PT1524268E

PT1524268E - Compostos e método para preparar áçidos 4-fenil-4-cianociclo-hexanóicos substituídos

Info

Publication number: PT1524268E
Application number: PT04078092T
Authority: PT
Inventors: Andrew Allen; Li Liu; Wilford Mendelson; Anne Marie Diederich
Original assignee: Smithkline Beecham Corp
Priority date: 1997-02-12
Filing date: 1998-02-12
Publication date: 2007-03-30
Also published as: BG103651A; AP9901618A0; ES2280008T3; CN1246855A; DE69813596T2; IL150955A; OA11144A; JP4093967B2; BG63541B1; SI1295869T1; CN1301982C; WO1998034584A3; SK108899A3; PT1023279E; EP1023279A4; NZ337084A; US6337408B1; AU6654498A; KR20000070927A; UY24882A1

Description

DESCRIÇÃO "COMPOSTOS E MÉTODO PARA PREPARAR ÁCIDOS 4-FENIL-4-CIANOCICLO-HEXANÓICOS SUBSTITUÍDOS" Âmbito da Invenção

Esta invenção abrange uma via de sintese para preparar ácido 4-ciano-4-(3-ciclopentiloxi-4-metoxifenil)ciclo-hexanóico. Este ácido é selectivo na inibição do centro catalítico na isoenzima fosfodiesterase denominada IV (PDE IV daqui em diante) e como tal é útil no tratamento de um número de doenças que podem ser moderadas afectando a enzima PDE IV e os seus subtipos. Área da Invenção A asma brônquica é uma doença complexa e multifactorial caracterizada por estreitamento reversível das vias aéreas e hiper-reactividade do tracto respiratório aos estímulos externos. A identificação de novos agentes terapêuticos para a asma é tornada difícil pelo facto de múltiplos mediadores serem responsáveis pelo desenvolvimento da doença. Deste modo, parece improvável que eliminando os efeitos de um único mediador venha a ter um efeito substancial em todos os três componentes da asma crónica. Uma alternativa para a "abordagem ao mediador" é 1 regular a actividade das células responsáveis pela patofisiologia da doença.

Uma tal via é elevar os níveis de cAMP (3', 5' -monofosfato de adenosina cíclica). Foi demonstrado que o AMP cíclico é um segundo mensageiro, mediando as respostas biológicas a uma ampla gama de hormonas, neurotransmissores e fármacos; [Krebs Endocrinology Proceedings of the 4th International Congress Excerpta Medica, 17-29, 1973] . Quando o agonista apropriado se liga a receptores específicos da superfície celular, a adenilato ciclase é activada, a qual converte Mg2+-ATP em cAMP a uma velocidade acelerada. 0 AMP cíclico modula a actividade da maior parte, senão de todas as células que contribuem para a patofisiologia da asma (alérgica) extrínseca. Como tal, uma elevação do cAMP proporcionaria efeitos benéficos incluindo: 1) relaxação do músculo liso das vias aéreas, 2) inibição da libertação do mediador de mastócitos, 3) supressão da desgranulação de neutrófilos, 4) inibição da desgranulação de basófilos, e 5) inibição da activação de monócitos e macrófagos. Deste modo, compostos que activam a adenilato ciclase ou inibem a fosfodiesterase devem ser eficazes na supressão da activação inapropriada do músculo liso das vias aéreas, e de uma ampla variedade de células inflamatórias. 0 principal mecanismo celular para a inactivação do cAMP é a hidrólise da ligação 3'-fosfodiéster por uma ou mais de uma família de isoenzimas referidas como fosfodiesterases de nucleótidos cíclicos (PDEs).

Foi agora demonstrado que uma isoenzima fosfodiesterase de nucleótidos cíclicos (PDE) distinta, PDE IV, é responsável pela quebra do cAMP no músculo liso das vias aéreas e células 2 inflamatórias. [Torphy, "Phosphodiesterase Isozymes: Potential Targets for Novel Anti-asthmatic Agents" in New Drugs for Asthma, Barnes, cd. IBC Technical Services Ltd., 1989]. A investigação indica que a inibição desta enzima produz não apenas relaxação do músculo liso das vias aéreas, mas também suprime a desgranulação dos mastócitos, basófilos e neutrófilos em conjunto com a inibição da activação de monócitos e neutrófilos. Além disso, os efeitos benéficos dos inibidores da PDE IV são nitidamente potenciados quando a actividade da adenilato ciclase das células alvo é elevada por hormonas apropriadas ou autocóides, como seria o caso, in vivo. Deste modo, os inibidores de PDE IV seriam eficazes no período asmático, onde níveis de prostaglandina E2 e prostaciclina (activadores da adenilato ciclase) são elevados. Tais compostos ofereceriam uma abordagem única para a farmacoterapia da asma brônquica e teriam vantagens terapêuticas significativas sobre os agentes actualmente no mercado. 0 processo e intermediários desta invenção proporcionam um meio para preparar determinados ácidos 4-substituídos-4-(3,4-di-substituídos-fenil)ciclo-hexanóicos, os quais são úteis para o tratamento da asma, e outras doenças que podem ser moderadas afectando a enzima PDE IV e os seus subtipos. Os produtos finais de particular interesse são completamente descritos na Patente U.S. 5552483 concedida a 3 de Setembro de 1996. A informação e representações aí divulgadas, na medida em que essa informação e representações são necessárias à compreensão desta invenção e à sua prática, são aqui incorporadas, na totalidade, por referência.

