NL8602878A

NL8602878A - Thiazolo4,5-cchinolinederivaten, werkwijze voor hun bereiding, alsmede dergelijke derivaten bevattende farmaceutische preparaten.

Info

Publication number: NL8602878A
Application number: NL8602878A
Authority: NL
Original assignee: Egyt Gyogyszervegyeszeti Gyar
Priority date: 1985-11-12
Filing date: 1986-11-12
Publication date: 1987-06-01
Also published as: YU192186A; BE905719A; SE8604839L; ZA868583B; CN86107754A; AU6508986A; HU197019B; SE8604839D0; BG46156A3; SU1544190A3; DK539786A; IL80611A0; NO864518L; JPS62161792A; DD254202A5; PL148186B1; NO864518D0; DK539786D0; FI864611A0; IT8622312A0

Description

NL 33.873-Kp/dJ/vdM * < - 1 -

Thiazolo/4,5-c7chinolinecLerivaten, werkwijze voor hun bereiding, alsmede dergelijke derivaten bevattende farmaceutische preparaten.

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op nieuwe thiazolo/4,5-c7isochinolinederivaten, op een werkwijze voor de bereiding daarvan, alsmede op farmaceutische preparaten die dergelijke derivaten bevatten.

5 Door Bachmann et al. werd in J. Am. Chem. Soc.

69, 365-371 (1947) 2-methyl-thiazolo/4,5-c7chinoline beschreven. In deze beschrijving werd echter omtrent enige biologische activiteit van de genoemde verbinding niets vermeld.

Volgens één aspect verschaft de onderhavige uit-10 vinding nieuwe thiazolo/4,5-c7chinolinederivaten met de algemene formule 1 van het formuleblad, waarin R waterstof, een rechte of vertakte alkylgroep met 2-5 koolstofatomen, desgewenst gesubstitueerd door één of meer halogeenatomen, of fenyl of fenyl-(lager alkyl), welk desge-15 wenst één of meer substituenten op de fenylring draagt, voorstelt; 1 2 R en R al dan niet hetzelfde zijn en waterstof, halogeen of lager alkyl voorstellen? alsmede zuuradditiezouten daarvan.

20 De term "rechte of vertakte alkylgroep met 2-5 koolstofatomen" kan bijv. zijn ethyl, n- of isopropyl, n-butyl, sec-butyl, isobutyl of tert-butyl, n-amyl of isoamyl. Wanneer R voor fenyl of fenyl-(lager alkyl) staat, kan de fenylring desgewenst één of meer identieke of verschillende 25 substituenten, bijv. halogeen, lager alkyl, lager alkoxy, hydroxy, nitro, amino of mono- of di-alkylamino, enz. dragen.

De fenyl-(lager alkyl)-groep kan bijv. benzyl of β-fenylethyl zijn. De term ”lager" heeft betrekking op rechte of vertakte groepen met 1-4 koolstofatomen. De term "lager alkoxy" heeft 30 betrekking op rechte of vertakte alkoxygroepen met 1-4 kool-stofatomen (bijv. methoxy, ethoxy, n-propoxy of isopropoxy).

8602878 - 2 - * i

De "rechte of vertakte alkylgroep met 2-5 kool-stofatomen" (R) kan desgewenst gesubstitueerd zijn door één of meer halogeenatomen, bijv. chloormethyl, dichloormethyl, * trichloormethyl, trifluormethyl, β-chloorethyl, enz. De term 5 "halogeen" omvat fluor-, chloor-, broom- of joodatomen.

De zuuradditiezouten van de verbindingen met de algemene formule ΐ van het formuleblad kunnen zijn gevormd met anorganische zuren (bijv. minerale zuren, zoals zoutzuur, waterstofbromide, zwavelzuur, fosforzuur, enz.), of organische 10 zuren (bijv. appelzuur, fumaarzuur, wijnsteenzuur, methaan-sulfonzuur, ethaansulfonzuur, enz.). De met farmaceutisch aanvaardbare anorganische of organische zuren gevormde farmaceutisch aanvaardbare zouten verdienen in het bijzonder de voorkeur. Als gunstige vertegenwoordigers van de farmaceutisch 15 aanvaardbare zuuradditiezouten kunnen de hydrochloriden en ethaansulfonaten worden vermeld.

Een bijzonder geschikte vertegenwoordiger van de verbindingen met de algemene formule T van het formuleblad is het thiazolo/4,5-c7chinoline en farmaceutisch aanvaardbare 20 zuuradditiezouten daarvan, in het bijzonder het hydrochloride en ethaansulfonaat.

Volgens een verder aspect verschaft de onderhavige uitvinding een werkwijze voor de bereiding van verbindingen met de algemene formule t van het formuleblad, waarin 25 R waterstof, een rechte of vertakte alkylgroep met 2-5 koolstofatomen, desgewenst gesubstitueerd door één of meer halogeenatomen, of fenyl of fenyl-(lager alkyl), dat desgewenst één of meer substituenten op de fenylring draagt, voorstelt; 1 2 30 R en R identiek of verschillend zijn en water stof, halogeen of lager alkyl voorstellen; alsmede farmaceutisch aanvaardbare zouten daarvan, gekenmerkt door a) het omzetten van een 3-amino-4-mercapto-chino- 35 line met de algemene formule 2 van het formuleblad, waarin 1 2 R en R de hierboven vermelde betekenissen hebben, of een zuuradditiezout daarvan met een carbonzuur met de algemene formule 3 : van het formuleblad, waarin R de boven vermelde 8602878 « i - 3 - betekenissen heeft, of een reactief derivaat daarvan; of b) het omzetten van een 3-amino-4-mercapto-chino-line met de algemene formule 2 van het formuleblad, of een zuuradditiezout daarvan met een aldehyde met de algemene for- 5 mule 5 van het formuleblad, waarin R de boven vermelde betekenissen heeft, in aanwezigheid van een oxidatiemiddel; of c) het cycliseren van een verbinding met de 1 2 algemene formule 4 van het formuleblad, waarin R, R en R de eerder vermelde betekenissen hebben; 10 en, desgewenst, het omzetten van een aldus ver kregen verbinding met de algemene formule t van het formuleblad in een zuuradditiezout of het vrijmaken van dezelfde verbinding uit een zout.

Volgens werkwijzevariant a) wordt een 3-amino-4-15 mercaptochinoline met de algemene formule 2 : van het formuleblad of een zuuradditiezout daarvan (bijv. hydrochloride) omgezet met een carbonzuur met de algemene formule 3 van het formuleblad of een.reactief derivaat daarvan. Als reactief zuurderivaat wordt bij voorkeur een anhydride, een trialkyl-20 orthocarboxylaat, een zuurhalide of ester gebruikt. Het reac-tieve derivaat van het zuur (bijv. anhydride_of trialkyl-orthocarboxylaat) kan in een overmaat worden gebruikt wanneer het tevens dient als reactiemedium. Men kan tevens tè werk gaan door de verbinding met formule 2 van het formuleblad en het 25 zuur met algemene formule 3 van het formuleblad of een reactief derivaat daarvan, in equimolaire hoeveelheden toe te passen en de reactie uit te voeren in aanwezigheid van een inert oplosmiddel. Als reactiemedium worden bij voorkeur aromatische koolwaterstoffen (bijv. benzeen, tolueen of 30 xyleen) gebruikt. De reactie kan worden uitgevoerd bij een temperatuur tussen 20-160°C; bij voorkeur gaat men te werk bij het kookpunt van het reactiemengsel.

Volgens een bijzonder geschikte uitvoeringsvorm van werkwijzevariant a) wordt een 3-amino-4-mercaptochinoline 35 met formule 2 van het formuleblad omgezet met een overmaat van een trialkylorthocarboxylaat bij een temperatuur tussen 100-160°C, bij voorkeur bij een temperatuur die 5-10°C lager is dan het kookpunt van het trialkylorthocarboxylaat en wordt 8602878

f V

- 4 - uit het reactiemengsel op continue wijze het bij de reactie gevormde alkanol verwijderd. Men kan bij voorkeur een tri-ethylorthocarboxylaat toepassen. Nadat de reactie voltooid is wordt het reactiemengsel afgekoeld tot kamertemperatuur.

5 Volgens een verdere voorkeursuitvoering wordt de verbinding met de algemene formule 2 van het formuleblad omgezet in een overmaat van een anhydride van het zuur met de algemene formule 3 van het formuleblad bij het kookpunt, echter bij een temperatuur lager dan 160°c.

10 De verbinding met formule 1 van het formuleblad kan worden geïsoleerd uit het reactiemengsel in de vorm van de vrije base of een zuuradditiezout daarvan middels bekende methoden (bijv. extractie, afkoeling, verdamping of filtratie).

Volgens werkwijzevariant b) wordt een 3-amino-4-15 mercaptochinoline met de algemene formule 2 van het formuleblad of een zuuradditiezout daarvan (bij voorkeur het hydrochloride) , omgezet met een aldehyde met de algemene formule 5 van het formuleblad, in aanwezigheid van een geschikt oxidatiemiddel, bij voorkeur lucht. De reactie wordt bij voorkeur 20 uitgevoerd in aanwezigheid van een inert organisch oplosmid-.. del. Als reactiemedium wordt bij voorkeur een alkanol (bijv.

methanol, ethanol of isopropanol) gebruikt. De reactie kan worden uitgevoerd tussen 20-160°C, bij; voorkeur bij het kookpunt van het reactiemengsel. Het aldehyde met de algemene formule 5 25 van het formuleblad kan in een equimolaire hoeveelheid of in een geringe overmaat (5-20 %) worden toegepast.

De verbinding met formule 1 van het formuleblad kan worden geïsoleerd uit het reactiemengsel met behulp van bekende methoden (bijv. afkoeling, verdunning met water, 30 filtratie).

Volgens werkwijzevariant c) wordt een 3-acylamido- 4-mercaptochinoline met de algemene formule 4 van het formuleblad onderworpen aan cyclisering. De ringsluiting wordt bij voorkeur uitgevoerd in een inert oplosmiddel. Als reactie-35 medium wordt bij voorkeur een aromatische koolwaterstof (bijv. benzeen, tolueen of xyleen) of een gehalogeneerde koolwaterstof (bijv. chloorbenzeen) toegepast. De reactie kan worden uitgevoerd bij hoge temperatuur, in het bijzonder bij 100- 8602878 * \ - 5 - 180°C.

De cyclisering kan worden bevorderd door de reactie uit te voeren in aanwezigheid van een water-onttrekkend middel. Polyfosforzuur bleek vooral geschikt te zijn voor dit 5 doel. Het is bijzonder gunstig om de reactie uit te voeren in een overmaat polyfosforzuur als reactiemedium onder verhitting in afwezigheid van een organisch oplosmiddel.

De verbinding met formule 1 van het formuleblad kan worden geïsoleerd uit het reactiemengsel met behulp van 10 bekende methoden (bijv. verdunning met water, alkalisering, extractie met een organisch oplosmiddel).

De verbinding met formule 1 van het formuleblad kan worden omgezet in een farmaceutisch aanvaardbaar zuuraddi-tiezout door het tot reactie te brengen met het overeenkomsti-15 ge zuur. De zoutvorming kan op een op zichzelf bekende wijze plaatsvinden. De base van de verbinding met formule 1 van het formuleblad kan worden vrij gemaakt uit de zuuradditiezouten met behulp van op zichzelf bekende methoden.

De uitgangsstoffen met de algemene formules 2: en 20 4 van het formuleblad zijn bekend en kunnen worden bereid volgens de in J. Am. _Chem. Soc. 69, 365-371 (1947) beschreven methode.

De overige uitgangsstoffen (verbindingen met de algemene formules 3 en 5 van het formuleblad) zijn commer-25 ciële produkten.

Volgens een verder aspect verschaft de onderhavige uitvinding farmaceutische preparaten, bevattende een thiazo-lo^4,5-c7chinoline met de algemene formule :t van het formuleblad of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout daarvan 30 vermengd met geschikte inerte vaste of vloeibare farmaceutische dragers.

De farmaceutische preparaten kunnen geschikt zijn voor orale (bijv. tabletten, beklede pillen, dragees, harde of zachte gelatinekapsules, oplossingen, emulsies of suspen-35 sies), parenterale (bijv. injecteerbare oplossingen) of rectale (bijv. suppositoria) toediening.

De farmaceutische preparaten volgens de onderhavige uitvinding kunnen worden bereid door in de farmaceutische 8602878 4 * - 6 - industrie bekende methoden door vermenging van een thiazolo-/4,5-c7chinoline met de algemene formule 1 van het formuleblad of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout daarvan, met geschikte inerte vaste of vloeibare farmaceutische dragers en 5 het mengsel tot een galenische vorm te verwerken.

Tabletten, beklede pillen, dragees en harde gelatinekapsules kunnen als drager bijv. lactose, maïszetmeel, talk, magnesiumcarbonaat, magnesiumstearaat, calciumcarbonaat, stearinezuur of zouten daarvan, bevatten.Zachte gelatinekapsu-10 les kunnen als drager bijv. plantaardige oliën, vetten, was of polyolen met een geschikte consistentie, bevatten. Wanneer oplossingen of siropen worden bereid, kunnen bijv. water, polyolen, polyethyleenglycol, saccharose of glucose worden gebruikt als drager. Injecteerbare oplossingen kunnen bijv.

15 water, alcoholen, polyolen, glycerol of plantaardige oliën als drager bevatten. Suppositoria kunnen als drager bijv. oliën, was, vetten, cacaoboter of polyolen met een geschikte consistentie bevatten.

De farmaceutische preparaten volgens de onderha-20 vige uitvinding kunnen tevens conventionele hulpmiddelen bevatten, die gewoonlijk in de farmaceutische industrie worden toegepast. Uit het omvangrijke gebied van conventionele toevoegsels kunnen bevochtigingsmiddelen, dispergeermiddelen, verduurzamingsmiddelen, emulgeermiddelen, oplosbaar-makende 25 middelen, kleurmiddelen, zoetstoffen, aromastoffen en zouten, die geschikt zijn voor het wijzigen van de osmotische druk, worden vermeld.

De dagelijkse dosering van het thiazolo/4,5-c7“ chinoline kan variëren tussen brede grenzen. Ter illustratie 30 wordt opgemerkt, dat de dosis van de verbinding met de algemene formule 1 van het formuleblad bij orale toediening kan liggen tussen ca. 20 mg/kg en ca. 1000 mg/kg, terwijl de parenterale dosis ca. 5 mg/kg tot ca. 250 mg/kg kan bedragen. Opgemerkt wordt, dat de boven genoemde intervallen slechts 35 benaderingen zijn en dat de werkelijke dosis altijd afhangt van diverse factoren, bijv. de ernst van de ziekte, leeftijd en conditie van de patient, enz., en wordt bepaald door de arts. De werkelijke dosis kan zelfs onder of boven de genoemde 8602878 * i - 7 - grenzen liggen.

De verbindingen met de algemene formule 1 van het formuleblad en farmaceutisch aanvaardbare zuuradditiezouten daarvan bezitten een waardevol, zeer interessant en speciaal 5 werkingsspectrum. De verbindingen met de algemene formule 1 van het formuleblad vertonen een depressieve werking op het centrale zenuwstelsel, die verschilt van die van bekende centrale depressieve middelen. In tegenstelling tot de meeste kalmerende middelen inhiberen de verbindingen met de algemene 10 formule 1 van het formuleblad niet een niet-specifiek active-ringsmechanisme en maken derhalve, zelfs bij toediening in hoge doses, de ontsnapping van dieren mogelijk in de een-sessie. ongeconditioneerde reflextest. Conventionele kalmerende middelen veroorzaken reeds bij minimale doses een volledige 15 inhibitie van deze reactie.

Het voornaamste verschil in werking tussen de verbindingen met de algemene formule 1. van het formuleblad en benzodiazepines is gelegen in het feit, dat de verbindingen met de algemene formule 1 van het formuleblad ontbloot zijn 20 van een spasmolytische werking en tegelijkertijd een significant sterkere depressieve werking op het centrale zenuwstelsel vertonen dan benzodiazepines. Bovendien worden de verbindingen met de algemene formule 1 van het formuleblad niet gebonden aan benzodiazepine-receptoren.

25 De farmacologische activiteit van de nieuwe ver bindingen met de algemene formule 1 van het formuleblad is aangetoond door de volgende testen.

1. Toxiciteitsstudies

De acute toxiciteit werd bepaald op CFY-ratten 30 (100-160 g). Groepen van 10 ratten werden gebruikt. De verbindingen werden oraal (in een hoeveelheid van 10 ml/kg) en s.c. (in een hoeveelheid van 5 ml/kg) toegediend. In het geval van orale toediening werden de dieren uitgehongerd gedurende 16 uur voor het experiment. Elke dosis werd toegediend aan 35 een groep van dieren, die gelijkelijk onderverdeeld waren in mannelijke en vrouwelijke exemplaren. De sterfgevallen die optraden binnen 48 uur werden in aanmerking genomen. Lofwaarden werden berekend op basis van de grafische methode van 8602878 - 8 -

Litchfield en Wilcoxon.

Thiazolo/4,5-c7chinolinehydrochloride LD^q = 55 mg/kg i.v.

260 mg/kg s.c.

5 350 mg/kg p.o.

Thiazolo/4,5-c/chinoline-ethaansulfonaat LD^g = 51 mg/kg i.v.

280 mg/kg s.c.

290 mg/kg p.o.

10 2. Hete-plaattest

De methode van Woolfe en McDonald (1944), zoals gewijzigd door PórszSsz en Herr (1950) werd toegepast. Het effect van elke dosis van de geneesmiddelen werd gecontroleerd op een groep van 10 ratten. De experimenten werden uitgevoerd 15 op metalen platen, die werden gehouden op een temperatuur van 56°C. De latentietijd van pijnreacties werd bepaald voorafgaande aan en 1 uur na de toediening van de testverbinding. Wanneer de reactietijd werd verlengd met meer dan 2,5 maal de controlewaarde, werd dat beschouwd als 100 % werking.

20 Thiazolo/4,5-c7chinolinehydrochloride EDj-q = 7,5 mg/kg s.c.

60 mg/kg p.o.

Thiazolo/4,5-c7chinoline-ethaansulfonaat EDj-g = 8 mg/kg s.c.

25 72 mg/kg p.o.

3. Algolytische test

De experimenten werden uitgevoerd volgens een methode die door Knoll in 1967 uitvoerig werd beschreven. Het wezen van de methode is, dat de i.v.- of s.c.-toediening van 30 10 mg/kg morfine de complete analgesia teweeg brengt in de rat, zodat een laparatomie kan worden uitgevoerd zonder het geringste teken van pijn of spanning of het optreden van post- 8602878

» V

- 9 - operatieve prostratie. Het pijngevoel wordt uitgedrukt in willekeurige eenheden op basis van goed gedefiniëerde criteria. Bij toekenning van 100 punten voor de pijnreactie in onbehandelde dieren en 0 voor een complete analgesia, is de 5 ED100 van een geneesmiddel de dosis, welke de pijn bij het dier volledig blokkeert en is de ED^g de dosis, welke het aantal punten vermindert tot 50. Slechts narcotische analge-tica zijn effectief in deze test. De testverbindingen beïnvloeden niet het chirurgische pijngevoel bij de rat.

10 4. Ineenkrimptest (peritoneaal)

De oorspronkelijk door van der Wende (1956) beschreven methode voor ratten, gemodificeerd door Witkin et al. (1961), resp. Koster en Anderson (1959), werd toegepast voor muizen. Elke dosis werd toegediend aan een groep van 10 15 muizen en na 20 minuten werd 60 mg/kg van een 0,6 % azijnzuur-oplossing i.p. geïnjecteerd. Ten gevolge van een chemische irritatie van het peritoneum kan een karakteristiek ineenkrimpen worden waargenomen bij 90 % van de controledieren.

Tien met de testverbindingen behandelde dieren werden onder 20 observatie gehouden gedurende 20 minuten, volgend op de i.p.-injectie van het zuur. Het analgetische effect van de afzonderlijke doses werd uitgedrukt in procenten: * analgetisch effect = 100 - dieren 3 ineenkrimpen controledieren

De noemer werd genomen als 90 % op basis van voorafgaand con-25 trole-onderzoek en de relevante literatuur.

Bij vergelijking van de resultaten, welke werden verkregen in de hete-plaattesten, kon een zwakkere werking in de laatst genoemde test worden waargenomen. Derhalve kan worden geconcludeerd, dat in de hete-plaattest - welke niet-30 selectief is voor de analgetische werking - niet slechts de analgetische, maar ook andere niet-specifieke centrale werkingen, die tevens leiden tot de verlenging van de reactietijd zijn gemeten.

Thiazolo/4,5-c/chinolinehydrochloride 35 ED50 = 22 nig/kcf s.c.

8602878 * v - 10 - 82 mg/kg p.o.

Thiazolo/4.5-c7chinoline-ethaansulfonaat ED^q = 56 mg/kg s.c.

70 mg/kg p.o.

5 5. Narcose mogelijk-makend effect

De slaaptijden werden bepaald voor groepen van 10 mannelijke CFY-ratten met een gewicht van 150-200 g per stuk. Inactine (35 mg/kg) werd geïnjecteerd in de staartader. De tijdstippen waarop de dieren hun oprichtreflex verloren en 10 herwonnen werden opgenomen. De controleslaaptijd bedroeg 425,49 ± 34,2 seconden (n = 120).

Beide teststoffen verlengden op significante wijze de controlebarbituraat-narcosetijd: thiazolo/4,5-c7chinolinehydrochloride 15 ED5q « 22 s.c.

22 p.o.

thiazolo/4,5-c7chinoline-ethaansulfonaat ED50 = 22 s.c.

32 p.o.

20 6. Gemodificeerde sprongtest

Deze test werd uitgewerkt voor het onderzoeken van psycho-actieve geneesmiddelen. De opstelling bestond uit een metalen plaat van 45°C en uit een glazen cylinder met open boven- en onderzijde. De onder de glazen cylinder op de 25 plaat geplaatste dieren liet men ëén maal opspringen. De latentietijd tussen het plaatsen en opspringen werd opgetekend. De tijd die nodig was voor ontsnapping (opspringen) is genomen als index voor de prikkelbaarheid van het centrale zenuwstelsel (CZS) en wordt uitgedrukt in eenheden van 0 tot 30 10. De geteste verbindingen bleken niet werkzaam te zijn bij de gemodificeerde sprongtest.

7. Screeningtest I werd uitgewerkt ter bestudering van het leren en onthouden van ratten gedurende de een-sessie conditionering.

8602878 - 11 -

Gedurende het conditioneren werden ratten getraind om op de bovenzijde van een glazen cylinder te springen met behulp van de electrische voet-schok (110 V). De ontsnappingsreactie (ongeconditioneerde reflex, OR) werd gecombineerd 5 met een bel als geconditioneerde stimulus. Het criterium voor het aanleren is, dat de geconditioneerde reflex (CR) 10 maal dient te worden uitgelokt met intervallen van 10 seconden zonder versterking. Het behoud van CR wordt positief beoordeeld, wanneer 24 uur na het experiment de CR kan worden uit-10 gelokt. In deze experimenten werden dieren verdeeld in 4 categorieën op basis van hun leervermogen. Het leervermogen is: afwezig, wanneer binnen 20 opeenvolgende proeven de ongeconditioneerde reflex (OR) niet optreedt; gering, wanneer OR optreedt, maar de geconditioneerde reflex (CR) niet; 15 middelmatig, wanneer CR optreedt na enkele extra combinaties; en uitstekend, wanneer CR 10 maal kan worden uitgelokt onmiddellijk na het combineren.

De verbindingen met de algemene formule 1 van het formuleblad inhiberen de ontwikkeling van de conditionele 20 reflex in deze test. In een dosis van 25 mg/kg veroorzaken thiazolo/4,5-c7chinolinehydrochloride en -ethaansulfonaat een volledige remming, terwijl 10 mg/kg een sterke remming veroorzaakt.

Een geringe dosis van haloperidol (0,025 mg/kg) 25 resulteerde in een sterke inhibitie bij het ontwikkelen van de geconditioneerde reflex, terwijl chloordiazepoxide in een dosis van 10 mg/kg niet de ontwikkeling van CR beïnvloedt.

8. Pendel-doos

De verkrijging van een tweeweg geconditioneerde 30 vermijdingsreflex (CVR) werd geanalyseerd in de pendel-doos gedurende 5 opeenvolgende dagen.

Het instrument werd geconstrueerd door het Research Institute for Electrical Industry (Hongarije). Het bestaat uit zes dozen, waarvan elke inwendig is gescheiden 35 door een barrière met een een klein gat in het midden. De dieren werden getraind om deze barrière te doorkruisen onder de duur van een geconditioneerde stimulus (CS, flits/licht) 8602878 - 12 - en wanneer zij daarin niet slaagden, werden zij gestraft met een voetschok (1,3 mA, OS). Er werden 100 beproevingen per dag uitgevoerd. Eén beproeving bestond uit een 15 seconden interval tussen de proeven, gevolgd door 15 seconden CS. De 5 laatste 5 seconden van CS overlapten met de eerste seconde van OS. Bij elke leersessie werd het aantal CVR en intersig-naalreacties (IR) automatisch opgeteld en geëvalueerd met behulp van meervoudige variantie-analyse (ANOVA). De testver-bindingen in doses van 10-25 mg/kg inhibeerden sterk de ver-10 krijging van een geconditioneerde reflex in de pendel-doos. Het aantal positieve responsen (F) leek significant kleiner te zijn in vergelijking met de controledieren, berekend vanaf de eerste experimentele dag.

Het aantal negatieve responsen (-f) in het geval 15 van 25 mg/kg was hoog.

Het aantal intersignaalreacties (IR) vertoonde een geringe terugval. 10 En 5 mg/kg chloordiazepoxide liet de verkrijging van de geconditioneerde reflex en IR onveranderd, maar in een dosis van 10 mg/kg verhoogde deze verbinding het 20 aantal negatieve responsen (f).

De resultaten zijn samengevat in tabel A.

TABEL A

Effect van thiazolo/4,5-c7chinoline-ethaansulfonaat (verbinding A) op de verkrijging van de geconditioneerde reflex in 25 een pendel-doos. Behandeling: s.c. Referentieverbinding: chloordiazepoxide.

testverbinding ^g/^g 1 2345 dagen zout bevattend - 25,3 44,8 54,4 52,9 55,6

Verbinding A 50* 8,9 24,5 20,8 14,6 16,2 30 25* 8,1 25,3 23,3 30,8 15,5 10 23,5 44,2 51,6 66,8 65,1 chloordiazepoxide 25* 9,7 12,2 17,9 20,0 21,4 10 19,9 37,9 33,7 35,6 41,2 5 23,1 38,7 35,6 41,1 50,8 8602878 - 13 - TABEL A (vervolg) testverbinding mg/kg 1 2 3 4 5 dagen zout bevattend - 10/3 7,1 6,1 10,3 8,0 5 verbinding A 50* 66,8 35,2 51,5 61,8 72,8 25* 70,3 41,8 40,4 46,3 61,3· 10 17,2 7,1 2,4 1,2 6,2 chloordiazepoxide 25* 74,0 67,5 67,0 65,6 59,8 10* 32,7 22,8 31,8 36,5 40,8 10 5 11,8 9,1 10,2 14,9 13,0

IR

zout bevattend - 12,2 15,8 10,2 9,1 6,4 verbinding A 50* 9,2 7,1 4,2 3,3 2,6 25 11,1 8,8 7,0 10,3 4,0 15 10 6,5 8,8 5,5 8,2 6,3 chloordiazepoxide 25 6,8 7,3 6,2 8,2 6,0 10 10,8 14,7 8,1 6,3 6,1 5 10,8 14,0 8,9 6,7 4,2 * = significante afwijking, berekend met behulp van meer-20 voudige variantieranalyse (ANOVA) .

9. Meting van de motiliteit in de pendel-doos Het in de pendel-doostest beschreven apparaat werd tevens gebruikt voor het onderzoeken van de motiliteit van de dieren. In het geval van het motiliteitsexperiment 25 werden alle stimuli uitgeschakeld en liet men de dieren vrij bewegen van het ene compartiment van de dozen naar het andere. Het aantal spontane doorkruisingen van het gat gedurende een observatieperiode van 30 minuten werd gemiddeld. De significantie werd berekend met behulp van de Student's t-test voor 8602878 * - 14 - twee gemiddelden.

De verbindingen met de algemene formule 1 van het formuleblad hebben een soortgelijke geringe motiliteitsvermin-derende werking in deze test.

5 10. Studie van de binding met benzodiazepine (BZD)- receptor

Voor deze studies werd een ruw corticaal 3 membraanpreparaat gebruikt. 2 yuM H-diazepam werd geïneubeerd met het membraan gedurende 1 uur bij 0°C in TRIS-citraatbuf-10 fer, pH 6,8. De specifieke binding werd bepaald in aanwezigheid van 10 jM diazepam. In verdringingsstudies werd chloor-diazepoxide gebruikt als controlegeneesmiddel. Chloordia- 3 zepoxide verdrong H-diazepam aan de receptor op een concen-tratie-afhankelijke wijze, terwijl de verbindingen met de 15 algemene formule 1 van het formuleblad, zelfs in hoge concen- 3 traties, niet de specifieke binding van H-diazepam veranderden en derhalve niet bonden aan de receptor.

Verdere details van de onderhavige uitvinding zijn te vinden in de navolgende voorbeelden, die niet dienen ter 20 beperking van de onderhavige uitvinding.

VOORBEELD I

Een mengsel van 17,62 g (0,1 mol) 3-amino-4-mercaptochinoline, 150 ml 100 % mierezuur en 1,5 g natrium-pyrosulfiet werd gehouden op de terugvloeitemperatuur geduren-25 de 3 uur. Het reactiemengsel werd afgekoeld, verdund met een mengsel van 800 ml water en 40 ml geconcentreerd zoutzuur, alkalisch gemaakt tot pH 10 door toevoeging van een natrium-hydroxide-oplossing en drie maal geëxtraheerd met 200 ml benzeen telkens. De benzeenoplossing werd uitgedampt. Aldus 30 werd 15,0 g thiazolo/4,5-c7chinoline verkregen, smp.: 114— 116°C, opbrengst 80 %.

De aldus verkregen base werd opgelost in aceton en daaraan werd een equivalente hoeveelheid ethaansulfonzuur toegevoegd. Het aldus verkregen thiazolo/4,5-c7chinoline-35 ethaansulfonaat smolt bij 155-157°C.

8602878 % - 15 -

VOORBEELD II

Men ging tewerk volgens voorbeeld I, met dien verstande, dat 3-amino-7-chloor-4-mercaptochinoline werd toegepast als uitgangsstof. Het aldus verkregen 7-chloor-5 thiazolo/4,5-c7chinoline smolt bij 199-200°C; opbrengst 78 %. VOORBEELD III

Men ging te werk volgens voorbeeld I, met dien verstande, dat mierezuur werd vervangen door trifluorazijnzuur.

Het aldus verkregen 2-trifluormethyl-thiazolo£4,5-c7chinoline 10 smolt bij 113-114°C; opbrengst 85 %.

VOORBEELD IV

Een mengsel van 17,62 g (0,1 mol) 3-amino-4-mercaptochinoline en 500 ml triethylorthoformiaat werd verhit op 120-140°C, terwijl de gevormde alcohol continu werd afge-15 destilleerd. Wanneer de laatste sporen ethanol waren verwijderd, werd het reactiemengsel afgekoeld, verdund met benzeen en de pH ingesteld op 1 door toevoeging van zoutzuur houdende ethanol. De geprecipiteerde kristallen werden gefiltreerd. Zo verkreeg men 21,5 g thiazolo^4,5-c7chinolinehydrochloride met 20 een opbrengst van 96 % en een smeltpunt van 231-232°C.

Het boven genoemde hydrochloride werd omgezet in thiazolo/4,5“c7chinoline met behulp van bekende methoden door behandeling met natriumhydroxide. Smp.: 114-116°C.

VOORBEELD V

25 De in tabel B opgesomde verbindingen werden bereid op een wijze die analoog is aan voorbeeld IV, onder toepassing van overeenkomstige uitgangsstoffen:

TABEL B

verbinding opbrengst zout smeltpunt 30 2-ethyl-thiazolo/4,5-c7~ chinolïne 85 HC1 208-210 2-fenyl-thiazolo/4,5-c7“ chinolïne 65 base 157-159 7-chloor-thiazolo/4,5-c7“ 35 chïnoline 85 base 199-200 2-n-propyl-thiazolo/4,5-c7 chinoline 75 HCl 175-177 8602878 - 16 -

VOORBEELD VI

Een mengsel van 17,62 g (0,1 mol) 3-amino-4-mercaptochinoline en 85 ml propionzuuranhydride werd eerst langzaam verhit tot het kookpunt en vervolgens gedurende 1,5 5 uur op de terugvloeitemperatuur gehouden. Het reactiemengsel werd druppelsgewijs toegevoegd aan 800 ml van 1 % waterige zoutzuur onder krachtig roeren. De homogene oplossing werd alkalisch gemaakt tot pH 10 door toevoeging van een natrium-hydroxide-oplossing en drie maal geëxtraheerd met telkens 10 200 ml benzeen. De benzeenoplossing werd uitgedampt. Aldus werd 19,26 g 2-ethyl-thiazolo/4,5-c/chinoline verkregen in een opbrengst van 90 % en met een smeltpunt van 48-49°C. VOORBEELD VII

De in tabel C opgesomde verbindingen werden bereid 15 op een wijze analoog aan voorbeeld VI, onder toepassing van de corresponderende uitgangsstoffen.

TABEL C

opbrengst smeltpunt verbinding % oc 20 2-n-propyl-thiazolo/4,5-c7chinoline 87 45-51 7,8-dimethoxy-2-methyl-thiazolo/4,5-c/- chinoiinè 85 200-202 2-fenyl-thiazolo/4,5-c7chinoline 80 157-159 7-chloor-2-methyl-thiazolo/4,5-c7"’ 25 ” chiiïoline 75 181-183

VOORBEELD VIII

Een mengsel van 12,56 g (0,05 mol) 3-aceetamido- 7-chloor-4-mercaptochinoline en 120 g polyfosforzuur werd verhit tot 140-160°C. Het reactiemengsel werd bij deze tempe-30 ratuur gedurende 2 uur geroerd, afgekoeld tot 90°C, waarna 700 ml water werd toegevoegd onder krachtig roeren. Wanneer het reactiemengsel was afgekoeld tot 20°C werd het alkalisch gemaakt door toevoeging van een natriumhydroxide-oplossing.

8602878 - 17 -

Het verkregen mengsel, dat een precipitaat bevatte, werd drie maal geëxtraheerd met telkens 150 ml chloroform. De chloro-formlagen werden verenigd en uitgedampt tot 60 ml, waarna 300 ml ethanol werd toegevoegd. Er werd 9,3 g 7-chloor-2-5 methyl-thiazolo/4,5-c7chinoline verkregen in de vorm van naaldkristallen. Opbrengst 80 %; smp. 181-183°C.

VOORBEELD IX

Een mengsel van 17,62 g (0,1 mol) 3-amino-4-mercaptochinoline, 15 g (0,11 mol) fenylazijnzuur en 200 g 10 polyfosforzuur werd langzaam verhit tot 140°C onder roeren.

Het reactiemengsel liet men staan bij deze temperatuur gedurende 2 uur, waarna het werd afgekoeld en toegevoegd aan 1000 g vergruizeld ijs onder krachtig roeren. Het mengsel werd alkalisch gemaakt met een waterige natriumhydroxide-oplossing, 15 drie maal geëxtraheerd met telkens 250 ml chloroform en het chloroformextract werd uitgedampt. Aldus verkreeg men 16,5 g 2-benzyl-thiazolo£4,5-cJchinoline, smp. 111-113°C, opbrengst 60 %.

VOORBEELD X

20 Een mengsel van 20,52 g (0,1 mol) 3-amino-4- mercaptochinolinehydrochloride, 10,61 g (0,1 mol) vers gedestilleerd benzaldehyde en 200 ml ethanol werd gehouden op de terugvloeitemperatuur gedurende 2 uur, waarna lucht door het reactiemengsel werd geborreld gedurende verscheidene dagen.

25 De neergeslagen kristallen werden afgefiltreerd en geherkris-talliseerd uit ethanol. Zo werd 13,5 g 2-fenyl-thiazolo/4,5-c7-chinoline verkregen. Het smeltpunt van dit produkt is identiek met dat van de volgens voorbeeld V bereide verbinding.

VOORBEELD XI

30 Tabletten met de volgende samenstelling werden bereid: hoeveelheid component mg/tablet thiazolo/4,5-c7chinoline-ethaansulfonaat 25,0 35 maïszetmeel 97,0 polyvinyIpyrrolidon 175,0 magnesiumstearaat 3,0 totaal gewicht 300,0 8602878 * - 18 -

Het mengsel van het werkzame bestanddeel en maïszetmeel werd bevochtigd met een 10-15 % polyvinylpyrrolidon-oplossing, gegranuleerd en gedroogd. De granules werden grondig gedroogd, vermengd met het magnesiumstearaat en tot 5 tabletten geperst.

VOORBEELD XII

Kapsules met de volgende samenstelling werden bereid met behulp van in de farmaceutische industrie op zichzelf bekende methoden: 10 hoeveelheid component mg/kapsule thiazolo/4,5-c7chinolinehydrochloride 20,0 lactose 60,0 maïszetmeel 17,0 15 talk 2,0 magnesiumstearaat 1,0 totaal gewicht 100,0 20 8602878

Claims

1. Thiazolo/4,5-c7chinolinederivaten met de algemene formule 1 van het formuleblad, waarin R staat voor waterstof, een rechte of vertakte 5 alkylgroep met 2-5 koolstofatomen, desgewenst gesubstitueerd door één of meer halogeenatomen, een fenyl of fenyl-(lager alkyl), dat desgewenst één of meer substituenten op de fenyl-ring draagt? 1 2 R en R identiek of verschillend zijn en water-10 stof, halogeen of lager alkyl voorstellen; alsmede zuuradditiezouten daarvan.

2. Thiazolo/4,5-c7chinoline en farmaceutisch aanvaardbare zuuradditiezouten daarvan.

3. Thiazolo/4,5-c7chinolinehydrochloride.

4. Thiazolo/4,5-c7chinoline-ethaansulfonaat,

5. Werkwijze voor de bereiding van thiazolo/4,5-cT-chinolinederivaten met de algemene formule 1 van het formuleblad, waarin R staat voor waterstof, een rechte of vertakte 20 alkylgroep met 2-5 koolstofatomen, desgewenst gesubstitueerd door één of meer halogeenatomen, een fenyl of fenyl-(lager alkyl), dat desgewenst één of meer substituenten op de fenyl-ring draagt? 1 2 R en R identiek of verschillend zijn en water-25 stof, halogeen of lager alkyl voorstellen? alsmede de zuuradditiezouten daarvan, gekenmerkt door a) het omzetten van een 3-amino-4-mercaptochino- line met de algemene formule 2 van het formuleblad, waarin 1 2 30. en R de boven genoemde betekenissen hebben, of een zuur-additiezout daarvan met een carbonzuur met de algemene formule 3 van het formuleblad, waarin R de boven gedefiniëerde betekenissen heeft, of een reactief derivaat daarvan; of b) het omzetten van een 3-amino-4-mercaptochino-35 line met de algemene formule 2 van het formuleblad, of een zuuradditiezout daarvan, met een aldehyde met de algemene formule 5 van het formuleblad, waarin R de eerder genoemde betekenissen heeft, in aanwezigheid van een oxidatiemiddel; of 8602878 - 20 - c) het cycliseren van een verbinding met de alge- 1 2 mene formule 4" van het formuleblad, waarin R, R en R de eerder gedefiniëerde betekenissen hebben; en desgewenst, het omzetten van een aldus verkre-5 gen verbinding met de algemene formule 1 van het formuleblad in een zuuradditiezout, of het vrij maken van dezelfde verbinding uit een zout.

6. Werkwijze volgens methode a) van conclusie 5, met het kenmerk, dat als reactief derivaat van 10 een carbonzuur met de algemene formule _3 van het formuleblad, een anhydride, trialkylorthocarboxylaat, zuurhalide of ester wordt toegepast.

7. Werkwijze volgens conclusie 6, met het kenmerk , dat als reactief derivaat van een carbonzuur 15 met de algemene formule : 3 van het formuleblad een trialkylorthocarboxylaat wordt toegepast en de reactie wordt uitgevoerd in een overmaat van de genoemde ester.

8. Werkwijze volgens conclusie 7, met het kenmerk , dat de reactie wordt uitgevoerd bij 20 100-160°C en de gevormde alcohol op continue wijze uit het reactiemengsel wordt verwijderd.

9. Werkwijze volgens methode b) van conclusie 5, met het kenmerk, dat de zuurstof van lucht wordt gebruikt als oxidatiemiddel.

10. Werkwijze volgens methode b) van conclusie 5 of conclusie 9, met het kenmerk, dat de reactie wordt uitgevoerd bij 20-160°C.

11. Werkwijze volgens conclusie 10, met het kenmerk , dat de reactie wordt uitgevoerd in een alka- 30 nol, bij voorkeur in methanol of ethanol, als medium.

12. Werkwijze volgens methode c) van conclusie 5, met het kenmerk, dat de cyclisering wordt uitgevoerd in aanwezigheid van een water-onttrekkend middel.

13. Werkwijze volgens conclusie 12, met het 35kenmerk , dat polyfosforzuur wordt gebruikt als water- onttrekkend middel.

14. Werkwijze volgens conclusie 12 of 13, met het kenmerk, dat de reactie wordt uitgevoerd bij 8602878 i — - 21 - 100-180°C.

15. Werkwijze volgens een der conclusies 12-14, met het kenmerk, dat de reactie wordt uitgevoerd in een inert oplosmiddel of in een overmaat van het 5 water-onttrekkende middel.

16. Werkwijze volgens een der conclusies 5—15 voor de bereiding van thiazolo/4,5-c7chinoline en zuuradditie-zouten daarvan, bij voorkeur het hydrochloride of ethaansul-fonaat, met het kenmerk, dat als uitgangs- 10 stoffen verbindingen met de algemene formules 2, 3.4 en 5. 1 2 van het formuleblad, waarin R, R en R alle waterstof voorstellen, worden gebruikt, en desgewenst, het aldus verkregen thiazolo/4,5-c/chinoline wordt omgezet in een zuuradditiezout, bij voorkeur in het hydrochloride of ethaansulfonaat.

17. Farmaceutisch preparaat, met het kenmerk , dat het tenminste één verbinding met de al- 1 2 gemene formule 1 van het formuleblad, waarin R, R en R de in conclusie 1 gedefiniëerde betekenissen hebben, of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout daarvan, bevat als 20 werkzaam bestanddeel in een therapeutisch werkzame hoeveelheid, vermengd met geschikte inerte vaste of vloeibare therapeutische dragers.

18. Farmaceutisch preparaat volgens conclusie 17, met het kenmerk, dat het als werkzaam bestand- 25 deel thiazolo/4,5-c7chinoline of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout, bij voorkeur het hydrochloride of ethaansulfonaat, daarvan bevat.

19. Werkwijze voor de bereiding van farmaceutische preparaten volgens conclusie 17 of 18, gekenmerkt 30. o o r het vermengen van een verbinding met de algemene formule T van het formuleblad of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout daarvan met geschikte vaste of vloeibare therapeutische dragers.

20. Toepassing van een verbinding met de algemene 1 2 35 formule 1 van het formuleblad, waarin R, R en R de in conclusie 1 gedefiniëerde betekenissen hebben, of een farmaceutisch aanvaardbaar zuuradditiezout daarvan, voor de bereiding van farmaceutische preparaten met een depressieve werking op 8602878 i Λ - 22 - het centrale zenuwstelsel.

21. Verbindingen met de algemene formule ΐ van het formuleblad en zuuradditiezouten daarvan, bereid met behulp van de werkwijze volgens een der conclusies 5-16.

22. Werkwijze, zoals deze hierin, in het bijzonder in de voorbeelden, wezenlijk is beschreven. 10 8002878