NO334431B1

NO334431B1 - Farmasøytisk sammensetning for behandling av kadiovaskulær eller cerebrovaskulær sykdom, inneholdende planteekstrakter samt anvendelse av samme.

Info

Publication number: NO334431B1
Application number: NO20061764A
Authority: NO
Inventors: Feng Wei; Dekun Li; Chongnian Luo; Hongshui Yue; Qingchuang Chen; Zhijuan Huang
Original assignee: Tasly Pharmaceutical Group Co
Priority date: 2003-09-23
Filing date: 2006-04-21
Publication date: 2014-03-03
Also published as: BRPI0414655A; EP1679058A4; CN100339085C; EA200600636A1; MY144043A; CA2538478A1; US7438935B2; ES2383599T3; CA2538478C; LT5433B; AU2004292351B2; KR20070028283A; SA04250309B1; EP1679058B1; DK1679058T3; WO2005051404A8; AP2006003596A0; PT1679058E; ZA200603180B; BRPI0414655B8

Abstract

Foreliggende oppfinnelse beskriver en farmasøytisk sammensetning for behandling av angiokardiopati som består av Radix Salviae Miltiorrhizae ekstrakt, 5,0 - 70,0 %, Radix Notoginseng ekstrakt, 10,0 - 85,0 %, Radix Astragali ekstrakt 5,0 - 70,0 %, og Bomeolum Suntheticum eller olje av Lignum Dalbergiae Odoferae, 1,0 - 15,0 %. Sammensetningen er aktiv mot cerebrale iskemi og myokardial iskemi. Effektene er overlegne i forhold til henholdsvis totale syrer fra Radix Salviae Miltiorrhiziae eller totale saponiner av Radix Notoginseng, eller kombinasjonen derav. Sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse kan fremskaffe forskjellige typer preparater ved tilsetting av forskjellige hjelpestoffer. Således fremskaffer foreliggende oppfinnelse en mer effektiv og bekvem sammensetning av TCM effektive seksjoner og dets preparater.

Description

Teknisk felt

Foreliggende oppfinnelse angår en medisinsk sammensetning. Spesielt angår den en farmasøytisk sammensetning for behandling av kardiovaskulære og cerebrovaskulære sykdommer.

Bakgrunnsteknikk

Statistikk har vist at sykeligheten og dødeligheten av kardiovaskulære og cerebrovaskulære sykdommer i Kina har økt de siste fem tiår. I løpet av 1950 til 1960-tallet rangerte kardiovaskulære sykdommer på femte og sjette plass av alle sykdommer som forårsaket død. Siden 1975 har de imidlertid gått opp til henholdsvis andre og tredje plass og død forårsaket av kardiovaskulære og cerebrovaskulære sykdommer har tatt førsteplassen av alle dødsfall forårsaket av sykdommer. Faktisk har mortaliteten av kardiovaskulære og cerebrovaskulære sykdommer i kina utgjort 42,6 % av alle dødsfall fra 2001 fra 12,07% i 1975. For tiden forårsaker de omkring 2 millioner dødsfall hvert år. Noen pasienter overlever, men de fleste overlevende er invalidisert og ute av stand til å ta vare på seg selv i sitt daglige liv, noe som gir byrder for deres familier og samfunnet.

Kardiovaskulære og cerebrovaskulære sykdommer er også de hyppigste årsakene til dødsfall i vestlige land. Basert på nåværende epidemiologiske data, er det estimert at inntil 2020, vil koronare arteriesykdommer og cerebral blødning fremdeles være nummer en og to av dødsårsaker for mennesker, selv om dødsfall p grunn av humane sykdommer vil bli signifikant endret. Det er beregnet at frem til da vil globale dødsfall av koronare arteriesykdommer øke fra 6,3 millioner i 1990 til 11 millioner; og dødsfall på grunn av cerebral blødning vil øke fra 4,4 millioner til 7,7 millioner. I løpet av disse 30 årene vil dødsfall på grunn av sykdommer i sirkulasjonssystemet øke til 59,6 %. Dødsfallene av koronar arteriesykdom og slag vil øke henholdsvis 74,6 % og 75 %. Alle disse data viser at kardiovaskulære og cerebrovaskulære sykdommer ikke bare er de viktigste sykdommene som er skadelige for den humane helse, de er også i dag og vil bli "dødsårsak nr. 1", som fører til død eller funksjonshemming.

Blant de terapeutiske medikamenter for behandling av kardiovaskulære og cerebrovaskulære sykdommer blir tradisjonelle kinesiske patentmedisiner og vestlige medisiner administrert med effekter som fokuserer på forskjellige sider; tradisjonell kinesisk patentmedisin har mindre bieffekter og har derfor tatt en stor del av markedet. Blant de tilgjengelige kinesiske patentmedisinene for behandling av kardiovaskulære og cerebrovaskulære sykdommer får de som omfatter som aktive komponenter, aktive ingredienser av biologisk aktive deler av urter, slik som notoginsenoid, salvianolinsyre, radix pueranin isoflavoner, og gypenosider, større og større oppmerksomhet. Siden de biologisk aktive delene i de tradisjonelle kinesiske patentmedisinske urtene for behandling av kardiovaskulære og cerebrovaskulære sykdommer har oppnådd respektive funksjoner og effekter som fokuserer på forskjellige aspekter, er de forventet å finne potensiell anvendelse innen kombinert administrasjon. På den andre siden, kommer de tradisjonelle kinesiske patentmedisinene basert på enkle biologisk effektive deler av urtene, spesielt i form av injeksjonsoppløsninger, slik som Xuesationg, Xueshuantong (varemerker), til kort hva angår behovet for kombinert administrasjon. Videre, representerer enkel blanding av noen tradisjonelle kinesiske patentmedisinske injeksjonsoppløsninger, uten foregående godkjenning av Statens Mat- og Medikamentadministrasjon en stor risiko for uventede negative reaksjoner, slik som hurtig blodtrykksøkning, feber og allergi. Derfor vil det være meget viktig å fremskaffe mer effektive og passende sammensetninger av biologisk aktive deler av urter for kliniske anvendelser.

Fra CN1079658 A er det kjent et medisinsk preparat i pulverform eller som en kapsel til bruk i forbindelse med behandling av kronisk iskemisk hjertesykdom. Preparatet inneholder et stort antall ingredienser, bl.a. Radix Salviae Miltiorrhizae, Radix Ginseng, Radix Astragali, Radix Notoginseng, Lignum Dalbergiae Odoriferae og Borneolum Syntheticum.

Fra CN 1074613 A er det kjent en farmasøytisk sammensetning for behandling av hjertesykdommer inneholdende vegetabilske ingredienser, herav Radix Salviae Miltiorrhizae, Radix Notoginseng, Radix Astragali, Borneolum Syntheticum og Lignum Dalbergiae Odoriferae.

Fra CN 1073875 A vedrører en farmasøytisk sammensetning for behandling av kardiovaskulære og cerebrovaskulære sykdommer. Sammensetningen inneholder bl.a. Radix Salviae Miltiorrhizae, Radix Astragali, Radix Notoginsengm, Lignum Dalbergiae Odoriferae og Borneolum Syntheticum.

Oppsummering av oppfinnelsen

Følgelig er det et mål ved foreliggende oppfinnelse å fremskaffe mer effektive og passende sammensetninger av bioaktive deler av urter og et preparat derav for behandlingen av kardiovaskulære og cerebrovaskulære sykdommer, som gjør det mulig å overvinne defektene ved den tradisjonelle kinesiske patentmedisin basert på enkle biologisk aktive deler av urter som ikke kan tilfredsstille det kliniske behovet for kombinert administrasjon og unngå potensielle bieffektreaksjoner som er forbundet med enkel blanding av medikamenter.

Foreliggende oppfinnelse kan bli implementert som angitt i de følgende utførelsesformer.

En farmasøytisk sammensetning for behandling av kardiovaskulær eller cerebrovaskulær sykdom, bestående av

5,0 % - 70,0 % Radix Salviae Miltiorrhizea ekstrakt;

10.0 % - 85,5% Radix Notoginseng ekstrakt;

5,0 % - 70,0 % Radix Astragali ekstrakt;

1,0 % -15,0 % Borneol eller olje av Lignum Dalbergiae Odoriferae, og en farmasøytisk akseptabel adjuvant.

