PT90973B - Peocesso para a preparacao de nucleosidos terapeuticos analogos da purina e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Description

Descrição

A presente invenção refere-se a análogos de nucleósidos de purina contendo um anel carbocíclico insaturado em vez do resíduo de açúcar, aos seus derivados farmaceuticamente aceitáveis e à sua utilização em terapia, particularmente no tratamento ou profilaxia de certas infecções por vírus.

A SIDA é uma doença imunossupressiva ou imunodestrutiva gue predispõe os pacientes a infecções oportunistas fatais. Caracteristicamente a SIDA está associa da com uma diminuição progressiva das cálulas-T, especialmen te o subconjunto ajudante-indutor contendo o marcador de su4 perncie OKT .

Ο vírus da imunodef iciência humana (HIV) foi isolado de forma reproductível a partir de pacientes com SIDA ou com os sintomas que frequentemente antecedem a SIDA. 0 HIV é citopático e parece infectar e destruir , 4 / preferivelmente células T contendo o marcador OKT , e e agora .dniversalmente aceite gue o HIV é o agente etiológico da SIDA.

Desde a descoberta de gue o HIV é o agente etiológico da SIDA, foram feitas várias tentativas para encontrar agentes quimioterapeuticos anti-HIV que possam ser eficazes no tratamento de pacientes com a SIDA. Assim, por exemplo, a descrição da Pgtente Europeia N2 196 185 refere a 3'-azido-3'-desoxitimidina (que tem o nome aprovado de zidovudina), os seus derivados farmaceuticamente aceitáveis e a sua utilização no tratamento de infecções pelo retrovírus humano incluindo a SIDA e condições clínicas associadas. Vince e col., A_ntiviral Research, _9 (1/2),

120 (1988) descreve certos nucleósidos de purina carbocíclicos (em particular (Ό-3-(cis-4-(hidroximetil)-2-ciclopentenil)guanina e a sua utilização contra o HIV.

Em todo o mundo o vírus da hepatite D xHBV) é patogenio virai da maior importância, é mais comum nos países Agiáticos, e é prevalente na África a Sul do Sahará. 0 vírus está etiologicamente associado com o carcinoma hepatocelular primário e pensa-se que causa 80% dos cancros do fígado em todo o mundo. Nos E_stados Unidos mais de dez mil pessoas são hospitalizadas pela doença de HBV em cada ano e morrem em média 250 com a doença fulminante.

Os E_stados U_nidos tem um conjunto estimado de 500 000 - 1 milhão de portadores infecciosos. A hepatite activa crónica desenvolver-se-á em mais de 25% dos portadores e dá freguentemente origem à cirrose. Egtima-se que 5 000 pessoas morram de cirose relacionada com HBV em cada ano nos Egtados U_nidos e que talvez 1000 morrem de

cancro no fígado relacionado com a HBV.

Mesmo quando existir uma vacina universal contra HBV continuará a haver necessidade de compostos eficazes anti-HBV. C grande conjunto de portadores persistentemente infectados, estimados em 220 milhões em todo o mundo, não beneficiarão da vacinação e continuarão com elevado risco de doença no fígado induzida por HBV. E_sta população portadora serve como fonte de infecção de individuos susceptíveis gue perpetuam a existir da doença particularmente em área endémicas ou grupos de elevado risco como por exemplo os dependentes da droga IV e homossexuais. Assim, existe uma grande necessidade para agentes antivirais eficazes, quer para o controlo da infecção crónica quer para reduzir a progressão para o carcinoma hepatocelular.

Os efeitos clínicos da infecção com o virus HBV incluem a cefaleia, febre, mal estar, náuseas, vómitos, anorexia, e dores abdominais. A replicação do vírus é habitualmente controlada pela resposta imune, com um período de recuperação que dura semanas ou meses no homem, mas a infecção pode ser mais severa conduzindo a uma doença crónica do fígado persistente tal como acima referido.

Sm Virai Infections of Humans (2® edição, Ed., Evans,

A.3. (1982) Plenum Publishing Corporation, Nova Iorque,

C pítulo 12 descreve-se com algum detalhe a etiologia das 9 infecções virais da hepatite.

virus da hepatite B (H3V) e um vírus contendo ADN pequeno que infecta o homem. Ele é um membro da classe de vírus humanos semelhantes conhecido como hepadnavírus, em que c ada membro desse grupo infecta selectivamente mamíferos ou aves hospedeiras, como por exemplo a marmota e o pato. Investigações recentes no mecanismo da replicação do genoma dos hepadnavírus indicam a importância da transcrição inversa do intermediário de ARN, sugerindo gue a transcriptose inversa ó um alvo quimioterapeltico lógico.

Descobriu-se açora que certos análogos dos purina contendo um anel carbocíclico insaturado, co mo a seguir referidos são úteis para o tratamento ou profilaxia de infecções virais por exemplo hepatite 3 e infecções por retrovírus, especialmente a SIDA.

D_e acordo com uma característica da invenção, proporcionam-se novos compostos com a formula (i)

na qual R representa

cada (por exemplo propiloxi ou isopropiloxi), opcionalmente substituida por alcóxi C. ,, cicloalquilo C (por exemplo 1 — o j— o cicloprovilmetoxi);cicloalquilo C_ cicloalquiloxi (C _Q) (por exemplo ciclobutoxi ou ciclopentiloxi), ariloxi (por exemplo feniloxi), aralquilo (por exemplo benzilo) ou aralquiloxi (por exemplo benziloxi) em que o arilo pode opcionslmente ser substituido com alquilo C. hidróxi ou haloχ — gèneo, alcenil tio (por exemplo aliltio), cicloalquil

C tio, alouil CL _r tio, ariltio ou aralquiltio em que o 3-o - 1-6 arilo pede opcionalmente ser substituido com alquilo C. _Az ' 2 hidróxi, halogenio ou nitro, ou R representa um grupo heterocí clico contendo um átomo de oxigénio ou um ou dois áto _ 4 BAD ORIGINAL

mos de azoto, e 3-7 átomos ds carbono com uma dupla ligação opcional no anel (por exemplo piperidino, pirrolidino ou furfurilo) contendo opcionaimmte um ou mais heteroátomos escolhidos de entre enxofre e oxigénio e opcionalmente substituído no anel por um ou mais grupos alquilo hidroxi ou halogéneo, cicloalquilo C₃_- tio, aralquiltio em que o arilo pode ser substituído com alquilo C , hidroxi ou 2 halogéneo, ou R representa um grupo imidazoliItio em que o radical imidazolilo pode ser substituído com um mais substituintes escolhidos de entre alquilo C. e C-substituida com nitro, ou R representa um grupo amino que é monoou di- substituído por um ou mais substituídos escolhidos de entre alquilo (por exemplo metilo ou etilo), alcoxi (por exemplo metoxi), hidroxialquilo $ (por exemplo hidroxietilo), cicloalquilo (preferivelmente cicloalquilo por exemplo cicloalquilo, ciclobutilo ou pentilo) opcionalmente subscituido por alquilo CL , (oor exemplo ciclopropil metilo), arilo (por exemplo fenilo), aralquilo (por exemplo benzilo) em que o arilo pode opcionalmente ser substituído com alquilo hidroxi ou halogéneo, alifo opcionalmente substituído com grupos mono- ou di- alquilo ou alcoxi (por exemplo dimetilalilo), e R representa hidrogénio, amino ou alquilo C (por exemolo l-o metilo), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Deve notar-se que a invenção também inclui os isómeros ópticos e geométricos dos compostos com a fórmula (I) quer isolados quer em mistura. Quando se faz referencia a um radical alquilo, ela inclui metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo e hexilo.

Dg acordo com um aspecto da presente invenção, proporcionam-se compostos com a fórmula:

bad original

Ν na qual representa um grupo com a fórmula (A), (3) ou (C)

e R representa alcoxi (por exemplo proniloxi ou isopropoxi), opcionalmente substituído por exemplo por cicloalquilo (por exemplo ciclopropilmetoxi), cicloalquiloxi

G_ „ (oor exemolo ciclobutiloxi ou ciclooentiloxi), ariloxi 3-o * (por exemplo feniloxi), aralquilo (por exemplo benzilo) ou aralquiloxi (por exemplo benziloxi) em que o arilo pode ser opcionalmente substituído com alquilo inferior, hidroxi ou halogeneo, cicloalquiltio r. alquiltio G. ,, ariltio ou aralquiltio em que o arilo pode ser opcionalmente substituio do com alquilo inferior, hidroxi, ou halogeneo, ou R⁶ represen ta um grupo heterocíclico contendo um átomo de oxigénio ou um ou dois átomos de azoto, e 3-7 átomos de carbono com duplas ligações opcionais no anel (por exemplo piperidino, pirrolidino ou furfurilo) opcionalmente contendo um heteroátomo de enxofre e/ou oxigénio e opcionalmente substituído no anel por um ou mais grupos alquilo inferior, hidroxi ou halogeneo, cicloalquiltio C₃__õ, aralquiltio em, que o arilo pode ser opcionalmente substituído oor alquilo inferior, hidroxi ou halogeneo, ou R. representa um grupo imidazoliltio em que o radical imidazolilo pode ser substituído com alquilo inferior e/ou G-substituido corn nitro, ou R representa um grupo amino que é mono- ou di-substituido com alquilo £]__g (p°r exemplo

BAD ORIGINAL

metóxi), hidroxialquilo g cicloalquilo C₃_g (por exemplo ciclopropilo ou ciclopentilo), arilo (por exemplo fenilo), aralquilo (por exemplo benzilo) em que o arilo pode ser opcionalmente substituído com alquilo inferior, hidroxi ou halogéneo, alilo opcionalmente substituído com grupos mono- ou di-alquilo ou alcóxi (por examplo dimetilalilo), e R representa hidrogénio ou amino, e os seus derivados farmaceuticamente aceitáveis.

Os exemplos preferidos dos compostos com a fórmula (I) inclui aqueles em que R^ representa A.

São também preferidos os compostos em que R θ alcóxi por exemplo metóxi ou butoxi ou é um grupo amino substituído com cicloalquilo C_. < (por exemplo ciclopropilo ou ci2 γ ° clobutilo) ou em que R é alcenilo ou alquil tio (por exemplo aliltio).

Um subgrupo preferido com a fórmula (I) é o seguinte

R' representa hidrogénio, amino ou alquilo C, . (cor exemc 1-5 ~ pio metilo) R representa cicloalquilo γ (preferivelmente cicloalquilo C₃__õ, por exemplo ciclopropilo, ciclobutilo ou ciclopentilo) e R representa um átomo de hidrogénio ou um substituinte escolhido de entre alquilo (por exemplo

BAD ORIGINAI.

metilo ou etilo), alcóxi C, . (oor exemolo metoxi), hidroxil-o alquilo C^__õ (por exemplo h idroxi eti lo), cicloalquilo (preferivelmente cicloalquilo g, por exemplo ciclopropilo ciclobutilo ou ciclopentilo) opcionalmente substituído com alquilo C , (por exemplo um radical ciclopropilo), arilo J_ — o (por exemplo fenilo), aralquilo (por exemplo benzilo) em que o arilo pode opcionalmente ser substituído com alquilo hidróxi ou halogéneo, alilo opcionalmente escolhido com grupos mono- ou di-alquilo ou alcóxi (por exemplo dimetilalilo) ou um seu derivado farmaceut icamente aceitável.

Mais preferivelmente representa A, ó

r° representa hidrogénio, R representa cicloalquilo C g e π? representa um átomo de hidrogénio.

Os isómeros mais preferidos são aqueles em que o grupo hidroximetilo é cis em relação à purina nos compostos com a fórmula (l) em que R^ é A.

Os exemplos particularmente preferidos de compostos com a fórmula (i) são:

a) (+)-cis-4-/ 2-amino-ó-ciclopropilamino)-9H-purin-9-il/-2-ciclopenteno-1-metano1;

b) (+)-cis-4-(2-amino-5-metoxi-9H-purin-9-il)-2-ciclop ent en o-1 - me t ano 1;

c) (+)-cis-4-(2-Amino-6-etoxi-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-1-metano1.

d) (+)-cis-4-(2-Amino-S-isopropoxi-9H-purin-9-il)- 2-ciclopenteno-1-metanol;

e) (+) -cis-4-(2-Amino-oéetiltio)-9H-purin-9-il)- 2-ciclopenteno-1-metano1;

f) (+) -cis-4- (õ-Aliltio)-2-amino-9H-purin-9-il) -2-ciclo penteno-l-motanol;

g) (+)-cis-4-(2-Amino-6-butoxi-9n-purin-9-il)-2-ciclo-penteno-1-metano1;

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h) (+) - cis-4- (2-A_mino- 5-ciclopentiloxi-9H-purin-9-il) -2-ciclopenteno-l-metanol;

i) (+)-cis-4-(6-Alilamino)-2-amino-9H-purin-9-il)- 2_ciclopenteno-l-metanol;

j) (+)-cis-4-(2-Amino-6-propoxi-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol;

k) (+)-cis-4- (2-Amino-5-oiclopropilmetilamino-9H-P^{u r}iⁿ_9_il )-2-ciclopenteno-l-metanol;

l) (+) - cis-4- ( 2-Amino-6-ciclobutilamino-9H-purin-9-il)- 2-ci clopenteno-1-meta nol;

m) (+) -cis-4- (2-Amino-S- (isobutiltio)-9H-purin-9-il) - 2-ciclopenteno-1-metanol;

Os compostos com a fórmula (I) acima ref rida e os seus derivados farmaceuticamente aceitáveis são de agora em diante referidos como compostos de acordo com a invenç3o.

Num aspecto da invenção proporcionam-se compostos de acordo com a invenção para utilização em terapia médica particularmente para o tratamento ou profilaxia de infecções por retrovírus e infecções virais de hepatite B.

Exemplos de infecções por retrovírus que podem ser tratadas ou evitadas de acordo com a invenção incluem infecções por retrovírus humanos como por exemplo o Virus da Imunodeficiôncia Humana (HIV), vírus HIV-2 e vírus Linfotrópicos das células-? Humanas (HLTV) por exemplo infecções por HTLV-I ou HTLV-IV. Os compostos de acordo com a invenção são especialmente úteis para o tratamento ou profilaxia da SIDA e condições clínicas relacionadas como por exemplo o complexo relacionado com a SIDA (ARC), a linfadenopatia progressiva generalizada da (ROL) , condições neurológicas relacionadas com a SIDA como por exemplo esclerose múltipla ou paraparese tropical, condições anti-HIV anticorpos-positivas e positivas a HIV, sarcoma de Kaposi e trornbocitopenia púrpura Os compostos podem também ser utilizados no tratamento ou prevenção da pesoriase.

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Num aspecto adicional da presente invenção incluem-se:

a) Um processo para o tratamento ou profilaxia de infecções por retrovírus e hepatite 3 que compreende tratar-se o paciente com uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a invenção.

b) Utilização de um composto de acordo com a invenção na preparação de um medicamento para o tratamento ou profilaxia das infecções ou condições acima mencionadas.

Por derivado farmaceutlcamente aceitável pretende significar qualquer sal,éster,sal desse éster farmaceutlcamente ou farmacologicamente aceitável, de um composto de acordo com a invenção ou qualquer composto que, por administração ao paciente,seja susceptível de proporcionar (directamente ou indirectamente) um composto de acordo com a invenção, ou um seu resíduo ou metabólico activo do ponto de vista antiviral.

Os ésteres preferidos dos compostos da invenção incluem ésteres de ácidos carboxílicos em que o radical nâo-carbonilo do grupo éster é escolhido de entre alquilo de cadeia linear ou ramificada por exemplo n-propilo, t-butilo, n-butilo, alcoxialquilo (por exemplo metoximetilo), aralquilo (por exemplo benzilo), ariloxialquilo (por exemplo fenoximetilo), arilo (por exemplo fenilo substiuuido com um halogéneo, alquilo 0^__Λ, alcoxi ou amino) ; ésteres de sulfonato por exemplo alquil- ou aralquilsulfonilo (por exemplo metanossulfonilo); ésteres de amino ácidos (por exemplo L-valilo ou L-isoleucilo); e ésteres de mono- di- ou tri-fosfato. Os ésteres de fosfato podem ser esterificados por exemplo com o substituinte seguinte (Zé^) _n ^{em Ω} θ escolhido de

0-20.

Sm relação aos ésteres acima descritos, a menos que se especifique o contrário, qualquer radical alquilo presente contém com vantagem 1 a 18 átomos de carbono, particularmente 1 a 4 átomos de carbono.Qualquer radical arilo presente nestes ésteres compreende com vantagem um grupo fenil

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J

Qualquer referencia a qualquer dos compostos acima citados pode também incluir uma referencia a um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de acorda com a invenção e dos seus derivados farmaceuticamente aceitáveis incluem sais básicos, por exemplo sais de metais alcalinos (por exemplo de sódio), metais alcalino-terrosos (por exemplo de magnésio),de amónio e NW⁺^ (em que W é alquilo

Os sais fisiologicamente aceitáveis de um átomo de hidrogénio ou de um grupo amino incluem sais de ácidos carboxílicos orgânicos como por exemplo o ácido acético, láctico, tartárico, málico, isetiónico e succínico;ácidos sulfónicos orgânicos como por exemplo o ácido metanossulfónico, etanossulfónico, benzenossulfónico e p-toluenossulfónico e ácidos inorgânicos como por exemplo o ácido clorídrico, sulfórico, fosfónico e sulfâmico.Os sais fisiologicamente aceitáveis de um composto com um grupo hidróxi incluem o anião do referido composto em combinação com um catião adequado como por exemplo N , NH e Nlí (em que W é um grupo alquilo C-,_₄).

Os compostos acima referidos de acordo a invenção e os seus derivados farmaceuticamente aceitáveis om podem ser utilizados em combinação com outros agentes terapêuticos para o tratamento ou profilaxia das infecções ou condições acima mencionadas.Exemplos de outros agentes terapêuticos incluem agentes que são eficazes para o tratamento ou profilaxia de infecções virais ou condições associadas como por exemplo 3'-azido-3'-desoxitimidina (zidovudina), 2 ¹, 3 ¹-didesoxinucleósidos como por exemplo 2 ¹, 3 '-didesoxicitidina, 23 '-dideso· xiadenosina e 2¹,3'-didesoxinosina, nucleósidos acíclicos(por exemplo aciclovir), interferões como por exemplo o cc-interferão inibidores da secreção renal como por exemplo probenicida, inibidores do transporte de nucleósidos como por exemplo dipiridamole, bem como imunomoduladores como por exemplo interleucina II e factores estimulantes de colónias de macrofagos de granulócitos. Os compostos componentes desta terapia de combinação podem ser administrados simultaneamente,em composições separadas ou combinadas,ou em alturas diferentes,por

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exemplo sequencialmente, como por exemplo quando se pretende um efeito combinado.

Os compostos de acordo com a invenção, também referidos aqui como ingrediente activo, podem ser administrados para a terapia por qualquer via adequada incluindo a via oral, rectal, nasal, tópica (incluindo a bucal e sublingual), vaginal e parentérica (incluindo subcutânea, intramuscular, intravenosa e intradérmica).Deve notar-se que a via preferida variará com a condição e idade do paciente, natureza da infecção e do ingrediente activo escolhido.

Em geral uma dose adequada será na gama ds 3,0 a 120 mg por quilograma de peso corpóreo do paciente por dia,preferencialmente na gama de 6 a 90 mg por quilograma de peso corpóreo por dia e mais preferencialmente na gama de 15 a 60 mg por quilograma de peso corpóreo por dia.A dose desejada é preferivelmente apresentada na forma de duas,três,quatro, cinco, seis ou mais subdoses, administradas a intervalos adequados, ao longo do dia.Estas sub-doses podem ser administradas em formas de unidade de dosagem contendo por exemplo 10 a 1500 mg, preferivelmente 20 a 1000 mg, e mais preferivelmente 50 a 700 mg do ingrediente activo por forma de unidade de dosagem.

