RU2054674C1 - Способ определения концентрации ионов калия в биологическом материале - Google Patents

Способ определения концентрации ионов калия в биологическом материале Download PDF

Info

Publication number
RU2054674C1
RU2054674C1 SU884613137A SU4613137A RU2054674C1 RU 2054674 C1 RU2054674 C1 RU 2054674C1 SU 884613137 A SU884613137 A SU 884613137A SU 4613137 A SU4613137 A SU 4613137A RU 2054674 C1 RU2054674 C1 RU 2054674C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
mmol
mmole
dehydrogenase
enzyme
ions
Prior art date
Application number
SU884613137A
Other languages
English (en)
Inventor
Натаниель Берри Майкл
Таун Майкл-Гарольд
Крессе Джордж-Буркхард
Геррманн Уве
Original Assignee
Дзе Флиндерс Юниверсити оф Саут Аустрэлиа
Берингер Маннгейм ГмбХ
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Дзе Флиндерс Юниверсити оф Саут Аустрэлиа, Берингер Маннгейм ГмбХ filed Critical Дзе Флиндерс Юниверсити оф Саут Аустрэлиа
Application granted granted Critical
Publication of RU2054674C1 publication Critical patent/RU2054674C1/ru

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/64—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving ketones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
    • C12Q1/32—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving dehydrogenase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
    • C12Q1/37—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving peptidase or proteinase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
    • C12Q1/40—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving amylase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/48—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving transferase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/527—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving lyase
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/84—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving inorganic compounds or pH
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2334/00—O-linked chromogens for determinations of hydrolase enzymes, e.g. glycosidases, phosphatases, esterases
    • C12Q2334/10—O-linked chromogens for determinations of hydrolase enzymes, e.g. glycosidases, phosphatases, esterases p-Nitrophenol derivatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2337/00—N-linked chromogens for determinations of peptidases and proteinases
    • C12Q2337/10—Anilides
    • C12Q2337/12—Para-Nitroanilides p-NA
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
    • G01N2333/91—Transferases (2.)
    • G01N2333/912—Transferases (2.) transferring phosphorus containing groups, e.g. kinases (2.7)
    • G01N2333/91205—Phosphotransferases in general
    • G01N2333/9121—Phosphotransferases in general with an alcohol group as acceptor (2.7.1), e.g. general tyrosine, serine or threonine kinases
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
    • G01N2333/914—Hydrolases (3)
    • G01N2333/924—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/962—Prevention or removal of interfering materials or reactants or other treatment to enhance results, e.g. determining or preventing nonspecific binding

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
  • Light Receiving Elements (AREA)
  • Semiconductor Lasers (AREA)

Abstract

Использование: медицина, в клинических лабораториях для определения неорганических ионов в биологических жидкостях, в частности в сыворотке или плазме крови. Сущность изобретения: у пациента берут пробу крови, затем 10 мкл плазмы или сыворотки крови помещают в инкубационную среду, содержащую 50 -10000 ед/л пируваткиназы, полученной из Bacillus stearothermophillus, 0,3 - 10 ммоль/л фосфоенолпирувата (нейтральной трис-соли), до 30 ммоль/л 4, 7, 13, 16, 21 - пентаокса-1, 10-диазабицикло-8, 8,5-трикозана, 0,10 - 0,8 ммоль/л 50 - 500 ммоль/л буфера при pH 8, 1 - 10 ммоль/л ионов марганца или магния, 2 - 100 ммоль/л хлористого лития, 0,5 - 10 ммоль/л АДФ (свободная кислота), 5000 - 100000 ед/л лактатдегидрона сыворотки, 2500 - 20000 ед/л глютаматдегидрогеназы (определено при 25 oС), 1 - 10 ммоль/л кетоглютарата (свободная кислота), или содержащую 50 - 1000 ед/л глицериндегидрогеназы, полученной из Enterobacter aerogenes, 0,3 - 3 ммоль/л глицерина, до 30 ммоль/л 4, 7, 13, 16, 21 - пентаокса - 1, 10 - диазабицикло - 8, 8,5 - трикозана, 0,1 - 5,0 ммоль/л NAD, 20 - 500 ммоль/л буфера pH 9, до 5 г/л альбумина сыворотки, 2500 - 20000 ед/л глютаматдегидрогеназы (определено при 25 oС), 1 - 10 ммоль/л кетоглютарата (свободная кислота), или содержащую 50 - 10000 ед/л ацетальдегида дегидрогеназы, полученной из дрожжей, 0,3 - 30 ммоль/л гликольальдегида, до 30 ммоль/л 4, 7, 13, 16, 21 - пентаокса - 1, 10 - диазабицикло 8, 8,5 - трикозана, 0,05 - 2,0 ммоль/л NAD , 50 - 500 ммоль/л буфера pH 7 - 8, 0,1 - 2 ммоль/л дитиотреитола, до 5 г/л сывороточного альбумина, 2500 - 20000 ед/л глютаматдегидрогеназы (определено при 25 oС), 1 - 10 ммоль/л кетоглютамата (свободная кислота), или содержащую 50 - 10000 ед/л ацетальдегида дегидрогеназы, 0,3 - 30 ммоль/л 4-нитрофенилацетата, до 30 ммоль/л 4, 7, 13, 16, 21 - пентаокса - 1, 10 - диазабицикло - 8, 8,5- трикозана, 0,001 - 0,1 ммоль/л NAD, 50 - 500 ммоль/л буфера рН 7 - 8, 0,1 - 2 ммоль/л дитиотреитола, до 5 г/л сывороточного альбумина, 2500 - 20000 ед/л глютаматдегидрогеназы (определено при 25 oС), 1 - 10 ммоль/л кетоглютамата (свободная кислота), затем инкубационную смесь инкубируют при 37 oС в течение 0,1 - 5 мин с последующим спектрофотометрированием при 340 нм и расчетом концентрации ионов калия с помощью калибровочной кривой. 4 з. п. ф-лы.

