KR20140080289A - 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 황기와 단삼의 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따른 조성물은 실제 임상에서 발생하는 급성 및 장기간의 과도한 스트레스로 인한 뇌조직의 손상 및 뇌기능 장애와 유사한 동물모델에서 예방 또는 치료에 매우 유효한 효과가 있어, 이에 대한 치료제로서 유용하게 활용될 수 있다.
Description
본 발명은 황기와 단삼의 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 치료용 조성물, 이의 제조방법 및 상기 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애 개선 또는 예방용 식품조성물에 관한 것이다.
최근 현대사회가 급격한 산업화와 고령화에 직면하면서 다양한 질병의 증가와 더불어 특히 뇌 관련 질환이 주요 이슈로 자리하고 있다. 이러한 뇌 관련 질환의 대표적인 원인으로 과도한 스트레스를 들 수 있다. 현대사회의 급격한 산업화 및 발전에 따라 과도한 스트레스는 피할 수 없는 것으로, 이는 불면증, 우울증, 집중력 장애, 기억력감퇴, 산화적 손상 및 노화와 같은 뇌 기능장애의 진행을 유발하고 이에 따라 점진적으로 알츠하이머, 파킨슨병 및 헌팅턴 병과 기능성 뇌조직의 장애에 대한 유병율이 증가하고 있으며, 또한 이로 인한 사회적 비용의 지출 역시 꾸준하게 상승하고 있다.
일반적으로 과도한 스트레스로 인한 뇌조직의 손상은 일차적으로 신체적 반응을 하여 무기력감을 호소하게 할 뿐만 아니라, 뇌의 여러 부분 중 특히 해마를 구성하고 있는 세포를 사멸시켜 대뇌로 이동하는 신경전달 경로를 차단하여 여러 뇌기능 장애 (행동 장애 및 기억력 감퇴) 등을 유발시키고, 또한 스트레스 반응으로 인한 HPA축(시상하부-뇌하수체-부신축)의 과도한 활성화를 통하여 스트레스성 호르몬의 분비를 촉진시킨다. 이러한 스트레스성 호르몬의 분비는 2차적으로 활성산소(reactive oxygen species, ROS)의 과도한 발생과 이를 제거하는 방어기전인 항산화 시스템(glutathione system, superoxide dismutase, catalase)의 결핍을 초래하며, 뇌조직의 복합적인 기능장애로 인한 신체적인 활동의 제약까지 초래하게 된다.
과도한 스트레스로 유도된 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 다양한 패턴과 병의 진행과정에 있어 임상적으로 환자의 경과에 가장 중요한 단계는 해마의 손상을 억제하고, 혹은 이미 시작된 경우라면 간경병의 진행을 억제하는 것이다. 따라서 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 치료를 연구하는 대부분의 수많은 연구자들은 이와 같은 질환의 예방이나 치료제 개발에 노력을 기울여 왔다. 그럼에도 불구하고 아직 특별한 치료법이나 치료 약물이 없는 실정이다.
이와 같은 문제들을 해결하고자 동서양에서 여러 약물(Acetyl-L-Carnitine - HCl 및 MAO, PNMT 및 COMP inhibitor)들을 발전시키고 이에 대한 과학적인 근거를 확보하고자 하는 노력 덕분에 스트레스 호르몬의 대사와 염증과 관련한 일정 부분 개선에는 효능을 보였지만, 약물의 안정성 및 정확한 작용기전에 대한 근본적인 해결책을 제시하지 못한 상태로 남아 있다.
본 발명자는 뇌조직의 산화적 손상으로 인한 뇌조직의 손상 및 뇌기능 장애와 관련한 동물모델을 이용하여 다양한 조합의 한약재 조성물을 연구하고 실험한 결과, 황기와 단삼의 추출물이 뇌조직의 손상 및 뇌기능 장애의 예방과 치료에 효과가 있음을 발견하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
상기의 목적을 해결하기 위해서, 본 발명은 황기 및 단삼의 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.
또한 상기의 다른 목적을 해결하기 위하여, 본 발명은 황기 및 단삼의 혼합물을 10~70 % 에탄올로 추출하는 단계를 포함하는 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법을 제공한다.
또한 상기 또 다른 목적을 해결하기 위하여, 본 발명은 황기 및 단삼의 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 개선용 식품 조성물 및 상기 식품조성물의 제조방법을 제공한다.
