RO119783B1 - Derivaţi de dolastatină, compoziţie farmaceutică şi utilizarea acestora - Google Patents
Derivaţi de dolastatină, compoziţie farmaceutică şi utilizarea acestora Download PDFInfo
- Publication number
- RO119783B1 RO119783B1 RO97-02254A RO9702254A RO119783B1 RO 119783 B1 RO119783 B1 RO 119783B1 RO 9702254 A RO9702254 A RO 9702254A RO 119783 B1 RO119783 B1 RO 119783B1
- Authority
- RO
- Romania
- Prior art keywords
- alkoxy
- pro
- xaa val
- val xab
- phenyl
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
- C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/101—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Abstract
Invenţia se referă la derivaţi de dolastatină şi care are structura chimică corespunzătoare formulei generale : R1R2N - CHK-CO-A-B-D-E-(F)t-K la o compoziţie farmaceutică care cuprinde o cantitate, eficientă terapeutic, de derivat de dolastatină şi un purtător acceptabil farmaceutic şi la utilizarea unui derivat de dolastatină pentru fabricarea unei compoziţii farmaceutice, pentru tratarea unei tumori la un mamifer. ŕ
Description
Invenția se referă la noi derivați de dolastatină și la o compoziție farmaceutică, utilizați în medicină pentru tratarea bolilor oncologice.
Este cunoscut faptul că peptidele izolate din materiale de origine marină, cum ar fi Dolastatin-10 (US 4816444) și Dolastatin-15 (EP-A-398558) prezintă activitate de inhibare a creșterii celulelor (conform Biochem. Pharmacology 40, nr. 8, 1859-64,1990; J. Natl. Cancer Inst. 85,483-88,1993, și referințele citate în acesta). Pe baza rezultatelor interesante obținute pe sisteme de tumori in vivo, sunt în curs evaluări preclinice ale acestor produși naturali, în vederea inițierii studiilor clinice pe pacienți cu cancer. Totuși, produșii naturali prezintă dezavantaje cum ar fi solubilitate slabă în solvenți apoși și costurile blocurilor necesare pentru sinteză.
Problema pe care o rezolvă invenția este de a prezenta derivați de dolastatină și o compoziție farmaceutică, și utilizarea unui derivat de dolastatină pentru fabricarea unei compoziții farmaceutice, pentru tratarea unei tumori la un mamifer.
Derivații de dolastatină conform invenției au structura chimică corespunzătoare formulei generale I:
R1 FFN-CHX-CO-A-B-D-E-jF), -K (I) în care
R’ este metil, etil sau izopropil;
R2 este hidrogen, metil sau etil;
R’-N-R2 pot forma împreună un ciclu pirolidinic;
A reprezintă un rest valii, izoleucil, leucii, 2-tert-butilglicil, 2-etilglicil, norleucil sau norvalil;
B reprezintă un rest N-metil-valil, -leucii, -izoleucil, -norvalil, -norleucil, -2-terț-butilglicil, -3terț-butil-alanil sau -2-etilglicil;
D este un rest prolil, 3,4-dehidroprolil, 4-fluoroprolil, 4,4-difluoroprolil, azetidin- 2-carbonil, homoprolil, 3-metilprolil, 4-metilprolil, 5-metilprolil sau tiazolidin-4-carbonil;
E este un rest 3,4-dehidroprolil, 4-fluoroprolil, 3-metilprolil, 4-metilprolil, azetidin-2-carbonil sau 4,4-difluoroprolil;
F este un rest valii, 2-ferț-butilglicil, izoleucil, leucii, 2-ciclohexilglicil, norleucil, norvalil, neopentilglicil, alanil, β-alanil sau aminoizobutiroil;
X este alchil (de preferință C2-C5), ciclopropil sau ciclopentil;
t este 0 sau 1; și
K este alcoxi CV4, benziloxi, -NH2 sau un fragment aminosubstituit care este -NH-alchil-C,.
4, -NH-C(CH3)2CN, -NH-C(CH3)2CCH, -NH-C(CH3)2C=CH2, -NH-C(CH3)2CH2CH2OH, -NH-C(CH3)2CH2OH, -NH-cicloalchil-C3.8, -NH-[3,3,0] -biciclooctil, norefedril, norpseudoefedril, -NH-chinolil, -NH-pirazil, -NH-CH2-benzimidazolil, -NH-adamantil, -NH-CH2-adamantil, -NH-CH(CH3)-fenil, -NH-C(CH3)2-fenil, -N(alcoxi-CM)-alchil-CV4, -Nialcoxi-C,.
4)-CH2-fenil, -N(alcoxi-CM)fenil, -N(CH3)OBzl, -NH-(CH2)v-fenil (v=0,1,2 sau 3), -NH(CH2)m-naftil (m=0 sau 1), -NH-(CH2)w-benzhidril (w=0,1 sau 2), -NH-bifenil, -NH-piridil, -NH-CH2-piridil, -NH-CH2-CH2-piridil, -NH-benzotiazolil, -NH-benzoizotiazolil, -NH-benzopirazolil, -NH-benzoxazolil, -NH-(CH2)mfluorenil (m=0 sau 1), -NH-pirimidil, -NH-(CH2)mindanil (m=0 sau 1), -NH-(CH2CH2O)y-CH3 (y=0, 1, 2, 3, 4 sau 5), -NH-(CH2CH2O)yCH2CH3 (y=0, 1,2, 3, 4 sau 5), -(CH2CH2O)y-CH3 (y=0, 1,2, 3, 4 sau 5),-(CH2CH2O)yCH2CH3 (y=0, 1,2, 3, 4 sau 5), -NCH3-NH-C6H5, -NCH3-NH-CH2-C6H5;
sau K este
RO 119783 Β1
RO 119783 Β1
COOEt
RO 119783 Β1
și săruri ale acestora cu acizi acceptabili fiziologic.41
Compoziția farmaceutică conform invenției cuprinde o cantitate eficientă terapeutic dintrun compus definit în revendicarea 1, și un purtător acceptabil farmaceutic.43
Utilizarea unui derivat de dolastatină conform invenției, pentru fabricarea unei compoziții farmaceutice pentru tratarea unei tumori la un mamifer.45
Prin aplicarea invenției, se obține avantajul că derivații conform invenției sunt mai rezistenți la degradarea enzimatică.47
RO 119783 Β1
Invenția se referă la peptide noi și la derivații acestora, care prezintă potențial terapeutic îmbunătățit pentru tratamentul bolilor neoplazice, comparativ cu Dolastatina-15. în plus, compușii conform invenției pot fi sintetizați în mod convenabil, în modul descris în detaliu în cele ce urmează.
Prin aplicarea invenției, se obțin compuși care sunt mai rezistenți la degradarea enzimatică, comparativ cu Dolastatin-15.
Derivații conform invenției includ peptide noi cu formula I
R’rfN-CHX-CO-A-B-D-E-(F), -K în care
R1 este metil, etil sau izopropil;
R2 este hidrogen, metil sau etil;
R’-N-R2 pot forma împreună un ciclu pirolidinic;
A reprezintă un rest valii, izoleucil, leucii, 2-tert-butilglicil, 2-etilglicil, norleucil sau norvalil;
B reprezintă un rest N-metil-valil, -leucii, -izoleucil, -norvalil, -norleucil, -2-tert-butilglicil, -3tert-butil-alanil sau -2-etilglicil;
D este un rest prolil, 3,4-dehidroprolil, 4-fluoroprolil, 4,4-difluoroprolil, azetidin-2- carbonil, homoprolil 3-metilprolil, 4-metilprolil, 5-metilprolil sau tiazolidin-4-carbonil;
E este un rest 3,4-dehidroprolil, 4-fluoroprolil, 3-metilprolil, 4-metilprolil, azetidin-2-carbonil sau 4,4-difluoroprolil;
F este un rest valii, 2-tert-butilglicil, izoleucil, leucii, 2-ciclohexilglicil, norleucil, norvalil, neopentilglicil, alanil, β-alanil sau aminoizobutiroil;
X este alchil (de preferință C2-C5), ciclopropil sau ciclopentil;
t este 0 sau 1; și
K este alcoxi (de preferință C,^), benziloxi sau un fragment amino substituit sau nesubstituit.;
și sărurile acestuia cu acizii acceptabili fiziologic. Invenția se referă, de asemenea, și la compoziții farmaceutice care conțin acești compuși împreună cu purtători acceptabili farmaceutic, și la utilizarea acestora pentru tratamentul cancerului la mamifere.
