použity pro studie in vitro, jako je autoradiografie tkáňových řezů nebo pro in vivo metody, například pro PET nebo SPÉCT skenování. Konkrétně jsou • · výhodné sloučeniny podle předkládaného vynálezu použitelné jako standardy a činidla pro stanovení schopnosti vazby potenciálního léčiva na CRF1 receptor.

Podrobný popis vynálezu (1) V prvním provedení předkládaný vynález poskytuje sloučeninu vzorce (I):

N

OMe (I) a její stereo!zomerické formy, nebo směsi jejích stereoizomerických forem, a její farmaceuticky přijatelné soli nebo proléčiva.

V jiném provedení předkládaný vynález poskytuje sloučeninu z provedení (1), její izomery, stereo!zomerické formy, směsi jejích stereoizomerických forem, její farmaceuticky přijatelná proléčiva, nebo její farmaceuticky přijatelné soli, kde uvedená sloučenina je 4-((R)-2-butylamino)-2,7-dimethyl-8-(2methyl-6-methoxypyrid-3-yl) [1,5-a] -pyrazol-1,3, 5-triazin nebo 4-((S)-2-butylamino)-2,7-dimethyl-8-(2-methyl-6-methoxypyrid3-yl)[1,5-a]-pyrazol—1,3,5-triazin.

(3) V jiném provedení předkládaný vynález poskytuje sloučeninu podle jakéhokoliv z provedení (1) až (2), její farmaceuticky přijatelná proléčiva; nebo její farmaceuticky

· přijatelné soli, kde uvedená sloučenina v podstatě neobsahuje (S) stereoizomer.

(4) V jiném provedení předkládaný vynález poskytuje sloučeninu z provedení (lb), kde uvedená sloučenina je 4-(2-butylamino)2,7-dimethyl-8-(2-methyl-6-methoxypyrid-3-yl)[1,5-a]-pyrazol1,3,5-triazin.

(5) V jiném provedení předkládaný vynález poskytuje sloučeninu z provedení (1), kde uvedená sloučenina je 4-((R)—2— butylamino)-2,7-dimethyl-8-(2-methyl-6-methoxypyrid-3-yl) [1,5a]-pyrazol-l, 3,5— triazin.

(6) Farmaceutický prostředek obsahující farmaceuticky přijatelný nosič a terapeuticky účinné množství sloučeniny podle jakéhokoliv z provedení (1) až (5).

(7) V jiném provedení předkládaný vynález poskytuje způsob pro antagonizování CRF receptoru u savce, který zahrnuje podání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle jakéhokoliv z provedení (1) až (5).

(8) V jiném provedení předkládaný vynález poskytuje způsob léčby onemocnění manifestujícího se hypersekrecí CRF u teplokrevného živočicha, který zahrnuje podání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle jakéhokoliv z provedení (1) až (5).

(9) V jiném provedení předkládaný vynález poskytuje způsob léčby onemocněníu savce, které může být ovlivněno nebo zmírněno antagonizováním CRF, kde uvedený způsob zahrnuje podání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle jakéhokoliv z provedení (1) až (5).

*· · ·*···· « • ··· · · · · · · ⁴ · · «·<· •· φ · ·· «φ (10) V jiném provedení předkládaný vynález poskytuje způsob pro antagonizování CRF receptoru u savce, kde uvedený způsob zahrnuje podání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle jakéhokoliv z provedení (1) až (5).

(11) V jiném provedení předkládaný vynález poskytuje způsob léčby úzkosti nebo deprese u savce, kde uvedený způsob zahrnuje podání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle jakéhokoliv z provedení (1) až (5).

(12) V jiném provedení předkládaný vynález poskytuje způsob pro vyhledávání ligandů pro CRF receptor, který zahrnuje:

a) provedení testu kompetitivní vazby s CRF receptorem, sloučeninou podle jakéhokoliv z provedení (1) až (5), která je značena detekovatelným činidel, a testovaným ligandem; a

b) stanovení schopnosti uvedeného potenciálniho ligandu vytěsnit z vazby uvedenou značenou sloučeninu.

(13) V jiném provedení předkládaný vynález poskytuje způsob pro detekování CRF receptorů ve tkáňových řezech, který zahrnuje:

a) kontaktování sloučeniny podle jakéhokoliv z provedení (1) až (5), která je značena detekovatelným Činidlem, se tkání, za podmínek umožňujících navázání sloučeniny na tkáň; a

b) detekování vazby značené sloučeniny na tkáň.

(14) V jiném provedení předkládaný vynález poskytuje způsob pro ínhibování vazby CRF na CRF-1 receptor, který zahrnuje kontaktování sloučeniny podle jakéhokoliv z provedení (1) až (5) s roztokem obsahujícím buňky exprimující CRF1 receptor, • · kde sloučenina je přítomná v roztoku v koncentraci dostatečné pro inhibováni vazby CRF na CRF-1 receptor.

(15) V jiném provedení předkládaný vynález poskytuje výrobek obsahující:

a) obalový materiál;

b) sloučeninu podle jakéhokoliv z provedení (1) až (5); a

c) příbalový leták obsažený v uvedeném obalu, na kterém je uvedeno, že uvedená sloučenina je účinná pro léčbu úzkosti či deprese.

(16) Předkládaný vynález také zhrnuje způsob léčby afektivních poruch, úzkosti, deprese, bolestí hlavy, syndromu dráždivého tračníku, post-traumatické stresové poruchy, supranukleární obrny, imunosuprese, Alzheimerovi nemoci, gastrointestinálních onemocnění, mentální anorexie a jiných poruch příjmu potravy, návyku na léky, abstinenčních příznaků při odvykání závislosti na alkoholu nebo jiných drogách, zánětlivých onemocnění, kardiovaskulárních nebo kardiálních onemocnění, problémů s fertilitou, infekce virem lidské imunodeficience, hemorhagického stresu, obezity, infertility, traumat hlavy a míchy, epilepsie, mrtvice, vředů, amyotrofické laterální sklerosy, hypoglykemie nebo onemocnění, jejichž léčba může být prováděna antagonizováním CRF, včetně onemocnění indukovaných nebo podporovaných CRF, u savců, kde uvedený způsob zahrnuje podání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle jakéhokoliv z provedení (1) až (5) uvedenému savci.

Definice

Termín farmaceuticky přijatelné soli, jak je zde použit, označuje soli připravené z farmaceuticky přijatelných netoxických kyselin, včetně anorganických kyselin a ♦ ♦ · ♦ · 9 · * 9 9

999 9 * · 99 9 organických kyselin. Mezi vhodné netoxické soli patří anorganické a organické kyseliny s bazickými zbytky, jako jsou například aminy, například kyselina octová, benzensulfonová, benzoová, kamforsulfonová, citrónová, ethensulfonová, fumarová, glukonová, glutamová, bromovodíková, chlorovodíková, isethionová, mléčná, maleinová, jablečná, mandlová, methansulfonová, mucinová, dusičná, pamová, pantothenová, fosforečná, jantarová, sírová, vinná, p-toluensulfonová a podobně; alkalické nebo organické soli s kyselými zbytky, jako jsou karboxylové kyseliny, například soli alkalických kovů nebo kovů alkalických zemin odvozené od následujících baží: hydridu sodného, hydroxidu sodného, hydroxidu draselného, hydroxidu vápenatého, hydroxidu hlinitého, hydroxidu lithného, hydroxidu hořečnatého, hydroxidu zinečnatého, amoniaku, trimethylammonia, triethylammonia, ethylendiaminu, n-methylglukaminu, lysinu, argininu, ornithinu, cholinu, N,N'dibenzylethylendiaminu, chlorprokainu, diethanolaminu, prokainu, n-benzylfenethylaminu, diethylaminu, piperazinu, tris(hydroxymethyl)-aminomethanu; tetramethylammoniumhydroxidu, a podobně.

