HRP931486A2 - Spiro piperidini i homolozi koji potpomažu oslobađanje hormona rasta - Google Patents

Spiro piperidini i homolozi koji potpomažu oslobađanje hormona rasta Download PDF

Info

Publication number
HRP931486A2
HRP931486A2 HRP931486AA HRP931486A HRP931486A2 HR P931486 A2 HRP931486 A2 HR P931486A2 HR P931486A A HRP931486A A HR P931486AA HR P931486 A HRP931486 A HR P931486A HR P931486 A2 HRP931486 A2 HR P931486A2
Authority
HR
Croatia
Prior art keywords
alkyl
aryl
carbonyl
amino
dihydro
Prior art date
Application number
HRP931486AA
Other languages
English (en)
Inventor
Meng-Hsin Chen
David B. R. Johnston
Ravi P. Nargund
Arthur A. Patchett
James R. Tata
Lihu Yang
Original Assignee
Merck Co. Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US08/147,226 external-priority patent/US5536716A/en
Application filed by Merck Co. Inc. filed Critical Merck Co. Inc.
Publication of HRP931486A2 publication Critical patent/HRP931486A2/hr
Publication of HRP931486B1 publication Critical patent/HRP931486B1/xx

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/021—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)n-C(=0)-, n being 5 or 6; for n > 6, classification in C07K5/06 - C07K5/10, according to the moiety having normal peptide bonds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • C07K5/06147—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic and His-amino acid; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06191—Dipeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Other In-Based Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Feed For Specific Animals (AREA)