în mod special, K poate fi C14 alcoxi, benziloxi sau un fragment amino cu formula R5-NR6 în care
R5 este hidrogen sau hidroxi sau Cb4 alcoxi, sau benziloxi (care poate fi substituit cu până la doi substituenți care pot fi independent CF3-, nitro, Cb4 alchilsulfonil, CM alcoxi, halogen, CV4 alchil, cian, hidroxi, N(CH3)2 COOMe, COOEt, COOiPr, sau COONH2), sau feniloxi (care poate fi substituit cu până la 2 substituenți care pot fi independent CF3, nitro, C1Jț-alchilsulfonic, Cb4-alcoxi, halogen, C,_4 alchil, cian, hidroxi, N(CH3)2, carboximetil, COOEt, COOiPr sau COONH2);
R6 este hidrogen sau Cb12 alchil (care poate fi substituit cu unul sau mai mulți atomi de fluor), sau -C(CH3)2CN, sau -C(CH3)2CCH sau -C(CH3)2C=CH2 sau - C(CH3)2CH2OH, sau -C(CH3)2CH2CH2OH sau -(CH2)v-C3 7-cicloalchil (v=0,1 sau 2) (care poate fi substituit cu o grupă metil), sau norefedril sau norpseudo-efedril sau chinolil sau pirazil sau adamantil sau -CH2-benzimidazoliul sau -CH2-adamantil sau alfa-metilbenzil sau alfa-dimetilbenzil sau -(CH2)v-fenil (v=0, 1, 2 sau 3, care poate fi substituit cu unul până la doi substituenți ce pot fi independent CF3, nitro, C14-alchilsulfonil, C14-alcoxi, halogen, CMalchil care poate forma un sistem ciclic, cian, hidroxi, N(CH3)2; carboximetil, COOEt, COOiPr sau COONH2), sau -(CH2)m-naftil (m=0 sau 1, care poate fi substituit cu până la doi substituenți ce pot fi independent CF3, nitro, C14-alchilsulfonil, C14-alcoxi, halogen, C14alchil, care pot forma un sistem ciclic, cian, hidroxi, N(CH3)2, COOMe, COOEt,
RO 119783 Β1
COOiPr sau COONH2), sau -(CH2)W- benzhidril (w=0,1 sau 2, care poate fi substituit cu 1 până la doi substituenți ce pot fi substituiți independent cu CF3, nitro, C, „-alchilsulfonil, C,„-alcoxi, halogen, C14 alchil, care pot forma un sistem ciclic, cian, hidroxi, N(CH3)2, 3
COOMe, COOEt, COOiPr sau COONH2), sau bifenil (care poate fi substituit cu până la doi substituenți care pot fi independent CF3, nitro, C1„-alchilsulfonil, C14-alcoxi, halo- 5 gen, C,„ alchil care poate forma un sistem ciclic, cian, hidroxi, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr sau COONH2), sau piridil (care poate fi substituit cu până la doi substi- 7 tuenți care pot fi independent CF3, nitro, C,„-alchilsulfonil, C,„-alcoxi, halogen, C14alchil care poate forma un sistem ciclic, cian, hidroxi, COOMe, COOEt, COOiPr sau 9 COONH2) sau picolil (care poate fi substituit cu până la doi substituenți care pot fi independent CF3-nitro, C,„-alchilsulfonic, C,„-alcoxi, halogen, C14alchil care poate forma 11 un sistem ciclic, cian, hidroxi, COOMe, COOEt, COOiPr sau COONH2), sau -CH2-CH2piridil (care poate fi substituit cu până la doi substituenți care pot fi independent CF3, 13 nitro, CΛ„-alchilsulfonil, C(„-alcoxi, halogen, C,„ alchil care poate forma un sistem ciclic, cian, hidroxi, COOMe, COOEt, COOiPr sau COONH2) sau benzotiazolil (care poate fi 15 substituit cu până la doi substituenți care pot fi independent CF3,nitro, C1„-alchilsulfonic, C^-alcoxi, halogen, C,„alchil care poate forma un sistem ciclic, ciano, hidroxi, N(CH3)2, 17
COOMe, COOEt, COOiPr sau COONH2), sau benzooxazolil (care poate fi substituit cu până la doi substituenți care pot fi independent CF3, nitro, C,„-alchilsulfonil, C,„-alcoxi, 19 halogen, C, „alchil, care poate forma un sistem ciclic, hidroxi, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr sau COONH2) sau benzopirazolil (care poate fi substituit cu până la doi substi- 21 tuenți care pot fi independent CF3, nitro, C, „-alchilsulfonil, C,„-alcoxi, halogen, C^alchil care poate forma un sistem ciclic, cian, hidroxi, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr sau 23 COONH2), sau benzotiazolil (care poate fi substituit cu până la doi substituenți, care pot fi indepen- 25 dent CF3, nitro, C^-alchilsulfonil, C,„-alcoxi, halogen, C^alchil ce poate forma un sistem ciclic, cian, hidroxi, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr sau COONH2), sau -(CH2)m- 27 fluorenil (m=0 sau 1, care poate fi substituit cu până la doi substituenți ce pot fi independent CF3, nitro, C,„-alchilsulfonil, C^-alcoxi, halogen, C^alchil, care poate forma un 29 sistem ciclic, cian, hidroxi, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr sau COONH2), sau pirimidil (care poate fi substituit cu până la doi substituenți care pot fi independent CF3, ni- 31 tro, C^-alchilsulfonil, C^-alcoxi, halogen, C,„ alchil care poate forma un sistem ciclic, cian, hidroxi, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr sau COONH2), sau -(CH2)m -indanil 33 (m=0 sau 1, care poate fi substituit cu până la doi substituenți care pot fi independent CF3, nitro, C1„-alchilsulfonil, C,„-alcoxi, halogen, C,„ alchil, care poate forma un sistem 35 ciclic, cian, hidroxi, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr sau COONH2), sau (CH2CH2O)y-CH3 (y = 0,1,3,4 sau 5) sau -(CH2CH2O)y-CH2CH3(y = 0,1,2,3,4 sau 5), 37 sau -NH-C6H5 (care poate fi substituit cu până la doi substituenți, ce pot fi independent CF3, nitro, C(„-alchilsulfonil, C14-alcoxi, halogen, C^alchil, care poate forma un sistem 39 ciclic, cian, hidroxi, COOMe, COOEt, COOiPr sau COONH2), sau -NCH3-C6H5 (care poate fi substituit cu până la doi substituenți ce pot fi independent CF3, nitro, C14-alchil- 41 sulfonil, C1„-alcoxi, halogen, Cf„ alchil care poate forma un sistem ciclic, cian, hidroxi, COOMe, COOEt, COOiPr sau COONH2), sau -NH-CH2-C6H5 (care poate fi substituit cu 43 până la doi substituenți care pot fi independent CF3, nitro, C,„-alchilsulfonil, C^-alcoxi, halogen, C,„ alchil care poate forma un sistem ciclic, cian, hidroxi, COOMe, COOEt, 45 COOiPr sau COONH2), sau NCH3) -CH2-C6H5 (care poate fi substituit cu până la doi substituenți care pot fi independent CF3, nitro, C1.4-alchilsulfonil, C,„-alcoxi, halogen, 47
RO 119783 Β1
C14 alchil care poate forma un sistem ciclic, cian, hidroxi, COOMe, COOEt, COOiPr sau COONH2), sau un heteroaril de 5 atomi care poate fi substituit cu până la doi substituenți care pot fi independent CF3, nitro, C3^-alchilsulfonil, CM-alcoxi, tiometil, tioetil, picolil, acetil, C3 6-cicloalchil, tiofenil, -CH2-COOEt, grupă C34-alchilen ce formează un sistem biciclic cu heterociclu; fenil (care poate fi substituit cu până la doi substituenți care pot fi independent nitro CF3, CN, halogen, Cb4-alchil), benzii (care poate fi substituit cu până la doi substituenți care pot fi, în mod independent, nitro, CF3, halogen, C,_4 alchil, C)4 alchilsulfonil, cian, hidroxi, C1.4-dialchilamino), sau -CHR7- heteroaril de 5 atomi (care poate fi substituit cu până la doi substituenți care pot fi independent CF3, nitro, cian, halogen, COOMe, COOEt, COOiPr, CONH2, C,.4-alchil, C14-alcoxi, fenil, benzii, naftil, sau C14-alchilsulfonil, [R7 = hidrogen, Ci_5-alchil liniar sau ramificat, benzii]). Grupa -CHR7-heteroaril de 5 atomi poate fi reprezentată, de exemplu, de următoarele resturi:
RO 119783 Β1
Heteroarilul de 5 atomi poate fi reprezentat de exemplu de următoarele resturi:
RO 119783 Β1
N-n
RO 119783 Β1
R5 -N-R6 împreună pot de asemenea forma structuri alese din grupul format din:
/ \ —N O \_7
Preferați sunt compușii având formula generală (I) în care: substituenții R1, R2, A, B, D,
E, X, F și tau următoarele semnificații:13
R1 este metil sau etil
R2 este hidrogen, metil sau etil;15
A reprezintă un rest valii, izoleucil, 2-terț-butilglicil;
B reprezintă un rest N-metil-valil, -izoleuci sau 2-terț-butilglicil;17
D este un rest prolil, 3,4-dehidroprolil, 4-fluoropropil, 3-metilpropil sau tiazolidin-4-carbonil;
E este un rest 3,4-dehidroprolil, 4-fluorprolil, 3-metilpropil sau azetidin-2-carbonil;19
F este un rest D-valil, 2-terț-butilglicil, D-izoleucil, D-leucil sau aminoizobutiroil;
X este -CH(CH3)2, -C(CH3)3, sau -CH (CH3)3 CH2CH3;21 t este 0 sau 1.