Idealmente, o ingrediente activo deve ser administrado para conseguir concentrações de pico no plasma do composto activo entre cerca de 1 a c erca de 75 uM,preferivelmente entre cerca de 2 e 50 uí-1, mais preferivelmente cerca de 3 e cerca de 30 ui-1. Isto pode ser conseguido, por exemplo, pela injecção intravenosa de uma solução 0,1a 5% solução do ingrediente activo,opcionalmente em solução salina ou administrado oralmente como bólus contendo cerca de 1 a cerca de 100 mg/kg do ingrediente activo.Os teores pretendidos no sangue podem ser mantidos por uma infusão continua para proporcionar cerca de 0,01 a cerca de 5,0 mg/kg/bora por infusão intermitente contendo cerca de 0,4 a cerca de 15 mg/kg do ingrediente activo.

Embora seja possível administrar o ingrediente activo, isolado é preferível apresentá-lo como composição farmacêutica.As composições da presente invenção compreendem pelo menos um ingrediente activo,como acima definido,juntamente com um ou mais veículos aceitáveis e opcionalmente outros agentes terapêuticos.Cada veículo deve ser aceitável no senBAD ORIGINA tido de ser compatível com os outros ingredientes da composição e não ser prejudicial para o paciente. As composições incluem as adequadas para administração oral,rectal, nasal,tópica (incluindo bucal e sublingual), vaginal ou parentérica (incluindo sub-cutânea, intramuscular, intravenosa ou intradérmica) .As composições convenientemente podem apresentar-se em forma de unidade de dosagem e podem ser preparadas por quaisquer processos b em conhecidos da técnica farmacêutica.Esses processos incluem a fase de se associar o ingrediente activo com o veículo que constitui um ou mais dos ingredientes acessórios.Em geral,as composições são preparadas misturando uniformemente e intimamente o ingrediente activo com os veículos líquidos ou os veículos sólidos finamente divididos ou ambos,e se necessário conformar-se o produto.

As composições da presente invenção adequadas para administração oral podem apresentar-se como unidades discretas como por exemplo cápsulas,hóstias ou comprimidos contendo cada um uma quantidade pré-determinada do ingrediente activo, como pó ou como grânulos;au uma solução ou uma suspensão num líquido aquoso ou não-aquoso?ou. como uma emulsão de óleo em água ou de água em óleo.G ingrediente activo pode também apresentar-se como um bólus,electuário ou pasta.Pode preparar-se um comprimido por compressão ou moldagem,opcionalmente com ou um ou mais ingredientes acessórios.Os comprimidos podem ser preparados por prensagem numa máquina adequada do ingrediente activo numa forma fluída como por exemplo pó ou grânulos,misturado opcionalmente com um ligante (por exemplo povidona,gelatina, h idroxipropilmetil celulose), lubrificante,diluente inerte, conservante,desintegrante (por exemplo amido glicolado de sódiq pclidona recticulada, carboximet.í Icelulose de sódio recticulado agente tensio-activo ou d.isprsante.Os comprimidos moldados podem também ser obtidos por moldagem numa, máquina, adequada de uma mistura do composto em pó humedecido com um diluente líquido inerte.Os comprimidos podem, opcionalm<nte ser revestidos ou fendidos e podem ser formulados de modo a proporcionarem uma libertação lenta ou controlada do ingrediente activo utilizado por exemplo,hidroxipropilmetilcelulose em várias proporções para proporcionar o perfil de libertação adequado.Os comprimidos podem também ser opcionalmente providos com. um revestimentò entérico,para proporcionarem uma libertação em parte do interio em sítios diferentes do estômago.Isto é particularmente vanta- r

BAD ORIGINAI.

joso para os derivados de nucleósidos da purina já que esses compostos são susceptíveis ce hidrólise acida.

As composições adequadas para administração tópica na boca incluem hóstias compreendendo o ingrediente activo numa base aromatizada.Geralmante sacarose e acácia ou tragacanto;pastilhas compreendendo o ingrediente activo numa base inerte como por exemplo gelatina e glicerina,ou sacarose e acácia;e lavagem de boca compreendendo o ingrediente activo num veículo líquido adequado.

As composições para administração rectal podem apresentar-se como supositórios com uma base adequada compreendendo por exemplo manteiga de cacau ou um salicilato.

A.s formulações adequadas para administração vaginal podem apresentar-se coro pessários,tampões,cremes, geis, pastas,espumas ou pulverizações contendo para além do ingrediente activo, veículos que são conhecidos como adequados na técnica farmacêutica.

As composições adequadas para administração parentérica incluem soluções para injecções estéreis isotónicas aquosas e não aquosas que podem conter anti-oxidantes,tampões, bactériostatos e soluções que tornam a composição isotónica com o sangue do paciente receptor; e suspensões estéreis aquosas e não aquosas que podam incluir agentes de suspensão e agentes espessantes.As composições podem apresentar-se em recipientes de doses unitárias ou de multidoses convenientemente selados,por exemplo ampolas e frascos,e podem ser armazenados numa condição liofilisad.a requerendo apenas a adição de um veículo líquido esterilizado,por exemplo água para injecções,imediatamente antes do uso.As soluções e suspensões para injecção extemporânea podem ser preparadas a partir de pós,grânulos e comprimidos esterilizados co tipo anteriormente descrito.

A.s composições para dosagens unitárias preferidas são as que contém uma dose diária ou dose unitária, ou sub-dose diária,como acima referido, ou uma sua fracção adequada, de um ingrediente activo.

Os compostos de acordo com a invenção podem também utilizar-se para utilização na fcrma de com14

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posições veterinárias, que pedem ser preparadas, por exemplo, por processos convencionais.

D_eve entender-se que para além dos ingredientes particularmente mencionados acima as composições desta invenção podem incluir outros agentes convencionais em relação ao tipo da composição em questão, por exemplo os adequados para administração oral podem incluir agentes edulcorantes, espessantes e aromatizantes.

A presente invenção inclui ainda um processo para a preparação de um composto de acordo com a invenção e os seus derivados fermaceuticamente aceitáveis que compreende:

(A( tratar-se um composto com a fórmula (II)

Z

H₂N

Ν'

R' (II)

2 na qual R e R são como atras definidos e Z representa um 2 grupo precursor para o referido R com um agente ou sob condições oue servem para converter o grupo precursor Z no 2 grupo R desejado, ou Z representa um grupo tio que pode ser substituído com um grupo apropriado para se bormar um composto com a fórmula (l) em que R é um grupo tio substituído ou;

B) fazer-se reagir um composto com a fórmula (III)

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I (III) ί

R' na qual R e R são ccmo atrás definidos, ou um seu derivado farmaceuticamente aceitável, com um agente que serve para se efectuar a formação do anel imidazole no composto com a fórmula (I) desejado, ou

i) quando se formar um composto com a fórmula (I), converter-se o referido composto num seu derivado farmaceuticamente aceitável, ou ii) quando se formar um derivado farmaceuticamente aceitável de um composto com a fórmula (I), converter -se o referido derivado no composto mãe com a fórmula (i) ou noutro dessss derivados.

P_rocesso A) acima citado pode ser efectuado de modo convencional, por exemplo, por tratamento de um composto com a fórmula (ll) em que Z representa um grupo substituível, por exemplo halogéneo, como por exemplo um grupo cloro, com, por exemplo, um metal alcalino (por exemplo sódio) ou um hidreto de metal alcalino (por exemplo hidreto de sódio) e um álcool adequado sob refluxo ou a uma ο _Λ peratura superior a 50 C de preferência num solvente orgatemnico.

Alternativamente o composto com a fórmula (II) pode ser tratado com uma amina ou cloridrato di ^f amino adequados para introduzir um grupo amino substituído como acima definido sob refluxo ou a uma temperatura superior^ a 50°C de preferência na presença de um solvente orgânico, i

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por exemplo metanol, etanol. Alternativamente, pode tratar-se um composto com a fórmula (II) em que Z é um grupo tio com um halogeneto adequado em atmosfera de azoto.

Processo B) pode ser efectuado por exemplo fazendo reagir um composto com a fórmula (III) com ácido fórmico ou um derivado reactivo do ácido fórmico, oftoformato de trietilo ou acetato de dietoximetilo, num solvente como por exemplo dimetilacetamida ou acetonitrilo a uma temperatura elevada, preferivelmente a 7 5-SO°C. E_sta reacção é convenientemente efectuada por adição de um pouco mais do que um equivalente de um ácido anidro forte, com 1,1 equiualentes de ácido etanossulfónico por equivalente de um composto com a fórmula (III), e neste caso utilizam-se temperaturas inferiores, por exemplo, 25°G.

No Processo A) o material de partida com a fórmula (II) pode ser preparado, por exemplo, ciclizando em primeiro lugar um composto com a fórmula (III) acima referida de modo análogo ao descrito para o Processo B) acima referido.

P_odem ser úteis outros reagentes para a ciclização de compostos com a fórmula (ΙΙΪ para se obterem compostos com a fórmula (I) em que R não seja hidrogénio.

P_or exemplo o ortoacetato de trietilo ou de trimetilo com anidrido acético a 7O-12O°C durante várias horas pro3 duz o R -CH., (ver H. C. Koppel e R. k. Robins, J. OrQ. Chem. ^J 3

1958, 1457), e o R -NH pode ser obtido por ciclização com isotiocianato de etoxicarbonilo (ver R. E_smail e F. Kurzer, Synthesis 1975, 301; L. 3. Towsend, e col., J. Hpterocyclic Chem. 1984, 21, 1245) . Esta reacção produz inicialmente

R -NHCOg ^Et que é em seguida hidrolisado numa base (por exemplo hidróxido de sódio aquoso) para R^-NH . A ciiização com etilxantato de potássio (W.T.Stolle, J. C. Sih, R.S.P. Hsi, J. L_sbel. Compo und R_adiopharm 1988, 891) em etanol a

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80°C produz R^-SH. A alquilação do SH com halogeneto de al- i quilo e com uma base (por exemplo carbonato de potássio em □

DMF) produz R -SMe, SEt.

P_ode converter-se um composto com a fórmula (I) num éster farmaceuticamente aceitável por reacçSo com um agente esterificante adequado, por exemplo um halogeneto de acilo ou um anidrido.

composto com a fórmula (i), incluindo os seus ésteres pode ser convertido nos seus sais farmaceuticamente aceitáveis de modo convencional por exemplo com tratamento com uma base adequada. Nm éster ou sal de um composto com a fórmula (I) pode ser convertido no composto mSe, por exemplo por hidrólise.

Os i sómeros ópticos e geométricos dos compostos com a fórmula (I) podem ser resolvidos ou isolados de modo convencional por exemplo por separação cromatográfica ou os ésteres diastereómericos são preparados por acilação do hidroxilo no radical ciclopentenilo com derivados de ácidos carboxílicos opticamente activos adequados tais como, por exemplo, com naproxeno (J. 0_rg. Chem., 51, 1287 (1986)). Os precursores de ciclopentenilo dos compostos com a fórmula (III) podem também ser resolvidos por cristalização fraccionada dos sais obtidos com ácido carboxílico opticamente activos (por exemplo ácido L-tartárico e os seus deri_z ι vados). Alternativamente, a resolução enzimatica pode ser conseguida tal como é referido em J. Med. Chem., 30, 746 (1987) e J. Med. Chem. 28, 1385 (1985).

Os significados dos seguintes exemplos servem apenas para ilustrar e não limitarem de qualquer ;

modo o âmbito da invenção. 0 termo ingrediente activo ί tal como utilizado nos Exemplos significa composto com a ,

J I formula (I) ou um seu derivado farmaceuticamente aceitável. | bad original

Exemplo 1 (+)-CÍS-4-/72-Amino-4-clcro-6-pirimidinil)amino/-2-ciclopenteno-l-metanol

Refluxaram-se em água (300 ml) numa atmosfera de azoto durante 18 horas acetato de cis-4— -acetamidociclopent-2-enoínetilo / S. Daluge e R. Vince,

J. Orq. Chem. 1978, 43, 2311) (14,88 g, 0,073 mol) e hidróxido de bário octahidr atado (46,19 g, 0,146 mol). Neutralizou-se a solução resultante com dióxido de carbono. Lavou-se o precipitado com água, e a seguir com etanol. Evaporaram -se as lavagens combinadas de filtração para se obter um xarope (11,16 g) que condensou com 2-amino-4,6-dicloropirimidina (23,91 g, 0,146 mol) e ertitilamina (30,5 ml,

0,219 mol) em 1-butanol sob refluxo (100 ml) durante 1,5 horas. Após adicional NaOH IN (73 ml) , evaporou-se a mistura resultante à secura e o sólido residual foi suspenso em CHCl^ (200 ml). S_eparou-se por filtração a 2-amino-4,6-dicloropirimidina não reagida e lavou-se com clorofórmio (100 ml). Concentraram-se as lavagens de filtração com clorofórmio e cromatografou-se em coluna de gel de sílica. Eluiu-se material de partida de pirimidina adicional com 2,5% de me tano 1 cloro fórmi o. Eiuiu-se o composto do título com 3, 5 % de metanolclorofórmio sob a forma de uma espuma sólida esbranquiçada (15,90 g, 91 %) : 'H-ÍP.MN (Me₂SO-d₆) 1.15-1.28 e 2.26-2.41 (2m, 2, CH ), 2,60-2,71 (m, 1,1'-H); 3,4 (m sobrepondo H₂0, CH₂OH), 4, 625 (t,J= =5, 3, 1, CH₂0H) , 4,95 (br, s, 1, CH-N) , 5, 67-5,87 (m, 2,

CH=CH) , 6,38 (br s, 1, NH₂) , 7,12(br s, 1, UH) ; MS (CP)M+1, 241, 243.

Anal. calc. para C H N^OCl.O. 2H 0 : C, 48,99; H, 5.55;

N, 22.85; Cl, 14,46.

Determ. : C, 49.10; H, 5.57; N, 22.81; Cl, 14,40.

- 19 I

Exemplo 2 ií )-cis-4-/~ / 2-Amino-6-cloro-5-./ (4-cloro fenil) azo /-4: i j| -PÍrimidinil7-amino7-2-ciclopenteno-l-metanol

D^ssolveu-se (+) -cis-4-/ (2-amino-4j -cloro-6-pirimidinil)-amino/-2-ciclopenteno-l-metanol do

Exemplo 1 (11,58 g, 48,1 mol) e acetato de sódio trihidratado (97 g) em ácido acético glacial (225 ml) e água (225 ml). Preparou-se de 4-cloroanilina (6/74 g, 52,8 mol) ácido cloríirico concentrado (14,7 ml), água (52 ml), e nitrito de sódio (4,01 <3, 58,2 mmol em 47 ml de gua), uma solução i θ fria (O, 5 C) de cloreto de 4-clorobenzenodiazónio. Açjicionou-se gota a gota esta solução fria à primeira solução durante 5 minutos. Filtrou-se o precipitado amarelo resultante durante 18 boras, lavou-se com água, e extoaíu-se com etanol para se obter o composto do título sob a forma de um pó amarelo e scuro.

(12,56 g, 69%), Pf 218-22O°C dec; Ή-RMN (Me^O-dg)

10, 25 (d, 1, NH) , 7,69 e 7,54 (ambos, J=8.9,CgH^), sobrepondo ί; 7.6 (br, 6, NH₂), 5.80-5.95 (m, 2, CH=CH) 5,24 (m, 1,CHN), 4,75(t, 1,CH₂OH), 3,41 (t, 1, CH^H) , 3,41 (t, 2, CH^C) , ii 2, 75 (m, 1, CH) , 2, 41 (m, 1, CH) , 1, 44-1, 53 (m, 1, CH) .

A_nal.calc. para C^gH^gN^Clí C, 50, 67; H, 4,25; N, 22,16; Cl, 18.70.

D_eterm. : C, 50, 59; K, 4,29; N, 22.10; Cl, 18,66

Exemplo 3 (+)-cis-4-/ ( 2, 5-Diamino-4-cloro-6-pirimidinil)-amino/-2-ciclopenteno-l-metanol

Suspendeu-se o composto do título do Exemplo 2 (11,67 g) em etanol (235 ml), ácido acético glacial (30 ml), e água (235 ml). Aqueceu-se a mistura sob re20

fluxo numa atmosfera de azoto. A^icionou-se em pequenas porções pó de zinco (13, 5 g) durante 30 minutos, período durante o qual o composto se dissolveu. Aqueceu-se a mistura reaccional durante mais 20 minutos, e em seguida fiitrou-se o excesso de zinco da solução quente, e lavou-se com etanol. Evaporaram-se cs filtrados, e purificou-se o resíduo numa coluna de gel de sílica eluindo com clorofórmio (1 1) e clorofórmio:metanol/4:1 (1,8 1). Combinaram-se as fracções contendo o produto, e removeu-se o solvente sob pressão reduzida para se obter o composto do título sob a forma de um óleo vermelho-laranja (11,2 g, > 100 % de rendimento). Obteve-se uma amostra pura durante uma outra reacção de pequena escala para se obter o produto sob a forma de um sólido amarelo claro com rendimento de 76 % ^-RMN (Me„SO-d,) 1,29 e 2,39 (m, 2, CH J , 2,69 (t, 1,

Δ Ό Z l'-H), 3,37 (d, 2, CH₂0H), 3,91 (br, 2, NH₂) , 4,60 (br, 1, CH₂0H), 5,^aO2 (m, 1, CHNH), 5,56 (br, s, 2, NH₂), 5,74 (m,

1, = CH), 5,86 (m, 1, = CH) , 6,36 (d, 1, CHNH):

Exemplo 4 (+)-cis-4-(2-Amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-1-metanol

Dissolveu-se o composto do título do Exemplo 3 (cerca de 9,7 g) em acetato de dietoximetilo (100 g), e refluxau-se durante dois dias, .

Removeu-se o solvente sob elevado vazio a cerca de 50°C, e adicionou-se daoxanc (40 ml) e HC1 Ο,5N (60 ml). Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 1, 25 horas, e am seguida refrigerou-se. Neutralizou-se a mistura reaccional a pH 7 com hidróxido de sódio 5N frio, e a seguir extraíu-se com clorofórmio : metanol/ /3:1 varias vezes. Secaram-se as f<â'ses orgânicas com sulfato de magnésio, filtraram-se e evaporaram-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia de colunas em gel de sílica,

eluindo com GHC1^:2 % de MeOH para se obterem 3,7 g (16% de rendimento) do composto do título.

Pf 138-139°C, ¹H-RMN (Me^O-dg) 1,63 e 2,61 (m, 2, CH₂) , 2.87 (m, 1, l'-H), 3,44 (d, 2, CH₂OH), 5,44 (m, 1, CH-N), 5,89 (m, 1, = CH), 6,14 (m, 1, = CH) , 6,82 (br s, 2, NH ), 8,02 (s, 1, 8-H). (CH₂OH não observando sob o pico de H₂0) uv : pH 1 lambda max 315 (7370), 218 (26200); lambda sh

239.5 (5650). pH 7.4 lambda max 307 ( 8000), 245,5 (4600), 223 (26400). MS (Ei) 265,267 (tn) (Cl) 266, 268 (m + 1) .

A_nal. calc. para C^HpK^ClO.2H₂O : C, 43, 79; H, 5,35; N, 23,21; Cl, 11,75.

D_eterm. C, 43, 67; H, 5,29; N, 23,05; Cl, 11.70

Exemplo 5 (+)-cis-4-/ 2-Amino-6-(ciclopropilamino)-9H-purin-9-il7-2-ciclopenteno-l-metanol

Dissolveu-se o composto do título no Exemplo 4 (0,50 g) em etanol (40 ml), e adicionou-se ciclopropilamina (0,65 ml, 5 equivalentes). Refluxou-se a mistura reaccional em azoto durante 6 horas. A^icionou-se mais 0,65 ml de ciclopropilamina, e refluxou-se a mistura reaccional durante mais 5,5 horas. Evaporaram-se os solventes, e adicionaram-se clorofórmio (25 ml) e solução saturada de bicarbonato de sódio (5 ml). Extraíu-se várias vezes a fase aquosa com CKCl para se obter o produto bruto. P_urificou-se este produto numa coluna de gel de silica eluindo com acetato de etilo : 3% de metanol para se obterem 0,43 g (80%) do composto do título. Recristalizou-se este produto de ace-

tonitrilo para se	obterem 0, 30	g do produto.	Mp 70°C
enruga, 85 C gelifica:	H-RMN	(MeSO-d) 0, 2 o	56 e 0, 63 (2m,
4, CH2CH2), 1,56 e	: 2, 60	(2m, 2,	5'-CH ), 2,85	(m, 1, l'-H),
3,0 2 (m, 1, CH-NH) ,	3,45	(t, 2,	CHOH), 4,71	(t, í, ch2oh),
4,28 (m, 1, 4'-H)z	5, 77	(s, 2,	Νφ, 5, 84 (m,	1, = ch2),
6,09 (m, 1, =CH);	7, 23	(d, 1,	NH-CH), 7,58 (	s,l, purina-8-Η)

ms (Cl) 287 (m+) ; uv pH 1; larrsbda max 296 (12850), 255 (9800), 210.5 (181C0); lambda sh 221 (16300). pH 7.4 : max

284, 5 (14300), 259.5 (8250) , 216 (21100).

