Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nowych pochodnych 4-dezacetylowiribiastyny o wzo¬ rze 1, w którym Q oznacza grupe o wzorze -NHNRR1, w którym R oznacza rodnik Ci—C3 al¬ kilowy, C2—C4 alkainokarboniylowy, dwuchloroace- tyJowy lub benizoilowy, a R1 oznacza atom wodoru, wzglednie R i R1 lacznie oznaczaja rodnik Ci—C3 alkilidenowy.Stwierdzono, ze pewne naturalne alkaloidy uzys¬ kiwane z Vinca rosea sa aktywne w leczeniu dos¬ wiadczalnych nowotworów zlosliwych u zwierzat.Nalezy do nich leurozyna (opis patentowy St. Zjedn, Ameryki nr 3 370 057); winkaleukoblastyna (win- blastyna) oznaczaina dalej skrótem VLB (opis pa¬ tentowy St. Zjedn. Ameryki nr S 097137); leuro- fonmina (belgijski opis patentowy nr 811110; leuro- zydyna (wiorozydyna) i leurokrystyna (w dalszej czesci opisu nazywana winkrystyna) (oba alkaloidy przedstawione w opisie patentowy St. Zjedn. Ame¬ ryki nr 3 205 220); dezoksy VLB „A" i „B", Tetra- hedron Letters 783 (1958); 4-dezacetoksywinblasty- na (opis patentowy St. Zjedn. Ameryki nr 3 954 773): 4-dezacetokisy-3,-hydroksywinblastyna) (opis paten¬ towy St. Zjedn. Ameryki nr 3 944 554); leurokolom- bina opis patentowy St. Zjedn. Ameryki nr 3 890 325) i winkadiolina (opis patentowy St. Zjedn.Ameryki nr 3 887 565). Dwa z powyzszych alkabi- dów, mianowicie VLB i wiinkrystyna, sa obecnie dostepne w handlu, jako leki stosowane w leczeniu nowotworów zlosliwych, zwlaszcza bialaczek i zbli- 10 15 20 25 30 zonych schorzen u ludzi. Oba alkaloidy zwyfkle po¬ daje sie dozylnie.Mozliwosci chemicznych modyfikacji alkaloidów Vinca sa ograniczone. Wynika to przede wszystkim z niezwykle zlozonej struktury czastek i trudnosci^ przeprowadzenia reakcji chemicznej modyfikujacej' wybrana grupe funkcyjna bez oddzialywania na inne grupy. Po drugie, badania strukturalne prze¬ prowadzone na dinierycznych alkaloidach pozba¬ wionych pozadanych wlasciwosci chemoteraipeutycz- nych, uzyskanych z frakcji Vinca rosca lub wytwo¬ rzonych z alkaloidów wykazaly, ze te „nieaktywne zwiazki" maja budowe bardzo zblizona do budowy alkaloidów aktywnych, czesto róznriac sie je<$ynie konfiguracja przestrzenna na jednym atomie* Wy* daje sie to wskazywac, ze czymnosc przeciwmowo* tworowa jest zwiazana z bardzo specyficzna ^tnik* . tura przestrzenna i ze szanse uzyskamia bardziej aktywnych leków przez modyfikacje tych struktur sa niewielkie.Udana modyfikacja fizjologicznie czynnego*elte- loidu jest 6,7-dwuwodoro VLB (opis patentowy St Zjedn. Ameryki nr 3 352 868) oraz zastapienie rodnika acetylowego przy C-4 (atom wegla nr 4 ukladu pierscieniowego VLB, patrz wzory 1 i 2} wyzszymi rodnikami alkanoterbonylowymi lub .in¬ nymi rodnikami acylowymi (patrz opis patentowy St Zjedn. Ameryki nr 3 392 173). Niektóre sposród powyzszych pochodnych C-4 wykazuja zdolnosc 125 470125 470 przedluzania zyda myszy inokulowanych