Semnificațiile preferate pentru K sunt:23
-OC(CH3)3, -NH2, -NH-C,.^ alchil, -NH-C3.8cicloalchil, -NH-[3,3,0]-biciclooctil, norefedril, norpseudoefedril, - NH-chinolil, -NH-pirazil, -NH-CH2-benzimidazolil, -NH-adamantil, -NH-CH2-ada- 25 mantii, -NH-CH(CH3)-fenil,-N-C(CH3)2-fenil, -N(C1^l-alcoxi)C1.4-alchil, -N(C^-alcoxi)-CH2-fenil, -N(C1^-alcoxi)-fenil, -N(CH3)OBzl, -NH-(CH2)v-fenil (v - 0,1,2 sau 3), -NH-(CH2)m-naftil (m=0 27 sau 1), -NH-(CH2)w -benzihidril (w - 0, 1 sau 2), -NH-bifenil, -NH-piridil, -NH-CH2-piridil, -NHCH2-CH2-piridil, -NH-benzotiazolil, -NH-benzoizotiazolil, -NH-benzopirazolil, -NH-benzoxazolil, 29 -NH-(CH2)m - fluorenil (m = 0 sau 1), -NH-pirimidil, -NH-(CH2)m-indanil (m = 0 sau 1), -NH(CH2CH2O)y -CH3 (y = 0,1,2,3,4 sau 5),-NH-(CH2CH2O)y-CH2CH3(y=0,1,2, 3,4 sau 5), -NH- 31 (heteroaril de 5 atomi) după cum se prezintă la pg.6 - 7), -NH-CHR7-heteroaril de 5 atomi [R7 = hidrogen, C15-alchil liniar sau ramificat, benzii] (după cum se prezintă la pg.5); sau K este: 33
RO 119783 Β1
Semnificațiile mai preferate pentru K sunt:
-NH-CH3, -NHCH2CH3, -NH(CH2)2CH3, -NH(CH2)3CH3, -NH(CH2)4CH3, -NH(CH2)5CH3-NH (CH2)6 CH3,-NH(CH2)7CH3,-NHCH(CH)3)2,-NHCH(CH3)CH2CH3,-NHCH(CH3)CH2CH2CH3,-NHCH (CH2CH3)2,-NH-(CH2CH2CH3)2,-NHC(CH3)3,-NHCH(CH2CH3)CH2CH2CH3,-NHCH(CH3)CH (CH3)2,-NHCH(CH2CH3)CH(CH3)2-NHCH(CH3)C(CH3),-NH-ciclopropil,-NH-ciclobutil,-NHciclopentil, -NH-ciclohexil, -NH-cicloheptil, -NH-ciclooctil, -NH-biciclo [3.3.0]octil, -N(CH3)OCH3, -N(CH3)OCH2CH3,-N(CH3)OCH2CH2CH3, -N(CH3)OCH(CH3)2, N(CH2CH3)OCH3> -N(CH2CH3) OCH2CH3,-N(CH(CH3)2)OCH3,-N(CH3)OCH2C6H5, N(OCH3)CH2-C6H5, -N(CH3)OC6H5, -NH(CH2)C6H5,-NH-(CH2)2C6H5 -NH(CH2)3 C6H5, -NHCH(CH3)C6Hs,-NHC(CH3)2C6H5, -NHC(CH3)2CH2CH3, -NHC(CH3)(CH2CH3)2,-NHCH(CH3)CH(OH)C6H5,-NHCH2-ciclohexil,-NH-CH2CF3.,NHCH(CH2F)2,-NHC(CH3)2CH2CH2OH,.-NH(CH2CH2O)2CH2CH3,-NHC(CH3)2CH(CH3)2,NHC(CH3)2CN,-NHC(CH3)2CCH,
-NHC(CH3)2C = CH2, norefedril, norpseudoefedril, -NH-chinolil, - NH-pirazil, -NH-adamantil(l), -NH-adamantil (2), -NH-CH2-adamantil, -NH-CH2-naftil, -NH-benzhidril, -NH-bifenil, -NH-piridil, -NH-picolil, -NH-CH2-CH2-piridil, -NH-benzotiazolil, -NH-benzoizotiazolil, -NH-benzopirazolil, -NH-benzoxazolil, -NH-fluorenil, -NH-pirimidil, -NH-tiazolil(2), -NH-izoxazolil(3), -NH-CH2-furanil(2), -NH-(3-metil)izoxazolil(5), -NH-(3-metil)izotiazolil(5), -NH-(2-trifluormetil)-tiadiazolil(5), -OC(CH3)3- NH-CH2-(4-metil)tiazolil(2), -NH-CH2-tienil(2), -NH-CH2-(5-metil)tienil(2), -NH-(2-metil)tiadiazolil(5), -NH-(2-ciclopropil)tiadiazolil(5).
sau K este:
Aceste exemple ilustrează, dar nu limitează, obiectul prezentei invenții.
Peptidele având formula generală I sunt în formă de L-aminoacizi, dar F poate fi, de asemenea, un D-aminoacid.
Compușii noi se pot prezenta sub formă de săruri cu acizi acceptabili din punct de vedere fiziologic, cum ar fi: acid clorhidric, acid citric, acid tartric, acid lactic, acid fosforic, acid metansulfonic, acid acetic, acid formic, acid maleic, acid fumărie, acid malic, acid succinic, acid malonic, acid sulfuric, acid L-glutamic, acid L-aspartic, acid piruvic, acid mucic, acid benzoic, acid glucuronic, acid oxalic, acid ascorbic și acetilglicina.
Compușii noi pot fi preparați prin metode cunoscute în chimia peptidelor.
Astfel, peptidele pot fi asamblate secvențial din aminoacizi sau prin legarea fragmentelor peptidice mici, potrivite în asamblarea secvențială, începând cu capătul C-terminal, catena peptidică este extinsă treptat cu câte un aminoacid. în cuplarea fragmentului, este posibil să se lege împreună fragmente de diferite lungimi, și fragmentele, la rândul lor, pot fi obținute prin asamblare secvențială din aminoacizi sau prin cuplarea fragmentelor.
RO 119783 Β1
Atât în asamblarea secvențială, cât și în cuplarea fragmentului, este necesar să se lege 1 unități, prin formarea unei legături amidice. Pentru acest scop, sunt adecvate metodele enzimatice și chimice. 3
Metodele chimice de formare a legăturii amidice sunt descrise în detaliu de către
Mueller, Methoden der organischen Chemie, vol.XV/2, pp 1 la 364. Thieme Verlag, Stuttgart, 5 1974; Stewart, Young, Solid Phase Peptide Synthesis, pg.31 la 34, 71 la 82, Pierce Chemical Company, Rockford, 1984; Bodanszky, Klausner, Ondetti, Peptide Synthesis, pg.85 la 128, 7
John Wiley & Sons, New York, 1976 și alte lucrări standard din chimia peptidelor. Se preferă, în mod deosebit, metoda cu azidă, metoda anhidridei simetrice și mixte, esterii activi preformați 9 sau generați in situ, utilizarea uretan-anhidridelor N-carboxi protejate ale aminoacizilor și formarea legăturii amidice folosind reactanți de cuplare/activatori, în special diciclohexilcarbodii- 11 midă (DCC), diizopropilcarbodiimidă (DIC), 1 -etoxicarbonil-2-etoxi-1,2-dihidrochinolină (EEDQ) clorhidrat de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimidă (EDCI), anhidrida n-propanfosfonică 13 (PPA), clorură de N,N-bis(2-oxo-3-oxazolidinil)-amidofosforil (ΒΟΡ-CI), brom-tr/s-pirolidinfosfoniu hexafluorfosfat (PyBrop), difenilfosforil azidă (DPPA), reactivul Castra (BOP, PyBop), 15 săruri de O-benzotriazolil Ν,Ν,Ν’, N’-tetrametiluroniu (HBTU), săruri de O-azabenzotriazolilΝ,Ν,Ν’,Ν’-tetrametiluroniu (HATU), cianură de dietilfosforil (DEPCN), 2,5-difenil-2,3-dihidro-3- 17 oxo-4-hidroxitiofen dioxid (reactivul Stenglich; HOTDO) și 1,1 '-carbonildiimidazol (CDI). Reactivii de cuplare pot fi folosiți singuri sau în combinație cu aditivi cum ar fi N,N-dimetil-4-aminopiridina 19 (DMAP), N-hidroxi-benzotriazol (HOBt), N-hidroxibenzotriazină (HOOBt), azabenzotriazol (HOAt), N-hidroxisuccinimidă (HOSu) sau 2-hidroxipiridină. 21 în timp ce în sinteza enzimatică a peptidelor este posibil să se renunțe la grupele de protecție, în sinteza chimică este necesară protecția reversibilă a grupelor reactive, care nu sunt 23 implicate în formarea legăturii amidice pentru ambii reactanți. Pentru sinteza chimică a peptidelor, se preferă trei tehnici de grupe de protecție convenționale: tehnicile benziloxicarbonil (Z), 25
Fbutoxicarbonil (Boc) și 9-fluorenilmetoxicarbonil (Fmoc). Identificată în fiecare caz este grupa de protecție a grupei alfa-amino a fiecărei unități de extindere a catenei. O prezentare detaliată 27 a grupelor de protecție ale aminoacidului este dată de Mueller, Methoden der organischen Chemie, voi. XV/1, pp.20 la 906, Thieme Verlag, Stuttgart, 1974. Unitățile folosite pentru asam- 29 blarea catenei peptidice pot fi reacționate în soluție, în suspensie sau printr-ο metodă similară cu cea descrisă de Merrifield în J. Amer. Chem.Soc.85 (1963) 2149. 31
Metode preferate în mod deosebit sunt cele în care peptidele sunt asamblate secvențial sau prin cuplarea fragmentelor, folosind tehnici de protecție a grupărilor Z, Boc sau Fmoc. 33 Unul din reactanții din tehnica Merrifield este legat la un suport polimeric insolubil (denumit în continuare rășină). Aceasta dă posibilitatea ca peptida să fie asamblată secvențial pe su- 35 portul polimeric, folosind tehnica grupei de protecție Boc sau Fmoc, catena peptidică în creștere fiind legată covalent la C terminal la particulele insolubile de rășină (conform fig. 1 și 2). Acest 37 procedeu face posibilă îndepărtarea reactanților și a produșilor secundari prin filtrare și, în acest fel, nu mai este necesară recristalizarea intermediarilor. 39
Aminoacizii protejați pot fi legați la orice polimer adecvat, care trebuie să fie insolubil în solvenții folosiți și să aibă o formă stabilă fizic, care să facă filtrarea ușoară. Polimerul trebuie 41 să conțină o grupă funcțională, la care primul aminoacid protejat poate fi legat printr-o legătură covalentă. Adecvați acestui scop sunt o serie de polimeri, cum ar fi celuloza, alcoolul polivinilic, 43 polimetacrilatul, polistirenul sulfonat, copolimerul stiren clormetilat/divinilbenzen (rășina Merrifield), rășina 4-metilbenzhidrilaminică (rășina MBHA), rășina fenilacetamidometil (rășina 45 Pam), rășina alcool p-benziloxi-benzilic, rășina benzhidril amină (rășina BHA), rășina 4-(hidroximetil)-benzoiloximetil, rășina Breipohlș.a. (Tetrahedron Letters 28 (1987) 565, furnizată de 47 BACHEM), rășina 4-(2,4-dimetoxifenilaminometil)fenoxi (furnizată de Novabiochem) sau rășina o-clortritil (furnizată de Biohellas). 49
RO 119783 Β1
Pentru sinteza în soluție a peptidelor, sunt adecvați toți solvenții care sunt inerți în condițiile de reacție, în special apa, Ν,Ν-dimetilformamida (DMF), dimetil sulfoxidul (DMSO), acetonitrilul, diclormetanul (DCM), 1,4-dioxanul, tetrahidrofuranul (THF), N-metil-2-pirolidona (NMP) și amestecuri ale acestor solvenți. Sinteza peptidelor pe suport polimeric poate fi efectuată în toți solvenții organici inerți în care derivații aminoacizilor folosiți sunt solubili. Totuși, solvenții preferați au în plus proprietăți de gomflare a rășinii, cum ar fi DMF, DCM, NMP, acetonitril și DMSO și amestecuri ale acestor solvenți.
