SI9300646A - Spiro piperidines and homologs which promote release of growth hormone - Google Patents

Spiro piperidines and homologs which promote release of growth hormone Download PDF

Info

Publication number
SI9300646A
SI9300646A SI9300646A SI9300646A SI9300646A SI 9300646 A SI9300646 A SI 9300646A SI 9300646 A SI9300646 A SI 9300646A SI 9300646 A SI9300646 A SI 9300646A SI 9300646 A SI9300646 A SI 9300646A
Authority
SI
Slovenia
Prior art keywords
alkyl
aryl
carbonyl
amino
dihydro
Prior art date
Application number
SI9300646A
Other languages
English (en)
Inventor
Meng-Hsin Chen
B R David Johnston
P Ravi Nargund
A Arthur Patchett
R James Tata
Lihu Yang
Original Assignee
Merck & Co Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US08/147,226 external-priority patent/US5536716A/en
Application filed by Merck & Co Inc filed Critical Merck & Co Inc
Publication of SI9300646A publication Critical patent/SI9300646A/sl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/021—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)n-C(=0)-, n being 5 or 6; for n > 6, classification in C07K5/06 - C07K5/10, according to the moiety having normal peptide bonds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • C07K5/06147—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic and His-amino acid; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06191—Dipeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Description

SPIRO PIPERIDINI IN HOMOLOGI, KI POSPEŠUJEJO SPROŠČANJE RASTNEGA HORMONA
Predložena prijava je delna nadaljevalna prijava naše prijave z zaporedno štev. 07/989,322, vložene 11. decembra 1992, kije istočasno v postopku.
Rastni hormon, ki se izloča iz hipofize, stimulira rast vseh tkiv telesa, ki so sposobna rasti. Poleg tega je znano, da ima rastni hormon naslednje osnovne učinke na metabolične procese telesa:
1. Povečana hitrost proteinske sinteze v vseh celicah telesa;
2. Zmanjšana hitrost izrabe ogljikovih hidratov v celicah telesa;
3. Povečana mobilizacija prostih maščobnih kislin in uporaba maščobnih kislin za energijo.
Posledica pomanjkanja izločanja rastnega hormona so lahko različne medicinske motnje, kot pritlikavost.
Za sproščanje rastnega hormona so znani različni načini. Na primer kemikalije, kot arginin, L-3,4-dihidroksifenilalanin (L-DOPA), glukagon, vazopresin, ter z insulinom inducirana hipoglikemija kot tudi aktivnosti, kot spanje in trening, posredno povzročijo, da se rastni hormon sprosti iz hipofize z učinkovanjem na nek način na hipotalamus, morda bodisi da se zmanjša izločanje somatostatina ali da se poveča izločanje znanega sekretagognega, rastni hormon sproščujočega faktorja (GRF) ali neznanega endogenega, rastni hormon sproščujočega hormona ali vse skupaj.
V primerih, kjer so bili želeni povečani nivoji rastnega hormona, so problem na splošno rešili s tem, da so zagotovili eksogeni rastni hormon ali z dajanjem GRF ali peptidne spojine, kar je stimuliralo proizvodnjo in/ali sproščanje rastnega hormona.
V katerem koli primeru je bilo zaradi peptidilne narave spojine potrebno, da so jo dajali z injekcijo. V začetku je bil vir rastnega hormona ekstrakcija hipofiz mrličev. Posledica tega je bil zelo drag produkt s tveganjem, da bi se lahko bolezen, združena z virom hipofize, prenesla na prejemnika rastnega hormona. Nedavno je postal dostopen rekonbinantni rastni hormon, ki je, čeprav pri njem ni več rizika prenosa bolezni, še vedno zelo drag produkt, ki ga je treba dajati z injekcijo ali z nazalnim sprejem.
Razvili so druge spojine, ki stimulirajo sproščanje endogenega rastnega hormona, kot analogne peptidilne spojine, sorodne GRF, ali peptidi iz US patenta 4,411,890. Ti peptidi, ki so sicer znatno manjši kot rastni hormoni, so še vedno občutljivi na različne proteaze. Kot pri večini peptidov je njihov petencial za oralno biouporabnost nizek. Predložene spojine so nepeptidni analogi za pospeševanje sproščanja rastnega hormona, ki so stabilni v številnih fizioloških okoljih in ki jih lahko dajemo parenteralno, nazalno ali oralno.
Predloženi izum zajema določene spiro spojine, ki imajo sposobnost, da stimulirajo sproščanje naravnega ali endogenega rastnega hormona. Spojine imajo tako sposobnost, da jih uporabimo pri zdravljenju stanj, ki zahtevajo stimulacijo proizvodnje ali izločanje rastnega hormona, kot pri ljudeh s pomanjkanjem naravnega rastnega hormona ali pri živalih, uporabljenih za proizvodnjo hrane, kjer bo posledica rastnega hormona večja, bolj produktivna žival. Tako je predmet predloženega izuma, da opišemo spiro spojine. Nadaljnji predmet predloženega izuma je, da opišemo postopke za pripravo takih spojin. Še nadaljnji predmet je, da opišemo uporabo takih spojin za povečanje izločanja rastnega hormona pri ljudeh in živalih. Še nadaljnji predmet predloženega izuma je, da opišemo sestavke, ki vsebujejo spiro spojine za uporabo pri zdravljenju ljudi in živali, tako da povečamo nivo izločanj rastnega hormona. Nadaljnji predmeti bodo postali očitni pri branju sledečega opisa.
Nove spiro spojine v smislu predloženega izuma najbolje opišemo z naslednjima strukturnima formulama I in II:
FL-C-N-C— A— 1 II
O
R4
N r5
R.-C-N-C—A—N 1 II '
O ,R4 r5
Formula II
Rx je Cj-C^ alkil, aril, aril^-C«. alkil) in C3-C? cikloalkil (C1-C6alkil) ali C^C^alkilK-C^Cg alkil, arilC^-C^lkilj-K-C^-^ alkil), C3-C? cikloalkil(C()-C5alkil)-K-(C1-C5 alkil), kjer je K O, S(O)m, Ν^)<3(0), ^Ο)Ν^, OC(O), C(O)O, ali -CR2=CR2ali ~C=C-, kjer so arilne skupine definirane spodaj in so lahko R2 in alkilne skupine nadalje substituirane z 1 do 9 halogeni, S(O)mR2.i, 1 do 3 OR^ ali (COjOR^ in so arilne skupine lahko nadalje substituirane s substituenti, izbranimi iz skupine, v kateri so fenil, fenoksi, halofenil, 1-3 C^-C^ alkili, 1 do 3 halogeni, 1 do 2 OR2, metilendioksi, S(O)mR2, 1 do 2 CF3, OCF3, nitro, N(R2)(R2), Ν^ϋ(Ο^, C(O)OR2, QO)N(R2)(R2), SO^R^RJ, N(R2)S(O)2 aril ali N(R2)SO2R2;
R2 je vodik, Cj-C^ alkil, C3-C? cikloalkil, kjer pa sta dve C^-C^ alkilni skupini prisotni na enem atomu, sta lahko v danem primeru spojeni, da tvorita C3-Cg cikličen obroč, ki v danem primeru vključuje kisik, žveplo ali NR^;
je vodik ali Cj-C«. alkil;
R3a in R3b sta neodvisno vodik, halogen, alkil, OR2, ciano, OCF3, metilendioksi, nitro S(O)mR, CF3 ali (3(0)01^ in kadar sta Rga in R3b v orto ureditvi, sta lahko spojena, da tvorita C5 - Cg alifatski ali aromatski obroč, ki v danem primeru vključuje 1 ali 2 heteroatoma, izbrana izmed kisika, žvepla ali dušika;
R4 in R5 sta neodvisno vodik, Cj-Cg alkil, substituiran Cx-C6 alkil, kjer so lahko substituenti 1 do 5 halo, 1 do 3 hidroksi, 1 do 3 Cj-C^ alkanoiloksi, 1 do 3 Cj-C* alkoksi, fenil, fenoksi, 2-furil, C4-C6 alkoksikarbonil, S(O)m(C1-C6 alkil); ali lahko R4 in Rs skupaj tvorita -(CH2)rLa (CH2)s-, kjer je La C^R^, O, S(O)m ali N(R2), r in s sta neodvisno 1 do 3 in je R^, kot je definirao zgoraj; R6 je vodik ali C^-C^ alkil;
Aje — (CH2)-C—(CH2)y— R7a ali
Z-(CH2)x-C—(CH2)y—
7a kjer sta x in y neodvisno 0 do 3;
Z je N-R2aliO;
R? in R?a sta neodvisno vodik, Cj-C^ alkil, OR2, trifluorometil, fenil, substituiran Cj-C^ alkil, kjer so substituenti imidazolil, fenil, indolil, p-hidroksifenil, OR2, 1 do 3 fluoro, S(O)mR2, C(O)OR2, C3-C? cikloalkil, N(R2)(R2), C(O)N(R2)(R2); ali sta lahko R? in R?a neodvisno spojena z eno ali obema skupinama R4 in R5, da nastanejo alkilenski mostovi med končnim vodikom in alkilnim delom skupine R? ali R?a, kjer most vsebuje 1 do 5 atomov ogljika;
B, D, E in F so neodvisno C(Rg)(R10), O, C=O, S(O)m ali NR9, tako da lahko eden ali dva od B, D, E ali F v danem primeru manjka, da dobimo 5-, 6- ali 7-členski obroč; in pod pogojem, da so lahko B, D, E in F C(Rg)(R10) ali C=O le, kadar je ena od preostalih skupin B, D, E in F istočasno O, S(O)m ali NR9; B in D ali D in E sta lahko skupaj N=CR10- ali CR10=N ali B in D ali D in E so lahko skupaj CRg=CR10, pod pogojem, daje eden od preostalega B in E ali F istočasno O, S(O)m ali NRy;
Rg in R10 sta neodvisno vodik, R2, OR2, (CH2)q aril, (CH2)q C(O)OR2, (CH2)q C(O)O(CH2)q aril ali (CH2)q (lH-tetrazol-5-il) in je lahko aril v danem primeru substituiran z 1 do 3 halo, 1 do 2 C^-Cg alkiloma, 1 do 3 OR? ali 1 do 2 C(O)OR2;
R9 je R2, (CH2)q aril, (CO)R2, C(O)(CH2)q aril, SO2R2, SO2(CH2)q aril,
C(O)N(R2)(R2), C(O)N(R2)(CH2)q aril, C(O)OR2, l-H-tetrazol-5-il, SO3H,
SO2NHCeeN, SO2N(R2)aril, SO2N(R2)(R2) in je lahko (CH2)q v danem primeru substituiran z 1 do 2 Ct-C4 alkiloma in sta lahko R2 in aril v danem primeru nadalje substituirana z 1 do 3 OR^, O(CH2)q arilom, 1 do 2 POjOR^, 1 do 2 C(O)O(CH2)q arilom, 1 do 2 C(O)N(R2a(R2a), 1 do 2 C(O)N(R2a)(CH2)q arilom, 1 do 5 halogeni, 1 do 3 C4-C4 alkili, 1,2,4-triazolilom, l-H-tetrazol-5-ilom, OOjNHSC^R^, S(O)mR2a, C(O)NHSO2(CH2)q arilom, SO2NHC=N, SO^HgOjR^, SO2NHC(O)(CH2q arilom, NfR^OJNiRJRJ, N(R2a)C(O)N(R2a)(CH2)q arilom, N(R2a)(R2>), N(R2a)C(O)R2a, N(R2a)C(O)(CH2)q arilom, OC(O)N(R2a(R2a), OC)O)N(R2a)(CH2)q arilom; SO2(CH2)qCONH-(CH2)wNHqO)R11, kjer je w 2-6 in je Rn lahko biotin, aril ali aril, substituiran z 1 ali 2 OR2,1-2 halogenoma, azido ali nitro;
m je 0,1 ali 2;
nje 1 ali 2;
q je lahko v danem primeru 0,1,2, 3 ali 4; in so
G, H, I in J atomi ogljika, dušika, žvepla ali kisika, tako da je vsaj eden heteroatom, in lahko eden od G, H, I ali J v danem primeru manjka, da dobimo 5- ali 6-členske heterociklične aromatske obroče; ter njihove farmacevtsko sprejemljive soli in posamezni diastereomeri.
V gornjih strukturnih formulah in po vsem predloženem opisu imajo naslednji izrazi navedene pomene:
Mišljeno je, da zgoraj navedene alkilne skupine zajemajo tiste alkilne skupine z označeno dolžino v bodisi ravni ali razvejeni konfiguraciji, ki lahko v danem primeru vsebuje dvojne ali trojne vezi. Primeri takih alkilnih skupin so metil, etil, propil, etinil, izopropil, butil, sek.-butil, terc.-butil, pentil, izopentil, heksil, izoheksil, alil, propenil, butenil, butadienil in ipd.
Mišljeno je, da zgoraj navedene alkoksi skupine zajemajo tiste alkoksi skupine z označeno dolžino v bodisi ravni ali razvejeni konfiguraciji, ki lahko v danem primeru vsebujejo dvojne ali trojne vezi. Primeri takih alkoksi skupin so metoksi, etoksi, propoksi, izopropoksi, butoksi, izobutoksi, terc.butoksi, pentoksi, izopentoksi, heksoksi, izoheksoksi aliloksi, propiniloksi, izobuteniloksi, 2-hekseniloksi, ipd.
Mišljeno je, da izraz halogen zajema fluor, klor, brom in jod kot atom halogena.
Mišljeno je, da izraz aril zajema fenil in naftil ter aromatske ostanke 5- in 6-členskih obročev z 1 do 3 heteroatomi ali kondenzirane 5- ali 6-členske biciklične obroče z 1 do 3 heteroatomi dušika, žvepla ali kisika. Primeri takih heterocikličnih aromatskih obročev so piridin, tiofen, benzotiofen, tetrazol, indol, N-metilindol, dihidroindol, indazol, N-formilindol, benzimidazol, tiazol, furan, pirimidin in tiadiazol.
Nekateri od zgoraj definiranih izrazov se lahko pojavijo več kot enkrat v gornji formuli in pri takem pojavljanju bo vsak izraz definiran neodvisno od drugega.
Prednostne spojine v smislu predloženega izuma so:
H H R4
FL-C-N-C—A—N 1 * 11 o
O
C=O
R
3a
Formula III kjer je Cj-^θ alkil, aril (C^-C* alkil), C3-C6 cikloalkil (Cj-C4 alkil), (C^-C, alkil)K-(CfC4 alkil), aril(C0-C5 alkil)-K-(CfC4 alkil), (C3-C7 cikloalkil)(C0-C5 alkil)-K(Cx-C4 alkil), kjer je K O, S(O)m, -CR2=CR2- ali -C=C- ali Ν(Ι^ΟΌ), kjer so R2 in arilne skupine nadalje substituirane z 1 do 7 halogeni, S(O)mC1-C4 alkilom, OR^ ali C(O)OR2a in so arilne skupine lahko nadalje substituirane z 1 do 2 C^-C, alkiloma, 1 do 2 halogenoma, 1 do 2 OR2 CF3, OCF3, metilendioksi, S(O)mR2, SO2N(R2)R2), N(R2SO2R2 ali C(O)OR2;
R2 je vodik, Cx-C6 alkil, C3-C? cikloalkil, in, če sta dve Cj-C6 alkilni skupini prisotni na enem atomu, sta lahko v danem primeru spojeni, da dobimo C4-C6 cikličen obroč, ki v danem primeru vsebuje 1 do 2 heteroatoma, izbrana izmed kisika, žvepla ali
NR^;
je vodik ali C2-C6 alkil;
R3a in R3b sta neodvisno vodik, halogen, alkil, OR^, metilendioksi, nitro,
S(O)mCrC4 alkil, CF3 ali C(O)OR2;
R4 in R5 sta neodvisno vodik, C4-C6 alkil, substituiran alkil, kjer so lahko substituenti 1 do 5 halo, 1 do 2 hidroksi, 1 do 2 Cx-C6 alkanoiloksi, 1 do 2 C^-C«. alkiloksi ali S(O)m(C1-C4 alkil);
A je:
— (CH2)x_C—(CH2)y — ^7a ali
Ri
-N(R2)-(CH2)x-C— (CH2)y7a
Iger sta x in y neodvisno 0,1 ali 2;
R7 in R?a sta neodvisno vodik, Cx-C4 alkil, substituiran Cx-C4 alkil, kjer so substituenti od 1 do 3 fluoro ali imidazolil, fenil, indolil, S(O)mC1-C4 alkil, C(O)OR2, ali sta R? in R?a lahko neodvisno spojena z eno ali obema od skupin R4 in R5, da nastanejo alkilenski mostovi med končnim dušikom in alkilnim delom skupine R? ali R?a, kjer most vsebuje 1 do 3 atome ogljika;
B, D in F so neodvisno C(Rg)(R10), C=O, S(O)m ali NR9, tako da lahko eden od B, D ali F v danem primeru manjka, da dobimo 5- ali 6-členski obroč, in pod pogojem, da je eden od B, D in F C(Rg(R10) ali C=O le, kadar je ena od preostalih skupin B, D in F istočasno O, S(O)m ali NR9;
Rg in R10 sta neodvisno vodik, R2, OR2, (CH2)q aril, (CH2)qC(O)OR2, (CH2)qC(O)O(CH2)q aril, (CH2)q(lH-tetrazol-5-il) in aril je lahko v danem primeru substituiran z 1 do 3 halo, 1 do 2 Cx-C4 alkiloma, 1 do 3 OR2 ah 1 do 2 C(O)OR2;
R9 je R2, (CH2)q aril, C(O)R2, C(O)(CH2)q aril, SO2R2, SO2(CH2)q aril, C(O)N(R2(R2), C(O)N(R2(CH2)q aril, l-H-tetrazolil-5-il, SO2NHC^N, SO2NR2 aril, SO2N(R2)(R2) in je lahko (CH2)q v danem primeru substituiran z 1 do 2 C^C^ alkiloma in je R2 lahko v danem primeru substituiran z 1 do 2 OR^, O(CH2)qarilom, 1 do 2 C(O)OR2a, C(O)N(R2a)(R2a), S(O)mR2a, l-H-tetrazol-5-ilom, C(O)NHSO2R2a, C(O)NHSO2(CH2)q arilom, N(R2a)(C(O)N(R2a(R2a) ali N(R2a)C(O)N(R2a)(CH2)q arilom in je lahko aril v danem primeru substituiran z 1 do 2 OR^, 1 do 2 halogenoma, 1 do 2 Cj-Cj alkiloma, C(O)OR2a ali l-H-tetrazol-5ilom; SO2(CH2)w CONH(CH2)w, NHC(O)Rn, kjer je w = 2 do 6, in je Rn lahko biotin, aril, aril, substituiran z 1 ali 2 OR2,1 do 2 halogenoma, azido ali nitro;
m je 0,1 ali 2;
q je lahko v danem primeru 0,1,2 ali 3; in je arilna skupina fenil, naftil, piridil, tienil, indolil, tiazolil ali pirimidinil, ter njihove farmacevtsko sprejemljive soli in posamezni diastereomeri.
Še nadaljnje prednostne spojine dobimo, kadar F ni prisoten v spojini III.
Tako so nadaljnje prednostne spojine v smislu predloženega izuma zajete v strukturni formuli IV:
H H R, i*i ,4
Fb-C-N-C—A—N 1 n '□
Ra je alkil, aril (CrC4 alkil), C5-C6 cikloalkil (C5-C6 alkil) ali (Cx-C4 alkil)-KCrC2alkil-, aril(C0-C2alkil)-K-(C1-C2 alkil), C3-C6 cikloalkil (C0-C2 alkilj-K-^-C^ alkil), kjer je K 0 ali S(O)m, in so arilne skupine lahko nadalje substituirane z i do 2 Cj-C4 alkiloma, 1 do 2 halogenoma, OR2, C(O)OR2, CF3 ah S(O)mR2;
R2 je vodik, Cx-C4 alkil, ciklo C3-C6 alkil in, kadar sta dva C^-C* alkila prisotna na enem atomu, sta lahko v danem primeru spojena, da dobimo C5-C6 cikličen obroč, ki v danem primeru vključuje heteroatome kisik ali NR^;
R^ je vodik ali C3-C4 alkil;
R3a in R3b sta neodvisno vodik, halogen, C3-C4 alkil, C(O)OR2, hidroksi,
C3-C4 alkoksi, S(O)mC1-C4 alkil ali CF3;
R4 in Rs sta neodvisno vodik, Cj-C4 alkil, substituiran C3-C4 alkil, kjer so lahko substituenti 1 do 2 hidroksi ah S(O)m (^-Ο3 alkil);
fr
A je:
— (CH2)x-C — R?a kjerjeXOali 1;
R? in R?a sta neodvisno vodik, Cj-C3 alkil; ali sta lahko R? in R?a neodvisno spojena z eno ali obema od skupin R4 in R5, da nastanejo alkilenski mostovi med končnim dušikom in alkilnim delom skupine R? ali R?a, da dobimo 5- ah 6-členske obroče, ki vsebujejo končni dušik;
B in D sta neodvisno C(Rg)(R10), C=O, O, S(O)m, NR9, pod pogojem, da je lahko eden od B in D C(Rg)(R10) ali C=O le, kadar je drugi od B in D O, S(O)m ali NR<?;
Rg in R10 sta neodvisno vodik, R2 ali (CH^ aril ter je aril lahko v danem primeru substituiran z 1 do 2 halo, 1 do 2 Cj-C4 alkiloma, OR2 ali 1 do 2 C(O)OR2;
R9 je C(O)R2, C(O)(CH2)q aril, SO2R2, SO(CH2)q aril, C(O)N(R2)(R2), C(O)N(R2)((CH2)q aril in je lahko (CH2)q v danem primeru substituiran z i do 2 CjC2 alkiloma in je R^ lahko v danem primeru substituiran z 1 do 2 OR^, O(CH2)q arilom, C(O)OR2a, C(O)N(R2a)(R2a), S(O)mR2a, l-H-tetrazol-5-ilom, C(O)NHSO2R2a ali N(R2a)C(O)N(R2a)(R2a) in je lahko aril v danem primeru sub10 stituiran z 1 do 2 OR^, 1 do 2 halogenoma, 1 do 2 alkiloma, <3(0)01^, 1-Htetrazol-5-ilom ali S(O)mR2a;
SO2(CH2)qCOHN(CH2)wNHC(O)R11, kjer je w = 2 do 6 in je Rn lahko v danem primeru biotin, aril in je lahko aril v danem primeru substituiran z 1 do 2 OR2,1 do 2 halogenoma, azido, nitro;
m je 0,1 ali 2;
q je lahko v danem primeru 0,1, 2 ali 3;
aril je fenil, naftil, piridil, indolil, tienil ali tetrazolil, ter njihove farmacevtsko sprejemljive soli in posamezni diastereomeri.
Najbolj prednostne spojine v smislu predloženega izuma so zajete v strukturni formuli V:
Rje oN
H,
CH
F
F
N
CH2CH2;
CH2CH2OH2;
CH2CH2CH2;
je H, fluoro;
D je O, S, S(O)m, NCR,), NSO2(R,), NSO2(CH2)t aril, ΝΟ(Ο)^, NSO2(CH2) OH, NSO2(CH2)qCOOR2, N-SO2(CH2)qC(O)-N(R2(R2), N-SO2(CH2)qC(O)N(R2)(CH2)wOH,
N-NH
N-SO2(CH2)q_J in Je ar^ pindil ter je lahko fenil
N=N substituiran z 1 do 2 halogenoma;
R, je H, Cx-C4 alkil; m = 1, 2; t je 0,1,2; qje 1,2,3; wje 2 do 6;
ter njihove farmacevtsko sprejemljive soli in posamezni diastereomeri.
Reprezentativne najbolj prednostne, rastni hormon sproščujoče spojine v smislu predloženega izuma so naslednje:
1. N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-r-il)karbonil]-2-(lH-indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
2. N- [ 1 (R)- [(l,2-dihidro-l-metankarbonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidinj - l’-il)karbonil]-2-(lH-indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
3. N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-benzensulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-l’-il)karbonil]-2-(lH-indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
4. N-[l(R)-[(3,4-dihidro-spiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidin]-r-il)karbonil]-2-(lH-indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
5. N-[l(R)-[(2-acetil-l,2,3,4-tetrahidrospiro[izokinolin-4,4’-piperidin]-ril)karbonil]-2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
6. N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-r-il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
7. N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-r-il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid mezilatna sol
8. N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-l’-il)karbonil]-2-(2’,6’-difluorofenilmetiloksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
9. N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonil-5-fluorospiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-l’il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
10. N-[l(S)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-r-il)karbonil]-2-(fenilmetiltio)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
11. N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro][3H-indol-3,4’-piperidin]-l’-il)karbonil]-3-fenilpropil]-2-amino-2-metilpropanamid
12. N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin[-l’-il)karbonil]-3-cikloheksilpropil]-2-amino-2-metilpropanamid
13. N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-l’-il)karbonil]-4-fenilbutil]-2-amino-2-metilpropanamid
14. N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-l’il)karbonil]-2-(5-fluoro-lH-indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
15. N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonil-5-fluorospiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-l’-il)karbonil]-2-(5-fluoro-lH-indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
16. N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-(2-etoksikarbonil)metilsulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piper idin]-r-il)karbonil]-2-(lH-indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
17. N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l,l-dioksospiro[3H-benzotiofen-3,4’-piperidin]-l’-il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid ter njihove farmacevtsko sprejemljive soli.
Reprezentativni primeri uporabljene nomenklature so podani spodaj:
N-[l(R)-[(3,4-dihidro-4-oksospiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidin]-l’-il)karbonil]-4-fenilbutil]-2-amino-2-metilpropanamid
N-[l(S)-[(l,2-dihidro-l-raetansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-l’-il)karbonil ]-2-(fenilmetiltio)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidm]-r-il)karbonil ]-2-(fenilmetiloksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid.
Po vsej predloženi prijavi uporabljamo naslednje okrajšave z naslednjimi pomeni:
BOC t-butiloksikarbonil
BOP benzotriazol-l-iloksi tris(dimetilamino)-fosfonijev heksafluorofosfat
CBZ benziloksikarbonil
DCC dicikloheksilkarbodiimid
DMF Ν,Ν-dimetilformamid
EDC l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid hidroklorid
FAB-MS masna spektroskopija z bombardiranjem s hitrimi atomi
GHRP peptid, ki sprošča rastni hormon
HOBT hidroksibenztriazol
LAH litijev aluminijev hidrid
HPLC visokotlačna tekočinska kromatografija
MHz megahertz
MPLC srednjetlačna tekočinska kromatografija
NMM N-metilmorfolin
NMR jedrska magnetna resonanca
ΟΧΟΝΕ kalijev peroksi monosulfat
PLC preparativna slojna kromatografija
PCC piridinijev klorokromat
Ser serin
TFA trifluoroocetna kislina
THF tetrahidrofuran
TLC tenkoslojna kromatografija
TMS tetrametilsilan
Spojine v smislu predloženega izuma imajo vse vsaj en asimetrični center, kot je označeno z zvezdico v zgornjih strukturnih formulah I in II. Dodatni asimetrični centri so lahko prisotni na molekuli glede na naravo različnih substituentov na molekuli. Vsak tak asimetrični center bo proizvedel dva optična izomera in mišljeno je, da so vsi taki optični izomeri, kot ločeni, čisti ali delno očiščeni optični izomeri, njihove racemne zmesi ali diastereomeme zmesi, zajeti v obseg predloženega izuma. V primeru asimetričnega centra, ki ga predstavlja zvezdica v formuli I in II, smo ugotovili, da je absolutna stereo kemija bolj aktivnih in tako bolj prednostnih izomerov, kot je prikazano v fomuli la. Z R2 substituentom kot vodikom ustreza specialna konfiguracija asimetričnega centra tisti v D-amino kislini. V večini primerov je to tudi označeno kot R-konfiguracija, čeprav bo to variiralo glede na vrednosti R4 in R2, uporabljenih pri R- ali S-stereokemičnih določevanjih.
Spojine v smislu izuma na splošno izoliramo v obliki njihovih farmacevtsko sprejemljivih kislinskih adicijskih soli, kot soli, izpeljanih ob uporabi anorganskih in organskih kislin. Primeri takih kislin so klorovodikova, dušikova, žveplova, fosforjeva, mravljinčna, ocetna, trifluoroocetna, propionska, maleinska, jantarna, malonska, metansulfonska kislina ipd. Poleg tega lahko določene spojine, ki vsebujejo kislo funkcijo, kot karboksi, izoliramo v obliki njihove anorganske soli, kjer lahko proti-ion izberemo izmed natrija, kalija, litija, kalcija, magnezija ipd. kot tudi iz organskih baz.
Pripravo spojin I in II v smislu predloženega izuma lahko izvedemo v zaporednih ali konvergentnih sintetskih poteh. Sinteze, ki podrobno pojasnjujejo pripravo spojin s formulo I in II na zaporeden način, so predstavljene v naslednjih reakcijskih shemah.
Zaščiteni amino kislinski derivati 1 so v mnogih primerih tržno dosegljivi, kjer je zaščitna skupina L npr. skupina BOC ali CBZ. Druge zaščitene amino kislinske derivate 1 lahko pripravimo po postopkih iz literature. Mnogi od spiro piperidinov in spiro azepinov (n = 2) s formulo 2 in 2a so znani v literaturi in jih lahko derivatiziramo na fenilu ali heteroarilu na standarden način, kot je halogeniranje, nitriranje, sulfoniranje itd. Po drugi strani lahko različne fenilno ali heteroarilno substituirane spiro piperidine in spiro azepine (n = 2) pripravimo po postopkih iz litera17 ture ob uporabi derivatiziranih fenilnih in heterarilnih intermediatov. V shemah, ki sledijo shemi 1, so sintetski postopki prikazani le s spiro piperidini, čeprav bodo strokovnjaki upoštevali, da se lahko prikazane pretvorbe izvedejo tudi v višji homologni vrsti, da dobimo spojine s formulama I in II z n = 2.
Intermediate s formulama 3 in 3a lahko sintetiziramo, kot je opisano na shemi 1. Pripajanje spiro piperidinov s formulo 2 in 2a, da zaščitimo amino kisline s formulo 1, kjer je L primerna zaščitna skupina, izvedemo s pridom v inertnem topilu, kot diklorometanu, s pripajalnim reagentom, kot je DCC ali EDC, v prisotnosti HOBT. Po drugi strani lahko pripajanje tudi izvedemo s pripajalnim reagentom, kot BOP, v inertnem topilu, kot diklorometanu. Ločenje neželenih stranskih produktov in čiščenje intermediatov izvedemo s kromatografijo na silikagelu ob uporabi flash kromatografije (W. C. Stili, M. Kahn in A. Mitra J. Org. Chem. 1978, 43, 2923), MPLC ali preparativne TLC.
SHEMA 1
Ri
-N-L COOH 1
Pretvorbo 3 in 3a v intermediate 4 in 4a lahko izvedemo, kot je prikazano na shemi 2. Benziloksikarbonilne skupine lahko odstranimo po številnih znanih postopkih; npr. s katalitskim hidrogeniranjem z vodikom v prisotnosti paladijevega ali platinovega katalizatorja v protičnem topilu, kot metanolu. V primerih, kjer je katalitsko hidrogeniranje kontraindicirano zaradi prisotnosti druge potencialno reaktivne funkcionalnosti, lahko beziloksikarbonilne skupine odstranimo tudi z obdelavo z raztopino bromovodika v ocetni kislini. BOC zaščitne skupine odstranimo v topilu, kot metilen kloridu ali metanolu, z močno kislino, kot klorovodikovo ali trifluoroocetno kislino. Pogoje, ki se zahtevajo za odstranitev drugih zaščitnih skupin, ki so lahko prisotne, lahko najdemo v Greene, T; Wuts, P.G.M. Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, Inc., New York, NY1991.
SHEMA 2
Intermediate s formulo 5 in 5b, kjer je A metilenska ali substituirana metilenska skupina, lahko pripravimo, kot je prikazano na shemi 3, s pripajanjem intermediatov s formulo 4 in 4a na amino kisline s formulo 6, ponovno v inertnem topilu, kot diklorometanu, s pripajalnim reagentom, kot EDC ali DCC, v prisotnosti HOBT. Te amino kisline 6 so znane amino kisline ali amino kisline, kijih zlahka sintetiziramo po postopkih, znanih strokovnjaku. Po drugi strani lahko pripajanje tudi izvedemo s pripajalnim reagentom, kot je BOP v inertnem topilu, kot diklorometanu. Tudi če je R4 ali R5 vodik, potem uporabimo amino kisline s formulo 7 v pripajalni reakciji, kjer je L zaščitna skupina, kot je definirano zgoraj, da dobimo 5a in 5c. Iz 5a in 5c (L = zaščitna skupina) lahko odstranimo zaščito ob znanih pogojih.
SHEMA 3
Ri R2 R6
-N-H
CO
R2 R6
3a R4
HOOC-A-N-R5 6 ali R2 R6 9 R4
N-C-A-N
R5 ali L
Rz
-N-H
HOOC-A-N-L
CO
'3a R2 O yR4 Rl--N_C_A_N'
CO R5 al1 L .Rz
3a
Spojine s formulo I in II, kjer je R4 in/ali R$ vodik, lahko nadalje pretvorimo v nove spojine I in II (prednostna stranska veriga R? = CH2-CH(OH)-CH2X, kjer je X = H ali OH), ki so substituirane na amino skupini, kot je prikazano na shemi 4. Reduktivno aminiranje I in II z aldehidom izvedemo ob znanih pogojih; npr. s katalitskim hidrogeniranjem z vodikom v prisotnosti platinovega, paladijevega ali nikljevega katalizatorja ali s kemičnimi redukcijskimi sredstvi, kot je natrijev cianoborohidrid, v inertnem topilu, kot metanolu ali etanolu. Po drugi strani lahko podobno pretvorbo izvedemo preko reakcije odpiranje epoksida.
SHEMA 4
Ri
R2 Rg 0
Rz /
I
R5
I w II . 4
N-O-A-N
CO
‘3a kjer je in/ali C1-C6 alkil ali substituiran alkil
Ri R2?69 r4
-N-C-A-1< CO R5
II kjer je R^ in/ali R^ C1-C6 alkil ali substituiran alkil
Spojine s formulo I in II, kjer je A N(R2)-(Cj)z-C(R7)(R7J-(CH2)y, lahko pripravimo, kot je prikazano na shemi 5, s presnovo 4 ali 4a z reagenti 8, kjer je X primerna odhodna skupina, kot Cl, Br, I, imidazol. Po drugi strani lahko 4 in 4a presnovimo z izocianatom s formulo 9 v inertnem topilu, kot 1,2-dikloroetanu. Če je R4 ali R5 vodik v končnem produktu, bodo reagenti 8 in 9 nosili odstranljivo zaščitno skupino L namesto R4 ali Ry
Ri R2 R6
-N-H
CO
R R2 ^6
3a
Ri
-N-H
CO
‘3a
SHEMA 5
O fjl2a R7 X—·*—N- (CH2)x-|—(CH2)yN R7a R.
ali
O=C=N—(CH2)x--(CH2)yN
7a
R,
Rc ali
Spojine I in II v smislu predloženega izuma lahko tudi pripravimo na konvergenten način, kotje opisano na reakcijskih shemah 6,7 in 8.
Zaščiteni amino kislinski derivati 10 so v mnogih primerih tržno dosegljivi, kjer je M = metilni, etilni ali benzilni ester. Druge estrsko zaščitene amino kisline lahko pripravimo po klasičnih postopkih, ki jih strokovnjak pozna. Nekateri od teh postopkov zajemajo reakcijo zaščitene amino kisline z diazoalkanom in odstranitev zaščitne skupine L, reakcijo amino kisline s primernim alkoholom v prisotnosti močne kisline, kot klorovodikove ali p-toluensulfonske kisline. Sintezne poti za pripravo novih amino kislin so opisane na shemah 14,15 in 16.
Intermediate s formulo 11 in 1 la lahko pripravimo, kot je prikazano na shemi 6, s pripajanjem aminov 10 na amino kisline 6 in/ali 7, kjer je L zaščitna skupina, kot je opisano zgoraj na shemi 3. Kadar je v 11 ali lla prisotna sečninska vezava, jo lahko uvedemo, kotje prikazano na shemi 5.
SHEMA 6
R2ip6 HOOC-A-N-R 6
—N-H ali
COOM + ^4
10 HOOC-A-N-L 7
R1
Ri
FE Rg θ R4 —N-C-A-N-R5 COOM
R2 R« 0 R4 —N-C-A-N-L COOM
11a
Ester 11 ali lla lahko pretvorimo v vmesne kisline 12 ali 12a po številnih znanih postopkih, kot je opisano na shemi 7, npr. metilne in etilne estre lahko hidroliziramo z litijevim hidroksidom v protičnem topilu, kot vodnem metanolu. Poleg tega lahko benzilno skupino odstranimo s številnimi reduktivnimi postopki, vključno s hidrogeniranjem v prisotnosti platinovega ali paladijevega katalizatorja v protičnem topilu, kot metanolu. Alilni ester lahko cepimo s tetrakis-trifenilfosfin paladijevim katalizatorjem v prisotnosti 2-etilheksanojske kisline v številnih topilih, vključno etil acetatu in diklorometanu (glej J. Org. Chem. 1982,42,587).
SHEMA Ί
R2 F*o r4 Ri_|_n_c-A-N-R5
COOM
Rl fr fr o fr
I ii I —N-C-A-N-R5 COOH fr
Ro Rg O R4 ά I 0 II I* —N-C-A-N-L COOM
11a R1
Ro R« O R4 ά i 0 ii i * —N-C-A-N-L COOH
12a
Kislino 12 ali 12a lahko nato pretvorimo v 5 & 5a in 5b & 5c, kot je opisano na shemi 8. Pripajanje spiro piperidinov s formulo 2 in 2a na kisline s formulo 12 ah 12a, kjer je L primerna zaščitna skupina, izvedemo s pridom v inertnem topilu, kot diklorometanu, s pripajalnim reagentom, kot dicikloheksil karbodiimidom (DCC) ali EDC, v prisotnosti 1-hidroksibenztriazola (HOBT). Po drugi strani lahko pripajanje tudi izvedemo s pripajalnim reagentom, kot benzotriazol-l-iloksitris(dimetilamino) fosfonijevim heksafluorofosfatom (BOP) v inertnem topilu, kot diklorometanu. Pretvorbo 5a & 5c v I in II izvedemo z odstranitvijo zaščitne skupine L. Kadar je R4 in/ali R5 H, lahko substituirane alkilne skupine v danem primeru dodamo atomu dušika, kot je opisano v shemi 4.
SHEMA 8
Ri
R2 R6 O R.
I 0 ii ,4
-N-C-A-N
Ri
Ro R6 O Z l ° II
Ri
CO
R
3a
Ro Rg O ά I 0 II
COOH
12a •N-C-A-N-L
Ri
R5ali L
R,
N-C-A-N
CO R5 al1 L
N
B'
D.
\—G /R3a i
u R3b
5b in 5c
Priprava oksigeniranih spiroindanilnih piperidinskih intermediatov je prikazana na shemi 9, kjer sta R.^ in R3b oba vodik. Hidroboriranje zaščitenega spiroindena 13, ki mu sledi oksidativna obdelava s piridinijevim klorokromatom, daje spiroindanon 14.
SHEMA 9
Pretvorba spiroindanov v benzolaktamske intermediate je prikazana na shemi 10. Obdelava spiroindanona s hidrazojsko kislino v inertnem topilu, kot kloroformu (Schmidtova reakcija) je eden od mnogih primernih postopkov iz literature za to pretvorbo. V tem primeru nastane zmes dveh benzolaktamov. Izomere zlahka ločimo s kromatografijo na silikagelu. Iz teh intermediatov lahko nato odstranimo zaščito in vdelamo v sekretagoge rastnega hormona, kot je prikazano na shemah 1 in 8 ob uporabi generičnega intermediata 2.
SHEMA 10
Z alkiliranjem 15 in 16 z alkil halidom v topilu, kot DMF, v prisotnosti NaH dobimo in 18 (R^Cj-O, alkil).
SHEMA 10A ali 16
Kada je L primerna zaščitna skupina, kot benzilna skupina, lahko amide reduciramo z litijevim aluminijevim hidridom, da dobimo amine 19 in 21. Te amine, kjer je R2 = H, lahko potem alkiliramo, ariliramo, aciliramo ali presnovimo s substituiranimi sulfonil halidi ali izocianati ob uporabi pogojev, ki jih strokovnjaki poznajo, da dobimo spojine 20 in 22. Z odstranitvijo zaščitne skupine (L) s hidrogenolizo ob uporabi paladijevega katalizatorja dobimo intermediate, ki jih lahko vdelamo v sekretagoge v smislu predloženega izuma ob uporabi kemije, prikazane na shemah 1 in 8 zgoraj, kjer se uporablja generični intermediat 2.
SHEMA 11
Po drugi strani lahko l,2,3,4-tetrahidrospiro[izokinolin-4,4’-piperidinski] obročni sistem pripravimo, kot je prikazano na shemi 12. Z ozonolizo zaščitenega spiroindena, ki mu sledi obdelava z dimetil sulfidom, dobimo hemiacetalni intermediat 24, iz katerega ob pogojih reduktivnega aminiranja in aciliranja dobimo amin 25. Amino zaščitno skupino (L) smo definirali zgoraj.
SHEMA 12
Obročne analoge s formulo 26, kjer je X, Y H,H; OH,H; H,OH; in = O, lahko pripravimo po postopkih, opisanih v literaturi in znanih strokovnjakom. Na primer, kot je prikazano na shemi 13, lahko spiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidinski analog pripravimo iz substituiranega ali nesubstituiranega 2-hidroksiacetofenona in ustrezno zaščitenega 4-piperidona, kot je opisano v Kabbe, H. J. Synthesis 1978, 886 - 887, in tam citiranih referencah. 2-hidroksiacetofenoni pa so bodisi tržno dostopni ah jih lahko pripravimo po poteh v literaturi, ki so znane strokovnjakom. Take postopke so opisali Chang, C. T. et al, v J. Am. Chem. Soc., 1961, 3414 - 3417, in Elliott, J. M. et al, v J. Med. Chem. 1992, 35, 3973 - 3976. Z odstranitvijo zaščitne skupine, kot je opisano v Protective Groups in Organic Synthesis, Greene, T. W., Wuts, P. G., John Wiley & sons, New York, 1991, in Olofson, R.A. et al, J. Org. Chem. 1984,49, 2081 2082, dobimo amin, ki ga lahko nato vdelamo v sekretagog rastnega hormona preko kemije, ki je podrobno prikazana na zgornjih shemah 1 in 8, kjer se uporablja generični intermediat 2.
SHEMA 13
1) HCI
2) H2, Pd/C
Ketonsko funkcionalnost v spojinah s splošno strukturo 27 lahko reduciramo do alkohola ob uporabi natrijevega borohidrida ali jo lahko popolnoma reduciramo do metilena tudi ob uporabi pogojev, ki jih strokovnjaki poznajo. Npr. z redukcijo ketona z natrijevim borohidridom, čemur sledi obdelava s koncentrirano klorovodikovo kislino in hidrogeniranje, dobimo spojine s splošno strukturo 29. Amin s strukturo 27, 28 ali 29 lahko nato vdelamo v sekretagog rastnega hormona preko kemije, podrobno prikazane na shemah 1 in 8, ob uporabi generične formule 2. Po drugi strani lahko keton pogosto reduciramo po vdelavi v spojine s formulo I.
Kiralne hidrospiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidinskej analoge lahko pripravimo ob uporabi optično aktivnih reducirnih sredstev in s kristalizacijo diastereomernih soli.
Spojine s formulama I in II v smislu predloženega izuma pripravimo iz številnih substituiranih naravnih in nenaravnih amino kislin, kot so tiste s formulami 30 in 6 in 7, kjer je A -(CH^-^R^R^^CH^ Priprava mnogih od teh kislin je bila opisana v US patentu 5206237.
Pripravo teh intermediatov v racemni obliki izvedemo po klasičnih postopkih, ki jih strokovnjaki poznajo (Williams, R. M. Synthesis of Optically Active α-amino Acids Pergamon Press: Oxford, 1989; Vol. 7). Obstajajo številni postopki za ločenje (DL)R2 R6 Ri--Nx
H
CO2H amino kislin. Eden od običajnih postopkov je, da ločimo amino ali karboksilno zaščitene intermediate s kristalizacijo soli, izvedenih iz optično aktivnih kislin ali aminov. Po drugi strani lahko amino skupino karboksilno zaščitenih intermediatov pripajamo na optično aktivne kisline ob uporabi preje opisane kemije. Z ločenjem posameznih diastereomerov bodisi s kromatografskimi tehnikami bodisi s kristalizacijo, čemur sledi hidroliza kiralnega amida, dobimo ločene amino kisline. Podobno lahko amino zaščitene intermediate pretvorimo v zmes kiralnih diastereomemih estrov in amidov. Z ločenjem zmesi ob uporabi zgoraj opisanih postopkov in s hidrolizo posameznih diastereomerov dobimo (D) in (L) amino kisline. Končno so Whitesides in sodelavci v J. Am. Chem. Soc. 1989, 111, 6354 - 6364, opisali encimatski postopek za ločenje N-acetilnih derivatov (DL)-amino kislin.
Kadar je zaželeno sintetiziranje teh intermediatov v optično čisti obliki, zajemajo nekateri uveljavljeni postopki: (1) asimetrično elektrofilno aminiranje kiralnih enolatov (J. Am. Chem. Soc. 1986, 108, 6394 - 6395, 6395 - 6397 in 6397 - 6399), (2) asimetrično nukleofilno aminiranje optično aktivnih karbonilnih derivatov, (J. Am.
Chem. Soc. 1992, 114, 1906; Tetrahedron Lett. 1987, 28, 32), (3) diastereoselektivno alkiliranje kiralnih glicinskih enolatnih sintonov (J. Am. Chem. Soc. 1991, 113, 9276; J. Org. Chem. 1989, 54, 3916), (4) diastereoselektivno nukleofilno adicijo na kiralni elektrofilni glicinatni sinton (J. Am. Chem. Soc. 1986, 108, 1103), (5) asimetrično hidrogeniranje prokiralnih dehidroamino kislinskih derivatov (Asymmetric Synthesis, Chiral Catalysis; Morrison, J. D. Ed; Academic Press: Orlando, FL, 1985; Vol 5), in (6) encimatske sinteze (Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1978,17,176).
Npr., alkiliranje enolata difeniloksazinona 31 (J. Am. Chem. Soc. 1991, 113, 9276) s cinamilbromidom v prisotnosti natrijevega bis(trimetilsilil)amida poteka gladko in dobimo 32, ki ga pretvorimo v želeno (D)-2-amino-5-fenilpentanojsko kislino 33 z odstranitvijo N-t-butiloksikarbonilne skupine s trifluoroocetno kislino in hidrogeniranjem preko katalizatorja PdCl2 (shema 14)
SHEMA 14
2)PdCI2/H2
Ph
CO2H
Intermediate s formulo 30, ki so O-benzil-(D)-serinski derivati 34, ugodno pripravimo iz primerno substituiranih benzil halidov in N-zaščitenega-(D)-serina 34. Zaščitna skupina L je ugodno skupina BOC ali CBZ. Benziliranje 34 lahko izvedemo po številnih postopkih, znanih iz literature, vključno z deprotoniranjem z dvema ekvivalentoma natrijevega hidrida v inertnem topilu, kot DMF, ki mu sledi obdelava z enim ekvivalentom izmed številnih benzil halidov (Synthesis 1989, 36), kot je prikazano na shemi 15.
SHEMA 15
HO
NaH/DMF
Ar-CH2-X
CO2H
H
CO2H
O-alkil-(D)-serinske derivate tudi pripravimo ob uporabi alkilirnega protokola, prikazanega na shemi 15. Drugi postopki, ki bi jih lahko uporabili za pripravo (D)serinskih derivatov s formulo 35, zajemajo s kislino katalizirano benziliranje karboksilno zaščitenih intermediatov, izvedenih iz 34, z reagenti s formulo ArCH20C(=NH)CCl3 (O. Yonemitsu et al. Chem. Pharm. Buli. 1988, 36, 4244). Po drugi strani z alkiliranjem kiralnih glicinskih enolatov (J. Am. Chem. Soc. 1991, 113, 9276; J. Org. Chem. 1989, 54, 3916) z ArCH2OCH2X, kjer je X odhodna skupina, dobimo 35. Poleg tega lahko D,L-O-aril(alkil)serine pripravimo in ločimo po zgoraj opisanih postopkih.
Alkiliranje N-zaščitenega-(D)-cisteina 36 izvedemo po postopku, opisanem pri sintezi (D)-serinskega derivata in prikazanem spodaj z Rla-X, kjer je X odhodna skupina, kot so halidi in meziloksi skupine, kot je prikazano na shemi 16.
SHEMA 16
HS
NaH/THF
Ria’*
CO2H
1a\,
COoH [Ο]
1a\
[°] n CO2H 38 n=1,2
Oksidacijo cisteinskih derivatov 37 v sulfoksid 38 (n = 1) in sulfon 38 (n = 2) lahko izvedemo z mnogimi oksidacijskimi sredstvi. (Za pregled oksidacije sulfidov glej Org. Prep. Proced. Int. 1982, 14, 45). Natrijev peijodat (J. Org. Chem. 1967, 32, 3191) se pogosto uporablja za sintezo sulfoksidov ter kalijev hidrogen persulfat (ΟΧΟΝΕ) (Tetrahedron Lett. 1981,22,1287) uporabimo za sintezo sulfonov.
Zato lahko številne substituirane amino kisline vdelamo v sekretagog rastnega hormona preko kemije, podrobno opisane na shemah 1 in 8. Sekretagoge, ki vsebujejo sulfoksidno ali sulfonsko funkcionalno skupino, lahko tudi pripravimo iz cisteinskih sekretagogov z uporabo natrijevega perjodata ali ΟΧΟΝΕ®. Po drugi strani lahko uporabimo vodikov peroksid kot oksidacijski reagent v zadnji stopnji sinteze, kot je prikazano na shemi 17. Sulfoksidne 40 (n = 1) in sulfonske 40 (n = 2) analoge lahko ločimo s preparativno tenkoslojno kromatografijo.
SHEMA 17
V/r 'nh2tfa co o
R
1a
.N
30% H2O2/TFA n=1,2
B i
D.
rLX^ K3b ^3a
Amino zaščitne skupine lahko odstranimo po številnih znanih postopkih, kot je opisano zgoraj in v Protective Groups in Organic Synthesis T. W. Greene, John Wiley and Sons, NY. 1981.
Spojine s formulo I, kjer sta R4 in R5 vsak vodik, lahko nadalje predelamo z reduktivnim alkiliranjem z aldehidom po zgornjih postopkih ali z alkiliranji, kot z reakcijo z različnimi epoksidi. Produkte, dobljene kot hidrokloridne ali trifluoroacetatne soli, ugodno čistimo z visokotlačno tekočinsko kromatografijo (HPLC) z obratno fazo ali s prekristalizacijo.
Spiro piperidine s formulo 41 lahko pripravimo po številnih metodah, vključno s sintezami, kot je opisano spodaj.
Spiro piperidine s formulo 42, kjer je L definirana zaščitna skupina, lahko sintetiziramo po metodah, ki so znane v literaturi (na primer H. Ong et al J. Med. CHem. 1983, 23, 981 - 986). Indolinski dušik od 42, kjer je L zaščitna skupina, kot metil ali benzil, lahko presnovimo s številnimi elektrofili, da dobimo spiro piperidine s formulo 43, kjer je lahko R9 množica funkcionalnosti. Spojino 42 lahko presnovimo z npr. izocianati v inertnem topilu, kot diklorometanu, da dobimo sečninske derivate, s kloroformati v inertnem topilu, kot diklorometanu, da dobimo karbamate, kislinske kloride,
SHEMA 18
anhidride, ali z acil imidazoli, da dobimo amide, s sulfonil kloridi, da dobimo sulfonamide, s sulfamil kloridi, da dobimo sulfamide. Tudi indolinski dušik od 42 lahko reduktivno alkiliramo z aldehidi ob znanih pogojih. Kadar je aldehid, uporabljen v reduktivni animacijski reakciji, zaščitena glioksilna kislina s strukturo HCOCOOM, kjer je M definirana zaščitna skupina, lahko M odstranimo iz produkta in nadalje derivatiziramo. Po drugi strani lahko 42 presnovimo z epoksidi, da dobimo 43, kjer je R9 β-hidroksisubstituirana alkilna ali arilalktlna skupina. Indolin 42 lahko tudi pretvorimo v spojine s formulo 43, kjer je R9 = fenil ali substituiran fenil, heteroaril ali substituiran heteroaril, tako da presnovimo 42 s fluoro fenilnim ali fluoro heteroarilnim reagentom. Ta kemija je podrobno opisana v H. Ong et al J. Med. Chem. 1983, 23, 981 - 986.
SHEMA 19
Spiro piperidinski intermediat 43 (L = Me ali Bn), kjer je R9 vodik ali večina zgoraj opisanih derivatov, lahko demetiliramo ali debenziliramo, da dobimo 44, kjer je R9 vodik ali večina od zgoraj opisanih derivatov, kot je prikazano na shemi 19. Za spojine s formulo 43, kjer je L = Me, lahko izvedemo demetiliranje po številnih postopkih, ki jih strokovnjak pozna. Na primer demetiliranje 43 izvedemo s tem, da ga presnovimo z bromocianom in kalijevim karbonatom v inertnem topilu, kot diklorometanu, da dobimo cianamid, ki ga lahko reduciramo, da dobimo 44, z obdelavo z litijevim aluminijevim hidridom v refluktirajočem tetrahidrofuranu, refluktirajoči močni kislini, kot vodni klorovodikovi kislini, ali z Grignardovimi reagenti, kot metil magnezijevim bromidom. Po drugi strani lahko demetiliramo 43 po metodi ACE-C1, kot je opisano v R. Olofson et al. J. Org. Chem. 1984, 49, 2795, in v tamkajšnjih referencah. Za intermediate s formulo 43, kjer je L = Bn, lahko odstranimo benzilno skupino z reduktivnimi postopki, vključno hidrogeniranjem v prisotnosti platinovega ah paladijevega katalizatorja v protičnem topilu, kot metanolu. Po drugi strani lahko debenziliramo 43, L = Bn, z metodo ACE-C1, kot je opisano v R. Olofson et al. J. Org. Chem. 1984.
Spiro heterociklične spojine 45 lahko pripravimo s številnimi postopki, vključno s sintezami, kot je opisano na shemi 20.
SHEMA 20
Alilno oksidacijo zaščitenega piperidina 47 izvedemo po klasičnih postopkih, ki jih strokovnjaki poznajo (Rabjohn, N. Org. React. 1976, 24, 261). Dobljen alil alkohol obdelamo s tionil kloridom v inertnem topilu, kot benzenu, da dobimo ustrezen klorid 48. Kadar je D = O ali S, alkiliramo v DMF ali acetonu kot topilu s kalijevim karbonatom kot bazo, kadar pa je D = NR9 (R9 = H, alkil, aril, acil, sulfonil, karbamat), izvedemo reakcijo z natrijevim hidridom kot bazo v inertnem topilu, kot THF, da dobimo ciklizacijski predhodnik 49. Kadar je L definirana zaščitna skupina, lahko spojino 49 cikliziramo s številnimi postopki, ki jih strokovnjaki poznajo. Na primer ciklizacijo 49 lahko izvedemo z reakcijo s tributilkositrovim hidridom (Curran, D. P. Synthesis 1988,417 in 489) v inertnem topilu, kot benzenu, da dobimo 46. Po drugi strani lahko spojino 46 (D = NR9) pripravimo po postopku, prikazanem na shemah 18 in 19. Kadar je D = S, lahko spojino 46 oksidiramo v sulfoksid 47 (n = 1) in sulfon 47 (n = 2) s številnimi oksidacijskimi sredstvi (shema 21). Na primer, natrijev perjodat pogosto uporabimo za sintezo sulfoksidov in ΟΧΟΝΕ uporabimo za sintezo sulfonov. Z odstranitvijo zaščitne skupine dobimo amin 45, ki ga nato lahko vdelamo v sekretagog rastnega hormona preko kemije, ki je podrobno prikazana na shemi 1 in 8 zgoraj, kjer se uporablja generični intermediat 2.
SHEMA 21
L i
N.
D=S [0]
L i
N
D = S(O)m m=1,2
Spiro piperidine s formulo 50 in s formulo 51 lahko pripravimo s sintezami, opisanimi na shemi 22.
Ftalimidini s formulo 53, kjer je Rn definiran kot alkil, aril, (CH/^-aril ali zaščitna skupina, so bodisi tržno dostopni ali jih lahko pripravimo iz ustreznih ftalimidov po postopkih, ki so znani iz literature (npr. Bewster et al v J. Org. Chem., 1963, 28, 501; Mcalees et al J. Chem. Soc., 1977, 2038). Ftalimidin 53 lahko alkiliramo v prisotnosti baze, kot kalijevega hidrida, litijevega ali kalijevega bis(trimetilsilil)amida, z zaščitenim bis-2-haloetil aminom, kjer je L definirana zaščitna skupina, kot metil, benzil, t-BOC ali CBZ itd., Y pa je lahko Cl, Br, I, da dobimo spiropiperidin 54. Zaščitno skupino lahko odstranimo po zgoraj opisanih postopkih, da dobimo spojino s formulo 50. Z redukcijo laktama v formuli 50 s hidridi, kot litijevim aluminijevim hidridom, dobimo formulo 51.
SHEMA 22
Zaporedje izvajanja prejšnjih reakcijskih shem ni pomembno in je stvar strokovnjaka, da variira zaporedje reakcij, da olajša reakcijo ali da se izogne neželenim reakcijskim produktom.
Rastni hormon sproščujoče spojine s formulo I in II so koristne in vitro kot enkratna orodja za razumevanje, kako se regulira izločanje rastnega hormona na nivoju hipofize. To vključuje uporabo pri ovrednotenju mnogih faktorjev, za katere se misli ali se ve, da vplivajo na izločanje rastnega hormona, kot je starost, spol, prehrambeni faktorji, glukoza, amino kisline, maščobne kisline kot tudi stanja posta in ne-pdsta. Poleg tega lahko spojine v smislu predloženega izuma uporabimo pri ovrednotenju, kako drugi hormoni modificirajo aktivnost sproščanja rastnega hormona. Bilo je že npr. ugotovljeno, da somatostatin inhibira sproščanje rastnega hormona. Drugi hormoni, ki so pomembni in ki jih je treba preučevati zaradi njihovega učinka na sproščanje rastnega hormona, so gonadni hormoni, npr. testosteron, estradiol in progesteron; adrenalni hormoni, npr. kortizol in drugi kortikoidi, epinefrin in norepinefrin; pankreatski in gastrointestinalni hormoni, npr. inzulin, glukagon, gastrin, sekretin; vazoaktivni peptidi, npr. bombezin, nevrokinini; in tiroidni hormoni, npr. tiroksin in trijodotironin. Spojine s formulama I in II lahko tudi uporabimo za raziskovanje možnih negativnih ali pozitivnih učinkov povratne informacije nekaterih od hipofiznih hormonov, npr. rastnega hormona in endorfin peptidov, na hipofizo za modificiranje sproščanja rastnega hormona. Posebno znanstveno pomembna je uporaba teh spojin za osvetlitev subceličnih mehanizmov, ki posredujejo sproščanje rastnega hormona.
Spojine s formulo I in II lahko dajemo živalim, vključno človeku, za sproščanje rastnega hormona in vivo. Na primer spojine lahko dajemo tržno pomembnim živalim, kot so prašiči, govedo, ovce ipd., da pospešimo in povečamo njihovo hitrost in obseg rasti, da izboljšamo učinkovitost hrane in da povečamo proizvodnjo mleka pri takih živalih. Poleg tega lahko te spojine dajemo ljudem in vivo kot diagnostično orodje, da direktno določimo, če je hipofiza sposobna sproščati rastni hormon. Npr. spojine s formulo I in II lahko dajemo in vivo otrokom. Serumske vzorce, ki smo jih vzeli pred in po takem dajanju, lahko testiramo na rastni hormon. Primerjava količin rastnega hormona v vsakem od teh vzorcev bi bila sredstvo za direktno določitev sposobnosti pacientove hipofize, da sprošča rastni hormon.
Torej zajema predloženi izum v svojem obsegu farmacevtske sestavke, ki vsebujejo kot aktivno sestavino vsaj eno od spojih s formulo I in II skupaj s farmacevtskim nosilcem ali razredčilom. V danem primeru lahko aktivna sestavina farmacevtskih sestavkov vsebuje anabolično sredstvo poleg vsaj ene od spojin s formulo I in II ali drug sestavek, ki ima drugačno aktivnost, npr. antibiotskega sredstva, ki dopušča rast, ali sredstva za zdravljenje osteoporoze, ali v kombinaciji s kortikosteroidom za minimiziranje kataboličnih stranskih učinkov ali z drugimi farmacevtsko aktivnimi materiali, kjer kombinacija poveča učinkovitost in minimizira stranske učinke.
Sredstva za pospeševanje rasti in anabolična sredstva so, vendar nanje niso omejena, TRH, dietilstilbesterol, estrogeni, β-agonisti, teofilin, anabolični steroidi, enkefalini, prostaglandini E vrste, spojine, opisane v US patentu št. 3,239,345, npr. zeranol, in spojine, opisane v US patentu št. 4,036,979, npr. sulbenoks, ali peptidi, opisani v US patentu št. 4,411,890.
Še nadaljnja uporaba sekretagogov rastnega hormona v smislu predloženega izuma je v kombinaciji z drugimi sekretagogi rastnega hormona, kot so rastni hormon sproščujoči peptidi GHRP-6, GHRP-1, kot je opisano v US patentu št. 4,411,890 ter objavah WO 89/07110, WO 89/07111, in B-HT920, kot tudi heksarelin in na novo odkriti GHRP-2, kot je opisano v WO 93/04081, ali rastni hormon sproščujoči hormon (GHRH, označen tudi GRF), in njegovi nalogi ali rastni hormon in njegovi analogi ali somatomedini, vključno IGF-1 in IGF-2, ali a-adrenergični agonisti, kot klonidin ali serotonin 5HTID agonisti, kot sumitriptan, ali sredstva, ki inhibirajo somatostatin ali njegovo sproščanje, kot fizostigmin in piridostigmin.
Kot je dobro znano strokovnjakom, so znane in potencialne uporabe rastnega hormona različne in mnogovrstne. Tako ima lahko dajanje spojin v smislu predloženega izuma za stimuliranje sproščanja endogenega rastnega hormona enake učinke ali uporabe kot sam rastni hormon. Te različne uporabe rastnega hormona lahko povzamemo, kot sledi: stimuliranje sproščanja rastnega hormona pri starejših ljudeh; zdravljenje odraslih s pomanjkanjem rastnega hormona; preprečevanje kataboličnih stranskih učinkov glukokortikoidov, zdravljenje osteoporoze, stimulacije imunskega sistema, pospeševanje zdravljenja ran, pospeševanje zacelitve kostnih zlomov, zdravljenje retardacije rasti, zdravljenje akutne ali kronične odpovedi ali insuficience ledvic, zdravljenje fiziološke nizke postave, vključno otrok s pomanjkanjem rastnega hormona, zdravljenje nizke postave v zvezi s kronično boleznijo, zdravljenje obezitete in retardacije rasti v zvezi z obeziteto, zdravljenje retardacije rasti v zvezi s Prader-Willijevim sindromom in Turnerjevim sindromom; pospeševanje okrevanja in zmanjšanje hosipitalizacije pacientov z opeklinami ali po velikih kirurških posegih, kot je gastrointestinalna kirurgija; zdravljenje retardacije intrauterine rasti, skeletne displazije, hiperkortizonizma in Cushingsovega sindroma; nadomestitev rastnega hormona pri pacentih s stresom; zdravljenje osteohondrodisplazij, Noonansovega sindroma, motenj spanja, Alzheimerjeve bolezni, upočasnjenega zdravljenja ran in psihosocialnega prikrajšanja; zdravljenje pulmonarne disfunkcije in odvisnosti od aparata za ventilacijo; oslabitev proteinskega kataboličnega odziva po veliki operaciji; zdravljenje sindromov slabe absorpcije, zmanjšanje kaheksije in proteinske izgube zaradi kronične bolezni, kot je rak ali AIDS; pospeševanje prirasta teže in proteinskega prirastka pri pacientih na TPN (popolno parenteralno hranjenje); zdravljenje hiperinzulinemije, vključno nezidioblastoze; adjuvantsko zdravljenje za indukcijo ovulacije ter za preprečevanje in zdravljenje čira na želodcu in dvanajstniku; za stimuliranje timusnega razvoja in preprečevanje s starostjo povezanega upadanja timusne funkcije; dodatna terapija za paciente na kronični hemodializi; zdravljenje imunosupresivnih pacientov in za povečanje odziva protiteles po cepljenju; izboljšanje mišične moči, mobilnosti, vzdrževanja debeline kože, metabolične homeostaze, renalne hemeostaze pri starejših rahlega zdravja;
stimulacija osteoblastov, preoblikovanja kosti in rasti hrustanca; zdravljenje nevroloških bolezni, kot je periferna in zaradi drog inducirana nevropatija, GuillianBarrejev sindrom, amiotropična lateralna skleroza, multipla skleroza, cerebrovaskularne nezgode in demielime bolezni; stimulacija imunskega sistema pri hišnih živalih in zdravljenje motenj staranja pri hišnih živalih; sredstvo za pospeševanje rasti pri živini; in stimulacija rasti volne pri ovcah.
Strokovnjaki bodo vedeli, da se sedaj uporablja številne spojine v prizadevanju, da bi zdravili zgoraj naštete bolezni ali terapevtske indikacije. Kombinacije teh terapevtskih sredstev, od katerih smo nekatere tudi omenili zgoraj s sekretagogi rastnega hormona v smislu predloženega izuma, bodo prispevale dodatne, komplementarne in pogosto sinergistične lastnosti za povečanje lastnosti pospeševanje rasti, anaboličnih lastnosti in zaželenih lastnosti teh različnih terapevskih sredstev. V teh kombinacijah so lahko terapevtska sredstva in sekretagogi rastnega hormona v smislu predloženega izuma neodvisno prisotni v območjih doz od ene stotinke do en-kratnika doznih nivojev, ki so učinkoviti, kadar te spojine in sekretagoge uporabimo posamič.
Kombinirano terapijo za inhibiranje kostne resorpcije, preprečevanje osteoporoze in povečanje celjenja kostnih zlomov lahko ilustriramo s kombinacijami bisfosfonatov in sekretagogov rastnega hormona v smislu predloženega izuma. Uporabo bisfosfonatov za te namene uporabe obravnava npr. Hamdy, N.A.T., Role of Bisfosfonates in Metabolic Bone Diseases. Trends in Endocrinol. Metab., 1993, 4, 19 - 25. Bisfosfonati s temi nameni uporabe so alendronat, tiludronat, dimetil - APD, rizedronat, etidronat, ΥΜ-175, klodronat, pamidronat in BM-210995. Glede na njihovo učinkovitost dajemo nivoje oralnih dnevnih doz bisfosfonata med 0,1 mg in 5 g in nivoje dnevnih doz sekretogogov rastnega hormona v smislu predloženega izuma med 0,01 mg/kg do 20 mg/kg telesne teže pacientom za učinkovito zdravljenje osteoporoze.
Spojine v smislu predloženega izuma lahko dajemo oralno, parenteralno (npr. intramuskularno, intraperitonealno, intravensko ali subkutano injekcijo ali vsadek), nazalno, vaginalno, rektalno, sublingvalno ali lokalno in jih lahko formuliramo v dozirne oblike, ustrezne za vsak način dajanja.
Trdne dozirne oblike za oralno dajanje so kapsule, tablete, pilule, praški in granule. Pri takih trdnih dozirnih oblikah pomešamo aktivno spojino z vsaj enim inertnim, far45 macevtsko sprejemljivim nosilcem, kot je saharoza, laktoza ali škrob. Take dozirne oblike lahko tudi vsebujejo, kot je normalna praksa, dodatne snovi, različne od inertnih razredčil, npr. maziva, kot magnezijev stearat. V primeru kapsul, tablet in pilul lahko dozirne oblike vsebujejo tudi pufre. Tablete in pilule lahko dodatno pripravimo z enteričnimi prevlekami.
Tekoče dozirne oblike za oralno dajanje so farmacevtsko sprejemljive emulzije, raztopine, suspenzije, sirupi, eliksirji, ki vsebujejo inertna razredčila, običajno uporabljena v stroki, kot vodo. Poleg takih inertnih razredčil lahko sestavki vsebujejo tudi adjuvante, kot omočila, emulgima in suspendirna sredstva ter sladila, sredstva za aromo in sredstva za odišavljenje.
Pripravki v smislu predloženega izuma za parenteralno dajanje so sterilne vodne ali nevodne raztopine, suspenzije ali emulzije. Primeri nevodnih topil ali vehiklov so propilen glikol, polietilen glikol, rastlinska olja, kot olivno olje in koruzno olje, želatina in injekcijski organski estri, kot etil oleat. Take dozirne oblike lahko tudi vsebujejo adjuvante, kot konzervima, omočilna, emulgirna in dispergirna sredstva. Lahko jih steriliziramo npr. s filtracijo skozi filter, ki zadrži bakterije, z vdelavo sterilizimih sredstev v sestavke, z obsevanjem sestavkov ali s segrevanjem sestavkov, lahko jih tudi izdelamo v obliki sterilnih trdnih sestavkov, ki jih lahko raztopimo v sterilni vodi ali kakem drugem sterilnem injekcijskem mediju tik pred uporabo.
Sestavki za rektalno ali vaginalno dajanje so prednostno supozitoriji, ki lahko vsebujejo poleg aktivne snovi ekscipiente, kot kakavovo maslo ali supozitorijski vosek.
Sestavke za nazalno ali sublingvalno dajanje tudi pripravimo s standardnimi znanimi ekscipienti.
Doziranje aktivne sestavine v sestavkih v smislu predloženega izuma lahko variiramo; vendar je potrebno, da je količina aktivne sestavine taka, da dobimo primemo dozirno obliko. Izbrano doziranje je odvisno od želenega terapevtskega učinka, od načina dajanja in od trajanja zdravljenja. Na splošno dajemo pacientom in živalim, npr. sesalcem, dozirne nivoje med 0,0001 do 100 mg/kg telesne teže dnevno, da dosežemo učinkovito sproščanje rastnega hormona.
Naslednji primeri so predvideni le za nadaljnjo ilustracijo in niso mišljeni kot omejevanje opisanega izuma.
PRIMER 1
N-[l(R)-[(2’,3’-dihidro-2-okso,spiro(piperidin-4.4’(lH)-kinolin]-ril)karbonil]-2(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: 1/2(120^^10^81^1^01111)3^241111^^023^0^8082^0(1^111^611:1^42 piperidin]
K raztopini 661 mg (2,31 mmolov) r-(t-butiloksi-karbonil)spiro[lH-inden-l,4’piperidina] [pripravljen po postopku Chambers, et al, J. Med. Chem., 1992,35, 2036] v 5,0 ml THF dodamo 5,8 ml (1,0 M THF, 2,9 mmolov) 9-BBN. Reakcijsko zmes segrevamo pri 70 °C, dokler TLC analiza ne pokaže, da je izhodni material porabljen. Raztopino koncentriramo in ostanek raztopimo v diklorometanu. Raztopino ohladimo na 0 °C in počasi 15 minut dodajamo 4,1 g (19,2 mmola) PCC. Reakcijsko zmes segrevamo do sobne temperature in nato do refluksa 30 minut. Raztopino nato razredčimo z etrom ter filtriramo skozi blazinico zmesi celita in florisila. S čiščenjem s flash kromatografijo (silikagel, heksan/etil acetat, 4:1) dobimo 326 mg (47 %) naslovne spojine.
H NMR (200 MHz, CDCL,): 7,75-7,60 (m, 2H), 7,50-7,44 (m, 2H), 4,30-4,15 (m, 2H), 2,85 (dt, 2H), 2,63 (s, 2H), 1,98 (dt, 2H), 1,53-1,40 (m, 2H), 1,49 (s, 9H).
Stopnja B: Spiro[lH-inden-1.4,-piperidin]-3(2H)-ontrifluoroacetamid
Raztopino intermediata iz stopnje A v zmesi trifluoroocetne kisline, diklorometana in anizola 1:1:0,5 mešamo 1 uro, nato koncentriramo in azeotropiramo iz toluena, da dobimo naslovno spojino.
H NMR (200 MHz, CDC13): 7,81-7,70 (m, IH), 7,62-7,45 (m, 2H), 7,22-7,15 (m, IH), 3,72-3,58 (m, 2H), 3,29-3,04 (m, 2H), 2,70 (s, 2H), 2,47 (dt, 2H), 1,85-1,75 (m, 2H).
/cu
Stopnja C: Trifluoroacetamid-2,3-dihidrospiro[inden-l,4’-piperidin
K raztopini 1,0 g (3,21 mmolov) intermediata, dobljenega v stopnji B, v 3,0 ml diklorometana dodamo 0,945 ml (6,74 mmolov) trietilamina in 50 mg DMAP ter končno 0,501 ml (3,53 mmolov) anhidrida trifluorocetne kisline. Reakcijsko zmes mešamo 3 ure in nato razredčimo z 20 ml diklorometana. Raztopino izperemo z vodo, posušimo nad magnezijevim sulfatom in koncentriramo. S čiščenjem s flash kromatografijo (silikagel, heksan/etil acetat 2:1) dobimo 568 mg (1,91 mmolov).
*H NMR (200 MHz, CDC13): 7,79-7,64 (m, 2H), 7,52-7,41 (m, 2H), 4,75-4,65 (m, IH), 4,22-4,08 (m, IH), 3,37 (dt, IH), 2,92 (dt, IH), 2,70 (s, 2H), 2,08 (dt, 2H), 1,711,62 (m, 2H).
Stopnja D: Trifluoroacetamid-3’,4’-dihidro-2-oksospiro[piperidin-4,4’-(lH)kinolin]
K raztopini 218 mg (3,36 mmolov) natrijevega azida v 0,285 ml vode in 1,5 ml kloroforma pri 0 °C dodamo 0,105 ml žveplove kisline. Reakcijsko zmes mešamo 2,5 ure, nato sloje ločimo in kloroformski sloj sušimo preko natrijevega sulfata. Raztopino hidrazojske kisline nato dodamo k raztopini 400 mg (1,34 mmolov) intermediata, dobljenega iz stopnje A. K tej raztopini dodajamo 5 minut 0,400 ml žveplove kisline. Reakcijsko zmes mešamo 20 minut, nato 45 minut pri 45 °C in končno 16 ur pri sobni temperaturi. Sloj žveplove kisline damo na led in nato naalkalimo s 50 %-nim natrijevim hidroksidom. Vodni sloj ekstrahiramo z etil acetatom. Etil acetatne ekstrakte posušimo nad natrijevim sulfatom in koncentriramo. S čiščenjem 100 mg-skega dela surovega produkta s flash kromatografijo (silikagel, diklorometan/etil acetat 1:1, nato pa 1:2) dobimo 50 mg (0,160 mmolov) materiala z visokim RF in 16 mg (0,051 mmolov) materiala z nizkim RF.
*H NMR (200 MHz, CDC13, visok RF): 8,9-8,7 (bs, IH), 7,40-7,21 (m, 2H), 7,18-7,04 (m, IH), 6,90-6,86 (m, IH), 4,52-4,36 (m, IH), 3,97-3,83 (m, IH), 3,52 (dt, IH), 3,22 (dt, IH), 2,79 (s,2H), 2,12-1,66 (m, 4H), Ή NMR (200 MHz, CDC13, nizek RF): 8,12 (dd,IH),7,60-7,52 (m, IH), 7,45-7,35 (m, 2H), 6,95 (bs, IH), 4,56-443 (m, IH), 4,033,96 (m, IH),3,64-3,62 (m, 2H), 3,49-3,35 (m, IH), 3,11 (dt, IH), 2,20-1,80 (m, 4H).
Stopnja E: 3,,4,-dihidro-2-oksospiro[piperidin-4,4’(lH)-kinolinj
Raztopino 49 mg (0,157 mmolov) materiala z visokim RF iz stopnje B v metanolu/vodi 4:1 s prebitkom kalijevega hidroksida mešamo preko noči. Raztopino koncentriramo in ostanku dodamo vodo in etil acetat. Sloje ločimo in vodni sloj ekstrahiramo z etil acetatom. Združene organske sloje sušimo nad natrijevim sulfatom in koncentriramo, da dobimo 31 mg (0,143 mmolov) naslovne spojine.
Stopnja F: N-[l(R)-[(2,,3,-dihidro-2-okso,spiro[piperidin-4,4’(lH)-kinolin]r-il)karbonil]-2-findol-3-il)etill-2-ill,l-dimetiletiloksikarbonillaminol-2-metilpropanamid
K raztopini 29 mg (0,134 mmolov) intermediata, dobljenega v stopnji C, 65 mg (0,167 mmolov) 2-amino-N-[-(R)-[2’,3’-dihidro-2-oksospiro[piperidin-4,4’-(l’H)kinolin]-l-il)karbonil]-2-(lH-indol-3-il)etil-2-metilpropanamida in 24 mg (0,174 mmolov) HOBT v diklorometanu dodamo 33 mg (0,174 mmolov) EDC. Reakcijsko zmes mešamo preko noči ter nato obdelamo in čistimo, kot je opisano za primer 1 (stopnja A) z eno izjemo, za kromatografijo uporabimo diklorometan/aceton. Dobimo 34,8 mg (0,059 mmolov) naslovne spojine.
Stopnja G: N-il(R)-i(2\3,-dihidro-2-okso,spiro[piperidin-4.4,(lH)-kinolin]l,il)karbonil]-2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Naslovno spojino (7,2 mg, 0,013 mmolov) dobimo iz intermediata iz stopnje D (14 mg, 0,023 mmolov) po postopku, opisanem za primer 1 (stopnja C) z eno izjemo. Hidrokloridno sol dobimo iz očiščenega prostega amina z dodatkom 4 N HCl v dioksanu v tem primeru.
1H NMR 400 MHz, CD3OD, 2:1 zmes rotomerov): 8,34 (d, 2/3 H), 8,27 (d, 1/3 H),
7.59 (d, 2/3 H), 7,55 (d, 1/3 H), 7,38 (d, 1/3 H), 7,33 (d, 2/3 H), 7,25 (d, 1/3 H), 7,186,98 (m, 4H), 6,85 (d, 1/3 H), 6,80 (d, 2/3 H), 6,68 (d, 2/3 H), 5,23-5,17 (m, IH), 4,224,19 (m, 2/3 H), 4,09-3,95 (m, 1/3 H), 3,62-3,59 (m, 1/3 H), 3,36-3,17 (m, 2 2/3 H), 3,08 (dt, 1/3 H), 2,75 (dt, 1/3 H), 2,69 (dt,2/3 H), 2,48 (dd, 2H), 1,93-1,75 (m, 2/3 H),
1.60 (s, 3H), 1,58 (s, 2H), 1,40-1,32 (m, IH), 1,51 (s, IH), 1,10 (m, 1/3 H), 1,02 (m, 2/3 H), 0,90 (dt, 2/3 H), 0,22 (dt, 2/3 H), FAB-MS: m/e 490 (m+1).
PRIMER 2
N-[l(R)-[(2\3>-dihidro-l-oksospiro[piperidin-4,4,(lH)-izokinolin]-ril)karbonill2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: [3,,4’-dihidro-l-oksospiro[piperidin-4,4’-(lH)-izokinolinj
Naslovno spojino (11,3 mg, 0,036 mmolov) pripravimo iz intermediata z nizkim RF iz primera 1 (stopnja D) (16,0 mg, 0,051 mmolov) po postopku, opisanem za primer 13 (stopnja D).
Ή NMR (200 MHz, CDC13): 8,12 (dd, IH), 7,60-7,52 (m, IH), 7,45-7,35 (m, 2H), 6,95 (bs, IH), 4,56-4,43 (m,IH), 4,03-3,96 (m, IH), 3,64-3,62 (m, 2H), 3,49-3,35 (m, IH),3,11 (dt, IH), 2,20-1,80 (m, 4H).
Stopnja B: N-il(R)-[(2\3,-dihidro-l-okso.spiro[piperidin-4,4’(lH)-izokinolin] l,il)-karbonill-2-(indol-3-il)etill-2-[[l,l-dimetiletiloksikarbonil]aminol-2-metilpropanamid
Naslovno spojino (13,6 mg, 0,023 mmolov) pripravimo iz intermediata iz stopnje A (10,0 mg, 0,032) in 2-amino-N-[l(R)-[2’,3’-dihidro-2-oksospiro[piperidin-4,4’(rH)-kinolin]-l-il)karbonil]-2-(lH-indol-3-il)etil-2-metilpropanamida (21,6 mg, 0,055 molov) po postopku, opisanem za primer 13 (stopnja D).
Stopnja C: N-l(R)-[(2,,3,-dihidro-l-oksospiro[piperidin-4,4,(lH)-izokinolinll’il)karbonil]-2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Raztopino 10,1 mg (0,017 mmolov) intermediata, dobljenega iz stopnje B, v 1,5 N HCI v etil acetatu mešamo preko noči ter nato koncentriramo in azeotropiramo iz metanola, da dobimo 8,3 mg (0,015 mmolov) naslovne spojine.
Ή NMR (400 MHz, CD3OD, 2:1 zmes rotomerov): 7,94 (d, 1/3 H), 7,87 (d, 2/3 H), 7,62-7,53 (m, 2H), 7,40-7,33 (m, 2 1/3 H), 7,18-7,10 (m, 3H), 6,75 (d, 2/3 H), 5,22-5,18 (m, 2/3 H), 5,15 (t, 1/3 H), 4,27-4,23 (m, 2/3 H), 4,14-4,10 (m, 1/3 H), 3,68-3,61 (m, IH), 3,25-3,18 (m, 4H), 3,10 (dt, 2/3 H), 2,87 (dt, 1/3 H), 2,70 (dt, 1/3 H), 2,65 (dt, 2/3 H), 1,88 (dt, 1/3 H), 1,75 (dt, 1/3 H), 1,62 + 1,61 + 1,59 + 1,51 (s, 6H skupno), 1,571,44 (m, IH), 1,38-1,35 (m, 1/3 H), 1,15-1,10 (m, 1/3 H), 0,929 (dt, 2/3 H), 0,19 (dt, 2/3 H), FAB-MS: m/e 490 (m+l).
PRIMER 3
N-[l(R)-i(4H-l-oksospiro[3H-2-benzopiran-3.4,-piperidin]-l,-il)karbonil]-2(indol-3-il)-etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: Spiro[3H-2-benzopiran-3,4’^piperidinl-l(4H)-on
K suspenziji 10 %-nega paladija na oglju (5 mg) v etanolu (5 ml) dodamo Γbenzilspiro[3H-2-benzopiran-3,4’-piperidin]-l-(4H)-on (20 mg, 0,058 mmolov). (Hashigaki et al Chem. Pharm. Bull.32 str. 3561-3568 (1984)). Hidrogeniranje izvajamo pri sobni temperaturi pri tlaku 1 bara. Reakcijsko zmes mešamo 2 uri v atmosferi dušika, dokler TLC analiza ne pokaže, da je reakcija končana. Katalizator odstranimo z vakuumsko filtracijo skozi celit 545 in filtrat koncentriramo, da dobimo želeni produkt (12,4 mg, 98,5 %).
FAB-MS izrač.: za C13H15NO2 217; ugot.: 218 (M+H, 100 %).
Stopnja B: N-[l(R)-[(4H-l-oksospiro[3H-2-benzopiran-3.4,-piperidin]-l’-il)karbonill-2-(indol-3-il)-etil]-2-[[(Ll-dimetiletiloksi)karbonil]aminol-2-metilpropanamid