Anal. calc. para _gNgO .0. 25 H₂0 s C, 57, 82; H, 6.41:

N, 28.90.

Determinado C, 57,84; H, 6,45; N, 28,86

Exemplo 6 ι (+) -cis-4- (2-Amino-6-metoxi-9H-purin-9-il) - 2-ciclopenteno! -1-metanol ' Dissolveu-se (+)-cis-4- (2-amino-4-cloro> -9H-purin-il)-2-ciclopenteno-l-metanol do Exemplo 4 (0,53 ! g, 2,0 mmol) em metanol e adicionou-se uma solução de sódio í

ί (O,23 g, 10 miliequivalentes) e metanol (20 ml). Após 10 horas de refluxo, a solução foi arrefecida, e neutralizadu-se com ácido clorídrico. Evaporou-se o solvente e cromato! grafou-se o resíduo em gel de sílica. Siuiu-se o produto sob a forma de uma espuma sólida branca (0,44 g) com 5% de metanol-acetato de etilo. Ή RMN (Me₂SO-dg) 1,57 e 2.60 ' (both m, 2, CH₂), 2,85 (m, 1,1'-H), 3,43 (t, 2, CH OH),

I 3,94 (s, 3, 0CH₃), 4,70 (t, 1, CH₂0H, 5,42 (m, 1, CH-N), ! 5,86 e 6,11 (m, 2, CH=CH), 6,37 (s, 2, NH ), 7,75 (s, 1, purina-SH).

ι i

Anal. calc. para C₁₂H₁₅N₅O ₂·0.0.5 EtOAc.0.2H₂0.0.30Me0H : C,

53, 83; H ó, 14; N, 25,11.

D_eterm. C, 53, 37; H, 6,09; N, 25,07.

Exemplo 7 ι

(+) -cis-4-(2-Amino-6-etoxi-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol

Carregou-se um frasco com etanol (33 ml) e sódio (0,172 g, 7,5 mmol). Após dissolução de todo o sódio adicionou-se (+)-cis-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol (0,40 g, 1,5 mmol) do Exemplo 4 e levou-se a solução a refthuxo durante 0, 5 horas. Deixou-se arrefecer a solução para a temperatura ambiente antes de se neutralizar com HC1 1,ON. Concentrou-se a seguir a solução e dividiu-se o resíduo entre clorofórmio e água. Secou-se a fase orgânica com MgSO^, filtrou-se e concentrou-se. Colocaram-se em seguida os resíduos numa coluna em gel de sílica e eluiram-se com 2% de metanol em clorofórmio para se obter um vidro amarelo (0,28 g, 67,8%).

Ή-RMN (Me^SO-dg) ^7,74 (s_z 1H, purina H-8), 6, 35 (br s,

2H, NH₂), 6,15 e 6,07 e 5,91-5,82 (ambos m, 2H, CH=CH)

5, 49-5, 35 (br m, 1H, CHN) 4.71(t, J=(5.3Hz, 1H, OH), 4.43 (a, J=7.0Hz, 0CH₂ CHg), 3.50-3.39 (m, 2H, OCH₂) , 2.95-2.78 (br m, 1H, H-l¹), 2.70-2. 52 (br, m, sobrepondo solvente,

0.5 CH₂), 1.68-1. 52 (br, m, 1H, 0.5 CH₂), 1.33 (+, J=7.1Hz, CH₃).

Anal. calc. para ^: 56.72; 6.22; N 25.44.

D_eterm. C, 56,48; H, 6,23; N, 25,20.

Exemplo 8 (+) -cis-4- (2-Amino-6-isopropoxi-9H-purin-9-il) - 2-ciclopenteno-l-metanol

Carregou-se um frasco com hidreto de sódio (dispersão em óleo a 60 %, 240 mg, N6 mmol) gue se lavou com hexanos antes da adição de isopropanol (20 ml) e (+)-cis-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-1-metanol (O, 318 g, 1, 19 mmol) do Exemplo 4. Agueceu-se esta solução a 75°C durante 2 horas antes de se deixar arrefecer para a temperatura ambiente e neutralizou-se com adição de HC1 1,ON. Concentrou-se a solução e colocou-se o resíduo numa _ 24 BAD ORIGINAL

coluna de gel de sílica que se eluiu com 10% de metanol-clorofórmio. Cristalizou-se de etanol:água 1:1 obtendo-se cristais esbranquiçados.

(265 mg, 77%) Pf 188-19i°C, Ή-RMN (Me 30-dg) 6 7,72 ((s, 1H, purina H-3), 6,28 (s, 2Ά, NH ), 6,09 e 5,87 (ambos tn, 2H, CH=CH) , 5, 50-5,37 (m, 2H, CHN, CHO) , 4,69 (_t, j=5.3, 1H, OH), 3,43 (m, 2H, CH₂OH), 2,86-2,81 (br m, 1H, CH), 2,67-2.51 e 1.64-1. 52 (2m, 2K) , CH₂) 1.31 (d, J=£. 2, (CH₃)₂ch).

A_nal. calcl. para ^]_4^19^5^ 2' C, 65,12; H, 6,62; N, 24 . 20. Determ. C, 58 , 20; H 6,66? N, 24,20.

I

Sxeipplos 9 e 10 (+)-cis-2-Amino-l,9-dihidro-9-/ (4-hidroximetil)-2-ciclopenten-l-il7-5H-purin-ó-tiona e

(+)-cis-4-(2-Amino-6-propiltio-9H-purin-9-il)-2-ciclopentefli -1-metanol

Re£luxou-se (+) -cis-4- ( 2-amino-6-cloroi -9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol (4,18 g, 15,7 mmol) do Exemplo 4 e tioureia (1,32 g, 17,3 mmol) em n-propanol durante 17 horas. Filtrou-se a mistura resultante e lavou-se o sólido com n-propanol para se obter (+)-cis-2-amino-l, 9-dihidro-9-/ (4-hidroximetil)-2-ciclopenten-l-il)-6H-purin-6-tiona sob a forma de um pó amarelo.

(2,19 g, 53%); Pf 235-233°O, Ή-RMN (DMSO-άθ) S ; 11,35 (5,1,NH); 7.77 (s, 1, H-3), 6,76 (br, s, 2 NH ) , 6,16 e ! 5,86 (ambos m, 2, CH=C.H), 5,35 (m, 1, CH-N), 4,70 (m, 1,

OH), 3,42 br m, sobrepondo H₂0, CH -O), 2.85 (br m, 1, CH) , 2,30 (m, sobrepondo solvente, 0.5 CH ), 1.60 (m, 1, 0.5 CH_?) .

A_nal. calc. para C^K N 05- c, 50,18: H 4,98; N, 26,60; S, 12.18.

- 25 BAD OB16'NAL

Determ: C,50,10; H,

A cromatografia em gel de sílica do conteúdo do filtrado de propanol produziu um segundo produto por eluição com 5 % de MeOH-E-tOAc. A cristalização de acetonitrilo produziu (+)-cis-4-(2-amino-6-propiltio-9H-purin-9-il)-2-ciclopenten-l-metanol sob a forma de um pó amarelo (0,441 g, 10%), pf. 12S-13O°C.

Ή-RMN (DMSO-dg) c> : 7,84 (s, 1, H-8) , 6,46 (br, s, 2,

NH₂), 6,15 e 5,90 (ambos m, 2, CH=CH), 5,45 (br, m, 1,

CH-N), 4,73 (t, J = 5,4,1 OH), 3,45 (m, 2, CH₂-0) , 3,25 (t, J=7, 3, 2, s-CH₂), 2.90 (br, m, 1, CH) , 2, 70-2, 55 (m, 1, 0.5 CH₂)/ 1, 80-1,50 (m, 3, 0.5 CH₂ sobrepondo CH₂ de propil),

1.0 (t, J=7.3, 3, CH ).

AhI. calc. para Ο^Η^Ν^Οδ: C, 55.06; H, 6,27; N, 22,93;

S, 10.50.

Determ. C, 55.15; H, 6,25: N, 22,91; S, 10.58.

Exemplo 11 (+) -cis-4- (2-Amino-õ-metiltio-9H-purin-9-il) - 2-ciclopenten-1-metanol

Agitou-se numa atmosfera de azoto com iodeto de metilo (0,54 g, 3,77 mmol) uma solução de (+)-cis-2-amino-l,9-dinidro-9-/ (4-hidroximetil)-2-ciclopenten-l-il)/-6H-purin-6-tiona (O, 5o g, 1,89 mmol) do Exemplo IO em NaOH IN (1, 39 ml) durante 30 minutos. E_xtraíu-se a mistura com CHCl^ (3 x 100 ml). S_ecaram-se os extractos (MgSO^), evaporou-se o solvente e cromatografou-se o sólido residual. Eluiu-se o produto numa coluna de gel de silica com 10% MeOH-CHCl^. A cristalização dessa amostra de acetonitrilo produziu o composto do título sob a forma de cristais amarelos (0,410 g, 78 %) ; Pf 152-154°C.

Ή-RMN(DMSO-dg) & ; 7.84((s, 1, H-3), 6,49 (br, s, 2, NH₂) 6.15 e 5,90 (ambos m, 2, CH=CH), 5,45 (br, m, 1, CH-N),

4,73 (t, J=5.3, 1, OH), 3,45 (m, 2, CH₂-O), 2.90 (br m,

1, CH) , 2.70-2.55 (m, sobrepondo s a 2.57, 4, 0.5 CH^ e

CH₃), 1. 65-1.55 (m, 1, 0.5 CH ) .

Anal. calc. para C^^^N^CS: C, 51,97; H, 5,45; N, 25, 25;

S, 11,56;

Doterm. C, 51,98; H, 5,48; N, 25,21; S, 11.65

Exemplo 12 (+)-cis-4-(2_Amino-6-((4-nitrobenzil tio-9H-purin-9-il)-2-ciclopecten-l-metanol

Agitou-se uma solução de (+)-cis-2-amino-1,9-dihidro-9-/ (4-hidroximetil-2-ciclopenten-l-il)-6H-purin-6-tiona (0,50 g, 1,89 mmol) do Exemplo 10 em DMF (5 ml) com K^CO^ (0,26 g, 1,89 mmol) e brometo de p-nitrobenzilo (0,41 g, 1,39 mmol) em azoto durante 12 horas. Repartiu-se a mistura entre H₂0 (5 ml) e CHCl^ (3 x 50 ml). S_ecaram-se os extractos de CHCl^ (MgS0₄), concentraram-se para um óleo amarelo, e cromatografou-se o óleo. A eluição de uma coluna de gel de sílica com 10% MeOH-CHCl^ produziu o composto do título como um pó amarelo (0,545 g, 73%),

Pf 199- 201°C.

H-RMN (DMSO-d.) £ ? 8/15 (A3, J=3. 3H„, 2, 0.5 C ,H. ), 7.76, o Z O 4

AB, J=V.0,2, 0.5 C₆H₄), 7.33 (_s, 1, H-8), 6.62 (s, 2, NH₂) , 6.10 e 5.85 (ambos m, 2, CH=CH), 5,40 (br m, 1, CH-N), 4.70 (t, J=5.3,l, OH), 4.63 (s, 2, , 3,42 (m, 2, CH -0),

2.35 (br, m, 1, CH) , 2.70-2.50 (m, sobrepondo solvente

0.5 CH ) , 1.70-1.50 (m, 1, 0.5 CH ) .

Anal. calc. para C₁₈H_l8N₆O₃S; C, 54, 26; H 4,55; N, 21,09;

S, 8.05

Determ.: C, 54,17; H, 4,56; N, 21.05; S, 8,11.

Exemplo 13 (+) -cis-4- (2-Amino-6- ( (l-metil-4-nitro-lH-imidazol-3-il) tio)-9H-purin-9-il)-2-ciclopenten-l-metanol

Adicionou-se a uma solução de (+)-cis-2-amino-l,9-dihidro-9-/^-(4-nidroximetil)-2-ciclopenten-l-il)-6H-purin-6-tiona (O, 5o g, 1,89 mmol) do Exemplo 10 em NaOH IN (1,89 ml), l-metil-4-nitro-5-cloro-imidazole (0,31 g, 1,89 mmol). Agitou-se a solução em azoto durante toda a noite e filtrou-se o precipitado resultante após adição de H₂0 (3 ml). A cromatografia do precipitado em gel de sílica produziu o composto do título, eluindo com 10% de rleOH-CHCl^ sob a forma de um pó amarelo (0, 63 8, 87 %),

Pf 207-208°C. Ή-RMN (DMSO-d-) ; 8,19 (s, 1 imidazol CH) ,

O

7,89 (S, 1, H-8), 6.55 (br, s, 2, NH₂), 6,15 e 5,85 (ambos m, 2, CH=CH), 5,40 (br m, 1, CH-N), 4.70 (t, J=5.3Hz, 1,

OH), 3.65 (s, 3, CH^), 3.40 (m, 2, OCH₂) , 2.85 (br m, 1,

CH) , 2.70-2.50 (m, sobrepondo solvente, 0.5 CH₂) , 1.70-1.50 (m, 1, 0.5 CH ).

Anal. calc. para C^^H^gNO^S-lH^: C, 44. 33; H, 4.46; N, 27.57 S, 7,89

Determ. C 44,22, 44.12: H, 4.46, 4.49; N, 27. 52, 27.46;

S 7.81

Exemplo 14 (+)-cis-4-(2-Amino-õ-etiltio-9H-purin-9-il)-2-ciclopenten-1-metanol

Açjicionou-se a uma solução de (+)-cis-2-amino-l,9-dihidro-9-/ (4-hidroximetil)-2-ciclopenten-l-il)-6H-purin-6-tiona (0,50 g, 1,89 mmol) em NaOH IN (1,89 ml), iodeto de etilo (0,27 g, 1,89 mmol) e dioxano (1 ml). Agitou-se a solução a 25°C numa atmosfera de azoto durante 1, 25 horas. Extraíu-se a mistura resultante com CHC1₃ (3 x

ml), secou-se (MgSO^) e evaporou-se para se obter o produto bruto sob a forma de um óleo amarelo. A cromatografia em gel da sílica produziu o composto do título, eluindo com 10% MeOH-CHCl^ e solidificou-se para se obter um pó amarelo em acetonitrilo (0,445 g, 80 %) ; Pf 123-125°C.

Ή-RMN (DMSO-dg) ã ; 7.82 (s, 1, H-8) , 6,43 (br, s, 2, NH₂) , 6.15 e 5.85 (ambos m, 2, CH=CH), 5.43 (m, 1, CH-N), 4.70 (t, J=5.4, 1, OH), 3,43 (m, 2, CH -0), 3.23 (q, J=7.3, sobrepondo H₂0, S-CH₂), 2.85 (br m, 1, CH), 2.70-2.55 (m,

1, 0.5 CH₂), 1.70-1.50 (m, 1, 0.5 , 1.30 (t, J=7.3, 3, ch₃).

Anal. calc. para Cj^Hj^N^OS: C, 53,51; H, 5.83; N, 24,19;

S, 10,99.

D_eterm: C, 53, 32; H, 5,93; N, 24,00; S, 10.94

Exemplo 15 (+)-cis-4-(2-Amino-6-artiltio-9H-purin-9-il)-2-ciclopenten-1-metanol

Adicionou-se a uma solução de (+)-cis-2-amino-l, 9-dihidro-9-_</~ (4-hidroximetil) - 2-ciclopenten-l-il)-6H-purin-6-tiona (O, 50 g, 1,89 mmol) do Exemplo 10 em NaOH IN (1,89 ml), brometo de alilo (0,229 g, 1,89 mmol) e dioxano (1 ml). Agitou-se a solução a 25°C sob azoto durante 1 hora. E_xtraíu-se a mistura com CHC1 (3 x 50 ml) e secaram-se os extractos de CHCl^ (MgSO^) e concentrou-se para se obter um óleo amarelo. A cromatografia em gel de sílica produziu o composto do título, que se eluiu com 10% de MeOH-CHClg e solidificou-se em acetonitrilo para se obter um pó amarelo, (0,436 g, 76%), Pf 108-110°C, H-RMN (DMSO-d^) á ; 7.83 (S, 1, H-8), 6,49 (br, s, 2, NH ), 6,15 e 5,85 (ambos m, sobrepondo 6.0, m, total 3, CH=CH, e ÇH=CH₂) .

5.45 (m, sobrepondo dd centrado a 5.35, 2, CH-N, e 0.5 =CH ),

5.10 (dd, 1, 0.5 =CH₂), 4.70 (t, J=5.3Hz, 1, OH), 3.95 (d, J=6.8Hz, 2, S-CH₂), ³·⁴⁵ (m, 2, CH₂-0), 2.85 (br, m, 1,

CH), 2.60 (m, 1, 0.5 CH2), 1·	60	(m, 1,	0.	5 CK2)
Anal. calc. para 2Ν553:	c,	55.42;	H,	5.65;
S,	10. 57
Determ: G, 55.3 7; H, 5.70;	N,	23,03;	s,	10.47

Exemplo 16 (+) - cis-4- (2-Amino-6-butoxi-9H-purin-9-il) - 2-ciclopenteno-1-metanol

Carregou-se um frasco com hidreto de sódio (dispersão em óleo a 60% 300 mg, 7,5 mmol) que a seguir se lavou com hexanos antes da adição de butanol (10 ml) contendo (+)-cis-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol (800 mg, 3 mmol) do Exemplo 4. Agitou-se a solução sob refluxo durante 2 horas e neutralizou-se em seguida pela adição de NaOH Ι,ΟΝ. A concentração da solução produziu o produto bruto que se purificou eluindo numa coluna em gel de sílica com 5% de metanol - clorofórmio (810 mg, 94%). A cristalização dessa amostra de etanol/acetonitrilo produziu um pó claro, Pf 122-123°C.

Ή-RMN (Me SO-d-,) 3 ⁷/⁷³ (^s, 1H, purina H8) , 6.12 e 5.56

Λ o (m, 2H, CH=CH), 5,41 (br m, 1H, NCH) 4,71 (não resolvido t,

1H, OH), 4,38 (t, J=6.6Hz, 2H, OCH butil), 3,42 (m, 2H,

OCH^), 2.85 (br m, 1H, CH) , 2,60 (m, 1H, Ο.δΟΗ^ ciclopenteno) , 1.75-1.35 (m, 5H, O.SCH^ ciclopenteno, CH2 0.92 (t, J=7.3Hz, 3H, CH-j) .

Anal. calc. D_eterm. : C, para C₁₅H₂₁M₅O₂: 59, 56; H, 7,07;

N,

59.30; H, 6,98; N, 23,0 9. 22, 37.

