SK285148B6 - Použitie tripeptidu a/alebo jeho soli na výrobu lieku na liečenie stresu - Google Patents

Použitie tripeptidu a/alebo jeho soli na výrobu lieku na liečenie stresu Download PDF

Info

Publication number
SK285148B6
SK285148B6 SK436-2000A SK4362000A SK285148B6 SK 285148 B6 SK285148 B6 SK 285148B6 SK 4362000 A SK4362000 A SK 4362000A SK 285148 B6 SK285148 B6 SK 285148B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
stress
group
tripeptide
pro
exposed
Prior art date
Application number
SK436-2000A
Other languages
English (en)
Other versions
SK4362000A3 (en
Inventor
Akihoro Masuyama
Toshiaki Takano
Original Assignee
Calpis Co., Ltd.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Calpis Co., Ltd. filed Critical Calpis Co., Ltd.
Publication of SK4362000A3 publication Critical patent/SK4362000A3/sk
Publication of SK285148B6 publication Critical patent/SK285148B6/sk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/55—Protease inhibitors
    • A61K38/556—Angiotensin converting enzyme inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/06—Tripeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Food Preservation Except Freezing, Refrigeration, And Drying (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Dairy Products (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Confectionery (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

Je opísané použitie tripeptidu a/alebo jeho soli na výrobu lieku na liečenie stresu, rovnako na výrobu potraviny na ošetrovanie stresu, kde uvedeným tripeptidom je Ile-Pro-Pro a/alebo Val-Pro-Pro.