bialacz¬ ka PJ534., Pochodna, w której rodnik acetylowy przy C-4 zastapiono rodnikiem chloroacetylowym, jest uzy¬ tecznym zwiazkiem przejsoiowym w syntezie struk¬ turalnie modyfikowanych zwiazków VLB, w któ¬ rych rodnik acetylowy przy C-4 VLB zastapiono rodmikiem N,N-dwualkiloglicylowym (patrz opis patentowy St. Zjedn. Ameryki nr 3 387 001). Otrzy¬ mano równiez przeoiwnowotworowe czynne C-3 karboksyamidSy i karboksyhydrazydy VLB, win- krystyny, winkadioliny i innych alkaloidów tej grupy (belgijski opis patentowy nr 813 168). Zwiazki te sa niezwykle interesujace, poniewaz np. 3-kar- boksyaanidy sa bairdiziej czynne w stosunku do osteogenicznego miesaka Ridgeway^ i miesaka lim- fatycznego Gardnera niz naturalna VLB, podstawo¬ wy alkaloid, z którego to pochodne zostaly wyprno- wa«Jzane.__ Pewne sposród tych pochodnych amidowych maja aktywnosc zblizona do aktywnosci wimkrystyny wobec tych samych nowotworów. Jeden z nich, 4-dezacetylo VLB C-3 katboiksyamiid (windezyna) znajduje sie obecnie w badaniach klinicznych, w których wykazal czynnosc w pewnych przypadkach bialaczM xl ludzi. Viindezyna okazuje sie miec mniejsza neurotoksycznosc niz wiinkrystyna i jest widocznie skuteczniejsza wobec bialaczek opornych na winlkrystyne. 4-dezacetylo VLB C-3 karboksyhydrazyd jest przedstawiony w belgijskim opisie patentowym nr .813 108 jako zwiazek czynny wobec tramsplanto- wamych nowotworów u myszy. Stwierdzono jego czynnosc wobec osteogenacznego miesaka Ridge- wajy^a i liimfatycznego miesaka Gardnera.Cecha sposobu wedlug wynalazku jest to, ze na C-3 pochodna 4^dezacetylowinkaleu!koblastyny o ogólnym wzorze 2, w którym Q' oznacza grupe o wzorze, -NHNH2, dziala sie w roztworze formal¬ dehydem, acetaldehydem, acetonem lub aldehydem propionowym,, z ewentualnym nastepnym uwodor¬ nieniem otrzymanego zwiazku, lub tez bezwodni¬ kiem luib chlorkiem kwasu C2—C4 alkanokarboksy- lowego, dwuchlorooctowego lub benzoesowego.R we wzorze 1 moze oznaczac rodnik metylowy, etylowy* n-propylowy, izopropylowy, acetylowy, propiomylowy, n-butyrylowy, izobutyrylowy, dwu- chloroacetyilowy lub benzoilowy.Rodniikami alkilidynowymi moga byc rodniki me- tylidenowy (=CH2, etylidenowy (=CHCH3), n-pro- pylidenowy (=CHC2Hs) lub izopropylidenowy (=CKCH3)2. - Zwiazki o wzorze 1 nazwano pochodnymi 4-de¬ zacetylo VLB C-3 karboksyhydrazydu. Systema¬ tyczna nazwa tych zwiazków winna zawierac czlon „3-a^karbometoksy", Czlon ten zostal pominiety, poniwaz jest zawarty w nazwie „C-3 karboksy- bydrazyd". Mozliwe jest równiez alternatywne nazwanie omawianych zwiazków pochodnymi 4-de¬ zacetylo VLB 23-demetoksy-23-hydirazydu, na pod¬ stawie zastapienia rodnika C-23 metoksylowego grupa hydirazydowa. Nazwe C-3 karboksyhydirazyd stosuje sie na zasadiate wyboru arbitralnego. ii 15 30 55 Hydrazyna zawiera dwa tomy azotu, które w hydrazydzie sa numerowane jak