După terminarea sintezei, peptida este scindată de suportul polimeric. Condițiile de scindare de pe diferite suporturi de rășină sunt prezentate în literatură. Reacțiile de scindare cele mai folosite sunt cele catalizate cu acid și cu paladiu, în special scindarea în acid fluorhidric lichid anhidru, în acid trifluormetansulfonic anhidru, în acid trifluoracetic diluat sau concentrat, scindarea catalizată cu paladiu în THF sau în amestecuri THF-DCM în prezența unei baze slabe, cum ar fi morfolina, sau scindarea în amestec de acid acetic-diclormetan-trifluoretanol. în funcție de grupele de protecție alese, acestea pot fi menținute sau pot fi scindate în condițiile de scindare.
Deprotejarea parțială a peptidei poate fi preferată atunci când trebuie efectuate anumite reacții de derivatizare. Se pot prepara peptide dialchilate la N-terminal
a) prin cuplarea N,N-d/-alchilaminoacizilor în soluție sau pe suport polimeric,
b) prin alchilare reductivă a peptidei legate de rășină în DMF/acid acetic 1% cu NaCNBHg și aldehida sau cetona adecvată,
c) prin hidrogenarea peptidelor în soluție, în prezența aldehidei sau cetonei și Pd/C.
Diferiți aminoacizi care nu se găsesc în natură și care sunt prezentați în descrierea de față pot fi obținuți din surse comerciale sau sintetizați din materiale accesibile comercial, folosind metodele cunoscute în domeniu. Sunt accesibile comercial următoarele materii prime: acid azetidin-2-carboxilic, 3-metil-L-prolină, 5-metil-L-prolină și 3,4-dehidroproline protejate Boc-sau Fmoc- (ACROS, NOVABIOCHEM, BACHEM), cis- și frans-4-fluorprolina se pot prepara din hidroxiprolină, prin metoda descrisă de Panasik ș.a. (N.Panasik, E.S. Eberhardt, A.S. Edison, D.R. Powell, R.T. Raines, Int. J. Peptide Protein Res., 44,1994, 262 - 269).
Compușii conform invenției pot fi folosiți pentru a inhiba sau pentru tratamentul de altă natură a tumorilor solide (ex. tumori pulmonare, de sân, colon, prostată, vezică, rectal sau de endometru), sau bolile maligne hematologice (exemplu: leucemii, limfoame), prin administrarea compusului la un mamifer.
Administrarea poate fi făcută prin orice mijloace care sunt convenționale pentru agenții farmaceutici, de preferință cei oncologici, incluzând căile orale și parenterale, cum ar fi subcutanat, intravenos, intramuscular și intraperitoneal.
Compușii pot fi administrați singuri sau sub formă de compoziții farmaceutice care conțin un compus cu formula I împreună cu un purtător acceptabil farmaceutic adecvat căii de administrare dorite. Asemenea compoziții farmaceutice pot fi combinații de produși, adică mai pot conține și alți ingredienți activi terapeutic.
Doza care trebuie administrată la mamifere va conține o cantitate eficientă de inhibare a tumorii din ingredientul activ, în funcție de o serie de factori convenționali, cum ar fi activitatea biologică a compusului folosit, mijloacele de administrare, vârstă, sănătate și greutatea corporală a primitorului, natura și gravitatea simptomelor, frecvența tratamentului, administrarea altor terapii și efectul dorit. O doză zilnică tipică este de aproximativ 0,5...50 mg/kg corp, în cazul administrării orale, și de aproximativ 0,05...20 în administrarea parenterală.
RO 119783 Β1
Compușii pot fi administrați sub forme de administrare farmaceutice convenționale solide sau lichide, de exemplu tablete neacoperite sau tablete acoperite (cu film), capsule, pulberi, granule, supozitoare sau soluții. Acestea sunt obținute în mod convențional. Substanțele active pot fi prelucrate cu auxiliari farmaceutici convenționali, cum ar fi lianții pentru tablete, agenții de umplutură, conservanții, agenții de dezintegrare a tabletelor, regulatorii de curgere, plastifianții, agenții de umectare, dispersanții, emulgatorii, solvenții, compozițiile cu eliberare susținută, antioxidanții și/sau gazele propulsoare (conform H.Sucker ș.a., Pharmazeutische Technologie, Thieme-Verlag, Stuttgart, 1978). Formele de administrare obținute în acest mod conțin în mod normal între 1...90% în greutate substanță activă.
Următoarele exemple au rolul de a ilustra invenția. Aminoacizii proteinogeni sunt abreviați folosind codul cunoscut, cu trei litere. Alte abrevieri folosite: Me2Val=N,N-dimetilvalină, MeVal=N-metilvalină.
în continuare, se prezintă două exemple de realizare a invenției:
A. Mod de lucru general
I. Peptidele din revendicarea 1 sunt fie sintetizate prin sinteze clasice, folosind metodologia Z- și Boc- descrisă anterior, fie prin metode standard ale sintezei în fază solidă, folosind tehnicile de protecție a grupelor Boc și Fmoc.
a) Ciclul de sinteză pentru tehnica grupării de protecție Fmoc | ||
1. | Spălare cu DMF | 1x 1 min |
2. | 20% piperidină în DMF | 1x4 min |
3. | 20% piperidină în DMF | 1 x 16 min |
4. | Spălare cu DMF | 5 x 1 min |
5. | Adăugarea aminoacidului preactivat (activare cu 1 echivalent TBTU și 5 echivalenți de DIPEA în DMF); Cuplarea peptidei | 1 x 61 min |
6. | Spălare cu DMF | 3 x 1 min |
7. | Dacă conversia este incompletă, se repetă cuplarea (înapoi la 5) | |
8. | 10% anhidridă acetică în DMF | 1x8 min |
9. | Spălare cu DMF | 3 x 1 min |
10. | înapoi la 2 | |
ΒΟΡ-CI și PyBrop se folosesc ca reactivi pentru cuplarea aminoacidului după N-metil- |
aminoacizi. Timpii de reacție au crescut corespunzător, incluzând cuplarea dublă. în sinteza în soluție, folosirea fie a NCA aminoacidului protejat Boc (N-carboxi anhidridei), NCA aminoacidului protejat Z(N-carboxi anhidride), fie a clorurii de pivaloil ca agent de condensare este cea mai avantajoasă pentru acest tip de cuplare.
II. Alchilarea reductivă la capătul N terminal
Rășina - peptidă preparată ca în Ala a fost deprotejată la capătul N-terminal (etapele 2-4 în Ala, și apoi a fost supusă reacției cu un exces molar de 3 ori de aldehidă sau cetonă în DMF/1 % acid acetic, cu adăugare de 3 echivalenți de NaCNBH3. După terminarea reacției (testul Kaiser negativ), rășina a fost spălată de mai multe ori cu apă, izopropanol, DMF și diclormetan. Alchilarea reductivă în soluție poate fi realizată, de exemplu, prin reacția peptidelor deprotejate la capătul N-terminal, fragmente de peptide sau aminoacizi cu aldehidele sau cetonele corespunzătoare, folosind NaCNBH3 sau hidrogen-Pd/C.
III. Prelucrarea rășină-peptidă obținută ca în Ib și II
Peptida-rășină a fost uscată sub presiune redusă și apoi a fost supusă unui tratament cu un amestec de TFA/apă (95:5) timp de 1,5 h (Wade, Tregear, Howard Florey Fmoc Workshop Manual, Melbourne 1985). Rășina a fost filtrată apoi și a fost spălată cu TFA și DCM.
RO 119783 Β1
Filtratul și soluțiile de spălare au fost concentrate și peptida a fost precipitată prin adăugare de dietileter. După răcire într-o baie cu gheață, precipitatul a fost filtrat, preluat în acid acetic 30% și liofilizat.
IV. Când se folosește o o-clortritil-rășină (furnizată de Biohellas), suspensia peptidă-rășină într-un amestec acid acetic/trifluoretanol/ciclometan (1:13) este agitată la temperatura camerei timp de 1 h. Rășina este apoi filtrată sub vid și spălată cu soluție de scindare. Filtratele combinate sunt concentrate sub vid și sunt tratate cu eter. Solidul precipitat este îndepărtat prin filtrare sau centrifugare, spălat cu dietil eter și uscat sub presiune redusă.
V. Purificarea și caracterizarea peptidelor
Purificarea a fost efectuată prin cromatografie de gel (SEPHADEX G-10, G-15/10% HOAc, SEPHADEX LH20/MeOH) și/sau cromatografie de presiune medie (fază staționară: HDSILC-8,20-45 μ, 100 Â; fază mobilă; gradientcu A=0,1% TFA/apă, B =0,1%TFA/MeOH), sau HPLC preparativă (fază staționară: Waters Delta-Pak C-18,15 μ, 100 Â; fază mobilă: gradient cu A=0,1% TFA/apă, B=0,1% TFA/MeOH).
Puritatea produșilor rezultați a fost determinată prin HPLC analitică (fază staționară: 1002,1 mm VYDAC C-18,300 Â; fază mobilă; gradient acetonitril-apă tamponat cu 0,1% TFA, 40°C). Caracterizarea a fost făcută prin spectrometrie de masă cu bombardament de atomi rapizi și spectroscopie RMN.
