CZ151495A3 - Spiropiperidine derivatives, process of their preparation and a pharmaceutical composition containing thereof - Google Patents

Description

Spiropiperidinové deriváty, způsob jejich výroby a farmaceutický prostředek s jejich obsahem

Oblast techniky

Vynález se týká spiropiperidinových derivátů, způsobu jejich výroby a farmaceutického prostředku s obsahem těchto látek, které jsou určeny pro zvýšení uvolňování růstového hormonu.

Dosavadní stav techniky Růstový hormon, který se tvoří a je vylučován hypofý-zou stimuluje růst všech tkání v organismu, které jsou schopné růstu. Mimoto má růstový hormon na metabclické pochody v organismu následující základní účinky: 1. zvyšuje rychlost tvorby bílkovin u všech buněk, 2. snižuje rychlost využívání uhlohydrátů ve všech / buňkách organismu a 3. zvyšuje mobilizaci volných mastných kyselin a využití těchto kyselin k získání energie.

Nedostatek sekrece růstového hormonu může mít za následek různé poruchy, například trpaslictví.

Pro uvolnění růstového hormonu je známa celá řada postupů. Například chemické látky jako arginin L-3,4-dihydroxy-fenylalanin (L-DOPA), glukagon, vasopressin a hypoglykemie, vyvolaná insulinem,' stejně jako některé činnosti nebo stavy, jako spánek nebo tělesná cvičení nepřímo způsobují uvolnění růstového hormonu tak, že nějakým způsobem působí na hypo-thalamus, pravděpodobně ve smyslu snížení sekrece somatosta-tinu nebo ve smyslu zvýšení nového známého faktoru, který 2 způsobuje uvolnění růstového hormonu, GRF, nebo jde o nějaký neznámý endogenní hormon, způsobující toto uvolnění nebo mů že jít o kombinaci všech těchto faktorů. 2 způsobuje uvolnění růstového hormonu, GRF, nebo jde o nějaký neznámý endogenní hormon, způsobující toto uvolnění nebo mů že jít o kombinaci všech těchto faktorů. > Μ £

V případě, že je žádoucí zvýšit hladinu růstového hormonu, řeší se problém obvykle tak, že se podává exoger.ní růstový hormon nebo se podává GRF nebo peptidové sloučeniny, které stimulují produkci a/nebo uvolnění růstového hormonu.

Ve všech těchto případech vyžaduje peptidová poloha podávaných látek jejich injekční podání. Zdrojem růstového hormonu byly zpočátku hypořýzy ze zemřelých, které byly extrahovány. Takto získaný materiál byl velmi drahý a přitom bylo jeho získávání spojeno s rizikem přenosu různých onemocnění na příjemce růstového hormonu. V současné době je již k dispozici rekom-binantní růstový hormon, který toto riziko vylučuje, jde však stále ještě o velmi drahý produkt, který je nutno podávat injekčně nebo ve formě spreje do nosu.

Byly vyvinuty ještě další látky, které stimulují uvolnění endogenního růstového hormonu, například peptidová sloučenina, příbuzná GRF nebo peptidy, popsané v US patentovém spoisu č. 4 411 890. Tyto peptidy jsou podstatně menší než molekula růstového hormonu, avšak stále ještě mohou být rozloženy různými proteázami. Tak jako tomu je u většiny pepti-dů, je jejich biologická dostupnost při perorálním podání nízká. Bylo by tedy zapotřebí nalézt látky nepeptidové povahy, které by rovněž vyvolávaly uvolnění růstového hormonu a přitom byly stále v různých fyziologických prostředích, přičemž by bylo možno je podávat parenterálně, do nosu a také perorálně. Nalezení látek tohoto typu si klade vynález za úkol. 3

Podstata vynálezu

Podstatu vynálezu tvoří určitá skupina spirosloučenip, které nají schopnost stimulovat uvolnění přirozeného, to znamená endogenního růstového hormonu. Tyto látky je proto! možno použít k léčení stavů, při nichž je zapotřebí stimulovat produkci nebo sekreci růstového hormonu, tak jako tónuj je u lidí, kteří produkují příliš malé množství přírodního! růstového hormonu nebo u živočichů, kteří jsou chováni na j žír a kde je možno při stimulaci produkce růstového hormonu získat větší hospodářské zvíře. Podstatu vynálezu tvoří také způsob výroby těchto látek a mimoto také farmaceutický prch středek, který uvedené látky obsahuje a je možno jej použít k léčení člověka i jiných živočichů za účelem zvýšení sekrece růstového hormonu. V průběhu popisu bude vysvětleno také použití uvedených látek ke zvýšení sekrece růstového hormclnu u člověka i u jiných živočichů.

Nové spircpiperidinové deriváty, které tvoří podstatU vynálezu, je možno vyjádřit následujícími obecnými vzorci I a II

(I) (II) 4 kde R1 znamená alkyl o 1 až 10 atomech uhlíku, aryl, arylalkyl o 1 až 6 atomech uhlíku v alkylové části, cykloalkyl-alkyl o 3 až 7 atomech uhlíku v cykloalkylové a 1 až 6 atomech uhlíku v alkylové části, alkyl-K-alkyl o 1 až 5 atomech uhlíku v každé alkylové části, aryialkyi 0 0 až 5 atomech uhlíku v alkylové části-K-alkyl o 1 až 5 atomech uhlíku, cykloalkylalkyl o 3 až 7 atomech uhlíku v cykloalkylové a 0 až 5 atomech uhlíku v alkylové části-K-alkyl o 1 až 5 atomech uhlíku, kde K znamená 0, S(0) , N(R2)C(0)f C(0)N(R2), GC(0), C(0)0 nebo -CR2=CR2- nebo -C=C-, přičemž R2 a alkylové skupiny mohou být dále substituovány 1 až 9 atomy halogenu, S(0)mR2a, 1 až 3 0R2a nebo C(0)0R2a a arylové skupiny mohou být dále substituovány fenylovým zbytkem, fenoxy-skupinou, halogenfenylovým zbytkem, 1 až 3 alkylovými zbytky o 1 až 6 atomech uhlíku, 1 až 3 atomy halogenu, 1 až 2 skupinami 0R2, methylendioxyskupinami nebo S(0)mR?, 1 až 2 skupinami CF^, 0CF3, nitroskupinami, N(R2)(R2), N(R2)C(0)R2, C(0)0R2, c(o)m(r2)(r2), S02N(R2)(R2), N(R2)S(0)2~arylovou skupinou nebo n(r2)so2r2, R2 znamená atom vodíku, alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku nebo cykloalkyl o 3 až 7 atomech uhlíku a v případě, že se na jednom atomu nacházejí dvě alkylové skupiny o 1 až 6 atomech uhlíku, mohou být popřípadě spojeny za vzniku cyklického kruhu o 3 až 8 atomech uhlíku, popřípadě obsahujícího kyslík, síru nebo NR_ , R2o znamená atom vodíku nebo alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, R,a a R3fe nezávisle znamenají atom vodíku nebo halogenu, alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, 0R2, kyanoskupinu, 0CF3, methylendioxyskupinu, nitroskupinu, S(0) R, CF~ nebo m o 0(0)0R2 a v případě, že R3a a R3b jsou navzájem v poloze 5 ortho, mohou být spojeny za vzniku alifatického nebo aromatického kruhu o 5 až 8 atomech uhlíku, popřípadě obsahujícího jeden nebo dva heteroatcmy ze skupiny kyslík, síra nebo dusík, vodíku, alkyl o 1 až ó r.ý alk;. 1 o 1 až 5 a~or.ec; n mohou být 1 až 5 9 «* s*, ***» <, a. * w a R. o l- nezávisle znamenají atc atomech uhlíku, substituovaný alkyl uhlíku, v němž substituenty mohci halogenu, 1 až 3 hydroxyskupiny, 1 až 3 alkancyloxy- skupiny o 1 až 10 atomech uhlíku, 1 až 3 alkoxyskupir.y o 1 až 5 atomech uhlíku, fenyl, fenoxyskupir.a, 2-furyl alkoxykarbonyl o 1 až 6 atomech uhlíku v alkoxylové části nebo S(0)m-alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, nebe R,. a R_ společně tvoří skupinu -(CH0) L (CH0) -, kde L znamená skupinu C(R_)OI 0, S(0) nebo M(R0), r a 3. c. <l nn c s nezávisle znamenají celé čísle i až 3 a R£ má svrchu uvedený význam, znamená atom vodíku nebo alkylový zbytek o 1 až 6 atomech uhlíku, znamena 97 (CH2)X C (CH2)y R7a nebo — Z-(CH2)x-C— (CH2)y R7a kde 6 Z znamená skupinu N-Rg nebo O,

Ry a R7a nezávisle znamenají vodík, alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, ORg, trifluormethyl, fenyl, substituovaný alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, na němž se sub- A* * ^ ^ —I M y ψ , ^ ^ ^ ^ ^ ^ ^ * · m Wk í /¾ Λ ^ 1 ^ ^ ^ r -1 — ^ , y ^ s ^ * vj vwx- — c x.,uua^v*/i, i.riujiyij

p-hydroxyfenyl, 0Ro, 1 až 3 atomy fluoru, S(0) R., C(C)CRg, cykloalkyl o 3 až 7 atomech uhlíku, N(Rg)(Rg) nebo C(0)M(Rg)(Rg) nebo mohou být Ry a Rya spojeny nezávisle s jednou nebo oběma skupinami R4 a Rg za vzniku alkylenových můstků mezi koncovým atomem dusíku a alky-lovou částí skupin Ry nebo Rya> přičemž tyto můstky obsahují 1 až 5 atomů uhlíku, B, D, E a F nezávisle znamenají C(Rg)(R10), 0, C=0, S(0)m nebo NRg, přičemž jedna nebo dvě skupiny ve významu B, D, E nebo F mohou chybět za vzniku 5, 6 nebo 7-člen-ného kruhu za předpokladu, že B, D, E a F mohou znamenat skupinu C(Rg)(R10) nebo C=0 pouze v případě, že jeden ze zbývajících symbolů B, D, E a F znamená 0, SÍO)^ nebo NRg, přičemž B a D nebo D a E mohou společně tvořit skupinu N = CR^q- nebo CR^q = N nebo mohou B a D nebo D a E společně tvořit skupinu CRg=CR10 za předpokladu, že jeden ze zbývajících symbolů B a E nebo F současně znamenají 0, S(0)m nebo NRg,

Rg a R10 nezávisle znamenají atom vodíku, R2, 0R2, (CHg)q- -aryl, (CH?) C(0)0Rg, (CH2) C(0)0(CHg) -aryl nebo

(CH_) (lH-tetrazol-5yl) a aryl může být substituován Q 1 až 3 atomy halogenu, 1 až 2 alkylovými skupinami o 1 až 8 atomech uhlíku, 1 až 3 skupinami ORg nebo 1 až 2 skupinami C(0)0R2,

Rg znamená Rg, (CHg)q-aryl, C(0)R2, C(0)(CHg) q-aryl, S02R2, S02(CH2) -aryl, C(0)N(R2)(Rg), C(0)N(Rg)(CHg)q- -ary1, C(0)0R2> l-H-tetrazol-5-yl, SOgH, S0gNHC=N, 7

V

S02N(R2)-aryl, S02N(R2)(R2) a skupina (CHg) může být substituována 1 až 2 alkylovými skupinami o 1 až 4 atomech uhlíku a R2 a arylová skupina mohou být popřípadě dále substituovány 1 až 3 skupinami 0R2a, -aryl, 1 až 2 skupinami C(0)0R_ , 1 až 2 skupinami <L CL C(3)0(CH0) -ary1, 1 až 2 skupinami ^ M > 9 N(9 2a" “2a' f 1 až 2 skupinami C(0)N(R2a)(CH2)c-aryl, 1 až 5 atomy halogenu, 1 až 3 alkylovými zbytky o 1 až 4 atomech; uhlíku, 1,2,4-triazolyl, l-H-tetrazol-5-yl, C(0)NHS02R2a, S(0)mR2a,'C(0)NHS02(CH2) -aryl, S02NHC=N, S02NHC(0)R2a, SOgNKC(0)(CH2)Q-aryl, N(R2)C(0)N(R2a)(R2a), N(R2a)C(0)N(R2a)(CH2) -aryl, j N(R2a)(H2a), N<R2a)C(0)R2a’ N(R2a)C(0)(CH2)q-aryl, ! 0C(0)N(R2a)(R2a), 0C(0)N(R2a)(CH2)q-aryl, skupina S02(CH2)qC0NH-(CH2)wNHC(0)r1^, kde w znamená číslo 2 až 6 a R^^ znamená biotin, aryl nebo aryl substituovaný 1 nebo 2 skupinami 0R2, 1 až 2 atomy halogenu, azido-skupinami nebo nitroskupinami, m znamená celé číslo 0, 1 nebo 2, n znamená celé číslo 1 nebo 2, q může popřípadě znamenat 0, 1,...2, 3 nebo 4 a G, Η, I a J jsou atomy uhlíku, dusíku, síry nebo kyslíku, přičemž alespoň jeden z těchto symbolů znamená hetero-atom a jeden ze symbolů G, Η, I nebo J může chybět za vzniku heterocyklických aromatických kruhů o 5 nebo 6 atomech v kruhu, jakož i farmaceuticky přijatelné soli a jednotlivé diastereo-mery těchto sloučenin.

Ve svrchu uvedených strukturních vzorcích a v průběnu popisu mají následující pojmy dále uvedený význam: 8

Alkylové skupiny mají svrchu uvedenou délku v přímém nebo rozvětveném řetězci a popřípadě mchou obsahovat dvojnou nebo trojnou vazbu. Příkladem takových skupin mohou být methyl, ethyl, propyl, ethinyl, isopropyl, butyl, sek.butyi, terc.butyl, pentyl, isopentyl, hexyl, isohexyl, allyl, pro-penyl, butenyl, butadienyl a podobně.

Alkoxyskupiny rovněž obsahují výše uvedený počet atomů v přímém nebo rozvětveném řetězci a popřípadě mohou rovněž obsahovat dvojné nebo trojné vazby. Jako příklady takových alkoxyskupin je možno uvést methoxy-, ethoxy-, propoxy-, iso-propoxy-, butoxy-, isobutoxy-, terč.butoxy-, pentoxy-, isc-pentoxy-, hexoxy-, isohexoxy-, allyloxy-, propinyloxy-, isobutenyloxy-, 2-hexenyloxyskupinu a podobně.

Atomem halogenu může být atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu.

Pod pojmem "aryl" se rozumí fenyl, naftyl a aromatické zbytky s 5- a 6-člennými kruhy, obsahující 1 až 3 heteroato-my nebo kondenzované 5- nebo 6-členné bicyklické kruhy, obsahující 1 až 3 heteroatomy ze skupiny dusík, síra nebo kyslík Příkladem takových heterocyklických-aromatických kruhů mohou být pyridin, thiofen, benzothiofen, tetrazol, indol, N-methyl-indol, dihydroindol, indazol, N-formylindol, benzimidazol, thiazol, furan, pyrimidin a thiadiazol. Některé ze svrchu uvedených pojmů se mohou ve vzorci vyskytnout více než jednou, v tomto případě jsou významy obou pojmů na sobě nezávislé.

Výhodné sloučeniny podle vynálezu je možno vyjádřit obecným vzorcem III 9 Η Η ι ι R φ R-C-N-C—Α—Ν 1 . ιι Ο ά

kde R, C=0

I

(III) znamená alkyl o 1 až 10 atomech uhlíku, arylalkyl o 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové části, cykloalkylh alkyl o 3 až 6 atomech uhlíku v cykloalkylové a 1 jaž 4 atomech uhlíku v alkylové části, alkyl o 1 až 4 j atomech uhlíku-K-alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, arýi-alkyl o 0 až 5 atomech uhlíku v alkylové části-K-alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, cykloaikylaiky 1 o 3 až 7 atomech uhlíku v cykloalkylové a 0 až 5 atomech uhlíku v alkylové části-K-alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, kde 0) , kde a alkylové skupiny jsou popřípadě dále substituovány 1 až 7 substituenty ze skupiny atom haloge:

nu, ) 0R S(0) -alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, CR» nebo C(0 m ° 2a za a arylové skupiny mohou být dále substituovány 1 ^ž 2 alkylovými skupinami o 1 až 4 atomech uhlíku, 1 2 atomy halogenu, 1 až 2 skupinami 0R5, CF^, OCF^ methylendioxy, SÍO^Rg, S0,N(R5)(R,). N(R2)SOgR2 nebo az

C(0)OR 2’ 2 10 znamená atom vodíku, alkyl o 1 až δ atomech uhlíku, cykloalkyl o 3 až 7 atomech uhlíku a v případě, že se na jeden atom váží dvě alkylové skupiny o 1 až 6 ato- a "2a o *‘3a a mech uh líku, mohou bý kruhu o az o atomec, 1 nebo 2 heteroatomy O " ^*1 Λ *» ? čL & je atcm vodíku nebo a nezávi alkyl o 1 pínu, nicr sle znamenají atom vodíku nebo halogenu, až 4 atomech uhlíku, C-R^, methylendioxysku-oskupinu, S(0) -alkyl o 1 až 4 atomech uhlí ku, CF, nebo CÍOjORg, ?., a nezávisle znamenají atom vodíku, alkyl o 1 až 6 ato mech uhlíku, substituovaný alkyl o i až 6 atomech uhlíku, kde substituenty mohou být 1 až δ atomů halo- genu, 1 až 2 hydroxyskupiny, 1 až 2 alkancyloxyskuplny o 1 až ž atomech uhlíku, 1 až 2 alkyloxyskupina o 1 až δ atomech uhlíku nebo S(0) -alkylové skuoiny o 1 rn * až 4.atomech uhlíku, znamen a

R 7

— (CH2)x~C (CH2)y— R7a nebo -N(R2)-(CH2)x C—(CH2)y — R7a 11 kde x a y nezávisle znamenají O, 1 nebo 2, R7 a R7 nezávisle znamenají vodík, alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, substituovaný alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku kde substituenty ze skupiny 1 až 3 atomy fluoru nebo imidazolyl, fenyl, indolyl, S(0) -alklyl o 1 až 4 atomech uhlíku, C(0)0R2 nebo mohou být Ry a nezávisle spojeny s jednou nebo s oběma skupinami ve významu P>4 a Rg za vzniku alkylenových můstků mezí koncovým atomem dusíku a alkylovou částí skupin Ry nebo Rya, přičemž tento můstek obsahuje 1 až 3 atomy uhlíku, B, D a F nezávisle znamenají C(RQ)(R10), 0, C = 0, S(0)m f*ebo NRg, přičemž jeden ze symbolů B, D nebo F může být Vynechán, čímž vznikne 5- nebo 6-členný kruh za předpokladu, že jeden ze symbolů B, D a F znamená skupinu C(Rg) (Rj_q) nebo C = 0 pouze v tom přípradě, že jeden ze zbývajících symbolů 3, D a F současně znamená 0, S(0)m nebo NRg, (CH2)q-ary!,

Rg a R1q nezávisle znamenají vodík, R?, ORg (CH2)qC(0)0R2, (CH2)qC(0)0(CH2.)q-aryl (CH2) (lH-tetrazol-5-yl), přičemž aryl je popřípadě substituován 1 až 3 atomy halogenu, 1 až 2 alkylovýjni skupinami o 1 až 4 atomech uhlíku, 1 až 3 skupinami ORg nebo 1 až 2 skupinami C(0)0R2, C(0)(CH2) -aryl, R,

V znamená R2, (CH2)q-aryl, C(0)R2 S02R2, S‘02(CH2) -aryl, C(0)N(R2) (Rg) , C(0)N(R2) (CHg -aryl, l-H-tetrazolyl-5-yl, S02NHC=N, SOgNRg-aryl, SOgN(Rg)(R2) a skupina (CH2)q je popřípadě substituována 1 až 2 alkylovými zbytky o 1 až 2 atomech uhlíku a skupina Rg je popřípadě substituována 1 až 2 substituenty ze skupiny 0R2a, 0(CH2)q-aryl, C(0)0R2a, 12 C(0)N(R5 )(R9 ), S(0) R5 , l-H-tetrazcl-5-yl, c. SL c.3. ΠΊ c. a C(O)NHS02R2a, C(O)NHS02(CH2) -ary1, :i(R2a)C(0)M(R2a)(R2a) nebo N(R2a)C(0)”(R2a)(CHp) --aryl, aryl může být popřípadě dále substituován jedním nebo dvěma substituenty ze skupiny 0R9 , atomy halogenu, alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, C*N0)CR2a nebo l-H-tetrazol-5-yl, dále skupinu S0p (CHp ) C0P.;H( CH2 )._r-NHC(0)R^, kde w znamená číslo 2 až δ a R1^ může být zbytek biotinu, aryl nebo aryl, substituovaný jednou nebo dvěma skupinami 0Rp, 1 až 2 atomy galogenu, azi-doskupinami nebo nitroskupinami, m znamená 0, 1 nebo 2, q popřípadě znamená 0, 1, 2 nebo 3 a arylovou skupinou je fenyl, naftyl, pyridyl, thienyl, indoly!, thiazolyl nebo pyrimidinyl, jakož i farmaceuticky přijatelné soli a jednotlivé diaste-reomery těchto sloučenin.

Další výhodnou skupinou sloučenin podle vynálezu jsou ty sloučeniny obecného vzorce III, které neobsahují skupinu ve významu symbolu F.

Další výhodnou skupinou sloučenin podle vynálezu jsou sloučeniny obecného vzorce IV 13

R -C-Ň-C—A—N

1 II C=0

I

kde R, znamená alkyl o 1 až 10 atomech uhlíku, ary1alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové části, cykloalkylalky o 5 až 6 atomech uhlíku v cykloalkylové a 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové části, alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku-K-alkyl o 1 až 2 atomech uhlíku, arylaiky1 oj 0 až 2 atomech uhlíku v alkylové části-X-alkyl o 1 j až 2 atomech uhlíku, cykloalkylalky 1 o 3 až 6 atomech uhlíku v cykloalkylové a O až 2 atomech uhlíku v alkylové části-K-alkyl o 1 až 2 atomech uhlíku, kde K zha-mená O nebo S(0)m a arylové skupiny mchou být dále sub stituovány jedním až dvěma substituenty ze skupiny alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, atomy halogenu, 0R2· C(0)0R2, CF3 nebo SCO) Rg, znamená vodík, alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, cyklo-alkyl o 3 až 6 atomech uhlíku a v případě, že jsou na 1 atom vázány dva alkylové zbytky o 1 až 4 atomech uhlíku, mohou popřípadě být spojeny za vzniku 5- ažj 14 6-členného kruhu, popřípadě obsahujícího jako hetero-atomy kyslík nebo skupinu NR0 , R0 znamená vodík nebo alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, 2 a a nezávisle znamenají atom vodíku nebo halogenu, alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, C(Q)OR^, hydrcxyskupinu, alkoxyskupinu o 1 až 4 atomech uhlíku, S(0)_-alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, nebo CFg, R^ a R^ nezávisle znamenají vodík, alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, substituovaný alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, kde substituenty mohou být 1 až 2 hydroxyskupiny nebo S(0) -alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, m A znamená skuoinu ' <CH2>x - C -

R 7a kde x znamená 0 nebo 1 a

Ry a Rya nezávisle znamenají vodík nebo alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku nebo mohou být skupiny Ry a Rya nezávisle spojeny s jednou nebo oběma skupinami R4 a R^ za vzniku alkylenových můstků mezi koncovým atomem dusíku a alkylovou částí skupin Ry nebo Rya za vzniku 5- nebo 6-členných kruhů, obsahujících koncový atom dusíku, B a D nezávisle znamenají C(Rg)(R10), C = 0, 0, S(0)m nebo NRg za předpokladu, že jeden ze symbolů B a D múze znamenat C(Rg)(R^Q) nebo C = 0 pouze v případě, že druhý z těchto symbolů znamená 0, S(0) nebo NRq> m 3 15 - nezávisle znamenají vodík, R2 nebo (CH2^q-aryl a aryl může být substituován 1 až 2 substituenty ze skupiny atom halogenu, alkylový zbytek o 1 až 4 atomech uhlíku, ORg nebo C(0)0R2>

Rq znamená C(0)R5, C(0)(CHg) -aryl, SO?Rp SO(CH2)c-aryl, (CH0) -aryl, a skupina (CHp) C(0)N(R2)(r2), C(0)N(R2 2'q »----- "-“2 q je popřípadě substituována 1 až 2 alkylovýni skupinami 0 1 až 2 atomech uhlíku a skupina R2 je popřípadě substituována 1 až 2 skupinami 0R2a, 0(CHP) -aryl, C(0)0R2a, C(0)N(R2a)(R2a), S(0)mR2a, l-H-tetrazol-5-yl, C(0)NHS02R2a nebo N(R2a)C(0)N(R2a)(R2&) , přičemž arylo-vá skupina je popřípadě substituována jedním až dvěma substituenty ze skupiny 0R2a, atorn ^al°Senu» alkyl o ub- mi 1 až 2 atomech uhlíku, C(0)0R2a> l-H-tetrazol-5-yl nebo S(0)mR2&, dále může Rg znamenat skupinu S02(CH2)qC0NH(CH2)wNHC(0)R11, kde w znamená číslo 2 až 6 a R11 je zbytek biotiku nebo aryl, popřípadě sv stituovaný 1 až 2 0R2> atomy halogenu, azidoskupinan nebo nitroskupinami, m znamená 0, 1 nebo 2, q popřípadě znamená 0, 1, 2 nebo 3, aryl znamená fenyl, naftyl, pyridyl, indoly1, thienyl nebo tetrazolyl, jakož i farmaceuticky přijatelné soli a jednotlivé diastereo-mery těchto sloučenin.

Nejvýhodnějšími sloučeninami podle vynálezu jsou sloučeniny obecného vzorce V 16

znamená některou ze skupin

T.Z

F CH2CH2CH2;

17 R 3a znamená atom vodíku nebo fluoru,

D znamená 0, S, S(0) . N(R„), NS0~( ΓΠ d d WC(0)(Rj), NS02(CH?) OH, NS02(CH-M-30?(CH2 ) QC(0)-N(R2)(R2), N-SC,7

O N-S02(CH2)qC(0)-N(R2)(CH2)w

O

N<

N-NH N-S02(CH2)q —¢/ |

N-N aryl je pyridyl nebo fenyl, popřípadě substituovaný 1 až 2 atomy halogenu, R2 znamená vodík nebo alkyl o 1 až -i atomech uhlíku, m znamená číslo 1 nebo 2, t znamená 0, 1 nebo 2, q znamená 1, 2 nebo 3, w znamená číslo 2 až 6, 18 jakož i farmaceuticky přijatelné soli a jednotlivé diasterc-mery těchto sloučenin.

Jako representativní a nejvýhodnějsi látky podle vynálezu s účinkem na uvolnění růstového hormonu je možno uvést následující sloučeniny: 1. IJ-/1(R)-/(1,2-dihydro-l-methansulfeny1spiro-/2H-indol- -3,4'-piperidin-l*-yl)karbony1/-2-(1H.indol-3-yi)ethyl/-2--amino-2-methylpripanamid, 2. N-/1(R)-/(1,2-dihydro-l-methankarbonylspiro/3H-indol-3 --piperidin/-1'-yl)karbony1/-2-(lH-indcl-3-yl)ethyl/-2-aninc--2-methylpropanamid, 3. N-/1(R)-/(1,2-dihydro-l-benzensulfcnylspiro/3H-indol--3,4'-piperidin-1'-yl)karbony1/-2-(lH-indol-3-yl)ethyl/-2--amino-2-methylpropanamid, 4. N-/1(R)-/(3,4-dihydro-spiro/2H- l-benzopyran-2,4'-piperidin/ -1'-yl)karbony 1/-2-( l.H-indol-3-yl }ethyl/-2-amino-2--methylpropanamid, 5. N—/1(R)—/(2-acetyl-l,2,3,4-tetrahydrospiro/isochinolin--4,4 -piperidin/-l'-yl)karbony1/-2-( indol-3-yl)ethyl/-2-amino -2-methylpropanamid, 6. N-/1(R)-/(1,2-dihydro-l-methansulfonylspiro/3H-indol-3,4 --piperidin/-l'-yl) karbony1/-2-(fenylmethyloxy)ethyl/-2--amino-2-methylpropanamid, 7. N-/1(R)-/(1,2-dihydro-l-methansulfony1spiro/3H-indol--3,4'-piperidin/-l'-yl)karbcnyl/-2-(fenylmethyloxy)ethy1/--2-amino-2-methylpropanamidmesylát, 8. N-/1(R)-/(1,2-dihydro-l-methansulfonylspiro/3H-indol--3,4-piperidin/-l'-yl)karbony1/-2-(2' ,6'-difluorfeny1methyl-oxy) ethyl /-2-amino-2-methylpropy námi d, 19 9. N-/1(R) —/(1,2-dihydro-l-methansulfonyl-5-fiuorspiro/3K--indol-3,4'-piperidin/-l '-yl) karbony 1/-2-( f er.yl methyl oxy) -ethyl/-2-amino-2-methylpropanamid, 10. N-/1(S)—/(1,2-dihydro-l-methansulfonylspiro/3H—indol4 -3,4'piperidin/-1' -y1)karbony1/-2-(feny1me thy11h i o)e thy1/4 -2-amino-2-methylpropanamid, 11. N-/1(R)-/(1,2-dihydro-l-methansulfonylspiro/3H-indol--3,4'-piperidin/-l '-yl )karbonyl/-3-fenylpropyl/-2-amino-2i· -methylpropanamid, 12 . N-/1 (R)-/ (1,2-dihy dro-l-me thansulf ony lsp i ro(3H-indol --3,4'-piperidin/-l'-yl)karbonyl/-3-cyklonexyIpropyl/-2--amino-2-methylpropanamití, 13 . N-/1 (R) —/ (1,2-dihydro-l-methansulfonylspiro/3H-indol--3,4'-piperidin/-!'-yl)karbonyl/-4-fenylbutyl/-2-amino-2-i -methylpropanamid, 14. N-/1(R)-/(1,2-dihydro-l-methansulfony1spiro/3H-indol--3,4'-piperidin/-1'-yl)karbony1/-2-(5-fluor-ΙΗ-indol-3-yl -ethyl/-2-amino-2-methylpropanamid, 15. N-/1 (R)-/(1,2-dihydro-l-methansulfonyl-5-fluorspiro/3H--indol-3,4'-piper idin/-l'-yl) karbony 1/-2-( 5-f luor-lH-indol--3-y 1)ethyl/-2-amino-2-methylpropanamid, 16. N-/1 (R) —/ (1,2-dihydro-l-(2-ethoxykarbonyl )methylsulfonyl spiro/3H, indol-3,4'-piperidin/-l'-yl)karbonyl)-2-(IH-indol--3-y1)ethyl/-2-amino-2-methylpropanamid, 17. N-/1(R)-/(1,2-dihydro-l,l-dioxospiro/3K-benzothiofen- I -3,4'-piperidin/-l'-yl)karbonyl/-2-(fenylmethyloxy)ethy1/4 -2-amino-2-methylpropanamid, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto sloučenin. 20 Dále budou uvedeny representativní pří z nichž je zřejmý princip použitého názvosi;

N-/1 (R) -/ (3,4-dihydro-4-oxospiro/2H-l-benzcpyrar.-2,4 ridin/-1'-yl)karbonyl/-4-fenylbutyl/-2 r-2-r 2-methyl. amid,

N-/1(S)-/(1,2-dihydro-l-methansulfony1 spiro/3H-indol--piperidin/-l, -yl)karbony 1/-2- ( feny lrr.e thyl thio ) ethyl/ -amino-2-methylpropanamid, 21 N-/1 (R)-/ (1,2-dihydro-l-methansulfonylspiro/3H-indol-3,4 -r -piperidin/-! * -yl) karbony 1/-2-( feny lmethyloxy) ethyl/-2--amino-2-methylpropanamid. V průběhu přihlášky mají jednotlivé použité zkratky následující význam: BOC terč.butyloxykarbonyl BOP benzotriazol-l-yloxytris(dimethylamino)fosfonium-hexafluorfosfát, CBZ benzyloxykarbonyl DCC dicyklohexylkarbodiimid DMF NtN-dimethylformamid EDC l-(3-dimethylaminopropyl )-3-ethylkarbodiimid- hydrochlorid FAB-MS hmotové spektroskopie při bombardování rychlými atomy j GKR? peptid, schopný uvolnit růstový hormon HOBT hydroxybenztriazol

LAH lithiumaluminiumhydrid 22 HPLC vysokotlaká kapalinová chromatografie MHz megahertz MPLC střednětlaká kapalinová chromatografie NMM fl-methylmorfolin IJMR nukleární magnetická resonance ΟΧΟΓΙΞ peroxymonosulfát draselný PLC preparativní chromatografie na vrstvě PCC pyridiniumchlorchroman

Ser sérum TFA kyselina trifluoroctová THF tetrahydrofuran TLC chromatografie na tenké vrstvě TMS tetramethylsilan.

Sloučeniny podle vynálezu obsahují alespoň jeden střed asymetrie, jak je označeno hvězdičkou ve strukturních vzorcích I a II. V molekule těchto látek však mohou být přítomny ještě další středy asymetrie v závislosti na povaze různých substituentů. V přítomnosti každého" takového středu asymetrie vzniknou dva optické isomery, přičemž tyto optické isomery, a to oddělené, čisté nebo částečně čištěné a jejich racemické nebo diastereomerní směsi rovněž spadají do rozsahu vynálezu. V případě středu asymetrie, který je ve vzorcích I a II označen hvězdičkou, bylo zjištěno, že jedna ze vzniklých látek je účinnější, vzorec výhodných isomerů je znázorněn obecným vzorcem Ia. V případě,, že R2 znamená atom vodíku, odpovídá konfigurace středu asymetrie konfiguraci v D-aminokyselinách. Ve většině případů se tato konfigurace označuje jako R-kon-figurace, i když může dojít ke změnám v závislosti na významu R^ a R2 při stanovení konfigurace jako R nebo S. 23

Sloučeniny podle vynálezu se obvykle izolují ve formě farmaceuticky přijatelných adičních solí s kyselinami, vyf Ví tvořených například při použití anorganických nebo organip<0 kyselin. Příkladem takových kyselin mohou být kyselina chlorovodíková, dusičná, sírová, fosforečná, mravenčí, octová^ trifluoroctová, propionová, maleinová, jantarová, malonová, methansulfonová a podobně. Mimoto je možno isolovat někteřé sloučeniny, obsahující kyselou funkci, například karboxylp-vou skupinu ve formě solí s anorganickými anionty, například jde o soli sodné, draselné, lithné, vápenaté, hořečnaté a; podobně, je však možno vytvořit také soli s organickými bázemi .

Sloučeniny obecného vzorce I a II podle vynálezu je možno připravit postupně nebo konvergentním postupem. Způ soby, jimiž je možno uvedené látky získat, budou pro postupný způsob uvedeny v následujících reakčních schématech. 24

Chráněné deriváty aminokyselin vzorce 1 jsou v mnoha případech běžně dodávány ve formě, kde ochrannou skupinou L je například skupina 30C nebo CBZ. Další chráněné deriváty aminokyselin vzorce 1 je možno připravit při použití postupů, uvedených v literatuře. Řada spiropiperidinů a spiro-azepinů (n = 2) obecného vzorce 2 a 2a jsou látky, které jsou z literatury známé a mohou být derivatizovár.y na fer.y-lové nebo heteroarylové skupině známými postupy, jako halo-genací, nitrací, sulfonylací a podobně. Různé spiropiperi-dinové a spiroazepinové deriváty, substituované na fenylové nebo heteroarylové skupině je také možno připravit při použití postupů, uvedených v následujících publikacích, přičemž jako meziprodukty se užijí sloučeniny, substituované na fenylové nebo heteroarylové skupině. Ve schemtatech, která následují za schématem 1 jsou syntetické postupy znázorněny pouze při použití spiropiperidinových derivátů, je však zřejmé, že popsané přeměny je možno uskutečnit také v sériích vyšších homologů za vzniku sloučenin obecného vzorce I a II, v nichž n = 2.

Meziprodukty obecných vzorců 3 a 3a je možno syntetizovat způsobem, popsaným ve schématu 1. Vazba spiropiperidinových sloučenin obecných vzorců 2a 2a na chráněné aminokyseliny vzorce 1, kde L je vhodná ochranná skupina se provádí běžně v inertním rozpouštědle, například v dichlormethanu v přítomnosti vazných činidel, například DCC nebo EDC a v přítomnosti HOBT. Vazbu je možno uskutečnit také při použití vazného reakčního činidla typu BOP v inertním rozpouštědle, například v dichlormethanu. Nežádoucí vedlejší produkty je možno odstranit současně s čištěním meziproduktů pomocí chro-matografie na silikagelu, zejména se užívá rychlá chromato-grafie podle publikace W. C. Still, M. Kahn a A. Mitra, J. Org. Chem., 1978, 43, 2923, MPLC nebo preparativní TLC. 25 25 Schéma 1

Pz íps

Ri—f-N-L

COOH 1 Přeměna sloučenin 3 a 3a na meziprodukty 4 a 4a může být uskutečněna podle schématu 2. Benzyloxykarbonylové skupiny je možno odstranit řadou postupů, které jsou v oboru známy, například katalytickou hydrogenací působením vodíku v přítomnosti katalyzátoru na bázi paladia nebo platiny v protickém rozpouštědle, jako methanolu. Tam, kde není možno použít katalytickou hydrogenací vzhledem k přítomnosti 26 dalších potenciálně reaktivních funkčních skupin, je rr.cžno benzyloxykarbonylové skupiny odstranit působením rozteku bremovodíku v kyselině octové. Ochrannou skupinu BCC je mc no odstranit v rozpouštědle, jako methylenchlcridu nebo methar.clu působením silné kyseliny, například kyseliny chl rovedíkové nebo triflucroctové. Podmínku orc odstranění ji temny, je možno Prctective Gro lne., New York , ných ochranných skupin, které mohou být př nalézt v publikaci Greene T. , Wuts P. G.M. in Orgar.ic Synthesis, John Wiley and Sons, NY 1991.

Schéma 2 R,

r2 R,—j—N-L CO

N-H

I CO

27

Meziprodukty obecného vzorce 5 a 5b, v nichž A známe4 ná methylenovou nebo substituovanou methylenovou skupinu, je možno připravit podle schématu 3 vazbou meziproduktů obecného vzorce 4 nebo 4a na aminokyseliny vzorce 6, opět v inertním rozpouštědle, jako dichicmethanu při použití vazného činidla, například EDC nebo DCC v přítomnosti HC5?. Aminokyseliny vzorce 6 jsou známé nebo je možno je snadno připravit známými postupy. Vazbu je možno také uskutečnit při použití vazného činidla typu BOP v inertním rozpouštědle, například dichlormethanu. Také v případě, že R4 nebo R_ znamená atom vodíku, je možno použít v průběhu vazné reakce aminokyseliny obecného vzorce 7, v nichž L znamená ochrannou skupinu ve svrchu uvedeném významu, čímž se získají sloučeniny 5a a 5c. Odstranění ochranných skupin ze sloučenin 5a a 5c, v nichž L znamená ochrannou skupinu, je možno uskutečnit za známých podmínek.

Sloučeniny obecného vzorce I a II, v nichž R^ a/nebo:

Rg znamená atom vodíku, je možno dále zpracovávat na nové j sloučeniny obecného vzorce I a II (výhodným postranním ře-tězcem R7 je CH2-CH(OH)-CH2X, kde X je atom vodíku nebo OH), tyto látky jsou substituovány na aminoskupině tak, jak je znázorněno ve schématu 4. Reduktivní aminace sloučenin obecného vzorce I a II působením aldehydu se provádí za známých podmínek, je například možno použít katalytickou hydrogenaci působením vodíku v přítomnosti katalyzátoru na bázi platiny, paladia nebo niklu nebo působením chemických redukčních činidel, jako je kyanohydroborát sodný v inertním rozpouštědle, jako methanolu nebo ethanolu. Obdobnou přeměnu je také možno uskutečnit přes otevření epoxidového kruhu. 28 Schéma 3 R~ c i 2 ·‘5

N-H RS 9 .R-t

•N-C-A-N

'5 nebo L

Rť CO

R4 HOOC-A-N-L 7 CO

Ri CO I

R 3a

Ro Rg O i £ i w II R1—|—N—C-A—N CO ,R*

R5 nebo L

R 3a

3a 29 fa fa ο I fc. t

11 I co I

N-C-A-N Schéma 4 r2 fa I p 1 1 Rs CO 1 N-C-A-N R*

reduktivní aminace net otevření epoxidu

l kde R4a/.nebo Rg je C. popr. substituovaný 6 alkyl, f2fa9 r4 R,—{— N-C-A-N^ Rs

CO I

*2?69 Λ Ri—r—N-C-A-N. CO fa I

3a II kde R4 a/nebo Rg je C, popř. substituovaný g alkyl, 30 m ca. Ί A je Je t V2C Γ V př 8 a pin

Sloučeniny vzorce I a II, v nichž A znamená ) (CHp)2-C(R7)(Ry&)(CH2) je možno připrav!o p 5 reakcí sloučenin 4 nebo 4a s reakč.ními čin snadno odštěpítelná skupina, jako Cl, Br, I, aké možno sloučeniny 4 a 4a uvést do reakce s ce 5 v inertním rozpouštědle, jako 1,2-dichlc ípade, že R4 nebo R_ v produktu je vodík, bud 9 coatřena odštěcitelnou ochrannou skuoir.cu L cd 1 1G i. e sche-y 8, kde * '.T '

činidla sto sku- R. nebo . 4 o

Schéma 5

Ro Rg ! ** I 3

R-,——N-H CO 1

O ?2a R7 /4 X (CH2)x-j— (C H2)yN R7a R« 8 nebo něco R:

CO I

'3a 0=C=N-(CH2)xf-(CH2)yN «7a \

Rs 31

Sloučeniny obecného vzorce I a II podle vynálezu je možno připravit také konvergentním způsobem, tak jak bude popsánov reakčních schématech 6, 7 a 8. C^é.r\βp.θ no v"· sn"* pc κy sc 1 ' p případů běžně dostupné, v těchto sloučeninách M znamená methyl-, ethyl- nebo benzylesterovou skupinu. Další obdobný: způsobem chráněné aminokyseliny je možno získat klasický: postupy, které jsou v oboru běžně známy. Některé z těchto metod zahrnují reakci chráněné aminokyseliny s diazoalkanem a odstranění ochranné skupiny L, reakci aminokyseliny s příslušným alkoholem v přítomnosti silné kyseliny, například, kyseliny chlorovodíkové nebo kyseliny p-toluensulíonové. Syntetické postupy, vhodné pro přípravu nových aminokyselin jsou popsány v následujících schématech 14, 15 a 15.