이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.
본 발명은 황기와 단삼의 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
황기(Astragali Radix)는 콩과(Leguminosae)에 속하는 생약제로 완화, 강장, 지한, 이뇨약 등으로서 허약, 수종에 사용되며 혈관확장 및 혈압강하작용이 있는 것으로 알려진 식물이다. 단삼(Salviae Radix)은 순형과(Ladiatae)에 속하는 생약제로, 주성분으로 탄시논(Tanshinone)등을 함유하며 한방에서는 강장, 통경 및 부인병 약으로서 월경불순, 자궁출혈, 복통 등에 사용하는 약제로 알려져 있다.
종래에 황기와 단삼을 이용한 뇌의 산화적 손상 및 뇌기능 장애에 관한 응용연구는 전무한 실정이었으나, 본 발명에서 황기와 단삼의 추출물이 뇌조직의 산화적 손상과 뇌기능 장애의 발생과 진행을 억제하고 치료하는데 우수한 효능이 있는 것으로 확인되었다.
본 발명의 황기 및 단삼의 추출물은 스트레스로 인한 뇌의 산화적 손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 치료에 효과적이다. 본 발명의 일 실시예에 있어서, 급성 및 만성 스트레스로 인한 뇌손상을 받은 실험군에 본 발명에 따른 조성물을 투여하였을때, 혈액 및 뇌조직에서 항산화시스템의 개선, 관련 호르몬의 장애 및 기억장애에 대해서 상당한 개선 효과를 보였다.
본 발명의 황기 및 단삼의 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 치료용 조성물에 있어서, 상기 유효성분은 아스트라갈로시드Ⅳ, 포모노네틴, 로즈마리산, 살비아놀릭 액시드 B일 수 있다.
또한 상기 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애는 치매, 알츠하이머 증후군, 파킨슨 증후군, 헌팅턴 증후군에서 선택되는 어느 하나일 수 있다.
본 발명의 조성물에 포함되는 황기와 단삼의 추출물은 추출 전에 황기와 단삼을 혼합하여 추출함으로써 제조할 수 있다.
추출물을 추출하기 전 혼합되는 황기와 단삼의 중량비와 관련하여, 바람직하게는 황기 : 단삼을 9 : 1 내지 1 : 9 로 하여 혼합할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 1 : 1 의 중량비로 혼합할 수 있다. 상기 혼합비율의 범위를 벗어나는 경우에, 황기와 단삼의 각 추출물을 단독으로 사용한 경우와 비교할 때 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애에 대한 치료 또는 예방의 효과면에서 큰 차이가 없으며, 상기의 혼합비율일때 그 효과가 가장 좋다.
본 발명의 추출물은 추출용매로 추출하거나, 추출용매로 추출하여 제조한 추출물에 분획용매를 가하여 분획하여 제조할 수 있다. 상기 추출용매는 물 및 유기 용매로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다. 상기 유기용매는 메탄올, 에탄올 등의 탄소수 1 내지 5의 알코올, 에틸아세테이트 또는 아세톤 등의 극성용매와 헥산 또는 디클로로메탄의 비극성용매 또는 이들의 혼합용매일 수 있으며, 상기 분획용매는 물, 부탄올, 에틸아세테이트, 클로로포름, 헥산 또는 이들의 혼합물일 수 있다.
본 발명의 조성물에서 황기 및 단삼의 추출물의 추출용매로 10~70% 에탄올로 추출하는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 30% 에탄올로 추출하는 것이 효과적이다. 추출용매인 10~70% 에탄올로 추출함에 따라 본 발명에 따른 조성물에 포함되는 추출물의 유효성분 파괴를 제어하고, 고수율의 유효성분을 수득할 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서 30% 에탄올로 추출한 추출물과 증류수로 추출한 추출물을 포함한 조성물의 항산화 능력을 비교한 결과 30% 에탄올로 추출한 추출물의 항산화능력이 더욱 높음을 확인할 수 있었다.
상기 추출물은 추출 또는 분획과정을 수행한 이후, 감압 여과 과정을 수행하거나 추가로 농축 및/또는 동결건조를 수행하여 농축하거나 용매를 제거할 수 있다. 상기 수득한 추출물은 사용 시까지 급속 냉동 냉장고(deep freezer)에 보관할 수 있다.
본 발명의 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 치료용 조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 황기 및 단삼 추출물을 0.001 내지 99.99중량%, 바람직하게는 0.1 내지 99 중량%로 포함할 수 있다. 상기 조성물은 황기 및 단삼 추출물 외에 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 중진제, 펙트산 및 그의 염,
알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 추가로 함유할 수 있으며, 상기 조성물에 상기 성분들이 독립적으로 또는 조합하여 추가될 수 있다.
상기 황기 및 단삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 그 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은 목적하는 방법에 따라 비경구 투여(예를 들어 정맥 내 , 피하, 복강 내 또는 국소에 적용)하거나 경구투여할 수 있다. 바람직한 투여량은 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 본원발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 바람직하게는 본 발명의 치료용 조성물은 황기 및 단삼 추출물의 양을 기준으로 1일 0.0001 내지 1000mg/kg으로, 보다 효과적이기 위해서는 0.01 내지 100mg/kg으로 투여하는 것이 바람직하다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량과 투여횟수는 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명은 황기 및 단삼 혼합물을 10~70% 에탄올로 추출하는 단계;
상기 추출물을 동결 건조하는 단계;
를 포함하는 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법을 제공한다.
상기 제조방법에서 황기 및 단삼 혼합물은 황기 : 단삼을 1 : 9 내지 9 : 1 의 비율로 혼합하는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 1 : 1의 혼합비율일 때 더욱 효과적이다. 또한 상기 황기 및 혼합물을 에탄올로 추출하는 단계에서, 바람직하게는 30% 에탄올로 추출할 수 있다. 상기 혼합비율의 범위를 벗어나는 경우에, 황기와 단삼의 각 추출물을 단독으로 사용한 경우와 비교할 때 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애에 대한 치료 또는 예방의 효과 면에서 큰 차이가 없으며, 상기의 혼합비율일때 그 효과가 가장 좋다.
본 발명에 따른 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법은 10~70% 에탄올로 추출하는 단계를 포함함에 따라 본 발명의 조성물에 포함되는 황기 및 단삼의 추출물의 유효성분의 파괴를 제어하고, 고수율의 유효성분을 수득할 수 있다.
본 발명은 황기 및 단삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다. 또한 본 발명은 황기 및 단삼 혼합물을 10 내지 70% 에탄올로 추출하는 단계; 상기 추출물을 동결 건조하는 단계; 를 포함하는 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 개선용 식품 조성물의 제조방법을 제공한다.
본 명세서에서 식품이란 함은 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 건강기능식품, 음료, 식품 첨가제 및 음료 첨가제를 모두 포함하는 의도이다.
본 발명에 따른 식품 조성물에서 황기 및 단삼의 추출물의 함량은 전체 식품 조성물 중 0.0001 내지 10 중량 % 함유할 수 있으며, 그 식품 제형으로는 통상적으로 사용되는 성분들을 이용하여 드링크제, 캬라멜, 초콜릿, 다이어트바 제형 또는 과쟈류인 식품으로 제형화될 수 있다.
상기 식품 조성물에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.
본 발명의 황기와 단삼의 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 실제 임상에서 발생하는 급성 및 장기간의 과도한 스트레스로 인한 뇌조직의 손상 및 뇌기능 장애와 유사한 동물모델에서 예방 또는 치료에 매우 유효한 효과가 있어, 이에 대한 치료제로서 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 증류수 및 에탄올을 사용하여 각각 추출한 추출물을 포함한 발명 조성물의 2가지의 조성내용물과 지표물질을 이용한 약물지문을 나타낸 것이다.
도 2는 증류수 및 에탄올 추출물에 대한 각각의 항산화 효능을 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 조성물이 급성 스트레스로 유발된 랫드의 혈청 내의 산화적 손상에 대한 효능을 나타내는 그래프이다..
도 4는 급성 스트레스로 유도된 뇌 조직 (대뇌·해마)에서의 지질 과산화에 대한 본 발명의 조성물의 효능을 나타낸 그래프이다.
도 5는 급성 스트레스로 유도된 랫드의 뇌 조직 (대뇌·해마)에서의 염증관련 인자들에 대한 효능 및 약물 기전을 확인한 사진이다.
도 6은 급성 스트레스로 유도된 랫드의 기억장애에 대한 개선 효능을 나타낸 그래프이다.