B. Mod de lucru specific
Exemplul 1. (SECV. IDNr.1)
Me2Val-Val-MeVal-Pro-L-Azetidinil-2-carboxamidă
0,53 g Fmoc-RINK-rășină (substituție 0,46 mmol/g), corespunzătoare unei șarje de 0,25 mmoli, a reacționat ca în Ala cu 0,4 mmoli cu fiecare din
Acid Fmoc-L-azetidin-2-carboxilic
Fmoc-Pro-OH
Fmoc-MeVal-OH
Fmoc-Val-OH Fmoc-Val-OH.
Aminoacidul care urmează acidului N-metilamino s-a cuplat cu PyBrop ca reactant de cuplare cu o cuplare dublă. După terminarea ciclurilor iterative de sinteză, peptida-rășină a fost supusă deprotejării la capătul N-terminal (etapele 2 - 4 din Ala) și apoi a reacționat cu o soluție apoasă de formaldehidă ca în AII, și apoi a fost uscat sub presiune redusă. Rășina rezultată a fost supusă sondării TFA ca în AIII. Produsul brut a fost purificat prin cromatografie de presiune medie, obținându-se 5 mg din peptida pură dorită (10-40% în 10; 40-90% în 200). Compusul a fost caracterizat în continuare prin spectrometrie de masă cu bombardament de atomi rapizi ([M+H] + = 537,37).
Exemplul 2. (SECV. ID Nr.1)
Me2Val-Val-MeVal-Pro-3,4-dehidroprolilbenzilamidă
a) Z-MeVal-Pro-OMe
66,25 g (250 mmoli) Z-MeVal-OH s-au dizolvat în 250 ml diclormetan uscat. După adăugarea a 36,41 ml (262,5 mmoli) trietilamină, amestecul de reacție a fost răcit la -25’C și s-au adăugat 32,27 ml (262,5 mmoli) clorură de pivaloil. După agitare timp de 2,5 h, s-au adăugat 41,89 g (250 mmoli) H-Pro-Pme x HCI în 250 ml diclormetan și amestecul de reacție s-a neutralizat cu 36,41 ml (262,5 mmoli) trietilamină la 0°C. S-a continuat agitarea timp de 2h la - 25”C și apoi, peste noapte, la temperatura camerei. Amestecul de reacție a fost diluat cu diclormetan și spălat cu soluție apoasă saturată de NaHCO3 (3x), apă (1 x), acid citric (3x) și soluție saturată de NaCI. Faza organică a fost uscată pe sulfat de sodiu și evaporată la sec. Reziduul (91,24 gf a fost agitat cu eter de petrol, peste noapte, și filtrat. S-au obținut 62,3 g produs.
RO 119783 Β1
b) H-MeVal-Pro-OMe 1
48,9 g (130 mmoli) Z-MeVal-Pro-OMe s-au dizolvat în 490 ml metanol. După adăugarea a 10,9 ml (130 mmoli) acid clorhidric concentrat și 2,43 g 10% Pd/cărbune, amestecul de 3 reacție s-a hidrogenat. După filtrare și evaporare la sec s-au obținut 36,43 g produs.
c) Z-Val-MeVal-Pro-OMe 5
18,1 g (65 mmoli) H-MeVal-Pro-OMe, 21,6 g (78 mmoli) Z-Val-N-carboxianhidridă și
22,8 ml (130 mmoli) diizopropiletilamină s-au agitat în 110 ml DMF la 40’C timp de 2 zile. După 7 evaporarea DMF, s-a adăugat diclormetan și faza organică a fost spălată cu soluție apoasă saturată de NaHCO3 (3x), apă (1x), acid citric 5% (3x) și soluție saturată de NaCI. Faza organică 9 a fost uscată pe sulfat de sodiu și evaporată la sec. S-a obținut produsul (29,3 g) sub forma unui ulei vâscos. 11
d) H-Val-MeVal-Pro-OMe
29,3 g (61,6 mmoli) Z-Val-MeVal-Pro-OMe s-au dizolvat în 230 ml metanol. După adău- 13 garea a 1,15 g 10% paladiu/cărbune, s-a hidrogenat amestecul de reacție. După filtrare și evaporare la sec, s-au obținut 21,96 g produs. 15
e) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe
15,29 g (61 mmoli) Z-Val-OH și 21,96 g (61 mmoli) H-Val-MeVal-Pro-OMe s-au dizolvat 17 în 610 ml diclormetan și s-au răcit la 0’C. După adăugarea a 8,16 ml (73,2 mmoli) N-metilmorfolină, 2,77 g (20,3 mmoli) HOBt și 11,74 g (61 mmoli) EDCI, amestecul de reacție a fost agitat 19 peste noapte la temperatura camerei, diluat cu diclormetan și spălat cu soluție apoasă saturată de NaHCO3 (3x), apă (1 x), acid citric 5% (3x) și soluție saturată de NaCI. Faza organică s-a us- 21 cat pe sulfat de sodiu și s-a evaporat la sec, obținându-se 31,96 g produs.
f) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH 23
31,96 g (57 mmoli) Z-Val- Val-MeVal-Pro-OMe s-au dizolvat în 250 ml metanol și s-au adăugat 102,6 ml (102,6 mmoli) LiOH 1M în apă. După agitare la temperatura camerei, timp 25 de 24 h, s-a adăugat apă și s-a evaporat metanolul sub presiune redusă. Faza apoasă s-a extras de 3 ori cu acetat de etil, s-a adus la pH = 2...4°C și s-a extras de 3 ori cu acetat de etil. 27
Extractele organice combinate s-au uscat pe sulfat de sodiu și solventul s-a evaporat sub presiune redusă, obținându-se 30,6 g solid alb. 29
g) Me2Val-Val-MeVal-Pro-OH
Acidul tetrapeptidic Ν,Ν-dimetilat a fost preparat din acidul tetrapeptidic Z-protejat prin 31 hidrogenarea grupei de protecție Z și adăugarea ulterioară de soluție apoasă de formaldehidă la amestecul de hidrogenare, obținându-se produsul dorit cu un randament aproape cantitativ. 33
h) Me2Val-Val-MeVal-Pro-3,4-dehidroprolin metilester
3,38 g Me2Val-Val-MeVal-Pro-OH (7,27 mmoli) și 0,925 g clorhidrat de 3,4-dehidroprolin 35 metilester (7,27 mmoli) s-au dizolvat în 75 ml diclormetan uscat. S-au adăugat la 4’C 0,975 ml N-metilmorfolină (8,72 mmoli), 0,332 g HOBt (2,43 mmoli) și 1,4 g EDCI (7,27 mmoli). După 37 agitare peste noapte, la temperatura camerei, s-a adăugat diclormetan, și faza organică a fost spălată de 3 ori cu soluție saturată de bicarbonat de sodiu și o dată cu apă. Stratul organic a 39 fost extras cu soluție apoasă 5% de acid citric. pH-ul stratului acid apos s-a ajustat apoi la pH 8 cu NaOH 1N și a fost extras de 4 ori cu diclormetan. După uscare pe sulfat de sodiu și 41 evaporare sub presiune redusă, s-au obținut 2,82 g pentapeptid metilester.
k) Me2 Val- Val-Me Val-Pro-3,4-dehidroprolin benzilamidă 43
O soluție formată din 2,0 g dehidroprolină, care conține pentapeptid metilester în 20 ml metanol, a fost tratată cu 4,6 ml soluție LiOH 1N la temperatura camerei. După terminarea 45 reacției (control tic), s-a adăugat apă, s-a evaporat metanolul și compusul a fost liofilizat din apă. Pulberea albă obținută a fost dizolvată în 36 ml diclormetan și s-au adăugat 0,388 ml 47
RO 119783 Β1 (3,55 mmoli) benzilamină. După adăugarea a 0,476 ml N-metilmorfolină (4,26 mmoli), 0,163g HOBt (1,19 mmoli) și 0,684 g EDCI (3,55 mmoli), la 4’C, amestecul de reacție a fost peste noapte agitat la temperatura camerei. S-a adăugat diclormetan și faza organică a fost spălată de 3 ori cu o soluție saturată de bicarbonat de sodiu și o dată cu apă. Stratul organic a fost extras de 2 ori cu acid citric 5%. Stratul apos acid a fost ajustat la pH 9 cu NaOH 5N și a fost extras de 4 ori cu diclormetan. După uscare pe sulfat de sodiu și evaporarea solventului sub presiune redusă, s-a obținut 600 mg pentapeptid benzilamidă brută. 300 mg din această peptidă brută a fost purificată în continuare, folosind cromatografie lichidă, de presiune medie (0-10% A în 5', 10-25% A în 10', 25-90% A în 450'), obținându-se 92 mg produs pur analitic. Compusul a fost caracterizat în continuare prin spectrometrie de masă cu bombardament de atomi rapizi ([M+H]+ - 639,4).