Description

Ova prijava je djelomičan nastavak naše neriješene prijave Serijski br. 07/989,322 podnijete 11. prosinca 1992.
Hormon rasta koji se izlučuje iz hipofize, stimulira rast svih tjelesnih tkiva koja su sposobna da rastu. Osim toga, poznato je da hormon rasta ima slijedeće osnovne efekte na metabolične procese tijela:
1. Povećana brzina sinteze proteina u svim ćelijama tijela;
1. Smanjena brzina korištenja ugljikovodika u ćelijama tijela;
1. Povećana mobilizacija slobodnih masnih kiselina i upotreba masnih kiselina i upotreba masnih kiselina za energiju.
Nedostatak razlikovanja hormona rasta može dovesti do različitih medicinskih poremećaja, kao što je smanjen rast.
Poznati su različiti načini za oslobađanje hormona rasta. Na primjer, kemikalije kao što su arginin, L-3,4-dihidroksifenilalanin (L-DOPA), glukagon, vazopresin, i insulinom inducirana hipoglikemija, kao i aktivnosti kao što je spavanje i vježbanje, mogu indirektno izazvati oslobađanje hormona rasta iz hipofize djelujući na neki način na hipotalamus, možda bilo da smanje izlučivanje somatostatina ili da povećaju razlikovanje poznatog sekretagognog (koji stimulira djelovanje izlučivanja naročito egzokrilnih žlijezda stimulans razlikovanja) faktora oslobađanja hormona rasta (GRF) ("growth hormone releasing factor) ili nekog nepoznatog endogenog hormona koji oslobađa hormon rasta ili svega ovoga.
U slučajevima gdje je bilo poželjno povećanje nivoa hormona rasta, problem je u općem slučaju rješen osiguranjem egzogenog hormona rasta ili primjenom GRF ili peptidnog spoja koji stimulira proizvodnju i/ili oslobađanje hormona rasta. U bilo kojem slučaju peptidna priroda spoja zahtijevala je da se primjenjuje injekcijom. U početku je izvor hormona rasta bila ekstrakcija iz hipofiznih žlijezda leševa. Posljedica ovoga je bio, veoma skup proizvod i postojao je rizik da se oboljenje vezano sa izvorom hipofizne žlijezde prenese na recipijenta hormona rasta. Nedavno je postao dostupan rekombinantni hormon rasta, koji iako više ne predstavlja rizik prenošenja oboljenja, još uvijek je veoma skup proizvod, koji se mora davati injekcijom ili nazalnim sprejom.
Razvijeni su drugi spojevi koji stimuliraju oslobađanje endogenog hormona rasta, kao što su analogni peptidni spojevi srodni sa GRF ili peptidi iz U.S. Patenta 4,411,890. Ovi peptidi, iako su znatno manji od hormona rasta, još uvijek su osjetljivi na različite proteaze. Kao kod najvećeg broja peptida, njihova potencijalnost za oralnu bioprimjenljivost je niska. Spojevi iz ovog izuma su nepeptidni analozi za potpomaganje oslobađanja hormona rasta, koji su stabilni u različitim fiziološkim sredinama i koji se mogu primjeniti parenteralnim, nazalnim ili oralnim putem.
Ovaj izum pokriva izvjesne spiro spojeve koji su sposobni da stimuliraju oslobađanje prirodnog ili endogenog hormona rasta. Tako su ovi spojevi pogodni da se upotrebe za tretiranje stanja koja zahtijevaju stimulaciju proizvodnje ili lučenja hormona rasta kako kod ljudi sa nedostatkom prirodnog hormona rasta ili kod životinja koje se koriste za proizvodnju hrane gdje stimulacija hormona rasta dovodi do veće, produktivnije životinje. Prema tome, predmet ovog izuma je da se opišu ovi spiro spojevi. Dalje je predmet ovog izuma da se opišu postupci za dobijanje ovih spojeva. Još jedan dalji predmet je da se opiše upotreba takvih spojeva za povećanje lučenja hormona rasta kod ljudi i životinja. Još jedan dalji predmet ovog izuma je da se opišu kompozicije koje sadrže spiro spojeve za upotrebu u tretiranju ljudi i životinja da bi se povećao nivo lučenja hormona rasta. Dalji predmeti će postati jasni čitanjem slijedećeg opisa.
Novi spiro spojevi iz ovog izuma su najbolje opisani slijedećim strukturnim formulama I i II:
[image]
R1 je C1-C10 alkil, aril, aril (C1-C6 alkil) i C3-C7 cikloalkil (C1-C6alkil) ili C1-C5 alkil, aril (C0-C5 alkil)-K-(C1-C5 alkil), C3-C7 cikloalkil (C0-C5 alkil)-K-(C1-C5 alkil), gdje jeK O, S(O)m, N(R2)C(O), C(O)N(R2), OC(O), C(O)O, ili -CR2=CR2- ili -C=C- gdje su aril grupe definirane niže, a R2 i alkil grupe mogu da budu dalje supstituirane sa 1 do 9 halogena, S(O)mR2a, 1 do 3 OR2a ili C(O)OR2a i aril grupe mogu da budu dalje supstituirane sa fenil, fenoksi, halofenil, 1-3 C1-C6 alkil, 1 do 3 halogena, 1 do 2 OR2, metilendioksi, S(O)mR2, 1 do 2 CF3, OCF3, nitro, N(R2)C(O)R2, C(O)OR2, C(O)N(R2)(R2), SO2N(R2) (R2), N(R2)S(O)2 aril, ili N(R2)SO2R2;
R2 je vodik, C1-6 alkil, C3-C7 cikloalkil, i gdje su dvije C1-C6 alkil grupe prisutne na jednom atomu, one mogu opciono da budu spojene tako da formiraju C3-8 ciklični prsten opciono uključujući kisik, sumpor ili NR2a;
R2a je vodik ili C1-C6 alkil;
R3a i R3b su nezavisno vodik, halogen, C1-C6 alkil, OR2, cijano, OCF3, metilendioksi, nitro, S(O)mR, CF3 ili C(O)OR2 i kada su R3a i R3b u orto rasporedu, oni mogu da budu spojeni tako da formiraju C5 do C8 alifatični ili aromatični prsten opciono uključujući 1 ili 2 heteroatoma odabrana od kisika, sumpora ili dušika;
R4 i R5 su nezavisno vodik, C1-C6 alkil, supstituirani C1-C6 alkil, gdje supstituenti mogu da budu 1 do 5 halogena, 1 do 3 hidroksi, 1 do 3 C1-C10 alkanoiloksi, 1 do 3 C1-C6 alkoksi, fenil, fenoksi, 2-furil, C1-C6 alkoksikarbonil, S(O)m(C1-C6 alkil); ili R4 i R5 mogu da budu uzeti zajedno tako da formiraju
-(CH2)rLa (CH2)s- gdje je La C(R2)2, O, S(O)m ili N(R2), r i s su nezavisno 1 do 3 i R2 je kao što je definirano ranije:
R6 je vodik ili C1-C6 alkil;
A je:
[image]
gdje su x i y nezavisno 0-3;
Z je N-R2 ili O;
R7 i R7a su nezavisno vodik, C1-6 alkil, OR2, trifluormetil, fenil, supstituirani C1-C6 alkil gdje su supstituenti imidazolil, fenil, indolil, p-hidroksifenil, OR2, 1 do 3 fluoro, S(O)mR2, C(O)OR2, C3-C7 cikloalkil, N(R2)(R2), C(O)N(R2)(R2); ili R7 i R7a mogu nezavisno da budu spojeni za jednu ili obje R4 i R5 grupe, tako da formiraju alkilen mostove između terminalnog dušika i alkil dijela R7 i R7a grupa, gdje most sadrži 1 do 5 ugljikovih atoma:
B, D, E i F su nezavisno C(R8(R10), O, C=O, S(O)m, ili
NR9 tako da jedna ili dvije od B, D, E, ili F grupa mogu opciono da nedostaju tako da je osiguran 5-to, 6-to, ili 7-mo člani prsten; pod uvjetom da B, D, E i F grupe mogu da budu C(R8)(R10) ili C=O samo kada je jedna od preostalih B, D, E i F grupa simultano O, S(O)m ili NR9; B i D ili D i E uzete zajedno mogu da budu N=CR10- ili CR10=N, ili B i D ili D i E uzete zajedno mogu da budu CR8=CR10 pod uvjetom da je jedna od drugih B i E ili F grupa simultano O, S(O)m ili NR9;
R8 i R10 su nezavisno vodik, R2, OR2, (CH2)q aril, (CH2)q C(O)OR2, (CH2)q C(O)OR2, (CH2)q C(O)O(CH2)q aril ili (CH2)q (1H-tetrazol-5-il) i aril može opciono da bude supstituiran sa 1 do 3 halogena, 1 do 2 C1-C8alkil, 1 do 3 OR2 ili 1 do 2 C(O)OR2;
R9 je R2, (CH2)q aril, C(O)OR2, C(O)O(CH2)q aril, SO2R2, SO2(CH2)q aril, C(O)N(R2)(R2), C(O)N(R2) (CH2)q aril, C(O)OR2, 1JH-tetrazol-5-il, SO3H, SO2NHC=N, SO2N(R2) aril, SO2N(R2) (R2) i (CH2)q može opciono da bude supstituiran sa 1 do 2 C1-C4 alkil, i R2 i aril mogu da budu opciono dalje supstituirani sa 1 do 3 OR2a, O(CH2)q aril, 1 do 2 C(O)OR2a, 1 do 2 C(O)O(CH2)q aril, 1 do 2 C(O)N(R2a)(R2a), 1 do 2 C(O)N(R2a) (CH2)q aril, 1 do 5 halogena, 1 do 3 C1-C4 alkil, 1,2,4-triazolil, 1H-tetrazol-5-il, C(O)NSO2R2a, S(O)mR2a, C(O)NHSO2(CH2)q aril, SO2NHC(O)R2a SO2NHC(O) (CH2)q aril, N(R2) C(O)N(R2a), N(R2a) C(O)N(R2a)q aril, N(R2a) (R2a), N(R2a)C(O)R2a, N(R2a) C (O) (CH2)q aril, OC(O)N(R2a)N(R2a) (CH2)q aril; SO2 (CH2)q CONH-(CH2)wNHC(O)R11, gdje je w 2-6 i R11 može da bude biotin, aril ili aril supstituiran sa 1 ili 2 OR2, 1-2 halogena, azido ili nitro;
m je 0, 1 ili 2;
n je 1 ili 2
q može opciono da bude 0, 1, 2, 3, ili 4; i
G, H, I i J su atomi ugljika, dušika, sumpora ili kisika, tako da je najmanje jedan heteroatom, a jedan od G, H, I ili J može opciono da nedostaje tako da se dobivaju 5-to ili 6-to člani heterociklični aromatični prstenovi;
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i individualni dijastereoizomeri.
U gornjim strukturnim formulama i kroz cijelu ovu specifikaciju, slijedeći izrazi imaju pokazana značenja:
Alkil grupe specificirane gore namijenjene su da obuhvate one alkil grupe dane dužine bilo u normalnoj ili razgranatoj konfiguraciji koja može opciono da sadrži dvogube ili trogube veze. Primjeri takvih alkil grupa su metil, etil, propil, etinil, izopropil, butil, sek-butil, tercijarna butil, pentil, izopentil, heksil, izoheksil, alil, propenil, butenil, butadienil i slično.
Alkoksi grupe specificirane gore namijenjene su da obuhvate alkoksi grupe dane dužine bilo u normalnoj ili razgranatoj konfiguraciji koja opciono može da sadrži dvogube ili trogube veze. Primjeri takvih alkoksi grupa su metoksi, etoksi, propoksi, izopropoksi, butoksi, izobutoksi, tercijarna butoksi, pentoksi, izopentoksi, heksoksi, izoheksoksi, aliloksi, propiniloksi, izobuteniloksi, 2-hekseniloksi, i slično.
Izraz "halogen" je namijenjen da obuhvati atom halogena, fluora, klora, broma i joda.
Izraz "aril" je namijenjen da obuhvati fenil i naftil i aromatične ostatke 5- i 6- članih prstenova sa 1 do 3 heteroatoma ili kondenzirane 5-to ili 6-to člane biciklične prstenove sa 1 do 3 heteroatoma od dušika, sumpora ili kisika. Primjeri takvih heterocikličnih aromatičnih prstenova su piridin, tiofen, benzotiofen, tetrazol, indol, N-metil-indol, dihidroindol, indazol, N-formilindol, benzimidazol, tiazol, furan, pirimidin i tiadiazol.
Izvjesni od gore definiranih izraza mogu da se nađu više nego jednom u gornjoj formuli i pri takvom javljanju svaki izraz treba da se definira nezavisno od drugog.
Prvenstveni spojevi ovog izuma su:
[image]
gdje je R1 C1-C10 alkil, aril (C1-4 alkil), C3-C6 cikloalkil (C1-4 alkil), (C1-4 alkil)-K-((C1-4 alkil), aril (C0-C5-alkil)-K(C1-C4 alkil), (C3-C7 cikloalkil) (C0-C5 alkil)-K-(C1-4 alkil), gdje je K O, S(O)m' -CR2=CR2-, C=C-; ili N(R2)C(O) gdje R2 i alkil grupe mogu da budu dalje supstituirane sa 1 do 7 halogena, S(O)mC1-C4 alkil, OR2a ili C(O)OR2a i aril grupe mogu da budu dalje supstituirane sa 1-2 C1-C4 alkil,, 1 do 2 halogena, 1 do 2 OR2, CF3, OCF3, metilendioksi, S(O)mR2, SO2 N(R2) (R2), N(R2)SO2R2 ili C(O)OR2.
R2 je vodik, C1-6 alkil, C3-7 cikloalkil, i ako su dvije C1-6 alkil grupe prisutne na jednom atomu, one mogu da budu opciono tako spojene da formiraju C4-6 ciklični prsten koji opciono obuhvaća 1 do 2 heteroatoma odabrana od kisika, sumpora ili NR2a;
R2a je vodik ili C1-6 alkil;
R3a i R3b su nezavisno vodik, halogen, C1-4 alkil, OR2, metilendioksi, nitro, S(O)mC1-C4 alkil, CF3 ili C(O)OR2;
R4 i R5 su nezavisno vodik, C1-6 alkil, supstituirani C1-6 alkil gdje supstituenti mogu da budu 1 do 5 halogena, 1 do 2 hidroksi, 1 do 2 C1-6 alkanoiloksi, 1 do 2 C1-6 alkiloksi ili S(O)m(C1-4 alkil);
A je:
[image]
gdje su x i y, nezavisno 0, 1, ili 2;
R7 i R7a su nezavisno vodik, C1-4 alkil, supstituirani C1-4 alkil gdje su supstituenti od 1 do 3 fluoro ili imidazolil, fenil, indolil, S(O)mC1-4 alkil, C(O)OR2 ili R7 i R7a mogu nezavisno da budu spojeni na jednu ili obje R4 i R5 grupe, tako da formiraju alkilen mostove između terminalnog dušika i alkil dijela R7 i R7a grupa, gdje most sadrži 1 do 3 atoma ugljika;
B, D i f su nezavisno C(R8) (R10), O, C=O, S(O)m ili NR9 tako da jedna od B, D ili f grupa može opciono da nedostaje tako da se dobijaju 5-to ili 6-to člani prstenovi i pod uvjetom da je jedna od B, D i F grupa C(R8) (R10) ili C=O samo kada je jedna od preostalih B, D i F grupa simultano O, S(O)m ili NR9;
R8 i R10 su nezavisno vodik, R2, OR2, (CH2)q aril, (CH2)qC(O)OR2, (CH2)qC(O)O(CH2)q aril, (CH2)q (1H-tetrazol-5-il) i aril može opciono da bude supstituiran sa 1 do 3 halogena, 1 do 2 C1-C4 alkil, 1 do 3 OR2 ili 1 do 2 C(O)OR2;
R9 je R2, (CH2)q aril, C(O)R2, C(O)(CH2)q aril, SO2R2, SO2(CH2)q aril, C(O)N(R2) (R2), C(O)N(R2) (CH2)q aril, 1-H-tetrazolil-5-il, SO2NHC=N, SO2NR2 aril, SO2N(R2) (R2) i (CH2)q može da bude opciono supstituiran sa 1 do 2 C1-C2 alkil i R2 može da bude opciono supstituiran sa 1 do 2 OR2a, O(CH2)q aril, 1 do 2 C(O)OR2a, (C(O)N(R2a) (R2a), S(O)mR2a, 1-H-tetrazol-5-il, C(O)NHSO2R2a, C(O)NHSO2(CH2)q aril, N(R2a)C(O)N(R2a) (R2a) ili N (R2a), (CH2)q aril i aril može opciono da bude supstituiran sa 1 do 2 OR2a, 1 do 2 halogena, 1 do 2 C1-4alkil, C(O)OR2a ili 1-H-tetrazol-5-il; SO2(CH2)w CONH(CH2)w NHC(O)R11, gdje je w -6 i R11 može da bude biotin, aril, ili aril supstituiran sa 1 ili 2 OR2, 1-2 halogena, azido ili nitro;
m je 0, 1, ili 2;
q može da bude opciono 0, 1, 2 ili 3; i
aril grupa je fenil, naftil, piridil, tienil, indolil, tiazolil ili pirimidinil,
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i individualni dijastereoizomeri.
Još jedni prvenstveni spojevi su realizirani kada F nije prisutno u spoju III.
Prema tome, daljnji prvenstveni spojevi prema ovom izumu realizirani su u strukturnoj formuli IV.
[image]
R1 je C1-C10 alkil, aril (C1-4 alkil), C5-6 cikloalkil-(C1-4 alkil) ili (C1-4 alkil) ili (C1-4 alkil)-K-C1-C2 alkil-, aril (C0-C2 alkil)-K-(C1-C2 alkil), C3-C6 cikloalkil-(C0-C2 alkil)-K-(C1-C2 alkil), gdje je K O ili S(O)m' i aril grupe mogu dalje da budu supstituirane sa 1 do 2 C1-4 alkil, 1 do 2 halogena, OR2, CF3 ili S(O)mR2;
R2 je vodik, C1-4 alkil, ciklo C3-C6 alkil, i, ako su prisutne dvije C1-4alkil grupe na jednom atomu, one mogu opciono da budu spojene tako da formiraju C5-C6 ciklični prsten koji opciono obuhvaća heteroatome kisika ili NR2a;
R2a je vodik ili C1-4 alkil;
R3a i R3b su nezavisno vodik, halogen, C1-4 alkil, C(O)OR2, hidroksi, C1-C4 alkoksi, S(O)mC1-C4 alkil ili CF3;
R4 i R5 su nezavisno vodik, C1-C4 alkil, supstituirani C1-C4 alkil gdje supstituenti mogu da budu 1 do 2 hidroksi ili S(O)m (C1-C3 alkil)
A je:
[image]
gdje je x 0 ili 1;
R7 i R7a su nezavisno vodik, C1-C3 alkil; ili R7 i R7a mogu nezavisno da budu spojeni za jednu ili obje R4 i R5 grupe tako da formiraju alkilen mostove između terminalnog dušika i alkil dijela R7 i R7a grupa tako da formiraju 5-to ili 6-to člane prstenove koji sadrže terminalni dušik;
B i D su nezavisno C(R8) (R10), C=O, O, S(O)m, NR9 pod uvjetom da jedna od B i D grupa može da bude C(R8) (R10) ili C=O samo kada je druga od B i D grupa O, S(O)m ili NR9;
(R8) i (R10) su nezavisno vodik, R2 ili (CH2)q aril, i aril može da bude opciono supstituiran sa 1 do 2 halogena, 1 do 2 C1-C4 alkil, OR2 ili 1 do 2 C(O)OR2;
R9 je C(O)R2, C(O)CH2)q aril, SO2R2, SO(CH2)q aril, C(O)N(R2) (R2), C(O)N(R2) (CH2)q aril i (CH2)q može da bude opciono supstituiran sa 1 do 2 C1-C2 alkil i R2 može da bude opciono supstituiran sa 1 do 2 OR2a, O(CH2)q aril, C(O)OR2a, C(O)N(R2a) (R2a), S(O)mR2a, 1H-tetrazol-5-il, C(O)NHSO2R2a ili N(R2a) (R2a) i aril može da bude opciono supstituiran sa 1 do 2 OR2a, 1 do 2 halogena, 1 do 2 C1-C2 alkil, C(O)OR2a, 1 do 2 halogena, 1 do 2 C1-C2 alkil, C(O)OR2a, 1 do 2 halogena, 1 do 2 C1-C2 alkil, C(O)OR2a, 1H-tetrazol-5-il ili S(O)mR2a;
SO2(CH2)qCONH(CH2)wNHC(O)R11 gdje je w 2-6 i R11 može opciono da bude biotin, aril, i aril može da bude opciono supstituiran sa 1 do 2 OR2, 1-2 halogena, azido, nitro;
m je 0, 1 ili 2;
q može da bude opciono 0, 1, 2 ili 3;
aril je fenil, naftil, piridil, indolil, tienil ili tetrazolil i njihove farmaceutski prihvatljive soli i individualni dijastereo izomeri.
Najpogodniji spojevi prema ovom izumu realizirani su u strukturnoj formuli V:
[image]
R2 je H, C1-C4 alkil
m = 1, 2;
t je 0, 1, 2;
q je 1, 2, 3;
w je 2-6
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i individualni dijastereoizomeri.
Reprezentativni najpogodniji spojevi koji oslobađaju hormon rasta prema ovom izumu obuhvaćaju slijedeće:
1. N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(1H-indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid
2. N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metankarbonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(1H-indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid
3. N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-benzolsulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(1H-indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid
4. N-/1(R)-/(3,4-dihidro-spiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(1H-indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid
5. N-/1(R)-/(2-acetil-1,2,3,4-tetrahidrospiro/izohinolin-4,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid
6. N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid
7. N-/1(R)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid mezilatna sol
8. N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(2',6'-difluorofenil-metiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid
9. N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonil-5-fluoro-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-
-il)karbonil/-2-(fenil-metiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid
10. N-/1(S)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-karbonil/-2-(fenilmetiltio)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid
11. N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-3-fenilpropil/-2-amino-2-metilpropanamid
12. N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-3-cikloheksilpropil/-2-amino-2-metilpropanamid
13. N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-4-fenilbutil/-2-amino-2-metilpropanamid
14. N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(5-fluor-1H-indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid
15. N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonil-5-fluoro-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-
il)karbonil/-2-(5-fluor-1H-indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid
16. N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-(2-etoksikarbonil)metil-sulfonilspiro-/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(1H-indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid
17. N-/1(r)-/1,2-dihidro-1,1-diokso piro/3H-benzotiofen-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid
i njihove farmaceutski prihvatljive soli.
Reprezentativni primjeri upotrebljene nomenklature su dani niže:
[image]
N-/1(R)-/(3,4-dihidro-4-oksospiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-4-fenilbutil/-2-amino-2-metil-propanamid
[image]
N-/1(S)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiltio)etil/-2-amino-2-metilpropanamid
[image]
N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid
Kroz ovu prijavu su upotrebljene slijedeće skraćenice sa slijedećim značenjima:
BOC t-butiloksikarbonil
BOP benzotriazol-1-iloksi tris/dimetilamino)-fosfonijev heksafluorofosfat
CBZ benziloksikarbonil
DCC dicikloheksilkarbodiimid
DMF N,N-dimetilformamid
EDC 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid hidroklorid
FAB-MS bombardiranje brzim atomima-masena spektroskopija
GHRP peptid koji oslobađa hormon rasta
HOBT hidroksibenztriazol
LAH litijev aluminijev hidrid
HPLC visoko rezoluciona tekuća kromatografija (tekuća kromatografija pod visokim pritiskom)
MHz megaherc
MPLC tekuća kromatografija pod srednjim pritiskom
NMM N-metilmorfolin
NMR nuklearna magnetna rezonanca
OXONE kalijev peroksi monosulfat
PLC preparativna kromatografija na sloju
PCC piridinijev klorohromat
Sec serin
TFA trifluoroctena kiselina
THF tetrahidrofuran
TLC kromatografija na tankom sloju
TMS tetrametilsilan
Svi spojevi prema ovom izumu imaju najmanje jedan asimetričan centar kao što je označeno zvjezdicom gore u strukturnim formulama I i II. Dodatni asimetrični centri mogu da budu prisutni na molekulu u zavisnosti od prirode različitih supstituenata u molekulu. Svaki takav asimetričan centar će dati dva optička izomera i namjera je da svi takvi optički izomeri, kako odvojeni, čisti ili djelomično prečišćeni optički izomeri, njihove racemske smjese ili dijastereoizomeri, budu uključeni u okvir ovog izuma. U slučaju asimetričnog centra predstavljenog zvjezdicom u formuli I i II, nađeno je da je apsolutna stereokemija aktivnijih i prema tome i pogodnijih izomera prikazana u formuli Ia. Sa R2 supstituentom kao vodikom, specijalna konfiguracija asimetričnog centra odgovara onoj u D-amino kiselini. U većini slučajeva ovo je također označeno kao R-konfiguracija, mada će ovo biti različito prema vrijednostima R1 i R2 upotrebljenih u dobijanju R- ili S- stereokemijskih rasporeda.
[image]
Ovi spojevi se uglavnom izoliraju u obliku njihovih farmaceutski prihvatljivih adicionih soli sa kiselinama, kao što su soli izvedene iz upotrebe neorganskih i organskih kiselina. Primjeri takvih kiselina su klorovodična, dušična, sumporna, fosforna, mravlja, octena, trifluoroctena, propionska, maleinska, jantarska, malonska, metan sulfonska i slično. Pored toga, izvjesni spojevi koji sadrže kiselinsku funkciju kao što je karboksi, mogu da se izoliraju u obliku njihove neorganske soli, u kojoj se suprotni ion može odabrati od natrija, kalija, litija, kalcija, magnezija i slično, kao i iz organskih baza.
Dobijanje spojeva I i II iz ovog izuma može da se vrši sekvencionalnim ili konvergentnim sintetskim načinima. Sinteze koje detaljno opisuju dobijanje spojeva formule I i II na sekvencionalan način dane su u slijedećim reakcionim shemama.
Zaštićeni derivati amino kiselina 1, su, u mnogim slučajevima, komercijalno dostupni, gdje je zaštitna grupa L, na primjer, BOC ili CBZ grupa. Drugi zaštićeni derivati amino kiselina 1 mogu da se dobiju prema literaturnim postupcima. Mnogi od spiro piperidina i spiro azepina (n=2) formula 2 i 2a su poznati u literaturi i mogu da daju derivate na fenil i heteroaril grupama standardnim načinima, kao što su halogenizacija, nitracija, sulfonilacija, itd. Alternativno, različiti fenil ili heteroaril supstituirani spiro piperidini i spiro azepini (n=2) mogu da se dobiju prema literaturnim postupcima upotrebljavajući derivatizirane fenil i heteroaril intermedijare. U shemama poslije sheme I, sintetski postupci su ilustrirani samo sa spiropiperidinima, premda će stručnjacima biti jasno da se ilustrirane transformacije mogu također izvesti u višim homolognim serijama, pri čemu se dobijaju spojevi formula I i II sa n=2.
Intermedijari formula 3 i 3a mogu da se sintetiziraju kao što je opisano u Shemi 1. Kuplovanje spiro piperidina formula 2 i 2a na zaštićene amino kiseline formule 1, gdje je L pogodna zaštitna grupa, uobičajeno se izvodi u inertnom otapalu kao što je diklormetan, pomoću reagensa za kuplovanje kao što je DCC ili EDC u prisustvu HOBT. Alternativno, kuplovanje može također da se postigne sa reagensom za kuplovanje kao što je BOP u inertnom otapalu kao što je diklormetan. Odvajanje neželjenih nus proizvoda, i prečišćavanje intermedijara postiže se kromatografijom na silika gelu, koristeći "fleš" kromatografiju (W.C. Still, M. Kahn, i A. Mitra, J. Org. Chem. 1978, 43, 2923), MPLC ili preparativnom TLC.
SHEMA 1
[image]
Konverzija 3 i 3a u intermedijare 4 i 4a može da se izvrši kao što je ilustrirano u shemi 2. Uklanjanje benziloksikarbonilnih grupa može da se izvrši nizom postupaka poznatih u tehnici; na primjer, katalitičkim hidrogeniranjem sa vodikom u prisustvu katalizatora od paladija ili platine u protonskom otapalu kao što je metanol. U slučajevima gdje je katalitička hidrogenacija kontraindicirana prisustvom drugih potencijalno reaktivnih funkcionalnosti, uklanjanje benziloksi karbonilnih grupa može također da se postigne tretiranjem sa otopinom bromovodika u octenoj kiselini. Uklanjanje BOC zaštitnih grupa vrši se u otapalu kao što je metilen klorid ili metanol sa jakom kiselinom, kao što je klorovodična kiselina ili trifluoroctena kiselina. Uvjeti koji su potrebni za uklanjanje drugih zaštitnih grupa koje mogu da budu prisutne mogu da se nađu u Greene, T; Wuts, P.G.M. Protective Groups in Organic Synthesis John Wiley & Sons, Inc., New York, NY 1991.
SHEMA 2
[image]
Intermedijari formule 5 i 5b, gdje je A metilen ili supstituirana metilen grupe, mogu da se dobiju kao što je prikazano u Shemi 3 kuplovanjem intermedijara formule 4 i 4a na amino kiseline formule 6, još jednom, u inertnom otapalu kao što je diklormetan pomoću reagensa za kuplovanje kao što su EDC ili DCC u prisustvu HOBT. Ove amino kiseline 6 su poznate amino kiseline ili su amino kiseline koje se lako sintetiziraju postupcima koji su poznati stručnjacima. Alternativno, kuplovanje može također da se izvrši sa reagensom za kuplovanje kao što je BOP u inertnom otapalu kao što je diklormetan. Također, ako je R4 ili R5 vodik, tada se upotrebljavaju u reakciji kuplovanja amino kiseline formule 7 gdje je L zaštitna grupa kao što je definirana gore, pri čemu se dobijaju 5a i 5c. Oslobađanje od zaštite (deprotekcija) 5a i 5c (L = zaštitna grupa) može da se izvrši pod uvjetima poznatim u tehnici.
SHEMA 3
[image]
Spojevi formule I i II gdje su R4 i/ili R5 vodik, mogu dalje da se prerađuju u nove spojeve I i II (prvenstveni bočni lanac R7 = CH2-CH(OH)-CH2X, gdje X = H ili OH) koja su supstituirana na amino grupi kao što je prikazano u shemi 4. Reduktivna aminacija I i II sa aldehidom vrši se pod uvjetima poznatim u tehnici; na primjer, katalitičkom hidrogenacijom sa vodikom u prisustvu katalizatora od platine, paladija ili nikla, i sa kemijskim redukcionim sredstvima kao što je natrij cijanoborhidrid u inertnom otapalu kao što je metanol ili etanol. Alternativno, slična transformacija može da se izvrši preko reakcije otvaranja epoksida.
SHEMA 4
[image]
Spojevi formula I i II, gdje A N(R2)-(CH2)z-(CR7)(R7a)-(CH2)y, mogu da se dobiju kao što je prikazano u shemi 5 reakcijom 4 ili 4a sa reagensima 8, gdje je X grupa koja se dobro udaljava kao što su Cl, Br, I, imidazol.
Alternativno, 4 i 4a mogu da reagiraju sa izocijanatom formule 9 u inertnom otapalu kao što je 1,2-dikloretan. Ako je R4 ili R5 vodik u finalnom proizvodu reagensi 8 i 9 će imati zaštitnu grupu L, koja se može lako udaljiti, umjesto R4 ili R5.
SHEMA 5
[image]
Spojevi I i II iz ovog izuma mogu također da se dobiju na onvergentan način kao što je opisano u shemama 6, 7 i 8.
Zaštićeni derivati amino kiseline 10 su, u mnogim slučajevima, komercijalno dostupni, gdje je M = metil, etil, ili benzil estri. Druge estrom zaštićene amino kiseline mogu da se dobiju klasičnim postupcima koji su poznati stručnjacima. Neki od ovih postupaka obuhvaćaju reakciju zaštićene amino kiseline sa dijazoalkanom i uklanjanje zaštitne grupe L, reakciju amino kiseline sa pogodnim alkoholom u prisustvu jake kiseline kao što je klorovodična kiselina ili p-toluolsulfonska kiselina. Sintetski putevi za dobijanje novih amino kiselina opisani u u Shemama 14, 15 i 16.
Intermedijari formule 11 i 11a, mogu da se dobiju kao što je prikazano u Shemi 6, kuplovanjem amina 10 na amino kiseline 6 i/ili 7, gdje je L zaštitna grupa, kao što je opisano gore u Shemi 3. Kada je prisutna karbamidna veza u 11 i 11a, može da se uvede kao što je ilustrirano u shemi 5.
SHEMA 6
[image]
Konverzija estra 11 ili 11a u intermedijarne kiseline 12 ili 12a može da se postigne nizom postupaka poznatih u tehnici, kao što je opisano u Shemi 7; na primjer, metil i etil estri mogu da se hidroliziraju sa litij hidroksidom u protonskom otapalu kao što je vodeni metanol. Pored toga, uklanjanje benzil grupe može da se izvrši nizom reduktivnih postupaka, uključujući hidrogenaciju u prisustvu platina ili paladij katalizatora u protonskom otapalu kao što je metanol. Alil estar može da se cjepa sa tetrakis-trifenil-fosfin paladijem kao katalizatorom u prisustvu 2-etil-kapronske kiseline u različitim otapalima, uključujući etil acetat i diklormetan (vidjeti J. Org. Chem. 1982, 42, 587).
SHEMA 7
[image]
Kiseline 12 ili 12a mogu tada da se prerade u 5 & 5a i 5b & 5c kao što je opisano u Shemi 8. Kuplovanje spiro piperidina formule 2 i 2a na kiseline formule 12 ili 12a, gdje je L pogodna zaštitna grupa, uobičajeno se vrši u inertnom otapalu kao što je diklormetan pomoću reagensa za kuplovanje kao što je dicikloheksil karbodiimid (DCC) ili EDC u prisustvu 1-hidroksibenztriazola (HOBT). Alternativno, kuplovanje može također da se izvrši sa reagensom za kuplovanje kao što je benzotriazol-1-ilokstris(dimetilamino-fosfonij heksafluorofosfat ("BOP") u inertnom otapalu kao što je diklormetan. Transformacija 5a % 5c u I i II postiže se uklanjanjem zaštitne grupe L. Kada su R4 i/ili R5 H, supstituirane alkil grupe mogu opciono da se diraju na atom dušika kao što je opisano u Shemi 4.
SHEMA 8
[image]
Dobijanje oksigeniziranih spiroindanil piperidin intermedijara ilustrirano je u Shemi 9, gdje su oba i R3a i R3b vodici. Hidroboriranje zaštićenog spiroindena 13 praćeno oksidativnom obradom sa piridinij klorkromatom osigurava spiroindanon 14.
SHEMA 9
[image]
Konverzija spiroindana u benzolaktam intermedijare je ilustrirana u Shemi 10. Tretiranje spiroindanona sa dušičnovodičnom kiselinom u inertnom otapalu kao što je kloroform (Schmidt-ova reakcija) je jedan od mnogih pogodnih literaturnih postupaka za ovu transformaciju. U ovom primjeru formira se smjesa dva benzolaktama. Izomeri se lako odvajaju kromatografijom na silika gelu. Ovi intermedijari mogu tada da se oslobode zaštite i da se inkorporiraju u sekretagoge (sekretagogni = koji stimulira lučenje naročito egzokrinih žlijezda, lijek ili kemikalija koja potpomaže ili stimulira lučenje = stimulasni lučenja) hormona rasta kao što je prikazano u Shemama 1 i 8 koristeći generički intermedijar 2.
SHEMA 10
[image]
Alkiliranje 15 i 16 sa alkil halogenidom u otapalu kao što je DMF u prisustvu NaH daje 17 i 18 (R2 = C1-C4 alkil).
SHEMA 10a
[image]
Kada je L pogodna zaštitna grupa kao što je benzil grupa, amidi mogu da se reduciraju sa litij aluminij hidridom pri čemu se dobijaju amini 19 i 21. Ovi amini, gdje R2 = H može tada da se alkilira, arilira, acilira, ili reagira sa supstituiranim sulfonil halogenidima ili izocijanatima upotrebljavajući uvjete poznate stručnjacima da bi se dobila spojeva 20 i 22. Uklanjanje zaštitne grupe (L) pomoću hidrogenolize upotrebljavajući paladij katalizator osigurava intermedijare koji mogu da se inkorporiraju u stimulanse izlučivanja prema ovom izumu koristeći hemizam ilustriran u Shemama 1 i 8 prikazan gore koji koristi generički intermedijar 2.
SHEMA 11
[image]
Alternativno, 1,2,3,4-tetrahidrospiro/izohinolin-4,4'-piperidin/prstenasti sistem može da se dobije kao što je iznijeto u Shemi 12. Ozonoliza zaštićenog spiroindena i zatim tretiranje sa dimetil sulfidom daje hemiacetal intermedijar 24 koji pod uvjetima reduktivne aminacije i acilacije osigurava amin 25. Zaštitna grupa (L) za amino grupu je definirana prethodno.
SHEMA 12
[image]
Analozi prstena formule 6, gdje je X, Y H,H; OH, H; H,OH; i =O mogu da se dobiju postupcima opisanim u literaturi i koji su poznati stručnjacima. Na primjer, kao što je ilustrirano u Shemi 13 spiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/analog može da se dobije iz supstituiranog ili nesupstituiranog 2-hidroksiacetofenona i kako treba zaštićenog 4-piperidona kao što je opisao Kabbe, H. J. Synthesis 1978, 886-887 i referencama tamo navedenim. 2-hidroksiacetofenoni, su pak ili komercijalno dostupni ili se mogu dobiti načinima poznatim u literaturi stručnjacima.
Takvi postupci su opisani od strane Chang-a, C.T. i surad., u J. Am. Chem. Soc., 1961, 3414-3417, i Elliott-a J. M. i surad., u J. Med Chem. 1992, 35, 3973-3976. Uklanjanje zaštitne grupe je kao što je opisano u: Protective Groups in Organic Synthesis, Green, T.W., Wuts, P.G., John Wiley & Sons, New York, 1991, i Olofson, R. A. i surad., J. Org. Chem. 1984, 49, 2081-2082, osigurava amin koji može da se inkorporira u stimulanse lučenja hormona rasta preko hemizma detaljno opisanog u Shemama 1 i 8 prikazanim gore koji koristi generički intermedijar 2.
[image]
SHEMA 13
[image]
SHEMA 13 (NASTAVAK)
[image]
Ketonska funkcionalnost kod spoja opće strukture 27 može da se reducira u alkohol upotrebljavajući natrij borhidrid ili može da se potpuno reducira do metilena također upotrebljavajući uvjete poznate stručnjacima. Na primjer, redukcijom ketona sa natrij borhidridom, a zatim tretiranjem sa koncentriranom klorovodičnom kiselinom i hidrogenacijom dobijaju se spojevi opće strukture 29. Amin strukture 27, 28, ili 29 može tada da se inkorporira u stimulans lučenja hormona rasta preko hemizma detaljno opisanog u Shemama 1 i 8, koristeći generički intermedijar 2. Alternativno, keton može često da se reducira poslije inkorporiranja u spoj formule I.
Dobijanje hiralnih hidroksispiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/ analoga može da se postigne upotrebljavajući optički aktivna redukciona sredstva i kristalizacijom dijastereoizomernih soli.
Spojevi formule I i II prema ovom izumudobijaju se iz različitih supstituiranih prirodnih amino kiselina i amino kiselina koje se ne nalaze u prirodi, kao što su one formula 30 i 6 i 7 gdje je A -(CH2)x-C(R7) (R7a)-(CH2)y. Dobijanje mnogih od ovih kiselina opisano je u US patentu 5206237.
Dobijanje ovih intermedijara u racemskom obliku postiže se klasičnim postupcima koji su poznati stručnjacima (Williams, R.M. "Synthesis of Optically Active α-Amino Acids" Pergamon Press: Oxford, 1989; Vol. 7). Postoji nekoliko postupaka za razdvajanje (DL)-amino kiselina.
[image]
Jedan od uobičajenih postupaka je da se razdvoje amino ili karboksil zaštićeni intermedijari kristalizacijom soli izvedenih iz optički aktivnih kiselina ili amina. Alternativno, amino grupa karboksil zaštićenih intermedijara može da se kupluje na optički aktivne kiseline upotrebljavajući hemizam opisan ranije. Odvajanje individualnih dijastereoizomera bilo kromatografskim tehnikama ili kristalizacijom, a zatim hidrolizom hiralnih amida daje razdvojene amino kiseline. Slično, intermedijari zaštićeni na amino, mogu da se konvertiraju u smjesu hiralnih dijastereoizomernih estara i amida. Odvajanje smjese upotrebljavajući postupke opisane gore i hidroliza individualnih dijastereoizomera osiguravaju (D) i (L) amino kiseline. Najzad, enzimatski postupak za razdvajanje N-acetil derivata (DL) amino kiselina objavili su Whitesides i suradnici u J. Am. Chem. Soc. 1989, 111 6354-6364.
Kada je poželjno da se sintetiziraju ovi intermedijari u optički čistom obliku, neki određeni postupci uključuju: (1) asimetričnu elektrofilnu aminaciju hiralnih enolata (J. Am. Chem. Soc. 1986, 108, 6394-6395, 6395-6397, i 6397-6399), (2) asimetričnu nukleofilnu aminaciju optički aktivnih karbonil derivata (J. Am. Chem. Soc. 1992, 114, 1906; Tetrahedron Lett. 1987, 28, 32), (3) dijastereoselektivno alkiliranje hiralnih glicin enolat sintona (J. Am. Chem. Soc. 1991, 113, 9276; J. Org. Chem. 1989, 54 3916), (4) dijastereoselektivnu nukleofilnu adiciju na hiralni elektrofilni glicinat sinthon (J. Am. Chem. Soc. 1986, 108, 1103), (5) asimetričnu hidrogenaciju prohiralnih dehidroamino kiselinskih derivata ("Asymmetric Synthesis, Chiral Catalysis; Morrison, J.D., Izd., Academic Press: Orlando, FL, 1985; Vol. 5), i (6) enzimatske sinteze (Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1978, 17, 176).
Na primjer, alkiliranje enolata difeniloksazinona 31 (J. Am. Chem. Soc. 1991, 113, 9276) sa cinamil bromidom u prisustvu natrij bis (trimetilsilil)amida protiče glatko, pri čemu se dobija 32 koji se konvertira u željenu (D)-2-amino-5-fenilpentanovu kiselinu 33 uklanjanjem N-t-butil-oksikarbonil grupe sa trifluoroctenom kiselinom i hidrogenacijom preko PdCL2 katalizatora (Shema 14)
SHEMA 14
[image]
Intermedijari formule 30 koji su derivati 0-benzil-(D)-serina 34 dobijaju se pogodno iz pogodno supstituiranih benzil halogenida i N-zaštićenog-(D)-serina 34. Zaštitna grupa L je pogodno BOC ili CBZ grupa. Benziliranje 34 može da se izvrši nizom postupaka koji su poznati u literaturi uključujući deprotonaciju sa dva ekvivalenta natrij hidrida u inertnom otapalu kao što je DMF i zatim tretiranjem sa jednim ekvivalentom različitih benzil halogenida (Synthesis 1989, 36) kao što je prikazano u Shemi 15.
SHEMA 15
[image]
Derivati O-alkil-(D)-serina se također dobijaju upotrebljavajući protokol alkiliranja prikazan u Shemi 15. Drugi postupci koji se mogu iskoristiti za dobijanje derivata (D)-serina formule 35 uključuju kiselinom kataliziranu benzilaciju intermedijara zaštićenih na karboksilu izvedenih iz 34 sa reagensima formule ArCH2OC(=NH)CCl3 (O. Yonemitsu i surad. Chem. Pharm. Bull. 1988, 36, 4244). Alternativno, alkiliranje hiralnih glicin enolata (J. Am. Chem. Soc. 1991, 113, 9276; J. Org. Chem. 1989, 54 3916) sa ArCH2OCH2X, gdje je X grupa koja odlazi daje 35. Dalje, D,L-O-aril(alkil)serini mogu da se dobiju i razdvoje postupcima opisanim gore.
Alkiliranje N-zaštićenog -(D)-cisteina 36 vrši se postupkom opisanim u sintezi derivata (D)-serina i ilustrirano je niže sa R1a-X gdje je X grupa koja odlazi kao što su halogenidi i meziloksi grupe kao što je prikazano u Shemi 16.
SHEMA 16
[image]
Oksidacija derivata cisteina 37 u sulfoksid 38 (n=1) i sulfon 38 (n=2) može da se postigne sa mnogim oksidacionim sredstvima (za pregled oksidacije sulfoksida vidjeti Org. Prep. Proced. Int. 1982, 14, 45). Natrijev perjodat (J. Org. Chem. 1967, 32, 3191) se često upotrebljava za sintezu sulfoksida, a kalijev bisulfat (OXONE) (Tetrahedron Lett. 1981, 22, 1287) se upotrebljava za sintezu sulfona.
Prema tome, različite supstituirane amino kiseline mogu da se inkorporiraju u stimulans lučenja hormona rasta preko hemizma detaljno opisanog u Shemama 1 i 8. Stimulansi lučenja koji sarže sulfoksidnu ili sulfonsku funkcionalnu grupu, mogu također da se dobiju iz stimulanasa lučenja cisteina upotrebljavajući perjodat ili OXONER. Alternativno, može se kao oksidaciono sredstvo upotrebiti vodik peroksid u posljednjem stupnju sinteze kao što je prikazano u Shemi 17. Sulfoksidni 40 (n=1) i sulfonski 40 (n=2) analozi mogu da se odvoje preparativnom tanko slojnom kromatografijom.
SHEMA 17
[image]
Uklanjanje amino zaštitnih grupa može da se postigne nizom postupaka poznatih u tehnici; kao što je opisano gore u Protective Groups in Organic Synthesis T.W. Greene, John Wiley and Sons, NY. 1981.
Spojevi formule I gdje su R4 i R5 svaki vodik mogu dalje da se prerade reduktivnim alkiliranjem sa aldehidom postupcima koji su naprijed navedeni ili alkiliranjima kao što je reakcojom sa različitim epoksidima. Proizvodi, dobijeni kao hidrokloridne ili trifluoracetatne soli, pogodno se prečišćavaju reverzno faznom tekućom kromatografijom (HPLC) ili prekristaliziranjem.
Spiro piperidini formule 41 mogu da se dobiju nizom postupaka, uključujući sinteze kao što je opisano niže.
[image]
Spiropiperidini formule 42 gdje je L definirana zaštitna grupa, mogu da se sintetiziraju postupcima koji su poznati u literaturi (na primjer H. Ong i surad. J. Med. Chem. 1983, 23, 981-986). Dušik indolina 42, gdje je L zaštitna grupa kao što je metil ili benzil, može da reagira sa različitim elektrofilima, pri čemu se dobijaju piperidini formule 43, gdje R9 mogu da budu različite funkcionalnosti. Spoj 42 može da reagira sa, na primjer, izocijanatima u inertnom otapalu kao što je diklormetan, pri čemu se dobijaju derivati karbamida, estrima klormravlje kiseline u inertnom otapalu kao što je diklormetan, pri čemu se dobijaju karbamati, kloridima kiselina, anhidridima, ili acil imidazolina pri čemu se
SHEMA 18
[image]
dobijaju amidi, sulfonil kloridima, pri čemu se dobijaju sulfonamidi, sulfamil kloridima, pri čemu se dobijaju sulfamidi. Isto tako, dušik indolina 42 može da se redukciono alkilira sa aldehidima pod uvjetima poznatim u tehnici. Kada je upotrebljeni aldehid u reakciji redukcione aminacije, zaštićena glioksilna kiselina strukture HCOCOOM, gdje je M definirana zaštitna grupa, M može da se ukloni iz proizvoda i da se ovaj dalje prevodi u derivate. Alternativno, 42 može da reagira sa epoksidima, pri čemu se dobija 43, gdje je R9 β-hidroksi supstituirana alkil ili arilalkil grupa. Indolin 42 može također da se transformira u spojeve formule 43, gdje je R9 = fenil ili supstituirani fenil, heteroaril ili supstituirani heteroaril, izvođenjem reakcije 42 sa fluoro fenil ili fluoro heteroaril reagensom. Ovaj hemizam su detaljno opisali H. Ong i surad. J. Med. Chem. 1983, 23, 981-986.
SHEMA 19
[image]
