CZ293682B6 - Peptid, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje - Google Patents

Peptid, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje Download PDF

Info

Publication number
CZ293682B6
CZ293682B6 CZ19973763A CZ376397A CZ293682B6 CZ 293682 B6 CZ293682 B6 CZ 293682B6 CZ 19973763 A CZ19973763 A CZ 19973763A CZ 376397 A CZ376397 A CZ 376397A CZ 293682 B6 CZ293682 B6 CZ 293682B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
methyl
nhch
methylprolyl
och
nhc
Prior art date
Application number
CZ19973763A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ376397A3 (cs
Inventor
Andreas Dr. Haupt
Franz Dr. Emling
Cynthia A. Dr. Romerdahl
Original Assignee
Abbott Gmbh & Co. Kg
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Abbott Gmbh & Co. Kg filed Critical Abbott Gmbh & Co. Kg
Publication of CZ376397A3 publication Critical patent/CZ376397A3/cs
Publication of CZ293682B6 publication Critical patent/CZ293682B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/101—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)

Abstract

Peptid obecného vzorce I, kde znamená R.sup.1.n. methyl, ethyl nebo izopropyl, R.sup.2.n. vodík, methyl nebo ethyl, nebo R.sup.1.n. a R.sup.2.n. spolu s atomem N dohromady tvoří pyrroilidinový kruh, A zbytky valyl, izoleucyl, leucyl, 2-terc-butylglycyl, 2-ethylglycyl, norleucyl nebo norvalyl, B zbytky N-methylvalyl, N-methylleucyl, N-methylizoleucyl, N-methylnorvalyl, N-methylnorleucyl, N-methyl-2-terc-butylglycyl, N-methyl-3-terc-butylalanyl nebo N-methyl-2-ethylglycyl, D zbytky prolyl, 3,4-dehydroprolyl, 4-fluoroprolyl, 4,4-difluoroprolyl, azetidin-2-karbonyl, homoprolyl, 3-methylprolyl, 4-methylprolyl, 5-methylprolyl nebo thiazolidin-4-karbonyl, E 3,4-dehydroprolyl, 4-fluoroprolyl, 3-methylprolyl, 4-methylprolyl, azetidin-2-karbonyl nebo 4,4-difluoropropyl, F zbytky valyl, 2-terc-butylglycyl, izoleucyl, leucyl, 2-cyklohexylglycyl, norleucyl, norvalyl, neopentylglycyl, alanyl, .beta.-alanyl nebo aminoizobutyroyl, X alkyl s 2 až 5 atomy uhlíku, cyklopropyl nebo cyklopentyl, t 0 nebo 1, a K alkoxy s 1 až 4 atomy uhlíku, benzyloxy nebo substituovanou nebo nesubstituovanou aminoskupinu nebo jeho soli s fyziologicky vhodnými kyselinami. Nové peptidy mají antineoplastický účinek.ŕ

