NO338784B1 - Vannfritt krystallinsk monokaliumsalt av en HIV-integraseinhibitor, farmasøytisk preparat derav, dets anvendelse i terapi, og dets anvendelse ved fremstilling av et medikament for behandling eller forebyggelse av HIV-infeksjon, eller for behandling, forebyggelse eller forsinkelse av begynnelsen av AIDS. - Google Patents

Description

Oppfinnelsens område

Foreliggende oppfinnelse er rettet mot et vanfritt krystallinsk monokaliumsalter av en HIV-integraseinhibitor av forbindelse A som definert nedenfor. Foreliggende oppfinnelse er også rettet mot farmasøytiske preparater som inneholder saltene og fremgangsmåter for anvendelse av saltene.

Oppfinnelsens bakgrunn

HIV-retroviruset er det agens som forårsaker AIDS. HIV-l-retroviruset anvender primært CD4-reseptoren (et transmembranprotein på 58 kDa) for å komme inn i celler, via høyaffinitetsinteraksjoner mellom viruskappeglykoproteinet (gp 120) og et spesifikt område i CD4-molekylet som forefinnes i T-lymfocytter og CD4 (+)-T-hjelperceller (Lasky L.A. et al., Cell 1987, 50: 975-985). HIV-infeksjon særpreges ved en asymptomatisk periode like etter infeksjonen som mangler kliniske manifestasjoner i pasienten. Progressiv HIV-indusert ødeleggelse av immunsystemet fører så til forhøyet utsatthet overfor opportunistiske infeksjoner, noe som til syvende og sist gir et syndrom som betegnes ARC (AIDS-relatert kompleks) som særpreges av symptomer som vedvarende, generalisert lymfadenopati, feber og vekttap, som så følges av fullt utviklet AIDS.

Etter inngang av retroviruset i en celle omdannes viralt RNA til DNA som så integreres inn i vertscellens DNA. Integrasjon av viralt DNA er et essensielt trinn i virusets livssyklus. Integrasjonen antas å formidles av integrase, et enzym på 32 kDa, i tre trinn: sammensetning av et stabilt nukleoproteinkompleks med virale DNA-sekvenser, kløyving av to nukleotider fra den 3' ende av det lineære, provirale DNA og kovalent sammenkobling av de tilbaketrukne 3' OH-endene i det provirale DNA i et forskjøvet kutt som innføres i vertens målsete. Det fjerde trinn i prosessen, reparasjonssyntese av det resulterende gap, kan utføres av cellulære enzymer.

Forbindelsen N-(4-fluorbenzyl)-5-hydroksy-l-metyl-2-(l-metyl-l-{[(5-metyl-l,3,4-oksadiazol-2-yl)karbonyl]amino}etyl)-6-okso-l,6-dihydropyrimidin-4-karboksamid (i det påfølgende betegnet "forbindelse A") er en kraftig HIV-integraseinhibitor. Strukturen av forbindelse A er som følger:

Forbindelse A beskrives i internasjonal patentpublikasjon WO 03/035077, som inkluderer en liste av forbindelser som er nyttige som inhibitorer av HIV integrase.

Oppsummering av oppfinnelsen

Beskrivelsen omtaler kaliumsalter, fortrinnsvis krystallinske salter, av forbindelse A. Kaliumsaltene av forbindelse A er signifikant mer løselige i vann enn den frie basen, og én krystallinsk form (heri identifisert som form 1) har vist forbedret farmakokinetikk i dyremodeller sammenlignet med den frie base. Det skal videre bemerkes at forsøk på å fremstille et krystallinsk Na-salt av forbindelse A ikke har vært vellykkede og kun har ført til amorft materiale.

Beskrevet her er fremgangsmåter for anvendelse av forbindelse A-saltene for inhibering av HIV-integrase, for behandling eller forebyggelse av HIV-infeksjon og for behandling, forebyggelse av eller forsinkelse av utløsningen av AIDS.

De ovenfor nevnte utførelsesformer og andre utførelsesformer, aspekter og egenskaper ved foreliggende oppfinnelse er enten videre beskrevet i den påfølgende beskrivelse, eksemplene og de vedlagte krav, eller vil være åpenbare ut fra disse.

Kort beskrivelse av figurene

Figur 1 er røntgenpulverdiffraksjonsmønsteret for kaliumsaltet av forbindelse A som fremstilt i eksempel 2. Figur 2 er DSC-kurven for kaliumsaltet av forbindelse A som fremstilt i eksempel 2. Figur 3 er røntgenpulverdiffraksjonsmønsteret for kaliumsaltet av forbindelse A som fremstilt i eksempel 4. Figur 4 er DSC-kurven for kaliumsaltet av forbindelse A som fremstilt i eksempel 4.

Detaljert beskrivelse av oppfinnelsen

Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer et vannfritt krystallinsk monokaliumsalt av forbindelse A, farmasøytiske preparater som inneholder saltet og anvendelse av saltet. Forbindelse A-kaliumsaltene og farmasøytiske preparater som inneholder saltene, er anvendbare for inhibering av HIV-integrase, forebyggelse av HIV-infeksjon, behandling av HIV-infeksjon, forsinkelse av begynnelsen av AIDS, forebyggelse av AIDS og behandling av AIDS hos voksne, barn eller spedbarn. Forsinkelse av begynnelsen av AIDS, forebyggelse av AIDS, behandling av AIDS eller behandling eller forebyggelse av HIV-infeksjon er definert til å omfatte, men ikke være begrenset til, behandling av et bredt utvalg av tilstander forbundet med HIV-infeksjon: AIDS, ARC, både symptomatisk og asymptomatisk, og faktisk eller mulig eksponering for HIV. For eksempel er kaliumsalter av forbindelse A og farmasøytiske preparater derav anvendbare for behandling av HIV-infeksjon etter mistanke om tidligere eksponering for HIV, f.eks. ved blodtransfusjon, utveksling av kroppsvæsker, bitt, utilsiktede kanylestikk eller eksponering for pasientblod under kirurgiske inngrep. Saltene kan også anvendes i "rednings"-behandling, dvs. at et kaliumsalt av forbindelse A kan anvendes for behandling av HIV-infeksjon, AIDS eller ARC i HIV-positive individer hvis virusbelastning har nådd et ikke påvisbart nivå ved hjelp av konvensjonelle behandlingsformer (f.eks. behandlingsformer som benytter kjente proteaseinhibitorer i kombinasjon med én eller flere kjente revers transkriptaseinhibitorer) og som så igjen er blitt forhøyet grunnet fremkomsten av HIV-mutanter som er resistente for de kjente inhibitorene.

Forbindelse A er en inhibitor av HIV-integrase. Forbindelse A er blitt analysert i en integraseinhiberingsanalyse i hvilken trådoverføring katalyseres av rekombinant integrase, og er blitt funnet å være en kraftig inhibitor. Trådoverføringsanalysen er beskrevet i eksempel 193 i WO 02/30930. Forbindelse A er også blitt funnet å være aktiv i en analyse for inhibering av akutt HIV-infeksjon av T-lymfoide celler utført i samsvar med Vacca et al., Proe. Nati. Acad. Sei. USA 1994, 91: 4096-4100.

Beskrevet er et krystallinsk kaliumsalt av forbindelse A. Ytterligere beskrevet er et vannfritt, krystallinsk kaliumsalt av forbindelse A. Den foreliggende oppfinnelse er et vannfritt, krystallinsk kaliumsalt av forbindelse A som er et krystallinsk kaliumsalt av forbindelse A i form 1, hvor form 1-saltet særpreges ved et røntgenpulverdiffraksjons-mønster erholdt ved anvendelse av kopper-Ka-stråling (dvs. at strålekilden er en kombinasjon av Cu K„i- og Ka2-stråling) som omfatter 20-verdier (dvs. refleksjoner ved 20-verdier) i grader på 5,9, 20,0 og 20,6. I et aspekt av denne utførelsen særpreges det krystallinske kaliumsalt av forbindelse A i form 1 ved et røntgenpulverdiffraksjonsmønster erholdt ved anvendelse av kopper-Ka-stråling som omfatter 20-verdier i grader på 5,9, 12,5, 20,0, 20,6 og 25,6. I et annet aspekt av denne utførelsen er form 1 av det krystallinske K-salt av forbindelse A som opprinnelig definert eller som definert i det foregående aspekt, og særpreges videre ved en differensiell skannende ka lori metri kurve erholdt ved en oppvarmingshastighet på 10 °C/min i en lukket kopp under nitrogen som viser en enkelt endoterm med en topptemperatur på tilnærmet 279 °C. Form 1 av det krystallinske K-salt er et monokaliumsalt. Form 1 av det krystallinske kaliumsalt av forbindelse A har vist overlegen oral biotilgjengelighet og forbedret farmakokinetikk (f.eks. forbedret Cmaks. og AUC) i rotter og hunder sammenlignet med forbindelse A i seg selv.

Ytterligere beskrevet er et krystallinsk kaliumsalt av forbindelse A som er et hydratisert, krystallinsk K-salt. Det hydratiserte, krystallinske kaliumsalt et hydratisert, krystallinsk kaliumsalt av forbindelse A i form 2, hvor form 2-saltet særpreges ved et røntgenpulverdiffraksjonsmønster erholdt ved anvendelse av kopper-Ka-stråling som omfatter 20-verdier i grader på 7,9, 13,8 og 24,5. Form 2 av det krystallinske kaliumsaltet av forbindelse A særpreges ved et røntgenpulverdiffraksjonsmønster erholdt ved anvendelse av kopper-Ka-stråling som omfatter 20-verdier i grader på 7,9, 13,8, 15,7, 24,5 og 31,5. Form 2 av det krystallinske K-salt av forbindelse A som opprinnelig definert eller som definert i det foregående aspekt, og særpreges videre ved en

differensiell skannende ka lori metri kurve erholdt ved en oppvarmingshastighet på

10 °C/min i en lukket kopp under nitrogen som viser to brede endotermer med topptemperaturer på tilnærmet 146 °C og 239 °C og en tredje, skarp endoterm med en topptemperatur på tilnærmet 276 °C.

Også beskrevet er farmasøytiske preparater som omfatter et kaliumsalt av forbindelse A som opprinnelig definert ovenfor eller som beskrevet i hvilken som helst av de ovenfor nevnte utførelser eller aspekter, og et farmasøytisk akseptabelt bærestoff.

Beskrevet er farmasøytiske preparater som omfatter produktet fremstilt ved å kombinere et kaliumsalt av forbindelse A som opprinnelig definert ovenfor eller som beskrevet i hvilken som helst av de foregående utførelser eller aspekter, og et farmasøytisk akseptabelt bærestoff.

Ytterligere beskrevet er farmasøytiske kombinasjoner av (i) et kaliumsalt av forbindelse A som opprinnelig definert ovenfor eller som beskrevet i hvilken som helst av de ovenfor beskrevne utførelser eller aspekter, eller (ii) et anti-HIV-middel utvalgt fra gruppen som består av HIV-antivirale midler, immunmodulerende midler og anti-infeksjonsmidler, hvor K-saltet av forbindelse A og anti-HIV-midlet begge benyttes i en mengde som gjør kombinasjonen effektiv for inhibering av HIV-integrase, for behandling eller forebyggelse av HIV-infeksjon eller for behandling, forebyggelse eller forsinkelse av begynnelsen av AIDS. I én utførelse omfatter de farmasøytiske kombinasjonene et kaliumsalt av forbindelse A og et anti-HIV-middel som er et antiviralt middel utvalgt fra gruppen som består av HIV-proteaseinhibitorer, ikke-nukleosidbaserte HIV-revers transkriptaseinhibitorer og nukleosidbaserte HIV-revers transkriptaseinhibitorer.

En farmasøytisk kombinasjon (dvs. et kaliumsalt av forbindelse A i kombinasjon med et annet anti-HIV-middel) kan tilføres separat eller sammen, og når de tilføres separat, kan de aktive forbindelsene gis samtidig eller på forskjellige tidspunkter (f.eks. alternerende). Dersom de aktive forbindelsene tilføres sammen (enten hver for seg eller, mer typisk, i et farmasøytisk preparat), kan de begge være en del av et enkelt preparat (f.eks. en sammenblanding av forbindelsene som om ønskelig omfatter én eller flere eksipienser), eller de kan foreligge i separate preparater (f.eks. innkapslede preparater som hvert inneholder en av de aktive forbindelsene og om ønskelig én eller flere eksipienser) som kan være pakket sammen eller separat.

Ytterligere beskrevet er følgende:

(a) En fremgangsmåte for behandling eller forebyggelse av HIV-infeksjon i et individ med behov for dette som omfatter tilførsel til individet av en effektiv mengde av et kaliumsalt av forbindelse A. (b) En fremgangsmåte for forsinkelse av begynnelsen av AIDS i et individ med behov for dette som omfatter tilførsel til individet av en effektiv mengde av et kaliumsalt av forbindelse A. (c) En fremgangsmåte for behandling eller forebyggelse av AIDS i et individ med behov for dette som omfatter tilførsel til individet av en effektiv mengde av et kaliumsalt av forbindelse A. (d) En fremgangsmåte for inhibering av HIV-integrase i et individ med behov for dette som omfatter tilførsel til individet av en effektiv mengde av et kaliumsalt av forbindelse A. (e) En fremgangsmåte for behandling eller forebyggelse av HIV-infeksjon i et individ med behov for dette som omfatter tilførsel til individet av et farmasøytisk preparat som omfatter en effektiv mengde av et kaliumsalt av forbindelse A og et farmasøytisk akseptabelt bærestoff. (f) En fremgangsmåte for forsinkelse av begynnelsen av AIDS i et individ med behov for dette som omfatter tilførsel til individet av et farmasøytisk preparat som omfatter en effektiv mengde av et kaliumsalt av forbindelse A og et farmasøytisk akseptabelt bærestoff. (g) En fremgangsmåte for behandling eller forebyggelse av AIDS i et individ med behov for dette som omfatter tilførsel til individet av et farmasøytisk preparat som omfatter en effektiv mengde av et kaliumsalt av forbindelse A og et farmasøytisk akseptabelt bærestoff. (h) En fremgangsmåte for inhibering av HIV-integrase i et individ med behov for dette som omfatter tilførsel til individet av et farmasøytisk preparat som omfatter en effektiv mengde av et kaliumsalt av forbindelse A og et farmasøytisk akseptabelt bærestoff. (i) Fremgangsmåten ifølge (a), (b), (c) eller (d) hvor kaliumsaltet av forbindelse A tilføres i kombinasjon med minst ett anti-HIV-middel utvalgt fra gruppen som består av antivirale AIDS-midler, immunmodulerende midler og antiifeksiøse midler, hvor K-saltet av forbindelse A og anti-HIV-midlet begge benyttes i en mengde som gjør kombinasjonen effektiv i fremgangsmåten. (j) Fremgangsmåten ifølge (a), (b), (c) eller (d) hvor kaliumsaltet av forbindelse A tilføres i kombinasjon med minst ett antiviralt middel utvalgt fra gruppen som består av HIV-proteaseinhibitorer, ikke-nukleosidbaserte HIV-revers transkriptaseinhibitorer og nukleosidbaserte HIV-revers transkriptaseinhibitorer, hvor K-saltet av forbindelse A og det antivirale middel begge benyttes i en mengde som gjør kombinasjonen effektiv i fremgangsmåten. (k) Fremgangsmåten ifølge (e), (f), (g) eller (h) hvor det farmasøytiske preparat som omfatter K-saltet av forbindelse A, tilføres i kombinasjon med minst ett anti-HIV-middel utvalgt fra gruppen som består av antivirale AIDS-midler, immunmodulerende midler og antiinfeksiøse midler, hvor K-saltet av forbindelse A og anti-HIV-midlet begge benyttes i en mengde som gjør kombinasjonen effektiv i fremgangsmåten. (I) Fremgangsmåten ifølge (e), (f), (g) eller (h) hvor det farmasøytiske preparat som omfatter K-saltet av forbindelse A, tilføres i kombinasjon med minst ett antiviralt middel utvalgt fra gruppen som består av HIV-proteaseinhibitorer, ikke-nukleosidbaserte HIV-revers transkriptaseinhibitorer og nukleosidbaserte HIV-revers transkriptaseinhibitorer, hvor K-saltet av forbindelse A og det antivirale middel begge benyttes i en mengde som gjør kombinasjonen effektiv i fremgangsmåten.

Ytterligere utførelsesformer beskrevet omfatter fremgangsmåtene som er beskrevet i (a)-(l) ovenfor, hvor kaliumsaltet av forbindelse A som benyttes i fremgangsmåten, er et kaliumsalt av forbindelse A som beskrevet i en av de forskjellige utførelsene og aspektene som er beskrevet ovenfor.

Beskrevet her er også et kaliumsalt av forbindelse A ifølge foreliggende oppfinnelse (i) for anvendelse i, (ii) for anvendelse som et medikament for, eller (iii) for anvendelse ved fremstilling av et medikament for: (a) inhibering av HIV-integrase, (b) behandling eller forebyggelse av HIV-infeksjon eller (c) behandling, forebyggelse av eller forsinkelse av begynnelsen av AIDS. I disse anvendelsene kan K-saltet av forbindelse A om ønskelig benyttes i kombinasjon med ett eller flere anti-HIV-midler utvalgt blant antivirale HIV-midler, antiinfeksiøse midler og immunmodulerende midler. Disse anvendelsene inkluderer anvendelsene som nettopp er beskrevet hvor kaliumsaltet av forbindelse A som benyttes i utførelsen, er et kaliumsalt av forbindelse A som beskrevet i en av de forskjellige utførelsesformene og aspektene som er beskrevet ovenfor.

En fremgangsmåte for fremstilling av et krystallinsk kaliumsalt av forbindelse A (alternativt heri betegnet "Fremgangsmåte Pl" eller "Pl-fremgangsmåten") omfatter: (Al-1) blanding av en vandig løsning av en kaliumbase med en blanding som omfatter forbindelse A, vann og en første mengde av en alkohol for dannelse av en basisk løsning av forbindelse A, og om ønskelig filtrering av løsningen, og (Al-2) tilsetning av kimkrystaller til løsningen dannet i trinn Al-1 og om ønskelig fortynning av den kimtilsatte løsningen med en andre mengde av alkoholen, eller

(Bl-1) tilsetning av kimkrystaller til en blanding som omfatter forbindelse A og en første mengde av et organisk løsemiddel utvalgt fra gruppen som består av et halogenert alkan, en dialkyleter, dialkoksyalkan, en syklisk eter eller dieter, et trialkylamin, et tertiært amid, et N-alkylpyrrolidon, et dialkylsulfoksid og et alkannitril, og (Bl-2) tilsetning av en vandig løsning av et kaliumsalt til den kimtilsatte blandingen fra trinn Bl-1, og

(Cl) kultivering av den kimtilsatte løsningen som dannes ved trinn Al-2 eller trinn Bl-2 for erholdelse av det krystallinske kaliumsalt av forbindelse A.

Alle trinnene i Pl-fremgangsmåten utføres om ønskelig, men fortrinnsvis, med agitasjon (f.eks. omrøring).

Forbindelse A har begrenset løselighet i vann og i alkoholen (f.eks. etanol), og det kan følgelig være vanskelig å oppløse forbindelse A fullstendig i alkohol- vannblandingen. Følgelig er forbindelse A-alkohol-vannblandingen som benyttes i trinn Al-1, typisk i form av en suspensjon før tilsetning av den vandige base. Under trinn Al-1 reagerer basen med den suspenderte forbindelse A og omdanner den til K-saltet som er relativt lett løselig i alkohol-vannblandingen, og som en følge av dette vil suspensjonen typisk omdannes til en relativt klar saltløsning. Formålet med den valgfrie titrering i trinn Al-1 er å fjerne eventuelt ikke oppløst eller utfelt forbindelse A fra løsningen og/eller å klarne løsningen før tilsetning av kimkrystaller.

Forbindelse A kan benyttes i trinn Al-1 i hvilken som helst mengde som til syvende og sist vil føre til dannelse av i det minste noe av det ønskede krystallinske K-salt. Det foretrekkes imidlertid å benytte en mengde av forbindelse A som vil gi en svært overmettet løsning av K-saltet etter fullført tilsetning av den vandige base i trinn Al-1 og før tilsetning av kimkrystaller, slik at mengden av krystallinsk K-salt som kan erholdes fra fremgangsmåten, kan maksimaliseres.

Formålet med den valgfrie fortynningen med alkoholen i trinn Al-2 er å tilveiebringe betingelser som er fordelaktige for krystallisering av K-saltet, dvs. at K-saltet er mindre løselig i alkoholen enn i vann.

Alkoholen som benyttes i trinn Al-1, kan være hvilken som helst alkohol som under de benyttede betingelser foreligger i væskefasen, er kjemisk inert og vil oppløse, suspendere og/eller dispergere forbindelse A slik at forbindelse A og kaliumbasen bringes i kontakt med hverandre slik at krystallisering av det ønskede K-salt av forbindelse A muliggjøres. Alkoholen er typisk en alkohol i hvilken forbindelse A har høyere løselighet enn K-saltet av forbindelse A slik at det tilveiebringes betingelser som er fordelaktige for krystalliseringen av K-saltet av forbindelse A. Alkoholer som er egnede for anvendelse i trinn Al-1, omfatter alkylalkoholer og sykloalkylalkoholer, f.eks. C!.6-alkylalkoholer og C4_6-sykloalkylalkoholer. Egnede alkoholer omfatter f.eks. metanol, etanol, propanol, isopropanol, syklobutanol og syklopentanol. I én utførelse er alkoholen en Ci-4-alkylalkohol. I en annen utførelse er alkoholen metanol eller etanol. En foretrukket alkohol for anvendelse i trinn Al-1 er etanol.

Det organiske løsemiddel som benyttes i trinn Bl-1, kan være et hvilket som helst halogenert alkan, en dialkyleter, et dialkoksyalkan, en syklisk eter eller dieter, et trialkylamin, et tertiært amid, et N-alkylpyrrolidon, et dialkylsulfoksid eller et alkannitril som under de benyttede betingelser foreligger i væskefasen, er kjemisk inert og vil oppløse, suspendere og/eller dispergere forbindelse A slik at forbindelse A og kaliumbasen bringes i kontakt med hverandre og at krystalliseringen av det ønskede K-salt av forbindelse A muliggjøres. Den fysiske tilstand til blandingen av organisk løsemiddel og forbindelse A før tilsetningen av kimkrystaller vil avhenge av faktorer som valg av løsemiddel, mengden av forbindelse A som benyttes og temperaturen. Blandingen kan f.eks. være en løsning i hvilken forbindelse A er fullstendig oppløst i det organiske løsemiddel eller en suspensjon i hvilken en viss andel (fra en liten til en stor andel) av forbindelse A forblir uoppløst. Noen løsemidler (f.eks. DMSO, acetonitril, NMP og DMF) danner typisk løsninger med forbindelse A (dvs. at de vil oppløse i det vesentlige alt av forbindelse A) for de konsentrasjoner av forbindelse A og under de betingelser som typisk benyttes i trinn Bl-1. Ikke oppløst forbindelse A i Bl-l-blandingen vil typisk gå i løsning under tilsetningen av den vandige base i trinn Bl-2, og deretter enten krystallisere eller forbli i løsning som K-saltet.

Det organiske løsemiddel i trinn Bl-1 er også typisk et løsemiddel i hvilket forbindelse A har høyere løselighet enn hva K-saltet av forbindelse A har, slik at det tilveiebringes betingelser som er fordelaktige for krystallisering av K-saltet av forbindelse

A.

Representative eksempler på løsemidler som er egnede for anvendelse i trinn Bl-1, omfatter karbontetraklorid, kloroform, metylenklorid, 1,2-dikloretan, 1,1,2-trikloretan, 1,1,2,2-tetrakloretan, etyleter, MTBE, THF, dioksan, 1,2-dimetoksyetan, trietylamin, tri-n-propylamin, dietylisopropylamin, diisopropyletylamin, DMF, DMAC, N-metylpyrrolidon, N-etylpyrrolidon, DMSO, acetonitril og propionitril.

En utførelsesform av fremgangsmåte Pl er fremgangsmåten som den opprinnelig er beskrevet ovenfor, hvor det organiske løsemiddel som benyttes i trinn Bl-1, er et Ci_8uforgrenet eller forgrenet, halogenert alkan, en dialkyleter hvor hver alkylgruppe uavhengig av den andre er C^-alkyl, et Ci_4uforgrenet eller forgrenet alkan substituert med to O-C^-alkylgrupper (som er like eller forskjellige), en C4-C6syklisk eter eller dieter, et tri-(Ci.4-akyl)amin, et N,N-di-(Ci-4-alkyl)-Ci_4-alkylamid, et N-(Ci_4-alkyl)pyrrolidon, et di-(Ci_4-alkyl)sulfoksid eller et C2-C4-alkannitril.

I en annen utførelsesform er det organiske løsemiddel som benyttes i trinn Bl-1, acetonitril, propionitril, THF, DMF, DMAC, N-metylpyrrolidon eller N-etylpyrrolidon. I en foretrukket utførelse er løsemidlet acetonitril eller NMP.

Kaliumbasen som benyttes i trinn Al-1 eller trinn Bl-2, omfatter med fordel kaliumhydroksid, kaliumkarbonat, kaliumbikarbonat eller kaliumalkoksid. Begrepet "kaliumalkoksid" viser til et kaliumsalt av en alkylalkohol. Kaliumalkoksidet er fortrinnsvis saltet av en Ci-6-alkylalkohol (dvs. KOR hvor R er Ci_6-alkyl) og er typisk saltet av en Ci_4-alkylalkohol. Egnede kaliumalkoksider omfatter f.eks. kaliummetoksid, kaliumetoksid, kaliumpropoksid og kaliumisopropoksid. En utførelsesform av Pl-fremgangsmåten er fremgangsmåten som den opprinnelig er beskrevet ovenfor eller som beskrevet i en foregående utførelse hvor, dersom et kaliumalkoksid benyttes i trinn Al-1, alkoholen har den samme alkylgruppen som alkoksidbasen, dvs. at MeOH benyttes sammen med KOMe, EtOH benyttes sammen med KOEt, i-PrOH benyttes sammen med kaliumisopropoksid osv.

En annen utførelsesform av fremgangsmåte Pl er fremgangsmåten som den opprinnelig er beskrevet ovenfor eller som beskrevet i en foregående utførelsesform hvor kaliumbasen som benyttes i trinn Al-1 eller trinn Bl-2, omfatter KOH, KOMe og KOEt. I et aspekt av denne utførelsen er kaliumbasen KOH.

Kaliumbasen (f.eks. KOH) kan benyttes i hvilket som helst forhold relativt til forbindelse A som fører til dannelse av minst noe av det ønskede kaliumsalt. Basen kan med fordel tilsettes i en mengde i området fra tilnærmet 0,1 til tilnærmet 3 ekvivalenter pr. ekvivalent forbindelse A. Basen tilsettes typisk i et forhold som under de benyttede reaksjonsbetingelser (f.eks. temperatur, omrøringsgrad osv.) vil tillate omdanning av i det minste en hoveddel (dvs. mer enn 50 %) av forbindelse A til det ønskede salt. Anvendelse av overskuddsmengder av base kan føre til dannelse av hydrolyseprodukter, mens anvendelse av subekvivalente mengder av basen på uønsket måte kan begrense omdanningsnivået, noe som fører til overdrevne mengder av ikke-reagert forbindelse A. Følgelig tilsettes basen typisk i en mengde i området fra tilnærmet 0,5 til tilnærmet 1,1 ekvivalenter pr. ekvivalent forbindelse A og tilsettes mer typisk i en mengde i området fra tilnærmet 0,9 til tilnærmet 1,0 ekvivalenter (f.eks. fra tilnærmet 0,90 til tilnærmet 0,98 ekvivalenter) pr. ekvivalent forbindelse A.

Hvilken som helst mengde av kimkrystall som vil indusere eller bidra til krystallisering av den ønskede krystallinske form av K-saltet av forbindelse A, kan benyttes i trinn A2 eller trinn Bl-2. Relativt svært små mengder av krystall benyttes typisk ikke da disse kan være minimalt effektive når det gjelder å indusere eller bidra til krystallisering. På den annen side benyttes typisk ikke svært store mengder av krystall da dette er sløseri med materiale og overskrider mengden som er nødvendig for å oppnå krystallisering. Følgelig benyttes kimkrystallene fortrinnsvis i en mengde i området fra tilnærmet 0,2 til tilnærmet 10 % (vekt/vekt) (f.eks. fra tilnærmet 0,5 til tilnærmet 10 %

(vekt/vekt)) relativt til vekten av forbindelse A (f.eks. betyr 10 % (vekt/vekt) at 10 g kimkrystaller benyttes pr. 100 g forbindelse A) og benyttes typisk i en mengde i området fra tilnærmet 1 til tilnærmet 5 % (vekt/vekt) relativt til vekten av forbindelse A.

Trinnene Al-1 og Al-2 eller trinnene Bl-1 og Bl-2 kan utføres over et bredt temperaturområde hvor temperaturen for trinn Al-1 eller trinn Bl-2 er slik at forbindelse A er løselig i reaksjonsmediet (dvs. en baseholdig, kimkrystalltilsatt løsning i et egnet, organisk løsemiddel som beskrevet ovenfor og vann) og at det krystallinske salt av forbindelse A i det minste delvis er uløselig i mediet. Hvert trinn utføres typisk ved en temperatur i området fra tilnærmet 0 til tilnærmet 60 °C, utføres typisk ved en temperatur i området fra tilnærmet 20 til tilnærmet 50 °C og utføres mer typisk ved en temperatur i området fra tilnærmet 20 til tilnærmet 30 °C (f.eks. fra tilnærmet 20 til tilnærmet 25 °C).

Inkuberingen i trinn Cl kan utføres ved hvilken som helst temperatur som fører til dannelse av den ønskede krystallinske form av K-saltet av forbindelse A. Trinn Cl utføres med fordel ved en temperatur i området fra tilnærmet 0 til tilnærmet 60 °C, utføres typisk ved en temperatur i området fra tilnærmet 0 til tilnærmet 50 °C (f.eks. fra tilnærmet 15 til tilnærmet 50 °C) og utføres mer typisk ved en temperatur i området fra tilnærmet 0 til tilnærmet 30 °C (f.eks. fra tilnærmet 20 til tilnærmet 30 °C).

En utførelsesform av Pl-fremgangsmåten er fremgangsmåten som opprinnelig beskrevet ovenfor eller som beskrevet i en foregående utførelse, hvor trinnene Al-1, Al-2 og Cl eller trinnene Bl-1, Bl-2 og Cl alle utføres i det samme temperaturområdet. I et aspekt av denne utførelsen utføres hvert av trinnene ved en temperatur i området fra tilnærmet 20 til tilnærmet 30 °C (f.eks. fra tilnærmet 20 til tilnærmet 25 °C).

En annen utførelsesform av Pl-fremgangsmåten er fremgangsmåten som opprinnelig beskrevet ovenfor eller som beskrevet i en foregående utførelse hvor trinnene Al-1 og Al-2 eller trinnene Bl-1 og Bl-2 alle utføres i det samme temperaturområde, men hvor trinn Cl utføres ved en lavere temperatur. I et aspekt av denne utførelsen utføres trinnene Al-1 og Al-2 eller trinnene Bl-1 og Bl-2 alle ved en temperatur i området fra tilnærmet 20 til tilnærmet 30 °C (f.eks. fra tilnærmet 20 til tilnærmet 25 °C), mens trinn Cl utføres ved en temperatur i området fra tilnærmet 0 til tilnærmet 20 °C (f.eks. fra tilnærmet 0 til tilnærmet 10 °C). I et annet aspekt av denne utførelsen utføres trinnene Al-1 og Al-2 eller trinnene Bl-1 og Bl-2 alle ved en temperatur i området fra tilnærmet 20 til tilnærmet 30 °C (f.eks. fra tilnærmet 20 til tilnærmet 25 °C), mens trinn Cl utføres ved en temperatur i området fra tilnærmet 0 til tilnærmet 10 °C (f.eks. fra tilnærmet 0 til tilnærmet 5 °C).