I

Farmaceuticky přijatelné soli sloučenin podle předkládaného vynálezu mohou být připraveny reakcí volné kyseliny nebo baze těchto sloučenin se stoichiometrickým množstvím vhodné baze nebo kyseliny ve vodě nebo v organickém rozpouštědle, nebo ve směsi těchto dvou rozpouštědel; obvykle jsou výhodná non-vodná media, jako je ether, ethylacetát, ethanol, isopropanol nebo acetonitril. Seznam vhodných solí je uveden v Remington's Pharmaceutical Sciences, 17. vydání, Mack Publishing Company, Easton, PA, 1985, str. 1418, která je zde uvedena ve své úplnosti jako odkaz.

• * «··«» · • ·«« ««*· ··· ·· ·« «·

Termín farmaceuticky přijatelná proléčiva, jak je zde použit, označuje jakékoliv kovalentně vázané nosiče, které uvolňují aktivní sloučeninu vzorce (I) in vivo, po podání takového proléčiva savci. Proléčiva sloučenin vzorce (I) jsou - v rámci lékařských znalostí - vhodná pro použití u člověka a živočichů bez nežádoucí toxicity, dráždění, alergické reakce a podobně, za přijatelného poměru risk/zisk, a tehdy, jsou-li účinná pro zamýšlené použití, což platí též pro „obojetné iontové formy sloučenin podle předkládaného vynálezu. Termín proléčivo označuje sloučeniny, které jsou rychle transformovány in vivo na původní sloučeniny vzorce (I), například hydrolýzou v krvi. Funkční skupiny, které mohou být rychle transformovány - metabolickým štěpením - in vivo, tvoří třídu skupin reaktivních s karboxylovou skupinou sloučenin podle předkládaného vynálezu. Mezi ně patří skupiny, jako je alkanoyl (jako je acetyl, propionyl, butyryl, a podobně), nesubstituovaný a substituovaný aroyl (jako je benzoyl a substituovaný benzoyl), alkoxykarbonyl (jako je ethoxykarbonyl), trialkylsilyl (jako je trimethyl- a triethysilyl), monoestery tvořené s dikarboxylovými kyselinami (jako je sukcinyl), a podobně. V důsledku snadnosti, se kterou jsou metabolicky štěpítelné skupiny sloučenin podle předkládaného vynálezu odštěpitelné in vivo, působí takové sloučeniny jako proléčiva. Sloučeniny nesoucí metabolicky odštěpitelné skupiny mají tu výhodu, že mohou mít lepší biologickou dostupnost v důsledku lepší rozpustnosti a/nebo rychlosti absorpce, kde tyto vlastnosti jsou ve srovnání s původní sloučeninou způsobeny přítomností metabolicky odštěpitelné skupiny. Podrobný popis proléČiv je uveden v následujících publikacích: Design of Prodrugs, H, Bundgaard, ed., Elsevier, 1985; Methods in Enzymology, K. Widder et al, Ed., Academie Press, 42, str.309-396, 1985; A Textbook of Drug Design and Development, Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard, «« 9 • ··· ι· · v · • · · · ♦ · · · ··· ·· ed., kapitola 5; Design and Applications of Prodrugs str. 113-191, 1991; Advanced Drug Delivery Reviews, H. Bundgard, 8, str.1-38, 1992; Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, str. 285, 1988; Chem. Pharm. Bull.,_: N. Nakeya et al, 32, str. 692, 1984; Pro-drugs as Novel Delivery Systems, T. Higuchi and V. Stella, Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series, a

Bioreversible Carriers in Drug Design, Edward B. Roche, ed., American Pharmaceutical Association a Pergamon Press, 1987, kde tyto publikace jsou zde uvedeny jako odkazy.

Za proléčivo se považují jakékoliv kovalentně vázané nosiče, které uvolňují aktivní původní lék vzorce (I) in vivo poté, co je takové proléčivo podáno savci. Proléčiva sloučenin vzorce (I) se připraví modifikováním skupin přítomných na sloučeninách takovým způsobem, že tyto modifikace jsou Štěpeny, buď běžnou manipulací nebo in vivo, na původní sloučeniny. Mezi proléčiva patří sloučeniny, ve kterých jsou hydroxy, aminové nebo sulfhydrylové skupiny navázány na jakoukoliv skupinu, která je po podání savci odštěpena za vzniku volné hydroxylové, amino nebo sulfhydrylové skupiny, v příslušném pořadí. Příklady proléčiv jsou acetátové, formiátové a benzoátové deriváty alkoholových a aminových funkčních skupin ve sloučeninách vzorce (I) a podobně.

Termín „v podstatě bez (S) stereoizomeru, jak je použit pro sloučeninu, znamená, že sloučenina je tvořena významně vyšším podílem (R) stereoizomeru než optického protipólu (tj. (S) stereoizomeru). Ve výhodném provedení termín „v podstatě bez (S) stereoizomeru znamená, že sloučenina je tvořena z alespoň 90% hmotnostních (R) stereoizomerem a z přibližně 10% hmotnostních (S)-stereoizomerem.

«· ·

19* · * · · 1 • · · · · · * ··· ··· ·· ··

Ve výhodnějším provedení termín „v podstatě bez (s) stereoizomeru znamená, že sloučenina je tvořena z alespoň 95% hmotnostních (R) stereoizomerem a z přibližně 5% hmotnostních nebo méně (S)-stereoizomerem. V ještě výhodnějším provedení termín „v podstatě bez (S) stereoizomeru znamená, že sloučenina je tvořena z alespoň 99% hmotnostních (R) stereoizomerem a z přibližně 1% hmotnostních nebo méně (S)stereoizomerem. V jiném výhodném provedení termín „v podstatě bez (S) stereoizomeru znamená, že sloučenina je tvořena z téměř 100% hmotnostních (R) stereoizomerem. Výše uvedená procenta jsou vztažena k celkovému množství kombinovaných stereoizomerů sloučeniny.

Termín „terapeuticky účinné množství sloučeniny podle předkládaného vynálezu označuje množství účinné pro antagonizování abnormálních koncentrací CRF nebo množství účinné pro léčbu příznaků afektivni poruchy, úzkosti nebo deprese u jedince.

Termín „značená, jak je zde použit, znamená, že sloučenina je přímo nebo nepřímo značená značkovacím činidlem, které poskytuje detekovatelný signál, jako je například radioizotop, fluorescenční činidlo, enzym, protilátka, částice, jako je magnetická částice, chemiluminiscenční činidlo, P³², I¹³¹ a At²¹¹, atd.

Syntéza

Mnoho organických sloučenin existuje v opticky aktivních formách, tj. mají schopnost rotovat rovinu polarizovaného světla. V popisovaných opticky aktivních sloučeninách jsou předpony D a L nebo R a S použity pro označení absolutní orientace molekuly okolo jejího chirálního centra (center).

·· t ·· · · • *♦· · · · • · · ··· ··

Předpony dal nebo (+) a (-) jsou použity pro označení rotace polarizovaného světla sloučeninou, kdy (-) nebo 1 znamená, že sloučenina je levotočivá. Sloučenina s předponou (+) nebo d je pravotočivá. Pro daný chemický vzorec jsou tyto sloučeniny, označované jako stereoizomery, identické, s tím rozdílem, že jsou zrcadlovými obrazy. Specifický stereoizomer může být také označován jako enantiomer a směs takových izomerů je často označována jako enantiomerická směs. Směs 50:50 enantiomerů je označována jako racemická směs.