Exemplo 17 (+) -cis-4- (2-Amino-õ-ciclopentiloxi-9H-purin-9-il) - 2-ciclopenténo-l-metanol

C_arregou-se um frasco com hidreto de sódio (dispersão em óleo a 60% 185 mg, 4, 6 mmol) que se lavou em seguida com hexanos antes da adição de ciclopentanol (10 ml) . Aqueceu-se a mistura resultante e adicionou-se (+)-cis-4-(2-amino-6-cloro-2H-purin-9-il)-2-ci clopenteno-1-metanol (0, 53 g, 2 mmol) do Exemplo 4. Após agitar a 100°C durante 0,75 horas neutralizou-se a solução pela adição de HC1 Ι,ΟΝ. A concentração da solução produziu o produto bruto que se purificou eluindo numa coluna de gel de sílica com 5% de metanol-clorofórmio (0,30 g, 47,6 %). A cristalização dessa amostra de etanol-acetonitrilo produziu um pó branco, Ff 188-19O°C. Ή-RMN (Me_nS0-dJ é> 7,74 (S, 1H,

Z —o purina H8), 6,33 (br s, 2H HH ), 6,12 e 5,87 (m, 2H, CH=CH) ,

5,60 (m, 1H, OCH), 5,42 (m, 1H, NCH), 4,73 (t, J=5.lHz,

1H, OH), 3.44 (m, 2H, OCH ) 2.37 (br, m, 1H, CH) 2,63-2.57 (m, 1H, 0.5 CHg ciclopenteno), 1.98 (br m, 2H, ciclopenteno), 1.80-1.57 (br, m, 7H, 0.5 CHg ciclopenteno, 3(2-3'

A_nal, calc. para ^c16^H2i^N5°2^{: C}'^6O'^{94; H}' ⁶' ^{71; N} 22,21. Determ: C, 60,99; H, 6,73; N, 22. 20.

Exemplo 18 (+)-cis-4-(2-Amino-6-ciclopentilamino-9H-purin-9-il)-2-ci clopenteno-1-metanol

Agitaram-se sob refluxo uma solução de (+) - cis-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol (0,53 g, 2 mmol) do Exemplo 4, trietilamina (2,00 g, 20 mmol), diclopentilamina (267 mg, 3,1 mmol) e etanol (10 ml) durante 9 horas. Deixou-se a solução arrefecer à temperatura ambienta antes de se adicionarem 2 ml de NaOH Ι,ΟΝ, e a concentração da solução produziu o produto bruto que se purificou eluindo numa coluna em gel de sílica utilizando 5 % de metanol em clorofórmio (0,430 g,

68,4 %). A cristalização dessa amostra de etanol-acetonitrilo produziu um pó claro, Pf 143-146°C.

Ή-RMN (Me2^SO~^.6^ ⁷' ⁰⁰ ^^{3/ 1H}' H-8), 7.00 (br, m, ]H, NH) 6.10 e 5,86 (m, 2H, CH=CH), 5.77 (br s, 2H, NH ) 5,39 (m, 1H, NCH ciclopenteno), 4,76 (br, s, 1H, OH),

4.53 (br m, 1H, NCH), 3,44 (tn, 2H, OCH₂) , 2,87 (m, 1H, CH) 2. 62-2.54 (m, 1H, 0.5 CH₂ anel ciclopenteno), 1.89 (br m, 2H, ciclopentil GH₂)' 1.70-1.48 (br, tn, 7H, 0.5 CH₂ anel ciclopenteno, 3CH₂).

Anal. calc. para Ό .0.25H_nO i C, 60, 26; H 7,11;

22 5 2

N, 26,35.

D_eterm.i C, C,

60,43; H, 7,16; N, 26,27 60,37; H, 7,17; N, 26, 25.

Exemplo 19 (+)-cis-4-(2-Amino-õ-alilamino-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol

Agitaram-se sob refluxo (+)-(1α, la)-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9-i1)- 2-ciclopenteno-1-metanol (0,531 g, 2 mmol) do Exemplo 4, alilamina (1,014 g, 17,8 mmol) e e tanol (5 ml) durante 2,75 horas. Deixou-se a solução arrefecer para atemperatura ambiente antes da .'adição de 2,0 ml de NaOH IN. A evaporaçãoproduziu o produto bruto que se purificou por adição de uma coluna de gel de silica com 5 % de metanol - clorofórmio (0,36 g, 63 %). A cristalização dessa amostra de etanol produziu um pó branco,

Pf 181 - 183°C.

Ή-RMN (Me₂S0-d_₆) à 7.58 (s, 1H, purina H.8), 7.28 (br s,

1H, NH), 6.11-6.06 (m, 1H, 0.5CH=CH) 5.98-5.82 (m sobrepondo br s a 5.86, 4H 0.5CH=CH, CH=, NH ) , 5.37 (m, 1H,

NCH), 5.16-4.98 (m, 2H, =CH ), 4.72 (t, J=5.lHz, 1H, OH)

4.07 (br m, 2H, NCH₂), 3.42 (m, 2H, OCH_?) 2.84 (br, m, 1H,

CH) , 2. 65-2.54 e 1.62-1. 57 (m, 2H, ciclopentil Crl₂) .

A_nal. calcl. para C₁₄H gNgO: C, 58, 73; H, 6,34; N, 29, 35.

Determ. : C, 58,47; H 6,42; N, 29,19.

Exemplo 20

(+) -cis-4- (2-Amino-õ-morfolinc-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-1-metanol

Agitaram-se sob refluxo durante 1 bora uma solução de (+)-cis-4-( 2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ci clopenteno-l-metanol (0,531 g, 2,00 mmol) do Exemplo 4 e morfolina (0,5 26 g, 6,04 mmol) em etanol (6 ml). D ixou-se

O a mistura reaccional arrefecer para a temperatura ambiente antes de se adicionarem 2 ml de NaOH Ι,ΟΝ. A concentração da mistura produziu o produto bruto que se purificou eluindo numa coluna de gel de sílica utilizando 5 % de metanol em clorofórmio (0,62 g, 98 %) . A cristalização dessa amostra de etanol-água produziu utn pó branco; Pf 165-167°C.

Ή-RMN (Me2^S0-bg) 5 7.62 (s, 1H, purina H-8) , 6.05 (m, 1H,

0.5CH=CH), 5.90-5.82 (m, sobrepondo br s a 5.85, 3H, 0.5 CH=CH, NH₂) · 5.39 (m, 1H, NCH) 4.72 (t, J=5.0Hz, 1H, OH)

4.09 e 3.64 (br, m, 8H, 4CH₂, no anel morfolino), 3.42 (m,

2H, OCH₂), 2.84 (br m, 1H, CH) , 2.65-2.54 e 1.59-1.47 (m,

2H), CH₂).

An^al· calc. para C^5^20^6^2^{5 C}' 56,95; H, 6.37; N, 26, 57. Determ.: C, 57,03; H, 6,41; N, 26,48.

Exemplo 21 (+)_ cis-4-(2-Amino-6~benzilamino-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-1-metanol

Agitaram-se sob refluxo durante 4 horas uma solução de (+)-cis-4-( 2-amino-6-cloro-9H)-purin-9-il) -2-ciclopenteno-l-metanol (0,531 g, 2,00 mmol) do Exemplo 4, benzilamina (0,214 g, 2,00 mmol) e trietilamina (1,717 g, mmol) em etanol (6 ml). Deixou-se a mistura reaccional arrefecer para a temperatura ambiente antes de se adicionarem 2 ml de NaOH Ι,ΟΝ. A concentração da mistura produziu o

produto bruto que se eluiu numa coluna de yel de sílica com 5 % de metanol-clorofórmio. A cristalização dessa amostra de etanol-água produziu um pó branco (0,386 g, 57%);

Pf 174-i76°C. Ή-Ρ.ΜΝ (Me SO-d ) 7.80-7.65 (br, s, 1H,

KH) , 7.60 (s, 1H, purina H-8), 6,08 (m, 1H 0.5CH=CH), 5.86-5.82) m, sobrepondo br s, 3H 0.5CH=CH, KH₂) , 5.35 (br m, 1H, NCH), 4.73 (t, J=4.9Hz, sobrepondo br s a 4.65, 3H, OH, NCH₂) 3.43 (m, 2H, CCH₂), 2.85-2.81 (br m 1H, CH) ,

2. 65-2.54 e 1.63-1.50 (m, 2K, CH^) ·

Anal. calc. para ^<-'^8^Η2Ο^Ν6°’ ^c* 64,27; H, 5.99; N, 24,98. Determ.: C, 64, 35; H, 6,02; K, 24,92.

Exemplo 22 (+)-cis-4-(2-Amino-6-(2-metcxietoxi-9H-purin-9-il)-ciclopentano-l-metanol

Carregou-se um frasco com hidreto de sódio (dispersão em óleo a 60 %, 298 mg, 7,45 mmol) que se lavou em seguida com hexanos antes da adição de metoxietanol (15 ml), adicionou-se (+)-cis-4-(2-amina-6-cloro-9H-purin-3-il)-2-ciclopenteno-l-metanol (0,531 g, 2 mmol do Exemplo 4 e agitou-se a solução a 1OO°C durante 1 hora e neutralizou-se pela adição de HCl 1,ON. Da concentração da solução produziu o produto bruto que se purificou eluindo numa coluna em gel de sílica eom 5% de metanol-clorofórmio (416 mg, 68 %) . Da cristalização de etanol obteve-se um pó claro, Pf 121-123°C. Ή-RKN (i4e₂S0-dg) é 7.78 (S, 1H, purina H8), 6.39 (br s, 2H, NH₂), 6.14 e 5.90 (m, 2H, CH=CH), 5.44 (br m, 1H, NCH), 4.72 (t, J=4.6Hz, 1H, OH) 4.72 e 3.69 (m,

4H, 0CK₂ CH₂0) > 3.45 (m, 2H, OCH^), 3.31 (s, sobrepondo com H₂0, OCH ), 2.88 (br m, 1H, CH), 2.67-2.60 e 1.65-1.58 (m, 2H, CH₂) .

Anal, calcl. para ^ci5^Hi9^N5°₃ : C, 55.07; H 6,27; N, 22.94.

D_eterm: C, 55,18; H 6,33; N, 22.95.

Exemplo 23 ( + ) -cis-4- (2-Amino-6-prcpil3inino-9H-purin-9-.il) - 2-ciclopenteno-l-metanol

Agitaram-se sob refluxo uma solução de (+) -cis-4- (-2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il) -2-ciclopenteno-l-metanol (O,531 g, 2,00 mmol) do Exemplo 4 e propilamina (1,12 g, 18,19 mmol) em 8 ml de etanol durante 2 horas. Deixou-se a solução arrefecer para a temperatura ambiente antes da adição de 2 ml de NaOH Ι,ΟΝ. A concentração da solução produziu o produto bruto que se purificou eluindo numa coluna em gel de sílica com 5 % de metanol-clorofórmio (0,46 g, 80 %). Da cristalização dessa amostra de etanol-acetato de etilo obteve-se um pó branco, Pf 138-14O°C. Ή-RMN (Me₂SO-dg) 7.57 (S, 1H, purina H-8) 7.20-7:05 (br s, 1H, NH) . 6.11-6.06 e 5.86-5.82 (ambos m, 2H,

CH=CH), 5.78-5. 70 (br, s, 2H, NH₂), 5.39 (m, 1H, NCH),

4.73 (t, J=5.3, 1H, OH), 3.45-3.28 (br m. sobrepondo H^O,

OCH , NCH₂) 2.93-2.78 (br, ro, 1H CH), 2. 65-2. 54 (m, 1H0.5 ciclopentil CH₂) , 1.62-1.58 (rn, 3H, 0.5 ciclopentil CH₂,

CH₂) 0,86 (t, J=7.4Hz, 3H, CH₃) .

Anal. calc. para Ο^^Η^Ν,Ο: C, 58, 32; H, 6,99; N, 29,15. D_eterm. C, 58,38; H, 7.02; M, 29,10.

Exemplo 24 (+)-cis-4-(2-Amino-6-anilino-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-1-metanol

Agitaram-se a 95°C uma solução de (+) -cis-4- ( 2-amino-6-cloro-9H-purin-9-ii) - 2-ciclopenteno-l-metanol (0,550 g, 2,07 mmol) do Exemplo 4 e anilina (0,965 g, 10,35 mmol) em 10 ml de metoxietanol durante 1 hora. D_Qixou-se a mistura reaccional arrefecer para a temperatura ambiente antes da adição de 2,05 ml de NaOH IN. A concen35

BAD ORIGINAL

tração da solução produziu o produto bruto que se purificou eluindo numa coluna em gel de sílica com 5% de metanol-clorofórmio (0,60 g, 90 %) . Da cristalização dessa amostra de etanol-acetonitrilo obteve-se um pó claro, Pf 177-179°G.

Ή-RMN (Me„S0-d, £ 9,32 (s, 1H, NH) , 8,00 (d, J=7.8Hz, “o

2H, CgHg), 7,74 (s, 1H, purina H-8), 7.25 (m, 2H, C^Hg), 6,94 (m, 1H, CMHj, 6,18-6.05 (br m, 3H, NH , 0.5CH=CH),

3 2

5,88 (m, 1H, 0.5CH=CH), 5.50-5.35 (br m, 1H, NCH) 4,74 (m,

1H, OH), 3.45 (m, 2H, CH₂O), 2.97-2.80 (br m, 1H, CH) ,

2.65 e 1.61 (2m, 2H, CH₂) .

Anal. calc. D_eterm. : C, para C^H θΝ O: C, 63, 34; H, 5.63; N, 26.07. 63, 26; H, 5.67; N, 26,01

Exemplo 25 (+) - cis-4-(2-Amino-ó-metilamino-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol

Agitaram-se (+)-cis-4-(2-amino-6—cloro-9H-purin-9-il) - 2-ciclopenteno-l-metanol (0,100 g, 1,5 mmol) do Exemplo 4 e metilamina (40 % de solução aquosa, 25 ml) a 60°C durante 0, 5 horas. Deixou-se a solução arrefecer para a temperatura ambiente antes da adição de 1,5 ml de NaOH 1, 5N. Da evaporação obteve-se o produto bruto gue se purificou eluindo numa coluna êm gel de sílica com 5 % de metanol-clorofórmio. O sólido resultante foi suspenso em acetonitrilo para se obter um pó amarelo pálido (O,274 g, 70 %)

P 221-223°C. 'H-RMN (Me„SO-dJ £ 7.57 (s, 1H, purina H-8), 7.12 (br s, 1I-I, NH) , 6.11-6.06 (m, 1H, O.5CH=CH), 5.87-5.SO (m, sobrepondo br s a 5.80, total 3H 0.5CH=CH, NH₂), 5.40-5.33 (m, 1H, CHN), 4.76-4.70 (m, 1H, OH), 3.43 (m,

2H, CH₂O) 2. 95-2. 77 (br s, 4H, CH₃, CH) , 2.65-2. 54 e 1.62-1.50 (ambos m, 2H, CH₂) .

A_nal. calc. para C₁₂H_l6N₅0: C, 55.37; H 6.20; N, 32,29

Determ. í C 55, 28; H, 6,24; N, 32,19.

2

BAD ORIGINAL aaSBaflía«á5S®a^í22 iW.ÚÍJSSIUiu,

Exemplo 26 (+) -cis-4- (2-Amino-6-dimetilamino-9H-purin-9-il)- 2-ciclopente no-l-metanol

Agitaram-se à temperatura de 80°C durante 0,5 horas (+)-cis-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)- 2-ciclopenteno-l-metanol (0,400 g, 1,5 mmol) do Exemplo 4 e dimetilamina (solução aquosa a 25 %, 20 ml). Deixou-se a mistura reaccional arrefecer para a temperatura ambiente antes da adição de 1,5 ml de NaOH IN. A concentração da solução produziu o produto bruto que se purificou eluindo numa coluna em gel de sílica com 5 % de metanol-clorofórmio (0,310 g, 75%). Da cristalização dessa amostra de etanol, t o

-agua obteve-se um po claro, Pf 173-174 C.

'H-Ri-iN (Me_S0-d^) á 7.60 (s, 1H, purina H-8), 6.10 e Z —o

5.84 (ambos m, 2H, CH=CH), 5.78 (s, 2H, NH₂) , 5.39 (m,

1H, CHN), 4.72 (m, 1H, OH), 3.42 (m, OCH₂ sobrepondo com H^O, NMe₂), 3.33 e 3.31 (ambos s, N(CH₂)₂ sobrepondo com H₂0, CCH₂) , 2.90-2.78 (m, 1H, CH), 2. 65-2. 53 e 1.59-1.47 (ambos m, 2H, CH₂) ·

A_nal. calcul.para Cj_3^H18^N6° ^{: C}' $6, 92; 6,61; N, 30,63.

Determ.: C, 56, 93; H, 6,64; N, 30,56

Exemplo 27 (+) -cis-4-(2-Amino-6-propoxi-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-1-metanol

Carregou-se um frasco com hidreto de sódio (dispersão em óleo a 60% (158 mg, 3 mmol) que se lavou em seguida com hexanos antes da adição de n-propanol (25 ml). A^icionou-se (+)-cis-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol do Exemplo 4 (4OO mg, 1,5 mmol) e agitou-se a solução à temperatura de 80°C durante 2 horas e neutralizou-se pela adição de HCl Ι,ΟΝ. A

concentração da solução produziu o produto bruto que se purificou eluindo numa coluna em gel de sílica com 2 % de metanol-clorofórmio (350 mg, 81 %) . A cristalização dessa amostra de etanol-água produziu um pó claro, Pf 97-99°C.

Ή-RMN (Me„SO-d,.) o 7.74 (s, 1H, purina, H-8), 6,34 (s, z o

2H, NH₂), 6.11 e 5.85 (ambos m, 2H, CH=CH), 5,41 (m, 1H, CHN) , 4.71 (m, 1H, OH), 4,34 (t, J=6.8, 2H, OCH ), 3,44 (m, 2H, 0Η_£ OH) , 2.85 (m, 1H, CH.», 2.60 (m, 1H, 0.5 CH ),

1.74 (m, 2H, CH₂CH₃) 1.61 (m, 1H, 0.5 CH₂· 0.95 (t, J=7,4,

3xb, CH₃) .

Anal, calcul	. para	C14	H19N5°2*°*35H2O:	c,	56, 88; H, 6, 72;
				N,	23,69.
Determ. : C,	5 7,00;	H,	6,78; N, 23,61
c,	56,93;	H,	6,81; N, 23,59

Exemplo 28 (+)-cis-4- (2-Amino-6- (( 2-hidroxietil)-amino)-9H-purin-9-il) -2-ci clopenteno-l-metanol

Carregou-se um fr^co com ( +_)-cis-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol (O, 53 g, 2,00 mmol) do Exemplo 4, trietilamina )0, 92 g,

9,10 mmol), etanolamina (0,172 g, 2,82 mmol) e metoxietanol (6 ml) durante 2 horas. Deixou-se a solução arrefecer para a temperatura antes da adição de 2 ml de NaOH 1,ON. Da concentração da solução resultou o produto bruto que se purificou eluindo de uma coluna em gel de sílica com 10 % de metanol/clorofórmio (0,430 g, 74 %) . A cristalização dessa amostra de etanol-água produziu um pó branco, Pf 15O-152°C. Ή-RMN (Me2^SQ-ó_g) S- 7.57 (_s, 1H, purina H-8), 7.00-6.87 (br s, 1H, NH), 6,11-6.06 (m, 1H, 0.5CH=CH), 5.87-5.80 (m, sobrepondo br s, 3H, 0.5 CH=CH, NH₂) , 5.3 7 (m, 1H, CHN),

4.72 (dois t, 2H, 20Η) , 3.53-3.40 (m, 6H, 2 0CH₂) , 2.87-2.80 (br m, 1H, CH) 2. 65-2.54 e 1.62-1. 50 (2m, 2H, CH ) .

A_nal. calcul. para C Determ.s C, 53, 89; H

13^K18^N6°2^í , 6,33; N,

C, 53, 78; 28, 90

6, 25; Ν, 28.95

Exemplo 29 (+)-cis-4-(2-Amino-6-(ciclopropilmetilamino)-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol

Colocaram-se numa bomba de Parr (+)-cis-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol (0, 53 g, 2 mmol) do Exemplo 4, N-metil-N-ciclopropilamina (0,8477 g, 12 mmol) e metanol (20 ml) e aqueceu-se à temperatura de 62°C durante 5 horas. Concentrou-se a solução e diluiu-se em seguida com metanol antes de levar a pH 12 pela adição de NaOH 1,ON. Concentrou-se a solução e purificou-se o resíduo por eluição de uma coluna em gel de sílica com 3% metanol-clorofórmio (0, 547 g, 91, 2 %) . Da cristalização dessa amostra de água-etanol obteve-se um pó branco,

Pf. 13O-131°C. Ή-RMN (Me 30-d ): £ 7.61 (s, 1H, purina H-8) , 6.10 (m, 1H, CH=), 5.84 (m, 1H, CH=) , 5.7 (brs, 2H,

NH ) , 5.40 (Μ, 1H, CHN) , 4.70 (brt, 1H, OH), 3.43 (m, 2H, ÇH₂OH) 3,24 (brs, 4H, CH , NCH ciclopropil), 2.85 (m, 1H,

CH) , 2. 66-2.57 e 1.61-1.51 (m, 2H^CH ciclopenteno) , 0.90-0.65 (m, 4H, 2CH₂ ciclopropano).