Description

Oblast techniky
Vynález se týká peptidů a farmaceutického prostředku, který ho obsahuje a je vhodný pro léčení onkologických onemocnění.
Dosavadní stav techniky
Je známé, že peptidy izolované z mořských zdrojů jako Dolastatin-10 (americký patentový spis US 4 816 444) a Dolastatin-15 (evropský patentový spis EP-A-398558) mají mocnou aktivitu jako inhibitory růstu buněk (Biochem Pharmacology 40, č. 8, str. 1859 až 1864, 1990; J. Nati. Cancer Inst. 85, str. 483 až 488, 1993 a tam uváděné odkazy na literaturu). Na základě zajímavých výsledků při pokusech s nádorovými systémy in vivo, se provádějí v současné době další preklinická hodnocení těchto přírodních produktů k iniciaci klinických studií na nemocných rakovinou.
Přírodní produkty mají však ten nedostatek, že jsou špatně rozpustné ve vodných rozpouštědlech a investiční náklady pro jejich syntézu jsou vysoké.
Vynález se týká nových peptidů a jejich derivátů, které představují zlepšený terapeutický potenciál pro ošetřování neoplastových onemocnění ve srovnání s Dolastatinem-15. Kromě toho lze nové peptidy podle vynálezu snadno syntetizovat dále podrobně popsaným způsobem.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu je peptid obecného vzorce I
R’R2N-CHX-CO-A-B-D-E-(F)t-K (I), kde znamená
Rl methyl, ethyl nebo izopropyl,
R2 vodík, methyl nebo ethyl,
R-N-R2 spolu dohromady pyrroilidinový kruh,
A zbytky valyl, izoleucyl, leucyll, 2-terc-butylglycyl, 2-ethylglycyl, norleucyl nebo norvalyl,
B zbytky N-methylvalyl, N-methylleucyl, N-methylizoleucyl, N-methylnorvalyl, Nmethylnorleucyl, N-methyl-2-terc-butylglycyl, N-methyl-3-terc-butylalanyl nebo N-methyl-2-ethylglycykl,
D zbytky prolyl, 3,4-dehydroproplyl, 4-fluoroprolyl, 4,4-difluoroprolyl, azetidin-2karbonyl, homoproplyi, 3-methylprolyl, 4-methylprolyl, 5-methylprolyl nebo thioazetidin-4-karbonyl,
E 3,4-dehydroprolyl, 4-fluoroprolyl, 3-methylprolyl, 4-methylprolyl, azetidin-2-karbonyl nebo 4,4-difluoropropyl,
-1 CZ 293682 B6
F zbytky valyl, 2-fórc-butylglycykl, izoleucyl, leucyl, 2-cyklohexylglycyl, norleucyl, norvalyl, neopentylglycyl, alanyl, beta-alanyl nebo aminoizobutyroyl,
X alkyl s výhodou s 2 až 5 atomy uhlíku, cyklopropyl nebo cyklopentyl, t 0 nebo 1 a
K alkoxy s výhodou s 1 až 4 atomy uhlíku, benzyloxy nebo substituovanou nebo nesubstituovanou aminoskupinu, nebo jeho soli s fyziologicky vhodnými kyselinami. Vynález se také týká způsobu přípravy těchto peptidů obecného vzorce I, farmaceutických prostředků, které tento peptid obecného vzorce I obsahují spolu s farmaceuticky vhodnými nosiči a kteiých se používá pro ošetřování rakoviny.
Symbol K znamená obzvláště C^alkoxy, benzyloxy nebo amino obecného vzorce R5-N-R6, kde znamená
R5 vodík nebo hydroxy nebo C, ^alkoxy nebo benzyloxy, popřípadě substituované až dvěma substituenty, na sobě nezávisle volené ze souboru zahrnujícího CF3, nitro, C|^alkylsulfonyl, Ci^alkoxy, halogen, CMalkyl, kyano, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr, a COONH? nebo R5 znamená fenyloxy popřípadě substituované až dvěma substituenty na sobě nezávisle volené ze souboru zahrnujícího CF3, nitro CMalkylsulfonyl, Cwalkoxy, halogen, CMalkyl, kyano, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr, a COONH2
R6 vodík nebo C]_i2alkyl popřípadě substituovaný alespoň jedním atomem fluoru, nebo znamená -C(CH3)2CN, -C(CH3)2CCH, -C(CH3)2C=CH2, -C(CH3)2CH2OH, -C(CH3)2CH2OH nebo -(CH2)vC3-7Cykloalkylem, kde znamená v 0, 1 nebo 2 a který je popřípadě substituován methylem, nebo znamená norefedryl, norpseudoefedryl, chinolyl, pyrazyl, adamantyl, -CHr-benzimidazolyl, -CH2-adamantyl, alfa-methylbenzyl, alfa-dimethylbenzyl, (CH2)vfenyl, kde znamená v 0, 1 nebo 2 a který je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobe nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitro, Cí^alkylsulfonyl, Ci^alkoxy, halogen, CMalkyl, který může vytvářet cyklický systém, kyano, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr a COONH2, nebo znamená -(CH2)mnaftyl, kde znamená m 0, 1 nebo 2 a který je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitro, Ci^alkylsulfonyl, CMalkyloxy, halogen, CMalkyl, který může vytvářet cyklický systém, kyano, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr a COONH2, nebo znamená -(CH2)wbenzhydryl, kde znamená w 0,1 nebo 2 a který je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitri, Ci^alkylsulfonyl, C^alkoxy, halogen, Ct_ 4alkyl, který může vytvářet cyklický systém, kyano, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr a COONH2, nebo znamená pyridyl, který je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávise volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitro, C1^talkylsulfonyl, Ci^alkoxy, halogen, CMalkyl, který může vytvářet cyklický systém, kyano, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr a COONH2, nebo znamená pikolyl, který je popřípadě substituván jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitro, C[^alkylsulfonyl, C^alkoxy, halogen, Ci-4alkyl, který může vytvářet cyklický systém, kyano, hydroxy, N(CH3)2, COOMet, COOEt, COOiPr a COONH2, nebo znamená -CH2-CH2-pyridyl, který je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitro, CMalkylsulfony, Ci^alkoxy, halogen, C walky 1, který může vytvářet cyklický systém, kyano, hydroxy, N(CH3)2, COOme, COOEt, COOiPr a COONH2, nebo znamená benzothiazolyl, který je popřípadě
-2CZ 293682 B6 substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitro, C|_4alkylsulfony, C|^alkoxy, halogen, Ci^alkyl, který může vytvářet cyklický systém, kyano, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr a COONH2, nebo znamená benzoizothiazolyl, který je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitro, C^alkylsulfonyl, Ci_4alkoxy, halogen, Ci^alkyl, který může vytvářet cyklický systém, kyano, hydroxy, N(CH3)2, COOMet, COOEt, COOiPr a COONH?, nebo znamená benzopyrazolyl, který je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitro, CMalkylsulfonyl, Ci^alkoxy, halogen, C^alkyl, který může vytvářet cyklický systém, kyano, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr a COONH2, nebo znamená benzooxyzolyl, který je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitro, Ci^alkylsulfonyol, Ci^alkoxy, halogen, CMálky 1, který může vytvářet cyklický systém, kyano, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr a COONH2, nebo znamená -(CH2)m-fluorenyl, kde znamená m 0 nebo 1, který je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitro, Ci_4alkylsulfonyl, CMalkoxy, halogen, C Málky I, který může vytvářet cyklický systém, kyano, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr a COONH2, nebo znamená pyrimidyl, který je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitro C^alkylsulfonyl, CMalkoxy, halogen, C^alkyl, který může vytvářet cyklický systém, kyano, hydroxy, N(CH3)2, COOme, COOEt, COOiPr a COONH2, nebo znamená -(CH2)m-indanyl, kde znamená m 0 nebo 1, který je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitro, Ci-4-alkylsulfonyl, CMalkoxy, halogen, CMálky 1, který může vytvářet cyklický systém, kyano, hydroxy, N(CH3)2 COOMe, COOEt, COOiPr a COONH2, nebo znamená -(CH2CH2O)yCH3, kde znamená y 0, 1, 2, 3, 4 nebo 5 nebo znamená -<CH2CH2O)yCH3, kde znamená y 0, 1, 2, 3, 4, nebo 5 nebo znamená -(CH2CH2O)yCH2CH3, kde znamená y 0, 1, 2, 3, 4, nebo 5 nebo znamená -NH-C6H5, který je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitro, Ci_4alkylsulfonyl, CMalkoxy, halogen, C Málky 1, který může vytvářet cyklický systém, kyano, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr a COONH2, nebo znamená -NCH3-C6H5, kteiý je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitro, CMalkylsulfonyl, Ci^alkoxy, halogen, CMalkyl, kteiý může vytvářet cyklický systém, kyano, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr a COONH2, nebo znamená -NH-CH2-C6H5, který je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitro, CMalkylsulfonyl, CMalkoxy, halogen, Ci_4alkyl, který může vytvářet cyklický systém, kyano, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr a COONH2, nebo znamená -NCH3-ÚH2-C6H5, který je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitro, CMalkylsulfonyl, CMalkoxy, halogen, CM»lkyl, který může vytvářet cyklický systém, kyano, hydroxy, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr a COONH2, nebo znamená pětičlenný heteroaiyl, který je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitro, CMalkylsulfonyl, CMalkoxy, thíomethyl, thioethyl, pikolyl, acetyl, C3_écykloalkyl, thiofenyl, CH2-COOEt, CMalkylen vytvářející bicyklický systém s heterocyklem, fenyl, který je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího nitro, CF3, kyano, halogen a CMalkyl, a dále zahrnujícího benzyl který je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího nitro, CF3, halogen, Ci^alkyl, CMalkylsulfonyl, kyano, hydroxy, CMdialkylamino, nebo znamená pětičlenný -CHR7-heteroaryl, který je popřípadě substituován jedním nebo dvěma substituenty na sobě nezávisle volenými ze souboru zahrnujícího CF3, nitro, kyano, halogen, COOMe, COOEt, COOiPr a
-3 CZ 293682 B6
COONHj, Ci^alkyl, C,^alkoxy, fenyl, benzyl, naftyl a Ci_4alkylsulfonyl, přičemž R znamená vodík, C|_5alkyl s přímým nebo s rozvětveným řetězcem nebo benzyl.
Kde zkratky mají následující význam: 5 Me - methyl
Et - ethyl
Pr - propyl
-4CZ 293682 B6
Případně se jako pětičlenný heteroaryl uvádějí následující zbytky:
CHj
S-N
N -N
^-SCH3
S-N
N -N
7^
N -N
N -N
-6CZ 293682 B6
Příkladně se jako seskupení R5-N-R6 uvádějí následující skupiny
~nCZ/s /—\ —N^O —N S=O \___/
—N S* \__f '0
Výhodně jsou peptidy obecného vzorce I, kde znamená
R1 methyl nebo ethyl,
R2 vodík, methyl nebo ethyl,
A zbytky valyl, izoleucyl nebo 2-terc-butylglycyl,
B zbytky N-methylvalyl, N-methylizoleucyl nebo N-methyl-2-terc-butylglycyl,
D zbytky prolyl, 3,4-dehydroprolyl, 4-fluoroprolyl, 3-methylprolyl nebo azetidin-2karbonyl,
E zbytky 3,4-dehydroprolyl, 4-fluoroprolyl, 3-methylprolyl nebo azetidin-2-karbony,
F zbytky D-valyl, 2-rerc-butylglycyl, D-izoleucyl, D-leucyl nebo aminoizobutyroyl,
X -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CH(CH3)CH2CH3;
t 0 nebo 1 a
K s výhodou znamená
-OC(CH3)3, -NH2, -NH-Ci_12-alkyl, -NH-C3_8-cykloalkyl,
-NH-[3,3,0]-bicyklooktyl, norefedryl, norpseudoefedryl,