Spiro piperidin intermedijari 43 (L = Me ili Bn), gdje je R9 vodik ili većina derivata opisanih gore, može da se demetilira ili debenzilira, pri čemu se dobija 44, gdje je R9 vodik ili većina derivata opisanih gore, kao što je prikazano u Shemi 19. Za spojeve formule 43, gdje je L = Me, demetiliranje (oslobađanje od metil grupe) može da se izvrši nizom postupaka koji su poznati stručnjacima. Na primjer, demetiliranje 43 se postiže reakcijom sa bromcijanom i kalijevim karbonatom u inertnom otapalu kao što je diklormetan, pri čemu se dobija cijanamid koji se reducira, pri čemu se dobija 44 tretiranjem sa litij aluminij hidridom u refluksirajućem tetrahidrofuranu, refluksirajućom jakom kiselinom kao što je vodena klorovodična kiselina, ili sa Grignard-ovim reagensom kao što je metil magnezijev bromid. Alternativno, demetiliranje 43 može da se izvrši pomoću ACE-Cl postupkom kao što je opisano u R. Olofson i surad., J. Org. Chem. 1984, 49, 2795 i referencama tamo. Za intermedijare fromule 43, gdje je L = Bn, uklanjanje benzil grupe (debenziliranje) može da se izvrši redukcionim postupcima uključujući hidrogenizaciju u prisustvu platina ili paladij katalizatora u protonskom otapalu kao što je metanol. Alternativno, debenziliranje 43 L = Bn, može da se postigne pomoću ACE-Cl postupka kao što je opisano u Olofson i surad. J. Org. Chem. 1984.
Spiro heterociklični spojevi 45 mogu da se dobiju nizom postupaka, uključujući i sintezu opisanu u Shemi 20.
SHEMA 20
[image]
Alkilna oksidacija zaštićenog piperidina 47 vrši se klasičnim postupcima koji su poznati stručnjacima (Rabjoh, N. Org. React, 1976, 24, 261). Dobijeni alil alkohol se tretira sa tionil kloridom u inertnom otapalu kao što je benzol, pri čemu se dobija odgovarajući klorid 48. Kada je D = O ili S, alkiliranje se izvodi u DMF ili acetonu kao otapalima sa kalijevim karbonatom kao bazom, a kada je D = NR9 (R9 = H, alkil, aril, acil, sulfonil, karbamat), reakcija se izvodi sa natrijevim hidridom kao bazom, u inertnom otapalu kao što je THF da bi se dobio prekursor ciklizacije 49. Kada je L definirana zaštitna grupa, spoj 49 može da se ciklizira nizom postupaka koji su poznati stručnjacima. Na primjer, ciklizacija 49 može da se izvrši reakcijom sa tributilkalaj hidridom (Curran, D.P. Synthesis 1988, 417 i 489) u inertnom otapalu kao što je benzol, pri čemu se dobija 46. Alternativno, spoj 46 (D= NR9) može da se dobije postupkom prikazanim u Shemama 18 i 19. Kada je D = S, spoj 46 može da se oksidira do sulfoksida 47 (n = 1) i sulfona 47 (n = 2) mnogobrojnim oksidacionim sredstvima (Shema 21). Na primjer, natrijev perjodat se često upotrebljava za sintezu sulfoksida, a OXONE se upotrebljava za sintezu sulfona. Uklanjanje zaštitne grupe osigurava amin 45 koji se tada može inkorporirati u stimulanse lučenja hormona rasta preko hemizma detaljno opisanog u Shemi 1 i 8 prikazanim gore koje koriste generički intermedijar 2.
SHEMA 21
[image]
Spiro piperidini formule 50 i formule 51 mogu da se dobiju sintezom opisanom u Shemi 22.
Ftalimidini formule 53, gdje je R11 definirano kao alkil, aril, (CH2)q-aril, ili zaštitna grupa, su ili komercijalno dostupni ili mogu da se sintetiziraju iz odgovarajućih ftalimida postupcima koji su poznati u literaturi (na primjer, Bewster i surad u J. Org. Chem., 1963, 28, 501; Mcalees i surad. J. Chem. Soc., 1977, 2038). Ftalimidini 53 mogu da se alkiliraju u prisustvu baze, kao što je kalijev hidrid, litij ili kalijev bis (trimetilsilil)amid, sa zaštićenim bis-2-haloetil aminom gdje je L definirana zaštitna grupa, kao što je metil, benzil, t-BOC, ili CBZ, itd., a Y može da bude Cl, Br, I, pri čemu se dobija spiropiperidin 54. Zaštitna grupa može da se ukloni postupcima opisanim gore, pri čemu se dobija formula 50. Redukcijom laktama u formuli 50 pomoću hidrida, kao što je litijev aluminijev hidrid, dobija se formula 51.
SHEMA 22
[image]
Zapaženo je da redoslijed izvođenja prethodnih reakcionih shema nije značajan i da je u okviru vještine stručnjaka da se varira redoslijed reakcija da bi se potpomogla reakcija ili da se spriječe neželjeni reakcioni proizvodi.
Spojevi koji oslobađaju hormon rasta formule I i II su korisni in vitro kao jedinstveni instrumenti za razumijevanje kako se lučenje hormona rasta regulira na nivou hipofize. Ovo obuhvaća upotrebu u procjenjivanju mnogih faktora za koje se misli ili zna da utječu na lučenje hormona rasta, kao što su starost, pol, faktori ishrane, glukoza, amino kiseline, masne kiseline, kao i stanja uzdržavanja od hrane i ne uzdržavanja od hrane. Pored toga, spojevi prema ovom izumu mogu da se upotrebe u procjenjivanju kako drugi hormoni modificiraju aktivnost oslobađanja hormona rasta. Na primjer, već ranije je ustanovljeno da somatostatin inhiira oslobađanje hormona rasta. Drugi hormoni koji su važni i za koje je potrebno da se prostudira kakav je njihov efekat na oslobađanje hormona rasta obuhvaćaju gonadalne hormone, na pr., testosteron, estradiol, i progesteron; adrenalne hormone, na pr., kortizol i druge kortikoide, epinefrin i norepinefrin; pankreatične i gastrointestinalne hormone, na pr., insulin, glukagon, gastrin, sekretin; vazoaktivne peptide, na pr., bombesin, neurokinine; i tiroidne hormone, na pr., tiroksin i trijodotironin. Spojevi formule I i II mogu također da se upotrebe da se ispitaju mogući negativni ili pozitivni rezultati efekata nekih hormona hipofize, na pr., hormona rasta i endorfin peptida, na hipofizu da modificira oslobađanje hormona rasta. Od naročitog naučnog značenja je upotreba ovih spojeva da se objasne subćelijski mehanizmi koji posreduju u oslobađanju hormona rasta.
Spojevi formule I i II mogu da se primjenjuju na životinje, uključujući ljude, da se oslobodi hormon rasta in vivo. Na primjer, spojevi mogu da se primjenjuju na komercijalno važne životinje kao što su svinje, stoka, ovce i slično da se ubrza i poveća njihova brzina i opseg rasta, da se poveća efikasnost hrane i da se poveća proizvodnja mlijeka kod takvih životinja. Pored toga, takvi spojevi mogu da se primjenjuju kod ljudi in vivo kao dijagnostička sredstva za direktno određivanje da li je hipofiza sposobna da oslobodi hormon rasta. Na primjer, spojevi formule I i II mogu da se primjene in vivo na djecu. Uzorci seruma uzeti prije i poslije takve primjene mogu da se analiziraju na hormon rasta. Uspoređenje količina hormona rasta u svakom od ovih uzoraka biti će način za direktno određivanje sposobnosti hipofize pacijenta da oslobodi hormon rasta.
Prema tome, ovaj izum obuhvaća unutar svog okvira farmaceutske kompozicije koje sadrže kao aktivnu komponentu, najmanje jedno od spojeva formule I i II sa farmaceutskim nosačem ili razblaživačem. Opciono, aktivna komponenta farmaceutskih kompozicija može da sadrži anaboličko sredstvo pored najmanje jednog od spojeva formule I i II ili neke druge kompozicije koja ima drugačiju aktivnost, na pr. antibiotskog permitanta rasta, ili sredstvo za tretiranje osteoporaze ili u kombinaciji sa kortikosteroidom da bi se smanjili na minimum katabolički sporedni efekti, ili sa drugim farmaceutski aktivnim materijalima gdje kombinacija povećava efikasnost i smanjuje na minimum sporedne efekte.
Sredstva koja potpomažu rast i anabolička sredstva obuhvaćaju, ali nisu ograničena na TRH, dietilstilbestrol, estrogene, ß-agoniste, teofilin, anaboličke steroide, enkefaline, E-serije prostaglandina, spojevi opisani u U.S. Patentu No. 3,239,345, na pr. zeranol, i spojevi opisani u U.S. Patentu No. 4,036,979, na pr., sulbenoks ili peptide opisane u U.S. Patentu No. 4,411,890.
Još jedna upotreba stimulanasa lučenja hormona rasta prema ovom izumu je u kombinaciji sa drugim stimulansima lučenja hormona rasta, kao što su peptidi GHRP-6, GHRP-1 koji oslobađaju hormon rasta kao što su opisani u U.S. Patentima No. 4,411,890 i publikacijama WO 89/07110, WO 89/07111 i B-HT920 kao i heksarelin i u novije vrijeme otkriven GHRP-2 kao što je opisano u WO 93/04081 ili hormon (GHRH, također obilježen kao GRF) koji oslobađa hormon rasta i njegovi analozi ili hormon rasta i njegovi analozi ili somatomedini uključujući IGF-1 i IGF-2 ili �-adrenergične agoniste kao što su klonidin ili serotinin 5HTID agonisti kao što su sumitriptan ili sredstva koja inhibiraju somatostatin ili njegovo oslobađanje kao što su fizostigmin i piridostigmin.
Kao što je dobro poznato stručnjacima, poznate i potencijalne upotrebe hormona rasta su različite i mnogobrojne. Prema tome, primjena spojeva prema ovom izumu za svrhe stimulacije oslobađanja endogenog hormona rasta može da ima iste efekte kao i upotreba samog hormona rasta. Ove različite upotrebe hormona rasta mogu da budu zbrojene na slijedeći način: stimuliranje oslobađanja hormona rasta kod starijih ljudi; tretiranje nedostatka hormona rasta kod odraslih ljudi; prevencija kataboličkih sporednih efekata glukokortikoida, tretiranje osteroporaze, stimulacija imunog sistema, ubrzavanje zacjeljivanja rana, ubrzavanje zarastanja frakture kostiju, tretiranje usporavanja rasta, tretiranje akutnog ili kroničnog bubrežnog oboljenja ili insuficijencije, tretiranje fiziološkog kratkog stasa, uključujući djecu sa nedostatkom hormona rasta, tretiranje kraktog stasa povezanog sa kroničnom bolešću, tretiranje debljine i usporavanja rasta povezanog sa debljinom, tretiranje usporavanja rasta vezano sa Prader-Willi-evim sindromom i turner-ovim sindromom; ubrzavanje oporavka i smanjenje hospitalizacije pacijenata kod opekotina ili poslije osnovne kirurgije kao što je gastrointestinalna kirurgija; tretiranje inrauteralnog usporavanja rasta, skeletne displazije, hiperkortisonizma i Cushingovog sindroma; zamjena hormona rasta kod stresnih pacijenata; tretiranje osteohondroisplazije, Noonans-ovog sindroma, poremećaja sna, Alzheimer-ove bolesti, usporednog zarašćivanja rana i psihosocijalnih lišavanja; tretiranje pulmonarne disfunkcije i zavisnosti od ventilatora; umanjenje proteinskog kataboličkog odgovora poslije osnovne operacije; tretiranje malabsorpcionih sindroma, smanjenje kaheksija i gubitka proteina uslijed kronične bolesti kao što je kancer ili SIDA; ubrzavanje dobijanja težine i porasta proteina kod pacijenata na TPN (total parenteral nutration) (totalnoj parenteralnoj ishrani); tretiranje hiperinsulinemije uključujući nesidoblastozu; pomoćno tretiranje za indukciju ovulacije i prevenciju i tretiranje gastričnih i duodenalnih ulcera; za stimulaciju razvoja timusa i prevenciju opadanja funkcije timusa sa starošću; pomoćne terapije za pacijente na kroničnoj hemodijalizi; tretiranje imunopotisnutih pacijenata i povećanja antitjelo odgovara poslije cjepljenja; povećanje jačine mišića, pokretljivosti, održavanje debljine kože, metaboličke homeostazije, renalne homeostazije kod osjetljivih starijih osoba; stimulacije osteoblasta, rekonstrukcije kostiju, i rast hrskavice; tretiranje neuroloških oboljenja kao što su periferalna i lijekom izazvana neuuropatija; Guillian-Barre-ovog sindroma, aminotropna lateralna skleroza, multipla skleroza, cerebrovaskularni udesi i demielinacione bolesti; stimulacija imunog sistema kod pratećih (domaćih) životinja i tretiranje poremećaja starenja kod pratećih životinja; stimuliranje rast kod stočnog fonda, i stimuliranje rasta vune kod ovaca.
Stručnjacima je poznato, da postoje mnogobrojni pojevi koji se sada upotrebljavaju u cilju da se tretiraju bolesti ili terapeutske indikacije nabrojane gore. Kombinacija ovih terapeutskih sredstava, od kojih su neka također spomenuta gore, sa stimulansom lučenja hormona rasta prema ovom izumu dovesti će do dodatnih, komplementarnih, i često sinergističkih svojstva za povećanje potpomaganja rasta anaboličkih i željenih svojstava ovih različitih terapeutskih sredstava. U ovim kombinacijama, terapeutska sredstva i stimulansi lučenja hormona rasta prema ovom izumu mogu da budu nezavisno prisutni u dozama koje se kreću od jednog stotog do jednog puta od nivoa doze, koji su efikasni kada se ovi spojevi i stimulansi lučenja koriste pojedinačno.
Kombinirana terapija da bi se inhibirala resorpcija kostiju, spriječila osteoporoza i ubrzalo zalječivanje lomova kostiju može se ilustrirati kombinacijom bisfosfonata i stimulanasa lučenja hormona rasta prema ovom izumu. Upotreba bisfosfonata za ove namjene dana je u pregledu, na primjer, Hamdy, N.A.T., "Role of bisphosphonates in Metabolic Bone Diseases". Trends in Endocrinol. Metab., 1993, 4, 19-25. Bisfosfonati sa ovim namjenama obuhvaćaju alendronat, tiludronat, dimetil - APD, rizedronat, etidronat, YM-175, klodronat, pamidronat, i BM-210995. Prema njihovoj jačini, nivoi oralnih dnevnih doza bisfosfonata od između 0.1 mg i 5 g i dnevni nivoi stimulanasa lučenja hormona rasta prema ovom izumu od između 0.01 mg/kg do 20 mg/kg tjelesne težine primjenjuju se na pacijente koji dobivaju efikasan tretman za osteoporozu.
Spojevi prema ovom izumu mogu da se primjenjuju oralno, parenteralno (na pr. intramuskularnim, intraperitonealnim, intravenskim ili subkutanim injekcijama, ili kao implantati), nazalnim, vaginalnim, rektalnim, sublingualnim ili lokalnim putevima i mogu da se formuliraju u oblicima doza pogodnim za svaki način primjene.
^vrsti oblici doza za oralnu primjenu obuhvaćaju kapsule, tablete, pilule, praškove i granule. U takvim čvrstim oblicima doza, aktivni spoj se mješa sa najmanje jednim inertnim farmaceutskim nosačem, kao što su saharoza, laktoza ili škrob. Takvi oblici doza mogu također da sadrže, kao što je normalno praksa, dodatne supstance drugačije nego što su inertni razblaživači, na pr., sredstva za podmazivanje kao što je magnezijev stearat.
U slučaju kapsula, tableta i pilula, oblici doza mogu također da sadrže i sredstva za puferiranje. Tablete i pilule mogu dodatno da se dobijaju sa vanjskim oblogama.
Tekući oblici doza za oralnu primjenu obuhvaćaju farmaceutski prihvatljive emulzije, otopine, suspenzije, sirupe, eliksire koji sadrže inertne razblaživače koji se uobičajeno koriste u tehnici, kao što je voda. Pored takvih inertnih razblaživača, kompozicije mogu također da obuhvaćaju ađuvanse, kao što su sredstva za močenje, emulgiranje, i suspendiranje i sredstva za zaslađivanje, davanje ukusa, i sredstva za parfumiranje.
Preparati prema ovom izumu za parenteralnu primjenu obuhvaćaju sterilne vodene i ne-vodene otopine, suspenzije, ili emulzije. Primjeri ne-vodenih otapala ili nosilaca su propilen glikol, polietilen glikol, biljna ulja, kao što su maslinovo ulje ili kukuruzno ulje, želatin, i injekcioni organski estri kao što je etil oleat. Takvi oblici doza mogu da sadrže ađuvanse kao što su sredstva za konzerviranje, močenje, emulgiranje i dispergiranje. Oni mogu da se steriliziraju pomoću, na primjer, filtracije kroz filter koji zadržava bakterije, inkorporiranja sredstava za sterilizaciju u kompoziciju, ozračivanja kompozicije, ili zagrijavanjem kompozicije. Oni mogu također da se proizvedu u obliku sterilnih čvrstih kompozicija koje mogu da se otope u sterilnoj vodi, ili nekom drugom sterilnom injektibilnom mediju neposredno prije upotrebe.
Kompozicije za rektalnu ili vaginalnu primjenu su prvenstveno supozitorije koje mogu da sadrže, pored aktivne supstance, ekscipijente kao što su kakao maslac ili vosak za supozitorije.
Kompozicije za nazalnu ili sublingualnu primjenu se također proizvode sa standardnim ekscipijentima koji su dobro poznati u tehnici.
Doze aktivne komponente u kompozicijama prema ovom izumu mogu da se mjenjaju; međutim, neophodno je da je količina aktivne komponente takva da se dobije pogodan oblik doze. Odabrana doza zavisi od željenog terapeutskog efekta, od načina primjene, i od trajanja tretiranja.
Uglavnom se primjenjuju nivoi doza od između 0.0001 do 100 mg/kg tjelesne težine svakodnevno na pacijente i životinje, na pr., sisare, da bi se postiglo efikasno oslobađanje hormona rasta.
Slijedeći primjeri su osigurani isključivo u svrhu dalje ilustracije i nisu namijenjeni da budu ograničenja za objavljeni izum.
PRIMJER 1
N-/1(R)-/(2', 3'-dihidro-2-oksospiro/piperidin-4,4'(1H)-hinolin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stupanj A: 1'-(t-butiloksikarbonil)3,4-dihidro-3-okso-spiro/1H-inden-1,4'-piperidin/
U otopinu 661 mg (2.31 mmola) 1'-(t-butiloksikarbonil)spiro/1H-inden-1,4'-piperidina/ /dobijenog postupkom Chambers-a i surad., J. Med. Chem., 1992, 35, 2036/ u 5.0 ml THF dodaje se 5.8 ml (1.0 M THF, 2.9 mmola) 9-BBN. Reakciona smjesa se zagrijava na 70ºC sve dok TLC analiza ne pokaže da je utrošen polazni materijal. Otopina se koncentrira i ostatak se otapa u diklormetanu. Otopina se ohladi na 0ºC i lagano u toku 15 minuta se dodaje 4.1 g (19.2 mmola) PCC. Reakciona smjesa se zagrijava do sobne temperature i zatim se refluksira 30 minuta. Otopina se tada razblažuje sa etrom i filtrira kroz sloj smjese celita i florisila. Prečišćavanjem pomoću "fleš" kromatografije (silika gel, heksan/etil acetat, 4:1) dobija se 326 mg (47%) naslovnog spoja.
1H NMR (200 MHz, CDCl3): 7.75-7.60 (m, 2H), 7.50-7.44 (m, 2H), 4.30-4.15 (m, 2H), 2.85 (dt, 2H), 2.63 (s, 2H), 1.98 (dt, 2H), 1.53-1.40 (m, 2H), 1.49 (s, 9H).
Stupanj B: Spiro/1H-inden-1,4'-piperidin/-3(2H)-on trifluoracetamid
Otopina intermedijara iz Stupnja A u 1 : 1 : 0.5 smjesi trifluoroctene kiseline, diklormetana i anizola mješa se 1 sat i zatim se koncentrira dušičnom destilacijom iz toluola, pri čemu se dobija naslovni spoj.
1H NMR (200 MHz, CDCl3): 7.81-7.70 (m, 1 H), 7.62-7.45 (m, 2H), 7.22-7.15 (m, 1H), 3.72-3.58 (m, 2H), 3.29-3.04 (m, 2H), 2.70 (s, 2H), 2.47 (dt, 2H), 1.85-1.75 (m, 2H).
Stupanj C: Trifluoracetamid-2,3-dihidrospiro/inden-1,4'-piperidin/
U otopinu 1.0 g (3.21 mmola intermedijara dobijenog u Stupnju B u 3.0 ml diklormetana, dodaje se 0.945 ml (6.74 mmola) trietilamina i 50 mg DMAP i na kraju 0.501 ml (3,53 mmola) anhidrida trifluor octene kiseline. Reakciona smjesa se miješa 3 sata i zatim razblažuje sa 20 ml diklormetana. Otopina se pere sa vodom, suši preko magnezijevog sulfata, i koncentrira. Prečišćavanjem pomoću "fleš" kromatografije (silika gel, heksan/etil acetat 2:1) dobija se 568 mg (1.91 mmola).
1H NMR (200 MHz, CDCl3): 7.79-7.64 (m, 2H), 7.52-7.41 (m, 2H), 4.75-4.65 (m, 1H), 4.22-4.08 (m, 1H), 3.37 (dt, 1H), 2.92 (dt, 1H), 2.70 (s, 2H), 2.08 (dt, 2H), 1.71-1.62 (m, 2H).
Stupanj D: Trifluoracetamid-3', 4'-dihidro-2-oksospiro-/piperidin-4,4'(1H)-hinolin/
U otopinu 218 mg (3.36 mmola) natrij azida u 0.285 ml vode i 1.5 ml kloroforma na 0ºC dodaje se 0.105 ml sumporne kiseline. Reakciona smjesa se miješa 2.5 sati i zatim odvajaju slojevi i kloroformski sloj se suši preko natrijevog sulfata. U otopinu od 400 mg (1.34 mmola) intermedijara dobijenog u Stupnju A dodaje se otopina hidrazinske kiseline. U ovu otopinu se dodaje 0.400 ml sumporne kiseline u toku 5 minuta. Reakcijska smjesa se miješa 20 minuta i zatim 45 minuta na 45ºC i na kraju 16 sati na sobnoj temperaturi. Sloj sumporne kiseline se dodaje u led i zatim se zaalkalira sa 50% natrijevim hidroksidom. Vodeni sloj se ekstrahira sa etil acetatom. Etil acetatni ekstrakti se suše preko natrijevog sulfata i koncentriraju. Prečišćavanjem jednog obroka od 100 mg sirovog proizvoda pomoću "fleš" kromatografije (silika gel, diklormetan/etil acetat 1 : 1, a zatim sa 1 : 2) dobija se 50 mg (0.160 mmola) materijala sa visokim RF i 16 mg (0.051 mmola) materijala sa niskim RF.
1H NMR (200 MHz, CDCl3, visoki RF): 8.9-8.7 (širok S, 1H), 7.40-7.21 (m, 2H), 7.18-7.04 (m, 1H), 6.90-.86 (m, 1H), 4.52-4.36 (m, 1H), 3.97-3.83 (m, 1H), 3.52 (dt, 1H), 3.22 (dt, 1H), 2.79 (s, 2H), 2.12-1.66 (m, 4H), 1H NMR (200 MHz, CDCl3, nizak RF): 8.12 (dd, 1H), 7.60-7.52 (m, 1H), 7.45-7.35 (m, 2H), 6.95 (širok s, 1H), 4.56-4.43 (m, 1H), 4.03-3.96 (m, 1H), 3.64-3.62 (m, 2H), 3.49-3.35 (m, 1H), 3.11 (dt, 1H), 2.20-1.80 (m, 4H).
Stupanj E: 3',4'-dihidro-2-oksospiro/piperidin-4,4'(1H)-hinolin
Otopina 49 mg (0.157 mmola) materijala sa visokim RF iz Stupnja B u metanolu/vodi 4:1 sa viškom kalijeva hidroksida miješa se preko noći. Otopina se koncentrira i dodaju se voda i etil acetat u ostatak. Slojevi se odvajaju i vodeni sloj se ekstrahira sa etil acetatom. Spojeni organski slojevi se suše preko natrijevog sulfata i koncentrira, pri čemu se dobija 31 mg (0.143 mmola) naslovnog spoja.
Stupanj F: N-/1(R)-/(2', 3'-dihidro-2-oksospiro/piperidin-4,4'(1H)-hinolin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3- il)etil/-2-//1,1-dimetiletiloksikarbonil/amino/-2-metilpropanamid
U otopinu 29 mg (0.134 mmola) intermedijara dobijenog u Stupnju C, 65 mg (0.167 mmola) 2-amino-N-/1(R)-/2',3'-dihidro-2-oksospiro/piperidin-4,4'(1'H)-hinolin/-1-il)karbonil/-2-(1H-indol-3-il)etil-2-metilpropanamida i 24 mg, (0.174 mmola) HOBT u diklormetanu dodaje se 33 mg (0.174 mmola) EDC. Reakcija se miješa preko noći i zatim se obradi i prečišćava kao što je opisano za Primjer 1 (Stupanj A) sa jednim izuzetkom što je upotrebljen diklormetan/aceton za kromatografiju. Dobijeno je 34.8 mg (0.059 mmola) naslovnog spoja.
Stupanj G: N-/1(R)-/(2',3'-dihidro-2-okso, spiro/piperidin-4,4'(1H)hinolin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3- il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Naslovni spoj (7.2 mg, 0.013 mmola) je dobijeno iz intermedijara iz Stupnja D (14 mg, 0.023 mmola) prema postupku opisanom u Primjeru 1 (Stupanj C) sa jednim izuzetkom. Hidrokloridna sol se dobija u ovom slučaju iz prečišćenog slobodnog amina adicijom 4 N HCl u dioksanu.
1H NMR (400 MHz, CD3OD), 2:1 smjesa rotomera): 8.34 (d, 2/3 H), 8.27 (d, 1/3 H), 7.59 (d, 2/3 H), 7.55 (d, 1/3 H), 7.38 (d, 1/3 H), 7.33 (d, 2/3 H), 7.25 (d, 1/3H), 7.18-6.98 (m, 4H), 6.85 (d, 1/3 H), 6.80 (d, 2/3 H), 6.68 (d, 2/3 H), 5.23-5.17 (m, 1H), 4.22-4.19 (m, 2/3 ), 4.09-3.95 (m, 1/3 H), 3.62-3.59 (m, 1/3 H), 3.36-3.17 (m, 2 2/3 H), 3.08 (dt, 1/3 H), 2.75 (dt, 1/3 H), 2.69 (dt, 2/3 H), 2.48 (dd, 2H), 1.93-1.75 (m, 2/3 H), 1.60 (s, 3H), 1.58 (s, 2H), 1.40-1.32 (m, 1H), 1.51 (s, 1H), 1.10 (m, 1/3 H), 1.02 (m, 2/3 H), 0.90 (dt, 2/3 H), 0.22 (dt, 2/3 H). FAB-MS: m/e 490 (m+1).
PRIMJER 2
N-/1(R)-/(2',3'-dihidro-1-oksospiro/piperidin-4,4'(1H)-izohinolin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stupanj A: /3',4'-dihidro-1-oksospiro/piperidin-4,4'(1H)-izohinolin/
Naslovni spoj (11.3 mg, 0.036 mmola) je dobijeno iz intermedijara sa niskim RF iz Primjera 1 (Stupanj D) (16.0 mg, 0.051 mmola) prema postupku opisanom za Primjer 13 (Stupanj D).
1H NMR (200 MHz, CDCl3): 8.12 (dd, 1H), 7.60-7.52 (m, 1H), 7.45-7.35 (m, 2H), 6.95 (širok s, 1H), 4.56-4.43 (m, 1H), 4.03-3.96 (m, 1h), 3.64-3.62 (m, 2H), 3.49-3.35 (m, 1H), 3.11 (dt, 1H), 2.20-1.80 (m, 4H).
Stupanj B: N-/1(R)-/(2',3'-dihidro-1-okso, spiro/piperidin-4,4'(1H)-izohinolin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-//1,1-dimetiletiloksikarbonil/-amino/-2-metilpropanamid
Naslovni spoj (13.6 mg, 0.023 mmola) je dobijeno iz intermdijara iz Stupnja A (10.0 mg, 0.032 mmola) i 2-amino-N-/1(R)-/2', 3'-dihidro-2-oksospiro/piperidin-4,4'-(1'H)-hinolin/-1-il)karbonil/-2-(1H-indol-3-il)etil-2-metil-propanamida (21.6 mg, 0.055 mmola) prema postupku opisanom za Primjer 13 (Stupanj D).
Stupanj C: N-/1(R)-/(2', 3'-dihidro-1-oksospiro/piperidin-4,4'(1H)-izohinolin/-1'-il)karbonil/-2-indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Otopina 10.1 mg (0.017 mmola) intermedijara dobijenog iz Stupnja B u 1.5 N HCl u etil acetatu miješa se preko noći i zatim se koncentrira i dušično destilira iz metanola, pri čemu se dobija 8.3 mg (0.015 mmola) naslovnog spoja.
1H NMR (400 MHz, CD3OD, 2:1 smjesa rotomera): 7.94 (d, 1/3 H), 7.87 (d,2/3 H), 7.62-7.53 (m, 2H), 7.40-7.33 (m, 2 1/3 H), 7.18-7.10 (m, 3H), 6.75 (d, 2/3 H), 5.22-5.18 (m, 2/3 H),5.15 (t, 1/3 H), 4.27-4.23 (m, 2/3 H), 4.14-4.10 (m, 1/3 H), 3.68-3.61 (m, 1H0, 3.25-3.18 (m, 4H), 3.10 (dt, 2/3 H), 2.87 (dt, 1/3 H), 2.70 (dt, 1/3 H), 2.65 (dt, 2/3 H), 1.88 (dt, 1/3 H), 1.75 (dt, 1/3 H), 1.62+1.61+1.59+1.51 (s, 6F totalno). 1.57-1 (m, 1H), 1.38-1.35 (m, 1/3 H), 1.15-1.10 (1/3 H), 0.929 (dt, 2/3 H ), 1.19 (dt, 2/3 H) FAB-MS: m/e 490 (m+1)
PRIMJER 3
N-/1(R)-/(4H-1-oksospiro/3H-2-benzopiran-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stupanj A: Spiro/3H-2-benzopiran-3,4'-piperidin/-1(4H)-on
U suspenziju 10% paladija na ugljenu (5 mg) u etanolu (5 ml) dodaje se 1'-benzilspiro/3H-2-benzopiran-3,4'-piperidin/-1(4H)-ona (20 mg, 0.058 mmola). (Hashigaki i surad. Chem. Pharm. Bull. 32 str. 3561-3568 (1984)). Hidrogenizacija se vrši na 1 atmosferi pritiska na sobnoj temperaturi. Reakcija se miješa 2 sata pod atmosferom vodika, sve dok TLC analiza ne pokaže da je reakcija završena. Katalizator se uklanja vakuum filtracijom kroz celit 545 i filtrat se koncentrira, pri čemu se dobija željeni proizvod (12.4 mg, 98.5%).
FAB-MS izračunato za C13H15NO2 217, nađeno 218 (M+H, 100%).
Stupanj B: N-/1(R)-/(4H-1-oksospiro/3H-2-benzopiran-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)-etil/-2-//(1,1-dimetiletiloksi)karbonil/amino/-2-metil-propanamid
Otopina intermedijara iz Stupnja A (12 mg, 0.055 mmola) i a(R)-//2-//(1,1-dimetiletoksi)karbonil/amino/-2,2-dimetil-1-oksoetil/amino/-1H-indol-3-propionske kiseline (27 mg, 0.058 mmola) u diklormetanu ohladi se na 0ºC i zatim se dodaje HOBT (2 mg, 0.015 mmola), N-metil-morfolina (8.8 mg; 0.084 mmola) i EDC (22 mg, 0.12 mmola). Reakciona smjesa se miješa na sobnoj temperaturi 1 sat, sve dok se TLC analizom ne procijeni da je reakcija završena. Otopina se tada pere sa zasićenom otopinom natrijevog klorida i suši se preko anhidriranog magnezijevog sulfata. Otopina se tada filtrira i koncentrira. Prečišćavanjem kromatografijom na silika gelu dobija se naslovni spoj (15 mg, 47%)
FAB-MS izračunato za C33H40N4O6 588; Nađeno 589 (M+H, 39%) /489 M+H 100, 42%) gubitak t-Boc grupe/
Stupanj C: N-/1(R)-/(4H-1-oksospiro/3H-2-benzopiran-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Otopina intermedijara iz Stupnja b (12 mg, 0.02 mmola) u metanolu (3 ml) ohlai se na 0ºC. Uz miješanje se lagano u smjesu dodaje koncentrirana klorovodična kiselina (3 ml). Reakcija se miješa 30 minuta, sve dok TLC analiza ne pokaže da je reakcija završena. Otopina se tada koncentrira nekoliko puta iz toluola. Hidrokloridna sol se upotrebljava bez prečišćavanja (10.15 mg, 96%).
1H NMR (400 MHz, CD3OD): Proizvod egzistira kao smjesa dva konformera (2:1): d 7.977, 7.905 (2d, 2/3 H), 7.604-6.994 (m, 8H), 5.134-5.093 (m, 12/3 H), Skriveni 5.025-4.715 (m, 2H), 4.191-4.114 (m, 1/3 H), 3.637-3.587 (m, 1H), 3.344-3.299 (m, 1H), 3.188-3.124 (m, 1H), 3.030 (s 2/3 H), (dt, 2.81 Hz, 9.4 Hz, 1/3 Hz, 1/3 H), 2.536 (g, 1 H), 2.301 (t, 1/3 H), 1.590, 1.571 (2s, 6H), 1.539-1.483 (m, 2/3 H), 1.275 (s, 6H), 1.259-1.206 (m, 2/3H), (m, 1H), 0.633-0.545 (m, 1/3 H), 0.277-0.361 (m, 1/3 H).
FAB-MS izračunato za C28H32N4O4 488; nađeno 489 (M+H, 65%).
PRIMJER 4
N-/1(R)-/(4',5'-dihidro-4'-oksospiro/piperidin-4,6'-/6H/-tieno/2,3-b/tiopiran/-1-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-propanamid hidroklorid
Stupanj A: N-/1(R)-/(4',5'-dihidro-4'-oksospiro/piperidin-4,6'-/6H/tieno/2,3-b/tiopiran/-1-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-//(1,1- dimetiletiloksi)karbonil/amino/-2-propanamid
Dobijen je postupkom opisanim u Primjeru 3, Stupanj B. Spiro/piperidin-4,6'-/6H/tieno/2,3-b/tiopiran/-4'-(5'H)-on hidroklorid (10 mg, 0.044 mmola) EP publikacija 90313262.9, α (R)-//2-//(1,1-dimetiletoksi)karbonil/amino/-2,2-dimetil-1-oksoetil/amino/-1H-indol-3-propionska kiselina (20 mg, 0.051 mmola), HOBT (1 ekvivalent), N-metilmorfolin (0.01 ml, 0.093 mmola), i EDC (20 mg, 0.10 mmola). Reakciono vrijeme: 5 sati. Prinos: 22 mg (98%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3): proizvod egzistira kao smjesa dva konformera (2:1): δ 8.240 (s, 2/3 H), 8.063 (s, 1/3 H), 7.680 (d, 2/3 H), 7.628 (d, 1/3 H), 7.416-6.962 (m, 5H), 5.279-5.162 (m, 1H), 4.878-4.763 (m, 1H), 4.285 (d, 2/3 H), 3.376 (d, 2/3 H), 3.342-3.196 (m, 1H), 3.129-2.973 (m, 1 2/3 H), 2.715-2.662 (m, 1H), 2.285 (d, 2/3 H), 2.139 (d, 2/3 H), 1.683-1.567 (m, 8 1/3 H), 1.503, 1.454, 1.427, 1.409 (4s, 12H), 1.278-1.217 (m, 2H), 0.708-0.628 (m,2/3 H).
FAB-MS izračunato za C31H38=N4O5S2 610; nađeno 611 (M+H, 32%).
Stupanj B: N-/1(R)-/(4',5'-dihidro-4'-oksospiro/piperidin-4,6'-/6H/tieno/2,3-b/tiopiran/-1-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-propanamid hidroklorid
Dobijen je postupkom opisanim u Primjeru 15, Stupanj C. Intermedijar iz prethodnog Stupnja (200 mg, 0.033 mmola) i metanol (3 ml). Reakcijsko vrijeme: 1.5 sati. Prinos: 12.2 mg (69%).
1H NMR (400 MHz, CD3Op): proizvod egzistira kao smjesa dva konformera (2:1): d 7.562-7.022 (m, 6H), 5.513-5.446 (m, 6 2/3 H), 5.099-5.003 (m, 1H) skriven 4.914-4.726 (m, 2/3 H), 4.178 (d, 1H), 3.624 (d, 1H), 3.337-3.043 (m, 2 2/3 H), 2.760-2.660 (m, 1H), 2.324 (d, 1H), 2.234 (d, 1H), 1.597, 1.587, 1.574, 1.510 (4s, 4H), 1.364-1.225 (m, 3H), 0.562-0.482 (m, 2/3H), -0.311 -0.391 (m, 2/3 H).
FAB-MS izračunato za C26H30N4O3S2 510; nađeno 511 (M+H, 51%).
PRIMJER 5
N-/1(R)-/(3-hidrospiro/1H-izobenzofuran-1,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stupanj A: N-/1(R)-/(3-hidrospiro/1H-izobenzofuran-1,4'piperidin/-1'-il)-karbonil/-2-(indol-3-il)-etil/-2-//(1,1-dimetiletiloksi)karbonil/-amino/-2-metilpropanamid
Dobiven je postupkom opisanim u Primjeru 3, Stupanj B. 3-Hidrospiro/1H-izobenzofuran-1,4'-piperidin)hidroklorid (10 mg, 0.044 mmola) (Bauer i surad. US 3985889) α (R)-//2-//1,1-dimetiletoksi)karbonil/amino/-2,2-dimetil-1-oksoetil/-amino/-1H-indol-3-propionska kiselina (20 mg, 0.051 mmola), HOBT (1 ekvivalent), N-metilmorfolin (0.01 ml, 0.093 mmola) i EDC (20 mg, 0.10 mmola). Reakcijsko vrijeme: 5 sati. Prinos: 21 mg (81%).
Proizvod egzistira kao smjesa dva konformera (1:1): (1H NMR CDCl3): δ 8.096 (s, 1H0, 7.689 (t, 1H), 7.341 (d, 1H), 7.244-6.611 (m, 6H), 5.288-5.202 (m, 1/2H), 4.945 (širok s, 1/2 H), 4.161 (d, 1/2 H), 4.003 (d, 1/2 H), 3.338 (d, 1/2H), 3.280-3.115 (m, 2 H), 3.005-2.861 (m, 1H), 2.751 (d, 1/2 H), 2.416 (d, 1/2 H), 1.787-1.549 (m, 3 1/2 H), 1.491, 1.461, 1.421, 1.410 (4s, 12H), 1.281-1.212 (m, sH), 0.857 (t, 6H).
FAB-MS izračunato za C32H40N4O5 560; nađeno 561 (M+H, 33%).
Stupanj B: N-/1(R)-/(3-hidrospiro/1H-izobenzofuran-1,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Dobiven je postupkom opisanim u Primjeru 3, Stupanj C. Intermedijar iz prethodnog Stupnja (20 mg, 0.04 mmola) i metanol (3 ml). Reakcijsko vrijeme: 1 sat. Prinos: 18.2 mg (93.5%).
1H NMR (400 MHz, CD3OD): Proizvod egzistira kao smjesa dva konformera (1:1): δ 7.621-6.568 (m, 8H), 5.198-5.136 (m, 1H), skriven 4.856 (širok s, 1H), 4.098-4.045 (m, 1H), 3.611-3.499 (m, 1H), 3.348-3.110 (m, 5 1/2 H), 2.987-2.903 (m, 2 1/2 H), 2.618 (d, 1/2 H), 2.508 (d, 1/2 H), 1.691-1.473 (m, 8H), 1.271 (širok s, 2 1/2 H), 0.081-0.006 (m, 1/2 H).
FAB-MS izračunato za C27H32N4O3 460; nađeno 461 (M+H 96%).
PRIMJER 6
N-/1(R)-/(3,4-dihidro-6-metil-4-oksospiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stupanj A: N-/1(R)-/(3,4-dihidro-6-metil-4-oksospiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-//(1,1-dimetiletiloksi)-karbonil/amino/-2-metilpropanamid
Dobiven je postupkom opisanim u Primjeru 3, Stupanj B. 3,4-Dihidro-6-metilspiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-4-on hidroklorid (20 mg, 0.058 mmola), (Hashigaki i surad., Chem. Pharm. Bull. 32 str. 3561-3568 (1984)) α (R)-//(2-//(1,1-dimetiletoksi)karbonil/amino/-2,2-dimetil-1-oksoetil/-amino/-1H-indol-3-propionska kiselina) (32 mg, 0.082 mmola), HOBT (1 ekvivalent), N-metil morfolin (0.03 ml, 0.28 mmola), i EDC (40 mg, 0.21 mmola).
Reakcijsko vrijeme: 8 sati. Prinos: 34 mg (86%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3): Proizvod egzistira kao smjesa dva konformera (2:1): δ 8.154 (s, 2/3 H), 8.088 (s, 1/3 H), 7.626 (d, 2/3 H), 7.591-7.060 (m, 6H), 6.725-6.688 (m, 2/3 H), 5.265-5.168 (m, 2/3 H), 4.985-4.900 (m, 2/3 H), 4.289-4.178 (m, 2/3 H), 3.469 (s, 2/3 H), 3.229-3.064 (m, 2 2/3 H), 2.730 (t, 2/3 H), 2.562 (s, 2 1/3 H), 2.251 (d, 2 1/3 H), 2.158 (d, 2/3 H), 2.068 (d, 2/3 H), 1.680-1.541 (m, 3H), 1.502, 1.475, 1.454, 1.427, 1.402 (5s, 15 H), 1.292-1.226 (m, 3H), 0.616-0.532 (m, 1/3 H), -0.495, -0.590 (m, 1/3 H).
FAB-MS izračunato za C34H42N4O6 602; nađeno 603. (M+H, 37%).
Stupanj B: N-/1(R)-/(3,4-dihidro-6-metil-4-oksospiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Dobiven je postupkom opisanim u Primjeru 3, Stupanj C.
Intermedijar iz prethodnog Stupnja (20 mg, 0.029 mmola) i metanol (3 ml). Reakcijsko vrijeme: 3 sata. Prinos: 17.5 mg (96.5%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3): Proizvod egzistira kao smjesa dva konformera (2:1): δ 7.550-6.768 (m, 7 1/3 H), 5.089-5.016 (m, 2H), skriven 4.872-4.679 (m, 1H), 4.144-4.093 (m, 1H), 3.569-3.485 (m, 1H), 3.321-3.081 (m, 2 1/3 H), 2.716-2.600 (m, 1 1/3 H), 2.253, 2.236, 2.222, 2.196, 2.190, 2.155 (6 s, 4H), 1.569, 1.541, 1.475 (3 s, 7H0, 1.388-1.237 (m, 3 2/3 H), 0.881-0.808 (m, 2H), 0.434-0.420 (m, 2/3 H), 0.427-0.436 (m, 2/3 H).
FAB-MS izračunato za C29H34N4O4 502; nađeno 503 (M+H, 97%).
PRIMJER 7
N-/1(R)-/(3,4-dihidro-4-oksospiro/2H-1-benzopiran-2,4'piperidin/-1'-il)karbonil/-4-fenilbutil-2-amino-2-metil-propanamid hidroklorid
Stupanj A: Fenilmetil estar α (R)-//2-//(1,1-dimetil-etiloksi)karbonil/amino/-2,2-dimetil-1-okso-etil/amino-4-
fenilbuterne kiseline
Otopina u diklormetanu 2(R)-amino-4-fenilbuterne kiseline, fenilmetil estra, soli toluolsulfonske kiseline (6.0 g, 13 mmola) ekstrahira se sa razblaženom otopinom natrijevog hidroksida. Organski sloj se suši preko MgSO4 i uparava, pri čemu se dobija ostatak. U otopinu ostatka, N-terc-butiloksikarbonil-a-metilalanina (3.21 g, 15.8 mmola), HOBT (1.7 g, 13 mmola) u diklormetanu, dodaje se EDC (5.1 g, 26 mmola) i smjesa se miješa preko noći na sobnoj temperaturi. Smjesa se tada sipa u smjesu slane otopine i 3 N HCl i ekstrahira se sa etil acetatom. Organski ekstrakt se suši, uparava i prečišćuje "fleš" kromatografijom, eluiranjem sa 40% etil acetata u heksanu, pri čemu se dobija željeni proizvod (5.47 g,91%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.34-7.07 (m, 10 H), 5.15 (d, JAB=12 Hz, 1H), 5.08 (d, JAB=12 Hz, 1H), 4.86 (širok s, 1H), 4.67-4.62 (m, 1H), 2.61-2.53 (m, 2H), 2.18-2.14 (m, 1H), 2.01-1.96 (m, 1H), 1.47 (s, 3H), 1.43 (s, 3H), 1.41 (s, 9 H).
Stupanj B: (R)-//2-//(1,1-dimetiletiloksi)karbonil/-amino/-2,2-dimetil-1-oksoetil/amino/-4-fenil-buterna kiselina
Intermedijar iz prethodnog Stupnja (5.37 g, 11.8 mmola) hidrogenizira se na sobnoj temperaturi i 1 atm. H2 upotrebljavajući 10% paladija na ugljenu kao katalizator (0.5 g) u toku 2 sata. Katalizator se filtrira kroz celit i uparava se pri čemu se dobija naslovni spoj (4.22 g, 100%).
1H NMR (200 MHz, CD3OD): δ 7.804-7.143 (m, 5H), 4.402-4.359 (m, 1H), 2.672 (dt, 2 Hz, 6 Hz, 2 H), 2.126-2.004(m, 2H0, 1.483, 1.444 (2s, 5H0, 1.423 (s, 9H), 1.412 (s, 3H).
Stupanj C: N-/1(R)-/(3,4-dihidro-4-oksospiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-4-fenil-butil-2-//(1,1-dimetiletiloksi)karbonil/amino/-2-metilpropanamid
Otopina spiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-4(3H)-ona (20 mg, 0.0776) i intermedijara iz prethodnog Stupnja (31 mg, 0.085 mmola) u diklormetanu ohladi se na 0ºC i zatim se dodaje HOBT (1 ekvivalent), N-metilmorfolin (0.1 ml, 0.90 mmola) i EDC (33 mg, 0.17 mmola). Reakcijska smjesa se miješa na sobnoj temperaturi 3 sata, sve dok se ne odredi pomoću TLC analize da je reakcija završena. Otopina se tada pere sa zasićenom otopinom natrijevog klorida i suši preko anhidriranog magnezijevog sulfata. Otopina se tada filtrira i koncentrira. Prečišćavanjem silika gel kromatografijom dobija se naslovni spoj (41.6 mg, 95.5%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3): Proizvod egzistira kao smjesa dva konformera (1:1): δ 7.853-6.925 (m, 9H), 4.936-4.868 (m, 2H), 4.355-4.265 (mt, 1H), 3.605-3.565 (m, 1/2H), 3.388-3.318 (m, 2H), 3.022-2.965 (m, 1H), 2.686-2.608 (m, 3H), 2.067-1.948 (m, 2 1/2 H), 1.871-1.810 (m, 1H), 1.580 (širok s, 2H), 1.503, 1.488, 1.455, 1.411, 1.403 (5s, 15H), 1.292-1.227 (m, 2H).
Stupanj D: N-/1(R)-/(3,4-dihidro-4-oksospiro/2H-1-benzopiran 2,4'-piperidin-1'-il)karbonil-4-fenil-butil-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Otopina intermedijara iz prethodnog Stupnja (40 mg, 0.071 mmola) u etil acetatu ohladi se na 0ºC. Zatim se u smjesu uvodi u toku 2 minuta plinski klorovbodik. Reakcije se mješaju 15 minuta, sve dok TLC ne pokaže da je reakcija završena. Otopina se koncentrira i hidrokloridna sol (33.8 mg, 95.5%) se upotrebljava bez prečišćavanja.
1H NMR (400 MHz, CD3O): Proizvod egzistira kao smjesa dva konformera (1:1): δ 8.271-8.229 (m, 1H), 7.799 (dd, 1 3/4 Hz, 7.84 Hz, 1H), 7.545 (q, 1H), 7.289-7.006 (m, 7H), 4.737-4.703 (m, 1H), 4.277 (d, 1/2 H), 4.186 (d, 1/2 H), 3.555-3.292 (m, 1 1/2 H), 3.187-3.068 (m, 1H), 2.809-2.724 (2m, 2H), 2.633-2.563 (m, 1H), 2.085-1.927 (m, 3 1/2 H), 1.645, 1.639, 1.616 (3s, 6H), 1.677-1.603 (m, 3H), 1.316-1.279 (m, 2H).
FAB-MS izračunato za C27H33N3O4 463; nađeno 464 (M+H, 54%).
PRIMJER 8
N-/1(R)-/(3,4-dihidro-4-oksospiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)-karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stupanj A: N-/1(R)-/3,4-dihidro-4-oksospiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-//(1,1-dimetiletiloksi)-karbonil/amino/-2-metilpropanamid
Otopina spiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-4(3H)-ona (20 mg, 0.776 i α (R)-//2-//(1,1-dimetiletiletiloksi)-karbonil/amino/-2,2-dimetil-1-oksoetil/amino/-3-(fenilmetiloksi)-3-propionske kiseline (32 mg, 0.085 mmola) u diklormetanu ohladi se na 0ºC i zatim se dodaje HOBT (1 ekvivalent), N-metilmorfolin (0.1 ml, 0.90 mmola) i EDC (33 mg, 0.171 mmola). Reakcijska smjesa se miješa na sobnoj temperaturi 4 sata sve dok se pomoću PLC analize ne utvrdi da je reakcija završena. Otopina se pere sa zasićenom otopinom natrijevog klorida i suši se preko anhidriranog magnezijevog sulfata. Otopina se tada filtrira i koncentrira. Prečišćavanjem silika gel kromatografijom dobija se naslovni spoj (40.8 mg, 91%).
FAB-MS izračunato za C32H41N3O7 579; nađeno 580 (M+H, 23%); /nađeno 480 (M+H-100, 57%) gubitak t-Boc zaštitne grupe/.
Stupanj B: N-/1(R)-/(3,4-dihidro-4-oksospiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Dobiven je postupkom opisanim u Primjeru 3, stupanj D. Intermedijar iz prethodnog Stupnja (35 mg, 0.061 mmola) i etil acetat (10 ml). Reakcijsko vrijeme: 1 sat. Prinos: 30.2 mg (97%).
1H NMR (400 Mhz, CD3OD): Proizvod egzistira kao smjesa dva konformera (1:1): δ�7.800-7292- (m, 1H), 7.533-7.578 (m, 1H), 7.395-7.285 (m, 5H), 7.088-7.015 (m, 2H), 5.551-5.107 (m, 1H), skriven 4.921-4.816 (m, 1H), 4.535-4.518 (2s, 1 1/2 H), 4.295 (d, 1H), 3.911-3.803 (m, 1H), 3.717-3.703 (2s, 1 1/2 H), 3.499-3.400 (m, 1H), 3.309-3.291 (4s, 3 1/2 H), 3.211-3.051 (m, 1H), 2.789 (q, 1/2 H), 2.633-2.513 (AB q, 1H), 2.060 (t, 1H), 1.897 (d, 1/2 H), 1.821-1.725 (m, 1/2 H), 1.626-1.567 (6s, 6H), 1.564-1.410 (m, 1/2 H), 1.301 (širok s, 1 1/2 H).
FAB-MS izračunato za C27H33N3O5 479; nađeno 480 (M+H, 100%).
PRIMJER 9
N-/1(R)-/(6-klor-3H-4-oksospiro/1H-hinazolin-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stupanj A: N-/1(R)-/(6-klor-3H-4-oksospiro/1H-hinazolin-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-)etil/-2-//(1,1-dimetiletiloksi)karbonil/-amino/-2-metilpropan amid
Dobiven je postupkom opisanim u Primjeru 3, Stupanj B. 6-Klorospiro-piperidin-4,2(1'H)-hinazolin)-4-(3H)-on hidroklorid (50 mg, 0.17 mmola), α (R)-//2-//(1,1-dimetil-etoksi)karbonil/amino/-2,2-dimetil-1-oksoetil/amino/-1H-indol-3-propionska kiselina (81 mg, 0.21 mmola), HOBT (1 ekvivalent), N-metil morfolin (1 ekvivalent), i EDC (80 mg, 0.42 mmola). Reakcijsko vrijeme: 3 sata. Prinos 64.5 mg (60%).
FAB-MS (izračunato za C32H39N6O5Cl 623; nađeno 624 (M+H, 29%).
Stupanj B: -/1(R)-/(6-klor-3H-4-oksospiro/1H-hinazolin-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Dobiven je postupkom opisanim u Primjeru 7, Stupanj D. Intermedijar iz prethodnog Stupnja (50 mg, 0.08 mmola). Reakcijsko vrijeme: 1 sat. Prinos: 40 mg (89.5%).
FAB-MS izračunato za C27H31N6O3Cl 523; nađeno 523 (M+H, 71%).