Raztopino intermediata iz stopnje A (12 mg, 0,055 mmolov) in a(R)-[[2-[[(l,l-dimetiletoksi)karbonil]amino]-2,2-dimetil-l-oksoetil]amino]-lH-indol-3-propanojske kisline (27 mg, 0,058 mmolov) v diklorometanu ohladimo na 0°C in nato dodamo HOBT (2mg, 0,015 mmolov), N-metil-morfolin (8,8 mg; 0,084 mmolov) in EDC (22 mg, 0,12 mmolov). Reakcijsko zmes mešamol uro pri sobni temperaturi, dokler s TLC analizo ne ocenimo, da je reakcija končana. Raztopino nato izperemo z nasičenim natrijevim kloridom in sušimo preko brezvodnega magnezijevega sulfata. Raztopino nato filtriramo in koncentriramo. S čiščenjem s silikagelno kromatografijo dobimo naslovno spojino (15 mg, 47 %).
FAB-MS izrač. za C^H^Og 588; ugot.: 589 (M+H, 39 %) [489 M+H-100, 42 %) izguba t-Boc skupine].
Stopnja C: N-[l(R)-i(4H-l-oksospiro[3H-2-benzopiran-3.4,-piperidinir-il)karbonill-2-(indol-3-il)-etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Raztopino intermediata iz stopnje B (12 mg, 0,02 mmola) v metanolu (3 ml) ohladimo na 0 °C. Ob mešanju nato počasi zmesi dodamo koncentrirano klorovodikovo kislino (3 ml). Reakcijsko zmes mešamo 30 minut, dokler TLC analiza ne pokaže, da je reakcija končana. Raztopino nato koncentriramo večkrat iz toluena. Sol klorovodikove kisline uporabimo brez čiščenja (10,15 mg, 96 %).
JH NMR (400 MHz, CD3OD): Produkt obstoji kot zmes dveh konformerov (2:1): δ 7,977, 7,905 (2d, 2/3 H), 7,604-6,994 (m, 8H), 5,134-5,093 (m, 1 2/3 H), skrit 5,0254,715 (m, 2H), 4,191-4,114 (m, 1/3 H), 3,637-3,587 (m, IH), 3,344-3,299 (m, IH), 3,188-3,124 (m, IH), 3,030 (s, 2/3 H), (dt, 2,81 Hz, 9,4 Hz, 1/3 H), 2,536 (q, IH), 2,301 (t, 1/3 H), 1,590,1,571 (2s, 6H), 1,539-1,483 (m, 2/3 H), 1,275 (s, 6H), 1,259-1,206 (m, 2/3 H), (m, IH), 0,633-0,545 (m, 1/3 H), -0,277 -0,361 (m, 1/3 H).
FAB-MS izrač. za C2gH32N4O4 488; ugot. 489 (M+H, 65 %).
PRIMER 4
N-ri(R)-[(4’,5’-dihidro-4,-oksospiro[piperidin-4,6’-[6Hltieno[2.3b]tiopiran]l-il)karbonill-2-(indol-3-il)etil1-2-amino-2-propanamid hidroklorid
Stopnja A: N-ri(R)-f(4,,5>-dihidro-4,-oksospiroipiperidin-4,6>-[6Hltienoi2.3b]tiopiranl-l-il)karbonill“2-(indol-3-il)etill-2-([(l,l-dimetiletiloksi)karbonil1amino1-2-propanamid
Pripravljen po postopku, opisanem v primeru 3, stopnja B. Spiro[piperidin-4,6’[6H]tieno[2,3-b]tiopiran]-4’-(5’H)-on hidroklorid, (10 mg, 0,044 mmolov) EP objava 90313262.9, a(R)-[[2-[[(l,l-dimetiletoksi)karbonil]amino]2,2-dimetil-loksoetil]amino]-lH-indol-3-propanojska kislina (20 mg, 0,051 mmolov), HOBT (1 ekv.), N-metilmorfolin (0,01 ml, 0,093 mmolov) in EDC (20 mg, 0,10 mmolov). Reakcijski čas: 5 ur. Dobitek: 22 mg (98 %).
XH NMR (400 MHz, CDC13): produkt obstoji kot zmes dveh konformerov (2:1): δ 8,240 (s, 2/3 H), 8,063 (s, 1/3 H), 7,680 (d, 2/3 H), 7,628 (d, 1/3 H), 7,416-6,962 (m, 5H), 5,279-5,162 (m, IH), 4,878-4,763 (m, IH), 4,285 (d, 2/3 H), 3,376 (d, 2/3 H), 3,342-3,196 (m, IH), 3,129-2,973 (m, 1 2/3 H), 2,715-2,662 (m, IH), 2,285 (d, 2/3 H), 2,139 (d, 2/3 H),1,683-1,567 (m, 8 1/3 H), 1,503, 1,454, 1,427, 1,409 (4s, 12H), 1,2781,217 (m, 2H), 0,708-0,628 (m, 2/3 H).
FAB-MS izrač. za 610; ugot. 611 (M+H, 32 %).
Stopnja B: N-[l(R)-i(4,.5>-dihidro-4>-oksospiro[piperidin-4.6,-[6H]tieno[2.3-bjtiopiran]-l-il)karbonill-2-(indoI-3-il)etil1-2-amino-2propanamid hidroklorid
Pripravljen po postopku, opisanem v primeru 15, stopnja C. Intermediat iz prejšnje stopnje (200 mg, 0,033 mmolov) in metanol (3 ml). Reakcijski čas: 1,5 ure. Dobitek: 12,2 mg (69%).
1H NMR (400 MHz, CD3OD): Produkt obstoji kot zmes dveh konformerov (2:1): S 7,562-7,022 (m, 6H), 5,513-5,446 (m, 6 2/3 H), 5,099 - 5,003 (m, IH), skrit 4,914 4,726 (m, 2/3H), 4,178 (d, IH), 3,624 (d, IH), 3,337-3,043 (m, 2 2/3 H), 2,760-2,660 (m, IH), 2,324 (d, IH), 2,234 (d, IH), 1,597,1,587, 1,574,1,510 (4s, 4H), 1,364-1,225 (m, 3H), 0,562-0,482 (m, 2/3 H), -0,311, -0,391 (m, 2/3 H).
FAB-MS izrač. za C26H30N4O3S2 510; ugot. 511 (M+H, 51 %).
PRIMER 5
N-[l(R)-[(3-hidrospiro[lH-izobenzofuran-1.4>-piperidin1-l>-il)karbonill-2-(indol3-il)etilj -2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: N-[l(R)-[(3-hidrospiro[lH-izobenzofuran-l,4’-piperidin]-l’il)-karbonil]-2-(indol-3-il)etil)-2-ii(l,l-dimetiletiloksi)karbonil]amino]-2-metilpropanamid
Pripravljen po postopku, opisanem v primeru 3, stopnja B. 3-hidrospiro[lHizobenzofuran-l,4’-piperidin] hidroklorid (10 mg, 0,044 mmolov), (Bauer et al US 3985889) a(R)-[[2-[[(l,l-dimetiletoksi)karbonil]amino]-2,2-dimetil-l-oksoetil]amino]-lH-indol-3-propanojska kislina (20 mg, 0,051 mmolov), HOBT (1 ekv.), N-metil-morfolin (0,01 ml, 0,093 mmolov) in EDC (20 mg, 0,10 mmolov). Reakcijski čas: 5 ur. Dobitek: 21 mg (81 %).
Produkt obstoji kot zmes dveh konformerov (1:1):
(XH NMR CDC13): δ 8,096 (s, IH), 7,689 (t, IH), 7,341 (d, IH), 7,244-6,611 (m, 6H), 5,288-5,202 (m, 1/2 H), 4,945 (br, s, 1/2 H), 4,161 (d, 1/2 H), 4,003 (d, 1/2 H), 3,338 (d, 1/2 H), 3,280-3,115 (m, 2H), 3,005-2,861 (m, IH), 2,751 (d, 1/2 H), 2,416 (d, 1/2 H), 1,787-1,549 (m 3 1/2 H), 1,491, 1,461, 1,421, 1,410 (4S, 12 H), 1,281-1,212 (m,
3Η), 0,857 (t, 6H).
FAB-MS izrač. za 560; ugot. 561 (M+H, 33 %).
Stopnja B: N-il(R)-f(3-hidrospiro[lH-izobenzofuran-l,4,-piperidin]-l,-il)karbonill-2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metil]propanamid hidroklorid
Pripravljen po postopku, opisanem v primem 3, stopnja C. Intermediat iz prejšnje stopnje (20 mg, 0,04 mmoli) in metanol (3 ml). Reakcijski čas: 1 ura. Dobitek: 18,2 mg (93,5 %).
Td NMR (400 MHz, CD3OD): Produkt obstoji kot zmes dveh konformerov (1:1): δ 7,621-6,568 (m, 8H), 5,198-5,136 (m, IH), skrit 4,856 (br, s, IH), 4,098-4,045 (m, IH), 3,611-3,499 (m, IH), 3,348-3,110 (m, 5 1/2 H), 2,987-2,903 (m, 2 1/2 H), 2,618 (d, 1/2 H), 2,508 (d, 1/2 H), 1,691-1,473 (m, 8H), 1,271 (br,s, 2 1/2 H), 0,081-0,006 (m, 1/2 H)·
FAB-MS izrač. za C^H^N^ 460; ugot.: 461 (M+H, 96 %).
PRIMER 6
N-[l(R)-[(3,4-dihidro-6-metil-4-oksospiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidinl-r-il)karbonil1-2-(indol-3-il)etilj-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: N-ri(R)-f(3,4-dihidro-6-metil-4-oksospiro[2H-l-benzopiran-2,4’piperidinl -1 ’-il)karbonilI-2-(indol-3-il)etill -2- [[(1,1-dimetiletiloksi)karbonillamino1-2-metilpropanamid
Pripravljen po postopku, opisanem v primem 3, stopnja B. 3,4-dihidro-6-metilspiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidin]-4-on hidroklorid (20 mg, 0,058 mmolov), (Hashigaki et al Chem. Pharm.Bull. 32 str. 3561-3568 (1984)) a(R)-[[2-[[(l,ldimetiletoksi)karbonil]amino]-2,2-dimetil-l-oksoetil]amino]-lH-mdol-3propanojska kislina) (32 mg, 0,082 mmolov), HOBT (1 ekv.), N-metil morfolin (0,03 ml, 0,28 mmolov) in EDC (40 mg, 0,21 mmolov). Reakcijski čas: 8 ur. Dobitek: 34 mg (86 %).
’H NMR (400 MHz, CDC13): Produkt obstoji kot zmes dveh konformerov (2:1): δ 8,154 (s, 2/3 H), 8,088 (s, 1/3 H), 7,626 (d, 2/3 H), 7,591-7,060 (m, 6H), 6,725-6,688 (m, 2/3 H), 5,265-5,168 (m, 2/3 H), 4,985-4,900 (m, 2/3 H), 4,289-4,178 (m, 2/3 H), 3,469 (s, 2/3 H), 3,229-3,064 (m, 2 2/3 H), 2,730 (t, 2/3 H), 2,562 (s, 2 1/3 H), 2,251 (d,
1/3 Η), 2,158 (d, 2/3 Η), 2,068 (d, 2/3 Η), 1,680-1,541 (m, 3Η), 1,502, 1,475, 1,454, 1,427,1,402 (5s, 15H), 1,292-1,226 (m, 3H), 0,616-0,532 (m, 1/3 H), -0,495, -0,590 (m, 1/3 H).
FAB-MS izrač. za C34H42N4O6 602; ugot. 603. (M+H, 37 %).
Stopnja B: NzQ£R)z[3J42dihidro^+netiM<!ksospiro[2H=Lbenzo2iran22142 piperidin1-r-il)karbonil1-2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Pripravljen po postopku, opisanem v primeru 3, stopnja C. Intermediat iz prejšnje stopnje (20 mg, 0,029 mmolov) in metanol (3 ml). Reakcijski čas: 3 ure. Dobitek: 17,5 mg (96,5 %).
1H NMR (400 MHz, CDC13): Produkt obstoji kot zmes dveh konformerov (2:1): δ 7,550-6,768 (m, 7 1/3 H), 5,089-5,016 (m, 2H), skrit 4,872-4,679 (m, IH), 4,144-4,093 (m, IH), 3,569-3,485 (m, IH), 3,321-3,081 (m, 2 1/3 H), 2,716-2,600 (m, 1 1/3 H), 2,253, 2,236, 2,222, 2,196, 2,190, 2,155 (6S, 4H), 1,569, 1,541, 1,475, (3s, 7H), 1,3881,237 (m, 3 2/3 H), 0,881-0,808 (m, 2H), 0,434-0,420 (m, 2/3 H), 0,427-0,436 (m, 2/3 H)·
FAB-MS izrač. za C^N// 502; ugot. 503 (M+H, 97 %).
PRIMER 7
N-il(R)-f(3,4-dihidro-4-oksospirof2H-l-benzopiran-2,4’-piperidin]-r-il)karbonil] -4-fenilbutil-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: a(R)-li2-l[(l.l-dimetiletiloksi)karbonil]amino]-2,2-dimetil-loksoetillaminol-4-fenilbutanoiska kislina, fenilmetilester
Diklorometansko raztopino 2(R)-amino-4-fenil-butanojske kisline-fenilmetilestrasoli toluensulfonske kisline (6,0 g, 13 mmolov) ekstrahiramo z razredčeno raztopino natrijevega hidroksida. Organski sloj sušimo preko MgSO4 in uparimo, da dobimo ostanek. Raztopini ostanka, N-terc.butiloksikarbonil-a-metilalanina (3,21 g, 15,8 mmolov), HOBT (1,7 g, 13 mmolov) v diklorometanu dodamo EDC (5,1 g, 26 mmolov) in zmes mešamo preko noči pri sobni temperaturi. Zmes nato zlijemo v zmes slanice in 3 N HC1 ter ekstrahiramo z etil acetatom. Organski ekstrakt posušimo, uparimo in čistimo s flash kolonsko kromatografijo ob eluiranju s 40 %-nim etil acetatom v heksanu, da dobimo želeni produkt (5,47 g, 91 %).
Ή NMR (400 MHz, CDC13): δ 7,34-7,07 (m, 10H), 5,15 (d, 1^=12 Hz, IH), 5,08 (d, JBA = 12 Hz, IH), 4,86 (br, s, IH), 4,67-4,62 (m, IH), 2,61-2,53 (m, 2H), 2,18-2,14 (m, IH), 2,01-1,96 (m, IH), 1,47 (s, 3H), 1,43 (s, 3H), 1,41 (s, 9H).
Stopnja B: o:(R)-[[2-[[(l,l-dimetiletiloksi)karbonil]amino]-2,2-dimetil-loksoetil] amino! -4-fenilbutanoj ska kislina
Intermediat iz prejšnje stopnje (5,37 g, 11,8 mmolov) hidrogeniramo pri sobni temperaturi in 1 baru H2 ob uporabi 10 %-nega paladija na oglju kot katalizatorja (0,5 g) 2 uri. Katalizator filtriramo skozi celit in uparimo, da dobimo naslovno spojino (4,22 g, 100%)·
Ή NMR (200 MHz, CD3OD): δ 7,804-7,143 (m, 5H), 4,402-4,359 (m, IH), 2,672 (dt, 2 Hz, 6 Hz, 2H), 2,126-2,004 (m, 2H), 1,483, 1,444 (2s, 5H), 1,423 (s, 9H), 1,412 (s, 3H).
Stopnja C: N-fl(R)-[(3,4-dihidro-4-oksospiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidin]l’-il)karbonil]-4-fenilbutil-2-[i(l,l-dimetiletiloksi)karbonillamino] -2-metilpropanamid
Raztopino spiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidin]-4(3H)-ona (20 mg, 0.0.776) in intermediata iz prejšnje stopnje (31 mg, 0,085 mmolov) v diklorometanu ohladimo na 0 °C in nato dodamo HOBT (1 ekv.), N-metilmorfolin (0,1 ml,0,90mmolov) in EDC (33 mg,0,17 mmolov). Reakcijsko zmes mešamo pri sobni temperaturi 3 ure, dokler s TLC analizo ne ocenimo, da je reakcija končana. Raztopino nato izperemo z nasičenim natrijevim kloridom in sušimo preko brezvodnega magnezijevega sulfata. Raztopino nato filtriramo in koncentriramo. S čiščenjem s silikagelno kromatografijo dobimo naslovno spojino (41,6 mg, 95,5 %).
Tl NMR (400 MHz, CDC13): Produkt obstoji kot zmes dveh konformerov (1:1): δ 7,853-6,925 (m, 9H), 4,936-4,868 (m, 2H), 4,355-4,265 (mt, IH), 3,605-3,565 (m, 1/2 H), 3,388-3,318 (m, IH), 3,022-2,965 (m, IH), 2,686-2,608 (m, 3H), 2,067-1,948 (m, 2 1/2 H), 1,871-1,810 (m, IH), 1,580 (br, s, 2H), 1,503, 1,488, 1,455, 1,411, 1,403 (5s, 15H), 1,292-1,227 (m, 2H).
Stopnja D: N-[l(R)-[(3,4-dihidro-4-oksospiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidinjr-il)karbonil]-4-fenilbutil-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Raztopino intermediata iz prejšnje stopnje (40 mg, 0,071 mmolov) v etil acetatu ohladimo na 0 °C. Nato plinski klorovodik uvajamo v raztopino v mehurčkih 2 minuti. Reakcijsko zmes mešamo 15 minut, dokler TLC ne pokaže, da je reakcija končana. Raztopino koncentriramo in sol klorovodikove kisline (33,8 mg, 95,5 %) uporabimo brez čiščenja.
NMR (400 MHz, CD3OD): Produkt obstoji kot zmes dveh konformerov (1:1): δ 8,271-8,229 (m, IH), 7,799 (dd, 1 3/4 Hz, 7,84 Hz, IH), 7,545 (q, IH), 7,289-7,006 (m, 7H), 4,737-4,703 (m, IH), 4,277 (d, 1/2 H), 4,186 (d, 1/2 H), 3,555-3,292 (m, 1 1/2 H), 3,187-3,068 (m, IH), 2,809-2,724 (2m, 2H), 2,633-2,563 (m, IH), 2,085-1,927 (m, 3 1/2 H), 1,645,1,639,1,616 (3s, 6H), 1,677-1,603 (m, 3H), 1,316-1,279 (m, 2H).
FAB-MS izrač. za C2?H33N3O4 463; ugot. 464 (M+H, 54 %).
PRIMER 8
N-[l(R)-[(3,4-dihidro-4-oksospiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidin]-l,-il)karbonil1-2-(fenilmetiloksi)etil1-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: N-il(R)-[3,4-dihidro-4-oksospiro[2H-l-benzopiran-2,4,-piperidin1r-il)karbonil1-2-(fenilmetiloksi)etil1-2-r((Ll-dimetiletiloksi)karbonil1amino]-2-metilpropanamid
Raztopino spiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidin]-4(3H)-ona (20 mg, 0,776) in a(R)-[[2-[[(l,l-dimetiletiloksi)karbonil]amino]-2,2-dimetil-l-oksoetil]amino]3(fenilmetiloksi)-3-propanojske kisline (32 mg, 0,085 mmolov) v diklorometanu ohladimo na 0 °C in nato dodamo HOBT (1 ekv.), N-metilmorfolin (0,1 ml, 0,90 mmolov) in EDC (33 mg, 0,171 mmolov). Reakcijsko zmes mešamo 4 ure pri sobni temperaturi, dokler s TLC analizo ne ocenimo, da je reakcija končana. Raztopino nato izperemo z nasičenim natrijevim kloridom in sušimo preko brezvodnega magnezijevega sulfata. Raztopino nato filtriramo in koncentriramo. S čiščenjem s silikagelno kromatografijo dobimo naslovno spojino (40,8 mg, 91 %).
FAB-MS izrač. za C32H41N3O7 579; ugot. 580 (M+H, 23 %), [ugot. 480 (M+H-100,
%), izguba t-Boc zaščitne skupine].
Stopnja B: N-[l(R)-[(3.4-dihidro-4-oksospiro[2H-l-benzopiran-2,4’-DiDeridin1l’-il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Pripravljen po postopku, opisanem v primeru 3, stopnja D. Intermediat iz prejšnje stopnje (35 mg, 0,061 mmolov) in etil acetat (10 ml). Reakcijski čas: 1 ura. Dobitek: 30,2 mg (97 %).
*H NMR (400 MHz, CD3OD): Produkt obstoji kot zmes dveh konformerov (1:1): δ 7,800-7,792- (m, IH), 7,533-7,578 (m, IH), 7,395-7,285 (m, 5H), 7,088-7,015 (m, 2H), 5,551-5,107 (m, IH), skrit 4,921-4,816 (m, IH), 4,535-4,518 (2s, 1 1/2 H), 4,295 (d, IH), 3,911-3,803 (m, IH), 3,717-3,703 (2s, 11/2 H), 3,499-3,400 (m, IH), 3,309-3,291 (4s, 3 1/2 H), 3,211-3,051 (m,IH), 2,789 (q, 1/2 H), 2,633-2,513 (AB q, IH), 2,060 (t, IH), 1,897 (d, 1/2 H), 1,821-1,725 (m, 1/2 H), 1,626-1,567 (6s, 6H), 1,564-1,410 (m, 1/2 H), 1,301 (br, s, 1 1/2 H). FAB-MS izrač. za C27H33N3O5 479; ugot. 480 (M+H, 100 %).
PRIMER 9
N-il(Rl-r(6-kloro-3H-4-oksospiro[lH-kinazolin-2,4’-piperidin]-r-il)karbonil]2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: N-il(R)-[(6-kloro-3H-4-oksospiro[lH-kinazolin-2<4,-piperidin1-l’il)karbonil1-2-(indol-3-il)etil1-2-i[(l,l-dimetiletiloksi)karbonil1aminol-2-metilpropanamid
Pripravljen po postopku, opisanem v primeru 3, stopnja B. 6-klorospiro(piperidin4,2(l’H)-kinazolin)-4(3H)on hidroklorid (50 mg, 0,17 mmolov), a(R)-[[2-[[(l,l-dimetiletoksi)karbonil]amino]2,2-dimetil-l-oksoetil]amino]-lH-indol 3-propanojska kislina (81 mg, 0,21 mmolov), HOBT (1 ekv.), N-metilmorfolin (1 ekv.) in EDC (80 mg, 0,42 mmolov). Reakcijski čas: 3 ure. Dobitek 64,5 mg (60 %).
FAB-MS izrač. za C32H39N6O5a 623; ugot.624 (M+H, 29 %).
Stopnja B: N-ilfR)-[f6-kloro-3H-4-oksospiro[lH-kinazolin-2,4’-piperidin]-l’il)karbonil1-2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Pripravljen po postopku, opisanem v primeru 7, stopnja D. Intermediat iz prejšnje stopnje (50 mg, 0,08 mmolov). Reakcijski čas: 1 ura. Dobitek: 40mg (89,5 %). FAB-MS izrač. za C^N^Cl 523; ugot. 523 (M+H, 71 %).
PRIMER 10
N-[l(R)-[(l,4-dihidro-4-fenil-l-oksospiro[3H-2-benzopiran-3,4’-piperidinl-l,-il)karbonil]-2-(indol-3-il)-etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: l,4-dihidro-4-fenilspiro(3H-2-benzopiran-3,4,-piperidin)-l-on
Pripravljen po postopku, opisanem v primeru 3, stopnja A, iz l’-benzil-l,4-dihidro-4fenilspiro(3H-2-benzopiran-3,4’-piperidin)-l-on hidroklorida, (8 mg, 0,019 mmolov) in etanola (5 ml). Reakcijski čas: 45 minut. Dobitek: 5,5 mg (98,5 %).
FAB-MS izrač. za C19H19NO2 293; ugot. 294 (M+H, 93 %).
Stopnja B: N-(l(R)-[(l,4-dihidro-4-fenil-l-oksospiro[3H-2-benzopiran-3,4’piperidin1-l’-il)karbonil]-2-(indol-3-il)etil]-2-[[(l,l-dimetiletiloksi)karbonil1amino1-2-metilpropanamid
Pripravljen po postopku, opisanem v primeru 3, stopnja B. Intermediat iz prejšnje stopnje (5 mg, 0,017 mmolov), a(R)-[[2-[[(l,l-dimetiletoksi)karbonil]amino]2,2-dimetil-l-oksoetil]amino]lH-indol-3-propanojska kislina (12 mg, 0,030 mmolov), HOBT (1 ekv.), N-metil morfolin (1 ekv.) in EDC (12 mg, 0,060 mmolov). Reakcijski čas: 5 ur. Dobitek: 9,2 mg (86 %).
'H NMR (400 MHz, CD3OD): Produkt obstoji kot zmes dveh konformerov (1:1): δ 8,185-8,072 (m, 1 1/2 H), 7,885 (s, 1/2 H), 7,710-6,813 (m; 12 H), 5,331-5,309 (m; 1/2 H), 5,198-5,111 (m, 1/2 H), 4,710-4,605 (m, 1/2 H), 4,300-4,235 (m, 1/2 H), 3,876 (d, 1/2 H), 3,719-3,617 (m, IH), 3,355-3,046 (m; 1 1/2 H), 2,746 (q, 1/2 H), 2,006-1,960 (m, IH), 1,678-1,574 (m, 2H), 1,438, -1,368 (m, 6H), 1,257,1,240,1,227, 1,208, 1,186 (5s, 5H).
Stopnja C: N-fliR)-[(T,4-dihidrO-4-fenil-l-oksospirof3H-2-benzopiran-3,4’piperidin]-lMl)karbonil]-2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Pripravljen po postopku, opisanem v primeru 7, stopnja D. Intermediat iz prejšnje stopnje (9 mg, 0,015 mmolov) in etil acetat (10 ml). Reakcijski čas: 1 ura. Dobitek: 8 mg (97 %).
*H NMR (400 MHz, CDC13): Produkt obstoji kot zmes dveh konformerov (2:1): δ 8,347-8,333 (m, IH), 8,043 (t, 1/2 H), 7,662-6,869 (m, 12 1/2H), 5,355-5,315 (m, 1/2 H), 5,108-5,061 (m, 1/2 H), skrit 4,897-4,768 (m,1/2 H), 4,174-4,103 (m, 1/2 H), 3,717-3,526 (m, IH), 3,387-3,237 (m, 2H), 3,179-3,067 (m, IH), 2,660 (q, 1/2 H), 2,044-1,981 (m, IH), 1,655-1,212 (m, 11H), 0,964-0,820 (m, 2 1/2 H), 0,575-0,423 (m, 1/2 H), -0,271- -0,448 (m, 1/2 H).
FAB-MS izrač. za C34H36N4O4 564; ugot. 565 (M+H,25 %).
PRIMER 11
N-[l(R)-[(3,4-dihidro-4-oksospiro[2H-l-benzopiran-2.4,-piperidin]-l>-il)karbonil]-2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: N-[l(R)-[(3.4-dihidro-4-oksospiro[2H-l-benzopiran-2.4>piperidin]-l,-il)karbonil]-2-(indol-3-il)etil]-2-[[(l,ldimetiletiloksi)karbonillamino]-2-metilpropanamid
Ta intermediat pripravimo iz a(R)-[[2-[[(l,l-dimetiletoksi)karbonil]amino]-2,2dimetil- l-oksoetil]amino]-lH-indol-3-propanojske kisline (903 mg, 2,3 mmolov) in spiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidin]-4(3H)-ona, hidroklorida (535 mg, 2,11 mmolov) (Elliott, J, et al, J. Med. Chem. 1992, 35, 3973-3976) po postopku, opisanem v primeru 25, stopnja A (1,25 g, 100 %).
XH NMR (400 MHz, CDC13): spojina obstoji kot zmes konformerov (razmerje 2:1): δ 8,42, 8,31 (2s, IH), 7,79, 7,75 (2dd, 1,6 Hz, 7,8 Hz, IH), 7,66, 7,56 (2d, 8,0 Hz, 7,6 Hz, IH), 7,47-6,78 (m, 8H), 5,37-5,15 (m, IH), 4,98, 4,94 (2br. s, IH), 4,24, 4,18 (2br. d, IH), 3,40,3,32 (2br. d, 2H), 3,23-3,02 (m, 3H), 2,73 (dt, 3Hz, 13Hz, IH), 2,47 (d, 2Hz, 1/3 H), 2,17 (d, 16,6 Hz, 2/3 H), 2,08 (d, 16,7 Hz, 2/3 H), 1,84 (br. s, 2H), 1,70-1,60 (br. dd, IH), 1,3-1,2 (br. dd, IH), 0,56 (dt, 4,6,13,8 Hz, 2/3 H), -0,55 (dt, 4,6,13,8 Hz, 2/3 H).
FAB-MS: izrač. za C^H^N^, 588; ugot. 595 (M+Li, 100 %).
Stopnja B: N-[l(R)-[(3,4-dihidro-4-oksospiro[2H-l-benzopiran-2,4?-piperidin]l,-il)karbonil]-2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
K mešani raztopini intermediata, pripravljenega v stopnji A (1,0 g, 1,7 mmolov) v metanolu (5 ml) dodamo koncentrirano klorovodikovo kislino (5 ml). Reakcijsko zmes mešamo 1 uro pri sobni temperaturi, dodamo 20 ml toluena in zmes uparimo v vakuumu. Ta postopek 2-krat ponovimo, da dobimo naslovno spojino (0,87 g, 98 %).
NMR (400 MHz, CD3OD): spojina obstoji kot zmes konformerov (razmerje 2:1); δ 7,76-6,90 (m, 10 H), 5,11 (dd, 5,11 Hz, IH), 4,16, 4,11 (2 td, 2,0 Hz, 14 Hz, IH), 3,60, 3,33 (2md, 14 Hz, IH), 3,25-3,10 (m, 2H), 2,92-2,67 (m 2H), 2,30-2,17 (AB, centriran pri w.23, 16,7 Hz, 2H), 2,85-2,80 (br, d, 1/3 H), 1,60, 1,59 (2s, 6H), 1,701,50 (m, skrit), 1,40-1,30 (md, IH), 0,47 (dt, 5,5, 13,5 Hz, 2/3 H), -0,38 (dt, 5,5, 13,5 Hz, 2/3 Hz).
FAB-MS: izrač. za C^H^N^, 488; ugot. 489 (M+H, 100 %).
PRIMER 11A
N-flfR)-|Y3,4-dihidro-4(RS)-hidroksispiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidin]-ril)karbonil]-2-(indol-3-il)etil1-2-amino-2-metilpropanamid
K mešani raztopini naslovne spojine v primeru 11 (55 mg, 0,09 mmolov) v metanolu (5 ml) pri 0 °C dodamo natrijev borohidrid (16 mg, 0,4 mmole) v več delih. Po mešanju pri 0 °C 30 minut zmes uparimo do suhega, raztopimo v diklorometanu in čistimo s flash kolono ob eluiranju z 10 %-nim metanolom v diklorometanu, da dobimo naslovno spojino (35 mg, 78 %).
JH NMR (400 MHz, CD3OD): spojina obstoji kot zmes 2 diastereomerov (1:1) in vsak izomer obstoji kot dva konformera (razmerje 2:1): δ 7,89-6,66 (m, 9H), 5,14-5,06 (m, IH), 4,52-4,45 (2 dd, IH), 4,22-4,10 (2 md, IH), 3,58-3,44 (2 md, IH), 3,25-3,14 (m, 2H), 3,10-2,59 (4 dt, IH), 2,02 (dd, 6,2, 14,7 Hz, 1/3 H), 1,79-1,74 (dd, 1/3 H), 1,60-1,40 (m, 3H), 1,37,1,31,1,28,1,28,1,26 (4s, 6H), 1,3-1,05 (m, skrit), 0,71, 0,49 (2 dt, 5,6,13,5 Hz, 2/3 H), -0,20, -0,47 (2 dt, 4,6,13,5 Hz, 2/3 H).
FAB-MS izrač. za C^H^N^, 490; ugot. 491 (M+H, 100 %).
PRIMER 12
N-ri(R)-[(3.4-dihidro-spiro[2H-l-benzopiran-2.4,-piperidinl-r-il)karbonil12-(indol-3-il)etil1-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: 3.4-dihidrospiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidinj
K mešani raztopini spiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidin]-4(3H)-ona, hidroklorida (53 mg, 0,21 mmolov) v metanolu (5 ml) pri 0 °C dodamo v več delih natrijev borohidrid (38 mg, 1 mmol). Po 30 minutah zmes uparimo in nato 30 minut obdelujemo s koncentrirano klorovodikovo kislino (2 ml). Z uparjenjem dobimo ostanek, ki ga hidrogeniramo s paladijem na oglju (10 %, 10 mg), H2(l bar) v etanolu 2 uri. S filtriranjem, da odstranimo katalizator, dobimo surov intermediat (89 mg), ki ga uporabimo brez nadaljnjega čiščenja.
XH NMR (400 MHz, CD3OD): 7,07 (je videti kot d, 5 Hz, 2H), 6,84 (je videti kot t, 7 Hz, 2H), 7,07-7,08 (m, 4H), 2,82 (t, 7 Hz, 2 H), 2,02 (br, d, 14,5 Hz, 2H), 1,90-1,85 (m, 4H). EI-MS: izrač. za C13H17NO, 203; ugot. 203 (M+, 45 %)
Stopnja B: N-[l(R)-[(3.4-dihidro-spiro[2H-l-benzopiran-2.4>-piperidin]-l?-il)karbonil]-2-(indol-3-il)etil]-2-[[(l,l-dimetiletiloksi)karboniljaminol -2-metilpropanamid
Ta intermediat pripravimo iz produkta stopnje A in a(R)-[[2-[[(l,l-dimetiletoksi)karbonil]amino]-2,2-dimetil-l-oksoetil]amino]-lH-indol-3-propanojske kisline po standardnih peptidnih pripajalnih postopkih.
]H NMR (400 MHz, CDC^): spojina obstoji kot zmes konformerov (razmerje 2:1): δ 8,04, 8,02 (2s, IH), 7,70, 7,61 (2d, 8 Hz, IH), 7,49-6,66 (m, IH), 4,92 (br, s, IH), 4,304,20 (m, IH), 3,4-3,1 (m, 4H), 2,85-2,45 (m, 3H), 1,68 (t, 7,6 Hz, IH),1,49, 1,45, 1,44, 1,43, 1,41 (5s, 12H), 1,30-1,21 (m, 3H), 1,11-1,07 (dd, 2,5, 14 Hz, 1/3H), 0,68 (dt, 4,5 Hz, 13 Hz, 1/3 H), -0,33-0,43 (dt, 1/3 H).
FAB-MS: izrač. za C33H42N4O5, 574; ugot. 575 (M+H, 35 %).
Stopnja C: N-ilfR)-[f3,4-dihidro-spiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidin]-ril]karbonill-2-(indol-3-il)etil1-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Naslovno spojino pripravimo iz intermediata v stopnji B po postopku, opisanem v primeru 11, stopnja B (90 %).
NMR (400 MHz, CD3OD): Spojina obstoji kot zmes konformerov (razmerje 2:1): δ 8,31, 8,21 (2 d, 6,6 Hz, 2/3 H), 7,58, 7,52 (2 d, 7,8 Hz, 1 H), 7,37 (d, 8,2 Hz, IH), 7,15-6,60 (m, 6 1/3 H), 5,17-5,13 (m, IH), 4,14 (br, d, 13,2 Hz, IH), 3,35-3,10 (m 3H), 2,90-2,45 (m,3 H), 1,70 (t, 6,9 Hz, IH), 1,60 (s, 6H), 1,60-1,40 (m, skrit), 1,40-1,20 (m, 2H), 1,11 (br,. d, 12,7 Hz, 2/3 H), 0,57 (dt, 4,3,13 Hz, 2/3 H), -0,31 (dt, 4,3,13, 2/3 H). FAB-MS: izrač. za C^N^, 474, ugot. 475 (M+H, 60 %).
PRIMER 13
N-[l(R)-[(3,4-dihidro-6-metansulfonilamino-4-okso-spiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidinl-l’-il)karbonil1-2-(indol-3-il)etil1-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Naslovno spojino pripravimo iz a(R)-[[2-[[(l,l-dimetiletoksi)karbonil]amino]2,2-dimetil-l- oksoetil]amino]-lH-indol-3-propanojske kisline in 3,4-dihidro-6metansulfonilamino-4-okso-spiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidina] po postopkih, opisanih v primeru 10, stopnji A in B.
N-[l(R)-[(3,4-dihidro-6-metansulfonilamino-4-okso-spiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidin]-l’-il)karbonil]-2-(indol-3-il)etil]-2-[[(l,l-dimetiletiloksi)karbonil]amino]-2-metilpropanamid.
1H NMR (400 MHz, CDC13): spojina obstoji kot zmes konformerov (razmerje 2:1): δ 8,60, 8,36 (2 Br. s, IH), 7,63-6,81 (m, 8H), 5,20 (br. s,IH), 5,10-5,02 (br. m, IH), 3,45-3,30 (br. m, IH), 3,25-3,10 (br. m, 2H), 2,97, 2,95 (2s, 3H), 2,75-2,56 (m, IH), 2,28 (v. br. s, IH), 2,18 (d, 16,6 Hz, IH), 2,05 (d, 16,6 Hz,IH), 1,86-1,45 (m, skrit), 1,51, 1,46, 1,44, 1,43, 1,42, 1,39 (6s, 12H),1,30-1,20 (m, 2H), 0,55-0,45 (m, 2/3 H), -0,55-0,65 (m, 2/3 H).
FAB-MS: izrač. za C^H^NjOgS, 681; ugot. 688 (M+Li, 40 %).
N-[l(R)-[(3,4-dihidro-6-metansulfonilamino-4-okso-spiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidin]-l’-il)karbonil]-2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid.
Ή NMR (400 MHz, CD3OD): spojina obstoji kot zmes konformerov (razmerje 2:1): δ 7,63-6,92 (m, 8H), 5,14-5,08 (m, IH), 4,18-4,08 (2 md,lH), 3,62-3,51 (2 md, IH), 3,25-3,10 (m, 2H), 2,91, 2,89 (2s, 3H), 2,78-2,67 (2 dd, 2 Hz, 15 Hz, 2H), 2,27 (d, 16,7 Hz, IH), 2,19 (d, 16,6 Hz, IH), 1,86-1,80 (m, 1/3 H), 1,80-1,50 (m, skrit), 1,60, 1,59, 1,48 (3s, 6H), 1,40-1,30 (m, IH), 0,47 (dt, 4,8 Hz, 13 Hz, 2/3 H), -0,39 (dt, 4,8 Hz, 13 Hz, 2/3 H).
FAB-MS: izrač. za C29H35N5O6S, 581; ugot. 582 (M+H, 75 %).
PRIMER 14
N-[l(R)-[(3,4-dihidro-4(RS)-hidroksi-6-metansulfonilamino-spiro[2H-l-benzopiran-2,4,-piperidinl-l’-il)karbonill-2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
Naslovno spojino pripravimo iz naslovne spojine v primeru 13 po postopku, opisanem v primeru 11A.
XH NMR (400 MHz, CD3OD): spojina obstoji kot zmes 2 diastereomerov (1:1) in vsak izomer obstoji kot dva konformera: δ 7,62-7,50 (m, IH), 7,42-7,29 (m,2H), 7,176,98 (m, 4H), 6,68 (d, 8,7 Hz,IH), 5,15-5,05 (m, IH), 4,75-4,65 (m, 1/3 H), 4,57 (dd, 7 Hz, 9 Hz, 1/3 H), 4,44 (dd, 6,5 Hz, 9,0 Hz, 1/3 H), 4,21-4,07 (m, IH), 3,56-3,44 (m,IH), 3,28-3,12 (m, 3H),3,08-3,01 (m,2/3 H), 2,89, 2,86 (2s, 3H), 12,82-2,55 (m, IH), 2,03 (dd, 6,0 Hz, 13,8 Hz, 1/2 H), 1,86 (dd, 6,0,13,7, 1/2 H), 1,70-1,35 (m, 3H), 1,33,1,32,1,31,1,28,1,24 (5s, 6H), 1,33-1,29 (m, skrit), 1,06 (br, d, 13 Hz, 1/3 H), 0,71 (dt, 4,6 Hz, 13 Hz, 1/3 H), 0,49 (dt, 4,6 Hz, 13 Hz, 1/3 H), -0,21 (dt, 4,6 Hz, 13 Hz, 1/3 H), -0,49 (dt, 4,6 Hz, 13 Hz, 1/3 H).
FAB-MS: izrač. za C29H37N5O6S, 583; ugot. 584 (M+H, 20 %).
PRIMER 15
N-[l(R)-i(2-acetil-l,2,3.4-tetrahidrospiro[izokinolin-4,4’-piperidinl-l’-il)karbonil]-2-(indol-3-il)etilI-2-ammo-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: l,3-dihidro-1.3-dihidroksispiro[4H-2-benzofuran-4,4,-piperidinΓ-karboksilna kislina, 1,1-dimetiletilester
K mešani raztopini spiro[lH-inden-l,4’-piperidin]-l’-karboksilne kisline, 1,163 dimetiletilestra (800 mg, 2,8 mmolov) v metanolu (50 ml) pri -78 °C prevajamo ozon v mehurčkih, dokler raztopina ne postane modra. Zmes pustimo stati pri tej temperaturi 20 minut, nato splaknemo z dušikom. Dodamo dimetil sulfid (3 ml), zmes segrejemo do sobne temperature in mešamo 2 uri. Z uparjenjem topila dobimo surov produkt (940 mg), ki ga uporabimo brez čiščenja.
Stopnja B: l,2,3,4-tetrahidrospiro[izokinolin-4,4’-piperidinl-r-karboksilna kislina, 1,1-dimetiletilester
Intermediat stopnje A (100 mg) mešamo v metanolu (2 ml), nasičenem z amoniakom, en dan in uparimo, da odstranimo amoniak. Ostanek ponovno raztopimo v metanolu (3 ml) in dodamo natrijev cianoborohidrid (50 mg, prebitek). Zmes mešamo preko noči. Z upaijenjem in čiščenjem dobimo amin.
rH NMR (400 MHz, CD3OD); δ 7,35-6,96 (m, 4H), 4,00 (s, 2H), 3,14 (s, 2H), 3,90 (br. s, 2H), 2,05 (br. s, 2H), 1,95 (br. t, 2H), 0,69 (d, 2H), 1,49 (s, 9 H).
Stopnja C: 2-acetil-l,2,3,4-tetrahidrospiro[izokinolin-4,4>-piperidinl-rkarboksilna kislina, 1,1-dimetiletilester
Intermediat (16 mg) iz stopnje A obdelujemo s piridinom (2 ml) in acetanhidridom (2 ml) 2 uri in reakcijsko zmes uparimo v vakuumu, da dobimo želeno spojino (12 mg).
T4 NMR (400 MHz, CDC13, spojina obstoji kot zmes 3:1 rotamerov): δ 7,36-7,05 (m, 4H), 4,72 (s, 2/4 H), 4,65 (s, 6/4 H), 4,10-4,00 (br.d, 12,8 Hz, 2H), 3,85 (br. s, 3/4 H), 3,65 (s, 1/4 H), 3,11 (t, 13,1 Hz, 3/4 H), 3,00 (t, 13,1 Hz, 1/4 H), 2,19 (s, 3/4 H), 2,18 (s, 9/4 H), 2,00-1,80 (m, 2H), 1/65-1,47 (m, 2H, skrit), 1,47 (s, 9/4 H), 1,45 (s, 27/4 H).
Stopnja D: 2-acetil-1.2,3,4-tetrahidrospiro[izokinolin-4,4’-piperidin
K raztopini intermediata iz stopnje C (12 mg) v etil acetatu (5 ml) pri 0 °C dovajamo HCl (plin) v mehurčkih, dokler ni nasičena. Po 30 minutah reakcijsko zmes uparimo v vakuumu, da dobimo želeni intermediat.
Tl NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7,47-7,19 (m, 4H), 4,79 (s, 2H), 3,96 (s, 2H), 3,36 (br. d, 6,7 Hz, 2H), 2,30 - 2,24 (m, IH), 2,21 (s, 3H), 1,76 (d, 13 Hz).
FAB-MS: izrač. za C^H^O, 244; ugot. 245 (M+1,100 %).
Stopnja E: N-[l(R)-[(2-acetil-l,2,3.4-tetrahidrospirolizokinolin-4,4,-piperidinll’-il)karbonill -2-(indol-3-il)etil] -2- [ [(1, 1 -dimetiletiloksi) karbonillaminol-2-metilpropanamid
Naslovno spojino pripravimo iz intermediata iz stopnje D po preje opisanih postopkih.
PRIMER 16
N-rifRWl,2-dihidro-l-metilsulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidinl-r-ir)karbonill2-(2,,6’-difluorofenilmetiloksi)etiI]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: Metil g(R)-[[2-[[(l,l-dimetiletoksi)karbonil]amino]-2,2-dimetil-loksoetil]amino1-3-f(2,.6,-difluorofenil)-metoksilpropanska kislina
K suspenziji natrijevega hidrida brez olja (pripravljen iz 60 %-ne oljne disperzije natrijevega hidrida z izpiranjem s heksani (3x), 1,2 g, 30,0 mmolov) v 30 ml Ν,Νdimetilformamida dodamo N-t-butiloksikarbonil-(D)-serin (3,07 g, 15,0 mmolov) v 10 ml Ν,Ν-dimetilformamida pri sobni temperaturi. Ko se plin nič več ne razvija, dodamo 2,6-difluorobenzil bromid (2,68 g, 12,9 mmolov). Po 18 urah mešanja pri sobni temperaturi reakcijski zmesi dodamo jodometan (1,0 ml, 16,0 mmolov). Zmes mešamo še 1 uro, nato zlijemo v vodo in ekstrahiramo z etil etrom. Organski sloj zaporedoma izpiramo z vodo (5x), slanico in sušimo preko natrijevega sulfata, filtriramo in koncentriramo. Ostanek raztopimo v 20 ml kloroforma ter pri sobni temperaturi dodamo BOC-a-metilalanin, EDC, HOBT in Et3N. Po 3 urah zlijemo reakcijsko zmes v vodo in ekstrahiramo z metilen kloridom. Organski sloj sušimo preko natrijevega sulfata in koncentriramo. Naslovno spojino dobimo po čiščenju s kromatografijo (heksan/etil acetat: 3/1), da dobimo 2,37 g (35 %).
1H NMR (300 MHz, CDC13 zmes rotamerov): 7,27 (m, IH), 7,02 - 6,88 (m, 2H), 4,95 (m, IH), 4,72 (dt, 8, 3 Hz, IH), 4,58 (br. s, 2H), 3,90 (m, IH), 3,78 (s, IH), 3,69 (s, 3H), 1,48 (s, 3H), 1,45 (s, 3H), 1,41 (s, 9H).
Stopnja B: N-fl(R)-il,2-dihidro-l-metilsulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidinll,-il)karbonil]-2-(2>,6>-difluorofenilmetiloksi)etil]-2-amino-2metilpropanamid hidroklorid
Raztopini intermediata, dobljeni iz tega primera, stopnja A, (2,37 g, 5,29 mmolov) v ml metanola dodamo litijev hidroksid (340 mg, 8,1 mmol) v 3 ml vode. Po 2 urah mešanja pri sobni temperaturi reakcijsko zmes koncentriramo, nato razredčimo z vodo in ekstrahiramo z etil etrom. Organski sloj zavržemo. Vodni sloj nakisamo z IN klorovodikovo kislino na pH=l,5 in ekstrahiramo z etil etrom (3x). Organski sloj posušimo nad natrijevim sulfatom, filtriramo in koncentriramo, da dobimo 2,18 g (95 %) kisline. Naslovno spojino pripravimo iz kisline (78 mg, 0,18 mmolov) in 1,2dihidro-l-metilsulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin-hidroklorida (50 mg, 0,165 mmolov) po postopku, opisanem v primeru 20, stopnja B (uporabiti hidroklorid v etil etru namesto trifluoroocetne kisline), da dobimo 48 mg (44 %).
‘H NMR (400 MHz, CD3OD zmes rotamerov): 7,39 (m, 2H), 7,22 (m, 11/2 H), 7,03 (m, 3 1/2 H), 5,14 (dd, 13, 7 Hz, IH), 4,66 (d, 16 Hz, 2H), 4,49 (m, IH), 4,09 (m, IH), 3,92 (br. s, 2H), 3,76 (m, 2H), 3,25 (m, IH), 2,97 (s, 3/2 H), 2,96 (s, 3/2 H), 2,87 (m, IH), 1,95 (m, IH), 1,76 (m, 3H), 1,61 (s, 3/2 H), 1,57 (s, 3 3/2 H), FAB-MS: 565 (M+l).
PRIMER 17
N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metilsulfonilspiro[3H-indol-3,4,-piperidinl-l,-il)karbonil]-3-cikloheksilpropil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: t-butiloksikarbonil-(D)-heksahidrohomofenilalanin
Raztopino t-butiloksikarbonil-(D)-homofenilalanina (100 mg, 0,358 mmolov) v 1 ml ocetne kisline hidrogeniramo preko PtO2 pri 1 baru 16 ur. Zmes filtriramo skozi celit, filtrat koncentriramo in azeotropiramo s toluenom.
1H NMR (400 MHz, CDC13): 5,03 (d, 8 Hz, IH), 4,22 (m, IH), 1,82 (m, IH), 1,64 (m, 6H), 1,41 (s, 9H), 1,20 (m, 6H), 0,84 (m, 2H).
Stopnja B: Benzil a(R)-[(2-[[(l,l-dimetiletoksi)karbonil1aminol-2,2dimetil-l-oksoetil]amino]-4-cikloheksilbutanoiska kislina