Meziprodukty obecného vzorce 11 a 11a je možno připravit způsobem podle schématu 6 tak, že se uskuteční vazba ! aminů 10 na aminokyseliny 6 a/nebo 7, v nichž L znamená 1 ochrannou skupinu, tak jak bylo popsáno svrchu ve schématu 3. V případě, že je ve sloučeninách vzorce 11 nebo 11a přítomna vazba typu močoviny, je možno.-ji zavést způsobem, popsaným ve schématu 5.

Schéma

Ba Rs o r4 Ri i N~C“A—N—n= HOOC-A-N-R5

Ri—|—N-H COOM 10

COOM 11 neoo HOOC-A-N-L 7

R2 r5 o r4 4 I a II I 4 Ri——N-C-A—N-L COOM 11a 32 Přeměnu esterů obecného vzorce li nebe 11a na kyseliny obecného vzorce 12 nebo 12a, jako meziprodukty, je možno uskutečnit celou řadou postupů, které jsou v oboru známy, jak je popsáno v následujícím schématu 7. Je například mož- ΠΟ ΓΠ 6 11* V1 S S ,t'6 Γ V 3 0 ^Vy/ 5 S Θ hlVC 1 v "* ~y 5.“ C^SCCtf.í .T. ΓΊΥ — Γ4 0-- xidu lithného v prctickém rozpouštědle, například ve směsi vody a methanolu. Odstranění benzylové skupiny je mimoto mošno uskutečnit celou řadou reduktivních postupů, například hydrogenací v přítomnosti katalyzátoru na bázi platiny nebo paiadia v erotickém rozpouštědle, například methanolu. Aliyl-ester je možno rozštěpit katalyzátorem, kterým je tetrakis-trifenyIfosfinpaladium v přítomnosti kyseliny 2-ethylhexancvé, postup je možno provádět v řadě rozpouštědel včetně ethyl-acetátu a dichlormethanu, jak bylo popsáno v J. Org. Chem. , 1982, 42, 587.

Schéma 7

92 ^so I ii R.——N—C -A R2 f6 O R4 i Λ I n r -j-n-c-a-n-r5 COOM 11 n-r5

Ri COOH 12

R2 Rg O R4 i ά i ° li i * ri—j—N-C-A-N-L COOH R, R2 Re O r ii

Ri·

•N-C-A-N-L COOM 11a 12a

Kyseliny vzorce 12 nebo 12a je pak mošno zpracovávat na sloučeniny vzorce 5 a 5a nebo na sloučeniny 5b a 5c tak, jak bude popsáno v následujícím schématu 8. Vazbu spiropipe-ridinových sloučenin vzorců 2 a 2a na kyseliny vzorce 12 nebo 33 12a, v nichž L znamená vhodnou ochrannou skupinu, je možno uskutečnit v inertním rozpouštědle, například dichlormethanu při použití vazného reakčního činidla, například dicyklone-xylkarbodiimidu, DCC nebo EDC v přítomnosti 1-hydroxybenz-triazolu, HOBT. Je také možno postupovat tak, že se vazba uskuteční s použitím vazného reakčního činidla například typu benzotriazol-l-yloxytris(dimethy lamino) f osíoniumnexaf Ιμοτ-fosfátu, BOP, v inertním rozpouštědle, například dichlormethanu. Přeměnu sloučenin 5a a 5c na produkty vzorce I a II je možno uskutečnit odstraněním ochranné skupiny L. V případě, že R4 a/nebo R5 znamenají atom vodíku, je popřípadě možno j na atom dusíku navázat substituované alkylové skupiny, tak jak bylo popsáno ve schématu 4. Příprava oxygenovaných spiroindanylpiperidinových sloučenin jako meziproduktů je znázorněna ve schématu 9, v němž ^3a ^ ^3b znamenaJí atomy vodíku. Při zpracování chráněného spiroindanu vzorce 13 působením hydroborátu s následným oki-dativním zpracováním pyridiniumchlorchromanem je pak možno získat spiroindanon vzorce 14. 34 Schéma 3 Ri

COOH

Rn—I COOH Η fu *?6 O i^l ιι 12

Ί ° ÍT N-C-A

R, Rs O R<—|—N—C -A-N CO R<

rte nebo L

Rsa R2 Re O i ά I ° II 12a

3a

•N-C-A-N

R5 nebo L

CO I

3a 5b a 5C - 35 Schéma

! ! Přeměna spíroindanových derivátů na benzolaktamové meziprodukty je znázorněna v následujícím schématu 10. Tuto přeměnu je možno uskutečnit celou řadou vhodných postupů, popsaných v literatuře, jedním z těchto postupů je postup, při němž se na spiroindanon působí kyselinou hydrazonovou I v inertním rozpouštědle, například chloroformu (Schmidtova reakce). V tomto příkladu se získá směs dvou benzolaktamů.i Tyto isomery se pak od sebe snadno oddělí chromatografií na silikagelu. Získané meziprodukty je pak možno zbavit ochran ných skupin a zařadit do sloučenin, zvyšujících sekreci růstového hormonu, jak je znázorněno ve schématech 1 a 8, v nichž se užívá meziproduktu vzorce 2.

Alkylacx získaných meziproduktů vzorce 15 a 16 působením alkylhalogenidu v rozpouštědle, například DMF v přítomnosti hydridu sodíku se získají sloučeniny vzorce 17 a 18, v nichž Rg znamená alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku. •i í

Schéma 10 36

Schéma 10 36 L

L

15

L O 14

Schéma 10A

V případe, že L znamená vhodnou ochr například benzylovou skupinu, je možno ami sobením lithiumaluminiumhydridu za vzniku a 21. Tyto aminy, v nichž znamená atom možno podrobit alkylaci, arylaci, acylaci

I R2 18 annou skupinu, dy redukovat pů-aminů vzorců 19 vodíku, je pak nebo je možno je I 37 uvés do reakce se substituovanými sulior.ylhaiogenidy nebe isokyanáty při použití známých postupů 20 a 22. Po odstranění ochranné skupiny použití katalyzátoru na bázi paladia je dukty, která je možno zařadit do slouže zvyšujících sekreci růstového hormonu p podle schématu 1 a 8 svrchu, v nichž se vzorce 2. za vzniku sloučenin L hycrogenolýzcu p mezne ziske' - r· ·2 ' e vv* ři použití pcstupu užívá meziorodukt

L

Schéma 11A L

L

16 38 1,2,3,4-Tetrahydrcspiro/isochinoli kruhový systém je možno připrav!o také z znázorněn ve schématu 12. Ozonolýzou chr

áněré'-' edným působení hemiacetal 24,

vého derivátu s násl ká jako meziprodukt ní aminací a acylací získar amin vzorce 23. L na amir.cskupíně byla definována svrchu.

Schéma 12

Kruhové analogy obecného vzorce 25, v němž λ, a Y jsou atomy vodíku nebo znamenají OH a H, Ha OH nebo =0 je možno připravit způsoby, které byly popsány v literátu a které jsou v oboru známé. 39

Například je možno podle následujícího schématu 13 připraví- spí ro/2H-l-benzopyran-2,4 * -picericinový/analog ze substituovaného nebo nesubstituovaného 2-hydroxyaceto-fenonu a příslušně chráněného 4-piperidcnu, jak bylo popsáno v publikaci Kabbe H. J., Synthesis, 197S, 885 - 887 j a v citacích, které jsou v této publikaci uvedeny. 2-hydr<p-xyacetofenony jsou sloučeniny, které jsou běžně dostupné nebo je možno je připravit způsoby, které byly popsány v literatuře, například v publikacích Chang C. T. a další, J. Am. Chem. Soc., 1961, 3414 až 3417 a Elliot J. M. a další, J. Med. Chem., 1992, 35, 3873'až 3876. Odstranění použitých ochranných skupin bylo popsáno v publikacích Protective Groups in Organic Synthesis, Greene T. W., Wuts P. G. , John Wiley and Sons, New York, 1991, a Olofson R. A. a další, J. Org. Chem., 1984, 49, 2081 - 2082. Odstraněním těchto skupin je možno získat amin, který je pak možno zařadit do sloučenin podle vynálezu, které vyvolávají sekreci růstového hormonu způsobem podle schémat 1 a 3, v nichž se používá meziprodukt vzorce 2. 40 * S c h e τ a 13

29 41 Kstonovou funkci ve sloučeninách obecného vzorce 27 je možno redukovat na alkoholovou funkci při pcužicí nydr borátu sodného nebo i zcela redukovat na methylenovou sko nu při použití známých podmínek. Je například možno ketcr redukovat působením hydrcborátu sodného a pak meziprodukt dále zpracovávat koncentrovanou kyselinou ohlorovočíkovc· za současné hydrogen.ace, čímž se získají sloučeniny obecr. ho vzorce 29. Amin vzorce 27, 28 nebo 22 je možno zařadit do sloučeniny, způsobující sekreci růstového hormcr.u chem kýmž postupy, které byly podrobně vysvětleny ve schematec 1 až 8 při použití meziproduktu obecného vzorce 2. Mimotoj je keton možno redukovat také po jeho zařazení do sloučenj obecného vzorce I. e- i.n m

Chirální analogy hydroxyspiro/2H-l-benzcpyran-2,4 --piperídinu/ je možno připravit při použití opticky aktivních redukčních činidel s následnou krystalizací diasterejc-merních solí.

Sloučeniny obecných vzorců I a II podle vynálezu je možno připravit z celé řady substituovaných přírodních i přírodních aminokyselin, například obecného vzorce 30, 6 7, v nichž A znamená -(CH2)x-C(R7)(R^a)-(CH2)y-. Příprava řady těchto kyselin byla popsána v US patentovém spisu č 5 206 237. Tyto meziprodukty je v racemické formě možno připra klasickými známými postupy, například podle publikace Williams R. M., "Synthesis of Optically Active alfa-Amino Acids" Pergamon Press, Oxford, 19S9, sv. 7. ne- á /i t

•N \ co2h

H 30 42 K rozdělení (DL)-aminokyselin existuje několik postupů. Běžným postupem pro dělení aminokyselin nebo jejich meziproduktů, chráněných na karboxylové skupině je krystalizace solí, odvozených od opticky aktivních kyselin nebo aminů. Ami-noskupina meziproduktů s chráněnou karboxylovou skupinou je také možno vázat na opticky aktivní kyseliny známým způsccem. Jednotlivé diastereomery je možno oddělit cnrcmatograficky nebo krystalizací s následnou hydrolýzcu chirálního amidu, čímž se získají rozdělené aminokyseliny. Obdobným způsobem je možno také meziprodukty s chráněnou aminoskupinou převést na směs chirálních diastereomerních esterů a amidů. Směs se rozdělí svrchu uvedenými způsoby a jednotlivé diastereomery se hydrolyzují, čímž se získají (D)— a (L)-aminokyseliny. Konečně existuje také enzymatický postup k rozdělení N-ace-tylových derivátů (DL)-aminokyseliny, postup byl popsán v publikaci Whitesides a další, J. Am. Chem. Soc., 1989, 111, 6354 - 6364. V případě, že je žádoucí syntetizovat uvedené meziprodukty v opticky čisté formě, je rovněž možno použít známé postupy, například 1) asymetrickou elektrofilní aminaci chirálních enolátů podle J. Am. Chem . Soc., 1986, 108, 6394 až 6395, 6395 až 6397 a 6397 až 6399; mimoto je vhodná také 2) asymetrická nukleofilní aminace opticky aktivních karbo-nylových derivátů podle J. Am. Chem. Soc., 1992, 114, 1906, nebo Tetrahedron Lett., 1987, 28, 32, 3) diastereoselektiv- ní alkylace chirálních glycinenolátových synthonů podle J.

Am. Chem. Soc., 1991, 113, 9276, nebo J. Org. Chem., 1989, 54, 3916, 4) diastereoselektivní nukleofilní adice chirál ního elektrofilního glycinátového synthonů podle J. Am. Chem. Soc., 1986, 108, 1103, 5) asymetrická hydrogenace prochirál- ních derivátů dehydroaminokyselin podle "Asymetrie Synthesis, Chiral Catalysis", Morrison J. D., Ed. Academie Press, Orlando, FL, 1985, sv. 5 a 6) enzymatická syntéza podle Angew. Chem.

Int. Ed. Engl., 1978, 17, 176. 43

Například alkylace enclátu diíenyloxazincr.u vzcrce podle J. Am. Chem. Soc. , 1991, 113, 9275 působením cinr.a. bromidu v přítomnosti bis(trimethylsilyl}amidu sodného p .bíhá bez obtíží za vzniku sloučeniny 32, která se pak př$vá dí na požadovanou kyselinu (D)-2-amirc-3-řerylpencarovcu vzorce 33 odstraněním M-terc.butyloxykarbcr.ylove skupiny scbením kyseliny trifluoroctové a hydroger.aoí při použit chloridu paladnatého jako katalyzátoru, postup se provádí podle schématu 14. Ο 1 W -·. vl-

Schéma 14

Ph

Ph

Ph 2)PdCI2/H2

nzyl-(D)-seri-z příslušně ho (D)-serinu úklad 30C nebo uskutečnit řa-etně deprotona-v inertním

Meziprodukty vzorce 30, které jsou 0-be novými deriváty vzorce 34 se snadno připraví substituovaných benzylhalogenidů a N-chránené vzorce 34. Ochrannou skupinou L může být např C3Z. Benzylaci sloučeniny vzorce 34 je možno dou postupů, které jsou známé z literatury vč ce působením dvou ekvivalentů hydridu sodíku - 44 rozpouštědle, například DMF s následný- půs vivlantem různých benzylhalogenidů podle Sv 36, jak je znázorněno ve schématu 15. i O ^ >

Schéma 15

H

H i N

NaH/DMF Ar-CH2-X

s

L co2h

C02H 35 34 C-aikyl-(D)-serinové deriváty je rovněž možno ořicra-vit alky lácí podle schématu 15. K přípravě (3) -ser·? -.0vých derivátů vzorce 35 je možno použít ještě další ocstuov například benzylaci meziproduktů s chráněnou karbcxvlovcu kv-selinou, odvozených od sloučeniny vzorce 34, katalvzovar.cu působením kyselin, při použití reakčních činidel obecného vzorce ArCH2OC(=NH)CCl3 podle 0. Yonemitsu a dalších, Chem. Pharm. Bull., 1988, 36, 4244. Při alkylaci chirálních gly-cinových anolátů podle J. Am. Chem. Scc., 1S91, 113 9276 J. Org. Chem., 1989, 54, 3916, působením AřCP^OCH^X, kde X znamená odštěpitelnou skupinu rovněž vznikají sloučeniny vzorce 35. Mimoto je možno (D,L)-0-aryi(alkyl)šeřiny možno připravit a rozdělit rovněž svrchu uvedenými postupy.

Alkylace N-chráněného (D)-cysteinu vzorce 36 se provádí postupy, popsanými pro syntézu (D)-serincvých derivátů a je mošno ji znázornit dále uvedeným schématem 15 při použití sloučenin R, -X, kde X je odštěpitelná skuoina, nacří-klad zbytek halogenidu nebo mesyloxyskupina. - 45

Schéma 16 H ! N.

H I ísU

NaH/THr RiťX R,

'.a'

HS co2h 37 36 [O]

Mas

*L

[O] n CO,H 38 n-1,2

Oxidaci cysteinových derivátů vzorce 37 na sulfoxidy vzorce 38 (n 1) a sulfony vzorce 38 (n = 2) je možno usku tečnit radou oxidačních činidel. Souhrnný článek, týkající se oxidace sulfidů je možno nalézt v Org. Prep. Proced. In~ 1982, 14, 45. Pro syntézu sulfoxidů a hvdrogenpersíranu dra selného,Oxone, podle Tetrahedron Lett., 1981, 22, 1287, je možno pří syntéze sulfonů užít jodistan sodný podle J. Org. Chem. , 1967, 32, 3191.

Je tedy zřejmé, že do látky, podporující sekreci růstového hormonu je způsoben, uvedeným ve schématech 1 a 8 mc no zařadit celou řadu substituovaných aminokyselin. Slouče ny, které obsahují sulfoxidovou nebo sulfoncvcu funkční sku pinu, je také možno připravit z cysteinu při použití jodis nu sodného nebo Oxone . Je také možno jako oxidační činid v posledním stupni syntézy použít peroxid vodíku, jak je z 4β zorněno v následujícím schématu 17. Sulioxidové ce 4C (n = 1) a sulfonové analogy vzorce 4~ (r. nc od sebe oddělit preparativní chrorr.atograíií

Schéma 1

R

NH2 TFA

CO O

40

I 47 f

Odstranění ochranných skupin na amínoskupině dosáhnout celou řadou známých postupů, tak jak byl; uvedeny nebo shrnuty v publikaci Pro tec ti ve C-rcups nic Synthesis, T. W. Greene,Jchn V/iiey ar.d Sons, Γ,' je nežne y svrchu in Crga- ivr.í alkvlací h postupu r.e-y. Výsledné trifluorace tá-ovou chrcma-

Slcučeniny obecného vzorce I, v němž r._ atomy vodíku, je možno dále zpracovávat reduk působením aldehydu některým se svrchu uvedený no alkylací, například reakcí s různými epcxi produkty, získané ve formě hydrochlorídu nebe tu je možno snadno čistit vysokotlakou kapali tografií v reverzní fázi nebo překrystálování

Spiropiperidínové deriváty vzorce 41 je možno připravit celou řadou postupů včetně syntéz, které budou dále podrobněji popsány.

Spiropiperidinové deriváty vzorce 42, v nichž L znamená ochrannou skupinu, je možno syntetizovat postupy, které jsou z literatury známy, například podle H. Ong a další, J. Med. Chem., 1983? 23, 981 - 9S6. Atom dusíku indolinové skupiny ve sloučenině vzorce 42, v-niž L znamená ochranncju skupinu, například methyl nebo benzyl, je možno uvést áq reakce 5 celou radcu elektroílíních sic spiropiperidinových derivátů vzorce 43, značena: řadu funkčních skupin. Sloučen možno do reakce například s ísokyanáty in za vzniku i c n z ~ mu z e 1 « Λ Λ

V

v"0”ce 4P V i é3 v* — 'O “ .0. . “ . ·„ * i «í. Ό * — -»

r.hvcriau le, jako dichlormethanu za vzniku deri mravenčenu v inertním rozpouštědle, na za vzniku karbamátů, chloridu kyselin,

imidazolů za vzniku amidů, sulfcnylchl amidů nebo sulfamylchloridů za vzniku ul

Schéma 1S

42 43

Atom dusíku indolinové skupiny ve sloučeninách vzorce 42 je také možno podrobit reduktivní alkylaci působením aldehydů za známých podmínek. V případě, že aldehydem, použitých při uskutečnění reduktivní aminace je chráněná kyselina glyoxylová obecného vzorce HCCCOCM. kde M znamená ochrannou skupinu, je možno skupinu M z produktu odstranit a navážet jinou skupinu. Sloučeniny vzorce 42 je také možno uvést do reakce s epoxidy za vzniku sloučenin 43, v nichž RQ zna-mer.á beta-hydroxysubstituovaný alkyl nebo aralkylovou skupinu. Indolinový derivát vzorce 42 je také možno převést na 49 sloučeniny vzorce 43, v nichž Rg známem tucvaný fenyl, heteroaryl nebo subsbitu akcí sloučeniny vzorce 42 s íiucríenylc arylovým reakčnín činidlem. Tyto postup

r.eoo substi-eteroarvl re-c z.ucrhete ce var.y ny v publikaci H. Cng a další, J. Meč. Che.n. , 1 až 9So.

Schéma

44 43

Spiropiperidinové meziprodukty'vzorce 43, v nichž L znamená Me nebo 3n a Rg je atom vodíku nebo svrchu popsán funkční skupiny je možno podrobit demethylaci nebo debenzý-laci za vzniku sloučenin vzorce 44, v nichž Rg je atom vo díku nebo řada svrchu uvedených skupin, tak jak je znázorněno ve schématu 19. Pro sloučeniny vzorce 43, v nichž L znamená methyl, je možno demethylaci uskutečnit řadou známých postupu. Je například možno sloučeninu vzorce 43 uvést do reakce s bromkyanem a uhličitanem draselným v inertním ro pouštědle, například dichlormethanu za vzniku kyanamidu, který je možno redukovat na sloučeninu vzorce 44 působeními lithíumaluminiumhydridu v tetrahydrofuranu za varu pod zp;ět-ným chladičem, nebo v silné kyselině, například kyselině j

I 50 chlorovodíkové za varu pod zpětným chladičem r.e'oc působení: Grigr.ardcva reakčního činidla, jako methylmagr.esiumbromidu Dertethyláci sloučeniny vzorce 43 je také možno uskutečnit metodou ACE-CL podle publikace R. Qlcfson a další, J. Org. , a ’ ; O 0 7OC - --- <3.__ kaci. V případě meziproduktů vzorce 43, y nichž L znamená be.nzyl, je možno benzylovcu skupinu odstranit reduktivními postupy, například hydrogenací v přítomnosti katalyzátoru na bázi platiny nebo paladia v protickém rozpouštědle, např klad methanolu. Debenzylaci je také možno uskutečnit metodo ACZ-C1 nedle svrchu uvedené oublikace. vzorce 4~ je možno při podle schématu 20.

Spircheterocyklické sloučeniny t řadou postupů, včetně syntézy prav

Schéma 20

D=0, S, NRg, X= halogenidy, Se, S 49 51

Oxidace chráněného piperidinu vzorce 47 se uskuteční, klasickými postupy, například podle publikace Rabjohn R.

Org. React., 1976, 24, 261. Na výsledný allylalkohol se působí thionylchloridem v inertním rozpouštědle, například benzenu za vzniku odpovídajícího chloridu vzorce 43. v případě, že D znamená kyslík nebo síru, je možno alkylaci uskutečnit v DMF nebo acetonu působením uhličitanu draselného jako bsize a v případě, že D znamená skupinu NRg, kde Rg je vodík, alkyl aryl, acyl, sulfonyl nebo karbamát, je možno reakci uskuteč-nit působením hydridu sodíku jako baze v inertním rozpouštědle, například THF za vzniku prekursoru cyklizace vzorce 49. V případě, že L znamená určitou definovanou ochrannou skupinu je možno sloučeniny vzorce 49 cyklizovat celou řadou známých postupů. Je například možno cyklizaci uskutečnit reakcí s hydridem tributylcínu podle publikace Curran D. P., Synthesis 1988, 417 a 489 v inertním rozpouštědle, například benzeny za vzniku sloučeniny vzorce 46. Sloučeninu vzorce 46, v níž D znamená skupinu NRg, je možno připravit také způsobem, který byl znázorněn ve schématech 18 a 19. V případě, že D znamená atom síry, je možno sloučeninu vzorce 46 oxidovat nai sulfoxid vzorce 47 (n = 1) nebo sulfon vzorce 47 (n = 2) řadou oxidačních činidel, jak je zřejmé ze schématu 21. Pro syntézu sulfoxidů je například často užíván jodistan sodný, pro syntézu sulfonů je často užíván Oxon. Odstraněním ochranné skupiny se pak získá amin vzorce 45, který je pak možno zařadit do sloučeniny, podporující sekreci růstového hormonu způsobem, který byl podrobně popsán svrchu ve schématech 1 a 8 při použití meziproduktů vzorce 2. 52

Schéma 21

L i

46 D=S

Spiropiperidinovš deriváty vzorce 50 a vzore:® 51 je možno připravit způsobem, uvedeným ve schématu 22.

Ftalimidiny vzorce 53, v nichž R,, znamená alk; y - * «·· (CH?)^-aryl nebo ochrannou skupinu se běžně dodávají nebo je možno je připravit z odpovídajících ftaiimidů způsoby, kzeré jsou známy z literatury, například podle publikace Bewster a další, J. Org. Chem., 1963, 28, 501 nebo Mcalees a další, J. Chem. Scc., 1977, 2038. Ftalimidiny vzorce 53 je možno alkylovat v přítomnosti baze, například hydridu draslíku nebo bis(trimethylsilyl)amidu lithia nebo draslíku působením chráněného bis-2-halogenethylaminu, v němž L známe ná ochrannou skupinu, jako methyl, benzyl, t.3CC nebo C3Z a podobně a Y je například atom chloru, bromu nebo jodu za vzniku spiropiperidinu vzorce 54. Ochrannou skupinu je možno odstranit svrchu uvedenými postupy za vzniku sloučeniny vzor ce 50. Redukcí tohoto laktamu hydridem, například lithium-aluminiumhydridem se získá sloučenina vzorce 51. 53 53

>VB 50 R3a i ‘3b

Schéma 22

NR«i 11

O 51 LN(CH2CH2Y)2

52 0

0 base 53 H N. R11 TJnr,, 30 Q —1R3a"T 7*, FW

R3a“ «11 51 50

Je nutno poznamenat, že poradí, v němž budou reakce podle svrchu uvedených schémat prováděny, není rozhodující a bude záležet na rozhodnutí odborníka, v jakém pořadí tyto reakce uskuteční k usnadnění průběhu reakce nebo k zábran* vzniku nežádoucích vedlejších reakčních produktů. 54

Sloučeniny obecných vzorců I a II jsou cenné při použití in vitro pro porozumění, jakým způsobem je řízena sekrece růstového hormonu na úrovni hypcfýzy. Jde o vyhodnocení celé řady faktorů, u nichž se považovalo za pravděpo- o nichž bylo známe, ze oV*-

* C Π 'sj LI tového hormonu, jako jsou vek, pohlaví, výživa, přívod glukosy, aminokyselin, mastných kyselin a také hladovění nebo trvalé nasycení. Mimoto je možno sloučeniny podle vynálezu použít k vyhodnocení toho, jakým způsobem další hormony modifikují uvolnění růstového hormonu. Bylo například již prokázáno, že somatostatin způsobuje inhibici uvolnění růstového hormonu. Dalšími hormony, které jsou důležité a které je zapotřebí sledovat, pokud jde o jejich účinky na uvolnění růstového hormonu, jsou hormony pohlavních žláz, jako testoste-ron, estradiol a progesteron, hormony nadledvinek, jako kor-tisol a další kortikoidy, epinefrin a norepinefrin, hormony slinivky břišní a dalších částí zažívací soustavy, jako insulin, glukagon, gastrin nebo sekterin, peptidy s účinností na cévy, jako bombesin, neurokininy a hormony štítné žlázy, jako thyroxin a trijothyronin. Sloučeniny obecného vzorce I a II je také možno využít ke sledování možné gegativní nebo positivní zpětné vazby v případě některých hormonů hypofýzy, například v případě růstového hormonu a peptidů typu endor-fínu na hypofýzu s následnou modifikací uvolnění růstového hormonu. Zvláštní důležitost z vědeckého hlediska má použití těchto látek k osvětlení subcellulárního mechanismu, který může rovněž ovlivnit uvolnění růstového hormonu.

Sloučeniny obecného vzorce I a II je možno podávat živočichům včetn ě člověka k uvolnění růstového hormonu in vivo. Je například možno uvedené látky podávat hospodářským zvířatům, jako vepřům, skotu, ovcím a podobně k urychlení jejich růstu a ke zvýšení výsledné hmotnosti a také k lepšímu využití krmivá a zvýšení mléčné produkce těchto zvířat. 55

Mimoto je uvedené látky možno podávat lidem in vivo jako diagnostický prostředek ke stanovení, zda je 'nypofýza schopná uvolnit růstový hormon. Například se sloučeniny obecného vzorce I a II podávají dětem a před a po podání je možno odebrat vzorky krve a stanovit koncentraci růstového hormonu. Srovnání množství růstového hormonu v každém z uvedených vzorků je pak prostředkem pro přímé stanovení schopnosti hy-pofýzy nemocného uvolnit růstový hormon.

Podstatu vynálezu tvoří rovněž farmaceutické prostředky, které jako účinnou složku obsahují alespoň jednu sloupe-ninu obecného vzorce I a II spolu s farmaceutickým nosičeh nebo ředidlem. Účinná složka tohoto farmaceutického prostřed ku může mimoto obsahovat ještě anabolickou látku nebo jinou sloučeninu s dalším žádoucím účinkem, například antibiotikum podporující růst nebo prostředek pro léčení osteoporosy nebo kortikosteroid ke snížení katabolických vedlejších účinkůj nebo jakoukoliv jinou farmaceuticky účinnou látku pro zvýšení účinnosti a snížení vedlejších účinků.

Pokud jde o látky, které mají anabolický účinek a podporují růst, může jít například o TRH, diethylstilbestrol estrogeny, beta-agonisty, thefollin, anabolické steroidy, enkefaliny, prostaglandina serie E, sloučeniny podle US pá-tentového spisu č. 3 239 345, například zeranol a podle US patentového spisu č. 4 036 979, například sulbenox nebo pep-tidy, které byly popsány v US patentovém spisu č. 4 411 890,

Sloučeniny podle vynálezu je dále možno také použít společně s dalšími látkami, které rovněž působí uvolnění růstového hormonu, jako jsou peptidy, uvolňující růstový hormon, GHRP-6, GHRP-1, popsané v US patentovém spisu č. i 4 411S90 a ve zveřejněných přihláškách WO 89/07110, WO 89/07111 a B-HT920, dále je možno použít také hexarelip 56 a nově objevený GHRP-2, popsaný ve zveřejněné přihlášce WO 93/04081 nebo hormon, uvolňující růstový hormon, GHRH, rovněž označovaný GRF a jeho analogy nebo růstový hormon a jeho analogy, nebo somatomediny včetně IGF-1 a IGF-2 nebo alía-adrenergní agonisty, jako clonidin nebo serotcnin, 5HTID-agonisty, jako surnitriptan nebo látky, způsobující in-hibici scmatostatinu nebo inhibici jeho uvolnění, jako jsou fyscstigmin a pyridostigmin.

Jak je v oboru dobře známo, je známé a potenciální použití růstového hormonu velmi široké. Podávání sloučenin podle vynálezu pro stimulaci uvolnění endogenního růstového hormonu má přitom stejný účinek jako růstový hormon. Z použití růstového hormonu je možno uvést například stimulaci uvolnění růstového hormonu u starých lidí, doplnění růstového hormonu u dospělých, prevenci katabolických vedlejších účinků glukokortikoidů, léčení osteoporosy, stimulaci imunologického systému, urychlení hojení ran, urychlení hojení kostních zlomenin, léčení opožděného růstu, léčení akutního nebo chronického selhání nebo nedostatečnosti ledvin, léčení fyziologicky malého růstu včetně dětí, u nichž je možno prokázat nedostatek růstového hormonu, léčení malého vzrůstu ve spojení s chronickým onemocněním,’ léčení obezity a opožděného růstu ve spojení s obezitou, léčení opožděného růstu v případě Prader-Williho syndromu a Turnérova syndromu, urychlení zotavení a zkrácení doby hospitalizace v případě popálenin nebo po velkých chirurgických zákrocích, například na zažívací soustavě, dále může jít o léčení opožděného nitroděložního růstu, kosterní dysplasie, hyperkorti-sonismu a Cushingova syndromu, o náhradu růstového hormonu u nemocných ve stresu, léčení osteochondrodysplasie, léčení Noonansova syndromu, poruch spánku, Alzheimerova onemocnění, pomalého hojení ran a psychosociální deprivace, dále je možno uvedené látky použít k léčení disfunkce plic a 57 závislosti na dýchacím přístroji, snížení bílkovinné ka~a-bolické odpovědi po velkých chirurgických zákrocích, k léčení malabsorpčního syndromu, ke zmírnění kachexie a ztráty bílkovin při chronických onemocněních, jako jsou zhoubné nádory nebo AIDS, při urychlení přísrůstku na váze a ke zlepšení tvorby bílkovin u nemocných, které je nutno živit umělou výživou parenterálně, dále je možno uvedené látky vyupít k léčení hyperinsulinemie včetně nešidíoblastosy, k vyvolání ovulace a při prevenci a léčení žaludečních a dvanéctní-kových vředů, k podpoře vývoje brzlíku a k prevenci zániku funkce brzlíku v souvislosti s věkem, jako pomocnou léčbu u nemocných s chronickou hemodialýzou, k léčení nemocných s potlačeným imunitním systémem a ke zvýšení tvorby protilátek po očkování, ke zvýšení svalové síly, pohyblivosti, udržení dobrého stavu pokožky, k metabolícké homeostáze a při ledvinové homeostáze u starších lidí, ke stimulaci osteoblas-tů, ke tvorbě kosti a pro růst chrupavky, dále při léčení některých neurologických onemocnění, jako jsou periferní he-uropathie a neuropathie, vyvolaná působením léků, syndrom! Guillian-Barré, amyotrofícká laterální sklerosa, roztroušená sklerosa, cévní mozkové příhody a demyelinizace, dále může jít o stimulaci imunitního systému a léčení poruch ve stáří, o podporu růstu u domácích zvířat a- u zrychlení růstu vlny u ovcí.

Je obecně známo, že v současné době se užívá celá řada sloučenin ve snaze léčit některá z těch onemocnění, která byla svrchu uvedena. Některé z těchto látek se rovněž uvádějí jako látky, které je možno použít spolu s růstovými hormonem. Z tohoto důvodu by použití takových látek se sloučeninami podle vynálezu mohlo přinést další, často synergní působení a tím i zlepšení růstu nebo anabolických a jiných žádoucích vlastností těchto sloučenin. V takových kombinacích je možno použít uvedené látky a sloučeniny podle vynálezu! 58 v dávkách, pohybujících se již o jedné setiny až dc plné dávky, která je účinná v případě, že jsou tyto účinné látky užity jednotlivě a nikoliv v kombinaci.

Kombinovaná léčba k inhibici resorpce kostní tkáně, prevencí osteoporosy a pro urychlené hojení kostních zlomenin může být ilustrována kombinací bifosfonátů a sloučenin podle vynálezu pro uvolnění růstového hormonu. Použití bifosfonátů k tomuto účelu bylo souhrnně popsáno například v publikaci Hamdy N. A. T. , Role of 3isphosphonates in Metabolic Bone Diseases. Trends in Endocrinol. Metab., 1993, 4, 19 až 25. Bifosfonáty pro toto použití zahrnují alendronát, tilu-drcnát, dimethyl-APD, risedronát, etidronát, YM-175, clodro-nát, pamidronát a BM-210995. Podle účinnosti se perorální denní dávka pro tyto bifosfonáty pohybuje v rozmezí 0,1 mg až 5 g, přičemž denní dávka sloučenin podle vynálezu se pohybuje v rozmezí 0,01 až 20 mg/kg tělesné hmotnosti. Tímto způsobem je s použitím uvedené kombinace možno dosáhnout dobrých léčebných výsledků při osteoporose.

Sloučeniny podle vynálezu je možno podávat perorálně, parenterálně, například ve formě nitrosvalové, intraperito-neální, nitrožilní nebo podkožní injékce nebo implantátu, dále do nosu, vaginálně, rektálně, pod jazyk nebo místně a sloučeniny podle vynálezu mohou být zpracovány na lékové formy, vhodné pro jednotlivé způsoby podání. Z pevných lékových forem pro perorální podání je možno uvést kapsle, tablety, pilulky, prášky a granuláty. V takových pevných lékových formách je účinná složka smísena s alespoň jedním inertním farmaceutickým nosičem, jako je sa-charosa, laktosa nebo škrob. Léková forma může obsahovat kromě nosičů další látky, například kluzné látky jako ste-aran hořečnatý a v případě kapslí, tablet a pilulek také pufry. Tablety a pilulky mohou být opatřeny enterosolventním povlakem. 59

Kapalné lékové formy zahrnují emulze, roztoky, suspen sirupy, elixíry s běžnými inertními ředidly, například vodo Tyto formy mohou obsahovat pomocné látky, jako smáčedla, er gátory, suspensní činidla, sladidla, chutové látky a parfér ze u. mul

Prostředky pro parenterální podání zahrnují sterilní vodné nebo nevodné roztoky, suspenze nebo emulze. Příkladem nevodných rozpouštědel jsou propylenglykol, polyethylenglykol rostlinné oleje, jako olivový a kukuřičný olej, želatinu a injekčně použitelné organické estery, jako ethyloleát. Také tyto formy mohou obsahovat pomocné látky, jako konzervační činidla, smáčedla, emulgátory a dispergační činidla, je také možno je sterilizovat, například filtrací přes bakteriologický filtr, přidáním sterilizačních látek, ozářením nebo zahřátím. je také možno účinné látky zpracovat na sterilní práškové formy, určené k rozpuštění ve sterilní vodě nebo i jiném sterilním injekčním prostředí těsně před použitím.

Prostředky pro rektální nebo vaginální podání jsou sj výhodou čípky, obsahující kromě účinné látky ještě bati, Například kakaové máslo nebo vosk.

Prostředky pro podávání do nosu nebo pod jazyk se rovněž připravují při použití známých pomocných látek. Dávka účinné látky v těchto prostředích se může měnit, zvolená dávka závisí na požadovaném léčebném účinku, na způsobu podání a na době léčení. Obvykle se člověku i jiným živočichům podává dávka účinné látky v rozmezí 0,0001 až 100 mg/kg hmotnosti denně k účinnému uvolnění růstového hormonu.

