PT92768B - Processo para a preparacao de analogos amida das prostaglandinas heterociclicas substituidas com 7-oxabicicloheptilos - Google Patents

Description

Memória descritiva referente ao Pedido de Patente de E.R,SQUIBB & SONS, INC., norte-americana, industrial, com sede em Delaware, Lawrenceville-Princeton Road, Princeton, New Jersey, Estados Unidos da América, para:

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE ANÁLOGOS AMIDA DA PROSTAGLANDINA HETEROCICLICA SUBSTITUÍDA

7-CXA3ICICLOHEPTTLO

O presente invento refere-se a um processo para a preparação de análogos amida da prostaglandina heterociclica substituída 7-oxabicicIoheptilo, que são antagonistas do receptor de tromboxano A^ (TXA^) ou em combinação antagonistas do receptor de tromboxano A^/ inibidores da sintase de tromboxano, utéis, por exemplo, no tratamento de distúrbios trombósicos e/ou vasospasticos e têm boa duração de acção. Estes compostos têm a fórmula estrutural

e incluindo todos os seus estereoisomeros, em que m é 1, 2 ou 3; n é O, 1, 2, 3 ou 4;

Z é -(^ch2)₂ ^{- ou} -CH=CHe quando Z fôr -CH=CH-, n é 1,2,3 ou 4:

R e C0₂H, alquilo inferior CC>₂, metal alcalino CO ,

CH₂OH, CONHSO₂R , CCNHR^3a, ou ²

H (-CH₂-5^_tetrazolilo),

X é 0, S ou NH;

é alquilo inferior, alquenilo inferior, alquinilo inferior, aralquilo, arilo, cicloalquilo ou cicloalquiloalquilo, cada sendo insubstituído ou facultativamente substituído por um grupo alquilo, arilo, cicloalquilo ou cicloalquilo alquilo;

R é hidrogénio, alquilo inferior, arilo ou aralquilo; ou

R e R em conjunto com o azoto a que estão ligados podem formar um anel pentagonal ou octagonal;

e alquilo inferior, arilo ou aralquilo; e

R^J é hidrogénio, alquilo inferior, arilo ou aralquilo. Assim, os compostos do invento abrangem os seguintes tipos de compostos:

ι-l·.

IC <CH₂)_m-z-<cH₂>_n-R

^<CH2>m-^Z-^(CH2>n-^R

ι

H z'

O termo alquilo inferior ou alquilo conforme aqui usado inclue tanto radicais de cadeia direita como ramificada tendo no máximo ló carbonos, de preferencia, 1 a 8 carbonos, tais como, metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, t-butilo, isobutilo, pentilo, hexilo, isohexilo, heptilo, 4,4-dimetilpentilo , octilo, 2,2,4-trimetilpentilo, nonilo, decilo, undecilo, dodecilo, os vários isomeros de cadeia ramificada destes e semelhantes, bem como grupos tais como os que incluem os substituintes 1, 2 ou 3 balo, um substituinte arilo, um substituinte alqui1-arilo, ura substituinte haloarilo, um substituinte cicloalquilo ou ura substituinte alquilcicloalquilo.

O termo cicloalquilo inclue grupos de hidrocarbonetos cíclicos saturados contendo 3 a 12 carbonos, de preferencia, 3 a 8 carbonos, que incluem ciclopropilo, ciclobutilo, ci clopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, ciclodocilo e ciclododecilo, quaisquer destes grupos podem ser substituídos por substituintes, tais corao, halogéneo, alquilo inferior, alcoxi inferior e/ou um grupo hidroxi.

O termo arilo ou Ar, conforme aqui usado, refere-se a grupos aromáticos monociclicos ou biciclicos, contendo de 6 a 10 carbonos na parte do anel, tais como, fenilo, naftilo. Arilo (ou Ar), fenilo ou naftilo podem incluir arilo substituído, fenilo substituído ou naftilo substituído, que podem incluir 1 ou 2 substituintes quer no fenilo quer no naftilo, tais como alquilo inferior, trifluorometilo, halogéneo (Cl, Br, I ou F), alcoxi inferior, arilcoxi, hidroxi, alquiltio, alqui 1 sulfini lo, alquilsulfonilo, ariltio, ari1sulfinilo e/ou arilsulfonilo.

O termo aralquilo, ari1-alquilo ou ari1-alquilo inferior conforme aqui usado, refere—se a grupos alquilo inferior, acima referidos, tendo um substituinte arilo, tal como, benzilo,

O termo alcoxi inferior , alcoxi ou aralcoxi inclue quaisquer dos grupos acima alquilo inferior, alquilo ou aralquilo, ligados a um átomo de oxigénio.

O termo halogéneo ou halo conforme aqui usado, refere-se a cloro, bromo, fluor ou iodo, sendo cloro o preferido.

O termo alqyenilo inferior ou alquenilo conforme aqui usado a respeito do substituinte R^ inclue uma cadeia de carbono de no máximo ló carbonos, de preferencia 3 a 10 carbonos, contendo uma ligação dupla que é separada de N pelo menos por uma metade de carbono saturada, tal como — (CH^)^, ^em R P°de ser 1 a 14, tal como, 2-propenilo, 2-butenilo, 3-butenilo, 2-pentenilo, U-pentenilo e análogos e pode incluir um substituinte de halogéneo, tal como I, Cl ou F.

termo alquinilo inferior ou alquinilo tal como aqui usado a respeito do substituinte inclue uma cadeia de carbono de no máximo l6 carbonos, de preferencia 3 a 10 carbonos, contendo uma ligação tripla que é separada de N pelo menos por uma metade de carbono saturada, tal como -(ΟΗ^)^,-, ^em ^^ue *1* Ρ^θ£^^{θ ser} 1 a lU, tal como, 2-propinilo, 2-butinilo, 3~butinilo e análogos.

Os compostos preferidos da formula L são aqueles em que Z é -CH=CH- na configuração cis, m é 1, n é 2 ou 3t

R é CO H, é fenilaquilo substituído ou ciclohexilai2 * quilo e R é H ou metilo.

1'

-6Os compostos da formula I do invento em que Z é -CH=CH ou P°dem ser preparados da maneira seguinte.

Os compostos do invento em que Z é —CH=CH— e de preferencia na forma cis e X é O são preparados, partindo-se do compostos II hidroximetilo

(que é preparado conforme descrito na Patente dos USA n?. 4.I43.O54) o qual é submetido a uma oxidação de Jones em que II se faz reagir com o Reagente de Jones (CrO^ dissolvido ou suspenso em ácido sulfuro aquoso, preparado como descrito em Fieser & Fieser, Reagente for Organich Synthesis, Vol. I, p. 142 (1967)) , na presença de acetona, numa atmosfera inerte, tal como, árgon, a uma temperatura no âmbito de cerca de -10 a cerca de 20-C, para formar o acido carboxilico III correspondente

-Ί-

Acido III, num solvente orgânico inerte, tal como, tetrahidrofurano, é a seguir submetido a uma reacção de acoplamento de carbodiimida com Amida A

H-N-CH-C-N ² I

HO

CH_ / ^{2 X}R² na presença de diciclohexilcarbodiimida (DCC) ou cloridrato de 1—(3—dimetilaminopropil)—3—etilcarbodiimida (WSC) e 1-hidroxibenzotriazolo, numa atmosfera inerte, tal como árgon, empregando uma proporção molecular de A:III na ordem de entre aproximadamente 1,2:1 a aproximadamente 1:1, para formar hidroxibisamida IV

Hidroxibisamida IV é submetida subsequentemente a ciclodesidrataçao, na qual é tratada uma solução ri_e IV num solvente orgânico inerte, tal como, tetrahidrofurano, acetonitrilo ou clorofórmio, numa atmosfera inerte, tal como árgon, com trifenilfosfina e tetracloreto de carbono nã presença duma base de amina, tal como, trietil— amina, para forma oxazolina V.

2b

Alfernativamente, bidroxibisamida IV é tratada com um cloreto de sulfonilo, tal como cloreto de metano sul— fonilo, e uma base de amina, tal como, trietilamina, seguido de tratamento com carbonato de potássio em acetona para, formar oxazolina V.

Oxazolina V é oxidada por tratamento com dióxido de manganésio ou peróxido de niquel, de preferencia, peroxido de niquel, para formar oxazolo IA'

IA' ( CH₂ )_m-CH=CH- (CH₂ )_n-C0^1 quilo cis

C-N-R

II ι 0 R

Alternativamente, partir de ácido 111 oxazolo IA' pode ser preparado

por um acoplamento de carbodiimida, conforme descrito anteriormente, excepto substituindo-se A' por A para se obter VI.

CO_Pro / ²

A' ^H2^N_<^ ch₂oh

em que Pro e um grupo protector convencional.

Hidroxiamida '1 é então submetida a uma ciclohesidratação e oxidação, conforme descrito para IV e V para formar VII

O grupo protector de VII pode ser eliminado para formar o ácido VIII correspondente que é tratado com excesso de

cloreto de oxalilo na presença dum solvente orgânico inerte, tal como, tolueno, cloreto de metileno ou clorofórmio e facultativamente uma quantidade catalítica de dimetilformamida, com agitação numa atmosfera inerte, tal como, árgon, para formar o cloreto ácido IX, em bruto

-11Ή

Α HC1HN-R¹ na presença duma base organica, tal como, trietilamina, numa atmosfera inerte, tal como, ãrgon, empregando uma proporção molecular de IX:A no âmbito de desde aproximadamente 0,5:1 a aproximadamente 1:1 e de preferencia de aproximadamente 0,8:1 a aproximadamente 1:1, para forma IA’ .

IA'

O

1'

Os compostos da formula I na qual Z representa -CH=CH- que é o isomero de ligaçao dupla trans podem ser preparados partindo do composto hidroximetilo II que inclue uma ligação dupla cis. O composto II e tratado com ura composto protector, tal como, cloreto de t-butildimetilsili lo ou outro grupo protector sililo, de acordo com o já descrito, na presença de imidazolo ou trietilamina e num solvente orgânico inerte, tal como, cloreto de metileno ou tetrahidrofurano, para formar o composto protegido X

Uma solução do álcool X protegido num solvente orgânico inerte, tal como, cloreto de metileno ou acetona e tratada com ezono em excesso a uma temperatura reduzida desde aproximadamente -78?C a aproximadamente -60?C seguida de tratamento com dimetil sulfureto em excesso (proporção molecular de X:(CH^)₂S no âmbito de aproximadamente 1:100 a aproximadamente 1:5), ou trifenilfosfina, para formar o aldeído XI 'Ί

Para os compostos do invento nos quais Z= —CH=CH— na forma trans e n=2, o aldeído XI é tratado a seguir cim uma mistura de brometo de litio ou cloreto de litio e trimetilfosfonoacetato e trietilamina num solvente orgânico inerte, tal como, cloreto de metileno ou clorofórmio, para formar o ester XH

Uma solução de ester ΧΓΙ num solvente orgânico inerte, tal como, tetrahidrofurano, eter ou dimetoxietano e arrefecido para uma temperatura de aproximada— mente —782C a O^C e reagida com hidreto de diisobutil— aluminio num solvente aromático, tal como, tolueno, durante um período de aproximadamente 0,5 a aproximadamente 4 horas, para formar o álcool XIII

V

Álcool XIII é tratado com brometo de bromotrifenilfosfónio (formado adicionando bromo a trifenilfosfina em tolueno ou outro solvente aromático numa atmosfera inerte, tal como, árgon, a uma temperatura reduzida de aproximadamente —10 a aproximadamente 10?C) na presença de piridina e tolueno, a uma temperatura reduzida de aproximadamente -10 a aproximadamente 10?C, para formar brometo XIV

Um ester alquilico do ácido acétido, tal como, t-butil acetato ou acetato de etilo, é tratado com uma solução de LDA (diisopropilamida de litio) num solvente orgânico inerte, tal como, tetrahidrofurano a uma temperatura reduzida de aproximadamente -78 a aproximadamente -60-C durante um período de aproximadamente 0,5 a aproximadamente 2 horas, seguido da adição duma solução de brometo XIV num solvente orgânico inerte, tal como, tetrahidrofurano para formar ester XV (em qúe n=2)

Para os compostos do invento em que Z=-CH=CH— na forma trans e n e 1, 3 ou 4, deixa—se reagir o aldeído XI com um sal de fosfónio da formula P

Br® ©

P (C₆H₅)₃P-(CH₂)_n+1-CH₂OH na presença duma base forte, tal como t-amilato de potássio em tolueno ou NaH/dimeti1sulfóxido para dar XIII*

(CH-)-CH=CH-(CH-) -CH-0H 2 m 2 n 2

CH₂-OPro

-16que e oxidado e esterificado usando processos conhecidos dos peritos no ramo para formar ester XV (no qual n=l, 3 ou 4).

Ester XV é depois desprotegido tratando XV em metanol numa atmosfera inerte, tal como, ãrgon, com ácido clorídrico em metanol (preparado adicionando cloreto de acetilo a metanol) para formar álcool XVI

XVZ pode ser então usado em vez de H como material de partida, seguindo o processo atras descrito para formar o ácido IIIA

e subsequentemente para formar o composto trans do invento IA

-17ΙΑ

Os compostos do invento IB em que Z é -CH=CH- e X é S podem ser preparado partido do ácido III ou IIIA como segue:

Faz-se reagir o ácido IH ou ΠΙΑ como cloreto de oxalilo, facultativamente na presença de quantidades cataliticas de dimetilformamida, em cloreto de metileno, para foxinar o cloreto acido correspondente, que é amidado reagindo com amónio para formar a amida XVH

XVII

Alternativamente, faz-se reagir o ácido UI ou IIIA com alquilcloroformato na presença duma amina, tal como, trietilamina para formar o anidrido misto

que é amidado fazendo-o reagir com solução de metanol-amónia ou solução de amónia aquosa concentrada para formar amida XVII,

Λ amida XVII c então tratada com pentasulfureto de fosfóro (P^S^) ou Reagente de Lawesson (2,4-bis(4metoxifenil)-l,3-ditia-2,U-difosfetano-2,U-dilsulfureto) para formar a tioamida XVIII correspondente

que e tratada cora*ácido bromopiruvico

O

II (Br-CH₂-C-CO₂H) num solvente polar, tal como, dimetilformamida na presença duma base fraca, tal como, J^CO^ empregando uma proporção molecular de XVIIT:ácido bromopiruvico no âmbito de aproximadamente 1:1 a aproximadamente 1:1,5 para formar tiazolina XIX

19Tiazolina XIX é então desidratada por meio de tratamento cora um cloreto de sulfonilo, tal como, cloreto de metanosulfonilo, na presença duma base, tal como, trietilamina para formar tiazolo acido XX

que é submetido a uma reaação de acoplamento de carbodiimida com amina

HN-R I o na presença de DCC ou WSC numa atmosfera inerte, tal como, árgon, empregando uma proporção molecular de Α',·χχ na ordem de aproxiradamente 1:1 a aproximadamente 2:1, pa

-20Os compostos do invento IC em que X é NH são preparados partindo de ácido III ou ΙΤΙΑ que é submetido a uma reacção de acoplamento com amina

H

I

H-NCEL-C-COOPro hÃboc em que Boc é t-butiloxicarbonilo e Pro é um grupo protector, tal como preferencialmente -CH CH Si(CH.)_, na

-X J presença dum agente de acoplamento, tal como, cloridrato de 1—(3—dimetilaminopropil)—3—etilcarbodiimida (WSC) e 1-hidroxibenzotriazolo (HOBT) e cloreto de metileno, empregando uma proporção molecular de III ou IIIA:B na ordem de desde aproximadamente 1,2:1 a aproximadamente 1:1, durante um período de aproximadamente 12 a aproximadamente 90 horas, Aamida resultante é submetida a uma reacção de tionação tratando a amida com reagente de Lawesson na presença de beizeno a uma temperatura de aproximadamente 50 a aproximadamente 75^C durante um período de aproximadamente 1 a aproximadamente h horas, para formar o ester XXI (CH,.) -CH=CH-(CH-) -COOaltruílo 2 m z n

XXI

C

II s

rq 1 2

HNBoc COOPro

-21O ester XXI é ciclizado tratando uma solução de XXi num solvente inerte, tal como, acetonitrilo, cloroformio ou tetrahidrofurano, com trifenilfosfina (empregando uma proporção molecular de XXI:trifenilfosfina de aproximadamente 0,8:1 a aproximadamente l:l) e tetracloreto de carbono na presença duma base de amina, tal como, trietilamina ou diisopropiletilamina, para formar imidazolina XXII

Imidazolina XXH e então desprotegida para eliminar o grupo protector Pro, usando processos convencionais, por exemplo, tratamento com acido trifluoroacético na presença de cloreto de metileno, para formar o ácido XXIII

-22A seguiiy ο ácido XXIII é submetido a uma reacção de acoplamento com amina A''’ na presença duma base de amina, tal como, piridina ou trietilamina, numa atmosfera inerte, tal como, árgon, na presença dum agente de acoplamento, tal como, WSC ou HOBT e clorofórmio, empregando uma proporção molecular de A’’’:XXIII no âmbito de aproximadamente 0,8 ;1 a aproximadamente 1,2:1 para formar a amida XXIV

A amida XXIV é oxidada por tratamento com um agente de oxidação, tal como, dióxido de manganésio, na presença dum solvente inerte, tal como, clorofórmio, para formar o ester ICa

Os esteres IA', IA, IBa e ICa podem ser convertidos nos ácidos correspondentes, isto é I¹

tratando os esteres com uma base, tal como, hidroxido de liitio, hidroxido de sódio ou hidroxido de potássio, para formar o sal de metal alcalino correspondente, seguido de neutralização com um ácido, tal como, ácido clorídrico diluído ou ácido oxalico para formar os compostos ácidos do invento.

Os compostos da formula I, na qual Z é —(CH ) * i podem ser preparados a partir do ácido I submetendo a hidrogenação usando, por exemplo, um catalisador de hidrogenação, tal como, paládio em carvão vegetal, na presença dum solvente orgânico inerte, tal como, acetato de etilo (EtOAc) ou ácido acético (AcOH) para formar o ácido do invento I (Cã₂)^(CS₂)₂-(CE₂)_n-COOH

-24ο

Os compostos do invento em que R é CONHSO^R -, isto

sao preparados tratando o acido I ou I com uma sulfo— namida da estrutura C_

O

C H-NS-R “ 2 II na presença dum agente de acoplamento, tal como, carbo— nildiimidazolo ou WSC na presença duma aminda, tal como, 4-dimetilaminopiridina numa atmosfera inerte, tal como, ãrgon, empregando uma proporção molecular de 1 2

C:I ou I nos limites de aproximadamente 0,8:1 a apro3 ximadamente 1,2:1, para foraar sulfonamída I , * X 2

Os ácidos I ou I podem ser convertidos nos esteres alquilicos correspondentes tratando os ácidos I e I² com o álcool apropriado sob catalisadores ácidos para formar os esteres.

Os compostos do invento em que R é -CH -5-tetrazolilo

4C e Z é -(CH^)2“ isto β I

sao preparados submetendo os esteres IA’, IA, IBa e ICa ou os esteres de 1^ a redução com um reagente liidreto, tal como borohidreto de litio ou borohidreto de sodio, para dar o álcool XXV

XXV

que é convertido no brometo em tratamento com dibrometo de trifenilfosfónio num solvente inerte, tal como, tolueno. 0 brometo é então convertido a nitrilo XXVI em tratamento coin um cianeto de metal alcalino num solvente polar, tal como, metano1/água.

π

Ο nitrilo XXVI é então submetido a uma reacação de cicloadição tratando XXVI com azida de sódio na presença de cloreto de amónio, dimetilformamida e cloreto de litio a uma temperatura de aproximadamente 100?C até aproximadamente 130?C para formar I .

Os compostos do invento em que R é -CH^-õ-tetrazolilo, e Z é -CH=CH-, isto é, I⁵

sao preparados tratando hemiacetal D (preparado descrito na Patente dos EUA n?. 4.654.356) como

com um reagente Wittig da estrutura E

Br® N—N

E (C₆B₅ )₃P®(CH₂ )_n+to |

N—N

I

H na presença duma base, tal como, t—butoxido de potássio ou hidreto de sodio—dimetil sulfáxido empregando uma proporção molecular de D:E dentro dos limites de aproximadamente 1:1 a aproximadamente 0,2:1 para formar o composto hidroximetil XXVII

'/ ch₂oh

que e tratado cora o composto protector F

F Pro-halogeneto por exemplo, eter bromometil metilico na presença de base para formar o tetrazolo XXVIII protegido

XXVIII _N—_N

O tetrazolo XXVIII protegido pode ser usado em lugar do composto hidroximetilo H para formar os vários compostos da formula XXIX em que X é O, S ou NH

que é desprotegido por tsãtamento com ácido aquoso, tal como, ácido clorídrico, para formar compostos do invento

I

-29Os compostos da formula I em que R é CONHR^^a em que R^^a não pode ser H podem ser preparados a partir do ácido I⁶ correspondente

tratando ácido I com cloridrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3~etilcarbodiimida na presença de dimetilformamida,

1-hidroxibenzotriazolo e uma base organica, tal como, tríetilamina e amina G

G HNHR^3â para formar a amida do invento I

na qual R^3a é alquilo inferior, arilo ou aralquilo.

-30Os compostos da formula I, na qual R é CONH podem r 6 ser preparados a partir do acido I correspondente, empregando o processo acima descrito para preparar a amida Τ' excepto que é usado cloreto de amónio em lugar de 8 amina G para formar a amida do invento I

Os compostos da formula I na qual R e CH OH podem ² 9 ser preparados a partir do ester correspondente I

o qual é tratado com um agente de redução, tal como, borohidreto de litio (LiBH^) num solvente inerte, tal como, eter dietilico ou tetrahidrofurano para formar o álcool Ι^θ

Os compostos deste invento tem quatro centros de assimetria, conforme indicado pelos asteristicos na formula I. No entanto, é evidente que cada uma das formulas acima apresentadas que não inclua asteristicos continua a representar todos os seus estereoisomeros possíveis. Todas as várias formas estereoisoméricas estão dentro do âmbito do invento.

As várias formas estereoisoméricas dos compostos do invento, nomeadamente, cis-exo, cis-endo, e todas as formas trans e pares estereoisoméricoa podem ser preparados empregando materais de partida e seguindo os processos, conforme delineado na Patente dos EUA n?. 4,143,054, Exemplos desses estereoisomeros estão apresentados a seguir

(cis-endo)

-(CH₂)_n-R ^R²

-(c^H2)_n-R ^XR² (trans)

Id

O R II / C-N ^R²

2'η (trans)

O núcleo em cada um dos compostos do invento é representado como

por qvfestão de conveniência ; também deve ser frizad que o núcleo nos compostos do invento pode ser repre sentado como

3'4

Os compostos deste invento são antagonistas dos receptores de tromboxano e, como tais, são uteis como inibidores das acções que medeiam o receptor de tromboxano. 0 termo antagonista do receptor de tromboxanoj inclue compostos que são chamados antagonistas do receptor de tromboxano A₂» antagonistas de tromboxano A₂, antagonistas de tromboxano A^/endoperóxido de prostaglandina, antagonistas do receptor-TP ou antagonistas de tromboxano.

Os compostos do invento são também inibidores da sintetase de tromboxano e consequentemente são uteis como inilidores da produção de tromboxano.

Os compostos deste invento são utéis como inibidores da função de plaquetas, isto é, para a prevenção e tratamento de distúrbios oclusivos, vasculares, trombósicos, quer completos ou parciais, por exemplo, trombose arterial, incluindo a das coronárias, cerebral, oftalmica, hepática, mesentérica, renal, artérais periféricas ou enxertos vasculares ou de orgãos, angina instável, ataques isquémicos transientes, ou claudicação intermitente. Podem ser ainda uteis para prevenir a trombose a seguir ao dano vascular produzido no decurso de processos diagnósticos ou terapêuticos, tais como, endarterectomia ou angiografia. Os compostos podem ser uteis no tratamento ou prevenção de distúrbios caracterizados por consumo de plaquetas e/ou activação, incluindo, activação de plaquetas, disfunção e/ou parda durante circulação extra—corporal, o uso de agentes para contraste radiográfico, purpura trombocitopenia trombósica, coagulação intravascular disseminada, purpura fulminans, reacção a transfusão hemolitica, ou síndroma urémico hemolitico, lupus sistémico, toxicidade

renal induzida por ciclosporina, hipertensão pulmonar, efeitos secundários provenientes de diálise, ou tratamento de aneurisino aortico abdominal. Os compostos podem ser usados no tratamento de trombose venosa o>i embolismo, incluindo embolismo pulmonar, trombose venosa profunda, trombose na veia hepática e trombose na veia renal .

Os compostos deste invento são uteis como inibidores de vasoconstricção arterial ou venosa. Nesta conformidade, podem ser utilizados para prevenir a vasoconstricção associada com angina instável, angona estável crónica, e variante, ou angina de Prinzmetal, sindroma de Raynaud, dôr de cabeça provocada por migraine, vasoespasma dos enxertos nas coronárias, cerebrais, oftálmicos, hepáticos, mesentéricos, renais, artérias periféricas ou vasculares, danificação vascular, tal como a associada com cirurgia ou trauma. Hipertensão de gravidez, sindroma hepato-renal, e hipertensão pulmonar são exemplos adicionais de distúrbios vasoconstrictores trataveis pelos compostos deste invento.

Os compostos deste invento são uteis como inibidores de broncoconstricção, isto é, hipersensibilidade a viagens aéreas, broncospasma alérgica, asma e respostas broncoconstri c ti vas a estimulo e ambientais, infecciosos, nocivos ou mecânicos.