As Patentes U.S. 5552438; 5602173; e 5602157 divulgam determinados inibidores como mediadores da actividade enzimática 3 ou catalítica da fosfodiesterase IV.

Sumário da Invenção

Esta invenção refere-se a um processo para enriquecer a forma do ácido cis-4-ciano-4-(3-ciclopentiloxi-4-metoxifenil)-r--ciclo-hexanocarboxílica a partir de uma mistura de isómeros cis e trans do ácido, cujo processo compreende a cristalização a partir de uma solução de hexano/acetato de etilo de isómeros cis e trans, do isómero cis essencialmente livre do isómero trans.

Numa forma de realização da invenção, a mistura cis/trans é dissolvida em acetato de etilo e hexanos.

Noutra forma de realização, a mistura cis/trans é dissolvida em acetato de etilo e, de seguida, são adicionados hexanos.

Ainda noutra forma de realização, a solução de acetato de etilo de isómeros cis/trans é aquecida até ao refluxo, arrefecida e, de seguida, são adicionados hexanos após a qual é realizada a cristalização.

Formas de Realização Específicas da Invenção 0 composto que é preparado por este processo é um inibidor da PDE IV. É útil para o tratamento de um número de doenças, tal como descrito na Patente U.S. 5552438 concedida a 3 de Setembro de 1996. 4

Um esquema representativo deste processo é delineado no Esquema I. Esta representação gráfica utiliza exemplos específicos para ilustrar a metodologia geral utilizada nesta invenção.