A_nal. calcul. para ^C]_5^H20^IT6° *° * ^5H2° ¹ C, 58, 24; H, 6,84; N 27,16 D_eterminado: C, 58,15; H, 6.86; N, 27,14.

Exemolo 30 (+)-cis-4-/ 2-Amino-6- ( (R)-sec-butoxi)-9H-purin-9-il/-2-ciclopenteno-1-metano1

Carregou-se um frasco com hidreto de sódio (dispersão em óleo a 60 % 300 mg, 7,5 mmol) que se lavou com hexano antes da adição de (+)-cis-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol do Exemplo 4 (800

!] mg, 3 mmol) em ~1O ml de R-(-)-butanol-2-. Agitou-se a soluçãe a temperatura ambiente durante 3 horas e a seguir (um banho de óleo) à temperatura de 60°C durante 1 hora.

jj Deixou-se a solução arrefecer para a temperatura ambiente íi í antes de neutralização com HC1 IN. Concentrou-se a solução j e cromatografou-se o resíduo em gel de sílica. Eluiu-se o [ composto do título com 5 % de metanol-clorofórmio (0,81 g,

I ί 89 %). A cristalização dessa amostra de etanol-acetonitrilo produziu um pó branco, Pf 159-161°C. Ή-RMN (Me₂SO-d^) $ 7.72 (s, 1H, purina H.8), 6, 30 (br s, 2H, ΝΗ.?), 6.10 e 5.86 (m, 2H, HC=CH), 5.44-5. 28 (m, 2H, NCH, OCH), 4.71 (t, J=5.C, 1, OH), 3.42 (m, 2, OCH ), 2.85 (m, 1, CH) ,

2.60 (m, 1, 0.5 CH^ ciclopenteno) , 1.61 (m, 3H, 0.5 CH^ ciclopenteno, CH₂) 1.27 (d, J=6.0, 3H, CHCH-J , 0.89 (t,

J=7.4, 3H, CH₃).

Anal, calcul. para ^5^21^5°2^{! C/} 59,39; H, 6,98; N, 23,09 Determ.: C, 59. 28; Η, 7.0i; N, 23.02.

I

I ; Exemplo 31 (+)-cis-4-(2-Amino-6-ciclobutilamino-9H-purin-9-il)-2-cicloί penteno-l-metanol i

Aqueceu-se em banho de óleo à temperatura de 7O-75°C em metanol (15 ml) durante 29 horas uma solução de (+)-cis-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-csclopenteno-l-metanol do Exemplo 4 (0,53 g, 2 mmol) e ciclobutilamina (11, 387 g, 19,5 mmol). Após arrefecimento para a temperatura ambiente, adicicnaram-se 2 ml de NaOH Ι,ΟΝ. Concentrou-se a solução e cromatografou-se o resíduo em gel de sílica. Eluiu-se o composto do título com 5 % de metanol-clorofórmio sob a forma de uma espuma incolor que solidificou num pó branco em acetonitrilo (454 mg, 75,7 %), Pf 181 - 183°C. ’Η-RMN (DMSO-dg) <5 7.59 (s, 1H, purina H.8),

7.38 (br m, 1H, NH), 6.10 (m, 1H 0.5 HC=CH) 5.84 (m sobrepon• i do br s, a 5.76, 3K, 0.5 CH=CK, NH₂^ 5.3 6 (m, 1H, NCH

ciclopenteno), 4.73 (t, sobrepondo br m, J=5. 2, 2H, OH,

NCH ciclo^uteno), 3.42 (m, 2H, OCH^), 2.83 (br m, 1H, CH) 2,55 (m, sobrepondo com DHSO, 1/2 CH^ ciclopenteno), 2,20-1.95 (br m, 4H, 2CH₂ ciclopenteno), 1.58 (m, 3, CH ciclopenteno, 0.5 CH₂ ciclopenteno).

Anal, calcul. para ^ci5^H2O^N6^{O: C}' 59,98; H, 6,71? N, 27, 98. D_eterm. Ça 60,05; H, 6,73; N, 27,91.

Exemplo, 3 2 (+)-cis-acetato de / 4-/“2-Amino-6-(ciclopropilamino)-9H-puriri-9-il.7-2-ciclopenten-l-il.7met ilo

Agitou-se à temperatura ambiente durante toda a noite uma solução de (+)-cis-4-(2-amino-6-ciclopropi1amino-9H-purin-9H-il)-2-ciclopenteno-1-metanol do Exemplo 4 (400 mg, 1,5 mmol), anidrido acético (228 mg, 2,2 mmol), 4-N, N-dimetilaminopiridina (8,4 mg, 6,9 x 10 ' mmol) e

N, N—dimetilformamida seca (12 ml). Concentrou-se a solução sob vazio elevado e colocaram-se os resíduos numa coluna de gel de sílica que se eluiu com 5 % de metanol-clorofórmio (240 mg, 48,7 %). Diluiu-se o composto do título em etanol e formou-se uma espuma sob vazio elevado.

Ή-RMN (DMSO-d₆) á 7.52 (s, 1H, purina, H8) , 7.28 (d,

J=4.5, 1H, NH), 6.07 e 5.94 (m, 2H, HC=CH) 5.81 (br, 2H,

NH₂), 5.39 (br m, 1H, NCH), 4.06 (m, 2H, 0CK₂) 3.02 (br m,

2H, CH, NCH ciclopropano), 2.65 (m, 1H 0.5 CH₂ ciclopenteno)

1.98 (s, 3H, Crl^) , 1.56 (m, 1H, 0.5 CH₂ ciclopenteno), 0.61 (m, 4H, 2CH₂ ciclopenteBo).

A_nal. calcul.

Determ.

para ^C16^H2O^I'6^O C, 57.16;

C, 5 6,88;

C, 56, 82;

₂.0.4H₂0.0.15EtOH:

H, 6,39; N, 24, 54. H, 6,32; N, 24,81 H, 6,3 2; N, 24,78

Exemplo 33 (+) -cis-4- (2-amino-5-but2 lamino-9H-purina-9-il)- 2-ciclopenteno-l-metanol

Agitaram-se sob refluxo durante 3 horas uma solução de (+)-cis-4-(2-am.ino-6-cloro-9H-purin-9H-il) -2-ciclopenteno-l-metanol do Exemplo 4 (0,408 g, 1,5 mmol), butilamina (0, 549 g, 7, 5 mmol, 5 equivalentes) e etanol (10 ml). Deixou-se a solução arrefecer para a temperatura ambiente antes da adição de 1,5 ml de NaOH 1,0 N. Concentrou-se a solução e purificou-se os resíduos por eluição numa coluna êm gel de sílica com 5% metanol-clorofórmio (0,440 g,

%). Dissolveu-se o composto do título em acetonitrilo quente e depois deixou-se arrefecer para produzir um pó branco, Pf 116-118°C. 'H-^RI-íN (Me_nS0.dJ S 7.57 (s, 1H, purina H.8) 7.12 (brm, 1H, NH), 6.09 e 5.85 (m, 2H, HC=CH),

5.75 (br s, 2H, NH₂) 5,36 (br m, 1H, NCH), 4.74 (t, J=5.3,

1H, OH), 3.42 (m, 4H, 0CH₂) , 2.84 (br, m, 1H, CH) , 2.58 (m, 1H, 0.5 CH2 ciclopenteno), 1,52 (m, 3H 0,5 CH₂ ciclopenteno, CH₂ butil), 1.30 (m, 2H, Cr^, butil), 0.87 (t, J=/. 2,

3H, CH₃) .

Anal, calcul.para ^cj_5^H22^N6° ^{: C/} 59,58; H, 7,34; N, 27,80. Determ: C, 59,44; H, 7,38; N, 27, 79.

Exemplo 34 cis-4-(2-amino-6-((s)-sec-butoxi)-9H-purin-S-il)-2-ciclopenteno-l-metanol

Carregou-se um frasco com hidreto de sódio (dispersão em óleo a 60 %, 300 mg, 7,5 mmol) que se lavou com hexanos antes da adição de (+)-cis-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol do Exemplo 4 (800 mg, mmol) em S-(t)-2-butanol (10 ml). Agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 6 horas antes da neutralização

em HC1 IN. Concentrou-se a solução e colocou-se o resíduo numa coluna de gel de sílica. Eluiu-se o composto do título com 5 % de metanol-clorofórmio (0,29 g, 32%). Da cristalização dessa amostra de etanol:acetonitrilo obteve-se um pó branco, Pf 159-162°C. Ή-RMN (Me.SO-dJ 5 7,72 (s, 1H, z o purina, H.3). 6.30 (br, s, 2H, NH₂) 6.10 e 5.86 (m, 2H, HC=CH), 5.44-5. 28 (tn, 2H, NCH, OCH) 4.71 (t, J=5.0, 1H,

OH), 3.42 (m, 2H, OCH₂), 2.35 (m, 1H, CH) _# 2.60 (m, 1H, 0.5

CH₂ ciclopenteno), 1.61 (m, 3H, 0.5 CH₂ ciclopenteno, CH₂) , 1.27 (d, J=).0, 3H, CH, CH₃), 0.89 (t, J=7.4, 3H, CH ) .

A_nal.

ca]c.

para W^.O.25 ^0

C, 58, 52; H, 7.04; N, 22.75.

Determ. C, 58,59; H, 6,94; N, 22.79

Exemplo 35 (+)(cis)-4-(2-amino-6-/ (6-hidroxiexil)tio/-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol

Adicionou-se a Uma solução de (+)-cis-2-amino-l,9-dihidro-9-/ (4- hidroximetil)-2-ciclopenten-1-il)-6H-purin-6-tiona-HCl, do Exemplo 9 (0,50 g, 1,45 mmol) em NaOH IN (2,9 ml)_p 6-bromo-l-hexanol (0,321 g, 1,77 mmol) em dioxano (1 ml). Agitou-se a solução a temperatura ambiente em azoto durante 5 horas adicionando-se durante esse período mais ó-bromo-l-hexanol (0,096 g, 0,53 mmol) e NaOH IN (O, 53 ml) . Evaporou-se a solução para remover o dioxano e extraíu-se a fase aquosa com 3 x 25 ml de clorofórmio. S_ecaram-se os extractos de clorofórmio combinados (MgSO^). Evaporou-se o solvente e cromatografou-se o óleo residual em gel de sílica. Eluiu-se o composto do título com 10 % de metanol-clorofórmio; da cristalização com acetonitrilo formou-se um sólido branco (0,469 g, 39 %), Pf 129 -130°C, Ή-RMN (DMSO-dg) S 7.34 (s, 1, H-8), 6,46 (br s,

2, NH₂), 6.15 e 5.90 (2m, 2, CH=CH), 5.45 (br m, 1, CH-N), 4 (t, J=5.5,l, OH), 4.36 (t, J=5. 2, 1, (¾) ₆, OH), 3.50-3.20

(todos m, sobrepondo H₂0, 2CH₂~O CH₂S), 2. 2. 70-2.55 (m, 1, 0.5 CH ), 1.70-1.50 (m, 3, 0.5 CH₂), 1.50-1. 20 (br m, 6. 2CH₂5) .

Anal.calcul.para C.-H_nCN_r0_o3: C, 56,19; H, * 1 / 2b □ 2.

3, 8,32

Determ; C, 56,0g; lí, 6,93; N, 19,22; 3, 3, (br m, 1, CH), 3-GH₂-ÇH₇) e

6.93; N, 19,27;

Exemplo 36 (+) -cis-4- ( 2-amino-6- (isopropilamino) -9H-purin-l-il) -2-ciclopent en-1-metanol

Colocaram-se numa bomba de Parr (+)-cis-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ciclopentena-l-metanol do Exemplo 4 (0,545 g, 2 mmol), isopropilamina (2,36 g, 40 mmol) e metanol (15 ml) e aqueceu-se à temperatura de 65-7O°C durante 12 horas. Adicionou-se NaOH IN (2 ml) e evaporou-se a solução à secura. Secou-se o resíduo por evaporação do metanol e cromatografou-se em gel de sílica. E^uiu-se o composto do título com 10 % de metunol-clorofórmio; da cristalização do acetonitrilo resultou um sólido branco (0,463 g, 80 %), pf 153-155°C.

Ή-RMN (DMSO-dJ —6	ã : 7, 60	(s, 1, H8), 6.90 (br, m, 1, NH) ,
6.10 e 5. 35 (2m,	2, CH=CH),	5.70 (br, s, 2, NH ), 5,40 (br
m, 1, CH-N), 4,75	(t J=5.0,	1, OH), 4,60-4,40 (br m, 1,
CH-NH), 3,4 5 (m,	2, CH 2-0),	2,35 (br m, 1, CH), 2,65-2.55
(m, 1 0.5 CH0) 1.	65-1.55 (m	, 1, 0.5 CH2), 1.17 (d, J=6.5,
6, 2 CH3).
Anal. calcul. para	Gl4H20rl6°	: C, 58, 32; H, 6,99; N, 29.15.
Deterna. C, 58, 4 2;	H, 7.00; ί	N, 29, 23.

Exemplo 37 (+) - cis-4- (2-amino-6-butilbio)-9H-purin-9-il) -2-ciclopenten-1-metanol

I Adicionou-se iodeto de butilo (0,348 g, 1,39 mmol), em dioxano (5 ml), a uma solução de (+)-cis-2-amino-l,9-dihidro-9-/~(4-hidroximetil)-2-ciclopenteno-l-il/-6H-purin-õ-tiona do Exemplo 9 (0,50 g, 1,39 mmol) em NaOH IN (1,39 ml). Agitou-se a solução durante 5 horas numa atmosfera de azoto à temperatura de 25°G e extraíu-se com CHCl^ (3 x 100 ml). Sgcaram-se os extractos combinados de clorofórmio (MgSO.), evaporou-se o solvente e cristalizouI

-se o óleo residual com acetonitrilo para produzir o composto do título sob a forma de um pó amarelo (0,491 g, 81 %),

Pf 12O-123°C. ‘H-RMN (DMSO-dJ é 7,82 (s, 1H-8) , 6.43 (br —o s, 2, NH₂), 6,15 e 5,85 (2m, 2, CH=CH), 5,40 (m, 1, CH-N),

4,70 (m, 1, OH), 3,43 (m, 2, CH^-O), 3.25 (t. J=7,4, sobrepondo H₂0, S-CH₂), 2.85 (br m, 1, CH), 2.70-2.55 (m, 1, 0.5 CK₂), 1.70-1.30 (m, 5 - CH₂“CH_O- + 1/2 CH₂), ^0,89

J=7. 2, 3, CH₃).

Anal, calcul. para C^^-H -jN^OS: C, 56,40; H, 6,62; N, 21,93 S, 10.04

D_stsrm; C, 56,31; H, 6,64; N, 21,39; S, 10,02.

Exemolo 38

I ... — i

, I (+)-cis-4-(2-amino-6-(isobutiltio)-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-1-metanol i Adicionou-se a uma soluç ão de (+) -cis- 2-amino-l, 9-dihidro-9-/f (4-hidroximetil) - 2-ciclopenten-l-il7-6H-purin-6-tiona-HCl do Exemplo 9 (O, 50 g, 1,45 mmol·, | em NaOH IN (2,9 ml), 1, iodo-2-metilpropano (0,3 26 g, 1,77 mmol) em dioxano (1 ml). Agitou-se a solução à temperatura ambiente sob azoto durante 24 horas e adicionou-se durante esse tempo mais l-iodo-2-metilpropano (0,130 g, 0,71 mmol) e NaOH IN. Evaporou-se em seguida a solução para remover o dioxano e extraíu-se a fase aquosa com 3 x 25 ml de cloroformio. Secaram-se os extractos de clorofórmio combinados (MgSO^), evaporou-se o solvente e cromatografou-se o óleo

residual em gel de sílica. Sluiu-se o composto do título com 10 % de metanol-clorofórmio; da cristalização com acetonitrilo obteve-se um pó branco (0,345 g; 75 %) Ff. 127 - 129 C.

'H-RMN (DMSO-άθ) (m,

A_nal. calcul. para C.

7,32 (s, 1, H-3), 6,44 (br,

(2m, 2, GH=GH), 5,45 (br, m,	lz
3,45 (m, 2, CH2-O), 3,18 (d,	J =
(br, m, 1, CH), 2, 70-2.50 (m,	sobrepon
2.0-1.80 (m, 1, I4e2ÇH), 1.70-	1. 50
(d, J=6.6, 6, 2CH3) .
21N5O3: C, 56,40; H, 6,62; N,	21.93;
3, 10,04.
,61; N, 21,93; 3, 10.10.

Exemplo 39 (+)-cis-4-(2-amino-6-ciclopentiltio)-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-rnetanol

Adicionou-se brometo de ciclopentilo (0, 282 g, 1,89 mmol) em dioxano (1 ml) a uma solução de (+)-cis-2-amino-l, 9-dihidro-9-/ (4-hidroximetil)-2-ciclopenteno-l-i_l7-6H-purin-6_tiona do Exemplo 9 (0,50 g, 1,89 mmol) em NaOH IN (1,89 ml). Agitou-se a solução em azoto à temperatura ambiente durante 24 horas e adicionou-se nesse período de tempo mais brometo de ciclopentilo (0,864 g,

5,67 mmol). Evaporou-se a solução para remover o dioxano e extraíu-se a fase aquosa com 3 x 50 ml de clorofórmio. Secaram-se os extractos combinados (i-ígSO^), evaporou-se o solvente e cromatografou-se o óleo residual em gel de sílica. Eiuiu-se o composto do título com 10% de metanol-clorofórmio e solidificou-se com acetonitrilo para se obter o composto do título sob a forma de urn pó amarelo (0,310 g,

%), Pf 167-169°C. Ή-Ri-IN (DHSO-dg) £ : 7.33 (S, 1, H-8) ,

6.43 (brs, 2, NH₂) , 6.13 e 5.87 (2M, 2, CH=CH) , 5.42 (br m, 1, GH-N), 4,72 (t, J=5.3, 1, OH), 4.30(m, 1, S-CH),

3.44 (m, 2, CH -0), 2.85 (brm, 1, CH) , 2.70-2.55 (m, 1,

0.5 CH₂), 2,30-2,15 (brm, 2, 2CH), 1.30-1.50 (m, 7, 2CH₂ mais 3/2 CH₂).

Anal. calc. para C^₈H₂^N₃OS: C, 57, 93; H, 6,39; N, 21,13;

S, 9,67.

D_eterm: C 57, 82; H, 6,42; N, 21,10; S, 9,57.

Exemplo 40 (+)-cis-4-(2-amino-õ-/ (ciclopropilmetil)tio/-9H-purin-9-il) -2-ciclopenteno-l-metanol

A^icionou-se bromometil ciclopropano (0, 239 g, 1,77 mmol) em dioxano (1 ml) a uma solução de (+) -cis-2-amino-l, 9-dibidro-9-/~ (4-hidroximetil) -2-ciclopenten-l-il)-6H-purin-6-tiona-HGl do Exemplo 4 (0,50 g, 1,45 mmol), NaOH IN (2,9 ml). Agitou-se a solução sob azoto à tem peratura ambiente durante 2 horas e extraíu-se em seguida com 3 x 50 ml de clorofórmio. S_ecaram-se os extractos combinados de clorofórmio (MgSO^), evaporou-se o solvente e cromatografou-se o óleo residual em gel de sílica. Eluiu-se o composto do título com 10 % de metanol-clorofórmio; da cristalização com acetonitrilo formou-se um sólido branco (0,350 g, 76 %), Pf 125-127°C.