Os compostos deste invento são uteis como inibidores de danificação isquémica e reperfusão a vários tecidos, incluindo miocárdio, pele, cérebro, intestinos ou rins, só ou em combinação com outros agentes destinados a restabelecer o fluxo sanguineo. Por exemplo, estes compostos podem ser uteis para melhorar a função miocardial pos—

- 36 -isquémica e reduzir a dimensão do infarte do miócardio. Isquemica provocada por redução do fluxo sanguíneo durante processos diagnósticos ou terapêuticos podem beneficiar por tratamento com estes compostos, por exemplo, reduzem o choque miocardial observado após a cirurgia de by-pass. Além disso, podedi ser uteis para reduzir a danificação nos tecidos provocada por uma pancada.

Os compostos deste invento podem ser uteis na prevenção ou tratamento de outros estados incluindo queimaduras, retinopatia diabética, metastases de tumores e disquinesia tardiva. Os compostos podem ser usados para potenciar a diurese induzida por diuréticos.

Para mais, os antagonistas do receptor de trombo— xano deste invento podem ser usados com um agente trom— bolitico tal como t-PA, estreptoquinase, uroquinase, prouroquinase ou complexo activador de estreptoquinaseplasminogeno anisoilado (APSAC) num período de 6 horas dum infarte de miocardio, Nesse caso, o agente trombo— litico podem ser usado em quantidades usadas convencionalmente, por exemplo, como revelado em Physicians'

Desk Reference, para reduzir o dano miocardial pós-isquémico.

Os compostos do inveato podem ser administrado oral ou parenteralmente a várias espécies mamíferas que se sabe serem sujeitas a essas doenças, por ex., humanos, gatos, cães e análogos numa quantãdade efectiva dentro do âmbito de dosagem de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 100 mg/kg, de preferencia aproximadamente 0,2 a aproximadamente 50 mg/kg e mais preferentemente de cerca de 0,5 a cerca de 25 mg/kg (ou de aproximadamente 1 a aproximadamente 2500 mg, de preferencia de aproximadamente 5 a aproximadamente 2000 mg) num regima de doses únicas ou 2 a 4 divididas diariamente.

- 37 ^χιΊ·

Os derivados de oxazolo do invento, isto é, compostos da formula I, em que X é O têm duração de acção particularmente longa e podem ser administrados, caso se desejar, nas dosagens acima indicadas uma vez por dia, uma vez em dias alternados ou, caso se desejar, uma vez por dia, duas vezes por semana.

A substancia activa pode ser utilizada numa composição tal como, comprimido, cápsula, solução ou suspensão contendo cerca de 5 a cerca de 500 mg por unidade de dosagem dum composto ou mistura de compostos da formula I ou numa forma tópica para sarar ferimentos (0,01 a 5/& em pêso do composto da fórmuEa I, 1 a 5 tratamentos por dia). Podem ser compostos de maneira convencional com um veículo ou transportaafor, excipiente, ligante, conservante, estabilisante, aroma, aceites fisiologicaraente, etc. ou com um transportador tópica, tal como Plastibase (óleo mineral com gel com polietileno), conforme fôr indicado pela prática farmacêutica aceite. Também como indicado na explicação acima, certos membros adicionalmente servem como intermediários para outros membros do grupo.

Os compostos do invento podem ser também administrados topicamente para tratar doenças vasculares periféricas e como tal podem ser formulados como creme ou pomada.

Os Exemplos seguintes representam formas de execução preferidas do presente invento. Desde que não haja indicação em contrario, todas as temperaturas são expressas em graus centígrados.

- 38 •ή

Exemplo 1 ácido /1S-/ÍX , 2s((Z),3x,5í7-/-6-/5-/5-/2Í5-cic lohexilbutil )amino7carbonil/-2-oxazolil7-7-oxabiciclo/2.2.l^hept2-il7-5-hexenoico

A. /^1,1-dimetiletoxi)carbonil7~N(5-ciclohexilbutil )-L-serinaniida

A uma solução de 575 mg de cloridrato de 5-ciclohexilbutil araina (3,0 mmole), 615 mg de t-butiloxi carbonil-Lserina (3,θ mmole, 1,0 equiv), 505 mg de hidrato de 1-hidroxibenzotriazolo (3,θ mmole, 1,0 equiv) e 3θ7 mg de diisopropiletllamina (3,θ mmol, 1,0 equiv) era 10 mL de tetrahidrofurano anidro (THF) com agitação, sob árgon a O?, foram adicionados 6l8 mg de 1,3-diciclohexilcardodiimida (3,0 mmole, 1,0 equiv) numa só porção. Formou-se um precipitado lentamente. Passada 1 hora, a mistura foi aquecida para temperatura ambiente e agitada durante 5 horas. Depois da diluição com acetato de etilo, a mistura foi filtrada e o filtrado foi lavado com uma solução de sal pH 1 (formada misturando água, salina e solução HC1 aquosa 1 M). Mais lavagem (dãas vezes) com NaHCO^ 1M foi seguida secando sobre Na^SO^ e evaporação paira dar

1,1 g da amida do título em bruto,

TLC (10$ /NH^ aquoso conc. 10$ em CH^OH/ em

CH₂C1₂ - anisaldeído):

ciclohexilbutilamina HC1 0,27 amida do título 0,57

B. N-(5-ciclohexilbutil)-L-serinamida

A uma solução de 1,1 g da amida da Parte A, em bruto, em 5 ml de CH₂C1₂ à temperatura ambiente, foram adicionados

1'

-394 mL de ácido trifluoroacético. A mistura foi agitada durante 4 horas. Depois da evaporação do solvente, foi eliminado o ácido trifluoroacético residual azeotropicamente por rotoevaporação com CHC1_. A cromatografia instaàtanea (ΐ5θ S de silica, 10^ /NH^ aquoso, concentrado 10J& em CH^OH/ em CH₂C1₂) deu, depois de azeotropar com tolueno e exposição a alto vácuo, 495 ^mg da amina do titulo pura, na forma dum sólido branco. O rendimento da amina do título era de 68[ sobretudo de cloridrato de 4-ciclohexilbutil amina.

TLC (l0$ /NH^ aquoso conc. 1<J$> em CH^OH/ em CH^Cl^anisaldeído):

Amida da Parte A 0,47 amina do título 0,17 ¹³C NMR (67.8 MHz in CDC1₃):

173.4, 64.6, 56.3, 39.1, 37.3, 36.9, 33.1, 29.6,

26.5, 26.2, 24.0

C. ácido /IS-/1*,2<(Z)„3*,4*//-6-/3-(hidroximetil)-7-oxabiciclo/2.2.l7hept-2-il7~4hexenoico, ester metilico

A uma solução parcial de 36,27 g de /AaR-(4a«f, 5/3,8/3, 8a/3 )_/-octahidro-5, θ -epoxi-lH-2-benzopiran~3—o 1 (preparado conforme descrito na Patente dos EUA n?. 4.143*054) (O,23 mole) e brometo de 3-carboxipropiltrifenilfosfónio (127,3'⁴ g, 0,37 mole) em 600 mL de ΤΓΈ anidro sob árgon a 3-0 foi adicionada, gota a gota, durante 1 hora, uma solução de 370,6 mL de t-amilado de potássio (0,68 mole duma solução de tolueno 1,8M) com agitação mecanica. Inicialmente a temperatura de reacção atingiu um máximo de 8?C e nivelou-se subsequentemente paVM ra 4?C no restante da adição de base. A reacção foi então realizada à temperatura ambiente durante 90 minutos. Foi introd uzido um banho de gêlo a O?C e a reacção foi extinta pela adição de 152'mL de ácido acético glacial, durante 30 minutos. Os solventes foram eliminados no vácuo (azeotropados com tolueno). Foram adicionados água (640 mL) e 5θ de HC1 concentrado (pH 2,6). A diluição com 640 mL de acetato de etilo, a adição de 149 g de NaCl e alguns cristais de semente de brometo de 3-carboxipropiltrifenilfosfónio foi seguida de agitação vigorosa durante 15 minutos. O precipitado foi recolhido por filtragem e lavado com 2 porções, cada uma de 320 mL de acetato de etilo. A fase de acetato de etilo foi separada, a fase aquosa foi extraída com acetato de etilo (2 x 200 mL, cada), as fases de acetato de etilo combinadas foram sêcas sobre MgSO^ e concentradas. Foi adicionado K^CO^ a 5$, aquoso (507 AL) seguido de agitação vigorosa durante 1 hora. Não ocorreu nenhuma precipitação. A mistura de reacção foi concentrada numa pasta e suspensa em 508 mL de água. Varias horas de agitação vigorosa não produziram nenhum precipitado. A água foi decantada e o resíduo foi suspenso em 200 mL de solução de K^CO^ a 5^, aquosa. Depois de agitação vigorosa, foi recolhido um sólido castanho claro por meio de filtração e lavagem várias vezes com água. As fases aquosas combinadas foram extraídas 5 X com 1:1 de tolueno/eter (230 mL cada). Depois de arrefecimento das fases aquosas, combinadas com um banho de gelo a 0?C, foi adicionado HC1 concentrado a pH 2,5, seguido de extracção com 1 X de 460 mL, seguida de 2 X de 23θ mL de acetato de etilo, de cada vez. As fases de

- 4l acetato de etilo combinadas foram secas sobre MgSO^ e evaporadas no vácuo para dar 49,74 dum óleo ambar.

Λ trituração de 3?O mT, de eter (temperatura ambiente, durante a noite) fez produzir sub-produtos fosforosos oleados. A solução de eter foi decantada do óleo vermelho escuro para dentro dum funil separador, e o óleo que foi retirado pela decantação, foi escoado para fora (l,5ú g). A evaporação da solução de eter no vácuo deu 43,08 g de ácido /ÍS-^l·/, 2.d. (7 ) , 3A, 6-/3-hidroximetil)-7-oxabiciclo/2.2.l7hept-2-il/-4hexenoico na forma dum óleo amarelo, viscoso.

XMR indicou um produto: óxddo de trifenilfosfina; proporção molecular de eter de 23:1:1,8 (massa $ 93:4,7:2,2). Rendimento exlusivo de óxido de trifenilfosfina/eter, 4θ,θ6 g (72,5$).

Foi adicionado gota a gota cloreto de acetilo (5,20 mL, 0,073 mole) a 80 mL de metanol à temperatura ambiente, sob argon. A solução de cloreto de acetilo/metanol foi então adicionada a uma solução de 42,98 g (o,l8 mole) em 700 mL de metanol duma só vez. A agitação continuou durante 3 horas. Foi adicionada tríetilamina (0,09 mole, 12,21 mL), foi eliminado metanol no vácuo, e o resíduo foi distribuído entre 300 mL de acetato de etilo e 150 mL de água. Depois da separação das fases, a fase aquosa foi extraída com 150 mL de acetato de etilo, as fases de acetato de etilo combinadas foram lavadas com salina, secas sobre Na^SO^ e evaporadas no vácuo para dar 43,06 g dum óleo castanho, viscoso. Acromatografia instantanea em 1350 g de Kieselgel E.

-42.Merck silica gel 6θ (240-400 malhas, 75/25 eter/hexanos, a seguir eter depois do produto pretendido começar a eluir para fora da coluna) deu 35,74 g do ester do titulo na forma dum óleo amarelo claro, viscoso, livre de óxido de trifenilfosfina por NMR.

NMR (CDC1₃, ref. TMS): δ 5.41-5.38, m (2H); 4.49, d, J=4.69Hz (1H); 4.22, d, J=4.69Hz (1H);

3.73-3.69, m (1H); 3.67, s, (3H); 3.60, m (1H);

2.37, br s (4H); 2.12-1.99, m (3H); 1.97-1.85, m (1H); 1.72, m (2H); 1.46, m (2H).

¹³C NMR (CDC1₃, ref. 77.00): δ 173.50, 130.42,

128.63, 80.23, 79.22, 61.74, 51.49, 48.95, 46.45,

33.86, 29.69, 29.31, 25.94, 22.92

D. ácido /ÍS-/Ix,2^(Z ),3^, 4^77-6-/3-( carboxi)7-oxabiciclo/2.2.l7hept-2-i )7^^-h exenoi co, ester metilico

A uma solução de 2,43 S de álcool impuro, Parte C (80% puro = 1,94 g, 7,6 mmole, contaminado com óxido de trifenilfosfina) em 40 mL de acetona sob árgon a 0?, foram adicionados lentamente 8 mL de Reagente de Jones (2,6 M em Cr^). A côr vermelha do reagente persistiu até ao final da adição. Esta mistura precipitada, resultante, foi agitada durante 20 minutos antes de ser adicionado 2-propanol para extinguir o reagente em excesso. Ainda a O?, foi adicionada solução NaFSO^ aquosa 3 M com agitação até se terem dissolvido todos os sais. Foi adicionada salina, seguida de extracção (3 vezes) com acetato de etilo. Depois da secagem dos extractos sobre Na^SO^ e evaporação do solvente, cromatografia instantanea (150 S de silica

- 43 25% ^a 4ϋ% /ácido acético a 5% em acetato de etilo_7 em gradiente de hexano), depois da eliminação azotrópica do ácido acético com tolueno, 1,91 g dum oLeo. Este óleo era ácido do título impuro (ttO% puro = 1,53 St contaminado com óxido de 'rifenilíos fina), obtido em 75% de rendimento .

TLC (ácido acético a 5% em acetato de etilo) en hexano anisaldeído):

álcool da Parte C 0,33 ácido do titulo 0,35 ¹³C NMR (67.8 MHz in CDCl₃):

175.3, 173.1, 129.1, 128.8, 78.0, 78.0, 51.6,

51.1, 47.4, 33.5, 28.8, 28.5, 26.9, 22.5

E. ácido /ÍS-/ía.2í<(z),3_í4(r* ),^/-6-/3/7/2-/14 -ci clohexi lbuti 1 )amino/^-l- (hidroximeti 1 )-2-o xo eti l/amino/carboni lJ7-7-oxabi ciclo/2.2.l7hept-2-il/-4-hexenoi co, ester metilico

A uma solução de 733 mg de ácido da Parte D, impuro (80% puro = 586 mg, 2,2 mmole, 1,1 equiv. contamina o com óxido de tri f eni lfosfina) em 4 mL de tetrahi- drofurano anidro (THF) sob árgon foram adicionados 356 mg de 1,1’-carbonildiimidazolo (2,2 mmole, 1,1 equiv), e a mistura foi deixada durante 1 hora. Como se formou um grande volume de precipitado, foram adicionados 5 mL de THF anidro e a mistura foi aquecida suavemente para ser obtida uma solução. (TLC mostrou um acilimidazolo estável). Após agitação 30 minutos, foi adicionada uma solução de 495 mg da amina da Parte B (2,0 mmole) em 10 mL de THF anidro, usando um adicional de 5 mL de

THF para se transferir quantitativamente a amina. TLC da mistura homogenea, passada 1 hora de agitação à temperatura ambiente, indicava uma reacção muito lenta. Por isso, HF foi evaporado passando árgon sobre a mistura, durante a noite, ate o seu volume se ter reduzido para 2 mL e se ter formado um precipitado. A adição de 5 mL de THF redíssolveu todo o precipitado. Passadas 5 Horas de mais agitação, a mistura foi evaporada e a cromatografia instantanea (150 S de silica, a 100^ de acetato de etilo em gradiente de hexano, depois θΤ> a 10'£

CH^OH em gradiente de acetato de etilo) deu 230 mg de hidroxibisamida do título, pura, na forma dum óleo. O rendimento da hidroxibisamida do título era de 23^·

Também foram isoladas a aminoesteramida isomérica (27%) θ o aducto 2:1 (l6%). Estes sub-productos puderam ser convertidos em bons rendimentos na hidroxibisamida do titulo por transesterificação com KCN em CH^OH à temperatura ambiente, embora a aminoesteramida possa isomerizar espontaneamente.

TLC (5θ^ /ácido acético a 5% acetato de etilo/ em hexano — anisaldeído):

amina da Parte B 0,00 ácido da Parte D 0,38 acilimidazolo 0,18 hidroxibisamida do título 0,22 aminoesteramida 0,04 aducto 2:1 0,33

13C NMR (67.8 MHz in CDC13): 173.3, 172.8, 170.4, 129.2, 129.0, 78.9, 78.8,
62.7,	54.0,	53.8,	51.3, 47.9, 39.4, 37.3, 36.9,
33.6,	33.1,	29.5,	29.4, 28.6, 27.2, 26.4, 26.1,
24.0,	22.6

F. ácido /lS-/Í«,2x(z),3,<(R*)_tM27-6-/3-/7iCF 'i-ciclohexi lbuti 1)amino^carboni 1^-4, 5-dihidro-2-oxazolil7~7-oxabici c lo/2.2. l7hept2-il~⁷-4-hexenoico, ester metilico_

Este produto químico está descrito por M.J. Miller, P.G. Mattingly, Μ.Λ. Morrison, e J. F. Kerwin, Jr.,

J. Am.Chem. Soc., 1980, 102. 7026.

A uma solução de 240 mg de hidroxibisamida da Parte E, pura (0,48 mmole) em 3 mL de THF anidra, sob árgon a temperatura ambiente, foram adicionados 189 mg de trifenilfosfina (0,72 mmole, 1,5 equiv), 73 mg de trietilamina (0,72 mmole, 1,5 equiv.) e 89 mg de CC1, (O, 58 mmol, 1,2 equiv) e a mistura foi aquecida em refluxo. Passada 1 hora foram adicionadas outras aliquotas tanto de CCl^ como de trietilamina e passadas 2,5 horas, mais outras aliquotas de cada um, outra vez. 2 horas mais tarde, outras aliquotas tanto de CCl^ como de trietilamina e metade duma aliquota (95 mg) de tri feni lfosfi na foram adicionadas. Passadas mais 2 horas, TLC indicava finalmente o consumo completo de hidroxibisamida da Parte E, e a mistura homogénea, inicialmente incolor tinha formado um precipitado branco e tinha escurecido.

A evaporação do solvente foi seguida por cromatografia instantanea (silica, 15$ acetona em tolueno) que produziu 190 mg de oxazolina do título, pura, um óleo.

A oxazolina foi obtida com um rendimento de 83$.

-46TLC (20$ acetona em tolueno - anisaldeído) :

hidroxibisamida da Parte E 0,0?

oxazolina do título 0,29 ¹³C NMR (67.8 MHZ in CDClg):

173.1, 171.2, 169.1, 129.3, 128.9, 79.0, 78.9, 69.6, 68.3, 51.3, 48.2, 46.3, 39.0, 37.4, 36.9, 33.7,

33.1, 29.6, 29.5, 28.7, 27.1, 26.5, 26.2, 24.0,

22.7 π n

G. acido /is-/ÍúG2«(z),3^4aJ7-6-/3-/4-//7(4ci clohexilbuti1)aminq7carbonil7-2-oxazo lil7~ —7—oxabicic lo£2.2 . l^/hep t—2-i h—hexenoi co, ester metilico _______

Este produto químico está descrito por D.L.Evans,

D.K. Minster, U. Jordis, S.M. Hecht, A. I.. Mazzu,

Jr., e A.I. Meyers, J, Org. Chem., 1979, 44, 497.

A uma solução de 190 mg de oxazolina da Parte F pura (θ,4θ mmole) em 10 mL de CHCl^, foram adicionados 200 mg de Νϊ0₂ não-titulado e a mistura heterogénea foi agitada à temperatura ambiente. TLC indicava um certo progresso na primeira hora, mas a seguir a reacção parou. Durante 1 dia, foram adicionadas cinco aliquotas mais do reagente até a reacção estar completa. A mistura foi diluída com acetato de etilo e esta foi agitada com solução de NaHSO^ aquosa 3 até a côr preta de NiO^ ter desaparecido e a maioria dos sólidos se ter dissolvido. A extracção (3 vezes) com acetato de etilo foi seguida secando sobre Na^SO^ e evaporação.

A cromatografia instantanea (silica, gradiente 25^ a 35% acetato de etilo em hexano) deu 90 mg de oxazolo

-47do titulo, puro, um sólido. C oxazolo foi obtido com um rendimento de ''8^.

TLC (100$ acetato de etilo - anisaldeido):

oxazolina da Parte F 0,52 oxazolo do título 0,8l

13C NMR (67.8 MHZ in CDCl,):
173.2,	163.8, 160.5, 140.4,	136.0, 129.4,	128.5,
79.5,	79.3, 51.4, 49.6, 46.	6, 39.0, 37.4,	37.0,
33.7,	33.3, 29.8, 29.7/ 28.	9, 27.8, 26.6,	26.3,
24.1,	22.7

H. ácido /ÍS-Zlx,2x(Z),3x,^77-6-/3-/4-/77(^ciclohexilbutil)aminq7carbonil/—2-oxazoli i77—oxabiciclo/2.2.l7bept—2—il7~4—hexenoico

A 90 mg de oxazolo da Parte G, puro (0,19 mmole) em 4 mL de CH^OH à temperatura ambiente, foram adicionados 2 mL de solução de NaOH aquosa 1,0 M. Depois de agitação da mistura durante 1,3 horas, foi adicionada solução de HC1, aquosa, 1 M para baixar o pH para 1. A extracção com acetato de etilo (3 vezes) foi executada a seguir. Os extractos foram secos sobre Na SO^ e a evaporação do solvente deu o ácido do título, em bruto.

A cromatografia instantanea (25 a 50^ /5^ ácido acético em acetato de etilo/ em gradiente de hexano) deu, depois da eliminação azeotrópica do ácido acético com tolueno, 71 mg do ácido do título, puro, como um sólido. O rendimento do ácido do título era de 8l$.

-48TLC (5θ^ /5^- ácido acético em acetato de etilo/etn hexanoanisaldeído):

oxazolo da Parte G 0,43 ácido do titulo 0,25 ¹³C NMR (67.8 MHz in CDC1₃):

176.9, 163.9, 160.7, 140.9, 135.7, 129.5, 128.4,

79.5, 79.3, 49.6, 46.5, 39.1, 37.4, 36.9, 33.7, 33.2, 29.7, 29.7, 28.8, 27.8, 26.6, 26.2, 24.1, 22.5

Exemplo 2 acido ,2X(Z),3/, 4///-6-/3-/4-//7 4-ciclohexilbuti 1 )meti lamino/carbonil/-2-oxazolil/-7-oxabiciclo/2 «2.l/hept-2-il7 -4-hexenoico

A. N-//l,l-(di metiletoxi)carbonil/—O— (fenilmetil)-L-serina, ester 2-(trimetilsilil )etilico _

Este produto químico está descrito por P. Sieber, Helv. Chim. Acta, (1977), 6θ, 2711.

A uma solução de 20,7 S de N—t—butiloxi— carbonil-0-benzíl-(L)-serina, (70 mmole), 11,0 g de piridina (139 mmol, 2,0 equiv) e 9,9 g de

2-trimetilsililetanol (84 mmole, 1,2 equiv) em 50 mL de CH^CN anidro com agitação, sob ãrgon, a O⁹, foram adicionados 15,8 S de 1,3-diciclohexilcarbodiimida (76 mmole, 1,1 equiv) duma só vez. Formou-se um precipitado. Passadas 3 horas, a mistura foi aquecida para temperatura ambiente e agitada durante 12 horas. Foi adicionada uma solução de 1,4 g de dihidrato do ácido oxálico (ll mmole, 0,15 equiv) em 3 mL de dimetilformamida (DMF) e a mistura foi agitada durante 1 hora antes da filtração. 0 bolo do filtro foi lavado com acetato de etilo até o filtrado estar

-49livre do ester do título. O filtrado foi lavado duas vezes com solução de HC1 aquosa, 1 M, mais salina e duas vezes com solução de NaHCO^ aquosa, 1 Μ. A secagem sobre Na_pSO^ e evaporação deu 34,8 g do ester do título, em bruto (79$ puro = 27,6 g, contaminado com solvente e 2-trimetilsili 1etanol) como um óleo em 100$ de rendimento.

TLC (50$ /5$ de ácido acético em acetato de etilo7 em hexano — anisaldeído):

N-BOC—O—benziil—(i,) —serina 0,40 ester da parte A 0,84 ¹³C NMR (67.8 MHz in CDC1₃): 170.5, 155.3, 137.5,

128.2, 127.6, 127.4, 79.5, 73.0, 69.9, 63.6, 54.0,

28.1, 17.2, -1.7

B. N—/?!,1-dimetiletoxi)carbonil/-Lserina, ester 2-(trimetilsili1)etilico

A uma solução de 3^,θ S de ester da Parte A, em bruto (79$ puro = 27,6 g, contaminado com solvente e 2-trimetilsililetanol, 70 mmole) em 200 mL de acetato de etilo mais 300 mL de ácido acético à temperatura ambiente, sob ãrgon, foram adicionados IO g de catalisador de 10$ Pd em carbono. A mistura foi nessa altura agitada sob uma atmosfera de durante 4 dias. TLC mostrou a conversão quase completamente limpa. A mistura foi filtrada através duma membrana de policarbonato e depois da evaporação do solvente, o ácido acético residual foi eliminado, azeotropando com tolueno e CH^Cl^. A cromatografia instanta— nea (750 S de silica, 10$ a 30$ de acido de acetato de etilo em gradiente de hexano) deu 3,58 g do material de

-50saída, puro, ester da Parte A, (l3$ de rendimento) e l6,49 g de ester desbenzilado do título, puro, na forma dum óleo, O rendimento do ester do título era de 78$·

TLC (25% acetato de etilo em hexano - anisaldeído):

ester da Parte A ester da Parte B

0,61

0,28

NMR (67.8 MHz in CDCl₃): 170.9, 155.6, 79.9,

63.8, 63.0, 55.8, 28.1, 17.2, -1.7

C, L-serina, ester 2-(trimetilsili1)etilico, monocloridrato_

Este proliuto quimico está descrito por P. Sieber,

R.H. Andreatta, K„ Eisler, B, Kamber, B. Riniker e H, Rink, Peptides: Proceedings of the Fifth American Peptide Symposium, M, Goodman and J. Meienhofer, Eds, Halsted Press, New York. (1977) PP· 543-545.

