NL8703148A

NL8703148A - Pyrimidinederivaten.

Info

Publication number: NL8703148A
Application number: NL8703148A
Authority: NL
Original assignee: Egyt Gyogyszervegyeszeti Gyar
Priority date: 1986-12-30
Filing date: 1987-12-29
Publication date: 1988-07-18
Also published as: PH24290A; PL269811A1; YU4989A; IL84988A0; GB8730297D0; FI875766A; SE8705196D0; SU1650014A3; YU241987A; KR940002669B1; KR880007545A; DK692587D0; FR2609033B1; AT397802B; FI86637C; GR872084B; YU46433B; CN87105992A; FI875766A0; DK692587A

Description

# NL 34.680-dJ/ab Pyrimidinederivaten

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op nieuwe gecondenseerde pyrimidinederivaten, een werkwijze voor de bereiding ervan, farmaceutische preparaten die dergelijke derivaten bevatten, en nieuwe tussenprodukten voor 5 gebruik in de bereiding van de gecondenseerde pyrimidineder ivaten alsmede op een werkwijze voor de bereiding van deze tussenprodukten.

In het Britse octrooischrift nr. 1072414 zijn thiazolo /3,2-$7pyrimidinederivaten beschreven. Van deze 10 verbindingen wordt gerapporteerd dat ze inwerken op de circulatie en een sedatieve-tranquillerende, diuretische, cy— tostatische, bacteriostatische, anti-inflammatore en anti-pyretische werking hebben.

In Jpn. K. Tokyo 80.64.591 zijn dioxoderivaten 15 van thiazolo/3,2-a7pyrimidinen met immunomodulerende werking beschreven.

Het is bekend, dat êên van de fundamentele doelen van de voorkoming van infectieuze ziekten berust op de verhoging van de werkzaamheid van de immunoprofylaxis en op de 20 vorming van een homogene immuuntoestand in grote populaties. Verbindingen die in staat zijn het immuunsysteem te stimuleren geven een nuttige bijdrage in de genoemde pogingen.

Het is een doel van de onderhavige uitvinding om nieuwe gecondenseerde pyrimidinederivaten te verschaffen 25 die een verbeterde immunostimulerende werkzaamheid hebben.

Volgens êên aspect van de onderhavige uitvinding worden nieuwe gecondenseerde pyrimidinederivaten verschaft met de algemene formule 1 van het formuleblad, waarin A Staat voor -CH2-CH2-,-CH2-CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-CH2- 30 of -CH=CH-; 4 R waterstof, C^_^-alkyl of eventueel gesubstitueerd fenyl is; r 0, 1, 2, 3 of 4 voorstelt; R waterstof of C.^-alkanoyl betekent; 2 i o 35 R waterstof, C^_^-alkanoyl of een groep met algemene for- .8702148 t - 2 -4 mule 1a van het formuleblad voorstelt, waarin R staat voor waterstof, C^_^-alkyl, C^^-alkenyl, fenyl of fenyl-C1 _-alkyl en 3 R waterstof is, 5 alsmede farmaceutisch aanvaardbare zuuradditiezouten daarvan en hydraten van de verbindingen met de algemene formule 1 of farmaceutisch aanvaardbare zuuradditiezouten daarvan.

De verbindingen met algemene formule 1, waarin 12 3 R , R en R elk waterstof voorstellen, kunnen aanwezig zijn 10 in twee tautomere vormen, zoals blijkt uit schema A. In 4 schema A hebben R en r de bovenvermelde betekenissen.

Gevonden werd, dat de nieuwe verbindingen met de algemene formule 1 de cellulaire immuunrespons tot een significante omvang verhogen, een immuun-stimulerende werking 15 bezitten en geen enkele onverenigbaarheid met de gebruikte vaccins vertonen.

De term "C^_^-alkyl" heeft betrekking op verzadigde alifatische koolwaterstofgroepen met rechte of vertakte keten (bijv. methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl 20 enz.). R4 in de betekenis van fenyl kan desgewenst één of meer identieke of verschillende substituenten dragen (bijv. halogeen, nitro, lager alkyl of lager alkoxy).

De term "C^_^-alkanoyl" verwijst naar zuurradica-len en deze groepen zijn afgeleid van alifatische carbon-25 zuren met 1-5 koolstofatomen (bijv. formyl, acetyl, propio-nyl, butyryl enz.). De term '^^-alkenyl" refereert naar alifatische koolwaterstofgroepen met rechte of vertakte keten die een olefinische dubbele band hebben (bijv. vinyl, allyl, methallyl enz.). De "fenyl-C^^-alkylgroep" kan bijv. 30 benzyl of β-fenyl-ethyl zijn. "A" staat voor 1,2-ethyleen, 1,3-propyleen, 1,4-butyleen of vinyl.

Verbindingen met de algemene formule 1, waarin A

4 staat voor -CE^-Cï^- of -CI^-C^-CË^-y R waterstof of methyl voorstelt; r is 1; R^ en R^ waterstof voorstellen en R^ wa-35 terstof of een groep met de algemene formule 1a, waarin R ethyl is, voorstelt, en de farmaceutisch, aanvaardbare zuuradditiezouten daarvan bezitten bijzonder waardevolle farma- . 8 7 0 3 1 4 8 ..... £.

- 3 - ceutische eigenschappen.

Vertegenwoordigers van de verbindingen met de algemene formule 1 welke bijzondere voorkeur verdienen, zijn de volgende derivaten: 5 7-amino-5-imino-2,3-dihydro-5H-thiazolo/3,2-a7pyrimidine; 8-amino-6-imino-3,4-dihydro-2H,6H-pyrimido/2,1-b7/1,3/thiazi-ne; 8-amino-6-iraino-3-methyl-2H, 6H-pyrimido/2,1 -b7,3_7-thiazine; N-ethyl-N' - (5-iniino-2,3-dihydro-5H-thiazolo/*3,2-a7pyrimidine-10 -7-yl)-thioureum en farmaceutisch aanvaardbare zuuradditiezouten daarvan.

De farmaceutische aanvaardbare zuuradditiezouten van de verbindingen met de algemene formule 1 kunnen zijn gevormd met anorganische of organische zuren (bijv. hydro-15 halogeniden zoals hydrochloriden of hydrobromiden; carbo-naten, hydrogeencarbonaten, sulfaten, acetaten, fumaraten, maleaten, citraten, ascorbinaten enz.).

Volgens een verder aspect van de onderhavige uitvinding wordt een werkwijze verschaft voor de bereiding van 20 verbindingen met de algemene formule 1 en de farmaceutisch aanvaardbare zuuradditiezouten en hydraten daarvan, gekenmerkt door a) het omzetten van een 2-mercapto-4,6-diamino-py- rimidinederivaat met algemene formule 2 van het formuleblad, 12 3 25 waarin R , R en R de eerdervermelde betekenissen hebben, met een dihalogeenverbinding met de algemene formule 3 van het formuleblad, waarin Y staat voor halogeen, bij voorkeur broom; Z halogeen, bij voorkeur chloor of broom voorstelt en 4 A, R en r de eerdergegeven definities hebben; of 30 b) het omzetten van een 2-mercapto-4,6-diaminopyri- midinederivaat met de algemene formule 2 met een dihalogeen- verbinding met de algemene formule 3 en het onderwerpen van de aldus verkregen verbinding met de algemene formule 4, 12 3 4 waarin A, R , R , R , R , ï en r de eerdervermelde defini- 35 ties hebben, aan een cyclisering na isolatie; of c) het omzetten van een verbinding met de algemene 1 2 formule 1, waarin R en/of R staat (staan) voor waterstof, met een carbonzuur met de algemene formule 5 van het formuleblad, waarin R^ waterstof of C^_^-alkyl voorstelt, of een f 4' - 4 - reactief derivaat daarvan; of d) het omzetten van een verbinding met de algemene 2 formule 1, waarin R waterstof voorstelt, met een isothio-cyanaat met de algemene formule 6 van het formuleblad, waar-5 in-R de hierbovengegeven definitie heeft? of e) het omzetten van een verbinding met de algemene formule 7 van het formuleblad, waarin A' staat voor -CH_-CH0-4 ί ά of -CH=CH- en R en r de eerdergegeven definitie hebben, met malondinitril met formule 8 van het formuleblad en, desge-10 wenst, het omzetten van een verbinding met algemene formule 1 in een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout daarvan of het vrijmaken van een base met de algemene formule 1 uit een zuuradditiezout daarvan of het overbrengen van een verbinding met de algemene formule 1 of een farmaceutisch aan-15 vaardbaar zuuradditiezout daarvan in een hydraat.

Volgens methode a) wordt een 2-mercapto-4,6-diami-no-pyrimidine met de algemene formule 2 omgezet met een dihalogeenverbinding met de algemene formule 3. De reactie kan worden uitgevoerd in een inert organisch oplosmiddel.

20 Als reactiemedium kan bijvoorbeeld een dialkylamide (zoals dimethylformamide), dialkylsulfoxide (bij voorkeur dimethyl-sulfoxide) , alifatische alcohol (bijv. ethanol of isopropanol), gechloreerde.-- alifatische koolwaterstof (bijv. chloroform, koolstoftetrachloride, methyleendichloride), aromatische 25 koolwaterstof (bijv. benzeen, tolueen, xyleen), alifatische ether (bijv. diethylether, tetrahydrofuran, dioxaan), alifatische koolwaterstof (bijv. hexaan of benzine) of een alifa-.tisch keton (bijv. aceton of methylethylketon) of een mengsel van ten minste twee van de bovengenoemde oplosmiddelen 30 worden gebruikt. Het verdient bijzondere voorkeur om dimethylformamide te gebruiken als oplosmiddel. De reactie kan worden uitgevoerd in aanwezigheid van een zuurbindend middel. Voor dit doel kan bijv. een alkalicarbonaat (bijv. natrium-of kaliumcarbonaat), alkalihydrogeencarbonaat (bijv. natri-35 urn- of kaliumhydrogeencarbonaat), alkalihydroxide (bijv. natrium- of kaliumhydroxide), aardalkalimetaalhydroxide (bijv. calciumhydroxide) of een tertiar amine (bijv. pyridine, tri-ethylamine of een ander trialkylamine) worden gebruikt.

.8703148 “ 5 —

Natriumcarbonaat en kaliumcarbonaat zijn bijzonder geschikt als zuurbindend middel.

De uitgangsmaterialen met de algemene formule 2 en 3 kunnen worden gebruikt in een equimolaire hoeveelheid of 5 de dihalogeenverbinding met algemene formule 3 kan worden toegepast in een geringe overmaat van circa 0,1-0,5 mol.

De reactietemperatuur hangt af van de reactiviteit van de uitgangsmaterialen. Men kan in het algemeen te werk gaan bij een temperatuur tussen kamertemperatuur en het kook-10 punt van het reactiemengsel, bij voorkeur bij circa 70°C.

De verbindingen met de algemene formule 1 kunnen in het algemeen geïsoleerd worden in de vorm van een zuuradditie-zout - bij voorkeur het hydrobromide - ofschoon andere farmaceutisch aanvaardbare zuuradditiezouten eveneens kunnen wor-15 den gevormd.

Volgens methode b) van de werkwijze volgens de onderhavige uitvinding wordt een 2-mercapto-4,6-diamino-pyrimi-dine met de algemene formule 2 omgezet met een dihalogeen-verbinding met de algemene formule 3 en de aldus gevormde 20 verbinding met de algemene formule 4 wordt na isolatie onderworpen aan cyclisering. De reactie kan worden uitgevoerd in een inert organisch oplosmiddel en in aanwezigheid van een zuurbindend middel. De inerte organische oplosmiddelen en de zuurbindende middelen, respectievelijk, kunnen die zijn 25 welke zijn opgesomd in verband met methode a), De tussenpro-dukten met de algemene formule 4 worden gevormd bij een lagere temperatuur dan is beschreven in methode aj. Men gaat bij voorkeur te werk bij 30-50°C, in het bijzonder bij circa 40 °C. Anderzijds is reactietijd van methode b) (vorming van 30 de verbinding met de algemene formule 4 en ringsluiting) langer dan die van methode a). De reactietijd is afhankelijk van de activiteit van de gebruikte uitgangsmaterialen en de temperatuur en bedraagt gewoonlijk circa 10-20 uur. De cyclisering van de verbinding met algemene formule 4 kan tot stand 35 worden gebracht bij een hogere temperatuur, bij voorkeur bij een temperatuur tussen circa 50°C en het kookpunt van het reactiemengsel.

Het reactiemengsel kan worden opgewerkt met behulp . B1 0 n 4 8 t - 6 - van op zichzelf bekende methoden.

Volgens methode c) wordt een verbinding met de 1 2 algemene formule 1, waarin R en/of R waterstof is (zijn), geacyleerd met een carbonzuur met de algemene formule 5 of 5 een reactief derivaat daarvan. Als reactief zuurderivaat kunnen bij voorkeur de overeenkomstige anhydriden, zuur-haliden of esters worden gebruikt. De acylering wordt uitgevoerd middels op zichzelf bekende methoden. Wanneer de acylering wordt uitgevoerd met behulp van een zuurchloride, 10 voegt men bij voorkeur een zuurbindend middel toe aan het reactiemengsel. Voor dit doel kan een alkalicarbonaat, alka-lihydrogeencarbonaat, alkalihydroxide of triethylamine worden gebruikt. Wanneer een zuuranhydride wordt gebruikt als acyleringsmiddel, kan de overmaat daarvan fungeren als het 15 reactiemedium of kan men werken in aanwezigheid van een inert organisch oplosmiddel. Indien vrije carbonzuren met de algemene formule 5 worden gebruikt, wordt de acylering bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een wateront-trekkend middel (bijv. dicyclohexylcarbodiimide). De acyle-20 ring kan gewoonlijk worden uitgevoerd bij een temperatuur tussen 10°C en het kookpunt van het reactiemengsel in afhankelijkheid van de reactiviteit van de uitgangsmaterialen.

In het verloop van methode c) wordt of worden ëën 25 of twee acylgroepen geïntroduceerd in het molekuul (d.w.z. de amino- en/of iminogroep bevestigd aan de pyrimidinering, wordt of worden geacyleerd), afhankelijk van de hoeveelheid van het gebruikte acyleringsmiddel.

Volgens methode d) wordt een verbinding met de 2 30 algemene formule 1, waarin R waterstof voorstelt, omgezet met een isothiocyanaat met de algemene formule 6 onder oplevering van een verbinding met de algemene formule 1, 2 waarin R een groep met de algemene formule 1a voorstelt.

De reactie kan worden uitgevoerd in een inert organisch op-35 losmiddel bij een temperatuur welke ligt tussen kamertemperatuur en het kookpunt van het reactiemengsel. Als reactiemedium kan bij voorkeur een alkanol (bijv. ethanol) worden if- \·: ( * & / V v £ *7 © * - 7 - gebruikt. Het isothiocyanaat met de algemene formule 6 kan worden gebruikt in een 1-1,5 molaire equivalente hoeveelheid, met betrekking tot de aminoverbinding met de algemene formule 1.

5 Volgens methode ë) van de werkwijze volgens de on derhavige uitvinding worden verbindingen met de algemene for-12 3 mule 1, waarin R , R en R staan voor waterstof en A is of -CH=CH-, bereid door reactie van een verbinding met de algemene formule 7 met malondinitril met de algemene 10 formule 8. Als reactiemedium kunnen bij voorkeur de in methode a) opgesomde oplosmiddelen worden gebruikt met uitzondering van alifatische ketonen. Het verdient bijzondere voorkeur om een alifatische alcohol te gebruiken als reactiemedium. De reactie kan bij voorkeur worden uitgevoerd in 15 aanwezigheid van een basische katalysator. Voor dit doel worden bij voorkeur alkalialcoholaten (bijv. natriummethylaat of natriumethylaat) gebruikt, ofschoon de andere in verband met methode a) genoemde basen eveneens kunnen worden toegepast .

20 De uitgangsmaterialen met de algemene formulae 7 en 8 kunnen worden gebruikt in equimolaire hoeveelheden, ofwel het malondinitril met formule 8 kan worden gebruikt in een overmaat van 0,1-0,5 mol.

De reactie kan tot stand worden gebracht bij een 25 temperatuur die ligt tussen kamertemperatuur en het kookpunt van het reactiemengsel, in afhankelijkheid van de reactiviteit van de gebruikte uitgangsverbindingen.

Het reactiemengsel kan worden opgewerkt met behulp van op zichzelf bekende methoden.

30 De aldus verkregen verbindingen met de algemene formule 1 kunnen worden omgezet in de zuuradditiezouten daarvan middels op zichzelf bekende methoden. Zo kan de verbinding met de algemene formule 1 worden omgezet met het geschikte anorganische of organische zuur in een inert organisch 35 oplosmiddel.

De verbindingen met algemene formule 1 kunnen worden vrijgemaakt uit de genoemde zuuradditiezouten door behan- .8703148 - 8 - deling met een base op een op zichzelf bekende wijze.

De verbindingen met de algemene formule 1 en de zuuradditiezouten daarvan kunnen hydraten vormen. Deze hydra-ten kunnen ofwel worden verkregen door toevoeging van water 5 aan een verbinding met de algemene formule 1 of een zuuraddi-tiezout daarvan, ofwel spontaan worden gevormd dankzij de hygroscopische eigenschappen van de watervrije verbindingen met de algemene formule 1.

Volgens een verder aspect van de onderhavige uit-10 vinding worden nieuwe tussenprodukten met de algemene formule 4 en zuuradditiezouten daarvan verschaft, waarin A -ch2-ch2-, -ch2-ch2-ch2-, -ch2-ch2-ch2-ch2-, of -CH=CH- is; 4 R waterstof, C^_^-alkyl of eventueel gesubstitueerd feriyl 15 is; r is 0, 1, 2, 3 of 4 R waterstof of C1 _,.-alkanoyl voorstelt; R betekent waterstof, _,-“alkanoyl of een groep met algemene formule 1a, waarin 20 R waterstof, C^_^-alkyl, C2_^-alkenyl, fenyl of fenyl- C. _-alkyl is en 3 R waterstof betekent; Y staat voor halogeen.

Volgens een verder aspect van de onderhavige uit-25 vinding wordt een werkwijze verschaft voor de bereiding van de verbindingen met de algemene formule 4 en zouten daarvan, gekenmerkt door de omzetting van een 2-mercapto-4,6-di- 1 2 amino-pyrimidine met de algemene formule 2, waarin R , R en 3 R de bovenvermelde betekenissen hebben, met een dihalogeen-30 verbinding met de algemene formule 3, waarin Y staat voor halogeen, bij voorkeur broom, Z is halogeen, bij voorkeur chloor 4 of broom en A, R en r de bovenvermelde betekenissen hebben, en desgewenst door de aldus verkregen verbinding met algemene formule 4-om te zetten in een zuuradditiezout daarvan.

35 De nieuwe tussenprodukten met algemene formule 4 kunnen worden bereid en omgezet na isolatie in de verbindingen met de algemene formule 1 ;zoals beschreven in methode b).

De als uitgangsmaterialen gebruikte 2-mercapto-4,6-diamino-pyrimidinen zijn bekende verbindingen en kunnen wor- 87 0 3 a ft v «· t* V t c 9 - 9 - den bereid door een gemodificeerde Traube-synthese £ W. Trau-be, Ann. 331, 64 (1904)_7 ·

De uitgangsmaterialen met de algemene formulae 3, 5, 6, 7 en 8 zijn bekende verbindingen en gemakkelijk ver-5 krijgbare commerciële produkten.

De verbindingen met de algemene formule 1 bezitten waardevolle immunostimulerende eigenschappen.

Exogene regulatie van het immuniserings sy s teem, de correctie van diens hyperfunctie of insufficiëntie, kwamen 10 gedurende het laatste decennium op de voorgrond, in navolging van het meer gedetailleerde inzicht van de immunologische processen.

In een microbiologische zin betekent immuniteit de bescherming van het organisme tegen pathogenen (zoals bacte-15 riën, virussen, fungi of parasieten), of tegen hun toxische stoffen. De heersende toestand van de immuniteit en de vorming daarvan worden steeds, behalve door genetische eigenschappen, eveneens beïnvloed door biologische effecten van de omgeving. De cellen van het immuniteitssysteem werken 20 volgens een strikt gedefinieerde "werkverdeling", dat wil zeggen dat sommige het vermogen hebben om vreemd materiaal (antigenen) te herkennen, terwijl andere antistoffen produceren of gedifferentieerd worden tot reactieve immunocyten , terwijl ook sommigen kunnen worden gevonden die de relaties 25 tussen de gedefinieerde groepen van cellen coördineren en/of controleren. Op deze basis kan immuniteit eveneens worden gekarakteriseerd door het feit dat het organisme materialen die vreemd voor haar zijn herkent en in staat is immuniteits-responsen daartegen te produceren door een strikt vastgelegde cellulaire interactie.

30 Vanuit het gezichtspunt van profylaxis tegen be smettelijke ziekten, is de zogenaamde door vaccinatie kunstmatig opgewekte "actieve immuniteit" buitengewoon gewichtig wanneer een "verzwakte" variëteit van de pathogenen, gedode pathogenen of toxinen daarvan wordt opgenomen in het orga-35 nisme.

De immunogene effecten van de in de immunoprofyla-xis toegepaste vaccins zijn tamelijk verschillend.

*8/031^ * * - 10 - <»

In het geval van bepaalde vaccins kan zelfs een levenslange immuniteit worden verkregen, terwijl sommige ervan een bescherming verlenen voor 1-2 jaar en een zeer significant deel ervan resulteert in een immuniteit die slechts geduren-5 de enkele maanden aanhoudt.

In het afgelopen decennium heeft het inzicht en de practische toepassing van materialen die de immuniteit modificeren of stimuleren geleid tot veelbelovende resultaten en voortschreiding ten aanzien van de correctie van een 10 immunologisch gebrek van het organisme en tot het verhogen van de efficiëntie van vaccins met slechts een zwak immuno-geen effect.

De laatste ontwikkeling is buitengewoon belangrijk op het gebied van de veterinaire wetenschap waar het ontwik-15 kelen van een immunologische homogeniteit in populaties van grote dieren één van de basisvereisten is voor het bereiken van het doel, dat vee een produktieniveau haalt dat overeenkomt met het genetische vermogen ervan.

Tijdens de onderhavige experimenten ter bestudering 20 van het immuniteitsstimulerende effect van bepaalde verbindingen is gevonden, dat de verbindingen met de algemene formule 1 het cellulaire beschermende vermogen van het organisme gunstig beïnvloeden en bij geschikte toepassing het immunogene effect van bepaalde typen van herpes virus vaccins met 25 slechts een zwak immunogeen effect (zoals bijvoorbeeld het vaccin dat wordt gebruikt tegen Aujeszky's ziekte) kunnen verhogen.

De resultaten met betrekking tot het immuniteitsstimulerende effect van de verbindingen met de algemene for-30 mule 1, verkregen door modeltesten uitgevoerd op muizen en varkens, zijn opgenomen in tabellen A en B.

< 8 Ί ö i i 4 & -11 - ψ

TABEL A

Modeltest op muizen

Testver- Vaccin Aantal dieren RCF CT

binding 0,1 mg/inuis_;_

Voorb. II Ay.verzw. 80 6-20/4-12 18-8/8-6 5 Ay. inact. 80 3-17/3-9 7-16/6-8

Voorb. V Ay.verzw. 50 5-15/5-10 8-5/7-4

Voorb. VII Ay.verzw. 50 7-21/5-11 18-10/7-4

Voorb. Ill B19 160 12-23/6-12 21-6/9-6

Voorb. XII Ay.verzw. 50 4-20/3-10 14-6/6-4 10 Opmerking: De teller bevat de waarden van de monsters die genomen zijn van dieren die behandeld zijn met het vaccin in combinatie met de testverbinding in de eerste, derde en vierde week, terwijl de noemer de waarden beschrijft van de dieren die 15 slechts behandeld zijn met het vaccin; alle waar den zijn uitgedrukt in procenten.

Legenda: RCF = Immuno -rosette-ontwikkeling CT = Cytotoxische reacties

TABEL B

20 Modeltest op varkens

Testver- Vaccin Aantal dieren RCF CT

binding

Voorb. II verzwakt 10 14-24/6-14 18-13/5-11 inactief 10 5-26/4-15 5-21/4-11 5 mg/varken_

Legenda: zie TABEL A

.8705146 -* - 12 -

Voor in vitxo reacties van de perifere lymfocyten werd de volgende onderzoeksmethode toegepast:

Afzondering van lymfocyten

Lymfocyten werden afgezonderd van bloedmonsters die 5 behandeld waren met heparine als anti-coagulans door Ficoll Paque. De celdichtheid werd ingesteld op 10 /ml in Hanks oplossing welke 10 % foetaal serum bevat. Van de celsuspen-sieS werd telkens 1,5 ml afgemeten in Leighton-buizen en vervolgens gecomplementeerd met antigenen overeenkomstig de 10 testen.

Immunoros&ttez-ontwikkeling (RCF)

Na geschikte voorbehandeling een 3-procent oplossing van rode bloedcellen van schapen geadsorbeerd met Boiven's antigenen. 0,1 ml van de zo behandelde rode bloed-15 cellen werd toegevoegd aan de Leighton-buizen en na een 16-urige incubatie werd de verhouding van de rosette-ontwik-kelende cellen microscopisch bepaald in gekleurde preparaten.

Cytotoxische reactie (CT)

De test werd uitgevoerd in een allogeen systeem.

20 0,1 ml van een lymfocytsuspensie met een cellulaire dichtheid van 10^/ml werd toegevoegd aan een suspensie van rode bloedcellen van schapen, gevoelig gemaakt met antigenen.

De waarden van het cytotoxische vermogen werden vastgesteld op basis van haemolyse die volgde op een 16-urige incubatie, 25 en werden gemeten op een Spekol-instrument bij 540 nm. De hoegrootheid van de reactie wordt uitgedrukt in de verhouding in vergelijking met de controle-experimenten, in procenten.

Zoals blijkt uit de gegevens van de tabellen beïnvloeden de testverbindingen niet op significante wijze de 30 blastogenese van de lymfocyten, maar zij verhogen de effectiviteit van de cellulaire immuniteitsreacties die kunnen worden aangegeven in de immuno-inductieve fase, met een 8-11 % toename van de RCF en een 10-12 % toename van de CT-waarde.

35 Bij vergelijking van het effect van de verbindingen met de algemene formule 1 met dat van de verbinding gemerkt met TEI-3096 en beschreven in het periodiek ' "Drugs of the Future" (1984, 9_ 591), berust het verschil op het feit ,8703148 - 13 - dat terwijl de laatst genoemde slechts de T-suppressorcellen activeert, de verbindingen met de algemene formule de activiteit van de T-killerlymfocyten verhogen en eveneens die van andere zogenaamde lymfocyt-K-cellen en dit openbaart zich in 5 de toename van het cytotoxische vermogen van het cellulaire immunis er ing s systeem.

Volgens een verder aspect van de onderhavige uitvinding worden farmaceutische preparaten verschaft die als werkzaam bestanddeel ten minste één verbinding met de algeme-10 ne formule 1 of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditie-zout daarvan of een hydraat van een verbinding met de algemene formule 1 of een .zout daarvan bevatten verenigd met geschikt inerte vaste of vloeibare farmaceutische dragers,

De farmaceutische preparaten volgens de onderhavi-15 ge uitvinding kunnen worden bereid langs methoden die op zichzelf bekend zijn voor de bereiding van preparaten die inwerken op het immuunsysteem. Het vaccin en de verbinding met de algemene formule 1 kunnen dus op diverse plaatsen in het lichaam worden geïntroduceerd. Men kan eveneens te werk gaan 20 door de verbinding met de algemene formule 1 te gebruiken in een vorm welke is opgenomen in een vaccin.

Verdere details van de onderhavige uitvinding zullen blijken uit de navolgende voorbeelden, zonder de bescher-mingsomvang te beperken tot deze voorbeelden.

25 De dagelijkse dosering van de verbindingen met de algemene formule 1 varieert tussen brede grenzen. De dagelijkse parenterale dosis bedraagt gewoonlijk van circa 0,1 mg/kg tot circa 30mg/kg, bij voorkeur 0,3-15 mg/kg, in het bijzonder circa 1-2 mg/kg, 30 bij varkens. Het werkzame bestanddeel wordt bij voorkeur opgenomen in het vaccin en geïnjecteerd in spierweefsel. De bovengenoemde doses zijn slechts van informatief karakter en de toegediende dosis kan ook boven of onder deze grenzen liggen.

35 1. Verbindingen met de algemene formule 4

VOORBEELD I

E-2-(2-broomvinyl)-thio-4,5-diamino-pyrimidine . fc / 0 3 . - » - 14 -

Een mengsel van 14,2 g (0,1 mol) 2-mercapto-4,6--diamino-pyrimidine, 20,4 g (0,11 mol) 1,2-dibroomethyleen (cis + trans), 200 ml dimethylformamide en 13,8 g (0,1 mol) kaliumcarbonaat wordt geroerd bij 45°C gedurende 17 uur, waar-5 na het reactiemengsel wordt uitgegoten in 1000 ml water. De neergeslagen kristallen worden gefiltreerd, gewassen met water en gedroogd. Zo wordt 11,0 g van de gewenste verbinding verkregen in een opbrengst van 44,5 %. Smeltpunt: 184-186°C.

C,H_BrN.S = 247,12 6 7 4 10 Elementaire analyse berekend gevonden C 29,16 % 29,99 % H 2,85 % 3,00 % N 22,67 % 21,91 % S 12,97 % 12,83 % 15 Br" 32,34 % 32,32 %

2. Verbindingen met de algemene formule 1 VOORBEELD II

7- amino-5-imino-2,3-dihydro-5H-thiazolo/3,2-aJ-pyrimidine-hydrochloride 20 Een mengsel van 14,2 g (0,1 mol) 2-mercapto-4,6- diamino-pyrimidine, 21,6 g (0,115 mol) ethyleenbromide (1,2--dibroomethyleen), 200 ml dimethylformamide en 13,8 g (0,1 mol) kaliumcarbonaat wordt geroerd bij 70°C gedurende 5 uur. Het reactiemengsel wordt afgekoeld, het neergeslagen produkt 25 wordt gefiltreerd, gewassen met water en gedroogd. Aldus verkrijgt met 23,6 g van de beoogde verbinding, opbrengst 95 %. Smeltpunt: boven 300°C.

C.-H0BrN S = 249,136 6 9 4

Elementaire analyse berekend gevonden 30 C 28,93 % 28,88 % H 3,64 % 3,68 % N 22,49 S 22,66 % S 12,87 % 12,70 %

Br" 32,07 % 32,08 %

35 VOORBEELD III

8- amino-6-imino-3,4-dihydro-2H,6H-pyrimido/2,1~b7~ /"1,3 _7thiazine-hydrobromide

Methode A

. 8703148 - 15 - « 14,2 g (0,1 mol) 2-mercapto-4,6-diamino-pyrimidine en 23,2 g (0,115 mol) 1,3-dibroompropaan worden omgezet op een wijze analoog aan voorbeeld I. Het reactiemengsel wordt opgewerkt zoals beschreven is in voorbeeld I. Aldus wordt 5 23,7 g van de beoogde verbinding verkregen, opbrengst 90 %. Smeltpunt: hoger dan 300°C.

C?H1 .jBrN^S = 263,163

Elementaire analyse berekend gevonden C 31,95 % 32,38 % 10 H 4,21 % 4,24 % N 21,29 % 21,10 % S 12,18 % 12,04 %

Br" 30,36 % 30,76 %

Methode B

15 14,2 g (0,1 mol) 2-mercapto-4,6-diamino-pyrimidine en 15,8 g (0,1 mol) 1,3-chloor-broom-propaan worden omgezet op een wijze die analoog is aan die in voorbeeld I. Het reactiemengsel wordt opgewerkt zoals beschreven in voorbeeld I. Aldus verkrijgt men 17,1 g van de gewenste verbinding.

20 Opbrengst 65 %, smeltpunt: hoger dan 300°C.

C7HnBrN4S = 263,163

Elementaire analyse berekend gevonden C 31,95 % 33,18 % H 4,21 % 4,52 % 25 N 21,29 % 12,10 % S 12,18 % 12,10 %

Br" 30,36 % 30,85 %

VOORBEELD IV

7-amino-2-fenyl-5-imino-2,3-dihydro-5H-thiazolo-30 /3,2-a7pyrimidine-hydrobormide

Een mengsel van 14,2 g (0,1 mol) 2-mercapto-4,6-diamino-pyrimidine, 30,4 g (0,115 mol) (1,2-dibroomethyl)benzeen, 200 ml dimethylformamide en 13,8 g (0,1 mol) kalium-carbonaat wordt geroerd op 45°C gedurende 6 uur. Het reactie-35 mengsel wordt afgekoeld, het precipitaat wordt gefiltreerd, gewassen met water en gedroogd. Aldus verkrijgt met 26,0 g van de gewenste verbinding, opbrengst 80 S, smeltpunt: hoger dan 300°C.

.8703*48 - 16 - C12H13BrN4S = 325,235

Elementaire analyse berekend gevonden C 44,32 % 44,52 % H 4,03 % 4,04 % 5 N 17,23 % 17,10 % S 9,85 % 9,81 %

Br" 24,57 % 25,05 %

VOORBEELD V

8-amino-6-imino-3-methyl-2H,6H -pyrimido/^l-b?-10 [λ ^J'-thiazine-hydrobromide 14.2 g (0,1 mol) 2-mercapto-4,6-diamino-pyrimidine en 19,7 g (0,115 mol) 2-methyl-1,3-chloor-broom-propaan worden omgezet op een wijze analoog aan die in voorbeeld I. Het reactiemengsel wordt opgewerkt zoals beschreven is in voor- 15 beeld I. Aldus verkrijgt men 18,9 g van de gewenste verbinding in een opbrengst van 65 %, smeltpunt: hoger dan 300°C. CgH13BrN4S = 277,19

Elementaire analyse berekend gevonden C 34,67 % 34,68 % 20 H 4,73 % 4,80 % N 20,21 % 19,96 % S 11,57 % 11,40 %

Br" 28,83 % 29,39 %

VOORBEELD VI

25 7-amino-5-imino-3-(of 2-)methyl-2H,5H-thiazolo- /3,2-$7pyr imidine-hydrobromide 14.2 g (0,1 mol) 2-mercapto-4,6-diamino-pyrimidine en 23,2 g (0,115 mol) 1,2-dibroom-propaan worden omgezet op een wijze analoog als beschreven in voorbeeld I. Het re- 30 actiemengsel wordt opgewerkt zoals beschreven is in voorbeeld I. Aldus wordt 15,8 g van de gewenste verbinding verkregen, opbrengst 60 %. Smeltpunt: hoger dan 300°C. C?H11BrN4S = 263,163

Elementaire analyse berekend gevonden 35 C 31,95 % 32,50 % H 4,21 % 4,47 % N 21,29 % 21,24 %

. 87 0 3 1 4 G

- 17 - ζ (elementaire analyse) (berekend) (gevonden) S 12,18 % 11,97 %

Br” 30,36 % 30,79 % VOORBEELD Vil 5 N-ethyl-N'-(5-imino-2,3-dihydro-5H-thiazolo/3,2- -aJpyrimidine-7-yl)-thioureum-hydrochloride Aan een suspensie van 26,5 g (0,1 mol) 7-amino-5--imino-2,3-dihydro-5H-thiazolo/3,2-a7pyrimidine-hydrocarbo-naat-dyhydraaten 140 ml ethanol wordt 11,3 g (0,13 mol) .

10 ethylisocyanaat toegevoegd. Het reactiemengsel wordt verhit tot het kookpunt gedurende 90 minuten en vervolgens afgekoeld, waarna het precipitaat wordt gefiltreerd, gewassen met ethanol en gedroogd. Zo wordt 23 g N-ethyl-N'-(5-imino-2,3-dihy-dro-5H-thiazolo-/3,2-a7pyrimidine-7-yl)-thioureum verkregen 15 in een opbrengst van 90 %.

12,8 g (0,05 mol) van de bovengenoemde base wordt opgelost in 80 ml aceton, waarna ethanol dat een equimolaire hoeveelheid waterstofchloride bevat, wordt toegevoegd. Het reactiemengsel wordt geroerd bij kamertemperatuur gedurende 20 1 uur, gefiltreerd, gewassen met aceton en gedroogd. Zo verkrijgt men 14,6 g van de gewenste verbinding (zout) in een opbrengst van 100 %, smeltpunt: hoger dan 360°C.

C9Ht4ClN5S2 =291,826

Elementaire analyse berekend gevonden 25 C 37,04 % 37,88 % H 4,83 % 4,93 % N 24,00 S 23,70 % S 21,97 % 21,95 %

Cl 12,15 % 12,10 %

30 VOORBEELD VIII

7-amino-5-imino-2,3-dihydro-5H-thiazolo/3,2-a7-pyrimidine-hydrocarbonaat-dihydraat Aan een oplossing van 224 g natriumhydrogeencar-bonaat en 2500 ml water wordt 24,9 g (0,1 mol) 7-amino-5-35 -imino-2,3-dihydro-5H-thiazolo/3,2-a7pyrimidine-hydrobromi-de toegevoegd. Het reactiemengsel wordt geroerd bij kamertemperatuur gedurende 8 uur, vervolgens gefiltreerd, gewassen met water en gedroogd. Zo wordt 17,2 g van de gewenste ,8703148 a - 18 - verbinding verkregen in een opbrengst van 75 %. Smeltpunt: 146-148°C.

C_H^N.OcS = 265/266

/ I o 4 D

Elementaire analyse berekend gevonden 5 C 31,70 % 32,68 % H 4,94 % 4/70 % N 21,12 % 20,69 % S 12,09 % 12,18 %

VOORBEELD IX

10 8-amino-6-imino-3,4-dihydro-2H,6H-pyrimido/2,1- -b7thiazine-hydrocarbonaat dihydraat 26.3 g (0,1 mol) 3-amino-6-imino-3,4-dihydro-2H,6H--pyrimido/Ï2,1-b7thiazine-hydrobromide wordt behandeld op een wijze analoog aan die van voorbeeld VIII. Zo verkrijgt men 15 17.g van de beoogde verbinding, opbrengst 70 %. Smeltpunt: 196-198°C.

CgH15N405S = 279,293

Elementaire analyse berekend gevonden C 34,40 % 35,65 % 20 H 5,41 % 5,52 % N 20,06 % 19,57 % S 11,48 % 11,32 %

VOORBEELD X

7-amino-5-imino-2,3-dihydro- 5H - thiazoloZ3,2-a.J-25 pyrimidine-diacetaat 5.3 g (0,02 mol) 7-amino-5-imino-2,3-dihydro-5H--thiazolo/3,2-a7pyrimidine-hydrocarbonaat-dihydraat wordt geroerd in 30 ml azijnzuur gedurende 6 uur. De oplossing wordt ingedampt waarna de achterblijvende kristallen wor-30 den gesuspendeerd in ethanol, de brij vervolgens wordt gefiltreerd en gedroogd. Zo verkrijgt men 0,6 g van de gewenste verbinding in een opbrengst van 59,5 % en een smeltpunt van 158-160°C.

C11H18N4°4S = 320'351 35 Elementaire analyse berekend gevonden C 43,70 % 43,68 % H 6,00 % 5,97 % N T8,53 % 18,17 % S 10,60 % 10,56 % .8703148 - 19 - * -

VOORBEELD XI

7-amino-5-imino-5H-thiazolo/3,2-öJ pyrimidine- -hydrobromide-hydraat

Een oplossing van 12f35 g (0,05 mol) E-2-(2-broom-5 vinyl)-thio-4,6-diamino-pyrimidine en 50 ml dimethylformamide wordt geroerd bij 150°C gedurende 20 minuten. De oplossing wordt afgekoeld tot 0°C, waarna het precipitaat wordt gefiltreerd, gewassen met isopropanol en gedroogd. Zo wordt 9,5 g van de gewenste verbinding verkregen, opbrengst 72%, smelt-10 punts hoger dan 300°C.

C6H9BrN4OS =265,135 elementaire analyse berekend gevonden C 27,18 % 27,27 % H 3,42 % 3,31 % 15 N 21,18 % 20,32 % S 12,09 % 11,75 %

Br" 30,14 % 30,84 %

VOORBEELD XXI

7-acetylamino-5-acetylimino-2,3-dihydro-5H-20 thiazolo/3,2-a7pyrimidine-hydrochloride

Een mengsel van 26,5 g (0,1 mol) 7-amino-5-imino--2,3-dihydro-5H-thiazolqf3,2-a/pyrimidine-hydrocarbonaat--dihydraat en 260 ml azijnzuuranhydride wordt verhit onder terugvloeiing gedurende 1 uur. Het reactiemengsel wordt af-25 gekoeld, waarna de neerslag wordt gefiltreerd. Zo verkrijgt men 17,7 g 7-acetylamino-5-acetylimino-2^-dihydro-SH-thia-zolo/S ,2-aJpyrimidine, opbrengst 70%.

12,6 g (0,05 mol) van de bovengenoemde base wordt opgelost in 210 ml ethylacetaat, waarna isopropanol dat een 30 equimolaire hoeveelheid waterstofchloride bevat, wordt toegevoegd. Het reactiemengsel wordt bij kamertemperatuur gedurende 1 uur geroerd, vervolgens gefiltreerd, gewassen met ethylacetaat en gedroogd. Zo verkrijgt men 13,0 g van het beoogde zout, opbrengst 90 %. Smeltpunt: hoger dan 300°C.

35 C10H13ClN4O2S = 288,752

Elementaire analyse berekend gevonden C 41,59 % 42,22 % H 5,54 % 4,60 % , i Ί 0 ; 1 4 8 3 * - 20 - * (elementaire analyse) (berekend) (gevonden) N 19,40 % 19,25 % S 11,10 % 10,96 %

Cl" 12,28 % 12,42 %

5 VOORBEELD XIII

7-amino-5-imino-2,3-dihydro-5H-thiazolo/3,2-a7pyri-midine-hydrobromide

Een mengsel van 10,21 g (0,1 mol) 2-amino-thiazo-line, 6,61 g (0,1 mol) malondinitril, 10,12 g (0,1 mol) tri-10 methylamine en 125 ml ethanol wordt tot reactie gebracht bij kamertemperatuur gedurende 2 dagen. Het reactiemengsel wordt geklaard en de pH wordt ingesteld op 6 door toevoeging van 48 % waterstofbromide onder koeling met ijswater. Zo wordt 18 g van de gewenste verbinding verkregen, opbrengst 72 %, 15 smeltpunt: hoger dan 300°C.

C9HgBrN4S = 249,136 elementaire analyse berekend gevonden C 28,93 % 29,23 % H 3,64 % 3,70 % 20 N 22,49 % 22,46 % S 12,87 % 12,85 %

Br" · 32,07 % 32,30 %

VOORBEELD XIV

7-amino-5--imino-2,3-dihydro-5H-thiazolo/3,2-a7pyri-25 midine

Een mengsel van 10,21 g (0,1 mol) 2-amino-thiazoli-ne, 6,61 g (0,1 mol) malondinitril en 200 ml dimethylformamide wordt omgezet bij 155°C gedurende 20 minuten. Het reactie-mengsel wordt afgekoeld tot kamertemperatuur, geklaard en 30 ingedampt. Het olie-achtige residu wordt gekristalliseerd uit acetonitril en gefiltreerd. Zo wordt 5,1 g van de gewenste verbinding verkregen, opbrengst 30%. Smeltpunt: hoger dan 300°C.

CgHgN4S= 168,218 35 elementaire analyse berekend gevonden C 42,84 % 42,81 % H 4,79 % 4,69 % N 33,31 % 33,29 % S 19,06 % 19,03 % .6703148 - 21 - k

VOORBEELD XV

9-amino-7-imino-2,3,4,5-tetrahydro-7H-thiazepino-/1 j 37/3,2-a_7pyrimidine-hydrobromide Een mengsel van 14,2 g (0,1 mol) 2-mercapto-4,6-di-5 amino-pyrimidine, 24,8 g (0,15 mol) 1.3 1,4-dibroombutaan, 200 ml dimethylformamide en 13,8 g (0,1 mol) kaliumcarbonaat wordt gedurende 11 uur geroerd bij 80°C. Het neergeslagen anorganische zout wordt afgefiltreerd, het reactiemengsel wordt geklaard, ingedampt en afgekoeld tot 10°C. Het neer-10 geslagen product wordt gefiltreerd, gewassen met isopropa-nol en gedroogd. Aldus verkrijgt men 23,3 g van de gewenste verbinding in een opbrengst van 84 %. Desvereist kan het product worden geherkristalliseerd uit een tienvoudige hoeveelheid van 50 % waterige ethanol. Smeltpunt: 283-284°C.

15 CgH13BrN4S - 277,19 elementaire analyse berekend gevonden C 34,66 % 34,65 % H 4,73 % 4,76 % N 20,21 % 19,58 % 20 S 11,57 % 11,35 %

Br" 28,83 % 28,19 %

VOORBEELD XVI

N-allyl-N1-(5-imino-2,3-dihydro-5H-thiazolo/3,2-a7-pyrimidine-7-yl)-thioureum 25 Een mengsel van 26,5 g (0,1 mol) 7-amino-5-imino- -2,3-dihydro-5H-thiazolo/3,2-a7pyrimidine-hydrocarbonaat--dihydraat en 14,87 g (0,15 mol) allylisothiocyanaat in 200 ml ethanol wordt tot koken verhit gedurende anderhalf uur. Nadat de reactie voltooid is wordt het reactiemengsel 30 afgekoeld tot 10°C, het produkt vervolgens gefiltreerd, gewassen met koude ethanol en gedroogd. Zo wordt 25,75 g van de gewenste verbinding verkregen, opbrengst 96,32 %. Bij herkristallisatie van het produkt uit 420 ml van een 4 : 1 mengsel van dimethylformamide en water verkrijgt men 21,4 g 35 product. Smeltpunt: 225-226°C.

C10H13N5S2 = 267'38 . 8)03148 i - 22 - elementaire analyse berekend gevonden C 44,92 % 45,70 % H 4,90 % 5,10 % N 26,19 % 26,25 % 5 - S 23,98 % 23,30 %

Aan een suspensie van 13,37 g (0,05 mol) van de bovengenoemde base in 100 ml isopropanol wordt een mengsel van isopropanol dat een eguimolaire hoeveelheid waterstof-chloride bevat druppelsgewijs toegevoegd bij 10°C onder 10 roeren. Het reactiemengsel wordt op deze temperatuur geroerd gedurende 2 uur, vervolgens gefiltreerd, gewassen met wat koude isopropanol en gedroogd. Zo verkrijgt men 15,19 g van het hydrochloride van de beoogde verbinding, opbrengst 100 %, smeltpunt: 186-187°C.

15 C1(JH14C1N5S2 = 3 03,84 elementaire ananlyse berekend gevonden S 39,53 % 39,47 % H 4,64 % 4,58 % N 23,05 % 22,95 % 20 S 21,11 % 21,15 %

Cl" 11,67 % 11,70 %

VOORBEELD XVII

N-fenyl-N1- (5-imino-2,3-dihydro-5H-thiazolo/3,2-aJ -pyrimidine-7-yl)-thioureum 25 Een mengsel van 26,5 g (0,1 mol) 7-amino-5-imino- -2,3-dihydro-5H-thiazolo/3,2-a7pyrimidine-hydrocarbonaat--dihydraat en 20,3 g (0,15 mol) fenylisothiocyanaat wordt omgezet zoals beschreven in voorbeeld XVI gedurende 35 minuten. Het reactiemengsel wordt opgewerkt. 30 g van de gewen-30 ste verbinding wordt verkregen in een opbrengst van 98,88 %. Het product kan worden geherkristalliseerd uit ethanol, indien nodig. Smeltpunt: 209-210°C.

c,3H13N5S2 = 3D3'413 elementaire analyse berekend gevonden 35 C 51,46 % 51,37 % H 4,32 % 4,41 % N 23,08 % 22,29 % S 21,14 % 21,04 % .8703148 V, - 23 - ί

Van 15,17 g (0,05 mol) van de bovengenoemde base wordt het hydrochloride gevormd zoals beschreven in voorbeeld XVI. Opbrengst 16,99 g (100 %), smeltpunt 178-179°C, C13H14C1N5S2 = 339,913 5 elementaire analyse berekend gevonden C 45,94 % 45,89 % H 4,15 % 4,10 % N 20,60 % 20,57 % S 18,87 % 18,85 % 10 Cl" 10,43 % 10,39 %

VOORBEELD XVIII

N-benzyl-N1-(5-imino-2,3-dihydro-5H-thiazolo/3,2--a7pyrimidine-7-yl)-thioureum

Een mengsel van 26,5 g (0,1 mol) 7-amino-5-imino- 15-2,3-dihydro-5H-thiazolo/3,2-sJ pyrimidine-hydrocarbonaat-dihydraat en 22,4 g (0,15 mol) benzylisocyanaat wordt omgezet zoals beschreven is in voorbeeld XVII. Na opwerken van het reactiemengsel verkrijgt men 31,2 g van de gewenste verbinding, opbrengst 98,8 % . Het product kan worden geher-20 kristalliseerd uit ethanol, indien nodig. Smeltpunt: 210-211°C.

C14H1SN5S2 = 317'440 elementaire analyse berekend gevonden C 52,97 % 52,63 % 25 H 4,77 % 4,65 %

N 22,06 % 21,27 S

S 20,20 % 20,17 %

Uit 15,87 g (0,05 mol) van de bovengenoemde base wordt het hydrochloride gevormd zoals beschreven in voor-30 beeld XVI. Opbrengst 17,69 g (100 %), smeltpunt: 201-202°C.

C14H16C1N5S2 = 353,898 elementaire analyse berekend gevonden C 47,52 % 47,48 % 35 H 4,56 % 4,53 % N 19,79 % 19,74 % S 18,12 % 17,94 %

Cl" 10,02 % 9,97 % .8703148 3 - 24 - *

VOORBEELD XIX

N-allyl-N' - (6-imino-3,4-dihydro-2H, 6H-pyrimido/~2,1 --ί7/Ί ,37thiazine-8-yl)-thioureum Een mengsel van 27,9 g (0,1 mol) 8-amino-6-imino-5 -3,4-dihydro-2H/6H-pyrimido/2/1-b7/"1,37thiazine-hydrocarbo-naat-dihydraat en 14,87 g (0,15 mol) allylisothiocyanaat wordt omgezet zoals beschreven in voorbeeld XIV. Het reac-tiemengsel wordt opgewerkt. Zo verkrijgt men 28,0 g van de gewenste verbinding in een opbrengst van 99,5 %. Het product 10 kan worden geherkristalliseerd uit ethanol, indien nodig. Smeltpunt: 196-197°C.

C11H15N5S2 = 281,407 elementaire analyse berekend gevonden C 46,95 % 47,39 % 15 H 5,37 % 5,41 % N 24,89 % 24,70 % S 22,79 % 22,69 %

Uit 14,07 g (0,05 mol) van de bovengenoemde base wordt het hydrochloride gevormd zoals beschreven in voor-20 beeld XVI. Opbrengst 15,8 g (100 %), smeltpunt: 175-176°C. C11H16C1N5S2 = 317,907 elementaire analyse berekend gevonden C 41,56 % 41,52 % H 5,07 % 4,95 % 25 N 22,03 % 21,97 % S 20,17 % 19,98 %

Cl" 11,15 % 11,21 %

VOORBEELD XX

N-fenyl-N'-(6-imino-3,4-dihydro-2H,6H-pyrimido-30 [2,1-b7/*1,37thiazine-8-yl) -thioureum

Een mengsel van 27,9 g (0,1 mol) 8-amino-6-imino--3,4-dihydro-2H,6H-pyrimido/2,1-b7/l,37thiazine-hydrocarbo-naat-dihydraat en 20,3 g (0,15 mol) fenylisothiocyanaat wordt omgezet zoals beschreven in voorbeeld XVI gedurende 2 uur.

35 Het reactiemengsel wordt vervolgens opgewerkt. Zo verkrijgt men 31,68 g van de gewenste verbinding, opbrengst 99,81 %. Smeltpunt: 215-216°C.

,8703148 - 25 - a C14H15N5S2 = 317'44 elementaire analyse berekend gevonden C 52,97 % 51,68 % H 4,76 % 4,67 % 5 N 22,06 % 21,57 % S 20,20 % 20,23 % 15,87 g (0,05 mol) van de bovengenoemde base wordt omgezet in het hydrochloride, zoals beschreven in voorbeeld XVI. Opbrengst 17,60 g (100 %), smeltpunt: 10 157-158°C.

C14H16C1N5S2 = 353,898 elementaire analyse berekend gevonden C 47,52 % 47,85 % H 4,56 % 4,59 % 15 N 19,79 % 19,63 % S 18,12 % 17,98 %

Cl 10,02 % 9,89 %

VOORBEELD XXI

N-benzyl-N1-(6-imino-3,4-dihydro-2H,6H-pyrimido-20 /2,1-hj/1,3/thiazine-8-yl)-thioureum

Een mengsel van 27,9 g (0,1 mol) 8-amino-6-imino--3,4-dihydro-2H, 6H-pyrimido/‘2,1 -bj /1,3/thiaz ine-hydrocarbo-naat-dihydraat en 22,4 g (0,15 mol) benzylisothiocynaat wordt omgezet zoals beschreven in voorbeeld XVI gedurende 45 minu-25 ten. Het reactiemengsel wordt opgewerkt. Aldus verkrijgt men 32,98 g van de gewenste verbinding, opbrengst 99,5 %. Het product kan worden geherkristalliseerd uit ethanol, indien nodig. Smeltpunt: 210-211°C.

C15H17N5S2 = 331'466 30 elementaire analyse berekend gevonden C 54,35 % 54,28 % H 5,17 % 5,07 % N 21,13 % 20,98 % S 19,35 % 19,22 % 35 16,57 g (0,05 mol) van de bovengenoemde base wordt omgezet in het hydrochloride. Opbrengst 13,35 g (100 %).

Smeltpunt: 189-190°C.

C15H18C1N5S2 = 367'924 fi 7 ft ~ i Sf t - 26 - elementaire analyse berekend gevonden C 48,97 % 48,67 % H 4,93 % 5,03 % N 19,04 % 18,97 % 5 S 17,43 % 16,93 %

Cl“ 9,64 % 9,43 % 10 .8/03148

Claims

1. Gecondenseerde pyrimidinederivaten met de algemene formule 1, waarin A staat voor -CH2-CH2-, -CH2~CE2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-CH2-of -CH=CH-; 4 5. waterstof, C^-alkyl of eventueel gesubstitueerd fenyl voorstelt; r is 0, 1,2, 3 of 4; R staat voor waterstof of C -alkanoyl; 2 1 —5 R is waterstof, C^_,--alkanoyl of een groep met algemene for-10 mule 1a, waarin R waterstof, C^^-alkyl, C2_4-alkenyl, fenyl of fenyl--C.j_2-alkyl is en R^ waterstof is, alsmede farmaceutisch aanvaardbare zuuradditiezouten daarvan 15 en hydraten van de verbindingen met de algemene formule 1 en zuuradditiezouten daarvan.

2. Verbindingen volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat A staat voor -CEL-CH0- of -CH^-CH^-CH.,-; R waterstof of methyl voorstelt; r is 1; R en RJ water-2 20 stof zijn en R waterstof of een groep met de algemene formule 1, waarin R ethyl voorstelt, is.

3. Eén of meer van de volgende verbindingen met de algemene formule 1 7- amino-5-imino-2,3-dihydro-5H-thiazolo/3,2-a7pyrimidine; 25 8-amino-6-imino-3,4-dihydro-2H,6H-pyrimido ƒ2,1-hjfi, 3/thia- zine; 8- amino-6-imino-3-methyl-2H,eH-pyrimido^, 1 -hj/j ,3_7-thiazine; N-ethyl-N'-(5-imino-2,3-dihydro-5H-thiazolo/3,2-a/pyrimidine--7-yl)-thioureum 30 alsmede farmaceutisch aanvaardbare zuuradditiezouten.daarvan.

4. Werkwijze voor de bereiding van gecondenseerde pyrimidinederivaten met de algemene formule 1, waarin A staat voor -CH2-CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2“CH2- Of -CH=CH-; 4 35. is waterstof, C^_4~alkyl of eventueel gesubstitueerd fenyl; . 8 / 0 ol 4 £ - 20 - * r is 0, 1, 2, 3 of 4; R staat voor waterstof^of C. --alkanoyl; 2 ' R betekent waterstof, _,_“alkanoyl of een groep met de algemene formule 1a, waarin

5 -C1 --alkyl is en 3 l~J R waterstof is? en Y staat voor halogeen, alsmede zuuradditiezouten daarvan.

5. Werkwijze volgens methode a) van conclusie 4, gekenmerkt door het uitvoeren van de reactie tussen de verbindingen met de algemene formulae 2 en 3 in aanwezigheid van een zuurbindend middel.

5 -R waterstof, C^^-alkyl, C2_^-alkenyl, fenyl of fenyl--C^_2-alkyl is en R3 staat voor waterstof, alsmede farmaceutisch aanvaardbare zuuradditiezouten daarvan en hydraten van de verbindingen met de algemene formule 1 10 en ... zuuradditiezouten daarvan, gekenmerkt door a) het omzetten van een 2-mercapto-4,6-diamino- -pyrimidinederivaat met de algemene formule 2, waarin 1 2 3 R , R en R de hierboven gedefinieerde betekenissen hebben, met een dihalogeenverbinding met de algemene formule 3, 15 waarin Y halogeen,bij voorkeur broom voorstelt; Z halogeen, bij voorkeur chloor of broom is en A, R^ en r de hierboven vermelde betekenissen hebben; of b) het omzetten van een 2-mercapto-4,6-diamincrpyri-midinederivaat met de algemene formule 2 met een dihalogeen- 20 verbinding met de aLgemene formule 3 en het onderwerpen van de aldus gevormde verbinding met de algemene formule 4, 12 3 4 waarin A, R, R, R, R, Yenrde hierboven vermelde betekenissen hebben, aan cyclisering na isolatie ervan; of c) het omzetten van een verbinding met de algemene 1 2 25 formule 1, waarin R en/of R staat (staan) voor waterstof, 5 met een carbonzuur met de algemene formule 5, waarin R waterstof of C^^-alkyl is, of een reactief derivaat daarvan; of d) het omzetten van een verbinding met de algemene 2 30 formule 1, waarin R waterstof is, met een isothiocyanaat met de algemene formule 6, waarin R de eerdervermelde betekenissen heeft; of e) het omzetten van een verbinding met de algemene formule 7, waar A' staat voor -Cï^-CI^- of -CH=CH- en R^ en 35. de eerdergegeven betekenissen hebben, met malondinitril met de algemene formule 8; en, desgewenst, het omzetten van een verbinding met de alge- - 29 - £ mene formule 1 in een farmaceutisch aanvaardbaar zuuraddi-tiezout ervan of het vrijmaken van een base met de algemene formule 1 uit een zuuradditiezout daarvan of het omvormen van een verbinding met de algemene formule T of een farma-5 ceutisch aanvaardbaar-zuuradditiezout daarvan in.een hydraat.

6. Werkwijze volgens conclusie 5, geken merkt door het gebruik van alkalicarbonaat, alkalihy-drogeencarbonaat, alkalihydroxide, aardalkalihydroxide of tertiair amine, bij voorkeur kaliumcarbonaat of natriumcar-bonaat, als zuurbindend middel.

7. Werkwijze volgens ëên der conclusies 4a, 5 en 6, gekenmerkt door het uitvoeren van de reactie in een inert organisch oplosmiddel.

8. Werkwijze volgens conclusie 7, gekenmerkt door het gebruik van een dialkylamide, dialkyl-20 sulfoxide, alifatische alcohol, gechloreerde . 1 X... alifatische alcohol, aromatische koolwaterstof, alifatische ether, alifatische koolwaterstof, alifatisch keton of een mengsel van twee of meer van deze oplosmiddelen, bij voorkeur dimethylformamide, als oplosmiddel.

9. Werkwijze volgens één der conclusies 4a en 5 tot 8, gekenmerkt door het uitvoeren van de reactie bij een temperatuur tussen kamertemperatuur en het kookpunt van het reactiemengsel.

10. Werkwijze volgens methode b) van conclusie 4, 30. e t het kenmerk, dat de vorming van de verbinding met de algemene formule 4 onder geringe verhitting, bij voorkeur bij 30 - 50°C, met bijzonder voordeel bij een temperatuur tussen 40°C en 45°C, wordt uitgevoerd.

11. Werkwijze volgens methode c) van conclusie 4, 35gekenmerkt door het gebruik van een anhydride, halogenide of ester als reactief derivaat van een carbon-zuur met de algemene formule 5.

12. Werkwijze volgens conclusie 11, met het -8703148 - 30 - * 4 kenmerk, dat de acylering wordt uitgevoerd met een zuurhalogenide van een carbonzuur met de algemene formule 5 in aanwezigheid van een zuurbindend middel.

13. Werkwijze volgens conclusie 11, met het 5 kenmerk, dat de acylering wordt uitgevoerd met een anhydride van een carbonzuur met de algemene formule 5 en de overmaat van het zuuranhydride wordt gebruikt als reactie-medium.

14. Werkwijze volgens één der conclusies 11-13, 10 ge.kenmerkt door het uitvoeren van de reactie bij een temperatuur tussen 10°C en het kookpunt van het reactie-mengsel.

15. Werkwijze volgens methode d) van conclusie 4, gekenmerkt door het uitvoeren van de reactie bij 15 een temperatuur tussen kamertemperatuur en het kookpunt van het reactiemengsel.

16. Farmaceutische preparaten die als werkzaam bestanddeel tenminste één verbinding met de algemene formule 12 3 4 1, waarin A, R , R , R , R en r zijn zoals gedefinieerd in 20 conclusie 1, of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditie-zout of een hydraat daarvan bevatten in vereniging met geschikte inerte vaste of vloeibare dragers.

17. Werkwijze voor de bereiding van farmaceutische preparaten volgens conclusie 16, gekenmerkt door 25 het mengen van een verbinding met de algemene formule 1 of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout of hydraat daarvan met geschikte inerte vaste of vloeibare therapeutische dragers.

18. Verbindingen met de algemene formule 1, be-30 reid volgens de werkwijze in één der conclusies 4-15.

19. Verbindingen met de algemene formule 4, waarin A staat voor -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-CH2-Of -CH=CH-; 4 35. is waterstof, C^_^-alkyl of eventueel gesubstitueerd fe-nyl; r is 0, 1, 2, 3 of 4; . 8702US ♦ - 31 - * R staat voor waterstof of C1 --alkanoyl 2. w) R staat voor waterstof, C^_^-alkanoyl of een groep met de algemene formule 1a, waarin R waterstof, C^_^-alkyl, -alkenyl, fenyl of fenyl-

20. Werkwijze voor de bereiding van verbindingen •I Λ Λ 10 met de algemene formule 4, waarin A, Y, r, R , R , R° en 4 R zijn zoals gedefinieerd in conclusie 19, alsmede zuuradditiezouten daarvan, gekenmerkt door het omzetten van een 2-mercapto-4,6-diamino-pyrimidine met de algemene 12 3 formule 2, waarin R , R en R zijn zoals hierboven vermeld, 15 met een dihalogeenverbinding met de algemene formule 3, waarin Y halogeen, bij voorkeur broom, voorstelt? Z halogeen, 4 bij voorkeur chloor of broom is, en A, R en r de eerder-gegeven definities hebben, en, desgewenst, het omzetten van de aldus verkregen verbinding met de algemene formule 4 in 20 een zuuradditiezout daarvan.

21. Werkwijze volgens conclusie 20, gekenmerkt door het uitvoeren van de reactie in aanwezigheid van een zuurbindend middel.

22. Werkwijze volgens conclusie 21, geken-25 merkt door het gebruik van een alkalicarbonaat, alkali- hydrogeencarbonaat, alkalihydroxide, aardalkalihydroxide of tertiair amine, bij voorkeur kaliumcarbonaat of natriumcar-bonaat, als zuurbindend middel.

23. Werkwijze volgens êên der conclusies 20-22, 30 gek e n m e r k t door het uitvoeren van de reactie in een inert organisch oplosmiddel.

24. Werkwijze volgens conclusie 23, gekenmerkt door het gebruik van een dialkylamide, dialkylsul-foxide, alifatische alcohol, gechloreerde alifatische kool- 35 waterstof, aromatische koolwaterstof, alifatische ether, alifatische koolwaterstof, alifatisch keton of een mengsel van twee of meer van de bovengenoemde oplosmiddelen,bij ft 7 0 '' I / P , P ƒ i V * ‘t 8 J - 32 - •A voorkeur dimethylformamide, als inert organisch oplosmiddel.

25. Werkwijze volgens één der conclusies 20-24, gekenmerkt door het uitvoeren van de reactie bij 0-50°C, bij voorkeur bij een temperatuur tussen 40°C en 5 45°C.

26. Werkwijze zoals in de aanvrage wezenlijk beschreven, met bijzondere verwijzing naar de voorbeelden.

27. Gebruik van verbindingen met de algemene formule 1 of farmaceutisch aanvaardbare zuuradditiezouten en 10 hydraten daarvan voor de bereiding van farmaceutische preparaten met een immunostimulerend effect. 15 8 7 Λ $ ï Λ / y 4 # §