Ifølge en ytterligere foretrukket utførelsesform av foreliggende oppfinnelse består foreliggende sammensetning av

15,0% - 50,0% Radix Salviae Miltiorrhizea ekstrakt;

25.0% - 65,0% Radix Notoginseng ekstrakt;

15,0% - 50,0% Radix Astragali ekstrakt; og

2,0% -12,0% Borneol eller olje av Lignum Dalbergiae Odoriferae, og en farmasøytisk akseptabel adjuvant.

Ifølge nok en ytterligere foretrukket utførelsesform av foreliggende oppfinnelse består foreliggende sammensetning av

20,0% - 30,0% Radix Salviae Miltiorrhizea ekstrakt;

30.0% - 55,0% Radix Notoginseng ekstrakt;

20,0% - 30,0% Radix Astragali ekstrakt; og

4,0% -10,0% Borneol eller olje av Lignum Dalbergiae Odoriferae, og en farmasøytisk akseptabel adjuvant.

23% Radix Salviae Miltiorrhizea ekstrakt;

45,0% Radix Notoginseng ekstrakt;

23,0% Radix Astragali ekstrakt; og

9% Borneol eller olje av Lignum Dalbergiae Odoriferae, og

en farmasøytisk akseptabel adjuvant.

Ifølge enda en foretrukket utførelsesform av foreliggende består foreliggende farmasøytiske sammensetning omfatter nevnte Radix Salviae Miltiorrhizea ekstrakt 45% - 70% salvianolinsyre B, 2% -10% salvianolinsyre E, 4% - 20% rosmarinsyre, 1% -10% litosperminsyre, og mer enn 70% salvinolinsyrer; hvor nevnte Radix Notoginseng ekstrakt omfatter 2% -10% notogensenosid R1, 2% -6% ginsenosid Rd, og mer enn 70% radix notogenseng saponiner; nevnte Radix Astragali ekstrakt omfatter 5% -15% astragalosid I og mer enn 70% Radix Astragali saposiner..

Ifølge enda en foretrukket utførelsesform av foreliggende sammensetning omfatter

nevnte Radix Salviae Miltiorrhizea ekstrakt omfatter mer enn 80% salvinolinsyrer; nevnte Radix Notoginseng ekstrakt omfatter mer enn 80% radix notogenseng saponiner; og nevnte Radix Astragali ekstrakt omfatter mer enn 80% Radix Astragali saposiner.

Ifølge enda en foretrukket utførelsesform av foreliggende sammensetning er den injeksjoner,

tabletter, tabletter med vedvarende frigiving, drop-piller, korn, injeksjonspulver, kapsler eller mikrogranuli.

Ifølge enda en foretrukket utførelsesform av foreliggende sammensetning er den injeksjon eller injeksjonspulver.

Ifølge enda et aspekt, angår foreliggende oppfinnelse anvendelsen av et Radix Salviae Miltiorrhizea ekstrakt, et Radix Notoginseng ekstrakt, et Radix Astragali ekstrakt, og Borneol eller olje av Lignum Dalbergiae Odoriferae for fremstilling av et medikament for behandling av kardiovaskulære eller cerebrovaskulære sykdommer, hvor medikamentet består av: 5,0% - 70,0% Radix Salviae Miltiorrhizea ekstrakt;

10.0% - 85,5% Radix Notoginseng ekstrakt;

5,0% - 70,0% Radix Astragali ekstrakt;

1,0% -15,0% Borneol eller olje av Lignum Dalbergiae Odoriferae, og en farmasøytisk akseptabel adjuvant.

Radix Salviae Miltiorrhizae-ekstraktet for de ovenfor nevnte farmasøytiske sammensetningene kan ble fremstilt ved hjelp av kjente fremgangsmåter, for eksempel ved fremgangsmåtene beskrevet i patentsøknadene CN 1352985A, CN 1247855A, CN 1242364A, CN1384090A, CN1459448A og Guo Ying et al, The Journal of Yunnan Univerity of Traditional Chinese Medicine, 2001, 24(4):6. Det kan også bli fremstilt ved fremgangsmåter tilsvarende til de ovenfor med passende modifikasjoner.

Foreliggende Radix Salviae Miltiorrhizea ekstrakt omfatter 45% - 70% salvianolinsyre B, 2% - 10% salvianolinsyre E, 4% -20% rosmarinsyre, 1% -10% litosperminsyre, og mer enn 70%, fortrinnsvis mer enn 80% salvinolinsyrer. Uten hensyn til fremgangsmåten for fremstilling av Radix Salviae Miltiorrhizae-ekstraktet, betyr uttrykket "Radix Salviae Miltiorrhizae-ekstrakt" som benyttet heri, at innholdet faller innen rammene som angitt; og for det formålet kan råekstraktet være ytterligere raffinert, slik som ved konsentrasjon, for å møte kravene hva angår innholdet av komponentene. Komponentene og deres innhold kan blikarakteriserthenholdsvis bestemt som følger: 1. Bestemmelse av innholdene av salvianolinsyre B, salvianolinsyre E, rosmarinsre og litosperminsyre i Radix Salviae Miltiorrhizae ekstrakt (HPLC)

a. Kromotografiske betingelser

Filler: Oktadecylsilyl-silaka-gel; mobol fase: acetonitril-vann-fosforsyre (23,5:76,5:0,02); deteksjonsbølgelengde: 288nm

Teoretiske plater er ikke lavere enn 5000, beregnet basert på toppen av salvianolinsyre B.

b. Fremstilling av kontrolloppløsninger

0,2 mg/ml salvianolinsyre B kontrolloppløsning ble fremstilt ved å blande kontrollprøven med den mobile fasen. Likeledes ble det også fremstilt 0,02 mg/ml salvianolinsyre E kontrolloppløsning, 0,05 mg/ml rosmarinsyre kontrolloppløsning, og 0,01 mg/ml litosperminsyre kontrolloppløsning.

c. Preparering av prøveoppløsninger:

35 mg Radix Salviae Miltiorrhizea ekstrakt ble ved nøyaktig opp i en 25 ml

måleflaske. Til flasken ble det tilsatt den mobile fasen for å oppløse prøven. Den resulterende oppløsningen ble videre fortynnet med samtidig risting til 25 ml med mobil fase. 5 ml prøveoppløsning ble tatt opp i en 25 ml måleflaske og til flasken ble det tilsatt mobil fase til 25 ml, den resulterende løsningen ble ristet for å blande den grundig.

d. Analyseprosedyren

10 |il henholdsvis av hver kontrolloppløsning og prøveoppløsning ble analysert ved væskekromatografi. 2. Bestemmelse av salvinolinsyre i Radix Salviae Miltiorrhizea ekstraktet ovenfor

(spektrofotometri)

a. Fremstilling av kontrolloppløsninger

20 mg/ml salvianolinsyre B oppløsning ble fremstilt ved å blande prøven med blandingen av acetonitril-vann-fosforsyre (23,5:76,5:0,02).

b. Fremstiling av prøveoppløsninger

25 mg av radix Salviae Miltiorrhizae-ekstraktet ble veid nøyaktig opp i en 50 ml

måleflaske. Til flasken ble det tilsatt blandingen av acetonitril - vann - fosforsyre (23,5:76,5:0,02). Den resulterende løsningen ble fortynnet ved samtidig risting til 25 ml med nevnte blanding. 2 ml prøveoppløsning ble tilsatt til en 50 ml måleflaske. Nevnte blanding ble tilsatt og fylt opp til 25 ml, mens den resulterende løsningen ble ristet for å blande den grundig.

c. Analyseprosedyre

Ta acetonitril-vann-fosforsyre (23,5:76,5:0,02) som blank, absorbsjonsverdien av kontrolloppløsningene og prøveløsningene blir bestemt individuelt under bølgelengde på 288 nm ved bruk av spektrofotometri ( China Pharmacopoeia, utgave 1995, volum 1, appendiks VA). Beregningene er basert på den følgende formel:

Salvinolinsyrer (%) = f(A-B)+B

hvor f er 0,626, korreksjonsfaktor; A er innholdet av salvinolinsyrer bestemt ved spektrofotometri mot salvianolinsyre B: B er innholdet av salvianolinsyre B bestemt ved HPLC.