A uma solução de 10,4 g de ester da Parte B (34,1 mmole) em 200 raL de eter dietilico foram adicionados 40 mL duma solução de aproximadamente HCl/metanol/acetato de metilo 6,5 M (260 mmole), (Esta solução foi preparada adicionado 42 g de cloreto de acetilo (0,54 mmole) gota a gota a 35 g de metanol (l,l mmole) com agitação a O? seguida de agitação à temperatura ambiente durante 2 horas). A mistura foi então agitada durante 4 horas, altura em que se desenvolveu gás lentamente. Com agitação num banho à temperatura ambiente, foram adicionados cautelosamente 32,8 g de NaHCO^ (390 mmole ) em pequenas porções para controlar a evolução do gás durante a neutralização. A mistura foi filtrada através de frita de vidro, usando 50$ de

-51metanol em eter dietilico para lavar o bolo do filtro.

A evaporação do solvente deu 8,06 g do cloridrato da amina do título, quase puro, em bruto, semi-sólido.

Este material pode ier sido só um sal parcial, mas assumindo ser um sal 1:1 puro, o rendimento foi de 98£.

TLC (lC^ /10$ aquoso, concentrado em CH^OH) em

CH^Cl,-anisaldeído):

ester da Parte B 0,63 amina da Parte C 0,22 ¹³C NMR (67.8 MHz in CDCl₃): 171.3, 63.9, 61.9,

55.5, 17.1, -1.8

D. ácido /ÍS-/ÍX, 2x(z),3x(r*),Ux7/-6-/3-/ZZi(hidroximetil)-2-oxo-2-/(trimetilsilil)etoxi7etil7amino7 carbonil7-7-oxabiciclo/2.2.l7hept-2-il/-4-hexenoico, ester metilico

A uma solução de 9,40 g, Exemplo 1, do ácido da Parte D (85$ puro = 7,99 g, 29,8 mmole), 8,04 g de cloridrato da amina da Parte C, quase puro, em bruto (95¹# puro = 7,60 g, 31,6 mmole, 1,06 equiv), 4,43 g de hidrato de 1-hidroxibenzotriazolo (32,8 mmole, 1,1 equivalente) e 4,24 g de diisopropiIetilamina (32,8 mmol,

1,1 equiv) em 50 mL de THF anidro, com agitação, sob árgon, à temperatura ambiente, foram adicionados aproximadamente 6,8 g de 1,3—diciclohexilcarbodiimida (33 mmol, 1,1 equiv) numa única porção. Formou-se lentamente um precipitado. Passadas 16 horas, o solvente foi evaporado e a cromatografia instantanea (silica, 3C’' 1OC$ acetati de etilo em gradiente de hexano( deu um

-52óleo contendo um sólido. Este material foi retomado em eter dietilico no qual o solido nao se dissolveu e foi filtrado. A evaporação deu 9,45 g da amida do título quase pura (90$ pura = 8,51 g), um óleo limpido. O rendimento da amida do título era de 63$.

TLC (10$ /10$ de NH^ aquoso CH₂C1₂ - anisaldeído):

amida da Parte C amida da Parte D concentrado em CH^OH/

0,37

0,65 em

TLC (50$ /5$ de ácido acético em acetato de etilo/ em hexano - anisaldeído):

Exemplo 1, ácido da Parte D 0,42 amida da Parte D 0,36 ¹³C NMR (67.8 MHz in CDC1₃): 173.5, 172.4, 170.3,

129.4, 129.1, 79.2, 79.1, 63.9, 63.2, 54.6, 54.5,

51.4, 47.8 33.7, 29.7, 28.5, 27.3, 22.7, 17.2, -1.7

E. ácido yis-/l flf, 2 »<(Z), 3* (R* ),4^//-6-23-/4,5dihidro-4-/^r/2-(trimetilsilil)etoxi7-carbonil72-oxazolil7-7-oxabiciclo-/2.2.l7hept-2-il7“^hexenoico, ester metilico

A uma solução de 8,3 g da amida da Parte D, quase pura (90$ pura = 7,5 g, ló,6 mmole) em 150 mL de CH^CN anidro, sob árgon, à temperatura ambiente (banho de temperatura ambiente) foram adicionados 13«! g de trifenilfosfina (50 mmol, 3»° equiv), 6,4 g de diisopropiletilamina (50 mmol, 3,0 equiv) e por fim 7,7 g de CCl^ (50 mmole, 3,0 equiv). Após agitação durante 2 horas, foi adicionada solução de NaHCO^ aquosa 1M, e

V a mistura foi extraída três vezes com CH₂C1₂.A secagem sobre Na^O^ foi seguida de evaporação e cromatografia instantanea (silica, 20£ a 5 O¹'-· de acetato de etilo em gradiente de hexano) que deu 5,9 g de oxazolina do título, quase pura ( 90# pura = 5,3 g), um óleo. A oxazolina foi obtida em 73^ de rendimento,

TLC (50^ de acetato de etilo em hexano - anisaldeído): amida da Parte D 0,20 oxazolina da Parte D 0,44 ¹³C NMR (67.8 MHz in CDCl₃): 172.7, 170.7, 169.0,

129.0 128.8, 78.3, 78.3, 69.0, 67.5, 63.2, 50.9,

48.1, 46.0, 33.4, 29.3, 28.4, 26.7, 22.4, 16.8, -2.0

F. acido /18-/1^,2^(2),3/,4^/-6-/3-/^-/22(trimetilsilil)etoxi/carbonil/-2-oxazolil77-oxabiciclo/2,2.l/hept-2-il/~4-hexenoico, ester metilico_

Este produto quimico está descrito por D.L. Evans,

D.K, Minster, U, Jordis, S.M, Hecht, A. L. Mazzu, Jr. e A. I. Meyers, J. Org. Chem., (1979), 44, 497A uma solução de 5,1 S de oxazolina da Parte E quase pura (9C^ pura = 4,6 g, 10,5 mmole) em 50 mL de CH₂C1₂, foram adicionados 10,1 g de Ni0_Q não-titulado e a mistura heterogénea foi agitada à temperatura ambiente. (Resultou uma reacção exotérmica na mistura, aquecendo um pouco), TLC indicou que a reacção estava quase completa passada 1 hora. Foi então adicionada uma outra aliquota, 2,0 g de Ni0₂» Passados 3θ minutos, a reacção estava completa e foram adicionados 15° mL de acetato de etilo. Para reduzir e dissolver os sais Ni, foram

- 54 adicionados 100 mL de solução de NaHSO^ aquosa 3 M e 200 mL de solução de citrato de trisódio, aquosa, 1 Μ, A agitação fez com que todos os sólidos se dissolvessem e a mistura aqueceu, A separação e extracção mais duas vezes com acetato de etilo (TLC indicou a extracção completa do oxazolo do titulo) foi seguida de secagem sobre Na^SO^ e evaporação. A purificação cromatografica instantanea dos 3,8 g do produto em bruto (l50 g de silica, 20$ a 75$ de acetato de etilo em gradiente de hexano) deu

2,6o g do oxazolo do título, puro, como um óleo, O oxazolo foi obtido com 57$ de rendimento.

TLC (50$ de acetato de etilo em hexano - anisaldeído): oxazolina da Parte Ε O, 34 oxazolo da Parte F O,58 ¹³C-NMR (67.8 MHz in CDC1₃): 172.9, 164.5, 161.0,

143.3, 133.0, 129.1, 128.4, 79.0, 78.9, 63.0 51.1,

49.5, 46.8, 33.5, 29.5, 28.7, 27.6, 22.5, 17.2, -1.8

G. ácido /fÍS-/lX,2X(Z),3X,4^7/-6-/3-(4carboxi-2-oxazolil)-7-oxabiciclo/2.2. hept-2-il7-4-b exenolco, ester metilico Este produto quitnico está descrito por P.Sieber,

R, H. Andreatta, K. Eisler, B. Kamber, B. Riniker, e

H. Rink, Peptldes: Proceedings of the Fifth American Peptide Symposium, M, Goodman e J. Meienhofer, Eds. Halsted Press, Nova York, (1977), pp. 5^3-545.

A uma solução de 3»1 S de osazolo da Parte F, puro (7,1 mmole) em 20 mL de DMF anidro sob árgon, foram adicionados 12,0 g de fluoreto de tetrabutilamónio

em silica (Fluka, 13,9 mmole, 1,96 equiv), e a mistura heterogenea foi agitada à temperatura ambiente durante 6 horas, A mistura foi diluída com 20 mL de 1$ de F^CCO^H, 1% de CH^OH, 98$ de acetato de etilo e filtrada usando 40 mL do mesmo solvente para lavar o bolo do filtro, O filtrado foi evaporado e azeotropado três vezes com tolueno para eliminar o DMF. O produto em bruào foi purificado numa resina permutadora de ôões: depois de lavar uma coluna de 250 g de AG 5OW-X8 (forma de hidrogénio) com água e depois 50$ CH^OH em água até o eluante estar incolor, o produto em bruto dissolvido em mL de 50$ CH^OH em água foi introduzido e a eluição foi realizada com o mesmo solvente. Esta deu 2,65 g de ácido de oxazolo do título, quase puro (90$ puro = 2,38 g) dum óleo. O ácido de oxazolo foi obtido com 10O$ de rendimento.

TLC (l$ F^CCO^, 1$ CH^OH, 98$ acetato de etilo anisaldeído):

oxazolo da Parte F 0,46 ácido de oxazolo da Parte G 0,15 ¹³C NMR (67.8 MHz in CD^OD): 175.0, 166.7, 163.8,

145.6, 134.2, 130.4, 129.7, 80.7, 80.7, 52.0, 50.7,

47.7, 34.6, 30.5, 29.7, 28.9, 23.8

Η, N—metil-4-ciclohexilbutilamina, monoclorldrato

A uma solução de 75θ mg de cloridrato de 4-ciclo—' hexilbutilamina (3,9 mmole) e 1,08 g de trietilamina (l0,8 mmole, 2,8 equiv) em 10 mL de THF anidro com agitação sob árgon a O?, foram adicionados 584 mg de

CICO^C^H^ (5,4 mraol, 1,4 equiv). Depois de aquecimento para temperatura ambiente, a mistura heterogénea foi agitada durante J horas, A diluição com eter dietilico foi seguida de lavagem (duas vezes) com solução de HC1 aquosa 1 Μ, A fase organica foi sêca sobre Na^SO^ e evaporada para se obter 950 mg do intermediário de carbamato de etilo, em bruto, um óleo, contaminado com alguma imida.

A uma solução de 950 mg do intermediário do carbamato de etilo, em bruto, em 10 mL de THF anidro com agitação sob árgon a 0?, foram adicionados 950 mg de hidreto de aluminio litio (25 mmol, 6,4 equiv). Desenvolveu-se gás, A mistura foi então aquecida em refluxo durante 2 horas. Depois de re-arrefecimento para O? e adição de 20 mL de eter dietilico, foi adicionado 1,0 mL de água cautelosamente para extinguir o hidreto em excesso. A mistura foi re-aquecida para temperatura · ambiente e ao mesmo ^empo que era agitada vigorosamente, foram adicionados 1,0 mL de solução de NaOH, aquosa, a 15$ e a seguir 3,0 mL de água, A mistura foi filtrada, lavando o bolo do filtro com 10$ /10$ de NH^ aquoso, concentrado em CH^OH/ em eter dietilico e o filtrado foi evaporado. Este material foi evaporado várias vezes com CH^OH para eliminar NH^ e por fim acidificado com solução de HC1 aquosa, concentrada. A eliminação azeotropica de água com tolueno e CH^OH deu, após exposição a alto vácuo, 830 mg de cloridrato de amina secundária, impura (80$ pura = 660 mg, contaminada com hloridrato de amina terciária) como um sólido. 0 produto foi obtido com 83$ de rendimento e foi retomado sem purificação.

TLC (lO^ /10^ de NH^ aquoso, concentrado em CH^OH/ em CH^Cl^-anisaldeído):

4-ciclohexilbutilamina 0,07 intermediário de carbamato 0,89 amina da Parte H 0,11

I, ácido /15-/1^,2^(2),3-(,4^//-6-/3-/4-//(4ciclohexilbutil)metilamino/carboniiy~2oxazolil/-7-oxabiciclo/2.2,l/hept-2-il/4-hexenoico, ester metilico

Uma amostra do ácido de oxazolo da Parte G, impuro (contaminado com tetrabutilamónio, mas como ácido livre, 0,20 mmole) foi seca azeotropando com DMF anidro e tolueno duas vezes (alto vácuo). Este material foi colocado em 2 mL de tolueno e ao mesmo tempo que a mistura heterogénea era agitada à temperatura ambiente sob árgon, foram adicionados 127 mg de cloreto de oxalilo (l,0 mmol, equiv). Desenvolveu-se gás. Passada 1 hora, for adicionado mais um suplemento de 127 mg de cloreto de oxalilo. De novo se desenvolveu gás. Esta mistura foi agitada durante a noite. TLC indicou a conversão pura do cloreto ácido tendo o nome ácido /lS-fij,2/(z),3^,4///-6-/5-/5-(c 1orocarboni1)-2-oxazolil/-7-oxabiciclo/2.2. l/ hept—2—il/-4—hexenoico, ester metilico. O solvente foi evaporado e foi adicionado tolueno e evaporado de novo para purgar qualquer cloreto de oxalilo remanescente.

ΑΘ cloreto ácido em bruto do ácido da Parte G foram adicionados 4 mL de CHCl^. 0 material não se dissolveu todo. Com agitação, sob árgon, à temperatura ambiente, foram adicionados 100 mg do cloridrato de amina secundária da Parte H, impura (8O& pura = 80 mg, contaminada com cloridrato de amina terciária, 0,39 mmole, 2 equiv)

e 145 mg de trietilamina (1,4 mmole, 7 equiv). Depois de agitação à temperatura ambiente durante 1 hora, a mistura foi diluída com acetato de etilo, foi adicionada água e a extracção (duas vezes) com acetato de etilo foi seguida pela secagem sobre Na^SO^ e evaporação. Foram obtidos 120 mg da amida do título, impura, na forma duma goma. 0 produto em bruto foi retomado sem purificação:

TLC (l$ F CCO₂H, 1$ CH^OH, 98 $ acetato de etilo anisaldeído):

ácido de oxazolo da Parte G 0,28 intermediário do cloreto ácido 0,78 amida da Parte I 0,64

J. ácido /ÍS-/I/,2Z(Z) ,3,^4-//7-6-/3- A-/2(4ci clohexi lbuti 1 )me ti lamino/carbon 1 ÍJ-2oxazolil7-7“Oxabiciclo/2.2.l/hept-2-il/4—bexenoi co

A 120 mg da amida da Parte I, impura, em 6 mL de temperatura ambiente, foram adicionados 2 mL de de NaOH aquosa 1,0 Μ. A mistura foi agitada duhoras e foi adicionada solução de HC1, aquosa,

M para baixar o pH para 1. Seguiur-se a extracção com acetato de etilo (3 vezes). Os extractos foram secos sobre Na₂SO^ e a evaporação do solvente deu do produto do titulo na forma dum ácido em bruto. A cromatografia instantanea (50$ a 1000$ /5$ ácido acético em acetato de etiloy em gradiente de hexano) produziu, após eliminação azeotropica do ácido acético com tolueno, 70 mg do produto do título, puro, como um óleo. O rendimento do produto do título foi em geral de 72$ a partir do ácido de oxazolo da Parte G, impuro.

CH^OH à soluç ão rante 3

-59TLC ( 5O“í /5^’ácirlo acét co em acetato de etilo/ em hexano - anisaIdeido ) :

Amida da Parte T O,36

Produtc. do título da

Parte J 0,2'

Í 3 ^JC NMR (67,8 MKz em C^;|C1^. Foram observadas duas conformações. As linhas devidas nitidamente só a uma conformação estão indicadas entre parêntesis):

177.0, 163.1, (162.3), (162.0), 142.5, 136.4,

129.6, 128.5, 79.5,79.4, (50.4), 49.7, (48.7),

46.7, 37.5, 37.0, (36.4), 34.1, 33.3, 29.7, 29.0,

27.9, (27.2), 26.6, 26.3, (24.2), (23.7), 22.9

EXemplo 3 ácido /lS-Zu, 2X (Z) , 3^^7-6-/3-/^-/1’ 1 -pi rrolidini 1 )carboni fZ-S-oxazolil/-7-oxabi ciclo.^2.2.l⁷hept-2iΐ/-4—hexenoi co

A. 1 — /V—/^ 1,1-dimetiletoxi (carboni l7I-seril/pi rrolídima

A uma solução agitada de pirrolidina f T,11 g,

15,7 mmole), t-buti loxicarboni1 (BCC)-(L)-serina (3,22 g, 15»7 mmole), hidrato de 1-hidroxibenzotriazo lo (2,12 g, 15»7 mmole) e diisopro pileti1 amina (2,73 mL, 15»7 mmole) em 30 ml, Ίθ THE sob árgon foi adicionada 1,3~diciclohexiIcarbodiimida (3,23 g, 15,7 mmole). Esta mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 17 horas e concentrada no vácuo. A mistura foi- diluída com 2C0 ml de acetato de etilo e o precipitado foi filtrado. (¹ precipitado 'oi lavado com acetat de etilo (3 x 4θ ml ). Os filtrados combinados foram lavados com solução de HCl aquosa IV

-60x ^:0 ml '. e concenl4o g de 01como títu lo .

x 70 ml ), Na!!('^r o saturado em solução (?

foi. seca (^vgSO,), filtrada Esta foi cromatogra'ada em

Λ fase organica trada no vacuo. silica gel Merck 6θ usando 2^C- CF OF em O!', eluente para dar 1 ,6'i g (’»!<) da amida do

TLC: silica gel, 4% CH^OH in C^C^, Rf 0.24,

Ce(SO₄)₂ ¹³C NMR (67.5 MHz, CDC1₃) δ: 169.4, 155.6, 79.7,

62.8, 53.5, 46.5, 45.9, 28.0, 28.0 28.0, 25.7, 23.8

3. ácido ZlS-/^rÍY,-^(z),3_A:(R*),4^7y-6-/3/7ZÍ-(bidroximeti1)-2-oxo-2-(l-pi rrolidini1)eti ly^amino/ca r boni l7~7-oxabi ci clo/2.2.1_/hept—2—il7—4—hexenoico, ester metilico

A uma solução agitada da amida da Parte A (0,96 g, 3,72 mmole) em 20 ml de CP^Cl^ anidro, sob árgon a O?C foram adicionados 5 ml. de ácido trifluoroacético (TFA). Λ mistura foi agitada a O-C durante 2 boras e diluída com 50 ml, de tolueno. Esta mistura foi concentrada no vácuo, A uma solução agitada deste sal de amina-TFA, hidrato de 1-hidroxibenzotriazilo (c,50 g, 3,73 mmole), e 5 ml. de trietilamina em 20 mL de DMF foi adicionada uma solução do Exemplo 1, ácido da Parte Γ) (1,00 S, 3,73 mmole) em 10 mL de DMF. Λ esta mistura foi então adicionado sal cloridrato de eti1-3(3-dimetilamino)propi1 carbodiimida. Λ mistura de reacção foi agitada a temperatura ambiente durante 19 horas e concentrada no vácuo. A mistura foi diluída

-61com 4θθ mL de acetatu de etilo e lavada com solução MCI IX (3 -X 30 , solução de XaOH 0,2 X (2 x 30 mL) e salina (l x 6< ml ) . A fase organica fôi seca ('fgSO, ) filtrada e concentrada no vacuo. Λ purificação foi efectuada por cromatograri a instantanea em y g de silica gel 6() Merck usando 0,4 I, tando de 2^ como 4$ de CH^OH em C!%Cl_n como eluenles para dar 320 mg (22$) do álcool do título.

TLC: silica gel, 4% CHgOH in CH₂C1₂, 0.22,

Ce(SO₄)₂.

¹³C NMR (67.5 MHz, CDC1₃) δ: 173.4, 172,2, 168.8, 129.3, 129.2, 78.9, 78.9, 63.5, 54.3, 52.2, 51.4,

48.0, 46.6, 45.9, 33.7, 29.5, 28.8, 27.2, 25.8,

24.0, 22.7

C. ácido 2^ (Z ),3/(R*)_f 4.^77-6JJò-, 5^-d i hidro-4-/~ l-pi rro li di ni 1 ) carboni. 17~2-oxa7oli l7—7-o xabi ci c lo ^2. 2. l_7hept-2-il7-4-hexenoico, ester metálico

A uma solução agitada do álcool da Parte Π (305 mg, 0,7? mmole) e diisopropileti1 amina (0,39 mL, 2,24 mmole) em 10 mL de CH^Cl^ sob argon a 0^?C, foi adicionado cloreto de metanosulfoni lo (C-,07 mL,

0,90 mmole). Esta mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas e concentrada no vácuo. 0 mesilato em bruto foi dissolvido em 30 mL de acetona e combinado com 0,6C g de X^CO^. Esta mistura foi aquecida em reflexo durante 4 horas, arrefecida para temperatura ambiente e dilyída com 100 mL de acetona. O precipitado foi separado por filtragem e lavado com acetona (3 x 40 ml). 0 filtrado

-62foi concentrado no vácuo e cromatografado em 50 g de silica gel 6θ Merck, usando 2$ de CH^CIÍ em Ch^Cl^ como eluente para dar 21·' mg (72$) -'a oxa— Λ 1 í —! -4 -> 4- ^ ·*. » 1 Λ • ·-/ A. *. » * 1 1 t.*·· ^. · V V* 1» «

TLC: silica gel, 4% CEL^OH in CH₂C1₂, R^ 0.20,

Ce(S0₄)₂· ¹³C NMR (67.5 MHz, CDC1₃) δ: 173.4, 168.2, 167.7, 10 129.5, 129.1, 78.9, 78.9, 68.7, 67.5, 51.4, 48.4,

46.5, 46.4, 46.1, 33.9, 29.7, 28.8, 27.1, 25.9,

24.1, 22.8

D. ácido /rs-/l$,2^(Z) ,3/,4//7-6-/3-/4//l-pirrolid inil Jcarboni l_/-2-o xazolil?-7oxabiciclo/2.2.l/hept-?-!l7~4-bexenoi co, ester metilico

Λ uma solução agitada de oxazolina da Parte C (200 mg, 0,51 mmole) em 5 ml. de CH^Cl^ foram adicionados 200 mg de NiO^. A mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas, altura em que foram adicionados outros 200 mg de Ni0_Q. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora e foram adicionados 200 mg de NiO^. Esta mistura foi agitada durante outra hora e foi adicionaria mais uma porção de 2' 0 mg de Ni0_p. A mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 17 horas e diluída com 80 mL de acetato de etilo. À mistura resultante foram adicionados 5 mL de solução de XaHSO^ 3>1 e 40 mT. de solução de citrato de sódio 1M. A fase organica foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de etilo (3 x 70 mL). Os extractos orgânicos combinados foram secados (.MgSO, ), filtrados e

-bi-

co n c en t rad o s no vacuo. O resultante foi cromatngrafado em 18 g de silica gel 6θ Merck usando 2^r< de CH OH em CH^Cl^ como eluente para dar 69,2 mg (357·) do ester do título.

TLC: silica gel, 4% CH₃OH in CH₂C1₂, 0.24,

Ce(SO₄)₂· ¹³C NMR (67.5 MHZ, CDCl₃) δ: 173.2, 163.1, 160.3, 142.2, 137.1, 129.3, 128.7, 79.4, 79.1, 51.4,

49.6, 48.2, 46.7, 46.6, 33.7, 29.7, 28.9, 27.8,

26.4, 23.7, 22.7

E. ácido /ÍS-/Í<, 2^(7),3^,-^/77-6-/3-/4-//1pi rrolidini1)carbonil7-2-oxazoliL/-7-oxabi ciclo/2.2.l7hept-2-il7~4-bexenoico

Λ uma solução agitada do ester da Parte P (69,0 mg, 0,18 mmole) e 2 mL de água em 12 ml. de THF foram adicionados 2 mL de solução de LiOH IX. Esta mistura foi espargida com árgon durante 10 minutos e agitada à temperatura ambiente por 7 horas. A mistura foi acidificada para pH 2 pela adição de solução de HC1 IX e saturada com NaCl. A fase THE foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de etilo (4 x 60 mL). Os extractos orgânicos combinados foram secados (MgSO^), filtrados e concentrados no vácuo.

A purificação foi efectuada por cromatografia ins —

tantanea	em	10 g de silica gal 6θ Merck,	usando 1(P
de	CH 0H	em	CHQC12 como eluente para dar	26 mg (39^·
do	ácido	do	11 tulo .
TLC:	silica	gel, 6% CH-OH in CH Cl , RF 0	.22,

Ce(S0₄)₂.

\'1η.

-64¹³C NMR (67.5 MHz, DMSO-άθ) Ô: 175.1, 163,2, 159.6, 142.2, 136.3, 130.5, 127.6, 78.8, 78.4,

48.8, 47.7, 46.3, 45.8, 29.3, 28.4, 27.5, 25.9,

-23.3, 23.2, 22.8

Exemplo 4 ácido /ÍS-/Í<2X(Z) ,3x,477-6-/3-/4-/(ci clo’ exi lamino)carboni l/-2-oxazoli \J-7-oxabi cic lo_/2.2.iy^^eP^~7^_ i l7-4-hexenoi co

A. /7 1, 1 -dimeti letoxi )carboni l/-\^Tc lclohexi l-L-SPrinamida

A uma solu;ao agitada de ciclohexilamina (l,ll g,

15,7 mmole), Boc-(l.)-serina (3,22 g, 15,7 mmole), hidrato de 1-hidroxibenzotriazolo (2,12 g, 15,7 mmole) e diisopropiletil amina (2,73 mL, 15,7 mmole) em 30 mL de THF sob árgon a 0?C foi adicionada 1,3-diciclohexilcarbodiimida (3,23 êT, 15,7 mmole). Esta mistura foi agitada à temperatura ambiente durante l8 horas. A mistura foi diluída com 200 ml, de acetato de etilo e o precipitado foi filtrado. 0 precipitado foi lavado com acetato de etilo (3 x 40 mí,) .

Os filtrados combinados foram lavados com solução de HC1 aquosa IN (3 x 70 ml,), e solução de NaHCO^ saturada (2 x 80 ml,). A fase organica foi secada (MgSO^ ), filtrada e concentrada no vácuo. Esta foi cromatografada em l4o g de silica gel 6θ Merck, usando 2% de CII^OH em CH^Cl^ como eluente para dar 1,64 g (4l^) da amida do título.

TLC: silica gel, 4% CH₃0H in CH₂Cl₂, R_f 0.24,

Ce(SO₄)₂.

¹³C NMR (67.5 MHz, CDCl₃) δ: 170.1, 156.1, 80.2,

62.7, 48.1, 32.6, 32.6, 28.1, 28.1, 28.1, 25.3,

24.5, 24.5, 24.5

B. ácido /Ϊ S-/1£<,2X(Z), 3<(R* ),4/^7-6-73/7/2-(ciclohexilamino)-l-(hidroximetil )-2oxoeti l/amino/carboni l_7-7-oxabiciclo/2.2.l/hept—2-i l/—4-he\enoico , ester metilico__

A uma solução agitada da amida da Parte Λ (l,06 g, 3»73 mmole) em 20 mL de LH^Cl^ anidro, sob árgon a 0?C foram adicionados 5 mT. de TFA. A mistura foi agitada a 0?<' durante 2 horas e diluída com 50 ml. de tolueno. Esta mistura foi concentrada no vácuo. A uma solução agitada desta amina-sal TFA, hidrato de 1-hidroxibenzotriazolo (C,50 g, 3,73 mmole) e 6 mL de trietilamina em 20 ml. de DMF foi adicionada uma solução do ácido do Exemplo 1, Parte D (1,OO g, 3.73 mmole) em 10 mL de DMF. A esta mistura foi então adicionado sal cloridrato de etil-3-(3-dimetilamino)-propil carbodimida (0,55 g,

3,73 mmole). A mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 19,5 horas e concentrada no iíácuo. A mistura foi diluída com 4r>0 mL de acetato de etilo e lavada com solução HC1 IN (3 x 40 mL), solução de NaOH 0,2 N (2 x 30 mL), solução de NaíICO^ saturada (l x 30 mL) e salina (l x 100 mL). A fase organica foi secada (íHgSO^), filtrada e concentrada no vácuo. A purificação foi efectuada por cromatografia instantanea em silica gel 60 Merck (6θ g) usando 2$ de CHy i! em CH^Cl^ como eluente para dar 690 mg (’<2$ do álcool do título.

TLC: Silica gel, 4% CH-OH in CH-Cl-, R- 0.30,

Ce(S0₄)₂ ¹³c NMR (67.5 MHz, CDC1₃) δ: 173.3, 173.0, 169.6, 5 129.4, 129.0, 79.1, 78.9, 62.7, 54.4, 53.7, 51.4,

48.2, 48.0, 33.7, 32.6, 32.6, 32.6, 29.5, 28.6,

27.5, 25.3, 24.6, 24.6, 22.7

C. ácido /lS-/lf ,2*<(Z ),3^ (R*), ^)7/-6-/3-/4/7ci clohex ίlamino)carbonil/-4,5~dihidrofr·-* 2-oxazolil7~7-oxabiciclo72.?.l/hept-2-il/4-hexenoico, ester metilico_

A uma solução agitada do álcool da Parte B (680 mg, 1,56 mmole) e diisopropiletil amina (O,82 mL, 4,6S mmole) em 20 mL de CH_OC1_O sob árgon a 0?C foi adicionado cloreto de metanosulfonilo (0,13 mL, 1,63 mmole). Esta mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora e concentrada no vácuo. O mesilato em bruto foi dissolvido em 20 mL de acetona e combinado com 647 mg de K^CO^. Esta mistura foi aquecida a 54?^p

I durante 3,5 horas, arrefecida para temperatura ambiente e diluída com 10C mL de acetona. O precipitado foi separado por filtragem e lavado com acetona (3 x 50 mL). 0 filtrado foi concentrado no vácuo e cromatografado em 50 g de silica gel 60 Merck usando 2% de CH^OII em CIÍ_QC1₉ como eluente para dar 540 mg (83) da oxazolina do título.

TLC: silica gel, 4% CH-OH in CH Cl , R- 0.42,

Ce(SO₄)₂.

-67¹³C NMR (67.5 ΜΗζ, CDC1₃) δ: 173.2, 170.4, 169.2,

129.5, 128.9, 79.1, 79.0, 69.7, 68.4, 51.4, 48.4,

47.8, 46.4, 33.8, 33.0, 32.8, 29.6, 28.9, 27.3, 25.4, 24.7, 24.7, 22.8

D. ácido /ÍS-/i/,2^(z),3^,4^77-6-/3-/4/7 ciclohexilamino)carbonil7-2-oxazolil7~7-oxabiciclo/2.2.l7hept-2-i£7-4-hexenoico, ester metilico_

A uma solução agitada de oxazolina da Parte C (530 mg, 1,?6 mmole) em 5 mL de CH₂C1₂ foram adicionados 1,06 g de NiC>₂. A mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas, altura em que foram adicionados outros 530 mg de Xi0₂« Λ mi stura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora e foram adicionados 530 mg de XiO₂. Esta mistura foi agitada durante outros 80 minutos e diluída com 120 mL de acetato de etilo.

À mistura resultante foram adicionados 10 mL de solução de XaíISO^ 3M e 70 mL de solução de citrato de sodio 1M. A fase organica foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de etilo (2 x 100 mL). Os extractos orgânicos combinados foram lavados com salina (l x 100 mL), secados (MgSO^), filtrados e concentrados no vácuo. Este foi cromatografado em 40 g de silica gel 60 Merck, usando 2% de CH^OH em CH₂C1₂ como eluente para dar 370 mg (70%) do ester do título.

TLC: silica gel, 4% CH₃0H in CH₂C1₂, R^ 0.64,

Ce(SO₄)₂·

-60^V4 ¹³C NMR (67.5 MHZ, CDCl₃) δ: 173.2, 163.7, 159.6,

140.6, 136.1, 129.4, 128.5, 79.5, 79.3, 51.4,

49.6, 47.8, 46.6, 33.7, 33.0, 33.0, 29.7, 28.8,

27.8, 25.4, 24.9, 24.9, 22.7

E. ácido /ÍS-/Í^, 2^ (Z ),3/, 4x7_7-6-/3-/4-/( ciei °hexi lamino )carboni1/-2-0xazolil7-7-oxabiciclo/2.2.l7hept-2-il7-4-hexenoi co

A uma solução agitada do ester da Parte D (360 mg, 0,86 mmole) e 10 mL de água em 6θ mL de THF foram adicionados 10 mT, de solução de LiOH IX. Esta mistura foi espargida com árgon durante 10 minutos e agitada à temperatura ambiente durante 7 horas. Λ mistura foi acidificada para pH 2 pela adição de solução de HC1 IX e saturada com XaCl. Λ fase THF foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de etilo (4 x 80 mL). Os extractos orgânicos, combinados foram secados (MgSO^), filtrados e concentrados no vácuo. A purificação foi efectuada por cromatografia instantanea em 4o g de silica gel 60 Merck, usando 4$ de CH^OH em CH₉C1₂ como eluente para dar 300 mg (86$) do ácido do título.

TLC: silica gel, 6% CH^OH in C^C^, R^ 0.32, Ce(SO₄)₂· ¹³C NMR (67.5 MHz, CDCl₃) 6: 176.9, 163.9, 160.0,

141.0, 129.5, 128.5, 79.5, 79.5, 48.1, 46.6, 33.7,

32.9, 32.9, 29.7, 28.9, 27.9, 25.5, 24.9, 24.9 \’h.

-69Exemplo 5 ácido /ÍS-/ÍX,2k(Z ),3/, 4-///-6-/3-Z4-//(2-cic lohexi 1eti1)amino/carbonil7-2-oxazolil/-7-oxabiciclo/2.2. í7hept-2-il7-4-hexenoico

A. /Tl»1-dimetiletoxi)carbonil7-N(2-ciclohexiletil)-L-serinamida

A uma solução agitada de 2-ciclohexiletilamina (2,00 g, 15,7 mmole), Boc-(L)-serina (3,22 g, 15,7 mmole), hidrato de 1-hidroxibenzotriazolo (2,12 g, 15,7 mmole) e diisopropiletil amina (2,73 mL, 15,7 mmole) em 4o mL de THF, sob árgon a 0?C foi adicionada 1,3-diciclohexilcarbodiimida (3,23 S, )-5,7 mmole). Esta mistura foi agitada à temperatura ambiente e foram adicionados IO mL de D>1F. A mistura de reacção foi então agitada à temperatura ambiente durante 18 horas.

A mistura foi diluída com 3θθ mL de acetato de etilo e o precipitado foi filtrado. O precipitado foi lavado com acetato de etilo (3 x 40 mL). O filtrado combinado foi lavado com solução de UC1 aquosa IN (3 x 70 mL), e solnção de NaHCO^ saturada (2 x 80 mL). A fase organica foi secada (MgSO^), filtrada e concentrada no vácuo. Este foi cromatografado em ÍÓO g de silica gel 60 Merck usando 1:4 de hexano-eter diètilico como eluente para dar 1,91 S (39$) da amida do título.

TLC: silica gel, 4% CH_OH in CH-Cl-, R_£ 0.34,

Ce(SO₄)₂·

¹³C NMR (67.5 MHz, CDClg) δ: 171.1, 80.3, 62.9,

37.3, 36.8, 35.2, 33.1, 33.1, 28.3, 28.3, 28.3,

26.4, 26.1, 26.1

3. ácido /1S-/Í (R* ),4$Z7-⁶-&-[[[?—

2-ciclohexiletil)aminq/-l-(hidroximetil)2-oxoetil/amino/carboni i/-7-oxabiciclo/2.2 . l?hep t -2-i 1J7-4-1 íexenoico, ester metilico

A uma solução agitada da amida da Parte A (l,28 g, 3»73 mmole) em 20 mL de CH^Cl^ anidro, sob árgon a 0^?C foram adicionados 5 ⁿ’L de TFA.

A mistura foi agitada a 0?C durante 2 horas e diluída com 50 mL de tolueno. Esta mistura foi concentrada no vácuo. A uma solução agitada desta amina—sal TFA, hidrato de 1—hidroxibenzotriazolo (0,50 St 3»73 mmole) e 5 ml de trietilamina em 20 mL de DMF foi adicionada uma solução do ácido do Exemplo 1, Parte D (l,00 g, 3»73 mmole) em 10 mL de DMF. A esta mistura foi então adicionado sal cloridrato de eti1-3(3^_dimetilamino)propi1 carbo— diimida (θ,55 St 3»73 mmole). A mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 17 horas e concentrada no vácuo. A mistura foi diluída com 400 mL de acetato de etilo e lavada com solução de HCI IN (3 x 40 mL), solução de NaOH 0,2 N (2 x 30 mL), solução de NalíCO^ saturada (l x 30 mL) e salina (l x 100 mL). A fase organica foi secada (MgSO^), filtrada e concentrada no vácuo. A purificação foi efectuada por cromatografia instantanea em 60 g de silica gel 6θ Merck usando 2$ de CH^OH em CH^Clg como eluente para dar 1,00 g (54°>) do álcool do título.

C. ácido /1S-/Íx',2X(Z),3X(R*),4/77-6-/3-/4/Zl2-ciclohexiletil )aminq/^Carboni l/-4,5dihidro-2-oxazolil7-7-oxabiciclo/2.2. l7~ hept-2-il7-4-hexenolco, ester metilico_

A uma solução agitada do álcool da Parte B (890 mg,

1,80 mmol) e diisopropiletil amina (0,94 mL, 5»^0 mmol) em 30 mL de CH^Cl^, eob árgon a 03C, foi adicionado cloreto de metanosulfonilo (0,l4 mL, 1,80 mmole). Esta mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora e concentrada no vácuo. O mesilato em bruto foi dissolvido em 3θ mL d® acetona e combinado com 0,77 g de K^CO^, Esta mistura foi aquecida em refluxo durante 4 horas, arrefecida para temperatura ambiente e diluída em 100 mL de acetona, 0 precipitado foi filtrado e lavado com acetona (3 x 50 mL). 0 filtrado foi concentrado no vácuo e cromatografado em 60 g de silica gel Merck usando 2$ de CH^OH em CH^Cl^ como eluente para dar 480 mg (5MQ da oxazolina do título.

TLC: silica qel, 42 CH₃0H em CH₂C1₂, R_f0.42, Ce(S0₄)₂.

¹³C NMR (67.5 MHz,CDC1₃) 6: 173.1, 171.2, 169.2,

129.4, 128.9, 79.1, 79.0, 69.6, 68.3, 51.4, 48.3,

46.3, 36.9, 36.8, 35.2, 33.7, 33.0, 32.9, 29.6,28.8,

27.2, 26.3, 26.1, 26.1, 22.8

- 72 D. ácido /15-/1/,2/(2),3/,4^.77-6-/3-/4-/27(2ci clohexiletil )amin</carboni 17-2-oxazo li ij7-oxabiciclo/2.2.l/hept-2-i l/-4-hexenoico, ester metillco_

A uma solução agitada de oxazolina da Parte C (480 mg, 1,01 mmole) em 20 mL de CH^Cl^ foram adicionados 480 mg de NiO^. A mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora, altura em que foram adicionados outros 480 mg de Ni0_?. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas e foram adicionados 480 mg de NiO^. Esta mistura foi agitada durante outras 15í5 horas e foi adicionada mais uma porção de 480 mg de NiO^. A mistura de reacção foi agitada durante 1,5 horas e diluída com 100 mL de acetato de etilo. λ mistura resultante foram adicionados 20 mL de solução de NaHSO^ 3^ ® 3θ mL de solução de citrato de sódio 1M. A fase organica foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de etilo (2 x 100 mL). Os extractos orgânicos combinados foram lavados com salina (l x 5θ mL)» secos (MgSO^), filtrados e concentrados no vácuo. Este foi cromatografado em 45 S de silica gel Merck 60 usando 2% de CH^OH em CH^C^ como eluente para dar 200 mg (42$) do ester do título.

TLC: silica gel,45 CH _} 0 H el CH₂C1₂,R_f0.60,Ce(SO^)₂ .

¹³C NMR(67.5 MHz,CDCl,) : 173.1, 163.7,

160.4, 140.3, 136.0,129.3,128.4, 79.4, 79.3,

51.3, 49.6, 46.6, 36.9, 36.7, 35.2, 33.6, 33.0,

33.0, 29.7, 28.8, 27.7, 26.4, 26.0, 26.0,22.7

- 73 E. ácido /1S-/Íí<2^(z),3^,^^Z7-6-/3-A-/Z(2ciclohexiletil)amino/carboni 2-oxazolil/7-oxabiciclo/2.2.ΐ7ΐιβρ1-2-1ΐ/-4-Ηβχβηοΐοο

A urâa solução agitada do ester da Parte D (190 mg, 0,40 mmol) e 4 mL de água em 3θ mL de THE foram adicionados 4 mL de solução de LiOH IN. Esta mistura foi espargida com árgon durante 10 minutos e a.gitada à temperatura ambiente durante 5 horas, A mistura foi acidificada para pH 2 pela adição de solução de HC1 IN e saturada com NaCl. A fase de THE foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de etilo (4 x 25 mL). Os extractos orgânicos combinados foram secos (MgSO^), filtrados e concentrados no vácuo. A purificação foi efectuada por cromatografia instantanea em 20 g de silica gel 60 Merck usando 4$ de CH^OH em CH₂C1₂ como eluente para dar 106,7 mg (59$) do ácido do título.

TLC: silica gel, 6% CH^OH em CH^Cl^; RfO.32, CeÇSO^)^· ¹³C NMR(67.5 HHz,CDC1₃)é =176.9, 163,9, 160.7,

140.8, 135.7, 129.4, 128.4, 79.5, 79.4, 49.6,

46.5, 36.9, 36.8, 35.2, 33.7, 33.0, 33.0, 29.6,

28.8, 27.8, 26.4, 26.1, 26.1, 22.6

- 74 Exemplo 6 ácido /LS-/Í^, 2^(Z), 3^, 4^/7-6-73-/4-///2-( '4-clorofenil )etil/aminq7carbonil7-2-oxazolil7-7-oxabici clo-/2.2.1_7hept-2-il7-4-hexenoi co

A. /{l«1-dimetiletoxi)carboni 1/-N-/2(4-clorofenil)etil7-L-serinamida_

A uma solução agitada de 2-(4-clorofeni1)etilamina (2,44 g, 15,7 mmole), Boc-(L)-serina (3,22 g, 15,7 mmole), hidrato de 1-hidroxibenzotriazolo (2,12 g, 15,7 mmole) e diisopropileti1 amina (2,73 «nL, 15,7 mmole) em 30 mL de THE sob árgon a 02C foi adicionada 1,3-diciclohexilcarbodiimida (3,23 g, 15,7 mmole). Esta mistura foi agitada à temperatura ambiente e foram adicionados 10 mL de DMF. A mistura de reacção foi a seguir agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura foi diluída em 200 mL de acetato de etilo e o precipitado foi filtrado. O precipitado foi lavado com acetato de etilo (3 x ’»O mL). 0e filtrados combinados foram lavados com solução de HC1 aquosa IN (3 x 70 mL) e solução de NaHCO^ saturada (2 x 80 mL). A fase organica foi sêca (MgSO^), filtrada e concentrada no vácuo. Este foi cromatografado em 16O g de silica gel 60 Merck, usando 1:4 hexano:eter dietilico como eluente para dar 2,56 g (48^) da amida do tí tu lo .

TLC: silica gel, 45 CH_?OH em CH₂C1₂, R_f0.34,Ce(S0₄)₂.

¹³C NMR (67-5 MHz, CDCip : 173.1, 157.6, 139.2,

133.1, 131.4, 131.4, 129.4, 129,4, 80.8, 63.3,

58.0, 41.7, 35.7, 34,7, 28.7, 28.7, 28.7

- 75 B. ácido /ÍS-/Í^2X(z)_t3^(R*),ÍHÕ7-6-/3-/ZZ2//2-(4-clorofeni1)etil/amino/-1-(hidroximetil )-2-oxoetil/amino/carbonil7-7-oxabiciclo/2.2.l/hept-2-±l7-4-hexenoico, ester metilico_‘' _

A uma solução agitada da amida da Parte A (l,28 g, 3,73 mmole) em 20 mL de CH₂C1₂ anidro, sob árgon a 0®C foram adicionados 5 mL de TFA. A mistura foi agitada a 05C durante 2 horas e diluída em 50 mL de tolueno. Esta mistura foi concentrada no vácuo. A uma solução agitada desta amina-sal de TFA, hidrato de 1-hidroxibenzotriazolo (θ,5θ St

3,73 mmole) e 5 mL de trietilamina em 20 mL de DMF foi adicionada uma solução do ácido do Exemplo 1, Parte D (l,00 g, 3*73 mmole) em 10 mL de DMF. A esta mistura foi e*tão adicionado sal de cloridrato de etil-3(3-dimetilamino)-propil carbodiimida (0,55 St 3t73 mmole). A mistura de reacção foi agitada à temperatura amirLente durante 17 horas e concentrada no vácuo. A mistura foi diluída em 400 mL de acetato de etilo e lavada com solução de HC1 IN (3 x 40 mL), solução de NaOH 0,2N (2 x 30 mL), solução de NaHCO^ saturada (l x 30 mL) e salina (l χ 1OO mL). A fase organica foi seca (MgSO^), filtrada e concentrada no vácuo.

A purificação foi efectuada por cromatograf!a ins— tantanea em 60 g de silica gel 60 Merck, usando 2$ de CH^OH em CH₂C1₂ como eluente para dar 1,00 g (54$) do álcool do título.

TLC: silica gel, 4% CH^OH em CH₂Cl₂,Rf 0.30, Ce(S0₄)₂13_CNMR (67.5 MHz, CDC1_?)£: 173.5, 172.9,170.6,

137.2,132.1, 130.o,130.0, 129.3, 129.1,128.5,

128.5, 79.0, 78.9, 62.7, 54.1, 53.9, 51.4, 48.0,

40.8, 34.8, 33.7, 29.5, 28.7, 27.3, 22.7

C. ácido /ÍS-/Í/,2^(z),34R*)»5y7_7-6-/3-/5///2-(5-clorofenilJetil/amino/carboni1^-5,5dihidro-2-oxazolil7“7-oxabiciclo/2.2.l/hept2-il7-5-bexenoico, ester metilico_

A uma solução agitada de álcool da Parte B (890 mg, 1,80 mmole) e diisopropiletil araina (0,95 mL,

5,5o mmole) em 3θ mL de CH^C^, sob árgon a 0*C, foi adicionado cloreto de raetanosulfonilo (0,15 mL,

1,80 mmole). Esta mistura foi agitada à temperatura. ambiente durante 1 hora e concentrada no vácuo.

O mesilato em bruto foi dissolvido em 3θ mL de acetona e combinado com 0,77 g de Κ,,ΟΟ^ . Esta mistura foi aquecida era refluxo durante 5 horas, arrefecida para temperatura ambiente e diluída com 1OO mL de acetona. O precipitado foi separado e lavado com acetona (3 x 5θ mL). O filtrado foi concentrado no vácuo e cromatografado em 6θ g de silica gel 60 Merck usando 2$ de CH^OH em CH₂C1₂ como eluente para dar 580 mg (55$) da oxazolina do título.

137.0, 132.Ϊ, 130.0, 130.0, 129.5, 129.0,128.6,

128.6, 79.1, 79-0, 69-6, 68.3, 51-5, 58-2, 56-3, 50.0, 35.8, 33.8, 29.6, 28.9,27.2,-22.8

D. ácido Λ3-ΖΪΧ,2Κ(ζ),3/,4χ7/-6-/3-/ΐι(4-clorof enil )etil/araino7 carbonil7-2oxazolil/-7-oxabiciclo/2.2.l/hept-2-il7H-hexenoico, ester metilico

A uma solução agitada de oxazolina daParte C (480 mg, 1,01 mmole) em 20 mL de CH₂C1₂ foram adicionados 480 mg de NiO^. A mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora, altura em que foram adicionados outros 480 mg de Ν1Ο₂· A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas e foram adicionados mais 480 mg de NiOg. Esta mistura foi agitada durante outras 15»5 horas e foi adicionada mais uma porção de 480 mg de Ni0_2< A mistura de reacção foi agitada durante 1,5 horas e diluída com ÍOO mL de acetato de etilo. À mistura resultante foram adicionados 20 mL de solução de NaHSO^ 3^ θ 3θ mL de solução de citx*ato de sódio 1M. A fase organica foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de etilo (2 x 100 mL). Os extractos orgânicos combinados foram lavados com salina (l x 5θ mL), secos (MgSO^), filtrados e concentrados no vácuo. Este foi cromatografado em 45 g de silica gel 60 Merck usando 2$ de CH^OH em CH₂C1₂ como eluente para dar 200 mg (42$) do ester do título.

TLC: silica gel, AZCB^OH em CH2C12, Rf0.6o,Ce(S04)? 13C NMR (67.5 HHz,CDCl3) : 173.2, 163.9, 160.6,
140.5, 137.2,	135.8, 132.2,	130,0,	130.0, 129.4,
128.6, 128.6,	128.5, 79.5,	79.3, 51	.4,49.6, 46.6,

40.1, 35.2, 33.7, 29.7, 28.9, 27.8, 22.7

E. ácido /ÍS-/V, 2oi(z), 3^, 4/77-6-/3-/^///2- (4-clorofenil )etil7amino_7 carbonil/-2oxazolil7-7-oxabiciclo/2.2. l/hept-2-i 1_/4-hexenoico_

A uma solução agitada do ester da Parte D (190 mg, 0,40 mmole) e 4 mL de água em 30 mL de THF foram adicionados 4 mL de solução de LiOH IN. Esta mistura foi espargida com árgon durante 10 minutos e agitada à temperatura ambiente durante 5 horas.

A mistura foi acidificada para pH 2 pela adição de solução de HCl IN · saturada com NaCl. A fase de THF foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de etilo (4 x 25 mL). Os extractos orgânicos combinados foram secos (MgSO^), filtrados e concentrados no vácuo. A purificação foi efectuada por cromatografia instantanea era 20 g de silica gel 60 Merck usando 4$ de CH^OH em CH^Cl^ como eluente para dar 106,7 mg (59$) do ácido do título.

