PT94842B

PT94842B - Processo para a preparacao de uma composicao farmaceutica sob a forma de microparticulas de um copolimero de acido lactico e glicolico e incorporando como substancia activa um pamoato, tanato, estearato ou palmitato de um peptido natural ou sintetico

Info

Publication number: PT94842B
Application number: PT94842A
Authority: PT
Inventors: Piero Orsolini
Original assignee: Debiopharm Sa
Priority date: 1989-07-28
Filing date: 1990-07-27
Publication date: 1997-04-30
Also published as: NO903264D0; GB2234169A; IT9021019A1; AT397197B; DK180790D0; SE9002522D0; GR900100568A; PT94842A; DK180790A; FI97688C; ZA905654B; CH679207A5; BE1003093A3; LU87772A1; NL194858B; GB9015722D0; NL194858C; JPH0366625A; IT9021019A0; FR2650182A1

Description

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE UMA COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA SOB A FORMA DE MICROPARTÍCULAS DE UM COPOLÍMERO DE ÁCIDO

LÁCTICO E GLICÕLICO E INCORPORANDO COMO SUBSTÂNCIA ACTIVA UM ΡΑΜΟΑΤΟ, TANATO, ESTEARATO OU PALMITATO

DE UM PÉPTIDO NATURAL OU SINTÉTICO )

A presente invenção diz respeito a um processo para a preparação de uma composição farmacêutica que se apresenta sob a forma de micropartículas, à composição assim obtida e à sua utilização para a preparação de suspensões injectáveis.

A presente invenção tem mais precisamente por objecto um processo para a preparação de uma composição farmacêutica destinada à libertação prolongada e controlada de substância medica; mentosa, apresentando-se sob a forma de micropartículas de copolímero do ácido láctico e glicólico incorporando como ingrediente activo um pamoato, tanato, estearato ou palmitato de um péptido natural ou sintético, mais particularmente um péptido comportando entre 3 e 45 aminoácidos.

Diversas soluções foram propostas até hoje para a preparação de composições com libertação prolongada e controlada de

substâncias medicamentosas, utilizando a preparação de implantes biodegradáveis, a microencapsulação ou a preparaçao de matrizes porosas biodegradáveis apresentando-se, por exemplo, sob a forma de micropartículas de diversas dimensões. Com este objectivo pode-se citar a patente de invenção europeia EP-A-0052510 para a microencapsulação e as patentes de invenção europeia EP-A-0058481 ou norte-americana US-A-3. 976. 071 para a preparação de implantes ou de matrizes porosas biodegradáveis. Estas técnicas recorrem todas à dissolução prévia no seio de um dissolvente orgânico, do polímero ou copolímero biodegradável utilizado como suporte, eventualmente à dissolução da própria substância medicamentosa. Se, em tais casos, a dispersão do ingrediente activo no seio da massa biodegradável for satisfatória, encontra-se sempre o problema dos vestígios do dissolvente residual que podem comprometer a utilização de tais composições a título terapêutico. A escolha de dissolventes pouco tóxicos em que a eliminação activa de vestígios de dissolvente pode ser por vezes complexa e dispendiosa e pode conduzir a uma diminuição de pureza inaceitável do composto.

Foi igualmente proposta a mistura a seco, quer dizer sem dissolvente, de uma substância proteica (Bovine Serum Albumine) e de um copolímero biodegradável do ácido láctico e glicólico sob forma pulverulenta, seguida da compressão à temperatura de fusão da mistura obtida (J.D. Gresser e colab., Biopolymeric Controlled Released System Vol. II, p. 136). Esta técnica não

-3se revelou satisfatória, particularmente quanto ã homogeneidade da distribuição da substância proteica BSA no seio da massa.

Contra todas as previsões, descobriu-se que se pode superar estes diversos obstáculos apesar de se partir do mesmo tipo de polímeros ou copolímeros biodegradáveis e de péptidos naturais ou sintéticos tais como os octa-, nona-, ou decapeptidos, mais geralmente de péptidos comportando 3 a 45 aminoàcidos, mediante utilização do processo de acordo com a presente invenção. 0 processo objecto da presente invenção está definido na reivindicação 1.

