SK282467B6 - Peptidy, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie - Google Patents

Peptidy, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie Download PDF

Info

Publication number
SK282467B6
SK282467B6 SK1654-97A SK165497A SK282467B6 SK 282467 B6 SK282467 B6 SK 282467B6 SK 165497 A SK165497 A SK 165497A SK 282467 B6 SK282467 B6 SK 282467B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
alkyl
optionally substituted
nitro
independently selected
cyano
Prior art date
Application number
SK1654-97A
Other languages
English (en)
Other versions
SK165497A3 (en
Inventor
Andreas Haupt
Franz Emling
Cynthia A. Romerdahl
Original Assignee
Basf Aktiengesellschaft
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Basf Aktiengesellschaft filed Critical Basf Aktiengesellschaft
Priority claimed from PCT/EP1996/002393 external-priority patent/WO1996040752A1/en
Publication of SK165497A3 publication Critical patent/SK165497A3/sk
Publication of SK282467B6 publication Critical patent/SK282467B6/sk

Links

Landscapes

  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Peptidy všeobecného vzorca (I) R1R2N - CHX - CO - A - B - D - E - (F)t-K, kde znamená R1 metyl, etyl alebo izopropyl, R2 vodík, metyl alebo etyl, R1-N-R2 spolu pyrolidínový kruh, A zvyšky Val, Ile, Leu, 2-terc-butylglycyl, 2-etylglycyl, norleucyl alebo norvalyl, B zvyšky N-metylvalyl, N-metylleucyl, N-metylizoleucyl, N-metylnorvalyl, N-metylnorleucyl, N-metyl-2-terc-butylglycyl, N-metyl-3-terc-butylalanyl alebo N-metyl-2-etylglycyl, D zvyšky pro, 3,4-dehydroprolyl, 4-fluórprolyl, 4,4-difluórprolyl, azetidín-2-karbonyl, homoprolyl, 3-metylprolyl, 4-metylprolyl, 5-netylprolyl alebo tiazolidín-4-karbonyl, E 3,4-dehydroprolyl, 4-fluórprolyl, 3-metylprolyl, 4-metylprolyl, azetidín-2-karbonyl alebo 4,4-difluórprolyl, F zvyšky Val, 2-terc-butylglycyl, Ile, Leu, 2-cyklohexylglycyl, norleucyl, norvalyl, neopentylglycyl, Ala, beta-Ala alebo aminoizobutyroyl, X alkyl, cyklopropyl alebo cyklopentyl, t 0 alebo 1, K alkoxyskupinu, benzyloxyskupinu alebo skupinu R5-N-R6, alebo ich soli s fyziologicky vhodnými kyselinami, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie v medicíne, zvlášť na ošetrovanie onkologických ochorení a nádorov cicavcov.ŕ

