KR101182199B1

KR101182199B1 - 단삼 추출물 또는 크립토탄시논을 유효성분으로 함유하는 뇌졸중의 예방 또는 치료용 조성물

Info

Publication number: KR101182199B1
Application number: KR1020100049639A
Authority: KR
Inventors: 박용기
Original assignee: 동국대학교 경주캠퍼스 산학협력단
Priority date: 2010-05-27
Filing date: 2010-05-27
Publication date: 2012-09-12
Also published as: KR20110130144A

Abstract

본 발명은 뇌졸중의 예방 또는 치료용 조성물 및 건강식품에 관한 것으로, 보다 구체적으로 본 발명의 단삼 추출물 또는 크립토탄시논은 뇌졸중의 발병 원인이 되는 뇌경색과 활성질소종, 활성산소종, 젖산 탈수소효소 등의 신경손상 유발물질의 생성 및 미토콘드리아 막전위의 변화를 근본적으로 차단시킴으로써 세포손상으로부터 뇌신경세포를 보호하여 뇌졸중을 예방 또는 치료에 효과를 나타냄으로, 본 발명의 단삼 추출물 또는 크립토탄시논(Cryptotanshinone)은 뇌졸중의 예방 또는 치료용 조성물 및 건강식품에 활용하는 것이다.

Description

단삼 추출물 또는 크립토탄시논을 유효성분으로 함유하는 뇌졸중의 예방 또는 치료용 조성물 {Composition containing Salvia miltiorrhiza extract or Cryptotanshinone for prevention or treatment of stroke}

본 발명에서는 뇌졸중의 예방 또는 치료용 조성물 및 건강식품을 제공하고자 한다.

뇌졸중 (stroke 또는 cerebrovascular accident)은 흔히 중풍이라고 하며, 뇌에 혈액을 공급하고 있는 혈관이 막히거나 터져서 손상 받은 부위의 뇌세포가 죽게 되어 그에 따른 의식소실, 언어장애, 반신마비 등 신체장애가 나타나는 신경학적 증상이다.

뇌졸중은 크게 뇌혈관이 막히는 허혈성뇌졸중 (뇌경색)과 뇌혈관이 터지는 출혈성뇌졸중 (뇌출혈)으로 구분된다.

허혈성 뇌졸중의 경우에서는 혈관의 동맥경화증으로 인한 뇌동맥의 혈전이나 색전과 심장질환 등에 의한 심인성 색전이 주된 원인이며, 뇌출혈의 경우는 고혈압에 의한 원발성 뇌출혈과 동정맥 기형이나 동맥류에 의한 지주막하 출혈이 중요한 원인이다.

뇌혈관이 막혀서 발생하게 되는 뇌경색증은 다시 뇌혈전증과 뇌색전증으로 구분되는데, 뇌혈전증은 고혈압, 당뇨병, 고지혈증 등에 의하여 동맥경화증이 초래되어 동맥의 벽이 두꺼워지거나 딱딱해지게 되고, 이로 인해 혈관이 좁아지고 혈관의 안벽이 상처받기 쉬워 매끄럽지 못해서 피가 엉겨 붙으면서 결국 막히게 되어 혈액의 공급이 현저히 줄거나 중단되어 뇌세포로 가는 산소 및 영양공급이 부족하여 뇌기능의 장애가 초래되며, 뇌색전증은 심장판막증 또는 심방세동등의 질환에 의하여 심장 내의 피의 흐름에 이상이 생겨 혈액의 일부가 심장 내에 부분적으로 정체해 있게 되고 따라서 응고되어 피찌꺼기가 생기게 되며, 이것이 떨어져 나가 뇌혈관을 막게 되어 뇌경색이 발생하게 된다.

뇌출혈의 경우에는 고혈압으로 인해 뇌혈관 내의 압력도 높아지기 때문에 작은 혈관의 벽이 견디지 못하고 터지는 원발성 뇌출혈, 혈관벽의 일부가 약해서 그 약한 부분의 벽이 늘어나 꽈리모양으로 불거져 나온 상태인 뇌동맥류가 어떤 계기에 터져서 발생하는 지주막하 출혈, 뇌동정맥 기형이 선천적으로 존재해 동맥의 높은 압력이 정맥으로 직접 전달되어 발생하는 뇌출혈로 나누며, 이 외에 혈액응고의 장애로 출혈 소인을 가진 경우에도 발생하게 된다.

뇌졸중은 암에 이어 국내 사망원인 2위의 질환으로, 2002년 세계 의약품 시장 동향에서 뇌졸중의 치료에 사용되는 항응고제, 혈전용해제, 항혈소판제 등의 혈액 관련 의약품의 시장 규모는 전 세계 의약품 시장 규모의 18% 정도인 872억 달러로 추정된다. 뇌졸중 환자의 수도 2005년 44만2699명이 발생해 2001년 대비 43.9% 증가하였고, 고령화 인구의 증가와 함께 인구 10만명 당 뇌졸중 환자수도 2001년 640명에서 2005년에는 908명으로 늘어났으며 진료비는 5625억원이 들어 2001년 대비 42.8%가 증가하였다.

그러나 뇌졸중은 병의 원인이 아직 확실치 않아 수술요법, 약물요법, 세포요법, 면역요법 등이 시도되고 있으나, 만성적이고 퇴행적이어서 치료가 쉽지 않다. 현재 치료방법으로서는 항혈전제, 항응고제, 항혈소판제제, 혈전용해제를 이용한 약물요법이 사용되고 있으나, 현재 유일하게 허가된 약물인 항혈전제(tPA)는 출혈성 뇌졸중의 경우 병을 더욱 악화시키게 되며, 알러지 등의 부작용을 유발하게 된다. 즉, 뇌졸중은 진단도 쉽지 않고 조기 발견이 어려우며 아직까지도 근본적인 치료법이 없는 상태이다.