-NH-chinolyl, -NH-pyrazyl, -NH-CH2-benzimidazolyl, -NH-adamantyl, -NH-CH2-adamantyl, -NH-CH(CH3)-fenyl, -NH-C(CH3)2-fenyl, -N(Ci^-alkoxy)Ci^-alkyl,
-N(C]_4-alkoxy)-CH2-fenyI,-N(C]-4-alkoxy)fenyl,
-N(CH3)OBzl, NH(CH2)v-fenyl (v=0,l,2,3), -NH-(CH2)m-, naftyl, (m=0, i 1), -NH-ÁCH?)w-benzhydryl (w=0,l,2),
-NH-bifenyl, -NH-pyridyl, -NH-CH2-pyridyl, -NH-CH2-CH2-pyridyl,
-NHbenzothiazolyl, -NH-enzoizothiazolyl,
-NH-benzopyrazolyl, -NH-benzoxyzolyl, -NH-(CH2)m-fluorenyl, (m = 0,1), -NH-pyrimidyl, -NH-(CH2)m-indanyl (m=0,1),
-NH-(CH2CH2O)y-CH3 (y= 0, 1, 2, 3, 4, 5), -NH-(CH2CH2O)y-CH2CH3 (Y = 0,1,2,3,4, 5), -NH-pětičlenný heteroaryl, shora charakterizovaný, -NH-CHR7-pětičlenný heteroaryl, shora charakterizovaný, -NH-CHR7-pětičlenný heteroaryl, shora charakterizovaný, přičemž R7 znamená vodík, Ci_5alkyl s přímým nebo s rozvětveným řetězcem nebo K znamená zbytek /s S~\ 8vJ ~\_y
--N S=O
V_7
Především znamená K zbytek
-NHCH3, -NHCH2CH3, -NH(CH2)2CH3, -NH(CH2)3CH3, -NH(CH2)4CH3. -NH(CH2)5CH3, -NH(CH2)6CH3, -ŇH(CH2)7CH3, -NHCH(CH3)2, -NHCH(CH3)CH2CH3j -ŇHCH(CH3)CH2CH2CH3, -NHCH(CH2CH3)2, -NHCH(CH2CH2CH3)2, -NHC(CH3)3, -NHCH(CH2CH3)CH2CH2CH3, -NHCH(CH3)CH(CH3)2s -NHCH(CH2CH3)CH(CH3)2, -NHCH(ČH3)C(CH3)3, -NH-cyklopropyl, -NH-cyklobutyl, -NH-cyklopentyl, -NH-cyklohexyl, -NH-cykloheptyl, -NH-cyklooktyl, -NH-bicyklo[3,3,0]oktyl, -N(CH3)OCH3, -N(CH3)OCH2CH3, -N(CH3)OCH2CH2CH3, -N(CH3)OCH(CH3)2j -N(CH2CH3)OCH3j -N(CH2CH3)OCH2CH3, -N(CH(CH3)2)OCH3j -N(CH3)OCH2C6H5, -N(OCH3)CH2-C6H5, -N(CH3)OC6H5, -NH-CH2-C6H5, -NH(CH2)2C6H5, -NH(CH2)3C6Hs, NHCH(CH3)C6H5, -NHC(CH3)2C6H5, -NHC(CH3)2CH2CH3, -NHC(CH3)(CH2CH3)2, -NHCH(CH3)CH(OH)C6H5, -NHCCH2-cyclohexyl, -NH-CH2CF3, -NHCH(CH2F)2, -NHC(CH3)2CH,CH2OH, -NH(CH7CH2O),CH2CH3, -NHC(CH3)7CH(CH3>, -NHC(CHj)2CN, -NHC(CH3)2CCH, NHC(CH3)2C=CH2, norefedryl, norpseudoefedryl, -NH-chinolyl, -NH-pyrazyl,
-NH-adamant-l-yl, -NH-adamant-2-yl, -NH-CH2-adamantyl, -NH-CH2-naftyl, -NH-benzhydryl, -NH-bifenyl, -NH-pyridyl, -NH-pikolyl, -NH-CH2-CH2-pyridyl, -NH-benzothiazuolyl, -NH-benzoizothiazolyl, -NH-benzopyrazolyl, -NH-benzoxazolyl, -NH-fluorenyl, -NH-pyrimidyl,
-NH-thiazol-2-yl, -NH-izoxazolyl-3-yl, -NH-CH2-furan-2-yl, -NH-(3-methyl)izoxazol-5-yl, -NH-(3-methyl)izothiazol-5-yl, -NH-(2-trifluormethyl)-thiadiazol-5-yl>-OC(CH3)3, -NH-CH2-(4~methyl)thiazol-2-yl,-NH-CH2-thien-2-yl, -NH-CH2-(5-methyl)thien-2-yl, -NH-(2-methyl)-thiadiazol-5-yl5 -NH-(2-cyklopropyl)thiadiazol-5-yl, nebo znamená K zbytek vzorce
-8CZ 293682 B6
Uvedené příklady vynález toliko objasňují, nijak jej však neomezují.
Peptidy obecného vzorce I se skládají z L-aminokyselin, F může však znamenat rovněž Daminokyselinu.
Peptidy obecného vzorce I mohou být ve formě solí s fyziologicky vhodnými kyselinami, jako jsou například kyselina chlorovodíková, citrónová, vinná, mléčná, fosforečná, methansulfonová, octová, mravenčí, maleinová, fumarová, jablečná, jantarová, malonová, sírová, L-glutamová, Lasparagová, pyrohroznová, muková, benzoová, glukuronová, šťavelová, askorbová a acetylglycin.
Peptidy obecného vzorce I se mohou připravovat o sobě známými způsoby z chemie peptidů. Tak se například mohou postupně skládat z aminokyselin nebo se mohou získat vázáním vhodných malých peptidových fragmentů. Při postupném skládání se vychází z C zakončení peptidového řetězce, který se postupně prodlužuje vždy o jednu aminokyselinu. Při kopulaci fragmentů je možné spolu vázat fragmenty různé délky, přičemž se takové fragmenty získají postupným váháním aminokyselin nebo rovněž kopulací fragmentů. Při obou těchto způsobech je nutné vázat vzájemně jednotky vytvářením amidové vazby. K tomuto účelu jsou vhodné jak chemické, tak enzymatické způsoby.
Chemické způsoby pro vytváření amidové vazby podrobně popsal Mueller (Methoden der organischen Chemie, svazek XV/2, str. 1 až 364, Thieme Verlag, Stuttgart, 1974; Stewart, Young, Solid, Phase Peptide Synthesis, str. 31 až 34, 71 až 82, Pierce Chemical Company Rockford, 1984; Bodanszky, Klausner, Ondetti, Peptide Synthesis, str. 85 až 128, John Wiley and Sons, New York, 1976) a které jsou rovněž popsány v jiných základních publikacích o chemii peptidů. Obzvláště výhodným je azidový způsob, symetrický a směsný anhydridový způsoby, in šitu generované a předformované aktivní estery, použití urethanu chráněného N-karboxyanhydridy aminokyselin a vytváření amidových vazeb za použití systému kopulační složka/aktivátory, přičemž se zvláště uvádějí dicyklohexylkarbodiimid (DCC), diizopropylkarbodiimid (DIC), l-ethoxykarbonyl-2-ethoxy-l,2-dihydrochinolin (EEDQ), l-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidhydrochlorid (EDCI), anhydrid n-propanfosfonové kyselina (PPA), N,N-bis(2-oxo-3-oxazolidinyl)amidofosforylchlorid (BOP-C1), bromo-tris-pyrrolidinofosfoniumhexafluorfosfát (PyBrop), difenylfosforylazid (DPPA) reagencie Castro (BOP, PyBop), Obenzotriazolyl-N,N,N',N'-tetramethyluroniové soli (HBTU), O-azabenzotriazolyl-N,N,N',N'tetramethyluroniové soli (HATU), diethylfosfrylkyanid (DEPCN), 2,5-difenyl-2,3-dihydro-3oxo-4-hydroxythiofendioxid (Steglichovo reakční činidlo, HOTDO) a l,l'-karbonyldiimidazol (CDI). Kopulační činidla se mohou používat samotná nebo v kombinaci s aditivy, jako jsou například N,N-dimethyl-4-aminopyridin (DMAP) N-hydroxybenzotriazol (HOBt), Nhydroxysukcinimid (HOSu) nebo 2-hydroxypyridin.
Zatímco je zpravidla možné upustit od chránících skupin při enzymatické syntéze peptidů, je přechodná ochrana reaktivních skupin, která se nepodílejí na amidové na amidové vazbě, nutná pro reakční složky při chemické syntéze. Při chemické syntéze peptidů se dává přednost třem
-9CZ 293682 B6 běžným způsobům použití chráničích skupin: způsobu používajícího benzyloxykarbonyl (Z), tbutoxykarbonyl (Boc) a 9-gfluorenylmethoxykarbonyI (Fmoc). V každém případě se používá chránící skupiny n alfa-aminoskupině jednotky prodlužující řetězec. Podrobný přehled skupin chránících aminoskupinu uvádí Mueller (Methoden der organischen Chemie, svazek XV/1, str. 20 až 906, Thieme Verlag, Stuttgart, 1974).
Jednotky, používané pro vytváření peptidového řetězce, se mohou nechávat reagovat v roztoku, v suspenzi nebo podobným způsobem, jaký popsal Murrifield (J. Amer. Chem. Soc. 85, str. 2149, 1963). Obzvláště výhodnými jsou způsoby, při kterých se peptidy vytvářejí postupně nebo kopulací fragmentů za použití chránících skupin Z, Boc nebo Fmoc. Jedna z reakčních složek při způsobu, kteiý popsal Murrifield se váže na nerozpustný polymerní nosič (označovaný zde také jako pryskyřice). Peptid se zpravidla vytváří postupně na polymemím nosiči za použití chránících skupin Boc nebo Fmoc, rostoucí peptidy řetězec je kovalentně vázán C zakončením na nerozpustné pryskyřičné částice (obr. 1 a 2). Tento způsob umožňuje odstranit reagenční činidla a vedlejší produkty filtrací a tedy je překrystalování meziproduktů zbytečné.
Chráněné aminokyseliny se mohou vázat na jakýkoliv hodný polymer, který musí být pouze nerozpustný v použitém rozpouštědle a musí mít stálou fyzikální formu, která usnadňuje filtraci. Polymer musí obsahovat ftinkční skupinu, na kterou se může pevně vázat první chráněná aminokyselina kovalentní vazbou. Pro tento účel jsou vhodné nejrůznější polymery: příkladně se uvádějí celulóza, polyvinylalkohol, polymethakrylát, sulfonovaný polystyren, kopolymer chlormethylovaného styrenu a divinylbenzenu (Murrifieldova pryskyřice), 4-methylbenzhydrylaminová pryskyřice (pryskyřice MBHA), fenylacetamidomethylová pryskyřice (Pampryskyřice), p-benzyloxybenzylalkoholová pryskyřice, benzhydrylaminová pryskyřice (BHApryskyřice), 4-(hydroxymethyl)benzoyloxymethylová pryskyřice, pryskyřice, kterou popsal Breipohl a kol. (Tetrahedron Letters 28, str. 565, 1987, obchodní produkt společnosti BACHEM), 4-(2,4-dimethoxyfenylaminomethyl)fenoxypiyskyřice (obchodní produkt společnosti Novabiochem) nebo o-chlortritylová pryskyřice (obchodní produkt společnosti Biohellas).
Pro peptidovou syntheru v roztoku se hodí všechna rozpouštědla, jež jsou inertní za reakčních podmínek, obzvláště voda, Ν,Ν-dimethylformamid (DMF), dimethylsulfoxid (DMSO), acetonitril, dichlormethan (DCM), 1,4-dioxan, tetrahydrofuran (THF), N-methyl-2-pyrrolidon (NMP) a směsi těchto rozpouštědel. Peptidovou synthesu na polymemím nosiči lze provádět ve všech inertních organických rozpouštědel, ve kterých jsou použité deriváty aminokyselin rozpustné. Výhodná rozpouštědla jako Ν,Ν-dimethylformamid, dichlormethan, N-methyl-2-pyrrolidon, acetonitril a dimethylsulfoxid a jejich směsi však působí bobtnání pryskyřic. Když je synthesa ukončena, peptid se od polymemího nosiče odštěpí. Podmínky, za kterých je odštěpení od různých piyskyřic možné, jsou popsány v literatuře. Nejběžněji používané odštěpovací reakce jsou katalyzovány kyselinami a palladiem, obzvláště je vhodné štěpení v tekutém bezvodém hydrogenfluoridu, v bezvodé trifluormethansulfonové kyselině, ve zředěné nebo v koncentrované trifluoroctové kyselině, palladiem katalyzované štěpení v tetrahydrofuran nebo ve směsi tetrahydrofuranu a dichlormethanu v přítomnosti slabé zásady jako je morfolin nebo štěpení ve směsích kyseliny octové a dichlormethantrifluormethanolu. V závislosti na zvolených chránících skupinách, mohou se tyto skupiny udržet nebo popřípadě odštěpit za štěpících podmínek. Cenné může být také částečné odstranění chránících skupin peptidu, mají-li se provést určité derivatizační reakce. Peptidy dialkylované na N-zakončení se mohou připravovat
a) kopulací příslušných Ν,Ν-dialkyIaminových kyselin v roztoku nebo na polymemím nosiči,
b) redukční alkylací peptidu vázaného na pryskyřici v systému dimethylformamid/1% octová kyselina s NaCNBH3 a s příslušným aldehydem nebo ketonem,
c) hydrogenací peptidů v roztoku v přítomnosti aldehydu nebo ketonu a palladia na uhlí.
-10CZ 293682 B6
Různé v přírodě se nevyskytující aminokyseliny podle vynálezu jsou obchodně dostupné nebo se mohou syntetizovat z obchodně dostupných materiálů způsoby známými ze stavu techniky. Obchodně dostupnými výchozími materiály jsou kyselina azetidin-2-karboxylová, 3-methyl-Lprolin, 5-methyl-L-prolin a skupinou Boc nebo Fmoc chráněný 3,4-dehydroprolin (ACROS, NOVABIOCHEM, BACHEM). Cis- a trans-4-fluoroprolin lze připravit způsobem, který popsán Panasik a kol. (N. Panasik. E. S., Eberhardt, A.S. Edison, D.R. Powell, R.T. Raines, Int. J. Peptide Protein Res. 44, str. 262 až 269, 1994) z hydroxyprolinu.