Inkuberingstiden kan variere innenfor et bredt område avhengig av bl.a. inkuberingstemperaturen, valg av løsemiddel, valg av base og de relative mengder og konsentrasjoner av forbindelse A, base og kimkrystall. Inkuberingen utføres typisk over et tidsrom som er tilstrekkelig til å erholde 50 % eller mer (og fortrinnsvis 90 % eller mer) av det teoretiske utbytte av K-salt fra moderluten. I alle tilfeller ligger inkuberingstiden typisk innenfor et område fra tilnærmet 0,1 til tilnærmet 24 timer, og mer typisk innenfor et område fra tilnærmet 0,5 til tilnærmet 12 timer. Det er typisk ønskelig å unngå relativt lange inkuberingstider (f.eks. mer enn tilnærmet 12 timer) da det er blitt observert at nivået av urenheter som inkorporeres i det krystallinske produkt, kan øke med økende inkuberingstid.

Forholdet mellom vann og alkohol som benyttes i trinn Al-1, kan variere over et bredt område. På den annen side er kaliumsaltet av forbindelse A relativt lett løselig i vann, og det kan følgelig være ønskelig å begrense andelen av vann som benyttes for å forhøye krystalliseringsutbyttet fra moderluten. Volum-volumforholdet mellom alkohol og vann kan med fordel ligge i området fra tilnærmet 80:20 til tilnærmet 20:80, ligger typisk i området fra tilnærmet 70:30 til tilnærmet 30:70, og ligger mer typisk i området fra tilnærmet 60:40 til tilnærmet 40:60 (f.eks. fra tilnærmet 55:45 til tilnærmet 45:55).

I trinn Al-2 kan den kimtilsatte løsning fortynnes med ytterligere en mengde av alkoholen. Som bemerket tidligere, er K-saltet av forbindelse A mindre løselig i alkoholen enn i vann, og fortynning med alkoholen vil følgelig gi betingelser som er fordelaktige for krystalliseringen av K-saltet. Volum-volumforholdet mellom løsemiddelalkohol og vann i den fortynnede, kimtilsatte løsning kan med fordel være minst tilnærmet 60:40, er typisk minst tilnærmet 80:20 (f.eks. fra tilnærmet 95:5 til tilnærmet 80:20) og er mer typisk minst tilnærmet 90:10 (f.eks. fra tilnærmet 95:5 til tilnærmet 90:10).

Det organiske løsemiddel og vann kan foreligge i trinn Bl-2 i hvilket som helst forhold til hverandre som fører til dannelse av i det minste noe krystallinsk K-salt av forbindelse A. Som bemerket ovenfor, har forbindelse A høyere løselighet i det organiske løsemiddel enn K-saltet av forbindelse A, og det å øke andelen av det organiske løsemiddel vil følgelig fremme krystallisering av K-saltet. Pa den annen side er K-saltet av forbindelse A typisk mer løselig i vann enn i det organiske løsemiddel, og det er følgelig ønskelig å begrense mengden av vann som innføres i systemet ved tilsetning av den vandige base for å minimalisere mengden salt som blir tilbake i moderluten under krystalliseringen. Volum-volumforholdet mellom organisk løsemiddel og vann i trinn Bo-løsningen kan med fordel være minst tilnærmet 70:30, er typisk minst tilnærmet 80:20 (f.eks. fra tilnærmet 95:5 til tilnærmet 80:20) og er mer typisk minst tilnærmet 90:10 (f.eks. fra tilnærmet 95:5 til tilnærmet 90:10).

Andre utførelsesformer av Pl-fremgangsmåten omfatter fremgangsmåten som opprinnelig beskrevet og som beskrevet i hver av de foregående utførelsesformer hvor hver av fremgangsmåtene videre omfatter: (Dl) gjenvinning av det krystallinske K-salt av forbindelse A fra den inkuberte løsning. I et aspekt av denne utførelsen gjenvinnes det krystallinske K-salt ved filtrering for erholdelse av en krystallkake, om ønskelig vask av kaken med et annet organisk løsemiddel som er det samme som eller forskjellig fra alkoholen som benyttes i trinn Al-1, eller det organiske løsemiddel som benyttes i trinn Bl-1, og tørking.

En annen utførelsesform av Pl-fremgangsmåten er fremgangsmåten som omfatter: (Al-1) blanding av en vandig løsning av KOH med en blanding som omfatter forbindelse A, vann og en første mengde av etanol for dannelse av en basisk løsning av forbindelse A og om ønskelig filtrering av løsningen,

(Al-2) tilsetning av kimkrystaller til løsningen som dannes i trinn Al-1 og fortynning av den kimtilsatte løsningen med en andre mengde av etanol for erholdelse av en fortynnet, kimtilsatt løsning, og

(Cl) inkubering av den fortynnede, kimtilsatte løsning fra trinn Al-2 for erholdelse av det krystallinske K-salt av forbindelse A.

Aspekter av utførelsesformen ovenfor omfatter fremgangsmåten som den nettopp er beskrevet, med inkorporering av én eller flere av følgende egenskaper (i) til (viii): (i) trinn Al-1 utføres ved en temperatur i området fra tilnærmet 20 til tilnærmet 50 °C (f.eks. fra tilnærmet 20 til tilnærmet 30 °C), (ii) trinn Al-2 utføres ved en temperatur i området fra tilnærmet 20 til tilnærmet 50 °C (f.eks. fra tilnærmet 20 til tilnærmet 30 °C), (iii) trinn Cl utføres ved en temperatur i området fra tilnærmet 0 til tilnærmet 30 °C (f.eks. fra tilnærmet 0 til tilnærmet 20 °C, eller fra tilnærmet 0 til tilnærmet 10 °C), (iv) i trinn Al-1 har den basiske løsning et volum-volumforhold mellom etanol og vann i området fra tilnærmet 70:30 til tilnærmet 30:70, (v) i trinn Al-2 har den fortynnede, kimtilsatte løsning et volum-volumforhold mellom etanol og vann på minst tilnærmet 80:20, (vi) kimkrystaller benyttes i en mengde i området fra tilnærmet 0,2 til tilnærmet 5 % (vekt/vekt) (eller fra tilnærmet 1 til tilnærmet 5 % (vekt/vekt)) relativt til totalvekten av forbindelse A, (vii) KOH benyttes i en mengde i området fra tilnærmet 0,9 til tilnærmet 0,1 ekvivalenter (f.eks. fra tilnærmet 0,9 til tilnærmet 0,98 ekvivalenter) pr. ekvivalent av forbindelse A, og (viii) fremgangsmåten omfatter videre trinn Dl som er gjenvinning av det krystallinske K-salt av forbindelse A (f.eks. ved å separere det krystallinske K-salt fra den inkuberte løsning ved filtrering for erholdelse av en krystallkake, om ønskelig vask av kaken med en tredje mengde etanol, og tørking).

Ytterligere en utførelsesform av Pl-fremgangsmåten er fremgangsmåten som omfatter: (Bl-1) tilsetning av kimkrystaller til en løsning som omfatter forbindelse A og acetonitril,

(Bl-2) tilsetning av en vandig løsning av KOH til den kimtilsatte løsning dannet i trinn Bl-1, og

(Cl) inkubering av løsningen fra trinn Bl-2 for erholdelse av det krystallinske K-salt av forbindelse A.

Aspekter av utførelsen ovenfor omfatter fremgangsmåten som den nettopp er beskrevet, med inkorporering av én eller flere av følgende egenskaper (i) til (viii): (i) trinn Bl-1 utføres ved en temperatur i området fra tilnærmet 20 til tilnærmet 50 °C (f.eks. fra tilnærmet 20 til tilnærmet 30 °C), (ii) trinn Bl-2 utføres ved en temperatur i området fra tilnærmet 20 til tilnærmet 50 °C (f.eks. fra tilnærmet 20 til tilnærmet 30 °C), (iii) trinn Cl utføres ved en temperatur i området fra tilnærmet 0 til tilnærmet 50 °C (f.eks. fra tilnærmet 20 til tilnærmet 30 °C), (iv) den kimtilsatte løsning erholdt i Bl-2, håret volum-volumforhold mellom acetonitril og vann på minst tilnærmet 90:10, (v) kimkrystaller benyttes i en mengde i området fra tilnærmet 0,2 til tilnærmet 5 % (vekt/vekt) (eller fra tilnærmet 1 til tilnærmet 5 % (vekt/vekt)) relativt til totalvekten av forbindelse A, (vi) KOH benyttes i en mengde i området fra tilnærmet 0,9 til tilnærmet 1,1 ekvivalenter (f.eks. fra tilnærmet 0,9 til tilnærmet 0,98 ekvivalenter) pr. ekvivalent av forbindelse A, og (vii) fremgangsmåten omfatter videre trinn Dl som er gjenvinning av det krystallinske K-salt av forbindelse A (f.eks. ved å separere det krystallinske K-salt fra den inkuberte løsning ved filtrering for erholdelse av en krystallkake, vask av kaken med acetonitril, og tørking).

Ytterligere utførelsesformer av Pl-fremgangsmåten omfatter fremgangsmåten som opprinnelig beskrevet og som beskrevet i hver av de foregående utførelsesformer hvor kimkrystallene som benyttes i fremgangsmåten, omfatter form 1 av det krystallinske kaliumsalt av forbindelse A og det krystallinske salt som er resultatet av fremgangsmåten, omfatter form 1 av det krystallinske kaliumsalt av forbindelse A.

Kimtilsetningstrinnet beskrevet ovenfor i fremgangsmåte Pl, er valgfritt i den forstand at krystallinsk K-salt av forbindelse A kan erholdes uten kimtilsetning. Kimtilsetning foretrekkes imidlertid som et middel for å indusere eller bidra til krystallisering generelt, og mer spesielt for fremstilling av spesifikke krystallinske former (f.eks. form 1).

Som bemerket ovenfor, er det her beskrevet tilførsel av en effektiv mengde av et kaliumsalt av forbindelse A (enten alene eller som den aktive bestanddel av et farmasøyt-isk preparat) for inhibering av HIV-integrase, for behandling eller forebyggelse av HIV-infeksjon eller for behandling, forebyggelse eller forsinkelse av begynnelsen av AIDS til et individ med behov for slik inhibering, behandling, forebyggelse eller forsinkelse. Det er også beskrevet anvendelse av et kaliumsalt av forbindelse A i kombinasjon med et anti-HIV-middel.

Begrepet "tilførsel" og varianter derav (f.eks. "tilføre" en forbindelse) med henvisning til et K-salt av forbindelse A betyr å levere saltet til individet med behov for inhibering, behandling eller forebyggelse. Dersom et kaliumsalt av forbindelse A tilføres i kombinasjon med ett eller flere andre aktive midler (f.eks. antivirale midler som er anvendbare for behandling eller forebyggelse av HIV-infeksjon eller AIDS), skal "tilførsel" og varianter derav alle forstås å omfatte levering av forbindelsen eller promedikamentet og andre midler samtidig (separat eller hver for seg) eller på forskjellige tidspunkter.