Description

Tento vynález sa týka použitia tripeptidu Ile-Pro-Pro a/alebo Val-Pro-Pro, a/alebo ich soli na výrobu liečiva na liečenie stresu, rovnako ako na výrobu potravín s antistresovými účinkami.
Doterajší stav techniky
V modernej spoločnosti sú ľudia vystavovaní rôznym druhom stresu, ktoré sú spôsobené vysoko vyspelými a zložitými vedeckými technológiami a tiež drastickými zmenami sociálneho prostredia. Hlavne v kozmopolitnej spoločnosti sa vytvárajú komplikované ľudské vzťahy, ktoré zapríčiňujú duševný stres. Bol opísaný rad príznakov, ktorými sa duševný stres prejavuje.
Pripúšťa sa, že duševný stres má veľký vplyv na obehový a imunitný systém. Pretože doteraz nebola dobre stanovená vedecká koncepcia a definícia stresu, v oblasti jeho hodnotenia existuje ešte veľa problémov spojených s metodologickými ťažkosťami. V poslednom čase boli publikované štúdie zaoberajúce sa stresom z medicínskeho pohľadu.
Napríklad sa opisuje, že keď je jedinec vystavený stresu, rastie u neho hladina angiotenzínu II a tiež u neho narastá hladina vnútrotclovčho sodíka, ktorý sa uvoľňuje resorpciou, čo má za následok nárast krvného tlaku (Osaka Mobara a kol.: Taisha, 28, 2, 323, 1991). Na základe týchto zistení sa vykonávali štúdie, ktorých cieľom bolo zistiť vplyv enalaprilu a alaceprilu, ktoré sú inhibítormi enzýmu premieňajúceho angiotenzín a používajú sa ako antihypertoniká pri liečení hypertenzie spôsobenej stresom (The American Joumal of Cardiology, 68, 15, 1362 (1991), Internal Medicíne, 32, 9, 691 (1993)). Predpokladá sa, že tento stres nespôsobuje iba nárast krvného tlaku, ale že tiež ovplyvňuje rôzne faktory, ktoré majú vplyv na vznik žalúdočných vredov, ischemickej srdcovej choroby, cerebrovaskulámych ochorení, hyperlipémie a podobne. Preto, hoci sa stres pokladá za jednu z príčin hypertenzie, sa nepredpokladá, že antistresový účinok by sa dosiahol iba potlačením rastu krvného tlaku.
V súčasnosti sa používajú ako prostriedky na zabránenie alebo zmiernenie duševných a telesných príznakov spôsobených stresom chemicky syntetizované lieky, ako sú sedatíva, prostriedky proti úzkosti a prášky na spanie. Ale tieto lieky sú návykové a majú vedľajšie účinky, preto nie je výhodné, aby sa denne užívali s cieľom zabrániť duševným a telesným príznakom spôsobených stresom. Z toho dôvodu sa požadujú, a preto sa i vyvíjajú prostriedky proti stresu, ktoré sa môžu užívať denne bez akýchkoľvek problémov so škodlivosťou zdraviu a ktoré môžu zmierniť či zabrániť duševným a telesným príznakom spôsobeným stresom. Napríklad existujú návrhy, aby prostriedok proti stresu obsahoval ako účinnú zložku L-teanín, ktorý je obsiahnutý v listoch čaju (japonská zverejnená patentová prihláška č. 6-100442), ďalej sa navrhla kompozícia proti stresu obsahujúca imidazolové zlúčeniny, ako sú anserín, valenín, n-metylhistidín, alebo τ-metylhistidm (japonská zverejnená patentová prihláška č. 9-20660), a „antistresové,, potraviny obsahujúce kompozíciu zloženú z glutatiónu a antíoxidantu (japonská zverejnená patentová prihláška č. 8-275752). Jeden článok tiež hovorí o vplyve vôní na zníženie stresu (Fragrance Joumal: 1991 - 11, s. 44 až 49). Doteraz však nebolo opísané, že tripeptid má vplyv na zmiernenie alebo zabránenie duševných alebo telesných príznakov zapríčinených stresom.
Úlohou tohto vynálezu je poskytnúť prostriedok proti stresu a funkčnú potravinu, ktoré môžu splniť uvedenú spoločenskú požiadavku, a ktoré sa môžu opakovane a denne užívať bez akýchkoľvek problémov so škodlivosťou zdraviu a ktoré môžu zmierniť či zabrániť duševným a telesným príznakom spôsobeným stresom.
Podstata vynálezu
Predmetom tohto vynálezu je použitie tripeptidu a/alebo jeho soli na výrobu lieku na liečenie stresu, kde uvedenýmtripeptidomje Ile-Pro-Pro a/alebo Val-Pro-Pro.
Predmetom tohto vynálezu je aj použitie tripeptidu a/alebo jeho soli na výrobu potraviny na ošetrovanie stresu, kde uvedeným tripeptidom je Ile-Pro-Pro a/alebo Val-Pro-Pro.
Ďalej sa uvádza podrobnejší opis tohto vynálezu.
Predložený vynález umožňuje získať liek proti stresu, ktorý obsahuje ako účinnú zložku uvedený tripeptid a/alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ, ktoré majú inhibičný účinok na enzým konvertujúci angiotenzín.
Predložený vynález umožňuje taktiež získať potraviny majúce antistresový účinok, ktoré obsahujú vymedzené tripeptidy.
Spôsob výroby týchto potravín majúcich antistresový účinok zahrnuje fermentáciu média obsahujúceho peptid a/alebo proteín obsahujúci sekvenciu Ile-Pro-Pro a/alebo Val-Pro-Pro za prítomnosti baktérií mliečneho kvasenia za podmienok, ktoré sú vhodné, aby vo fermentačnom médiu vznikal tripeptid Ile-Pro-Pro a/alebo Val-Pro-Pro.
Spôsob, ako znížiť stres, zahrnuje orálne podávanie účinného množstva tripeptidu a/alebo jeho farmaceutický prijateľných solí majúcich inhibičný účinok na enzým konvertujúci angiotenzín.
Liek proti stresu a potraviny s anti stresovým účinkom sú v tomto prípade označované spoločným názvom „prostriedok proti stresu“, pokiaľ nie je uvedené inak alebo pokiaľ tak nevyplýva z kontextu.
Výhodné uskutočnenie vynálezu
Prostriedok proti stresu podľa predloženého vynálezu obsahuje ako účinnú zložku tripeptid a/alebo jeho soľ majúcu inhibičný účinok na enzým konvertujúci angiotenzín. V predloženom vynáleze „antistresový“ účinok označuje pôsobenie, ktoré spôsobuje priblíženie stavov subjektu k stavom, keď tento subjekt nie je vystavený stresu, to je napríklad pôsobenie na zníženie systolického a diastolického krvného tlaku, ktoré sa zvyšovali kvôli stresu a pôsobenie na zamedzenie alebo predchádzanie znižovania imunologických činností zapríčinených stresom, ako je zníženie reakcie slezinových buniek.
Tento tripeptid môže byť výhodne vybraný zo skupiny tvorenej Ile-Pro-Pro, Val-Pro-Pro (ďalej v texte označované ako IPP a VPP) a ich zmesi, ktoré majú inhibičný účinok na enzým konvertujúci angiotenzín.
Medzi soli tohto tripeptidu môžu byť zahrnuté farmakologicky prijateľné soli tak anorganické, ako je hydrochlorid, síran, fosforečnan, ako i organické, ako je citrát, malát, fumarát, vínan a laktát.
Tento tripeptid sa môže vyrábať napríklad fermentáciou s použitím mikroorganizmov, enzýmovou hydrolýzou alebo chemickou syntézou.
Fermentácia s použitím mikroorganizmov sa môže vykonávať kultivovaním baktérií mliečneho kvasenia v médiu zloženom z potravinového materiálu obsahujúceho peptid a/alebo proteín, ktorý zahrnuje aminokyselinovú sekvenciu zodpovedajúcu tomuto tripeptidu, ako je sekvencia lle-ProPro a/alebo Val-Pro-Pro.