Sloučeniny podle vynálezu mohou sloužit k inhibici nebo jinému léčení pevných nádorů (například nádorů plicních, prsních, tlustého střeva, prostaty, žlučníku, konečník nebo endometriálních nádorů) nebo hematologických onemocnění (například leukemie, lymphomas), podáváním sloučenin savcům.
Specielní předností nosných sloučenin podle vynálezu je že jsou odolnější vůči enzymatickému rozkladu ve srovnání s Dolastatinem-15.
Podávání může být běžnými farmaceutickými s výhodou onkologickými prostředky, včetně orálních a parenterálních prostředků, subkutánně, intravenózně, intramuskulámě a intraperitoneálně.
Sloučeniny mohou být podávány samotné nebo v podobě farmaceutických prostředků obsahujících sloučeninu obecného vzorce I spolu s farmaceuticky vhodným nosičem pro danou cestu podávání. Takovými farmaceutickými prostředky mohou být kombinované výrobky, mohou tedy obsahovat jiné terapeuticky účinné přísady
Dávka podávaná samcům obsahuje nádor inhibující účinnou látku, která závisí na běžných faktorech jako je biologická aktivita použité sloučeniny, způsob podání, věk, zdravotní stav a hmotnost pacienta, povaha a druh příznaků, frekvence ošetřování, podávání jiných léků a požadovaný účinek. Typickou denní dávkou je přibližně 0,5 až 50 mg na kg tělesné hmotnosti při orálním podávání a přibližně 0,05 až 20 při parenterálním podávání.
Nové sloučeniny podle vynálezu lze podávat ve formě běžných pevných nebo tekutých farmaceutických prostředků, tedy povlečených nebo nepovlečených tablet, kapslí, prášků, granulí, čípků nebo roztoků. Ty se vyrábějí obvyklým způsobem. Účinné látky mohou být při tom kombinovány s obvyklými farmaceutickými pomocnými látkami, jako s pojivý tablet, plnidly, chránícími činidly, činidly k rozpadavosti tablet, regulátory tekutosti, zvláčňovadly, rozpouštědly, látkami zpožďujícími účinek, antioxidanty a nebo s nosnými plyny (H. Sucker a kol. Pharmazeutische Technologie, Thieme Verlag, Stuttgart, 1978). Takto podávané formy léčiv obsahují normálně hmotnostně 1 až 90 % účinné látky.
Následující příklady vynález objasňují, aniž ho jakkoli omezují. V příkladech jsou proteinové aminokyseliny uváděny zkratkami v běžném 3-písmenovém kódu. Jinými zkratkami jsou: Me2Val = Ν,Ν-dimethylvalin, MeVal = N-methylvalin.
Příklady provedení vynálezu
A. Obecné postupy
I. Peptidy podle vynálezu obecného vzorce I jsou buď syntetizované klasickou roztokovou syntézou standardními shora popsanými způsoby za použití Z a Boc, nebo standardními způsob syntézy v pevném stavu pomocí chránících skupin Boc a Fmoc.
a) Cyklus syntézy pro techniku chránících skupin Fmoc.
-11 CZ 293682 B6
1. promytí DMF
2.20 % piperidinu v DMF
3. 20 % piperidinu v DMF
4. promytí DMF
5. přidání předem aktivované chránící x 1 min x 4 min x 16 min
5x1 min aminokyseliny (aktivované 1 ekvivalentem TBTU a 5 ekvivalenty DIPEA v DMF) peptidová kopulace
6. promytí DMF
7. není-li konverse úplná opakování
1x61 min x 1 min kopulace (zpět k 5.)
8. promytí DMF
9. zpět do 2.
x 1 min
Ke kopulaci aminokyselin po N-aminokyselinách se používá reakčních činidel BOP-C1 a PyBrop. Reakční doby se příslušně zvětší zařazením dvojných vazeb. Při roztokové syntéze je pro tento způsob kopulace nej výhodnější použití buď Boc-chráněných (N-karboxy anhydridů) aminokyselin NCA, Z-chráněných (N-karboxyanhydridů) aminokyselin NCA, nebo pivaloylchloridu jako kondenzačního činidla.
II. Redukční alkylace N-zakončení
Peptidová pryskyřice podle Ala se zbaví chránících skupin na N-zakončení (kroky 2 až 4 v Ala) a pak se nechá reagovat s 3-násobným molámím nadbytkem aldehydu nebo ketonu v systému dimethylformamid/1% octové kyseliny, s přísadou 3 ekvivalentů NaCNBH3. Po ukončení reakce (negativní Kaiser-test) se pryskyřice promyje několikrát vodou, izopropanolem, dimethylformamidem a dichlormethanem. Reduktivní alkylace v roztoku lze například dosáhnout reakcí peptidů zbavených chránících skupin na N-zakončení, peptidových fragmentů nebo aminokyselin s odpovídajícími aldehydy nebo ketony použitím naCNBH3 nebo systému vodík palladium na uhlí.
III. Zpracování peptidových piyskyřic získaných podle odstavce Ib a II
Peptidová pryskyřice se vysuší za sníženého tlaku a pak se zpracuje 1,5 hodin směsí TFA/voda (95:5) (Wade, Tregear, Howard Florey Fmoc Workshop Manual, Melboume, 1985). Pryskyřice se odfiltruje a promyje se TFA a dichlormethanem. Filtrát a promývací roztoky s zkoncentrují a peptid se vysráží přísadou diethyletheru. Po ochlazení v ledové lázni se sraženina odfiltruje, vyjme se do 30% octové kyseliny a lyofilizuje se.
IV. Použije-li se o-chlorotritylové pryskyřice (obchodní produkt společnosti Biohellas), míchá se 1 hodinu při teplotě místnosti suspense peptidové pryskyřice v systému octová kyselina/trifluorethol/dichlormethan (1:1:3). Pryskyřice se odfiltruje za odsávání a důkladně se promyje štěpícím roztokem. Spojené filtráty se zkoncentrují ve vakuu a zpracují se etherem. Vysrážená pevná látka se odstraní filtrací nebo odstředěním, promyje se diethyletherem a vysuší se za sníženého tlaku.
V. Čištění a charakterizace peptidů
Čištění se provádí gelovou chromatografií (SEPHADEX G-10, G-15/10 % HOAc, SEPHADEX LH20/MeOH) a/nebo středotlaku chromatografií (stacionární fáze: HD-SIL C-8, 20-45 mikrometrů, 100 Angstrom; mobilní fáze: gradient s A = systém 0,1 % TFA/voda, B = systém 0,1 % TFA/MeOH), nebo preparativní chromatografií HPLC (stacionární fáze: Waters Delta-Pak C-18, 15 mikrometrů 100 Angstrom; mobilní fáze: gradient s A = systém 0,1 % TFA/voda, B = systém 0,1% TFA/MeOH).
-12CZ 293682 B6
Čistota výsledných produktů se zjišťuje analytickou chromatografíí HPLC (stacionární fáze: 100 2,1 mm VYDAC C-18 300 Angstrom: mobilní fáze: acetonitril-voda gradient, pufrováno s 0,1 % TFA, 40 °C). Charakterizace bombardováním rychlými atomy hmotovou spektroskopií a NMR spektroskopií.
B. - Specifické postupy
Příklad 1 (SEQ ID NO: 1)
Me2Val-Val-MeVal-Pr-L-azetudinyl-2-karboxamid
Nechává se reagovat 0,53 g pryskyřice Fmoc-RINK (substituce 0,46mmol/g), odpovídající velikosti dávky 0,25 mmol jako v Ala pokaždé s 0,4 mmol
Fmoc-azetidin-2-karboxylové kyseliny,
Fmoc-Pro-OH, Fmoc-MeV al-OH, Fmoc-Val-OH, Fmoc-Val-OH.
Aminokyselina následující po N-methylaminokyselině se spojí dvojnou vazbou kopulačním činidlem ByProp. P ukončení interativních syntetických cyklech, se zpeptidové pryskyřice odstraní chránící skupiny N-zakončení (kroky 2 až 4 v Ala) a nechá se dále reagovat s vodným roztokem formaldehydu jako v AII a vysuší se za sníženého tlaku. Výsledná pryskyřice se odštěpí TFA jako v ΑΠΙ. Surový produkt se čistí preparativní středotlakou chromatografíí, čímž se získá 5 g žádaného čistého peptidu (10 až 40 % A v 10'; 40 až 90 % A ve 200'). Sloučenina se dále charakterizuje bombardováním rychlými atomy hmotovou spektroskopií a NMR spektroskopií. ([M+H].
Příklad 2 (SEQ ID NO: 1)
Me2 V al-V al-MeV al-Pro-3,4-dihydroly lbenzy lamid
a) Z-MeVal-Pro-OMe
Ve 250 ml suchého dichlormethanu se rozpustí 66,25 g (250 mmol) Z-Val-OH. Po přidání 36,41 ml (262,5 mmol) triethylaminu se reakční směs ochladí na teplotu -25 °C a přidá se 32,27 ml (262,5 mmol) pivaloylcholoridu. Po 2,5-hodinovém míchání se do reakční směsi přidá 41,89 g (250 mmol) H-Pro-Ome x HCI ve 250 ml dichlormethanu a při teplotě 0 °C se neutralizuje 36,41 ml (262,5 mmol) triethylaminu. V míchání se pokračuje 2 hodiny při teplotě -25 °C a přes noc při teplotě místnosti. Reakční směs se zředí dichlormethan a důkladně se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3x), vodou (lx), 5% citrónovou kyselinou (3x) a nasyceným roztokem chloridu sodného. Organická fáze se vysuší síranem sodným a odpaří se k suchu. Zbytek (91,24 g) se míchá přes noc s peptroletherem a zfíltruje se. Získá se 62,3 g produktu.
b) H-MeVal-Pro-OMe
Ve 490 ml methanolu se rozpustí 48,9 g (130 mmol) Z-MeVal-Pro-OMe. Po přidání 10,9 ml (130 mmol) koncentrované chlorovodíkové kyseliny a 2,43 g 10% palladia na uhlí se reakční směs hydrogenuje. Filtrací a odpařením k suchu se získá 36,43 g produktu.
-13 CZ 293682 B6
c) Z-Val-MeVal-Pro-OMe
Ve 110 ml dimethylformamidu se míchá dva dny při teplotě 40 °C 18,1 g H-MeVal-Pro-OMe,
21.6 g (78 mmol) Z-Val-N-karboxyanhydridu a 22,8 ml (130 mmol) diizopropylethylaminu po dobu dvou dnů. Po odpaření dimethylformamidu se přidá dichlormethan a organická fáze se promyje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3x), vodou (lx), 5% citrónovou kyselinou (3x) a nasyceným roztokem chloridu sodného. Organická fáze se vysuší síranem sodným a odpaří se k suchu. Získá se 29,3 g produktu v podobě viskosního oleje.
d) H-Val-MeVal-Pro-OMe
Ve 230 ml methanolu se rozpustí 29,3 g (61,6 mmol) Z-Val-MeVal-Pro-OMe. Po přidání 1,15 g 10% palladia na uhlí se reakční směs hydrogenuje. Filtrací a odpařením k suchu se získá 21,96 g produktu.
e) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe
V 610 ml dichlormethanu se rozpustí 15,29 g (61 mmol) Z-Val-OH a 21,96 g (61 mmol) HVal-MeVal-Pro-OMe a ochladí se na teplotu 0 °C. Po přidání 8,16 ml (73,2 mmol) Nmethylmorfolinu, 2,77 g (20,3 mmol) HOBt a 11,74 g (61 mmol) EDCI se reakční směs míchá přes noc při teplotě místnosti, zředí se dichlormethanem a důkladně se promyje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3x), vodou (lx) 5% citrónovou kyselinou (3x) a nasyceným roztokem chloridu sodného. Organická fáze se vysuší síranem sodným a odpaří se k suchu. Získá se 31,96 g produktu.
f) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH
Ve 250 ml methanolu se rozpustí 31,96 g (57 mmol) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe a přidá se
102.6 ml (102,6 mmol) lm roztoku hydroxidu s lithného ve vodě. Po 24-hodinovém míchání při teplotě místnosti se přidá voda a methanol se odpaří za sníženého tlaku. Vodná fáze se extrahuje (3x) ethylacetátem, nastaví se na hodnotu pH 2 při teplotě 4 °C a extrahuje se (3x) ethylacetátem. Spojené organické extrakty se vysuší síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Získá se 30,6 g produktu v podobě bílé pevné hmoty.
g) Me2Val-Val-MeVal-Pro-OH
Připraví se Ν,Ν-dimethylovaná tetrapeptidová kyselina se Z-chráněné tetrapeptidové kyseliny hydrogenaci chránící Z-skupiny a následným přidáním vodného formaldehydového roztoku do hydrogenační směsi, čímž se získá žádaný produkt v téměř kvantitativním výtěžku.
h) Me2Val-Val-MeVal-Pro-3,4-dehydroprolinmethylester