Praktické provedení vynálezu bude osvětleno následu jícími příklady, které však nemají sloužit k omezení rozsahu vynálezu. 60 Příklady provedení vynálezu Příklad 1 -4,4' (1H) -chinolin/-! 'yl) karbcnyl] -2- (indol-3-yl; a ryl] -2-amir.c-2-rr.etvíd rocanamid hvdrcchlorid 1'-(t-butylcxykarbcnyl)3, 4-dihydro sciro f IK-inden·. -1, 4 'piperidir.]_ Část A: cxc-

Do roztoku oólrng (2,3lmmcl) 1'- (t-butyloxy-karbonvi) spiro [lH-indene-1, 4 '-piperidínu], jehož příprava je popsána Chambersem a spol. v J.Med.Chem., 19S2, 35, 2036, v 5,0 ml tetrahydrořuranu se přidá 5,3 mi (2,9 mmcl) 1,0 M roztoku 9-BEN v tetrahydrořuranu. Reakčni směs se zahřívá při teplotě 70°C a ukončeni reakce se prokáže chromatografii na tenké vrstvě. Roztok se zahusti a zbytek se rozpustí v dichlořmetanu. Po zchlazeni na teplo- tu 0°C se během 15 minut pomalu přidá 4,1 g (19,2mmol) PCC. Reakčni směs se zahřeje na teplotu místnosti a 30 minut se zahřívá pod refluxem. Po zředění eterem se vzniklá směs filtruje přes síto směsi celitu a florisilu. Po absorbci na sloupec silikagelu se směs čistí rychlou chromatografii při eluci směsí hexanu a etylacetátu v poměru 4:1 za vzniku 326 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 47%. 7,50 - 7,44 2,63 (s, 2H), 9H) . ^H-NMR (200 MHz, CDCl^): 7,75 - 7,60 (m, 2H) (I·!, 2H) , 4,30 - 4,15 (m, 2H) , 2,85 (dz, 2H) , 1,98 (dr, 2H), 1,53 - 1,40 (m, 2H), 1.49 (s, 61 Část 3: Spiro[IH-inden -1,4'piperidin]-3'2K)-cr trifluoracetamid

Ve směsi kyseliny triflucrcctová, dichlcr-metanu a anisolu v poměru 1:1:0,5 se 1 hcdir.u míchá meziproduktu z části A. Fo zahuštění a azeczrooní destilaci z toluenu vznikne výsledná sloučenina. (ra, 1H), 7,52 - 7,45 3,58 (ra, 2H), 3,29 -2H), 1,85 - 1,75 (m 1H-MMR (200 MHz, CDC13): 7,81 - 7,70 (m, 2H), 7,22 - 7,15 (m, 1H), 3,72 -3,04 (m, 2H), 2,70 (s, 2H), 2,47 (dt, 2H) . Část C: Triřluoroacetamid-2,3-dihydrospiro [inden - 1,4 'piperidin]_ ;

Do roztoku l,0g (3,21 mmol) meziproduktu i ! získaného v části B ve 3,0 ml dichlormetanu se přidá 0, 945ml (6,74 mmol) trietylaminu a 50 mg 4-dimetylamino-pyridinu a následně 0,501 ml (3,53 mmol) anhydridu ! kyseliny trifluoroctové. Reakční směs se míchá 3 hodiny, a pak se ředí 20 ml dichlormetanu. Po promytí vodou a sušení nad síranem horečnatým se směs zahustí a po absorbci na sloupec sillikagelu se čistí rychlou chromatografií při eluci směsí hexanu a etylacetátu v poměru 2:1 za vzniku 568 mg (1,91 mmol) výsledné sloučeniny. 1H-NMR (200 MHz, CDC13): (m, 2H) , 4,75 - 4,65 (m, (dr, 1H), 2,92 (dt, 1H), - 1,62 (m, 2H). 7,79 - 7,64 (m, 2H), 7,52 - 7,41 1H), 4,22 - 4,08 (m, 1H), 3,37 2,70 (s, 2H). 2,08 (dt, 2H), 1,71 62 Část D: Trifluoracetamid-3 ', 4 ' -dihydrc-2-oxcspirc- [piperidin-4,4'(1H)-chinolin]_

Dc roztoku 213 mg (3,36 izď azidu sodíku v 0,233 ni vody a 1,5 ni chloroform se při teplete 0"C přidá r. 4 ne W / J w mi kyše líny sír ove. Reakcnt směs se '"Ji — t 5 hedinv míchá a po oddělení podílů se chloroformová vrst v a s uší nad sí raném sodným. Roztok ky s e i i n y h y d r a z i n o v é se p riua do 4QCmg (1,34 mmol) meziproduktu vyroceného v části A. Dc takto připraveného roztoku se během pěti minut přidá 0,400 ml kyseliny sírové a vzniklá re akční směs se míchá 20 minut, následně 45 minut při teplotě 45°C a nakonec 16 hodin při teplotě místnosti. Vrstva s obsahem kyseliny sírové se přidá dc ledu a přidáním 50% rozteku hydroxidu sodného se přivede na zásadité pH. Vodný podíl se extrahuje etylace-tátem a vzniklé etylacetátové extrakty se suší nad síranem sodným a následně se zahustí. Po absorbci na sloupec sili-kagelu se 100 mg část surového produktu čistí rychlou chrcmatografií při eluci směsí dichlormetar.u a etvlacetácu v poměru 1:1 a následně 1:2 za vzniku 50 mg (0,160 mmol) produktu o vysoké hodnotě Rf a 16 mg (0,05r mmol) produktu o nízké hodnotě Rf. ΧΗ- NMR (200 MHz, cdci3, vysoká RF) : 8 ,9-8 ,7 (široký s, 1H) , 7,4 0 - 7,21 (m, 2H) , 7, 18-7, 04 (m, 1H) , 6 ,90 - o , 86 (m i 1H) » 4, ,52 - 4,36 (m, 1H ), 3,97 - 3,83 (m, 1! U· Ί 3,52 (dt, 1H) , 3,2 2 (dr, 1H), 2 ,79 (s, 2H) , 2 ,12 - 1 ,66 (m , 4 H) , XH- NMR (200 MHz. cdci3, nízké RF): 8, 12 (dd , i H) , 7 ,60 - 7,52 (m, ih: ' 7 45 - 7,35 (m ., 2H), 6,95 (š iroký S, 1H), 4,56 - 4,4 3 (.- 3, 1H ) , 4 , 03 - 3, 96 (m, 1H), 3, 6U - 3 ,52 (m, 2H) , 3,49 - 3 ,35 (m, 1H) , 3,11 (dt, 1H), 2,20 - 1,30 (m, 4H) . - 63 Část £: 3', 4 '-dihydro-2-oxospirc ípiperidin-4, 4 ' (1H1 — chinolin]_[_

Ve směsi metanolu a vody v poměru 4:1 s přebytkem hydroxidu draselného se přes noc míchá 4 9 mg (0,157 mmcl! roztoku vyrobeného v části B o vyseká hodnotě Rř. Po zahuštěni roztoku se do vzniklého zbytku přidá voda a etyiacetát. Podíly se oddělí a vodný podíl se extrahuje etylacetátem. Sloučená organické podíly se suší nad síranem sodným a zahustí se za vzniku 31 mg (0,143 mmcl; výsledné sloučeniny. Část F: N- [1 (R) -[ 12', 3'-dihydro-2-oxospiro [piperi- din-4,4'(1K)-chinolin-1'yl)karbonvll-2-- (indol-3-yl) etyl] -2-[ [1,1-dinezyletyloxy- karbonyl]amino] -2-metylpropanamid__

Do roztoku 29 mg (0,134 rtimolO meziproduktu, jehož příprava je popsána v časti C, 65 mg (0,157 mmolj 2-amino-N- [1 (R) - [2', 3'-dihydro-2-oxospiro [piperidin--4,4' (l'H) -chinolin]-1-yl) karbonyl]-2-(iH-indol-3-yl)-etyl-2-metylpropanamidu a 24 mg (0,174 mmol) 1-hydroxy-benztriazolu v dicnlormetanu se přidá 33mg (0,174 mmol) EDC. Reakční směs se míchá přes noc a následně se zpracuje a čistí podle postupu uvedeném v příkladě 1, část A za použití eluční směsi dichlormetanu a acetonu. Vznikne 34,é mg (0,059 mmol) výsledné sloučeniny. Část G: N-[l(R)-[(2',3' -dihydro-2-oxospiro [piperi- din-4,4 ' (1K)-chinolin] -1'-yl)karbony!]-2- i - (indol-3-yl) etyl] -2-aminc-2-metylpropanamid hydrochlorid_

Podle postupu uvedeném v příkladě 1, část C 64 se v y n o c j. 7, 2 mg (0, 013 mmol) srn • ěSÍ rotamerú v pcm .ěru 2: - výsl edná sloučen iny za pou .žit i 1 4 mg (0,023 mmcl mezi produktu vyrobeného v čás "1 D. V O V tem tio p* —C adě ? cuž ije hydr cchlor ‘ " Γ* vyr ’CC6 r.·/' z volného ar: •inu Čiš" šr.ého př idár. ím 4 N kys eli Ti*V **· C 2Γ 0 V C O. i hC 0 * * 0 "v c iicx ano l._. .. ΓΊ~.« MR (4 00 MHz, CD3 OD, 2 : i srn ěs rotamerú): 8, 2n (d , 2 / o n 8,27 (d, 1/3 H), 7,59 (d, 2/3 H) , 7 , o d ( o , 1 . j *"* i t 7,: 38 (d, 1/3 H), 7 ,33 (d, 2/3 q 'i 7 ,25 (d Ί ? — /3 H), 7,13 - δ ,98 (m > 4H) , 6,85 (d , 1/ 3 H) , 6,80 (d , 2 /3 H), 6,63 (d, 2/ 3 H ), 5,23 - δ , 17 (m, 1H) , 4,22 - 4 , 19 (m , 2/3 H), 4,0 g - 3 ,95 (m, 1/3 H), 3,62 - 3 ,59 (n , i /3 H), 3,36 - 3,17 (m , 2 2/ 3H) 3,08 (do, 1/ 3 H) , 2, 75 (dt , 1 /3 u * * y » 2,69 (dt, 2/ 3 H), 2, 48 (dd, 2H) , 1, 93 - 1,75 (m, 2/3 H) , 1 , CU v 3, on) , 1 — > 58 (s, 2H 1,40 - í 32 (m, 1H), 1,51 (s, 1H ), 1,10 (m, 1/3 H) , 1 ,02 (m 2/3 H), 0 ,90 (dt , 2/3 H), 0,22 ( A *- '•«k U f 2/3 H). FA3- MS: m/e 490 (m + 1). Příklad 2 N- [1(R)-[(2'/3'-dihydro-1-oxospiro[piperidin-4,4 ' (1H) --isochinolin] -l'yl) karbonyl] -2- (indol-3-yl) etyl] -2-amino--2-metylpropanamid hydrochlorid_ Část A: 3',4'-dihydro-l-oxospiro[piperidin-4,4 ' - (1H)-isochinolin_

Podle postupu uvedeném v příkladě 13, část D se vyrobí 11,3 mg (0,036 mmol) výsledné sloučeniny za použití 16,0 mg (0,051 mmcl) meziproduktu o nízké hodnotě Rf vyrobeného v části D příkladu 1. 7 1H-riMR (CDC13): 8,12 (dd, 1H), 7,60 - 7,52 (m, 7,35 (m, 2H), 6,95 (široký s, 1H), 4,55 - 4,42 4,03 - 3,96 (rn, 1H), 3,64 - 3,62 (m, 2K\ 3,49 1H), 3,11 (ά-, 1H), 2,20 - 1,80 (m, a;-:;. i-;, (m, 1 Část S: N- [1 (R) -[ (2 ', 3'-dihydre-l-cxcspirc [pipe- ridin-4,4 ' (1H) -isochinolin-1 'yi· karbonyl] -2-(indol-3-yl)-etyl·]-2-[ [1/ i-dine“yi e cyloxy- ; karbonyl] amino] -2-metylprcpanamid_!_ Z 10,0 g (0,032ínol) meziproduktu vyrobeného; v části A tohoto příkladu a 21,6 mg (0,055mmol) 2-amino-Ň-- [i (R) - [2', 3 '-dihydro-2-oxospiro (piperidin-4,4 ' (ΓΚ) -chinoiinj -i-yl) karbonyl] -2- (lH-indol-3-yl) ecyl-2-metyl-propanamidu se vyrobi 13,6 mg (0,023 mmol) výsledné sloučeniny podle postupu uvedeném v příkladě 13, část D. ; Část C: N- [1 (R) -[ (2 ', 3 '-dihydro-l-oxospiro [piperi din-4, 4'(1H)- isochinolin]-1'yl)karbonyl]--2- (indol-3-yl) etyl] -2-amino-2-metyl- propanamid hydrochlorid_

Roztok 10,1 mg (0,017 mmol) meziproduktu vyrobeného v části B v 1,5 N kyselině cnlorovodi.<ové se přes ncc míchá a následně zahustí. Azectropní destilací z metanolu se získá 8,3 mg (0,015 mmol) výsledné sloučeniny. 1 směs rotamerů): 7,94 (c, 1/ 3H) , -NMR (400 MHz, CD30D, 2 7,87 (d, 2/3 H), 7,62 - 7,53 (m, 2H), 7,40 - 7,33 (m, 2 1/3 H), 7,13 -7,10 (m, 3H), 6,75 (d, 2/3 H), 5,22 - 5,18 (m,

2/3 H), 5,15 (t, 1/3 H), 4,27 - 4,23 (n., 2/3 H), 4,14 - 4 m, 1/3 H), 3,68 - 3,61 (m, 1H), 3,25 - 3,18 (m, 4H), 3,1C 10 66 1.35 (η, 1/3 Η), 1,15 - 1,1 γ-λ-3-Μ3 : m/e 490 (m + 1). 2,70 (do, 1/3 H), 2,65 (dt, 1/3 H), 1,62 -u 1 — * 57 - i.zz (m, IH). > — j i / 3 - * - , O . - , , Γ*· ^ “"· f -2 v z 2 Z - * — / 3 Příklad Ν- [1 (R) - [ (4H-l-oxospiro [3H-2-ber.2pyrar.-3,4 ' ciceridinl --1 'yl) karbonyl] -2- (indol-3-yl) etyl] -2-aninc-2-metvl-prooanamid hvdrochlorid nalezeno 67 Část 3: N- [ 1 (R) - [ ( 4H-l-oxcspirc-[3K-2-’eenzcyran- -3, 4 'piperidin] -i 'yl) karbcr.yl] -2- (indcl-3--yl) etyl] -2- [ [i, 1-dimetylezyloxykarbcnyl] -amine] -2-netvlorccananid hvdrcchlorid ,Y> 2» £ V· * azolu, 8,3 mg mg (0 ,12 mmol) SBC. teplo tě místnes ti do jgraři i na tenká vrstvě srn chl oridu sodr. .ého a •atým. Po řiltra ci se po ab sorbci na sloupec vzniku 15 mg vý sledr.é

Roztok 12 mg (0,055 mmcl,! meziproduktu vyrobeného v části A tohoto přikladu a 27 mg (0, 058 mmcl; kyseliny a (R) - [ [2- [ [ (1,1-dimetyletylcxy' karbcr.yl] -amine] -2,2-dimetyl-i-oxcetyl] amine] -IH-indcl-prcpicr.cvé v dichlcr- metanu se chladí při teplotě 0°C a následně se přidá 2 mg (0,015 mmol) 1-hydrox’ (0,084 mmol) N-metylmorfolinu a 2 Reakčni směs se míchá 1 hodinu p] ukončení reakce prokázaném chrom;

Roztok se promyje nasyceným roztt suší se nad bezvodým síranem hoř< roztok zahustí a vzniklý zbytek ; silikagelu čistí cnromatografií ; sloučeniny s výtěžkem 47%. FAB-MS vypočteno pro C33H4oN4°6 588» nalezeno 589 (Μ + H, 39 %) Λ489 Μ + H - 100, 42 %) Ztráta skupiny t-Boc skupiny. Část C: N- [1 (R) - [ (4H-l-oxospiro- [3H-2-ber.zpyran- -3,4 'piperidin] -1 'yl) karbony!] -2- (indol-3 -yl) etyl] -2-amino-2-metylpropanamid- hydrochlorid_

Roztok 12 mg (0,02 mmcl! meziproduktu 68 vyrobeného v části 3 tohoto přikladu v 3 ni metanolu se chladl na teplotu Q°C a za stálého mícháni se dc směsi pomalu přidají 3 mi koncentrované kyseliny chlorovodíkové Vzniklá reakční směs se míchá 30 minut a dokončení reakoe se ověří chrcmatografií na tenké vrstvě. Po několikerém, zahuštění roztoku z toluenu vznikne bez dalšího čištění 10,15 mg výsledného hydrcchloridu s výtěžkem. 36 %. jako směs dvou }, 7,500 - 6,994 1,,-NHR (400 MHz, CDo0D): Produkt existuje ΓΙ 'ó koníormerů ( : 1): 7,977, 7,905 (2d, 2/3 (m, 6H), 5,134 - 5,093 (m, 1 2/3 H), 11- (m, 1/3 H), 1H;, 3,133 - 3,124 ,4 Hz, 1/3 H), ,571 (2s, 6H), 1,539 - 1,205 (m, 2/3 H), -0,361 (m, 1/3 H). zakrytý 5,025 - 4,715 (m, 2H), 4,191 - -, 3,637 - 3,587 (m, 1H) , 3,34U - 3,229 (n, (m, 1H, 3,030 (s, 2/3 H), (dt, 2,81 Hz,. 9 2,536 (o, 1H), 2,301 (t, 1/3 H), 1,590, 1 - 1,483 (m, 2/3 H) , 1,275 (s, 6H), 1,259 (m, 1H), 0,633 - 0,545 (m, 1/3 H), -0,277 °2βΗ32Ν4°4 438' (Μ + H, 65 %). vypočteno pro nalezeno 489

FAB-MS Příklad 4 N-[1 (R) - [ (4',5' -dihydro-4 ' -oxospiro [piperidin-4, 6' - [ 6H] -thieno [2,3-b [thiopyran] -1-yl) karbonyl] -2- (indol-3-yl) -etyl] -2-amino-2-metylpropanamid hydrochlorid_ Část A: N-[1 (R) - [ ( 4', 5 ' -dihydro-4 ' -oxcspiro- [piperidin-4 , ó'-[6K]- thieno[2,3-b-- [thiopyran] -1-yl) karbonyl] -2- ;indol-3-yl) -etyl] -2- [ [ (1,1-dimetyletyloxy) karbonyl] - amino]-2-metylpropanamid_

Podle postupu uvedeném v příkladě 3, část B 69 a za použití 10 mg (0,044 mmol) spiro[piperidin-4,6 ' -C6H] thieno[2, 3—b] thiopyran] -4 ' (5'K1 -on hydrochloridu, jehož příprava je popsána v E? 90313262.9 , 20 mg (0,051 mmol) kyseliny a (R) - [ [2- [ [ (1, l-dinetylezylcxy) - cl- 1 (0,093 j ej ichž sloučeni m 9S%.

karbonyl] amino] -2,2-dimetyl-l-oxcetyl] prccionové, 1 ekv. 1-hydroxybenztriazciu, 0,01 : mmol) N-metylmcrfolinu a 20 mg (0,10 mmol) EDC, reakční doba je 5 hodin. Vznikne 22 mg výsledné jako směs dvou konformerů v poměru 2:1 s výtěžk ^H-NMR (400 MHz, CDClg): Produkt existuje jako směs dvou konformerů (2 : 1): 8,240 (s, 2/3 H), 8,063 (s, 1/3 H), 7,680 (d, 2/3 H), 7,628 (d, 1/3 H), 7,413 - ó,952 (m, 5H) \ 5,279 - 5,162 (m, 1H), 4,878 - 4,763 (m, 1H; , 4,235 (d, 2/3H) 3,375 (d, 2/3 H), 3,342 - 3,196 (m, 1H), 3,129 - 2,973 (mi 1 2/3H), 2,715 - 2,662 (m, 1H), 2,285 (d, 2/3 H), 2,139 (d, 2/3 H), 1,683 - 1,567 (m, 8 1/3 H), 1,503, 1,454, 1,427, 1,409 (4s, 12 H), 1,278 - 1,217 (m, 2H), 0,708 - 0,628 (m, 2/3 H). FAB-MS vypočteno pro C^Hgg^OgSj 610 > nalezeno 611 (Μ + H, 32 %). Část B: N- [1 (R) - [ (4', 5'-dihydro-4 '-oxospiro- [piperidin-4, 6[6H] thieno [2,3-b [thiopyran] -1-yl) karbonyl] -2- (indol-3-yl) etyl] - 2-amino-2-metylpropanamid hydro chlorid Podle postupu uvedeném v příkladě 15, část a za použití 200 mg (0,033 mmol) meziproduktu předchozí části A tohoto příkladu a 3 ml metanolu jako výchozích sloučenin se, jejichž reakční doba je 1,5 hodiny. Vznikne 12,2 mg výsledné sloučeniny jako směs dvou konformerů v poměru 2:1 s výtěžkem 69%. 70 70 Vm ÍMR ( 400 MHz, CD^OD): Pr o cukr koní ‘ořme rů (2 : 1) : 7,56 2 - 7 ,022 o> ro 2 H) , 5,099 - 5 , ,003 (m, 1 H) , 2 / 3 — 4,178 (á . 1: ·:), 3 rvi «o £ (d, 2 2/ 3 H) , 2,750 - 2 , 650 (m, 1 * · v Π / , existuje jako srně (m, 6H), 5,512 -skrytý 4,914 - 4, 1H). 3,327 - 3.2-2.3?u '- i-' ? 1H), 1,597, 1,587, 1,574, 1,510 (4s, 4 (m, 3H), 0,562 - 0,482 (m, 2/3 H) , -0, ( T. 7 25 (n

2 5 2'3 H)

FAB-MS vypočteno pro C26H30N4°3S2 nalezeno 511 (Μ + H, 51 %). Příklad 5 N- [1 (R) - [ (3-hydrospiro [IH-iscbenzfuran-I, 4 '-piperidin! --1 '-yl) karbonyl] -2- (indol-3-yl) etyl] -2 - amine - 2 -ne tyl -propananid hydrochlorid_______ Část A: N- [1 (R) - [ (3-hydrospiro [IH-isobenzřuran- -1,4'piperidin]-1'yl)karbonyl]-2-[i (1,1-di-metyletyloxy) Jcarbonyl] amino] -2-metyl- propanamid_- ___

Podle postupu uvedeném v příkladě 3,část B a za použití 10 mg (0,044 mmol) 3-hydrospiro[lH-isobenz-řuran-1, 4 ' -piperidin] hydro chloridu, jehož příprava je popsána Bauerem a spol. v US 3985889, 20 mg (0,051 mmol) kyseliny a(R)-[[2-[[(1,1-dimetyletoxy)karbonyl]amino] --2,2-dimetyl-l-oxoetyl]amino] -lH-indol-3-propionové, 1 ekv. 1-hydroxybenztriazolu, 0,01 ml (0,093 mmol) N-metylmorřolinu a 20 mg (0,10 mmol) EDO, jejichž reakční doba je 5 hodin. Vznikne 21 mg výsledné sloučeniny jako směs dvou konformerů v poměru 1:1 s výtěžkem 81%. 71 71 n-IIMR CDC13): 8,096 (s, 1H), 7,639 (t, 1 H), 7,3 41 (d, 1 7,2^4 - 6,611 (m, 6H) , 5,288 - 5,202 (n, i/2 4,945 ( roky s, 1/2 H) , 4,161 (d, 1/2 H), 4,003 ( d , 1/2 ri , 3 t 3 3 (d, 1/2 H), 3, 280 - 3 ,115 (m, 2H}, 3,005 - 2,361 'n, ih: 2,751 ( d, 1/2 • ♦ > ^ « ··/» ^ t 16 (c, 1/ — ·""*/, 1,/3. ” —»'·** • \ ... f £ 1,491, 1,461, 1,421, 1,410 (4s, 12 H), 1, 2Si - 1 , 212 (rr., 0,857 ( t, 6H). FAB-MS vypočteno pro C32H4oN^°5 550’ nalezeno 561 (Μ + H, 33 %). Část B: N- [1 (R) - [ (3-hydrospiro [IK-iscbenzíuran--1, 4 '-piperidin] -l'yl) karbony! j -2- íindcl-3 -yl) etyl] -2-amino-2-metylprcpanamid hvdrochlorid _

Sloučenina se vyrob! podle postupu uvedeném v příkladě 3, část C za použití 20 mg (0,04 mmol) meziproduktu vyrobeného v předchozí části A tohoto příkladu a 3 mi metanolu. V reakční době 1 hodina vznikne 18,2 mg výsledné sloučeniny jako směs dvou koníormerů v poměru 1: s výtěžkem 93,5%. 1H-NMR (400 MHz, CDgOD): Produkt existuje jako směs dvou i koníormerů (1 : 1): 7,621 - 6,568 (m, 8H) , 5,198 - 5,136 j (m, 1H) , skrytý 4,856 (široký s, 1H), 4,098 - 4,045 (m, 1H) , 3,611 - 3,499 (m, 1H), 3,348 - 3,110 (m, 5 1/2 H) , 2,987 -2,903 (m, 2 1/2 H), 2,618 (d, 1/2 H) , 2,50S (d, 1/2 H), 1,691 - 1,473 (m, 8H), 1,271 (široký s, 2 1/2 H), 0,081 - O.OCjo (m, 1/2 H). FA3-MS Vypočteno pro C27H32N4°3 450« nalezeno 461 (Μ + H, 96 %). 72 Příklad 5 N- ]1 ;R} - ] (3, 4-dihydro-ó-metyl-4-excspiro ]2H-l-berzpyraz- _ ·? '_**.* -J i ' _ · ' . . ^ ' 1 - v V- .-N ^ ^ ' ' -- ~m / ~z. w — — * J — jf ~ ;fwG — v — w j'—- ~ — J — -i amir.c-Z-nezviprcDanamid nvdrcchlorid Část Λ: N- [1 (R) - [ {3,4-dihydro-6-metyl-4-cxcspire- [2H-l-benzpyran- 2, 4 '-piperidir.] -1' yi ) --karbonyl]-2-(indol-3-yl; etyi] -2-aminc-2- metylpropanamir.ohydrochlcrid_

Podle postupu uvedeném v příkladě 3, část za použití 20 mg (0,058 mmol) 3,4-dihydro-o-metylspiro-[2H-l-ber.zpyrar.-2, 4 '-piperidir.] -4-cn hydrocr.loridu, jeho: příprava je popsána Hashigakim a spol. v Chem. Pharm. Bull. 32, str. 3561-3568 (1984), 32 mg (0,082mmol) kyseliny a (R) - [ [2- [ [ (1,1-dimetyletoxy) karbcr.yl] amine] -2,2-dimetyl-l-oxcetyl] amino]-lK-indol-3-propioncvé, 1 ekv. 1-hydroxybenztriazolu, 0,03 ml (0,28 mmel) N-metylmorřo-linu a 40 mg (0,21 mmol) EDC se v reakčr.í době 8 hodin vyrobí 34 mg výsledné sloučeniny jako směs dvou konfořme rů v poměru 2:1 s výtěžkem 86%. ^H-NMR (400 MHz, CDCl^): Produkt existuje jako směs dvou konformerů (2 : 1): 8,154 (s, 2/3 H), 8,088 (s, 1/3 H), 7,625 (d, 2/3 H), 7,591 - 7,060 (m, 6H), 6,725 - 6,688 (m, 2/3 H), 5,255 - 5,168 (m, 2/3 H), 4,985 - 4,900 (m, 2/ 3 H), 4,289 - 4,178 (m, 2/3 H), 3 ,469 (s, 2/3 H), 3 .229 -"S — o ,06-1 (m, 2 H), 2,730 (t, 2/3 H), 2,562 (s, 2 1/3 ' P ' t — · 251 (d, 2 1/3 H), 2,153 (d, 2/3 H), 2,068 (d, 2/3 H), 1,63 0 - 1,541 (m, 3H), 1,502, 1,475, 1, 454, 1,427, 1,402 v 5s , 15 W "i 1 P Q 2 1,226 (m, 3H), 0,616 - 0,532 (m, 1/3 H' , -o, 45 -0,590 (m, 1/3 H). FAB-MS vypočteno pro 602 *

nalezeno 603 (M +· H, 37 %) . 73 ,ast B:

N- [i (R) - [ (3, 4-dihydro-5-metyl-4-cxcs; [2H-l-benzpyrar.-2,4 '-piperidin] -1' yl karbony!] -2- (indol-3-ylezyl] -2-amir.i

metylpropar.amid hydroch’ Sloučenina se vyrobí ccí uvedeném v příkladě 3, část C za použiz. mmcl) meziproduktu vyrobeného v předchc; příkladu a 3 ml metanolu. V reakční dob· 17,5 mg výsledné sloučeniny jako směs ά poměru 2:1 s výtěžkem 96,5%. 1H-NMR (4C0 MHz, CDCl^): Produkt existuje jako směs dvou koníormerů (2 : 1): 7,550 - 5,768 (m, 7 1/3 H), 5,089 - 5,0 (m, 2H), skrytý 4,872 - 4,679 (m, 1H), 4,144 - 4,053 (η, 1H 3,569 - 3,485 (a, 1H), 3,321 - 3,081 (m, 2 1/3 H), 2,716 j-2,600 (m, 1 1/3 H), 2,253, 2,236, 2,222, 2,196, 2,190, 2,|15 (6s, 4H) , 1,569, 1,541, 1,475 (3s, 7H) , 1,383 - 1,237 (m,! 3 2/3 H), 0,331 - 0,808 (m, 2H), 0,434 - 0,420 (m, 2/3 H) , 0,427 - 0,436 (m, 2/3 H). FA3-MS vypočteno pro C29H34N4°4 502> nalezeno 503 (Μ + H, 97 %). Příklad 7 N-[l (R) - [ (3, 4-dihydro-4-oxospiro [2H-l-benzpyran--2,4' -piperidin] -1 'yl) karbonyl] -4-řenylbutyl-2-amino-2-metylpropanamid hyarochlorid__ Část A: řenylmetylester kyseliny a (R) -[Γ2-[[(1,1-dimetyletoxy) karbonyl] amir.o] -2,2-dimetyl-1-oxoetyl]amino]-4-fenylbutanové_ 74

Rcztoicu 6,0 g (13 mmol) řer.yieszeru kyseliny 2 (R; -amino-4-řenylbutancvé ve řorr.é seli s kyselinou toluensulfoncvcu se extrahuje zředěným rozookerr. hydroxidu sodného. Organický pcdil se suši nad síranem. heřečnatým. a odpařuje se. Zo roztoku vzniklého zbytku obsahující 3,21 g (15,3 mmol) N-terc.-but j/loxykarbcnyl-a-m.etylalaninu a 1,7 g (13 mmol) 1-hydrcxybenztriazolu v dichlormetar.u se přidá 5,1 g (26 mmol) EDO a směs se míchá při teplotě místnosti přes noc. Vzniklá reakčr.í směs se vlije do směsi nasyceného roztoku chloridu sodného a 3N kyseliny chlorovodíkové a extrahuje se etylacetátem. Organický extrakt se suší, odpařuje a čistí rychlou sloupcovou chromatcgrafií při eluci 40% etylacetátem v hexanu za vzniku 5,47 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 91%. 1H-NMR (400 MHz, CDC13): 7,34 - 7,07 (n, 1CH, 5,15 (d, JA3 = 12 Hz, 1H), 5,08 (d, JA3 = 12 Hz, 1H), 4,85 (široký s, 1H), 4,57 - 4,62 (m, 1H), 2,61 - 2,53 (m, 2H), 2,18 - 2,14 (m, 1H), 2,01 - 1,96 (m, 1H), 1,47 (s, 3H), 1,43 (s, 3H), 1,41 (s, 9H). Část B: kyselina a(R)-[[2-[[(1,1-dimezyletoxy) - karbonyl] amino] -2, 2-dimetvl-l-oxoetyl] - amino]-4-fenvlbutanová_ Při teplotě místnosti se 2 hodiny hydroger.uje pod tlakem 0,1 MPa vodíku 5,37 g (11,3 mmol) meziproduktu vyrobeného v předchozí části A při použití 0,5 g 10% paladia na aktivním uhlí. Katalyzátor se odstraní filtrací přes celit a odpařuje se za vzniku 4,22 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 100%. - 75 - 1Η-ιΙΗΗ (200 MHz, CD30D): 7,804 - 7,143 (m, 5H), 4,ac2 -(m, 1H), 2,672 (dt, 2 Hz, 6 Hz, 2H), 2,126 - 2,0C4 (m, 2 1,433, 1,444 (2s, 5H), 1,423 (s, 9H) , 1,412 (s, 3H). Část C: N-[1 (R) -((3, 4-dihydro-4-oxospirc- [2K-l-benzpyran-2, 4 ' -piperidinj -1' ví) -karbonyl] -4-fenylbutyl-2“ [ [ (1, 1-dimetyl-etoxv) karbonyl]amino] -2-metyloropanamid Roztok 20 mg (0,0776 mm.ol) spirc[2K-l-benzpyran-2, 4 '-piperidin]-4 (3K) -onu a 31 mg (0, 085 mmoi) meziproduktu vyrobeného v předchozí Části B tohoto příkladu v dichlor- metanu se zchladí na teplotu 0°C a následně se přidá 1 ekv. 1-hydroxybenztriazclu, 0,1 ml (0,90 mmol) N-metylmorfolinu a 33 mg (0,17 mmoi) EDO. Reakční směs se 3 hodiny míchá při teplotě místnosti a ukončení reakce se ověří chromatografií na tenké vrstvě, j Roztok se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného a suší se nad bezvodým síranem hořečnatým. Po filtraci a zahuštění se vzniklý zbytek čistí po absorbci na sloupec silikagelu chromatografií za vzniku 41,6 mg výsledné sloučeniny jako směs dvou konformerů v poměru 1:1 s výtěžkem 95,5%. 1H-NMR (400 MHz, CDClg): Produkt existuje jako směs dvou konformerů (1 : 1): 7,853 - 6,925 (m, 9H) , 4,936 - 4,868 (m, 2H), 4,355 - 4,265 (mt, 1H), 3,605 - 3,565 (m, 1/2 H), 3,388 - 3,318 (m, 1H), 3,022 - 2,965 (m, 1H), 2,686 - 2,608 (m, 3H) , 2,067 - 1,948 (m, 2 1/2 H), 1,871 - 1,810 (m, 1H), 1,580 (široký s, 2H), 1,503, 1,488, 1,455, 1,411, 1,403 (5s 15 H), 1,292 - 1,227 (m, 2H). 76 Část D: N- [1 (R) - [ (3, 4-dihydro-4-cxcspirc- [2H-l-ber.zpyran-2, 4 '-piperidir.] -1' -yl. -ka rbc ny 1 ] - 4 - fenyIbut y1- 2 - a~ i r. propanamid hydrochlcrid_

Roztok 40 mg (0,071 mmol: mez vyrobeného v předchozí části C tohoto příkl o niinu*: tánu se zchladl na teplotu 0°C a následně se probublávat plynným chlorovodíkem. Reakční s: 15 minut a ukončení reakce se potvrdí chromá tenké vrstvě. Roztok se zahustí za vzniku 33 výsledného hyarochloridu s výtěžkem 95,5 %, dalšího čištění použije pro následující synt zograr , 3 mg který bez ^H-MMR (400 MHz, CD^OD): Produkt existuje jako směs dvou konformerů (1 : 1): 8,271 -8,229 (m, 1H) , 7,739 (dd, 1 3/4 Hz, 7,84 Hz, 1 H) , 7,545 (q, 1H), 7,2S9 - 7,006 (m, 7 H), 4,737 - 4,703 (m, 1 H), 4,277 (d, 1/2 H), 4,186 (d, 1/2 H), 3,555 - 3,292 (m, 1 1/2 H), 3,137 - 3,063 (m, 1H), 2,809 - 2,724 (2m, 2H) , 2,633 - 2,563 (m, 1H), 2,085 - 1,927 (m, 3 1/2 H), 1,645, 1,639, 'l,616 (3s, 6H), 1,677 - 1,603 (m, 3H) , 1,316 - 1,279 (m, 2H) . FAB-MS vypočteno pro C27H33N3°4 463, nalezeno 464 (Μ + H, 54 %). Příklad 8 N- [1 (R) - [ (3,4-dihydro-4-oxospiro [2K-l-benzpyran- > - -piperidin] -1' yl) karbonyl] -2- ( f enylmetyloxy) etvl ] -2-amino-2-metylpropanamid hvdrochlorld 77 Část A: N-[1(R)-[(3,4-dihydro-4-cxospiro- [2H-l-benzpyran-2, 4 '-piperidin] -I' yl — karbonyl]-2(fenylmetyioxy'etyi]-2-- [ [ (1,1-dimetyletyloxy) karbcr.yl] amine] - -2-metylprcpanamid_i_

Roztok 20 mg (0,776 mmol, spirc ]2H-l-benz-pyran-2,4 '-piperidin]-4 (3H) -onu a 32 mg (0,063 mmcl; kyseliny a (R) - [ [2- [ [ (1,1-dimetyletylcxy· karbonyl] amine] - 2,2-dimetyl-l-oxoetyl] amino] -3- (fenylmetyioxy! -3-prcpar.ové v dichlormetanu se zchladí na teplotu 0°C a následně se přidá 1 ekv. 1-hydroxybenztriazolu, 0,1 mi (0,90 mmol) N-metylmorfolinu a 33 mg (0,171 mmol) EDC. Reakční směs se 4 hodiny míchá při teplotě místnosti a ukončení reakce se ověří chromatografií na tenké vrstvě. Roztok se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného a suší se nad bezvedým síranem hořečnatým. Po filtraci a zahuštění se vzniklý zbytek čistí po absorbci na sloupec siiikagelu chromatografií za vzniku 40,8 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem; 91 %. FA3-MS vypočteno pro C32H4]N307 579, nalezeno 580 (Μ + H, 23 %), (nalezeno 480 (Μ + H- 100, 57 %) ztráta ochranné skupiny t-Boc). Část B: N-[1 (R) -[ (3, 4-dihydro-4-oxospiro [2K- -l-benzpyran-2, 4 '-piperidin]-1'yl) karbonyl] - i 2-(fenylmetyioxy) etyl] -2-amino-2-metyl-propanamid hydrochlorid_

Sloučenina se vyrobí pcále pes :u uveaenám ladě 3, část D za použiti 35 mg tu vyrobeného v předchozí části jejichž reakční doba je 1 hodin r.é sloučeniny jako směs dvou ko: rn 97%. *· MR ( 4Q0 MH z, CD-.0D): Produkt exis tu * e jak o směs dvou ko nf /n r» me ru (1 : 1) : 7,800 - 7,792 (m, 1H ϊ 7 533 - 7,573 (m 1 1H ), 7,395 - 7 ,285 (m , 5H), 7 ,088 - 7,015 (m, 2b -M * / , 5, 55 I - 5,107 (m, 1H), skrytý 4,921 - 4,3 16 (n , 1H), 4,53 5 - 4, 51 8 (2s, 1 1/2 H), 4, 295 (d, 1H), •5 ^ f 911 - 3,8G3 (m, 1H), 3, 717 - 3,703 (2s, 1 1/2 H), 3,49 9 _ 3,400 (m , 1H), 3,30 Q - 3, 291 ( 4 S , 3 1/2 H), 3, 211 - 3, 051 (m, 1H) , 2,789 (q, 1/2H 2, 53 3 - 2,513 (AG, q, 1H) , 2,060 (t, 1H) , 1,3 97 (d, 1/2 H' •tyf 1, 82 1 - 1,725 (m, 1/2 H), 1,626 - 1,567 (5s, 6H) , 1 , 564 - 1, 410 (m i, 1/2 H), 1,301 ( široký s , i 1/2 H) . v

S 77

FAB-MS vypočteno pro CgyH^N^O,- 479, nalezeno 480 (Μ + H, 100 %). Příklad 9 N- [1 (R) - [ (6-chloro-3H-4-oxospiro [lH-chinazolin-2, 4 '-piperidin]-l'yl) karbonyl]-2-(indol-3-yl) etyl] --2-amino-2-metylpropanamid hvdrochlorid_ Část A: N- [1 (R) - [ (6-chloro-3H-4-oxcspiro-l-chinazolin- 2,4'-piperidin]-1' yl) karbonyl] -2- (indol-3--yl)etyl]-2- [ [ (1,1-dimetyletoxy)karbonyl]- amino] -2-metylpropanamid hydrochlorid_

Podle postupu uvedeném v příklade 3, část B za použiti 50 mg (0,17 mmol) β-chlorspiro- piperidin-4,2(1Ή)-chinazolin)-4(3H)on hydrochloridu, 81 mg (0,21mmol) kyseliny ΛΐίΛ (R) - [ [2-( [ (1, 1-dimetyl- 79 etoxy) karbonyl] amino] -2, 2-dimetyl-l-oxoetyl3 amine] -lH-indcl-3-propionové, 1 ekv. 1-hydroxybenzcriazclu, i ekv. N-metylmorfolinu a 80 mg (0,42 mmol) EDC, jejichž reakčni doba je 3 hodin. Vznikne 64,5 mg výsledná sloučeniny s výtěžkem 60%. FA3-MS vypočteno pro C32H39N6°5C1 523, nalezeno 624 (Μ + H, 29 %). Část 3: N- [1 (R) - [ ( 6-chloro-3H-4-oxospiro Γ1Η- chinazolin-2,4' -piperidin] -1'yl) karbony!] --2- (indol-3-yl) etvl] -2-amir.o-2-metyi- propanamid hydrochlorid_

Sloučenina se vyrobí podle postupu uvedeném v příkladě 7, část D za použití 50 mg (0,08 mmol) meziproduktu vyrobeného v předchozí části A, jejichž reakčni doba je 1 hodina. Vznikne 40 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 89,5%. FAB-MS vypočteno pro C27H3iN6°3C1 523’ nalezeno 523 {Μ + H), 71 %). Příklad 10 N- [i (R) - [ (1/ 4-dihydro-4-fenyl-l-oxospiro[3H-2-ber.zpyran- -3,4'-piperidin]-1'-yl)karbonyl] -2-(indol-3-yl)etyl]-2-amino—2 — metylpropanamid hydrochlorid___—

Sloučenina ss vyrobí podle ocstuc' v P-4.<lade 3, část A za pcužirí 3 πια (0,019 ~~.c ~-snzy_-_, 4-dinydro-4-fenylspiro (3H-2-berzcvr piperidin)-1-on hydrochloridu a 5 rul etanclu v dcoe 45 manut. Vznikne 5,5 mg výsledné sloučeni výtěžkem 93,5%. FA3-MS vypočteno pro ^°-3, nalezeno 294 (Μ + H, 93 %). Část B: N-[1 (R) - [ (1, 4-dihydro-4-fenyl-i-oxcspirc- [3H-2-benzpyran-3, 4'-piperidin]-1'yl) -karbonyl] -2- (indol-3-yl) etyl] -2- [[,1,1-dimetyletyloxy) karbonyl] amino] -2-metyI- propanamid_____

Podle postupu uvedeném v příkladě 3, část 3 za použiti 5 mg (0,017 mmol)meziproduktu vyrobeného v předchozí části A tohoto příkladu, 12 mg (0,030mmol) kyseliny a (R) - [ [2- [ [ (1,1-dimetyletoxy) karbonyl] amine] --2,2-dimetyl-l-oxoetyl] amino] -lH-indol-3-propionové, 1 ekv. 1-hydroxybenztriazolu, 1 ekv. N-metylmorfolinu a 12 mg (0,0 50 mmol) EDC, jejichž reakční doba jsou 3 hodiny. Vznikne 9,2 mg výsledné sloučeniny jako směs dvou kenfer-merů 1:1 s výtěžkem 86%. (400 MHz, CD^OD): Produkt existuje jako směs dvou konformerů (1 : 1): 8,185 - 8,072 (m, 1 1/2 H), 7,3S5 (s, 81 1/2 Η), 7,710 - 6,813 (m, 12 Η), 5,331 - 5.3C9 (m, 1/2 Η) 5,158 - 5,111 (m, 1/2 Η), 4,710 - 4,605 (η, 1/2 Η), 4,300 - 4,235 (m, 1/2 Η), 3,876 (d, 1/2 Η), 3,719 - 3,617 / — V Γη , 3,355 - 3,046 (m, 1 1/2 Η), 2,746 (q, 1/2 Η;, 2,006 - 1,5ς (π*., lni, 1,673 - 1,574 (m, 2ΚΪ , 1,423 - 1,265 5 Η! , 1 1,240, 1,227, 1,208, 1,186 (5s, 5Η). Část C: Ν— C1 (R) - [ (1/ 4-dihydro-4-fenvi-l-oxospiro- [3H-2-benzpyran- 3, 4'-piperidin]-1'yli-karbonyl]-2 (indol-3-yl)etyl] -2-amino-2- -metylpropanaraid hydrochlorid_i

Sloučenina se vyrobí podle postupu uvedeném; v příkladě 7, část D za použití 9 mg (0,015 mmci) meziproduktu vyrobeného v předchozí části B tohoto příkladu a 10 ml etylacetátu jako výchozích sloučenin, jejichž reakční doba je 1 hodina. Vznikne 8 mg výsledné sloučenin jako směs dvou konřormerů v poměru 2:1 s výtěžkem 97%. ] n-NMR (400 MHz, CDC13): Produkt existuje jako směs dvou konformerů (2 : 1): 8,347 - 8,333 (m, 1H), 8,043 (t, 1/2 M), 7,662 - 6,869 (m, 12 1/2 H), 5,355 - 5,315 (m, 1/2 H) , 5,108 - 5,061 (m, 1/2 H), skrytý 4,897 - 4,768 (m, 1/2 H), 4,174 - 4,103 (m, 1/2 H), 3,717 - 3,526 (m, 1H) , 3,387 - 3,237 (m, 2H), 3,179'- 3,067 (m, 1H), 2,660 (q, 1/2 H), 2,044 - 1,981 (m, 1H) , 1,655 - 1,212 (m,HH), 0,964 - 0,820 (m, 2 1/2 H), 0,575 - 0,423 (m, 1/2 H) , -0,271 0,448 (til, 1/2 H). FA3-MS vypočteno pro ^34^35^4^4 564, nalezeno 565 (Μ + H, 25 %). P klad 11 82 N- Γ1 (R) - [ (3,4-dihydro-4-oxospiro (2H-i-ear.zpy -2,4' -ciperidin] -1'yl> karbony!] -2 ·'ir.dcl-3-yl -2-anir..c-2-metylprcpar.amid hydrcohlorid_ Část A: N- [1 (R) - [ (3, 4 - d i h y d r o - 4 - c x c s p i r o (2K~ -1-benzpyran- 2, 4'-piperidin]-1'yl;-karbonyl]-2-(indcl-3-yl)etyl]-2-[[(1, 1 dimetvletoxy)karbony!] amine]-2-netyi-· propanamid hydrochlorid_____