Médiom je výhodne potravinový materiál obsahujúci peptid a/alebo proteín, ktorý zahrnuje aminokyselinovú sekvenciu zodpovedajúcu týmto tripeptidom. Potravinovým materiálom môže byť mlieko, mliečny kazeín, kukurica, kukuričný proteín, pšenica, pšeničný proteín, sójové bôby, odtučnené sójové bôby alebo sójový proteín. Médium môže ďalej obsahovať iné zložky, ako je kvasnicový extrakt, vitamíny a minerály, ak je to nevyhnutné.
Ako baktérie mliečneho kvasenia sa môžu použiť baktérie mliečneho kvasenia rodu Lactobacillus. Napríklad sa môžu použiť Lactobacillus helveticus, Lactobacillus delbruekii, subsp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum alebo Lactobacillus casei subsp. casei. Konkrétne sa môžu použiť Lactobacillus helveticus ATCC55796, Lactobacillus delbruekii subsp. bulgaricus ATCC11842, Lactobacillus acidophilus ATCC4356, Lactobacillus fermentum ATCC 14931 alebo Lactobacillus casei subsp. casei ATCC393.
Fermentácia sa môže vykonávať tepelnou sterilizáciou média, ochladením média na požadovanú kultivačnú teplotu a potom zaočkovaním média predkultivovaným zákysom baktérií mliečneho kvasenia. Inokulačné množstvo zákysu baktérií mliečneho kvasenia je výhodne 105 až 107 buniek baktérií mliečneho kvasenia na 1 g média. Kultivačná teplota sa môže pohybovať v rozsahu 20 až 50 °C a výhodne v rozsahu 30 až 45 °C. Kultivačná doba sa môže pohybovať v rozsahu 3 až 48 hodín a výhodne 6 až 24 hodín. Kultivácia sa môže skončiť až počet buniek baktérií mliečneho kvasenia dosiahne hodnotu 108 buniek/g alebo viac a kyslosť mliečnej kyseliny dosiahne hodnotu 1 alebo viac. Výsledné kultivačné médium zvyčajne obsahuje 0,1 až 100 gg/g IPP a/alebo VPP, hoci to závisí od materiálu a zloženia média.
Samotné kultivačné médium obsahujúce živé baktérie mliečneho kvasenia sa môže použiť ako prostriedok proti stresu podľa tohto predloženého vynálezu. Alternatívne sa môže použiť kultivačné médium po tepelnej sterilizácii, napríklad až na 80 °C. Ďalej kultivačné médium sa môže spracovať lyofílizáciou, sušením v rozprašovacej sušiarni alebo sušením v bubnovej sušiarni na prášok.
Kultivačné médium sa môže koncentrovať, aby sa tripeptid prečistil pred použitím ako prostriedok proti stresu podľa tohto vynálezu. Koncentrácia a purifikácia sa môže vykonávať tak, že kultivačné médium je odstredené a odoberie sa supematant z odstreďovanej kvapaliny. S cieľom získať viac koncentrovaný a purifikovaný tripeptid sa môže supematant ďalej spracovávať elektrodialýzou, ionexovou živicou, dialýzou na membráne z dutých vláken, reverznou osmózou, hydrofóbnou kolónovou chromatografiou alebo ich kombináciou.
Príprava tripeptidu enzýmovou hydrolýzou môže zahrňovať postupné pôsobenie proteináz a karboxypeptidáz na potravinový materiál obsahujúci peptid a/alebo proteín obsahujúci aminokyselinovú sekvenciu zodpovedajúcu týmto tripeptidom, ako je Ile-Pro-Pro a Val-Pro-Pro. Proteinázami môžu byť proteinázy získané z mikroorganizmov, rastlín alebo živočíchov a môžu byť pripravené všeobecne známymi metódami. Karboxypeptidázami môžu byť karboxypeptidázy získané z mikroorganizmov, rastlín alebo živočíchov, ktoré môžu byť pripravené všeobecne známymi metódami.
Príprava tripeptidu chemickou syntézou môže zahrňovať všeobecne známe organické syntézy. Tripeptid sa môže napríklad získať tak, že sa pripravia aminokyseliny, ktoré sú zložkami konečného tripeptidu, aminoskupiny každej aminokyseliny sa chránia fluorenylmetoxykarbonylovou skupinou, následne sa aminokyseliny chránené fluorenylmetoxykarbonylovou skupinou nechajú zreagovať akoukoľvek bežnou metódou podľa sekvencie aminokyselín konečného tripeptidu za vzniku tripeptidu viazaného na živicu a potom sa táto živica odstráni akýmkoľvek bežným spôsobom a tripeptid sa prečistí.
Obsah tripeptidu v prostriedku proti stresu podľa predloženého vynálezu nie je nijako obzvlášť obmedzený, ak to umožňuje podávanie účinného množstva tripeptidu a bude sa o ňom diskutovať neskôr. Obsah tripeptidu v tomto prostriedku môže byť zvyčajne 0,001 až 1 hmotn. %.
Prostriedok proti stresu podľa predloženého vynálezu môže obsahovať okrem tripeptidu a/alebo jeho soli tiež iné prísady, ako sú cukry, proteíny, lipidy, vitamíny, minerály, aromatizačné prostriedky a farbivá.
Prostriedok proti stresu podľa predloženého vynálezu sa môže aplikovať ľuďom alebo zvieratám. Aplikácia sa môže vykonávať orálne alebo intravenózne, pričom orálna aplikácia je výhodnejšia.
Účinné množstvo prostriedku proti stresu podľa tohto vynálezu vhodné na aplikáciu sa môže zvyčajne pohybovať v rozsahu od 0,1 do 40 mg/kg telesnej hmotnosti/deň tripeptidu na orálnu aplikáciu, aby sa dosiahol opísaný účinok, t. j. zmiernenie alebo zabránenie stresu u ľudí. Tento prostriedok proti stresu sa môže však aplikovať v množstve, ktoré prevyšuje uvedený rozsah.
Pri aplikácii prostriedku proti stresu podľa predloženého vynálezu pacientovi dochádza k zmenám rôznych fyziologických ukazovateľov, ktoré sú ovplyvnené stTesom, ako je nárast krvného tlaku a zníženie imunologických funkcií. Tieto fyziologické ukazovatele sú nižšie ako v prípade, keď sa prostriedok nepodáva, a približujú sa hodnotám, keď pacient nie je vystavený stresu.
Funkčné potraviny podľa tohto vynálezu obsahujú prostriedok proti stresu. Konzumácia týchto funkčných potravín bráni stresu alebo zmierňuje stres.
Obsah prostriedku proti stresu vo funkčných potravinách podľa tohto vynálezu nie je zvlášť limitovaný za predpokladu, že tripeptid a/alebo jeho soľ vo funkčných potravinách sú v koncentračnom rozsahu umožňujúcom dosiahnutie antistresového účinku. Funkčné potraviny môžu zvyčajne obsahovať také množstvo prostriedku proti stresu, aby obsah tripeptidu a/alebo jeho soli vo funkčnej potravine bol v rozsahu od 0,001 do 0,1 hmotn. %.
Konzumáciou funkčných potravín podľa tohto vynálezu v množstve pohybujúcom sa v rozsahu od 0,1 do 40 mg tripeptidu na kg telesnej hmotnosti a deň sa môžu dosiahnuť výhodné účinky, ktoré sú opísané v tomto vynáleze. Funkčné potraviny môžu byť konzumované i v množstve, ktoré presahuje uvedený rozsah.
Funkčné potraviny podľa tohto vynálezu môžu zahrňovať jogurt, mliečne zakysané nápoje, syr, potraviny a nápoje obsahujúce fermentované kyslé mlieko alebo potraviny pre zdravú výživu a môžu byť v pevnej forme, ako je prášok, granuly a tablety, alebo tekutej forme, ako je pasta, gél a kvapalina.
Tripeptid, účinná zložka prostriedku proti stresu a funkčné potraviny podľa tohto vynálezu, môže byť pripravený fermentáciou potravín pomocou baktérií mliečneho kvasenia, z tohto dôvodu je celkom bezpečný.