S-au preparat, ca în exemplele 1 și 2, următorii compuși:
3. Xaa Val Xab Pro Xac
4. Xaa Val Xab Pro Xad
5. Xaa Val Xab Pro Xae
6. Xaa Val Xab Pro Xaf
7. Xaa Val Xab Pro Xag
8. Xaa Val Xab Pro Xah
9. Xaa Val Xab Pro Xai
10. Xaa Val Xab Pro Xak
11. Xaa Val Xab Pro Xal
12. Xaa Val Xab Pro Xam
13. Xaa Val Xab Pro Xan
14. Xaa Val Xab Pro Xao
15. Xaa Val Xab Pro Xap
16. Xaa Val Xab Pro Xaq
17. Xaa Val Xab Pro Xar
18. Xaa Val Xab Pro Xas
19. Xaa Val Xab Pro Xat
20. Xaa Val Xab Pro Xau
21. Xaa Val Xab Pro Xav
22. Xaa Val Xab Pro Xaw
23. Xaa Val Xab Pro Xax
24. Xaa Val Xab Pro Xay
25. Xaa Val Xab Pro Xaz
26. Xaa Val Xab Pro Xba
27. Xaa Val Xab Pro Xbb
28. Xaa Val Xab Pro Xbc
29. Xbd Val Xab Pro Xar
30. Xbe Val Xab Pro Xar
31. Xaa Val Xab Pro Xcx
32. Xaa Val Xab Pro Xcy
33. Xaa lle Xab Pro Xar
34. Xaa Xbh Xab Pro Xar
35. Xaa Val Xbf Pro Xar
36. Xaa Val Xbg Pro Xar
37. Xaa Val Xab Pro Xbi
38. Xaa Val Xab Pro Xbk
39. Xaa Val Xab Pro Xbl
40. Xaa Val Xab Pro Xbm
41. Xaa Val Xab Pro Xbn
RO 119783 Β1
42. Xaa Val Xab Pro Xbo1
43. Xaa Val Xab Pro Xbp
44. Xaa Val Xab Pro Xpq3
45. Xaa Val Xab Pro Xbr
46. Xaa Val Xab Pro Xbs5
47. Xaa Val Xab Pro Xbt
48. Xaa Val Xab Pro Xbu7
49. Xaa Val Xab Xbq Xbv
50. Xaa Val Xab Pro Xbw9
51. Xaa Val Xab Pro Xbx
52. Xaa Val Xab Pro Xby11
53. Xaa Val Xab Pro Xbz
54. Xaa Val Xab Pro Xca13
55. Xaa Val Xab Pro Xcb
56. Xaa Val Xab Pro Xcc15
57. Xaa Val Xab Pro Xcd
58. Xaa Val Xab Pro Xce17
59. Xaa Val Xab Pro Xcf
60. Xaa Val Xab Pro Xcg19
61. Xaa Val Xab Pro Xch
62. Xaa Val Xab Pro Xci21
63. Xaa Val Xab Pro Xck
64. Xaa Val Xab Xcn Xco23
65. Xaa Val Xab Xcn Xak
66. Xaa Val Xab Xcn Xaq25
67. Xaa Val Xab Xcn Xar
68. Xaa Val Xab Xcn Xay27
69. Xaa Val Xab Xcp Xak
70. Xaa Val Xab Xcp Xaq29
71. Xcw Val Xab Xcp Xar
72. Xcx Val Xab Xcp Xay31
73. Xaa Val Xab Pro Xcn Xcr
74. Xaa Val Xab Pro Xcn Xcs33
75. Xaa Val Xab Pro Xcn Xct
76. Xaa Val Xab Pro Xcn Xcu35
77. Xaa Val Xab Pro Xcn Xcv
78. Xaa Vak Xab Pro Xcq Xcr37
79. Xaa Val Xab Pro Xcq Xcs
80. Xaa Val Xab Pro Xcq Xct39
81. Xaa Val Xab Pro Xcq Xcu
82. Xaa Val Xab Pro Xcq Xcv41
83. Xaa Val Xab Pro Xcw Xcr
84. Xaa Val Xab Pro Xcw Xcs43
85. Xaa Val Xab Pro Xcw Xct
86. Xaa Val Xab Pro Xcw Xcu45
87. Xaa Val Xab Pro Xcw Xcv
88. Xaa Val Xab Pro Xcw OCH347
89. Xaa Val Xab Pro Xcl
90. Xaa Val Xab Pro Xcm49
91. Xaa Val Xab Pro Xcz
92. Xaa Val Xab Pro Xda51
RO 119783 Β1
Rezultatele caracterizării noilor compuși sintetizați sunt prezentate în tabelul de mai jos
Exemplul | Analiza MS cu bombardament de atomi rapizi |
[Nr.] | [Masa moleculară (măsurată)] |
61 | 627 |
64 | 546 |
88 | 552 |
89 | 655 |
Tabelul 1
Identificarea secvențelor compușilor preparați conform exemplelor 1 și 2
Compus nr. | Numărul Secvenței ID. Nr |
1-32, 35-63, 88-92 33 34 64-72 73-87 | 12345 |
Simbolurile Xaa au următoarele semnificații:
Xaa: N,N-Dimetilvalină
Xab: N-Metilvalină
Xac:
o
Xad:
Xae:
Xaf:
RO 119783 Β1
RO 119783 Β1
Xam:
Xan:
Xao:
RO 119783 Β1
RO 119783 Β1
Xax:
Xay:
Xaz:
Xba:
Xbb:
Xbc:
CH3
RO 119783 Β1
Xbd: Ν,Ν-dimetilizoleucinâ
Xbe: N.N-dimetil^-terî-butil-glicină Xbf: N-metilizoleucină
Xbg: N-metil-2-tert-butil-glicină
Xbh: 2-terf-butil-glicină
Xbi:
Xbk:
CH3
Xbb
Xbm:
RO 119783 Β1
Xbn:
Xbo:
Xbp:
Xbq:
Xbr:
RO 119783 Β1
Xbs:
Xbt:
Xbii:
Xbv:
RO 119783 Β1
Xbx:
Xby:
Xbz:
Xca:
Xcb:
Xcc:
RO 119783 Β1
RO 119783 B1 | |
Țel: | Y 0 |
Xcm: | O' 0 |
Xct | 3,4-cehidrcprolină |
Xco: | 3,4-dehidroorolin amidă |
Xcp: | L-tiazolîdin-4-carbonil |
Xcq: | 4-fluor-prolină ch3 |
Xcr: | O H3c ,CH3 \7>ch3 |
Xcsi | 0 h3c ch3 |
Xct: | o |
RO 119783 Β1
RO 119783 Β1
Compușii conform invenției pot fi evaluați din punct de vedere al activității anti-cancer, prin metode convenționale, incluzând, de exemplu, metodele prezentate în continuare.
TESTUL 1: A. Metodologie in vitro
Citotoxicitatea s-a măsurat folosind metodologia standard pentru liniile de celule aderente, cum ar fi testul microculturii cu tetrazoliu (MTT). Detaliile acestui test sunt publicate (Alley, MC ș.a., Cancer Research 48589-601,1988). S-au folosit culturile cu creștere exponențială a celulelor tumorale, cum ar fi cele ale carcinomului colonului HT-29 sau ale tumorii pulmonare LX-1, s-au folosit pentru a face culturi pe plăci cu microtitru. Celulele au fost însămânțate la 5000 - 20000 celule per godeu, într-o placă cu 96 godeuri (în 150 pl de mediu), și au fost lăsate să crească, peste noapte, la 37’C. Se adaugă compușii pentru testare la o diluție de 10 ori, variind de la 10'4M la 10’1°M. Celulele s-au incubat apoi timp de 48 h. Pentru a determina numărul de celule viabile din fiecare godeu, s-a adăugat colorant MTT (50 μΙ soluție de 3 mg/ml bromură de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazol în soluție salină). Acest amestec s-a incubat la 37°C timp de 5 h, și apoi s-au adăugat, în fiecare godeu, 50 μΙ 25% SDS, pH = 2. După incubare peste noapte, s-a citit absorbanța pentru fiecare godeu la 550 nm, folosind cititorul ELISA. Au fost calculate valorile medii+/- abaterea standard (SD) datelor din godeurile replicate, folosind formula % T/C (% celule viabile tratate/control).
Concentrația compusului de testat care dă o valoare T/C de 50% din valoarea de inhibare a creșterii s-a desemnat ca valoare IC50
OD celule tratate
OD celule de control
100 = % TIC
Compus din exemplul | IC50[M] |
1 | 6x 106 |
2 | 1 x 109 |
61 | 2x 106 |
64 | 2x10'8 |
88 | 4 x 10'8 |
89 | 6x108 |
Testul 2: B. Metodologia in vivo
Compușii conform invenției au fost testați preclinic pentru determinarea activității in vivo, care este un indiciu al utilității clinice. Aceste evaluări au fost efectuate pe un șoarece nud, în care s-au transplantat (xenogrefe) țesuturi tumorale, de preferință de origine umană, după cum se cunoaște în domeniu. Compușii testați au fost evaluați din punct de vedere al activității lor antitumorale, după administrare la șoarecii care au xenogrefe.
în special tumorile de sân uman (MX-1), care au crescut în șoareci nuzi atimici, au fost transplantate în șoareci noi, folosind fragmente tumorale ce au avut o mărime de aproximativ
RO 119783 Β1 mg. Ziua transplantării s-a denumit ca ziua 0. După 6 până la 10 zile, șoarecii au fost tratați 1 cu compușii test, prin injectare intravenoasă, în grupe de 5 -10 șoareci pentru fiecare doză. Compușii au fost administrați zilnic, timp de 3 săptămâni, la doze cuprinse între 1-100 mg/kg 3 corp.
Diametrele tumorilor și greutățile corporale au fost măsurate de două ori pe săptămână. 5 Volumul tumorilor a fost calculat folosind diametrele măsurate cu șublerul Vernier și cu formula (lungime x lățime?)/2 = mm3 volum al tumorii
Volumele medii ale tumorii au fost calculate pentru fiecare grup tratat, și valorile T/C au fost determinate pentru fiecare grup, raportat la tumorile controlului netratat.11
Compușii noi prezintă proprietăți bune de inhibare a tumorii.