Description

Oblasť techniky
Predložený vynález sa týka peptidov, farmaceutického prostriedku, ktorý ich obsahuje, a ich použitia na ošetrovanie onkologických ochorení a nádorov cicavcov.
Doterajší stav techniky
Je známe, že peptidy izolované z morských zdrojov ako Dolastatín-10 (americký patentový spis číslo 4 816 444) a Dolastatín-15 (európsky patentový spis číslo EP-A-398558) majú veľkú aktivitu ako inhibítory rastu buniek (Biochem Pharmacology 40, č. 8, str. 1859 až 1864,1990; J.Natl.Cancer Inst. 85, str. 483 až 488,1993 a tam uvedené odkazy na literatúru). Na základe zaujímavých výsledkov pri pokusoch s nádorovými systémami in vivo, sa uskutočňujú v súčasnosti ďalšie preklinické hodnotenia týchto prírodných produktov na iniciáciu klinických štúdií pre chorých na rakovinu.
Prírodné produkty majú však ten nedostatok, že sú zle rozpustné vo vodných rozpúšťadlách a investičné náklady na ich syntézu sú vysoké.
Vynález sa týka nových peptidov a ich derivátov, ktoré predstavujú zlepšený terapeutický potenciál na ošetrovanie neoplastových ochorení v porovnaní s Dolastatínom-15. Okrem toho je možné nové peptidy podľa vynálezu ľahko syntetizovať spôsobom ďalej podrobne opísaným.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu sú peptidy všeobecného vzorca (I)
R’R2N - CHX - CO - A - B - D - E - (F)t-K (I), kde znamená
R1 metyl, etyl alebo izopropyl,
R2 vodík, metyl alebo etyl,
R’-N-R2 spolu pyroilidínový kruh,
A zvyšky valyl, izoleucyl, leucyl, 2-terc-butylglycyl, 2-etylglycyl, norleucyl alebo norvaiyl,
B zvyšky N-metylvalyl, N-metylleucyl, N-metylizoleucyl, N-metylnorvalyl, N-metylnorleucyl, N-metyl-2-terc-butylglycyl, N-metyl-3-terc-butylalanyl alebo N-metyl-2-etylglycyl,
D zvyšky prolyl, 3,4-dehydroprolyl, 4-fluórprolyl, 4,4-difluórprolyl, azetidín-2-karbonyl, homoprolyl, 3-metylprolyl, 4-metylprolyl, 5-metylprolyl alebo tiazolidín-4-karbonyl,
E 3,4-dehydroprolyl, 4-fluórprolyl, 3-metylprolyl, 4-metylprolyl, azetidín-2-karbonyl alebo 4,4-difluórprolyl,
F zvyšky valyl, 2-terc-butylglycyl, izoleucyl, leucyl, 2-cyklohexylglycyl, norleucyl, norvaiyl, neopentylglycyl, alanyl, B-alanyl alebo aminoizobutyroyl,
X alkyl výhodne s 2 až 5 atómami uhlíka, cyklopropyl alebo cyklopentyl, t znamená 0 alebo 1 a
K alkoxyskupinu výhodne s 1 až 4 atómami uhlíka, benzyloxyskupinu alebo aminoskupinu všeobecného vzorca R5-N-R6, kde znamená
R5 vodík alebo hydroxyskupinu alebo CM-alkoxyskupinu alebo benzyloxyskupinu, pripadne substituovanú až dvoma substituentami od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3) nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, C|^alkoxyskupinu, halogén, Cwalkyl, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo R5 znamená fenyloxyskupinu, prípadne substituovanú až dvoma substitu entmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, C1.4alkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2,
R6 vodík alebo CMzalkyl, pripadne substituovaný aspoň jedným atómom fluóru, alebo znamená -(CH3)2CN, -C(CH3)2CCH, -C(CH3)2C=CH2, -C(CH3)2CH2OH, -C(CH3)2CH2CH2OH alebo -(CH2)„C3.7cykloalkyl, kde v znamená 0, 1 alebo 2 a ktorý je prípadne substituovaný metylom, alebo znamená norefedryl, norpseudoefedryl, chinolyl, pyrazyl, adamantyl, -CH2-benzimidazolyl, -CH2-adamantyl, α-metylbenzyl, a-dimetylbenzyl, -(CH2),fenyl, kde v znamená 0, 1, 2 alebo 3 a ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, Ct. 4alkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, C1J(alkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr a COONHZ, alebo znamená -(CH^nJiaftyl, kde m znamená 0 alebo 1 a ktorý je pripadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, C1J(alkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, Ci^alkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená -(CH2)wbenzhydryl, kde w znamená 0,1 alebo 2 a ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, Cualkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená bifenyl, ktorý je pripadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená pyridyl, ktorý je pripadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, Cm-alkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená pikolyl, ktorý je pripadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená -CH2-CH2-pyridyl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkyl-sulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, Cualkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená benzotiazolyl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená benzoizotíazolyl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkyl-sulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2,
SK 282467 Β6
COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONHj, alebo znamená benzopyrazolyl, ktoiý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená benzooxyzolyl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, Cb4alkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, Cwalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená -(CH2)m-fluorenyl, kde m znamená 0 alebo 1, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkyl-sulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená pyrimidyl, ktorý je pripadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, Cwalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, Cwalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená -(CH2)m-indanyl, kde m znamená 0 alebo 1, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma subtituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CFj, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená -(CH2CH2O)yCH3, kde y znamená 0, 1, 2, 3, 4 alebo 5, alebo znamená -(CH2CH2O)yCH2CH3, kde y znamená 0, 1, 2, 3, 4 alebo 5, alebo znamená -NH-C6H3, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená -NCH3-C6H3, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená -NH-CH2-C5H5, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená -NCH3-CH2-C6H5, ktorý je prípadne subtituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená päťčlenný heteroaryl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, tiometyl, tioetyl, pikolyl, acetyl, C3.6cykloalkyl, tiofenyl, CH2COOEt, C3.4alkylén vytvárajúci bicyklický systém s heterocyklom, fenyl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho nitroskupinu, CF3, kyanoskupinu, halogén alebo CMalkyl, a ďalej zahŕňajúceho benzyl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho nitroskupinu, CF3, halogén, CMalkyl, CMalkyl-sulfonyl, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, CMdialkyl-aminoskupinu, alebo znamená päťčlenný -CHR7-hetero-aryl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, kyanoskupinu, halogén, COOMe, COOEt, COOiPr a COONH2, CMalkyl, CMalko-xyskupinu, fenyl, benzyl, naftyl alebo CMalkylsulfonyl, pričom R7 znamená vodik, CMalkyl s priamym alebo s rozvetveným reťazcom alebo benzyl, alebo ich soli s fyziologicky vhodnými kyselinami. Vynález sa tiež týka farmaceutického prostriedku, ktorý tieto peptidy všeobecného vzorca (I) obsahuje spolu s farmaceutický vhodnými nosičmi, a ich použitia na ošetrovanie onkologických ochorení a nádorov cicavcov.