Předkládaný vynález zahrnuje všechny stereoizomerické formy sloučenin vzorce I. Centra asymetrie, která jsou přítomná ve sloučeninách vzorce I, mohou mít nezávisle S konfiguraci nebo R konfiguraci. Předpony dal nebo {+) a (-) jsou použity pro označení směsu rotace polarizovaného světla sloučeninou, kdy (-) nebo 1 znamená, že sloučenina je levotočivá. Sloučenina s předponou (+) nebo d je pravotočivá. Předkládaný vynález zahrnuje všechny možné enantiomery a diastereomery a směsi dvou nebo více stereoizomerů, například směsi enantiomerů a/nebo diastereomerů, ve všech poměrech. Tak mohou být enantiomery v předkládaném vynálezu v enantiomericky Čisté formě, jak jako levotočivé, tak jako pravotočivé sloučeniny, a také ve formě racemátů a ve formě směsi dvou enantiomerů ve všech poměrech. V případě cis/trans izomerismu zahrnuje předkládaný vynález jak cis formy, tak trans formy, stejně jako směsi těchto forem ve všech poměrech. Příprava jednotlivých stereoizomerů může být provedena, pokud je to žádouci, separací směsi běžnými způsoby, například chromatografií nebo krystalizací, použitím stereochemicky uniformních výchozích materiálů pro syntézu nebo pomocí stereoselektivní syntézy. Případná derivatizace může být provedena před separací stereoizomerů. Separace směsi stereoizomerů může být provedena ve stadiu sloučenin vzorce I * · « » 9 ·«· nebo ve stadiu jakéhokoliv meziproduktu v průběhu syntézy Předkládaný vynález zahrnuje všechny tautomerní formy sloučenin vzorce (I).

Sloučenina vzorce (I) může být připravena za použití postupů uvedených ve schématu 1.

Schéma 1

X=OH alkylaůoí činidlo bazejozpouftédlo

X=F

Alkoxidkovu rozpouftédlo bromové činidlo přáad* rozpouftédlo

1. alkyllithfum rozpouftédlo

XBíOlQ,

3. kyselina HiO

OS· os·

OD X-OH nebo F 0» on

CH>,

0K«

Komplexy nebo soli Pd nebo Ni beze Rozpouftédlo

os· baze rozpouftédlo wn

Wl Wl

«>

on

ttJ X-tK>-a-buV*a

Sloučenina vzorce (II), kde X = F, jmůže reagovat s alkoxidem kovu (např. methoxidem sodným, methoxidem draselným; připraveným předem nebo generovaným in šitu) v inertním rozpouštědle za zisku meziproduktu vzorce (III). Inertními rozpouštědly mohou být, například, alkylalkoholy (1 až 8 atomů uhlíku, výhodně methanol nebo ethanol), nižší alkannitrily (1 až 6 atomů uhlíku, výhodně acetonitril), voda, dialkylethery (výhodně diethylether), cyklické ethery (výhodně tetrahydrofuran nebo 1,4-dioxane), N,N-dialkylfomamidy (výhodně dimethyl formamid), Ν,Ν-dialkylacetamidy (výhodně dimethylacetamid), cyklické amidy (výhodně N-methylpyrrolidin2-on), dialkylsulfoxidy (výhodně dimethylsulfoxid) nebo aromatické uhlovodíky (výhodně benzen nebo toluen). Výhodné reakční teploty jsou v rozmezí od 0°C do 100°C.

Alternativně může sloučenina vzorce (II), kde X = OH, reagovat s alkylačním činidlem za přítomnosti baze v inertním rozpouštědle, za zisku meziproduktu vzorce (III). Alkylačním činidlem mohou být, například, halogenalkany (např. CH₃I), dialkylsulfáty (např. MežSOJ nebo alkyltrifluorsulfonáty (např. CH₃Q₃SCF₃) .

Mezi baze patří, například, alkalické kovy, hydridy alkalických kovů (výhodně hydrid sodný), alkoxidy alkalických kovů (1 až 6 atomů uhlíku) (výhodně methoxid sodný nebo ethoxid sodný), hydridy kovů alkalických zemin, karbonáty alkalických kovů, karbonáty přechodných kovů (např. uhličitan stříbrný), dialkylamidy alkalických kovů (výhodně lithium-diisopropyiamid), hydrogenuhličitany alkalických kovů, hydroxidy alkalických kovů, bis(trialkylsilyl)amidy alkalických kovů (výhodně natrium-bis-(trimethylsilyl)amid), trialkylaminy (výhodně N,N-di-isopropyil-N-ethylamin) nebo aromatické aminy (výhodně pyridin).

•4 4 4 · · » »· • Μ· 4 4 > 4 · · • 4 · · 4 4 · · «4* 44 ·· 44

Mezi inertní rozpouštědla patří, například halogenuhlovodíky (1 až 8 atomů uhlíku, 1 až 8 halogenů), nižší alkannitrily (1 až 6 atomů uhlíku, výhodně acetonitril), voda, dialkylethery (výhodně diethylether), cyklické ethery (výhodně tetrahydrofuran nebo 1,4-dioxan), Ν,Ν-dialkylformamidy (výhodně dimethylformamid), N,Ndialkylacetamidy (výhodně dimethylacetamid), cyklické amidy (výhodně N-methylpyrrolidin~2-on), dialkylsulfoxidy (výhodně dimethylsulfoxid) nebo aromatické uhlovodíky (výhodně benzen nebo toluen). Výhodné reakční teploty jsou v rozmezí od 50°C do 150°C.

Sloučenina vzorce (III) může být transformována na sloučeninu vzorce (IV) reakcí s brominačním činidlem za přítomnosti nebo nepřítomnosti dalších činidel v inertním rozpouštědle. Mezi brominační činidla patří, například, Nbromosukcinimid-2,2'-azobísisobutyro-nitril (AIBN), Nbromftaliinid-2,2'-azobisiso-btltyronitril (AIBN)), bróm. Mezi aditiva patří, například, fosforečnany alkalických kovů (např. K3PO4, Na3PO₄), hydrogenfosforečnany alkalických kovů (např. Na₂HPO₄, K₂HPO₄), dihydrogenfosforečnany alkalických kovů (např. NaH₂PO₄, KH₂PO₄) . Mezi inertní rozpouštědla patří, například, halogenuhlovodíky (1 až 6 atomů uhlíku, 1 až 6 halogenů (výhodně chlórů), voda, Ν,Ν-dialkylformamidy (výhodně dimethylformamid), N,N-dialkylacetamidy (výhodně dimethylacetamid), cyklické amidy (výhodně N-methylpyrrolidin2-on). Výhodné reakční teploty jsou v rozmezí od 0°C do 200 °C (lépe 20 °C až 120 °C) .

Sloučenina vzorce (IV) může být přeměněna na sloučeninu vzorce (V) sekvenčními reakcemi s (1) alkyl-lithiem v inertním rozpouštědle při teplotách od -100°C do 50°C; (2) sloučeninou

vzorce B(OR^a)₃ (kde R^a je alkyl s přímým nebo rozvětveným řetězcem tvořený 1 až 20 atomy uhlíku) při teplotách v rozmezí od -100°C do 50°C; a (3) kyselinou za přítomnosti nebo nepřítomnosti vody při teplotách od -100°C do 100°C. Alkyllithium může být sloučenina s přímým nebo rozvětveným řetězcem obsahující 1 až 20 atomů uhlíku. Mezi inertní rozpouštědla patří, například, dialkylethery (výhodně diethylether), cyklické ethery (výhodně tetrahydrofuran nebo 1,4—dioxan), nebo aromatické uhlovodíky (výhodně benzen nebo toluen).

Mezi kyseliny patří, například, alkanové kyseliny tvořené 2 až 10 atomy uhlíku (výhodně kyselina octová), halogenalkanové kyseliny (2-10 atomů uhlíku, 1-10 halogenů, jako je kyselina trifluoroctová), arylsulfonové kyseliny (výhodně kyselina para-toluensulfonová nebo benzensulfonová), alkansulfonové kyseliny obsahující 1-10 atomů uhlíku (výhodně kyselina methansulfonové), kyselina chlorovodíková, kyselina sírová nebo kyselina fosforečná.