V 75 ml suchého dichlormethanu se rozpustí 3,38 g Me2Val-Val-MeVal-Pro-OH (7,27 mmol) a 0,925 g 3,4-sdehydroproplinmethylesterhydrochloridu (7,27 mmol). Při teplotě 4 °C se přidá 0,975 ml N-methylmorfolinu (8,72 mmol), 0,332 HOBt (2,43 mmol) a 1,4 g EDCI (7,27 mmol). Po míchání přes noc při teplotě místnosti se přidá dichlormethan a organická fáze se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3x) a vodo (lx). Organická fáze se extrahuje 5% vodnou citrónovou kyselinou. Hodnota pH vodné kyselinové vrstvy se nastaví na 8 IN roztokem hydroxidu sodného a extrahuje se 4x dichlormethanem. Po vysušení síranem sodným a odpaření za sníženého tlaku se získá 2,82 g pentapeptidmethylesteru.
- 14CZ 293682 Β6
k) Me2Val-VaI-MeVal-Pro-3,4-dehydroprolinbenzylamÍd
Roztok 2,0 g hydroprolinu, obsahující pentapeptidmethylester ve 20 ml methanolu, se zpracuje při teplotě místnosti 4,6 ml ln roztoku hydroxidu lithného. Po ukončení reakce (kontrola chromatografií v tenké vrstvě) se přidá voda, methanol se odpaří a sloučenina se lyofilizací zbaví vody. Získaný bílý prášek se rozpustí ve 36 ml dichlormethanu a přidá se 0,388 ml (3,55 mmol) benzylamidu. Po přidání 0,476 ml N-methylmorfolinu (4,26 mmol), 0,163 HOBT (1,19 mmol) a 0,684 g EDCI (3,55 mmol) při teplotě 4 °C se reakční směs míchá přes noc při teplotě místnosti. Při dá se dichlormethan a organická fáze se promyje 3x nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou (lx). Organická vrstva se extrahuje 2x 5% citrónovou kyselinou. Kyselá vodná vrstva se nastaví na hodnotu pH 9 5N roztokem hydroxidu sodného a extrahuje se dichlormethanem (4x). Po vysušení síranem sodným a odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se získá 600 mg surového pentapeptidhbenzylamidu. 300 mg tohoto surového peptidu se čistí kapalinovou středotlakou chromatografií (0 až 10 % A v 5', 10 až 25 % A v 10', 25 až 90 % A v 450'), čímž se získá analyticky čistý produkt. Sloučenina se dále charakterizuje hmotovou spektrografií při bombardování rychlými atomy ([M+H]+ = 639,4).
Následující sloučeniny byly připraveny a mohou být připraveny podle příkladu 1 a 2:
3. Xaa Val Xab Pro Xac
4. Xaa Val Xab Pro Xad
5. Xaa Val XabProXae
6. Xaa Val XabProXaf
7. Xaa Val Xab Pro Xag
8. Xaa Val XabProXah
9. Xaa Val Xab Pro Xai
10. Xaa Val Xab Pro Xak
11. Xaa Val XabProXal
12. Xaa Val Xab Pro Xam
13. Xaa Val XabProXan
14. Xaa Val Xab Pro Xao
15. Xaa Val Xab Pro Xap
16. Xaa Val XabProXaq
17. Xaa Val Xab Pro Xar
18. Xaa Val Xab Pro Xas
19. Xaa Val XabProXat
20. Xaa Val Xab Pro Xau
21. Xaa Val Xab Pro Xav
22. Xaa Val Xab Pro Xaw
23. Xaa Val Xab Pro Xax
24. Xaa Val Xab Pro Xay
25. Xaa Val Xab Pro Xaz
26. Xaa Val Xab Pro Xba
27. Xaa Val Xab Pro Xbb
28. Xaa Val Xab Pro Xbc
29. Xaa Val Xab Pro Xar
30. Xbe Val Xab Pro Xar
31. Xaa Val Xab Pro Xcy
32. Xaa Val Xab Pro Xcy
33. Xaa Ile Xab Pro Xar
34. Xaa Xbh Xab Pro Xar
35. Xaa Val Xbf pro Xar
36. Xaa Val Xbg Pro Xar
37. Xaa Val XabProXbi
38. Xaa Val Xab Pro Xbk
39. Xaa Val Xab Pro Xbl
-15CZ 293682 B6
40. XaaVal XabProXbm
41. Xaa Val XabProXbn
42. XaaValXabProXbo
43. Xaa Val Xab Pro Xbp
44. Xaa Val Xab Pro Xbq
45. Xaa Val Xab Pro Xbr
46. XaaVal XabProXbs
47. Xaa Val Xab Pro Xbt
48. Xaa Val Xab Pro Xbu
49. Xaa Val Xab Pro Xbv
50. Xaa Val Xab Pro Xbw
51. Xaa Val Xab Pro Xbx
52. Xaa Val Xab Pro Xby
53. Xaa Val Xab Pro Xbz
54. Xaa Val Xab Pro Xca
55. Xaa Val Xab Pro Xcb
56. Xaa Val Xab Pro Xcc
57. Xaa Val Xab Pro Xcd
58. Xaa Val Xab Pro Xce
59. XaaVal XabProXcf
60. Xaa Val Xab Pro Xcg
61. Xaa Val Xab Pro Xch
62. Xaa Val Xab Pro Xci
63. Xaa Val Xab Pro Xck
64. Xaa Val Xab Xcn Xco
65. Xaa Val Xab Xcn Xak
66. Xaa Val Xab Xcn Xaq
67. Xaa Val Xab Xcn Xar
68. Xaa Val Xab Xcn Xay
69. Xaa Val Xab Xcp Xak
70. XaaVal Xab Xcp Xaq
71. Xcx Val Xab Xcp Xar
72. Xcx Val Xab Xcp Xay
73. Xaa Val Xab Pro Xcn Xcr
74. Xaa Val Xab Pro Xcn Xcs
75. Xaa Val Xab Pro Xcn Xct
76. Xaa Val Xab Pro Xcn Xcu
77. Xaa Val Xab Pro Xcn Xcv
78. Xaa Val Xab Pro Xcq Xcr
79. Xaa Val Xab Pro Xcq Xcs
80. Xaa Val Xab Pro Xcq Xct
81. Xaa Val Xab Pro Xcq Xcu
82. Xaa Val Xab Pro Xcq Xcv
83. Xaa Val Xab Pro Xcw Xcr
84. Xaa Val Xab Pro Xcw Xcs
85. Xaa Val Xab Pro Xcw Xct
86. Xaa Val Xab Pro Xcw Xcu
87. Xaa Val Xab Pro Xcw Xcv
88. Xaa Val Xab Pro Xcw OCH3
89. Xaa Val Xab Pro Xcl
90. Xaa Val Xab Pro Xcm
91. Xaa Val XabProXcz
92. Xaa Val Xab Pro Xda
-16CZ 293682 B6
Příklady MS-charakterizace syntetizovaných nových sloučenin jsou uvedeny v následující tabulce.
Příklad č. Analýza MS při bombardování rychlými atomy [mol. hmotnost (naředěná)J
61 627
64 546
88 552
89 655
Tabulka I - Identifikace sekvence sloučenin připravených podle příklad 1 a 2
Sloučenina č. Sekvenční ID-číslo
1-32, 35 - 63, 88 - 92 1
33 2
34 3
64-72 4
74-87 5
Symboly Xaa v součtu mají následující význam: ío Xaa: N,N-Dimethylvalin
Xab: N-Methylvalin
Xac:
Xac:
Xad:
Xae:
- 17CZ 293682 B6
Xaf:
Xa?:
Xah:
Xax:
O HaC
Xak:
Xal:
Xara:
- 1SCZ 293682 B6
Xan:
Xao:
Xap:
Xaq:
Xar:
Xas:
- 19CZ 293682 B6
Xau:
Xav:
Xaw:
Xax:
Xay:
O
Xaz:
-20CZ 293682 B6
Xba:
Xbb:
Xbc:
Xbd: N,N-dimethylizoleucin
Xbe: N,N-methyl-2-/erc-butyl-glycin
Xbf: N-methylizoleucin
Xbg: N-methyl-2-fórc-butyl-glycin
Xbh: 2-terc-butylglycin
Xbi:
-21 CZ 293682 B6
Xbk:
Xbl:
Xbm:
Xbn:
Xbo:
F
-22CZ 293682 B6
Xbp:
Xbq:
Xbr:
Xbs:
Xbt:
-23CZ 293682 B6
Xbu:
Xbv:
F
Xbw:
Xbx:
Xby:
Xbz:
Xca:
-24CZ 293682 B6
Xcb:
Xcc:
Xcd:
Xce:
Xcg:
Xch:
O
O
-25CZ 293682 B6
Xci:
Xck: 3,4-dehydrol in-adamantyl( 1 )-amid
Xcl:
Xcn: 3,4-dehydroprolin
Xco: 3,4-dehydroproline amid
Xcp: L-thiazolidine-4-karbonyl
Xcq: 4~fluoro-prolin
Xcr:
Xcs: ... PR
«3^ j-CH>
0
-26CZ 293682 B6
Xct:
H3CXCH3 'NA)fN'^CH3
O
Xcu:
Xcv:
Xcw:
Xcx:
Xcy:
Xcz:
CH, ^i/ym^-ch3 o
CH, ,N^rNxx—CH3 H3C 0
Xda:
-27CZ 293682 B6
Sloučeniny podle vynálezu se mohou testovat na účinek proti rakovině běžnými způsoby včetně například dále popsaného způsobu:
A. Metodologie in vitro
Cytotoxicíta se měří standardní metodologií při přilnuté buněčné linie jako je „microculture tetrazolium test“ (MTT). Podrobnosti této zkoušky jsou popsány v literatuře (Alley, MC, kol. Cancer Research 48: str. 589 až 601,1988). K získání kultur pro mikrotitrační destičky se použije exponenciálně rostoucích kultur nádorových buněk, jako jsou buňky HT-29 colon-carcinoma nebo LX-plicního nádoru. Buňky se nasadí v množství 5000 až 20 000 na důlek v 96-důlkových destičkách (ve 150 μΐ média) a kultivují se přes noc při teplotě 37 °C. Přidají se sloučeniny v 10násobném zředění 10-4 M až 10‘10 M. Buňky se pak inkubují 48 hodin. Ke zjištění počtu živých buněk v každém důlku se přidá barvivo MTT (50 μΐ roztoku 3 mg/ml 3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5-difenyltetrazoliumbromidu v solance). Tato směs se inkubuje 5 hodin při teplotě 37 °C a pak se do každého důlku přidá 50 μΐ 25% SDS, pH 2. Po celoroční inkubaci se pak odečítá absorbance každého důlku při 550 nm čítačem ELISA. Vypočtou se střední hodnoty +/- SD dat z replikovaných důlků, za použití vzorce % T/C (% ošetřených živých buněk/kontrolních buněk).
OD ošetřených buněk
------------------ x 100 = % T/C
OD kontrolních buněk
Koncentrace zkoušené sloučeniny, která dává hodnotu inhibice růstu T/C = 50 % je označována jako hodnota IC50.
Sloučenina podle příkladu IC50 [M]
1 1 x 10*b
2 ——5
61 1 x 10'8
64 1 x 10’8
88 ——j
89 1 x 10'8
B. Metodologie in vivo
Sloučeniny podle vynálezu se zkoušely dále v preklinických testech na aktivitu in vivo, která je indikativní pro klinické použití. Takové testy se provádějí na holých myších, kterých se transplantují (xenoroubují) nádorové tkáně, s výhodou lidského původu, jak je to dobře známo v tomto oboru. Zkoušené sloučeniny se vyhodnocují z hlediska protinádorové účinnosti po podání myším s xenoimplantátem.
Lidské prsní nádory (MX-1), které rostliny v athymické holé myši se transplantují do nové hostitelské myši pomocí nádorových fragmentů o velikosti přibližně 50 mm. Den transplantace je dnem O. Šest až deset dní později se myši ošetří zkoušenými sloučeninami podávanými jako intravenózní injekce ve skupinách po 5 až 10 myších při každé dávce. Sloučeniny se podávaly každý druhý den po dobu tří týdnů v dávkách 1 až 100 mg/kg tělesné hmotnosti. Průměry nádorů a tělesná hmotnost se měřily dvakrát týdně. Objemy nádorů se vypočetly z průměrů měřených posuvným měřítkem a pro každou ošetřovanou skupinu se vypočtou objemy nádorů podle vzorce (délka x šířka2)/2 = mm3 objemu nádoru
Pro každou skupinu se vypočtou střední objemy nádorů a zjistí se hodnoty T/C pro každou skupinu oproti neošetřeným kontrolním nádorům.
-28CZ 293682 B6
Nové sloučeniny vykazují dobré vlastnosti inhibice nádorů.
Průmyslová využitelnost
Peptid pro výrobu farmaceutických prostředků k ošetřování onkologických onemocnění savců.
Seznam sekvencí (1) Obecné informace
i) Přihlašovatel
A. Adresát: BASF Aktiengesellschaft
B. Ulice: Carl-Bosch-Strasse 38
C. Město: Ludwigshafen
E. Stát: Německá spolková republika
F: ZIP: D-67056
G. Telefon: 0621/6048526
H. Telefax: 0621/6043123
I. Telex: 1762175170 ii) Název vynálezu: Peptid a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje iii) Počet sekvencí: 5 iv) Forma pro počítač
A. Typ média: Disketa 3,5 palce, 2 DD
B. Počítač: IBM AT-kompatibilní, 80286 procesor
C. Operační systém: MS-DOS version 5,0
D. Software: WordPerfect
2. Informace o SEQ ID NO: 1:
i) Charakteristiky sekvence
A. Délka: 5 aminokyselin
B. Typ: aminokyselina
D. Topologie: lineární ii) Typ molekuly: peptid xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 1:
Xaa Val Xaa Pro Xaa
2. Informace o SEQ ID NO: 2:
i) Charakteristiky sekvence
A. Délka: 5 aminokyselin
B. Typ: aminokyselina
D. Topologie: lineární i i) Typ molekuly: peptid xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 2:
Xaa Ile Xaa Pro Xaa
2. Informace o SEQ ID NO: 3:
i) Charakteristiky sekvence
A. Délka: 5 aminokyselin
B. Typ: aminokyselina D. Topologie: lineární ii) Typ molekuly: peptid xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 3: Xaa Xaa Xaa Pro Xaa
2. Informace o SEQ ID NO: 4:
i) Charakteristiky sekvence
A. Délka: 5 aminokyselin
B. Typ: aminokyselina D. Topologie: lineární ii) Typ molekuly: peptid xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 4: Xaa Val Xaa Xaa Xaa
2. Informace o SEQ ID NO: 5:
i) Charakteristiky sekvence
A. Délka: 6 aminokyselin
B. Typ: aminokyselina D. Topologie: lineární ii) Typ molekuly: peptid xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 5: Xaa Val Xaa Pro Xaa Xaa