Som anvendt her, er begrepet "preparat" ment å omfatte et produkt som omfatter de angitte bestanddeler, så vel som hvilket som helst produkt som direkte eller indirekte dannes ved å sammenblande de angitte bestanddeler.

Med "farmasøytisk akseptabelt" menes at bestanddelene i det farmasøytiske preparat må være forenlige med hverandre og ikke skadelige for mottakeren.

Begrepet "individ" som anvendt her, viser til et dyr, fortrinnsvis et pattedyr, mest foretrukket et menneske, som har vært gjenstand for behandling, observasjon eller eksperimentering.

Begrepet "effektiv mengde" som anvendt her, betyr den mengde av den aktive forbindelse eller det farmasøytiske middel som utløser den biologiske eller medisinske respons i et vev, et system, et dyr eller et menneske som ønskes av en forsker, en veterinær, en lege eller annet klinisk personell. Den effektive mengden kan være en "terapeutisk effektiv mengde" for lindring av symptomene på sykdommen eller tilstanden som behandles. Den effektive mengden kan også være en "profylaktisk effektiv mengde" for forebyggelse på symptomene av sykdommen eller tilstanden som skal forhindres. Begrepet omfatter også heri den mengde av aktiv forbindelse som er tilstrekkelig til å inhibere HIV-integrase og derved utløse den ønskede respons (dvs. en "inhiberingseffektiv mengde"). Den aktive bestanddelen (dvs. forbindelse A) tilføres som et kaliumsalt, og henvisninger til mengden av aktiv bestanddel gjelder den frie fenolform av forbindelse A.

Begrepet "anti-HIV-middel" betyr et middel som er effektivt i én eller flere av følgende anvendelser: inhibering av integrase eller et annet enzym som er nødvendig for HIV-replikasjon eller -infeksjon, forebyggelse av HIV-infeksjon, behandling av HIV-infeksjon, forsinkelse av begynnelsen av AIDS, forebyggelse av AIDS eller behandling av AIDS. Egnede anti-HIV-midler omfatter antivirale HIV/AIDS-midler, antiinfeksiøse midler og immunmodulerende midler.

For det formål å inhibere HIV-integrase, behandle eller forebygge HIV-infeksjon eller behandle, forebygge eller forsinke begynnelsen av AIDS, kan et kaliumsalt av forbindelse A tilføres ved hvilket som helst middel som gir kontakt mellom det aktive middel og midlets virkesete. Kaliumsaltet kan tilføres ved hvilket som helst konvensjonelt middel som er tilgjengelig for anvendelse i forbindelse med farmasøytiske midler, enten som enkeltvise, terapeutiske midler eller i en kombinasjon av terapeutiske midler. Saltet kan tilføres alene, men tilføres typisk sammen med et farmasøytisk bærestoff utvalgt basert på den valgte tilførselsvei og standard farmasøytisk praksis. Et K-salt av forbindelse A kan f.eks. tilføres oralt, parenteralt (innbefattet subkutane injeksjoner, intravenøst, intramuskulært, intrasternal injeksjon eller ved infusjonsteknikker), ved inhaleringsspray eller rektalt, i form av en enhetsdose av et farmasøytisk preparat som inneholder en effektiv mengde av K-saltet og konvensjonelle, ikke-toksiske, farmasøytisk akseptable bærestoffer, adjuvanser og bærere. Flytende preparater som er egnet for oral tilførsel (f.eks. suspensjoner, siruper, eliksirer og lignende) kan fremstilles ifølge teknikker som er kjente innen faget og kan benytte hvilket som helst av de vanlige mediene, f.eks. vann, glykoler, oljer, alkoholer og lignende. Faste preparater som er egnet for oral tilførsel (f.eks. pulvere, piller, kapsler og tabletter), kan fremstilles ifølge teknikker som er kjente innen faget og kan benytte faste eksipienser som stivelser, sukkere, kaolin, smøremidler, bindemidler, desintegrasjonsmidler og lignende. Parenterale preparater kan fremstilles ifølge teknikker som er kjente innen faget og benytter typisk sterilt vann som bærestoff og om ønskelig andre bestanddeler, f.eks. et solubiliseringsmiddel. Injiserbare løsninger kan fremstilles ifølge fremgangsmåter som er kjent innen faget, hvor bærestoffet omfatter en saltløsning, en glukoseløsning eller en løsning som inneholder en blanding av salt og glukose. Videre beskrivelse av fremgangsmåter som er egnet for anvendelse ved fremstilling av farmasøytiske preparater er beskrevet og av bestanddeler som er egnet for anvendelse i preparatene, gis i Remington's Pharmaceutical Sciences, 18. utgave, redigert av A.R. Gennaro, Mack Publishing Co., 1990.

I en foretrukket utførelsesform tilføres kaliumsaltet av forbindelse A oralt i et farmasøytisk preparat som omfatter K-saltet av forbindelse A og hydroksypropylmetylcellulose (f.eks. HPMC 2910), hvor preparatet er sammenpresset til en tablett. I en annen foretrukket utførelsesform tilføres kaliumsaltet av forbindelse A oralt i et farmasøytisk preparat som omfatter K-saltet av forbindelse A, en poloksamer (f.eks. poloksamer 407), hydroksypropylmetylcellulose (f.eks. HPMC K4M) og laktose (f.eks. vannholdig laktose, spraytørket), hvor preparatet er sammenpresset til en tablett.

Et kaliumsalt av forbindelse A kan tilføres oralt i et doseringsområde (alle doser som beskrives heri er basert på en aktiv bestanddel) på fra 0,001 til 1 000 mg/kg kroppsvekt av pattedyret (f.eks. menneske) pr. dag i en enkelt dose eller oppdelt på flere doser. Et foretrukket doseringsområde er fra 0,01 til 500 mg/kg kroppsvekt pr. dag, tilført oralt i en enkelt dose eller oppdelt på flere doser. Et annet foretrukket doseringsområde er fra 0,1 til 100 mg/kg kroppsvekt pr. dag, tilført oralt i en enkelt eller oppdelt på flere doser. For oral tilførsel kan preparatene foreligge i form av tabletter eller kapsler som inneholder fra 1,0 til 1 000 mg av den aktive bestanddel, nærmere bestemt 1, 5, 10, 15, 20, 25, 50, 75, 100, 150, 200, 250, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900 og 1 000 mg av den aktive bestanddel, for symptomatisk justering av dosen som tilføres pasienten som skal behandles. En foretrukket dose av kaliumsaltet av forbindelse A (f.eks. form 1) for voksne mennesker er oral tilførsel i form av kapsler eller tabletter i en mengde på fra 100 mg til 600 mg to ganger daglig. Det angitte dosenivå og doseringshyppigheten for en gitt pasient kan variere og vil avhenge av en rekke forskjellige faktorer, innbefattet pasientens alder, kroppsvekt, generelle helsetilstand, kjønn og kost, tilførselsmåten og tilførselstidspunktet, utskillelseshastigheten, medikamentkombinasjonen og omfanget av den angjeldende tilstand.

Forkortelser som anvendes her, omfatter følgende: AIDS = ervervet immunsviktsyndrom, ARC = AIDS-relatert kompleks, AUC = areal under kurven for en fremstilling av plasmakonsentrasjonen som funksjon av tiden til siste prøve (f.eks. 24 timer), Bz = benzoyl, Cmaks. = maksimal plasmakonsentrasjon, DIEA = diisopropyletylamin, DMAC = N,N-dimetylacetamid, DMADC = dimetylacetylendikarboksylat, DME = 1,2-dimetoksyetan, DMF = N,N-dimetylformamid, DMSO = dimetylsulfoksid, DSC = differensiell skannende kalorimetri, ekv. = ekvivalent(er), EtOAc = etylacetat, EtOH = etanol, HIV = humant immunsviktvirus, HPLC = høyytelses væskekromatografi, i-Pr = isopropyl, IPA = isopropylalkohol, KF = Karl Fisher-titrering for vann, KOEt = kaliumetoksid, LC = væskekromatografi, LCAP = LC-areal i prosent, LCWP = LC-vektprosent, Me = metyl, MeCN = acetonitril, MeOH = metanol, MSA = metansulfonsyre, MTBE = metyl-tert.-butyleter, MW = molekylvekt, NMM = N-metylmorfolin, NMP = N-metylpyrrolidon, NMR = kjernemagnetisk resonans, t-Bu = tert.-butyl, TG = termogravimetrisk, THF = tetrahydrofuran, XRPD = røntgenpulverdiffraksjon.

Med mindre annet er angitt, er alle områder som angis her, innbefattet. For eksempel betyr et tem peratu rom råde fra tilnærmet 15 °C til tilnærmet 80 °C at temperaturen kan være tilnærmet 15 °C, tilnærmet 80 °C eller hvilken som helst verdi mellom disse.

En referanse her til "ekvivalent" eller "ekvivalenter" betyr molare ekvivalenter.

Eksempel 1

Fremstilling av forbindelse A oa dens krystallinske kaliumsalt i form 1

Trinn 1: Strecker- amindannelse

Acetoncyanhydrin (11,5 kg, 12,3 I) ble fylt i en 5 gallon autoklav, og beholderen ble plassert under et nitrogentrykk på 5 psi. Autoklaven ble avkjølt til 10 °C, og ammoniakkgass (~3,44 kg) under et trykk på 30 psi ble ført inn i karet inntil reaksjonen nådde fullstendig omdanning, bestemt ved GC-analyse (mindre enn 0,5 % a). Den resulterende suspensjon ble overført til en "polyjug" og autoklaven vasket med MTBE (tilnærmet 17 I). Reaksjonsblandingen og vaskeløsningen ble så overført til en 100 I ekstraktor fulgt av MTBE (15 I), blandingen ble omristet og sjiktene forsiktig separert. Det vandige sjikt ble tilbakeekstrahert med MTBE (5 I) og sjiktene forsiktig separert. De organiske sjikt ble slått sammen og overført til en 100 I kolbe utstyrt med en porsjonskonsentrator gjennom et direktekoblet filter, og porsjonen ble oppkonsentrert (15-20 °C, lavt vakuum) til tilnærmet 20 I for fjerning av eventuelt overskudd av ammoniakk. Aminonitrilet ble erholdt i 97 % analyseutbytte (11,1 kg) ved NMR som en løsning i MTBE.