한편, 한약재는 오래전부터 전통적으로 인간의 질병을 치료하고 신체를 보호하는데 사용해 왔으며 현재 여러 질병의 예방 및 치료제로 사용되고 있다. 특히 한약재는 천연약물로써 효과가 복합적이고 장기사용에도 부작용이 적으며 다양한 생리활성으로 뇌 질환과 같은 다발성의 복합원인 질환에 더욱 효과적이어서 현재 양방학적 관점에서 개발되고 있는 많은 합성약품들의 화학적인 부작용으로 인해 전 세계적으로 관심이 증폭되고 있다.

본 발명은 부작용이 적고 뇌졸중 치료에 효과가 뛰어난 크립토탄시논 또는 단삼추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌졸중 예방 또는 치료용 조성물 및 건강식품을 제공하고자 한다.

본 발명은 크립토탄시논 (Cryptotanshinone)을 유효성분으로 포함하는 뇌졸중 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.

상기 크립토탄시논은 단삼에서 유래하여 얻어질 수 있다.

상기 크립토탄시논은 하기 공정단계에 의해 얻어지는 것이 바람직하다.

(가) 단삼을 물로 추출한 후 농축하여 물추출물 농축액을 얻는 단계;

(나) 상기 물 추출물을 메탄올로 추출한 후 농축하여 메탄올 추출물 농축액을 얻는 단계;

(다) 상기 메탄올 추출농축액을 헥산-디클로로메탄으로 분획하는 단계; 및

(라) 상기 분획물을 크로마토그래피를 이용하여 크립토탄시논을 정제하는 단계.

상기 (라)단계에서 크로마토그래피는 메탄올을 이동상으로 할 수 있다.

또한, 상기 조성물은 탄시논(Tanshinone) I, 탄시논 II, 탄시논 IIA, 살비아닉에시스 A (salvianic acid A), 황기, 및 아스트라갈로시드(Astragalosie)로 이루어진 군에서 선택된 것을 더 포함할 수 있다.

본 발명은 크립토탄시논을 유효성분으로 포함하는 뇌졸중 예방 또는 개선용 건강식품을 제공한다.

또한, 본 발명은 단삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌졸중 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.

상기 단삼 추출물은 단삼을 물, 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출하여 얻은 것을 특징으로 한다.

상기 단삼 추출물에 황기 추출물 또는 아스트라갈로시드 (Astragalosie)를 더 포함할 수 있다.

상기 황기 추출물 대 단삼 추출물이 중량을 기준으로 20 ~ 1 :4 (황기: 단삼)인 것이 바람직하다.

본 발명은 단삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌졸중 예방 또는 개선용 건강식품을 제공한다.

이상 설명한 바와 같이, 본 발명의 단삼 추출물 또는 크립토탄시논을 사용할 경우, 뇌졸중의 발병 원인이 되는 신경세포사멸 유발 물질들의 생성 및 분비를 분자생물학적 수준에서 근본적으로 차단시킴으로써 뇌졸중을 예방 및 치료할 수 있다. 따라서 본 발명의 단삼 추출물 또는 크립토탄시논을 약학 조성물 및 건강식품 등 다양한 분야에 활용하여 뇌졸중의 예방 또는 치료제로 유용하게 사용될 수 있다.

도 1은 뇌졸중이 유발된 흰쥐의 뇌경색에 있어 생리식염수만으로 된 대조군, 황기, 단삼 혼합추출물, 황기추출물, 단삼 추출농축액의 억제효과를 나타내는 TTC 염색사진으로서, 왼쪽은 실제 뇌경색 반구의 TTC 염색사진, 오른쪽은 각 그룹 당 10 마리의 동물에서의 뇌경색 변화를 나타낸 그래프이다.
도 2는 신경세포의 산화적 손상 유발물질인 SNP를 처리하여 세포사멸이 유도되었을 때 크립토탄시논의 세포생존에 대한 효과를 MTT 비색정량법을 이용하여 측정한 그래프이다.
도 3은 크립토탄시논의 뇌 신경보호효능을 구체적으로 확인하기 위해서 N2A 신경세포에 SNP를 처리하여 세포사멸을 유도한 후 그리스시약 반응법을 이용하여 신경세포로부터 생성되는 일산화질소 (NO^-)의 생성 양을 측정한 그래프이다.
도 4는 크립토탄시논의 뇌 신경보호효능을 구체적으로 확인하기 위해서 N2A 신경세포에 SNP를 처리하여 세포사멸을 유도한 후 LDH 방출 측정키트를 이용하여 신경세포로부터 방출되는 젖산 탈수소(LDH)의 생성 양을 측정한 그래프이다.
도 5는 크립토탄시논의 뇌 신경보호효능을 구체적으로 확인하기 위해서 N2A 신경세포에 SNP를 처리하여 세포사멸을 유도한 후 ROS 생성을 H₂-디클로로플루오레신 디아세테이트 (H₂-Dichloro fluorescin Diacetate, DCFH-DA)를 이용하여 측정한 그래프이다.
도 6은 크립토탄시논의 뇌 신경보호효능을 구체적으로 확인하기 위해서 N2A 신경세포에 SNP를 처리하여 세포사멸을 유도한 후 미토콘드리아 막전위의 변화를 형광염색법을 이용하여 측정한 그림과 그래프이다. A 그림은 형광염색에 대한 그림, B 그림은 형광염색에 따른 형광감도(JC-1 monomer)의 변화 그래프이다.
도 7은 단삼 추출물의 크로마토그램과 분리한 화합물인 크립토탄시논이다.

본 발명은 크립토탄시논을 유효성분으로 포함하는 뇌졸중 예방 또는 치료용 조성물 및 건강식품을 제공한다.

다른 한편으로, 본 발명은 단삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌졸중 예방 또는 치료용 조성물 및 건강식품을 제공한다.

이하, 본 발명을 상세히 설명하겠다.

천연물질로써 효과가 복합적이고 장기사용에도 부작용이 적으며 다양한 생리활성으로 뇌졸중과 같은 다발성의 복합원인 질환에 효과적인 물질을 개발하기 위해 예의 연구 노력한 결과, 본 발명의 단삼 추출물 또는 크립토탄시논을 포함한 조성물을 사용하게 되면 신경손상과 관련된 여러 가지 인자들의 생성이 조절되고 신경세포 죽음의 경로를 차단할 수 있게 되어 뇌졸중을 예방 및 치료할 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.