Claims (4)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Peptid obecného vzorce I
    R’R2N-CHX-CO-A-B-D-E-(F)t-K (I), kde znamená
    R1 methyl, ethyl nebo izopropyl,
    R2 vodík, methyl nebo ethyl, nebo R1 a R2 spolu s atomem N dohromady tvoří pyrrolidinový kruh,
    A zbytky valyl, izoleucyl, leucyll, 2-terc-butylglycyl, 2-ethylglycyl, norleucyl nebo norvalyl,
    -30CZ 293682 B6
    B zbytky N-methylvalyl, N-methylleucyl, N-methylizoleucyl, N-methylnorvalyl, Nmethylnorleucyl, N-methyl-2-tórc-butylglycyl, N-methyl-3-terc-butylalanyl nebo N-methyl-2-ethylglycyl,
    D zbytky prolyl, 3,4-dehydroproplyl, 4-fluoroprolyl, 4,4-difluoroprolyl, azetidin-2karbonyl, homoproplyl, 3-methylprolyl, 4-methylprolyl, 5-methylprolyl nebo thiazolidin-4-karbonyl,
    E 3,4-dehydroprolyl, 4-fluoroprolyl, 3-methylprolyl, 4-methylprolyl, azetidin-2-karbonyl nebo 4,4-difluoropropyl,
    F zbytky valyl, 2-terc-butylglycyl, izoleucyl, leucyl, 2-cyklohexylglycyl, norleucyl, norvalyl, neopentylglycyl, alanyl, beta-alanyl nebo aminoizobutyroyl,
    X C2_5 alkyl, cyklopropyl nebo cyklopentyl, t 0 nebol, a
    K Ci^alkoxy, benzyloxy, skupinu OC(CH3)3, NH2 nebo substituovanou aminoskupinu:
    -NHCH3, -NHCH2CH3, -NH(CH2)oCH3, -NH(CH2)3CH3, -NH(CH2)4CH3, -NH(CH2)5CH3, -NH(CH2)6CH3j -ŇH(CH2)7CH3, -NHCH(CH3)2, -NHCH(CH3)CH2CH3, -NHCH(CH3)CH2CH2CH3, -NHCH(CH2CH3)2, -NHCH(CH2CH2CH3>, -NHC(CH3)3, -NHCH(CH2CH3)CH7CH2CH3, -NHCH(CH3)CH(CH3j2, -NHCH(CH2CH3)CH(CH3)2, -NHČH(CH3)C(CH3)3, -NH-cyklopropyl, -NH-cyklobutyl, -NH-cyklopentyl, -NH-cyklohexyl, -NH-cykloheptyl, -NH-cyklooktyl, -NH-bicyklo[3,3,0]oktyl, -N(CH3)OCH3, -N(CH3)OCH2CH3, -N(CH3)OCH2CH2CH3, -N(CH3)OCH(CH3)2, -N(CH2CH3)OCH3j -N(CH2CH3)OCH2CH3, -N(CH(CH3)2)OCH3, -N(CH3)OCH2C6H5, -N(OCH3)CH2-C6H5, -N(CH3)OC6H5, -NH-CH2-C6H5, -NH(CH2)2C6H5, -NH(CH2)3C6Hs, -NHCH(CH3)C6H5j -NHC(CH3)2C6H5, -NHC(CH3)2CH2CH3, -NHC(CH3)(CH2CH3)2, -NHCH(CH3)CH(OH)C6H5, -NHCH7-cyklohexyl, -NHCH2CF3, -NHCH(CH2F)2, -NHC(CH3)2CH2CH2OH, -NH(CH2CH2O)2CH2CH3, -NHC(CH3)2CH(CH3)2, -NHC(CH3)2CN, -NHC(CH3)2CCH, -NHC(CH3)2C=CH2, norefedryl, norpseudoefedryl, -NH-chinolyl, -NH-pyrazyl, -NH-adamant-l-yl, -NH-adamant-2-yl, -NH-CH2-adamantyl, -NH-CH2-naftyl, -NH-benzhydryl, -NH-bifenyl, -NH-pyridyl, -NH-pikolyl, -NH-CH2CH2-pyridyl, -NH-benzothiazolyl, -NH-benzoizothiazolyl, -NH-benzopyrazolyl, -NH-benzoxazolyl, -NH-fluorenyl, -NH-pyrimidyl, -NH-thiazol-2-yl, -NH-izoxazol-3-yl, -NH-CHr-furan-2-yl, -NH-(3-methyl)izoxazol-5-yl, -NH-(3-methyl)izothiazol-5-yl, -NH-(2-trifluormethyl)-thiadiazol-5-yl,-NH-CH2-(4-methyl)thiazol-2-yl, -NH-CH2-thien-2-yl, -NH-CH2-(5-methyl)thien-2-yl,-NH-(2-methyI)thiadiazol-5-yl, -NH-(2-cyklopropyl)thiadiazol-5-yl, nebo K představuje zbytek vzorce
    -31 CZ 293682 B6 nebo jeho soli s fyziologicky vhodnými kyselinami.
  2. 2. Peptid podle nároku 1 obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají v nároku 1 uvedený význam nebo jeho soli pro použití v medicíně, zvláště pro ošetřování onkologických nemocí.
  3. 3. Farmaceutický prostředek, v y z n a č u j í c í se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství peptidů podle nároku 1 obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají v nároku 1 uvedený význam a farmaceuticky vhodný nosič.
  4. 4. Použití peptidů obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají v nároku 1 uvedený význam pro přípravu léčiva k ošetřování nádorů savců.
CZ19973763A 1995-06-07 1996-06-03 Peptid, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje CZ293682B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/472,453 US5831002A (en) 1992-05-20 1995-06-07 Antitumor peptides