Description

Изобретение относится к способам и реагентам для определения ионов калия, именуемых далее аналитами в биологических жидкостях.
Изобретение основано на способности многих аналитов стимулировать или ингибировать активность чувствительных ферментов. Аналиты могут быть катионными или анилонными, металлами или не металлами, простыми или составными. На практике часто обнаруживают, что аналиты присутствуют в образце в концентрации, которая находится вне пределов чувствительности соответствующего аналитического индикаторного фермента, или возникают сложности, связанные с наличием других ионов, к которым данный фермент также чувствителен. Изобретение касается этих проблем и разрешает их различными способами.
В практике клинической биохимии измерения электролитов в сыворотке являются наиболее обычными аналитическими тестами, которые осуществляют в больницах. Такие определения необходимы не только для рутинных исследований, но часто и в экстренных угрожающих случаях, когда важна скорость анализа.
Так как основной причиной задержек в больницах является перевозка образцов из палат в диагностические лаборатории, способ, который позволяет легко произвести определение у постели больного, представит значительную ценность в опасных ситуациях.
Обычным способом анализа калия в практике клинической биохимии является пламенная фотометрия. Этот способ основан на том, что некоторые атомы при нагревании переходят в возбужденное состояние и излучают свет характеристической длины волны при возвращении в основное состояние. Интенсивность энергии излучения на характеристической длине волны, которую излучают атомы в пламени, прямо пропорциональна количеству атомов, возбужденных в пламени, что соответственно прямо пропорционально концентрации интересующего вещества в образце. Необходимые приборы сложны, относительно дороги и требуют использования горючих газов.
В альтернативном способе, особенно для калия, используют ионоселективные электроды. В идеале каждый электрод обладает уникальным ионоселективным свойством, которое должно позволить ему реагировать только на один ион. На практике это не так, и для каждого ионоселективного электрода имеются "мешающие" ионы. Более того, ионоселективные электроды вовсе не абсолютно специфичны, хотя обычно возможны поправки. Такие электроды измеряют потенциал, создаваемый в присутствии специфического иона. Приборы относительно дорогостоящие. Ни один из способов нельзя осуществить спектрофотометрически, и поэтому клиническая потребность в определении ионов приводит к существенному усложнению коммерчески доступных клинических анализаторов, большинство из которых сконструировано главным образом для спектрометрических анализов. Оба способа требуют высокой степени профессионализма и опыта для их успешного применения.
Основным недостатком этих способов является применение растворов, содержащих высокотоксичные вещества. Некоторые способы сложны и неточны (например, титрование). Многие из реагентов нестабильны, а калибровочные кривые нелинейны (например, роданидный способ). Некоторые из этих способов нуждаются дополнительно в предварительной подготовке для исключения помех из-за содержания протеина в образце.
В аналитической биохимии W. H. Outlaw и O.H.Lowry, 92, 370-374 (1979) описан ферментативный анализ для определения ионов калия в тканях. При этом способе использована пируваткиназа из мускула кролика, которая активируется ионами кальция и ионами натрия, причем первые примерно в сорок раз более эффективны. Благодаря такой неспецифичности этот способ годится для растительных материалов, в которых ионы калия являются преобладающими, но не подходит для измерений в тканях живого организма подобных сыворотке, которые содержат тридцатикратный избыток ионов натрия. Поэтому ионы натрия вызывают неприемлемые помехи при использовании ферментативной фотометрической методики, описанной Лоури, для измерения калия в плазме или сыворотке. Другой проблемой является то, что ионы аммония аналогично активируют ионы калия. Указанный способ не предназначен для решения этих критических проблем в отношении анализа ионов калия в биологических жидкостях (таких как сыворотка), она также не предлагает никаких способов для определения ионов натрия.
Поэтому целью настоящего изобретения является создание способа и реагентов, которые позволили бы избежать вышеуказанные затруднения. В настоящем изобретении эти проблемы разрешены за счет способа определения ионов (аналитов) в биологической жидкости, в которой измеряют влияние этих ионов на активность фермента.
Ключевым признаком изобретения является использование селективно связывающих агентов для доведения свободной концентрации аналита до оптимального интервала для аналитического фермента, особенно, если разбавление жидкости невозможно. Кроме того, предлагается использовать конкурентоспособные ингибиторы соответствующего аналитического фермента для снижения его чувствительности к аналиту, что позволяет измерять последний при более высоких концентрациях. Это особенно полезно, например, если селективно связывающие агенты труднодоступны или неприемлемо дороги.
Используют селективно связывающие агенты для снижения свободных концентраций посторонних ионов до уровней, при которых их влияние более не принимается во внимание. Используют также тот факт, что конкурирующий ингибитор может взаимодействовать более эффективно с посторонними ионами, отличающимися от аналита, за счет чего возрастает чувствительность фермента к аналиту по сравнению с посторонним ионом.
Важным моментом является выбор оптимальных условий реакций, включая выбор подходящего изофермента, чтобы стимуляторные или ингибиторные воздействия аналита оказались значительно сильнее, чем для посторонних ионов. Действие аналита и посторонних ионов на активность аналитического фермента должны быть аддитивны, чтобы если известна концентрация мешающих ионов, концентрацию аналита легко можно было бы определить по разности. Если известно, что посторонний ион присутствует в относительно постоянной концентрации в анализируемой жидкости, то на него может быть сделана поправка путем включения соответствующей концентрации постороннего иона в стандартные (калибровочные растворы. Другим способом анализа таких аналитов является использование конкурентного связывающего анализа, если аналит вытесняет другой ион из связывающего агента, и определяют действие высвобожденного иона на активность соответствующего фермента.
Подходящие ферменты.
В качестве подходящих ферментов можно указать (Н.J.Eventet al. Ann.Rev. Plant. Physiol. 17, 47, 1966 следующие:
трансферазу, например трансферазу, переносящую фосфорсодержащие группы. Такой трансферазой может быть пируваткиназа. Вместо пируваткиназы можно использовать и другие каналы, такие как аденилаткиназу или гексокиназу, чувствительные к иону магния или иону марганца. Другой трансферазой является ацетаткиназа (из Е.coli). Примером служит пиридоксалкиназа из мозга, которая чувствительна к ионам цинка;
гидролазы, такие как гликозидаза, например α- или β -D-галактозидаза (из Е. coli), карбоксипептидаза А) из бычьей поджелудочной железы) коллагеназа (из Сlostrodium hystolicum амилаза) из слюны или поджелудочной железы) или фосфогликоллятфосотаза;
пептидные гидролазы, такие как цистеин или тиолзависимые протеиназы, конкретные примеры которых Сalpain I и II, называемые также активированными кальцием нейтральными протеазами (описаны Сасаки и др. в J.Biol.Chem. 259, 12489-12494/1984). Последние феpменты можно выделить и очистить из различных тканей животных, например, из печени и почек крысы, эритроцитов человека и свиньи, мозга быка и скелетного мускула кролика по способам Китазары и др. описанным в J.Biochem. 95, 1759-1766/1984). Еще одним примером может служить дипептидиламинопептидаза (Е.С. 3.4.14.1, Cathepsin C), J.Ken. Me Donald, Bioch. Biopnys. Res Commуnication, 24(5), 66, 77f. Другим источником ферментов являются протеины, полученные с помощью генной рекомбинантной методики;
оксидоредуктазы, такие как глицериндегидрогеназа (из Enterobacter aerogenes), ацетальдегидрогеназа (из дрожжей) или тиросиназа (катехолоксидаза);
лиазы, такие как альдолаза (из дрожжей) или карбангидраза (из бычьих эритроцитов);
различные ферменты из галофильных организмов. Другим источником ферментов являются протеины, полученные методом генной рекомбинации.
Селективные связывающие агенты.
Для связывания аналитов или посторонних ионов можно использовать широкий круг связывающих агентов. Такими связывающими или маскирующими веществами являются криптанды, коронанды, краунэфиры, поданды, сферанды, гемисферанды, каликсарены и их сочетания, природные ионофоры, например антибиотики, циклические пептиды подобные валиномицину, комплексоны и хелатирующие агенты, например иминодиуксусная кислота, ЕДТА, нитротриуксусная кислота и их производные.
Примерами хелаторов, способных связывать поливалентные ионы, в частности двухвалентные катионы, являются этиленгликоль-бис-(2-аминоэтиловый эфир)-N, N,N',N'-тетрауксусная кислота (называемая ЕGTA) и этилендинитрило (тетрауксусная кислота (ЕДТА). Хотя существует много связывающих агентов, которые могут связывать поливалентные ионы, например ЕДТА и его производные, агенты, которые способны связывать одновалентные ионы, встречаются реже. Тетрафенилбор связывает ионы калия. Однако группой соединений с более широкими возможностями являются криптаны, которые служат примерами реагентов, которые селективно связывают моновалентные катионы в водных растворах R.M.Ztaff и др. Chem. Revus, 85, 271-339). Специальными примерами криптандов являются Kryptofix® соединения фирмы Меrck-Schuchardt, например:
4,7,13,16,21-пептаокса-1,10-диазабицикло 8.8.5-трикозан, Kryptofix® 221, с. 438, каталог Меrck-Schuchardt, 1987/1988, N 810646 (К 221);
4,7,13,16,21,24-гексаокса-1,10-диазабицикло 8.8.8 гексакозан, Kryptofix® 222, с, 438, каталог Меrck-Schuchardt, 1987/1988 N 810647 (К 222).
В качестве маскирующих соединений для исключения посторонних анионов потенциально можно использовать следующие классы соединений: анионкриптанды, гетероциклофаны, катапинанды и неорганические комплексы металлов или нерастворимые соли. Конкретные примеры соединений, комплексующих анионы, описаны в литературе: например, азамоно- или азаполициклы, макроциклические четвертичные тетраэдронные соединения, макроциклические бис-металл-комплексы, макроциклы с ковалентно внедренными центрами льюисовых кислот, протонированные или алкилированные четвертичные криптанды или катапинанды (Е.Р.Schmidtchen Nachrichten Chem. Techn. lab. 36(1), 1988 S. 8f Е.Сraf. J.Amer Chem. Soc. 98(20), 1976, 6403 f; С.Н.Раги, J.Amer.Chem.Soc. 90(9), 1968, 2431), так же как, например, гексахлорный комплекс Fe(III) или нитрат серебра.
Функция связывающих агентов.
Эти связывающие агенты используют для селективного связывания мешающих ионов и для снижения концентрации аналитов до оптимально измеряемых уровней, если невозможно разбавление образца.
Одним из вариантов изобретения является способ, при котором присутствующий связывающий агент образует комплекс с "индикаторными" ионами, причем из этих комплексов индикаторные ионы стехиометрически замещаются аналитическими ионами, и определяется влияние замещенных индикаторных ионов на активность фермента, за счет чего получают косвенное определение величины концентрации аналитических ионов. Например, при таком способе ферментом служит пируваткиназа, индикаторными ионами являются ионы калия, связывающим агентом служит Kryptofix® 221, а нужно определить ион натрия; или ферментом служит киназа, индикаторным ионом является Mg+2, связывающим агентом является хелатообразующий агент, например ЕДТА, а ионом является металл, или ферментом является пиридоксалкиназа, индикаторным ионом является Zn2+, связывающим агентом служит Kryptofix® 221, а ионом является тяжелый металл; или ферментом является α-амилаза, связывающим агентом является Ag или Hg, а подлежащим определению ионом является хлор; или ферментом является коллагеназа, связывающим агентом является такой хелатообразующий агент, как ЕДТА, а подлежащим определению ионом является кальций.
Жидкости для анализа.
Биологическими жидкостями, в которых проводят определение аналитов, являются кровь, сыворотка, плазма.
Применение общих принципов к определению ионов калия и натрия.
Существенным требованием для удовлетворительного способа определения ионов калия в сыворотке или плазме на основании чувствительности пируваткиназы к ионам калия является исключение помех, создаваемых ионами натря и аммония. В соответствии с общими принципами изобретения этого можно достичь одним из следующим способов:
1. Селективным связыванием ионов натрия подходящим связывающим агентом, например, Kryptofix® 221.
2. Выбором Bacillus stearothermophilus, а не мускул кроликов в качестве источника пируваткиназы, так как бактериальный фермент обладает чувствительностью к ионам калия по отношению к ионам натрия в два раза более высокой нежели фермент мускула.
3. Включением в анализ ионов, которые являются конкурирующими ингибиторами чувствительного индикаторного фермента, например использование ионов лития для конкуренции с ионами натрия и ионами калия.
4. Ферментативным делением ионов аммония.
Так как ионы лития менее эффективны в качестве конкурирующих по сравнению с ионами калия, чистый эффект состоит в повышении относительной чувствительности пируваткиназы к ионам калия еще на 50% по сравнению с ионами натрия. Более того, в присутствии ионов лития действие ионов калия и ионов натрия на активность пируваткиназы становится скорее аддитивным нежели кооперативным. Это позволяет измерять концентрацию любого из ионов калия или натрия при условии, что концентрация другого иона известна.
По способам 2 и 3 в отсутствии связывающего агента можно получить относительную чувствительность пируваткиназы для калия по сравнению с ионами натрия порядка 100:1. Это означает, что даже при чрезвычайно аномальных концентрациях ионов натрия (либо 110 либо 170 ммоль/л) ошибка в измерении концентрации ионов калия не превысит 0,3 ммоль/л относительно нормальной концентрации иона натрия в плазме 140 ммоль/л. Это не считается достаточно точным. Однако, если истинная концентрация ионов натрия в плазме известна, достижима точность измерения ионов калия вплоть до 0,05 ммоль/л. Если объединить способы 1-3 и включить связывающий агент, например, 4,7,13,16,21-пентаокса-1,10-диазабицикло-8,8,5-трикозан, относительную чувствительность пируваткиназы к ионам калия по сравнению с ионами натрия можно повысить до величины более 500:1. В этих условиях нет необходимости знать концентрацию ионов натрия для определения концентраций ионов калия в плазме вплоть до 0,05 ммоль/л.
Эти способы определения иона калия демонстрируют применимость общих принципов, разработанных в изобретении в плане снижения посторонних влияний.
Аналитические способы для ионов калия. Для определения ионов калия жидкость, например плазму крови, инкубируют с буферированной смесью, содержащей аденозиндифосфат (АДР), фосфоенолпируват (РЕР), восстановленный никотинамидадениндинуклеотид (NАДН), пируваткиназу (РК) и лактатдегидрогеназу (LДH). Образование пирувата и затем лактата в этой смеси, в реакциях катализируемых РК и затем лактата в этой смеси, в реакциях катализируемых РК и LDH, полностью зависит от присутствия соответствующих катионов, при отсутствии которых РК полностью неактивен. NАДН сильно поглощает на 340 нм, тогда как NAД не поглощает.
В условиях, выбранных для анализа, которые включают наличие ионов марганца, которые необходимы бактериальной РК, скорость окисления АДН пропорциональна концентрации ионов калия.
В этих условиях происходят следующие реакции:
PEP + AДP + H+
Figure 00000001
Пируват + ATP (1)
Пируват + NAДH + H+
Figure 00000002
Лактат + NAД+ (2)
Скорость реакции (1) определяется концентрацией присутствующих ионов калия в системе, а это ограничивает скорость реакции (2). Существует несколько способов, которыми можно измерять скорость этих реакций. Стандартным способом является спектрофотометрическое определение скорости исчезновения NАДН в реакции (2). NАДН сильно поглощает на 340 нм, тогда как NАД не поглощает вовсе. Соответственно падение поглощения реакционной смеси при 340 нм (или альтернативной длине волны) обеспечивает прямое измерение скорости реакции, и отсюда можно получить концентрацию ионов калия, имеющихся в смеси. В другом варианте выгодно использовать тот факт, что обе реакции (1) и (2) потребляют Н+, понижая тем самым концентрацию протонов в реакционной смеси. Скорость уменьшения концентрации протонов можно измерить рН-метром или титрованием. В последнем случае концентрация используемого буфера должна быть гораздо меньше, чем при спектрофотометрическом способе. Для записи активности пируваткиназы можно использовать флюориметры или люминометры, или другое оборудование.
Существует целый ряд других способов определения накопления пирувата, ассоциированного с РК активностью. Они включают способ измерения неорганических фосфатов или поглощенного кислорода, или перекиси водорода; ацетилфосфат или двуокись углерода, вырабатываемые под действием фермента пируватоксидазы; образование гидразона с 2,4-динитрофенилгидразином, измерение реагентов или продуктов ферментативного действия пируваткарбоксилазы; пируватдекарбоксилаза или пируватдегидрогеназа; применение системы соединенных с флавинами; изотопные способы измерения малых концентраций субстратов (Analytical Biochem. 118, 344-352 (1981).
При изучении 200 образцов сыворотки было достигнуто хорошее согласование с другими способами, например, пламенной фотометрией и измерениями ионоселективными электродами. При этом способе значительные помехи вызывают ионы аммония, которые обычно присутствуют в сыворотке или вырабатываются при стоянии. Возможности помех за счет ионов аммония можно полностью избежать, включив в реакционную смесь α-кетоглютарат (КG) и глутаматдегилрогеназу (GДН). Ионы аммония удаляются при предварительном инкбировании в соответствии с реакцией:
NH4+KG+NAДH ___→ глутамат + NAД+
В таких растворах как моча, в которых содержание ионов аммония может быть высоко, используют парную реакцию:
NH4+KG++NAДPH __→ глутамат + NAДPH
глюкоза-P-З+NAДP ___→ 6-фосфоглюконат + NAДPH
Объединенный способ используют глюкозу-6-фосфатдегидрогеназу. При условии, что добавляемые глюкоза-6-Р и -КG-находятся в избытке ко всем присутствующим ионам аммония, все ионы аммония будут удалены, а NАДН сохранится в реагенте.
Типичные интервалы концентраций основных реагентов для ферментативного определения при 37оС ионов калия с использованием 10 мкл образца плазмы или сыворотки следующие: РК (В. Stearothermophilus 50 ед/л до 10000 ед/л PEP (нейтрали- зованная Трис соль) 0,3 30 ммоль/л 4,7,13,16,21- пентаокса- 1,10-диазабицикло- 8,8,5-трикозан До 30 ммоль/л АДН 0,01 0,8 ммоль/л Буфер, рН 7-8 50-500 ммоль/л Mn2+ или Mg2+ 1-10 ммоль/л LiCl 2-100 ммоль/л АДР (свободная кислота) 0,5-10 ммоль/л LДН (определено при 25оС) 5000-100000 ед/л Сыворотка альбумина До 5 г/л GДН (определено при 25оС) 2500-20000 ед/л KG (свободная кислота) 1-10 ммоль/л
Другим примером чувствительным к ионам калия является глицериндегидрогеназа (Е.С.С. Linet al B, 235, 1820, 1960).
Интервал типичных концентраций основных реагентов для ферментативного определения при 37оС ионов калия с использованием глицериндегидрогеназы является следующим; Глицеринде- гидрогеназа 50-1000 ед/л Глицерин 0,3-3 моль/л 4,7,13,6,21- пентаокса-1,10- диазабицикло-8,8,5- трикозан До 30 ммоль/л NАД 0,1-5,0 ммоль/л Буфер, рН 9 20-500 ммоль/л Сыворотка альбумина До 5 г/л GДН (определено при 25оС) 2500-20000 ед/л КG (свободная кислота) 1-10 ммоль/л
Другим ферментом, чувствительным к ионам калия, является ацетальдегиддегидрогеназа (Arch.Biochem.Biophys. 34, 86, 1951).
Типичный интервал концентраций основных реагентов для ферментативного определения ионов калия при 37оС составляет: Ацетальдегид- дегидрогеназа 50-10000 ед/л Гликольальдегид 0,3-30 ммоль/л 4,7,13,16,21- пентаокса-1,10- диазабицикло-8,8,5- трикозан До 30 ммоль/л NАД 0,05-2,0 ммоль/л Буфер, рН 7-8 50-500 ммоль/л Дитиотреитол 0,1-2 ммоль/л Сыворотка альбумина До 5 г/л GДН (определено при 25оС) 25000-20000 ед/л КG (свободная кислота) 1-10 ммоль/л. Гликольальдегид можно заменить на ацетальдегид (0,02-1 ммоль/л).
Ацетальдегиддегидрогеназа также демонстрирует эстеразную активность, так что концентрацию ионов калия можно определять, регистрируя высвобождение 4-нитрофенола из 4-нитрофенил-ацетата. Типичные интервалы концентраций основных реагентов для ферментативного определения ионов калия при 37оС на основании эстеразной активности ацетальдегиддегидрогеназы: Ацетальдегид дегидрогеназа 50-10000 ед/л 4-Нитрофени- лацетат 0,1-2 ммоль/л 4,7,13,16,21- пентаокса-1,10- диазабицикло-8,8,5- трикозан До 30 ммоль/л NАДН 0,001-0,1 ммоль/л Буфер, рН 7-8 50-500 ммоль/л Дитиотреитол 0,1-2,0 ммоль/л Сыворотка альбумина До 5 г/л GДН (определено при 25оС) 2500-20000 ед/л
КG (свободная кислота) 1-10 ммоль/л.
В нижеприведенных примерах образцы небольшого объема (10 мкл), если нет других указаний в случае сыворотки или плазмы), смешивают с реагентом 1, содержащим буферированный субстрат и некоторые факторы, и инкубируют в течение некоторого времени, обычно 0,1-5 мин. Значения поглощения обычно считывают с определенными интервалами во время этого инкубационного периода. Затем добавляют реагент 2, содержащий фермент, и записывают скорость реакции. В некоторых примерах реагент 1 содержит индикаторный фермент, а реагент 2 соответствующий субстрат. В примерах указана окончательная реакционная смесь после того, как смешивают образец, реагент 1 и реагент 2.
П р и м е р А. Измерение концентрации ионов калия с помощью пируваткиназы без агента, связывающего ионы натрия, причем концентрация ионов натрия неизвестна.
Окончательная инкубируемая смесь содержит: 175 ммоль/л Трис-НСl буфер, рН 7,4, 20 ммоль/л Li/17 ммоль/л ОН, 3 ммоль/л Сl), 3,0 ммоль/л MnCl2, 2,6 ммоль/л АДР (свободная кислота), 2,9 ммоль/л РЕР (нейтрализованная Трис соль), 0,4 ммоль/л NАДН, 17000 ед/л LДН (определено при 25оС), 890 ед/л РК из Bacillus stearothermophilus, 4,0 ммоль/л КG 8600 ед/л GДН (в глицерине, определено при 25оС), 140 мг/л альбумина сыворотки человека.
Стандарты для ионов калия (калибровочные растворы) содержат 140 ммоль/л ионов натрия для компенсации стимуляторного действия ионов натрия, присутствующих в плазме на пируваткиназу.
П р и м е р В. Определение концентрации ионов калия с использованием пируваткиназы без агента, связывающего ионы натрия; концентрация ионов натрия известна.
Инкубируемая смесь и калибровочные растворы тe же, что и в примере А.
На концентрацию ионов натрия в смеси можно внести поправку, добавляя (или вычитая) 0,1 ммоль/л калия на каждые 10 ммоль/л концентрации ионов натрия, которая ниже (или выше) 140 ммоль/л ионов натрия. Однако такую поправку следует проверить, исследуя водные растворы, содержащие известные концентрации ионов натрия и калия.
П р и м е р С. Определение концентрации ионов калия с использованием пируваткиназы в присутствии агента, связывающего ионы натрия. Методика по примеру С, но без альбумина сыворотки человека, и среда содержит, кроме того, 6 мкмоль 4,7,13,16,21-пентаокса-1,10-диазабицикло-8,8,5-трикозана на анализ. рН выбирают 7, 8 для того, чтобы минимизировать отклонения в вытеснении ионов натрия из 4,7,13,16,21-пентаокса-1,10-диазабицикло-8,8,5-трикозана за счет различного содержания ионов калия в отдельных образцах.