상기 크립토탄시논 (cryptotanshinone)은 탄시논류의 일종으로서 그 구조식은 하기와 같다.

<구조식 1>

본 발명의 크립토탄시논 (cryptotanshinone)은 그 수득 경로에는 무관하며 이의 제조방법 또한 특별히 한정된 것은 아니어서, 상업적으로 입수하거나 인위적인 합성방법 또는 식물로부터 추출하는 방법으로도 얻을 수 있다. 합성하여 제조하는 방법은 실험실 규모 정도의 소량 합성이 가능하나 합성효율이 떨어지므로 식물로부터 추출하는 방법이 유리한데, 바람직하게는 다년생 초본식물 단삼 (Salvia militiorrhira Bge.)에서 추출하여 분리함으로써 크립토탄시논을 얻을 수 있다.

본 발명의 바람직한 일례로, 단삼으로부터 하기 공정단계에 의해 크립토탄시논을 분리하는 것을 특징으로 한다.

상기 (가)단계에서 단삼은 물, 알코올 또는 이들의 혼합용매를 사용하여 추출할 수 있으며, 바람직하게는 물을 이용하여 추출할 수 있다.

상기 물 추출하는 일례로, 단삼 중량의 1 내지 10배, 바람직하게는 2 내지 6배의 물을 첨가하여 추출할 수 있으며, 일주일간 1 내지 10회, 바람직하게는 2 내지 5회 추출한 후 여과하고 , 그 여과액을 감압 농축할 수 있다. 이때 본 발명의 추출온도는 특별히 한정되는 것은 아니나, 상온에서 이루어지는 것이 바람직하다.

상기 (나)단계에서 상기 물추출 농축액에 메탄올에 넣고 메탄올 추출물 농축액을 얻을 수 있는데, 본 발명의 메탄올 농축액을 얻는 일례로, 5 내지 25시간, 바람직하게는 10 내지 20시간 동안 추출한 다음 원심분리하여 상층액을 여과하고, 그 여과액을 감압 농축하여 수득할 수 있다. 이때 본 발명의 추출온도는 특별히 한정되는 것은 아니나, 상온에서 이루어지는 것이 바람직하다.

상기 (다) 단계는 메탄올 추출농축액을 헥산-디클로로메탄으로 분획할 수 있다. 본 발명의 바람직한 일례로, 상기 메탄올 추출물 농축액 시료를디클로로메탄으로 용해하고 농축 건조하여 실리카 겔이 충진된 컬럼에서 헥산-디클로로메탄으로 용출시킴으로 분획할 수 있다. 이때 헥산과 디클로로메탄의 비율은 특별히 한정되는 것은 아니나, 부피비를 기준으로 1 내지 30;1 (헥산; 디클로로메탄, v/v)일 수 있으며, 바람직하게는 5 내지 20;1일 수 있다.

상기 (라) 단계는 상기 분획물을 이동상은 특별히 한정된 것은 아니나, 메탄올을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 30 내지 70% 메탄올을 사용하여 크로마토그래피를 실시함으로 크립토탄시논을 분리할 수 있다.

본 발명의 조성물은 또한, 탄시논 (Tanshinone) I, 탄시논 II, 탄시논 IIA, 살비아닉에시스 A (salvianic acid A), 황기, 및 아스트라갈로시드 (Astragalosie)로 이루어진 군에서 선택된 것을 더 포함할 수 있다.

본 발명의 크립토탄시논은 뇌졸중의 발병 원인이 되는 뇌경색과 활성질소종, 활성산소종, 젖산 탈수소효소 등의 신경손상 유발물질의 생성 및 미토콘드리아 막전위의 변화를 근본적으로 차단시킴으로써 세포손상으로부터 뇌신경세포를 보호함으로 뇌졸중의 예방 또는 치료에 효과적이므로, 본 발명의 조성물을 뇌졸중 예방 또는 치료용 약학 조성물이나 건강식품으로 활용할 수 있다.

본 발명은 단삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌졸중 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.

크립토탄시논은 단삼에도 포함되어 있으므로, 크립토탄시논 대신 단삼 추출물을 사용할 수 있다.

본 발명의 단삼은 (丹蔘)(생약명: Salviae Miltiorrhizae, 학명: Salvia miltiorrhiza Bunge)은 꿀풀과의 다년생 초본으로서 뿌리를 약용으로 사용하며 활혈(活血), 거어(祛瘀)시켜서 여성의 생리통, 산후의 구토와 복통, 심흉부의 동통을 제거하며, 관절염, 심장질환, 동맥경화 등의 질환 및 중국 및 동남아 지역에서 항암치료를 위한 생약 처방에 널리 사용되고 있으며 (북경중의학원: 실용중의학. P.344,1986), 최근에는 중국, 일본, 미국에서 단삼의 성분 및 약리적 효능이 광범위하게 연구되고 있다. 단삼의 주요 성분으로는 탄시논 (Tanshinone), 크립토탄시논 (Cryptotanshinone), 다이하이드로 탄시논 (Dihydrotanshinone), 페루기놀 (Ferruginol), 비타민 A와 E (Vitamin A & E) 등이 있다 (Che AJ, Zhang JY, Li CH, Chen XF, Hu ZD, Chen XG. Separation and determination of active components in Radix Salviae miltiorrhizae and its medicinal preparations by nonaqueous capillary electrophoresis. J Sep Sci. 2004 May;27(7-8):569-75).

본 발명의 단삼 추출물을 얻는 방법은 특별히 한정된 것은 아니나, 물, 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출하는 것이 바람직하다.