Raztopino BOC-D homafenilalanina v ocetni kislini hidrogeniramo preko PtO2 pri 1 baru 16 ur. Zmes filtriramo skozi celit in koncentriramo. Temu ostanku (44 mg) v 15 molih DMF dodamo benzil bromid (198 ml) in K2CO3 (970 mg) pri sobni temperaturi. Po mešanju preko noči zlijemo zmes v 200 ml etra in izperemo z vodo. Organsko fazo sušimo preko MgSO4, filtriramo in koncentriramo. Ostanek čistimo s flash kromatografijo (silikagel, 7,5 %-en etil acetat v heksanih), da dobimo 534 mg (95 %) tega intermediata. Raztopino 534 mg tega materiala v 10 ml 1:1 TFA/CH2C12 mešamo 1 uro, nato izženemo in azeotropiramo iz toluena. Ostanek raztopimo v 10 ml CH2Cl2 in ohladimo na 0 °C. Dodamo BOC-a-metilalanin (362 mg), EDC, HOBT in NMM ter mešamo preko noči. Raztopino zlijemo v 250 ml etil acetata in zaporedoma izpiramo z IN NaHSO4 (vodni), vodo in nasičenim vodnim NaHCO3. Organsko fazo sušimo, filtriramo in koncentriramo. Čistimo s flash kromatografijo (silikagel, etil acetat/heksani), da dobimo 638 mg naslovne spojine.
XH NMR (200 MHz, CDC13); .8-.95 (m, 3H), 1,05 - 1,3 (m, 7H), 1,4 - 1,9 (m, 19H), 2,15 (m, 2H), 4,59 (m, IH), 4,87 (m, IH), 5,18 (m, 2H), 6,96 (m, IH), 7,35 (m, 5H). FAB-MS izrač. za C26H4QN2O5 460; ugot. 461,5 (M+H).
Stopnja C: N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metilsulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin1r-il)karbonil1-3-cikloheksilpropil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Zmes 638 mg intermediata, dobljenega v stopnji B, in 100 mg 10 %-nega Pd na oglju mešamo 4 ure pod balonom, ki vsebuje H2. Zmes filtriramo skozi celit in filtrat koncentriramo. Del (87 mg) tega ostanka raztopimo v 2 ml CH2C12, dodamo 49,8 mg l,2-dihidro-l-metilsulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin hidroklorida, EDC in HOBT ter mešamo 16 ur. Raztopino zlijemo v 200 ml etil acetata in zaporedoma izperemo z IN NaHSO4 (vodni), vodo in nasičenim vodnim NaHCO3. Organsko fazo sušimo, filtriramo in koncentriramo. Čistimo s flash kromatografijo (silikagel (60 %-en etil acetat/heksani), da dobimo 55 mg (47 %) tega intermediata. Ves ta material raztopimo v 2 ml 1:1 TFA/CH2C12 in mešamo 1/2 ure. Raztopino izženemo in ostanek čistimo s flash kromatografijo (silikagel, metanol, NH4OH (vodni), CP^C^). Spojino nato raztopimo v CF^C^, obdelamo z HC1 v etru in koncentriramo, da dobimo naslovno spojino.
Tl NMR (400 MHz, CD3OD); .93 (m,2H), 1,15-1,3 (m, 6H), 1,55 -1,8 (m, IH), 2,06 (dt, 15, 4 Hz, IH), 2,88 (m, IH), 2,97 (m, IH), 3,35 (m, 2H), 3,8 - 4,1 (m, 3H), 4,51 (m, IH), 4,83 (m, IH), 7,06 (q, 7 Hz, IH), 7,22 (m, 2H), 7,37 (d, 8 Hz, IH).
FAB-MS izrač. za C27H42N4O4S 518; ugot. 519,7 (M+H).
PRIMER 18 (POSTOPEK 1)
N-[lfR)-[fT2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-r-il)karbonil1-2-(fenilmetiloksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin1hidroklorid
K raztopini 1,20 g (5,8 mmolov) T-metil-l,2-dihidro-spiro[3H-indol-3,4’piperidina] (pripravljenega, kot je opisano v Ong et al J. Med. Chem. 1983, 23, 981986) v 20 ml suhega diklorometana pri 0 °C dodamo trietilamin (0,90 ml; 6,4 mmolov) in metansulfonilklorid (0,49 ml; 6,35 mmolov) ter mešamo 30 minut. Reakcijsko zmes zlijemo v 15 ml nasičene vodne raztopine natrijevega bikarbonata in ekstrahiramo z diklorometanom (2 x 10 ml). Združene organske faze izperemo s slanico (20 ml), sušimo nad brezvodnim kalijevim karbonatom, filtriramo in topilo odstranimo pri zmanjšanem tlaku, da dobimo 1,44 g metansulfonamidnega derivata kot bledo rumeno olje, ki ga uporabimo brez čiščenja.
K raztopini gornjega surovega produkta v 20 ml suhega 1,2-dikloroetana pri 0 °C dodamo 1,0 ml (9,30 mmolov) 1-kloroetil kloroformata, nato mešamo pri sobni temperaturi 30 minut in končno 1 uro pri refluksu. Reakcijsko zmes koncentriramo do približno 1/3 volumna, nato razredčimo z 20 ml suhega metanola in refluktiramo 1,5 ure. Reakcijsko zmes ohladimo na sobno temperaturo in koncentriramo do približno polovice volumna. Oborino filtriramo in izperemo z majhnim volumnom hladnega metanola. S tem dobimo 1,0 g piperidinske HCI soli kot belo trdno snov. Filtrat koncentriramo in dodamo majhen volumen metanola, nato pa eter. Oborjeni material še enkrat filtriramo, izperemo s hladnim metanolom in sušimo. Tako dobimo še 0,49 g želenega produkta. Celoten dobitek l,49g (70 %).
Ή NMR (CDC13, 200 MHz) δ 7,43 - 7,20 (m, 3H), 7,10 (dd, IH), 3,98 (bs, 2H), 3,55 3,40 (bd, 2H), 3,35 - 3,10 (m, 2H), 2,99 (s, 3H), 2,15 (t, 2H), 2,00 (t, 2H).
Stopnja B: N-ri(R)-f(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4,-piperidinll,-il)karbonil)-2-(fenilmetiloksi)etilj-2-i(l,l-dimetiletoksi)karbonillamino-2-metil-propanamid
K 0,35 g (1,15 mmolov) (2R)-2-[(l,l-dimetiletoksi)karbonil]amino-3-[2-(fenilmetiloksi)etil]-l-propanojske kisline v 13 ml diklorometana dodamo 1,2-dihidro-l68 metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]hidroklorid (0,325 g; 1,07 mmolov), 0,18 ml (1,63 mmolov) N-metilmorfolina, 0,159 g (1,18 mmolov) 1-hidroksibenztriazola (HOBT) in mešamo 15 minut. Dodamo EDC (0,31 g; 1,62 molov) in mešamo še 1 uro. Dodamo še 60 μ[ N-metilmorfolina in mešamo 45 minut. Reakcijsko zmes zlijemo v 5 ml vode in organski sloj ločimo. Organski sloj speremo s 5 ml 0,5N vodne klorovodikove kisline in 5 ml nasičene vodne raztopine natrijevega bikarbonata. Združene organske faze sušimo preko brezvodnega magnezijevega sulfata in koncentriramo, da dobimo 0,627 g produkta kot rumeno peno, ki jo uporabimo brez čiščenja.
K 0,627 g (1,07 mmolov) gornjega produkta v 5 ml diklorometana dodamo 1,0 ml trifluoroocetne kisline in mešamo pri sobni temperaturi 75 minut. Dodamo še 1,00 ml trifluoroocetne kisline in mešamo 10 minut. Reakcijsko zmes koncentriramo, razredčimo s 5,0 ml diklorometana in skrbno naalkalimo z zlivanjem v 10 ml 10 %-ne vodne raztopine natrijevega karbonata. Organski sloj ločimo in vodni sloj nadalje ekstrahiramo z 2-krat 15 ml diklorometana. Združene organske faze speremo s 5 ml vode, sušimo preko kalijevega karbonata, filtriramo in koncentriramo, da dobimo 0,486 g amina kot rahlo rumeno peno, ki jo uporabimo brez čiščenja.
K 0,486 g (1,01 mmolu) amina in 10 ml diklorometana dodamo 0,26 g (1,28 mmolov) 2-[(l,l-dimetiletoksi)karbonil]amino-2-metil-propanojske kisline, 0,173 g (1,28 mmolov) 1-hidroksibenztriazola (HOBT) in EDC (0,245 g; 1,28 molov) ter mešamo preko noči pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes zlijemo v 5,0 ml vode in organski sloj ločimo. Vodni sloj povratno ekstrahiramo s 5 ml diklorometana. Združene organske faze izperemo s 5,0 ml 0,5N vodne klorovodikove kisline, 5 ml nasičene vodne raztopine natrijevega bikarbonata, sušimo nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in koncentriramo, da dobimo 0,751 g surovega produkta kot rumeno peno. Raztopino tega surovega produkta v diklorometanu kromatografiramo na 25 g silikagela ter eluiramo najprej s heksani/acetonom/diklorometanom (70/25/5) in nato s heksani/acetonom/diklorometanom (65/30/5). Tako dobimo 0,63 g naslovne spojine kot belo trdno snov.
Ή NMR (CDQ3, 400 MHz) spojina obstoji kot 3:2 zmes rotamerov S 7,40 - 7,10 (m, 6H), 7,06 (d, 1/3H), 7,02 (t, 1/3H), 6,90 (t, 1/3H), 6,55 (d, 1/3H), 5,15 (m, IH), 4,95 (bs, IH), 4,63 (bd, 1/3H), 4,57 - 4,40 (m, 2 2/3H), 4,10 (bd, 1/3H), 4,00 (bd, 1/3H), 3,82 (t, IH), 3,78 - 3,62 (m, 2H), 3,60 - 3,50 (m, IH), 3,04 (q, IH), 2,87 (s, IH), 2,86 (s, 2H), 2,80 - 2,60 (m, IH), 1,90 (bs, IH), 2,85 - 2,75 (m, IH), 1,82 - 1,60 (m, 3H), 1,55 -1,45 (m, IH), 1,45 (s, 4H), 1,42 (s, 2H), 1,39 (s, 9H).
Stopnja C: N-fl(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidinll’-il)karbonill-2-(fenilmetiloksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
K 0,637 g (0,101 mmolu) intermediata iz stopnje B v 5 ml diklorometana dodamo 2,5 ml trifluoroocetne kisline in mešamo 30 minut pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes koncentriramo do olja, prevzamemo v 10 ml etil acetata in speremo z 8 ml 10 %-ne vodne raztopine natrijevega karbonata. Vodni sloj nadalje ekstrahiramo s 5 ml etil acetata. Združene organske faze izperemo z 10 ml vode, sušimo nad magnezijevim sulfatom, filtriramo in koncentriramo, da dobimo 0,512 g proste baze kot belo peno.
K 0,512 g proste baze v 5 ml etil acetata pri 0 °C dodamo 0,2 ml nasičene klorovodikove kisline v etil acetatu in mešamo 1,5 ure. Belo oborino filtriramo pod dušikom, izperemo z etrom in posušimo, da dobimo 0,50 g naslovne spojine kot belo trdno snov.
Tl NMR (400 MHz, CD3OD) Spojina obstoji kot 3:2 zmes rotamerov. δ 7,40 - 7,28 (m, 4H), 7,25 - 7,17 (m, 2H), 7,08 (t, 1/3H), 7,00 (t, 1/3H), 6,80 (d, 1/3H), 5,16 (ddd, IH), 4,60 - 4,42 (m, 3H), 4,05 (t, IH), 3,90 (bs,2H), 3,83 - 3,70 (m, 2H), 3,30 - 3,15 (m, 1HO, 2,97 (s, IH), 2,95 (s, 2H), 2,90 - 2,78 (m, IH), 1,96 (t, 1/3H), 1,85 - 1,65 (m, 4H), 1,63 (s, 2H), 1,60 (s, 4H).
PRIMER 19 (POSTOPEK 2)
N-il(R)-f(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiroi3H-indol-3.4,-piperidin]-l,-il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: (2R)-[[[-2-(l,l-dimetiletoksi)karbonil]aminol-2,2-dimetil-loksoetil]amino-2-(fenilmetoksi)etil]-l-propanoiska kislina alilester
Pripravljen iz (2R)-2-[(l,l-dimetiletoksi)karbonil]-amino-3-(fenilmetiloksi)etilpropanojske kisline in alilalkohola z izvedbo pripajalne reakcije v CH2C12 v prisotnosti EDC in DMAP.
Ή NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,25 (s, 5H), 5,8 (m, IH), 5,2 (dd, 2H), 5,0 (bs, IH), 4,7 (m, IH), 4,6 (m, 2H), 4,4 (dd, 2H), 3,9 (dd, IH), 3,6 (dd, IH), 1,45 (d, 6H), 1,39 (s, 9Η).
Stopnja B: (2R)-[[[-2-(l,l-dimetiletoksi)karbonil]amino]-2.2-dimetil-loksoetil]amino-2-(fenilmetiloksi)etil)-l-propanoiska kislina
K mešani raztopini surovega intermediata, dobljenega v stopnji A (6,7 g, 15,9 mmolov), tetrakis (trifenilfosfin)-paladija (1,8 g, 0,1 ekv.) in trifenil fosfina (1,25 g, 0,3 ekv.) dodamo raztopino kalijevega 2-etil heksanoata (35 ml, 0,5 M raztopine v EtOAc). Reakcijsko zmes mešamo pri sobni temperaturi v atmosferi dušika 1 uro, nato jo razredčimo z etrom (100 ml) in zlijemo v led-vodo. Organski sloj ločimo in vodno frakcijo nakisamo s citronsko kislino (20 %), nato ekstrahiramo z EtOAc. EtOAc ekstrakte izperemo s slanico, posušimo nad magnezijevim sulfatom, filtriramo in uparimo, da dobimo naslovno spojino kot trdno snov.
XH NMR (400 MHz, CD3OD) S 7,3 (s, 5H), 4,7 (m, IH), 4,5 (s, 2H), 4,0 (m, IH), 3,6 (m, IH), 1,4 (d, 6H), 1,3 (s, 9H).
Stopnja C: N-[l(R)-[(1.2-dihidro-l-metansulfonilspnO[3H-indol-3,4’-piperidin]l’-il)karbonill-2-(fenilmetiloksi)etil]-2-[(l,l-dimetil-etoksi)karbonillamino-2-metilpropanamid
K raztopini 1,0 g (3,44 mmolov) l-metansulfonilspiro[indolin-3,4’-piperidin]hidroklorida, 1,44 g (3,78 mmmolov) (2R)-[[-2-(l,l-dimetiletoksi)karbonil)amino]2,2-dimetil-l-oksoetil]-amino-2-(fenilmetiloksi)etil)-l-propanojske kisline, N-metilmorfolina (0,58 ml; 5,20 mmolov) in 1-hidroksibenztriazola (HOBT) (0,58 g; 3,78 mmolov) v 50 ml diklorometana dodamo EDC (1,03 g; 5,20 mmolov) in mešamo 16 ur pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes razredčimo s še 50 ml diklorometana in izperemo z vodno raztopino natrijevega bikarbonata (50 ml), sušimo nad brezvodnim magnezijevim sulfatom, filtriramo in koncentriramo. S flash kromatografijo (50 g silikagela) surovega oljnatega ostanka dobimo 2,148 g (90 %) želenega materiala kot brezbarvno peno.
'H NMR (CDC13, 400 MHz) Spojina obstoji kot 3:2 zmes rotamerov δ 7,40 - 7,10 (m, 6H), 7,06 (d, 1/3H), 7,02 (t, 1/3H), 6,90 (t, 1/3H), 6,55 (d, 1/3H), 5,15 (m, IH), 4,95 (bs, IH), 4,63 (bd, 1/3H), 4,57 - 4,40 (m, 2 2/3H), 4,10 (bd, 1/3H), 4,00 (bd, 1/3H), 3,82 (t, IH), 3,78 - 3,62 (m, 2H), 3,60 - 3,50 (m, IH), 3,04 (q, IH), 2,87 (s, IH), 2,86 (s, 2H), 2,80 - 2,60 (m, IH), 1,90 (bs, IH), 2,85 - 2,75 (m, IH), 1,82 - 1,60 (m, 3H), 1,55 -1,45 (m, IH), 1,45 (s, 4H), 1,42 (s, 2H), 1,39 (s, 9H).
Stopnja D: N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4,-piperidin]r-il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
K raztopini 2,148 g (3,41 mmolov) intermediata iz stopnje C v 10 ml diklorometana dodamo 5 ml trifluoroocetne kisline in mešamo 1 uro. Reakcijsko zmes koncentriramo in naalkalimo s 100 ml 5 %-ne vodne raztopine natrijevega karbonata ter ekstrahiramo z diklorometanom (3 x 50 ml). Združene organske faze izperemo s slanico (50 ml), sušimo nad brezvodnim kalijevim karbonatom, filtriramo in koncentriramo, da dobimo brezbarvno peno. K raztopini pene v 25 ml etil acetata pri 0 °C dodamo 4 ml IM raztopine klorovodikove kisline v etil acetatu. Oborino filtriramo in izperemo najprej z etil acetatom in nato z etil acetatom-etrom (1:1) ter posušimo, da dobimo 1,79 g (93 %) naslovne spojine kot brezbarvno trdno snov.
NMR (400 MHz, CD3OD) Spojina obstoji kot 3:2 zmes rotamerov. δ 7,40 - 7,28 (m, 4H), 7,25 - 7,17 (m, 2H), 7,08 (t, 1/3H), 7,00 (t, 1/3H), 6,80 (d, 1/3H), 5,16 (ddd, IH), 4,60 - 4,42 (m, 3H), 4,05 (t, IH), 3,90 (bs, 2H), 3,83 - 3,70 (m, 2H), 3,30 - 3,15 (m, 1HO, 2,97 (s, IH), 2,95 (s, 2H), 2,90 - 2,78 (m, IH), 1,96 (t, 1/3H), 1,85 - 1,65 (m, 4H), 1,63 (s, 2H), 1,60 (s, 4H).
PRIMER 20
N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonil-5-bromo-spiro[3H-indol-3,4’-piperidin^-ϊ,il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid trifluoroacetat
Stopnja A: N-ίl(R)-ί(l,2-dihidro-l-metansulfonil-5-bromospiro[3H-indol-3,4,piperidin1-l’-il)karbonil]-2-(fenilmetil-oksi)-etil1-2-[(l,ldimetiletoksi)karbonil]amino-2-metilpropanamid
K raztopini 300 mg (1,03 mmolov) l-metansulfonilspiro-[3H-indol-3,4’piperidinjhidroklorida v 5 ml ledocta dodamo 0,28 g (2,06 mmolov) broma in mešamo 1 uro pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes koncentriramo do suhega, naalkalimo z 10 ml 5 %-ne vodne raztopine natrijevega karbonata in ekstrahiramo z diklorometanom (3 x 10 ml). Združene organske faze speremo s slanico (10 ml), sušimo nad brezvodnim kalijevim karbonatom, filtriramo in koncentriramo, da dobimo 0,25 g surovega produkta kot rumeno olje, ki ga uporabimo brez čiščenja.
Stopnja B:
K raztopini gornjega surovega produkta v 10 ml diklorometana dodamo 0,43 g (1,13 mmolov) intermediata iz primera 19, stopnja B, 0,17 g (1,13 mmolov) HOBT in 0,34 g (1,70 mmolov) EDC ter mešamo 16 ur pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes razredčimo s 15 ml etra, izperemo z 10 %-no vodno raztopino citronske kisline (15 ml), nasičeno raztopino natrijevega bikarbonata (15 ml), sušimo preko brezvodnega magnezijevega sulfata, filtriramo in koncentriramo, da dobimo surov oljnat produkt. Ta ostanek čistimo s flash kromatografijo (15 g SiO2; CH2Cl2-aceton (10:1) kot eluent), da dobimo 0,184 g (26 % za 2 stopnji) pripojenega materiala kot brezbarvno peno.
K 0,184 g (0,26 mmolov) gornjega materiala v 2 ml diklorometana dodamo 2 ml trifluoroocetne kisline in mešamo 1 uro pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes uparimo do suhega, da dobimo 0,146 g (93 %) naslovne spojine kot belo trdno snov. FAB-MS: izrač. za C^H^BrN^S 608; ugot. 609,5.
PRIMER 21
N-[l(R)-[(l,2-dihidro-spirol3H-indol-3,4’-piperidin]-r-il)karbonil1-2-(indol3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid dihidroklorid
Stopnja A: Spiro[3H-indol-3,4’-piperidin]
K raztopini 1,0 g (5,0 mmolov) r-metil-spiro[3H-indol-3,4’-piperidina] (pripravljenega, kot je opisano v H. Ong et al J.Med. Chem. 1983, 23, 981-986) in 1,0 g uprašenega kalijevega karbonata v 30 ml suhega diklorometana pri sobni temperaturi dodamo 0,50 g bromciana in mešamo 1 uro. Reakcijsko zmes filtriramo skozi blazinico celita in izperemo s kloroformom-metanolom (95:5). Filtrat koncentriramo in ostanek splakujemo skozi blazinico silikagela s kloroformommetanolom (95:5) kot eluentom. S tem dobimo ~ 1,2 g rumenega olja, ki ga uporabimo brez čiščenja.
K suspenziji gornje spojine v 30 ml suhega DME pri 0 °C dodamo 0,30 g litijevega aluminijevega hidrida, segrejemo na sobno temperaturo in končno refluktiramo 1 uro. Reakcijsko zmes ohladimo na 0 °C in pogasimo z 0,30 ml vode, 0,30 ml 15 %-ne vodne raztopine natrijevega hidroksida in 0,90 ml vode. Trdne snovi odfiltriramo skozi blazinico celita in dobro izperemo s kloroformom-metanolom (10:1). S koncentriranjem filtrata dobimo 0,74 g spojine kot rumeno peno. Ta material je 1:1 zmes naslovne spojine in l’-metil-spiro[3H-indol-3,4’-piperidinaj.
Stopnja B: (2R)-[[-2-[[hl-dimetiletoksi)karbonillaminol-2,2-dimetil-l-oksoetil]amino]-lH-indol-3-propanojska kislina benzilester
K 5,0 g (16,5 mmolom) tržno dostopnega N-t-BOC-D-triptofana v 100 ml kloroforma dodamo 1,80 ml (16,5 mmolov) benzilalkohola, 0,20 g (1,65 mmolov) 4-N,Ndimetilaminopiridina (DMAP) in 3,20 g EDC ter mešamo 16 ur. Reakcijsko zmes zlijemo v 100 ml vode in organski sloj ločimo. Vodni sloj nadalje ekstrahiramo z 2 x 100 ml kloroforma. Združene organske faze izperemo s 50 ml 10 %-ne vodne citronske kisline, 100 ml 10 %-ne vodne raztopine natrijevega bikarbonata, posušimo preko brezvodnega magnezijevega sulfata, filtriramo in koncentriramo, da dobimo gosto olje.
K raztopini tega olja v 10 ml diklorometana dodamo 20 ml trifluoroocetne kisline in mešamo 1 uro. Reakcijsko zmes koncentriramo, skrbno naalkalimo z nasičeno vodno raztopino natrijevega bikarbonata in ekstrahiramo s kloroformom (2 x 100 ml). Združene organske faze izperemo s slanico (100 ml), posušimo preko kalijevega karbonata, filtriramo in koncentriramo, da dobimo 5,46 g amina kot ijavo olje, ki ga uporabimo brez čiščenja.
K 5,46 g gornjega produkta v 100 ml kloroforma dodamo 3,40 g (22,2 mmolov) HOBT, 4,60 g (22,2 mmolov) N-BOC-a-metilalanina in 5,32 g (28,0 mmolov) EDC ter mešamo 16 ur. Reakcijsko zmes zlijemo v 100 ml vode in organski sloj ločimo. Vodni sloj nadalje ekstrahiramo z 2 x 100 ml kloroforma. Združene organske faze izperemo s 50 ml 10 %-ne vodne citronske kisline, 100 ml 10 %-ne vodne raztopine natrijevega bikarbonata, sušimo nad brezvodnim magnezijevim sulfatom, filtriramo in koncentriramo, da dobimo 6,94 g produkta kot gosto olje. S flash kromatografijo (200 g SiO2; heksan-etil acetat kot eluent) dobimo 4,75 g želenega materiala kot brezbarvno peno.
*H NMR (CDC13, 200 MHz) S 8,48 (bs, IH), 7,54 (bd, IH), 7,38 - 7,23 (m, 3H), 7,19 (bd, 2H), 7,15 - 7,00 (m, IH), 6,90 (d, IH), 6,86 (d, IH), 5,06 (bs, 2H), 4,95 (ddd, IH),
3,30 (2dd, 2H), 1,40 (s, 15H).
Stopnja C: (2R)-[[-2-[[l,l-dimetiletoksi)karboniljamino]-2,2-dimetil-loksoetiljaminol-lH-indol-3-propanojska kislina
K raztopini 4,75 g materiala iz stopnje B v 100 ml etanola dodamo 1,0 g 10 % Pd/C in mešamo pri sobni temperaturi 18 ur pod balonom Katalizator odfiltriramo skozi blazinico celita in izperemo z etil acetatom. Filtrat koncentriramo, da dobimo 2,96 g kisline kot brezbarvno peno.
'H NMR (CDC13, 200 MHz) δ 8,60 (bs, IH), 7,55 (d, IH), 7,26 - 6,90 (m, 3H), 6,88 (bd, IH), 4,80 (m, IH), 3,32 (2dd, 2H), 1,37 (s, 3H), 1,35 (s, 12H).
Stopnja D: N-[l(R)-IYl,2-dihidro-spiro[3H-indol-3,4’-r)iperidinl-r-il)karbonill2-(indol-3-il)etil1-2-[(l,l-dimetiletoksi)karbonillamino-2-metilpropanamid
K raztopini 0,122 g (0,542 mmolov) 1:1 zmesi intermediata iz stopnje A in Γ-metilspiro[3H-indol-3,4’-piperidina v 5 ml suhega kloroforma pri sobni temperaturi dodamo 0,105 g (0,271 mmolov) intermediata iz stopnje C, 41 mg (0,271 mmolov) HOBT in 80 mg (0,41 mmolov) EDC ter mešamo 2 uri pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes razredčimo z 10 ml kloroforma, izperemo z nasičeno vodno raztopino natrijevega bikarbonata (10 ml) in 10 ml slanice, sušimo preko brezvodnega kalijevega karbonata, filtriramo in koncentriramo. S flash kromatografijo (10 g SiO2; 2 % MeOR-CHCl3) ostanka dobimo 94 mg želenega produkta kot rumeno peno.
Spojina obstoji kot 3:2 zmes rotamerov.
Ή NMR (CDCLj, 400 MHz) δ 8,37 (d, 1/3H), 8,35 (d, 2/3H), 8,19 (d, IH), 7,72 (d, 2/3H), 7,60 (d, 1/3H), 7,38 (d, 2/3H), 7,32 (d, 1/3H), 7,22 - 7,08 (m, 3H), 7,00 (2t, IH), 6,93 (d, 1/3H), 6,69 (t, IH), 6,60 (d, 1/3H), 6,56 (d, 2/3H), 6,50 (d, 2/3H), 5,30 - 5,15 (m, IH), 5,00 (bs, IH), 4,34 (m, IH), 3,62 - 3,50 (m, IH), 3,30 - 3,11 (m, 4H), 2,90 (dt, IH), 2,40 (dt, 1/3H), 1,70 - 1,55 (m, 1 2/3H), 1,34 (s, 2H), 1,31 (s,4H), 1,28 (s, IH), 1,31 (s, 9H), 1,20 -1,11 (m, IH), 0,32 (dt, 1/3H).
Stopnja E: N-fl(R)-r(l,2-dihidro-spiroi3H-indol-3,4’-piperidin1-l’-il)karbonill2-(indol-3-il)etill-2-amino-2-metilpropanamid dihidroklorid
K 27,5 mg intermediata iz stopnje D dodamo 1,0 ml metanola in 1,0 ml koncentrirane klorovodikove kisline ter mešamo 1 uro pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes koncentriramo, naalkalimo s 5 ml 10 %-ne vodne raztopine natrijevega kar75 bonata in ekstrahiramo s kloroformom (3x5 ml). Združene organske faze izperemo s slanico (10 ml), sušimo nad kalijevim karbonatom, filtriramo in koncentriramo, da dobimo gosto olje. S preparativno TLC (0,50 mm plošča; kloroform-metanol 96:5+1 % NH4OH) dobimo 12 mg želenega produkta kot rumeno trdno snov.
Spojina obstoji kot 3:2 zmes rotamerov.
Ή NMR (CDC13, 400 MHz) δ 8,37 (d, 1/3H), 8,35 (d, 2/3H), 8,19 (d, IH), 7,72 (d, 2/3H), 7,60 (d, 1/3H), 7,38 (d, 2/3H), 7,32 (d, 1/3H), 7,22 - 7,08 (m, 3H), 7,00 (2t, IH), 6,93 (d, 1/3H), 6,69 (t, IH), 6,60 (d, 1/3H), 6,56 (d, 2/3H), 6,50 (d, 2/3H), 5,30 - 5,15 (m, IH), 4,34 (m, IH), 3,62 - 3,50 (m, IH), 3,30 - 3,11 (m, 4H), 2,90 (dt, IH), 2,40 (dt, 1/3H), 1,70 - 1,55 (m, 1 2/3H), 1,34 (s, 2H), 1,31 (s, 4H), 1,28 (s, IH), 1,20 - 1,11 (m, IH), 0,32 (dt, 1/3H).
PRIMER 22
N-ll(R)-r(l,2-dihidro-l-metilkarbonilspiro[3H-indol-3,4,-piperidin]-l’-il)karbonil]-2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
K 26 mg intermediata iz primera 21, stopnja D, v 1,0 ml 1,2-dikloroetana in 55 μΐ (0,14 mmolov) N-metilmorfolina pri 0 °C dodamo 6,6 μΐ (0,93 mmolov) acetil klorida in mešamo 1 uro. Reakcijsko zmes razredčimo s 5 ml etra, izperemo s 5 ml 10 %-ne vodne citronske kisline, 5 ml nasičene raztopine natrijevega bikarbonata, sušimo nad brezvodnim magnezijevim sulfatom, filtriramo in koncentriramo, da dobimo bledo rumeno peno, ki jo uporabimo brez čiščenja.
K gornjemu materialu v 1,0 ml diklorometana dodamo 1,0 ml trifluoroocetne kisline in mešamo 1 uro pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes koncentriramo, naalkalimo s 5 ml 10 %-ne vodne raztopine natrijevega karbonata in ekstrahiramo s kloroformom (3x5 ml). Združene organske faze izperemo s slanico (10 ml), sušimo nad kalijevim karbonatom, filtriramo in koncentriramo, da dobimo gosto olje. K raztopini tega materiala v 1,0 ml metanola dodamo 1,0 ml 4M klorovodikove kisline v dioksanu in koncentriramo do suhega, da dobimo 16 mg naslovne spojine kot bledo rumeno trdno snov.
Spojina obstoji kot 3:2 zmes rotamerov.
Ή NMR (CD3OD, 400 MHz) δ 8,43 (d, IH), 8,35 (t, IH), 7,72 (d, 2/3H), 7,61 (d, 1/3H), 7,40 - 7,25 (m, 2H), 7,20 - 7,08 (m, 3H), 7,05 - 6,95 (m, 2 2/3H), 6,50 (d, 1/3H),
5,25 - 5,10 (m, IH), 5,00 - 4,84 (2bd, IH), 3,68 - 3,45 (m, 3H), 3,20 (m, 2H), 2,60 76
2,48 (m, 11/3H), 2,30 (dt, 1/3H), 2,00 (s, IH), 1,98 (s, 2H), 1,81 -1,40 (m, 4H), 1,35 (s, 2H), 1,33 (s, 2H), 1,32 (s, IH), 1,30 (s, IH), 1,25 - 1,15 (m, IH), 1,10 - 1,00 (m, IH), 0,20 (dt, 1/3H).
PRIMER 23
N-[l(R)-[(1.2-dihidro-l-benzensulfonilspiro[3H-indol-3,4,-piperidin1-l’-il)karbonil]-2-(indol-3-il)etil1-2-amino-2-metilpropanamid
K 26 mg (0,050 mmolom) intermediata iz primera 21, stopnja D, v 1,0 ml 1,2dikloroetana in 5 μΐ N-metil morfolina dodamo pri 0 °C 7,5 μΐ benzensulfonilklorida in mešamo 1 uro. Reakcijsko zmes razredčimo z 10 ml etra, izperemo s 5 ml 10 %-ne vodne citronske kisline, 5 ml nasičene raztopine natrijevega bikarbonata, sušimo nad brezvodnim magnezijevim sulfatom, filtriramo in koncentriramo, da dobimo 29,8 mg surovega produkta kot bledo rumeno peno. K raztopini tega materiala v 2 ml metanola dodamo 1,0 ml koncentrirane klorovodikove kisline in mešamo 1 uro. Topilo odstranimo pod zmanjšanim tlakom, da dobimo naslovno spojino kot rjavo trdno snov.
Ta spojina obstoji kot 3:2 zmes rotamerov.
Ή NMR (CDClj, 400 MHz) δ 8,30 (bs, 1/3H), 8,20 (bs, 2/3H), 8,05 (bs, 2/3H), 7,88 (d, 1/3H), 7,72 - 7,45 (m, 5H), 7,43 - 7,30 (m, 4H), 7,20 - 7,05 (m, 2H), 7,00 - 6,90 (m, 2 2/3H), 6,35 (d, 1/3H), 5,25 - 5,10 (m, IH), 4,90 (bs, IH), 4,30 (dt, IH), 4,15 (dt, IH), 3,95 (dd, IH), 3,60 - 3,40 (m, 3H), 3,25 - 3,20 (m, 2H), 2,90 (dt, IH), 2,73 (dt, 2 2/3H), 2,35 (m, 11/3H), 1,80 (m, IH), 1,50 (s, IH), 1,43 (s, 2H), 1,39 (s, 3H), 1,30 -1,20 (m, 2H), 1,00 (bd, 1/3H), 0,90 - 0,70 (m, 2H), 0,55 (bd, 1/3H), 0,48 (dd, 2/3H), -0,90 (dt, 1/3H).
PRIMER 24
N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4,-piperidin1-l’-il)karbonil]-2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
K raztopini 0,258 g (0,50 mmolov) intermediata iz primera 21, stopnja D, v 10 ml suhega diklorometana pri 0 °C dodamo 0,39 ml (1,00 mmol) N-metilmorfolina in 45 μΐ (0,60 mmolov) metansulfonilklorida ter mešamo 30 minut. Reakcijsko zmes razredčimo z 10 ml etra ter izperemo z nasičeno raztopino natrijevega bikarbonata (5 ml), slanico (5 ml), sušimo nad brezvodnim magnezijevim sulfatom, filtriramo in koncentriramo, da dobimo produkt kot bledo rumeno peno, ki jo uporabimo brez čiščenja. Raztopini tega materiala v 3,0 ml diklorometana dodamo 1,0 ml trifluoroocetne kisline in mešamo 1 uro pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes koncentriramo, naalkalimo s 5 ml 10 %-ne vodne raztopine natrijevega karbonata in ekstrahiramo s kloroformom (3x5 ml). Združene organske faze speremo s slanico (10 ml), sušimo nad kalijevim karbonatom, filtriramo in koncentriramo, da dobimo gosto olje. K raztopini tega materiala v 3,0 ml metanola dodamo 200 μΐ 4M klorovodikove kisline v dioksanu in koncentriramo do suhega, da dobimo 98 mg želenega materiala kot bledo rumeno trdno snov.
Spojina obstoji kot 3:2 zmes rotamerov.
Ή NMR (CD3OD, 400 MHz) δ 8,43 (d, IH), 8,35 (t, IH), 7,72 (d, 2/3H), 7,61 (d, 1/3H), 7,40 - 7,25 (m, 2H), 7,20 - 7,08 (m, 3H), 7,05 - 6,95 (m, 2 2/3H), 6,50 (d, 1/3H),
5,25 - 5,10 (m, IH), 5,00 - 4,84 (2bd, IH), 3,68 - 3,45 (m, 3H), 3,20 (m, 2H), 2,82 (s, IH), 2,80 (s, 2H), 2,60 - 2,48 (m, 11/3H), 2,30 (dt, 1/3H), 1,81 -1,40 (m, 4H), 1,35 (s, 2H), 1,33 (s, 2H), 1,32 (s, IH), 1,30 (s, IH), 1,25 -1,15 (m, IH), 1,10 - 1,00 (m, IH), 0,20 (dt, 1/3H).
PRIMER 25
N-l(R)-[1.2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidinl-l,-il)karbonillf3-fenilpropill-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: N-l(R)-[l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4?-piperidin]l’-il)karbonill-3-fenilpropill-2-i(l,l-dimetiletoksi)karbonil]amino-2-metilpropanamid
Naslovno spojino pripravimo iz (2R)-2-[(l,l-dimetiletoksi)karbonil]amino-4-fenil1-butanojske kisline in l,2-dihidro-l-metilsulfonilspiro[3H-indol-3,4’piperidinjhidroklorida z uporabo pripajalnega postopka, kot je opisan v primeru 18, stopnja B. Surovi produkt čistimo na silikagelu ob uporabi 5 % acetona v CH//
Ή NMR (400 MHz, CDC/) δ 7,2 (m, 9H), 4,9 (m, IH), 4,5 (m, IH), 3,8 (m, 2H), 3,2 (m, 2H), 2,9 (s, 3H), 2,7 (m, 2H), 2,3 (s, 2H), 2,0 (m, 2H), 1,7 (m, 4H), 1,5 (s, 6H), 1,4 (s,9H).
Stopnja B: N-l(R)-[1.2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidinll,-il)karbonill-3-fenilpropill-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Pripravljen iz intermediata, dobljenega v stopnji A, ob uporabi postopka odstranitve zaščite, kot je opisano v primeru 18, stopnja C.
NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7,3 (m, 9H), 4,5 (m, IH), 3,9 (m, 2H), 3,5 (m, 2H), 3,2 (m, 2H), 2,9 (s, 3H), 2,7 (m, 4H), 2,0 (m, 4H), 1,6 (s, 6H).
PRIMER 26
N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-trifluorometansulfonil-5-fluoro-spiro[3H-indol-3,4’piperidin1-l,-il)karbonil]-2-(indol-3-il)etill-2-amino-2-metilpropanamid trifluoroacetat
Stopnja A: Ι^Ζ^ΛΜίΌ^Ιζ^βιιζΐΙοΚΜίΜΛοηΐ^δ^ηοΓΟιβρΐΓοΙ^Η^η^οΙό^ piperidinj
K 7,82 g 60 %-nega natrijevega hidrida dodamo heksan in tekočine dekantiramo. K temu dodamo raztopino 11,10 ml (89 mmolov) 2,5-difluorofenilacetonitrila v 150 ml DMSO in mešamo 30 minut. Po kapljicah dodamo raztopino 15,10 g 1-klorometil etilamina-hidroklorida v 150 ml DMSO in segrevamo 4 ure pri 75 °C. Reakcijsko zmes zlijemo na 600 g ledu in ekstrahiramo z etrom (5 x 200 ml). Združene organske faze izperemo s 3 x 100 ml 2N klorovodikove kisline. Združene vodne ekstrakte naalkalimo na pH=9 s 50 %-nim vodnim natrijevim hidroksidom in ekstrahiramo z etrom (3 x 200 ml). Združene organske faze izperemo s slanico (100 ml), posušimo nad kalijevim karbonatom in koncentriramo, da dobimo 15,54 g gostega olja.
Etanol (24 ml) dodajamo po kapljicah k 9,90 g litijevega aluminijevega hidrida v 250 ml DME pri 0 °C in nato segrevamo do refluksa. Dodamo raztopino spojine v 250 ml DME in refluktiramo 72 ur. Reakcijsko zmes nato ohladimo na 0 °C in pogasimo z vodo (10 ml), 10 ml 15 %-nega NaOH in 30 ml vode. Suspenzijo sušimo preko I^CO^ filtriramo in koncentriramo, da dobimo 13,6 g gostega olja. Ta surovi produkt trituriramo s heksani, trdno snov filtriramo in nadalje izperemo s heksani. 200 MHz NMR (CDC13) trdne snovi (2,6 g) nakazuje okoli 75 % želenega spiroindolina.
K raztopini 1,02 g te zmesi v 50 ml CH2C12 pri 0 °C dodamo 1,0 ml trietilamina in 0,80 ml CBZ-C1 ter mešamo 1 uro pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes zlijemo v 50 ml 5 %-ne HC1 in vodni sloj ločimo. Vodni sloj naalkalimo s 50 %-nim NaOH do pH=10 in ekstrahiramo s CH2C12 (3 x 25 ml). Združene organske faze izperemo s slanico (50 ml), sušimo preko K^COj in koncentriramo, da dobimo 1,26 g spojine kot gosto olje.
Ή NMR (200 MHz, CDC13) δ 7,7 - 7,90 (m, IH), 7,50 - 7,15 (m, 6H), 6,95 - 6,60 (m, 2H), 5,28 (bs, 2H), 3,90 (bs, 2H), 2,85 (bd, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,20 - 1,80 (m, 4H), 1,65 (bd, 2H).
Stopnja B: N-fl(R)-f(1.2-dihidro-l-benziloksikarbonil-5-fluorospiroi3H-indol3,4,-piperidin1-l,-il)karbonill-2-(indol-3-il)etil]-[[(l.l-dimetiletiloksi)karbonil] amino] -2-metilpropanamid
K 1,62 g (4,62 mmolom) gornjega intermediata iz stopnje A v 10 ml 1,2-dikloroetana pri 0 °C dodamo 0,65 ml ACE-C1 in refluktiramo 1 uro. Reakcijsko zmes koncentriramo na 1/3 volumna, razredčimo z 10 ml metanola in segrevamo do refluksa 1 uro. Reakcijsko zmes koncentriramo do suhega in trituriramo z etrom, da dobimo ijavo trdno snov. Ta material raztopimo v nasičeni raztopini natrijevega bikarbonata (25 ml) in ekstrahiramo z diklorometanom (2 x 25 ml). Združene organske faze sušimo nad K2CO3in koncentriramo, da dobimo 0,384 g proste baze.
K 0,384 g tega materiala v 15 ml CH2C12 dodamo 0,483 g kislinskega intermediata, dobljenega iz stopnje C primera 21, 0,189 g HOBT in 0,34 g EDC ter mešamo 18 ur. Reakcijsko zmes zlijemo v 10 ml vode in ekstrahiramo s CH2C12 (2 x 10 ml). Združene organske faze izperemo s 20 ml 10 %-ne citronske kisline, 20 ml nasičenega NaHCO3, sušimo preko MgSO4 in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka na 25 g silikagela s heksani-acetonom (1:1) kot eluentom dobimo 0,389 g želenega materiala.
H NMR (200 MHz, CDC13) δ 7,7 - 7,90 (m, IH), 7,50 - 7,15 (m, 6H), 6,95 - 6,60 (m, 2H), 5,28 (bs, 2H), 3,90 (bs, 2H), 2,85 (bd, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,20 -1,80 (m, 4H), 1,65 (bd, 2H).
Stopnja C: N-[l(R)-[(l,2-dihidro-5-fluoro-spiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-l’illkarbonill-2-findol-3-il)etilj-iifl.l-dimetiletiloksi)karboniljaminol-2-metilpropanamid
K raztopini 0,363 g intermediata, dobljenega iz stopnje B, v 5 ml etanola dodamo 0,10 g 20 %-nega paladijevega hidroksida na oglju in hidrogeniramo pod balonom H2 1 uro, katalizator odfiltriramo in izperemo z več metanola. Filtrat koncentriramo, da dobimo 0,262 g želenega materiala.
1H NMR (400 MHz, CDC13) Ta material je 2:1 zmes rotamerov. δ 8,85 - 8,60 (2bs, IH), 7,70 (d, 2/3H), 7,55 (d, 1/3H), 7,38 (d, 2/3H), 7,30 (d, 1/3H), 7,28 - 7,15 (m, 4H), 7,13 - 7,02 (m, 2H), 6,65 (dt, 2H), 6,50 (dd, 1/3H), 6,45 (dd, 2/3H), 6,14 (dd, 2/3H),
5.30 - 5,13 (m, IH), 5,10 (bs, IH), 4,30 (bd, 2/3H), 422 (bd, 1/3H), 3,50 - 3,30 (m, IH),
3.30 - 3,00 (m, 4H), 3,00 - 2,80 (m, IH), 2,73 (t, IH), 2,53 - 2,40 (m, 11/3H), 2,20 (t, 1/3H), 1,49 (s, 3H), 1,45 (s, 3H), 1,41 (s, 9H), 1,20 (dt, 1/3H), 0,95 (bd, 2/3H), 0,90 (dt, 2/3H), -0,05 (dt, 1/3H).
Stopnja D: N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-trifluorometansulfonil-5-fluoro-spiro[3Hindol-3,4,-piperidinl-l,-il)karbonil1-2-(indol-3-il)etil]-[[fl,ldimetiletiloksi)karbonil]amino1-2-metilpropanamid
K raztopini 30 mg intermediata, dobljenega iz stopnje C, v 1 ml diklorometana pri 0 °C dodamo 0,050 ml trietilamina in 0,020 ml anhidrida trifluorometansulfonske kisline ter mešamo 5 minut, katalizator odfiltriramo in izperemo z več metanola. Reakcijsko zmes vlijemo v 5 ml 5 %-ne vodne raztopine natrijevega karbonata in mešamo 5 minut. Vodni sloj ekstrahiramo s CH2C12 (2x5 ml), združene organske faze sušimo preko MgSO4 filtriramo in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka na 3 g silikagela s CH^^-acetonom (4:1) kot eluentom dobimo 21 mg produkta.
1H NMR (400 MHz, CDC13) Ta material je 2:1 zmes rotamerov. δ 8,40 (bs, 2/3H),
8,25 (bs, 1/3H), 7,70 (d, 2/3H), 7,60 (d, 1/3H), 7,40 (d, 2/3H), 7,35 - 7,10 (m, 5H), 6,90 - 6,80 (m, 2H), 6,18 (dd, IH), 5,30 - 5,13 (m, IH), 4,95 (bs, 2/3H), 4,90 (s, 1/3H), 4,45 (bd, 2/3H), 4,35 (bd, 1/3H), 3,85 - 3,70 (m, 2H), 3,70 - 3,55 (m, 2H), 3,30 - 3,10 (m, 2H), 2,70 (t, IH), 2,45 (t, 1/3H), 2,35 (t, 2/3H), 1,49 (s, 3H), 1,45 (s, 3H), 1,41 (s, 9H), 1,20 (dt, 1/3H), 0,95 (bd, 2/3H), 0,90 (dt, 2/3H), -0,05 (dt, 1/3H).
Stopnja E: N-[l(R)-i(1.2-dihidro-l-trifluorometansulfonil-5-fluoro-spiro[3Hindol-S^-piperidinj-r-iljkarbonill^-fmdol-S-iljetil]^metilpropanamid trifluoroacetat
