DK175495B1

DK175495B1 - Fremstilling af farmaceutisk præparat

Info

Publication number: DK175495B1
Application number: DK199001807A
Authority: DK
Inventors: Piero Orsolini
Original assignee: Debiopharm Sa
Priority date: 1989-07-28
Filing date: 1990-07-27
Publication date: 2004-11-08
Also published as: FI97688C; US5134122A; FR2650182A1; AU619996B2; GR1001215B; GB2234169B; IL95120A0; SE9002522L; SE9002522D0; DE4023134C2; IE902592A1; NO903264L; NO903264D0; PT94842A; CH679207A5; ATA154590A; LU87772A1; AT397197B; FR2650182B1; IE65397B1

Description

i DK 175495 B1

Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling af et farmaceutisk præparat, som tilvejebrin-ger en forlænget og styret afgift af en lægemiddelsubstans, og som opnås i form af mikropartikler af en mælkesyre- og 5 glycolsyre-co-polymer, og der, som den aktive substans, inkorporerer pamoatet, tannatet, stearatet eller palmitatet af et naturligt eller syntetisk peptid, især af et peptid omfattende 3-45 aminosyrer.

Hidtil er der foreslået forskellige løsninger til frem-10 stilling af præparater, der sikrer en forlænget og styret afgift af lægemiddelsubstanser, hvilke præparater er baseret på fremstillingen af bionedbrydelige implantater, på mikroindkapsling eller på fremstilling af porøse bionedbrydelige matricer, fx i form af mikropartikler med for-15 skellig kornstørrelse. I denne henseende kan nævnes EP-A—0052510 angående mikroindkapsling og EP-A-0058481 eller US-A-3.976.071 angående fremstillingen af implantater eller af porøse bionedbrydelige matricer. Alle disse teknikker gør brug af en indledende opløsning af den bioned-20 brydelige polymer eller co-polymer, der anvendes som bærer, i et organisk opløsningsmiddel, og, om nødvendigt, opløsning af selve lægemiddelsubstansen. Skønt dispersionen af den aktive substans igennem hele den bionedbrydelige masse i sådanne tilfælde er tilfredsstillende, mødes der altid 25 problemer med spormængder fra tilbagebievent opløsningsmiddel, hvilke spormængder kan gøre brugen af sådanne præparater til terapeutisk anvendelse problematisk. Udvælgelsen af opløsningsmidler med lav toksicitet eller gennemgribende fjernelse af spor af opløsningsmidlet kan 30 undertiden være kompliceret og dyr, eller den kan resultere i et uacceptabelt tab af produktets renhed.

Det er også blevet foreslået at tørblande - dvs. uden noget opløsningsmiddel - en proteinsubstans (bovint serumalbumin) og en bionedbrydelig mælkesyre- og glycolsyre-co-polymer i 35 form af pulvere og derpå udføre en komprimering ved smeltetemperaturen af den blanding, der således opnås (J. D.