nastepuje -CO-NiH-N*H2.Pochodne hydrazydowe otrzymywane sposobem wedlug wynalazku sa pochodnymi N2.Zwiazki o wzorze 1, w którym R oznacza rodnik C2—C4 alkanokairbonylowy, dwuchloroacetylowy lub benzoilowy otrzymuje sie dzialajac na 4-dezacetylo VLB C-3 karbotksyhyidrazyd odpowiednim bezwod¬ nikiem lub chlorkiem kwasowym. Podobnie, 4-de¬ zacetylo VLB C-3 karboksyhydrazyd jest produk¬ tem wyjsciowym w syntezie zwiazków o wzoirze 1, w którym R i R1 lacznie oznaczaja rodnik Ci—C3 alkilidenowy. Zwiazki te otrzymuje sde dzialajac na nie podstawiony C-3 karboksyhydrazyd formal¬ dehydem, acetaidehydem, propionaldehydem lub acetonem. Pochodne alkilidenowe mozna uwodor¬ niac, np. wodorkiem, jak NaBH4, otrzymujac odpo¬ wiedni zwiazek o wzoirze 1, w którym R oznacza rodnik Ci—C3 alkilowy a R1 oznacza atom wodoru.Zwiazek o wzorze 2 mozna otrzymywac kilkoma alternatywnymi sposobami W sposobie korzyst¬ nym otrzymuje sie 4-deacetylo VLB C-3 karboksy¬ hydrazyd dzialajac na VLB hydrazyna, wedlug belgijskiego opisu patentowego nr 813168 VLB i hydrazyne ogrzewa sie w zamknietym naczyniu reakcyjnym, stosujac jako rozpuszczalnik bezwod¬ ny etanol. Alternatywnie mozna dzialac na 4-deza¬ cetylo VLB bezwodna hydrazyna, w tych samych warunikach. Reakcja hydrazyny z VLB prowadzi do hydrolizy grupy acetoksy przy C-4, co powo¬ duje, ze produktem reakcji jest zawsze 4-dezace¬ tylo VLB C-3 karboksyhydrazyd, niezaleznie od tego, czy jako material wyjsciowy stosuje sie VLB czy tez 4-dezacetylo VLB. 4-dezacetylo VLB C-3 karboksyhydrazyd o wzo¬ rze 2 wytwarza sie np. nastepujaco. 4-dezacetylo VLB ogrzewano w bezwodnym eta¬ nolu z nadmiarem 'bezwodnej hydrazyny w zamk¬ nietym naczyniu reakcyjnym, w okolo 60°C, w ciagu okolo 18 godzin. Po oziebieniu i otwarciu na¬ czynia reakcyjnego wylano zawartosc i pod zmniej¬ szonym cisnieniem odparowano z niej skladniki lotne. Pozostalosc, zawierajaca 4-dezacetylo VLB C-3 karboksyhydrazyd, rozpuszczono w chlorku me¬ tylenu, roztwór przemyto woda i wysuszono, po czym pod zmniejszonym cisnieniem odparowano rozpuszczalnik. Pozostalosc rozpuszczono w mie¬ szaninie 1:1 chloroformu z benzenem i poddano chromatografii na zelu krzemionkowym.Chromatogram rozwijano mieszanina benzen- -chloroformtrójetyloamina. Poczatkowe frakcje chromatograficzne zawieraly nieprzereagowana 4-dezacetylo VLB. Dalsze frakcje zawieraly 4-deza¬ cetylo-lS^dekarbometolksy VLB C-3 karboksyhyd¬ razyd, który uprzednio opisal Neuss i inni, Tetra- hedron Letters 1968, 783. Frakcje, w których chro¬ matografia cienkowarstwowa wykazala obecnosc 4-dezacetylo VLB C-3 karboksyhydrazydu, pola¬ czono i pod zmniejszonym cisnieniem odparowano z nich rozpuszczalniki. Otrzymano staly produkt o temperaturze topnienia 219—220°C, z rozkladem.Zwiazki o wzoirze 1 sa czynne w hamowaniu transplantowanych nowotworów u myszy i/lub praedulzaniu zycia