도 7은 본 발명 조성물의 급성 스트레스로 유도된 랫드의 기억장애에 대한 약리 작용 및 뇌조직의 산화적 손상에 대한 효능을 나타낸 그래프이다.
도면 8은 본 발명 조성물이 만성 구속 스트레스로 유도된 랫드의 산화적 뇌손상에 대한 개선 효능 및 스트레스성 호르몬 과분비에 대한 개선 효과를 나타낸 그래프이다.
도 9는 본 발명 조성물이 만성 스트레스로 유도된 랫드의 산화적 뇌손상에 대한 혈액학적인 변화 관찰 및 항산화 개선 효능을 보여주는 표이다.
도 10은 본 발명 조성물이 만성 구속 스트레스로 유도된 랫드의 산화적 뇌손상에 대한 스트레스 호르몬 대사 효소 및 염증성 요소들에 대한 유전자 발현의 변화 분석을 나타낸 그래프이다.
도 11은 본 발명 조성물이 인지 장애에 대한 개선 효과를 나타내는 그래프이다.
도 12는 본 발명 조성물이 만성 콜드 스트레스로 유도된 랫드의 스트레스 호르몬 분비의 개선 효과를 나타내는 그래프이다.
도 13은 본 발명 조성물이 만성 콜드 스트레스로 유도된 랫드의 뇌조직의 산화적 손상에 대한 개선 효과를 나타낸 그래프이다.
도 14는 본 발명 조성물이 만성 스트레스로 유도된 랫드의 뇌조직의 염증반응 및 호르몬 대사에 관련 효소들에 대한 개선 효과를 나타내는 그래프이다.
도 15는 발명 조성물이 만성 스트레스로 유도된 뇌조직의 병변에 대한 조직학적인 개선을 보여주는 사진이다.
도 2는 증류수 및 에탄올 추출물에 대한 각각의 항산화 효능을 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 조성물이 급성 스트레스로 유발된 랫드의 혈청 내의 산화적 손상에 대한 효능을 나타내는 그래프이다..
도 4는 급성 스트레스로 유도된 뇌 조직 (대뇌·해마)에서의 지질 과산화에 대한 본 발명의 조성물의 효능을 나타낸 그래프이다.
도 5는 급성 스트레스로 유도된 랫드의 뇌 조직 (대뇌·해마)에서의 염증관련 인자들에 대한 효능 및 약물 기전을 확인한 사진이다.
도 6은 급성 스트레스로 유도된 랫드의 기억장애에 대한 개선 효능을 나타낸 그래프이다.
도 7은 본 발명 조성물의 급성 스트레스로 유도된 랫드의 기억장애에 대한 약리 작용 및 뇌조직의 산화적 손상에 대한 효능을 나타낸 그래프이다.
도면 8은 본 발명 조성물이 만성 구속 스트레스로 유도된 랫드의 산화적 뇌손상에 대한 개선 효능 및 스트레스성 호르몬 과분비에 대한 개선 효과를 나타낸 그래프이다.
도 9는 본 발명 조성물이 만성 스트레스로 유도된 랫드의 산화적 뇌손상에 대한 혈액학적인 변화 관찰 및 항산화 개선 효능을 보여주는 표이다.
도 10은 본 발명 조성물이 만성 구속 스트레스로 유도된 랫드의 산화적 뇌손상에 대한 스트레스 호르몬 대사 효소 및 염증성 요소들에 대한 유전자 발현의 변화 분석을 나타낸 그래프이다.
도 11은 본 발명 조성물이 인지 장애에 대한 개선 효과를 나타내는 그래프이다.
도 12는 본 발명 조성물이 만성 콜드 스트레스로 유도된 랫드의 스트레스 호르몬 분비의 개선 효과를 나타내는 그래프이다.
도 13은 본 발명 조성물이 만성 콜드 스트레스로 유도된 랫드의 뇌조직의 산화적 손상에 대한 개선 효과를 나타낸 그래프이다.
도 14는 본 발명 조성물이 만성 스트레스로 유도된 랫드의 뇌조직의 염증반응 및 호르몬 대사에 관련 효소들에 대한 개선 효과를 나타내는 그래프이다.
도 15는 발명 조성물이 만성 스트레스로 유도된 뇌조직의 병변에 대한 조직학적인 개선을 보여주는 사진이다.