LISTA SECVENȚELOR (1) INFORMAȚIA GENERALĂ15 (i) SOLICITANT (A) BASF Aktiengesellschaft17 (B) STRADA: Carl-Bosch-Strasse 38 (C) ORAȘUL: Ludwigshafen19 (D) ȚARA: Bundesrepublik Deutschland (E) ZIP: D-6705621 (F) TELEFON: 0621/6048526 (G) TELEFAX: 0621/604312323 (H) TELEX: 1762175170 (ii) TITLUL INVENȚIEI: Derivați de dolastatină, compoziție farmaceutică25 și utilizarea acestora (iii) NUMĂRUL SECVENȚELOR: 527 (iv) FORMA DE CITIRE PE CALCULATOR (A) TIPUL DE MEDIU: Dischete, 3,5 inch, 2DD29 (B) CALCULATOR IMB AT - compatibil procesor 80286 (C) SISTEM DE OPERARE: MS-DOS versiunea 5,031 (D) SOFT: Word Perfect (2) INFORMAȚIE PENTRU SECV. ID Nr. 1 (i) CARACTERISTICILE SECVENȚEI:35 (A) LUNGIME: 5 aminoacizi (B) TIP: AminoaciD37 (C) TOPOLOGIE: lineară (ii) TIPUL DE MOLECULĂ: peptidă39 (xi) DESCRIEREA SECVENȚEI SECV. ID Nr.1:
Xaa Val Xaa Pro Xaa41
INFORMAȚIE PENTRU SECV. ID Nr.2 (i) CARACTERISTICILE SECVENȚEI:45 (A) LUNGIME: 5 aminoacizi (B) TIP: AminoaciD47 (C) TOPOLOGIE: lineară (ii) TIPUL DE MOLECULĂ: peptidă49 (xi) DESCRIEREA SECVENȚEI SECV. ID Nr.2:
Xaa lle Xaa Pro Xaa51
RO 119783 Β1
INFORMAȚIE PENTRU SECV. ID Nr.3 (i) CARACTERISTICILE SECVENȚEI:
(A) LUNGIME: 5 aminoacizi (B) TIP: AminoaciD (C) TOPOLOGIE: lineară (ii) TIPUL DE MOLECULA: peptidă (xi) DESCRIEREA SECVENȚEI SECV. ID Nr.3:
Xaa Xaa Xaa Pro Xaa
INFORMAȚIE PENTRU SECV. ID Nr.4 (i) CARACTERISTICILE SECVENȚEI:
(A) LUNGIME: 5 aminoacizi (B) TIP: AminoaciD (C) TOPOLOGIE: lineară (ii) TIPUL DE MOLECULĂ: peptidă (xi) DESCRIEREA SECVENȚEI SECV. ID Nr.4:
Xaa Val Xaa Xaa Xaa
INFORMAȚIE PENTRU SECV. ID Nr.5 (i) CARACTERISTICILE SECVENȚEI:
(A) LUNGIME: 6 aminoacizi (B) TIP: AminoaciD (C) TOPOLOGIE: lineară (ii) TIPUL DE MOLECULĂ: peptidă (xi) DESCRIEREA SECVENȚEI SECV. ID Nr.5:
Xaa Val Xaa Pro Xaa Xaa
Claims (4)
- Revendicări1. Derivați de dolastatină, caracterizați prin aceea că au structura chimică corespunzătoare formulei generale I:R’ ffN-CHX-CO-A-B-D-E-(F)t-K în careR1 este metil, etil sau izopropil;R2 este hidrogen, metil sau etil;R1-N-R2 pot forma împreună un ciclu pirolidinic;A reprezintă un rest valii, izoleucil, leucii, 2-te/ț-butilglicil, 2-etilglicil, norleucil sau norvalil;B reprezintă un rest N-metil-valil, -leucii, -izoleucil, -norvalil, -norleucil, -2-teȚ-butilglicil, -3tert-butil-alanil sau -2-etilglicil;D este un rest pirolil, 3,4-dehidroprolil, 4-fluoroproli1,4,4-difIuoroprolil, azetidin-2- carbonil,3-metilprolil, 4-metilprolil, 5-metilprolil sau tiazolidin-4-carbonil;E este un rest 3,4-dehidroprolil, 4-fluoroprolil, 3-metilprolil, 4-metilprolil, azetidin-2-carbonil sau 4,4-difluoroprolil;F este un rest valii, 2-te/ț-butilglicil, izoleucil, leucii, 2-ciclohexilglicil, norleucil, norvalil, neopentilglicil, alanil, β-alanil sau aminoilizobutiroil;X este alchil (de preferință C2-C5), ciclopropil sau ciclopentil;t este 0 sau 1; șiK este alcoxi C14, benziloxi, -NH2 sau un fragment aminosubstituit, care este -NH-alchilCM, -NH-C(CH3)2CN, -NH-C(CH3)2CCH, -NH-C(CH3)2C=CH2, -NH-C(CH3)2 CH2CH2OH, -NH-C(CH3)2CH2OH, -NH-cicloalchil-C3.8, -NH-[3,3,0] -biciclooctil, norefedril, norpseudoRO 119783 Β1 efedril, -NH-chinolil, -NH-pirazil, -NH-CH2-benzimidazolil, -NH-adamantil, -NH-CH2-adamantil, 1 -NH-CH(CH3)-fenil, -NH-C(CH3)2-fenil, -N(alcoxi-C^)-alchil-C^, -N(alcoxi-C14)-CH2-fenil, -N(alcoxi-CiJfenil, -N(CH3)OBzl, -NH-(CH2)v-fenil (v=0,1,2 sau 3), -NH- (CH2)m-naftil (m=0 sau 31), -NH-(CH2)w-benzhidril (w=0, 1 sau 2), -NH-bifenil, -NH-piridil, -NH-CH2-piridil, -NH-CH2CH2-piridil, -NH-benzotiazolil, -NH-benzoizotiazolil, -NH- benzopirazolil, -NH-benzoxazolil, 5 -NH-(CH2)mfluorenil (m=0 sau 1), -NH-pirimidil, -NH-(CH2)m -indanil (m=0 sau 1), -NH-(CH2CH2O)y-CH3 (y=0, 1,2, 3, 4 sau 5), -NH-(CH2CH2O)y- CH2CH3 (y=0, 1,2, 3, 4 sau 5), 7-(CH2CH2O)y-CH3 (y=0, 1,2, 3, 4 sau5),-(CH2CH2O)y-CH2CH3 (y=0,1,2, 3,4 sau 5), -NCH3-NH-C6H5, -NCH3-NH-CH2-C6H5; 9 sau K este:RO 119783 Β1RO 119783 Β1CH, și săruri ale acestora cu acizi acceptabili fiziologic. 39
- 2. Derivați de dolastatină conform revendicării 1, caracterizați prin aceea că se folosesc în medicină, în special pentru tratarea bolilor oncologice. 41
- 3. Compoziție farmaceutică, caracterizată prin aceea că aceasta cuprinde o cantitate eficientă terapeutic, dintr-un compus definit în revendicarea 1 și un purtător acceptabil farma- 43 ceutic.
- 4. Utilizarea unui derivat de dolastatină așa cum este definit în revendicarea 1, pentru 45 fabricarea unei compoziții farmaceutice pentru tratarea unei tumori la un mamifer.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US08/472,453 US5831002A (en) | 1992-05-20 | 1995-06-07 | Antitumor peptides |
PCT/EP1996/002393 WO1996040752A1 (en) | 1995-06-07 | 1996-06-03 | Novel dolastatin derivatives, their preparation and use |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RO119783B1 true RO119783B1 (ro) | 2005-03-30 |
Family
ID=23875567
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RO97-02264A RO118953B1 (ro) | 1995-06-07 | 1996-06-03 | Derivaţi peptidici şi metodă de tratament a tumorilor la mamifere |
RO97-02254A RO119783B1 (ro) | 1995-06-07 | 1996-06-03 | Derivaţi de dolastatină, compoziţie farmaceutică şi utilizarea acestora |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RO97-02264A RO118953B1 (ro) | 1995-06-07 | 1996-06-03 | Derivaţi peptidici şi metodă de tratament a tumorilor la mamifere |
Country Status (33)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5831002A (ro) |
EP (2) | EP0871656B1 (ro) |
JP (2) | JP4221062B2 (ro) |
KR (2) | KR100437986B1 (ro) |
CN (2) | CN1182154C (ro) |
AR (2) | AR003136A1 (ro) |
AT (2) | ATE224910T1 (ro) |
AU (2) | AU725170B2 (ro) |
BG (2) | BG102125A (ro) |
BR (2) | BR9609424A (ro) |
CA (2) | CA2219819C (ro) |
CO (2) | CO4700527A1 (ro) |
CZ (2) | CZ293683B6 (ro) |
DE (2) | DE69623472T2 (ro) |
DK (2) | DK0871656T3 (ro) |
ES (2) | ES2188759T3 (ro) |
HR (2) | HRP960257A2 (ro) |
HU (2) | HU228071B1 (ro) |
IL (2) | IL122215A (ro) |
MX (2) | MX9709147A (ro) |
MY (2) | MY119042A (ro) |
NO (2) | NO317670B1 (ro) |
NZ (2) | NZ310444A (ro) |
PL (2) | PL185762B1 (ro) |
PT (2) | PT871656E (ro) |
RO (2) | RO118953B1 (ro) |
SI (2) | SI0832104T1 (ro) |
SK (1) | SK282466B6 (ro) |
TR (2) | TR199701545T1 (ro) |
TW (2) | TW508357B (ro) |
UA (2) | UA46776C2 (ro) |
WO (2) | WO1996040751A1 (ro) |
ZA (2) | ZA964710B (ro) |
Families Citing this family (30)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5807984A (en) * | 1995-11-09 | 1998-09-15 | Basf Aktienegesellschaft | Oligopeptides, the preparation and use thereof |
TW474946B (en) * | 1995-12-15 | 2002-02-01 | Basf Ag | Novel compounds, the preparation and use thereof |
US20010009901A1 (en) * | 1996-12-11 | 2001-07-26 | Basf Aktiengesellschaft Germany | Antineoplastic peptides |
US5965537A (en) * | 1997-03-10 | 1999-10-12 | Basf Aktiengesellschaft | Dolastatin 15 derivatives with carbonyl and heterocyclic functionalities at the C-terminus |
US6103698A (en) * | 1997-03-13 | 2000-08-15 | Basf Aktiengesellschaft | Dolastatin-15 derivatives in combination with taxanes |
US6143721A (en) | 1997-07-18 | 2000-11-07 | Basf Aktiengesellschaft | Dolastatin 15 derivatives |
US6015790A (en) * | 1997-10-06 | 2000-01-18 | Basf Aktiengesellschaft | Methods and compositions for treating rheumatoid arthritis |
US5985837A (en) * | 1998-07-08 | 1999-11-16 | Basf Aktiengesellschaft | Dolastatin 15 derivatives |
CA2360740A1 (en) | 1999-03-02 | 2000-09-08 | Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. | Compounds useful as reversible inhibitors of cathepsin s |
US6420364B1 (en) | 1999-09-13 | 2002-07-16 | Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. | Compound useful as reversible inhibitors of cysteine proteases |
EP2266607A3 (en) | 1999-10-01 | 2011-04-20 | Immunogen, Inc. | Immunoconjugates for treating cancer |
WO2002088298A1 (en) | 2001-04-27 | 2002-11-07 | The Procter & Gamble Company | Compounds, compositions, and methods for controlling biofilms |
WO2003051835A2 (en) * | 2001-12-18 | 2003-06-26 | Proteologics, Inc. | Methods and compositions for the inhibition of viral release |