Pretože prostriedok proti stresu a funkčné potraviny podľa tohto vynálezu obsahujú tripeptid, sú celkom bezpečné a ich opakované a každodenné užívanie môže zmierniť príznaky alebo zabrániť duševným a telesným príznakom spôsobeným rôznymi druhmi stresu.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Predložený vynález bude podrobnejšie vysvetlený v nasledujúcich príkladoch, ale tento vynález sa neobmedzuje iba na ne.
Príklad 1 g práškovej smotany sa rozpustilo v 100 g vody. Výsledný roztok bol sterilizovaný pri teplote 115 °C počas 20 minút, ochladený na izbovú teplotu, zaočkovaný jedným platinovým očkom Lactobacillus helveticus ATCC-8205 a kultivovaný pri 37 °C počas 24 hodín, týmto postupom sa pripravil primárny zákys (5 x 108 buniek/ml, pH 3,5). Potom boli zaočkované 2 kg smotany (obsahujúcej 9 hmotn. % sušiny) sterilizované zahriatím na teplotu 90 °C 80 g primárneho zákysu a kultivované pri teplote 37 °C počas 24 hodín, týmto postupom sa pripravil sekundárny zákys. Nakoniec 4,5 kg práškovej smotany sa rozpustilo v 50 kg vody. Výsledný roztok bol sterilizovaný zahriatím na teplotu 90 °C, ochladený na izbovú teplotu, zaočkovaný 2 kg sekundárneho zákysu a kultivovaný pri teplote 37 °C počas 24 hodín, týmto postupom sa pripravilo 56 kg zakysaného mlieka. Obsah IPP a VPP v takto pripravenom zakysanom mlieku bol 5,4 mg IPP a 9,5 mg VPP na liter.
Príklad 2
Pri 6 kg zakysaného mlieka pripraveného podľa príkladu 1 sa upravilo pH na hodnotu 7,3 pomocou 10 N vodného roztoku hydroxidu sodného, k takto upravenému zakysanému mlieku sa pridal 1 liter ionexovej živice (obchodná značka „Amberlite XAD-2“, výrobca ORGANO CORP.) a ďalej sa pridala destilovaná voda tak, aby celková hmotnosť výslednej zmesi bola 20 kg. Táto zmes bola miešaná miešadlom počas 90 minút a potom filtrovaná na odsávacom filtračnom zariadení, aby sa odseparovala živica. Živica na filtri bola premytá 20 kg destilovanej vody a potom sa premytá živica zhromaždila. Zhromaždená živica bola zmiešaná s 0,8 kg metanolu a miešala sa počas 30 minút miešadlom. Výsledná zmes sa filtrovala cez nylonovú vlnu (200 mesh-pre rozmer častíc 0,047 mm) a potom cez tvrdý filtračný papier na odsávacom zariadení. Získaný filtrát sa zahustil na vákuovej odparke pri teplote 55 °C. Týmto postupom sa pripravilo 200 g koncentrovanej kvapaliny. K tejto kvapaline sa pridalo 250 ml ionexovej živice (obchodná značka Amberlite IRA-400 (typ OH)“, výrobca ORGANO CORP.), zmes sa miešala počas 10 minút a filtrovala cez tvrdý filtračný papier na odsávacom zariadení. Vo filtráte sa upravilo pH na hodnotu 7 pomocou 1 N roztoku kyseliny chlorovodíkovej a potom sa lyofilizoval. Takto prečistený a vysušený produkt sa jednotne rozpúšťal v 5 ml destilovanej vody, aplikoval na kolónu (obchodná značka „Sephadex G-25“, výrobca PHARMACIA Co.) a eluoval destilovanou vodou s cieľom zachytiť tripeptidovú frakciu. Lyofilizáciou tejto frakcie sa získalo 50 mg práškovej formy prečistenej tripeptidovej frakcie. 50 mg práškovej formy prečistenej tripeptidovej frakcie obsahovalo 0,6 mg IPP a 1,0 mg VPP.
Príklad 3
IPP a VPP bolí syntetizované nasledujúcou organickou syntézou. Táto syntéza sa vykonávala metódou na pevnej fáze s použitím prístroja na automatickú syntézu peptidov (typ PSSM-8), výrobca SHIMADZU Co. Ako nosič pevnej fázy sa použilo 20 pmol polystyrénovej živice (benzyloxybenzylalkoholového typu), na ktorú bol naviazaný prolin majúci aminoskupinu chránenú fluorenylmetoxykarbonylovou skupinou (ďalej označovanú ako Fmoc). Peptid na viazaný na živicu bol pripravený tak, že podľa aminokyselinovej sekvencie boli postupne bežnou metódou naviazané jednotlivé aminokyseliny. Každá aminokyselina sa pridala do reakčnej zmesi v množstve 100 pmol a mala aminoskupinu chránenú Fmoc skupinou, t. j. do reakčnej zmesi sa pridalo Fmoc-Ile, Fmoc-Pro a Fmoc-Val. Tento peptid naviazaný na živicu sa suspendoval v 1 ml reakčnej kvapaliny (obsahujúcej 1 hmotn. % etánditiolu, 5 hmotn. % anizolu a 94 hmotn. % kyseliny trifluóroctovej), reakcia prebiehala počas 2 hodín pri izbovej teplote s cieľom oddeliť peptidy zo živice a odstrániť ochranné skupiny z bočných reťazcov týchto peptidov. Táto reakčná zmes sa filtrovala cez sklenený filter, zmiešala s 10 ml bezvodého éteru, aby sa vyzrážal purifikovaný peptid, ktorý bol ďalej odstredený pri 3000 ot/min. počas 5 minút s cieľom oddeliť precipitát. Precipitát bol premytý niekoľkokrát bezvodým éterom a potom sa sušil v prúde dusíka. Všetky takto získané surové syntetizované peptidy boli rozpustené v 2 ml 0,1 N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej a nakoniec sa purifikovali na HPLC s reverznou kolónou C18 za týchto podmienok:
Pumpa: typ L6200, výrobca HITACHI, Ltd.
Detektor: typ L4000 UV detektor na meranie UV absorbancie pri 215 nm, výrobca HITACHI, Ltd.
Kolóna: MICROBONDASPHERE 5 μ C j s, výrobca Waters Inc. Eluent: kvapalina A; 0,1 hmotn. % vodný roztok TFA kvapalina B; acetonitril obsahujúci 0,1 hmotn. % TFA (B/A + B) x 100 (%) :0-+40 % (60 minút)
Prietok: 1 ml/min.
Pri maximálnej absorbancii sa zberali elučné frakcie, ktoré boli ďalej lyofílizované s cieľom získať požadované syntetizované peptidy, t. j. 2,1 g IPP a 0,9 mg VPP. Purifikované peptidy boli analyzované od ich N-konca plne automatickým analyzátorom proteínovej primárnej štruktúry (typ PPSQ-10, výrobca SHIMADZU Co.) a analyzátorom aminokyselín (typ 800, výrobca NIHON BUNKOU KOUGYO Co.). Zistilo sa, že tieto peptidy zodpovedajú uvedenej špecifikácii.
Príklad 4 krysích samcov druhu Wister (s telesnou hmotnosťou asi 300 g) sa prípravne kŕmilo jeden týždeň. Počas prípravného kŕmenia a doby trvania pokusu boli krysy kŕmené iba komerčnou diétou (obchodná značka „CE-2“, výrobca NIHON CREA Co.), vodu mohli piť podľa chuti.
Po týždennom prípravnom kŕmení boli krysy rozdelené do troch skupín (8 v každej skupine), a to nasledovne:
1. skupina - nebola vystavená stresu a podával sa jej fyziologický roztok,
2. skupina - bola vystavená stresu a podával sa jej fyziologický roztok,
3. skupina - bola vystavená stresu a podával sa jej VPP a IPP. Zvieratá z 2. a 3. skupiny boli vystavené stresu počas 9 dní, keď každý deň sa nechali 4 hodiny v chladnej miestnosti (4 °C).