3. HPLC fingeravtrykksspektrum av nevnte Radix Salviae Miltiorrhizae ekstrakt

For bestemmelsesmetoden blir det vist til beskrivelsen i sammenheng med bestemmelsen av salvianolinsyre B og E, rosmarinsyre, litosperminsyre ovenfor (1). Måletiden er 60 minutter.

Av alle felles fingeravtrykkstopper, er toppen av salvianolinsyre B, en felles topp som representerer et relativt stort og stabilt toppområde, valgt som referansetopp. Den relative retensjonstiden og relative topparealet blir beregnet mot retensjonstiden og topparealet til referansetoppen. Der er 5 - 7 felles topper i fingeravtrykket til Radix Salviae Miltiorrhizae ekstraktet ovenfor, og der er typisk 6 felles topper. De relative retensjonstidene er i rekkefølge 0,55 - 0,65 (topp for salvianolinsyre E), 0,66 - 0,70 (topp for rosmarinsyre), 0,71 - 0,79 (topp for litosperminsyre), 1 (topp for salvianolinsyre B), 1,03 - 1,12,1, 21 - 1,30. Av alle de felles toppene, har kun toppen for salvianolinsyre B, referansetoppen, et forhold av et enkelt toppareal til totalt toppareal som er større enn 20 %. Topparealet til salvianolinsyre B står for 57 % - 87% av totalt toppareal: dets relative toppareal er 1. Med relativ retensjonstid på 0,66 - 0,70, står topparealet til den felles toppen av rosmarinsyre for 3 % til 18 % av totalt toppareal;

og dets relative toppareal er 0,03 - 0,25. Det totale toppareal av ikke-felles topp er

mindre enn 10 % av det totale toppareal.

Radix Notoginseng-ekstraktet i de ovenfor nevnte farmasøytiske sammensetningene kan bli fremstilt ved hjelp av kjente prosesser, for eksempel ved fremgangsmåten beskrevet i kinesisk patent ZL1095363, kinesisk patentsøknad CN1352985A, Qian Tianxiang et al, Foreign Medical Sciences, Plant Medicine Section, 1997, 12(4)), Tang Diguang, The Journal ofChinese Traditional Patent Medicine, 1990,12(8):5, The Standard of Public Health Ministry of China WS3- B- 3590- 2001 ( z). Det kan også bli fremstilt ved fremgangsmåter tilsvarende til disse med passende modifikasjoner. Det er også kommersielt tilgjengelig på markedet, slik som i form av et ekstrakt omfattende 95% (bestemt ved UV) Radix Notoginseng sampniner (Rb1>30%, Rg1>20%, R1>15%, bestemt ved HPLC).

Foreliggende Radix Notoginseng ekstrakt omfatter 2% -10% notogensenosid R1, 2%-6% ginsenosid Re, 15%-40% ginsenosid Rg1,15%-40% ginsenosid Rb1, 5% -12% ginsenosid Rd, og mer enn 70%, fortrinnsvis mer enn 80%, radix notoginseng saposiner. Uansett fremgangsmåten for fremstilling av Radix Notiginseng ekstrakt, betyr uttrykket "Radix Notoginseng ekstrakt" som benyttet her, at innholdet av bestanddelene faller innen rammene som ovenfor angitt, og for det formålet kan rå-ekstrakter bli ytterligere raffinert, slik som ved konsentrering, for å møte kravene med hensyn på innholdet av komponentene. Komponentene og deres innhold kan bli henholdsviskarakterisertog bestemt som følger: 1. Bestemmelse av innhold av ginsenosid Re, ginsenosid Rd, notoginsenosid R1, ginsenosid Rg1 og ginsenosid Rb1 i Radix Notoginseng ekstrakt (HPLC)

a. Kromatografiske betingelser og test av anvendelighet av system

Filler: Oktadecylsilyl-silika-gel; Kolonnetemperatur: 40 °C; strømningshastighet:

0,7 ml/min.; deteksjonsbølgelengde: 203 nm; gradient av mobil fase som følger:

b. Fremstilling av kontrolloppløsninger

0,2 mg/ml ginsenosid Re kontrolloppløsning ble fremstilt ved blanding av kontrollprøven med metanol. Likeledes, ble det også fremstilt henholdsvis 0,4 mg/ml ginsenosid Rd kontrolloppløsning, 0,2 mg/ml ginsenosid R1 kontrolloppløsning, 0,4 mg/ml notoginsenosid Rg1 oppløsning og 0,4 mg/ml ginsenosid Rb1 kontrolloppløsning.

c. Fremstilling av prøveoppløsninger:

20 mg av Radix Notoginseng ekstrakt ble veid nøyaktig opp i en 50 ml

måleflaske. Til flasken ble det tilsatt den mobile fasen for å oppløse prøven. Den resulterende oppløsningen ble videre fortynnet med samtidig risting til 50 ml med mobil fase.

d. Analyseprosedyre

10jllI av her standardoppløsning og prøveoppløsning ble injisert i HPLC-systemet og ble analysert. HPLC-spekteret til Radix Notoginseng ekstrakt ifølge foreliggende oppfinnelse ble så fremskaffet. (1) Bestemmelse av Radix Notoginseng saposiner i radix notoginseng-ekstraktet ovenfor (spektrofotometri)

(2) HPLC fingeravtrykkspektrum av Radix Notoginseng ekstrakt

Av alle felles fingeravtrykkstopper, ble toppen av ginsenosid Rg1, som representerer et relativt stort og stabilt toppareal, valgt som referansetopp. Den relative retensjonstiden og relative toppareal ble beregnet mot retensjonstiden og topparealet til referansetoppen. Der er 9 - 12 felles topper i fingeravtrykksspekteret til Radix Notoginseng ekstraktet ovenfor, og der er typisk 11 felles topper. De relative retensjonstidene for de 11 felles toppene er i rekkefølge 0,77-0,85 (topp for notoginosid R1), 0,87 - 0,97 (topp for ginsenosid Re), 1 (topp for ginsenosid Rg1, dvs. referansetoppen), 1,58-2,67, 0,68-2,76, 2,77-2,81, 2,82-2,91 (topp for ginsenosid Rb1)2,95-3,03, 3,05-3,13, 3,15-3,22 (topp for ginsenosid Rd), 3,24-3,91. Av alle de felles toppene, har kun toppen dor ginsenosid Rg1 og toppen for ginsenosid Rb1 frohold av enkelttopp-areal til totalt toppareal som er større enn 20 %. Topparealet til ginsenosid Rg1, refereransetoppen, står for 20-35 % av totalt toppareal, dets relative toppareal er 1. Topparealet til ginsenosid Rb1 står for 30- 50 % av det totale topparealet, dets relative toppareal er 0,85 - 2,50. Topparealet for notoninsenosid står for 2-8 % av totalt toppareal, dets relative toppareal er 0,06 - 0,40. Topparealet for ginsenosid Rd står for 5-14 % av totalt toppareal, dets relative toppareal er 0,14-0,70. Det totale toppareal av ikkefelles topp er mindre enn 10 % av det totale topparealet.

Radix Astragali ekstraktet i den ovenfor nevnte farmasøytiske sammensetningen kan bli fremstilt ved midlerifølge kjent teknikk, for eksempel som beskrevet i kinesisk patent CN1096269, Yu Hao et al, West China Journal of Pharmaceutical Sciences, 1993, 8(3): 163, Teng Xinglong et al., Heilingjiang Medical Journal, 2002, 15(5):340, Wang Zhijie et al., Journal ofZhejiang College of Traditional Chinese Medicine, 2001, 25(5): 43. Det kan også bli fremstilt ved fremgangsmåter tilsvarende de ovenfor nevnte med passende modifikasjoner. Det er også kommersielt tilgjengelig på markedet, slik som i form av et ekstrakt omfattende 80-90 %

(bestemt ved UV) Radix Astragali ekstrakt.

Foreliggende Radix Astragali ekstrakt omfater 5-15 % astragalosid I og mer enn 70 % redix astragali saponiner, eller fortrinnsvis mer enn 80 % radix astragali saponiner. Uavhengig av fremstillingsmetoden til Radix Astragali ekstraktet, betyr uttrykket "Radix Astragali ekstrakt" som benyttet heri at innholdet i ekstraktet faller innenfor den angitte rammen, og for det formålet kan råekstraktet bli ytterligere raffinert, for å møte kravene med hensyn på innholdet av komponentene.

Boreolet benyttet i sammensetningen ovenfor kan vare naturlig forekommende eller være et syntetisk et.