Ako päťčlenný -CHR7-heteroaryl sa napríklad uvádzajú nasledujúce zvyšky:
Ako päťčlenný heteroaryl sa napríklad uvádzajú nasledujúce zvyšky:
Ako zoskupenie Rs-N-R6 sa napríklad uvádzajú nasledujúce skupiny
-Ό /“λ r~\ ~\_7S -Ν__/=Ο
r~\ 4o
~NvJ
Výhodné sú peptidy všeobecného vzorca (I), kde znamená
R1 metyl alebo etyl,
R2 vodík, metyl alebo etyl,
A zvyšky valyl, izoleucyl alebo 2-terc-butylglycyl,
B zvyšky N-metylvalyl, N-metylizoleucyl alebo N-metyl-2-terc-butylglycyl,
D zvyšky prolyl, 3,4-dehydroprolyl, 4-fluórprolyl, 3-metylprolyl alebo azetidín-2-karbonyl,
E zvyšky 3,4-dehydroprolyl, 4-fluórprolyl, 3-metylprolyl alebo azetidín-2-karbonyl,
F zvyšky D-valyl, 2-terc-butylglycyl, D-izoleucyl, D-leucyl alebo aminoizobutyroyl,
X -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CH(CH3)CH2CH3;
t znamená 0 alebo 1 a
K výhodne znamená
-OC(CH3)3, -NH2, -NH-CMj-alkyl, -NH-CM-cykloalkyl, -NH-[3,3,0]-bicyklooktyl, norefedryl, norpseudoefedryl, -NH-chinolyl, -NH-pyrazyl, -NH-CH2-benzimidazolyl, -NH-adamantyl, -NH-CH2-adamantyl, -NH-CH(CH3)-fenyl,
-NH-C(CH3)2-fenyl, -N(CM-alkoxy)CM-alkyl, -N(C1.4-alkoxy)-CH2-fenyl, -N(CM-alkoxy)-fenyl, -N(CH3)OBzl, -NH-(CH2)v-fenyl (v=0,l ,2,3), -NH-(CH2)mnaftyl (m=0 alebo l),-NH-(CH2)w-benzhydryl (w=0,l alebo 2),
-NH-bifenyl, -NH-pyridyl, -NH-CH2-pyridyl, -NH-CH2-CH2-pyridyl, -NH-benzotiazolyl, -NH-benzoizotiazolyl, -NH-benzopyrazolyl, -NH-benzoxazolyl, -NH-(CH2)m-fluorenyl (m=0,l), -NH-pyrimidyl, -NH-(CH2)m-indanyl (m=0,l), -NH-(CH2CH2O)y-CH3 (y=0,l,2,3,4,5), -NH-(CH2CH2O)y-CH2CH3 (y=0,l,2,3,4,5), -NH-päťčlenný heteroaryl, vyššie charakterizovaný, -NH-CHR7-päťčlenný heteroaryl, vyššie charakterizovaný, pričom R7 znamená vodík, C].5alkyl s priamym alebo s rozvetveným reťazcom alebo K znamená zvyšok
Predovšetkým K znamená zvyšok
-NHCHj, -NHCHjCHj, -NHÍCHiKHj, -NHÍCHjjjCHj, -NH(CH2>CHj, -NH(CH2)sCH3, -NH(CH2)ťCH3, -NH(CH2>CH3, -NHCH(CHj)2, -NHCH(CH3)CH2CHj, -NHCHCCHílCHiCHŕHj, -NHCHfCHŕH^, -NHCCHjCHCHjjz, -NHC(CH3)j, -NHCHfCH^HjjCHjCHjCHj, -NHCH(CH3)CH(CH3h, -NHCH(CH2CH3)CH(CH3)2, -NHCHCCHjHCHj),,
-NH-cyklopropyl, -NH-cyklobutyl, -NH-cyldopentyl, -NH-cykWiexyL -NH-cykloheptyl, -NH-cyklooktyl, -NH-bicyklo[33,0]oktyl, -NfCHjjOCHa, -NfCHjjOCHíH,, -NjCHjjOCHiCHjCHj, -NfCHjjOCHÍCHah, -NíCHjCHjfOCH,, -N/CHzCHíXXľHjCH^ -N(CH(CH3);)OCHj, -NfCHjJOCHAHs, -NÍOCHjjCHj-CíHj, -N(CH3XX^Hä -NH-CHrCelk -NHfCHjj^s, -NHfCHjjjCeHs -NHCHÍCHjjCsH,, -NHCfCHjjŕJfs, -NHCíCIIjJjCIIjCIIj, -NHQCHjXCHŕH^, -NHCHfCHjjCHfOHjCÄ
-NHCHrcyklohexyl, -NH-CHjCF,, -NHCH(CH2Fh, -NHQCH^HjCHjOH, -Nl -NHC(CH3hCH(CH3)2,
-NHC(CHjiCN, -NHQCHaýCCH, -NHQCHjhC-CHí, norefedryl, norpseudoefediyl, -NH-chinolyl, -NH-pyrazyl,
-NH-damantyl(l), -NH-adamantyl(2), -NH-CHradamantyl, -NH-CHrnaítyi, -NH-benzhydryl, -NH-bifenyl, -NH-pyridyl, -NH-pikolyl, -NH-CHj-CHj-pyŕidyl, -NH-benzotiazolyl, -NH-benzoizotiazolyl, -NH-benzopyrazolyl, -NH-benzoxaznlyl, -NH-fluorenyl, -NH-pyrimidyl, -NH-tiazo1yl(2), -NH-izoxazn1yl(3), -NH-CH2-fiiranyl(2), -NH-(3-metyl)Í2Oxazolyl(5), -NH-(3-metyl)Í2ntia2Dlyl(5), -NH-(2-trifluónnetyi)-tiadiazolyl(5), -OC(CH3ý, -NH-CHr(4-metyl)tiazolyl(2), -NH-CH2-tienyl(2), -NlI-CIIr(5-nKtyl)ticny1(2), -NH-(2-metyl)tiadiazolyX5), -NH-(2-cyklopropyl)tiadiazolyl(5), alebo K znamená zvyšok vzorca
Uvedené príklady vynález iba objasňujú, ale ho však neobmedzujú.
Peptidy všeobecného vzorca (I) sa skladajú z L-aminokyselín, F môže však znamenať takisto D-aminokyselinu.
Peptidy všeobecného vzorca (I) môžu byť vo forme soli s fyziologicky vhodnými kyselinami, ako sú napríklad kyselina chlorovodíková, citrónová, vínna, mliečna, fosforečná, metánsulfónová, octová, mravčia, maleínová, fumarová, jablčná, jantárová, malónová, sírová, L-glutamová, L4
SK 282467 Β6
-asparágová, pyrohroznová, muková, benzoová, glukuronová, šťaveľová, askorbová a acetylglycín.
Peptidy všeobecného vzorca (I) je možné pripravovať o sebe známymi spôsobmi z chémie peptidov. Napríklad sa môžu postupne skladať z aminokyselín alebo sa môžu získať viazaním vhodných malých peptidových fragmentov. Pri postupnom skladaní sa vychádza z C zakončení peptidového reťazca, ktorý sa postupne predlžuje vždy o jednu aminokyselinu. Pri kopulácii fragmentov je možné viazať spolu fragmenty rôznej dĺžky, pričom sa takéto fragmenty získajú postupným viazaním aminokyselín alebo takisto kopuláciou fragmentov. Pri obidvoch týchto spôsoboch je nutné vzájomne viazať jednotky vytváraním amidovej väzby. Na tento účel sú vhodné tak chemické, ako aj enzymatické spôsoby.
Chemické spôsoby na vytváranie amidovej väzby podrobne opísal Mueller (Methoden der organischen Chemie, zväzok XV/2, str. 1 až 364, Thieme Verlag, Stuttgart, 1974; Stewart, Young, Solid Phase Peptide Synthesis, str. 31 až 34, 71 až 82, Pierce Chemical Company, Rockford,1984; Bodanszky, Klausner, Ondetti, Peptide Synthesis, str. 85 až 128, John Wiley and Sons, New York, 1976) a ktoré sú takisto opísané v iných základných publikáciách o chémii peptidov. Zvlášť výhodným je azidový spôsob, symetrický a zmesový anhydridový spôsob, in situ generované a predformované aktívne estery, použitie uretánu chráneného N-karboxyanhydridmi aminokyselín a vytváranie amidových väzieb s použitím systému kopulačná zložka/aktivátory, pričom sa zvlášť uvádzajú dicyklohexylkarbodiimid (DCC), diizopropylkarbodiimid (DIC), l-etoxykarbonyl-2-etoxy-l,2-dihydrochinolín (EEDQ), l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyljkarbodiimidhydrochlorid (EDCI), anhydrid n-propánfosfónovej kyseliny (PPA), N,N-bis(2-oxo-3-oxazolidinyljamidofosforylehlorid (ΒΟΡ-Cl), bromo-trispyrolidinofosfóniumhexafluórfosfát (PyBrop), difenylfosforylazid (DPPA) reagencie Castro (BOP, PyBop), O-baizotriazolyl-N,N,N',N'-tetrametyluróniovej soli (HBTU), 0-azabenzotriazolyl-N,N,N',N'-tetrametyluróniovej soli (HATU)> dietylfosforylkyanid (DEPCN), 2,5-difenyl-2,3-dihydro-3-oxo-4-hydroxytioféndioxid (Steglichovo reakčné činidlo, HOTDO) a l,l'-karbonyldiimidazol (CD1). Kopulačné činidlá je možné používať samotné alebo v kombinácii s aditívami, ako sú napríklad N, N-dimetyl-4-aminopyridín (DMAP) N-hydroxybenzotriazol (HOBt), N-hydroxysukcinimid (HOSu) alebo 2-hydroxypyridín.