myszy inokulowanych mowotwo-125 470 5 rami. Czynnosc zwiazków wykazano w próbach obejmujacych podawanie ich, zwykle droga do¬ otrzewnowa, w danej dawce, w ciagu 7—10 dni.Po uplywie tego czasu mierzono wielkosc nowotwo¬ ru. Przedluzenie zycia oznacsoaino jaiko róznice czasu zycia zwierzat traktowanych i zwierzat kontrol¬ nych.W ponizszej tablicy 1 przedstawiono wyniki ba¬ dan, w których nowotworowe myszy z pozytywnym, skutkiem traktowano zwiazkiem o wzorze 1. W ko¬ lumnie 1 tablicy podlano nazwe zwiazku, w ko¬ lumnie 2 nazwe tranisplantowanego nowotworu, w kolumnie 3 dawke lub zakres dawka i liczbe dni dawkowania, a w kolurnnie 4 procent hamowania wzrostu nowotworu lub procent przedluzenia zycia iw przypadku B16).ROS jest skrótowa nazwa osteogenicznego mie- saka Ridgeway^a, GLS oznacza limfatyczny zwiazek Gardnera, a B16 zlosliwego czerniaka.Tablica 1 1 Zwiazek | 1 No¬ wo¬ twór 2 Dawka mg/kgX Xdmi 31 Procent hamo¬ wania lub przedluzenie 3 dni 4 7 dni 5 | 6 c. & tablicy 1 5 25 1 4-dezacetylo VLB C-3 N*etylokar- boksyhydra- zyd 4-dezacetylo VLB C-3 N2-(-aceto- ksy)etylo- karboksy- hydrazyd 4-dezacetylo VLB C-3 N2-acetylo- karboksy- hydrazyd 4-dezacetylo VLB C-3 N2-benzoilo- karboksy- hydrazyd 4-dezacetylo VLB C-3 N2-butyrylo- karboksy hydrazyd 1 2 GLS ' GLS GLS B16 GLS GLS 31 0,5x10 0,25x10 0,5x10 0,25x10 0,125x10 0,5x10 0,25x10 0,125x10 1,2x3 0,9x3 0,6x3 0,3x3 0,15x3 0,5x10 0,25x10 0,125x10 0,5x10 0,25x10 C,125xl0 4 dawka tok¬ syczna 100 (+) 100 100 74 IGO 100 100 i dawka tok¬ syczna 100 76 64 100 100 1 5 1 dawka tok- 1 syczna 1 dawka tok¬ syczna 100 73 26 dawka tok¬ syczna 100 93 69 84 109 100 71 dawka tok¬ syczna; 45 dawka i tok¬ syczna 100 100 | 30 VLB C-3 N2-izopropy- lidenokarbo ksyhydtra- 1 syd | ROS| 0,15x10 | | - 74 40 Dla porównania, przy stosowaniu 4-dezacetylo- -VLB-3-CHkarbok»yhydrazydiu (stanowiacego zwia¬ zek wyjsciowy w sposobie wedlug wynalazku, w próbie zwalczania GLS wszczepionego laboratoryj¬ nie myszom, zwalczanie schorzenia w 73°/o uzyskano dopiero po podawaniu w ciagu 7 dni dawki 0,2 mg/kg, natomiast zwalczanie 100% osiagnieto po 10 dniach podawania dawki 0,6 mg/kg.Ponizej w tablicy 2 przedstawiono wyniki badan dla najbardziej zblizonych znanych zwiazków wy¬ kazujacych dzialanie iinhibitujace wobec GLS. Ba¬ danie to opisano w cytowanym powyzej belgijskim opisie patentowym rur 813168.Tablica 2 50 55 65 Zwiazek 4-dezacetylo VLB 3C karboksiyhydirazyd 4-dezacetylo-dezoksy VLB „B" C-3 kairbo- ksylohydrazyd Siarczan 4-dezacetylo VLB C-3 karboksy- arnidu Siarczan 4-dezaicetylo VLB C-3 N-(3,4-dwUr hydroksyfenyiloetylo)- karboksyamidiu 1 Dawka mg/kgX Xdni 0,2—0,6 X X7—10 0,6X7 0,15—1,0 X Xio 0,4X7 0,2X7 04 X 7 ¦/• hamo- wania 73—100 77 79—100 36 16 H* 1 4-dezacetylo VLB C-3 NMzopropy Mdenokar- boksyhyd- razyd 4-dezacetylo VLB C-3 N2-etylideno karboksy- hydrazyd 4-dezacettylo VLB