Oljen av Lignum Dalbergiae Odoferae benyttet i nevnte sammensetning kan ble fremstilt ved destillering av Lignum Dalbergiae Odoferae.

Sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse kan bli formulert som forskjellige doseringsformer ved kombinering med en eller flere farmasøytisk akseptable adjuvanter. Nevnte adjuvant omfatter, men er ikke begrenset til, stivelse, dekstin, laktose, mikrokrystallink cellulose (avicel), hydroksypropyl metylcellulose (HPMC), polyetylenglykol, magnesiumstearat, mikrosilisiumgel, xylitol, laktitol, glukose, glycin, D.mannitol og liknende Foreliggende farmasøytiske sammensetning kan ha form av injeksjoner, tabletter, tabletter med vedvarende frigiving, drop-piller, korn, injeksjonspulvere, kapsler, mikrogranuli og liknende. Tabletter, drop-piller, injeksjonspulver og kapsler er foretrukket. Det totale innholdet av salvinolinsyre, radix notoginseng saposiner og radiks astragali saposiner er foretrukket over 80 %, dersom sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse er formulert som injeksjoner eller injeksjonspulver.

Råmaterialene for foreliggende sammensetning er enkelt tilgjengelige og letter således kommersiell produksjon av foreliggende sammensetning. Foreliggende sammensetning kan bli formulert som forskjellige former som ønsket, og gir mer bekvem, mer effektiv og høykvalitetskontrollert moderne kinesisk tradisjonell patentmedisin for kliniske anvendelser.

Foreliggende oppfinnelse sammenligner effektene av anti-cerebral iskemi av foreliggende sammensetninger; salvinolinsyrer pluss radix notoginseng saposiner pluss broneol eller olje av lignum dalberiae odoferae; salvinolinsyrer pluss radix notiginseng saposiner; salvinolinsyrer og radix notoginseng saposiner, ved bruk av modellen av den lokaliserte cerebrale iskemi forårsaket av jern(lll)klorid heksahydrat lokalt på midtre cerebrale arterie, og bestemmelsen av de neurologiske symptomer og arealet til cerebralt infarkt. Resultatene viser at foreliggende sammensetning har signifikant effekt på anti-cerebral iskemi. Dets terapeutiske effekter er mer signifikante enn den til enkle salvinolinsyrer eller radix notoginseng saposiner, mer signifikant enn salvinolinsyrer pluss radix notoginsent saposiner og mer signifikant enn salvinolinsyrer pluss notoginseng saposiner pluss Broneol eller olje av Lignum Dalbergiae Odoferae. Resultatene indikerer at den farmasøytiske sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse, dvs. sammensetningen av Radix Salviae Miltiorrhizae ekstrakt pluss Radix Notoginseng ekstrakt pluss Radix Astragali ekstrakt og Broneol, eller Radix Salviae Miltiorrizae ekstrakt pluss Radix Notoginseng ekstrakt pluss Radix Astragali ekstrakt og olje av Lignum Dalbergiae Odoferae, som har signifikant synergetisk effekt.

Kort beskrivelse av figurene

Fig. 1: HPLC fingeravtrykks-spektrum av Radix Salviae Miltiorrhiaze ekstrakt (0-60 min);

Fig. 2: HPLC fingeravtrykks-spektrum av Radix Notoginseng ekstrakt (0-30 min).

I beskrivelsen av foreliggende oppfinnesle er alle prosenter av vekt, hvis ikke annet er indikert.

Detaljert beskrivelse av utførelsesformene

Foreliggende oppfinnelse vil bli bedre forstått ved referanse til eksemplene som følger. De følgende eksemplene er kun for illustrative formål og er ikke ment å begrense rammen til oppfinnelsen.

Eksempel 1

Radix salviae miltiorrhizae ekstrakt:

Radix salviae miltiorrhizae ekstraktet ble fremstilt ved fremgangsmåten beskrevet i kinesisk patentsøknad nr. CN1459448A. Således ble 5 kg Radix Salviae miltiorrhizae malt til et grovt pulver og så ekstrahert tre ganger med deionisert vann ved 100 °C under milde kokebetingelser. For den første ekstraksjonen ble 27,5 kg vann tilsatt og oppvarmet i en time; for den andre og tredje ekstraksjonen ble 15 kg vann tilsatt og oppvarmet i 0,5 time hver gang. Surheten til ekstraktet ble justert til pH 2 med 10% HCI og så filtrert. Filtratet ble lastet på en polyamidresinkolonne (mengden tørr resin er to tredjedeler av mengden av råekstraktet). Kolonnen ble eluert med deionisert vann på 5 ganger volumet av kolonnen, fult av 5 ganger kolonnevolumet av 0,1% NaHC03-oppløsning. Eluatet ble samlet. Etter justering av pH til 2 me 105 HCI, ble eluatet satt på en D101 makroporøs absorptiv resin. Resinen ble eluert med deionisert vann inntil eluatet ble nøytralt. Så ble kolonnen eluert med 95 % etanol og fargebåndet ble oppsamlet. De oppsamlede oppløsningene ble konsentrert under redusert trykk inntil opptørking. Det tørre materialet ble oppløst i vann og så lagret i kjøleskap over natten. Etter filtrering gjennom 0,3 pm blandet cellulose mikroporefilterfilm, salvinolinsyreekstraktet ble oppnådd. Det ble justert til pH 6,0 med 2 % NaOH-oppløsning og umiddelbart lyofilisiert for å gi 221 g frysetørket Radix Salviae Miltiorrhizae ekstraktmateriale. Utbyttet var 4,4 % av råmaterialet av Radix salviae miltiorrhizae.

Radix salviae miltiorrhizae ekstrat fremstilt slik inneholder salvianolinsyre A, salvianolinsyre B, salvianolinsyre C, salvianolinsyre E, salvianolinsyre G, miltionon I, rosmarinsyre, litosperiminsyre, danshensu også videre. Hvori nevnte salvinolinsyre B var 53,73%, salvianolinsyre E var 3,7%, rosmarinsyre var 5,2%, litosperminsyre var 1,7% og salninolinsyrer var 83,94%. Der var 6 felles topper vist i HPLC fingeravtrykksspekter av Radix salviae miltiorrhizae ekstrakt (gjennomsnittet av 10 porsjoner). Gjennomsnittene av de relative retensjonstidene for disse 6 felles toppene var, i den gitte rekkefølgen, 0,60 (topp for salvianolinsyre E), 0,68 (topp for rosmarinsyre), 0,73 (topp for litosperminsyre), 1 (topp for salvianolinsyre B), 1,08, 1,26. Av felles topper hadde kun toppen for salvianolinsyre B som var referansetoppen, forholdet mellom av enkeltoppareal til totalt toppareal som var større enn 20%. Topparealet til salvianolinsyre B utgjorde 72 % (gjennomsnitt) av totalt toppareal; og det relative topparealet var 1. Topparealet av rosmarinsyre sto for 10 % (gjennomsnitt) av totalt toppareal, og dets relative toppareal var 0,14 (gjennomsnitt). Det totale topparealet av ikke-felles topper var mindre enn 10 % av totalt toppareal. HPLC fingeravtrykksspekteret til Radix Slviae Miltiorrhizae er vist i figur 1.