Desiaty deň bol krysám z 1. a 2. skupiny podaný prostredníctvom orálnej sondy do žalúdka 1 ml fyziologického roztoku a krysám z 3. skupiny sa podal fyziologický roztok, ktorý obsahoval 3 mg/kg telesnej hmotnosti zvieraťa IPP a VPP syntetizovaného v príklade 3. Po tejto aplikácii boli krysy z 2. a 3. skupiny vystavené chladovému stresu počas 4 hodín. Dve hodiny po skončení záťaže sa meral krvný tlak u krýs zo všetkých troch skupín s použitím bezohrevového neinvazívneho krysieho sfygmomanometra (typ PE300, výrobca CSI Co.) tým spôsobom, že meracia manžeta bola pripevnená na chvost. Tieto výsledky sú zhrnuté v tabuľke 1.
Výsledky krvného tlaku sú zhrnuté v tabuľke 1. Z tabuľky 1 je zrejmé, že tak systolický, ako i diastolický krvný tlak bol vyšší v 2. skupine, ktorá bola vystavená stresu, v porovnaní s 1. skupinou, ktorá nebola vystavená stresu. Naopak, u krýs 3. skupiny, ktorej sa podával VPP a IPP, bol tak systolický, ako i diastolický krvný tlak nižší ako u krýs 2. skupiny, ktorej sa podával fyziologický roztok a približuje sa hodnotám 1. skupiny, v ktorej krysy neboli vystavené stresu.
Tabuľka 1
Experimentálne skupiny Systolický krvný tlak (kPa = mmHg) Diastolický krvný tlak (kPa = mmHg)
1. - nevystavená stresu, podávaný fyziologický roztok 16,1 = 121 12,9 = 97
2. - vystavená stresu, podávaný fyziologický roztok 18,1= 136* 14,3= 107
3. - vystavená stresu, podávaný VPP a IPP 17,2= 129 13,5= 101
* významný rozdiel oproti 1. skupine na hladine významnosti 5 %
Zmeny krvného tlaku pred chladovým stresom a po chladovom strese sú zhrnuté v tabuľke 2. Ako je vidieť v tabuľke 2, tak systolický, ako i diastolický krvný tlak bol významne vyšší v 2. skupine, ktorá bola vystavená stresu, v porovnaní s 1. skupinou, ktorá nebola vystavená stresu. Nárast tak systolického, ako i diastolického krvného tlaku bol potlačený v 3. skupine, ktorej sa podával VPP a IPP, v porovnaní s 2. skupinou, ktorá dostala fyziologický roztok. Hlavne potlačenie nárastu systolického krvného tlaku bolo významné. Tieto výsledky potvrdili, že podávanie IPP a VPP má za následok potlačenie nárastu krvného tlaku vyvolaného stresom.
Tabuľka 2
Experimentálne skupiny Systolický krvný tlak (A Pa= mmHg) Diastolický krvný tlak (APa = mmHg)
1. - nevystavená stresu, podávaný fyziologický roztok -293 = - 2,2 -333 = - 2,5
2. - vystavená stresu, podávaný fyziologický roztok 1493 = 11,2* 813 = 6,1*
3. - vystavená stresu, podávaný VPP a IPP 493 = 3,7# -80 = -0,6
* významný rozdiel oproti 1. skupine na hladine významnosti 5 % # významný rozdiel oproti 2. skupine na hladine významnosti 5 %
Príklad 5 krysích samcov druhu Wister (s telesnou hmotnosťou asi 300 g) bolo prípravne kŕmených jeden týždeň. Počas prípravného kŕmenia a doby trvania pokusu boli krysy kŕmené iba komerčnou diétou (obchodná značka „CE-2“, výrobca N1H0N CREA Co.), vodu mohli piť podľa potreby.
Po týždennom prípravnom kŕmení boli krysy rozdelené do troch skupín (8 v každej skupine), a to nasledovne: 1. skupine sa podával fyziologický roztok, 2. skupine sa podával VPP a 3. skupine sa podával IPP. Krysy zo všetkých troch skupín boli vystavené stresu počas 9 dní, rovnako ako v príklade 4, keď každý deň sa nechali 4 hodiny v chladnej miestnosti (4 °C).
Desiaty deň bol krysám z 1. skupiny podaný prostredníctvom orálnej sondy do žalúdka 1 ml fyziologického roztoku a krysám z 2. a 3. skupiny sa podal 1 ml fyziologického roztoku, ktorý obsahoval 3 mg/kg telesnej hmotnosti zvieraťa IPP alebo 3 mg/kg telesnej hmotnosti zvieraťa VPP, ktoré boli syntetizované v príklade 3. Po tejto aplikácii boli krysy zo všetkých troch skupín vystavené chladovému stresu počas 4 hodín a potom bol u nich rovnakým spôsobom ako v príklade 4 meraný krvný tlak. Tieto výsledky sú zhrnuté v tabuľke 3.
Výsledky krvného tlaku sú zhrnuté v tabuľke 3. Ako je zrejmé z tabuľky 3, tak systolický, ako i diastolický krvný tlak bol významne nižší v 2. a 3. skupine, ktorým sa podávali tripeptidy, v porovnaní s 1. skupinou, ktorej sa podával fyziologický roztok. Potvrdilo sa, že podávanie tripeptidov má za následok potlačenie nárastu krvného tlaku vyvolaného stresom.
Tabuľka 3
Experimentálne skupiny Systolický krvný tlak (kPa = mmHg) Diastolický krvný tlak (kPa = mmHg)
1. - podávaný fyziologický roztok 18,4= 138 14,7= 110
2. - podávaný VPP 17,5= 131* 13,5= 101*
3. - podávaný IPP 17,3 = 130* 13,6= 102*
* významný rozdiel oproti 1. skupine na hladine významnosti 5 %
Príklad 6
Tento test sa vykonával rovnakým spôsobom ako v príklade 5 s tou výnimkou, že 1. skupine krýs sa podávali 2 ml fyziologického roztoku, 2. skupine krýs sa podávalo 5 ml/kg telesnej hmotností zakysaného mlieka pripraveného podľa príkladu 1, a 3. skupine krýs sa podávali 2 ml fyziologického roztoku obsahujúceho 150 mg/kg práškovej purifikovanej tripeptidovej frakcie pripravenej podľa príkladu 2. Po tejto aplikácii vzoriek boli krysy vystavené stresu a u každej z nich sa zmeral krvný tlak.
Výsledky krvného tlaku sú zhrnuté v tabuľke 4. Ako je uvedené v tabuľke 4, keď je porovnaná 2. skupina, ktorej sa podávalo zakysanc mlieko a 3. skupina, ktorej sa podávala prášková purifikovaná frakcia tripeptidu, s 1. skupinou, ktorej sa podával fyziologický roztok, je zrejmé, že tak systolický, ako i diastolický krvný tlak je v 2. a 3. skupine nižší ako v 1. skupine. Týmto sa potvrdilo, že podávanie zakysaného mlieka a purifikovanej tripeptidovej frakcie má za následok potlačenie nárastu krvného tlaku vyvolaného stresom.
Tabuľka 4
Experimentálne skupiny Systolický krvný tlak (kPa = mmHg) Diastolický krvný tlak (kPa = mmHg)
1. - podávaný fyziologický roztok 18,0= 135 14,1 = 106
2. - podávané zakysané mlieko 17,6= 132 13,2 = 99*
3. - podávaná tripeptidová frakcia 17,1 = 128* 13,5 = 101*
* významný rozdiel oproti 1. skupine na hladine významnosti 5 %
Príklad 7 krysích samcov druhu Wister (s telesnou hmotnosťou asi 300 g) sa prípravne kŕmilo jeden týždeň. Počas pri pravného kŕmenia boli krysy kŕmené iba komerčnou diétou (obchodná značka „CE-2“, výrobca NIHON CREA Co.), vodu mohli piť podľa potreby.
Po tomto prípravnom kŕmení boli krysy rozdelené do troch skupín (8 v každej skupine), a to nasledovne:
1. skupina - nebola vystavená stresu a podával sa jej fyziologický roztok,
2. skupina - bola vystavená stresu a podával sa jej fyziologický roztok,
3. skupina - bola vystavená stresu a podával sa jej VPP a IPP.
Zvieratá z 2. a 3. skupiny boli vystavené stresu, ktorý bol vyvolaný ponorením do vody počas 6 hodín počas jedného dňa. Počas pokusu, ktorý trval 5 dni, boli zvieratá dané do drôtenej klietky, kde sa zadržiavali a ponárali do vodného kúpeľa 25 °C tým spôsobom, že mali hlavy nad vodnou hladinou, aby mohli dýchať. Počas stresovej záťaže mohli krysy konzumovať komerčnú diétu (obchodná značka „CE-2“, výrobca NIHON CREA Co.), vodu mohli piť podľa potreby.