Esquema I

]-S 1-*

1.7

5

II 1

^ Η20 Η20

Com referência ao Esquema I, a isovanilina, 3-hidroxi-4-metoxibenzaldeido, é um material de partida prontamente disponível. Pode ser alquilado com uma unidade R,X (X = Cl, Br e I) tal como representado pelo cloreto de ciclopentilo. 0 vaso reaccional é primeiro purgado com um gás inerte, por exemplo azoto. É depois adicionado um solvente polar ao vaso, tal como DMF, em seguida a isovanilina e depois o aducto R,X e alguma base. São utilizados cerca de 2 equivalentes de aducto R,X em relação à isovanilina. De igual modo, são 6 utilizados cerca de 2 equivalentes de base, novamente em relação à isovanilina. A base pode ser qualquer base inorgânica ou um carbonato. Aqui, é ilustrado pelo carbonato de potássio. Os conteúdos do vaso são aquecidos até cerca de 125 °C durante cerca de 90 até 120 minutos, tempo no qual a reacção ter-se-á concluído. Os conteúdos do vaso são arrefecidos até à temperatura ambiente, filtrados para remover os sais inorgânicos, e lavados com um álcool, tal como metanol. Este filtrado contém o aldeído, assinalado como 1-1. O aldeído é então reduzido ao álcool utilizando um agente redutor inorgânico. Para realizar isto, o filtrado da reacção antecedente é tratado com boro-hidreto de sódio e, depois de processamento, proporciona o álcool 1-2 desejado com 97% de rendimento global a partir da isovanilina. Isto é conseguido arrefecendo o filtrado até cerca de 0 °C sendo depois adicionado um agente redutor, boro-hidreto de sódio, neste caso. São utilizados cerca de 0,25 até 0,5 equivalentes deste agente redutor. A temperatura é mantida a cerca de 0 °C durante a adição do agente redutor e durante cerca de 30 até 40 minutos após. De seguida, a temperatura é permitida subir até cerca da temperatura ambiente, depois da qual é adicionado ao vaso reaccional cerca de um equivalente e meio de HC1. O álcool é então extraído para um solvente orgânico, ilustrado pelo tolueno, e lavado com bicarbonato de sódio diluído. A fase orgânica superior contendo o álcool é depois tratada com excesso de ácido clorídrico concentrado à temperatura ambiente para proporcionar, depois de processamento, o cloreto de benzilo 1-3 desejado. O cloreto é isolado como uma solução p/p num solvente de amida, ilustrado pelo DMF, e tratado com cerca de 50% de excesso molar de cianeto de sódio a uma 7 temperatura moderadamente elevada, aqui ilustrada como 55 °C. Isto proporciona o nitrilo 1-4 desejado. 0 nitrilo é isolado como uma solução p/p num solvente apropriado, tal como acetonitrilo anidro, e directamente utilizado no próximo passo. A solução de nitrilo é carregada com acrilato de metilo. É arrefecida até cerca de -10 °C e, lentamente tratada com uma quantidade catalítica de Triton-B no mesmo solvente, tal como utilizado para dissolver o nitrilo. O acrilato de metilo é adicionado num excesso de 3 a 4 partes. A reacçâo é concluída em 30 a 45 minutos depois dos quais o produto de adição de acrilato, o produto pimelato, 1-5, é isolado como uma solução p/p em tolueno e tratado com cerca de 2 equivalentes de metóxido de sódio a cerca de 75 °C originando o produto β-ceto-éster, 1-6. A solução reaccional é arrefecida e neutralizada até pH 7 com ácido mineral, tal como ácido clorídrico 6 N. A solução é carregada com dimetilssulfóxido, cloreto de sódio, água, e aquecida, por exemplo até cerca de 150 °C, para efectuar a descarboxilação, originando 1-7. A cetona, 1-7, é isolada do sistema de solventes como um sólido esbranquiçado. O dicarbonitrilo 1-8 é preparado a partir da cetona tratando a cetona com cloroacetonitrilo na presença de uma base inorgânica e de uma quantidade catalítica de cloreto de benziltrietilamónio (BTEAC). A cetona é carregada numa mistura de base forte (hidróxido de potássio aquoso) e um solvente miscível em água, tal como tetra-hidrofurano. É adicionado um ligeiro excesso de cloroacetonitrilo a uma temperatura reduzida, cerca de 0 °C ou próximo. A reacção é mantida aproximadamente a essa temperatura durante o tempo da reacção, habitualmente cerca de 1 hora. O produto é isolado e é, habitualmente, cristalino. 0 dicarbonitrilo é convertido no ácido ciclo-hexanocarboxílico utilizando um catalisador ácido de Lewis; também é necessária água para conduzir a reacção ao ácido. Sem água, os intermediários l-10a e l-10b podem dimerizar. Esta reacção é efectuada carregando um vaso com solventes, neste caso exemplificados por DMF, acetonitrilo e água, e o ácido de Lewis (cerca de 1,5 equivalentes), ilustrado pelo LiBr, purgando o vaso com um gás inerte, adicionando o dicarbonitrilo lia ou Ilb, ou uma mistura de lia e Ilb e aquecendo o vaso e os seus conteúdos até cerca de 100 °C durante um número de horas, 8 horas por exemplo. O ácido é isolado por meios convencionais.

Deve ser notado que esta reacção, que é a conversão do epóxido no ácido, envolve diversos intermediários que não necessitam ser isolados. Foi descoberto que o tratamento do epóxido com LiBr proporciona os intermediários l-9a e l-9b. O intermediário l-9a é formado quando é adicionado LiBr ao vaso reaccional. No entanto, o intermediário l-9a converte-se novamente no epóxido sob as condições reaccionais descritas. O intermediário l-9b também é formado mas, aparentemente, reage rapidamente para formar intermediários, tais como o enolato A, l-10a e l-10b, etc., conduzindo ao produto. Deste modo, parece que l-9a e l-9b são formados, mas que l-9a se converte novamente no epóxido que, por fim, forma l-9b, o qual é então convertido noutros intermediários do percurso reaccional para formar os ácidos 1-lla e 1-llb. De um modo parentético, a designação "OM(H)" em l-9a e l-9b significa o sal metálico do álcool ou o álcool per se, dependendo das condições reaccionais. Crê-se que o intermediário l-9b se converta nos acilnitrilos de fórmulas l-10a e l-10b via intermediário proposto entre parênteses. A existência do intermediário entre parênteses proposto (enolato) 9 não foi totalmente confirmada. E, apesar de os acilnitrilos de l-10a e l-10b não terem sido directamente observados, existem evidências indirectas para estes compostos em virtude do facto do produto de bis-condensação, dímero B, ter sido isolado e ser análogo a compostos descritos onde um bis-condensado similar é o produto de um acilnitrilo.