Raix Notoginsent ekstrakt:

Radix notoginseng saposinene som var kommersielt tilgjengelige ble ytterligere raffinert for å produsere ønsket Radix Notoginseng ekstrakt. Det fremstilte ekstraktet inneholdt ginsenosid Rb1, ginsenosid Re, ginsenosid Rd, ginsenosid Rg1, ginsenosid Rg2, ginsenosid Rg3, ginsenosid Rh1, ginsenosid Rh2, panaxytriol, notoginsenosid R1, notoginsenosid R2, notoginsenosid R3,20-gluko-ginsenosid Rf. Hvori ginsenosid Re utgjorde 3,9%, ginsenosid Rg1 utgjorde 34,3%, ginsenosi Rb1 utgjorde 31,0%, ginsenosid Rd utgjorde 8,8%, notoginsenosid R1 utgjorde 6,8% og radix notoginseng saposiner utgjorde 94%. Der var 11 felles topper vist i HPLC fingeravtrykksspekter (gjennomsnitt for 10 porsjoner) av Radix notoginseng ekstrakt. Gjennomsnittet for retensjonstider for disse 11 toppen var, i den angitte rekkefølgen, 0,82 (topp for notoginsenosid R1), 0,94 (topp for ginsenosid Re), 1 (topp for ginsensosid Rg1, referansetoppen), 2,63, 2,74, 2,79, 2,85 (topp for ginsenosid Rb1), 2,99, 3,08, 3,18 (topp for ginsenosid Rd) og 3,28. Av alle felles topper, hadde toppen for ginsenosid Rg1 og toppen for ginsenosid Rb1 forhold av enkeltoppareal til totalt toppareal som var større enn 20 %. Topparealet av ginsenosid Rg1 (dvs referansetoppen) utgjorde 28 % (gjennomsnitt) av totalt toppareal, og dets relative toppareal var 1. Topparealet til ginsenosid Rb1 stod for 39 %

(gjennomsnitt) av totalt toppareal, og dets relative toppareal var 1,39 (gjennomsnitt). Topparealet for notoginsenosid R1 stod for 6 % (gjennomsnitt) av totalt toppareal, og dets relative toppareal var 0,20 (gjennomsnitt). Topparealet for ginsenosid Rd stod for 10 %

(gjennomsnitt) av totalt toppareal, og dets relative toppareal var 0,37 (gjennomsnitt). Det totale topparealet av ikke-felles topper var lavere enn 10 % av totalt toppareal. HPLC fingeravtrykksspekteret av radix notoginseng er vist i figur 2.

Raix Astragali ekstrakt:

Radix Astragali ekstrakt som var kommersielt tilgjengelig ble ytterligere raffinert. Det fremstilte ekstraktet innehold acetylastragalosid, astragalosid I, astragalosid II, astragalosid III, astragalosid Ivm isoastragalasid I, isoastragalosid II, astramembrannin II, sykloastragenol, soyasaponin I, lupeod, B-sitosterol, daucosterin. Hvor astragasosid I utgjorde 9,5 % og innholdet av radix astragali ekstrakt var 88,9 %. 75 mg Radix Salviae Miltrorrhizae ekstrakt, 150 mg Raix Notoginseng ekstrakt, 75 mg Radix Astragali ekstrakt, alle fremstilt ovenfor og 30 mg Norneol ble blandet tilstrekkelig. Så ble blandingen lyofilisiert for å gi sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse.

Eksempel 2

100 mg Radix Salviae Miltrorrhizae ekstrakt, 200 mg Radix Notoginseng ekstrakt, 75 mg Radix Astragali ekstrakt, fremstilt i eksempel 1, og 30 mg olje av Lignum Dalbergiae Odoferae ble blandet med 400 mg polyetylenglykol 6000, og smeltet for å gi en blanding. Så ble blandingen tillat å avkjøle og sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse ble oppnådd.

Eksempel 3

96 mg Radix Salviae Miltrorrhizae ekstrakt, 136 mg Radix Notoginseng ekstrakt, 70 mg Radix Astragali ekstrakt, fremstilt i eksempel 1 ovenfor, og 28 mg Borneol ble blandet tilstrekkelig. Blandingen ble så lyofilisiert og sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse ble oppnådd.

Eksempel 4

70 mg Radix Salviae Miltrorrhizae ekstrakt, 150 mg Radix Notoginseng ekstrakt, 90 mg Radix Astragali ekstrakt, fremstilt i eksempel 1 ovenfor, og 20 mg Borneol ble blandet tilstrekkelig. Blandingen ble så lyofilisiert og sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse ble oppnådd.

Eksempel 5

165 mg Radix Salviae Miltrorrhizae ekstrakt, 80 mg Radix Notoginseng ekstrakt, 60 mg Radix Astragali ekstrakt, fremstilt i eksempel 1 ovenfor, og 25 mg Borneol ble blandet tilstrekkelig. Blandingen ble så lyofilisiert og sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse ble oppnådd.

Eksempel 6

75 mg Radix Salviae Miltrorrhizae ekstrakt, 135 mg Radix Notoginseng ekstrakt, 82 mg Radix Astragali ekstrakt, fremstilt i eksempel 1 ovenfor, og 38 mg Borneol ble blandet tilstrekkelig. Blandingen ble så lyofilisiert og sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse ble oppnådd.

Eksempel 7

230 mg Radix Salviae Miltorrhizae ekstrakt, 75 mg Radix Notoginseng ekstrakt, 17 mg Radix Astragali ekstrakt, fremstilt i eksempel 1 ovenfor, og 8 mg Borneol ble blandet tilstrekkelig. Blandingen ble så lyofilisiert og sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse ble oppnådd.

Eksempel 8

17 mg Radix Salviae Miltorrhizae ekstrakt, 70 mg Radix Notoginseng ekstrakt, 230 mg Radix Astragali ekstrakt, fremstilt i eksempel 1 ovenfor, og 13 mg Borneol ble blandet tilstrekkelig. Blandingen ble så lyofilisiert og sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse ble oppnådd.

Eksempel 9

55 mg Radix Salviae Miltorrhizae ekstrakt, 160 mg Radix Notoginseng ekstrakt, 63 mg Radix Astragali ekstrakt, fremstilt i eksempel 1 ovenfor, og 48 mg Borneol ble blandet tilstrekkelig. Blandingen ble så lyofilisiert og sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse ble oppnådd.

Eksempel 10

96mg Radix Salviae Miltorrhizae ekstrakt, 13 mg Radix Notoginseng ekstrakt, 70 mg Radix Astragali ekstrakt, fremstilt i eksempel 1 ovenfor, og 28 mg olje fra Lignum Dalbergiae Odoferea ble blandet tilstrekkelig med 400 mg polyetylenglykol 6000, og smeltet. Blandingen ble så avkjølt og sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse ble oppnådd.

Eksempel 11

70 mg Radix Salviae Miltorrhizae ekstrakt, 150 mg Radix Notoginseng ekstrakt, 70 mg Radix Astragali ekstrakt, fremstilt i eksempel 1 ovenfor, og 20 mg olje fra Lignum Dalbergiae Odoferea ble blandet tilstrekkelig med 400 mg polyetylenglykol 6000, og smeltet. Blandingen ble så avkjølt og sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse ble oppnådd.

Eksempel 12

165 mg Radix Salviae Miltorrhizae ekstrakt, 80 mg Radix Notoginseng ekstrakt, 60 mg Radix Astragali ekstrakt, fremstilt i eksempel 1 ovenfor, og 25 mg olje fra Lignum Dalbergiae Odoferea ble blandet tilstrekkelig med 400 mg polyetylenglykol 6000, og smeltet. Blandingen ble så avkjølt og sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse ble oppnådd.

Eksempel 13

75 mg Radix Salviae Miltorrhizae ekstrakt, 135 mg Radix Notoginseng ekstrakt, 82 mg Radix Astragali ekstrakt, fremstilt i eksempel 1 ovenfor, og 38 mg olje fra Lignum Dalbergiae Odoferea ble blandet tilstrekkelig med 400 mg polyetylenglykol 6000, og smeltet. Blandingen ble så avkjølt og sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse ble oppnådd.

Eksempel 14

230 mg Radix Salviae Miltorrhizae ekstrakt, 75 mg Radix Notoginseng ekstrakt, 17 mg Radix Astragali ekstrakt, fremstilt i eksempel 1 ovenfor, og 8 mg olje fra Lignum Dalbergiae Odoferea ble blandet tilstrekkelig med 400 mg polyetylenglykol 6000, og smeltet. Blandingen ble så avkjølt og sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse ble oppnådd.

Eksempel 15

17 mg Radix Salviae Miltorrhizae ekstrakt, 70 mg Radix Notoginseng ekstrakt, 230 mg Radix Astragali ekstrakt, fremstilt i eksempel 1 ovenfor, og 13 mg olje fra Lignum Dalbergiae Odoferea ble blandet tilstrekkelig med 400 mg polyetylenglykol 6000, og smeltet. Blandingen ble så avkjølt og sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse ble oppnådd.

Eksempel 16

55 mg Radix Salviae Miltorrhizae ekstrakt, 160 mg Radix Notoginseng ekstrakt, 63 mg Radix Astragali ekstrakt, fremstilt i eksempel 1 ovenfor, og 48 mg olje fra Lignum Dalbergiae Odoferea ble blandet tilstrekkelig med 400 mg polyetylenglykol 6000, og smeltet. Blandingen ble så avkjølt og sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse ble oppnådd.