De acordo com a presente invenção, utilizam-se os péptidos naturais ou sintéticos sob a forma de sais, mais precisamente sob a forma de pamoatos, tanatos, estearatos ou palmitatos, sendo o pamoato utilizado de preferência. Pode-se observar a este propósito que estes sais de péptidos são inssolúveis em água.

Os sais mencionados acima, assim como os copolímeros do ácido láctico (L- ou D,L- láctico) e do ácido glicólico, são utilizados sob forma pulverulenta, sob a forma de micropartículas de dimensões médias inferiores a cerca de 200 micra. Obtiveram-se bons resultados com micropartículas de copolímero da ordem dos 180 micra ou menos, podendo o sal peptídico ser de uma granulometria ainda mais reduzida. A mistura destes ingredientes afectua-se a seco em qualquer aparelho apropriado, por exemplo

um moinho de esferas, ã temperatura ambiente (cerca de 25°C) até mesmo a uma temperatura inferior, por exemplo compreendida entre 5 e 10°C. As proporções dos constituintes pulverulentes pode variar de modo esperado, por exemplo entre 0,1 e 15Z em peso do sal peptídico, em função dos efeitos terapêuticos pretendidos.

De acordo com a presente invenção, uma vez a mistura determinada devidamente homogeneizada, submete-se a uma compressão progressiva e, simultaneamente, a um aquecimento progressivo antes de se efectuar a extrusão. Estas duas operações, assim como o transporte da mistura para a zona de pré-compressão e de pré-aquecimento pode realizar-se com vantagem com um parafuso sem fim, convenientemente dimensionado. A taxa de compressão pode variar em função de numerosos factores tais como a geometria da aparelhagem ou a granulometria da mistura pulverulenta. Mais determinante a dominar é o pré-aquecimento e a sua evolução ã medida que a mistura avança : função da natureza dos compostos a tratar (copolímero, péptido) tenta-se manter um gradiente de temperatura cujo máximo é da ordem dos 80°C. A temperatura inicial ã qual se submete a mistura pulverulenta pode ser de 25°C, mais ou menos de acordo com os casos.

A mistura assim pré-comprimida e pré-aquecida é então submetida à extrusão, a uma temperatura mais geralmente compreendida entre cerca de 80°C e cerca de 100°C, sendo o limite superior deste intervalo ditado pela natureza da substância

medicamentosa (péptido) que convém não deteriorar. A extrusão pode efectuar-se a uma pressão variando fortemente, entre 50 e 2

500 kg/cm , sendo o essencial combinar a temperatura e a pressão de extrusão com a viscosidade do composto. Pressão e temperatura adequadas favorecem evidentemente, a perfeita homogeneização dos ingredientes, em particular a distribuição regular do sal peptídico no seio da massa do copolímero.

A extrusão propriamente dita efectua-se com um bico de forma e dimensões padrão, colocada no fim do trajecto do parafuso sem fim anteriormente referido. O arrefecimento do composto extrudido efectua-se mediante qualquer meio apropriado, ar ou gás estéril arrefecido ou mediante simples perda. de calor.

De acordo com a presente invenção, o produto de extrusão convenientemente arrefecido é então pulverizado a baixa temperatura, de preferência a uma temperatura inferior a 0°C, mesmo nitidamente mais inferior, -10 ou -30°C por exemplo. Utiliza-se com vantagem a pulverização criogénica, uma técnica já conhecida. Submete-se em seguida o produto assim pulverizado a uma selecção das micropartículas em função das suas dimensões médias, sendo então retiradas as de dimensões inferiores a 200 micra, de preferência inferiores ou iguais a 180 micra, de acordo com o processo da presente invenção. Esta separação das micropartículas pode efectuar-se, por exemplo, mediante peneiração. As micropartí cuias seleccionadas e reunidas estão então prontas para utilização

-6L,

De acordo com o processo da presente invenção, as etapas anteriormente descritas decorrem sucessivamente, sem tempo morto excessivo de uma fase para a outra. A vantagem deste processo é que todas as etapas se podem efectuar em contínuo encadeando-se uma após a outra, mediante simples transferência da mistura tratada.

De acordo com a presente invenção, como copolímero do ácido láctico e glicólico, utiliza-se qualquer tipo de copolímero biodegradável constituído sobre esta base, de preferência um copolímero do ácido L- ou D,L-láctico contendo entre 45 e 90° (mole) de radicais de ãcido láctico respeetivamente entre 55 e 10Z (mole) de radicais de ácido glicólico. Tais polímeros preparam-se facilmente de acordo com a literatura citada precedentemente ou podem obter-se junto do comércio especializado.