Zatiaľ, čo je spravidla možné upustiť od chrániacich skupín pri enzymatickej syntéze peptidov, je prechodná ochrana reaktívnych skupín, ktoré sa nepodieľajú na amidovej väzbe, potrebná pre reakčné zložky pri chemickej syntéze. Pri chemickej syntéze peptidov sa dáva prednosť trom bežným spôsobom použitia chrániacich skupín: spôsobu používajúceho benzyloxykarbonyl (Z), t-butoxykarbonyl (Boe) a 9-fluorenylmetoxykarbonyl (Fmoc). V každom prípade sa používa chrániaca skupina na a-aminoskupine jednotky predlžujúcej reťazec. Podrobný prehľad skupín chrániacich aminoskupinu uvádza Mueller (Methoden der organischen Chemie, zväzok XV/1, str. 20 až 906, Thieme Verlag, Stuttgart, 1974).
Jednotky používané na vytváranie peptidového reťazca sa môžu nechávať reagovať v roztoku, v suspenzii alebo podobným spôsobom, aký opísal Murrifield (J. Amer. Chem. Soc. 85, str. 2149, 1963). Zvlášť vhodné sú spôsoby, pri ktorých sa peptidy vytvárajú postupne alebo kopuláciou fragmentov s použitím chrániacich skupín Z, Boe alebo Fmoc. Jedna z reakčných zložiek pri spôsobe, ktorý opísal Murrifield, sa viaže na nerozpustný polymémy nosič (označovaný tu tiež ako živica). Peptid sa spravidla vytvára postupne na polymémom nosiči s použitím chrániacich skupín Boe alebo Fmoc, rastúci peptidový reťazec je kovalentne viazaný C zakončením na nerozpustné živicové častice (obr. 1 a 2). Tento spôsob umožňuje odstrániť reagenčné činidlá a vedľajšie produkty filtráciou a tak je prekiyštalovanie medziproduktov zbytočné.
Chránené aminokyseliny sa môžu viazať na akýkoľvek vhodný polymér, ktorý musí byť iba nerozpustný v použitom rozpúšťadle a musí mať stálu fyzikálnu formu, ktorá uľahčuje filtráciu. Polymér musí obsahovať funkčnú skupinu, na ktorú sa môže pevne viazať prvá chránená aminokyselina kovalentnou väzbou. Na tento účel sú vhodné najrôznejšie polyméry: napríklad sa uvádza celulóza, polyvinylalkohol, polymetakrylát, sulfonovaný polystyrén, kopolymér chlórmetylovaného styrénu a divinylbenzénu (Murrifieldova živica), 4-metylbenzhydrylamínová živica (živica MBHA), fenylacetamidometylová živica (Pamživica), p-benzyloxybenzylalkoholová živica, benzhydrylamínová živica (BHA-živica), 4-(hydroxymetyl)benzoyloxymetylová živica, živica, ktorú opísal Breipohl a kol. (Tetrahedron Letters 28, str. 565, 1987, obchodný produkt spoločnosti BACHEM), 4-(2,4-dimetoxyfenylaminometyljfenoxyživica (obchodný produkt spoločnosti Novabiochem) alebo o-chlórtritylová živica (obchodný produkt spoločnosti Biohellas).
Na peptidovú syntézu v roztoku sa hodia všetky rozpúšťadlá, ktoré sú inertné pri reakčných podmienkach, zvlášť voda, Ν,Ν-dimetylformamid (DMF), dimetylsulfoxid (DMSO), acetonitril, dichlórmetán (DCM), 1,4-dioxán, tetrahydrofurán (THF), N-metyl-2-pyrolidón (NMP) a zmesi týchto rozpúšťadiel. Peptidovú syntézu na polymérnom nosiči je možné uskutočňovať vo všetkých inertných organických rozpúšťadlách, v ktorých sú použité deriváty aminokyselín rozpustné. Výhodné rozpúšťadlá ako N,N-dimetylformamid, dichlórmetán, N-mefyl-2-pyrolidón, acetonitril a dímetylsulfoxid a ich zmesi však spôsobujú nabobtnávanie živíc. Keď je syntéza ukončená, peptid sa od polymémeho nosiča odštiepi. Podmienky, pri ktorých je odštiepenie od rôznych živíc možné, sú opísané v literatúre. Najbežnejšie používané odštepovacie reakcie sú katalyzované kyselinami a paládiom, zvlášť je vhodné štiepenie v tekutom bezvodom hydrogénfluoride, v bezvodej trifluórmetánsulfónovej kyseline, v zriedenej alebo v koncentrovanej trifluóroctovej kyseline, paládiom katalyzované štiepenie v tetrahydroíuráne alebo v zmesi tetrahydrofiiránu a dichlórmetánu v prítomnosti slabej zásady, ako je morfolín alebo štiepenie v zmesiach kyseliny octovej a dichlórmetántrifluórmetanole. V závislosti od zvolených chrániacich skupín, sa môžu tieto skupiny udržať alebo pripadne odštiepiť za štiepiacich podmienok. Cenné môže byť tiež čiastočné odstránenie chrániacich skupín peptidu, ak sa majú uskutočniť určité derivatizačné reakcie. Peptidy dialkylované na N-zakončení sa môžu pripravovať:
a) kopuláciou príslušných Ν,Ν-dialkylamínových kyselín v roztoku alebo na polymémom nosiči,
b) redukčnou alkyláciou peptidu viazaného na živici v systéme dimetylformamid/1 % octová kyselina s NaCNBH3 a s príslušným aldehydom alebo ketónom,
c) hydrogenáciou peptidov v roztoku s prítomnosťou aldehydu alebo ketónu a paládia na uhlí.
Rôzne v prírode sa nevyskytujúce aminokyseliny podľa vynálezu sú obchodne dostupné alebo sa môžu syntetizovať z obchodne dostupných materiálov spôsobmi známymi zo stavu techniky. Obchodne dostupnými východiskovými materiálmi sú kyselina azetidín-2-karboxylová, 3-metyl-L-prolín, 5-metyl-L-prolín a skupinou Boe alebo Fmoc chránený 3,4-dehydroprolín (ACROS, NOVABIOCHEM,
BACHEM). Cis- a trans-4-fluórprolín je možné pripraviť spôsobom, ktorý opísal Panasik a kol. (N. Panasik, E.S. Eberhardt, A.S. Edison, D.R. Powell, R.T. Raines Int. J. Peptide Proteín Res. 44, str. 262 až 269,1994) z hydroxyprolínu.
Zlúčeniny podľa vynálezu môžu slúžiť na inhibíciu alebo na iné liečenie pevných nádorov (napríklad nádorov pľúcnych, prsných, hrubého čreva, prostaty, žlčníka, konečníka alebo endometriálnych nádorov) alebo hematologických ochorení (napríklad leukémia, lymphomas), podávaním zlúčenín cicavcom.
Špeciálnou prednosťou nových zlúčenín podľa vynálezu je, že sú odolnejšie proti enzymatickému rozkladu v porovnaní s Dolastatínom-15.
Podávanie môže byť bežnými farmaceutickými, výhodne onkologickými prostriedkami vrátane orálnych a parenterálnych prostriedkov, subkutánne, intravenózne, intramuskuláme a intraperitoneálne.
Zlúčeniny sa môžu podávať samotné alebo v podobe farmaceutických prostriedkov obsahujúcich zlúčeninu všeobecného vzorca (I) spolu s farmaceutický vhodným nosičom pre danú cestu podávania. Takýmito farmaceutickými prostriedkami môžu byť kombinované výrobky, môžu teda obsahovať iné terapeuticky účinné prísady.
Dávka podávaná cicavcom obsahuje nádor inhibujúci účinnú látku, ktorá závisí od bežných faktorov, ako je biologická aktivita použitej zlúčeniny, spôsob podania, vek, zdravotný stav a hmotnosť pacienta, povaha a druh príznakov, frekvencia ošetrovania, podávanie iných liekov a požadovaný účinok. Typickou dennou dávkou je asi 0,5 až 50 mg na kg telesnej hmotnosti pri orálnom podávaní a asi 0,05 až 20 mg pri parenterálnom podávaní.