Claims (5)

1. СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ ИОНОВ КАЛИЯ В БИОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ, отличающийся тем, что плазму или сыворотку крови в объеме 10 мкл помещают в инкубационную среду, содержащую фермент, связующий агент, который связывает мешающие ионы, и/или снижает концентрацию ионов калия до оптимального уровня для измерения, и/или снижает сродство фермента к ионам калия, индикатор, конкурирующий ингибитор фермента, буфер, затем инкубационную смесь инкубируют при 37oС в течение 0,1 - 5 мин с последующим спектрофотометрированием при 340 нм и расчетом концентрации ионов калия с помощью калибровочной кривой.
2. Способ по п.1 отличающийся тем, что ферментом является пируваткиназа, полученная из Basillus stearothermophillus, а инкубационная смесь состоит из 50 - 10000 ед/л указанного фермента, 0,3 - 30 ммоль/л фосфоенолпирувата (нейтральное триссоли), до 30 ммоль/л 4, 7, 13, 16, 21-пентаокса-1,10-диазабицикло-8,8,5-трикозана, 0,01 - 0,8 ммоль/л N АДН, 50 - 500 ммоль/л буфера с pH 8, 1 - 10 ммоль/л ионов марганца или магния, 2 - 100 ммоль/л хлористого лития, 0,05 - 10 ммоль/л АДФ (свободной кислоты), 5000 - 100000 ед/л лактатдегидрогеназы (определено при 25oС), до 5 г/л альбумина сыворотки, 2500 - 20000 ед/л глютаматдегидрогеназы (определено при 25oС), 1 - 10 ммоль/л кетоглютарата (свободная кислота).
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что ферментом является глицериндегидрогеназа, полученная из Enterbacter aerogenes, а инкубационная смесь состоит 50 - 1000 ед/л указанного фермента, 0,3 - 3 ммоль/л глицерина, до 3 ммоль/л 4, 7, 13, 16, 21-пентаокса-1,10-диазабицикло-8,8,5-трикозана, 0,1 - 5,0 ммоль/л N АД, 20 - 500 ммоль/л буфера с pH 9, до 5 г/л альбумина сыворотки, 2500 - 20000 ед/л глютаматдегидрогеназы (определено при 25oС), 1 - 10 ммоль/л кетоглютарата (свободная кислота).
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что ферментом является ацетальдегид дегидрирогеназы, полученной из дрожжей, а инкубационная смесь состоит из 50 - 10000 ед/л указанного фермента, 0,3 - 30 ммоль/л гликольальдегида, до 30 ммоль/л 4, 7, 13, 16, 21-пентаокса-1,10-диазабицикло-8,8,5-трикозана, 0,05 - 2,0 ммоль/л N АД, 50 - 500 ммоль/л буфера с pH 7 - 8, 0,1 - 2 ммоль/л дитиотреитола, до 5 г/л сывороточного альбумина, 2500 - 20000 ед/л глютаматдегидрогеназы (определено при 25oС), 1 - 10 ммоль/л кетоглютамата (свободная кислота).
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что ферментом является ацетальдегид дегидрогеназы, а инкубационная среда состоит из 50 - 10000 ед/л указанного фермента, 0,3 - 30 ммоль/л 4-нитрофенилацетата, до 30 ммоль/л 4, 7, 13, 16, 21-пентаокса-1,10-диазабицикло-8,8,5-трикозана, 0,0001 - 0,1 ммоль/л N АД, 50 - 500 ммоль/л буфера с pH 7 - 8, 0,1 - 2 ммоль/л дитиотреитола, до 5 г/л сывороточного альбумина, 2500 - 20000 ед/л глютаматдегидрогеназы (определено при 25oС), 1 - 10 ммоль/л кетаглютамата (свободная кислота).
SU884613137A 1987-04-10 1988-04-02 Способ определения концентрации ионов калия в биологическом материале RU2054674C1 (ru)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
AUPI136587 1987-04-10
AUP11365 1987-04-10
AUP12311 1987-06-05
AUPI231187 1987-06-05
PCT/EP1988/000275 WO1988008137A1 (en) 1987-04-10 1988-04-02 Determination of ions in fluids

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2054674C1 true RU2054674C1 (ru) 1996-02-20