C-3 N2-metylide nofcabroksy- hydrazyd 4-dezacetylq VLB C-3 N2-izopropy- lidenokarbo ksyhydira- zyd | 2 ROS GLS ROS GLS 3 0,05x10 0,1x10 0,15x10 1 0,2— —1,0x10 0,4x9 0,2x9 0,4x9 0,2x9 0,5x10 0,25x10 0,125x10 ROS| 0,15x10 | 4 1 33 42 74 dawka tok¬ syczna dawka tok¬ syczna' 100 dawka tok¬ syczna 100 dawkai tok¬ syczna 100 / i 91 5 dawka tok¬ syczna 100 91 - 74 15125 470 7 Tak wiec; swiajziki wedlug wynalazku s^ aktyw¬ niejsze odt zwiazków znanych, lub tez dzialaja sku¬ tecznie przy znacznie, nizszych; dawkach? wzglednie po uplywie mniejszejl liczby dni. Oczywiscie, aktywnosc niej jest jedynym czynnikiem waznym 5 w przypadku 'leków prraciwnowotworowych, jako ze równie istotna, jest przyiswajainosc leku przez pacjenta (brali reakcji uczuleniowej lub nieprzyj- mowamie-leku sprzez orgianizm). Zwiazki o wzorze 1 sa doskonale [przyswajalne, przy czym pod tym 10 wzgledem sa znacznie korzystniejsze od zwiazków znanych.Jak mozna toylo, oczekiwac, nowe hydrazydowe pochpdne o wzorze 1 róznia sie spektrum przeciw- nowotwarowym od ?VLB, wlnikryiatyny i winde^yny 15 oraz od estrów? C-4i N,Nrdiwualkilógliicylowych VLB, w ta)ki sam sposób,^wj jaki przeciwnowotworowe spekjjra tych izwiazków róznia sie miedzy soba, tzn.,: ze poszczególne -zwiazki sa skuteczniejsze wobec pewnych jnowotworów lub pewnych klas 20 nowotwwów, a mniej ? skutecane wobec innych.Jednakze stosjujac zwiazki o wzorze 1 klinicznie, lekarz klindcysjta poda je poczatkowo ta sama droga i w tym samyjm nosniku i wobec tych samych no¬ wotworów, jadfc w przypadku klinicznego stosowa- 25 nia winlkrystyiiy i VLBj Róznice ^dawkowania beda oczywiscie brac pod uwage wzgledna róznice ak¬ tywnosci nowych zwiazków i winkrystyny lub VLB wobec tego samego doswiaidczalnego nowotworu umyszy. 30 Przy, stosowaniu nowych hydrazydowych pochod¬ nych o wzorze 1 jako czynników przeciwnowotwo- rowych stosuje sie iizotoniczinife roztwory zawiera¬ jace w 1 ml 1—10 mg zwiaszku o wzorze 1. Zwiazki podaje sie w dawce 0,01 ^do 1, korzystnie 0,1 do 35 1 mjg/jtg Wagi ciala, raz lub dwa razy tygodniowo lub raz, niadwa tygodnie, zaleznie od aktywnosci i toksycznosci zwiazku. .Alternatywny sposób wyz¬ naczania .dawki leczniczej bierze pod oiwage po- wieirzichnie jciala; jako odpowiednia przyjmuje sie 40 dawke, 0,1—10 mg/m2, podawana co 7 do 14 dni.Kliniczne gadania zwiazków o *wzórze 1 przepro- wadjza sie sposobem S.K. Cartera, opisanym w roz¬ dziale „Study Design Prinoiples for the Clinical Evalufttien - of New Drugs as Developed by the 45 Chemotherapy Programme of the National Cancer InstaWte*', strony 2i2—289 monografii „The Design of Clinical Trials in/Cancer Therapy", wydawca Maufice Staauet i(Futura i^ublishing <$o.t New Yoirk, 1973). 