Trinn 2: Innføring av benzyloksykarbonyl ( Cbz) - beskyttelsesqruppe

En visuelt ren 100 I kolbe med en 5 I tilsetningstrakt, et termoelement og et nitrogeninnløp ble fylt med en 59 % (vekt/vekt) løsning av cyanoamin b i MTBE (4,44 analyse-kg). Løsningen ble videre fortynnet med MTBE (62,5 I) for å bringe konsentrasjonen til tilnærmet 15 ml/g. Benzylklorformiat (1,20 ekv., 10,42 kg, 61,10 mol) ble så tilført over et tidsrom på 15 minutter via tilsetningstrakten ved en hastighet som holdt porsjonstemperaturen under 35 °C. DIEA (1,3 ekv., 8,88 kg, 68,70 mol) ble så tilsatt over et tidsrom på 1,5 timer til den gule suspensjon mens porsjonstemperaturen ble holdt under 35 °C. Suspensjonen ble noe mer løselig etter hvert som DIEA ble tilsatt, men to faser ble observert når omrøringen ble stoppet. Reaksjonsblandingen ble inkubert i 16 timer ved 20-25 °C, hvoretter DI-vann (20 I, 4,5 ml/g) ble tilsatt til porsjonen. Porsjonen ble så overført til en 100 I skilletrakt og fasene separert. Det organiske sjikt ble så vasket med 3 x 10 I vann og så med 15 I saltlake. Det organiske sjikt ble via et 10 um direktekoblet filter overført til en 100 I rundbunnet kolbe, hvoretter løsemidlet ble byttet til 90:10 heptan:MTBE. Krystallisering skjedde under løsemiddelbyttet, og det resulterende, hvite, krystallinske produkt ble frafiltrert og vasket med 3 x 5 I 90:10 heptan:MTBE. I alt 10,1 kg produkt (88 % utbytte) ble erholdt med mer enn 99 HPLC A%. I alt 26,7 kg produkt ble erholdt i 3 porsjoner med et gjennomsnittlig isolert utbytte

o

pa

86 %. Trinn 3: Amidoksimdannelse

En løsning av aminonitril (15 g) i IPA (40 ml) ble oppvarmet til 60 °C under omrøring, og NH2OH i vann (5,05 ml) ble tilsatt ved denne temperatur i løpet av 20 minutter. Den klare blanding ble så inkubert ved 60 °C i 3 timer i løpet av hvilke produktet begynte å krystallisere ut av løsningen ved denne temperatur etter 2 timer. Suspensjonen ble så avkjølt til 0-5 °C, og n-heptan (40 ml) ble tilsatt dråpevis over et tidsrom på 20 minutter. Etter omrøring i 2 timer ved 0-5 °C ble suspensjonen filtrert og filterkaken vasket med en 20 % løsning av IPA i heptan (60 ml) og så tørket under vakuum med en nitrogenstrøm ved romtemperatur for erholdelse av rent amidoksim i et utbytte på 88 %.

Trinn 4: Dannelse av hvdroksvpyrimidinon

En suspensjon av amidoksim (2,90 kg) i metanol (12 I) ble tilsatt dimetylacetylendikarboksylat (1,77 kg) over et tidsrom på 20 minutter. En svak eksoterm reaksjon skjedde slik at temperaturen i suspensjonen økte fra 20 °C til 30 °C over 15-20 minutter. Etter 1,5 time viste HPLC mer enn 95 % omdanning til de intermediære cis/trans-addukter. Løsemidlet ble så byttet til xylener under redusert trykk (maksimal temperatur = 50 °C), hvor 2 volumer [2 x 7,5 I] ble tilsatt og redusert til et endelig volum på 7,5 I. Reaksjonsblandingen ble så oppvarmet til 90 °C og holdt ved denne temperatur i 2 timer mens gjenværende MeOH ble fjernet med en nitrogenstrøm. Temperaturen ble så økt i trinn på 10 °C over et tidsrom på 3,5 timer til 125 °C og holdt ved denne temperatur i 2 timer. Temperaturen ble så endelig økt til 135 °C i 5 timer. Reaksjonsblandingen ble så avkjølt til 60 °C, og MeOH (2,5 I) ble tilsatt. Etter 30 minutter ble MTBE (9 I) langsomt tilsatt for oppbygging av et lag med kimkrystaller. Porsjonen ble så avkjølt til 0 °C i 14 timer og så avkjølt videre til -5 °C og inkubert i 1 time før filtrering. Det faste stoff ble forskyvningsvasket med 10 % MeOH/MTBE (6 I, så 4 I, på forhånd avkjølt til 0 °C) og tørket på filterholderen under en nitrogenstrøm for erholdelse av 2,17 kg (51,7 % korrigert utbytte, 99,5 % (vekt/vekt)).

HPLC-fremgangsmåte: Kolonne: Zorbax C-8 4,6 mm x 250 mm, 40 % ACN/60 % 0,1 % H3PO4til 90 % ACN/10 % 0,1 % H3PO4over et tidsrom på 12 minutter, holding i 3 minutter og så tilbake til 40 % ACN over et tidsrom på 1 minutt. Retensjonstider: amidoksim d - 2,4 minutter, DMAD - 6,7 minutter, intermediære addukter - 8,4 og 8,6 minutter (8,4-minutters-toppen sykliserer hurtigere), produkt e - 5,26 minutter, xylener - flere topper rundt 10,4-10,7 minutter.

Trinn 5: N- metvlerinq

En løsning av pyrimidindiolen e (2 kg) i DMSO (16 I) ble tilsatt en løsning av Mg(OMe)2i MeOH (11,95 kg), hvoretter overskudd av MeOH ble avdampet under vakuum (30 mm Hg) ved 40 °C i 30 minutter. Blandingen ble så avkjølt til 20 °C, hvoretter Mel (1,38 I) ble tilsatt og blandingen omrørt ved 20-25 °C i 2 timer og så ved 60 °C i 5 timer under trykk i en lukket kolbe. HPLC viste at reaksjonen var fullstendig. Blandingen ble så avkjølt til 20 °C, hvoretter MeOH (14 I) ble tilsatt fulgt av langsom tilsetning av 2 M HCI (20 I) [eksoterm] over et tidsrom på 60 minutter. Natriumbisulfitt (5 % (vekt/vekt), 2 I) ble så tilsatt for fjerning av overskudd av I2, hvorved løsningen ble hvit. Vann (40 I) ble så tilsatt over et tidsrom på 40 minutter, og suspensjonen ble omrørt i 40 minutter på et isbad og så filtrert. Filterkaken ble vasket, først med vann (20 I) og så med MTBE:MeOH 9/1 (30 I) for fjerning av O-metylert biprodukt. HPLC viste mindre enn 0,5 A% O-metylert produkt etter vask. Det faste stoff ble tørket over natten ved romtemperatur under vakuum med en N2-strøm for erholdelse av 1,49 kg N-metylpyrimidon (70 % utbytte, korrigert for renheten av utgangsmaterialet og produktet).

Trinn 6: Aminkoblinq

En suspensjon av N-metylert pyrimidinon f (1,4 kg) i EtOH (14 I) ved 4 °C ble langsomt tilsatt 4-fluorbenzylamin (1,05 kg) over et tidsrom på 15 minutter, hvoretter en eksoterm til 9 °C ble observert under tilsetningen av den første molekvivalent av aminet. Suspensjonen ble svært tykk, og kraftig omrøring var nødvendig. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 72 °C over et tidsrom på 2 timer og holdt ved denne temperatur i 1 time og 45 minutter. Løsningen ble ekstremt viskøs ved 45 °C hvor en liten eksoterm ble observert til 50 °C, hvoretter suspensjonen langsomt klarnet og ble homogen etter 1 time ved 72 °C. En HPLC-prøveanalyse (HPLC-fremgangsmåten tilsvarte den benyttet i trinn 4 ovenfor) ved reaksjonens avslutning viste mindre enn 0,5 A% N-metylert pyrimidinon. Reaksjonsblandingen ble så avkjølt til 60 °C, og eddiksyre (0,55 I) ble tilsatt over et tidsrom på 30 minutter, fulgt av tilsetning av vann (6,7 I) over et tidsrom på 30 minutter, og så tilsetning av kimkrystall (3,0 g) for å utløse krystallisering. Etter 30 minutter ved 60 °C ble mer vann (7,3 I) tilsatt over et tidsrom på 30 minutter, og reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur over natten. Etter 13 timer var temperaturen 20 °C, og på dette tidspunkt ble reaksjonsblandingen filtrert og suspensjonen vasket med 50 % vann/EtOH (2x4 1). Det faste stoff ble tørket på filterholderen under vakuum/N2-strøm til konstant vekt for erholdelse av et hvitt, fast produkt (1,59 kg, 90 % korrigert utbytte, 99 % LCWP og 99,7 % LCAP bestemt ved en HPLC-fremgangsmåte som tilsvarer den benyttet i trinn 4 ovenfor).

Trinn 7: Hvdrogenerinq av Cbz- amid

Et hydrogeneringskar av rustfritt stål ble prekondisjonert med MeOH, Pd/C-katalysator og MSA under reaksjonsbetingelsene som er beskrevet nedenfor. Cbz-amid fl (10 g) ble så suspendert i MeOH (80 ml) i det prekondisjonerte kar. MSA (1,45 ml) ble tilsatt til suspensjonen i én porsjon ved romtemperatur. 5 % Pd/C (0,15 g, 50 % våt) ble også tilsatt til hydrogeneringskaret. Hydrogen ble tilført til karet i tre på hverandre følgende sykluser med vakuum og hydrogentilsetning, hvoretter blandingen ble hydrogenert ved 40 psig i 3-4 timer ved 50 °C. Etter hydrogeneringen ble vann (8 ml) tilsatt til reaksjonsblandingen, blandingen ble omrørt, og katalysatoren ble frafiltrert og vasket med 4:1 MeOH:vann (20 ml). pH i de sammenslåtte filtrater ble justert til pH 7 til 8,0 ved langsom tilsetning av 1 N NaOH (22,4 ml), som førte til utfelling av et fast stoff. Suspensjonen ble omrørt ved 0-5 °C i 4 timer, og det faste stoff ble frafiltrert, vasket med vann (30 ml), oppsamlet og tørket under vakuum ved 50 °C. Aminproduktet (som hydrat) ble erholdt som et hvitt, krystallinsk, fast stoff (7,7 g) i 96 % utbytte (korrigert for KF), 89 % LCWP, 99,8 % LCAP, KF = 11 % (vekt/vekt).

HPLC-fremgangsmåte A (produktanalyse): kolonne: 25 cm x 4,6 mm Zorbax RX-C8, mobil fase: A = 0,1 % H3P04, B = CH3CN, 0 minutter (80 % A/20 % B), 20 minutter (20 % A/80 % B), 25 minutter (20 % A/80 % B), elueringshastighet: 1,0 ml/minutt, bølgelengde: 210 nm, kolonnetemperatur: 40 °C, retensjonstider: des-fluoraminbiprodukt - 5,5 minutter, aminprodukt - 5,85 minutter, toluen - 16,5 minutter, Cbz-amid - 16,82 minutter.

HPLC-fremgangsmåte B (produktrenhet): kolonne: 25 cm x 4,6 mm YMC-basisk, mobil fase: A = 25 mmol KH2P04justert til pH = 6,1, B = CH3CN, 0 minutter (90 % A/10 % B), 30 minutter (30 % A/70 % B), 35 minutter (30 % A/70 % B), elueringshastighet: 1 ml/minutt, bølgelengde: 210 nm, kolonnetemperatur: 30 °C, retensjonstider: des-fluoramin - 9,1 minutter, amin - 10,1 minutter, toluen - 24,2 minutter, Cbz-amid - 25,7 minutter.