Sloučenina vzorce (VII) může být produkována reakcí sloučeniny vzorce (V) se sloučeninou vzorce (VI) za přítomnosti a komplexu nebo soli palladia nebo niklu, baze a inertního rozpouštědla. Mezi komplexy palladia nebo niklu patří, například, fosfinové komplexy, jako je Pd(PPh₃)o PdCl₂(PPh₃)₂, NÍCI2 (PPI13) 2 nebo (1,1—bis (difenylfosfj.no) ferrocen-l-dichlorpalladium. Mezi baze patří, například, alkalické kovy, hydridy alkalických kovů (výhodně hydrid sodný), alkoxidy alkalických kovů (1 až 6 atomů uhlíku) (výhodně methoxid sodný nebo ethoxid sodný), karbonáty alkalických kovů, karbonáty alkalických kovů (např. uhličitan barnatý), karbonáty přechodných kovů (např. uhličitan stříbrný) nebo trialkylaminy (např. triethylamin) . Inertní

rozpouštědla zahrnují, například, dialkylethery (výhodně diethyiether), cyklické ethery (výhodně tetrahydrofuran nebo 1,4-dioxan), nebo aromatické uhlovodíky (výhodně benzen nebo toluen). Výhodné jsou reakční teploty v rozmezí od -100 °C do 100 °C.

Meziprodukt vzorce (VII) může reagovat s baží za přítomnosti inertní rozpouštědla za zisku sloučeniny vzorce (VIII), kde M je kation alkalického kovu (např. sodíku nebo draslíku). Mezi baze patří, například, hydroxidy alkalických kovů (např. NaOH nebo KOH), alkoxidy alkalických kovů (1 až 6 atomů uhlíku) (výhodně methoxid sodný nebo ethoxid sodný) nebo hydroxidy kovů alkalických zemin. Inertní rozpouštědla jsou například alkylalkoholy (1 až 6 atomů uhlíku, nižší alkannitrily (1 až 6 atomů uhlíku, výhodně acetonitril), voda, cyklické ethery (výhodně tetrahydrofuran nebo 1,4-dioxan), Ν,Ν-dialkylformamidy (výhodně dímethyl formamid), N, Ndialkylacetamidy (výhodně dimethylacetamid), cyklické Amidy (výhodně N-methylpyrrolidin-2-on), dialkylsulfoxidy (výhodně dímethylsulfoxid). Výhodné reakční teploty jsou v rozmezí od 0 °C do 150°C.

Sloučeniny vzorce (VIII) mohou reagovat s hydrazin-hydrátem za přítomnosti kyseliny a inertního rozpouštědla při teplotách v rozmezí 0°C až 200°C, výhodně 70°C až 150°C, za zisku sloučenin vzorce (IX). Mezi kyseliny patří, například, alkanové kyseliny obsahující 2 až 10 atomů uhlíku (výhodně kyselina octová), halogenalkanové kyseliny (2-10 atomů uhlíku,

1-10 halogenů, jako je kyselina trifluoroctová), arylsulfonové kyseliny (výhodně kyselina p-toluensulfonová nebo kyselina benzensulfonová), alkanesulfonové kyseliny obsahující 1 až 10 atomů uhlíku (výhodně kyselina methansulfonová), kyselina chlorovodíková, kyselina sírová nebo kyselina fosforfečná.

• · · • · « • · · « 0« ··

Inertní rozpouštědla zahrnují, například, vodu, alkylalkoholy (1 až 8 atomů uhlíku, výhodně methanol nebo ethanol), nižší alkannitrily (1 až 6 atomů uhlíku, výhodně acetonitril), cyklické ethery (výhodně tetrahydrofuran nebo 1,4-dioxan), Ν,Ν-dialkylformamidy (výhodně dimethylformamid) , Ν,Ν-dialkylacetamidy (výhodně dimethylacetamid), cyklické Amidy (výhodně N-methylpyrrolidin-2-on), dialkylsulfoxidy (výhodně dimethylsulfoxid) nebo aromatické uhlovodíky (výhodně benzen nebo toluen).

Sloučenina vzorce (IX) může reagovat se sloučeninami vzorce H3C(C=NH)0R^c (kde R^c je alkyl (1-6 atomů uhlíku)) za přítomnosti nebo nepřítomnosti kyseliny za přítomnosti inertního rozpouštědla při teplotách v rozmezí 0°C až 200°C za vzniku sloučeniny vzorce (X). Kyseliny mohou zahrnovat, například, alkanové kyseliny o 2 až 10 atomech uhlíku (výhodně kyselina octová), halogenalkanové kyseliny (2-10 atomů uhlíku, 1-10 halogenů, jako je kyselina trifluoroctová), arylsulfonové kyseliny (výhodně kyselina p-toluensulfonová nebo benzensulfonová), alkansulfonové kyseliny o 1 až 10 atomech uhlíku (výhodně kyselina methansulfonová), kyselinu chlorovodíkovou, kyselinu sírovou nebo kyselinu fosforečnou. Použijí se stoichiometrická nebo katalytická množství takové kyseliny.

Inertním rozpouštědlem může být, například, voda, alkanenitrily (1 až 6 atomů uhlíku, výhodně acetonitril), halogenuhlovodíky (1 až 6 atomů uhlíku a 1 až 6 halogenů) (výhodně dichloroethan nebo chloroform), alkylalkoholy o 1 až 10 atomech uhlíku (výhodně ethanol), dialkylethery (4 až 12 atomů uhlíku, výhodně diethylether nebo di-isopropylether)

nebo cyklické ethery, jako je dioxan nebo tetrahydrofuran. Výhodné jsou teploty v rozmezí od 0°C do 100 °C.

Sloučenina vzorce (X) může být přeměněna na meziprodukt vzorce (XI) reakcí se sloučeninami C=0(Rd)₂ (kde Rd je halogen (výhodně chlor), alkoxy (1 až 4 atomů uhlíku) nebo alkylthio (1 až 4 atomů uhlíku)) za přítomnosti nebo absence baze v inertním rozpouštědle při reakční teplotě mezi -50°C až 200°C. Baží mohou být, například, hydridy alkalických kovů (výhodně hydrid sodný), alkoxidy alkalických kovů (1 až 6 atomů uhlíku) (výhodně methoxid sodný nebo ethoxid sodný), uhličitany alkalických kovů, hydroxidy alkalických kovů, trialkylaminy (výhodně N,N-diisopropyl-N-ethylamin nebo triethylamin) nebo aromatické aminy (výhodně pyridin).

Inertními rozpouštědly mohou být, například, alkylalkoholy (1 až 8 atomů uhlíku, výhodně methanol nebo ethanol), nižší alkannitrily (1 až 6 atomů uhlíku, výhodně acetonitril), cyklické ethery (výhodně tetrahydrofuran nebo 1,4-dioxan), Ν,Ν-dialkylformamidy (výhodně dimethylformamid), N,Ndialkylacetamidy (výhodně dimethylacetamid), cyklické amidy (výhodně N-methylpyrrolidin-2-on), dialkylsulfoxidy (výhodně dimethylsulfoxid) nebo aromatické uhlovodíky (výhodně benzen nebo toluen).

Sloučenina vzorce (XI) může reagovat s halogenačním činidlem za přítomnosti nebo absence baze a za přítomnosti nebo absence inertního rozpouštědla při reakčních teplotách v rozmezí od -80°C do 250°C, za zisku halogenovaného meziproduktu (XII) (kde X je halogen). Mezi halogenační činidla patří, například, SOC1₂, POCI3, PCI3, PC1₅, P0Br₃, PBr₃ nebo PBr₅. Mezi baze patří, například, trialkylaminy (výhodně

N,N-di-isopropyl-N-ethylamin nebo triethylamin) nebo aromatické aminy (výhodně N,N-diethylamin).

Mezi inertní rozpouštědla patří, například, N,Ndialkylformamidy (výhodně dimethylformamid), Ν,Ν-dialkylacetamidy (výhodně dimethylacetamid), cyklické amidy (výhodně N-methylpyrrolidin-2-on) nebo aromatické uhlovodíky (výhodně benzen nebo toluen). Výhodné reakční teploty jsou v rozmezí od 20 °C do 200°C.

Sloučenina vzorce (XII) může reagovat s alkylaminem za přítomnosti nebo absence baze za přítomnosti nebo absence inertního rozpouštědla při reakčních teplotách v rozmezí -80 až 250°C, za zisku sloučenin vzorce (I). Mezi baze patří, například, hydridy alkalických kovů (výhodně hydrid sodný), alkoxidy alkalických kovů (1 až 6 atomů uhlíku) (výhodně methoxid sodný nebo ethoxid sodný), hydridy kovů alkalických zemin, dialkylamidy alkalických kovů (výhodně lithium-diisopropylamid), uhličitany alkalických kovů, hydrogenuhličitany alkalických kovů, bis(trialkylsilyl)amidy alkalických kovů (výhodně natrium-bis (trimethylsilyl) amid), trialkylaminy (výhodně N,N-di-isopropyl-N-ethylamin) nebo aromatické aminy (výhodně pyridin).