Esquema 2

Sabe-se que os dimeros, tais como o dimero A, se formam a partir de acilnitrilos semelhantes l-10a/b na presença de HCN (Thesing, J.; Witzel, D.; Brehm, A. Angew Chem., 1956, 68, 425; e Hunig, S.; Schaller, R. Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1982, 21, 36) . E, para além disso, foram preparadas amostras autênticas dos intermediários l-10a e l-10b verificando-se que se convertem nos ácidos 1-lla e 1-llb quando expostos a água. 0 isómero equatorial l-10a foi convertido no ácido numa proporção equatorial/axial de cerca de 98:2, enquanto que o isómero axial 1-1 Oa foi isomerizado numa preponderância do isómero equatorial 1-lla (77:23). Acredita-se que o acilnitrilo axial foi convertido no acilnitrilo equatorial através do intermediário enolato entre parênteses proposto. 0 segundo, esquema reaccional seguinte, ilustra a preparação dos ácidos de fórmula (I) a partir do bromoaldeido de 10 fórmula (IV).

Esquema 3

Os exemplos seguintes são proporcionados para ilustrar especificidades da invenção, não para a limitar. 0 que é reservado ao requerente está descrito nas reivindicações aqui apensas.

Exemplos Específicos

Exemplo de Referência 1

Preparação de 3-Ciclopentiloxi-4-metoxibenzaldeído

Um balão de fundo redondo de 12 litros equipado com um agitador aéreo, termómetro interno e um condensador de refluxo equipado com uma entrada de azoto foi purgado com azoto. 0 balão foi carregado com dimetilformamida (2,4 L) , isovanilina (350 g, 2,3 mol, 1 equivalente), cloreto de ciclopentilo (481 g, 4,6 mol, 2,0 equivalentes) e carbonato de potássio (634 g, 4,6 mol, 2,0 equivalentes), A suspensão agitada de um modo 11 vigoroso foi aquecida até 125 °C durante duas horas ou até ao desaparecimento da isovanilina. A reacção foi arrefecida até 20-30 °C e filtrada para remover os sais inorgânicos. O bolo filtrado foi lavado com metanol (1,0 L). O filtrado límpido, castanho-claro (DMF e metanol) contendo o produto, 3-ciclopentiloxi-4-metoxibenzaldeído foi directamente utilizado no passo seguinte (100% de rendimento da solução).

Exemplo de Referência 2

Preparação de álcool 3-Ciclopentiloxi-4-metoxibenzílico

Um balão de fundo redondo de 12 litros equipado com um agitador aéreo, termómetro interno e um condensador de refluxo equipado com uma entrada de azoto foi purgado com azoto. O balão foi carregado com dimetilformamida (2,4 L), metanol (1,0 L), e 3-ciclopentiloxi-4-metoxibenzaldeído (506 g, 2,3 mol, 1 equivalente). Os conteúdos do balão foram arrefecidos até 0 a 5 °C, seguido da adição de boro-hidreto de sódio (32,2 g, 0,85 mol, 0,37 equivalentes). A reacção foi mantida entre 0 até 5 °C durante 30 minutos, e aquecida até 20 a 25 °C durante mais 2 horas ou até ao desaparecimento do aldeído. Foi adicionada uma solução de ácido clorídrico 6 N (195 mL, 1,17 mol, 0,51 equivalentes) durante 20 minutos. A reacção foi concentrada sob pressão reduzida, e arrefecida até 20 a 25 °C. O balão foi carregado com água desionizada (1,9 L) e tolueno (1,9 L) . As fases foram separadas, a fase orgânica foi isolada e lavada duas vezes com água desionizada (2 x 800 mL). O produto, álcool 3-ciclopentiloxi-4-metoxibenzílico foi recolhido 12 como uma solução em tolueno (97% de rendimento da solução) e directamente utilizado no passo seguinte.

Exemplo de Referência 3

Preparação de 4-Clorometil-2-ciclopentiloxi-l-metoxibenzeno

Um balão de fundo redondo de 12 litros equipado com um agitador aéreo, termómetro interno e um condensador de refluxo equipado com uma entrada de azoto foi purgado com azoto. 0 balão foi carregado com álcool 3-ciclopentiloxi-4-metoxibenzílico (495 g, 2,2 mol, 1 equivalente) numa solução de tolueno. À solução agitada de um modo vigoroso a 22 °C foi adicionado ácido clorídrico concentrado (600 g, 2,75 equivalentes). A reacção foi mantida entre 20 até 25 °C durante 30 minutos. A fase orgânica superior foi isolada e a fase acídica inferior foi desprezada. A fase orgânica superior foi carregada com uma solução de 10% de bicarbonato de sódio (550 g, 0,65 mol, 0,36 equivalentes) e éter t-butilmetílico (814 g). Os conteúdos do balão foram agitados de um modo vigoroso e deixados repousar. O produto, 4-clorometil-2-ciclopentiloxi-l-metoxibenzeno, foi isolado como uma solução em tolueno e éter t-butilmetílico (96,8% de rendimento da solução). Isto foi directamente utilizado no passo seguinte.