50 Przyklad I. Wytwarzanie 4-dezacetylo VLB C-3 jN^etylidenokarboksyhydirazydu.W 50 ml CH2CI2 rozpuszczono 1 mdlimol (768 mg) 4-dezacetylo VLB C-3 karboksyhydrazydu, a do 55 roztworu dodano -200 mg CH3CHO. Naczynie reak¬ cyjne zamknieto i pozostawiono w ciagu nocy w temperaturze pokojowej. Odparowano roztwór, otrzymujac 'brazowo zabarwiony, bezpostaciowy prosizek, który poddano rozdzialowi miedzy CH2C12 i wode, w celu usuniecia nadmiaru 'CH3CHO. Roz¬ twór w CH^Cl2 wysuszono i odparowano do sucha.Otrzymano1 brazowej barwy, bezpostaciowy proszek zawierajacy 4-dezacetylo VLB C-3 N2-etylidenokar- boksyhydraizycT o na&tepUfacych slanych fizsycznych: P5 8 wddrno masowe: m/e = 794W(M+) widmo IR: v= 1680 cm"i (-CON), 1710 cirri (fCOO) Przyklad II. Wytwarzanie 4-dezacetylo VLB C-3 N2-etylokarboiksyhydrazydu. 4-dezacetylo VLB C-3 N2-etylidenokarboksyhyd- razyd z przykladu I rozpuszczono w IGO ml absolut¬ nego etanolu, a do roztworu dodano 500 mg 96°/o NaBH4. Mieszanine reakcyjna mieszano w ciagu nocy w temperaturze pokojowej, po czym dodano 1 N. HCl, w takiej ilosci, by otrzymac klarowny roztwór. Nastepnie dodano dalszej ilosci wody.Roztwór zalkalizowarno stezonym NH4OH i dwu¬ krotnie ekstrahowano CH2CI2. Ekstrakty wysuszono i odparowano do sucha. Otrzymano brazowej bar¬ wy, bezpostaciowy proszek (49 mg) o nastepuja¬ cych wlasciwosciach fizycznych: widmo masowe: m/e = 796 (M+) widmo IR: j = 3460 cm~i (N-H), 1656 cm~i (CON 1715 cm-i (COO).Przyklad III. Wytwarzanie 4-dezacetylo VLB C-3 N2-acetylokarboksyhydrazydu.Do roztworu 1500 mg 4-kiezacetylo VLB C-3 kar- boksyhydrazydju w 50 ml CH2CI2 dodano 3(0 mg bezwodnika octowego. Mieszanine reakcyjna utrzy¬ mywano w ciagu 3 godzin w temperaturze poko¬ jowej. Roztwór w CH2CI2 przemyto rozcienczoriym NH4OH i ponownie woda, po czym wysuszono i od- parowano, do sucha. Otrzymano l750 mg brazowej barwy, bezpostaciowego proszku zawierajacego 4-de¬ zacetylo VLB C-3 N2-acetyloka(rbok§yhydrazyd o nastepujacyeh wlasciwosciach fizycznych: widmo masowe: m/e = 810 (M+) widmo IR: y = 3410 cm-i (N-H), 1720 cm~i (COO), 1670 cm-i (CON).W podobny sposób, zastepujac bezwodnik octowy bezwodnikiem dwuchlorooctowym, otrzymuje sie 4-dezacetylo VLB C-3 N2-dwuchloroacetylokarbo- ksyhydraizyd. » Przyklad IV. Wytwarzanie 4-dezacetoksy VLB C-3 N2-butyirylokarboksyhydrazydu.Do roztworu 768 mg 4-dezacetylo VLB C-3 kar¬ boksyhydrazydu w 50 ml CH2CI2 dodano 120 mg bezwodnika maslowego Naczynie reakcyjne zamk¬ nieto i pozostawiono w ciagu nocy w temperaturze pokojowej. Mieszanine reakcyjna ekstrahowano rozcienczonyni NH4CH, odrzucajac ekstrakt. Pozos¬ taly roztwór w CH2CI2 Wysuszono i odparowano do sucha. Pozostalosc poddano chromatografii na zelu krzemionkowym, prowadzac elucje ' mieszanina octan etylu: metanol (1:1). Frakcje wykazujace w chromatografii cienkowarstwowej obecnosc za¬ danego produktu polaczono i odparowano do sucha.Otrzymano 128 mg brazowej barWy, bezpostaciowe¬ go proszku zawierajacego 4-dezacetylo VLB C-3 