Family

ID=25643255

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU884613137A RU2054674C1 (ru) 1987-04-10 1988-04-02 Способ определения концентрации ионов калия в биологическом материале

Country Status (24)

Country Link
US (1) US6068971A (ru)
EP (9) EP0471391B1 (ru)
JP (8) JPH0642839B2 (ru)
KR (4) KR920009425B1 (ru)
CN (3) CN1051111C (ru)
AR (1) AR241802A1 (ru)
AT (4) ATE146599T1 (ru)
BR (1) BR8806575A (ru)
CS (2) CS170792A3 (ru)
DD (1) DD269919A5 (ru)
DE (6) DE3855714T2 (ru)
DK (1) DK687488A (ru)
ES (4) ES2097781T3 (ru)
FI (3) FI885727A (ru)
HR (1) HRP940731A2 (ru)
HU (5) HUT51677A (ru)
IE (3) IE940436L (ru)
IL (3) IL101585A (ru)
LV (1) LV11068B (ru)
NO (3) NO176072C (ru)
NZ (3) NZ239099A (ru)
RU (1) RU2054674C1 (ru)
WO (1) WO1988008137A1 (ru)
YU (1) YU47192B (ru)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2569172C1 (ru) * 2014-05-05 2015-11-20 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт высокотемпературной электрохимии Уральского отделения Российской Академии наук Способ определения концентрации протонов в протон-проводящих оксидных материалах
RU2630695C1 (ru) * 2016-12-14 2017-09-12 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт физической химии и электрохимии им. А.Н. Фрумкина Российской академии наук (ИФХЭ РАН) 2,4,6-Трис[(2-дифенилфосфорил)-4-этилфенокси]-1,3,5-триазин в качестве электродоактивного селективного ионофора для катиона лития в пластифицированных мембранах ионоселективных электродов
WO2020077344A1 (en) * 2018-10-12 2020-04-16 Polymer Technology Systems, Inc. Systems and methods for point-of-care detection of potassium

Families Citing this family (50)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0274343A1 (en) * 1987-01-06 1988-07-13 IntraCel Corporation A system of reactants involving an apo-enzyme useful in immunological analysis and a method for carrying out immunoassays with this system
DE3855714T2 (de) * 1987-04-10 1997-05-07 Boehringer Mannheim Gmbh, 68305 Mannheim Verfahren und Zusammensetzung zum Nachweis von Natrium-Ionen in Flüssigkeiten
US5013648A (en) * 1988-09-09 1991-05-07 Em Diagnostic Systems, Inc. Enzymatic detection of monovalent anions
JP2748134B2 (ja) * 1988-11-29 1998-05-06 オリエンタル酵母工業株式会社 マグネシウムの定量方法
GB9015683D0 (en) * 1990-07-17 1990-09-05 Amersham Int Plc Testing for metal ions
WO1993001310A1 (en) * 1991-07-11 1993-01-21 University Of Maryland At Baltimore Lead assay
US5334507A (en) * 1991-09-20 1994-08-02 Toyo Boseki Kabushiki Kaisha Composition for measurement of potassium ion concentration and composition for elimination of ammonium ions
WO1993011259A1 (en) * 1991-12-02 1993-06-10 Oriental Yeast Co., Ltd. Method and reagent for determination of serum iron or unsaturated iron binding capacity
US5700652A (en) * 1993-04-07 1997-12-23 Kyowa Medex Co., Ltd. Quantitative determination method for sodium ions
JPH06311896A (ja) * 1993-04-30 1994-11-08 Kyowa Medex Co Ltd カリウムイオンの定量方法
US5532136A (en) * 1993-06-22 1996-07-02 Bionebraska, Inc. Monoclonal antibody assay and kit for detecting metal cations in body fluids
JP3203105B2 (ja) * 1993-08-23 2001-08-27 協和メデックス株式会社 ナトリウムイオンの定量方法
DE4401868C1 (de) * 1994-01-22 1995-02-16 Lobbe Xenex Gmbh Mikrobielles Verfahren zum Nachweis von Schadstoffen
JPH07203991A (ja) * 1994-01-24 1995-08-08 Kyowa Medex Co Ltd カリウムイオンの定量方法
US6114134A (en) * 1997-06-25 2000-09-05 International Reagents Corporation Method for assaying biological specimens for substances contained in the components thereof and reagent to be used in this method
WO1998059068A1 (fr) * 1997-06-25 1998-12-30 International Reagents Corporation Procede servant a analyser des specimens biologiques afin de rechercher des substances contenues dans leurs constituants et reactif utilise dans ce procede
JP4416866B2 (ja) * 1998-07-30 2010-02-17 オリエンタル酵母工業株式会社 カルシウム測定用液状試薬
CA2377665A1 (en) * 1999-07-06 2001-01-11 General Atomics Methods and compositions for assaying analytes
US7192729B2 (en) 1999-07-06 2007-03-20 General Atomics Methods for assaying homocysteine
US6376210B1 (en) 1999-07-06 2002-04-23 General Atomics Methods and compositions for assaying analytes
US6610504B1 (en) 2000-04-10 2003-08-26 General Atomics Methods of determining SAM-dependent methyltransferase activity using a mutant SAH hydrolase
US7045098B2 (en) 2001-02-02 2006-05-16 James Matthew Stephens Apparatus and method for removing interfering substances from a urine sample using a chemical oxidant
US20030022390A1 (en) * 2002-05-30 2003-01-30 Stephens James Matthew Method and kit for making interfering substances in urine undetectable
US6811997B2 (en) * 2002-07-02 2004-11-02 Bechtel Bwxt Idaho, Llc Method for chromium analysis and speciation
US7920906B2 (en) 2005-03-10 2011-04-05 Dexcom, Inc. System and methods for processing analyte sensor data for sensor calibration
US9247900B2 (en) 2004-07-13 2016-02-02 Dexcom, Inc. Analyte sensor
US7384760B2 (en) 2004-04-30 2008-06-10 General Atomics Methods for assaying inhibitors of S-adenosylhomocysteine (SAH) hydrolase and S-adenosylmethionine (SAM)-dependent methyltransferase
WO2006127694A2 (en) 2004-07-13 2006-11-30 Dexcom, Inc. Analyte sensor
US8989833B2 (en) 2004-07-13 2015-03-24 Dexcom, Inc. Transcutaneous analyte sensor
EP1784162A2 (en) * 2004-08-23 2007-05-16 Remote Clinical Solutions, Inc. System and method for modifying a fluid for oral administration
US20060121548A1 (en) * 2004-11-09 2006-06-08 Remote Clinical Solutions, Inc. Systems and methods for measuring sodium concentration in saliva
US20070015287A1 (en) * 2005-07-15 2007-01-18 Remote Clinical Solutions, Inc. Methods and devices for measuring analyte concentration in a nonblood body fluid sample
JP2007116977A (ja) * 2005-10-27 2007-05-17 Toyobo Co Ltd 他測定項目への影響低減方法
CN100458420C (zh) * 2006-12-21 2009-02-04 中电投远达环保工程有限公司 硝酸汞滴定测量石灰石浆液中氯离子的方法
US8187890B2 (en) * 2007-06-04 2012-05-29 Lehigh University Rapid sensing of toxic metals with hybrid inorganic materials
US7829340B2 (en) 2007-08-06 2010-11-09 Oft Labs, Llc Oral fluid assays for the detection of heavy metal exposure
US8420341B2 (en) * 2007-12-14 2013-04-16 Genewiz Inc., Suzhou Methods for measuring ADP
WO2009135035A1 (en) * 2008-05-02 2009-11-05 Specialty Assays, Inc. Enzymatic determination of potassium ions using stable nad(p)h analogs.
BR112012020015B1 (pt) 2010-03-30 2021-05-25 F. Hoffmann-La Roche Ag método para determinar a concentração de íons de cálcio, reagente para medição da concentração de íons de cálcio e kit de teste
CN102539696A (zh) * 2010-12-13 2012-07-04 苏州艾杰生物科技有限公司 氨(氨离子)的测定方法与氨(氨离子)诊断/测定试剂盒
CN102539682A (zh) * 2010-12-13 2012-07-04 苏州艾杰生物科技有限公司 氨(氨离子)的测定方法与氨(氨离子)诊断/测定试剂盒
JP5100903B1 (ja) * 2012-04-06 2012-12-19 Ａｋｊグローバルテクノロジー株式会社 リチウム試薬組成物、それを用いたリチウムイオン測定方法及び測定装置
JP5222432B1 (ja) * 2012-11-07 2013-06-26 Ａｋｊグローバルテクノロジー株式会社 リチウム測定方法
KR101506147B1 (ko) * 2013-12-13 2015-03-26 삼성전자 주식회사 시약 세트, 시료 검사방법, 미세유동장치 및 검사장치
CN105420344A (zh) * 2015-12-12 2016-03-23 山东博科生物产业有限公司 一种稳定、抗干扰能力强的血清钾检测试剂及检测方法
US11214821B2 (en) 2016-07-18 2022-01-04 Vision Diagnostics, Inc. Reagents and methods of use with automated analyzers for obtaining a specific gravity index for urine
CN108607237B (zh) * 2018-05-03 2019-06-21 大连理工大学 一种adp配基层析介质的保护方法
CN109187522A (zh) * 2018-08-31 2019-01-11 山东博科生物产业有限公司 一种血清钠比色法检测试剂盒
CN111208176B (zh) * 2020-01-15 2022-11-08 湖南工业大学 一种检测钾离子和钠离子浓度的电化学试条及其检测方法
CN113718015B (zh) * 2021-08-27 2024-05-07 迪瑞医疗科技股份有限公司 一种体外酶法钾测定试剂盒的制备方法