Exemplo de Referência 4

Preparação de 4-Cianometil-2-ciclopentiloxi-l-metoxibenzeno Um balão de fundo redondo de 12 litros equipado com um 13 agitador aéreo e um dispositivo de destilação foi purgado com azoto. 0 balão foi carregado com 4-clorometil-2-ciclopentiloxi--1-metoxibenzeno (519 g, 2,15 mol, 1,0 equivalentes) numa solução de tolueno e éter t-butilmetílico. A reacção foi concentrada a um resíduo sob pressão reduzida. O balão de 12 litros foi carregado com DMF (1,44 kg) e cianeto de sódio (142 g, 2,9 mol, 1,35 equivalentes). A reacção foi aquecida até 55 °C durante 6 horas ou até considerada concluída pelo desaparecimento do cloreto de benzilo. A reacção foi concentrada a um resíduo, sob pressão reduzida. Foram carregados, no balão, éter t-butilmetílico (2,30 kg) e água desionizada (800 mL) . Os conteúdos do balão foram agitados de um modo vigoroso e deixados repousar. A fase orgânica superior foi isolada, lavada três vezes com água desionizada (3 x 800 mL) e concentrada a um resíduo sob pressão atmosférica. Foi adicionado acetonitrilo (1,26 kg) ao balão e a destilação prosseguiu até terem sido recolhidos 400 mL de solvente adicionais. O produto, 4-cianometil-2-ciclopentiloxi-l-metoxibenzeno, foi isolado como uma solução em acetonitrilo (92,2% de rendimento). Isto foi directamente utilizado no passo seguinte.

Exemplo de Referência 5

Preparação de Dimetil-4-ciano-4-(3-ciclopentiloxi-4-metoxi-fenil)pimelato

Um balão de fundo redondo de 12 litros equipado com um agitador aéreo, termómetro interno e um condensador de refluxo equipado com uma entrada de azoto foi purgado com azoto. O balão foi carregado com uma solução de 4-cianometil-2-ciclopentiloxi-l-metoxibenzeno (460 g, 1,99 mol, 14 1.0 equivalente) em acetonitrilo e acrilato de metilo (520 g, 6.0 mol, 3,0 equivalentes). Os conteúdos do balão foram arrefecidos até -10 °C. Uma ampola de adição isobárica foi carregada com acetonitrilo (1,1 L) e hidróxido de benziltrimetilamónio (uma solução a 40% p/p em metanol, 25 g, 0,06 mol, 0,03 equivalentes). Os conteúdos da ampola de adição foram adicionados ao balão. Foi observada uma exotérmica e, após agitação durante 30 minutos, os conteúdos do balão foram arrefecidos até 20 °C. A reacção foi concentrada a um resíduo, sob pressão reduzida. Foi adicionado tolueno (2,6 L) ao resíduo. Esta solução de dimetil-4-ciano-4-(3-ciclopentiloxi-4-metoxifenil)pimelato (90% de rendimento da solução) foi directamente utilizada no passo seguinte.

Exemplo de Referência 6

Preparação de 4-Ciano-4-(3-ciclopentiloxi-4-metoxifenil)ci-clo-hexan-l-ona

Um balão de fundo redondo de 12 litros equipado com um agitador aéreo, termómetro interno e um condensador de refluxo equipado com uma entrada de azoto foi purgado com azoto. O balão foi carregado com uma solução de dimetil-4-ciano--4-(3-ciclopentiloxi-4-metoxifenil)pimelato (720 g, 1,78 mol, 1 equivalente) em tolueno e metóxido de sódio (25% em peso em metanol, 545 g, 2,67 mol, 1,5 equivalentes). A reacção foi aquecida até 70 a 75 °C durante 2 horas ou até considerada concluída pelo desaparecimento do pimelato. A reacção foi arrefecida até 25 °C. Foi adicionada uma solução de ácido clorídrico 6 N de modo a ajustar o pH até 6,8 - 7,2. A reacção foi concentrada a um resíduo, sob vácuo. O balão foi carregado 15 com dimetilssulfóxido (3,3 L), água desionizada (250 mL) e cloreto de sódio (250 g).