본 발명의 일례로, 건조된 단삼 중량의 1 내지 10배, 바람직하게는 2 내지 4배의 물에 단삼의 성분들이 용해될 수 있도록 하고, 여과를 통해 완전히 용해되지 않은 고형물들을 분리한 다음, 감압농축을 통해 수분을 제거하여 분말형태로 제조한 단삼 물 추출물을 얻을 수 있으며, 이러한 단삼 추출물에는 크립토탄시논을 포함한 다양한 생리활성 물질들이 포함되어 있다. 이때 본 발명의 추출온도는 특별히 한정되는 것은 아니나, 상온에서 이루어지는 것이 바람직하다.

본 발명의 일례로, 상기 물 추출 분말을 1 내지 10배, 바람직하게는 2 내지 4배 부피의 에탄올에 현탁하고 일주일 간 1 내지 10회 상온 추출하고 감압 농축을 통해 에탄올을 제거하여 분말형태로 제조한 단삼 추출물을 얻을 수 있다.

본 발명의 단삼 추출물은 통상의 분획방법으로 추가의 분획공정을 수행할 수 있다. (Harborne J.B.Phytochemical methods: A guide to modern techniques of plant analysis. 3rd Ed. pp 6-7, 1998).

본 발명의 바람직한 일례로, 상기 단삼을 물을 용매로 물 추출물을 수득한 후, 이를 다시 메탄올로 추출한 다음, 이러한 메탄올 추출물을 헥산-디클로로메탄으로 분획함으로 분획물을 얻을 수 있다.

본 발명의 단삼 추출물은 뇌졸중으로 인해 나타나는 뇌경색의 크기를 유의하게 억제하며, 뇌졸중의 발병에 관련이 있는 산화적 손상으로 인한 뇌신경세포에서의 산화물질의 생성을 유의하게 억제하여 뇌신경세포를 보호함으로 뇌졸중의 예방 또는 치료에 효과적이므로, 본 발명의 조성물을 뇌졸중 예방 또는 치료용 약학 조성물이나 건강식품으로 활용할 수 있다.

추가적으로 본 발명인 뇌졸중의 예방 및 치료용 조성물에는, 단삼 추출물에 황기추출물 또는 아스트라갈로시드(Astragalosie)를 더 포함할 수 있다.

이때, 황기 추출물 대 단삼 추출물의 혼합비율은 특별히 한정된 것은 아니나, 바람직하게는 중량을 기준으로 20~1:4 (황기:단삼)일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 10~1:4 (황기: 단삼)일 수 있다.

이때, 본 발명의 황기를 추출하는 방법은 상기 단삼을 추출하는 방법과 동일하게 수행될 수 있다.

상기와 같이 황기와 단삼 추출물을 함께 사용한 경우가 황기, 단삼의 각각의 추출물을 사용한 경우보다 뇌졸중 동물에서 뇌경색 발생을 현저하게 감소시킨 것을 확인할 수 있다.

본 발명은 상기 크립토탄시논을 유효성분으로 포함하는 뇌졸중 예방 또는 치료용 조성물, 바람직하게는 약학 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 단삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 뇌졸중 예방 또는 치료용 조성물, 바람직하게는 약학 조성물을 제공한다.

본 발명의 유효성분은, 조성물 총 중량에 대하여 0.1 내지 90 중량%로 포함한다.

본 발명의 크립토탄시논 또는 단삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 본 발명의 약학조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며 (예: 문헌 [Remington's Pharmaceutical Science, 최신판; Mack Publishing Company, Easton PA), 예를 들면 과립제, 세립제, 산제, 경질캡슐제, 연질캡슐제, 시럽제, 유제, 현탁제 또는 액제 등의 경구 투여용 약학 조성물로서 투여해도 되고, 정맥내 투여, 근육내 투여, 또는 피하 투여용 주사제, 점액제, 좌제, 경피흡수제, 경점막 흡수제, 점비제, 점이제, 점안제, 흡입제, 크림제, 연고제, 파프제 등의 비경구 투여용 의약조성물로서 투여하는 것도 가능하다. 분말형태의 약학조성물로서 조제된 제제를 사용시에 용해하여 주사제 또는 점액제로서 사용해도 된다. 특히, 본 발명의 약학조성물은 페이스트 연고, 크림, 밀크, 파프제, 분제, 침투 패드, 용액, 겔, 분무제, 로션 또는 현탁액 형태의 제형인 것이 바람직할 수 있다.

약학 조성물의 제조에는 고체 또는 액체의 제제용 첨가물을 사용할 수 있다. 제제용 첨가물은 유기 또는 무기 중 어느 것이어도 된다. 즉, 경구용 고형제제를 제조하는 경우는, 주약에 부형제, 추가로 필요에 따라 결합제, 붕괴제, 활택제, 착색제 등을 첨가한 후, 통상적인 방법에 의해 정제, 피복정제, 과립제, 산제, 캡슐제 등 형태의 제제를 조제할 수 있다. 사용되는 부형제로서는 예를 들면 유당, 자당, 백당, 포도당, 옥수수 전분 (corn starch), 전분, 탈크, 소르비트, 결정 셀룰로오스, 덱스트린, 카올린, 탄산칼슘, 이산화규소 등을 들 수 있다. 결합제로서는 예를 들면 폴리비닐알코올, 폴리비닐에테르, 에틸셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 아라비아고무, 트래거캔스 (tragacanth), 젤라틴, 셀락 (shellac), 히드록시프로필셀룰로오스, 히드록시프로필메틸셀룰로오스, 구연산칼슘, 덱스트린, 펙틴 (pectin) 등을 들 수 있다. 활택제로서는 예를 들면 스테아린산마그네슘, 탈크, 폴리에틸렌글리콜, 실리카, 경화식물유 등을 들 수 있다. 착색제로서는 통상 의약품에 첨가하는 것이 허가되어 있는 것이라면 모두 사용할 수 있다. 이들의 정제, 과립제에는 당의 (糖衣), 젤라틴코팅, 기타 필요에 따라 적절히 코팅할 수 있다. 또한, 필요에 따라 방부제, 항산화제 등을 첨가할 수 있다.