PRIMJER 10
N-/1(R)-/(1,4-dihidro-4-fenil-1-oksospiro/3H-2-benzopiran-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stupanj A: 1,4-Dihidro-4-fenilspiro(3H-2-benzopiran-3,4'-piperidin)-1-on
Dobiven je postupkom opisanim u Primjeru 3, Stupanj A iz 1'-benzil-1,4-dihidro-4-fenilspiro(3H-2-benzopiran-3,4'-piperidin-1-on hidroklorida, (8 mg, 0.019 mmola) i etanola (5 ml). Reakcijsko vrijeme: 45 minuta. Prinos: 5.5 mg (98.5%).
FAB-MS izračunato za C19H19NO2 293; nađeno 294 (M+H, 93%).
Stupanj B: N-/1(R)-/(1,4-dihidro-4-fenil-1-oksospiro/3H-2-benzopiran-3,4'-piperidin/-1'-il)-karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-//(1,1-dimetiletiloksi)karbonil/amino/-2-metilpropanamid
Dobiven je postupkom opisanim u Primjeru 3., Stupanj B. Intermedijar iz prethodnog Stupnja (5 mg, 0.017 mmola), α /R(-//2-//(1,1-dimetiletoksi)karbonil/amino/-2,2-dimetil-1oksoetil/amino/-1H-indol-3-propionska kiselina (12 mg, 0.030 mmola), HOBT (1 ekvivalent), N-metil morfolin (1 ekvivalent), i EDC (12 mg, 0.060 mmola). Reakcijsko vrijeme: 5 sati.
Prinos: 9.2 mg (86%).
1H NMR (400 MHz, CD3OD): Proizvod egzistira kao smjesa dva konformera (1:1): δ 8.185-8.072 (m, 1 1/2 H), 7.885 (s, 1/2 H), 7.710-6.813 (m, 12H), 5.331-5.309 (m, 1/2 H), 5.198-5.111 (m, 1/2 H), 4.710-4.605 (m, 1/2 H), 4.300-4.235 (m, 12H), 3.876 (d, 1/2 H), 3.719-3.617 (m, 1H), 3.355-3.046 (m, 1 1/2 H), 2.746 (q, 1/2 H), 2.006-1.960 (m, 1H), 1.678-1.574 (m, 2H), 1.438-1.368 (m, 6H), 1.257, 1.240, 1.227, 1.208, 1.186 (5s, 5H).
Stupanj C: N-/1(R)-/(1,4-dihidro-4-fenil-1-oksospiro/3H-2-benzopiran-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Dobiven je postupkom opisanim u Primjeru 7, Stupanj D. Intermedijar iz prethodnog Stupnja (9 mg, 0.015 mmola) i etil acetat (10 ml). Reakcijsko vrijeme: 1 sat. Prinos: 8 mg (97%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3): Proizvod egzistira kao smjesa dva konformera (2:1); δ 8.347-8.333 (m, 1H), 8.043 (t, 1/2 H), 7.662-6.869 (m, 12 1/2 H), 5.355-5.315 (m, 1/2 H), 5.108-5.061 (m, 1/2 H), skriven 4.897-4.768 (m, 1/2 H), 4.174-4.103 (m, 1/2 H), 3.717-3.526 (m, 1H), 3.387-3.237 (m, 2H), 3.179-3.067 (m, 1H), 2.660 (q, 1/2H), 2.044-1.981 (m, 1H), 1.655-1.212 (m, 11 H), 0.964-0.820 (m, 2 1/2 H), 0.575-0.423 (m, 1/2 H), -0.271- -0.448 (m, 1/2 H).
FAB-MS izračunato za C34H36N4O4 564; nađeno 565 (M+H, 25%).
PRIMJER 11
N-/1(R)-/(3,4-dihidro-4-oksospiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stupanj A: N-/1(R)-/(3,4-dihidro-4-oksospiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-//(1,1-dimetiletiloksi)karbonil/-amino/-2-metilpropanamid
Ovaj intermedijar je dobijen iz α (R)-//2-//(1,1-dimetiletiletoksi)karbonil/amino/-2,2-dimetil-1-oksoetil/-amino/-1H-indol-3-propionske kiseline (903 mg, 2.3 mmola) i spiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-4(3H)-on hidroklorida (535 mg, 2.11 mmola) (Elliott J. i surad., J. Med. Chem. 1992, 35, 3973-3976) postupkom opisanim u Primjeru 25, Stupanj A (1.25 g, 100%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3): spoj egzistira kao smjesa konformera (odnos 2:1):
δ 8.42, 8.31 (2s, 1H), 7.79, 7.75 (2 dd, 1.6 Hz, 7.8 Hz, 1H), 7.66, 7.56 (2d, 8.0 Hz, 7.6 Hz, 1H), 7.47-6.78 (m, 8H), 5.37-5.15 (m, 1H), 4.98, 4.94 (2 širok s, 1H), 4.24, 4.18 (2 širok d, 1H), 3.40, 3.32 (2 širok d, 2H), 3.23-3.02 (m, 3H), 2.73 (dt, 3 Hz, 13 Hz, 1H), 2.47 (d, 2 Hz, 1/3 H), 2.17 (d, 16.6 Hz, 2/3 H), 2.08 (d, 16.7 Hz, 2/3 H), 1.84 (širok s, 2H), 1.70-1.60 (širok dd, 1H), 1.3-1.2 (širok dd, 1H), 0.56 (dt, 4.6, 13.8 Hz, 2/3 H), -0.55 (dt, 13.8 Hz, 2/3 H).
FAB-MS: izračunato za C33H40N4O6, 588; nađeno 595 (M+Li, 100%).
Stupanj B: N-/1(R)-/(3,4-dihidro-4-oksospiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
U ootpinu intermedijara dobijenog u Stupnju A (1.0 g, 1.7 mmola) u metanolu (5 ml), koji se miješa, dodaje se koncentrirana klorovodična kiselina (5 ml). Reakcijska smjesa se miješa na sobnoj temperaturi jedan sat i dodaje se 20 ml toluola i smjesa se uparava u vakuumu. Ovaj postupak se ponavlja dva puta, pri čemu se dobija naslovni spoj (0.87 g, 98%).
1H NMR (400 MHz, CD3OD): spoj egzistira kao smjesa konformera (odnos 2:1): δ 7.76-6.90 (m, 10 H), 5.11 (dd, 5.11 Hz, 1H), 4.16, 4.11 (2 td, 2.0 Hz, 14 Hz, 1H), 3.60 3.33 (2 md, 14 Hz, 1 H9, 3.25-3.10 (m, 2H), 2.92-2.67 (m, 2H), 2.30-2.17 (AB, koncentrirano na dužini 23, 16.7 Hz, 2H), 2.85-2.80 (širok d, 1/3 H), 1.60, 1.59 (2s, 6H), 1.70-1.50 (m, skriven), 1.40-1.0, md, 1H), 0.47 (dt, 5.5, 13.5 Hz, 2/3 H), -0.38 (dt, 5.5, 13.5 Hz, 2/3 Hz).
PRIMJER 11A
N-/1(R)-/(3,4-dihidro-4-(RS)-hidroksispiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metil-propanamid
U otopinu naslovnog spoja iz Primjera 11 (55 mg,0.09 mmola) u metanolu (5 ml), koji se miješa na 0ºC se dodaje natrijev borhidrid (16 mg, 0.4 mmola) u nekoliko obroka. Poslije miješanja na 0ºC 30 minuta smjesa se uparava do suha i otapa u diklormetanu i prečišćuje se "fleš" kromatografijom na koloni, eluiranjem sa 10% metanola u diklormetanu, pri čemu se dobija naslovni spoj (35 mg, 78%).
1H NMR (400 MHz, CD3OD): spoj egzistira kao smjesa dva dijastereoizomera (1:1), a svaki izomer egzistira kao dva konformera (odnos 2:1): δ 7.89-6.66 (m, 9H), 5.14-5.06 (m, 1H), 4.52-4.45 (2 dd, 1H), 4.22-4.10 (2 md, 1H), 3.58-3.44 (2 md, 1H), 3.25-3.14 (m, 2H), 3.10-2.59 (4 dt, 1H), 2.02 (dd, 6.2, 14.7 Hz, 1/3 H), 1.79-1.74 (dd, 1/3 H), 1.60-1.40 (m, 3H), 1.37, 1.31, 1.28, 1.28, 1.26 (4 s, 6H), 1.3-1.05 (m, skriven), 0.71-0.49 (2 dt, 5.6, 13.5 Hz, 2/3 H), -0.20, -0.47 (2 dt, 4.6, 13.5 Hz, 2/3 H).
FAB-MS: izračunato za C28H34N4O4, 490; nađeno 491 (M+H, 100%).
PRIMJER 12
N-/1(R)-/(3,4-dihidrospiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stupanj A: 3,4-Dihidrospiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/
U otopinu spiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin-4(3H)-on hidroklorida (53 mg, 0.21 mmola) u metanolu (5 ml) koji se miješa na 0º, dodaje se u nekoliko obroka natrijev borhidrid (38 mg, 1 mmola). Poslije 30 minuta smjesa se uparava i zatim se tretira sa koncentriranom klorovodičnom kiselinom (2 ml) 30 minuta. Uparavanjem se dobija ostatak koj ise hidrogenizira sa paladijem na ugljenu (10%, 10 mg), H2 (1 atm) u etanolu dva sata. Filtracijom da bi se uklonio katalizator dobija se sirovi intermedijar (89 mg) koji se upotrebljava bez daljnjeg prečišćavanja.
1H NMR (400 MHz, CD3OD): 7.07 (javlja se kao d, 5 Hz, 2H), 6.84 javlja se kao t, 7 Hz, 2H), 7.07-7.08 (m, 4H), 2.82 (t, 7 Hz, 2H), 2.02 (širok d, 14.5 Hz, 2H), 1.90-1.85 (m, 4H).
EI-MS: izračunato za C13H17NO, 203; nađeno 203 (M+, 45%).
Stupanj B: N-/1(R)-/(3,4-dihidrospiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-//1,1-dimetiletiloksi)karbonil/-amino/-2-metilpropanamid
Ovaj intermedijar je dobijen iz proizvoda iz Stupnja A i α (R)-//2-//(1,1-dimetiletoksi)karbonil/amino/-2,2-dimetil-1-oksoetil/amino/-1H-indol-3-propionske kiseline radeći prema standardnim postupcima kuplovanja peptida.
1H NMR (400 MHz, CDCl3): spoj egzistira kao smjesa konformera (odnos 2:1):
δ 8.04, 8.02 (2s, 1H), 7.70, 7.61 (2d, 8 Hz, 1 H), 7.49-6.66 (m, 1H), 4.92 (širok s, 1H), 4.30-4.20 (m, 1H), 3.4-3.1 (m, 4H), 2.85-2.45 (m, 3H), 1.68 (t, 7.6 Hz, 1H), 1.49, 1.45, 1.44,1.43, 1.41 (5 s, 12 H), 1.30-1.21 (m, 3H), 1.11-1.07 (dd, 2.5, 14 Hz, 1/3 H), 0.68 (dt, 4.5 Hz, 13 Hz, 1/3 H), -0.33- -0.43 (dt, 1/3 H).
FAB-MS: izračunato za C33H42N4O5, 574; nađeno 575 (M+H, 35%).
Stupanj C: N-/1(R)-/(3,4-dihidrospiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Naslovni spoj je dobijen iz intermedijara u Stupnju B prema postupku opisanom u Primjeru 11, Stupanj B. (90%).
1H NMR (400 MHz, CD3OD): spoj egzistira kao smjesa konformera (odnos 2:1): δ 8.31-8.21 (2 d, 6.6 Hz, 2/3 H), 7.58, 7.52 (2 d, 7.8 Hz, 1H), 7.37 (d, 8.2 Hz, 1H), 7.15-6.60 (m, 6 1/3 H), 5.17-5.13 (m, 1H), 4.14 (širok d, 13.2 Hz, 1H), 3.35-3.10 (m, 3H), 2.90-2.45 (m, 3 H), 1.70 (t, 6.9 Hz, 1H), 1.60 (s, 6H), 1.60-1.40 (m, skriven), 1.40-1.20 (m, 2 H), 1.11 (širok d, 12.7 Hz, 2/3 H), 0.57 (dt, 4.3, 13 Hz, 2/3 H), -0.31 (dt, 4.3, 13, 2/3 H).
FAB-MS: izračunato za C28H34N4O3, 474; nađeno 475 (M+H, 60%).
PRIMJER 13
N-/1(R)-/3,4-dihidro-6-metansulfonilamino-4-okso-spiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Naslovni spoj je dobijen iz α (R)-//2-//(1,1-dimetiletoksi)karbonil/amino/02,2-dimetil-1-oksoetil/amino/-1H-indol-3-propionska kiselina i 3,4-dihidro-6-metansulfonilamino-4-okso-spiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidina/ radeći prema postupcima opisanim u Primjeru 10, Stupnjevi A i B.
N-/1(R)-/(3,4-dihidro-6-metansulfonilamino-4-okso--spiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)-etil/-2-//(1,1-dimetiletiloksi)karbonil/amino/-2-metilpropanamid
1H NMR (400 MHz, CDCl3) spoj egzistira kao smjesa konformera (odnos 2:1): δ 8.60, 8.36 (2 širok s, 1H), 7.63-6.81 (m, 8H), 5.20 (širok s, 1H), 5.10-.502 (širok m, 1H), 3.45-3.30 (širok m, 1H), 3.25-3.10 (širok m, 2H), 2.97, 2.95 (2s, 3H), 2.75-2.56 (m, 1H), 2.28 (veoma širok s, 1H), 2.18 (d, 16.6 Hz, 1H), 2.05 (d, 16.6 Hz, 1H), 1.86-1.45 (m skriven), 1.51, 1.46 1.44, 1.43, 1.42, 1.39 (6 s, 12 H), 1.30-1.20 (m, 2H0, 0.55-0.45 (m, 2/3 H), -0.55- -0.65 (m, 2/3 H0.
FAB-MS: izračunato za C34H43N5O8S, 681; nađeno 688 (M+Li, 40%).
N-/1(R)-/(3,4-dihidro-6-metansulfonilamino-4-okso-spiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid.
1H NMR (400 MHz, CD3OD): spoj egzistira kao smjesa konformera (odnos 2:1): δ 7.63-6.92 (m, 8H), 5.14 5.08 (m, 1H), 4.18-4.08 (2 md, 1H), 3.62-3.51 (2 md, 1H), 3.25-3.10 (m, 2H), 2.91, 2.89 (2 s, 3H), 2.78-2.67 (2 dd, 2Hz, 15 Hz, 2H), 2.27 (d, 16.7 Hz, 1H), 2,19 (d, 16.6 Hz, 1H), 1.86-1.80 (m, 1/3 H), 1.80-1.50 (m, skriven), 1.60, 1.59, 1.48 (3s, 6 H), 1.40-1.30 (m, 1H), 0.47 (dt, 4.8 Hz, 13 Hz, 2/3 H), -0.39 (dt, 4.8 Hz, 13 Hz, 2/3 H).
FAB-MS: izračunato za C29H35N5O6S, 581; nađeno 582 (M+H, 75%).
PRIMJER 14
N-/1(R)-/(3,4-dihidro-4(RS)-hidroksi-6-metansulfonilaminospiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid
Naslovni spoj je dobijen iz naslovnog spoja iz Primjera 13 prema postupku opisanom u Primjeru 11A.
1H NMR (400 MHz, CD3OD): spoj egzistira kao smjesa 2 dijastereoizomera (1:1) i svaki izomer egzistira kao dva konformera: δ 7.62-7.50 (m, 1H), 7.42-7.29 (m, 2H), 7.17-6.98 (m, 4H), 6.68 (d, 8.7 Hz, 1H), 5.15-5.05 (m, 1H), 4.75-4.65 (m, 1/3 H), 4.57 (dd, 7 Hz, 9 Hz 1/3 H), 4.44 (dd, 6.5 Hz, 9.0 Hz, 1/3 H), 4.21-4.07 (m, 1H), 3.56-3.44 (m, 1 H), 3.28-3.12 (m, 3H), 3.08-3.01 (m, 2/3 H), 2.89, 2.86 (2 s, 3H), 12.82-2.55 (m, 1H), 2.03 (dd, 6.0 Hz, 13.8 Hz, 1/2 H), 1.86 (dd, 6.0 13.7, 1/2 H), 1.70-1.35 (m, 3 H), 1.33, 1.32, 1.31, 1.28, 1.24 (5s, 6H), 1.33-1.29 (m, skriven), 1.06 (širok d, 13 Hz, 1/3 H), 0.71 (dt, 4.6 Hz, 13 Hz, 1/3 H), 0.49 (dt, 4.6 Hz, 1/3 H), -0.21 (dt, 4.6 Hz, 13 Hz, 1/3 H), -0.49 (dt, 4.6 Hz, 13 Hz, 1/3 H).
FAB-MS: izračunato za C29H37N5O6S, 583; nađeno 584 (M+H, 20%).
PRIMJER 15
N-/1(R)-/(2-acetil-1,2,3,4-tetrahidrospiro/izohinolin-4,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stupanj A: 1,1-dimetiletil estar 1,3-dihidro-1,3-dihidroksispiro/4H-2-benzofuran-4,4'-piperidin/-1'-karboksilne
kiseline
U otopinu 1,1-dimetiletil estra spiro/1H-inden-1,4'-piperidin/-1'-karboksilne kiseline (800 mg, 2.8 mmola) u metanolu (50 ml), koji se miješa na -78ºC, provodi se ozon sve dok otopina ne postane plava. Smjesa se ostavi da stoji na toj temperaturi 20 minuta, a zatim se provjetrava sa dušikom. Dodaje se dimetil sulfid (3 ml) i smjesa se zagrijava do sobne temperature i miješa se dva sata. Uparavanjem otapala dobija se sirovi proizvod (940 mg) koji se upotrebljava bez prečišćavanja.
Stupanj B: 1,1-dimetiletil estar 1,2,3,4-tetrahidrospiro-/izohinolin-4,4'-piperidin/-1'-karboksilne kiseline
Intermedijar iz Stupnja A (100 mg) miješa se umetanolu (2 ml) zasićenom sa amonijakom jedan da i uparava se da bi uklonio amonijak. Ostatak se ponovno otapa u metanolu (3 ml) i dodaje se natrijev cijanoborhidrid (50 mg, višak). Smjesa se miješa preko noći. Uparavanjem i prečišćavanjem dobija se amin.
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.35-6.96 (m, 4H), 4.00 (s, 2H), 3.14
(s, 2H), 3.90 (širok s, 2H), 2.05 (širok s, 2H), 1.95 (širok t, 2H), 0.69 (d, 2H), 1.49 (s, 9 H).
Stupanj C: 1,1-dimetiletil estar 2-acetil-1,2,3,4-tetrahidrospiro/izohinolin-4,4'-piperidin/-1'-karboksilne kiseline
Intermedijar (16 mg) iz Stupnja A se tretira sa piridinom (2 ml) i acet anhidridom (2 ml) 2 sata i reakcijska smjesa se uparava u vakuumu, pri čemu se dobija željeni spoj (12 mg).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, spoj egzistira kao smjesa od 3:1 rotamera): δ 7.36-7.05 (m, 4H), 4.72 (s, 2/4 H), 4.65 (s, 6/4 H), 4.10-4.00 (širok d, 12.8 Hz, 2H)3.85 (širok s, 3/4 H), 3.65 (s, 1/4 H), 3.11 (t, 13.1 Hz, 3/4 H), 3.00 (t, 13.1 Hz, 1/4 H), 2.19 (s, 3/4 H), 2.18 (s, 9/4 H), 2.00-1.80 (m, 2H), 1.65-1.47 (m, 2H, skriven), 1.47 (s, 9/4 H), 1.45 (s, 27/4 H).
Stupanj D: 2-acetil-1,2,3,4-tetrahidrospiro/izohinolin-4,4'-piperidin/
U otopinu intermedijara iz Stupnja C (12 mg) u etil acetatu (5 ml) na 0ºC provjetrava se HCL (plinski) sve dok se ne dobije zasićenje. Poslije 30 minuta, reakcijska smjesa se uparava u vakuumu, pri čemu se dobija željeni intermedijar.
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.47-7.19 (m, 4H), 4.79 (s, 2H), 3.96 (s, 2H), 3.36 (širok d, 6.7 Hz, 2H), 2.30-2.24 (m, 1H), 2.21 (s, 3H0, 1.76 (d, 13 Hz).
FAB-MS: izračunato za C15H20N2O, 244; nađeno 245 (M+1, 100%).
Stupanj E: N-/1(R)-/2-acetil-1,2,3,4-tetrahidrospiro/izohinolin-4,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-//(1,1-dimetiletiloksi)-karbonil/amino/-2-metilpropanamid
Naslovni spoj je dobijen iz intermedijara iz Stupnja D, prema postupcima opisanim prethodno.
PRIMJER 16
N-/1(R)-/1,2-dihidro-1-metilsulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(2',6'-difluorofenilmetiloksi)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stupanj A: Metil α(R)-//2-//(1,1-dimetiletoksi)karbonil/-amino/-2,2-dimetil-1-oksoetilamino/-3/(2',6'-
difluorofenil)metoksipropionska kiselina
Natrijev hidrid bez ulja (dobijen iz 60% uljane disperzije natrijevog hidrida pranjem sa heksanima (3 X), 1.2 g, 30.0 mmola), u obliku suspenzije u 30 ml N,N-dimetilformamida, dodaje se u N-t-butiloksikarbonil-(D)-serin (3.07 g, 15.0 mmola) u 10 ml N,N-dimetilformamida na sobnoj temperaturi. Kada se više ne razvija plin, dodaje se 2,6-difluorobenzil bromid (2.68 g, 12.9 mmola). Poslije 18 sati mješanja na sobnoj temperaturi, u reakcijsku smjesu se dodaje metiljodid (1.0 ml, 16.0 mmola). Smjesa se miješa još 1 sat, i zatim se sipa u vodu, i ekstrahira se sa etil etrom. Organski sloj se pere jedno za drugim sa vodom (5X), slanom otopinom i suši se preko natrijevog sulfata, filtrira i koncentrira. Ostatak se otapa u 20 ml kloroforma i na sobnoj temperaturi se dodaje BOC-α -metilalanin, EDC, HOBT, i Et3N. Poslije 3 sata reakcijska smjesa se izruči u vodu i ekstrahira se sa metilen kloridom.
Organski sloj se suši preko natrijevog sulfata i koncentrira. Naslovni spoj se dobija poslije prečišćavanja kromatografijom (heksan/etil acetat: 3/1), pri čemu se dobija 2.37 g (35%).
1H NMR (300 MHz, CDCl3 smjesa rotamera). 7.27 (m, 1H), 7.02-6.88 (m, 2H), 4.95 (m, 1H), 4.72 (dt, 8, 3 Hz, 1H), 4.58 (široko s, 2 H), 3.90 (m, 1H), 3.78 (s, 1H), 3.69 (s, 3H), 1.48 (s, 3H0, 1.45 (s, 3H), 1.41 (s, 9 H).
Stupanj B: N-/1(R)-/1,2-dihidro-1-metilsulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-/2',6'-difluorofenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metil-propanamid hidroklorid
Otopinu intermedijara dobijenog iz ovog Primjera, Stupanj A (2.37 g, 5.29 mmola) u 30 ml metanola, dodaje se litijev hidroksid (340 mg, 8.1 mmola) u 3 ml vode. Poslije 2 sata mješanja na sobnoj temperaturi, reakcijska smjesa se koncentrira, i zatim se razblažuje sa vodom, ekstrahira se sa etil etrom. Organski sloj se uklanja. Vodeni sloj se zakiseljava sa 1 N klorovodičnom kiselinom do pH = 1.5 i ekstrahira se sa etil etrom (3 X). Organski sloj se suši preko natrijevog sulfata, filtrira i koncentrira, pri čemu se dobiva 2.18 g (95%) kiseline. Naslovni spoj se dobiva iz kiseline (78 mg, 0.18 mmola), i 1,20dihidro-1-metilsulfonilspiro/3H-indol-3,4’-piperidin hidroklorida (50 mg, 0.165 mmola) postupkom opisanim u primjeru 20, Stupanj B (upotreba klorovodika u etil etru umjesto trifluoroctene kiseline), pri čemu se dobiva 48 mg (44%).
1H NMR (400 Mhz, CD3OD smjesa rotamera): 7.39 (m, 2H), 7.22 (m, 1 1/2 H), 7.03 (m, 3 1/2 H), 5.14 (dd, 13, 7 Hz, 1H), 4.66 (d, 16 Hz, 2H), 4.49 (m, 1H), 4.09 (m, 1H), 3.92 (širok s, 2H), 3.76 (m, 2H), 3.25 (m, 1H), 2.97 (s, 3/2 H), 2.96 (s, 3/2 H), 2.87 (m, 1H), 1.95 (m, 1H), 1.76 (m, 3H), 1.61 (s, 3/2 H),
FAB-MS: 565 (M+1).
PRIMJER 17
N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metilsulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-3-cikloheksilpropil/-2-amino-2-metiopropanamid hidroklorid
Stupanj A: t-butiloksikarbonil-(D)-heksahidrohomofenil-alanin
Otopina t-butiloksikarbonil-(D)-homofenilalanina (100 mg, 0.358 mmola) u 1 ml octene kiseline hidrogenizira se preko PtO2 na jednoj atmosferi 16 sati. Smjesa se filtrira kroz Celit i filtrat se koncentrira i dušično destilira sa toluolom.
1H NMR (400 MHz, CDCl3): 5.03 (d, 8Hz, 1H), 4.22 (m, 1H0, 1.82 (m, 1H), 1.64 (m, 6H), 1.41 (s, 9H), 1.20 (m, 6H), 0.84 (m, 2H).
Stupanj B: Benzil α (R)-//2-//(1,1-dimetiletoksi)karbonil/-amino/-2,2-dimetil-1-oksoetil/amino/-4-
cikloheksilbuterna kiselina
Otopina BOD-D-homafenilalanina u octenoj kiselini hidrogenizira se preko PtO2 na jednoj atmosferi 16 sati. Smjesa se filtrira kroz celit i koncentrira. U ovaj ostatak (44 mg) u 15 ml DMF dodaje se benzil bromid (198 ml) i K2CO3 (970 mg) na sobnoj temperaturi. Poslije mješanja preko noći, smjesa se sipa u 200 ml etra i pera se sa vodom. Organska faza se suši preko MgSO4, filtrira i koncentrira. Ostatak se prečišćava "fleš" kromatografijom (silika gel, 7.5% etil acetata u heksanima), pri čemu se dobija 534 mg (95%) ovog intermedijara. Otopina 534 mg ovog materijala u 10 ml 1:1 TFA/CH2Cl2 se miješa 1 sat i zatim se oslobodi lakih frakcija i dušično destilira iz toluola. Ostatak se otopi u 10 ml CH2Cl2 i ohladi se na 0ºC. Dodaju se BOC- α -metilalanin (362 mg), EDC, HOBT i NMM i miješa se preko noći. Otopina se sipa u 250 ml etil acetata i pere se jedno za drugim sa 1 N vodenom otopinom NaHSO4, vodom i zasićenom vodenom otopinom NaHCO3. Organska faza se suši, filtrira i koncentrira. Prečišćavanjem pomoću "fleš" kromatografije (silika gel, etil acetat/heksanih) dobija se 638 mg naslovnog spoja.
1H NMR (200 MHz, CDCl3) 8-.95 (m, 3 H), 1.05-1.3 (m,7H), 1.4-1.9 (m, 19H), 2.15 (m, 2H), 4.59 (m, 1H), 4.87 (m, 1H), 5.18 (m, 2H), 6.96 (m, 1H), 7.35 (m, 5 H).
FAB-MS izračunato za C26H40N2O5 460; nađeno 461.5 (M+H).
Stupanj C: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metilsulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-3-cikloheksilpropil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Smjesa 638 mg intermedijara dobijenog u Stupnju B i 100 mg 10% Pd na ugljenu miješa se pod bocom koja sadrži H2 u toku 4 sati. Smjesa se filtrira kroz Celit i filtrat se koncentrira. Jedan dio (87 mg) ovog ostatka se otapa u 2 ml CH2Cl2 i dodaje se 49.8 mg 1,2-dihidro-1-metilsulfonilspiro-/3H-indol-3,4'-piperidin hidroklorida, EDC i HOBT i miješa se 16 sati. Otopina se sipa u 200 ml etil acetata i pere se jedno za drugim sa 1 N vodenom otopinom NaHSO4, vodom i zasićenom otopinom NaHCO3. Organska faza se suši, filtrira i koncentrira. Prečišćavanjem sa "fleš" kromatografijom (silika gel, 60% etil acetata/heksana) dobija se 55 mg (47%) ovog intermedijara. Cijeli ovaj materijal se otapa u 2 ml 1:1 TFA/CH2Cl2 i miješa se 1/2 sata.
Otopina se oslobodi lakih frakcija i ostatak se prečišćuje "fleš2 kromatografijom (silika gel, metanol, NH4OH (vodeni), CH2Cl2). Spoj se tada otapa u CH2Cl2, tretira se sa HClu etru i koncentrira, pri čemu se dobija naslovni spoj.
1H NMR (400 MHz, CD3OD): .93 (m, 2H), 1.15-1.3 (m, 6H0, 1.55-1.8 (m, 1H0, 2.06 (dt, 15.4 Hz, 1H), 2.88 (m, 1H), 2.97 (m, 1H), 3.35 (m, 2H), 3.8-4.1 (m, 3H), 4.51 (m, 1H), 4.83 (m, 1H), 7.06 (q, 7 Hz, 1H), 7.22 (m, 2H), 7.37 (d, 8 Hz, 1 H).
FAB-MS izračunato za C27H42N4O4S 518; nađeno 519.7 (M+H).
PRIMJER 18 (POSTUPAK 1)
N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stupanj A: 1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/hidroklorid
U otopinu 1.20 g (5.8 mmola) 1'-metil-1,2-dihidro-spiro/3H-indol-3,4'-piperidina/ (dobijenog kao što je opisano u H. Ong i surad., J. Med Chem. 1983, 23, 981-986) u 20 ml suhog diklormetana na 0ºC dodaje se trietilamin (0.90 ml, 6.4 mmola) i metansulfonil klorid (0.49 ml, 6.35 mmola) i miješa se 30 minuta. Reakcijska smjesa se sipa u 15 ml zasićene vodene otopine natrijevog bikarbonata i ekstrahira se sa diklormetanom (2 x 10 ml). Spojene organske otopine se peru sa slanom otopinom (20 ml), suše se preko anhidriranog kalijevog karbonata, filtriraju i otapalo se uklanja pod smanjenim pritiskom, pri čemu se dobija 1.44 g derivata metansulfonamida kao svjetlo žuto ulje koje se upotrebljava bez prečišćavanja.
U otopinu ovog gornjeg sirovog proizvoda u 20 ml suhog 1,2-dikloretana na 0ºC dodaje se 1.0 ml (9.30 mmola) 1-kloroetil klorformijata, i zatim se miješa na sobnoj temperaturi 30 minuta i na kraju se refluksira 1 sat. Reakcijska smjesa se koncentrira na približno jednu trećinu zapremnine i zatim se razblažuje sa 20 ml suhog metanola i refluksira se 1.5 sati. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu i koncentrira se na približno jednu polovicu zapremnine. Talog se profiltrira i pere se sa malom zapremninom hladnog metanola. Ovo je dalo preinos od 1.0 g piperidin HCl soli kao bijele čvrste supstance. Filtrat se koncentrira i dodaje se mala zapremnina metanola i zatim etar. Staloženi materijal se filtrira još jednom, pere se sa hladnim metanolom i suši. Dobija se još 0.49 g željenog proizvoda. Ukupan prinos 1.49 g (70%)
1H NMR (CDCl3, 200 MHz): δ 7.43-7.20 (m, 3H), 7.10 (dd, 1H), 3.98 (širok s, 2H), 3.55-3.40 (širok d, 2H), 3.35-3.10 (m, 2H), 2.99 (s, 3H), 2.15 (t, 2H), 2.00 (t, 2H).
Stupanj B: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro-/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-/(1,1-dimettiletoksi)-karbonil/amino-2-metilpropanamid
U 0,35 g (1.15 mmola) (2R)-2-/(1,1-dimetiletoksi)-karbonil/amino-3-/2-(fenilmetiloksi)etil/-1-propionske kiseline u 13 ml diklormetana, dodaje se 1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin hidroklorida (0.325 g, 1.07 mmola), 0.18 ml (1.63 mmola) N-metilmorfolina, 0.159 g (1.18 mmola) 1-hidroksibenztriazola (HOBT) i miješa se 15 minuta. Dodaje se EDC (0.31 g, 1.62 mola) i mješanje se nastavlja 1 sat. Dodaje se dodatnih 60 µl N-metilmorfolina i miješa se 45 minuta. Reakcijska smjesa se izruči u 5 ml vode i organski sloj se odvaja. Organski sloj se pere sa 5 ml 0.5 N vodene otopine klorovodične kiseline i 5 ml zasićene vodene otopine natrijevog bikarbonata. Spojene organske otopine se suše preko anhidriranog magnezijevog sulfata, i koncentriraju se, pri čemu se dobija 0.627 g proizvoda kao žute pjene koji se upotrebljava bez prečišćavanja.
U 0.627 g (1.07 mmola) gornjeg proizvoda u 5 ml diklormetana, dodaje se 1.0 ml trifluoroctene kiseline i miješa se na sobnoj temperaturi 75 minuta. Dodaje se dodatnih 1.00 ml trifluoroctene kiseline i miješa se 10 minuta. Reakcijska smjesa se koncentrira, razblažuje se 5.0 ml diklormetana i pažljivo se zaalkalira sipanjem u 10 ml 10% vodene otopine natrijevog karbonata. Organski sloj se odvaja i vodeni sloj se dalje ekstrahira sa 2 x 15 ml diklormetana. Spojeni organski slojevi se peru sa 5 ml vode, suše se preko kalijevog karbonata, filtrira i koncentrira, pri čemu se dobija 0.486 g amina, kao svjetlo žta pjena, koji se upotrebljava bez prečišćavanja.
U 0.486 g (1.01 mmola) amina u 10 ml diklormetana dodaje se 0.26 g (1.28 mmola) 2-/(1,1-dimetiletoksi)karbonil/-amino-2-metil-propionske kiseline, 0.173 g (1.28 mmola) 1-hidroksibenztriazola (HOBT) i EDC (0.245 g, 1.28 mmola) i miješa se na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcijska smjesa se izruči u 5.0 ml vode i odvoji se organski sloj. Vodeni sloj se ponovno ekstrahira sa 5 ml diklormetana. Spojeni organski slojevi se peru sa 5.0 ml 0.5 N vodene klorovodične kiseline, 5 ml zasićene vodene otopine natrijevog bikarbonata, suše se preko anhidriranog magnezijevog sulfata, i koncentrira se, pri čemu se dobija 0.751 g sirovog proizvoda, kao žuta pjena. Otopina ovog sirovog proizvoda u diklormetanu, kromatografija se na 25 g silika gela i eluira se prvo sa heksanima/acetonom/diklormetanom) 70/25/5), a zatim sa heksanima/acetonom/diklormetanom (65/30/5). Dobija se 0.63 g naslovnog spoja kao bijela čvrsta supstanca.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) spoj egzistira kao 3:2 smjesa rotamera: δ 7.40-7.10 (m, 6H), 7.06 (d, 1/3H), 7.02 (t, 1/3H), 6.90 (t, 1/3H), 6.55 (d, 1/3H), 5.15 (m, 1H), 4.95 (širok s, 1H), 4.63 (širok d, 1/3H), 4.57-4.40 (m, 2 2/3 H), 4.10 (širok d, 1/3H), 4.00 (širok d, 1/3H), 3.82 (t, 1H), 3.78-3.62 (m, 2H), 3.60-3.50 (m, 2H), 3.60-3.50 (m, 1H), 3.04 (q, 1H), 2.87 (s, 1H), 2.86 (s, 2H), 2.80-2.60 (m, 1H), 1.90 (širok s, 1H), 2.85-2.75 (m, 1H), 1.82-1.60 (m, 3H), 1.55-1.45 (m, 1H), 1.45 (s, 4H), 1.42 (s, 2H), 1.39 (s, 9H).
Stupanj C: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/1'-il)karbonil/-2-(fenil-metiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
U 0.637 g (0.101 mmola) intermedijara iz Stupnja B u 5 ml diklormetana, dodaje se 2.5 ml trifluoroctene kiseline i miješa se na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakcijska smjesa se koncentrira do ulja, preuzima seu 10 ml etil acetata i pere se sa 8 ml 10% vodene otopine natrijevog karbonata. vodeni sloj sedalje ekstrahira sa 5 ml etil acetata. Spojene organske otopine se pere sa 10 mlvode, suše se preko magnezijevog sulfata, filtriraju i koncentriraju, pri čemu se dobija 0.512 g slobodne baze, kao bijela pjena.
U 0.512 g slobodne bze u 5 ml etil acetata na 0ºC dodaje se 0.2 ml zasićene klorovodične kiseline u etil acetatu i miješa se 1.5 sati. Bijeli talog se filtrira pod dušikom, pere se sa etrom, i suši se, pri čemu se dobija 0.50 g naslovnog spoja kao bijela čvrsta supstanca.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) Spoj egzistira kao 3:2 smjesa rotamera: δ 7.40-7.28 (m, 4H), 7.25-7.17 (m, 2H), 7.08 (t, 1/3H), 7.00 (t, 1/3H), 6.80 (d, 1/3H), 5.16 (ddd, 1H), 4.60-4.42 (m, 3H), 4.05 (t, 1H), 3.90 (širok s, 2H), 3.83-3.70 (m, 2H),3.30-3.15 (m, 1H), 2.97 (s, 1H), 2.95 (s, 2H), 2.90-2.78 (m, 1H), 1.96 (t, 1/3H), 1.85-1.65 (m, 4H), 1.63 (s, 2H), 1.60 (s, 4H).
PRIMJER 19 (POSTUPAK 2)
N-/1R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stupanj A: Alil estar (2R)-///-2-(1,1-dimetiletoksi)karbonil/-amino/-2,2-dimetil-1-oksoetil/amino-2-(fenil-metoksi)etil/-1-propionske kiseline
Dobiven je iz (2R)-2-/(1,1-dimetiletoksi)karbonil/-amino-3-(fenilmetiloksi)etil-propionske kiseline i alil alkohola izvodeći reakciju kuplovanja u CH2Cl2 u prisustvu EDC i DMAP.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.25 (s, 5H), 5.8 (m, 1H), 5.2 (dd, 2H), 5.0 (širok s, 1H), 4.7 (m, 1H), 4.6 (m, 2H), 4.4 (dd, 2H), 3.9 (dd, 1H), 3.6 (dd, 1H), 1.45 (d, 6H), 1.39 (s, 9H).
Stupanj B: (2R)-///-2-(1,1-dimetiletoksi)karbonil/amino/-2,2-dimetil-1-oksoetil/amino-2-(fenilmetil-oksi)etil)-1-propionska kiselina
U otopinu sirovog intermedijara dobijenog u Stupnju A (6.7 g, 15.9 mmola), tetrakis (trifenilfosfin)-paladija (1.8 g, 0.1 ekvivalent) i trifenil fosfina (1.25 g, 0.3 ekvivalenta), koji se miješa, dodaje se otopina kalija-2-etil haksanoata (35 ml), 0.5 M otopina u EtOAc). Reakcijska smjesa se miješa na sobnoj temperaturi pod atmosferom dušika 1 sat i zatim se razblažuje sa etrom (100 ml) i sipa se u ledenu vodu. Organski sloj se odvoji, a vodena frakcija se zakiseli sa limunskom kiselinom (20%), zatim se ekstrahira sa EtOAc. EtOAc ekstrakti se peru sa slanom otopinom, suše se preko magnezijevog sulfata, filtriraju i uparavaju, pri čemu se dobija naslovni spoj kao čvrsta supstanca.
1H NMR (400 Hz, CD3OD): δ 7.3 (s, 5H), 4.7 (m, 1H), 4.5 (s, 2H), 4.0 (m, 1H), 3.6 (m, 1H), 1.4 (d, 6H), 1.3 (s, 9H).
Stupanj C: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin-1'-il)karbonil/-2-(fenil-metiloksi)etil/-2-/(1,1-dimetil-etoksi)karbonil/-amino-2-metilpropanamid
U otopinu 1.0 g (3.44 mmola) 1-metansulfonilspiro-/indolin-3,4'-piperidin/ hidroklorida, 1.44 g (3.78 mmola) (2R)-//-2-(1,1-dimetiletoksi)karbonil)amino/-2,2-dimetil-1-oksoetil/-amino-2-(fenilmetiloksi)etil-1-propionske kiseline, N-metil morfolina (0.58 ml, 5.20 mmola), i 1-hidroksibenztriazola (HOBT) (0.58 g, 3.78 mmola), u 50 ml diklormetana, dodaje se EDC (1.03 g 5.20 mmola) i miješa se na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakcijska smjesa se razblažuje sa dodatnim 50 ml diklormetana i pere se sa vodenom otopinom natrijevog bikarbonata (50 ml), suši se preko anhidriranog magnezijevog sulfata, filtrira i koncentrira se. "Fleš" kromatografijom (50 g silika gela) sirovog uljanog ostatka, dobija se 2.148 g (90%) željenog materijala kao bezbojne pjene. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) spoj egzistira kao 3:2 smjesa rotamera: δ 7.40-7.10 (m, 6H), 7.06 (d, 1/3H), 7.02 (t, 1/3H), 6.90 (t, 1/3H), 6.55 (d, 1/3H), 5.15 (m, 1H), 4.95 (širok s, 1H), 4.63 (širok d, 1/3H), 4.57-4.40 (m, 2 2/3 H), 4.10 (širok d, 1/3H), 4.00 (širok d, 1/3 H), 3.82 (t, 1H), 3.78-3.62 (m, 2H), 3.60-3.50 (m, 1H), 3.04 (q, 1H), 2.87 (s, 1H), 2.86 (s, 2H), 2.80-2.60 (m, 1H), 1.90 (širok s, 1H), 2.85-2.75 (m, 1H), 1.82-1.60 (m, 3H), 1.55-1.45 (m, 1H), 1.45 (s, 4H), 1.42 (s, 2H), 1.39 (s, 9H).
Stupanj D: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
U otopinu 2.148 g (3.41 mmola) intermedijara iz Stupnja C u 10 ml diklormetana, dodaje se 5 ml trifluoroctene kiseline i miješa se 1 sat. Reakcijska smjesa se koncentrira i zaalkalira sa 100 ml 5% vodene otopine natrijevog karbonata i ekstrahira se sa diklormetanom (3 x 50 ml). Spojene organske otopine se peru sa slanom otopinom (50 ml), suše se preko anhidriranog kalijevog karbonata, filtriraju i koncentriraju, pri čemu se dobija bezbojna pjena. U otopinu ove pjene u 25 ml etil acetata na 0ºC, dodaje se 4 ml 1 M otopina klorovodične kiseline u etil acetatu. Talog se filtrira i pere se prvo sa etil acetatom i zatim sa etil acetatom-etrom (1:1), suši se, pri čemu se dobija 1.79 g (93%) naslovnog spoja kao bezbojna čvrsta supstanca.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) Spoj egzistira kao 3:2 smjesa rotamera: δ 7.40-7.28 (m, 4H), 7.25-7.17 (m, 2H), 7.08 (t, 1/3 H), 7.00 (t, 1/3H), 6.80 (d, 1/3H), 5.16 (ddd, 1H), 4.60-4.42 (m, 3H), 4.05 (t, 1H), 3.90 (širok s, 2H), 3.83-3.70 (m, 2H), 3.30-3.15 (m, 1H), 2.97 (s, 1H), 2.95 (s, 2H), 2.90-2.78 (m, 1H), 1.96 (t, 1/3H), 1.85-1.65 (m, 4H), 1.63 (s, 2H), 1.60 (s, 4H).
PRIMJER 20
N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonil-5-bromspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid trifluoracetat
Stupanj A: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonil-5-brom-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetil-oksi)etil/-2-/(1,1-dimetiletoksi)-karbonil/amino-2-metilpropanamid
U otopinu 300 mg (1.03 mmola) 1-metansulfonilspiro-/3H-indol-3,4'-piperidin/hidroklorida u 5 ml glacijalne octene kiseline, dodaje se 0.28g (2.06 mmola) broma i miješa se na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakcijska smjesa se koncentrira do suha, zaalkalira se sa 10 ml 5% vodene otopine natrijevog karbonata, i ekstrahira se sa diklormetanom (3 x 10 ml). Spojene organske otopine se peru sa slanom otopinom (10 ml), suše se preko anhidriranog kalijevog karbonata, filtriraju i koncentriraju, pri čemu se dobija 0.25 g sirovog proizvoda kao žuto ulje koje se upotrebljava bez prečišćavanja.
Stupanj B:
U otopinu gornjeg sirovog proizvoda u 10 ml diklormetana dodaje se 0.43 g (1.13 mmola) intermedijara iz Primjera 19, Stupanj B, 0.17 g (1.13 mmola) HOBT, i 0.34 g (1.70 mmola) EDC i miješa se na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakcijska smjesa se razblažuje sa 15 ml etra i pere se sa 10% vodenom otopinom limunske kiseline (15 ml), zasićenom otopinom natrijevog bikarbonata (15 ml), suši se preko anhidriranog magnezijevog sulfata, filtrira se i koncentrira, pri čemu se dobija sirovi uljani proizvod. Ovaj ostatak se prečišćuje "fleš" kromatografijom (15 g SiO2; CH2Cl2-aceton (10:1) kao eluent), pri čemu se dobija 0.184 g (26% za dva stupnja) kuplovanog materijala kao bezbojna pjena.
U 0.184 g (0.26 mmola) gornjeg materijala u 2 ml diklormetana dodaje se 2 ml trifluoroctene kiseline i miješa se na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakcijska smjesa se uparava do suha, pri čemu se dobija 0.146 g (93%) naslovnog spoja kao bijela čvrsta supstanca.
FAB-MS: izračunato za C27H34BrN4O5S 608; nađeno 609.5.
PRIMJER 21
N-/1(R)-/(1,2-dihidrospiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)-karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid dihidroklorid
Stupanj A: Spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/
U otopinu 1.0 g (5.0 mmola) 1'-metilspiro/3H-indol-3,4'-piperidina/ (dobijenog kao što je opisano u H. Ong i surad., J. Med. Chem. 1983, 23, 981-986) i 1.0 g sprašenog kalijevog karbonata u 30 ml suhog diklormetana na sobnoj temperaturi dodaje se 0.50 g bromcijana i miješa se 1 sat. Reakcijska smjesa se filtrira kroz sloj celita i pere se sa kloroformom-metanolom (95:5). Filtrat se koncentrira i ostatak se ispere kroz sloj silika gela sa kloroformom-metanolom (95:5) kao eluent. Ovo daje č 1.2 g žutog ulja koje se upotrebljava bez prečišćavanja.
U suspenziju gornjeg spoja u 30 ml suhog DME NA 0ºC, dodaje se 0.30 g litijenog aluminijevog hidrida i zagrije se na sobnu temperaturu i na kraju se refluksira 1 sat. Reakcijska smjesa se ohladi do 0ºC i zaustavlja se reakcija sa 0.30 ml vode, 0.30 ml 15% vodene otopine natrijevog hidroksida, i 0.90 ml vode. Čvrste supstance se filtriraju kroz sloj celita i peru se dobro sa kloroformom-metanolom (10:1). Koncentriranjem filtrata dobija se 0.74 g spoja kao žuta pjena. Ovaj materijal je bio 1:1 smjesa naslovnog spoja i 1'-metil-spiro/3H-indol-3,4'-piperidina/.
Stupanj B: benzil ester (2R)-//-2-//1,1-dimetiletoksi)-karbonil/amino/-2,2-dimetil-1-oksoetil/-amino/-1H-indol-3-propionske kiseline
U 5.0 g (16.5 mmola) komercijalno dostupnog N-t-BOC-D-triptofana u 100 ml kloroforma, dodaje se 1.80 ml (16.5 mmola) benzil alkohola, 0.20 g (1.65 mmola) 4-N,N-dimetilamino pirimidina (DMAP), i 3.20 g EDC i miješa se 16 sati. Reakcijska smjesa se sipa u 100 ml vode i organski sloj se odvaja. Vodeni sloj se dalje ekstrahira sa 2 x 100 ml kloroforma. Spojene organske otopine se peru sa 50 ml 10% vodene otopine limunske kiseline, 100 ml 10% vodene otopine natrijevog bikarbonata, suše se preko anhidriranog magnezijevog sulfata, filtriraju se i koncentriraju, pri čemu se dobija gusto ulje.
U otopinu ovog ulja u 10 ml diklormetana, dodaje se 20 ml trifluoroctene kiseline i miješa se 1 sat. Reakcijska smjesa se koncentrira, zaalkalira se pažljivo sa zasićenom vodenom otopinom natrijevog bikarbonata i ekstrahira se sa kloroformom (2 x 100 ml). Spojene organske otopine se peru sa slanom otopinom (100 ml), suše se preko kalijevog karbonata, filtriraju i koncentriraju, pri čemu se dobija 5.46 g amina kao mrko ulje koje se upotrebljava bez prečišćavanja.
U 5.46 g gornjeg proizvoda u 100 ml kloroforma, dodaje se 3.40 g (22.2 mmola) HOBT, 4.60 g (22.2 mmola N-BOC- α -metil alanina, i 5.32 g (28.0 mmola) EDC i miješa se 16 sati. Reakcijska smjesa se izruči u 100 ml vode i odvaja se organski sloj. Vodeni sloj se dalje ekstrahira sa 2 x 100 ml kloroforma. Spojeni organski spojevi se peru sa 50 ml 10% vodene otopine limunske kiseline, 100 ml 10% vodene otopine natrijevog bikarbonata, suše se preko anhidriranog magnezijevog sulfata, filtriraju i koncentriraju, pri čemu se dobije 6.94 g proizvoda kao gusto ulje. "Fleš" kromatografijom (200 g SiO2) heksan-etil acetat kao eluent) dobija se 4.75 g željenog materijala kao bezbojna pjena.
1H NMR (CDCl3, 200 MHz) δ 8.48 (širok s, 1H), 7.54 (širok d, 1H), 7.38-7.23 (m, 3H), 7.19 (širok d, 2H), 7.15-7.00 (m, 1H), 6.90 (d, 1H), 6.86 (d, 1H), 5.06 (širok s, 2H), 4.95 (ddd, 1H), 3.30 (2dd, 2H), 1.40 (s, 15H).
Stupanj C: (2R)-//-2-//1,1-dimetiletoksi)karbonil/amino/-2,2-dimetil-1-oksoetil/amino/-1-H-indol-3-propionska kiselina
U otopinu 4.75 g materijala iz stupnja B u 100 ml etanola, dodaje se 1.0 g Pd/C i miješa se na sobnoj temperaturi pod bocom H2 18 sati. Katalizator se profiltrira kroz sloj celita i pere se sa etil acetatom. Filtrat se koncentrira, pri čemu se dobija 2.96 g kiseline kao bezbojna pjena.
1H NMR (CDCl3, 200 MHz) δ 8.60 (širok s, 1H), 7.55 (d, 1H), 7.26-6.90 (m, 3H), 6.88 (širok d, 1H), 4.80 (m, 1H0, 3.32 (2dd, 2H), 1.37 (s, 3H), 1.35 (s, 12H).
Stupanj D: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil//-2-(indol-3-il)etil/-2-/(1,1-dimetiletoksi karbonil/amino-2-metilpropanamid
U otopinu 0.122 g (0.542 mmola) 1:1 smjese intermedijara iz Stupnja A i 1'-metil-spiro/3H-indol-3,4'-piperidina/ u 5 ml suhog kloroforma na sobnoj temperaturi dodaje se 0.105 g (0.271 mmola) intermedijara iz Stupnja C, 41 mg (0.271 mmola) HOBT, i 80 mg (0.41 mmola) EDC i miješa se na sobnoj temperaturi 2 sata. Reakcijska smjesa se razblažuje sa 10 ml kloroforma, pere se sa zasićenom vodenom otopinom natrijevog bikarbonata (10 ml) i 10 ml slane otopine, suši se preko anhidriranog kalijevog karbonata, filtrira se i koncentrira. "Fleš" kromatografijom (10 g SiO2 i 2% MeOH-CHCl3) ostatka daje 94 mg željenog proizvoda kao žuta pjena.
Spoj egzistira kao 3:2 smjesa rotamera. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.37 (d, 1/3H), 8.35 (d, 2/3H), 8.19 (d, 1H), 7.72 (d, 2/3H), 7.60 (d,1/3H), 7.38 (d, 2/3H), 7.32 (d, 1/3H), 7.22-7.08 (m, 3H), 7.00 (2t, 1H), 6.93 (d, 1/3H), 6.69 (t, 1H), 6.60 (d, 1/3H), 6.56 (d, 2/3H), 6.50 (d, 2/3H), 5.30-5.15 (m, 1H), 5.00 (širok s, 1H), 4.34 (m, 1H), 3.62-3.50 (m, 1H), 3.30-3.11 (m, 4H), 2.90 (dt, 1H), 2.40 (dt, 1/3H) 1.70-1.55 (m, 1 2/3H), 1.34 (s, 2H), 1.31 (s, 4H), 1.28 (s, 1H), 1.31 (s, 9H), 1.20-1.11 (m, 1H), 0.32 (dt, 1/3H).
Stupanj E: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
U 27.5 mg intermedijara iz Stupnja D, dodaje se 1.0 ml metanola i 1.0 ml koncentrirane klorovodične kiseline i miješa se na sobnoj temperaturi 1 sat.
Reakcijska smjesa se koncentrira, zaalkalira se sa 5 ml 10% vodene otopine natrijevog karbonata, i ekstrahira se sa klorofromom (3 x 5 ml). Spojene organske otopine se peru sa slanom otopinom (10 ml), suše se preko kalijevog karbonata, filtriraju i koncentriraju, pri čemu se dobija gusto ulje. Preparativna TLC (0.50 mm ploča; kloroform-metanol 96:5 + 1% NH4OH) daje 12 mg željenog proizvoda kao čvrsta žuta supstanca.
Spoj egzistira kao 3:2 smjesa rotamera. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.37 (d, 3/H), 8.35 (d, 2/3H), 8.19 (d, 1H), 7.72 (d, 2/3H), 7.60 (d, 1/3H), 7.38 (d, 2/3H), 7.32 (d, 1/3H), 7.22-7.08 (m, 3H), 7.00 (2t, 1H0, 6.93 (d, 1/3H), 6.69 (t, 1H), 6.60 (d, 1/3H), 6.56 (d, 2/3H), 6.50 (d, 2/3H), 5.30-5.15 (m, 1H), 4.34 (m, 1H), 3.62-3.50 (m, 1H), 3.30-3.11 (m, 4H), 2.90 (dt, 1H), 2.40 (dt, 1/3H), 1.70-1.55 (m, 1 2/3H), 1.34 (s, 2H0, 1.31 (s, 4H), 1.28 (s, 1H), 1.20-1.11 (m, 1H), 0.32 (dt, 0 1/3H).
PRIMJER 22
N-/(R)-/(1,2-dihidro-1-metilkarbonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
U 26 mg intermedijara iz Primjera 21, Stupanj D u 1.0 ml 1,2-dikloretana u 55 µl (0.14 mmola) N-metil-morfolina na 0ºC dodaje se 6.6 µl (0.93 mmola) acetil klorida i miješa se 1 sat. Reakcijska smjesa se razblažuje sa 5 ml etra, pere se sa 5 ml 10% vodene otopine limunske kiseline, 5 ml zasićene vodene otopine natrijevog bikarbonata, suši se preko anhidriranog magnezijevog sulfata, filtrira, i koncentrira, pri čemu se dobija svjetlo žuta pjena koja se upotrebljava bez prečišćavanja.