•H-RMN (DMS0-d₆) è> : 7.32 (S, 1, H-8), 6.44 (br s, 2, NH./, 6.10 e 5.85 (2m 2, CH=CH), 5.40 (br m, 1, CH-N), 4.71 (m, 1, OH), 3.43 (m, 2, CH₂-O) , 3.26 (d, J=12.1, 2, S-CH₂) , 2.85 (br m, 1, CH), 2.70-2.50 (m, sobrepondo solvente, 0.5 CH ),

1.70-1.50 (m, 1, 0.5 CH₂), 1.20-1.o (m, 1, CH ciclopropil), 0.55 e 0.35 (ambos m, 4, ciclopropil CH₂).

Anal. calc. para Cj^H^gN^OS: C, 56,76; H, 6.03; N, 22,07;

S, 10.10.

D_eterm: C, 56,65; H, 6,05; N, 22,01; S, 10,19.

Exemplo. 41 (+)-cis-4-(amino-6-hidroxihexil)amino)9H-purin-9-il-2-ciclo penteno-1-metanol

Ref luxou-se numa atmosfera de azoto durante 32 horas uma solução de (+) - (cis)-5-( 2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol do Exemplo 4 (0, 544 g, 2 mmol), trietilamina (0 , 607 g, 6 mmol) e 6-amino-l-hexanol (0, 234 g, 2 mmol) em etanol (5 ml). Adicionou -se durante este tempo mais 6-amino-l-hexanol (0,117 g, mmol). Adicionou-se em seguida N_aOH IN (2 ml) e deixou-se a solução a agitar durante 30 minutos. Concentrou-se a solução em vazio, secou-se o óleo residual por evaporação do etanol e cromato grafou-se em gel de sílica. Equiu-se o composto do título com 7 % de metanol-clorofórmio; da cristalização com acetonitrilo (0,473 g, 68 %) obteve-se um pó branco (0,473 g, 68 %), Pf 12O-121°C.

Ή-RMN (DMSO-d₅) £ : 7,57 (S, 1, H-8), 7.10 (br s, 1,NH), 6.10 e 5.85 (2m 2, CH=CH), 5.74 (br s, 2, NH ), 5.40 (rà, 1, CH-N), 4.73 (t, J=5.3, 1, OH), 4.31 (t, J=5. 2, (CH^-OH), 3,50-3.30 (todos m, sobrepondo H₂O,2, CH₂~0 e CH^-N), 2.85 (br m, 1, CH), 2.70-2.50 (m, sobrepondo solvente, 0.5 CH₂),

1.70-1. 20 (todos m, 9,4 CH₂ e 0.5 CH₂) .

Anal. calc. para ^17^26^6° 2^: C, 58, 94; H, 7,56; N, 24,26 Determ: C, 58,84; H, 7,63; N, 24,21.

Exemplo 42 (+)-cis-4-(2-amino-õ-(3-buteniltio)-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-1-metanol

Adicionou-se a uma solução de (+)-cis-2-amino-l,9-dihidro-9-/~(4-hidroximetil)-2-ciclopenten-l-il7-õH-purin-6-tiona-HCl do Exemplo 9 (0,50 g, 1,45 mol) em NaOH IN (2,9 ml), 4-bromo-l-buteno (196 g, 1,45 mmol) em dioxano (1 ml). D_eixou-se a solução a agitar à temperatu ra ambiente durante 5 horas e durante esse tempo adicionou48

BAD ORIGINAL

-se mais 4-bromo-l-buteno (0,196 g, 1,45 mmol) e NaOH IN (1,45 ml). Svaporou-se em seguida a solução para remover o dioxano e extraíu-se a fase aquosa com clorofórmio (3 x 25 ml). S_ecaram-se os extractos combinados de clorofórmio com (MgSO^), evaporou-se o solvente e crcmatografou-se o óleo residual em gel de sílica. Eluiu-se o composto do título com 7 % de metanol-clorofórmio? expandiu-se de etanol sob vazio (0,410 g, 35 %) . Ή-RMN-(DMSO-dg) : 7.82 (s,

1, H-8), 6.45 (br s, 2, NH₂), 6.10 e 5.85 (2m, sobrepondo 6.0-5.75, m, total 3, CH=CH e CH-CH₂) , 5.40 (br m, 1, CH-N), 5.20-5.0 (m, 2, CH=ÇH₂), 4.71 (t, J=5.3, 1, OH), 3.50-3.25 (2m, sobrepondo H^O, CH₂Y-3, CH -O), 2.85 (br, m, 1, CH)

2, 70-2,30 (2m, sobrepondo solvente, 0.5 CH₂ e S-CH^ CH^),

1.70-1.50 (m, 1, 0,5 CH₂) .

Anal. calc. para C-, s^gN^OS. 0.25H₂0-0. 20 EtOH:

C, 55, 86; H, 6.30? N, 21.15; S, 9.68 D_eterm: C, 55.97; H, 6.19; N, 20,77; S, 10.02.

Exemplo 43

I ι (+)-cis-acetato de / 4-(2-amino-6-(ciclopropilmetilamino)-9H-purin-9-ϊχ/-2-ciclopenteno-1-il7-metilo

Aqitou-se à temperatura ambiente numa atmosfera de azoto durante a noite uma solução de (+)-cis-4-(2-amino-6-(ciclopropiImetilamino)-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol do Exemplo 29 (0,30 g, 1 mmol), anidrido acético (0,204 g, 2 mmol), N,N-dimetilaminopiridina (0,005 g, 0,04 mmol) em N,N-dimetiIformamida (10 ml). Adicionou-se H^O (1 ml) e deixou-se em seguida a solução agitar mais uma hora, e de seguida concentrau-se em alto vazio. Dividiu-se o óleo residual entre solução saturada de bicarbonato de sódio (5 ml) e clorofórmio (3 x 50 ml). S_ecaram-se os extractos combinados de clorofórmio (MgSO^), evaporou—se o solvente e cromatografou-se o resíduo em gel de sílica. Eluiu-se

o composto do título com 4% do metanol-clorofórmio, expandiu-se de etanol em alto vazio e obteve-se uma espuma (0,330 g, 93 %). Ή-RMN (DMSO-dg) 7.59 (s, 1, H-8), 6.10 e 5.90 (2m, 2, CH=CH), 5.80 (br, s, 2, N^), 5.40 (br m,

1, CH-N), 4.05 (d, J=6.1, 2, 0CH_?), 3.3O_3.2O (m, sobrepondo s a 3.23, total 4, CH-N-Me e CH^), 3.10 (br m, 1,

CH), 2.75-2.60 (m, 1, 0.5 CH₂), 1.65-1.50 (m, 1, 0.5 CH₂) .

Anal· calc. para C. _H„„N-0 „.0.4 5H„O 0.5 StOH:;

172262 2

C, 58, 21; H, 6, 63; N, 23, 82.

Determ: C, 58,15; 58.09; H, 6.60, 6.61; N, 23,91,

23.83.

Exemplo 44 (+) -cis-4- ( 2-amino-6- (terc-butilamino)-9H-purin-9-il) - 2-ciclopenteno-l-metanol

Aqueceu-se numa bomba de Parr a uma temperatura de 80°C durante 23 horas (+)-cis-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol do Exemplo 4 (0,544 g, 2,0 mmol) e terc-butilamina (15 ml). Concentrou-se a solução resultante e secou-se o óleo residual por evaporação do etanol e cromatografou-se em gel de sílica. Eluiu-se o composto do título com 5% de metanol-clorofórmio; da cristalização do acetonitrilo obteve-se um pó branco (0, 392 g, 65 %, Pf 161-163°C. Ή-RMN (DKSO-dg) £> : 7.56 (s, 1, H-8), 6.10 (m, sobrepondo s a 6.03, total 2, =CH e NH), 5.85 (m, sobrepondo s a 5.78, total 3, =CH e NH ), 5.40 (br m, 1, CH-N), 4.72 (t, J=5.3, 1, OH), 3.40 (m, 2, CH₂~0), 2.85 (br, m, 1, CH), 2.70-2.50 (m, sobrepondo solvente 0.5 CH₂>, 1.65-1.40 (m. sobrepondo s a 1.45, total 10. 0.5 CH₂ e 3 CH ) .

A_nal. calc. para C-j^H^NgO: C, 59, 53; H, 7,33; N, 27,79 Determ: C, 59,58; H, 7,35; N, 27,86.

BAD ORIGINAL

Exemplo 45 (+) -9-/ 3-hidroximetil) -3-ciclopenten-l-il) guanina

A. (+)-4-acetamido-l-ciclopenteno-l-carboxilato de metilo

Dissolveu-se em metanol seco (25 ml) (+)-cis-4-acetamido-2-ciclopenteno-l-carboxilato de metilo (S. Daluge e R. Vince, J. OrQ». Chem. 1978, 43, 2311_7 (3,90 g, 21,3 mmol) e adicionou-se a uma solução de metóxido de sódio preparada de sódio (0,98 9, 43 miliequiv.) e metanol seco (150 ml) . Agitou-se esta solução à temperatura de 25°C durante 2,0 horas e em seguida neutralizou-se com ácido clorídrico 1 N. Concentrou-se a solução a 40 ml e extraíu-se com clorofórmio (3 x 75 ml). Secou-se o clorofórmio (MgSO^) e evaporou-se para se obter um vidro incolor (3,9 g). Da cromatografia em gel de sílica com 1-2 % de metanol-clorofórmio obteve-se o composto do título sob a forma de cristais brancos (4,33 g, 82 %), Pf 72-74°C.

/Lit. : Can. J. Chem. 1985 63, 2787; Pf 75-7õ°C_7.

A sublimação dessa amostra a 1OO°C/O,2 mm produziu cristais brancos, Pf 72-74°C. Ή-RMN (DMSO-d ) ã : 8.055 (br, d, 1, i\^TH) , 6,68 (m, 1, =CH) , 4.3 (m, 1, CHN), 3.65 (s, 3, OMe), 2.9-2.7 e 2.4-2.2 (ambos m, 4, 2CH₂), 1.75 (s, 3, MeC=0).

Anal. calc. para CgH^^NOg. O.IH^O: C, 58,43; H, 7,19; N, 7,57 D_eterm: C, 58, 37; H, 7,34; N, 7.34.

. (+)-4-Acetamido-l-ciclopsnteno metanol

A secagem por evaporação de tolueno do (+)-4-acetamido-l-ciclopenteno-l-carboxilato de metilo (3,66 g, 20,0 mmol) produziu uma solução com um volume final de 50 ml. Arrefeceu-se esta solução a uma temperatura de -70°C numa atmosfera de azoto. Arjicionou-se gota a gota durante mais 2 horas uma solução de hidreto de diisobutil alumínio em tolueno (1,5 M, 42 ml, 63 mmol). Agitou—se a solução turva

resultante a uma temperatura de -70°G durante mais 40 minutos. Adicionou-se gota a gota metanol arrefecido (5 ml), seguido de uma soluçSo de tartarato de sódio e potássio (11,29 g) em água (15 ml) a uma temperatura constante de -70°C. Deixou-se a agitar a mistura resultante a uma temperatura de 0°C durante várias horas, diluiu-se em metanol (150 ml) e filtrou-se. Svsporou-se o metanol e cromatografou-se o óleo castanho residual (3.44 g) em gel de sílica. Eluiu-se o composto do título sob a forma de um óleo amarelo pálido com 5 % de metanol-clorofórmio? 1,30 g (42 %) .

Ή-RMN (DMSO-d,) :8.00 (d, 1, 1H), 5,45 (m, 1,=CH), —o

4.71 (t, J=5.5, 1, OH), 4.35-4.2 (m, 1, CH-N), 4.0-3.9 (m,

2. CH₂0H), 2.65-2.5 (sobrepondo DMSO-d,-) e 2.2-2.0 (ambos m,

4, 2CH₂), 1.77 (s, 3, CH₃GO); EI-MS : M=155.

G. (+)-9-/ 3-(Hidroximetil)-3-ciclopenten-l-il)guanina

Converteu-se (+)-4-acetamido-1-ciclopenteno metanol (1.40 g, 9,02 mmol) pelos procedimentos dos Exemplos 1-4 para (+)-cis-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-1-ciclopenteno-l-metanol como espuma sólida amarelo pálida (0,31 g, 42 %), após eluição em gel de sílica com 5-10 % de metanol-clorofórmio; Ή-RMN e espectro de massa confirmaram a estrutura com contaminação de 5-10 % de (+)-4- ( 2-amino- 5-cloro-9H-purin-9-il)i-ciclopentil metanol. A hidrólise dessa amostra (455 mg, 1,75 mmol) foi efectuada em dioxano (5 ml) e ácido clorídrico 1 N (20 ml) a uma temperatura de 70°C durante 12 horas. Levou-se a solução resultante a um pH 6 com hidróxido de sódio e evaporou-se à secura. Suspenderam-se os sólidos residuais em metanol e foram absorvidos em gel de sílica. A eluição com 33 % de metanol-clorofórmio produziu o composto do titulo sob a forma de um sólido untuoso incolor. Três cristalizações com água produziram cristais brancos (214 mg, 5C %);

Pf 26O°C dec. .

BAD ORIGINAL

¹ H-RMN (DMSO-d ) J : 10.54 (s, 1, NHOO) , 8.14 (s, 1, —6 purina, H-8), 6.44 (s, 2, ^I?H ), 5.70 (s, 1, =CH), 4.97 (m, 1, CH-N), 4.85 (br t, l,0H), 4.02 (s, 2, CH OH), 2.9-2.7 (m, 2, GH₂), 2,6-2.5 (m, sobrepondo DMSO-d^, CH₂) .

Anal, calcl. D_eterm: C, para C-^H^N^ : 53, 24; H, 5,33; N,

C, 53.43; 28, 27.

H,

5. 30; N,

28, 32

Exemplo 46 (+) -cis-4- ( 2-amino-6- ( (2- (dimetilamino) etil) amino) -9H-purin-9-il)- 2-ci clopenteno-1-metanol

Agitou-se sob refluxo durante 3,5 horas um frasco carregado com (+)-(cis)-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol do Exemplo 4 (399 mg, 1,5 mmol), N, N-dimetilaminoetilamino (309 mg, mmol) e etanol (10 ml) . D_eixou-se a solução arrefecer para a temperatura ambiente antes da adição de 1,5 ml de NaOH IN. Concentrou-se em seguida a solução e colocaram-se os resíduos numa coluna em gel de silica. Eiuiu-se o composto do título com 30 % de metanolclorofórmio e concentrou-se a seguir para se obter um vidro incolor. A diluição com metanol (5 ml) e HCl (0,3 ml, 12 N) , seguido de evaporação produziu .um sólido amarelo pálido que se suspendeu em Ε^ΟΗ; (380 mg, 59%) , Pf. dec. z* 185°C,

Ή-RMN (Me₂SO-dg) Ó 10.4, 9, 25, 7, 67 (todos br,

NH⁺, NH2⁺), 8.06 (s, 1H, purina h-8), 6,18-6.15 e 5.89-5.86 (ambos m, 2H, HC=CH) , 5.45 (br s, 1H, CH-N) 4.20 (br s, 1H-1'), 3.90 (br, s, 2H, CH C ) , 3.53-3.3 (m, 4H, NCH - . CH2N) , 2.83 e 2.80 (ambos s, 6H, NMe₂) , 2.75-2. 55 (m, 1H,

0.5 CH₂), 1.7C-1.5O (m, 1H, 0.5 Ch₂) .

Anal, calcul. para ^c]_ 5^23^7° ' 3HC1.0, 25H₂0 :

C, 41,77; H, 6.19; N, 22, 73; Cl 24, 66.

Determ: C, 41,51,-41,43; H, 5.88, 5.90; N, 22. 52, 22.48;

Cl 24.61.

Exemplo 47 (+)-cis-2-/ (2-amino-9-(4-hidroximetil)-2-ciclopenten-l-il)-9H-purin-6-il)amino/acetato de etilo

Refluxou-se numa atmosfera de azoto durante 2 dias uma solução de (+) - (c.is)-4- (2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol do E_xemplo 4 (4OO mg, 1,50 mmol), cloridrato de glicinato de etilo (237 mg,

1,70 mmol), e trietilamina (516 mg, 5,10 mmol) em etanol absoluto (10 ml). Evâporou-se o etanol e dividiu-se o resíduo entre uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio e clorofórmio. Secou-se o clorofórmio (MgSO^), evaporou-se e cromatografou-se o resíduo em gel de sílica. E^uiu-se o composto do título em 5 % de metanol clorofórmio sob a forma de um vidro amarelo pálico (240 mg, 43 %) que se solidificou para se obter um pó branco em éter de acetonitrilo? Pf. 95 - 97°C. Ή-RMN (DMSO-d,) S : 7.62 (s, 1, purina H-S), 7.43

J 'i (br, s, 1,NH), 6.10 (m, 1, =CH) , 5.34 (m, 3, =CH e NH_),

I ² j 5.37 (m, 1, CH-N), 4.73 (t, J=5.3, 1, OH), 4.08 (m, 4, OCH ij ²

J CH₃ e NCh^T2), 3,425 (t, J=5.5, 2, CH₂0H) , 2.85 (m, 1. CH) , í 2.60 e 1.60 (ambos m, 1 cada, .

ii d

! 1 j Anal, calcul. para ^G^5^2C'^W6°3^{: C}' 54,21; H, 6.07? N, 25,29. ί Determ : C, 54,45; H, 5,93; N, 25,07.

I

I ί Exemplo 48 j (+)-cis-dicloridrato de 4-(2-amino-õ-piperidino-9K-purin-9ί i -il)-2-ciclopenteno-l-metanol

I Refluxou-se numa atmosfera de azoto duI rante 1 hora uma solução de (+)-(cis)-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9-.il)-2-ciclopenteno-l-metanol do Exemplo 4 (399 mg, 1.50 mmol) e piperidina (298 mg, 3,5 mmol) em etanol absoluto (10 ml). A^icionou-se hidróxido de sódio 1 N e evaporou-se a solução à secura. C_romatografou-se o resícuo em gel de sílica. E]_uiu-se o compostod.o título em 10 % de metanol-clorofórmio sob a forma de um vidro amarelo pálido (0,30 g). A precipitação sob a forma de cloridrato do acetonitrilo produziu um pó branco (0,30 g, 52 %); Pf. dec a

175-18O°C ’Η-RMN (DMSO-dJ £ : 7.91 (s, 1, purina H-8) c

7.70 (br 3,2, NH₂) 6.2-6.1 e 5.9-5.8 (ambos m, 2, CH=CH) , 5.55-5.4 (br m, 1, CH-N), 5.4-3.8 (br m, NH⁺, 2CH₂N, OH), 3.5-3.35(m, 1, H-l'), 2. 75-2.55 (m, 1, 0.5 CH₂), 1.75-1.50 (m, 7, 3CH₃ e 0.5 CH ) .

A_nal. calcul.para C θΗ₂₂ΝθΟ.2ΗΟ1: C, 49, 62; H, 6,25; N, 21,70 Cl, 18, 31

Determ: C, 49, 54; H, 6,26; N, 21,64; Cl, 18.24.