Os conteúdos do balão foram aquecidos até 145 - 155 °C e mantidos a esta temperatura durante 2 horas. A reacção foi arrefecida e concentrada a um resíduo, sob vácuo. Foi adicionada água (1,9 L), acetato de etilo (1,25 L) e éter t-butilmetílico (620 mL) ao resíduo. A solução foi agitada e deixada repousar. As fases foram separadas e a fase aquosa foi novamente extraída com acetato de etilo (1,25 L) . As fases orgânicas reunidas foram lavadas duas vezes com água desionizada (2 x 2,5 L) . A fase orgânica foi isolada e concentrada a um resíduo, sob pressão reduzida. Foi adicionado isopropanol (1,66 L) a este resíduo e aqueceu-se para produzir uma solução, seguido da adição lenta de hexanos (1,66 L) . A suspensão foi arrefecida até 5 °C durante 30 minutos e mantida entre 0 a 5 °C durante 2 horas. O produto foi filtrado e lavado com uma mistura 50-50 de isopropanol-hexanos (840 mL) a 0 °C. 0 produto foi seco para produzir 4-ciano-4-(3-ciclopentiloxi-4-metoxife-nil)ciclo-hexan-l-ona (315 g, 56% a partir do pimelato).

Exemplo de Referência 7

Preparação de cis-(+/-)-6-[3-(ciclopentiloxi)-4-metoxife-nil]-1-oxobiciclo[2,5]octano-2,6-dicarbonitrilo

Um balão de fundo redondo de 5 litros equipado com um agitador aéreo, termómetro interno e uma entrada de azoto purgado com azoto. O balão foi carregado com hidróxido de potássio a 50% (220 g) e tetra-hidrofurano (550 mL). Enquanto se agitava à temperatura ambiente, adicionou-se cloreto de 16 benziltrimetilamónio (8,1 g, 0,035 mol, 0,05 equivalentes). A solução foi arrefecida até 0 °C. Uma ampola de adição isobárica foi carregada uma solução contendo tetra-hidrofurano (550 mL) , 4-ciano-4-(3-ciclopentiloxi-4-metoxifenil)ciclo-hexan--1-ona (230 g, 0,73 mol, 1,0 equivalente) e cloroacetonitrilo (56 g, 0,78 mol, 1,07 equivalentes) à temperatura ambiente. Enquanto se agitavam os conteúdos do balão a 0 °C, foi adicionada a solução da ampola de adição isobárica durante 15 minutos. A temperatura foi mantida entre 0 e 5 °C e agitada durante 1 hora. A reacção foi aquecida até 25 °C, diluída com água (900 mL) e acetato de etilo (900 mL). A solução foi agitada e deixada repousar durante 30 minutos. As fases foram separadas, a fase orgânica foi isolada e concentrada a um resíduo, por destilação a vácuo. Foi adicionado metanol (540 mL) e a solução foi aquecida até 40 °C. Enquanto prosseguia o arrefecimento até 20 °C durante 90 minutos, foram adicionados hexanos (540 mL) . O arrefecimento prosseguiu e o produto começou a cristalizar a 10 °C. A suspensão foi então arrefecida até -5 °C e mantida a -5-0 °C durante 2 horas. 0 produto foi filtrado e lavado com uma mistura 50-50 de metanol-hexanos (300 mL) a 0 °C. O produto foi seco para produzir cis-( + /-)-6-[3-(ciclopentiloxi)-4-metoxife-nil]-1-oxobiciclo[2,5]octano-2,6-dicarbonitrilo (190 g, 73%) como um sólido cristalino branco.

Exemplo de Referência 8

Preparação de l-9a

Num frasco de 12 dracmas com rosca e tampa foi adicionado diglima (5,92 g) e o epoxinitrilo (0,70 g, 1 eq.) do Exemplo 7. Esta mistura foi agitada com aquecimento num banho de óleo 17 durante 5 min. De seguida, foi adicionado MgBr2.6H2O (0,906 g, 1,55 eq.). Após 3 h não foi detectado qualquer material de partida. A mistura reaccional foi arrefecida e misturada de seguida com ácido citrico aquoso a 5%/acetato de etilo e as fases foram agitadas e separadas. A segunda extracção com éter/acetato de etilo originou alguma coloração extraída para a fase orgânica, mas a extracção seguinte não tinha coloração. As fracções orgânicas foram reunidas e lavadas com água e solução salina e secas com MgS04. O produto foi cristalizado de hexano; p. f. 151-152 °C.

Análise elementar: C - 58,20, H - 5,82, Br - 18,44, N - 6,46; encontrado C - 58,32, H - 5,73, Br - 18,48, N - 6,34. A estrutura foi confirmada por determinação estrutural de raios-X de uma amostra cristalina obtida de álcool metílico.