U gornji materijal u 1.0 ml diklormetana, dodaje se 1.0 ml trifluoroctene kiseline i miješa se na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakcijska smjesa se koncentrira, zaalkalira se sa 5 ml 10% vodene otopine natrijevog karbonata, i ekstrahuje se sa kloroformom (3 x 5 ml). Spojene organske otopine se peru sa slanom otopinom (10 ml) suše se preko kalijevog karbonata, filtriraju i koncentriraju se, pri čemu se dobija gusto ulje. U otopinu ovo materijala u 1.0 ml metanola, dodaje se 1.0 ml 4M klorovodične kiseline u dioksanu i koncentrira se do suha, pri čemu se dobija 16 mg naslovnog spoja kao svjetlo žuta čvrsta supstanca.
Spoj egzistira kao 3:2 smjesa rotamera. 1H NMR (CD3OD, 400 MHz δ 8.43 (d, 1H), 8.35 (t, 1H), 7.72 (d, 3/2H), 7.61 (d, 1/3H), 7.40-7.25 (m, 2H), 7.20-7.08 (m, 3H), 7.05-6.95 (m, 2 2/3H), 6.50 (d, 1/3H), 5.25-5.10 (m, 1H), 5.00-4.84 (širok d, 1H), 3.68-3.45 (m, 3H), 3.20 (m, 2H), 2.60-2.48 (m, 1 1/3H), 2.30 (dt, 1/3H), 2.00 (s, 1H), 1.98 (s, 2H), 1.81-1.40 (m, 4H), 1.35 (s, 2H), 1.33 (s, 2H), 1.32 (s, 1H), 1.30 (s, 1H), 1.25-1.15 (m, 1H), 1.10-1.00 (m, 1H), 0.20 (dt, 1/3H).
PRIMJER 23
N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-benzolsulfonilspiro/3H-indol-3,4'piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid
U 26 mg (0.050 mmola) intermedijara iz Primjera 21, Stupanj D u 1.0 ml 1,2-dikloretana i 5µl N-metil morfolina, dodaje se na 0ºC 7.5 µl benzolsulfonil klorida i miješa se 1 sat. Reakcijska smjesa se razblažuje sa 10 ml etra, pere se sa 5 ml 10% vodene otopine limunske kiseline, 5 ml zasićene otopine natrijevog bikarbonata, suši se preko anhidriranog magnezijevog sulfata, filtrira i koncentrira se, pri čemu se dobija 29.8 mg sirovog proizvoda kao svjetlo žuta pjena. U otopinu ovog materijala u 2 ml metanola, dodaje se 1.0 ml konc. klorovodične kiseline i miješa se 1 sat. Otapalo se uklanja pod smanjenim pritiskom, pri čemu se dobija naslovni spoj kao mrka čvrsta supstanca.
Ovaj spoj egzistria kao 3:2 smjesa rotamera. 1H NMR (CDCl3, 400 MHz) d 8.30 (širok s, 1/3H), 8.20 (širok s, 2/3H), 8.05 (širok s, 2/3H), 7.88 (d, 1/3H), 7.72-7.45 (m, 5H), 7.43-7.30 (m, 4H), 7.20-7.05 (m, 2H), 7.00-6.90 (m, 2 2/3H), 6.35 (d, 1/3H), 5.25-5.10 (m, 1H), 4.90 (širok s, 1H), 4.30 (dt, 1H), 4.15 (dt, 1H), 3.95 (dd, 1H), 3.60-3.40 (m, 3H), 3.25-3.20 (m, 2H), 2.90 (dt, 1H), 2.73 (dt, 2 2/3H), 2.35 (m, 1 1/3H), 1.80 (m, 1H), 1.50 (s, 1H), 1.43 (s, 2H), 1.39 (s,3H), 1.30-1.20 (m, 2H), 1.00 (širok d, 1/3H), 0.90-.070 (m, 2H), 0.55 (širok d, 1/3H), 0.48 (dd, 2/3H), -0.90 (dt, 1/3H).
PRIMJER 24
N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
U otopinu 0.258 g (0.50 mmola) intermedijara iz Primjera 21, Stupanj D u 10 ml suhog diklormetana na 0ºC, dodaje se 0.39 ml (1.00 mmola) N-metil morfolina, i 45 µl (0.60 mmola) metansulfo klorida i miješa se 30 minuta.
Reakcija se razblažuje sa 10 ml etra i pere se sa zasićenom otopinom natrijevog bikarbonata (5 ml), slanom otopinom (5 ml), suši se preko anhidriranog magnezijevog sulfata, filtrira, i koncentrira se, pri čemu se dobija proizvod kao svjetlo žuta pjena koja se upotrebljava bez prečišćavanja. U otopinu ovog materijala u 3.0 ml diklormetana, dodaje se 1.0 ml trifluoroctene kiseline i miješa se na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakcijska smjesa se koncentrira, zaalkalira se sa 5 ml 105 vodene otopine natrijevog karbonata, i ekstrahira se sa kloroformom (3 x 5 ml). Spojene organske otopine se peru sa slanom otopinom (10 ml), suše se preko kalijevog karbonata, filtriraju, i koncentriraju, pri čemu se dobija gusto ulje. U otopinu ovog materijala u 3.0 ml metanola, dodaje se 200 µl 4M klorovodične kiseline u dioksanu i koncentrira se do suha, pri čemu se dobija prinos od 98 mg željenog materijala kao svjetlo žuta čvrsta supstanca.
Spoj egzistria kao 3:2 smjesa rotamera. 1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ 8.43 (d, 1H), 8.35 (t,1H), 7.72 (d, 2/3H), 7.61 (d, 1/3H), 7.40-7.25 (m, 2H), 7.20-7.08 (m, 3H), 7.05-6.95 (m, 2 2/3H), 6.50 (d, 1/3H), 5.25-5.10 (m, 1H), 5.00-4.84 (širok d, 1H), 3.68-3.45 (m, 3H), 3.20 (m, 2H), 2.82 (s, 1H), 2.80 (s, 2H)), 2.60-2.48 (m, 1 1/3H), 2.30 (dt, 1/3H), 1.81-1.40 (m, 4H), 1.35 (s, 2H), 1.33 (s, 2H), 1.32 (s, 1H), 1.30 (s, 1H), 1.25-1.15 (m, 1H), 1.10-1.00 (m, 1H), 1.10-1.00 (m, 1H), 0.20 (dt, 1/3H).
PRIMJER 25
N-1(R)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-/3-fenilpropil/-2-amino-2-metil-propanamid hidroklorid
Stupanj A: N-1(R)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-3-fenil-propil/-2-/(1,1-dimetiletoksi)karbonil/amino-2-metilpropanamid
Naslovni spoj se dobija iz (2R)-2-/(1,1-dimetil-etoksi)karbonil/amino-4-fenil-1-buterne kiseline i 1,2-dihidro-1-metilsulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/hidroklorida koristeći postupak kuplovanja kao što je opisano u Primjeru 18, Stupanj B. Sirovi proizvod se prečišćuje na silika gelu upotrebljavajući 5% acetona u CH2Cl2.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.2 (m, 9H), 4.9 (m, 1H), 4.5 (m, 1H). 3.8 (m, 2H), 3.2 (m, 2H), 2.9 (s, 3H), 2.7 (m, 2H), 2.3 (s, 2H), 2.0 (m , 2H), 1.7 (m, 4H), 1.5 (s, 6H), 1.44 (s, 9H).
Stupanj B: N-1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-3-fenil-propil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Dobiven je iz intermedijara dobijenog u Stupnju A, upotrebljavajući postupak oslobađanja od zaštite kao što je opisano u Primjeru 18, Stupanj C.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.3 (m, 9H), 4.5 (m, 1H), 3.9 (m, 2H), 3.5 (m, 2H), 3.2 (m, 2H), 2.9 (s, 3H), 2.7 (m, 4H), 2.0 (m, 4H), 1.6 (s, 6H).
PRIMJER 26
N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-trifluormetansulfonil-5-fluor-spiro-/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-indol-3-il)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid trifluoracetat
Stupanj A: 1,2-dihidro-1-benziloksikarbonil-5-fluor-spiro-/3H-indol-3,4'-piperidin/
U 7.82 g 60% natrijevog hidrida, dodaje se heksan i tečnosti se dekantiraju. U ovo se dodaje otopina 11.10 ml (89 mmola) 2,5-difluorofenilacetonitrila u 150 ml DMSO i miješa se 30 minuta. Ukapavanjem se dodaje otopina 15.10 g 1-klormetil etilamin hidroklorida u 150 ml DMSO i zagrijava se na 75ºC 4 sata. Reakcijska smjesa se izrući u 600 g leda i ekstrahira se sa etrom (5 x 200 ml). Spojene organske otopine se peru sa 3 x 100 ml 2N klorovodične kiseline. Spojeni vodeni ekstrakti se zaalkaliraju do pH =9 sa 50% vodenom otopinom natrijevog hidroksida i ekstrahiraju se sa etrom (3 x 200 ml). Spojeni organski ekstrakti se peru sa slanom otopinom (100 ml), suše preko kalijevog karbonata i koncentriraju, pri čemu se dobija 15.54 g gustog ulja.
Etanol (24 ml) se dodaje ukapavanjem u 9.90 g litij aluminijevog hidrida u 250 ml DME na 0ºC i zatim se zagrijava do refluksa. Dodaje se otopina spoja u 250 ml DME i refluksira se 72 sata. Zatim se reakcija ohladi na 0ºC i ugasi se sa vodom (10 ml), 10 ml 15% NaOH, i 30 ml vode. Suspenzija se suši preko K2CO3, filtrira, i koncentrira, pri čemu se dobija 13.6 g gustog ulja. Ovaj sirovi proizvod se triturira sa heksanima, čvrsta supstanca se filtrira, i pere se dalje sa heksanima.
200 MHz NMR (CDCl3) čvrste supstance (2.6 g) pokazuje oko 75% željenog spiro-indolina.
U otopinu 1.02 g ove smjese u 50 ml CH2Cl2 na 0ºC, dodaje se 1.0 ml trietilamina u 0.80 ml CBZ-Cl i miješa se 1 sat na sobnoj temperaturi.
Reakcijska smjesa se sipa u 50 ml 5% HCl i odvoji se vodeni sloj. Vodeni sloj se zaalkalira sa 505 NaOh do pH= 10 i ekstrahira se sa CH2Cl2 (3 x 25 ml). Spojeni organski ekstrakti se peru sa slanom otopinom (50 ml), suše se preko K2CO3 i koncentriraju, pri čemu se dobija 1.26 g spoja kao gusto ulje.
1H NMR (200 MHz, CDCl3) δ 7.7-7.90 (m, 1H), 7.50-7.15 (m, 6H), 6.95-6.60 (m, 2H), 5.28 (široko s, 2H), 3.90 (široko s, 2H), 2.85 (široko d, 2H, 2.30 (s, 3H), 2.20-1.80 (m, 4H), 1.65 (široko d, 2H).
Stupanj B: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-benziloksikarbonil-5-fluoro-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)-karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-//(1,1-dimetil-etiloksi)karbonil/amino/-2-metilpropanamid
U 1.62 g (4.62 mmola) gornjeg intermedijara iz Stupnja A u 10 ml 1,2-dikloretana na 0ºC, dodaje se 0.65 ml ACE-Cl i refluksira se 1 sat. Reakcijska smjesa se koncentrira do jedne trećine zapremnine i razblažuje se sa 10 ml metanola i zagrijava se do refluksa 1 sat. Reakcijska smjesa se koncentrira do suha i triturira sa etrom, pri čemu se dobija mrka čvrsta supstanca. Ovaj materijal se otapa u zasićenoj otopini natrijevog bikarbonata (25 ml) i ekstrahira se sa diklormetanom (2x25 ml). Spojene organske otopine se suše preko K2CO3 i koncentriraju, pri čemu se dobija 0.384 g slobodne baze.
U 0.384 g ovog materijala u 15 ml CH2Cl2 dodaje se 0.483 g intermedijara kiseline dobijenog iz Stupnja C iz Primjera 21, 0.189 g HOBT, i 0.34 g EDC i miješa se 18 sati. Reakcijska smjesa se sipa u 10 ml vode i ekstrahira se sa CH2Cl2 (2 x 10 ml). Spojeni organski ekstrakti se peru sa 20 ml 10% otopine limunske kiseline, 20 ml zasićene otopine NaHCO3, suše se preko MgSO4, i koncentriraju. "Fleš" kromatografija ostatka na 25 g silika gela sa heksanima-acetonom (1:1) kao eluentom da je 0.389 g željenog materijala.
1H NMR (200 MHz, CDCl3) δ 7.7-7.90 (m, 1H), 7.50-7.15 (m, 6H), 6.95-6.60 (m, 2H), 5.28 (širok s, 2H), 3.90 (širok s, 2H), 2.85 (širok d, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.20-1.80 (m, 4H), 1.65 (širok d, 2H).
Stupanj C: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-5-fluor-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)-etil/-//(1,1-dimetiletiloksi)karbonil/amino/-2-metilpropanamid
U otopinu 0.363 g intermedijara dobijenog iz Stupnja B u 5 ml etanola, dodaje se 0.10 g 205 paladij hidroksida na ugljenu i hidrogenizira se pod H2 bocom 1 sat, katalizator se profiltrira i pere se sa još metanola. Filtrat se koncentrira, pri čemu se dobija 0.262 g željenog materijala.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) Ovaj materijal je 2:1 smjesa rotamera.
δ 8.85-8.60 (2 širok s, 1H), 7.70 (d, 2/3H), 7.55 (d, 1/3H), 7.38 (d, 2/3H), 7.30 (d, 1/3H), 7.28-7.15 (m, 4H), 7.13-7.02 (m, 2H), 6.65 (dt, 2H), 6.50 (dd, 1/3H), 6.45 (dd, 2/3H), 6.14 (dd, 2/3H), 5.30-5.13 (m, 1H), 5.10 (širok s, 1H), 4.30 (širok d, 2/3H), 422 (širok d, 1/3H), 3.50-3.30 (m, 1H), 3.30-3.00 (m, 4H), 3.00-2.80 (m, 1H), 2.73 (t, 1H), 2.53-2.40 (m, 1 1/3H), 2.20 (t, 1/3H), 1.49 (s, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.41 (s, 9H), 1.20 (dt, 1/3H), 0.95 (širok d, 2/3H), 0.90 (dt, 2/3H), -0.05 (dt, 1/3H).
Stupanj D: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-trifluormetansulfonil-5-fluor-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)-karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-//(1,1-dimetiletiloksi)karbonil/amino/-2-metilpropanamid
U otopinu 30 mg intermedijara dobijenog iz Stupnja C u 1 ml diklormetana na 0ºC, dodaje se 0.050 ml trietilamina i 0.020 ml triflik anhidrida i miješa se 5 minuta, katalizator se profiltrira i pere se sa još metanola. Reakcija se izruči u 5 ml 5% vodene otopine natrijevog karbonata i miješa se 5 minuta. Vodeni sloj se ekstrahira sa CH2Cl2 (2 x 5 ml) i spojeni organski ekstrakti se suše preko MgSO4, filtriraju, i koncentriraju. "Fleš" kromatografijom ostatka na 3 g silika gela sa CH2Cl2 -acetonom (4:1) kao eluentom dobija se 21 mg proizvoda.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) Ovaj materijal je bio 2:1 smjesa rotamera.
δ 8.40 (širok s, 2/3H), 8.25 (širok s, 1/3H), 7.70 (d, 2/3H), 7.60 (d, 1/3H), 7.40 (d, 2/3H), 7.35-7.10 (m, 5H), 6.90-6.80 (m, 2H), 6.18 (dd, 1H), 5.30-5.13 (m, 1H), 4.95 (širok s, 2/3H), 4.90 (s, 1/3H), 4.45 (širok d, 2/3H), 4.35 (širok d, 1/3H), 3.85-3.70 (m, 2H), 3.70-3.55 (m, 2H), 3.30-3.10 (m, 2H), 2.70 (t, 1H), 2.45 (t, 1/3H), 2.35 (t, 2/3H), 1.49 (s, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.41 (s, 9H), 1.20 (dt, 1/3H), 0.95 (širok d, 2/3H), 0.90 (dt, 2/3H), -0.05 (dt, 1/3H).
Stupanj E: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-trifluormetansulfonil-5-fluor-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)-karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-metilpropanamid trifluoracetat
U otopinu 21 mg intermedijara dobijenog iz Stupnja D, koji se nalazi u 1 ml diklormetana i 1 ml trifluoroctene kiseline na sobnoj temperaturi 30 minuta. Isparljive supstance se uparavaju do suha i trituriraju sa etrom, pri čemu se dobija žuta čvrsta supstanca.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) Ovaj materijal je 2:1 smjesa rotamera, δ 7.65 (d, 2/3H), 7.60 (d, 1/3H). 7.42 (d, 2/3H), 7.35-7.10 (m, 5H), 6.93-6.80 (m, 2H), 6.24 (dd, 1H), 5.30-5.13 (m, 1H), 4.95 (širok s, 2/3H), 4.90 (s, 1/3H), 4.45 (širok d, 2/3H), 4.35 (širok d, 1/3H), 3.85-3.70 (m, 2H), 3.70-3.55 (m, 2H), 3.30-3.10 (m, 2H), 2.70 (t, 1H), 2.45 (t, 1/3H), 2.35 (t, 2/3H), 1.49 (s, 3H), 1.45 (s, 3H), 0.93 (širok d, 2/3H), 0.90 (dt, 2/3H), -0.05 (dt, 1/3H).
PRIMJER 27
N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-/metoksikarbonil/metilsulfonil-5-fluor-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid trifluoracetat
Stupanj A: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-trifluormetansulfonil-5-fluor-spiro/3H-indol-3,4’-piperidin/-1’-il)-karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-metilpropanamid trifluoracetat
U otopinu 77 mg intermedijera dobivenog iz Stupnja C iz Primjera 26 u 1 ml diklormetana na 0ºC, dodaje se 0.30 ml N-metilmorfolina, i 0.024 ml 2-karbometoksimetansulfonilklorida i miješa se 1 sat. Reakcija se izruči u 5 ml 5% vodene otopine netrijevog karbonata i miješa se 5 minuta. Vodeni sloj se ekstrahira sa CH2Cl2 (2 x 5 ml) i spojeni organski ekstrakti se peru sa slanom otopinom (5 ml), suše preko MgSO4, filtriraju i koncentriraju. "Fleš" kromatografijom ostatka na 5 g silika gela sa CH2Cl2-acetonom (4:1) kao eluentom dobija se proizvod.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) Materija je 2:1 smjesa rotamera.
δ 8.48 (širok s, 2/3H), 8.35 (širok s, 1/3H), 7.70 (d, 2/3H), 7.60 (d, 1/3H), 7.40 (d, 2/3H), 7.32 (d, 1/3H), 7.25-7.00 (m, 4H), 6.90-6.78 (m, 2H), 6.18 (dd, 1H), 5.30-5.20 (m, 1H), 4.97 (široko s, 2/3H), 4.91 (s, 1/3H), 4.50-4.35 (2 širok d, 1H), 4.02 (s, 2/3H), 3.99 (s, 1/3H), 3.76 (q, 2H), 3.58 (s, 1H), 3.56 (s, 2H), 3.08-3.07 (m, 2H), 2.72 (t, 1H), 2.50-2.30 (2 t, 1H), 1.65 (t, 1/3H), 1.50 (s, 2H), 1.46 (s, 4H), 1.40 (s, 9H), 1.30 (m, 1/3H), 1.10 (širok d, 2/3H), 0.88 (dt, 2/3H), -0.13 (dt, 1/3H).
Stupanj B: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-/metoksikarbonil/metil-sulfonil-5-fluor-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin//-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-metilpropanamid trifluoracetat
U otopinu 24 mg intermedijara dobijenog iz Stupnja A, koji se održava u 1 ml diklormetana i 1 ml trifluoroctene kiseline na sobnoj temperaturi 30 minuta. Isparljive supstance se uparavaju do suha i triturira se sa etrom, pri čemu se dobija 23 mg bezbojne čvrste supstance.
1H NMR (400 MHz, CD3OD). Ovaj materijal je bio 2:1 smjesa rotamera.
δ 8.70 (široko s, 1/3H), 8.60 (široko s, 2/3H), 7.60 (m, 2/3H), 7.50 (d, 2/3H), 7.48 (m, 1/3H), 7.40 (d, 2/3H), 7.31 (d, 1/3H), 7.25-7.00 (m, 4H), 6.95-6.85 (m, 1H), 6.70 (dd, 1/3H), 6.15 (dd, 2/3H), 5.20-5.10 (m, 1H), 4.38 (širok d, 1/3H), 4.28 (širok d, 2/3H), 4.02 (s, 2/3H), 3.99 (s, 1/3H), 3.76 (q, 2H), 3.58 (s, 1H), 3.56 (s, 2H), 3.08-3.07 (m, 2H), 2.72 (t, 1H), 2.50-2.30 (2 t, 1H), 1.65 (t, 1/3H), 1.65 (s, 2H), 1.60 (s, 4H), 1.30 (m, 1/3H), 1.00 (širok d, 2/3H), 0.88 (dt, 2/3H), -0.10 (dt, 1/3H).
PRIMJER 28
N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonil-5-fluor-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stupanj A: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-benziloksikarbonil-5-fluor-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)-karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-//(1,1-dimetiletiloksi)karbonil/amino/-2-metilpropanamid
U 0.330 g 1,2-dihidro-1-benziloksikarbonil-5-fluor-spiro/3H-indol-3,4'-piperidina/ dobijenog iz Stupnja A, Primjera 26 u 10 ml 1,2-dilormetana na sobnoj temperaturi, dodaje se 0.35 g N-tBOC-O-benzil-D-serina, 0.195 g HOBT, i 0.30 q EDC i miješa se 18 sati. Reakcijska smjesa se izruči u 10 ml vode i ekstrahira se sa CH2Cl2 (2 x 10 ml). Spojeni organski ekstrakti se peru sa 20 ml 10% limunske kiseline, 20 ml zasićene otopine NaHCO3, suše preko MgSO4 i koncentriraju.
U otopinu intermedijara dobijenog iz Stupnja A u 5 ml CH2Cl2, dodaje se 5 ml trifluoroctene kiseline i miješa se na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakcijska smjesa se koncentrira, razblažuje se sa 5.0 ml diklormetana i pažljivo se zaalkalira sa 10 ml 10% vodene otopine natrijevog karbonata. Organski sloj se odvaja i vodeni sloj se dalje ekstrahira sa 2 x 15 ml diklormetana. Spojene organske otopine se peru sa 5 ml vode, suše se preko kalijevog karbonata, filtriraju i koncentriraju, pri čemu se dobija 0.39 g amina kao gusto ulje.
U 0.39 g gornjeg intermedijara u 10 ml 1,2-diklormetana na sobnoj temperaturi, dodaje se 0.24 g N-tBOC-�-metilalanina, 0.195 g HOBT, i 0.30 g EDC i miješa se 18 sati. Reakcijska smjesa se izrući u 10 ml vode i ekstrahira se sa CH2Cl2 (2 x 10 ml). Spojene organske otopine se peru sa 20 ml 10% limunske kiseline, 20 ml zasićene otopine NaHCO3, suše se preko MgSO4, i koncentriraju. "Fleš" kromatografijom ostatka preko 30 g silika gela sa heksanom-etil acetatom (2:1) kao eluentom, dobija se 0.33 g proizvoda.
1H NMR (200 MHz, CDCl3) δ 7.80 (širok S, 1H), 7.50-7.15 (m, 5H), 7.10 (širok d, 1H), 6.90-6.70 (m, 1H), 6.27 (širok d, 1H), 7.35-7.10 (m, 5H), 5.35-5.10 (m, 3H), 4.99 (s, 1H), 4.70-4.40 (m, 3H), 3.90-3.50 (m, 4H), 3.15-2.90 (m, 2H), 2.80-2.50 (m, 2H), 1.80-1.40 (m, 2H), 1.50 (3H), 1.42 (s, 6H).
Stupanj B: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-5-fluor-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetil-oksi)etil/-//(1,1-dimetiletiloksi)karbonil/amino/-2-metilpropanamid
U otopinu 0.330 g intermedijara dobijenog iz Stupnja A u 5 ml etanola, dodaje se 1 kap trietilamina i hidrogenizira se sa bocom vodika 3 sata. Katalizator se profiltrira kroz sloj celita i pere se sa etil acetatom. Filtrat se koncentrira, pri čemu se dobija 0.269 g proizvoda kao bezbojna pjena.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.35-3.720 (m, 4H), 7.17-7.08 (m, 2H0, 6.80-6.65 (m, 2/2/3H), 6.27 (dt, 1/3H), 5.20-5.10 (m, 1H), 4.90 (s, 1H), 4.60-4.40 (m, 3H), 4.00 (širok t, 1H), 3.75-3.60 (m, 1H), 3.55-3.40 (m, 3H), 3.18-3.30 (m, 2H), 2.90-2.65 (m, 1H), 1.83-1.50 (m, 4H), 1.48 (s, 4H), 1.42 (s, 2H), 1.39 (s, 9H).
Stupanj C: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonil-5-fluor-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-//(1,1-dimetiletiloksi)-karbonil/-amino/-2-metilpropanamid
U otopinu 0.134 g intermedijara iz Stupnja B u 5 ml diklormetana, dodaje se 0.080 ml N-metilmorfolina, i 0.022 metansulfonilklorida i miješa se na 0ºC 30 minuta. Reakcijska smjesa se razblažuje sa dodatnih 5 ml diklormetana i pere se sa 5 ml zasićene otopine natrijevog bikarbonata, slanom otopinom (5 ml), suši se preko MgSO4 i koncentrira. "Fleš" kromatografijom ostatka preko 20 g islika gela, dobija se 0.101 g željenog proizvoda.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.40-7.20 (m, 5H), 7.08 (d, 1H), 6.95-6.80 (m, 2/ 1/3H), 6.23 (dd, 2/3H), 5.20-5.10 (m, 1H), 4.90 (širok s, 1H), 4.60 (širok d, 2/3H), 4.58-4.40 (m, 3/3/3H), 4.10-4.00 (m, 1H), 3.38-3.70 (m, 2l/3H), 3.66-3.60 (m, 1/2H), 3.60-3.50 (m, 1H), 3.10-2.95 (m, 1H), 2.86 (s, 1H), 2.84 (s, 2H), 2.80 (t, 1/3H), 2.65 (t, 2/3H), 2.90-2.50 (m, 4H), 1.45 (s, 4H), 1.44 (s, 2H), 1.42 (s, 3H), 1.40 (s, 6H).
Stupanj D: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonil-5-fluorspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
U otopinu 0.101 g intermedijara iz Stupnja C u 1 ml dilormetana, dodaje se 1.0 ml trifluoroctene kiseline i održava se na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakcijska smjesa se uparava do suha, zaalkalira se sa 10% vodenom otopinom natrijevog karbonata (10 ml), i ekstrahira se sa diklormetanom (3 x 5 ml). Spojena organska otopina se pere sa slanom otopinom(5 ml), suši se preko kalijevog karbonata, i koncentrira. Ovaj materijal se otapa u 2 ml etil acetata i dodaje se na 0ºC 0.10 ml 4 M HCl u EtOAc. Talog se filtrira pod dušikom i pere se sa EtOAc/etrom (1:1) i suši se, pri čemu se dobija 62 mg proizvoda kao bijela čvrsta supstanca.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.40-7.20 (m, 5H), 7.08 (d, 1H), 6.95-6.80 (m, 2/1/3H), 6.23 (dd, 2/3H), 5.20-5.10 (m, 1H0, 4.60 (širok d, 2/3H), 4.58-4.40 (m, 3/1/3H), 4.10-4.00 (m, 1H), 3.38-3.70 (m, 21/3H), 3.66-3.60 (m, 1/2H), 3.60-3.50 (m, 1H), 3.10-2.95 (m, 1H), 2.86 (s, 1H), 2.84 (s, 2H), 2.80 (t, 1/3H), 2.65 (t, 2/3H), 2.90-2.50 (m, 4H), 1.45 (s, 4H), 1.44 (s, 2H).
PRIMJER 29
Stupanj A: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-benzolsulfonil-5-fluorspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid trifluoracetat
U otopinu 0.026 g intermedijara iz Stupnja B iz Primjera 27 u 2 ml diklormetana, dodaje se 0.020 ml N-metilmorfolina i 0.012 ml benzolsulfonilklorida i miješa se na 0ºC 1 sat. Reakcijska smjesa se izruči u 10 ml etra i pere se sa 5 ml zasićene otopine natrijevog bikarbonata, suši se preko MgSO4 i koncentrira. "Fleš" kromatografijom ostatka preko 10 g silika gela, sa CH2Cl2-etrom (2:1) kao eluentom dobija se 0.019 g proizvoda.
Ovaj materijal je tretiran sa 1 ml diklormetana i 1 ml trifluoroctene kiseline 1 sat. Reakcijska smjesa je uparavana do suha i ostatak je trituriran sa etrom, pri čemu se dobija 18 mg željenog proizvoda kao bijela čvrsta supstanca.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.80 (d, 2H), 7.70-7.55 (m, 2H), 7.55-.7.50 (m, 2H), 7.40-7.20 (m, 4 2/3H), 7.03-6.92 (m, 1H), 6.82 (dt, 2/3H), 6.47 (dt, 2/3H), 5.08 (dt, 1H), 4.60-4.48 (m, 2H), 4.33 (širok t, 1H), 3.94-3.85 (m, 3H), 3.75-3.65 (m, 2H), 3.10 (dt, 1H), 2.80 (dt, 1H), 1.73 (dt, 1H), 1.58 (s, 4H), 1.56 (s, 2H), 1.50 (dt, 1H), 1.38 (dt, 1H), 1.10 (dt, 2H).
PRIMJER 30
N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-etansulfonil-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stupanj A: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-benziloksikarbonil-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin-1'-il)karbonil/-2-(fenilemtiloksi)etil/-//(1,1- dimetiletiloksi)-karbonil/amino/-2-metilpropanamid
U 5 g 1,2-dihidro-1-benziloksikarbonil-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/ hidroklorida u 100 ml diklormetana na sobnoj temperaturi, dodaje se 3.64 g N-t-BOC-O-benzil-D-serina, 1.83 g HOBT, 2.60 ml N-metilmorfolina i 3.70 g EDC i miješa se 18 sati. Reakcijska smjesa se izruči u 100 ml vode i ekstrahira se sa CH2Cl2 (2 x 100 ml). Spojeni organski ekstrakti se peru sa 100 ml 10% limunske kiseline, 100 ml zasićene otopine NaHCO3, suše preko MgSO4, i koncentriraju.
U otopinu intermedijra dobijenog iz Stupnja A u 20 ml CH2Cl2, dodaje se 20 ml trifluoroctene kiseline i miješa se na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakcijska smjesa se koncentrira, razblažuje se sa 50 ml diklormetana i pažljivo se zaalkalira sa 100 ml 10% vodene otopine natrijevog karbonata. Organski sloj se odvaja i vodeni sloj se dalje ekstrahira sa 2 x 50 ml diklormetana. Spojeni organski slojevi se peru sa 50 ml vode, suše se preko kalijevog karbonata, filtriraju i koncentriraju, pri čemu se dobija amin kao gusto ulje.
U gornji intermedijar u 50 ml diklormetana, dodaje se na sobnoj temperaturi 2.50 g N-tBOC-�-metilalanina, 1.83 g HOBT, i 3.70 g EDC i miješa se 18 sati. Reakcijska smjesa se sipa u 10 ml vode i ekstrahira se sa CH2Cl2 (2 x 10 ml). Spojene organske otopine se peru sa 20 ml 10% limunske kiseline, 20 ml zasićene otopine NaHCO3, suše preko MgSO4, i koncentriraju. "Fleš" kromatografijom ostatka preko 300 g silika gela sa heksanom-etil acetatom (2:1) kao eluentom, dobija se 8.1 g proizvoda.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.85 (širok s, 1H), 7.45-7.20 (m, 10H), 7.20-7.05 (m, 22/3H), 6.95 (t, 1/3H), 6.88 (t, 1/3H), 6.53 (dd, 2/3H), 5.35-5.20 (m, 2H), 5.20-5.10 (m, 1H), 4.92 (širok s, 1H), 4.65-4.20 (m, 4H), 4.05 (širok d, 2/3H), 4.00-3.80 (m, 1, 1/3H), 3.80-3.60 (m, 1H), 3.10 (t, 2/3H), 3.00-2.85 (m, 1/3H), 2.82-2.60 (2t, 1H), 1.90-1.55 (m, 5H), 1.49 (s, 4H), 1.42 (s, 2H), 1.40 (s, 9H).
Stupanj B: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)-etil/-//(1,1-dimetiletoksi)karbonil/amino/-2-metilpropanamid
U otopinu 8.10 g intermedijara dobijenog iz Stupnja A u 80 ml etanola, dodaje se 1 g 20% paladij hidroksida/C i hidrogenizira se sa bocom vodika 1 sat. Katalizator se profiltrira kroz sloj celita i pere se sa etil acetatom. Filtrat se koncentrira, pri čemu se dobija 4.69 g proizvoda kao bezbojne pjene.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.35-7.20 (m, 5H), 7.18 (d, 1/2H), 7.10 (d, 1/2H), 7.04-6.98 (m, 2H), 6.75-6.60 (m, 2H), 5.20-5.10 (m, 1H), 4.97 (širok s, 1H), 4.55-4.40 (m, 3H), 3.95 (dd, 1H), 3.73-3.61 (m, 1H), 3.60-3.50 (m, 1H), 3.50-3.33 (m, 3H), 3.10 (dt, 1H), 2.83 (dt, 1H), 1.85-1.55 (m, 5H), 1.47 (s, 4H), 1.42 (s, 2H), 1.39 (s, 9H).
Stupanj C: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-etansulfonil-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid
U otopinu 0.158 g intermedijara iz Stupnja B u 5 ml diklormetana, dodaje se 0.053 ml N-metilmorfolina, i 0.034 ml etansulfonilklorida i miješa se na 0ºC 30 minuta na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakcijska smjesa se razblažuje sa dodatnih 5 ml diklormetana i pere se sa 5 ml zasićene otopine natrijevog bikarbonata, slanom otopinom (5 ml), suši se preko MgSO4 i koncentrira. "Fleš" kromatografijom ostatka preko 10 g silika gela sa CH2Cl2-etrom (3:1) kao eluentom dobija se 0.057 g željenog proizvoda.
U otopinu 0.057 g gornjeg intermedijara u 1 ml diklormetana, dodaje se 1.0 ml trifluoroctene kiseline i održava se na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakcijska smjesa se koncentrira do suha i triturira se sa etrom, pri čemu s dobija 0.034 g proizvoda kao žuta čvrsta supstanca.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.40-7.25 (m, 5H), 7.25-7.13 (m, 21/2H), 7.03 (t, 1/2H), 6.95 (t, 1/2H), 6.80 (d, 1/2H), 5.18 (dt, 1H), 4.60-4.42 (m, 3H), 4.08 (t, 1H), 3.96 (s, 2H), 3.83-3.70 (m, 2H), 3.29-3.15 (m, 3H), 2.84 (dt, 1H), 1.90 (dt, 1H), 1.74-1.62 (m, 4H), 1.62 (s, 2H), 1.60 (s, 4H), 1.33 (dt, 3H).
PRIMJER 31
Stupanj A: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-/2-metil-2-propansulfonil/-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il/-karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-//(1,1-dimetiletiloksi)karbonil/amino/-2-metilpropanamid
U otopinu 0.212 g intermedijara iz Stupnja B iz Primjera 29 u 2 ml 1,2-dikloretana, dodaje se 0.083 ml trietilamina i 0.054 ml izopropilsulfonilklorida i miješa se na 0ºC 30 minuta i na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakcijska smjesa se razblažuje sa 5 ml diklormetana i pere se sa 5 ml zasićene otopine natrijevog bikarbonata, slanom otopinom (5 ml), suši se preko MgSO4 i koncentrira. "Fleš" kromatografijom ostatka preko 10 g silika gela sa CH2Cl2-etrom (3:1) kao eluentom, dobija se 0.113 g željenog proizvoda.
U otopinu 0.101 g gornjeg intermedijara u 1 ml diklormetana, dodaje se 1.0 ml trifluoroctene kiseline i održava se na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakcijska smjesa se uparava do suha, zaalkalira se sa 10% vodenom otopinom natrijevog karbonata (10 ml) i ekstrahira se sa diklormetanom (3 x 5 ml). Spojene organske otopine se peru sa slanom otopinom (5 ml), suše preko kalijevog karbonata i koncentriraju. ovaj materijal se otapa u 2 ml etil acetata i dodaje se 0.10 ml 4M HCl u EtOAc na 0ºC. Talog se filtrira pod dušikom i pere se sa EtOAc/etrom (1:1) i suši se, pri čemu se dobija 88 mg proizvoda kao bijela čvrsta supstanca.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.40-7.20 (m, 5H), 7.08 (d, 1H), 6.95-6.80 (m, 2/1/3H), 6.23 (dd, 2/3H), 5.20-5.10 (m, 1H), 4.60 (širok d, 2/3H), 4.58-4.40 (m, 3/1/3H), 4.10-4.00 (m, 1H), 3.38-3.70 (m, 21/3H), 3.66-3.60 (m, 172H), 3.60-3.50 (m, 1H), 3.10-2.95 (m, 1H), 2.86 (s, 1H), 2.84 (s, 2H), 2.80 (t, 1/3H), 2.65 (t, 2/3H), 2.90-2.50 (m, 4H), 1.45 (s, 4H), 1.44 (s, 2H).
PRIMJER 32
Stupanj A: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-/2-karbometoksimetansulfonil-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin//-1'-il)-karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-//(1,1-dimetiletiloksi)karbonil/-amino/-2-metilpropanamid hidroklorid
U otopinu 0.50 g intermedijara iz Stupnja B Primjera 29 u 10 ml diklormetana, dodaje se 0.21 ml N-metilmorfolina i 0.10 ml 2-karbometoksimetansulfonilklorida i miješa se na 0ºC 30 minuta. Reakcijska smjesa se razblažuje sa 10 ml diklormetana i pere se sa 5 ml zasićene otopine natrijevog bikarbonata, slanom otopinom (5 ml) i suši se preko MgSO4 i koncentrira. "Fleš" kromatografijom ostatka preko 20 g silika gela sa CH2Cl2-etrom (3:1) kao eluentom, dobija se 0.529 g željenog proizvoda.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.39-7.20 (m, 5H), 7.20-7.10 (m, 21/2H), 7.08 (dt, 1H), 6.92 (t, 1/2H), 6.55 (d, 1/2H), 5.20-5.10 (m, 1H), 4.94 (širok s, 1H), 4.60 (širok d, 1H), 4.53-4.40 (m, 2H), 4.10 (2 širok s, 2H), 4.05-3.90 (m, 2H), 3.70 (dt, 1H), 3.63 (s, 11/2H), 3.61 (s, 11/2H), 3.59-3.50 (m, 1H), 3.05 (dt, 1H), 2.70 (dt, 1H), 1.90-1.50 (m, 4H), 1.49 (s, 4H), 1.44 (s, 2H), 1.39 (s, 9H).
Stupanj B: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-/2-karbometoksimetansulfonil-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin//-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
U otopinu 0.113 g gornjeg intermedijara u 1 ml diklormetana, dodaje se 1.0 ml trifluoroctene kiseline i održava se na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakcijska smjesa se uparava do suha, zaalkalira se sa 10% vodenom otopinom natrijevog karbonata (10 ml) i ekstrahira se sa diklormetanom (3 x 5 ml). Spojene organske otopine se peru sa slanom otopinom (10 ml), suše preko kalijevog karbonata i koncentriraju. Ovaj materijal se otapa u 2 ml etil acetata i 0.20 ml 4 M HCl u EtOAc se dodaje na 0ºC. Dodaje se etar i talog se profiltrira pod dušikom, i pere se sa etrom i suši, prei čemu se dobija 0.108 g proizvoda kao bijela čvrsta supstanca.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.40-7.20 (m, 5H), 7.08 (d, 1H), 6.95-6.80 (m, 2/1/3H), 6.23 (dd, 2/3H), 5.20-5.10 (m, 1H), 4.60 (širok d, 2/3H), 4.58-4.40 (m, 3/1/3H), 4.10-4.00 (m, 1H), 3.38-3.70 (m, 21/3H), 3.66-3.60 (m, 1/2H), 3.60-3.50 (m, 1H), 3.10-2.95 (m, 1H), 2.86 (s, 1H), 2.84 (s, 2H), 2.80 (t, 1/3H), 2.65 (t, 2/3H), 2.90-2.50 (m, 4H), 1.45 (s, 4H), 1.44 (s, 2H).
PRIMJER 33
Stupanj A: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-/2-karboksimetansulfonil-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin//-1'-il)-karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-//(1,1-dimetiletiloksi)karbonil/amino/-2-metilpropanamid trifluoracetat
U otopinu 0.126 g intermedijara iz Stupnja A, Primjera 32 u 3 ml metanola i 1 ml vode na 0ºC, dodaje se 2 kapi 5N vodene otopine natrijevog hidroksida i miješa se 30 minuta. Reakcijska smjesa se zakiseljava na pH=2 sa 0.50 N vodenom otopinom klorovodične kiseline, razblažuje se sa slanom otopinom (5 ml), i ekstrahira se sa CH2Cl2 (2 x 5 ml). Spojene organske otopine se peru sa slanom otopinom (10 ml), suše se preko MgSO4 i koncentrira, pri čemu se dobija 0.098 g bijele pjene.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.80 (širok s, 1H), 7.45 (d, 1/2H), 7.40-7.13 (m, 7H), 7.02 (t, 1/2H), 6.90 (t, 1/2H), 6.50 (d, 1/2H), 5.22-5.10 (m, 1H), 4.60-4.40 (m, 3H), 4.20-4.00 (m, 3H), 3.92 (d, 1H), 3.70-5.50 (m, 2H), 3.04 (dt, 1H), 2.70 (dt, 1H), 1.93-1.50 (m, 4H), 1.42 (s, 6H), 1.33 (s, 9H).
Stupanj B: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-/2-karboksimetansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid
U otopinu 0.098 g intermedijara iz Stupnja A u 1 ml diklormetanu, dodaje se 1 ml trifluoroctene kiseline i miješa se 30 minuta. Reakcijska smjesa se uparava do suha i triturira se sa etrom, pri čemu se dobija 0.096 g proizvoda kao bijela čvrsta supstanca.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.40-7.28 (m, 6H), 7.24-7.15 (m, 21/2H), 7.00 (dt, 1H), 6.80 (d, 1/2H), 5.17 (dt, 1H), 4.60-4.45 (m, 2H), 4.22 (d, 2H), 4.14-4.00 (m, 3H), 3.81-3.70 (m, 2H), 3.22 (dt, 1H), 2.83 (dt, 1H), 1.96 (dt, 1/2H), 1.80-1.64 (m, 41/2H), 1.62 (s, 1H), 1.60 (s, 5H).
PRIMJER 34
Stupanj A: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-/2-hidroksietansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-//(1,1-dimetiletiloksi)-karbonil/amino/-2-metilpropanamid trifluoracetat
U otopinu 0.222 g intermedijara iz Stupnja A, Primjera 32 u 2 ml anhidriranog tetrahidrofurana na sobnoj temperaturi, dodaje se 0.48 ml 2M otopine litijevog borhidrida u tetrahidrofuranu i miješa se 3 sata. Reakcijska smjesa se ugasi sa 0.50 ml acetona, razblažuje se sa 15 ml vode, i ekstrahira se sa CH2Cl2 (2 x 15 ml). Spojene organske otopine se peru sa slanom otopinom (10 ml), suše se preko MgSO4 i koncentriraju, pri čemu se dobija 0.27 g bijele pjene. "Fleš" kromatografijom ostatka preko 10 g silika gela sa CH2Cl2-acetonom (2:1) kao eluentom, dobija se 0.129 g željenog materijala, kao gusto ulje.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.32-7.20 (m, 6H), 7.20-7.10 (m, 2H), 7.09 (d, 1/2H), 6.98 (t, 1/2H), 6.90 (t, 1/2H), 6.54 (d, 1/2H), 5.17-5.10 (m, 1H), 5.00 (širok s, 1H), 4.61-4.39 (m, 3H), 4.10-3.95 (m, 5H), 3.93-3.74 (m, 2H), 3.66 (dd, 1H), 3.53 (dt, 1H), 3.27 (dt, 2H), 3.00 (dt, 1H), 2.70 (dt, 1H), 1.90-1.50 (m, 4H), 1.43 (s, 4H), 1.41 (s, 2H), 1.36 (s, 9H).
Stupanj B: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-/2-hidroksietansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin//-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetoksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid trifluoracetat
U otopinu 0.129 g intermedijara iz Stupnja A u 1 ml diklormetana, dodaje se 1 ml trifluoroctene kiseline i miješa se 30 minuta. Reakcijska smjesa se uparava do suha i triturira sa etrom, pri čemu se dobija 0.113 g proizvoda kao bijela čvrsta supstanca.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.40-7.25 (m, 6H), 7.25-7.13 (m, 21/2H), 6.98 (dt, 1H), 6.80 (d, 1/2H), 5.20-5.10 (m, 1H), 4.60-4.43 (m, 3H), 4.10-3.90 (m, 5H), 3.81-3.70 (m, 2H), 3.40-3.33 (dt, 2H), 3.20 (dt, 1H), 3.82 (dt, 1H), 2.00-1.63 (m, 4H), 1.61 (s, 1H), 1.58 (s, 5H).
PRIMJER 35
Stupanj A: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-trifluorometanmetansulfonil-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)-karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil-//(1,1-dimetiletiloksi)karbonil/amino/-2-metilpropanamid hidroklorid
U otopinu 0.150 g intermedijara iz Stupnja B, Primjera 29 u 5 ml diklormetana, dodaje se 0.10 ml N-metilmorfolina i 0.057 ml trifluormetansulfo anhidrida i miješa se na 0ºC 15 minuta. Reakcijska smjesa se razblažuje sa 5 ml zasićene vodene otopine natrijevog bikarbonata i ekstrahira se sa 2 x 5 ml diklormetana. Spojene organske otopine se peru sa slanom otopinom (5 ml), suše se preko MgSO4 i koncentrira. "Fleš" kromatografijom ostatka preko 10 g silika gela sa heksanom-acetonom (3:1) kao eluentom, dobija se 0.136 g željenog proizvoda.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) d 7.40-7.15 (m, 6H), 7.15-6.93 (m, 21/2H), 6.53 (d, 1/2H), 5.20-5.10 (m, 1H), 4.90 (širok s, 1H), 4.70-4.60 (m, 3H), 4.15-3.90 (m, 3H), 3.70 (ddd, 1H), 3.60-3.50 (m, 1H), 3.00 (dt, 1H), 2.70 (dt, 1H), 1.93-1.55 (m, 4H), 1.46 (s, 4H), 1.43 (s, 2H), 1.40 (s, 9H).
Stupanj B: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-trifluorometansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin//-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
U otopinu 0.136 g gornjeg intermedijara u 1 ml diklormetana, dodaje se 1.0 ml trifluoroctene kiseline i održava se na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakcijska smjesa se uparava do suha, zaalkalira se sa 10% vodenom otopinom natrijevog karbonata (5 ml) i ekstrahira se sa etil acetatom (2 x 5 ml). Spojene organske otopine se peru sa slanom otopinom (5 ml), suše preko kalijevog karbonata, i koncentriraju. Ovaj materijal se otapa u 2 ml etil acetata i dodaje se na 0ºC 0.20 ml 4M HCl u EtOAc. Dodaje se etar i talog se profiltrira pod dušikom i pere se sa etrom i suši, pri čemu se dobija 0.94 g proizvoda kao bijela čvrsta supstanca.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.40-7.15 (m, 6H), 7.15-6.93 (m, 21/2H), 6.53 (d, 1/2H), 5.20-5.10 (m, 1H), 4.90 (širok s, 1H), 4.70-4.60 (m, 3H), 4.15-3.90 (m, 3H), 3.70 (ddd, 1H), 3.60-3.50 (m, 1H), 3.00 (dt, 1H), 2.70 (dt, 1H), 1.93-1.55 (m, 4H), 1.46 (s, 4H), 1.43 (s, 2H).
PRIMJER 36
Stupanj A: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-benzolsulfonil-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
U otopinu 0.148 g intermedijara iz Stupnja B iz Primjera 29 u 3 ml diklormetana, dodaje se 0.30 ml N-metilmorfolina i 0.022 ml benzolsulfonil klorida i miješa se na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakcijska smjesa se razblažuje sa 10 ml diklormetana i pere se sa 10 ml zasićene vodene otopine natrijevog bikarbonata, suši se preko MgSO4 i koncentrira. "Fleš" kromatografijom statka preko 10 g silika gela sa heksanom-acetonom (3:1) kao eluentom, dobija se 0.190 g željenog proizvoda.
U otopinu 0.190 g gornjeg intermedijara u 3 ml diklormetana, dodaje se 3 ml trifluoroctene kiseline i održava se na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakcijska smjesa se uparava do suha, zaalkalira se sa 10% vodenom otopinom natrijevog karbonata (5 ml), i ekstrahira se sa etil acetatom (2 x 5 ml). Spojeni organski ekstrakti se peru sa slanom otopinom (5 ml), suše preko kalijevog karbonata, i koncentriraju. Ovaj materijal se otapa u 2 ml etil acetata i dodaje se na 0ºC 0.40 ml 4M HCl EtOAc. Dodaje se etar i talog se filtrira pod dušikom i pere se sa etrom i suši, pri čemu se dobija 0.136 g proizvoda kao bijela čvrsta supstanca.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) d 7.82 (d, 2H), 7.67-7.58 (m, 2H), 7.52 (t, 2H), 7.40-7.20 (m, 6H), 7.10-6.90 (m, 11/2H), 6.68 (d, 1/2H), 5.10 (dt, 1H), 4.53 (ABq, 2H), 4.35 (t, 1H), 4.00-3.80 (m, 3H), 3.75-3.65 (m, 2H), 3.10 (dt, 1H), 2.73 (dt, 1H), 1.75 (dt, 1/2H), 1.48 (m, 11/2H), 1.20-1.05 (m, 2H).
PRIMJER 37
Stupanj A: N-/1(R)-/(1,2-dihidro/1-ureidometil-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid trifluoracetat
U otopinu 0.148 g intermedijara iz Stupnja B iz Primjera 29 u 5 ml 1,2-dikloretana, dodaje se 0.10 ml metilizocijanata i miješa se na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakcijska smjesa se uparava do suha. "Fleš" kromatografijom ostatka preko 15 g silika gela sa CH2Cl2-acetonom (2:1) kao eluentom, dobija se 0.137 g željenog proizvoda.
Ovaj materijal se tretira sa 3 ml diklormetana i 3 ml trifluoroctene kiseline 30 minuta na sobnoj temperaturi. Reakcijska smjesa se uparava do suha i triturira sa etrom, pri čemu se dobija 0.126 g svjetlo žute čvrste supstance.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.82 (dd, 1H), 7.42-7.35 (m, 5H), 7.30-7.20 (m, 21/2H), 6.75 (d, 1/2H), 5.19 (dt, 1H), 4.60-4.50 (m, 3H), 4.13 (širok d, 1H), 3.90-3.68 (m, 4H), 3.25 (t, 1H), 2.90-2.70 (2s, 4H), 1.98 (dt, 1/2H), 1.85-1.65 (m, 31/2H), 1.62 (s, 2H), 1.59 (s, 4H).
PRIMJER 38
N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-/1-metoksikarbonil-1-metil-etansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid trifluoracetat
Stupanj A: 1,2-dihidro-1-/1-metoksikarbonil-1-metil-etansulfonil/-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/