Family Cites Families (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH316613A (fr) * 1950-02-25 1956-10-15 Security Trust Company Of Roch Procédé de préparation d'un composé indicateur à base de résine d'échange d'ions
US2791533A (en) * 1951-02-24 1957-05-07 Security Trust Company Ion exchange resin indicator compound
DE2137146B2 (de) 1971-07-24 1974-07-04 C.H. Boehringer Sohn, 6507 Ingelheim Verfahren zur photometrischen Bestimmung von Chloridionen in Körperflüssigkeiten
DE2349819A1 (de) * 1973-10-04 1975-04-17 Eppendorf Geraetebau Netheler Verfahren zur enzymkinetischen konzentrationsbestimmung eines substrats
JPS5414196A (en) * 1977-07-05 1979-02-02 Taiko Electric Works Ltd Automatic posting device input expansion system
JPS56164787A (en) * 1980-05-21 1981-12-17 Unitika Ltd Production of heat-resistant pyruvate kinase
US4278440A (en) 1980-02-04 1981-07-14 Union Carbide Corporation Reagent and method for direct determination of chloride in serum
US4734375A (en) * 1980-05-27 1988-03-29 Miles Laboratories, Inc. Ion specific test method
CA1168705A (en) * 1980-05-27 1984-06-05 Hamish Small Ion exchange chromatography with indirect photometric detection
ATE17500T1 (de) * 1981-10-05 1986-02-15 Boehringer Mannheim Corp Linear kinetische feststellung von bicarbonat in koerperfluessigkeiten.
DE3202779A1 (de) * 1982-01-28 1983-08-04 Merck Patent Gmbh, 6100 Darmstadt Kaliumreagens und verfahren zur bestimmung von kaliumionen
US4393142A (en) 1982-02-01 1983-07-12 American Monitor Corporation Assay method and reagent for the determination of chloride
US4455371A (en) * 1982-03-03 1984-06-19 The Ohio State University Research Foundation Oxalate oxidase composition for assay of oxalate
US4663278A (en) * 1982-04-30 1987-05-05 Syva Company Agglutination dependent enzyme channeling immunoassay
US4657854A (en) * 1983-05-05 1987-04-14 Ivan Endre Modrovich Assay systems based on magnesium-responsive enzymes
CA1222438A (en) * 1983-05-12 1987-06-02 Steven C. Charlton Unified test means for ion determination
DE3345748A1 (de) 1983-12-17 1985-08-29 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Phenolsulfonphthaleinyl-ss-d-galactoside, verfahren zu deren herstellung sowie deren verwendung zur bestimmung der ss-d-galactosidase
EP0150227A1 (en) * 1983-12-23 1985-08-07 FUJIREBIO KABUSHIKI KAISHA also trading as FUJIREBIO INC. Dipeptide derivatives and their use in determining the activity of carboxypeptidase A
DE3411574A1 (de) 1984-03-29 1985-10-10 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Glycoside von resorufin-derivaten, verfahren zu deren herstellung sowie deren verwendung zur bestimmung der aktivitaet von glycosidasen
JPS61151460A (ja) * 1984-12-25 1986-07-10 Fuji Photo Film Co Ltd カルシウムまたはマグネシウム分析用一体型多層分析要素
DD236114A1 (de) * 1985-04-09 1986-05-28 Univ Halle Wittenberg Verfahren zur bestimmung von bakterieninfektion in liquores
DE3614470A1 (de) * 1985-05-02 1986-11-20 Gary D. Flushing N.Y. Steinman Verfahren zum messen der kaliumgehalte in biologischen fluessigkeiten
IL79087A0 (en) * 1985-07-02 1986-09-30 Miles Lab Multilayer ion test means
JPS6236199A (ja) * 1985-08-07 1987-02-17 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd カルシウムイオンの定量法
JPH0612999B2 (ja) * 1986-11-17 1994-02-23 関東化学株式会社 塩素イオン定量用試薬
US4820647A (en) * 1986-12-03 1989-04-11 Biotrack, Inc. Method for detecting a metal ion in an aqueous environment
GB8708034D0 (en) * 1987-04-03 1987-05-07 British Telecomm Optical fibre device fabrication
US5409814A (en) * 1987-04-10 1995-04-25 Boehringer Mannheim Gmbh Determination of ions in fluids
DE3855714T2 (de) * 1987-04-10 1997-05-07 Boehringer Mannheim Gmbh, 68305 Mannheim Verfahren und Zusammensetzung zum Nachweis von Natrium-Ionen in Flüssigkeiten
US5162525A (en) * 1987-07-31 1992-11-10 Allied-Signal Inc. Fluorogenic and chromogenic three-dimensional ionophores as selective reagents for detecting ions in biological fluids