Krysám sa podávali vzorky počas piatich po sebe nasledujúcich dní, v ktorých boli vystavené stresovej záťaži. Ako vzorka sa krysám z 1. a 2. skupiny podával 1 ml fyziologického roztoku, 3. skupine krýs sa podával 1 ml fyziologického roztoku obsahujúceho 3 mg/kg telesnej hmotnosti IPP a 3 mg/kg telesnej hmotnosti VPP, ktoré boli syntetizované v príklade 3. Vzorky boli krysám podávané prostredníctvom orálnej sondy do žalúdka.
Medzi 2. a 3. dňom stresovej záťaže sa zbieral moč pokusných krýs z metabolických klietok, ktorý sa ďalej analyzoval metódou HPLC kvôli stanoveniu koncentrácie katecholamínu a indolaminu. Analýza sa vykonávala na kolóne s reverznou fázou (obchodná značka „Catecholpack“), výrobca NIHON BUNKOU KOUGYO Co. a látky sa detegovali elektrochemickým detektorom (obchodná značka „Coulochem“, výrobca ESA Co.).
Po poslednom vystavení stresovej záťaži 5. deň boli krysy usmrtené dekapitáciou, bola z nich vybraná slezina a týmus a odobrali sa vzorky krvi. Zloženie sérových aminokyselín bolo stanovené analyzátorom aminokyselín (typ 800, výrobca NIHON BUNKOU KOGYO Co.) z dôvodu výpočtu Fischerovho pomeru (molámy pomer rozvetvených aminokyselín/aromatickej aminokyseliny). Stanovila sa hmotnosť týmusu a pečene. Zo sleziny boli pripravené slezinové bunky, pri ktorých sa stanovila produkcia interleukĺnu 2 a reakcia na mitogén podľa nasledujúcich postupov.
(Príprava slezinových buniek)
Slezina bola jemne rozomletá v homogenizátore, potom bola vystavená hypotonickému pôsobeniu s cieľom odstrániť hemocyty, potom boli bunky premyté MEM, ktorý obsahoval 2 % fetálneho teľacieho séra (FCS) a suspendované v médiu RPN 1640 obsahujúcom 10 % FCS s cieľom pripraviť suspenzie voľných buniek, ktorých koncentrácia bola 1 x 107.
(Stanovenie produkcie interleukínu 2)
Pripravilo sa médium RPN 1640 obsahujúce 2,5 x 106 voľných slezinových buniek podľa opísaného postupu, 5 pg/ml konkanavalinu A (ConA) a 10 % FCS. Toto médium sa kultivovalo 24 hodín. Množstvo interleukínu 2 v supernatante kultivovaného média sa meralo biostanovením používajúcim reaktívny bunkový kmeň ako ukazovateľ proliferácie interleukínu 2.
(Reakcia na mitogén)
Pripravilo sa médium RPN 1640 obsahujúce buď 5 pg/ml konkanavalinu A (ConA) alebo lecitínu získaného z rastliny Phytolacca americana (pokeweed mitogén, PKW), 5 x 106 voľných slezinových buniek podľa opísaného postupu a 10 % fetálneho teľacieho séra. Toto médium sa kultivovalo 24 hodín. Počet buniek po 24 hodinách sa určil z nameranej absorbancie, pričom sa použil príjem MTT (3-(4,5-dimetyltiazoil-2-yl)-2,5-difenyltetrazóliumbromid) ako ukazovateľ, ktorý predstavuje pomer buniek bez mitogénu.
Množstvo noradrenalínu a dopamínu vylučovaného v moči medzi druhým a tretím dňom stresového zaťaženia je uvedené v tabuľke 5. Ako je zrejmé z tabuľky 5, vylučovanie noradrenalínu a dopamínu v moči bolo v 2. skupine, ktorá bola vystavená stresu, významne menšie ako v 1. skupine, ktorá nebola vystavená stresu. V 3. skupine, ktorej boli podávané tripeptidy, sa potlačil pokles vylučovaného adrenalínu a dopamínu v porovnaní s 2. skupinou, ktorej sa podával fyziologický roztok. Takto sa preukázalo, že IPP a VPP potláčajú stresom indukovaný pokles pri vylučovaní noradrenalínu a dopamínu v moči.
Tabuľka 5
Experimentálne skupiny Noradrenalín (mg/deň) Dopamín (mg/deň)
1. - nevystavená stresu, podávaný fyziologický roztok 0,296 0,466
2. - vystavená stresu, podávaný fyziologický roztok 0,168* 0,287*
3. - vystavená stresu, podávaný VPP a IPP 0,231*# 0,396*#
* významný rozdiel oproti L skupine na hladine významnosti 5 % # významný rozdiel oproti 2. skupine na hladine významnosti 10 %
V tabuľke 6 je uvedený Fischerov pomer sérových aminokyselin po usmrtení krýs. Ako je uvedené v tabuľke 6, Fischerov pomer bol v 2. skupine, ktorá bola vystavená stresu, významne nižší v porovnaní s 1. skupinou, ktorá nebola vystavená stresu. Oproti tomu bol Fischerov pomer významne vyšší v 3. skupine, ktorej sa podávali tripeptidy, ako v 2. skupine, ktorej sa podával fyziologický roztok.
Tabuľka 6
Experimentálne skupiny Fischerov pomer
L - nevystavená stresu, podávaný fyziologický roztok 3,34
2. - vystavená stresu, podávaný fyziologický roztok 2,97*
3. - vystavená stresu, podávaný VPP a IPP 3,27#
* významný rozdiel oproti L skupine na hladine významnosti 5 % # významný rozdiel oproti 2. skupine na hladine významnosti 5 %
V tabuľke 7 sú zhrnuté hmotnosti týmusu a sleziny po usmrtení krýs. Hmotnosť týmusu a sleziny bola v 2. skupine, ktorá bola vystavená stresu, nižšia ako v 1. skupine, ktorá nebola vystavená stresu. Hmotnosť týmusu a sleziny v 3. skupine, ktorej sa podávali tripeptidy, je mierne väčšia ako v 2. skupine, ktorej sa podával fyziologický roztok.
Tabuľka 7
Experimentálne skupiny Hmotnosť týmusu (mg) Hmotnosť sleziny (mg)
1. - nevystavená stresu, 433 769
Experimentálne skupiny Hmotnosť týmusu (mg) Hmotnosť sleziny (mg)
podávaný fyziologický roztok
2. - vystavená stresu, podávaný fyziologický roztok 202* 453*
3. - vystavená stresu, podávaný VPP a IPP 226* 495*
* významný rozdiel oproti 1. skupine na hladine významnosti 5 %
Reakcia na mitogén slezinových buniek je zhrnutá v tabuľke 8. Produkcia interleukínu 2 v slezinových bunkách je zhrnutá v tabuľke 9. V 2. skupine, ktorá bola vystavená stresu, sa preukázalo, že sa znižuje reakcia na mitogén a produkcia interleukínu 2 v porovnaní s 1. skupinou, ktorá nebola vystavená stresu. Oproti tomu sa preukázalo, že v 3. skupine, ktorej sa podávali tripeptidy, narastá reakcia na mitogén a produkcia interleukínu 2 v porovnaní s 2. skupinou, ktorej sa podával fyziologický roztok.
Tabuľka 8
Experimentálne skupiny Reakcia na mitogén
ConA PWM
1. - nevystavená stresu, podávaný fyziologický roztok 1,91 1,45
2. - vystavená stresu, podávaný fyziologický roztok 1,56* 1,26*
3. - vystavená stresu, podávaný VPP a IPP 1,80# 1,37#
* významný rozdiel oproti 1. skupine na hladine významnosti 5 % # významný rozdiel oproti 2. skupine na hladine významnosti 5 %
Tabuľka 9
Experimentálne skupiny Produkcia interleukínu 2 (jednotky/ml)
1. - nevystavená stresu, podávaný fyziologický roztok 6 094
2. - vystavená stresu, podávaný fyziologický roztok 4 431
3. - vystavená stresu, podávaný VPP a IPP 7 086#
# významný rozdiel oproti 2. skupine na hladine významnosti 10 %
Tieto výsledky potvrdzujú, že podávanie IPP a VPP môže potlačiť pokles ukazovateľov imunologických funkcií vyvolaných stresom, ako je zmena v rovnováhe krvných aminokyselín (Fischerov pomer), atrofia týmusu a sleziny a pokles reaktivity slezinových buniek.

Claims (2)

1. Použitie tripeptidu a/alebo jeho soli na výrobu lieku na liečenie stresu, kde uvedeným tripeptidom je Ile-Pro-Pro a/alebo Val-Pro-Pro.
2. Použitie tripeptidu a/alebo jeho soli na výrobu potraviny na ošetrovanie stresu, kde uvedeným tripeptidom je Ile-Pro-Pro a/alebo Val-Pro-Pro.
SK436-2000A 1997-09-26 1998-02-05 Použitie tripeptidu a/alebo jeho soli na výrobu lieku na liečenie stresu SK285148B6 (sk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP26242297A JP4727770B2 (ja) 1997-09-26 1997-09-26 尿中カテコールアミン低下、尿中ノルアドレナリン低下、尿中ドーパミン低下及びＦｉｓｃｈｅｒ比低下の少なくとも１つの軽減剤
PCT/JP1998/000480 WO1999016461A1 (fr) 1997-09-26 1998-02-05 Agents antistress et aliments fonctionnels

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK4362000A3 SK4362000A3 (en) 2001-03-12
SK285148B6 true SK285148B6 (sk) 2006-07-07

Family

ID=17375571

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK436-2000A SK285148B6 (sk) 1997-09-26 1998-02-05 Použitie tripeptidu a/alebo jeho soli na výrobu lieku na liečenie stresu

Country Status (23)

Country Link
US (1) US6410685B1 (sk)
EP (1) EP1018341B1 (sk)
JP (1) JP4727770B2 (sk)
KR (2) KR100379819B1 (sk)
CN (1) CN1198641C (sk)
AT (1) ATE264687T1 (sk)
AU (1) AU728565B2 (sk)
BG (1) BG64692B1 (sk)
BR (1) BR9813222A (sk)
CA (1) CA2303810C (sk)
CZ (1) CZ298848B6 (sk)
DE (1) DE69823369T2 (sk)
DK (1) DK1018341T3 (sk)
ES (1) ES2219868T3 (sk)
HU (1) HUP0004617A3 (sk)
ID (1) ID25635A (sk)
IN (1) IN190794B (sk)
PL (1) PL192873B1 (sk)
PT (1) PT1018341E (sk)
SK (1) SK285148B6 (sk)
TR (1) TR200000863T2 (sk)
TW (1) TWI231213B (sk)
WO (1) WO1999016461A1 (sk)

Families Citing this family (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ334627A (en) * 1999-03-12 2002-07-26 Horticulture & Food Res Inst A therapeutic composition containing a therapeutic agent such as an anthelmintic and an antistress agent such as metyrapone or a nitric oxide promoter for increasing efficacy of therapeutic agents and animal growth
FR2793257B1 (fr) * 1999-05-06 2001-07-27 Gervais Danone Sa Bacteries lactiques a proprietes anxiolytiques, et leurs utilisations
FI113741B (fi) * 1999-11-01 2004-06-15 Valio Oy Menetelmä verenpainetta alentavia peptidejä sisältävän tuotteen valmistamiseksi
JP4633876B2 (ja) * 1999-11-11 2011-02-16 カルピス株式会社 トリペプチドの製造方法
US8178150B2 (en) 2000-02-22 2012-05-15 Suzanne Jaffe Stillman Water containing soluble fiber
US7892586B2 (en) 2001-02-22 2011-02-22 Suzanne Jaffe Stillman Water containing soluble fiber
DE10105040A1 (de) * 2001-02-05 2002-08-14 Tell Pharm Ag Hergiswil Tripeptid-Derivate für die Behandlung von postläsionalen Krankheiten des Nervensystems
DE10105038B4 (de) 2001-02-05 2005-07-07 Neurotell Ag Tripeptid-Derivate für die Behandlung von postläsionalen Krankheiten des Nervensystems
DE10105041A1 (de) 2001-02-05 2002-08-14 Tell Pharm Ag Hergiswil Tripeptide und Tripeptid-Derivate für die Behandlung neurodegenerativer Krankheiten
EP1509609B1 (en) 2002-06-04 2015-04-22 DSM IP Assets B.V. Protein hydrolysate rich in tripeptides
US20050222263A1 (en) * 2002-09-18 2005-10-06 Ajinomoto Co., Inc. Compositions against stress-related diseases and methods for treating stress-related diseases
JPWO2004026296A1 (ja) * 2002-09-18 2006-01-12 味の素株式会社 抗ストレス性疾患組成物
TWI411441B (zh) * 2003-03-18 2013-10-11 Suntory Holdings Ltd 血管收縮素轉化酶抑制性肽類
ZA200507880B (en) * 2003-05-05 2006-12-27 Unilever Plc Hydrolysed casein product comprising tripeptides IPP and/or VPP
EP1727440A1 (en) * 2004-03-19 2006-12-06 Campina Nederland Holding B.V. Method of preparing a food ingredient and food product having angiotensin-i-converting enzyme inhibiting properties and products thus obtained
WO2006005757A2 (en) * 2004-07-12 2006-01-19 Dsm Ip Assets B.V. Blood pressure lowering oligopeptides
JP5770411B2 (ja) * 2005-02-24 2015-08-26 ディーエスエム アイピー アセッツ ビー．ブイ． グリコマクロペプチド由来の血圧降下ペプチド
WO2007013426A1 (ja) * 2005-07-26 2007-02-01 Calpis Co., Ltd. 発酵乳の製造方法及び発酵乳飲食品
WO2007079977A2 (en) * 2006-01-16 2007-07-19 Dsm Ip Assets B.V. Nutraceutical compositions comprising tripeptides
US20090111758A1 (en) * 2006-05-15 2009-04-30 Valio Ltd. Use of therapeutically useful peptides
JP5394628B2 (ja) * 2007-02-09 2014-01-22 クロスフィールドバイオ株式会社 新規なラクトバチルス属微生物および乳酸菌製剤
CN101909645A (zh) * 2007-11-14 2010-12-08 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 包含ipp和/或vpp的降血压组合
JP5618395B2 (ja) * 2009-08-13 2014-11-05 カルピス株式会社 自律神経活動調節用組成物および自律神経を調節する方法
JP2011136932A (ja) 2009-12-28 2011-07-14 Calpis Co Ltd 脳機能改善用組成物および脳機能を改善する方法
JP2010183918A (ja) * 2010-06-01 2010-08-26 Calpis Co Ltd トリペプチドの製造方法
CN102399261B (zh) * 2010-09-07 2014-06-25 任发政 具有血管紧张素转化酶c-端选择性抑制活性的三肽及其应用和组合物
JP2011102331A (ja) * 2011-02-17 2011-05-26 Calpis Co Ltd 尿中ドーパミン低下の予防及び軽減剤
JP5892687B2 (ja) 2011-07-07 2016-03-23 高砂香料工業株式会社 風味改善ペプチド
CN103204909B (zh) * 2013-04-17 2014-09-03 苏州凯祥生物科技有限公司 一种抗高血压活性肽vppipp
JP5853326B2 (ja) * 2013-12-24 2016-02-09 カルピス株式会社 自律神経活動調節用組成物および自律神経を調節する方法
JP2014208702A (ja) * 2014-07-31 2014-11-06 カルピス株式会社 自律神経活動調節用組成物および自律神経を調節する方法
CN104725485B (zh) * 2014-11-19 2018-01-16 扬州大学 一种重组活性肽及其同步制备方法
WO2017057319A1 (ja) * 2015-09-30 2017-04-06 株式会社明治 乳酸菌スターターの調製方法及び発酵乳の製造方法
CN111909978B (zh) * 2020-07-10 2021-06-22 青岛农业大学 一种利用发酵法从玉米蛋白粉中定向制备富含lpp水解物的方法

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5189064A (en) * 1985-07-22 1993-02-23 Matrix Technologies, Inc. Treatment of cocaine addiction
GB2227658A (en) * 1989-02-03 1990-08-08 Cellana Thyrotropin releasing hormone (trh) composition for enhancing immune function
ATE124867T1 (de) * 1989-02-16 1995-07-15 Sankyo Co Peptide, die eine reninhemmende aktivität besitzen, deren herstellung und verwendung.
US5264419A (en) * 1990-08-31 1993-11-23 Warner-Lambert Company N-substituted cycloalkyl and polycycloalkyl α-substituted TRP derivatives
US5593967A (en) * 1990-08-31 1997-01-14 Warner-Lambert Company Cholecystokinin antagonists, their preparation and therapeutic use
JP2904655B2 (ja) * 1992-09-17 1999-06-14 サントリー株式会社 抗ストレス剤
US5639729A (en) * 1993-08-26 1997-06-17 Immunobiology Research Institute, Inc. Tripeptides useful in immune and CNS therapy
US5604198A (en) * 1994-05-12 1997-02-18 Poduslo; Joseph F. Method to enhance permeability of the blood/brain blood/nerve barriers to therapeutic agents
JPH08275752A (ja) * 1995-04-07 1996-10-22 Riken Vitamin Co Ltd ストレス改善食品
JPH0920660A (ja) * 1995-07-04 1997-01-21 Suntory Ltd 抗ストレス組成物
JP4065038B2 (ja) * 1996-08-07 2008-03-19 カルピス株式会社 計算作業負荷ストレス緩和剤

Also Published As

Publication number Publication date
CA2303810A1 (en) 1999-04-08
SK4362000A3 (en) 2001-03-12
CN1279614A (zh) 2001-01-10
PL339348A1 (en) 2000-12-18
CZ298848B6 (cs) 2008-02-27
DK1018341T3 (da) 2004-07-26
TR200000863T2 (tr) 2000-11-21
US6410685B1 (en) 2002-06-25
DE69823369T2 (de) 2005-05-04
ATE264687T1 (de) 2004-05-15
KR100383492B1 (ko) 2003-05-12
BG104381A (en) 2001-02-28
WO1999016461A1 (fr) 1999-04-08
BR9813222A (pt) 2000-08-29
EP1018341A4 (en) 2002-08-28
KR20030005137A (ko) 2003-01-15
ID25635A (id) 2000-10-19
DE69823369D1 (de) 2004-05-27
HUP0004617A2 (hu) 2001-05-28
PL192873B1 (pl) 2006-12-29
KR20010024277A (ko) 2001-03-26
CA2303810C (en) 2007-03-27
JPH11100328A (ja) 1999-04-13
EP1018341B1 (en) 2004-04-21
EP1018341A1 (en) 2000-07-12
PT1018341E (pt) 2004-08-31
KR100379819B1 (ko) 2003-04-14
IN190794B (sk) 2003-08-23
TWI231213B (en) 2005-04-21
HUP0004617A3 (en) 2001-11-28
CN1198641C (zh) 2005-04-27
AU5780198A (en) 1999-04-23
CZ20001083A3 (cs) 2001-01-17
AU728565B2 (en) 2001-01-11
JP4727770B2 (ja) 2011-07-20
ES2219868T3 (es) 2004-12-01
BG64692B1 (bg) 2005-12-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SK285148B6 (sk) Použitie tripeptidu a/alebo jeho soli na výrobu lieku na liečenie stresu
AU2009228250B2 (en) Leucine-rich peptide compositions and methods for isolation
US5854029A (en) Method for preparing antihypertensive agent
KR102432193B1 (ko) 유청단백 가수분해물을 유효성분으로 함유하는 근감소증의 개선, 예방 또는 치료용 조성물
TW201039839A (en) Composition for regulating antonomic nervous activity and method for regulating autonomic nervous
US20220330595A1 (en) Angiotensin-converting enzyme inhibitor, blood pressure-lowering agent, and beverages and food products
EP2040732A1 (en) New use of therapeutically useful peptides
JP4718534B2 (ja) Ｆｉｓｃｈｅｒ比低下抑制剤
MXPA00002839A (en) Antistress agents and functional foods
US20220322700A1 (en) Composition for alleviating, preventing or treating sarcopenia, containing whey protein hydrolysate as active ingredient
JP2011102331A (ja) 尿中ドーパミン低下の予防及び軽減剤
JP2005239686A (ja) 脂肪燃焼促進組成物及び該組成物を含有する食品又は医薬品
RU2457852C2 (ru) Новое применение терапевтически эффективных пептидов
TW200902045A (en) Agents for preventing cardiac failure

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of maintenance fees

Effective date: 20130205