U 5.06 g 1,2-dihidro-1-benziloksikarbonil-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/hidro-klorida u 50 ml diklormetana, dodaje se 3.0 ml trietilamina i 3.40 g di-t-butilkarbonata i miješa se na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakcijska smjesa se uparava do suha i razblažuje se sa 100 ml etra i pere se sa 50 ml 0.50N vodene otopine klorovodične kiseline, 50 ml slane otopine, suši se preko MgSO4 i koncentrira. U ovaj sirovi proizvod u 50 ml etanola, dodaje se 1 g 20% paladij hidroksida na ugljenu i hidrogenizira se sa H2 bocom preko noći. U 0.506 g ovog spoja u 15 ml diklormetana na 0ºC, dodaje se 0.74 ml trietilamina i 0.41 ml karbometoksimetansulfonil klorida i miješa se 1 sat.
Reakcijska smjesa se razblažuje sa 25 ml etra i pere se sa zasićenom otopinom natrijevog bikarbonata (20 ml), suši se preko MgSO4 i koncentrira. "Fleš" kromatografijom ostatka preko 25 g silika gela sa heksanom-etil acetatom 4:1 kao eluentom, dobija se 1.79 g željenog proizvoda kao gusto ulje.
Natrijev hidrid (0.102 g 60%-tnog u mineralnom ulju) pere se sa heksanima i zatim suspenidra u 5 ml suhog DMF.
Otopina 0.158 g gornjeg intermedijara u 1 ml DMF se dodaje i miješa se 30 minuta. Dodaje se metil jodid (1.85 mmola) i miješa se 31 sat. Reakcijska smjesa se izruči u 15 ml zasićene vodene otopine amonijevog klorida i ekstrahira se sa etrom (2 x 15 ml). Spojeni organski ekstrakti se peru sa vodom (15 ml), slanom otopinom (15 ml), suše se preko MgSO4 i koncentriraju, pri čemu se dobija 0.179 g željenog materijala.
1H NMR (200 MHz, CDCl3) δ 7.32 (d, 1H), 7.20-6.90 (m, 3H), 4.13 (širok d, 2H), 2.83 (širok t, 2H), 1.85-1.70 (m, 4H), 1.69 (s, 6H),148 (s, 9H).
Stupanj B: N-/1(R)-(1,2-dihidro-/1-metoksikarbonil-1-metiletansulfonil/-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-//(1,1-dimetiletiloksi)karbonil/amino/-2-metilpropanamid
U otopinu 0.179 g intermedijara iz Stupnja a, dodaje se 1 ml diklormetana i 1 ml trifluoroctene kiseline i miješa se 30 minuta. Reakcijska smjesa se uparava do suha, zaalkalira se sa 10 ml 10% vodene otopine natrijevog karbonata i ekstrahira se sa 2 x 10 ml diklormetana. Spojeni organski ekstrakti se peru sa slanom otopinom (10 ml), suše preko kalijevog karbonata, filtriraju i koncentriraju, pri čemu se dobija 0.120 g piperidina kao gusto ulje. U otopinu ovog spoja u 5 ml diklormetana, dodaje se 0.132 g intermedijara kiseline dobijenog u Primjeru 21, Stupanj B, 0.055 g HOBT, 0.102 g EDC i miješa se 18 sati. Reakcijska smjesa se razblažuje sa 25 ml etra i pere se sa 15 ml 0.05N HCl, zasićenom otopinom natrijevog bikarbonata (15 ml), suši se preko MgSO4 i koncentrira. "Fleš" kromatografijom ostatka preko 20 g silika gela sa CH2Cl2-acetonom (5.1) kao eluentom, dobija se 0.094 g željenog proizvoda.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.60 (s, 2/3H), 8.50 (s, 1/3H), 7.70 (d, 2/3H), 7.60 (d, 1/3H), 7.35 (d, 2/3H), 7.30 (d, 1/3H), 7.26-7.00 (m, 5H), 6.90 (t, 11/3H), 6.40 (d, 2/3H), 5.28-5.16 (m, 1H), 5.05 (širok s, 1H), 4.41 (širok d, 2/3H), 4.32 (širok d, 1/3H), 3.78-3.65 (m, 2H), 3.56 (s, 2H), 3.55 (s, 1H), 3.50 (širok d, 1H), 3.20 (dt, 1H), 3.15 (ddd, 1H), 2.75 (t, 1H), 2.42 (m, 1H), 1.18 (d, 2H), 1.24 (s, 4H), 1.50 (s, 2H), 1.48 (s, 4H), 1.42 (s, 9H), 1.30-1.18 (m, 1H), 1.10-0.90 (m, 11/3H), 0.03 (dt, 2/3H).
Stupanj C: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-/1-metoksikarbonil-1-metiletansulfonil/-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid trifluoracetat
Otopina 0.094 g intermedijara iz Stupnja C se tretira sa 1 ml diklormetana i 1 ml trifluoroctene kiseline 30 minuta, uparava se do suha i triturira sa etrom, pri čemu se dobija 0.082 g željenog proizvoda.
1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ 7.70 (d, 2/3H), 7.60 (d, 1/3H), 7.35 (d, 2/3H), 7.30 (d, 1/3H), 7.26-7.00 (m, 5H), 6.90 (t, 11/3H), 6.40 (d, 2/3H), 5.28-5.16 (m, 1H), 5.05 (širok s, 1H), 4.41 (širok d, 2/3H), 4.32 (širok d, 1/3H), 3.78-3.65 (m, 2H), 3.56 (s, 2H), 3.55 (s, 1H), 3.50 (širok d, 1H), 3.20 (dt, 1H), 3.15 (ddd, 1H), 2.75 (t, 1H), 2.42 (m, 1H), 1.18 (d, 2H), 1.24 (s, 4H), 1.50 (s, 2H), 1.48 (s, 4H), 1.30-1.18 (m, 1H), 1.10-0.90 (m, 11/3H), 0.03 (dt, 2/3H).
PRIMJER 39
N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-3-amino-3-metilbutanamid hidroklorid
Stupanj A: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-3-amino-3-metilbutanamid
U suspenziju 1.14 g 1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro-/3H-indol-3,4'-piperidin hidroklorida (dobijenog kao što je opisano u Stupnju A, Primjera 18 (postupak 1) u 50 ml diklormetana, dodaje se 0.80 ml N-metilmorfolina, 1.00 g N-tBOC-D-triptofrana, 0.80 HOBT, i 1.20 q EDC i miješa se na sobnoj temperaturi 18 sati. Reakcijska smjesa se razblažuje sa 100 ml etra i pere se sa 50 ml 0.05N HCl, 50 ml zasićene otopine natrijevog bikarbonata, suši se preko MgSO4, i koncentrira.
Otopina gornjeg intermedijara u 50 ml etil acetata se tretira na 0ºC sa HCL (q) 2 minute, i zatim se miješa 1 sat. Dodaje se suh etar (50 ml), i staložena čvrsta supstanca se sakuplja filtracijom. Prinos je bio 1.44 q.
U 0.86 g amin hidroklorida u 30 ml diklormetana, dodaje se 0.24 ml N-metilmorfolina, 0.36 g HOBT, 0.56 g EDC, i miješa se preko noći. Reakcijska smjesa se razblažuje sa 100 ml etra, pere se sa 0.05N HCl (50 ml), 50 ml zasićene otopine NaHCO3, suši se preko MgSO4 i koncentrira. "Fleš" kromatografijom ostatka preko 20 g silika gela sa CH2Cl2-acetonom (5:1) kao eluentom, dobija se 0.74 g željenog proizvodfa.
U otopinu 0.74 g gornjeg intermedijara u 5 ml etil acetata na 0ºC provjetrava se suh plinski HCl 2 minuta i miješa se 30 minuta. Dodaje se etar da bi se potpuno staložio proizvod. ^vrsta supstanca se filtrira, pere se sa etrom pod dušikom, i suši se, pri čemu se dobija 0.57 g željenog proizvoda.
1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ 7.69 (d, 2/3H), 7.55 (d, 1/3H), 7.37-6.90 (m, 5H), 6.82 (širok t, 11/3H), 6.43 (d, 2/3H), 5.31-5.18 (m, 1H), 4.40 (širok d, 2/3H), 4.30 (širok d, 1/3H), 3.63-3.38 (m, 4H), 3.22-3.05 (m, 2H), 2.83-2.75 (m, 1H), 2.80 (s, 1H), 2.74 (s, 2H), 2.63 (dd, 1H), 2.55-2.43 (m, 2H), 2.20 (širok d, 1H), 1.70-1.53 (m, 1H), 1.38 (2H), 1.36 (s, 2H), 1.35 (s, 1H), 1.34 (s, 1H), 1.18 (širok d, 1H), 1.20-0.94 (m, 11/3H), 0.03 (dt, 2/3H).
PRIMJER 40
N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-/3-/2(R)-3-dihidroksipropil/-amino/-3-metilbutanamid hidroklorid
Stupanj A: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro-/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-/3-/2(R)-3-dihidroksilpropil/-amino/-3-metilbutanamid hidroklorid
U otopinu 0.30 g spoja dobijenog u Stupnju b, Primjera 39 u 5 ml suhog metanola, dodaje se 1.5 g anhidriranog natrijevog acetata, 0.30 g (R)-1,2-izopropiliden-glicerinaldehida (Tetrahedron 1985, 41, 3117) i miješa se 1 sat. Dodaje se THF otopina natrijevog cijanoborhidrida (8.7 ml 1M otopine) i miješa se 18 sati. Reakcijska smjesa se razblažuje sa 20 ml vode i ekstrahira se sa diklormetanom (3 x 10 ml). Spojeni organski ekstrakti se peru sa zasićenom otopinom natrijevog bikarbonata (10 ml), suše se preko K2CO3, i koncentriraju. "Fleš" kromatografijom preko 10 g silika gela sa CH2Cl2-metanolom (98:2) dobija se 0.146 g redukciono aminovanog spoja.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 8.70-8.40 (m, 2H), 7.63 (d, 2/3H), 7.55 (d, 1/3H), 7.37 (t, 1H), 7.32 (d, 1/3H), 7.28 (d, 2/3H), 7.20-6.95 (m, 41/3H), 6.52 (d, 2/3H), 5.20-5.08 (m, 1H), 4.55-4.24 (m, 3H), 4.10 (t, 2/3H), 4.05 (t, 1/3H), 3.80-3.70 (m, 1H), 3.70-3.50 (m, 4H), 3.30-3.10 (m, 2H), 2.84 (s, 1H), 2.80 (s, 2H), 2.80-2.70 (m, 2H), 2.68-2.45 (m, 1H), 2.37 (s, 2H), 1.70 (t, 2/3H), 1.52 (širok d, 1/3H), 1.44 (s, 2H), 1.43 (s, 1H), 1.35 (s, 2H), 1.33 (s, 1H), 1.25 (s, 3H), 1.33 (s, 6H), 1.20-1.05 (m, 2H), 0.90-0.65 (m, 1/3H), 0.30 (dt, 2/3H).
Stupanj B:
Otopina 0.146 g gornjeg intermedijara miješa se u 3 ml metanola i 0.100 ml koncentrirane klorovodične kiseline 30 minuta. Reakcijska smjesa se uparava do suha i čvrsta supstanca se pere sa etrom i suši, pri čemu se dobija 0.109 g željenog materijala.
1H NMR (400 MHz, CD3) δ 7.63 (d, 2/3H), 7.55 (d, 1/3H), 7.41 (d, 2/3H), 7.38 (d, 1/3H), 7.32 (d, 1/3H), 7.26 (d, 2/3H), 7.21-7.10 (m, 4H), 7.08-7.00 (m, 21/3H), 6.63 (d, 2/3H), 5.25 (dd, 2/3H), 5.19 (dd, 1/3H), 4.36 (širok d, 2/3H), 4.30 (širok d, 1/3H), 3.92-3.83 (m, 1H), 3.80-3.50 (m, 6H), 3.28-3.10 (m, 3H), 3.05-2.95 (m, 2H), 2.90 (s, 1H), 2.86 (s, 2H), 2.78-2.55 (m, 4H), 1.83-1.65 (m, 1H), 1.43 (s, 2H), 1.39 (s, 2H), 1.37 (s, 1H), 1.32 (s, 1H), 1.36-1.20 (m, 1H), 0.04-0.18 (m, 22/3H0, -0.08 (dt, 2/3H).
PRIMJER 41
N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-/3-/2(R)-hidroksipropil/-amino/-3-metilbutanamid hidroklorid
Stupanj A: N-/1(R)-/(1,2-dihidfro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-/3-/2(R)-hidroksipropil/-amino/-3-metilbutanamid hidroklorid
U 0.26 g intermedijara iz Stupnja B, Primjera 39, dodaje se 5 ml suhog metanola, 1.5 g anhidriranog natrijevog acetata, svježe pripremljenih 0.10 g 2(R)-(tetrahidropiranil)-oksi-propionaldehida i miješa se 1 sat na sobnoj temperaturi. Dodaje se THF otopina natrijevog cijanoborhidrida (8.5 ml 1M otopine) i miješa se 18 sati. Reakcijska smjesa se razblažuje se 10 ml zasićene otopine natrijevog bikarbonata i ekstrahira se sa diklormetanom (2 x 15 ml). Spojene organske otopine se peru sa slanom otopinom (10 ml), suše se preko K2CO3 i koncentriraju. "Fleš" kromatografijom ostatka preko 10 g silika gela sa CH2Cl2-metanolom (98:2) kao eluentom dobija se 0.219 g željenog proizvoda.
Gornji materijal se miješa u 3 ml suhog metanola sa 0.10 ml koncentrirane klorovodične kiseline, uparava se do suha, i ostatak se triturira sa etrom, pri čemu se dobija 0.174 g naslovnog spoja kao svjetlo žuta pjena.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.63 (d, 2/3H), 7.55 (d, 1/3H), 7.41 (d, 2/3H), 7.38 (d, 1/3H), 7.32 (d, 1/3H), 7.26 (d, 2/3H), 7.21-7.10 (m, 4H), 7.08-7.00 (m, 21/3H), 6.63 (d, 2/3H), 5.25 (dd, 2/3H), 5.19 (dd, 1/3H), 4.36 (širok d, 2/3H), 4.30 (širok d, 1/3H), 3.92-3.83 (m, 1H), 3.80-3.50 (m, 4H), 3.28-3.10 (m, 3H), 3.05-2.95 (m, 2H), 2.90 (s, 1H), 2.86 (s, 2H), 2.78-2.55 (m, 4H), 1.83-1.65 (m, 1H), 1.43 (s, 2H), 1.39 (s, 2H), 1.37 (s, 1H), 1.32 (s, 1H), 1.36-1.20 (m, 1H), 1.28 (d, 3H), 0.04-0.18 (m, 22/3H), -0.08 (dt, 2/3H).
PRIMJER 42
N-/1(R)-//3-oksospiro/izobenzofuran-1(3H), 4'-piperidin/-1'-il/-karbonil/-2-(fenilmetoksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid trifluoracetat
Stupanj A:
U 0.165 g intermedijara kiseline dobijenog kao što je opisano u Stupnju B, Primjera 19 u 10 ml CH2Cl2, dodaje se 0.095 g 3-oksospiro/izobenzofuran-1(3H), 4'-piperidina/, 0.067 g HOBT, i 0.110 g EDC i miješa se na sobnoj temperaturi 4 sata. Reakcijska smjesa se izruči u 10 ml CH2Cl2, i pere se sa 20% vodene otopine i limunske kiseline (5 ml), zasićenom otopinom natrijevog bikarbonata (5 ml), suši se preko MgSO4 i koncentrira. "Fleš" kromatografijom ostatka preko 10 g silika gela sa heksanom-acetonom (3:1) kao eluentom dobija se 0.234 g kuplovanog proizvoda.
U otopinu 0.024 g gornjeg intermedijara u 1 ml CH2Cl2, dodaje se 1.0 ml trifluorooctene kiseline i održava se na sobnoj temperaturi 30 minuta. Isparljive supstance se uparavaju i ostatak se triturira sa etrom, pri čemu se dobija 21 mg naslovnog spoja kao čvrsta supstanca.
1H NMR (CD3OD, 400 MHz) δ 7.85 (d, 1/2H), 7.80 (d, 1/2H), 7.63 (t, 1/2H), 7.54-7.40 (m, 21/2H), 7.35-7.20 (m, 51/2H), 7.06 (d, 1H), 6.58 (d, 1/2H), 5.25-5.15 (m, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.69 (širok d, 1H), 4.55-4.40 (m, 2H), 4.14 (širok d, 1H), 3.70-3.40 (m, 2H), 3.18-3.10 (m, 1H), 2.13 (dt, 1H), 2.90-2.75 (m, 2H), 2.70-2.50 (m, 2H), 1.47 (s, 1.5H), 1.46 (s, 1.5H), 1.44 (s, 1.5H), 1.43 (s, 1.5H).
PRIMJER 43
N-/1(R)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-4-fenilbutil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stupanj A: N-/1(R)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro-/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-4-fenilbutil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Ovaj spoj je dobijen iz 2(R)-N-t-butoksi-karbonil-5-fenilpentanove kiseline i 1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/hidroklorida koristeći hemizam opisan za dobijanje spoja u Primjeru 18.
FAB-MS izračunato za C28H38N4O4S: Mol. tež. = 526.2; nađeno m/e=(m+1) 527.9.
PRIMJER 44
N-/1(R)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-fenilmetiltio)etil/-2-amino-2-metilpropanamid trifluoracetat
Stupanj A: N-/1(R)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-fenil-metiltio)etil/-2-amino-2-metilpropanamid trifluoracetat
Ovaj spoj je dobijen iz komercijalno dostupnog N-t-BOC-S-benzil-D-cisteina i 1,2-dihidro-1-metansulfonil-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/hidroklorida koristeći hemizam opisan za dobijanje spoja u Primjeru 18.
FAB-MS izračunato za C27H36N4O4S2: Mol. tež. = 544.7; nađeno m/e = (m+1) 548.5.
PRIMJER 45
N-/1(R,S)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(2'-piridometiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid trifluoracetat
Stupanj A: 1,1-dimetiletil estar N-/1(R,S)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-
il)karbonil/-2-hidroksi-karbaminske kiseline
U otopinu N-t-BOC-(D)-serina (56 mg, 274 mmola) u 2.5 ml THF na sobnoj temperaturi, dodaje se 1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/ hidroklorida (dobijenog iz Primjera 18, Stupanj A, 83 mg, 0.274 mmola), trietilamina (45 ml, 0.33 mmola), HOBT (44 mg, 0.33 mmola), i EDC (63 mg, 0.33 (mmola). Poslije 3 sata, smjesa se razblažuje sa etil acetatom i zatim se pere jedno za drugim sa vodom i slanom otopinom. Organski sloj se suši preko natrijevog sulfata, filtrira i koncentrira. Ostatak se prečišćuje pomoću MPLC (silika gel, 100% etil acetata), pri čemu se dobija 112 mg (90%) naslovnog spoja.
Stupanj B: 1,1-dimetiletil estar N-/1(R,S)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-
il)karbonil/-2-(2'-piridometiloksi)etil/karbaminske kiseline
U natrijev hidrid oslobođen ulja (dobijen iz 60% uljane disperzije natrijevog hidrida pranjem sa heksanima (3 x), 9 mg, 0.21 mmola), u 0.3 ml THF, dodaje se 2-pikolil klorid (16 mg, 0.1 mmola) u 0.3 ml DMF. Poslije 5 minuta, u reakcijsku smjesu se dodaje intermedijar dobijen iz Stupnja A (45 mg, 0.1 mmola). Smjesa se miješa na sobnoj temperaturi dva sata i zatim se razblažuje sa etrom. Etarski sloj se pere sa vodom (5 x), slanom otopinom i suši se preko natrijevog sulfata. Poslije prečišćavanja (Preparativna - TLC, silika gel, 100% etil acetata), izolirano je 16 mg naslovnog spoja (29%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3, smjesa rotamera): 8.53 (m, 1H), 7.77-6.83 (m, 7H), 5.75 (m, 1/2H), 4.98 (m, 2H), 4.67 (m, 2 1/2H), 4.25 (m, 1/2H), 4.10 (m, 1/2H), 3.91-3.67 (m, 4H), 3.17 (m, 1H), 2.91 (s, 3/2H), 2.89 (s, 3/2H), 2.79 (m, 1H), 1.95-1.69 (m,4H), 1.42 (s, 9/2H), 1.41 (s, 9/2H).
Stupanj C: N-/1(R,S)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro-/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(2'-piridometiloksi)etil/-2-amino-2-metil-propanamid trifluoracetat
Otopina intermedijara dobijenog iz Stupnja B (16 mg, 0.029 mmola) u 0.5 ml trifluoroctene kiseline miješa se na sobnoj temperaturi 1/2 sata i zatim se koncentrira. U otopinu ovog ostatka u 1 ml kloroforma, dodaje se t-butiloksikarbonil--metilalanin (6.5 mg, 0.032 mmola), HOBt (4.3 mg, 0.032 mmola), trietilamin (10 ml, 0.064 mmola), i EDC (6 mg, 0.032 mmola). Poslije 12 sati na sobnoj temperaturi, smjesa se razblažuje sa metilen kloridom i zatim se pere sa vodom i slanom otopinom. Organski sloj se suši preko natrijevog sulfata, filtrira i koncentrira. Ostatak se prečišćuje Preperatidvnom-TLC (silika gel, 100% etil acetata). Prečišćeni spoj se koncentrira. U ostatak se dodaje na sobnoj temperaturi trifluoroctena kiselina. Poslije 1 sata smjesa se koncentrira, pri čemu se dobija naslovni spoj (5.3 mg).
1H NMR (400 MHz, CD3OD, smjesa rotamera): 8.70 (širok s, 1H), 8.30 (m, 1H), 7.84 (m, 1H), 7.77 (m, 1H), 7.36 (m, 1H), 7.24 (m, 1 1/2H), 7.06 (m, 1 1/2H), 5.24 (t, 6 Hz, 1H), 4.86 (m, 2H), 4.56 (d, 13 Hz, 1H), 4.08 (m, 1H), 3.95 (m, 4H), 3.36 (m, 1H), 2.97 (s, 3/2H), 2.96 (s, 3/2H), 2.01-1.78 (m, 4H), 1.63 (s, 3/2H), 1.61 (s, 3/2H), 1.59 (s, 3/2H), 1.58 (s, 3/2H).
PRIMJER 46
N-/1(R,S)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(2'-piridotio)etil/-2-amino-2-metilpropanamid trifluoracetat
Stupanj A: 1,1-dimetiletil estar N-/1(R,S)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-
il)karbonil/-2-(2'-piridotio)etil/karbaminske kiseline
U natrijev hidrid oslobođen ulja (600 mg, 7.5 mmola) u obliku suspenzije u 20 ml DMF, dodaje se N-tBOC-D-cistein (1.2 g, 5.4 mmola) u 20 ml DMF na -10ºC. Smjesa se zagrijava do sobne temperature i miješa se još jedan sat. Dodaje se otopina 2-brompiridina (0.514 ml, 5.4 mmola) u 10 ml DMF. Poslije zagrijavanja 20 sati na 80ºC. U ovu reakcijsku smjesu se dodaje CuI (1.03 g, 5.4 mmola) i miješa se na istoj temperaturi još 20 sati. Smjesa se ohladi na sobnu temperaturu i izrući se u 0.5N klorovodičnu kiselinu i ekstrahira se sa etrom. Etarski sloj se filtrira kroz Celit, suši se preko natrijevog sulfata i koncentrira. Ostatak se prečišćuje pomoću MPLC (silika gel, metilen klorid/metanol = 10/1). U prečišćeni spoj (170 mg, 0.57 mmola) u metilen kloridu, dodaje se 1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/hidroklorid (dobijen iz Primjera 18, Stupanj A, 172 mg, 0.57 mmola), trietilamina (95 ml, 0.68 mmola) HOBt (92 mg, 0.68 mmola) i EDC (130 mg, 0.68 mmola) i reagira prema postupku opisanom u Primjeru 45, Stupanj A, pri čemu se dobija naslovni spoj (310 mg, 99%).
Stupanj B: N-/1(R,S)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro-/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(2'-piridotio)etil/-2-amino-2-metilpropanamid trifluoracetat
Dobijen je iz intermedijara dobijenog iz Stupnja A (290 mg, 0.53 mmola) pomoću TFA postupka oslobađanja od zaštite. Dobija se naslovni spoj (102 mg).
1H NMR (400 MHz, CD3OD, smjesa rotamera): 8.45 (dd, 1, 1 Hz, 1H), 7.61 (m, 1H), 7.39-7.05 (m, 6H), 5.27 (m, 1H), 4.52 (t, 12 Hz, 2H), 4.01 (m, 3H), 3.80 (m, 1H), 3.45 (m, 1H), 2.98 (s, 3H), 2.90 (m, 1H), 2.10-1.79 (m, 4H), 1.63 (s, 3/2H), 1.60 (s, 3/2H), 1.59 (s, 3/2H), 1.58 (s, 3/2H), FAB-MS: 532.7 (M+1).
PRIMJER 47
N-/1(R,S)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(cikloheksiltio)etil/-2-amino-2-metilpropanamid trifluoracetat
Stupanj A: N-t-Boc-cikloheksilcistein
U otopinu cikloheksilmerkaptana (1 ml, 8.18 mmola) i metil 2-acetamidoakrilata (1.29 g, 9 mmola) u THF, dodaje se katalitička količina natrijevog hidrida na sobnoj temperaturi. Poslije 7 dana, reakcija se koncentrira. Otopina ostatka u 20 ml 6 N klorovodične kiseline se refluksira 4 sata i ohladi se na sobnu temperaturu. Dobijena otopina se ostavi da stoji 12 sati i profiltrira se. Čvrste supstance se suše u vakuumu. U smjesu ove kisele hidrokloridne soli u 1 N natrijeve hidroksidne otopine (15 ml), dodaje se di-t-butil dikarbonat (1.68 g, 7.7 mmola) u 15 ml 1,4-dioksana. Poslije 12 sati, smjesa se izruči u 0.5 N klorovodičnu kiselinu i ekstrahira se sa etil acetatom. Organski sloj se pere sa vodom, slanom otopinom i suši se preko natrijevog sulfata. Poslije filtracije i koncentriranja, izolira se naslovni spoj u 92% prinosu (2.23 g).
Stupanj B: 1,1-dimetiletil estar N-/1(R,S)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-
il)karbonil/-2-(cikloheksiltio)etil/karbaminske kiseline
Dobiven je iz intermedijara dobijenog iz Stupnja A (303 mg, 1.0 mmola) postupkom opisanim u Primjeru 45, Stupanj A, pri čemu se dobija naslovni spoj (420 mg) u 76% prinosu.
Stupanj C: N-/1(R,S)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro-/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(cikloheksiltio)etil/-2-//(1,1-dimetiletiloksi)-karbonil/amino/-2-metilpropanamid
Otopina intermedijara dobijenog iz Stupnja B (420 mg, 0.76 mmola) u 5 ml trifluoroctene kiseline, miješa se na sobnoj temperaturi 1/2 sata i zatim se koncentrira i suši. U otopini ovog ostatka u 10 ml kloroforma, dodaje se t-butiloksi-karbonil- α -metilalanin (170 mg, 0.84 mmola), HOBt (113 mg, 0.84 mmola), trietilamin (116 ml, 0.84 mmola), i EDC (160 mg, 0.84 mmola). Poslije 12 sati na sobnoj temperaturi, smjesa se razblažuje sa metilen kloridom i pere se sa vodom i slanom otopinom. Organski sloj se suši preko natrijevog sulfata, filtrira i koncentrira. Ostatak se prečišćuje pomoću MPLC (silika gel, heksan/etil acetat = 1/1), pri čemu se dobija naslovni spoj (430 mg) u 89% prinosu.
Stupanj D: N-/1(R,S)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro-/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(cikloheksiltio)etil/-2-amino-2-metilpropanamid trifluoracetat
Otopina intermedijara dobijenog iz Stupnja C (35 mg, 0.055 mmola) u 0.5 ml trifluoroctene kiseline miješa se na sobnoj temperaturi 1/2 sata i zatim se koncentrira, pri čemu se dobija naslovni spoj (33 mg).
1H NMR (400 MHz, CD3OD, smjesa rotamera): 7.38 (d, 8 Hz, 1H), 7.25-7.17 (m, 2H), 7.06 (m, 1H), 5.02(m, 1H), 4.52 (m, 1H), 4.11 (m, 1H), 3.97 (m, 2H), 3.39 (m, 1H), 3.02 (m, 1H), 2.98 (s, 3H), 2.90-2.71 (m, 3H), 2.05-1.74 (m, 9H), 1.62 (s, 3/2H), 1.61 (s, 3/2H), 1.60 (s, 3/2H), 1.57 (s, 3/2H), 1.32 (m, 5H). FAB-MS: 537.9 (M+1).
PRIMJER 48
N-/1(R,S)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-0il)karbonil/-2-(cikloheksilsulfonil)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
U otopinu intermedijara dobijenog iz Primjera 47, Stupanj C (35 mg, 0.055 mmola) u 1 ml metanola, dodaje se na sobnoj temperaturi natrijev perjodat u 1 ml vode. Poslije nekoliko sati, reakcijska smjesa se razblažuje sa etil acetatom i pere se sa vodenom otopinom natrijevog sulfita. Organski sloj se suši preko natrijevog sulfata, filtrira se i koncentrira.
Oslobađanjem od zaštite ostatka, pomoću postupka sa trifluoroctenom kiselinom (Primjer 47, Stupanj D) dobija se sirovi proizvod, koji se prečišćuje pomoću preparativne TLC (silika gel, metilen klorid/metanol/amonijev hidroksid = 10/1/0.1).
Prečišćeni proizvod se ponovno zakiseljava sa HCl u etru, pri čemu se dobija naslovni spoj (21 mg).
1. 1H NMR (400 MHz, CD3OD, smjesa dijastereoizomera i rotamera):
7.38-7.04 (m, 4H), 5.43 (m,1H), 4.50 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 3.96 (m, 2H), 3.38 (m, 1H), 3.13 (m, 1H), 2.98 (s, 3H), 2.90-2.71 (m, 3H), 2.05-1.74 (m, 9H), 1.62 (m, 6H), 1.51-1.32 (m, 5H). FAB-MS: 553.9 (M+1).
PRIMJER 49
N-/1(R,S)-/1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(cikloheksilsulfonil)etil/-2-amino-2-metil propanamid hidroklorid
U otopinu intermedijara dobijenog iz Primjera 47, Stupanj C (35 mg, 0.055 mmola) u 1 ml metanola, dodaje se OXONE u 1 ml vode na sobnoj temperaturi. Poslije nekoliko sati, reakcijska smjesa se razblažuje sa etil acetatom i pere se sa vodenom otopinom natrijevog sulfita. Organski sloj se suši preko natrijevog sulfata, filtrira i koncentrira.
U ostatak se dodaje trifluoroctena kiselina postupkom opisanim u Primjeru 47, Stupanj D, pri čemu se dobija sirovi proizvod, koji se prečišćuje preparativnom -TLC (silika gel, metilen klorid/metanol/amonijev hidroksid = 10/1/0.1). Prečišćeni proizvod se ponovno zakiseljava sa HCl u etru, pri čemu se dobija naslovni spoj (12 mg).
1H NMR (400 MHz, CD3OD, smjesa rotamera ): 7.36 (dd, 7, 2 Hz, 1H), 7.22 (m, 2H), 7.06 (m, 1H), 5.53 (m, 1H), 4.51 (m, 1H), 4.11 (m, 1H), 3.95 (m, 2H), 3.49 (m, 2H), 3.38 (m, 1H), 3.10 (m, 1H), 2.98 (s, 3/2H), 2.97 (s, 3/2H), 2.91 (m, 1H), 2.20-1.74 (m, 9H), 1.62 (s, 3/2H), 1.61 (s, 3/2H), 1.58 (s, 3/2H), 1.57 (s, 3/2H), 1.51-1.32 (m, 5H), FAB-MS: 569.9 (M+1).
PRIMJER 50
N-/1(R)-/spiro/benzo/b/tiofen-3(2H), 4'-piperidin/-1'-il karbonil-2-indol-3-il/etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Stupanj A: 1-1/(1,1-dimetiletoksi)karbonil/-3-hidroksi-4-metilen-1,2,5,6-tetrahidropiridin
U suspenziju/otopinu metiltrifenilfosfonijevog jodida (30 g, 74 mmola) u 150 ml THF dodaje se lagano butillitijum (2.5 N, 25.5 ml, 63.7 mmola) na 0ºC. Poslije miješanja jedan sat na sobnoj temperaturi, dodaje se u reakcijsku smjesu lagano na sobnoj temperaturi N-tBOC zaštićeni 4-piperidin (dobijen iz 4-piperidon monohidrat hidroklorida postupkom opisanim u Protective Groups in Organic Synthesis T.W. Greene, John Wiley and Sons, NY, 1981) u 50 ml THF. Reakcija se miješa 2 sata i filtrira. Filtrat se koncentrira i prečišćuje se (MPLC, silika gel, heksan/etil acetat = 10/1), pri čemu se dobija Wittigov proizvod (7.9 g) u 82% prinosu.
U suspenziju selendioksida/silika gela (dobijenu prema postupku opisanom u Chem. lett. 1981, 1703) u 30 ml metilen klorida, dodaje se t-butil vodikov peroksid (1.23 ml). Poslije 15 minuta dodaje se Wittig-ov proizvod (0.72 g, 3.69 mmola) u 5 ml metilen klorida. Zamućena otopina se miješa 3 sata i filtrira se kroz Celit. Filtrat se pere sa vodom, slanom otopinom i suši preko natrijevog sulfata. Organski sloj se koncentrira i prečišćuje se "fleš" kromatografijom (heksani/etil acetat = 4/1), pri čemu se dobija naslovni spoj u 52% prinosu (0.41 g).
Stupanj B: 1-/(1,1-dimetiletoksi)karbonil/-4-klormetil-1,2,5,6-tetrahidropiridin
Intermedijar dobijen iz Stupnja A (400 mg, 1.88 mmola) otapa se u 10 ml benzola, i dodaje se tionil klorid/165 ml, 2.26 mmola) i zagrijava se na 60ºC 25 minuta. Dobijena smjesa se izruči u vodenu otopinu NaHCO3 i ekstrahira se sa etrom. Etarski sloj se suši preko magnezijevog sulfata i koncentrira se, pri čemu se dobija naslovni spoj (333 mg, 77%).
Stupanj C: 1-/(1,1-dimetiletoksi)karbonil/-4-//(2-bromfenil)tio/metil-1,2,5,6-tetrahidropiridin
Intermedijar dobijen iz Stupnja B (330 mg, 1.43 mmola) otapa se u 10 ml acetona i dodaje se 2-bromtiofenol (172 ml, 1.43 mmola) i kalijev karbonat (390 mg, 2.86 mmola). Reakcijska smjesa se zagrijava na 60ºC jedan sat i zatim se filtrira kroz silika gel (100% etra). Organski sloj se koncentrira i prečišćuje pomoću "fleš" kromatografije (silika gel, heksani/etil acetat = 10/1), pri čemu se dobija naslovni spoj u 84% prinosu (460 mg).
Stupanj D: 1'-/(1,1-dimetiletoksi)karbonil/-spiro/benzo/b/-tiofen-3-(2H), y'-piperidin
Intermedijar dobijen iz Stupnja C (450 mg, 1.17 mmola) otapa se u 60 ml benzola i dodaje se AIBN (10 mg) i tributilkalaj hidrid (644 ml, 2.39 mmola). Ova smjesa se refluksira 2 sata i koncentrira se. Ostatak se otapa u etru i dodaje se brom, sve dok reakcijska otopina ne dobije smeđu boju. U ovu smeđu otopinu dodaje se ukapavanjem na sobnoj temperaturi DBU (650 ml). Dobijena zamućena otopina se filtrira kroz silika gel i pere se sa etrom. Etarska otopina se koncentrira i ostatak se prečišćuje radijalnom kromatografijom (silika gel, heksani/etil acetat = 10/1), pri čemu se dobija naslovni spoj (157 mg) u 43% prinosu.
Stupanj E: N-/1(1R)-/spiro/benzo/b/tiofen-3(2H), y'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-
metilpropanamid hidroklorid
Otopina intermedijara dobijenog iz Stupnja D (50 mg, 0.164 mmola) u 0.5 ml TFA, miješa se na sobnoj temperaturi 1/2 sata i zatim se koncentrira. Ostatak se razblažuje sa kloroformom i pere se sa vodenom otopinom NaHCO3. Organski sloj se suši preko natrijevog sulfata, filtrira i koncentrira, pri čemu se dobija slobodni amin (32 mg) u 95% prinosu. Otopini slobodnog amina (5.1 mg, 0.025 mmola) u 1 ml kloroforma dodaje se intermedijar dobijen iz Primjera 21, Stupanj C (9.2 mg, 0.0246 mmola), HOBt (4.0 mg 0.0295 mmola) i EDC (5.6 mg, 0.0295 mmola) na sobnoj temperaturi. Poslije 12 sati, reakcijska smjesa se izruči u vodu i ekstrahira se sa kloroformom.
Kloroformski sloj se suši preko natrijevog sulfata, filtrira i koncentrira. Ostatak se prečišćuje preparativnom-TLC (silika gel, heksani/etil acetat = 1/1), pri čemu se dobija bezbojna pjena (13 mg, 94%). Naslovni spoj se dobija iz ove bezbojne pjene prema postupku opisanom uPrimjeru 18, Stupanj C.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) smjesa rotamera: δ 7.62 (d, 8 Hz, 2/3H), 7.54 (d, 8 Hz, 1/3H), 7.39 (d, 8 Hz, 2/3H), 7.35 (d, 8 Hz, 1/3H), 7.19-7.00 (m, 6 1/3H), 2.62 (m, 1H), 1.72-1.65 (m, 2 1/3H), 1.61 (s, 4H), 1.50 (s, 2H), 0.94 (m, 1H), 0.10 (m, 2/3H). FAB-MS 477 (m+1).
PRIMJER 51
Stupanj A: 1',2-dimetilspiro/izoindolin-1-on-3,4'-piperidin/
U otopinu koja se miješa 2-metilizoindolin-1-ona (1.47 g 10 mmola, koji se nabavlja od Aldrich Chemical company) i mekloretamin hidroklorida (2.9 gm 15 mmola) u DMF (50 ml) na 0ºC pod Ar, dodaje se lagano kalijev hidrid (35% u mineralnom ulju, 4.5 g 40 mmola). Reakcijska smjesa se tada lagano zagrijava do sobne temperature i miješa se još 3 sata. TLC (60% etil acetata u heksanu) pokazuje da je reakcija završena. Smjesa se lagano izruči na led, i ekstrahira sa etil acetatom šest puta. Spojeni organski ekstrakti se suše (Na2SO4) i uparavaju. Ostatak se prečišćuje "fleš" kromatografijom eluiranjem sa gradijentom otapala od 5-10% metanola u diklormetanu, pri čemu se dobija 1.17 g proizvoda.
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.85 (dd, J=1.5 Hz, 6.5 Hz, 1H), 7.81 (d, J=7.1 Hz, 1H), 7.50-7.40 (m, 2H), 3.03 (s, 3H), 2.95-2.90 (m, 2H), 2.71 (dt, J=2.6 Hz, 11.4 Hz, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.31 (dt, J=4.7 Hz, 13 Hz, 2H), 1.44 (dd, J=1.6 Hz, 13 Hz, 2H).
FAB-MS izračunato za C14H18N2O, 230; nađeno 231 (M+H).
Stupanj B: 2-metilspiro/izoindolin-1-on-3,4'-piperidin/
Postupak demetilacije je prema Tidwell-u i Buchwald-u, J. Org. Chem. 1992, 57, 6380-6382. U otopinu koja se miješa, proizvoda iz Stupnja A (1.0 g, 4.35 mmola) u 1,2-dikloretanu (10 ml) na 0ºC dodaje se 1-kloretil klorformijat (0.56 ml, 5.2 mmola) i smjesa se miješa 20 minuta. Dodaje se metanol (10 ml) i dobijena smjesa se refluksira jedan sat. Uparavanjem i prečišćavanjem fleš kromatografijom na koloni eluiranjem sa 10-20% NH4OH-MeOH (1:10) u kloroformu, dobija se 0.63 g proizvoda.
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.02 (d, J=8 Hz, 1H0, 7.85 (d, J=8 Hz, 1H), 7.70 (t, J=8Hz, 1H), 7.60 (t, J=8 Hz, 1H), 3.75-3.60 (m, 4H), 3.10 (s, 3H), 2.60-2.51 (m, 2H), 1.72 (širok d, J=14 Hz, 2H).
EI MS izračunato za C13H16N2O 216; nađeno 301 (M+, 5%), 216 (M+), 185, 160.
Stupanj C: 1,1-dimetiletil estar 2-metilspiro/izoindolin-1-on-3,4'-piperidin/-1'-karboksilne kiseline
U otopinu koja se miješa 2-metilizoindolin-1-ona (100 mg) u DMF (2 ml), dodaje se višak KH u mineralnom ulju na 0ºC pod Ar. Poslije 5 minuta, dodaje se bis(2-brometil)t-butil karbamat (300 mg) i smjesa se miješa na sobnoj temperaturi 1 sat i zagrijava se na 80ºC preko noći. Smjesa se sipa na led, i ekstrahira se sa etil acetatom. Organski ekstrakti se suše (Na2SO4) i uparavaju. Ostatak se prečišćuje preparativnom TLC eluiranjem sa 60% etil acetata u heksanu, pri čemu se dobija 16 mg proizvoda.
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.89 (dd, J=1.3 Hz, 5.8 Hz, 1H), 7.75 (d, J=6.5 Hz, 1H), 7.54-7.40 (m, 2H), 4.35-4.10 (širok m, 2H), 3.02 (s, 3H), 2.14 (dt, J=5.3 Hz, 13 Hz, 2H), 1.49 (s, 9H), 1.46-1.40 (m, 2H).
FAB-MS izračunato za C18H24N3O3, 316; nađeno 317 (M+H, 100%).
Stupanj D: 2-metilspiro/izoindolin-1-on-3,4'-piperidin/
Intermedijar iz Stupnja C (16 mg) tretira se sa koncentriranom HCl i MeOH na sobnoj temperaturi 2 sata i uparava se, pri čemu se dobija željeni proizvod.
Svi spektralni podaci za ovaj spoj su isti kao u Stupnju B.
Stupanj E: N-/1(R)-/(2-metilspiro/izoindolin-1-on-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-//(1,1-dimetiletiloksi)karbonil/amino/-2-metilpropanamid
Spoj je dobijen prema standardnoj tehnologiji peptidnog kuplovanja iz (R)-//2-//(1,1-dimetiletoksi)karbonil/-amino/-2,2-dimetil-1-okosetil/amino/-1H-indol-3-propionske kiseline (25 mg) i proizvoda iz Stupnja B.
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.58, 8.44 (2 širok s, 1H), 7.80-7.15, 6.44 (m, d, J=7.6 Hz, totalno 10H), 5.43-5.36, 5.22-5.15 (2M, 1H), 4.98 (širok s, 1H), 4.60-4.50 (širok m, 1H), 3.64-3.50 (širok m, 1H), 3.40-3.05, 2.72 2.64 (2m, 4H), 2.88, 2.51 (2s, 3H), 2.00-1.90 (m, 2H), 1.52, 1.51 (2s, 3H), 1.49 (s, 3H), 1.45, 1.44 (2s, 9H), 1.40-0.40 (nekoliko m, 2H).
FAB-MS izračunato za C33H41N5O5, 587; nađeno 588 (M+H), 532, 488.
Stupanj F: N-/1(R)-/(2-metilspiro/izoindolin-1-on-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hirodklorid
Naslovni spoj je dobijen upotrebljavajući HCl u etil acetatu iz proizvoda iz Stupnja E.
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.84-6.89 (m, 9H), 5.30, 5.15 (2 dd, 1H), 4.50-4.40 (m, 1H), 3.85-3.77 (m, 1H), 3.65-3.50 (m), 3.40-3.15 (m), 2.95, 2.58 (2s, 3H), 2.95-2.85 (m), 2.55-2.47 (m), 2.22-2.15 (m), 2.09-2.00 (m), 1.65, 1.64, 1.60 (3s, 6H), 1.50-1.20 (m), 1.15-1.05 (m), 0.9-0.8 (m), 0.61-0.52 (m).
FAB-MS izračunato za C28H33N5O3, 471; nađeno 472 (M+H).
PRIMJER 52
N-/1(R)-//1-/////6-///4-azido-2-hidroksi-5-jodfenil/karbonil/-amino/-heksilino/karbonil/metil/sulfonil/-2,3-dihidrospiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il/karbonil/-2-(fenilmetiloksi)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
U otopinu komercijalno dostupnog N-hidroksisukcimidil-4-azido-2-hidroksi-benzoata u 5 ml CH2Cl2, dodaje se 6-N-t-butoksikarbonil-n-heksilamin hidroklorida u 0.10 ml Hunig's-ove baze i miješa se 4 h. Reakcijska smjesa se uparava do suha i kromatografira se na 15 g silika gela. Eluiranjem sa heksanima-etil acetatom (2:1), dobija se 0.229 g acetiliranog proizvoda. U 29 mg gornjeg materijala dodaje se 2 ml THF i 2 ml 0.01 M vodene otopine NaOH, 25 mg kalijevog jodida. Dodaje se kloramin-T (15 mg) i miješa se 30 minuta. Reakcija se zaustavi sa 2 ml zasićene otopine natrijevog tiosulfata, razblažuje se sa5 ml 0.05 N HCl i ekstrahira se sa etil acetatom (2 x 5 ml). Spojeni organski ekstrakti se peru sa slanom otopinom (5 ml), suše preko MgSO4 i koncentriraju. "Fleš" kromatografijom ostatka (5 g silika gela) sa heksanom -etrom (3:1) dobija se 26 mg jodiranog materijala. Deprotekcija N-tBOC vrši se sa 4M HCl u etil acetatu, pri čemu se dobija 21.4 mg hidroklorida.
U otopinu ovog materijala u 5 ml CH2Cl2 dodaje se 49 mg intermedijara kiseline iz Stupnja A iz Primjera 33, 0.016 ml NMM, 19.8 mg HOBT, i 29 mg EDC i miješa se 18 sati. Reakcija se obrađuje i prečišćuje na uobičajen način.
Ponovno se još jednom vrši deprotekcija N-tBOC grupe sa 4M HCl u etil acetatu. Ovo daje naslovni spoj kao žutomrku čvrstu supstancu. Ovaj materijal se zaalkalira otapanjem u 2 ml zasićene otopine NaHCO3 i ekstrahira se sa CH2Cl2 (2 x 3 ml). Spojeni organski ekstrakti se suše preko Na2SO4 i koncentrira se, pri čemu se dobija naslovni spoj.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) spoj egzistira kao 3:2 smjesa rotamera. 8.40-8.20 (m, 1H), 7.95 (s, 2/3H), 7.90 (s, 1/3H), 7.40-6.90 (m, 9 1/3H), 6.70 (s, 2/3H), 6.55 (m, 1H), 5.20-5.10 (m, 1H), 4.70-4.40 (m, 4H), 4.10-3.80 (m, 5H), 3.80-3.50 (m, 4H), 3.40-3.10 (m, 4H), 3.10-3.00 (m, 1H), 2.70 (dt, 1H), 1.90-1.20 (m, 14H), 1.30 (s, 6H).
PRIMJER 53
N-/1(S)-/(1,2-dihidro-1-metilsulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetilsulfonil)etil/-2-amino-2-metil-propanamid hidroklorid
Stupanj A: N-/1(S)-/(1,2-dihidro-1-metilsulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetilsulfonil)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid
Uzorak N-/1(S)-/(1,2-dihidro-1-metilsulfonilspiro-/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiltio)etil/-2-//1,1-dimetiletiloksi)karbonil/amino/-2-metilpropanamida (Primjer 44, Stupanj C), 72 mg, otapa se u 0.5 ml metanola i ohladi se u kupaoni sa ledom. U ovu otopinu se dodaje, ukapavanjem uz miješanje otopina 101 mg OXONE (TM) u 0.5 ml vode. Reakcija se prati nekoliko sati pomoću TLC na silika gel GF pločama, razvijenim sa 2:1 EtOAc: heksanom; uočene su dvije polarnije mrlje koje rastu vremenom na trošak polaznog materijala. Kada je polazni materijal suštinski utrošen, reakcijska smjesa se dovodi skoro do suha pod strujom dušika, i ostatak se ekstrahira sa kloroformom. Sa MgSO4 osušeni ekstrakt se podvrgava preparativnoj TLC na 8" x 1,000 µ silika gel GF pločama, razvijenim sa EtOAc: heksanom; izolirane su dvije trake. Manja polarna komponenta se otapa u 0.5 ml anizola, ohladi se u ledenoj-kupaoni, i tretira se sa 0.5 ml TFA. Reakcija se zaustavlja i uklanja se iz kupaone. Poslije 30 minuta, uklanja se TFA pod aspiratorom u vakuumu, a količina preostalog anizola se uparava pod strujom dušika. Ostatak se preuzima u kloroformu i mućka se sa 1M K2HP4, u koji je dodano dovoljno NaOH da bi se dobio pH 9. Tada se uklanja se kloroform i vodena faza se ekstrahira nekoliko puta sa kloroformom, spojene organske faze se suše sa MgSO4 i koncentriraju pod smanjenim pritiskom do gume. Preparativna TLC na silika gel pločama sa 0.5:5:95 konc. NH4OHMeOH:CHCl3 daje slobodnu bazu naslovnog spoja.
Izračunato za C27H36N4O6S2: Mol. tež. = 576.7; nađeno m/e = (m+1) 577.5.
Stupanj B: N-/1(S)-/(1,2-dihidro-1-metilsulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetilsulfonil)etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorid
Hidrokloridna sol spoja iz Stupnja A gore, dobija se upotrebljavajući standardne postupke opisane gore koji daju naslovni spoj.
PRIMJER 54
Dobijanje dva N-/1(S)-/(1,2-dihidro-1-metilsulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetilsulfonil)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid hidroklorida
Stupanj A: N-/1(S)-/(1,2-dihidro-1-metilsulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetilsulfonil)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid
Podvrgavanjem polarnije trake iz Stupnja A, Primjer 53, TFA/anizol deblokirajućem postupku opisanom tamo, a zatim istom preparativnom TLC obradom, izolirane su dvije trake, koje odgovaraju za dva očekivana dijastereoizomerna sulfoksida. Za manje polarni dijastereoizomer, izračunato za C27H36N4O5S2: Mol. tež = 560.7; nađeno m/e = (m+1) 561.7.
Za polarniji dijastereoizomer: izračunato za C27H36N4O5S2: Mol. tež = 560.7; nađeno m/e = (m+1) 561.7.
Stupanj B: N-/1(S)-/(1,2-dihidro-1-metilsulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetilsulfonil)etil/-2-amino-2- metilpropanamid hidroklorid
Naslovni spoj je dobijen zamjenjujući bilo koji od spojeva izoliranih iz Stupnja A gore, spoj dobijen u Stupnju A, Primjer 53; Stupnju B, Primjer 53.
PRIMJER 55
N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid mezilat
Ovaj spoj je dobijen tretiranjem slobodne baze dobijene u Primjeru 18, Stupanj c, sa metan sulfo kiselinom. Naslovni spoj je dobijen prekristaliziranjem ovoga iz etil acetata-etanola-vode, t.t. = 166-168ºC.
PRIMJER 56
2,3,3a,4,6,6a-heksahidro-2-okso-1H-tieno/3,4-d/imidazol-4(S)-pentanova kiselina-6-/////1'-//(29R)-//2-amino-2-metil-1-oksopropil/-amino/-3-(fenilmetiloksi)-1-oksopropil/-2,3-dihidrospiro/3H-indol-3,4'-piperidin-1'-il/sulfonil/metil/karbonil/amino/heksil estar trifluracetat
U otopinu 0.108 g intermedijara dobijenog u Primjeru 33, Stupanj A u 5 ml CH2Cl2, dodaje se 20 mg 6-amino-heksanola, 28 mg HOBT, i 42 mg EDC i miješa se 4 sata, reakcijska smjesa se razblažuje sa 10 ml CH2Cl2 i pere se sa 0.5N HCl (5 ml), zasićenom vodenom otopinom NaHCO3 (5 ml), suši se preko MgSO4 i koncentrira. Ostatak se prečišćuje "fleš" kromatografijom (10 g silika gela) sa CH2Cl2-acetonom (1:1) kao eluentom.
U 56.2 mg gornjeg intermedijara u 2 ml CH2Cl2 i 2 ml DMF, dodaje se 23 mg biotina, 14 mg DMAP, 28 mg EDC i miješa se 18 sati. Reakcija se obrađuje na uobičajeni način. Prečišćavanjem ostatka pomoću "fleš" kromatografije na 5 g silika gela sa CH2Cl2-acetonom (1:1) kao eluentom, dobija se 22 mg biotin konjugata. Deprotekcija N-tBOC vrši se u CH2Cl2-TFA, pri čemu se dobija 18.9 mg naslovnog spoja kao bijela čvrsta supstanca.
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) spoj je 3:2 smjesa rotamera. δ 8.45-8.23 (m, 1H), 7.9 (s, 1H), 7.40-7.28 (m, 4H), 7.25-7.17 (m, 2H), 700 (dt, 2/3H), 6.80 (d, 1/3H), 5.21-5.14 (m, 1H), 4.60-4.42 (m, 4H), 4.28 (širok t, 1H), 4.15-4.00 (m, 6H), 3.85-3.70 (m, 2H), 3.20-3.10 (m, 3H), 2.90 (dd, 1H), 2.83 (dt, 1H), 2.70 (d, 1H), 2.40-2.25 (m, 2H), 2.00-0.60 (m, 18H), 1.62 (s, 3H), 1.60 (s, 3H).