Trinn 8: Oksadiazolkoblina

Del A: Fremstilling av K- saltet av oksadiazol

Etyloksalylklorid (4,01 kg) ble langsomt tilsatt til en blanding av 5-metyltetrazol (2,50 kg), trietylamin (3,03 kg) i toluen (32 I) ved 0 °C med en hastighet som gjorde at temperaturen holdt seg under 5 °C. Den resulterende suspensjon ble omrørt i 1 time ved 0-5 °C, hvoretter trietylamin/HCI-saltet ble frafiltrert. Det faste stoff ble vasket med 27 I kaldt toluen (5 °C). De sammenslåtte filtrater ble inkubert ved 0 °C og langsomt tilsatt til en varm løsning av toluen (50 °C, 15 I) over et tidsrom på 40-50 minutter (utvikling av N2-gass), hvoretter løsningen ble inkubert ved 60-65 °C i 1 time. Etter avkjøling til 20 °C ble toluenløsningen vasket med 5 I 10 % saltlake, hvoretter løsemidlet ble byttet til etanol (redusert til 8 I, hvoretter 17 I EtOH ble tilsatt, så konsentrert ned til 8 I, hvoretter 33 I EtOH ble tilsatt for justering av det endelige volum til 41 I). Etanolløsningen ble avkjølt til 10 °C, og vandig KOH (8,0 I) ble tilsatt over et tidsrom på 30 minutter, hvoretter den resulterende, tykke suspensjon ble omrørt i 40 minutter ved romtemperatur mens K-saltet av oksadiazol ble utkrystallisert. Det faste stoff ble frafiltrert og vasket med 11 I EtOH og så til slutt med 15 I MTBE. Det faste stoff ble tørket over natten under vakuum ved 20 °C med en nitrogenstrøm for erholdelse av 4,48 kg (90,8 %) av K-saltet i.

Del B: Oksadiazolkoblinq

En 500 ml rundbunnet kolbe ble fylt med K-saltet av oksadiazol i (33,8 g), fulgt av MeCN (280 ml) og DMF (0,33 ml) under kraftig omrøring. Den resulterende suspensjon ble så avkjølt til 0-5 °C, og oksalylklorid (23,7 g) ble tilsatt over et tidsrom på 20 minutter for å holde den indre temperatur under 5 °C. Den resulterende acylkloridholdige suspensjon ble så inkubert i 1 time.

En 2 I rundbunnet kolbe ble tilsatt det frie amin h (30 g), fulgt av THF (821 ml). Den resulterende suspensjon ble avkjølt til 0-5 °C, hvoretter NMM (21,56 g) ble tilsatt og den således erholdte suspensjon omrørt i 10 minutter ved den lave temperatur. Den tidligere fremstilte, acylkloridholdige suspensjon ble langsomt tilsatt til suspensjonen av fritt amin over et tidsrom på 20 minutter slik at temperaturen ikke overskred 5 °C. Suspensjonen ble så inkubert i 1,5 time ved 0-5 °C. På dette tidspunkt viste HPLC intet gjenværende amin h (<0,5 % LCAP, 100 % omdanning). Reaksjonsblandingen ble så tilsatt NH4OH (30 % i vann) (69 ml) over et tidsrom på 3 minutter. Den resulterende gule suspensjon ble så omrørt i ytterligere 1 time ved en temperatur under 10 °C. Den gule suspensjon ble så surgjorttil pH 2-3 med HCI (2 N) (500 ml). Den resulterende, rødvins-fargede løsning ble tilsatt IPA (920 ml). Organiske løsemidler med lavt kokepunkt ble så avdampet under redusert trykk (40 torr) ved romtemperatur til et endelig volum av løsningen til 1 100 ml ved hvilket volum krystallinsk forbindelse A begynte å utfelles. Vann (400 ml) ble så tilsatt til denne nye suspensjon over et tidsrom på 10 minutter, og suspensjonen ble inkubert over natten ved romtemperatur. Den inkuberte suspensjon ble filtrert, og det erholdte, faste stoff ble vasket med vann (170 ml), fulgt av vask med en strøm av kald MeOH (300 ml, på forhånd avkjølt i et isbad) og endelig med vann (700 ml). Det således erholdte, faste stoff ble tørket over natten under vakuum og nitrogen-strøm for erholdelse av 35,5 g forbindelse A (91 % utbytte).

Trinn 9: Dannelse av et krystallinsk kaliumsalt av forbindelse A

Acetonitril (50 ml) og vannfri forbindelse A (5,8 g, 97,4 % (vekt/vekt)) ble ved romtemperatur overført til en 125 ml rundbunnet kolbe med kjølekappe og utstyrt med mekanisk røreverk og et nitrogeninnløp (dvs. at krystalliseringen ble utført under nitrogen). Den resulterende suspensjon ble omrørt ved 45 °C inntil alt fast stoff var fullstendig oppløst. Form 1 av krystallinsk K-salt av forbindelse A ble så tilført løsningen som kimkrystaller (0,184 g, 3 % (vekt/vekt) relativt til den teoretiske mengde K-salt). Vandig KOH, 30 % (vekt/vekt) løsning (0,98 ekv., 2,33 ml, 0,0125 mol) ble så tilsatt med følgende tilsetningsprofil mens porsjonens temperatur ble holdt ved 45 °C:

0,466 ml over et tidsrom på 5 timer, 0,0932 ml/t (20 mol%)

1,864 ml over et tidsrom på 7 timer, 0,2663 ml/t (80 mol%)

Den resulterende suspensjonen ble avkjølt til 20 °C og inkubert ved 20 °C inntil konsentrasjonen av forbindelse A i moderluten ble målt til under 4 g/l. Porsjonen ble filtrert, og filterkaken ble vasket med MeCN (3 x 12 ml) og så tørket under vakuum ved 45 °C med en liten nitrogenstrøm inntil mengden av MeCN og vann som forelå, bestemt ved termogravimetrisk analyse, var mindre enn 1 % (vekt/vekt). K-saltet av forbindelse A ble erholdt i >99 A% ved HPLC-analyse.

Eksempel 2

Form 1 av krystallinsk kaliumsalt av forbindelse A

Del A: Fremstilling

Etanol (147 ml), vann (147 ml) og forbindelse A (97,9 g analyse ved HPLC) ble overført til en 1 I rundbunnet kolbe utstyrt med mekanisk røreverk, tilsetn i ngstra kt, nitrogeninnløp (dvs. at fremstillingen ble utført under nitrogen) og et termoelement. Vandig KOH (45 % (vekt/vekt), 0,98 ekv., 18,5 ml, 216 mmol) ble tilsatt til suspensjonen over et tidsrom på 10 minutter ved 21 °C. Den resulterende suspensjon ble omrørt i 0,5 time, noe som førte til at det meste av det faste stoff ble oppløst, hvoretter porsjonen ble filtrert gjennom et 1 um filter direkte over i en 5 I rundbunnet kolbe utstyrt med mekanisk røreverk, tilsetningstrakt, nitrogeninnløp og termoelement. 1 l-kolben ble vasket med 1:1 (vol/vol) vann/EtOH (48 ml), og vaskeløsningen ble filtrert over i krysta 11 ise ri ngska ret på 5 I. Den filtrerte løsning ble tilsatt kimkrystaller av krystallinsk form 1 av K-saltet av forbindelse A (200 mg) ved romtemperatur og så inkubert i 1 time for oppbygging av et godt lag med kimkrystaller, hvoretter suspensjonen ble fortynnet med EtOH (1,57 I) ved 20 °C over et tidsrom på 1,5 time. Porsjonen ble så avkjølt til tilnærmet 4 °C og inkubert inntil konsentrasjonen av forbindelse A i moderluten ble målt til 4,7 g/l. Porsjonen ble filtrert, krystalliseringskaret ble vasket med 50 ml EtOH over i filteret, og filterkaken ble vasket med EtOH (4 x 100 ml) og så tørket under vakuum og en nitrogenstrøm inntil mengden av EtOH som forelå ut fra NMR, var tilnærmet 0,4 mol% relativt til kaliumsaltet. Kaliumsaltet av forbindelse A ble erholdt i 88 % utbytte (91,5 g analyse ved HPLC, 99 areal% ved HPLC-analyse).

Del B: Karakterisering

Et XRPD-mønster for et K-salt fremstilt på den måte som er beskrevet i del A, ble erholdt med et Philips Analytical X'Pert Pro røntgenpulverdiffraktometer ved anvendelse av et kontinuerlig skan fra 2,5 til 40° 20 over et tidsrom på tilnærmet 12 minutter (dvs. 0,02° trinnstørrelse med 40 sekunder/trinn), 2 RPS holderrotasjon og en gonio-skanakse. Kopper-K-alfa 1 (Kai)- og K-alfa 2 (Ka2)-stråling ble anvendt som kilde. Eksperimentet ble utført under rombetingelser. XRPD-mønsteret vises i figur 1. 20-verdiene og de tilsvarende d-avstander omfatter følgende:

Et K-salt fremstilt som beskrevet i del A, ble også analysert med et TA Instruments DSC 2910 differensielt skannende kalori meter ved en oppvarmingshastighet på 10 °C/minutt fra romtemperatur til 350 °C i en aluminiumsbeholder med krympet hull i nitrogenatmosfære. DSC-kurven, som vises i figur 2, viste en enkelt, skarp endoterm med en topptemperatur på tilnærmet 279 °C og en tilhørende fusjonsvarme på 230,0 J/g. Endotermen antas å skyldes smelting.

En termogravimetrisk analyse ble utført med et Perkin-Elmer modell TGA 7 under nitrogen ved en oppvarmingshastighet på 10 °C/minutt fra romtemperatur til tilnærmet 350 °C. TG-kurven viser et vekttap på 0,3 % under oppvarmingen til 250 °C.

Hygroskopisitetsverdier ble erholdt med en VTI Symmetrical Vapor Sorption Analyzer modell SGA-1. Verdiene ble oppsamlet ved romtemperatur fra 5-95 % relativ fuktighet og tilbake, endring på 5 % relativ fuktighet pr. trinn. Likevektsbetingelsene var 0,01 % (vekt/vekt) endring på 5 minutter med en maksimal ekvilibreringstid på 180 minutter. Verdiene viste at materialet hadde en 1,8 % vektøkning ved ekvilibrering ved 95 % RH ved 25 °C. Ved tilbakeekvilibrering ned til 5 % RH vendte materialet tilbake til tilnærmet tørrvekten. En XRPD-analyse av materialet etter hygroskopisitetseksperimentet viste at materialet ikke hadde endret faser.

K-salt fremstilt som beskrevet i del A, ble også analysert ved HCI-titrering ved anvendelse av et Brinkmann Metrohm 716 DMS Titrino. Analyseresultatene viste at saltet var et monokaliumsalt.