Eyemplo 49 (+)-cis-4-/ 2-amino-õ-c-clopropiletilamino)-9H-purin-9-il/

-2-ciclopenteno-l-metanol

P_reparou-se uma amostra de N-ciclopropil-N-etilamina da forma seguinte: Agitou-se vigorosamente com arrefecimento (banho com gelo) enguanto se adicionava gota a gota anidrido trifluoroacético (50 ml, 0,36 mmol) durante 30 minutos, cáclopropilamina (18,44 ç, 0.323 mmol) carbonato de potássio (45,6 g, 0,33 mmol), e éfeer dietilico seco (250 ml). Adicionou-se água gelada (20 ml). S_eparou-se a fase de éter e secou-se (MgSO_Á). A concentração produziu um líijuido amarelo pálido (51,1 g) . Dissolveu-se uma porção deste líquido (15,3 g, ca. 0,1 mmole) em acetona seca (250 ml),.com iodeto cie etilo (46,8 g, 0,30 mmole) e aquecen-se a uma temperatura de 70°C (banho de óleo). Adicionou-se hidróxido de potássio em pó (16,8 g, 0,300 equiv.) . Continuou-se a agitar a uma temperatura de 70°C durante 30 minutos. Removeu-se por evaporação o excesso de iodo de etilo e a acetona. Adicionou-se água (100 ml) ao resíduo bad original

e refluxou-se a solução durante 15 minutos (banho de óleo a 110 °C) e manteve-se o refluxo durante 5 minutos. Arrefeceu-se a solução a uma temperatura de 25°C, saturou-se com cloreto de sódio, e extraíu-se com éter dietílico (3 x 100 ml). S_ecou-se a solução de éter (MgSO^) e evaporou-se para se obter um óleo amarelo pálido (1,86 g, 57 %) . 'H-RMN (DMSO-d,) á : 7.74 (o, J=6.0, 2, NCH CH ), 2.2-2.08 (m, 1, —o * —z 3

CHN), 1.97 (br s, NH +H₂0), 1.19 (t, J=6.0, 3, NCH₂CH₃),

l. 9-1.3 (m, 4, 2CH₂). Aqueceu-se essa amostra de N-ciclopropil-N-etilamina (1,26 g) com (+) - (cis)-4-( 2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol do Exemplo (544 mg, 2,00 mmol) em metanol (16 ml) numa bomba de Parr a uma temperatura de 75°C durante 11,5 horas. Adicionou-se hidróxido de sódio (1 N, 1,5 ml) e evaporou-se a solução à secura, Cromatografou-se o resíduo em gel de sílica. Eluiu-se o composto do título com 4 % de metanol-clorofórmio sob a forma de um vidro amarelo pálido que cristalizou com acetonitrilo; 298 mg (47%); Pf 152 - 154°C.

•H-RMN (DMSO-dg) S> : 7.64 (s, 1H, purina H-8), 6.11 e 5.88 (m, 2, HC-CH), 5.80 (br s, 2, NH₉), 5.42 (m, 1, NCH ciclopenteno), 4.75 (t, J=4.8, 1,OH), 3.94 (m, 2, NCZ^),

3.45 (m, 2, 0CH₂) , 3.05 (m, m, NCH ciclopeopano) , 2.87 (br m, 1, CH) , 2.60 (m, sobrepondo com DMSO, 0.5 GH^ ciclopenteno

1.56 (m, 1, 0.5 CH₂ ciclopenteno), 1.10 (t, J=6.9, CH ),

C.85 e 0.65 (m, 4, 2CH₂) .

Anal, calcul.para ^Gi6^{: I}22^K6^{O: C}' 61,13; H, 7.05; N, 26,73. Determ: G, 61,06; H, 7.07; N, 26, 66.

Exemplo 50 (+)-cis-trifluoroacetato de L-valinato de / 4-/2-amino-6-6-(ciclopropilamino)-9H-purin-9-il/-2-ciclopenten-l-il/-metilo u—

Agitou—se em cloreto de metileno seco (46 ml) durante 40 minutos N-butiloxicarbonil-L-valina ⁵⁶ _BAd OR'G'^NAL

(1.200 g, 5.19 mmol) e N, N-d 5 ciclohexilcarbodiiirtida (0,562 g, 2,73 mmol). Filtrou-se a mistura, lavou-se o precipitado com cloreto de metileno (8 ml), e evaporou-se à secura o filtrado lavado. Adicionou-se este sólido branco residual em duas partes a (+)-cis-4-(2-amino-6-(ciclopropilamino)-9H-purin-S-il)-2-ciclopenteno-l-metanol do E_xemplo5 (572 mg, 2,00 mmol), Ν, Ν'-dimetilformamida seca (19 ml) e 4-N, N-dimetilaminopiridina (20 mg, 0,16 mmol). Agitou-se a mistura reaccional a uma temperatura de 7,5°G numa atmosfera de azoto durante 69 horas, antes da adição de água (0,3 ml). Evaporou-se a solução à secura e dividiu-se o resíduo entre clorofórmio e NaHCO^ (2,5 mmol) em H₂0. Extraíu-se a fase aquosa com clorofórmio e secsram-se as fases orgânicas combinadas (MgSO^), e filtrou-se. A eluição em 4 % de metanol-clorofórmio produziu o derivado de N-butiloxi-carbonilo do composto do título sob a forma de uma espuma branca, (520 g) , Ή-RMN (Me₂SO-dg) <5 : 7,62 (s, 1, purina H-8),

7.30 (d» J=3.9, 1, NH ciclopropilamina) , 7.16 (d, J=7.9,l,

CHN), 6.08 e 5.95 (m, 2, HC=CH) , , 5.83 (br s, 2, NH₂),

5,42 (br m, 1, NCH), 4.13 (d, J=6.3,2, 0CH₂), 3.82 (t, J= = 7.4, 1, NCH de valil ), 3.0 8 (br m, 2, CH ciclopenteno, CHciclopropano), 2.69 (m, 1, 0.5 CH₂ ciclopenteno), 1.97 (m, 1, CHMe ₂), 1.60 (m, 1, 0.5 CH₂ ciclopenteno), 1.37 (s, 9* C(CH) ₃), 0.88-0.79 (sobrepondo d, 6, CH(ÇH₃) ), 0,64 e

0,59 (m, 4, 2CH₂ ciclopropano).

Dfssolveu-se este derivado (510 mg) em ácido trifluoroacético : cloreto de metileno/l:3 (“25 ml) e agitou-se a solução a uma temperatura de 25°C durante 30 minutos. D_a evaporação obteve-se uma espuma amarela (745 mg). Ή-RMN (DMS0-d₆) : $ 9,85 (br m, 1, NH), 8,37 (br, m, 3,

NH₂ ⁺ ), 8,01 (br ε, 1, purina H-8), 7.57 (br s, 2, NH₂),

6.17 e 6.02 (m, 2, HC=CH), 5.48 (m, 1, NCH ciclopenteno),

4,26 (m, sobrepondo br solvente, 0CH₂), 3,94 (br, m, sobrepondo solvente valil CH), 3.17 (m, 1, CH) , 2.9-2.68 (br m,

2, ciclopropil CHN, 0.5 CH₂ ciclopenteno), 2.14 (m, 1, CHMe ₂),

CAD

1.66 (m, 1, 0.5 CH₂ ciclopenteno), 0,94 (ra, o, CHHe₂, CH₂ ciclopropano), 0.70 (ra, 2, ciclopropil CH^).

A_nal. calcul. para C^gH₂^N^0₂·0.8H₂0.3.8 CF^CO^: C, 38, 35; H, 3.9 2; N, 11.77.

Determ.: C, 38, 25; H, 3.79; N, 11.80.

Exemplo 51 (+) -cis-4-/^-2-amino-6- (ciclobutilmetilamino) -9l-í-purin-9-il7 -2-ciclopenteno-l-metanol

Preparou-se uma amostra de N-ciclobutil-N-metilamino como a seguir se descreve. Agitou-se vigorosamente em éter dietilico seco (250 ml) numa acmosfera de azoto num banho géLtado enquanto se adicionava gota a gota anidridotrifluoroacético (10.7 ml) durante 20 minutos, ciclobutilamina (5,00 g, 68,9 mmol) e carbonato de potássio (13,3 g, 96,5 mmol). A^ic.onou-se água gelada (20 ml). S_eparou-se a fase de éter, secou-se (KgSO₄), e concentrou-se nma líquido incolor (11, 50 g). Dissol veu-ce este líquido em acetona seca (170 ml) com iodeto de metilo (40 g, 0.28 mmol) e aqueceu-se a uma temperatura de 40°C. Adicionou-se hidróxido de potássio em pó (16 σ, O, 28 equiv.). Continuou-se a aqitação a 40°C durante 45 minutos. Removeu-se por evaporação o excesso de iodeto de metilo e a acetona e adicionou-se água (75 ml) ao líquido e sólidos residuais. Refluxou-se a solução resultante 15 minutos (banho de óleo 11O°C) e refluxou-se durante 5 minutos. A_rrefeceu-se a solução à temperatura de 25°C, saturou-se com cloreto de sódio, e extraiu-se com éter dietilico (3 x 150 ml). S_ecou-se e solução de éter (MgSC^) e evaporou-se para color (3,72 g, 64 %) Ή-RMN (CDCl^)

CHN), 2.34 (s, 3, NCK₃) , 2. 27-2.03 (m, (m, 4, CH₂ e 2CH) .

- 58 : 3, 25-3.15 (1, 1, 2, 2CH), 1.8-1.6 u .c original^

Aqueceu-se essa amostra de N-ciclobutil-N-metilamina (510 mg, 6,0 mmol) com (+) - (cis)-4-( 2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-(ciclopenteno-l-metanol do Exemplo 4 (544 mg, 2,00 mpol) em metanol (16 ml) numa bomba de Farr a uma temperatura de 65°C durante 5,5 horas. Adicionou-se hidróxido de sodio (1 N, 2 ml) e evaporou-se a solução à secura. Cromatografou-se o resíduo em gel de sílica. E]_uiu-se o composto do título com 10 % de metanol-clorofórmio como uma espuma sólida amarelo pálido de acetonitrilo;

528 mg, 84% Ή-RMN (DMSO-d,-) 6 7.62 (s, 1, purina H-8) , —o

6.15-6.07 (m, 1, =CH), 6.0-5.7 (ni, 4, =CH, e ciclobutil CHN), 5.5-5.3 (m, 1, CHN), 4.77 (t, J=5.3,l, OH), 3.42 (m, 2, ÇH₂OH), 3.27 (s, sobreposto com H'₂O, N-CH ), 2.85 (m, 1, H-l¹), 2.7-2.5 (m, 1, C.5 ciclopentil CH₂), 2.4-2.0 (m, 4, 2 ciclobutil CH₂) , 1.7-1.4 (m, 3, 0.5 ciclopentil CK2 e ciclobutil CH₂) .

A_nal. calc. para O^H^N^O .O3H₂0.0.05 CH CH: C, 60.08;

H, 7.12; N, 26.33

Determ: C, 6C.O2, 59.97; H, 7.10, 7.13; N, 26.30, 26. 26.

Ή-RMN (DMSO-d ) é> : 7.58 (s, 1, H-8), 6.10 e 5.85 (2, m, sobrepondo s a 5.77, total 4. CH=CH e NH ), 5.40 (br m, 1, CH-N), 4.73 (t, J=5.3, 1, OH), 3.45 (m, 2, CH₂-O), 3.40-3.20 (m, sobrepondo CH₂~NH) , 2,85 (br m, 1, CH),

2.70-2.50 (m, sobrepondo solvente 0.5 CH₂) , 1.70-1.50 (m,

1, 0.5 CH₂, 1.20-l.C (m, 1, QÍ-CH HH), 0.45-0.20 (m, 2,

CH₂-CH₂ ciclopropil.

A_nal.calc. para ^G15^H2o^N6^{C: G/ 98; H/ 6}' ^{71; N/ 27} ·⁹⁸

Determ: C, 59,90, 59, 83; H, 6, 72, 6, 76; N, 27,91.

Exemplo 52 (+)-cis-trifluoroacetato de L-valinato de /^-4-/^_ 2-amino-6-(ciclopropilmetilamino)-9H-purln-9-il7-2-ciclopenteno-l-il)-metilo ^r -,- .-,ρύΘίΝΜ·

I

Agitou-se em cloreto de metileno (15 ml) durante 1 hora, N-butiloxicaobonil-L-valina (1,09 g, 5,0 mmol) e N, N-diciclohexilcarbodiimida (0,515 g,

2, 5 mmol) . Filtrou-se a mistura, lavou-se o precipitado com cloreto de metileno (10 ml), e evaporou-se o filtrado e lavou-se à secura. A^icionou-se a esta mistura (+)-cis-4-(2-amino-6-(ciclopropilmetilamino)-9H-purin-9-il/-2-ciclopenteno-l-metanol do Exemplo 29 (0,600 g, 2 mmol),

N, N-dimetilformamida seca (15 ml) e N, N-dimetilaminopiridina (5 mg, 0,04 mmol). Agitou-se a solução à temperatura ambiente numa atmosfera de azoto durante 16 horas. A^icionou-se H₂0 (1 ml) e concentrou-se a solução em vazio. Dividiu-se o óleo residual entre NaOH IN (2 ml) e clorofórmio (3 x 50 ml). Secaram-se os extractos de clorofórmio combinados (MgS0₄), evaporou-se o solvente e cromatografou-se o resíduo em gel de sílica. A eluição em 5 % de metanol-clorofórmio produziu o derivado bloqueado de N-butiloxicarbonilo do composto do título sob a forma de um sólido branco (0 , 750 g, 75 %) . Ή-RMN (DMSO-dJ : 7, 62 (s, 1, H-8),

-O

7.15 (d, J=8.2, 1,NH), 6.10 e 5.90 (2m, 2, CH=CH) , 5.79 (br s, 2, NK₂), 5.40 (br, m, 1, CH-N), 4.10 (5, J=6.4, 2, CH₂—O) _t 3.80 (m, 1, valil CH-N), 3.30-3.15 (m, sobrepondo s a 3.23, total 4, CH-N-Me), 3.10-3.0 (br m, 1, CH) , 2.75-2.55 (m, 1, 0.5 CH₂), 2.05-1.85 (m, 1, CHMe ) , 1.70-1.50 (m, 1,

O. 5 CH₂), 1.34 (m, 9, Cí'.e₃), 0.90 -0.60 (m, 10, CHMe₂ e ciclo propil CH₂). Dissolveu-se essa amostra (0,74 g, 1,5 mmol) em ácido trifluoroacético:cloreto de metileno/l:3 (25 ml) e agitou-se a solução à temperatura de 25°C numa atmosfera de azoto durante 30 minutos. Da evaporação resultou o composto do título sob a forma de uma espuma awarela (0,957 g, 37 %) Ή-RMN (DMSO-d, 5 : 8.38 (br, s, 3, NH₃ ⁺) , 8.0 (s, 1, H-8), 7.80-7.10 (br m, 2, NH ), 6.18 e 6.C (2m, 2, CH=CH), 5.48 (m, 1, CH-N), 4.26 (br d, J=õ.56, sobreposto com H₂0, CH₂-O), 3.93 (br m, 1, CH-N valil), 3.55 (br, s,

3, N-Me), 3.20-3.10 (br m, 2, CH e ciclopropil CH-N) , 2.79-2.69 (m, 1, 0.5 CH₂), 2 . 20 - 2.05 (m, 1, ÇHMe₂), 1.67-1.60 (m, 1, 0.5 CH₂) , 1.10-0.90 (m, 10,2 CH₃ e 2 ciclopropil CH₂) .

Anal.calcu. para ^C2O^K29^N7° 2* 2·ΟΗ₂Ο .0.4 Et0H.2.õ0 CF^ CO/H: C, 42.74; H, 4.95; N, 13.39

Determ; C, 42, 63; H, 4,91; N, 13,42.

Exemplo 53 (+) -cis-4- (2-amino-õ-ciclobutiltio) -9H-purin-9-il) -2-ciclopenteno-1-metanol

Agitou-se em azoto durante 24 horas a uma temperatura de 25°C, uma mistura de (+)-cis-cloridrato de 2-amino-l,9-dihidro-9-/~(4-hidroximetil)-2-ciclopenten-l-il7-õH-purin-6-tiona do Exemplo 9 (500 mg, 1,45 mmol), carbonato de potássio (600 mg) e brometo de ciclobutilo (0,98 g, 7,25 mmol) adicionando em 5 partes durante 18 horas em N, N-dimetilformamida seca (20 ml). Removeu-se sob presssão reduzida a N,N-dimetilformamida. D£vidiu-se o óleo residual entre clorofórmio e água. S₉cou-se a fase de clorofórmio em (MgSO^) e concentrou-se para se obter um vidro amarelo que se cromatografou em gel de sílica. E^uiu-se o composto do título em 6% de metanol-clorofórmio e cristalizou-se quatro vezes de acetonitrilo para se obterem grânulos amarelos pálidos (0,115 g, 25 %) , Pf 159 - 160°C. Ή-RiíN (DMSO-d J :

^—6

7.81 (s, 1, H-8), 6.41 (br, s, 2, N^), 6.10 e 5.35 (2 m, 2, CH=CH), 5.40 (br m, 1, CH-N), 4.69 (_t, J=5.3) sobrepondo 4.60 - 4.50 (m, total 2, OH e S-CH), 3.45 (m, 1, CH -0), 2.30 (br, m, 1, CH) , 2.70-1.90 (m, sobrepondo solvente,

0.5 CH₂ e 3 ciclobutilo CH₂) , 1.70-1.50 (m, 1, 0.5 CH^) .

Anal. calc. para C^^H gN^OS: C, 56.76; H, 6.03; N, 22.06:

S, 10.10.

D_eterni; C, 56,75; H, 5.07; N, 21.98; S, 10.04.

Exemplo 54 (+)-cis-4- (2-amino-6- ( (2, 3-dihidropropil) amino)-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-1-metanol

Refluxou-se durante toda a noite numa atmosfera de azoto uma solução de (+)-cis-4- (2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ciclocentsno-l-metanol do S_xemplo 4 (O,544, 2 mmol), 3-amino-l,2-propanodiol (1,87 mg, 2 mmol), trietilamina (607 mg, 6 mmol) e metoxietanol (6 ml). A^icionou-se NaOH IN (2 ml) e concentrou-se em vazio e secou-se por evaporação do etanol. Cromatografou-se o óleo residual em gel de sílica. Eluiu-se o composto do título em 20 % de metanol-clorofórmio: da cristalização do acetonitrilo-metanol resultou um pó branco (0,300 g, 47 %, Pf. 119 - 121°C, Ή-RMN (DMSO-dg) è ·. 7,60 (s, 1, H-8), 6.90 - 6.80 (br m, 1, NH) , 6.10 (m, 1, =CH),

5.85 (m, 3, =CH e NH ), 5.40 (br m, 1, GH-N), 4.90 (m, 1, OH) 4.72 (t, J=5.3, 1, OH), 4.62 (t, J=5.9, 1, OH), 3.7-3.25 (todos m, sobrepondo Η₉ϋ, 2CH₂~O e CH-O), 2.85 (br m, 1, CH) , 2.70-2.50 (m, sobrepondo solvente 0.5 CH₂) , 1.70-1.50 (m, 1, 0/5 CH ) .

Anal.calc. para C. .H_N_r0 _0.5H O : C, 51.06; H, 6.43? N, 25.52 14 ZO 6 3 2

Determ: C, 50,99; 50,96; H, 6,45, 6,49; N, 25,42, 25, 36.

Exemplo 55 (+) -cis-4-/ 2-a’!:ino-6-ciclopropilamino) -3-metil-9H-purin-9-i_l/- 2- ciclopenteno-l-metanol

Agitou-se (+) -cls-4-/~ ( 2, 5-diamino-4- cloro-6-pirimidinil)amino/-2-ciclopenteno-l-mstanol preparado como no Exemplo 3 (1,12 g, 4,38 mol) em N, N-dimetilformamida (5 ml) com ortoacetato de trimetilo (30 ml) e ácido etano sulfónico (0,66 g, 5,7 mmol) a temperatura de o

0 durante 3 dias. 2_vaporou-se a solução resultante obtendo-se um. xarope amarelo. Adicionou-se anidrido acético (20 ml) e refluxou-se esta solução durante 2, 5 horas. Evaporou-se a solução escura resultante para se obter um xarope, que se dissolveu em ácido clorídrico 1 N (5O ml). Após 24 horas, ajustou-se o pH a 6 com hidróxido de sódio e evaporou-se a

- 62 BAD ORIGINAL maior parte da água. Sxtraíu-se o produto bruto em 20 % de álcool isopropílico-clorofórmio. Secou-se esta solução (MgSO^) e evaporou-se o solvente para se obter (+) -cis-4—

-(2-amino-6-cloro-3-metil-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-I-metanol sob a forma de um vidro amarelo pálido (0,30 g) : confirmada a estrutura por Ή-RMN. Djssolveu-se esta amostra em metanol (10 ml) e agitou-se numa bomba de Parr com ciclopropilamina (1 ml) a uma temperatura de 70°C durante 12 noras. Da evaporação e cromatografia em gel de sílica obteve-se o composto de título, eluindo sob a forma de uma espuma sólida de cor creme (136 mg) em 5 % de metanol-clorofórmio. Ή-RMN (DMSO-dg) 5 : 7.13 (d, J=4.6, 1, NH), 6-02 e 5.34 (ambos m, 2, CH=CH), 5.68-5.56 (m, 3, NH₂ e CH-N), 4.35 (t, 1, CH₂0H) , 3.53 (m, 2, CH OH), 3.02 (m, 1, CH-N de ciclopropil), 2.88 (m, 1, CH), 2.5 (m, sobrepondo solvente 0.5 ciclopentil CH₂) , 1.72 (m, 1, 0.5 ciclopentil CH₂),

0.7-0.5 (m, 4,2 ciclopropil CH₂) .