Eksempel 17

75 g Radix Salviae Miltorrhizae ekstrakt, 135 g Radix Notoginseng ekstrakt, 96 g Radix Astragali ekstrakt, fremstilt i eksempel 1 ovenfor, og 25 g Borneol, 90 mg mannitol, 15 g kalsium-dinatrium-edat og 15 ml destillert vann ble blandet tilstrekkelig. Blandingen ble så tillat å bli lyofilisiert og oppdelt i 1000 alikvoter.

Eksempel 18

67 g Radix Salviae Moltorrhizae ekstrakt (CN patentsøknad CN 1352985A, eksempel 1), 180 g Radix Notoginseng ekstrakt (eksempel 1 i foreliggende oppfinnelse), 67 g Radix Astragali ekstrakt (eksempel 1 i foreliggende oppfinnelse) og 16 g Borneol ble blandet tilstrekkelig med 40 g mikrokrystallinsk cellulose. 3 % povidon-etanoloppløsning ble tilsatt for å mykne blandingen. Blandingen ble så ledet gjennom en 18# sikt for å danne korn og tørket ved 60 °C i 30 - 45 minutter. De således fremstilte kornene ble så tri med og 4 g talk ble tilsatt og blandet grundig. De dannede korn ble så fylt i kapsel.

Eksempel 19

50 g Radix Salviae Miltorrhizae ekstrakt (fremstilt ifølge vannekstraksjons- og alkoholutfellingsmetoden, Guo Ying et al, The journal ofYunnan University of Traditional Chinese Medicina, 2001, 24(4): 6), 210 g Raix Notoginseng ekstrakt (Qian Tian Xiang et al, Foreign Medical Sciences, Plant Medicine Section, 1997,12(4)), 50 g Radix Astragali ekstrakt (eksempel 1 i foreliggende oppfinnelse), o 20 g Borneol ble oppløst individuelt med en liten mengde fysiologisk saltvann. Passende mengde Tween 80 ble så tilsatt- Hver blanding ble finmalt under redusert trykk inntil den ble klar og transparent. Filtratet ble samlet opp i en beholder inneholdende fysiologisk saltvann. Beholderen ble forseglet og sterilisert med kokende vann. De tre typene klare oppløsninger ble så blandet og surheten ble justert til 5. Passende volum fysiologisk saltvann ble tilsatt. Filtreringsprosessen ble gjentatt for å gi en klar og transparent oppløsning. Den ønskede injeksjonen ble fremstilt.

Eksempel 20

60 g Radix Salviae Miltorrhizae (CN patentsøknad nr. CN 1284090A, eksempel 1), 80 g Radix Notoginseng ekstrakt (Tang Di Guang, The Journal of Chinese Traditional Patent Medicine, 1990,12(8) :5), 165 g Radix Astragali ekstrakt (eksempel 1 i foreliggende oppfinnelse) og 25 g Borneol ble blandet tilstrekkelig med 40 g mikrokrystallinsk cellulose. 3% povidon-etanol oppløsning ble tilsatt for å mykne blandingen. Blandingen ble så ledet gjennom en 18# sikt, og tørket ved 60 °C i 30 - 45 minutter for å gi korn, 4 g talk ble tilsatt og blandet grundig. De dannede kornene ble presset til tabletter.

Eksempel 21

90 g Radix Salviae Miltorrhizae (CN patentsøknad nr. CN 1284090A, eksempel 1), 150 g Radix notoginseng ekstrakt (eksempel 1 i foreliggende oppfinnelse), 82 g Radix astragali ekstrakt (eksempel 1 i foreliggende oppfinnelse) og 8 g Borneol ble blandet tilstrekkelig med 40 g mikrokrystallinsk cellulose. 3% povidon-etanol-oppløsning ble tilsatt for å mykne blandingen.

Blandingen ble ledet gjennom 18# sikt for å danne korn og tørket ved 60 °C i 30 - 45 minutter. De således dannede kornene ble trimed og så ble 4 g talk tilsatt og grundig blandet.

Eksempel 22

85 g Radix Salviae Miltrorrhizae ekstrakt (CN patentsøknad nr CN1384090A, eksempel 1, 135g Radix Notoginseng ekstrakt (eksempel 1 i foreliggende oppfinnelse), 80 g Radix Astragali ekstrakt (Teng Xing Long et al, Hei Long Jiang Medical Journal, 2002,15(5):340), og 30 g Borneol ble blandet tilstrekkelig med 700 g polyetylenglykol 6000 og smeltet. Så dryppet i lavtemperatur parafin, utvalgte piller og lavtemperatur parafin ble fjernet.

Eksempel 23

17 g Radix Salviae Miltorrhizae ekstrakt (CN patentsøknad nr CN1384090A, eksempel 1, 280 g Radix Notoginseng ekstrakt (eksempel 1 i foreliggende oppfinnelse), 17 g Radix Astragali ekstrakt (Ekstraksjon: Yu Hao et al., West China Journal of Pharmaceutical Sciences, 1993, 8(3):163); Raffinering: Teng Xing Long et al, Hei Long Jiang Medical Journal, 2002,15(5):340), og 16 g Borneol ble blandet tilstrekkelig med 700 g polyetylenglykol 6000 og smeltet. Så dryppet i lavtemperatur parafin, utvalgte piller og lavtemperatur parafin ble fjernet.

Eksempel 24

67 g Radix Salviae Miltorrhizae ekstrakt (CN patentsøknad nr CN1384090A, eksempel 1), 180 g Radix Notoginseng ekstrakt (eksempel 1 i foreliggende oppfinnelse), 67 g Radix Astragali ekstrakt (eksempel 1 i foreliggende oppfinnelse) og 16 g Lignum Dalbergiae Odoferae ble blandet tilstrekkelig med 40 g mikrokrystallinsk cellulose. 3% povidon-etanol oppløsning ble tilsatt for å mykne blandingen. Blandingen ble ledet gjennom en 18# sikt for å danne korn, og tørket ved 60 °C i 30 - 45 minutter. Etter trimed ble 4 g kalk tilsatt og blandet grundig. De dannede kornene ble fylt i kapsler.

Eksempel 25

60 g Radix Salviae Miltorrhizae ekstrakt (CN patentsøknad nr CN1384090A, eksempel 1), 80 g Radix Notoginseng ekstrakt (Tang Di Guang, The Journal of Chinese Traditional Patent Medicine, 1990,12(8):5), 165 g Radix Astragali ekstrakt (eksempel 1 i foreliggende oppfinnelse) og 25 g Lignum Dalberiae Odoferae ble blandet tilstrekkelig med 40 g mikrokrystallinsk cellulose. 3% povidon-etanol oppløsning ble tilsatt for å mykne blandingen. Blandingen ble ledet gjennom en 18# sikt for å danne korn, og tørket ved 60 °C i 30 - 45 minutter. Etter trimed ble 4 g kalk tilsatt og blandet grundig. De dannede kornene ble fylt i kapsler.

Eksempel 26

90 g Radix Salviae Miltorrhizae ekstrakt (CN patentsøknad nr CN1384090A, eksempel 1), 150 g Radix Notoginseng ekstrakt (eksempel 1 i foreliggende oppfinnelse), 82 g Radix Astragali ekstrakt (eksempel 1 i foreliggende oppfinnelse) og 25 g Lignum Dalbergiae Odoferae ble blandet tilstrekkelig med 40 g mikrokrystallinsk cellulose. 3% povidon-etanol oppløsning ble tilsatt for å mykne blandingen. Blandingen ble ledet gjennom en 18# sikt for å danne korn, og tørket ved 60 °C i 30 - 45 minutter. Etter trimed ble 4 g kalk tilsatt og blandet grundig. De dannede kornene ble trimed og pakket.

Eksempel 27

85 g Radix Salviae Miltorrhizae ekstrakt (CN patentsøknad nr CN1384090A, eksempel 1), 135 g Radix Notoginseng ekstrakt (eksempel 1 i foreliggende oppfinnelse), 80 g Radix Astragali ekstrakt (Teng Wing Long et al, Hei Long Jiang Medical Journal, 2002,15(5):340)) og 30 g olje av Lignum Dalberiae Odoferae ble blandet tilstrekkelig med 700 g polyetylenglykol 6000, og smeltet. Så dryppet opp i lavtemperatur flytende parafin, piller tatt ut og flytende parafin fjernet.