Tais péptidos, naturais ou sintéticos, assim incorporados no seio da massa do copolímero são de preferência sais de péptidos comportando entre 3 e 45 aminoácidos, mais particularmente sais de LH-RH (Luteinizing Hormone- Releasing Hormone), de somatostatina, de GH-RH (Growth Hormone- Releasing Hormone) ou da calcitonina, ou dos seus homólogos ou análogos sintéticos.

Mais particularmente, são pamoatos de LH-RH, ou da somatostatina ou de um dos seus homólogos ou análogos escolhidos entre

D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-OH,

I-1

D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Trp-NH₂,

I-1

D-Trp-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH₂,

I-1

D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH₂,

I-1

D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH₂, ι-r

AcPhe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH₂,

I-(

AcPhe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH₂, (piro) Glu-His-Trp-D-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-NHR^, (piro) Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-NHR-p (piro) Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH₂ ou (piro) Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Phe-Leu-Arg-Pro-Gly-NH₂ (o símbolo representa um radical alquilo inferior), nao sendo esta enumeração limitativa.

As micropartículas preparadas pelo processo de acordo com a presente invenção a partir dos ingredientes mencionados antes são então utilizadas, depois de uma esterilização adequada, para a preparação de suspensões injectáveis.

Os exemplos a seguir ilustram o processo de acordo com a presente invenção de modo mais pormenorizado sem contudo a limitar de modo algum.

Exemplo 1

Primeiramente trituram-se a baixa temperatura, 20 g de copolímero 50 : 50 (mole Z) do ácido D,L-láctico e glicólico sob a forma de grânulos da ordem de 3 a 5 mm de diâmetro e selecciona-se até à obtenção de micropartículas de dimensão média de 180 micra ou menos.

A esta massa pulverulenta adiciona-se 0,490 g de pamoato de D-Trp6-LH-RH (fórmula geral do péptido) :

[(piro) Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-Nl^] finamente pulverizado. 0 composto apresenta-se sob a forma de micropartículas de dimensão de cerca de 10 micra e de estrutura amorfa. Homogeneiza-se a mistura resultante à temperatura ambiente em um moinho.

Coloca-se em seguida a mistura homogeneizada em um aparelho equipado com um parafuso sem fim ligado a um bico de extrusão convencional. 0 parafuso sem fim pode ter um comprimento de cerca de 25 cm e um diâmetro de cerca de 1,5 cm. Comporta uma primeira zona que serve exclusivamente para o deslocamento da mistura, próxima de uma segunda zona reservada à compressão e ao pré-aquecimento .

Ao longo de todo o percurso, leva-se a mistura de 25 a cerca de 80°C, sendo a velocidade do deslocamento adaptada para que esta fase seja da ordem dos 5 minutos aproximadamente. A extrusão propriamente dita tem lugar a 98°C, comportando o bico de extrusão um orifício da ordem dos 1,5 mm de diâmetro.

Deixam-se em seguida arrefecer os filamentos assim obtidos até à temperatura ambiente, cortam-se em pequenas porções e trituram-se, finalmente, a -30°C. Após peneiração, isolam-se as micropartículas de dimensão média de 180 micra ou menos.

A análise química efectuada sobre amostras de produto extrudido e triturado confirma a perfeita homogeneidade da dispensão do ingrediente activo no seio da massa de copolímero.

Submetem-se as micropartículas assim obtidas a uma esterilização mediante raios gama e suspemdem-se, em seguida em um veículo estéril apropriado. Os ensaios in vivo (doseamento da taxa de testosterona sanguínea em estirpes de ratos machos) confirmam a libertação regular da substância activa pelo menos durante 25 dias, o que se traduz por uma descida da taxa de testosterona para valores de castração.

Exemplo 2

Procede-se de acordo com o processo descrito no exemplo 1, para preparar micropartículas de copolímero de ácido D,L-láctico-glicólico 50 : 50 (mole X) contendo, com uma dosagem comparável, um pamoato de um dos decapéptidos seguintes :

(piro) Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Phe-Leu-Arg-Pro-Gly-Nl^, (piro) Glu-His-Trp-D-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-NHR-^ ou (piro) Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-NHR(R^ = etilo)

Os ensaios da actividade in vivo confirmam uma libertação regular do ingrediente activo durante várias semanas.