이하, 본 발명을 실시예를 통하여 상세히 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것으로, 본 발명의 권리범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않으며, 본 발명의 사상과 범위 내에서 여러가지 변형 또는 수정 할 수 있음은 당업자에게 명백한 것이다.
[
실시예
1]
황기와
단삼의
추출물을 함유한 조성물 제조 및 추출용매에 따른 항산화능력 평가
1-1. 증류수 및 에탄올을 추출용매로 이용한 조성물 제조
황기(Astragali Radix)와 단삼(Salvia Miltiorrhizae Radix)을 각각 1 중량부의 비율로 섞어 구성된 것을 증류수를 이용한 열탕 추출 및 30% 에탄올로 추출하여, 여과와 원심분리를 거친 후에 동결 건조하였다. 최종적으로 전탕 전의 건조 조성물의 무게 대비 약 20.5 % 와 18.0 %의 건조 엑스를 각각 회수했다. 회수된 건조엑스의 성분에 대한 품질관리 및 각각의 추출물에 대한 성분 분석의 차이를 확인하기 위하여 본 발명의 조성물을 구성하는 2종의 한약물과 지표성분 (황기: astragaloside IV, formonoetin; 단삼: rosmarinic acid, Salvianolic acid B)을 이용하여 HPLC를 이용하여 약물지문을 만들었다(도 1).
1-2. 추출용매에 따른 항산화능력 효능 평가
1-1에서 제조된 각 조성물에 대하여 각각 본 발명물의 구성물 중 유효성분이라 판단되는 화합물 (황기- 아스트라갈로시드Ⅳ(Astragaloside IV), 포모노네틴(Formononetin); 단삼- 로즈마리산(Rosmarinic acid), 살비아놀릭 액시드 B(Salvianolic acid B))의 함량의 분석을 하기 표 1에 나타내었다.
|
황기(%함량) | 단삼(%함량) | 황기 및 단삼(%함량) | |||
물추출 | 30% 에탄올 추출 | 물추출 | 30% 에탄올 추출 | 물추출 | 30% 에탄올 추출 | |
아스트라갈로시드Ⅳ | 0.081±0.000 | 0.0161±0.004 | 미검출 | 미검출 | 0.024±0.004 | 0.087±0.004 |
포모노네틴 | 0.007±0.001 | 0.077±0.000 | 미검출 | 미검출 | 0.002±0.001 | 0.021±0.001 |
로즈마리산 | 미검출 | 미검출 | 0.246±0.001 | 0.253±0.001 | 0.136±0.002 | 0.103±0.002 |
살비아놀릭 액시드 B | 미검출 | 미검출 | 8.08±0.136 | 8.689±0.187 | 0.631±0.012 | 3.621±0.038 |
1-1에서 제조된 각 조성물 즉, 증류수 및 30% 에탄올로 추출한 조성물간의 항산화 능력과 관련하여, 총항산화능(total antioxidant capacity), 과산화수소제거능 및 총페놀 함량을 통하여 평가해본 결과 30% 에탄올로 추출한 본 발명 조성물의 항산화 능력이 물로 추출한 조성물보다 더 우수함을 확인할 수 있었다(도 2).
[
실시예
2] 뇌조직의
산화적
손상에 대한 예방 및 치료 효능 평가
2-1. 스트레스로 유도된 뇌 조직의
산화적
손상에 대한 효능 검정
5주령의 숫컷 랫드(SD rat, 180-200g) 60 마리를 6그룹(그룹당 10마리)으로 나누어 정상군을 제외한 나머지 다섯 그룹에는 스트레스 유도전 3일간 하루에 한번씩 각각의 그룹에 증류수, 세농도의 발명 조성물(50, 100, 200 mg/kg) 및 비타민 C (100mg/kg)를 각각 경구투여하였다. (이하, 각 실험결과를 나타내는 도면에서 각 그룹을 각각 정상군-Nommal, 증류수-Control, 세농도의 발명조성물-Myp 50, Myp100, Myp200, 비타민C-VitC100 으로 표시하였다. 또한 본 발명조성물을 Myelophil이라 표기할 수 있다.) 이후, 12시간 동안 수염 및 눈썹을 제거하여 극심한 정신적인 스트레스를 가한 다음, 부검시 뇌조직 및 혈액을 분리하여 약물의 효능을 혈청에서 스트레스 관련 호르몬, 뇌조직의 산화적 손상 및 염증정도 및 뇌조직에서 염증성 관련요인과 관련하여 평가하였다. 그 결과는 도 3 내지 도 5에 나타내었다.