Eksempel 28

17 g Radix Salviae Miltorrhizae ekstrakt (CN patentsøknad nr CN1384090A, eksempel 1), 280 g Radix Notoginseng ekstrakt (eksempel 1 i foreliggende oppfinnelse), 17 g Radix Astragali ekstrakt (Eksempel 1 i foreliggende oppfinnelse, ekstraksjon: Yu Hao et al., West China Journal of Pharmaceutical Sciences, 1993, 8(3):163; raffinement: Teng Wing Long et al, Hei Long Jiang Medical Journal, 2002,15(5):340)) og 16 g olje av Lignum Dalberiae Odoferae ble blandet tilstrekkelig med 700 g polyetylenglykol 6000, og smeltet. Så dryppet opp i lavtemperatur flytende parafin, piller tatt ut og flytende parafin fjernet.

Eksperiment 1 - effekter av foreliggende farmasøytiske sammensetninger på lokalisert cerebral iskemi hos rotter.

1. Materialer

a. Dyr: hankjønns Sprague-Dawley (SD) rotter, vekt 180 - 200 g, kvalitetskontroll sertifikatnummer SCXK (Beijing) 2002-0003, utstedt av Beijing Weitong Lihua Experimental Animal Techonolgy Co, Limited.

b. Testede medikamenter og kjemiske midler:

Testede medikamenter: en sammensetning fremstilt i foreliggende eksempel 1 og 2; ekstraktet av Radix Salviae Miltorrhizae i foreliggende eksempel 1;

ekstraktet av Radix notoginseng i foreliggende eksempel 1; ekstraktet av Radix Astragali i foreliggende eksempel 1; olje av Lignum Dalbergiae Odoferae og Borneol. XUESAITONG (handelsnavn) ble anskaffet på markedet, fremstilt av Qunming Pharmaceutical Co., limited, Lot nummer 20020922.03.

Kjemisk middel: 2, 3, 5-trifenyltetrazoliumklorid (TTC), lyst gulaktig pulver, produkt fra Bejing Mashi Fine Chemical Co., Limited, lotnummer 011102. c. Eksperimentelle instrumenter: XXT stereoskopisk mikroskop, produkt fra Yunnan Optical Instrument Factory, Modell AEG-220 Electronic Analytical Scale, produkt fra Japan Shimadzu Corporation; 307-6 Destop Dental Instrument Cart, produkt fra Shanghai Dental Medical Instrument Factory; HZQ-C Air Bath Ventilator, produkt fra Harbin Medical Instrument Factory.

2. Metoder og resultater

a. Gruppe og administrasjonen av produktene for undersøkelse: Dyrene ble tilfeldig grupper per vekt. Dyrene i alle gruppene ble administrert testproduktene via sublingual vene 30 minutter etter operasjon. De testede produktene til undersøkelse ble også gitt via intraperitoneal injeksjon ved 2 timer og 23 timer etter operasjon. Alle produktene ble fortynnet med fysiologisk saltvann til ønsket konsentrasjon. Mengden injisert var 0,4 ml per 100 g kroppsvekt.

b. Modellen av middel cerebralarterie embolisme: rotter ble bedøvd ved at de ble gitt 10 % kloralhydratoppløsning (350mg/kg) via intraperitoneal og ble fiksert på høyre laterale posisjon. Et 1,5 cm langt kurvesnitt ble gjort fra midtpunkt mellom ytre hjørne av øyet og venstre eksterne ørekanal. Temporalismuskelen ble skåret av og ut, det temporale benet ble eksponert og under stereoskopisk mikroskop ble det åpnet et 2,5 mm diameter benvindu ved posisjonen som er sammenføyningen mellom det zygomatiske benet og det squamosale temporale benet og er kun 1 mm fra munnenden av sammenføyningen. Rester ble fjernet og den midtre cerebrale arterien (som er lokalisert mellom lukteorganet og den inferiore cerebrale venen) ble eksponert; en liten bit plastfilm ble plassert for å beskytte området omkring blodkaret. En liten bit kvantitativt filterpapir gjennombløtt med 10 |il 50% jernklorid(lll) over dette segmentet av den midtre cerebrale arterien: 30 minutter senere ble papiret tatt bort og det topicale vevet ble vasket med fysiologisk saltvann, snittet ble sydd i lag. Rottene ble returnert til burene for å komme seg under normale levevilkår. Romtemperaturen var kontrollert ved 24 °C.

c. Skårkriterier for nevrologiske symptomer

Behaviorelle undersøkelser ble utført 24 timer etter operasjonen. Skårkriteriene var som følger: (1) observert fleksbetingelser i foriemmene etter løfting av rottene etter deres haler: det vil bli registrert som 0 poeng dersom begge foriemmene ble strukket forover symmetrisk; 1 poeng dersom det er skulderfleksjon, albufleksjon, og/eller skulderintorsjon på foriemmene på motsatt side for operasjonen. (2) Med rottene plassert på den flate overflaten, skyver begge skuldrene mot den motsatte siden og sjekket motstand. Det vil bli registrert som 0 poeng dersom motstanden er lik og sterk på begge sider; 1 poeng dersom motstanden på den motsatte siden av operasjonen avtok. (3) Plassert med begge foriemmene til rotten på en metallrist og observasjon av muskeltensjon. Det vil bli registrert som 0 poeng dersom muskeltensjonen på begge sider var lik og sterk; 1 poeng dersom muskeltensjonen på motsatt side av operasjonen avtok. (4) det vil bli registrert som 1 poeng dersom rotten kontinuerlig roterer mot motsatt side for operasjonen etter at den ble løftet i halen.

Basert på skårkriteriene ovenfor, var full skår 4 poeng. Desto høyere skårene er, desto alvorligere er den behaviorelle lyten.

d. Bestemmelse av grad av cerebral infarkt

Rottene ble dekapitert etter at de behaviorelle vurderingene var fullført. Hjernene ble samlet. Luktesenteret, cerebellum og den nedre hjernestammen ble kastet, resten av hjernen ble sagittalt skåret i 5 skiver. Neddykking av de fem skivene av hjerne opp i TTC-fargeoppløsning (hver 5 ml fargeoppløsning inneholdende 4% TTC 1,5 ml, 1 M K2HP040,1 ml, så tilsatt destillert vann til merket), inkubert ved 37 °C i mørket i 30 minutter, hjerneskivene flyttet til 10% formaldehydoppløsning og lagret i 24 timer i mørket. Ved farging, ble ikke-iskemiske områder rosa-røde, mens iskemiske områder bar hvite. Hvitt vev fra hjerneskivene ble skåret forsiktig ut og veid. Vektprosenten av infarktvev i hele hjernen og i den skadede siden av hjernen ble ansett som graden av hjerneinfarkt.

e. Resultater:

Resultatene i tabell 1 og 2 viser at alle testede medikamenter har signifikante effekter på anticerebral iskemi. Av alle medikamentene oppnådde sammensetningen i foreliggende eksempel 1 (Radix Salviae Mitiorrhiza ekstrakt, Radix Notoginseng ekstrakt, Radix Astragali ekstrakt og Borneol) og sammensetningen ifølge foreliggende eksempel 2 (Radix salviae miltiorrhizae ekstrakt, Radix notoginseng ekstrakt, Radix astragali ekstrakt og olje av Lignum Dalberigiae Odoferae) de signifikante terapeutiske effektene. Kun administrering av salvinolsyrer eller radix notoginseng saponiner har tilsvarende effeter som administrasjon av XUESAITONG (handelsnavn, positivt kontrollmedikament); de terapeutiske effektene av administrasjon av kombinasjonen av salvinolsyre pluss radix notoginseng saponiner pluss borneol er bedre enn den ved administrasjon av salvinolsyrer pluss radix notoginseng saponiner eller kun salvinolsyre eller kun radix notoginseng saponiner eller XUESAITONG (handelsnavn), men den er dårligere enn den til den farmasøytiske sammensetningen ifølge foreliggende eksempel 1 og den farmasøytiske sammensetningen ifølge foreliggende eksempel 2.