Raztopino 21 mg intermediata, dobljenega iz stopnje D, vzdržujemo v 1 ml diklorometana in 1 ml trifluoroocetne kisline pri sobni temperaturi 30 minut. Hlapne snovi uparimo do suhega in trituriramo z etrom, da dobimo rumeno trdno snov.
XH NMR (400 MHz, CD3OD) Ta material je 2:1 zmes rotamerov. S 7,65 (d, 2/3H),
7,60 (d, 1/3H), 7,42 (d, 2/3H), 7,35 - 7,10 (m, 5H), 6,93 - 6,80 (m, 2H), 6,24 (dd,lH),
5,30 - 5,13 (m, IH), 4,95 (bs, 2/3H), 4,90 (s, 1/3H), 4,45 (bd, 2/3H), 4,35 (bd, 1/3H), 385 - 3,70 (m, 2H), 3,70 - 3,55 (m, 2H), 3,30 - 3,10 (m, 2H), 2,70 (t, IH), 2,45 (t, 1/3H), 2,35 (t, 2/3H), 1,49 (s, 3H), 1,45 (s, 3H), 0,93 (bd, 2/3H), 0,90 (dt, 2/3H), -0,05 (dt, 1/3H).
PRIMER 27
N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-[metoksikarbonil]metilsulfonil-5-fluoro-spiro(3H-indol3,4,-piperidinl]-l,-il)karbonil]-2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid trifluoroacetat
Stopnja A: N-(l(R)-i(1.2-dihidro-l-[metoksikarbonillmetilsulfonil-5-fluorospiro[3H-indol-3,4’-piperidinl1-T-il)karbonill-2-(indol-3-iI) etill-2-metilpropanamid trifluoroacetat
K raztopini 77 mg intermediata, dobljenega iz stopnje C primera 26, v 1 ml diklorometana pri 0 °C dodamo 0,30 ml N-metilmorfolina in 0,024 ml 2-karbometoksimetansulfonilklorida ter mešamo 1 uro. Reakcijsko zmes zlijemo v 5 ml 5 %-ne vodne raztopine natrijevega karbonata in mešamo 5 minut. Vodni sloj ekstrahiramo s CF^C^ (2x5 ml) in združene organske faze izperemo s slanico (5 ml), sušimo preko MgSO4, filtriramo in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka na 5 g silikagela s CF^C^-acetonom (4:1) kot eluentom dobimo 64 mg produkta.
XH NMR (400 MHz, CDC13) Ta material je 2:1 zmes rotamerov. δ 8,48 (bs, 2/3H), 8,35 (bs, 1/3H), 7,70 (d, 2/3H), 7,60 (d, 1/3H), 7,40 (d, 2/3H), 7,32 (d, 1/3H), 7,25 7,00 (m, 4H), 6,90 - 6,78 (m, 2H), 6,18 (dd, IH), 5,30 - 5,20 (m, IH), 4,97 (bs, 2/3H), 4,91 (s, 1/3H), 4,50 - 4,35 (2bd, IH), 4,02 (s, 2/3H), 3,99 (s, 1/3H), 3,76 (q, 2H), 3,58 (s, IH), 3,56 (s, 2H), 3,08 - 3,07 (m, 2H), 2,72 (t, IH), 2,50 - 2,30 (2t, IH), 1,65 (t,
1/3Η), 1,50 (s, 2H), 1,46 (s, 4H), 1,40 (s, 9H), 1,30 (m, 1/3H), 1,10 (bd, 2/3H), 0,88 (dt, 2/3H), -0,13 (dt, 1/3H).
Stopnja B: N-[l(R)-f(l,2-dihidro-l-fmetoksikarbonillmetilsulfonil-5-fluorospiro[3H-indol-3,4,-piperidinll-r-il)karbonil]-2-(indol-3-il)etilI-2-metilpropanamid trifluoroacetat
Raztopino 24 mg intermediata dobljenega iz stopnje A, vzdržujemo v 1 ml diklorometana in 1 ml trifluoroocetne kisline pri sobni temperaturi 30 minut. Hlapne snovi uparimo do suhega in trituriramo z etrom, da dobimo 23 mg brezbarvne trdne snovi.
rH NMR (400 MHz, CD3OD) Ta material je 2:1 zmes rotamerov. δ 8,70 (bs, 1/3H),
8,60 (bs, 2/3H), 7,60 (m, 2/3H), 7,50 (d, 2/3H), 7,48 (m, 1/3H), 7,40 (d, 2/3H), 7,31 (d, 1/3H), 7,25 - 7,00 (m, 4H), 6,95 - 6,85 (m, IH), 6,70 (dd, 1/3H), 6,15 (dd, 2/3H), 5,20 5,10 (m, IH), 4,38 (bd, 1/3H), 4,28 (bd, 2/3H), 4,02 (s, 2/3H), 3,99 (s, 1/3H), 3,76 (q, 2H), 3,58 (s, IH), 3,56 (s, 2H), 3,08 - 3,07 (m, 2H), 2,72 (t, IH), 2,50 - 2,30 (2t, IH), 1,65 (t, 1/3H), 1,65 (s, 2H), 1,60 (s, 4H), 1,30 (m, 1/3H), 1,00 (bd, 2/3H), 0,88 (dt, 2/3H), -0,10 (dt, 1/3H).
PRIMER 28
N-ri(R)-i(1.2-dihidro-l-metansulfonil-5-fluoro-spiroI3H-indol-3.4’-piperidin]-ril)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etilI-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: N-fl(R)-i(l,2-dihidro-l-benziloksikarbonil-5-fluorospiror3Hindol-3.4’-piperidin1-T-il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etil)-[((l.l-dimetiletiloksi)karbonil]amino]-2-metilpropanamid
K 0,330 g l,2-dihidro-l-benziloksikarbonil-5-fluoro-spiro[3H-indol-3,4’-piperidina, dobljenega iz stopnje A primera 26, v 10 ml 1,2-diklorometana pri sobni temperaturi dodamo 0,35 g N-tBOC-O-benzil-D-serina, 0,195 g HOBT in 0,30 g EDC ter mešamo 18 ur. Reakcijsko zmes zlijemo v 10 ml vode in ekstrahiramo s CH2C12 (2 x 10 ml). Združene organske faze izperemo z 20 ml 10 %-ne citronske kisline, 20 ml nasičenega NaHCO3, sušimo preko MgSO4 in koncentriramo.
K raztopini intermediata, dobljeni iz stopnje A, v 5 ml CH2C12 dodamo 5 ml trifluoroocetne kisline in mešamo 30 minut pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes koncentriramo, razredčimo s 5,0 ml diklorometana in skrbno naalkalimo z 10 ml 10 %-ne vodne raztopine natrijevega karbonata. Organski sloj ločimo in vodni sloj nadalje ekstrahiramo z 2 x 15 ml diklorometana. Združene organske faze izperemo s 5 ml vode, sušimo nad kalijevim karbonatom, filtriramo in koncentriramo, da dobimo 0,39 g amina kot gosto olje.
K 0,39 g gornjega intermediata v 10 ml 1,2-diklorometana pri sobni temperaturi dodamo 0,24 g N-tBOC-a-metilalanina, 0,195 g HOBT in 0,30 g EDC ter mešamo 18 ur. Reakcijsko zmes zlijemo v 10 ml vode in ekstrahiramo s CH2C12 (2 x 10 ml). Združene organske faze izperemo z 20 ml 10 %-ne citronske kisline, 20 ml nasičenega NaHCO3, sušimo preko MgSO4 in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka preko 30 g silikagela s heksanom-etil acetatom (2 : 1) kot eluentom dobimo 0,33 g produkta.
rH NMR (200 MHz, CDC13) δ 7,80 (bs, IH), 7,50 - 7,15 (m, 5H), 7,10 (bd, IH), 6,90 6.70 (m, IH), 6,27 (bd, IH), 7,35 - 7,10 (m, 5H), 5,35 - 5,10 (m, 3H), 4,99 (s, 1 H),
4.70 - 4,40 (m, 3H), 3,90 - 3,50 (m, 4H), 3,15 - 2,90 (m, 2H), 2,80 - 2,50 (m, 2H), 1,80 1,40 (m, 2H), 1,50 (3H), 1,42 (s, 6H).
Stopnja B: N-[l(R)-[(1.2-dihidro-5-fluoro-spiro[3H-indol-3,4,-piperidin1-r-il)karbonil1-2-(fenilmetiloksi)etil]-[[(l,l-dimetiletiloksi)karbonil1aminol-2-metilpropanamid
K raztopini 0,330 g intermediata, dobljenega iz stopnje A, v 5 ml etanola dodamo 1 kapljico trietilamina in hidrogeniramo 3 ure z balonom vodika. Katalizator odfiltriramo skozi blazinico celita in izperemo z etil acetatom. Filtrat koncentriramo, da dobimo 0,269 g produkta kot brezbarvno peno.
!H NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,35 - 7,20 (m, 4H), 7,17 - 7,08 (m, 2H), 6,80 - 6,65 (m, 2/2/3H), 6,27 (dt, 1/3H), 5,20 - 5,10 (m, IH), 4,90 (s, IH), 4,60 - 4,40 (m, 3H), 4,00 (bt, IH), 3,75 - 3,60 (m, IH), 3,55 - 3,40 (m, 3H), 3,18 - 3,30 (m, 2H), 2,90 - 2,65 (m, IH), 1,83 -1,50 (m, 4H), 1,48 (s, 4H), 1,42 (s, 2H), 1,39 (s, 9H).
Stopnja C: N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonil-5-fluorospiroi3H-indol-3,4’piperidin]-l,-il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etil]-[f(1,1-dimetiletiloksi)- karbonil][amino]-2-metilpropanamid
K raztopini 0,134 g intermediata iz stopnje B v 5 ml diklorometana dodamo 0,080 ml
N-metilmorfolina in 0,022 ml metansulfonilklorida ter mešamo 30 minut pri 0 °C.
Reakcijsko zmes razredčimo s še 5 ml diklorometana in izperemo s 5 ml nasičene raztopine natrijevega bikarbonata, slanico (5 ml), sušimo preko MgSO4 in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka preko 20 g silikagela dobimo 0,101 g želenega produkta.
Ή NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,40 - 7,20 (m, 5H), 7,08 (d, 1 H), 6,95 - 6,80 (m, 2/1/3H), 6,23 (dd, 2/3H), 5,20 - 5,10 (m, IH), 4,90 (bs, IH), 4,60 (bd, 2/3 H), 4,58 4,40 (m, 3/1/3H), 4,10 - 4,00 (m, IH), 3,388 - 3,70 (m, 21/3H), 3,66 - 3,60 (m, 1/2H),
3,60 - 3,50 (m, IH), 3,10 - 2,95 (m, IH), 2,86 (s, IH), 2,84 (s, 2H), 2,80 (t, 1/3H), 2,65 (t, 2/3H), 2,90 - 2,50 (m, 4H), 1,45 (s, 4H), 1,44 (s, 2H), 1,42 (s, 3H), 1,40 (s, 6H).
Stopnja D: N-Il(R)-f(l,2-dihidro-l-metansulfonil-5-fluoro-spirof3H-indol-3,4’piperidinl -1 ’-il)karbonill -2-(fenilmetiloksi)etin -2-amino-2metilpropanamid hidroklorid
K raztopini 0,101 g intermediata iz stopnje C v 1 ml diklorometana dodamo 1,0 ml trifluoroocetne kisline in vzdržujemo 30 minut pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes uparimo do suhega, naalkalimo z 10 %-no vodno raztopino natrijevega karbonata (10 ml) in ekstrahiramo z diklorometanom (3x5 ml). Združene organske faze izperemo s slanico (5 ml), sušimo preko kalijevega karbonata in koncentriramo. Ta material raztopimo v 2 ml etil acetata in dodamo 0,10 ml 4M HCl v EtOAc pri 0 °C. Oborino filtriramo pod dušikom, izperemo z EtOAc/etrom (1 : 1) in sušimo, da dobimo 62 mg produkta kot belo trdno snov.
‘H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7,40 - 7,20 (m, 5H), 7,08 (d, IH), 6,95 - 6,80 (m, 2/1/3H), 6,23 (dd, 2/3H), 5,20 - 5,10 (m, IH), 4,60 (bd, 2/3H), 4,58 - 4,40 (m, 3/1/3H),
4.10 - 4,00 (m, IH), 3,388 - 3,70 (m, 21/3H), 3,66 - 3,60 (m, 1/2H), 3,60 - 3,50 (m, IH),
3.10 - 2,95 (m, IH), 2,86 (s, IH), 2,84 (s, 2H), 2,80 (t, 1/3H), 2,65 (t, 2/3H), 2,90 - 2,50 (m, 4H), 1,45 (s, 4H), 1,44 (s, 2H).
PRIMER 29
Stopnja A: ^[1^)-((1,2-0111^0-1-66^6^^10^1-5-1100^)50^013^^01-3,4,piperidin]-l’-il)karbonil[-2-(fenilmetiloksi)etil]-2-amino-2metilpropanamid trifluoroacetat
K raztopini 0,026 g intermediata iz stopnje B primera 27 v 2 ml diklorometana dodamo 0,020 ml N-metilmorofolina in 0,012 ml benzensulfonilklorida ter mešamo 1 uro pri 0 °C. Reakcijsko zmes zlijemo v 10 ml etra in izperemo s 5 ml nasičene raztopine natrijevega bikarbonata, sušimo nad MgSO4 in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka preko 10 g silikagela s CH2Cl2-etrom (2 : 1) kot eluentom dobimo 0,019 g produkta.
Ta material obdelujemo z 1 ml diklorometana in 1 ml trifluoroocetne kisline 1 uro. Reakcijsko zmes uparimo do suhega in ostanek trituriramo z etrom, da dobimo 18 mg želenega produkta kot belo trdno snov.
Ή NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7,80 (d, 2H), 7,70 - 7,55 (m, 2H), 7,55 - 7,50 (m, 2H),
7,40 - 7,20 (m, 42/3H), 7,03 - 6,92 (m, IH), 6,82 (dt, 2/3H), 6,47 (dt, 2/3H), 5,08 (dt, IH), 4,60 - 4,48 (m, 2H), 4,33 (bt, IH), 3,94 - 3,85 (m, 3H), 3,75 - 3,65 (m, 2H), 3,10 (dt, IH), 2,80 (dt, IH), 1,73 (dt, IH), 1,58 (s, 4H), 1,56 (s, 2H), 1,50 (dt, IH), 1,38 (dt, IH), 1,10 (dt, 2H).
PRIMER 30
N-[l(R)-[(1.2-dihidro-l-etansulfonil-spiroi3H-indol-3.4,-piperidinl-T-il)karbonilj-2-(fenilmetiloksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: N^l{R)JQi2rdihidro2lrbenziloksikarboniEspiro£3H2indol23a42 piperidin]-r-il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)-etil]-[[(l,l-dimetiletiloksi)karbonil]amino]-2-metilpropanamid
K 5 g l,2-dihidro-l-benziloksikarbonil-spiro[3H-indol-3,4’-piperidin]hidroklorida v 100 ml diklorometana pri sobni temperaturi dodamo 3,64 g N-tBOC-O-benzil-Dserina, 1,83 g HOBT, 2,60 ml N-metilmorfolina in 3,70 g EDC ter mešamo 18 ur. Reakcijsko zmes zlijemo v 100 ml vode in ekstrahiramo s CH2C12 (2 x 100 ml). Združene organske faze izperemo s 100 ml 10 %-ne citronske kisline, 100 ml nasičenega NaHCO3, sušimo preko MgSO4 in koncentriramo.
K raztopini intermediata, dobljeni iz stopnje A, v 20 ml CH2C12 dodamo 20 ml trifluoroocetne kisline in mešamo 30 minut pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes koncentriramo, razredčimo s 50 ml diklorometana in skrbno naalkalimo s 100 ml 10 %-ne vodne raztopine natrijevega karbonata. Organski sloj ločimo in vodni sloj nadalje ekstrahiramo z 2 x 50 ml diklorometana. Združene organske faze izperemo s 50 ml vode, sušimo nad kalijevim karbonatom, filtriramo in koncentriramo, da dobimo amin kot gosto olje.
H gornjemu intermediatu v 50 ml diklorometana pri sobni temperaturi dodamo 2,50 g N-tBOC-a-metilalanina, 1,83 g HOBT in 3,70 g EDC ter mešamo 18 ur. Reakcijsko zmes zlijemo v 10 ml vode in ekstrahiramo s CH2C12 (2 x 10 ml). Združene organske faze izperemo z 20 ml 10 %-ne citronske kisline, 20 ml nasičenega NaHCO3, sušimo preko MgSO4 in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka preko 300 g silikagela s heksanom-etil acetatom (2 :1) kot eluentom dobimo 8,1 g produkta.
*H NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,85 (bs, IH), 7,45 - 7,20 (m, 10H), 7,20 - 7,05 (m, 22/3H), 6,95 (t, 1/3H), 6,88 (t, 1/3H), 6,53 (dd, 2/3H), 5,35 - 5,20 (m, 2H), 5,20 - 5,10 (m, IH), 4,92 (bs, IH), 4,65 - 4,20 (m, 4H), 4,05 (bd, 2/3H), 4,00 - 3,80 (m, 1,1/3H), 3,80 - 3,60 (m, IH), 3,10 (t, 2/3H), 3,00 - 2,85 (m, 1/3H), 2,82 - 2,60 (2t, IH), 1,90 1,55 (m, 5H), 1,49 (s, 4H), 1,42 (s, 2H), 1,40 (s, 9H).
Stopnja B: N-[l(R)-[(l,2-dihidro-spiror3H-indol-3,4’-piperidin]-l’-il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etil]-[[(l,l-dimetiletoksi)karbonil]amino]-2-metilpropanamid
K raztopini 8,10 g intermediata, dobljenega iz stopnje A, v 80 ml etanola dodamo 1 g 20 %-nega paladijevega hidroksida/C in hidrogeniramo 1 uro z balonom vodika. Katalizator odfiltriramo skozi blazinico celita in izperemo z etilacetatom. Filtrat koncentriramo, da dobimo 4,69 g produkta kot brezbarvno peno.
XH NMR (400 MHz, CDCL,) δ 7,35 - 7,20 (m, 5H), 7,18 (d, 1/2H), 7,10 (d, 1/2H), 7,04 - 6,98 (m, 2H), 6,75 - 6,60 (m, 2H), 5,20 - 5,10 (m, IH), 4,97 (bs, IH), 4,55 - 4,40 (m, 3H), 3,95 (dd, IH), 3,73 - 3,61 (m, IH), 3,60 - 3,50 (m, IH), 3,50 - 3,33 (m, 3H), 3,10 (dt, IH), 2,83 (dt, IH), 1,85 -1,55 (m, 5H), 1,47 (s, 4H), 1,42 (s, 2H), 1,39 (s, 9H).
Stopnja C: N-[l(R)[(1.2-dihidro-l-etansulfonil-spiro[3H-indol-3.4’-piperidin]r-il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)-etil]-2-amino-2-metilpropanamid
K raztopini 0,158 g intermediata iz stopnje B v 5 ml diklorometana dodamo 0,053 ml N-metilmorfolina in 0,034 ml etansulfonilklorida ter mešamo 30 minut pri 0 °C in eno uro pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes razredčimo s še 5 ml diklorometana in izperemo s 5 ml nasičene raztopine natrijevega bikarbonata, slanico (5 ml), sušimo preko MgSO4 in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka preko 10 g silikagela s CH2Cl2-etrom (3 :1) kot eluentom dobimo 0,057 g želenega produkta.
K raztopini 0,057 g gornjega intermediata v 1 ml diklorometana dodamo 1,0 ml tri87 fluoroocetne kisline in vzdržujemo 30 minut pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes koncentriramo do suhega in trituriramo z etrom, da dobimo 0,034 g produkta kot rumeno trdno snov.
Ή NMR (400 MHz, CD3OD) S 7,40 - 7,25 (m, 5H), 7,25 - 7,13 (m, 21/2H), 7,03 (t, 1/2H), 6,95 (t, 1/2H), 6,80 (d, 1/2H), 5,18 (dt, IH), 4,60 - 4,42 (m, 3H), 4,08 (t, IH), 3,96 (s, 2H), 3,83 - 3,70 (m, 2H), 3,29 - 3,15 (m, 3H), 2,84 (dt, IH), 1,90 (dt, IH), 1,74 -1,62 (m, 4H), 1,62 (s, 2H), 1,60 (s, 4H), 1,33 (dt, 3H).
PRIMER 31
Stopnja A: N-[l(R)-r(l,2-dihidro-l-i2-metil-2-propansulfonilspirof3H-indol3,4Tpiperidinl1-r-il)karbonill-2-(fenilmetiloksi)etil1-[f(l,ldimetiletiloksi)-karbonillamino1-2-metilpropanamid
K raztopini 0,212 g intermediata iz stopnje B primera 29 v 2 ml 1,2-dikloroetana dodamo 0,083 ml trietilamina in 0,054 ml izopropilsulfonilklorida ter mešamo 30 minut pri 0 °C in 3 ure pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes razredčimo s 5 ml diklorometana in izperemo s 5 ml nasičene raztopine natrijevega dikarbonata, slanico (5 ml), sušimo preko MgSO4 in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka preko 10 g silikagela s CH2Cl2-etrom (3 :1) kot eluentom dobimo 0,113 g želenega produkta.
K raztopini 0,101 g gornjega intermediata v 1 ml diklorometana dodamo 1,0 ml trifluoroocetne kisline in vzdržujemo 30 minut pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes uparimo do suhega, naalkalimo z 10 %-no vodno raztopino natrijevega karbonata (10 ml) in ekstrahiramo z diklorometanom (3x5 ml). Združene organske faze izperemo s slanico (5 ml), sušimo nad kalijevim karbonatom in koncentriramo. Ta material raztopimo v 2 ml etil acetata in pri 0 °C dodamo 0,10 ml 4M HCI v EtOAc. Oborino filtriramo pod dušikom, izperemo z EtOAc/etrom (1 : 1) in posušimo, da dobimo 88 mg produkta kot belo trdno snov.
Ή NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7,40 - 7,20 (m, 5H), 7,08 (d, IH), 6,95 - 6,80 (m, 2/1/3H), 6,23 (dd, 2/3H), 5,20 - 5,10 (m, IH), 4,60 (bd, 2/3H), 4,58 - 4,40 (m, 3/1/3H),
4.10 - 4,00 (m, IH), 3,388 - 3,70 (m, 21/3H), 3,66 - 3,60 (m, 1/2H), 3,60 - 3,50 (m, IH),
3.10 - 2,95 (m, IH), 2,86 (s, IH),2,84 (s, 2H), 2,80 (t, 1/3H), 2,65 (t, 2/3H), 2,90 - 2,50 (m, 4H), 1,45 (s, 4H), 1,44 (s, 2H).
PRIMER 32
Stopnja A: N-[l(R)-[(1.2-dihidro-l-[2-karbometoksimetansulfonilspiroi3Hindol-3,4’-piperidin] ] -1 ’-il) karbonil! -2-(fenilmetiloksi)etil] fi(l,l-dimetiletiloksi)-karbonil]-amino]-2-metilpropanamid hidroklorid
K raztopini 0,50 g intermediata iz stopnje B primera 29 v 10 ml diklorometana dodamo 0,21 ml N-metilmorfolina in 0,10 ml 2-karbometoksimetansulfonilklorida ter mešamo 30 minut pri 0 °C. Reakcijsko zmes razredčimo z 10 ml diklorometana in izperemo s 5 ml nasičene raztopine natrijevega bikarbonata, slanico (5 ml), sušimo preko MgSO4 in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka preko 20 g silikagela s CH2Cl2-etrom (3 :1) kot eluentom dobimo 0,529 g želenega produkta.
Ή NMR (400 MHz, CDCL) δ 7,39 - 7,20 (m, 5H), 7,20 - 7,10 (m, 21/2H), 7,08 (dt, IH), 6,92 (t, 1/2H), 6,55 (d, 1/2H), 5,20 - 5,10 (m, IH), 4,94 (bs, IH), 4,60 (bd, IH), 4,53 - 4,40 (m, 2H), 4,10 (2bs, 2H), 4,05 - 3,90 (m, 2H), 3,70 (Dt, IH), 3,63 (s, 11/2H),
3,61 (s, 11/2H), 3,59 - 3,50 (m, IH), 3,05 (dt, IH), 2,70 (dt, 1H0, 1,90 - 1,50 (m, 4H), 1,49 (s, 4H), 1,44 (s, 2H), 1,39 (s, 9H).
Stopnja B: N-[l(R)-i(l,2-dihidro-l-[2-karbometoksimetansulfonilspiroi3Hindol-3,4,-piperidin]]-l’-il)karbonill-2-(fenilmetiloksi)etil]-2amino-2-metil-propanamid hidroklorid
K raztopini 0,113 g gornjega intermediata v 1 ml diklorometana dodamo 1,0 ml tirfluoroocetne kisline in vzdržujemo 30 minut pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes uparimo do suhega, naalkalimo z 10 %-no vodno raztopino natrijevega karbonata (10 ml) in ekstrahiramo z diklorometanom (3x5 ml). Združene organske faze izperemo s slanico (10 ml), sušimo nad kalijevim karbonatom in koncentriramo. Ta material raztopimo v 2 ml etil acetata in dodamo 0,20 ml 4M HCI v EtOAc pri 0 °C. Dodamo eter, oborino filtriramo pod dušikom, izperemo z etrom in posušimo, da dobimo 0,108 g produkta kot belo trdno snov.
Ή NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7,40 - 7,20 (m, 5H), 7,08 (d, IH), 6,95 - 6,80 (m, 2/1/3H), 6,23 (dd, 2/3H), 5,20 - 5,10 (m, IH), 4,60 (bd, 2/3H), 4,58 - 4,40 (m, 3/1/3H),
4.10 - 4,00 (m, IH), 3,388 - 3,70 (m, 21/3H), 3,66 - 3,60 (m, 1/2H), 3,60 - 3,50 (m, IH),
3.10 - 2,95 (m, IH), 2,86 (s, IH), 2,84 (s, 2H), 2,80 (t, 1/3H), 2,65 (t, 2/3H), 2,90 - 2,50 (m, 4H), 1,45 (s, 4H), 1,44 (s, 2H).
PRIMER 33
Stopnja A: N-ri(R)-f(l,2-dihidro-l-[2-karboksimetansulfonilspiro[3H-indol3.4, -piperidinl1-l,-il)karbonill-2-(fenilmetiloksi)etil]-[[(l,ldimetiletiloksi)-karbonil1amino1-2-metilpropanamid trifluoroacetat
K raztopini 0,126 g intermediata iz stopnje A primera 32 v 3 ml metanola in 1 ml vode pri 0 °C dodamo 2 kapljici 5N vodnega natrijevega hidroksida in mešamo 30 minut. Reakcijsko zmes nakisamo na pH = 2 z 0,50 N vodno klorovodikovo kislino, razredčimo s slanico (5 ml) in ekstrahiramo s CH2C12 (2x5 ml). Združene organske faze izperemo s slanico (10 ml), sušimo preko MgSO4 in koncentriramo, da dobimo 0,098 g bele pene.
'H NMR (400 MHz, CDC13) δ 9,80 (bs, IH), 7,45 (d, 1/2H), 7,40 - 7,13 (m, 7H), 7,02 (t, 1/2H), 6,90 (t, 1/2H), 6,50 (d, 1/2H), 5,22 - 5,10 (m, IH), 4,60 - 4,40 (m, 3H), 4,20 4,00 (m, 3H), 3,92 (d, IH), 3,70 - 5,50 (m, 2H), 3,04 (dt, IH), 2,70 (dt, IH), 1,93 -1,50 (m, 4H), 1,42 (s, 6H), 1,33 (s, 9H).
Stopnja B: N-il(R)-[(l,2-dihidro-l-[2-karboksimetansulfonilspirof3H-indol3.4, -piperidinll-l’-il)karbonil1-2-(fenilmetiloksi)etill-2-amino2-metilpropanamid
K raztopini 0,098 g intermediata iz stopnje A v 1 ml diklorometana dodamo 1 ml trifluoroocetne kisline in mešamo 30 mihut. Reakcijsko zmes uparimo do suhega in trituriramo z etrom do 0,096 g produkta kot bele trdne snovi.
Ή NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7,40 - 7,28 (m, 6H), 7,24 - 7,15 (m, 21/2H), 7,00 (dt, IH), 6,80 (d, 1/2H), 5,17 (dt, IH), 4,60 - 4,45 (m, 2H), 4,22 (d, 2H), 4,14 - 4,00 (m, 3H), 3,81 - 3,70 (m, 2H), 3,22 (dt, IH), 2,83 (dt, IH), 1,96 (dt, 1/2H), 1,80 - 1,64 (m, 41/2H), 1,62 (s, IH), 1,60 (s, 5H).
PRIMER 34
Stopnja A: N-ri(R)-f(l,2-dihidro-l-[2-hidroksietansulfonilspiroi3H-indol3.4?-piperidin]]-l,-il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etil]-(i(l.ldimetiletiloksi)-karbonil]amino]-2-metilpropanamid trifluoroacetat
K raztopini 0,222 g intermediata iz stopnje A primera 32 v 2 ml brezvodnega tetrahidrofurana pri sobni temperaturi dodamo 0,48 ml 2M raztopine litijevega borohidrida v tetrahidrofuranu in mešamo 3 ure. Reakcijsko zmes pogasimo z 0,50 ml acetona, razredčimo s 15 ml vode in ekstrahiramo s CH2C12 (2 x 15 ml). Združene organske faze izperemo s slanico (10 ml), sušimo preko MgSO4 in koncentriramo, da dobimo 0,27 g bele pene. S flash kromatografijo ostanka preko 10 g silikagela s CH2Cl2-acetonom (2 : 1) kot eluentom dobimo 0,129 g želenega materiala kot gosto olje.
H NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,32 - 7,20 (m, 6H), 7,20 - 7,10 (m, 2H), 7,09 (d, 1/2H), 6,98 (t, 1/2H), 6,90 (t, 1/2H), 6,54 (d, 1/2H), 5,17 - 5,10 (m, IH), 5,00 (bs, IH), 4,61 4,39 (m, 3H), 4,10 - 3,95 (m, 5H), 3,93 - 3,74 (m, 2H), 3,66 (ddd, IH), 3,53 (dt, IH), 3,27 (dt, 2H), 3,00 (dt, IH), 2,70 (dt, IH), 1,90 - 1,50 (m, 4H), 1,43 (s, 4H), 1,41 (s, 2H), 1,36 (s, 9H).
Stopnja B: N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-[2-hidroksietansulfonilspiro[3H-indol3,4,-piperidin]]-ril)karbonil]-2-(fenilmetoksi)etil1-2-amino-2metilpropanamid trifluoroacetat
K raztopini 0,129 g intermediata iz stopnje A v 1 ml diklorometana dodamo 1 ml trifluoroocetne kisline in mešamo 30 minut. Reakcijsko zmes uparimo do suhega in trituriramo z etrom do 0,113 g produkta kot bele trdne snovi.
XH NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7,40 - 7,25 (m, 6H), 7,25 - 7,13 (m, 21/2H), 6,98 (dt, IH), 6,80 (d, 1/2H), 5,20 - 5,10 (m, IH), 4,60 - 4,43 (m, 3H), 4,10 - 3,90 (m, 5H), 3,81 3,70 (m, 2H), 3,40 - 3,33 (dt, 2H), 3,20 (dt, IH), 3,82 (dt, IH), 2,00 - 1,63 (m, 4H),
1,61 (s, IH), 1,58 (s, 5H).
PRIMER 35
Stopnja A: N-il(R)-[(l,2-dihidro-l-trifluorometanmetansulfonilspiroi3H-indol3<4’-piperidin]-l,-il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etil1-[[(l,ldimetiletiloksi)-karbonillaminol-2-metilpropanamid hidroklorid
K raztopini 0,150 g intermediata iz stopnje B primera 29 v 5 ml diklorometana dodamo 0,10 ml N-metilmorfoIina in 0,057 ml anhidrida trifluorometansulfonske kisline ter mešamo 15 minut pri 0 °C. Reakcijsko zmes razredčimo s 5 ml nasičene vodne raztopine natrijevega bikarbonata in ekstrahiramo z 2 x 5 ml diklorometana. Združene organske faze izperemo s slanico (5 ml), sušimo preko MgSO4 in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka preko 10 g silikagela s heksanomacetonom (3 :1) kot eluentom dobimo 0,136 g želenega produkta.
Ή NMR (400 MHz, CDC13) δ 7,40 - 7,15 (m, 6H), 7,15 - 6,93 (m, 21/2H), 6,53 (d, 1/2H), 5,20 - 5,10 (m, IH), 4,90 (bs, IH), 4,70 - 4,60 (m, 3H), 4,15 - 3,90 (m, 3H), 3,70 (ddd, IH), 3,60 - 3,50 (m, IH), 3,00 (dt, IH), 2,70 (dt, IH), 1,93 - 1,55 (m, 4H), 1,46 (s, 4H), 1,43 (s, 2H), 1,40 (s, 9H).
Stopnja B: N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-trifluorometansulfonilspiro[3H-indol3,4,-piperidin]]-l,-il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etill-2-amino2-metilpropanamid hidroklorid
K raztopini 0,136 g zgornjega intermediata v 1 ml diklorometana dodamo 1,0 ml trifluorooacetne kisline in vzdržujemo 30 minut pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes uparimo do suhega, naalkalimo z 10 %-no vodno raztopino natrijevega karbonata (5 ml) in ekstrahiramo z etilacetatom (2x5 ml). Združene organske faze izperemo s slanico (5 ml), sušimo nad kalijevim karbonatom in koncentriramo. Ta material raztopimo v 2 ml etilacetata in dodamo 0,20 ml 4M HCl v EtOAc pri 0 °C. Dodamo eter in oborino filtriramo pod dušikom, speremo z etrom in posušimo, da dobimo 0,94 g produkta kot belo trdno snov.
(H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7,40 - 7,15 (m, 6H), 7,15 - 6,93 (m, 21/2H), 6,53 (d, 1/2H), 5,20 - 5,10 (m, IH), 4,90 (bs, IH), 4,70 - 4,60 (m, 3H), 4,15 3,90 (m, 3H), 3,70 (ddd, IH), 3,60 - 3,50 (m, IH), 3,00 (dt, IH), 2,70 (dt, IH), 1,93 - 1,55 (m, 4H), 1,46 (s, 4H), 1,43 (s, 2H).
PRIMER 36
Stopnja A: N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-benzensulfonil-spiro[3H-indol-3,4’piperidin]-r-il)karbonin-2-(fenilmetiloksi)etil]-2-amino-2metilpropanamid hidroklorid
K raztopini 0,148 g intermediata iz stopnje B primera 29 v 3 ml diklorometana dodamo 0,30 ml N-metilmorfolina in 0,022 ml benzensulfonil klorida in mešamo 1 uro pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes razredčimo z 10 ml diklorometana, izperemo z 10 ml nasičene vodne raztopine natrijevega bikarbonata, sušimo preko MgSO4 in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka preko 10 g silikagela s heksanom-acetonom (3 :1) kot eluentom dobimo 0,190 g želenega produkta.
K raztopini 0,190 g gornjega intermediata v 3 ml diklorometana dodamo 3 ml trifluoroocetne kisline in vzdržujemo 30 minut pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes uparimo do suhega, naalkalimo z 10 %-no vodno raztopino natrijevega karbonata (5 ml) in ekstrahiramo z etil acetatom (2x5 ml). Združene organske faze izperemo s slanico (5 ml), sušimo preko kalijevega karbonata in koncentriramo. Ta material raztopimo v 2 ml etil acetata in dodamo 0,40 ml 4M HC1 v EtOAc pri 0 °C. Dodamo eter, oborino filtriramo pod dušikom, izperemo z etrom in posušimo, da dobimo 0,136 g produkta kot belo trdno snov.
Ή NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7,82 (d, 2H), 7,67 - 7,58 (m, 2H), 7,52 (t, 2H), 7,40 7,20 (m, 6H), 7,10 - 6,90 (m, 11/2H), 6,68 (d, 1/2H), 5,10 (dt, IH), 4,53 (ABq, 2H), 4,35 (t, IH), 4,00 - 3,80 (m, 3H), 3,75 - 3,65 (m, 2H), 3,10 (dt, IH), 2,73 (dt, IH), 1,75 (dt, 1/2H), 1,48 (m, 11/2H), 1,20 -1,05 (m, 2H).
PRIMER 37
Stopnja A: N-[l(R)-f(l,2-dihidro-fl-ureidometil-spiroΓ3H-indol-3,4,piperidinl-T-il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etill-2-amino2-metilpropanamid trifluoroacetat
K raztopini 0,148 g intermediata iz stopnje B primera 29 v 5 ml 1,2-dikloroetana dodamo 0,10 ml metilizocianata in mešamo 1 uro pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes uparimo do suhega. S flash kromatografijo ostanka preko 15 g silikagela s CP/C/acetonom (2:1) kot eluentom dobimo 0,137 g želenega produkta.
Ta material obdelujemo s 3 ml diklorometana in 3 ml trifluoroocetne kisline 30 minut pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes uparimo do suhega in trituriramo z etrom, da dobimo 0,126 g bledo rumene trdne snovi.
Ή NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7,82 (dd, IH), 7,42 - 7,35 (m, 5H), 7,30 - 7,20 (m, 21/2H), 6,75 (d, 1/2H), 5,19 (dt, IH), 4,60 - 4,50 (m, 3H), 4,13 (bd, IH), 3,90 - 3,68 (m, 4H), 3,25 (t, IH), 2,90 - 2,70 (2s, 4H), 1,98 (dt, 1/2H), 1,85 - 1,65 (m, 31/2H), 1,62 (s,2H), 1,59 (s, 4H).
PRIMER 38
N-il(R)-r(l,2-dihidro-l-[l-metoksikarbonil-l-metil-etansulfonil-spiro[3H-indol3,4’-piperidin]-l,-il)karbonil]-2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid trifluoroacetat
Stopnja A: l,2-dihidro-l-[l-metoksikarbonil-l-metil-etansulfonin-spiro[3Hindol-3,4’-piperidinl
K 5,06 g l,2-dihidro-l-benziloksikarbonil-spiro[3H-indol-3,4’-piperidin] hidroklorida v 50 ml diklorometana dodamo 3,0 ml trietilamina in 3,40 g di-t-butilkarbonata ter mešamo 3 ure pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes uparimo do suhega, razredčimo s 100 ml etra ter izperemo s 50 ml 0,50N vodne klorovodikove kisline, 50 ml slanice, sušimo preko MgSO4 in koncentriramo. K temu surovemu produktu v 50 ml etanola dodamo 1 g 20 %-nega paladijevega hidroksida na oglju in hidrogeniramo preko noči z balonom H2. K 0,506 g te spojine v 15 ml diklorometana pri 0 °C dodamo 0,74 ml trietilamina in 0,41 ml karbometoksimetansulfonil klorida ter mešamo 1 uro. Reakcijsko zmes razredčimo s 25 ml etra, izperemo z nasičeno raztopino natrijevega bikarbonata (20 ml), sušimo preko MgSO4 in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka preko 25 g silikagela s heksanom-etil acetatom 4:1 kot eluentom dobimo 1,79 g želenega materiala kot gostega olja.
Natrijev hidrid (0,102 g 60 %-nega v mineralnem olju) izperemo s heksani in nato suspendiramo v 5 ml suhega DMF. Dodamo raztopino 0,158 g gornjega intermediata v 1 ml DMF in mešamo 30 minut. Dodamo metil jodid (1,85 mmolov) in mešamo 3 ure. Reakcijsko zmes zlijemo v 15 ml nasičene vodne raztopine amonijevega klorida in ekstrahiramo z etrom (2 x 15 ml). Združene organske faze izperemo z vodo (15 ml), slanico (15 ml), sušimo preko MgSO4 in koncentriramo, da dobimo 0,179 g želenega materiala.
Ή NMR (200 MHz, CDC13) δ 7,32 (d, IH), 7,20 - 6,90 (m, 3H), 4,13 (bd, 2H), 2,83 (bt, 2H), 1,85 -1,70 (m, 4H), 1,69 (s, 6H), 1,48 (s, 9H).
Stopnja B: N-[l(R)-f(l,2-dihidro-il-metoksikarbonil-l-metiletansulfonil]-spiro[3H-indol-3,,4’-piperidin]-r-inkarbonil1-2-iindoI-3-iPetil]-[IYl,ldimetiletiloksi)-karbonil]amino1-2-metilpropanamid
K raztopini 0,179 g intermediata iz stopnje A dodamo 1 ml diklorometana in 1 ml trifluoroocetne kisline ter mešamo 30 minut. Reakcijsko zmes uparimo do suhega, naalkalimo z 10 ml 10 %-ne vodne raztopine natrijevega karbonata in ekstrahiramo z 2 x 10 ml diklorometana. Združene organske faze izperemo s slanico (10 ml), posušimo preko kalijevega karbonata, filtriramo in koncentriramo do 0,120 g piperidina kot gostega olja. K raztopini te spojine v 5 ml diklorometana dodamo 0,132 g kislinskega intermediata, pripravljenega v primeru 21, stopnja B, 0,055 g HOBT, 0,102 g EDC in mešamo 18 ur. Reakcijsko zmes razredčimo s 25 ml etra in izperemo s 15 ml 0,05N HCl, nasičeno raztopino natrijevega bikarbonata (15 ml), sušimo preko MgSO4 in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka preko 20 g silikagela s CL^C^-acetonom (5:1) kot eluentom dobimo 0,094 g želenega produkta. Ή NMR (CDC13, 400 MHz) δ 8,60 (s, 2/3H), 8,50 (s, 1/3H), 7,70 (d, 2/3H), 7,60 (d, 1/3H), 7,35 (d, 2/3H), 7,30 (d, 1/3H), 7,26 - 7,00 (m, 5H), 6,90 (t, 11/3H), 6,40 (d, 2/3H), 5,28 - 5,16 (m, IH), 5,05 (bs, IH), 4,41 (bd, 2/3H), 4,32 (bd, 1/3H), 3,78 - 3,65 (m, 2H), 3,56 (s, 2H), 3,55 (s, IH), 3,50 (bd, IH), 3,20 (dt, IH), 3,15 (ddd, IH), 2,75 (t, IH), 2,42 (m, IH), 1,18 (d, 2H), 1,24 (s, 4H), 1,50 (s, 2H), 1,48 (s, 4H), 1,42 (s, 9H), 1,30 -1,18 (m, IH), 1,10 - 0,90 (m, 11/3H), 0,03 (dt, 2/3H).
Stopnja C: N-[l(R)-[(l,2-dihidro-[l-metopksikarbonil-l-metiletansulfonillspiroi3H-indol-3,4,-piperidin1-l’-il)karbonil]-2-(indol-3-il)etill2-amino-2-metil-propanamid trifluoroacetat
Raztopino 0,094 g intermediata iz stopnje C obdelujemo z 1 ml diklorometana in 1 ml trifluoroocetne kisline 30 minut, uparimo do suhega in trituriramo z etrom, da dobimo 0,082 g želenega produkta.
‘H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ 7,70 (d, 2/3H), 7,60 (d, 1/3H), 7,35 (d, 2/3H), 7,30 (d, 1/3H), 7,26 - 7,00 (m, 5H), 6,90 (t, 11/3H), 6,40 (d, 2/3H), 5,28 - 5,16 (m, IH), 5,05 (bs, IH), 4,41 (bd, 2/3H), 4,32 (bd, 1/3H), 3,78 - 3,65 (m, 2H), 3,56 (s, 2H), 3,55 (s, IH), 3,50 (bd, IH), 3,20 (dt, IH), 3,15 (ddd, IH), 2,75 (t, IH), 2,42 (m, IH), 1,18 (d, 2H), 1,24 (s, 4H), 1,50 (s, 2H), 1,48 (s, 4H), 1,30 - 1,18 (m, IH), 1,10 - 0,90 (m, 11/3H), 0,03 (dt, 2/3H).
PRIMER 39
N-fl(R)-f(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidml-r-il)karbonil1-2-(indol-3-il)etil1-3-amino-3-metilbutanamid hidroklorid
Stopnja A: N-fl(R)-f(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4,-piperidinjl’-il)karbonil1-2-(indol-3-il)etill-3-amino-3-metilbutanamid
K suspenziji 1,14 g l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro-[3H-indol-3,4’-piperidinj hidroklorida (pripravljenega, kot je opisano v stopnji A primera 18 (postopek 1)) v 50 ml diklorometana dodamo 0,80 ml N-metilmorofolina, 1,00 g N-tBOC-Dtriptofana, 0,80 g HOBT in 1,20 g EDC ter mešamo 18 ur pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes razredčimo s 100 ml etra in izperemo s 50 ml 0,05N HC1, 50 ml nasičene raztopine natrijevega bikarbonata, sušimo nad MgSO4 in koncentriramo.
Raztopino gornjega intermediata v 50 ml etil acetata pri 0 °C obdelujemo s HC1 (g) 2 minuti in nato mešamo 1 uro. Dodamo suhi eter (50 ml) in oborjeno trdno snov zberemo s filtriranjem. Dobitek je 1,44 g.
K 0,86 g amin hidroklorida v 30 ml diklorometana dodamo 0,24 ml N-metilmorfolina, 0,36 g HOBT, 0,56 g EDC in mešamo preko noči. Reakcijsko zmes razredčimo s 100 ml etra in izperemo z 0,05N HC1 (50 ml), 50 ml nasičenega NaHCO3, sušimo nad MgSO4 in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka preko 20 g silikagela s CE^C^-acetonom (5 :1) kot eluentom dobimo 0,74 g želenega produkta.
K raztopini 0,74 g gornjega intermediata v 5 ml etil acetata pri 0 °C dovajamo v mehurčkih suh plinski HC1 2 minuti in mešamo 30 minut. Dodamo eter, da popolnoma oborimo produkt. Trdno snov filtriramo in izperemo z etrom pod dušikom in posušimo, da dobimo 0,57 g želenega produkta.
'H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ 7,69 (d, 2/3H), 7,55 (d, 1/3H), 7,37 - 6,90 (m, 5H), 6,82 (bt, 11/3H), 6,43 (d, 2/3H), 5,31 - 5,18 (m, IH), 4,40 (bd, 2/3H), 4,30 (bd, 1/3H),
3.63 - 3,38 (m, 4H), 3,22 - 3,05 (m, 2H), 2,83 - 2,75 (m, IH), 2,80 (s, IH), 2,74 (s, 2H),
2.63 (dd, IH), 2,55 - 2,43 (m, 2H), 2,20 (bd, IH), 1,70 - 1,53 (m, IH), 1,38 (2H), 1,36 (s, 2H), 1,35 (s, IH), 1,34 (s, lh), 1,18 (bd, IH), 1,20 - 0,94 (m, 11/3H), 0,03 (dt, 2/3H).
PRIMER 40