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Руководство по клиническим лабораторным исследованиям. /Под ред.Кост Е.А. и Смирновой Л.Г. М.:Медицина, 1964, с.248-250. *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2569172C1 (ru) * 2014-05-05 2015-11-20 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт высокотемпературной электрохимии Уральского отделения Российской Академии наук Способ определения концентрации протонов в протон-проводящих оксидных материалах
RU2630695C1 (ru) * 2016-12-14 2017-09-12 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт физической химии и электрохимии им. А.Н. Фрумкина Российской академии наук (ИФХЭ РАН) 2,4,6-Трис[(2-дифенилфосфорил)-4-этилфенокси]-1,3,5-триазин в качестве электродоактивного селективного ионофора для катиона лития в пластифицированных мембранах ионоселективных электродов
WO2020077344A1 (en) * 2018-10-12 2020-04-16 Polymer Technology Systems, Inc. Systems and methods for point-of-care detection of potassium

Also Published As

Publication number Publication date
ES2098300T3 (es) 1997-05-01
DE3890267T1 (de) 1989-05-03
EP0476715A2 (en) 1992-03-25
JPH0564599A (ja) 1993-03-19
NO932856L (no) 1988-11-30
CS170892A3 (en) 1992-12-16
CN1051111C (zh) 2000-04-05
EP0471391A3 (en) 1992-12-09
JPH0642839B2 (ja) 1994-06-08
WO1988008137A1 (en) 1988-10-20
CN1088109C (zh) 2002-07-24
DD269919A5 (de) 1989-07-12
IL101586A (en) 1995-12-08
LV11068A (lv) 1996-02-20
EP0470652A3 (en) 1992-07-29
ES2058165T3 (es) 1994-11-01
NO176072B (no) 1994-10-17
JPH05130893A (ja) 1993-05-28
IL101585A0 (en) 1992-12-30
HU9201059D0 (en) 1992-06-29
FI885727A0 (fi) 1988-12-09
DE3855714D1 (de) 1997-01-30
NO932856D0 (no) 1993-08-11
EP0476715A3 (en) 1992-07-22
KR920010132B1 (ko) 1992-11-16
CN1096583A (zh) 1994-12-21
DE3855715T2 (de) 1997-05-07
IE881022L (en) 1988-10-10
ATE148793T1 (de) 1997-02-15
JPH05130895A (ja) 1993-05-28
JPH05276993A (ja) 1993-10-26
KR920010312B1 (ko) 1992-11-26
JPH01503596A (ja) 1989-12-07
KR920010313B1 (ko) 1992-11-26
FI942872A (fi) 1994-06-16
HU9201057D0 (en) 1992-06-29
EP0286039B1 (en) 1993-06-23
NZ239099A (en) 1994-10-26
NO885350L (no) 1988-11-30
BR8806575A (pt) 1989-10-31
EP0494704A3 (en) 1992-09-02
IL101585A (en) 1995-12-08
IL101586A0 (en) 1992-12-30
IL86017A (en) 1995-12-08
IE62537B1 (en) 1995-02-08
JP2610074B2 (ja) 1997-05-14
AR241802A1 (es) 1992-12-30
DK687488D0 (da) 1988-12-09
KR920009425B1 (ko) 1992-10-16
EP0286039A3 (en) 1988-12-28
FI942873A (fi) 1994-06-16
EP0494705A3 (en) 1992-09-02
CN1089808C (zh) 2002-08-28
DK687488A (da) 1988-12-09
IE940435L (en) 1988-10-10
CS170792A3 (en) 1992-12-16
KR910005411A (ko) 1991-03-30
DE3855790T2 (de) 1997-06-12
HU9201060D0 (en) 1992-06-29
DE3881931D1 (de) 1993-07-29
EP0471391B1 (en) 1997-02-05
DE3855715D1 (de) 1997-01-30
KR890700833A (ko) 1989-04-27
US6068971A (en) 2000-05-30
DE3855790D1 (de) 1997-03-20
ATE91025T1 (de) 1993-07-15
EP0471391A2 (en) 1992-02-19
EP0286039A2 (en) 1988-10-12
EP0504948A1 (en) 1992-09-23
EP0476715B1 (en) 1996-12-18
NO885350D0 (no) 1988-11-30
EP0470652A2 (en) 1992-02-12
JP2683182B2 (ja) 1997-11-26
NO932855D0 (no) 1993-08-11
HUT51677A (en) 1990-05-28
ES2097781T3 (es) 1997-04-16
JPH05130896A (ja) 1993-05-28
JPH05130894A (ja) 1993-05-28
DE3855714T2 (de) 1997-05-07
HU9201058D0 (en) 1992-06-29
YU69988A (en) 1990-02-28
NZ239095A (en) 1994-10-26
ATE146600T1 (de) 1997-01-15
NO932855L (no) 1988-11-30
JPH05276994A (ja) 1993-10-26
IE940436L (en) 1988-10-10
EP0494704A2 (en) 1992-07-15
FI942873A0 (fi) 1994-06-16
CN1030094A (zh) 1989-01-04
EP0309525A1 (en) 1989-04-05
YU47192B (sh) 1995-01-31
EP0508388A1 (en) 1992-10-14
FI942872A0 (fi) 1994-06-16
ES2097782T3 (es) 1997-04-16
JP3080770B2 (ja) 2000-08-28
EP0470652B1 (en) 1996-12-18
ATE146599T1 (de) 1997-01-15
CN1104772A (zh) 1995-07-05
FI885727A (fi) 1988-12-09
LV11068B (en) 1996-04-20
DE3881931T2 (de) 1993-12-16
NO176072C (no) 1995-01-25
NZ224171A (en) 1994-10-26
HRP940731A2 (en) 1996-12-31
EP0494705A2 (en) 1992-07-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2054674C1 (ru) Способ определения концентрации ионов калия в биологическом материале
US5384247A (en) Determination of sodium ions in fluids
AU662510B2 (en) Determination of ions in fluids
AU662516B2 (en) Determination of ions in fluids
RU2081411C1 (ru) Композиция для определения ионов натрия (варианты)
AU662515B2 (en) Determination of ions in fluids
AU651712B2 (en) Determination of ions in fluids
AU622859C (en) Method and composition for the determination of potassium ions in fluids
AU662726B2 (en) Determination of ions in fluids
AU622859B2 (en) Method and composition for the determination of potassium ions in fluids