Meziprodukt se vyrebi za použití 535 mg (2,11 mmol) spiro (2H-l-ber.zpyran-2, 4'-piperidin)-4 (3K)~ -onu, jehož příprava je popsána Elliotem a spol. v Med. Chem. 1992, 35, 3973-3976, a 903 mg (2,3 mizel) kyseliny a(R)-[[2-[[(l,1-dimetyletoxy)karbonyl]amino]-2,2-dine-tyl-l-oxoetyl]amino]-lH-indol-3-propionové a podle postupu uvedeném v příkladě 25, část A. Vznikne 1,25 g výsledné sloučeniny jako směs dvou koníormerů v poměru (2:1) s výtěžkem 100%. 1H-NMR (400 MHz, CDC13): Produkt existuje jako směs dvou konformerů (poměr 2 : 1): 8,42, 8,31 (2a, 1H), 7,79, 7,75 (2 dd, 1,6 Hz, 7,8 Hz, 1H), 7,66, 7,56 (2d, 8,0 Hz, 7,6 Hz, 1H), 7,47 - 6,78 (m, 8H), 5,37 - 5,15 (m, 1H), 4,98, 4,94 (2 široký s, 1H), 4,24, 4,18 (2 široký d, 1H), 3,40, 3,32 (2 široký d, 2H), 3,23 - 3,02 (m, 3H), 2,73 (dt, 3 Hz, 13 Hz, 1H), 2,47 (d, 2Hz, 1/3 H), 2,17 (d, 16,6 Hz, 2/3 H), 2.08 (d, 16 Hz, 2/3 H), 1,84 (široký s, 2H), 1,70 - 1,60 (široký dd, 1H), 1,3 - 1,2 (široký dd, 1H), 0,56 (dt, 4,6, 13.8 Hz, 2/3 H), -0,55 (dt, 4,6, 13,3 Hz, 2/3 H). 83 FA3-MS: vypočteno pro C33H4oN4°6* 588’ nalezeno 595 (M + Li, 100 %). Část B: N- [1 (R) - [ (3, 4-dihydro-4-cxos?iro [2H- l-benzpyran-2, 4 '-piperidir.] -1' yl) karbcnyl; --2 (indol-3-yl) etyl] -2-aminc-2-metyl- propanamid hydrochlorid_

Do míchaného roztoku 1,0 g (1,7 mmol) meziproduktu vyrobeného v předchozí části A v Smi metanolu se přidá 5 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové a vznikl: reakční směs se míchá 1 hodinu při teplotě místnosti. Po přidání 20 mi toluenu se směs odpařuje ve vakuu a celý postup se dvakrát opakuje. Vznikne 0,87 g výsledné sloučeniny jako směs dvou konformerů v poměru 2:1 s výtěžkem 98%. D <rytý) , 38 ^Ή-ΝΜΗ (400 MHz, CD^OD): Produkt existuje jako směs dvou konformerů (poměr 2:1): 7,76 - 6,90 (m, 10H) , 5,11 (dd, 5, 11 Hz, 1H), 4,16, 4,11 (2 td, 2,0 Hz, 14 Hz, 1H), 3,60 3,33 (2 md, 14 Hz, 1H), 3,25 - 3,10 (m, 2H), 2,92 - 2,57 (m, 2H), 2,30 - 2,17 (AB, w. 23, 16,7 Hz, 2H), 2,85 - 2,8 (široký d, 1/3 H), 1,60, 1,59 (2s, 6H), 1,70 - 1,50 (m, s 1,40 - 1,30 (md, 1H), 0,47 (dt, 5,5, 13,5 Hz, 2/3 H), -0, (dt, 5,5, 13,5 Hz, 2/3 Hz). FA3-MS: vypočteno pro C28H32N4°4’ 488> nalezeno 489 (Μ + H, 100 %). 84

Příklad 11A N- [ 1 (?-) - l ( 3, 4-dihydro-4 (R3) -hydroxyspirc ;2K-l-cenzpyran-— 2, ^ cíceřidinl-1 * vl) karbonvl1 —2 — ir.dc 1 — 2 — vl a""-Ί* — -2-aminc-2-metylpropanamid__

Do míchaného roztoku 55 mg (0,09 mmcl: výsledné sloučeniny příkladu 11 v 5 ml metanolu se při nepietě 03C po částech přidá 16 mg (0,4 mmol) fcerhydridu sodného. Vzniklá reakční směs se 30 minut míchá při teplotě 0cC a následně se odpařuje dosucha a rozpustí se v dichlor-metanu. ?o čištění rychlou sloupcovou chrcmatograřií při eluci 10% metanolem v dichlormetanu vznikne s výtěžkem 78% 3o mg výsledné sloučeniny jako směs dvou diastereomerů v poměru 1:1. Každý isomer má dva kcnřormery v poměru 2:1. lpj NMR (400 MHz, CD^OD) : Produkt existuje jako směs dvou diastereomerů ( 1 : 1) a isomer jako dva kor.řormery (poměr 2 : 1): 7,89 - 6,66 (m, 9H), 5,14 - 5,06 (m, 1H), 4,52 - 4,54 (2 dd, 1H), 4,22 - 4,10 (2 md,_lH), 3,58 - 3,44 (2 md, 1H), 3,25 - 3,14 (m, 2H), 3,10 - 2,59 (4 dt, 1H), 2,02 (dd, 6,2, 14,7 Hz, 1/3 H), 1,79 - 1,74 (dd, 1/3 H), 1,60 - 1,40 (m, 3H), 1,37, 1,31, 1,28, 1,28, 1,26 (4 s, 6H), 1,3 - 1,05 (m, skrytý), 0,71, 0,49 (2 dt, 5,6, 13,5 Hz, 2/3 H) , -0,20, -0,47 (2 dt, 4,6, 13,5 Hz, 2/3 H). FA3-MS: vypočteno pro C28H34N4°4’ 490» nalezeno 491 (Μ + H, 100 %). Příklad 12 N-[1(R)-[ (3, 4-dihydro-spirc [2H-l-ber.zpy -2, 4 ' -piperidin] -1 'yl) karbonyl] -2- (indol -2-aminc-2-metylpropar.amid hydrochlorid Část A: 3,4-dihydrospiro [2H-l-benzpyrar.- 2/ 4 '-piperidin]______

Do míchaného roztoku 53 mg (0,21mmci) spiro+-[2H-l-benzpyran-2,4'-piperidin]-4 (3H)-on hydrochloridu v i 5 ml metanolu se při teplotě 0°C po částech přidá 33 mg (i mmol) borhydridu sodného. Směs se 30 minut odpařuje a I na vzniklý zbytek se 30 minut působí 2 mi nasycené kyše- i líny chlorovodíkové. Po odpařování vznikne zbytek, který j se 2 hodiny hydrogenuje za přítomnosti 10 mg 10% paladia I na aktivním uhlí pod tlakem vodíku 0,1 MPa. Katalyzátor se odstraní filtrací za vzniku 89 mg surového meziproduktu, 1 který se pro další syntézu použije bez dalšího čištění.' 1H-NMR (400 MKz, CD-jOD): 7,07 (jeví se jako d, 5 Hz, 2H), j 6,84 (jeví se jako t, 7 Hz, 2H), 7,07 - 7,08 (m, 4H), 2,8^ (t, 7 Hz, 2H) , 2,02 (široký d, 14,5 Hz, 2H), 1,90 - 1,85 j (m, 4H). EI-MS: vypočteno pro C13H1?N0, 203, nalezeno 203 (M+, 45 %). Část B: N- [1 (R) -((3, 4-dihydro-spiro [2H-l-benzpvran-| -2, 4 '-piperidin] -1 'yl) karbonyl] -2- (indol-3--yl) etyl] — [ [ (1,1-dimetyletoxy) karbonyl] -amino]-2-metylpropanamid______ 85

Sloučenina se vyrobí za pcužizi meziproduktu vyrobeného v předchozí části A tohoto příkladu a kyseliny a 'R; - [ [2- [ [ (1/ l-dimetyletoxy) karbonyl] amine] -2,2-dinetyl-1—cxcetvl] amine] — 1H—indcl—3—crocicr.ové ccdle cbwkléhc postupu používaného pro sloučení peptidů. Vznikne výsledná sloučenina jako snes dvou kondomerů v poměru 2:1. MP (400 MHz, CDC1 ^): Produkt existuje jako směs dvou koní o rrr.e rů ( poměr 2 : 1): 8,04, 8 ,02 (2s, 1H), 7,70 , 7,61 (2d, 3 Hz, 1 H), 7,49 - 6,66 (m, 1H), 4,92 (široký s , 1H), 4,30 - 4,20 (m, 1H), 3,4 - 3,1 (m , 4h), 2 ,85 - 2,45 (m, 3K) 1,68 (r, 7,6 Hz, l.H), 1,49, 1,45, 1,44, 1 ,43, 1,41 (5 s, 12 1,30 - 1,21 (m, 3H), 1,11 - 1,07 (dd, 2,5 , 14 Hz, 1 /3 H), 0,63 (dt, 4, 5 Hz, 13 Hz, 1/3 H), -0,33 - -0,43 (dt, 1/3 H). FA3-M5: vypočteno pro C33H42N4°5» 574, nalezeno 575 (Μ + H, 35 %). Část C: N- [1 (R) - [ (3, 4-dihydro-spiro [2H-l-benzpyran- -2, 4 '-piperidin] -1 'yi) karbony!] -2- (indol--3-yl) etyl] -2-amino-2-metylpropanamid- hydrochlorid_

Podle postupu uvedeném v příkladě 11, část 3 se s výtěžkem 90% vyrobí výsledná sloučenina jako směs dvou konřormerů v poměru 2:1 za použití meziproduktu vyrobeného v předchozí části B jako výchoz! sloučeniny. ^H-NHR (400' MHz, CD^OD): Produkt·existuje jako směs dvou konformerů (poměr 2:1): 8,31, 8,21 (2 d, 6,5 Hz, 2/3 H), 7,58, 7,52 ( 2 d, 7,8 Hz, 1H) , 7,37 (d, 8,2 Hz. 1H), 7,15 - 6,50 (m, 6 1/3 H), 5,17 - 5,13 (m, 1H), 4,14 (široký d, 13, Hz, 1H), 3,35 - 3,10 (m, 3H), 2,90 - 2,45 (m, 3H), 1,70 (t, 87 6,9 Hz, 1H), 1,60 (a, 6H), 1,60 - 1,40 (n, 1,20 (m, 2H), 1,11 (široký d, 12,7 Hz, 2/2 13 Hz, 2/3 H), -0,31 (dt, 4,3, 13 Hz, 2/3 skrytý), “/, 0,57

γΑΞ-MS: vvccčteno oro C~eH, .N .0., 474. nalezeno 475 (Μ + H, 60 %). Příklad 13 N- (1 (R) - [ (3,4-dihydro-6-metansul£onylamino-4-oxc-spiro- - [2H-l-benzpvran-2/ 4 '-piperidin] -1' yl) karbony!] -2- - (ináol-3-yl) etyl] -2-amino-2-metylpropar.amid hydrochlorid !

Sloučenina se vyrob! podle postupu uvedeném v příkladě 10, část A a B za použiti kyseliny ct{R)-[[2- -[ [ (1, 1-dimetyletoxy) karbonyl] amine]-2, 2-dimetyl-l-oxo- etyl] amino]-lH-indol-3-propionové a 3, 4-dihydro-ó-metan-sulfonylamino-4-oxo-spiro-[2H-l-benzpyran-2,4 '-piperidinu) Část A: N- [1 (R) -({3, 4-dihydro-6-metansulfonyl- amino-4-oxo-spiro-[2K-l-benzpyran-2, 4 -piperidin] -l'yl) karbonyl] -2- (indol-3-yl) -etyl] -2- [ [ (1,1-dimetyletyloxy) karbonyl] - amino] -2-metylpropanamid__ Výsledná sloučenina je směsi dvou konformerů v poměru 2:1. ^H-NMR (400 MHz, CDClg): Produkt existuje jako směs dvou ; konformerů (poměr 2:1): 8,50, 8,36 (2 široký s, 1H), 7,63 - 6,81 (m, 8H), 5,20 (široký s, 1H), 5,10 - 5,02 (široký m, 1H), 3,45 - 3,30 (široký m, 1H) , 3,25 - 3,10 (široký m, 2H) , 2,97 - 2,95 (2s, 3H), 2,75 - 2,56 (m, 1H), 2,2S (široký s, 1H), 2,18 (d, 16,6 Hz, 1H), 2,05 (d, 16,6 Hz, 1H), 1,86 - 88 Výsledná sloučenina je směsi d vou '«-''n-s

1.^5 (m, skryty), 1,5: L, 1,46 12 H ) , 1,30 - 1,20 (m, 2H), 0 -0,65 (m, 2/3 H). FAB-M 3: vypočteno pro C„ .H 43 nalezeno 638 (M + L Část B: N- [1 (R) - [ (3,4-dihydro-6-mezans 4-oxo-spiro- í2H-i-ben2pyrar.-2/ 4 -1'yl)karbonyl]-2-(indol-3-yl)e -2-metylpropanamid hydrochlorid ' -I -'íamzr.c- -ain - yi] 2 mi. r. o — v poměru 2 • w-*aormer·' ^H-NMR (400 MHz, CD,0D): Produkt existuje jako . j 'j e“*^s avcu koníormerů (poměr 2 : 1): 7,63 - 6,92 (m, 8H) . r i , (m, 1H), 4,18 - 4,08 (2 md, 1H), 3,62 - 3,51 (2 md 3,25 - 3,10 (m, 2H), 2,91, 2,89, (2 s, 3H) , 2,78 -’2 57' (2 dd, 2 Hz, 15 Hz, 2H) , 2,27 (d, 16,7 Hz, 1H) , 2,19^ 16,6 Hz, 1H), 1,86 - 1,80 (m, 1/3 H), 1,80 - 1,50 (n, Sk~v^' 1,60, 1,59, 1,48 (3s, 6H), 1,40 - 1,30 (m, 1H) , 0,47 ’ (d/” ^ 4,8 Hz, 13 Hz, 2/3 H), -0,39 (dt, 4,8 Hz, 13 Hz, 2/3 H).* FAB-MS: vypočteno pro C29H35N5°6S> 581, nalezeno 582 (Μ + H, 75 %). Příklad 14 N- [1 (R) - [ (3,4-dinydro-4 (RS) -hydroxy-6-metansulřonylamino--spiro- [2H-i-benzpvran-2, 4 '-piperidin] -1 'yl) -karbonyl] - 2-indol-3-yl) etyl] -2-amino-2-metylpropanamid_

Sloučenina se vyrobí podle za použití sloučeniny vyrobené v příkladě 13 a podle postupu uvedeném v příkladě 11 A. Vznikne výsledná sloučenina jako směs diastereomerů v poměru 1:1 a každý isomer má dva konformery. 7,29 1H-M MR ( o o MHz, CD30D): 7,62 - 7 O tn m, 1-' 7 4 ·*···/* ' , 2 - ‘ (m, 2H), 7,17 - 6,98 (m, 4H), 6,6 3 (d, 8 7 -- i - ' , 5 5,05 (m, 1H) , 4, 75 - 4,65 (m, 1/3 H), 4, 57 (dd, 7 Hz, 1/3 H) , 4,44 (dd , 6,5 Hz, 9,0 Hz, 1/3 • · > , 4,21 - 4,07 1H) , T e, -> ) - 6 - 3,44 (η, 1K), 3,2 ^ — 3,12 ( T 9 w ~ t 1 · 03 - (m, 2/3 H) , 2,89 , 2,86 (2s, 3! H), 2,82 - p - > - 'v · “ > 1H) (dd, 6,0 Hz, 13, 8 Hz, 1/2 H), 1,8 6 (dd t 6,0, 13,7 Hz, 1,70 - 1 ,35 (m, 3H), 1,33, 1, 32, 1,31, X ,2S, 1,24 (5s 1,33 - 1 ,29 (m, skrytý), 1,06 (ši roký d, 1 w* - , i /3 H (d~, 4,6 Hz, 13 Hz, 1/3 H), 0 ,49 (dt, 4, 6 Hz, 13 Hz, > 15 a t — \ -i. , 2 X / , 5 1/3 13 ♦ · / 'Λ u -0,21 (dt, 4,6 Hz, 13 Hz, 1/3 H) , -0,49 (dt, 4,5 Hz, 1/3 H). 71 FA3-MS: vypočteno pro C29H37N5°6S’ 583, nalezeno 584 (Μ + H, 20 %). Příklad 15 N- [1 (R) - [ (2-acetyl-l, 2,3, 4-tetrahydrospiro [isochinolin-4,4' -piperidin] -1' -yl) -karbonyl] -2-indol-3-yi) etyl] -2-amino-2-metylpropanamid hvdrochlorid_ Část A: 1,1-dimetylester kyseliny 1,3-dihydro- -1,3-di-hydroxyspiro [4H-2-benzíuran-4,4' - piperidin] -1' - karboxylové_| Při teplotě -78°C se nechá míchaný roztok 800mg (2,8 mmol) 1,1-dimetylesteru kyseliny spiro[lH-indene-1,4'-piperidin]-1'-karboxylové v 50mi metanolu probublávat ozonem do zmodrání roztoku. Směs se nechá stát 20 minut při. stejné teplotě 20 minut a následně se prcbublává dusíkem. Po přidání 3ml dimetylsulfidu se směs! zahřeje na teplotu místnosti a následně se 2 hodiny míchá Po odpaření rozpouštědla vznikne 940 mg surového produktu který se v další syntéze použije bez dalšího čistění. 1 90 1,1-dinetyietylester 1,2,3,4-tezrahydro-spiro [iscchinolin- 4,4' -piperidin] - Část 3: -1'-karboxylové kyseliny_

Ve 2 ml metanolu, který se po drbu 1 dne sytil amoniakem se michá 100 mg meziproduktu vy části A tohoto přikladu a odpařuje se při odstr amoniaku. Zbytek se rozpust! ve 3 mi metanolu a .c. Směs vvsledn C Λ se přidá v přebytku 50 mg kyanborhydridu sodná' přes noc michá, odpařuje se a čisti za vzniku sloučeniny. 1H-NMR (400 MHz, CD30D) : 7,35 3,14 (3, 2H) , 3,90 (široký s, (široký t, 2H), 0,59 (d, 2H), - 6,96 (m, 4H), 4,00 (s, 2H), 2H), 2,05 (široký s, 2H), 1,9 1,49 (s, SH). Část C : 1,1-dimetyletylester 2-acetyi-l,2,3,4- tetrahydrospiro- [isochinolin-4, 4 ' -pipe- ridin]-1'-karboxylové kyseliny_

Na 16 mg meziproduktu vyrobeného v části A se 2 hodiny působí 2 ml pyridinu a 2 mi anhydridu kyseliny octové a vzniklá reakční směs se odpařuje ve vakuu za vzniku 12 mg výsledné sloučeniny jako směs rotamerů v poměru 3:1. 1 1 H-NMR (400 MHz, CDC13): 7,36 - 7,05 (m, 4H), 4,72 (s, 2/4 H), 4,55 (s, 6/4 H), 4,10 - 4,00 (široký d, 12,8 Hz, 2H), 3,85 (široký s, 3/4 H), 3,65 (s, 1/4 H), 3,11 (t, 13,1 Hz, 3/4 H), 3,00 (t, 13,1 Hz, 1/4 H), 2,19 (s, 3/4 H), 2,18 (s 9/4 H), 2,00 - 1,80 (m, 2H), 1,65 - 1,47 (m. 2H, skrytý), 1,47 (s, 9/4 H), 1,45 (s, 27/4 H). - 91 - Část D: 2-308171-1/2/3,4- tetrahydrospiro[isechi- nolin- 4,4* -piperidin]_______

Roztok 12 mg meziproduktu vyrobeného v předchozí části C v 5 ml etylacetátu se nechá při teplotě 53C probublávat plynnou kyselinou chlorovodíkovou až dc nasycení roztoku. Po 30 minutách se reakční směs odpařuje i ve vakuu za vzniku požadovaného meziproduktu. i 1H-NMR (400 MHz, CD-jOD): 7,47 - 7,19 (m, 4H) , 4,79 (s, 2H) , 3,96 (s, 2H), 3,36 (široký d, 6,7 Hz, 2H), 2,30 - 2,2^ (n, 1H), 2,21 (s, 3H), 1,76 (d, 13 Hz). FA3-MS: vypočteno pro C15H2qN20, 244, nalezeno 245 (M + 1, 100 %). Část Ξ: N-[l(R)-[(2-acetyl-l,2,3,4-tetra- hydrospiro-[isochinolin-4,4'-piperidin]--1'yl)-karbonyl]-2-indol-3-yl)etyl]-2--[[(1,1-dimetyletyloxy)karbonyl]- amino] -2-metylpropanamid hydrocnlorid_ Výsledná sloučenina sě vyrobí za použití meziproduktu předchozí části D podle obvyklého postupu. Přiklad 16 N- [1 (R) - ((I, 2-dihydro-l-metylsulfonylspiro- [3H-indol--3,4 '-piperidin] -l'-yl) karbonyl]-2- (2', 6'-difluorfenyl-metyloxy) etyl]-2-amino-2-metylpropanamid hydrochlorid 92 Část A: metyl a (R) - Γ [2- [ [(1,1-dimetyletoxy)- karbony 1] aiaino] -2,2-diaetyI-l-cxoet vi1 *·· amino]-3-[(2', 6'-diíluorřenvl)metoxy]- propionová kyselina__

Co suspenze 1/ — 5 ( u mne — < nycrrcr,.' sodného prostého oleje, který se připraví z 50% olejové disperze hvdridu sodného trojr.áscdbným promytím směsi hexanů, v 30 ml N, N-dimetylformamidu se přidá při teplo místnosti 3,07 g (15,0mmol) N-t-butyloxykarbcnyl-05-šeřinu v 10 ml N, N-dime tyl formami du. Po úplném vývoji plynu se přidá 2,63g (12,9 mmol) 2,6-difiuorbenzylbromitíu a po 13 hodinách míchání při teplotě místnosti se do reakční směsi přidá 1,0 ml (16,0 mmol) jodmetanu. Směs se míchá 1 hodinu, pak se vlije do vody a extrahuje se etvl-eterem. Organický podíl se postupně promyje pětkrát vodou, nasyceným roztokem chloridu sodného a suší se nad síranem sodným. Po filtraci a zahuštění se vzniklý zbytek rozpustí při teplotě místnosti ve 20 ml chloroformu a BOC-a-metyl-alaninu, EDC, 1-hydroxybenztriazolu a trietylnitrilu . Po 3 hodinách se reakčni směs vlije do-vody a extrahuje se metylenchloridem. Organický podíl se suší nad síranem sodným a zahustí se. Vzniklý zbytek se čistí po absorbci na sloupec silikagelu chromatografií při eluci směsí hexanu a etylacetátu v poměru 3:1 za vzniku 2,37g směsi rotamerů výsledné sloučeniny s výtěžkem 35%. ^H-NMR (300 MHz, CDCl^ směs rotamerů): 7,27 (m, 1H), 7,02 - 6,SS (m, 2H), 4,95 (m, 1H), 4,72 (dt, 8, 3 Hz, 1H), 4,58 (široký s, 2H), 3,90 (m, 1H), 3,78 (s, 1H), 3,59 (s, 3H), 1,48 (s, 3H) , 1,45 (s, 3H), 1,41 (s, 9H). 1 - 93 Část 3: N- [1 (R) - [1,2-dihydro-l-metylsulfonyI- spiro[3H-indol-3, 4 ' -piperidinj-1'-yi) -karbonyl] -2- (2 *, 6' -difluorfer.ylmetyicxy) -etyi] -2-amino-2-metylprcpar.amid hydrochlorid___ i

Do 2,37 g (5,29 mmol) roztoku meziproduktu ; vyrobeného v předchozí části A tohoto příkladu ve 30 ml metanolu se přidá 340 mg (8,1 mmol) hydroxidu lithného v 3 ml vody. Po 2 hodinách míchání při teplotě místnosti se reakční směs zahustí, ředí vodou a extrahuje etyleterem. Organický podíl se odloží. Vodný podíl se přidáním 1N kyseliny chlorovodíkové okyselí na pH * 1,5 a následně se extrahuje třikrát etyleterem. Organický podíl se suší nad: síranem sodným, filtruje se a zahustí za vzniku 2,13 g kyseliny s výtěžkem 95%. Podle postupu uvedeném v příkladě 20, část B za použití 78 mg (0,18 mmol) kyseliny a 50 mg : (0,165 mmol) 1, 2-dihydro-l-metylsulfonylspiro [3K-indol--3, 4 '-piperidinhydrochloridu a za použití chlorovodíku v | etyleteru namísto kyseliny trifluoroctové vznikne 48 mg směsi rotamerů výsledné sloučeniny s výtěžkem 44% . 1 1 H-NMR (400 MHz, CD30D směs rotamerů): 7,39 (m, 2H) , 7,22 (m, 1 1/2 H), 7,03 (m, 3 1/2 H) , 5,14 (dd, 13 Hz, 7 Hz, 1H), 4,56 (d, 15 Hz, 2H) , 4,49 (m, ΓΚ), 4,09 (m, 1H), 3,92 (široký s, 2H), 3,76 (m, 2H) , 3,25 (m, 1H), 2,97 (s, 3/2 H), 2,96 (s, 3/2 H), 2,87 (m, 1H), 1,95 (m, 1H), 1,76 (m, 3H), 1,6! (s, 3/2 H), 1,57 (s, 3 3/2 H) . FAB-MS: 565 (M + 1). 94 Přiklad 17 N- [1 (R) - [ (1,2-dihydro -1 -met yi sulicny1sp i rc --3,4' -piperidin] -l'yl) karbony!j -3-cyklohaxy -amino-2-metylpropanamid hydrochlorid_ Část A: t-butyloxykarbonyl-(D) -hexahydrc- homofenylalanin_ zutylexy kar-ocrové se 15 tlaku 0,1 MPa. a azectrcpické er.ina.

Roztok lOOmg (0,358 mmol; t-i bonyl-(D)-homofenylalaninu v 1 mi kyseliny hodin hydrogenuje přes oxid platičitý při Po filtraci přes celit, zahuštěni filtrátu destilaci z toluenu vznikne výsledná siouč 1H-NMR (400 MHz, CDC13): 5,03 (d, 8Kz, 1H), 4,22 (m, 1H) , 1,82 (m, 1H), 1,64 (m, 6H), 1,41 (s, 9K), 1,20 (m, 6H), 0,3 (m, 2H). Část B: benzyl-a-(R)- [ [2-[ [ (1,1-dimetyletoxy) - -karbonyl] amino] -2, 2-dimetyl-l-oxoetyl] - amino]-4-cyklohexylbutanová kyselina_ Při tlaku 1 MPa se v přítomnosti oxidu platičitého hydrogenuje 16 hodin roztok BOC-D-homo-fenylalaninu v kyselině octové a následně se filtruje přes celit a zahustí se. Do 44 mg vzniklého zbytku v 15 ml dimetylfluoridu se přidá při teplotě místnosti 198 ml benzylbromidu a 970 mg uhličitanu draselného. Směs se přes noc míchá, apk se vlije do 200 ml eteru a premyje se vodou. Organický podíl se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a zahustí. Po absorbci na sloupec silikagelu se vzniklý zbytek čistí rychlou chromatografií při eluci 7,5% etylacetátem ve směsi hexanů za vzniku 534 mg mezi 95 produktu s výtěžkem 95%. Roztok 534 mg tohoto meziprodukt v 10 ml směsi TFA a metylenchloridu se 1 hodinu míchá, následně se stripuje a azeotropicky destiluje z toluenu. Vzniklý zbytek se rozpustí v 10 ml metylenchloridu a zchladí se na teplotu 0°C. Po přidání 362 mg BCC-a-metyl-alar.inu, EDC, 1-hydroxybenztriazoiu a N>IM se vzniklá směs míchá přes noc. Roztok se vlije do 250 mi ezylacezátu a postupně se promyje 1N vodným roztokem hydrogensíránu sodného, vodou a nasyceným vodým roztokem hydrogenuhii-čitanu sodného. Organický podíl se suší, filtruje a zahustí. Po absorbci na sloupec silikagelu se vzniklý zbytek čistí chromatografií při eluci směsí etylacetátu al hexanů za vzniku 638 mg výsledné sloučeniny. XH-NMR (200 MHz, CDClg): 0,8 - 0,95 (m, 3H) , 1,05 - 1,3 (φ, 7H), 1,4 -1,9 (m, 19H), 2,15 (a, 2H), 4,59 (m, 1H), 4,87 (n, 1H), 5,18 (m, 2H), 6,96 (m, 1H), 7,35 (m, 5H). FAB-MS vypočteno pro C26^40^2^5 460 > nalezeno 461,5 (Μ + H). Část C: N- [1 (R) - [ (1, 2-dihydro-l-metylsulfonyl- spiro[3H-indol-3, 4'-piperidin]-l'yl)-karbonyl]-3-cyklohexylpropyl] -2-amino--2-metylpropanamid hydrochlorid Směs 638 mg meziproduktu získaného v části B a 100 mg paladia na aktivním uhlí se míchá 4 hodiny pod, baňkou obsahující vodík. Směs se filtruje přes celit a filtrát se zahustí. Ve 2 ml metylenchloridu se rozpustí 87 mg vzniklého zbytku a po přidání 49,8 mg 1, 2-dihydro-l- 96 -metylsulfonylsoiro [3H-indcl-3, 4 '-pioeridin hvdrocrJ o~-EDC a 1-hydroxybenztriazolu se vzniklá směs míchá 16 hodin. Roztok se vlije do 200 ml etylacetátu a crcmvHe s-1M vodným roztokem hydroger.s Íránu sodného, vodou a nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitar.u sodného. Crca-nický podlí se suší, filtruje a zahusti. ?o absorpci p.a sloupec silikagelu se vzniklý zbytek čisti chrcmarograřii při eluci 60% směsi etylacetátu a hexanů za vzniku 55 rua meziproduktu s výtěžkem 47%, Celé množství takto vzniklé sloučeniny se rozpustí ve 2 ml tetrahydrořurar.u a metvlen-chloridu v poměru 1:1 a vzniklá směs se 0,5 hodiny míchá. Roztok se stripuje a zbytek se čistí po abscrbci na sloupec silikagelu rychlou chromatografií pfi eluci metanolem, vodným roztokem hydroxidu amonného a metylenchiori-du. Sloučenina se rozpustí v metylenchioridu, na vznikl*/ roztok se působí kyselinou chlorovodíkovou v eteru a zahustí se za vzniku výsledné sloučeniny. 2H), 1,15 — 1,3 (m, 6H), 4 Hz, 1H), 2,88 (m, 1H), 4,1 (m, 3H), 4,51 (m, 1H), 7,22 (m, 2H), 7,37 (d, ‘•H-NMR (400 MHz, CD30D) : 0,93 (m, 1,55 - 1,8 (m, 1H), 2,06 (dt, 15, 2,97 (m, 1H), 3,35 (m, 2H), 3,8 - 4,83 (m, 1H), 7,06 (q, 7 Hz, 1H) , 8 Hz, 1H). FAB-MS vypočteno pro C27H42N4°4S 518 * nalezeno 519,7 (Μ + H). Příklad 18 (postup 1) N- [1 (R) - [ (1/ 2-dihydro-l-metansulfonylspiro- [3H-indol--3, 4 '-piperidin]-l'yl)karbonyl]-2-(fenylmetyioxy) etyl] -2-amino-2-metyloxy) etyl] -2-amino-2-metylprcpanamid hvdrochlorid_ _ 97 Část A: 1, 2-dihydro-l-metansulfonyispiro f3K-indcl- -3,4*-piperidinj hyydrochlorid_

Do roztoku 1,20 g (5,8 mrvo!) l'metyl-1,2--dihydrospiro [3H-indol-3, 4'-piperidinul, jehož příprava ; pcpsár.a H.Cr.gem a spcl. v J.Med.Chem. 1583, 23, 581-558, ve 20 ml suchého dichlormetanu se při teplotě 0°C přidá 0,90 mi (6,4 mmol) trietylaminu a 0,49 ml (6,35 mmol) metansulřonylchloridu a vzniklá reakční směs se 30 minut míchá. Po vlití do 15 ml nasyceného vodného roztoku uhličitanu sodného se reakční směs extrahuje dvakrát 10 mi dichlormetanu. Sloučené organické podíly se promyjí 20 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad bezvcdým uhličitanem draselným, filtruje se a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku za vzniku 1,44 g metan-suifonamidového derivátu v podobě bledě žlutého oleje, který se v dalším postupu syntézy použije bez dalšího čištění.

Do roztoku vzniklého surového produktu ve 20 ml suchého 1,2-dichlormetanu se při teplotě 0°C přidá 1,0 mlj (9,3 mmol) l-chloretylchloroformátu_a vzniklá reakční směs se míchá 30 minut při teplotě místnosti a následně se zahřívá pod refluxem 1 hodinu. Po zahuštění reakční směsi g přibližně na jednu třetinu objemu se vzniklý zbytek ředí 20 ml suchého metanolu a refluxuje se 1,5 hodiny. Reakčn^ směs se zchladí na teplotu místnosti a zahustí se přibliž ně na jednu polovinu objemu. Sraženina se filtruje a promyje malým množstvím studeného metanolu za vzniku 1,0 piperidinhydrochloridu jako bílé pevné látky. Filtrát se zahustí a přidá se malé množství metanolu a eteru. Sraženina se znovu filtruje, promyje studenými metanolem a suší. Vznikne dalších 0,49 g výsledné sloučeniny. Celkový výtěžek reakce je 1,49 g (70%) výsledné sloučeniny. 98 ^H-NMR (200 MHz, CDC13): 7,43 - 7,20 (m, 3H) , 7,10 (dá, 3,98 (široký s, 2H) , 3,55 - 3,40 (bd, 2H) , 3,35 ·· 3>. ?.0 2H), 2,99 (s, 3H), 2,15 (t, 2H), 2,00 (t, 2H). Čá B: N-[l(R)-[ (1,2-dihydro-I-metansuičonylspirc -[3K-indol-3, 4 '-piperidinl -1'-yi; karbcnv) ' · -2- (fenylmetyloxy) etyl] -2- [ (1,l-dimetyl·--etoxv) karbonyl] amino-2-metylpropanamid

Do 0,35 g (1,15 mmoi) kyseliny (2R)-2 — [ (1,1-dimetyletoxy) karbonyl] amino-3- [2- ί fenylmetyloxy) -etyl]-1-prcpionové ve 13 ml dichlormetanu se přidá 0,325g (1, 07 mmol) 1,2-dihydro-l-metansulfonylspiro [3K-indol-3( 4 ' --piperidin]hydrochloridu, 0,18 ml (1,63 mmol) N-metyl-morřolinu, 0,159 g (1,18 mmol) 1-hydroxybenztriazolu a vzniklá reakčni směs se michá 15 minut. Po přidáni 0,31 g (1,62 mol) EDC se směs michá 1 hodinu a následně se přidá 60 μΐ N-metylmorřolinu. Po 45 minutách michání se reakčni směs vlije do 5 ml vody a organický pódii se oddělí, prcmyje 5 ml 0,5 N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové a 5 ml nasyceného vodného roztoku uhličitanu sodného. Sloučené organické podíly se suší nad bezvodým síranem hořečnatým a zahustí se za vzniku 0, 627 g produktu jako žluté pěny, která se bez dalšího čištění použije v dalším postupu syntézy.

Do 0,627 g (1,07 mmol) vzniklého produktu v 5 ml dichlormetanu se přidá 1,0 ml kyseliny trifluor-octové a po 75 minutách míchání při teplotě místnosti se přidá další 1,00 ml kyseliny trifluoroctové. Po 10 minutách míchání se reakčni směs zahustí a následně zředí 5,0 ml dichlormetanu. Přidáním 10 ml 10% vodného roztoku uhličitanu sodného se reakčni směs přivede na bazické pH. 99

Organický podíl se oddělí a vodný podíl se extrahuje dvakrát 15 ml dichlormetanu. Sloučené organické extrakty se promyjí 5 ml vody, suší se nad uhličitanem draselným, filtruje se a zahustí za vzniku 0,436 g aminu v podobě nažloutlé pěny, který se použije pro další postup syntézy bez dalšího čištění.

Do 0,436 g (1,01 mmol) aminu a 10 mi dichlormetanu se přidá 0,26 g (1,28 mmcl) kyseliny 2-- [ (1,1-dimetyletoxy) karbonyl] amino-2-metyl-propionové, 0,173 g (1,28 mmol) 1-hydroxybenztriazolu a 0,245 g (1,23 mol) EDO a vzniklá směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Reakční směs se vlije do 5,0 ml vody a organický podíl se oddělí. Vodný podíl se extrahuje 5 mi dichlormetanu a sloučené organické podíly se promyjí 5,0 ml 0,5 N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, 5 ml nasyceného vodného roztoku uhličitanu sodného, suší se nad bezvodým síranem hořečnatýra a zahustí se za vzniku 0,751 g surového produktu jako žluté pěny. Roztok toho produktu v dichlormetanu se po absorbci na 25 g sloupec silikagelu čistí chromatograřií při eluci směsí hexanů, acetonu a dichlormetanu v poměru 70:25:5 a následně směsí hexanů, acetonu a dichlormetanu v poměru 65:30:5. Vznikne 0,63 g bílé pevné látky výsledné sloučeniny. ,02 ),

^H-NMR (400 MHz, CDCl^): Produkt existuje jako směs dvou rotamerů (3 : 2): 7,40 - 7,10 (m, 5H), 7,06 (d, 1/3 H), 7 (t, 1/3 H), 6,90 (t, 1/3 H), 6,55 (d, 1/3 H), 5,15 (m, 1H 4,95 (široký s, 1H), 4,63 (bd, 1/3 H), 4,57 - 4,40 (m, 2 2/3 H), 4,10 (bd, 1/3 H), 4,00 (bd, 1/3 H), 3,82 (t, 1H) , ,87 3,7S - 3,62 (m, 2H), 3,60 - 3,50 (m, 1H), 3,04 (q, 1H), 2 (s, 1H), 2,86 (s, 2H), 2,80 - 2,60 (m, 1H), 1,90 (široký s, 1H), 2,85 - 2,75 (m, 1H), 1,82 - 1,60 (m, 3H), 1,55 - 1,45 (m, 1H), 1,45 (s, 4H), 1,42 (s, 2H), 1,39 (s, 9H). 100 Část C: N— [ 1 (R) — [ (1,2-dihyáro-l-mezyisulícnylspirc- - [3K-indol-3,4 '-piperidin] -1' yl karbony1 1 --2- (fer.yimetylcxy) etyl] -2-aminc-2-metyl- propanamid hydrcchlorld_

Do 0,637 g (0,101 mmcl) meziproduktu vyrobeného v části 3 tohoto přikladu v 5 ml dichlcrmezanu se přidá 2,5 ml kyseliny triřiuorcczcvé a vzniklá směs se 30 minut míchá při teplotě místnosti. Po zahuštění za vzniku oleje se vzniklý zbytek přenese do 10 ml etyl-acetátu a promyje se 3 ml 10% vodného roztoku uhličitanu sodného. Voaný podíl se dále extrahuje 5 ml etylacetátu a sloučené organické podíly se promyjí 10 ml vody, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a zahustí za vzniku 0,512 g volných baží v podobě bílé pěny.