Ved anvendelse av eksperimentell hjerteinfarkt i rotter og ekstrakorporal perfusjonsmetode, sammenligner foreliggende oppfinnelse effektene av anti-myokardial iskemi av den farmasøytiske sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse, salvinolsyrer pluss radix notoginseng saponiner pluss broneol eller olje av Lignum Dalbergiae Odoferae, salvinolsyrer pluss radix notoginseng saponiner, salvinolsyrer og radix notoginseng saponiner. Resultatene viser at den farmasøytiske sammensetningen ifølge foreliggende oppfinnelse har signifikante anti-myokardiea iskemi-effekter. Dets terapeutiske effekter er bedre enn anvendelse av kun salvinolsyrer eller radix notoginseng saponiner, sterkere enn den ved adminstrasjon av salvinolsyrer pluss radix notoginseng saponiner, og bedre enn den til salvinolsyrer pluss radix notoginseng saponiner pluss borneol eller olje av Lignum Dalbergiae Odoferae. Resultatene indikerer at de farmasøytiske sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse, dvs. Radix Salviae Miltiorrhizzae pluss Radix Notoginseng ekstrakt pluss Radix Astragali ekstrakt og Broneol, eller Radix Salviae Miltiorrhizzae pluss Radix Notoginseng ekstrakt pluss Radix Astragali ekstrakt og olje av Lignum Dalbergiae odoriferae, har de fire sterke synergistiske virkninger.

Eksperiment 2 Studier på de anti-myokardiale iskemi-effektene av foreliggende sammensetninger 1. Gruppe og administrasjonen av undersøkte produkter: 70 hannkjønns Wistar rotter, vekt 250,8 ± 24,6 gram, ble tilfeldig delt i syv medikamentgrupper per deres vekt: fysiologisk saltvann som kontroll, ZUESAITONG, salvinolsyrer, de farmasøytiske sammensetningen ifølge foreliggende eksempel 1 og de farmasøytiske sammensetningene ifølge foreliggende eksempel 2. Alle testede medikamenter ble fortynnet med fysiologisk saltvann til de ønskede konsentrasjoner; de testede medikamentene ble administrert ve 4 ml/kg via halevene-injeksjon.

2. Metode

a. Modell for eksperimentell myokardial infarkt hos rotter: Rotter ble bedøvd med pentobarbital natrium (45 mg/kg) vie intraperioneal injeksjon, fiksert i supin posisjon og en trakea-tube ble satt inn, et 2 cem langt lengdesnitt ble gjort langs venstre side av sternum. Etter åpning av thorax-hulen, kutting av tredje og fjerde ribbe i bruskdelen nær sternum, opprettholdelse av respirasjon med et apparat for kunstig respirasjon (ventilasjonsvolum 2 ml/100g, 50 ganger /minutt). Åpning av den pericardiale membran og hjertet eksponert, strengen satt på under den venstre nedadløpende coronare arterien av hjertet for ligering, måling av standard II linje elektrokardiogram. Stabilisert i 10 minutter, så ble den venstre nedadløpende koronare hjertearterinen ligert og thorax-hulen ble lukket. Utskilte stoffer i larynx ble sugd ut med sprøyte og rottene ble returnert til egenrespirasjon. 15 minutter etter ligering av koronararterien, ble testmedikamentene gitt via vene. Hjertet ble tatt ut 4 timer etter ligering av koronararterien, og seksjonen av hjertet under ligeringsstrengen ble skåret ut

og skåret i fem skiver, hjerteskivene ble farget med nitroblue tetrazolium (NBY). Arealprosenten av myokardialt infarkt over arealet til ventrikkelen så vel som hele hjertet ble beregnet, og analysert ved statistisk metode (t-test).

b. Isolert Perfusert (Langendorff) hjerteeksperiment: Det refereres til

"Experimental Methodology of Pharmacology (editert av Shuyun Xu etc, People Health Press, tredje utgave, januar 2002).

3. Resultater a. Effektene av arealet av myokardialt infarkt i rotter, se tabell 3. b. Effekt på strømningsvolum i koronararterie og hjerteråte på isolerte marsvinhjerter, se tabell 4.

Resultatene fra tabell 3 og tabell 4 viser at alle testede medikamenter har signifikante effekter på myokardial iskemi. Av alle medikamentene, har sammensetningen ifølge eksempel 1 i foreliggende oppfinnelse (Radix Salviae Miltiorrhizae ekstrakt, Radix Notoginseng ekstrakt, Radix Astragali ekstrakt og borneol) og den farmasøytiske sammensetningen ifølge eksempen 2 ifølge foreliggende oppfinnelse ((Radix Salviae Miltiorrhizae ekstrakt, Radix Notoginseng ekstrakt, Radix Astragali ekstrakt og olje av Lignum Dalbergiae Odoferae) vist å ha de beste terapeutiske effektene. Kun administrasjon av salvinolsyrer eller radix notoginseng saponiner har samme effekt som administrasjon av QUESAITONG (positiv kontroll-medikament); de terapeutiske effektene av administrasjon av kombinasjonen av salvinolsyrer pluss radix notoginseng saponiner eller salvinolinsyre alene eller radix notoginseng alene eller XUSAITONG alene, men den er dårligere enn den til den farmasøytiske sammensetningen ifølge foreliggende eksempel 1 og den farmasøytiske sammensetningen ifølge foreliggende eksempel 2.

Claims

1. En farmasøytisk sammensetning for behandling av kardiovaskulær eller cerebrovaskulær sykdom, bestående av

5,0% - 70,0% Radix Salviae Miltiorrhizea ekstrakt;

10.0% - 85,5% Radix Notoginseng ekstrakt;

5,0% - 70,0% Radix Astragali ekstrakt;

2. Den farmasøytiske sammensetningen ifølge krav 1, bestående av

15,0% - 50,0% Radix Salviae Miltiorrhizea ekstrakt;

25.0% - 65,0% Radix Notoginseng ekstrakt;

15,0% - 50,0% Radix Astragali ekstrakt;

3. Den farmasøytiske sammensetningen ifølge krav 2, bestående av

20,0% - 30,0% Radix Salviae Miltiorrhizea ekstrakt;

30.0% - 55,0% Radix Notoginseng ekstrakt;

20,0% - 30,0% Radix Astragali ekstrakt;

4. Den farmasøytiske sammensetningen ifølge krav 3, bestående av

23% Radix Salviae Miltiorrhizea ekstrakt;

45,0% Radix Notoginseng ekstrakt;

23,0% Radix Astragali ekstrakt;

9% Borneol eller olje av Lignum Dalbergiae Odoriferae, og en farmasøytisk akseptabel adjuvant.

5. Den farmasøytiske sammensetningen ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 4, hvor nevnte Radix Salviae Miltiorrhizea ekstrakt omfatter 45% - 70% salvianolinsyre B, 2% -10% salvianolinsyre E, 4% - 20% rosmarinsyre, 1% -10% litosperminsyre, og mer enn 70% salvinolinsyrer; hvor nevnte Radix Notoginseng ekstrakt omfatter 2% -10% notogensenosid R1,

2% - 6% ginsenosid Rd, og mer enn 70% radix notogenseng saponiner; nevnte Radix Astragali ekstrakt omfatter 5% -15% astragalosid I og mer enn 70% Radix Astragali saposiner.

6. Den farmasøytiske sammensetningen ifølge krav 5, hvor nevnte Radix Salviae Miltiorrhizea ekstrakt omfatter mer enn 80% salvinolinsyrer; nevnte Radix Notoginseng ekstrakt omfatter mer enn 80% radix notogenseng saponiner; og nevnte Radix Astragali ekstrakt omfatter mer enn 80% Radix Astragali saposiner.

7. Den farmasøytiske sammensetningen ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 6, hvor den er injeksjoner, tabletter, tabletter med vedvarende frigiving, drop-piller, korn, injeksjonspulver, kapsler eller mikrogranuli.

8. Den farmasøytiske sammensetningen ifølge krav 7, hvor den er injeksjon eller injeksjonspulver.

9. Anvendelsen av et Radix Salviae Miltiorrhizea ekstrakt, et Radix Notoginseng ekstrakt, et Radix Astragali ekstrakt, og Borneol eller olje av Lignum Dalbergiae Odoriferae for fremstilling av et medikament for behandling av kardiovaskulære eller cerebrovaskulære sykdommer, hvor medikamantet består av:

5,0% - 70,0% Radix Salviae Miltiorrhizea ekstrakt;

10.0% - 85,5% Radix Notoginseng ekstrakt;

5,0% - 70,0% Radix Astragali ekstrakt;