경구 투여를 위한 액체제제, 예를 들면 유제, 시럽제, 현탁제, 액제의 제조에는 일반적으로 사용되는 불활성인 희석제, 예를 들면 물 또는 식물유를 사용할 수 있다. 이 제제에는 불활성인 희석제 이외에 보조제, 예를 들면 습윤제, 현탁 보조제, 감미제, 방향제, 착색제 또는 보존제를 배합할 수 있다. 액체제제를 조제한 후, 젤라틴과 같은 흡수될 수 있는 물질의 캡슐 속에 충전해도 된다. 비경구 투여용 제제, 예를 들면 주사제 또는 좌제 등의 제조에 사용되는 용제 또는 현탁제로서는, 예를들면 물, 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 벤질알코올, 올레산에틸, 레시틴을 들 수 있다. 좌제의 제조에 사용되는 기제로서는, 예를 들면 카카오버터, 유화 카카오버터, 라우린버터, 위텝졸을 들 수 있다. 제제의 조제방법은 특별히 한정되지 않고, 당업계에서 범용되고 있는 방법은 모두 이용 가능하다.

주사제의 형태로 하는 경우에는, 담체로서 예를 들면 물, 에틸알코올, 마크로골 (macrogol), 프로필렌글리콜, 구연산, 초산, 인산, 젖산, 젖산나트륨, 황산 및 수산화나트륨 등의 희석제; 구연산나트륨, 초산나트륨 및 인산나트륨 등의 pH 조정제 및 완충제; 피로아황산나트륨, 에틸렌디아민사초산, 티오글리콜산 및 티오젖산 등의 안정화제 등을 사용할 수 있다. 또한, 이 경우, 등장성 용액을 조제하기 위해 충분한 양의 식염, 포도당, 만니톨 또는 글리세린을 제제 중에 배합해도 되고, 통상의 용해 보조제, 무통화제 또는 국소 마취제 등을 사용하는 것도 가능하다.

연고제, 예를 들면 페이스트, 크림 및 겔의 형태로 하는 경우에는, 통상 사용되는 기제, 안정제, 습윤제 및 보존제 등을 필요에 따라 배합할 수 있어, 통상적인 방법에 의해 성분을 혼합하여 제제화할 수 있다. 기제로서는 예를 들면 백색 바셀린, 폴리에틸렌, 파라핀, 글리세린, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘 및 벤토나이트 등을 사용할 수 있다. 보존제로서는 파라옥시안식향산 메틸, 파라옥시안식향산 에틸, 파라옥시안식향산 프로필 등을 사용할 수 있다. 첩부제 (貼付劑)의 형태로 하는 경우에는, 통상의 지지체에 상기 연고, 크림, 겔 또는 페이스트 등을 통상적인 방법에 의해 도포할 수 있다. 지지체로서는 면, 스테이플 파이버 (staple fiber) 및 화학섬유로 되는 직포 또는 부직포 ; 연질 염화비닐, 폴리에틸렌 및 폴리우레탄 등의 필름 또는 발포체 시트를 적합하게 사용할 수 있다.

본 발명의 약학의 투여량은 특별히 한정되지 않지만, 성인 1일당 유효성분인 크립토탄시논의 통상적인 투여량은 0.1 내지 5000mg/kg, 바람직하게는 1 내지 700mg/kg일 수 있으며, 성인 1일당 유효성분인 단삼추출물의 통상적인 투여량은 0.1 내지 5000mg/kg, 바람직하게는 1 내지 700mg/kg일 수 있으며 환자의 연령, 병태, 증상에 따라 적절히 증감(增減)하는 것이 바람직하다. 상기 1일량은 1일에 1회, 또는 적당한 간격을 두고 하루에 2~3회에 나눠 투여해도 되고, 수일 (數日) 간격으로 간헐 (間歇)투여해도 된다. 그러나, 본 발명의 약제학적 조성물의 상기 투여량은 투여 경로, 환자의 연령, 성별, 체중, 환자의 중증도 등의 여러 관련 인자에 비추어 결정되는 것이므로 상기 투여량은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 아니된다.

본 발명은 크립토탄시논을 유효성분으로 포함하는 건강식품을 제공한다.

또한, 본 발명은 단삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 건강식품을 제공한다.

상기 유효성분을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강 기능성 식품류 등이 있다.

이때, 식품 또는 음료 중의 상기 유효성분의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 50 중량 %로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.01 내지 50 g, 바람직하게는 0.2 내지 5g의 비율로 가할 수 있다.

본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 크립토탄시논 또는 단삼 추출물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제 (타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등)) 및 합성 향미제 (사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제 (치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있으며, 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.01 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다

이하, 실시예, 실험예 및 제제예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예, 실험예 및 제제예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예, 실험예 및 제제예에 의해 제한되지 않는다.

< 실시예 >

실시예 1. 추출물의 제조

1-1. 단삼 추출물의 제조

건조된 국내산 단삼의 뿌리 5 ㎏을 각각 세말한 후 물 2ℓ를 가하여 상온 추출한 다음, 3겹 거어즈와 와트만 여과지 (Whatman No.1)로 여과하고 감압농축하였다. 이와 같은 추출조작을 일주일 간 실온에서 3회 반복 실시하여 단삼의 물 추출농축액 (수득율; 46.07%)을 수득하였다. 본 발명의 단삼 추출농축액은 멸균된 생리식염수 또는 인산완충액 (pH 7.4)에 녹여 하기 실시예에 사용하였다.

1-2. 황기 , 단삼 추출물의 제조

건조된 국내산 황기, 단삼의 뿌리 500g을 각각 세말한 후 물 2ℓ를 가하여 상온 추출한 다음, 3겹 거어즈와 와트만 여과지(Whatman No.1)로 여과하고 40℃에서 감압농축하였다. 이와 같은 추출조작을 일주일 간 3회 반복 실시하여 황기, 단삼의 물 추출농축액(수득율; 34.8%)을 수득하였다. 본 발명의 황기, 단삼 추출농축액은 멸균된 생리식염수 또는 인산완충액 (pH 7.4 내지 7.6)에 녹여 하기 실시예에 사용하였다.