Nové zlúčeniny podľa vynálezu je možné podávať vo forme bežných pevných alebo tekutých farmaceutických prostriedkov, teda potiahnutých alebo nepotiahnutých tabliet kapsúl, práškov, granúl, čapíkov alebo roztokov. Tie sa vyrábajú obvyklým spôsobom. Účinné látky môžu byť pritom kombinované s obvyklými farmaceutickými pomocnými látkami, ako so spojivami tabliet, plnidlami, chrániacimi činidlami, činidlami pre rozpadavosť tabliet, regulátormi tekutosti, zvláčňovadlami, rozpúšťadlami, látkami oneskorujúcimi účinok, antioxidantmi a alebo s nosnými plynmi (H. Sucker a kol. Pharmazeutische Technológie, Tliieme Verlag, Stuttgart, 1978). Takto podávané formy liečiv obsahujú normálne hmotnostné 1 až 90 % účinnej látky.
Nasledujúce príklady vynález objasňujú bez toho, aby ho obmedzovali. V príkladoch sú proteínové aminokyseliny uvádzané skratkami v bežnom 3-písmenovom kóde. Inými skratkami sú: Me2Val = Ν,Ν-dimetylvalín, MeVal - N-metylvalín.
Príklady uskutočnenia vynálezu
A. Všeobecné postupy
I. Peptidy podľa vynálezu všeobecného vzorca (I) sú buď syntetizované klasickou roztokovou syntézou štandardnými opísanými spôsobmi s použitím Z a Boe, alebo štandardnými spôsobmi syntézy v pevnom stave pomocou chrániacich skupin Boe a Fmoc.
a) Cyklus syntézy pre techniku chrániacich skupín Fmoc.
1. premytie DMF 1 x 1 min.
2. 20 % piperidínu v DMF 1 x 4 min.
3. 20 % piperidínu v DMF 1x16 min.
4. premytie DMF 5 x 1 min.
5. pridanie vopred aktivovanej chrániacej
1x61 min. 3 x 1 min.
x 1 min.
aminokyseliny (aktivovanej 1 ekvivalentom TBTU a 5 ekvivalentmi DIPEA v DMF) peptidová kopulácia
6. premytie DMF
7. ak nie je konverzia úplná, opakovanie kopulácie (späť k 5.)
8. premytie DMF
9. späť do 2.
Na kopuláciu aminokyselín po N-aminokyselinách sa používajú reakčné činidlá ΒΟΡ-Cl a PyBrop. Reakčné časy sa príslušne zväčšia zaradením dvojitých väzieb. Pri roztokovej syntéze je na tento spôsob kopulácie najvýhodnejšie použitie buď Boc-chránených (N-karboxy anhydridov) aminokyselin NCA, Z-chránených (N-karboxyanhydridov) aminokyselín NCA, alebo pivaloylchlorid ako kondenzačné činidlo.
II. Redukčná alkylácia N-zakončenia
Peptidová živica podľa Ala sa zbaví chrániacich skupin na N-zakončení (kroky 2 až 4 v Ala) a potom sa nechá reagovať s 3-násobným molámym nadbytkom aldehydu alebo ketónu v systéme dimetylformamid/1 % kyseliny octovej, s prísadou 3 ekvivalentov NaCNBHj. Po ukončení reakcie (negatívny Kaiser-test) sa živica premyje niekoľkokrát vodou, izopropanolom, dimetylformamidom a dichlórmetánom. Reduktívnu alkyláciu v roztoku je možné napríklad dosiahnuť reakciou peptidov zbavených chrániacich skupín na N-zakončení, peptidových fragmentov alebo aminokyselín so zodpovedajúcimi aldehydmi alebo ketónmi použitím NaCNBH3 alebo systému vodík paládium na uhli.
III. Spracovanie peptidových živíc získaných podľa odstavca Ib a II
Peptidová živica sa vysuší pri zníženom tlaku a potom sa spracuje 1,5 hodiny zmesou TFA/voda (95 : 5) (Wade, Tregear, Howard Florey Fmoc Workshop Manual, Melboume, 1985). Živica sa odfiltruje a premyje sa TFA a dichlórmetánom. Filtrát a premývacie roztoky sa skoncentrujú a peptid sa vyzráža prísadou dietyléteru. Po ochladení v ľadovom kúpeli sa zrazenina odfiltruje, vyberie sa do 30 % kyseliny octovej a lyofilizuje sa.
IV. Ak sa použije o-chlorotritylová živica (obchodný produkt spoločnosti Biohellas), mieša sa 1 hodinu pri laboratórnej teplote suspenzia peptidovej živice v systéme kyselina octová/ /trifluóretanol/dichlórmetán (1 :1 :3). Živica sa odfiltruje pri odsávaní a dôkladne sa premyje štiepiacim roztokom. Spojené filtráty sa skoncentrujú vo vákuu a spracujú sa éterom. Vyzrážaná pevná látka sa odstráni filtráciou alebo odstredením, premyje sa dietyléterom a vysuší sa pri zníženom tlaku.
V. Čistenie a charakterizácia peptidov
Čistenie sa uskutočňuje gélovou chromatografiou (SEPHADEX G-10, G-15(10% HOAc, SEPHADEX LH20/MeOH) a/alebo strednotlakovou chromatografiou (stacionárna fáza: HD-SIL C-8, 20-45 mikrometrov, 100 Angstrom; mobilná fáza: gradient s A = systém 0,1 % TFA/voda, B = systém 0,1 % TFA/MeOH), alebo preparatívnou chromatografiou HPLC (stacionárna fáza: Waters Delta-Pak C-18, 15 mikrometrov 100 Angstrom; mobilná fáza: gradient s A = systém 0,1 % TFA/voda, B = systém 0,1 % TFA/MeOH).
Čistota výsledných produktov sa zisťuje analytickou chromatografiou HPLC (stacionárna fáza: 100 2,1 mm
VYDAC C-18 300 Angstrom; mobilná fáza: acetonitrilvoda gradient, pufrované s 0,1 % TFA, 40 °C). Charakteri6 zácia bombardovania rýchlymi atómami hmotnostnou spektroskopiou a NMR spektroskopiou.
B. Špecifické postupy
Príklad 1 (SEQIDNO:1) Me2Val-Val-MeVal-Pro-L-azetidinyl-2-karboxamid
Necháva sa reagovať 0,53 g živice Fmoc-RINK (substitúcia 0,46 mmól/g), zodpovedajúca veľkosti dávky 0,25 mmól ako v Ala vždy s 0,4 mmól Fmoc-azetidín-2-karboxylovej kyseliny,
Fmoc-Pro-OH, Fmoc-MeVal-OH, Fmoc-Val-OH, Fmoc-Val-OH.
Aminokyselina nasledujúca po N-metylaminokyseline sa spojí dvojitou väzbou kopulačným činidlom ByProp. Po ukončení íteratívnych syntetických cyklov sa z peptidovej živice odstránia chrániace skupiny N-zakončenie (kroky 2 až 4 v Ala) a nechá sa ďalej reagovať s vodným roztokom formaldehydu ako v AII a vysuší sa pri zníženom tlaku. Výsledná živica sa odštiepi TFA ako v AIII. Surový produkt sa čistí preparatívnou strednotlakovou chromatografiou, čím sa získa 5 mg žiadaného čistého peptidu (10 až 40 % A počas 10'; 40 až 90 % A počas 200'). Zlúčenina sa ďalej charakterizuje bombardovaním rýchlymi atómami hmotnostnou spektroskopiou a NMR spektroskopiou. [M+H]+.
Príklad 2 (SEQ ID NO: 1)
Me2V al-V al-MeV al-Pro-3,4-dehydroprolylbenzylamid
a) Z-MeVal-Pro-OMe
V 250 ml suchého dichlórmetánu sa rozpustí 66,25 g (250 mmól) Z-Val-OH. Po pridaní 36,41 ml (262,5 mmól) trietylamínu sa reakčná zmes ochladí na teplotu -25 °C a pridá sa 32,27 ml (262,5 mmól) pivaloylchloridu. Po 2,5-hodinovom miešaní sa do reakčnej zmesi pridá 41,89 g (250 mmól) H-Pro-OMe x HCI v 250 ml dichlórmetánu a pri teplote 0 °C sa neutralizuje 36,41 ml (262,5 mmól) trietylamínu. V miešaní sa pokračuje 2 hodiny pri teplote -25 °C a cez noc pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa zriedi dichlórmetánom a dôkladne sa premyje nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (3x), vodou (lx), 5 % kyselinou citrónovou (3x) a nasýteným roztokom chloridu sodného. Organická fáza sa vysuší síranom sodným a odparí sa do sucha. Zvyšok (91,24 g) sa mieša cez noc s petroléterom a sfiltruje sa. Získa sa 62,3 g produktu.