Mezi inertní rozpouštědla patří, například, alkylalkoholy (1 až 8 atomů uhlíku, výhodně methanol nebo ethanol), nižší alkannitrily (1 až 6 atomů uhlíku, výhodně acetonitril), dialkylethery (výhodně diethylether), cyklické ethery (výhodně tetrahydrofuran nebo 1,4-dioxan), Ν,Ν-dialkylformamidy (výhodně dimethylformamid), Ν,Ν-dialkylacetamidy (výhodně dimethylacetamid), cyklické amidy (výhodně N-methylpyrrolidin2-on), dialkylsulfoxidy (výhodně dimethylsulfoxid), aromatické

4 4 4 4 4 4 4	4· 4 4 4 4·	• 4 4 • · 4
4 4	4 4 4	• ·· 4
	4 44 44	·· 44

uhlovodíky (výhodně benzen nebo toluen) nebo halogenalkany obsahující 1 až 10 uhlíků a a 1 až 10 halogenů (výhodně dichlorethan). Výhodné reakční teploty jsou v rozmezí od 0°C do 140°C.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být připraveny jako radioaktivně značené sloučeniny, pomocí syntézy za použití prekursorů obsahujících alespoň jeden atom, který je radioizotopem. Radioizotop je výhodně vybrán ze skupiny zahrnující alespoň jeden uhlík (výhodně ¹⁴C), vodík (výhodně ³H), síru (výhodně ³⁵S) nebo jód (výhodně ¹²⁵I) . Takové radioaktivně značené sloučeniny se výhodně syntetizují s použitím radioizotopu od dodavatele specializovaného na syntézu radioaktivně značených sloučenin. Takovými dodavateli jsou například Amersham Corporation, Arlington Heights, 111.; Cambridge Isotope Laboratories, lne. Andover, Mass.; SRI International, Menlo Park, Calif.; Wizard Laboratories, West Sacramento, Calif.; ChemSyn Laboratories, Lexena, KS; American Radiolabeled Chemicals, lne., St.Louis, Mo.; a Moravek Biochemicals lne., Brea, Calif.

Tritiem značené sloučeniny mohou být také snadno připraveny katalyticky za použití platinou-katalyzované výměny v tritiované kyselině octové, kyselinou katalyzované výměny v tritiované kyselině trifluoroctové, nebo heterogenněkatalyzované výměny s tritiovým plynem. Takové postupy jsou také výhodně provedeny za použití běžného radioaktivního značení od dodavatelů uvedených v předchozím odstavci a za použití sloučeniny podle předkládaného vynálezu jako substrátu. Dále, některé prekursory mohou být podrobeny výměně tritium-halogen, redukci nenasycených vazeb plynným tritiem nebo redukcí za použití natrium-borotritidu.

Autoradiografie receptorů (receptorové mapování) může být provedena in vitro, jak je popsáno Kuharem v kapitolách 8.1.1 až 8.1.9 Current Protocols in Pharmacology (1998) John Wiley & Sons, New York, za použití radioaktivně značených sloučenin podle předkládaného vynálezu.

Příklady provedeni vynálezu

Analytická data byla zaznamenána pro sloučeniny popsané dále za použití následujících obecných postupů: protonové NMR spektrum se stanovilo na Varian VXR nebo Unity 300 FT-NMR přístrojích (300 MHz); chemické posuny se zaznamenávaly v ppm (δ) z interního tetramethysilanového standardu v deuterochloroformu nebo deuterodmethylsulfoxidu, jak je uvedeno dále. Hmotnostní spektrum (MS) nebo hmotnostní spektrum s vysokým rozlišením (HRMS) se zaznamenávaly na Finnegan MAT 8230 spektrometru nebo Hewlett Packard 5988A model spektrometru (za použití chemoionizace (Cl) s NH₃ jako plynným nosičem, elektropostřikové ionizace (ESI), chemoionizace při atmosférickém tlaku (APCI) nebo plynové chromatografie (GC)). Teploty tání se zaznamenávaly na MelTemp 3.0 vyhřívaném bloku a jsou nekorigované. Teploty varu jsou nekorigované. Všechna měření pH během zpracování byla provedena za použití papírku.

Činidla byla zakoupena z komerčních zdrojů a byla, pokud to bylo nutné, přečištěna podle obecného způsobu popsaného v D. Perrin and W.L.F. Armarego, Purification of Laboratory Chemicals, 3. vydání, (New York: Pergamon Press, 1988). Chromatografie byla provedena na silikagelu za použití systému rozpouštědel popsaného dále. Pro systém směsi rozpouštědel jsou uvedeny objemové poměry. Jinak jsou podíly a procenta hmotnostní. Běžně použitými zkratkami jsou: DMF (N,N28

dimethylformamid), EtOH (ethanol), MeOH (methanol), EtOAc (ethylacetát), HOAc (kyselina octová), DME (1,2-diethoxyethan) a THF (tetrahydrofuran).

Následující příklady jsou uvedeny pro podrobnější dokreslení předkládaného vynálezu. Tyto příklady nijak neomezují rozsah předkládaného vynálezu.

Příklad 1

Příprava 2,7-dimethvl-8-(2-methyl-6-methoxypyrid3-yl) [ 1.5-a]pyrazolo-[l. 3.5]-triazin-4 (3H)-onu

A. 2-methoxy-6-methylpyridin.

Sodík (31,0 g, 1,35 mol) se přidá po částech do methanolu (500 ml) během 30 minut za míšení v baňce s refluxním chladičem. Po dokončení adice se reakční směs nechá vychladnout na teplotu místnosti. Po částech se za míšení přidá 2-fluor-6-methyIpyridin (50 g, 450 mmol). Reakční směs se potom zahřeje na teplotu zpětného toku a mísí se po dobu 48 hodin. Směs se potom ochladí na teplotu místnosti a rozpouštědlo se odstraní ve vakuu za zisku žlutého oleje. Zbytek se odebere ve vodě (500 ml) a provedou se tři extrakce s etherem (200 ml). Kombinované organické vrstvy se suší přes MgSO₄, přefiltruji se a rozpouštědlo se odstraní z filtrátu ve vakuu za zisku žluté kapaliny: ¹H-NMR (CDC1₃, 300 MHz): δ 7,44 (dd, 1H, J = 8,7), 6,71 (d, 1H, J = 7), 6,53 (d, 1H, J = 8), 3,91 (s, 3H), 2,45 (5, 3H) .

B. 2-methoxy-6-methylpyridin.

Směs 2-hydroxy-6-methylpyridinu (6,85 g, 62,8 mmol), uhličitanu stříbrného (22,5 g, 81,6 mmol), jodmethanu (39,1

ml, 628 mmol) a chloroformu (200 ml) se mísí při teplotě místnosti po dobu 40 hodin ve tmě. Reakční směs se přefiltruje přes celit. Odebraný pevný materiál se promyje etherem. Kombinované filtráty se zahustí ve vakuu za zisku kapaliny (6,25 g), která je identická s produktem ze stupně A.

C. 6-methoxy-3-brom-2-methylpyridin.

Směs 2-methoxy-6-methylpyridin (17,0 g, 138 mmol) a roztoku hydrogenfosforečnanu sodného (0,15 M ve vodě, 250 ml) se mísí při teplotě místnosti. Po kapkách se během 15 minut adiční nálevkou přidá brom (7,1 ml, 138 mmol). Reakční směs se potom mísí při teplotě místnosti po dobu 4 h. Čirý bezbarvý roztok se naředí vodou (500 ml) a extrahuje se třikrát dichlormethanem (200 ml) . Kombinované organické vrstvy se suší přes MgSCU, přefiltrují se a rozpouštědlo se z filtrátu odstraní ve vakuu za zisku žluté kapaliny. Rychlá chromatografie na silikagelu (EtOAc:hexan::1:20) a odstranění rozpouštědla z vybraných kombinovaných frakcí vede k zisku čiré bezbarvé kapaliny (15,4 g): ^-NMRťCDClj, 300 MHz): δ 7,60 (d, 1H, J = 8), 6,46 (d, 1H, J=8), 3,89 (s, 3H), 2,54 (s, 3H).