Exemplo 3

Trituram-se, primeiramente, a baixa temperatura 13,85 g de copolímero 75 : 25 (mole Z) de ácido D,L-láctico e glicólico sob a forma de grânulos da ordem de 3 a 5 mm de diâmetro e peneira-se depois até ã obtenção de micropartículas de dimensão média igual a 180 micra ou menos.

A esta massa pulverulenta, adicionam-se 1,15 g de pamoato de D-Trp^-LH-RH [fórmula geral do péptido :

(piro) Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-Nl^] finamente pulverizado. 0 produto apresenta-se sob a forma de micropartículas de dimensão igual a cerca de 10 micra e de estrutura amorfa. Homogeneiza-se a mistura resultante ã temperatura ambiente em um moinho e submete-se finalmente ao tratamento descrito no Exemplo 1.

Após criopulverização, peneiração e finalmente esterilização mediante raios gama, suspendem-se as micropartículas no seio de um veículo estéril apropriado. Os ensaios in vivo (doseamento da taxa de testosterona sanguínea em estirpes de ratos machos) confirmam a libertação regular do ingrediente activo pelo menos durante 40 dias, o que se traduz por uma queda da taxa de testosterona para valores da castração.

Exemplo 4

Procede-se de acordo com o descrito no exemplo 1, partindo de 18 g de copolímero 50 : 50 (mole Z) de ácido D,L-láctico e glicõlico e 2,85 g de pamoato de um análogo da somatostatina - fórmula do pétido

D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NHz para se obter micropartículas apresentando a granulometria pretendida.

A análise química efectuada sobre amostras de composto extrudido e triturado confirma a perfeita homogeneidade da dispersão do ingrediente activo no seio da massa de copolímero.

Os ensaios in vivo, além disso, confirmam a libertação controlada do ingrediente activo (análogo da somatostatina) durante um período de pelo menos 7 dias.

Exemplo 5

Repete-se o processo descrito no Exemplo 4, mas partindo-se desta vez de 13,50 g de copolímero 75 : 25 de ácido D,L-láctico-glicólico e de 1,50 g do pamoato do análogo da somatostatina identificada antes.

As micropartículas assim obtidas, uma vez esterilizadas por meio de raios gama, são finalmente suspensas no seio de um veículo estéril apropriado. Os ensaios in vivo (doseamento da quantidade do análogo da somatostatina no soro sanguíneo dos ratos que levaram uma única injecção a tg) indicam uma libertação controlada da substância activa durante um mínimo de 15 dias.

Exemplo 6

Procede-se de acordo com o descrito no exemplo 4, para se obter micropartículas de copolímero do ácido D,L-láctico-glicólico

: 50 (mole %) contendo com um doseamento comparável um pamoato de um dos seguintes octapéptidos :

I I

D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-OH,

I I

D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Trp-NH₂, ι i

D-Trp-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH₂,

I I

D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH₂, i i

AcPhe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH₂,

I-1

AcPhe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH₂.

A análise química efectuada sobre amostras de produto extrudido e triturado confirma a perfeita homogeneidade da dispersão do ingrediente aetivo no seio da massa de copolímero

Durante as experiências descritas anteriormente, observou-se que os filamentos extrudidos, uma vez cortados em bastonetes de comprimento apropriado, podem ser utilizados directamente como implantes, após esterilização. Tais implantes asseguram igualmente a libertação prolongada e controlada do ingrediente aetivo.

Claims

) 1.- Processo para a preparação de uma composição farmacêu tica destinada ã libertação prolongada e controlada de uma subs tãr.cia medicamentosa, apresentando-se sob a forma de micropartí cuias de eopolímero de ácido láctico e glicõlico incorporando como ingrediente activo um pamoato, tanato, estearato ou palmitarc de um péptido natural ou sintético, caracterizado pelo fac tc:

a) de se misturar a seco o eopolímero e o ingrediente acravo escolhidos, ambos presentes seb a forma de micropartícu-15las de dimensão média inferior a cerca de 200 microns;

b) de se gressivamente até comprimir progressivamente e se aquecer procerca de 80°C a mistura pulverulenta obtida;

c) de se submeter a mistura pré-comprimida e pre-aquecida a uma extrusão a uma temperatura compreendida entre cerca de 80°C e 100°C; e