Exemplo de Referência 9

Preparação de l-9b

Foi adicionado a Mg (0,189 g, 2,02 eq.) (refinado com pilão e almofariz) em éter, 1,2-dibromoetano (1,55 g, 2,06 eq.) num pequeno volume de éter para iniciar a Grignard. Quando a maior parte do magnésio foi consumida e não foi observada evolução do etano, a reacção foi agitada durante 0,5 h adicionais à temperatura ambiente, após a qual foi adicionado o epóxido do Exemplo 7 (1,41 g; 1 eq.) numa quantidade mínima de tetra-hidrofurano seco à temperatura ambiente. Depois de cerca de 70 h à temperatura ambiente, foram obtidos ambos o bromocianoálcool (l-9b) e a bromociano-hidrina (l-9a), numa proporção de 6:1. O produto l-9b foi isolado como um óleo por 18 HPLC preparativa. A estrutura foi confirmada por RMN de carbono e protão.

Exemplo de Referência 10

Preparação de Composto 3-1 - Epoxissulfona A um balão de fundo redondo de 25 mL equipado com uma barra de agitação magnética e um septo de borracha foram carregados 1,00 g de 4-ciano-4-(3-ciclopentiloxi-4-metoxifenil)ciclo-hexan--1-ona, 0,70 g de clorometil p-tolilsulfona e 7 mL de tetra-hidrofurano. Isto foi agitado, de seguida foram adicionados 3 mL de NaOH aquoso a 50% p/p e benzyltrimeth ch (0,05 g). Esta suspensão foi agitada de um modo vigoroso durante 2 horas à temperatura ambiente. A solução da reacção foi transferida para um funil de separação ao qual foram adicionados 50 mL de acetato de etilo e acidificou-se com HC1 6 N. A fase orgânica foi retida, lavada 2X com água desionizada, seca com MgS04 e filtrada para remover os sais.

Exemplo de Referência 11

Preparação de Composto 3-2 - Bromoaldeido

Foi adicionado, a magnésio (0,048 g, 1,03 eq., 0,021 mol; refinado com pilão e almofariz) em éter, 1,2-dibromoetano (0,40 g, 1,06 eq., 0,02 mol) sob azoto. Foram adicionadas duas gotas de iodo em éter para iniciar a reacção, depois das quais se aqueceu a reacção de um modo suave. Uma vez formada a reacção de Grignard, o balão de reacção foi arrefecido até cerca de 5 °C 19 e foi adicionada a epoxissulfona do Exemplo 10 (0,93 g, 1 eq., 0,002 mol) em éter/cloreto de metileno. A reacção foi seguida via TLC (condições: silica gel com ciclo-hexano:tolueno:acetonitrilo:ácido acético 40:40:20:4). A reacção foi agitada a 5 °C durante 2 horas. O produto foi isolado por adição de água e éter/TBME à mistura reaccional e separando as fases orgânicas. Estas foram lavadas com água e solução salina e secas sobre MgS04. A evaporação resultou num óleo que foi sujeito a cromatografia flash sobre 40 g de silica gel utilizando uma mistura de hexano e acetato de etilo (5-40% de acetato de etilo). Isto originou um óleo límpido (0,49 g) contendo proporções aproximadamente iguais de isómeros equatorial e axial, conforme determinado por RMN de protão. O espectro de massa revelou um ião molecular a m/e 405 contendo um átomo de bromo [C2oH24BrN03] .

Exemplo 12

Preparação de ácido c-4-ciano-4-(3-ciclopentiloxi-4--metoxifenil)-r-ciclo-hexanocarboxílico