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ376397A3 CZ376397A3 (cs) 1998-06-17
CZ293682B6 true CZ293682B6 (cs) 2004-07-14

Family

ID=23875567

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ19973763A CZ293682B6 (cs) 1995-06-07 1996-06-03 Peptid, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje
CZ19973765A CZ293683B6 (cs) 1995-06-07 1996-06-03 Peptid, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ19973765A CZ293683B6 (cs) 1995-06-07 1996-06-03 Peptid, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje

Country Status (33)

Country Link
US (1) US5831002A (cs)
EP (2) EP0871656B1 (cs)
JP (2) JP4221062B2 (cs)
KR (2) KR100437985B1 (cs)
CN (2) CN1182154C (cs)
AR (2) AR003427A1 (cs)
AT (2) ATE224910T1 (cs)
AU (2) AU725170B2 (cs)
BG (2) BG102125A (cs)
BR (2) BR9609423A (cs)
CA (2) CA2219818C (cs)
CO (2) CO4700527A1 (cs)
CZ (2) CZ293682B6 (cs)
DE (2) DE69623992T2 (cs)
DK (2) DK0832104T3 (cs)
ES (2) ES2186783T3 (cs)
HR (2) HRP960257A2 (cs)
HU (2) HU228071B1 (cs)
IL (2) IL122215A (cs)
MX (2) MX9709147A (cs)
MY (2) MY119042A (cs)
NO (2) NO318384B1 (cs)
NZ (2) NZ310444A (cs)
PL (2) PL185762B1 (cs)
PT (2) PT871656E (cs)
RO (2) RO118953B1 (cs)
SI (2) SI0832104T1 (cs)
SK (1) SK282466B6 (cs)
TR (2) TR199701545T1 (cs)
TW (2) TW508357B (cs)
UA (2) UA46776C2 (cs)
WO (2) WO1996040751A1 (cs)
ZA (2) ZA964710B (cs)

Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5807984A (en) * 1995-11-09 1998-09-15 Basf Aktienegesellschaft Oligopeptides, the preparation and use thereof
TW474946B (en) * 1995-12-15 2002-02-01 Basf Ag Novel compounds, the preparation and use thereof
US20010009901A1 (en) * 1996-12-11 2001-07-26 Basf Aktiengesellschaft Germany Antineoplastic peptides
US5965537A (en) * 1997-03-10 1999-10-12 Basf Aktiengesellschaft Dolastatin 15 derivatives with carbonyl and heterocyclic functionalities at the C-terminus
US6103698A (en) * 1997-03-13 2000-08-15 Basf Aktiengesellschaft Dolastatin-15 derivatives in combination with taxanes
US6143721A (en) * 1997-07-18 2000-11-07 Basf Aktiengesellschaft Dolastatin 15 derivatives
US6015790A (en) * 1997-10-06 2000-01-18 Basf Aktiengesellschaft Methods and compositions for treating rheumatoid arthritis
US5985837A (en) * 1998-07-08 1999-11-16 Basf Aktiengesellschaft Dolastatin 15 derivatives
US6395897B1 (en) 1999-03-02 2002-05-28 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Nitrile compounds useful as reversible inhibitors of #9 cathepsin 5
US6420364B1 (en) 1999-09-13 2002-07-16 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compound useful as reversible inhibitors of cysteine proteases
AU775373B2 (en) 1999-10-01 2004-07-29 Immunogen, Inc. Compositions and methods for treating cancer using immunoconjugates and chemotherapeutic agents
US7018642B2 (en) 2001-04-27 2006-03-28 The Procter & Gamble Company Compounds, compositions, and methods for controlling biofilms
AU2002359792A1 (en) * 2001-12-18 2003-06-30 Proteologics, Inc. Methods and compositions for the inhibition of viral release
WO2003072754A2 (en) * 2002-02-27 2003-09-04 The Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Conjugates of ligand, linker and cytotoxic agent and related compositions and methods of use
WO2006013552A2 (en) 2004-08-02 2006-02-09 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Articles of peptide nanostructures and method of forming the same
CA2607940C (en) 2005-05-18 2009-12-15 Aegera Therapeutics Inc. Bir domain binding compounds
EP1924245A2 (en) * 2005-08-19 2008-05-28 Government of the United States of America, Represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Topical formulations of histone deacetylase inhibitors and methods of using the same
EP1973928A2 (en) * 2005-10-11 2008-10-01 Ramot at Tel-Aviv University Ltd. Self-assembled fmoc-ff hydrogels
US8163792B2 (en) 2006-05-16 2012-04-24 Pharmascience Inc. IAP BIR domain binding compounds
JP5452223B2 (ja) * 2006-07-24 2014-03-26 テトラロジック ファーマシューティカルズ コーポレーション Ｉａｐ阻害剤
CN101674835B (zh) * 2007-04-12 2013-12-11 台湾神隆股份有限公司 制备加兰他敏的方法
UY32099A (es) 2008-09-11 2010-04-30 Enanta Pharm Inc Inhibidores macrocíclicos de serina proteasas de hepatitis c
US8283372B2 (en) 2009-07-02 2012-10-09 Tetralogic Pharmaceuticals Corp. 2-(1H-indol-3-ylmethyl)-pyrrolidine dimer as a SMAC mimetic
SG10201501095WA (en) 2010-02-12 2015-04-29 Pharmascience Inc Iap bir domain binding compounds
CA2822556A1 (en) 2010-12-30 2012-07-05 Enanta Pharmaceuticals, Inc Macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors
CN103380132B (zh) 2010-12-30 2016-08-31 益安药业 菲啶大环丙型肝炎丝氨酸蛋白酶抑制剂
US10201584B1 (en) 2011-05-17 2019-02-12 Abbvie Inc. Compositions and methods for treating HCV
EA201391756A1 (ru) * 2011-05-27 2014-05-30 Амбркс, Инк. Композиции, содержащие, способы, включающие, и применение производных доластатина, связанных с неприродными аминокислотами
WO2015103490A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 Abbvie, Inc. Solid antiviral dosage forms
MX2024002571A (es) 2021-09-03 2024-03-20 Toray Industries Composicion farmaceutica para tratamiento y/o prevencion de cancer.

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816444A (en) * 1987-07-10 1989-03-28 Arizona Board Of Regents, Arizona State University Cell growth inhibitory substance
US4879278A (en) * 1989-05-16 1989-11-07 Arizona Board Of Regents Isolation and structural elucidation of the cytostatic linear depsipeptide dolastatin 15
DK0934950T3 (da) * 1991-08-09 2002-07-29 Teikoku Hormone Mfg Co Ltd Tetrapeptidderivat
CZ292612B6 (cs) * 1992-05-20 2003-11-12 Abbott Gmbh & Co. Kg Peptid s protirakovinnou aktivitou, jeho použití a farmaceutický prostředek s obsahem takového peptidu
US5530097A (en) * 1994-08-01 1996-06-25 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Human cancer inhibitory peptide amides
US5504191A (en) * 1994-08-01 1996-04-02 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Human cancer inhibitory pentapeptide methyl esters

Also Published As

Publication number Publication date
HUP9801910A3 (en) 1999-06-28
ATE224910T1 (de) 2002-10-15
IL122215A (en) 2001-08-26
DK0871656T3 (da) 2003-01-27
AU725164B2 (en) 2000-10-05
SK165397A3 (en) 1998-10-07
DE69623472T2 (de) 2003-08-21
NO975710D0 (no) 1997-12-05
NO975710L (no) 1998-02-02
MY124487A (en) 2006-06-30
US5831002A (en) 1998-11-03
PT871656E (pt) 2002-12-31
CA2219819A1 (en) 1996-12-19
HU228071B1 (hu) 2012-09-28
UA46775C2 (uk) 2002-06-17
CZ376397A3 (cs) 1998-06-17
PL185763B1 (pl) 2003-07-31
EP0871656B1 (en) 2002-09-25
ES2188759T3 (es) 2003-07-01
CN1182154C (zh) 2004-12-29
JPH11504652A (ja) 1999-04-27
CN1187198A (zh) 1998-07-08
RO118953B1 (ro) 2004-01-30
UA46776C2 (uk) 2002-06-17
DK0832104T3 (da) 2003-01-06
HU228073B1 (hu) 2012-09-28
KR19990022582A (ko) 1999-03-25
PL185762B1 (pl) 2003-07-31
PL323723A1 (en) 1998-04-14
TR199701545T1 (xx) 1998-04-21
DE69623992D1 (de) 2002-10-31
TR199701544T1 (xx) 1998-03-21
IL122216A0 (en) 1998-04-05
CA2219818C (en) 2008-05-20
NZ310443A (en) 1999-10-28
SI0871656T1 (en) 2003-08-31
ZA964710B (en) 1997-12-08
CN1187199A (zh) 1998-07-08
BR9609423A (pt) 1999-06-29
IL122216A (en) 2002-02-10
IL122215A0 (en) 1998-04-05
MX9709146A (es) 1998-03-31
BG102125A (en) 1998-09-30
DE69623472D1 (de) 2002-10-10
NO317670B1 (no) 2004-11-29
EP0832104B1 (en) 2002-09-04
CZ376597A3 (cs) 1998-06-17
WO1996040751A1 (en) 1996-12-19
WO1996040752A1 (en) 1996-12-19
ZA964711B (en) 1997-12-08
AR003136A1 (es) 1998-07-08
NO975711D0 (no) 1997-12-05
NO975711L (no) 1998-01-30
HUP9801817A3 (en) 1999-06-28
DE69623992T2 (de) 2003-05-22
TW508357B (en) 2002-11-01
AR003427A1 (es) 1998-08-05
NO318384B1 (no) 2005-03-14
HUP9801817A2 (hu) 1998-11-30
BR9609424A (pt) 2000-03-28
CO4700526A1 (es) 1998-12-29
NZ310444A (en) 1999-11-29
JP3957751B2 (ja) 2007-08-15
PL323726A1 (en) 1998-04-14
SI0832104T1 (en) 2003-08-31
AU725170B2 (en) 2000-10-05
KR100437986B1 (ko) 2004-09-18
MY119042A (en) 2005-03-31
PT832104E (pt) 2002-12-31
KR19990022583A (ko) 1999-03-25
HRP960257A2 (en) 1998-02-28
CN1182153C (zh) 2004-12-29
HRP960277A2 (en) 1997-10-31
CA2219818A1 (en) 1996-12-19
TW424096B (en) 2001-03-01
EP0832104A1 (en) 1998-04-01
ES2186783T3 (es) 2003-05-16
MX9709147A (es) 1998-03-31
EP0871656A1 (en) 1998-10-21
JPH11504653A (ja) 1999-04-27
KR100437985B1 (ko) 2004-09-18
AU6124296A (en) 1996-12-30
ATE223431T1 (de) 2002-09-15
JP4221062B2 (ja) 2009-02-12
HUP9801910A2 (hu) 1999-01-28
CZ293683B6 (cs) 2004-07-14
AU6124196A (en) 1996-12-30
CA2219819C (en) 2008-05-20
BG102152A (en) 1998-09-30
CO4700527A1 (es) 1998-12-29
RO119783B1 (ro) 2005-03-30
SK282466B6 (sk) 2002-02-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ293682B6 (cs) Peptid, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje
US5502032A (en) Peptides, the preparation and use thereof
IL166853A (en) Antineoplastic peptides, their preparation and various uses thereof
US8440626B2 (en) Antineoplastic peptides
AU775090B2 (en) Antineoplastic peptides
SK165497A3 (en) Peptides, preparation method thereof and pharmaceutical composition containing the same

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20150603