Claims (16)

1. Spojevi, naznačeni time, što imaju formulu: [image] gdje je: R1 C1-C10 alkil, aril, aril (C1-C6 alkil) i C3-C7 cikloalkil (C1-C6 alkil) ili C1-C5 alkil, aril (C0-C5 alkil)-K-(C1-C5 alkil), C3-C7 cikloalkil (C0-C5 alkil)-K-(C1-C5 alkil) gdje je K O, S(O)m, N(R2)C(O), C(O)N(R2), OC(O), C(O)O, ili -CR2=CR2- ili -C=C- gdje su aril grupe definirane niže, a R2 i alkil grupe mogu da budu dalje supstituirane sa 1 do 9 halogena, S(O)mR2a , 1 do 3 OR2a ili C(O)OR2a i aril grupe mogu da budu dalje supstituirane sa fenil, fenoksi, halofenil, 1-3 C1-C6 alkil, 1 do 3 halogena, 1 do 2 OR2, metilendioksi, S(O)mR2, 1 do 2 CF3, OCF3, nitro, N(R2) (R2), N(R2)C(O)R2, C(O)OR2, C(O)N(R2) (R2), SO2N(R2) (R2), N(R2)SO2R2; R2 je vodik, C1-C6 alkil, C3-C7 cikloalkil, i gdje su dvije C1-C6 alkil grupe prisutne na jednom atomu, one mogu opciono da budu spojene tako da formiraju C3-C8 ciklični prsten opciono uključujući kisik, sumpor ili NR2a; R2a je vodik ili C1-C6 alkil; R3a i R3b su nezavisno vodik, halogen, C1-C6 alkil, OR2, cijano, OCF3, metilendioksi, nitro, S(O)mR, CF3 ili C(O)OR2 i kada su R3a i R3b u orto rasporedu, oni mogu da budu spojeni tako da formiraju C5 do C8 alifatični ili aromatični prsten opciono uključujući 1 ili 2 heteroatoma odabrana od kisika, sumpora ili dušika; R4 i R5 su nezavisno vodik, C1-C6 alkil, supstituirani C1-C6 alkil, gdje supstituenti mogu da budu 1 do 5 halogena, 1 do 3 hidroksi, 1 do 3 C1-C10 alkanoiloksi, 1 do 3 C1-C6 alkoksi, fenil, fenoksi, 2-furil, C1-C6 alkoksikarbonil, S(O)m(C1-C6 alkil); ili R4 i R5 mogu da budu uzeti zajedno tako da formiraju -(CH2)rLa (CH2)s- gdje je La C(R2)2, O, S(O)m ili NR2), r i s u nezavisno 1 do 3 i R2 kao što je definirano ranije; R6 je vodik ili C1-C6 alkil; A je: [image] gdje su x i y nezavisno 0-3; Z je N-R2 ili O; R7 i R7a su nezavisno vodik, C1-C6 alkil, OR2, trifluormetil, fenil, supstituirani C1-C6 alkil gdje su supstituenti imidazolil, fenil, indolil, p-hidroksifenil, OR2, 1 do 3 fluoro, S(O)mR2, C(O)OR2, C3-C7 cikloalkil, N(R2)(R2), C(O)N(R2)(R2); ili R7 i R7a mogu nezavisno da budu spojeni za jednu ili obje R4 i R5 grupe, tako da formiraju alkilen mostove između terminalnog dušika i alkil dijela R7 i R7a grupa, gdje most sadrži 1 do 5 ugljikovih atoma; B, D, E i F su nezavisno C(R8) (R10), O, C=O, S(O)m, ili NR9 tako da jedna ili dvije od B, D, E, ili F grupa mogu opciono da nedostaju tako da je osiguran 5-to,m 6-to, ili 7-mo člani prsten; pod uvjetom da B, D, E i F grupe mogu da budu C(R8)(R10) ili C=O samo kada je jedna od preostalih B, D, E i F grupa simultano O, S(O)m ili NR9; B i D ili D i E uzete zajedno mogu da budu N=CR10- ili CR10 = N, ili B i D ili D i E uzete zajedno mogu da budu CR8=CR10 pod uvjetom da je jedna od drugih B i E ili F grupa simultano O, S(O)m ili NR9; R8 i R10 su nezavisno vodik, R2, OR2, (CH2)q aril, (CH2)q C(O)OR2, (CH2)q aril ili (CH2)q (1H-tetrazol-5-il) i aril može opciono da bude supstituiran sa 1 do 3 halogena, 1 do 2 C1-C8alkil, 1 do 3 OR2 ili 1 do 2 C(O)OR2; R9 je R2, (CH2)q aril, C(O)R2, C(O)(CH2)q aril, SO2R2, SO2(CH2)q aril, C(O)N(R2), C(O)N(R2)(CH2)q aril, C(O)OR2, 1H-tetrazol-5il, SO3H, SO2NHC=N, SO2N(R2) aril, SO2N(R2)(R2) i (CH2)q može opciono da bude supstituiran sa 1 do 2 C1-C4 alkil, i R2 i aril mogu da budu opciono dalje supstituirani sa 1 do 3 OR2a, O(CH2)q aril, 1 do 2 C(O)OR2a, 1 do 2 C(O)O(CH2)q aril, 1 do 2 C(O)N(R2a)(R2a), 1 do 2 C(O)N(R2a)(CH2)q aril, 1 do 5 halogena, 1 do 3 C1-C4 alkil, 1,2,4-triazolil, 1H_tetrazol-5-il, C(O)NHSO2R2a, S(O)mR2a, C(O)NHSO2 (CH2)q aril, SO2NHC=N, SO2NHC(O)R2a, SO2NHC(O)(CH2)q aril, N(R2)C(O)N(R2a)(R2a), N(R2aC(O)N(R2a)(CH2)q aril, N(R2a)(R2a), N(R2a)C(O)R2a, N(R2a)C(O)(CH2)q aril, OC(O)N(R2a)(R2a), OC(O)N(R2a) (CH2)q aril; SO2(CH2)q CONH-(CH2)wNHC(O)R11 gdje je w 2-6 i R11 može da bude biotin, aril ili aril supstituiran sa 1 ili 2 OR2, 1-2 halogena, azido ili nitro; m je 0, 1 ili 2; n je 1 ili 2 q može opciono da bude 0, 1, 2, 3 ili 4; i G, H, I i J su atomi ugljika, dušika, sumpora ili kisika, tako da je najmanje jedan heteroatom, a jedan od G, H, I ili J može opciono da nedostaje tako da se dobijaju 5-to ili 6-to člani heterociklični aromatični prstenovi; i njihove farmaceutski prihvatljive soli i individualni dijastereoizomeri.
2. Spoj prema zahtjevu 1, naznačen time, što ima formulu: [image] gdje je R1 C1-C10 alkil, aril (C1-C4 alkil), C3-C6 cikloalkil (C1-C4 alkil), (C1-C4 alkil)-K-(C1-C4 alkil), aril (C0-C5-alkil)-K-(C1-C4 alkil, (C3-C7 cikloalkil) (C0-C5 alkil)-K-(C1-C4 lkil), gdje je K O, S(O)m, -CR2=CR2-, -C=C-; ili N(R2)C(O) gdje R2 i alkil grupe mogu da budu dalje supstituirane sa 1 do 7 halogena, S(O)m C1-C4 alkil, OR2 ili C(O)OR2 i aril grupe mogu da budu dalje supstituirane sa 1-2 C1-C4 alkil, 1 do 2 halogena, 1 do 2 OR2, CF3, OCF3, metilendioksi, S(O)mR2, SO2N(R2) (R2), N(R2)SO2R2 ili C(O)OR2. R2 je vodik, C1-C6 alkil, C3-C7 cikloalkil, i ako su dvije C1-C6 alkil grupe prisutne na jednom atomu, one mogu da budu opciono tako spojene da formiraju C4-C6 ciklični prsten koji opciono obuhvaća 1 do 2 heteroatoma odabrana od kisika, smpora ili NR2a; R2a je vodik ili C1-C6 alkil R3a i R3b su nezavisno vodik, halogen, C1-C4 alkil, OR2, metilendioksi, nitro, S(O)mC1-C4 alkil, CF3 ili C(O)(OR)2; R4 i R5 su nezavisno vodik, C1-C6 alkil, supstituirani C1-C6 alkil gdje supstituenti mogu da budu 1 do 5 halogena, 1 do 2 hidroksi, 1 do 2 C1-C6alkiloksi ili S(O)m(C1-C4 alkil); A je: [image] gdje su x i y nezavisno 0, 1, ili 2; R7 i R7a su nezavisno vodik, C1-C4 alkil, supstituirani C1-C4 alkil gdje su supstituenti od 1 do 3 fluoro ili imidazolil, fenil, indolil, S(O)m C1-C4 alkil, C(O)OR2 ili R7 i R7a mogu nezavisno da budu spojeni na jednu ili obje R4 i R5 grupe, tako da formiraju alkilen mostove između terminalnog dušika i alkil dijela R7 i R7a grupa, gdje most sadrži 1 do 3 atoma ugljika; B, D i F su nezavisno C(R8)(R10), O, C=O, S(O)m ili NR9 tako da jedna od B, D ili f grupa može opciono da nedostaje tako da se dobijaju 5-to ili 6-to člani prstenovi i pod uvjetom da je jedna od B, D i F grupa C(R8) (R10) ili C=O samo kada je jedna od preostalih B, D i F grupa simultano O, S(O)m ili NR9; R8 i R10 su nezavisno vodik, R2, OR2, (CH2)q aril, (CH2)qC(O)OR2, (CH2)qC(O)O(CH2)q aril, (CH2)q (1H-tetrazol-5-i) i aril može opciono da bude supstituiran sa 1 do 3 halogena, 1 do 2 C1-C4 alkil, 1 do 3 OR2 ili 1 do 2 C(O)OR2; C(O)N(R2a)(R2a), S(O)mR2a, 1-H-tetrazol-5-il, C(O)NHSO2R2a, C(O)NHSO2(CH2)q aril, N(R2a)C(O)N(R2a)(R2a) ili N(R2a)C(O)N(R2a)(CH2)q aril i aril može opciono da bude supstituiran sa 1 do 2 OR2a, 1 do 2 halogena, 1 do 2 C1-C4 alkil, C(O)OR2a ili 1-H-tetrazol-5-il; SO2(CH2)wCONH(CH2)w NHC(O)R11, gdje je w 1-6 i R11 može da bude biotin, aril, ili aril supstituiran sa 1 ili 2 OR2, 1-2 halogena, azido ili nitro; m je 0, 1, ili 2; q je 0, 1, 2 ili 3; i aril grupa je fenil, naftil, piridil, tienil, indolil, tiazolil ili pirimidinil, 1 njegove farmaceutski prihvatljive soli i individualni dijastereoizomeri.
3. Spoj prema zahtjevu 2, naznačen time, što F nije prisutno.
4. Spoj prema zahtjevu 3, naznačen time, što ima formulu: [image] R1 je C1-C10 alkil, aril (C1-C4 alkil), C5-C6cikloalkil (C1-C4 alkil) ili (C1-C4 alkil)-K-C1-C2 alkil-aril (C0-C2 alkil)-K-(C1-C2 alkil), C3-C6 cikloalkil (C0-C2 alkil)-K-(C1-C2 alkil), gdje je K, O ili S(O)m' i aril grupe mogu dalje da budu supstituirane sa 1 do 2 C1-C4 alkil, 1 do 2 halogena, OR2, C(O)OR2, CF3 ili S(O)mR2; R2 je vodik, C1-C4 alkil, ciklo C3-C6 alkil, i, ako su prisutne dvije C1-C4 alkil grupe na jednom atomu, one mogu opciono da budu spojene tako da formiraju C5-C6 ciklični prsten koji opciono obuhvaća heteroatome kisika ili NR2a; R2a je vodik ili C1-C4 alkil; R3a i R3b su nezavisno vodik, halogen, C1-C4 alkil, C(O)OR2, hidroksi, C1-C4 alkoksi, S(O)mC1-C4 alkil ili CF3; R4 i R5 su nezavisno vodik, C1-C4 alkil, supstituirani C1-C4 alkil, gdje supstituenti mogu da budu 1 do 2 hidroksi ili S(O)m (C1-C3 alkil); A je: [image] gdje je x, 0 ili 1; R7 i R7a su nezavisno vodik, C1-C3 alkil; ili R7 i R7a mogu nezavisno da budu spojeni za jednu ili obje R4 i R5 grupe tako da formiraju alkilen mostove između terminalnog dušika i alkil dijela R7 i R7a grupa tako da formiraju 5-to ili 6-to člane prstenove koji sadrže terminalni dušik; B i D su nezavisno C(R8) (R10), C=O, O, S(O)m' NR9 pod uvjetom da jedna od B i D grupa može da bude C(R8) (R10) ili C=O samo kada je druga od B i D grupa O, S(O)m ili NR9; R8 i R10 su nezavisno vodik, R2, OR2, (CH2)q aril, i aril može da bude opciono supstituiran sa 1 do 2 halogena, 1 do 2 C1-C4 alkil, OR2 ili 1 do 2 C(O)OR2; R9 je C(O)R2, C(O)(CH2)q aril, SO2R2, SO(CH2)q aril, C(O)N(R2)(R2), C(O)N(R2) (CH2)q aril i (CH2)q može da bude opciono supstituiran sa 1 do 2 C1-C2 alkil i R2 može da bude opciono supstituiran sa 1 do 2 OR2a, O(CH2)q aril, C(O)OR2a, C(O)N(R2a), S(O)mR2a, 1H-tetrazol-5-il, C(O)NHSO2R2a ili N(R2a)C(O)N(R2a) (R2a) i aril može da bude opciono supstituiran sa 1 do 2 OR2a, 1 do 2 halogena, 1 do 2 C1-C2 alkil, C(O)OR2a, 1-H-tetrazol-5-il ili S(O0mR2a; SO2(CH2)qCONH(CH2)wNHC(O)R11 gdje je w 2-6 i R11 može opciono da bude biotin, aril, i aril može da bude opciono supstituiran sa 1 do 2 OR2a, 1-2 halogena, azido, nitro; m je 0, 1 ili 2; q može da bude opciono 0, 1, 2 ili 3; aril je fenil, naftil, piridil, indolil, tienil ili tetrazolil i njihove farmaceutski prihvatljive soli iindividualni dijastereoizomeri.
5. Spoj prema zahtjevu 1, naznačen time, što ima formulu: [image] [image] R2 je H, C1-C4 alkil; m = 1,2; t je 0, 1, 2; q je 1, 2, 3; w je 2-6 i njegove farmaceutski prihvatljive soli i individualni dijastereoizomeri.
6. Spoj prema zahtjevu 1, naznačen time, što je: N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(1H-indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metankarbonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(1H-indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-benzolsuflonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(1H-indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid N-/1(R)-/(3,4-dihidro-spiro/2H-1-benzopiran-2,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(1H-indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid N-/1(R)-/(2-acetil-1,2,3,4-tetrahidrospiro/izohinolin 4,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(indol-3-il)etil/-2-amino-2- metilpropanamid N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)-etil/-2amino-2-metilpropanamid mezilatna sol N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(2', 6'-difluorofenilmetil oksi)etil/-2-amino-2-metilpropanamid N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonil-5-fluoro-spiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi) etil/-2-amino-2-metilpropanamid N-/1(S)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiltio)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-3-fenilpropil/-2-amino-2-metilpropanamid N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-3-cikloheksilpropil/-2-amino-2-metilpropanamid ili N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-4-fenilbutil/-2-amino-2-metilpropanamid N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonilspiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(5-fluor-1H-indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-metansulfonil-5-fluorospiro/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(5-fluor-1H-indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1-(2-etoksikarbonil)metil-sulfonilspiro-/3H-indol-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(1H-indol-3-il)etil/-2-amino-2-metilpropanamid N-/1(R)-/(1,2-dihidro-1,1-diokso piro/3H-benzotiofen-3,4'-piperidin/-1'-il)karbonil/-2-(fenilmetiloksi)-etil/-2-amino-2-metilpropanamid i njihove farmaceutski prihvatljive soli.
7. Spojevi prema zahtjevu 1, naznačeni time, što imaju formulu: [image] i gdje su R1, R2, R3a, R3b, R4, R5, R6, A, B, D, E, F, G, H, I, J, i n kao što su definirani u zahtjevu 1.
8. Postupak za dobijanje spoja prema zahtjevu 1, naznačen time, što obuhvaća reakciju spoja koje ima formulu: [image] sa spojem koje ima formulu [image] gdje su R1, R2, R3a, R4, R5, R6, A, B, D, E, F, G, H, I, J i n kao što su definirani u zahtjevu 1, a L je zaštitna grupa koja se naknadno uklanja ukoliko je prisutna i formiraju se soli ako se želi.
9. Postupak za dobijanje spoja prema zahtjevu 1, naznačen time, što obuhvaća reakciju spoja koji ima formulu: [image] sa spojem koje ima formulu: [image] gdje su R1, R2, R3a, R3b, R4, R5, R6, A, B, D, E, F, G, H, I, J i n kao što sudefinirani u zahtjevu 1, a L je zaštitna grupa koja se naknadno uklanja ukoliko je prisutna i formiraju se soli ukoliko se želi.
10. Postupak za povećanje nivoa endogenog hormona rasta kod ljudi ili životinja, naznačen time, što obuhvaća primjenu na takvog čovjeka ili životinju efikasne količine spoja prema zahtjevu 1.
11. Kompozicija korisna za povećanje endogene proizvodnje ili oslobađanja hormona rasta kod čovjeka ili životinje, naznačena time, što obuhvaća inertni nosač i efikasnu količinu spoja prema zahtjevu 1.
12. Kompozicija korisna za povećanje endogene proizvodnje ili oslobađanje hormona rasta kod čovjeka ili životinje, naznačena time, što obuhvaća inertni nosač i efikasnu količinu spoja prema zahtjevu 1, upotrebljene u kombinaciji sa drugim stimulansima lučenja hormona rasta, kao što su GHRP-6, GHRP-1, GHRP-2, faktorom oslobađanja hormona rasta (GFR), jednim od njegovih analoga ili IGF-1 ili IGF-2.
13. Postupak za tretiranje osteoporaze, naznačen time, što obuhvaća tretiranje pacijenta sa osteoporozom sa bisfosfonatnim spojem u kombinaciji sa spojem prema zahtjevu 1.
14. Postupak prema zahtjevu 13, naznačen time, što je bisfosfonatni spoj alendronat.
15. Kompozicija za tretiranje osteoporaze, naznačena time, što obuhvaća inertni nosač, bisfosfonatni spoj i spoj prema zahtjevu 1.
16. Kompozicija prema zahtjevu 15, naznačena time, što je bisfosfonatni spoj alendronat.
HR931486A 1992-12-11 1993-12-10 Spiro piperidines and homologs which promote release of growth hormone HRP931486B1 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US98932292A 1992-12-11 1992-12-11
US08/147,226 US5536716A (en) 1992-12-11 1993-11-03 Spiro piperidines and homologs which promote release of growth hormone