D. Kyselina 6-methoxy-2-methylpyridin-3-boritá

Roztok 6-methoxy-3-brom-2-methyipyridinu (59,8 g, 296 mmol) v suchém THF (429 ml) se ochladí za míšení v atmosféře dusíku na teplotu -78 °C. Po kapkách se během 30 minut přidá roztok nbutyllithia (2,5 M, 130,4 ml, 326 mmol) v hexanu. Reakční směs se mísí po dobu 3 hodin při -78 °C. Po kapkách se během 30 minut přidá roztok tri-isopropylboritanu (102,7 ml, 445 mmol) v suchém THF (100 ml). Reakční směs se zahřeje na teplotu místnosti, během 16 hodin, za míšení. Do míšené směsi se přidá kyselina octová (37,35 g, 622 mmol) a potom voda (110 ml). Po

» · ♦ 1 • · ♦· hodinách se vrstvy separují a organická vrstva se zahustí ve vakuu. Zbytek se odebere ve 2-propanolu (750 ml) a rozpouštědlo se odstraní na rotační odparce (teplota lázně 50 °C). Zbytek se trituruje s etherem. Produkt se odebere filtrací a suší se ve vakuu (48,4 g) : t.t. 200 °C; ¹H—NMR (CD3OH, 300 MHz) : δ 7,83 (d, 1H, J = 8), 6,56 (d, 1H, J - 8) , 3,85 (s, 3H),

2,44 (s, 3H); GC-MS: 168 (M+ + H).

E. 2-methyl-3- (5-methylisoxazol-4-yl)-6-methoxypyridin.

Směs 4-jod-5-methylisoxazolu (18,2 g, 87 mmol), kyseliny 6-methoxy-2-methylpyridin-3-borité (14,6 g, 87 mmol), hydrogenuhličitanu sodného (22,0 g, 262 mmol), vody (150 ml) a DME (150 ml) se zbaví plynu (třikrát) míšením za aplikace vakua a poté atmosféry dusíku. Najednou se přidá [1,1bis(difenylfosfin)ferrocen)-dichlorpalladium (II) (2,14 g, 2,6 mmol). Reakční směs se odplynuje stejně jako předtím. Reakční směs se potom mísí pří 80 °C po dobu 4 hodin a potom se ochladí na teplotu místnosti. Tři extrakce EtOAc, sušení kombinované organické vrstvy přes MgSOo filtrace a odstranění rozpouštědla ve vakuu vedou k zisku oleje. Rychlá chromatografie (EtOAc:hexan::1:9) a odstranění rozpouštědla z požadovaných frakcí ve vakuu vedou k zisku produktu (7,15 g) : ¹H-NMR (CDC1₃, 300 MHz): δ 8,16 (S, 1H), 7,33 (d, 1H, J =

8), 6,63 (d. 1H, J= 8), 3,95 (s, 3H), 2,35 (s, 6H); APCI⁺-MS: 205 (M⁺ + H) .

F. 1-kyan-l-(2-methyl-6-methopyrid-3-yl)propan-2-on, sodná sůl

Směs methoxidu sodného (25% hmot./hmot., 13 ml,, 70 mmol), 2-methyl-3-(5-methylisoxazol-4-yl)-6-methoxypyridinu (7,15 g, mmol) a methanolu (50 ml) se mísí při teplotě místnosti po dobu 16 hodin. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu za zisku ·» · ·· · · * ·♦· « · · • · · · ·« · ·· žlutého oleje. Triturací s etherem, filtrací a sušením ve vakuu se získá surový produkt ve formě bílé pevné látky (9,3 g) *

G. 5-amino-4-(2-methyl-6-methoxypyrid-3-yl)-3-methylpyrazol.

Směs 1-kyan-l-(2—methyl-6-methoxypyrid-3-yl)propan-2-onu, sodné soli (9,3 g), hydrazin-hydrátu (6 ml, 123,3 mmol) a ledové kyseliny octové (150 ml) se mísí při teplotě místnosti po dobu 4 hodin. Reakční směs se zahustí ve vakuu. Zbytek se rozpustí v 1Ň HCl a získaný roztok se extrahuje dvakrát EtOAc. IN roztok NaOH se přidává do vodné vrstvy do té doby, než se dosáhne pH 12. Vzniklý semi-roztok se třikrát extrahuje ethylacetátem. Kombinované organické vrstvy se suší přes MgSO₄ a přefiltrují se. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu za zisku a viskozního oleje {5,8 g) . hl-NMR {CDC1₃, 300 MHz) 7,37 (d, 2H,

J = 8), 6,62 (d, 2H, J= 8), 3,95 (s, 3H), 2,36 (s, 3M), 2,08 (s, 3H); APCI⁺-MS: 219 (Μ* + H); 260 (M* + CH₃CN) .

H. 5-acetamidin-4-(2-methyl-6-methoxypyrid-3-yl)-3methylpyrazol, sůl kyseliny octové

Ethylacetamidát, hydrochlorid (6,46g, 52,2 mmol) se rychle přidá do míšené směsi uhličitanu draselného (6,95 g, 50,0 mol), dichlormethanu {60 ml) a vody (150 ml). Vrstvy se separují a vodná vrstva se extrahuje dichlormethanem {2 X 60 ml). Kombinované organické vrstvy se suší přes MgSO₄ a přefiltrují se. Rozpouštědlo se odstraní prostou destilací a reziduum, čirá světle Žlutá kapalina, se použije bez dalšího přečištění.

Ledová kyselina octová (1,0 ml, 17,4 mmol) se přidá do míšené směsi 5-amino-4-(2-methyl-6-methoxypyrid-3-yl)-3• ·«·· · · ’ i •44 4 * * 44 4

444 44«·

444 44 44 >« methylpyrazolu (3,8 g, 17,4 mmol), ethylacetamidátu ve formě volné baze a dichlormethanu (100 ml). Vzniklá reakčni směs se mísí při teplotě místnosti po dobu 16 hodin; na konci této doby se směs zahustí ve vakuu. Zbytek se trituruje s etherem, produkt se přefiltruje a promyje se velkým množstvím etheru. Bílý pevný materiál se suší ve vakuu (5,4 g) : ¹H-NMR (CD₃OH, 300 MHz): 7,43 (s, 2H, J=8), 6,69 (s, 2H, J = 8), 4,9 (brs, 2H), 3,93 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 1,88 (s, 3H); APCI+-MS: 260 (M⁺ + H) .

I. 2,7-dimethyl-8-(2-methyl-6-methoxypyrid-3-yl)[1,5-a]pyrazolo-[l,3,5]-triazin-4 (3H)-on.

Pelety sodíku (3,9 g, 169 mmol) se za důkladného míšení přidají do ethanolu (200 ml). Poté, co všechen sodík zreaguje, se přidá 5-acetamidino-4-(2-methyl-6-methoxypyrid-3-yl)-3methylpyrazol, sůl kyseliny octové, (5,4 g, 16,9 mmol) a diethylkarbonát ( 16,4 ml, 135,3 mmol). Vzniklá reakční směs se zahřeje na teplotu zpětného toku a mísí se po dobu 18 hodin. Směs se ochladí na teplotu místnosti a rozpouštědlo se odstraní ve vakuu. Zbytek se rozpustí ve vodě a pomalu se přidává IN roztok HCl do dosažení pH 6. Vodná vrstva se extrahuje třikrát EtOAc; kombinované organické vrstvy se suší přes MgSO₄ a přefiltrují se. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu za zisku pevné látky. Trituraci s etherem, filtrací a sušením ve vakuu se získá bílý pevný materiál (3,9 g) : ¹H-NMR (CD₃OH, 300 MHz): 7,49 (d, 2H, J = 8), 6,69 (d, 2H, J = 8), 3,93 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,24 (s, 3H); APCI⁺-MS:

286 (M⁺ + H) .