Do 0,512 g volných baží v 5 ml etylacetátu se při teplotě 0°C přidá 0,2 ml nasycené kyseliny chlorovodíkové v etylacetátu a vzniklá směs se míchá 1,5 hodiny. Bílá sraženina se filtruje pod dusíkem, promyje se eterem a suší se za vzniku 0,50 g bílé pevné látky výsledné sloučeniny. ^H-NMR (400 MHz, CD^OD): Produkt existuje jako směs dvou rotamerů (3 : 2): 7,40 - 7,28 (m, 4H) , 7,25 - 7,17 (m, 2H) , 7,08 (t, 1/3 H), 7,00 (t, 1/3 H) , 5,80 (d, 1/3 H), 5,16 (ddd, 1H), 4,60 - 4,42 (m, 3H) , 4,05 (t, 1H) , 3,90 (široký s, 2H), 3,83 - 3,70 (m, 2H), 3,30 - 3,15 (m, 1H), 2,97 (s, 1H), 2,95 (s, 2H) , 2,90 - 2,78 (m, 1H), 1,96 (t, 1/3 H), 1,85 - 1,65 (m, 4H), 1,63 (s, 2H), 1,60 (s, 4H). 101 Příklad 19 (postup 2) N-[1(R)-((i, 2-dihydro-l-metylsulfonylspirc :3K-ir.dcl--3,4'-piperidin] -1'-yl) karbcnyl] -2-(fenylmetyloxy: styl] -2-anir.c-2-metyloxy'/ styl] -2-aminc-2-merylprzpanamiá hvdrochlorid______ Část A: alyiester kyseliny (2Α)-[(Γ2-(1,1--dimetyletoxy) karbonyl] anino-2,2--dimetyl-l-oxoetyl] amino-2- (f er.yl- -metoxy)etyl]-1-propionové

Sloučenina se vyrobí z kyseliny (2R)-2-(l,l dimetyletoxy) karbonyl] -amino-3- (fenylmetyloxy) etyl-propionové a alylalkonolu podle obvyklého postupu v rnety-lenchloridu za přítomnosti EDC a 4-N,N-dimetylaminopv-ridinu (DMAP) . ’ 1H-NMR (400 MHz, CDC13): 7,25 (s, 5H), 5,8 (m, 1H), 5,2 (dd 2H), 5,0 (široký S, 1H), 4,7 (m, 1H), 4,6 (m, 2H), 4,4 (dd, 2H), 3,9 (dd, 1H), 3,6 (dd, 1H), 1,45 (d, 6H), 1,39 (s, 9^) Část B: Kyselina (2R)-[ [ [2-(l, 1-dimetyletoxy) -karbonyl] amino-2,2-dimetyl-l-oxoetyl] -amino-2-(fenylmetyloxy) etyl]-1-propionové ;

Do 6,7 g (15,9 mmol) míchaného rozteku surového meziproduktu části A, 1,8 g (0,1 ekv.) tetrakis-f (trifenylfosfin)paladia a 1,25 g (0,3 ekv.) trifenyl-fosfinu se přidá do roztoku 35 mi 0,5 M roztoku 2-etyl- I hexanoátu draselného v etylacetátu. Reakčni směs se míchá 1 hodinu při teplotě místnosti pod atmosférou dusíku a následně se ředí 100 ml eteru a vlije se do směsi vody a | 102 ledu. Oragr.ický podíl se oddělí a vodr.ý podíl se přidáním 20% kyseliny citrónové okyselí a následně extrahuje etvl-acetátem. Etylacetátcvé extrakty se prcmyjí nasyceným roctcker. chloridu sodného, suší se nad sírar.err. horečnatým, filtrují se a odpařují ta vtr.iku pevné látky výsledné sloučeniny.' (4C0 MKz, CD30D): 7,3 (s, 5H), 4,7 (m, 1H), 4,5 (s, 2H) , 4,0 (m, 1H), 3,5 (m, 1K) , 1,4 (d, 5H), 1,3 (s, SH). Část C: N-[1 (R) - [ (l, 2-dihydro-l-rtstansulfcnylspiro-- [3H-indoi-3, 4 '-piperidir.j -1 '-yl) --karbonyl] -2-(řenyimetylcxy) etyl] -2- [(1,1--dimetyletoxy) karbonyl] amino-2-metyl- -propanamid_

Do roztoku 1,0 g (3,44 mozol) 1-metansulfo-nylspiro [indolin-3, 4 '-piperidin]hydrochloridu, 1,44 g (3,78 mmol) kyseliny (2R)-[ [2-(1,1-dimetyletoxy) karbonyl] amino] -2, 2-dimetyl-l-oxoetyl] amino-2- (řenvlmetoxy) -etyl)-1-prcpionové, 0,58 ml (5,20 mmol) N-metylnoríolinu a 0,53 g (3,78 mmol) 1-hydroxybenztriazolu (KCST) v 50 ml dichlormetanu se přidá 1,03 g (5,20 mmol) EDC a vzniklá směs se míchá 16 hodin při teplota místnosti. Po zředění 50 ml dichlormetanu a promytí 50 ml vodného roztoku uhličitanu sodného se vzniklá reakční směs suší nad síranem horečnatým, filtruje se a zahustí. Vznikl zbytek jako olej, který se po absorpci na sloupec 50 g silikagelu čistí rychlou chromatografií za vzniku 2,143 g za vzniku bezbarvé pěny výsledné sloučeniny s výtěžkem 90%. 103 103 n- ΓΠ4Η (400 MH z, CDC 13) : Pr odukr existuje jak z směs dvc u rot ame ru (3 : 2): 7, 40 - 7, 10 (m, 6H), 7, JC ( ~ 1 "3 ' , — / — · · l t 7 , (t, 1/3 K) , 6, 90 (t, 1/ 3 H) , 6 ,55 (d, 1/3 π / , 5,13 (a, 1H ) 4,5 5 (š iroký s , 1H), 4, 63 (bd, 1/ *3 l* \ ·« o 4* y , — 9 57 - * · ·Λ / «η ? \ ··♦ » 2 i H) , 4,10 (bd, 1/3 H) , 4 ,00 (bd , i . 3 - ·' - *» *_·' 2 7 3 _ -a w ,62 (m, 2H) , 3,60 - 3,50 (m * 9 ~ *-* N Q ·* • · / ♦ W , — íq, i - * ? 37 (s 1H) , 2, 86 (s, 2H), 2 ,30 - 2 ,60 (n T * · \ i , Ir., , J. ,90 (široký s, i:- 2,8 2,75 (m , 1H), 1, 82 - 1, 60 (m, 3H;, 1,5 5 - 1,4= ( »*» ili * 1H) , 1, ^5 (s, 4H), 1 ,42 (s, 2H \ ) t 1,39 (s, • N- tl (R) - [ (1, 2 -dihydro -1 -me z an s ui řc ny1sp i ro--[3H-indol-3, 4 ' -piperidir.] -l'-yl) --karbonyl] -2-(fenylmetylcxy) ezyl] -2-aminc- ; -2-metyloxy) etyl] -2-aminc-2-mezylpropanamidj Část D:

hvdrochlorid _L

Do roztoku 2,148 g (3,41 mol' meziproduktu vyrobeného v části C tohoto přikladu v 10 mi dichlormetanu se přidá 5 ml kyseliny trifluoroctové a vzniklá směs se 1 hodinu míchá. Reakční směs se zahustí a přidáním 100 ml 5% vodného roztoku uhličitanu sodného se přivede na zásadité pK. Po extrakci třikrát 50 ml dichlormetanu se sloučené organické extrakty promyji 50 ml nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad bezvodým uhličitanem draselným, filtruje se a zahustí za vzniku bezbarvé pěny. Do roztoku pěny v 25 ml etylacetátu se při teplotě 0°C přidá 4 ml 1M roztoku kyseliny chlorovodíkové v etylacetátu. Sraženina se oddělí filtrací a promyje nejprve etylacetátem a následné směsi eLyxacetatu a eteru v poměru 1:1. Po sušen vznikne 1,79 g bezbarvé pevné látky výsledné sloučeniny s výtěžkem 93%. 104 : směs dvou 1H-:-!MR (4C0 MHz, CD^OD): Produkt existu O rota me 9 ru (3 : 2) : 7,40 - 7, 28 ( m, 4rf) , 7,08 ( -· t 1/3 ! H), 7,00 (t Ί r ± /3 H), 6,8C 1H) , 4 ,ÓQ - 4 ,42 (m, 3H) , 4 ,05 (t, ih:, 3,83 - — 1 70 (: ·**» OL’", Ί 1 — * ; ' í — t w «* t i z, 1 i (s, 2H 1 / * 2,90 - 2,78 (m, 1H / 9 1,36 (t, (m, 4H \ ) t 1,63 (s , 2H), 1 , 60 (s .1 U > 7, 7,17 (m, 2 2 H], 5,15 ;široký s, Příklad 20 N-[1(R)-[(1,2-dihydro-l-metansulřonyl orc. a-sp - [3H-indol-3, 4 ' -piperidin] -1'-yl) karbcr.yl ] -2- (řer.yi--metyloxy) etyl] -2-amino-2-metyloxy) etyl] -2-ar.ir.c-2- 1 2 Část A: U. *· 1 metviorooanamid trifluoracetát_ N- [ 1 (R) - [ (1, 2-dihydro-I-r.etansulfcnyi-5--brom-spiro- [3K-indoi-3, 4 ' -piparidir.] --l'-yl) karbonyl] -2- ífenylr.etyloxy) etyl] -2- [ (1,1-dimetylatoxy) karbcnyl] amino- 2-metylpropanamid_

Do roztoku 300 mg {1,03 mmol) 1-metansulfo-nylspiro [3H-indol-3, 4'-piperidin]hydrcchloridu v 5 ml ledové kyseliny octové se přidá 0,28 g (2,06 mmol) bromu a vzniklá reakční směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti. Reakční směs se zahustí dosucha a po přidání 10 ml 5% vodného roztoku uhličitanu sodného se třikrát extrahu 2 mi dichlormetanu. Sloučené organická podíly se promyjí 10 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad bezvodým uhličitanem draselným, filtruje se a zahustí za vzniku 0,25 g surového produktu jako žlutého oleje, který se pro následující syntézu použije bez dalšího čistění. 105 Část 3: N- [ 1 (R) - [ (1,2-dihydro-l-netylsulřcnyl-S- -brcm-spiro-[3K-indcl-3, 4 '-piperidin] -1 -yi)-karbonyl]-2-(řenyl-mstylcxy;etyi]-2--anino-2-metyloxy) etyl] -2-amine-£-ne z y 1 -propar.am.id triflucracetáz_

Do roztoku meziproduktu v 10 .tl dichlcr-metanu vyrobeného v předchozí časti se přidá 0/43 g (1,13 romcl) meziproduktu, jehož příprava je popsána v části 3 příkladu 19, 0,17 g (1,13 mmcl) 1-hydrcxybenztriazclu a 0,34 g (l,70mnol) SDC a vzniklá reakčni směs se 1c hodin míchá při teplotě místnosti. Po ředění v 15 mi eteru se vzniklá reakčni směs promyje 15 ml 10% vodné kyseliny citrónové, 15 ml nasyceného roztoku uhličitanu sodného, suší se nad bezvodým síranem hořečnatým, filtruje se a zahustí za vzniku surového produktu jako oleje. Tento zbytek se po absorbci na 15 g sloupec silikagelu Čistí rychlou chromatografií při eluci směsí metylenchioridu a acetonu v poměru 10:1 za vzniku 0,134 g bezbarvé pěny meziproduktu s výtěžkem 26 % pro oba stupně.

Do 0,184 g (0,26 mmol) vzniklého meziproduktu ve 2 ml dichlormetanu se přidá 2 ml kyseliny trifluoroctové a směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti. Reakčni směs se odpařuje dcsucha za vzniku 0,149g (93%) bílé pevné látky výsledné sloučeniny s výtěžkem 93%,' FA3-MS: vypočteno pro C27H34BrN405S, 608, nalezeno 609,5.

106 Příklad 21 N- [ 1 í R;· - [ í i, 2-dihydro-sp irc [3H-ir.dci-3, 4 ' -piperidir." -1' --yl) karbony!] -2- (indol-3-yl) etyl] - 2 - a m i n c - 2 - m e t y 1 -crccanamid aihvdrochlorid Část A: Spiro [3H-indol-3,4 ' -piperidir.]

Do roztoku 1,0 g (5,0 mmcl) 1'-metylspiro--[3H-indol-3,4'-piperidinu, jehož příprava je popsána K. Ongem a spol. v J. Med. Chem. 1983,23, 981-986, a 1,0 g práškového uhličitanu draselného ve 30 mi suchého dichlormetanu se při teplotě místnosti přidá 0,50 g brom-kyanu a vzniklá směs se míchá 1 hodinu. Reakční směs se filtruje přes celit a promyje se směsí chloroformu a metanolu v poměru 95:5. Filtrát se zahustí a zbytek se čistí po absorbci na sloupec silikagelu rychlou chromatografií při eluci směsí chloroformu a metanolu v poměru 95:5. Vznikne přibližně 1,2 g žlutého oleje, který se v další syntéze použije bez následného čistění.

Do takto vzniklé suspenze v 30 ml suchého DME se přidá 0,30 g lithium aluminium hydridu a vzniklá reakční směs se zahřeje na teplotu místnosti a následně se 1 hodinu refluxuje. Po zchlazení na teplotu 0°C se reakce ukončí přidáním 0,30 ml vody, 0,30 ml 15% vodného roztoku hydroxidu sodného a 0,90 ml vody. Pevný podíl se oddělí filtrací přes celit a důkladně se prcmyjí směsí chloroformu a metanolu v poměru 10:1. Zahuštěním filtrátu vznikne 0,74 g žluté pěny směsi v poměru 1:1 výsledné sloučeniny a 1'-metylspiro [3H-indol-3, 4 ' -piperidinu] . 107 Část Ξ: Benzylester kyseliny (2R —[ 12—I Cl, 1 -di.r.ezy 1 - etoxy) karbonyl] aminc-2, 2-dirr.ezyl-l-cxcetyl; aminol-lK-indol-3-propleno vé_!

Do 5,0 g (16,5 mmol) běžně dodávaného N-t-30C-D-cryptořanu ve 100 ml chlcrcřzrrr.u se přidá 1, ? ? mi (16,5 mmoi) benzylaikcholu, 0,20 g ; 1, 55.t~.c1 ; dimetylamir.opyridinu (DMA?) a 3,20 g EDC a vzniklá reakčni směs se 15 hodin míchá. Po vliti směsi do 100 ml vody se; organický pcdil oddělí a vodr.ý pcdíl se extrahuje dvakrát 100 ml chloroformu. Sloučené organické pcdily se promyjí| 50 ml 10% vodného roztoku roztoku uhličitanu sečného, suší se nad bezvodým síranem horečnatým, filtruje se a zahustí za vzniku hustého oleje.

Roztok takto vzniklého oleje v 10 ml dichlormetanu se přidá do 20mi kyseliny triílucrcctové a 1 hodinu se míchá. Reakčni směs se zahustí, přidáním nasyceného vodného roztoku uhličitanu sodného se přivede J na zásaditá pK a extrahuje se dvakrát 100 ml chloroformuj

Sloučené organické podíly se promyjí 100 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad uhličitanem draselným, filtruje se a zahustí za vzniku 5,46 g hnědého oleje aminu, který se bez dalšího čištění použije pro další postup syntézy.

Do 5,46 g takto vzniklého produktu ve 100 mlj. chloroformu se přidá 3,40 g (22,2 mmol; 1-hydroxybenz-triazolu, 4,60 g (22,2 mmol) N-BOC-cc-metyl alar.inu a 5,32 g (28,0 mmol) EDC a vzniklá směs se 16 hodin míchá. Reakčni směs se vlije do 100 ml vody a organický· podíl sé oddělí. Vodný podíl se extrahuje dvakrát 100 ml chloroformu a sloučené organické podíly se promyjí 50 mi 10% vodné kyseliny citrónové, 100 ml 10% vodného roztoku uhličitanů 108 108 scdr.ého, suší se nad bezvodým se a zahustí za vzniku 6,94 g se co absorbcí na sloupec 200 síranem horečnatým, filtruje hustého oleje. Tento produkt g siiikagelu čistí chremate-a etylacetátu za vzniku sloučeninv. gr -- při eluc: i směsí , hexanu 4 ř 75 g bezbarvé pěny v ýsledné 1-, -n; (200 MHz, cdci3 ): 8 7, 38 - 7,23 (m, 3H) , 7 i 9 » — ^ (bd, 6 , oř, •Μ» '-Z (d , 1H), 6, 86 (d, 1H) , 5, 1H ), 3, 30 (2dd, 2H), 1 ,40 (s, (široký s, 1H), 7, ,34 (b 2H), 7,15 - 7,03 (m, 1 06 (široký s, 2h:, , 4,95 15H) . Část C: (2R) - [ [2-[[1,1-dimetyletcxy)karbony!]- amino] -2,2-dimetyl-l-oxcezyl] amine] - -lH-indol-3-oroDÍonová kyselina_ - - ........ —* .........-

Do roztoku 4,75 g sloučeniny vyrobené v části B tohoto příkladu ve 100 ml etanclu se přidá 1,0 g 10% palaaia na aktivním uhlí a vzniklá reakčni směs se 13 hodin míchá pod baňkou s obsahem vodíku při teplotě místnosti. Katalyzátor se oddělí filtrací přes síto celit a promyje se etylacetátem. Po zahuštění filtrátu vznikne 2,96 g bezbarvé pěny výsledné kyseliny. 1H-NMR (200 MHz, CDC13): 8,60 (široký s, 1H) , 7,55 (d, 1H) , 7,26 - 6,90 (m, 3H), 6,88 (bd, 1H), 4,S0 (m, 1H), 3,32 (2dd, 2H), 1,37 (s, 3H), 1,35 (s, 12H) . 109 N- [I (R) - [ (1,2-dihydro-spiro [3K-indci~3,4 piperidin] -1' — yl) karbony!; -2- (indcl-3-yi) -etyl] -2- ((1, l-dimetyletcx.y; karbony 1} amine--2-metvlorocanamid Část C:

Do roztoku 0,122 g (0,542 mel: směsi meziproduktu vyrobeného v části A tohoto přikladu a | 1'-metylspiro-[3H-indol-3,4'-piperidinu; v 5 mi suchého i chloroformu se při teplotě místnosti přidá 0,103 g (0,2-1 mmol) meziproduktu vyrobeného v části C, 41 mg (0,271 mmci) 1-hydroxybenztriazolu a 80 mg (0,41 mmol) SDC vzniklá reakční směs se 2 hodiny míchá při teplotě místnosti. Po zředění 10 ml chloroformu sa směs promyje 10 ml nasyceného vodného roztoku uhličitanu sodného a 10 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, filtruje se a zahustí. Po absorbci na sloupec 10 g silikagelu se vzniklý zbytek čistí rychlou chromatografií při eluci směsí metanolu a chloroformu za vzniku 94 mg žluté pěny výsledné sloučeniny, jako směs dvou rotamerů v pcměru 3:2.· 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 8,37 (d, 1/3 H), 8,35 (d, 2/3 H), 8,19 (d, 1H), 7,72 (d, 2/3 H), 7,60 (d, 1/3 H), 7,38 (d, 2/3 H), 7,32 (d, 1/3 H), 7,22 - 7,08 (m, 3H) , 7,00 (2t, 3jH) , 6,93 (d, 1/3 H), 6,69 (t, 1H), 6,60 (d, 1/3 H), 6,56 (d, 2/3 H), 6,50 (d, 2/3 H), 5,30 - 5,15 (m, 1H), 5,00 (široký s, 1H), 4,34 (m, 1H), 3,62 - 3,50 (m, 1H), 3,30 - 3,11 (m, 4H), 2,90 (dt, 1H), 2,40 (dt, 1/3 H), 1,70 - 1,55 (m, 1 2/3 H), 1,34 (s, 2H) , 1,31 (s, 4H) , 1,2S (s, 1H) , 1,31 (sj, 9H), 1,20 - 1,11 (m, 1H), 0,32 (dt, 1/3 H). 111 Příklad 22 N- [1 (R) - [ (1/ 2-dihydro-l-metylkarbonylspirc .[3H-indcl-3, 4 ' --pipsridin] -1' - vi) karbony 1 ] -2- (indc 1 -3-y 1: ez y 1 j -2 -amine - -2-metylpropanamid hydro chlorid_

Do 2c mg meziproduktu vyrobeného v části D přikladu 21 v 1,0 ml 1,2-dichloretanu a 55 μΐ (0,14 mol N-metylmorfolinu se při teplotě 0°C přidá 6,6 μ! (0,93 mmol) acetylchloridu a vzniklá směs se 1 hodinu míchá. Po zředěni 5 ml eteru se reakčni směs prcmyje 5 ml 10% vodné kyseliny citrónové, 5 ml nasyceného roztoku uhličitanu fodného, suši se nad bezvodým síranem hořečnatým, filtruje se a zahustí za vzniku bledě žluté pěny , která se bez dalšího čištění použije v následujícím postupu syntézy.

Do takto vzniklé pěny v 1,0 ml dichlor-metanu se přidá do 1,0 ml kyseliny trifiuoroctové a vzniklá směs se 1 hodinu míchá. Reakčni směs se zahustí, přidáním 5 ml 10% vodného roztoku uhličitanu sodného se přivede na zásadité pH a extrahuje se třikrát 5 ml chloroformu. Sloučené organické podíly se promyjí 10 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad uhličitanem draselným, filtruje se a zahustí za vzniku hustého oleje. Do roztoku tohoto oleje v 1,0 ml metanolu se přidá 1,0 ml 4M kyseliny chlorovodíkové v dioxanu a po zahuštění dosucha vznikne 16 mg bledě žluté pevné látky výsledné sloučeniny jako směs rotamerú v poměru 3:2. 1H-NMR (400 MHz, CD30D): 8,43 (d, 1H) , 8,35 (t, 1H), 7,72 (d, 2/3 H), 7,61 (d, 1/3 H), 7,40 - 7,25 (m, 2H), 7,20 - 7,08 (m, 3H), 7,05 - 6,95 (m, 2 2/3 H), 6,50 (d, 1/3 H), 5,25 - 112 112 5,10 (m , ih: ) , 5, 00 1 CD (2bd , 1H), 3,oo — w, ^ ( *, < 3,20 (n, 2H) , 2,60 - 2,48 (m , 1 1/3 H) , 2,30 (dt, 1/3 u 4 * / 2,00 (s, 1H), 1,98 (s 3, 2H), 1,81 - 1,4 C (η, -H), 1,35 ( 3 2.H) , 1,33 (s, 2H) , 1, ,32 (s, 1H), O CO «—1 i= i - ' i 5 5 _ 1, (m, 1H) , 1,10 - 1, 00 (m, 1H) , o, Iv) o o. • 1 12 H . Příklad 23 N-[1(R)-[(i,2-dihydro-l-benzensulřonylsp -3,4' -piperidin] -1' —yX) karbonyl] -2- (indci-3-yi) etyi] -2-amino-2-metylpropanamid__ v

Do 26 mg (0,050 mmol) meziproduktu vyrobeného v části D příkladu 21 v 1,0 ml 1,2-dichloretar.u a 5 μΐ N-metylmorfolinu se při teplotě 0°C přidá 7,5 μΐ ber.zen-sulfonylchloridu a vzniklá směs se 1 hodinu míchá. Po zředění 10 ml eterem se reakční směs promyje 5 mi 10% vodné kyseliny citrónové, 5 ml nasyceného roztoku uhličitanu sodného, suší se nad bezvodým síranem hořec- ; natým, filtruje se a zahustí za vzniku 29,3 mg bledě žlutá pěny surového produktu. Do roztoku tohoto produktu ve 2 ml metanolu se přidá 1,0 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové a vzniklá směs se 1 hodinu míchá. Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku za vzniku hnědé pevné látky výsledné sloučeniny jako směs rotamerů poměru 3:2. H) , 8,20 (ši roký 1/3 H), 7,72 -05 (a, 2H), j ,25 - 5,10 (ni, 1H-NMR (400 MHz, CDCl^: 8,30 (široký s, 1/3 s, 2/3 H), 8,05 (široký s, 2/3 H), 7,88 (d, 7,45 (m, 5H), 7,43 - 7,30 (m, 4H), 7,20 - 7, 7,00 - 6,90 (m, 2 2/3 H), 6,35 (d, 1/3 H), 5 1H), 4,90 (široký s, 1H), (dd, 1H), 3,60 - 3,40 (m, 4,30 (dt, 1H), 4,15 (dt, 1H), 3,95 3H), 3,25 - 3,20 (m, 2H), 2,90 (dt, 113 1H), 2,73 (ft, 2 2/3 H), 2,35 (η, 1 1/

1,50 (s, 1H), 1,43 (s, 2K), 1,39 (s, 3 2H) , 1,00 (bd, 1/3 H), 0,90 - 0,70 (m, H), 0,43 (dd, 2/3 H), -0,90 (dt, 1/3 H 1.2C ( (cd, 1 24 Příklad N- [1 (R) - [ (1,2-dihydro-l-metansulfonylspiro í2K-indol--3,4'-piperidin]-1'-yl)karbonyli-2-(indoi-2-yi)etyl ] - 2-anino-2-met ylpropanamid hydrochlorid_

Do roztoku 0, 258 g (0,50 mmcl) meziproduktu vyrobeného v části D příkladu 21 v 10 mi suchého dichlormetanu se při teplotě 0°C přidá 0,33 ml (1,00 mm.cl N-metylmorfolinu 45 μΐ (0,60 mmol) mezansulřonyichioridu a vzniklá směs se 30 minut míchá. Po zředění 10 ml eteru se reakčr.í směs promyje 5 ml nasyceného roztoku uhličitanu sodného a 5 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad bezvodým síranem hořečnatým, filtruje se a zahustí za vzniku bledě žlutá pěny meziproduktu, která se bez dalšího čištění použije v následujícím postupu syntézy.

Do roztoku meziproduktu v 3 ml dichlormetanu se přidá do 1,0 ml kyseliny trifluoroctové a vzniklá směs se při teplotě místnosti 1 hodinu míchá. Reakční směs se zahustí, přidáním 5 ml 10% vodného roztoku uhličitanu sodného se přivede na zásadité pH a extrahuje se třikráz 5 ml chloroformu. Sloučené organické podíly se promvjí 10 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad uhličitanem draselným, filtruje se a zahustí za vzniku hustého oleje. Do roztoku tohoto oleje v 3,0 ml metanolu se přidá 200 μΐ 4M kyseliny chlorovodíkové v dioxanu a po zahuštěni dosucha vznikne 98 mg bledě žluté pevné látky výsledné sloučeniny jako směs rotamerů v poměru 3:2. 114 114 1H-NMR (^CO MHz, CD3OD): 8,43 (d, 1H), 8,35 (d, 2/3 H), 7,61 (d, 1/3 H), 7,40 - 7,25 (n, 7,08 (m, 3H}, 7,05 - 6,95 (m, 2 2/3 H), 6,5C 5.25 - 5,10 (m, 1H), 5,CO - 4,84 (2bd, 1H), (m, 3H), 3,20 U, 2H), 2,82 (3, 1H), 2,30 ( 2,43 (η, 1 1/3 H), 2,30 (dt, 1/3 H), 1,51 -1,35 (s, 2H) , 1,33 (s, 2H), 1,32 (s, 1H), 1, 1.25 - 1,15 (m, 1H), 1,10 - 1,00 (m, 1.-:), O, ;, 7,72 7,20 - 1 i/3 h:, ( Λ s

O ( i

f -5 1 u ' S# 1 ‘ / J O (dt, 1/3 H Příklad 25 N- [1 (R) - [ (1/ 2-dihydro-l-metansulfonylspiro [3K-indcl--3,4'-piperidin]-1'-yl)karbonyl]-3-fenyipropyi]--2-aroin.o-2-metylpropanaruid hvdrochlorid__i Část A: N- [1 (R) - [ (1,2-dihydro-l-raetansulfonylspirc-[3H-indol-3,4 '-piperidin] -l'-yl) karbonyl - í -3-fenylpropyl]-2-[ (1,1-dinetyietoxy) - karbonvl] araino-2-metylprcpanar.id _ _ —— - - “ -- — | Výsledná sloučenina se vyrobí z (2R)-2- -[ (1,1-dimetyletoxy) karbonyl] amino]-4-řenylbutanové ! kyseliny a 1,2-dihydro-l-metylsulfonylspiro [3H-indol- -3, 4'-piperidin] hydrochloridu podle postupu uvedeného v| příkladě 18, část B. Surový produkt se po absorbci na sloupec silikagelu čistí chromatografií při eluci 5% acetonem. v metylenchloridu. 1H-NMR (400MHz, CDClg): 7,2 (ra, 9H), 4,9 (m, 1H), 4,5 (m, 1H), 3,8 (m, 2H), 3,2 (m, 2H), 2,9 (s, 3H), 2,7 (m, 2H) , 2,3 (s, 2H), 2,0 (m, 2H), 1,7 (m, 4H), 1,5 (s, 6H), 1,4 (s, 9H) . 115 N- [1 (R) - [ (1,2-dihydro-I-metar.sulřonylspirc-- [3H-indol-3, 4 '-piperidin]-1' — yl) karbcnyl} --3-fenylpropyi] -2-anino-2-metyiorocanamiá Část 3: hydrochlorid_

Sloučenina se vyrobí podle postupu uvede ném v příkladě 13, část C za použití meziproduktu připraveného v části A tohoto příkladu jako výchoz, sloučeniny.' 1H-NMR (4C0 MHz, CD3OD) : 7,3 (m, 9H) , 4,5 (m, 1H) , 3,9 (m, 2H), 3,5 (m, 2H), 3,2 (m, 2H), 2,9 (s, 3H), 2,7 (m, 4H), 2, (m, 4H), 1,6 (s, 6H). Příklad 26 N- [1 (R) - [ (1,2-dihydro-l-tri£luormetansulfonyl-5-řluor--spiro- [3H-indol-3, 4'-piperidin] -1'-yl) karbony!] -3--fenvlpropyl] -2-amino-2-metylopanamid trifluoracetát _ Část A: 1,2-dihydro-l-benzylkařbcnyl-5-fluor--spiro-[3H-indol-3, 4'-piperidin]

•O

Do 7,82 g 60% hydridu sodného se přidá hexan a kapalný podíl se dekantuje. Po přidání 11,10 ml (89 mmol) roztoku 2,5-difluorfenylacetnitrilu ve 150 ml DMSO se vzniklá reakční směs míchá 30 minut. Po kapkách se přidá 15,10 g 1-chlormetyletylaminhydrochloridu ve 150 ml DMSO, vzniklá reakční směs se zahřívá 4 hodiny při teplotě 75°C a následně se vlije do 600 g ledu a extrahu se pětkrát 200 ml eteru. Sloučené organické podíly se promvjí třikrát 100 ml 2N kyseliny chlorovodíkové. Sloučené vodné extráty se přivedou na pH = 9 přidáním 50% 116 vodného roztoku hydroxidu sodného a extrahuji se třikrát 200 ml eteru. Sloučené organické extrakty se promyjí ICC ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad uhličitanem horečnatým a zahusti se za vzniku. 15,54 g hustého oleje.

Do 9,90 g lithiumaluminum hydříču v 25C ml DME se při teplotě 0°C přidá po kapkách 24 ml etanelu a následně se refluxuje. Po přidání rozteku hustého oleje v 250 ml DME se vzniklá reakční směs refluxuje 72 hodin a následně se zchladí na teplotu 0°C. Reakce se zastaví přidáním 10 ml vody, 10 ml 15% hydroxidu sodného a 30 mi vody. Vzniklá suspenze se suší nad uhličitanem draselným, filtruje se a zahustí za vzniku 13,6 g hustého oleje. Surový produkt se rozetře s hexany. NHR 200MHz (CDC13} pro 2, 6 g pevné látky prokazuje 75% výtěžek požadovaného soiroindolu.

Do roztoku 1,02 g této směsi v 50 mí metylenchloridu se při teplotě 0°C přidá 1,0 mi trietyi-aminu a 0,80 ml CBZ-C1 a vzniklá směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti. Reakční směs se vlije do 50 ml 5% kyseliny chlorovodíkové, vodný podíl'se oddělí, přivede na zásadité pH - 10 přidáním 50% roztoku hydroxidu sodného a extrahuje se třikrát 25 ml metylenchloridu. Sloučené orgat nické podíly se promyjí 50 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad uhličitanem draselným a zahustí se za vzniku 1,26 g hustého oleje výsledné sloučeniny. 1H-NMR (200 MHz, CDC^): 7,7 - 7,90 (m, 1H), 7,50 - 7,15 (m, 6H), 6,95 - 6,60 (m, 2H) , 5,23 (široký s, 2H·, 3,90 (široký s, 2H), 2,85 (bd, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,20 - 1,30 (η, 4H), j 1,65 (bd, 2H). 117 Část 3; N-[l(R}-[ (1,2-dih.ydro-l-benzylcxykarbcnyl- -5-fluor-spiro-[3H-indcl-3, 4 '-piceridin] -—1' —yl) karbcnylj -2- (indol-3-yl etyl] --[ [ (1/ 1-dimetyletoxy) karbony!] aminc- -2-metylccropanananid______

Do 1,62 g (4,62 mmci) meziproduktu, jehož příprava je popsána v předchozí části A tohoto příkladu 10 ni 1,2-dichloretanu se při teplotě 0°C přidá 0,65 ml ACE-Cl a vzniklá směs se refluxuje I hodinu. Reakční sně se zahustí na třetinu objemu a následně se ředí 10 ml meuar.olem a ref luxu je 1 hodinu. Reakční směs se zahustí dcsucha, rozetře s eterem za vzniku hnědé pevné látky. Tento produkt se rozpustí ve 25 mi nasyceného roztoku uhličitanu sodného a extrahuje se dvakrát 25 mi dichior-metanu. Sloučené organické extrakty se suší nad uhličitanem draselným a zahustí se za vzniku 0,384 g volných basi.

Do 0,384 g tohoto produktu v 15 ml mety-lenchloridu se přidá 0,483 g kyselého meziproduktu, jeho příprava je popsána v části C příkladu 21, 0,189 g 1-hydroxybenztriazolu a 0,34 g EDC a vzniklá směs se 18 hodin míchá. Po vlití reakční směsi do lOml vody a extrakci dvakrát 10 ml metylechlortidu se sloučené organické podíly promyjí 20 ml 10% kyseliny chlorovodíkové, 20 ml nasyceného roztoku hvdrogenuhličitanu sodného, suš se nad síranem hořečnatým a zahustí se. Vzniklý zbytek s čistí po absorbci na 25 g silikagelu rychlou cn x* oiud u c grafií při eluci směsí hexanu a acetonu v perněru 1:1. Vzniklo 0,389 g výsledné sloučeniny. 118 1H-NMR (200 MHz, CDC13): 7,7 - 7,90 (a, 1H!, 7,50 - 5,15 (m, 6H), 5,95 - 6,60 (m, 2H), 5,2S (široký s, 2H), 3,9C (široký s, 2H), 2,85 (bd, 2H), 2,30 (s, 3H', 2,20 - 1,80 (a, 4H), 1,65 (bd, 2H). Část C: N-[l(R)-[ (1,2-dihydro-5-řluor-spirc- - [3H-indol-3, 4 '-piperidir.] -1' — yl) karbony 1'. --2-(indol-3-yl) etyl]-[ [ (1, 1-dimetyletyloxy' f* -karbonyl] amino] -2-metylopanamid_j_

Do roztoku 0,363 g meziproduktu vyrobeného! v části B tohoto přikladu v 5 ml etanolu se přidá 0,10 g 20% hydroxidu paladia na aktivním unii a hydrogenuje se 1 hodinu pcd baňkou s obsahem vodíku. Katalyzátor se oddělí filtrací a prcmyje se metanolem. Filtrát se zahustjí za vzniku 0,262 g jako směsi dvou rotamerů v poměru 2:1 výsledné sloučeniny. 1H-NMR (400 MHz, CDC13): 8,85 - 8,60 (2bs, 1H), 7,70 (d, 2/3 H), 7,55 (d, 1/3 H), 7,38 (d, 2/3 K), 7,30 (d, 1/3 H), 7,28 - 7,15 (m, 4H), 7,13 - 7,02 (m, 2H), 6,65 (dt, 2H) , 6,50 (dd, 1/3 H), 6,45 (dd, 2/3 H), 6,14 (dd, 2/3 H), 5,30 - 5,13 (m, 1H), 5,10 (široký s, 1H), 4,30 (bd, 2/3 H) , 4,22 (bd, 1/3 H), 3,50 - 3,30 (m, 1H), 3,30 - 3,00 (m, 4H) , 3,00 - 2,80 (m, 1H), 2,73 (t, 1H), 2,53 - 2,40 (m, 11/3 H) , 2,20 (ť, 1/3 H), 1,49 (S, 3H), 1,45 (s, 3H), 1,41 (s, 9H), 1,20 (dt, 1/3 H), 0,95 (bd, 2/3 H), 0,90 (dt, 2/3 H), -0,05 (dt, 1/3 H) . 119 Část D: N- [i (R) -[ (1, 2-dihydro-l-triřiucrmezan- -sulfonyl-5-flucr-spirc-[3H-ir.dol-3,4 ' -piperidin] -1' -yl) karbony 1 i -2- íindci-3-yl. -etyi] - [ [ (1,1-dinetyletyicxy) karbcrylj -ainino] -2-metylccananid __

Do roztoku 30 mg meziproduktu připraveného v části C tohoto přikladu v 1 ml dichlcrmetanu se při teplotě 0°C přidá 0,050 ml trietylaminu a 0,020 ml anhydridu kyseliny trifluoroctové a vzniklá směs se míchá 5 minut. Katalyzátor se oddělí filtrací a promyje nadbytkem metanolu. Po vlití reakční směsi do 5 ml 5% vodného roztoku uhličitanu sodného se vzniklá směs míchá 5 minut. Vodný podíl se extrahuje dvakrát 5 mi metylenchlo-ridu a sloučené organické podíly se suší nad síranem horečnatým, filtruje se a zahustí. Po abscrbci na 3 g silikagelu se vzniklý zbytek čistí rychlou chromatografií při eluci směsí metylenchloridu a acetonu v poměru 4:1 za vzniku 21 mg výsledné sloučeniny jako směs rocamerů poměru 2:1. 1H-NMR (400 MHz, CDC13): 8,40 (široký s, 2/3 H), 8,25 (široký s, 1/3 H), 7,70 (d, 2/3 H), 7,60 (d, 1/3 H), 7,40 (d, 2/3 H), 7,35 - 7,10 (m, 5H), 6,90 - 6,80 (m, 2H), 6,18 (dd, 1K), 5,30 - 5,13 (m, 1H), 4,95 (široký s, 2/3 H), 4,90 (s, 1/3 H), 4,45 (bd, 2/3 H), 4,35 (bd, 1/3 H), 3,85 - 3,70 (m, 2H), 3,70 - 3,55 (m, 2H), 3,30-3,10 (m, 2H), 2,70 (t, 1H), 2,^5 (t, 1/3 H), 2,35 (t, 2/3 H), 1,49 (s, 3H), 1,45 (s, 3H), 1,41 (s, 9H), 1,20 (dt, 1/3 H), 0,95 (bd, 2/3 H), 0,90 (dt, 2/3 H), -0,05 (dt, 1/3 H). 120 Část E: N-[1(R)-[ (1, 2-dihydro-l-triflucrmezan- -sulfonyl-5-flucr-spiro [3H-ir.dcl-3, 4 ' --piperidin] -1' -yl) karbor.yl; -2- ; ir.dcl-3--yl) etyl] - 2 - a m i n o - 2 - m e t y 1 p r c p z r. a r i d trifluoracetát_

Do roztoku 21 mg meziproduktu vyrobeného v části D tohoto přikladu v 1 ml dichlrcmezarvu a se přidá 1 ml kyseliny trifluoroctové a vzniklá směs se 30 mir.ur michá při teplotě místnosti. Rodil těkavých látek se odpaří aosucha a zbytek se rozetře s eterem za vzniku žluté pevné látky směsi rotamerú v poměru 2:1 výsledné sloučeniny. í 3H) ,

1H-NMR (400 MHz, CD30D): 7,65 (d, 2/3 H), 7,50 (d, 1/3 HD 7,42 (d, 2/3 H), 7,35 - 7,10 (m, 5H), 6,93 - 6,80 (m, 2H) 6,24 (dd, 1H), 5,30 - 5,13 (m, 1K) , 4,95 (široký s, 2/3 fí 4,90 (s, 1/3 H), 4,45 (bd, 2/3 H), 4,35 (bd, 1/3 H), 3,85 - 3,70 (m, 2H), 3,70 - 3,55 (m, 2H), 3,30 - 3,10 (m, 2H) , 2,70 (t, 1H), 2,45 (t, 1/3 H), 2,35 (t, 2/3 H), 1,49 (s, 1,45 (s, 3H), 0,93 (bd, 2/3 H), 0,90 (dt, 2/3 H), -0,05 (dt, 1/3 H). Příklad 27 N- [1 (R) - [ (1/ 2-dihydro-l- [metoxykarbonyl]metylsulfonyl-3- j fluor-spiro- [3H-indol-3, 4 '-piperidin] ] -1 '-yl) karbonyl] -2-j

I - (indol-3-yl) etylj -2-amino-2-metylpropanamid trifluoracetát 121 cás~ A: N- [ 1 (R) - [ (1, 2-dihydro-l-fmetexvkarbr'"·* · ’ - * * j ~ j — -metylsulfcnyl-5-flucr-spiro- Ι3Η-1ηά01 _ -3, 4 '-piperidin] ] -1' —yl} karbcnyl] -2- ;irdcl--3-yl) styl] -2-metylcpanamid triflucr~? - £ Dc roztoku 77 mg meziproduktu připraveného v části C přikladu 26 v 1 ml dichlormetar.u se při teolotí 0°C přidá 0,30 ml N-metyimorčolinu a 0,024 ml 2-karbc— metoxymetansulřcnylchloridu a vzniklá reakčni směs se 1 hodinu míchá. Po vlití reakčni směsi do 5 ml 5% vodného rozteku uhličitanu sodného a 5 minutách míchání se vodnv pedíi dvakrát extrahuje 5 ml metylnchloridu a sloučené organická extrakty se promyjí 5 mi nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad síranem hořečnatým, filtrují se a zahustí. Po absorbci na 5 g silikagelu se vzniklý zbytek čistí rychlou chromatografií při eluci směsí mety-lenchloridu a acetonu v poměru 4:1 za vzniku 64 mg směsi rotamerů v poměru 2:1 výsledné sloučeniny. 1H-NMR (400 MHz, CDC13) : 8,48 (široký s, 2/3 H) , 8,35 (široký s, 1/3 H), 7,70 (d, 2/3 H), 7,60 (d, 1/3 H), 7,40 (d, 2/3 H), 7,32 (d, 1/3 H), 7,25 - 7,00 (m, 4K), 6,90 - 6,78 (m, 2H), 6,18 (dd, 1H), 5,30 - 5,20 (m, 1H), 4,97 (široký s, 2/3 H), 4,91 (s, 1/3 H), 4,50 - 4,35 (2bd, 1H), 4,02 (s, 2/3 H), 3,99 (s, 1/3 H), 3,76 (q, 2H), 3,53 (s, 1H), 3,56 (s, 2H) , 3,08 - 3,07 (m, 2H), 2,72 (t, 1H), 2,50 - 2,30 (2t, 1H), 1,65 (t, 1/3 H), 1,50 (s, 2H) , 1,46 (s, 4H), 1,40 (s, 9H) , 1,30 (m, 1/3 H), 1,10 (bd, 2/3 H' , 0,SS (dt, 2/3 H), -0,13 (dt, 1/3 H). 122 Část B: N-(l(R)-[(l,2-dihydro-i-[metoxykarbcr.yl]- -metylsulfonyl-5-fluor-spiro í3K-ir.dci-3, 4 piperidin] ] —1' —yl) karbony!]-2- (indoi-3-yl etyl]-2-amino-2-metylpropanamid triflucr- acetát_________

Do roztoku 24 mg meziproduktu připraveného v části A tohoto přikladu v 1 ml dichicrnezar.u a 1 mi kyseliny trifluoroctové se při teplotě místnosti 30 minut michá. Pódii těkavých látek se odpaři dcsucha a zbytek se rozetře s eterem za vzniku 23 mg bezbarvá pevná látky výsledné sloučeniny jako směs rotamerů v poměru 2:1. ; 1H-NI4R (400 MHz, CD30D) : 8,70 (široký s, 1/3 H) , 8,60 (si s, 2/3 H), 7,60 (m, 2/3 H), 7,50 (d, 2/3 H), 7,48 (m, 1/3 H), 7,40 (d, 2/3 H), 7,31 (d, 1/3 H), 7,25 - 7,00 (m, *K) 6,95 - 6,85 (m, 1H), 6,70 (dd, 1/3 H) , 6,15 (dd, 2/3 H) , ! 5,20 - 5,10 (m, 1H), 4,38 (bd, 1/3 H) , 4,28 (bd, 2/3 H) , j 4,02 (s, 2/3 H), 3,99 (s, 1/3 H), 3,76 (q, 2H), 3,58 (s, 3,56 (s, 2H), 3,08 - 3,07 (m, 2H), 2,72 (t, 1H) , 2,50 - 2 (2t, 1H), 1,65 (t, 1/3 H), 1,65 (s, 2H), 1,60 (s, 4H), 1, (m, 1/3 H), 1,00 (bd, 2/3 H), 0,88 (dt, 2/3 H), -0,10 (dt 1/3 H). reky »

,30 30 » Příklad 28 N-[1(R)-[(i, 2-dihydro-l-metansulfonyl-5-fluor-spiro- [3H--indol-3, 4 '-piperidin] -1 '-yl) karbonyl] -2- (fenylmetyloxy) --etyl] -2-amino-2-metylpropanamid hydrochlorid____ 123 Část A: N- [1 (R) - [ (1,2-dihydro-l-benzyloxykarbonyl]- -5-fluor-spiro[3H-indol-3,4'-piperidin]]--1'-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]--[[(1,1-dimetyletyloxy)karbonyl]amino]-2- -metylpropanamid_

Do roztoku 0/330 g meziproduktu vyrobeného v čászi A přikladu 26 1,2-dihydro-i-benzyioxykarbonyl- -5-fiuor-spiro [3H-indol-3, 4 '-piperidinu] v 10 ml 1,2-dichlormetanu se při teplotě místnosti přidá 0,35 g N-tBOC-O-benzyl-D-serinu, 0,195 g 1-hydroxybenztriazolu a 0. 30 g EDC a vzniklá směs se 18 hodin míchá. Po vlití reakční směsi do 10 ml vody se reakční směs extrahuje dvakrát 10 ml metylenchloridu. Sloučené organické podíly se promyjí 20 ml 10% kyseliny citrónové, 20 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, suší se nad síranem hořečnatým a zahustí.