Eksempel 3

Form 1 av krystallinsk kaliumsalt av forbindelse A

Forbindelse A (45 g) ble løst i 50:50 vol/vol EtOH:MeCN (434 ml) ved 35 °C ved erholdelse av en løsning med en konsentrasjon på 96 g/l. En løsning av KOEt i EtOH (38 g, 24 % (vekt/vekt) KOEt) ble blandet med EtOH (342 g) for erholdelse av en 2,4 %

(vekt/vekt) løsning av etoksidet i etanol. Et kimkrystall-lag (form 1 av det krystallinske K-salt av forbindelse A) ble fremstilt ved å tilsette K-saltet (9,1 g) til 70:30 etanol: acetonitril (177 ml), hvoretter kim krysta I lene ble våtmalt i 30 minutter ved anvendelse av en IKA modell T50 våtmølle for erholdelse av et kimkrystall-lag med partikkeltall tilnærmet 48 600 (dvs. et partikkelstørrelsesområde fra 1 til 500 um) og en gjennomsnittlig partikkelstørrelse på 10,4 um.

Kimkrystallsuspensjonen (186 ml) ble overført til et krystalliseringskar, og hele EtOH:MeCN-løsningen av forbindelse A ble overført til en sprøytepumpe med kjølekappe. Sprøytepumpekappen ble holdt ved 45 °C, og kappen på krystalliseringskaret holdt ved 37 °C for erholdelse av en porsjonstemperatur på 35 °C. Løsningen av forbindelse A og KOEt-løsningen ble så samtidig tilsatt til krystalliseringskaret mens porsjonstemperaturen ble holdt ved 35 °C. Over de første 5 timene av tilsetningen ble forbindelse A-løsningen tilsatt med en hastighet på 0,29 ml/minutt, og KOEt-løsningen med en hastighet på

0,23 ml/minutt, hvoretter hastigheten ble endret for de neste 7 timene til 0,83 ml pr. minutt av forbindelse A-løsningen og 0,66 ml/minutt for KOEt-løsningen. Etter de 7 timene (12 timer total tilsetningstid) var hele forbindelse A-løsningen blitt tilsatt, og KOEt-tilsetningen ble fortsatt ved 0,66 ml/minutt inntil hele løsningen var tilsatt. Etter tilsetningen ble porsjonen avkjølt fra 35 °C til 20 °C over et tidsrom på 3 timer og så inkubert ved 20 °C i 2,5 timer og filtrert. Etter filtreringen ble filterkaken vasket med

EtOH (3 x 45 ml) i en forskyvnings/oppsuspensjons/forskyvningsvaskesekvens, så be-handlet med en nitrogenstrøm i 1 time og til slutt tørket over natten i en vakuumovn ved 45 °C for erholdelse av et isolert utbytte av krystallinsk K-salt av forbindelse A på 94 %.

Eksempel 4

Form 2 av krystallinsk kaliumsalt av forbindelse A

Fast KOH (47,9 mg) og forbindelse A (402,4 mg) ble tilsatt til aceton (8 ml), og den resulterende løsning ble ultralydbehandlet ved anvendelse av en Fisher Scientific Ultrasonic modell FS30H ved 40 kHz i flere minutter inntil en utfelling ble dannet. Prøven ble så vakuumfiltrert til tørrhet.

Et XRPD-mønster for det isolerte, krystallinske kaliumsalt fremstilt på måten som nettopp ble beskrevet, ble erholdt ved anvendelse av det samme instrument og de samme innstillinger som ble benyttet i eksempel 2. XRPD-mønstret er vist i figur 3. 20-verdiene og de tilsvarende d-avstander omfatter følgende:

K-salt fremstilt på den nettopp beskrevne måte, ble analysert med et TA Instruments DSC 2920 differensielt skannende kalorimeter ved en oppvarmingshastighet på 10 °C/minutt fra romtemperatur til 350 °C i en aluminiumsbeholder med krympet hull i nitrogenatmosfære. DSC-kurven som vises i figur 4, viste en bred endoterm ved tilnærmet 146 °C som antas å skyldes desolvering (assosiert fusjonsvarme = 9,66 J/g), en bred endoterm ved tilnærmet 238 °C som antas å skyldes en faseendring til form 1

(fusjonsvarme = 21,16 J/g), fulgt av en skarp endoterm ved tilnærmet 276 °C som antas å skyldes smelting av form 1 (fusjonsvarme = 124,6 J/g). Forskjellen i topptemperatur og fusjonsvarme sammenlignet med de tilsvarende verdiene erholdt for form 1 i eksempel 2, kan bl.a. skyldes forskjeller i de krystallinske prøvene (f.eks. forskjeller i nivået av urenheter eller ikke perfekte krystaller) og/eller ufullstendig omdanning til form 1 i dette DSC-skan og en viss påfølgende dekomponering under smeltingen av form 1.

Termog ravi metriske analyser utført på samme måte som beskrevet i eksempel 2, ble utført på flere prøver av det krystallinske K-salt fremstilt som beskrevet i dette eksempel. Resultatene viser at materialet (krystallinsk form 2) er et variabelt solvat som taper fra tilnærmet 1,6 til tilnærmet 3,5 % flyktig materiale under oppvarming til 200 °C. TG-massespektroskopi og KF-titreringer utført på prøvene, viser at form 2 inneholder vann. Kilden for vannet som forefinnes i form 2, kan være vann som foreligger som en urenhet i acetonet og/eller den faste KOH som anvendes i krystalliseringsfremgangs-måten. Ved oppvarming av form 2 ut over desolveringstemperaturen og inkubering skjedde en hurtig rehydrering. XRPD-undersøkelser har vist at ved oppvarming av form 2 ut over desolveringstemperaturen, men under transisjonstemperaturen for omdanning til form 1, var fasen uendret, noe som viser at form 2 kan være isomorf. Prøver av form 2 oppvarmet over 240 °C og så analysert ved XRPD, ble funnet å delvis ha blitt omdannet til form 1.

Eksempel 5

Tablettutforminq inneholdende form 1 av krystallinsk kaliumsalt av forbindelse A

Del A -

Sammenpressede tabletter inneholdende 100 mg forbindelse A beregnet som den frie fenol, ble fremstilt ved å sammenblande alle bestanddelene opplistet ovenfor, bortsett fra det ekstragranulære magnesiumstearat i en blander ("Turbula" type T2F risteblander, Basel, Sveits) i 10 minutter. Uttak av det sammenblandede materiale med vekt tilnærmet 1 g ble sammenpresset til kompakt materiale (eller kuler) i en bordpresse (Auto Carver modell Auto "C", katalog nr. 3888, Carver, Inc., Wabash, Indiana) ved anvendelse av et 1 x 0,5 tommers rektangulært stempel til 12 MPa (4 KN). Kulene ble så overført til granuler ved å la dem passere gjennom en sikt med 1 mm åpninger. Granulene ble blandet sammen med det ekstragranulære magnesiumstearat i Turbula-blander i 5 minutter, og de smurte granulene ble sammenpresset til tabletter ved anvendelse av Auto Carver-pressen med et 13/32 tommers standard, konkavt, rundt stempel.

Del B -

Sammenpressede tabletter med sammensetningen beskrevet i tabellen ovenfor, ble fremstilt ved anvendelse av en fremgangsmåte som tilsvarer den beskrevet i del A.

Eksempel 6

Tablettutforminq inneholdende form 1 av krystallinsk kaliumsalt av forbindelse A

Sammenpressede tabletter inneholdende 400 mg forbindelse A beregnet som fri fenol, ble fremstilt ved en rullesammenpressings- og tablettsammenpressingsprosess. Poloksamer 407, magnesiumstearat og natriumstearylfumarat ble forsiktet gjennom sikter med nr. 30 og nr. 60 meshstørrelse i denne rekkefølge, og så blandet med alle de andre bestanddelene bortsett fra det ekstragranulære magnesiumstearat i en Patterson-Kelly (PK) V-blander i 5 minutter. Det sammenblandede materiale ble så siktet gjennom en nr. 35 sikt for oppbrytning av agglomerater, og det siktede materiale ble så blandet videre i den samme PK-blander i tilnærmet 15-20 minutter. Blandingen ble så gjort kompakt ved anvendelse av en Freund type TF minirullekompaktor ved et valsetrykk på 40 kgf/cm<2>, en rullehastighet på 3 rpm og en skruehastighet på 10 rpm. Det resulterende flak ble malt i en liten Quadro Comil utstyrt med en rund impeller, siktstørrelse 39R (dvs. rundt hull med størrelse 0,039 tommer, tilnærmet meshstørrelse nr. 20) og drevet ved 1 700 rpm. De resulterende granuler ble så blandet med 0,5 % ekstragranulært magnesiumstearat i PK-blanderen i 5 minutter for fremstilling av den endelige blanding. De smurte granulene ble så sammenpresset til tabletter ved anvendelse av en roterende tablettpresse med vanlig, ovalformet stempel ved en kompresjonskraft som var tilstrekkelig til å gi en tabletthardhet på 16 til 20 kilopond (dvs. 156,9 til 196,1 Newton) målt ved anvendelse av en Key modell HT-300 hardhetsanalysator.

Claims (7)

1. Vannfritt, krystallinsk monokaliumsalt av forbindelse A, karakterisert vedat det har et røntgenpulverdiffraksjonsmønster erholdt ved anvendelse av kopper-Ka-stråling, som omfatter 20-verdier i grader på 5,9, 20,0 og 20,6. hvor forbindelse A har formelen:

2. Vannfritt, krystallinsk kaliumsalt av forbindelse A ifølge krav 1, hvor det har et røntgenpulverdiffraksjonsmønster erholdt ved anvendelse av kopper-Ka-stråling, som omfatter 20-verdier i grader på 5,9, 12,5, 20,0, 20,6 og 25,6.

3. Vannfritt, krystallinsk kaliumsalt av forbindelse A ifølge krav 2, hvor det videre gir en differensiell skannende kalorimetrikurve erholdt ved en oppvarmingshastighet på 10 °C/minutt i en lukket kopp under nitrogen som viser en enkelt endoterm med en topptemperatur på tilnærmet 279 °C.

4. Farmasøytisk preparat, karakterisert vedat det omfatter en effektiv mengde av et monokaliumsalt av forbindelse A ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 3 og et farmasøytisk akseptabelt bærestoff.

5. Monokaliumsalt av forbindelse A ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 3, for anvendelse i terapi.

6. Monokaliumsalt for anvendelse i terapi ifølge krav 5, hvor terapien er behandling eller forebyggelse av HIV-infeksjon eller behandling, forebyggelse eller forsinkelse av begynnelsen av AIDS.

7. Anvendelse av et monokaliumsalt av forbindelse A ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 3, ved fremstilling av et medikament for behandling eller forebyggelse av HIV-infeksjon eller for behandling, forebyggelse eller forsinkelse av begynnelsen av AIDS.