Um balão de fundo redondo de 5 litros equipado com um agitador aéreo, termómetro interno e um condensador de refluxo com uma entrada de azoto foi purgado com azoto. O balão foi carregado com dimetilformamida (580 g), acetonitrilo (480 g), brometo de lítio (72 g, 0,83 mol, 1,62 equivalentes) e água desionizada (20 g, 1,1 mol, 2,2 equivalentes). A solução foi agitada sob azoto a 25 - 30 °C seguido da adição de cis-(+/-)-6--[3-(ciclopentiloxi)-4-metoxifenil]-1-oxobiciclo[2,5]octano-2,6--dicarbonitrilo (180 g, 0,51 mol, 1,0 equivalente). O reactor foi aquecido até 90 - 95 °C durante 8 horas ou até considerada 20 concluída pelo desaparecimento do epoxinitrito. Os conteúdos do balão foram arrefecidos até 20 °C, seguido da adição de uma solução de hidróxido de sódio (92 g de hidróxido de sódio, 2,3 mol, 4,5 equivalentes, dissolvidos em 200 mL de água desionizada) . A suspensão foi agitada até 20 °C durante 30 minutos seguido da adição de hipoclorito de sódio (600 mL, 0,46 mol, 0,9 equivalentes). Os conteúdos do balão foram agitados durante 90 minutos, seguido da adição de éter t-butilmetílico (2,27 kg) e HC1 6 N (644 mL, 3,86 mol, 7,5 equivalentes). A fase aquosa inferior foi novamente extraída com éter t-butilmetílico (454 g) e as fases orgânicas reunidas foram lavadas quatro vezes com água desionizada (4 X 800 mL) . A fase orgânica foi concentrada a um resíduo. Foi carregado, no balão, acetato de etilo (900 g) e aqueceu-se até ao refluxo. Os conteúdos do balão foram arrefecidos até 50 °C seguido da adição de hexanos (672 g). Os conteúdos do balão foram arrefecidos até 0 °C e mantidos durante uma hora. 0 produto foi filtrado e lavado com acetato de etilo/hexanos (1/9, 175 g) frio. O produto foi seco para produzir ácido c-4-ciano-4-(3-ciclopentiloxi-4-metoxifenil)-r--ciclo-hexanocarboxílico (125 g, 69%) como um pó esbranquiçado.

Exemplo de Referência 13

Preparação de cloreto do ácido c-4-ciano-4-(3-ciclopenti-loxi-4-metoxifenil)-r-ciclo-hexanocarboxílico

Num frasco de 1 tubuladura equipado com fluxo de azoto foram combinados ácido c-4-ciano-4-(3-ciclopentiloxi-4-metoxife-nil)-r-ciclo-hexanocarboxílico (1,372 g, 1 eq., 0,004 mol) e cloreto de oxalilo (4,568 g, 9 eq., 0,036 mol). Foi então adicionada uma gota de dimetilformamida. Esta mistura foi 21 agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Após evaporação sob alto vácuo produziu-se o produto mencionado em epigrafe.

Exemplo de Referência 14

Preparação da Forma l-10a-4-ciano-4-(3-ciclopentiloxi-4--metoxifenil)-r-ciclo-hexanoacilnitrilo

Uma amostra do cloreto do ácido (0,217 g, 0,006 mol, 1 eq.) preparado no Exemplo 12, foi dissolvida, num frasco, em CDC13 (2,34 mL) . A esta solução (arrefecida até 5 °C) foi adicionado cianeto de trimetilsililo (0,07 g, 1,3 eq., 0, 008 mol) e uma quantidade catalítica de Znl2 (0,004 g). Esta solução foi sujeita a refluxo de um dia para o outro. Isto proporcionou 0,211 g do produto mencionado em epigrafe. IR: COCN, v 2220 cm-1; C=0, v 1720 cm-1. A pureza isomérica de l-10a foi determinada por hidrólise do acilnitrilo em água morna, sendo o produto o composto 1-lla essencialmente puro.

Exemplo de Referência 15

Preparação da Forma l-10b de 4-ciano-4-(3-ciclopentiloxi-4--metoxifenil)-r-ciclo-hexanoacilnitrilo

Numa experiência análoga ao Exemplo 14, o ácido carboxílico axial foi convertido no cloreto do ácido utilizando cloreto de oxalilo e uma quantidade catalitica de dimetilformamida. Este cloreto do ácido foi directamente convertido no acilnitrilo correspondente, l-10b, o isómero do composto preparado no 22

Exemplo 14. A pureza isomérica foi determinada por hidrólise do acilnitrilo agitando-o em água morna durante 20 horas. A determinação de HPLC analítica revelou que >96% do produto tinha a forma de l-10b.

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Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Processo para enriquecimento da forma do ácido cis-4-ciano--4- (3-ciclopentiloxi-4-metoxifenil)-r-ciclo-hexanocarboxi-lico a partir de uma mistura de isómeros cis e trans, cujo processo compreende a cristalização a partir de uma solução de hexano/acetato de etilo de isómeros cis e trans, do isómero cis essencialmente livre do isómero trans.
2. Processo da reivindicação 1, em que a mistura cis/trans é dissolvida em acetato de etilo e hexanos.
3. Processo da reivindicação 2, em que a mistura cis/trans é dissolvida em acetato de etilo e, de seguida, são adicionados hexanos.
4. Processo da reivindicação 3, em que a solução de acetato de etilo de isómeros cis/trans é aquecida até ao refluxo, arrefecida e, de seguida, são adicionados hexanos após a qual é realizada a cristalização. Lisboa, 8 de Março de 2007 1