TLC: silica gel, ÓSCH^OH em CH₂C1₂, R_f0.32,Ce(S0₄)_?.

¹³C NMR (67.5 MHz,CDClj)á: 176.9, 175.4, 164.0, 160.9, 140.9, 137.2, 130.1, 130.1, 129.4, 128.6,

128.6, 79.6, 79.5, 49.6, 46.6, 40.2, 35.1, 33.7,

29.7, 28.9, 27.9, 22.6

- 79 1'Η,

Exemplo 7 ácido (z),3^,4777-6-/3-Α-/Λ²* -clorofenil)amino/carbonil7-2-oxazolil7-7-oxabiciclo/2.2.l/ hept-2-il7-4-hexenoico;

A. /7^»1-dimetiletoxi)carbonil/-N(4-clorofenil)-L-aerinamida_

A uma solução agitada de 4-cloroanilina (2,00 g,

15,7 mmole), Boc-(l)—serina (3,22 g, 15»7 mmole), hidrato de 1—hidroxibenzotriazolo (2,12 g, 15»7 mmole) e diisopropiletil amina (5,4o mL, 31»2 mmole) em 40 mL de DMF sob árgon foi adicionado sal de cloridrato de etil—3(3-dimetilaraino)propil carbodiimida (2,31 St

15,7 mmole). Esta mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 17 horas e concentrada no vácuo. A mistura foi diluída em 400 mL de acetato de etilo e lavada com solução de HC1 aquosa IN (3 x 70 mL), e solução de NaHCO^ saturada (2 x 70 mL). A fase organica foi sêca (MgSO^), filtrada e concentrada no vácuo. Esta foi cromatografada em 80 g de silica gel 60 Merck usando 1 L tanto de 1:3 como 1:4 de hexano— eter dietilico como eluentes para dar 1,02 g (21% da amida do título.

TLC: silica gel, 4% CH OH em CH Cl , R 0,34,

Ce(SO₄)₂.

B. ácido /ÍS-/íô(f,2^(z),37(R*)4,<77-6-/3-//Z2/(4-clorofenil)amino/-l—(hidroximetil)—

2-oxoetil7amino7carbonil7-7-oxabiciclo/5.2.r7hept-2-il7-4-hexenoico, ester metili— co

- 80 1 ¹ Ιη,

A uma solução agitada da amida da Parte A (l,02 g, 3,24 mmole) em 12 mL de CH₂C1₂ anidro sob argon a 03C foram adicionados 3 mL de TFA. A mistura foi agitada a 02C durante 3 horas e diluída cora 50 mL de tolueno. Esta mistura foi concentrada no vácuo. A uma solução agitada desta amina-sal d· TFA, hidrato de 1-hidroxibenzotriazolo (0,50 St 3»73 mmole) e 5 mL de trietilamina em 20 mL de DMF foi adicionada uma solução do ácido do Exemplo 1, Parte D (l,OO g,

3,73 mmole) em IO mL de DMF. A esta mistura foi a seguir adldionada l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida, sal de cloridrato. A mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 17 horas e concentrada no vácuo. A mistura foi diluída com 400 mL de acetato de etilo e lavada com solução de HC1 IN (3 x 3θ mL), solução de NaOH 0,2N (2 x 30 mL) e salina (l x ÍOO mL). A fase organica foi sêca (MgSO^) e concentrada no vácuo. A purificação foi efectuada por cromatografia Inatantanea em 80 g de silica gel 60 Merck usando 2$ de CH^OH era CH₂C1₂ como eluente para dar 38O mg (22$) do álcool do título.

TLC: silica gel, 4$ de CH^OH em CH₂C1₂, R_f 0,31,

Ce(SO₄)₂.

C. ácido ZÍS-/T^,2/(z),3^(R*),4^7-6-/3-/4-/n^clorofenil)amino7carbonil7-4,5-dihidro-2oxazolil7-7-oxabiciclo/2.2. l7hept-2-il7-4hexenoico, ester metílico__

A uma solução agitada do álcool da Parte B (370 mg, 0,80 mmole) e diisopropiletil amina (0,42 mL, 2,39 mmole) em 5 mL de CHCl^, sob árgon a O^C foi adiciona81 do cloreto de raetanosulfonilo (θ,θ68 mL, 0,88 mmole). Esta mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos e concentrada no vácuo. O mesilato em bruto foi dissolvido em 10 mL de acetona e com—

- binado com 0,70 g de Κ,,ΟΟ^. Esta -mistura foi aquecida quase em refluxo durante 3 horas, arrefecida para temperatura ambiente e diluída com 1OO mL de acetona. O precipitado foi filtrado e lavado com acetona (3 x 30 mL). O filtrado foi concentrado no vácuo e cromatografado em 35 S de silica gel 60 Merck usando 2$ de CH^OH em Cl^Clg como eluente para dar 210 mg (59$) da oxazolina do título.

TLC: silica gel,45 CH₃0H em Ch₂Cl₂, R_f 0.68,Ce(S0₄)₂. ¹³C NMR (67.5 MHz,CDC1₃) : 173.2, 170.0, 169.6,

135.8, 129.5, 129.4, 128.9, 128.9, 128.5, 120.9,

120.9, 79.2,79.2, 69.4, 68.7, 51.4, 48.3, 46.4,

33.7, 29.6, 28.8, 27.2, 22.8.

D. ácido /ÍS-/Í^₉2^(Z) clorofeni1)araino/carbonil7-2-oxazo 1117-7oxabi ciclo/2.2.l7hept-2-il7-4-hexenoico, ester metilico_

A uma solução agitada de oxazolina da Parte C (2OO mg, 0,4-5 mmole) em 3 mL de CH₂C1₂ foram adicionados 200 mg de Ni0₂« A mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas, altura era que foram adicionados outros 200 mg de NiO₂« A mistura foi agitada ã temperatura ambiente durante 1,5 horas e foram adicionados 200 mg de NiO^. Esta mistura foi agitada durante mais 1,5 horas e foi adi- 82 cionada mais uma porção de 200 mg de Ni0_2< A mistura de reacção foi agitada durante 2 horas e diluída com 1OO mL de acetato de etilo. λ mistura resultante foram adicionados 5 “L de solução de NaHSO^ 3M e 3θ de solução de citrato de sódio 1M. A fase organica foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de etilo (2 x 1OO mL). Os extractos orgânicos combinados foram sâ6ds (MgSO^), filtrados e concentrados no vácuo. Este foi cromatografado em 15 g de silica gel 60 Merck usando 2$ de CH^OH em CH₂C1₂ como eluente para dar 140 mg (70$) do ester do título.

TLC: silica gel, 45 CHjOH em CH₂C1₂,R_f0.76, Ce(S0₄)₂· ¹³CNNMR (67.5 MHz,CDC1₃)6: 173.2, 164.2, 158.4,

141.4, 136.0, 135.9, 129.5,129.3,128.9,128.9,

128.4, 121.1,121.1,79.6, 79.4, 51.4 ,49.6, 46.6,

33.7, 29.7, 28.9, 27.9, 22.8.

E. ácido /is-/i^24z),3,<^<77-6-/3-?4-/Z^clorofenil)aminq7carbonil7-2-oxazolil/-7oxabiclclo/2.2.l7hept-2-il7-4-hexenoico

A uma solução agitada do ester da Parte D (135 mg, 0,03 mmole) e 3 mL de água era 15 mL de THF foram adicionados 3 «L de solução de LiOH IN. Esta mistura foi espargida com ãrgon durante 10 minutos e agitada à temperatura ambiente durante 5 horas. A mistura foi adidifiçada para pH 2 peia adição de solução de HC1 IN e saturada com NaCl. A fase de THF foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de eti- 83 lo (4 x 15 mL). Os extractos orgânicos combinados foram secados (LgSO^Jf, filtrados e concentrados no vácuo. A purificação foi efectuada por cromatografia instanta— nea em 15-S de silic-a gol 60 Merck usar,do 4$-de CH^CH em CH^Cl^ como eluente para dar 79»2 mg (6l$) do ácido do título.

TLC: silica gel, 62 CH₃OH em CH₂C1_2> R_f0.36,Ce(S0₊)₂.

¹³C NMR (67.5 MHz, CDC1..)£: 179.0, 177.6, 164.2,

141.7, 136.0, 135.9, 129.4, 128.9,128.5, 121.2,

121.2,79.7,79.5,49.6,46.6, 33.6, 32.3, 29.7, 2B.9,27.9,22.6,

Exemplo 8 ácido /ÍS-/Í< 2X (Z ) , 3</, 4_l//7-6-_J/3-zf4-///4-(4-clorofenil )bu til/ami no/carbonil/-2-o xazolil/-7-oxabi ci clo/2.2.l7bept-2-il7-4-hexenoico

A. ácido /Is-/l < 2^(Z )»3*, 4</7-6-/3-/4-/Z/4(4-clorofenil)butil7amino/carboni 1/-2oxazolil/-7-oxabiciclo/2.2.l/hept-2-il/4-hexenoico, ester metílico

0,21 g do composto impuro do Exemplo 2, Parte G (50$ puro - 0,11 g, 0,33 mmole) foi agitado em cerca de 4 mL de tolueno e foi adicionado 0,1 mL (l,l4 mmole) de cloreto de oxalilo. Foi adicionada uma gota de dimetilformamida e a mistura foi agitada durante 2 horas á temperatura ambiente, após o que a reacção estava completa por TLC. A mistura de reacção foi concentrada no vácuo; o resíduo foi reconcentrado duas vezes de 2 mL de tolueno para dar um óleo alaranjado, nomeadamente, ácido /1S-/1 2, 2<(Z ) , 3X, 4///-6-(4-(clorocarboni1) -2-oxazoli 1)-7-oxabiciclo/2.2.l/hept-2-i//-4-hexenoi co, ester metilico. A este óleo foram adicionados aproximadamente 3 mL de CHCl^, seguidos de 0,11 mL (0,08 g, 0,?8 mmole) de trietilamina e 0,13 g (0,71 mmole) de 4-(4-clorofeni1lbutilamina e a mistura foi agitada durante a noite à temperatura ambiente.

A mistura de reac;ão foi diluída com acetato de etilo e água, a fase organica foi separada e a fase aquosa foi extraída duas vezes com 20 mL de acetato de etilo. As fases organicas foram combinadas, lavadas com salina, secas sobre MgSO^ e concentradas no vácuo para dar 0,43 S dum óleo alaranjado.

Este óleo foi cromatografado instantaneamente (silica; 0% a 1OO% de acetato de etilo em gradiente de hexano) para se obter 0,26 g do ester metilico do título, impuro (50% puro = 0,13 g) como óleo. O produto foi obtido com um rendimento de 78%.

¹³C NMR (67.8 MHz, CDC1 ) S :172.8, 163.6, 160.3,

140.2, 140.2, 135.7, 131.0, 129.4, 129.1, 128.2,

128.0, 79.2, 79.1, 51.1, 49.4, 46.3, 38.4, 34.4,

33.5, 29.4, 28.6, 28.1, 27.6, 22.5

3. ácido /15-/1^,22(2),3^,4^//-6-/3-/^-///^(4-clorofenil)butl ^/amino/carbonil/“2oxazolil/-7-oxabi ci clo/2.2.l/hept-2-i1/4-hexenolco_

0,26 g do ester impuro da Parte A (50% puro =

0,13 g, 0_r26 mmole) foi agitado em aproximadamente 3θ mL de NaOH IN e 2 mL de THF durante 8 horas à temperatura ambiente. A mistura de reacção foi concentrada para eliminar THF e acidificada para pH aproximadamente 2 com HC1 concentrado. Foi adicionado acetato de etilo e a fase organica foi separada. A fase aquosa foi extraí- 85 -

da duas vezes com cerca de 20 mL de acetato de etilo.

As fases organicas foram combinadas, lavadas com NaCl saturado, sêcas sobre MgSO^ e concentradas no vácuo para. dar 0,2 g dum óleo limpido. Este foi cromatografado instantaneamente (silica, 0,50$ CH^OH; 0,25$ CH^CO^; 99,25$ de acetato de etilo) para dar 0,10 g de produto puro. O produto foi obtido com 79$ de rendimento.

¹³C NMR (67.8 MH_z, CDEipÓ: 178.4, 164.4, 161 .4,

141.0, 140.4, 135.6, 131.3, 129.6, 129.3, 128.5,

128.3, 79.5, 79.4, 49.6, 46.5, 38.8, 34.6,33.6,

29.6, 28.9, 28.4, 27.8, 22-5

Exemplo 9 ácido /ÍS-/Í ^,-2^(2 ), 3Z, 4/77-6-/3/4-/714-ciclohexilbuti 1 )amino7carbonil7-2-tiazolil/-7-oxabiciclo /2.2.l/— hept-2-il/-4-hexenolco

A. ácido j/lS-Zl/¹, 2/(Z ), 3*J» 4</77“6-/3-(aminocarbonil )-7-oxabici clo/2.2.l/hept-2-il/-4hexenoico, ester metilico_

A uma solução do ácido do Exemplo 1, Parte D (2,45 g, 9,13 mmole) em benzeno anidro (100 mL) foi adicionado, gota a gota, durante um período de IO minutos, cloreto de oxalilo (0,96 mL, 11 mmole).

Após agitação durante 5 horas, a reacção foi concentrada no vácuo, dissolvida em THF anidro (10 mL) e adicionada gota a gota, durante um período de 5 minutos a uma solução a 0?C de hidróxido de amónio concentrado (3 mL) em THF (lOO mL). A reacção foi então concentrada no vácuo. 0 sólido residual foi repartido entre acetato de etilo (150 mL) e I^CO^

0,25 M (25 mL). A fase aquosa foi extraída com ace—

tato de etilo (25 ^mL). As fases organicas combinadas foram secas (Na₂S0^) e concentradas no vácuo. 0 resíduo (2,2 g) foi suspenso em eter em ebulição (100 mL). Foi adicionado acetato de etilo (aprox. 10 mL) para efectuar solução. A mistura foi concentrada para cerca de 50 mL-num banho -de vapor, arrefecido para a temperatura ambiente, semeado e gelado durante a noite. Foi obtida a amida do título, pura (l,19 g_t 49$) por filtração. A amida do título, adicional (l45 mg) foi obtida por concentração dos solutos mãe para 15 mL e deixando ocorrer a cristalização.

B. ácido /lS—/liX, 2o<(Z ) , 3 —6—(aminotiocarbonil)-7-oxabiciclo/2.2.l7hept-2-il/4-hexenoico, ester metillco

A uma solução a 60?C da amida da Parte A (267 mg, 0,999 mmole) em tolueno anidro (10 mL) foi adicionado Reagente de Lawesson (222 mg, 0,55 mmole). A reacção foi agitada a 6O5C durante 30 minutos, diluída com eter dietilico (50 mL) e lavada com NaHCO^ semi-saturado (2x5 mL). A fase organica foi secada (Na 2^S04⁾ e concentrada no vácuo. O resíduo foi passado através dum tampão curto de silica usando 50^ acetato de eti— lo/hexanos para dar um sólido amarelo (249 mg, 88$).

C. ácido /lS-/la<, 2c/(Z ), 3°/, 4/7/-6-/3^-(4—carboxi2-tiazoli1)-7-oxabiciclo/2.2. l/hept2-il/-4-hexenoico, ester metilico

A uma solução de tioamida da Parte B (400 mg,

1,41 mmole) e K^CO^ anidro, em pó (390 mg, 2,82 mmole) em DMF anidro (10 mL), foi adicionado, em várias

- S7 υ

porções, ácido bromopiruvico (contem 0,4 mol água/mol bromoácido, 295 mg, 1»69 mmole). A reacção é deixada em agitação à temperatura ambiente durante 30 minutos. Passado esse tempo, foi adicionada uma porção adicional de 29,5 mg de ácido bromopiruvico. Passada mais 1 hora, o solvente foi eliminado no vácuo a menos de 30^?C. θ residuo foi suspenso/dissolvido em cloreto de metileno (10 mL). Foi adicionada trietilamina (O,59 mL, 4,2 mmole) seguida da adição gota a gota de cloreto de metanosulfonilo (0,33 mL, 4,2 mmole). Depois de agitação durante 5 minutos, a reacção foi diluída com eter dietílico (40 mL). A fase organica foi extraída com K^CO^ Ο,5M (9 x 10 mL). As fases aquosas combinadas foram trazidas para pH 1,5 com HC1 6 N e extraídas com eter dietílico (6 x 25 mL). Estas fases organicas combinadas foram secadas (Na 2^S°4> e concentradas no vácuo. O rendimento do ácido do produto foi de 212 mg (43$).

D. ácido /lS-/!^, 2X (z), 3X, 4^//-6-/3-/4-/21^ciclohexilbutil)aminq/carbonil/-2-tiazolil/7-oxabiciclo/2.2.L/hept-2-il/-4-hexenoico, ester metilico_

A uma solução do ácido da Parte C (42,0 mg,

0,120 mmole) em DMF anidro (l mL) foi adicionado 1,1'carbonildiiraidazolo (20,3 mg, 0,125 mmole). A reacção foi deixada em agitação durante 1 hora· Foi então adicionada uma soloção de cloridrato de (ciclohexilbutil)amina (23»4 mg, 0,131 mmole) e trietilamina (O,020 mL, 0,14 mmole) em DMF anidro (0,5 mL). A reacção foi agitada durante 1 hora e concentrada para eliminar DMF. O resíduo foi retomado em eter di'h· etilico (20 mL) e HC1 0,5 N (5 mL). A fase organica foi secada (Na^SO^) e concentrada no vácuo. A amida resultante (46,8 mg, 81%) foi cromatografada (sili— ca, 50% acetato de etilo/hexanos) para dar 37,1 mg (64%) do ester do titulo como óleo incolor,

E. ácido /ÍS-/l7,2/(z ),3/, 4^2/-6-/3-/4-//^(4ciclohexilbutilJaraino/carbonil7-2tiazolil7-7-oxabici clo/2.2.l/bept2-il/-4-hexenoico

A uma solução da amida da Parte D era metanol (l mL) foi adicionado KOH 2 N (0,3 mL). A reacção foi agitada durante 2 horas. Foi adicionada mais uma porção de 0,3 mL de KOH. Passada mais 1 hora, a reacção foi concentrada para eliminar metanol, O residuo foi dissolvido em água (l mL) e foi adicionado HC1 1 N para trazer o pP. para 2. A mistura foi extraída com cloreto de metileno (3x5 mL). As fases organicas combinadas foram secadas (Na^SO^) e concentradas no vácuo para dar um óleo (34,7 mg,

96%).

EXEMPLO IO ácido /ÍS-/l< ₉2<j (Z) ,3X,4rL//-6-/3-/5-/Z(4-ciclohexilbutil)-aminq7 carbonil7-lH-imidazol-2-il7-7-oxabi ciclo/2.2.1~7hept-2-il7-4-hexenoico, ester metilico

A. ácido 2-(((1,1—dimetiíetoxi)carbonil)amino)—

3-(((fenilmetoxi)carbonil)amino)propanoico

N-<A-Boc-asparagina (l8,0 g, 77,5 mmole) foi adicionada a uma solução de bis(trifluoroacetoxi)iodo- 89 silbenzeno (50,0 g, 116,3 mmole) em l/l de DMF/H₂O (620 mL), Passados 15 minutos, foi adicionada piridina (l2,5 mL, 155,1 mmole). A solução amarela escura foi agitada durante a noite (l6 horas), A solução agora amarela clara foi concentrada no vácuo a menos de r'

40?C. 0 resíduo foi diluído com água (6θθ mL), lavado com eter dietilico (6 x 400 mL) e a seguirconcentrado no vácuo. Este produto em bruto foi dissolvido em água (lOO mL). X solução foi adicionado Νβ,,ΟΟ^

0,5M para trazer o pH para cerca de 8. A seguir foi adicionado THF (lOO mL). A esta mistura agitada vigorosamente, foi adicionado gota a gota benzilclorofornato (CBZ—Cl) (80$ puro determinado por integração NMR; 19,8 g, 93,0 mmole) dissolvido em THF (50 mL). Foi adicionada solução adicional de Na^O^ conforme era necessário para manter um pH básico (como julgado por tiras de pH nos limites pH 5-1θ)« Uma bora depois da adição estar completa, a reacção foi concentrada para eliminar THF. O residuo foi extraí— do com eter dietilico (3 x 200 mL). A fase aquosa foi trazida para pH 2 oom H^SO^ concentrado. A mistura foi extraída com eter dietilico (4 x 200 mL). Estes últimos extxactos foram secados (Na^O^) e concentrados no vacuo, A cromatografia (80$ de acetato de etilo/bexanos contendo 1$ de ácido acético) rendeu 4,23 S (l6$) dum produto do título ligeiramente impuro.

(silica, acetato de etilo+0,5$ ácido acético)0,27·

B. 2—(trimetilsilil)etil 2-(((1,1dimetiletoxi)carboni1)amino)-3-(((fenilmetoxi)carbonil)amlno)propanoato

A uma solução a 08C do ácido da Parte A (3,96 g, 11,7 mmole) em THF anidro (5θ mH) foi adicionado 1,1’ — carbonildiiraidazolo (2,08 g, 12,9 mmole). Passada 1 hora, foi adicionado 2—(trimetilsiHil )etanol (3*4 mL).

A reacção foi então trazida para 7O-C durante 1 hora. Depois do arrefecimento, a reacção foi concentrada e cromatografada (flash, silica, 50 rmm dia., 25$ acetato de etilo/hexanos) para dar 3»θθ ? do ester do titulo na forma dum óleo transparente i Rp (silica, 25$ acetato de etilo/hexaroos) 0,32.

C. ácido 3“amino-2-/^l,l-di.metiletoxi)carbonil/amino/propanoico, ester 2-(trimetilsilil )etilico________

A uma solução da amina-Z d a-? ar te B (2,89 g, 6,60 mmole) em 2-propanol/água (65 mL/6 mL) foi adicionado formato de amónio (2,08 g, 33,0 mmole) e a seguir uma pasta de Pd/C (10$, 0,5 s) em 2-propanol (4 mL). A mistura foi agitada * temperatura ambiente durante 1 hora. A reacção foi filtrada através de Celite^) e concentrada no vácuo. O resíduo foi retomado em 70 mL de acetato de etilo e 30 mL de NaCl saturado contendo 8 mL de NaOH 5^Ν· A fase aquosa Éontinuou a ser extraída com acetato de etilo (2 x 70 mL). As fases organicas combinadas foram secadas (Na^SO^) e concentradas no vácuo para dar o composto do título na forma dum óleo (1,85 g, 92$) :

R*. (silica, 10$ metanol/clorofórmio) 0,75.

- 91 D. ácido /ÍS-/í42^(z),3<,4<77-6-/3-///2-/Z(l,ldimeti let.oxi ) carboni l/amino/-3“OXO“3*£72- (trimetilsilil)etoxi7propil/amino7tioxometil/—7oxabiciclo/2.2.l/hept-2-il/—4—hexenoico, ester metilico_

WSC (l,l8 g, 6,15 mmole) foi adicionado a uma solução de ácido /ÍS-/l^, 2ιΧ (Z ), 3<, 4/7-/-6-/3-(carboxi )-7oxabiciclo/2.2.l/hept-2—il/—4—hexenolco, ester metili— co (1,65 g, 6,15 mmole), composto da Parte C (1,85 g, 6,08 mmole) e HOBT (83I mg, 6,15 mmole) em cloreto de metileno (60 mL). A reacção foi agitada durante 16 horas, diluída com cloreto de metileno (300 mL), extraída (1 x 50 mL de RC1 IN; 1 x 50 mL de NaHCO^ saturado; 1 x 50 mL de água), secada (Na^SO^) β concentrada no vácuo. A cromatografia (flash, silica, 50 ram dia, 40$ acetato de etilo/hexanos, 2L; 60$ acetato de etilo, IL) rendeu um óleo: 2,11 g (63$); R^. (silica,

10$ metanol/clorofórmio) 0,67·

A amida precedente (l,94 g, 3,50 mmole) foi agitada a 65⁵ C em benzeno (40 mL) com Reagente de Laweason (850 mg, 2,10 mmole) durante 1,5 horas. A reacção foi arrefecida e diluída com eter dietilico (250 mL). A mistura foi lavada (2 x 50 mL de Na^CO^ 0,5N), secada (Na^SO^), concentrada no vácuo e croma— tografada (flash, silica, 5θ mm dia, 25$ acetato de etilo/hexanos) para dar l,6l g (80$) do composto do titulo na forma dum óleo; R^ (silica, 25$ acetato de etilo/hexanos) 0,l4.

E. ácido /lS—/1/, 2//Ζ ) ,3^,4Λ//-6—/3-/ϊ-/(ΐ»1— dimetiletoxi)carbonil/-4,5-dihidro-5//2-(trimetilsilil)etoxi/carbonil-lHimidazolo-2-il/-7-oxabiciclo/2,2.l/hept2-il/-4-hexenoico« ester metilico_

Tetracloreto de carbono (3,00 mL, 31,2 mmole) foi adicionado a uma solução do composto da Parte D (l,6l g, 2,82 mmole), trifenilfosfina (2,22 g, 8,46 mmole), trietilamina (l,l8 mL, 8,46 mmole) em acetonitrilo anidro (28 mL). A reacção foi agitada durante 4 horas· A reacção foi diluída com eter dietilico (125 mL), NaCl saturado (125 ®L) e água (5 mL). A fase aquosa continuou a ser extraída com eter (125 mL). As fases organicae combinadas foram secadas (Na^SO^) e concentradas no vácuo. O resíduo foi triturado em sequência com eter (20 mL, 10 mL e 7 ®L), tomando e concentrando de cada vez o filtrado para o ciclo seguinte.