Příklad 2:

Příprava 4-((R)-2-butylamino)-2,7-dimethyl-8-(2-methyl-6methoxypyrid-3-yl) [1,5-a]-pyrazol-l,3,5-triazinu • · · 9 ·· 9»

A. 4-chlor-2,7-dimethyl-8-(2-methyl-6-methoxypyrid-3-yl) - [1,5a}-pyrazoltriazin.

Směs 2,7-dimethyl-8-(2-methyl-6-methoxypyrid-3-yl)[1,5-a]pyrazol-1,3,5-triazin-4-onu {příklad 1, 3,9 g, 13,7 mmol), diisopropylethylaminue (9,5 ml, 54,7 mmol), oxychloridu fosforečného (5,1 ml, 54,7 mmol) a toluenu (75 ml) se mísí při teplotě zpětného toku po dobu 4 hodin. Těkavé složky se odstraní ve vakuu. Zbytek se vnese na vrstvu silikagelu na celitu a eluuje se 1:1 směsí EtOAc a hexanu. Rozpouštědlo se odstraní z filtrátu ve vakuu za zisku oleje.

B. 4-((R)-2-butylamino)-2,7-dimethyl-8-(2-methyl-6methoxypyrid-3-yl) [1,5-aJ-pyrazol-l,3,5-triazin

Směs 4-chlor-2,7-dimethyl-8-(2-methyl-6-methoxypyrid-3-yl)[1,5-aJ-pyrazoltriazinu (2,0 ml, 20,5 mmol), diisopropyl ethyl aminu (9,5 ml, 54,7 mmol) a suchého THF (25 ml) se misi při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu. Chromatografií zbytku na koloně (nejprve za použití EtOAc:hexanu::1:2, potom za použití EtOAc:hexanu:: 1:4) se získá produkt. Odstraněním rozpouštědla ve vakuu se získá bílý pevný materiál (2,3 g): t.t. = 118,3 °C ; ^XH-NMR (CDCla, 300 MHz): 5 7,41 (d, 1H, J = 8), 6,63 (d, 1H, J = 8), 6,25 (br d, 1H, J = 9), 4,35^4,30 (m, 1H), 3,95 (s, 3H),

2,49 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 1,76-1,66 (m,

2H), 1,34 (d, 3H, J = 7), 1,02 (t, 3H, J = 7) ; (CDCla, 100,52 MHz): δ 163,8, 163, 0, 155,7, 153,7, 147, 8, 146, 6, 141, 6, 118,5,

107,4, 106, 6, 53, 3, 48,2, 29,7, 26, 1, 22, 9, 20,4, 13,1, 10,3; IR (čistý, KBr, cm’¹): 3380 (m), 3371 (m), 2968 (m), 2928 (m), 2872 (w), 1621 (s), 1588 (s), 1544 (s), 1489 (s), 1460 (s),

1425 (s), 1413 (s), 1364 (s), 1346 (m), 1304 (s), 1275 (s), φφφ · φ · · · φ φ φ φ «φ φ φ · «φ · * φφφ «φφφ «·Φ ·· φφ ··

1247 (s), 1198 (m), 1152 (m), 1134 (m), 1112 (m), 1034 (s),

1003 (m); ESI(+)-HRMS: Vypočteno pro Ci_eH_ž4N₆O: 341,2089.

Zjištěno: 341,2093 (M⁺ + H) . Analýza vypočtena pro Ci8H₂4N₆O: C, 63,51, H, 7,12, N, 24, 69; Zjištěno: C, 63,67, H, 7,00, N,

24,49.

Použití

Test vazby na CRF receptor u krys pro hodnocení biologické aktivity

Vazebná afinita ke krysím kortikálním receptorům se testovala publikovaným způsobem (E.B. De Souza, J.

Neuroscience, 7: 88 (1987).

Křivky inhibice vazby [^12SI-Tyr°]-o-CRF na buněčné membrány při různých ředěních testovaného léku se analyzovaly za použití programu pro iterativní vyhodnocení křivky LIGAND (P.J. Munson a D. Rodbard, Anal. Biochem. 107:220 (1980), který určuje hodnoty Ki pro inhibici, které jsou potom použity pro hodnocení biologické aktivity.

Inhibice aktivity adenylát-cyklásy stimulované CRF

Inhibice aktivity adenylát-cyklásy stimulované CRF může být provedena způsobem popsaným v G. Battaglia et al., Synapse 1:572 (1987). Stručně, test se provede při 37 °C během 10 minut ve 200 ml pufru obsahujícího 100 mM Tris-HCl (pH 7,4 při 37°C), mM MgCÍ2, 0,4 mM EGTA, 0,1% BSA, 1 mM isobutylmethylxantinu (IBMX), 250 jednotek/ml fosfokreatininkinasy, 5 mM kreatinfosfátu, 100 mM guanosin-5'-trifosfátu, 100 nM oCRF, antagonistické peptidy (koncentrace 10’⁹ až 10^-6m) a 0,8 mg původní tkáně (nevysušené, přibližně 40-60 mg proteinu).

• · · • ♦ · I ·· ··

Reakce se iniciovaly přidáním 1 nM ATP/³²P-ATP (přibližně 2-4 mCi/zkumavku) a ukončily se adicí 100 ml 50 mM Tris-HCl, 45 mM ATP a 2% dodecylsíranu sodného. Pro sledování obnovování cAMP se 1 μΐ [³H] cAMP {přibližně 40000 dpm) přidal před separací do každé zkumavky. Separace [³²P]cAMP z [³²P]ATP se provedla sekvenční elucí přes Dowex kolonu a kolonu s oxidem hliitým.

In vivo biologický test

In vivo aktivita sloučeniny podle předkládaného vynálezu může být hodnocena za použiti jakéhokoliv biologického testu dostupného v oboru. Mezi příklady takových testů patří test akustického vylekání, test běhu po schodech a test chronického podávání. Tyto a další modely vhodné pro testování sloučenin podle předkládaného vynálezu jsou popsány v C.W. Berridge a A.J. Dunn, Brain Research Reviews 15:71 (1990).

Sloučenina může být testována na jakémkoliv druhu hlodavců nebo malých savců.

Sloučenina podle předkládaného vynálezu je použitelná při léčbě poruch spojených s abnormální koncentrací faktoru uvolňujícího kortikotropin u pacientů trpících depresemi, afektivními poruchami a/nebo úzkostí.

Sloučenina podle předkládaného vynálezu může být podávána pro léčbu těchto abnormalit způsobem, který vede ke kontaktu aktivního Činidla s místem jeho účinku v těle savce.

Sloučeniny mohou být podávány jakýmikoliv běžnými prostředky dostupnými v oboru, buď jako samostatné farmaceutické agens, nebo v kombinaci s dalšími terapeutickými agens. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být podávány samostatně, ale spíše jsou podávány spolu s farmaceutickými nosiči

vybranými podle daného způsobu podání a v souladu se standardní farmaceutickou praxí.

Podávané dávky velmi závisí na typu použití a na známých faktorech, jako jsou farmakodynamické vlastnosti daného činidla a jeho způsob a cesta podání; věk pacienta, jeho hmotnost a zdravotní stav; charakter a rozsah příznaků; typ současné léčby; frekvence aplikací; a požadovaný efekt. Pro použití při léčbě uvedených onemocnění a poruch může být sloučenina podle předkládaného vynálezu podávána orálně denně v dávce 0,002 až 200 mg/kg tělesné hmotnosti. Obvykle je dávka 0,01 až 10 mg/kg, rozdělená do více dávek, jednou až čtyřikrát za den, nebo v prostředku se zpomaleným uvolňováním, účinná v dosažení požadovaného farmakologického efektu.

Dávkové formy (prostředky) vhodné pro podání obsahují přibližně 1 mg až přibližně 10 mg aktivní složky na jednotku.