EP1531846A4 (en) * | 2002-02-27 | 2006-04-19 | Us Gov Health & Human Serv | CONJUGATES OF LIGAND, LINK AND CYTOTOXIC AGENS, AND RELATED COMPOSITIONS AND USE PROCESSES |
US8568637B2 (en) | 2004-08-02 | 2013-10-29 | Ramot At Tel-Aviv University Ltd. | Method of forming a fiber made of peptide nanostructures |
JP4954983B2 (ja) | 2005-05-18 | 2012-06-20 | ファーマサイエンス・インコーポレイテッド | Birドメイン結合化合物 |
US20080292616A1 (en) * | 2005-08-19 | 2008-11-27 | Government Of The United Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And.... | Topical Formulations of Histone Deacetylase Inhibitors and Methods Using the Same |
US10004828B2 (en) * | 2005-10-11 | 2018-06-26 | Romat at Tel-Aviv University Ltd. | Self-assembled Fmoc-ff hydrogels |
CN101535300B (zh) | 2006-05-16 | 2014-05-28 | 埃格拉医疗公司 | Iap bir域结合化合物 |
EP2049524A2 (en) * | 2006-07-24 | 2009-04-22 | Tetralogic Pharmaceuticals Corporation | Iap inhibitors |
NZ580271A (en) * | 2007-04-12 | 2011-03-31 | Scinopharm Taiwan Ltd | Process for making galantamine |
UY32099A (es) | 2008-09-11 | 2010-04-30 | Enanta Pharm Inc | Inhibidores macrocíclicos de serina proteasas de hepatitis c |
US8283372B2 (en) | 2009-07-02 | 2012-10-09 | Tetralogic Pharmaceuticals Corp. | 2-(1H-indol-3-ylmethyl)-pyrrolidine dimer as a SMAC mimetic |
WO2011098904A1 (en) | 2010-02-12 | 2011-08-18 | Aegera Therapeutics, Inc. | Iap bir domain binding compounds |
MX2013007677A (es) | 2010-12-30 | 2013-07-30 | Abbvie Inc | Inhibidores macrociclicos de serina proteasa de hepatitis. |
AU2011352145A1 (en) | 2010-12-30 | 2013-07-18 | Abbvie Inc. | Phenanthridine macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors |
US10201584B1 (en) | 2011-05-17 | 2019-02-12 | Abbvie Inc. | Compositions and methods for treating HCV |
JP6581774B2 (ja) * | 2011-05-27 | 2019-09-25 | アンブルックス, インコーポレイテッドAmbrx, Inc. | 非天然アミノ酸結合ドラスタチン誘導体を含有する化合物またはその化合物の溶媒和物、およびドラスタチンアナログを誘導体化するための方法 |
EP3089757A1 (en) | 2014-01-03 | 2016-11-09 | AbbVie Inc. | Solid antiviral dosage forms |
WO2023033129A1 (ja) | 2021-09-03 | 2023-03-09 | 東レ株式会社 | 癌の治療及び/又は予防用医薬組成物 |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4816444A (en) * | 1987-07-10 | 1989-03-28 | Arizona Board Of Regents, Arizona State University | Cell growth inhibitory substance |
US4879278A (en) * | 1989-05-16 | 1989-11-07 | Arizona Board Of Regents | Isolation and structural elucidation of the cytostatic linear depsipeptide dolastatin 15 |
DE69230824T2 (de) * | 1991-08-09 | 2000-07-27 | Teikoku Hormone Mfg Co Ltd | Neue tetrapeptidderivate |
UA45304C2 (uk) * | 1992-05-20 | 2002-04-15 | Басф Аг | Похідні пептиду або їх солі, фармацевтична композиція |
US5504191A (en) * | 1994-08-01 | 1996-04-02 | Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University | Human cancer inhibitory pentapeptide methyl esters |
US5530097A (en) * | 1994-08-01 | 1996-06-25 | Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University | Human cancer inhibitory peptide amides |
-
1995
- 1995-06-07 US US08/472,453 patent/US5831002A/en not_active Expired - Lifetime
-
1996
- 1996-06-03 AU AU61242/96A patent/AU725170B2/en not_active Ceased
- 1996-06-03 TR TR97/01545T patent/TR199701545T1/xx unknown
- 1996-06-03 UA UA98010070A patent/UA46776C2/uk unknown
- 1996-06-03 SI SI9630539T patent/SI0832104T1/xx unknown
- 1996-06-03 BR BR9609424-9A patent/BR9609424A/pt not_active Application Discontinuation
- 1996-06-03 WO PCT/EP1996/002392 patent/WO1996040751A1/en active IP Right Grant
- 1996-06-03 PL PL96323723A patent/PL185762B1/pl unknown
- 1996-06-03 RO RO97-02264A patent/RO118953B1/ro unknown
- 1996-06-03 AT AT96918661T patent/ATE224910T1/de active
- 1996-06-03 BR BR9609423A patent/BR9609423A/pt not_active Application Discontinuation
- 1996-06-03 DE DE69623472T patent/DE69623472T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-03 CA CA002219819A patent/CA2219819C/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 JP JP50013297A patent/JP4221062B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 JP JP50013197A patent/JP3957751B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 AT AT96918660T patent/ATE223431T1/de active
- 1996-06-03 CA CA002219818A patent/CA2219818C/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 PT PT96918661T patent/PT871656E/pt unknown
- 1996-06-03 HU HU9801910A patent/HU228071B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 HU HU9801817A patent/HU228073B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 NZ NZ310444A patent/NZ310444A/xx not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 DK DK96918661T patent/DK0871656T3/da active
- 1996-06-03 MY MYPI96002155A patent/MY119042A/en unknown
- 1996-06-03 NZ NZ310443A patent/NZ310443A/en not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 UA UA98010069A patent/UA46775C2/uk unknown
- 1996-06-03 TR TR97/01544T patent/TR199701544T1/xx unknown
- 1996-06-03 SK SK1653-97A patent/SK282466B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 CZ CZ19973765A patent/CZ293683B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 RO RO97-02254A patent/RO119783B1/ro unknown
- 1996-06-03 CN CNB961944676A patent/CN1182154C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 ES ES96918661T patent/ES2188759T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-03 SI SI9630550T patent/SI0871656T1/xx unknown
- 1996-06-03 ES ES96918660T patent/ES2186783T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-03 KR KR1019970709064A patent/KR100437986B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 PT PT96918660T patent/PT832104E/pt unknown
- 1996-06-03 DE DE69623992T patent/DE69623992T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-03 WO PCT/EP1996/002393 patent/WO1996040752A1/en active IP Right Grant
- 1996-06-03 MX MX9709147A patent/MX9709147A/es unknown
- 1996-06-03 IL IL12221596A patent/IL122215A/xx not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 EP EP96918661A patent/EP0871656B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-03 DK DK96918660T patent/DK0832104T3/da active
- 1996-06-03 MX MX9709146A patent/MX9709146A/es unknown
- 1996-06-03 CZ CZ19973763A patent/CZ293682B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 EP EP96918660A patent/EP0832104B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-03 PL PL96323726A patent/PL185763B1/pl unknown
- 1996-06-03 KR KR1019970709063A patent/KR100437985B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 AU AU61241/96A patent/AU725164B2/en not_active Ceased
- 1996-06-03 CN CNB961944684A patent/CN1182153C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 IL IL12221696A patent/IL122216A/en not_active IP Right Cessation
- 1996-06-04 MY MYPI96002170A patent/MY124487A/en unknown
- 1996-06-06 ZA ZA9604710A patent/ZA964710B/xx unknown
- 1996-06-06 HR HR08/472,453A patent/HRP960257A2/hr not_active Application Discontinuation
- 1996-06-06 HR HR08/472,453A patent/HRP960277A2/hr not_active Application Discontinuation
- 1996-06-06 ZA ZA9604711A patent/ZA964711B/xx unknown
- 1996-06-06 AR ARP960102980A patent/AR003136A1/es active IP Right Grant
- 1996-06-06 AR ARP960102981A patent/AR003427A1/es active IP Right Grant
- 1996-06-07 CO CO96029751A patent/CO4700527A1/es unknown
- 1996-06-07 CO CO96029749A patent/CO4700526A1/es unknown
- 1996-06-07 TW TW085106866A patent/TW508357B/zh not_active IP Right Cessation
- 1996-10-02 TW TW085106867A patent/TW424096B/zh not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-12-05 NO NO19975711A patent/NO317670B1/no not_active IP Right Cessation
- 1997-12-05 NO NO19975710A patent/NO318384B1/no not_active IP Right Cessation
- 1997-12-18 BG BG102125A patent/BG102125A/xx unknown
- 1997-12-29 BG BG102152A patent/BG102152A/xx unknown
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RO119783B1 (ro) | Derivaţi de dolastatină, compoziţie farmaceutică şi utilizarea acestora | |
AU679479B2 (en) | Dolostatin analog | |
EP0642530B1 (en) | Derivatives of dolastatin | |
IL166853A (en) | Antineoplastic peptides, their preparation and various uses thereof | |
AU775090B2 (en) | Antineoplastic peptides | |
SK282467B6 (sk) | Peptidy, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie |