PT87592B

PT87592B - Processo para a preparacao de compostos antivirais de arabinosidos de purina substituidos e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT87592B
Application number: PT87592A
Authority: PT
Inventors: Thomas Anthony Krenitsky; George Walter Koszalka; Deveron Randolph Averett; Allan Ray Moorman; Lynda Addington Jose
Original assignee: Wellcome Found
Priority date: 1987-05-30
Filing date: 1988-05-27
Publication date: 1992-09-30
Also published as: NL300302I2; CA1330990C; ES2091750T3; CY2001A; US5424295A; PT87592A; FI882511A0; CS8803635A2; NO172543C; DE122008000003I1; NO882357L; ZA883829B; JP2667873B2; MY103567A; PL157684B1; SA99200688A; IL86531A0; KR970009474B1; GB8712745D0; LU91370I2

Description

Memória descritiva referente à patente de invenção de THE WELLCOME POUNDATION LIMITED, bri tânica, industrial' e comercial, com sede em 183-193 Euston Road, London, NW1 2BP Inglaterra, para PROCESSO PARa A PREPARAÇÃO DE

COMPOSTOS ANTIVIRAIS DE ARABINÕSIDOS DE PURINA SUBSTITUÍDOS

E DE COMPOSIÇOES PARMACEUTICAS

QUE OS CONTÊM.

MEMÓRIA descritiva

A presente invenção refere-se á preparação de certos arabinósidos de purina substituídos, e dos seus derivados fisiologicamente aceitáveis em particular ésteres, referindo ainda a sua utilização no tratamento de certas doenças provocadas pelo virus de ADN.

virus da varieela-herpes zoster (VZV) que causa a varicela e cobreiro ê um virus de ADR da família dos herpes. A varicela ê a doença principal causada pelo VZV num hospedeiro sem imunidade; ela é habitualmente uma doen ça benigna das crianças que se manifesta com febre e borbulhas com desejo de coçar. 0 herpes zoster (cobreiro) é a forma recor rente da doença que ocorre em adultos que foram previamente in fectados com o virus de varicela-zoster. As manifestações clínicas desta infecção são caracterizadas por neuralgia e borbulhagem vesicular da pele que é unilateral e dermatomal na sua distribuição. A propagação da inflamação pode levar a parilisia

PA

ou convulsões e coma, se as meninges fossem infectadas.

Nos pacientes imunodeficientes o vírus pode disseminar-se provocando doenças graves e por vezes fatais. A causa da imunodeficiência pode ser devida a medicamentos utilizados em pacientes de transplantes ou no tratamento de neoplasmas malignos, ou doenças, como a SIDA, que destroem o sistema imunológico, deixando a vitima vulnerável a in fecções que em principio não seriam perigosas.

cetomegalovirus (CMV) e outro vírus da família do herpes. A infecção pode ser adquirida na infância ou adolescência e, no feto, e a infecção intrauterina e provavelmente a forma mais comum da infecção, mas atê cerca de 90% das infecçoes congénitas são assintomáticas no nascimento. A infecção principal da mãe durante a gravidez é geralmente considerada de muito risco para o bébê não-nascido, enquanto na reactivação as infecçoes do feto são habitualmente clinicamente despercebidas. Os efeitos clínicos variam desde a morte e grave doença (microcefalia, hepatosplenomegalia, icterícia, atraso mental) por falha de crescimento, susceptibilidade a in fecções do peito e do ouvido atê uma falta de efeito óbvio de doença. Em jovens adultos ela pode não se manifestar ou manifestar-se como febre glandular como as doenças que resultam de contacto físico íntimo.

Infecçoes igualmente sérias podem também ocorrer devidas a reactivação do vírus dormente em pacientes imuno-comprometidos como descrito para as infecçoes por VZV. Essas infecçoes resultam em maior morbidade e fatalidade por retinite, pneumonia e doenças gastro-intestinais.

Verificou-se agora que certos nucleósidos de arabino-purina descritos a seguir caracterizados pela presença de grupos substituídos nas posições -2 e -6 do anel de purina têm actividade potente contra infecçoes por vírus hu manos particularmente os causados pelo vírus da varicela zostei (VZV) ou citomegalovirus (GMV).

Certos nucleósidos de arabino-purina substituídos, em particular a 9-f^-D-arabinofuranosil-6-metoxi2

-9H-purina, 9-^-D-arabinofuranosil-6-pirrolidino-9H-purina, 9-fi-D-_ar_abinofuranosil-6-metilamino-9H-purina e 9-@~D-arabinofuranosil-6-dimetilamino-9H-purina descritos a seguir para a sua utilização no tratamento de infecções por VZV e CJAV, foram previamente descritos em J. Org. Chem. Vol. 27 3274-9 (1962), Câncer Treatment Rep. 60 (10), 1567-84, (1976), Tetrahedron 40 (4), 709-13, (1984), Canada J. Biochem 43(1), 1-15, (1965), J. Med. Chem 12, 498-504, (1969), J. Biol. Chem. 251(13), 4055-61, (1976), Ann. N.Y. Acad. Sei. 284, 81-90, (1977), EP002192, US 3666856, US371613, US3758684.

Assim num primeiro aspecto a presente invenção refere-se a um composto com a fórmula (I):

OH (I) na qual RI representa um átomo de halogéneo (poi’ exemplo cloro ou iodo), um grupo alcoxi C^__^ (por exemplo metoxi ou etoxi),

etoxi); um grupo amino que é mono- ou dissuhstituido por alquilo (por exemplo metilo ou etilo), alquilo C-^_^ substituido com um ou mais átomos de flúor (por exemplo 2-fluoroetilo ou 2,

2,2-triíluoroetilo), ou cicloalquilo (por exemplo ciclopro pilo), ou o membro amino de um anel contendo 4-7 átomos de carbono e opcionalmente uma dupla ligação (por exemplo pirrolidino) e/ou um átomo de azoto adicional, e R2 representa hidrogénio, halogéneo ou amino, e os seus derivados fisiologicamente aceitáveis para 0 tratamento ou profilaxia de infecções virais humanas causadas por VZV ou CmV.

A presente invenção também inclui os compostos de fórmula (I) em que R2 é hidrogénio e RI é metoxi, piperidino ou pirrolidino e quando R2 é amino e RI é cloro e os

seus sais farmaceuticamente aceitáveis para utilização em terapia médica.

Na fórmula (I) acima os grupos alquilo (incluindo os dos agrupamentos alcoxi, alquilamino ou dialquilamino) são preferivelmente os grupos metilo, etilo ou propi lo.

Os compostos preferidos de fórmula (I) incluiem aqueles em que:

a) R2 é hidrogénio, e

b) RI ê alcoxi C·^ especialmente metoxi, ou

c) RI é alquilo C-^-amino especialmente dimetilamino, ou:

d) RI ê halogéneo, especialmente iodo.

Os seguintes compostos são compostos preferidos da presente invenção em virtude da sua actividade antiviral potente contra V2V ou CMV:

1) 9--D-arabinofuranosil-6-metilamino-9H-purina,

2) 9-^-D-arabinofuranosil-6-dimetilamino-9H-purina,

3) 9-ΉD-arabinofuranosil-6-metoxi-9H-purina,

4) 9—P—D—arabino furano sil-6-et oxi-9H-purina,

5) 9-f-D-arabino furano sil-6-iodo-9H-purina,

6) 9-P-D-arabino furano sil-2-amino-6-io dop urina,

7) 9--D-arabino furano sil-6-pirro1idino-9H-purina,

8) 9-(J -D-arabinofuranosil-2-cloro-ó-metilamino-9H-purina,

9) 9-$-D-arabino furano sil-6-ci clop rop ilamino-9H-purina,

10) 9-Ç-D-arabino furano sil-6-e t ilmetilamino-9H-purina,

11) 9-P“D-arabino furano sil-2-amino-6-metoxi-9H-purina,

12) 9-P>-D-arabinofuranosil-6-n-propoxi-9H-purina.

Nos compostos acima numerados, os • compostos 2), 3) e 5) são especialmente preferidos. A presente

- 4 invençSo também inclui os novos compostos de fórmula (I) e os seus derivados fisiologicamente aceitáveis particularmente os compostos 4), 5), 6), 8), 9), 10), 11) e 12) acima apresentados.

Num segundo aspecto a presente invenção também apresenta os novos compostos de fórmula I (a)

OH na qual Rl representa um átomo de halogéneo (por exemplo cloro ou iodo), um grupo alcoxi 0j_-5 (P°^{r exem}pl° metoxi ou etoxi), alcoxi G^_^substituido com halogéneo (por exemplo trifluoroetoxi) um grupo amino que é mono- ou dissubstituido por alquilo ^1-5 (Ρ^0Γ θ^χθωρ1θ metilo ou etilo), alquilo ¢-^-5 substituido por um ou mais átomos de flúor, (por exemplo 2-fluoroetilo ou

2,2,2-trifluoroetilo), ou cicloalquilo (por exemplo ciclopropilo), ou o membro amino de um anel contendo 4-7 átomos de carbono e opcionalmente uma dupla ligação (por exemplo pirroliàino) e/ou um átomo de azoto adicional, e R2 representa hidrogénio, halogéneo ou amino desde que quando R2 for hidrogénio,

Rl não representar cloro, metoxi, metilamino, etilamino, dimetilamino, piperidino ou pirrolidino e quando Rl for amino, R2 não representar cloro ou metilamino, e os seus derivados fisiologicamente aceitáveis diferentes de derivados de 2*, 3*, 5»-triacetato e tribenzilo dos compostos de fórmula I (a) em que Rl é cloro ou flúor quando R2 for cloro, flúor, hidrogénio ou amino.

A presente invenção inclui ainda um composto de fórmula I(a) para uso em terapia médica particular nente no tratamento de infecções virais humanas causadas por

Num aspecto adicional a presente invenção apresenta derivados farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de fórmula (I) nomeadamente qualquer éter, sal, éster ou sal desse éster ou qualquer outro composto, farmaceuticamente aceitável que, após administração a um paciente humano ê susceptível de dar (directa ou indirectamente) um composto de fórmula (I) ou um seu metabólito ou resíduo antiviralmente activo.

Os ésteres farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de fórmula (I) acima apresentados são particularmente preferidos dado que são susceptiveis de darem altos teores do composto mãe no plasma de um paciente após administração oral. A presente invenção apresenta particularmente, como uma classe preferida de novos compostos, os derivados far maceuticamente aceitáveis do composto 3) de cima obtido por esterificação do grupo 2*-, 3*- e/ou 5’-hidroxi do radical de arabino-açucar.

Os derivados particularmente preferidos dos compostos de fórmula (I) incluem mono-di-ou tri-ésteres do resíduo de arabino-açucar substituído nas posições 2’ 3’ e 5* do referido resíduo.

Esses ésteres preferidos incluem os ésteres de ácidos carboxilicos em que o radical não-carbonilo do agrupamento éster é escolhido entre alquilo de cadeia linear ou ramificada (por exemplo n-propilo, t-butilo, n-butiloi alcoxialquilo (por exemplo metoximetilo), aralquilo (por exemplo benzilo), ariloxialquilo (por exemplo fenoximetilo), arilo (por exemplo fenilo) opcionalmente substituído com halogéneo, alquilo ou alcoxi C^_^, nitro ou amino, ésteres de sulfonato como alquilsufonilo, ou alquilarilsulfinilo (por exemplo metanossulfonilo ou tosilsulfonilo), ésteres de aminoácidos (por exemplo L-valilo), e ésteres de mono-, di- ou tri fosfatos. Os sais farmaceuticamente aceitáveis destes ésteres incluem sais de sódio, potássio, NR^⁺ em que R=H ou alquilo • C-^g, e sais de adição de ácido. Nos grupos ésteres de cima, . os grupos alquilo (incluindo os que estão nos agrupamentos al-

coxi) contêm 1 a 12 átomos de carbono e os grupos arilo são de preferência fenilo. ;

Os seguintes ésteres e éteres são ~ ί compostos novos preferidos da presente invenção:

13. 9-(5-0-Benzoil-f°-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina i

I

14. 6-l;letoxi-9-/5-0-( 4-metilf enil sulf onil )-@-D-arabinof uranosil )/-9H-purina

15. 6-Metoxi-9-(5-0-metilsufonil-p^,-D-arabinofuranosil)-9H-purina

16. 9- (5-0-( 4-metilbenzoil arabino furano sil) - 6-met oxi- 9H-purina

17. 9- (5-<X 4-clorobenzoil)-Ç' -D-arabinofuranosil )-6-metoxi-9H-purina

18. 9-(5-0-(4-metoxibenzoil)-D-arabinofurano sil)-6-metoxi-9H-purina

19. 6-metoxi-9- (5-0-f enilacetil-í^-D-arabinof urano sil)-9H-purina

20. 6-metoxi~9-(5-0-feniloxiacetil-4-D-arabinofuranosil)-9H-purina

21. 6-metoxi-9-(5-0-metoxiacetil- (*-D- arabino furano sil)-9H-purina

22. 9-/5-0-(4-nitrobenzoil)-(*-D-arabinofuranosil/-6-metoxi-9H-purina

23. 6-metoxi-9-(5-0-pentanoil-f-D-arabinofuranosil)-9H-purina

24. 9-/5-0-( 4-aminobenzoil)-(¹-D-arabinofuranosil/-6-metoxi- 7 9H-purina

25. 6-metoxi-9-(5-0-propionil-^-D-arabinofuranosil)-9H-purina

2δ. 9-(5-0-butanoil-(⁵-D-arabinofuranosil )-6-metoxi-9H-purina

27. 9-/5-0-(2,2,dimetilpropionil)-β-D-arabinofurano sil/-6-metoxi-9H-purina

28. 9-/5-O-acetil-^-D-arabinofuranosil -6-metoxi-9H-purina

29. 6-metoxi-9-/5-0-(2-metilpropionil)-^-D-arabinofuranosil/-9H-purina

30. 6-metoxi-9-/2-0- (2,2-dimetilpropionil)- ('-D-arabinof uranosil/-9H-purina

31. ó-metoxi-S-A^^j5-tri-Q-acetil)-f-D-arabinofuranosil -9H· -purina

32. 6-metoxi-9-(2-0-pentanoil-^-D-arabinofuranosil)-9H-purina

33. 9-(2-0-butanoil-^-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina

34. 6-metoxi-9-/2-0-(2-metilpropionil)-^-D-arabinofuranosil -9H-purina

35. 9-(3-0-b enzo il-Ç-D-arabino furano sil) -6-metoxi-9H-purina

36. 9-(2,3- anidro- (¹ -D-lixo f urano sil) - 6-metoxipurina

37. 6-metoxi-9-/X2-0-(4-metoxi~benzoil) j-^-D-arabinofuranosilZ^H-purina

38. 6-metoxi-9-/’(2-0-(4-metoxibenzoil) )-^-D-arabinofuranosil/-9H-purina

- 8 39. 9-/2-0-(4-cloiObenzoil)-^-D-arabinofuranosil/-6-metoxi-9H-purina

40. 6-metoxi-9-/3,5-0-(1,1,3,3-tetraisopropil-1,3-dissiloxan-1,3-diil)-^ -D-arabinofuranosil/-9H-purina

41. 6-metoxi-9-/2-0-(2-aminobenzoil)-^-D-arabinofuranosil -9Hpurina

42. 6-metoxi-9-/2- (4-metilbenzoil )-3»5-0-(1,1,3,3-tetraisopropildissiloxan-l,3“diil)-(?-D~arabinofuranosil)/-9H-purina

43. 6-metoxi-9-/2-(4-metoxibenzoil)-3,5-0-(1,1,3,3-tetraisopro pildissiloxan-l,3-diil)-^-D-arabinofuranosil/-9H-purina

44. 9-/2-(4-clorobenzil)-3,5-0-(1,1,3,3-tetraisopropildissiloxan-1,3-diil)-^-D-arabinofuranosil/-6-metoxi-9H-purina

45. Éster 5*-monofosfato da S-^-D-arabinofuranosil-ó-dimetila mino-9H-purina

46. 5’-monofosfato de arabinósido de 6-metoxipurina

47. 5’-trifosfato de arabinósido de 6-metoxipurina

Os compostos particularmente preferi dos são os referidos acima com os números 16, 24 e 32.

Os nucleósidos de purina de fórmula (I) e os seus derivados serão de ora em diante referidos como compostos de acordo com a invenção ou como ingredientes activos.

Num aspecto preferido, adicional da presente invenção refere-se a utilização de um composto de acordo com a invenção na preparação de um medicamento para o tratamento ou profilaxia de infecções virais humanas causadas por VZV ou CMV.

- 9 I

A presente invenção refere ainda um ¹método para o tratamento ou profilaxia de infecções por VZV e ί CMV num paciente humano que compreende a administração ao refe ! rido paciente humano de uma quantidade eficaz de um composto I de acordo com a invenção. j método anteriormente descrito in- ί clui inibir-se a replicação dos virus VZV ou CMV em células hospedeiras de um mamífero que compreende aplicar-se uma quan- I tidade inibidora eficaz de replicação do vírus do composto de fórmula (I), ou dum seu derivado farmaceuticamente aceitável, às células infectadas.

Exemplos das condições clinicas causadas por infecções por VZV e CMV que podem ser tratadas de acordo com a invenção incluem as referidas acima.

composto de fórmula (I) e os seus derivados farmaceuticamente aceitáveis (de ora em diante coleç tivamente referidos como ingredientes activos) podem ser administrados por qualquer via adequada à condição a tratar, incluindo as vias adequadas a via oral, rectal, nasal, tópica (incluindo a bucal e sublingual), vaginal,e parentérica (incluindo subcutânea, intramuscular, intravenosa, intradérmica, intra tecal e epidural). Deve notar-se que a via preferida pode variar com, por exemplo, a condição do paciente.

Para cada uma das utilizações e indicações acima referidas a quantidade necessária do ingrediente activo (como acima definido) depende de vários factores incluir do a severidade da condição a tratar e a identidade do paciente e será em última análise ditada pela vontade do médico assis tente. Em geral, contudo, para cada uma destas utilizações e indicações, uma dose eficaz, adequada estará na gama de 0,1 a 250 mg por quilograma de peso corpóreo do paciente por dia,pre ferivelmente na gama de 0,1 a 100 mg por quilograma de peso, corpóreo por dia e mais preferivelmente na gama de 1 a 20 mg por quilograma de peso corpóreo por dia, uma dose óptima é de cerca de 15 mg por quilograma de peso corpóreo por dia (a menos que se indique o contrário todos os pesos do ingrediente

activo são calculados com base no composto mãe da fórmula (I), ! para sais e ésteres os números serão aumentados proporcionalmente). A dose desejada é preferivelmente apresentada em duas, três, quatro ou mais sub-doses administradas a intervalos adequados ao longo do dia. Estas sub-doses podem ser administradas em formas de unidades de dosagem, por exemplo, contendo 5 a 1000 mg, preferivelmente 20 a 500 mg e mais preferivelmente 100 a 400 mg do ingrediente activo por forma de unidade de dosagem.

Embora seja possivel administrarem-se os ingredientes activos isoladamente é preferível apresentá-ΐοε na forma de composições farmacêuticas. As composições da presen te invenção compreendem pelo menos mn ingrediente activo, como acima definido, em associação com um ou mais veículos aceitáveis e opcionalmente outros ingredientes terapêuticos. 0(s) veí culo(s) deve(m) ser aceitável (is) no sentido de sere(m) compativel(is) com os outros ingredientes da composição e não ser (em) prejudicial(is) aos seus recipientes.

As formulações incluem as adequadas para administração oral, rectal, nasal, tópica (incluindo bucal e sublingual), vaginal ou parentérica (incluindo subcutânea, intramuscular, intravenosa, intradérmica, intratecal e epi durai). As formulações podem apresentar-se convenientemente em formas de dosagem unitária e podem ser preparadas por quaisquer dos processos bem conhecidos da técnica farmacêutica. Esses pro cessos incluem a fase de se associarem o ingrediente activo com o veículo que constitui um ou mais dos ingredientes acessórios. Em geral preparam-se as formulações misturando uniformemente e intimamente o ingrediente activo com veículos líquidos ou veículos sólidos finamente divididos ou ambos, e em seguida, se necessário, conformar-se o produto.

As formulações da presente invenção adequadas para administração oral podem ainda apresentar-se como unidades discretas como por exemplo cápsulas, hóstias ou com primidos contendo cada um uma quantidade predeterminada do ingrediente activo, como pó ou grânulos, como solução ou suspen11 -

são num liquido aquoso ou num liquido não-aquoso, ou como uma emulsão liquida de óleo em água ou uma emulsão líquida de água em óleo. 0 ingrediente activo pode também apresentar-se na forma de um bolo, electuário ou pasta.

Pode obter-se um comprimido por compressão ou moldagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes acessórios. Os comprimidos obtidos por compressão podem ser pre parados comprimindo numa máquina adequada o ingrediente activo na forma fluida como pó ou grânulos, misturado opcionalmente com um ligante (por exemplo povidona, gelatina, hidroxipropilme til celulose), lubrificante, diluente inerte, conservante, desintegrante (por exemplo amido glicolato de sódio, povidona rec ticulada, carboximetil celulose de sódio recticulado), agente tensoactivo ou agente dispersante. Os comprimidos moldados podem obter-se moldando numa máquina adequada uma mistura do composto em pó humedecido com um diluente liquido inerte. Os comprimidos podem opcionalmente ser revestidos ou entalhados e podem ser formulados para darem uma libertação lenta ou controlada do ingrediente activo nele utilizado, por exemplo, hidroxipropilmetilcelulose em várias proporções para dar o perfil de libertação pretendido.

Para infecções do olho ou outros tecidos externos, por exemplo boca e pele, as formulações são pre ferivelmente aplicadas como um unguento tópico ou creme contendo o ingrediente activo numa quantidade, por exemplo, de 0,075 a 20% em peso, preferivelmente 0,2 a 15% em peso e mais preferivelmente 0,5 a 10% em peso. Quando formulados na forma de um unguento, os ingredientes activos podem ser utilizados com uma base parafínica ou uma base de unguento miscivel com a água. Alternativamente, os ingredientes activos podem ser formulados num creme com uma base de creme de óleo em água.

Se desejado, a fase aquosa do creme pode incluir, por exemplo, pelo menos 30% p/p de um álcool polihidrico, isto ê, um álcool com um ou mais grupos hidroxilo como por exemplo propileno glicol, butano-l,3-diol, manitol, sorhitol, glicerol e polietileno glicol e suas misturas. As for mulações tópicas podem desejavelmente incluir um composto que aumente a absorção ou penetração do ingrediente activo através da pele ou outras áreas afectadas. Exemplos desses realçadores da penetração dêrmica incluem o sulfóxido de dimetilo e análogos parecidos.

A fase oleosa das emulsões da presente invenção pode ser constituída por ingredientes conhecidos de modo conhecido. Embora a fase possa compreender apenas um emulsificante (conhecido também como emulgente), ela compreende desejavelmente uma mistura de pelo menos um emulsificante com uma gordura ou um óleo ou com uma gordura e com um óleo. Preferivelmente, inclui-se um emulsificante hidrofilico juntamente com um emulsificante lipofílico que actua como estabilizante. E também preferido incluir um óleo e uma gordura. Em conjunto, o(s) emul sificante(s) com ou sem estabilizador(es) perfaz(em) assim a chamada cera emulsificante, e a cera juntamente com o óleo e/ou gordura perfazem assim a chamada base de unguento emulsificante que forma a fase oleosa dispersada das formulações de creme.

Os emulgentes e estabilizantes de emulsão adequados na formulação da presente invenção incluem Tween 60, Span 80, álcool cetostearílico, álcool miristílico, mono-estearato de glicerilo e lauril sulfato de sódio.

A escolha dos óleos ou gorduras adequados para a formulação é feita com base na obtenção das propriedades cosméticas pretendidas, dado que a solubilidade do composto activo na maior parte dos óleos que podem ser utilizados em composições farmacêuticas de tipo emulsão é muito baixa. Assim o creme deve ser de preferencia um produto não gorduroso, que não manche e seja lavável com uma consistência adequada para evitar as fugas de tubos e de outros contentores. Podem utilizar-se ésteres de alquilo mono- ou dibásicos de cadeia linear ou ramificada como por exemplo di-isoadipato, estearato de isocetilo, diéster de propileno glicol de óleos gordos de coco, miristato de isopropilo, oleato de decilo, palmitato de isopropilo, estereato de butilo, palmitato de 2-etilhexilo ou uma mis tura de ésteres de cadeia ramificada conhecida como Crodamol

CAP, sendo os últimos três os ésteres preferidos. Estes podem ser utilizados sozinhos ou em combinação dependendo das proprie dades pretendidas, Altemativamente, podem utilizar-se lípidos de elevado ponto de fusão como por exemplo parafina branca macia e/ou parafina liquida ou outros óleos minerais.

As composições adequadas para adminis tração tópica ao olho também incluem gotas para olhos em que o ingrediente activo ê dissolvido ou suspenso num veículo adequado, especialmente um solvente aquoso para o ingrediente activo. 0 ingrediente activo está preferivelmente presente nestas formulações numa concentração de 0,5 a 20%, com vantagem 0,5 a 10% particularmente 1,5% em peso.

As formulações adequadas para a administração tópica na boca incluem hóstias compreendendo o ingrediente activo numa base aromatizada, geralmente sacarose e acácia ou tragacanto, pastilhas compreendendo o ingrediente activo numa base inerte como por exemplo gelatina e glicerina, ou saca rose e acácia, e lavagens de boca compreendendo o ingrediente activo num veículo líquido adequado.

As composições para administração rectal podem apresentar-se como supositórios com uma base adequada compreendendo por exemplo manteiga de cacau ou um salicilato.

As formulações adequadas para adminis tração nasal em que o veículo é um sólido incluem um pó grossei ro com um tamanho de partícula por exemplo na gama de 20 a 500 micrometros que é administrado de maneira a que se tome cada inalação, isto ê, por inalação rápida através da passagem nasal a partir de um contentor do pó mantido perto do nariz. As composições adequadas em que o veículo é liquido, para administração por exemplo como pulverizador nasal ou como gotas nasais incluem soluções aquosas ou oleosas do ingrediente activo.

As composições adequadas para administração vaginal podem apresentar-se como pessários, tampões, cremes, geis, pastas, espumas ou pulverizações contendo além do ingrediente activo veículos que são conhecidos na técnica

como adequados.

As composições adequadas para administração parentérica incluem soluções para injecçoes aquosas e não aquosas esterilizadas que podem conter anti-oxidantes, tampões, bacteriostatos e solutos que tornam a formulação isotónica com o sangue do paciente em causa, e suspensões estéreis aquosas e não aquosas que podem incluir agentes de suspensão e agentes espessantes. As formulações podem apresentar-se em doses unitárias ou contentores de multi-dose, por exemplo ampolas e frascos fechados, e podem ser armazenadas numa condição liofilizada requerendo apenas a adição de um veículo liquido esterilizado, por exemplo água para injecções, imediatamente da utilização. As soluções e suspensões para injecção extemporânea podem ser preparadas a partir de pós, grânulos e compri midos esterilizados do tipo previamente descrito.

As formulações para unidades de dosa gem preferidas são as que contêm uma dose diária ou uma sub-dose unitária diária, como acima referido, ou uma sua fracção adequada, de um ingrediente activo.

Deve notar-se que além dos ingredien tes particularmente mencionados acima as composições da presen te invenção podem incluir outros agentes convencionais da técnica em relação ao tipo de composição em questão, por exemplo as adequadas para administração oral podem incluir agentes aro matizantes.

A presente invenção refere-se a um processo para a preparação de um composto de fórmula I(a), ou a um seu derivado farmaceuticamente aceitável, especialmente éster compreendendo:

A. Fazer-se reagir um composto com a fórmula (II)

na qual Rl e R2 são como acima definidos, com um composto de fórmula (III)

HO

HQ (III)

OH na qual X representa uma base de pirimidina ou de purina (diferente de um composto de fórmula (II), ou

B. Fazer-se reagir um composto de fórmula (IV)

(IV) na qual 2 é um grupo substituível e R2 é como acima definido, com um composto susceptível de introduzir o grupo necessário na posição-6; e opcionalmente em seguida ou simultaneamente, quando o composto resultante for um composto de fórmula (I), converter-se esse composto num seu derivado farmaceuticamente aceitável ou quando o composto resultante for um derivado farmaceuticamente aceitável convertê-lo num derivado farmacêutica mente aceitável diferente ou num composto de fórmula (I).

Em relação ao processo A), X ê com vantagem uma base de uracilo. A reacção pode ser efectuada, por exemplo, por tratamento dos compostos de fórmulas II e III com uma enzima como por exemplo uma enzima fosforilase, por exemplo, uridina fosforilase ou nucleósido de purina fosforilase, ou uma sua mistura preferivelmente na presença de um sal fosfato a um valor de pH de 5,0-9,0 e uma temperatura de 15°- 16 -

-90°C, com vantagem 4O°-6O°C.

Em relação ao processo B), este pode ser efectuado de acordo com o procedimento descrito por Reist. E.J. et al., J. Org. Chem. 27 (1962) 3274-3279. Um grupo substituível conveniente e um ãtomo de halogéneo por exemplo cloro, sendo a reacção convenientemente efectuada num solvente orgânico, por exemplo metanol absoluto, com um agente susceptível de dar o grupo necessário na posição-6 por exemplo, uma ami na adequada no caso em que Rl representa um grupo alquilo- ou dialquilamino.

Os ésteres e sais fisiologicamente aceitáveis dos compostos de fórmula (I) podem ser preparados de modo convencional, por exemplo podem preparar-se os ésteres por esterificação do composto mãe com um halogeneto de acilo ou ani drido adequado. Alternativamente os ésteres podem ser preparados deslocando um grupo substituível adequado, por exemplo halogeneto, com um ácido carboxílico adequado ou abrindo um nucleósido anidro adequado do composto mãe com um ácido carboxílico ou um seu sal adequados.

Os seguintes Exemplos ilustram a presente invenção mas não devem ser considerados como limitando de qualquer forma a invenção.

Exemplo 1: 9-ft-D~arabinofuranosil-6-metilamino-9H purina

Combinaram-se o 6-tiol-9-( -B-arabinofuranosil)-9H-purina (Reist. E.J. et al.. J. Org. Chem. 27 (1962) 3274-3279) (0,35 mmol, 100 mg) e 5 ml de metanol absoluto e arrefeceu-se para -10°C enquanto protegido da humidade. Eez-se borbulhar cuidadosamente cloro gasoso através da suspensão durante 2 min.. Agitou-se a solução resultante durante 5 min. a -10°C e em seguida fez-se borbulhar azoto seco através da solução fria durante 15 min. até 0 excesso de cloro ter sido removido. Adicionaram-se 2 ml de uma solução aquosa a 40% de metilamina à mistura reaccional, que foi em seguida aquecida numa autoclave de aço inoxidável a 115°C durante 4,5 horas.

à secura obtendo-se um rendimento de 88% do composto do título Após recristalização em água a amostra tinha um ponto de fusão de 201,5-202,5°C.

Anal. Calcd. para ^C11^H13^N5°4^:

Calcd: C, 47.0; H, 5.38; N, 24.9

Determinada:C, 47.2; H, 5.72; N, 25.2

Exemplo 2: 9-fr-D-arabinofuranosil-6-dimetilaminopurina

Combinaram-se a 6-dimetilaminapurina (Sigma Chemical Co. St. Louis, MO) (6,4 mmol, 104 g) e arabinósido de uracilo (Torrence, P.P. et al,, J. Med. Chem., 22 (3) (1979), 316-319) (8 mmol, 1,96 g) em 0,412 litros de uma solução 5 mM de fosfato de potássio a pH 8,0 com azida de potássio a 0,02%. Adicionaram-se nucleôsido de purina fosforilase purificada (3260 unidades) e uridina fosforilase (810 unida des) e agitou-se a solução a 35°G. Passados 59 dias liofilizou -se a mistura reaccional. Suspendeu-se o resíduo em 250 ml de água e agitou-se â temperatura ambiente durante 1 hora. Separa ram-se os sólidos por filtração e armazenou-se 0 filtrado a 3°C. Passadas 72 horas, recolheu-se o precipitado e combinou-se com 0 bolo anterior. Adicionou-se este bolo a 100 ml de uma mistura de 95% de etanol/água, aqueceu-se à ebulição e filtrou-se. Removeu-se o solvente a pressão reduzida e cromatogra fou-se 0 resíduo numa resina BioRad P-2 em 30% de n-propanol/ água (v/v), utilizando de uma vez uma coluna de 7,5 x 90 cm, e duas vezes mais numa coluna de 5 x 90 cm. Este procedimento produziu 0,12 g de 6-dimetilaminopurina-9- -D-arabinofuranósido como 0,5 hidrato.

Anal. Calcd. para ^G12^H17^iJ5°4 °-^5H2^O:

Calcd: C, 47.36; H, 5.96; N, 23.01

Determinada:C, 47.23; H, 5.59; N, 22.75

Os dados de RMN e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 3; 9-(^l)-D-arabinofuranosil-6-metoxipurina

Preparou-se uma suspensão de 6-metoxipurina (Sigma Chemical Co. S. Luís, MO), (6,6 mmol, 1 g) e arabinósido de uracilo (Torrence, P.E. et al J. Med. Chem. 22(3) (1979) (10,1 mmol, 2,45 g) em 575 ml de uma solução 10 mM de fosfato de potássio, solução a 0,04% de azida de potássio, pH 7,8 contendo 10% de n-propanol (v/v). Adicionaram-se uridina fosforilase purificada (560 I.U.) e nucleósido de purina fosforilase (10000 I.U.) (Krenitsky, T.A. et al, Biochemistry, 20, 3615, 1981 e Patente USA 4 381 444) e agitou-se a solução a 35°C. Passados trinta dias, filtrou-se a mistura reaccional. Ajustou-se 0 filtrado a pH 10,5 com hidróxido de amónio e cromatografou-se numa coluna de 2,5 x 7 cm contendo uma resina de Dowex-l-formato. Eluiu-se a resina com 30% de n-propanol/água (v/v). As fracções contendo 0 produto foram combinadas e 0 solvente foi removido a pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo numa solução de 30% de n-propanol/água (v/v) e cromatografõu-se numa coluna BioRad P-2 (7,5 x 90 cm). Combinaram-se as fracções contendo o produto e após liofilização obtiveram-se 0,922 g de 6-metoxipurina-9- -D-arabinofuranósido como dihidrato.

Anal. Calcd. para Ο^Η^Ιί^Ο^ΒΕ^,Ο:

Calcd: C, 41.51; H, 5.70; N, 17.60

Determinada:C, 41.46; H, 5.74; N, 18.13

Os dados de RMN e espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 4: 9-ft-D-arabinofuranosil-6-etoxipurina

Suspenderam-se a 6-etoxipurina (Sigma Chemical Co. S. Luis, MO) (3,05 mmol, 0,5 g) e arabinósido de uracilo (6,09 mmol, 1,48 g) em 100 ml de uma solução 10 mM de fosfato de potássio, uma solução de azida de potássio a 0,04% com um pH de 7,4. Adicionaram-se uridina fosforilase purificada (6000 I.U.) e nucleósido de purina fosforilase (8400 U.I.)

(Krenitsky, T.A., et al, Biochemistry, 20, 3615, 1981 e Patente USA 4 381 444) e agitou-se a suspensão a 35°C.

Após 168 horas adicionaram-se mais 18 000 unidades de uridina fosforilase e 75 600 unidades de nucleósido de purina fosforilase. Passados sete dias filtrou-se a mistura reaccional e cromatografou-se o filtrado numa coluna contendo uma resina Dowex-l-hidróxido (2,5 x 8 cm). Eluiu-se a coluna com a mistura a 90% metanol/água (v/v) e combinaram-se as fracções contendo o produto e removeu-se o solvente a pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em 30% de n-propanol e água (v/v) e cromatografou-se numa coluna contendo BioRad P-2 (5 x 90 cm). Eluiu-se o produto com 30% de n-propanol/água (v/ /v). Combinaram-se as fracções contendo o produto e removeu-se o solvente a pressão reduzida obtendo-se 0,363 g de 6-etoxipurina-9- -D-arabinofuranósido que depois de analisado revelou ser um 0,3 hidrato.

Anal. Calcd. para

Calcd: C, 47,78; H, 5.55; N, 18.57

Determinada:C, 47.99; Η, 5·54; N, 18.40

Os dados de RMN e de espectrometria de massa eram consistentes com a estrutura.

Exemplo 5: 9-fi-D-arabinofurano sil-6-iodopurina

Dissolveram-se a β-iodopurina (Sigma Chemical Co. S. Luis, MO) (4 mmol, 1 g) em 15 ml de 1,2-dimetoxietano com aquecimento. Adicionaram-se 50 mililitros de uma solução de arabinósido de uracilo (10,1 mmol) em fosfato de potássio 10 mM, solução de azida de potássio a 0,04%, pH de 7,4. Adicionaram-se uridina fosforilase (6 800 U.I.) e nucleósido de purina fosforilase (12 000 U.I.) e agitou-se a mistura reaccional a 35°C. Passados 21 dias adicionaram-se mais 4 800 unidades de uridina fosforilase e 20 000 unidades de nucleósido de purina fosforilase. Passados 90 dias filtrou-se a mistura reaccional e removeu-se o solvente a pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em 100 ml de água, aqueceu-se com vapor, e em se20 -

guida filtrou-se. Cromatografou-se o filtrado numa coluna contendo resina XAD-2 (5 x 35 cm). Eluiu-se esta coluna com 2 lt. de água seguido de 2 lt. de etanol. Combinaram-se as fracções contendo o produto e removeu-se o solvente a pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em 30% de n-propanol/água (v/v) e croma tografou-se numa coluna contendo BioRad P-2 (5 x 90 cm). Eluiu -se o produto com uma mistura de 30% n-propanol/água. Combinaram-se as fracções contendo o produto e removeu-se o solvente a pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo numa mistura de 30% n-propanol/água (v/v) e cromatografou-se numa coluna contendo Sephadex G-10 (5 x 90 cm). Eluiu-se esta coluna com uma mistura de 30% de n-propanol/água (v/v). Combinaram-se as fracções contendo o produto e após se remover o solvente a pressão redu zida obtiveram-se 0,253 g de 6-iodopurina-9- -D-arabinofuranósido que foi analisada na forma de 1,5 hidrato.

Anal. Calcd. para ^G10^Hll^H4°4

Calcd: C, 29.65; H, 3.48; W, 13.83

Determinada:C, 29.43; R, 3.53; R, 13.66

A RI»ÍN e a espectrometria de massa estavam de acordo com a estrutura.

Exemplo 6: 9-0~D-arahinofuranosil-2-amino-6-iodopurina

Combinaram-se a 2-amino-6-iodopurina (Sigma Chemical S. Luis M0) 25,5 mmol, 6,75 g) e arabinósido de uracilo (61,9 mmol, 15,1 g) em 0,31 lt. de uma solução de fosfato de potássio 10 mM, pH 6,9 com 0,02% de azida de potássio. Adicionaram-se nucleósido de purina fosforilase purificada (17 000 unidades) e uridina fosforilase (2 000 unidades) e agitou-se a solução a 37°C. Passados 18 dias adicionaram-se mais 5 700 unidades de uridina fosforilase. Passados 57 dias filtrou-se a mistura reaccional e cromatografou-se o filtrado numa coluna contendo resina XAD-2 (8 x 11 cm). Eluiu-se o produto com um gradiente em fases de etanol/água (v/v) da forma seguinte: 0,35 1 10%; 1 1 20%; 1 1 50%; 0,2 1 95%. Combinaram-se as fracções contendo o produto e removeu-se o etanol a

a pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo numa mistura de 30% de n-propanol/água (v/v) e cromatografou-se numa coluna de 7,5 x 90 cm contendo resina BioRad P-2. Este procedimento deu origem a 1,1 g de 2-amino-6-iodopurina-9- -D-arabinofuranósido como 0,5 hidrato.

Anal. Galcd. para

Calcd: C, 29.87; H, 3.26; lí, 17.41

Determinada; C, 29.86; li, 3.29; lí, 17.39

A RiúN e a espectrometria de massa estavam de acordo com a estrutura.

Exemplo 7: 9-^-D-arabinofuranosil-6-pirrolidinopurina

Preparou-se uma suspensão de 6-pirrolidinopurina (Sigma Chemical Co. S. Luis, kO) (2,6 mmol),0,5 g e arabinôsido de uracilo (5,29 mmol, 1,29 g) em 100 ml de uma solução de fosfato de potássio 10 mk, solução a 0,04% de azida de potássio com um pH de 7,4. Adicionaram-se uridina fosforilase purificada (6 000 U.I.) e nucleósido de puridina fosforilase (8 400 U.I.) (Krenitsky, T.A., et al Biochemistry, 20 3615, (1981) e Patente USr 4 381 444) e agitou-se a suspensão a 35°C . Passados 20 dias filtrou-se a mistura reaccional e cromatografou-se o filtrado numa coluna contendo uma resina de Dowex-l-hidróxido (2,5x8 cm). Eluiu-se 0 produto da coluna com uma mistura de 90% de metanol/água (v/v). Combinaram-se as fracções contendo 0 produto e removeu-se 0 solvente a pres são reduzida. Dissolveu-se o resíduo em 50 ml de uma solução a 30% de n-propanol e água (v/v) e cromatografou-se numa colu na BioRad P-2 (5x90 cm). Eluiu-se o produto com uma mistura de 30% de n-propanol/água (v/v). Combinaram-se as fracções contendo 0 produto e removeu-se 0 solvente a pressão reduzida obtendo-se 0,573 g de 6-pirrolidinopurina-9-^-U-arabinofuranó sido.

Anal. Calcd.para Cj^H-^íí^O^

Determinada: G. 52.60; H, 6.09; 11,21.51

A RMN e a espectrometria de massa estavam de acordo com a estrutura.

Exemplo 8: 9-fr-D-arabinofuranosil-2-cloro-6-metilaminopurina iíanteve-se à temperatura ambiente du rante 4 dias num recipiente fechado selado uma solução de 2,6-dicloro-2’,3’,5’-tri-O-benzil-9-(^-D-arabinofuranosil)purina (Keller, P. et al J.Org.Chem., 32, 1644 (1967); líontgomery, J.

A. e Hewson, K.J., J. Jiied. Chem. 12, 498 (1967)) (5,92 g, 10 mmol) em benzeno (35 ml de uma solução de 0,6 g de metilamina por 10 ml de benzeno). Arrefeceu-se o vaso sob pressão com gelo, abriu-se, e filtrou-se o conteúdo para remover o cloridrato de metilamina. Removeu-se o solvente a pressão reduzida para se obter um óleo que foi combinado com um óleo obtido de uma reacção da mesma escala, mas conduzida a 125°C. 0 peso total foi de 11,4g. A análise de TLC mostrou que era uma mistura do material de partida, e compostos mono e dimetilamino. Croma tografou-se o óleo em 285 g de sílica gel usando 30% de acetona e 70% de ciclohexano em volume. 0 componente processado a seguir ao material de partida (TLC, sílica gel, 3:7 acetona:ci clohexano) foi recolhido e o solvente foi removido a pressão reduzida. Obtiveram-se 4,8 g de 2-cloro-6-metilamino-2’,3^,,5’-tri-0-benzil-9-(^~D-arabinofuranosil)purina, na forma de um óleo. Adicionou-se uma porção de 1,1 g deste óleo em 40 ml de 2-metoxietanol a cloreto de paládio (0,87g) que foi prêrreduzi^ do num dispositivo de Parr. Hidrogenou-se esse produto a 345 kpa durante 30 minutos com atmosfera de hidrogénio mudada após os 15 minutos iniciais. Removeu-se o catalisador por filtração através de um leito de Celite e lavou-se com metanol. Heutrali zou-se o filtrado poi· adirão de Dowex-1 (HCO^). Removeu-se a resina por filtração e lavou-se com metanol. Evaporou-se o fil trado a pressão reduzida e triturou-se o resíduo com clorofórmio. Lavou-se o produto bruto com água quente, dissolveu-se em metanol quente, filtrou-se, arrefeceu-se e recolheu-se o sóli- 23 -

do obtido. A cristalização de água ebuliente produziu o produto na forma de hidrato.

Obtiveram-se 44,5 mg; pf 224-225°C.

Anal. Calcd. para C^I^^R^O^Cl.^O

Calcd: C, 39.58; N, 20.98; H, 4.84

Determinada: C, 39.27; lí, 20.83; H, 5.16

Exemplo 9: 9-^-D-arabinofuranosil-ó-ciclopropilaminopurina

Preparou-se uma suspensão de 6-ciclopropilaminopurina (preparada por deslocamento nucleófilo do gru po cloro em 6-cloropurina (Sigma Chemicals S. Luis MO) por ciclopropilamina em acetonitrilo) (2,85 mmol, 0,5g) θ arabinósido de uracilo (Torrence, P.P. et al J. Med. Chem., 22(3) (1979) 316-319) (5,71 mmol, l,39g) em 100 ml de fosfato de potássio 10 mM, solução a 0,04% de azida de potássio com pH de 7,4. Ádicionaram-se uridina fosforilase purificada (6 000 U.I.) e nucleósido de purina fosforilase (8 400 U.I.) (Krenitsky et al Bi0chemistry 20 3615, 1981 e Patente US 4 381 444) e agitou-se a suspensão a 35°C. Passadas 120 horas filtrou-se a mistura reaccional e cromatografou-se 0 filtrado numa coluna contendo uma. resina de Dowex-l-hidróxido (2,5 x 10 cm). Eluiu-se a coluna com uma mistura de 90% de metanol/água (v/v). Combinaram-se as fracçoes contendo o produto e removeu-se o solvente a pressão reduzida. Dissolveu-se 0 resíduo numa mistura de 30% de n-propanol e água (v/v) e cromatografou-se em BioRad P-2 (5 x 90 cm). Eluiu-se a coluna com 30% de n-propanol/água (v/vi; Recristalizou-se 0 precipitado da mistura reaccional com metanol quente obtendo-se 0,0352 g que foi analisado como monohidra to de 6-ciclopropilaminopurina-9-(^l’-D-arabinofuranósido. 0 filtrado da recristalização foi cromatografado em resina BioRad P-2 (5x90 cm) como acima descrito. Combinaram-se as fracçoes contendo 0 produto de ambas as colunas e removeu-se 0 solvente a pressão reduzida obtendo-se 0,342 g de 6-ciclopropilaminopurina-O-^-D-arabinofuranósido que foi analisado como 0,8 hidra• to com 0,3 CjHqO.

Anal. Calcd., para C-^H^γΝ^Ο^ 1 HgO

Calcd: C, 48.00; H, 5.89; N, 21.53

Determinada: C, 48.05; H, 5.89; N, 21,55

A RMN e a espectrometria de massa estavam de acordo com a estrutura.

Exemplo 10: 9-.ft-p-arabinofuranosil-6-etil (metil)aminopurina

Preparou-se a 6-etil(metil)aminopuri na por deslocamento nucleófilo do grupo cloro em 6-cloropurina (sigma Chemicals, S. Luís MO) por 6-etil(metil)amina em acetonitrilo. Preparou-se uma suspensão de 6-etil(metil)aminopurina (2,8 mmol, 0,5g) e arabinósido de uracilo (5,6 mmol, l,38g) em 575 ml de fosfato de potássio 10 mM, solução a 0,04% de azida de potássio, pH de 7,4, contendo 10% de n-propanol (v/v). Adicionaram-se uridina fosforilase purificada (6 000 U.I.) e nucleósido de purina fosforilase ( 8 400 U.I.) (Krenitsky et al Biochemistry 20 3615, 1981 e Patente US 4 381 444) e agitou-se a solução a 37°C. Passados noventa dias filtrou-se a mistura reaccional e crornatografou-se o filtrado numa coluna de 2,5 x 13 cm contendo uma resina Dowex-l-hidróxido. Eluiu-se a resina com uma mistura de 90% de metanol/água (v/v). Combinaram-se as fracções contendo o produto e removeu-se o solvente a pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em 30% de n-propanol/água (v/ /v) e cromatografou-se numa coluna BioRad P-2 (7,5 x 90 cm). Combinaram-se as fracções contendo o produto e após liofilização obtiveram-se 0,680g de 6-etil(metil)aminopurina-9- -D-arabinofuranôsido.

Anal. Calcd. para

Calcd: C, 50.48; H, 6.19; N,22.Ó4

Determinada: C, 50.36; H,6.25; N,22.52

A RmN e a espectrometria de massa estavam de acordo com a estrutura.

Exemplo 11: 9“ft~D-arabinofuranosil-2-amino-ó-metoxipurina

Combinou-se a 2-amino-o-metoxipurina (preparada por deslocamento nucleófilo do grupo cloro na 2-amino-6-cloropurina (Sigma Chemicals S. Luis áO) pelo metanol em hidreto de sódio em tetrahidrofurano) (6,4 mmol, l,05g) com 35 ml da solução de arabinósido de uracilo (7,04 mmol, l,75g) em fosfato de potássio 10 mk e 7% de n-propanol (v/v). 0 pH foi ajustado para 6,75. Adicionou-se o nucleósido de purina fosforilase purificada ( 18 000 unidades) e urina fosforilase (1 020 unidades) e incubou-se a solução a 37°C. Apôs 26 dias filtrou-se a mistura reaccional e cromatografou-se o filtrado numa coluna de resina Dowex-1-formato (2x7 cm) após ajustar-se o pH para 10,5 com hidróxido de amónio concentrado. Eluiu-se a coluna com uma mistura a 7% de n-propanol/água (v/v) e combinaram-se as fracções contendo o produto e removeu-se o solvente em vazio. Extraiu-se o resíduo com 25 ml de água e separou-se o filtrado dos sólidos por centrifugação. 0 sobrenadante, após repouso à temperatura ambiente, formou cristais de 2-amino-b-metoxipurina-9- -D-arabinofuranósido que após secagem em vazio produziram 0,327 g de produto.

Anal. Calcd. para ^clA5*5^O5

Calcd: C, 44.44; H, 5.09; N, 23.56

Determinada: C, 44.49; H, 5.13; U, 23.52

A Ri.ih e espectrometria de massa estavam de acordo com a estrutura.

Exemplo 12: 9-ft-D-arabinofuranosil-6-n-propoxipurina

Combinou-se a 6-n-propoxipurina (5,6 mmol, lg, Sigma Chemicals, S. Luis AO) com 545 ml de uma solução de arabinósido de uracilo (10,1 mmol) em fosfato de potássio 10 mMe 7% de n-propanol (v/v). Adicionaram-se uridina fosforilase purificada (680 I.U.) e nucleósido de purina fosforilase (12 000 I.U.) e agitou-se a mistura reaccional a 35°C. í'il

trou-se a mistura reaccional após 58 dias e armazenou-se o filtrado a 3°C durante 20 horas. Recolheu-se o precipitado resultante por centrifugação, dissolveu-se em 30% de n-propanol/água (v/v), e cromatografou-se numa coluna de resina Dowex-1-formato (2,5 x 5 cm) após ajustar-se o pH para 10,5 com hidróxido de amónio concentrado. Eluiu-se a coluna com 30% de n-propanol/ /água e combinaram-se as fracções contendo o produto e removeu -se o solvente em vazio. Dissolveu-se o resíduo em n-propanol e cromatografou-se numa coluna contendo BioRad P-2 (5 x 90 cm). Eluiu-se a coluna com 30% de n-propanol/água (v/v). Combinaram -se as fracções contendo o produto e após remoção do solvente em vazio dissolveu-se o resíduo em água e cromatografou-se numa coluna contendo BioRad P-2 (5x90 cm). Eluiu-se a coluna com água. Combinaram-se as fracções contendo o produto e após liofilização, obtiveram-se 0,758 g de 6-n-propoxipurina-9--D-ara binofuranósido que foi analisado como um monohidrato.

Anal. Calcd. para θχ 1·0 ^Η2θ

Calcd: C, 47.56; H, 6.14; h, 17.06

Determinada: C, 47.63; H, 6.13; h, 17.11

A EME e a espectrometria de massa estavam de acordo com a estrutura.

Exemplo 13: 9-(5-0-benzoil-fr-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina

Dissolveu-se 9(^-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina do Exemplo 3 (0,283 g, 1,0 mmole) em dimetilacetamida anidra (5,0 ml), arrefeceu-se para 4°C, e adicionou-se cloreto de benzoilo (0,155 g, 1,1 mmol). Agitou-se a mistura durante 24 horas em árgon, deixou-se lentamente aquecer para a temperatura ambiente. Adicionaram-se em seguida mais

1,1 equivalentes de cloreto de benzoilo â temperatura ambiente e continuou-se a agitação durante mais 24 horas. Arrefeceu-se a mistura reaccional deitando-a em 50 ml de água com gelo, ex. traiu-se com CHCl^ (3 x 30 ml), e secaram-se os extractos orgânicos (MgSO^). Purificou-se 0 resíduo após evaporação por cro- 27 matografia de flash em sílica gel (25,0 g, 2,5 x 15 cm) com um gradiente em fases de CHCl^ para CHCl^: acetona/l:l. Combinaram- se as fracçoes contendo o produto com um Rf de 0,21 (sílica gel, CHCl^: acetona/l:l) para se obterem 92 mg do composto desejado.

pf: 202-204°C;

Análise calculada para θΐβ^ιθ^Ο^ ^: 55.96; H, 4.70; íí, 14.5C

Determinada: C, 56.04; H, 4.74; N, 14.40

A RLílí e a espectrometria de massa estavam de acordo com a estrutura.

Exemplo 14: 6-Metoxi-9-/5-0~(4-metilfenilsulfonil)-(^>-D-arabinofuranosil7-9H-purina

Suspenderam-se 0 cloreto de 4-toluenossulfonilo recentemente recristalizado (0,312 g, 1,63 mmol) e 9 (|^-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9R-purina do Exemplo 3 (0,308 g, 1,09 mmol) em acetonitrilo anidro (25 ml), arrefeceu -se para 3°C num banho de gelo, e adicionou-se piridina (5,0 ml) para dissolver o nucleósido. Agitou-se a solução em árgon a 3°C durante 1 hora, manteve-se em seguida a -15°C durante 42 horas. Arrefeceu-se a mistura reaccional com bicarbonato de só. dio a 5% (3 ml), evaporou-se para aproximadamente 10 ml, coeva porou-se em seguida com 95% de etanol. Absorveu-se 0 resíduo numa quantidade mínima de sílica gel e adicionou-se a uma colu na de flash com sílica gel (25,0 g, 2,5 x 15 cm) em CH^Clg:

MeOH (15:1). À eluição com este solvente (450 ml) seguida de CH^Cl^íMeOH (10:1, 550 ml) produziu três materiais absorventes de UV. Combinaram-se as fracçoes contendo um material com Rf= =0,42 (sílica gel, CHgClgZ^eOH (10:1) e purificaram-se em seguida em três placas sequenciais de sílica gel em cromatografia preparativa, usando em primeiro lugar CHgC^jMeOH (10:1) e acetona:^nas segundas duas placas para produzir 88 mg de material desejado na forma de um vidro transparente, pf: 177-181°C;

Análise calculada para Ο^θί^θΝ^Ογβ. 0.15 H^Os C, 49.23;

H,4.66; í.,12.76

Determinada: G, 49.28; H, 4.71; N, 12.71.

A RW e a espectrometria de massa estavam de acordo com a estrutura.

Exemplo 15: 6-^etoxi-9-(5-0~nietil sul fonil-f>-D-arabino furanosil)-9H-purina

Suspendeu-se a 9-(^-0-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina do Exemplo 3 (0,600 g, 2,13 mmol) em acetonitrilo seco (40 ml) e adicionou-se piridina anidra (8 ml). 0 frasco foi arrefecido num banho de gelo/sal -3°G e adicionou-se cloreto de metano sulfonilo (0,16 ml, 2,13 mmol). 25 minutos depois arrefeceu-se a solução com HgO (3 ml), e concentrou-se para 10 ml, e depois coevaporou-se com várias adições de etanol, mantendo-se sempre a temperatura abaixo de 38°G. Hemoveu-se a piridina residual numa bomba de vazio. Aplicou-se o resíduo a uma coluna de flash de sílica gel (25,0 g, 2,5 x 15 cm) equilibrada em CH^Cl^xtíeOíI (15:1). A coluna foi eluida em primeiro lugar com 150 ml deste solvente e depois com CHgG^: :MeOH (10:1, 450 ml). As fracções contendo o material com um Rf=O,34 sílica gel, CHgC^íMeOH (10:1) produziram 0,488 g do produto (57%) como espuma branca:

pf: 177-181°C (dec);

Análise calculada para C^H-^N^OyS ’ 0.5 HgO: G, 39.02; H,4.64;

N,15.17

Determinada: C, 39.02; H, 4.66; Ií, 15.08.

Os dados de Riffl e de esoectometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 16: 9-(5~0~(4-netilbenzoil)-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina

Suspendeu-se a 9-(^-D-arabinofurano- 29 -

sil)-6-metoxi-9H-purina do Exemplo 3 (0,283 g, 1,0 mmol) em acetonitrilo anidro (10,0 ml), adicionou-se piridina (2,3 ml) para efectuar uma solução completa, seguido de cloreto de 4-metil-benzoilo (0,170 g, 1,1 mmol). Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 24 horas em atmosfera de árgon, arrefeceu-se por adição de isopropanol (5 ml), e evaporou-se à secura, seguido de coevaporação com etanol (2 x 10 mil 0 resíduo foi depois purificado por cromatografia de flash em gel de sílica (25,0 g, 2,5 x 15 cm) com um gradiente em fases de CHCl-j para 1:1 GHCl^:acetona. As fraeções contendo o produto com Rf=0,41 (gel de sílica, GHCl^:acetona/l:l) foram combinados para produzirem 132 g do composto desejado:

pf: 127-128°C;

Análise calculada para ^χ^^Ο^θό * θ·5 ^2θ^: 0,55.74; Η,5.17;

R,13.69.

Determinada: C, 55.48; Η, 5.36; K, 13.64.

Os dados de Rkh e de espectometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 17: 9-(5-0-(4-Clorobenzoil)-^-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina

Suspendeu-se 9-((^-D-arabinofuranosil) -6-metoxi-9H-purina do Exemplo 3 (0,283 g, 1,0 mmol) em acetonitrilo anidro (10,0 ml), adicionou-se piridina (2,3 ml) para efectuar a solução completa, seguida de cloreto de 4-metil-ben zoilo (0,193 g, 1,1 mmol). Agitou-se a mistura reaccional â temperatura ambiente durante 24 horas em atmosfera de árgon, arrefeceu-se por adição de isopropanol (5 ml), e evaporou-se à secura, seguido de coevaporação com etanol (2 x 10 ml). 0 resíduo foi depois purificado por cromatografia de flash em gel de sílica (25,Og, 2,5 x 15 cm) com um gradiente em fases de CHCly· acetona (1:1). As fraeções contendo o produto com Rf de 0,37 (gel de sílica, CHCl^:acetona (1:1) foram combinadas para produzirem 105 g do composto desejado:

pf: 122-124°C;

í

Análise calculada para C^gR^ClN^O^ . 0.5 H^Q; 0,50.30; Ií,4.22;

R,13.04.

Determinada: 0,50.20; H,4.28; Ií,12.94.

Os dados de RÍ4E e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 18: 9-(5-0-(4-.iletoxibenzoil)-fr-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina

Suspendeu-se a 9-((^-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina do Exemplo 3 (0,283 g, 1,0 mmol) em acetonitrilo anidro (10,0 m), adicionou-se piridina (2,3 ml) para efectuar a solução completa, seguida de cloreto de 4-metil-benzoilo (1,1 mmol). Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 24 horas em atmosfera de argon, arre feceu-se por adição de isopropanol (5 ml), e evaporou-se à secura, seguido de coevaporaçao com etanol (2 x 10 ml). 0 resíduo foi então purificado por cromatografia de flash em gel de sílica (25,0 g, 2,5 x 15 cm) com um gradiente em fases de GHG1para CHClyacetona (1:1). As fracções contendo o produto com Rf de 0,30 (gel de sílica, CHClyacetona (1:1) foram combinadas para produzirem 110 g do composto desejado:

pf: 195-197°G

Análise calculada para ^i9^20^4°7 ’ ^0: G, 54.22; H,4.91» lí, 13.31

Determinada: C, 54.22; H, 4.94; Ií, 13.30

Os dados de RmN e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 19: 6-metoxi-9-(5~0~fenilacetil-^-D-arabinofuranosil)-9H-Purina

Suspendeu-se a 9-(O-D-arabinofurano- 31 -

sil)-6-metoxi-9H-purina do Exemplo 3 (0,300 g, 1,06 mmol) em acetonitrilo (25 ml) seguido de piridina anidra (5 ml). Arrefe ceu-se a solução a 3°C num banho de gelo e adicionou-se cloreto de fenilacetilo (0,20 ml, 1,5 mmol). Após agitação a 3°0 durante uma hora, a solução foi arrefecida para -15°C durante 40 horas. Arrefeceu-se a mistura reaccional com 5% de tfaHCO^ (3ml), concentrou-se para 10 ml, e depois evaporou-se com várias adições de etanol. Retomou-se o resíduo em CELjClg:me0Il (15:1) e aplicou-se a uma coluna de flash em gel de sílica (25,0 g, 2,5x xl5 cm) cheia com o mesmo solvente, eluiu-se com 500 ml deste solvente seguido de (15:1) GH₂CL₂:metanol (15:1, 500 ml). As fracções com Rf=0,38 (sílica, 10:1 CH₂C1₂:metanol) produziram 0,128 g de produto bruto contaminado com um valor de Rf impureza superior. A purificação adicional por cromatografia de camada preparativa com CELjCl^LíeOH (10:1), seguida da segunda placa utilizando acetona: CH^Cl^ (1:1) produziram 0,102 g do produto lesejado como espuma branca:

pf: 74-75°C;

Análise calculada para θχ^^θΗ^Ο^ . 0.1 H^O: 0,56.74; H,5,O6;

tf,13.93.

Determinada: G, 56.74; H, 5.11; tf, 13.90.

Os dados de RLitf e de espectrometria le massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 20; 6-ketoxi-9-(5-Q-feniloxiacetil-^-D-arabinofuranosil)-9H-purina

Suspendeu-se a 9-(Ç-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-Purina do Exemplo 3 (0,322 g, 1,14 mmol) em acetonitrilo seco (25 ml) seguido de piridina anidra (5 ml). Arrefeceu-se a solução para 3°G num banho de gelo e adicionou-se cloreto de fenoxiacetilo (0,24 ml, 1,7 mmol). Após agitação durante duas horas a 3°C, a mistura reaccional foi arrefecida com 5% de tfaHCO^ (2 ml), concentrada para 10 ml, e evaporada com varias adições de etanol. Purificou-se o resíduo por cromatografia de flash em gel de sílica (25,0 g, 2,5 x 15 cm) em ·ftAí Xr ►.· · Ww»&·*'

em CH₂C1₂:metanol (15:1). Eluiu-se eom 400 ml deste solvente seguido de 10:1 CH₂C1₂:metanol (500 ml), e 9:1 CH₂C1₂:metanol (300 ml) produzindo 0,213 g do produto bruto. Este material foi recristalizado de metanol para produzir 0,101 g (20%) de um material cristalino branco:

pf: 193-195°C

Análise calculada para ^ci9^H2O^4°7 ’ θ·θ5 H₂0: ^»54.69; 11,4.85;

N,13.43.

Determinada: C, 54.69; H, 4.89; H, 13.40.

Os dados de RMN e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 21: 6-Metoxi-9-(õ-O-metoxiacetil-ft-D-arabinofuranosil)-9H-purina

Suspendeu-se a 9-(Q-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-Purina do Exemplo 3 (0,300 g, 1,06 mmol) em acetonitrilo (25 ml) seguida de adição de piridina anidra (5ml)i Arrefeceu-se a solução para -3°G num banho de gelo/sal e adicio nou-se cloreto de metoxiacetilo (0,10 ml, 1,1 mmol). Após agitação no banho de gelo/sal durante 2 horas, a mistura reaccional foi arrefecida com 5% de NaHCO^ (2 ml), concentrada para 10 ml, e depois evaporada com várias adições de etanol. Aplicou -se o resíduo numa coluna de flash de gel de sílica (25,0 g,

2,5 x 15 cm) cheia com 10:1 CH₂C1₂:MeOH. Eluiu-se com 500 ml deste solvente seguido de 9:1 CíI₂Gl₂:MeOH (300 ml) produzindo 0,086 g do produto bruto. Recristalizou-se este material de MeOH e HgO para produzir 0,035 g (9,3%) de cristais brancos: pf: 137-139°G;

Análise calculada para · 0.5 H₂0: 0,46.28; H,5.27;

N,15.42.

Determinada: 0, 46.33; K, 5.27; N, 15.37.

Os dados de RMN e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 22: 9-/5-O-(4-Nitrobenzoil)-^-D-arabinofuranosil/-6-metoxi-9H-purina

Suspendeu-se a 9-(^-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina do Exemplo 3 (0,283 g, 1,0 mmol) em acetonitrilo anidro (10,0 ml), adicionou-se piridina (2,3 ml) para se efectuar uma solução completa, seguido de cloreto de

4-nitro-benzoilo (0,205 g, 1,1 mmol). Agitou-se a mistura reac cional à temperatura ambiente durante 24 horas em atmosfera de árgon, arrefeceu-se por adição de isopropanol (5 ml), e evaporou-se à secura, seguido de coevaporação com etanol (2x10 ml). 0 resíduo foi então purificado por cromatografia de flash em gel de sílica (25,0 g, 2,5 x 15 cm) com um gradiente em fases de CHGl^ para CHCl^:acetona (1:1). As fracções contendo o produto com um Rf=O,37 (gel de sílica, CHCl^:acetona (1:1) foram combinadas para produzirem 105 g do composto desejado: pf: 202:203°C;

Análise calculada para G-^θΗ^γΝ^Οθ: 0,50.12; H,3.97; N,l6.24.

Determinada: G, 50.21; h, 4.02; lí, 16.16.

Os dados de RMN e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 23: 6-Metoxi-9~(5-0-pentanoil-ft-D-arabinofuranosil)-9H-purina

Suspendeu-se a 9-(Ô-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina do Exemplo 3 (0,852 g, 3,01 mmol) em acetonitrilo (75 ml) e adicionou-se piridina seca (15 ml).Arre feceu-se a solução num banho de gelo/água e adicionou-se clore to de pentanoilo (0,4 ml, 3,31 mmoles). Arrefeceu-se a mistura reaccional após duas horas por adição de 3 ml de metanol e eva porou-se para se obter um óleo viscoso transparente. Purificou -se o resíduo por cromatografia de flash em gel de sílica com um gradiente em fases de CHCl^ para CnCl^m-eOE (9:1). Este faç to produziu 330 mg do produto contaminado com o correspondente 2’ -éster (ver Exemplo 32) e um produto desconhecido com um

valor de Rf inferior. 0 resíduo foi purificado adicionalmente por HPLC preparativa de fase inversa (Alltech C_1Q, 10 mm x 25 cm, tamanho de partícula 10 micrometros, 70% 1^0:30% CH^CR,

4,0 ml/min) preparando uma solução 10 mg/ml no mesmo solvente com um volume de injecção de 1,0 ml. 0 resíduo foi co-evaporado com acetona para produzir 260 mg de espuma branca e frágil (24%):

pf: 85-95°C;

Análise calculada para θι^^Η22^Κ4θ6 * 0.05(CH₃)200.0.55 Hg⁰¹C, 51.16; R, 6.22; R, 14.78.

Determinada: C, 50.98; H, 6.03; R, 14.63.

Os dados de RmA e de espectrometria de massa eram coerentesscom a estrutura.

Exemplo 24: 9-/5-0-(4-Aminobenzoil-^-D-arabinofuranosil)7-6-metoxi-9H-Purina

Suspendeu-se a 9-(5-0-(4-Ritrobenzoil)-^-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-^H-purina do Exemplo 22 (0,350 g, 0,81 mmol) em etanol (100,0 ml) e adicionou-se 10% de paládio em carvão (0,100 g). Apôs evacuação e carga alternativas do sistema com hidrogénio, a mistura reaccional é agitada num aparelho de Parr a 345 kpa durante três horas. Piltrou-se depois a mistura reaccional através de Celite e evaporou-se o filtrado à secura. Suspendeu-se o resíduo após evaporação em metanol e filtrou-se para produzir o composto desejado como sólido branco (0,285 g, 88%):

pf: 198-200°C;

Análise calculada para C-^H-^R^Og . 0.3 Η2θί C, 53.15; R,4.8ó;

R, 17.22.

Determinada: C, 52.96; H, 4.64; R, 17.07.

Os dados de RMR e de espectrometria • de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 25: 6-ketoxi-9- (5-0-propionil-^-D-arabinofuranosil)-9H-purina

Suspendeu-se a 9-(?-B-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina do Exemplo 3 (0,847 g, 3,0 mmol) em acetonitrilo anidro (30,0 ml) e adicionou-se piridina (9,0 ml) para efectuar uma solução completa. Após arrefecer-se para 5°G, adicionou-se cloreto de propionilo (0,305 g, 3,3 mmol) e agitou-se a mistura reaccional durante a noite em atmosfera de árgon enquanto era aquecida para 13°C. Após arrefecimento com isopropanol (5 ml) e evaporação â secura, seguido de coevaporação com etanol (2x10 ml), o resíduo foi purificado por cromatografia de flash em gel de sílica (25,0 g, 2,5 x 15 cm) com um gradiente em fases de CHGl^:acetona (1:1). As fracções contendo o produto com Rf=0,38 (gel de sílica, CRCl^íacetona/líl) foram combinadas e este material foi purificado adicionalmente por cromatografia de pressão média em gel de sílica (colunas tandem 1,5x25,0 cm e 1,5x100,0 cm; CITCl^: acetona (3:1) para produzir 0,114 g do composto desejado como sólido branco:

pf; 62-Ó4°C;

Análise calculada para ^14^3^4^ * θ·5 ^2θ G, 50.68;

H, 5.76; R, 15.25.

Determinada: C, 50.72; H, 5.80; R, 15.28.

Os dados de RkR e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 26; 9-(5-0-Butanoil--D-arabinofuranosil)-6-met oxi-9Hpurina

Suspendeu-se a 9-(Q-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina do Exemplo 3 (0,847 g, 3,0 mmol) em acetonitrilo anidro (30,0 ml) e adicionou-se piridina (9,0 ml) para efectuar a solução completa. Após arrefecimento para 5°G, adicionou-se cloreto de butirilo (0,352 g, 3,3 mmol) e agitou-se a mistura reaccional durante a noite em atmosfera de árgon

enquanto era aquecida para 13°G. Após arrefecimento com isopropanol (5 ml) e evaporação à secura, seguida de coevaporação com etanol (2x10 ml), o resíduo foi purificado por cromatografia de flash em gel de sílica (25,0 g, 2,5 x 15 cm) com um gradiente em fases de CHCl^ para GHGl^íacetona (1:1). Combinaram-se as fracções contendo o produto com Rf=0,38 (gel de sílica, CHCl₃:acetona/l:l). Este material foi purificado adicionalmente por cromatografia de pressão média em gel de sílica (colunas tandem 1,5 x 25,0 cm e 1,5 x 100,0 cm; GHGl^íacetona (2:1)) para produzir 267 mg do composto desejado como sólido branco: pf: 108-110°C;

Análise calculada para ^ΰ]_5^Η2Ο^4°6^: 51.13; h,5.72; 11,15.90.

Determinada: C, 51.21; H, 5.73; N, 15.81,

Os dados de RmN e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 27: 9-/5-0-(2,2-Dimetilpropionil)-^-D-arabinofuranosil7-6-metoxi-9H-purina

Suspendeu-se a 9-(^-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina do Exemplo 3 (0,850 g, 3,01 mmol) em acetonitrilo seco (75 ml) e adicionou-se piridina anidra (15 ml). Arrefeceu-se a solução para, 3°G num banho de gelo e adicio nou-se cloreto de 2,2-dimetil propionilo (0,41 ml, 3,3 mmol). Após agitação a 3°C durante seis horas, a mistura reaccional foi arrefecida com heOH (2 ml), concentrada para 10 ml, e depois coevaporada com várias adições de etanol. Aplicou-se o re síduo numa coluna de flash em gel de sílica (20,0 g, 2,5 xl2,0 cm) cheia com CH₂Cl₂;meQH (10:1). Eluiu-se com 300 ml deste solvente produzindo 0,464 g de material de partida, e 0,553 g de produto bruto. A purificação adicional por cromatografia de flash (sílica, 2,5 x 10,0 cm), eluindo com um gradiente dé CH₂C1₂ para keOH em CH₂C1₂ (1:9) produziu 0,419 g (38%) de um vidro transparente:

pf: 73-7ó°G;

Análise calculada para θχ^22^4θ6 * ^2θ^: ^,51.19; Η, 6.18;

14,14-93.

Determinada: Ο, 51.43» Η» 6.06; Η, 14.91.

Os dados de EmH e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 28: 9-(5-0-Acetil-^~D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9Hpurina

Preparou-se uma suspensão de 9-(^-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina do Exemplo 3 (0,850 g, 3,01 mmol) em acetonitrilo anidro (75 ml) seguido de piridina anidra (15 ml). Arrefeceu-se a solução para 3°0 num banho de gelo e adicionou-se cloreto de acetilo (0,24 ml, 3,4 mmol).

Após agitação num banho de gelo/sal durante meia hora, arrefeceu-se a mistura reaccional com metanol (2 ml), concentrou-se a 10 ml, e em seguida evaporou-se com várias adições de etanol. Purificou-se o resíduo por cromatografia de flash em gel de sílica (25,0 g, 2,5 x 15 cm), eluindo com C^C^MeOHdO:!, 300 ml) para dar 0,710 g do produto bruto. Uma segunda coluna de (25,0 g, 2,5 x 15 cm), eluindo com CHg^lgí-eOH (15:1) deu 0,610 g de um vidro transparente que ainda continha uma pequena quantidade de uma impureza de alto valor de Af. A purificação adicional do produto por cromatografia de camada preparativa com 0Η₂01₂:MeOH (9:1), seguida de carregamento das aparas da placa numa coluna de flash (20,Og, 2,5 x 12 cm) em ^e eluindo com gradiente de MeOH em CH^Cl^ produziu o produto pretendido na forma de uma espuma branca (0,308g, 31%):

pf: 64-67°C;

Análise calculada para . 0.5 H^O: 0,46.85; 11,5.14;

11,16.81.

Determinada: 47.04; H, 5.12; N, 16.72.

Os dados de íímN e espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 29: 6-Metoxi-9-/5-Q- (2-metilpropionil)-ft-D-arabinoftirano s iV- 9H- P urina

Μ Z

Preparou-se uma suspensão de 9-(l¹-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-2H-purina do Exemplo 3 (0,500 g,

1,77 mmol) em acetonitrilo anidro (25 ml) seguido de piridina anidra (5 ml). Arrefeceu-se a solução para 3°C num banho de gelo e adicionou-se cloreto de isobutirilo (0,21 ml, 2,0 mmol). Apôs agitação a 3°G durante três horas, parou-se a reacção com MeOH (2 ml), concentrou-se para 10 ml, e em seguida coevaporou -se com várias adições de etanol. Aplicou-se o resíduo a uma coluna de silica gel de cromatografia de flash (25,0 g x 2,5 x x 15 cm) cheia com CHgClgíMeOH (10:1). A eluição com 300 ml deste solvente produziu 0,167 g do material de partida, e 0,221 g do produto bruto. Fez-se a purificação adicional do produto por cromatografia preparativa de camada com CHgC^íMeOK (9il), seguida de carregamento de aparas de placa numa coluna de sílica gel de flash (16,0 g, 2,5 x 10 cm) cheia com CHgCl^. A coluna foi eluida com gradiente de MeOH em CI^C^ obtendo-se 0,127 g de um vidro transparente (20%):

pf: 68-71°C.

Análise calculada para θ^^Ο^-θό * H^O . 0.05 MeOH:

0, 50.43; H, 5.82; 1Ί, 15.63.

Determinada: C, 50.49; H, 5.83; N, 15.62.

Os dados de HMN e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 30? 6-Metoxi-9-/2-0-(2»2-dimetilpropionil)-ft-D-arabinofuranosil/-9H-purina

Adicionaram-se 9- ((^-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina do Exemplo 3 (298,5 mg, 1,06 mmol), 4-dimetilaminopiridina (1 mg, 10 /mol), acetonitrilo (20 ml), e piridina (5 ml) a um frasco de fundo redondo de três bocas equipado com um termómetro, válvula de admissão de argon, agitador magnético, condensador e manta de aquecimento. Adicionou39 -

-se anidrido trimetilacético (0,22 ml, 1,06 mmol) e aqueceu-se a soluçSo a 40° G durante 26 h,oras. Parou-se a reacção nessa altura adicionando 2 ml de água e evaporando até de obter um óleo transparente. Purificou-se o resíduo por cromatografia de flash em gel de sílica com um gradiente em fases de CHCl^ a CHGl^: MeOH (9:1). Este material foi ainda purificado por cromatografia de camada preparativa com CHCl^ikeOH (9:1) e coevaporado com tetracloreto de carbono e acetona para se obterem 90 mg de uma espuma branca frágil.

Análise calculada para θιό^Η22^Ν4°6 ‘ (GH-^GQ . 0,45 GGl^:

G, 45.47; H, 5.13; H, 12.78.

Determinada: C, 45.67; H, 5.27; E, 12.67.

Os dados de RME e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 31: 6-ketoxi-9-/~(2,3,5-tri-O-aeetil)-β-D-arabinofurano sil7-9H-purina

Adicionaram-se a 9-(C^?-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina do Exemplo 3 (1,009 g, 3,57 mmol),

4-dimetilaminopiridina (0,0098 g, 80 /mol), trietilamina (0,59 ml, 4,2 mmol) e acetonitrilo anidro (52 ml) a um frasco de fundo redondo de três bocas equipado com termómetro, entrada de árgon, agitador magnético e um banho de gelo/acetona. Após se ter arrefecido a solução leitosa a -20°C, adicionou-se anidrido acético (2,4 ml, 25,4 mmol). A solução tornou-se imediatamente transparente. Passados 5 minutos parou-se a reacção com MeOH (5 ml) e evaporou-se para se obter um óleo viscoso transparente. A cromatografia de flash em gel de sílica com um gradiente de CHCl-j e MeOH produziu um produto na forma de um ôleo viscoso transparente. Dissolvendo este material numa quantidade mínima de acetona, diluindo com água e liofilizando, isolaram-se 1,03 g (71%) de produto na forma de um pó branco.

Análise calculada para θχγ^Η20^4°8^: G,50.00; H,4.94; 11,13.72. Determinada: G, 49.80; H, 5.09; E, 13.50.

Os dados de RMN e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 32: 6-Metoxi-9-(2-0-pentanoil-^-D-arabinofuranosil)-9H-purina.

Método 1

Adicionaram-se 9- (β-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina do Exemplo 3 (283 mg, 1,0 mmol) acetonitrilo (20 ml) e piridina (5 ml) a um frasco de fundo redondo de três bocas equipado com um termómetro, válvula de admissão de árgon, e agitador magnético. Adicionou-se anidrido valêrico (0,2 ml, 1,0 mmol) e deixou-se a solução agitar a 20°G durante três horas. Parou-se a reacção com água (2 ml) e evaporou-se para se obter um óleo transparente, e em seguida purificou-se por cromatografia de flash em sílica com um gradiente em fases de GHCl^ a CHClyMeOH (9:1). Obtiveram-se 110 mg do 2’-êster contaminado com o 5’ -éster (ver Exemplo 23), um material com um valor Rf menor. Este material foi ainda purificado por cromatografia de camada preparativa em sílica com CHCl^xMeQH (9:1) e coevaporado com acetona para se obterem 70 mg do 2* -éster como um vidro transparente.

Análise calculada para 6]_6^22^4°6 ' C, 53.16;

H, 6.37; Ν, 14.17v

Determinada: G, 52.89; H, 6.37; N, 13.96.

Os dados de RMN e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Processo 2

Adicionou-se 6-metoxi-9-/3,5-0-(1,1,

3,3-tetraisopropildisiloxan-l,3-diil)-f^?-D-arabinofuranosil/-^H-purina do Exemplo 40 (2,5 g, 4,8 mmol) a um frasco de fundo redondo de 250 ml juntamente com 4-dimetilaminopiridina (0,06g, 0,47 mmol). Adicionaram-se acetonitrilo anidro (30 ml) e trieti

Ίamíηa (2,65 ml), e carregou-se um funil de adição constante com acetonitrilo (20 ml) e anidrido pentanóico (1,13 ml, 5,7 mmol). Arrefeceu-se a mistura reaccional num banho de gelo a 3°C numa corrente de árgon. A adição lenta de solução de anidrido pentanóico foi efectuada num periodo de 2 horas. Tratou-se a mistura reaccional com metanol (10 ml) e concentrou-se a pressão reduzida. Retomou-se o resíduo em GfíCl^ (200 ml) e extraiu-se com água (2x50 ml). Extrairam-se de novo as fases aquosas combinadas com OHCl^ (25 ml) e secaram-se as fases orgânicas combinadas (MgSO^), filtraram-se e concentraram-se para se obterem 3,44g de produto bruto.

Dissolveu-se o produto bruto 6-metoxi-9-/2-0-pentanoil-3,5-0-(l,l,3,3-tetraisopropildissiloxan-1,3-diil)-^-D-arabinofuranosil/-^H-purina em tetrahidrofurano (120 ml) e H^O (3 ml). Arrefeceu-se a solução para 3°0 num banho de gelo e adicionou-se uma solução 1,0 II de fluoreto de te trabutilamónio em tetrahidrofurano (6,0 ml). Após 1,5 horas, adicionou-se uma solução saturada de cloreto de amónio (2 ml) e fez-se passar a mistura reaccional directamente numa coluna de gel de sílica (5,0 x 8,0 cm) cheia de clorofórmio. Eluiu-se a coluna com clorofórmio (200 ml) e em seguida com uma mistura 1:1 de acetona:clorofórmio (400 ml) e todas as fracções conten do o produto foram combinadas e concentradas. A purificação final foi efectuada numa coluna de flash de sílica gel (5,0 x 15 cm) eluida com gradiente em fases de acetona em CHCl^ obtendo-se 1,17 g (67%) de um vidro pegajoso transparente contaminado com ácido pentanóico:

Análise calculada para ^ci^22^4°6 * ^0,2 ^5^10θ2^{: G}’ 5²·79>

H, 6.25; D, 14.48.

Determinada: G, 52.97; H, 6.38; N, 14.60.

Exemplo 33: 9- (2-0-But anoil- ^>-D- ara bino furano sil) - 6-met oxi- 9H-purina

Adicionaram-se 9- ((’-D-arabinofuranosil )-6-metoxi-9H-purina do Exemplo 3 (283 mg, 1,0 mmol), aceto-

nitrilo (20 ml) e piridina anidra ( 5 ml) a um frasco de fundoí redondo de três bocas equipado com termómetro, admissão de ár-ι gon, agitador magnético e arrefeceu-se para 4°0. Adicionou-se ; anidrido butírico (170 /1, 1,0 mmol) e deixou-se a solução agii tar a 5°C durante 6 horas em atmosfera de argon. Nesta altura,ί parou-se a reacção adicionando 2 ml de água e evaporando para se obter um óleo transparente. Purificou-se a mistura reaccional por cromatografia de flash utilizando um gradiente em fases de CHCl^ a 1:1 CHCl^:acetona. Este material foi ainda purií ficado por cromatografia de camada preparativa em gel de sílica com uma mistura de 9:1 CHCl^MeOH para se obterem 90 mg do 2’-éster como óleo transparente.

Análise calculada para θ]_5^20^4θ6 ’ ^2θ^: 50.36; E,5,80;

N, 15.66.

Determinada: C, 50.36; H, 5.81; N, 15.66.

Os dados de RMN e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 34: 6-metoxi-9--/~2-Q-(2-metilpropionil)-ft-D-arabinofuranosiV-9H-purina

Adicionaram-se 9-(β-D-arabinofurano sil)-6-metoxi-9H-purina do Exemplo 3 (290,0 mg, 1,03 mmol), acetonitrilo (20 ml) e piridina (5 ml) a um frasco de fundo re dondo de três bocas equipado com termómetro, admissão de árgon, agitador magnético, condensador e manta de aquecimento. Adicio nou-se anidrido isobutírico (170 /J., 1,0 mmol) e aqueceu-se a solução a 30°C durante quatro horas. Parou-se a reacção nesta altura adicionando 2 ml de água e evaporou-se para se obter um óleo. Purificou-se o resíduo por cromatografia de flash em gel de sílica com um gradiente em fases de CHCl^ a (9:1). As fracções que continham o produto com um valor de Rf de 0,54 (sílica CHCl^iMeOIi, 20:1) foram ainda purificadas por cromatografia de camada preparativa em gel de sílica com CnCl^;

:MeOH (9:1). Obtiveram-se 90,0 mg do 2’-êster como vidro trans ’ parente.

Análise calculada para . 0.1 G^H^O: 0,51 »31; ΙΙ,5·8Ο;|

11,15.64. ί

Determinada: G, 51.41; Η, 5·θ1; Ii, 15.72. i i

Os dados de RAIi e de espectrometria ί de massa eram coerentes com a estrutura. i

Exemplo 35: 9-(3-0-Benzoil-f⁾-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina. í

Dissolveu-se a 9-(2,3-anidro-(5-D-lixoj furanosil)-6-metoxi-9H“purina (para a preparação ver o Exemplo j 36) (0,264 g, 1,0 mmol) em etanol anidro (20,0 ml), aqueceu-se sob refluxo e adicionou-se em atmosfera de árgon benzoato de amónio (0,209 g, 1,5 mmol). Adicionou-se mais 1,5 mmol de benzoato de amónio âs 24 e 35 horas. Evaporou-se a mistura reaccio nal à secura após 48 horas de refluxo. 0 resíduo após evaporação foi purificado por cromatografia de chama em gel de sílica (25,0 g, 2,5 x 15 cm) com CHCl₃:acetona/3:l. As fracções que continham o produto com Rf de 0,52 (sílica gel, CHCl^:acetona/ 1:1) foram combinadas para darem 138 mg do composto pretendido, pf: 180-182°C;

Análise calculada para θ^θΗ^θΝ^Ο^: C,55.96;H,4.7O;lí,14.5O.

Determinada: C, 55.90; K, 4.71; Ii, 14.44.

Os dados de Rmlí e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 36: 9-(2,3-Anidro-γ-D-lixofuranosil)-6-metoxipurina

Dissolveu-se trifenilfosfina (5,9O2g,

22,5 mmol) em 1,4-dioxano (138 ml) e aqueceu-se a 70°G. Adicionou-se a esta mistura 9-(Q-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-puri na do Exemplo 3 (4,234 g, 15,0 mmol), agitou-se a mistura duran te 10 minutos, e adicionou-se gota a gota durante 10 minutos azodicarboxilato de dietilo (3,919 g, 22,5 mmol) em 1,4-dioxano (50 ml). Agitou-se a mistura reaccional a 70°G durante uma hora, arrefeceu-se para a temperatura ambiente e evaporou-se para se obter um óleo castanho escuro pesado. Este material foij purificado por cromatografia de flash em sílica (188,0 g, 5,0 xj í

x 21,0), eluindo com CHCI-jíacetona (5:1, 3,6 litros) e GhCly zAcetona (3:1, 2,0 litros). Combinaram-se as fracções contendo o material com Rf=0,24 (sílica, CHCl^:acetona, 1:1) e evapora- ram-se à secura. Purificou-se ainda o resíduo por cromatografia) de flash em sílica (250,0 g, 5,0 x 28,0 cm), eluindo com EtOAc ) para se obterem 2,452 g (62%) do material pretendido na forma ) de uma espuma branca: ) s

pf: 144-145.5°C;

Análise calculada para ^11^12^4^4 * ^O,25 63¾⁰ · °·°5 GHGl^:

G, 49.78; H,4.80; N,19.68.

Determinada: C, 49.80; H, 4.95; h, 19.87.

Os dados de RmN e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 37: 6-Metoxi-9-/~(2-Q-(4-metoxibenzoil) )-fi-D-arabinofuranosil7-9H-purina

Dissolveu-se a 6-metoxi-9-/2-(4-metoxibenzoil)-3,5-0-(1,1,3,3-tetraisopropildissiloxan-1,3-diil)-^-D-arabinofuranosil/-9H-purina (para a preparação ver Exemplo 43 a seguir) (0,86 g, 1,3 mmol) em THE (40 ml) e H₂0 (1 ml) adicionou-se água (1 ml). Arrefeceu-se a solução para 3°G e adicionou-se uma solução 1,0 M de fluoreto de tetrabutilamónio em THE (6,3 ml). Passados 30 minutos, adicionaram-se mais 5 ml de água, reduziu-se a mistura reaccional a metade e fez-se pas sar directamente para uma coluna de flash de sílica gel (25,Og,

2,5 x 15 cm) contendo GK^Glg. Eluiu-se a coluna com CH₂C1₂(200 ml) seguido de CH₂Cl₂:keOH (20:1, 400 ml) e todas as frac ções contendo matei⁴ial com Rf=0,20 (sílica, CH₂C1₂:AeOh (20:1) foram combinadas para se obterem 0,570g de uma espuma branca.

A purificação final foi conseguida numa coluna de flash de sílica gel (5,0 x 15 cm) contendo CííCly a eluição com um gradiente em fases de acetona em clorofórmio produziu 0,325g (60%) do produto na forma de uma espuma branca:

pf: 71-75°C;

Análise calculada para ^19^20^4^7 · θ·^ OHCl^ . 0.25 GyigO:

C, 51.60; H, 4.71; lí, 12.00.

Determinada: C, 51.56; H, 4.70; II, 11.95.

Os dados de fiMN e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 38: 6-metoxi-9-/2-0-(4-metilbenzoil))-ft-D-arabinofurano sil/-9H-Purina

Dissolveu-se a 6-metoxi-9-/2-(4-metilbenzoil)-3,5-0-(1,1,3,3-tetraisopropildissiloxan-1,3-diil)-(^-D-arabinofuranosil/-9H-purina (para a preparação ver Exemplo 42 a seguir) (0,85 g, 1,3 mmol) em THE (40 ml) e água ( 1 ml). Arrefeceu-se a solução para 3°C e adicionou-se uma solução 1,0 M fluoreto de tetrabutilamônio em THE (5,0 ml). Passados 30 minutos, adicionaram-se mais 5 ml de água, reduziu-se o volume da mistura reaccional a metade, e fez-se passar directamente por uma coluna de flash de sílica gel (20,0 g, 2,5 x 12 cm) contendo C^C^· Eluiu-se a coluna com CHgO^ ^00 ml) seguido de ^:^θΟΗ (15:1., 400 ml) e combinaram-se todas as;

fracçoes contendo 0 material com Rf=0,20 (sílica, Ο^Ο^ίΑ,θΟΗ (20:1). Aplicou-se o produto bruto a uma segunda coluna de flash de gel de sílica (25,0 g, 2,5 x 18 cm) contendo acetona: CHgClg (1:1). A eluição com 0 mesmo solvente produziu 0,633 g do produto que foi ainda purificado por cromatografia de camada preparativa (sílica, acetona: GHgClg (1:1)) e cromatografia de chama (25,0 g, 2,5 x 15 cm). Eluiu-se a coluna com um gradiente em fases de acetona em CHGl^ para dar 0,243 g (47%) de um vidro transparente.

pf: 69-73°C;

Análise calculada para ^G]_g^2O^4^6 ’ 0·4 ^ΰ3^6θ ’ θ·^5 GHGl^:

C, 54.17; K, 5.03; A, 12.36.

Determinada: G, 54.00; H, 5.08; lí, 12.30.

Os dados de RuAí e de espectrometria I de massa eram coerentes com a estrutura. j

Exemplo 39: 9-/~2-0- (4-01orobenzoil )-^-D-arabinofuranosiV-ó-metoxi-9H-purina

Dissolveu-se o 9-/2-(4-clorobenzoil)-3,5-0-(1,1,3,3-tetraisopropildissiloxan-1,3-diil-Ώ-arabinofuranosil/-6-metoxi-9H-purina (para a preparação ver o Exemplo 44 a seguir) (1,07 g, 1,7 mmol) em THE (40 ml) e água ( 1 ml). Arrefeceu-se a solução para 3 0 e adicionou-se uma solução 1,0 M de fluoreto de tetrabutilamónio em THE (4,5 ml). Passados 30 minutos, adicionou-se mais 5 ml de água e fez-se passar directamente a mistura reaccional por uma coluna de flash de sílica gel (20,0 g, 2,5 x 12 cm) contendo CHgCl^. Eluiu-se a coluna com (200 ml) seguido de CI^C^íMeOH (20:1, 400 ml) e todas as fracções contendo 0 material com Rf=0,20 (sílica, CHgC^íMeOH (20:1)) foram combinadas. Aplicou-se 0 produto bru to a unia coluna de flash de sílica gel (30,0 g, 2,5 x 18 cm) contendo acetona:CHCl^ (1:1). A eluição com 0 mesmo solvente produziu 0,269 g de produto que foi ainda purificado por croma tografia de fase preparativa (sílica, acetona:CHCl^ (2:3)) e cromatografia de flash (25,0 g, 2,5 x 15 cm). Eluiu-se a coluna com um gradiente em fases de acetona em CHCl^. Preparou-se uma amostra analítica tomando 0 produto em éter anidro e preci pitando com éter do petróleo (4O-6O°C) e liofilizando 0 precipitado para se obterem 0,082 g (12%) de um pó branco:

pf: 76-81°C;

Análise calculada para Ο^θΗ^γΙϊ^Ο^ΟΙ . 1.20 HgO . 0.35 C, 49.45; H, 4.68; A, 12.11.

Determinada: G, 49.78; H, 4.38; H, 11.88.

Os dados de HAT e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 40; 6-ketoxi-9-/3,5-0- (1,2,3,3-tetraisopropil-1,3-dissiloxan-l,3-diil)-@-D-arabinofuranosil7-9D-purina

Dissolveu-se a 9-(^-D-arabinofuranosil )- 6-me toxi- 9H-purina do Exemplo 3 (1,0 g, 3,54 mmol) e imidazole (0,965 g, 14,2 mmol) em dimetilformamida anidra (10 ml) e arrefeceu-se a solução para 3°C. Adicionou-se em seguida 1,3-| -dicloro-l,l,3,3-tetraisopropildissiloxano (1,35 ml, 3,90 mmol)! e agitou-se a mistura em atmosfera de árgon durante três horas. Parou-se a reacção com água (1 ml) e concentrou-se a pressão re duzida. Repartiu-se o resíduo entre acetato de etilo (150 ml) e água (50 ml), e secou-se a fase de acetato de etilo (AgSO^), e concentrou-se. Retomou-se o produto bruto em acetato de etilo e purificou-se por cromatografia de flash em gel de sílica (25,0 g, 2,5 x 15 cm) em acetato de etilo. As fracções com Rf de 0,70 (sílica, acetato de etilo) deram 1,48 g (80%) do material pretendido como sólido branco.

UV max: EtOH: 248,4 nm.

Os dados de RH e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 41: 6-Metoxi-9-/2-0-(2-aminobenzoil)-β-D-arabinofurano siV-9H-purina

Adicionaram-se 9-(^-D-arabinofuranosil)-6-metoxi-9H-purina do Exemplo 3 (0,283 g, 1,0 mmol), aceto nitrilo (15 ml), anidrido isatóico (0,189 g, 1,1 mmol), e bicar *Ή bonato de sódio (84 mg, 1,0 mmol) a um frasco redondo de três bocas, equipado com termómetro, válvula de admissão de árgon, agitador magnético, condensador e manta de aquecimento. Refluxou-se a suspensão durante 3,5 horas e em seguida adicionou-se um segundo equivalente de anidrido isatóico. Apôs se ter reflu xado durante outra hora, arrefeceu-se a mistura reaccional para a temperatura ambiente, filtrou-se e evaporou-se o filtrado para se obter um vidro espumoso. Purificou-se o resíduo por cio matografia de flash em sílica com gradiente em fases de GHGl^ a 9:1 CHCl-jíMeOH. Obtiveram-se 53,1 mg do 2’-éster com um vi48 *

-JSO9*BSaí®5S®K!SÍB7aBBag®XÍ7u. ™ *í dro frágil; pf: 91-93°C.

Análise calculada para O^gH^glí^O^ . 0.3 HgO . 0.2 CH^O:

0, 52.90; H, 4.98; K, 16.95.

Determinada; C, 53.23; H, 4.98; H, 17,21.

Os dados de BMK^T e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 42; 6-Metoxi-9-2^-0~(4-metilbenzoil)-5,5-0-(1,1,5,5-tetraisopropildissiloxan-I,3-diil)- P-D-arabinofuranosil7-9H-purina

Adicionou-se 6-metoxi-9-/3,5-0-(1,1,

3,3-tetraisopropildissiloxan-l,3-diil)- p-D-arabinof urano sil}7-9H-purina do Exemplo 40 (1,0 g, 1,9 mmol) a um frasco de fundo redondo de 100 ml com 4-dimetilaminopiridina (0,02 g, 0,16 mmol), acetonitrilo (25 ml), e trietilamina (0,4 ml), e arrefeceu-se a solução num banho de gelo a 3°C durante 5 minutos. Adi cionou-se cloreto de toluilo (0,30 ml, 2,3 mmol), e agitou-se a mistura durante três horas a 3°C. Adicionaram-se em seguida mais trietilamina (0,5 ml) e cloreto de toluilo (0,5 ml) e aqueceu-se a mistura à temperatura ambiente. Após sete horas, tratou-se a mistura com metanol (2 ml), concentrou-se a pressão reduzida e aplicou-se o resíduo a uma coluna de sílica gel (2,5 x 15 cm) em CHgClg. Eluiu-se a coluna com CHgClgíMeOH (10:1,

400 ml) obtendo-se 0,90 g (74%) do produto pretendido:

Análise calculada para ^C31^H46^E4°7^Si2^{í C}’ 57,92; H, 7,21;

E, 8,71.

Determinada: C, 57.69; H, 7.43; 17, 8.40.

Os dados de M e de espectrometria de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 45: 6-Metoxi-9-/2-0-(4-metoxibenzoil)-3,5-0-(1,1,3,3-tetraisopropildissiloxan-1,5-diil)--D-arabinofuranosilT-9H-purina

Adicionou-se 6-metoxi-9-/3,5-0-(1,1,

3,3-tetraisopropildissiloxan-l,3-diil )-β -D-arabinofuranosil/-9H-purina do Exemplo 40 (1,0 g, 1,9 mmol) a um frasco de fundo redondo com 100 ml de capacidade com 4-dimetilaminopiridina (0,02 g, 0,16 mmol), acetonitrilo (25 ml), e trietilamina (0,4 ml), seguido de cloreto de anisoilo (0,35 ml, 2,5 mmol). Passadas quatro horas à temperatura ambiente, tratou-se a mistura reaccional com metanol (2 ml) e concentrou-se a pressão reduzida. Aplicou-se o resíduo a uma coluna de flash de sílica gel 25,0 g, 2,5 x 15 cm) em CH₂Cl₂:MeOH (20:1). A eluiçao com este solvente produziu 0,930 g (74%) do produto pretendido.

Análise calculada para O^-^H^gtf^OgSig . 0.35 H₂0: C, 55.97: H, 7.08; tf, 3.42.

Determinada: 0, 56.02; H, 7,01; tf, 8.32.

Exemplo 44: 9-/2-0-(4-clorobenzoil)-3,5-0-(1,1,3,3-tetraisopro pildissiloxan-1,3-diil)- f? -tf-arabinofuranosil/-6-met oxi-9H-purina

Adicionou-se 6-metoxi-9-/3,5-0-(1,1,

3,3-tetraisopropildissiloxan-l,3-diil)-β -D-arabinofuranosil/⁷-9H-purina do Exemplo 40 (1,0 g, 1,9 mmol) a um frasco de fundo redondo de 250 ml de capacidade com 4-dimetilaminopiridina (0,02 g, 0,16 mmol), acetonitrilo (25 ml), e trietilamina (0,4 ml), e a solução foi arrefecida num banho de gel a 3°C durante 5 minutos. Adicionou-se cloreto de 4-clorobenzoilo (0,31 ml,

2,5 mmol) e removeu-se a mistura reaccional do banho de gelo. Após oito horas à temperatura ambiente, tratou-se a solução com MeOH (3 ml) e concentrou-se a pressão reduzida. Retomou-se o resíduo em OHgClg e aplicou-se a uma coluna de flash de sílica gel (25,0 g, 2,5 x 15 cm) no mesmo solvente. Eluiu-se a coluna com CH₂C1₂ (200 ml), e em seguida com CH₂Cl₂:MeOH (20:1, 400 ml) obtendo-se 1,05 g (82%) do produto, homogéneo por cromatografia de camada fina (sílica, CH₂Cl₂:MeOH (20:1), Rf = = 0,44);

Análise calculada para Ο^θΗ^^Ν^ΟγΟΙοΙ^: G,54.32; H, 6.53;

Ii, 8.45.

Determinada: G, 54.48; H, 6.72; D, 8.28.

Exemplo 45: Sster de 5*-monofosfato de 9-fr-D-arabinofuranosil-6-dimetilamino-9H-purina.

Sintetizou-se o éster de 5’-monofosfato de 9-^-D-arabinofuranosil-6-dimetilamino-9H-purina pela transferência do grupo fosfato terminal do 5*-trifosfato de ade nosina (ATP) para o grupo 5’-0R de 9-^-D-arabinofuranosil-ó-dimetilamino-9H-purina, catalisado pela timidina quinase (TK) a partir do virus de varicela zoster (VZV) (Pyfe, kolecular Pharmac 21 432, 1982).

A 0,5 ml de tampão 0,02 k de tris(hidroximetil)aminometano-HCl, pH 7,5, foram adicionados 50 mmol de 9-^-D-arabinofuranosil-ó-dimetilamino-9H-purina, 55 mmol de ATP (Sigma Chemicals, S. luis, kO), 55 mmol de mgCl^, e 0,005 U.I. de VZV TK. Incubou-se a solução a 21°G durante 2,5 horas e em seguida filtrou-se através de um filtro Centricon 10 (uma membrana Yk com peso molecular de corte de 10 K da Amicon Inc., Denvers, kA) para remover a proteína. 0 produto foi caracterizado por uma mancha de absorção de luz ultravioleta numa cromatografia de camada fina de permutadora de aniões que migrou com um valor tipico de Rf de um monofosfato.

Exemplo 46: 5^,-konofosfato de arabinósido de 6-metoxipurina

Dissolveu-se o nucleósido, arabinósido de 6-metoxipurina, 1,5 g (4,9 mmol) em 15 ml de fosfato trietilo e 4,8 ml de trietilamina. Arrefeceu-se a solução a -10°G. Durante a agitação, adicionaram-se 0,91 ml de oxicloreto de fósforo. Passados 10 min,, adicionaram-se mais 0,3 ml de oxicloreto de fósforo. Passados mais 10 min., terminou-se a reacção adicionando-se 100 ml de uma solução 0,5 k de trietila mina em água arrefecida com gelo. Todos os reagentes acima men • cionados foram adquiridos de nldrich.

- 51 I

Os componentes da mistura reaccionalí final foram separados por cromatografia de permuta iónica em QAE-Sephadex (Pharmacia). Eluiram-se os componentes com um gra diente de hicahornato de amónio 5θ mM -1M. 0 5’-nionofosfato de arabinósido de 6-metoxipurina era apenas 10% do material eluido da coluna. Para remover o ortofosfato inorgânico do composto utilizou-se a cromatografia de permuta iónica numa resina BioRad AG-1X8 com um gradiente em fases de bicabornato de amónio 100 mM -750mM. Evaporaram-se em vazio as fracções contendo o composto para remover o bioabornato de amónio em excesso e em seguida liofilizaram-se.

5*-monofosfato de arabinósido de

6-metoxipurina foi obtido com rendimento de 3% (0,14 mmol, 50 mg). 0 espectro UV (250 nm max e 221 nm min a pE 7), e a proporção de base/fosfato (1,00/1,08) eram coerentes com a estrutura do composto. Ele podia ser clivado para o nucleósido pela fosfatase alcalina e 5’-nucleotidase.

Exemplo 47; 5⁾-Trifosfato de arabinósido de 6-metoxipurina

Dissolveu-se o 5’-monofosfato de ara binósido de 6-metoxipurina do Exemplo 46 (36 mg, 93 /-mol) em 2 ml de hexametilfosforamida. Adicionou-se carbonildiimidazole (82 mg, 506 /mol) e agitou-se a mistura durante 2 horas â temperatura ambiente. Adicionou-se metanol (0,032 ml, 800 //mdí) e agitou-se a mistura durante 20 minutos. Adicionou-se o pirofosfato de tributilamónio (220 mg, 470 /ano 1, da Sigma) que tinha sido dissolvido em 1,5 ml de hexametilfosforamida e agitou -se a mistura durante 18 horas à temperatura ambiente. Terminou-se a reacção pela adição de 50 ml de água. Os reagentes acima mencionados foram adquiridos de Aldrich a menos que seja referido o contrário. 0 5’-trifosfato foi purificado por cromatografia de permuta iónica em QAE Sephadex A-25 (Pharmacia) eluido com um gradiente em fase de bicabornato de amónio 50 mM -800 mM. As fracções contendo o produto foram evaporadas uma vez a pressão reduzida para remover o excesso de bicarbona . to de amónio e em seguida re-dissolveu-se em água e armazenou- 52 -

-se liofilizado a -20°C. j õ^t^ifosfato de arabinósido de 6-metoxipurina foi obtido com um rendimento de 60% (57 /unol, 30 ι mg). 0 espectro de UV (250 nm max e 223 nm min a pH 7), e a proj porção de base/fosfato (1,00/3,10) eram coerentes com a estrutuj ra do composto. Ele podia ser clivado para o nucleôsido pela i fosfatase alcalina e para monofosfato pela fosfodiesterase 1. ί

Exemplo 48: 6-Dimetilamino-9-(2-Q-valeril)-ff -D-arabinosil-9H-purina

Dissolveu-se o arabinósido de 6-dimetilaminopurina (0,501 g; 1,67 mmol) em 20 ml de piridina e 20 ml de DME. Levou-se a soluçSo a 4°G e adicionou-se lentamente anidrido valêrico (0,43 ml; 2,17 mmol, Aldrich Chemical Co., Milwaukee, WI) dissolvido em 5 ml de piridina e 5 ml de DmP. Levou-se a solução a 40°C e removeu-se em vazio o solvente após 2 horas. Submeteu-se o resíduo a cromatografia de flash numa coluna de silica gel, 4,8x20 cm, com 150 ml de cada uma das seguintes misturas de diclorometanometanol (v:v): 100:0, 98:2; 96:4; 94:6; 92:8; 90:10. Reuniram-se as fracções contendo o pro duto e a liofilização produziu 0,195 g de 6-dimetilamino-9-(2-0-vaieril)-?>-D-arabinosil-9H-purina: TLC Rf 0,55 (silica gel,

9:l/diclorometano metanol).

Análise para: θχγ^25^5θ5 . 0,51^0:

Calculada: C, 52.57; H, 6,75, U, 18.03

Determinada: C, 52.61; H, 6.77; N, 17.99

Os dados de RME e de espectro de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 49: 6-Dimetilamino-9-(2,5,5-triacetil-^-D-arabinosil)-9H-purina

Dissolveu-se o arabinósido de 6-dimetilaminopurina (3,00 g; 10,00 mmol) em 20 ml de acetonitrilo e

ml de piridina equilibrada a 4°C. adicionou-se gota a gota â mistura reaccional cloreto de acetilo (2,85 ml; 40,08 mmol, Aldrich Chemical Co., Milwaukee, WI) em 7 ml de acetonitrilo. Após 5 horas, removeu-se o solvente em vazio a uma temperatura inferior a 45°C e colocou-se o material residual numa bomba de alto vazio durante 24 horas* Submeteu-se o resíduo seco a cromatografia de flash numa coluna de silica gel, 4,8x25 cm, com 9:l/diclorometanozmetanol. Reuniram-se as fracções contendo o produto e a liofilização produziu 0,445 g de 6-dimetilamino-9-(2,3,5-triacetil-^-D-arabinosil-9H-purina: TLC Rf 0,61 (silica gel, 9:l/diclorometano:metanol).

Análise para: C^glig3^5θ7’

Calculada: C, 51.30; H, 5.50; R, 16.62

Determinada: C, 51.40; H, 5,55; R, 16.54

Os dados de RmH e de espectro de massa eram coerentes com a estrutura.

Exemplo 50ϊ Composições para comprimidos

Prepararam-se as seguintes composições A e B por granulação húmida dos ingredientes com uma solução de povidona, seguida pela adição de estearato de magnésio e compressão.

Formulação A

	mg/comprimido	mg/comprimido
a) Ingrediente activo	250	250
b) Lactose B.P.	210	26
c) Povidona B.P.	15	9
d) Amido Glicolato de
sódio	20	12
e) Estearato de magnésio	_í	3
	500	300

Formulação B
	mg/comprimido	mg/conrprir
a) Ingrediente activo	250	25O
b) lactose	150	-
c) Avicel pH 101	60	26
d) Povidona B.P.	15	9
e) Amido Glicolato de
sódio	20	12
f) Estearato de magnésio	í	3
	500	300

Formulação G

	mg/comprimido
Ingrediente activo	100
Lactose	200
Amido	50
Povidona B.P.	5
Estearato de magnésio	4

359 prepararam-se os comprimidos a partir dos ingredientes anteriores (C) por granulação húmida seguido de compressão. Numa compo sição alternativa a Povidona B.P. pode ser substituída por Poli vinilpirrolidona.

Preparam-se as seguintes composições, D e E, por compressão directa dos ingredientes misturados. A lactose na composição E ê de tipo de compressão directa (Dairy Crest - Zeparox”).

Formulação D mg/câp sula

Ingrediente activo 250

Amido Pregelatinizado 1IF15 150

400

Formulação E mg/cápsula

Ingrediente activo 250

Lactose 150

Avicel 100

500

Formulação F (Formulação de Libertação Controlada)

A formulação á preoarada por granula ção húmida dos ingredientes (como a seguir indicados) com uma solução de povidona seguida pela adição de estearato de magnésio e compressão.

mg/comprimido

a)	Ingrediente activo	500
b)	Hidroxipropilmetil- celulose (Methocel K4M Premium)	112
c)	Lactose B.P.	53
d)	Povidona B.P.	28
e)	Estearato de magnésio	7 700

xi libertação do medicamento tem lugar num período de cerca de 6-8 horas e está completa após 12 horas.

Exemplo 51: Formulações para Cápsulas

Formulação A

Prepara-se uma formulação para cápsu las misturando os ingredientes da Formulação D no Exemplo 4S

acima referido e enchendo uma cápsula de gelatina dura de duas partes. A Formulação B (ver abaixo) ê preparada de modo semelhante.

Formulação B	mg/cápsula
a) Ingrediente activo	250
b) Lactose B.P.	143
c) Amido Glicolato de sódio	25
d) Estearato de magnésio	_2 420
Formulação C	mg/cápsula
a) Ingrediente activo	250
b) Macrogol 4000 B.P.	3^0

600

Preparam-se as cápsulas fundindo o Macrogol 4000 BP, dispersando o ingrediente activo no fundido e introduzindo o fundido numa cápsula de gelatina dura de duas partes.

Formulação D mg/cápsula

Ingrediente activo	250
Lecitina	100
Oleo de Amendoim	100
	450

Preparam-se as cápsulas dispersando o ingrediente activo na lecitina e no óleo de amendoim e intro duzindo a dispersão em cápsulas de gelatina macia elástica.

Formulação E (Cápsulas de Libertação Controlada)

Prepara-se a seguinte formulação

para cápsulas de libertação controlada extrudindo os ingredien tes a, b e c utilizando um extrusor seguido de esferonisação do extrudido e secagem. Os pellets secos são em seguida revestidos com uma membrana de controlo de libertação (d) e introduzidos numa cápsula de gelatina dura de dois componentes:

mg/cápsula

a)	Ingrediente activo	250
b)	Celulose microcristalina	125
c)	Lactose B.P.	125
d)	Etil Celulose	13
		513

Exemplo 52: Solução Oftálmica

Ingrediente activo

Cloreto de sódio, qualidade analítica

Tiomersal

Ãgua pura atê

Ajustado a

0.5

0.9 cr o

0.001 g

100 ml

7.5

Exemplo 53: Formulação Injectável

Ingrediente activo 0,200 g

Tampão de fosfato estéril, sem pirogénio (pH 9,0) atê 10 ml

Dissolve-se o ingrediente activo na maior parte do tampão de fosfato (35°-4O°G), e em seguida perfaz-se ao volume e filtra-se através de um filtro esterilizado de microporos num frasco de vidro de âmbar esterilizado de 10 ml (tipo 1) e sela-se com tampas esterilizadas e sobresselagens.

Exemplo 54: Injecção intramuscular
Ingrediente activo	0.20 g
Álcool Benzílico	0.10 g
Glicofurol 75	1.45 g
Agua para injecções q.b. para	3.00 ml
Dissolve-se	0 ingrediente

glicofurol. Adiciona-se em seguida o álcool benzílico e dissol ve-se, e adiciona-se água até 3 ml. A mistura é em seguida fil trada através de um filtro de microporos esterilizado e selada em frascos de vidro de âmbar esterilizados de 3 ml (tipo 1).

Exemplo 55: Suspensão de Xarope

Ingrediente activo Solução de Sorbitol Glicerol

Dispersável celulose Benzoato de sódio Aroma, Pêssego 17.42.3169 Âgua purificada q.b. atê

0.25 g 1.50 g 2.00 g

0.075 g 0.005 g 0.0125 ml

5.00 ml

Dissolve-se o benzoato de sódio numa parte de água purificada e adiciona-se a solução de sorbitol Adiciona-se o ingrediente activo e dispersa-se. Mo glicerol ê disperso o espessante (celulose dispersável). misturam-se as duas dispersões e perfazem-se para o volume pretendido com água purificada. Consegue-se maior espessamento como necessário por agitação extra da suspensão.

Exemplo 56: Supositório mg/supo sitório

Ingrediente activo (63 /un) £ 25G

Gordura dura, BP (Witepsol H15 - Dynamit RoBel) 1700

1950 i 0 ingrediente activo é utilizado como pó no qual pelo menos 90% das partículas têm diâmetro de 63 m ou inferior.

Um quinto do Witepsol Hl5 ê fundido num recipiente com camisa de vapor a 45°C de temperatura máxima. 0 ingrediente activo ê aspirado através de um peneiro de 200 m e adicionado à base fundida com mistura, utilizando um silverson equipado com uma cabeça de corte, até se conseguir umaddispersão macia, mantendo a mistura a 45°G, adiciona-se 0 restante Witepsol H15 à suspensão e agita-se atê se obter uma mistura homogénea. Faz-se passar a suspensão global através de uma rede de aço inoxidável de 250 m e, com agitação contínua, deixa-se arrefecer para 40°C. A uma temperatura de 38°G a 40°C, introduzem-se 2,02 g da mistura em moldes de plástico adecuadcs. Os supositórios são deixados arrefecer para a temperatura ambiente.

Exemplo 57: Pessários mg/pessârio

Ingrediente activo 63 >m 250 Dextrose Anidra 380 Amido de Batata 363 Estearato de magnésio _7

1000 kisturam-se directamente os ingredientes acima referidos e preparam-se os pessários por compressão directa da mistura resultante.

Exemplo 58: Ensaio da Toxicidade e Biodisponibilidade untivirai

Determinação da Actividade anti-Virus da Varicela-Eoster:

Determinaram-se os efeitos inibidores do composto na replicaçao de VEV estirpe Oka pelo procedi60 -

mento ELISA (Berkowitz, E.E., e Levin, i„.J. (1985). Antimicrob. Agents e Chemother. 28: 207-210) que foi modificado da forma sej guinte. Iniciaram-se as infecçoes na presença do medicamento, í em vez de ser antes da adição do medicamento. No final de incu bação de três dias do medicamento e do vírus com células não infectadas (fibroblastos diplóides humanos, estirpe I.1RC-5), as placas de 96 furos foram centrifugadas durante 5 minutos a 200x xg para sedimentar as células separadas antes da fixação do glu taraldeido. 0 presente ensaio de ELISa utilizou uma fosfatase alcalina conjugada com IgG anti-humano como segundo anticorpo.

A velocidade de clivagem do fosfato de p-nitrofenilo por fosfa tase alcalina ligada foi determinada como descrito na literatu ra (Tadepalli, fl.M., Quinn, R.P., e Averett, D.R. 1986. nntimi crob. Agents and Chemother, 29, 93-98). Utilizaram-se células nao-infectadas para obter as velocidades de reacção de controlo, que foram subtraídas às velocidades obtidas com o vírus presente. Este ensaio foi adequado para detectar a progenia de vírus em cultura que eram inicialmente infectadas com 15 a 36OO partículas infecciosas por furo.

Determinação da Inibição do Crescimento de Células de mamíferos

Não Infectadas i^ediu-se a capacidade dos compostos candidatos para inibirem o crescimento das células D98 (humanas) e células L (murina) pela determinação do número de células após três dias de exposição a um número convencional de cê lulas a várias diluições do composto (Rideout, J.L., Krenitsky,

T.A., Koszalka, G.W., Cohn, N.K., Chao, E.Y. Elion, G.B.,Lattei V.S., e Williams, R.B. (1982) J. med. Chem. 25: 1040-1044). 0 número de células foi em seguida comparado com 0 número obtido na ausência do composto. Efectuou-se a contagem de células quei por contagem directa de partículas após tripsinização da monocamada, ou por determinação espectrofotomêtrica da quantidade de manchas vitais absorvidas pela célula. Obtiveram-se resultados comparáveis com ambos os métodos.

Análise de dados

Calculou-se a concentração do compos: to resultante em 50% dos valores do controlo (1C50) quer por interpolação directa dos gráficos do log da concentração do coa posto em função da percentagem do valor de controlo, quer a par tir de um programa de computador que analisa os dados de acordo com o mesmo algoritmo. Utilizaram-se dados na gama dos 20% a 80% do controlo nestes cálculos.

Exemplo VZV (IC^q m) Toxicidade das células (% de controlo a 100 m) Células D-98 Células L

1	3	93	37
2	1	85	69
3	0.8	96	72
4	6	107	97
5	1	50	50
6	3	61	47
Aciclovir	20	100	50

Ensaio e Dados de Biodisponibilidade

Dosearam-se dois ratos Eong-Evans com o composto por gavage com um tubo intragástrico a uma dose de 10 mg/kg do Exemplo 3 ou o equivalente molar dos Exemplos 16, 24 e 32. Colocaram-se os animais em gaiolas metabólicas e reco, lheu-se a urina durante períodos de 0-24 horas e 24-48 noras após a dosagem. Analisaram-se as urinas por I1PLC de fase inver sa. Os resultados são expressos com % de Dose recuperada na urina em 48 horas em relação ao composto do Exemplo 3.

Exemplo % Dose

4.9/2.5

16	11.7
24	7.9
32	15.9

Claims

REIVIOICAÇOES

- la Processo para a preparação de um com· posto com a fórmula I(a) na qual R^ representa metoxi, etoxi, propoxi ou iodo, um grupo alcoxi 5 substituído com halogéneo, um grupo amino que é mono-substituido com metilo, alquilo CA _c substituído com um ou mais átomos de fluor ou cicloalquilo 0·₂·_θ ou é di-substituido com alquilo alquilo 0χ_^ substituído com um ou mais átomos de flúor, ou cicloalquilo C^_g, ou é o membro de amino de um anel contendo 4-7 átomos de carbono e opcionalmente uma dupla ligação e/ou um átomo de azoto adicional, e Rg representa hidrogénio, halogéneo ou amino, e dos seus derivados farmaceuti camente aceitáveis, com a condição de quando Rg for hidrogénio, Rj. não representar metoxi, dimetilamino, piperidino ou pirrolidino, caracterizado por:

A. fazer-se reagir um composto com a fórmula (II) (II) na qual R^ e R^ ^são como atrás definidos, fórmula (III) com um composto com a

X (III) na qual X representa uma base de pirimidina ou purina (diferen· te do composto com a fórmula (II)), ou

B. fazer-se reagir um composto com a fórmula (IV) (IV) na qual Z é um grupo substituível e R^ θ como atrás definido, com um composto susceptível de introduzir o grupo necessário na posição-6, e opcionalmente em seguida ou simultaneamente, quando o composto resultante for um composto com a fórmula I(a) converter-se este composto num seu derivado farmaceuticamente aceitável ou quando o composto resultante for um derivado farmaceuticamente aceitável converter-se este composto num deriva· do farmaceuticamente aceitável diferente ou num composto com a fórmula I(a).

-
2ã Processo para a preparação de um dera vado farmaceuticamente aceitável de um composto com a fórmula I(b) na qual R^ representa metoxi, etoxi, propoxi ou iodo, um grupo alcoxi C-^_5 substituido com halogéneo, um grupo amino que é mono-substituido com metilo, alquilo C-^_^ substituido com um ou mais átomos de flúor ou cicloalquilo C^_g ou é di-substituido com alquilo C^_^, alquilo substituido com um ou mais átomos de flúor, ou cicloalquilo ou é o membro de amino de um anel contendo 4-7 átomos de carbono e opcionalmente uma dupla ligação e/ou um átomo de azoto adicional, e R₂ representa hidrogénio, halogéneo ou amino, caracterizado por compreender (1) a preparação de um composto com a fórmula I(b) da forma seguinte:

A. fazer-se reagir um composto com a fórmula (II) (Π)

R_? N 2Í

H na qual R^ e R₂ sao como atrás definidos com um composto com a fórmula (III) na qual X representa uma base de pirimidina ou purina (diferente do composto com a fórmula (II)), ou

B. fazer-se reagir um composto com a fórmula (IV)

HO__ \ OH 7

OH na qual Z é um grupo substituível e R₂ é como atrás definido, com um composto susceptível de introduzir o grupo necessário na posição-6, e (2) em seguida ou simultaneamente, quando o compos to resultante for um composto com a fórmula I(b), converter-se este composto no seu derivado farmaceuticamente aceitável ou quando o composto resultante for um derivado farmaeeuticamente aceitável converter-se este composto num derivado farmaceuticamente aceitável diferente ou num composto com a fórmula l(b).

-
3^Processo de acordo com a reivindicação 2 caracterizado por o derivado farmaceuticamente aceitável ser um éster escolhido de ésteres de ácido carboxílico em que o radical não carbonilo do agrupamento éster é alquilo, alcoxialquilo, aralquilo, ariloxialquilo de cadeia linear ou ramificada, arilo opcionalmente substituído com halogéneo, alquilo ^ou alcoxi Cq_45 nitro ou amino, ésteres de sulfonatos tais como de alquilsulfonilo, ou alquilarilsulfonilo, ésteres de amino ácido, e ésteres de mono-, di- e tri-fosfato.

_
4a _

Processo de acordo com as reivindicações 2 ou 3 caracterizado por se obter nomeadamente um derivado farmaceuticamente aceitável de 9-p -D-arabinofuranosil-6-metoxi -9H-purina.

-
5- Processo de acordo com a reivindicação 4 caracterizado por se obter nomeadamente a ó-metoxi-9-(2-0-pen tanoil-p-D-arabinofuranosil-9H-purina.

- óâ Processo para a preparação de uma compo

Λ r?

«um«H ·*^ sição farmacêutica caracterizado por se incorporar como ingrediente activo um composto com a fórmula (I) ^R1 na qual Rj_ representa metoxi, etoxi, propoxi ou iodo, um grupo alcoxi substituido com halogéneo, um grupo amino que é mo* no-substituido com metilo, alquilo C-^ substituido com um ou mais átomos de flúor ou cicloalquilo ^ou θ di-substituido por alquilo alquilo substituido com um ou mais átomos de flúor, ou cicloalquilo ^0Ll θ ⁰ membro de amino de um anel contendo 4-7 átomos de carbono e opcionalmente uma dupla ligação e/ou um átomo de azoto adicional, e R₂ representa hidrogénio, halogéneo ou amino, e um seu derivado farmaceuticamente aceitável, com a condição de quando R₂ for hidrogénio, R^ não representar metoxi, dimetilamino, piperidino ou pirrolidino preparado da forma seguinte:

A. fazer-se reagir um composto com a fórmula (I±)

H (II) na qual R^ ^e ^2 ^s^° ^Gomo definidos com um composto com a fórmula (III) na qual X representa uma base de pirimidina ou purina (diferen te do composto com a fórmula (II)), ou

B. fazer-se reagir um composto com a fórmula (IV)

HO-, (IV)

OH na qual Z é um grupo substituível e é como atrás definido, com um composto susceptível de introduzir o grupo necessário na posição-6, e opcionalmente em seguida ou simultaneamente, quando o composto resultante for um composto com a fórmula I, converter-se este composto num seu derivado farmaceuticamente aceitável ou quando o composto resultante for um derivado farmaceuticamente aceitável converter-se este composto num deriva· do farmaceuticamente aceitável diferente ou num composto com a fórmula I, em associação com pelo menos um excipiente farmacêutico para se obter a referida composição farmacêutica.

Processo de acordo com a reivindicação
6 caracterizado por o composto com a fórmula (I) ser a 9-p-D-arabinofuranosil-6-metoxi-9H-purina.

— 8ã —

Processo de acordo com a reivindicação 6 caracterizado por o composto com a fórmula (I) ser a 6-metoxi -9-(2-0-pentanoil-β -D-arabinofuranosil)-9H-purina.

A requerente declara que o primeiro pedido desta patente foi apresentado no Peio Unido em 30 de Maio de 1987, sob o nS. 8712745.

Lisboa, 27 de Maio de 1988