Do roztoku meziproduktu získaného v části A v 5 ml metylenchloridu se přidá 5 ml kyseliny trifluor-octové a vzniklá směs se 30 minut míchá. Po zahuštění a zředění 5,0 ml dichlormetanu se směs opatrně přivede na zásadité pH přidáním 10 ml 10% vodného roztoku uhličitanu sodného. Organický podíl se oddělí a- vodný podíl se dále extrahuje dvakrát 15 ml dichlormetanu. Sloučené organické podíly se promyjí 5 ml vody, suší se nad uhličitanem draselným, filtrují se a zahustí za vzniku 0,39 g aminu jako hustého oleje.

Do 0,39 g takto vzniklého produktu v 10 ml 1, 2-dichlormetanu se při teplotě místnosti přidá 0,24g N-t-30C-a-metylalaninu 0,195 g 1-hydroxybenztriazolu a 0,30 g EDC a vzniklá reakční směs se 18 hodin míchá. Po vlití směsi do 10 ml vody se vzniklý roztok extrahuje dvakrát 10 ml metylenchloridu. Sloučené organické podíly se promyjí 20 ml 10% kyseliny citrónové, 20 ml nasyceného 124 roztoku hydrcgenuhličitanu sodného, suši se nad síranem hořečnatým a zahustí. Vzniklý zbytek se po acscrbci na sloupec 30 g silikagelu čistí rychlou chrcrr.atcgrařií při i eluci směsí hexanu a etvlacetátu v poměru 2:1 za vzniku 0,33 g výsledné sloučeniny. 1H-MMR (200 MHz, CDC13): 7,80 (široký s, 1K; , 7,50 - 7,15 (m, 5H) , 7,10 (bd, 1H), 6,90 - 6,70 (m, 1H) , 6,27 (bd, 1H) , 7,35 - 7, lo (m, 5H), 5,35 - 5,10 (ra, 3H) , 4,99 (s, 1H), 4 -4,40 (m, 3H), 3,90 -3,50 (m, 4H), 3,15 - 2,90 (m, 2H), 2,80 - 2,50 (m, 2H) , 1,80 - 1,40 (m, 2H) , 1,50 (3H), 1,42 (s, 6H). Část B: N-[l(R)-[(l,2-dihydro-5-fIuor-spiro[3H--indol-3, 4 ' -piperidin] -1' -yl) karbonyl ] --2-(fenylmetyloxy)etyl]-(Γ (1, i-dimetyl--etoxy) karbonyl] amino j -2-mecylpropanamid Do roztoku 0,330 g meziproduktu vyrobeného; v části A tohoto příkladu v 5 ml etanolu se přidá 1 kapka trietylaminu a vzniklá směs se pod baňkou s obsahem vodíku 3 hodiny hydrogenuje. Katalyzátor se oddělí filtrací přes i celit a promyje se etylacetátem. Filtrát se zahustí za vzniku 0,269 g bezbarvé pěny výsledné sloučeniny. H-NMR (400 MHz, CDC13): 7,35 - 7,20 (m, 4H) , 7,17 - 7,08 i (m, 2H), 6,80 - 6,65 (m, 2/2/3 H), 6,27 (dt, 1/3 H), 5,20;

O - 5,10 (m, 1H), 4,90 (s, 1H), 4,60 - 4,40 (:„ 3H) , 4,00 j (bt. 1H), 3,75 - 3,60 (m, 1H) , 3,55 - 3,40 (m, 3H), 3,18 4 3,30 (m, 2H), 2,90 - 2,65 (m, 1H) , 1,83 - 1,50 (m, 4H), 1^48 (s, 4H), 1,42 (s, 2H), 1,39 (s, 9H). 125 Část C: N— [1 (R) — [ (1,2-dihydro-i-neíar.sulřcnyi- -5-fluor~spi.ro [3K-ir.dol-3,4 ' -piperidin] ] --1'-yl) karbony! j-2-; řenylmetylzxy etyl] -- [ [ (1, 1-dinetyletylcxy; karbcnyl] amine] -2- -metylpropanamid_

Do roztoku O,134 g meziproduktu vyrobeného v části B tohoto příkladu v 5 ml dichlcrmetar.u se přidá 0,080 ml N-metylmorfolinu a 0,022 ml metansulfcnylchlcridu a vzniklá směs se 30 minut míchá při teplotě 0°C. Po zředění 5 ml dichlormetanu se reakční směs promyje 5 mi nasyceného roztoku uhličitanu sodného a 5 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad bezvodým síranem hořečnatým a zahustí se. Vzniklý zbytek se po abscrbci na sloupec 20 g silikagelu čistí rychlou chrcmatografií za vzniku 0,101 g výsledné sloučeniny. 1H-rIMR (4C0 MHz , CDC13): 7 ,40 - 7,20 (m , 5i r.) , 7,08 (d, 1H) , 6,95 - 6 , 80 (m, 2/1/3 H), 6,23 (dd, 2/3 H) , 5,20 - 5,10 (m, 1H) , 4,90 (široký s, 1H), 4,60 (bd, 2/3 H) , 4,58 - 4,40 (m, 3/1/ 3 H) , 4,10 - 4,00 (m, 1H) , 3,88.- 3 ,70 (m, 21/3 H) , 3,66 - 3, 60 (m , 1/2 H) , 3,60 - 3,50 (m, 1H), 3, 10 - 2,59 (m, 1H) , 2,86 (s, 1H) , 2 ,84 (s, 2H) , 2, 80 (t, 1/ 3 H ) , 2,65 ( t, 2 /3 H), 2,90 -2,50 (m, 4H), 1 ,45 (s, 4H), 1,4 4 (s, 2H) , 1, 42 (s, 3H), 1,40 (s, 6H). Část D: N- [1 (R) - [ (1,2-dihydro-l-metar.suifony 1-5- -fluor-spiro- [3H-indol-3,4 ' -piperidin] --1 '-yl) karbonyl] -2- (fenylmetyioxyi -etyl] --2-amino-2-metylpropanamia hydrochlorid 126

Do roztoku 0/101 mg meziproduktu připraveného v části C tohoto přikladu v 1 ml dichlořmetanu se přidá 1,0 ml kyseliny triřlucrcctové a vzniklá směs se teplotě místnosti 30 minut míchá. Po odpařováni dcsucha se vzniklý zbytek přivede na zásadité pK přidáním 10 ml 10% vodného roztoku uhličitanu sodného ^a následně se extrahuje třikrát 5 ml dichlormetanu. Sloučené organické podíly se promyjí 5 ml nasyceného rozteku chloridu sodného, suší se nad uhličitanem draselným a zahustí se. Po rozpuštění vzniklého zbytku ve 2 ml etylacetátu se do vzniklého roztoku přidá 0,10 ml 4M kyseliny chlcrovcdí kové v etylacetátu při teplotě 0°C. Sraženina se oddělí filtrací pod dusikem a promyje se směsí etylacetátu a eteru v poměru 1:1. Po sušení vznikne 52 mg bílé pevné látky výsledné sloučeniny . H-MMR (400 MHz, CD30D): 7,40 - 7,20 (m, 5H), 7,08 (d, 1H) , 6,95 - 6,80 (m, 2/1/3 H), 6,23 (dd, 2/3 H), 5,20 - 5,10 (rt, 1H), 4,60 (bd, 2/3 H), 4,58 - 4,40 (m, 3/1/3 H) , 4,10 - 4 ,Í00 (m, 1H), 3,88 - 3,70 (m, 2 1/3 H), 3,66 - 3,50 (m, 1/2 H) , 3,60 - 3,50 (m, 1H), 3,10 - 2,95 (m, 1H), 2,86 (s, 1H), 2,84 (s, 2H), 2,80 (t, 1/3 H), 2,65 (t, 2/3 H), 2,90 - 2,50 (m, 4H) , 1,45 (s, 4H) , 1,44 (s, 2.H) . Příklad 29 Část A: N- [1(R)-[(1,2-dihydro-l-benzensulfonyi-5- fluor-spiro[3H-indol-3, 4'-piperidin]]-1'--yl)karbonyl]-2-(fenvlmetyloxy^ etyl]-2-amino-2-metylpropanamid trifluoracetát 127

Do roztoku 0,026 g meziproduktu připraveného v části 3 přikladu 27 ve 2 ml dichlormetar.u se přidá 0,020 mi N-metylmcrfolinu a 0,012 ml benzensulřcnyichic-ridu a vzniklá reakční směs se při teclctě 0*0 1 hodinu míchá. Pc vlití reakční směsi do 10 ml eteru se směs prcmyje 5 mi nasyceného roztoku uhličitanu sodného, suší se nad síranem horečnatým a zahustí. Pc absorbci na 10 z siiikagelu se vzniklý zbytek čistí rychlou chrcmatograíií při eiuci směsí metyler.chloridu a eteru v poměru 2:1 za vzniku 0,019 g produktu.

Na takto vzniklý produkt se působí 1 ml dichicr-metanu a 1 ml kyseliny trifluoroctové 1 hodinu. Reakční směs se odpařuje dosucha a vzniklý zbytek se rozetře s eterem za vzniku 18 mg bílé pevné látky výsledné sloučeniny. ‘ 1H-NMR (400 MHz, CD30D): 7,80 (d, 2H), 7,70 - 7,55 (m, 2H), 7,55 - 7,50 (m, 2H) , 7,40 - 7,20 (m, 4 2/3 H), 7,o3 - 5,92 (m, 1H), 6,82 (dt, 2/3 H), 6,47 (dt, 2/3 H), 5,08 (dt, 1H), 4,60 - 4,48 (m, 2H), 4,33 (bt, 1H), 3,94 - 3,85 (m, 3H), 3,75 - 3,55 (m, 2H), 3,10 (dt, 1H), 2,80 (dt, 1H), 1,73 (dt, 1H), 1,50 (s, 4H), 1,55 (s, 2H), 1,50 (dt, 1H), 1,38 (dt, 1H), 1,10 (dt, 2H). Příklad 30 N-[1(R)-[(1,2-dihvdro-l-ethansulřonyl-spiro[3H--indol-3,4'-piperidin]]-1'-yl)karbonyl]-2-(řenyl-metyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropanamid hydrochlorid 128 Část A: N- [1(R)-[ (1,2-dihydro-l-benzyicxyk, cr.vu. - -spiro [3H-indci-3, 4 '-piperidinj ] -1' —yl) --karbonyl]-2-{íenyimetyloxy)etyl ] - Γ' : 1,1-dimetyletyloxy) karbonyl] amino] -2-mezyi- propanaagg

Do roztoku 5 g 1,2-dihydro-l-cer.zylkarbcr.yl -5-řIucr-spiro-[3K-indol-3, 4'-piperidir.] hydrochlcridu v 100 ml dichlormetanu se při teplotě místnosti přidá 3,c4 |g N-t3CC-0-benzyl-D-serinu, 1,83 g 1-hydrcxybenztriazoiu, 2,60 ml N-metylmorfolinu a 3,70 g EDC a vzniklá směs se 18 hodin míchá. Po vlití reakční směsi do 100 mi vody se I reakční směs extrahuje dvakrát 100 ml metylenchloridu. Sloučené organické podíly se promyjí 100 mi 10% kyseliny citrónové, 100 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, suší se nad síranem hořečnatým a zahustí se.

Do roztoku meziproduktu získaného v části A ve 20 mi metylenchloridu se přidá 20 ml kyseliny trifiuor-octové a vzniklá směs se 30 minut míchá. Po zahuštění a zředění 50 ml dichlormetanu se směs opatrně přivede na zásadité pH přidáním 100 ml 10% vodného roztoku uhličitanu sodného. Organický podíl se oddělí a vcdný podíl se dále extrahuje dvakrát 50 ml dichlormetanu. Sloučené organické podíly se promyjí 50 ml vody, suší se nad uhličitanem draselným, filtrují se a zahustí za vzniku aminu jako hustého oleje.

Do takto vzniklého produktu v 50 ml dichlormetanu se při teplotě místnosti přidá 2,50 g N-t-BOC-a-metvlalaninu, 1,83 g 1-hydroxybenztriazolu a 3,70 g EDC a vzniklá reakční směs se 18 hodin míchá. Po vlití směsi do 10 mi vody se vzniklý roztok extrahuje dvakrát 10 ml metylenchloridu. Sloučené organické podíly se promyjí 20 ml 10% j kyseliny citrónové, 20 ml nasyceného roztoku hvdrogen- 129 uhličitanu sodného, suší se nad s i raněn, horečnatým a zahusti. Vzniklý zbytek se po absorbci na sloupec 300 g siiikagelu čisti rychlou chromatcgrafií při eluci směsí hexanu a etylacetátu v poměru 2:1 za vzniku 3,1 g výsledné 'ή-ΜΜΗ (400 MHz, CDC13): 7,85 (m, 10H), 7,20 - 7,05 (m, 22/ (t, 1/3 H) , 6,53 (dd, 2/3 H), 5,10 (m, 1H), 4,92 (široký s, 4,05 (bd, 2/3 H), 4,00 - 3,80 1H), 3,10 (t, 2/3 H), 3,00 -(21, 1H), 1,90 - 1,55 (m, 5H) 1,40 (s, 9H) . (široký s, 1H, 7,45 - 7,20 H), 6,95 (t, 1 · ^ ' , 6,33 5,35 - 5,20 (“, — · · / ? 5,20 - 1H), 4,65 - 4,2 0 (m, . / t (tn, 1 1/3 H), 3 , 80 - 3,60 ( ,85 (m, 1/3 H), 2,82 - 2,60 1,49 (S, 4H), 1,42 (s, 2H), Část B: N-[1(R)-[(1,2-dihydro-spiro[3H-indol-3,4 -piperidin] ] -1'-yl) -karbcr.yl] -2- (fenyl-metyloxy)etyl]-[[(1,1-dimetyletoxy)- karbonyl]amino]-2-metylpropananid_

Do roztoku 8,10 g meziproduktu vyrobeného v části A tohoto přikladu v 80 ml etanclu se přidá lg 20% hydroxidu paladia na aktivním uhlí a vzniklá směs se pod baňkou vodíku 1 hodinu hydrogenuje. Katalyzátor se oddělí filtrací přes celit a promyje se etylacetátem. Filtrát se zahustí za vzniku 4,69 g bezbarvé pěny výsledná sloučeniny. 1H-MMR (400 MHz, CDC13): 7,35 - 7,20 (n, 5H), 7,18 (d, 1/2 H), 7,10 (d, 1/2 H), 7,04 - 6,98 (m, 2H', 6.75 - 6,60 (m, 2H), 5,20 - 5,10 (m, 1H), 4,97 (široký s, 1H), 4,55 - 4,40 (m, 3H), 3,95 (dd, 1H), 3,73 - 3,61 (m, 1H), 3,60 - 3,50 130 130 Část C: N- [ 1 (R)-[ (1, 2 -dihvdr o -1 - e z ar.sul fc r.y 1 --spiro[3H-indcl-3, 4'-piperidin]]-1 yl)karbonyl]-2-(fenylmetyioxy)etyl]- -2-amino-2-metylpropanamid_

Do roztoku 0,153 g meziproduktu vyrobeného v části 3 tohoto příkladu v 5 ml dichlormetanu se přidá 0,053 ml N-metylmorfolinu a 0,034 ml etansulfonylchlorid a vzniklá směs se 30 minut míchá při teplotě 0°C a 1 hca: při teplotě místnosti. Po zředění 5 ml dichlormetanu se reakční směs promyje 5 ml nasyceného roztoku uhličitanu sodného a 5 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad síranem hořečnatým a zahustí se. Vzniklý zbytek po absorbci na sloupec 10 g silikagelu čistí rychlou chromatografií při eluci směsí metylenchloridu a eteru v poměru 3:1 za vzniku 0,057 g meziproduktu. (m, 1H), 3,50 - 3,33 (m, 3H), 3,10 (dt, 1H) , 2,8 1,85 - 1,55(m, 5H), 1,47 (s, 4H), 1,42 (s, 2H), (dt, 19 i, s ,

Do roztoku 0,057 g meziproduktu v 1 ml dichlormetanu se přidá 1 ml kyseliny trifluoroctové a vzniklá směs se teplotě místnosti 30 minut míchá. Po odpařování dosucha se vzniklý zbytek rozetře s eterem za •vzniku 0,034 g žluté pevné látky výsledné sloučeniny.

1H-NMH ((400 MHz, CD3CD) : 7,40 - 7,25 (m, 5H) , 7,25 - 7,1^ (m, 21/2 H), 7,03 (t, 1/2 H) , 6,95 (t, 1/2 H), 6,80 (d, 1/2 H), 5,18 (dt, 1H), 4,60 - 4,42 (m, 3H), 4,08 (t, 1H), 3,90 (s. 2H), 3,83 - 3,70 (m, 2H), 3,29 - 3,15 (m, 3H), 2,84 (<k, 1H), 1,90 (dt, 1H), 1,74 - 1,62 (m, 4H), 1,62 (s, 2H), 1,60 (s, 4H), 1,33 (dt, 3H) . I i o klad 31 131 Část A: N- [1 (R) - [ (i, 2-dihydro-l- .'2-netyI-2-prcpan- -suiícnyi-spiro [3H-indol-2, 4 '-piceridin] ] --1'-yl) karbony 1 j -2-(fenylmetylcxy - ezvi; -- [ C í 1/ 1-dimetyletylcxy) karbony!: amine; - -2-netylprcpananid_

Do roztoku 0,212 g meziproduktu vyrobenéh v části 3 přikladu 29 v 2 ml 1,2-dichlcretanu se ořidá 0, 083 ml trietylaminu a 0,054 ml isoprcpylsuiřonyichlc: a vzniklá směs se 30 minut míchá při teplotě 0°C a násl 3 hodiny při teplotě místnosti. Po zředění 5 mi dichio: metanu se reakční směs premyje 5 ml nasyceného roztoku uhličitanu sodného a 5 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad síranem horečnatým a zahustí se. Vzniklý zbytek se po absorpci na sloupec 10 g silikagelu čistí rychlou chromatografií při eluci směsí metylencnloridu a LJ. eteru v poměru 3:1 za vzniku 0,113 g výsledná sloučeniny. Do roztoku 0,101 mg meziproduktu v lml dichlormetanu se přidá 1 ml kyseliny trifluoroctové a' vzniklá směs se teplotě místnosti 30 minut míchá. Po odpařování dosucha se vzniklý zbytek přivede na zásadité pH přidáním 10 ml 10% vodného roztoku uhličitanu sodného a následně se extrahu třikrát 5 ml dichlormetanu. Sloučené organické podíly se promyjí 5 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad uhličitanem draselným a zahustí se. Po rozpuštění vzniklého zbytku ve 2 ml etylacetátu se do vzniklého roztoku přidá 0,10 ml 4M kyseliny chlorovodíkové v etylacetátu při teplotě 0°C. Sraženina se oddělí filtrací pod dusíkem a promyje se směsí etylacetátu a eteru v poměru 1:1. Po sušení vznikne 88 mg bílé pevné látky výsledné sloučeniny . 132 132 'H-NMR (400 MHz , CD30D): 7,40 -7,20 (m 5H) 7,08 (d, iíf. 6,95 - 6,80 (m, 2/1/3 H), 6,23 (dd, 2/3 H), 5,20 - 5,10 ( 1H), 4, 60 ( bd, 2/3 H), 4,58 - 4,40 (mf ; 3/1/3 H), 4 ,1C - A (~, 1H) , 3, 33 - 3,70 (m, 21/3 H), 3,56 - - 3,5' : (~, 1'2 H ' 3,60 - 3,50 (m, 1H), 3,10 - 2, 95 (η, 1H , 2,£ :6 (5 , 1H) , (s, 2H) , 2, 80 ( t,' 1/3 H), 2,65 (t, 2/3 2 ar. _ a sr ^ y 'mJ W (* 4K), 1,45 (s, 4H), 1,44 (s, 2H). Příklad 32 Část A: N- [1 (R) - [ (1, 2-dihydro-l- [2-karbometoxy-metansulfonyl-spiro[3H-indol-3, 4 '-piperi-din] ] -1'-yl)karbonyl] -2- (fenvlmetyloxy) -etyl] - [ [ (1/ 1-dimetyletyloxy) karbony!] -amino] -2-metylpropanamid_

Do roztoku 0,50 g meziproduktu vyrobenéhc v části B příkladu 29 v 10 ml dichlormetanu se přidá 0,21 ml N-metylmorřolinu a 0,10 ml 2-karbometoxymetansulfonyí-chloridu a vzniklá směs se 30 minut míchá při teplotě 0°C. Po zředění 10 ml dichlormetanu se reakční směs promyje 5 ml nasyceného roztoku uhličitanu sodného a 5 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad bezvodým síranem horečnatým a zahustí se. Vzniklý zbytek se po absorbci na sloupec 20 g silikagelu čistí rychlou chromatografií při eluci směsí metylenchloridu a eteru v poměru 3:1 za vzniku 0,529 g výsledné sloučeniny.1

\ I H-NMR (400 MHz, CDC13): 7,39 - 7,20 (m, 5H), 7,20 - 7,ld (m, 21/2 H), 7,08 (dt, 1H), 6,92 (t, 1/2 H), 6,55 (d, 1/2 H), 5,20 - 5,10 (m, 1H), 4,94 (široký s, 1H), 4,60 (bd, 1H) m, 4,53 - 4,40 (m, 2H) , 4,10 (2 široký s, 2H), 4,05 - 3,90 ( 1 I , 133 2H) , 3,70 (dt, 1H), 3,63 (s, 11/2 H), 3,61 (s, 11/2 - 3,50 (a, 1H), 3,05 (dt, 1H), 2,70 (dt, 1 K}, 1,90 (m, 4H), 1,49 (s, 4H), 1,44 (s, 2H), 1,29 (s, 9H . N- [1 (R) -((i, 2-dihydro-l- í2-karbometcxy-metansulfcnyl-spiro [3K-ir.dcl-3,4 '-piperi- din] ] -1' —yl) karbonyl] -2- (řsnylmetylcxy) -etvl] -2-amino-2-metylprocanamid hydrochl 4 Do roztoku 0,113 g meziproduktu v I ml dichlormetanu se přidá 1,0 ml kyseliny triřluoroctové a vzniklá směs se teplotě místnosti 30 minut míchá. Po odpařování dosucha se vzniklý zbytek přivede na zásadité pH přidáním 10 ml 10% vodného roztoku uhličitanu sodného a následně se extrahuje třikrát 5 ml dichlormetanu. Sloučené organické podíly se promyjí 10 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad uhličitanem draselným a zahustí se. Po rozpuštění vzniklého zbytku ve 2 ml etylacetátu se do vzniklého roztoku přidá 0,20 ml 4M kyseliny chlorovodíkové v etylacetátu při teplotě 0°C: Po přidání eteru se sraženina oddělí filtrací pod dusíkem a promyje se eterem. Po sušení vznikne 0,108 g bílé pevné látky výsledné sloučeniny' . 1 1 H-NMR (400 MHz, CD30D) : 7,40 - 7,20 (m, 5H) , 7,08 (d, 1H) , 6,95 - 6,80 (m, 2/1/3 H), 6,23 (dd, 2/3 H), 5,20 - 5,10 (m, 1H), 4,60 (bd, 2/3 H), 4,58 - 4,40 (m, 3/1/3 H), 4,10 - 4,00 (m, 1H), 3,388 - 3,70 (m, 21/3 H), 3,66 - 3,60 (m, 1/2 H), 3,60 - 3,50 (m, 1H), 3,10 - 2,95 (m, 1H), 2,86 (s, 1H), 2,84 (s, 2H), 2,80 (t, 1/3 H), 2,65 (t, 2/3 H), 2,90 - 2,50 (m, 4K), 1,45 (s, 4H), 1,44 (s, 2H). Příklad 33 134 Část A: N- [1 (R) - [ (1,2-dihydro-l - [2-karboxymetar.- sulfonyl-spiro[3K-indoi-3, i ' -ciceri-din] -1' -yl) karbony!j -2- (ier.yirr.e~yloxy · -etyl] - [ [ (1,l-dimetyletyicxy) karbony!] - amino] -2-metylpropanamid trifluoracetát_

Do roztoku 0,126 g meziproduktu vyrobeného ; v části A příkladu 32 v 3 ml metanolu a 1 ml vody se při j teplotě 0°C se přidají 2 kapky 5N vodného roztoku hydroxidu sodného a vzniklá směs se 30 minut míchá. Po okyselení směsi přidáním 0,50 N vodného ropztoku kyseliny chlorovodíkové, ředění 5 ml nasyceného roztoku chloridu sodného s;e směs extrahuje dvakrát 5 ml metylenchloridu. Sloučené organické podíly se promyjí 10 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad síranem horečnatým a zahustí se. Vznikne 0,098 g bílé pěny výsledné sloučeniny. 1H-NMR (400 MHz, CDC13) : 9,80 (široký s, 1H) , 7,45 H), 7,40 - 7,13 (m, 7H), 7,02 (t, 1/2 H), 5,90 (t, 5,50 (d, 1/2 H), 5,22 - 5,10 (m, 1H), 4,60 - 4,40 4,20 - 4,00 (m, 3H) , 3,92 (d, 1H), 3,70 - 5,50 (m, (dt, 1H), 2,70 (dt, 1H), 1,93 - 1,50 (m, 4H) , 1,42 1,33 (s, 9H). (d, 1/2 1/2 H>„ (m, 3H)„ 2H), 3„ 04 (s, 6H), Část B: N-[1 (R)-[ (1,2-dihydro-l-[2-karboxymetan-sulřonyl-spiro [3H-indol-3,4 ' -piperidin] ] --1 '-yl) karbonyl] -2- (řenyimetyloxy) etyl] --2-amino-2-metylpropanamid_ 135

Do roztoku 0,058 g meziproduktu ver.ého v části A tohoto přikladu v 1 ml dichl přidá 1,0 ml kyseliny trifluoroczcvé a vznikl teplotě místnosti 30 minut míchá. ?o odpařcvá vzniklý zbytek se rozetře s eterem za vzniku pevné látky výsledné sloučeniny . 1H-MMR (‘ iOO MHz , CD 30D): 7 ,40 - 7,28 (m, 6H) 7 - 7 (m, 21/ 2 H), , 7, 00 ( dt, 1H) , 6 ,80 (d, 1/2 H) , 5,17 (dt, 4,60 - 4. ,45 (m, 2H) , 4,22 (d, 2H), 4, ,14 - 4, 00 (m, •au w* · / 3,31 - 3 , ,70 (m, 2H) , 3,22 (dt , 1H), í 2,33 (dt , 1H·, 1,9 (dt, 1/ 2 H) , , 1, 80 - 1,64 ( m, 41/2 H), , 1, 62 ( s, 1H) . 1, (S, 5H) e

Příklad 34 Část A: N- [1 (R) - [ (1,2-dinydro-l- [2-hydroxyetan- sulřonyl-spiro [3H-indol-3,4 '-piperidin] ] --l'-yl) karbonyl] -2-(fenylmetyloxy) etyl] --[ [ (1,1-dimetyletoxy) karbonyl] amino] -2- metvlpropanamid triřluoracetát_

Do roztoku 0,222 g meziproduktu vyrobeného části A příkladu 32 ve 2 ml bezvodého tetrahydrofuranu se při teplotě místnosti. přidá 0,48 ml 2M borhydridu litného v tetrahydrofuranu a vzniklá směs se 3 hodiny míchá.

Reakce se ukončí 0,50 ml acetonu, ředí se 15 ml vody a extrahuje se dvakrát 15 ml metylenchloridu. Sloučené organické podíly se promyjí 10 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad síranem hořečnatým a zahustí se 136 2a vzniku 0,27 g bilé pěny. Vzniklý zbytek se pc absorbci na sloupec 10 g silikagelu čisti rychlou chrcmatcgrařii I při eluci směsi metylenchloridu a acetonu v pc.měru 2:1.

Vznikne 0,129 g hustého oleje výsledné slou óh: , 7,20 - 7,1·: ], 6,90 (t, 1/2 Hp , 00 (široký s, 1H)|, , 3,93 - 3,74 (rr., (dt, 2K), 3,00 (dt 1,42 (s, 4H), 1,41 *

(400 MHz, CDC13): 7,32 - 7,20 (rr., (m, 2H), 7,09 (d, 1/2 H), 6,98 (t, 1/2 H 6,54 (d, 1/2 H), 5,17 - 5,10 (m, 1H), 5, 4,61 - 4,39 (m, 3H) , 4,10 - 3,95 (m, 5KÍ 2H) , 3,66 (ddd, 1H), 3,53 (dt, 1H), 3,27 1H), 2,70 (dt, 1H), 1,90 - 1,50 (m, 4H) , (s, 2H), 1,36 (s, 9H). Část 3: N-[l(R)-[ < 1, 2-dihydro-l-[2-hydroxyetar.- sulfonyl-spiro [3H-indol-3,4 ' -piperidin] ] --l'-yl)karbonyl]-2-(fenylmetylcxy) etyl] --2-amino-2-metylpropanamiá trifluoracetát Do roztoku 0,129 g meziproduktu Části A tohoto přikladu v 1 ml dichlormetanu se přidá 1 ml kyseliny trifluoroctové a vzniklá směs se 30 minut míchá Reakční směs se odpařuje dosucha a po rozetření s eterem vznikne 0,113 g bílé pevné látky výsledné sloučeniny.

1H-NMR (400 MHz, CD30D): 7,40 - 7,25 (m, 6Η), 7,25 - 7,13 (m, 21/2 H), 6,98 (dt, 1H), 6,80 (d, 1/2 H), 5,20 - 5,10 (m, 1H), 4,60 - 4,43 (m, 3H), 4,10 - 3,90 (m, 5H), 3,81 -3,70 (m, 2H), 3,40 - 3,33 (dt, 2H) , 3,20 (dt, 1H), 3,82 ( 1H), 2,00 - 1,63 (m, 4H), 1,61 (s, 1H) , 1,58 (s, 5H). Příklad 35 137 Část A: N— [ 1 (’R) — Γ (1,2-dihydro-l-tiřiucr:r.ecan- suiíonyi-spiro [3K-indoi-3,4 ' -piperi-din] -1 '-yl; karbcnyl] -2- (f enylmetylcxy) -etyl] - [ [ (1,1-dimetyletoxy' karbcnyl] - amine] -2-metylpropanamid hydrochlcrid_

Do roztoku 0,150 g meziproduktu vyrobeného v části E příkladu 29 v 5 ml dichlormetanu se přidá 0,10 ml N-metylmorfolinu a 0, 057 ml anhydridu kyseliny tri-fluormetansulfonové a vzniklá směs se 15 minut míchá při teplota 0°C. Po zředění 5 ml nasyceného vodného roztoku uhličitanu sodného se směs extrahuje dvakrát 5 ml dichlormetanu. Sloučené organické podíly se promyjí 5 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad bezvcdým síranem hořečnatým a zahustí se. Vzniklý zbytek se po absorbci na sloupec 10 g siiikagelu čistí rychlou chrcma-tograřií při eluci směsí hexanu a acetonu v poměru 3:1 za vzniku 0,136 g výsledné sloučeniny. 1H- NMR (400 MHz , CDC13): 7,40 (m, 21/2 H) , 6, 53 (d, 1/ 2 H), (m, 1H) , 4,90 ( široký s, 1H) , 3,9 0 (m, 3H) , 3 ,70 (ddd, 1H) , (dt , 1H) , 2, 70 (dt, 1H), 1,93 1,4 o ( S , 2H) , i ,40 (s, 9 H). -7,15 (m, 5H), 7,15 - 6,93 6,53 (d, 1/2 H), 5,20 - 5,10 4,70 - 4,50 (m, 3H), 4,15 - 3,60 - 3,50 (m, 1H), 3,00 - 1,55 (m, 4H), 1,46 (s, 4H), 138 Část 3: N- [1 {R) - [ (1,2-dihydro-i-trifluornetan-sulfonyl-spiro[3H-indol-3,4'-piperi-din]]-1'—yl}karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)-etyl] -2-amino-2-metylprcgar.amid hydrochlcr

Do roztoku 0,136 g meziproduktu v 1 ml dichlormetanu se přidá 1,0 ml kyseliny rriíluoroctcvé a vzniklá směs se teplotě místnosti 30 minut míchá. Po odpařování dosucha se vzniklý zbytek přivede na zásadité pH přidáním 5 ml 10% vodného roztoku uhličitanu sodného následně se extrahuje dvakrát 5 ml etylacetáíu. Sloučené organické podíly se promyjí 5 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad uhličitanem draselným a zahustí se. Po rozpuštění vzniklého zbytku ve 2 ml etylacetátu se do vzniklého roztoku přidá 0,20 mi 4M kyseliny chlorovodíkové v etylacetátu při teplotě 0°C. Po přidání eteru sé sraženina oddělí filtrací pod dusíkem a promyje se eteretn. Po sušení vznikne 0,94 g bílé pevné látky výsledné sloučeniny . i 1H-NMR (400 MHz, CD30D): 7,40 - 7,15 (m, 6H), 7,15 - 6,93 (m, 21/2 H), 6,53 (d, 1/2 H), 5,20 - 5,10 (m, 1H), 4,90 (široký s, 1H), 4,70 - 4,60 (m, 3H), 4,15 - 3,90 (m, 3H)i 3,70 (ddd, 1H), 3,60 - 3,50 (m, 1H), 3,00 (dt, 1H), 2,70 (dt, 1H), 1,93 - 1,55 (m, 4H), 1,46 (s, 4H), 1,43 (s, 2h1.

Příklad 36 I Část A: N- [1 (R) -((1,2-dihydro-l-benzensulfonyl- spiro[3H-indol-3,4'-piperidin]-1'-yl)-karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-aminc--2-metylpropanamid hydrochlorid_[_ 139

Do roztoku 0,418 g meziproduktu vyrobeného v části B přikladu 29 v 3 ml dichiormetanu se přidá 0,30 ml N-metylmorfolinu a 0,022 ml benzensulřonyichloridu a vzniklá směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti. Po zředěni 10 ml dichiormetanu se reakčni směs promyje 10 ml nasyceného rozteku uhličitanu sodného, suší se nad síranem hořečnatým a zahustí se. Vzniklý zbyt sloupec 10 g silikagelu čistí rychlou i,- c Λ a r* c y·

cr.rc og. eluci směsí hexanu a acetonu v poměru 3:1 za vzniku 0,190 g výsledné sloučeniny.

Do roztoku 0,190 mg meziproduktu v 3 mi dichlometanu se přidá 3 ml kyseliny triřiucroctové a vzniklá směs se teplotě místnosti 30 minut míchá. Po odpařování dosucha se vzniklý zbytek přivede na zásadité pH přidáním 5 ml 10% vodného roztoku uhličitanu sodného a následně se extrahuje dvakrát 5 ml etylacetátu. Sloučené organické podíly se promyjí 5 ml nasyceného roztoku chlo-· ridu sodného, suší se nad uhličitanem draselným a zahustí se. Po rozpuštění vzniklého zbytku ve 2 ml etylacetátu se do vzniklého roztoku přidá 0,40 ml _4H kyseliny chlorovodíkové v etylacetátu při teplotě 0°C. Pc přidání eteru se sraženina oddělí filtrací pod dusíkem a promyje se eterem. Po sušení vznikne 0,136 g bílé pevné látky výsledné sloučeniny . 1H-NMR (400 MHz, CD30D): 7,82 (d, 2H) , 7,67 - 7,58 (m, 2H), 7,52 (t, 2H), 7,40 - 7,20 (m, 6H), 7,10 - 6,90 (m, 11/2 H) , 6,63 (d, 1/2 H), 5,10 (dt, 1H), 4,53 (A3q, 2H), 4,35 (t, 1H) , 4,00 - 3,80 (m, 3H) , 3,75 - 3,65 (m, 2r.\ 3,10 (dt, 1H) , 2,73 (dt, 1H), 1,75 (dt, 1/2 H), 1,48 p, 11/2 H), 1,20 - 1,05 (m, 2H). Příklad 37 140 N- [1 (R) - [ (1, 2-dihydro-l- f2-hydroxyeran-sulfcnyl-spirc [3H-ir.doi-3, 4 ' -piperidir.j ] --1'-yi)karbonyl]-2-(fer.ylmetyloxy)etyI3--2-amino-2-metylpropananld trifluoracetár Část A:

Do roztoku 0,148 g meziproduktu vyrobeného v části 3 příkladu 29 v 5 ml 1,2-dichicretanu se přidá 0,10 ml metylisokyanátu, vzniklá směs se při teplotě místnosti 1 hodinu míchá a suší se dosucha. Vzniklý zbyt* se po absorbci na sloupec 15 g silikagelu čisti rychlou chromatografií při eluci směsi metyler.chloridu a acetonu poměru 2:1. Vznikne 0,137 g výsledné sloučeniny.

Do roztoku meziproduktu části A tohoto pří kladu ve 3 ml dichlormetanu se přidají 3 ml kyseliny tri fluoroctové a vzniklá směs se 30 minut míchá při teplotě místnosti. Reakční směs se odpařuje dosucha a po rozetření s eterem vznikne 0,126 g bledě žluté pevné látky výsledné sloučeniny. 1H), 3,25 ,65 XH-MNMR (400 MHz, CDgOD): 7,82 (dd, 1H), 7,42 - 7,35 (m, 5H), 7,30 - 7,20 (m, 21/2 H), 5,75 (d, 1/2 H), 5,19 (dt, 4,60 - 4,50 (m, 3H), 4,13 (bd, 1H), 3,90 - 3,68 (m, 4H) , (t, 1H), 2,90 - 2,70 (2s, 4H), 1,98 (dt, 1/2 H), 1,85 - 3 (m, 31/2 H) , 1,62 (s, 2H), 1,59 (s, 4H). Příklad 38 141 N- [1 (R) - [ (1, 2-dihydro-l- [1-metoxykarbcnyl-i-metyi suifcr.yispiro- [3H-indol-3,4 '-piperidi. -2- í ináci-3-yl) etyl] -2-amino-2-metylp c par.amza trifluoracetát metvletan- Část A: 1,2-dihydro-l-[l-metoxykarbonyl -sulfonyl] -spiro [3K-indol-3, 4 ' -piperidin]

Do 5/OS 1,2-dihydro-l-benzylkarbonylspiro-- [3K-indol-3, 4 '-piperidin]hydrochloridu v 50 ml dichior-metanu se přidá 3,0 ml trietylaminu a 3,40 g di-t-butyl-karbonáz a vzniklá směs se při teplotě místnosti míchá 3 hodiny. Reakční směs se odpařuje dosucha, zředí se 100 ml eteru a promyje se 50 ml 0,50 N vodné kyseliny chlorovodíkové, 50 ml nasyceného roztoku chloridu sodného. Po sušení nad síranem hořečnatý a zahuštění se do vzniklého zbytku v 50 ml etanolu přidá 1 g 20% hydroxidu paladia na aktivním uhlí a vzniklá směs se přes noc hydrogenuje pod baňkou s obsahem vodíku. Do roztoku-0,506 g meziproduktu v 15 ml dichlormetanu se při teplotě 0°C přidá 0,74 ml trietylaminu a 0,41 ml karbometoxymetansulfonylchloridu a vzniklá směs se 1 hodinu míchá. Po zředění se 25 ml eteru se směs promyje 20 ml nasyceného roztoku uhličitanu sodného, suší nad síranem hořečnatým a zahustí se. Vzniklý zbytek se po absorbci na sloupec 25 g silikagelu čistí rychlou chromatografií při eluci směsí hexanu a etyl-acetátu v poměru 4:1. Vznikne 1,79 g hustého oleje meziproduktu. 142

Po promytí 0,102 g 60% rozteku nydridu sodnéhij: v minerálním oleji směsí hexanů se roztok uvede do suspenze v 1 ml dimetvlfluoridu. Po přidání 0,153 g meziproduktu v 5 ml suchého dimetylfluoridu do suspenze se vzniklá smfs 30 minut míchá. Po následném přidání 1,95 mm cl metyljodidu se reakční směs míchá 3 hodiny, vlije se dc 15 ml nasyceného vodného roztoku chloridu amonného a extrahuje se dvakrát 15 ml eteru. Sloučené organické podíly se promyjí 1: ml vody, 15 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, suší se nad síranem horečnatým a zahustí se za vzniku 0,179 g výsledné sloučeniny.' 1H-NMR (2C0 MHz, CDC13): 7,32 (d, 1H) , 7,20 - 6,90 (m, 3Kj) , 4,13 (bd, 2H) , 2,83 (bt, 2H) , 1,85 - 1,70 (m, 4H) , 1,69 (s, 6H), 1,48 (s, 9H). Část B: N- [1 (R) - [ (1,2-dihydro-[l-metoxykarbonyl--1-metyletansulfonylspiro-[3K-indol-3, 4 -piperidin] ]-l'-yl) karbonyl] -2- (indol-3--yl) etyl]-[ [ (1,1-dimetyletyloxy) karbonyl] --amino]-2-metylpropanamid_

Do roztoku 0,179 g meziproduktu části A tohoto příkladu v lml dichlormetanu se přidá 1 ml kyselihy triřluoroctové a vzniklá směs se 30 minut míchá. Reakční směs se odpařuje dosucha a vzniklý zbytek se přivede na zásadité pH přidáním 10 ml 10% vodného roztoku uhličitan^ sodného a následně se extrahuje dvakrát 10 ml dichlormetanu. Sloučené organické podíly se promyjí 10 ml nasy- ; ceného roztoku chloridu sodného, suší se nad uhličitanem | draselným, filtrují se a zahustí za vzniku 0,120 g hustého oleje piperidinu. Do roztoku této sloučeniny v 5 ml dichlormetanu se přidá 0,132 g kyselého meziproduktu 143 připraveného v části 3 příkladu 21, 0,055 g 1-hydrcxy-benzcriazolu, 0,102 g EDC a vzniklá směs se 13 hodin míchá. Reakční směs se ředí 25 ml eteru a prcmyje se 15 : 0,Cc N kyseliny chlorovodíkové, 15 mí r.asvcer.éhc roztoku zahustí se. Fo abscrbci na sloupec 20 g siiikagelu se vzniklý zbytek čistí rychlou chromatcgrařií při eluci směsí metylenchloridu a acetonu v poměru 5:1 za vzniku 0,094 g výsledné sloučeniny. H-NMR (4C0 MHz, CDC13): 8,60 (s, 2/3 K', 8,50 (s, 1/3 H), 7,70 (d, 2/3 H), 7,60 (d, 1/3 H), 7,35 (d, 2/3 H), 7,30 (d, 1/3 H), 7,26 - 7,00 (m, 5H), 6,90 (t, 11/3 H), 6,40 (d, 2/3 H), 5,23 - 5,16 (m, 1H), 5,05 (široký s, 1H), 4,41 (bd, 2/3 H), 4,32 (bd, 1/3 H), 3,78 - 3,65 (m, 2H), 3,56 (s, 2K), 3,: (s, 1H), 3,50 (bd, 1H), 3,20 (dt, 1H) , 3,15 (ddd, 1H), 2,75 (t, 1H) , 2,42 (m, 1H), 1,18 (d, 2H) , 1,24 (s, 4H), 1,50 (s, 2H), 1,48 (s, 4H), 1,42 (s, 9H), 1,30 - 1,1S (m, 1H), 1,10 - 0,90 (m, 11/3 H), 0,03 (dt, 2/3 H). Část C: N- [1 (R) - [ (1, 2-dihydro- [1-metoxykarbonyl- -1-metyletansulřonyl]-spiro(3H-inaol-3,4 ' --piperidin]]-l'-yl)karbonyl] -2-(indol-3--yl)etyl]-2-amino-2-metylpropanamid trifluoracetát_

Do roztoku 0,094 g meziproduktu vyrobeného v části 3 tohoto příkladu v 1 ml dichlormetanu se přidá 1 ml kyseliny triřluoroctové a vzniklá směs se 30 minut míchá, odpařuje se dosucha a po rozetření s eterem vznikne 0,0S2 g výsledné sloučeniny. 144 1H-NMR (40C MHz, CD30D): 7,70 (d, 2/3 H', , 7,50 (d, 1/3 H)

7,35 (d, 2/3 H), 7,30 (d, 1/3 H) , 7,25 - 7,00 (η, 5H' , 5,20 (t, 11/3 H), 5,40 (d, 2/3 H) , 5,23 - 5,15 (-, 1H;, 5,03 (li roký s, 1H), 4,41 (bd, 2/3 H), 4,32 (bd, 1/3 H;, 3,75 - 3|5 (.7,, 2H) , 3,56 (s, 2H) , 3,53 13, i"*), = ~ vJ (dt, 1H) , 3,15 (ddd, 1H) , 2,75 (t, 1K) , 2,42 (m, 1H) , 1,1$ (d, 2H), 1,24 (s, 4K), 1,50 (s, 2H) , 1,48 (s, 4H), 1,30 1,18 (m, 1H), 1,10 - 0,90 (m, 11/3 H) , 0,03 (du, 2/c ·“·/· Příklad 39 N- [1 (R) - [ {1, 2-dihydro-l-metansulfcnyispirc i3H-indol--3,4 ' -piperidin] -1 *-yl) karbonyl] -2- (indol-3-yl j -etyl] -3-amino-3-metylbutanamid hydrochlorld_ Část A: N-[l (R) -[ (!, 2-dihydro-l-tietansulfor.ylspiro-[3H-indol-3, 4 '-piperidin] -1 '-yi) karbony!] -2- (indol-3-yl) etyl] -3-anino-3-metyibutanani

Do suspenze 1,14 g 1,2-dihydro-l-metan-sulfonylspiro[3H-indol-3,4'-piperidin] hydrochioridu, jehož příprava je popsána v části A"příkladu 18 (postup 1 v 50 ml dichlormetanu se přidá 0,80 ml N-metylmorfolinu, 1,00 g N-tBOC-D-tryptofanu, 0,80 g 1-hydroxybenztriazolu 1,20 g EDC a vzniklá směs se 18 hodin míchá. Reakční směs se ředí 100 ml eterem, promyje se 50 ml 0,05 N kyseliny chlorovodíkové, 50 ml nasyceného roztoku uhličitanu sodného, suší se nad síranem hořečnatým a zahustí se.