V těchto farmaceutických prostředcích je aktivní složka obvykle přítomná v množství přibližně 0,5 až 95% hmotnostních vzhledem k celkové hmotnosti prostředku.

Aktivní složka může být podána orálně v pevných dávkových formách, jako jsou kapsle, tablety a prášky; nebo v kapalných dávkových formách, jako jsou elixíry, sirupy a/nebo suspenze. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být také podány parenterálně ve formě sterilních kapalných prostředků.

Želatinové kapsle mohou být použity pro podání aktivní složky a vhodného nosiče, jako je například laktosa, škrob, magnesium-stearát, kyselina stearová nebo deriváty celulosy. Podobná ředidla mohou být použita pro výrobu lisovaných tablet. Jak tablety, tak kapsle mohou být vyrobeny jako přípravky se zpomaleným uvolňováním, které umožňují • φ φ

kontinuální uvolňování léku po určitou dobu. Lisované tablety mohou být potahované cukrem nebo filmem, aby byla zamaskována nepříjemná chuť, nebo aby se dosáhlo selektivního rozpadu tablety v gastrointestinálním traktu.

Kapalné dávkové formy pro orální podání mohou osbahovat barviva nebo chuťová korigens, aby se zvýšila jejich přijatelnost pro pacienta.

Obecně, voda, farmaceuticky přijatelné oleje, salinický roztok, vodný roztok dextrosy (glukosy) a podobné sacharidové roztoky a glykoly, jako je propylenglykol nebo polyethylenglykol, jsou vhodnými nosiči pro parenterální roztoky. Roztoky pro parenterální podání výhodně obsahují sůl aktivní složky rozpustnou ve vodě, vhodná stabilizační činidla a pokud je to nutné, tak pufrovací substance. Antioxidační činidla, jako je kyselý siřičitan sodný, siřičitan sodný nebo kyselina askorbová, samostatně nebo v kombinaci, jsou vhodnými stabilizačními činidly. Také se používá kyselina citrónová a její soli, a EDTA. Dále mohou parenterální roztoky obsahovat konzervační Činidla, jako je benzalkoniumchlorid, methyl- nebo propyl-paraben a chlorbutanol.

Vhodné farmaceutické nosiče jsou popsány v Remington⁷s Pharmaceutical Sciences, A. Osol, v standardní liteartuře.

Použitelné farmaceutické dávkové formy pro podání sloučenin podle předkládaného vynálezu mohou být ilustrovány na následujících příkladech.

Kapsle

Velké množství kapslí se připraví naplněním každé standardní dvoudílné želatinové kapsle 100 mg aktivní složky • 4 * · 4 · 4 4 • 44 44 44 «4 ve formě prášku, 150 mg laktosy, 50 mg celulosy a 6 mg magnesium-stearátu.

Kapsle z měkké želatiny

Připraví se směs aktivní složky v jedlém oleji, jako je sojový olej, olej z bavlníkových semen nebo olivový olej, a tato směs se injikuje do želatiny za zisku kapslí z měkké želatiny obsahujících 100 mg aktivní složky. Kapsle se promyjí a suší se.

Tablety

Velké množství tablet se připraví běžným způsobem tak, že dávková jednotka obsahuje 100 mg aktivní složky, 0,2 mg koloidního oxidu křemičitého, 5 mg magnesium-stearátu, 275 mg mikrokrystalické celulosy, 11 mg škrobu a 98,8 mg laktosy. Na tablety může být nanesen vhodný potah, aby se zlepšila jejich chuť a nebo aby se oddálila jejich absorpce.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být také použity jako činidla nebo standardy v biochemických testech pro studium neurologických funkcí, dysfunkcí a nemocí.

Ačkoliv byl předkládaný vynález popsán na svých výhodných provedeních, budou další provedení jasná odborníkům v oboru. Vynález není proto omezen na popsaná provedení a modifikace a variace těchto provedení spadají do rozsahu předkládaného vynálezu, který je omezen pouze připojenými patentovými nároky.

Claims (17)

1. Patentové nároky její izomery, stereoizomerické formy nebo směsi jejích stereoizomerických forem, její farmaceuticky přijatelná proléčiva nebo farmaceuticky přijatelné soli.
2. 2. Sloučenina podle nároku 1, její farmaceuticky přijatelná proléčiva nebo farmaceuticky přijatelné soli, kde uvedená sloučenina je 4-((R)-2-butylamino)-2,7-dimethyl-8-(2-methyl-6methoxypyrid-3-yl)[1,5-a] -pyrazol-1,3,5—triazin.
3. 3, Sloučenina podle nároku 1, její farmaceuticky přijatelná proléčiva nebo farmaceuticky přijatelné soli, kde uvedená sloučenina v podstatě neobsahuje svůj (S) stereoizomer.
4. 4. Sloučenina podle nároku 1, kde uvedená sloučenina je 4-(2butylamino)-2,7-dimethyl-8-(2-methyl-6-methoxypyrid-3-yl)[1, 5-a]-pyrazol-l,3,5-triazin.
5. 5. Sloučenina podle nároku 1, kde uvedená sloučenina je 4((R)-2-butylamino)-2,7-dimethyl-8-(2-methyl-6-methoxypyrid-3yl)(1,5-a]-pyrazol-1,3,5-triazin.

   • ·
6. 6. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím, že obsahuje farmaceuticky přijatelný nosič a terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 1.
7. 7. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím, že obsahuje farmaceuticky přijatelný nosič.a terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 5.
8. 8. Způsob pro antagonizování CRF receptoru u savce vyznačující se tím, že zahrnuje podání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle nároku 1 uvedenému savci.
9. 9. Způsob pro léčbu onemocnění manifestujícího se hypersekrecí CRF u teplokrevného živočicha vyznačující se tím, že zahrnuje podání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle nároku 1 uvedenému živočichovi.
10. 10. Způsob pro léčbu onemocnění, které může být ovlivněno nebo vylepšeno antagonizováním CRF, vyznačující se tím, že zahrnuje podání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle nároku 1 uvedenému savci.
11. 11. Způsob pro antagonizování CRF receptoru u savce vyznačující se tím, že zahrnuje podání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle nároku 5 uvedenému savci.
12. 12. Způsob léčby úzkosti nebo deprese u savce vyznačující se tím, že zahrnuje podání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle nároku 1 uvedenému savci.
13. 13. Způsob léčby úzkosti nebo deprese u savce vyznačující se tím, že zahrnuje podání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle nároku 5 uvedenému savci.
14. 14. Způsob pro vyhledávání ligandů pro CRF receptory vyznačující se tím, že zahrnuje:

    (a) provedení kompetitivního vazebného testu s CRF receptorem, sloučeninou podle nároku 1, která je značená detekovatelným značkovacím činidlem, a testovaným ligandem; a (b) stanovení schopnosti uvedeného testovaného ligandu vytěsňovat z vazby uvedenou značenou sloučeninu.
15. 15. Způsob pro detekování CRF receptorů ve tkáni vyznačující se tím, že zahrnuje:

    (a) kontaktování sloučeniny podle nároku 1, která je značená detekovatelným značkovacím činidlem, se tkání, za podmínek, které umožňují navázání sloučeniny na tkáň; a (b) detekování značené sloučeniny navázané na tkáň.
16. 16. Způsob pro inhibování vazby CRF na CRF-1 receptor vyznačující se tím, že zahrnuje kontaktování sloučeniny podle nároku 1 s roztokem obsahujícím buňky exprimující CRF-1 receptor, kde sloučenina je přítomna v roztoku v koncentraci dostatečné pro inhibování vazby CRF na CRF-1 receptor.
17. 17. Výrobek vyznačující se tím, že obsahuje:

    (a) obalový materiál;

    (b) sloučeninu podle nároku 1; a • 0 · • ··♦

    0 0» 0 0 0 · ·· · «0 · · 04 (c) příbalový na kterém pro léčbu leták obsažený v uvedeném obalovém materiálu, je uvedeno, že uvedená sloučenina je účinná úzkosti nebo deprese.