Anal. calc. para C^^H^N^O .0.25082^0H; 0,065 H₂0 C, 57, 23; H, 7.02; N, 26. 26.

Determ: C, 57.55; H, 6.99; N, 25, 95.

Sxemplo 56 (+)-cis-4-(2-amino-6-((2-nidroxi-l-hidroximetil)etil)amino)⁹ 29H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-l-metanol

Agitou-se uma solução de cloridrato de serinol (0,765 g, 6,00 mmol) em metanol (20 ml) com uma resina de permuta iónica básic3 durante 10 minutos. Filtrou-se a resina e concentrou-ss oriltrado para um óleo incolor. Adicionou-se a este óleo (+)-cis-4-(2-amino-6-cloro-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-I-uistanol (0,544 g, 2,00 mmol) e metanol (10 ml). Agitou-se a solução resultante numa bomba de Parr a uma temperatura ds 80°C durante toda a noite. Adicionou-se NaHG IN (2 ml) e evaporou-se o solvente, Cromatogra· fou-se o resíduo em gel de sílica. E]_uiu-se o composto do

BAU ORIGINAL * título em 20 % de metanol-clorofórmio; da cristalização do acetonitrilo-metanol obteve-se um pó branco (0,404 g, 63 %, ) Pf 16O-162°C. Ή-RMN (DHSO-dg) S : 7. 60 (s, 1, H-S), 6.33 (m, 1, NH) , 6.10 (m, 1, =CH), 5.90-5.75 (m, sobreposto por s a 5.3; total 3, =CH e NH?) , 5.40 (br m, 1, CH-N), 4.70 (m, 3 OH), 4.20 (br m, 1, CH-NH) , 3.60-3.40 (2 m 6,3 CH₂-0) , 2.75 (br m, 1, CH), 2.70-2.50 (m, 1, 0.5 CH,.), 1.65-1.50 (m, 1, 0.5 CH?) .

Anal. calc. para ^4-^20 ^W6°3^{: C/} 52,49; H, 6.29; N, 26, 24. D_eterm: C, 52,3 3; H, 6,33; N, 26, 23.

Exemplo A

Formulação para comprimidos

A_s formulações seguintes, A, B e C são preparadas porgranulação húmida dos ingredientes com uma solução de povidona, seguida de adição de estearato de magnésio e compressão.

bad ORIGINAL

- 64 t

Formulação A mq/comprimido mq/comprimido

(a) Ingrediente Activo	250	250
(b) Lactose 3.?.	210	26
(c) Povidona 3.P.	15	9
(^) Amido Glicolato de Sodio	20	12
(e) Estearato de magnésio	5	3

500 300

Formulação B mq/comprimido mq/comprimido

(a) Ingrediente Activo	250	250
(b) Lactose	150	-
(p) Avicel PH 101	60	26
(d) Povidona 3.P.	15	9
(e) Amido Glicolato de sódio	20	12
(f) Estearato de Magnésio	5	3
	500	300
Formulação G	mg/comprimido
Ingrediente activo	ioo
Lgctose	200
Amido	50
Povidona	5
Estearato de magnésio	4

359

A_s formulações seguintes, D e Ξ, preparam-se por compressão directa dos ingredientes misturados. A lactose na formulação S é do tipo de compressão directa (Dairy Crest - Zeparox).

Formulação D mg/comprimido

250

Ingrediente activo

Amido pré-gelatinizado	150
	400
Formulação S
	mq/comprimido
Ingrediente activo	250
Lactose	150
A vicei	100
	500
Formulação F (Formulação de Lib	ertação Controlada)
A formulação é preparada por -
húmida dos ingredientes (ver a	seguir) com uma sol
povidona seguido pela adição de	estearato de magné
compressão.
	mo/comprimido
(a) Ingrediente activo	500
(b) Hidroxipropilmetilcelulose	112
(Methoesl K4M Premium)
(c) Lactose 3.P.	53
(d) Povidona 3.P.	28
(e) Estearato de magnésio	7

700

A libertação do medicamento tem lugar durante um período de cerca de 6-8 horas e está completo após 12 horas.

Exemplo B

Formulações para cápsulas

Formulação A

A formulação para uma cápsula prepara-se misturando os ingredientes da Formulação D do Exemplo A de cima e introduzindo numa cápsula de gelatina dura de duas partes. A Formulação 3 abaixo prepara-se de modo semelhante.

Formulação 3	mg/cápsula
(a) Ingrediente activo	250
(b) Lactose B.P.	143
(c) Amido de Glicolato de sódio	25
(5) Estearatode magnésio	2 4 20
Formulação C	mg/cápsula
(a) Ingrediente activo	250
(b) Macrogol 4000 3.P.	3 50

600

As capsulas com a formulação C são preparadas aquecendo o Macrogol 4000 BP, dispersando o ingredien te activo no fundido e introduzindo o fundido em cápsulas de gelatina dura de duas partes.

Formulação D

mq/cápsula

Ingrediente activo

Lecitina

ó]_eo de Amendoim

250

100

100

50

A_s cápsulas com a formulação D são preparadas dispersando o ingrediente activo na lecitina e óleo de amendoim e introduzindo a dispersão em cápsulas de gelatina macias e elásticas.

Formulação E (Capsulas de Libertação Controlada)

A seguinte formulação para cápsulas de libertação controlada é preparada extrudindo cs ingredientes a, b e c utilizando um extrusor, seguido da esferonização do extrudido e secando. Os agregados secos são em seguida revestidos com uma membrana de libertação controlada (d) e introduzidos em cápsuias de gelatina durade duas partes.

mq/cápsula

(a)	ingrediente activo	250
(b)	Celulose microcristalina	125
(c)	Lactose S.P.	125
(d)	Etil celulose	13

513

Sxemplo C

Formulação Injectável

Formulação A

BAD original

Ingrediente activo

Solução de ácido clorídrico Ο.ΙρΊ ou solução de hidróxido de sódio 0.1 g.s a pH

4.0 a 7.0

Água esterilizada q.b. até 10 ml

Dissolve-se o ingrediente activo na maior parte da água (35 - 40°C) e ajusta-se o pH entre 4,0 e 7,0 com o ácido clorídrico ou hidróxido de sódio como apropriado. Perfaz-se em seguida o lote a volume com água e filtra-se através de um filtro micro poro esterilizado num frasco de vidro âmbar esterilizado 10 ml (tipo I) e sela-se com tampas e selagens esterilizadas.

Formulação 3

Ingrediente activo 0.125 g

Tampão de fosfato esterilizado, sem pirogénio pH 7, q.b. até 25 ml

Exemplo D

Injecção intramuscular

Ingrediente activo

Álcool benzílico

Giicofurol 75

Água para injecções q.b. para

O. 20 g

O. lo g

1,45 g

3.00 ml

Dissolve-se o ingrediente activo em glicofurol. Adiciona-se em seguida o álcool benzílico e dissol ve-se, e adiciona-se água até 3 ml. Filtra-se em seguida a mistura através de um filtro microporo esterilizado e introduz-se em frascos 3 ml de vidro âmbar selados e esterilizados (tipo 1).

- 69 BAD ORIGINAL i

ί

J Exemplo Ξ

XH£2£g.

Ingrediente activo Solução de sorbitol

Glicerol

Benzoato de sódio

A_roma, pêssego 17.42.3169 Água pura g.b. até

0.25 g

1. 50 g

2.00 g

0.005 g

0.0125 ml

5.00 ml

Dissolve-se o ingrediente activo numa mistura de glicerol e muita água purificada. Adiciona-se em seguida à solução, uma solução aquosa de benzoato de sódio, seguido da adição ds solução de sorbitol e finalmente o aroma. Perfaz-se a volume com água purificada e mistura-se bem.

Exemplo F

Supositório mg/suposltório

Ingrediente activo (63 jam)* 250

G_ordura dura, 3P (witepsol H15 - Dynamit NoBel) 17 70

20 * O ingrediente activo á utilizado sob a forma de um pó em que pelo menos 90% das partículas tem diâmetro de 63 um ou inferior.

F_unde-se um quinto de Witepsol H 15 num recipiente com camisa de vapor a temperatura máxima de o . ,

G. Peneira-se o ingrediente activo através de um peneiro de 200 _zum e adiciona-se a uma base fundida com agitação, utilizando um agitador com cabeça cortante, atá se atingir uma

- 70 BAD ORIGINAL ^f j

dispersão fluída. M_antem-se a mistura a uma temperatura de 45°C, adiciona-se o restante Witepsol à suspensão e agita-se para se obter uma mistura homogénea. P_assa-se toda a suspensão através de rede de aço inoxidável de 250 /im e, com agitação contínua, deixa-se arrefecer à temperatura de 40°C. À temperatura de 33°G a 4o°G, introduzem-se 2,0 2 g da mistura em poldes de plástico de 2 ml adequados. Deixam-se os supositórios arrefecer para a temperatura ambiente.

Exemplo G

Pessários

Inqrediente activo (53 jjm)

Anidrato de Dextrose

Amido de batata

Estearato de magnésio mq/pessário

250

330

363

1000

Misturam-se os ingredientes referidos acima directamente e preparam-se os pessários por compressão directa de mistura resultantes.

Actividade A_nti-viral

E_nsaiam-5e os compostos dos Exemplos 5 e 6 para determinação da sua actividade anti-HIV em células MT4 ger dmente de acordo com o método descrito por Mitsuya e col., Proc. Hat. Acad. Sei.; USA Vol. 82, pp 7095-7100, Outubro de 1985, e verificou-se que tinham valores de ΙΟ^θ de 32,7 _zum e 13.7 jum, respectivamente. Uma determinação repetida do composto do Exemplo 5 deu o valor de 11 ^im.

A determinação da actividade anti-HBV é efectuada ensaiando a capacidade do composto na prevenção da replicaçâo de H3V de pato in vitro, de modo descrito por

BAD ORIGINAL

i’i Tuttleman, Pugh e Summers (Journal of Virology, 58:17-25, i; 1986). Obtiveram-se hepatócitos de pato e colocaram-se em í cultura, infectaram-se com H3V de pato. Após três dias de j infecção, as células infectadas foram expostas a várias concentrações do composto de ensaio por um período adicional

II z 4 ii de oito dias. Apos esta exposição, extraiu-se o ADN de cada !i cultura de células infectadas e composto, e a quantidade de

1} , !| ADN virai e especificamente determinado e comparada com a í: obtida de culturas semelhantes sem o composto de ensaio.

ίΐ !Í | Dados de Toxicidade i

Dotermlnação da Inibição do Crescimento de Células de MamíI feros Não-Infectados !

ί

I Mediu-se a capacidade dos compostos

II candidatos da inibição do crescimento de células D98 (humanas) e células L (murinas) por determinação do número de células após três dias de exposição de um número padrão de células [ para várias diluições do composto (Rideout, J. L., Krenitsky, li Τ. A., Kaszalka, G. W., Conh, N. K., Chao, Ε. Y. Elion, G.3., [( Latter, V. S., e Williams, R. B. (1982) J. Med. Chem. 25:

ii 1040-1044). Comparou-se em seguida o número de células com ί o número obtido na ausência do composto. A enumeraç 3.0 ÓâS Cô~ '! lulas foi efectuada quer oela contagem directa das partículas í

! seguida da tripsinização da mono fase, quer por determinação espectrofotométrica da quantidade de manchas vitais absorvidas pelas células. Obtiveram-se resultados comparáveis em j ambos os processos.

I

Análise de D_ados i

Calculou-se a concentração do composto gue resulta em 50 % dos valores de controle (IC50) quer por interpolação directa de gráficos do lagoritmo da concentração do composto em função da percentagem do valor do controle,

BAD ORIGINAL ou a partir de um programa de computador que analisa os dados de acordo com o mesmo algoritmo. Ultisou-se nestes cálculos, dados na gama cfe 20% a 30% do controle.

E saiaram-se todos os compostos nas células D-98 e verificou-se c?ue possuíam um valor de IC^ 50 /· 100 /jm.

Claims (2)

1. REIVINDICAÇÕES

   Frocesso para a preparação de um composto com a fórmula (I) na qual R representa

   - 73 BAD ORIGINAL

   S*5»H3nt».

   e R representa um alcóxi ₅ de cadeia linear ou ramificada, opcionalmente substituida por alcóxi ^ou· cicloalquilo ^C3_6' cicloalquilo ^c3_g* cicloalquiloxi ^c3_g/ arilo, i, aralquilo ou aralqniloxi em que o arilo pode opcionalmente ser substituido com alquilo hidroxi ou halogéneo, alcenil tio, cicloalquil C g tio, alquil C tio, ariltio ou aralquiltio em que o arilo pode opcionalmente ser substituido com alquilo C, _Λ, hidroxi, halogéneo ou 2 nitro, ou R representa um grupo heterocíclíco contendo um átomo de oxigénio ou urn ou dois átomos de azoto, e 3-7 átomos de carbono com uma dupla ligação opcional no anel e contendo opcionalmente um ou dois heteroátomos escolhidos de entre enxofre e oxigénio e opcionalmente substituido no anel por um ou mais grupos alquilo hidroxi ou halogénio, cicloalquil C₃_g tio, aralquiltio em que o arilo pode ser substituido com alquilo C·^, hidroxi ou halogénio, ou R² representa um grupo imidazoliltio em que o radical imidazoliào pode ser substituido com um ou mais substituintes escolhidos de entre alquilo C , e C-substituido com nitro,
2. 2 i^—+ ou R representa um grupo amino que é mono- ou di-substituido por um ou mais substituintes escolhidos de entre alquilo

   C₃_₆, alcóxi C₁_₆, hidroxialquilo, cicloalquilo C₃_₇ opcionalmente substituido por alquilo C^_g, arilo, aralquilo em que o arilo pode opcionalmente ser substituido com alauilo ^cl_4' hidroxi ou halogéneo, alilo opcionalmente substituido com grupos mono- ou di-alguilc ou alcóxi, e R² representa hidrogénio, amino ou alquilo C , ou de um seu derivado far1— o maceuticamente aceitável, caracterizado por:

   à) tratar-se um composto com a fórmula (II)

   BAD ORIGINAL

   12 ζ na qual R e R são como atrás definidos e Z representa 2 um grupo precursor para o referido R com um agente ou sob condições que sirvam para converter o grupo precursor 2

   Z no grupo R desejado, ou Z representa um grupo tio que pode ser substituído com um grupo apropriado para se formar um composto com a fórmula (l)em. que R ' é ura grupo tio substituído ou,

   B) fazer-se reagir um composto com a fórmula (III)

   R¹

   NH.

   (III)

   NH

   I

   ΚΙ 2 X na qual R e R são como atrás definidos, cu um seu derivado farmaceuticamente aceitável, com um agente que sirva para as efectuar a formação do anel de imidazole com composto com a fórmula (i) desejado, ou quando se formar um composto com a fórmula (I), converter-se o referido composto num seu derivado farmaneuticamente aceitável, ou bad OR'^g'^NAL

   i) ii) quando se formar um derivado farmaceuticamente aceitável de um composto com a fórmula (i), converter-se o referido derivado no composto mãe com a fórmula (I) ou noutro desess derivados.

   Processo de acordo comi a reivindicação 1, caracterizado por representar

   - 3s F_rocesso de acordo com as reivindicações 1 ou 2 para a preparação de um composto com a fórmula:

   R representar hidrogénio, amino ou alquilo G^_g, R representar cicloalquilo e R^ representar um átomo de hidrogénio ou um substituinte escolhido de entre alquilo C₃_g, alcoxi C, ,, hidroxialouilo CL cicloalquilo CL opciol-o l-o 3-0 nalmente substituído por alquilo CL arilo, aralquilo em

   1- o que o etilo pode opcionalmente ser substituido com alquilo C^_₄, hidroxi ou halogeneo, alilo opcionalmente substituido com grupos mono- ou di-aiguilo ou alcoxi, ou um seu derivado farmaceuticamente aceitável.

   ; - 42 _ í

   i

   Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter nomeadamente o (+)-cis-4-(2-amino-6-ciclopropilamino)-9H-purin-9-il)-2-ciclopenteno-S-metanol.

   - 5ã Processo para a preparação de uma composição farmacêutica caracterizado por se incorporar como ingrediente activo um composto com a fórmula (I) bad originw- 77 na qual R representa e R representa um alcóxi de cadeia linear ou ramificada, opcionalmente substituido por alcóxi C^_g ou cicloalquilo cicloalquilo C₃_g, cicloalquiloxi C₃_g, ariloxi, aralquilo ou aralquiloxi em que o arilo pede opcionalmente ser substituido com alquilo C , hidróxi ou halogéneo, alceniltic, cicloalquilo ^^-6 alquil ^Cj__g tio, ariltio ou aralquiltio em que o arilo pode opcionalmente ser substituido com alquilo C ,, hidróxi, halogéneo ou nitro, ou R^z

   1- -X representa um grupo heterociclico contendo um átomo de oxigénio ou um ou dois átomos de azoto, e 3-7 átomos de carbono com uma dupla ligação opcional no anel e contendo opcionalmen te um ou máis heteroátomos escolhidos de entre enxofre e oxigénio e opcionalmente substitido no anel por um ou mais grupos alquilo C^_^, ⁿãbroxi ou halogéneo, cicloalquil C₃ tio, aralquiltio em que o arilo pode ser substituido com alquilo C^_₄, hidróxi ou halogéneo, ou í< representa um grupo imidazoliltio em que o radical imidazolilo pode ser substituido com um ou mais substituintes escolhidos de entre 2 alquilo e C-substituida com nitro, ou R representa um grupo amino que é mono- ou di-substituido com um ou mais

   - 78 BAD ORIGINAL substituintes escolhidos ds entre alquilo C. alcoxi C.

   l—o l—o hidroxialouilo C. cicloalquilo C_, _ opcionalmente subsl-o * 3 -7 tituido oor alquilo C. arilo, aralquilo em que o arilo pode opcionalmente ser substituido com alquilo hidroxi ou halogéneo, alquilo opcionalmente substituido com outros 3 grupos mono- ou di-alquilo cu alcoxi, e R representa mdrogénio, amino ou alquilo ou de um seu derivado farmaceuticamente aceitável que compreende preparar-se o referido composto por meio de um processo que envolve:

   A) tratar-se um composto com a fórmula (li) (II) na qual R e R são como atrás definidos e 2 re2 presenta um grupo precursor para o referido R com um agente ou sob condições que sirvam para converter 2 o grupo precursor 2 no grupo R desejado, ou 2 representa um grupo tio que pode ser substituido com um grupo apropriado para se formar um composto com a fórmula (i) em que R é um grupo tio substituido, ou

   B) fazer-se reagir um composto com a fórmula (III) (i) ii) na qual R e R são como atrás definidos, ou um seu derivado farmaceutlcamente aceitável, com um agente que sirva para se efectuar a formação do anel imidazole no composto com a fórmula (l) desejado, ou quando se formar um composto com a fórmula (I), converter-se o referido composto num seu derivado farmaceuticamente aceitável, ou quando se formar um derivado farmaceutlcamente aceitável de um composto com a fórmula (I), converter-se o referido derivado no ccmposto mãe com a fórmula (i) ou noutro desses derivados, em associação com pelo menos excipiente farmaceutlcamente aceitável.