d) de se pulverizar a baixa temperatura o composto resultante da extrusão, de se seleccionar depois e, finalmente, de se recolherem as micropartículas que apresentem uma dimensão inferior a 200 microns aproximadamente.
2. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de as micropartículas de copolímero apresentarem uma dimensão média inferior ou igual a 180 microns.
3. - Processo de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo facto de se efectuarem a pré-compressão e o pré-aquecimento da mistura simultaneamente, com um parafuso sem fim.
4. - Processo de acordo com uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo facto de se efectuar a extrusão a uma pressão compreendida entre 50 e 500 Kg/cm^-.

Processo de acordo com uma das reivindicações 1 a 4,

-16caracterizado pelo facto de a pulverização do composto resultante da extrusão ser uma pulverização criogénica.
6,- Processo de acordo com uma cas reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo facto de se efectuar a selecção das microparrículas resultantes da pulverização mediante peneiração.
7.- Processo de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo facto de o copolímero de ácido láctico e glicólico ser um copolímero de ãcido L-ou D, L - láctico contendo entre 45 e 90% (moles %) de radicais ácido láctico,.respectivamente entre 55 e 10% (moles) de radicais ácido glicólico.
8. - Processo de acordo com uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo facto de o ingrediente activo ser um pamoato, tanato, estearato ou palmitato de um péptido natural ou sintético comportando 3 a 45 aminoácidos, particularmente LH-RH, somatcsratina, GH-RH ou calcitonina ou os seus análogos ou homólogos sintéticos.
9. - Processo de acordo com a reivindicação 8, caracterizadc pelo facto de o ingrediente activo ser um pamoato de LH-RH, de scmatostatina ou de um dos seus análogos ou homólogos sintéticos escolhidos entre ί-t

D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-OH, r-,

D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lyε-Thr-Cys-Trp-NH₂, *--,

D-Trp-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH₂, <-5

D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lvs-Val-Cys-Thr-NH₂, ✓

D-Phe-Cys-Tvr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH₂, r~ .................

AcPhe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH₂, fAcPhe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH₂, (piro) Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Giy-NH₂, (piro) Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Phe-Leu-Arg-Pro-Gly-NH₂, (piro) Glu-Eis-Trp-D-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-NKR^, ou (piro) Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-NHR^ (R^ = alquilo inferior)
10.- Processo para a preparação de uma suspensão injectãvel, caracterizado pelo facto de se misturar uma quantidade efe£ tiva de uma composição farmacêutica preparada pelo processo de acordo com uma qualquer das reivindicações la 9, com agentes auxiliares de formulação apropriados.

Lisboa, 27 de Julho de 1990 C A-2ite Oficial da Prcp+sdade Industrial

RESUMO

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE UMA COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA SOB A FORMA DE MICRO?ARTICULAS DE UM COPOLIMERO DE ÃCIDO LÃCTICO E GLI CÕLICO E INCORPORANDO COMO SUBSTÂNCIA ACTIVA UM ΡΑΜΟΑΤΟ, TANATO, ESTEARATO OU PALMITATO DE UM PÉPTIDO NATURAL OU SINTÉTICO

Descreve-se um processo para a preparação de uma composição farmacêutica destinada à libertação prolongada e controlada de uma substância medicamentosa, apresentando-se sob a forma de micropartículas de um copolímero de ãcido láctico e glicólico incorporando como ingrediente activo um pamoato, tanato, estearato ou palmitato de um péptido natural ou sintético, caracterizado pelo facto:

a) de se misturar a seco o copolímero e p ingrediente activo escolhidos, ambos presentes sob a forma de micropartículas de dimensão média inferior a cerca de 200 microns;

b) de se comprimir progressivamente e se aquecer proçressivamente até cerca de 80°C a mistura pulverulenta obtida;

c) de se submeter.a mistura pré-comprimida e pré-aque cida a uma extensão a uma temperatura compreendida entre cerca de 80°C e 100°C; e

d) de se pulverizar a baixa temperatura o composto resultante da extrusão, de se seleccionar depois e, finalmente, de se recolherem as micropartículas que apresentem uma dimensão inferior a 200 microns aproximadamente.

A composição farmacêutica preparada pelo processo de acordo com a presente invenção é útil para a preparação de suspensões injectáveis.