A cromatografia (flash, silica, 50 m» dia. 50$ acetato de etilo/hexanos) rendeu 1,09 g (72$) do composto do título na forma dum óleo; (silica, 50$ acetato de etilo/hexenos)o,29«

F. ácido /lS—/l/,2(z),3í/,4/77-6—/3-(5-carboxi4,5-dihidro-lH—imidazolo-2-il)-7-oxabiciclo/2.2.l/hept-2-il/—4-hexenoico, ester metilico, ra mono cloridrato_ _

A uma solução do composto da Parte E (1,09 g,

2,03 mmole) em cloreto de metileno (2 mL) foi adicionado ácido trifluoroacético (4 mL). A reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora, diluída com tolueno (40 mL) e a seguir concentrada no vácuo. O resíduo foi retomado em acetato de etilo (60 mL) e

- 93 1% foi lavado (2x5 ®L) com NaHCO^ saturado. A fase organica foi secada (Na₂SO₄ e concentrada no vácuo para dar ácido /lS- (1^,2^ (Z ), 3* ,4%77-6-/3- ( 5-carho-4,5-dihidro-lH-imidazol-2-il)-7-oxabiciclo/2.2.l7 hept-2-il/-4-hexenoico, ester metilico (2Ó1 mg, 27$).

A fase aquosa foi trazida para pH 2 e concentrada no vácuo. A extracção do sólido com clorofórmio (2 x 15 mL), seguida de concentração no vácuo deu o composto do título (553 ng, 73$).

G. ácido As-^X»2X(z),3%4^7-6-/3-/5-/Zl>ciclohexilbutil)amino/carbonil7-lH-imidazol2-il7-7-oxabiciclo/2.2.l7hept-2-il7-4hexenoico, ester metilico_

Uma mistura do ácido da Parte F (516 mg, 1,38 mmole), cloridrato de (4-ciclohexilbutil)amina (345 mg, l,8O mmole), WSC (345 mg, 1,80 mmole), HOBT (243 mg, 1,80 mmole) e tríetilamina (θ,5θ mL, 3*6 mmole) em cloreto de metileno (l5 mL) foi agitada durante 24 horas, A reacção foi diluída com cloreto de metileno (50 « lavada (2 x 10 mL de NaHCO^ saturado), secada (NagSO^) e concentrada no vácuo para dar um óleo amarelado, nomeadamente ácido /lS-/ÍÀ,2/— (z),3< 4=27-6-/5-/5-/21¾ -ciclohexilbutilJamino/carbo— nil7-4,5-dihidro-lH-imidazol-2-il7-7-oxabiciclo/2.2.Γ7hept-2-il7-4-hexenoico, ester metilico. Este óleo foi dissolvido em clorofórmio (20 mL). Foi adicionado Mn0₂ activo (Aldrich, 1,0 g). A reacção foi agitada durante 24 horas. Foi adicionada mais uma porção de 0,5 g de Mn0₂ e a agitação continuou por mais 3 dias.

Foi adicionado mais MnO (0,5 g) · Passadas 5 horas, a

- * (R) reacção foi filtrada através de Celite'· ' . A almofada

- 95 foi lavada cotn porções de clorofórmio. Os filtrados combinados foram concentrados no vácuo. A cromatografia (flash, silica, 25 mm dia, 2$ metanol/clorofórmio) rendeu 235 mg (36$) do composto do ester do título, na forma dum óleo.

Exemplo 11 ácido ZÃS-/Í /, 2X (Z ), 3 5<77-6-/3-/5-/Z(5-ciclohexilbutil )amino/ carbonil/'-lH-iraidazol-2-il7^_7^-oxab±cicl o/2.2.l7hept-2-il/-5-hexenoico

A uma solução do ester do Exemplo 10 em metanol (8 mL) foi adicionado KOH 2N (5 mL). A reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 5 horas. O metanol foi eliminado no vácuo. O resíduo foi retomado em cloreto de metileno (25 nl) e trazido para pH 2 com HC1 IN. Depois de agitação, a fase aquosa continuou a ser extraída com cloreto de metileno (25 mL). As fases organicas combinadas foram secadas (Na_SO, ) e concentradas no vácuo. O residuo foi retomado em cloreto de metileno (10 mL) e passado rapidamente com HC1 etéreo (5 mL) durante 30 segundos. A mistura foi concentrada no vácuo. À trituração com IO mL de acetato de etilo (fervendo à temperatura ambiente) rendeu um sólido branco que foi recolhido por filtração, lavado com acetato de etilo (5 mL) e secado para dar o ácido do título na forma dum sólido branco:

1265 mg (52$); p.f. 168-173’C.

ί Ι'ήI ¹

- 95 NMR (tetradeuteriometanol/deuterioclorofórmio,

270 ΗΗζ):<£8.05 (s, 1Η), 5.23-5.36 (m_T 2Η), 4.73 (s, ΙΗ), 4.41 (s, 1H), 3.74 (d, J=B Hz, 1H),

3.34-3.37 (m, 2H), 0.84-2.44 (m, 28H).

NMR (desacoplamento completo, 67,8 MHz, tetradeuteriometanol/deuterioclorofónnio):δ

175.4, 157.0, 147.8, 130.1, 127.3, 120.7,80.0,

79,9, 44.9, 39.8, 37.4, 36.9, 33.5, 33.1, 29.1,

28.7, 28.1, 26.5, 26.2, 24.1, 22.6.

-IR-_t(KBr,): 3427(m), 3232 (m); 3009 (m), 2923 (s),

2851 (m), 1730 (m), 1718 (m), 1651 (m), 1566 (m),

1448 (w), 1334 (w), 1189 (w) cm ¹ líRMS (Cl, NH-jDEP 50, pos.ion spectrum) m/z(rei.int.)

458.(2). 184 (7), 173 (14), 172 (6), 169 (9),168(13),

167 (5), \5T (ÍÒ), 156 (100), 155 (25), 154 (35), 152 (6).

Anal.Cale.para C..HC1N0.0.25 H_0:

. 26 40 3 4 2

C,63.63; H, 8.19; Cl, 7.11; N, 8.43 Enc. C,62.76; H, 8.30; Cl, 6.82; N, 8.37.

Exemplo 12 /lS-/l A',2/ (Z) , 3/,4<77-N-(4-clclohexllbutil)2-/2-/5(lH-tetrazol-5-il)-2-pentenil/-7-oxabiciclo/2.2.í7hept-3-il7-4—oxazolocarboxamida

A. /ÍS-/l <4 2/ (Z ) , 3 2p</7-2-/5- (lH-tetrazol5-H)-2-pentenil7-7-oxabiciclo/2.2.l7heptano-3—metanol

- 96 A uma pasta a O^C de 1,0 mmole de /4aR(4a«(, 5 β,8 3,8aX)_/-octahidro-5»8-epoxi-lH-2-benzopiran3-ol, preparado conforme descrito.na Patente dos EUA n*. 4.143.054 e 1,4 mmole de brometo de 3-(tetrazol—5-il)propiltrifenilfosfono em tetrahidrofurano é adicionada gota a gota uma solução 1,8M de KOt-amilato em tolueno (2,8 mmole). A mistura é deixada aquecer à temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reacção é extinta pela adição de ácido acético. A mistura de reacção é concentrada no vácuo e purificada por cromatografia com silica gel usando mistura de CH₃OH/CH₂C1₂ como eluentes.

B. /lS—/lX,2^(z) ,3^4^//-2-/5—(l-metoximetil-lH-tetrazol-5-il)-2-pentenil7-7oxabiciclo/2.2.l7hgptano-3-®etanol___

Uma solução de 1,0 mmole do tetrazolo do título A em THF é arrefecida para 05C e tratada com 1,0 mmole de trietilamina e 1,0 mmole de eter bromometilmetilico. A mistura é agitada durante 4 horas à temperatura ambiente e depois repartida entre NaHCO^ aquoso, saturado e acetato de etilo. A fase de acetato de etilo é secada, filtrada e concentrada no vácuo para dar o tetrazolo do título B,

C. /0.5-/1^,2^ (z) ,3ο<,4$/7-Ν-(4—ciclohexilbutil)-2-/2-/5-(1-metoximetil-lH-tetrazol5—il)-2-pentenil/-7-oxabiciclo/2.2.l/hept3—ii7—4—oxazolocarboxamida

Seguindo o Exemplo 1, excepto substituindo o tetrazolo do Exemplo 12, Parte B, pelo ester do Exemplo 1, Parte C, é obtido o composto do título.

- 97 D. /Ts-/l7. 2^(z ) , 3 «x, 4 X7/-N- (4-cic lohexi1butil)-2-/2-/5-(lH-tetrazol-5-il)-2pentenil7-7-oxabiciclo/2.2.l7hept-3-il74-oxazolocarboxamida

A uma solução de 1,0 mmole de tetrazolo do titulo C era CH^OH (25 mL) é adicionada 1 gota de solução de HC1 concentrada. A solução é aquecida em refluxo durante 2 horas· Ao arrefecer, a mistura de reacção é concentrada no vácuo. O produto era bruto é purificado por fase—inversa de HPLC usando misturas de CH^CN/0,02$ de H^PO^ aquoso como fase móvel para ser obtido o tetrazolo do título.

Exemplos de compostos adicionais de acordo com o presente invento que podem ser preparados seguindo os processos descritos na descrição e exemplos d· trabalho incluem, mas não estão limitados, aos seguintes s

IVj,

HA481a

-98αύ

X

CN

O u

CN

O

U

CN

OS cn

O in

CN

U in

	A >,	in	cO U
cn	A			X	CN
3!	O			Ό	X
U	N		lf)	CJ	CJ
CN	(0		X	CN	CN
O	P		Ό	O	O
W	P		cj	W	W
A	<u	X		a	A
2	P	CN	2	2	2
o	»	O	o	O	o
o	in 1 CN X u	CJ	o lf)	CJ	CJ
Γ			X		CJ»
33			Ό		X
cn		in	CJ		<<
U		X	CN		CJ
1	33	Ό X		1
•H		U	U	X	c

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A <0 cn in > co σ» A A A

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HA481a

CM

K

U

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CM

CM

CM cm ω

CM CM <1· m Ό f

CM CM CM CM

CO

CM σ>

CM

1'

100

Exemplo 30 ácido /1S-/1X ,2x(Z),3X, 4 JjJ-6-/3-/4-//( 6-ci c lohexi lhexi 1 ) amino/carboni l/-2-oxazo li 1/-7-oxabi ci c 10/2.2.1/hent-?-ilV-4-hexenoico, ester metilico ^{* lo}

A. Benzenopentanol, ester de metanosulfonato

A uma solução agitada de 5~feni1-1-pentanol (5»0 g,

30,4 mmole) em 20 mL de cloreto de metileno a -7O⁹C, sob árgon, foi adicionado primeiramente (4,0 g, 39»5 mmole), e a seguir cloreto de metanosulfonilo (2,83 mL, 4,18 g, 36,5 mmole) gota a gota. A mistura de reacção foi aquecida- lentamente para temperatura ambiente. Depois de agitação durante 2 horas à temperatura ambiente, foi adicionada água e a mistura de reacção foi extraída com cloreto de metileno (50 mL).

A fase aquosa foi extraída duas vezes mais com ΟΗ,,Ο^ (25 mL). As fases organicas foram combinadas e lavadas com salina, secas sobre MgSO^ e concentradas para se obter 7» 30 g (ΐθθ%) do composto do título na forma dum óleo amarelo. R 0,9 em 50% hexano-acetato de etilo (UV, Ce(SO₄)₂).

¹³C NH? (CDC1₃): <5141.9, 128.2, 125.6, 69.9,

37.1, 35.5, 30.6, 28.8, 24.8.

B. Henzenohewanonltrilo

A uma solução agitada do composto da Parte A (7»3θ g, 3θ»1 mmole) em 70 mL de C₂H₂0H à temperatura ambiente foi adicionada uma solução de KCN (9,81 g,

150,6 mmole) em 29 mL de água. Esta mistura de reacção foi agitada durante 20 horas, e a seguir extraída com CHCl^ três vezes (50 mL). As fases organicas foram combinadas e lavadas com água, seguidamente cora

101

salina, secas sobre MgSO^ e concentradas no vácuo para ser obtido um óleo amarelo contendo o composto do título e o composto restante da Parte A. Este óleo foi purificado por cromatografia instantanea (95:5 hexano—acetato de etilo) para serem obtidos 2,16 g (4l$) do produto do título desejado como um óleo.

¹³C NMR (CDC1₃): 6141.8, 128.0, 125.5, 119.5,

35.4, 30.5, 27.9, 24.9, 16.7.

C, ciclohexanohexanamina

A uma solução agitada do composto da Parte B (2,l6 g, 12,4 mmole) em 100 mL de CH^COOH foi adicionado Pt0₂ (0,60 g). A mistura foi agitada à temperatura ambiente num balão de H₂ a 1 atmosfera. Passadas 20 horas, a mistura de reacção foi filtrada através duma almofada de celite e a almofada foi lavada com etanol duas vezes. 0 filtrado foi concentrado no vácuo para ser obtido um semi-sólido. Este foi agitado em hexano e foi obtido por filtração o produto do titulo na forma dum sólido fofo branco (2,00 g, 95$).

D. ácido /13-/1^,2/(2),3/,4/77-6-/5-/4-//(6ciclohexilhexil)amino/carbonil7-2-oxazolil/— 7-oxabiciclo/5.2·l/hept-2-i l/-4-hexenoico, ester metillco______

Uma amostra de l,6l g do ácido oxazolo do Exemplo 2, Parte G (4,8 mmole) foi séca azeotropando com DMF anidro e tolueno, duas vezes (alto vácuo). Este material (que continha DMF residual) foi dissolvido em 30 mL de tolueno e foram adicionados com agitação à temperatura ambiènte, sob ãrgon, 2,9 g de cio102 ΐ'ή, reto de oxalilo (23 mmole). Desenvolveu-se gás. Formou-se um óleo escuro no fundo da mistura de reacção. (θ óleo era o produto de reacção de DMF com cloreto de oxalilo). Passados 5 minutos, foram adicionados mais 2,9 g de cloreto de oxalilo. Esta mistura foi agitada durante a noite. TLC indicou a conversão limpa ao cloreto ácido. 0 sobrenadante foi separado com uma pipeta e transferido para um balão cheio com argon.

O óleo foi agitado duas vezes com tolueno adicional e o sobrenadante transferido. Os sobrenadantes combinados foram evaporados com CHCl^ para dar 1,54 g (91$ de rendimento) do cloreto ácido, nomeadamente ácido /lS-/lX, 2X (Z ) , 3A 4$7_7“6“Z3^-/^- (clorocarboni l)-2-oxazolil/-7-oxabiciclo/2.2.l/hept-2-i l7~4-hexenoico, ester metilico.

A uma solução de (0,55 g, 3>° mmole) da amina da Parte C em 5 ”iL de clorofórmio a 0⁹C, foi. adicionada (θ,3 g, 3»0 mmole) de trietilamina e (0,53 g,

1,5 mmole) do cloreto ácido supracitado. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 14 horas, a seguir diluída com clorofórmio e água. A fase organica foi separada e a fase aquosa foi extraída com 20 mL de clorofórmio, duas vezes. As fases organicas foram combinadas, lavadas com salina, secas sobre MgSO^ e concentradas. A cromatografia instantanea (gradiente 0$ a.75$ EtOAc erá hexano)deu 0,49 g de produto na forma dum óleo limpido com 65$ de rendimento. Rp 0,5 em 1:1 de hexano-acetato de etilo (UV, Ce(SO₄)₂).

¹³C NMR (67.8 MHz CDCl^): 6172.8, 163.5, 160.1,

140.1, 135.8, 129.1, 128.2, 79.2, 79.0, 51.0,

49.4, 46.3, 38.7, 37.2, 37.0, 33.4, 33.0, 29.4,

29.2, 28.6, 27.5, 26.6, 26.3, 26.1, 22.5

1'

103 Exemplo 31 ácido ZÍS-/Í X, 2/ (Z ), 3 X,6 -ciclohexilhexil)amino7carbonil7-2-oxazolil7~7-oxabiciclo/2.2. l/hept2-il7-4-hexenoico

Uma solução de (0,49 g, 0,97 mmole) do ester do Exemplo 30 em 8 raL de NaOH IN e 8 ml de THF foi agitada durante 18 horas, a seguir concentrada no vácuo para eliminar THF e acidificada para pH 1,5 com HC1 IN. Foi adicionado acetato de etilo e a fase organica foi separada, A fase aquosa foi extraída duas vezes com 20 mL de acetato de etilo. As fases organicas foram combinadas, lavadas com salina, sêcas sobre MgSO^ e concentradas no vácuo. Foi obtido um sólido branco. Este foi cristalizado de hexano e clorofórmio para dar 0,40 g (84$) de produto puro como um sólido branco.

Rp 0,36 era 0,1$ CH^COOH em (4$ metanol em acetato de etilo). Visualizado por UV: Ce(S0^)₂· /x_7_D ^?=+30,2, c 0,58 g/lOO mL de CH^OH, mp 82-83?C.

Exemplo 32 ácido /lS-ZÍ/, 2X (Z ), 3 p, 4/77-6-/3-/5-/ZÍ 6-ciclohexilhexil)-amino7carbonil7-2-oxazolil7-7-oxabiciclo/2.2.l7 hept-2-il7-4-hexenoico, ester metilico

A uma solução agitada de 0,49 g (l,40 mmole) de cloreto ácido preparado como descrito no Exemplo 2, Parte I mais uma quantidade desconhecida de sal de Vilsmeier em IO mL de clorofórmio, foi adicionado 0,28 g (2,80 mmole) de trietilamina e 0,38 g (2,1 mmole) de 6-ciclohexilhexilamina, preparada no Exemplo 30, Parte C. A mistura foi agitada à temperatura

104 ambiente durante 10 horas, posteriormente diluída com acetato de etilo e água. A fase organica foi separada e a fase aquosa foi extraída cora 20 mL de acetato de e-tilo, duas vezes. As fases ôrganicas foram combinadas, lavadas com salina, secas sobre MgSO^ e concentradas. A cromatografia instantanea (gradiente 0$ a 1OC$ acetat3 de etilo-hexano) deu 0,17 g do produto do título na forma dum óleo limpido com 25$ de tendimento. R*.=O,46 em 1:1 de acetato de etilo:hexano.

Exemplo 33 ácido /lS-/!/ , 2$ (Z ) , 3 (3» 4/Z7-6-/3-/4-//J 6-ci^clohexilhexi 1 )-aminqTcarbonil_7-2-oxazolil7-7-oxabiciclo/2<2. lj hept-2-il7-4-hexenoico

Uma solução de 0,17 g (θ,33 mmole)do ester do Exemplo 32 em 5 mL de NaOH IN e 2 mL de tetrahidro— furano foi agitada λ temperatura ambiente durante 10 horas, depois concentrada no vácuo para eliminar THF e acidificada para pH 1,5 com HCl concentrado.

Foi adicionado acetato de etilo e a fase organica foi separada. A fase aquosa foi extraída duas vezes com 20 mL de acetato de etilo. As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salina, secas sobre MgSO^ e concentradas no vácuo. Foi obtido um óleo limpido. Este foi cromatografado em 1:1 de EtOAc-hexano com 0,25$ CH^COOH para dar 0,13 g (78$) do produto do título na forma dum óleo (contendo 2,5$ do isomero cis do composto do Exemplo 3LA). R_f=O,36 em 4$ CH^OH, 0,1$ CH^COOH, 95,5$

EtQAc (UV, Ce(SO₄)₂). Z>7_D*=+55« em CH^OH a c=0,50 g/lOO mL.

105 Exemplo 34 ácido /l X, 2λ(Ζ ),3X, M/-6-/3-/4-(l-pirrolidinilcarbonil)2-oxazolil/-7-oxabiciclo/2.2,l/hept-2-il/-4hexenoico, ester metilico

A uma solução agitada de 0,18 g (0,50 mmole) do cloreto ácido preparado no Exemplo 2, Parte I, era 3 mL de clorofórmio a 0?C, sob árgon, foi adicionado 0,10 g (l,0 mmole) de trietilamina e 0,07 S (l,0 mraole) de pirrolidina. A mistura foi aquecida para temperatura ambiente e agitada durante 10 horas, a seguir diluída com acetato de etilo e água, A fase organica foi separada e a fase aquosa foi extraída cora 20 mL de acetato de etilo, duas vezes. As fase organicas foram combinadas, lavadas com salina, secas sobre MgSO^ e concentradas. A cromatografia ins— tantanea (gradiente 50$ a 100$ acetato de etilo em hexano, depois 2$ metanol era acetato de etilo) deu 0,13 S produto do título na forma dum óleo lim— pido com 68$ de rendimento. R^=0,6 em 9:1 de acetato de etilo-raetanol (UV, Ce(SO^)₂).

¹³C NMR (67.8 MHZ, CDCl/: à 172.9, 162.9, 160.0,

141.9, 136.9, 129.0, 128.5, 79.2, 78.9, 51.1,

49.4, 47.9, 46.5, 46.4, 33.5, 29.5, 28.7, 27.6,

26.1, 23.4, 22.5

Exemplo 35 ácido /lX,2s<(Z ) , 3 ^,4 X/-6-/3-/5-(l-pirrolidinilcarbonil )2-oxazolil7-7-oxabiciclo/2.2.l7hept-2-il/-4-hexenoico

Uma solução de 0;13 g (0,33 mmole) do composto do Exemplo 34 em 10 mL de NaOH IN e 2 mL de tetrahidrofu— \·

- 106 rano foi agitdda durante 10 horas à temperatura ambiente, a seguir concentrada no vácuo para eliminar THF e acidificada para pH 1,5 com HCI IN.

Foi adicionado acetato de etilo e a fase organica foi separada· A fase aquosa foi extraída duas vezes com 20 mL de acetato de etilo. As fases organicas foram combinadas, lavadas com salina, sÉ6As sobre MgSO^ e concentradas no vácuo. Foi obtido um óleo limpido. Este foi cromatografado (EtOAc depois 1$ CH^OH, 0,25$ CH^COOH, 98,75$ EtOAc)para dar 0,12 g (92$) de produto puro como um óleo.

R_f =0,2 em 1$ CH^OH, 0,5$ CH^COOH, 98,5$ EtOAc.

=+35,7⁵ em CH^OH a c=2,40 g/lOO mL.

Exemplo 36 ácido /lS-/l/,2λ(Z),3X,4///-6-/3-/4-/Jpropilamino)carbonil7-2-oxazolil7-7-oxabiciclo/2.2.l7hept-2il7—4-hexenolco, ester metilico

A uma solução de (0,22 g, 3,7 mmole) de propilamina em 5 mL de clorofórmio a 09 sob árgon, foi adicionado 0,162 g (0,46 mmole) de cloreto ácido preparado como descrito no Exemplo 2, Parte I. A mistura foi aquecida para temperatura ambiente e agitada durante 14 horas, depois diluída cora clorofórmio e água. A fase organica foi separada e a gase aquosa foi extraída com 20 mL de clorofórmio, duas vezes. As fases organicas foram combinadas, lavadas com salina, sfiOas sobre MgSO^ e concentradas. A cromatografia instantanea (gradiente 0$ a 75$ EtOAc em hexano) deu 0,15 S do produto do título como um óleo limpido com 85$ de rendimento. Rj. 0,29 em 4$ metanol em acetato de etilo (UV, Ce(S0₄)₂).

^{180 (CDC1}3); Ó173.0, 163.7,160.4,140.2, 136.0,129.2,128.4,

79.3, 79.2, 51-2, 49.5, 46.5, 40.5, 33.6. 29.6, 28.7, 27.7,22.7,

22.6, 11.2

107 'tr]

Exemplo 37 ácido /1S-/1X, 2/ (Z ), 3*ό 4///-6-/3-/4-/( pro pi lamino ) carbonil/-2-oxazolil/-7-oxabi ci cl0/2. 2 .l/hept-2i1/-4-hexenoi co

Uma solução de 0,15 S (0,39 mmole) de ester do Exemplo 36 em 8 mL de NaOH IN e 8 mL de THF foi agitada durante 18 horas, depois concentrada no vácuo para eliminar THF e acidificada para pH 1,5 com HC1 IN. Foi adicionado acetato de etilo e a fase organica foi separada. A fase aquosa foi extraída duas vezes com 20 mL de acetato de etilo. As fases organicas foram combinadas, lavadas com salina, sêcas sobre MgSO^ e concentradas no vácuo. Foi obtido um óleo limpido. Este foi cristalizado de hexano e clorofórmio para dar 0,14 g (100$ do produto puro na forma dura solido branco. R^. 0,4l em 0,1^· CH^COCH, 4^ metanol, 95»9$ acetato de etilo (UV, CeíSO^),). pf 1171182C, /rf7?_D=+42,12 a c 4,7 g/lOO mL CH^OH.

Exemplo 38 ácido /lS-/L<, 2X.(Z ) , 3X, 4oé//-6-/3-/^-//( 4-butilf enil ) aminq7carbonil7-2-oxazolil/-7-oxabiciclo/2.2. /7hept—2-il/-4-hexenoico, ester metilico

A uma solução de 0,189 g (l,27 mmole) de 4-burilanilina em 5 de clorofórmio sob árgon a C2C, foi adicionado 0,17 g (0,48 mmole) de cloreto ácido preparado conforme descrito no Exemplo 2, Parte T e O, 145 g

108 (l,44 mmole) de trietilamina. A mistura foi agitada à temperatura ambiente e agitada durante l4 horas, depois diluída com clorofórmio e água. A fase organlna foi separada e a fase aquosa .foi extraída com 20 mL de clorofórmio, duas vezes. As fases organicas foram combinadas, lavadas com salina, secas sobre MgSO^ e concentradas. A cromatografia instantanea (gradiente 0$ a 75$ EtOAc em hexano) deu 0,16 g do produto do título como um óleo limpido com um rendimento de 69$. Rjç. 0,87 em 4$ metanol em acetato de etilo (UV, Ce(S0,J₂).

¹³C NMR (CDC1): £ 173.1, 163.9, 158.2, 141.1 ,

139.0, 136.2, 129.4, 128.7, 128.4, 119.7, 79.4,

79.3, 51.3, 49.6, 46.6, 34.9, 33.6, 33.5, 29.7,

28.8, 27.8, 22.7, 22.1, 13.8.

Exemplo 39 ácido /lS-Zl/, 2/(7 ) , 3/, M77-6-/5-/4-//(4-butilfenil)aminq/carbonil_7-2-oxazolil7“7-oxabiciclo/2.2. l7hept-2-il7-4-bexenoico

Uma solução de 0,16 g (θ,3^ mmole) do ester do Exemplo 3θ ^em θ mL de NaOH IN e 8 mL de THF foi agitada durante 18 horas, depois concentrada no vácuo para eliminar THF e acidificada para pH 1,5 com HC1 IN. Foi adicionado acetato de etilo e a fase organica foi separada. A fase aquosa foi extraída duas vezes com 20 mL de acetato de etilo. As fases organicas foram combinadas, lavadas com salina, secas sobre MgSO^ e concentradas no vácuo. Foi obtido um óleo limpido. Este foi cristalizado de hexano e clorofórmio para se obter 0,13 g (87$) de produto

109

puro na forma dum sólido amarelo, R^, 0,47 em 0,1$ CH^COOH, 4$ metanol, 95·9$ de acetato de etilo (UV, Ce(SO₄)₂). pf 113-11450. =+6,44, 0,59 g/100 mL de CK^OH.

Exemplo 40 ácido /ÍS-/l X, 2^(Z ), 3X, 4x77-6-/3-/4-/(2,3-dihidrolH-indol-l-i1)carbonil/-2-oxazolil7-7-oxabici clo/2.2.l7bept-2-il7-4-hexenoi co, ester metilico

A uma solução de 0,18 g (1,50 ramole) de indolina em 5 raL de clorofórmio, foi adicionado 0,18 g (l,8 mmole) de trietilamina e 0,46 g (l,30 mmole) de cloreto ácido preparado como descrito no Exemplo 2, Parte I. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 14 boras, depois diluída com clorofór mio e água. A fase organica foi separada e a fase aquosa foi extraída cora 20 mL de clorofórmio, duas vezes. As fases organicas foram combinadas, lavadas com salina, sêcas sobre MgSO^ e concentradas.

A cromatografia instantanea (gradiente 0$ a 75$ de EtOAc em hexano) deu 0,37 g do produto do título como um óleo amarelo com 65$ de rendimento.

R_f 0,8 em 98,9$ de acetato de etilo, 1$ metanol,

0,1$ TFA (UV, Ce(SO₄)₂).

Exemplo 4l ácido /lS-/í<,2<(Z),3X,4/77-6-/3-A-/72,3-dihidroΙΗ-indol—1-il)carboni l/—2-oxazolil/-7-oxabi ciclo/Γ. 2. l7hept-2-i l7-4 —hexenoi co ''ma solução de 0,37 g (θ,8θ mmole) do ester do Exemplo 40 em 15 mL de NaOH IN e 15 mL de me-

11Ctanol foi agitada durante 18 horas e acidificada para pH 2 com HC1 concentrado. Foi adicionado acetato de etilo e a fase organica foi separada. A fase aquosa foi. extraída duas vezes com 20 mL de acetato de etilo. As fases organicas foram combinadas, lavadas com salina, secas sobre MgSO^ e concentradas no vácuo. Foi obtido um óleo vermelho. Este foi cromatografado (0,1$ CH^COCH em (gradiente 0$ a 100$ EtOAc em hexano) para dar 0,25 g (75$) do produto do título, puro, como um óleo amarelo. R_f 0,29 em 0,1$ CH^COCH em 5C$ acetato de etilo em hexano (UV, Ce(SO^)₂).

Z<7'_d =+31.2 em CH^OH a c 0,53 g/lOC mL.

Exemplo 52 /Ts-/l^, 2/(Z ) , 3$, 5/77-6-/3-/5-//(5 -ci clohexilbutil)amino/carbonil7-2-oxazolil7-7-oxabiciclo/2.2.l/hept-2-il7-N-(fenilsulfoni1)-5-hexenamida

A uma solução agitada de 1-(3-dimetilaminopropi1)-3-etilcarbodiimida, sal de cloridrato (102 mg, 0,50 mmole) e 5—dimetilaminopiridina (66,7 mg, 0,50 mmole) em 5θ mL de DMF foi adicionada benzenosulfonamida (80 mg, 0,51 mmole) e (02^5)7^ (θ»ΐ5 mL, 1,00 mmole) seguida pelo ácido do Exemplo 1 (229 mg, 0,50 mmole). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 18 horas e concentrada no vácuo. O resíduo foi distribuído entre 25 mL de solução HC1 IN e EtOAc (’l x 50 ml).

Os extractos EtOAc combinados foram lavados com 30 mL de salina, secos (MgSC^), filtrados e concentrados no vácuo. Este foi cromatografado em 30 g de silica gel 6θ Merck, usando 2$ CH^OH em CH2CI2 como eluente para dar 250 mg da sulfonalll

Ι'Ιη, mida do título. Este produto foi distribuído entre 60 mL de EtOAc e H^O (l x 20 mL). A fase organica foi seca (MgSO^), filtrada e concentrada no vácuo para dar 210 mg (70%) do composto do titulo na forma dum sólido, p.f. 154-15Ó?C,

TLC: silica gel, 4% CH^OH/CI^Cl^ R_f 0,46, Ce(SO₄)₂.

¹³C NMR do composto do titulo (0001^,67.5 MHz): é 171.1,

170.5, 163.9, 161.1, 140.7, 139.0, 135.9,133.5,

128.7, 128.2, 79.7, 79.7, 49.5, 46.4, 39.2, 37.4,

37.0, 35.9, 33.3, 29.7, 28.8, 27.9, 26.6,

26.3, 26.3, 24.1, 22.3

Exemplo 43 /lS-/l/, 2/(z), 3X, 4777-6-23-/4-//(4-ciclohexilbutil )amino/carbonil/-2-oxazo1ÍÍ/-N-(meti 1sulfoni1)—7— oxabiciclo/2.2.l/hept-2—il/-4-bexenamida

A uma solução agitada de 1-(3-dime ti laminopropil )-3—etilcarbodiimida, sal de cloridrato (102 mg, 0,50 mmole) e 4-dimeti laminopiridina (66,7 mg, 0,50 mmole) em 50 mL de TOMF foi adicionada metanosulfonamida (47«6 mg, 0,50 mmole) e (C₂H₅)₃N (0,l4 mL, 1,00 mmole), seguida do ácido do Exemplo 1 (229 mg, 0,50 mmole). A mistura foi agitada à temperatura dmbiente durante 18 horas e concentrada no vácuo. 0 resíduo foi distribuído entre 25 mL de solução HC1 IN e EtOAc (4 vezes com 40 mL). 0S EXTRActos de EtOAc combinados foram lavados cora 3θ mL de salina, secos (MgSO^), filtrados e concentrados no vácuo. Este foi cromatografado em 30 S de silica gel Merck usando 2% CH^OH em CH^C^ como eluente paira dar 200 mg da sulfonamida do título. Este

112 produto foi distribuído entre 6θ mL de EtOAc e

H^O (l x 20 mL). A fase organica foi seca (MgSO^), filtrada e concentrada no vácuo para dar 150 rog (56$) do composto do título na forma dum sólido, p.f. l40-l42?C, TLC: silica gel, 4$ CH₃OK/CH₂C1₂,

Rj 0,40, Ce(SO₄)₂.

C NMR do composto do titulo(CDC1_?, 67.5 MHz):ò171.8,

163.9, 161.0, 140.8, 135.9, 128.8, 128.7, 79.7,

79.7, 49.5, 46.4, 41.3, 39.2, 37.4, 37.0, 36.0,

33.3, 33.3, 29.7, 28.8, 28.0, 26.6, 26.3, 26.3, 24.1,22.3

Exemplo 44 ácido /ÍS-/Í í, 2/(Z ), 3 4//7-7-/3-/4-/Ζ7 4-ciclohexilbu til )-amino/carboni l/-2-oxazolil/-7-oxat»iciclo/2.2. Ff heftt-2-il7-5-heptenoico, ester metillco

A. ácido /ÍS-/Í/, 2/(Z ),3/, 4/77-7-(3-carboxi)-7oxabiciclo/2.2.l7hept-2-il7-5-heptenolco_

A uma solução agitada de ácido /ls-/l/,2/(Z),3/,4/77“ 7-(3-hidroximetil)-7-oxabiciclo/2.2.l7hept-2-il/-5heptenoico, ester metillco (1,60 g, 5,97 mmole) em 1OO mL de acetona a 0«C foi adicionado MnSO^ tratado com reagente Jones (cerca de 1OO mg de MnSO^ dissolvido em 1OO mL de reagente Jones) até persistir uma cor vermelho-alaranjado. A mistura foi agitada a O?C durante 3θ minutos e à temperatura ambiente durante

1,5 horas. A mistura foi extinta com álcool isopropilico (IPA) e concentrada no vácuo. 0 resíduo foi distribuído entre 70 mL de solução de NaHSO^ 3M e EtOAc (4 x 100 mL). Os extractos de EtOAc combinados foram lavados com H₂0 (l x 70 mL) e salina (l x 70

- 113 mL). A fase organica foi sêca (.MgSO^), filtrada e con centrada no vácuo para dar 1,57 S (93% do ácido do titulo que foi usado para a transformação seguinte sem mais purificação. TLC: silica gel, 4%

CH OH/CH₂C1₂, R_f 0,24 (Ce(SO₄)₂.

NMR do ácido do titulo (CDCl^, 67.5 MHz): £176.7, 174.0, 130.5, 128.3, 78.4, 78.2, 51.8, 51.3, 47.8,

33.3, 29.0, 28.7, 27.2, 26.6, 24.6

B. ácido 72-/l4-ciclohexilbutil)amino}-1hidroximetil)-2-oxoetil7carbamico, ester 1,1-dimetiletilico

A uma mistura agitada de 4-ciclohexilbuti1amina * sal HC1 (19,5 St 102 mmole), l-hidroxi^enzotriazol * b₂C (l6,5 g, 122 mmole) e Boc-L-serina (25«θ St 122 mmole) em 400 mL de D HF sob árgon, a 0?C foi adicionado em sequencia (C₂H )^N (42,5 mL,

305 mmole) e 1-(3-dimeti laminopropi1)-3-eti1 carbodiimida · sal HC1 (23,4 g, 122 mmole). A mistura foi agitada a O?C durante 1 hora e à temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura foi concentrada no vácuo e diluída com 800 mL de EtOAc. A solução resultante foi lavada com solução de HC1 IN (3 vezes com 120 inL) e solução de NaOH 0,2N (2 vezes com 100 mL), solução de NaKCO^ saturada (l vez com 100 mL) e salina (l vez com 150 mL). A fase organica foi secada (MgSO^), filtrada e concentrada no vácuo para dar 39,9 g da amida do título num rendimento quantitativo. TLC: silica gel, 4% CH^OH/ CH₂C1₂, R_f 0,38, Ce(SO₄)₂.

NMR da amida do título (CDCL^, 67.5 MHz): <5 171.2,

156.2, 80.3, 62.8, 39.6, 37.4, 37.0, 33.3, 29.6,

28.2, 26.6, 26.3, 24.0.

114

C. ácido ZlS-_ZU,2-((Z),3X,L<77-7-73-y2/2-/('lci clohexilbuti1)aminq/-l-(hidroximeti 1)2-oxoeti l/amino/carboni 1.7-7-oxabi ciclo/2.2.l/hept-2-il7“5-hept enoi co, ester metilico

A uma solução agitada da amida da Parte B (1,90 g, 5»56 mmole) em 20 mL de CH^Cl^ a O?C foram adicionados 8 mL de ácido tri f luoroac é ti co . Esta mistura foi agitada a 0?C durante 3 horas. A mistura foi diluída com 50 mL de tolueno e concentrada no vácuo para dar amina · sal TFA. A uma solução agitada desta amina · sal TFA, ácido da Arte A (1,57 g» 5»57 mmole) e 1-hidroxibenzotriazolo · f^O (0,75 g, 5»57 mmole) em 60 mL de DMF a O^c, sob árgon, foram adicionados em sequencia (3,88 mL, 27,8 mmoles) e l-(3“dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida · sal HC1 (l,07 g, 5»57 mmole). Esta mistura foi nesta altura agitada à temperatura ambiente durante 16 horas e concentrada no vácuo. 0 produto em bruto foi diluído com 400 ml. de EtOAc e lavado com solução de PCI IN (3 vezes com 7θ mL), solução de NaOH 0,2N (2 vezes com 30 mL) e solução de NaHCO^ saturada (l vez com 50 mL). A fase organica foi secada (MgSO^), filtrada e concentrada no vácuo. Este foi cromatografado em 70 g de silica gel 60 Merck usando 2% de CH^OH em Cf^Cl^ como eluente para dar 1,74 g (42') do álcool do título. TLC: silica gel,

2% CH OH/CH₂C1₂, R_f 0,18, Ce(SO_u)₂.

¹³C NMR do álcool do titulo (COC1₃, 67.5 MHz):&174.0,

173.2, 170.6, 130.6, 128.5, 79.2, 79.0, 62.7,

54.4, 53.5, 51.4, 48.0, 39.5, 37.4,37.0,33.3,

33.3, 33.3, 29.6, 28.6,27.5, 26.6, 26.3,26.3,

24.7, 24.1

- 115 d. ácido /is-Ziy,2X(z),3^,^/77-7-hciclohexi lbuti 1 )amino_7carboni V/-4,5di bi dro-2-0xazo1-2-il7~7-oxabi ci clo/2.2.l/bept-2-i1/-5-^eptenoico, ester metilico

A uma solução agitada do álcool da Parte C (1,10 g, 2,17 mmole) e (C₂H ) N (0,6l mL, 4,35 mmole) em 10 mL de CH₂C1₂ anidro foi adicionado cloreto de metanosulfonilo (0,20 mL, 2,61 mmole).

Esta mistura foi agitada a 0⁹C, sob uma atmosfera de argon durante 1,5 horas e diluída com 200 mL de CH₂C1₂· Esta mistura foi lavada com solução de NaHCO^ saturada (l vez com 20 mL) e salina (l vez com 20 mL). A fase organica foi secada (MgSO^), filtrada e concentrada no vácuo. 0 produto em bruto foi dissolcido em 20 mL de acetona e combinado com 1,40 g de KgCO^. A mistura foi posta em refluxo durante 5 horas e arrefecida para temperatura ambiente. 0 precipitado foi filtrado através duma í R) almofada de 2 polegadas de Celite' ' e lavada com acetona (4 vezes com 5θ mL). 0 filtrado foi concentrado no vácuo. A puin.fi cação foi efectuada por cromatografia instantanea em 36 g de silica gel 60 Merck usando 2$ de CH^OH em CH₂C1₂ como eluente pa ra dar 740 mg (70$) da oxazolina do título. TLC: silica gel, 4$ CII^OH/CHgClg, R_f 0,48, Ce(S0_u)₂.

NMR do composto do titulo (0001^,67.5 MHz) : <5 173.7

171.2, 169.2, 130.5, 128.4, 79.0, 79.0, 69.6,
68.3,	51.3,	48.3,	46.3, 39.0, 37.4, 36.9, 33.3,
33.2,	33.2,	29.7,	29.6, 28.8, 27.2, 26.6, 26.5,
26.2,	26.2,	24-6,	24.0

•d*

- 116 E. ácido /is-/l<,2/(z),3<4///-7-/3-/4-//(4-‘ ci clohexilbu ti1)amino/carbonilJ7-2oxazolil/-7-oxabiciclo/2.2.l7hept-2il/-5-heptenoico, ester metilico

A uma solução agitdda da oxazolina da Parte D (73O mg, 1,50 mmole) em 15 mL de CK₂C1₂ anidro foram adicionados 1,1C g de yiC>₂. Esta mistura foi agitada à temperatura ambiente durante uma hora, e a seguir foi adiciondo 0,74 g de Ni0₂· Esta mistura foi agitada à temperatura ambiente durante mais uma hora e foi adicionada uma segunda porção de O,7’4 g de Ni0₂· Esta mistura foi agitada à temperatura ambiente durante uma hora mais e a seguir -diluída eem 80 mL-de EtOAC, 5θ mL de solução de NaHS0^. 3M e 5θ mL de solução de citrato de sódio 1M . A fase aquosa foi separada e extraída com EtOAc (3 x 120 mL ) . Os extractos orgânicos, combinados foram secados (MgSO^), filtrados e concentrados no vácuo. Este foi cromatografado em 3θ g de silica gel Merck 60 usando 2$ CII^OH em CH,,C1₂ como eluente para dar 410 mg (56$) do oxazolo do titulo. TLC: silica gel, 2$ CH^OH/Cl^Cl^

R_f 0,31, Ce(S0^)₂.

Wfl cb coiposto do titulo (CDCl^, 67.5 MHz):ó173.7,

163.8, 160.5, 140-4, 136.1, 130,5, 128.0, 79,5,

79.3, 51.3, 49.7, 46.6, 39.0, 37.4, 37.0,33.3,

33.3, 29.8, 29.7, 28.9, 27.8, 26.6, 26.3,24.6,

24.1 ι··

117

Exemplo 45 ácido /lS-/lk, 2^(Z),3X, ’»/77-7-/3-/4-//(4-ciclohexilbutil) amino/carbonil7-2-oxazolil/-7-oxabiciclo/2.2. l/hept2-il/—5-beptenolco

A uma solução agitada de oxazolo do Exemplo 44 (4l0 mg, 0,84 mmole) em 20 mL de CH^OH foram adicionados 5 mL de solução de NaOH IN. Esta mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2,5 horas e concentrada no vácuo. Esta mistura foi distribuída entre 10 mL de solução de HC1 IN saturada com NaCl e EtOAc (4 vezes com 20 níL). Os extractos de EtOAc foram secados (MgSO^), filtrados e concentrados no vácuo. A purificação foi efectuada por cromatografia instantanea em 20 g de silica gel 60 Merck, usando 150 mL de 2$ CH^OH em CH^Cl^ como eluente, seguido da eluição de 4$ CH^OH em CH^Cl^ com ácido acético a 1$ para dar 370 mg (93$) do ácido do título puro. p.f. 123-125⁵C.

TLC: silica gel, 6$ CH^OH em CH₂C1₂, R_f 0,22, 0β(50^)_ο.

NMR do composto do titulo (CDCl^, 67.5 MHz): ¢177.8, 164.0, 160.9, 140.9, 135.8, 130.5, 128.1, 79.4,

79.4, 49.8, 46.7, 39.2, 37.5, 37.0, 33.3, 33.3,

29.8, 28.9, 27.8, 26.6, 26.5, 26.3, 24.4,

24.2.

ί'

118

Exemplo 46 ácido _/Ã^S-ZÍ^»^{* 2}^(^z)«3^,4_:/77-6-/3-/4-/2(7,7-dimetiloctil)aming7carbonil7-2-oxazolil7-7-oxabLCÍclo/2. 2. l/hept2-il7~4-hexenoico, ester meti lico

A. 3,3-dimetilbutanal

Uma solução de cloreto de oxalilo (9,4 mL, 13,6 g,

107 mmole) sob árgon em CH₂C1₂ (500 mL) foi preparada num balão de 1000 mL e arrefecida para -60?C. Foi adicionada gota a gota durante IO minutos uma solução de DMSO (15,4 mL, 18,5 g, 235 mmole) em 25 mL de CH₂C1₂.

A mistura de reacção foi agitada durante 10 minutos, e foi adicionado lentamente 3»3-dimeti1-1-butanol (lO g, 98 mmole), A agitação continuou durante um adicional de 20 minutos antes de ter sido adicionado (C_H_)_ON

5 5 (68,1 mL, 49,5 g, 489 mmole) e a seguir a mistura de reacção foi deixada aquecer para temperatura ambiente. Nesta altura foi adicionada água (50 mL). A mistura foi separada e a fase aquosa foi extraída uma vez com CH₂C1₂ (30 mL). As fases ôrganicas foram combinadas, lavadas sequencionalmente com 1$ HCl aquoso, água, NaHCO^ saturado, H₂O ^θ NaCl saturado, e secadas sobre MgSO^. A solução filtrada foi concentrada usando um evaporador rotativo para se obter 3,3 g (33$) do composto do título na forma dum óleo amarelo. O rendimento baixo foi devido provavelmente à volatilidade do produto.

¹³C NMR (67.8 MHz, CDC1}): 6203.3, 56.4, 31.0

29.7

119

B. ácido (Z)-7,7-dimetil-U-octenoico A uma solução agitada de brometo de 3-carboxipropiltrifenil fosfónio (13,72 g, 31,9 mmole) em 60 mL de TíIF anidro, sob árgon, a —15^?C foram adicionados gota a gota 1,72 N K t-amilato/tolueno (32 mL, 57,9 mmole) durante 10 minutos. A mistura de cor laranja foi agitada durante 0,5 hora. A esta, foi adicionado o aldeído da Parte A (2,00 g, 19»9 mmole) lentamente como uma solução de 5 mL de THF. A mistura de reacção foi agitada a —15^eC durante 1 hora e à temperatura ambiente durante 20 horas. A mistura de reacção foi extinta com 12 mL de CH^COOH adicionado gota a gota e depois concentrada no vácuo. O resíduo foi distribuído entre EtOAc (lOO mL) e água (lOO mL), A fase aquosa foi extraída duas vezes mais com EtOAc (lOO mL). As fases organicas combinadas foram lavadas em sequencia com 1$ HC1 aquoso, H^O, NaHCO^ saturado, e NaCl saturado, secadas dobre MgSO^, e concnetradas no vácuo. O residuo foi cromatografado eluindo com 0,3$ CH^COOH em (gradiente 1$ a 100$ EtOAc em hexano) para se obter 1,75 S (51$) do produto do titulo desejado.

¹³C NMR (CDClj): «S179.8, 128.6, 128.4, 41.0,

34.1, 31,1, 29.2, 22.6.

C. ácido 7,7-dimetiloctanoico A uma solução agitada do ácido da Parte B (l,2 g, 7,04 mmole) em 8 ml. de CH^COOH foi adicionado 0,2 g de óxido de platina. Esta mistura foi agitada durante 14 horas sob 1 atmosfera de (balão). A mistura de reacção foi filtrada através duma almofada de Celite(R). O filtrado foi concentrado no

120

novácuo. 0 residuo foi diluído com 50 mL de tolueno e concentrado de novo. Este processo foi repetido uma vez mais, para se obter 1,2 g (lOC$) do produto do titulo desejado como óleo.

D. 7« 7-dimetiloctanamida

A uma solução agitada do ácido da Parte C (l,21 g,

7»02 mmoles) em 5° mL de tolueno foram adicionados 3 mL de cloreto de oxalilo. Esta mistura de reacção foi agitada durante 1 bora à temperatura ambiente sob árgon e concentrada no vácuo. O resíduo foi diluído com 20 mL de tolueno e concentrado outra vez. Este processo foi repetido para eliminar vestígios de cloreto de oxalilo. O resíduo foi agitado à temperatura ambiente sob árgon em 5 mL de CH^OH e (l,17 mL, 8,43 mmole) e foi adicionado um excesso de amónia metanólica 9 M (2 mL). Depois de agitação durante l6 horas, a mistura de reacção foi distribuída entre 3 mL de água e 20 mL de EtOAc. A fase aquosa foi extraída duas vezes mais com EtOAc (20 mL). As fases organicas combinadas foram lavadas com NaCl, secadas sobre MgSO^, filtradas e concentradas no vácuo para se obter um semi-sólido. O semi-sólido foi cristalizado por trituração com hexano para se obter 0,5 g (42$) do produto do título, desejado, como um sólido.

¹³C NMR (CDCip: <5176.3, 43.9, 35.9, 30.2, 30.1, 29.3, 25.5, 24.2 e. 7,7-dimetiloctanamina

A uma solução da amida da Parte D (0,45 g» 2,62 mmole) em 50 mL de eter anidro agitada sob árgon a

121

02C foi adicionado hidreto de aluminio litio (0,11 g, 2,88 mmole). Foi desenvolvidogás. A mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 4 dias. Enquanto era agitada vigoroaamente, a reacção foi extinta cautelosamente pela adição de 0,02 mL de H₂0, 0,02 mL de 15$ NaOH aquoso, e 0,072 mL de H._?0, Formou-se um precipitado branco. Depois de agitação durante 0,5 horas, o precipitado branco foi filtrado e o filtrado foi concentrado no vácuo para se obter 0,4 g (89$) do composto do título na forma dum óleo amarelo. Este óleo foi cristalizado por trituração com hexano e CHCl^.

F. ácido ZÍS-/L(,2/(z),3/,4$77-6-/3-ZÇ-/Z(7,7dimetiloxtil)amino7carbonil/-2-oxazolil77-oxabiciclo/2,2.l7hept-2-il/-4-hexenoico, ester metilico_

A uma solução de cloreto ácido preparado no Exemplo 2, Parte I (0,46 g, 1,3 mmole) mais uma quantidade desconhecida de salde Vilsmeier em 5 mL de CHCl^ sob ãrgon à temperatura ambiente, foi adicionado (CgH^J^N (O,25 mL, 0,18 g, 1,8 mmole) e amina da Parte E (0,24 g, 1,5 mmole). A mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas, depois diluída com EtOAc e água. A fase organica foi separada e a fase aquosa foi extraída com 20 mL de EtOAc duas vezes. As fases organicas foram combinadas, lavadas com salina, secadas sobre MgSO^ e concentradas, Acromatografia :instantanea (gradiente 0$ a 100$ EtOAc em hexano) deu 0,20 g (32$) do produto do titulo desejado, na forma dum óleo. R^. é 0,8 em 1$ TFA, 1$ CH^OH, 98$ EtOAC.

122

¹³C NMR (CDC1₃): 172.8, 163.6, 160.2, 140.1,

135.9, 129.1, 128.3, 79.3, 79.1, 51.1, 49.4, 46.4,

43.9, 38.8, 33.5, 29.9, 29.5, 29.4, 29.1, 28.7,

27.6, 26.7, 24.1, 22.5

Exemplo 47 ácido /i3-/ix,2X(z), 3X Λ $/7-6-/5-Λ-/2? 7,7-dimetiloctil)amino7carbonil7-2-oxazoli/7-7-0xabiciclo/2.2.l7hept2-i1/-4-hexenoi co

Uma solução do ester do Exemplo 46 (θ,20 g, 0,38 mmole) em 10 mL de NaOH IN e 10 mL de THF foi preparada.

A mistura de reacção foi agitada durante 13 horas, depois concentrada no vácuo para eliminar THF e acidificada para pH 2 com HC1 IN. Foi adicionado EtOAc e a fase organica foi separada. A fase aquosa foi extraída duas vezes com 20 mL de EtOAc. As fases organicas foram combinadas, lavadas com salina e concentradas no vácuo para se obter um oleo limpido. Este óleo foi cromatografado ( 0,1$- em CH^COOH em (gradiente 0/ a 50$ EtOAc em hexano) para se obter 0,12 g '66$) do ácido do título na forma dum sólido branco, pf 68-69-C. R é 0,18 em líl hexano-EtOAc coπ 0,05$ CH^COCH.

=+31-1 em CH^OH θ c=0.46 g/100 ml.

¹³C NMR (CDClj): £176.8, 163.9, 160.7, 140.8,

135.7, 129.4, 128.4, 79.5, 79.3, 49.6, 46.5, 44.0,

39.1, 33.6, 30.1, 29.6, 29.4, 29.3, 28.8, 27.8,

26.8, 24.3, 22.5

- 123 Exemplo 48 ácido /Ts-ZÍX, 2A(E), 37, 4/7/-6-/3-/4-//( 4-ci clobexilbuti 1)amino/carboni l/-2-oxazoli l/_7__oxabi ci cio/2.2. l/bept2-il/-4-1 exenoi co

A. ácido /ÍS-/l/, 2/<(Z ), 37, 4/7/-7_/3-//di meti 1 — (l, 1-dimetilet i.1 )si lil/oxi/-7-oxabiciclo/2«2.l/bept-2-ll/-5~beptenoico, ester metílico

A uma solução em agitação de 20,57 g de ácido /lS-/í<7,27(z),37,4/7/-7-/3-(hi droximeti 1 )-7~oxabiciclo/2.2.l/hept—2—il/—5-beptenoico, ester metilico (preparado conforme descrito na Patente dos ⁵'UA n?. 4.143.034) (75,8 mmole) e 5,74 g de irnidazolo (84,4 mmoles, 1,1 equiv) em 100 mL de CT^Cl.,, sob árgon, a O?, foram adicionados 12,05 g de cloreto de t-butildimetilsililo (79,8 mmoles, 1,04 equiv.),Formou-se um precipitado. A mistura foi aquecida para temperatura ambiente e 10 minutos depois foi diluída em eter dietílico (Et₂0), lavada com água três vezes e salina uma vez, sêca sobre Na SO. e concentrada por roto-evaporação e a seguir alto vácuo. O resíduo, / 3θ,31 g de eter sililico do título, quase puro, foi usado sem mais purificação. 0 rendimento do ester do titulo era grosseiramente quantitativo.

TLC (50$ EtOAc em bexanos - anisaldeído):

material de partida 0,21 ester do título 0,79

B. /ÍS-(l7,27,3X,4X)/-3-/7Zll,1-dimeti 1eti 1 )dimetilsi lil/oxi/raetiL/-7-oxabi ci clo/2.2.l7heptano-2-acetaldeído l·

- 124

Uma solução de 30,31 g do eter sililico da Parte A, quase puro (76,8 moles' em 2C0 mL de CH^Cl^ a -78? foi tratada com ozono até persistir uma côr azul durante 25 minutos. Depois de purgar 0^ em excesso com 0₂, foram adicionados 48,0 g (CK^^S (770 mmoles, 10 equiv) e a mistura foi aquecida para temperatura ambiente. Passada 1 bora de agitação à temperatura ambiente, o solvente e (CH )_pS em excesso foram eliminados

- 1 ~ por roto-evaporaçao. H NMR do material em bruto revelou a redução incompleta do ozonido. Por isso, depois de se redissolver em Cí^Cl^ à temperatura ambiente, foram adicionados 20,2 g de trifeni 1 fosfina (77 mmoles, 1,0 equiv). Esta mistura aqueceu devido à reacção exotérmica. Depois de agitação durante a noite, a maioria do solvente foi evaporado e foi adicionado hexano par^-precipitar óxido de tri f eni lfosfina e trifeni lfosfina. 0 precipitado foi filtrado e o filtrado foi concentrado antes da cromatografia instantanea (gradiente 5$ a 15$ EtOAc em hexanos) permitir o isolamento de 16,31 S do aldeído do título, puro, na for ma dum óleo.

TLC: 50$ EtOAc em hexanos - anisaldeído):

eter sililico da Parte A 0,89 aldeído do título 0,76 metil 5“Oxop®^n,tanoa to 0,51

C. ácido /lS-(l_í<,2^(E),3</,4<)7-4-/3-/Z7(l.ldimetileti1)dimetilsilil7oxi/metil/-7oxabiciclo/2.2. l(/hept-2-il7~2-butenoi co, ester metilico

Um balão contendo 3»3 C (37«9 mmole) de LiDr foi colocado sob vácuo e aquecido com uma rajada de calor

- 125 para eliminar qualquer humidade. Ao arrefecer, o balao foi inundado com Ar e foram adicionados 20 ml de CH₂C1_O. Á esta mistura agitada, foi adicionada uma solução de 5,44 g (29,9 mmole) de trimetilfosfonoacetato em 30 mL de CH^l^, seguida de 4,0 mL de (C₂H ) X (28,7 mmole). Esta mistura foi agitada durante 15 minutos, após o que foi adicionado durante 1 minuto o aldeído em bruto da Parte H em 35 mL de CH₂C1₂· A acção foi acompanhada duma reacção ligeiramente exotérmica e da formação dum precipitado pegajoso. Esta mistura foi agitada vigorosamente à temperatura ambiente, durante a noite. A mistura de reacção foi distribuída entre 200 mL de hexano e 100 mL de HC1 0,3 Μ. A fase aquosa foi extraída uma vez com ICO mL de eter dietilico. Os extractos orgânicos combinados foram secados sobre MgSO^, filtrados e concentrados no vácuo. A análise TLC mostrou que a reacção não estava completa (4050$). 0 residuo foi então dissolvido em 50 mL de CH₂C1₂ e a este foram adicionados 6,3 g (18,8 mmoles) de carbometoximetilenotri fenilfosforano. Esta solução foi agitada à temperatura ambiente durante 22 horas e depois concentrada no vácuo. O resíduo foi triturado com eter dietilico e diluído com um volume igual de hexano. A mistura foi refrigerada durante 2 horas e a seguir o sólido foi retirado porfiltração. O filtrado foi concentrado no vácuo.

produto em bruto foi purificado por cromatografia em 167 g de silica gel usando 4:1 de hexanoeter dietilico como eluente para dar 5»9 g (91$) do ester do titulo.

- 126 TLC: silica gel, 2:1 hexano-e~er, ^?f 0,6, vanilina.

¹³C NMR (67.8'MHz em CDCi}): £148.8, 121.8, 79.9,

78.8, 61.9, 51.4, 44.8, 30.7, 29.5, 29.4, 25.9,

18.2, -5.4.

_D. /ÍS=(l<2<(E),3<4Xg-4-/3-f/Z{l,ldimetiletil )dimetilsili l_/oxij/meti \J-Joxablciclo/2.2.l7hept-2-il/-2-buten-l-ol

Uma solução de 5»2 g (l5,3 mmole) do ester· da Parte C em 80 mL de THF foi arrefecida para -789C. A esta solução agitada foi adicionado gota a gota 50,0 mL duma solução ΏΙBAL—II 1,5 M em tolueno durante um período de 20 minutos. A reacção foi agitada a -789C ao longo de 5 horas e seguidamente extinta pela adição duma solução de 10 mL de acetona em 10 mL de tolueno. Esta adição foi seguida por uma outra adição lenta de 60 g de 1C:9 (p/p) de silica gel:água. Após terem sido adicionados alguns gramas da silica gel húmida, o banho frio foi retirado. A mistura de reacção foi diluída com 20 mL de eter, A temperatura do vaso foi vigiada e quando atingiu 109C, o balão foi imerso

- num banho de gelo. Este foi agitada ao longo de 1 hora e aseguir a silica gel foi eliminada por filtração. 0 bôlo do filtro foi lavado com duas porções de 100 mL de èter. Os filtrados rombinados foram secados sobre MgSO^, filtrados e concentrados no vácuo para dar 5,05 g (>100·$) do álcool do titulo em bruto.

TLC: silica gel, 2:1 hexano-eter, R^. 0,1 vanilina.

127 ¹³C NMR (67.9! MHz em CDClj): £ 131.6, 130.3, 79.8,

78.8, 63.3, «1.8, 49.3, 45.4, 30.5, 29.5, 29.3,

25.9, 18.2, -5.4.

S. /lS- (1 < 27(e), 3*, 47 )7-4-/3-/7/11,1dimetileti 1 )dimeti lsi li l/oxi/meti l7~ 7-oxabici cio/2.2 . l/hept-2-il~7-2-buteno1—brometo_

A um balão contendo 0,83 g de tri f enilfosfina (3,17 mmoles, 1,0 equiv.) dissolvida em 10 mL de tolueno sob árgon a 0?, foi adicionado 0,51 S de 3i*₂ (3,17 mmoles, 1,0 equiv) numa única porção, formou-se um precipitado amarelado e uma goma laranja, 0 raspar com uma espátula converteu a goaa num precipitado com um fluxo mais livre. A adstura foi aquecida brevemente para temperatura aoabiente, depois re-arrefecida para 0?. A esta foi adicionada gota a gota uma solução de 1,04 g <3a álcool da Parte D (95% puro=0,99 g, 3,17 mmo2«s) β 0,28 g de piridina (3,49 mmoles, 1,1 equivalentes) em 5 mL de tolueno mais uma porção de 5 »L. A mistura foi agitada a 0? durante 30 mi•íto», depois aquecida para temperatura ambiente.

A reacção estava incompleta de acordo com TLC. Jfeaeedas 4 horas (som mais progressos por TLC), * *^<tura foi filtrada e o filtrado foi evapora— *··» A cromatografia instantanea (gradiente 3% a ' 3®^-f< EtOAc em hexanos) permitiu o isolamento

ÍR!r> ag do brometo do título, um óleo e 190 mg *>ceol da Parte D, não-reagido. 0 rendimento ^<'**¹'os<’to do título era de 74%.

T*> Z

27% EtOAc em hexanos - anisaldeído): slcool da Parte D 0,21 brometo do título 0,75

128 Λ ¹³C NMR (67.8 ΜΗζ em CDClj): £ 135.6, 127.5, 79.8,

78.8, 61.8, 49.4, 45.3, 33.1, 30.5, 29.5, 29.4,

25.9, 18.2, -5.3.

. F. ácido /Ts-(l<,?X(E)_t3í/,42)7-6-/3-//'/'(l,Tdi me ti leti 1)dimetilsilil/oxi /metil/-7oxabiciclo/2.2. L/hept-2-il/—4-hexenoico, ester 1,1-dimetiletílico

A uma solução de LDA em THF (2,70 mmoles, 1,15 equiv, preparada pela adição lenta de 1,08 mL de solução de C/rí^Li 2,5 M em hexanos (2,70 mmoles,

1.15 equiv) a uma solução de 303 mg de diisopropil amina -3.0 mmoles, 1,28 equiv) em 4 mL de THF anidro, com agitação a 0?, sob árgon e depois com agitação durante 15 minutos) agitadrio sob árgon a -78? foi adicionada gota a gota uma solução de 348 mg de acetato de t-butilo 't-BuOAc) (3.0 mmoles, 1,28 equiv) em 3 mL de TFF anidro ao longo de 15 minutos. Depois de agitação durante 1 hora, foi adicionada gota a gota uma solução de 880 mg de brometo da Parte D (2,35 mmoles) em 3 mL de THF anidro com mais duas porções de 2 mL. Passadas 8 horas de agitação a —78TDLC mostrando só reacção parcial, a mistura foi deixada aquecer desde muito lentamente (aproximadamente 8? porhora) até temperatura ambiente. TLC indicou mais progresso mas o consumo ainda incompleto de brometo. A adição de lmL de solução de NH^Cl aquosa, saturada, foi seguida por secagem sobre Na₂5O^ e evaporação, 0 residuo foi cromatografado instantaneamente (5% EtOAc em hexano) para se obter 55θ mg do produto de ester do titulo, quqse puro (97% puro = 534 mg). O rendimento do ester do título era de 55%.

129

TLC (5$ EtOAc em hexanos - anisaldeído):

brometo da Parte E 0,20 ester do título 0,13 ^1j>C NMR (67.7 MHz em CDCip: 6172.4, 130.6,

129.6, 80.0, 79.8, 78.8, 61.9, 49.4, 45.8, 35.4,

30.-8,29.6, 29.4, 28.1, 25.9, 1832, -5.3.

G. ácido /lS-(lX,2X(E), 3X, 4X )2“6-/3-(hidroximetil)-7-oxabiciclo/2.2.l/hept-2-ií/4-hexenoico, ester metilico

A uma solução de 55θ mg de ester da Parte F, quase puro (97$ puro = 534 mg, 1,30 mmoles) em 20 mL de CH^OH com agitação à temperatura ambiente, sob árgon, foram adicionados 2 mL duma solução de HC1 anidro em CH^OH (preparada adicionado 2 gotas de cloreto de acetilo a 2 mL de CH^OH à temperatura ambiente e depois deixando ficar 1 minuto. TLC indicou a conversão completa para um intermediário passada 1 hora. Este intermediário foi convertido muito lentamente no produto. A adição de 10 mL de mais solução de HC1 em CH^OH acelerou a reacção. Passados 14 dias, foram adicionados 2 mL de (C₂H^)^N e a mistura foi evaporada. Esta deu 6J0 mg do álcool do título, embruto.

TLC (5θ$ EtOAc em hexanos - anisaldeído): ester da Parte F 0,94 intermediário O»33 álcool do título O,23

130

H. ácido /is-flcSs^ÍE), 3Χ, ^)7-⁶-/3-^carboxi-Το xabici cio £2. 2. l/hept-2-i l/^-ít“^bexGnòi co , ester metilico

A uma solução de 630 mg do álcool em bruto, da Parte O, em 20 mL de acetona, sob árgon a O⁹, foram adicionados lentamente 4 mL de Reagente de Jones (2,6>! em Cr^ ). A côr vermelha do reagente persistiu no final da adição. A mistura precipitada, resultante, foi deixada aquecer até à temperatura ambiente durante 20 minutos antes de re-arrefecimento e adicção de 2-propanol para extinguir o reagente em excesso. Ainda a O⁹., foi adicionada solução de XaFSO^, aquosa, 3^5 com agitação até todos os sais se terem dissolvido. Salina foi adicionada e seguida de extracção (3 vezes) com EtOAc. Depois da secagem dos extractos sobre Na^SO^ e evaporação do solvente, a cromatografia instantanea (silica, gradiente 25$ a 50$ (5$ ácido acético em EtOAc) em hexano) deu, depois da eliminação azeotrópica de ácido acético com tolueno, 2Ó0 mg do ácido do título, obtido em rendimento total de 75$ 80 ester da Parte F.

TLC (50$ (5$ CH^COOH em EtOAc) em hexano anisaldeído):

Álcool da Parte G 0,32 ácido do título 0,36 ¹³C NMR (67.8 MHz em COClj): £ 177.1, 173.4,

130.4, 129.2, 78.2, 78.1, 51.9, 51.3, 47.4, 33.8,

32.4, 28.9, 28.8, 27.7.

131

I. ácido /ÍS-/Í/, 2/ (e),3/,4á77-6-Z5-/4-/7J4ci clobexilbu ti 1)aminõ7 carbonil7-2-oxazoli1/7-oxabiciclo/2,2. l~^hept-2-í l7-4-hexenoico

Seguindo o processo do Exemplo 1, partindo da Parte E excepto substituindo o ácido da Parte H, pelo ácido do Exemplo 1, Parte D, é obtido o composto do título, pf. 122-125⁵; TLC (50% /5% AcOH em EtOAc/ em hexano; ácido do título R^. 0,33;

¹³C NMR (CDClj, 67.8 MHz) 176.9, 163.9, 160.7,

140.8, 135.6, 130.0, 128.8, 79.4, 79.1, 49.1,

46.5, 39.1, 37.4, 36.9, 23.7, 33.2, 33.0, 29.7,

29.5, 28.8, 27.5, 26.5, 26.2, 24.0

Exemplo 49 ácido /lS- (1/, 2/, 3/, 4/)_/-3-/''-/// 4-(ci clohexilbu ti l)amino_7carbonil7-2-oxazolil7-7-oxahiciclo/2.2. Γ7heptano-2-hexanoico______

Uma solução de 130 mg do ácido do Exemplo 1 em 10 mL de acetato de etilo e 1,0 ml, de ácido acético foi desgaseificada por um ciclo cheio de vácuo com argon. A esta solução foram adicionados 34 mg de 10% Pd/C e a atmosfera por mudada para hidrogénio por dois ciclos com enchimento de vácuo. Foi mantida uma pressão ligeiramente positiva por intermédio do uso dum balão de hidrogénio. A mistura foi agitada à tem peratura ambiente durante 22,5 horas, diluída com CH^Cl^ e filtrada através dum filtro de policarbonato para eliminar o catalisador. O filtrado foi concentrado no vácuo. O resíduo foi diluído com tolueno e reconcentrado. Depois da adição de acetato de etilo

132 ao resíduo, não se dissolveu uma pequena quantidade de material semelhante a gel. A solução foi decantada e concentrada no vácuo. O produto em bruto foi disso.lvido num minimo de acetato de etilo e diluído com cerca de três volumes de hexano. Ao arrefecer não apareceu nenhum sólido, mas, depois de ficar a 5?C durante a noite formou-se um sólido semelhante a gel, branco. Este foi eliminado por filtração e secado no vácuo. O pó branco resultante foi triturado em hexano, filtrado e sêco no vácuo para dar 6l mg do ácido do título, puro; p.f. 97(amolece), 122-3?C

Anal.Cale, para C Η N 0 :

40 2 5

C,67.79; H, 8.75; N, 6.08 Enc: C,67.58; H, 8.79; N, 5.97

TLC: silica gel, 4% CH₃OH/CH₂C1₂, R_f=0.35,

Ce(S0₄)₂.

/a_/_D= +23 (c=0.68, CHC1_?).

¹⁵C NMR (COC1₃, 67.5 MHZ): 164.2, 160.8, 140.7,

135.9, 79.5, 79.4, 49.8, 47.2, 39-2, 37.5, 37.1,

33.7, 33.4, 29.9, 29.7, 29.2, 29.0, 28.1, 26.7,

26.4, 24.5, 24.2.

Exemplo ácido fi-S-fi-JL, 2(/(z), 3,,/, 4/7/-6-/3-/5-/7/’⁴“^CÍclohex^ilbutilJamino/carbonil/-2-oxazo111/-7-0xabiciclo.1/hept—2—il/—5—hexenolco, ester metilico

1^ι

133 -

ester metilico

A uma mistura agitada do ácido do Exemplo 1, Parte D (6,70 g, 25,2 mmoles), 1-hidroxibenzotriazolo monohidrato (3,^0 g, 25»2 mmoles) e sal TFA da amina do Exemplo 1, Parte 9 (8,97 g, 25»2 mmoles) em 100 mL de DMF sob árgon a OSC foi adicionado em sequência (C₂H₅) N (17,6 mL, 126 mmoles) e sal cloridrato de l-(3-dimetilamvnopropil)-3-etilcarbodiimida (4,82 g, 25,2 mmoles). A mistura foi agitada a 0?C durante 2 horas e à temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura foi concentrada no vácuo e distribuída entre 800 mL de EtOAc e solução de HC1 IN (2 x 100 mL), solução de NaOH 0,2N (2 x 100 mL), solução de NaHCO^ saturada (l x 100 mL). A fase organica foi secada (.MgSO,^), filtrada e concentrada no vácuo. Esta foi cromatografada em 180 g de silica gel 60 Merck, usando 2$ de CH^OH/CH^^ como eluente para dar

4,75 g (39$) da amida do título.

TLC: silica gel, 50$ (5$ AcOH em EtOAc) em hexano, R^. 0,22, anisaldeído.

B. ácido /1S-/3/ ,2/(z),3^(R*), W7-7-6-/3-Z*4-

A uma mistura agitada da amida da Parte A (4,69

- 134 -

19.1 imoles) e cloreto de roesilo (ϋ,82 mL, 10,5 mmoles). A mistura foi agitada a 0^?C durante 1 hora e diluída com 100 mL de CH₂C1₂» lavada com solução de MaHCO saturada (l- x 30 mL) e salina (l x 3θ mL).

A fase organica foi seca (MgSO^), filtrada e concentrada no vácuo. O mesilato em bruto foi dissolvido em 60 mL de acetona e combinado com K^CC^ (5,0 g,

36.2 mmoles). A mistura foi levada a ferver em refluxo durante 4,5 horas e arrefecida para temperatura ambiente. 0 sólido foi filtrado e lavado com acetona (4 x 40 mL). 0 filtrado foi concentrado no vácuo e cromatografado em 120 g de silica gel Merck 60, usando 2$ CH OH/CH₂C1₂ como eluente para dar 3,93 g (θ6$) da oxazolina do título.

TLC: silica gel, 20$ acetona em tolueno, R*,

0,29 anisaldeído.

C. ácido /TS-/T^,2^(Z), 3J, 4//7-6-/3-/4-^/2(4ci clohexilbuti1)amino7carboni1/—2-oxazolil/7~oxabiciclo/2.2. l7hept-2-i_l7-4-bexenoico , ester metilico

-A uma mistura agitada de oxazolina da Parte R (3»90 g, 8,23 mmoles) em 80 mL de CH₂Cl_n anidro,

90b árgon,foram adicionados 6 g de Ni0_2< A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 40 minutos, altura emque foram adicionados 4 g de Ni0₂» A mistura foi agitada durante mais 70 minutos e de novo foram adicionados 2 g de NiC₂» A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas e diluída com 120 mL de EtOAc, 6θ mL de solução de NalISO^ 3N β 6θ mL de solução de citrato de sódio 1M. A fase aquosa foi separada e extraída com

- 135 '*1

EtOAc (4 χ Ι50 mL). Os extractos de EtOAc combinados foram secados (MgSO^), filtrados e concentrados no vácuo.

A purificação foi efectuada por cromatografia instantanea em 120 g de silica gel ÓO >íerck, usando 2$ de CH₃OH/CH₂C1₂ como eluente para dar 1,85 5 (48$) do oxazolo do título.

TLC: silica gel, EtOAc, R_f 0,81, anisaldeído.

- 136 -

Claims (1)

1. REIVINDICAÇÃO

   Processo para a preparaçãode compostos da Formula facto de composto da formula caracterizado pelo (a) submeter-se um (CH )-CH = CH-(CH„) -CO_alquilo z m 2 n 2^ a oxidação com dióxido de manganésio ou quel para formar produtos da formula I, alquilo e X é oxigénio, ou peróxido de ni na qual R é (b) acoplar-se um intermediário tendo a estrutura da formula I, em que R é alquilo e o grupo -CCNR₁R₂ é sub tituído por —C0₂H com um composto da formula HNR^.R_O, d acordo com métodos convencionais, para formar produtos nos quais X é oxigénio, enxofre ou -NH-, e

   (c) hidrolisar-se os referidos produtos de (a) e (b) em que R é ester alquilico para formar produtos era que R é —C0₂H e formar-se sais de metais alcalinos do refe rido grupo carboxilo (COgH) ou submeter-se o referido grupo a uma sulfonação ou amidação convencionais para formar produtos em que R é -CONHSC^R^ ou -CONHR^A,

   ΑλλΛΧΧΧΧΧΛΧΧλ

   Lisboa, 23 de Dezembro de 1989.

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