혈청에서 스트레스 호르몬을 평가 하였을 시, 스트레스와 관련된 호르몬의 수치가 실험군에서 유의적으로 감소되었으며, 산화적 손상을 평가하는 실험에서는 발명 조성물을 먹인 실험군들이 매우 유의성 있게 개선되었으며(도 3), 뇌 조직의 산화적 손상 및 염증정도를 알아보는 실험에서도 발명조성물의 효과가 입증되었다 (도 4). 또한 약물의 작용기전을 알아보는 실험에서도 뇌조직에서 염증성 관련 요인을 각각 해마와 대뇌에서 측정하였을시 실험군에서 상당히 개선 시키는 효능을 보였다(도 5)
2-2. 뇌손상을 유발하는 약물에 대한 뇌조직의
산화적
손상과 뇌기능 장애에 대한 효능 검정
10주령의 숫컷 C57 마우스(C57/BL6, 24-27g) 48 마리를 6그룹(그룹당 8마리)으로 나누어 정상군을 제외한 5 그룹에는 1주간 증류수와 본 발명조성물(50, 100, 200 mg/kg, P.O) 및 타크린 (10 mg/kg, P.O)를 기억력 감퇴 및 산화적 기전을 가진 뇌손상을 유발하는 화학약물인 스코폴라민 (1mg/kg, I.P)투여 7일전에 하루 1회씩 투여 후 첫 행동관찰 및 뇌조직의 산화적 손상과 뇌기능 장애에 대한 뇌 조직에 대한 약물의 효능을 평가하였다. 그 결과는 도 6 및 도 7에 나타냈다.
행동 관찰 및 기억력 감퇴에 관한 실험에서 본 발명 조성물을 투여한 실험군에서 상당한 개선을 보였으며(도 6), 혈액 및 뇌조직에서의 산화적 손상 및 또한 뇌에서 중요한 기능을 담당하는 기억력 감퇴와 관련한 효소의 활성을 본 발명 조성물을 투여한 실험군에서 상당히 개선시켰다(도 7).
[
실시예
3] 만성 스트레스로 유도된 뇌조직의
산화적
손상에 대한 예방 및 치료 효능평가
3-1. 만성 스트레스 (구속 스트레스)로 인한
산화적
뇌조직의 손상 및 뇌기능의 장애에 대한 본 발명 조성물의 효능 검정
8주령의 수컷 C57마우스(C57/BL6, 22-26g) 60 마리를 6그룹(그룹당 10마리)으로 나누어 정상군을 제외한 모든 그룹은 증류수와 본 발명조성물(25, 50, 100 mg/kg, P.O) 및 비타민 C (100 mg/kg, P.O)를 3주간 하루 1회씩 투여하였고, 뇌손상을 유발하는 정신적 스트레스인 구속-스트레스를 3주간 하루 1회 3시간씩 유도 후, 뇌 조직과 혈청에서 정신적 스트레스로 유도된 산화적 뇌조직의 손상뿐만 아니라 뇌 기능의 장애에 대한 본 발명 따른 조성물의 효능을 평가하였다.
스트레스성 호르몬 과분비 및 산화적 뇌손상에 관한 실험에서 실험에서 본 발명 조성물을 투여한 실험군에서 상당한 개선을 보였으며 (도 8), 혈액 및 뇌조직에서의 항산화 시스템의 개선 효능 뿐만 아니라(도 9) 유전자 발현 및 단백질 수준에서의 산화적 손상 및 염증에 관한 요소들의 개선 및 스트레스성 호르몬의 대사 장애에도 개선시키는 효능을 보였다. 또한, 본 발명 조성물을 투여한 실험군은 인지 기억 장애에 대한 부분에서 상당한 개선 효과를 보였다(도 10 및 도 11)
3-2.만성 스트레스(콜드 스트레스)로 인한
산화적
뇌손상에 대한 효능 검정
5주령의 수컷 엘비뇨 마우스(Balb/C, 18-20g) 60 마리를 6그룹(그룹당 8마리)으로 나누어 정상군을 제외한 모든 그룹은 증류수와 본 발명조성물(25, 50, 100 mg/kg, P.O) 및 비타민 C (50 mg/kg, P.O)를 2주간 하루 1회씩 투여하였고, 콜드 스트레스를 2주간 하루 1회 4시간씩 유도 후, 뇌 조직과 혈청에서 정신적 스트레스로 유도된 산화적 뇌손상에 대한 효능을 단백질 및 유전자 수준에서 확인하였다.
스트레스성 호르몬 과분비 및 산화적 뇌손상에 관한 실험에서 본 발명 조성물을 투여한 실험군에서 상당한 개선을 보였으며(도 12 및 13), 혈액 및 뇌조직에서 유전자 발현 및 단백질 수준에서의 산화적 손상 및 염증에 관한 요소들의 개선을 보였다(도 14). 특히 해마 부분에서 관찰된 세포의 사멸을 본 발명조성물을 투여한 실험군에서 상당히 개선시킨 것을 확인할 수 있었다(도 15)
하기에 본 발명의 조성물을 위한 제제예를 예시한다.
[
제조예
1]
황기
및
단삼의
추출물을 이용한 제제
제조예
1-1.
산제의
제조
황기 및 단삼 추출물 분말 20 mg
유당 100 mg
탈크 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
제조예
1-2. 정제의 제조
황기 및 단삼 추출물 분말 10 mg
옥수수전분 100 mg
유당 100 mg
스테아린산 마그네슘 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
제조예
1-3. 캡슐제의 제조
황기 및 단삼의 추출물 10mg
결정성 셀룰로오스 3 mg
락토오스 14.8 mg
마그네슘 스테아레이트 0.2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
제조예
1-4. 주사액제의 제조
황기 및 단삼의 추출물 10㎍/㎖
묽은 염산 BP pH3.5로 될때까지
주사용 염화나트륨 BP 최대 1㎖
통상의 주사액제의 제조에 따라 상기의 성분을 혼합하고, 용액을 투명유리로 된 5㎖ 타입Ⅰ앰플 중에 충전시키고, 유리를 용해시킴으로써 공기의 상부 격자하에 봉입시키고, 120℃에서 15 분이상 오토클레이브시켜 멸균하여 주사액제를 제조하였다.
[
제제예
2] 드링크제의 제조
황기 및 단삼의 추출물 100mg
포도당 10mg
구연산 0.6g 및 액상 올리고당 25g을 혼합한 후 정제수 300ml를 가하여 각 병에 200ml 씩 되게 충전하였다. 병에 충진한 후 130℃ 에서 4 내지 5초간 살균하여 음료를 제조하였다.
Claims (11)
- 황기와 단삼의 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 치료용 조성물.
- 제 1항에 있어서, 상기 유효 성분은 아스트라갈로시드Ⅳ, 포모노네틴, 로즈마리산, 살비아놀릭 액시드B 인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 황기와 단삼의 추출물은 10~70% 에탄올로 추출한 것임을 특징으로 하는 조성물.
- 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 황기와 단삼의 중량비가 9:1 내지 1:9 인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애는 치매, 알츠하이머 증후군, 파킨슨 증후군, 헌팅턴 증후군으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 조성물.
- 황기 및 단삼 혼합물을 10 내지 70% 에탄올로 추출하는 단계;
상기 추출물을 동결 건조하는 단계;
를 포함하는 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 치료용 조성물의 제조방법. - 제 6항에 있어서, 상기 황기 및 단삼 혼합물에서 황기와 단삼은 중량비가 9:1 내지 1:9 인 것을 특징으로 하는 조성물의 제조방법.
- 황기 및 단삼의 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
- 제 8항에 있어서, 상기 유효 성분은 아스트라갈로시드 Ⅳ, 포모노네틴, 로즈마리산, 살비아놀릭 액시드B 인 것을 특징으로 하는 식품 조성물.
- 제 8항 또는 9항에 있어서, 황기 및 단삼의 추출물은 10~70% 에탄올로 추출한 것임을 특징으로 하는 식품 조성물.
- 황기 및 단삼 혼합물을 10 내지 70% 에탄올로 추출하는 단계;
상기 추출물을 동결 건조하는 단계;
를 포함하는 산화적 뇌손상 및 뇌기능 장애의 예방 또는 개선용 식품 조성물의 제조방법.
Priority Applications (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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