DK 175495 B1 I

Gresser et al., Bi©polymeric Controlled Release System I

bind II, side 136). Denne teknik viste sig ikke at være I

tilfredsstillende, især hvad angår homogeniteten af pro- I

teinsubstansens (BSA) fordeling igennem hele massen. I

5 Det har overraskende vist sig, at disse forskellige pro- I

blemer kan overvindes ved anvendelse af metoden ifølge den I

foreliggende opfindelse, selv når der som udgangsmateriale I

anvendes den samme type bionedbrydelige polymerer eller I

co-polymerer og naturlige eller syntetiske peptider, såsom I

10 octa-, nona- eller decapeptider og mere generelt peptider, I

der omfatter 3-45 aminosyrer. I

Ifølge opfindelsen anvendes naturlige eller syntetiske I

peptider på saltform, mere præcist som pamoater, tannater, I

stearater eller palmitater, fortrinsvis som pamoater. Det I

15 skal i denne henseende bemærkes, at disse peptidsalte er I

uopløselige i vand. I

Ligesom co-polymererne af mælkesyre (L- eller D,L-mælke- I

syre) og glycolsyre anvendes de ovennævnte salte i pulver- I

form, og især i mikropartikelform med en gennemsnitlig I

20 kornstørrelse under ca. 200 ^m. Der er blevet opnået gode I

resultater med co-polymermikropartikler med en kornstør- I

relse af størrelsesordenen 180 μη eller mindre, idet pep- I

tidsaltet kan have en endnu mindre kornstørrelse. Blandin- I

gen af disse materialer udføres ved tørblanding i et hvil- I

25 ket som helst egnet apparat, fx i en kuglemølle, og ved I

stuetemperatur (ca. 25°C) eller endog lavere temperatur, fx I

5-10°C. Mængden af pulverbestanddelene kan variere inden I

for et bredt område, fx fra 0,1 til 15 vægtprocent for I

peptidsaltet afhængigt af de ønskede terapeutiske effekter. I 1

Ifølge opfindelsen underkastes en given blanding, når den I

er passende homogeniseret, en progressiv komprimering og I

samtidig en progressiv opvarmning, før den ekstruderes. I

Ligesom transporten af blandingen til forkomprimerings- og I

DK 175495 B1 3 foropvarmnningszonen kan disse to processer med fordel udføres under anvendelse af en endeløs skrue med passende dimensioner. Komprimeringsforholdet kan variere afhængig af talrige faktorer såsom apparatets geometri eller pulver-5 blandingens kornstørrelse. Styringen af foropvarmnningen og af den ændring, den gennemgår, når sammenblandingen skrider frem, er mere kritisk: afhængigt af arten af de produkter, der skal behandles (co-polymer, peptid), skal det så vidt muligt tilstræbes at bevare en temperaturgradient, der ikke 10 overstiger ca. 80*C. Initialtemperaturen, som pulverblan-dingen udsættes for, kan være 25*C, eller lavere eller højere afhængigt af forholdene.

Den således forkomprimerede og foropvarmnede blanding underkastes derpå en ekstrudering ved en temperatur, der 15 sædvanligvis ligger på mellem ca. 80’C og 100’C, idet den øvre grænse af dette område dikteres af arten af lægemiddelsubstansen (peptid), som ikke bør nedbrydes. Ekstruderingen kan udføres ved et tryk, soro kan variere betragteligt i området fra 50 til 500 kg/cm2, idet det vigtigste 20 er, at ekstruderingstemperaturen og -trykket kan tilpasses produktets viskositet. Et hensigtsmæssigt tryk og en hensigtsmæssig temperatur kan oplagt fremme bestanddelenes fuldkomne homogenisering og især peptidsaltets ensartede fordeling gennem hele co-polymermassen.

25 Den faktiske ekstrudering udføres ved hjælp af en dyse med standardform og -dimensioner, hvilken dyse er placeret ved neddstrømmsenden på den ovennævnte endeløse skrue. Det ekstruderede produkts afkøling opnås ved en hvilken som helst hensigtsmæssig metode såsom kold, steril luft eller 30 gas eller blot ved naturligt varmetab.

Ifølge opfindelsen pulveriseres det ekstruderede produkt, der er tilstrækkeligt afkølet, ved lav temperatur, fortrinsvis ved en temperatur lavere end 0*C eller endog meget lavere, fx -10*C eller -30*C. Der kan med fordel anvendes 35 kryogenpulverisering, som er en i og for sig kendt teknik.

I DK 175495 B1 I

I I

I Det således pulveriserede produkt underkastes derpå en sor- I

I tering af mikropartiklerne i henhold til deres gennemsnits- I

I kornstørrelse; dem med en kornstørrelse under 200 μπι og i

I fortrinsvis under eller lig med 180 μΐη bibeholdes i henhold I

I 5 til fremgangsmåden ifølge opfindelsen. Sorteringen af I

I mikropartikler kan udføres fx ved sigtning. De sorterede I

I mikropartikler opsamles, og de er derpå klar til brug. I

I I overensstemmelse med fremgangsmåden ifølge opfindelsen I

I finder de ovennævnte trin sted successivt uden nogen unød- I

I 10 vendig forsinkelse mellem to på hinanden følgende trin. Én I

I fordel ved denne fremgangsmåde er, at den også kan udføres I

I som en kontinuerlig proces, hvor alle processerne finder I

I sted successivt, blot ved at overføre den behandlede bian- I

I ding. I

I 15 Ifølge opfindelsen kan der som co-polymer af mælkesyre- og I

I glycolsyre anvendes en hvilken som helst bionedbrydelig co- I

I polymer, der omfatter et sådant basismateriale, og for- I

I trinsvis en co-polymer af L- eller D,L-mælkesyre indehol- I

I dende henholdsvis fra 45 molprocent til 90 molprocent I

I 20 mælkesyreenheder og fra 55 molprocent til 10 molprocent I

I glycolsyreenheder. Sådanne polymerer fremstilles let som I

I beskrevet i den ovennævnte litteratur, eller de kan fås fra I

I specialiserede firmaer. I 1

De peptidsalte, enten naturlige eller syntetiske, der I

I 25 således er inkorporeret i co-polymermassen, er fortrinsvis I

I salte af peptider omfattende fra 3-45 aminosyrer, især I

I LH-RH-salte (luteiniserende hormonfrigørende hormon), soma- I

I tostatinsalte, GH-RH-salte (væksthormonfrigørende hormon) I

I eller calcitoninsalte eller salte af disses syntetiske I

I 30 homologer eller analoger. I

5 DK 175495 B1

Det foretrækkes især, at LH-RH-pamoatet, somatostatinpamoa-tet eller pamoatet af én af deres homologer eller analoger er valgt blandt ---, D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-OH, r- -* 5 D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr“CyS“Trp-NH2,

f I

D-Trp-Cys-Phe-D“Trp-Lys“Thr-Cys-Thr“NH2,

1-—-J

D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr“NH2, T-, D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2, AcPhe-Cys-Phe-D“Trp“Lys-Thr-Cys-Thr“NH2, i-1 10 AcPhe“Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2, (pyro)Glu-His-Trp-Ser-Tyr“D-Trp-Leu-Arg“Pro-Gly-NH2, (pyro)Glu-His-Trp-Ser“Tyr“D-Phe-Leu-Arg-Pro“Gly-NH2, (pyro)Glu-His-Trp-D-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-NHR1 eller 15 (pyro)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-NHR1 hvor (R1 = lavere alkyl), idet denne liste ikke skal betragtes som begrænsende.

Mikropartiklerne, der opnås i overensstemmelse med fremgangsmåden ifølge opfindelsen ud fra de ovennævnte bestand-20 dele, anvendes efter en passende sterilisation til fremstilling af injicerbare suspensioner.

Følgende eksempler illustrerer opfindelsen mere detaljeret uden dog at begrænse dens omfang.

I DK 175495 B1 I

I I

I EKSEMPEL 1 I

I 20 g 50:50 (molprocent) D,L-mælkesyre- og glycolsyre-co- I

I polymer i form af granula med en diameter i området fra ca. I

I 3 til 5 mm blev ferst malet ved lav temperatur og sigtet, I

I 5 hvilket gav mikropartikler med en gennemsnitlig kornstør- I

I relse på 180 μτα eller derunder. I

I Til denne pulvermasse blev der sat 0,490 g fintpulveriseret I

I D-Trp6-LH-RH-pamoat (peptidets formel: I

I (pyro)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2)· I

I 10 Produktet omfatter mikropartikler med en kornstørrelse på I

I ca, 10 /in, og det har en amorf struktur. Den resulterende I

I blanding blev homogeniseret i en mølle ved stuetemperatur. I

I Den homogeniserede blanding blev derpå anbragt inden i et I

I apparat, der var forsynet med en endeløs skrue koblet til I

I 15 en konventionel ekstruderingsdyse. Den endeløse skrue kan I

I have en længde på ca. 25 cm og en diameter på ca. 1,5 cm. I

I Den omfatter en første zone, hvis formål udelukkende er at I

I bevæge blandingen, og som støder op til en anden zone, der I

I er beregnet til komprimeringen og foropvarmnningen. I

I 20 Mens blandingen bevæger sig, opvarmes den fra 25“ C til ca. I

I 80°C, idet bevægelseshastigheden justeres således, at denne I

I fase varer ca. 5 minutter. Den faktiske ekstrudering finder I

I sted ved 98*C gennem en ekstruderingsdyse, der har en I

I åbning med en diameter på ca. 1,5 mm. I 1

I Den kemiske analyse, der blev udført på prøver fra pro- I

I 30 duktet efter ekstrudering og maling, bekræfter den fuldkorn- I

25 De således opnåede tynde tråde lades derpå afkøle ved I

I stuetemperatur, skæres i korte stykker og males til sidst I

I ved -30°C. Efter sigtning opsamles mikropartikler med en I

I gennemsnitlig kornstørrelse på 180 μΐη eller derunder. I

7 DK 175495 B1 ne homogenitet af dispergeringen af den aktive substans igennem hele polymermassen.

De ovennævnte opnåede mikropartikler blev underkastet en sterilisation med gammastråler, og derpå blev de suspen-5 deret i et hensigtsmæssigt sterilt vehikel. In vivo-under-søgelser (bestemmelse af blodtestosteronniveauet i hanrotter) bekræfter den regelmæssige afgift af aktiv substans i løbet af mindst 25 dage, hvilket resulterer i et testosteronfald til kastrationsniveau.

10 EKSEMPEL 2

Mikropartikler af en 50:50 (molprocent) D,L-mælkesyre-glycolsyre-co-polymer blev fremstillet ifølge metoden fra eksempel 1, hvilke partikler omfatter et sammenligneligt indhold af pamoatet af ét af følgende decapeptider: 15 (pyro) Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Phe-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2, (pyro) Glu-His-Trp-D-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-NHR1 eller (pyro) Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-NHR1 (R1 = ethyl) 20 De aktivitetsundersøgelser, der blev udført in vivo. bekræfter en regelmæssig afgift af den aktive substans over flere uger.

EKSEMPEL 3 13,85 g af en 75:25 (molprocent) co-polymer af D,L-mælke-25 syre- og glycolsyre i form af granula med en diameter af størrelsesordenen 3-5 mm blev først malet ved lav temperatur og sigtet, hvilket gav mikropartikler med en gennemsnitlig kornstørrelse på 180 μη eller derunder.

I DK 175495 B1 I

I I

I Til denne pulveriserede masse blev der sat 1,15 g fint- I

I pulveriseret D-Trp6-LH-RH-pamoat (peptidets formel): I

I (pyro)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2). I

I 5 Produktet består af mikropartikler med en kornstørrelse på I

I ca. 10 μη, og det har en amorf struktur. Den resulterende I

I blanding blev homogeniseret ved stuetemperatur i en mølle I

I og til sidst underkastet den behandling, der er beskrevet i I

I eksempel 1. I

I 10 Efter kryopulverisering, sigtning og til sidst gammastråle- I

I sterilisation blev mikropartiklerne suspenderet i et hen- I

I sigtsmæssigt sterilt vehikel. In vivo-undersaaelser (be- I

I stemmelse af blodtestosteronniveauet i hanrotter) bekræfter I

I den regelmæssige afgift af den aktive substans i løbet af I

I 15 mindst 40 dage, hvilket resulterer i et testosteronfald til I

I kastrationsniveau. I 1

EKSEMPEL 4 I

I Fremgangsmåden fra eksempel 1 blev fulgt gående ud fra 18 g I

I af en 50:50 (molprocent) co-polymer af D,L-mælkesyre- og

I 20 glycolsyre og 2,85 g af pamoat af en somatostatinanalog - I

I idet peptidets formel er: I

I i-j I

I D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2,

I hvilket gav mikropartikler med den ønskede kornstørrelse. I

I Den kemiske analyse, der blev udført på prøver af produktet I

I 25 efter ekstrudering og maling, bekræfter den fuldkomne

I homogenitet af dispergeringen af den aktive substans igen- I

I nem hele co-polymermassen. I

9 DK 175495 B1

In vivo- undersøgelser bekræfter yderligere den styrede afgift af den aktive substans (somatostatinanalog) over en periode på mindst 7 dage.

EKSEMPEL 5 5 Fremgangsmåden fra eksempel 4 blev gentaget gående ud fra 13,50 g af en 75:25 co-polymer af D,L-mælkesyre- og glycol-syre og 1,50 g pamoat af ovennævnte somatostatinanalog.

De således opnåede mikropartikler blev efter gammastrålesteriliseret til slut suspenderet i et hensigtsmæssigt 10 sterilt vehikel. In vivo-undersøaelser (bestemmelse af somatostatinanalogniveauer i blodserum hos rotter, der havde fået en enkelt injektion ved t0) indicerer en styret afgift af den aktive substans i løbet af mindst 15 dage.

EKSEMPEL 6 15 Fremgangsmåden fra eksempel 4 blev anvendt, hvilket gav mikropartikler af en 50:50 (molprocent) co-polymer af D,L-mælkesyre- og glycolsyre indeholdende en tilsvarende mængde pamoat af ét af følgende octapeptider: T—---1 D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-OH, i-1 20 D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Trp-NH2, > 1" D-Trp-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2· x-j D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2, 1-------1

AcPhe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2» '-—--f

AcPhe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2.

I DK 175495 B1 I

I 10 I

I Kemisk analyse udført på prøver af produktet efter eks- I

I trudering og maling bekræfter den fuldkomne homogenitet af I

I dispergeringen af den aktive substans igennem hele co- I

I polymermassen. I

I 5 Under de ovennævnte eksperimenter blev det bemærket, at de I

I ekstruderede tynde tråde, når de var skåret til korte stave I

I med passende længde, kunne anvendes direkte som implantater I

I efter sterilisation. Sådanne implantater sikrer også en I

I forlænget og styret afgift af den aktive substans. I

Claims

1. Fremgangsmåde til fremstilling af et farmaceutisk præparat, som tilvejebringer en forlænget og styret afgift af en lægemiddelsubstans, hvilket præparat opnås i form af ' 5 mikropartikler af en co-polymer af mælkesyre- og glycol- syre, og der, som aktiv substans, inkorporerer et pamoat, tannat, stearat eller palmitat af et naturligt eller syntetisk peptid, kendetegnet ved, at: 10 a) den valgte co-polymer og aktive substans, der begge er til stede i mikropartikelform med gennemsnitlig kornstørrelse under ca. 200 μΐη, tørblandes; b) den således opnåede pulverblanding komprimeres progressivt og opvarmes progressivt op til ca. 80“C; 15 c) den forkomprimerede og foropvarmnede blanding underkastes ekstrudering ved en temperatur på mellem ca. 80“C og 100“C; og d) det produkt, der resulterer fra ekstruderingen, pulveriseres ved lav temperatur, hvorpå de mikropartik- 20 ler, der har en kornstørrelse under ca. 200 ^m, ud vælges og til sidst opsamles.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at co-polymermikropartiklerne har en middelkornstørrelse på under eller lig med 180 μΐη. 1

3. Fremgangsmåde ifølge krav l eller 2, kendetegnet ved, at forkomprimeringen og forop-varmnningen af blandingen udføres samtidig ved hjælp af en endeløs skrue. I DK 175495 B1 I I 12 I

4. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene I I 1-3, I I kendetegnet ved, at ekstruderingen udføres ved I I et tryk i området fra 50 til 500 kg/cm2. I

55. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene I I I I kendetegnet ved, at pulveriseringen af det I I produkt, der resulterer fra ekstruderingen, er en kryogen- I I pulverisering. I I 10 6. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene I I i”5' I I kendetegnet ved, at udvælgelsen af de mikropar- I I tikler, der resulterer fra pulveriseringen, udføres ved I I sigtning. I I 15 7. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene I I 1_6' I I kendetegnet ved, at co-polymeren af mælkesyre- I I og glycolsyre er en co-polymer af L- eller D,L-mælkesyre I I indeholdende henholdsvis 45-90 molprocent mælkesyreenheder I I 20 og 50-10 molprocent glycolsyreenheder. I 1

8. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene I I 1-7, I I kendetegnet ved, at den aktive substans er I I pamoatet, tannatet, stearatet eller palmitatet af et natur- I I 25 ligt eller syntetisk peptid omfattende 3-45 aminosyrer, I I især af LH-RH, somatostatin, GH-RH, calcitonin eller af I I syntetiske analoger eller homologer deraf. I DK 175495 B1

9. Fremgangsmåde ifølge krav 8, kendetegnet ved, at den aktive substans er et pamoat af LH-RH, af somatostatin eller af én af analogerne eller homologerne deraf valgt blandt i-1 , 5 D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-OH, I--1 • D“Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Trp-NH2, i-1 D-Trp-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2, T-1 D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2, 1 -1 D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2, r--,

10 AcPhe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2, AcPhe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2, (pyro)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu“Arg-Pro-Gly-NH2, (pyro)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Phe-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2, (pyro)Glu-His-Trp-D-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-NHR1 15 eller (pyro)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-NHR1 hvor (R1 = lavere alkyl).

10. Farmaceutisk præparat i form af mikropartikler opnået i ved fremgangsmåden ifølge i et hvilket som helst af kravene 20 1-9. r

11. Anvendelse af et farmaceutisk præparat ifølge krav 10 til fremstilling af injicerbare suspensioner.