Na roztok takto vzniklého meziproduktu v 50 ml etylacetátu se při teplotě 0°C působí 2 minuty kyselinou chlorovodíkovou a následně se míchá 1 hodinu. Po přidání 50 ml suchého eteru se sražený pevný podíl oddělí filtrací. Vznikne 1,44 g meziproduktu. 145

Do 0,86 g aminhydrcchloridu ve metanu se přidá 0,24 ml N-metylmorřoiinu, roxybenztriazolu, 0,56 EDC a vzniklá směs noc. Po zředěni reakční směsi 100 mi e:er

Ju nu aicnicr-0,36 g i-hyd-se míchá cřes

0,05 M kyseliny chlorovodíkové a 50 ml nasvc genuhličitanu sodného se reakční směs suší n horečnatým a zahustí. Vzniklý zbytek se po a: sloupec 20 g silikagelu čistí rychlou chromá eluci směsí metylenchloridu a acetonu v perně vzniku 0,74 a mezioroduktu.

Roztok 0,74 g meziproduktu v 5 mi etylacetátu se při teplotě 0°C probublává suchou plynnou kyselinou chlorovodíkovou 2 minuty a následně se 30 minut míchá. Po přidání eteru do úplného vytvoření sraženiny výsledné sloučeniny se sraženina oddělí filtrací a promyje pod dusíkem eterem. Po sušení vznikne 0,57 g výsledné sloučeniny. 1H-NMR (400 MHz, CD30D): 7,59 (d, 2/3 H), 7,55 (d, 1/3 H), 7,37 - 6,90 (m, 5H), 6,82 (bt, 11/3 H), 6,43 (d, 2/3 H) , 5,31 - 5,18 (m, 1H), 4,40 (bd, 2/3 H), 4,30 (bd, 1/3 H) , 3,63 - 3,38 (m, 4H), 3,22 - 3,05 (m, 2H), 2,83 - 2,75 (m, 1H), 2,80 (s, 1H), 2,74 (s, 2H), 2,63 (dd, 1H), 2,55 - 2,43 (m, 2H), 2,20 (bd, 1H), 1,70 - 1,53 (m, 1H), 1,38 (2H), 1,36 (s, 2H) , 1,35 (s, 1H), 1,34 (s,. 1H) , 1,18 (bd, 1H), 1,20 -0,94 (m, 11/3 H), 0,03 (dt, 2/3 H).

Příklad 4Q N- [1 (R) - [ (1/ 2-dihydro-l-metansulronylspiro [3n-indol- -3,4' -piperidin] -l'-yl)karbonyl] -2- (indol-3-yl) etyl]-_ [3- [2 (R) -3-dihydroxypropyl] amino] -3-metylbutar.amid hvdrochlorid _______ 146 Část A: N- [1 (R) - [ (1, 2-dihydro-l-metansulřcr.yl-spiro[3H-indol-3, 4'-piperidin]-1'-yli-karbonyl] -2- (lndol-3-yl) etvl] — '3- C2 .P- --3-dihydroxypropyl] aminoj -3-mecylbuzana:r.:.o

hydrochlorid_.__J

Do roztoku 0,30 g sloučeniny vyrocené v části B přikladu 39 v 5 ml suchého metanolu se přidá 1,= g bezvodého acetátu sodného, 0,30 g (R; -1,2-isoprcpyiider.-glyceraldehydu (Tetrahedron 1985, 41, 3117) a vzniklá směs se 1 hodinu michá. Po přidáni 8,7 ml 1 M roztoku kyanbcr-hydridu sodného v tetrahydrořurar.u se vzniklá re akční směs

I míchá 18 hodin, následně se zředí 20 mí vody, extrahuje sej třikrát 10 ml dichlormetanu a sloučené organické extrakty se promyjí 10 ml nasyceného roztoku uhličitanu sodného. Pc sušení nad uhličitanem draselným a zahuštění se vzniklý zbytek po absorbci na sloupec 10 g silikagelu čistí rychlou chromatografií při eluci směsí metyíenchloridu a metanolu v poměru 98:2 za vzniku 0,146 g výsledné sloučeniny, která vzniká reduktivní aminací. 1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 8,70 - 8,40 (m, 2H) , 7,63 (d, 2/3 H), 7,55 (d, 1/3 H), 7,37 (t, 1H), 7,32 (d, 1/3 H), 7,28 (d, 2/3 H), 7,20 - 6,95 (m, 41/3 H), 6,52 (d, 2/3 H), 5,20 - 5,08 (m, 1H), 4,55 - 4,24 (m, 3H), 4,10 (t, 2/3 H) , 4,05 (t, 1/3 H), 3,80 - 3,70 (m, 1H), 3,70 - 3,50 (m, 4H) , 3,30 - 3,10 (m, 2H), 2,84 (s, 1H), 2,80 (s, 2H) , 2,80 - 2,70 (m, 2H), 2,68 - 2,45 (m, 1H), 2,37 (s, 2H), 1,70 {z, 2/3 H) , i 1,52 (bd, 1/3 H), 1,44 (s, 2H), 1,43 (s, 1K), 1,35 (s, 2H) , 1,33 (s, 1H), 1,25 (s, 3H), 1,33 (s, 6K), 1.20 - 1,06 (m, ! 2H), 0,90 - 0,65 (m, 1/3 H), 0,30 (dt. 2.'3 HN. 1*17 Část B:

Roztok 0,146 g vzniklého meziproduktu se 30 minut míchá v 3 ml metanolu a 0,100 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Reakční směs se odpařuje dcsucha a pevný pcdíl se promyje eterem a suší se za vzniku 0,109 g výsledné sloučeniny. 1H-:;:4R (400 MHz, CD30D) : 7,63 (d, 2/3 H), 7,53 (d, 1/3 H; , 7,41 (d, 2/3 H), 7,38 (d, 1/3 H), 7,32 (d, 1/3 H', 7,25 (d, 2/3 H), 7,21 - 7,10 (m, 4H), 7,08 - 7,CO (m, 21/3 H), 5,53 (d, 2/3 H), 5,25 (dd, 2/3 H), 5,19 (dd, 1/3 K) , 4,36 (bd, 2/3 H), 4,30 (bd, 1/3 H), 3,92 - 3,83 (m, 1H;, 3,80 - 3,50 (m, 6H), 3,28 - 3,10 (m, 3H), 3,05 - 2,95 (m, 2H), 2,90 (s, 1H), 2,85 (s, 2H), 2,78 - 2,55 (m, 4H) , 1,33 - 1,55 (m, 1H) 1,43 (s, 2H) , 1,39 (s, 2H), 1,37 (s, 1H), 1,32 (s, 1H), 1,3 - 1,20 (m, 1H), 0,04 - 0,18 (m, 22/3 H), -0,03 (dt, 2/3 H). Příklad 41 N- [1 (R) - [ (1,2-dihyaro-l-metansulfonylspiro [3H-indol--3,4' -piperidin] ] -1 '-yl) karbonyl] -2- (indol-3-yl) etyl] -- [3-[2(R)-hydroxypropyl]amino]-3-metylbutananid hvdrochlorid Část A: N- [1(R)-[(1,2-dihydro-l-metansulfonylspiro [3H-indol-3,4'-piperidin]]-1'-yl)-karbonyl]-2-(indol-3-yl)etyl]-[3- [2 (R) -hydroxypropyl]amino]-3-mezylbutanamid hvdrochlorid

Do roztoku 0,26 g sloučeniny vyrobené 148 v části B přikladu 39 v 5 ml suchého metanolu se přidá

1.5 g bezvodého acetátu sodného a 0,30 g čerstvě prior ného 2 (R) - (tetrahydropyranyl) oxy-propionaldehydu a vzr. směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti. Po přidá 3.5 mi 1 M roztoku kyar.fcorhydridu sodného v tetrahydrc řuranu se vzniklá reakční směs se míchá 15' hodin, následně se zředí 10 ml nasyceného roztoku uhličitanu sečného, extrahuje se dvakrát 15 ml dichlormetanu a sloučené organické extrakty se premyjí 10 ml nasyceného roztoku chloridu sodného. Po sušení nad uhličitanem draselným a zahuštění se vzniklý zbytek po absorbci na sloupec 10 g silikage-lu čistí rychlou chromatografií při eluci směsí metylen-chloridu a metanolu v poměru 98:2 za vzniku 0,219 g požadovaného meziproduktu.

Meziprodukt se míchá v 3 mí suchého metanolu a 0,10 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Reakční směs se odpařuje dosucha, vzniklý zbytek se rezetře s eterem za vzniku 0,174 g bledě žluté pěny výsledné sloučeniny. . 1H-NMR (400 MHz, CD30D): 7,63 (d, 2/3 H), 7,55 (d, 1/3 H) 7,41 (d, 2/3 H), 7,38 (d, 1/3 H), 7,32 (d, 1/3 H), 7,26 (d, 2/3 H), 7,21 - 7,10 (m, 4H) , 7,08 - 7,00 (m, 21/3 H), 6,63 (d, 2/3 H), 6,63 (d, 2/3 H) , 5,25'(dd, 2/3 H), 5,19 (dd, 1/3 H), 4,36 (bd, 2/3 H) , 4,30 (bd, 1/3 H), 3,92 - 3,83 (m, 1H), 3,80 - 3,50 (m, 4H) , 3,28 - 3,10 (m, 3H), 3,05 - 2,95 (m, 2H), 2,90 (s, 1H), 2,86 (s, 2H), 2,78 - 2,55 (m, 4H), ! 1,83 - 1,65 (m, 1H) , 1,43 (s, 2H), 1,39 (s, 2H), 1,37 (s, 1H), 1,32 (s, 1H), 1,36 - 1,20 (m, 1H), 1,2S (d, 3H), 0,04 - 0,18 (m, 22/3 H), -0,08 (dt, 2/3 H). 149 Příklad 42

N- [1 (R) -[[3-oxospiro[isobenzfuran-1(3H;,4 '-pi? -1' -yl] karbcnyl] -2- (fer.ylmetoxy) etyl] -2-amir.c-2 crcoar.aniid rričiuoracetát ___ Času A;

Do 0,165 g kyselého meziproduktu vyroceného v části 3 přikladu 19 v 10 ml metylenchlorzau se prtaa 0, 095 g 3-oxospiro [isobenzfuran-1 (3H) , 4 ' .piperidinu] , 0, 067 g 1-hydroxybenztriazolu a 0,110 g EDC a vzniklá směs se 4 hodiny míchá. Reakční směs se vlije do 10 ml metylenchloridu a promyje se 5 ml 20% vodného roztoku kyseliny citrónové, 5 ml nasyceného roztoku uhličitanu sodného, suší se nad síranem horečnatým a zahustí se. Po absorbci na sloupec 10 g silikagelu se vzniklý zbytek čistí rychlou chromatograřií při eluci směsí hexanu a acetonu v poměru 3:1 za vzniku 0,234 meziproduktu.

Do roztoku 0,024 g meziproduktu v 1 ml metylenchloridu se přidá 1,0 ml kyseliny trifluoroctové a vzniklá směs se míchá při teplotě místnosti 30 minut.

Podíl těkavých látek se odpaří a zbytek se rozetře s eterem za vzniku 21 mg pevné látky výsledné sloučeniny. 1H-NMR (400 MHz, CD30D): 7,85 (d , 1/2 H) , 7,80 (c, 1/2 H), 7,63 (t, 1/2 H), 7,54 - 7,40 (m, 21/2 H), 7,35 ~ ' , 20 (m, 51/2 H) , 7,06 (d , 1H), 6 ,58 (d, 1/2 H / % 5,25 - 5,1 5 (m, 1H), 4,93 (s, 1H), 4, 69 (bd, 1H), 4,5 5-4 , 40 (m, 2H) , 4,14 (bd, 1H) , 3,70 - 3,40 (m, 2H) , 3,18 - 3,10 (m , 1H) , 2,1 3 (dt, 1H), 2,90 - 2, 75 (m, 2H), 2,70 - 2,50 (m, 2H : , 1,4 7 ( s, 1/5 H), 1,46 ( s , 1.5H) , 1,44 (s, 1.5H) , 1,43 (s, 1,5 H) . - 150 - Příklad 43 N- [i (R) - [ (1, 2-dihydro-l-metansulfonylspiro r3K-ir.dcl--3,4' -piperidin] ] -1' -vl) Jcarbonyl] -4-řenylburyl] -- 2 - amine -2 -ir.s t y Ip rop ar.anid hydro chlc r i d _ Část A:' N- [1 (R) - [ (1,2 - d i h y d r o -1 - rr. s z a n s u 1 f c r. y 1 -spiro[3H-indol-3,4'-piperidin] ·-i'-yl)-karbonyl] -4-fenylbutyl] -2-amine- 2 =z y 1 - propanamid hydrochlorid___

Sloučenina se připraví za použití kyseliny 2 (R)-N-t-butoxykarbonyl-5-fenylpentancvé a 1,2-dihydro--1-metansulfonylspiro [3H-indol-3, 4' -piperidin] hydrochlc-ridu a podle postupu uvedeného v příkladě 13. FAB-MS: vypočteno pro C28H38N4°4S: molekulová hmotnost = 525,2, nalezeno m/e = (m-rl) 527,9. Příklad 44 N- [1 (R) - [ (1,2-dihydro-l-metansulfonylspiro [3H-indol--3,4' -piperidin] -1' -yl) karbonyl] -2-fenylmetylthio) etyl] --2-amino-2-metylpropanamid trifluoracetát_ Část A; N-[l(R)-[ (1, 2-dihydro-l-metansulfonyl-spiro [3H-indol-3, 4 '-piperidin] -1'-yl) -karbonyl] -2-řenylfenylmetylthio) etyl] -2--amino-2-metylpropanamid trifluoracetát Sloučenina se připraví za použití běžně dováného N-t-BOC-S-benzyl-D-cysteinu a 1,2-dihydro--1-metansulfonylspiro [3H-indol-3,4'-piperidin] hydrochlo-ridu podle postupu uvedeném v příkladě 18. 151 FA3-MS vypočteno oro C,7H-RM 0,S,: 27 35 4 4 2 molekulová hmotnost = 544,7, nalezeno n/e = (n- icetaz N-[1(R,3)-[(1,2-dihydro-l-metansulíony -3,4' -piperidin]-1'-yl)karbony1]-2-(2' etyl] -2-anino-2-metylpropanamid trifl Část A: 1,1-dimetylester N-[1(R, S;-[(1,2-dihydrc--l-metansulfonylspiro[3H-indcl-3,4'-piperidin]-1'-yl)karbony!]-2-hydroxyl- karbaminové kyseliny__

Do roztoku 56 mg (274 mmol; N-t-3CC--D-serinu v 2,5 ml tetrahydrofuranu se při teplotě místnosti přidá 83 mg (0,274 mmol) meziproduktu vyrobeného v části A příkladu 18 1,2-dihydro-l-metansulřonylspirc-[3K-indol-3,4'-piperidinu]hydrochloridu , 45 mi (0,33 mmol) trietylaminu, 44mg (0,33 mmol) i-hydroxybenztriazclu a 63 mg (0,33 mmol) EDC a vzniklá směs se 3 hodiny míchá. Po ředěni reakční směsi etylacetátem a postupném promytí vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného se organická vrstva suší nad síranem sodným, filtruje a zahustí.

Vzniklý zbytek se čistí MPLC na silikagelu při elouci 100% etylacetátem za vzniku 112 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 90%. Část 3: 1,1-dimetylester N-[1(R, S' -[(1,2-dihydro- -1-metansulíonylspiro[3H-indol-3,4 ' -piperidin] -1' -yl) karbony! ] -2- ·, 2 ' -pyridometyi oxy) etyl] karbaminové kyseliny__ 152

Do suspenze 9 g (0,21 ranci) hydridu sodného prostého oleje, který se připraví z 60% olejové disperze hydridu sodného trojnásobným promytím směsí hexanů/ v 0,3 ml tetranydrofuranu se přidá 16 mg (0,1 mmol;

ilTiC se 2-picolyIchloridu v 0,3 ml dimetylfluoridu se do re akční směsi přidá 45 mg (0,1 mmcl) kladl vyrobeného v předchozí části A tohoto p míchá 2 eterem. hodiny při teplotě místnosti a následně se rea Éterová vrstva se pětkrát promyje vedou, nasyc roztokem chloridu sodného a suší se nad síranem soar.ym. silikagel prepara-i i eluci 100% etvl-eninv s vvtezkem

Vzniklý zbytek se čistí po absorbci na tivní chromatografii na tenké vrstvě př acetátem za vzniku 16 mg výsledné slouč 29%. | i (400 MHz, CDClg, směs rotanerů): 8,53 (m, 1H), 7,77 - 6,83 (m, 7H) , 5,75 (m, 1/2 H), 4,98 (m, 2H), 4,57 (m, 2j 1/2 H) , 4,25 (m, 1/2 H), 4,10 (m, 1/2 H), 3,91 - 3,67 (m, 4H) , 3,17 (m, 1H), 2,91 (s, 3/2 H) , 2,89 (s, 3/2 H), 2,79 (m, 1H), 1,95 - 1,69 (m, 4H), 1,42 (s, 9/2 H) , 1,41 (s, 9/2H) Část C: N- [1 (R, S) - [ (1,2-dihydro-l-metansulřonyl- spiro [3H-indol-3,4'-piperidin]-1'-yl)-karbonyl] -2- (2 '-pyridometyloxy) etyl] -2-amino-2-metylpropanamid trifluoracetát Roztok 16 mg (0,029 mmol) meziproduktu připraveného v části B tohoto příkladu v 0,5 ml kyseliny trifluoroctové se při teplotě místnosti 30 minut míchá a následně zahustí. Do roztoku vzniklého zbytku v 1 ml chloroformu se přidá 6,5 mg (0,032 mmol) t-butyloxy-karbor.yl-a-metylalaninu, 4,3 mg (0,032 mmol) 1-hydroxy-benztriazolu, 10 ml (0, 064 mmol) trietylaminu a 6 mg (0,032 mmcl) EDO. Po 12 hodinách při teplotě místnosti směs ředí metylenchloridem a p remy je se vodou a π as 7.-: e: roztokem chloridu sodného. Organická vrstva se suší na: síranem sodným, filtruje se a zahustí. Vzniklý zbytek : po atsorbci' na silikagei čistí preparativr.í chromát o gr: tenká vrstvě při eluci při eluci 100% etylaoetátem. Čištěná sloučenina se zahustí a do vzniklého zbytku se přidá při teplotě místnosti kyselina triflucroctová. ?c hodině se směs zahustí za vzniku 5,3 mg výsledné sloučeniny. H-NMR (400 MHz, CDgOD , směs rotamerů): 8 ,70 (Ši roký s, 1 « ,30 (m , 1H), 7, 84 (m, 1H), 7 ,77 (m, 1H \ 7, 36 ( m, 1H), 7 m, 11 /2 H), 7, 06 (m, 1 1/2 H), 5,24 ( 6 U 'r 1H) , 4,í m, 2H) , 4,56 (d , 13 Hz, 1H), 4,08 (m, 1H > ) * τ α = w j w (m, ^h: f 9 ,36 (m , 1H), 2, 97 (s, 3/2 H) , 2,96 (s, 0 /2 VI X ^ J 9 'Λ '“V n ! * > m, 4H) , 1,63 (s , 3/2 H), 1,6 1 (s, 3/2 H) t — ,59 (s, 3/2 H 1,53 (s, 3/2 H). Příklad 46 N- [1 (R, S) - [ (1,2-dihydro-l-metansulfonylspiro [3K-intíol--3,4' -piperidin] -1 '-yl) karbonvl] -2- (2 '-pyridothio) -etyl] -2-amino-2-metylpropanamid trifluoracetát_ - 154 - 1, 1-dimetylester N-[1(R,S)-[ (1,2-dihydro--1-metansulfonylspiro [3K-indci-3, 4 ' -cipe-ridin] -1'-yl)karbcnyl] -2- (2' -pyridcthic) -etyl] karbaminové kyseliny_ _

Část A

Do suspenze 600 mg (7,5 mmol) hydridu sečného prostého oleje v 20 ml dimetylřlucridu se přidá 1,2 mg (5,4 mmol) N-t-BCC-D-serir.u ve 2C mi dimetyl-fluoridu při teplotě -10°C. Směs se zahřeje na teplotu místnosti a 1 hodinu se míchá. Do re akční směsi se přidá roztok 0,514 ml (5,4 mmol) brompyridir.u v 10 ml dimetyi-řluoridu. Po 20 hodinách zahřívání při teplotě 80°C se do reakční směsi přidá 1,03 g (5,4 mmol) jodidu mětíhého a směs se při stejné teplotě míchá dalších 20 hodin. Směs se zchladí na teplotu místnosti a vlije do 0,5 N kyseliny chlorovodíkové a extrahuje se eterem. Éterová vrstva se oddělí filtrací přes celit, suší se nad síranem sodným a zahustí se. Vzniklý zbytek se čistí MPLC na silikagelu pifi eluci směsí metylenchloridu a metanolu v poměru 10:1. Do 170 mg (0,57 mmol) čištěné sloučeniny v metylenchloridu se přidá 172 mg (0,57 mmol) 1,2-dihydro-l-metansulfonyl-spiro [3H-indol-3, 4 '-piperidinjhydrochloridu, jehož příprava je posána v části A příkladu 18, 95 ml (0,68 mmol) trietylaminu, 92 mg (0,68 mmol) 1-hydroxybenz-triazolu a 130 mg (0,68 mmol) EDC Reakce probíhá podle postupu uvedeném v části A příkladu 45 za vzniku 310 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 99%. Část B: N-[1 (R,S)-[(1,2-dihydro-l-metansulfonyl- spiro[3H-indol-3, 4 '-piperidin] -1 '-yl) -karbonyl] -2-(2 '-pyridcthio) etyl] -2-amino -2-metylpropanamid trifluoracetát_

Sloučenina se vyrobí za použití 290 mg (0,53 mmol) meziproduktu, jehož příprava je uvedena v předchozí části A. Sloučenina se zbaví svých ochranných 155 skupin za použiti kyseliny trifluoroctové. Vznik směsi rotamerú výsledné sloučeniny. iH-:i MR (4Q0 M Hz, CD30D, sně s rotar.erů' : 2 . - 1H) , 7, 61 (m, 1H), 7,39 . 7 i -- — \ ·*· 1 , 5H', , = 2 - 9 - (t, 12H z, 2H) , 4,01 (m, 3K) , 3,80 (m, 1- “ , > 2,98 ( 3 , 3H) , 2,90 (m, 1H) , 2,10 - - 1,79 (m, 3/2 H) , 1,60 (s, 3/2 H) , 1, 59 (s, 3/2 h: > T / 9 ~ FA5- MS : 532, 7 (M + 1) . Příklad 47 N- [1 (R, S) - [ (1,2-dihydro-l-metansulřcnyispiro r3H-indcl--3/ 4 '-piperidin] -1'-yl) karbonyl] -2-(cyklohexyithio) -etyl] -2-amino-2-metylpropanamid triflucracetát_ Část A: N-t-BOC-cyklohexylcystein

Do roztoku 1 ml (8,18 πεζοί) cyklohexyl-merkaptanu a 1,29 g (9 mmol) metyl 2-acetamidakrylátu v tetrahyarofuranu se přidá př teplotě místnosti katalitická množství hydridu sodného. Po 7 dnech se reakčni směs zahusti a roztok vzniklého zbytku se v 20 mi 6 N kyseliny chlorovodíkové 4 hodiny refluxuje a následně zchladí na teplotu místnosti. Vzniklý roztok se nechá 12 hodin stát, a pak se filtruje. Pevný podíl se suší pod vakuem a do směsi tohoto hydrochloridu v 15 ml 1N roztoku hydroxidu sodného se přidá 1,68 g (7,7 mmol) di-t-butyldicarbonatu v 15 ml 1,4-dioxanu. Po 12 hodinách se směs vlije do 0,5 N kyseliny chlorovodíkové a extrahuje se etylacetátem. Organická vrstva se promyje vodou, nasyceným roztokem chloridu sodného a suší se nad síranem sodným. Po filtraci a zahuštění vznikne 2,23 g výsledné sloučeniny s výtěžkem 92%. 156 Část 3: 1,1-dimetyletylester N-[1(R,S)-(1,2- dihydro-l-metansulfonylspiro (3K-irdci-3,4'-piperidin]-1'-yl)kartony!]-2-(cyklc- hexylthio) etyl] karbamincvé kyseliny__

Sloučenina se vyrobí za použiti 303 mg (1,0 mmc 1) meziproduktu, jehož příprava je uvedena v části A tohoto příkladu a podle postupu uvedeného v části A příkladu 45. Vzniklo 420 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 76%. Část C: N- [1 (R, S) - [1,2-dihydro-l-metansulfonyl- spiro[3H-indol-3, 4'-piperidin]-1'-yl)-karhonyl]-2-(cyklohexylthio)etyl]-2-- [ [ (1,1-dimetyletyloxy)karbonyl]amino]- -2-metylpropanamid_

Roztok 420 mg (0,76 mmoi) meziproduktu v 5 ml kyseliny trifluoroctové se 0,5 hodiny míchá při teplotě místnosti, zahustí se a suší. Do roztoku vzniklého zbytku v 10 ml chloroformu se přidá 170 mg (0,84 mmol) t-butyloxykarbonyl-a-metylalaninu, 113 mg (0,84 mmol) 1-hydroxybenztriazolu, 116 ml (0,84 mmol) trietylarainu aj 160 mg (0,84 mmol) EDC. Po 12 hodinách při teplotě místnosti se směs ředí metylenchloridem a promyje se voddu a nasyceným roztokem chloridu sodného. Organický podíl s^ suší nad síranem sodným, filtruje se a zahustí. Vzniklý zbytek se čistí po absorbci na silikagel MPLC při eluci směsí hexanů a etylacetátu v poměru 1:1 za vzniku 430 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 89%. 157 N-[1 (R, S) - [ (1,2-dihydro spiro[3K-indol-3,4'-pip· ícarbonyl] -2- (cyklonexyl Čá D:

a -2-metylprcpanamid trifluoracer áz Roztok 35 mg (0,055 mmcl' meziprcdu připraveného v části C tohoto přikladu v 0,5 ml ky triřluoroctová se míchá při teplotě místnosti 0,5 následně se zahustí za vzniku 33 mg výsledná slcuč H), 4,52 (m, , 3,02 (m , Ir. i , - (m, 9H), 1,52 1,57 (s, 3/2 (400 MHz, CD^OD, směs rotamerů}: 7,35

7,25 - 7,17 (m, 2H), 7,C6 (m, 1H), 5,02 (m, 1H) , 4,11 (m, 1H), 3,97 (m, 2H), 3,39 (m, 1H 2,98 (s, 3H) , 2,90 - 2,71 (m, 3H), 2,05 - 1, (s, 3/2 K), 1,61 (s, 3/2 H), 1,60 (s, 3,2 H) H) , 1,32 (m, 5H). FA3-MS: 537,9 (M + 1) . Příklad 48 N- [1 (R, S) - [ (1, 2-dihydro-l-metansulfonyispiro [3H-indoi--3, 4 '-piperidin] -l'-yl) karbonyl] -2- (cykichexyisulřinyl) - etyl] -2-anino-2-metylpropanamid hvdrochlorid_

Do roztoku 35 mg (0,055 mmol) připraveného v části C příkladu 47 v 1 ml metanolu se přidá při teplotě místnosti jodistan sodný v 1 ml vody. ?o několika hodinách se reakční směs ředí etylacetátem a promyje se vodným roztokem siřičitanu sodného. Organická vrstva se suší nad síranem sodným, filtruje se a zahustí. Odštěpením ocnranných skupin za použití metody s kyselinou triřluor-octovou podle postupu uvedeného v čászi D příkladu 47 vznikne surový produkt, který se po absorbci na silikagel 158 čisti preparativní chromatografií na tenká vrstvě při eiuci směsí metylenchloridu, metanolu a hydroxidu amen v poměru 10:1:0,1. Čištěný produkt se znovu přivede r.a kyselé pH přidáním kyseliny chlorovodíková v eteru za vzniku 21 mg výsledné sloučeniny.

- 7,04 3,95 (m 2,71 (m 7,38 » 2,90 1,32 (4CO MHz, CD^OD, směs diastereomerů a rozáměrů' : (m, 4H), 5,43 (m, 1H), 4,50 (m, 1H), 4,05 (m, 1H) , 2H), 3,38 (m, 1H), 3,13 (m, 1H), 2,98 (s, 3H), , 3H), 2,05 - 1,74 (m, 9H), 1,52 (m, 6H), 1,51 -(m, 5 FAM-MS: 553,9 (m + 1). Příklad 49 N- [1 (R, 5) - [ (1,2-dihydro-l-metansulfonylspiro [3K-indol--3,4' -piperidin] -1 '-yl) karbonyl] -2- (cyklohexylsulfonyl) - etyl] -2-amino-2-metylpropanamid hydrochlorid_

Do roztoku 35 mg (0,055 mmol) připraveného v část C příkladu 47 v 1 ml metanolu se přidá při teplotě místnosti Oxon v 1 ml vody. Po několika hodinách se reakčni směs ředí etylacetátem a promyje se vodným roztokem siřičitanu sodného. Organická vrstva se suší nad síranem sodným, filtruje se a zahustí. Odštěpením ochranných skupin za použití metody s kyselinou trifluoroctovou podlje postupu uvedeného v části D příkladu 47 vznikne surový produkt, který se po absorbci na silikagel čistí preparativní chromatografií na tenké vrstvě při eluci směsí mezylenchloridu, metanolu a hydroxidu amonného v poměru 10:1:0,1. Čištěný produkt se znovu přivede na kyselé pH přidáním kyseliny chlorovodíkové v eteru za vzniku 12 mg výsledné sloučeniny. 159 1H-MMR o o Mři iz, CD3CD, směs roraněnu): 7, ,35 (cd, 7, 2 Hz, 1H), 7, 22 ( m, 2H) , 7,05 (m, 1H) , 5 , ,53 (m, i lt. ; , t- , ~ i. v m , j.. 4,11 (m . 1H ), 3,95 (m, c >H), 3,49 (, 2H! , (m, 1H) , 2, 98 (s, 3/2 h: >> 2,97 (s, T / 5 ' —— · ♦ ' 1 'Λ * ? ? * * ' ' ~ ~ - · ··· - ·” J 2,20 - 1,74 (- , O * * ** H), l,í 12 (s, 3,'2 * / t — 9 ^ - . . 5 , z, z n . . , 3 (s, 3/2 H) , 1, 51 - 1,32 (m, 5H). FA3-MS: 559 Q 9 - (M + 1). Přiklad 50 N— [1 (R) — [spiro [benzo [b] thiofen-3 (2K) , 4 ' -piperidin ] -1' -yl) karbonyl-2-indol-3-yl-etyl) 2-amino-2-metylprcpanamid hydrochlorid_ Část A: 1- [ (1,1-dimetyletoxy) karbony!] -3-hydrcxy-4- metylen-1,2, 5, 6-tatrahydropyridin_

Do suspenze nebo roztoku 30 g (74 smol) metyltrifenylfosfinjodidu ve 150 ml tetranydrofuranu se pomalu při teplotě 0°C přidá 25,5 ml (63,7 smol) 2,5 N butyilithia. Po hodině mícháni při teplotě místnosti se pomalu při teplotě místnosti přidá N-t-30C chráněný 4-piperidon,(příprava z 4-piperidon monohydrát hydro-chloridu je popsána T.W.Greenem, Johnem Wileyem a syny v Protective Groups in Organic Synthesis, NY, 1981) v 50 ml tetrahydrofuranu. Reakční směs se 2 hodiny míchá, a pak se filtruje. Filtrát se zahustí a vzniklý zbytek se pc absorbsi na silikagel čistí MPLC při eluci směsí hexanů a etylacetátu v poměru 10:1 za vzniku 7,9 g Wiztigcva produktu s výtěžkem 82%.

Do suspenze oxidu seleničitého na silikagelu, jehož příprava je popsána v Chem. lett. 1981, 1703, v 30 ml metylencnloridu se přidá 1,23 ml t-butylhydroperoxidu. 160

Po 15 minutách se přidá 0,72 g (3,69 mmol·) Witt produktu v 5 ml metylenchloridu. Zakalený rczcc hodiny míchá, a pak filtruje přes celit. Filtr promyje vedou, nasyceným roztokem chloridu ster.

Cj O % Λ

__d u a ety.ace-s loučen my s se nad síranem sodným. Organický pedii se zi vzniklý zbytek se čisti po absorbci na slcu: rychlou chromatografií při eluci směsi hexa: tátu v poměru 4:1 za vzniku 0,41 g výsledné výtěžkem 52%. Část S: 1- [ (1,1-dimetyletoxy) karbor.yl] -4-chlor- metyl-1,2,5,6-tetrahydropyridin_ C. 400 mg (1,88 mmol) meziproduktu připraveného v části A tohoto příkladu se rozpustí v 10 ml benzenu a po přidání 165 ml (2,26 mmol) thicnylchloridu vzniklá reakční směs zahřívá 25 minut na teplotu 50cC. Vzniklá reakční směs se vlije do vodného roztoku hydrog uhličitanu sodného a extrahuje se eterem. Éterová vrstv se suší nad síranem hořečnatým a následně se zahustí za vzniku 333 mg výsledné sloučeniny s- výtěžkem 77%. Část C: l-[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl]-4-[[(2- bromfenyl)thio]metyl-l,2,5, 6-tetrahydro- pyridin_ V 10 ml acetonu se rozpustí 330 mg (1,43 mmol) meziproduktu připraveného v části B tohoto příkladu a do vzniklého roztoku se přidá 172 mi (1,43 mmol) 2-bromthiofenolu a 390 mg (2,86 mmol) uhličitanu draselného. Reakční směs se zahřeje 1 hodinu na teplotu 60°C a následně se filtruje přes silikagel při eluci 100% eterem. Organický podíl se zahustí a vzniklý zbytek se čistí po absorbci na sloupci silikagelu rychlou chromatografií při eluci směsí hexanů a etylacetátu v poměru 10:1 za vzniku 460 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 34%. 161 Část D: l'-[ (1,1-dimetyletoxy} karbcnyl] -spi-0.

[benzo [b] thiořen-3 (2H) , 4 ' -pipericv V 60 ml benzenu se rozpustí 430 ma (1/17 mmol) meziproduktu připraveného v části c cříkiadu a/do vzniklého roztoku se přidá 10 mg a;-v = ml (2/39 mmcl) trifcutyihydridu cínu. Pc 2 hodinách zahřívání pod refluxem se reakční směs zahustí a vz-->-.-. zbvtek se rozpustí v eteru. Do reakčního roztoku se brom dc vzniku nahnědlé barvy roztoku. Po kankách 5= nannědleho roztoku přidá 6S0 ml DBU a vzniklý zakalený roztok se filtruje přes silikagel a prcmyje se eterem. Éterový roztok se zahustí a vzniklý zbytek se po absorbci na silikagel čistí radiální chromatografií při eluci směsí hexanů a etylacetátu v poměru 10:1 za vzniku 157 mg výsledné sloučeniny s výtěžkem 43%. Část Ξ: N- [1 (R) - [spiro [benzo [b] thiofen-3 (2H), 4 ' - piperidin] -1'-yl) karbonyl-2-indoi-3-yl) -etyl] -2-amino-2-metylorocanamid hvdrochlorid Roztok 50 mg (0,164 mmol) meziproduktu připraveného v části D tohoto příkladu v 0,5 ml TFA se míchá 30 minut při teplotě místnosti, a pak se zahusti. Zbytek se zředí chloroformem a promyje vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organický pcdíl se suší nad síranem sodným, filtruje se a zahustí za vzniku 32 mg volného aminu s výtěžkem 95%. Do roztoku 5,1 mg (0,025 mmol) volných aminů v 1 ml chloroformu se přidá přr teplotě místnosti 9,2 mg (0,0246 mmol) meziproduktu, jehož příprava je popsána v části C příkladu 21, 4,0 mg (0,0295 mmol) 1-hydroxvbenztriazolu a 5,6 mg (0,0295 mmcl) EDC. Fc 12 hodinách míchání se reakční směs vlije do vody a extrahuje se chloroformem. Chloroformová vrstva se suší nad síranem sodným, filtruje se a zahustí. Zbytek se čxsti 162 po absorbci na sloupec silikagelu preparativni chromatz-grafií na tenké vrstvě při eluci směsi hexanů a etylace-tátu v poměru 1:1 za vzniku 13 mg bezbarvé pěny s výtěžke 94%. Výsledná sloučenina se vyrobí z bezbarvé pěny podle postupu v části C příkladu 13. <’> - C\| 1H-NMR (400 MHz, CD30D, směs rotamerů): 7,52 (d, 8 Hz, 2/ H), 7,54 (d, 8 Hz, 1/3 H), 7,39 (d, 8 Hz, 2/3 H), 7,35 (d 8 Hz, 1/3 H), 7,19 - 7,00 (m, 6 1/3 H), 2,62 (m, 1H), 1,7 - 1,65 (m, 2 1/3 H), 1,61 (s, 4H), 1,50 (s, 2H), 0,94 (m, 1H), 0,10 (m, 2/3 H). FA3-MS 477 (m + 1). Příklad 51 Část A: 1',2-dimetylspiro[isoindclin-l-on-3,4 '- piperidin]_

Do míchaného roztoku 1,47 g (10 mmol) 2-metylisoindoli-l-onu, který dodává Aldrich Chemical company, a 2,9 g (15 mmol) mechlorethamin hydrochloridu v 50 ml dimetylfluoridu se při teplotě 0°C pod argonem se pomalu přidá 4,5 g (40 mmol) 35% hydridu draselného v minerálním oleji. Reakční směs se následně pomalu ohřeje na teplotu místnosti a míchá další 3 hodiny. Ukončení reakce se potvrdí chromatograřií na tenké vrstvě při eluc 60% etylacetátu v hexanu. Reakční směs se pomalu vlije dq ledu a šestkrát se extrahuje etylacetátem. Sloučené organické extrakty se suší nad síranem sodným a odpařuji i se. Vzniklý zbytek se čistí rychlou chromatograřií při eluci gradientem 5-10% metanolu v dichlormetanu za vzniku! 1,17 g výsledné sloučeniny. 163 1H-::MR (4CC MHz, CDC13): 7,85 (dd, J = 1

7,81 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,50 - 7,^0 (z 2,93 - 2,90 (m, 2H), 2,71 (dt, J = 2,6 r 2,45 (s, 3H) , 2,31 (dt, J = 4,7 Hz, 13 (-J = 1,5 Hz, 13 Hz, 2H). 230. FA3-MS vypočteno pro nalezeno 231 (Μ + H). Část 3: 2-metylspiro [isoindolin-l-on-3, 4 ' -piperidir.'.