실시예 2. 크립토탄시논의 정제

상기 물추출 농축액에 메탄올을 각각 넣고 15시간 동안 3회 상온 추출한 다음 원심분리하여 상층액을 여과하고, 그 여과액을 감압농축하였다. 상기 메탄올 추출농축액을 증류수에 현탁한 후 분액여두에 옮겨 디클로로메탄으로 분획한 후 디클로로메탄층을 농축 건조하여 얻어진 분획물을 실리카겔 (silica gel)로 충진한 유리 컬럼 (5×30 ㎝)에 걸어 헥산-디클로로메탄으로 밀도구배법 분리 (gradient elution)를 수행함으로써 크립토탄시논을 분리하였다. 즉, 실리카겔을 유리 컬럼에 25 ㎝ 높이로 충진한 다음, 시료를 둥근 플라스크에 넣고 디클로로메탄을 첨가하여 용해하고 실리카 겔 13을 첨가 후 감압농축기로 농축하여 시료를 실리카 겔에 코팅 되도록 한 후 실리카 겔이 충진 된 유리 컬럼의 상부에 올려놓고 헥산:디클로로메탄 (10:1, v/v)로 용출을 시작하여 100 ㎖씩 테스트 튜브 (test tube)에 분취하였다. 순차적으로 디클로로메탄 용매의 농도를 높여 최종 100% 디클로로메탄 용매로 용출시키면서 분리하였다. 이 분리물을 TLC로 확인하여 소분획으로 나누었으며 분리된 5개의 소분획 중 분획물 4번을 ODS겔로 충진한 유리 컬럼 (3×30 ㎝)으로 컬럼 크로마토그래피를 실시하였다. 즉, ODS겔을 유리 컬럼에 25㎝ 높이만큼 충진하고 50% 메탄올을 충분히 용출시키면서 평형화시켰다. 다음, 시료를 50% 메탄올 용액으로 현탁시킨 후 칼럼에 투입한 후 이동상 용매를 50% 메탄올로 하여 테스트 튜브에 10 ㎖씩 분취하였다. 분취된 모든 분획을 TLC로 확인하고 동일한 분획을 합쳐서 농축하여 순수화합물인 크립토탄시논을 얻었다 (도7).

실시예 3. 뇌졸중 동물모델실험

본 발명의 단삼 추출물과 황기, 단삼추출무의 뇌경색 억제효과를 확인하기 위하여 뇌졸중 동물모델을 대상으로 실험하였다.

① 국소적 뇌허혈 (transient middle cerebral artery occlusion) 동물모델 제작방법

뇌졸중 동물모델은 국소적 뇌허혈 동물모델로 흰쥐 (SD rat)를 24시간 절식시킨 후 질소와 산소가 7:3으로 혼합된 가스에 2.5% 이소플루란 (isoflurane)으로 마취 하여 온목동맥과 바깥 목동맥을 결찰하고, 속목동맥의 분지점으로부터 17 ㎜의 프루브(probe)를 삽입하여 중간대외동맥의 바닥부위를 폐쇄하여 허혈을 유발시켰다. 일정시간 동안 중간대외동맥을 폐쇄한 후 속목동맥에 삽입한 프루부를 제거하여 재관류를 수행하였다.

② 약물투여 방법

생리식염수에 녹인 단삼 추출물을 62 ㎎/㎏ 농도로 뇌허혈 유발 2시간 후에 단회 경구투여하였다. 또한 실험대조군의 경우 생리식염수만 동일조건으로 단 회 경구투여하였다.

③ 뇌경색의 측정

뇌허혈에 의해 유발되는 뇌조직 손상을 관찰하기 위해 TTC 염색을 수행하여 뇌경색의 용적을 image processing software package를 이용하여 측정하였고, 그 결과를 하기 도 1에 나타내었다.

실시예 4. 신경세포배양실험

본 발명 크립토탄시논의 뇌 신경세포사멸에 대한 억제효과를 확인하기 위하여 마우스의 뇌 신경세포 (N2A neuroblastoma cell)를 대상으로 실험하였다.

① 뇌 신경세포 배양

N2A 세포를 American Type Culture Collection (ATCC)사로부터 구입하여 10% fetal bovine serum과 1% 항생제 (penicillin/streptomycin)가 포함된 DMEM 배지에서 37℃, 5% CO₂조건으로 배양하였다.

② 추출농축액 처리 및 세포사멸 유도

배양된 N2A 세포에 5, 10, 20 μM의 크립토탄시논을 처리하여 20 시간 동안 배양한 후 500 μM의 SNP를 처리하여 20 시간 동안 배양함으로써 세포사멸을 유도하였다.

③ 세포사멸 정도 측정

SNP (Sodium Nitroprusside)는 일산화질소를 유리시킴으로써 뇌 신경세포에 산화적 손상을 유발하는 물질이며 신경세포 사멸을 유도하게 된다.

이에 본 실시예에서는 N2A 뇌 신경세포를 대상으로 하여 상기 실시예 2에서 분리한 크립토탄시논을 처리한 후 SNP를 처리하였을 때, SNP에 의해 세포사멸이 유도된 신경세포 생존율의 감소가 크립토탄시논에 의해 보호될 수 있는지 측정하였다. SNP 처리에 의한 세포사멸 정도는 MTT formazan[(3-(4,5-dimethylthia zol- 2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide] 표준비색정량법으로 측정하였다. 즉, SNP를 처리하여 20 시간 동안 배양한 N2A 세포에 MTT 염색약을 넣은 후 4시간 동안 세포배양기 내에서 반응시켰다. 반응 종료 후 세포 배양액을 제거하고 술폭시화디메틸 (DMSO) 용액을 넣어 세포를 완전히 용해시킨 후 540 nm의 흡광도에서 발색정도를 측정하였다.

④ 일산화질소의 측정

활성질소종 (reactive nitrogen species; HNO₂, NO₂, NO^-, ONOO^-)은 세포사멸이 유도된 뇌 신경세포로부터 생성되는 자유 라디칼로서 정상적으로는 감염이나 염증반응에서 이물질 제거 및 면역계를 활성화시키는데 중요한 역할을 하지만 과도한 생성은 신경세포와 조직에 강력한 독성을 나타내어 신경퇴행을 가속화시키는 것으로 알려져 있다.

이에 본 실시예에서는 N2A 뇌 신경세포를 대상으로 하여 상기 실시예 2에서 분리한 크립토탄시논을 처리하였을 때, SNP에 의해 세포사멸이 유도된 N2A 신경세포로부터 유리되는 일산화질소 (NO^-)의 생성이 억제되는지 그리스시약 (Griess reagent) 반응법으로 확인하였다.

일산화질소의 측정은 세포배양액에 그리스 시약 (0.1% N-1-naphthylethyl enediamine / 1% sulfanilamide in 5% H₃PO₄)을 동량으로 넣어 잘 섞은 후 15분간 암반응 시켰다. 반응액의 발색정도를 마이크로 플레이트 리더 (microplate reader)를 이용하여 540 nm의 파장에서 흡광도를 측정함으로써 발색 정도를 수치화 하였고, 세포 배양액 내 일산화질소의 농도 (μM)는 NaNO₂ 표준액의 정량곡선을 기준으로 계산하였다.

⑤ 젖산 탈수소효소 (Lactate dehydrogenase, LDH) 분비 측정

젖산 탈수소효소 (LDH)는 생체 내 모든 기관에서 발현되는 효소로서 해당 작용(glycolysis) 마지막 단계에서 젖산발효에 관여하는데 세포가 죽으면서 세포막이 전투과성이 되면 세포 밖으로 방출되는데 그 양을 측정함으로써 세포손상 정도를 확인할 수 있다. 즉, 세포 배양액 내 LDH의 양이 많아지면 세포가 죽었다는 것을 의미하므로 세포사멸 또는 세포독성의 유무를 판단하는 정량방법이 된다.

이에 본 실시예에서는 N2A 신경세포에 상기 실시예 2에서 분리한 크립토탄시논을 처리하였을 때, SNP에 의해 세포사멸이 유도된 N2A 신경세포로부터 방출되는 LDH의 생성이 억제되는지 LDH 정량키트(assay kit)를 이용하여 확인하였다.

⑥ 활성산소종 (Reactive oxygen species, ROS) 분비 측정

활성산소종 (ROS)는 세포 분열, 생존, 노화, 사멸 등 정상적인 생리적 기능 조절에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있지만, 자유 라디칼을 가져 안정되지 못한 상태로 인해 강한 활성을 가져 조절되지 않은 과도한 생성은 DNA, 단백질, 지질 등의 세포 구성 요소에 심각한 손상을 일으키며, 결국 뇌 신경퇴행질환을 포함한 다양한 질병의 원인이 되고 있다.

이에 본 실시예에서는 N2A 신경세포에 상기 실시예 2에서 분리한 크립토탄시논을 처리하였을 때, SNP에 의해 산화적 손상이 유도된 N2A 신경세포로부터 ROS의 생성이 억제되는지 세포 내 ROS를 형광프루브 (fluorescent probe)인 H₂-Dichlorofluorescin Diacetate (DCFH-DA)를 이용하여 측정하였다. 즉, 20 μM H₂-DCFH-DA가 포함된 Hank's balanced salt solution buffer에서 37℃에서 20분 간 반응시킨 후 형광현미경을 사용하여 측정하였다.

⑦ 미토콘드리아 막전위 (mitochondrial membrane potential) 변화의 측정

미토콘드리아 (mitochondria)는 세포사멸에 중요한 역할을 하는 세포로 미토콘드리아 막전위의 상실을 통해 미토콘드리아 외막 투과성 (Mitochondria Outer Membrane Permeabilization, MOMP)이 촉발됨으로써 미토콘드리아내의 여러 단백질들이 세포질로 빠져나와 핵의 응집 및 DNA 단편화 등으로 세포가 마침내 죽게 된다.

이에 본 실시예에서는 N2A 신경세포에 상기 실시예 2에서 분리한 크립토탄시논을 처리하였을 때, SNP에 의해 세포사멸이 유도된 N2A 신경세포로부터 미토콘드리아 막전위의 파괴가 억제되는지 측정하기 위해 형광염료를 이용하여 미토콘드리아 막전위을 염색하였다. 즉, 신경세포를 슬라이드 글라스에 부착시키고 10 ㎍/㎖ JC-1과 20분 동안 실온에서 반응한 후 형광현미경으로 형광의 변화를 관찰하였다.

< 실험예 및 결과>

실험예 1. 뇌졸중 동물의 뇌경색 발생에 대한 효과

뇌졸중이 유발된 흰쥐의 뇌경색 (brain infarction)에 대한 본 발명에 의한 단삼 추출농축액의 치료효과를 TTC 염색방법으로 조사하고 얻어진 결과를 도 1에 정리하였다.

하기 도 1에서 나타난 바와 같이, 생리식염수를 투여한 대조군에서는 뇌경색이 현저히 증가되었으며, 본 발명 단삼 추출농축액의 투여시 뇌경색의 크기가 유의적으로 감소됨을 확인할 수 있었다.

또한, 본 발명의 황기, 단삼이 혼합된 추출농축액의 뇌경색 감소 효과는 황기와 단삼 각각의 추출물 보다 더 효과적인 것으로 나타났다.

실험예 2. 뇌 신경세포사멸에 대한 효과

본 발명에 의한 크립토탄시논에 의한 뇌 신경세포보호 효능을 구체적으로 확인하고 작용기전을 밝히기 위해서 먼저, 뇌 신경세포인 N2A 세포에 SNP를 처리하여 세포사멸을 유도한 후 MTT formazan 비색정량법을 이용하여 세포생존도를 조사하고 그 결과를 도 2에 정리하였다.

하기 도 2에 나타난 바와 같이, 본 발명에 의한 크립토탄시논은 SNP로 유도된 뇌 신경세포사멸로부터 세포를 보호하여 세포생존도를 유의적이고 농도의존적으로 증가시켰다. 따라서, 뇌 신경세포에서 크립토탄시논은 세포사멸을 막아 신경세포를 보호할 수 있는 것으로 확인되었다.