N2-butyrylokarboksyhydrazydu o nastepujacych wlasciwosciach fizycznych: widmo masowe: m/e = 838 (M+),* 497, 355, 154.Przyklad V. Wytwarzanie:4-dezacetylo VLB C-3 N2-benzoik)karboksyhydirazydU.Do roztworu 768 mg 4-dezacetylo VLB C-3 kar- boiksyhydrazydu w 50 ml CH2CI2 dodano 240 mg bezwodnika benzoesowego. Mieszanine w zamknie¬ tym naczyniu reakcyjnym utrzymywano w ciagu nocy w temperaturze pokojowej. Po otwarciu na¬ czynia roztwór przemyto kolejno rozcienczonym125 470 9 10 NH4CH i woda, w celu usuniecia soli kwasu benzo¬ esowego. Roztwór w CH2CI2 wysuszono i odparo- v;ano do sucha. Bezpostaciowy proszek poddano chromatografiii na zelu krzemionkowym, prowadzac elucje mieszaindina octan etylu: metanol (1:1) Frakcje, w których chromatografia cienkowarst¬ wowa wykazala obeonlosc zadanego produktu (zel krzemionkowy, octani etylu : metanol 1 :1) polaczo¬ no i odparowano do sucha. Otrzymano 150 mg bra¬ zowej barwy, bezpostaciowego proszku zawieraja¬ cego 4-dezacetylo VLB C-3 N^benzodlokarboksy- hydirazyd o nastepujacych wlasciwosciach fizycz¬ nych: widmo masowe: m/e = 872 (M+), 813, 531, 355, 154 widmo NMR: zgodne z proponowaina struktura; nowe protony aromatyczne parzy 7,3—8,0.Przyklad VI. Wytwarzanie 4-dezacetylo VLB C-3 N2-metylidenoka(i^bokisyhydi]^azyd(u. 768 mg 4-dezacetylo VLB C-3 ikarboksyhydrazydu rozpuszczono w 100 ml czterowodorofiuraniu, a do roztworu dodano 20 ml 37°/o roztworu HCHO w wo¬ dzie. Naczynie reakcyjnie zamknieto, a jego zawar¬ tosc mieszano w ciagu nocy w temperaturze poko¬ jowej. Roztwór reakcyjny odparowano do zelu, który nastepnfie rozpuszczono w absolutnym eta¬ nolu. Do alkoholowego (roztrwoni dodano CH2C12, a otrzymany roztwór ekstrahowano woda. Roztwór w CH2O2 oddzielono, wysuszono i odparowano do sucha. Otrzymano brazowej barwy, bezpostaciowy proszek zawierajacy 4-dlezacetylo VLB C-3 N2^me- tylidtenokarboksyhydiraizyd o nastepujacych wlasci¬ wosciach fizycznych: widmo masowe: m/e = 780 (M+), 439, 355, 154 widmo IB: szerokie pasmo karibonylowe v = 1650—1740 cm-* widmo NMR: dwa nowe sygnaly 5 4,63 i 8 4,89.Przyklad VII. Wytwarzanie 4-dezacetyloVLB C-3 N2-izopropyiUdleaiokarboksyhydirazydu. 400 mg 4-dezacetylo VLB C-3 karboksyhydrazydu rozpuszczono w 25 ml acetonu, a roztwór mieszano w ciagu 3 dmd w temperaturze pokojowej, utrzy¬ mujac go w ciemnosci. Roztwór odparowano, otrzy¬ mujac okolo 400 mg 4-dezace^ylo VLB C-3 N*-dzo- propylidenokarboksyhydrazydu o nastepujacych wlasciwosciach fizycznych: widmo masowe: m/e = 808 (M+), 822, 836, 777, 750, 751, 467, 355, 154, 124 widmo IR (CHCI3): v=1730 cm~i (-COOCH3), 1710 cm-*, (-N=C-), 1685 cm-i, (-COONH-).Zastrzezenia patentowe 1. Sposób wytwarzania nowych pochodnych 4-dez- acetylowinblastyiny o ogólnym wzorze 1, w którym Q oznacza grupe o wzorze -NHNRR1, w którym R i R1 lacznie oznaczaja rodnik Ci—C3 alkilideno- wy, znamienny tym, ze na C-3 pochodna 4-dezace- tylowinkaleukoblastyny o ogólnym wzorze 2, w it 11 25 40 45 50 55 którym Q' oznacza grupe o wzorze -NHNH* dziala sie w roztworze formaldehydem, acetaldehydem, acetonem lub aldehydem propionowym. 