N-[lfR)-lYl,2-dihidro-l-metansulfonilspiroi3H-indol-3,4’-piperidin]-r-iQkarbonill-2-(indol-3-il)etil1-[3(2-((R)-3-dihidroksilpropil]-amino]-3-metilbutanamid hidroklorid
Stopnja A: N-flfR)-[Yl,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidm]l’-il)karbonilj-2-(indol-3-il)etil1-f3-i2(R)-3-dihidroksilpropil1aminol -3-metilbutanamid hidroklorid
K raztopini 0,30 g spojine, dobljene v stopnji B primera 39, v 5 ml suhega metanola damo 1,5 g brezvodnega natrijevega acetata, 0,30 g (R)-l,2-izopropilidengliceraldehida (Tetrahedron 1985, 41, 3117) in mešamo 1 uro. Dodamo THF raztopino natrijevega cianoborohidrida (8,7 ml IM raztopine) in mešamo 18 ur. Reakcijsko zmes razredčimo z 20 ml vode in ekstrahiramo z diklorometanom (3 x 10 ml). Združene organske faze izperemo z nasičeno raztopino natrijevega bikarbonata (10 ml), sušimo nad K2CO3 in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka preko 10 g silikagela s CH2Cl2-metanolom (98: 2) dobimo 0,146 g reduktivno aminirane spojine. Ή NMR (CDC13, 400 MHz) δ 8,70 - 8,40 (m, 2H), 7,63 (d, 2/3H), 7,55 (d, 1/3H), 7,37 (t, IH), 7,32 (d, 1/3H), 7,28 (d, 2/3H), 7,20 - 6,95 (m, 41/3H), 6,52 (d, 2/3H), 5,20 5,08 (m, IH), 4,55 - 4,24 (m, 3H), 4,10 (t, 2/3H), 4,05 (t, 1/3H), 3,80 - 3,70 (m, IH), 3,70 - 3,50 (m, 4H), 3,30 - 3,10 (m, 2H), 2,84 (s, IH), 2,80 (s, 2H), 2,80 - 2,70 (m, 2H), 2,68 - 2,45 (m, IH), 2,37 (s, 2H), 1,70 (t, 2/3H), 1,52 (bd, 1/3H), 1,44 (s, 2H), 1,43 (s, IH), 1,35 (s, 2H), 1,33 (s, IH), 1,25 (s, 3H), 1,33 (s, 6H), 1,20 - 1,05 (m, 2H), 0,90 0,65 (m, 1/3H), 0,30 (dt, 2/3H).
Stopnja B:
Raztopino 0,146 g gornjega intermediata mešamo v 3 ml metanola in 0,100 ml koncentrirane klorovodikove kisline 30 minut. Reakcijsko zmes uparimo do suhega, trdno snov izperemo z etrom in posušimo, da dobimo 0,109 g želenega materiala.
Ή NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7,63 (d, 2/3H), 7,55 (d, 1/3H), 7,41 (d, 2/3H), 7,38 (d, 1/3H), 7,32 (d, 1/3H), 7,26 (d, 2/3H), 7,21 - 7,10 (m, 4H), 7,08 - 7,00 (m, 21/3H), 6,63 (d, 2/3H), 5,25 (dd, 2/3H), 5,19 (dd, 1/3H), 4,36 (bd, 2/3H), 4,30 (bd, 1/3H), 3,92-3,83 (m, IH), 3,80 - 3,50 (m, 6H), 3,28 - 3,10 (m, 3H), 3,05 - 2,95 (m, 2H), 2,90 (s, IH), 2,86 (s, 2H), 2,78 - 2,55 (m, 4H), 1,83 -1,65 (m, IH), 1,43 (s, 2H), 1,39 (s, 2H), 1,37 (s, IH), 1,32 (s, IH), 1,36 -1,20 (m, IH), 0,04 - 0,18 (m, 22/3H), - 0,08 (dt, 2/3H).
PRIMER 41
N-fl(R)-i(1.2-dihidro-l-metansulfonilspirof3H-indol-3,4,-piperidinl-l,-il)karbonill-2-(indol-3-il)etil1-13-i2(R)-hidroksilpropil]-aminol-3-metilbutanamid hidroklorid
Stopnja A: N-flfRl-fil^-dihidro-l-metansulfonilspirolSH-indol-S^^piperidinll’-il)karbonil]-2-(indol-3-il)etill-i3-i2(R)-hidroksilpropill-amino13-metilbutanamid hidroklorid
K 0,26 g intermediata iz stopnje B primera 39 dodamo 5 ml suhega metanola, 1,5 g brezvodnega natrijevega acetata, sveže pripravljenega 0,10 g 2(R)(tetrahidropiranil)oksi-propionaldehida in mešamo 1 uro pri sobni temperaturi. Dodamo THF raztopino natrijevega cianoborohidrida (8,5 ml IM raztopine) in mešamo 18 ur. Reakcijsko zmes razredčimo z 10 ml nasičene raztopine natrijevega bikarbonata in ekstrahiramo z diklorometanom (2 x 15 ml). Združene organske faze izperemo s slanico (10 ml), sušimo nad K2CO3 in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka preko 10 g silikagela s CH2Cl2-metanolom (98 : 2) kot eluentom dobimo 0,219 g želenega produkta.
Gornji material mešamo v 3 ml suhega metanola z 0,10 ml koncentrirane klorovodikove kisline, uparimo do suhega in ostanek trituriramo z etrom, da dobimo 0,174 g naslovne spojine kot bledo rumeno peno.
*H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7,63 (d, 2/3H), 7,55 (d, 1/3H), 7,41 (d, 2/3H), 7,38 (d, 1/3H), 7,32 (d, 1/3H, 7,26 (d, 2/3H), 7,21 - 7,10 (m, 4H), 7,08 - 7,00 (m, 21/3H), 6,63 (d, 2/3H), 5,25 (dd, 2/3H), 5,19 (dd, 1/3H), 4,36 (bd, 2/3H), 4,30 (bd, 1/3H), 3,92 3,83 (m, IH), 3,80 - 3,50 (m, 4H), 3,28 - 3,10 (m, 3H), 3,05 - 2,95 (m, 2H), 2,90 (s, IH), 2,86 (s, 2H), 2,78 - 2,55 (m, 4H), 1,83 - 1,65 (m, IH), 1,43 (s, 2H), 1,39 (s, 2H), 1,37 (s, IH), 1,32 (s, IH), 1,36 - 1,20 (m, IH), 1,28 (d, 3H), 0,04 - 0,18 (m, 22/3H), -0,08 (dt, 2/3H).
PRIMER 42
N-[l(R)-[[3-oksospiro[izobenzofuran-l(3H),4,-piperidinl-l’-illkarbonil1-2-(fenilmetoksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid trifluroracetat
Stopnja A:
K 0,165 g kislinskega intermediata, pripravljenega, kot je opisano v stopnji B primera 19, v 10 ml CH2C12 dodamo 0,095 g 3-oksospiro[izobenzofuran-l(3H),4’piperidina], 0,067 g HOBT in 0,110 g EDC in mešamo 4 ure pri sobni temperaturi. Reakcijsko zmes zlijemo v 10 ml CH2C12 in izperemo z 20 %-no vodno citronsko kislino (5 ml), nasičeno raztopino natrijevega bikarbonata (5 ml), sušimo nad MgSO4 in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka preko 10 g silikagela s heksanomacetonom (3 :1) kot eluentom dobimo 0,234 g pripojenega produkta.
K raztopini 0,024 g gornjega intermediata v 1 ml CH^C^ dodamo 1,0 ml trifluoroocetne kisline in vzdržujemo 30 minut pri sobni temperaturi. Hlapne snovi uparimo in ostanek trituriramo z etrom, da dobimo 21 mg naslovne spojine kot trdno snov.
Ή NMR (CD3OD, 400 MHz) δ 7,85 (d, 1/2H), 7,80 (d, 1/2H), 7,63 (t, 1/2H), 7,54 7,40 (m, 21/2H), 7,35 - 7,20 (m, 51/2H), 7,06 (d, IH), 6,58 (d, 1/2H), 5,25 - 5,15 (m, IH), 4,93 (s, IH), 4,69 (bd, IH), 4,55 - 4,40 (m, 2H), 4,14 (bd, IH), 3,70 - 3,40 (m, 2H), 3,18 - 3,10 (m, IH), 2,13 (dt, IH), 2,90 - 2,75 (m, 2H), 2,70 - 2,50 (m, 2H), 1,47 (s, 1,5H), 1,46 (s, 1,5H), 1,44 (s, 1,5H), 1,43 (s, 1,5H).
PRIMER 43
N-[l(R)-fl.2-dihidro-l-metansulfonilspiroi3H-indol-3,4,-piperidin1-l’-il)karbonil]-4-fenilbutil1-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: N-ri(R)-[l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’piperidin]-l>-il)karbonil]-4-fenilbutifl-2-amino-2metilpropanamid hidroklorid
To spojino pripravimo iz 2(R)-N-t-butoksikarbonil-5-fenilpentanojskega in 1,2dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin] hidroklorida ob uporabi kemije, opisane za pripravo spojine v primeru 18.
FAB MS izrač. za C^H^N^S: m.m. = 526,2; ugot. m/e = (m+l) 527,9.
PRIMER 44
N-[l(R)-[l,2-dihidro-l-metansulfonilspiroi3H-indol-3,4’-piperidm[-r-il)karbonill-2-fenilmetiltio)etil]-2-amino-2-metilpropanamid trifluoroacetat
Stopnja A: N-[l(Rj-[1.2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidinjr-il)karbonil]-2-fenilmetiltio)etil1-2-amino-2-metilpropanamid trifluoroacetat
To spojino pripravimo iz tržno dostopnega N-t-BOC-S-benzil-D-cisteina in 1,2dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidinj hidroklorida ob uporabi kemije, opisane za pripravo spojine v primeru 18.
FAB MS izrač. za : m.m. = 544,7; ugot. m/e = (m+l) 548,5.
PRIMER 45
N-il(R,S)-[l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3.4,-piperidin]-r-il)karboni11-2-(2’-piridometiloksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid trifluoroacetat
Stopnja A: N-[(R.S)-[l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’piperidin1-l’-il)karbonil1-2-hidroksil-karbaminska kislina h 1-dimetiletilester
K raztopini N-t-BOC-(D)-serina (56 mg, 274 mmolov) v 2,5 ml THF pri sobni temperaturi dodamo l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin] hidroklorid (pripravljen iz primera 18, stopnja A, 83 mg, 0,274 mmolov), trietilamin (45 ml, 0,33 mmolov), HOBT (44 mg, 0,33 mmolov) in EDC (63 mg, 0,33 mmolov). Po 3 urah zmes razredčimo z etil acetatom in nato zaporedoma izperemo z vodo in slanico. Organski sloj sušimo nad natrijevim sulfatom, filtriramo in koncentriramo. Ostanek čistimo z MPLC (silikagel, 100 %-en etil acetat), da dobimo 112 mg (90 %) naslovne spojine.
100
Stopnja B:
N-[l(R,S)-[l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’piperidinj-lMljkarbonill-Z-t^-piridometiloksijetill karbaminska kislina 1,1-dimetiletilester
K natrijevemu hidridu brez olja (pripravljenemu iz 60 %-ne oljne disperzije natrijevega hidrida z izpiranjem s heksani (3 x), 9 mg, 0,21 mmolov) v 0,3 ml THF dodamo 2-pikolil klorid (16 mg, 0,1 mmol) v 0,3 ml DMF. Po 5 minutah dodamo intermediat, dobljen iz stopnje A, (45 mg, 0,1 mmol) k reakcijski zmesi. Zmes mešamo 2 uri pri sobni temperaturi in nato razredčimo z etrom. Etrski sloj izperemo z vodo (5 x), slanico in sušimo nad natrijevim sulfatom. Po čiščenju (preparativna TLC, silikagel, 100 %-en etil acetat) izoliramo 16 mg naslovne spojine (29 %).
NMR (400 MHz, CDC/ zmes rotamerov): 8,53 (m, 1 H), 7,77 - 6,83 (m, 7 H), 5,75 (m, 1/2 H), 4,98 (m, 2H), 4,67 (m, 2 1/2 H), 4,25 (m, 1/2 H), 4,10 (m, 1/2 H), 3,91 - 3,67 (m, 4 H), 3,17 (m, 1 H), 2,91 (s, 3/2 H), 2,89 (s, 3/2 H), 2,79 (m, 1 H), 1,95 -1,69 (m, 4 H), 1,42 (s, 9/2 H), 1,41 (s, 9/2 H).
Stopnja C: N-[l(R.S)-Γl,2-dihidro-l-metansulfonilspiroΓ3H-indol-3.4,piperidin]-l,-il)karbonil]-2-(2,-piridometiloksi)-etil]-2amino-2-metilpropanamid trifluoroacetat
Raztopino intermediata, dobljenega iz stopnje B, (16 mg, 0,029 mmolov) v 0,5 ml trifluoroocetne kisline mešamo pri sobni temperaturi 0,5 ure in nato koncentriramo. K raztopini tega ostanka v 1 ml kloroforma dodamo t-butiloksikarbonil-a-metilalanin (6,5 mg, 0,032 mmolov), HOBt (4,3 mg, 0,032 mmolov), trietilamin (10 ml, 0,064 mmolov) in EDC (6 mg, 0,032 mmolov). Po 12 urah pri sobni temperaturi zmes razredčimo z metilen kloridom in nato izperemo z vodo in slanico. Organski sloj sušimo nad natrijevim sulfatom, filtriramo in koncentriramo. Ostanek čistimo s preparativno TLC (silikagel, 100 %-en etil acetat). Očiščeno spojino koncentriramo. K ostanku dodamo trifluoroocetno kislino pri sobni temperaturi. Po 1 uri zmes koncentriramo, da dobimo naslovno spojino (5,3 mg).
XH NMR (400 MHz, CD/D, zmes rotamerov): 8,70 (br. s, 1 H), 8,30 (m, 1 H), 7,84 (m, 1 H), 7,77 (m, 1 H), 7,36 (m, 1 H), 7,24 (m, 11/2 H), 7,06 (m, 1 1/2 H), 5,24 (t, 6 Hz, 1 H), 4,86 (m, 2 H), 4,56 (d, 13 Hz, 1 H), 4,08 (m, 1 H), 3,95 (m, 4 H), 3,36 (m, 1 H), 2,97 (s, 3/2 H), 2,96 (s, 3/2 H), 2,01 -1,78 (m, 4 H), 1,63 (s, 3/2 H), 1,61 (s, 3/2 H), 1,59 (s, 3/2 H), 1,58 )s, 3/2 H).
101
PRIMER 46
N-[l(R.S)-[l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-r-il)karbonil]-2-(2’-piridotio)etil]-2-amino-2-metilpropanamid trifluoroacetat
Stopnja A: N-il(R,S)-il,2-dihidro-l-metansulfonilspiroi3H-indol-3,4’piperidin1-r-il)karbonilj-2-(2’-piridotio)etillkarbaminska kislina 1,1-dimetiletilester
K suspenziji natrijevega hidrida brez olja (600 mg, 7,5 mmolov) v 20 ml DMF dodamo N-t-BOC-D-cistein (1,2 g, 5,4 mmolov) v 20 ml DMF pri -10 °C. Zmes segrejemo na sobno temperaturo in mešamo še 1 uro. Raztopino 2-brompiridina (0,514 ml, 5,4 mmole) v 10 ml DMF dodamo k reakcijski zmesi po segrevanju 20 ur pri 80 °C. K tej reakcijski zmesi dodamo Cul (1,03 g, 5,4 mmole) in mešamo pri isti temperaturi še 20 ur. Zmes ohladimo na sobno temperalturo, zlijemo v 0,5 N klorovodikovo kislino in ekstrahiramo z etrom. Etrski sloj filtriramo skozi celit, sušimo preko natrijevega sulfata in koncentriramo. Ostanek čistimo z MPLC (silikagel, metilen klorid/metanol = 10 :1). K očiščeni spojini (170 mg, 0,57 mmolov) v metilen kloridu dodamo l,2-dihidro-l-metansuIfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidm] hidroklorid (pripravljen iz primera 18, stopnja A, 172 mg, 0,57 mmolov), trietilamin (95 ml, 0,68 mmolov), HOBt (92 mg, 0,68 mmolov) in EDC (130 mg, 0,68 mmolov) in presnovimo po postopku, opisanem v primeru 45, stopnja A, da dobimo naslovno spojino (310 mg, 99 %).
Stopnja B: THl^R^fljMihidrOjMnetaiisulfonilspiiOjBHrindgl^^ piperidinl-r-il)karbonil]-2-(2,-piridotio)etill-2-amino-2metilpropanamid trifluoroacetat
Pripravljen iz intermediata, dobljenega iz stopnje A, (290 mg, 0,53 mmolov) s postopkom TFA deprotekcije. S tem dobimo naslovno spojino (102 mg).
1H NMR (400 MHz, CD3OD, zmes rotamerov): 8,45 (dd, 5, 1 Hz, 1 H), 7,61 (m, 1 H), 7,39 - 7,05 (m, 6 H), 5,27 (m, 1 H), 4,52 (t, 12 Hz, 2 H), 4,01 (m, 3 H), 3,80 (m, 1 H), 3,45 (m, 1 H), 2,98 (s, 3 H), 2,90 (m, 1 H), 2,10 -1,79 (m, 4 H), 1,63 (s, 3/2 H), 1,60 (s, 3/2 H), 1,59 (s, 3/2 H), 1,58 (s, 3/2 H). FAB-MS: 532,7 (M+l).
102
PRIMER 47
N-[lfR,sT[l,2-dihidro-l-metansulfonilspiroi3H-indol-3,4’-piperidin]-r-irikarbonil]-2-(cikloheksiltio)etil]-2-amino-2-metilpropanamid trifluoroacetat
Stopnja A: N-t-Boc-cikloheksilcistein
K raztopini cikloheksilmerkaptana (1 ml, 8,18 mmolov) in metil 2-acetamidoakrilata (1,29 g, 9 mmolov) v THF dodamo katalitsko količino natrijevega hidrida pri sobni temperaturi. Po 7 dneh reakcijsko zmes koncentriramo. Raztopino ostanka v 20 ml 6N klorovodikove kisline refluktiramo 4 ure in ohladimo na sobno temperaturo. Dobljeno raztopino pustimo stati 12 ur in filtriramo. Trdne snovi sušimo pod vakuumom. K zmesi te soli klorovodikove kisline in raztopine IN natrijevega hidroksida (15 ml) dodamo di-t-butil dikarbonat (1,68 g, Ί,Ί mmolov) v 15 ml 1,4-dioksana. Po 12 urah zmes zlijemo v 0,5 N klorovodikovo kislino in ekstrahiramo z etil acetatom. Organski sloj izperemo z vodo, slanico in sušimo preko natrijevega sulfata. Po filtriranju in koncentriranju izoliramo naslovno spojino z dobitkom 92 % (2,23 g).
Stopnja B: ^[1^,8)-11.2^11^0-1-111613^^10^^^013^^01-3,4^piperidin]-l>-il)karbonil]-2-(cikloheksiltio)etil] karbaminska kislina 1,1-dimetiletilester
Pripravljen iz intermediata, dobljenega iz stopnje A, (303 mg, 1,0 mmol) po postopku, opisanem v primeru 45, stopnja A, da dobimo naslovno spojino (420 mg) z dobitkom 76 %.
Stopnja C: N-[l(R,S)-[l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’piperidin1-r-il)karbonin-2-(cikloheksiltio)etill-2-[[(l,ldimetiletiloksi)karbonil]amino1-2-metil-propanamid
Raztopino intermediata, dobljenega iz stopnje B, (420 mg, 0,76 mmolov) v 5 ml trifluoroocetne kisline mešamo pri sobni temperaturi 0,5 ure ter nato koncentriramo in sušimo. K raztopini tega ostanka v 10 ml kloroforma dodamo t-butiloksikarbonil-ametilalanin (170 mg, 0,84 mmolov), HOBt (113 mg, 0,84 mmolov), trietilamin (116 ml, 0,84 mmolov) in EDC (160 mg, 0,84 mmolov). Po 12 urah pri sobni temperaturi zmes razredčimo z metilen kloridom ter izperemo z vodo in slanico. Organski sloj sušimo preko natrijevega sulfata, filtriramo in koncentriramo. Ostanek čistimo z
103
MPLC (silikagel, heksani/etilacetat = 1/1), da dobimo naslovno spojino (430 mg) v 89%.
Stopnja D: N-[l(R,S)-[L2-dihidro-l-metansulfonilspHOi3H-indol-3,4’piperidin1-r-il)karbonil]-2-(cikloheksiltio)etill-2-amino-2metilpropanamid trifluoroacetat
Raztopino intermediata, dobljenega iz stopnje C, (35 mg, 0,055 mmolov) v 0,5 ml trifluoroocetne kisline mešamo 0,5 ure pri sobni temperaturi in nato koncentriramo, da dobimo naslovno spojino (33 mg).
*H NMR (400 MHz, CD3OD, zmes rotamerov): 7,38 (d, 8 Hz, 1 H), 7,25 - 7,17 (m, 2 H), 7,06 (m, 1 H), 5,02 (m, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 4,11 (m, 1 H), 3,97 (m, 2 H), 3,39 (m, 1 H), 3,02 (m, 1 H), 2,98 (s, 3 H), 2,90 - 2,71 (m, 3 H), 2,05 -1,74 (m, 9 H), 1,62 (s, 3/2 H), 1,61 (s, 3/2 H), 1,60 (s, 3/2 H), 1,57 (s, 3/2 H), 1,32 (m, 5 H). FAB-MS: 537,9 (M+l).
PRIMER 48
N-[l(R.S)-[1.2-dihidro-l-metansulfonilspiro(3H-indol-3,4,-piperidin]-l>-il)karbonil]-2-(cikloheksilsulfinil)etil]-2-amino-2-metilpropananrid hidroklorid
K raztopini intermediata, dobljenega iz primera 47, stopnja C, (35 mg, 0,055 mmolov) v 1 ml metanola dodamo natrijev perjodat v 1 ml vode pri sobni temperaturi. Po nekaj urah reakcijsko zmes razredčimo z etil acetatom in izperemo z vodno raztopino natrijevega sulfita. Organski sloj sušimo preko natrijevega sulfata, filtriramo in koncentriramo. Z odstranitvijo zaščite iz ostanka s postopkom s trifluoroocetno kislino (primer 47, stopnja D) dobimo surov produkt, ki ga čistimo s preparativno TLC (silikagel, metilen klorid/metanol/amonijev hidroksid = 10/1/0,1). Očiščen produkt ponovno nakisamo s HCl v etru, da dobimo naslovno spojino (21 mg)· 3H NMR (400 MHz, CD3OD, zmes diastereomerov in rotamerov): 7,38 - 7,04 (m, 4 H), 5,43 (m, 1 H), 4,50 (m, 1 H), 4,05 (m, 1 H), 3,96 (m, 2 H), 3,38 (m, 1 H), 3,13 (m, 1 H), 2,98 (s, 3 H), 2,90 - 2,71 (m, 3 H), 2,05 -1,74 (m, 9 H), 1,62 (m, 6 H), 1,51 -1,32 (m, 5 H). FAB-MS: 553,9 (M+l).
104
PRIMER 49
N-llfR.Sj-fbZ-dihidro-l-metansulfonilspHODH-indol-S^-piperidinl-L-irikarboni11-2-(cikIoheksilsulfonil)etil1-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
K raztopini intermediata, dobljeni iz primera 47, stopnja C, (35 mg, 0,055 mmolov) v 1 ml metanola dodamo ΟΧΟΝΕ v 1 ml vode pri sobni temperaturi. Po nekaj urah reakcijsko zmes razredčimo z etil acetatom in izperemo z vodno raztopino natrijevega sulfita. Organski sloj sušimo preko natrijevega sulfata, filtriramo in koncentriramo. K ostanku dodamo trifluoroocetno kislino po postopku, opisanem v primeru 47, stopnja D, da dobimo surov produkt, ki ga čistimo s preparativno TLC (silikagel, metilen klorid/metanol/amonijev hidroksid = 10/1/0,1). Očiščen produkt ponovno nakisamo s HCl v etru, da dobimo naslovno spojino (12 mg).
*H NMR (400 MHz, CD3OD, zmes rotamerov): 7,36 (dd, 7,2 Hz, 1 H), 7,22 (m, 2 H), 7,06 (m, 1 H), 5,53 (m, 1 H), 4,51 (m, 1 H), 4,11 (m, 1 H), 3,95 (m, 2 H), 3,49 (m, 2H), 3,38 (m, 1 H), 3,10 (m, 1 H), 2,98 (s, 3/2 H), 2,97 (s, 3/2 H), 2,91 (m, 1 H), 2,20 -1,74 (m, 9 H), 1,62 (s, 3/2 H), 1,61 (s, 3/2 H), 1,58 (s, 3/2 H), 1,57 (s, 3/2 H), 1,51 -1,32 (m, 5 H). FAB-MS: 569,9 (M+l).
PRIMER 50
N-fl(R)-fspiro[benzo[b]tiofen-3(2H),4,-piperidin]-l,-il-karbonil-2-indol-3-il)etil-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: l-[(l,l-dimetiletoksi)karbonil1-3-hidroksi-4-metilen-l,2,5,6tetrahidropiridin
K suspenziji/raztopini metiltrifenilfosfonijevega jodida (30 g, 74 mmolov) v 150 ml THF počasi dodamo butillitij (2,5 N, 25,5 ml, 63,7 mmolov) pri 0 °C. Po mešanju 1 uro pri sobni temperaturi dodamo N-t-BOC zaščiten 4-piperidon (pripravljen iz
4-piperidon monohidrata hidroklorida po postopku, opisanem v Protective Groups in Organic Synthesis T. W. Greene, John Wiley and Sons, NY. 1981, v 50 ml THF počasi k reakcijski zmesi pri sobni temperaturi. To reakcijsko zmes mešamo 2 uri in filtriramo. Filtrat koncentriramo in čistimo (MPLC, silikagel, heksani/etil acetat = 10/1), da dobimo Wittigov produkt (7,9 g) z dobitkom 82 %.
105
K suspenziji selenovega dioksida/silikagela (pripravljeni po postopku, opisanem v Chem. lett. 1981, 1703) v 30 ml metilen klorida dodamo t-butil hidroperoksid (1,23 ml). Po 15 minutah dodamo Wittigov produkt (0,72 g, 3,69 mmolov) v 5 ml metilen klorida. Motno raztopino mešamo 3 ure in filtriramo skozi celit. Filtrat izperemo z vodo, slanico in sušimo preko natrijevega sulfata. Organski sloj koncentriramo in čistimo s flash kromatografijo (heksani/etil acetat = 4/1), da dobimo naslovno spojino z dobitkom 52 % (0,41 g).
Stopnja B: l-[(l,l-dimetiletoksi)karbonill-4-klorometil-l,2,5,6-tetrahidropiridin
Intermediat, dobljen iz stopnje A (400 mg, 1,88 mmolov) raztopimo v 10 ml benzena, dodamo tionil klorid (165 ml, 2,26 mmolov) in segrevamo 25 minut na 60 °C. Dobljeno zmes zlijemo v NaHCO3 (vodni) in ekstrahiramo z etrom. Etrski sloj sušimo preko magnezijevega sulfata in koncentriramo, da dobimo naslovno spojino (333 mg, 77 %).
Stopnja C: l-i(l,l-dimetiletoksi)karbonill-4-[[(2-bromofenil)-tio1metil1,2,5,6-tetrahidropiridin
Intermediat, dobljen iz stopnje B, (330 mg, 1,43 mmolov) raztopimo v 10 ml acetona ter dodamo 2-bromotiofenol (172 ml, 1,43 mmolov) in kalijev karbonat (390 mg, 2,86 mmolov). Reakcijsko zmes segrevamo 1 uro na 60 °C in nato filtriramo skozi silikagel (100 %-en eter). Organski sloj koncentriramo in čistimo s flash kromatografijo (silikagel, heksani/etil acetat = 10/1), da dobimo naslovno spojino z dobitkom 84 % (460 mg).
Stopnja D: Γ-ΙΥ1 J-dimetiletoksi)karbonill-spiro[benzorbltiofen-3-f2H\v’piperidin
Intermediat, dobljen iz stopnje C, (450 mg, 1,17 mmolov) raztopimo v 60 ml benzena ter dodamo AIBN (10 mg) in tributilkositrov hidrid (644 ml, 2,39 mmolov). To zmes refluktiramo 2 uri in koncentriramo. Ostanek raztopimo v etru in dodajamo brom, dokler reakcijska raztopina ne postane rjavkaste barve. Tej rjavkasti raztopini pri sobni temperaturi po kapljicah dodamo DBU (650 ml). Dobljeno motno raztopino filtriramo skozi silikagel in izperemo z etrom. Etrsko raztopino koncentriramo in ostanek čistimo z žarkovno kromatografijo (silikagel, heksani/etil acetat = 10/1), da dobimo naslovno spojino (157 mg), dobitek 43 %.
106
Stopnja E: N-[l(lR)-ispirofbenzo[b1tiofen-3(2H),y,-piperidin]l,-il)karbonil1-2-(indol-3-il)etill-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Raztopino intermediata, dobljenega iz stopnje D, (50 mg, 0,164 mmolov) v 0,5 ml TFA mešamo 0,5 ure pri sobni temperaturi in nato koncentriramo. Ostanek razredčimo s kloroformom in izperemo z NaHCO3 (vodni). Organski sloj sušimo preko natrijevega sulfata, filtriramo in koncentriramo, da dobimo prost amin (32 mg), 95 %. Raztopini prostega amina (5,1 mg, 0,025 mmolov) v 1 ml kloroforma dodamo intermediat, dobljen iz primera 21, stopnja C (9,2 mg, 0,0246 mmolov), HOBt (4,0 mg, 0,0295 mmolov) in EDC (5,6 mg, 0,0295 mmolov) pri sobni temperaturi. Po 12 urah reakcijsko zmes zlijemo v vodo in ekstrahiramo s kloroformom. Kloroformski sloj sušimo nad natrijevim sulfatom, filtriramo in koncentriramo. Ostanek čistimo s preparativno TLC (silikagel, heksani/ etil acetat = 1/1), da dobimo brezbarvno peno (13 mg, 94 %). Naslovno spojine dobimo iz te brezbarvne pene po postopku, opisanem v primeru 18, stopnja C.
Ή NMR (400 MHz, CD3OD, zmes rotamerov): δ 7,62 (d, 8 Hz, 2/3 H), 7,54 (d, 8 Hz, 1/3 H), 7,39 (d, 8 Hz, 2/3 H), 7,35 (d, 8 Hz, 1/3 H), 7,19 - 7,00 (m, 6 1/3 H), 2,62 (m, 1 H), 1,72 -1,65 (m, 2 1/3 H), 1,61 (s, 4 H), 1,50 (s, 2 H), 0,94 (m, 1 H), 0,10 (m, 2/3 H). FAB-MS 477 (m+l).
PRIMER 51
Stopnja A: r,2-dimetilspirofizoindolin-l-on-3,4’-piperidinl
K mešani raztopini 2-metilizoindolin-l-ona (1,47 g, 10 mmolov, dostopna pri Aldrich Chemical company) in mekloretamin hidroklorida (2,9 g, 15 mmolov) v DMF (50 ml) pri 0 °C pod Ar počasi dodamo kalijev hidrid (35 % v mineralnem olju, 4,5 g, 40 mmolov). Reakcijsko zmes nato počasi segrejemo do sobne temperature in mešamo še 3 ure. TLC (60 %-en etil acetat v heksanu) pokaže, da je reakcija končana. Zmes počasi zlijemo na led in jo šestkrat ekstrahiramo z etil acetatom. Združene organske ekstrakte sušimo (Na^OJ in uparimo. Ostanek čistimo s flash kromatografijo ob eluiranju z gradientom topila 5 -10 % metanola v diklorometanu, da dobimo 1,17 g produkta.
XH NMR (400 MHz, CD^): δ 7,85 (dd, J = 1,5 Hz, 6,5 Hz, 1 H), 7,81 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 7,50 - 7,40 (m, 2 H), 3,03 (s, 3 H), 2,95 - 2,90 (m, 2 H), 2,71 (dt, J = 2,6 Hz, 11,4
107
Hz, 2 H), 2,46 (s, 3 H), 2,31 (dt, J = 4,7 Hz, 13 Hz, 2 H), 1,44 (dd, J = 1,6 Hz, 13 Hz, 2 H).
FAB-MS izrač. za C14HlgN2O,230; ugot. 231 (M+H).
Stopnja B: 2-metilspirofizoindolin-l-on-3,4’-piperidin]
Demetilacijski postopek je po Tidwellu in Buchwaldu, J. Org. Chem. 1992,57, 6380 6382. K mešani raztopini produkta iz stopnje A (1,0 g, 4,35 mmolov) v 1,2dikloroetanu (10 ml) pri 0 °C dodamo 1-kloroetil kloroformat (0,56 ml, 5,2 mmola) in zmes mešamo 20 minut. Dodamo metanol (10 ml) in dobljeno zmes refluktiramo 1 uro. Z upaijenjem in flash kolonskim čiščenjem ob eluiranju z 10 - 20 % NH4OHMeOH (1:10) v kloroformu dobimo 0,63 g produkta.
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8,02 (d, J = 8 Hz, 1 H), 7,85 (d, J = 8 Hz, 1 H), 7,70 (t, J = 8 Hz, 1 H), 7,60 (t, J = 8 Hz, 1 H), 3,75 - 3,60 (m, 4 H), 3,10 (s, 3 H), 2,60 2,51 (m, 2 H), 1,72 (br. d, J = 14 Hz, 2 H).
El MS izrač za C13H16N20,216; ugot. 301 (M+, 5 %), 216 (M+), 185,160.
Stopnja C: 2-metilspiro[izoindolin-l-on-3,4’-piperidin1-r-karboksilna kislina 1,1-dimetiletilester
K mešani raztopini 2-metilizomdolin-l-ona (100 mg) v DMF (2 ml) dodamo prebiten KH v mineralnem olju pri 0 °C pod Ar. Po 5 minutah dodamo bis(2-bromoetil)t-butil karbamat (300 mg), zmes mešamo 1 uro pri sobni temperaturi in segrevamo pri 80 °C preko noči. Zmes zlijemo na led in jo ekstrahiramo z etil acetatom. Organski ekstrakt sušimo (Na2SO4) in uparimo. Ostanek čistimo s preparativno TLC ob eluiranju s 60 %-nim etil acetatom v heksanu, da dobimo 16 mg produkta.
JH NMR (400 MHz, CDcl3): δ 7,89 (dd, J = 1,3 Hz, 5,8 Hz, 1 H), 7,75 (d, J = 6,5 Hz, 1 H), 7,54 - 7,40 (m, 2 H), 4,35 - 4,10 (br. m, 2 H), 3,02 (s, 3 H), 2,14 (dt, J = 5,3 Hz, 13 Hz, 2 H), 1,49 (s, 9 H), 1,46 -1,40 (m, 2 H).
FAB-MS izrač. za C^H^N^, 316; ugot. 317 (M+H, 100 %).
Stopnja D: 2-metilspiro[izoindolin-l-on-3,4’-piperidin]
Intermediat iz stopnje C (16 mg) obdelujemo s koncentrirano HC1 in MeOH pri sobni temperaturi 2 uri in uparimo, da dobimo želeni produkt. Vsi spektralni podatki za to spojino so enaki kot v stopnji B.
108
Stopnja E: N-[l(R)-[(2-metilspiro[izoindolin-l-on-3,4,-piperidin]-l,-il) karbonin-2-(indol-3-il)etil1-2-f[(l,l-dimetiletiloksi)karbonil] amino]-2-metilpropanamid
Spojino pripravimo po standardni peptidni pripajalni tehnologiji iz a(R)-[[2-[[(l,l-dimetiletoksi)karbonil]-amino]-2,2-dimetil-l-oksoetil]amino]-lH-indol-3-propanojske kisline (25 mg) in produkta iz stopnje B.
Ή NMR (400 MHz, CDa3): δ 8,58, 8,44 (2 br. s, 1 H), 7,80 - 7,15, 6,44 (m, d, J = 7,6 Hz, skupaj 10 H), 5,43 - 5,36, 5,22 - 5,15 (2 m, 1 H), 4,98 (br. s, 1 H), 4,60 - 4,50 (br. m, 1 H), 3,64 - 3,50 (br. m, 1 H), 3,40 - 3,05, 2,72 - 2.64, (2 m, 4 H), 2,88, 2,51 (2 s, 3 H), 2,00 -1,90 (m, 2 H), 1,52,1,51 (2 s, 3 H), 1,49 (s, 3 H), 1,45,1,44 (2 s, 9 H), 1,40 0,40 (več m, 2 H).
FAB-MS izrač za C33H41N5O5, 587; ugot. 588 (M+H), 532, 488.
Stopnja F: N-ί l(R)-f (2-metilspiroiizoindolin- l-on-3,4’-piperidinj-1 ’-il)karbonil1-2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Naslovno spojino pripravimo ob uporabi HCI v etilacetatu iz produkta stopnje E.
Ή NMR (400 MHz, CD3OD); δ 7,84 - 6,89 (m, 9 H), 5,30, 5,15 (2 dd, 1 H), 4,50 4,40 (m, 1 H), 3,85 - 3,77 (m, 1 H), 3,65 - 3,50 (m), 3,40 - 3,15 (m), 2,95, 2,58 (2 s, 3 H), 2,95 - 2,85 (m), 2,55 - 2,47 (m), 2,22 - 2,15 (m), 2,09 - 2,00 (m), 1,65,1,64,1,60 (3 s, 6 H), 1,50 -1,20 (m), 1,15 -1,05 (m), 0,9 - 0,8 (m), 0,61 - 0,52 (m).
FAB-MS izrač. za 471; ugot. 472 (M+H).
PRIMER 52
N-fl(R)-[[l-irrrr6-[[r4-azido-2-hidroksi-5-jodofenil]karbonillamino]heksillamino]karbonil]metil1sulfonill-2,3-dihidrospiroi3H-indol-3.4,-piperidm1-r-il1karbonil1-2-(fenilmetiloksi)etill-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
K raztopini tržno dostopnega N-hidroksisukcimidil-4-azido-2-hidroksi-benzoata v 5 ml CH2C12 dodamo 6-N-t-butoksikarbonil-n-heksilamin hidroklorid in 0,10 ml Hunigove baze in mešamo 4 ure. Reakcijsko zmes uparimo do suhega in kromatografiramo na 15 g silikagela. Eluiranje s heksani-etil acetatom (2 : 1) da 0,229 aciliranega produkta. K 29 mg gornjega materiala dodamo 2 ml THF in 2 ml 0,01 M vodnega NaOH, 25 mg kalijevega jodida. Dodamo kloramin-T (15 mg) in
109 mešamo 30 minut. Reakcijsko zmes pogasimo z 2 ml nasičene raztopine natrijevega tiosulfata, razredčimo s 5 ml 0,05 N HC1 in ekstrahiramo z etil acetatom (2x5 ml). Združene organske faze izperemo s slanico (5 ml), sušimo preko MgSO4 in koncentriramo. S flash kromatografijo ostanka (5 g silikagela) s heksanom-etrom (3 : 1) dobimo 26 mg jodoniranega materiala. Izvedemo deprotekcijo N-tBOC s 4M HC1 v etil acetatu, da dobimo 21,4 mg hidroklorida.
K raztopini tega materiala v 5 ml CH2C12 dodamo 49 mg kislinskega intermediata iz stopnje A primera 33,0,016 ml NMM, 19,8 mg HOBT in 29 mg EDC ter mešamo 18 ur. Reakcijsko zmes dodelamo in čistimo na običajen način.
Še enkrat izvedemo deprotekcijo N-tBOC skupine s 4M HC1 v etil acetatu. S tem dobimo naslovno spojino kot rumeno rjavo trdno snov. Ta material naalkalimo z raztapljanjem v 2 ml nasičenega NaHCO3 in ekstrahiramo s CH2C12 (2x3 ml). Združene organske faze posušimo preko Na2SO4 in koncentriramo do naslovne spojine.
ΣΗ NMR (CDQ3, 400 MHz). Spojina obstoji kot 3 : 2 zmes rotamerov. S 8,40 - 8,20 (m, 1 H), 7,95 (s, 2/3 H), 7,90 (s, 1/3 H), 7,40 - 6,90 (m, 9 1/3 H), 6,70 (s, 2/3 H), 6,55 (m, 1 H), 5,20 - 5,10 (m, 1 H), 4,70 - 4,40 (m, 4 H), 4,10 - 3,80 (m, 5 H), 3,80 - 3,50 (m, 4 H), 3,40 - 3,10 (m, 4 H), 3,10 - 3,00 (m, 1 H), 2,70 (dt, 1 H), 1,90 - 1,20 (m, 14 H), 1,30 (s, 6 H).
PRIMER 53
N-ilfSEffl^-dihidro-l-metilsulfonilspiropH-indol-S^-piperidinj-r-inkarbonill-2-(fenilmetilsulfonil)etil1-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stopnja A: N-ilfSj-ifl^-dihidro-l-metilsulfonilspirolSH-indol-S^^piperidinlr-il)karbonil]-2-(fenilmetilsulfonil)-etill2-amino-2-metilpropanamid
Vzorec N-[l(S)-[(l,2-dihidro-l-metilsulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-l’-il)karbonil]-2-(fenilmetiltio)etil]-2-[[l,l-dimetiletiloksi)karbonil]amino]-2-metilpropanamida (primer 44, stopnja C), 72 mg, raztopimo v 0,5 ml metanola in ohladimo na kopeli ledu. K temu po kapljicah ob mešanju dodamo raztopino 101 mg ΟΧΟΝΕ (TM) v 0,5 ml vode. Reakcijo kontroliramo več ur s TLC na silikagelnih GF ploščah, razvitih z 2 : 1 EtOAc:heksanom; opazimo, da dva bolj polarna madeža rasteta v teku časa na račun izhodnega materiala. Ko izhodni material v bistvu izgine, reak110 cijsko zmes skoraj posušimo v toku dušika in ostanek ekstrahiramo s kloroformom. Preko MgSO4 sušeni ekstrakt podvržemo preparativni TLC na 8 x 8 x 1000 μτη silikagelni GF plošči, razviti s EtOAc:heksan; izoliramo dva trakova. Manj polarno komponento raztopino v 0,5 ml anizola, ohladimo na kopeli ledu in obdelamo z 0,5 ml TFA. Reakcijo zaustavimo in odstranimo iz kopeli. Po 30 minutah večino TFA odstranimo v vakuumu vodne črpalke in večino preostalega anizola uparimo v toku dušika. Ostanek prevzamemo v kloroformu in stresamo z 1 M K^HPO^ kateremu smo dodali dovolj NaOH, da je pH > 9. Kloroform nato odstranimo in vodno fazo še večkrat ekstrahiramo s kloroformom, združene organske faze sušimo z MgSO4 in koncentriramo pri zmanjšanem tlaku do gumija. S preparativno TLC na silikagelni GF plošči z 0,5 : 5 : 95 konc. NH4OH : MeOH : CHC13 dobimo prosto bazo naslovne spojine.
Izrač. za C27H36N4O6S2: m.m. = 576,7; ugot. m/e = (m+1) 577,5.
Stopnja B: N-[lfSl-[fl,2-dihidro-l-metilsulfonilspiro[3H-indol-3,4’piperidinj -1 ’il)karbonil] -2-(fenilmetilsulfonil)-etill -2-amino-2metilpropanamid hidroklorid
Hidrokloridno sol spojine iz stopnje A zgoraj pripravimo ob uporabi standarnih postopkov, opisanih zgoraj, ki dajejo naslovno spojino.
PRIMER 54
Priprava obeh N-il(S)-r(l,2-dihidro-l-metilsulfonilspiro-[3H-indol-3,4’-piperidin]r-il)karbonil]-2-(fenilmetilsulfinil)-etill-2-amino-2-metilpropanamidhidrokloridov
Stopnja A: N-[l(S)-[(1.2-dihidro-l-metilsulfonilspiro[3H-indol-3,4,piperidinl-r-il)karbonil]-2-(fenilmetilsulfinil)-etil]-2amino-2-metilpropanamid
S postopkom TFA/anizolnega deblokiranja bolj polarnega traku iz stopnje A, primer 53, ki je tam opisan, čemur sledi enaka preparativna TLC dodelava, izoliramo dva trakova, ki ustrezata obema pričakovanima diastereomernima sulfoksidoma.
Za manj polami diastereomer: izrač. za C27H36N4O5S2: m.m. = 560,7; ugot. m/e = (m+1) 561,7.
Za bolj polami diastereomer: izrač. za C2?H36N4O5S2: m.m. = 560,7; ugot. m/e = (m+1) 561,7.
111
Stopnja B: N-rifSWfl,2-dihidro-l-metilsulfonilspiiO[3H-indol-3,4’piperidin1-r-il)karbonil1-2-(fenilmetilsulfinil)-etill-2amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Naslovno spojino dobimo s substituiranjem katerekoli od spojin, izoliranih iz stopnje A zgoraj, za spojino, pripravljeno v stopnji A, primer 53 za stopnjo B, primer 53.
PRIMER 55
N-il(R)-r(1.2-dihidro-l-metansulfonilspiroi3H-indol-3.4,-piperidin1-r-il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etil1-2-amino-2-metilpropanamid mezilat
To spojino pripravimo z obdelavo proste baze, dobljene v primeru 18, stopnja C, z metansulfonsko kislino. Naslovno spojino dobimo s tem, da jo prekristaliziramo iz etilacetata-etanola-vode, tal. = 166 do 168 °C.
PRIMER 56
2,3,3a,4,6,6a-heksahidro-2-okso-lH-tieno[3,4-dlimidazol-4(S)-pentanoiska kislina-6-f[ii[l>-ff(29R)-([2-amino-2-metil-l-oksopropil]-amino]-3-(fenilmetiloksi)-l-oksopropil]-2.3-dihidrospiro[3H-indol-3.4,-piperidin]-l,-il]sulfonil]metiljkarboniljaminojheksilester trifluoroacetat
K raztopini 0,108 g intermediata, pripravljenega v primeru 33, stopnja A, v 5 ml CH2C12 dodamo 20 mg 6-amino-heksanola, 28 mg HOBT in 42 mg EDC ter mešamo 4 ure. Reakcijsko zmes razredčimo z 10 ml CH2C12 in izperemo z 0,5N HCl (5 ml), nasičenim vodnim NaHCO3 (5 ml), sušimo preko MgSO4 in koncentriramo. Ostanek čistimo s flash kromatografijo (10 g silikagela) s CH2Cl2-acetonom (1 : 1) kot eluentom.
K 56,2 mg gornjega intermediata v 2 ml CH2C12 in 2 ml DMF dodamo 23 mg biotina, 14 mg DMAP, 28 mg EDC in mešamo 18 ur. Reakcijsko zmes obdelamo na običajen način. S čiščenjem ostanka s flash kromatografijo preko 5 g silikagela s CP^C^acetonom (1 : 1) kot eluentom dobimo 22 mg biotinskega konjugata. Deprotekcijo N-tBOC izvedemo v CH2C12-TFA, da dobimo 18,9 mg naslovne spojine kot belo trdno snov.
112 !H NMR (CDC13, 400 MHz). Spojina je 3 : 2 zmes rotamerov. d 8,45 - 8,23 (m, 1 H), 7,9 (s, 1 H), 7,40 - 7,28 (m, 4 H), 7,25 - 7,17 (m, 2 H), 7,00 (dt, 2/3 H), 6,80 (d, 1/3 H), 5,21 - 5,14 (m, 1 H), 4,60 - 4,42 (m, 4 H), 4,28 (bt, 1 H), 4,15 - 4,00 (m, 6 H), 3,85 3,70 (m, 2 H), 3,20 - 3,10 (m, 3 H), 2,90 (dd, 1 H), 2,83 (dt, 1 H), 2,70 (d, 1 H), 2,40 2,25 (m, 2 H), 2,00 - 0,60 (m, 18 H), 1,62 (s, 3 H), 1,6 (s, 3 H).
Za
Merck & Co., Inc.:
PATENTNA PISARNA LJUBLJANA

Claims (13)

  1. PATENTNI ZAHTEVKI
    1. Spojina s formulo:
    ?2 ^6 R4 r *C-N-C—A—N 1 H D * f 2 i6 .R4
    R C-N-C—A—N
    II r-,
    Formula II
    Rj je /-/0 alkil, aril, arfl(/-/ alkil) in C3-C7 cikloalkil (/-/alkil) ali /-/alkilK-/-C5 alkil, aril(C0-C5alkil)-K-(/-C5 alkil), /-/ cikloalkn(C0-C5alkil)-K-(/-C5 alkil), kjer je K O, S(O)m, N^/O), /Ο)Ν^, OC(O), /0)0, ali -CR2=CR2ali -C=C-, kjer so arilne skupine definirane spodaj in so lahko R2 in alkilne skupine nadalje substituirane z 1 do 9 halogeni, S(O)mR2a, 1 do 3 OR^ ali (00)01/ in so arilne skupine lahko nadalje substituirane s substituenti, izbranimi iz skupine, v kateri so fenil, fenoksi, halofenil, 1-3 /-/ alkili, 1 do 3 halogeni, 1 do 2 OR2, metilendioksi, S(O)mR2, 1 do 2 CF3, OCF3, nitro, NfR^CR^, N(R2)C(O)R2, /OjOR^ C(O)N(R2)(R2), SO2N(R2)(R2), N(R2)S(O)2 aril ali N(R2)SO2R2;
    R2 je vodik, /-/ alkil, /-/ cikloalkil, kjer pa sta dve /-/ alkilni skupim prisotni na enem atomu, sta lahko v danem primeru spojeni, da tvorita /-/ cikličen obroč, ki v danem primeru vključuje kisik, žveplo ali NR^;
    I/ je vodik ali /-/ alkil;
    R^ in R3b sta neodvisno vodik, halogen, /-/ alkil, OR2, ciano, OCF3, metilendioksi, nitro S(O)mR, CF3 ali C(O)OR2 in kadar sta R^ in R3b v orto ureditvi, sta lahko spojena, da tvorita / - / alifatski ali aromatski obroč, ki v danem primeru vključuje 1 ali 2 heteroatoma, izbrana izmed kisika, žvepla ali dušika;
    114
    R4m R5 sta neodvisno vodik, Ct-C6 alkil, substituiran C^-C^ alkil, kjer so lahko substituenti 1 do 5 halo, 1 do 3 hidroksi, 1 do 3 Cj-C^ alkanoiloksi, 1 do 3 C^-C^ alkoksi, fenil, fenoksi, 2-furil, C4-C6 alkoksikarbonil, S(O)m(C1-C6 alkil); ali lahko R4 in R5 skupaj tvorita -(CH2)rLa (CH2)s-, kjer je La Ο(Κ^)2, O, S(O)m ali N(R2), r in s sta neodvisno 1 do 3 in je R2, kot je definirao zgoraj;
    R6 je vodik ali Cx-C6 alkil;
    A je r7 — (CH2)X—C—<CH2)y— ^7a ali — Z-(CH2)X-C—(CH2)y— ^7a kjer sta x in y neodvisno 0 do 3;
    Z je ali O;
    R? in R?a sta neodvisno vodik, Cj-C6 alkil, OR2, trifluorometil, fenil, substituiran Cj-C6 alkil, kjer so substituenti imidazolil, fenil, indolil, p-hidroksifenil, OR2, i do 3 fluoro, S(O)mR2, C(O)OR2, c3-c7 cikloalkil, N(R2)(R2), C(O)N(R2)(R2); ali sta lahko R? in R?a neodvisno spojena z eno ali obema skupinama R4 in R5, da nastanejo alkilenski mostovi med končnim vodikom in alkilnim delom skupine R? ali R?a, kjer most vsebuje 1 do 5 atomov ogljika;
    B, D, E in F so neodvisno C(Rg)(R10), O, C=O, S(O)m ali NR9, tako da lahko eden ali dva od B, D, E ali F v danem primeru manjka, da dobimo 5-, 6- ali 7-členski obroč; in pod pogojem, da so lahko B, D, E in F C(R8)(R10) ali C=O le, kadar je ena od preostalih skupin B, D, E in F istočasno O, S(O)m ali NR?; B in D ali D in E sta lahko skupaj N=CR10- ali CR10=N ali B in D ali D in E so lahko skupaj CRg=CR10, pod pogojem, daje eden od preostalega B in E ali F istočasno O, S(O)m ali NR9;
    Rg in Rw sta neodvisno vodik, R2, OR2, (CH2)q aril, (CH2)q C(O)OR2, (CH2)q (3(0)0(01^ aril ali (CHJg (lH-tetrazol-5-il) in je lahko aril v danem primeru sub115 stituiran z 1 do 3 halo, 1 do 2 C^Cg alkiloma, 1 do 3 OR2 ali 1 do 2 C(O)OR2;
    R9 je R2, (CH2)q aril, (CO)R2, C(O)(CH2)q aril, SO2R2, SO2(CH2)q aril, C(O)N(R2)(R2), C(O)N(R2)(CH2)q aril, C(O)OR2, l-H-tetrazol-5-il, SO3H, SO2NHChN, SO2N(R2)aril, SC^h^R^R^ in je lahko (CH2)q v danem primeru substituiran z 1 do 2 alkiloma in sta lahko R2 in aril v danem primeru nadalje substituirana z 1 do 3 OR^, 0(0-1^ arilom, 1 do 2 C(O)OR2a, 1 do 2 C(O)O(CH2)q arilom, 1 do 2 C(O)N(R2a(R2a), 1 do 2 C(O)N(R2a)(CH2)q arilom, 1 do 5 halogeni, 1 do 3 alkili, 1,2,4-triazolilom, l-H-tetrazol-5-ilom, CfOjNHSC^R^, S(O)fflR2a, C(O)NHSO2(CH2)q arilom, SO2NHC=N, SO.NH^OjR^, SO2NHC(O)(CH2q arilom, NCR^O^RJRJ, N(R2a)C(O)N(R2a)(CH2)q arilom, N(R2a)(R2a), N(R2a)C(O)R2a, N(R2a)C(O)(CH2)q arilom, OC(O)N(R2a(R2a), OC)O)N(R2a)(CH2)q arilom; SO2(CH2)qCONH-(CH2)wNHC(O)Rn, kjer je w 2-6 in je Rn lahko biotin, aril ali aril, substituiran z 1 ali 2 OR2,1-2 halogenoma, azido ali nitro;
    m je 0,1 ali 2;
    nje 1 ali 2;
    q je lahko v danem primeru 0,1,2, 3 ali 4; in so
    G, H, I in J atomi ogljika, dušika, žvepla ali kisika, tako da je vsaj eden heteroatom, in lahko eden od G, H, I ali J v danem primeru manjka, da dobimo 5- ali 6-členske heterociklične aromatske obroče; ter njene farmacevtsko sprejemljive soli in posamezni diastereomeri.
  2. 2. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, daje *H H R4
    R^-C-N-C— A—N'
    II D
    Formula III
    116 kjer je Rx Cx-C1() alkil, aril (Cx-C4 alkil), C3-C6 cikloalkil (Cx-C4 alkil), (Cx-C4 alkil)K-(CfC4 alkil), aril(C0-C5 alkil)-K-(CJ-C4 alkil), (C3-C? cikloalkil)(C0-C5 alkil)-K(CfC4 alkil), kjer je K O, S(O)m, -CR^CR^ ali -C=C- ali N(R2C(O), kjer so R2 in arilne skupine nadalje substituirane z 1 do 7 halogeni, S(O)mC1-C4 alkilom, OR2 ali C(O)OR2 in so arilne skupine lahko nadalje substituirane s Cx-C4 alkilom, 1 do 2 halogenoma, 1 do 2 OR2 CF3, OCF3, metilendioksi, S(O)mR2, SO^R^R^, N(R2SO2R2 ali C(O)OR2;
    R^ je vodik, Cx-C6 alkil, C3-C? cikloalkil, in, če sta dve C1-C6 alkilni skupini prisotni na enem atomu, sta lahko v danem primeru spojeni, da dobimo C4-C6 cikličen obroč, ki v danem primeru vsebuje 1 do 2 heteroatoma, izbrana izmed kisika, žvepla ali NR-;
    2a’
    R^ je vodik ali Cx-C6 alkil;
    R3a in R3b sta neodvisno vodik, halogen, Cx-C4 alkil, OR2, metilendioksi, nitro, S(°)mCl’C4 alkil’ CF3 ali C(°)0R2;
    R4 in R5 sta neodvisno vodik, Cx-C6 alkil, substituiran Cx-C6 alkil, kjer so lahko substituenti 1 do 5 halo, 1 do 2 hidroksi, 1 do 2 C^-C^ alkanoiloksi, 1 do 2 Cx-C6 alkiloksi ali S(O)m(CfC4 alkil);
    Aje:
    — (CH2)x-C—(CH2)y— F*7a ali 'N(R2)-(CH2)x-C— (CH2)y^7a
    117 kjer sta x in y neodvisno 0,1 ali 2;
    R7 in R7a sta neodvisno vodik, Cj-C4 alkil, substituiran Cx-C4 alkil, kjer so substituenti od 1 do 3 fluoro ali imidazolil, fenil, indolil, S(O)mC1-C4 alkil, CfOjOR^ ali sta R? in R7a lahko neodvisno spojena z eno ali obema od skupin R4 in R5, da nastanejo alkilenski mostovi med končnim dušikom in alkilnim delom skupine R? ali R7a, kjer most vsebuje 1 do 3 atome ogljika;
    B, D in F so neodvisno C(Rg)(R10), C=O, S(O)m ali NR9, tako da lahko eden od B, D ali F v danem primeru manjka, da dobimo 5- ali 6-členski obroč, in pod pogojem, da je eden od B, D in F C(Rg(R10) ali C=O le, kadar je ena od preostalih skupin B, D in F istočasno O, S(O)m ali NR9;
    Rg in R10 sta neodvisno vodik, R2, OR2, (CH2)q aril, (CH2)qC(O)OR2, (CH2)qC(O)O(CH2)q aril, (CH2)q(lH-tetrazol-5-il) in aril je lahko v danem primeru substituiran z 1 do 3 halo, 1 do 2 C7-C4 alkiloma, 1 do 3 OR2 ali 1 do 2 CfOjOR^
    R9 je R2, (CH2)q aril, C(O)R2, C(O)(CH2)q aril, SO2R2, SO2(CH2)q aril, C(O)N(R2(R2), C(O)N(R2(CH2)q aril, l-H-tetrazolil-5-il, SO2NHChN, SO2NR2 aril, SO2N(R2)(R2) in je lahko (CH2) v danem primeru substituiran z 1 do 2 C^-C^alkiloma in je R2 lahko v danem primeru substituiran z 1 do 2 OR^, O(CH2)qarilom, 1 do 2 C(O)OR2a, CfOjN^KRJ, 8(0)^, l-H-tetrazol-5-ilom, C(O)NHSO2R2a, C(O)NHSO2(CH2)q arilom, N(R2a)(C(O)N(R2a(R2a) ali N(R2a)C(O)N(R2a)(CH2)q arilom in je lahko aril v danem primeru substituiran z 1 do 2 OR^, 1 do 2 halogenoma, 1 do 2 Cj-C4 alkiloma, CfOjOR^ ali l-H-tetrazol-5ilom; SO^CH^ CONH(CH2)w, NHC(0)Rn, kjer je w = 1 do 6, in je Rn lahko biotin, aril, aril, substituiran z 1 ali 2 OR2,1 do 2 halogenoma, azido ali nitro;
    m je 0,1 ali 2;
    qje 0,1, 2 ali 3; in je arilna skupina fenil, naftil, piridil, tienil, indolil, tiazolil ali pirimidinil, ter njene farmacevtsko sprejemljive soli in posamezni diastereomeri.
  3. 3. Spojina po zahtevku 2, označena s tem, da F ni prisoten.
    118
  4. 4. Spojina po zahtevku 3, označena s tem, daje
    Rx je CfC10 alkil, aril (CfC4 alkil), C5-C6 cikloalkil (C5-C6 alkil) ah (CfC4 alkil)-KCfC2alkil-, arilCC^alkflj-K-CCj^ alkil), C3-C6 cikloalkil (C0-C2 alldlj-K-CCjalkil), kjer je K 0 ali S(O)m, in so arilne skupine lahko nadalje substituirane z 1 do 2 Cj-C4 alkiloma, 1 do 2 halogenoma, OR2, C(O)OR2, CF3 ali
    R2 je vodik, Cx-C4 alkil, ciklo C3-C6 alkil in, kadar sta dva Cx-C4 alkila prisotna na enem atomu, sta lahko v danem primeru spojena, da dobimo C5-C6 cikličen obroč, ki v danem primeru vključuje heteroatome kisik ali NR^;
    je vodik ali Cx-C4 alkil;
    in R3b sta neodvisno vodik, halogen, Cx-C4 alkil, CfOjOR^ hidroksi,
    Cx-C4 alkoksi, S(O)mC1-C4 alkil ali CF3;
    R4 in R5 sta neodvisno vodik, Cx-C4 alkil, substituiran Cx-C4 alkil, kjer so lahko substituenti 1 do 2 hidroksi ali S(O)m (Cx-C3 alkil);
    A je:
    —(CHA-C— ^7a
    119 kjer je X O ali 1;
    R7 in R7a sta neodvisno vodik, Cx-C3 alkil; ali sta lahko R? in R7a neodvisno spojena z eno ali obema od skupin R4 in R5, da nastanejo alkilenski mostovi med končnim dušikom in alkilnim delom skupine R? ali R?a, da dobimo 5- ah 6-členske obroče, ki vsebujejo končni dušik;
    B in D sta neodvisno C(Rg)(RX0), C=O, O, S(O)m, NR9, pod pogojem, da je lahko eden od B in D C(Rg)(RX0) ali C=O le, kadar je drugi od B in D O, S(O)m ali NR9;
    Rg in R10 sta neodvisno vodik, R2, OR2 ali (CH2) aril ter je aril lahko v danem primeru substituiran z 1 do 2 halo, 1 do 2 Cx-C4 alkiloma, OR2 ah 1 do 2 C(O)OR2;
    R9 je C(O)R2, C(O)(CH2)q aril, SO2R2, SO(CH2)q aril, C(O)N(R2)(R2), C(O)N(R2)((CH2)q aril in je lahko (CH^) v danem primeru substituiran z 1 do 2 CxC2 alkiloma in je R2 lahko v danem primeru substituiran z 1 do 2 OR^, O(CH2)q arilom, C(O)OR2a, C(O)N(R2a)(R2a), S(O)mR2a, l-H-tetrazol-5-ilom, C(O)NHSO2R2a ali N(R2a)C(O)N(R2a)(R2a) in je lahko aril v danem primeru substituiran z 1 do 2 OR^, 1 do 2 halogenoma, 1 do 2 Cx-C2 alkiloma, C(O)OR2a, 1-Htetrazol-5-ilom ali S(O)mR2a;
    SO2(CH2)qCOHN(CH2)wNHC(O)Rxx, kjer je w = 2 do 6 in je Rn lahko v danem primeru biotin, aril in je lahko aril v danem primeru substituiran z 1 do 2 OR2,1 do 2 halogenoma, azido, nitro;
    m je 0,1 ali 2;
    q je lahko v danem primeru 0,1,2 ali 3;
    aril je fenil, naftil, piridil, indolil, tienil ali tetrazolil, ter njene farmacevtsko sprejemljive soli in posamezni diastereomeri.
    120
  5. 5. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da ima formulo:
    Rje
    Q-CH2CH, ^~^-CH2CH2CH2, CH2OCH2,
    CH2CH2,
    2 p
    CH2OCH2i
    F—fVcH2CH2;
    N CH2CH2CH2;
    CH2CH2CH2;
    R^je H, fluoro;
    D je O, S, S(O)m, NfR^, NSO^, NSO/CH^ aril, ΝΟ(Ο)^, NSO/CH^OH, NSO2(CH2)qCOOR2, N-SO2(CH2)qC(O)-N(R2(R2), N-SO2(CH2)qC(O)121
    N(R2)(CH2)wOH,
    N N H in j e aril fenil ali piridil ter je lahko fenil
    N-SO2(CH2)q ( I substituiran z 1 do 2 halogenoma;
    N=N
    R2 je H, Cx-C4 alkil;
    m = 1,2;
    tjeO, 1, 2;
    qje 1,2,3;
    w je 2 do 6;
    ter njene farmacevtsko sprejemljive soli in posamezni diastereomeri.
  6. 6. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da je:
    N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-mdol-3,4’-piperidin]-l’-il)karbo nil]-2-(lH-indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
    N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metankarbonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-l’-il)karbo nil]-2-(lH-mdol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
    122
    N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-benzensulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-l’-il)karbonil]-2-(lH-indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
    N-[l(R)-[(3,4-dihidro-spiro[2H-l-benzopiran-2,4’-piperidin]-l’-il)karbonil]-2-(lH-indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
    N-[l(R)-[(2-acetil-l,2,3,4-tetrahidrospiro[izokmolin-4,4’-piperidin]-l’il)karbonil]-2-(indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
    N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-r-il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
    N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-l’-il)karbonil] -2-(fenilmetiloksi)etil] -2-amino-2-metilpropanamid mezilatna sol
    N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-l’-il)karbonil]-2-(2’,6’-difluorofenilmetiloksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
    N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonil-5-fluorospiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-ril)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
    N-[l(S)-[(l,2-dihidrO’l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-l’-il)karbonil]-2-(fenilmetiltio)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
    N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro][3H-indol-3,4’-piperidiii]-l’-il)karbonil]-3-fenilpropil]-2-ammo-2-metilpropanamid
    N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin[-l’-il)karbo nil]-3-cikloheksilpropil]-2-amino-2-metilpropanamid ali
    N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-l’-il)karbonil]-4-fenilbutil]-2-amino-2-metilpropanamid
    N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-ril)karbonil]-2-(5-fluoro-lH-mdol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
    123
    N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-metansulfonil-5-fluorospiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-l’-il)karbonil]-2-(5-fluoro-lH-indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
    N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l-(2-etoksikarbonil)metilsulfonilspiro[3H-indol-3,4’-piperidin]-l’-il)karbonil]-2-(lH-indol-3-il)etil]-2-amino-2-metilpropanamid
    N-[l(R)-[(l,2-dihidro-l,l-dioksospiro[3H-benzotiofen-3,4’-piperidin]-r-il)karbonil]-2-(fenilmetiloksi)etil]-2-amino-2-metilpropanamid in njene farmacevtsko sprejemljive soli.
  7. 7. Spojine po zahtevku 1, označene s tem, da so kjer so Rp R2, R^, R3b, R4, R5, R6, A, B, D, E, F, G, H, I, J in n, kot je definirano v zahtevku 1.
    124
  8. 8. Postopek za pripravo spojine po zahtevku 1, označen s tem, da spojino s formulo | I R1-|—N-H CO r2
    R1-p-N-H
    CO
    4a presnovimo s spojino s formulo
    HOOC-A-N<
    R4
    HOOC-A-N<
    R4 ali kjer so Rp R2, R^, R3b, R4, R5, R6, A, B, D, E, F, G, H, I, J in n, kot je definirano v zahtevku 1, in je L zaščitna skupina, ki jo nato odstranimo, če je prisotna, in tvorimo soli, če želimo.
    125
  9. 9. Postopek za pripravo spojine po zahtevku 1, označen s tem, da spojino s formulo presnovimo s spojino s formulo
    Ri
    Μθο r4 —n-c-a-n-r5 COOH ali
    Rt
    Ro Rr θ R4 —N-C-A-N-L COOH
    12a kjer so Rp R2, R3a, R3b, R4, R5, R6, A, B, D, E, F, G, El, I, J in n, kot je definirano v zahtevku 1, in je L zaščitna skupina, ki jo nato odstranimo, če je prisotna, in tvorimo soli, če je želeno.
  10. 10. Sestavek, koristen za povečanje endogene proizvodnje ali sproščanje rastnega hormona pri ljudeh ali živalih, označen s tem, da zajema inerten nosilec in učinkovito količino spojine po zahtevku 1.
  11. 11. Sestavek, koristen za povečanje endogene proizvodnje ali sproščanja rastnega hormona pri ljudeh ali živalih, označen s tem, da obsega inerten nosilec in učinkovito količino spojine po zahtevku 1, uporabljene v kombinaciji z drugimi sekretagogi rastnega hormona, kot so GHRP-6, GHRP-1, GHRP-2, rastni hormon sproščujoč faktor (GRF), eden od njegovih analogov ali IGF-1 ali IGF-2.
    126
  12. 12. Sestavek za zdravljenje osteoporoze, označen s tem, da obsega inertni nosilec, bifosfonatno spojino in spojino po zahtevku 1.
  13. 13. Sestavek po zahtevku 12, označen s tem, da je bifosfonatna spojina alendronat.
SI9300646A 1992-12-11 1993-12-10 Spiro piperidines and homologs which promote release of growth hormone SI9300646A (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US98932292A 1992-12-11 1992-12-11
US08/147,226 US5536716A (en) 1992-12-11 1993-11-03 Spiro piperidines and homologs which promote release of growth hormone

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SI9300646A true SI9300646A (en) 1994-09-30

Family

ID=26844709

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SI9300646A SI9300646A (en) 1992-12-11 1993-12-10 Spiro piperidines and homologs which promote release of growth hormone

Country Status (27)

Country Link
US (1) US5652235A (sl)
EP (1) EP0615977B1 (sl)
JP (1) JP2509530B2 (sl)
CN (1) CN1034733C (sl)
AT (1) ATE220071T1 (sl)
AU (1) AU673552B2 (sl)
BG (1) BG61979B1 (sl)
CA (1) CA2110670C (sl)
CZ (1) CZ151495A3 (sl)
DE (1) DE69332075T2 (sl)
DK (1) DK0615977T3 (sl)
DZ (1) DZ1736A1 (sl)
ES (1) ES2177538T3 (sl)
FI (1) FI952863A0 (sl)
HR (1) HRP931486B1 (sl)
HU (2) HUT72076A (sl)
IL (1) IL107837A0 (sl)
MX (1) MX9307850A (sl)
NO (1) NO952295L (sl)
NZ (1) NZ258412A (sl)
PL (1) PL176993B1 (sl)
PT (1) PT615977E (sl)
RO (1) RO115804B1 (sl)
RU (1) RU2168512C2 (sl)
SI (1) SI9300646A (sl)
SK (1) SK282166B6 (sl)
WO (1) WO1994013696A1 (sl)

Families Citing this family (116)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5686624A (en) * 1992-01-30 1997-11-11 Sanofi 1-benzenesulfonyl-1,3-dihydro-indol-2-one derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions in which they are present
DK78692D0 (da) * 1992-06-12 1992-06-12 Lundbeck & Co As H Dimere piperidin- og piperazinderivater
PL314003A1 (en) * 1993-10-19 1996-08-05 Merck & Co Inc Combination of bisulphonates and substances enhancing secretion of growth hormone
US5492916A (en) * 1993-12-23 1996-02-20 Merck & Co., Inc. Di- and tri-substituted piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1H-azepines promote release of growth hormone
US5494919A (en) * 1993-11-09 1996-02-27 Merck & Co., Inc. 2-substituted piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1H-azepines promote release of growth hormone
US5492920A (en) * 1993-12-10 1996-02-20 Merck & Co., Inc. Piperidine, pyrrolidine and hexahydro-1H-azepines promote release of growth hormone
WO1995014666A1 (en) * 1993-11-24 1995-06-01 Merck & Co., Inc. Indolyl group containing compounds and the use thereof to promote the release of growth hormone(s)
US5721251A (en) * 1993-12-10 1998-02-24 Merck & Co., Inc. Piperidine, pyrrolidine and hexahydro-1H-azepines promote release of growth hormone
US5721250A (en) * 1993-12-23 1998-02-24 Merck & Co. Inc. Di-and tri-substituted piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1H-azepines promote release of growth hormone
WO1995034311A1 (en) * 1994-06-13 1995-12-21 Merck & Co., Inc. Piperazine compounds promote release of growth hormone
US5783582A (en) * 1994-07-20 1998-07-21 Merck & Co., Inc. Piperidines and hexahydro-1H-azepines spiro substituted at the 4-position promote release of growth hormone
GB9415996D0 (en) * 1994-08-08 1994-09-28 Merck Sharp & Dohme Therapeutic agents
US5798337A (en) * 1994-11-16 1998-08-25 Genentech, Inc. Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues
US20020111461A1 (en) 1999-05-21 2002-08-15 Todd C. Somers Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues
US5656606A (en) * 1995-02-17 1997-08-12 Merck & Co., Inc. Camphor compounds promote release of growth hormone
US5731317A (en) * 1995-03-10 1998-03-24 Merck & Co., Inc. Bridged piperidines promote release of growth hormone
US5559128A (en) * 1995-04-18 1996-09-24 Merck & Co., Inc. 3-substituted piperidines promote release of growth hormone
EP0823904A4 (en) * 1995-04-19 1998-09-09 Merck & Co Inc METHOD FOR PRODUCING SPIROINDOLINES
WO1996035713A1 (en) * 1995-05-08 1996-11-14 Pfizer, Inc. Dipeptides which promote release of growth hormone
MX9709278A (es) * 1995-05-29 1998-03-31 Pfizer Dipeptidos que promueven la liberacion de la hormona de crecimiento, composiciones que los contienen y uso de los mismos.
KR19990067097A (ko) * 1995-10-27 1999-08-16 폴락 돈나 엘. 성장 호르몬 분비 촉진제의 제조 방법
CZ128098A3 (cs) * 1995-10-27 1998-09-16 Merck And Co., Inc. Polymorfní formy látek, podporujících sekreci růstového hormonu a farmaceutický prostředek s jejich obsahem
US5767124A (en) * 1995-10-27 1998-06-16 Merck & Co., Inc. Polymorphic forms of a growth hormone secretagogue
US6531314B1 (en) 1996-12-10 2003-03-11 Merck & Co., Inc. Growth hormone secretagogue receptor family
WO1997022004A1 (en) 1995-12-13 1997-06-19 Merck & Co., Inc. Assays for growth hormone secretagogue receptors
GB2308362A (en) * 1995-12-19 1997-06-25 Lilly Industries Ltd Pharmaceutical indole derivatives
WO1997022367A1 (en) * 1995-12-20 1997-06-26 Merck & Co., Inc. Radiolabeled growth hormone secretagogue
HN1996000101A (es) 1996-02-28 1997-06-26 Inc Pfizer Terapia combinada para la osteoporosis
US6071926A (en) * 1996-05-22 2000-06-06 Arch Development Corporation Sleep quality improvement using a growth hormone secretagogue
US5877182A (en) * 1996-09-13 1999-03-02 Merck & Co., Inc. Piperidines promote release of growth hormone
WO1998016527A1 (en) * 1996-10-15 1998-04-23 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Benzoxepine derivatives which promote release of growth hormone
AU4993497A (en) * 1996-10-25 1998-05-22 Merck & Co., Inc. Convergent process for the preparation of a growth hormone secretagogue
US6046333A (en) * 1996-10-25 2000-04-04 Merck & Co., Inc. Convergent process for the preparation of a growth hormone secretagogue
UA59384C2 (uk) 1996-12-20 2003-09-15 Пфайзер, Інк. Похідні сульфонамідів та амідів як агоністи простагландину, фармацевтична композиція та способи лікування на їх основі
JP2000514838A (ja) * 1997-05-14 2000-11-07 藤沢薬品工業株式会社 成長ホルモンの放出を促進するピペリジノ誘導体
DE69837264T2 (de) * 1997-06-25 2008-01-31 Pfizer Inc. Dipeptidverbindungen, die Wachstumshormon-Sekretagoga sind
UA64751C2 (uk) 1997-06-25 2004-03-15 Пфайзер Продактс Інк. Спосіб лікування інсулінової толерантності речовинами, які посилюють секрецію гормону росту (варіанти) та фармацевтична композиція (варіанти)
UA53716C2 (uk) * 1997-06-25 2003-02-17 Пфайзер Продактс Інк. Тартратна сіль заміщеного дипептиду, спосіб її одержання, проміжні сполуки та спосіб їх одержання, фармацевтична композиція (варіанти), спосіб підвищення рівнів ендогенного гормону росту та спосіб лікування або профілактики захворювань (варіанти)
ZA987383B (en) * 1997-08-19 2000-02-17 Lilly Co Eli Treatment of congestive heart failure with growth hormone secretagogues.
ZA987385B (en) * 1997-08-19 2000-04-18 Lilly Co Eli Growth hormone secretagogues.
US6329342B1 (en) 1997-08-19 2001-12-11 Eli Lilly And Company Treatment of congestive heart failure with growth hormone secretagogues
US6374762B1 (en) * 1997-10-27 2002-04-23 Correct Craft, Inc. Water sport towing apparatus
HUP0102460A3 (en) * 1998-06-30 2001-12-28 Novo Nordisk As Compounds with growth hormone releasing properties, pharmaceutical compositions comprising thereof and their use
US6919315B1 (en) 1998-06-30 2005-07-19 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties
US6682908B1 (en) 1998-07-10 2004-01-27 Merck & Co., Inc. Mouse growth hormone secretagogue receptor
CA2333857A1 (en) 1998-07-13 2000-01-20 Merck & Co., Inc. Growth hormone secretagogue related receptors and nucleic acids
US6645726B1 (en) 1998-08-10 2003-11-11 Merck & Co., Inc. Canine growth hormone secretagogue receptor
EP1112071A4 (en) * 1998-08-18 2003-03-19 Lilly Co Eli SECRETAGOGUES OF GROWTH HORMONES
US6639076B1 (en) 1998-08-18 2003-10-28 Eli Lilly And Company Growth hormone secretagogues
US6358951B1 (en) 1998-08-21 2002-03-19 Pfizer Inc. Growth hormone secretagogues
US6380184B1 (en) 1998-10-28 2002-04-30 Bristol-Myers Squibb Co. Benzoazepines and analogs thereof useful as growth hormone secretagogues
CA2362290A1 (en) 1999-02-18 2000-08-24 Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. Novel amide derivatives as growth hormone secretagogues
JP2002523368A (ja) * 1999-02-19 2002-07-30 イーライ・リリー・アンド・カンパニー 成長ホルモン分泌促進薬
CO5160260A1 (es) * 1999-02-19 2002-05-30 Lilly Co Eli Secretagogos de la hormona del crecimiento derivados de imi- dazol 1,4- substituido
US6828331B1 (en) 1999-02-19 2004-12-07 Eli Lilly And Company Growth hormone secretagogues
US6525203B1 (en) 1999-03-12 2003-02-25 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic aromatic compounds useful as growth hormone secretagogues
US6518292B1 (en) 1999-03-12 2003-02-11 Bristol-Myers Squibb Co. Heterocyclic aromatic compounds usefuls as growth hormone secretagogues
US6462053B1 (en) 1999-08-20 2002-10-08 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Spiro compounds
US6803372B2 (en) 1999-08-20 2004-10-12 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Spiro compounds
TWI279402B (en) * 1999-08-20 2007-04-21 Banyu Pharma Co Ltd Spiro compounds having NPY antagonistic activities and agents containing the same
AU7556800A (en) * 1999-10-07 2001-05-10 Tadeka Chemical Industries, Ltd. Amine derivatives
WO2001060796A1 (en) 2000-02-18 2001-08-23 Meiji Seika Kaisha, Ltd. PHENOXYALKYLAMINE DERIVATIVES USEFUL AS OPIOID δ RECEPTOR AGONISTS
ES2252230T3 (es) 2000-05-11 2006-05-16 Bristol-Myers Squibb Company Analogos de tetrahidroisoquinolina utiles como secretores de la hormona del crecimiento.
ATE446758T1 (de) 2000-05-31 2009-11-15 Pfizer Prod Inc Verwendung von wachstumshormonsekretagoga zur förderung der beweglichkeit des verdauungstrakts
CA2420535A1 (en) 2000-08-30 2002-03-07 Mary Tanya Am Ende Sustained release formulations for growth hormone secretagogues
US7169777B2 (en) 2001-01-23 2007-01-30 Eli Lilly And Company Melanocortin receptor agonists
EP1368340B1 (en) 2001-01-23 2005-08-10 Eli Lilly And Company Piperazine derivatives as melanocortin receptor agonists
CA2433025A1 (en) 2001-01-23 2002-08-01 Chaoyu Xie Substituted piperidines/piperazines as melanocortin receptor agonists
AP1699A (en) * 2001-03-21 2006-12-26 Warner Lambert Co New spirotricyclic derivatives and their use as phosphodiesterase-7 inhibitors
US6911447B2 (en) 2001-04-25 2005-06-28 The Procter & Gamble Company Melanocortin receptor ligands
WO2002094825A1 (fr) * 2001-05-22 2002-11-28 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Nouveau derive de spiropiperidine
US7125840B2 (en) 2001-10-09 2006-10-24 Eli Lilly And Company Substituted dipeptides as growth hormone secretagogues
AU2002357692A1 (en) 2001-11-09 2003-05-26 Bristol-Myers Squibb Company Tetrahydroisoquinoline analogs as modulators of chemokine receptor activity
ES2274201T3 (es) 2002-01-23 2007-05-16 Eli Lilly And Company Agonistas del receptor de melanocortina.
WO2003087069A2 (en) * 2002-04-09 2003-10-23 Eli Lilly And Company Dipeptidic growth hormone secretagogues
US20060167268A1 (en) * 2002-04-09 2006-07-27 Eli Lilly And Company, Patent Division, Growth hormone secretagogues
US7026335B2 (en) 2002-04-30 2006-04-11 The Procter & Gamble Co. Melanocortin receptor ligands
JP4490809B2 (ja) 2002-06-05 2010-06-30 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー カルシトニン遺伝子関連ペプチド受容体拮抗薬
SE0202133D0 (sv) * 2002-07-08 2002-07-08 Astrazeneca Ab Novel compounds
TW200504033A (en) 2002-10-23 2005-02-01 Procter & Gamble Melanocortin receptor ligands
WO2004080459A1 (en) * 2003-03-14 2004-09-23 Merck Sharp & Dohme Limited Method for treating mild cognitive impairment and for preventing or delaying alzheimer’s disease
CN1297557C (zh) * 2003-04-10 2007-01-31 上海药明康德新药开发有限公司 螺环类模板化合物的制备
GB0313772D0 (en) * 2003-06-13 2003-07-23 Merck Sharp & Dohme Therapeutic treatment
US7476653B2 (en) 2003-06-18 2009-01-13 Tranzyme Pharma, Inc. Macrocyclic modulators of the ghrelin receptor
EP1682136A4 (en) 2003-11-04 2009-06-03 Elixir Pharmaceuticals Inc THERAPEUTIC COMPOUNDS AND CORRESPONDING USES THEREOF
GB0328906D0 (en) * 2003-12-12 2004-01-14 Syngenta Participations Ag Chemical compounds
CN100345851C (zh) * 2004-01-02 2007-10-31 上海药明康德新药开发有限公司 螺二氢吲哚类模板化合物及其制备方法
CA2561801A1 (en) * 2004-04-02 2005-10-20 Elixir Pharmaceuticals, Inc. Sulfonamides and uses thereof
UA87854C2 (en) 2004-06-07 2009-08-25 Мерк Энд Ко., Инк. N-(2-benzyl)-2-phenylbutanamides as androgen receptor modulators
AU2005277389A1 (en) 2004-08-18 2006-03-02 Elixir Pharmaceuticals, Inc. Growth-hormone secretagogues
EP1781288A2 (en) * 2004-08-19 2007-05-09 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of muscarinic receptors
US7786141B2 (en) * 2004-08-19 2010-08-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Dihydrospiroindene modulators of muscarinic receptors
RU2007124373A (ru) * 2004-11-29 2009-01-10 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед (Us) Модуляторы мускариновых рецептеров
EP1973543A2 (en) 2005-12-22 2008-10-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of muscarinic receptors
RU2008137593A (ru) * 2006-02-22 2010-03-27 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед (Us) Модуляторы мускариновых рецепторов
US8263605B2 (en) 2006-02-22 2012-09-11 Vertex Pharmaceutical Incorporated Modulators of muscarinic receptors
CU23558A1 (es) 2006-02-28 2010-07-20 Ct Ingenieria Genetica Biotech Compuestos análogos a los secretagogos peptidicos de la hormona de crecimiento
CN101500565A (zh) 2006-06-29 2009-08-05 弗特克斯药品有限公司 毒蕈碱性受体的调节剂
CA2660903A1 (en) 2006-08-15 2008-02-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of muscarinic receptors
AU2007284350A1 (en) * 2006-08-18 2008-02-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of muscarinic receptors
WO2008056687A1 (fr) * 2006-11-09 2008-05-15 Daiichi Sankyo Company, Limited Nouveau dérivé de spiropipéridine
EP2118080B1 (en) 2007-02-09 2016-08-31 Ocera Therapeutics, Inc. Macrocyclic ghrelin receptor modulators and methods of using the same
EP2155769B1 (en) 2007-05-04 2012-06-27 Katholieke Universiteit Leuven KU Leuven Research & Development Tissue degeneration protection
CA2700724A1 (en) * 2007-10-03 2009-04-09 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of muscarinic receptors
WO2010093578A1 (en) * 2009-02-10 2010-08-19 Glaxo Group Limited Indolinyl-, benzofuranyl-, and benzothienyl- amides as modulators of chemokine receptors
EP2275421A1 (en) * 2009-07-15 2011-01-19 Rottapharm S.p.A. Spiro amino compounds suitable for the treatment of inter alia sleep disorders and drug addiction
WO2012012843A1 (en) * 2010-07-28 2012-02-02 The University Of Queensland Modulators of protease activated receptors
US8546416B2 (en) * 2011-05-27 2013-10-01 Novartis Ag 3-spirocyclic piperidine derivatives as ghrelin receptor agonists
WO2013190520A2 (en) 2012-06-22 2013-12-27 The General Hospital Corporation Gh-releasing agents in the treatment of vascular stenosis and associated conditions
US9119832B2 (en) 2014-02-05 2015-09-01 The Regents Of The University Of California Methods of treating mild brain injury
CN106572997A (zh) 2014-05-30 2017-04-19 辉瑞公司 作为选择性雄激素受体调节剂的腈衍生物
MX2017001408A (es) * 2014-08-05 2017-05-10 Raqualia Pharma Inc Derivados de serina como agonistas del receptor de grelina.
TW201607927A (zh) * 2014-08-28 2016-03-01 愛沃特股份有限公司 異喹啉類之製造方法
WO2017075535A1 (en) 2015-10-28 2017-05-04 Oxeia Biopharmaceuticals, Inc. Methods of treating neurodegenerative conditions
BR112020016256A2 (pt) 2018-02-21 2020-12-15 AI Therapeutics, Inc. Terapia de combinação com apilimod e agentes gluta-matérgicos
WO2023275715A1 (en) 2021-06-30 2023-01-05 Pfizer Inc. Metabolites of selective androgen receptor modulators

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8332704D0 (en) * 1983-12-07 1984-01-11 Pfizer Ltd Growth promotants for animals
IL96507A0 (en) * 1989-12-08 1991-08-16 Merck & Co Inc Nitrogen-containing spirocycles and pharmaceutical compositions containing them
US5206235A (en) * 1991-03-20 1993-04-27 Merck & Co., Inc. Benzo-fused lactams that promote the release of growth hormone
US5578593A (en) * 1992-12-11 1996-11-26 Merck & Co., Inc. Spiro piperidines and homologs promote release of growth hormone

Also Published As

Publication number Publication date
NZ258412A (en) 1997-01-29
BG99710A (bg) 1996-01-31
IL107837A0 (en) 1994-04-12
DE69332075T2 (de) 2003-01-16
RU2168512C2 (ru) 2001-06-10
BG61979B1 (bg) 1998-11-30
NO952295L (no) 1995-08-10
HU211301A9 (en) 1995-11-28
MX9307850A (es) 1994-06-30
SK282166B6 (sk) 2001-11-06
CN1034733C (zh) 1997-04-30
CA2110670A1 (en) 1994-06-12
DE69332075D1 (de) 2002-08-08
AU5232093A (en) 1994-06-23
CN1092071A (zh) 1994-09-14
FI952863A (fi) 1995-06-09
ES2177538T3 (es) 2002-12-16
WO1994013696A1 (en) 1994-06-23
CZ151495A3 (en) 1995-12-13
US5652235A (en) 1997-07-29
ATE220071T1 (de) 2002-07-15
HU9501683D0 (en) 1995-08-28
EP0615977A1 (en) 1994-09-21
HUT72076A (en) 1996-03-28
CA2110670C (en) 2001-04-17
JPH06263737A (ja) 1994-09-20
EP0615977B1 (en) 2002-07-03
PL176993B1 (pl) 1999-08-31
JP2509530B2 (ja) 1996-06-19
AU673552B2 (en) 1996-11-14
PL309331A1 (en) 1995-10-02
HRP931486A2 (hr) 1995-02-28
PT615977E (pt) 2002-10-31
RO115804B1 (ro) 2000-06-30
FI952863A0 (fi) 1995-06-09
DZ1736A1 (fr) 2002-02-17
NO952295D0 (no) 1995-06-09
HRP931486B1 (en) 2003-08-31
SK75995A3 (en) 1995-11-08
DK0615977T3 (da) 2002-07-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5652235A (en) Method of using spiro piperidines to promote the release of growth hormone
US5536716A (en) Spiro piperidines and homologs which promote release of growth hormone
US5492916A (en) Di- and tri-substituted piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1H-azepines promote release of growth hormone
US5777112A (en) Piperazine compounds promote release of growth hormone
US5783582A (en) Piperidines and hexahydro-1H-azepines spiro substituted at the 4-position promote release of growth hormone
US5767118A (en) 4-Heterocyclic peperidines promote release of growth hormone
US5804578A (en) Piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1H-azepines promote release of growth hormone
WO1997034604A1 (en) 4-spiroindoline piperidines promote release of growth hormone
US5880125A (en) 4-spiroindoline piperidines promote release of growth hormone
JP2509147B2 (ja) 成長ホルモンの放出を亢進させるスピロピペリジン及び同族体
US5965565A (en) Piperidines promote release of growth hormone
GB2298647A (en) Bridged piperidines promoting release of growth hormone
US5656606A (en) Camphor compounds promote release of growth hormone
AU6343200A (en) Amido spiropiperidines promote the release of growth hormone