실험예 3. 일산화질소 생성에 대한 효과

본 발명에 의한 크립토탄시논에 의한 뇌 신경세포보호 효능을 구체적으로 확인하고 작용기전을 밝히기 위해서 뇌 신경세포인 N2A 세포에 SNP를 처리하여 세포사멸을 유도한 후 그리스시약 반응법을 이용하여 신경세포로부터 생성되는 일산화질소(NO^-)의 생성 양을 측정하고 그 결과를 도 3에 정리하였다.

하기 도 3에 나타난 바와 같이, 본 발명에 의한 크립토탄시논은 SNP에 의해 산화적 손상이 일어난 신경세포로부터 분비되는 일산화질소의 양을 유의적이고 농도의존적으로 감소시켰다. 따라서, 뇌 신경세포에서 크립토탄시논은 산화적 손상으로부터 신경세포를 보호할 수 있는 것으로 확인되었다.

실험예 4. 젖산 탈수소효소 분비에 대한 효과

뇌 신경세포인 N2A 세포에 SNP를 처리하여 세포사멸을 유도한 후 신경세포로부터 방출되는 젖산 탈수소효소(LDH)의 양을 측정하고 그 결과를 도 4에 정리하였다.

하기 도 4에 나타난 바와 같이, 본 발명에 의한 크립토탄시논은 SNP에 의해 세포사멸이 일어난 신경세포로부터 방출되는 LDH의 양을 유의적이고 농도의존적으로 감소시켰다. 따라서, 뇌 신경세포에서 크립토탄시논은 세포사멸로부터 신경세포를 보호할 수 있는 것으로 확인되었다.

실험예 5. 활성산소종 ( ROS ) 생성에 대한 효과

신경 세포의 사멸과 관련이 있는 활성산소종의 생성에 대한 효과를 확인하기 위해 뇌 신경세포인 N2A 세포에 SNP를 처리하여 세포사멸을 유도한 후 신경세포로부터 방출되는 ROS의 양을 측정하고 그 결과를 도 5에 정리하였다.

하기 도 5에 나타난 바와 같이, 본 발명에 의한 크립토탄시논은 SNP에 의해 세포사멸이 일어난 신경세포로부터 방출되는 ROS의 양을 유의적이고 농도의존적으로 감소시켰다. 따라서, 뇌 신경세포에서 크립토탄시논은 ROS의 생성을 막아 신경세포의 죽음을 막을 수 있는 것으로 확인되었다.

실험예 6. 활성산소종 ( ROS ) 생성에 대한 효과

신경 세포의 사멸과 관련이 있는 미토콘드리아 막전위의 변화에 대한 효과를 확인하기 위해 뇌 신경세포인 N2A 세포에 SNP를 처리하여 세포사멸을 유도한 후 신경세포의 미토콘드리아 막전위를 측정하고 그 결과를 도 6에 정리하였다.

하기 도 6에 나타난 바와 같이, 본 발명에 의한 크립토탄시논은 SNP에 의해 세포사멸이 일어난 신경세포에서 점상형(punctuated pattern)의 오렌지색 형광이 녹색형광으로 유의적으로 변화하면서 미만형(diffused pattern)으로 세포질 전체에 균질하게 분포하는 것으로 나타났다. 따라서, 뇌 신경세포에서 크립토탄시논은 미토콘드리아 막전위의 상실을 막아 신경세포의 죽음을 막을 수 있는 것으로 확인되었다.

< 제제예 >

제제예 1. 약학 조성물의 제제예

① 캅셀제의 제조

단삼 추출물 10 g

결정성 셀룰로오스 3 g

락토오스 14.8 g

마그네슘 스테아레이트 0.2 g

② 주사제의 제조

크립토탄시논 10 g

만니톨 180 g

주사용 멸균 증류수 2974 g

Na2HPO412H2O 26 g

③ 액제의 제조

단삼 추출물 20 mg

이성화당 10 g

만니톨 5 g

정제수 적량

제제예 2. 건강식품의 제제예

① 건강식품의 제조

단삼추출물 1000 ㎎

비타민 혼합물 적량

비타민 A 아세테이트 70 ㎍

비타민 E 1.0 ㎎

비타민 B1 0.13 ㎎

비타민 B2 0.15 ㎎

비타민 B6 0.5 ㎎

비타민 B12 0.2 ㎍

비타민 C 10 ㎎

비오틴 10 ㎍

니코틴산아미드 1.7 ㎎

엽산 50 ㎍

판토텐산 칼슘 0.5 ㎎

무기질 혼합물 적량

황산제1철 1.75 ㎎

산화아연 0.82 ㎎

탄산마그네슘 25.3 ㎎

제1인산칼륨 15 ㎎

제2인산칼슘 55 ㎎

구연산칼륨 90 ㎎

탄산칼슘 100 ㎎

염화마그네슘 24.8 ㎎

② 건강음료의 제조

크립토탄시논 100 ㎎

비타민 C 15 g

비타민 E(분말) 100 g

젖산철 19.75 g

산화아연 3.5 g

니코틴산아미드 3.5 g

비타민 A 0.2 g

비타민 B1 0.25 g

비타민 B2 0.3g

물 정량

Claims

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단삼 및 황기의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 허혈성 뇌졸중 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제 7항에 있어서,
상기 단삼 및 황기의 혼합 추출물은 단삼 및 황기를 물, 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출하여 얻은 것임을 특징으로 하는, 허혈성 뇌졸중 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
삭제
제 7항에 있어서, 상기 단삼 및 황기의 혼합 추출물은 황기 추출물 대 단삼 추출물이 중량을 기준으로 20 ~ 1 :4 (황기: 단삼)인 것을 특징으로 하는, 허혈성 뇌졸중 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
단삼 및 황기의 혼합 추출물을 유효성분으로 포함하는 허혈성 뇌졸중 예방 또는 개선용 건강식품.