b) H-MeVal-Pro-OMe
V 490 ml metanolu sa rozpustí 48,9 g (130 mmól) Z-MeVal-Pro-OMe. Po pridaní 10,9 ml (130 mmól) koncentrovanej chlorovodíkovej kyseliny a 2,43 g 10 % paládia na uhlí sa reakčná zmes hydrogenuje. Filtráciou a odparením do sucha sa získa 36,43 g produktu.
c) Z-Val-MeVal-Pro-OMe
V 110 ml dimetylformamidu sa mieša dva dni pri teplote 40 °C 18,1 g H-MeVal-Pro-OMe, 21,6 g (78 mmól) Z-Val-N-karboxyanhydridu a 22,8 ml (130 mmól) diizopropyletylamínu počas dvoch dní. Po odparení dimetylformamidu sa pridá dichlórmetán a organická fáza sa premyje nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (3x), vodou (lx), 5 % kyselinou citrónovou (3x) a nasýteným roztokom chloridu sodného. Organická fáza sa vysuší síranom sodným a odparí sa do sucha. Získa sa 29,3 g produktu v podobe viskózneho oleja.
d) H-Val-MeVal-Pro-OMe
V 230 ml metanolu sa rozpustí 29,3 g (61,6 mmól) Z-Val-MeVal-Pro-OMe. Po pridaní 1,15 g 10 % paládia na uhlí sa reakčná zmes hydrogenuje. Filtráciou a odparením do sucha sa získa 21,96 g produktu.
e) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe
V 610 ml dichlórmetánu sa rozpustí 15,29 g (61 mmól) Z-Val-OH a 21,96 g (61 mmól) H-Val-MeVal-Pro-OMe a ochladí sa na teplotu 0 °C. Po pridaní 8,16 ml (73,2 mmól) N-metylmorfolínu, 2,77 g (20,3 mmól) HOBt a 11,74 g (61 mmól) EDCI sa reakčná zmes mieša cez noc pri laboratórnej teplote, zriedi sa dichlórmetánom a dôkladne sa premyje nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (3x), vodou (lx), 5 % kyselinou citrónovou (3x) a nasýteným roztokom chloridu sodného. Organická fáza sa vysuší síranom sodným a odparí sa do sucha. Získa sa 31,96 g produktu.
f) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH
V 250 ml metanolu sa rozpustí 31,96 g (57 mmól) Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe a pridá sa 102,6 mi (102,6 mmól) 1 M roztoku hydroxidu lítneho vo vode. Po 24-hodinovom miešaní pri laboratórnej teplote sa pridá voda a metanol sa odparí pri zníženom tlaku. Vodná fáza sa extrahuje (3x) etylacetátom, nastaví sa na hodnotu pH 2 pri teplote 4 °C a extrahuje sa (3x) etylacetátom. Spojené organické extrakty sa vysušia síranom sodným a rozpúšťadlo sa odparí pri zníženom tlaku. Získa sa 30,6 g produktu v podobe bielej pevnej hmoty.
g) Me2Val-Val-MeVal-Pro-OH
Pripraví sa Ν,Ν-dimetylovaná tetrapeptidová kyselina zo Z-chránenej tetrapeptidovej kyseliny hydrogenáciou chrániacej Z-skupiny a následným pridaním vodného formaldehydového roztoku do hydrogenačnej zmesi, čím sa získa žiadaný produkt v takmer kvantitatívnom výťažku.
h) Me2V al-V al-MeV al-Pro-3,4-dehydroprolínmetylester
V 75 ml suchého dichlórmetánu sa rozpustí 3,38 g Me2Val-Val-MeVal-Pro-OH (7,27 mmól) a 0,925 g 3,4-dehydroprolínmetylesterhydrochloridu (7,27 mmól). Pri teplote 4 °C sa pridá 0,975 ml N-metylmorfolínu (8,72 mmól), 0,332 HOBt (2,43 mmól) a 1,4 g EDCI (7,27 mmól). Po miešaní cez noc pri laboratórnej teplote sa pridá dichlórmetán a organická fáza sa premyje nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (3x) a vodou (lx). Organická fáza sa extrahuje 5 % vodnou kyselinou citrónovou. Hodnota pH vodnej kyselinovej vrstvy sa nastaví na 8 1N roztokom hydroxidu sodného a extrahuje sa 4x dichlórmetánom. Po vysušení síranom sodným a odparení pri zníženom tlaku sa získa 2,82 g pentapeptidmetylesteru.
k) Me2Val-Val-MeVal-Pro-3,4-dehydroprolínbenzylamid
Roztok 2,0 g dehydroprolinu, obsahujúci pentapeptidmetylester v 20 ml metanolu, sa spracuje pri laboratórnej teplote so 4,6 ml 1 N roztoku hydroxidu lítneho. Po ukončení reakcie (kontrola chromatografiou na tenkej vrstve) sa pridá voda, metanol sa odparí a zlúčenina sa lyofilizáciou zbaví vody. Získaný biely prášok sa rozpustí v 36 ml dichlórmetánu a pridá sa 0,388 ml (3,55 mmól) benzylamidu. Po pridaní 0,476 ml N-metylmorfolinu (4,26 mmól), 0,163 g HOBt (1,19 mmól) a 0,684 g EDCI (3,55 mmól) pri teplote 4 °C sa reakčná zmes mieša cez noc pri laboratórnej teplote. Pridá sa dichlórmetán a organická fáza sa premyje 3x nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a vodou (lx). Organická vrstva sa extrahuje 2x 5 % kyselinou citrónovou. Kyslá vodná vrstva sa nastaví na hodnotu pH 9 5N roztokom hydroxidu sodného a extrahuje sa dichlórmetánom (4x). Po vysušení síranom sodným a odparení rozpúšťadla pri zníženom tlaku sa získa 600 mg surového pentapeptidbenzylamidu. 300 mg tohto surového peptidu sa čistí kvapalinovou strednotlakovou chromatografiou (0 až 10 % A za 5', 10 až 25 % A za 10', 25 až 90 % A za 450'), čim sa získa analyticky čistý produkt. Zlúčenina sa ďalej charakterizuje hmotnostnou spektrografiou pri bombardovaní rýchlymi atómami ([M+H]+= 639,4).
Nasledujúce zlúčeniny sa pripravili a môžu byť pripravené podľa príkladu 1 a 2:
57. Xaa Val Xab Pro Xcd
58. Xaa Val Xab Pro Xca
59. Xaa Val Xab Pro Xcf
60. Xaa Val Xab Pro Xcj
61. Xaa Val Xab pro Xeh
62. Xaa val xab Pro Xcl
63. Xaa Val Xab Pro Xck
64. xaa val Xab Xcn xco
65. Xaa Val Xab Xcn Xak
3. Xaa Val Xab Pro Xac
4. Xaa Val Xab Pro Xad
5. Xaa Val Xab pro Xae ¢. Xaa Val Xab Pro Xaf 7. Xaa Val Xab Pro Xaj g. Xaa Val Xab Pro Xah
9. Xaa Val Xab Pro Xai
10. Xaa Val Xab Pro Xak
11. Xaa Val Xab Pro xai
12. Xaa Val Xab Pro Xan
13. Xaa Val Xab Pro Xan
14. Xaa Val xab pro Xao
15. Xaa Val Xab Pro Xap
16. Xaa Val Xab Pro Xaq
17. Xaa Val Xab Pro Xar
18. Xaa Val Xab Pro Xas
19. Xaa Val Xab Pro Xat
20. Xaa Val Xab pro Xau
21. Xaa Val Xab Pro Xav
22. Xaa Val Xab Pro Xaw
23. Xaa Val Xab Pro Xax
24. Xaa Val Xab Pro Xay
25. Xaa Val xab Pro Xaz
26. Xaa Val Xab Pro Xba
27. Xaa Val Xab Pro Xbb
28. Xaa Val Xab Pre Xbc
29. Xbd Val Xab Pro Xar
30. Xbe Val Xab Pro Xar
31. Xaa Val Xab Pro Xcx
32. Xaa Val Xab Pro xcy
33. Xaa íle Xab Pro Xar
34. Xaa Xbh Xab Pro Xar
35. Xaa Val Xbf Pro Xar
36. Xaa Val Xbq Pro Xar
66. xaa val Xab Xca Xaq
67. Xaa Val Xab Xcs Xar
68. Xaa Val Xab xca Xay
69. xaa Val xab Xcp Xak
70. Xaa val Xab Xcp Xaq
71. Xcv Val Xab Xcp Xar
72. Xcx Val Xab Xcp Xay
73. Xaa val Xab Pro Xcn xer
74. Xaa Val Xab Pro Xcn Xcs
7S. Xaa Val Xab Pro Xcn Xct
76. Xaa Val Xab Pro Xcn Xcn
77. Xaa val Xab Pro Xcn Xcv
78. Xaa val xab Pro Xcq Xcr
79. Xaa Val Xab Pro Xcq Xcs
80. Xaa Val Xab Pro Xcq Xct
81. Xaa Val Xab Pro Xcq Xeti
82. Xaa Val Xab Pro Xcq xar
83. xaa val xab pro xgv xcx
84. Xaa Val Xab Pro Xcv Xcs
85. Xaa Val Xab Pro Xcv Xct
86. Xaa Val Xab Pro Xcv Xcq
87. Xaa Val Xab Pro Xcv Xcv
88. Xaa Val Xab Pro Xcv OCSj
89. Xaa Val Xab Pro Xcl
90. Xaa Val Xab pro Xat
91. xaa val xab Pro rez
92. Xaa Val Xab Pro Xda
Príklady MS-charakterizácie syntetizovaných nových zlúčenín sú uvedené v nasledujúcej tabuľke.
Príklad
Analýza MS pri bombardovaní rýchlymi atómami
Príklad Analýza MS pri bombardovaní rýchlymi atómami
č. (mol. hmotnosť (nameraná)]
61 627
64 546
88 552
B9 655
37. Xaa Val Xab Pro Xbi
38. Xaa Val Xab Pro xbk
39. Xaa val Xab Pro Xbl
40. Xaa Val Xab Pro Xbn
41. Xaa Val Xab pro Xbn 43. Xaa Val Xab Pro Xbo
43. Xaa Val Xab Pro Xbp
44. Xaa Val Xab Pro Xbq
45. Xaa Val Xab Pro Xbr
46. Xaa Val Xab Pro Xbs
47. Xaa Val Xab Pro Xbt
48. Xaa Val Xab Pro Xbu
49. Xaa Val Xab Pro Xbv
50. Xaa Val Xab Pro Xbv
51. Xaa Val Xab Pro Xbx
52. Xaa Val Xab Pro Xby
53. Xaa Val Xab Pro Xbs
54. Xaa Val Xab Pro Xca
55. Xaa Val Xab Pro Xcb
56. Xaa Val Xab Pro Xcc
Tabuľka I - Identifikácia sekvencie zlúčenín pripravených podľa príkladu 1 a 2
Zlúčenina č.
Sekvenčné ID-číslo
1-32, 35-63, 88-321
332
343
64-724
74-875
Symboly Xaa v súčte majú nasledujúci význam:
Xaa.· N,N-Dimetylvalín
Xab: N-Metylvalín
Xac:
Xad:
Xaf:
Xau:
Xags
Xaii:
Xai:
Xav:
Xaw:
X&x:
Xak;
Xal:
Xay:
Xazs
XM*.
Xam:
Xant 0 H3C
Xbb:
Xao:
Xbc:
Xap:
Xaq:
Xari
Xas:
Xat;
Xbd: N,N-dimetylizoleucin
Xbe: N,N-dimetyl-2-terc-butyl-glycín
Xbf: N-metylizoleucín
Xbg : N-metyl-2-terc-butyl-glycín
Xbh : 2-terc-butylglycín
F
O HjG
Xbk:
Xbl:
Xbtn:
Xba:
Xbo:
Xbp:
Xbq:
Xbr:
Xbs:
Xbt:
Xck: 3,4-dehydroprolín-adamantyl(l)-amid
Xck:
fcl.'
31 <-d«hydroproIín-adanjantyl( 1) -amid
Xcn: 3,4-dehydroprolín
Xco: 3,4-dehydroprolín amid
Xcp: L-tiazolidin-4-karbonyl
Xcq: 4-fluórprolín
Xcr:
Xcs:
XCt:
Xcu:
Xcvs
Xcw: Xcx;
Xcy:
Xcz:
O*.
''(A/m'^zxch3 xn'áY'n^-chj o h3c °
Xda:
Zlúčeniny podľa vynálezu sa môžu testovať na účinok proti rakovine bežnými spôsobmi napríklad vrátane ďalej opísaného spôsobu:
A. Metodológia in vitro
Cytotoxicita sa meria štandardnou metodológiou pre priľnuté bunkové línie, ako je „microculture tetrazolium test“ (MTT). Podrobnosti tejto skúšky sú opísané v literatú re (Alley, MC a kol. Cancer Research 48: str. 589 až 601, 1988). Na získanie kultúr pre mikrotitračné doštičky sa použijú exponenciálne rastúce kultúry nádorových buniek, ako sú bunky HT-29 colon-carcinoma alebo LX-pľúcneho nádoru. Bunky sa nasadia v množstve 5000 až 20 000 na jamku v 96-jamkových doštičkách (v 150 μΐ média) a kultivujú sa cez noc pri teplote 37 °C. Pridajú sa zlúčeniny v 10-násobnom zriedení 104Μ až 10'l0M. Bunky sa potom inkubujú 48 hodín. Na zistenie počtu živých buniek v každej jamke sa pridá farbivo MTT (50 μΐ roztoku 3 mg/ml 3-(4,5-dimetyltiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazóliumbromidu v solanke). Zmes sa inkubuje 5 hodín pri teplote 37 °C a potom sa do každej jamky pridá 50 μΐ 25 % SDS, pH 2. Po celonočnej inkubácii sa potom odpočíta absorbancia každej jamky pri 550 nm počítačom ELISA. Vypočítajú sa stredné hodnoty +/- SD dát z replikovaných jamiek, s použitím vzorca % T/C (% ošetrených živých buniek/kontrolných buniek).
OD ošetrených buniek
------------------------ x 1OD - t T/c OD kontrolných buniek
Koncentrácia skúšanej zlúčeniny, ktorá dáva hodnotu inhibície rastu T/C = 50 % je označovaná ako hodnota IC50.
Zlúčenina podlá príkladu
I 1 x 1O(
2 1 X 10’’
61 1 X 10'
64 1 x 101
88 1 x
89 1 x 10 i
B. Metodológia in vivo
Zlúčeniny podľa vynálezu sa skúšali ďalej v preklinických testoch na aktivitu in vivo, ktorá je indikatívna na klinické použitie. Takéto testy sa uskutočňujú na holých myšiach, ktorým sa transplantujú nádorové tkanivá, výhodne ľudského pôvodu, ako je to dobre známe v odbore. Skúšané zlúčeniny sa vyhodnocujú z hľadiska protinádorovej účinnosti po podaní myšiam so xenoimplantátom.
Ľudské prsníkové nádory (MX-1), ktoré rástli v atymickej holej myši sa transplantujú do novej hostiteľskej myši pomocou nádorových fragmentov s veľkosťou asi 50 nm. Deň transplantácie je dňom 0. Šesť až desať dní neskôr sa myši ošetria skúšanými zlúčeninami podávanými ako intravenózne injekcie v skupinách po 5 až 10 myší pri každej dávke. Zlúčeniny sa podávali každý druhý deň počas troch týždňov v dávkach 1 až 100 mg/kg telesnej hmotnosti. Priemery nádorov a telesná hmotnosť sa merali dvakrát týždenne. Objemy nádorov sa vypočítali z priemerov meraných posuvným meradlom a pre každú ošetrovanú skupinu sa vypočítajú objemy nádorov podľa vzorca (dĺžka x šírka2)/2 = mm3 objemu nádoru
Pre každú skupinu sa vypočítajú stredné objemy nádorov a zistia sa hodnoty T/C pre každú skupinu oproti neošetreným kontrolným nádorom.
Nové zlúčeniny majú dobré vlastnosti inhibície nádorov.
Priemyselná využiteľnosť
Peptid na výrobu farmaceutických prostriedkov na 0šetrovanie onkologických ochorení cicavcov.
SK 282467 Β6
Zoznam sekvencií (1) Všeobecné informácie
i) Prihlasovateľ
A. Adresát: BASF Aktiengesellschaft
B. Ulica: Carl-Bosch-Strasse 38
C. Mesto: Ludwigshafen
E. Štát: Nemecká spolková republika
F. ZIP: D-67056
G: Telefón: 0621/6048526
H: Telefax: 0621/6043123
1. Telex: 1762175170 ii) Názov vynálezu: Peptid a farmaceutický prostriedok, ktorý ho obsahuje iii) Počet sekvencií: 5 iv) Forma pre počítač
A. Typ média: Disketa 3,5 palca, 2 DD
B. Počítač: IBM AT-kompatibilný, 80286 procesor
C. Operačný systém: MS-DOS version 5,0
D. Software: WordPerfect
2. Informácia o SEQ ID.N0:I:
i) Charakteristiky sekvencie
A. Dĺžka: 5 aminokyselín
B. Typ: aminokyselina
D. Topológia: lineárna ii) Typ molekuly: peptid xi) Opis sekvencie: SEQ ID. NO: 1:
Xaa Val Xaa Pro Xaa
2. Informácia o SEQ ID. NO: 2:
i) Charakteristiky sekvencie
A. Dĺžka: 5 aminokyselín
B. Typ: aminokyselina
D. Topológia: lineárna ii) Typ molekuly: peptid xi) Opis sekvencie: SEQ ID. NO:2 :
Xaa íle Xaa Pro Xaa
2. Informácia o SEQ ID. NO:3 :
i) Charakteristiky sekvencie
A. Dĺžka: 5 aminokyselín
B. Typ: aminokyselina
D. Topológia: lineárna ii) Typ molekuly: peptid xi) Opis sekvencie: SEQ ID. NO:3 :
Xaa Xaa Xaa Pro Xaa
2. Informácia o SEQ ID. NO:4 :
i) Charakteristiky sekvencie
A. Dĺžka: 5 aminokyselín
B. Typ: aminokyselina
D. Topológia: lineárna ii) Typ molekuly: peptid xi) Opis sekvencie: SEQ ID. NO:4 :
Xaa Val Xaa Xaa Xaa
2. Informácie o SEQ ID. NO: 5 :
i) Charakteristiky sekvencie
A. Dĺžka: 6 aminokyselín
B. Typ: aminokyselina
D. Topológia: lineárna ii) Typ molekuly: peptid xi) Opis sekvencie: SEQ ID. NO:5 : Xaa Val Xaa Pro Xaa Xaa

Claims (4)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Peptidy všeobecného vzorca (I)
    R'R2N - CHX - CO - A - B - D - E - (F)t-K (I), kde znamená
    R1 metyl, etyl alebo izopropyl,
    R2 vodík, metyl alebo etyl,
    R'-N-R2 spolu pyroilidínový kruh,
    A zvyšky valyl, izoleucyl, leucyl, 2-terc-butylglycyl, 2-etylglycyl, norleucyl alebo norvalyl,
    B zvyšky N-metylvalyl, N-metylleucyl, N-metylizoleucyl, N-metylnorvalyl, N-metylnorleucyl, N-metyl-2-terc-butylglycyl,glycyl, N-metyl-3-terc-butylalanyl alebo N-metyl-2-etylglycyl,
    D zvyšky prolyl, 3,4-dehydroprolyl, 4-fluórprolyl, 4,4-difluórprolyl, azetidín-2-karbonyl, homoprolyl, 3-metylprolyl, 4-mctylprolyl, 5-metylproIyl alebo tiazolidín-4-karbonyl,
    E 3,4-dehydroprolyl, 4-fluórprolyl, 3-metylprolyl, 4-metylprolyl, azetidín-2-karbonyl alebo 4,4-difluórprolyl,
    F zvyšky valyl, 2-terc-butylglycyl, izoleucyl, leucyl, 2-cyklohexylglycyl, norleucyl, norvalyl, neopentylglycyl, a -lanyl, β-alanyl alebo aminoizobutyroyl,
    X alkyl výhodne s 2 až 5 atómami uhlíka, cyklopropyl alebo cyklopentyl, t znamená 0 alebo 1 a
    K alkoxyskupinu výhodne s 1 až 4 atómami uhlíka, benzyloxyskupinu alebo aminoskupinu všeobecného vzorca R-N-R6, kde znamená
    R5 vodík alebo hydroxyskupinu alebo C^-alkoxyskupinu alebo benzyloxyskupinu, prípadne substituovanú až dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3j nitroskupinu, Cualkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2,alebo R5 znamená fenyloxyskupinu, pripadne substituovanú až dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, C1.4alkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2,
    R6 vodík alebo Cn2alkyl, prípadne substituovaný aspoň jedným atómom fluóru, alebo znamená -(CH3)2CN, -C(CH3)2CCH, -C(CH3)2C=CH2, -C(CH3)2CH2OH, -C(CH3)2CH2CH2OH alebo -(CH2)vC3.7cykloalkyl, kde v znamená 0, 1 alebo 2 a ktorý je prípadne substituovaný metylom, alebo znamená norefedryl, norpseudoefedryl, chinolyl, pyrazyl, adamantyl, -CH2-benzimidazolyl, -CH2-adamantyl, d-metylbenzyl, d-dimetylbenzyl, -(CH2)vfenyl, kde v znamená 0, 1, 2 alebo 3 a ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, Ci. 4alkylsulfonyl, C|.4alkoxyskupinu, halogén, Cwalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr a COONH2, alebo znamená -(CHj^aífyl, kde m znamená 0 alebo 1 a ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, C1.4alkylsulfonyl, C|.4alkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená -(CH2)wbenzhydryl, kde w znamená 0,1 alebo 2 a ktorý je pripadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, Cl.4alkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, Cwalkyl, ktoiý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená bifenyl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, Cwalkyl, ktoiý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená pyridyl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, C1Jt-alkoxyskupinu, halogén, C^alky!, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená pikolyl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, Ci_4alkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená -CH2-CH2-pyridyl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, Ci.4alkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená benzotiazolyl, ktoiý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená benzoizotiazolyl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalko-xyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2,
    COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená benzopyrazolyl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená benzooxyzolyl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená -(CH2)m-fluorenyl, kde m znamená 0 alebo 1, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, Cj^alkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktoiý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená pyrimidyl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená -(CH2)m-indanyl, kde m znamená 0 alebo 1, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma subtituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMal-kyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, N(CH3)2, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená -(CH2CH2O)yCH3, kde y znamená 0, 1, 2, 3, 4 alebo 5, alebo znamená
    -(CH2CH2O)yCH2CH3, kde y znamená 0, 1, 2, 3, 4 alebo 5, alebo znamená -NH-QHs, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktoiý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená -NCH3-C6H3, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, CMalkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená -NH-CH2-C6H5, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, Cb 4alkylsulfonyl, Ci^al-koxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená -NCH3-CH2-C6H5, ktorý je prípadne subtituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, C3. 4alkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, halogén, CMalkyl, ktorý môže vytvárať cyklický systém, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, COOMe, COOEt, COOiPr alebo COONH2, alebo znamená päťčlenný heteroaiyl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, C(. 4alkylsulfonyl, CMalkoxyskupinu, tiometyl, tioetyl, pikolyl, acetyl, C3^cykloalkyl, tiofenyl, CH2-COOEt, C3.4alkylén vytvárajúci bicyklický systém s heterocyklom, fenyl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho nitroskupinu, CF3, kyanoskupinu, halogén alebo CMalkyl, a ďalej zahŕňajúceho benzyl, ktoiý je pripadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho nitroskupinu, CF3, halogén, CMalkyl. CMalkylsulfonyl, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, CMdialkylaminoskupinu, alebo znamená päťčlenný -CHR7-heteroaryl, ktorý je prípadne substituovaný jedným alebo dvoma substituentmi od seba nezávisle zvolenými zo súboru zahŕňajúceho CF3, nitroskupinu, kyanoskupinu, halogén, COOMe, COOEt, COOiPr a COONH2, CMalkyl, CMalkoxyskupinu, fenyl, benzyl, naftyl alebo C|.4alkylsulfonyl, pričom R7 znamená vodík, C]_salkyl s priamym alebo s rozvetveným reťazcom alebo benzyl, alebo ich soli s fyziologicky vhodnými kyselinami.
  2. 2. Peptidy všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, alebo ich soli na použitie v medicíne, zvlášť na ošetrovanie onkologických ochorení.
  3. 3. Farmaceutický prostriedok, vyznačuj úci sa t ý m , že obsahuje terapeuticky účinné množstvo peptidu všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1 a farmaceutický vhodný nosič.
  4. 4. Použitie peptidov všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1 na prípravu liečiva na ošetrovanie nádorov cicavcov.
SK1654-97A 1995-06-07 1996-06-03 Peptidy, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie SK282467B6 (sk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US42745395A 1995-06-07 1995-06-07
PCT/EP1996/002393 WO1996040752A1 (en) 1995-06-07 1996-06-03 Novel dolastatin derivatives, their preparation and use

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK165497A3 SK165497A3 (en) 1998-08-05
SK282467B6 true SK282467B6 (sk) 2002-02-05

Family

ID=23694939

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK1654-97A SK282467B6 (sk) 1995-06-07 1996-06-03 Peptidy, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie

Country Status (1)

Country Link
SK (1) SK282467B6 (sk)

Also Published As

Publication number Publication date
SK165497A3 (en) 1998-08-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0871656B1 (en) Dolastatin derivatives, their preparation and use
US5502032A (en) Peptides, the preparation and use thereof
US7662786B2 (en) Dolastatin 15 derivatives
US5939527A (en) Tetrapeptides as antitumor agents
IL166853A (en) Antineoplastic peptides, their preparation and various uses thereof
SK282467B6 (sk) Peptidy, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie

Legal Events

Date Code Title Description
PC4A Assignment and transfer of rights

Owner name: ABBVIE DEUTSCHLAND GMBH & CO. KG, WIESBADEN, DE

Free format text: FORMER OWNER: ABBOTT GMBH & CO. KG, WIESBADEN, DE

Effective date: 20141020

MM4A Patent lapsed due to non-payment of maintenance fees

Effective date: 20150603