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HRP931486A2 true HRP931486A2 (hr) 1995-02-28
HRP931486B1 HRP931486B1 (en) 2003-08-31

Family

ID=26844709

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HR931486A HRP931486B1 (en) 1992-12-11 1993-12-10 Spiro piperidines and homologs which promote release of growth hormone

Country Status (27)

Country Link
US (1) US5652235A (hr)
EP (1) EP0615977B1 (hr)
JP (1) JP2509530B2 (hr)
CN (1) CN1034733C (hr)
AT (1) ATE220071T1 (hr)
AU (1) AU673552B2 (hr)
BG (1) BG61979B1 (hr)
CA (1) CA2110670C (hr)
CZ (1) CZ151495A3 (hr)
DE (1) DE69332075T2 (hr)
DK (1) DK0615977T3 (hr)
DZ (1) DZ1736A1 (hr)
ES (1) ES2177538T3 (hr)
FI (1) FI952863A0 (hr)
HR (1) HRP931486B1 (hr)
HU (2) HUT72076A (hr)
IL (1) IL107837A0 (hr)
MX (1) MX9307850A (hr)
NO (1) NO952295L (hr)
NZ (1) NZ258412A (hr)
PL (1) PL176993B1 (hr)
PT (1) PT615977E (hr)
RO (1) RO115804B1 (hr)
RU (1) RU2168512C2 (hr)
SI (1) SI9300646A (hr)
SK (1) SK282166B6 (hr)
WO (1) WO1994013696A1 (hr)

Families Citing this family (116)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5686624A (en) * 1992-01-30 1997-11-11 Sanofi 1-benzenesulfonyl-1,3-dihydro-indol-2-one derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions in which they are present
DK78692D0 (da) * 1992-06-12 1992-06-12 Lundbeck & Co As H Dimere piperidin- og piperazinderivater
BR9407869A (pt) * 1993-10-19 1996-10-29 Merck & Co Inc Combinaçao composiçao farmacêutica e processo para o tratamento de osteoporose
US5494919A (en) * 1993-11-09 1996-02-27 Merck & Co., Inc. 2-substituted piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1H-azepines promote release of growth hormone
US5492920A (en) * 1993-12-10 1996-02-20 Merck & Co., Inc. Piperidine, pyrrolidine and hexahydro-1H-azepines promote release of growth hormone
US5492916A (en) * 1993-12-23 1996-02-20 Merck & Co., Inc. Di- and tri-substituted piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1H-azepines promote release of growth hormone
JPH09505601A (ja) * 1993-11-24 1997-06-03 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド インドリル基含有化合物類および成長ホルモン放出を促進するためのそれらの使用
US5721251A (en) * 1993-12-10 1998-02-24 Merck & Co., Inc. Piperidine, pyrrolidine and hexahydro-1H-azepines promote release of growth hormone
US5721250A (en) * 1993-12-23 1998-02-24 Merck & Co. Inc. Di-and tri-substituted piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1H-azepines promote release of growth hormone
US5777112A (en) * 1994-06-13 1998-07-07 Merck & Co., Inc Piperazine compounds promote release of growth hormone
US5783582A (en) * 1994-07-20 1998-07-21 Merck & Co., Inc. Piperidines and hexahydro-1H-azepines spiro substituted at the 4-position promote release of growth hormone
GB9415996D0 (en) * 1994-08-08 1994-09-28 Merck Sharp & Dohme Therapeutic agents
US20020111461A1 (en) 1999-05-21 2002-08-15 Todd C. Somers Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues
US5798337A (en) * 1994-11-16 1998-08-25 Genentech, Inc. Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues
US5656606A (en) * 1995-02-17 1997-08-12 Merck & Co., Inc. Camphor compounds promote release of growth hormone
US5731317A (en) * 1995-03-10 1998-03-24 Merck & Co., Inc. Bridged piperidines promote release of growth hormone
US5559128A (en) * 1995-04-18 1996-09-24 Merck & Co., Inc. 3-substituted piperidines promote release of growth hormone
WO1996033189A1 (en) * 1995-04-19 1996-10-24 Merck & Co., Inc. Process for the preparation of spiroindolines
WO1996035713A1 (en) * 1995-05-08 1996-11-14 Pfizer, Inc. Dipeptides which promote release of growth hormone
US5936089A (en) * 1995-05-29 1999-08-10 Pfizer Inc Dipeptides which promote release of growth hormone
US5767124A (en) * 1995-10-27 1998-06-16 Merck & Co., Inc. Polymorphic forms of a growth hormone secretagogue
EP0863900A1 (en) * 1995-10-27 1998-09-16 Merck & Co., Inc. Process for the preparation of a growth hormone secretagogue
PL327511A1 (en) * 1995-10-27 1998-12-21 Merck & Co Inc Polymorphous forms of a growth hormone secretion stimulating substance
ATE334394T1 (de) 1995-12-13 2006-08-15 Merck & Co Inc Testverfahren für die sekretionsrezeptoren von wachstumshormonen
US6531314B1 (en) 1996-12-10 2003-03-11 Merck & Co., Inc. Growth hormone secretagogue receptor family
GB2308362A (en) * 1995-12-19 1997-06-25 Lilly Industries Ltd Pharmaceutical indole derivatives
WO1997022367A1 (en) * 1995-12-20 1997-06-26 Merck & Co., Inc. Radiolabeled growth hormone secretagogue
HN1996000101A (es) 1996-02-28 1997-06-26 Inc Pfizer Terapia combinada para la osteoporosis
AU3220097A (en) * 1996-05-22 1997-12-09 Arch Development Corporation Sleep quality improvement using a growth hormone secretagogue
US5877182A (en) * 1996-09-13 1999-03-02 Merck & Co., Inc. Piperidines promote release of growth hormone
WO1998016527A1 (en) * 1996-10-15 1998-04-23 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Benzoxepine derivatives which promote release of growth hormone
WO1998018815A1 (en) * 1996-10-25 1998-05-07 Merck & Co., Inc. Convergent process for the preparation of a growth hormone secretagogue
US6046333A (en) * 1996-10-25 2000-04-04 Merck & Co., Inc. Convergent process for the preparation of a growth hormone secretagogue
UA59384C2 (uk) 1996-12-20 2003-09-15 Пфайзер, Інк. Похідні сульфонамідів та амідів як агоністи простагландину, фармацевтична композиція та способи лікування на їх основі
WO1998051687A1 (en) * 1997-05-14 1998-11-19 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Piperidino derivatives which promote growth hormone release
JP3514774B2 (ja) 1997-06-25 2004-03-31 ファイザー・インク 成長ホルモン分泌促進薬としてのジペプチド誘導体
UA64751C2 (uk) 1997-06-25 2004-03-15 Пфайзер Продактс Інк. Спосіб лікування інсулінової толерантності речовинами, які посилюють секрецію гормону росту (варіанти) та фармацевтична композиція (варіанти)
UA53716C2 (uk) * 1997-06-25 2003-02-17 Пфайзер Продактс Інк. Тартратна сіль заміщеного дипептиду, спосіб її одержання, проміжні сполуки та спосіб їх одержання, фармацевтична композиція (варіанти), спосіб підвищення рівнів ендогенного гормону росту та спосіб лікування або профілактики захворювань (варіанти)
US6329342B1 (en) 1997-08-19 2001-12-11 Eli Lilly And Company Treatment of congestive heart failure with growth hormone secretagogues
ZA987385B (en) * 1997-08-19 2000-04-18 Lilly Co Eli Growth hormone secretagogues.
ZA987383B (en) * 1997-08-19 2000-02-17 Lilly Co Eli Treatment of congestive heart failure with growth hormone secretagogues.
US6374762B1 (en) * 1997-10-27 2002-04-23 Correct Craft, Inc. Water sport towing apparatus
US6919315B1 (en) 1998-06-30 2005-07-19 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties
KR100907638B1 (ko) * 1998-06-30 2009-07-14 노보 노르디스크 에이/에스 성장 호르몬 방출성을 가지는 화합물
US6682908B1 (en) 1998-07-10 2004-01-27 Merck & Co., Inc. Mouse growth hormone secretagogue receptor
CA2333857A1 (en) 1998-07-13 2000-01-20 Merck & Co., Inc. Growth hormone secretagogue related receptors and nucleic acids
US6645726B1 (en) 1998-08-10 2003-11-11 Merck & Co., Inc. Canine growth hormone secretagogue receptor
WO2000010565A1 (en) * 1998-08-18 2000-03-02 Eli Lilly And Company Growth hormone secretagogues
US6639076B1 (en) 1998-08-18 2003-10-28 Eli Lilly And Company Growth hormone secretagogues
US6358951B1 (en) 1998-08-21 2002-03-19 Pfizer Inc. Growth hormone secretagogues
US6380184B1 (en) 1998-10-28 2002-04-30 Bristol-Myers Squibb Co. Benzoazepines and analogs thereof useful as growth hormone secretagogues
AU759022B2 (en) 1999-02-18 2003-04-03 Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. Novel amide derivatives as growth hormone secretagogues
JP2002523368A (ja) * 1999-02-19 2002-07-30 イーライ・リリー・アンド・カンパニー 成長ホルモン分泌促進薬
US6828331B1 (en) 1999-02-19 2004-12-07 Eli Lilly And Company Growth hormone secretagogues
CO5160260A1 (es) * 1999-02-19 2002-05-30 Lilly Co Eli Secretagogos de la hormona del crecimiento derivados de imi- dazol 1,4- substituido
US6525203B1 (en) 1999-03-12 2003-02-25 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic aromatic compounds useful as growth hormone secretagogues
US6518292B1 (en) 1999-03-12 2003-02-11 Bristol-Myers Squibb Co. Heterocyclic aromatic compounds usefuls as growth hormone secretagogues
US6803372B2 (en) 1999-08-20 2004-10-12 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Spiro compounds
US6462053B1 (en) 1999-08-20 2002-10-08 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Spiro compounds
TWI279402B (en) 1999-08-20 2007-04-21 Banyu Pharma Co Ltd Spiro compounds having NPY antagonistic activities and agents containing the same
CA2386517A1 (en) * 1999-10-07 2001-04-12 Takeda Chemical Industries, Ltd. Amine derivatives
ATE302184T1 (de) 2000-02-18 2005-09-15 Meiji Seika Kaisha Phenoxyalkylaminderivate als agonisten des opioid-delta rezeptors
AU5959201A (en) 2000-05-11 2001-11-20 Bristol Myers Squibb Co Tetrahydroisoquinoline analogs useful as growth hormone secretagogues
ES2333097T3 (es) 2000-05-31 2010-02-17 Raqualia Pharma Inc Uso de secretagogos de la hormona de crecimiento para estimular la motilidad gastrointestinal.
EP1313473A2 (en) 2000-08-30 2003-05-28 Pfizer Products Inc. Sustained release formulations for growth hormone secretagogues
JP2004524297A (ja) * 2001-01-23 2004-08-12 イーライ・リリー・アンド・カンパニー メラノコルチン受容体アゴニスト
US7157463B2 (en) 2001-01-23 2007-01-02 Eli Lilly And Company Substituted piperidines/piperazines as melanocortin receptor agonists
ES2247298T3 (es) 2001-01-23 2006-03-01 Eli Lilly And Company Derivados de piperazina y piperidina como agonistas del receptor de melanocortina.
AP1699A (en) 2001-03-21 2006-12-26 Warner Lambert Co New spirotricyclic derivatives and their use as phosphodiesterase-7 inhibitors
US6911447B2 (en) 2001-04-25 2005-06-28 The Procter & Gamble Company Melanocortin receptor ligands
WO2002094825A1 (fr) * 2001-05-22 2002-11-28 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Nouveau derive de spiropiperidine
US7125840B2 (en) 2001-10-09 2006-10-24 Eli Lilly And Company Substituted dipeptides as growth hormone secretagogues
US6649606B1 (en) 2001-11-09 2003-11-18 Bristol-Myers Squibb Co. Tetrahydroisoquinoline analogs as modulators of chemokine receptor activity
ES2274201T3 (es) 2002-01-23 2007-05-16 Eli Lilly And Company Agonistas del receptor de melanocortina.
US20060167268A1 (en) * 2002-04-09 2006-07-27 Eli Lilly And Company, Patent Division, Growth hormone secretagogues
WO2003087069A2 (en) * 2002-04-09 2003-10-23 Eli Lilly And Company Dipeptidic growth hormone secretagogues
US7026335B2 (en) 2002-04-30 2006-04-11 The Procter & Gamble Co. Melanocortin receptor ligands
AU2003237255B8 (en) 2002-06-05 2010-01-07 Bristol-Myers Squibb Company Calcitonin gene related peptide receptor antagonists
SE0202133D0 (sv) * 2002-07-08 2002-07-08 Astrazeneca Ab Novel compounds
US7132539B2 (en) 2002-10-23 2006-11-07 The Procter & Gamble Company Melanocortin receptor ligands
JP2006520371A (ja) * 2003-03-14 2006-09-07 メルク　シャープ　エンド　ドーム　リミテッド 軽症の認識損傷の治療方法及びアルツハイマー病の予防又は遅延方法
CN1297557C (zh) * 2003-04-10 2007-01-31 上海药明康德新药开发有限公司 螺环类模板化合物的制备
GB0313772D0 (en) * 2003-06-13 2003-07-23 Merck Sharp & Dohme Therapeutic treatment
US7476653B2 (en) 2003-06-18 2009-01-13 Tranzyme Pharma, Inc. Macrocyclic modulators of the ghrelin receptor
WO2005046682A1 (en) * 2003-11-04 2005-05-26 Elixir Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic compounds and uses thereof
GB0328906D0 (en) * 2003-12-12 2004-01-14 Syngenta Participations Ag Chemical compounds
CN100345851C (zh) * 2004-01-02 2007-10-31 上海药明康德新药开发有限公司 螺二氢吲哚类模板化合物及其制备方法
WO2005097788A2 (en) * 2004-04-02 2005-10-20 Elixir Pharmaceuticals, Inc. Sulfonamides and uses thereof
UA87854C2 (en) 2004-06-07 2009-08-25 Мерк Энд Ко., Инк. N-(2-benzyl)-2-phenylbutanamides as androgen receptor modulators
CA2576915A1 (en) 2004-08-18 2006-03-02 Elixir Pharmaceuticals, Inc. Growth-hormone secretagogues
US7786141B2 (en) * 2004-08-19 2010-08-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Dihydrospiroindene modulators of muscarinic receptors
EP2374455A3 (en) * 2004-08-19 2012-03-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of muscarinic receptors
RU2007124373A (ru) * 2004-11-29 2009-01-10 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед (Us) Модуляторы мускариновых рецептеров
RU2008130094A (ru) 2005-12-22 2010-01-27 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед (Us) Модуляторы мускариновых рецепторов
CN101426499A (zh) * 2006-02-22 2009-05-06 弗特克斯药品有限公司 毒蕈碱受体调节剂
WO2007100670A1 (en) 2006-02-22 2007-09-07 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Spiro condensed piperidnes as modulators of muscarinic receptors
CU23558A1 (es) 2006-02-28 2010-07-20 Ct Ingenieria Genetica Biotech Compuestos análogos a los secretagogos peptidicos de la hormona de crecimiento
EP2040706A2 (en) 2006-06-29 2009-04-01 Vertex Pharmceuticals Incorporated Modulators of muscarinic receptors
JP2010500412A (ja) 2006-08-15 2010-01-07 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド ムスカリン受容体の調節剤
CN101573121A (zh) * 2006-08-18 2009-11-04 弗特克斯药品有限公司 毒蕈碱受体调节剂
WO2008056687A1 (fr) * 2006-11-09 2008-05-15 Daiichi Sankyo Company, Limited Nouveau dérivé de spiropipéridine
KR20090107088A (ko) 2007-02-09 2009-10-12 트랜자임 파르마 인크 거대고리 그렐린 수용체 조절제 및 이의 사용 방법
US20100099640A1 (en) 2007-05-04 2010-04-22 Joannes Geuns Tissue degeneration protection
WO2009045519A1 (en) * 2007-10-03 2009-04-09 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of muscarinic receptors
WO2010093578A1 (en) * 2009-02-10 2010-08-19 Glaxo Group Limited Indolinyl-, benzofuranyl-, and benzothienyl- amides as modulators of chemokine receptors
EP2275421A1 (en) * 2009-07-15 2011-01-19 Rottapharm S.p.A. Spiro amino compounds suitable for the treatment of inter alia sleep disorders and drug addiction
JP5883863B2 (ja) * 2010-07-28 2016-03-15 ザ ユニバーシティ オブ クィーンズランド プロテアーゼ活性化受容体の調節剤
UY34094A (es) * 2011-05-27 2013-01-03 Novartis Ag Derivados de la piperidina 3-espirocíclica como agonistas de receptores de la ghrelina
WO2013190520A2 (en) 2012-06-22 2013-12-27 The General Hospital Corporation Gh-releasing agents in the treatment of vascular stenosis and associated conditions
US9119832B2 (en) 2014-02-05 2015-09-01 The Regents Of The University Of California Methods of treating mild brain injury
BR112016027778A2 (pt) 2014-05-30 2017-08-15 Pfizer Usos de derivados de carbonitrila, sua combinação e sua composição farmacêutica
MX2017001408A (es) * 2014-08-05 2017-05-10 Raqualia Pharma Inc Derivados de serina como agonistas del receptor de grelina.
TW201607927A (zh) * 2014-08-28 2016-03-01 愛沃特股份有限公司 異喹啉類之製造方法
WO2017075535A1 (en) 2015-10-28 2017-05-04 Oxeia Biopharmaceuticals, Inc. Methods of treating neurodegenerative conditions
CA3090807A1 (en) 2018-02-21 2019-08-29 AI Therapeutics, Inc. Combination therapy with apilimod and glutamatergic agents
WO2023275715A1 (en) 2021-06-30 2023-01-05 Pfizer Inc. Metabolites of selective androgen receptor modulators

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8332704D0 (en) * 1983-12-07 1984-01-11 Pfizer Ltd Growth promotants for animals
IL96507A0 (en) * 1989-12-08 1991-08-16 Merck & Co Inc Nitrogen-containing spirocycles and pharmaceutical compositions containing them
US5206235A (en) * 1991-03-20 1993-04-27 Merck & Co., Inc. Benzo-fused lactams that promote the release of growth hormone
US5578593A (en) * 1992-12-11 1996-11-26 Merck & Co., Inc. Spiro piperidines and homologs promote release of growth hormone

Also Published As

Publication number Publication date
HU9501683D0 (en) 1995-08-28
DE69332075D1 (de) 2002-08-08
FI952863A (fi) 1995-06-09
JP2509530B2 (ja) 1996-06-19
RO115804B1 (ro) 2000-06-30
PT615977E (pt) 2002-10-31
EP0615977B1 (en) 2002-07-03
AU673552B2 (en) 1996-11-14
BG99710A (bg) 1996-01-31
HUT72076A (en) 1996-03-28
FI952863A0 (fi) 1995-06-09
CZ151495A3 (en) 1995-12-13
NO952295L (no) 1995-08-10
JPH06263737A (ja) 1994-09-20
US5652235A (en) 1997-07-29
HRP931486B1 (en) 2003-08-31
IL107837A0 (en) 1994-04-12
CA2110670C (en) 2001-04-17
NZ258412A (en) 1997-01-29
MX9307850A (es) 1994-06-30
DK0615977T3 (da) 2002-07-22
SI9300646A (en) 1994-09-30
AU5232093A (en) 1994-06-23
SK75995A3 (en) 1995-11-08
WO1994013696A1 (en) 1994-06-23
PL309331A1 (en) 1995-10-02
BG61979B1 (bg) 1998-11-30
EP0615977A1 (en) 1994-09-21
CN1034733C (zh) 1997-04-30
SK282166B6 (sk) 2001-11-06
RU2168512C2 (ru) 2001-06-10
DE69332075T2 (de) 2003-01-16
PL176993B1 (pl) 1999-08-31
CN1092071A (zh) 1994-09-14
HU211301A9 (en) 1995-11-28
ES2177538T3 (es) 2002-12-16
CA2110670A1 (en) 1994-06-12
ATE220071T1 (de) 2002-07-15
NO952295D0 (no) 1995-06-09
DZ1736A1 (fr) 2002-02-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HRP931486A2 (hr) Spiro piperidini i homolozi koji potpomažu oslobađanje hormona rasta
US5536716A (en) Spiro piperidines and homologs which promote release of growth hormone
US6251902B1 (en) Dipeptide derivatives as growth hormone secretagogues
Guerlavais et al. New active series of growth hormone secretagogues
JP2509147B2 (ja) 成長ホルモンの放出を亢進させるスピロピペリジン及び同族体
WO1997034604A1 (en) 4-spiroindoline piperidines promote release of growth hormone
US5880125A (en) 4-spiroindoline piperidines promote release of growth hormone
WO1997036873A1 (en) Piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1h-azepines promote release of growth hormone
US5965565A (en) Piperidines promote release of growth hormone
WO1997011697A1 (en) 3-spirolactam, 3-spiroamino, 3-spirolactone and 3-spirobenzopyran piperidines and pyrrolidines promote release of growth hormone
ES2219368T3 (es) Amidoespiropiperidinas que promueven la liberacion de la hormona de crecimiento.

Legal Events

Date Code Title Description
A1OB Publication of a patent application
AIPI Request for the grant of a patent on the basis of a substantive examination of a patent application
ODRP Renewal fee for the maintenance of a patent

Payment date: 20030804

Year of fee payment: 10

B1PR Patent granted
PBON Lapse due to non-payment of renewal fee

Effective date: 20031211