2. Sposób wedflrug zastrz. 1, znamienny tym, ze w przypadku wytwarzania 4-dezacetylo VLB C-3 N2-etyIidenokarbol^yhyd(razydiu na 4-dezacetylo VLB C-3 karboksyhydrazyd dziala sde acetaldehy¬ dem. 3. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze w przypadku wytwairzainia 4-dezacetyilo VLB C-3 N2-izopropyMdenokarbofeSiyhydrazydu na 4-dezace¬ tylo VLB karboksyhydlrazyd dziala sie acetonem. 4. Sposób wedlug zastrz, 1, znamienny tym, ze w przypadku wytwarzania 4-dezacetylo VLB C-3 N2-metylidenokarbokisyhydirazydiu na 4-dezacetylo VLB karboksyhydrazyd dziala sie formaldehydem, 5. Sposóbwytwarzaaiia nowych pochodnych 4-dezr acetylowiniblastyny o ogólnym wzorze 1, w którym Q oznacza grupe o wzorze -NHNRR1, w którym R oznacza rodnik Ci—C* alkilowy, a R1 oznacza atom wodoru, znamienny tym, ze na C-3 pochodna 4^ezacetylowtinikaleiukoblastyny o ogólnym wzo¬ rze 2, w którym Q' oznacza grupe o wzorze -NHNHa dziala sie w roztworze formaldehydem, acetalde¬ hydem, acetonem lub aldehydem propionowym, po czym uwodornia sie powstaly zwiazek o wzorze 1, w którym R i R1 lacznie oznaczaja rodnik Ci—Ca alkdlidenowy. 6. Sposób wedlug zastrz. 5, znamienny tym, ze w przypadku wytwarzania 4-dezacetylo VLB' C-3 N2-etylokarboJksyhydirazydfu na 4-dezacetylo VDB C-3 karboksyhydrazyd dziala sde acetaldehydem, a otrzymamy produkt uwodarnia. 7. Sposób wytwarzania nowych pochodnych 4-dez- acetylowinblastyiny o. ogólnym wzorze 1, w którym Q oznacza grupe o wzorze -NHNRR1, w którym R oznacza rodnik C2—C4 alkamokairbonylowy, dwu- chloroacetylowy, benzoilowy, a R1 oznacza atom wodoru, znamienny tym, ze na C-3 pochodna 4-dez- acetylowinkaleukoblastyny o ogólnym wzorze 2, w którym Q' oznacza grupe c wzorze -NHNH2, dziala sie w roztworze bezwodnikiem lub chlorkiem kwasu C2—C4 allkanokarboksylowego, diwuchloro- octowego lub benzoesowego. 8. Sposób wedlug zastrz. 7, znamienny tym, ze w przypadku wytwairzainia 4-dezacetylo VLB C-3 N2-acetyjlokarbokslyhydirazydiu na 4-dezacetylo VLB C-3 karboksyhydrazyd dziala sie bezwodnikiem octowym. 9. Sposób wedlug zastrz. 7, znamienny iym, ze w przypadku wytwarzania 4-dezacetylo VLB C-3 N2-boityrylokair,boksyhydrazydu na 4-dezacetylo VLB C-3 karboksyhydrazyd dziala sie bezwodni¬ kiemmaslowym. * 10. Sposób wedlug zastrz. 7, znamienny tym, ze w przypadku wytwarzania 4-dezacetylo VLB C^-3 N£-benzoilokairboksyhydirazydu na 4-dezacetylo VLB C-3 karboksyhydrazyd dziala sde bezwodnikiem benzoesowym.125 470 11' tl[ - OH r_NrJ__C,H '2P5 C-O-CH, X— CH2-GH. 4l_ ni i * 5 Wzórl OH 141 -is-lSl H e'Ji' C-O-CH, Wzór 2 OZGraf. Z.P. Dz-wo, z. 912 (80+15) 3.85 Cena 100 zl PL PL PL PL PL