Demetylace se provede podle postupu popsaného Tidwellem a Buchwaldem v J. C-rg. Chem. 1992, 5", 6380-6382. Do míchaného roztoku 1,0 g (4,35 mmol) výsledné sloučeniny části A tohoto příkladu v 10 ml 1,2-dichlcr-etanu se při teplotě 0°C přidá 0,56 ml (5,2 mmol) 1-chlcr-etylchloroformátu a směs se 20 minut míchá. Po přidání 10 ml metanolu se vzniklá reakční směs zahřívá 1 hodinu pod refluxem. Po odpařování a čištění rychlou sloupcovou chrcmatografií při eluci 10-20% směsí hydroxidu sodného a metanolu v poměru 1:10 v chloroformu vznikne 0,63 g výsledné sloučeniny. n-NMR (400 MHz, CD30D): 8,02 (d, J = 8 Hz, 1H) , 7,85 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,70 (t, J = 8 Hz, 1H), 7,60 (t, J = 8 Hz, (s, 3H), 2,60 - 2,51 (m, 2H), 216 216 (M+), 185, 150. 1H), 3,75 - 3,60 (m, 4H), 3,10 1,72 široký d, J = 14 Hz, 2H) . EI-MS vypočteno pro C^H^gN^O, 301 (M+, 5%), nalezeno 163 163 Část C: 1,1 dimetylester kyseliny 2-metyls: [isoindolin-l-on-3, 4 ' -piperidin; -i· karboxylové________ Do míchaného roztoku 100 mg 2-mety: ml dimetylfluoridu se v cřebvtku c o-

1 2 hydrid draslíku v minerálním oleji při teplotě Q5C pcd | argonem. Po 5 minutách se přidá 300 mg bis (2-brometyl, t- I butylkarbamátu a vzniklá reakční směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti a následně se přes noc zahřívá pří teplotě 30°C. Reakční směs se vlije do ledu a extrahuje se etylacetátem. Organické extrakty se suší nad síranem sodným a odpařují se. Vzniklý zbytek se čistí preparativní chromatografií na tenké vrstvě při eluci 60% etylacetátem v hexanu za vzniku 16 mg výsledné sloučeniny. 1H-NMR ((400 MHz, CDClg) : 7,89 (dd, J = 1,3 Hz, 5,8 Hz, 1H) , 7,75 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 7,54 - 7,40 (m, 2H) , 4,35 - 4,10 (široký m, 2H), 3,02 (s, 3H) , 2,14 (dt, J = 5,3 Hz, 13 Hz, 2H) , 1,49 (S, 9H), 1,46 - 1,40 (m, 2H). FAB-MS vypočteno pro C^gHg^jNgOg, 316, nalezeno 317 (Μ + H, 100 %). Část D: 2-metylspiroCisoindolin-l-on-3,4 '-piperidin

Na 16 mg meziproduktu připraveného v části C se působí 2 hodiny při teplotě místnosti kyselinou chlorovodíkovou a metanolem a následně se reakční směs odpařuje za vzniku výsledné sloučeniny. Všechny spektrální hodnoty odpovídají výsledkům uvedených pro sloučeninu části B tohoto příkladu. 164 Část E: N-[1(R)-[ (2-metylspiro [iscindolin-i-cn- -3,4 '-piperidin] -1' -yl) karbonyl] -2- (ir.dcl-—3—yl) etyl] -2-[ [ (1,l-dimetyletyicxy · - karbonyl] amine] -2-netylprcpana:r,id_

Sloučenina se připrav! obvyklým pcstucen pro vazbu peptidů z 25 mg kyseliny aÍR)-íE2-[í(I,1-dinetyletoxy) karbonyl] amino] -2,2- dinetyl-i-cxcezyl] -ani no]-lH-indol-3-propionové a sloučeniny připravené v části 3 tohoto přikladu. 1H-r.TMR (4C0 MHz, CDCIg), 8,58 , 8,44 (2 široký s, 1H) , 7,80 - 7,15, 6,44 (m, d, J = 7,5 Hz, celkem 1CH), 5,43 - 5,36, 5,22 - 5,15 (2m, 1H), 4,98 (široký s, 1H) , 4,50 - 4,50 (široký m, 1H) , 3,64 - 3,50 (široký m, 1H) , 3,40 - 3,05, 2,72 - 2,64 (2m, 4H) , 2,88, 2,51 (2s, 3K) , 2,00 - 1,90 (m, 2K) , 1,52, 1,51 (2s, 3H), 1,49 (s, 3H), 1,45, 1,44 (2s, 9H), 1,40 - 0,40 (několik m, 2H). FAB-MS vypočteno pro C33H4^N505, 587, nalezeno 588 (Μ + H), 532, 488. Část F: N-[1(R)-[ (2-metylspiro [isoindolin-l-on- -3,4 '-piperidin] -1 '-yl) karbonyl] -2- (indol--3-yl) etyl] -2-amino-2-metylpropanamid hydrochlorid_ Výsledná sloučenina se připraví ze sloučeniny připravené v části E tohoto příkladu jako výchozí sloučeniny a za použití kyseliny chlorovodíkové v etylacetátu . 1H-NMR (400 MHz, CD^D): 7,84 - 6,39 (m, 9H) , 5,30, 5,15 (2 dd, 1H), 4,50 - 4,40 (m, 1H), 3,85 - 3,77 (m, 1H), 3,65 - 165 - - 165 - - 3.5C 1 o r i 3, 15 (m) , 2,95, 2,58 (2s, 2,35 (n ), 2,55-2 ,47 (m), 2,22 - 2,15 (m), 2 1,65, 1 ,5Δ, 1,60 ( 3s, 6H) , 1, bO - i , z _ . m , 1 0,9 - 0 ,3 (~:, 0,5 1_ _ 0,62 (m' . Γ Λ1 “.'iO l vypočteno nalezeno p ΓΟ 472 C23H3 (M + •v» ,-N _ C 3 O n / · Příklad 52 N- [i(R)-[[1-[[[ [ Γβ-[L[4-azido-2-hydrcxy-5-icdře: karbony!] aninojhexyl] air.ino] karbonylj metyl] suifc: 2,3-dihydrcspiro[3H-indcl-3,4 '-piperidir.j -1 '-yi; -2- (řenyimetyicxy) etyl] -2-amir.o-2-metylprcpanam: hvdrochlcrid

Do roztoku běžně dodávaného N-h.ydrcxy-sukcinimidyi-4-azidc-2-hydroxyber.zcátu v 5 ml metylen-chloridu se přidá 6-NT-t-butylkarbcnyl-n-hexylaminhydro-chlorid a 0,10 ml Huningovy baze a vzniklá snes se 4 hodiny míchá. Reakční směs se odpařuje dcsucha a pc absorbci na sloupec 15 g silikagelu se čisti chrcmato-grafii při eluci směsí hexanů a etyiacetátu v poměru 2:1 za vzniku 0,229 g acylovaného produktu. Do 29 mg tohoto produktu se přidají 2 ml tetrahydrofuranu, 2 mi 0,01 M vodného roztoku hydroxidu sodného a 25 mg jodidu draselného. Po přidání 15 mg chloraminu-T se vzniklá směs míchá 30 minut. Reakce se ukončí přidáním 2 mi nasyceného roztoku thiosírar.u sodného, ředí se 5 ml 0,05 NT kvselir.cu chlorovodík •ou a extrahuje se dvakrát 5 ml

Sloučené craganickě extrakty se promyj i 5 ml nasyceného roztoku chloridu sodného a suší nad síranem hcřečnazým.. ? zahuštění se vzniklý zbytek po absorbci na sloupec 5 g 156 rycnuou cnrcnazcgrařzí ccměru 3:1. Vznikne 2 5 eteru v w/ — v-- ' :kzu. Oddělením N-tSCC ochranné j 1.0—..".o vou v θv_acs _a _ u -o roztoku tohoto hydrcchlcr: przca %9 g kyseleno nszzcrcc přikladu 33, 0,016 itolu a 29 mg E2C a vz Lehá. Reakce a čištěni produktu :o pcstupu. Odděleni N-t30C ochranné sku 4M kyseliny chlorovodíkové v et ϊdé pevné látky. Přidáním ‘.uhličitanu sodného se tento meziprodu) pH a extrahuje se dvakrát 3 ml metyle: i organické podíly se suší nad síranem, se za vzniku výsledné sloučeninu.

vr\?V _ w . .. . ca:ici Slcučí (s, 2/3 H' (CDC1„, 400 MHz): Produkt existuje jako směs dvou rotamerů (3 : 2): 8,40 - 8,20 (m, 1H), 7,95 (s, 2/3 H), : (s, 1/3 H), 7,40 - 5,90 (m, 9 1/3 H), 5,70 4,uo (m, 4H), 4,1 3,10 (~, 4H) (m, 1H), 5,20 - 5,10 /m, 1H), 4,70 - 3 > > 3,30 (m, 5H), 3,80 - 3,50 (m, 4H), 3,40 - 3,] - 3,00 (m, 1H), 2,70 (dt, 1H), 1,90 - 1,20 (m, 14H), 1,. (s, 6H;. Příklad N- 11 í 5 ' - [ i 1,2 - d i h y d r o -1 - m e t y 1 s u 1 ř o n y 1 s p i r o Γ3Η-ιη·: -3,4'-piperidin]]-1'-yl)karbony!]-2-[fenylmety:s; ervl]-2 -ami no-2-me t y1p ro c a n ami d h yd ro ch1o r i d 157 _ N-[1 ' 5- [ <1,2-dihydro-l-metylsulfenol- spiro í3H-indol-3, 4 ' -piceridir.’ ] -1' -yl, -karbcnylj -2-(fenylmetyisulfcnyl etylj - - 2 - ar.l nc - 2 -ne t y Ip r o par, arů d_ 7 0,3 ml mez sne iu se rczcustí ~2 mg výsledr.-sloučeniny části C přikladu 44 N-'1'S -! 1,2-iihydro--l-metylsulřcnylspiro [3H-ir.dol-3, 4 ' -piperidir.' -1' -yl. -karbony!'. -2-fenylmstylthio) etyl] -2- [ [1,1-dimstyletyloxy -karbony!; amino]-2-metylpropanamidu a následné se směs chladí v lázni ledu. Za stálého míchání se dc této směsi přidá pc kapkách roztok 101 mg Cxcr.u (TM, v 0,5 ml vody. Reakční směs se několik hodin sleduje chromatograřií na tenké vrstvě na deskách silikagelu GF při eluci směsí etylacetáiu a hexanu v poměru 2:1. Dvě polárnější skvrny se vyvíjí současně s vymizením výchozího materiálu. Fc spotřebování výchozích sloučenin se reakční směs odpařuje téměř dcsucha pod proudem dusíku a vzniklý zbytek se extrahuje chloroformem. Extrakty se suší nad síranem horečnatým a vzniklý zbytek se zpracuje po absorbci na 8"x 3"x 1, 000 μ desky silikagelu GF preparativr.í chromatcgrafií na tenké vrstvě při eluci směsí etylacetáf a hexanu při vývoji dvou pruhů. Méně polární část se rozpustí v 0,5 ml anisoiu, zchladí se v lázni ledu. Po působena 0,5 ml TFA se baňka s reakční směsí zazátkuje a vyjme z lázně. Po 30 minutách se hlavní podíl TFA odstraň pod vakuem udržovaným čerpadlem a hlavní podíl ar.izoiu se oddělí odpařováním pod proudem dusíku. Vzniklý zbytek se přenese dc chlorcíomu, protřepe se s 1M hydrcger.fosřo-rečnanem draselným a dc směsi se přidá dostatek hydroxidu sodného k dosaženi hodnoty pH větší než 9. Chloroform se odstraní a vodný podíl se extrahuje několikrát chloroformem, sloučené organické extrakty se suší nad síranem Ιδ3 hcrecnazvn a zar.usti se za smzeneno Z; r*' š V ve cc ter.c r·, r v n c · 2/ jo 4 c 2 sz = 575,7, nalezeno m/e = Cász 3: N- [1 (S) - [ (i, 2 -dihydro -1 -r,ez yi s ulřc r. ví -spiro [3H-ir.dol-3,4 ' -piperidin i -i ' -vl -karconvi] — 2 — (zeny"1 na"'/’ ~—- - -2 -anino-2-netv lo r op anar.ld hydrc chlorid - ΓΊ 0 2Γ 3. IIV S ó 0 Γ Výsledná sloučenina s ými postupy. p klad 54 Příprava dvou N- [1 (S) - [ (1,2-dihydro-l-nie v_- spiro[3H (fenvine indci-3,4'-piperidin]-1'-yl) karbonyl]-2-vlsulfinvi)etvi]-2-aminc-2-metvlorooananid hvdrochloridů Část A: N- [1ÍS) - [ í i, 2 - d i h y d r o -1 - n e t y 1 s u 1 í c n y 1 -spiro [ 3H-indcl-3, 4 ' -piperidin] -1' -yl-karbony!]-2-(fenyimetyisuifinyl}etyl] -- 2 - a in i n c - 2 - n e t v 1 d r o n a n a ir. i d :nozi sloučeninou je vvss: 159 Cenrance s/cuoinv se ocoeii znora uveaer.vm ccstucen anisclu a sloučenina je zpracované cr.r v r 3 O V 6 .

Vyp eč ceno pro molekulová hrne 2 / j o 4 3 2 m/e = (n-1 551.7. oolárnějši diastereorr.er: :r.cs~ = :cj, / vypočteno pro CU-rU^N .0CS-: molekulová 27 jo 4 5 2 nalezeno m/e = (m+1) 561,7. -aS. a: N-[1(S)-[(1,2-dihydro-l-nezylsulřcnvl-spiro i3I-:-indol-3, 4 '-piperidin] ] -1' -yl) -karbonyl] -2- (íenylmetylsulřinyl) etylj-2-anino-2-metylprcpar.anid hvdrochlorid ucí sloučeniny 1¾ U 3 příkladu připravené v části A příkladu 53 nebo části 3 Příklad 55 N- [ 1 (R) - [ (1, 2-dihydro-l-metansulfcnylspiro [3H-indol--3,4' -piperidin] ] -1' -yl) karbonyl] -2- (fenylmetylcxy) ecyl] - 2-aninc-2-metylpropanamid mesylat__

Na volné baze výsledné sloučeniny, části C přiklad’ 13 se působí kyselinou metansulřor.ovcu. Výsledná sloučenina o teplotě tání 1ó6-1g6°C se získá kryszalizaci ze směsi ecylacetátu, etanolu a vody. 170 S - [ L [ l ϋ I' - 2 9R'; - [ [2-aminc-2-netyl-l-cxoprcpyi; -a.T.ir.o --3-( řenylmetyloxy! -1-oxcpropyl ] -2 , 3-dihydrcscirc-[2H-indcl-3, 4 '-piperidin; -1' -yl] sul feny 1; metyl] karbony! a------0... = /._/_;;·_δΓ ί-Γ---LUCraCS”át ΧΥ38_1Γ.Υ Z , C , .2 a , a , C , C a - h e x a h y d r o - 2 - o x o -1 H-1 h i e r. o [3, 4-d imibazcl-4 ' 3 ; cent ar. z ve o-aminc n ex ano r u, roztoku 0,103 g meziproduktu cřicravené: říkladu 33 v 5 mi nezyier.chlcridu se pře: 23 mg i-hydrcxybenztriazolu a 42 nicna. vzniklá reakční směs se 4 hedinv nezyier.chlcridu a promyti 5 ml 0,5 N kyselir.y chlorovodíkové, 5 ml nasyceného vccnéhc rozteku hydro ger.uhl i č i -tanu scciuénc se reakční směs suší nad síranem heřečnazdm zahustí se. Zbytek se čisti po absorbci na sloupec 10 g silikagelu rychlou chromatcgrafií při eluci směsí metylenchloridu a acetonu v poměru 1:1.

Do 56,2 mg meziproduktu v :le ccvY-uet: 2 ml dimetylřluoridu se přidá 23 mg březinu, 14 mg 4-N,l -dimetylamincpyridinu (DMA?) , 23 mg E2C 13 hodin míchá. Reakční směs se zpracuj postupu. Zbytek se čistí po absorbci na sloupec 5 g silikagelu rychlou chrcmazografií při eluci metylenchlc-ridu a acetonu v poměru 1:1 za vzniku 22 mg konjugátu biozinu. Po oddělení N-tSOC ochranných skupin mezylenchlc-ridem a TFA. vznikne 18,9 mg bílé pevné látky výsledné sloučeniny jako směsi rotamerů v poměru 3:2.. H-MI4R (CDCLJ: o 3,45- 8 ,23 (m, 1H), 7 o 1 (s, 1H' 1 1 -Λ _ 7 ,2S (rr., 4H) f 7,25 - 7,17 (m, 2H), 7,CO ( d z . 23 H' , 5,3C i A 4·» > 1/3 H\ 5,21 - 5,14 (m, 1H), 4,50 - 4.42 (m. ju ' 4 23 ( £ ~ 1HN, 4,15 - 4 ,C0 (m, 6H) , 3,85 - 3 7 C · - , 2H v -y > w · _ - - Λ ^ (m, 3 H' , 2,90 (db. 1 ·_’ 'i * * · t 2,83 (dt, 1H ' ? 7 7 V d . 1H ' , 2 , -C - 2,25 (η, 2H ), 2.00 - 0 ,50 (. m, 18 H' , 1.52 . -> f · ·\ Q 7 —· f * 1 J- . 6C ( 3 Zas tunuje:

Claims (7)

1. - 171 - - 171 - (I) (i:) kds R, T> znamená alkyl o 1 až 10 atomech uhlíku, aryl, arylajlkyl o 1 až 6 atomech uhlíku v alkylcvé části, cyklcalkyl-aikyi o 3 až 7 atomech uhlíku v cyklealkylevé a i rx 5 atomech uhlíku v alkylové části, alky1-K-alky1 o až 5 atomech uhlíku v každé alkylové části, arylaikj o 0 až 5 atomech uhlíku v alkylové čásoi-X-alkyl o 1 až 5 atomech uhlíku, cykioaikylalky 1 c 3 až 7 atom ΊΓ1Ί- ηí V ν ? a τ ξ η τ c ν ε :ι idir.ové deriváty obecných Sp ircpipe fp2 *jl5 R.-C-N-C—A—N II O R, rp2 'T'5 F R,-C-N-C—A—N * U N O Rs r.s C=0 i ,NL c=o I

   ja <u v cykloalkvlové a 0 a" 5 ato v a 1' < y — levé části-K-alky1 o 1 až 5 atomech uhlíku, K z ta- i mená 0, S(0)m, N(R2)C(0) , c ^ c 0 n a c c -ch2 =CR2~ nebo -C=C-, přičemž S, a 3. 1 i\Y i O Vé sku p lny 172 * mohou bv~ dále substituovaný 1 az e ao 0 ΓΤ.Υ .. d--' e - * · » ^ \ ^ 1 ** *~ * III li Ck 1 az 3 CR„ nebo C;0)CR,„ a a c. a a ary *0'/t: Sr.UO---j* * mohou být dále Suvb vi vUv » 5 · * j* — v ' /vr. 10 v -y *7i( f~r. z skupinou, halo g e n í e ny 1 ov ý n z o y o k o n, 1 >f 1 cil 3 a 1 kviz v/ni „ X ^ ^ . s. _ í. S .·% ». :cy txy o 1 až δ atomech uhlíku, 1 až •.a.T.i -r.?, me_rr.c—-.·=- "W 1 -"‘2 * ^ "2 '' N ·ν R - } C ( 0) k2’ SCpN(R? ) (Rg ) , M(R2)S(0: ,-arylovcu skupin- v: '3 \c; 5 “ - -·? ' ~ *'?λ9 ’ Ol Φ znamená atom vodíku, alkyl o 1 až 5 acci nebo cykloalkyl o 3 až 7 atomech uhlíku že se na jednom atomu nacházejí dvě alk: o 1 až δ atomech uhlíku, mohou bý o popřípadě spojen:· za vzniku cyklického kruhu o 3 az 8 atomech uhlíku, ^ ~ Cw La 0 obsahujícího kyslík. s 1 ru nebo kR„ , znamena atom vccixu něco aikv_ o _ az c n. i' R„ a R„. nezávisle znamena o a jo a.kvl o 1 az 6 atomec; * ~.e thylendioxy skupinu, C(0)0R2 a v p řípadě, ortho, mchcu být spoj aromatického kruhu o m obsahujícího jeden ne kyslík, síra nebo dus * a — ~ . r-τ ky a.rve s ku p - nu , ^u - ^ ? ne:5r:a:cr.v se
2. 3.SCT.6C- nr uhlíku, V p S * -Λ C* ^ t ’ visle znamenají aoom vodíku, alky ch uhlíku, substituovaný alkyl o 1 uimz suostttuer.ty mohou 1 až 3 hvd roxv s kuo inv . 1 s.-cuci.ny o 1 až 10 atomech uhlíku. c 1 až 5 atomech u'-' alkoxykarbcr.y I o 1 ^ v * nebo S v 0 ) — a * x v « o 1 a z 6 m o 1 - _ . . *w A C .-. v n _ i:\U v a — λ ^ -> ~ !XV . 173 H. a R_ scclečně tvoří sku·' ' •'u · ^ o La znamená skupinu 0(Η?) , 0, S s nezávisle znamenají celé čísl: uvezený význam, ?- — (CHa)-C— (CHj)y· R-a · neoc Z*VCn 2) χ L/ (C Π 2) Kze znamená skupinu N-R2 nebo O, t r i ?lucrme thy1, , .· -j Q Λ alkyl c 1 až 6 z e ny 1, suesti- *jl na r.šm.ž se 5 , fen yl, indoly 3 . 3 , .tl — ur. - 1 ku, N v,' 3 -3 ^ 5 w w w V . . J • — * v 1 a R- za v! z •0 rr. e m dusíku a - £ a _ — t #- 1' Z 0 rr.U 5 Z λ f M <]) • V -* Cl i\ M llCwav Ai / /a atomech uhlíku, szízuenzy vc^i ze sKupmy p-hydroxyfenyl, CR2, 1 až 3 atomy fl CvO)CR2, cykloalkyl o 3 až 7 ator.eor nebe C(0)N(R5) (R,) nebe mohou by: R_ levou částí skuoin R_ nebo R_ . 7 7 a obsahují 1 až 5 atomů uhlíku. 17

   -s <a O nezávisle znamenají atc vodíku, R~ , CR„ , -aryl, (CH2 ) GC (0) C-R? , (CH2 ) cC (O) C (CH, ? ,-aryl nebo (CH2 V lH-tesrazoi-=yl ) a aryl může být substituován 1 3. Z 3 atomy halogenu, 1 až 2 Λ 1 ... 7 ^ _ i ^ · .. , .· .· -K 1 2. Z 3 atomech uhlíku, 1 až 3 2 skupinami C(O)CR2, i r2, (CH qp Cpu ϊ , — a y^v > 2' q ~‘y~ „-aryl, í Cl3!S, C V (-Λ ' / t .· ^ r‘P W v w 'i ’ p- qp ·_· qp \r_-p_V -ary 1, C(C)GR2, 1-H-te SC2N(R2)-arylf S02N(R2)(R?) a substituována 1 až 2 aikylovými skupinami o 1 až atomech uhlíku a R2 a aryloví páde dále substituovány 1 až sxuc ma v vπ, v a «urr— q rw —__ϋΛ 3 skuoinarri c;o)C(CH2^-aryl 2 skupinami C(0)CR2=. . at 2 skupinami lalogenu, 1 až 3 alkvlovvmi , - ’ NK i lw — ^ ?Jr.u = .« il — V. ^ Λ 'C Λ \ —' N. * ‘ (R ů. 3. Λ ' 'r v_ V, - . i v rc >, . > Λ 1 1 Π 1 q 2“2a SC , :.'HC . 0)3, . SvO) R 1 až 2 skupinami Cpi',' C(0)N(R„ HCH^ -arvl . tbytky setra n : \ V": 1 ·ρ '?···· v q 3)?KR^ WR ) , jj(R. / c 2 a x , OC ( 0 ) N ( R . í3 1 Λρν·_· _ f ^ Λ ' q .,'-'·'11· . ‘Λ··0 .q v. U ' Γ., , v-* d λ J. j. .UCH^ t 175 až 5 a R^, zrazená biotin, aryl r 1 r.ebc 2 skupinami 0Rp, 1 až 2 a-skupinami ne: : nitroskupir.ami , znamená celé číslo 0, 1 nebe 2, znamená celé čísle 1 nebe 2. Q může popřípadě znamenat i—1 O G, * · » I a J jsou atomy uhlíku, dusík přičemž alespoň jeden z těchto atom a jeden ze symbolů G, H, 3__/ Λ.3__ zebe J může chybě' cickveh kruhů c 5 za vzniku heeerccyklických aroma nebo δ atomech v kruhu, oky přijatelné min. ja.oc i i a soli a jednotí: rmaceut: o sloučí
3. 2. Spiropiperidincvé deriváty podle nár co a * r·* a <r n vzor

   (lil) kde 176 alkyl o 1 až 10 atome uhlíku v alkyl atomech uř ' uhlíku v alkvl u atomeon a t cm.e cr. ur. -1 ku—X—alky _ alkyl c 0 ač 5 atomech o I az - azcr.e. o 1 ač 4 atomech uhlíku, cykle alky laiky: atomech uhlíku v cyklcalkylevé a C ač 5 1 ač 4 atome; v alkvlové části-X-alkvl uhlíku, kdí X zr.a...ena 0, S(0) , -CR0=CR„-, -( m 2 £ kde R2 a alkyiovš skupiny jsou p. tuovár.y 1 ač 7 substituer.zy ze sl S v0) -alkyl o 1 ač 4 atomech uhlíku. CR^ nebo *m 2 a a arylcyé skupiny mohou být dále substituovány 2 alkylovými skupinami o 1 ač 4 atomech uhlíku 2 atomy halogenu, 1 ač 2 skupinami h\ R 17 W IV) methylendioxy, S(0)^Ro, C { 0) C R. ? , ς Λ V 3 ' m 2’ 2 v“2 i_ r.. \ *J '--o - uhlíku, znamená atom vodíku, alkyl c 1 ač cyklcalky 1 o 3 ač 7 atomech uhlíku a v případě, ž O α.υι.. 5Π 3.Ζ0ΓΠ V3.Z1. dvě alk hl íku, meheu být spe c 4 ač 6 aton iech uhl 1 3- 1 nebo 2 heteroatomy ze skupiny kyslík, síra nebo sk; pina r'r'2a’ ie atom vodíku nebo alkvl c 1 ač 6 atomech uhlíku. ne;av;s:e znamenaje atom vecixu •1 o 1 ač 4 atomech ur f\ \ a · ; skut inu, S \ 0 -alkvl ’ m ku, Cr ^ nebe C v 0)CR^, o í. I - 177 I

   ' (CH2)x C (CH2)y R73 ** A ·> Z*·» 7' N(R2)-{CH2)x C —(CH2) R7a kde X a y nezávisle znamenají O, 1 nebe 2 R„ a R„ nezávisle znanénaji vodík, alkyl uhlíku, substituovaný alkyl o 1 a kde. substituenty ze skupiny íenyl, indclyl, az o s(o: rr.ee n un. spojeny s jednou neoo s ky 1 o 1 B.Z SLZ 4 SLZ C w ^ r. u: 2 azer.y i. o — a λ - - Q ^ λ · v» ·/ ” ^ a Z- η· iv*c i P.arr. i. ve ;ků ne z i ker ,ζ ον; nebe .. ρ ;nto můstek obsahuje 1 až 3 accrr.y ur..u 178 B , D nezávisle znamenají C(RQ) o NR c pricem nechán, cimz vznikne : kladu, že ježen ze syr C Ra ) v ?.., nebo C = 3 O J- O a 7 ,,,SV72 ' T λ ' ,ι'λ e · ř **· *«-\ -λ ^ * z- —. z<w j / c* j « u «L. i i»w v ~ < jeden ze symbolu 3 ~ ^ Λ ,-' n — C ' Λ ' O 'V > m nebo NRa, a R, - nezávisle znamenají vodík. j.0 (CH2)cC(0)CR?, (CH5)nCC3)0CH 2 c (CK5) (lH-tetrazol-5-yl}, přičemž ary! substituován 1 až 3 atomy halogen· skupinami o 1 až 4 atomech uhlíku, 1 0?·2 nebo 1 až 2 skupinami 0(0)3?.,, R. znamená Ra, (CH?)„-aryl, C - ary., S02H2, Su2(CH2)Q-aryl, C(C)M(R, -aryl, l-H-tetrazolyl-č-yl, SCaMHC=M, SCulIR SG2N(R2)(R2) a skupina (CH?)^ je popřípadě vána 1 až 2 alkylovými zbytky o 1 až 2 atomech u: a skupina ?2 je popřípadě substituována 1 až 2 s· tuentv ze skuDinv 0R-„, 0(CH_)„-aryl, Cy0'0R, , “ * ” 2 a 2 c u * C(0)N(R2a)(R2a)f S(0)mR2a, i-H-tezrazol-5-yl, C(0)MHS02R2a, C(0)MHSC2(CH2) -aryl, N(R2a)C(0)N(R2a)(R2fl) nebo N(R, = ) C ( 0 ; M( R? = ' (CHp , -aryl, aryl může být popřípadě dále substituován jedním nebo dvěma substituenty ze skucir haloger.u, alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku, l-H-tezrazol-5-yl, dále skucinu 30 ' ' v2 ' U) l\) NHC(0)R^., kde w znamená číslo 2 a. k biot inu, aryl nebo a dvěma skupí námi cr2, 1 pinami nebo ni tr 'ObhllOi! znamená 0, 1 nebo 2, popřípadě znamená 0, 1, 2 nebo 3 a 179 arylovců skupinou je íenyl, naítyl, pyrit: lyl, thiazolyl nebo pyrimidir.yl, — * a c —ía «. akcž i farnaceutickv oři iate1 "·= *: 1 = recmery těchto sloučenin. Sc ircpiperidincvé deriváty ::, v nichž chybí symbol ?. ;cc_e r.a: c.-.u í v z o:
4. 4. Spiropiperidinové deriváty podle nároku Ξ, obec: vzorce IV Η H p, F,,—C-N-C—A—N 11 *c O R= C=0

   r‘Sb IV kde Λ. i znamená alkyl o 1 až 10 atomech uhlíku 1 až 4 atomech uhlíku v alky levé části. o 5 až 6 atomech uhlíku v cykiealkylevé a 1 až 4 ar mech uhlíku v alkýlové části, alkyl c 1 až 4 atomeph uhlíku-K-alkyl o 1 až 2 atomech uhlíku, arylalkyl jo 0 až 2 atomech uhlíku v alkylové části-K.-alkyl o 1| 130 R. až 2 atomech uhlík·-:, cykloalkylalkyl .íku v cykloalkylové a Q až 2 ac cr.eoh uhlík.·. '3 c as ~ i—k - a^xy .i. o 1 as 2 atom;ech uhlixu. 2~icucvány jedním až dvěma subs · 'U5r*v aa skuclr.·.· alkyl cla:- accmech uhlíku, accmy halogenu. IR,. C( j)0R-, CF- nebo S(0) F._, č. O ΓΓ* c znamená vodík, alkyl o 1 až 4 a::~.a:h uhlíku, cykl - alkyl c 3 až δ atomech uhlík na 1 atom vázány dva alkylov uhlíku, mchcu popřípadě býz spojeny za vzniku 6-členného kruhu, popřípadě obsahujícího jako a boxy kyslík nebo skupinu znamená vodík nebo alkvl o 1 až - atomech uhl: O0 a znamer.aj í atom vodíku nebo Λ 5 * ^ 3* A »“* * * 4 atomech r.y -re xy s x .u o 1 až 4 avCT.scr. ur.llKU, 5 ch uhlíku, nebo CF„. o R , a <3. Λ-3 nezávisle znamenají vodík, alkyl o 1 až - atomech uhlíku, substituovaný alkyl o 1 až - atomech uhlíku, kde substituenty mohou být 1 až 2 hydroxyskupir.y nebo S(0) -alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, m A zr.amena skuomu - (CKj) - c R_ / a A x a znamená 0 nebo 1 181 P-7 a R7a nezávisle znamenají vodík 3 atomech uhlíku nebo mohou být skucir.v visle spojeny s jednou za vzniku alkylenových siku a alkylovou částí skupin R_ nebo ? ó- r.ebc 6-č ienných kruhů, obsahu-ícich - az nebe ober.a skupinami ♦ »iL* 3 ^ .tr--.*s w Γ. Z Z J * . D nezávisle znamena-’í CÍR,,1! w 3 ^ VN » *·* , ·'?.a za předpokladu, že jeden znamenat C(Rg)(R10) nebe C = druhý z těchto symbolů znamená 0, 5{G} nebo nezávisle znamenají vodík, R, nebo (CH„'„-aryl a R_ a .- k10 aryl může být substituován i až 2 substituenty ze skupiny atom halogenu, alkylový zbytek o 1 až - atomech 0R? nebo C(0)0R2, R3 znamená C(0)R2, C(0)(CH?)( r\i ní -ary_. Sv,.?., C(0)N(R2)(R2), C(0)N(R2)(CH2) -aryl, a skupin ^ je popřípadě substituována 1 až 2 alky levými skupinami 0 1 až 2 atomech uhlíku a skupina RP je popřípadě substituována 1 až 2 skupinami 0R2a, 0(CH2)c~ary1. C(0)OR2a, C(0)N(R2a)(R2a), S(0)“?.2a, l-H-tetrazcl-3-yl, C(0)NKS0oR- nebo N(R, )C(0'N(R..)(?,, } , přičemž aryle-vá skupina je popřípadě substituována jedním, až dvěma substituenty ze skupiny 0R2a, a”orn halogenu, alkyl o 1 až 2 atomech uhlíku, C(0)0R2q. l-H-tetrazol-3-yl dále může Ra znamenat sku nebo S(0) R m“2a’ v/ znan.er 30, ( CH_ ) C0NH(CH, ) NKC (0) R. . , kdí 2 2 q 2 w li až 6 a R^., je zbytek biotiku neb. stitucvaný 1 až 2 CRa, atomy halogenu, azideskupin: nebo nitroskupinami, znamená 0, 1 nebe 2, ocořípadě znamená 0, 1, 2 neb 132

   183

   tr Γ* ··

   =_// Ns Γ" ' ‘ ' wTow i 1OW1 »' — . // \\_r*·_: λ>_: · r \ J '2°' ‘2wr,2· znamená aocm vodíku nebo fluoru. znamená 0, S, S(0] Mí’ Ί Ncr i"’ \'C 1U“2··’ ‘“''i “2f mc(o> (?.p), mso2(ch2^ch, mscp(ch;· ,c::h. N-SC- (CH, 5 C (0} -N (?>9 ) C R. } . N-SC,~CrL ‘ ,3 . 2 2 G 2 i riO N-S02(CH2)qC(0)-N(n2)(CH2). -* \ -i ·

   * i w C Ci"· — N

   // V_v N-S02(Cr;2LC(0)-N(n2)(CH2)w N~. / N-NH N-S02[CK2)=—(/ N=N 18 18 A. ary 1 je pyridyl nebo fenyl, popřípadě subs -izucvar.y _ až 2 atorty halogenu, ’' p zr.arer.á vodík nebo alkyl o 1 až u atoreoh uhlík 'i i znarena číslo i něco i. w u. znarená C, 1 nebo 2, -4 c zr.ar.ená 1, 2 nebe 3, w zr.arer.á číslo 2 až δ, jakož i řarraceuticky přijatelné soli a ň ed~o za rery těchto sloučenin. δ. Spircpiperidinové deriváty obecného nároku 1 ze skupiny N-/1 (R) -/ (1,2-dihydro-l-.ret hansu li onyisp. -3 , u -pipsridin-1 -yl )karbcr.yl/-2-(1H.indol-- ar.lr.c~ 2 -ne thy lp ripananid, kr-/1(R)-/(1,2-dihydro-l-me thar.kar -piperidin/-! -yl)karbcnyl/-2-( iH-indol-3-o •2-ne thyIpropananid, ir.ao. N-/1 (R) -/ (1,2-dihydro-l-benzer.sulíe 3 , - -piperidin-1*-yl)karbony1/-2-(1H-- 2 -re thy 1 p rop ar. ani d, N-/1(R)-/(3,4-dihydro-spiro/2H-ridir. '-1 -yl )karbcr.yl/-2-( IH-inde - r e t h y 1 o r o c ar. ar. i d, kI-,'l(R'-/(2-aoetyl-l,2,3,u-‘:e' -t -piperidin/-! ”-yl )karber.yl ' n.e chviorooar.arid, 185 2-dihydro-l-rr.e thar.sul icr.y lap i re ’ 3 H - ir.de 1--piperi dir./ -1 ~ -yl }karbcnyl/-2-( feny Im.e thylexy ' e thy 1 '-2--aminc-2-me thylpropanarnid, N-/1(3:- •V*J v_ / ]_: o' _ / (i; 2-dir.vdro-1 -r.e er.ar.su' *'; r.v' se r e 2 - - ir d; 1 - ~ v. J-. i-.u, — -y·, Nu* “· \ - ~ · · J- - . ·. w . . . j · · Λ; «- - « «- - 2 - a m. i n c - 2 - m. e t h y 1 p r o p a r. a m, i d m. e s y 1 á e , (r: -/ (1,2-dihydro-l-nethar.sulf e: -3 , --piperidin/-l ' -yl )karbcr.yl/-2- ( 2 ” , oxy) e t h y 1 / - 2 - a rr. i n c - 2 - m e ohyIp ropyramid . M-/1 (?.; -/ (1,2-dihydro-i-methar.sulfer -indol-3 , ^ '-piperidin/-! '-yl / karbony 1, e o h y 1 / - 2 - am i r. c - 2 - m. s t h y 1 p r c ρ ar a m. i d, ,su.r _?_/ -'a-v*·· -a--· i - v; s r.y i me t r.y _ c xy M-/KS}-/ (1,2-dihydrc-l-metharsulf enylspirc 2H--irde; -2,4 piperidin/-! -yl }karbcr.yl/-2-(fer.ylneer.y 1 er.i e : ethy 1 - 2-am.ir.o-2-me thylpropanarnid, N-/1 (R' -/ (1,2-dihydro-l-.methar.3ulf or.y Isp irc 2H-indc 1--3,4 -piperidin/-! -yl )karbonyl/-3-fer.ylpropy 1 '-2-amir.c-2 - m. e t hy 1 p r o p ar. amid, N-/1 (R) -/ (1,2-dihydrc-l-me thar.sul fe r.y Isp irc ( 3H-ir.de 1--3,4' -piperidir./-!' -yl )karbcnyl/-3-cyklchexy Ipropy 1/-2- - ami.ro-2-me thylpropan amid, N-/1(R' -/ (1,2-dihydro-l-nethansulf er.ylspiro/ 3r.-indcl--2,4 -piperidin/-! -yl )karbcnyi/---fer.ylbutyl.'-2-amir.c-2--methy Ip rop ar amid, r.y 13 -UCT N-/ !(?.)-/(! , 2-dihydro-l-m.ethar.sulf; -3,4 -piperidin/-! -yl )karbcr.yl/-2-( 5-: e t h.y 1 - 2 - an. i nc - 2 - me t hy 1 p r o p ar. am i d . N-.·' l(R}-/(1,2-dihydro-l-metharsulfcryl-: -ir.doi-3,4 ' -piperidin/-l *-yl)karbony 1 -2 - ( 5--3-vlN e rhvl '-2-aninG-2-nethvloroosnanid . :rs: i ·. - do i - 185

   kde R. vyzná: uvedený R3b’ R^’ R R A 3 η - r a n ma j í ve vzorci I . ůscb vvrofcv s i y C- O ' C ^ vzorce I podle nároku 1, v y z n a e že se uvede do reakce sloučenina oce O V 187

   kde jednotlivé symboly nají vý an, uve A λ v* \r ^ w * *J V" se sloučeninou obecného vzorce HOOC-A-N< HOOC-A-N< nebo Rt kde a R- mají význam, uvedený ve vzorci I a L znamená ochrannou skupinu, která je později odstr něr.a, načež se popřípadě získaný produkt převede r.a sůl.
5. 9. Způsob výroby spiropiper idinovýoh d vzorce I podle nároku 1 , v y z n a č u j í o že se uvede do reakce s loučenina obecného v: se t ; 2 nebe 133 133

   Λ V Η

   kde Jednotlivé symboly mají význam, uvedený v se sloučeninou obecného vzorce 12 nebo 12a R, R« O Ra i - i - II I R.—r-N-C-A-N—L neoo 1 i R2 Íso i * I ii R. N-C-A-N-R: COOH COOH 12a 12 kde L znamená ochrannou skupinu, která se později odstra: a ostatní symboly mají význam, uvedený ve vzorci I, načež se získaný produkt popřípadě převede na svou sůl. --i-£u—Způsob—zvý-šen4..--k-OF.c-e-Pit-pa€-e--e-ndo§e-tTn4-h-s—nůs-t-ová: •hormonu u— o-l-ov-ěk-a-net>o-jin-ýcfe—žó-voč-ks-h-ů-;—v-—y—a—n—a-ž - u—J- "0-C‘U -ί—CT t-’ -JL ' ϋ-s—e--1— Ί.—m—,—z-e-—woq-ga~va—uc ^ nne—mnc-jj ~ .. -ainovvoh· derivátů obecného-vzorce—I o o dle r, á
6. 10. Farmaceutický prostředek pro zvýšení e dukce nebo uvolnění růstového hormonu u člověka nebo jiný' vočichů, v y z n a č u j í c í s e tím . že obsahuje inné množscví spi rop iperi dinovéhe derivátu obecného vzorce podle nároku 1 a inertní nosič· 189 l4. Farmaceutický prostředek pro zvýšení endogenní produkce nebo uvolnění růstového hormonu u člověka nebo jiných živočichů, vyznačující se tím, že obsahuje inertní nosič a účinné množství spiropiperidómového derivátu mi pro zvýšení sekrece růstového hormonu, jako jsou GHR?-? GHF.P-1, GHRP-2, faktor pro uvolnění růstového hormonu GF.F některý z jeho analogů nebo IGF-i nebo IGF-2. —~3~,—Způsob- léčení osteoporosy-—v—y—z n -a č u j—í—s—í- -s—e-1—í—m——že--&e -n-emoo»nému—pod^vá-bi-iho-s-f-on-á-t-v komb ir.ac i •&Θ—sp-ipo-piperi-di novým· derivátem obecného v-s-oroe—é—-pe-dle -n-á-*ek-j· 1·.- -=~-i—£p4eob~-ped-le--nároku 13, v v—z -n a o--u -j—í—9—í--s—§—í—i—sj—,—Ž3—se—jako—b i fosfor, át ušije aler.dror.g.t..
7. 12. Farmaceutický prostředek pro léčení ostecpcrcsy vyznačující se tím, že obsahuje inertní nosič, bifosfcr.át a spiropiperidinový derivát obecného vzorce I podle nároku 1. 1¾. Faragiceutický prostředek podle nároku 15, v y značující se tím, že jako bifosfonát obsahuje alendronát. ^astuouje: